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ZEITSCHRIFT 

FÜR 

WISSENSCHAFTLICHE 


MIKROSKOPIE 

UND  FÜR 

MIKROSKOPISCHE  TECHNIK 

BEGRÜNDET  VON  Vf.  J.  BEHRENS 


Unter  besonderer   Mitwirkung 

von 

Prof.  Dr.  Paul  Schieflferdecker  und   Dr.  E.  Sommerfeldt 

in  Bonn  in  Tübingen 

herausgegeben 

von 

Dr.  ernst  Küster 

in  Halle   a.  S. 


Band  XXII 

(Jahrgang  1905) 


Mit  3  LichtdrucktHteln,  1  Steindrucktafel  und  -44:  Holzsclmitten 


LEIPZIG 


Verlag    von    S.   Hirzel 


1905 


Alle  Rechte   vorbehalten. 


X^ 


I  n  h  a  1 1  s  Y  e  r  z  e  i  c  h  n  i  s. 


I.   Abhandlungen. 


Seite 

Ambronn,  H. ,  Über  pleochroitiscbe  Silberkristalle  und  die  Färbung 

mit  Metallen 349 

Arbeit,  E.,  Der  Leitzsche  Universal-Projektions-Apparat 363 

Arndt,  G,,  Beiträge  zur  Technik  und  Methodik  der  mikroskopischen 

Doppelsäge 104 

Bödecker,  C.  F.,  Eine  Entkalkungsmethode  für  Gewebe,  welche  wenig 

organische  Substanz  enthalten,  in§be;^ondere  Zahnschmelz   .     .     190 
Cagnetto,  G. ,   Per   la  colorazione  delle   cellule  cromofile  dell'Hypo- 

physis  cerebri 539 

Cristina,  Di,  Kuovo  metodo  per  attaccare  i  tagli  fatti  da  pezzi  inclusi 

in  celloidina 99 

Fiorentini,  P. ,  ed  Siguer,  M. ,   Su   di  un  Metodo   di  Colorazione  e 

Conservazione  permanente  del  Sedimento  urinario 187 

Fischer,  Alfr.,   Eine  Sperrvorrichtung    für  mikroskopische   Demon- 
strationen       100 

Hansen,  F.  C.  C,   Über   Eisenhämatein,  Chromalaunhämatem ,  Ton- 
erdealaunhämatein ,  Hämateinlösungen   und   einige  Cochenille- 

farblösuugen 45 

Heidenhain,  M.,  Die  Trichloressigsäure  als  Fixierungsmittel.     .     .     .     321 
— ,  — ,  Über  die  Färbung  von  Knochenknorpel  zu  Kurszwecken''  .     .     325 
— ,  — ,  Über  die  Massenfärbung  mikroskopischer  Schnitte  auf  Glimmer- 
platten       330 

— ,  — ,  Über  die  Anwendung  des  Azokarmins  und  der  Chromotrope  .     337 

Henneberg,  Neues  Mikrotom  von  Leitz 125 

Konaschko,  P.,  Zur  Technik  der  Injektion  feiner  Gefäße      ....     179 
Melissinos,  K.,  Vorrichtung  zur  gleichzeitigen  schnellen  Färbung  der 

auf  Deckgläsern  oder  Objektträgern  aufgeklebten  Serienschnitte     130 


IV  Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Metz,  C. ,  Die  Leitzsche  Dunkelfeldbeleuchtung  bei  Verwendung  der 

homogenen  Ölimmersion 114 

Neumayer,    L.,    Objektträgergestell     zur    Massenfärbung    von    auf- 
geklebten Paraffinschnitten 181 

Pauly,  Ant.,  Über  eine  einfache  Methode  zur  Bestimmung  der  Brechungs- 
exponenten von  Flüssigkeiten 344 

Pavlow,  AV.,  Kreosot  als  wasserentziehendes  Mittel  bei  der  Einbettung 

in  Paraffin 18ß 

Peter,  K.,  Der  Anstrich  der  liichtebene 530 

Richter,   Osw. ,   Die  Fortschritte   der   botanischen   Mikrochemie   seit 

Zimmermanns  „Botanischer  Mikrotechnik" 194,  3G9 

Ruzicka,  VI.,  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung 91 

Schneider,  J.,  u.  Just,  J.,  Ultramikroskoi^ie  der  Uleosole     ....  481 
Schouten,  S.  L. ,   Reinkulturen   aus   einer  unter  dem  Mikroskop  iso- 
lierten Zelle 10 

Siding,  A.,  Ein  Beitrag  zur  Paraffinschneidetechnik 177 

Sommerfeldt ,  E. ,   Die  mikroskopische  Achsenwinkelbestimmung  bei 

sehr  kleinen  Kristallpräparaten 356 

Strehl,  K.,  Mikroskopisches  Experiment 192 

— ,  — ,  Beugungsbild  und  Absorptionsbild 1 

Triepel,  H.,  Ein  Zylinder -Rotations -Mikrotom 118 


II.   Referate. 

Abbe,  E.,  Gesammelte  Abhandlungen.  Bd.  IL  (Wissenschaftliche  Ab- 
handlungen aus  verschiedenen  Gebieten,  Patentschriften,  Ge- 
dächtnisreden)   544 

Abrikossolf,  A.  J.,  Über  die  ersten  anatomischen  Veränderungen  bei 

Lungenphthise 439 

Albanese,  N.,  Ein  neuer  Fall  von  Endotropismus  des  Pollenschlauches 
und  abnormer  Embryosackentwicklung  bei  Sibbaldia  pro- 
cumbens  L 299 

Allen,  Ch.  E. ,   Nuclear  division  in  the  pollen  mothercells  of  Lilium 

canadense 461 

Arnold,  J.,  Über  Bau  und  Sekretion  der  Drüsen  der  Froschhaut ;  zu- 
gleich ein  Beitrag  zur  Plasmosomen-Granulalehre 286 

Bab,  H.,  Die  Colostrumbildung  als  physiologisches  Analogon  zu  Ent- 
zündungsvorgängen. Gleichzeitig  ein  Beitrag  zur  Lehre  von 
den  Leukocyten  und  deren  Granulationen.  Mit  historischen 
Darlegungen 272 

Backmund,    K.,    Entwicklung    der   Haare    und    .Schweißdrüsen    der 

Katze 285 

Bäckström,  H.,  Ein  Kugelgranit  von  Spitzbergen 588 


Inhaltsverzeichnis.  V 

Seite 

Ballowitz,  E.,  Die  Riechzelien  des  Flußneunauges  [Petrouiyzon  Hu- 

viatilis] 160 

Bartel,  J..  u.  Stein,  R.,  Lymphdrüsenbau  und  Tuberkulose     .     .     .     568 

Baudi  u.  Simouelli,  Über  die  Anwesenheit  der  Spirochaete  pallida 
in  sekundär  syphilitischen  Manifestationen  und  über  die  zu 
ihrem  Nachweis  angewendeten  Fiirbungsmethoden 579 

Beck  V.  Managetta,  G.,  Über  die  Verwendung  der  Persio- Essigsäure 

zu  mikroskopischen  Tinktionen 166 

Backe,  F.,  Optische  Untersuchungsmethoden 306 

— ,  — ,  Messung  des  Winkels  der  optischen  Achsen  aus  der  Hyperbel- 
krümmung      464 

Behrens,  H. ,  Reaktionen  für  den  mikrochemischen  Nachweis  organi- 
scher Basen 305 

Berliner,  K. ,  Beiträge  zur  Histologie  und  Entwicklungsgeschichte 
des  Kleinhirns,  nebst  Bemerkungen  über  die  Entwicklung  der 
Funktionstüchtigkeit  derselben 566 

Björkenlieim,  C.  G.,  Beiträge  zur  Kenntnis  des  Pilzes  in  den  Wurzel- 
anschwellungen von  Alnus  incana 300 

Blumsteiu- Judina,  B. ,  Die  Pneumatisation  des  Markes  der  Vogel- 
knochen  560 

Böhmer,  C,  Anleitung  zur  Untersuchung  landwirtschaftlich  wichtiger 
Stoffe.  Zum  Gebrauch  in  landwirtschaftlichen  und  agrikultur- 
chemischen Laboratorien  und  für  die  Praxis  zusammengestellt 
und  bearbeitet 545 

Bösenberg,  H. ,  Beiträge   zur  Kenntnis  der  Spermatogenese  bei  den 

Arachnoiden 426 

Boit,  H.,  Einfache  und  sichere  Identifizierung  des  Typhusbacillus .     .     572 

Bordiert,  M,,  Über  Markscheidenfärbung  bei  niederen  Wirbeltieren  .     153 

Bürdet,  J.,  Une  methode  de  culture  des  microbes  anaerobies    .     .     .     454 

Brand,  F.,   Über   die   sogenannten  Gasvakuolen  und  die  differenten 

Spitzenzellen  der  Cyanophyceen,  sowie  über  Schnellfärbung   .     458 

Braun,  F.,  Einige  Beobachtungen,  die  sich  auf  künstliche  Doppel- 
brechung beziehen 302 

— ,  — ,  Herstellung  doppelt  brechender  Körper  aus  isotropen  Bestand- 
teilen   . 302 

Über  metallische  Gitterpolarisation,  insbesondere  ihre  Anwen- 
dung zur  Deutung  mikroskopischer  Präparate 306 

— ,  — ,  Der    Hertz  sehe     Gitterversuch    im    Gebiete    der    sichtbaren 

Strahlung 306 

Brauns,  R.,  Mineralogie 304 

Bredig,  G.,  u.  Schukowsky,  G.  v.,  Prüfung  der  Natur  der  flüssigen 

Kristalle  mittels  elektrischer  Kataphorese 305 

Brunnee,  R.,  Polarisations -Mikroskoppolymeter 586 

Bürker,  K.,  Notiz  über  eine  neue  Form  der  Zählkammer      ....     554 

Buutiug,  P.  L.,   The  Histology   of  Lymphatic   Glands:   the  general 

Structure,  the  Reticulum  and  the  Germ  Centres 287 

Cajal,  S.  R.,  Das  Neurofibrillennetz  der  Retina 155 


1 


VI  Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Cajal,  S,  R.,  siehe  auch  Ramön  y  Cajal, 

Cameron,  J.,  The  Development  of  the  Retina  in  Amphibia,  an  Embryo- 

logical  and  Cytological  Study 290 

Cavalie,  M.,  Les  ramifications  nerveuses  dans  Torgane  electrique  de 
la    torpille    (Torpedo   Galvani)    [Dispositif  fibrillaire    dans    les 

gaines  des  fibres  nerveuses  et  autour  d'elles] 278 

Chamberlain,  Ch.  J.,  Methods  in  Plant  Histology 585 

Claussen,  P.,  Zur  Entwicklung  der  Ascomyceten.  Boudiera     .     .     .     297 
Courmont,  J. ,    et   Andre,    Ch. ,   Technique   histologique   permettant 
de   deceler   sur   les   coupes  les   substances   du   groupe   de   la 

Purine,  notamment  l'acide  urique 417 

Degen,  A.,   Untersuchungen   über   die   kontraktile  Vakuole  und  die 

Wabenstruktur  des  Protoplasmas 552 

Depdolla,  Ph.,  Untersuchungen  über  die  Spermatogenese  vom  Lum- 

bricus  terrestris 265 

Doelter,  C,  Die  Silikatschmelzen 463 

Doerr,  R.,  Beobachtungen  über  bazilläre  Dysenterie 294 

Dogiel,  A.  S.,  Der  librilläre  Bau  der  Nervenendapparate  in  der 
Haut   des   Menschen   und   der   Säugetiere   und   die   Neuronen- 

theorie 5G5 

Donaggio,  A.,  Colorazione  positiva  delle  libre  nervöse  nella  fase 
iniziale  della  degenerazione  primaria  e  secondaria,  sistematica 

or  dififusa  del  sistema  nervoso  centrale 563 

Donaldson,  H.  H.,  a.  Hoke,  G,  W.,  On  the  Areas  of  the  Axis  Cilinder 
and  meduUary  Slieath  as  seen  in  cross  Sections  of  the  Spinal 

Nerves  of  Vertebrates 446 

Donau,    Über   die   Färbung   der   Boraxperle   durch   kolloidal  gelöste 

Edelmetalle 304 

Dreuw,  Exstirpations-  und  Operationsfelder 137 

Driesseu,  L.  F.,  Zur  Glykogenfärbung 422 

Dschiinkowsky,  E.,  u.  Luhs,  S.,  Apparat  zum  sterilen  Blutentnehmen 

zwecks  Untersuchung 295 

Dubreuil,  G.,  Le  Picro-Bleu,  note  sur  l'emploi  de  ce  reactif  pour  la 
coloration  specifique   des  fibrilles  conjonctives.     Application  ä 

l'etude  du  tissu  reticule  du  ganglion  lymphatique 420 

Dworetzky,  A. ,  Erfahrungen  mit  der  Spengler  sehen  Formalin- 
methode  zur  Reinzüclitung  von  Tuberkelbazillen  aus  Bakterien- 
gemischen       450 

Edens,  Über  Amyloidfärbung  und  Amyloiddegeneration 558 

Ei'dely,  A.,  Untersuchungen  über  die  Eigenschaften  und  die  Ent- 
stehung der  Lymphe.  Fünfte  Mitteilung.  Über  die  Beziehung 
zwischen  Bau  und  Funktion  des  lymphatischen  Apparates  des 

Darmes 427 

Ernst,  A.,  Zur  Kenntnis  des  Zellinhaltes  von  Derbesia 299 

Ferguson,  Margaret  C. ,  Contributions  to  the  knowledge  of  the  life 
liistory  of  Pinus  with  special  reference  to  sporogenesis,  the 
development  of  the  gametophytes  and  fertilization      ....     583 


Inhaltsverzeichnis.  VII 

Seite 

Fernandez,  M.,  Zur  mikroskopischen  Anatomie  des  Blutgefäßsystems 
der  Tunikaten.  Nebst  Bemerkungen  zur  Phylogenese  des 
Blutgefäßsystems  im  allgemeinen 142 

Fichera,  G. ,  Über   die  Verteilung   des   Glykogens   in   verschiedenen 

Arten  experimenteller  Glykosurie 288 

Fischer,  A.,  Die  Zelle  der  Cyanophyceen 455 

— ,  — ,  Eine  neue  Glykogenfärbung 421 

Fischer,  H. ,  Über  die  kolloidale  Natur  der  Stärkekörner  und  ihr 
Verhalten  gegen  Farbstoffe.  Ein  Beitrag  zur  Theorie  der 
Färbung 458 

Fischler,  F.,  Über  die  Unterscheidung  von  Neutralfetten,  Fettsäuren 

und  Seifen  im  Gewebe 262 

Fleischer,  B. ,   Beiträge    zur  Histologie   der   Tränendrüsen   und   zur 

Lehre  von  den  Sekretgranula 162 

Floyd,  R.,   A   contribution   to   tlie   nervous  cytology  of  Periplaneta 

Orientalis,  the  common  cockroach 143 

Gadzikiewicz,  W.,  Über  den  feineren  Bau  des  Herzens  bei  Malako- 

straken 141 

Gaehtgens,  W.,  Der  Bacillus  jasmino-cyaneus  und  der  Bacillus  flavo- 

aromaticus,  zwei  neue  Farbstoff  bildende  Bakterien    ....     293 

Galli,  G.,  Ein  verbesserter  Mischer  zur  Zählung  der  Blutkörperchen     148 

Giemsa,  G.,  Bemerkungen  zur  Färbung  der  Spirochaete  pallida    .     .     576 

— ,  — ,  Erwiderung  zu  vorstehenden  Bemerkungen 578 

— ,  — ,  Eine  Vereinfachung  und  Vervollkommnung  meiner  Methylenazur- 
Methylenblau -Eosin -Färbemethode  zur  Erzielung  der  Roma- 
NOw^SKi-NocHT  sehen  Chromatinfärbung 449 

Glas,  E.,  Über  intraepitheliale  Drüsen,  Cysten  und  Leukocytenhäufchen 

der  menschlichen  Nasenschleimhaut 286 

— ,  — ,  Zur  Frage  der  Sarkolyse.  [Erste  Mitteilung  über  quergestreifte 
Muskeln  und  deren  Zerfallsprodukte  im  follikulären  Gewebe 
der  Tonsille] 427 

Goldsteiu,  K. ,  Untersuchungen  über  das  Vorderhirn  und  Zwischen- 
hirn einiger  Knochenfische  [nebst  einigen  Beiträgen  über 
Mittelhirn  und  Kleinhirn  derselben] 565 

Grabower,  Die  Verteilung  und  Zahl  der  Nervenfasern  in  den  Kehl- 
kopfmuskeln und  die  Hinfälligkeit  des  Erweiterers  der  Stimmritze    279 

Gräfe,  V.,  Eine  neue  Reihe  von  Holzreaktionen 581 

Groot,  J.  G.  de,    Ein   neuer    Kitt   zum   Schließen   von   Gefäßen  mit 

Alkoholpräparaten  auch  für  den  Versand 136 

Haane,  G.,  Über  die  Cardiadrüsen  und  Cardiadrüsenzone  des  Magens 

der  Haussäugetiere 567 

Haberlandt,    G, ,    Über    die    Plasmahaut    der    Chloroplasten    in    den 

Assimilationszellen  von  Selaginella  Martensii  Spring    ....    584 

Ralphen,  G. ,   et  Riche,  A.,    Contribution    k   l'etude   des    teintures 

histologiques 546 

Hansen,  F.  C.  C,  Untersuchungen  über  die  Gruppe  der  Bindesub- 
stanzen.   I.  Der  Hyalinknorpel 433 


VIII  Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Hai'desty,  I.,  On  the  Development  and  Nature  of  the  Neuroglia  .     .     157 

Harz,  C.  O. ,   Amylum,   Amj'lodextrin  und  Erythrodextrin   in  ihrem 

Verhalten  gegen  Chromsäure 459 

Heinemann ,  Pli. ,  Untersuchungen  über  die  Entwicklung  des  Meso- 
derms  und  den  Bau  des  Ruderschwanzes  bei  den  Ascidien- 
larven 424 

Helber,  E.,  Über  die  Zählung  der  Blutplättchen  im  Blute  des  Menschen 

und  ihr  Verhalten  bei  pathologischen  Zuständen 150 

— ,  — ,  Über  die  Entstehung  der  Blutplättchen  und  ihre  Beziehungen 

zu  den  Spindelzellen 268 

HeHer,   O,,    Die    RoTHBERGERSche  Neutralrotreaktion    auf  Gelatine 

bei  370 292 

Herxheimer,  K. ,  u.  Hühner,  H. ,  Über  Darstellungsweise  und  Be- 
fund der  bei  Lues  vorkommenden  Spirochaete  pallida     .     .     .     575 

Hinden,  F.,   Neue  Reaktionen   zur   Unterscheidung   von  Calcit  und 

Dolomit 303 

Hirschler,  J.,  Weitere  Regenerationsstudien  an  Lepidopterenpuppen 

[Regeneration  des  vorderen  Körperendes] 265 

Hlawatsch,    C,   Bestimmung   der  Doppelbrechung  für  verschiedene 

Farben  an  einigen  Mineralien 302 

Hoffendahl ,  K. ,   Beitrag   zur  Entwicklungsgeschichte  und  Anatomie 

von  Poecilasma  aurantium  Daravin 144 

Hus,  Henri  T.  A.,   Spindle  Formation  in  the  PoUen-Mother-Cells  of 

Cassia  tomentosa  B 582 

Illing,    G. ,    Vergleichende    histologische    Untersuchungen    über    die 

Leber  der  Haussäugetiere 436 

— ,  — ,  Vergleichende  makroskopische  und  mikroskopische  Unter- 
suchungen über  die  submaxillaren  Speicheldrüsen  der  Haus- 
säugetiere       284 

— ,  — ,  Über  einen  eigenartigen  Befund  in  den  Glandulae  vesiculares 

und  den  Glandulae  ductus  deferentis  des  Rindes 570 

Imliof,  G.,  Anatomie  und  Entwicklungsgeschichte  des  Lumbaimarkes 

bei  den  Vögeln 283 

JoHy,  J. ,   Recherches   experimentales   sur   la   Division  indirecte  des 

Globules  rouges 148 

Joris,  H.,  Histogenese  du  Neurone 279 

Kamou,  K.,  Über  die  Geruchsknospen 161 

Karakacheif,   K.   Iv.,    Über  das   Verhalten    der   Langerhans  sehen 

Inseln  des  Pankreas  bei  Diabetes  meUitus 435 

Keinath,  K.  Th. ,   Über   den  mikroskopischen  Nachweis  von  Fett  in 

normalen  Muskeln 145 

Koch,  A.,  Jahresbericht  über  die  Fortschritte  in  der  Lehre  von  den 

Gärungsorganismen 448 

König,  E.,  Über  Badeplatten 413 

Koii'ansky,  Eugenie,  Über  eigentümliche  Gebilde  in  den  Leberzellen 

der  Amphibien 288 


Inhaltsverzeichnis.  IX 

Seite 

Koi)sch,  F.,  Über  den  Kern  der  Thrombocyten  und  über  einige 
Methoden  zur  Einführung  in  das  Studium  der  Säugetier- 
Thrombocyten 268 

Kozowsky,   A.   D. ,    Zur    Färbungsmethodik    der    Nervenfasern    des 

Zentralnervensystems 277 

Kral,  F.,  Zur  Difterenzierung  und  objektiven  Darstellung  des  Zell- 
inhaltes von  Hefe-  und  Spaltpilzen 296 

— ,  — ,  Über  einfache  expeditive  Geißelfärbungsmethoden 295 

Kraus,  A.,  Zur  Färbung  der  Hyphomyceten  im  Horngewebe     .     .     .     572 

Krebs ,  P. ,  Die  Nervenendigungen  im  Musculus  stapedius  mit  be- 
sonderer Berücksichtigung  der  bei  der  Färbung  angewandten 
Technik 280 

Lams,  H. ,   Contribution    ä   l'Etude   de    la   Genese    du   vitellus   dans 

rOvule  des  Teleosteens 16(3 

Laß ,  M. ,  Beiträge  zur  Kenntnis  des  histologisch-anatomischen  Baues 
des  weiblichen  Hundeflohes  [Pulex  canis  Duges  s.  Pulex 
serraticeps  Taschenbero] 425 

Leake,  H,  M.,  The  localization  of  the  indigo-producing  substance  in 

indigo-pielding  plants 461 

Lehmann,  0.,  Flüssige  Misch-  und  Schichtkristalle 303 

Lenhossek,  M.  v.,  Ramöx  y  Cajals  neue  Fibrillenmethode .     .     .     .     264 

Lenzmann ,  R. ,  Über   eine  vereinfachte  Methode   der  Färbung   von 

Bluttrockenpräparaten 431 

Lesage,  Culture  de  l'amibe  de  la  dysenteris  des  pays  chauds   .     .     .     140 

Leyen,  E.  von  der,  Über  die  Schleimzone  des  menschlichen  Magen- 

und  Darmepithels  vor  und  nach  der  Geburt 435 

Liebreich,  O.,   Über  Blutkörperchenzählung  mit  dem  Thoma-Zeiss- 

schen  Apparat 554 

Liudner,P.,  Mikroskopische  Betriebskontrolle  in  den  Gärungsgewerben 
mit  einer,Einführung  in  die  technische  Biologie,  Hefenreinkultur 
und  Infektionslehre 135 

London,  E.  S.,  Zur  Lehre  von  dem  feineren  Bau  des  Nervensystems     447 

Luczizky ,  W. ,   Über   die  Dispersion   der   optischen  Achsen  bei  den 

rhombischen  Pyroxenen 464 

Lugiato,  L.,  Degenerazioni  secondarie  sperimentali  [da  strappo  dello 
sciatico]  studiate  col  metodo  di  Donaggio  per  le  degenerazioni 
—  prima  e  seconda  note 563 

Mark,  E.  L.,  A  paraffine  bath  heated  by  electricity 548 

Merck,  E.,  Prüfung  der  chemischen  Reagentien  auf  Reinheit    .     .     .     413 

Meves,  F.,   Zur  Wirkung   von  Säure   auf  die  roten  Blutkörperchen 

der  Amphibien 291 

— ,  — ,  Über  die  Wirkung  von  Ammoniakdämpfen  auf  die  roten  Blut- 
körperchen von  Amphibien 556 

— ,  — ,  Über  die  Wirkung  gefärbter  Jodsäure  auf  die  roten  Blut- 
körperchen der  Amphibien.    Vorläufige  Mitteilung 430 

Meyburg ,  H. ,   Beitrag  zur  Kenntnis  des  Stadiums  der  „primären  in 

toto  konzentrischen"  Knochenbildung 153 


X  Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Meyer,  P.,  Ein  Verfahren  zur  Erzielung  haltbarer  Amyloidpräparate    571 

Michaelis,  L.,  Ultramikroskopische  Untersuchungen 423 

Michniewicz,  H.  R.,   Über  Plasmodesmen   in   den  Kotyledonen  von 

Lupinus-Arten  und  ihre  Beziehung  zum  interzellularen  Plasma     300 
Miyake,  K.,  Über  Reduktionsteilung  in  den  Pollenmutterzellen  einiger 

Monokotylen 460 

Möller,    J. ,   Mikroskopie   der   Nahrungs-   und   Genußmittel   aus   dem 

Pflanzenreich 412 

Molisch,  H.,  Über  amorphes  und  kristallisiertes  Anthokyan  ....     459 

Mulon,  P.,  Action  de  l'acide  osmique  sur  les  graisses 138 

3Iyers,  B.  D.,  Fixation  of  tissues  by  injection  into  the  arteries     .     .     555 
Nabias ,  B.  de ,   Nouvelle   methode   de  coloration  rapide  du  Systeme 

nerveux  au  chlorure  d'or 139 

Nicolle,  F.,  Suite  d'experiences  relatives  au  phenomene  de  l'agglutina- 

tion  des  microbes 454 

Noeggerath  u.  Staehelin,  Zum  Nachweis  der  Spirochaete  pallida  im 

Blut  Syphilitischer 578 

Nowack,   K.,  Über   die   Grenzen   der   Verwertbarkeit   des  Malachit- 

grünagars 453 

Ocker-Blom,  M.,  Bestimmung  der  elektrischen  Leitfähigkeit  mit  Bezug 

auf  bakteriologische  Zwecke 451 

Oppenheim,  31.,  u.  Sachs,  O. ,   Eine   einfache   und  schnelle  Methode 

zur  deutlichen  Darstellung  der  Spirochaete  pallida      ....     579 
Overton,  J.  B.,   Über  Reduktionsteilung  in   den   Pollenmutterzellen 

einiger  Dikotylen 460 

Pensa,  A. ,   Osservazioni  suUa  distribuzione  dei  vasi  sanguigni  e  dei 

nervi  nel  pancreas 438 

Petersen,   O.,   Über   sekretorische   Änderungen   im   Epithel  der   ab- 
leitenden Harn wege  bei  einigen  Säugetieren 569 

Phillii)S,  D.  P.  A.,   Comparative  Study  of  the  Cytology  and  Move- 

ments  of  the  Cyanophyceae 168 

Pighinl,  G.,  Sur  l'origine  et  la  formation  des  cellules  nerveuses  chez 

les  embryons  des  Selaciens 441 

Pinkiis,  F.,   Über  Hautsinnesorgane  neben   dem   menschlichen  Haar 

(Haarscheiben)  und  ihre  vergleichend-anatomische  Bedeutung .     160 
Pötzsch,  O.,   Über   die  Entwicklung  von  Niere,  Perikard  und  Herz 

bei  Planorbis  corneus 161 

Porcile,  V.,  Untersuchungen  über  die  Herkunft  der  Plasmazellen  in 

der  Leber 164 

Porta,  A. ,  Ricerche  anatomiche  suU'apparecchio  velenifero  di  alcuni 

pesci 567 

Preisich,  K.,  u.  Heim,  P.,  Über  die  Abstammung  der  Blutplättchen     266 
Prytz ,  K. ,  Mikroskopische  Bestimmung   der  Lage  einer  spiegelnden 

Fläche.     Optischer  Kontakt 588 

Quincke,  G.,  Über  Ausbreitung  und  Extensionskraft 301 

— ,  — ,  Doppelbrechung  der  Gallerte  beim  Aufquellen  und  Schrumpfen     301 
Ramön  y  Cajal,  S.,  Neuroglia  y  neurofibrillas  dei  lumbricus     .     .     .     444 


Inhaltsverzeichnis.  XI 

Seite 

Ramön  y  Cajal,  S. ,  La  methode  h  l'iii-gent  reduit  associee  ä  la 
methode  embryonnaire  poiir  Tetiide  des  noyaux  moteurs  et 
sensitifs 273 

— ,  — ,  siehe  aiicli  Cajal,  S. 

Ramön  y  Cajal,  S.,   y   Garcia,  D.  D. ,  Las  lesiones  del  reticulo   de 

las  celulas  nerviosas  en  la  rabia 443 

Regaud,  Cl.,  et  Dubreuil,  G.,  8ur  un  nouveau  procede  d'argentation 

des  epitheliums  au  moyen  du  protargol 418 

Reitmann,  K.,  Zur  Färbung  der  Spirochaete  pallida 577 

Richards,  Th.  W,,  a  Wells,  R,  CL,  The  Nephelometer,  an  Instru- 
ment tbr  Detecting  and  Estimating  opalescent  Precipitations     304 

Rosenbusch,  H. ,   Mikroskopische  Physiographie  der  Mineralien  und 

Gesteine 586 

Rossi,  E.,  L'intima  struttura  delle  cellule  nervöse  umane 273 

Riibaschkin,  W.,  Studien  über  Neuroglia 158 

Rufflni,   A.,    Di    una   nuova   guaina    [guaina  sussidiaria]    nel   tratto 

terminale  delle  fibre  nervöse  di  senso  nell'uomo 447 

Rullmann ,    W. ,    Über    das   Verhalten   des   im  Erdboden   eingesäten 

Typhusbazillus 292 

Rftzicka,  V. ,   Über   tinktorielle   Differenzen   zwischen  lebendem   und 

abgestorbenem  Protoplasma 548 

Sala,  G.,  Beitrag  zum  Studium  der  feineren  Struktur  der  Netzhaut  .     291 

Schalfer,  K. ,   Neurofibrillenpräparate  nach  der  Bielschowsky sehen 

Methode 564 

Schmidt,  .T.  E.,  Beiträge  zur  normalen  und  pathologischen  Histologie 
einiger  Zellarten  der  Schleimhaut  des  menschlichen  Darm- 
kanales 439 

Schmorl,  G.,  Die  pathologisch-histologischen  Untersuchungsmethoden     134 

Scholz,  F.,  Über  Aceton-Celloidin-Schnelleinbettung 415 

Schridde,   H.,- Beiträge   zur  Lehre   von   den   Zellkörnclungen.     Die 

Körnelungen  der  Plasmazellen 550 

Schröder,  O. ,  Beiträge  zur  Kenntnis  der  Bauchsinnesorgane  [Bauch- 
augen] von  Eunice  virides  Gray  sp.  [Palolo] 424 

SchüUer,  M. ,  Über  die  Chromatinkörper  der  Krebs-  und  Sarkom- 
parasiten des  Menschen 451 

Schwarz,  G. ,  Studien  über  im  großen  Netz  des  Kaninchens  vor- 
kommende Zellformen 434 

Seddig,  M.,  Über  „Wachstums"-Erscheinungen  an  Quecksilbertropfen    465 

Seiter,  Über  Sporenbildung  bei  Milzbrand  und  andern  sporenbilden- 
den Bakterien 573 

Senft,  E.,  Mikroskopische  Untersuchung  des  Wassers  mit  bezug  auf 
die  in  Abwässern  und  Schrautzwässern  vorkommenden  Mikro- 
organismen und  Verunreinigungen 412 

— ,  — ,  Über  den  mikrochemischen  Zuckernachweis  durch  essigsaures 

Phenylhydrazin 298 

Shattuck,  Charles  H.,  A  morphological  Study  of  Ulmus  americana  .     463 

Shoemaker,  D.  N.,   On  the  Development  of  Hamamelis  virginiana     .     462 


XII  Inhaltsverzeichnis. 

Seite 

Skrobansky,  Eine  Methode  der  nachträglichen  Färbung  mit  Bleu  de 

Lyon  und  Pikrinsäure 138 

Sniidt,  E.  F.,  Bacteria  in  relation  to  plant  diseases.  Vol.  1.  Methods 
of  werk  and  general  literature  of  bacteriologj^  exclusive  of 
plant  diseases 580 

Srdinko,  O.  V.,  Eine  sichere  Methode  zur  Differenzierung  der  Rinden- 
und  Markelemente  der  Nebenniere,  besonders  bei  Säugetieren 
und  Menschen 437 

Stark,  M.,  Zusammenhang  des  Brechungsexponenten  natürlicher  Gläser 

mit  ihrem  Chemismus 307 

Stead,  J.  E.,  Micro-Metallography  with  practical  Demonstration     .     .     464 

— ,  — ,  Methods  for  Detecting  the  mere  Highly  Phosphorised  Portions 

in  Iron  and  Steel 465 

Stern,  M.,  Histologische  Beiträge  zur  Sekretion  der  Bürzeldrüse   .     .     569 

Sternberg,   K. ,    Eine   Schnittfärbung    nach    der    Romanowski  sehen 

Methode 416 

Stoeltzuer,  W.,  Über  Metallfärbungen  verkalkter  Gewebeteile  .     .     .     545 

Strasbiirger,  E.,  Typische  und  allotypische  Kernteilung.    Ergebnisse 

und  Erörterungen 460 

Stroß ,  O. ,   Über  das  Wachstum   der  Gonokokken  auf  serumhaltigen 

Nährböden 294 

Takayama,  M,,  Beiträge  zur  Toxikologie  und  gerichtlichen  Medizin, 

nebst  einem  Vorwort  von  Prof.  Dr.  R.  Kobert 557 

Tellyesuiczky,  K.  v.,  Aufkleben  der  Celloidinschnitte 137 

Thesing,  C,  Ein  Wort  zu  dem  Aufsatze  von  Dr.  Giemsa  „Bemer- 
kungen zur  Färbung  der  Spirochaete  pallida" 578 

Thiroiix,  Recher ches  morphologiques  et  experimentales  sur  Trypano- 

soma  paddae 140 

Thomson,  R.  B.,  The  Megaspore-membrane  of  the  Gymnosperms .     .     583 

Thugiitt,  St.  J.,  Fritz  Hindens  „Neue  Reaktionen  zur  Unterschei- 
dung von  Calcit  und  Dolomit 303 

Tiberti,  N. ,   Über  die  Sekretionserscheinungen   in   den   Nebennieren 

der  Amphibien 164 

— ,  — ,  Mikroskopische  Untersuchungen  über  die  Sekretion  des  Pankreas 

bei  entmilzten  Tieren 165 

Triollet,  M.,  Dispositif  pour  steriHser  le  catgut  h  l'autoclave    .     .     .     454 

Turban,  Demonstration   und  Erläuterung  mikroskopischer  Präparate 

von  Tuberkulose 574 

Valediusky,  I.  A.,  Zur  Frage  über  die  Nervenknoten  im  Herzventrikel 

einiger  Säugetiere.     Vorläufige  Mitteilung 44'2 

Vanino,  S.,  u.  Hartl,  F.,  Über  neue  Bildungsweisen  kolloidaler  Lö- 
sungen und  das  Verhalten  derselben  gegen  Baryumeulfat  .     .     305 

Varela  de  la  Iglesia,   R. ,    Contribuciön    al    estudio    de    la    luedula 

espinal 445 

Weidenreich,  F.,  Studien  über  das  Blut  und  die  blutbildenden  und 
-zerstörenden  Organe.  2.  Bau  und  morphologische  Stellung 
der  Blutlymphdrüsen 146 


Inhaltsverzeichnis.  XIII 

Seite 

Weinscheuk,  E.,  Über  die  Skelettteile  der  Kalkschwämme  ....  587 
Winslow,  Ch.-E.  A.,  Elements  of  applied  Microscopy.     A  text-book 

for  beginners 135 

AVoyeicki,  Z.,  Einige  neue  Beiträge  zur  Entwicklungsgeschichte  von 

Basidiobolus  Ranarum 300 

Wuttig,  H. ,  Experimentelle  Untersuchungen  über  Fettaufnahme  und 

Fettablagerung 43(j 

York,  Harlan  H.,  The  Agar-Agar  and  Paraffin  Method  for  imbedding 

Plant  Tissues 4G2 

Zacharias,  E.,  Über  die  Cyanophyceen 297 

Ziegler,  K.,  Histologische  Untersuchungen  über  das  Ödem  der  Haut 

und  des  Unterhautzellgewebes 145 

Zietzschmaun ,  O.,  Über   die  acidophilen  Leukocyten  (Körnerzellen) 

des  Pferdes 429 

Zlatogoroff,  S.  J.,  Zur  Mikrobiologie  der  Masern 450 

— ,  — ,  Zur  Morphologie  und  Biologie  des  Mikroben  der  Bubonenpest 

und  des  Pseudotuberkulosebacillus  der  Nagetiere  [Bac.  pseudo- 

tuberculosis  rodentium] 452 


Verzeichnis  der  Mitarbeiter 

an  Band  XXll. 


Dr.   Gr.  Arndt  in  München. 

Prof.  Dr.  H.  Ambronn  in  Jena. 

E.  Arbeit  in  Wetzlar. 

Dr.  E.  A.  Bessey  in  Miami  (Florida). 

C.  F.  Bödecker  in  Berlin. 

Dr.   G.  Cagnetto  in  Padua. 

Dr.   Di  Cristina  in  Berlin. 

Dr.  P.  Fiorentiui  in  Messina. 

Prof.  Dr.  Alfr.  Fischer  in  Basel. 

H.  Freund  in  Halle  a.  S. 

Prof.  Dr.  F.   C.  C.  Hansen  in  Kopenhagen. 

Prof.  Dr.  M.  Heidenhain  in  Tübingen. 

Dr.  0.  Henker  in  Jena. 

Prof.  Henneberg  in  Gießen. 

Dr.   W.   Hoftmann  in  Berlin. 

Dr.  J.  Just  in  Prag. 

P.   Kouaschko  in  Kiew. 

Dr.  E.  Küster  in  Halle  a.  S, 

Dr.   0.  Levy  in  Halle  a.  S. 

Dr.  K.  Melissinos  in  Athen. 


Verzeichnis  der  Mitarbeiter  an  Band  XXII.  XV 

Dr.  C.  Metz  in  Wetzlar. 

Dr.  L.  Neumayer  in  München. 

A.   Paiily  in   Wien. 

Prof.   W.  Pavlow  in  Charkow. 

Prof.  Dr.  K.  Peter  in  Greifswald. 

Dr.  0.  Richter  in  Prag. 

Dr.   VI.  Rüzicka  in  Prag. 

Prof.  Dr.  P.  Schiefferdecker  in  Bonn. 

Prof.  Dr.  H.   Schmaus  t  in  München. 

Dr.  J.  Schneider  in  Prag. 

Dr.  E.  Schoebel  in  Neapel. 

Dr.  S.  L.  Schonten  in  Utrecht. 

Dr.  G.   Seliber  in  Paris -Charlottenburg. 

Dr.  A.  Siding  in  Wien. 

M.  Signer  in  Messina. 

Dr.   E.   Sommerfeldt  in  Tübingen. 

Prof.  Dr.  K.   Strehl  in   Erlangen. 

Prof.  Dr.  H.  Triepel  in  Greifswald -Breslau. 

W.   Wangerin  in  Halle  a.  S. 


Band  XXIL    Heft  1. 


Beugungsbild  und  Absorptionsbild. 

Von 

Karl  Strehl 

in  Erlangen. 

In  meiner  Abhandlung:  „Theorie  der  allgemeinen  mikrosko- 
pischen Abbildung"  (Erlangen,  1900),  welche  scheinbar  fast  un- 
bemerkt geblieben  ist,  habe  ich  gezeigt,  daß  es  nur  eine  Theorie 
der  optischen  Instrumente  gibt,  die  Beugungstheorie,  und  daß  die 
sogenannten  Theorien  von  Abbe  und  Rayleigh  nur  formal,  nicht 
sachlich  verschiedene  Betrachtungsweisen  vorstellen,  so  wie  man  z.  B. 
auf  dem  Gebiete  der  Geometrie  eine  analytische  und  eine  synthe- 
tische Methode  der  Behandlung  kennt.  Die  Wirkungsweise  des 
Mikroskops  ist  so  "wenig  anders  wie  die  des  Fernrohrs,  daß  wenn 
z.  B.  ein  Planet  - —  etwa  Mars  —  gitterförmiges  Detail  nach  Art 
einer  Diatomee  zeigen  würde,  dann  annähernd  die  Abbe  sehe  „Theorie" 
anwendbar  wäre.-^  Der  Unterschied  ist  nur  der,  daß  die  Art  der 
Beleuchtung  des  Planeten  durch  die  Sonne  eine  Resultante  aller 
möglichen  Phasen  erzeugt,  während  bei  der  Diatomee  die  Beleuchtungs- 
weise mit  streng  gleicher  Phase  möglich  ist.  Es  .handelt  sich  mithin 
nicht  um  dies,  welche  Anschauungsweise  die  richtige  sei,  nur  um 
das,  welche  in  jedem  einzelnen  Fall  leichter  zum  Resultat  führt. 

Um  so  merkwürdiger  mußte  es  mich  berühren,  als  ich  in 
„Dr.  A.  Winkelmann:  Handbuch  der  Physik  2.  Aufl.  VI.  Bd. 
1.  Hälfte,  Optik  I"  p.  380  das  Werk:  „Stefan  Apathy:  Die 
Mikrotechuik  der  tierischen  Morphologie  2.  Abt."  (Leipzig,  1901) 
zitiert    fand,    von  welchem  es  heißt,    daß  es  „die  Abbe  sehe  Theorie 


1)  Vgl.  Zentralz.  f.  Optik  u.  Mach.  Bd.  XXVI,  1905,  No.  6. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  1.  1 


2  Strehl:  Beugimgsbild  und  Absorptionsbild.  XXII,  1. 

der  mikroskopischen  Bilderzeugimg  bestreitet".  Es  schien  lohnens- 
wert,  das  Werk  kommen  zu  lassen,  und  ich  bin  für  die  Mühe  der 
Durchsicht  einigermaßen  auf  meine  Kosten  gekommen  mit  dem  Erfolg, 
daß  ich  im  nachstehenden  eine  kritische  Würdigung  der  Anschauungen 
Apathy's  bieten  will,  in  dem  Sinne,  daß  ich  nicht  sowohl  bei  den 
zahllosen  Eiuzelsätzen  und  fortgesetzten  Wiederholungen  des  Ver- 
fassers jeden  einzelnen  Satz  bestätigen  oder  bestreiten  werde  — 
dies  würde  Bände  geben  —  wie  vielmehr  die  meiner  Ansicht  nach 
wichtigsten  Punkte  herausgreifend  gleich  meine  Meinung  kundgeben 
möchte,  wobei  in  Klammer  hinten  die  Seitenzahl  bei  Apathy  bezw. 
Abbe  beigefügt  wird. 

Zunächst  kann  ich  feststellen:  ApAthy  leugnet  nicht  die  Abbe  sehe 
Theorie,  er  schränkt  sie  nur  ein  (517).  Er  ist  nämlich  der  Ansicht, 
daß  das  gewöhnliche  mikroskopische  Bild  gleichsam  eine  Übereinauder- 
lagerung  von  drei  der  Art  nach  gänzlich  verschiedenen  Bildern  sei, 
einem  Beuguugsbild  im  Sinne  Abbes,  einem  Refraktionsbild  und  einem 
Absorptionsbild,  welch'  letzterem  ApÄthy  den  Vorzug  gibt. 


I.  Beiiguiigstheorie  und  geometrische  Optik. 

Eine  Erörterung  der  theoretischen  Verhältnisse  erscheint  schon 
um  so  mehr  augebracht,  als  bis  auf  diesen  Tag  Mängel  der  Theorie, 
Mißverständnisse  und  Vermischung  von  Beugungstheorie  und  geo- 
metrischer Optik  sich  die  Hand  reichen. 

So  hat  z.  B.  der  Begriff:  „schmaler  Lichtkegel"  Verwirrung 
erzeugt.  In  dem  Werk:  „Gesammelte  Abhandlungen  von  Ernst  Abbe" 
dürfte  der  Satz  (291):  „.  .  .  nun  war  aber  ohne  jede  weitere  Rechnung 
sogleich  einleuchtend,  daß  der  immer  anwachsende  Beugungseffekt 
bei  fortschreitender  Verringerung  des  einfallenden  Lichtkegels  .  .  . 
jedenfalls  bei  solchen  schmalen  Beleuchtungskegeln  das  der  vollen 
Öffnung  zugängliche  Detail  längst  ausgelöscht  haben  mußte"  Mißver- 
ständnissen ausgesetzt  gewesen  sein.  Hier  muß  ich  gleich  bemerken, 
daß  es  eine  Wirkung  dieses  „schmalen  Lichtkegels"  überhaupt  nicht 
geben  kann,  mithin  auch  keine  Beugungswirkung  (513),  weil  er  nur 
ein  Phantom  der  geometrischen  Optik  ist,  vergleichbar  einem  aus  je 
einem  Soldaten  aller  Nationen  der  Erde  zusammengewürfelten 
Bataillon.  Beugungstheoretisch  dürfen  stets  nur  solche  Strahlen 
zusammengefaßt  werden,  welche  kohärent  d.  h.  interferenzfähig  sind 


XXII,  1.  Strehl:  Beugungsbild  und  Absorptionsbild.  3 

und  erzeugen  auch  bei  selbstleuchtenden  Objekten  nur  kohärente  von 
einem  Inchtpunkt  ausgehende  Strahlen  den  Bildpunkt  (519). 

Es  ist  z.  B.  falsch,  daß  bei  sphärischer  Aberration  je  nach  Ein- 
stellung verschiedene  Ordnungen  von  Beugungsspektren  zur  Wirkung 
kommen  (566).  Stets  kommen  alle  Beugungsspektra,  jedoch  in  ver- 
schiedener sich  störender  oder  gar  zerstörender  Weise  zur  Wirkung. 

Mit  Recht  rügt  Apathy,  daß  Abbe  die  Sehtiefe  ohne  Rücksicht 
auf  die  Theorie  der  sekundären  Abbildung  d.  h.  eben  die  Beugungs- 
theorie behandelt  (530).  In  meiner  eingangs  erwähnten  Schrift  ist 
dem  Maugel  abgeholfen. 

Am  merkwürdigsten  dürfte  sein,  daß  man  zwar  seit  Abbe  eine 
Erklärung  der  Wirkung  von  Mikroskopobjektiveu  auf  beugungs- 
theoretischer Grundlage  —  freilich  nur  ganz  allgemein  —  hatte,  die 
Konstruktion  und  Untersuchung  derselben  aber  meines  Wissens  bis 
vor  kurzem  nach  den  Anschauungen  der  geometrischen  Optik  geschah. 
Hier  sucht  meine  Studie:  „Untersuchung  eines  Mikroskopobjektives" 
(Zeitschr.  f.  Instrumentenkunde  Bd.  XXV^,  1905,  p.  3)  Wandel  zu 
schaffen. 


II.  Beugungsbild. 

1.  Existenz  der  „Öffnungsbeugung". 

Abbe  scheint  mit  dem  Satz  (293):  „.  •  .  daß  bei  der  Abbildung.  .  . 
mittels  durchfallender  oder  reflektierter  Strahlen  eine  Öftnungs- 
beugung  .  .  .  überhaupt  nicht  eintreten  kann,  daß  eine  solche  viel- 
mehr prinzipiell  auf  den  Fall  selbstleuchtender  Objekte  beschränkt 
ist"  die  vom  Fernrohrobjektiv  her  bekannte  ÖÖnungsbeugung  d.  h. 
nicht  etwa  mißverstandenerweise  die  Beugung  der  Strahlen  am 
materiellen  Rand  der  Fassung,  sondern  den  für  die  Größe  des 
Bildpunktes  wichtigen  Umstand,  daß  die  Glasscheiben  nicht  un- 
begrenzt groß  sind,  ausdrücklich  geleugnet  zu  haben  (504). 
Rayleigh  gründet  seine  „Theorie"  auf  diese  Öffnungsbeugung. 
Tatsächlich  existiert  diese  auch  beim  Mikroskop;  denn  was  ist  der 
Umstand,  daß  der  die  num.  Ap.  bestimmende  Rand  der  Fassung  in 
der  hinteren  Brennebene  des  Objektives  die  Beugungsspektra  höherer 
Ordnung  abschneidet,  mithin  nur  der  mehr  oder  minder  große  mittlere 
Teil  der  ganzen  Beugungsfigur  zur  Wirkung  kommt,  anders  als  eben 
Öffnungsbeugung?    Man  darf  nur  nicht  vergessen,  daß  es  neben  den 

1* 


4  •  Strehl:  Beugungsbild  und  Absorptionsbild.  XXII,  1. 

Maxima  1.  Ordnung  —  nicht  zu  verwechseln  mit  den  Ordnungen 
der  Beugiingsspektra;  dies  sind  lauter  Max.  1.  Ordnung  —  schon 
im  einfachsten  Fall  auch  solche  2.  Ordnung  gibt,  ja  strenggenommen 
die  Beugungsfigur  stets  kontinuierlich  ist  (512).  Je  mehr  von  dieser 
abgeschnitten  wird,  desto  schlechter  wird  die  Abbildung.  Es  tut 
gar  nichts  zur  Sache,  ob  ich  statt  der  hinteren  Brennebene  des 
Objektives  die  Austrittspupille  des  ganzen  Mikroskops  über  dem 
Okular  zu  Rate  ziehe.  Ich  bitte  nur  zu  beachten,  '  daß  dort  die- 
selben Beugungsspektra  nur  in  kleinem  Maßstab  sich  wieder  finden  (506). 
Wenn  man  die  Austrittspupille  verkleinert,  dann  werden  Beugungs- 
spektra abgeschnitten  (507). 


2.  Beseitigung  der  „OflFnungsbeugung". 

Apäthy  bemüht  sich  mit  der  Frage  der  Beseitigung  der  Öff- 
nungsbeugung. Diese  kann  natürlich  nicht  beseitigt  werden  (521, 
bezw.  490),  denn  sie  hängt  mit  der  Art  der  Bilderzeugung  zu- 
sammen :  Objektive  von  unendlicher  linearer  Öffnung  bei  endlicher 
Tubuslänge,  bezw.  unendlich  kleine  Wellenlängen  gibt  es  eben  nicht. 
Apathy  hält  es  für  nützlich  die  Lichtquelle  in  die  Objektivöffnung 
zu  projizieren  (520).  Allein  auch  in  diesem  Falle  kann  das  Bild 
nicht  als  ein  Schattenbild  nach  geometrisch -optischen  Gesetzen  auf- 
gefaßt werden,  vielmehr  wird  jede  Stelle  des  Präparates  zu  einem 
sekundären  Lichtpunkt;  wo  die  Beleuchtungsstrahlen  an  und  für  sich 
ihren  Schnittpunkt  haben ,  ändert  an  der  Sache  gar  nichts.  Der 
ganze  Unterschied  wäre  der :  Bei  Projektion  der  Lichtquelle  in  die 
Objektivöffnung  wird  ein  großer  Teil  des  Präparats  mit  kohärentem 
Licht  von  kontinuierlich  sich  ändernder  Phase  beleuchtet.  Bei  Pro- 
jektion einer  selbstleuchtenden  Lichtquelle  in  die  Präparatebene 
leuchtet  das  Präparat  Stelle  für  Stelle  mit  gegenseitig  inkohärentem 
Licht.  Ob  wirklich  erstere  Beleuchtungsart  —  vielleicht  infolge 
von  der  über  das  Präparat  wandernden  Phasenverschiebung  —  einen 
nennenswerten  Vorteil  ergibt ,  möchte  ich  dahingestellt  sein  lassen : 
Die  Öffnungsbeugung  wird  weder  so  noch  anders  beseitigt. 


XXII,  1.  Strehl:  Beugungsbild  und  Absorptiunsbild.  5 

III.   Refraktionsbild. 

1.    Schiefe  Beleuchtung. 

Hier  möchte  ich  zeigen ,  daß  wenn  schiefe  Beleuchtung-  bei 
dickem  Präparat  ganz  seltsame  Dinge  zeigt ,  man  dann  nicht  erst 
auf  das  Refraktionsbild  zurückkommen  muß,  dies  vielmehr  beugungs- 
theoretisch so  sein  muß. 

a)  Streifen  lose   Schichten. 

Setzen  wir  voraus,  das  Präparat  bestehe  aus  strukturlosen  durch- 
scheinenden Schichten  parallel  zur  Tischebene  mit  den  Abständen  X. 
Wenn  wir  gerade  Beleuchtung  mit  enger  Blende  verwenden ,  dann 
erblicken  wir  ohne  Okular  nur  ein  weißes  ungebeugtes  Hauptmaximum 
ohne  jedes  Beugungsspektrum  —  vorausgesetzt  ist  natürlich  ein 
Objektiv  von  der  num.  Ap.  =  1,  mit  Okular  ein  gleichförmiges  Ge- 
sichtsfeld. Wenn  wir  hingegen  äußerst  schiefe,  d.  h.  wagrechte 
Beleuchtung  verwenden ,  dann  wirkt  das  Präparat  als  Gitter  und 
sendet  neben  dem  jetzt  am  Rand  zu  liegen  kommenden  weißen  un- 
gebeugten Hauptmaximum  mindestens  noch  ein  hier  in  die  Achse 
fallendes  Beugungsspektrum  in  das  Objektiv :  wir  erblicken  eine  zur 
Verbindungsstrecke  senkrechte  Streifung. 

b)  S  ch  i  cht  en  1 0  se    Streifen. 

Setzen  wir  als  Präparat  strukturlose  Streifen  (im  Sinne  von  Papier- 
„streifen")  senkrecht  zur  Tischebene  mit  den  Abständen  X  voraus. 
Bei  gerader  Beleuchtung  erblicken  wir  unter  Verwendung  eines  Ob- 
jektivs von  der  num.  Ap.  =  1  natürlich  ohne  Okular  ein  weißes 
ungebeugtes  Hauptmaximum  in  der  Achse  und  beiderseits  am  Rand 
je  ein  Beugungsspektrum ,  mit  Okular  ein  Bild  der  Streifung.  Bei 
äußerst  schiefer  (wagrechter)  Beleuchtung  kann  das  Präparat  nicht 
als  Beugungsgitter  wirken,  wir  erblicken  ohne  Okular  nur  ein  weißes 
ungebeugtes  Hauptmaximum  am  Rand,  mit  Okular  ein  gleichförmiges 
Gesichtsfeld.  Daß  man  in  Wirklichkeit  auch  in  diesem  Fall  die  Strei- 
fuug  sieht ,  kommt  davon  her ,  daß  die  notwendigen  Bedingungen 
sich  schwer  rein  verwirklichen  lassen;  daß  man  für  gewöhnlich  bei 
sehr  schiefer  Beleuchtung  Streuungen  äußerst  scharf  sieht,  hängt 
mit  andern  Verhältnissen  zusaiiimen,    d.  h.    man   sollte  sie  eigentlich 


6  Strehl:  Beugungsbild  und  Absorptionsbild.  XXII,  1. 

bei  gerader  Beleuclituug  ebenso  scharf  sehen,  wären  nicht  hindernde 
Umstände  vorhanden. 

Wir  sehen,  schiefe  Beleuchtung  neigt  dazu,  an  Stelle  der  Struktur 
parallel  zur  Tischebene  beim  dicken  Präparat  die  Struktur  senkrecht 
zur  Tischebene  zu  zeigen.  Wenn  es  auch  nicht  dazu  kommt,  daß 
erstere  ausgelöscht  wird,  dann  wird  es  doch  vorkommen,  daß  letztere 
sich  störend  einmischt,  und  dies  selbst  bei  gerader  Beleuchtung  am 
Rand  dicker  Präparate  aus  dem  umgekehrten  Grunde.  Ich  bin  des- 
halb mit  Abbe  entschieden  der  Ansicht,  daß  dünne  Präparate  und 
gerade  Beleuchtung  die  wissenschaftliche  Normalbeobachtungsform  ist. 


2.    Refraktionsbild. 

Gleichwohl  will  ich  Apathy  nicht  unrecht  geben ;  es  gibt  zweifels- 
ohne Wirkungen  der  Absorption  (Schatten) ,  Brechung ,  totalen  und 
partiellen  Reflexion  (Richtungsänderung) ,  Verzögerung  (Phasenände- 
rung) im  Präparat  (574).  Nur  darf  man  sich  ja  nicht  vorstellen, 
daß  diese  Prozesse  im  Gebiete  der  Größenordnung  der  Wellenlänge 
auch  durchaus  so  verlaufen  müssen,  wie  an  Objekten  von  endlicher 
Größe. 

Die  Experimente  von  Braun  (Nachahmung  der  elektrischen  Ver- 
suche von  Hertz  mit  Lichtwellen  an  mikroskopischen  Gittern)  haben 
vielmehr  ergeben ,  daß  je  nach  der  Größe  der  Gitterkonstante  die 
Polarisation  bald  senkrecht,  bald  parallel  zu  den  Gitterstäben  ver- 
läuft. Theoretische  Untersuchungen  über  die  Polarisation  des  Lichtes 
bei  Spiegelung  an  Kugeln  von  der  Größe  X  ergaben  verschiedene 
Resultate  bezüglich  des  günstigsten  Polarisationswinkels  für  Kugeln 
aus  Metall  und  Kugeln  aus  dielektrischen  Stoff'en.  Praktische  Unter- 
suchungen ergaben  eine  verschiedene  Reflexions-  bezw.  Zerstreuungs- 
fähigkeit an  Kugeln  von  der  Größe  einer  Wellenlänge  und  Kugeln, 
welche  klein  gegen  l  sind  (Rayleigh).  Durch  Moleküle  geht  das 
Licht  möglicherweise  ohne  Richtungsänderung,  nur  geschwächt  und 
freilich  mit  Phasenänderung,  hindurch. 

Ich  bin  der  Ansicht:  Wie  sich  elektrische  Wellen  gegen  Objekte 
von  gewöhnlicher  Größe  verhalten ,  so  verhalten  sich  Lichtwellen 
gegen  mikroskopische  Objekte.  Die  Durchleuchtung  mikroskopischer 
Präparate  ist  ein  Abbild  im  kleinen  der  Telegraphie  ohne  Draht 
durch  Hindernisse.  Aus  letzterer  wird  man  vielleicht  noch  bezw. 
erst  viel  über  erstere  erfahren. 


XXII,  1.  Strehl:  Beugungsbild  und  Absorptionsbild. 


IV.  Al)Sorptionsbil(l. 

Nach  Apathy  sind  die  beiden  Bedingungen  des  reinen  Absorp- 
tionsbildes:  1)  Die  Lichtbrechimgeu  im  Objekt  müssen  ausgeglichen 
werden.     2)  Beleuchtung  mit  voller  Apertur  (572). 

1.   Färbungsbild. 

Daß  sich  die  Zwischen-  und  Querscheiben  beim  quergestreiften 
Muskel  färben  lassen,  halte  auch  ich  für  sehr  wichtig  (582).  Nur 
muß  man  berücksichtigen,  daß  verschiedene  Färbbarkeit  bezw.  sogar 
Färbung  nicht  immer  Anzeiclien  stofflicher  Verschiedenheit,  manchmal 
nur  von  verschiedener  Diclitigkeit  sein  wird. 

Abbes  Unterscheidung  zwischen  Absorptionsbild  und  Struktur- 
bild, die  er  später  glücklich  fallen  ließ,  denn  beides  sind  Beugungs- 
bilder, hat  gar  nichts  zu  tun  mit  Apathys  Färbungsbild  (508). 

2.   Selbstleuchtendes  Bild. 

Wenn  man  mit  einem  Kondensor  von  größerer  Apertur  als  das 
Objektiv  das  Bild  einer  selbstleuchtenden  Lichtquelle  in  die  Präparat- 
ebene wirft,  dann  leuchtet  jede  noch  auflösbare  Stelle  mit  eigenem 
(inkohärentem)  Licht.  Auch  dies  ist  gleichsam  ein  Färbungsbild, 
nur  für  gewöhnlich  arm  an  Farben :  hell  und  dunkel.  Auf  diese 
Weise  betrachtet  man  ja  die  Bakterien.  Indem  Apa'thy  nach  Mög- 
lichkeit färbt,  macht  er  sich  von  der  Bedingung  des  Selbstleuchtens 
frei ;  denn  z.  B.  ein  rotes  Korn  und  ein  blaues  Korn  nebeneinander 
leuchten  auch  mit  gegenseitig  interferenzunfähigem  Licht. 

Durch  die  Aufhellung  des  Präparates  (Beseitigung  von  allen 
Lichtbrechungen)  sucht  Apathy  Störungen  fernzuhalten,  durch  Be- 
leuchtung mit  voller  Apertur  das  leider  durch  die  Aberrationen  der 
Objektive  getrübte  Maximum  des  Auflösungsvermögens  zu  erzielen. 
Dieser  Weg  ist  rationell. 


V.   Vergleichuug  (Mischbild). 

Für  gewöhnlich   hat  man   nun  nach  Apathy  eine  Mischung  von 
Beugung    (im  engeren  Sinne) ,    Refraktion   (im   weitesten   Sinne)    und 


8  Strehl:  Beugungsbild  und  Absorptionsbild.  XXII,  1. 

Absorption.  Diesen  gestörten  Durchgang  des  Lichtes  durch  ein 
Präparat  nannte  ich  in  meiner  Abhandlung  „Beugung"  schlechthin. 
Je  nachdem  man  Planspiegel,  Hohlspiegel,  direkte  oder  indirekte 
Lichtquelle,  Kondensor  mit  großer  oder  kleiner  Öffnung  und  scharfer 
oder  unscharfer  Einstellung  verwendet,  wird  die  Wirkung  verschieden 
(554) ,  indem  bald  mehr ,  bald  weniger  benachbarte  Elemente  mit 
kohärentem  Lichte  von  größerer  oder  kleinerer  PhasendifFerenz  be- 
leuchtet werden.  Rechnerisch  ist  nichts  unmöglich,  nur  müßte  man 
stets  die  Bedingungen  genau  kennen  und  ist  die  Rechnung  nicht 
immer  kurz.  Helmiioltz  ,  Abbe  ,  Rayleigh  behandelten  in  ihrer 
„Theorie"  ja  nur  die  allereinfachsten  Sonderfälle.  Ich  bin  syste- 
matisch weiter  gegangen,  soweit  dies  einen  Sinn  hat.  Bei  den  kom- 
plizierten Beobachtungsfällen  heißt  es  eben :  „Probieren  geht  über 
Studieren." 


1.  Auflösungsvermögen. 

Isolierte  helle  Objekte  sind  bei  genügend  intensiver  Beleuchtung 
bis  fast  zur  Eiweißmolekülgröße  herab  sichtbar. 

Isolierte  dunkle  Objekte  erfordern  eine  gewisse  Größe,  um  sicht- 
bar zu  sein  (vgl.  meine  demnächst  in  der  Instrumentenkunde  er- 
scheinende  „Astrophotometrie"). 

Etwas  anders  ist  die  Trennung  mehrerer  Objekte,  und  wieder 
verschieden  die  von  2  oder  oc  vielen,  beleuchteten  oder  selbstleuchten- 
den, Punkten  oder  Geraden  oder  Flächen,  hellen  auf  dunklem  oder 
dunklen  auf  hellem  Grund.  All  diese  Fälle  habe  ich  längst  berechnet. 
Mikroskop  oder  Fernrohr  macht  hier  keinen  Unterschied.  Sehr  ver- 
schieden sind  die  Werte  im  allgemeinen  nicht  (582). 

ApATHYS  Absorptionsbild  ergibt  dem  allgemeinen  Auflösungs- 
vermögen nach  keine  Verbesserung.  Wenn  ein  rotes  und  ein  grünes 
Korn  in  nicht  mehr  auflösbarem  Abstand  nebeneinander  liegen,  dann 
verschmelzen  eben  das  runde  rote  und  das  runde  grüne  zu  einem 
links  rot,  in  der  Mitte  weiß,  rechts  grün  gefärbtem  ovalen  Beugungs- 
scheibchen  (553).     Gewonnen  wird  hierdurch  im  wesentlichen  nichts. 


2.   Objektähnlichkeit. 

Die  Erklärung   der   verschiedenen  Pleurosigmabilder  blieb  nicht 
etwa    bei    einem    vergeblichen  Versuch    stehen    (567) ;    ich    empfehle 


XXII,  1.  S  t  r  e  h  1 :  Beugungsbild  und  Absorptionsbild.  9 

diesbezüglich  das  Studium  meiner  Abhandlung :  „Das  Pleurosigma- 
bild"   fZeitschr.   f.  Instrumentenkunde  XIX,   p.  325,    1899). 

Daß  das  Beugnngsbild  zu  zahllosen  Täuschungen  Anlaß  gibt, 
ist  nicht  neu  und  längst  erörtert,  besonders  der  Begritf  „Tiefenbild". 
Es  fand  denn  auch  Apathy  bei  Triceratium  und  verschiedener  Ein- 
stellung nicht  weniger  als  15  Bilder,  welche  von  der  Lage  der 
Schale  niclit  abhängen ,  und  2 ,  welche  bei  Ümwendung  derselben 
umgekehrte  Einstellung  erfordern  (514). 

Ich  halte  es  für  glaubhaft,  daß  Apathys  Färbungsbild  nach 
der  Seite  der  Objektähnlichkeit  einen  Fortschritt  darstellt,  und  daß 
er  auf  diese  Weise  neue  und  wichtige  Resultate  fand,  ohne  die  letz- 
teren selbst  beurteilen  zu  können. 

Wenn  Abbe  sagt  (291),  „denn  beim  wirklichen  Gebrauch  stär- 
kerer Objektive  hatte  ich,  außer  für  ganz  exzeptionelle  Zwecke,  nie- 
mals eine  andere  (Beleuchtung)  in  Anwendung,  oder  auch  nur  mit 
Vorteil  anwendbar  gefunden",  dann  möchte  ich  bemerken,  daß  Abbe 
in  erster  Linie  Physiker  war,  auch  daß  sich  sein  „schmaler  Licht- 
kegel"   auf  die  Unterscheidung   an   dünnen  Präparaten  bezog  (510). 


Tl.   Beleuchtungsstärke. 

„Planspiegel"  ist  nichts  anderes  als  „Lochblende"  bei  direkt 
gegen  eine  Lichtquelle  gehaltenem  Tubus. 

„Hohlspiegel"  ist  nichts  anderes  als   „Planspiegel  -|-  Linse". 

Der  allgemeinste  Fall  ist  theoretisch  eine  Linse  vom  Öffnuugs- 
halbmesser  r  und  der  Brennweite  /",  im  Abstand  d  vom  Präparat, 
das  Mikroskop  direkt  auf  eine  (runde)  Lichtquelle  von  der  halben 
Winkelöffnung  99   und    dem    spezitischen  Leuchtvermögen  e  gerichtet. 

Die  in  1  sec  durch  1  qmm  der  Linsenöffnung  gehende  Licht- 
menge ist  proportional  e  sin'  cp ;  wäre  keine  Linse  da ,  wäre  dies 
die  Wirkung  des  Planspiegels  auf  die  Präparatebene  (vorausgesetzt, 
daß  vom  Präparat  aus  die  ganze  Lichtquelle  durch  den  Planspiegel 
übersehbar  ist;  außerdem  hätte  man  99  eben  zu  reduzieren). 

Die  durch  die  Linse  eintretende  Lichtmenge  e  sin-  99  •  >■-  n  (wo- 
bei alles  in  mm  zu  messen)  wird  konzentriert  auf  die  Kreisfläche  s-71 
in  der  Präparatebene.  Die  Wirkung  des  Kondensors  auf  die  Prä- 
paratebene ist  mithin  e  sin"  99  •  V'^js^'^  um  s  zu  berechnen,  setze  man 
zunächst  o  =  f-  tan  99  =  Radius  des  Bildes  der  Lichtquelle  und  hat 


10    Schouten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.  XXII,  1. 

schließlich  s  =  r  —  (r — 0)  •  djf-^    bei  scharfer  Einstellung  des  Kon- 
densors ist  die  Wirkung  auf  die  Präparatebene  s  sin'-^  99  •  r-/a-. 

Schließlich  möchte  ich  noch  erwähnen,  daß  der  Kondensor  den 
Wolkenhimmel  oder  staubige  Fenster  mehr  oder  minder  scharf  in 
der  Präparatebene  abbildet  und  aus  diesem  rein  praktischen  Grund 
oft  Anlaß  zu  schlechten  Bildern  gibt. 

[Eingegangen  am  24.  Februar  1905.] 


[Aus  dem  botanischen  und  dem  hygienischen  Institut  der  Universität 

in  Utrecht.] 

Reinkulturen  aus  einer  unter  dem  Mikroskop 

isolierten   Zelle. 

Von 

Dr.  S.  L.  Schouten 

in  Utrecht. 


Hierzu   dreizehn   Holzschnitte. 


Einleitung. 


Kochs  Plattenkulturmethode  ist  es  zu  danken,  daß  das  Studium 
der  Mikroorganismen  und  speziell  die  Bakteriologie  in  der  letzten 
Zeit  so  außerordentliche  Fortschritte  gemacht  haben.  Aber  dennoch 
ist  die  Herstellung  einer  Reinkultur  vieler  Mikroorganismen  noch 
ein  ungelöstes  Rätsel. 

Viele  Forscher  v^^erden  meinen,  dieses  sei  nicht  die  Folge  eines 
Mangels,  welchen  diese  Methode  als  solche  hat,  sondern  es  hänge 
vielmehr  damit  zusammen ,  daß  die  richtige  Zusammensetzung  des 
Nährbodens  in  solchen  Fällen  noch  unbekannt  ist.  Sie  denken,  daß 
die  Herstellung  einer  Reinkultur  vermittels  der  Plattenkulturmethode 
sicherlich  gelingen  wird,  wenn  diese  erst  gefimden  ist. 

Obgleich  es  mir  selbstverständlich  fern  liegt,  Kochs  geniale 
Erfindung  auch  nur  im  geringsten  zu  bekritteln ,    ich  vielmehr  ihren 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkultureneiner  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle,    n 

Wert  voll  anerkenne ,  glaube   ich    doch ,    daß    obige  Meinung    falsch 
ist ,  und    daß    im  Verfahren    selbst    die  Ursache    dafür    liegen  kann, 
daß    es    bisher    bei    vielen    Mikroorganismen    resultatlos    verwendet, 
wurde. 

Das  ist  z.  B.  der  Fall  bei  verschiedenen  größeren  Organismen, 
welche  in  Medien  vorkommen,  worin  sich  zugleich  viel  Bakterien 
befinden,  wie  Amöben,  Infusorien,  große  Sporen  von  Pilzen,  von 
Myxomyceten  etc.  Ich  glaube,  daß  die  Reinkultur  solcher  Organismen 
oft  deshalb  mißglückt  ist ,  weil  es  außerordentlich  schwierig  ist ,  sie 
durch  Schütteln  (der  Hauptfaktor  der  Plattenkulturmethode)  von  den 
Bakterien  zu  befreien ,  die  in  ihrer  unmittelbaren  Nähe  liegen  oder 
auf  ihrer  Außenseite  festsitzen ;  die  Folge  ist ,  daß  wolil  Kolonien 
entstehen,  aber  daß  nach  kürzerer  oder  längerer  Zeit  sich  doch  die 
Verunreinigungen  durch  Bakterien  zeigen. 

Auch  ist  es  möglich,  daß  die  chemischen  Eigenschaften  der 
Gelatine  als  solche  schädlich  auf  die  Entwicklung  wirken.  Das  ist 
z.  B.  durch  Winogradsky  bewiesen  für  die  Nitrit-  und  Nitrat-bildenden 
Bakterien  in  der  Erde.  Diese  können  auf  Nährböden,  welche  reich 
an  organischen  Nährstoffen  sind ,  nicht  gedeihen.  Es  ist  durchaus 
nicht  gewagt ,  a  priori  anzunehmen ,  daß  dies  mit  mehreren  Arten 
von  Bakterien  der  Fall  ist ,  welche  man  bisher  noch  nicht  in  Rein- 
zucht hat  gewinnen  können. 

Endlich  kann  vielleicht  die  physische  Natur  der  Gelatine, 
nämlich  die  Tatsache ,  daß  sie  einen  festen  Nährboden  liefert ,  der 
Grund  sein  für  die  negativen  Resultate ,  die  man  bisher  bei  einigen 
Organismen  erzielt  hat.  Wenn  diese  nämlich  in  der  Natur  nur  in 
flüssigen  Medien  vorkommen  und  auch  ihr  Bau  (z.  B.  der  Besitz  von 
Cilien)  und  ihre  Lebensverrichtungen  fz.  B.  schnelle  Bewegung)  ver- 
raten, daß  sie  speziell  für  flüssige  Medien  geeignet  sind,  dann  wird 
man  sich  a  priori  nicht  wundern,  daß  man  unter  ihnen  einige  findet, 
die  auf  einem  festen  Nährboden  weniger  gut  oder  überhaupt  nicht 
wachsen  können.  Das  kann  z.  B.  zugleich  mit  den  oben  angegebenen 
Gründen  eine  der  Ursachen  sein ,  daß  Amöben  und  Myxomyceten, 
die  in  ihrer  Entwicklung  ein  Schwärmerstadium  durchlaufen ,  sowie 
Infusorien  und  viele  Bakterien,  die  sehr  beweglich  sind,  noch  nicht 
rein  gezüchtet  werden  konnten. 

Doch,  was  auch  die  Gründe  sein  mögen ,  es  ist  eine  Tatsache, 
daß  man  von  vielen  Organismen  auf  keinerlei  Weise ,  auch  nicht 
vermittels  der  Plattenkulturmethode ,  eine  Reinkultur  hat  herstellen 
können. 


12    Scheuten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Diese  und  andere  Gründe  ließen  es  mir  als  nicht  überflüssig 
erscheinen,  auf  dem  Gebiete  der  Eeinknlturtechnik  einmal  einen  ganz 
neuen  Weg  zu  versuchen  und  zu  sehen,  zu  welchen  Resultaten  ich 
damit  kommen  würde. 

Die  Resultate  sind  in  kurzen  Worten  folgende.  Man  kann  mit 
Hilfe  von  feinen  Glasnadeln ,  deren  Bewegung  vermittels  einer  be- 
stimmten Mechanik  vollständig  geregelt  wird ,  aus  einem  Gemenge 
verschiedener  Mikroorganismen  einen  beliebigen  isolieren  und 
auf  einen  Nährboden  überführen.  Zu  diesem  Zweck  bringt  man  von 
dem  Material,  aus  dem  man  eine  Zelle  isolieren  will,  einen  Tropfen 
auf  ein  Deckglas  und  daneben  in  einigem  Abstand  einen  Tropfen 
von  dem  Nährboden,  in  welchem  die  Kultur  entstehen  soll.  Das 
Deckglas  wird  auf  eine  feuchte  Kammer  gelegt,  die  sich  auf  dem 
Objekttisch  des  Mikroskops  befindet,  und  durch  deren  Seitenwände 
man  die  genannten  Nadeln  so  gestochen  hat ,  daß  sie  mit  ihren 
Spitzen  das  Deckglas  berühren  können.  Vermittels  der  Nadeln  kann 
man  nun  mit  der  stärksten  Vergrößerung  eine  Bakterie  oder  eine 
andere  Zelle  aus  dem  Tropfen  isolieren  und  in  einen  andern  über- 
führen. Danach  wird  das  Deckglas  auf  eine  einfache  feuchte  Kammer 
gelegt,  die,  wenn  nötig,  in  einen  Brutschrank  gesetzt  werden  kann. 
Das  Wachstum  der  Kolonie  kann  von  Anfang  an  dann  auch  mit  der 
stärksten  Vergrößerung  beobachtet  werden. 

Nicht  nur  für  den  oben  beschriebenen  Zweck ,  die  Gewinnung 
von  Reinkulturen  im  allgemeinen,  sondern  auch  für  viele  andere 
Probleme ,  welche  man  nicht  im  voraus  zu  bestimmen  imstande  ist, 
kann  die  neue  Methode  nützlich  sein.  Es  muß  doch  im  allgemeinen 
von  großem  Interesse  sein,  daß  mau  jetzt  eine  Bakterie  oder  etwaige 
andere  Mikroorganismen  ebensogut  „aussäen"  kann  als  eine  höhere 
Pflanze,  daß  man  ilire  Entwicklung  von  Anfang  an  beobachten,  daß 
man  sie,  mit  einem  Wort,  individuell  behandeln  kann. 

Auf  ein  Problem,  für  welches  ich  die  Methode  besonders  ge- 
eignet halte,  und  worüber  ich  weiter  unten  einige  Versuche  mit- 
teilen werde ,  will  ich  schon  jetzt  weisen.  Ich  meine  das  der 
Variabilität  und  der  Pleomorphie.  Jedermann  muß  zugeben,  daß 
auf  diesem  Gebiete  noch  viel  methodisch  gearbeitet  werden  muß. 
Wer  nur  ein  wenig  tiefer  in  die  Bakteriologie  und  speziell  in  die 
bakteriologische  Systematik  eindringt,  wird  zu  dem  traurigen  Schluß 
kommen,  daß  durch  die  unmethodischen  Arbeiten  vieler  Forscher 
der  letzten  .lahre  das  Material  wie  in  einem  Augiasställe  aufgehäuft 
ist.     Es    wäre    wünschenswert,    daß    man    endlich    einmal   ein   Ende 


XXII,  1.   Schouten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    13 

machte  mit  dem  oft  ganz  unmotivierten  Beschreiben  „neuer"  Arten. 
Viele  Forscher ,  welche  jetzt  irgendwo  eine  Bakterie  finden ,  stellen 
eine  Kulturplatte  dar,  beobachten  das  Wachstum  auf  einigen  der 
gebräuchlichsten  Nährböden  und  warten  ab,  ob  sie  eine  Ähnlichkeit 
mit  einer  schon  bestehenden  Art  konstatieren  können.  Finden  sie 
diese  nicht  gleich  bei  ihren  ersten  Versuchen,  dann  glauben  sie  der 
Wissenschaft  wunders  einen  Dienst  zu  erweisen,  wenn  sie  die  „neue" 
Art,  begleitet  von  einer  Diagnose,  die  in  gar  vieler  Beziehung  dunkel 
ist  oder  größtenteils  sich  in  allgemeinen  Ausdrücken  bewegt,  in  die 
Welt  schicken.  Darum  aber  bekümmern  sie  sich  nicht ,  welchen 
ändernden  Einfluß  etwa  frühere  Lebensumstände  auf  die  gefundene 
Bakterie  gehabt  haben  können,  oder  welche  Modifikationen  die  von 
ihnen  verwendeten  Nährböden  imstande  sind  noch  zu  verursachen. 
Und  das  sind  doch,  neben  vielen  andern,  immerhin  sehr  belangreiche 
Faktoren.  Daher  kommt  es,  daß  man  viele  Arten,  die  man  anfäng- 
lich als  verschieden  ansah,  später  doch  als  gleich  beurteilen  lernte, 
daß  man  es  mit  andern  Worten  mit  pleomorphen  Formen  zu  tun 
gehabt  hatte ,  und  daß  man  anderseits  Arten ,  die  man  früher  für 
gleich  angesehen  hatte,  scheiden  mußte. 

Wie  dem  auch  sei,  es  herrscht  eine  entsetzliche  Verwirrung 
auf  dem  Gebiete  der  bakteriologischen  Systematik,  einmal  infolge 
der  großen  Schwierigkeiten,  die  das  zu  bearbeitende  Material  selbst 
für  den  kundigsten  Forscher  hat,  dann  infolge  des  unachtsamen  und 
flüchtigen  Arbeitens  anderer.  Will  man  dieser  Verwirrung  so  viel 
als  möglich  Einhalt  tun,  dann  muß  vor  allem  die  Variabilität  und 
der  Pleomorphismus  gründlich  studiert  werden.  Und  für  ein  solches 
Studium  ist  es  notwendig,  darüber  durchaus  sicher  zu  sein,  daß  man 
bei  der  Herstellung  der  Reinkultur  auch  wirklich  von  nur  einer  Zelle 
ausgegangen  ist. 

Ferner  muß  man  unbedingt  jede  folgende  Generation  für  sich 
imtersuchen  können,  wenn  man  einen  Mikroorganismus  sich  unter 
veränderten  äußeren  Umständen  teilen  läßt,  ebensogut  wie  man  bei 
höheren  Pflanzen  alle  aufeinander  folgenden  Generationen  auf  diesen 
Punkt  untersuchen  kann.  Wenn  man  z.  B.  dem  nachgehen  will,  was 
für  einen  verändernden  Einfluß  eine  sauere  Nährflüssigkeit  auf  einen 
bestimmten  einzelligen  Organismus  a  hat,  dann  muß  man  a  sich  in 
der  saueren  Flüssigkeit  in  zwei  Zellen  a^  -\-  a^  teilen  lassen  können, 
die  eine  Zelle  a^  sofort  auf  einen  gewöhnlichen  Nährboden  bringen, 
die  andere  sich  wiederum  in  a.^  -(-  «3  teilen  lassen  können.  Danach 
muß  man  wieder  die  eine  Zelle  «„  ^nf  denselben  gewöhnlichen  Nähr- 


14    Schonten:  Reinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII.  1. 

bodeu  bringen,  und  die  andere  sich  wiederum  zu  a.^-\-a^  teilen 
lassen,  etc.  Auf  solche  Weise  erhält  man  Kulturen  der  aufeinander 
folgenden  Generationen  a^^  a.^j  a.^  etc.,  und  kann  studieren,  inwie- 
weit die  veränderten  P^ormen  allmälilich  ineinander  übergehen 
oder  auch  sprungweise  durch  Mutation  auseinander  ent- 
standen sind. 

Ich  bilde  mir  durchaus  niclit  ein,  daß  diese  meine  Methode  ein 
Mittel  ist,  mit  der  man  alle  möglichen  Reinkulturen  herstellen  kann 
(denn  welche  Methode  ist  überhaupt  unbegrenzt  brauchbar!),  oder 
daß  sie  gar  die  schon  bestehende  Reinkulturmethode,  die  in  so 
vieler  Beziehung  ausgezeichnete  Plattenkulturmethode  verdrängen  wird. 
Ich  kann  mir  sehr  gut  Fälle  vorstellen,  in  denen  sie  nicht  bequem, 
vielleicht  gar  nicht  anwendbar  ist,  z.  B.  wenn  die  Bakterien  sich 
zwischen  sehr  feinen,  aus  Stäbchen  und  kleineu  Partikelchen  be- 
stehenden Detritus  befinden.  Mein  Ziel  ist  nur,  sie  anzuwenden, 
solange  man  auf  keinem  andern  einfacheren  Wege  zum  Ziele  kommt. 

Zum  Schlüsse  noch  die  kurze  Bemerkung:  die  Gruudleger  der 
Mykologie  (de  Bary,  Brefeld  n.  a.)  sind  bei  der  Herstellung  ihrer 
Pilzkultureu  immer  nur  von  einer  Zelle  in  einem  hängenden  Tropfen 
ausgegangen.  Bekanntlich  war  ihre  Methode,  eine  Masse  Sporen 
und  Conidieu  in  einer  sterilisierten  Flüssigkeit  zu  verteilen,  auf  ver- 
schiedeneu Deckgläsern  dann  eine  Menge  hängender  Tropfen  anzu- 
bringen und  solange  zu  suchen,  bis  sie  einen  Tropfen  fanden,  in 
dem  sich  eine  Spore  oder  Conidie  befand.  Die  Kulturflüssigkeiten 
wurden  ein  wenig  sauer  genommen,  um  Bakterienentwicklung  zu 
verhindern.  Für  morphologische  Studien  sind  solche  Kulturen  sehr 
geeignet,  aber  als  Ausgangspunkt  für  physiologische  Untersuchungen 
nicht,  denn  für  die  Reinheit  kann  man  durchaus  nicht  garantieren. 
Ihre  Methode  ist  aber  nicht  brauchbar  für  kleinere  Zellen,  und  durch- 
aus nicht  für  Bakterien. 


Beschreibung  des  Isolierapparates. 

Figur  1  gibt  eine  schematische  Darstellung  des  Instrumentes, 
das  zur  Isolierung  dient.  Die  Zeichnung  stellt  einen  1  :  4  ver- 
kleinerten vertikalen  Durchschnitt  durch  die  Mitte  des  Apparates  dar. 

Ä  ist  eine  eiserne  Platte,  die  aitf  vier  Füßchen  steht.  Das 
Mikroskop  ist  vermittels  eines  Bügels  auf  einer  viereckigen  kupfernen 
Platte  B  befestigt.     Durch  Drehung   einer  Schraube   kann   man   das 


XXll,  1.   Schonten:  Reinkultureneiner  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    15 

Mikroskop  mit  B  nach  links  und  rechts  bewegen,  vermittels  einer 
anderen  Schraube  vorwärts  und  rückwärts. 

Von  dem  Mikroskop  ist  gezeichnet  der  Objekttisch  jF,  der  Be- 
leuchtungsapparat von  Abbe  G^  die  Irisblende  H^  der  Spiegel  /, 
der  Fuß  J  und  ein  Objektiv  K.  Auf  dem  Objekttisch  befindet  sich 
eine  feuchte  Kammer,  die  „Isolierkammer"  Z,  die  eine  besondere 
Konstruktion  liat.  Ihre  linke  und  rechte  Seitenwand  nämlich  sind 
mit  einem  horizontalen  Spalt  versehen,  der  mit  dickem  Öl  ver- 
schlossen werden  kann.  Durch  diese  sind  zwei  Glasnadeln  M  ge- 
stochen, deren  Form  unten  beschrieben  werden  soll.  Zwei  Glasstücke, 
die  sich  oben  an  den  Spalten  befinden,  können  M^eggenommen  wer- 
den, wenn  man  die  Nadeln  herausnehmen  oder  wieder  an  ihren  Platz 
bringen  will.  Wenn  man  sie  zu  diesem  Zwecke  jedesmal  wieder 
durch  den  Spalt  stecken  müßte,  so  würde  man  Gefahr  laufen,  die 
feinen  Spitzen,  auf  die  alles  ankommt,  abzubrechen. 

Auf  die  feuchte  Kammer ,  die  vermittels  eines  beweglichen 
Objekttisches  (ich  gebrauche  den  von  Leitz,  No.  99  aus  Katalog 
Xo.  39)  verschoben  werden  kann,  bringt  man  das  Deckglas,  an  dessen 
Unterseite  die  Isolierung  vorgenommen  werden  soll. 

Die  Nadeln  sind  jede  in  einem  Halter  N  befestigt,  der  sich  auf 
einem  Kupferstab  0  befindet,  der  um  einen  Punkt  P  drehbar  ist. 
Am  Ende  des  Stabes  befindet  sich  ein  rundes  Stahlplättchen,  ver- 
mittels dessen  er  auf  einem  vertikalen  Stab  R  ruht.  R  kann  ver- 
mittels des  Triebes  S  auf  und  nieder  geschraubt  werden. 

Es  versteht  sich  von  selbst,  daß  die  Spitze  von  M  in  die  feuchte 
Kammer  nach  unten  geht,  wenn  R  nach  oben  geschraubt  wird,  und 
umgekehrt.  Die  Scliraiibe  an  R  hat  eine  ziemlich  feine  Ganghöhe, 
und  der  Hebelarm  0  ist  ungefähr  doppelt  so  lang  als  der  Abstand 
von  P  bis  zur  Spitze  der  Glasnadel.  Man  kann  somit  sehr  geringe 
Veränderungen  zustande  bringen.  Der  Drehpunkt  P  wird  durch 
eine  Kupferstange  V  getragen,  welche  an  den  Säulen  T  befestigt  ist. 

Die  Halter  N  kann  man  mit  den  Glasnadeln  bequem  von  dem 
Instrumente  nehmen,  wenn  die  Glasstückchen,  welche  die  Seitenspalten 
bedecken,  weggenommen  sind. 

Da  die  Nadeln  M  in  verschiedener  Höhe  in  den  Nadelhaltern 
N  befestigt  werden  können,  kann  man  bei  dem  Apparat  auch  ver- 
schiedene Mikroskope  benutzen,  z.  B.  Zeiss  Stativ  /«,  Leitz  Stativ 
/,  /ft,  Ib  etc.  Auf  kleine  Stative  ist  nicht  gerechnet,  weil  diese 
bei  der  bakteriologischen  Untersuchung  im  allgemeinen  nicht  wohl 
anwendbar  sind. 


16    Schouten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Der  Abstand  zwischen  den  Stützpunkten  P  ist  so  weit  ge- 
nommen, daß  Objekttische  der  größten  Stative,  und  also  selbstver- 
ständlich auch  kleinere,  dazwischen  passen. 

Mit  Absicht  ist  an  beiden  Seiten  zwischen  V  und  dem  Mikro- 
skop ein  großer  Raum  offen  gelassen,  durch  Avelchen  man  die  Hände 
stecken  kann,  falls  das  für  eine  Versetzung  des  Spiegels  oder  der 
Irisblende  nötig  wird. 

Es  war  eine  zeitraubende  Arbeit,  die  brauchbarste  Form  für  die 
Glasnadeln  auszuprobieren  und  eine  Methode  für  die  Anfertigung  zu 
finden.     Viele  technische  Schwierigkeiten  kreuzten  hierbei  den  Weg. 

Nach  längeren  Untersuchungen  in  dieser  Richtung  halte  ich  es 
für  das  beste,  bei  der  Isolierung  aller  Organismen  Glasnadeln  zu 
gebrauchen,  die  an  der  Spitze  zu  einem  Auge  umgebogen  sind. 

Jede  Nadel  ist  an  dem  Teil,  welcher  sich  über  dem  Stab  0 
befindet,  3  bis  4  mm  dick;  ungefähr  über  dem  Drehpunkt  P  ver- 
jüngt sie  sich  zu  +  -^/.^  mm  Dicke.  Das  letzte  Ende  aber,  aus 
welchem  das  Auge  geformt  ist,  hat  eine  bestimmte  Dicke,  die  im 
Verhältnis  zu  der  Größe  des  Auges  steht,  das  daraus  geformt  ist. 

Für  die  kleinsten  Mikroorganismen,  z.  B.  stab-,  kommaförmige 
und  runde  Bakterien,  wird  (Fig.  2j  ein  Auge  (No.  2)  verwandt  mit 
einem  äußeren  Durchmesser  von  9^t  und  einer  Drahtdicke  von  2"5^. 
Für  die  größten  Zellen,  z.  B.  einzellige  Algen,  Schwärmsporen  von 
Algen  und  Pilzen ,  große  Sporen  und  Conidien ,  Saccharomyceten, 
Infusorien  etc.,  wird  ein  Auge  (No.  4)  angewandt  mit  einem  äußeren 
Durchmesser  von  50  jji  und  einer  Drahtdicke  von  10  ^a,  für  Mikro- 
organismen dazwischenliegender  Größen  ein  Auge  von  30  ^a  äußeren 
Durchmessers  bei  einer  Drahtdicke  von  5  ^  (No.  3).  Endlich  wird 
noch  bei  der  Isolation  von  Bakterien  außer  dem  genannten  kleinen 
Auge  eine  einfache  spitz  zulaufende  Glasnadel  gebraucht  von  10  /^ 
Dicke  (No.  1). 

Die  Nadeln  sind  an  dem  Ende,  welches  in  der  Isolierkammer 
steckt,   in  einer  Länge  von  +  3  mm    etwas   nach   oben  umgebogen. 

Die  Befestigung  der  Isoliernadeln  in  dem  Apparat  geschieht  auf 
folgende  Weise. ^ 

Man  setzt  das  Mikroskop  auf  den  Isolierapparat,  und  zwar  in 
seinen    mittleren  Stand ,    d.  h.  so ,    daß    es  vermittels  der  Schiebvor- 


')  Wer  sich  einen  Isolierapparat  anscbafl't,  empfängt  diesen  mit  Nadeln, 
die  in  den  Nadelhaltern  befestigt  sind.  Ich  teüe  hier  absichtlich  mit,  wie 
dies  geschieht.  Man  kann  also,  falls  eine  bricht,  eine  neue  besonders  be- 
stellen und  selbst  an  dem  Apparat  befestigen. 


I 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    1 7 

richtung  ungefähr  ebenso  weit  nach  rechts  als  nach  links,  nach  vorne 
als  nach  hinten  verschoben  werden  kann.  Ebenso  ist  die  Isolier- 
kammer  mitten  unter  das  Objektiv  gestellt ;  die  losen  Stücke,  welche 
die  Seitenspalten  bedecken,  sind  abgenommen. 

Nun  bringt  man  in  die  Nadellialter  N  Glaserkitt  und  legt  darauf 
die  Nadeln  so,  daß  die  umgebogenen  Enden  nach  oben  weisen,  sich 


|Kj/L 


1. 


beinahe  mitten  unter  dem  Objektiv  berühren  und  sich  etwas  tiefer 
als  der  obere  Rand  der  Isolierkammer  befinden.  Dann  legt  mau 
die  losen  Stücke  wieder  auf  die  Seitenspalten  und  ein  Deckglas  auf 
die  Isolierkammer.  Nun  drückt  man  die  Nadeln  so  tief  in  den 
Glaserkitt,  daß  die  Enden  bei  einem  ungefähr  horizontalen  Stand 
durch    Bewegung    der  Triebe  S   (Fig.  1)    die    Unterseite    des   Deck- 


N^l 


©^ 


N5  2 


glases  berühren  können,  aber  auch  mindestens  2  mm  nach  unten 
bewegt  werden  können.  Man  muß  diese  Bewegungen  nicht  allein 
vornehmen  können ,  wenn  die  Isolierkammer  sich  mitten  unter  dem 
Tubus  des  Mikroskops  befindet,  sondern  auch,  w^enn  sie  so  weit  nach 
links  oder  rechts  verschoben  ist,  wie  dies  für  das  Isolieren  notwendig 
wird.  Weiter  dürfen  die  Enden,  wenn  sie  das  Deckglas  berühren, 
nicht  zu  weit  auseinander  stehen,  z.  ß.  auf  eine  Distanzweite  von 
300  ju,  und  sich  nicht  genau  gegenüber  stehen.  Im  letzten  Fall  be- 
stünde   nämlich    die    Möglichkeit,    daß    sie    bei    einer    gleichzeitigen 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  1.  2 


18    Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

ober-  und  unterwärtsigen  Bewegung  ineinander  greifen  und  breclien 
würden. 

Zum  Schluß  noch  ein  Hauptfaktor,  auf  den  geachtet  werden  muß. 
Das  Auge  muß  solch  einen  Stand  haben ,  daß  es ,  wenn  es  gegen 
das  Deckglas  angebracht  ist,  mit  seinem  ganzen  Umriß  das 
Deckglas  berührt.  Man  kontrolliert  dies  in  einem  hängenden  Tropfen, 
den  man  auf  das  Deckglas  der  Isolierkammer  angebracht  hat ,  mit 
der  stärksten  Vergrößerung.  Wenn  man  das  Auge  in  trockenem 
Zustande  gegen  das  Deckglas  bringt,  kann  man  sicli  unmöglich  dar- 
über Sicherheit  verschaifen. 

Befinden  sich  die  Nadeln  nun  an  der  gewünschten  Stelle,  dann 
kann  man,  falls  man  vorsichtig  zu  Werke  geht  und  sie  nicht  berührt, 
schon  sofort  mit  der  Isolierung  beginnen.  Wenn  nach  einiger  Zeit 
der  Glaserkitt  hart  geworden  ist,  ist  selbstverständlich  eine  Ver- 
schiebung immöglich. 

Wir  wir  oben  gesehen  haben ,  braucht  man  beim  Apparat 
4  Nadeln  und  somit  4  Nadelhalter  iV.  Man  tut  gut,  diese  zu  nume- 
rieren ;  No.  1  und  No.  4  werden  rechts,  No.  2  und  No.  3  links  im 
Apparat  angebracht. 

Daß  die  Nadeln  mit  großer  Vorsicht  behandelt  werden  müssen, 
ist  selbstverständlich.  Ein  Andrücken  gegen  das  Deckglas  können 
sie  aber,  da  sie  sehr  elastisch  sind,  gut  vertragen. 

Leider  kann  ich  jetzt  noch  nicht  den  festgesetzten  Preis  des 
ganzen  Apparates  oder  der  besondern  Nadeln  mitteilen,  und  auch 
nicht  die  Verfertigungsweise  der  letzteren.  Hoifentlich  wird  jedoch 
bald  diese  Lücke  ausgefüllt  werden.  Eventuelle  Anfragen  werde 
ich  indessen  vorläufig  gern  entgegennehmen. 

Mit  diesem  Apparat  ist  man  also  imstande,  sehr  feine  Bewegungen 
unter  dem  Mikroskop  auszuführen.  Bis  jetzt  noch  sind  die  Versuche 
allein  auf  das  Isolieren  von  Mikroorganismen  beschränkt.  Ich  bin 
aber  überzeugt,  daß  man  mit  dieser  Methode  vielerlei  andere  Ar- 
beiten wird  verrichten  oder  doch  bequemer  machen  können,  z.  B. 
das  Sortieren  von  feinem  Planktonmaterial,  das  Verfertigen  von 
Dauerpräparaten  solcher  Mikroorganismen  etc.  Sind  mir  die  schwie- 
rigsten Experimente  (das  Isolieren  von  Bakterien)  geglückt,  dann 
darf  ich  wohl  erwarten ,  daß  auch  leichtere  Versuche  nicht  miß- 
glücken werden.  ^ 


^)  Als  ich  meine  Methode  schon  ganz  ausgearbeitet  und  bereits  viele 
Versuche  mit  ihr  angestellt  hatte,   bemerkte  ich  aus  den  historischen  An- 


XXII,  1.   Schouten:  Reinkulturen  einer  untere!.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    1 9 


Das  Isolieren. 

Die  Deckgläser,  welche  hierzu  gebraucht  werden,  sind  18x18  mm 
groß.  Peinliche  Sauberkeit  ist  selbstverständlich.  Am  besten  bringt 
man  sie  zunächst  einige  Zeit  in  die  bekannte  Mischung  von  Bichromat- 
kalium  und  Schwefelsäure  ;  wenn  es  nötig  ist,  kocht  man  sie  in  dieser 
Mischung  oder  in  heißem  Seifenwasser  auf.  Nach  tüchtigem  Ab- 
spülen werden  sie  in  Alkohol  aufbewahrt. 

Will  man  nun  isolieren,  so  beginnt  man  damit,  einige  Deck- 
gläser mit  einem  feinen  Leinentuch,  Avelches  man  mit  ganz  wenig 
Vaseline  versehen  hat,  einzureiben.  Mit  einem  andern  reinen  Tuch 
reibt  man  die  Vaseline  wieder  so  weit  ab,  daß  das  Deckgiäschen 
nur  noch  eben  leicht  beschlagen  aussieht.  Auch  sorgt  man  für  eine 
genügende  Anzahl  feuchter  Kammern.  Man  verwendet  hierzu  nicht 
die  gebräuclüichste  Form,  nämlich  einen  Ring  auf  einem  Objektglas, 
sondern  einen  viereckigen  Glasrahmen  auf  einem  Objektglas.  Die 
Seitenwände  der  Kammer  sind  2  bis  .3  mm  hoch,  5  mm  breit ;  der 
Innenraum  ist  14X14  mm.  Man  kann  diese  Kammern  bequem 
selbst  anfertigen,  wenn  man  den  Glasrahmen  aus  4  losen  Stücken 
macht.  Man  reibt  sie  ebenso  wie  die  Isolierkammer  von  innen  ein 
mit  Vaseline,  welches  die  Stäubchen,  die  hereinfallen  könnten,  fest- 
halten soll. 

Ebenso  werden  sowohl  die  Seitenwände  der  feuchten  Kammer 
als  die  Isolierkammer  vorher  an  der  Oberseite  mit  Vaseline  ver- 
sehen, die  zur  Abschließung  mit  den  Deckgläschen  notwendig  ist. 


merkungen,  die  Apäthy  in  seinem  Buch:  Die  Mikrotechnik  der  tierischen 
Morphologie  Bd.  I,  Brannschweig  (Bruhn)  189(j  gibt,  daß  man  schon  in 
früheren  Jahren  allerlei  Versuche  gemacht  hatte,  um  kleine  Organismen 
(Diatomeen,  kleine  Crustaceen  etc.)  auf  bequemere  Weise  unter  dem 
Mikroskop  bewegen  und  isoHeren  zu  können.  Übrigens  hat  keine  dieser 
Methoden  den  Erwartungen  entsprochen,  weil  ihr  Gebrauch  zu  viele  Be- 
schwerden mit  sich  brachte  und  allein  bei  schwacher  Vergrößerung  an- 
wendbar war.  Als  ein  Kuriosum  sei  hier  allein  die  beste  dieser  Einrich- 
tungen genannt,  die  Hanks  im  Jahre  1877  konstruierte.  Sie  bestand  aus 
einem  Stück  Bürstenhaar,  dessen  Spitze  sich  in  der  Mitte  des  Gesichts- 
feldes befand.  Durch  horizontale  Bewegungen  des  Objekttisches  wurden 
die  Objekte  in  horizontaler  Richtung,  durch  Auf-  und  Abwärtsbewegen 
des  Beleuchtungsapparates  in  vertikaler  Richtung  transponiert.  Man  konnte 
einen  Organismus  dadurch  isoheren,  daß  man  ihn  an  der  feuchten  Spitze 
des  Haares  anklebte  und  ihn,  wenn  das  Haar  trocken  geworden  war,  auf 
einem  Gläschen  auffing. 

9* 


20    Scheuten:  Reinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Jetzt  nntersuclit  mau  erst ,  wie  viel  mau  vou  dem  Material, 
woraus  isoliert  werdeu  soll,  in  einen  Tropfen  einer  ^/^prozeutigeu 
Kochsalzlösung-  bringen  muß ,  so  daß  nicht  zu  viel  Zellen  sich  am 
Rand  des  Tropfens  befinden.  Es  muß  nämlich  möglich  sein,  wie  wir 
bald  sehen  werden,  eine  Zelle  in  einem  ganz  kleinen  Tröpfchen  aus 
dem  großen  Tropfen  zu  ziehen,  ohne  daß  andere  Zellen,  wenigstens 
nicht  in  zu  großer  Zahl,  mitgehen. 

Man  zieht  darum  ein  mit  Vaseline  eingeriebenes  Deckgläschen 
dreimal  durch  die  Flamme.  Hierauf  legt  mau  es  auf  die  „Wechsel- 
kammer" (s.  p.  32)  so  nieder,  daß  die  Seite  des  Deckglases,  die 
beim  Ziehen  durch  die  Flamme  nach  unten  gekehrt  war,  sich  auf 
der  Unterseite  befindet.  Nun  setzt  man  4  Tropfen  einer  '^/^^prozen- 
tigen  Kochsalzlösung  auf  das  Deckglas,  und  bringt  in  jeden  Tropfen 
mittels  einer  Platinnadel  oder  einer  ganz  feinen  Platinöse  verschiedene 
mit  dem  bloßen  Auge  kontrollierte  Quantitäten  des  Materials  (das 
man  zu  diesem  Zweck  in  Bouillon  oder  auf  einem  festen  Nährboden 
gezüchtet  hat),  und  verteilt  durch  vorsichtiges  Rühren  die  Zellen  so 
gut  wie  möglich  im  Tropfen.  Dann  wird  das  Deckglas  auf  eine 
feuchte  Kammer  gelegt ,  auf  deren  Boden  man ,  gegen  die  Vorder- 
oder gegen  die  Hinterseite  (nicht  in  die  Mitte,  denn  das  könnte  die 
Beobachtung  hindern)  ein  Tröpfchen  Wasser  gelegt  hat,  und  unter- 
sucht man,  in  welchem  der  4  Tropfen  das  Material  am  besten  ver- 
dünnt ist. 

Hierauf  wird  das  Gläschen,  auf  welchem  man  isolieren  will, 
zugerichtet.  Man  zieht  es  auch  dreimal  durch  die  Flamme,  und  legt 
es  auf  die  Wechselkammer  wie  das  vorige.  Nun  sterilisiert  man 
eine  Platinöse  und  setzt  untereinander,  gleich  nahe  der  Mitte  des 
Deckglases,  und  zwar  an  der  linken  Seite,  3  Tröpfchen  der  sterili- 
sierten Flüssigkeit,  in  der  die  Kultur  entstehen  soll.  (Diese  Tropfen 
nenne  ich  von  jetzt  ab  einfach  „Kulturtropfen".)  Daneben,  also 
rechts  von  der  Mitte,  setzt  man  auf  +  2  mm  Abstand  von  jedem 
Tropfen,  auch  untereinander,  2  Tropfen  einer  ^/^prozentigen  Koch- 
salzlösung (weiterhin  „Materialtropfen"  genannt)  und  darunter  einen 
Tropfen  einer  sterilisierten  '^/^prozentigen  Kochsalzlösung  (Fig.  3).^ 

Man  bringt  immer  zuerst  die  Kulturtropfen  auf  das  Grläschen 
und  dann  die  Materialtropfen,  weil  so  am  wenigsten  Gefahr  ist,  daß 
das  Gläschen  noch  nicht  genügend  abgekühlt  ist.  Schließlich  bringt 
man  in  die  Materialtropfen   eine   genügende  Quantität  des  Materials, 


^)  Der  Diameter  der  Tröpfchen  darf  nicht  größer  sein  als  +  1"5  mm. 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    21 

und  legt  das  Deckgläseben  auf  eine  der  zugerichteten  feuchten  Kam- 
mern, ziir  Verhütung  einer  Infektion,  und  zugleich  um  es  an  den 
Rändern  mit  Vaseline  zu  versehen. 

Nun  legt  man  auf  den  Boden  der  Isolierkammer  gegen  die 
Vorder-  oder  gegen  die  Hinterseite  (nicht  in  die  Mitte!)  ein  Tröpfchen 
Wasser  und  geht  dann  zum  Sterilisieren  der  Nadeln  über.  Für 
Bakterien  gebraucht  man  links  die  Isoliernadel  mit  dem  kleinsten 
Auge  (No.  2),  rechts  die  spitz  zulaufende  gerade  Nadel  (No.  1). 
Um  diese  zu  sterilisieren,  nimmt  man  die  losen  Seitenstücke,  die  die 
Spalten  bedecken,  von  der  Isolierkammer  ab.  Indem  man  nun  die 
Schrauben,    womit   die  Stäbe  JV  in   0  befestigt   sind,    losdreht,    holt 


0 

0 

0 

0 

0 

0 

3  —  12. 


man  N  vorsichtig  aus  dem  Apparat  und  hält  die  Spitzen  der  Glasnadeln 
zunächst  in  ein  Fläschchen  mit  starker  Schwefelsäure  und  dann  etwas 
tiefer  in  ein  Fläschchen  mit  Ammoniak.  Man  taucht  die  Spitze  immer 
etwas  tiefer  in  das  Ammoniak  als  in  die  Schwefelsäure,  da  es  sonst 
möglich  ist,  daß  ein  Teil  der  Schwefelsäure  nicht  genügend  neutra- 
lisiert wird  und  dann  nachher  zu  der  Spitze  der  Nadel  hin  diffundiert. 
Dadurch  könnte  die  zu  isolierende  Zelle  beschädigt  werden,  was  mir 
im  Beginn  meiner  Versuche,  als  ich  auf  diese  Einzelheit  nicht  achtete, 
oft  vorkam.  Dann  bringt  man  die  Nadeln  wieder  auf  ihren  Platz 
und  legt  die  losen  Seitenstücke  auf  die  Spalten.  Bevor  man  diese 
schließt,  legt  man  das  Deckgläschen,  auf  dem  isoliert  werden  soll 
(„Isolierdeckgläschen"),  schon  wieder  auf  die  Isolierkammer  (wobei 
man  wohl   darauf  zu  achten  hat,    daß    nicht    eine    der  Nadeln  einen 


22    Schonten:  lleinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Materialtropfen  berührt).  Je  eher  nämlich  die  Nadeln  vor  Lnft- 
infektiou  (s.  p.  36)  geschützt  werden,  desto  besser.  Das  Schließen 
selbst  geschieht  mit  Olivenöl,  welches  durch  Diapalm  so  dickflüssig 
gemacht  ist,  daß  es  nach  z.  B.  zwei  Tagen  noch  nicht  aus  den 
Spalten  herausgeflossen  sein  darf.  Es  wird  vor  dem  Gebrauch  um- 
gerührt; man  läßt  es  von  einem  platten  Spatel  in  den  Spalt  fließen. 
Nun  geht  man  zum  eigentlichen  Isolieren  über.  Man  wartet 
noch  eben,  bis  das  Deckglas  ganz  beschlagen  ist  mit  kleinen  ab- 
gerundeten Tröpfchen.^  In  der  Figur  4  (u.  fi".)  sind  diese  Konden- 
sierungströpfchen  deutlichkeitshalber  weggelassen.  Ist  man  so  weit, 
und  ist  also  die  Isolierkammer  mit  Wasserdampf  gesättigt,  dann 
taucht  man  die  Spitzen  der  Nadeln  bei  schwacher  Vergrößerung 
einige  Male  in  den  Tropfen  steriler  '^^prozentiger  NaCl-Lösung.  Das 
geschieht  um  sie  von  Ammoniaksulfat  zu  befreien,  obgleich  ich  nicht 
glanbe,  daß  dies  schädlich  auf  die  zu  isolierende  Zelle  einwirken 
kann,'-  und  um  das  Auge  der  linken  Nadel  mit  NaCl-Lösung  zu  füllen. 
Hierauf  stellt  man  vermittels  der  Schiebebewegung  von  B  (Fig.  1) 
das  Mikroskop  so,  daß  das  Auge  der  linken  Nadel,  während  es  das 
Deckglas  beinahe  berührt,  bei  stärkster  Vergrößerung  genau  in  die 
Mitte  des  Gesichtsfeldes  kommt.  Die  rechte  Nadel  wird  um  drei 
Schraubgänge  nach  unten  gedreht.  Hierauf  stellt  man  vermittels 
der  beweglichen  Objekttafel  bei  schwacher  Vergrößerung  die  Isolier- 
kammer so,  daß  das  Auge  beinahe  den  Rand  eines  Materialtropfens 
berührt,  und  zwar  den  Rand,  der  dem  gegenüberliegenden  Kultur- 
tropfen zugekehrt  ist  (Fig.  4).  Natürlich  muß  man  dafür  sorgen, 
daß  bei  diesen  Verschiebungen  die  linke  Nadel  nicht  mit  einem  der 
Tropfen  in  Berührung  kommt.      Bei  der  rechten  Nadel    ist    das    un- 


\)  Daß  die  größeren  Material-  und  Kulturtropfen  und  die  kleinen 
Kondensierungstroixfen  alle  abgerundet  sind ,  ist  eine  Folge  von  dem  Ge- 
brauch der  Vaseline.  Auf  gewöhnlichen  Deckgläsern  würden  alle  diese 
Tropfen  unregelmäßige  Konturen  haben  und  mehr  oder  weniger  ausfließen 
und  untereinander  zusammenfließen,  wodurch  das  ganze  Isolationsverfahren 
unmöglich  sein  würde.  Indessen  darf  nur  sehr  wenig  Vaseline  auf  dem 
Deckglas  nach  dem  Ausreiben  zurückbleiben ,  da  sonst  beim  Schieben  des 
Auges  gegen  das  Deckglas  die  überflüssige  Vaseline  leicht  in  Form  kleiner 
Stäbchen  in  die  isolierten  Tropfen  hineingelangt,  was  zu  Verwechslung  mit 
Bakterien  Anlaß  geben  könnte. 

-)  Nach  MiyUEL,  Les  organismes  vivants  de  l'atmosphere,  sind  nicht 
weniger  als  250  g  Ammonium  sulf.  nötig,  um  auf  1  1  Bouillon  entwick- 
lungshemmend einzuwirken;  er  rechnet  es  demnach  unter  die  sehr  schwach 
antiseptischen  Körper. 


XXII,  1.   Scliüuten:  Reinkultureneiner  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    23 

möglich,  weil  sie  ganz  nach  unten  gedreht  ist.  Nun  gebraucht  man 
die  stärkste  Vergrößerung;  um  alles  an  den  richtigen  Platz  (Fig.  5) 
im  Gesichtsfeld  zu  bekommen,  wird  bisweilen  noch  eine  kleine  Ver- 
schiebung des  Mikroskops  oder  der  Nadel,  die  man,  weil  sie  das 
Deckglas  nicht  berührt,  nur  so  eben  sieht,  notwendig  sein.  Man 
sucht  nun  am  Rand  des  Tropfens  entlang,  bis  man  eine  Bakterie, 
die  man  isolieren  will,  sieht.  Wir  nehmen  au,  daß  wir  diese  in 
einem  Teile  des  Tropfenrandes  finden,  wo  sich  nicht  viel  andere 
Bakterien  aufhalten.  Können  wir  solch  einen  Teil  nicht  in  dem 
einen  Materialtropfen  finden ,  so  suchen  wir  in  dem  anderen.  Dann 
bringt  man  das  äußerste  Ende  des  Auges  der  Nadel  (in  Fig.  4  bis  7 
durch  eine  kleine  halbkreisförmige  Linie  wiedergegeben)  gegen  das 
Deckglas  und  berührt  damit  eben  den  Tropfenrand.  Dadurch  wird 
ein  wenig  Flüssigkeit  aus  dem  Tropfen  gezogen  (Fig.  6).  Sieht  man, 
daß  die  betretfende  Bakterie  mitgegangen  ist,  dann  verschiebt  man 
die  Isolierkammer  ein  wenig,  wodurch  ein  kleines  Tröpfchen  mit 
der  Bakterie  darin  sich  vom  großen  Tropfen  loslöst  (Fig.  7).  Hierzu 
sind  sehr  kleine  Bewegungen  notwendig;  man  kann  diese  noch 
besser  als  durch  Verschiebung  der  Isolierkammer  bekommen, 
wenn  man  seitlich  gegen  die  Mikrometerschraube  des 
Mikroskops  drückt. 

Nun  bewegt  man  die  linke  Nadel  ein  Avenig  nach  unten  und 
untersucht,  ob  man  die  eine  Bakterie,  und  nicht  mehr  als  sie,  in 
dem  Tröpfchen  liegen  sieht.  Ist  das  so,  dann  bringt  man  das  Auge 
der  linken  Nadel  eben  gegen  das  Deckglas  auf  einen  Platz  dicht 
bei  dem  Tröpfchen  mit  der  isolierten  Bakterie.  Dadurch  soll  das 
Auge  einen  Teil  seines  Inhalts  auf  das  Deckglas  absetzen  (Fig.  8j, 
und  folglich  weniger  Flüssigkeit  enthalten  (sei  es  auch  nur  eine 
Zeitlang,  denn  allgemach  zieht  es  wieder  Wasserdampf  an  sich,  mit 
dem  die  Isolierkammer  gesättigt  ist).  Wenn  man  dann  das  Auge 
wieder  in  den  Tropfen  mit  der  isolierten  Bakterie'  bringt,  und  darauf 
wieder  nach  unten  bewegt,  wird  die  Bakterie  meistens  aus  dem 
Tröpfchen  verschwunden  und  in  das  Auge  übergegangen  sein.  Scheint 
das  noch  nicht  geschehen  zu  sein,  dann  muß  die  beschriebene  Be- 
wegung wiederholt  werden. 

Diese  Bakterie  muß  nun  in  eines  der  Kulturtröpfchen  gebracht 
werden.  Zu  diesem  Zweck  nimmt  man  statt  der  starken  Vergrößerung 
die  schwache  und  verschiebt  die  Isolierkammer  so  weit  nach  rechts, 
daß  das  Auge  der  linken  Nadel,  wenn  diese  nach  oben  bewegt  wird, 
zwischen  zwei  Kulturtröpfchen,    und    zwar    ganz   nahe  am  Rand  des 


24    Schonten:  lieinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

einen  der  beiden,  ankommt.  Man  versucht  dies  dadurch,  daß  man 
das  Auge  bis  dicht  an  das  Deckglas  bringt.  Erst  wenn  man  die 
schwache  Vergrößerung  wieder  mit  der  starken  gewechselt  hat,  bringt 
man  das  Auge  gegen  das  Deckglas.  Dieses  setzt  dadurch  ein  Tröpf- 
chen ab  (Fig.  9),  in  dem  sich  wahrscheinlich  die  isolierte  Bakterie 
befindet.  Ist  das  nicht  der  Fall,  dann  setzt  man  mit  dem  Auge 
neben  das  erste  Tröpfchen  ein  zweites,  und  wenn  notwendig,  mehrere, 
bis  man  in  einem  derselben  die  bewußte  Bakterie  liegen  sieht. 

Auf  dieselbe  Weise  isoliert  man  zwei  andere  Bakterien,  die  man 
ebenso  jede  neben  ihrem  Kulturtropfen  deponiert. 

Nun  bringt  man  die  isolierten  Bakterien  in  die  Kulturtropfen, 
Dies  geschieht  nicht  vermittels  der  augförmigen  linken  Nadel,  welche 
man  bisher  gebraucht  hat,  sondern  mit  der  spitzen  rechten  Nadel. 
Man  dreht  bei  schwacher  Vergrößerung  die  linke  Nadel  um  drei 
Schraubgänge  ^  nach  unten,  die  rechte  Nadel  in  die  Höhe,  und  bringt 
diese,  vermittels  der  Schiebevorrichtung  B  genau  unter  eines  der 
Tröpfchen,  worin  sich  eine  isolierte  Bakterie  befindet.  Jetzt  vertauscht 
man  die  schwache  Vergrößerung  mit  der  stärksten,  imd  bringt  die 
Spitze  der  rechten  Nadel  bis  zur  Berührung  des  Deckglases  in  das 
Tröpfchen.  Dann  verschiebt  mau  die  Isolierkammer,  oder  besser 
noch  man  drückt  gegen  die  Mikrometerschraube  des  Mikroskops,  so 
daß  die  Spitze  der  Nadel  das  Tröpfchen  mit  der  Bakterie  in  den 
Kulturtropfen  zieht.  Während  dies  geschieht,  muß  man  die  Bakterie 
gut  im  Auge  behalten.  Das  ist  möglich,  weil  die  rechte  Nadel  in 
eine  Spitze  ausläuft,  die  die  Bakterie  nicht  so  leicht  dem  Auge  ent- 
zieht als  ein  augförmig  umgebogenes  Ende,  das  mehr  Platz  einnimmt. 
Im  Moment  des  Zusammenfließens  (Fig.  10)  der  beiden  Tropfen  ist 
man  also  sicher,  daß  die  isolierte  Bakterie  wirklich  in  den  Kultur- 
tropfen gelangt  ist.  Meistens  kann  man  sie  darin  liegen  sehen. 
Macht  man  von  einem  festen  Kulturtropfen,  z.  B.  Gelatine,  Gebrauch, 
dann  sieht  man  das  Tröpfchen  mit  der  Bakterie  an  der  Gelatine 
liegen  (Fig.  11). 

Auf  dieselbe  Weise  werden  die  anderen  isolierten  Bakterien  in 
ihre  Kulturtropfen  gebracht. 

Wir  haben  oben  die  Annahme  gemacht,  daß  die  isolierte  Bakterie 
bei  ihrer  Entfernung  aus  dem  Materialtropfen  sich  in  einem  Teil  des 


^)  Drei  Schraubgänge  genügen,  um  zu  verhindern,  daß  die  Spitze  der 
Nadel  während  der  Verschiebungen  der  Isolierkammer  die  Unterseiten  der 
Tropfen  berühren  kann. 


XXII,  1.   Schouten:  Reinkultureneiner  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    25 

Tropfenrandes  befand,  wo  nicht  viel  andere  Bakterien  sich  aufhielten. 
Allein  in  diesem  Falle  darf  man  auf  die  beschriebene  AVeise  7AI 
Werke  gehen,  und  also,  sobald  man  gesehen  hat,  daß  man  eine 
Bakterie  aus  dem  Materialtropfen  geholt  hat,  diese  sofort  in  dem 
Auge  der  linken  Nadel  auffangen  und  in  nächster  Nähe  des  Kultur- 
tropfens deponieren. 

Vorausgesetzt  nun  aber,  daß  die  Bakterie  sich  in  ihrem  Material- 
tropfen in  einem  Teil  befand,  wo  auch  viele  andere  Bakterien  in 
nächster  Nähe  waren  (hierfür  besteht  z.  B.  große  Möglichkeit,  wenn 
die  ursprüngliche  Flüssigkeit  nicht  gut  verdünnt  ist),  dann  ist  es 
sehr  leicht  möglich,  daß  sich  in  dem  isolierten  Tröpfchen  zwar  nur 
eine  Bakterie  befindet,  aber  daß  im  Auge  der  Nadel  auch  eine  oder 
gar  mehrere  Bakterien  vorkommen.  In  diesem  Falle  kann  es  daher  auch 
passieren,  daß  in  dem  Tröpfchen,  welches  man  neben  dem  Kultur- 
tropfen absetzt,  nicht  eine,  sondern  mehrere  Bakterien  sich  befinden. 
Nun  könnte  man  meinen,  daß  das  so  schlimm  nicht  sei,  da  man 
dann  ja  einfach  das  Tröpfchen  mit  den  Bakterien  neben  dem  Kultur- 
tropfen liegen  lassen  kann,  um  darauf  eine  andere  Bakterie  zu 
isolieren.  Man  tut  aber  gut,  im  Auge  zu  behalten,  daß  ein  Tropfen 
auf  dem  Deckglas  oft  im  Verlauf  der  folgenden  Stunden  ein  M^enig 
auseinander  fließt,  so  daß  die  verschiedenen  Bakterien  dann  in  den 
Kulturtropfen  gelangen  würden.  Es  ist  darum  besser,  in  solch  einem 
Fall  vorsichtiger  zu  arbeiten.  Wenn  mit  der  linken  Nadel  eine 
Bakterie  aus  dem  Materialtropfen  isoliert  ist,  und  man  Grund  hat  zu  ver- 
muten, daß  in  dem  Auge  der  Nadel  noch  andere  Bakterien  sitzen, 
so  bringt  man  einfach  in  der  Nähe  des  isolierten  Tropfens  das  Auge 
so  oft  gegen  das  Deckglas ,  bis  alle  Flüssigkeit  mit  den  eventuell 
darin  befindlichen  Bakterien  auf  dem  Deckglas  abgesetzt  ist  (Fig.  12). 
Darauf  bringt  man  mit  schwacher  Vergrößerung  das  Auge  in  den 
Tropfen  ^/^  prozentiger  Kochsalzlösung,  um  es  noch  einmal  abzuspülen 
und  sogleich  wieder  mit  Flüssigkeit  zu  füllen,  und  dann  erst  bringt 
man  die  isolierte  Bakterie  auf  die  oben  beschriebene  Weise  in  ihren 
Kulturtropfen. 

Es  ist  wohl  unnötig  zu  sagen,  daß  jeder,  der  mit  dieser  Methode 
arbeitet,  von  selbst  allerlei  kleine  Einzelheiten  durch  die  Praxis  lernt. 
Hat  man  z.  B.  mit  einem  Tropfen  zu  tun,  in  dem  sich  am  Rand  ent- 
lang entweder  durch  ungenügende  Verdünnung  oder  durch  zufällige 
Umstände  so  viel  Bakterien  befinden,  daß  es  beinahe  unmöglich  ist 
eine  zu  isolieren,  und  hat  man  dann  weiter  aus  dem  Materialtropfen 
ein  Tröpfchen  isoliert,  worin  sich  nicht  eine,  sondern  zwei  oder  mehr 


26    Bchouten:  Reinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Bakterien  befinden,  von  denen  eine  die  gesuchte  ist,  dann  kann  man 
das  Auge  der  linken  Nadel  erst  in  dem  Tropfen  '^j^  prozentiger  Koch- 
salzlösung abspülen  und  es  dann,  nachdem  man  es  auf  die  bekannte 
Weise  von  ein  wenig  Flüssigkeit  entlastet  hat,  in  das  Tröpfchen 
mit  jenen  Bakterien  bringen.  Dadurch  werden  einzelne  Bakterien 
in  die  Flüssigkeit  des  Auges  übergehen  und  vielleicht  bleibt  gerade 
die  eine  gesuchte  zurück;  ist  das  nicht  der  Fall,  dann  kann  man 
die  Flüssigkeit  aus  dem  Auge  in  Tropfen  auf  das  Deckglas  absetzen, 
und  dabei  geschieht  es  leicht,  daß  sich  die  Bakterien  scheiden, 
indem  sie  in  verschiedene  Tröpfchen  gelangen.  Sobald  man  die 
gewünschte  Bakterie  in  einem  Tropfen  abgesondert  liegen  sieht, 
spült  man  das  Auge  in  dem  Kochsalztropfen  ab,  und  transportiert 
die  Bakterie. 

Dergleichen  besondere  Fälle  könnte  man  natürlich  noch  mehr 
beschreiben;  wir  wollen  es  aber  hierbei  bewenden  lassen,  weil  die 
Praxis  in  dieser  Beziehung  die  beste  Lehrmeisterin  ist. 

Durch  einige  Übung  bringt  man  es  recht  bald  so  weit,  daß, 
wenn  das  Material  ungefähr  die  richtige  Verdünnung  hat  (ist  das 
nicht  der  Fall,  dann  kann  man  Avohl  auch  isolieren,  aber  nicht  so 
bequem),  man  in  ungefähr  5  Minuten  eine  Bakterie  aus  dem  Material- 
tropfen isoliert  und  in  den  Kulturtropfen  bringt. 

Es  ist  natürlicli  nicht  nötig,  die  Nadeln  nach  dem  Isolieren 
jeder  Zelle  aufs  neue  zu  sterilisieren;  das  muß  allein  geschehen, 
wenn  man  sie  einige  Zeitlang  nicht  gebraucht  hat,  und  ebenso  wenn 
man  beim  Isolieren  einen  Fehler  gemacht  hat,  der  es  als  wahr- 
scheinlich erscheinen  läßt,  daß  sie  durch  Bakterien  verunreinigt  sind 
(z.  B.  wenn  die  rechte  Nadel,  auf  die  schließlich  alles  ankommt, 
durch  Unglück  in  den  Materialtropfen  gekommen  ist). 

Sind  drei  Bakterien  transponiert,  dann  läßt  man,  wenn  man 
noch  mehrere  isolieren  will ,  das  Deckglas  noch  auf  der  Isolier- 
kammer liegen,  bis  man  ein  zweites  Deckgläschen  in  Bereitschaft 
gestellt  hat. 

Wenn  man  ein  Deckgläscheu  von  der  Isolierkammer  wegnimmt, 
tut  man  gut,  mit  Vorsicht  zu  Werke  zu  gehen.  Hebt  man  es  zu 
schnell  auf,  dann  wird  das  Öl,  das  die  Seitenspalten  abschließt,  in 
die  Isolierkammer  gesogen  und  die  Unterseite  des  Deckglases  ver- 
unreinigt. Man  steckt  darum  eine  platte ,  feinspitzige  Pinzette 
zwischen  das  Deckglas  und  die  Wand  der  Kammer  und  macht  erst 
eine  Öffnung  in  die  Vaseline,  die  zur  Abschließung  dient.  Erst  darauf 
hebt  man  das  Deckglas  vorsichtig  auf. 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  Isoliert.  Zelle.    2  7 

Jedes  Deckglas,  auf  dem  man  isoliert  hat,  wird  auf  eine  feuchte 
Kammer  gelegt.  Man  kann,  um  Verdunstung  der  Kulturtropfen  zu 
verhüten,  auf  den  Boden  einen  kleinen  Wassertropfen  bringen,  aber 
immer  gegen  die  Wand,  welche  sich  bei  den  Materialtropfen  befindet. 
Der  Wasserdampf,  welcher  sich  aus  diesem  Tröpfchen,  besonders  in 
einem  Brutschranke,  entwickelt,  wird  nämlich  meistens  im  stärksten 
Maße  kondensiert  auf  dem  Teil  des  Deckglases,  welcher  sich  darüber 
befindet,  hier  also  zwischen  den  Materialtropfen.  Geschähe  das 
zwischen  den  Kulturtropfen,  dann  könnten  diese  zerfließen  und  die 
Kultur  also  mißglücken. 

Da  ich  indessen  während  meiner  Versuche  bemerkte,  daß 
hängende  Tropfen,  sei  es  von  Bouillon,  Nährgelatine  oder  anderen 
Flüssigkeiten,  nach  einiger  Zeit  mehr  oder  weniger  sauer  werden 
(eine  Tatsache,  die,  soweit  ich  weiß,  noch  nicht  beobachtet  ist, 
und  worüber  ich  bald  eine  Mitteilung  veröffentlichen  will),  ist  es 
weit  besser,  auf  den  Boden  der  feuchten  Kammer  ein  kleines  Stück- 
chen Filtrierpapier  (etwa  3X8  mm  groß),  getränkt  mit  einer 
2prozentigen  KOII-Lösung,  zu  legen.  Dadurch  wird  das  Sauerwerden, 
das  meistens  eine  entwicklungsliemmende  oder  gar  tödliche  AVirkung 
auf  die  isolierten  Bakterien  hat,  verhütet.  Ein  Tropfen  KOH- 
Lösnng  leistet  keine  Dienste,  da  er  zwischen  dem  Boden  und  den 
Seitenwänden  der  feuchten  Kammer  zerfließt.  Nach  dem  Gebrauch 
werden  die  Kammern  gut  gereinigt  und  vom  überschüssigen  KOH 
befreit,  da  sonst  bei  fortwährendem  Gebrauch  die  Konzentration  zu 
hoch  werden  würde,  und  ein  Austrocknen  der  hängenden  Tropfen 
zu  fürchten  wäre. 

Die  benutzten  feuchten  Kammern  werden  in  eine  gehörige 
Temperatur  gebracht.  Wenn  diese  Temperatur  höher  ist  als  25*^  C, 
muß  das  Deckgläschen,  das  schon  vermittelst  V^aseline  auf  der 
feuchten  Kammer  befestigt  ist,  außerdem  noch  an  zwei  Seiten  mit 
Paraffin  bestrichen  werden,  was  man  am  bequemsten  so  macht,  daß 
man  sie  aus  einem  gläsernen  Tropfgläschen  ausfließen  läßt.  Beim 
Gebrauch  von  Vaseline  allein  gleitet  das  Gläschen,  wenn  dieses 
flüssig  wird,  ganz  von  seinem  Platz.  Wenn  als  Kulturtropfen  ein 
fester  Boden  angewandt  wurde,  kann  die  Entwicklung  der  Kolonie 
mit  starker  Vergrößerung  beobachtet  werden,  weil  dieselbe  sich  am 
Rande  vollzieht. 

Untersuchen  wir  nun  die  Isolierung  größerer  Organismen. 

Ehe  man  mit  der  Isolierung  beginnt,  mißt  man  die  Größe  der 
Zellen,    um  zu    bestimmen,    mit  welcher  Nadel  isoliert  werden  muß. 


28    Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Haben  die  Zellen  eine  solche  Größe ,  daß  sie  am  besten  mit  Nadel 
No.  3  transportiert  werden,  dann  setzt  man  alle  Tropfen  auf  das 
Deckglas ,  wie  es  oben  für  Bakterien  beschrieben  worden  ist. 
Werden  aber  die  Zellen  am  besten  mit  Nadel  No.  4  transportiert, 
dann  setzt  man,  da  diese  Nadel  rechts  im  Apparat  angebracht  ist, 
die  Kulturtropfen  an  die  rechte ,  die  anderen  Tropfen  an  die  linke 
Seite,  so  daß  die  Zellen  mit  No.  4  isoliert  und  transportiert,  mit 
No.  o  in  die  Kulturtropfen  geschoben  werden. 

Wir  wollen  die  Isolierung  einer  großen  Zelle  nun  nicht  mehr 
ausführlich  beschreiben.  Die  Methode  ist  in  der  Hauptsache  dieselbe 
wie  die,  welche  wir  oben  in  extenso  für  Bakterien  mitgeteilt  haben; 
die  Änderungen  lernt  jeder  selbständig  bei  der  Ausführung.  Auf 
einige  bedeutungsvolle  Sachen  wollen  wir  aber  noch  weisen. 

Zunächst  auf  den  besonderen  Nutzen  des  sterilen  Kochsalz- 
tropfens. Dieser  kann  uns  hier  einen  besonderen  Dienst  erweisen,  wenn 
die  ursprüngliche  Flüssigkeit  nicht  genügend  verdünnt  ist,  oder  wenn 
an  der  zu  isolierenden  Zelle  (Hefezelle,  Scliimmelspore  etc.)  eine 
Bakterie  fest  zu  sitzen  scheint.  In  solchen  Fällen  kann  man  den 
Inhalt  des  Auges  der  Nadel,  in  dem  sich  die  zu  isolierende  Zelle 
befindet,  gleichsam  darin  abspülen,  wobei  die  festsitzende  Bakterie 
vielleicht  abgelöst  wird ,  und  die  überflüssigen  Bakterien  zurück- 
bleiben. 

Auch  machen  wir  darauf  aufmerksam,  daß  bei  der  Isolierung 
großer  Zellen  im  allgemeinen  mit  anderen  Vergrößerungen  gearbeitet 
wird,  als  bei  der  Isolierung  von  Bakterien.  Es  ist  z.  B.  anzu- 
raten, die  Arbeiten,  die  wir  in  Figur  5  bis  7  dargestellt  haben, 
besonders  wenn  die  zu  isolierenden  Zellen  sehr  groß  sind,  und  also 
die  Nadel  mit  dem  größten  Auge  angewandt  wird,  nicht  mit  einer 
Immersionslinse ,  sondern  mit  einem  mehr  oder  weniger  starken 
Trockensystem  zu  verrichten,  z.  B.  Leitz  6  bis  8,  Zeiss  E  oder  F. 
Man  kann  selbst  noch  schwächere  Vergrößerungen  gebrauchen,  wenn 
man  sicher  ist,  daß  der  Materialtropfen  von  Bakterien  nicht,  oder 
doch  sehr  wenig,  verunreinigt  ist,  und  man  also  sehr  wenig  Möglich- 
keit hat,  außer  der  zu  isolierenden  Zelle  noch  andere  Zellen,  z.  B. 
Bakterien  aus  dem  Tropfen  herauszuziehen.  Das  Immersionssystem 
gebraucht  man  hier  nur,  um  zu  kontrollieren,  ob  man  nicht  mehr 
als  die  eine  gewünschte  Zelle  isoliert  hat,  und  es  ist  wohl  ratsam, 
bei  dieser  Kontrolle  die  isolierte  Zelle  in  dem  Tröpfchen  gut  hin 
und  her  zu  bewegen,  so  daß  sie  von  allen  Seiten  gut  beobachtet 
werden  kann.      Schimmelsporen  und  Conidien    deponiert  man    immer 


XXII,  1.   Schonten:  ßeinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    29 

bei  schwacher  Vergrößerung  in  die  Mitte  des  Kultiirtropfens ;  bei 
dem  Keimen  kann  das  Mycelium  sich  dann  nach  allen  Seiten  aus- 
breiten, ohne  aus  dem  Tropfen  herauszutreten,  was  natürUch  ge- 
schehen würde,  wenn  die  keimende  Zelle  am  Rande  läge. 

Jetzt  eine  Bemerkung,  die  soAvohl  für  die  Isolierung  größerer 
Zellen  als  auch  Bakterien  gilt.  Man  kann  die  zu  isolierende  Zelle 
noch  auf  eine  andere,  als  iu  Figur  5  und  6  beschriebene  Weise  aus 
dem  Materialtropfen  herausbringen,  wenigstens  .in  einzelnen  Fällen. 
Wenn  man  ein  gut  verdünntes  Bakterienmaterial  hat,  kann  man 
auch  eine  Bakterie  isolieren,  welche  etwas  vom  Rande  des  Tropfens 
entfernt  liegt,  indem  man  nämlich  das  Auge  nicht  an  den  Rand, 
sondern  sofort  in  den  Tropfen  an  den  Platz  der  bewußten  Bakterie 
bringt.     In  vielen  Fällen  wird  es  glücken,    diese  dann    aufzufangen. 

Das  geht  jedoch  nicht  bei  einer  Bakterie,  die  sich  weit  vom 
Rand  entfernt  befindet,  also  in  einem  dickeren  Teil  des  Tropfens, 
denn  in  solchem  Fall  ist  die  Möglichkeit  zu  groß,  andere  Bakterien 
in  das  Auge  der  Nadel  zu  bekommen,  die  sich  in  tieferen  Schichten 
des  Tropfens  befinden  und  die  man  nicht  mit  dem  Immersionssystem 
sehen  kann.  Sehr  gut  geht  aber  dieses  Auffangen,  selbst  mitten 
aus  dem  Tropfen,  bei  großen  Zellen  mit  schwacher  Vergrößerung. 
In  diesem  Falle  darf  die  Flüssigkeit  nicht  zu  stark  mit  Bakterien 
verunreinigt  sein. 

Nicht  geringe  Schwierigkeit  bereiten  Zellen ,  die  sich  an  dem 
Deckglas  mehr  oder  weniger  festkleben,  was  ja  Bakterien  (wahr- 
scheinlich vermittels  ihrer  Cilien)  wohl  gelegentlich  tun.  Man  kann 
sie  oft  nicht  aits  dem  Tropfen  herausbringen. 

Am  bequemsten  sind  die  Bakterien  zu  isolieren,  welche  in  Be- 
wegung sind ,  was  man  a  priori  gewiß  nicht  erwarten  würde.  Man 
sucht  einfach  einen  Platz  am  Rand  des  Tropfens  auf,  wo  die  Bakterie 
nach  ihrer  Bewegung  vermutlich  entlang  kommt,  um  in  dem  Moment 
die  Bewegung  zu  vollziehen ,  die  in  Figur  6  gezeichnet  ist.  Fast 
immer  wird  es  glücken,  die  Bakterie  in  dem  gelegten  „Hinterhalt" 
zu  packen. 

Sehr  bequem  sind  auch  Bakteriensporen  zu  isolieren,  wenigstens 
wenn  man  einen  einfachen  Kunstgriff  anwendet,  der  darin  besteht, 
daß  man  das  Ende  der  Nadel  mit  einer  sehr  dünneu  Paraffinschicht 
überzieht,  und  zwar  dadurch,  daß  man  es  in  eine  lüprozentige 
Lösung  von  Paraffin  in  Petroleumäther  taucht.  Dann  bleiben  die 
Bakteriensporen  außerordentlich  gut  an  der  Nadel  haften ;  man  kann 
sie    sogar    mit    der   punktförmigen    Nadel    No.   1  isolieren.     Die  Er- 


30    Schonten:  Reinkultureneiner  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    XXII,  1. 

klärung  dieser  Tatsaclie  ist  natürlich  in  einer  besonderen  Adhäsion 
zwischen  der  Paraffin  und  der  Sporenwand ,  die  eine  besondere 
chemische  Struktur  hat,  zu  suchen.  — 

Wir  liaben  gesehen ,  daß  das  Material ,  woraus  isoliert  wurde, 
immer  in  physiologischer  Kochsalzlösung  verteilt  war.  Aus  zwei  Ur- 
sachen habe  ich  diese  Flüssigkeit  gewählt :  zunächst  wegen  seiner 
geringen  Viskosität.  Aus  Figur  6  und  7  ist  es  ersichtlich,  daß  die 
kleine  Flüssigkeitsmenge  mit  der  isolierten  Zelle ,  wenn  sie  aus  den 
größeren  Materialtropfen  gezogen  ist ,  sich  als  ein  selbständiges 
Tröpfchen  loslöst.  Das  würde  nicht  möglich  sein ,  wenn  man  es 
mit  einer  viskosen  Flüssigkeit  zu  tun  hätte. ^  Zweitens  liegt  ein 
großer  Vorteil  darin,  daß  Tröpfchen  einer  Kochsalzlösung  nicht  ver- 
dampfen 5  man  kann  diese,  mit  den  darin  sich  befindenden  Bakterien, 
z.  B.  24  Stunden  auf  der  Isolationskammer  lassen ,  und  dann  haben 
sie  noch  dieselbe  Größe.  Tröpfchen  einer  anderen  Flüssigkeit  werden 
während  der  Beobachtung  kleiner,  um  nach  sehr  kurzer  Zeit  beinahe 
ganz  zu  verschwinden.  Eine  vollkommene  Erklärung  dieses  Phäno- 
mens wage  ich  noch  nicht  zu  geben ;  sicherlich  spielen  hier  aber, 
wie  zahlreiche  Versuche  mir  lehrten ,  die  wasseranziehende  Kraft 
des  Kochsalzes  und  die  Temperatur  des  Apparates  selbst  und  der 
Umgebung  eine  Hauptrolle. 

Man  isoliere,  wenn  möglich,  aus  frisch  hergestelltem  Material, 
z.  B.  aus  Kulturen,  welche  nicht  älter  sind  als  24  Stunden,  ins- 
besondere wenn  man  es  mit  Bakterien  zu  tun  hat.  Es  ist  mir  näm- 
lich wahrscheinlich ,  daß  oft  ein  ziemlich  großer  Prozentsatz  der 
Bakterien  in  einer  Kultur  tot  oder  beinahe  tot,  jedenfalls  nicht  mehr 
entwicklungsfähig  ist.  Das  kann  jedoch  nicht  von  allen  Bakterien 
gesagt  werden ;  ich  habe  gearbeitet  mit  Arten  (z.  B.  die  Fäces- 
bakterien  von  Kohlbrugge  ,  worüber  später  gehandelt  werden  soll), 
wobei  alle  isolierten  Bakterien  sofort  Kolonien  gaben,  und  mit 
andern  Arten,  bei  denen  die  Isolation  einer  ziemlich  großen  Anzahl 
Zellen  kein  Resultat  ergab.  Bei  Hefezellen  und  selbstverständlich 
auch  bei  Pilzsporen  tritt  diese  Schwierigkeit  nicht  zutage. 

Man  untersuche  immer,   ehe  man  mit  dem  eigentlichen  Isolieren 


^)  Es  kann  aber  auch  vorkommen,  daß  gewisse  Flüssigkeiten  zu 
wenig  viskos  sind,  so  daß  sie  sich  über  die  Unterseite  des  Deckglases 
ausbreiten.  Das  ist  z.  B.  der  Fall  mit  gewöhnlichem  Serum.  Wenn  man 
davon  Kulturtropfen  nimmt,  findet  man  diese  nach  einiger  Zeit  untereinander 
zerflossen.  Man  verdünnt  es  daher  mit  Wasser  oder  mischt  es  mit  ein 
wenig  Gelatine. 


XXII,  1.   Schouten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    31 

anfängt ,  in  welcher  Nährflüssigkeit  der  Organismus ,  der  isoliert 
werden  soll ,  am  besten  wächst.  Zu  diesem  Zweck  richtet  man 
mehrere  Deckgläschen,  jedes  mit  einem  Materialtropfen  und  mit 
z.  B,  5  Kulturtropfen  verschiedener  Nährlösungen ,  und  bringt  in 
dem  Isolierapparat ,  vermittels  einer  der  augförmigen  Nadeln ,  bei 
schwacher  Vergrößerung,  ein  ganzes  Auge,  gefüllt  mit  Zellen, 
in  jeden  Kulturtropfen.  Die  Deckgläschen  werden  dann  auf  ge- 
wöhnliche feuchte  Kammern  gelegt,  wenn  nötig  in  den  Brutschrank 
gestellt,  und  am  folgenden  Tage  kontrolliert.  Diese  vorläufigen  Ver- 
suche sind  bequem  auszuführen ,  und  kosten  nicht  viel  Zeit.  Be- 
ginnt man  aber  sofort  mit  dem  Isolieren,  dann  tut  man  oft  viel 
Arbeit  umsonst. 

Die  Gründe  für  den  Gebrauch  zweier  Nadeln  sind  folgende. 

Irgendwelche  Umstände  könnten  Veranlassung  sein,  daß  sich  in 
dem  Auge  der  Nadel ,  mit  der  eine  Zelle  isoliert  wurde ,  noch  eine 
Bakterie  festsetzte,  obgleich  es  sehr  selten  vorkommt,  wenn  man  mit 
reinen ,  gut  sterilisierten  Nadeln  arbeitet ,  wenn  das  Material  ge- 
nügend verdünnt  ist ,  und  man  nur  dafür  sorgt ,  daß  die  Nadel 
niemals  zu  tief  im  Materialtropfen  steckt.  Dann  könnte  die  Bakterie 
wohl  einmal  mit  der  isolierten  Zelle  zusammen  in  dem  Kulturtropfen 
landen,  und  es  würde  keine  Keinkultur  entstehen.  Wenn  man  eine 
große  Zelle,  z.  B.  von  Hefe,  isolierte,  würde  man  den  Fehler  später 
wohl  bemerken ,  aber  bei  Bakterien  könnte  große  Verwirrung  ent 
stehen. 

Darum  haben  wir  lieber  mit  zwei  Nadeln  arbeiten  wolleii. 
Hat  man  wirklich  beobachtet,  daß  man  nur  eine  Zelle  isoliert  hat 
und  neben  dem  Kulturtropfen  deponiert ,  dann  wird  diese  weiter  in 
den  Kulturtropfen  mit  der  zweiten  Nadel  transponiert,  über  deren 
vollkommene  Reinheit  man  sieher  sein  kann. 

Wenn  man  nach  einiger  Zeit  sieht,  daß  die  isolierte  Zelle  sich 
in  dem  Kulturtropfen  vermehrt  hat,  muß  in  ein  gewöhnliches  Röhr- 
chen übergeimpft  werden.  Hat  man  einen  festen  Kulturtropfen  ge- 
braucht, so  wartet  man,  bis  die  Kolonie  mit  bloßem  Auge  sichtbar 
ist.  Für  die  Übertragung  kann  man  von  einem  einfachen  kleinen 
Apparat,  der  „Wechselkammer",  Gebrauch  machen,  die  schematisch 
und  im  Durchschnitt  in  Figur   13   abgebildet  ist. 

Auf  einem  Fuß  Ä,  der  mit  Blei  beschwert  ist,  stehen  zwei 
Säulchen  i?,  von  10  cm  Höhe.  Auf  diesen  ist  ein  Objektglas  C  mit 
einer  feuchten  Kammer  vermittels  Siegellack  befestigt.  In  der  Mitte 
ist  eine  Öffnung  D,    deren  Durchmesser    15  mm   beträgt.     Die    Öff- 


32    Schonten:  Reinkultureneineruntercl.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

nimg  kann  durch  ein  Glasplättchen  jE",  das  ganz  mit  Vaseline  be- 
strichen ist,  abgeschlossen  werden,  wenn  man  es  darunter  schiebt. 
Dieses  Plättchen  hat  in  der  Mitte  eine  Öffnung,  worunter  ein  hohler 
kupferner  Knopf  O  befestigt  ist.  In  diesen  Knopf  bringt  man  einen 
Tropfen  Wasser,  so  daß  nach  Abschließung  der  Kammer  von  unten 
der  Raum  mit  Wasserdampf  gesättigt  ist.  Auf  die  feuchte  Kammer, 
welche  ebenfalls  von  innen  mit  Vaseline  bestrichen  ist ,  um  von 
Infektion  durch  Stoffteilchen  nicht  belästigt  zu  werden,  legt  man  das 
Deckglas  F ^  auf  dem  isoliert  ist.  Man  kann  nun  sehr  bequem, 
wenn  man  E  weggeschoben  hat,  von  unten,  durch  die  Öffnung  hin, 


B 


D 


G 


E 


C 


B 


A 
13. 


V 


mit  einer  Platiunadel  aus  dem  Kulturtropfen  in  ein  Röhrchen  über- 
impfen. Dieser  kleine  Apparat  hat  den  Vorteil,  daß  das  Deckgläschen 
vollkommen  festsitzt,  daß  Infektion  von  außen  während  dieser  Mani- 
pulation beseitigt  wird ,  und  daß  das  Verdampfen  der  Tropfen  auf 
dem  Deckgläschen  mehr  verhindert  wird ,  was  nicht  der  Fall  ist, 
wenn  mau  es  einfach  in  eine  Deckglaspinzette  klemmt. 

Der  Apparat  findet  auch ,    wie    wir    oben    sahen ,    bei  der  Ver 
dünnung  des  Materials    und   der  Herstellung   der  Isolierdeckgiäschen 
Verwendung. 

Sollte  es  vielleicht  für  einige  Mikroorganismen  aus  dem  einen  oder 
andern  Grunde  erwünscht  sein,  daß  sie  nach  der  Isolation  sich  nicht 
in  einer  feuchten  Kammer ,  sondern  direkt   in    einem  Röhrchen  oder 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    ;i3 

Kolben  weiter  entwickeln,  so  kann  man  folgendermaßen  zu  Werke 
gehen.  Man  isoliert  in  einem  flüssigen  Knlturtropfen  und  bringt 
sofort  das  Gläschen  anf  die  Wechselkammer.  In  einem  sterilisierten 
Kapillarglasröhrchen  (+  1  cm  lang,  Lumenweite  +  ^j^  mm),  oder 
in  einem  sterilisierten  Stückchen  Filtrierpapier  (+  3X6  mm) ,  von 
dem  man  immer  Vorrat  haben  muß ,  wird  dann  vermittels  einer 
sterilisierten  Pinzette  der  Kulturtropfen  aufgesogen  und  sofort  in  das 
Röhrchen  oder  den  Kolben  gebracht. 


Anwendungen. 

Natürlich  bestanden  die  ersten  Anwendungen  darin ,  daß  ich 
Reinkulturen  von  allerlei  Mikroorganismen  züchtete,  auch  von  solchen, 
bei  denen  das  Isolieren  nach  der  Koch  sehen  Methode  mit  mehr  oder 
weniger  Schwierigkeiten  verbunden  ist.  Von  den  letzteren  nenne 
ich  die  Saprolegniaceen,  die,  wie  bekannt ,  meistens  in  Wasser  vor- 
kommen, welches  von  Bakterien  wimmelt,  was  zur  Folge  hat,  daß 
Kulturplatten  oft  so  stark  durch  überwuchernde  Bakterien  verun- 
reinigt sind,  daß  ein  Isolieren  des  langsam  wachsenden  Pilzes  un- 
möglich gemacht  wird.  Es  kostete  jedoch  nicht  viel  Mühe,  um  nach 
der  beschriebenen  Methode  aus  sporenhaltigem  Material  (besonders 
wenn  die  Sporen  noch  nicht  lange  aus  dem  Sporangium  heraus- 
getreten waren)  eine  Spore  zu  isolieren,  die  nicht  mit  Bakterien  ver- 
unreinigt war,  und  daraus  eine  Reinkultur  zu  züchten. 

Zwei  Anwe'ndungen  möchte  ich  noch  ausführlich  beschreiben, 
und  zwar  weil  dabei  meine  Methode  in  der  Tat  die  einzige  war, 
die  zu  einem  Resultate  führte.  Beide  betretfen  die  Frage  der 
Pleomorphie. 

Eine  Auseinandersetzung  von  dem,  was  über  diese  belangreiche 
Frage  geschrieben  ist,  und  eine  Aufzählung  der  verschiedenen  Beob- 
achtungen, die  damit  zusammenhängen,  würde  Stotf  genug  geben  für 
ein  ganzes  Buch.  Ich  will  mich  darum  in  diesem  engen  Rahmen 
einer  ausführlichen  Besprechung  dieser  Frage  enthalten,  und  nur  zu 
zeigen  versuchen,  daß  für  ein  abschließendes  Studium  dieses  Problems, 
die  bisher  gebrauchten  technischen  Hilfsmittel  unzureichend  sind,  und 
eine  Methode  wie  die  oben  beschriebene  unbedingt  notwendig  ist. 
Dabei  ist  die  Benennung  „Pleomorphie"  als  ein  Kollektivbegritf 
aufzufassen,  unter  den  alle  beobachteten  Variationen  von  Bakte- 
rien fallen. 

Zeitsclir.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  1.  3 


34    Schonten:  Reinkultureneiner  unter  cl.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 

Bei  den  Untersuchungen  von  Nägeli,  Zopf  u.  a.,  welche  die 
gewaltigsten  Übergänge  zwischen  allen  möglichen  Formen  wahr- 
nahmen, brauchen  wir  nicht  stehen  zu  bleiben,  da  sie  nicht  mit 
Reinkulturen  angestellt  und  also  in  gewissem  Sinne  wertlos  sind. 
Ganz  richtig  sagt  darum  Migula^,  mit  Bezug  auf  die  Versuche  von 
Zopf,  wo  er  über  Arten  spricht,  die  in  Reinkulturen  gezüchtet  sind: 
„Eine  so  weitgehende  Vielgestaltigkeit  ist  niemals  beobachtet  worden." 

Aber  zwischen  Pleomorphie  in  diesem  Sinn  und  einem  absoluten 
Konstantsein  der  Form  besteht  ein  großer  Unterschied.  Zahllos  sind 
die  Versuche,  welche  ernste  und  tüchtige  Forscher  mit  Hilfe  von 
Reinkulturen  gemacht  haben,  bei  denen  die  Formen  der  Bakterien 
doch  ineinander  übergingen.  Man  hat  Kokken  sich  in  Stäbchen  ver- 
ändern sehen,  Stäbchen  in  Vibrionen,  diese  wieder  in  Kokken  etc., 
und  das  alles  unter  veränderten  Umständen,  die  nicht  so  abnormal 
waren,  daß  sie  nicht  auch  in  der  Natur  hätten  vorkommen  können. 
Was  hat  man  von  solchen  Versuchen  zu  halten?  Viele  Forscher 
nehmen  sie  als  wahr  an  und  schrecken  doch  vor  einer  konsequenten 
Anwendung  der  Resultate  zurück,  die  darin  bestehen  muß,  daß  man 
die  ganze  Einteihmg  der  Bakterien  in  Kokken,  Stäbchen  etc.  fahren 
läßt.  Aber  damit  würde  ein  großer  Teil  des  Gebäudes  der  Bak- 
teriologie fallen. 

Eine  Folge  ist,  daß  man  in  den  meisten  Handbüchern  einer 
gewissen  Unsicherheit  über  diese  Frage  begegnet.  Mau  fürchtet  sie 
anzufassen,  redet  um  die  Dinge  herum  und  kommt  zu  dem  billigen 
Schluß,  daß  die  Wahrheit  wohl  so  etwa  in  der  Mitte  liegen  müsse. 
Aber  mit  diesem  Ausweg  ist  wenig  getan. 

Doch  gibt  es  einzelne  Forscher,  die  wohl  zu  sagen  wagen,  was 
sie  von  den  Dingen  halten,  und  die  in  scharf  umrissenen  Zügen  an- 
geben ,  inwieweit  sie  die  Pleomorphie  annehmen  oder  verwerfen. 
Zu  ihnen  gehören  u.  a.  Migula  und  Duclaux.  Der  erstere,  ein 
Gegner  der  Pleomorphie,  erkennt  z.  B.  in  bezug  auf  die  Mikrospora 
comma-  an,  daß  diese  als  echte  typische  Koramaformen  vorkommen 
können,  die  ungefähr  dreimal  so  lang  als  breit  sind,  und  eine  deut- 
liche Krümmung  anzeigen ;  weiter  in  kürzeren  Längen ,  wobei  die 
Krümmung  stärker  oder  schwächer  sein  kann,  und  endlich  als  sehr 
lange  Formen,  sechs-  bis  achtmal  so  lang  als  dick,  mit  einer  sehr 
starken    oder    kaum    bemerkbaren  Krümmung.     Er  nimmt  also,    wie 


^)  Migula,  W.,  System  der  Bakterien  Bd.  I,  p.  221. 
2)  1.  c,  p.  234. 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    35 

jeder  Bakteriologe  beute  tut,  an,  daß  die  Größe  der  Zellen  sich 
verändern  kann,  und  auch,  daß  Unterschiede  in  der  Form  vorhanden 
sein  können,  letzteres  jedoch  innerhalb  gewisser  Grenzen,  die  der 
Charakter  der  Art  bestimmt.  Die  Grenzen  zieht  er  mit  Bestimmt- 
heit wenn  er  sagt :  „Indessen  so  verschiedenartig  auch  die  einzelnen 
Formen  einer  Art  sein  mögen,  sie  halten  sich  dennoch  immer  inner- 
halb der  Grenzen,  welche  ihnen  durch  den  Charakter  der  Gattung- 
gezogen  sind ;  niemals  wird  aus  einer  Microspora  ein 
Spirillum  oder  ein  Bacillus." 

Einen  entgegengesetzten  Standpunkt  nimmt  mit  eben  so  viel 
Bestimmtheit  Duclaux  ein.  Nachdem  er  verschiedene  Versuche  an- 
geführt hat,  bei  denen  die  Formen  der  Bakterien  auf  alle  mögliche 
Weise  ineinander  übergehen,  sagt  er^:  „Une  Classification  est  im- 
possible  k  faire;  il  est  impossible  de  trouver  pour  chaque  microbe 
un  petit  nombre  de  proprietes  assez  nettes  et  assez  constantes  pour 
pouvoir  assurer  sa  diagnose."  Unter  „Art"  versteht  darum  Duclaux 
einen  Bazillus  von  typischer  Form,  mit  all  den  abweichenden  Ba- 
zillen ,  die  auf  experimentellem  Wege  daraus  gezüchtet  werden 
können. 

Bei  einem  methodischen  Studium  der  Frage  von  der  Pleomorphie 
wird  ja  doch  immer  wohl  eine  Schwierigkeit  bleiben,  die  man  nicht 
ganz  auflösen  kann. 

Es  ist  diese:  welche  der  veränderten  Umstände,  unter  denen 
man  die  Form  der  Bakterien  variieren  sieht,  sind  abnormal,  d.  h. 
so,  daß  sie  in  der  Natur  nicht  vorkommen,  und  welche  sind  normal. 
Einige  Autoren  '  z.  B.  wollen  durchaus  niclit  leugnen ,  daß  eine 
Bakterie  in  der  Form  eines  Stäbchens,  Vibrios  und  Kokkus  vor- 
kommen kann,  wenn  man  nur  die  Kultur  abnormalen  Umständen 
aussetzt.  Mace"  sagt  über  den  Proteus  von  Hauser:  „Mais  pour 
obtenir  des  variations  de  formes ,  il  faut  placer  la  Bacterie  dans 
des  conditions  defavorables,  en  particulier  l'a  faire  vivre  dans 
un  milieu  acide." 

Es  ist  wahr,  daß  viele  Fälle  von  Pleomorphie,  die  bekannt  ge- 
worden sind,  gerade  die  Folge  abnormaler  Lebensbedingungen  waren 
(cf.  z.  B.  die  bekannten  Versuche  von  Guignard  und  Charnix  mit 
Bac.  pyocyaneus ,  von  Schottelius  mit  Bac.  prodigiosus  etc.).  In 
allen  diesen  Fällen  konnten  die  Forscher  die  ursprünglichen  Formen 


^)  Duclaux,  Traite  de  microbiologie.    I,  1898,  p.  260. 
-)  Traite  pratique  de  Bacteriulogie.    3°ie  ed.    1897.    p.  329. 

3* 


• 


36    Schouten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.  XXII,  1. 

wieder    erlangen,    Avenn    sie    die  Bakterien  aueli  wieder    in    ilirc  ur- 
sprüug-licbe  Umgebung  brachten. 

Andere  Untersuchungen  —  zu  zahlreich  um  aufgezählt  zu  wer- 
den —  hat  man  angestellt,  bei  denen  Veränderungen  erschienen 
unter  modifizierten  Umständen,  die  man  nur  in  blindem  Vorurteil 
abnormal  nennen  kann. 

In  solchen  Fällen  nehmen  die  Gegner  der  Pleomorphie  ihre 
Zuflucht  zu  einer  anderen  Waffe.  Die  Forscher  sind  dann  bei  ihrer 
vermeintlichen  Reinkultur  entweder  nicht  von  einer  Zelle  ausge- 
gangen, oder  die  Kultur  ist  später  durch  Luftinfektion  verunreinigt 
worden. 

Es  ist  nicht  zu  leugnen,  daß  beide  Fälle  vorkommen  können. 
Die  Möglichkeit  einer  Luftinfektion  ist  aber  bekanntlich  äußerst 
gering.  Wenn  man  weiter  mit  der  nötigen  Vorsicht  arbeitet  und 
die  Versuche,  wo  es  darauf  ankommt  (wie  bei  den  hier  folgenden 
über  Pleomorphie),  nicht  nur  einmal  ausführt,  sondern  gleichzeitig 
in  verschiedenen  Serien,  und  sie  darauf  noch  einmal  wieder- 
holt, dann  hat  mau  Sicherheit,  daß  Luftinfektion  nicht  die  Ursache 
fehlerhafter  Resultate  gewesen  ist.' 

Der  andere  Einwand,  daß  man  bei  der  Reinkultur,  die  man 
mit  der  Koch  scheu  Methode  bekommen  hat,  nicht  von  einer  Zelle 
ausgegangen  ist,  halte  ich  für  bedeutungsvoller.  Von  verschiedenen 
Seiten  hat  man  darauf  gewiesen,  daß  der  Plattenkulturmethode  nicht 
zu  trauen  ist,  wenn  man  nur  einmal  eine  Platte  ausgießt,  und 
aus  den  daraus  entstandenen  Kolonien  Kulturen  anlegt,  —  eine  üble 
Angewohnheit,  die  viele  Forscher  haben.  Aber  ich  glaube  nicht, 
daß  alle  Forscher  Kochs  Methode  in  dieser  Weise  in  Anwenduna' 
bringen,  ^'iele  werden  zweifellos  nicht  aus  den  zuerst  entstandenen 
Kolonien  direkt  ihre  Kulturen  angelegt  haben,  sondern  aus  den 
Kolonien  zuerst  noch  einmal  eine  Platte  gegossen,  und  dies  einige 
Male  wiederholt  haben,  bevor  sie  ihre  eigentlichen  Versuche  an- 
stellten. Und  nun  darf  Pleomorphie,  die  man  bei  solchen  Versuchen 
gefunden  hat,  nicht  so  einfach  geleugnet  werden.  Ich  für  meinen  Teil 
glaube  nämlich,   daß   unter  solchen  Vorsichtsmaßregeln    die  Methode 


^)  Die  Möglichkeit  einer  Luftinfektion  haben  beide  Methoden.  Sie  ist 
aber  bei  meinem  Isolationsvorfaliren  mindestens  ebenso  gering  wie  bei  der 
Plattenkulturmethode.  Während  meiner  sechsjährigen  Versuchszeit  ist  mir 
noch  nicht  ein  Fall  vorgekommen. 


XXII,  1.   Seh  outen:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    ;^  7 

von  Koch  nahezu  vollkommene  Zuverlässigkeit  gil)t\  und  dies  ist 
auch  die  Absicht  des  Erfinders  gewesen,  dessen  Methode  nicht  an 
Wert  verlieren  darf,  weil  andere  sie  verkehrt  anwandten. 

Aber  absolute  Zuverlässigkeit  k  a  n  n  sie  nicht  geben. 
.JöRGENSKN ■^  sagt  darum  auch:  „Wenn  man  auch  die  Plattenkulturen 
mehrere  Male  wiederholt,  so  weiß  man  doch  in  Wirklichkeit  nie, 
ob  das  Ziel  erreicht  ist  oder  nicht."  Darum  hat  Hansen"^  Kochs 
Methode  auf  die  Weise  für  Hefezellen  verbessert,  daß  er  auf 
einem  großen  Deckglas  eine  Gelatineplatte  ausgießt,  die  so  dünn  ist, 
daß  man  unter  dem  Mikroskop  kontrollieren  kann,  ob  die  Zellen 
geschieden  sind  und  wo  sie  liegen.  Die  Stellen  werden  angedeutet, 
und  man  kann  die  Entwicklung  der  Kolonien  vom  ersten  Augenblick 
an  verfolgen. 

Für  Bakterien  ist  dieses  Prinzip  natürlich  undurchführbar,  da 
man  sie  in  einer  noch  so  dünnen  Gelatineschicht  doch  nicht  liegen 
sehen  und  noch  weniger  von  festen  kleinen  Partikelchen  unterscheiden 
kann,   die  immer  in  kolossaler  Menge  darin  vorkommen. 

Ich  meine  darum,  daß  meine  Isolierungsmethode  für  eine  ab- 
schließende Untersuchung  über  die  Veränderlichkeitserscheiuungen  bei 
Mikroorganismen'  notwendig  ist,  und  zwar  vor  allem,  weil  man  hier- 
bei sicher  ist ,  daß  der  Ausgangspunkt  der  Kultur  eine  Zelle  ist, 
weiter,  weil  man  die  Variation  schon  bei  den  ersten  Zellen  der 
Kolonie  kontrollieren  kann,  und  nicht  zum  wenigsten,  weil  sie  den 
Weg  zu  einem  vergleichenden  Versuch  aller  aufeinanderfolgenden 
Generationen  bahnen  kann  (vergl.  p.  13). 

Die  Versuche,  die  ich  gemacht  habe,  sind  geringer,  als  man 
nach  dieser  langen  Einleitung  erwarten  sollte.  Der  Grund  hierfür 
ist,  daß  ich  noch  keine  Gelegenheit  hatte,  sie  weiter  fortzusetzen. 
Was  ich  aber  gefunden  habe,  halte  ich  für  nicht  zu  unwesentlich, 
um  es  hier  mitzuteilen. 


^)  Dieses  gilt  natürlich  nur,  wenn  man  es  mit  kleinen  Zellen  zu  tun 
hat,  auf  denen  sich  nicht  leicht  andere  festsetzen.  Für  große  Zellen,  die 
aus  einem  stark  verunreinigten  Medium  kommen,  die  oft  mit  Bakterien 
besetzt  sind,  bleibt  (wie  ich  schon  in  der  Einleitung  sagte)  der  Ein- 
wand bestehen,  daß  sie  durch  Schütteln  nicht  isoliert  werden  kimnen. 
selbst  nicht,  wenn  man  die  Plattenkulturmethode  mehrere  Male  an- 
wendet. 

-)  Die  Mikroorganismen  der  Gärungsindustrie.  Berlin  (Parey) 
1898,  p.  37. 

^)  ibid.,  p.  35. 


38    Schonten:  Reinkvilturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1. 


I. 

Dr,  KoHLBRUGGE^  hatte,  während  er  an  dem  hiesigen  hygieni- 
schen Institut  Untersuchungen  anstellte,  für  eine  Untersuchung  von 
Fäces  Gelatineplatten  angelegt  und  aus  den  Kolonien  in  Röhrchen 
mit  Fleischgelatine  übergeimpft.  Nach  einiger  Zeit  fand  er  in  zwei 
Eöhrchen  eine  Mischung  von  Stäbchen  und  Vibrionen,  und  weil  er 
gerade  mit  einer  Untersuchimg  über  Vibrionen  beschäftigt  war,  wollte 
er  diese  letzteren  isolieren.  Er  goß  zum  zweiten  Male  eine  Platte, 
diesmal  von  Fleischagar.  Von  den  entstandenen  Kolonien  zeigte 
jedoch  keine  einzige  Vibrioneu,  sondern  alle  bestanden  aus  kurzen 
Stäbchen.  Er  impfte  auf  Glyzeringelatine,  und  das  Resultat  war 
wieder:  nur  sehr  kurze  Stäbchen.  Nach  einiger  Zeit  aber,  als  die 
Gelatine  flüssig  geworden  war,  untersuchte  er  sie  wieder,  und  mm 
kamen  neben  den  Stäbchen  wieder  Vibrionen  vor.  Aus  der  flüssig 
gewordenen  Gelatine  goß  er  mm  wiederum  eine  Agarplatte,  und  die 
Folge  war,  daß  er  wiederum  nichts  als  kurze  Stäbchen  fand.  Aus 
derselben  Gelatine  goß  er  auch  eine  Gelatineplatte  und  machte  eine 
Stichkultur  in  Fleischgelatine.  Im  Anfang  traf  er  nur  kurze  Stäb- 
chen an,  aber  später,  als  die  Gelatine  flüssig  geworden  war,  neben 
den  Stäbchen  auch  Vibrionen.  Auf  keine  Weise  war  es  ihm  möglich, 
eine  Reinkultur  von  Vibrioneu  zu  gewinnen;  wohl  von  Stäbchen, 
wenn  er  nämlich  eine  Kultur  in  Bouillon,  worin  beide  vorkamen,  bei 
37^  setzte.  Darin  schienen  die  Vibrionen  abzusterben,  während  die 
Stäbchen  übrig  blieben. 

KoHLBRUGGE  teilte  mir  endlich,  nachdem  alle  Versuche,  um  die 
Sache  aufzulösen,  mißglückt  waren,  den  rätselhaften  Fall  mit,  und 
ersuchte  mich,  doch  einmal  einen  Vibrio  aus  einer  flüssigen  Kultur 
für  ihn  zu  isolieren. 

Ich  isolierte  einige.  Die  Kulturtropfen  bestanden  aus  Fleisch- 
gelatine. Die  Deckgläschen,  auf  denen  isoliert  wurde,  lagen  auf 
feuchten  Kammern,  auf  deren  Boden  ich  noch  ein  Tröpfchen  Wasser 
brachte.  Am  folgenden  Morgen  waren  die  Kolonien  schon  da,  und 
wir  konnten  mit  der  stärksten  Vergrößerung  das  Gewimmel  der  Vi- 
brionen prachtvoll  sehen.  Am  darauffolgenden  Tage  hatten  die 
Kolonien    an    Größe    stark    zugenommen ;    sie    nahmen    ungefähr    ein 


^)  Symbiose  zweier    pleomorpher    Fäces -Bakterien    (Arch.    f.    pathol. 
Anat.  u.  Phys.  u.  f.  klin.  Med.     Bd.  CLXIII,  H.  3,  p.  365). 


XXII,  1.   Schouten:  Keinkultureneiner  unter  d. Mikroskop  isoliert. Zelle.    39 

Viertel  von  der  Größe  der  Kulturtropfen  eiu.  In  allen  sahen  wir 
stark  bewegliche  Vibrionen.  Wir  machten  auch  gefärbte  Präparate 
davon  und  sahen  wieder  nichts  als  Vibrionen,  Darauf  wurde  aus 
den  Kolonien  auf  drei  verschiedene  Nährböden  geimpft,  nämlich  auf 
gewöhnliche  Fleischgelatine,  auf  dieselbe  zehnmal  verdünnt,  welche 
also  flüssig  war,  und  auf  Peptonwasser  (1  Prozent  Pepton).  Nach 
zwei  Tagen  machten  wir  farbige  Präparate  von  diesen  Kulturen.  In 
den  Kulturen  auf  gewöhnlicher  Gelatine  waren  lebende  Vibrionen, 
auch  Stäbchen  zu  sehen,  von  beiden  ungefähr  gleichviel.  Die  Kul- 
turen  in  flüssigen  Nährböden  zeigten  beinahe  nur  Vibrionen. 

Auch  isoliei'te  ich  zwei  Vibrionen  in  Fleischgelatine,  und  legte 
das  Deckgläschen  auf  eine  feuchte  Kammer,  auf  deren  Boden  ich 
keinen  Wassertropfen  brachte.  Die  Oberfläche  der  Kulturtropfen 
war  hier  also  trocken. 

In  Verbindung  hiermit  war  auch  ein  Unterschied  zu  beobachten 
in  der  Gestalt  der  Bakterien  aus  den  Kolonien.  Während  in  den 
vorigen  Kolonien,  welche  in  einem  mit  Wasserdampf  gesättigten 
Kaum  entstanden  waren,  alle  Bakterien  nach  einigen  Tagen  noch 
als  stark  bewegliche  Vibrionen  in  dem  Kondeusationswasser,  welches 
auf  den  Kulturtropfen  sich  niedergeschlagen  hatte,  durcheinander 
wimmelten,  entstanden  hier  aus  der  isolierten  Vibrio  schon  im  Anfang 
dicke  Vibrionen,  die  unbeweglich  waren  (wahrscheinlich,  weil  sie 
vollständig  trocken  lagen),  während  eine  Untersuchung  der  Kolonien, 
als  sie  drei  Tage  alt  Avaren,  neben  den  dicken  Vibrionen  schon 
Stäbchen  sehen  ließ. 

Es  ergab  sich  also  auf  jeden  Fall  mit  vollkommener  Sicherheit 
aus  allen  diesen  Untersuchungen,  daß  eine  Vibrio  Stäbchen  hervor- 
bringen kann.  Es  war  sehr  wahrscheinlich ,  daß  die  physikalische 
Natur  des  Nährbodens  hierbei  eine  große  Rolle  spielt,  und  zwar 
so,  daß  auf  einem  festen  Nährboden  Stäbchen,  auf  einem  flüssigen 
Vibrionen  entstehen. 

Wa  r  u  m  in  flüssigen  Nährböden  im  Anfang  noch  einige  Stäbchen 
neben  den  Vibrionen  vorkommen,  wage  ich  nicht  zu  entscheiden. 
Aber  bei  Cholerakulturen  ist  dieses  auch  eine  gewöhnliche  Er- 
scheinung. 

Aus  den  Kulturen  mit  Vibrionen  kann  man  wieder  die  Stäbchen 
zurückerhalten,  wenn  man  auf  feste  Nährböden  impft,  imd  aus  Kul- 
turen mit  Stäbchen  erhält  man  die  Vibrionen  wieder,  wenn  man  sie 
in  flüssige  Medien  bringt.  Wir  haben  hier  also  eine  Erscheinung 
einer  nicht  erblichen  Variation.      Dieser  Fall  ist  analog  demjenigen, 


40    Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.  XXII.  1. 

dem  BoxNiER  bei  höheren  Pflanzen  nachgegangen  ist.  Dieser  For- 
scher^ brachte  Pflanzen  aus  der  Ebene  anf  die  Berge,  sah  dort 
Veränderungen  auftreten,  brachte  sie  darauf  wieder  in  die  Ebene, 
und  fand,  daß  sie  ihre  vorige  Gestalt  wieder  annahmen. 

Obgleich  diese  Experimente  wohl  einigen  Anspruch  auf  Ge- 
nauigkeit macheu  konuten,  weil  ich  sie  nicht  mit  einer,  sondern  mit 
mehreren  Vibrionen  gemacht  hatte,  beschloß  ich  doch,  derselben  Frage 
noch  einmal  nachzugehen.  Insonderheit  wollte  ich  noch  einmal  sehen, 
binnen  wieviel  Zeit  man  aus  einem  Vibrio  ein  Stäbchen,  und  aus 
einem  Stäbchen  wieder  einen  Vibrio  machen  könne. 

Ich  isolierte  vier  Vibrionen  in  Kulturtropfen  von  Fleischgelatine. 
Zwei  davon  ließ  ich  sich  in  einer  feuchten  Kammer,  ohne  Wasser 
auf  dem  Boden,  entwickeln;  die  anderen  mit  einem  Wassertropfen. 
Nach  zwei  Tagen  kontrollierte  ich  die  Kolonien.  Die  ersteren  be- 
standen aus  dicken,  unbeweglichen,  die  letzteren  aus  dünneren,  stark 
beweglichen  Vibrionen.  Von  den  Kolonien  impfte  ich  auf  Fleisch- 
agar,  aus  jeder  Kolonie  in  ein  Röhrchen.  Nach  zwei  Tagen  schien 
es  bei  Untersuchung  der  lebenden  Zellen,  wie  der  gefärbten  Prä- 
parate ,  daß  in  allen  Röhrchen  nichts  als  sehr  kleine  bewegliche 
Stäbchen ,  höchstens  1  /tt  lang ,  vorkamen ,  einige  so  kurz ,  daß  es 
beinahe  Kokken  waren.  Aus  jedem  dieser  Agarröhrchen  impfte  ich 
in  Bouillon,  gewöhnliche  und  zehnmal  verdünnte  Bouillongelatine. 
Nach  zwei  Tagen  schienen  alle  flüssigen  Nährböden  nichts  als  große, 
stark  bewegliche  und  stark  gekrümmte  Vibrionen  zu  enthalten,  wäh- 
rend auf  der  Fleischgelatine  nur  kleine,  bewegliche  Stäbchen  vor- 
kamen. Innerhalb  6  Tagen  war  also  der  Übergang  vom  Vibrio 
zum  Stäbchen,  und  vom  Stäbchen  Avieder  zurück  zum  Vibrio  ab- 
gelaufen. 

Noch  ein  kurzes  Wort  will  ich  beifügen  nacli  Anleitung  einer 
Bemerkung,  die  Kohlbrugge  in  der  oben  genannten  Abhandlung 
(pag.  375)  macht. 

Er  sagt  darin,  daß  das  Stäbchen  aus  dem  Gemenge  von  Vi- 
brionen und  Stäbchen,  das  icli  auch  für  ihn  isolierte,  nach  der  Iso- 
lierimg die  Gelatine  nicht  mehr  verflüssigte,  aber  vorher  wohl.  Das 
war  vollkommen  richtig.  Der  Grund  für  diese  Erscheinung  war,  daß 
ich  bei  meinen  ersten  Experimenten  die  Nadeln  beim  Sterilisieren 
zuweilen  tiefer  in  die  Schwefelsäure  als  ins  Ammoniak  eintauchte.    Da- 


^)  Recherches  sur  Tanatomie  experimentale  des  vegetaux.    G.  Bonnier. 
Ed.  Crete.    Corbeil  (S.  et  0.)  189G. 


XXII,  1.   Scliouten:  Reinkultureneinerunterd.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    41 

diircli  diffundierte,  worauf  ich  oben  (p.  21)  schon  verwiesen  habe,  die 
überflüssige  Säure  nach  der  Spitze  der  Nadel,  zum  Nachteile  natürlich 
der  isolierten  Bakterien.  Als  ich  unter  Vermeidung'  dieses  Fehlers 
das  Stäbchen  nochmals  isolierte,  schien  sein  Verflüssigungsvermögen 
nach  der  Isolierung  ebenso  stark  zu  sein. 


II. 

Bei  einer  Untersuchung  über  „Raggi",  die  ich  in  „'s  Lands 
Plantentuin"  zu  Buitenzorg  machte ,  wurde  ich  schon  im  Anfang 
durch  eine  Erscheinung,  die  meine  Aufmerksamkeit  erregte,  auf  einen 
Seitenweg  geführt,  den  betreten  zu  haben  ich  mich  aber  nicht  zu 
beklagen  brauche. 

Ich  nahm  nämlich  wahr ,  daß  die  Sporangien  von  Rhizopus 
Oryzae,  einem  der  beiden  Pilze,  die  stets  im  Raggi  gefunden  werden, 
Sporen  enthalten  von  sehr  verschiedener  Größe  und  Gestalt.  Die 
kleinen  waren  meistens  elliptisch,  +  6x5/*  groß ;  daneben  waren 
langgedehnte  Sporen  darunter,  z.  B.  von  .32  X  8  /^  und  dazwischen 
allerlei  Übergänge.  Unter  dem  Eindruck  der  Untersuchungen  von 
DE  Vries  über  Mutation,  fragte  ich  mich  unwillkürlich,  ob  die  ver- 
schiedenen Sporen  unter  denselben  Bedingungen  ausgesäet ,  immer 
einen  Pilz  von  derselben  Form  geben  würden. 

Bei  meinen  Experimenten  ging  ich  immer  von  eine  m  Sporan- 
gium  aus ,  aus  dem  ich  dann  nach  meiner  Reinkulturmethode  drei 
Sporen,  eine  kleme,  eine  mittelgroße  und  eine  große  aussuchte,  und 
diese  in  Tropfen  von  derselben  Nährflüssigkeit  brachte  (5  Prozent 
Glukose,  ^/.i  Prozent  Pepton,  ^/^^  Prozent  Mouokaliumphosphat,  Yoo  ^^^' 
zent  Magnesiumsulfat).  Dies  alles  geschah  unter  einem  Deckgläs- 
chen, so  daß  die  Bedingungen  für  alle  drei  dieselben  waren.  Als 
das  Mycelium  sich  in  einem  Tropfen  genügend  entwickelt  hatte,  wurde 
es  in  ein  Röhrchen  mit  Glukose-Pepton-Agar  (obengenannte  Mischung 
-j-  2  Prozent  Agar)  gebracht.  Auch  hierbei  sorgte  ich  für  voll- 
ständige Gleichheit  des  Nährbodens. 

Zunächst  schien  es  mir,  daß  die  Entwicklung  während  der  ersten 
24  Stunden  in  gleichem  Verhältnis  zu  der  Größe  der  Spore  war ; 
später  fiel  der  Unterschied  weg  oder  war  doch  nicht  mehr  wahr- 
nehmbar. Die  mittelgroßen  und  die  großen  Sporen  gaben  stets  den 
normalen  Pilz.  Die  kleinen  entwickelten  sich  in  den  ersten  3  Tagen 
nur  bis  zu   einem  gewissen  Stadium  (zu  einem  so  kleinen  Mycelium, 


42    Schonten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.   XXII,  1, 

daß  es  noch  bequem  in  dem  Tröpfchen ,  in  dem  die  Spore  isoliert 
war ,  Platz  hatte) ,  blieben  darauf  einige  Tage  stehen  und  gingen 
dann  in  den  meisten  Fällen  zugrunde.  Doch  waren  auch  solche 
darunter,  die  das  kritische  Stadium  überwanden  und  dann  sofort 
eine  Zwergrasse  gaben ,  die  sich  als  erblich  konstant  erwies ;  sah 
ich  doch  während  der  vielen  Impfungen^  die  ich  gut  3  Jahre  lang 
anstellte ,  keine  Veränderungen.  Wir  haben  hier  also  einen 
Fall   von    Mutation    bei    Pilzen. 

Wenn  man  den  normalen  Pilz  und  die  Zwergrasse  (beide  also 
von  einem  Sporangium  herrührend)  nebeneinander  setzt,  sieht  mau 
makroskopisch  folgende  Unterschiede : 

Normal:  Füllt  nach  2  Tagen  die  untere  Hälfte  des  Röhrchens 
ganz  mit  seinen  langen  Öporangienträgern ,  auf  denen  die  ziemlich 
großen  Sporangien  sitzen. 

Z  w  e  r  g  r  a  s  s  e  :  Bildet  nur  eine  filzartige  Schicht  auf  der  Ober- 
Hache  des  Nährbodens ;  diese  Schicht  wird  einige  Millimeter  dick ; 
die  Sporangienträger  werden  höchstens  4  mm  lang. 

Mikroskopisch  findet  man  folgende  Einzelheiten : 

Normal:  Diameter  der  Sporangien  +  180  ,a,  Dicke  der 
Sporangienträger  +   16 /i.     Die  Sporen  ungefähr  8x6  /t. 

Zwergrasse:  Diameter  der  Sporangien  +  70  /^,  Dicke  der 
Sporangienträger  +  8  f-i.  Mittlere  Größe  der  Sporen  6x4  /t. 
Sehr  dünne  Sporangiumwand ,  was  auch  daraus  deutlich  wird ,  daß 
man  mit  einer  Impfnadel  niemals  ganze  Sporangien  überimpfen  kann, 
da  sie  beim  Berühren  sofort  zertrümmert  Averden.  Das  ist  bei  der 
normalen  Form  absolut  nicht  der  Fall. 

p]s  ist  mir  noch  nicht  klar,  welche  Faktoren  das  Absterben 
des  Myceliums  von  einer  kleinen  Spore  bewirken,  und  welche  Fak- 
toren es  dieses  Stadium  überleben  lassen,  um  dann  eine  Zwergrasse 
zu   formen. 


Zusammenfassung. 

1)  Die  neue  Methode  zur  Herstellung  von  Reinkulturen  läßt 
sich  kurz  hierin  zusammenfassen :  Unter  dem  Mikroskop  wird,  wenn 
nötig  bei  stärkster  Vergrößerung ,  mit  Hilfe  von  feineu  Glasösen, 
eine  Zelle  aus  einem  Tropfen  mit  verschiedenen  Mikroorganismen 
isoliert  und  in  einen  sterilen  Tropfen  gebracht,  worin  sie  sich  zu 
einer  Reinkultur  entwickelt. 


XXII,  1.   Schonten:  Reinkultureneiner  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    43 

2)  Der  Nachteil  dieser  Methode  (wenn  ich  das  einen  Nachteil 
nennen  darf)  besteht  hierin ,  daß  sie  an  die ,  welche  sie  anwenden, 
höhere  Forderungen  stellt  als  die  von  Koch.  Ich  vermute  darum, 
daß  ganz  unpraktische  Menschen  sie  nicht  immer  mit  Befriedigung 
anwenden  werden.     Auch  fordert  sie  wohl  mehr  Zeitaufwand. 

3)  Der  allgemeine  Vorteil  besteht  darin,  daß  man  mit  ihr  Mikro- 
organismen sozusagen  individuell  beliandeln  kann.  Wenn  mau 
sie  bei  Reinkulturen  anwendet,  hat  man  vollkommene  Sicherheit,  daß 
die  einzelne  Kultur  aus  nicht  mehr  als  einer  Zelle  entstanden  ist. 
Weiter  kann  man  die  Zelle,  die  man  isolieren  will,  auswählen,  ^  und 
nach  der  Isolierung  genau  kontrollieren ,  was  mit  der  Zelle  vor- 
gegangen ist.  Die  Entwicklung  der  Reinkultur  kann  man  dann  auch 
vom  ersten  Augenblick  an  mit  starker  Vergrößerung  beobachten, 
besonders  wenn  der  Nährboden  fest  ist. 

Dieses  sind  Vorteile ,  welche  die  Plattenkulturmethode  nicht 
darbietet ,  da  sie  niemals  vollkommen  Sicherheit  zu  geben  ver- 
mag, daß  alle  Kolonien  aus  einer  Zelle  entstanden  sind ;  da  ferner 
beim  Gießen  einer  Platte  stets  uns  unbekannt  bleibt,  welche  Zellen 
sterben,  welche  sich  weiter  entwickeln,  und  was  anfänglich  mit  diesen 
letzteren  passiert,  -  und  endlich ,  weil  man  bei  einer  Plattenkultur 
niemals  die  EntAvicklung  der  Kolonien  mit  der  stärksten  Vergrößerung 
kontrollieren  kann. 

4)  Diese  Methode  kann  für  eine  endgültige  Untersuchung  aller 
möglichen  Fragen,  die  Pleomorphie  betreffen,  dienen.  Man  geht  hier 
nämlich  von  einer  Zelle  aus  und  kann  sofort  sehen,  welche  die  Form 
der  Zellen  ist ,  '  die  daraus  entstehen.  Ich  zweifle  nicht ,  daß  man 
auch  alle  aufeinander  folgenden  Generationen  wird  untersuchen 
können. 

Gilt  das  Gesagte  speziell  für  die  Herstellung  von  Reinkulturen, 
so  sind  doch  auch  noch  andere  Anwendungen  luöglich.  Man  wird 
mit  Hilfe  dieser  Methode  allerlei  Mikroorganismen  miteinander  in 
Berührung  bringen  oder  verschiedenen  Experimenten  unterwerfen 
können.     Man  wird  also  z.  B. : 


^)  Das  ist  besonders  von  Bedeutung,  wenn  man  mit  einem  Ma- 
terial zu  tun  hat,  bei  dem  ein  großer  Teil  der  Zellen  mit  Bakterien 
besetzt  ist. 

^)  Es  können  denn  auch  beim  Gießen  von  Plattenkulturen  oft  sehr 
rätselhafte  Fälle  sich  einstellen,  in  denen  die  Koch  sehe  Methode,  auch  bei 
wiederholter  Anwendung  uns  im  Stiche  läßt  (cf.  oben  die  Vibrionen  von 
Kohlbrugge). 


44    Schüuten:  Reinkulturen  einer  unter  d.  Mikroskop  isoliert.  Zelle.    XXII,  1. 

5)  die  Frage  der  Kopulation  mit  ihr  untersuchen  können.  Es 
gibt  im  Tier-  wie  im  Pflanzenreich  viele  Fälle,  wo  man  nicht  weiß, 
ob  man  es  mit  Kopulation  zu  tun  hat.  Das  ist  natürlich  kaum  aus- 
zumachen, wenn  solche  Zellen,  die  oft  beweglich  sind,  sich  in  großen 
Tropfen  zugleich  mit  anderen  Organismen  befinden.  Jetzt  ist  man 
imstande  auf  einem  Deckglas  in  verschiedenen  kleinen  Tropfen  zwei 
Zellen  zusammen  zu  bringen ;  man  kann  also  viel  bequemer  vmter- 
suchen,  ob  Kopulation  stattfindet.  Konnte  man  dieses  früher  nur 
zufälHg  sehen,  so  hat  man  jetzt  eine  sichere  Methode. 

6)  ^an  wird  vielleicht  unter  dem  Mikroskop  verschiedene  Ex- 
perimente über  Symbiose  und  Parasitismus  niederer  Organismen 
machen  und  diese  von  Anfang  an  kontrollieren  können. 

7)  Schließlich  will  ich  noch  darauf  weisen,  daß  für  rein  tech- 
nische Zwecke  der  Isolierungsapparat  nützlich  sein  kann.  Das 
Sortieren  von  sehr  feinem  Planktonmaterial  und  die  Anfertigung  von 
Dauerpräparaten  davon  (besonders  einzelner  Orgaue),  wird  bequemer 
und  mit  größerer  Exaktheit  vorgenommen  werden  können  als  unter 
der  Lupe  oder  dem  Präpariermikroskop  aus  freier  Hand.  Die  Unter- 
suchung oder  das  Zeichnen  lebender  Mikroorganismen,  die  stark  be- 
weglich sind  (z.  B.  Infusorien,  Schwärmsporen),  ist  oft  nicht  möglich, 
da  sie  fortwährend  aus  dem  Gesichtsfelde  des  Mikroskops  ver- 
schwinden. Mit  Hilfe  des  Isolierungsapparates  kann  man  sie  aber 
in  ein  kleines  Tröpfchen  überführen,  wenn  nötig  so  klein,  daß  sie 
genau  hineinpassen  und  sich  also  nicht  drehen  können. 

8)  Um  den  Wert  der  Methode  zu  bestimmen,  speziell  was  die 
Anfertigung  von  Reinkulturen  betrifft,  sind  mit  ihr  Reinkulturen  von 
einer  großen  Anzahl  Mikroorganismen  (Bakterien ,  Hefe-  und  Pilz- 
arten) angefertigt ,  auch  von  solchen ,  bei  denen  die  Züchtung 
bisher  nach  der  Platteukulturmethode  mehr  oder  weniger  Nach- 
teile  hatte. 

9)  Die  Methode  ist  angewendet  für  die  Untersuchung  der  Frage 
nach  der  Pleomorphie ;  mit  vollkommener  Sicherheit  ist  bewiesen, 
daß  ein  Vibrio  sich  in  ein  Stäbchen  und  ein  Stäbchen  sich  in  ein 
Vibrio  verändern  kann. 

10)  Der  Bacillus ,  der  zu  diesen  Experimenten  diente ,  zeigte 
die  Form  eines  großen  Vibrios  auf  einem  gewöhnlichen ,  flüssigen 
Nährboden  und  die  Form  eines  kurzen  Stäbchens  auf  demselben 
Nährboden,  wenn  dieser  mit  Gelatine  festgemacht  war. 

11)  Der  Übergang  vom  Vibrio  zum  Stäbchen  und  vom  Stäbchen 
wieder  zum  Vibrio  kann  in  G  Tagen  sich  vollziehen. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  HJimateinKjsungen  und  Cochenillefarblösungen.    45 

12)  Mit  Hilfe  dieser  Methode  ist  es  geglückt,  durch  Mutation 
eine  Zwergrasse  aus  einem  Pilz  (Rhizopiis  Oryzae)  entstehen  zu  lassen. 
Während  der  vielen  Impfungen,  jetzt  3  Jahre  lang  ausgeführt,  er- 
wies sich  diese  Zwergrasse  als  konstant. 


Am  Ende  dieser  Arbeit  ist  es  mir  eine  angenehme  Pflicht, 
Herrn  Prof.  F.  A.  F.  C.  Went,  Direktor  des  botanischen  Instituts, 
und  Herrn  Prof.  C.  Eykman  ,  Direktor  des  hygienischen  Instituts, 
meinen  herzlichen  Dank  auszusprechen  für  das  freundliche  Interesse, 
das  sie  meiner  Arbeit  entgegengebracht  haben. 

[Eingegangen  am  16.  Februar  1905.] 


Über  Eisenbämatein,   Chromalaunhämatem, 

Tonerdealaunhämatem,    Hämateinlösungen    und 

einige  Cochenillefarblösungen. 

Von 

F.  C.  C.  Hausen, 

am  Normalanatomischen  Institut  der  Universität  Kopenhagen. 

I.    Die  Eisenhämateine. 

In  seiner  großen  Arbeit :  „Neue  Untersuchungen  über  Zentral- 
körper" ( Arch.  f.  mikr.  Anat.  Bd.  XLIII,  1894),  sagt  Martin  Heidek- 
HAiN  bei  Besprechung  seiner  Eisenhämatosylinmethode  folgendes : 
„Natürlich  habe  ich  auch  versucht  in  Analogie  des  Böhmer  sehen 
Prinzipes  (Hämatoxylin-Aluminium-Farben)  das  Eiseuhämatoxylin  in 
Lösung  zu  erhalten,  die  Farbe  somit,  wie  Benda  sich  trefl'end  aus- 
drückt, als  ^Tinte'  zu  verwerten,  allein  hierbei  erhielt  ich  nur  minder- 
wertige Tiuktiouen." 

Später  hat  Fr.  A.  Janssens  und  A.  Leblanc  (Zeitschr.  f.  wiss. 
Mikrosk.  Bd.  XV,  p.  264)  den  Ammoniakalaun  in  Delafields  Ge- 
misch   durch    Eiseualaun    ersetzt    und    zur    Färbung    der    Kerne    der 


46   Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Hefezellen  benutzt ;  jüngst  hat  Karl  Weigert  (Zeitsclir.  f.  wiss. 
Mikrosk.  Bd.  XXI,  1904,  p.  1  —  5)  ein  Eisenhämatoxylin  angegeben, 
nämlich:  A)  1  g  Hämatoxylin  in  100  cc  96prozentigem  Alkohol  ge- 
löst. B)  4  cc  Liqu.  ferri  sesquichlorati  (Ph.  G.  IV.  enthält  ca.  10  Proz. 
Eisenchlorid)  -|-  1  cc  offizin.  Salzsäure  (enthält  ca.  25  Proz.  HCl) 
und   95   cc  Aqu.  destill. 

Von  A  und  B  werden  gleiche  Teile  gemischt,  man  erhält  keine 
Fällungen,  sondern  eine  schwarze  Lösung,  welche  wiederholt  benutzt 
werden  kann,  aber  am  besten  jedesmal  frisch  bereitet  wird  (Färbe- 
dauer wenige  Minuten).  Die  Färbung  wird  als  Keruvorfärbung  für 
„VAN  Gieson"- Färbung  benutzt. 

Selbst  hatte  ich  auch  seit  1899  vielfach  eine  schnelle  Eisen- 
hämatoxylinmethode  benutzt ,  die  im  wesentlichen  eine  modifizierte 
BENDASche  war:  Kurze  Beizung  der  Schnitte  mit  Eisenchloridlösung 
(4  Prozent)  —  aber  in  der  Wärme,  und  hernach  Behandlung,  ebenfalls 
in  der  Wärme,  mit  stark  oxydierter,  ^  wässerig  alkoholischer  Hämatein- 
lösung,  Diflterenzierung  in  der  Eisenchloridlösung.  Es  war  also  etwas 
ähnliches,  wie  das  von  Gurwitsch  angegebene  Schnellverfahren. 

Verschiedene  Umstände  veranlaßten  mich  im  vorigen  Jahre  ein- 
mal wieder  mit  Hämatoxylin-  und  Hämateinfarben  mich  genauer  zu 
beschäftigen,  und  die  für  jeden  Mikrotechniker  naheliegende  Idee, 
über  welche  sich  Martin  Heidenhain  (wie  ich  später  fand)  loc.  cit. 
1894  so  unzweideutig  geäußert  hat,  versuchte  ich  weiter  auszuarbeiten. 
Meine  Resultate  sind  so  befriedigend  gewesen ,  daß  ich  glaube ,  die 
nachstehenden  Farblösungen  für  den  weiteren  Gebrauch  empfehlen 
zu  können ;  wir  haben  dieselben  hier  im  Institute  vielfach  benutzt. 
Daß  sie  die  altbewährten  Eisenhämatoxylinmethoden  von  Benda  und 
Heidenhain  überall  ersetzen  sollen,  ist  nicht  von  mir  beabsichtigt. 


Durch  die  grundlegenden  Untersuchungen  Otto  Linne  Erdmann s^ 
im  Jahre  1842  über  das  Hämatoxylin,  wurde  definitiv  gezeigt,  daß 
die  eigentlich  färbenden  Eigenschaften  nicht  dem  Hämatoxylin,  son- 
dern dem  von  Erdmann  zuerst  chemisch  rein  dargestellten  und  genau 
untersuchten   Hämatein    zukommen;    das    Hämatoxylin    färbt    nur, 


^)  Mit  der  berechneten  Menge  Kaliumpermanganat  nach  meiner  Me- 
thode; siehe  später. 

-)  Erdmann,  0.  L. ,  Über  das  Hämatoxylin  (Journ.  f.  prakt.  Chemie 
Bd.  XXVI,  1842,  p.  193—216). 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblüsungcn.    47 

wenn  es  durch  Oxydation  in  Hämatei'n,  resp.  Häraateinverbindungen 
oder  in  noch  höhere  Oxydationsstufen  überführt  wird.  —  Durch  die 
Arbeiten  von  Gerhardt,  Erdmann  und  Hesse  wurde  die  Elementar- 
formel des  Hämatoxylins  genau  bestimmt,  sie  ist  bekanntlich  :  C-^^H^^Og 
und  kristallisiert  mit  1  H^O  (rhombisch)  oder  mit  3  H.,0  (tetragonal). 
Letztere  Verbindung  dürfte  infolge  der  Darstellungsmethode  des 
Hämatoxylins  die  gewöhnlich  im  Handel  vorkommende  sein.  Alle 
Angaben  im  folgenden  beziehen  sich  daher  auf  das  mit  ,3  H.^O 
kristallisierende  Hämatoxylin.  Das  Molekulargewicht 
desselben  ist:  302  -f  54  =  356. 

Das  Hä matein  entsteht  aus  dem  Hämatoxylin,  indem  zunächst 
2  Atome  Wasserstoff  wegoxydiert  werden ,  dagegen  tritt ,  wie  Erd- 
mann-^  zuerst  meinte,  kein  Sauerstoff  in  das  Molekül  ein.  Die  Reak- 
tion ist  also : 

Cto^^o  +  0  =  c^r^e  +  H,0. 

Hämatoxylin  Hämatein 

D  a  s  M  0  1  e  k  n  1  a  r  g  e  w  i  c  h  t  d  e  s  H  ä  m  a  t  e  1  n  s  ist  also  300.  Die 
für  analytische  Zwecke  angegebene  Darstellungsweise  des  Hämateins 
wurde  ursprünglich  von  0.  L.  Erdmann  1842  genau  angegeben  und 
ist  mit  geringen  Modifikationen-  die  noch  gebräuchlichste  (sie  steht 
beschrieben  loc.  cit.   1842,  p.  205 — 207). 

Hämatoxylin  wird  in  nicht  zu  kleiner  Quantität  in  heißem  Wasser, 
worin  es  leicht  löslich  ist,  gelöst,  ein  kleiner  Überschuß  von  Ammoniak 
wird  zugesetzt,  -die  also  alkalische  purpurne  Lösung  in  eine  flache 
Schale  gegossen  und  lose  zugedeckt  der  Oxjalation  des  Luftsauer- 
stoffs überlassen.  Ammoniak  muß  immer  im  Überschuß  zugegen  sein, 
und  die  Oxydation  muß  bei  immer  vorhandenem  Überschuß  von 
Hämatoxylin  verlaufen,  sonst  erhält  man  leicht  höhere  Oxydations- 
produkte als  Hämatein."^  Ich  kann  Erdmann  nicht  in  extenso  zitieren, 
aber  jeder    mit   Hämatoxylin   arbeitende    Mikrotechniker   sollte   diese 


1)  loc.  cit.  1842. 

-)  Siehe  auch  meinen  Artikel:  Über  Oxydationsmittel  für  Hämatoxylin ; 
vgl.  0.  L.  Erdmann,  loc.  cit.,  Hesse,  loc.  cit.  (p.  338)  1859,  E.  Erdmann, 
Schultz,  loc.  cit.  1883,  p.  23G  u.  a. 

^)  Die  Unkenntnis  mit  diesen  und  andern  schon  1842  von  Erdmann 
angegebenen  Verhältnissen  hat  sicherlich  die  Mißerfolge  vieler  Mikrotech- 
niker mit  dem  (ähnlichen)  Paul  Mayer schem  Eezepte  (1891)  zur  Dar- 
stellung des  Hämatemammoniaks  verursacht. 


48    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

und  die  andern  Originalarbeiten  lesen,  „überflüssige  Entdeckungen" 
würde  es  dann  weniger  geben. 

Nun  läßt  sich  natürlich  die  Oxydation  des  Häraatoxylins  in  das 
färbende  Hämatein  auch  durch  viele  andere  Oxydationsmittel  vor- 
nehmen, und  viele  chemische  Stoffe,  welche  leicht  Sauerstoff  abgeben, 
sind  dazu  geeignet.-^ 

Auch  in  der  Mikrotechnik  des  Hämatoxylins  tut  man  gut 
daran,  quantitativ  zu  verfahren,  Avie  ich-  es  1895  angegeben 
habe.  Die  Bedingung  ist  nur  die ,  daß  man  die  Reaktions- 
gleichung für  die  Einwirkung  des  S  a  u  e  r  s  t  o  f  f  s  p  e  n  d  e  r  s 
auf  das  H  ä  m  a  t  o  x  y  1  i  n  kennt.  Wünscht  mau  die  zur  Über- 
führung in  Hämatein  (oder  noch  höhere  Oxydationsprodukte)  pro 
1  g  Hämatoxylin  (tetragonal)  nötige  Menge  eines  be- 
liebigen Sauer  Stoff  sp  end  er  s  zu  kennen,  so  läßt  sich  diese 
Größe  dann  aus  den  chemischen  Formeln  leicht  berechnen.  Ein 
Molekül  Hämatoxylin  braucht  zur  Überführung  in  Hämatein  1  Atom 
Sauerstoff;  setzt  man  das  Grammolekül  Hämatoxylin  als  356,  und 
ist  n  die  Anzahl  Sauerstoffatome ,  welche  ein  Grammol  (GM.)  des 
Sauerstoffspenders  zur  Oxydation  des  Hämatoxylins  in  Hämatein  der 
Reaktionsgleichung  gemäß  abzugeben  vermag ,  so  gibt  folgende 
Gleichung  die  pro  1  g  Hämatoxylin  nötige  Menge  eines 
beliebigen  Sauerstoffspenders  mit  einer  für  unsere  Zwecke 
allgemein  genügenden  Genauigkeit : 

_  0-0028  •  GM. 
n 

1  g  Hämatoxylin  braucht  zur  Überführung  in  Hämatein 
folgende  Mengen    der    unten  beispielsweise  aufgezählten  Stoffe : 

von  Kaliump  ermanganat 0'177  g 

Kaliumbichrouiat 0'276  ., 


n 


Kaliumchlorat'^ 0114 


)) 


^)  Siehe  meinen  Artikel  über  Oxydationsmittel  für  Hämatoxylin. 

-)  Eine  schnelle  Methode  zur  Darstellimg  des  Böhmer  sehen  (Alaun-) 
Hämatoxylins  (Zool.  Anz.  No.  375,  Febr.  1895). 

^)  Bei  der  Anwendung  von  Chloraten  und  Perchloraten  muß  die 
Reaktion  in  saurer  Lösung  geschehen,  und  es  muß  als  Sauerstoff  Über- 
führer eine  ganz  geringe  Menge  von  Kupfer-,  Chrom-,  Eisen-  oder,  wie 
ich  iramer  anwende,  1  bis  2  mg  Vanadinsalz  zugegen  sein;  die  Demon- 
strationsversuche  ohne  Säure  und  mit  Säure,  ohne  „Transferrer"  und 
mit  Transferrer  sind  sehr  instruktiv  (s.  meinen  Artikel  „Über  Oxydations- 
mittel" etc.). 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    49 

von  K  a  1  i  u  m  p  e  r  c  h  1 0  r  a  t 0*097  g 

„     Kaliumjodat 0*200  „ 

„     Kaliumbij  odat 0-182  „ 

„     Na  tri  umj  odat  (Paul  Mayer  1904).     .  0*187  „    etc. 

Bei  Erdmann  (1842)  steht  u.  a.  p.  205:  „Eisenalaun^  erzeugt 
(mit  Hämatoxylin)  erst  nach  einiger  Zeit  einen  geringen  schwarz- 
violetten Niederschlag."  p.  212  steht:  „Das  Hämatein- Ammoniak 
gibt  mit  den  meisten  Metallsalzen  gefärbte  Niederschläge.  Mit  essig- 
saurem Bleioxyd  einen  dunkelblauen  Niederschlag,  mit  schwefel- 
saurem Kupferoxd  bildet  sich  ein  blauer  ins  violette  geneigter 
Niederschlag.  Mit  salpetersaurem  Wismutoxyd  prachtvoll  vio- 
letter Niederschlag.  Mit  Eisenalaun  schwarzer  Niederschlag.  Mit 
Eisenchlorür  [!]  violetter  Niederschlag."  Ähnliche  Angaben  finden 
sich  in  allen  Chemien  die  Farbstoffe  betreffend. 

In  der  praktischen  Färberei  werden  diese  Eigenschaften  be- 
kanntlich schon  lange  ausgenützt. 

Was  speziell  die  Eisenhämatoxylinfärbung  betrifft ,  haben  wir 
es  bekanntlich"'^  mit  folgenden  Verhältnissen  zu  tun.  Die  Eisenbeize 
muß  am  besten  eine  Eisenoxydverbindung  sein.  Verwendet 
man  z.  B.  den  Eisenalaun,  so  geschieht  folgendes : 

1)  Es  fixieren  sich  auf  dem  mikroskopischen  Schnitt  (oder  den 
Geweben)  basische  unlösliche  oder  schwerlösliche  Eisenoxydver- 
bindungen, z.  B.   basische   Salze. 

2)  Dieselben  bilden  mit  verschiedenen  Farbstoffen  schwer-,  resp. 
unlösliche  gefärbte  Verbindungen  —  Lacke.  Wird  z.  B.  Häma- 
toxylin verwendet,  ist  die  Wirkung  eine  doppelte;  einerseits 
wird  das  Hämatoxylin  in  Hämatein  (oder  in  noch  höhere  Oxydations- 
stufen, darüber  später)  von  einem  Teil  des  Eisenoxydsalzes  über- 
führt,^ wobei  sich  Eisenoxydulverbindung  bildet. 


^)  Dies  trifft,  wie  meine  Angaben  unten  zeigen,  nicht  ohne  weiteres  zu ; 
man  muß  dann  nämlicli  eine  nicht  zu  konzentrierte  Hiimatoxylinlösung,  welche 
einige  Zeit  (wohl  verschlossen)  gestanden  hat,  nehmen,  ferner  muß  diese 
Lösung,  sowie  die  Eisenalaunlösung  kalt  und  letztere  Lösung  nicht  zu 
verdünnt  sein,  sonst  geschieht  die  Oxydation  in  Hämatein  und  „Ferro- 
lackbildung",  wie  ich  angeführt  habe. 

')  Den  Chemikern  vom  Fach  ist  dies  lange  bekannt  und  von  ihnen 
habe  ich  es  meinerseits  wieder  gelernt. 

«)  Vgl.  P.  Mayer  im  Anat.  Anz.  Bd.  XIII,  1899,  p.  319  (die  Note!). 
Dieser,  um  die  Mikrotechnik  so  verdiente  Forscher,  hat  diejenigen  Mikro- 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  1.  4 


50    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Anderseits  verbindet  sich  der  Rest  des  basischen  Eisen- 
salzes oder  Oxydes  mit  dem  gebildeten  Hämatein;  die  färberischen 
Eigenschaften  dieses  Eisenlackes  haben  Benda  und  M.  Heidenhain 
mit  so  großem  Erfolge  in  der  Mikrotechnik  verwertet.  —  Wird 
Hä  mateinlösung  gebraucht,  könnte  jedenfalls  die  oxydierende 
Wirkung  des  Eisenoxyds  wegfallen  (gewöhnlich  tut  sie  es  aber  nicht, 
darüber  später ;  vgl.  auch  P.  Mayer,  loc.  cit.),  und  könnte  man  statt 
der  Eisenoxydverbindung  auch  Eisenoxydulverbindungen  als  Beizen 
verwenden,  was  ich  auch  tatsächlich  mit  Erfolg  getan  habe. 

Man  kann  also  zweifach  verfahren :  Entweder  getrennt  beizen 
und  färben  oder  beides  gleichzeitig  tun(BENDA,  Heidenhain,  Weigert). 
Beizende  Eigenschaften  kommen  im  hohen  Grade  solchen  Stotfen  zu, 
welche  teils  leicht  basische  Salze ,  teils  oder  zugleich  Verbindungen 
von  mehreren  Oxydationsstufen  bilden  (auf  andere  Beizen  gehe  ich 
hier  natürlich  nicht  ein).  Daher  die  allgemein  übliche  Verwendung 
von  Aluminium-,  Eisen-,  Chrom-  (und  Kupfer-)  Verbindungen,  welche 
uns  in  der  Mikrotechnik   überwiegend  interessieren. 


Betrachten  wir  zunächst  die  E  i s  e  n  v  e  r  b  i  n  d  u  n  g  e  u.    Gewöhn- 
lich verwendet   man  den  Eis  enalaun-F  erriamm  oniumsulfat 

VI 

Fe^CSOJg,  (NHJ2  SO,  +  24H2O. 

Mol.  =  965.  Löst  man  diesen  Stoff  in  (ausgekochtem)  Wasser,  so  wird, 
was  wichtig  ist,  eine  teilweise  Hydrolyse  des  Eisenoxydsulfates 
eintreten ,  die  Lösung  färbt  sich  gelb ,  gelbbraun  und  enthält  außer 
unzersetztem  Eisenoxydsulfat  ^  freie  Schwefelsäure  und  kolloidal  ge- 
löstes Ferrihydroxyd,  Mit  steigender  Temperatur  wird  die  Hydro- 
lyse stärker  und  daher  auch  die  Braunfärbung  der  Lösung;  eben 
diese  hydrolytische  Spaltung  ist  für  die  beizenden  Eigenschaften  der 
Lösung  wichtig ,  ebenso  erhellt  sich  hieraus  das  Faktum ,  daß  die 
Beizung-  in  der  Wärme  schneller  geht.  Es  lassen  sich  diese  Ver- 
hältnisse   durch   Versuche   leicht    demonstrieren;    die    gebildete    freie 


techniker,  welche  dieses  Verhalten  des  Hämatoxylins  vorher  nicht  kannten, 
darauf  aufmerksam  gemacht  und  auch  hierhergehörige  Experimente  an- 
gegeben. 

V)  Von  der  Ionisation  sehe  ich  hier  ab. 

'^)  Die  Ablagerung  von  basischen  Verbindungen  in  dem  Gewebe  — 
also  auch  die  Färbung. 


XXII,  1 .  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen,    ö  1 

Säure  (auch  z.  B.  aus  einer  Eisenchloridlösung)  kann  man  beispiels- 
weise teilweise  wegdittundieren  lassen ,  wodurch  der  Gehalt  der 
Eisenbeizlösung  an  kolloidalem  Ferrihydroxyd  zunimmt.  Eine  solche 
Eiseulösung  beizt  auch  in  der  Kälte  weit  schneller  und  stärker  als 
eine  gewöhnliche  Lösung  des  Eisensalzes. 

Eine  größere  Verdünnung  der  Eisensalzlösung  vermehrt  die 
Hydrolyse ,  begünstigt  somit  die  Ablagerung  von  Eisenoxyd ,  resp. 
von  basischen  Salzen  in  den  Geweben,  aber  zugleich  setzen  auch 
solche  Salze  sich  im  Gefäß  nach  einiger  Zeit  ab.  Der  Konzentrations- 
abnahme entsprechend  wird  aber  von  einer  gewissen  Grenze  ab  die 
Beizung  absolut  schwächer. 

Daß  die  Abspülung  der  gebeizten  Schnitte  in  Brunnenwasser 
(alkalisch,  kohlensäurehaltig  !)  ebenfalls  die  Bildung  von  Eisenhydroxyd, 
resp.  basischen  Salzen  begünstigt,  ist  ohne  weiteres  klar. 

Umgekehrt  verringert  ein  Zusatz  von  freier  Säure  zur  Eisen- 
salzlösung deren  Beizwirkung  entsprechend  der  Massenwirkung.  Soll 
daher  die  Eisenalaunlösung  beim  Stehen  keine  unlösliche  basische  Ver- 
bindungen in  der  Flasche  absetzen,  so  nehme  man  eine  etwas  stärkere 
Lösung  als  l-^/^ Prozent,  z.  B.  5 Prozent,  in  der  die  Hydrolyse  relativ 
geringer  ist.  Auch  kann  man  der  Lösung  eine  entsprechende  Menge 
Schwefelsäure  zusetzen ,  dadurch  wird  die  Hydrolyse  ebenfalls  ver- 
mindert ;  bei  größerem  Überschuß  an  freier  Säure  wird  die  Hydrolyse 
ganz  aufgehoben  erscheinen ,  statt  der  braunen ,  braungelben  Farbe, 
hat  man  eine  ganz  schwach  gelblich  gefärbte  oder  ungefärbte  Flüssig- 
keit. Was  die 'oxydierende  Wirkung  der  Ferrisalze  (Ferri- 
sulfat ,  Eisenalaun ,  Eiseuchlorid  etc.)  betrifft ,  so  verläuft  die 
Reaktion  in  den  einfachen  Fällen  (in   saurer  Lösung)  folgendermaßen  : 

VI  II 

Fe,  (SOJ.  +  HoO  =  2  Fe  SO^  +  H,  SO^  +  0 
Ferrisulfat  Ferrosulfat 

also  1  g  Mol.  Ferrisalz  vermag  1  g  Mol.  Hämatoxylin 
in  H ä m a t e  1  n  zu  überführen. 

Nimmt  man  Eisenalaun,  Ferriammoniumsulfat,  so 
braucht  man  davon  2*7.1  g  um  1  g  Hämatoxylin  in 
Hämatein  zu  oxydieren,  unter  der  Voraussetzung ,  daß  die 
Reaktion  quantitativ  verläuft,  und  dies  dürfen  wir  der  Hauptsache 
nach  annehmen.     Die  Reaktionsgleichung  ist: 

4* 


52    Hansen:  Über  Hämateinlösung'en  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

VI  II 

I :    Fe,  (SO J. ;  (NH J^  >S0^  +  H,0  =-  Fe  SO^  ;  (NHJ,  SO, 


Ferriammoniuiüsulfat  Ferroammoniumsulfat 

II 
+  Fe  SO^  +  H,  SO,  +  Ol 

und  II:     C,,H,,0,  +  0,  =  C,,H,,0,  +  H,0. 
Hämatoxylin  Hämatein 

F;S  tritt  also  Ferroammoniumsulfat  (Mohrs  Salz),  Ferrosulfat^ 
und  freie  Schwefelsäure  auf,  wenn  in  einer  Eisenalaunlösung  Häma- 
toxylin zu  Hämatein  oxydiert  wird,  und  es  läßt  sieb  leicht  zeigen, 
daß  Hämatein  sowohl  mit  dem  Ferrosulfat  als  auch 
mit  dem  Ferroammoniumsulfat"  dunkelviolette  bis 
schwarzviolette  Verbindungen  eingeht.  (Conf,  Erdmann 
1842'^  und  später.)  Und  dasselbe  tritt  natürlich  ein  mit  dem  bei  der 
Oxydationsreaktion  entstandeneu  Ferrosalze,  wie  der  Versuch  leicht 
zeigt.  Eine  der  „blauen"  Methode  Martin  Heidenhains  ganz  ähn- 
liche Färbung  läßt  sich  mit  „Ferrohämatein"  folgendermaßen  aus- 
führen. 

1*355  g  Eisenalaun  wird  kalt  in  50  g  (sauerstoff freiem  und 
kohlensäurefreiem)  ausgekochtem  Wasser  gelöst;  0*50g  Hämatoxylin 
wird  ebenso  in  50  g  ausgekochtem  heißem  Wasser  gelöst  und  her- 
nach abgekühlt,  wobei  das  Hämatoxylin  bekanntlich  nicht  wieder  aus- 
fällt. Die  angegebene  Menge  Eisenalaun  reicht  gerade  hin,  um  alles 
Hämatoxylin  in  Hämatein  zu  überführen.  Dies  beginnt  gewöhnlich 
auch  in  der  Kälte,  sobald  man  die  eine  Lösung  in  die  andere  gießt; 
am  besten  werde  die  Eisenlösung  langsam  unter  stetem  Umrühren 
in  die  Hämatoxylinlösung  gegossen.  Die  Hämatoxylinlösung  wird  bei 
Erwärmung  sehr  schnell  in  Hämatein  überführt,  höhere  Oxydations- 
stufen kommen  zunächst  nicht  vor,  weil  einerseits  niemals  Überschuß 
an  Sauerstoff  vorhanden  ist,  und  auch  die  gebildeten  Ferrosulfate  eine 
andersweitige  Oxydation  vorläufig  verhindern. 

Man  erhält  eine  dunkelviolette  Lösung,  welche  reichlich  schwarze 
Ausfällung  enthält.     Diese  Lösung  enthält  die  Verbindung  von  Häma- 


^)  P.  Mayer  hat  1899  das  Auftreten,  von  Ferrosulfat  besprochen  (siehe 
loc.  cit.). 

^)  Durch  vorheriges  Hinzufügen  der  berechneten  Menge  Ammonium- 
sulfat läßt  sich  das  gebildete  Ferrosulfat  in  der  Form  des  stabileren  Ferro- 
ammoniumsulfats  erhalten. 

3)  loc.  cit.  p.  219. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    53 

tein  lind  Ferrosalz  (Hämatoxylin  und  Ferrosalz  verhält  sich  ganz  an- 
anders,  ist  nicht  gefärbt).  Die  Lösung,  welche,  um  die  Luftoxydation 
möglichst  zu  vermeiden,  nicht  filtriert  wird,  färbt  beim  Versuch  so- 
gleich sehr  schnell  die  Schnitte  mit  schwarzvioletten  oder  fast  ganz 
schwarzen  Kernen,  Plasma  mehr  violett,  glatte  Muskeln  und  Binde- 
gewebe ebenso;  Kittleisten,  Centrosomen  lassen  sich  bei  passender 
Anwendung  auch  färben.  Die  Färbung  ist  gegen  starke  Essigsäure 
sehr  resistent.  Um  seiner  Sache  ganz  sicher  zu  sein,  mag  man  mit 
Ferrosulfat  (konz.  Lösung)  nachbehandeln  (eventuell  mit  einer  Spur 
von  Oxalsäurezusatz).  Auch  kann  man  die  Farblösung  mit  einer 
reinen  Lösung  von  Ferroammoniumsulfat  vermischen  (dieselbe  löst 
nicht  unbedeutend  die  schwarzviolette  Lackverbindung)  imd  hernach 
färben  (Schnitte  vorher  mit  sauerstoflffreiem  Wasser  behandelt).  Es 
kann  kaum  ein  Zweifel  darüber  bestehen,  daß  wir  hier  die  Erd- 
mann sehe  F  e  r  r  0  h  ä  m  a  t  e  i  n  V  e  r  b  i  n  d  u  n  g  auf  die  Gewebe  fixiert 
haben.  ^  Natürlich  läßt  sich  auch  Eisensulfat  (Ferrosulfat)  verwenden, 
wobei  man  der  Lösung  eine  Spur  von  Oxalsäure  zusetzt,  um  sicher 
alles  Eisenoxydsulfat  zu  reduzieren;^  und  zur  Abwechslung  kann  man 
also  die  von  mir  unten  angegebene^  (frisch  bereitete)  Hämatei'n- 
lösung  verwenden.  Die  Resultate  sind  auch  auf  diese  Weise  ganz 
ähnlich,  nur  werden  die  Töne  mehr  schwarzgrau.*  Ferrohämatein 
löst  sich  in  nicht  unbedeutender  Menge  in  Eisensulfatlösung,  freie 
Schwefelsäure  begünstigt  die  Lösung, 

Auch  in  Ferroammoniumsulfat  kann  man  die  Hämatein- 
lösung  oder  die  Hämatoxylinlösung  in  diese  Oxydulsalzlösung  gießen 
und  nachträglich  mit  der  berechneten  Menge  Sauerstolfspender  (Kalium- 
permanganat, F  erria  mm  oniumsulf  a  t)  oxydieren. 

Die  Resultate  sind  ähnlich.  Verwendet  man  statt  Hämateinlösung 
d  i  e  fnach  meiner  Angabe  unten)  2  bis  .3  f  a  c  h  0  x  y  d  i  e  r  t  e  ,.  a  1  s  0  die 
Oxy  h  ä  m  at  eine  ,  so  werden  die  Färbtöne  viel  schwärzer,  resp. 
ganz:  schwarz,  auch  mit  Eisenoxydulsalzen.    Es  läßt  sich  zeigen,   daß 


^)  Doch  mögen  bei  der  „blauen"  Farbe  Heidenhains  die  Kalksalze 
des  Leitungswassers  etwas  mitwirkend  sein.  Bei  dem  kürzeren  Beizen  bei 
der  Heidenhain  sehen  blauen  Methode  fixiert  sich  weniger  Ferrioxyd  auf 
das  Gewebe,  so  daß  die  disponible  Sauerstoffmenge  nur  zur  Bildung  von 
Hämatein,  jedenfalls  nicht  zur  Bildung  von  so  großen  Mengen  der  höiieren 
Uxydationsprodukte  hinreicht,  daß  die  Färbung  schwarz  würde. 

-)  Rhodankaliumprobe. 

^)  Mit  Kaliumpermanganat  quantitativ  oxydiert. 

^)  Ob  sieh  wohl  mehr  Eisensalz  an  das  HämateVnmolekül  anlagert? 


54    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

eine  Oxydation  der  Eisenoxydulverbindungen  seitens  der  Hämateine 
und  Oxyhämateine  gewöhnlich  nicht  vorkommt;  darüber  später. 

Wichtig  für  die  Färbung  mit  Eisenhämatein  und  besonders  für 
die  Elektion  ist  natürlich  die  aus  den  Ferriverbiudungen  abgespaltete 
Schwefelsäure. 

Ist  dagegen  Überschuß  an  Eisenoxydverbindungeu  vorhanden, 
so  ist  teils  Sauerstoff  zur  höheren  Oxydation  des  Hämateins  disponibel, 
teils  treten  die  Eisenoxydlacke  auf.  Die  genaue  Untersuchung  dieser 
Verhältnisse  muß  natürlich  quantitativ  vorgehen  und  läßt  sich  auch 
nicht  allzuschwer  ausführen. 

Die  Bedeutung  der  Oxydationsstufe  des  Hämateins  habe  ich 
untersucht,  dagegen  nicht,  wie  viele  Eisenatome  mit  dem  Hämatein- 
molekül  verbunden  sind,  dazu  fehlten  mir  die  Gelegenheit  und  die 
Mittel. 


Als  ich  zur  Ausprüfung  einer  Eisenhämateinlösung  ging,  ent- 
schied ich  mich  nach  vielen  Versuchen  für  das  von  M.  Heidenhaix 
gebrauchte  Ferriammoniumsulfat,  welches  entschieden  mehrere 
Vorzüge  den  übrigen,  auch  leichtzqgänglichen  Eisenoxydsalzen  gegen- 
über besitzt.     Ferner  waren  mehrere  Punkte  zu  berücksichtigen. 

Es  mußte  genügend  Eisen  oxydsalz  vorhanden  sein, 
wenigstens  genug,  um  das  H  ä  m  a  t  o  x  y  1  i  n  in  H  ä  m  a  t  e  i  n 
zu  überführen.  Die  dazu  erforderliche  Menge  beträgt  per  1  g 
Hämatoxylin   2*71  g  Ferriammoniumsulfat.^ 

Der  Eisenhämateinlack  ist  bekanntlich  sowohl  in  Säuren  als  aucli 
in  den  sauer  reagierenden  Eisensalzlösungen''  löslich,  was  ja  Bexda 
und    M.  Heidenhaix    zur    Differenzierung    der    Färbungen    benutzten. 

Diese  Verhältnisse  benutzte  ich  analog  dem  (Tonerde-) ALinn- 
hämatein,  wo  ja  auch  der  Farblack  in  Überschuß  des  sauer  n 
renden  Salzes  löslich  ist.  Aus  Gründen,  die  sich  für  den  Kun^tgej 
leicht  aus  den  vorhergehenden  Auseinandersetzungen  ergeben,  isi 
Farbwirkung  der  Lösung  bei  Verwendung  des  Eisenalauns  als  Lösungs- 
mittel entschieden  günstiger,  als  wenn  man  Säuren  verwendet. 


')  Der  Einfachheit  halber  lasse  ich  den  Eisenalaun  den  Sauerstoff 
liefern,  aber  auch  andere  Sauerstoffspender  habe  ich  mit  Erfolg  angewandt. 
Man  kann  auch,  wie  ich  getan  habe,  mittels  Kaliumpermanganat  das  Häma- 
toxylin quantitativ  oxydieren,  so  hoch  man  will. 

'-)  Nicht  bloß  in  Oxydsalzen,  sondern  auch  in  Eisenoxydulsalzen,  auch 
in  andern,  z.  B.  Tonerdealaun,  ist  der  Eisenlack  löslich. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    55 

Die  Ausprüfung  der  besten  Farblösungen  bat  viele  variierende 
Versuche  mit  Farblösungen  und  Probefärbungen  erfordert,  die  ich 
aber  hier  übergehe,  und  es  hat  sich  herausgestellt,  daß  die  von  mir 
färberisch  ausgeprüfte  Lösung  einer  ganz  bestimmten  Oxydationsstufe 
des  Hämateins  entspricht. 


Als  für  allgemeine  Zwecke  am  meisten  geeignet  empfehle  ich 
folgende  Lösung: 

1)  10  g  reines  Eisenalaun  (Ferriammoniumsulfat)  wird  in 
der  Wärme  gelöst  in   150  g  destillierten  Wassers; 

2)  1*6  g  Hämatoxylin  wird  in  75  g  destillierten  Wassers 
in  der  Wärme  gelöst,  diese  Menge  braucht  zur  Oxydation  in  Hämatein 
4-34  =  (2-71  +  1-63)  g  Eisenalaun. 

Das  Hämatoxylin  fällt  nach  der  Auflösung  nicht  wieder  aus 
beim  Erkalten.  Die  beiden  ganz  kalten  Lösungen  werden  vermischt, 
indem  die  Eiseualaunlösung  in  die  Hämatoxylinlösung  unter  stetem 
Umrühren  gegossen  wird.  Die  Oxydation  geht  in  der  Kälte  allmählich 
vor  sich,  die  Farbe  wird  erst  braun,  dann  blau,  dann  dunkelviolett; 
man  erhitzt  allmählich  zum  Kochen,  um  die  Reaktion  zu  beschleu- 
nigen. Das  Erhitzen  nehme  man  in  einer  Porzellanschale  oder  in 
einem  Kolben  oder  Becherglase  vor,  eventuell  in  dem  Sandbade,  man 
rühre  nur  mäßig  um,  damit  die  Luftoxydation  nicht  unkontrollierbar 
groß  werde,  wodurch  die  Farbe  der  Lösung  olivengrün  wird;  wie 
man  die  zuweit  gegangene  Oxydation  redressieren  kann,  darüber  später. 

Es  bildet  sich  so  zuerst  das  Hämatein,  hernach  die  höheren 
Oxydationsprodukte,  und  da  gleichzeitig  Lackbildung  eintritt,  ist  in 
kurzer  Zeit  die  Reaktion  sicher  beendigt;  mau  läßt  nur  kurze  Zeit 
(^/o  bis  1  Min.)  sieden  und  hernach  erkalten.  Wünscht  man  das  ge- 
bildete Ferrosulfat  als  Ferroammoniumsulfat  in  der  Lösung  zu  haben, 
füge  man  1*40  g  Ammoniumsulf at  hinzu,  -wodurch  die  na6h- 
folgende  Oxydation  des  Ferrosulfats  in  Ferrisulfat  an  der  Luft  nicht 
so  rasch  geht.  — 

Die    Farblösung    soll    eine    dunkelbraune^    Farbe 


^)  Ist  die  Farbe  versehentlich  durch  zu  langes  Kochen  an  der  Luft 
zu  oHvengrün  geworden  (Gegenwart  von  Ferrisalzen) ,  füge  man  der  er- 
hitzten Lösung  tropfenweise  10  Prozent  Oxalsäure  zu  unter  Umrühren,  bis 
die  Lösung  den  richtigen  braunen  Farbton  erhalten  hat  (es  ist  nicht  (ixal- 
saures  Eisenoxydul),  gleichzeitig  wird  dann  der  Niederschlag  zuiu^p^wmi 
Teü  aufgelöst  worden  sein. 


56    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

haben,  sauer  reagieren  und  die  größte  Menge  des  gebildeten 
Eisentrioxybämateinlacks  in  Lösung  halten. 

Ein  geringerer  Teil  des  Farbstofles  ist  nicht  aufgelöst  und 
in  der  folgenden  Zeit  fallen  auch  immer  kleine  Mengen  aus.  Ich 
habe  gefunden ,  daß  dieser  Überschuß  des  Farbstoffes  wichtig  ist, 
die  Farblösung  färbt  so  besser ,  als  wenn  man  z.  B.  durch  Zusatz 
von  Schwefelsäure  die  ganze  Lackmenge  in  Lösung  halten  würde. 
In  der  Wärme  löst  sich  der  Niederschlag  teilweise  wieder  auf,  wel- 
ches Verhalten  man  gelegentlich  benutzen  kann,  um  intensiver  zu 
färben.  Fügt  man  der  Lösung  etwas  Alkohol  10  bis  20  bis  30  cc 
hinzu,  so  bildet  sich  mit  der  Zeit  etwas  Aldehyd,  und  dies,  ebenso 
wie  der  Alkohol,  verlangsamt  die  Luftoxydation;  gewöhnlich  pflege 
ich  es  nicht  zu  tun. 

Nimmt  man  wesentlich  mehr  Eisenalaun,  so  erhält  man  dunkel- 
olivengrüne  Lösungen ,  welche  sich  ziemlich  klar  halten ,  wenigstens 
nicht  so  viel  absetzen.     Eine  solche  Lösung  enthält  z.  B. : 

13  g  Eisenalaun, 
200  g  destilliertes  Wasser, 
1   g  Hämatoxylin. 

Sie  färbt  auch  ganz  brauchbar,  aber  lange  nicht  so  gut  wie  die 
Lösungen,  welche  den  dunkelbraunen  Ton  zeigen.  Außer  dem  hier 
angegebenen  habe  ich  systematisch  viele  andere  aus  den  chemischen 
Verhältnissen  sich  ergebenden  Kombinationen  versucht,  auch  solche 
mit  relativ  mehr  Hämatoxylin;  für  einige  Zwecke  sind  diese  mit  viel 
Hämatoxylin  intensiv  diffus  färbende  Lösungen  ganz  wertvoll,  aber  ich 
führe  sie  für  den  allgemeinen  Gebrauch  nicht  an. 


Die  empfohlene  Farblösung  ist  gut  haltbar,  ^  —  mehrere  Monate. 
Ein  Bodensatz  schadet  wie  gesagt  gar  nicht,  aber  vor  dem  Gebrauche 


^)  Obwohl  die  Farblüsung-  sehr  leicht  herzustellen  ist,  und  die  Er- 
zielung der  besten  F  a r  b  w  i  r  k  u  n  g  immer  das  Hauptaugenmerk ,  die 
größere  Haltbarkeit  nur  eine  Nebenbedingung  sein  soll,  will  ich  doch  nicht 
unterlassen,  eine  theoretisch  ganz  interessante  R  e  g  e  n  e  r  a  t  i  o  n  s  m  e  t  h  o  d  e 
der  Farblösung  zu  beschreiben.  Wenn  die  Farblösung  viel  Bodensatz 
abgesetzt  hat,  und  wenn  die  Farbwirkung  bedeutend  langsamer  und 
schwächer  wird  (z.  B.  nach  einigen  Monaten) ,  beruht  das  auf  einer  durch 
die  Luft  bewirkten  Oxydation  des  Ferrosalzes  in  Ferrisalz.  Man  schütte 
dann  das  Ganze  in  eine  Porzellanschale,  erwärme,  und  füge  jetzt  tropfen- 
weise ein  wenig  lOprozentige  Oxalsäure  hinzu  unter  ständigem  Umrühren ; 


XXII,  1.   Hansen:  Über  Hämatei'nlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    57 

filtriere  man  immer,  sie  setzt  dann  selbst  bei  der  Färbung  in  Cuvetten 
in  24  Stunden  keinen  Farbstolfniederschlag  ab.  Aufbewahrt  werde  sie 
aber  immer  am  besten  über  einem  Überschuß  des  Farblackes  und 
gut  verschlossen. 

Die  Farblösung  läßt  sich  sehr  vielseitig  verwenden.  Besonders 
schön  ist  die  tief  schwarze  Ker  n -(Chromatin-)  färb  uug,  aber 
auch  die  scharfe  Darstellung  mancher  Plasmastrukturen  (des 
Trophospongium  z.B.),  der  Kittleisten,  Bürstensäume  etc.  ist  vorzüglich. 

Es  ist  wesentlich  eine  S  c  h  u  i  1 1  f  ä  r  b  u  n  g ,  sie  geht  gewöhnlich  auch 
in  der  Kälte  sehr  schnell  vor  sich.  Man  kann  kurz,  Minuten,  oder 
länger.  Stunden,  bis  24  Stunden  färben;  in  letzterem  Falle  wird 
sehr  stark  überfärbt,  aber  nicht  alle  Elemente  gleichstark  (so  daß 
ich  gelegentlich  gar  nicht  die  (tagelange)  Färbung  habe  differenzieren 
brauchen),  hernach  kann  man  in  der  üblichen  Weise  differenzieren, 
am  besten  mittelst  verdünnter  Säuren  (Schwefelsäure ,  Essigsäure- 
Benda). 

Gewöhnlich  genügt  die  kurze  Färbung  ohne  nach- 
trägliche Differenzierung.  Zweckmäßig  ist  es  dann  oft, 
die  Schnitte  in  der  Farbtlüssigkeit  kurz  zu  erwärmen  (bis  40  oder 
50°);  gutfixiertes  Material,  gut  aufgeklebt,  verträgt  in  den  meisten 
Fällen  ohne  den  geringsten  Schaden  eine  etwas  höhere  kurzdauernde 
P>wärmung,  wie  ich  vielfach  beobachtet  habe.  Nach  der  Färbung 
wird  in  destilliertem  Wasser  abgespült  und  ausgewaschen, 
nach  Belieben,  5  bis  10  Minuten,  nachher  wie  gewöhnlich  in  Leitungs- 
wasser ausgewaschen  und  dann,  wie  üblich,  in  Balsam  übergeführt. 
Gewöhnlich  ist  auch  nach  dieser  kurzen  Färbung  die  Differenzie- 
rung der  Schnitte  und  die  Nuancierung  eine  vorzüg- 
liche. Auch  die  Centrosomen  lassen  sich  durch  diese  Farblösung 
darstellen ,  doch  bekommt  man  sie  so  nicht  elektiv  isoliert  gefärbt. 
Wünscht  man  sie  besonders  darzustellen,  so  verfahre  man  ent- 
weder nach  der  Heidenhain sehen  oder  ßENDASclren  Methode,  oder 
man  überfärbe  in  meiner  Farblösung  stundenlang  (eventuell  24  Stunden) 
und  differenziere  nachher  wie  allgemein  üblich. 


sobald  alles  Ferrisulfat  durch  die  Oxalsäure  in  Ferrosulfat  wieder  reduziert 
worden  ist,  ist  der  Bodensatz  fast  wieder  aufgelöst,  die  Farbe  der  Lösung 
ist  tief  kaffeebraun  geworden  und  sie  färbt  jetzt  wieder  kräftig  und  gut, 
anscheinend  ein  bißchen  brauner  als  ursprünglich,  aber  durch  Abspülung 
der  Schnitte  mit  destilliertem  Wasser  (und  nachher  Leitungswasser)  wird 
alles  wieder  schwarz  im  Ton. 


58    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Die  Färbung  mittelst  dieses  Eisenhämateins  läßt  sich  sehr  wohl 
mit  den  meisten  anderen  Färbungen  kombinieren.  Die  Kernfärbung 
ist  sehr  resistent,  verträgt  z.  B.  Säurefuchsin- Pikrin  (nach  meiner 
Methode)  etc.  anstandslos ,  natürlich  auch  Eosin ,  Erythrosin ,  Licht- 
grün etc. 

Wünscht  man  mehr  r  e  i  n  e  K  e  r  n  f  ä  r  b  u  n  g  oder  n  u  r  eine 
solche,  so  setze  man  bestimmte  kleine  Quantitäten  freier  Schwefelsäure 
zu.     Folgende  Mischungen  kann  ich  empfehlen: 

A.  Eisenhämateinlösung 4  cc 

1  Prozent  Schwefelsäure 1    „ 

also  ein  Zusatz  von  2<>/oo  H2SO4. 


Man  erhält  so  weniger  Plasmafärbung,  doch  gleich  intensive  und 
rfe  K 
Mischung;: 


scharfe  Kernfärbung.    Noch  mehr  isolierte  Kernfärbung  gibt  folgende 


B.  Eisenhämateinlösung 4  cc 

1  Prozent  Schwefelsäure 2    „ 

(ca.  3-30/00  H,3  SO,). 

Man  färbt  am  schnellsten,  wenn  man  die  Farblösung  erwärmt; 
durch  Behandlung  mit  dünner,  2  bis  3  pro  Mille  Schwefelsäure  läßt 
sich  jeder  Grad  von  isolierter  Kernfärbung  erhalten. 

In  den  meisten  Fällen  ziehe  ich  die  Hauptfärbung  allein  mit 
ihren   reichen    Nuancierungen    der    reinen    Kernfärbung    absolut    vor. 

Auch  als  gewöhnliche  Arbeitsmethode  ist  sie  ihrer 
Leichtigkeit  und  Haltbarkeit  und  sonstigen  guten  Eigen- 
schaften wegen  aufs  wärmste  zu  empfehlen. 

Detaillierte  Angaben  über  die  Anwendung  auf  verschiedenes 
Material,  bei  verschiedener  Fixierung  etc.  zu  machen,  halte  ich  für 
überflüssig,  doch  besonders  hervorheben  will  ich,  daß  auch  sonst 
schwierig  färbbares  Material  damit  oft  gut  gefärbt  werden  kann. 


Über  die  chemischen  Vorgänge  bei  der  Bereitung  dieser  P^isen- 
hämateinfarblösung  habe  ich  schon  oben  einige  Angaben  gemacht. 
Um  Genaueres  darüber  zu  erfahren,  habe  ich  systematisch  viele  quan- 
titative Versuche  angestellt.  Die  wichtigsten  Resultate  werde  ich 
hier  kurz  mitteilen. 

Ich  halte  mich  aber  nur  an  die  gröberen  chemischen  Verhält- 
nisse, die  gefundenen  Resultate  gelten  in  dieser  Beziehung  auch  für 
andere  analoge  Eisenverbindungen  als  den  Eisenalaun. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    59 

Da  ich  nicht  in  der  Lage  war,  Elementaranalysen  der  ver- 
schiedenen Lacke  zu  machen,  griff  ich  zur  Untersuchung-  der  Oxyda- 
tionsprodiikte  des  Hämateins  mittels  der  stufen  weisen  Oxy- 
dation. Ich  behandelte  eine  abgewogene  Menge  Hämatoxylin  (resp. 
Hämatein)  mit  bestimmten  Mengen  von  Ferrisalz  und  oxydierte 
vorsichtig  so  weit  (eventuell  in  der  Wärme),  bis  sich  kein 
Ferrisalz  mit  der  Rhodankaliumreaktion  in  der  wässe- 
rigen Lösung  mehr  nachweisen  ließ.  Die  Lösung  enthielt 
dann  nur  Ferrosalze  und  die  freigewordene  Schwefelsäure  (siehe  die 
Oxydationsgleichung  oben) ,  und  mit  den  also  gewonnenen  Lösungen 
von  bestimmter  Zusammensetzung  wurden  Probefärbungen  auf  gleich- 
artigem Material  gemacht.  Ich  betrachte  vorläufig  die  Sache  so,  als 
ob  ich  mit  jedem  disponiblen  Sauerstoffatom  zwei  der  disponiblen 
Wasserstoffatome  des  Hämatoxylins  resp.  Hämateins  oxydiere ,  und 
diese  hypothetischen  Oxydationsstufen  benenne  ich  einfach  so: 

Hämatoxylin  -^  H.,  =  Hämatein. 
Hämatein  ^  Hg         =  Dioxyhäiuatei'n. 
Hämatein  -i-  Hg         =  Trioxyhämatein. 
Hämatein  —  H^        =  Tetraoxyhämatein  etc. 

Mit  der  fortschreitenden  Oxydation  des  Hämateins  stellten  sich 
gesetzmäßige  Farbenänderungen  ^  ein,  welche  sich  in  analoger  Weise 
und    noch    deutlicher  bei  den  Chromlacken ^  zeigen;    darüber  später. 

Allein  maßgebend  ist  hier  die  Oxydationsstufe  des  Hämatoxylins ; 
man  erhält  nämlich  ganz  analoge  Resultate ,  wenn  mau  das  Häma- 
toxylin in  Lösung  mit  einer  berechneten  Menge.  Schwefelsäure  (um 
neutrale  Salze  zu  bilden)  und  mit  anderen  Oxydationsmitteln  quan- 
titativ oxydiert  und  dann  mittels  Ferrosalzen  (Eisensulfat,  Mohrs  Salz) 
oder  mittels  Chromidsalzen  die  Farblacke   bildet. 

Um  ein  G  r  a  m  m  ^  Hämatoxylin  i  n  H  ä  m  a  t  e  i  n  zu  oxy- 
dieren ,  braucht  man  2'7 1  g  F  e  r  r  i  a  m  m  0  n  i  um  s  u  1  f  a  t ;  damit 
werden  bekanntlich  zwei  Wasserstoffatome  wegoxydiert,  für  jedes 
folgende  Wasserstoffatom  braucht  man   1"355  g  Eisenalaun. 

Zur  Auflösung  der  Substanzen  wird  nur  ausgekochtes,  sauerstoft- 


')  In  der  technischen  Färberei  ist  es  eine  altbekannte  Tatsache,  daß 
mit  steigender  Oxydation  an  der  Luft  die  Eisenhämatoxj'linlacke  erst 
bläulich,  dann  schwarz  und  zuletzt  bräunlich  und  minderwertig  werden. 

^)  Auch  bei  Tonerdelacken. 

^)  Die  Gewichtsmengen  sind  mit  einer  Genauigkeit  von  +  2-5  mg  an- 
gegeben, was  hier  völlig  genügt. 


60    Hansen:  Über  Hcämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

freies,  destilliertes  Wasser  benutzt.  Es  läßt  sich  zeigen,  daß  Hämatein 
in  schwach  saurer  Lösung  mittels  also  bestimmter  Mengen  Kalium- 
permanganats (oder  titrierten  Wasserstoffsuperoxyd)  oxydiert ,  in 
diese  hölieren  Oxydationsprodukte  übergeführt  wird  ^ ;  bringt  man  dann 
solche  höher  oxydierte  Lösungen  (in  sauerstofffreiem  Wasser)  mit 
J'errosalzen  zusammen,  so  werden  sie  nicht  reduziert,  so  daß  sich 
kein  F  e  r  r  i  s  a  1  z  bildet.  Es  läßt  sich  also  bestimmt  schließen, 
daß,  wenn  (bei  der  Oxydation  des  Hämatoxylins  mittels  Ferrisalzen) 
bei  der  Rhodankaliumreaktion  kein  Ferrisalz  mehr  nachgewiesen 
werden  kann,  dasselbe  all  seinen  disponiblen  Sauerstoff  an  das  Häma- 
toxyliu  abgegeben  hat,  wenigstens  werde  ich  dies  so  lange  annehmen, 
bis  ich  widerlegt  werde. 

Von  den  vielen  Versuchen  führe  ich  hier  einige  an,  wobei  man 
mir  eine  kleine  Wiederholung  des  Ferrohämateins  gestatte. 

1.    F  e  r  r  oh  ämat  ein  (cf.  auch  oben)  =  Hämatoxylin -^  H._,. 

1*355  g  Eisenalaun  werden  in  40  cc  Wasser,  und  0'50  g 
Hämatoxylin  in  10  g  Wasser  gelöst ;  beide  Lösungen  vorsichtig  ver- 
mischt, geben  folgende  Oxydationsphasen.  Zuerst  bildet  sich  Häma- 
tein, welches  die  Lösung  tiefbraun  färbt,  aber  schnell  fängt  sie  an 
violett  zu  werden,  indem  nun  die  Ferrolackbildung  anfängt  und  gleich- 
zeitig ein  Teil  des  gebildeten  Lackes  als  ein  schwarzer  amorpher 
Niederschlag  sich  absetzt,  auch  an  der  Oberfläche  zeigt  sich  eine 
glänzende  Haut.  Die  Lösung  färbt  jetzt  sogleich,  wie  oben  angegeben, 
Kerne  schwarz  bis  schwarzviolett,  Plasma  mehr  violett.  Die  Färbung 
wird  durch  Ferrosulfat  nicht  verändert.  Fügt  man  10  g  Ferro- 
ammoniumsulfat  in  50  g  sauerstofffreiem  Wasser  hinzu ,  erhält  man 
eine  dunkelviolette  Lösung,  indem  der  Niederschlag  darin  größten- 
teils aufgelöst  wird.  In  dieser  Lösung  läßt  sich  keine 
Spur  von  Ferrisalzen  nachweisen;  sie  färbt  wie  oben  an- 
gegeben. 

Wir  haben  also  hier  eine  Verbindung  (Lack)  des  gebildeten  Häma- 
teins  mit  dem  Ferrosalz,  welche  schwarzviolett  ist.  Es  erhellt  hieraus, 
daß  Ferroh  ä  matein  die  eigentliche  Farbe  ist  und  nicht 
ein  Ferrihämatein.  Und  ich  habe  die  besten  Gründe,  anzunelimen, 
daß  die  Ferrolacke  liier  die  eigentümlichen,  wertvollen  Farblacke  sind. 


^)  Die  Reaktion  muß  ganz  abgelaufen  sein,  eventuell  durch  Erhitzen 


der  Lösung. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen,    gl 

daß  dagegen  die  Lacke,  welche  Fernverbindungen  enthalten,  minder- 
wertige Farben  sind.  Das  geht  auch  aus  den  Prozessen  der  tech- 
nischen Färberei  hervor. 

Bestätigt  wird  diese  Ansicht  durch  das  Verhalten  der  Ferro- 
lacke  der  höheren  Oxydationsstufen. 

Nehmen  wir  einstweilen  meine  willkürliche  vorläufige  Nomen- 
klatur an,  und  bezeichnen  wir  ein  Hämatein,  welches  mit  1  Atom 
Sauerstoff  weiter  oxydiert  wird  (also  möglicherweise  2  Atome  Wasser- 
stoff verliert),  als  D  ioxy  hämatein ,  so  können  wir  eine  solche 
Lösung  folgendermaßen  bereiten. 


2.    F  e  rr  odioxy  h  am  at  e in. 

a)  1  g  Hämatoxylin  in  50  g  Wasser  gelöst; 

b)  5*42  g  Eisenalaun  in   100  g  Wasser  gelöst. 

Die  Lösungen  werden  gut  abgekühlt ,  eventuell  zur  Zurück- 
drängung der  Hydrolyse  in  der  Eisenalaunlösung  wird  derselben 
ca.  0*8  g  Schwefelsäure^  zugefügt.  Die  Eisenalaunlösung  wird  in 
die  Hämatoxylinlösuug  unter  stetem  Umrühren  gegossen.  Die  Lösung 
färbt  sich  zuerst  vorübergehend  braun  (Bildung  von  gelöstem  Häma- 
tein!), hiernach  dunkelviolett,  wie  oben  beim  Ferrohämatein. 

Es  lassen  sich  in  diesem  Stadium"  noch  reiclilich 
F  e  r  r  i  s  a  1  z  e  nachweisen,  und  erst  nach  und  nach  in  der  Kälte 
geht  die  Oxydation  in  Dioxyhämatein  (Lack)  vor  sich. 

Durch  Probefärbung  in  diesem  Stadium  erhält  man  immer  einen 
mehr  violetten  Ton.  Erhitzt  mau  aber,  geht  die  Reaktion  weit  schneller, 
und  nach  kurzem  Kochen  ist  die  Oxydation  in  Dioxyhämatein  voll- 
ständig, wenn  sich  kein  Ferrisalz  mehr  nachweisen  läßt.^  (NB. 
Verwendung  von  sauerstofffreiem  Wasser.  Die  Oxydation  au  der 
Luft  kommt  beim  kurzen  Kochen  in  den  Kolben  nicht  in  Betracht.) 


^)  Also  z.B.  8  cc  von  10  Proz.  H2SO4  Lösung;  man  kann  dasselbe 
unterlassen  oder  die  Schwefelsäure  der  Hämatoxylinlösung  vorher  zufügen ; 
das  ändert  an  dem  Resultate  nichts.  Nur  hält  sich  der  Lack  viel  reich- 
licher in  der  Lösung  mit  mehr  Schwefelsäure  aufgelöst. 

■^)  Auch  Probefärbungen  (kalt!)  wurden  gemacht,  wir  haben  hier  noch 
mit  dem  Ferrohämatein  zu  tun. 

^)  Sind  die  zwei  Lösungen  vor  dem  Vermischen  nicht  genügend  ab- 
gekühlt, bekommt  man  sofort  Lackbildung  und  Oxydation  zu  Dioxyhäma- 
tein, so  daß  man  das  Stadium  der  braunen  Hämateinfarbe  und  die  violette 
Ferrohämateinlackbildung  gewöhnlich  nicht  sieht.  Für  die  Praxis  ist  dies 
natürlich  gleichgültig. 


62    Hansen:  Über  Hämatei'nlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Die  Lösung  ist  dunkelbraun  von  dem  richtigen  Ton  und  enthält  ge- 
wöhnlich noch  etwas  ungelösten  Lack  (so  daß  man  vor  dem  Gebrauche 
filtrieren  muß) ,  welchen  man  eventuell  durch  etwas  Schwefelsäure- 
zusatz auflösen  kann. 

Die  Lösung  enthält  nur  Ferosalze.  Die  Probefärbung 
(sauerstofiYreies  Wasser)  gibt  tiefschwarze  Kerne ,  Plasma  ebenso 
weit  schwärzer  als  bei  Ferrohämatein,  aber  doch  immer  mehr  violett 
als  die  folgende  Oxydationsstufe.  — 

Wünscht  man  alles  bei  der  Reaktion  auftretende  Ferrosulfat  in 
das  haltbarere  Mohr  sehe  Salz  zu  überführen,  so  setze  mau  vor  oder 
nach  der  Reaktion  die  berechnete  Menge  Ammoniumsulfat  hinzu  (bei 
den  angegebenen  Mengen  also:  0"73  g  (NH^jg  SO^),  auch  scheint 
hierdurch  etwas  mehr  Lack  in  Lösung  zu  gehen ,  die  Farbe  der 
Lösung  wird  brauner.  — 

Eine  rein  schwarze,  resp.  grauschwarze  Färbung  des  Plasmas  er- 
hält man  nur  an  einer  noch  höheren  Oxydationsstufe.  Oxydiert  man 
im  Sinne  des  oben  Gesagten  fünf  Wasserstotfatome  des  Hämatoxylins 
—  also  drei  des  Hämateins,  so  erhält  man 

3.   das  Tri  oxy  h  ä  ma  t  e in. 

Diese  Oxydationsstufe  ist  von  mir  als  die  zweck- 
mäßigste empfohlen;  die  oben  angegebene  „  Eisen - 
liäm at einlösung"  enthält  diese  Stufe,  und  zwar  so,  daß  kleine 
Abweichungen  von  den  genauen  Quantitäten  in  der  Zusammensetzung 
durchaus  nicht  schaden.  ^     Man  bildet  sie  folgendermaßen : 

1  g  Hämatoxylin  in  50  g  Wasser,  6'78  g  Eisenalaun  in  100  g 
Wasser  gelöst  (dazu  0*6  bis  0'8  g  Schwefelsäure).  Die  Lösungen 
werden  wie  oben  vermischt,  man  erhitzt,  bis  die  Proben  kein  Ferri- 
salz  mehr  bei  Rhodankalium  zeigen,  hiernach  kühlt  man  ab  und  fügt 
0*93  g  Ammoniumsulfat  hinzu.  Die  Lösung  enthält  nun  Trioxy- 
hämateinferrolack,  Ferrosalze  und  freie  Schwefelsäure. 

Sie  färbt  sehr  intensiv ,  ganz  analog  der  empfohlenen  Lösung 
und  absolut  schwärzer  als  das  D  i  o  x y  h  ä  m  a  t  e  i"  n. 


^)  Da  die  nächsten  höheren  Oxydationsstufen  auch  schwarz  färben, 
obwohl  je  höher  um  so  minder  kräftig,  sieht  man,  daß  das  Färbvermögen 
der  angegebenen  Lösung  vorerst  nicht  besonders  von  der  unvermeidlichen 
nachträglichen  Luftoxydation  beeinflußt  wird,  je  kälter  um  so  haltbarer,  je 
mehr  in  der  Flasche  ist,  ebenso. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    63 

Höher  mit  der  Oxydation  zu  gehen ,  hat  keinen  Vorteil.  Ich 
habe  sowohl  die  Tetraoxy-,  Pentaoxy-  und  Hexaoxyhäma- 
te  in  eisenlacke  geprüft.  Sehr  brauchbar  ist  noch  das  Tetra- 
oxyhämatein ,  es  hat  aber  keinen  Vorteil  vor  dem  Trioxyhämatein. 
Mit  noch  höherer  Oxydation  wird  die  Färbekraft  geringer  und  die 
Töne  minderwertig,   oliven,   bräunlich  etc. 

Der  in  der  Lösung  gebildete  Eisenlack  wird ,  wie  gesagt ,  zum 
Teil  von  der  bei  der  Oxydation  des  Hämatoxylins  freigewordenen 
Schwefelsäure  in  Lösung  gehalten  und  extra  Schwefelsäurezusatz  ^  löst 
den  Niederschlag  mehr  und  mehr  auf,  über  eine  gewisse  Grenze 
hinaus  erhält  man  dann,  wie  oben  gesagt,  mehr  reine  Kernfärbung. 
Nicht  allein  in  der  also  besprochenen  Weise  lassen  sich  diese  Ver- 
hältnisse dokumentieren.  Ich  habe  beispielsweise  auch  das 
H ä m  a 1 0 X y 1  i n  gesondert  in  Lösung  in  die  verschie- 
denen Oxydationsstufen  überführt,^  und  hernach  die 
Lösung  mit  einer  entsprechenden  Menge  Ferrosalz  vermischt  und 
eventuell  die  angegebene  Menge  Schwefelsäure  zugefügt.  Man  erhält 
bei  diesem  Verfahren  ganz  dieselben  Resultate  wie  mit  Eisenalaun- 
oxydation. 

Sehr  schön  beobachtet  man  die  L  a  c  k  b  i  1  d  u  n  g ,  wenn  man 
eine  Lösung  von  Dioxy-  oder  Trioxyhämatein  in  Wasser  bereitet  und 
dann  in  vollgefüllter ,  gutverschlossener  Flasche  aufbewahrt  (so  daß 
nachträgliche  Luftoxydation  ausgeschlossen  ist).  Nach  einigen  Tagen 
mischt  man  die  Lösung  mit  einer  entsprechenden  Ferrosalzlösung. 
Sind  die  Lösungen  kalt,  tritt  die  Lackbildung  oft  sehr  langsam  ein, 
so  daß  man  energisch  kochen  muß ,  um  die  Lacke  völlig  zu  bilden. 
Weit  leichter  zu  beobachten  als  beim  Eisenhämatein  ist  dies  Verhalten 
bei  den  Chromalaunhämateinen  und  auch  bei  den  Thonerdelacken, 
sowie  bei  Chromcochenillen. 


Fasse  ich  meine  Ergebnisse  zusammen,  die  auch  zum  Teil 
in  noch  auffälligererWeise  für  Chromalaun-  und  Thon- 
erdealaunlacke  gelten,  sind  es  folgende: 


^)  Es  ist  vorteilhafter  die  vermehrte  Lösung  des  Lackes  durch  einen 
Schwefelsäurezusatz  zu  erreichen  als  durch  einen  größeren  Gehalt  an  Eisen- 
alaun, wodurch  die  Färbungen,  wie  leicht  verständlich,  ungünstig  be- 
einflußt werden. 

2)  Mit  den  berechneten  Mengen  von  Kaliumpermanganat  in  saurer 
Lösung,  oder  mit  andern  Oxydationsmitteln. 


64    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Hämatosylin  bildet  schwach  gefärbte  oder  farblose  Lacke.  Häma- 
tein  bildet  die  für  die  respektiven  Metalle  b  1  a  u  e  s  t  e  n  Lacke. 

Mit  zunehmender  Oxydation  werden  die  Nuancen  immer  dunkler, 
resp.  violett  oder  schwarzblau,  schwarz,  zuletzt  bräunlich. 

Hämateiuferrolack  ist  dunkelviolett.  Dioxyhämatein-  und  Trioxy- 
hämatein-  sowie  Tetraoxyhämatei'n-Eiseulack  ist  schwarz,  hernach  be- 
kommen die  Farben  einen  bräunlicheren  Stich. 

Die  für  die  Mikrotechnik  wertvollen  Eisenhäma- 
teine  müssen  hier  als  Ferro  verbin  düngen^  aufgefaßt 
werden.     Ferriverbindungen  sind  minderwertig. 

Zuletzt  mag  nicht  unerwähnt  bleiben ,  daß  der  Schleim  oft 
eine  Metachromasie  mit  purpurviolettem  Ton  zeigt  bei  der  Färbung 
mit  Eisendioxy-  und  Trioxyhämatein.  Die  Metachromasie 
zeigt  sich  am  ausgesprochensten  im  Wasser ,  wird  aber  durch  die 
Alkoholbehandlung  größtenteils  zerstört  und  ist  praktisch  ohne  Be- 
lang. Auch  bei  den  Chrom  ala  unhä  mateinen  findet  man  ähn- 
liche Verhältnisse. 

Für  Stückfärbung  habe  ich  diese  Eisenhämateine  nicht  em- 
pfohlen ,  sie  werden  sich  aber  gewiß  bei  passendem 
Schwefelsäurezusatz  sehr  wohl  verwenden  lassen 
können.  Je  nach  Fixation  und  Material  und  den  gewünschten  Resul- 
taten (reine  Kernfärbung  oder  auch  diffuse  Färbung)  muß  der  Schwefel- 
säurezusatz ein  leicht  auszuprüfender  sein  (s.  oben). 

Zum  Auswaschen  muß  am  besten  Sauerstoff  freies,  ausgekochtes 
Wasser  verwendet  werden ,  ebenso  fülle  mau  die  Gläser  ganz  voll, 
um  Luftoxydation  zu  vermeiden,  oder  absorbiere  den  Sauerstoff  durch 
einen  mit  Pyrogalluslösuug  befeuchteten  Wattebausch ,  der  durch 
eine  Zwischenlage  von  hydrophober  Watte  am  Heruutergleiten  ver- 
hindert wird. 


n.   Die  Chromhämateine. 

Die  Chromlacke  des  Hämatoxylins  oder  richtiger  der  Hämateine 
und  Oxyhämateine  sind  technisch  sehr  wichtig ,  weil  sie  so  wider- 
standsfähig sind.  In  der  Mikrotechnik  spielen  sie  (abgesehen  von 
den  Färbungen  des  Nervensystems)  wenigstens  keine  so  große  Rolle, 
wie  sie  verdienen. 


II 
^)  d.  h.  sie  enthalten  das  zweiwertige  Eisenatom  Fe. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämatei'nlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    05 

Ihre  bekannteste  bewußte  Anwendung  ist  die  R.  Heidenhain  sehe 
Chromhämatoxylinfärbung-.  Die  nicht  wenigen  Rezepte  hierzu  brauche 
ich  hier  nicht  zu  wiederholen.  Beizung  der  Gewebsstücke  (oder 
Schnitte)  mit  Lösung  von  Chromaten  oder  Bichromaten  und  darauf- 
folgende Behandlung  mit  Hämatoxylinlösungeu  (auch  umgekehrt)  ist 
das  Wesentlichste. 

Dagegen  ist  die  Anwendung  von  Chromidsalzen^  meines  Wissens 
nicht  gebräuchlich,  — •  z.  B.  Chromalaun  oder  Chromisulfat  in  Ver- 
bindung mit  liämatoxylin  analog  dem  Tonerdealaunhämatoxylin  wird 
nicht  augewandt. 

Tatsächlich  gibt  auch  ein  analog  konstruiertes  Chromalaunhäma- 
toxylin  zunächst  ganz  schlechte  oder  minderwertige  Resultate. 

Trotzdem  ist  es  mir  durch  einfache  Mittel  gelungen ,  Chrom- 
alaunhämateine  von  vorzüglicher  Brauchbarkeit  und 
Färbekraft  herzustellen.  Die  Verwendbarkeit  derselben  wird  sehr 
allgemein  werden  können,  weil  sie  vielfach  weit  besser  als  die 
gewöhnlichen  Tonerdehämateine  wirken  und  weit  widerstands- 
fähiger sind. 


Zunächst  nur  ein  paar  orientierende  Bemerkungen  über  die  Chrom- 
lacke und   Chrombeizen. 

Es  ist  bekannt,  daß  Chromidoxyhydrate  oder  alle  Chromidsalze  (z.B. 
Chromidsulfat,  Chromalaun)  die  relativ  stabilsten  Chromverbindungen 
sind.  Durch  viele  Reduktionsprozesse  erhält  man  aus  Chromsäure^ 
Bichromsäure  und  deren  Verbindungen  zuletzt  Chromoxyd-(Chromid-) 
Verbindungen.  Fixiert  man  beispielsweise  in  der  Mikrotechnik  die  Ge- 
webe in  Chromsäure ,  Chromaten  oder  Bichromaten,  erhält  man  zu- 
erst gelbliche  Verbindungen  dieser  Oxydationsstufe ,  hernach  tritt 
in  den  Geweben  eine  braune  Verbindung,  welche  größtenteils  Chrom- 
dioxyd (CrO.,)  oder Chromi Chromat  (Cr^Og'CrOg)  ist,  auf.  Die- 
selbe bildet  sich  auch  bei  Belichtung  von  „Chromgelatine"  in  der 
Photographie,  wodurch  die  Gelatine  unlöslich  wird,  ferner  zuerst  durch 
Reduktion  von  Chromaten,  besonders  Bichromaten  (Müllers  Flüssig- 
keit etc. !)  in  den  Geweben  (und  auch  mit  Alkohol  im  Lichte  als  ein 
brauner  amorpher  Niederschlag) ,  welche  durch  langes  Auswässern 
weiter  zersetzt  wird.  Es  ist  klar,  daß  diese  Verbindung,  welche  noch 
imstande    ist,    Sauerstoif   abzugeben  (und  dabei  in  Chromoxyd  über- 


*)  Abgesehen  von  den  Weigert  sehen  Gliafiirbungen  als  Beize. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  1.  5 


66    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

geht),  auch  Hämatoxylin  in  Hämatein  und  Oxyhämateiu  zu  oxydieren 
vermag.  Auf  diesem  Verhalten  beruht  die  gewöhnliche  schwarze  oder 
blaue   „Chromhämatoxylin"-Stückfärbung. 

Nach  genügend  langer  Zeit  und  besonders  beim  Verweilen  des 
chromfixierten  Gewebes  in  Alkohol  geht  die  Reduktion  des  Chromi- 
chromats  weiter,  und  zuletzt  ist  alles  in  Chromoxyd  übergeführt,  wir 
haben  dann  die  bekannten  grünen  resp.  graugrün  gefärbten  Gewebs- 
stücke,  in  welchen  jetzt  alles  Chrom  als  Chromoxyd -(Chromid-) 
Verbindungen  gebunden  ist.  Solches  Material  vermag  nicht  mehr 
Hämatoxylin  zu  oxydieren. 

Genauer  auf  die  möglichen  Formen  einzugehen ,  in  denen  die 
Chromidverbindungen  vorkommen  könnten,  halte  ich  für  überflüssig; 
jeder  einigermaßen  chemisch  Geschulte  weiß,  daß  die  Oxydationsstufe 
dem  Chromoxyd  entspricht,  aber  zugleich,  daß  wahrscheinlich  sehr 
komplexe  Verbindungen  vorliegen,  mau  mag  dieselben  in  rein  quanti- 
tativer Hinsicht  wohl  größtenteils  als  basische  Verbindungen  — 
Salze ,  Hydroxysalze  —  auffassen ,  aber  molekular  ist  die  Sache  so 
einfach  nicht.  Ich  brauche  nur  auf  das  höchst  eigentümliche  Ver- 
halten der  grünen  Chromisulfatlösungen  hinzuweisen  oder  auf  die  sehr 
verschiedenen  Löslichkeitsverhältnisse  des  Chromidhydroxyd.^ 

Mikrotechnisch  wichtig  ist  die  Tatsache,  daß  „gut  fixiertes  Ge- 
webe" sich  vorzüglich  färbt;  und  das  sind  eben  solche  Gewebe,  in 
welchen  bei  genügend  langer  Einwirkung  der  Chromsalze  sich 
Chromid-Chromate  oder  basische  Chromidverbindungen  genug  gebildet 
haben,  worauf  die  Farbstoffe  sich  fixieren  können.  Die  gute  Färb- 
barkeit  der  Formol-Bichromatmischungen  beruht  ebenfalls  auf  der  in 
gleichem  Sinne,  aber  schneller  sich  zeigenden  Reduktionswirkung  des 
Formaldehyds  auf  die  Bichromate. 

Verwendet  man  Tonerdealaunhämateiue  (z.  B.  die  von  mir  1895 
angegebene  voll  oxydierte  Lösung) ,  so  färben  sich  die  auf  diese 
AVeise  gut  chromierten  Gewebe  besonders  kräftig. 

Ebenso  werden  die  meisten  Mikroskopiker  erfahren  haben,  daß 
solche  Präparate  besonders  haltbar  sind.  Mir  wenigstens  ist  immer 
die  weit  größere  Widerstandsfähigkeit  der  gleichen  Präparate  (auch 
gegen  Licht)  aufgefallen. 

Diese  Sache  verhält  sich ,  wie  ich  aus  meinen  Untersuchungen 
entnehme,  sehr  wahrscheinlich  so,  daß  sich  das  Hämatein,  der  Ton- 


^)  Auf  die   wichtige  Rolle,   welche  das  Licht   bei   den  Beizprozessen 
mit  Chromverbindungen  spielt,  brauche  ich  nur  hinzuweisen. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    67 

erdelack  zum  Teil ,  mit  dem  Chromoxyd  des  fixierten  Gewebes  ver- 
bindet, so  daß  wir  nicht  reinen  Touerdehämateiulack ,  sondern  in 
verschiedenem  Grade  Chromoxydhiimateinlack  gleichzeitig  erhalten; 
und  die  Chromhämateiulacke  sind  weit  widerstandsfähiger  und  auch 
dunkler  als  die  Tonerdelacke. 


Als  Ausgangspunkt  für  die  Chromhämateine  wählte  ich  den 
Chromalaun:  Cr.-,  (80^)3,  K.,  80^  -(-  24  H^O,  der  mir  die  meisten 
Vorteile  zu  bieten  scheint;  erstens  weil  er,  wie  der  Versuch  lehrt, 
sich  relativ  leicht  mit  den  Geweben  vereinigt  (energisch  beizt),  zwei- 
tens mit  den  Oxydationsprodukten  des  Hämateins  intensiv  gefärbte 
Lacke  von  hohem  Färbevermögen  bildet. 

Durch  Kochen  geht  bekanntlich  das  violette  Salz  in  das  grüne 
über,  und  ich  habe  prinzipiell  immer  die  grüne  Modifikation 
verwendet,  indem  ich  die  Lösungen  kochte.  Übrigens  ist  die 
Lösung  immer  etwas  hydrolysiert,  was  für  die  Beizung  und  Färbung 
wichtig  ist.  Bei  genügend  langer  Einwirkung  werden  die  Gewebe 
stark  gebeizt  (besonders  bei  30  bis  35  Grad),  darüber  später.  Wünscht 
man  stärkeres  Beizen,  verwendet  man  am  besten  Lösungen  von  soge- 
nannten basischen  Chromisulfaten. 

Mau  erhält  z.  B.  ein  Salz :  Cr^  (80^)3  (OH)g ,  wenn  die  Lösung 
von  Chromalaun  mit  frischgefälltem  Chromoxydhydrat  behandelt  wird. 

Auch  mittels  Ammoniumhydrat  oder  kohlensauren  Alkalien  er- 
hält mau  ein  basisches  Salz ,  Cr.,  SO^  (OH)^ .  Es  bildet  sich  zuerst 
ein  Niederschlag  (von  Chromihydrat) ,  welcher  sich  wieder  auflöst 
unter  Bildung  von  „basischen"^  Salzen.  Solche  Lösungen  halten  sich 
bei  passender  Zusammensetzung  sehr  lange  und  vertragen  auch  das 
Kochen,  ohne  daß  sich  die  basischen  Salze  ausscheiden. 

Um  eine  gut  färbende  Chromalaunhämateinlösung 
herzustellen,  habe  ich  gefunden,  daß  die  Lösung  am 
besten  etwas  (nicht  besonders  viel)  basische  Chromver- 
bindungen enthalten  soll,  und  daß  sich  die  höheren 
Oxydationsprodukte  des  Hämateins  vorteilhafter  als 
das   Hä matein   selbst   anwenden   lassen. 


*)  Das  wenigstens  bei  der  Ammoniakbehandlung  sich  sehr  komplizierte 
Verbindungen  bilden,  ist  bekannt;  für  unsere  Zwecke  dürfen  wir  aber  die 
Verhältnisse  zunächst  so  auffassen,  als  ob  einfach  basische  Verbindungen 


wirklich  in  der  Lösung  wären. 


68    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Hämatoxylin  und  Chromalaun  geben  keine  Farblösung- ;  das  tun 
erst  die  Oxydationsprodukte  von  dem  Hämatein  aufwärts  (cf.  früher). 
Zur  Oxydation  des  Hämatoxylins  kann  man,  wie  ich  andernorts  be- 
sprochen habe,  viele  verschiedene  Oxydationsmittel  anwenden,  sobald 
man  bewußt  quantitativ  verfährt,  wie  in  der  Mikrotechnik^ 
des  Hämatoxylins  ich  es   1895  zuerst  empfohlen  und  getan  habe. 

Beispielsweise  kann  man  die  berechnete  Menge  übermangan- 
sauren Kalis  verwenden,  aber  am  besten  gebraucht  man  hier 
das  Kaliumbichromat  in  der  berechneten  Menge. 

Also  wird  eine  bestimmte  Menge  Chromalaun  in  Wasser  gelöst 
und  gekocht,  bis  die  Lösung  ganz  grün  wird,  hiernach  löst  man  das 
Hämatoxylin  entweder  direkt  in  der  warmen  Chromalaunlösung,  was 
sehr  schnell  geht,  oder  das  Hämatoxylin  wird  gesondert  in  destilliertem 
Wasser  gelöst  und  der  Chromalaunlösung  zugefügt.  Man  läßt  er- 
kalten" und  setzt  hiernach  die  berechnete  Menge  Bichromas  kalicus 
(gelöst)  hinzu  unter  stetem  Umrühren. 

Die  Oxydation  beginnt  sogleich ,  es  ist  aber  notwendig  zum 
Kochen  zu  erwärmen ,  um  die  Oxydation  schnell  durchzuführen  und 
besonders  um  die  Chromlackbildung  zu  beschleunigen.  Es  wird  das 
Bichromat  durch  das  Hämatoxylin  in  Chromidverbindungen  reduziert, 
indem  es  seinen  disponiblen  Sauerstoff  abgibt.  Die  Reaktion,  welche 
in  saurer  Lösung  verläuft,  ist  bekanntlich  folgende : 


K,  Cr,  0,  -f  4  H,  SO^  =  K,  SO,,  Cr,  (SOJ.^  +  4  H,0  -f  0. 


3- 


Kaliumbichromat  Chromalaun 


Die  Schwefelsäure  wird  von  dem  vorhandenen  Chromalaun  ge- 
liefert, d.  h.  es  bilden  sich  eben  durch  die  Oxydation  des 
Hämatoxylins  die  für  die  Färbekraft  der  Lösung  wichtigen 
basischen  Salze.  Ganz  ähnlich  basische  Salze  bilden  wird  das 
übermangansaure  Kali,  wie  ich  1895  im  Zoologischen  Anzeiger 
No.  473  gezeigt  habe,  und  dasselbe  gilt  von  andern  ähnlichen  Sauer- 
stoifspendern. 

Verhindert  man  durch  einen  berechneten  Schwefelsäurezusatz 
die  Bildung  von  basischen  Salzen ,  so  ist  die  Lösung  zwar  selbst 
gleich  intensiv  gefärbt ,  aber  sie  färbt  die  Gewebe  schlecht  oder 
gar  nicht. 


1)  Zool.  Anz.  No.  473,  1895. 

-)  Indem  man  die  Schale  oder  den  Kolben  in  kaltes  Wasser  stellt. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämate'mlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    69 

Dadurch  ist  uns  ein  ausgezeichnetes  Mittel  in  die 
Hände  gegeben,  die  Färbung  zu  modifizieren.  Ohne  Säure- 
zusatz färbt  das  Chromalaunhämatein  die  Kerne  intensiv,  und  außer- 
dem sehr  stark  auch  die  Zwischensubstanzen  und  das  Plasma  (also 
mehr  diffus).  Bei  geeignetem  (s.  unten)  Schwefelsäurezusatz 
kann  man  aber  z.  B.  eine  sehr  intensiv  reine  Kernfärbung  er- 
zielen. Die  Chromalaunlösung  ist  immer  etwas  hydrolysiert,  sie  ent- 
hält, um  rein  quantitativ  zu  reden,  gelöstes  Chromhydroxyd ^  und 
etwas  hydrolytisch  abgespaltene  Schwefelsäure.  Nun  ist  aber  die 
Beizwirkuug  (also  auch  die  Fixierung  des  Farbstoffes  auf  dem  Ge- 
webe) eng  mit  dem  Vorhandensein  von  disponiblem  Chromhydroxyd 
verknüpft.  Drängt  man  also  die  Hydrolyse  durch  Schwefelsäure- 
zusatz zurück,  ward  die  Färbung  auch  zurückgehen,  die  Verbindung 
des  Farblackes  mit  dem  Gewebe  wird  dissoziiert  nach  dem  Gesetze 
der  Massenwirkung ;  "  zuerst  natürlich  in  den  lockeren  Verbindungen, 
zuletzt  in  den  Kernen.  Es  ergibt  sich  ferner  hieraus,  daß  man  durch 
geeignet  gewählte  Verhältnisse  zwischen  dem  Farblack,  der  Chrom- 
alaunmenge und  dem  Schwefelsäurezusatz  Stückfärbungen  erhalten 
kann ,  wobei  man  fast  beliebig  lange  die  Färbung  ausdehnen  kann, 
ohne  daß  störende  Überfärbung  eintritt,  es  läßt  sich  eben  dadurch 
der  gewünschte  Punkt  der  Färbung,  wo  die  färbenden  und  ent- 
färbenden Kräfte  der  Lösung  im  Gleichgewicht  miteinander  sind,  im 
voraus  genau  bestimmen. 

Ich  habe  das  praktisch  bestätigt  gefunden.  Da  die  Hydrolyse 
ebenso  wie  die  Reaktionsgeschwindigkeit  mit  zunehmender  Temperatur 
wächst,  wird  die  Färbung  der  Gewebe  ungemein  durch  Er- 
wärmung beschleunigt.  Daher  ist  Brütofentemperatur  oft  sehr 
geeignet  und  die  meisten  gut  fixierten  Gewebe  vertragen  allgemein 
ohne  Schaden  kürzere  Temperatursteigerungeu  der  Farblösung  von 
50  bis  60^,  ja  bisweilen  noch  höhere,  wie  ich  vielfach  konsta- 
tiert habe. 

Ich  hebe  nochmals  hervor,  daß  ganz  wie  hier  auseinander  ge- 
setzt die  Verhältnisse  beim  Eisenalaunhämatein  liegen,  bei  dem 
Ton  er  dealaunhä  matein,  sowie  b'fci  dem  später  zu  erwähnenden 
M  a  n  g  a  n  h  ä  m  a  t  e  in. 


^)  Daß  die  Verhältnisse  aber  molekular  weit  koiupHzierter  sind,  ist 
oben  gesagt. 

-)  Vgl.  „Den  Hyaline  Bruskgrundsubst."  1900  und  „Der  Hyalinknorpel" 
I,  Anat.  Hefte,  H.  83,  1905. 


70   Hansen:  Über  Hämatei'nlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Es  gelten  ferner  ähnliche  Überlegungen  für  Eisenalaun  Cochenille, 
Tonerdealaimcochenille  und  Chromalauncochenille  (resp.  Karmin)  etc. 


Über  die  Oxydationsstufen  des  Hämatoxylins  ist  noch 
zu  sprechen ;  ähnlich  dem  vorher  beim  Eisenalaunhämatein  Gesagten 
kann  man  außer  dem  Hämatein  auch  die  von  mir  provisorisch  so 
genannten  Oxyhämateiue  verwenden.  Es  bestehen  hier  ja  ganz  gesetz- 
mäßige Verhältnisse.  ^ 

Chromalaun  hämatein  gibt  eine  rein  himmelblaue  Färbung. 

Chromalaundioxy hämatein  gibt  eine  intensiv  dunkelblaue, 
resp.  schwarzblaue  Färbung  und  ist  für  den  allgemeinen  Gebrauch 
am  meisten  zu  empfehlen. 

Noch  mehr  schwarzblau  färbt  Trioxyhämatein. 

Wünscht  man  ganz  schwarze  Färbungen  (der  Kerne  z.  B.) ,  so 
verwende  man  Tetraoxy-  oder  Pentaoxyhämatein.  Bei  noch 
höherer  Oxydation  verliert  die  Farbe  an  Kraft  und  wird  mehr 
bräunlich. 

Die  P"'arblösungen  lassen  sich  auch  so  herstellen ,  daß  mau  das 
Hämatoxylin  in  wässeriger  Lösung  für  sich  oxydiert,  z.  B.  mit  Kalium- 
bichromat  oder  übermangansaurem  Kali  (s.  später),  die  Lösung  muß 
alsdann  die  berechneten  Mengen  Schwefelsäure  enthalten,  damit  sich 
neutrales  Mangansulfat  bildet,  resp.  Chromidsulfat.  Dann  gieße  man 
die  kalte  Chromalaunlösung  und  die  Hämateinlösung  zusammen  und 
erwärme  bis  zur  Lackbildung.  Um  so  gut  färbende  Lösungen  daraus 
zu  erhalten,  muß  man  entsprechend  dem  oben  Gesagten  soviel  Alkali 
oder  frisch  gefälltes  Chromhydroxyd  zu  der  kalten  Lösung  setzen, 
daß  die  der  Hämateinlösung  extra  zugefügte  Schwefelsäure  neutrali- 
siert wird ,  d.  h.  daß  die  Farblösung  genügend  basische  Salze  ent- 
hält. — 

Je    frischer    die    Hämatein-    oder    Oxyhämateinlösungeu    bereitet 


^)  Siehe  auch  oben  über  die  Nomenklatur ;  Hämatein  =  Hämatoxylin  -^  H.,. 

Werden  in  Hämatein  weitere  2  H  oxydiert  erhält  man  Dioxyhämatein. 
„       „  „  „       3  H         ,,  n         n     Trioxyhämatein. 

.,       „  „  .,       4  H         „  ,,         „     Tetraoxyhämatei'n. 

.,       .,  „  „       5H         ,,  „         .,     Pentaoxj^hämatein. 

„       „  „  „       6  H         „  77         n     Hexaoxyhämatein. 

Diese  Namen  sind  nur  für  die  Beschreibung  der  bei  der  stufenweisen  Oxy- 
dation erhaltenen  Produkte  rein  provisorisch  gewählt,  sonst  prätendieren 
sie  nichts. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    7 1 

sind,  um  so  schneller  tritt  die  Lackbildung  ein.  Je  höher  das  Häma- 
tein  oxydiert  ist,  um  so  langsamer  die   Lackbildung. 

L<äßt  man  die  wässerigen  Hämatein-,  resp.  Oxyhämateinlösungen 
längere  Zeit  in  ganz  vollgefüllten  Flaschen  gut  verschlossen  stehen, 
so  daß  jede  nachträgliche  Oxydation  ausgeschlossen  ist,  so  erfolgt  die 
Lackbildung  um  so  schwieriger  und  langsamer,  je  älter  die  Lösung, 
so  daß  man  gelegentlich  sehr  energisch  kochen  muß,  damit  sie  ein- 
tritt. Vielleicht  haben  sich  die  Hämateinmoleküle  miteinander  ver- 
kettet ,  polymerisiert ,  kondensiert ,  so  daß  diese  Bindungen  erst  ge- 
sprengt werden  müssen,  ehe  die  Lackbilduug  eintreten  kann,  welche 
bei  frischer  Lösung  durch  keine  solche  Verkettungen  verzögert  wird. 
Auch  bei  Tonerdealaunlacken  begegnet  man  den  hier  mitgeteilten 
Unregelmäßigkeiten  bei  Anwendung  älterer  Lösungen  von  Hämatein. 

Praktisch  nehme  ich  immer  die  Oxydation  des  Hämatoxylins 
in  der  Chromalaunlösung  vor,  ebenso  wie  ich  in  der  von  mir  1895 
angegebenen  Tonerdealaunhämateinlösung  gemacht  habe ,  ein  Ver- 
fahren, das  entschieden  besser  ist  als  das  Hämatein  oder  Hämatein- 
ammoniak  vorher  darzustellen  und  nachträglich  in  Alaunlösung  auf- 
zulösen.^ Man  wird  auch  hier  bei  den  verschiedenen  Cliromalaun- 
hämateinen  und  Oxyhämatei'neu  die  zwei  Prozesse  auseinander  zu 
halten  haben  (s.  oben):  1)  die  Oxydation  des  Hämatoxylins, 
die  relativ  leicht  vor  sich  geht,  und  2)  die  Lackbildung  zwischen 
dem  Hämatein,  resp.  den  Oxyhämateinen  und   dem  Chromsalz. 

Man  arbeite,  um  dies  wahrzunehmen,  mit  gut  gekühlten  Lösungen. 
Nach  Zufügen  des  gelösten  Bichromats  zur  Chromalaunhämatoxylin- 
lösung  (mit  oder  ohne  Schwefelsäurezusatz)  beobachtet  man  zunächst 
das  Auftreten  der  brauneu  Farbe  der  Hämateine  resp.  Oxyhämateine. 


^)  Ganz  neulich  hat  ja  auch  Paul  Mayer  sein  älteres  Verfahren  ver- 
lassen und  vollführt  die  Oxydation  des  Hämatoxylins  in  der  kalten  Alaun- 
lösung, er  gebrauclit  jodsaures  Natrium  als  Oxydans ;  aber' —  was  wichtig  ist  — 
er  verfährt  jetzt  ebenso,  wie  ich  es  1895  zuerst  empfohlen  habe,  und  ge- 
braucht die  quantitativ  nötige  Menge  Oxydans,  um  das  Hämatoxylin  in 
Hämatein  überzuführen.  Wie  ich  im  Jahre  1895  die  berechnete,  eben 
nötige  Menge  Kaliumpermanganat  angab,  um  1  g  Hämatoxylin  in  der 
Alaunlösung  in  Hämatein  zu  überführen  und  die  Menge  auf  das  gewöhn- 
hch  vorkoiumende  tetragonale  Hämatoxylin  bezog,  ebenso  hat  P.  Mayer 
jetzt  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XX,  p.  -409 ff.)  zwei  Qnanta  Natrium- 
jodat  angegeben,  welche  wie  die  Berechnung  zeigt,  einfach  auf  das  rhom- 
bische und  das  tetragonale  Hämatoxylin  sich  beziehen.  Er  hat  sich  also 
in  der  Hauptsache  meinem  vor  10  Jahren  angegebenen  Prinzip  an- 
geschlossen. 


72   Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Erwärmt  man,  so  tritt  kurz  oder  lang,  resp.  erst  beim  Kochen  die 
intensiv  blaue,  schwarzblaue,  resp.  schwarze  Lackbildung  ein.  Am 
leichtesten  geschieht  die  Lackbildung  beim  Hämatein  (nur  kurzes 
Kochen ,  bisweilen  schon  in  der  Kälte) ;  schon  beim  Oxyhämatein 
muß  man  länger  kochen,  ehe  die  Lackbildung  beendet  ist,  und  beim 
Tetra oxy-  und  Pentaoxy hämatein  beobachtet  man  am  deutlichsten 
die  Oxydation  getrennt  von  der  Lackbildung.  Selbst  nach  ein  paar 
Minuten  Kochen  ist  wohl  die  Oxydation  des  Hämatoxylins,^  aber 
nicht  die  Lackbildung  erfolgt ,  die  Lösung  färbt  in  diesem  Zustande 
schlecht,  in  der  Eigenfarbe  der  Oxyhämateine  bräunlich,  oder  schwach 
schmutzigviolett;  erst  wenn  mau  mehrere  Minuten  kocht,  bis  die 
Lackbildung  eintritt,  erhält  man  die  sattgefärbte  Lacklösung.  — 


Die  Reaktionsgleichungen,  nach  welchen  die  Oxydation  mittels 
Kaliumchromats  und  Kaliumbichroraats  in  saurer  Lösung  ver- 
läuft, sind  der  Hauptsache  nach  die  folgenden: 

Für  Kaliumchromat  (K^  CrO^ ;  Mol.  =  194-4): 
2  (K,  Cr  OJ  +  5  H,  SO^  =  2  K.  80^  +  Cr,  (SO^).  +  5  H^O  -f  O3. 

Für  Kaliumbichromat  (K.^  Cr,  0, ;  Mol.  =  294*5): 
K,  Cr,  0,  -^  4  H,  SO^  =  K,  SO,,  Cr,  (SOJ3  -f  4  H,0  -f-  O3. 

Aus  diesen  Gleichungen  berechnet  man  leicht  die  per  1  g  Häma- 
toxylin  nötige  Menge  Chromats,  resp.  Bichromats,  um  die  erwünschten 
Oxydationsstufen  des  Hämatoxylins  zu  erhalten. 

Wenn  die  Oxydation  in  der  Chromalaunlösung  vor  sich  geht, 
liefert  diese  die  notwendige  Schwefelsäure,  resp.  es  bilden  sich,  wie 
oben  angegeben,  der  Oxydationsmenge  entsprechende  Mengen  basischer 
Salze.  Wünscht  man  (quantitativ)  die  Bildung  der  neutralen  Salze, 
so  füge  man  der  Chromalaunlösung  vor  oder  nach  der  Oxydation  des 
Farbstoffes  soviel  freie  Säure  (Schwefelsäure)  hinzu,  daß  sie  eben  ge- 
nügt zur  (theoretischen)  Bildung  der  neutralen  Salze. 

Wie  man  aus  den  Reaktionsgleichungen  sieht,  braucht  Kalium- 
monochromat  1  Mol.  Schwefelsäure  mehr  (5  Mol.),  als  das  Bichromat 


')  Vielleicht  infolge  Ringbildung,  Kondensation  etc.  unter  den  Oxy- 
hämateinmolekülen ;  über  die  nicht  wenigen,  tatsächlich  vorhandenen  Mög- 
lichkeiten siehe  die  chemische  Literatur  über  die  Konstitution  und  den 
Abbau  des  Hämatoxylins  und  des  Brasilins. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    73 

(4  Mol.)  bei  Abgabe  gleicher  Sauerstoffmengen,  d.  li.  wird  keine 
freie  Schwefelsäure  hinzugefügt,  so  bilden  sich  beim  Monochromat 
entsprechend  mehr  basische  Chromsalze  als  beim  Bichromat.  Auf 
diesen  Verhältnissen  dürfte  es  zum  Teil  beruhen,  daß  die  Anwendung 
des  Monochromates  (gelb)  bei  der  alten  (R.  Heidenhain  sehen)  Chrom- 
hämatoxylinstückfärbung  bevorzugt  wird ,  während  das  Bichromat 
leichter  überoxydiert,  —  der  säurebiudenden  Wirkung  des  gebildeten 
neutralen  2  K.,  SO^  beim  Monochromat  nicht  zu  vergessen.  Bei  der 
Chromhämatoxylinstückfärbung  nach  Apathy  sowie  bei  anderen ,  wo 
alkoholische  Lösungen  angewendet  werden,  geht  im  Dunklen  und 
bei  Zimnrertemperatur  die  Oxydation  und  die  Lackbildung  (u.  a.  ent- 
sprechend der  geringen  Ionisation)  langsamer  vor  sich  und  geht  auch 
nicht  so  leicht  zu  weit,  ist  daher  besser  zu  überwachen.  Da  ich 
immer  quantitativ  verfahre,  bevorzuge  ich  aus  leicht  begreiflichen 
Gründen  das  K  a li u mb i  c h  r  0  m a  t  als  0 x y  d a n  s. 

Die  Menge  freier  Schwefelsäure ,  welche  man  der  Farblösung 
hinzufügen  muß,  wenn  man  das  neutrale  Chromidsulfat,  resp.  den 
Chromalaun  als  Endprodukt  bei  der  Oxydation  mittels  Kali um- 
bi  Chromats  wünscht,  anwenden  muß,  berechnet  sich  zu:  1"333  g 
H2  SO^  pro  lg  Kaliumbichromat,  also  braucht  0*276  g^ 
Kalium  bichromat  0-368  g  H.,  SO^  . 

Die  Mengen  von  Kaliumbichromat,  welche  nötig  sind,  um  nach 
dem  oben  Gesagten  1  g  Hämatoxylin  in  die  verschiedenen  Oxydations- 
stufen zu  oxydieren,  habe  ich  hier  berechnet  (und  praktisch  geprüft). 
Die  Zahlen  sind,  entsprechend  dem  praktischen  Gebrauche,  ein  wenig 
abgerundet,   was  prinzipiell  bedeutungslos  ist. 

Zur  Bildung  von 

a)  Chromalaun-Hämatein  braucht  1  g  Hämatoxylin  0"28  g  Kaliumbichromat 

b)  „  -Dioxyhämatein        .,  1  „  „  0'55  „  „ 

c)  .,  -Trioxyhämatein       ..  1  ,,  „  0*69  „  „ 

d)  „  -Tetraoxyhämatei'n  .,  1  „  „  0-83 '„  ,, 

e)  „  -Pentaoxyhämatein ,,  1  „  „  0*96  .,  ,, 

f)  „  -Hexaoxyhämatein   ,,  1  „  „  1-10  „  „ 

Es  lassen  sich  hiernach  eine  große  Menge  von  Farblösungen  kon- 
struieren, welche  innerhalb  ziemlich  weiter  Grenzen  gruppenweise  die 
besprochenen  gesetzmäßig  abgestuften  Farbtöne  geben ,  sowie  ent- 
sprechend   dem   Gehalt    an    basischen   Chromsalzverbindungeu ,    resp. 


^)  Diese  Menge  genügt,  um  zwei  Wasserstoffatome  in  1  g  Hämatoxylin 
zu  oxydieren. 


74   Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

nach  dem  verschiedenen  Säurezusatz  beliebig  variiert  werden  können, 
mit  Rücksicht  auf  Kernfärbung,  Plasmafärbung,  diffuse  Färbung  etc., 
wie  ich  oben  auseinandergesetzt  liabe.  Ganz  entsprechende  Varia- 
tionen lassen  sich  bezüglich  der  Farblacke  mit  anderen  Metallsalzen 
erreichen ,  wie  ich  wiederholt  hervorgehoben  und  praktisch  vielfach 
geprüft  habe. 


Die  Chromalaunhämateinrezepte,  welche  ich  hier  empfehle,  sind 
aus  einer  großen  Menge,  praktisch  geprüften,  ausgewählt,  als  die 
mir  zweckmäßigst  erscheinenden;  möge  ein  anderer  nach  seinem 
Ermessen  andere  Rezepte  bevorzugen,  das  Prinzip  einmal  aufgestellt 
wird  dadurch  nicht  verändert. 


Mein  C  h  r  o  m  a  1  a  u  n  d  i  o  x  y  h  ä  m  a  t  e  i  n  hat  folgende  Zusammen- 
setzung : 

1)  Chroma  laun  (chemisch  rein)  10  g,  wird  gelöst  in  destil- 
liertem Wasser  250  g,  die  Lösung  wird  gekocht,  bis  sie  ganz 
grün  wird. 

2)  H ä m a 1 0 X y  1  i n  (pur.  krist.)  1  g  wird  in  lieißem  destil- 
liertem Wasser  10  bis  15  g  gelöst,  die  beiden  Lösungen  werden 
vermischt ,  oder  es  werden  die  Hämatoxylinkristalle  direkt  in  die 
heiße  Chromalaunlösuug  unter  Umrühren  gelöst.  Man  läßt  die  nur 
schwach  gefärbte  Lösung  erkalten,  dann  füge  man : 

3)  0'5  g  H2  SO^  (ca.  5  cc  einer  lOprozentigen  Schwefelsäurelösung) 
hinzu  und  hernach 

4)  oxydiert  man.  Kali  u  m  b  i  c  h  r  0  m  a  t  0*55  g  wird  in  ca.  20  cc 
warmem  Wasser  gelöst,  und  nachdem  diese  Lösung  auch  abgekühlt 
(durch  Eintauchen  des  Reagensglases  im  Wasser),  gießt  man  sie 
tropfenweise  unter  stetem  Umrühren  in  die  Chrom- 
a  1  a  u  n  h  ä  m  a  t  o  x  y  1  i  n  1  ö  s  u  n  g. 

Man  erwärmt  die  Mischung  bis  zum  Kochen  und  läßt  unter 
stetem  Umrühren  einige  Minuten  lang  sieden,  bis  die  Lackbildung 
vollendet  ist,  was  oft  nur   1  bis  2  Minuten  dauert. 

Durch  den  Schwefelsäurezusatz  hält  sich  der  Lack  fast  ganz 
in  Lösung ,  ein  geringer  ungelöster  Überschuß  des  Lackes  schadet 
durchaus  nicht,  ist  eher  erwünscht. 

Vor  dem  Gebrauche  wird  immer  filtriert.  Die  Lösung 
liält  sich  sehr  lange.    Schnitte  werden  damit  ^/^  bis  2  bis  5  Minuten 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    75 

und  länger  gefärbt ;  o  h u e  daß  lu  a  n  d  a  0  Über  f  ä  r  b  e  n  zu  f  ü r  e li - 
ten  braucht,  kann  mau  stundenlang  färben.  Bei  mäßiger  Erwär- 
mung (40  bis  50  ^)  färbt  sie  auch  noch  schneller.  Ich  färbe  ent- 
weder ö  bis  10  Minuten,  erwärme  gelegentlich  kurz,  ich  habe  nie 
einen  Nachteil  von  der  Erwärmung  gesehen. 

Die  Farbe  ist  eine  tief  blauschwarze,  äußerst 
präzise  und  scharfe  K  e  r  n  f  ä  r  b  u  n  g  (Chromatin) ,  auch  das 
Plasma  färbt  sich  schwach ,  aber  bei  der  angegebenen  Zusammen- 
setzung ist  die  Kernfärbung  dominierend.^  Die  Farbe  ist  gegen 
Säuren  etc.  äußerst  widerstandsfähig  und  hält  sich  auch  im 
Lichte  vorzüglich.  Sie  läßt  sich  mit  bestem  Erfolge  mit  Säurefuchsin- 
Pikrinfärbung  verwenden,  sowie  mit  den  roten  und  orangen  Plasma- 
farben etc. 

Indem  der  Chromalaun  die  Gewebe  verschieden  stark  beizt, 
werden  die  Gegenfärbuugen  oft  feiner  abgestuft  in  ihren  Tönen  er- 
scheinen, als  bei  der  Tonerde-Häraatoxylinfärbung. 

Ich  empfehle  diese  Farbe  und  die  folgenden  als 
besser  als  Tonerdealaunhämatein  für  den  gewöhn- 
lichen Gebrauch,^  weil  eben  die  Chromoxyhämateine  sehr  echte 
Farben  sind. 

Für  die  M  i  k  r  0  p  h  0 1  o  g-  r  a  p  h  i  e  haben  sich  diese  Chromalaun- 
hämateine ,  ebenso  wie  meine  Eisenhämateinfärbung ,  sehr  geeignet 
erwiesen. 

Die  Farbeverteilung  ist  so  bestimmt ,  daß  ich  dieses  saure 
Chromalaunhämatein  unverändert  als  Stückfärbung  habe  benutzen 
können.  Man  färbt  dann  bei  kleinen  Stücken  3  bis  4  bis  5  Tage  laug- 
(bei  größeren  länger),  wäscht  gut  in  destilliertem  Wasser  aus,  welches 
oft  gewechselt  und  am  besten  vorher  durch  Auskochen  von  Sauerstotf 
befreit  wird,'^  ebenso  wie  man  das  Glas  ganz  vollfüllt  l)is  an  den 
Stöpsel.  Das  Auswaschen  dauert  am  besten  nicht  zu  kurz  {',>  bis  4  bis 
5  Tage),  aber  selbst  wenn  das  Wasser  sich  noch  ganz  schwach  färbt, 
kann  man  ruhig  mit  Alkohol  in  steigender  Konzentrierung  weitergehen 
und  dann  einschmelzen. 

Die  Stückfärbung  ist  ebenso  vorwiegend  Kernfärbung,  aber  auch 
Plasma ,    Bindegewebe ,    Muskeln    etc.    haben    einen  schönen  Ton  er- 


^)  Der  Schlehn  wird  in  der  wässerigen  Lösung  oft  metachromatisch 
rotviolett  gefärbt,  jedoch   hält  sich  diese  Metachromasie  nicht  in  Alkohol. 

^)  Die  Strukturen  vertragen  infolge  der  schwärzeren  Farbe  weit 
stärkere  Vergrößerungen  als  beim  Tonerdehämatem. 

^)  Kann  in  vielen  Fällen  unterbleiben. 


76    Hansen:  Über  Hämate'inlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1, 

halten.     Die   glatten  Muskeln   färben    sich    gewöhnlich    etwas  grauer 
im  Ton. 

Durch  vermehrten  Schwefelsäuregehalt  (z.  B.  0*6  bis  0*7  g)  läßt 
sich  reine  Kernfärbung  erzielen ,  doch  das  muß  je  nach  dem  Mate- 
rial  ausprobiert  werden ,    gewöhnlich  ziehe  ich  etwas  Plasmafärbung 

mit  vor. 

*  * 

Ist  stärkere  Plasmafärbung  erwünscht,  als  die  angegebene  Farb- 
lösung gibt,  so  nehme  man  einfach  O'IO  bis  0*25  bis  O'BO  g 
Schwefelsäure  statt  0*50  g. 

Ohne  Schwefelsäurezusatz  färbt  die  Farblösung  Kerne  sehr 
intensiv,  dann  aber  auch  Plasma,  Strukturen,  Muskeln,^  Zwischen- 
substanzen etc.  stark,  aber  sehr  „difterenziert",  nur  muß  die  Färbe- 
dauer sich  etwas  nach  dem  Material,  der  Fixation  u.  dergl.  richten; 
gewöhnlich  darf  die  Färbung  nicht  zu  lange  dauern,  weil  sie  sonst 
zu  intensiv  wird.  Das  beste  läßt  sich  doch  sehr  leicht  ausprobieren. 
Für  gewöhnlich  verwende  ich  zwei  Lösungen,  mit  resp.  0*25  g  und 
0*50  g  Schwefelsäure,  sowie  eine  Lösung  ohne  Schwefelsäure. 

Geht  mau  von  der  schwefelsauren ,  rein  kernfärbenden  Lösung 
aus,  so  ist  dieselbe  aber  sehr  leicht  in  eine  sicher  plasmafärbende  zu 
verwandeln,  man  braucht  nur  die  Farblösung  mit  ein  wenig  am  besten 
frisch  gefälltemChromoxydhydrat(Cr(OH)3)  zu  versetzen,  gut  schütteln, 
eventuell  etwas  zu  erwärmen  (nicht  kochen!)  und  dann  zu  iiltrieren. 
Auch  mit  entsprechend  geringem  Alkalizusatz  bewirkt  man  dasselbe, 
und  kann  man  sich  so  leicht  die  zur  Neutralisation  des  Schwefel- 
säurezusatzes  nötige  Menge  einer  dünnen  kohlensauren  Alkalilösung 
berechnen  und  einem  beliebigen  Quantum  der  Farblösung  zusetzen."-^ 

Mit  dem  Tetraoxyhämatein  bis  dem  Hexaoxyhämatein  liefert  der 
Chromalaun  ja  schwarze  Färbungen.  Wünsclit  man  solche ,  so  ver- 
wende man  einfach:  250  g  Wasser,  12  g  Chromalaun,  1  g  Häma- 
toxylin  und  (statt  0*55  g)  0*83  g  Bichromas  kalicus,  man  erhält 
so  das  Tetraoxyhämatein,  welches  ich  als  das  zweckmäßigste  be- 
trachte, oder  man  verwende  0*96  g  Bichromas  kalicus,  womit  man 
Pentaoxyhämatein    bekommt.     Der  Schwefelsäurezusatz    sei    dann 


^)  Man  beachte  die  starke  Färbung  der  glatten  Muskeltibrillen,  sowie 
die  Membranellen  vom  Bindegewebe  um  die  glatten  Miiskelzellen  etc. 

'-)  Durch  Zusatz  von  kohlensaurem  Alkali  zur  Tonerdehämateinlösung 
(Alaunhämatoxylin)  habe  ich  die  gewöhnliche  Lösung  in  eine  stark  schleim- 
färbende verwandeln  können  (darüber  werde  ich  später  berichten). 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    7  7 

uiclit  größer  als  0'3  bis  0*4  g,  weil  die  Färbekraft  der  höheren 
Oxydationsprodukte  geringer  ist.  Man  koche  energisch,  bis  sich  die 
intensiv  schwarzvioletten  Lacke  bilden,  denn  anfangs  erhält  man  nur 
die  braune  Färbung  des  Oxyhämateins.  Ein  Bodensatz  schadet  nicht; 
vor  dem  Gebrauche  wird  filtriert.  Die  Färbung  ist  eine  Schnittfär- 
bung, am  besten  mit  Erwärmung,  wie  früher  gesagt. 

Auch  als  Stlickfarben  lassen  sich  die  Lösungen  verwenden,  man 
setze  aber  dann  etwas  mehr  Schwefelsäure  hinzu,  je  nach  dem  Ma- 
terial; doch  verfüge  ich  in  dieser  Beziehung  nur  über  beschränkte 
Erfahrung. 


Dagegen  kann  man  mit  Chromalaundioxyhämatein^  als  Ausgangs- 
punkt sehr  leicht  schwarze  Schnittfärbuugen  extemporieren.  Man  ver- 
mische am  besten  10  Teile  der  Färbelösung  mit  1  Teil  einprozeutiger 
Bichromaskalicuslösung"  in  der  Kälte  und  färbe  z.  B.  unter  mittlerer 
Erwärmung. 

Alsdann  bekommt  man  rein  schwarze  Kernfärbungen;  auch  an- 
dere Verhältnisse  der  Mischung  lassen  sich  brauchen,  nimmt  man 
aber  wesentlich  mehr  Bichromat,  wird  die  Farbe  nicht  so  intensiv 
und  auch  bräunlicher  im  Ton;  bei  entsprechender  Variation  der 
Mischungsverhältnisse  lassen  sich  alle  Töne  von  blauschwarz,  schwarz 
bis  zu  braungelb  und  gelblich  erzielen.  (Die  verschiedenen  Mißfär- 
bungen, welche  gelegentlich  bei  der  R.  Heidenhain  sehen  Chromhäma- 
toxylin-Stückfärbuug  eintreten,  erklären  sich  aus  dem  hier  Mitgeteilten, 
ebenfalls,  daß  die  Beizung  der  Gewebe  gelegentlich  geringer  ausfällt, 
indem  die  Reduktion  in  Chromidverbindungen  ungenügend  vor  sich 
geht.) 

Beizt  man  beliebig  fixiertes  Material  mit  einer  Chromalaunlösung, 
und  behandelt  man  hernach  die  Stücke  mit  einer  Lösung  von  Häma- 
tein  oder  besser  Dioxyhämatein ,  so  erzielt  man  seTir  gute  Stückfär- 
bungen; auch  für  Schnitte  zu  verwenden. 

Die  Fixierung  des  Chromoxyds  (aus  dem  Chromalaun)  auf  den 
Geweben  läßt  sich  sehr  augenfällig  so  demonstrieren.  Man  beizt  drei 
Stücke  desselben  Materials  (z.  B.  in  Alkohol  oder  Formolalkohol 
fixiertes)  in 


1)  Mit  0-5  g  Schwefelsäure. 

^)  Auch  einprozentige   Chromaskalicuslösung   läßt   sich  in   der   Kälte 
verwenden. 


78    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

a)  5  Prozent  ueutr.  Chromalaun  in  Wasser  (grün  gekocht); 

b)  in  derselben  Lösung  mit   1  bis  2  Prozent  Hg  SO^  Zusatz; 

c)  in  einer  Lösung,  in  welcher  durch  Zusatz  von  einigen  Tropfen 
konz.  (25  Prozent)  Ammoniak  oder  10  Prozent  Nag  CO3  ein 
Mehrgehalt  an  löslichen  basischen  Salzen  gebildet  sind  (siehe 
oben).-^ 

Am  besten  beizt  man  bei  Brütofentemperatur  (30  bis  35  ^  C.) 
ein  paar  Tage;  die  Lösungen  dringen  sehr  gut  ein,  und  dann  sind 
die  Stücke,  welche  in  der  neutralen  (a)  und  der  basischen  (c)  Lösung 
behandelt  worden  sind,  ganz  grün,  graugrün;  die  in  der  sauren  Lösung 
(b)  dagegen  sehr  wenig  resp.  gar  nicht  graugrün.  Durch  diese  Mittel, 
Schwefelsäurezusatz  oder  Alkalizusatz,  hat  man  es  in  seiner  Hand, 
die  Litensität  der  Beizung  zu  variieren,  je  nach  dem  Material,  natür- 
lich auch  durch  die  Dauer  und  die  Temperatur. 

Mit  der  basischen  Beizung  erhält  man  außer  Kernfärbung  mehr 
diffuse  Färbung,  welche  sich  besonders  für  dünne  Schnitte  und  Plasma- 
strukturen eignen. 

Nach  derBeizuug,  durchweiche  unlösliche  Chromoxydverbindungen 
(conf.  oben)  auf  dem  Gewebe  befestigt  worden  sind,  wird  abgespült 
oder  auch  ausgewaschen  (ist  nicht  so  sehr  von  Belang)  und  hernach 
werden  die  Stücke  (bei  30  bis  35  Grad)  in  dem  10 fachen  Volum  von 
0*5  Prozent  Dioxyhämatein-  in  Wasser  oder  auch  mit  25  bis 
50  Prozent  Alkoholzusatz  einige  Tage  (2  bis  5)  gefärbt,  je  nach  der 
Größe  der  Stücke. 

Es  bilden  sich  gewöhnlich  keine  Niederschläge,  die  Farbflüssig- 
keit wird  nötigenfalls  einmal  erneuert ,  und  jetzt  bildet  sich  im  Ge- 
webe der  tief  schwarzblaue  Lack ,  natürlich  nur  an  den  Stellen  ge- 
bunden, wo  die  Beize  gebunden  war,  während  die  Farbflüssigkeit  zwar 
dunkler  gefärbt,  aber  klar  bleibt. 


^)  Z.  B.  5  bis  10  Tropfen  Ammoniak  auf  250  g  5prozentiger  grüner 
Chromalaunlösung;  der  entstehende  Niederschlag  muß  sich  in  der  kalten 
Lösung  glatt  wieder  auflösen  beim  Schütteln ;  die  Lösungen  müssen  sich 
auch  nach  dem  Kochen  klar  halten. 

^)  1  g  Hämatoxylin  wird  in  150  g  Wasser  gelöst,  es  werden  0-31  g 
H., SO4  zugefügt;  dann  löst  man  0"355  g  Kaliumpermanganat  in  50  g  Wasser 
und  vermische  die  kalten  Lösungen.  Man  erwärmt,  kocht  ein  paar  Mi- 
nuten und  erhält  eine  tief  braune  Lösung  von  Dioxyhämatein,  welche  sich 
sehr  gut  hält.  Man  kann  das  Hämatoxylin  in  entsprechend  weniger  Wasser 
lösen  und  nach  der  Oxydation  mit  der  entsprechenden  Alkoholmenge  ver- 
mischen, z.  B.  1  g  Hämatoxylin  in  50  g  Wasser  oxydieren,  dann  50  g 
Alkohol  zugefügt. 


XXII,  1.  Ilunsen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    79 

Nach  passendem  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser  überführe 
man  in  Alkoliol  in  steigender  Konzentration,  und  da  das  Hämatein 
oder  Dioxyhämatein  in  Alkohol  etwas  löslich  ist,  braucht  man  Nieder- 
schläge in  den  Stücken  niclit  zu  fürchten ;  Paraftineinbettung  oder 
Celloidin.     Gewöhnlich  habe  ich  so  verfahren : 

Beizung  in  grüner  Chromalaunlösung  bei  30  bis  35*'  2  bis 
5  Tage,  Auswaschung  eventuell  '^j.-^  bis  1  Tag;  Färbung  in  0'5pro- 
zentigen  Dioxyhämatein  ebenso  lange. 

Nur  bei  sehr  schwierigem  Material  bilde  ich  in  der  Beizflüssig- 
keit ein  wenig  basische  Salze. 

Bei  passendem  Schwefelsäuregehalt  der  Beizflüssigkeit,  1  bis 
2  pro  Mille,  erhält  man  mehr  reine  Kernfärbung. 


Vergleichsweise  habe  ich  auch  eine  Manganhämatein- 
1  ö  s  u  n  g  versucht ;  am  besten  verwendet  man  hier  auch  Dioxyhäma- 
tein. Mit  einer  starken  Lösung  von  Manganosulfat  (MnSO^)  bildet 
eine  einprozentige  Lösung  von  Dioxyhämatein  einen  violettbraunen 
Lack ,  welcher  in  der  Wärme  dissoziiert  wird ;  in  einer  verdünnten 
Lösung  von  Manganosulfat  tritt  die  Lackbildung  nicht  ein. 
Das  Mauganhämatein  wird  folgendermaßen  bereitet: 
Manganosulfat  5  g,  destilliertes  Wasser  200  g,  Hämatoxylin  1  g 
werden  gelöst.  Man  oxydiert  mit  Kaliumpermanganat  0"18  bis 
0"19  g  in  10  cc  Wasser  gelöst.  Wünscht  man  Mangandioxy- 
hämatein,  so  verwende  man  einfach  0*36  g  Kaliumpermanganat. 
—  Beim  Kochen  erhält  man  erst  einen  intensiv  schwarzvioletten 
Niederschlag  und  eine  braune  Lösung;  setzt  man  aber  eine  ganz 
geringe  Schwefelsäuremenge  hinzu  (1  bis  r2  cc  einer  lOprozentigen 
Ho  SO^-  Lösung  -\-  200  g  Farblösung),  so  ist  der  Niederschlag  darin 
außerordentlich  leicht  löslich,  und  man  erhält  eine  tief  orangebraune 
Lösung,  welche  schön  tiefbraune  Kerne,  braunes  Plasma  (auch  braune 
Centrosomen)  färbt.  Anwendung  ganz  wie  bei  einer  Alaunhämatein- 
lösung. 

in. 

Betreuend   der   gewöhnlichen    Tonerdealaunhämateinlösung 
habe   ich    gefunden,    daß    man,    wenn  man    das   von  mir   1895^  an- 


^)  Zool.  Anz.  No.  473. 


80    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösimgen.  XXII,  1. 

gegebene  quantitative  Vorgehen  bei  der  Herstellung  des  volloxydierten 
„Alaunh.äraatoxylins"  befolgt,  man  durchaus  nicht  ängstlich  zu  sein 
braucht,  etwas  zu  hoch  zu  oxydieren,  wenn  man  nur  das  Dioxy- 
hämatein  nicht  überschreitet ,  auch  muß  genügend  Alaun  vorhanden 
sein.  Eine  passende  kleine  Menge  Schwefelsäure  dazu  mit  Rück- 
sicht auf  das  zu  bildende  neutrale  Manganosulfat  bewirkt,  wenn  ge- 
wünscht, reinere  Kernfärbung.  Um  neutrales  Manganosulfat  bei  der 
Oxydation  mit  Kaliumpermanganat  in  der  Alaunlösung  zu  bilden, 
braucht  1  g  Kaliumpermanganat  0*93  g  Schwefelsäure;  die  pro  1  g 
Hämatoxylin  zur  Überführung  in  Hämatein  nötige  Menge  (0'177  g) 
Kaliumpermanganat  braucht  also  0*157  g  H,  SO^.  Eine  Tonerde- 
alaunhämateinlösung  nach  meinen  Angaben  im  Jahre  1895  (Zool. 
Anz.  No.  473)  läßt  sich  jetzt  auch  so  zusammensetzen,  indem  ich 
nur  den  geringen  und  praktisch  bedeutungslosen  Alkoholgehalt  weg- 
gelassen habe. 

a)  20  g  Kalialaun  gelöst  in  200  g  destilliertem  Wasser  in  der 
Wärme.  —  lg  Hämatoxylin  wird  ebenso  in  der  warmen  Alaunlösung 
leicht  aufgelöst,  eventuell  durch  Kochen. 

Man  oxydiere  mit  einem  der  vielen  geeigneten  SauerstofFsiJender, 
am  besten,  wie  ich  es  empfohlen  habe,  b)  mit  (0*177)  0*18  g 
Kaliumpermanganat,^  welches  in  einer  kleinen  Menge  Wasser 
gelöst  wird.  Indem  a  und  b  kalt  vermischt  werden,  beginnt  sogleich 
die  Hämateinbildung  und  die  Lackbildung.  Ich  erhitze  aber  die 
Mischung  zum  Kochen,  weil  so  die  Hämateinbildung  und  die  Lack- 
bildung in  kürzester  Zeit  beendet  wird ;  in  der  Kälte  dauert  es  etwas 
länger,  bis  der  Prozeß  abgelaufen  ist. 

Viele  Histiologen  arbeiten,  um  reine  Kernfärbung  zu  er- 
halten, mit  Vorliebe  mit  einer  dünneren  Tonerdealauuhämateinlösung, 
wie  mit  dem  P.  MAYERSchen  Hämalaun. 

Eine  dem  Hämalaun  in  allen  den  Eigenschaften,  worauf  es 
ankommt,  ähnliche  Hämateinalaunlösung  stellt  man  sich  aus 
meinem  Tonerdealaunhämatein  leicht  dar  durch  einfache 
Verdünnung  mit  Alaunwasser.  Man  nehme  einfach  220  g 
meiner   Lösung,'-^   dem    neuen   oder  dem    alten  Rezepte  nach,  und 


^)  3  CO  einer  bei  16*^  konzentrierter  wässeriger  Lösung  von  Kalium- 
permanganat, wie  ich  seinerzeit  für  die  Praxis  angab,  entspricht  mit  ge- 
nügender Genauigkeit  dem  hier  angegebenen  Quantum. 

-)  Ob  dieselbe  die  10  cc  Alkoliol,  welche  früher  zur  Auflösung  des 
Hämatoxylins  gebraucht  wurden,  enthält  oder  nicht,  ist  praktisch  ganz  be- 
deutungslos;  ebenso   ist   der  Manganosulfatgehalt   ganz   gleichgültig,   von 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen,    g  1 

vermische  sie    mit  800  g  Wasser   und    30  g  Alaun.     Das  Re- 
sultat ist,  wie  leicht  ersichtlicli,   „Hämalaun". 


IV. 

Ein  paar  einfache  Methoden  zur  Darstellung  von  Häraatein- 
lösungen  dürften  hier  angezeigt  sein. 

A.    Wässerige  Hämateinlösung. 

1)  1  g  Hämatoxylin  (pur.)  wird  in  der  Wärme  in  .50  g  destil- 
liertem Wasser  gelöst,  dazu  O'lö?  g  HgSO^^  (0-16  g). 

2)  0-177  g  (0-18)  Kaliumpermanganat  in  .50  g  destilliertem 
Wasser  gelöst. 

1  und  2  werden  vermischt  (kalt),  die  Reaktion  beginnt  sogleich. 
Man  erwärmt  kurz  zum  Kochen ,  und  läßt  nach  der  sehr  schnellen 
Beendigung  der  Reaktion  wieder  erkalten,  indem  man  das  Gefäß 
in   kaltes  Wasser  stellt. 

Man  hat  alsdann  eine  dunkel  orangebraune  Lösung  von  Häma- 
tein  erhalten,  welche  sich  fortwährend  fast  klar  hält.  Ein  ganz  ge- 
ringfügiger Niederschlag  mit  der  Zeit  schadet  nicht,  wird  aber  auch 
teils  durch  beliebigen  Alkoholzusatz,  teils  durch  Verdünnung  bis  auf 
^/^  Prozent  vermindert.  Die  geringen  Spuren  von  Kaliumsulfat  und 
Manganosulfat  sind  praktisch  ohne  jede  Bedeutung  für  unsere  Zwecke. 

keinerlei  Einfluß  auf  die  Farbe.  Es  ist  eine  theoretische  Prüderei,  an 
dem  gebildeten  Manganosulfat  Anstoß  zu  nehmen  und  nicht  auch  den 
verwendeten  Kalialaun  auf  Verunreinigungen  zuerst  chemisch  zu  unter- 
suchen, was  gewiß  kein  Mikrotechniker  tut.  Die  Methode  von  Harris 
(1898),  statt  Kaliumpermanganat  Quecksilberoxyd  zur  Oxydation  des  Häma- 
toxylins  in  der  warmen  Alaunlösung  zu  verwenden,  ist  von  autoritativer 
Seite  als  „theoretisch  richtiger"  als  die  meinige  (1895)  bezeichnet  worden, 
wahrscheinlich  hat  man  erstens  nicht  kontrolliert,  ob  die  Reaktion  auch 
quantitativ  verläuft,  wie  wir  dies  beim  Kaliumpermanganat  z.  B.  wissen, 
zweitens  ist  auch  die  Richtigkeit  nur  eine  „theoretische",  denn  praktisch 
enthält  die  Hämateinalaunlösung  nach  dem  Kochen  mit  Quecksilberoxyd 
aufgelüste  Quecksilbersalze,  wie  leicht  nachweisbar;  vielleicht  rührt  die 
„bessere  Haltbarkeit"  der  Harris  sehen  Lösung  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk. 
1901)  gegenül>er  der  Mayer  sehen  Lösung  nicht  vom  Klima,  sondern  von 
dieser  praktisch  sonst  gewiß  unwichtigen  Verunreinigung  mit  Quecksilbersulfat 
lier.  Natürlich  haben  all  diese  ganz  kleinen  Mengen  von  Nebenprodukten 
ebensowenig  zu  bedeuten  wie  das  Jodnatrium  in  Paul  Mayers  neuestem 
Hämalaun. 

^j  Man  scheue   die   kleine  Mühe  nicht,   diese  Menge   titrimetriscli  bei- 
zufügen, wenn  man  ganz  genau  arbeiten  will. 

Zeitschr.  f.  wiss.  :Mikroskopie.     XXII,  1.  (j 


82    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Ein  Alkoliolzusatz ,  z.  B.  von  10  bis  25  Prozent,  kann  empfohlen 
werden. 

Nach  ganz  derselben  Methode  lassen  sich  beliebig  hochoxydierte 
Oxyhämateinlösuugeu  darstellen  (s.  oben).  Eine  Dioxyhämätein- 
lösung  vQu  ^/g  Prozent  habe  ich  mehrmals  mit  gutem  Erfolge 
verwendet. 

1  g  Hämatoxylin  in  150  g  Wasser  gelöst,  dazu  0'32-^  g  Ho  SO^ 
wird  mit  0'36'-  g  Kaliumpermanganat  in  50  g  Wasser  gelöst, 
oxydiert ;  man  erhält  eine  tief  braunrote  Lösung ;  eventuell  Alkohol- 
ersatz eines  Teiles  des  Wassers. 


Ich  habe  im  vorhergehenden  die  Oxydationsprodukte  des  Häma- 
teius  rein  praktisch  als  Di-,  Tri-,  Tetra-  etc.  Oxyhämateine  benannt 
und,  wie  gesagt,  vorläufig  ganz  willkürlich  die  Sache  so  betrachtet, 
als  ob  2  bis  6  Wasser stoifatome  des  Hämateins  oxydiert  würden, 
indem  die  1  bis  3  Sauerstoffatome  verbraucht  würden,  gleichviel  ob 
wirklich  2  Wasserstoffatome  als  Wasser  wegoxydiert  würden  (wie 
das  bei  der  Hämateinbildung  aus  dem  Hämatoxylin  geschieht),  oder 
ob  vielleicht  Hydroxylierung  eines  Wasserstoffatoms  durch  Einführung 
des  Sauerstoflatoms  erfolgte.  Sobald  wir  nämlich  über  das  Häma- 
tein  hinausgehen ,  wußten  wir ,  bisher  wenigstens ,  nichts  genaueres 
über  die  Natur  und  Konstitution  der  Oxydationsprodukte  anzu- 
geben. In  den  letzten  Jahren  sind  wir  aber  durch  die  Arbeiten 
von  Perkin  und  Yates,'^  welche  mir  nicht  zugänglich  waren,  und 
durch  die  Arbeiten  von  St.  v.  Kostanecki  und  Lampe  ,  sowie  von 
BoLEiNA,  V.  KosTANECKi  uud  J.  Tambor  u.  a.  Über  die  Konstitution 
und  den  Abbau  des  Brasilins  und  des  mit  demselben  so  eng  ver- 
wandten Hämatoxylins  sehr  viel  genauer  unterrichtet  worden.  Wer 
die  hierher  gehörige  fachchemische  Literatur  studiert,  wird  an 
der  Hand  der  da  angegebenen  Daten  leicht  sehen ,  daß  es  mehrere 
tatsächlich  vorhandene  Möglichkeiten  zum  Unterbringen ,  resp.  zum 
Verbrauche  von  3  (und  auch  mehr)  Sauerstoffatomen  gibt,  wie  ich 
es  oben  angenommen  hatte.  Sei  es  nun  Hydroxylierung  oder  Weg- 
oxydation von  Wasserstoff",  eventuell  mit  Doppelbindung  oder  Ring- 
schließung, sowie  auch  Kondensation  oder  Verkettung  von  zwei  oder 


1)  Eigentlich  0-314. 

2)  Eigentlich  0-355  g. 

*)  Proced.  ehem.  Soc.  vol.  XVI,  1900. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    83 

mehreren  Farbstoffmolekülen,  mit  oder  ohne  Beteiligung-  von  Metallsalz- 
molekülen. Was  speziell  die  höheren  Oxydationsprodukte  betrifft, 
würde  es  mich  nicht  überraschen,  wenn  Ringbildung  oder  Verkettung 
von  mehreren  Farbstoffmolekülen  gefunden  werden  sollte. 

Die  eigentümlich  verlangsamte  Lackbildung ,  welche  besonders 
bei  Farbstofflösungen  auftritt,  welche  einige  Zeit  (ohne  Nachoxyda- 
tion) gestanden  hatten,  könnte  auf  eine  also  temporär  verminderte 
Reaktionsfähigkeit  hindeuten.  Ebenso  ist  die  Möglichkeit  der  Kon- 
densation bei  der  Lackbildung  in  der  Lösung  und  insbesondere  bei 
der  Fixierung  des  Farblackes  in  den  Geweben  zu  denken ;  auch  das 
mit  der  Zeit  selbst  in  ganz  gefüllten ,  wohl  verschlossenen  (aus- 
gedampften) Flaschen  auftretende  Unlöslichwerden  eines  Teiles  des 
Farblackes  ^  könnte  dafür  sprechen.  Besonders  mache  ich  auf  das 
Phänomen  aufmerksam,  daß  alle  Chromalaunhämatein-  und  Oxyhäma- 
teinlacke  in  der  Lösung  blauviolett ,  resp.  tiefblau  erscheinen ,  im 
Gewebe  fixiert  vielfach  ganz  schwarz  färben. 

Weiter  sich  in  Vermutungen  zu  ergehen,  hat  vorläufig  (für  mich) 
keinen  Zweck;  der  Möglichkeiten  sind  eben  viele.  Eine  Diskussion 
an  der  Hand  der  Konstitutionsformeln  hat  imr  Wert  für  das  Auf- 
suchen von  Direktiven  für  eine  genaue  quantitative  chemische  Unter- 
suchung der  besprochenen  Verhältnisse.  Von  großem  Wert  wäre 
jedenfalls  die  Elementaranalyse,  u.  a.  die  Bestimmung  der  Anzahl 
Metallatome  in  den  Farblacken  der  Eisen-  und  Chromverbindungen 
im  Verhältnis  zur  Anzahl  der  Hämatoxylin-  resp.  Hämatei'nmoleküle. 
Man  bekäme  dann  etwas  festeren  Boden  unter  den  Füßen  für  theore- 
tische Deduktionen.  Es  ist  natürlich  sehr  wohl  möglich ,  daß  schon 
in  der  technischen  Literatur  derartige,  mir  nicht  auffindbare  Angaben 
vorliegen,  in  der  mir  zugänglichen  chemischen  Literatur  habe  ich 
solche  nicht  gefunden,  auch  wird  ja  selbst  in  den  speziell  farbchemi- 
schen Lehrbüchern  aus  der  neuesten  Zeit  angegeben,  daß  die  höheren 
Oxydationsprodukte  des  Hämatoxylins  nicht  genau  untersucht  wor- 
den sind. 

Es  ist  für  einen  Chemiker  selbstverständlich,  daß  das  meiste 
des  hier  Mitgeteilten  nicht  bloß  auf  das  Hämatoxylin  und  dessen 
Oxydationsprodukte,  sondern  auch  auf  das  so  eng  und  gleichartig 
konstituierte  Brasilin  und  dessen  Oxyderivate  angewendet  werden 
kann ,  wie  mir  auch  einige  hierher  gehörige  Versuche  bestätigt 
haben. 


Wh-d  durch  die  Ansäuerung  (Salzbildung)  verhindert. 


84    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

Durchgehend  aber  sind  die  Hämatoxylinfarben  den  Brasilinfarben 
für  mikroskopische  Zwecke  vorzuziehen,  u.  a.  weil  die  Hämatoxyline 
mehr  blau  resp.  blauschwarz  sind,  und  daher  optisch  den  mehr  roten 
Brasilinderivaten  vorzuziehen  sind.  Durch  Berücksichtigung  der  Diffe- 
renz im  Molekulargewicht  (und  der  Anzahl  der  Hydroxylgruppen) 
lassen  sich  sehr  leicht  die  oben  angegebenen  Rezepte  auf  das  Bra- 
silin und  Brasilein  umrechnen. 


Es  war  (und  ist  noch)  meine  Absicht ,  die  methylierten 
Hämatoxyline  auf  ihr  färberisches  und  lackbildendes  Vermögen 
zu  untersuchen ,  weil  ich  aber  zu  spät  die  dazu  nötigen  Materialien 
bekommen  habe,  muß  ich  diese  Versuche  von  der  vorliegenden  Publi- 
kation ausschließen. 

Für  die  Ausarbeitung  der  in  dieser  Arbeit  mitgeteilten  Unter- 
suchungen habe  ich ,  soweit  möglich,  die  wichtigsten  fachchemischen 
Originalarbeiten  über  das  Hämatoxylin  studiert  und  den  größten 
Nutzen,  wenigstens  für  meine  eigene  Auffassung  der  hierhergehörigen 
Verhältnisse,  davon  gehabt.  Hatte  ich  doch  selbst  vor  Jahren  das 
Hämatoxylin  sowie  das  Hämatein  und  dessen  Farblacke  zuerst  aus 
den  chemischen  Lehrbüchern  kennen  gelernt,  und  ist  doch  die  Dar- 
stellung des  Hämateins  und  des  Hämateinammoniaks  schon  im  Jahre 
1842  von  0.  L.  Erdmamn  so  sorgfältig  beschrieben  worden,  wie  noch 
nicht  in  der  histologisch-mikrotechnischen  Literatur,  so  da:ß  Erdmanns 
Methode  der  Darstellung^  seitdem  in  den  größeren  chemischen  Hand- 
büchern steht,  von  den  späteren  Origiualabhandlungen  nicht  zu  reden. 


V.   Über  Ferricochenillelösung. 

Daß  Cochenille  mit  Eisenverbindungen  graue  resp.  schwarze 
Farbtöne  gibt ,  ist  den  Färbern  ja  längst  bekannt ,  daher  auch  die 
Warnung  vor  eisenhaltigem  Wasser  bei  der  Cochenillefärberei.  In  der 
Mikrotechnik  sind  diese  schwarzen  Cochenilleeisenlacke  von  A.  Spuler '^ 
verwertet,    welcher   besonders  eine  Stückfärbung  in  zwei  Stufen  an- 


^)  Oxydation  einer  ammoniakalischen  Hämatoxylinlösung  an  dem 
Luftsauerstoif  in  einer  flachen  Schale. 

-)  Enzyklopädie  der  mikroskopischen  Technik.  I.  Artikel  Coche- 
nille (1903),  p.  153—154. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösung-en  und  Cochenillefarblösungen.    85 

gegeben  hat ,  indem  erst  mit  einem  Cochenilleauszug  durchgefärbt 
und  dann  in  Eiseualauulösung  gebeizt  und  umgefärbt  wird.  Auch 
für  Schnitte  läßt  sich  diese  Methode  natürlich  verwenden.  Später 
hat  K.  Peter^  eine  abgeänderte  Spui.ERSche  Methode  benutzt,  um 
bei  sonst  schwarzer  Farbe  der  Kerne  etc.  die  Dotterkörner  rot- 
gefärbt zu  erhalten. 

Nun  habe  ich  nach  Analogie  der  von  mir  oben  beschriebenen 
Eisenalaunhämateinlösung  und  Chromalaunhämatei'nlösung  ein  paar 
Farblösungeu  hergestellt,  welche  ich  u.  a.  des  theoretischen  Ver- 
gleiches wegen  neben  der  Hämateinfärbung  besprechen  werde. 

Wässeriger  Cochenilleauszug  gibt  bekanntlich  mit  Eisenchlorid 
sowie  mit  Eisenalaun  schwarze  Fällungen.  In  Säuren  lösen  sich  diese 
schwarzen  Ausfällungen  wieder  auf. 

Es  läßt  sich  nun  ziemlich  leicht  eine  Ferricochenille- 
lösung  ausprobieren,  welche  Kerne  intensiv  schwarz  färbt,  ebenso, 
aber  schwächer,  die  übrigen  Bestandteile  in  schwarzer  bis  grauer 
Farbe. 

Ich  benutze  seit  längerer  Zeit  mit  Erfolg  unten  beschriebene 
Lösung: 

Ferriammonium  Sulfat  (Eisenalaun)  8  g  wird  aufgelöst  in 
destill.  Wasser  250  g,  Cochenillepulver  5  bis  10  g  wird  darin 
sorgfältig  verteilt  (es  färbt  sich  die  Cochenille  sogleich  ganz  schwarz), 
und  15  cc  einer  lOprozentigen  Schwefelsäurelösung  werden  zugesetzt; 
man  erhitze  unter  Umrühren  zum  Kochen  und  lasse  cirka  15  bis 
20  Minuten  sieden,  indem  man  das  abgedampfte  Wasser  von  Zeit 
zu  Zeit  ersetzt;  nach  10  Minuten  Kochen  werden  wieder  10  cc  der 
lOprozentigen  Schwefelsäure  zugesetzt,  so  daß  im  ganzen  25  cc 
lOprozentige  Schwefelsäure  zugefügt  worden  sind. 

Die  Farblösung  wird  abfiltriert  und  soll  ganz  dunkelbraun  bis 
schwarzbraun  sein.     Die  Lösung  ist  sehr  haltbar. 

Man  färbt  Schnitte  aus  beliebigem  Material  darin  5  bis  10  Mi- 
nuten, eventuell  mit  Erwärmung  der  Lösung;  spült  ab  mit  destil- 
liertem Wasser,  gewöhnliches  Leitungswasser  kann  nach  Belieben  zur 
Nachbehandlung  verwendet  werden,  die  Farbe  wird  dadurch  vielleicht 
etwas  besser  fixiert. 

Gewöhnlich  braucht  man  nicht  zu  differenzieren ,  aber  in  ver- 
dünnten Säuren  (2-  bis  4prozentige  Essigsäure  langsam  oder  1  bis  2  bis 


1)  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXI,  1904,  p.  314—320  (Eine  neue 
Dotterfärbung),  Jan.  1905. 


86    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

öpromillige    Schwefelsäure    schneller)    erzielt    man   jeden    beliebigen 
Grad  von  Kernfärbung. 

Auch  als  Stückfärbung  läßt  sie  sich  sehr  gut  verwenden. 
Man  färbt  alsdann  3  bis  4  bis  5  Tage  (oder  länger)  in  der  Lösung; 
Auswaschung  in  destilliertem  Wasser,  dann  Härten  in  Alkohol  steigen- 
der Konzentration  etc.  Vorzugsweise  sind  die  Kerne  ganz  schwarz 
gefärbt,  aber  auch  Plasma  und  die  übrigen  Gewebsbestandteile  haben 
feine  graue  Töne  erhalten;  so  stark  plasmafärbend  wie  Eisenhäma- 
tein  ist  sie  lange  nicht,  deswegen  eignet  sie  sich  besonders  für  Stück- 
färbung. 

Das  Eisensalz  muß  eine  Fe  r  riverbin  düng  sein;^ 
dies  läßt  sich  leicht  demonstrieren. 

Kocht  man  z.  B.  Cochenillelösung  mit  einer  Lösung  von  Ferro- 
ammoniumsulfat,  welcher  sicher  keine  Ferriverbindungen  enthält, 
so  bekommt  man  nur  purpurrote  Farbe  der  Mischung;  sehr  ähnlich 
der  Alauncochenille  unter  sicherem  Ausschluß  von  Sauerstoif  färbt 
diese  Ferrocochenillelösung  ganz  purpurrot,  analog  einer  Alauneoche- 
nille ,  läßt  man  aber  die  also  roten  Sclmitte  in  sauerstoffhaltigem 
Wasser  liegen,  so  changiert  die  Farbe  nach  und  nach  in  grau  bis 
schwarz  (Kerne).  Erst  werden  die  Kerne  schwarz ,  dann  folgt  das 
Plasma,  während  das  Bindegewebe  sich  etwas  länger  rot  hält. 

Wird  eine  Spur  von  oxydierender  Substanz  in  die  Lösung  ge- 
bracht, so  tritt  mit  dem  Ferrisalz  sogleich  die  graue  bis  schwarze 
Färbung  ein. 

Auch  der  umgekehrte  Versuch  läßt  sich  machen.  Tropft  man 
eine  Iprozentige  Oxalsäurelösung  zu  der  schwarzbraunen  Ferricoche- 
nillelösung  (warm),  so  verwandelt  sich  nach  und  nach  das  Ferrisalz 
in  Ferrosalz;  sobald  diese  Umwandlung  vollständig  ist, ^  ist  die 
Flüssigkeit  jetzt  ganz  rotfarbig  geworden  und  färbt  die 
Schnitte  (aus  sauerstoif  freiem  Wasser)  auch  rot,  wie  oben  beschrieben; 
bei  Gegenwart  von  sauerstoffhaltigem  Wasser  geht  die  Farbe  wieder 
in  schwarz  über. 

Oxydationsmittel  verwandeln  natürlich  die  also  durch  Oxalsäure 
reduzierte  rote  Ferrocochenille  wieder  in  schwarze  Ferricocheuille. 
Dieser  Versuch  läßt  sich  vielfach  variieren. 

Vermischt  man  ausgekochte  Alaun  ■'  cochenillelösung  mit  gleichen 


^)  Im  Gegensatz  zum  Eisenhämatein. 

■-)  Ein  kleiner  Überschuß  an  Oxalsäure  ist  vorteilhaft   um  die  Luft- 
oxydation zu  neutralisieren. 
■')  Tonerdealaun. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hiimateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.    87 

Teilen  einer  gleicbprozeutigen,  sicher  ferrisalzfreien  Lösung  von  Eisen- 
sulfat ^  (oder  MoHRS  Salz),  so  färben  sich  bei  Sauerstoffausschluß  die 
Schnitte  nur  rot  oder  purpurn,  wie  bei  der  Alauncochenille  üblich,  beim 
geringsten  Zusatz^  aber  von  oxydierender  Substanz  (z.  B.  Gegenwart 
von  Chromaten  oder  Chromichromat)  wird  die  Färbung  aber  gleich 
schwärzlich,  —  hier  zuerst  das  Plasma,  während  sich  die  Kerne  länger 
rotviolett  halten.  Letzteres  Verhalten  beruht  natürlich  darauf,  daß 
sich  der  violette  oder  purpurne  Tonerdecochenillelack  in  die  Kerne 
lokalisiert  hat,  und  daß  er  erst  nachträglich  durch  den  Ferrilack  ver- 
drängt werden  soll;  in  dem  zuerst  erwähnten  Versuche,  wo  nur 
Eisenbeize  vorhanden  war,  müßten  natürlich  die  Kerne  ihrer  Affinität 
entsprechend  zuerst  die  Ferrisalze  aufspeichern  und  so  zuerst  und 
am  stärksten  schwarz  werden.'^  Es  ist  für  das  Gelingen  dieser  Ver- 
suche notwendig,  unter  peinlichstem  Ausschluß  des  Sauerstoffs  von 
den  Ferroverbindungen  zu  arbeiten. 


VI.    Chromalauncochenille. 

Eine    ziemlich    gut   verwendbare  Chromalauncochenille  läßt- sich 
leicht  herstellen: 


ö 


Chromalaun o  g 

Destilliertes  Wasser 200  „ 

Cochenille 10  ,, 

werden  15  bis  20  Minuten  gekocht,  indem  das  abgedampfte  Wasser 
immer  ersetzt  wird,  eventuell  kann  etwas  (5  cc  lOprozentige  H.,  SO^) 
zugefügt  werden. 

Man    erhält   nach  der  Filtrierung  eine  dunkelgraublaue  Lösung, 
welche  Kerne    tief   graublau   färbt ,    während  das  Plasma  sich  mehr 


^)  Eventuell  mit  einem  ganz  kleinen  Oxalsäuregehalt. 

'^)  Die  gewöhnlichen  wässerigen  Lösungen  von  Eisenoxydulsalzen  ent- 
halten ja  immer  etwas  Ferrisalz,  ohne  besondere  Vorsichtsmaßregeln  würde 
also  auch  gewöhnliche  Eisensulfatlösung  die  roten  Cochenillefarben  schwarz 
färben. 

^)  Ganz  analog  dem  hier  Gesagten  erklärt  sich  also  Peteks  Kot- 
bleiben der  Dotterkörner  beim  schwarzen  Färben  der  Kerne.  Der  wässe- 
rige Cochenilleauszug  ist  wahrscheinhch  in  den  Dotterkörnern  stärker 
gebunden  als  in  den  (nicht  gebeizten)  Kernen;  kommt  jetzt  Eisenalaun- 
lösung hinzu,  so  findet  die  Lackbildung  in  den  Kernen  und  also  auch  die 
Umlarbung  viel  leichter  statt  als  in  den  Dotterkörnern ,  deren  Affinitäten 
schon  besser  durch  die  Cochenille  abgesättigt  waren. 


88    Hansen:  Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXII,  1. 

grau  färbt.  Besonders  für  Dur  clif  ä  rbuug  eignet  sich  diese  Farb- 
lösuug  sehr  gut;  sie  ist  vorwiegend  kernfärbend.  Schnitte  färbe  man 
entweder  stundenlang  oder  erwärme  die  Farblösung;  wünscht  man 
stärker  diftuse  Färbung,  setze  man  2  g  Kaliumacetat  hinzu  und  koche 
die  Lösung,  oder  man  füge  dem  jedesmal  zu  gebrauchenden  Quantum 
ein  wenig  Ammoniak  hinzu,  5  bis  8  Tropfen  einer  25prozentigen  Ammo- 
niaklösung auf  200  cc  Farblösung  genügen,  aber  durch  etwas  Thymol- 
zusatz  muß  man  alsdann  diese  ammoniakhaltige  Lösung  vor  Schimmel- 
bildung schützen. 

Schnitte  in  der  Chromalauncochenillelösung  gefärbt  werden  mit 
^1^  pro  Mille  Bichromaskalicuslösung  behandelt  schwarz. 
2  pro  Mille  Ur annitratlösung  bewirkt  ebenso  erst  schwarze,  her- 
nach grünschwarze  bis  dunkelgrüne  Farbe  der  Schnitte.  Übrigens 
glaube  ich  nicht,  daß  diese  Farblösung  je  besondere  praktische  Be- 
deutung erlangen  wird,  weil  wir  andere  bessere  Lösungen  besitzen; 
ich  habe  sie  auch  nur  deswegen  erwähnt,  weil  sie  für  die  Chrom- 
cochenillelackbildung interessant  ist. 

Der  Chromidcochenillelack  bildet  sich  nämlich  nur  leicht  beim 
Kochen  der  Chromalaunlösung  mit  dem  Cochenillepulver,  bei  niedri- 
gerer (also  auch  gewöhnlicher)  Temperatur  bekommt  man  eine  schar- 
lachrote Lösung  der  Cochenille  in  Chromalaunlösung,  welche  die  Kerne 
rot  färbt,  auch  die  roten  Blutkörperchen  stark  etc.;  erst  beim  Er- 
hitzen der  Schnitte  in  der  Farblösung  bis  zum  Kochen^  sieht  man 
die  rote  Farbe  in  dunkelgraublaue  umschlagen,  ganz  wie  im  Ton  der 
gebildeten  Chromidcochenillelacke. 

Nun  ist  es  bekannt,  daß  man  gelegentlich  bei  Alauncochenille- 
stückfärbung von  Material ,  welches  in  Chromaten  fixiert  wurde ,  oft 
z.  B.  die  glatte  Muskulatur  (auch  Schleim  ab  und  zu)  mit  violettroten 
Kernen  und  graublauem  Plasma  gefärbt  erhält,  daß  also  eine  ganz 
hübsche  Metachromasie  vorliegen  kann.  Nach  der  Farbe  der  Chromid- 
cochenillelacke zu  urteilen,  und  da  bekanntlich  die  glatte  Muskulatur 
nicht  wenig  Chromidhydroxydverbindungen  zu  binden  vermag  (so  sieht 
sie  an  den  in  Chromalaun  gebeizten  Stücken  ganz  graugrün  aus),  ver- 
mute ich  daher,  daß  diese  „Metachromasie"  auf  die  durch  die  lange 
Stückfärbedauer  bewirkte  Bildung  von  Chromidcochenillelack  statt  der 
Tonerdecochenillelack  beruht. 


^)  Hat  natürlich  nur  experimentelle  Bedeutung. 


XXII,  1.  Hansen:  Über  Hämateinlösnngen  und  Coclienillefarblösungen.    89 

Literaturverzeichnis. 

(Die  allgemeine  chemische  Literatur  ist  nicht  angeführt.) 

I.   F achchemische  Literatur. 

1)  Erdmann,  0.  L. ,  Über  das  Hämatoxylin  (Journ.  f.  prakt.  Chemie 
Bd.  XXVI,  1842,  p.  193-216  [Grundlegendes  Werk]). 

2)  Ref.  desselben  in:  Annalen  der  Chemie  und  Pharmacie,  herausg. 
von  WÜHLER  u.  Liebig.    Bd.  XLIV,  1842,  p.  292—296. 

3)  Handwörterbuch  der  reinen  und  angewandten  Chemie  von  Liebig, 
PoGGENDORFF  u.  WÜHLER.  Bd.  III,  1848,  Artikel:  Hämatein  und  Häma- 
toxylin, p.  757—762. 

4)  Erdmann,  0.  L.,  Vermischte  Mitteilungen.  7.  Über  das  H.ämatoxylin 
(Journ.  f.  prakt.  Chemie  Bd.  LXXV,  1858,  p.  218—224). 

5)  Hesse  ,  0. ,  Über  das  Hämatoxjdin  (Ann.  d.  Chemie  u.  Pharmacie 
Bd.  CIX— CX,  1859,  p.  332—341). 

6)  Beim,  F.,  Über  das  Hämatoxylin  (Ber.  d.  deutsch,  ehem.  Ges.  1871, 
p.  329—334). 

7)  Hummel,  J.  J.,  u.  Perkin,  A.  G.  ,  Über  einige  neue  Verbindungen 
des  Hämateins  und  Brasileins  (Ber.  d.  deutsch,  ehem.  Ges.  1882,  p.  2337 
— 2347  [u.  a.  eine  einfache  Darstellungsmethode  des  Hämateins]). 

8)  Erdmann,  E.,  u.  Schultz,  G.,  Über  das  Hämatoxylin  und  Hämatein 
(Ann.  d.  Chemie  u.  Pharmacie  Bd.  CCXVI,  1883,  p.  232—240). 

9)  NiETZKi,  R. ,  Chemie  der  organischen  Farbstofie.  2.  Aufl.  Berlin 
1894.     3.  Aufl.  1897.     4.  Aufl.  1901. 

10)  RuPE,  H.,  Chemie  der  natürlichen  Farbstoffe.    Braunschweig  1900. ' 

11)  HuJLMEL,  J.  J.,  u.  Knecht,  E. ,  Die  Färberei  und  Bleicherei  der 
Gespinstfasern.     2.  Aufl.     Berlin  1891. 

12)  Kostanecki  ,  St.  v.  ,  Lampe  ,  V. ,  Studien  über  das  Brasilin  (Ber. 
d.  deutsch,  ehem.  Ges.  1902,  Bd.  11,  p.  1667—1674). 

13)  BoLLiNA,  E, ,  Kostanecki,  St.  v. ,  Tambor,  J. ,  Studien  über  das 
Brasilin  (Ber.  d.  deutsch,  ehem.  Ges.  1902,  Bd.  II,  p.  1675—1679). 

14)  Kostanecki,  St.  v.  ,  Rost,  A.  ,  Naphthalin  aus  Umwandlungspro- 
dukten des  Hämatoxylins  (Ber.  d.  deutsch,  ehem.  Ges.  1903,  Bd.  II,  p.  2202 
— 2206;  vgl.  auch  ein  paar  andere  Artikel  daselbst  von  v.  Kostanecki). 

15)  Perkin,  W.  H.  jun.,  Über  den  Abbau  des  Brasilins  (Ber.  d.  deutsch, 
ehem.  Ges.  1902,  Bd.  III,  p.  2946—2947). 

16)  Herzig,  J.,  u.  Pollak,  J.,  Über  Brasilin  und  Hämatoxylin  (Ber.  d. 
deutsch,  ehem.  Ges.  1903,  Bd.  I,  p.  398—400). 

17)  Herzig,  J.  ,  u.  Pollak,  J.  ,  Brasilin  und  Hämatoxylin  (ibid.  1903, 
Bd.  II,  p.  2319-2320). 

18)  Herzig,  J.,  u.  Pollak,  J.  ,  Über  Brasilin  und  Hämatoxjiin  (ibid. 
1903,  Bd.  IV,  p.  3713—3715). 

II.    Mikro technische  Literatur  (nur  eine  Auswahl). 

1)  Benda,  C,  Über  eine  neue  Färbemethode  des  Zentralnervensystems 
und  Theoretisches  über  Häraatoxylinfärbungen  [Eisenhämatoxylin]  (Arch.  f. 
Anat.  u.  Physiol.,  Physiol.  Abt.,  1886,  p.  562—564). 


90    Hansen:   Über  Hämateinlösungen  und  Cochenillefarblösungen.  XXIl,  1. 

2)  Mayer,  P.,  Über  das  Farben  mit  Hämatoxylin  (Mitteil.  d.  zool. 
Stat.  Neapel  Bd.  X,  1891,  p.  170 — 18G  [macht  auf  das  Hämatein  auf- 
merksam]). 

3)  Heidenhain,  M.  ,  Neue  Untersuchungen  über  Zentralkörper  (Arch. 
f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  XLIII,  1894  [s.  p.  431—432,  Eisenhämatoxylin]). 

4)  Benda,  C,  Zellstrukturen  und  Zellteilungen  des  Salamanderhodens 
(Verb.  d.  anat.  Ges.,  VH.  Vers.  Göttingen  1893,  p.  1(51— 165  [Eisenhäma- 
toxybnj). 

5)  Hansen,  Fr.  C.  C. ,  Eine  schnelle  Methode  zur  Herstellung  des 
Böhmer  sehen  Hämatoxylins  (Zool.  Anz.  No.  473,  1895,  Febr.  [Das  quan- 
titative Verfahren  bei  der  Oxydation  des  Hämatoxylins  in  Hämatein]). 

G)  Mayer,  P.,  Über  Hämatoxylin,  Karmin  und  verwandte  Materien 
(Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie  Bd.  XVI,  1899,  p.  196-220). 

7)  Janssens  et  Leblanc,  Recher  dies  cytologiques  sur  la  cellule  de 
la  levure  (La  Cellule  t.  XIV,  1898);  Ref.  in  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk. 
Bd.  XV,  p.  264  (hematoxyline  noire). 

8)  Mayer,  P.,  Beruht  die  Färbung  der  Zellkerne  auf  einem  chemischen 
Vorgang  oder  nicht?  (Anat.  Anz.  Bd.  XIII,  1899,  p.  313—322). 

9)  Lee  U.Mayer,  Grundzüge  der  mikroskopischen  Technik.  2.  Aufl.  1901. 

10)  Lee  et  Henneguy,   Traite   des  methodes  techniques  de  l'anatomie 
microscopique.     Paris  1896. 

11)  Enzyklopädie  der  mikroskopischen  Technik  Bd.  I — II.    Berlin  1903. 
(Verschiedene  Artikel.) 

12)  Weigert,  K.,  Eine  kleine  Verbesserung  der  Hämatoxylin-  van  Gieson- 
Methode  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXI,  1904,  p.  1—5). 

13)  ScHULTZE,  0.,  Über  Stückfärbung  mit  Chromhämatoxylin  (Zeitschr. 
f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXI,  1904,  p.  5—9). 

14)  Peter,  K.,  Eine  neue  Dotterfärbung  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk. 
Bd.  XXI,  1904,  p.  314—320). 

Kopenhagen,  9.  März  1905. 

[Eingegangen  am  30.  März  1905.] 


XXII,  1.  Rüzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  91 


[Aus  dem  k.  k.  hygienischen  Institut  des  Prof.  Dr.  Gust.  Kabrhel  in  Prag.] 

Zur  Theorie  der  vitalen   Färbung. 

Von 
Dr.  Tlaflislav  Rüzicka, 

Institut  sassistent . 

Durch  eine  ausgedehnte  Versuchsreilie  ist  es  mir  gelungen ,  in 
dem  tinktoriellen  Verhalten  des  lebenden  und  toten  Protoplasmas 
eine  Differenz  nach  der  Richtung  hin  zu  eruieren ,  daß  sich  das 
lebende  rot,  das  tote  aber  blau  färbt,  wenn  man  ihm  ein  äquimole- 
kulares Gemisch  von  Neutrah-ot  und  Methylenblau  vorsetzt. 

Die  Methode  gestaltet  sich  folgendermaßen : 

Man  mischt  0'05prozentige  Lösungen  von  Neutralrot  und  Methylen- 
blau medic.  Höchst  in  destilliertem  Wasser  zu  gleichen  Teilen.  Von 
dem  Gemisch  tropft  man  auf  gut  gereinigte  Objektträger  und  läßt 
die  Tropfen  bei  35^  C.  im  Trockenschrank  verdampfen.  Auf  die 
angetrocknete  Farbschicht  bringt  man  sodann  das  Objekt  in  dem 
für  dasselbe  isotonischen  Medium,  das  hiermit  zugleich  als  Lösungs- 
mittel des  Färbegemisehes  dient. 

Die  verwendeten  Farbstoffe  sind  beide  basischen  Charakters, 
ihre  Konstitution  ist,  wie  aus  den  nachstehenden,  Pappenhedis  Farb- 
chemie (St.  381  lind  376)  entnommenen,  Formeln  zu  ersehen  ist, 
sehr  analog. 


CeH3N(CH3).3 
N(^  ^N  Mol.  Gewicht  252-53  Neutralrot. 

C^H,— NH., 

\ 
GH, 

C«.H,N(CH3), 


CeH3  =  N(CH3)., 


Nl^  ;S  Mol.  Gewicht  284-36  Methylenblau. 


92  Ruzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  XXII,  1. 

Infolge  dieses  ümstandes  erscheint  das  elektive  Verhalten  der 
beiden  Farbstoife  sehr  interessant,  und  zwar  um  so  mehr,  als  keine 
zwingenden  Gründe  vorhanden  sind,  um  bei  denselben  ein  verschie- 
denes Molekularvolumen  anzunehmen. 

Es  ist  im  Interesse  der  Theorie  der  Färbung  sicherlich  wichtig, 
ein  klares  Bild  Aon  den  Vorgängen,  welche  bei  Anwendung  meiner 
Methode  die  Färbung  ermöglichen,  zu  erhalten. 

Dies  werde  ich  nun  hier  zu  entwerfen  trachten.  Wie  die  Er- 
kenntnis dieser  Vorgänge  das  tiefere  Eindringen  in  die  Struktur- 
unterschiede zwischen  dem  lebenden  und  toten  Protoplasma  zu  fördern 
vermag,  habe  ich  an  einer  anderen  Stelle   dargelegt.^ 

Um  eine  leichtere  Analyse  dieser  Vorgänge  zu  ermöglichen, 
suchte  ich  den  Färbungsakt  in  seinen  Hauptkomponenten: 

1)  Dem  Eindringen  des  FarbstotFes  in  die  Zelle  und 

2)  der    (sei    es    physikalischen    oder    chemischen)    Bindung    des 
Farbstoftes  in  der  Zelle 

näher  zu  erfassen. 

Hierbei  ging  ich  von  der  Voraussetzung  aus ,  daß  sich  die 
lebende  Substanz  in  mehr  oder  minder  flüssigem  Zustande  befindet 
und  aus  zwei  Schichten  von  verschiedener  Dichte ,  einer  äußeren 
dichteren  imd  einer  inneren  flüssigeren,  besteht.  Denkt  man  sich 
eine  derartig  zusammengesetzte  Zelle  von  einer  Flüssigkeit  umgeben, 
so  wird  sich  ihre  Außenschicht  den  von  derselben  getrennten  Flüssig- 
keiten (d.  h.  dem  Medium  und  der  Innenschicht)  gegenüber  wie  eine 
Membran  verhalten.  Die  physikalischen  Eigenschaften  dieser  Membran 
werden  für  den  Austausch  der  durch  dieselbe  getrennten  Flüssig- 
keiten entscheidend  sein. 

Da  es  sich  in  meinem  Falle  darum  handelt,  nur  das  Verhalten 
von  basischen  Farbstoffen  zu  prüfen,  so  kann  der  Umstand,  daß  die 
vorliegende  Membran  nicht  für  alle  Stoffe  permeabel  ist  (da  mit 
Ausnahme  von  Methylorange  und  der  Tropäoline  00  und  000  keine 
saueren  Farbstoffe  dieselbe  zu  durchdringen  vermögen) ,  vernach- 
lässigt werden. 

Somit  nehmen  wir  die  Membran  als  unveränderlich  und  für 
wässerige  Lösungen  basischer  Anilinfarbstoffe  durchgängig  an ,  wo- 
durch der  vorliegende  Fall  auf  seine  einfachsten  Bedingungen  zu- 
rückgeführt erscheint. 


1)  Siehe   meine   Arbeit   „Über  tinktorielle  Diff'erenzen   zwischen  leben- 
dem und  abgestorbenem  Protoplasma"  (Pflügers  Arch.  1905). 


XXII,  1.  Ruzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  93 

Dies  alles  angenommen ,  haben  wir  einen  Fall  vor  uns ,  in 
welchem  die  Färbung  nach  den  Gesetzen  der  einfachen  Ditfusion 
vor  sich  gehen  sollte.  Daß  die  Diffusion  gelöster  Stolfe  in  Colloiden 
mit  derselben  Geschwindigkeit  vor  sich  geht  wie  in  wässerigen  Lö- 
sungen, hat  bereits  Graham  (1862)  bewiesen. 

Diesen  Gesetzen  gemäß  werden  Farbstofflösungen  mit  einer 
Schnelligkeit  aufgenommen,  welche  der  Konzentration  der  Lösungen 
proportional  und  von  der  Reibung  der  Farbstoffmoleküle  abhängig 
ist.  Die  Diffusion  dauert  solange ,  bis  die  Konzentrationen  der  zu 
beiden  Seiten  der  Membran  befindlfchen  Flüssigkeiten  ausgeglichen 
sind.  Bei  einem  elektrolytisch  vollkommen  dissoziierten  Färbegemische, 
wie  es  in  unserem  Falle  vorliegt,  müßte  schließlich  die  Lösung  zu 
beiden  Seiten  der  Membran  gleich,  d.  h.  im  Mischtone,  also  violett, 
gefärbt  erscheinen. 

3Iit  Hinblick  darauf  ist  es  klar,  daß  die  Ergebnisse  meiner 
Versuche  die  angedeutete  einfache  physikalische  Deutung  nicht  zu- 
lassen; denn  das  Gemisch  müßte  mit  derselben  Geschwindigkeit 
diffundieren,  wie  die  dasselbe  zusammensetzenden  Einzellösungeu. 
Dies  tritt  jedoch  nicht  zutage,  denn  die  lebenden  Zellen  entnehmen 
dem  Gemische  nur  die  rote,  die  toten  nur  die  blaue  Farbe. 

Diese  mit  aller  Sicherheit^  konstatierte  Tatsache  gestattet  eine 
zweifache  Deutung : 

1)  Beide  Farbstoffe  dringen  in  die  Zelle  ein,  docli  unterliegt 
der  eine,  je  nach  Leben  oder  Tod  der  Zelle,  chemischen  Umwand- 
lungen, so  daß  stets  nur  der  zweite  zum  Ausdruck  gelangt. 

2)  Das  Methylenblau  kann  in  die  lebende  Zelle  nicht  eindringen, 
weil  sich  dem  Durchtritte  seines  Moleküls  durch  die  Zeilaußenschicht 
ein  für  seinen  Partiärdruck  unüberwindlicher  Widerstand  ent- 
gegenstellt. 

Der  zweiten  Deutung  gemäß  müßte  man  dafürhalten,  daß  die 
Außenschicht  der  lebenden  Zelle  nur  dem  Neutralrotmolekül  form- 
adäquate Poren  besitze ,  und  daß  dieselben  erst  durch  den  Tod 
der  Zelle  eine  auch  für  das  Methylenblaumolekül  formadäquate 
Gestaltung  erfahren. 

Es  leuchtet  jedoch  ein ,  daß  —  wenn  diese  Deutung  richtig 
wäre  —  die  definitive  Färbung  der  (toten)  Zelle  wiederum  violett 
sein  müßte.  Sie  ist  jedoch  rein  blau.  Nur  Bakterien  und  Hypho- 
myceten    lassen   sowohl    während    des   Lebens ,    als    auch    nach   dem 


^)  Siehe  diesbezüglich  meine  oben  citierte  Arbeit. 


94  Rüzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  XXII,  1. 

Tode  eine  violette  Färbung  erkennen.  Doch  tritt  auch  bei  ihnen 
der  Unterschied  zutage ,  daß  intra  vitani  die  rote ,  post  mortem  die 
blaue  Farbe  entschieden  überwiegt,  so  daß  man  —  wollte  man  diese 
Tatsache  durch  einfache  Diffusion  erklären  —  zu  mindestens  suppo- 
uiereu  müßte ,  daß  der  Durchtritt  des  Methylenblaus  durch  die 
Bakterien-  und  Hyphomyceteumembrau  intra  vitam  erschwert  er- 
scheint. Diese  Erschwerung  der  Diifusion  würde  aber  einer  physi- 
kalischen Erklärung  große  Schwierigkeiten  bereiten. 

Es  ist  außerdem  hinlänglich  bekannt,  daß  das  Methylenblau 
auch  bei  der  gewöhnlichen  Verwendungsweise  lebende  Zellen  sehr 
gut  färbt,  so  daß  jede  Annahme  eines  Widerstandes,  den  ihre  Außen- 
schicht dem  Methylenblaumolekül  entgegensetzen  sollte,  hinfällig  wird. 
Dasselbe  gilt  auch  von  den  Bakterien.  Milzbrandbazillen,  die  ich  in 
einem  Bouillontropfen  auf  eine  trockene  Methylenblauschicht  brachte 
und  auf  diese  Weise  gefärbt  habe,  übertrug  ich  aus  dem  Präparate 
nach  einer  halben  Stunde  auf  frischen  schrägen  Agar,  und  konnte 
sie  so  weiterzüchten. 

Der  Annahme  chemischer  Vorgänge  bei  meiner  vital-letalen  Fär- 
bung steht  der  Umstand  entgegen ,  daß  es  möglich  ist ,  sowohl  eine 
lebende,  wie  eine  tote  Zelle  singulär  ebeiiso  mit  dem  Neutralrot, 
als  mit  dem  Methylenblau  zu  färben.  Wie  könnte  man  da  annehmen, 
daß  die  differentielle  Tinktion :  Rotfärbung  der  lebenden  und  Blau- 
färbung der  toten  Zelle  aus  dem  Gemische  der  beiden  Farbstott'e, 
auf  einer  chemischen  Grundlage  zustande  kommt? 

Freilich  wird  die  Färbung  im  Tone  einer  konzentriertereu  Lö- 
sung vollendet ,  als  die  färbende  Flotte  war ,  und  dieser  Umstand 
wurde  von  manchen  als  ein  Zeichen  chemischer  Bindung  des  Farb- 
stoffes angesehen.  Daß  dies  nicht  immer  der  Fall  ist,  beweisen  die 
Versuche  von  Spiro.  ^  Doch  haben  seine  Schlüsse  nur  für  tote 
Gegenstände  Geltung. 

Immerhin  könnte  man  noch  einen  Deutungsversuch  im  Sinne 
der  physikalischen  Färbungstheorie  unternehmen,  indem  man,  Over- 
TONS  Beispiel  foFgend,  van  t'Hoffs  Theorie  der  festen  Lösungen 
und  das  sogenannte  Teilungsprinzip  Giorgieviczs  zu  Rate  ziehen 
würde. 

OvERTON-  hat  die  Behauptung  aufgestellt,  daß  die  Zellaußen- 
schicht    nur    dann    für  einen  Stoff  permeabel  sei,  wenn  er  in  einem 


^)  Über  physikalische  und  physiologische  Selektion.     Ötraßburg  1897. 
-)  Viertelj.  d.  naturf.  Vers,  in  Zürich.     XLIV.     1899. 


XXII,  1.  Rüzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  95 

Gemisch  von  Cholesterin ,  Lecithin  nnd  Protagon  löslich  ist.  Die 
genannten  Stoffe  sollen  in  der  Außenschicht  der  Zelle  stets  enthalten 
sein  und  haben  die  Eigenschaft,  sehr  große  Quantitäten  von  AVasser 
aufnehmen  zu  können.  Dieser  Umstand  erklärt  die  Durchlässigkeit 
der  Zellaußenschicht  für  das  Wasser. 

Applizieren  wir  nunmehr  das  eben  Angeführte  auf  den  Färbungs- 
akt ,  so  haben  Avir  erstens  zu  erwälnien ,  daß  sämtliche  basische 
Farbstoffe  in  Cliolesterin,  Lecithin  etc.  löslich  sind. 

Des  weiteren  habe  ich  anzuführen ,  daß  Overton  ursprünglich 
der  Ansicht  war ,  daß  die  Farbsalze  beim  Eindringen  in  die  Zellen 
durch  Hydrolyse,  infolge  der  Einwirkung  der  schwachen  Gewebs- 
säuren,  dissoziiert  werden  und  als  Basen  mit  den  Säuren  der  Zellen 
zu  Farbsalzen  zusammentreten.  Diese  chemische  Ansicht  vom  Färbe- 
akte hat  OvERTOx  nachher  ^  geändert  und  nimmt  nunmehr  an ,  daß 
in  vielen  Fällen  —  zu  welchen  auch  die  Färbungen  mit  Neutralrot 
und  Methylenblau  gehören  —  die  Farbstoffe  als  solche  in  die  Zelle 
aufgenommen  werden.  Ich  glaube  diese  Behauptung  bestätigen  zu 
können.  Die  Farbstoffe  gelangen  also  durch  Diffusion  in  die  Zelle. 
p]s  fragt  sich  nun,  auf  welche  Weise  sie  die  Färbung  im  Tone  einer 
kouzentrierteren  Lösung  vollbringen. 

Nach  Overton  wird  dies  durch  mechanische  Verteilung  des 
Farbstoffes  auf  die  Farbflotte  und  auf  das  zu  färbende  Objekt  be- 
werkstelligt. Der  Konzentrationsunterschied  des  Farbstoffes  stammt 
dalier,  daß  die  Substanz  der  gefärbten  Teile  für  den  Farbstoff  ein 
größeres  Lösungsvermögen  zutage  gelegt  hat ,  als  das  Wasser  der 
Farbflotte.  Wie  lichou  erwähnt,  schreibt  Overton  dieses  größere 
Lösungsvermögen  der  Gegenwart  von  Cholesterin,  Lecithin,  Protagon, 
Cerebrin  zu.  Zugunsten  dieser  Ansicht  führt  er  an,  daß  diese  Stoffe, 
wenn  sie  in  sehr  verdünnten  Lösungen  von  basischen  Farbstoffen 
suspendiert  werden,  die  Farbstoffe  an  sich  ziehen. 

Dies  ist  jedenfalls  ein  bemerkenswertes  Resultat.  Docli  gibt 
Overton  selbst  an ,  daß  er  nicht  zu  erklären  weiß ,  wie  es  kommt, 
daß  sich  in  Nervenfäden  zwar  die  Achsenzylinder,  nicht  aber  das 
Mark,  welches  doch  soviel  Protagon  enthält,  mit  Methylenblau  färben. 
Auch  dafür  bleibt  die  Erklärung  aus,  wieso  das  Methylenblau,  welches 
doch  in  lebende  Zellen  leicht  eindringt,  daselbst  keine  kräftige 
Färbung  entfaltet. 

Dem    habe    ich    noch    hinzuzufügen ,    daß    auch    die    intravitalen 


1)  Jahrb.  f.  wiss.  Botanik.    XXXIV.    1900. 


96  Rüzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  XXII,  1. 

Kernfärbungeu  auf  Grund  der  Annahme  Overtons  nicht  erklärt 
werden  können  5  einmal  treten  sie  ein,  das  andere  Mal  nicht ,  auch 
kann  die  einmal  erzielte  Kernfärbung  wieder  zurückgehen,  um  ent- 
weder nie  mehr  oder  später  wieder  von  neuem  aufzutreten.  Kann 
da  auch  ein  Cholesterin  etc.  -  Gehalt  zur  Erklärung  herangezogen 
werden  und  selbst  wenn  man  einen  Wechsel  desselben  annimmt? 

Es  scheint  also,  daß  die  Erklärung  Overtons  auf  allgemeine 
Gültigkeit  keinen  Anspruch  erheben  kann. 

Damit  will  ich  jedoch  keineswegs  bestreiten,  daß  die  Proto- 
plasmasubstanzen den  Farbstotfen  gegenüber  ein  großes  Lösungs- 
vermögen zutage  legen  können.  Es  geht  dies  ja  aus  meinen  eigenen 
Versuchen,  bei  welchen  Neutralrotfärbungen  lebender  Zellen  fast 
momentan  vollendet  wurden,  klar  hervor. 

Wollte  man  jedoch  das  Resultat  meiner  vital-letalen  Färbung 
nach  dem  Muster  von  Overton  bloß  auf  das  Teilungspriuzip  zurück- 
führen,   so  würde   man   auf  unüberwindliche  Schwierigkeiten   stoßen. 

Man  könnte  durch  dasselbe  wohl  vielleicht  die  singulären  Fär- 
bungen erklären.  Wollte  man  aber  das  Ergebnis  der  Färbung  mit 
meinem  Gemische  durch  das  Teilungsprinzip  erklären,  so  müßte  man 
vorerst  eine  Deutung  für  die  Tatsache  finden^  daß  durch  Anwendung 
meines  Gemisches  die  lebende  Zelle  nur  rot,  die  tote  nur  blau  ge- 
färbt wird,  wobei  im  letzteren  Falle  die  ganze  Farblösung  abgefärbt 
erscheint.  Ist  es  etAva  zulässig,  die  Annahme  aufzustellen,  daß  die 
lebende  Substanz  nur  für  das  Neutralrot,  die  tote  nur  für  das  Me- 
thylenblau Lösungsvermögen  aufweist  ?  Selbst  wenn  wir  keinen  andern 
naheliegenden  Einwurf  berücksichtigen  würden,  so  wäre  zu  bedenken, 
daß  bei  dieser  Annahme  der  SchlußefFekt  der  Färbung  sich  in  vio- 
letter Mischtinktion  kundgeben  müßte,  was  jedoch  nicht  der  Fall  ist. 

Ich  möchte  an  dieser  Stelle  auch  eines  schönen  Versuches  Er- 
wähnung tun,  der  auf  Hamburgers^  Veranlassung  von  Versteeg 
und  DE  Vries  ausgeführt  worden  ist.  Durch  Vergleichung  der  Ge- 
frierpunkterniedriguugen  einer  Farbstotf-  und  einer  Eiweißlösung  mit 
derjenigen  eines  Gemisches  der  beiden  konnte  eruiert  werden,  daß 
das  Neutralrot  mit  dem  toten  Eiweiß  keine  chemische  Verbindung 
eingeht,  während  das  Methylenblau  eine  solche  bildet. 


1)  Osmotischer  Druck  etc.  Bd.  III  (St.  423,  Anmerkung).  Dieser  Ver- 
such war  mir,  wie  ich  ausdrücklich  konstatiere,  zurzeit  der  Ausarbeitung 
meiner  eigenen  Versuche  noch  nicht  bekannt  und  bringe  ich  ihn  erst  hier 
mit  den  letzteren  in  Beziehung. 


XXII,  1.  Riizicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  97 

Dieses  Ergebnis  kann  mit  meinen  Versuchsresultaten  in  guten 
Einklang  gebracht  werden. 

Ich  habe  durch  Versuche,  in  welchen  ich  ganz  geringe  Quanti- 
täten Farbstoff  mit  lebenden  Zellen  in  Berührung  brachte ,  zeigen 
können,  daß  Zellen,  welche  das  Neutralrot  intra  vitam  aufgenommen 
Laben,  postmortal  diese  Färbung  abgaben,  während  Zellen,  welche 
intra  vitam  das  Methylenblau  nicht  aufgenommen  haben,  sich  post 
mortem  mit  demselben  färbten. 

Dieses  Resultat  wäre  im  Hinblick  auf  den  obigen  Versuch 
Hamburgers  dahinaufzufassen,  daß  in  der  letzteren  postmortalen 
Methy  len  blaufärb  ung  eine  chemische  Färbung  vor- 
liegt. Durch  diese  Annahme  erklärt  sich,  warum  in  den  Färbe- 
versuchen mit  meinem  Geraische  nie  eine  postmortale  Neutralrotfärbung 
zustande  kam ,  obwohl  das  Gemisch  äquimolekular  war.  Die  intra- 
vitale Abfärbung  des  Methylenblaus  ist  ja  auch  nicht  anders  auf- 
zufassen, als  ein  chemischer  Vorgang. 

Es  handelt  sich  nunmehr  noch  darum,  den  Charakter  der  vitalen 
Neutralrotfärbung  zu  beleuchten.  Aus  Hamburgers  Versuche  geht 
hervor ,  daß  bei  der  Neutralrotfärbung  des  toten  Eiweißes  keine 
chemische  Verbindung  zustande  kommt.  Die  Färbung  muß  also  durch 
physikalische  Vorgänge  von  statten  gegangen  sein.  Dies  lassen  meine 
Versuche  sehr  scharf  sehen.  Eine  während  des  Lebens  durch  Neutral- 
rot gefärbte  Zelle  entfärbt  sich,  während  sie  abstirbt.  Doch  tritt  diese 
Entfärbung,  meinen  Versuchen  gemäß,  nur  dann  ein,  wenn  man 
nicht  eine  relativ  zu  gr  oß  e  F  ar  b  s  1 0  ff  menge  verwendet 
h  a  t.  Färbt  man  jn  einem  relativen  Überschusse  des  Farbstoffes,  so 
tritt  bei  singulärer  Färbung  auch  eine  Neutralrottinktion  der  toten  Zellen 
ein.     Die  Abfärbung  tritt  dann  selbst  vorübergehend  nicht  in  Sicht. 

Färbt  man  lebende  Zellen  in  einem  relativen  Überschusse  von 
Methylenblau,  so  erzwingt  man  in  analoger  Weise  eine  Färbung, 
doch  ist  diese  Färbung  in  ihrem  Wesen  eine  physikalische ;  denn 
benützt  man  relativ  wenig  Farbstoff,  so  kommt  es  zu  einer  Methylen- 
blaufärbung erst  nach  dem  Absterben  der  Zelle. 

Es  ist  also  klar,  daß  bei  der  P^ärbung  mit  meinem 
Gemische  das  elektive  Resultat  nur  auf  chemischen 
Vorgängen  beruhen  kann.  Beide  Farbstoffe  sind  in  meinem 
Gemische  in  relativem  Überschusse  vorhanden.  Während  bei  singu- 
lärer Färbung  unter  solchen  Umständen  eine  physikalische  Tinktion 
eintritt,  führt  die  simultane  Doppelfärbung  mit  dem  äquimolekularea 
Gemische  zum  Ausdrucke  der  chemischen  Vorgänge, 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  1.  7  " 


98  Ruzicka:  Zur  Theorie  der  vitalen  Färbung.  XXII,  1. 

Dies  wird  durcli  Aveitere  von  mir  ausgeführte  Versuche  und 
Beobachtungen  bekräftigt,  welche  den  Beweis  liefern,  daß  die  beiden 
Farbstoffe  in  der  Zelle  gleichzeitig  vorhanden  sind. 

Darauf  weisen  die  nachfolgenden  Beobachtungen  hin.  Der  mittel- 
ständige Kern  ist  oft  das  erste ,  was  sich  in  einer  sonst  nur  von 
dem  roten  Farbstoff  gefärbten  Zelle  blau  tingiert ;  die  in  den  Nahrungs- 
vakuolen  sonst  gänzlich  rot  gefärbter  Amöben  enthaltenen  Bakterien 
sind  blau ;  ein  rot  gefärbtes  Infusorium  zeigte ,  von  einem  andern 
gleichfalls  rot  gefärbten  verschlungen,  augenblicklichen  Wechsel  der 
Färbung  ins  Blaue ;  inmitten  rot  gefärbter  Granula  erscheinen  blau 
tingierte.  Die  Farblösung  entfärbt  sich,  so  daß  bei  Schluß  des  Ver- 
suches (d.  h.  nachdem  die  Zellen  abgestorben  sind)  sich  soAvohl  der 
rote ,  als  auch  der  blaue  Farbstoff  in  den  gefärbten  Objekten  be- 
finden muß. 

Bewiesen  wird  die  gleichzeitige  Gegenwart  beider  Farbstoffe  in 
der  Zelle  durch  Zusatz  von  Wasserstoffsuperoxyd.  Durch  Oxyda- 
tion des  zweiten,  in  der  Zelle  enthaltenen,  jedoch  nicht  sichtbaren 
Farbstoffes  —  der  mit  dem  sichtbaren  komplementär  ist  —  tritt  sodann 
in  den  Zellen  violette  Mischfärbung  auf. 

Somit  kann  als  bewiesen  gelten,  daß  bei  Anwen- 
dung meines  Geraisches  in  der  lebenden  Zelle  das 
Methylenblau,  in  der  toten  das  N e u t r a  1  r o t  zwar  ent- 
halten, jedoch  durch  die  chemischen  Einflüsse  des 
Protoplasmas  unsichtbar  gemacht  worden  sind.  Wie 
aus  meinen  Versuchen  hervorgeht ,  beruht  diese  Einwirkung  des 
Protoplasmas  auf  seinen  reduzierenden  Eigenschaften. 

Bezüglich  meiner  weiteren  biologischen  Ausführungen  muß  ich 
auf  meine  eingangs  zitierte  Arbeit  hinweisen.  An  diesem  Orte  wollte 
ich  nur  jene  Resultate  hervorheben,  welche  sich  auf  die  Theorie  der 
vitalen  histologischen  Färbung  beziehen  und  zum  ersten  Male  zeigen, 
daß  die  Neutralrotfärbung  der  lebenden  Zelle  ein 
chemischer  Vorgang  ist,  a\-  ä  h  r  e  n  d  die  Methylenblau- 
f  ä  r  b  u  n  g  der  lebenden  Zelle  zwar  ein  vitales  Phäno- 
men  ist,    aber    auf    physikalischer    Grundlage    beruht. 

[Eingegangen  am  28.  Februar  1905.] 


XXII,  1.  Cristina:  Nouvo  metodo  per  attaccare  i  tagli  fatti  da  pezzi,    99 


Nuovo  metodo  j^er  attaccare  i  tagli  fatti  da 
pezzi  inclusi  in  celloidina. 

Per  il 

Dr.  Di  Cristina. 

Dato  clie  con  le  nuove  manipolazioni  proposte  da  Apathy,  si 
possono  ottenere  sezioni  sottillissime  a  cominciare  da  tre  /*,  si  preseiita 
di  nuovo  la  questione  deirappicicatura  dei  tagli.  Due  gravi  incove- 
nienti  presenta  adesso  l'inclusione  in  celloidina :  1^  Che  alcuni  organi 
come  intestiuo ,  stomaco  in  sezioni  sottili  non  resistono  alle  mani- 
polazioni di  colorazione ,  disidratazione  guastandosi.  2^  Le  sezioni 
in  celloidina  non  attaccate  al  portaoggetti ,  non  possono  essere  disi- 
dratate  convenieutemente ,  perclie  la  celloidina  negli  alcool  forti  si 
discioglie,  rovinando  cosi'  le  sezioni,   — 

Ho  cercato  di  ovviare  a  questo  inconveniente  servendomi  di  un 
metodo  semplicissimo  di  appicciatiira  dei  tagli  sul  vetrino  portaoggetti. 
Questo  metodo  permette  ancbe  la  preparazione  dei  tagli  in  Serie  in 
modo  semplicissimo.  II  procedimento  e  il  segueute :  Le  sezioni  fatte 
se  sono  giä  colorate  in  massa  vengono  trasportate  in  acool  a  94*^ 
perö  devono  qui  soggiornare  il  meno  possibile,  se  non  sono  colorate 
possono  essere  colorate  prima  di  attaccarle,  e  come  ultimo  vanno 
trasportate  in  alcool  a  94°,  qui  semplicemente  devono  restare  un 
tempo  brevissimo. 

Si  preparano  prima  dei  vetrini  portaoggetti,  su  cui  si  spalma 
uno  Strato  di  alburaina  glicerinata  cosi  composta: 

Albumina  d'uovo  parti  5,   Glicerina  neutra  parti   la. 

Con  una  striscia  di  carta  bibula  introdotta  nella  vascbetta  con- 
tenente  le  sezioni,  si  cerca  di  prendere  le  sezioni  in  modo  perö  che 
esse  vengono  distese  sulla  carta  senza  far  pieghe.  Quindi  si  tira 
la  carta  per  un  estremo  facendo  in  modo  che  le  sezioni  vi  rimangano 
attaccate.  Questa  striscia  di  carta  si  adaggia  dal  lato  ove  stanno 
distese  le  sezioni,  sul  vetrino  portaoggetti  gia  spalmato  di  albumina, 
sü  di  essa  si  adaggiano  altre  striscie  asciutte  e  si  preme  un  pö  col 
palmo  delle  dita  fiuche  i  tagli  restano  distesi.  —  Per  l'azione  coagu- 


100  Fischer:  Sperrvorrichtung  für  mikroskup.  Demonstrationen.  XXII,  1, 

lante  dell'alcool  suiralbumiua  i  tagli  restano  appicciiiati  solidameute. 
—  I  tagli  cosi  trattati  possono  essere  sottoposti  a  tutte  le  mani- 
polazioni,  ed  infine  se  ne  piio  alloutauare  la  celloidiua  coiralcool  assoluto 
senza  che  11  preparato  sublsca  delle  alterazlonl.  —  Le  sezioni  attaccate 
vanuo  trasportate  subito  in  alcool  assoluto.  81  deve  perö  badare 
che  l'albumlna  glicerinata  conteuga  molta  albumina,  polche  se  pre- 
domina  nella  soluzlone  in  suo  luogo  la  gllcerina,  11  metodo  nun  rlesce. 

Berlin,  26.  März  1905. 

[Eingegangen  am  29.  März  1905.] 


Eine  Sperrvorrichtung  für  mikroskopische 
Dem  onstrationen. 


Von 

Alfred  Fischer 

in  Basel. 


Hierzu   zwei   Holzschnitte. 


Jeder,  der  mikroskopische  Präparate  zu  demonstrieren  hat, 
kennt  den  Übelstaud,  daß  Unerfahrene  die  Mikrometerschraube  nicht 
sachgemäß  benutzen  und  auch  gelegentlich  den  groben  Trieb  miß- 
brauchen. Die  Einstellung  wird  gestört,  die  Präparate  werden 
zerquetscht. 

Auf  der  Städteausstellung  1903  in  Dresden  war  eine  große 
Zahl  Mikroskope  aufgestellt,  mit  denen  jedermann  Bakterienpräpa- 
rate ,  die  durch  besondere  Vorkehrungen  an  den  Mikroskopen  völlig 
geschützt  waren,  betrachten  konnte.  Jeder  neu  Hinzutretende  konnte 
sich  mit  der  partiell  gesperrten  Mikrometerschraube  das  Bild  selbst 
wieder  einstellen.  Die  dort  verwendeten  Einrichtungen,  die  für 
wissenschaftliche  Demonstrationen  zu  kostspielig  und  zum  Teil  über- 
flüssig sein  würden ,  erweckten  in  mir  den  Wunsch ,  auf  einfachere 
Weise  dem  allbekannten  Übelstande  abzuhelfen.  Mit  Avesentlicher 
Unterstützung    des   Herrn    Mechaniker  Dijrrenberger   in  Basel    habe 


XXII,  1.  Fischer:  Sperrvorrichtung  für  mikroskop.  Demonstrationen.    lOl 

ich  eine  solche  Einrichtung  für  ein  größeres  Stativ,   etwa  Zeiss  No.  Ja, 
zusammengestellt. 

Auf  wohlfeile  Art  kann  man  die  grobe  Einstellung  durch  Kapseln 
aus  steifem  Karton  verdecken.  Figur  1  zeigt  eine  elegantere  Ein- 
richtung, die  eine  Verkoppelung  und  Vereinfachung  der  von  Zeiss 
gelieferten  Schutzhülsen  für  die  grobe  Schraube  ist.  Diese  Zeiss  sehen 
Hülsen  müssen  in  zweimal  2  besondern  Handgriffen  über  die  beiden 
Schraubenknöpfe  geschoben  werden.  Jede  dieser  Hülsen  besteht 
aus   zwei    ineinander    passenden  Ringen:    man    muß    erst    den    einen 


1.  2. 

In   einer  Photographie   des  montierten  Mikroskopes   sind   die  beiden  Teile 
der  Schutzeinrichtung  nachträglich  schärfer  hervorgehoben.    Der  herunter- 
geklappte Sperrzeiger  liegt  zwischen  dem  rechts  sichtbaren  und   dem  vom 
Schraubenkopf  verdeckten  dritten  Stift. 

Figur  2  ist  das  einfachere  Modell  des  Sperrzeigers,  rechts  und  links  sieht 

man  die  Federn. 
(Photographiert  und  gezeichnet  von  Herrn  Dr.  Th.  Frank.) 

Ring  über  den  Knopf  schieben  und  dann  den  zweiten  Ring  aufsetzen. 
Da  die  beiden  Ringe  fest  aufeinanderpassen  müssen,  damit  die  Hülse 
gut  zusammenhält,  so  geht  dieses  Aufsetzen  der  Hülsen  keineswegs 
schnell  und  auch  nicht  ohne  Verschiebung  der  Einstellung  vor  sich. 
Die  gekoppelten  Hülsen,  die  ich  hier  vorschlage,  werden  mit  einem 


102   Fischer:  Sperrvorrichtung  für  mikroskop.  Demonstrationen.  XXII,  1. 

einzigen  Griff  aufgesetzt  und  verdecken  die  Schraubenknöpfe  so 
vollständig  (Fig.  1),   daß  nicht  mehr  daran  gedreht  Averden  kann. 

Je  nach  der  Form  des  Statives,  der  Ansatzhöhe  des  Triebes 
und  anderem  wird  die  Verkoppelung  der  Hülsen  verschieden  vor- 
zunehmen sein.  Die  Figur  zeigt  das  Modell  für  ein  ZEisssches 
Stativ.  An  dem  Schraubenknopf  rechts  hebt  sich  schwarz  ein  Metall- 
ring von  4'4  cm  Gresamtdurchmesser,  ca.  3  cm  im  Lichten  ab.  Der 
aus  geschwärztem  Messingblech  hergestellte  Ring  ist  etwa  7  mm  breit 
und  trägt  einen  nicht  den  ganzen  Umfjing  einnehmenden  8  mm  hohen 
Aufsatz ,  der  so  angebracht  ist ,  daß  er  etwa  ^/.,  des  Schrauben- 
knopfes von  oben  verdeckt  (Fig.  1  links  und  rechts).  Diese  beiden 
Ringe  sind  durch  einen  Metallsteg ,  dessen  Länge  aus  der  Distanz 
der  Schraubenknöpfe  sich  ergibt,  verkoppelt.  Die  Koppelung  trägt 
an  der  Tubusseite  eine  Rinne,  deren  Form  genau  dem  Querschnitte 
der  Führungsleiste  für  die  Triebstange  entspricht  und  so  weit  ist, 
daß  bequem  übergeschoben  werden  kann.  Außerdem  ist  die  Koppe- 
lung in  der  Mitte ,  wo  die  Rinne  eingeschnitten  ist ,  nach  abwärts 
eingeknickt ,  damit  sie  auf  dem  kleinen  Vorsprung  des  Statives 
(Fig.  1)  aufliegt. 

Für  die  Sperrung  der  Mikrometerschraube  empfiehlt  sich  folgende 
Einrichtung.  Auf  den  Schraubenknopf  (Fig.  l)  werden  in  gleichen 
Abständen  eine  Anzahl,  etwa  4  mm  hoher  Metallstifte,  deren  Distanz 
durch  die  Feinheit  der  Schraube  bedingt  ist,  eingesetzt.  Wenn  diese 
bei  einer  Umdrehung  ■'/^  mm  leistet ,  so  genügen  2  oder  3  solcher 
Stifte,  bei  älteren  Stativen  mit  gröberer  Schraube  4  oder  5,  je  nach 
Belieben. 

An  jener  Stelle  des  Statives,  die  den  Zeiger  für  die  Ablesung 
der  Schraube  trägt,  wird  ein  zurückklappbarer  Zeiger  eingesetzt,  der 
auf  den  Schraubenknopf  heruntergeklappt  zwischen  den  Stiften  liegt 
und  die  Drehung  der  Schraube  nur  so  weit  gestattet,  bis  er  an 
einen  der  Stifte  anschlägt.  Der  Zeiger  muß  zwar  etwas  kräftiger 
sein  als  der  Ablesezeiger,  kann  aber  doch  noch  so  dünn  bleiben, 
daß  er  auch  für  nicht  allzu  feine  Ablesungen  verwendet  werden  kann. 

Für  diesen  Sperrzeiger  sind  zwei  Modelle  abgebildet.  In  Figur  1 
wird  der  Zeiger  mit  dem  Schräubchen  rechts  umgeklappt,  mit  dem 
links  festgestellt.  Diese  Einrichtung  ist  sehr  zuverlässig  und  ge- 
stattet dem  Beobachter  nicht,  die  Sicherung  abzustellen.  Das  andere 
Modell  (Fig.  2)  ist  einfacher  und  genügt  im  allgemeinen.  Der  Zeiger 
wird  mit  dem  Schräubchen  rechts  herausgeklappt  und  durch  zwei 
Federn  in  dieser  Stellung  gehalten.    Verwendet  man  diese  einfachere 


1 
I 


XXII,  1.  Fischer:  Sperrvorrichtung  für  lulkroskop.  Demonstrationen.    103 

Siclierimg,  so  muß  man  allerdings  die  Hörer  darum  bitten,  diesen 
Zeiger  nicht  heraufzuklappen,  sondern  nur  an  der  Mikrometerschraube 
zu  drehen,  bis  sie  anstößt. 

Das  Präparat  wird  wie  üblich  eingestellt,  der  Sperrzeiger  herunter- 
geklappt und  die  Sicherung  für  den  groben  Trieb  aufgesetzt.  Eine 
kleine  Aufmerksamkeit  ist  vorher  notwendig.  Sollte  der  Sperrzeiger 
zu  nahe  an  einen  der  Stifte  herangekommen  sein  bei  der  Einstellung 
mit  normalsichtigem  Auge,  so  würde  für  die  beiden  Extreme  der 
fehlerhaften  Augen  der  Spielraum  zu  ungleich  sein.  Man  achte  darauf, 
daß  bei  normaler  Einstellung  der  Zeiger  etwa  in  der  Mitte  zwischen 
zwei  Stiften  steht. 

Ist  dies  nicht  sogleich  zufällig  erreicht,  so  klappt  man  den  Zeiger 
wieder  herauf,  hebt  mit  der  groben  J^instellung  den  Tubus  eine  Spur, 
stellt  mit  der  Mikrometerschraube  wieder  genau  ein  und  klappt  den 
Sperrzeiger  wieder  herunter.  Vielleicht  wird  noch  einmal  diese 
Nachhilfe  zu  wiederholen  sein,  bis  der  Zeiger  die  gewünschte  Stellung 
hat.  Wer  diese  kleine  Nachhilfe  möglichst  vermeiden  will,  der  lasse 
in  den  Knopf  der  feinen  Mikrometerschraube  mit  ^/^  mm  Umgang 
nur  zwei  Stifte  einsetzen.  Aber  selbst  bei  drei  Stiften  (Fig.  1)  ist 
diese  kleine  Einstellungskorrektur  so  einfach  und  für  den  geübten 
Mikroskopiker  so  leicht,  daß  es  kaum  der  Mühe  lohnt,  darüber  zu 
reden.  Ich  brauche  seit  einem  Jahr  dreistiftige  Sicherungen  ohne 
jede  Beschwerde. 

Sobald  die  Mikrometerschraube  mit  guter  Mittellage  des  Sperr- 
zeigers eingestellt  ist,  werden  die  gekoppelten  Hülsen  über  den  groben 
Trieb  geschoben  und  damit  ist  das  Präparat  völlig  geschützt.  Die 
Mikrometerschraube  kann  weder  zu  hoch,  noch  zu  tief,  bis  zum  Zer- 
quetschen des  Präparates,  gedreht  werden,  sondern  bei  drei  Stiften 
nur  um  ^^  Umgang,  bei  2  um  Vi  »:ich  auf-  und  abwärts.  Jeder 
neue  Beobachter  kann  und  muß  innerhalb  dieser  Grenzen  die  scharfe 
Einstellung  des  Präparates  finden. 

Ich  erwähne,  daß  die  feinsten  Bakterienpräparate  ganz  Ungeübten 
so  demonstriert  werden  können  und  daß  einige  Mikroskopiker,  die 
diese  Schutzeinrichtung  kennen  lernten,  sofort  von  deren  Brauchbar- 
keit überzeugt  waren. 

Ich  habe  diese  kleine  Konstruktion  vor  einiger  Zeit  der  Firma 
Zeiss  vorgelegt,  die  mit  größter  Bereitwilligkeit  mir  ihre  eigenen 
entsprechenden  I^inrichtungen  zur  Ansicht  schickte.  Über  die  von 
Zeiss  gelieferten  Hülsen  für  die  Knöpfe  des  groben  Triebes  wurde 
schon  gesprochen,   die  Sperre  für  die  Mikroraeterschraube  muß  über 


104  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.  XXII,  1. 

deren  Knopf  liinweggeschoben  werden    und    ist    nicht   so  bequem  zu 
handhaben  wie  die  hier  vorgeführte  Zeigersperrung. 

Leider  lehnte  es  die  Firma  Zeiss  ab,  mein  Modell  auszuführen. 
Da  ich  von  der  Brauchbarkeit  meines  Vorschlages  nach  wie  vor 
überzeugt  bin,  so  gebe  ich  die  Einrichtung  hiermit  allgemein  be- 
kannt, in  der  Hoffnung,  daß  sie  vielen  Kollegen  recht  gute  Dienste 
leisten  wird.  Die  Herstellung  ist  so  einfach ,  daß  jeder  Feinmecha- 
niker sie  in  kurzer  Zeit  ausführen  kann. 

[Eingegangen  am  2.5.  Februar  1905.] 


[Aus  dem  pathologischen  Institut   der   Universität   (Obermedizinalrat  Prof. 
Dr.  v.  BoUinger)   und   der   Prosektur   des   Krankenhauses   rechts   der   Isar 

in  München  (Prof.  Dr.  Schmaus).] 


Beitrüge  zur  Technik  und  Methodik  der  mikro- 
skopischen Doppelsäge. 

Von 


Dr.  Georg  Arndt 


Assistenzarzt  an  der  Künigl.  chirm-g.  Klinik  in  Erlangen,  ehem.  Volontärassistent 

des  Instituts. 


Hierzu   5   Holzschnitte. 


Nach  der  vor  fast  vier  Jahren  erfolgten  Veröffentlichung  meiner 
Doppelsäge  ^  ward  mir  erst  spät  die  Gelegenheit  zum  weiteren  Aus- 
bau der  Methode  zu  teil.  Das  möge  erklären ,  weshalb  in  den 
folgenden  Beiträgen  erst  ein  Teil  von  dem  vorliegt,  was  als  nächster 
Programmpunkt  gelten  mußte  ,  der  allein  der  Verbesserung  des  In- 
strumentariums und  der  Methodik  gewidmet  war.  Die  in  der  ersten 
Arbeit  niedergelegten  Anweisungen  für  die  Behandlung  und  den  Ge- 
brauch des  inzwischen  an  zahlreichen  Instituten  eingeführten  Instru- 


^)  Präzisionssäge    zur  Herstellung  mikroskopischer   Präparate   harter 
Substanzen  (Diese  Zeitschr.  Bd.  XVIII,  1901,  p.  146—159). 


XXII,  1.  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.    105 

ments  haben  sieb  mir  und  anderen  auch  weiterhin,  selbst  bei  der 
Bearbeitung  von  anscheinend  ungeeigneten  Objekten  bewährt.  Es 
sei  aber  betont,  daß  wie  für  jede  andere  mikroskopisch -technische 
Methode,  so  auch  für  die  Doppelsäge  iintadelhafte  Beschaffenheit  des 
Instruments  und  der  Sägeblätter,  sowie  Vertrautheit  mit  den  genannten 
Vorschriften  die  natürliche  Voraussetzung  für  ihre  erfolgreiche  An- 
wendung bilden. 


a.  Verlängerung  der  wirksamen  Sägefläche. 

Für  die  Bearbeitung  breiter  und  umfangreicher  Objekte ,  be- 
sonders aber  auch  für  die  Sicherheit  und  Schnelligkeit  des  Sägens 
ist  die  Spannweite  der  Sägeblätter  von  erheblicher  Bedeutung.     Der 


freie  Spannraum  der  Doppelsäge  ist  nun  mit  6*5  cm  für  die  wich- 
tigsten Zwecke  'zwar  hinreichend  weit  getroffen ,  doch  können  von 
diesem  Maße  höchstens  4*5  cm  benutzt  werden ,  weil  die  Vorrich- 
tungen, welche  zum  Einstellen  des  gegenseitigen  Abstandes  der  Säge- 
blätter herunterklappbar  angebracht  sind ,  an  jeder  Seite  fast  1  cm 
fortnehmen  (cf.  Fig.  1,  Darstellung  der  Doppelsäge  mit  der  alten 
Stellvorrichtung) ;  auch  der  verbleibende  Raum  ist  nur  mit  der  Vor- 
sicht zu  benutzen,  daß  beim  Sägen  die  Stellschrauben  A:  nicht  gegen 
Objekt  oder  Schraubstock  stoßen  dürfen,  soll  nicht  die  genaue  Ein- 
stellung der  Schnittdicke  verloren  gehen. 

Da  die  Spannweite  für  unsere  Mailänder  Metallsägen  nur  unter 
der  Gefahr  vergrößert  werden  kann,  daß  ihre  straffe  Spannung,  Ein- 
stellung und  Festigkeit  Einbuße  leidet,  so  konnte  nur  von  der  Ver- 
änderung der  Stellvorrichtung  eine  Ausnutzung  der  verfügbaren 
Spannweite  erhofft  werden.  Es  wurden  daher  die  Stellschrauben  /i, 
die    bisher    direkt    auf   die    Sägeblätter    wirkten,    weiter    nach    oben 


106   Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.  XXII,  1. 

verlegt    und    durch    eine    gelenkige    Vorrichtung    mit    den    Sägen    in 
Verbindung  gesetzt, 

Figur  4  zeigt  diese  Vorrichtung  in  natürlicher  Größe  von  vorn, 
Figur  2  und  3  die  damit  ausgerüstete  neue  Säge  von  der  Seite, 
und  zwar  Figur  2    mit   gebrauchsfertig    heruntergeklappter ,  Figur  3 


mit    hochgedrehter    Stellvorrichtung,      Die    Buchstabenbezeichnungen 
der  vier  ersten  Figuren  entsprechen  einander. 

Die  Stellschrauben  k  sind  in  Muttergewinden  der  Fortsätze  f 
(s.  Fig,  2  u,  4)  des  Sägenteiles  a  gelagert  —  mit  a  sind  die  festen, 
mit  b  die  beweglichen  Klemmbacken  bezeichnet,  welche,  durch  die 
Schraube  e  zusammengepreßt,   die  Sägen  c  zwischen  sich  fassen.   — 


m 


Durch  Ftechtsdrehung  der  Stellschrauben  k  werden  die  bei  jj  mit- 
einander gelenkig  verbundenen  Branchen  /^  und  /„  einer  gut  ver- 
stählten zangenartigen  Vorrichtung  einander  genähert  und  wirken 
gleichzeitig  distanzevermindernd  auf  die  Sägen  r?,  c  (in  Fig.  4  im 
Querschnitt  getroffen),  welche,  wie  beim  alten  Instrument,  durch 
dünne,  innerhalb  der  Klemmbacken  a  und  b  zwischen  den  Säge- 
blättern  eingepreßte  Stahlplatten  in    einem    maximalen    gegenseitigen 


XXII,  1.  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsiige.    io7 

Abstand  gehalten  werden.  Um  den  hierdurch  gesetzten  Widerstand 
gegen  den  Druck  der  Branchen  zu  verringern,  ist  jedes  der  beiden 
Stahlplättclien  an  seinem  vorderen  Rande ,  entsprechend  der  Aus- 
trittstelle der  Sägeblätter,  mit  einer  2  mm'  messenden  Auskehlung 
versehen  worden.  Da  jede  der  Branchen  ^^^  und  /.,  kaum  O'l  cm 
dick  ist  und  dem  Sägenteil  a  fest  anliegt,^  so  gehen  von  der  Spann- 
weite der  Sägen  insgesamt  nur  0'2  cm  verloren ,  es  bleiben  also 
6*3  cm  verfügbar.  Als  weiterer  Vorzug  gegenüber  der  alten  Säge 
kommt  in  Betracht,  daß  Stöße  gegen  die  Branchen,  wie  sie  beim 
schnellen  Sägen  vorkommen ,  die  Genauigkeit  der 
Einstellung  nicht  stören.  Die  neue  Stellvorrichtung  |,  f 
kann  auch  an  der  alten  Säge  angebracht  werden.  Der 
Preis  für  diese  Änderung  stellt  sich  auf  10  Mark. 


b.  Methodik. 


Die  Beantwortung  der  in  der  ersten  Veröffent- 
lichung  der  Doppelsäge  gestellten  Frage ,  ob  frische, 
feuchte  Objekte  bessere  Schnitte  ergeben  als  trockene ,  habe  ich, 
außer  an  Wirbeltierknochen  und  -zahnen  verschiedener  Herkunft  und 
Vorbeliandlung,  auch  an  pflanzlichen  Hartgebilden  geprüft,  möchte 
aber ,  bei  dem  verhältnismäßig  geringen  Umfang  des  letztgenannten 
Materials,  das  folgende  Urteil  vorwiegend  auf  tierische  Hartgebilde 
beziehen. 

Die  damals  mitgeteilte  vereinzelte  Beobachtung,  daß  Präparate 
von  frischen,  spongiösen  Knochen  weit  besser  gelangen  als  solche 
von  gleichartigen  macerierten  Objekten,  ist  auch  später  durch 
zahlreiche  vergleichende  Versuche  bestätigt  worden.  Das  gleiche 
gilt  für  die  kompakte  Knochensubstanz,  während  Zement  und  Dentin 
keinen  Unterschied ,  ob  feucht  oder  trocken  geschnitten ,  erkennen 
ließen.  Knochen,  die  in  Sublimat,  Formalin  (10  Prozent)  oder  Alkohol 
konserviert  waren ,  boten  gegenüber  frischen  Knochen  keinen  Unter- 
schied. Röhrenknochen  von  Neugeborenen  und  fötale  Knochen  eines 
Falles  von  sogenannter  fötaler  Rachitis ,  die  "/^  bis  1  Jahr  in  For- 
malin   gelegen    hatten ,    schienen    mir    aber    an    Konsistenz    erheblich 


^)  In  Figur  2  sind  die  Stellvorrichtungen  /  nur  der  größeren  Deut- 
lichkeit halber  mit  einem  gewissen  Abstand  vom  übrigen  Sägenkörper  ge- 
zeichnet worden. 


108   Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.  XXII.  1. 

abgenommen  zu  haben  und  ließen  weniger  dünne  Schnitte  zu  als  im 
frischen  Zustande.  Analog  den  Erfahrungen,  die  man  an  Kaiserling- 
Präparaten  mit  dem  Verschwinden  von  harnsauren  Niederschlägen 
in  Organen  gemacht  hat/  dürfte  in  unserem  Falle  die  aus  dem 
Formalin  sich  bildende  Ameisensäure  die  Entkalkung  und  Kon- 
sistenzverminderung der  jungen  Knochen  bewirkt  haben.  Da  es 
Westenhoeffer  durch  Einbringen  von  Quecksilberoxyd  (zwischen 
Fließpapierscheiben  am  Boden  des  Gefäßes  und  in  einem  Stoffbeutel) 
in  das  Gefäß  mit  der  III.  Kaiserling sehen  Flüssigkeit  gelungen  ist, 
die  Bildung  der  Ameisensäure  für  lange  Zeit  unschädlich  zu  machen, 
so  empfiehlt  sich  dasselbe  Vorgehen  auch  für  die  Konservierung  von 
Knochen  in  allen  Fällen ,  wo  die  Aufbewahrung  in  Alkohol  nicht 
bevorzugt  wird."  Das  Vergleichsmerkmal  für  die  Beschaifenheit  feucht 
oder  trocken  gefertigter  Präparate  bot  nicht  die  geringste  erreich- 
bare Schnittdicke  allein,  sondern  gleichzeitig  die  Ausdehnung  der 
Schnitte  und  der  Mangel  an  Artefakten.  Im  allgemeinen  konnten 
letztere ,  d.  h.  Sägerillen ,  Risse ,  Abreißungen  feiner  Bälkchen  und 
Lamellen,  an  feucht  konservierten  oder  frischen  Schnitten  weit  seltener 
als  an  macerierten,  trockenen  in  störendem  Maße  beobachtet  werden. 
Querschnitte  z.B.,  die  von  macerierten  langen  Röhrenknochen  oft 
dünner  als  von  frischen  oder  feucht  konservierten  Stücken  zu  er- 
halten sind,  stehen  doch  an  Vollkommenheit  hinter  diesen  zurück. 
Längsschnitte  lassen  sich  aus  frischen  oder  feucht  konservierten 
Röhrenknochen  stets  mindestens  ebenso  dünn  als  von  macerierten 
herstellen. 

Für  die  Herstellung  lebensfrischer  Präparate,  für  die  die 
Schnelligkeit  der  Sägemethode  besonders  ins  Gewicht  fällt,  zeigte  es 
sich  zweckmäßig,  die  Schnittstelle  und  die  Sägen  während  des  Schnei- 
dens fortwährend  von  physiologischer  Kochsalzlösung  berieseln  zu 
lassen,  einerseits,  um  die  Austrocknung  des  dünnen  Präparatblättchens 
zu  verhüten,  anderseits,  um  die  Sägeblätter,  die  sich  sonst  erhitzen 
würden,  ständig  kühl  und  leicht  gleitend  zu  erhalten.  Die  Temperatur- 
erhöhung der  Sägen  • — ■  für  die  übrigens  meines  Erachtens  neben  der 
äußeren  noch  die  innere,  aus  den  Zug-  und  Druckbeanspruchungen  der 
Sägeblätter  und  ihrer  Zähne  hervorgehende  Reibung  in  Betracht  kommt 
—  kann  den  vitalen  Zustand  des  Gewebes  verändern,  aber  auch  durch 


*)  Westenhoeffer,  Salkowski- Festschrift,  Berlin  1904. 
-)  „Sehr  schön  werden  auch  Knochen  konserviert,  besonders  Rachitis 
und  Syphihs."     Westenhoeffer,  1.  c. 


XXII,  1.  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.   109 

ererhöhte  Quelhing  der  nächsten  Umgebung  der  Sägen  die  Arbeit  des 
Sägens  selber  erschweren.  Letzteres  habe  ich  an  feucht  konser- 
vierten Knoclien  und  botanischen  Objekten  auch  dadurcli  verhindern 
können ,  daß  ich  während  des  Sägens  Glyzerin  mit  einem  Pinsel 
nicht  zu  sparsam  auf  die  Schnittstelle  tropfen  ließ.  Bespülung  der 
Schnittfläche  mit  reichlich  Wasser  oder  der  konservierenden  Flüssig- 
keit scheint  dem  Schneiden  unter  Glyzerin  gleich  zu  kommen.-^  Zum 
Auffangen  der  Flüssigkeit  genügt  ein  zwischen  die  Wangen  des 
Schraubstocks  gestecktes  Tuch ,  welches  gleichzeitig  zur  Ableitung 
in  ein  am  Boden  stehendes  Gefäß  dient.  Ist  das  Objekt  in  der 
unten  beschriebenen  Schraubkluppe  (Fig.  5)  fixiert,  so  findet  die 
Flüssigkeit  in  dem  Kasten  a^^   der  nicht,    wie  auf  der  Abbildung, 


von  dem  Holzblock  g  völlig  ausgefüllt  wird ,  Raum  zum  Sammeln 
und  fließt  durch  ein  Loch  in  der  Stirnwand  des  Kastens  und  den 
Rohrstutzen  A:,  der  zweckmäßig  einen  Gummischlauch  als  Fortsetzung 
erhält,  ab.  Da  es  beim  Sägen  von  Vorteil  ist,  die  Finger  der  linken 
Hand  gegen  das  Objekt  oder  den  Schraubstock  zu  stützen ,  sei  es, 
um  Vibrationen  des  ersteren  zu  dämpfen  oder  die  Schnittführung 
sicherer  zu  gestalten,  so  ist  für  die  Berieselung  der  Schnittstelle  ent- 
weder Assistenz  nötig  oder  eine  der  einfachen  Vorrichtungen,  wie 
sie  zur  Bespülung  des  Mikrotommessers  beim  Schneiden  von  Celloidin- 


^)  Daß  die  Sägeblätter  nach  jedem  Gebrauche  gereinigt  werden 
müssen,  gilt,  des  Röstens  wegen,  besonders  für  Formalinschnitte:  man 
reinigt  die  Sägen  am  besten  im  gespannten  Zustande  mit  einem  Wasser- 
pinsel und  trocknet  sie  durch  Zwischenziehen  eines  Streifens  Fließpapier. 


110  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.  XXII,  1. 

stücken  zahlreich  angegeben ,  entweder  kontinuierlich  oder  durch 
Druck  auf  einen  Gummiball  (vom   Fuß)  zu  betätigen  sind. 

Wer  die  Doppelsäge  oft  benutzt,  empfindet  die  Berieselung  auch 
als  sicheren  Schutz  gegen  die  Einatmung  des  Sägestaubes  wohltätig. 
Aus  diesem  Grunde ,  dann  aber  auch ,  um  die  Brüchigkeit  der  ent- 
stehenden Präparatblättchen  zu  mindern  und  die  Gleitfähigkeit  der 
Sägeblätter  zu  erhöhen ,  empfahl  es  sich ,  auch  trockene  und  mace- 
rierte  Gewebe ,  besonders  wieder  Knochen ,  mit  Glyzerin  oder  nicht 
zu  dünnem  Zedernöl  an  der  Schnittstelle  zu  tränken.  Meistenteils 
verdiente  das  Sägen  mit  „Schmierung"  den  Vorzug,  es  ging  leichter, 
ohne  Staubentwicklung  von  statten  und  behütete  zweifellos  manches 
Präparat  vor  dem  vorzeitigen  Ablösen. 

Für  die  Herauslösung  des  fertig  gesägten  Blättchens  war  in 
der  ersten  Veröffentlichung  die  Wahl  gelassen  worden ,  es  entweder 
so  abzulösen,  „wie  man  es  mit  Doppelmesserschnitten  zu  tun  pflegt, 
indem  man  das  Instrument  etwas  nach  links  und  rechts  herüber 
biegt,  während  man  einige  Sägebewegungen  ausführt",  oder  so,  daß 
man  die  Säge  „vorsichtig  heraushebt,  mit  dem  Taschenmesser  in 
eine  Schnittfurche  eingeht  und  das  Präparat  an  der  Haftstelle  ab- 
knickt". Das  erste  der  beiden  Verfahren  hat  sich  für  Präparate 
von  zartem  Gefüge  als  unzweckmäßig  herausgestellt;  nur  dicke  und 
wenig  umfangreiche  Schnitte  leiden  keine  Gefahr  dabei.  Statt  eines 
Taschenmessers  bedient  man  sich  beim  zweiten  Verfahren,  besonders 
dort ,  wo  es  sich  um  tief  gehende  Schnittfurcheu  handelt ,  besser 
eines  dünnen,  scharfen  Skalpells ;  ist  der  Schnitt  an  seiner  Haftstelle 
sehr  dünn ,  so  genügt  auch  ein  dünner ,  aber  kräftiger  Metallspatel 
zum  Abknicken. 

Das  Herausheben  der  Säge  aus  den  Schnittfurchen  kann  bei 
breiten ,  tiefen  Schnitten  Schwierigkeit  macheu  und  zum  Zerreißen 
des  Präparates  führen;  das  läßt  sich  leicht  dadurch  verhüten,  daß 
man  das  ganze  Stück  samt  der  festsitzenden  Säge  aus  dem  Schraubstock 
nimmt,  und  dann  erst  mit  größerer  Freiheit,   die  Säge  heraus  hebelt. 

Zum  Einschluß  des  D  au  e  r  pr  äp  ar  a  t  e  s  dient  mir  Canada- 
balsam  (sc.  harter)  nur  für  Präparate  mit  Lufteinschluß,  die  das 
Verhalten  der  Knochenlacunen  und  ihrer  Kanälchen  zeigen  sollen. 
Da  die  wichtigste  Vorbedingung  für  die  Haltbarkeit  der  Präparate 
ihre  Trockenheit  ist,  so  sei  im  Hinblick  auf  das  oben  empfohlene 
Feuchtschneiden  darauf  hingewiesen,  daß  so  hergestellte,  an  der  Luft 
getrocknete  Schnitte  in  Canadabalsam  nach  längerer  oder  kürzerer 
Zeit    mehrfach    trübe    wurden;     an    Präparaten,     die    ^j.^    Stunde    in 


XXII,  1.  Arndt:"  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge,   m 

absolutem  Alkohol  (im  Brutschrank  bei  37 "),  dann  kurze  Zeit  in 
Äther  zuiiTbracht  hatten  und  nach  dessen  Verdunstung  in  flüssig  ge- 
machten Canadabalsam  eingebracht  worden  waren,  ist  Trübung  nicht 
beobachtet  worden.  Zur  Konservierung  von  Schnitten,  die  nicht  so- 
fort mikroskopiert  werden  sollen,  ferner  zum  Studium  von  Struktur- 
und  Übersichtsbildern,  Einschlüssen  der  knöchernen  Hohlräume  ist 
der  Grly zerineinschliiß  an  die  erste  Stelle  zu  setzen.  Völlig  säure- 
freies Glyzerin  dürfte  im  Handel  kaum  zu  haben  sein ;  für  die 
Gefahrlosigkeit  des  sehr  geringen  Säuregehaltes  spricht  jedenfalls 
der  Umstand,  daß  zahlreiche  Knochen-  und  Zahnpräparate,  die  ich 
seit  vier  Jahren  in  Glyzerin  eingeschlossen  aufbewahre ,  keinerlei 
Spuren  von  Säurewirkung  zeigen.  Schnitte  von  macerierten  Knochen 
werden  vom  Glyzerin  weit  schneller  aufgehellt  als  solche  von  frischen 
oder  feucht  konservierten.  Dicke  Übersichtspräparate  der  letzteren 
Art  können  schneller  aufgehellt  werden,  wenn  man  die  Schnitte  vom 
Wasser  (das  Abpinseln  des  Sägemehls  geschieht  am  besten  unter 
Wasser)  nicht  direkt  in  Glyzerin,  sondern  zunächst  für  einige  Stunden 
in  eine  Mischung  von  Wasser  und  Glyzerin  zu  gleichen  Teilen  bringt 
und  auch  des  weiteren,  bis  zum  Verbringen  in  reines  Glyzerin,  den 
Glyzerinanteil  der  Mischung  nur  allmählich  steigen   läßt. 

Was  das  Anwendungsgebiet  der  Doppelsäge  betrifft ,  so 
lag  mir  ihre  Nutzbarmachung  für  das  Gebiet  der  pathologischen 
Anatomie  besonders  nahe.  Hierbei  zeigte  sich,  daß  auch  von  solchen 
Objekten,  deren  lockeres  Gefüge  die  unmittelbare  Bearbeitung  auf 
dem  Schleifstein  gänzlich  ausschließt  oder  nur  in  beschränkter  Größe 
zuläßt,  mit  der  Doppelsäge  noch  große  Übersichtsschnitte  gelangen. 
Als  Beispiel  eines  Objektes  von  ungleichartigem ,  teilweise  lockerem 
Gefüge  können  die  Knochen  des  Schädeldaches  dienen ;  schneidet 
man  solche  frischen  oder  feucht  konservierten  Schädelknocheu,  deren 
Markhypertrophie  vermehrte  Knochenbildung  vortäuschte ,  so  wird, 
wer  mit  Vorsicht  gesägt  hatte,  oft  überrascht  durch  die  Beobachtung, 
daß  selbst  weitmaschige  Netzwerke  von  feinsten  Spongiosa-Bälkchen 
meist  erhalten  geblieben  sind.  Auch  von  solchen  pathologischen 
01)jekten,  bei  denen  eine  Abnahme  des  Kalkgehaltes,  wie  bei  osteo- 
malacischen  Knochen,  oder  eine  hochgradige  Auflockerung  sämtlicher 
Lamellensysteme,  nebst  Erweiterung  und  Deformierung  der  Havers- 
schen  Kanäle  und  ausgedehnte  Volkmann  sehe  Kanalikulation  im 
Vordergrund  standen,  wie  ich   sie  in  einem  Falle  von  Akromegalie^ 


^)  Worüber  an  anderer  Stelle  berichtet  werden  soll. 


112  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.  XXII,  1. 

und  —  teilweise  —  an  Sequestern  osteomyelitischen  Ursprungs  reicH- 
lich  beobachten  konnte,  ließen  sich  unschwer  instruktive  Quer-  und 
Längsschnitte  anfertigen. 

Zur  Gewinnung  e  n  t  k  a  1  k  t  e  r  Knochenpräparate  war  die  Doppel- 
säge mehrfach  in  denjenigen  Fällen  von  Nutzen,  wo  eine  beschleu- 
nigte Untersuchung  erwünscht  war.  Man  schneidet  bei  hoch- 
geklappter Stellvorrichtung  Knochenplättchen  von  ca.  0*3  bis  0*5  mm 
Dicke ;  solche  Plättchen  sind  leicht  in  großer  Ausdehnung  auch  von 
stark  spongiösem  Material  zu  gewinnen ;  sie  können  in  kurzer  Frist 
entkalkt  und  in  Celloidin  eingeschlossen  oder  gleich  auf  dem  Gefrier- 
mikrotom geschnitten  werden.  Ist  für  einen  genau  ebenen  Einschluß 
und  richtige  Orientierung  gesorgt  worden ,  so  läßt  sich  immer  eine 
Anzahl  feiner  Mikrotomschnitte  gewinnen,  die  in  der  üblichen  Weise 
weiter  behandelt  werden. 


c.   Sehraubkluppe. 

Der  Mangel  an  brauchbaren  Vorrichtungen  zur  sicheren  Be- 
festigung sehr  kleiner  oder  platter  oder  zarter  Objekte  zwecks  Be- 
arbeitung mit  der  Doppelsäge  machte  mir  die  Konstruierung  eines 
Hilfsmittels  nötig,  das  technisch  zur  Gruppe  der  „Kluppen"  gerechnet 
werden  kann,  seiner  Form  nach  aber  sich  weit  von  ihnen  entfernt 
und  daher  besonders  beschrieben  sei: 

p]in  kräftiger  schmiedeeiserner  Arm  a  (Fig.  5)  von  12  cm  Länge 
geht  an  dem  einen  Ende  in  den  viereckigen  länglichen  Kasten  a^ 
über,  an  dessen  Stirnwand  das  Abflußrohr  k  fs.  o.)  angebracht  ist. 
Der  Innenraum  des  Kastens  wird  größtenteils  von  dem  aus  weichem 
Holz  gefertigten  Holzblock  g  eingenommen,  dessen  rauher  Querschnitt 
horizontal  liegt  und  den  oberen  Kastenrand  um  0'5  cm  überragt. 
Die  auf  der  anderen,  auf  der  Figur  nicht  sichtbaren  Seitenfläche  des 
Kastens  angebrachte ,  punktiert  gezeichnete  Schraube  h  dient  zur 
Befestigung  des  Blockes.  Der  vom  Boden  des  Kastens  ausgehende 
Fortsatz  f  kann  in  Schraubstöcke  beliebiger  Art  und  Größe  horizontal 
eingespannt  werden.  Das  andere  Ende  des  Armes  a  ist  durch  ein 
Scharniergelenk  c  mit  dem  beweglichen  Arm  h  verbunden,  der  durch 
eine  mit  breitem,  kräftigem  Flügelgriff  versehene  Schraube  e,  ent- 
gegen dem  Widerstand  einer  Feder  d^  dem  festen  Arm  a  genähert 
werden  kann.  Das  freie  Ende  des  Armes  b  reicht  bis  zur  Mitte  des 
Blockes  g^  ist  abgeplattet,  stark  verbreitert  und  an  seiner  Unterfläche 


XXII,  1.  Arndt:  Technik  u.  Methodik  d.  mikroskopischen  Doppelsäge.   113 

gezähnt.  Die  Zahniuig  verhindert  auch  ohne  Anwendung  starken 
Druckes,  daß  ein  zwischen  b  und  den  Holzblock  g  festgespanntes 
Objekt  /  beim  Sägen  (die  Schnittstelle  ist  durch  einen  Pfeil  ange- 
deutet) seitlich  ausweicht.  Der  Holzblock  kann  natürlich  beliebige 
Form  erhalten,  am  einfachsten  lassen  sich  weiche  Celloi'dinklötze  zu- 
stutzen;  für  Schnitte  von  schmalen,  rundlichen  oder  hochkantigen 
Objekten,  z.  B.  Querschnitte  von  jugendlichen  Röhrenknochen,  wurde 
der  Holzblock  mit  einer  längs,  in  der  Ebene  der  Zeichnung,  ver- 
laufenden Rinne  versehen,  in  der  das  Objekt  mit  großer  Sicher- 
heit und  Schonung  gegen  seitliche  Verschiebung  durch  den  Arm  b 
festgehalten  wird.  Die  Holzunterlage  gestattet,  was  besonders 
an  Querschnitten  von  platten  Objekten ,  z.  B.  Knochenplatten  der 
Dura  mater ,  angenehm  empfunden  wird ,  auch  die  untersten 
Schichten  des  Objekts  mit  in  den  Bereich  des  Schnittes  zu  ziehen; 
der  Holzblock  wird  dabei  zwar  mitgeschnitten ,  schädigt  aber  die 
Sägen  nicht. 

Herstellung  und  Vertrieb  der  neuen  Doppelsäge  und  Schraub- 
kluppe erfolgt  wie  bisher  durch  die  Fabrik  chirurgischer  Instrumente 
von  J.  Thamm  in  Berlin  NW.,  Karlstraße   14. 

[Eingegangen  am  17.  Februar  1905.] 


Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII.  1. 


]^14  Metz:  Die  Leitzsclie  Dunkelfeldbeleuchtung.  XXII,  1. 


Die  Leitzsche  Dunkelfeldbeleuchtung 
bei  Verwendung  der  homogenen  Olimmersion. 

Von 

Carl  Metz 

in  Wetzlar. 

Hierzu   vier  Holzschnitte. 


Nach  der  Einführung  eines  Beleuchtimgsapparates  am  Mikroskop, 
bestehend  aus  Spiegel  und  Kondensorlinsen,  welchen  wir  den  Eng- 
ländern WoLLASTON,  GoRiNG  lind  Brewster  verdanken,  findet  sich 
schon  eine  von  Reade  um  1837  angegebene  Einrichtung  für  Dunkel- 
feldbeleuchtung erwähnt  (s.  Hakting-Theile,  Das  Mikroskop,  2.  Aufl., 
I,  p.  245).  Eine  Reihe  von  Vorrichtungen  zur  Erzielung  der  Dunkelfeld- 
beleuchtung findet  sich  in  der  Folge  erwähnt.  Am  meisten  führten  sich 
die  Zentralblenden  ein.  Es  wird  durch  diese  bekanntlich  der  zentrale 
Teil  des  Kondensors  bis  zur  Öff"nung  des  Objektives  abgeblendet 
und  die  Beleuchtung  durch  die  Randstrahlen  des  Kondensors,  deren 
Apertur  höher  ist  als  die  des  Objektives,  bewirkt.  Ein  Eindringen 
der  direkten  Lichtstrahlen  in  den  Bildraum  bleibt  dadurch  aus- 
geschlossen. Diese  Blendung  war  zulässig,  solange  man  nur  mit 
Trockensystemen  arbeitete ,  deren  Apertur  wesentlich  kleiner  ist  als 
die  des  Kondensors.  Anders  verhält  es  sich ,  wenn  man  sich  der 
Olimmersion  bedient.  Die  Apertur  dieses  Objektives  und  die  des 
gebräuchlichen  Kondensors  ist  gleich.  Es  bieten  sich  zwei  Wege, 
eine  Dunkelfeldbeleuchtung  bei  Anwendung  der  Olimmersion  zu  er- 
zielen. Entweder  benutzt  man  einen  Kondensor  von  erheblich  höherer 
Apertur  als  1*30  und  blendet  die  zentralen  Lichtbündel  bis  zu  der 
Apertur  der  Immersion  ab,  oder  man  verzichtet  auf  einen  Teil  der 
Oifnung  der  Immersion  und  benutzt  die  ausgeschaltete  Apertur  des 
Objektivs  zur  Beleuchtung.  Es  lassen  sich  hierzu  zwei  Wege  ein- 
schlagen: man  benutzt  die  höhere  Apertur  zur  Beleuchtung  und 
bedient  sich  des  inneren  zentralen  Lichtkegels  zur  Beobachtung 
(s.  diese  Zeitschr.  Bd.  XV,   1898,  p.  289  ft'.),    oder    man    beleuchtet 


XXII,  1. 


Metz:  Die  Leitzsche  Dunkelfeldbeleuchtuni?. 


115 


mit  einem  inneren  Lichtkegel  und  schaltet  ihn  bei  der  Beobachtung 
aus.  In  dieser  Weise  ist  die  hier  mitgeteilte,  in  der  optischen  Werk- 
stätte von  E.  Leitz  in  Wetzlar  ausgeführte ,  Einrichtung  zustande 
gekommen. 

Da  das  Licht  der  Sonne  oder  einer  Bogenlampe  von  nicht  unter 
8  Ampere  Stärke  zur  Verwendung  vorgesehen  ist,  so  kann  der  innere 
Beleuchtungskegel  dünn  werden :  eine  starke  Abbiendung  des  Objek- 
tives und  ein  größerer  Verlust  an  auflösender  Kraft  wird  dadurch 
nach  Möglichkeit  vermieden. 

Den  einen  Bestandteil  der  neuen  Duukelfeldeinrichtung  bildet 
der    eigene  Beleuchtungsapparat  (s.  Fig.  1),    welcher    an   Stelle    des 


1. 


Dunkelfeld-Beleuchtungsapparat. 


2. 

Objektiv  mit  Stempelblende. 


gewöhnlichen  Beleuchtungsapparates   in   dessen  federnde  Hülse  unter 
dem  Mikroskop  eingesteckt  wird. 

Das  Beleuchtungssystem  ist  eine  achromatische  Doppellinse  von 
9  mm  Brennweite  und  4  mm  Öffnung,  welche  dem  Üffnungswinkel 
von  24^  entspricht.  Die  obere  Planfläche  des'  Beleuchtungssystems 
sitzt  7  mm  unter  der  Objektebene ,  so  daß  letztere  mit  dem  oberen 
Brennpunkt  des  Beleuchtungssystems  zusammenfällt. 

Unter  dem  Kondensor  sitzt  eine  Blendscheibe  mit  den  Blenden- 
öffnungen von  0'5,  1*0,  1*5  und  2"0  mm.  Nach  der  Wahl  dieser 
Öft'nungeu  beträgt  der  Öffnungswinkel  des  Beleuchtungskegels  6,  12, 
18  und  24  Grad. 

Durch  eine  Zentriervorrichtuug  wird  der  Beleuchtungsapparat 
genau  auf  die  optische  Achse  eingestellt. 

8* 


116 


Metz:  Die  Leitzsche  Dunkelfeldbeleuchtung, 


XXII.  1. 


Durch  den  Hohl-  oder  Planspiegel  wird  das  Licht  der  Sonne 
oder  einer  Bogenlampe  dem  Kondensor  zugelenkt. 

Der  zweite  wesentliche  Bestandteil  der  Dunkelfeldeinrichtung  ist 
die  Blende  (Fig.  2) ,  welche  die  Gestalt  eines  kleinen  Stempels  be- 
sitzt und  sich  auf  den  zentralen  Teil  der  hinteren  Linse  des  Öl- 
immersions-Systems  aufsetzt.  Dieser  Stempel,  dessen  untere  Fläche 
einen  Durchmesser  von  1"75  mm  besitzt,  wird  in  der  Achse  eines 
kleinen  Zylinders  mittels  zwei  über  Kreuz  laufender  Drähtchen  ge- 
halten. Dieser  Zylinder  wird  an  Stelle  des  Objektivverbindungs- 
stückes mit  dem  vernickelten  die  Linsen  enthaltenden  Teil  des  Ob- 
jektives verschraubt.  Die  lose  in  der  optischen  Achse  verschiebbare 
Blende  fällt  beim  Gebrauch  von  selbst,  vermöge  ihres  Gewichts  auf 
die    hintere    Linsenverbindung    des    Objektives    und    schneidet    allen 


Schematische  Darstellung  des  Strahlenverlaufes  in  Blende  und  Objektiv. 


zentralen  Bündeln  bis  zu  einer  (Jffnung  von  38^  den  Zutritt  zum 
Tubus  und  Bildraiim  ab.  Ein  solches  Bündel  —  in  der  schematischen 
Darstellung  (Fig.  3)  durch  die  ausgezogenen  Linien  veranschaulicht 
—  dient  also  nur  zur  Beleuchtung  des  Objektes. 

Die  bilderzeugenden  Strahlenbündel,  welche  von  dem  grell  be- 
leuchteten Objekt  ausgehen  —  in  Figur  3  durch  punktierte  Linien 
bezeichnet  —  besitzen  die  ()ffnungswinkel  38  bis  120",  denen  die 
num.  Aper.  0"5  bis   1*30  entsprechen. 

Nicht  allzu  schwierig  läßt  sich  bei  richtiger  Handhabung  des 
Apparates  das  von  störenden  Lichtreflexen  freie  dunkle  Gesichts- 
feld erzielen. 

Der  scharfe  Kontrast  zwischen  dunkelem  Feld  und  grell  leuch- 
tendem Bilde  läßt  noch  Objekte  hervortreten,  welche  bei  gewöhnlicher 


XXII,  1.  Metz:  Die  Leitzsche  Dunkelfeldbeleuchtung.  117 

Beleuchtung  dem  Auge  entgehen.  Es  kann  deshalb  diese  Dunkel- 
feldeinrichtung, welche  der  von  Siedentopf  und  Zsigmondy  (Annal. 
der  Physik  X,  1903,  p.  1 — 39)  angegebenen  Methode  verwandt  ist, 
auch  zur  Erforschung  ultramikroskopischer  Teilchen  vorteilhaft  heran- 
gezogen werden.  Auch  sonst  unsichtbare  ungefärbte  Bakterien 
lassen  sich  durch  diese  Einriclitung  zur  Wahrnehmung  bringen. 

Zur  Untersuchung  ultramikroskopischer  Teilchen  in  Flüssigkeiten, 
z.  B.  in  Gold-  und  Silberlösungen,  dient  eine  Kammer,  welche  Figur  4 
im  Querschnitt  zeigt.     Die   Einrichtung  der  Kammer  ist  folgende: 

In  einer  Messingplatte  ist  eine  zylindrische  Vertiefung  aus- 
gedreht. Den  Boden  dieser  Kammer,  deren  Mitte  durchbohrt  ist, 
deckt  eine  Glasplatte.  Die  Mitte  der  Glasplatte  bildet  eine  kreis- 
runde Erhöhung,  deren  plane  und  mit  der  Bodenfläche  parallele  Ober- 
fläche etwa  1  mm  die  Bodenfläche  überragt.  Zwischen  diesem  inneren 
zylindrischen  Glaskörper    und    der  Kammerwand    ist    eine  Rinne   ge- 


T 


-IJ 


J 


I         1 ,.__ V  WflB^:^:        I 


j  

4. 
Kaminer  zur  Untersuchung  von  Flüssigkeiten, 

bildet.  Das  dünne  Deckglas  von  18  mm  Durchmesser,  welches  zur 
Bedeckung  der -Kammer  dient,  ist  an  der  unteren  Seite  eines  Ringes, 
der  sich  auf  die  Metallkamraer  aufschraubt,  mit  einer  Gummidichtung 
aufgesetzt.  Das  verschraubte  Deckglas  sitzt  so  auf  dem  oberen,  etwas 
über  der  Oberfläche  des  Glaszylinders  erhöhten  Metallrand  der  Kammer, 
daß  zwischen  der  Unterfläche  des  Deckglases  und  der  Oberfläche  des 
Glaszylinders  sich  ein  0"08  mm  hoher  Raum  bildet,  der  mit  der 
Rinne  in  Verbindung  steht.  Von  dieser  führen  zwei  Öffnungen,  durch 
welche  die  zu  untersuchende  Flüssigkeit  zu-  und  abströmt,  nach  außen. 
In  dem  von  dem  Dunkelfeldkondensor  beleuchteten  schmalen  Raum 
zwischen  Deckglas  und  Glaszylinder  wird  die  Untersuchung  vor- 
genommen. 

Es  treten  bei  der  Beobachtung  mit  der  beschriebenen  Dunkel- 
feldbeleuchtung, wie  überhaupt  bei  Anwendung  von  Duukelfeldbeleuch- 
tung,  leicht  stark  störende  Beugungserscheinungen  hervor. 

Sie   lassen   sich  durch   eine  passende  Wahl  der  Stelle  des  Prä- 


118  T  r  i  e  p  e  1 :  Ein  Zylinder  -  Rotations  -  Mikrotom.  XXII,  1, 

parates,  in  welcher  die  beleiicliteteu  Objekte  nicht  zu  sehr  gehäuft 
auftreten,  durch  eine  günstige  Einbettung  der  Objekte,  durch  richtige 
Regulierung  und  Dämpfung  des  Lichtes  vermindern. 

Gelingt  es  durch  solche  oder  ähnliche  Mittel  Bilder  zu  erhalten, 
in  denen  die  sekundären  Beugungsbilder  gegen  das  primäre  Bild 
sehr  deutlich  zurücktreten  und  letzteres  nicht  verwirren,  so  könnte 
dieser  Beleuchtungseinrichtung,  mit  welcher  man  bei  gewöhnlicher 
Beleuchtung  unsichtbare  Objekte  zu  erkennen  vermag,  ein  günstiges 
Prognostikon  für  die  Zukunft  gestellt  werden. 

[Eingegangen  am  19.  März  1905.] 


Ein  Zylinder  -  Rotations  -  Mikrotom. 

Von 
Hermaiin  Triepel 

in  Greifswald. 


Hierzu   drei   Holzschnitte. 


Bei  den  meisten  der  bisher  konstruierten  Mikrotome  sind  Schnitt- 
ebene  des  Objektes  und  gleitende  Flächen  des  Instrumentes  so  an- 
geordnet, daß  schon  die  geringste  Abweichung  von  der  exakten 
Bewegung  der  Gleitflächen  nicht  unbeträchtliche  Schwankungen  der 
erzielten  Schnittdicke  herbeiführen  kann.  So  bedingt  beispielsweise 
bei  Schlittenmikrotomen  eine  minimale  Drehung  des  Messerschlittens, 
wie  sie  leicht  beim  Schneiden  schwieriger  Objekte  sich  einstellt, 
infolge  von  Hebelwirkung  einen  bedeutenden  Ausschlag  des  freien 
Messerendes.  Der  Übelstand  wird  besonders  dann  fühlbar,  wenn 
sich  zwischen  den  aufeinander  gleitenden  Flächen  eine  Ölschicht  be- 
findet, da  deren  Form  veränderlich  ist.  Die  Dicke  dieser  Schicht 
schwankt  erheblich ,  sobald  der  auf  ihr  lastende  Druck  nur  im  ge- 
ringsten Grade  verändert  wird.  ^ 


1)  Vgl.  Heidenhain,  M.,  Über  die  Schlittenbremse,  eine  Neukonstruk- 
tion am  Jung  sehen  Mikrotom  zur  Vermehrung  der  Stabilität  der  Schlitten- 
führung (Diese  Zeitschr.  Bd.  XVIII,  1901,  p.  138). 


XXII,  1. 


Triepel:  Ein  Zylinder -Rotations -Mikrotom. 


119 


Ich  glaube  nun,  daß  bei  dem  Zylinder-Rotatious -Mikrotom, 
das  ich  im  folgenden  beschreiben  werde,  der  Einfluß  der  genannten 
Fehlerquelle  von  vornherein  durch  das  Prinzip  ausgeschaltet  ist, 
das  der  Konstruktion  des  Instrumentes  zugrunde  gelegt  wurde.  Es 
ist  bei  diesem  nur  eine  einzige  gleitende  Fläche  vorhanden ,  die  so- 
wohl bei  der  Hebung  des  Objektes ,  als  auch  bei  der  Herstellung 
der  Schnitte  bewegt  wird,  so  daß  die  unvermeidlichen  Abweichungen 


1. 


von  mathematisch-exaktem  Gang  auf  einen  einzigen  Ort  beschränkt 
sind.  Die  Schnittebene  des  Objektes  ist  nun  senkrecht  zur  Glejt- 
fläche  orientiert,  und  etwa  vorkommende  ungewollte  Verschiebungen 
werden  daher  im  wesentlichen  nur  Verlagerungen  des  Objektes 
parallel  zur  Schnittebene,  aber  nicht  senkrecht  zu  ihr  veranlassen. 

Das  Mikrotom  ist  nach  meinen  Angaben  in  der  Werkstätte  von 
Gustav  Miehe  angefertigt  worden.  Einige  Einzelheiten  der  Kon- 
struktion wurden  auf  Anraten  von  Herrn  F.  Bode,  des  Inhabers  der 
Werkstätte,  in  den  Plan  übernommen. 


J20  Triepel:  Ein  Zylinder -Rotations -Mikrotom.  XXII,  1. 

Figur  1  zeigt  das  Mikrotom  in  (nicht  ganzj  ^/^  der  natür- 
lichen Größe. 

Mit  einer  Grundplatte  ist  ein  auf  drei  Füßen  ruhender  stark- 
wandiger  Hohlzyliuder  von  107  mm  äußerem  Durchmesser  fest  ver- 
banden. In  ihm  befindet  sich  ein  zweiter  Hohlzylinder,  der  aus 
Stahl  gefertigt  ist,  eine  Höhe  von  115  mm  und  einen  äußeren  Durch- 
messer von  80  mm  besitzt  und  am  oberen  und  unteren  Ende  durch 
eine  Messingplatte  verschlossen  ist.  Der  unteren  Verschlußplatte  ist 
noch  ein  kleines  Plättchen  aus  gehärtetem  Stahl  aufgeschraubt,  mit 
dem  der  innere  Zylinder  auf  der  Mikrometerschraube  steht.  Die 
Stahlkuppe  der  Schraube  ist  gleichfalls  gehärtet.  Im  übrigen  ist  die 
Hebungsvorrichtung  die  bekannte ;  Drehung  der  Scheibe  um  die 
Breite  eines  Zahnes  bewirkt  Hebung  des  Zylinders  um  2  ^i. 

An  der  oberen  Verschlußplatte  des  inneren  Zylinders  ist  die 
Objektklammer  befestigt.  Das  Schneiden  geschieht  in  der  Weise, 
daß  der  Zylinder  mit  dem  Objekt  gedreht  wird,  während  das  Messer 
festgestellt  ist. 

Von  den  weiteren  Einrichtungen  des  Apparates  sind  zunächst 
die  beiden  Kugellager  zu  erwähnen,  in  denen  sich  der  innere  Zylin- 
der bewegt,  und  die  am  oberen  und  unteren  Ende  des  festen  Zylinders 
angebracht  sind.  Figur  2  stellt  in  "j^  der  natürlichen  Größe  einen 
Schnitt  durch  das  obere  der  beiden  Lager  dar.  Es  bedeutet  hier 
a  den  äußeren,  b  den  inneren  Zylinder,  c  und  d  sind  zwei  Stahl- 
ringe ,  die  in  ein  an  der  Innenseite  von  a  gedrehtes  Gewinde  ein- 
geschraubt sind.  Die  Ringe  sind  an  der  unteren,  beziehungsweise 
oberen  inneren  Kante  abgeschrägt,  und  sie  begrenzen  zusammen  mit 
der  äußeren  Fläche  des  inneren  Zylinders  einen  im  Durchschnitt 
dreiseitigen  Kanal,  der  vollkommen  mit  Stahlkugeln  von  4  mm  Durch- 
messer angefüllt  ist.  Beim  Justieren  des  Instrumentes  wird  der 
Ring  c  dem  Ring  d  nach  Möglichkeit  genähert  und  darauf  durch 
die  Kontremutter  e  in  der  Lage  gesichert. 

Das  Messer  wird  auf  einem  massiven  vierseitigen,  nach  oben 
z.u  etwas  verjüngten  Prisma  (s.  Fig.  1)  befestigt,  das  23  cm  hoch  ist 
und  rechts  von  den  Zylindern  etwas  hinter  der  horizontalen  Mittel- 
linie steht.  Das  Prisma  trägt  an  seiner  vorderen  Seite  das  Lager, 
in  dem  sicli  die  Achse  der  Kurbel  dreht.  Am  linken  Ende  der 
Achse  befindet  sich  ein  aus  Hartgummi  gefertigtes  Zahnrad,  und 
dessen  Zähne  greifen  in  vertikal  stehende  Leisten  ein,  die  an  einem 
den  äußeren  Zylinder  kragenartig  überragenden  Vorsprung  der  oberen 
Verschlußplatte    des    inneren    Zylinders    angebracht    sind.      Bei    der 


XXII,  1. 


Triepel:  Ein  Zylinder -Rotations -Mikrotom. 


121 


durch  die  Kurbeldrehimg  bewirkten  Bewegung  des  Zylinders  findet 
eine  Übersetzung  von  2  :  1  statt. 

Der  Objekthalter  ist  so  eingerichtet,  daß  er  einmal  im  ganzen 
in  verschiedene  Entfernung  von  der  Zylinderachse  gebracht  werden 
kann.  (Der  Ort  der  gleitenden  Fläche  ist  durch  einen  auf  der 
oberen  Verschlußplatte  eingeschnittenen  Kreis  bezeichnet.)  Ferner 
können  an  einem  Kreuzstück  Drehungen  um  zwei  zueinander  senk- 
recht stehende  horizontale  Achsen  ausgeführt  werden,  und  der  Stift 
der  Klammer  läßt  sich  höher  und  tiefer  stellen  und  um  seine  eigene 
Achse  drehen. 

Von  den  Maßen  des  Apparates  ist  noch  bemerkenswert,  daß 
die  Mittellinien  der  Kugellager  um  74  mm  voneinander  entfei'nt  sind 


b 

\  ® 

Ic 

n 

a 

3. 


und  die  Mitte  des  oberen  Lagers  von  der  durch  das  obere  Ende 
des  Prismas  gelegten  llorizontalebene  (die  annähernd  mit  der  Schnitt- 
ebene zusammenfällt)  um  96  mm  absteht. 

Es  erscheint  geboten ,  daß  man  bei  einem  neukonstruierten 
Mikrotom  die  G  r  i)  ß  e  des  übe  r  h  a  u  p  t  möglichen  Fehlers 
zu  ermitteln  sucht  und  so  über  die  theoretischen  Erwägungen  Rechen- 
schaft gibt,  die  zu  dem  Bau  des  Instrumentes  geführt  haben. 

Bei  dem  beschriebenen  Zylinder-Rotations-Mikrotom  ist  —  sofern 
man  von  einer  Deformation  der  Metallteile  absieht  —  eine  Ab- 
weichung vom  mathematisch -exakten  Gang  nur  dadurch  möglich, 
daß  der  innere  Zylinder  selbst  bei  der  sorgfältigsten  Justierung 
noch  minimale  Drehungen  um  horizontal  liegende  Achsen  ausführen 
kann.    Der  Mittelpunkt  dieser  Drehungen  kann  in  der  Zylinderachse 


122  Triepel:  Ein  Zylinder -Rotations -Mikrotom.  XXII,  1. 

und  in  halber  Höhe  zwischen  den  beiden  Kngellagern  angenommen 
werden. 

Beträgt  die  Drehung  des  Zylinders  um  den  Punkt  M  (s.  Fig.  3) 
den  Winkel  99,  so  bewegt  sich  der  Objektpunkt  P  nach  P',  d.  h. 
er  senkt  sich  um  //,  wobei  y  den  gesuchten  möglichen  Fehler  be- 
deutet. 

Nennt  man  r  den  Abstand  des  Punktes  P  von  der  Zyliuder- 
achse ,  d  seinen  Abstand  von  il/,  h  seinen  Abstand  von  der  durch 
M  gelegten  Horizontalebene ,  .s  die  Gerade  PP'  und  )]  und  q  die 
in  den  gezeichneten  rechtwinkligen  Dreiecken  den  Seiten  y  bezw.  r 
gegenüber  liegenden  Winkel,  und  setzt  man 

QP  s 

''''  T  =  2^  =  ^'' 

cos  —■  =  /»•, 
so  ergibt  sich 

y  =  s  '  sin  y  =  s  ■  sin  ^-^  -f  q^ 
=  s  I  sin  ^  cos  Q  -|-  cos  ^  sin  ^1 

y  =  2c  ich  -j-  kr). 

Es  folgt  hieraus,  daß  der  mögliche  Fehler  um  so  größer  ist,  je 
größer  r  ist,  d.h.  der  Abstand  des  Objektpunktes  von  der  Zylinderachse. 
Der  Fehler  wächst  auch  mit  wachsendem  Ä,  aber  in  viel  geringerem 

Grade,    da   bei   den  in  Frage  kommenden  Werten   von    -^  jedenfalls 

c  <C  k-  Ja,  man  kann,  da  -^  sehr  klein  ist,  die  Größe,  in  der  c'^ 
als  Faktor  auftritt,  vernachlässigen  und  erhält  somit  näherungsweise 

y  =  2  ckr  =  2  sin  -^  cos  ^  r 

y  =  sin  (p7\ 

Der  mögliche  Fehler  ist  also  direkt  proportional  dem  Sinus  des 
möglichen  Neigungswinkels  und  dem  Abstand  des  Objektes  von  der 
Zylinderachse. 

Der  Fehler  würde  =  0  werden,  wenn  man  r  ^^  0  machte,   d.  h. 


XXII,  1.  Triepel:  Ein  Zylinder-Rotations-Mikrotom.  123 

das  Objekt  in  die  Achse  des  Zylinders  bräclite ,  wobei  aber  natür- 
lich die  Herstellung-  von  Schnitten  ausgeschlossen  wäre. 

Die  Größe  des  Winkels  cp  hängt  bei  gleich  guter  Justierung 
des  Instrumentes  von  den  Dimensionen  der  Zylinder  ab,  cp  wird  um 
so  kleiner,  je  weiter  die  beiden  Kugellager  voneinander  und  von 
der  Zylinderachse  (Punkt  M)  abstehen.  Aus  technischen  Gründen 
ist  man  freilich  genötigt,  gewisse  Maße  der  Konstruktionsteile  nicht 
zu  überschreiten. 

Um  eine  Vorstellung  von  der  Größe  y  zu  gewinnen,  kann  mau 
für  cp  willkürlich  einen  beliebigen  kleinen  Wert  einsetzen.  Es  sei 
beispielsweise  cp  =  l',  was  bei  den  angegebenen  Maßen  des  In- 
strumentes einer  seitlichen  Verschiebung  des  inneren  Zylinders  in 
der  Höhe  eines  Kugellagers  um  fast  genau  0*0 1  mm  entspricht. 
Dann  berechnet  sich 


für 

r  =  10  mm 

y  =  0-0029  mm 

11 

r  =  20    „ 

y  —  0-0058    „ 

11 

r  =  30    ,, 

y  —  0-0087    „ 

11 

r  —  40    ., 

U  =  0-0116    „ 

11 

r  —  .50    ., 

1/  =  0-0145    „      etc 

Die  berechneten  möglichen  Fehler  sind  zwar  schon  recht  merklich, 
indessen  ist  zu  bedenken,  daß  sie  doch  bedeutend  kleiner  sind  als 
die  Fehler,  die  bei  Mikrotomen  anderer  Konstruktion  sich  einstellen 
können,    daß    ferner    der  Wert    des  Winkels  cp  bei  guter  Justierung 


o 


wohl  noch  herabgedrückt  werden  kann,  und  daß  endlich  die  an- 
gegebenen Werte -von  //  nur  für  den  ungünstigsten  Fall  Geltung 
haben,  während  bei  gut  sclmeidbaren  Objekten  //  für  jedes  r  eo 
ipso  =^  0  oder  doch  nahezu  =^  0  wird. 

Wenn  nun  auch  der  mögliche  Fehler,  wie  angegeben,  zugleich 
mit  dem  Abstände  /•  von  der  Achse  abnimmt,  so  erhält  man  doch 
tatsächlich  durchaus  befriedigende  Resultate,  wenn  mau  bei  einem 
Abstände  von  4 — 5  cm  arbeitet,  also  dort,  wo  der  Kreis  in  die 
obere  Verschlußplatte  des  inneren  Zylinders  eingeschnitten  ist,  oder 
noch  außerhalb  von  dieser  Stelle.  Man  könnte  meinen,  es  müsse 
störend  wirken,  daß  die  Messerschneide  nicht  auf  geradem,  sondern 
auf  kreisförmig  gebogenem  Wege  durch  das  Objekt  geführt  wird. 
Das  ist  aber  nicht  der  Fall.  Wenn  r  zu  klein  genommen  wird  und 
das  (in  Paraffin  eingebettete)  Objekt  nicht  entsprechend  schmal  ist, 
kommt  es  vor,  daß  die  Zusammenschiebun»  des  Schnittes  —  die 
ja  bei  Paraffinobjekten  nie  ausbleibt   —   nicht  in  seiner  ganzen  Breite 


124  Triepel:  Ein  Zylinder -Rotations -Mikrotom.  XXII,  1. 

gleiclimäßi,^^  ausfällt.  Wählt  mau  r  etwas  größer,  so  treteu  solche 
DifFereuzen  uicht  mehr  iu  die  Erscheiuuug,  so  daß  das  Mikrotom 
u,  a,    auch    bei    der    Herstellung-    von  Bändern    gute  Dienste    leistet. 

Als  weiteren  Vorteil,  den  der  Gebrauch  des  Mikrotoms  mit  sich 
bringt,  möchte  ich  es  bezeichnen,  daß  man  es  nicht  nötig  hat,  das 
Objekt  nach  Anfertigung  eines  Schnittes  vor  der  Herstellung  des 
nächsten  wieder  unter  der  Messerschneide  zurückzuführen.  Wenn 
man  dies  vermeiden  will,  so  braucht  man  nur  die  Kurbel  immer  in 
demselben  Sinne  weiter  zu  drehen. 

Als  Annehmlichkeit  ist  es  wohl  anzusehen,  daß  die  Gleitflächen 
vollkommen  verdeckt,  also  vor  Bescliädigungen  wie  auch  vor  Staub 
geschützt  sind.  Die  Anwendung  eines  Schmiermittels  ist  überflüssig 
oder  nur  nach  sehr  langem  Gebrauche  des  Instrumentes  wünschenswert. 

Das  Mikrotom  ist  in  erster  Linie  für  Schneiden  mit  quer- 
gestelltem Messer  bestimmt.  Das  Objekt  wird  genau  senkrecht 
zur  Messerschneide  bewegt,  wenn  diese  bezw.  ihre  Verlängerung  die 
Achse  der  Zylinder  schneidet.  Die  radiäre  Richtung  erliält  die 
Messerschneide  bei  den  gebräuchlichen  kurzen  Messern  mit  ca.  3"5  cm 
breiter  Klinge  dann ,  wenn  das  Messer  senkrecht  zur  Tiefenrich- 
tung des  ganzen  Instrumentes  gestellt  wird,  ganz  entsprechend  der 
horizontalen  Stellung  bei  Schlittenmikrotomen). 

Man  kann  dieselben  Messer  auch  mäßig  sehräggestellt  verwenden, 
indessen  soll  man  mit  ihnen  nicht  unter  allzu  kleinen  Winkeln  schneiden. 
Wie  man  durch  eine  einfache  Zeichnung  leicht  bestätigt,  schließt  eine 
Gerade,  die  mehrere  konzentrische  Kreise  schneidet,  mit  diesen,  sofern 
sie  nicht  radiär  gerichtet  ist,  verschiedene  Winkel  ein.  So  werden 
auch  an  dem  neuen  Mikrotom  beim  Schneiden  mit  schräggestelltem 
Messer  Teile  des  Objektes,  die  ungleich  weit  von  der  Zylinderachse 
entfernt  sind,  unter  verschiedenen  Winkeln  getroften.  Große  Differenzen 
im  Schnittwinkel  können  zum  Zerreißen  des  Schnittes  führen.  Celloidiu- 
schnitte  sind  widerstandsfähiger  als  Paraffinschnitte ,  dicke  Schnitte 
sind  widerstandsfähiger  als  dünne  (aus  diesem  Grunde  läßt  sich  keine 
allgemein  gültige  Vorschrift  über  den  Grenzwinkel  angeben,  bis  zu 
dem  Schrägstellungen  der  geraden  Messer  erlaubt  sind).  Wenn  man 
an  allen  Punkten  des  Objektes  unter  gleichem  Winkel  schneiden 
wollte,  so  müßte  man  der  Messerschneide  eine  gekrümmte  Form 
geben,  und  zwar  die  Form  einer  logarithmischen  Spirale,  die  für 
jeden  Schnittwinkel  einen  besonderen  Verlauf  besitzen  würde.  Weil 
die  Herstellung  exakt  gekrümmter  Messer  mit  großen  Schwierigkeiten 
verbunden  ist,    und  zudem  das  Arbeiten  mit  sichelförmigen  Messern, 


XXII,  1.  Henneberg:  Neues  Mikrotom  von  Leitz.  125 

wie  ein  Versuch  zeigte,  nicht  zu  tadellosen  Schnitten  führt,  wird 
fernerhin  von  ihrer  Anfertigung  abgesehen  werden.  Übrigens  beachte 
man,  daß  an  dem  neuen  Mikrotom  ein  schräggestelltes  (gerades)  Messer 
mit  der  kreisförmigen  Bahn  des  Objektes  natürlich  einen  viel  spitzeren 
Winkel  bildet  als  mit  der  Tiefendimension  des  Instrumentes. 

Der  Vertrieb  des  gesetzlich  geschützten  Mikrotoms  ist  der  Firma 
Gustav  Miehe  in  Hildesheim  übertragen  worden. 

[Eingegangen  am  17.  März  1905.] 


[Aus  dem  anatomischen  Institut  zu  Gießen.] 

Neues  Mikrotom  von  Leitz. 

Von 

Prof.  Henueberg. 


Hierzu   vier  Holzs  chnitte. 


Seit  einigen  Monaten  ist  im  hiesigen  anatomischen  Institut  ein 
Mikrotom  aus  der  Werkstatt  von  LEiTZ-WetzIar  in  Gebrauch,  das 
außer  Einrichtungen,  die  sich  bereits  an  andern  Mikrotomen  hnden, 
einige  neue  aufweist  und,  nachdem  nach  unserer  Angabe  eine  Anzahl 
von  Änderungen  vorgenommen  wurden,  uns  in  mancher  Beziehung 
zweckmäßig  zu  sein  scheint.  Das  Instrument  ist  so  einfach  und  die 
Figuren  genügend  übersichtlich,  daß  die  Beschreibung  kurz  gefaßt 
werden  kann. 

Es  handelt  sich  um  ein  ganz  besonders  stabil  gebautes  Schlitten- 
mikrotom mit  automatischer  Objekthebnng  und  großem,  recht  schwerem 
Messerschlitten,  der  direkt  mit  der  Hand  oder  durch  Kette  und  Zahn- 
rad geführt  wird.  Das  Instrument  wird  in  zwei  Größen  mit  einer 
Bahnlänge  von  32  und  42  cm  hergestellt.  Für  die  meisten  Zwecke 
wird  die  kleine  Form  genügen. 

W^ill  man  den  Messerblock  direkt  mit  der  Hand  führen,  so 
befestigt  man  einen  Bügel  an  dem  Block,  und  zwar  geschieht  dies 
mit  derselben  Schraube,  die  auch  die  Messerklammer  hält  (cf.  Fig.  2). 


126 


Henne b  er  g:  Neues  Mikrotom  von  Leitz. 


XXII,  1. 


Bei  der  Benutzung  der  Kette  wird  das  Mikrotom  an  jedem 
Ende  mittelst  einer  Flügelschraube  mit  einem  Balken  armiert  (Fig.  1), 
von  denen  jeder  ein  Kettenrad,  der  eine  außerdem  die  Kurbel,  der 
andere  die  Einrichtung  zum  Spannen  der  Kette  trägt.  Die  Be- 
wegungen des  Blockes  mit  Hilfe  der  Kette  kann  auf  verschiedene  Art 
geschehen.  Dies  scheint  mir  ein  Vorzug  des  Instrumentes  zu  sein, 
der  es  besonders  auch  für  Anfänger  brauchbar  macht,  da  mau,  je 
nachdem  es  einem  bequemer  ist,  entweder  mit  der  rechten  Hand  die 
Kurbel  dreht  und  mit  der  linken  den  Pinsel  führt  oder  umgekehrt. 
Die  Kurbel  läßt  sich  nämlich,  abgesehen  von  der  Stellung,  die  Figur  1 


zeigt,  an  demselben  Ende  des  Mikrotoms,  aber  an  der  andern  Seite 
des  Kettenrades  anbringen.  Man  dreht  dann  mit  der  rechten  Hand. 
Sodann  lassen  Kurbel  und  Kettenspanner  sich  vertauschen.  Nimmt 
man  die  Kurbel  an  das  hintere  Ende,  so  dreht  man  dieselbe  natur- 
gemäß mit  der  Linken. 

Die  Art  der  selbsttätigen  Hebung  des  Objekts  zeigt  Figur  2. 
Die  Drehung  des  Zahnrades  um  ein  bestimmtes  Stück  geschieht 
indirekt  durch  einen  winkelig  gebogenen  Hebel,  der  mittels  einer 
Schraube  beweglich  am  Block  (daher  Blockwinkel)  befestigt  ist.  Der 
nach  unten  gerichtete  Schenkel  nimmt  bei  der  Bewegung  des 
Schlittens  nach  dem  Ende  der  Bahn  einen  federnden  Haken  mit,  der 


XXII,  1. 


Henneberg:  Neues  Mikrotom  von  Leitz. 


127 


in  die  Zähne  des  Rades  eingreifend  dies  ein  Stück  mit  herumzieht. 
Die  Länge  der  Strecke,  um  welche  der  Blockwiukel  das  Rad  auf 
solche  Weise  dreht,  ist  abhängig  von  der  Stellung  des  nach  unten 
gerichteten  Schenkels.  Je  steiler  er  steht,  desto  länger,  je  schräger, 
desto  kürzer  ist  sie.  Dabei  ist  Voraussetzung,  daß  der  Block  immer 
bis  zu  einem  bestimmten  Punkte  der  Bahn  hin  bewegt  wird,  nämlich 


2. 


bis  an  das  Ende  derselben ,  wo  er  an  eine  quere  Platte  anschlägt. 
Letztere  ist,  um  den  Stoß  zu  mildern,  mit  Leder  überdeckt.  In  der- 
selben Weise  wirkt  es  günstig,  wenn  man  das  ganze  Mikrotom  auf 
eine  Filzplatte  stellt  oder  unter  die  drei  Füße  Gummistücke  legt. 
Die  Steil-  oder  Schrägstellung  des  Blockwinkels  geschieht,  wie 
aus  der  Figur  2  sofort  ersichtlich,  mit  Hilfe  eines  kleinen  Sperrhakens ; 
die  auf  der  kleinen  Skala  angebrachten  Zahlen  geben  die  Anzahl 
der  Radzähne    an,    um  die   bei  der  betreffenden  Stellung  des  Block- 


128 


Henneberg:  Neues  Mikrotom  von  Leitz. 


XXII,  1. 


winkeis  das  Rad  gedreht  wird.  Ein  Radzahn  entspricht  einer 
Schnittdicke  von  O'OOl  mm.  Bei  steilster  Stellnng  des  Blockwinkels 
wird  das  Rad  nm  25  Zähne  gedreht.  Es  werden  also  dann  Schnitte 
von  25  yM  geliefert. 

Die  Vorwärtsbewegnng  des  Hakens  erfolgt  durch  die  auf  der 
Figur  2  sichtbare  Spiralfeder,  und  zwar  dann,  Avenn  der  Block  das 
Messer  zum  Objekt  hinführt.  Hierbei  gleitet  der  Haken  am  Zahnrande 
vorwärts,  bis  er  an  der  vertikalen  Wand  des  Mikrotoms  einen  Wider- 
stand findet.  Damit  das  Zahnrad  nicht  zu  leicht  geht,  wodurch  ein 
Zurückschnappen  eintreten  kann ,  ist  eine  kleine  Bremse  (auf  den 
Figuren  nicht  sichtbar)  angebracht,  die  durch  Anziehen  einer  Schraube 
in  ihrer  Wirkung  reguliert  Avird. 


Zur  Erleichterung  der  Einstellung  des  Objekthalters  besteht  die 
an  ihm  befestigte  Mutter ,  in  der  sich  die  Zahnradspindel  bewegt, 
aus  zwei  Hälften,  an  deren  jede  wie  bei  einer  Zange  je  ein  Schenkel 
ansitzt  (auf  Fig.  1  sichtbar).  Eine  zwischen  den  letzteren  angebrachte 
Feder  drückt  die  beiden  Teile  genügend  fest  zusammen.  Ein  Druck 
auf  die  Schenkel  genügt,  um  die  Mutter  zu  öffnen  und  den  Ob- 
jekthalter au  dem  Gewinde  der  Spindel  hinauf  und  hinab  schieben 
zu  können. 

Die  Messerklammer  ermöglicht  es  durch  den  Gebrauch  zweier 
Schrauben,  das  Messer,  das  auf  einer  um  eine  Achse  drehbaren  Platte 
ruht,  steiler  oder  iiacher  zu  stellen;  die  Schraube  zur  Befestigung 
der  Messerklammer  gleitet  auf  dem  Block  in  einer  Rinne,  wodurch 
die  Verschiebung  der  Klammer  sehr  bequem  geschieht. 

Um  beim  Schneiden  von  Celloi'dinobjekten  das  Messer  mit  70*^/q 
Alkohol  zu  beträufeln,  haben  wir  dem  Mikrotom  einen  Tropfapparat 
beigefügt.     Dieser  besteht  aus  einem  Kessel  mit  abschließbarer  Aus- 


XXII,  1. 


Henne beri?:  Neues  Mikrotom  von  Leitz. 


129 


finßröhre  am  Boden.  Er  wird  aufgesetzt  und  durch  eine  Schraube 
befestigt  auf  einem  Zapfen,  der  mit  einer  Fußplatte  in  die  Block- 
rinne eingeschoben  wird.  Es  ist  dafür  gesorgt,  daß  die  Ausfluß- 
öffnung in  die  Nähe  des  Objektes  geführt  werden  kann.  Dies  ge- 
schieht einmal  dadurch,  daß  der  ganze  Apparat  in  der  Blockrinne 
hin-  und  herbewegt  werden  kann.  Sodann  ist  die  horizontale  Aus- 
flußröhre um  eine  am  Boden  des  Kessels  befestigte  kurze  ver- 
tikale   zum     Durchtritt    des    Alkohols    durchbohrte    Achse    drehbar. 


Da  letztere  an  der  Peripherie  des  kreisförmigen -Bodens  liegt,  so 
kann  sie  und  damit  auch  die  Ausflußöffnung,  indem  man  den  Kessel 
um  seine  Achse  dreht,  auch  auf  solche  Weise  dem  Objekt  ge- 
nähert werden. 

Um  bei  querstehendem  Messer  die  zur  Anfertigung  gerader 
Schnittbänder  nötigen  senkrecht  zur  Bahn  und  parallel  zur  Messer- 
schneide stehenden  Ebenen  vorn  und  hinten  am  Paraffiublock  her- 
zustellen, läßt  sich  an  dem  Messerblock  ein  genau  im  rechten  Winkel 
zur  Bahn  stehendes  Messer  drehbar  anbringen.  Dasselbe  wird  ein- 
mal mit  dem  einen  Ende,  dann  mit  dem  anderen  an  den  Messerblock 

Zeitschr.  f.  fl-iss.  ilikroskopie.     XXII,  1.  9 


130  Melissinos:  Vorrichtung  z.  Färbung  aufgeklebt.  Öerienschnitte.  XXII,  1. 

angefügt ,  so  daß  es  beim  Schneiden  der  beiden  Ebenen  jedesmal 
seine  genau  senkrecht  stehende  Fläche  dem  Paraffinblock  zuwendet. 
Indem  man  den  Messerblock  allmählich  nach  dem  eingebetteten  Ob- 
jekt hin  bewegt,  schneidet  man  das  umgebende  Paraffin,  soweit  es 
entbehrlich  ist,  schichtweise  weg.  Wir  haben  uns  dieses  Messer 
vor  Jahren   herstellen   lassen   und   glauben   es   empfehlen  zu  können. 

[Eingegangen  am  31.  März  1905.] 


[Aus  dem  Pathologisch -Anatomischen  Institut  zu  Athen.] 

Yorrichtung   zur   gleichzeitigen   schnellen 

Färbung   der   auf  Deckgläsern   oder   Objektträgern 

aufgeklebten  Serienschnitte. 

Von 
Dr.  Koust.  Melissinos, 

Privatdozent  der  Anatomie  und  Histologie  und  Prosektor  an  dem  Pathologisch- 
Anatomischen  Institut. 


Hierzu   ein   Holzschnitt. 


Denjenigen ,  welche  sich  der  Methoden  zum  ein-  oder  viel- 
fachen Färben  der  auf  Deckgläsern  oder  Objektträgern  aufgeklebten 
Serienschnitte  bedienen,  stehen  einige  Vorrichtungen  zur  Verfügung, 
bei  deren  Anwendung  die  allgemeine  Behandlung  der  Färbung  und 
des  Auswascheus  beschleunigt  und  die  Färbung  der  Schnitte  einfarbig 
wird.  Diese  Instrumente  haben  die  meisten  (die  sich  mit  der 
mikroskopischen  Technik  beschäftigen)  gemäß  der  Mißstände  der 
früheren  modifiziert  oder  ganz  neue  anfertigen  lassen ,  z.  B.  hat 
ScHiEFFERDECKER^  im  Jahre  1900  die  auf  der  einen  Seite  befind- 
liche und  mit  Riefeln  versehene  feste  Platte  der  älteren  durch 
eine  bewegliche  mit  Riefelungen  versehene  Platte  ersetzt,  und  so  ist 


^)  ScHiEFFERDECKER,  H.,  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XVII. 


XXII,1.  Melissinos:  Vorrichtung z.  Färbung' aufgeklebt. Serienschnitte.  131 

es  ihm  gelungen  in  den  Apparat  Platten  verschiedener  Größe  ein- 
zusetzen. R.  KuTNER^  in  Berlin,  J.  Schaffer""  in  Wien,  R.  Bor- 
mann'^  in  Göttingen,  Caro^  in  Berlin,  Buscalioni''  in  Rom,  Hellen- 
dall'' in  Straßburg,  und  im  Jahre  1903  J.  Dewitz'  und  Schaffer ^ 
haben ,  nachdem  sie  die  früheren  Apparate  modifiziert  und  ergänzt 
hatten ,  Jeder  eine  eigene  Vorrichtung  zum  Färben  und  zu  andern 
Behandlungen  der  aufgeklebten  Schnitte  hergestellt. 

Da    wir    annehmen    dürfen ,    daß    der    Mikroskopiker    besonders 
darauf  bedacht  sein  muß,  wie  man  Zeit  und  Material,  das  oft  nicht 


gerade  billig  ist,  spare,  und  die  in  dem  Kästchen  eingesetzten  Deck- 
gläser bequemer  und  besser  aufbewahre,  als  es  die  bisher  übliche 
Numerierung-    gestattete ,    haben    wir    durrh    die  Ergänzung    des  mo- 


^)  Kutner,  K.,  Deutsche  med.  Wochenschr.  9.  F.,  1893. 
^)  Schaffer,  J.,  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XI. 
^)  Bormaxx,  K.,  Zeitschr.  f.  wi.ss.  Mikrosk.  Bd.  XI. 
^)  Caro,  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XI. 
■")  Buscalioni,  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XIV. 
")  Hellendall,  H.,  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XVII. 
^)  Dewitz,  J.,  Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  XXXIII. 
*)  Schaffer.  J..  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XIX. 


9* 


132  Melissinos:  Vorrichtungz.  Färbung  aufgeklebt.  Serienschnitte.  XXII,  1. 

difizierten  ScHiEFFERDECKERSclien  Apparates  und  am  hiesigen  Platze 
in  der  mechanischen  Werkstätte  des  Herrn  König  einen  eigenen 
Apparat  angefertigt,  welclier  viel  besser  ist  als  jener  und  allen  Be- 
dürfnissen der  mit  histologisch  -  mikroskopischen  Arbeiten  Beschäf- 
tigten gerecht  wird. 

Mein  Apparat ,  welchen  ich  auf  dem  Panhellenischen  Kongreß 
in  Athen  (6.  Mai  1903)  vorgezeigt  habe,  besteht  aus  einem  vier- 
eckigen Kästchen  K^  welches  80  mm  lang ,  45  mm  breit  und  hoch 
ist.  Auf  der  einen  inneren  Seite  des  Apparates  befindet  sich  eine 
mit  Riefelungen  versehene  Platte  A^  welche  durch  einen  kleinen 
Knopf  Kn  festgehalten  wird.  Die  Platte  A  hat  20  Riefelungen  R 
zur  Aufnahme  von  20  Objektträgern  oder  40  Deckgläsern.  Parallel 
zu  der  Platte  A  und  ebenfalls  in  dem  Kästchen  befindet  sich  eine 
zweite  Platte  i?,  welche  die  gleiche  Anzahl  von  gleichgroßen  Riefe- 
hmgen hat.  Diese  steht  durch  einen  langen  Arm  Ar  mit  der 
Schraube  S  in  Verbindung.  Dreht  man  diese  Schraube ,  so  nähert 
und  entfernt  sich  die  Platte  B  von  der  unbeweglichen  Platte  A. 
Eine  jede  von  den  riefenhaltigen  Platten  trägt  am  unteren  Rande 
und  in  der  inneren  Fläche  einen  feinen  Draht,  welcher  5  mm  über 
die  Oberfläche  hervorragt  und  dazu  dient,  das  Herabfallen  der 
Platten  in  den  Niederschlag  des  Farbstoffes  am  Grunde  des  Ge- 
fäßes zu  verhindern.  Die  bewegliche  Platte  B  trägt  an  ihren  Seiten- 
rändern zwei  P^inschnitte ,  um  die  Zirkulation  der  Farbstott'lösungen, 
Waschflüssigkeiten  etc.  zu  erleichtern.  Die  größten  Gläser,  die  man 
hineinstellen  kann,  haben  folgende  Maße:  14X14  mm,  40X40  mm, 
18X24  mm,  20X30  mm,  23X30  mm,  30  X  40  mm  und  23  X  50  mm, 
Deckgläser  quadratische  und  längliche  Form,  18 — 30  mm  rundliche 
Form,  und  28X48  mm,  26X76  mm,  45x76  mm  Objektträger. 
Die  Größe  der  eingestellten  Deckgläser  wird  durch  eine  auf  dem 
oberen  Rand  der  Seite ,  wo  die  Schraube  S  ist ,  eingravierte  Skala 
Sk  in  Millimetern  gemessen. 

Mein  Apparat  übertriff"t  die  von  andern  Autoren  beschriebenen 
Apparate,  a)  weil  man  mit  ihm  Objektträger  oder  Deckgläser  gleich- 
zeitig behandeln  kann ;  b)  weil  die  in  den  Riefelungen  der  Platten 
A  imd  B  eingestellten  Deckgläser  durch  eine  Umdrehung  der  Schrauben 
festgehalten  werden,  so  daß,  wenn  man  den  Apparat  bei  dem  Aus- 
gießen der  verschiedenen  Färbflüssigkeiten  umkehrt,  keine  Platte 
(Deckglas)  hinabfällt;  c)  schließlich  kann  man  mit  einem  und  dem- 
selben Apparat  ein  reichliches  auf  den  Deckgläsern  aufgeklebtes 
Material    in    kurzer  Zeit    behandeln.      Die    verschiedenen    darin    hin- 


XXIIjl.  Melissinos:  Vorrichtung- z.  Färbung  aufgeklebt.  Serienschnitte.  133 

gestellten  Materialien,  z.  1).  FärbfUissigkeiten,  Alkohol,  Xylol,  welche 
man  durch  einen  in  der  einen  Kcke  befindlichen  Schnitt  hineingießt, 
werden  in  verschiedenen  Flaschen  zur  zweiten  und  dritten  Färbung 
derselben  nach  vorhergehender  Filtration  aufbewahrt.  Dieser  Ap- 
parat, dem  ich  eine  kleine  Modifikation  hinzufügte,  die  ich  bald  ver- 
öttentliclien  werde ,  wird  durch  Lösen  des  kleinen  Knopfes  K  und 
der  beiden  kleinen  Schrauben  des  Armes  der  Platte  B  auseinander 
genommen  und  dann  kann  mau  ihn  im  Innern ,  sowie  die  Platten 
A  und  B  gut  reinigen. 

7  Monate  nach  meiner  Mitteilung  auf  dem  II.  Panhellenischen 
Kongreß  hat  Dr.  W.  Hoffmann  ^  in  Heidelberg  einen  kleinen  Apparat 
für  Deckgläser  beschrieben,  welchen  er  Deckglastransporteur 
für  Schnittfärbuug  nennt.  Dieser  ist  sehr  einfach  und  billig,  aber 
er  erfüllt  nicht  alle  die  von  mir  beschriebenen  Zwecke  und  be- 
sonders was  die  gute  Befestigung  der  Deckgläser  aller  Arten  der- 
selben, z.  B.  von  rundlichem  Format,  betrifft. 

1)  HoFFMAxx,  W.,  Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XX,  H.  2. 
[Eingegangen  am  26.  Januar  1905.] 


134  Referate.  XXII,  1. 


Referate. 


1.  Lehr-  und  Handbücher. 

Schmorl ,  G.,  Die  pa|liologisch-liiytologisclien  Unter- 
suchungsmethoden. 3.,  neu  bearbeitete  Aufl. ;  Leipzig 
(F.  e.  W.  Vogel),   1905.  8-75  M. 

Die  vorliegende  d  r  i  1 1  e  Auflage  der  „pathologisch-histologischen 
Untersuchungsmethoden"  hat  eine  nicht  unerhebliche  Mehrung  ihres 
Umfanges  erfahren,  was  in  Anbetracht  der  massenhaft  anschwellenden 
diesbezüglichen  Verötfentlichuugen  wohl  nicht  zu  vermeiden  war ,  im 
Gegenteil  nur  zu  begrüßen  ist,  da  der  Verfasser  auch  für  die  neue 
Auflage  seinem  Grundsatz  treu  blieb ,  nur  von  ihm  selbst  nach- 
geprüfte Vorschriften  aufzunehmen ;  auch  so  noch  war  die  Auswahl 
jedenfalls  keine  leichte.  Einzelne  Kapitel  mußten  infolge  der  Wand- 
lungen der  neuesten  Technik  umgearbeitet  werden ,  andere  —  Ab- 
schnitte über  mikroskopisches  Zeichnen  und  über  Polarisation  — 
wurden  neu  eingefügt.  Im  übrigen  blieb  die  Anordnung  des  Buches 
die  bisherige,  schon  bewährte.  Besonders  anzuerkennen  ist  es,  daß 
bei  allem  Streben  nach  Kürze  die  Darstellung  der  ^lethoden  aus- 
führlich genug  bleibt ,  um  eine  präzise  Anwendung  derselben  zu  er- 
möglichen und  daß ,  was  Referent  besonders  hoch  veranschlagen 
möchte,  sich  bei  jedem  Kapitel  die  einschlägige  Originalliteratur  zu- 
sammengestellt rindet;  sehr  schätzenswert  ist  es  ferner,  daß  solche 
Methoden,  welche  noch  nicht  bis  zur  völligen  Sicherheit  herangebildet 
werden  konnten,  als  solche  bezeichnet  sind,   so  daß  derjenige,  welcher 


XXII,  1.  Referate.  135 

das  erstemal  mit  denselben  hantiert ,  die  Schuld  des  etwaigen  Miß- 
lingens  nicht  unbedingt  auf  sich  oder  seine  Reagenzien  zu  schieben 
veranlaßt  wird,  was  gewiß  vor  einem  weiteren  Versuch  an  anderem 
Material  weniger  abschrecken  wird,  als  wenn  er  auf  die  Möglichkeit 
des  Mißlingens  nicht  hingewiesen  worden  wäre.  Auch  sonst  zeigen 
zahlreiche  eingestreute  Bemerkungen,  namentlich  Warnungen  vor 
einzelnen  naheliegenden  Fehlgriffen,  daß  die  wiedergegebenen  Me- 
thoden unter  den  Augen  des  Verfassers  im  Laboratorium  durch- 
probiert worden  sind  und  das  ganze  Gebiet  eine  didaktische  Durch- 
arbeitung erfahren  hat.  Erwähnt  soll  endlich  noch  werden,  daß  auch 
für  die  dem  Pathologen  und  Histologen  sonst  gewöhnlich  ferner 
liegenden  Gebiete  der  Untersuchung  des  Auges  und  des  Gehörorgans 
ausreichende  Vorschriften  gegeben  sind.  Die  Ausstattung  des  Buches 
ist  eine  des  Verlags  würdige.  Schmaus  {München). 

WinsIOW,    Ch. -E.   A.,    Elements    of   applied    Microscopy. 

A  text-book   for   beginners.     First   edit.     New  York 

(Jolin  Wiley  &  Sons),  1905.  183  pp. 
Nach  einer  kurzen  Schilderung  des  Mikroskops  und  seiner  wich- 
tigsten Nebenapparate  bespricht  Verf.  die  wichtigsten  Stärkearten, 
einige  Nahrungs-  und  Genußmittel,  einige  technisch  verwertbare  Faser- 
arten ,  die  Zusammensetzung  des  Papiers ,  gibt  einige  Angaben  über 
„the  Microscope  in  Medicine  and  Sanitation"  und  forensische  Mikro- 
skopie, spricht  auf  einigen  Seiten  kurz  über  Mikrochemie  und  schließt 
mit  einigen  Winken  für  die  Untersuchung  von  Metallen  etc.  In  allen 
Abschnitten  handelt  es  sich  nur  um  einige  Beispiele.,  die  V^erf.  aus 
den  betreffenden  Gebieten  auswählt,  die  zur  Einführung  der  Anfänger 
in  den  Stoff  vielleicht  genügen  mögen.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Lindner,  P.,  Mikroskopische  Betriebskontrolle  in  den 
Gärungsgewerben  mit  einer  Einführung  in  die 
technische  Biologie,  Hefenreinkultur  und  In- 
fektionslehre. 4.,  neu  bearb.  Aufl.  237  Abb.,  4  Tfln., 
521   pp.     Berlin  (Paul  Parey)   1905.  19  M. 

Das  vortreffliche  Handbuch  zeigt  in  seiner  neuen  Form  wiederum 
mancherlei  Ergänzungen  und  Verbesserungen,  die  den  Resultaten  der 
neuesten  Forschungen  Rechnung  tragen.  Das  Buch ,  das  in  erster 
Linie  für  die  Praktiker  des  Gärungsgewerbes  bestimmt  ist ,  beginnt 
mit  einer  Anleitung  zum  Gebrauch  des  Mikroskops  und  zum  mikro- 
skopischen Sehen,   erläutert  unter  allerhand  Objekten  namentlich  die- 


j^36  Referate.  XXII,  1. 

jeuigen,  welche  dem  Gäruugstechuiker  —  oft  rein  zufällig  —  be- 
gegnen und  gibt  am  Ende  der  Einleitung  Winke  für  die  Einrichtung 
und  Ausstattung  eines  Laboratoriums. 

Den  Hauptteil  des  Buches  füllt  die  Besprechung  der  „Kultur- 
versuche und  Untersuchungsmethoden",  die  Schimmelpilz-  und  die 
Hefenkunde.  Zu  letzterer  gehören  die  mustergültigen  Tafeln.  — 
Das  Buch  sei  zum  Studium  bestens  empfohlen. 

Küster  {Halle  a.  S.). 


2.   Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

Groot,  J.  (j.  de,  Ein  neuer  Kitt  zum  Schließen  von  Ge- 
fäßen mit  Alkoholpräparaten,  auch  für  den 
Versand  (Zool.  Anz.  Bd.  XXVHI,  1904,  p.  406—407). 
Derselbe  besteht  aus  4  g  Gelatine,  30  cc  Wasser  imd  8  g  Zink- 
weiß. In  einem  dickwandigen  kleinen  Gefäß  verreibt  man  zunächst 
das  Zinkweiß  mit  ein  wenig  von  den  30  cc  Wasser,  gibt  dann 
das  übrige  Wasser  und  die  zerkleinerte  Gelatine  hinzu,  erwärmt 
über  kleiner  Flamme  (also  ohne  die  Siedetemperatur  zu  erreichen), 
so  daß  keine  Luftbläschen  auftreten,  und  bringt,  nach  gehöriger 
Mischung  mit  einem  Pinsel,  eine  gleichmäßige  Lage  auf  den  vorher 
abgetrockneten  Rand  des  Gefäßes.  Dann  wird  ohne  jede  Eile  die 
Glasplatte,  die  man  vorher  schwach  angewärmt  hat,  aufgelegt,  und 
sobald  der  Kitt  etwas  erstarrt  ist,  ein  wenig  augedrückt.  Nach 
einiger  Zeit  drückt  man  die  Deckplatte  fester  und  zum  Schluß  sehr 
fest  an,  so  daß  der  Kitt  rings  herum  der  Glasplatte  anliegt  und 
einen  glatten  weißen  Wulst  um  sie  bildet.  Schließlich  wird  die  Glas- 
platte luit  einem  Gewicht  beschwert  und  das  Gefäß  beiseite  gesetzt. 
Dabei  ist  darauf  zu  achten,  daß  vorläufig  der  Alkohol  mit  dem  Kitt 
noch  nicht  in  Berührung  kommt.  Sobald  der  Kittrand  trocken  ist, 
d.  h.  nach  etwa  2  Stunden,  darf  dann  der  Alkohol  ohne  Gefahr  den 
Kitt  benetzen.  Auch  mit  Korkstöpseln  verschlossene  Präparatgläser 
können  mit  diesem  Kitt  verschlossen  werden.  Behufs  Oftnen  der 
Gefäße  wird  der  Kitt  einfach  mit   Wasser  befeuchtet. 

E.   Schoebel  {Neapel). 


XXII,  1.  Referate.  137 

Tellyesiiiczky  ,  K.  V. ,  Aufkleben  der  Celloi  diiischnitt  e 
(V^erh.  d.  Anat.  Ges.,  18.  Vers.,  Jena  1904;  Anat.  Anz., 
Ergänzungsh.  z.  Bd.  XXV,  1904,  p.  182). 
Verf.  liat  die  Methode  von  Argutinsky  modifiziert.  Das  Wesent- 
liche derselben  besteht  darin ,  daß  die  Grundlage ,  auf  welche  die 
Celloidinschnitte  aufgeklebt  werden  sollen ,  mit  einer  Eiweißschicht 
überzogen  wird,  welche  vor  allem  durch  Wärme  zur  Gerinnung  ge- 
bracht wird.  Auf  die  geronnene  Eiweißschicht  legt  man  der  Reihe 
nach  die  nassen  Schnitte,  welche  dann  mit  mehrschichtigem  Filtrier- 
papier angepreßt  werden.  Die  Modifikation  besteht  darin,  daß  Verf. 
statt  des  Glyzerineiweißes  von  Mayer  einfach  stark  verdünntes  Ei- 
weiß verwendet.  Das  Weiße  eines  Eies  (etwa  20  bis  25  cc)  wird 
mit  destilliertem  Wasser  auf  100  cc  verdünnt  und  filtriert,  nachdem 
es  gut  durchgeschüttelt  ist.  Mit  einer  solchen  Lösung  kann  man 
leicht  eine  gleichmäßige  und  dünne  Schicht  erhalten,  während  Mayers 
Glyzerineiweiß  immer  eine  ungleiche  rauhe  Schicht  ergibt.  Das  Gly- 
zerin ist  ganz  zwecklos.  Die  Versuche  des  Verf.  ergaben,  daß 
Eiweiß  selbst  in  sehr  verdünntem  Zustande  (1  :  80  bis  100)  klebt. 
Auch  das  vom  Verf.  empfohlene  Eiweiß  ist  so  verdünnt,  daß  die 
Färbung  der  durch  dasselbe  erzielbaren  Schicht  fast  gleich  Null  ist. 
Für  histologische  Kurse  oder  bei  Anfertigung  von  Serienschnitten 
klebt  Verf.  die  Schnitte  auf  größere  Glimmerplatten,  welche  bei  den 
Kursen  zur  Verteilung  der  Schnitte  ebenso  verwendet  werden ,  wie 
man  sie  sonst  bei  Verteilung  von  Paraffinschnitten  benutzt.  Ein 
großer  Vorteil  des  Aufklebens  auf  Glimmerplatten  ist  der,  daß  man 
das  Aufdrücken  -  mit  Filtrierpapier  sehr  vorteilhaft  mit  den  Walzen 
gewöhnlicher  photographischer  Satiniermaschinen  bewirken  kann ,  so 
daß  man  auch  größte  Schnitte  leicht  behandeln  kann. 

Schiefferdecker  [Bonn). 

Dreu W ,  E  x  s  t  i  r  p  a  t  i  o  n  s  -  und  0  p  e  r  a  t  i  o  n  s  f  e  d  e  r  (Monatsh.  f. 
prakt.  Dermatol.  Bd.  XXXIX,  1904,  p.  208—210  m.  1  Fig.). 
Verf.  beschreibt  und  empfiehlt  ein  kleines  Instrument  in  der 
Form  einer  Schreibfeder ,  welches  dazu  dienen  soll ,  kleine  Haut- 
stückchen oder  pathologische  Affektionen  bequem  herauszuschneiden, 
was  abgesehen  von  andern  Zwecken  besonders  zur  Sicherung  der 
Diagnose  durch  die  histologische  Untersuchung  von  Wert  sein  kann. 
Die  Exstirpationsfeder  ist  zu  beziehen  von  dem  Instrumentenmacher 
C.  W.  BoLTE  Nachf. ,  Hamburg,  Rathausstraße  20,  zum  Preise  von 
einer  Mark.  Schiefferdecker  {Bonn). 


138  Referate.  XXII,  1. 

Mlllon ,  P. ,  Action  de  Tacide  osmique  sur  les  graisses 
(Bibliogr.  anat.  t.  XIII,  1904,  fasc.  4,  p.  208—213). 
Verf.  kommt  bei  seinen  Untersuchungen  zu  folgenden  Schlüssen : 
1)  Die  Ölsäure  ist  es  allein,  welche  die  Färbung  durch  Osmiumsäure 
bei  der  Fixierung  der  Fette  bewirkt.  2)  Jedes  Fett,  das  sich  in 
den  Geweben  direkt  unter  der  Einwirkung  von  Osmiumsäure 
schwärzt,  besteht  zum  größten  Teile  aus  Oleinsäure.  .3)  Jedes 
Fett,  welches  in  den  Geweben  unter  der  Einwirkung  von  Osmium- 
säure gelb  oder  braun  wird,  besteht  zum  größten  Teile  aus  Pal- 
mitin-  oder  Stearinsäure.  Die  angegebene  schwache  Färbung  wird 
hervorgerufen  durch  eine  geringe  Menge  von  Oleinsäure.  Ein  solches 
Fett  wird  durch  Osmiumsäure  nur  schlecht  fixiert  und  wird 
infolgedessen  durch  ätherische  Öle  leicht  gelöst.  Das  braun  ge- 
färbte Fett  kann  bei  Einwirkung  von  schwachem  Alkohol  eine 
schwarze  Färbung  annehmen.  4)  Die  Lecithine,  welche  infolge 
ihrer  chemischen  Zusammensetzung  stets  arm  an  Oleinsäure  sind, 
gehören  zu  der  eben  genannten  Kategorie  der  sich  braun  färben- 
den Fette,  die  mit  Alkohol  sich  schwarz  färben  und  nur  mangelhaft 
fixiert  sind.  Schiefferdecker  (Bofin). 

Skrobansky,  E  i  n  e  M  e  t  h  o  d  e  der  n  a  c  h  t  r  ä  g  1  i  c  h  e  n  F  ä  r  b  u  n  g 
mit  Bleu  de  Lyon  und  Pikrinsäure  (Intern.  Monats- 
schr.  f.  Anat.  u.  Physiol.  Bd.  XXI,   1904,  H.  1—3,  p.  21 
—22). 
Baumgarten  und  später  Tonkow  haben  das  Bleu  de  Lyon  schon 
benutzt.     Der  letztere  verwendete  Jodzusatz  und  infolgedessen  färbten 
sich    die  Präparate    schon   nach  einigen  Minuten ,  während  ohne  Jod 
mehrere  Stunden  oder  gar  Tage  erforderlich  sind.    Verf.  verfuhr  in 
folgender  Weise :    Die  Objektträger  mit  den  in  Boraxkarmin  gut  ge- 
färbten   Schnitten    kommen    aus    destilliertem    Wasser    in    folgende 
Mischung : 

Destilliertes  Wasser 50  Teile 

Bleu  de  Lyon,  gesättigte,  alkoholische  (95pro- 

zentige)  Lösung 2     „ 

Pikrinsäure,  gesättigte,  wässerige  Lösung  .     .       5     „ 

In  dieser  verbleiben  die  Schnitte  2  bis  3  Minuten  und  werden  dann 
in  Alkohol  von  70,  80,  90  Prozent  und  absoluten  Alkohol  über- 
tragen, dann  Xylol,  Kanadabalsam.  Verf.  hat  auf  diese  Weise  Organe 
behandelt,  die  in  den  verschiedensten  Flüssigkeiten :  Alkohol,  Chrom- 
essigsäure, Sublimat,  Zenker  scher  Flüssigkeit  etc.  fixiert  waren;  Verf. 


XXII,  1.  Referate.  I39 

hat  ganz  junge,  frisch  fixierte  Embryonen  und  Organe,  die  erst  nach 
längerer  Zeit  der  Leiche  entnommen  waren ,  gefärbt ,  und  hat  stets 
ein  deutlich  und  scharf  differenziertes ,  mehrfarbiges  Bild  erhalten. 
Die  Methode  ist  einfach  und  schnell ,  das  ganze  Verfahren  dauert 
nicht  länger  als  7   bis   10  Minuten.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Nabias ,  B.  de ,  N  0  u  v  e  1 1  e  m  e  t  h  0  d  e  de  c  0 1 0  r  a  t  i  0  n  rapide 
du  Systeme  nerve ux  au  chlor ure  d'or  (Bibliogr. 
anat.  "t.  XIII,  1904,  fasc.  4,  p.  221—222;  Compt.  Rend. 
Soc.  de  Biol.  t.  LVI,  1904,  p.  426). 
Die  Schnitte  des  Nervengewebes  nach  Fixierung  in  Alkohol, 
Sublimat ,  in  den  Flüssigkeiten  von  Flemming  ,  kurz  in  irgendeinem 
Fixierungsmittel,  welches  Jod  eintreten  läßt,  werden  auf  dem  Objekt- 
träger nach  Entwässerung  in  folgender  Weise  behandelt:  1)  Be- 
handlung mit  einer  Jodlösung.  Man  kann  die  Gram  sehe  Flüssigkeit 
verwenden  (Jod  1,  Jodkalium  2,  destilliertes  Wasser  300)  oder  eine 
schwächere  Lösung,  bis  zu  ^/jooo  herunter,  die  weniger  intensiv  ein- 
wirkt und  daher  den  anatomischen  Details  weniger  schaden  kann. 
Die  Schnitte  werden  gelb ,  es  ist  dies  das  Zeichen ,  daß  das  Jod 
eingedrungen  ist,  was  durchaus  nötig  ist.  2)  Abwaschen  durch  Über- 
gießen mit  destilliertem  Wasser.  3)  Behandlung  mit  einer  Gold- 
chloridlösung (einprozentig) ,  die  Schnitte  werden  wieder  gebleicht. 
4)  Neues  Auswaschen  mit  destilliertem  Wasser.  5)  Behandlung  mit 
Anilinwasser  (Anilin  1  cc,  destilliertes  Wasser  100  cc,  tüchtig  schüt- 
teln. Filtrieren  durch  ein  feuchtes  Filter  und  in  gelbem  Glase  auf- 
bewahren. Das  Anilinwasser  kann  bis  zu  ^/looo  ""^^  weiter  verdünnt 
werden).  Die  so  behandelten  Schnitte  zeigen  sofort  eine  Veränderung, 
wenn  die  Auiliulösung  stark  ist;  nach  einigen  Augenblicken,  wenn 
sie  schwach  ist.  Dann  wieder  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser, 
steigender  Alkohol,  absoluter  Alkohol,  Xylol,  Kanadabalsam.  Die 
eben  beschriebene  Umänderung  kann  auch,  und  -zwar  mitunter  in 
ausgezeichneter  Weise  erhalten  werden  nach  Behandlung  mit  Xylol- 
Aniiin  nach  Entwässerung  (Xylol  100  cc,  Anilin  1  cc).  Die  Schnitte 
erscheinen  schön  lila  oder  purpurfarbig.  Die  Farbe  ist  dunkel  nach 
starken  Anilinlösungen,  hell  nach  verdünnten.  Unter  den  zahlreichen 
Stoffen,  welche  diese  Umänderung  hervorrufen  können  (Verf.  studiert 
dieselben  noch  weiter),  verdienen  auch  Resorcinlösungen  von  ^/^^q, 
/looo  ""<^  selbst  ^'looon  «zugewandt  zu  werden  wegen  der  Schönheit 
des  Farbeutones  und  weil  die  Kerne  deutlicher  als  mit  andern  Mitteln 
hervorzutreten  scheinen.     Die  Achsenzylinder  sind  schön  imprägniert 


140  Referate.  XXII,  1. 

und  mit  ihren  Fibrillen  leicht  zu  verfolgen.  Um  die  Fibrillen  gut 
sichtbar  zu  machen,  muß  man  die  Fixierung,  soweit  möglich,  mit 
isotonischen  Flüssigkeiten  ausführen.  Verf.  wird  später  geeignete 
Flüssigkeiten  mitteilen.  ScJiie/ferdecker  (Bonn). 


3.   Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


A.   Niedere   Tiere. 

Lesage ,  Culture  de  l'amibe  de  la  dyse uteri«  des  pays 
chauds  (C.  R.  Ac.  Sc.  t.  CXXXIX,  p.  1237—1239;  Anu. 
de  rinst.  Pasteur  t.  XIX,  1905,  uo.  1,  pp.  9 — IG  av.  1  pL). 

Verf.  kultivierte  eine  Amöbe,  die  dem  Darmschleim  von  an  tro- 
pischer Dysenterie  Erkrankten  entstammte. 

Um  einen  an  Nährstoffen  armen  Nährboden  zu  erhalten,  werden 
Schalen  mit  Nähragar  8  Tage  lang  unter  einem  starken  Wasser- 
strom gewaschen,  dann  werden  sie  sterilisiert  und  bei  einer  Tempe- 
ratur von  18—25^  zur  Kultur  verwandt.  Einige  Tage  nach  der 
Impfung '  erhält  man  kleine  Amöben,  die  man  in  andere  Schalen  in 
bestimmtem  Abstand  von  einer  Kolonie  irgendwelcher  gewöhnlichen,  für 
die  Amöben  unschädlichen  Mikroben  (Verf.  gebraucht  Paracoli)  bringt. 
Hat  die  Amöbe  die  Kolonie  erreicht,  so  überträgt  man  sie  in  eine 
weitere  Schale,  nach  einer  gewissen  Zahl  von  Überimpfungen  erhält  man 
eine  reine  Mischkultur  (Amöbe  -]-  Paracoli).       G.   Seliber  {Paris). 

Thiroux ,    Recherches    morphologiques    et    experimen- 
tales    sur    Trypanosoma    paddae     (Ann.    de    ITust. 
Pasteur  1905,  t.  XIX,  no.  2,  p.  65—83   av.   1   pl.). 
Verf.    gebrauchte    für    die    Kultureu    Nähragar    von    folgender 

Zusammensetzung : 


P^leisch  uiaceriert 100t)  g 

Pepton 10  „ 

Seesalz 5  „ 

Agar 30 


n 


^  Mit   frischem  Darmschleim   oder   mit   ausgetrocknetem ,   in   dem   die 
Amöben  Cysten  bilden. 


XXII,  1.  Referate.  141 

Ist  der  Nähragar  bis  40 **  erkaltet,  so  fügt  man  ein  gleiches 
Volumen  oder  anderthalb  soviel  Gänseblut  hinzu.  Taubenblut  erwies 
sich  als  ungünstig  für  die  Entwickelung.  Man  läßt  die  Reagens- 
gläser während  24  Stungen  in  geneigter  Stellung  bei  Laborien- 
temperatur  trocknen;  dann  werden  sie  mit  Gummistöpseln  versehen 
und  in  vertikaler  Stellung  in  einen  Trockenschrank  (bei  37^)  ge- 
bracht. Nach  24  Stunden  wird  das  Kondensationswasser  mit  Hilfe 
des  Blutes,  das  man  vom  Herzen  des  Sperlings  nimmt,  geimpft. 

In  solchen  Kulturen  fangen  die  Protozoen  am  8.  oder  9.  Tage 
an  sich  zu  vermehren;  am  12.  bis  15.  Tage  bemerkt  man  Invo- 
lutionsformen ;  die  Trypanosomen  behalten  ihre  Beweglichkeit  länger 
als  40  Tage.  — 

Die  Trypanosomen  haben  in  den  Kulturen  geringere  Dimen- 
sionen als  im  frischen  Blute.  Unter  den  Involutionsformen  sind  viele 
hanteiförmig,  andere  rund ;  die  letzteren  bestehen  aus  eineiL  Haufen 
von  lichtbrechenden  Kügelchen.  Verf.  glaubt,  daß  diese  Segmen- 
tierung des  Protoplasmas  einen  Übergang  zur  Cystenbildung  darstellt. 

Verf.  färbte  seine  Präparate  nach  der  Methode  von  Laveran  mit 
Eosinblau  Borrel  und  Tannin  (im  Thermostaten  bei  5.3  bis  54°); 
Kern  und  Geißel  wurden  rotviolett,  das  Centrosom  tiefviolett  gefärbt. 

An  nicht  intensiv  gefärbten  Präparaten  beobachtete  der  Verf. 
vor  und  hinter  dem  Zellkern  helle  nicht  scharf  abgegrenzte  Räume, 
offenbar    wenig    chromophile  Protoplasmateile ,    aber  keine  Vakuolen. 

G.  Seliber  (Paris). 

Gadzikiewicz ,  -W. ,    Über   den   feineren  Bau   des  Herzens 

bei    M  a  1  a  k  0  s  t  r  a  k  e  n    (Jenaische    Zeitschr.   f.   Naturwiss. 

Bd.  XXXIX,   1904,  p.  203—234  m.  6  Figg.  u.  4  Tfln.). 

Die    zur    Untersuchung    dienenden    Meeresformen    wurden    aus 

Neapel   bezogen    und    waren    teils  in  Pikrinsäure,  teils  mit  Sublimat 

fixiert.     Für    Garamarus    und   Porcellio    wandte    V.erf.    entweder    die 

Hennings  sehe  ^    oder    die  GiLsoNSche    Flüssigkeit    an.      Beide    geben 

sehr  gute  Resultate,  das  Chitin  ist  weich  und  läßt  sich  gut  schneiden. 

Trotzdem    wurde ,    wo    immer   mögUch ,    die    Cuticula    entweder   vom 

ganzen  Körper   abpräpariert    oder   das  Herz  allein  verarbeitet.     Für 

kleinere  Objekte    empfiehlt    es    sich  auch ,  da  das  Herz  direkt  unter 

der    dorsalen  Cuticula    liegt ,    nur    die    ventrale    weg   zu  präparieren 

und    das  Objekt    derartig    beim    Schneiden   zu    orientieren,   daß    das 


^)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XVII,  1900,  p.  312. 


142  Referate.  XXII,  1. 

Messer  des  Mikrotoms  zuerst  auf  die  von  der  Cuticula  befreite  Bauch- 
seite trifft.  —  Von  den  verschiedenen  Färbungsmethoden  gibt  Eisen- 
hämatoxylin  für  die  feineren  Strukturverhältnisse  unvergleichlich 
bessere  .Resultate  als  irgend  eine  andere  Methode.  In  vielen  Fällen 
kann  sie  auch  für  die  Zellgreuzenbestimmung  die  Silbermethode  er- 
setzen, wobei  sie  noch  den  Vorteil  hat,  so  gut  wie  gar  keine  stören- 
den Niederschläge  zu  geben.  Verwendet  wurde  die  Heidenhain  sehe 
Vorschrift,  jedoch  wurde  die  Einwirkungsdauer,  sowohl  der  Eisen- 
alaim-  wie  der  Hämatoxyliulösung  auf  die  Hälfte  der  vorgeschriebenen 
Zeit  herabgesetzt.  Zur  Nachfärbung  wurde  Erythrosin  oder  das 
Pikrinsäure-Säurefuchsingemisch  benutzt.  Letztere  Färbung  hält  Verf. 
wenigstens  für  Crustaceen  als  Unterscheidungsmittel  für  Bindegewebs- 
und Muskelfasern  für  vollständig  wertlos.  Häufig  färben  sich  Muskel- 
fasern rot  und  Bindegewebsfasern  gelb ,  doch  kommt  auch  das  Um- 
gekehrte vor.  Von  andern  Färbungen  gab  noch  Safranin  gute 
Resultate.  Sehr  gute ,  den  Eisenhämatoxylin  ähnliche  Färbungen 
liefert  auch  das  Chromhämatoxylin  nach  Apathy;  es  ist  besonders 
für  dicke  Schnitte  zu  empfehlen.  E.   Schoebel  (Neapel). 

Ferriaiidez,  M.,  Zur  mikroskopis  chen  Anatomie  des  Blut- 
gefäßsystems    der    T  Unikaten.      Nebst    Bemer- 
kungen zur  Phylogenese  des  Blutgefäßsystems 
im  allgemeinen    (Jenaische    Zeitschr.    f.    Naturwiss.  Bd. 
XXXIX,   1904,  p.  323—422  m.   12  Figg.  u.  4  Ttln.). 
Zur  Fixierung    der  Salpen    kam    mit    gutem  Erfolg  Chromessig- 
säure   und  FLEMMiNGSches  Gemisch ,    für   die   Ascidien    hauptsächlich 
Sublimatgemische  zur  Verwendung.     Verf.  pflichtet  van  Benden  und 
JuLiN  vollständig  bei,  wenn  sie  betonen,  daß  neben  Schnittpräparaten 
auch  Ausbreitungspräparate  für  das  Studium  der  Histologie  des  Tuni- 
katenherzens  herangezogen  werden  müssen.     Vielleicht    sind    letztere 
sogar  notwendiger  als  erstere.     Da  bei  Schnitten  die  dünne  Muskel- 
membran des  Herzens  leicht  reißt,  und  dann  bei  der  Weiterbehandlung 
gern  abschwimmt,  so  wurde  die  Doppeleinbettung  nach  Jordan^  an- 
gewendet.    Falten    im  Präparat    sind    bei    derselben    zwar  nicht  gut 
zu  vermeiden,  aber  wo  solche  nicht  stören,  ist  durch  sie  doch  wenig- 
stens   die  Herstellung    dünnerer    Schnitte    ermöglicht.     Auch    die  ge- 
wöhnliche   Paraffineinbettung    mit    Aufkleben    der    Schnitte    mittels 
Glyzerin-Eiweiß    und   nachherigem  Überpinseln   derselben  mit  dünner 


1)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XVII,  1900,  p.  191. 


XXII,  1.  Referate.  143 

Photoxyliulüsung-  ist  mit  Vorteil  anzuwenden.  Gefärbt  wurde  für 
allgemeine  Zwecke  mit  Eisenhämatoxylin  mit  und  ohne  Erythrosiu- 
nacbfärbung,  und  speziell  zum  Nachweis  der  Mitosen  mit  Safranin. 
Die  Ausbreitungspräparate  des  Herzens  wurden  ebenfalls  meistens 
mit  Eisenhämatoxylin  gefärbt ;  daneben  kam  aber  speziell  für  die 
Muskelstruktur  auch  die  Vor-  und  Nachvergoldung  nach  Apathy  und 
zur  Darstellung  der  Zellgrenzen  die  von  Seeliger  auch  für  konser- 
viertes Material  gerühmte  Methylenblaumethode  zur  Anwendung.  Verf. 
möchte  aber  für  letzteren  Zweck  auch  dem  Eisenhämatoxylin  den 
Vorzug  geben.  Bei  der  Eisenhämatoxylinfärbung  müssen  aber  die 
Membranen  vorher  unbedingt  möglichst  gut  ausgebreitet  werden ,  da 
sonst  durch  ungleichmäßiges  Ausziehen  leicht  Flecken  und  dergleichen 
entstehen.  Die  Dauer  des  Beizens  und  Färbens  kann  im  allgemeinen 
bis  zu  einer  halben  Stunde  verkürzt  werden.  Die  Ausbreitungs- 
präparate wurden  stets  in  Glyzerin  eingeschlossen.  Die  Eisenfärbung 
hält  sich  darin,  besonders  wenn  keine  Nachfärbung  stattgefunden 
hatte,  recht  lange  Zeit  unverändert.  Erwähnt  wird  noch,  daß  Aus- 
breitungspräparate nur  von  größeren  Formen  vorteilhaft  herzustellen 
sind.  E.   Schoehel  {Neapel). 

Floyd ,    R.,    A    contribution    to   the   nervous  cytology  of 
P  e  r  i  p  1  a  n  e  t  a  o  r  i  e  n  t  a  1  i  s  ,   the  common  c  o  c  k  r  o  a  c  h 
(Mark   Anniversary    Volume    New    York    190:3,    Art.    XVII 
p.  341 — 357   w.  3  pl.,  Ref.  n.  Ref.  in  .Journ.  Compar.  Neurol. 
and  Psychol.  vol.  XIV,   1904,  no.  3,  p.  287—288). 
Verf.    hat    eine  Reihe  von  Versuchen  über  die  Einwirkung  von 
verschiedenen  Fixierungsmitteln    auf   den  Bau    der  Nervenzellen    aus 
den    Thorakalganglien    von    Periplaneta    Orientalis    angestellt.      Nach 
Fixierung   in  der  Flüssigkeit  von  voi  Rath,    in  Pikrinsäure-Formol, 
in    der  Flüssigkeit    von    van  Gehuckten,    in  Sublimatlösung    und   in 
einer  Chromsäure-Oxalsäuremischung  zeigte  sich  eine  mehr  oder  weniger 
starke  Schrumpfung    des  Zellplasmas   und  eine  Veränderung  des  fei- 
neren Baues.     In    allen  Zellen    dieser  Präparate    traten   deutlich  ein 
zentraler,    dunkel   gefärbter,  körniger  Abschnitt  und  eine  periphere, 
von  einem  Fibrillennetzwerk  gebildete  Zone  hervor.    In  den  Nerven- 
fasern zeigten  die  Fibrillen  ebenfalls  Anastomosen.    Frische,  lebende 
Ganglienzellen  nach  Färbung  mit  Nissls  Methylenblau  in  physiologi- 
scher Kochsalzlösung  zeigten  nur  eine  geringe  Schrumpfung-  des  Zell- 
plasmas   oder    gar    keine.     Sie    ließen    durchaus    keine  Zellmembran 
erkennen    und    zeigten    auch    nichts    von    den    sich    stark    färbenden 


144  Referate.  XXII,  1. 

Körnchen,  die  charakteristisch  für  das  fixierte  Gewebe  sind,  obgleich 
die  Fibrillennetze  deutlich  hervortraten.  Diese  normale  Struktur  zeigten 
auch  Zellen ,  welche  durch  Formoldämpfe  fixiert ,  mit  Methylenblau 
gefärbt  und  mit  Amraoniummolybdat  fixiert  worden  waren.  Verdünntes 
Formol  imd  verdünnter  Alkohol  werden  für  größere  Gewebestücke 
empfohlen.  Die  chromophilen  Körner  der  NissL-Substanz  sind  nach 
Verf.  nicht  als  ein  normaler  Bestandteil  anzusehen ,  sondern  treten 
in  dem  Zellplasma  erst  als  postmortale  Veränderung  auf  oder  wäh- 
rend der  Einwirkung  der  meisten  Fixierungsmittel.  Die  NissL-Substanz 
ist  durch  Färbung  nicht  darstellbar  nach  Behandlung  der  Zellen  mit 
Ätznatron,  nach  längerer  Faradisation,  wahrscheinlich  auch  nicht  nach 
Strychninvergiftung ;  Arsenikvergiftung  veranlaßt  eine  Zunahme  der 
Substanz.  Scliiefferdecker  {Bonn). 

Hoftendahl ,    K.,    Beitrag    zur    Entwicklungsgeschichte 
und   Anatomie   von   P o e c i  1  a s m a  a u r a n t i u m  Dar- 
win   (Zool.    Jahrb.,    Abt.    f.    Anat.    u.    Ontogen. ,    Bd.  XX, 
1904,  p.   363—398  m.   4  Tfln.). 
Zur  Untersuchung  diente  Material  der  deutschen  Tiefsee-Expedi- 
tion ,    das   teils    mit  80prozentigen  Alkohol ,    teils   mit  SOprozentigem 
Formol-Alkohol   konserviert    worden    war.     Mit    beiden  Methoden    ist 
aber    keine   sehr    befriedigende    Fixierung    erzielt    worden,    wie    be- 
sonders   die    Untersuchung    der  jüngsten    festsitzenden    Cyprisstadien 
und    der   histologischen  Details  ergab.     Die  Tiere  wurden ,  eventuell 
nach  Entkalkung  der  Schalen   mittels  Pikrinsäure ,    in  Nelkenöl    auf- 
gehellt und  gezeichnet,  dann  in  Paraffin    eingebettet    und  in  Schnitt- 
serien zerlegt.     Gefärbt  wurde  teils  nach  der  Heidenhain  sehen,  teils 
nach    der    van  Gieson sehen   Methode    oder    mittels    Hämalaun.      Die 
Mundteile ,    Beine    und    der    Penis    wurden    von    einigen    Exemplaren 
abpräpariert    und   nach  Aufhellung    in  Nelkenöl    in  toto   in    Kanada- 
balsam eingeschlossen.  E.  Schoebel  (Neapel). 

Heath,  H.,  The  Nervous  System  and  Subr  ad  ular  Organ 

in  two  Genera  of  Solenogastres    (Zool.  Jahrb.,  Abt. 

f.  Anat.  u.  Ontogen.,  Bd.  XX,    1904,  p,  399—408  w.  1  plt.). 

Zur  Fixation   eignet   sich  vor  allem   50prozentiger  Alkohol ,  der 

nach    ungefähr    einstündiger    Einwirkung    allmählich    auf    85  Prozent 

verstärkt  wird.     Dabei  ist  nur  die   Vorsicht  zu  gebrauchen,  daß  die 

Temperatur  des  schwachen  Alkohols  nicht  die  Temperatur  von  15**  C. 

übersteigt ,    um    einer  Mazeration    vorzubeugen.     Kommt    es    bei    der 


XXII,  1.  Referate.  145 

Fixation  nicht  auf  die  Erhaltung  der  Kalkstachehi  an,  können  mit 
Vorteil  auch  andere  Fixierungsflüssigkeiten  Verwendung  finden.  Formol 
und  Sublimat  geben  aber  im  besten  Falle  nur  mittelmäßige  Resultate, 
gute  dagegen  Sublimat-Eisessig  und  das  GiLSONSche  Gemisch,  ebenso 
auch  die  FLEMMixGsche  Flüssigkeit,  abgesehen  von  der  oft  störenden 
Schwarzfärbung  der  Gewebe.  In  mancher  Beziehung  verdient  das 
VOM  RATiische  Gemisch,  vor  allem  bei  Nachbehandlung  der  Objekte 
mit  einprozentiger  Holzessiglösung,  vor  allen  anderen  Fixierungen  den 
Vorzug,  hauptsächlich  zur  Untersuchung  des  Nervensystems.  Für 
die  Färbung  eignet  sich  Delafields  Hämatoxylin  und  Heidenhains 
Eisenhämatoxylin,  kombiniert  mit  einer  schwachen  Rubinfärbung,  am 
besten.  E.   Schoebel  {Neapel). 


J5.    Wirbeltiere. 

Ziegler ,    K. ,    Histologische    Untersuchungen    über    das 
Ödem   der  Haut   und  des  U  n  t  e  r  h  a  u  t  z  e  1 1  g  e  w  e  b  e  s 
(Beitr.    z.  patliol.    Anat.    u.  z.    allgem.  Pathol.    Bd.  XXXVI, 
1904,  H.  .3,  p.  435—505  m.  8  Figg.  i.  Text). 
Die  von  menschlichen  Leichen  herrührenden  Hautstüeke  wurden 
durchschnittlich    5   bis   12    Stunden    nach    dem    Tode,    einzelne    auch 
bald  nach  dem  Tode,  durch  Einstichinjektion  mit  lOprozentiger  Formol- 
lösung fixiert,    in  Alkohol  nachgehärtet   und  in  Celloidin  eingebettet. 
Färbung  der  Scbnitte  mit  Hämatoxylin-Eosin,  nach  van  Gieson,  mit 
polychromem  Methylenblau  und  mit  Eisenhämatoxylin  und  Nachfärbung 
nach  van  Gieson  (Maximow).     Letztere  Methode  färbt  die  Zellkerne 
und  ihre  Einschlüsse,  die  Zentrosomen  (nur  in  lebend  fixierten  Zellen), 
die  elastischen  Fasern  und  die  Markscheiden  der  Nervenfasern  schön 
schwarz,    die  Fasern    des  Bindegewebes  rot,  uudißerenziertes  Proto- 
plasma graugelblich.    Dieselbe  scheint  Verf.  zur  Unterscheidung  der 
fixen    von    den    freien  Zelleleraenten    ganz   unentbehrlich.     Das  poly- 
chrome Methylenblau    läßt    die  Beschaffenheit   der  Bindegewebszellen 
deutlich  hervortreten  und  färbt  die  Granula  der  EHRLicHScheu  Mast- 
zellen metachromatisch  violettrot.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Keinatll ,  K.  Th. ,  t'  b  e  r  den  mikroskopischen  Nachweis 
von  Fett  in  normalen  Muskeln  (Inaug.-Dissertation 
Tübingen   1904,  32  pp.). 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  1.  10 


146  .  Referate.  XXII,  1. 

Kleine  Muskelstückcheu  wurden  in  öprozentiger  Formollösung 
fixiert,  ausgewaschen  und  mit  dem  Gefrierraikrotom  geschnitten.  Fär- 
bung meist  in  TOprozentiger  Alkoholsudanlösung ,  anfangs  auch  in 
Natronlaugesudan.  Letztere  Methode  wurde  verlassen ,  da  bei  der 
kurzen  Färbezeit  die  Schnitte  leicht  überfärbt  wurden  und  dann 
Niederschlag  eintrat.  Durch  TOprozentige  Alkoholsudanlösung  und 
nachherige  Kernfärbung  mit  Hämatoxylin  konnte  das  Fett  am  deut- 
lichsten sichtbar  gemacht  werden.  Die  primäre  Osmierung  hatte  den 
Vorteil,  daß  das  Fett  des  Perimysiums,  das  beim  Schneiden  intensiv 
schwarz  war,  nicht  zu  sehr  über  das  Präparat  verstreut  wurde,  doch 
färbte  sich  das  Fett  um  die  Kerne  der  Muskeln  von  ausgewachsenen 
Individuen  nur  sehr  wenig,  manchmal  gar  nicht.  Dabei  hatten  die 
Stücke  so  lange  in  Flemming scher  Lösung  gelegen,  daß  sie  hinreichend 
durchtränkt  sein  mußten.  In  so  behandelten  Schnitten  färbte  sich 
das  Fett  nachträglich  mit  Sudan  schwarzrot.  Wo  Verf.  an  dem- 
selben Muskel  auch  noch  die  sekundäre  Osmierung  anwandte,  färbten 
sich  die  Fetttröpfchen  an  sehr  wenig  Stellen  und  blieben  im  übrigen 
ungefärbt.  Daß  mit  Sudan  weit  mehr  Fetttropfen  sichtbar  gemacht 
werden  konnten,  ist  wohl  darin  begründet,  daß  dieses  alles  Fett 
färbt,  Osmiumsäure  dagegen  nur  Ölsäure  und  Olein. 

Scliiefferdecker  {Bonn). 

Weideureich ,  F. ,    Studien    über    das   Blut    und    die    blut- 
bildenden   und    -zerstörenden    Organe.      2.    ISau 
und    morphologische    Stellung    der    B  1  n  1 1  y  ni  p  h  - 
drüsen  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXV,  1904,  p.  1  —  77 
m.   6   Figg.  u.   5  THn.). 
Die  fraglichen  Drüsen  finden  sich  —   Verf.  untersuchte  speziell 
das    Schaf    —    im    retroperitonealen    Fettgewebe    abwärts    von    den 
Nieren    und    am  Beckeneingang,    und    zwar   vorwiegend    in    nächster 
Nähe    der    großen   Gefäße.     Auch    im    Mediastinalraum    kommen    sie 
vor ,    aber    nicht    so    zahlreich  wie   im  Abdomen.     Auffallend  ist  die 
Inregelmäßigkeit    ihres    Vorkommens.      Man    kann    oft    viele    Schafe 
durchmustern,  ohne  an  den  Prädilektionsstellen  irgendwelche  zu  finden. 
Alter  und  Geschlecht  ist   dabei    anscheinend    ohne   jeglichen   Einfluß, 
ebenso  der  Ernährungszustand  des  Tieres.    Auch  die  Jahreszeit  spielt 
keine    Rolle.     Wie    das   Vorkommen    variiert    auch    die    Größe ;    von 
der  Größe    eines  Stecknadelkopfes    bis    zu    der    einer  Walnuß  finden 
sich    alle    Übergänge.      Die    Drüsen    sucht    man    am    besten    am    ge- 
schlachteten   und    völlig    entbluteten  Tiere  auf,    nachdem    der    Darm 


XXII,  1.  Referate.  I47 

und    seine  Anhänge  lierauspräpariert    sind ,    die  Nieren   aber  an  Ort 
und  Stelle    belassen    wurden ,    und  nimmt  sie  mit  samt  dem  sie  um- 
gebenden Fett  heraus.    Vor  dem  Einlegen  in  die  FixierungsHüssigkeit 
ist  es  aber  ratsam,  das  Fettgewebe  abzupräparieren.     Da  die  Kapsel 
leicht    einreißt ,    ist    bei    dieser    Manipulation   Vorsicht    geboten.     Als 
ausgezeichnetes    Fixationsmittel ,    das    sowohl    für    das    Studium    der 
gröberen  wie  der  feineren  Verhältnisse   geeignet   ist ,    empfiehlt    sich 
die  ZENKERSche  Flüssigkeit.     Zur  Färbung  eignet  sich  besonders  die 
vom    Verf.    bereits    für    die    Milz    angegebene    Dreifachfärbung    mit 
Hämalaun ,    Orange    und    Rubin  S ,    speziell    für   die  Darstellung    des 
Bindegewebes  das  MALLORYSche  Hämatoxylin    oder   die   Chromsilber- 
methode nach  Oppel,  für  elastische  Fasern  Resorcin-Fuchsin.     Venen- 
injektion   mit    Berlinerblau    gelingt     leicht ,     indem     man    mit     einer 
PRAVAz-Spritze  in  eine  Drüse  einsticht  und  die  Farblösung  einspritzt. 
Es  füllt  sich  dabei   ohne  weiteres    die  Vene    der   betreffenden  Drüse 
und  von  dieser  aus  die  Vene    der    benachbarten.     Will  man  für  be- 
stimmte Zwecke  eine  besonders  sorgfältige  Fixation  erzielen,  so  kann 
man    auf   gleiche   Weise    die  Fixierungsflüssigkeit  (Sublimat -Eisessig, 
FLEMMiNGSche  oder  HERMANNSche  Lösung)  injizieren.    Verhältnismäßig 
schwierig  ist  die  Injektion  der  Arterien,    da    dieselben    so  fein  sind, 
daß  sie  kaum  mit  bloßem  Auge  zu  erkennen  sind,  und  es  also  auch 
unmöglich    ist,    eine  Kanüle    in    sie    einzuführen.     Verf.    verfuhr    so, 
daß    er    das    retroperitoneale  Fett    von   den  Nieren  abwärts  bis  zum 
Rande  des  großen  Beckens  sorgfältig  mit  samt  den  Gefäßen  heraus- 
nahm, alle  sichtbaren  durchschnittenen  Arterien  unterband  und  dann 
in    die  Aorta    die    Berlinerblaulösung   einspritzte.     Beim  Unterbinden 
übersehene  Schnittstellen    machen    sich    bald   durch  Auslaufen  kennt- 
lich und  man  kann  nun  leicht  das  Versäumte  nachholen.     So  gelingt 
es  die  kleinen,  von    der  Aorta  oder  auch  von  der  Arteria  iliaca  ab- 
gehenden   und    in    das    Fettgewebe    verlaufenden  Arterien   zu   füllen. 
Man    sucht   dann,  die  Abgangsstelle  am  Hauptgefäße  auf,  führt  dort 
eine  feine  Kanüle  ein  und  spritzt  jetzt  von  hier  aus  mit  einer  Pravaz- 
Spritze  die  Farblösung  ein.    Ist  die  Injektion  geglückt,  so  umschneidet 
man    die    Drüse    und    bringt    sie    ohne    weiteres    in    die    Fixierungs- 
fiüssigkeit.  — 

Für  das  Aufsuchen  der  Drüsen  bei  kleineren  Tieren  empfiehlt 
es  sich ,  die  Tiere  durch  Halsschnitt  sich  verbluten  zu  lassen  und 
dann  nach  Öffnung  der  Leibeshöhle  sehr  vorsichtig,  ohne  Verletzung 
von  Gefäßen ,  den  Magen  und  die  Gedärme  zur  Seite  zu  schlagen. 
Man  wird    dann  bei   der  Ratte  z.  B.  die  Drüsen    leicht    an  der    hin- 

10* 


148  Referate.  XXII,  1. 

teren  Fläche  des  Pankreas,  sowie  oberhalb  der  linken  Nierenarterie 
finden.  E.  Schoehel  (Neapel). 

Galli,  G. ,  Ein  verbesserter  Mischer  zur  Zählung  der 
Blutkörperchen  (Münchener  med.  Wochenschr.  Jahrg.  LI, 
1904,  No.  13,  p.  561  m.  1  Fig.). 
Zur  Verdünnung  des  Blutes  wird  bekanntlich  ein  Mischgefäß, 
ein  sogenannter  Melangeur,  verwendet.  Da  die  jetzt  vorhandene 
Form  dem  Verf.  nicht  zu  genügen  schien,  so  hat  er  einen  neuen 
Apparat  konstruiert,  der  mit  einem  Saugapparat  versehen  ist,  welcher 
die  präziseste  Aufsaugung  ermöglicht,  so  daß  die  Verdünnung  mit 
Sicherheit  jedesmal  rasch  und  leicht  gelingt.  Verf.  hat  diesen  neuen 
Apparat  mit  einem  Glasmantel  umgeben ;  der  Kaum  zwischen  dem 
Mantel  und  dem  eigentlichen  Apparat  ist  luftleer  gemacht ,  wodurch 
die  Übertragung  der  Handwärme  vermieden  wird.  Der  Saugapparat 
kann  einmal  durch  eine  Schraube  feiner  bewegt  werden  und  ermög- 
licht so  eine  sehr  gleichmäßige  und  langsame  Aufsaugung  des  Blutes, 
es  kann  aber  auch  durch  eine  ziehende  Bewegung  die  Flüssigkeit 
rasch  emporgehoben  werden.  Die  Handhabung  und  Reinigung  des 
Instrumentes  soll  sehr  einfach  und  bequem  sein.  Wegen  des  Näheren 
der  Konstruktion  muß  auf  das  Original  und  die  dort  gegebene  Ab- 
bildung verwiesen  werden.  Schiefferdecker  {Boim). 

JoIIy,  J. ,  Recherches  experimentales  sur  la  Division 
indirecte  desGlobulesrouges  (Arch.  d'anat.  Microsc. 
t.  VI,  1904,  fasc.  4,  p.  455 — 6.-!2  av.  1  plches.). 
Die  Untersuchungen  wurden  ausgeführt  an  Triton  cristatus, 
palmatus ,  alpestris ,  puuctatus.  Zwischen  den  einzelnen  Arten  be- 
stehen keine  wesentlichen  Differenzen.  Triton  cristatus  ist  das  be- 
quemste Tier.  Um  Teilungen  der  Blutkörperchen  zu  erhalten ,  muß 
man  eine  Blutregeneration  herbeiführen.  Man  hat  eine  solche  bis 
jetzt  durch  Blutentziehung  veranlaßt.  Will  man  dieses  Mittel  z.  B. 
beim  Frosche  anwenden,  so  soll  man  wenigstens  nicht  ein  Glied  ab- 
schneiden, sondern  die  Spitze  einer  Pipette  in  die  Vena  abdominalis 
einführen.  Verf.  hat  mit  diesem  Mittel  bei  Fröschen  gute  Resultate  er- 
halten. Bei  Tritonen  sind  keine  so  großen  Gefäße  vorhanden,  daß  mau 
dieses  Verfahren  verwenden  kann.  Verf.  hat  daher  die  Tiere  mehrere 
Monate  lang  hungern  lassen  und  sie  dann  reichlich  gefüttert.  Die 
Tiere  halten  das  Hungern  vorzüglich  aus.  Um  sie  am  Leben  zu 
erhalten ,    legt    man    am    besten    auf   den  Grund   einer   tiefen  Schale 


XXII,  1.  Referate.  149 

gewaschene  Kiesel  und  in  die  Mitte  dieser  ein  Stück  Ziegel.  Man 
gießt  dann  so  viel  Wasser  zu,  daß  dieses  bis  an  die  Oberfläche  des 
Ziegels  steigt  und  bedeckt  dann  die  Schale  mit  einer  Glasplatte, 
doch  so,  daß  noch  Luft  zutreten  kann.  Die  Tiere  magern  während 
der  Sommermonate  stärker  ab  als  während  der  Wintermonate.  Die 
Männchen  magern  schneller  ab  als  die  Weibchen ,  besonders  wenn 
diese  voll  von  Eiern  sind.  Man  kann  die  Abmagerung  beschleunigen, 
wenn  man  den  Tieren  keine  Steine  gibt,  auf  denen  sie  außerhalb 
des  Wassers  sich  ausruhen  können.  Es  schien  dem  Verf.  aber,  daß 
die  Tritonen,  welche  zu  schnell  abgemagert  waren,  später  die  Nahrung 
weniger  gut  aufnahmen.  Die  Abmagerung  kann  einen  sehr  hohen 
Grad  erreichen ,  ohne  den  Tod  zu  veranlassen.  Schließlich  bleiben 
die  Tiere  unbeweglich  und  können  in  diesem  Zustande  noch  wochen- 
und  monatelang  leben.  Diesen  äußersten  Zustand  der  Abmagerung 
darf  man  aber  nicht  eintreten  lassen,  denn  solche  Tiere  nehmen  die 
Nahrung  nicht  mehr  in  richtiger  Weise  auf.  Man  erkennt  den  Grad 
der  Abmagerung  am  Anblicke  des  ganzen  Körpers  und  besonders 
des  Schwanzes,  der  seine  dorsalen  und  ventralen  Verbreiterungen 
verliert  und  sich  der  zylindrischen  Form  nähert.  Dieses  ist  ein 
gutes  Kennzeichen  für  den  Grad  der  Ernährung.  Am  besten  fängt 
man  die  Tritonen  im  Frühjahre  (Februar,  März,  April)  und  läßt  sie 
hungern,  man  kann  sie  dann  von  Ende  Juni  bis  in  den  November 
hinein  verwenden.  Tritonen,  welche  im  Juni  oder  Juli  gefangen  sind, 
kann  man  von  September  bis  Februar  brauchen.  Um  sie  zu  füttern, 
setzt  Verf.  die  Tiere  in  eine  hinreichend  breite  Schale  mit  Larven 
von  Chironomus.  -  Zuerst  füllt  sich  nun  der  Darmkanal,  dann  tritt 
eine  Abschuppuug  der  Haut  ein,  welche  das  sichere  Kennzeichen  ist, 
daß  ein  lebhafter  Stoffwechsel  eingetreten  ist  (gewöhnlich  48  Stunden 
nach  der  ersten  Mahlzeit),  dieselbe  setzt  sich,  wenn  auch  weniger 
deutlich,  fort.  Etwa  10  bis  12  Tage  nach  dem  Beginne  der  Fütte- 
rung treten  die  ersten  Mitosen  in  den  roten  Blutkörperchen  auf. 
Verf.  hat  vergleichsweise  das  fixierte  und  gefärbte  Blut  und  das 
frische  und  lebende  Blut  untersucht.  Um  Präparate  von  fixiertem 
Blute  herzustellen,  breitet  Verf.  das  Blut  auf  einem  Deckgläschen 
dadurch  in  dünner  Schicht  aus,  daß  er  mit  dem  Rücken  eines  anderen 
Gläschens  darüberfährt  5  dann  wird  das  frische  Blut  sofort  fixiert, 
entweder  mit  Sublimat  oder  noch  besser  mit  der  folgenden  modifi- 
zierten Flemming  sehen  Lösung,  bei  der  der  Essigsäuregehalt  herab- 
gesetzt ist: 


150  Referate.  XXII,  1. 

Chromsäure,  einprozentige  Lösung      ....     30     Vt. 
Osmiumsäure,  einprozentige  Lösung    ....     15       „ 
Essigsäure 05    „ 

Dauer  der  Fixierung  10  Minuten,  doch  kann  mau  ohne  Schaden  die 
Präparate  24  Stunden  und  länger  in  der  Fixierungsflüssigkeit  lassen. 
Das  Fixierungsmittel  wirkt  wie  eine  Beize,  welche  die  Färbung  be- 
günstigt. Nach  sorgfältigem  Auswaschen  in  fließendem  Wasser  oder 
in  einer  größeren  Menge  öfters  gewechselten  Wassers  kann  man  mit 
den  meisten  Farbstoff'en  färben.  Am  günstigsten  erwiesen  sich : 
Thionin,  Safraniu  mit  nachfolgender  Färbung  in  der  Benda  sehen 
Mischung  oder  ohne  solche,  Eisenhämatoxylin  nach  Heidenhain.  So 
erhält  mau  ausgezeichnete  Kernteilungsfiguren.  Benutzt  man  eine 
FLEMMiNüSche  Lösung  ohne  Essigsäure,  also  eine  Chrom -Osmium- 
mischung, so  erhält  man  ziemlich  gute  Resultate  in  bezug  auf  die 
Fixierung  des  Hämoglobins  und  des  Kernes,  doch  ist  dieser  natürlich 
nicht  so  gut  fixiert,  als  wenn  man  Essigsäure  mit  verwendet.  — 
Um  Blut  von  Triton  zu  erhalten ,  kann  man  entweder  den  Schwanz 
an  seiner  Basis  abschneiden,  oder  man  kann  das  Blut  dem  Herzen 
entnehmen  (bedeutend  besser).  Man  muß  möglichst  reines  Blut 
nehmen,  ohne  Beimischung  von  Gewebssäften,  wodurch  die  Gerinnung 
beschleunigt  wird.  Verf.  schneidet  daher  die  Spitze  des  Herzens  ab 
und  führt  eine  Pipette  ein.  —  Um  das  frische  Blut  zu  studieren, 
kann  man  verschieden  verfahren.  Am  einfachsten  nimmt  man  einen 
Objektträger,  der  mit  zwei  kleinen  Paraffinstreifen  versehen  ist,  auf 
welche  später  das  Deckglas  gelegt  wird:  das  Blut  ist  vor  Druck 
geschützt  und  um  den  Blutstropfen  verbleibt  eine  gewisse  Luftmenge. 
Man  schließt  mit  Paraffin  ein.  Der  Blutstropfen  muß  abgerundet  im 
Zentrum  liegen.  Verf.  hat  weiter  die  feuchte  Kammer  benutzt  mit 
hängendem  Tropfen.  Hier  stört  die  Menge  der  Blutkörperchen, 
jedenfalls  darf  man  nur  die  Randpartieen  untersuchen,  außerdem 
bewegen  sich  die  Körperchen  stets  etwas.  Verf.  gibt  der  ersteren 
Methode  den  Vorzug.  —  Um  die  Blutkörperchen  bei  höheren 
Temperaturen  zu  studieren,  hat  Verf.  sich  der  Apparate  von  Malassez 
und  Regaud  bedient.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Helber ,  E. ,     Über    die    Zählung    der    Blutplättchen    im 

Blute     des    Menschen    und     ihr     ^'  e  r  h  a  1 1  e  n    bei 

pathologischen    Zuständen  (Deutsches  Arcli.  f.  klin. 

Med.  Bd.  LXXXI,   1904,  H.  3,  4,  p.  HIG— 327). 

Die  Angaben   über    die  Zahl   der  Blutplättchen    lauten   bis  jetzt 


XXII,  1.  Referate.  151 

sehr  verschieden.  Dies  kann  an  unregelmäßigen  Schwankungen  der 
Plättchenzahl  liegen,  es  kann  aber  auch  daran  liegen,  daß  man  noch 
nicht  darüber  einig  ist,  welche  Gebilde  als  Plättchen  aufgefaßt  werden 
sollen.  Durch  die  neueren  Arbeiten  von  Dekhuyzen  und  Deetjen 
wurde  die  Zellnatur  und  das  Vorhandensein  eines  Kernes  festgestellt, 
durch  Kopsi'H  wurden  diese  Annahmen  bestätigt.  Will  man  bei  einer 
Zählung  nur  die  diesen  Bedingungen  entsprechenden  Plättchen  zählen, 
so  sind  alle  die  Umstände  auszuschalten,  durch  die  eine  Veränderung 
des  Blutes  während  der  Entnahme  und  der  Anfertigung  des  Präpa- 
rates entstehen  kann.  Denn  Veränderungen  der  Erythrocyten  und 
Leukocyten  führen  zu  Abschnürungen  von  Teilen  derselben  und  diese 
können  dann  mit  den  eigentlichen  Plättchen  die  grüßte  Ähnlichkeit 
haben,  eine  so  große  Ähnlichkeit,  daß  selbst  Forscher  wie  Arnold 
und  seine  Schüler  sie  mit  den  früher  von  Bizzozeko  beschriebenen 
Plättchen  völlig  identifizieren.  Durch  physikalische  Veränderungen 
des  Blutes,  z.  B.  durch  eintretende  Gerinnung,  treten  die  sogenannten 
Arnold  sehen  Körperchen  aus  den  roten  Blutkörperchen  aus.  Auch 
die  Blutstäubchen  sind  nicht  unter  die  Blutplättchen  zu  rechnen. 
Früher  wurde  das  Verhältnis  der  Plättchen  zu  den  roten  Blutkörper- 
chen in  frischen  oder  in  Trockenpräparaten  bestimmt  und  daraus 
die  Plättchenzahl  ausgerechnet.  Dies  ist  neuerdings  sehr  erleichtert 
worden  durch  die  Entdeckung  Deetjen s  von  der  Bedeutung  des 
Natriummetaphosphats  für  die  Erhaltung  der  Plättchen ,  die  extra- 
vasculär  sehr  labiler  Natur  sind.  Aber  auch  hierbei  sind  noch 
Schwierigkeiten  und  Unsicherheiten  vorhanden.  Die  Zahl  der  Plättchen 
ist  immer  weseaitlich  (etwa  lömal)  kleiner  als  die  der  roten  Blut- 
körperchen, man  muß  also,  um  eine  ausreichende  Zahl  der  Plättchen 
zu  bekommen,  sehr  viele  Erythrocyten  zählen.  Ferner  hat  das  Mischen 
von  Blut-  und  Salzlösung  durch  Verreiben  auf  dem  Objektträger 
mittels  Platinöse  ebenfalls  seine  Nachteile ,  da  es  nicht  leicht  ist, 
eine  gleichmäßige  Verteilung  zu  erzielen.  Die  Zählung  mittels  der 
Thoma-Zeiss sehen  Kammer  ergab  keine  besseren  Resultate.  Zwar 
läßt  sich  das  Haften  der  Plättchen  am  Glase  verhindern,  wenn  man 
mit  gereinigten  Gläsern  und  schnell  arbeitet.  Aber  die  gewöhnlichen 
Kammern  sind  so  hoch ,  daß  die  Plättchen  sich  bei  ihrer  Kleinheit 
in  den  verschiedenen  Höhenschichten  verteilen  und  somit  nur  ein  Teil 
auf  den  Boden  der  Kammer  zu  liegen  kommt.  Das  Aufsuchen  der 
in  verschiedenen  Höhenlagen  schwimmenden  Plättchen  mittels  der 
Mikrometerschraube ,  besonders  in  den  oberen  Teilen  der  Kammer, 
wobei  die  Kammerstriche  anfangen   unsicher   zu  werden ,    macht    die 


152  Referate.  XXII,  1. 

Zählung  sehr  unsicher.  Erschwert  wird  sie  ferner  dadurch ,  daß 
wegen  des  großen  Abstandes  des  Deckgläschens  von  dem  Quadrat- 
netze stärkere  Objektive  wegen  ihres  geringen  Fokalabstandes  nicht 
anwendbar  waren.  Will  man  aber  die  Plättchen  als  solche  sicher 
erkennen  und  von  andern  Gebilden  des  Blutes,  insbesondere  den  Ab- 
kömmlingen der  roten  Blutscheiben  sicher  unterscheiden,  so  ist  min- 
destens eine  Vergrößerung  von  500  nötig.  Nach  vielem  Probieren 
erwies  sich  das  folgende  Verfahren  als  bi*auchbar :  Die  Firma  C.  Zeiss 
fertigte  eine  Zählkammer  von  0*02  mm  Höhe  an.  Sonst  gleicht  diese 
vollkommen  der  gewöhnlichen  0*1  mm  hohen  Kammer  zur  Blut- 
körperchen-Zählung. Bei  dieser  neuen  Kammer  fällt  die  lästige  Durch- 
musterung der  verschiedeneu  Höhenlagen  fast  weg.  Wenn  man  das 
O'l  mm  dicke  Deckgläschen  von  Zeiss  verwendet,  so  können  auch 
stärkere  Objektive  benutzt  werden.  Zweckmäßig  erwiesen  sich  die 
Wasserimmersion  D  und  das  Trockensystem  E.  Bei  Verwendung 
des  Kompensationsokulars  12  konnten  dann  Vergrößerungen  bis  zu 
1080  erzielt  werden.  Diese  reichten  bei  guter  Beleuchtung  voll- 
kommen aus ,  um  die  Plättchen  sicher  zu  erkennen  und  von  allen 
andern  Gebilden  ohne  Schwierigkeit  zu  unterscheiden.  Meistens  wurde 
mit  E  und  Kompensationsokular  6  gearbeitet.  Das  Blut  wurde  aus 
dem  vorher  mit  Alkohol  und  Äther  gereinigten  Ohrläppchen  ent- 
nommen und  in  einem  Mischer  (Verdünnung  1  :  31),  der  mit  Salpeter- 
säure, Wasser,  Alkohol,  Äther  sorgfältig  gereinigt  war,  bis  zur 
Marke  1  aufgesogen  und  weiter  schnell  durch  eine  lOprozentige 
Natriummetaphosphatlösung  bis  zur  Marke  31  verdünnt.  Der  Mischer 
wurde  geschüttelt  und  sofort  ein  kleiner  Tropfen  auf  den  Boden  der 
Kammer  gebracht.  Wenn  die  Mischung  in  der  Ampulle  bei  durch- 
fallendem Lichte  hell  und  bei  auffallendem  stark  lichtreflektierend 
ist,  so  ist  das  Präparat  meist  gut  (Deckfarbe).  Eine  Mischung,  die 
Lackfarbe  zeigt,  ist  stets  unbrauchbar.  Werden  beim  Einstechen  in 
das  Ohrläppchen  Quetschungen  vermieden,  und  sind  die  Gläser  immer 
sauber,  so  werden  stets  brauchbare  Bilder  erzielt.  Die  Metaphosphat- 
lösung  ist  sehr  wenig  haltbar,  so  daß  sie  am  besten  ungefähr  alle 
3  Tage  neu  bereitet  und  vor  dem  Gebrauche  filtriert  wird.  Das  in 
dieser  Weise  zubereitete  Präparat  soll  das  folgende  Bild  zeigen :  Die 
roten  Blutkörperchen  liegen  völlig  intakt,  mit  Delle  versehen,  neben- 
einander auf  dem  Boden  der  Kammer,  keine  Geldrollenbildung; 
zwischen  den  roten  Blutscheiben  liegen  ziemlich  gleichmäßig  verteilt 
rundliche  oder  ovale,  stärker  lichtbrechende,  mit  dunkleren  Stellen,  be- 
sonders an  den  Randpartien ,  versehene ,   völlig   farblose  Körperchen 


XXII,  1.  Reteiate.  153 

von  etwa  ein  Drittel  der  Größe  der  roten  Blutkörperchen.  Sie  liegen 
einzeln  oder  zu  zweien,  dreien,  jedoch  deutlich  voneinander  abgrenz- 
bar. Man  sieht  auch  größere  Plättchen  von  etwa  der  halben  Größe 
der  roten  Blutscheiben ,  die  sich  wohl  in  gequollenem  Zustande  be- 
finden. Nicht  sämtliche  Plättchen  sind  rund  oder  oval ,  ein  Teil, 
besonders  wenn  eine  leichte  Beschädigung  stattgefunden  hat,  ist  un- 
regelmäßig zackig.  Leukocyten  sind  bei  der  Kleinheit  der  Kammer 
nur  in  kleiner  Anzahl  vorhanden.  Hat  das  Blut  Schaden  gelitten, 
so  kann  man  sehr  gut  Abschnürungsprodukte  von  den  Erythrocyten 
beobachten ;  diese  sind  dann  rund  und  kugelig,  der  größte  Teil  zeigt 
auch,  wenigstens  im  Anfange  noch,  deutlich  Hämoglobinfarbe.  Solche 
Präparate  sind  von  der  Zählung  stets  auszuschließen ,  ebenso  die- 
jenigen, in  denen  die  Plättchen  deutliche  Haufen  über  6  bis  8  bilden 
oder  die  roten  Blutkörperchen  agglutiniert  sind.  Man  kann  somit  in 
der  Kammer  gleichzeitig  Erythrocyten ,  Plättchen  und  Leukocyten 
zählen.  Die  Zahl  der  letzteren  ist  wegen  der  Kleinheit  der  Kammer 
etwas  ungenau.  Schiefferdeclxer  (Bonn). 

Meyburg ,  H. ,    Beitrag    zur  Kenntnis    des  Stadiums   der 
„primären    in    toto    konzentrischen"    Knochen- 
bildung    (Arch.     f.    mikrosk.    Anat.    Bd.    LXIV ,     1904, 
p.   627—652  m.  8  Figg.). 
Als  Material    zu   den  anzufertigenden  Schliffen  dienten  Knochen 
vom  Rind,  Schaf,  Kamel,  Pferd  und  Ziege.     Es  wurden   teils  mace- 
rierte  Knochen  verwandt,  teils  solche,  die,  nachdem  sie  etwa  3  Wochen 
in  4prozentiger  i'ormoUösung    und    darauf  in  96prozentigem  Alkohol 
gelegen  hatten,  getrocknet  worden   waren.     Die    mit   der    Säge    her- 
gestellten Knocheuscheiben  wurden  zunächst  mittels  Feilen  zu  dünneu 
Lamellen    bearbeitet    und    dann    erst    fertig    geschliften    und    poliert. 
Diese  Methode  gestattet   ein   außerordentlich   schnelles   Arbeiten    und 
die  Anfertigung    großer   Übersichtsschliffe.     Geschliffen    wurden    fast 
durchweg    Metacarpi    und    Metatarsi ,    und    zwar    quer ,    radial    und 
tangential.  E.   Schoebel  {Neapel). 

Borchert,   M.,  Über  Markscheidenfärbung  bei  niederen 

Wirbeltieren  (Verhandl.  der  Berliner  Physiol.  Ges.  Sitz. 

6.  Mai  1904,  Arch.   f.  Anat.  u.  Physiol.  1904,  Physiol.  Abt., 

H.   5,  6,  p.  572—575). 

Die  Osmiumsäure  wird,    wie  Max  Schul tze  zuerst  gezeigt  hat, 

durch  das  gesamte  Gewebe  des  Zentralnervensystems  reduziert.    Die 


154  Referate.  XXII,  1. 

intensivste  Reduktion  erfolgt  in  den  Marlcsclieiden  der  marklialtigen 
Nervenfasern.  Aus  dem  zwischen  den  marklialtigen  Nervenfasern 
gelegenen  Gewebe  lassen  sich  die  Osraiumsäure-Reduktiousprodukte 
durch  DifFerenzierungsflüssigkeiten  (am  besten  durch  die  von  Pal  an- 
gegebene Ditfereuzierung  mittels  Kali  liypermanganicum  und  darauf 
folgende  Behandlung  mit  Kali  oxalicum  und  Kali  sulfuricum)  voll- 
ständig entfernen,  so  daß  die  markhaltigen  Nervenfasern  schwarz  auf 
weißem  Grunde  liegen.  Für  die  systematische  Untersuchung  der 
Hirnfaserung  ist  die  Osmiumsäure  nur  von  Exner  und  Tuczek  ange- 
wendet worden.  Für  die  Hirnfaseranatomie  der  niederen  Wirbeltiere 
ist  sie  niemals  angewendet  worden,  obwohl  die  Gehirne  hier  so  klein 
sind,  daß  sie  sich  anwenden  ließe.  Bei  niederen  Wirbeltieren  ist 
aber  die  Weigert  sehe  Markscheidenfärbung  oft  mit  größeren  Schwierig- 
keiten verbunden.  Nur  eine  viele  Monate  währende  Vorbehandlung 
mit  MtJLLERScher  Flüssigkeit  läßt  gute  WEioERT-Präparate  erhotfen, 
und  auch  dann  ist  der  Erfolg  noch  unsicher.  Noch  schwieriger  liegt 
die  Sache  bei  jugendlichen,  noch  nicht  markreifen  Gehirnen  niederer 
Wirbeltiere.  Die  Chromhämatoxylinlacke  werden  bei  der  Weigert- 
sclien  Methode  in  dem  zwischen  den  markhaltigen  Nervenfasern  ge- 
legeneu Gewebe  mit  besonderer  Zähigkeit  festgehalten  und  lassen 
sich  selten  ohne  schwere  Schädigung  der  Faser  daraus  entfernen. 
Dem  gegenüber  gelingt  es  hier,  mit  der  Osmiumsäurebehandlung  in 
3  bis  4  Tagen  lückenlose  Serien  von  Markscheidenpräparaten  zu  er- 
halten ,  die  hinter  den  schönsten  WEiGERx-Präparaten  nicht  im  ge- 
ringsten zurückstehen.  Diese  Methode  ist  dabei  ungemein  einfach, 
versagt  nie  und  eignet  sich  in  gleicher  Weise  für  jugendliche  wie 
für  erwachsene  Gehirne.  Im  Gegensatze  zu  der  WEiGERT-Methode 
leidet  sie  unter  der  Paraffineinbettung  nicht,  gestattet  also  die  Her- 
stellung auch  feinster  Schnitte.  Ein  weiterer  Vorzug  der  Osniium- 
methode  ist  die  Möglichkeit  der  Stückfärbung  des  Gehirns.  Methode: 
Die  Gehirne,  die  dem  Verf.  in  lOprozentiger  Formollösung  von  der 
zoologischen  Station  in  Neapel  zugesandt  waren ,  wurden  in  .3  mm 
dicke  Scheiben  zerlegt.  Diese  kommen  für  24  Stunden  in  ein- 
prozentige  Osmiumsäurelösung ,  dann  für  mehrere  Stunden  in  destil- 
liertes Wasser,  steigenden  Alkohol,  werden  in  Paraffin  eingebettet  und 
geschnitten.  Schon  jetzt  zeigen  die  Präparate  einen  schönen  Kontrast 
zwischen  grauer  und  weißer  Substanz.  Solche  Präparate  geben  eine 
Kontrolle  dafür  ab ,  ob  und  in  wie  weit  durch  die  Differenzierung 
markhaltige  Nervenfasern  zerstört  werden.  Eine  solche  Kontrolle 
kann  in  Fällen  von  pathologischem  Faserausfall  von  großer  Bedeutung 


XXII,  1.  Referate.  I55 

werden.  Eine  solche  Kontrolle  fehlt  bei  der  Weigert  sehen  Methode. 
Die  übrigen  Schnitte  werden  nach  Pal  dilierenziert,  d.  h.  sie  kommen 
für  wenige  Sekunden  in  eine  O"2.5prozentige  Lösung  von  Kalium 
In-perraanganicum,  werden  dann  kurz  abgespült  und  kommen  für  kurze 
Zeit  in  eine  Lösung  von: 

Acid.  oxal lü 

Kalium  sulf. 1-0 

Destilliertes  Wasser 200-0 

Nach  beendigter  Differenzierung  mehrstündiges  oder  noch  längeres 
Auswaschen  in  häufig  gewechseltem  oder  fließendem  Wasser,  damit 
auch  die  kleinsten  Spuren  von  Diflerenzierungsflüssigkeit  entfernt 
werden.  Dann  Entwässerung,  Aufhellung,  Kanadabalsam.  Verf.  ist 
nach  seinen  Untersuchungen  der  Meinung,  daß  die  Osmiumsäure- 
behandlung für  die  systematische,  faseranatoraische  Untersuchung  des 
erwachsenen  und  fötalen  Selachiergehirns  (hierauf  beziehen  sich  bisher 
die  Untersuchungen)  die  Markscheidenfärbung  von  Weigert-Pal  völlig 
ersetzt  und  wesentliche  Vorzüge  vor  ihr  Ijat.  Der  einzige  Nachteil 
dieser  Methode  ist  der,  daß  sie  auf  kleinere  Gehirne  beschränkt  ist. 
Frisches  Torpedogehirn  direkt  mit  Osmiumsäure  behandelt  zeigte  eine 
ebenso  gelungene  Markscheidenfärbung ,  wie  das  zuerst  mit  Formol 
behandelte ,  nur  zeigen  die  Präparate ,  bevor  sie  difterenziert  sind, 
einen  weniger  scharfen  Kontrast  zwischen  grauer  und  weißer  Sub- 
stanz, da  die  zwischen  den  markhaltigen  Nervenfasern  gelegene 
Substanz  stärker  mit  gefärbt  ist.  ScMe ff  er  decket'  (Bonn). 

Cajal,  S.  ß.,    Das   Neurofi  brillenne  tz   der  Retina  (Intern. 
Monatsschr.  für  Anat.  u.   Physiol.   Bd.  XXI,  H.  4—8,    1904, 
p.  369—396  m.   1  Tfl.). 
Die  Silbermethode  von  Cajal  ist  schon  in  dieser  Zeitschrift  aus- 
führlich   mitgeteilt    worden;    Cajal    gibt    in    der  vorliegenden  Arbeit 
nur  eine  kurze  Mitteilung  darüber,  in  welcher  Weise  seine  Methode 
speziell  für  die  Retina  anzuwenden  ist.    1.  Methode:  1.  Frische  Stücke 
von  Netzhaut  und  Sclera  werden  drei  Tage  lang  im  Wärmeofen  bei 
30bis3.T^  C.    in    einer   l"5prozentigen  Lösung    von  Silbernitrat   ge- 
lassen.   (Man  kann  auch  Lösungen  von  0'75  bis  3  Prozent  verwenden.) 
2.   Waschen    in  destilliertem   Wasser  wenige  Sekunden  und  Einlegen 
für  24  Stunden  in  folgende  Mischung:   Dest.  Wasser   100  cc,   Hydro- 
chinon  oder  Pyrogallussäure  1  g,  Formol  h  bis  10  cc.    3.  Auswaschen 
der    Stücke    in    dest.    Wasser    wenige    Minuten ,    steigender    Alkohol, 


156  Referate.  XXII,  1. 

Celloidin ,  Origanumöl ,  Xylol-Damar.  Die  Imprägnation  betrifft  ge- 
wöhnlich alle  Zellen,  welche  ein  differenziertes  Neurofibrillennetz  be- 
sitzen. Doch  trifft  man  auch  Stellen ,  an  welchen  nur  eine  Zellart 
oder  nur  einige  Zellen  gefärbt  sind ,  solche  sind  besonders  geeignet 
zu  einer  genauen  Untersuchung.  Je  länger  die  Stücke  im  Ofen  bleiben, 
desto  größer  ist  die  Gefahr,  Imprägnationen  ohne  Kontrast  zwischen 
Grund  und  Fibrillen  zu  erhalten.  Im  allgemeinen  ist  bei  einer  Tem- 
peratur, welche  nicht  über  32°  C.  hinausgeht,  die  Reife  der  Stücke 
(Zeitpunkt  des  größten  Kontrastes)  zwischen  dem  3.  und  4.  Tage  er- 
reicht. Starke  Silberlösungen  (3  Prozent)  ergeben  eine  sehr  gute 
Fixierung,  aber  geringere  Kontraste  als  weniger  starke  Lösungen 
(1  bis  1*5  Prozent).  Die  0'75prozentige  Lösung  ergibt  eine  sehr 
intensive  und  kontrastreiche  Färbung  des  Netzes ,  jedoch  schrumpft 
das  Protoplasma  zu  sehr,  so  daß  oft  eine  Lücke  zwischen  Zellmem- 
bran und  Neurofibrillenplexus  entsteht.  Deshalb  hat  Verf.  hauptsäch- 
lich Lösungen  von  1'2  oder  1'5  Prozent  verwendet,  namentlich  bei 
der  dünnen  Netzhaut  von  Kaninchen  und  Meerschweinchen.  Dicke 
Retinae,  welche  eine  große  Menge  von  Silbernitrat  absorbieren,  ver- 
langen ,  wenn  die  Flüssigkeitsmenge  nicht  groß  ist ,  höhere  Konzen- 
tration. 2.  Methode:  F  i  x  i  e  r  u  n  g  d  u  r  c  h  A  m  m  o  n  i  a  k  a  1  k  o  h  o  1. 
Zur  Färbung  der  großen  Netzhautzellen  der  großen  Säugetiere  (Hund, 
Schaf,  Pferd  etc.).  1.  Die  Netzhautstücke  kommen  für  24  Stunden 
in  eine  Mischung  von  50  cc  Alkohol  von  96  Prozent  und  5  Tropfen 
Ammoniak.  2.  Abspülen  einige  Sekunden  in  destilliertem  Wasser  und 
Einlegen  in  eine  einprozentige  Lösung  von  Silbernitrat  auf  ungefähr 
4  Tage  (Ofen,  30  °  C).  3.  Reduktion,  Härtung,  Einbettung  etc.,  wie 
bei  Methode  1.  Verf.  setzt  manchmal  der  Fixierungstlüssigkeit  5  Teile 
Glyzerin  auf  100  Teile  Flüssigkeit  zu:  es  scheint  dies  den  Grund 
durchsichtiger  zu  machen.  Wenn  man  dem  Reduktionsbade  20  Teile 
Alkohol  von  96  Prozent  auf  100  cc  zusetzt,  scheint  der  Unterschied 
zwischen  dem  Grunde  und  den  Neurofibrillen  etwas  größer  zu  werden. 
Bei  dieser  Methode  der  alkalischen  Fixierung  färben  sich  hauptsäch- 
lich die  großen  Ganglienzellen  und  die  Horizontalzellen  oft  schokoladen- 
braun ;  für  die  mittleren  und  kleinen  Ganglienzellen  ist  diese  Methode 
nicht  so  gut  wie  die  vorige.  Es  scheint,  daß  das  Fibrillennetz  der 
kleinen  Zellen  durch  die  alkalische  Flüssigkeit  verändert  wird,  denn 
es  nimmt  das  Silber  oft  nicht  an.  Diese  beiden  eben  empfohlenen 
Methoden  ergeben  auch  bei  Nervenzentren  gute  Resultate,  wenn  man 
das  Silber  einen  oder  2  Tage  länger  einwirken  läßt.  Verf.  hat  ferner 
oft    zugleich    mit   den  Zellen  der  Netzhaut  sehr  gute  Färbungen  der 


XXII,  1.  Referate.  157 

Neurofibrillen  in  den  motorischen  Nervenendigungen  der  Augenmuskeln 
(junge  Kaninchen,  einige  Tage  alte  Sperlinge  etc.)  sowie  der  elasti- 
schen Fasern  und  der  Muskelfasern  erhalten.  In  den  Muskelfasern 
sieht  man  außer  den  dunklen  Querstreifen  ein  interfibrilläres  Netz, 
welches  wahrscheinlich  dem  Sarkoplasma  entspricht.  Die  Theorie 
dieser  Methode  ist  noch  nicht  klar.  Der  schwierigste  Punkt  der 
Imprägnation  ist  die  Feststellung  der  Reifezeit  der  organischen  Silber- 
verbindung. Man  muß  in  jedem  einzelnen  Falle  die  günstigste  Zeit 
für  die  Reduktion  feststellen.  Die  Einwirkung  der  Wärme  ist  wohl 
vergleichbar  dem  Einflüsse  des  Lichtes  auf  die  Photographie.  Trotz 
der  Einfachheit  der  Methode  und  ihrer  konstanten  Resultate  sind  nicht 
alle  Präparate  gleich  gut  in  bezug  auf  die  Schärfe  der  Neurofibrillen 
und  die  Vollständigkeit  der  Färbung.  Diese  Verschiedenheiten  hängen 
zweifellos  ab  von  der  Art  des  Tieres,  seinem  Alter  (bei  jungen  Tieren 
ist  die  Reaktion  gewöhnlich  stärker)  und  noch  von  verschiedenen 
anderen  bisher  unbekannten  Dingen.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Hardesty,  I.,  On  the  Development  and  Nature  of  the 
Neuroglia  (Amer.  Journ.  Anat.  vol.  III,  1904,  no.  3, 
pp.  229—268  w.  5  pltes.). 
Untersucht  wurde  an  Schweineembryonen.  Fixiert  wurde  in  der 
Flüssigkeit  von  Carnoy.  Paraffinschnitte,  Färbung  mit  Hämatoxylin 
und  Congorot ,  welch  letzteres  die  Zellgrenzen  sehr  gut  hervortreten 
läßt,  ferner  mit  der  Neurogliamethode  von  Benda  nach  der  Modifikation 
von  Huber.  Für  fibröses  Bindegewebe  wurde  oft  die  Methode  von 
Mallory  verweiulet.  Zur  Vergleichung  und  Kontrolle  wurde  die 
Silbermethode  benutzt,  die  bei  Tieren  unter  10  mm  Länge  keine 
Resultate  ergab.  Es  wurde  die  schnelle  GoLC4ische  Methode  ver- 
wendet und  Silberimprägnation  nach  Formalinhärtung.  Nach  der 
nötigen  Übung  gelang  es,  bei  Tieren  über  10  mm  erfolgreiche  Fär- 
bungen zu  erhalten  und  auch  bei  jüngeren  waren. die  Resultate  be- 
friedigend. Auch  die  Pankreatin -Verdauungsmethode  wurde  benutzt; 
die  jüngsten  hierzu  verwendeten  Stadien  maßen  15  mm.  Zur  Zeit 
des  Beginns  der  Markreife  wurde  Osmiumsäure  verwendet.  Durch 
die  Benda  sehe  Neurogliafärbung  werden  die  Neurogliafasern  und  das 
Kernchromatin  tief  blau  gefärbt.  Die  gewöhnliche  Beschreibung  der 
Neuroglia  bezieht  sich  eben  nur  auf  Fasern,  welche  sich  blau  zu 
färben  vermögen.  Es  ist  dabei  aber  wohl  möglich,  daß  nur  die  voll 
entwickelten  Fasern  diese  Fähigkeit  besitzen.  Andere  Formen  des 
nicht    nervösen  Gewebes    des  Rückenmarks  werden  braunrot  oder  in 


158  Referate.  XXII,  1. 

versehieclenen  Nuancen  von  rosa  (pink)  gefärbt.  In  den  frühen  Ent- 
wicklungsstadien des  Schweines,  bevor  die  Neurogliafasern  entwickelt 
sind,  färben  sich  die  Kerne  allein  blau.  Das  allgemeine  spongio- 
blastische  Gewebe  wird  hinreichend  rötlich  gefärbt,  um  Struktur 
und  Anordnung  zu  erkennen,  Zellgrenzen  treten  dabei  aber  nicht 
hervor.  Es  wurden  daher  in  diesen  Fällen  noch  andere  Methoden 
angewendet.  Bei  der  erwachsenen  Neuroglia  dagegen  übertriftt  die 
Methode  von  Benda  alle  anderen  in  bezug  auf  klare  Darstellung  der 
Details  der  Neurogliafasern  und  Schärfe  des  Kontrastes. 

Schiefferdecker  {Bonn). 

Rubaschkill,  W.,  Studien  über  Neuroglia  (Arch.  f.  mikrosk. 
Anat.  Bd.  LXIV,  1904,  p.  575—626  m.  4  Tfln.). 
Mit  der  WEiGERTSchen  Methode  konnte  Verf.  keine  befriedigen- 
den Resultate  erhalten,  da  ihm  kein  vollständig  frisches  Material  vom 
menschlichen  Gehirn  zur  Verfügung  stand ;  zu  befriedigenden  Resul- 
taten aber  führte  folgende  Methode,  die  auch  zur  Untersuchung  der 
Glia  im  Gehirn  von  Tieren  verwendbar  ist.  Besonders  gute  Resul- 
tate gibt  das  Katzengeliirn.  Für  das  Gelingen  der  Methode  wesent- 
lich ist  die  Injektion  der  Gehirngefäße  mit  der  fixierenden  Flüssigkeit. 
Diese  wird  an  dem  frischen  mittels  Chloroform  getöteten  Tier  durch 
die  Aorta  oder  Art.  carot.  comm.  oder  sonst  geeignetes  Gefäß  aus- 
geführt. Als  tauglich  für  die  Weiterbearbeitung  sind  nur  diejenigen 
Hirnbezirke  anzusehen ,  welche  von  der  fixierenden  Flüssigkeit  ge- 
troffen, d.  h.  deutlich  gelbgrün  gefärbt  sind.  Die  fixierende  Flüssig- 
keit besteht  aus :  100  Teilen  2'5prozentiger  Lösung  von  doppelchrom- 
saurem  Kali ,  0*5  bis  1  Teil  neutrales  essigsaures  Kupfer ,  2"5  bis 
3  Teilen  Eisessig  und  10  Teilen  käufliches  Formol.  Die  Menge  des 
Kupfersalzes  wie  die  der  zu  seiner  Auflösung  notwendigen  Essigsäure 
muß  nach  Art  und  Alter  des  Tieres  etwas  geändert  werden.  Für 
junge  und  kleine  Tiere  nimmt  man  0"5,  für  alte  und  große  1,  und 
für  Katzen  von  mittlerem  Alter  0*75  Teile  des  ersteren.  Die  fixierende 
Flüssigkeit  wird  folgendermaßen  zubereitet:  Der  siedenden  Lösung 
von  doppelchromsaurem  Kali  wird  das  fein  pulverisierte  essigsaure 
Kupfer  und  dann  die  zur  Lösung  dieses  Salzes  notwendige  Menge 
Essigsäure  (aber  nicht  mehr  als  3  Teile)  zugesetzt.  Nach  höchstens 
5  bis  10  Minuten  langem  Kochen  klärt  sich  die  Flüssigkeit  und 
wird  grün.  Ist  die  Flüssigkeit  aus  irgendeinem  Grunde  nicht  klar 
geworden,  so  muß  sie  filtriert  werden.  In  diesem  Zustande  ohne 
Formol  kann  die  Flüssigkeit  beliebig  lange  aufbewahrt  werden.     Das 


XXII,  1.  Referate.  IfjO 

Formol  setzt  man  immer  erst  unmittelbar  vor  dem  Gebrauch  zu.     Vor 
der    Injektion    wird    die    zu    benutzende    Flüssigkeit    zur    Hälfte    mit 
Wasser    verdünnt  und,  auf  37  bis  38 '^  C.  erwärmt,  in  einer  Menge 
von  200  bis  1000  cc  —  je  nach  der  Größe  des  Tieres  und  der  Injek- 
tionsstelle —  eingespritzt.    Nach   10  Minuten  werden  nach  Eröffnung 
des   Schädels  die  zur  Untersuchung  tauglichen  Teile    des  Hirns   aus- 
geschnitten   und    in  die  unverdünnte  Fixierungsflüssigkeit  von  35  bis 
40°  C.  für  5  bis  7  Tage  eingelegt.  Die  ersten  4  Tage  muß  die  Flüssig- 
keit gewechselt  werden.    Nach  beendeter  Fixierung  werden  die  Objekte, 
ohne  vorher  mit  Wasser  abgespült  zu   werden,  leicht  mit  Fließpapier 
abgetrocknet,   dann  für  6  bis   12  Stunden  in  95prozeutigem  Alkohol 
entwässert    und    schließlich    in    gewöhnlicher  Weise   in   Paraffin    ein- 
gebettet. Celloi'dineinbettung  ist  nicht  rätlich,  da  durch  sie  die  Färbung 
sehr  erschwert  wird.     Wenn  möglich  sollen  auch  die  Paraffinschnitte 
nicht  aufgeklebt  werden,  sondern  die  vom  Paraffin  befreiten  Schnitte . 
in    Schalen    gefärbt    werden.     Die  P^ärbung    stellt    eine    Modifikation 
der  Weigert  sehen  Fibrinfärbung  dar.     Die  nicht  aufgeklebten  Schnitte 
werden    6    bis   12    Stunden    (die    aufgeklebten    3-    bis    4mal    länger) 
in    einer    gesättigten    wässerigen    Lösung    von    Methyl-Violett  B    oder 
20  bis  30  Minuten  in  einer  Mischung  aus  3  Teilen  gesättigter  alko- 
liolischer  Lösung    der    gleichen   Farbe    und    1  Teil    Anilinwasser   ge- 
färbt.    Wässerige    Lösungen    geben    eine    zartere    Färbung,    Anilin- 
lösungen    dagegen   nicht    selten     reichlichen     Niederschlag    auf   den 
Präparaten.      Ganz     im     allgemeinen    ist     es    angebracht    auf    etwa 
5  cc  Farblösung  einige  Tropfen    einer    öprozentigen  Oxalsäurelösuug 
zuzusetzen.       Die    gefärbten     Schnitte     kommen     nach     gründlichem 
Abspülen    in     Wasser     für     Ya    '^^''    ^'"®    Minute    in    eine    Jod -Jod- 
kaliumlösung    (Jod    1,     Jodkalium    2,    Wasser    300),    werden    dann 
wieder    abgespült,    dann    ^i    '*'s    ^^  Minute    lang    in    95prozentigem 
Alkohol  entwässert  und  schließlich  in  Nelken-  oder  Anilinöl  differen- 
ziert.    Ersteres  dürfte  im  allgemeinen  vorzuziehen  -  sein ,  weil  es  die 
Farbe  weniger  energisch  auszieht,  und  die  Differenzierung  so  leichter 
zu  überwachen  ist.     Meist    können    die  Schnitte  ohne  Nachteil  sogar 
einige  Stunden  im  Nelkenöl  verbleiben.     Tritt  gelegentlich  im  Nelkenöl 
keine  genügende  f^ntfärbung  ein,    dann   ist  dieselbe  doch  meist  noch 
mit  Anilinöl  leicht  zu  erzielen.     Bei  dieser  Färbemethode  nehmen  die 
Gliafasern    eine    gesättigte    violette    Farbe    an,    das    Zellprotoplasma 
färbt  sich  heller.     In    den  Nervenzellen    färben    sich   die  Kerne  und 
die  NissL  sehen  Schollen.     Die  Nervenfasern  bleiben  ungefärbt,  ebenso 
die  Pia  mater  und  das  Bindegewebe.     Zum  Schluß    ist   noch   zu  er- 


160  Referate.  XXII,  1. 

wähnen ,  daß  in  einigen  Hirubezirken ,  nämlich  in  der  Groß-  und 
Kleinliirnrinde,  meist  nur  ungenügende  Färbung  zu  erreichen  ist. 
Leicht  und  mit  größter  Regelmäßigkeit  färbt  sich  die  Neuroglia  im 
Rückenmark ,  in  der  Medulla  oblongata ,  im  Hirnstamm  und  in  der 
Umgebung  der  Ventrikel.  E.  Schoebel  {Neapel). 

Pinkus,  F.,  Über  Hautsinnesorgane  neben  dem  mensch- 
lichen Haar  (Haarscheiben)  und  ihre  ver- 
gleichend-anatomische Bedeutung  (Arch.  f.  mi- 
krosk.  Anat.  Bd.  LXV,  1904,  p.  78 — 95  m.  2  Ttln.). 
Zur  Untersuchung  des  nervösen  Teiles  der  in  Frage  stehenden 
Gebilde  dienten  anfangs  Gold-  und  Golgi- Präparate ,  welche  aber 
nur  mäßige ,  teils  lückenhafte ,  teils  nicht  einwandsfreie  Resultate 
ergaben.  Bessere  Präparate,  welche  namentlich  die  gröbere  Anord- 
nung der  Nerven  sehr  gut  darstellten,  lieferte  die  Behandlung  der 
frischen  Hautstückchen  mit  Palladiumchlorürlösung  während  2  bis 
4  Tagen.  Nach  Alkoholbehandluug  und  der  gewöhnlichen  Paraffin- 
einbettung  wurde  ganz  sichere  Schwärzung  der  Achsenzylinder  er- 
zielt ,  leider  waren  aber  gewisse  Forraveränderungen ,  namentlich  im 
Epithel  nicht  zu  umgehen,  und  die  Färbbarkeit  der  übrigen  Gewebs- 
elemente  zeigte  sich  stark  beeinträchtigt.  Ist  aber  erst  einmal  die 
Nervenverteilung  eruiert,  so  genügt  die  gewöhnliche  van  GiESONSche 
Hämatoxylin- Pikrinsäure- Fuchsin S- Färbung  oder  eine  der  üblichen 
Färbungen  der  elastischen  Fasern  vollständig,  um  die  Nerven  bis  in 
die  Nähe  des  Epithels  verfolgen  zu  können.  Gute  Übersichtsbilder 
über  die  ganze  Haarscheibe  und  vor  allem  die  Möglichkeit  des  Stu- 
diums der  feineren  Verhältnisse  sind  aber  ausschließlich  mit  Methylen- 
blaupräparaten (in  der  Modifikation  von  Dogiel  und  Bethe)  zu  er- 
zielen. E.  Schoebel  {Neapel). 

Ballowitz ,    E. ,     Die     Riechzellen     des     Flußneunauges 
[Petromyzon    fluviatilis]     (Arch.    f.    mikrosk.    Anat. 
Bd.  LXV,   1904,  p.   78—95  m.   1   Tfl.). 
Zur  Untersuchung    des   aus   dem  frisch  getötetem  Tiere  heraus- 
präparierten Geruchsorgans  und  seiner  Riechschleimhaut  kamen  haupt- 
sächlich drei  Verfahren  zur  Anwendung :    1)  Mazeration  und  Isolierung 
der  Epithelelemente ;  2)  Fixierung  durch  Sublimat,  Sublimat-Eisessig 
(5  Prozent  Eisessigzusatz  zu  konzentrierter  Sublimatlösung),  absoluter 
Alkohol  und  FLEMMiNosche  Flüssigkeit,  Einbettung  in  Paraffin,  Färbung 
der  Schnittserien    hauptsächlich    mit  Eisenhämatoxylin    nach    Heiden- 


I 


XXII,  1.  Referate.  161 

HAIN ;    3)    Imprägnation    mit    Silberchromat    nach    der    von    Ramön  y 
Cajal  modifizierten  Golgi  sehen  Methode. 

Die  wichtigsten  Resultate  wurden  durch  Mazeration  und  Isolie- 
rung erhalten.  In  den  Mazerationsflüssigkeiteu  dürfen  die  kleinen 
Stücke  nicht  zu  lange  liegen,  nach  einem  bis  2  Tagen  Mazerations- 
dauer erhält  man  gewöhnlich  die  besten  Präparate. 

E.  Schoebel  (Neajjel). 

Kamoil,  K. ,  Über  die  Geruchsknospen  (Arch.  f.  mikrosk. 
Anat.  Bd.  LXIV,  1904,  p.  653—664  m.  1  Tfl.). 
Die  Untersuchungen  wurden  an  der  Nasen-  und  Mundschleim- 
haut von  Esox  und  Trigla  angestellt.  Die  ausgeschnittenen  Schleim- 
hautstücke dieser  Fische  wurden  in  Zenker  scher,  Flemming  scher  und 
Hermann  scher  Flüssigkeit  oder  Kochsalz-Sublimatlösung  fixiert.  Subli- 
raathaltige  Flüssigkeiten  dürften  für  den  vorliegenden  Zweck  die 
geeignetsten  Fixierungsflüssigkeiten  sein.  Gefärbt  wurde  hauptsächlich 
mit  Eisenhämatoxylin.  Zum  Studium  des  Verhaltens  der  Nerven- 
fasern fand  die  Golgi  sehe  Methode,  sowie  die  vitale  Methylenblau- 
färbung Anwendung.  Zur  Isolierung  der  Elemente  der  Regio  olfac- 
toria  wurde  0"05prozentige  Chromsäurelösung  benutzt. 

E.  Schoebel  {Neapel). 

PÖtzsch,    0.,    Über    die    Entwicklung    von    Niere,    Peri- 
kard und  Herz  beiPlanorbis  corneus  (Zool.  Jahrb., 
Abt.    f.    Anat.    u.  Ontogen. ,  Bd.  XX,   1904,    p.  409—438 
m.   10  FJgg.  u.   3  Tfln.). 
Der  Laich  wird    im  allgemeinen  während    des  ganzen  Sommers 
reichlich  abgesetzt ,    und  zwar  an  untergetauchten  Pflanzenteilen  und 
welken    Blättern.      Durch    seine    flach    scheibenförmige    Gestalt    und 
rötliche  Farbe    ist    er    ohne    weiteres    von   demjenigen  von  Limnaeus 
zu  unterscheiden ,    der    sich   zumeist   an  der  Unterseite  der  auf  dem 
Wasser  schwimmenden  Blättern  findet    und    durch   eine    mehr  wurst- 
förmige  Gestalt  und   ein  vollständig  wasserhelles  Aussehen  charakte- 
risiert ist.     Vor  der  Fixierung,  die  Verf.  hauptsächlich  mit  Hermann- 
scher  oder  ZENKERScher  Flüssigkeit  vornahm,  wurde  immer  der  Kokon 
geöfl:net  und  das  anhaftende  Eiweiß  vom  Embryo  mittels  physiologischer 
Kochsalzlösung  abgespült.     Die  Orientierung  der  Objekte  beim  Mikro- 
tomieren  wurde  nach  der  von  Hoffmanx  in  dieser  Zeitschrift  Bd.  XV, 
p.  317,  beschriebenen  Nelkenöl-CoUodium-Methode  vorgenommen.    Als 
Orientierungsmarken  und  Anhaltspunkte  zur  Bestimmung  des  relativen 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  1.  11 


162  .  Referate.  XXII,  1, 

Alters  der  einzelnen  Embryonen  diente  einmal  die  mehr  oder  weniger 
tiefe  Einbuchtung  zwischen  Fuß  und  Eingeweidesack,  und  außerdem 
die  Ausbildung  der  Radulatasche ,  die  an  dem  aufgehellten  Objekt 
immer  sehr  gut  zu  erkennen  ist. 

Die  Färbung  der  Schnitte  geschah  fast  ausschließlich  nach  der 
Heidenhain  sehen  Eisenhämatoxylin-Methode.  Nur  für  die  ganz  jungen 
Stadien  ist  einfache  Färbung  in  DELAFiELoschem  Hämatoxylin  vor- 
zuziehen, weil  das  Eisenhämatoxylin  das  Dotter  vollständig  schwärzt, 
wodurch  die  Deutlichkeit  der  Bilder  stark  beeinträchtigt  wird.  Für 
Totalpräparate  erwies  sich  Alaunkarmin  mit  starker  Differenzierung 
in  Salzsäurealkohol  als  recht  günstig.  E.   Schoebel  {Neapel). 

Fleischer,  B.,  Beiträge  zur  Histologie  der  T  r  ä  n  e  n  d  r  ü  s  e  n 
und  zur  Lehre  von  den  S  e  k  r  e  t  g  r  a  n  u  1  a  (Anat.  Hefte, 
Heft  78  [Bd.  XXVI,  H.  1]  1904,  p.  103—166  m.  6  Tfln.). 
Es  wurde  die  Tränendrüse  des  erwachsenen  Rindes  und  des 
Kalbes  benutzt.  Gleich  nach  dem  Schlachten  wurde  der  knöcherne 
Orbitalrand  ringsum  losgeschlagen  von  dem  Inhalte  der  Orbita  und 
hierauf  die  Tränendrüse  von  hinten  herauspräpariert.  Dieselbe  liegt 
oben  außen  hinter  dem  Orbitalrande  und  ist  ein  länglich  ovales  Organ 
von  über  Walnußgröße,  ventralwärts  abgeplattet.  Kleine  Stückchen 
wurden  nach  möglichster  Entfernung  der  derben  umhüllenden  Fascien 
sofort  in  die  verschiedenen  Fixierungsflüssigkeiten  gebracht.  Fixie- 
rung: Konzentrierte  Sublimatlösung  in  0'6prozentiger  Kochsalzlösung, 
Alkohol  70  Prozent  (täglich  steigend) ,  Mischung  von  konzentrierter 
Sublimat-  und  2prozentiger  Osmiumsäurelösung,  0'5prozentige  Osmium- 
säurelösung, FLEMMiNGSche  Lösuug ,  konzentrierte  wässerige  Pikrin- 
säurelösung ,  Trichloressigsäure  lOprozentige  Lösung  (die  Präparate 
dürfen  nicht  in  Wasser  ausgewaschen  werden,  da  sonst  Quellung  ein- 
tritt; die  t'bertragung  geschieht  direkt  in  96prozentigen  oder  abso- 
luten Alkohol).  Nach  24-  bis  48  stündigem  Aufenthalte  in  diesen 
Lösungen  wurden  die  Präparate  in  steigendem  Alkohol  langsam  ent- 
wässert (außer  den  Präparaten  aus  Trichloressigsäure).  Einbettung 
in  Paraffin  nach  der  Schwefelkohlenstoftmethode  von  M.  Heidenhain 
(absoluter  Alkohol  und  Schwefelkohlenstoff  zu  gleichen  Teilen,  Schwefel- 
kohlenstoff 1  und  2,  konzentrierte  Lösung  von  45grädigem  Paraffin 
und  Schwefelkohlenstoff  bei  etwa  20  *^,  konzentrierte  Lösung  von  55grä- 
digem  Paraffin  bei  etwa  40'^,  Paraffin  1  und  2),  Die  3  bis  h  fi  dicken 
Schnitte  wurden  mit  Wasser  auf  dem  Objektträger  fixiert.  Die  Subli- 
matfixierung   eignete    sich    gut    zur  Darstellung  der  Sekretkapillaren 


XXII,  1.  Referate.  163 

und  der  Zentralkörper-,  auch  die Trichloressigsäure  war  hierfür  brauch- 
bar. Die  Alkoholfixierung  führte  starke  Veränderungen  des  Zellproto- 
plasmas herbei,  es  wurden  deshalb  nur  im  Stück  mit  Chromhäma- 
toxylin  nach  R.  Heidenhain  gefärbte  Präparate  zu  bestimmten  Zwecken 
benutzt.  Die  in  Flejiming  scher  Lösung  fixierten  Stücke  ließen  sich 
mit  den  angewandten  Farbstoffen  sehr  schlecht  färben ,  so  daß  sie 
nicht  benutzt  wurden.  Die  in  Osmium  fixierten  Präparate  wurden 
in  beschränktem  Maße,  besonders  zur  Darstellung  der  Sekretgranula 
benutzt.  Eine  besonders  gute  Erhaltung  dieser  Granula  zeigte  sich 
bei  der  Pikrinsäurefixierung  der  Kalbsdrüse.  Auch  die  frische 
Drüse  wurde  untersucht,  indem  mit  dem  Rasiermesser  möglichst  dünne 
Schnitte  abgetragen  und  unter  dem  Deckglase,  eventuell  nach  leichtem 
Zerzupfen,  mit  oder  ohne  Zusatz  von  0*7prozentiger  Kochsalzlösung 
mit  Ölimmersion  untersucht  wurden.  Verf.  hat  auch  die  frische  Drüse 
maceriert  (nach  Peiser):  Einlegen  von  kleinen  Stückchen  für  12  bis 
24  Stunden  in  konzentrierte  Salzsäure,  dann  auswaschen  und  untersuchen 
in  Wasser  mit  oder  ohne  Deckglas :  Die  einzelnen  Tubuli  beziehungs- 
weise die  Gruppen  derselben  werden  isoliert  und  es  läßt  sich  ihre 
Form  durch  Hin-  und  Herneigen  des  Objektträgers  (ohne  Deckglas) 
von  verschiedenen  Seiten  beobachten.  Die  menschliche  Tränendrüse 
wurde  ebenso  wie  die  tierische  behandelt,  unmittelbar  nach  der  Hin- 
richtung in  die  Fixierungsflüssigkeit  gebracht  etc.  Färbung:  Zur 
Darstellung  der  Sekretkapillaren  und  Zentralkörper  wurde  die  Eisen- 
hämatoxylinraethode  von  M.  Heidenhain  verwendet.  Zum  Auffinden 
der  Zentralkörper  bewährte  sich  eine  Nachfärbung  mit  Kongokorinth 
(konzentrierte  alkoholische  Lösung):  leichte  Rotfärbung  des  Protoplas- 
mas und  deutlicheres  Hervortreten  der  um  die  Zentralkörper  herum 
befindlichen  hellen  Zone.  Ferner  wurde  zum  Studium  der  allgemeinen 
histologischen  Verhältnisse ,  insbesondere  des  ausführenden  Systems 
eine  Nachfärbung  der  mit  Hämatoxylin  (Delafield)  gefärbten  Schnitte 
mit  Benzopurpurin  6  B  angewandt  (M.  Heidenhain)  :  .Färbung  mit  kon- 
zentrierter alkoholischer  Lösung,  nachdem  der  Schnitt  durch  kurzes 
Verweilen  in  leicht  alkalischem  Alkohol  alkalisch  gemacht  und  dann 
sorgfältig  wieder  ausgewaschen  war;  Auswaschen  des  überflüssigen 
Farbstott'es  in  Alkohol.  Zur  Darstellung  der  Sekretgranula  hat  Verf. 
außer  der  Eisenhämatoxylinfärbung  eine  kombinierte  Anilinfärbung 
benutzt  (beschrieben  von  Heidenhain  in  dieser  Zeitschrift  Bd.  XX, 
1903,  p.  179),  nachdem  Versuche  mit  Safranin,  Lichtgrün,  Lichtgrün- 
Safranin,  Methylenblau,  Thiazinrot  keine  befriedigenden  Resultate  er- 
geben hatten,  nämlich  eine  Kombination  von  Brillantschwarz,  Toluidin- 

11* 


164  Referate.  XXII,  1. 

blau  und  Safraniu:  Die  Schnitte  kamen  in  eine  einprozeutige  wässe- 
rige Lösung  von  Brillantscliwarz  3B  für  wenige  Minuten  (Schnitte 
bläulich  schwarz) ,  dann  für  wenige  Minuten  in  eine  gleich  starke 
Lösung  von  Toluidinblau  (Schnitte  stark  dunkelblau),  dann  Differen- 
zierung in  einer  0"5prozentigen  alkoholischen  Safraninlösung  (nicht 
zuviel!),  endlich  Entfernung  des  überschüssigen  Safranins  mit  Alkohol. 
Diese  Färbung  wurde  besonders  angewandt  bei  Präparaten  nach  Fixie- 
rung in  Sublimat,  Trichloressigsäure  und  Pikrinsäure.  Zur  Darstel- 
lung der  Membrana  propria  der  Tubuli  wurde  nach  Vorfärbung  mit 
Carmalaun  eine  einprozeutige  wässerige  Lösung  von  Blauschwarz  B 
benutzt,  wodurch  dieselbe  als  scharfe  blaue  Linie  hervortritt.  — 
Zu  besonderen  Zwecken  wurde  auch  die  Submaxillaris  und  Parotis 
des  Rindes,  sowie  diese  und  die  Tränendrüse  des  Kaninchens  unter- 
sucht. Sckiefferdecker  (Bonn). 

Porcile,    Y.,     Untersuchungen    über    die    Herkunft    der 
Plasmazellen    in    der    Leber    (Beitr.  z.  pathol.  Anat. 
u.  z.  allgem.  Pathol.  Bd.  XXXVI,  1904,  H.  2,  p.  375—399 
m.   1  Tfl.). 
Verf.    hat  durch  Einspritzen  von  Terpentinöl  in  die  Kaninchen- 
leber Gewebsteile    zum  Absterben   gebracht  und  dann  den  Heilungs- 
prozeß genauer  untersucht,  Terpentinöl  wird  von  den  Tieren  besser 
vertragen  als  Karbol  und  bringt  eine  gleichmäßigere  Wirkung  hervor, 
als  organische   Extrakte  oder  Nukleoproteine.    Nach  der  Einspritzung 
wurde  das  Tier  noch  30  Stunden,  56  Stunden,  4  Tage,   7  Tage  und 
10  Tage  am  Leben  gelassen.     Fixiert  wurde  mit  Alkohol,  Sublimat, 
Zenker  scher  Flüssigkeit,  MüLLER-Formol,  seltener  mit  Flemming  scher 
Lösung.    Gefärbt  wurde  mit  Methylenblau  (gewöhnlichem  oder  poly- 
chromem nach  Unna)  ,   Methylgrünpyronin  nach  Pappenheim  ,    Häma- 
toxyhn-Eosin,   Safranin  und  der  Methode  von  van  Gieson.     Die  Fär- 
bung mit  Metylpyronin  lieferte  sehr  schöne,  charakteristische  Bilder. 

Schieferdecker  (Bonti). 

Tiberti ,  N.,    Über   die  Sekretionserscheinungen  in  den 
Nebennieren  der  Amphibien  (Beitr.  z.  pathol.  Anat. 
u.  z.  allgem.  Pathol.  Bd.  XXXVI,   1904,  H.  2,  p.  161—183 
m.   1   Tfl.). 
Verf.  hat  bei  den  vorliegenden  Untersuchungen  die  Absicht  ge- 
habt, vom  histologischen  Gesichtspunkte  aus  das  Verhalten  der  Neben- 
nieren   nach    der    Injektion    gewisser    Substanzen    zu    studieren,    von 


XXII,  1.  Referate.  165 

denen  einige  imstande  sind,  die  Sekretion  in  den  wahren  und  eigent- 
lichen Drüsenorganen  zu  befördern ,  andere  als  technische  Produkte 
des  Stoffwechsels  betrachtet  werden  müssen.  Unter  den  Substanzen 
der  ersten  Art  wählte  Verf.  das  Pilocarpin  und  das  Nikotin ,  von 
denen  der  zweiten  das  Xanthin ,  das  Leucin ,  das  Kreatin  und  die 
Taurocholsäure.  Die  Nebennieren  von  Kaninchen,  Meerschweinchen 
und  Hunden  erwiesen  sich  bald  als  ungünstig  für  diese  Untersuchung, 
Verf.  wählte  daher  die  Amphibien  (besonders  Bufo  vulgaris  und 
Rana  temporaria).  Die  Injektionen  wurden  stets  unt.er  die  Haut  des 
Abdomens  gemacht.  Gleich  nach  Tötung  des  Tieres  wurde  die  Bauch- 
höhle eröffnet,  die  Nieren  wurden  herausgenommen  und  die  Neben- 
nieren ausgeschnitten  5  an  letzteren  blieb  infolge  ihrer  innigen  Be- 
ziehung zu  den  Nieren  immer  ein  Stück  Nierenparenchym  hängen, 
wodurch  es  möglich  wurde,  vergleichsweise  zu  untersuchen,  wie  sich 
die  Granularsekretion  in  den  Nierenepithelien  und  in  den  Neben- 
nieren verhielt.  Die  Organstücke  wurden  fixiert  in  Flemming scher, 
Hermann  scher,  Zenker  scher  Flüssigkeit,  sowie  in  gesättigter  Sublimat- 
lösung. Gefärbt  wurde  vorzugsweise  mit  der  Methode  von  Galeotti 
in  folgender  Weise :  Fixierung  in  FLEMMiNGScher  oder  Hermann  scher 
Flüssigkeit.  Einschluß  in  Paraffin.  Färbung  der  sehr  feinen ,  am 
Deckglase  befestigten  Schnitte  unter  Erwärmung  mit  einer  gesättigten 
Fuchsinlösung  in  Anilinwasser.  Reichliches  Auswaschen  in  fließen- 
dem Wasser.  Die  Schnitte  kommen  in  eine  gesättigte  hydroalkoho- 
lische  Lösung  von  Pikrinsäure ,  wodurch  das  Cytoplasma  der  Zell- 
elemente entfärbt  wird.  Waschen  in  fließendem  Wasser.  Einige 
Minuten  lang  Färbung ,  ohne  zu  erwärmen ,  in  einer  0"5prozentigen 
alkoholischen  Lösung  von  Methylengrün.  Auswaschen  in  destilliertem 
Wasser.  Schnelles  Entwässern  durch  absoluten  Alkohol,  Xylol,  Bal- 
sam. Die  Körnchen  und  Kerne  färben  sich  rot ,  das  Cytoplasma 
grün.  Außerdem  wurden  auch  einfache  Färbungen  mit  Safrauin, 
Hämatoxylin,  Eosin  etc.  verwendet.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Tiberti ,  N.,   Mikroskopische  Untersuchungen   über   die 
Sekretion   des  Pankreas    bei  entmilzten  Tieren 
(Beitr.    z.    pathol.  Anat.   u.    z.  allgera.  Patliol.    Bd.  XXXVI, 
1904,  H.  2,  p.  184—191   m.    1   Tfl.). 
Die    Versuche    wurden    an    Hunden    ausgeführt.     Die    Operation 
wurde  sehr  gut  vertragen.     Die  Tiere  wurden  gewöhnlich  .S^/^  Stun- 
den nach  Nahrungsaufnahme  getötet,   da  dies  der  geeignete  Zeitpunkt 
war,  um  die  Alveolarzellen  im  Maximum  ihrer  sezernierenden  Tätig- 


166  Referate.  XXII,  1. 

keit  anzutreffen.  Wäre  die  Beobachtung  später  vorgenommen  worden, 
so  hätte  man  die  Zellen  arm  an  Körnchen  angetroffen,  da  letztere 
sieh  in  die  Ausscheidungswege  ergossen  haben  würden.  Nach  Tötung 
des  Tieres  wurden  kleine  Pankreasstücke  herausgenommen  und  in 
Flemming  scher,  Hermann  scher  Flüssigkeit,  sowie  in  gesättigter  Subli- 
matlösung fixiert.  Zur  Färbung  wurde  fast  ausschließlich  die  Methode 
von  Galeotti  benutzt  (siehe  das  vorstehende  Referat).  Das  Proto- 
plasma der  Zellen  färbt  sich  grün ,  die  Körnchen ,  der  Nucleus  und 
die  Nucleoli  färben  sich  rot.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Lams,    H.,     Contribution    ä    TEtude     de    la     Genese    du 

vitellus     dans    l'Ovule     des    Teleosteens     (Arch. 

d'auat.     microsc.     t.    VI,     1904,     fasc.    4,    pp.    633 — 652 

av.  2  plches.). 

Untersucht    wurden    die    Eier    des    Stints    (Osmerus    eperlanus). 

Verschiedene  Stücke  des  Ovariums  wurden  tixiert  in  Flemming  scher, 

Hermann  scher,  Bouin  scher  Flüssigkeit,  Sublimat-Essigsäure,  absolutem 

Alkohol.     Die  besten  Resultate    ergab  die  Flemming  sehe  Flüssigkeit, 

Einbettung  in  Paraffin.     Die  mit  dem  Minot sehen  Mikrotom  gemachten 

Schnitte    wurden     mit    Safranin    in    Verbindung     mit    Lichtgrün    und 

Geutiana  violett     gefärbt.       Sublimat- Essigsäure     mit     darauffolgender 

Färbung  durch  Eisenhämatoxylin  von  Heidenhain  ließ  die  Chromatin- 

teile  des  Kernes  und  des  Dotters  hervortreten. 

Schiefferdecker  {Botin). 


C.   Botanisches.  ^ 

Beck    Yon    Managetta,    0.,     Über    die    Verwendung    der 

Persio-Essigsäure     zu     mikroskopischen    Tink- 

tionen   (Sitzungsber.  d.  Deutseh.  naturwiss.-mediz.  Vereins 

f.   Böhmen  „Lotos"    1904,  No.   1). 

Als    neuen  empfehlenswerten,    vielseitig  verwendbaren  Farbstoff" 

nennt  Verf.  P  er  s  i  o. 

„Persio,    roter  Indigo   oder  Cudbear,    ist  ein  der  Orseille  nach 


1)  Referate    über    bakteriologische    und    raineralogische    Arbeiten    ira 
nächsten  Heft.  K. 


XXII,  1.  Referate.  167 

Herkunft  und  Zusammensetzung  ganz  ähnliches  Produkt  und  stellt 
ein  purpurrotes  bis  violettes  Pulver  mit  laugenhaftem  Geschmack 
und  etwas  urinösem  Gerüche  dar.  Es  entstammt  den  Orseille- 
Flechten  und  wird  in  mehreren  Farbenabstufungen  in  den  Handel 
gebracht.  Persio  ist  im  Wasser  sowie  in  Essigsäure  leicht  löslich, 
wenig  oder  gar  nicht  im  Alkohol." 

Besonders  empfehlenswert  ist  die  Anwendung  des  Farbstoffs  in 
Form  der  Persio-Essigsäure;  eine  konzentrierte  Lösung  färbt 
Schnell  und  kräftig  in  1  bis  2  Minuten.  Man  färbt  in  einem  Tropfen 
der  Farbstofflösung  auf  dem  Objektträger.  Bei  Anwendung  einer 
verdünnten  Lösung,  die  man  einige  Stunden  lang  einwirken  lassen 
muß,  fällt  die  Färbung  noch  schöner  aus.  —  Die  gefärbten  Schnitte 
können  in  Glyzerin,  gesättigte  Lösung  von  Kaliumazetat  und  vene- 
zianischen Terpentin  übertragen  werden ,  die  alle  die  ursprüngliche 
Färbung  verändern  —  aber  in  vorteilhaftem  Sinne.  „In  Glyzerin 
bleibt  die  braun-purpurfarbige  Tinktion  der  Chloro-  und  Leukoplasten 
erhalten.  Die  Zellkerne  speichern  gewissermaßen  den  Farbstoff  auf 
und  werden  dunkelpurpurn,  die  Chromatinsubstanz  derselben  erscheint 
sehr  deutlich :  hingegen  wird  die  Zellmembran  nur  schwach  gefärbt. 
—  In  venezianischem  Terpentin  werden  die  Zellwände  etwas 
rötlichviolett,  alle  plasmatischen  Teile  violett,  die  Kerne  noch  dunkler 
gefärbt.  —  In  Kaliazetat  wird  die  Farbe  der  Tinktion  in  ein  schönes 
Blauviolett  umgewandelt.  Überraschenderweise  erlangt  die  Färbung 
mit  der  Zeit  immer  tiefere  Töne :  die  Kerne  werden  fast  schwarz 
und  dadurch  ungemein  auffällig.  Aber  auch  das  lästige  Aufquellen 
der  Zellkerne,  welches  dieser  Einbettungsflüssigkeit  anhaftet  —  was 
z.  B.  die  so  schönen  Methylgrünessigsäure-Tinktionen  schädigt  —  wird 
vermieden.  Läßt  man  Persio-Essigsäure  kräftiger  resp.  länger  ein- 
wirken, so  erhält  man  schön  differenzierte  Färbungen  der  Gewebe. 
Bast-  und  Sklerenchymzellen  werden  prächtig  rotviolett  und  die  Kuti- 
kula  gelb.     Gewöhnliche  Zellulosemembranen  bleiben  hell."  — 

Persio-Essigsäure  läßt  sich  mit  anderen  Farbstoffen  kombinieren. 
Verf.   erprobte  folgende  Mischungen: 

Persio-Essigsäure- Kernschwarz  und  Persio-Essig- 
säure-Nigrosin:  Einbettung  in  Glyzerin ;  schwarzviolette,  dauer- 
hafte Färbung.     Zellwände,  auch  Collenchym  gefärbt. 

Persio  -  Essigsäure  -  Methylgrün  essigsaure:  warm 
rotbraune  Töne.  In  Glyzerin  starke  Färbung  der  Membranen, 
Sklerenchyra  und  Collenchym  fleischrot ;  ähnliche  Färbungen  bei  Ein- 
betten in  Terpentin. 


168  Keferate.  XXII,  1. 

Persio-Essigsäure-Gentianaviolett  (verdünnte  Lö- 
sung) :  Einbetten  in  Terpentin.  Zellwände  blauviolett,  Zellkerne  und 
plasmatische  Substanz  schön  rotbraun.   — 

Persio  -  Essigsäure  färbt  plasmatische  Substanz ,  auch  die  Chro- 
matophoren  rasch  und  dauerhaft;  besonders  wertvoll  macht  den  Farb- 
stoff die  Haltbarkeit  der  Färbungen  in  Glyzerin.  Auch  andere 
Organismen  —  Schizophyceae ,  Bacillariaceae ,  Conjugaten  etc.  — 
färben  sich  gut.  Verf.  macht  auf  die  gute  Färbung  der  Pyrenoide 
und  Chloroplasten  bei  Konjugaten  durch  Persio-Essigsäure  aufmerksam. 
Bei  Rot-  und  Braunalgen  färben  sich  Kern  und  Chromatophoren  gut, 
bei  Pilzen  nur  die  plasmatischen  Teile.  Die  Chloroplasten  der  Moose 
färben  sich  erst  bei  längererer  Einwirkungsdauer. 

Küster  {Halle  a.  S.). 

Phillips,   D.  P.  A.,  Comparative   Study  of  the  Cytology 
and    Movements    of   the    Cyanophyceae    (Transact. 
a.  Proceed.  Botan.  Soc.   Pennsylvania  vol.  I,    1904,    no.   3, 
p.   237—335). 
Die  zu  studierenden  Algen  waren  sowohl  unter  günstigen  natür- 
lichen Bedingungen  als  in  Nährlösungen  mit  Zusatz  oder  Weglassung  ver- 
schiedener Stoffe  kultiviert.    Gefärbt  wurde  in  vivo  durch  Methylenblau 
oder  nach  Fixierung.     Zum  Fixieren  wurden  folgende  Lösungen  ver- 
wandt :  Chromsäure  von  verschiedenen  Konzentrationen ,  Chromessig- 
säure, Sublimat  (heiße  wie  kalte  Lösung),  alkoholische  und  wässerige 
Lösungen  von  Pikrinsäure,  Pikrinschwefelsäure,  Osmiumsäure,  Flemming- 
sches    Gemisch    (konzentriert  und    verdünnt),    Hermann  sehe    Lösung, 
Essigsäure    von    verschiedenen    Konzentrationen,    Formalin,   Alkohol, 
Formalin    und    Alkohol ,    und    kochende  Wasser.     Bei   Prüfung    aller 
einzelnen  Fragen    benutzte  Verf.  Material ,    das   mit    allen  genannten 
Mitteln    fixiert    worden    war,    sowie    lebendiges    Material.      Entweder 
sogleich  nach  dem  Fixieren  und  Auswaschen  oder  erst  nach  allmäh- 
lichem Entwässern  wurde  gefärbt. 

Am  besten  geeignet  zeigten  sich  folgende  Färbemittel :  Heiden- 
hain sches  Eisenalaun-  und  Delafield sches  Hämatoxylin.  Benutzt 
wurden  ferner  saures  Hämatoxylin,  Safranin,  Eosin,  Erythrosin,  Methyl- 
grün, Methylenblau  (intra  vitam),  Methylviolett,  Gentianaviolett,  Pikro- 
karmin,  Borkarmin  und  Karbolfuchsin.  Gebeizt  wurde  nach  bakterio- 
logischen Methoden.  Die  gefärbten  Fäden  wurden  in  lOprozentiges 
Glyzerin  eingelegt  und  dem  Verdunsten  ausgesetzt.  Nach  Eindicken 
des  Glyzerins  wurde  Glyzeringelatine  zugesetzt. 


XXII,  1.  Referate.  169 

Die  gallertigen  äußeren  Schichten  der  Zellwände  von  Nostoc, 
Oscillaria  etc.  wurden  nach  vorherigem  Beizen  durch  Eisessig,  Karbol- 
fuchsin, Methylenblau  oder  saures  Hämatoxylin  gefärbt. 

Im  Kern  (Zentralkörper)  finden  sich  Körner,  die  Kernfärbe- 
raitteln  gegenüber  wie  Chromatinbläschen  reagieren.  Nach  Ver- 
dauung der  Zelle  in  künstlichem  Magensaft  bleibt  Kern  samt  Chro- 
matinbläschen unzerstört. 

Die  im  Cytoplasma  liegenden  Cyanophycinkörner  werden 
durch  DELAFiELDSches  Hämatoxylin  schwach  gefärbt,  durch  4prozentige 
Salzsäure  oder  einprozentige  Schwefelsäure  oder  Chloralhydrat  gelöst. 
Die  „Schleimkugeln"  stellen  Kohlehydrate  dar,  die  6prozentiger 
Kalilauge  gegenüber  wie  Paramylum  reagieren.  —  Das  Vorhanden- 
sein von  Glykogen  läßt  sich  mikrochemisch  nachweisen.  —  Bei  Ver- 
wendung der  oben  erwähnten  Farbstoffe  war  eine  Art  Kernteilung, 
die  sich  mit  Karyokinese  vergleichen  ließ,  zu  beobachten. 

Durch  Plasmolyse  nach  der  GARDiNERSchen  Methode  mit  Jod 
imd  Schwefelsäure  bewies  Verf.,  daß  die  cilienähnlichen  Körper, 
die  man  für  anhängende  Bakterien  gehalten  hat,  wirklich  Cilien 
sind.  An  den  Endzellen  der  Fäden  sind  sie  lang,  an  den  anderen 
Zellen  kurz.  Die  letzteren  lassen  sich  nicht  gleich  durch  Färben 
nachweisen ,  da  der  Zusatz  von  Beizen  oder  auch  von  Wasser  die 
Cilien  gegen  die  Wand  drückt.  Wenn  man  aber  mit  Protoplasma- 
färbemitteln ohne  nachheriges  Waschen  färbt,  so  sind  die  0*5  ,a 
langen  Cilien  gut  zu  sehen.  Ernst  A.  Bessey  {Washington). 


170  Neue  Literatur.  XXII,  1. 


Neue  Literatur 


1.  Lehr-  und  Handbücher. 


Clausen,  Grundriß  der  Trichinenschau.  Leitfaden  für  den  Unterricht  in 
der  Ausbildung  der  Trichinenschauer  nebst  den  preußischen  gesetz- 
lichen Bestimmungen.     Berlin  (R.  Schoetz)  1905.     55  pp.  1- —  M. 

Heine,  P.,  Hilfsbuch  für  Fleischbeschauer.  Hannover  (M.  u.  H.  Schaper) 
1905.     108  pp.  geb.  2-75  M. 

Heine,  P. ,  Leitfaden  der  Trichinenschau.  Hannover  (M.  u.  H.  Schaper) 
1905.     47  pp.  geb.  1-50  M. 

Joseph,  M.,  Dermato-histologische  Technik,  3.  Aufl.  Berlin  (Louis  Markus- 
sche  Verlagsbuchhandlung)  1905. 

Liuduer,  P. ,  Mikroskopische  Betriebskontrolle  in  den  Gärungsgewerben 
mit  einer  Einführung  in  die  technische  Biologie,  Hefenreinkultur  und 
Infektionslehre.  4.,  neu  bearb.  Aufl.,  237  Abb.,  4  Tfln.,  521  pp.  Berlin 
(Paul  Parey)  1905.  (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  135.)     19  M. 

Lynch,  R.,  Mikroskopische  Untersuchung  der  Fäces.  Ihre  Bedeutung  und 
ihre   Anwendung   in   der   ärztlichen  Praxis.     8'-.     Leipzig  (G.  Thieme) 

1904.  35  pp.  1-20  M. 
Schmorl,  G.,  Die  pathologisch-histologischen  Untersuchungsmethoden.     3., 

neu  bearbeit.  Aufl.    Leipzig  (F.  C.  W.  Vogel)  1905.    (Vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  134.)  8-75  M. 

Winslow,  Ch.-E.  A.,    Elements   of  applied  Microscopy.     A  text-book  for 

beginners.    First  edit.    New  York  (John  Wiley  &  Sons)  1905.    183  pp. 

(Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXH,  1905,  p.  135.)' 
Anleitung,  kurze,  zur  Herstellung  mikroskopischer  Präparate  (Fixier ungs-, 

Härtungs-,  Einbettungs-  und  Färbungsmethoden).    Würzburg  (Mönnich) 

1905.  8'\  ^  —-80  M. 


XXU,  1.  Neue  Literatur.  171 


2.   Mikroskop  und  mikroskopische  Apparate. 


a.   Nene  Mikroskope. 

(^Chabrie,   M.    C. ,)    Construction-principle    of    an    optical    apparatus    for 

obtaining   very  lars^e  magnifications  [The  Diastoloscope]    (C.  K.  Acad. 

Sc.   Paris   t.  CXXXVIII ,    1904,   p.  ^Oö;   vgl.   Journ.  R.   Microsc.   Soc. 

1905,  pt.  1,  p.  108). 
Koristka's   large   Model   microscope    (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1, 

p.  101:  vgl.  F.  Koristka's  special  Catalogue;  Milan  Nov.  1904). 


b.   Objective. 


Chalmers,  S.  D.,  The  theory   of  symmetrical  optical  objectives.    Part  11 

(Roy.  Soc.  London,  Jan.  26.,  1905). 
H.,    Construction    of   aplanatic    combinations    of  lenses    with    or   without 

achromatism  (English  Mechanic  vol.  LXXX,  1904,  p.  252). 
(Keeley,  F.  J.,)  Spencer   Objective   (Journ.   R.   Microsc    Soc.  1905,  pt.  1, 

p.  103 ;  vgl.  Proc.  Acad.  Nat.  Sei.,  Philadelphia  vol.  LVI,  1904,  p.  475). 


c.  Okular. 

Merlin,  A.  A.  C,  Microscopical  high  powers  and  deep  eye-pieces  (English 
Mechanic  vol.  LXXX,  1904,  p.  455;  vgl.  Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 
pt.  1,  p.  103). 


d.    Lupen. 

Das   Mikrophotoskop   [Generalstabskartenlupe]    (Kriegstechnisclie  Zeitschr. 
1905,  H.  1). 


172  Neue  Literatur.  XXII,  1. 


e.   ültramikroskop. 

(Biltz,  W.,)  Ultramicroscopic  observations  on  the  decomposition  of  Sulphur 

from   Thiosulphuric   acid   and   of  Selenium   from   Selenic  acid   (Nachr. 

d.   kgl.  Ges.  d.  Wiss.  Göttingen  1904,  p.  300;  vgl.  Journ.  R.  Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  1,  p.  107). 
(Maxwell,  J.  C.,)  Colours   in   inetal   glasses  and   in  metallic  films   (Proc. 

Roy.   Soc.   vol.  LXXIII,   1904,  p.  443;   vgl.   Journ.    R.   Microsc.   Soc. 

1905,  pt.  1,  p.  107). 
Michaelis,  L. ,    Ultramikroskopische  Untersuchungen   (Virchows  Arch.  f. 

pathol.  Anat.  Bd.  CLXXIX  [Folge  17,  Bd.  IX],  1905,  H.  2,  p.  195—200). 


3.  Mikrophotographie  und  Projektion. 

(Chapman  Jones,)  Three-colour  photography  (Knowlßdge  vol.  I,  1904, 
p.  285;  vgl.  Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1,  p.  104). 

Edelmann,  M. ,  Universal-Vorlesungs- Projektionslampe  (Phys.  Zeitschr. 
Bd.  VI,  1905,  p.  78). 

(Köhler,  A.,)  Photomicrography  with  the  aid  of  iiltra-violet  light  (Enginee- 
ring vol.  LXXVIII,  1904,  p.  760;  vgl.  Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 
pt.  1,  p.  103). 

Simon  et  Spillmann,  L.,  Application  de  la  Photographie  ä  la  numeration 
des  elements  figures  du  sang  (Compt.  Rend.  Soc,  Biol.  t.  LVII,  1904, 
no.  37,  p.  659—6(30). 

(Thompson,  J. ,)  Photomicrography  and  Photomicrometry  (Proc.  Scot. 
Micr.  Soc.  vol.  IV,  1903,  p.  44;  vgl.  Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1, 
p.  106). 


4.  Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

(Collins,  J.  R.,)  Hanging-drop  preparations  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 
pt.  1,  p.  117;  vgl.  Brit.  Med.  Journ.  vol.  II,  1904,  p.  1635). 

Darvk^in,  H.,  Electric  thermostat  (Phil.  Mag.  vol.  VII,  1904,  p.  408). 

Dreuw ,  Exstirpations-  und  Operationsfeder  (Monatsh.  f.  prakt.  Dermatol. 
Bd.  XXXIX,  1904,  p.  208—210  m.  1  Fig. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  137). 


XXII,  1.  Neue  Literatur.  173 

Goppelsroeder,  Fr.,  Studien  über  die  Anwendung  der  Kapillaranalyse  bei 
vitalen  Tinktionsversuchen  (Verh.  d.  Naturf.  Gesellsch.  Basel  Bd.  XVII, 
1904,  p.  157—198  m.  23  Tfln.). 

Groot,  J.  G.  de,  Ein  neuer  Kitt  zum  Schließen  von  Gefäßen  mit  Alkohol- 
präparaten, auch  für  den  Versand  (Zool.  Anz.  Bd.  XXVIII,  1904, 
p.  406—407;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  ISC). 

Hesketh  Walker,  Notes  on  Marine  alpharia  (English  Mechanic  vol.  LXXX, 
1904,  p.  324). 

(Horder,  E. ,)  AU-metal  cover-glass  holder  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 
pt.  1,  p.  117;  vgl.  Brit.  Med.  Journ.  vol.  II,  1904,  p.  759). 

Lugaro,  E.,  Sulla  tecnica  del  metodo  di  Nissl  (Monit.  Zool.  Ital.,  Anno  IG, 
no.  1,  p.  11 — 16). 

3Iarrassini,  A. ,  Nota  di  tecnica  microscopica  (Rendic.  Accad.  med.  Pisa, 
24  febbr.  1904;  Giorn.  Ital.  Sc.  med.,  Anno  2,  1904,  no.  5,  p.  66). 

Mulon,  P.,  Action  de  l'acide  osmique  sur  les  graisses  (Bibliogr.  anat. 
t.  XIII,  1904,  fasc.  4,  p.  208—213 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  138). 

Nabias,  B.  de,  Nouvelle  methode  de  coloration  rapide  du  Systeme  nerveux 
au  chlorure  d'or  (Bibliogr.  anat.  t.  XIII,  1904,  fasc.  4,  p.  221—222; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  139). 

Prytz ,  K. ,  Optisk  kontakt  mellem  et  mikroskop  og  en  spejlende  flade. 
I.  Tilvejebringelse  af  kontakten  (Overs.  Vidensk.  Selsk.  Forh.  Kopen- 
hagen 1905,  p.  17). 

Skrobansky,  Eine  Methode  der  nachträglichen  Färbung  mit  Bleu  de  Lyon 
und  Pikrinsäure  (Intern.  Monatsschr.  f.  Anat.  u.  Physiol.  Bd.  XXI, 
1904,  H.  1—3,  p.  21—22;   vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1905,  p.  138). 

New  imbedding  bath  (Cambridge  Scientific  Instrument  Company,  Special 
Catalogue  1904;  vgl.  Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1904,  pt.  1,  p.  114). 


5.  Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


a.   Niedere  Tiere. 

Fernandez,  M.,  Zur  mikroskopischen  Anatomie  des  Blutgefäßsystems  der 
Tunikaten.  Nebst  Bemerkungen  zur  Phylogenese  des  Blutgefäßsystems 
im  allgemeinen  (Jenaische  Zeitschr.  f.  Naturwiss.  Bd.  XXXIX,  1904, 
p.  323—422  m.  12  Figg.  u.  4  Tfln. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  142). 

Floyd,  R. ,  A  contribution  to  the  nervous  cj-tologj'  of  Periplaneta  orien- 
talis ,  the  common  cockroach  (Mark  Anniversary  Volume  New  York 
1903,  Art.  XVII,  p.  341—357  w.  3  pl.,  Ref.  n.  Ref.  in  Journ.  Compar. 


174  Neue  Literatur.  XXII,  1. 

Neurol.   and  Psycho!,   vol.  XIV,  1904,  no.  3,  p.  287—288;  vgl.  diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  143). 
Gadzikiewicz,  W,,  Über  den  feineren  Bau  des  Herzens  bei  Malakostraken 

(Jenaische  Zeitschr.   f.   Naturwiss.   Bd.  XXXIX,  1904,  p.  203—234  m. 

(j  Figg.  u.  4  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitsclir.  Bd.  XXII,  1905,  p.  141). 
Heath,  H.,  The  Nervous  System  and  Subradular  Organ  in  two  Genera  of 

Solenogastres  (Zool.  Jahrb.,  Abt.  f.  Anat.  u.  Ontogen.,  Bd.  XX,  1904, 

p.  399—408  w.  1  plt. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  144). 
Hoffendahl ,  K. ,  Beitrag   zur   Entwicklungsgeschichte  und  Anatomie  von 

Poecilasma  aurantium  Darwin  (Zool.  Jahrb.,  Abt.  f.  Anat.  u.  Ontogen. 

Bd.  XX,  1904,  p.  363—398  m.  4  Tfln.;   vgl.  diese   Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  144). 
Lesage,  Culture   de  l'amibe  de  la  dysenterie  des  pays  chauds  (C.  R.  Ac. 

Sc.    t.   CXXXIX,    p.   1237—1239;    Ann.    de    l'Inst.   Pasteur    t.   XIX, 

1905,   no.  1,   p.  9—16  av.  1  pl. ;   vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 

p.  140). 
Sala,  Luigi,  Intorno  ad  una  particolaritä  di  struttura  delle  cellule  epiteliali 

che  tappezzano  il  tubo  ovarico  e  spermatico  degli  Ascaridi   (Arch.  Sc. 

med.  vol.  XXVIII,  1904,  fasc.  3,  p.  301-317  c.  1  Tfl.). 
Thiroux,  Recherches  morphologiques  et  e.xperiraentales  sur  Trypanosoma 

paddae  (Ann.  de  ITnst.  Pasteur  t.  XIX,  1905,  no.  2,  p.  65 — 83  av.  1  pl. ; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  140). 


b.  Wirbeltiere. 

Ballowitz,  E.,  Die  Riechzellen  des  Flußneunauges  [Petromyzon  fluviatihs] 

(Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXV,  1904,  p.  78—95  m.  1  Tfl. ;  vgl.  diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  160). 
Borchert,  M.,  Über  Markscheidenfärbung  bei  niederen  Wirbeltieren  (Verh. 

d.  Berliner  Physiol.  Ges.  Sitz.  6.  Mai  1904 ;  vgl.  Arch.  f.  Anat.  u.  Physiol. 

Physiol.  Abt.,   1904,   H.  5,  6,  p.  572—575;  diese  Zeitschr.   Bd.  XXII, 

1905,  p.  153). 
Bosellini,  B.  L.,  Plasma  cellule  ed  apparato  linfoemopojetico  (Giorn.  Ital. 

Malattie  veneree  e  pelle  vol.  XLV,  1904,  Anno  39,  fasc.  5,  p.  521—565 

c.  1  tav.). 
Cajal,  S.  R.,  Das  Neurofibrillennetz  der  Retina  (Intern.  Monatsschr.  f.  Anat. 

u.  Physiol.  Bd.  XXI,  1904,  H.  4-8,  p.  369—396  m.  1  Tfl.;   vgl.   diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  155). 
Ferra! ,  Carlo,    Sulla  diagnosi   specifica   del   sangue  col  metodo  biologico 

in  medicina  legale.     3.  Nota:  Azione   della  putrefazione  sulla  reazione 

col  metodo  biologico  (Bull.  Accad.  med.  Genova,  Anno  19,  1904,  no.  3, 

p.  191—204). 


XXII,  1.  Neue  Literatur.  175 

Fleischer,  B.,  Beiträge  zur  Histologie  der  Tränendrüsen  und  zur  Lehre 
von  den  Sekretgranula  (Anat.  Hefte,  H.  78  [Bd.  XXVI,  H.  1],  1904, 
p.  103— 1G6  m.  GTfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1904,  p.  162). 

Galli ,  G. ,  Ein  verbesserter  Mischer  zur  Zählung  der  Blutkörperchen 
(Münch.  med.  Wochenschr.  Jahrg.  LI,  1904,  No.  13,  p.  561  m.  1  Fig.; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  148). 

Hardesty,  I.,  On  the  Development  and  Nature  of  the  Neuroglia  (Amer. 
Journ.  Anat.  vol.  III,  1904 ,  no.  3,  p.  229 — 268  w,  5  pltes. ;  vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  157). 

Helber,  E.,  Über  die  Zählung  der  Blutplättchen  im  Blute  des  Menschen 
und  ihr  Verhalten  bei  pathologischen  Zuständen  (Deutsches  Arch.  f. 
Idin.  Med.  Bd.  LXXXI,  1904,  H.  3,  4,  p.  316—327 ;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  150). 

Jelly,  J.,  Recherches  experimentales  sur  la  Division  indirecte  des  Globules 
rouges  (Arch.  d'anat.  Microsc.  t.  VI,  1904,  fasc.  4,  p.  455 — 632  av. 
4  plches.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  148). 

Kamou,  K.,  Über  die  Geruchsknospen  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXIV, 
1904,  p.  653—664  m.  1  Tti.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  161). 

Keinath,  K.  Th.,  Über  den  mikroskopischen  Nachweis  von  Fett  in  nor- 
malen Muskeln  (Inaug.  Dissertation  Tübingen  1904,  32  pp. ;  vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  145). 

Lams ,  H. ,  Contribution  h  l'Etude  de  la  Genese  du  vitellus  dans  TOvule 
des  Teleosteens  (Arch.  d'anat.  microsc.  t.  VI,  1904,  fasc.  4,  p.  633 — 652 
av.  2  plches.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  166). 

Meves,  Fr.,  Über  die  Wirkung  gefärbter  Jodsäure  auf  die  roten  Blut- 
körperchen der  Amphibien  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905,  No.  4,  5, 
p.  97—103  m.  4  Figg.). 

Meyburg,  H. ,  Beitrag  zur  Kenntnis  des  Stadiums  der  „primären  in  toto 
konzentrischen"  Knochenbildung  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXIV, 
1904,  p.  627—652  m.  8  Figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  153). 

Modica,  Orazio,  Nuovo  metodo  di  fissazione  del  sangue  (Arch.  Farmacol. 
sperim.  e  Sc.  aftini.  Anno  3,  vol.  III,  1904,  fasc.  11,  5  pp.). 

Moll ,  Alfr. ,  Zur  Darstellung  der  Neuroglia  und  der  Achsenzylinder  im 
Sehnerven  (Beitr.  z.  Augenheilk. ,  Festschr.  Jul.  Hirschberg  überr., 
Leipzig  1905,  p.  195—198  m.  1  Tfl.). 

Pardl,  F.,  Eritrociti  nucleati  (eritroblasti)  ed  anucleati,  leucoblasti  e  cellule 
giganti  (megacariociti)  nel  grande  epiploon  del  coniglio  (Rendic.  Accad, 
med.  Pisa,  5  febbr.  1904:  Giorn.  Ital.  Sc.  med..  Anno  2,  1904,  no.  4, 
p.  56 — 57). 

Pensa,  Antonio,  Delhi  esistenza  di  fibre  nervöse  aventi  speciali  rapporti 
collependima  (Boll.  Soc.  med.-chir.  Pavia,  1904,  no.  3,  p.  156—160 
c.  1  tav.). 

Pinkus,  F.,  Über  Hautsinnesorgane  neben  dem  menscMichen  Haar  (Haar- 
scheiben) und  ihre  vergleichend -anatomische  Bedeutung  (Arch.  f. 
mikrosk.  Anat.  Bd.  LXV^,  1904,  p.  78—95  m.  2  Tlin. ;  vgl.  diese  Zeit- 
schr. Bd.  XXH,  1905,  p.  160). 


176  Neue  Literatur.  XXll,  1. 

Pötzsch,  O. ,  Über  die  Entwicklung  von  Niere,  Perikard  und  Herz  bei 
Planorbis   corneus   (Zool.   Jahrb. ,   Abt.   f.  Anat.  u.  Ontogen.   Bd.  XX, 

1904,  p.  409—438  m.  10  Figg.  u.  3  Tfln. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  161). 

Forelle,  V.,  Untersuchungen  über  die  Herkunft  der  Plasmazellen  in  der 
Leber  (Beitr.  z.  pathol.  Anat.  u.  z.  allgem.  Pathol.  Bd.  XXXVI,  1904, 
H.  2,  p.  375—399  m.  1  TH. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXH,  1905,  p.  164). 

Raehlmauu,  E.,  Ultraiuikroskopische  Untersuchungen  von  Blut-  und  Sekret- 
bestandteilen (Wiener  med.  Wochenschr. ,  Jahrg.  LV,  1905,  No.  1, 
p.  30—37  m.  7  Figg.). 

Rubaschkiu,  W.,  Studien  über  Neuroglia  (Arch.  f.  mikrosk.  Ant.  Bd.  LXIV, 
1904,  p.  575—626  m.  4  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  158). 

Tarugi ,  N. ,  Di  alcune  incertezze  suU'esame  di  macchie  sanguigne  e  suUa 
probabile  costituzione  chimica  del  sangue  (Giorn.  Ital.  Sc.  med..  Anno  2, 
1904,  No.  12,  p.  183—185). 

Tiberti,  N.,  Mikroskopische  Untersuchungen  über  die  Sekretion  des  Pan- 
kreas bei  entmilzten  Tieren  (Beitr.  z.  pathol.  Anat.  u.  z.  allgem.  Pathol. 
Bd.  XXXVI,  1904,  H.  2,  p.  184—191  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXn,  1905,  p.  165). 

Tiberti,  N. ,  Über  die  Sekretionserscheinungen  in  den  Nebennieren  der 
Amphibien  (Beitr.  z.  pathol.  Anat.  u.  z.  allgem.  Pathol.  Bd.  XXXVI, 
1904,  H.  2,  p.  161—183  m.  1  Tfl. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  164). 

Torday,  Ariiäd  v.,  Die  basophilen  Körnchen  der  roten  Blutkörperchen 
(Pester  med.-chir.  Presse,  Jahrg.  XLI,  No.  8,  p.  173 — 176). 

Weidenreich ,  F. ,  Studien  über  das  Blut  und  die  blutbildenden  und 
-zerstörenden  Organe.  2.  Bau  und  morphologische  Stellung  der  Blut- 
lymphdrüsen (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXV,  1904,  p,  1 — 77  m. 
6  Figg.  u.  5  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  146). 

Weidenreich ,  F. ,  Über  die  Form  der  Säugererythrocyten  und  die  form- 
bestimmenden Ursachen  (Folia  haematol.,  Jahrg.  II,  No.  2,  p.  95 — 104). 

Ziegler,  K.,  Histologische  Untersuchungen  über  das  Ödem  der  Haut  und 
des  Unterhautzellgewebes  (Beitr.  z.  pathol.  Anat.  u.  z.  allgem.  Pathol. 
Bd.  XXXVI,  1904,  H.  3,  p.  435—505  m.  8  Figg.-,  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  14.5). 


Band  XXII.    Heft  2. 


Ein  Beitrag  zur  Paraffinschneidetechnik. 

Von 
Dr.  Anton  Siding, 

Stadt.  Arzt  im  Versorgungsheim  der  Stadt  Wien,  gewes.  Assistent  am  I.  anat.  Institut 

in  Wien. 

Ein  gewiß  oft  empfimtlener  Übelstand  bei  dei*  Herstellung-  von 
Paraffinschnitten  ist  der ,  daß  infolge  des  Wechsels  der  äußeren 
Temperatur  auch  die  Konsistenz  und  infolgedessen  die  Schnittfähig- 
keit des  Paraffinblockes  sich  ändert.  Dieselbe  Paraffinmischung,  die 
z.  B.  morgens  gute  und  glatte  Schnitte  liefert ,  erweist  sich  mittags 
als  zu  weich ;  die  Schnitte  falten  sich ,  kleben  am  Messer  oder  es 
ist  das  Umgekehrte  der  Fall,  die  Schnitte  rollen  sich  oder  bröckeln 
gar.  Wenn  man ,  wie  es  Rawitz  ^  mit  Recht  empfiehlt ,  nur  hartes 
Paraffin  mit  einem  Schmelzpunkt  von  56  bis  58^  C.  benützt,  so  hat 
man  zwar  den  Vorteil ,  möglichst  dünne  Schnitte  zu  erzielen ,  aber 
die  Unannehmlichkeit  des  Rollens  und  Bröckeins  der  Schnitte  ist 
natürlich  in  erhöhtem  Maße  vorhanden. 

Bei  Anwendung  des  im  folgenden  zu  beschreibenden  Kunst- 
griffes ,  der  mir  oft  aus  der  Verlegenheit  geholfen  hat ,  gelang  es 
mir  oft,  schöne  glatte  Schnitte  zu  erhalten,  wenn  die  bekannten 
Mittel  gegen  das  Rollen  nnd  Bröckeln  der  Schnitte  —  Schnittstrecker, 
Erwärmen  des  Messers  etc.  —  mich  im  Stiche  ließen. 

Ich  presse  mir  mit  den  Fingern  ein  Stückchen  Zugparaffin  zu 
einer  dünnen,  durchscheinenden  Platte  von  der  Größe  der  Schnitt- 
rtäclie  zurecht  und  drücke  dieselbe  auf  die  Schnittfläche  des  Paraffin- 
blockes auf.  Einige  Übung  lehrt  es  bald,  den  richtigen  Druck  zur 
Erzielung  einer  innigen  Adhäsion  zu  finden. 


^)  Leitfaden  für  histologische  Untersuchungen. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  2.  12 


178  Siding:  Ein  Beitrag  zur  PHraffinsclineidetechnik.  XXII,  2. 

Blöcke  aus  hartem  Paraffin  oder  niclit  zu  weichen  Paraffin- 
mischungen  halten  diesen  Druck  ganz  gut  aus  ohne  Schaden  zu  leiden. 

Wenn  die  Platte  gut  aufgedrückt  ist,  so  bleibt  nach  dem  Durch- 
ziehen des  Messers  der  Paraffinschnitt  glatt  auf  der  Unterfläche  der 
aufgelegten  Paraffinplatte  kleben  und  man  kann  nun  letztere  samt 
dem  Schnitt  mit  dem  Finger  auf  den  mit  der  Aufklebeflüssigkeit 
bestrichenen  Objektträger  drücken.  Es  entfällt  somit  das  zeitraubende 
und  unsichere  Glätten  des  Schnittes  mit  der  Staarnadel. 

Die  vorzügliche  Methode  von  Gaule  und  Altmann,  bei  welcher 
die  Schnitte  ohne  Aufklebemittel,  bloß  durch  Kapillar-Attraktion  am 
Objektträger  haften,  ist  hier  allerdings  nicht  anwendbar.  Die  weitere 
Behandlung  des  Schnittes  ist  die  sonst  bei  Paraffinschnitten  ge- 
bräuchliche. 

Man  erzielt  bei  einiger  Übung  sehr  hübsche  Resultate ,  man 
kann  sehr  dünne  und  zugleich  große  Schnitte  mit  wenig  Mühe  an- 
fertigen. Besonders  bei  der  Anfertigung  von  histologischen  Präpa- 
raten ,  die  als  Übersichtsbilder  dienen ,  leistet  diese  Methode  sehr 
gute  Dienste.  Bei  sehr  großen  Objekten  kann  man  auch,  um  einen 
innigeren  Kontakt  der  Paraffinplatte  mit  der  Schnittfläche  zu  er- 
zielen, folgendermaßen  verfahren :  Man  erhitzt  auf  dem  Spatel  etwas 
weiches  Paraffin  bis  auf  seinen  Schmelzpunkt  —  eine  zu  starke  Er- 
wärmung ist  nicht  zulässig  —  und  gießt  dann  das  geschmolzene 
Paraffin  auf  die  Schnittfläche  auf. 

Eine  ähnliche  Methode  wandte  Professor  Hochstetter  an,  indem 
er  ein  Stückchen  Seidenpapier  fest  auf  die  Schnittfläche  andrückte. 
Böhm  und  Oppel^  empfehlen  zur  Herstellung  dünnerer  Schnitte  die 
Schnittfläche  des  Celloidin-  oder  Paraffinblockes  mit  einer  dünnen 
Kollodiumschicht  zu  bestreichen ,  dieselbe  erstarren  zu  lassen  und 
dann  zu  schneiden.  Bei  Celloidin  führt  jedoch  diese  Methode  nie 
zum  Ziele,  da  an  dem  feuchten  Celloidinblock  das  Kollodium  einfach 
nicht  haftet;  bei  Paraffin  ist  sie  wohl  anwendbar,  doch  falten  sich 
immer  die  Schnitte  infolge  der  ungleichmäßigen  Zusaramenziehung 
des  Celloidinhäutchens ,  so  daß  es  ganz  unmöglich  ist ,  den  Schnitt 
glatt  auf  den  Objektträger  zu  bringen. 


')  Taschenbuch  der  mikrosk.  Technik,  S,  36. 

[Eingegangen  am  15.  April  1905.] 


XXII,  2.      Konasch ko:  Zur  Technik  der  Injektion  feiner  Gefäße.       179 


[Aus  dem  Laboratorium  für  allgemeine  Pathologie  der  Kaiserl.  St.  Wladimir- 
Universität  zu  Kiew.    Direktor:  Prof.  W.  Lindemann.] 

Zur  Technik  der  Injektion  feiner  Grefäße. 

Von 
P.  Konaschko 

in  Kiew. 

Beim  Injizieren  von  einzelnen  Organen  kleiner  Tiere  ist  es  bis- 
weilen erforderlich,  Kanülen  in  sehr  feine  Gefäße  einzuführen.  So 
erweist  es  sich  z.  B.  beim  Injizieren  des  Pfortadersystems  der  Frosch- 
niere als  am  zweckmäßigsten,  die  Kanüle  in  die  v.  portae  renis 
selbst  einzuführen,  wenngleich  diese  Prozedur  bedeutende  Schwierig- 
keiten bietet.  Man  könnte  ja  freilich  die  Kanüle  in  die  v.  abdom. 
anter.  einbinden  und  von  dieser  aus  injizieren.  Doch  ergäbe  sich 
dann  erstens  keine  so  vollkommene  Injektion,  weil  ein  beträchtlicher 
Teil  des  Druckes  auf  die  Injektion  auch  der  übrigen  Äste  der 
V.  abdom.  anter.  käme,  und  zweitens  vermöchten  wir  nicht,  eine 
genügend  deutlich  gegen  kollaterale  Rahmen  und  Anastomosen  ab- 
gegrenzte Injektion  zu  erhalten. 

Die  Einführijug  einer  Kanüle  in  ein  feines  Gefäß  (als  „Finder" 
dient  gewöhnlich  die  feine  Branche  einer  gebogenen  Pinzette ,  wie 
sie  beim  Anfertigen  von  mikroskopischen  Präparaten  gebraucht  wird) 
ist  überaus  schwierig  und  gelingt  bei  Anwendung  der  allgemein 
üblichen  Methode  nicht  immer.  Das  Haupthindernis  besteht  nicht  in 
der  absoluten  Enge  des  Gefäßlumens ,  sondern  im  Zusammenfallen 
des  letzteren  nach  dem  Auswaschen  des  Gefäßes  mit  physiologischer 
Kochsalzlösung  zwecks  Entfernung  des  Blutes.  Im  Zustande  der 
Ausdehnung  vermag  nun  aber  ein  sogar  äußerst  enges  Gefäß  eine 
entsprechend  feine  Kanüle  durchzulassen.  Auf  Grund  der  erwähnten 
Tatsachen  wende  ich  mit  Erfolg  folgendes  Verfahren  an,  bei  welchem 
zwei  Kanülen  zur  Verwendung  gelangen.  Dasselbe  zerfällt  in  zwei 
Prozesse : 

a)  Die  erste  —  die  Hilfskanüle  —  wird  gewöhnlich  in  das 
größte    der    mit    dem    zu    injizierenden    Gebiete    im    Zusammenhang 

12* 


löO      Konaschko:  Zur  Technik  der  Injektion  feiner  Gefäße.      XXII,  2. 

stehenden  Gefäße  eingeführt ;  so  wird  z.  B.  beim  Injizieren  des  Pfort- 
adersystems der  Niere  die  Hilfskanüle  etwa  in  die  v.  cava  inferior, 
oder  die  v.  abdom.  anter.  eingeführt.  Durch  diese  Kanüle  injizieren 
wir  das  betreffende  Gebiet  möglichst  vollständig  mit  einer  warmen 
farblosen  Gelatinelösung  von  nicht  allzu  starker  Konzentration.  Hier- 
bei ist  natürlich  das  ganze  Präparat  in  ein  warmes  Wasserbad  zu 
bringen.  Nach  möglichst  vollkommener  Injektion  wird  das  Präparat 
dem  Bade  entnommen  und  kalt  gestellt.  Die  im  Innern  der  Gefäße 
erstarrende  Gelatine  erhält  dieselben  nun  im  Zustande  der  Aus- 
dehnung. 

b)  Es  gelingt  nun  ziemlich  leicht  eine  entsprechend  feine  Kanüle 
in  das  auf  solche  Weise  dilatierte  Gefäß  einzuführen.  War  die 
Gelatinelösung  nicht  allzu  konzentriert,  so  leistet  die  im  Innern  des 
Gefäßes  erstarrte  Gelatinesäule  der  Einführung  der  Kanüle  nur  ge- 
ringen Widerstand.  Nach  Befestigung  der  Kanüle  wird  das  ganze 
Präparat  von  neuem  in  warmes  Wasser  gebracht,  nach  Verlauf  von 
einigen  Minuten  die  nun  wieder  flüssig  gewordene  Gelatine  zum 
Ausfließen  gebracht  und  alsdann  die  eigentliche  Injektionsmasse  ein- 
gespritzt. 

Mit  Hilfe  dieser  Methode  ist  es  mir  gelungen,  Kanülen  sogar  in 
eine  der  vv.  renis  advehens  secundariae  zu  bringen ,  die  ungefähr 
zweimal  so  dünn  ist,  als  die  v.  renis  advehens  princeps  (=  v.  portae 
renis).  Die  Kanülen ,  die  von  mir  in  die  erstgenannte  Vene  ein- 
geführt wurden,  stellen  dünne,  zu  äußerst  feinen  Kapillaren  aus- 
gezogene Glasrölirchen  dar,  welche  die  unter  hohem  Drucke  stehende 
Flüssigkeit  nicht  in  einem  Strahle,  sondern  tropfenweise  heraustreten 
lassen.  Zur  Glättung  der  Ränder  einer  solchen  Kanüle  genügt  schon 
eine   schwache  Flamme. 

[Eingegangen  am  5.  April  1905.] 


XXII,  2,         Neumayer:  Objektträgergestell  zur  Massenfärbung.  181 


Objektträgergestell  zur  Massenfarbuiig  von   auf- 
geklebten Paraffinschnitten. 


Von 

L.  Neuniayer 

in  München. 


Hierzu  ein  Holzschnitt. 


Die  Notwendigkeit  gleichzeitig  zahlreiche  auf  Objektträgern  auf- 
geklebte Parafßnschnitte  zu  beliandeln  fülirte  zur  Konstruktion  von 
Apparaten,  die  in  vielen  Fällen  in  rationeller  Weise  die  Prozeduren 
vereinfachen  und  abkürzen. 

Wenn  ich  von  den  vielfach  im  Gebrauch  befindlichen  Farb- 
trögen  aus  Porzellan,  Glas  etc.  absehe,  die  —  wie  schon  der  erste 
von  Mährenthal  (1)  oder  der  von  Schaffer  (2)  angegebene  Apparat 
—  vor  allem  den  Nachteil  liaben ,  daß  die  Objektträger,  jeder 
einzeln  für  sich,  von  einer  Flüssigkeit  resp.  Schale  in  die  andere 
gebracht  werden  müssen,  kommen  hier  nur  jene  Apparate  in  Betracht, 
welche  eine  größere  Zahl  von  Objektträgern  mit  einem  Hand- 
griff aus  einem  -  Medium  in  das  andere  überzuführen  gestatten. 

Diese  Idee  versuchte  wohl  zuerst  H.  Stuasser  (3)  praktisch  zu 
verwirklichen ,  indem  er  Blechkästchen  mit  siebartig  durchlöcherten 
Boden  für  je  einen  01)jektträger  verwandte,  die  zu  je  sechs  in 
flache  Schalen  gestellt  wurden. 

Einen  bedeutenden  Fortschritt  in  gewisser  Hinsiclit  zeigt  schon 
das  von  J.  Dewitz  (4)  aus  Glas  konstruierte  „Gestell  für  Objekt- 
träger bei  Serienscluiitten".  Hier  können  mindestens  10  Objektträger 
zu  gleiclier  Zeit  behandelt  werden,  indem  der  mit  Objektträgern  be- 
schickte xVpparat  von  einer  Flüssigkeit  in  die  andere  übergeführt  wird. 

Auf  denselben  Prinzipien  fußt  der  von  R.  Borrmann  (5)  an- 
gegebene Apparat.  Bokrmaxn  ,  der  das  von  Dewitz  angegebene 
Modell  nicht  erwähnt,  konstruierte  seinen  Apparat  aus  Messing.  Ein 
aus  diesem  Metall  hergestellter  Kechen  liält  die  auf  einem  messingenen 
Wellblech  ruhenden  Objektträger  der  Länge  nach  in  vertikaler  Kich- 


182  Neuraayer:  Objektträger gestell  zur  Massenfärbung.         XXII,  2. 

tuDg  und  kann  montiert  mit  30  Objektträgern  —  oder  60,  wenn  je 
zwei  zusammen  in  ein  Fach  gebracht  werden  —  an  einer  Stangen- 
führung in  den  Flüssigkeitsbehälter  eingesenkt  oder  herausgehoben 
werden.  Die  hierdurch  erzielten  Vorteile  sind  in  die  Augen  springend : 
Es  können  die  60  Objektträger  wie  ein  einziger  zu  gleicher  Zeit 
entparaffiniert,  vollständig  gleich  stark  gefärbt  und  aufgehellt  werden. 
Die  Flüssigkeitsmenge  von  300  bis  400  cc  ist  der  großen  Anzahl 
von  Objektträgern  entsprechend   und   kann  öfters  gebraucht  werden. 

Im  Jahre  1901  demonstrierte  v.  Apathy  (6)  auf  dem  Zoologen- 
kongreß in  Berlin  eine  Serienklammer,  die  ohne  Benutzung  eines  in 
Fächer  geteilten  Gefäßes  mehrere  Objektträger  zu  gleicher  Zeit  zu 
behandeln  gestattet.  Durch  eingelegte  Glasleisten  werden  die  Ob- 
jektträger voneinander  getrennt  und  durch  Federkraft  zusammen- 
gehalten. 

Von  denselben  Gesichtspunkten  ausgehend  konstruierte  Arlexs 
Kappers  (7)  einen  Apparat.  Derselbe  besteht  aus  einem  Metall- 
kästchen, in  das  die  Objektträger  —  bis  zu  14  Stück  —  durch 
Glasklötze  voneinander  getrennt,  eingesetzt  und  durch  Federwirknng 
festgehalten  werden. 

Zu  erwähnen  sind  noch  die  von  K.  Holzapfel  (8)  mid  S.  Lichten- 
berg (9)  angegebenen  Objektträgergestelle.  Bei  jenem  werden  die 
Objektträger  —  bis  zu  30  Stück  —  durch  rechenförmige  Glas- 
rahmen in  aufrechter  Stellung  in  genau  passende  Glasgefäße  ge- 
bracht ;  der  von  S.  Lichtenberg  angegebene  Apparat  ist  von  vier 
aus  Nickelin  hergestellten  gekerbten  Rahmen  konstruiert,  in  die  — 
in  maximo  12  —  Objektträger  ebenfalls  der  Länge  nach  eingesteckt 
lind  das  Ganze  mittels  eines  über  die  oberen  Enden  der  Objektträger 
heraussehenden  Verbindungsarmes  in  die  verschiedenen  Reagentien 
gebracht  werden  kann. 

Aus  dieser  kui-zen  Zusammenstellung  der  bisher  konstruierten 
Apparate  ergeben  sich  zwei  Systeme  —  abgesehen  von  den  mit 
Rippen  versehenen  Farbtrögen  —  von  Apparaten  für  Massenfärbungen  : 

1)  Die  stabilen  Rahmen  aus  Glas  oder  Metall;  hierher  gehören 
die  von  Dewitz,  Borrmann,  Holzapfel  und  Lichtenberg  angegebenen 
Vorrichtungen.  2)  Die  nach  dem  Prinzip  federnder  Zangen  kon- 
struierten Objektträgerhalter  von  Apathy  und  Ariens  Kappers. 

Da  ich  für  Kurszwecke  80  und  mehr  Objektträger  gleichzeitig 
zu  färben,  entwässern  etc.  hatte,  versuchte  ich  die  praktische  Ver- 
wendbarkeit der  meisten  oben  angegebenen  Objektträgergestelle  mit 
wenig  befriedigendem  Resultate.     Während  die  einen  durch   die  ge- 


XXII,  2.         Neumayer:  Objektträgergestell  zur  Massenfiirbung.  183 

ringe  Anzahl  der  aufgenommenen  Objektträger  kaum  ein  rascheres 
Arbeiten  als  die  Farbtröge  ermöglichten ,  erwiesen  sich  die  andern 
infolge  ihrer  Zerbrechlichkeit  als  wenig  ökonomische  Instrumente. 
Diese  und  noch  andere  Gründe  veranlaßten  mich,  einen  soliden,  ein- 
fachen Apparat  zu  konstruieren ,  der ,  handlich ,  eine  Mindestzahl 
von  80  Objektträgern  (engl.  Format)  zu  gleicher  Zeit  zu  behandeln 
gestattete. 

Beistehende  Figur  zeigt  das  Instrument  in  der  Ansicht  von  oben. 
Es  besteht   aus   zwei   konzentrischen  Reifen  a  und  b ,   welche  durch 


zwei  rechtwinklig  aufeinanderstehende  Balken  —  e  und  c  —  fixiert 
werden.  Die  beiden  Reifen  haben  je  eine  Höhe  von  2'9  cm  und 
stehen  7*9  cm  in  lichter  Weite  voneinander  ab,  so  daß  ein  Objekt- 
träger vom  englischen  Format  leicht  der  Länge  nach  eingeschoben 
werden  kann.  Auf  den  Querbalken  e  —  e  laufen  je  1  cm  vom 
äußern  und  Innern  Reifen  entfernt  zwei  Ringe  c  und  f/,  die  den 
Objektträgern  als  Unterlage  dienen.  An  der  Innenseite  des  äußeren 
Reifens  a  springen  80  imgefähr  1'8  cm  hohe  Leisten  vor,  die 
ca.  0*4  cm  breite  Spalten  zwischen  sich  lassen ,  in  die  die  Objekt- 
träger eingeschoben  werden.     Der  innere  Reifen  b  trägt  acht  solche 


184  Neumayer:  Objektträgergestell  zur  Massenfärbung.         XXII,  2. 

Leisten,  die  in  etwa  2  cm  Entfernung  voneinander  stehen  und  ebenso 
"wie  die  am  äußeren  Reifen  etwas  niedriger  wie  dieser  sind.  Der 
Kaum,  der  zwischen  je  zwei  Leisten  des  inneren  Reifens  sich  findet, 
reicht  vollkommen  aus,  um  10  Objektträger  von  gewöhnlicher  Dicke 
zu  fassen ,  ja  es  bleibt  noch  Raum ,  so  daß  in  jeden  Fächer  je 
zwei  Objektträger  eingeschoben,  in  maximo  also  160  Objektträger 
zu  gleicher  Zeit  behandelt  werden  können.  Eine  Partie  des  mon- 
tierten Apparates  zeigt  der  nach  oben  gekehrte  Quadrant  der  Ab- 
bildung, wo   die   Lage  der  Objektträger  zu  erkennen  ist. 

Dort ,  wo  sich  die  beiden  Querbalken  c  und  e  innerhalb  des 
inneren  Ringes  {b)  überkreuzen,  ist  in  einen  zylindrischen  Zapfen  ein 
T-förmiges  Metallstück  [f)  eingeschraubt.  An  diesem  kann  der  ganze 
Apparat  mit  Hilfe  eines  hakenförmigen  Schlüssels,  der  dem  Apparate 
beigegeben  ist ,  gefaßt  und  in  die  verschiedenen  Reagentien  trans- 
feriert werden. 

Zur  Herstellung  dieses  Objektträgergestelles  wurde  Gußeisen 
verwendet,  das  weiß  emailliert  gegen  alle  in  der  histologischen  Technik 
angCAvandten  Reagentien  genügend  widerstandsfähig  ist.  Aus  der 
Verwendung  dieses  Materials  erklärt  sich  das  relativ  große  Gewicht 
des  ganzen  Apparates,  das  bei  vollständiger  Füllung  mit  80  Objekt- 
trägern noch  um  ca.  400  g  steigt.  Andrerseits  ist  aber  hierdurch 
eine  Haltbarkeit  des  Instrumentes  erzielt,  die  allen  Anforderungen 
im  Laboratorium  sowohl  wie  in  Kursen  genügen  dürfte.  Ich  hebe 
hier  hervor,  daß  wir  auch  Versuche  mit  andern  ]\Ietallen,  Avie  z.  B. 
Aluminium  zur  Herstellung  des  Apparates  gemacht  haben,  daß  aber 
die  bisherigen  Erfolge  gerade  mit  diesem  Metall ,  wenn  auch  eine 
Gewichtsverminderung  auf  365  g  erzielt  Avurde,  wenig  befriedigend 
waren.  Vielleicht  ergeben  weitere  Versuche  mit  Legierungen  dieses 
Metalles  bessere  Resultate.  Als  Behälter  für  die  verschiedenen 
Reagentien  verwende  ich  die  Koch  sehen  Kulturschalen.  Bei  der 
Überführung  der  Präparate  empfiehlt  es  sich,  die  den  Objektträgern 
oder  zwischen  denselben  adhärierende  Flüssigkeit  abtropfen  zu  lassen 
oder  noch  besser  mit  einem  Fließpapierbauschen  von  unten  lier  ab- 
zusaugen. Wird  in  dieser  Weise  verfahren,  so  lassen  sich  Toluol, 
Alkohol  etc.  öfters  gebrauchen  und  wird  an  Reagentien  mehr  gespart, 
als  wenn  eine  Reihe  kleiner  Apparate  verwendet  würde. 

Die  bis  jetzt  verwendeten  Apparate  haben  sich  auf  das  beste 
bewährt ;  die  Vorzüge  derselben  liegen  vor  allem  in  der  großen  Zeit- 
ersparnis, die  das  Arbeiten  mit  ihnen  bei  Massenfärbungen  gewährt, 
in    ihrer  Widerstandsfälligkeit   gegen    alle  Reagentien,    gegen    große 


XXII,  2.         Neuiuayer:  Objektträgergestell  zur  Massenfärbung.  185 

Hitze    und    in    der    Gleiclimäßig'keit    der    Fcärbung,     die  bei    absolut 
gleich  lang-er  Tinktion  sämtliche  Schnitte  zeigen. 

Die  beschriebenen  Objektträgergestelle  sind  durcli  das  Spezial- 
geschäft für  Mikroskopie  und  medizinische  Diagnostik  von  Dr.  A. 
ScHWALM,  München,  Sonnenstraße  10,  zu  dem  Preise  von  6  Mark 
zu  beziehen,  welches  auch  die  technische  Ausführung  der  Apparate 
übernommen  hatte. 


Literaturverzeichnis. 

1)  Zitiert  bei  Dewitz,  J.,  Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  XXXIII,  p.  41(j. 

2)  Schaffer,  J.,  Ein  Glasgefaß  zur  Verarbeitung  umfangreicher  auf- 
geklebter Schnittserien  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XI,  p.  150).  —  Der- 
selbe, Ein  neuer  gläserner  Farbtrog  für  Serienschnitte  (Zeitschr.  f.  wiss. 
Mikrosk.  Bd.  XIX,  p.  297). 

3)  Strasser  ,  H. ,  Über  die  Nachbehandlung  von  Serienschnitten  bei 
Paraffineinbettung  (Zeitschr.  f.  wiss.  ]Mikrosk.  Bd.  III,  1880,  p.  346). 

4)  Dewitz,  J.,  Gestell  für  Objektträger  bei  Serienschnitten  (Arch.  f. 
mikrosk.  Anat.  Bd.  XXXIII,  p.  410). 

5)  BoRRJiANN,  R.,  Ein  neuer  Apparat  zur  bequemen,  schnellen  und 
gleiclimäßigen  Färbung  und  Weiterbehandlung  von  Serienschnitten  (Zeitschr. 
f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XI,  p.  459). 

ij)  Apäthy,  S.  V.,  Über  einige  neue  mikrotechnische  Vorrichtungen. 
Mit  Demonstration  der  Apparate,  9  Figg.  (Ber.  üb.  d.  Verh.  d.  5.  Internat. 
Zool.  Kongr.  Berlin  1901). 

7)  Ariens  Kappers,  C.  U. ,  P^in  kleiner  Apparat  für  die  Gesamt- 
behandlung vieler  Objektträger  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXI,  p.  185). 

8)  Holzapfel,  K.,  Gestell  für  Objektträger  bei  Reilienschnitten  (ArcJL 
f.  mikrosk.  Anat.  u.  Entwicklungsgesch.  Bd    LIX,  p.  457). 

9)  Lichtenberg,  S.,  Objektträgergestell  zur  gleiclizeitigen  Behandlung 
zahlreicher  Schnitte  (Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXI,  p.  321). 

[Eingegangen  am  19.  Juni  1905.] 


186  P  a  V 1 0  w :  Kreosot  als  wasserentziehendes  Mittel  bei  Einbettung.  XXII,  2. 


Kreosot  als  wasserentziehendes  Mittel  bei  der 
Einbettun  o;  in  Paraffin. 

Von 
W.  Pavlow 

in  Charkow. 


Die  üblichen  Methoden  für  Einbettung  in  Paraffin  bestehen  im 
allgemeinen  in  folgendem.  Die  fixierten  Objekte  werden  in  Wasser 
gewaschen  und  hiernach  in  Alkohol  verschiedener  Stärkegrade  zur 
Entwässerung  und  Härtung  gelegt.  Weiter  bringt  man  sie  in  Flüssig- 
keiten, welche  Paraffin  lösen  (z.B.  Xylol,  Toluol  etc.)  und  endlich 
in  reines  Paraffin.  Die  Entwässerung  und  die  Härtung  in  absolutem 
Alkohol  wird  als  unerläßlich  für  die  Einbettung  in  Paraffin  be- 
trachtet. 

Der  Nachteil  dieser  Methode  ist  allen  bekannt.  Wenn  das 
Objekt  bei  der  Übertragung  in  Xylol,  Toluol  etc.  nicht  gut  genug  ent- 
wässert ist,  so  wird  es  von  den  Flüssigkeiten  und  vom  Paraffin  nicht 
durchdrungen ,  und  infolgedessen  schneiden  sich  solche  Präparate 
schlecht. 

Zur  völligen  Entwässerung  ist  es  unbedingt  nötig,  die  Objekte 
längere  Zeit  im  Alkohol ,  welcher  einige  Male  gewechselt  Avird ,  zu 
halten,  was  —  von  den  Kosten  abgesehen  —  die  fixierten  Gewebe 
angreift:  sie  schrumpfen,  brechen  leicht  etc. 

Die  von  mir  vorgeschlagene  Methode  der  Einbettung  der  Objekte 
in  Paraffin  erleichtert  die  Sache  sehr,  und  die  Präparate  fallen  dabei 
nicht  schlechter  aus  als  bei  der  alten. 

Die  in  irgendeiner  Flüssigkeit  fixierten,  und  wenn  nötig,  mit 
Wasser  gewaschenen  Objekte  werden  ohne  vorhergehende 
Entwässerung  in  Creosotum  fagi  auf  4  bis  24  Stunden 
(je  nach  der  Größe  des  Objekts),  dann  auf  2  bis  3  Stunden  in 
reines  Kreosot  gebracht,  dann  auf  Filtrierpapier  zur  Entfernung  des 
überschüssigen  Kreosots  gelegt,  auf  eine  Stunde  in  Xylol  oder  Toluol 
übertragen,  und  dann  wie  gewöhnlich  im  Paraffin  eingebettet. 


XXII,  2.  Fiorentini-Signer:  Metodo  di  Colorazione  e  Conservazione.   187 

Man  kann  auch  aus  dem  reinen  Kreosot  direkt  ins  Paraffin 
übertragen.  Die  auf  solche  Weise  eingebetteten  Objekte  werden 
gut  vom  Mikrotom  geschnitten,  färben  sich  gut  und  stehen  den  mit 
vorangehender  Entwässerung  eingebetteten  Objekten  nicht  nach. 

[Eingegangen  am  4.  Juni  1905.] 


[Istituto  di  Clinica  ^ledica  deUa  R.  Universitä  di  Messina.    Diretto  dal 

Prof.  Cav.  U.  Gabbi.J 


Su  di  un  Metodo   di  Colorazione  e  Conservazione 
permanente  del  Sedimente  urinario. 

Dei 

Dott.  Pietro  Fiorentiui,   ed  M.  Signer, 

I"  Assistente  Assistente  volontario. 


Con  una   tavola  (tab.  I). 


Tutti  coloro  che  si  sono  occupati  di  ricerche  di  microscopia  clinica 
sono  d'accordo  neU'ammettere  che  e  una  buona  pratica  colorare  il 
sedimento  urinario,  ed  in  ispecie  perche  i  cilindri  ialini  sono  talora 
cosi  diafani  da  riuscirne  difficile  l'osservazione. 

Jaksch^  dice  che  inditfenteremente  si  possono  nsare  il  picro- 
carminio ,  il  violetto  di  Genziana ,  l'eosina ,  rematossilina  acida ,  la 
saffrauina,  il  Bruno  di  Bismarck.  Tale  affermazione  e  certamente 
inesatta  giacche,  come  vedremo  in  seguito ,  alcune  di  tali  sostanze 
coloranti  rispondono  assai  mediocremente  allo  scopo. 

Beale-  consiglia  il  Rosso  di  Magenta ,  che  corrisponde  assai 
bene ;  Knüll  ^  il  Violetto  di  Metile.  — Altri,  ed  anche  lo  stesso  Jaksch, 
raccomandano  la  soluzione  iodoiodurata,  l'acido  osmico,  il  bicromato 


^)  Jaksch  :  La  diagnosi  clinica  delle  malattie  interne  (Milano,  Vallardi). 


-)  Beale  :  Arch.  of  Med.  1863. 

"")  Knoll:  Zeitschr.  f.  Heilk.  1882—1884. 


188   Fiorentini-Signer :  Metodo  di  Colonizione  e  Consei-vazione.  XXII,  2. 

potassico ;    Coplin-^    il  Sudan  III    per    il    grasso ;    Padoa^  la    doppia 
colorazione  clie  si  ottiene  col  Sudan  III  (Daddi)  ed  il  Bleu  di  Metile. 

E  stata  usata  la  fucsina ,  Fematossilina  alluminata ,  Padoa  ä 
esperimentato  con  la  nnicomateina  e  col  mucocaruiinio ,  constataudo, 
a  difterenza  di  Meyer  ed  Harris,  che  queste  2  ultime  sostanze  non 
presentano  alcun  speciale  vantaggio.  Kon  furono  dimenticati  l'acido 
picrico,  le  soluzioni  ammoniacali  di  Carminio,   la  tintura  di  Jodo. 

Noi  abbiamo  provato,  senza  risultati  degni  d'interesse,  l'orceina, 
il  rosso  inagdala,   la  cocciniglia,   la  tionina  fenica. 

Gli  inconvenieuti  a  cui  danno  luogo  questi  metodi  varii  di  colora- 
zione si  possono  brevemente  riassumere  cosi : 

Le  soluzioni  alcaline  sciolgono  in  parte  i  cilindri  mentre  in 
quelle  neutre  questi  si  rigonfiano  ed  assumono  assai  male  il  colore. 
I  cristalli   subiscono    anch'essi  delle   alterazioni   piü  o    meno  notevoli. 

L'acido  osmico  da  dei  preparati  in  genere  assai  confusi  a  causa 
della  notevole  quantitä  di  precipitato,  e  per  quanto  si  cerclii,  non  e 
possibile  ottenere  preparazioni  nitide  e  pulite. 

Inoltre  il  metodo  e  poco  spedito  giacclie  Tacido  osmico  deve 
agire  a  lungo.  Padoa,  che  si  e  niolto  occupato  deirargomento,  non 
ha  avuto  anch'egli  buoni  risultati. 

L'ematossiline  rispondono  discretamente  purche  l'orina  non  con- 
tenga  muco  e  non  si  tratti  della  alluminata ,  e  cosi  pure  rispondono 
discretamente  allo  scopo  „l'eosina,  il  violetto  di  Genziana,  la  fucsina 
acida,  l'acido  picrico ,  il  bleu  di  metile ,  la  tintura  di  jodio ,  sempre 
in  soluzioni  diluite. 

II  metodo  della  doppia  colorazione  proposto  da  Padoa  col  Rosso 
Sudan  III  (Daddi)  ed  il  bleu  di  metile  serve  molto  bene  per  la 
ricerca  del  grasso  nei  cilindri  urinarii. 

Ma  cio  che  colora  ottimamente  il  sedimento  urinario  nei  suoi 
singoli  componenti  e  la  miscela  triacida  di  Ehrlich.  Con  questa 
si  ha  una  colorazione  di  contrasto  che  e  veramente  interessante. 

II  Protoplasma  cellulare  ed  i  globuli  rossi  assumono  una  distin- 
tissima  colorazione  rosso  orange,  mentre  i  globuli  bianchi  si  colorauo 
nei  loro  protoplasma  in  rosso,  i  nuclei  in  verde  e  cosi  pure  i  raicro- 
organismi.  Gli  spermatozoi  assumono  nella  porzione  cefalica  una 
bella  colorazione  verde,    mentre   la   coda   si   colora   piü   debolmente : 


1)  Coplin:    Reazioni    microchiiuiche    dei    cilindri   renali    (British  Med. 
Journ.  1902). 

-)  Padoa:  Iliv.  Crit.  Clin.  Med.  1904. 


XXII,  2.  Fiurentinl-Öigner:  Metodo  di  Colorazione  e  Conservazione.   189 

i  cilindri  ialini  si  colorano  in  im  delicatissimo  colore  violetto,  meiitre 
i  granulosi,  ed  i  cerei  in  rosso  orange,  gli  ialino  granulosi  assiimono 
tale  doppia  colorazione.  I  cristalli  in  genere  non  vengono  alterati. 
Gli  elementi   nei    cilindri   assuraono    il    colore  nel   modo  gia  indicato. 

I  granuli  grassosi  spiccano  piu  distintaniente  (vedi  tavola), 
Castellino  a  recentissimamente  confermata  la  nostra  osservazione 
(Sahli  Punt'^  V«). 

Inoltre  nel  metodo  che  noi  veniamo  indicando  cio  che  ha  spe- 
ciale importanza  e  quanto  rigiiarda  non  la  tecnica  di  Colorazione, 
ma  qiiella  di  Conservazione.  E  noto  che  il  volere  fare  dei  preparati 
permanenti  di  sediraento  urinario  e  cosa  difticile  per  il  fatto  che  il 
sedimento  siibisce  sia  col  proscingamento  all'aria ,  sia  con  quello  al 
calore  anche  lieve  o  con  l'alcool  o  coi  metodi  di  Lenker,  Marchi 
0  Müller,  delle  modificazioni  e  dei  guasti  piü  o  meno  gravi  secondo 
che  si  tratta  di  cellule,  di  globiili,  di  cilindri  e  di  cristalli.  Questi 
diie  Ultimi  in  genere  souo  i  piü  danneggiati. 

l'cr  questo  si  usa  molto  poco  il  metodo  di  Conservazione  per- 
manente di  sedimento  urinario.  Noi  facendo  una  Serie  di  ricerche 
sul  proposito  abbiamo  potuto  constatare  che  il  sedimento  Jion  subisce 
alcuna  modificazione  ove  venga  trattato  con  glicerina  lievissima- 
mente  acida. 

Forti  di  questa  osservazione ,  dopo  avere  raccolto  il  sedimento 
urinario  o  mediante  centrifugazione  o  lasciandolo  precipitare  in  cilindri 
di  vetro ,  dopo  averlo  rapidamente  colorato  con  la  miscela  triacida, 
lo  abbiamo  trattato  con  glicerina  leggermente  acidulata. 

Una  goccia.  dei  sedimento  cosi  colorato  e  preparato,  posto  su 
di  un  porta  oggetti,  ricoperto  dal  relativo  coprioggetti ,  si  luta  con 
Bitume  Giudaico. 

In  tal  modo  si  ottengono  dei  preparati  permanenti,  ottimamente 
colorati,  che  resistono  inalterati  alla  luce  ed  alFaria  per  dei  mesi. 
(La  tavola  rappresenta  una  goccia  di  sedimento  d'iirina  di  un  nefri- 
tico  degente  in  clinica  nel  febbraio.  II  preparato  venne  precisamente 
allestito  in  tale  epoca ,  il  disegno  fu  fatto  3  mesi  dopo  senza  che 
dnrante  tale  periodo  di  tempo  il  sedimento  subisse  alterazione  alcuna.) 

L'utilita  quindi  di  tal  metodc»  e  grandissima  in  ispecie  dal  punto 
di  vista  dimostrativo ,  in  quanto  che  si  puo  cosi  teuere  e  rievocare, 
quando  si  voglia,  tutta  revoluzione  di  un  processo  renale. 

[Eingegangen  am  15.  Juni  1905.] 


190  Bödecker:  Eine  Entkalkungsmethode  für  Gewebe.         XXII,  2. 


Eine  Entkalkungsmethode  für  Gewebe, 
welche  wenig  organische  Substanz  enthalten,  ins- 
besondere Zahnschmelz. 


[Vorläufige  Mitteilung.] 

Von 

C.  Francis  Bödecker, 

D.  D.  S. 


Hierzu   eine  Tafel  (Tab.  II). 


Die  außerordentliche  Schwierigkeit,  gute  mikroskopische  Präpa- 
rate von  dem  organischen  Bestandteil  des  Schmelzes  herzustellen, 
veranlaßte  mich,  eine  neue  Entkalkungsmethode  zu  ersinnen.  Bei 
dem  Gebrauch  dieser  Methode  ist  es  möglich,  den  gesamten  proto- 
plasmatischeu  Inhalt  des  Schmelzes  in  annähernd  riclitiger  Lage  zu 
erhalten.  Durch  die  übliche  Entkalkungsmethode,  bei  welcher  Zähne 
direkt  in  eine  dünne  Säurelösung  gelegt  werden,  wird  der  Proto- 
plasmabestandteil des  Schmelzes  von  dem  des  Dentins  abgerissen 
und  weggewaschen.  Bessere  Präparate  wurden  durch  Entkalkung 
dünner  Schmelzschliffe  unter  dem  Deckglas  erhalten,  aber  auch  hier- 
bei konnte  man  nur  kleine  starkverzerrte  Reste  sehen. 

Bei  Anwendung  der  neuen  Methode  werden  die  Präparate  in 
der  üblichen  Weise  bis  zur  dünnen  Celloidinlösung  gebracht.  Dann 
kommen  die  Stücke  in  die  Entkalkungslösung ,  welche  aus  dickem 
Celloidin  mit  einem  Zusatz  von  6  bis  10  Prozent  konzentrierter 
Salpetersäure  besteht.  Die  Stärke  der  Säure  ändert  sich  außer- 
ordentlich wegen  der  schnellen  Verdunstung  des  Alkohols  und  Äthers. 
Darum  müssen  alle  2  bis  3  Tage  einige  Tropfen  Alkohol  und  Äther 
zugesetzt  werden,  um  die  richtige  Konsistenz  zu  erhalten.  Die  Dauer 
des  Entkalkungsprozesses  hängt  natürlich  von  der  Größe  des  Präpa- 
rats ab.     Ich  habe  Schliffe  von  ungefähr  30  Mikron  Dicke  innerhalb 


XXII,  2.         Bödecker:  Eine  Entkalkungsmethode  für  Gewebe.  191 

2  Wochen  entkalkt,  während  ein  1  mm  dicker  Querschnitt  von  einem 
Bikuspidaten  über  2  Monate  in  Anspruch  genommen  hat.  Nachdem 
das  Präparat  2  Tage  Lang  in  der  Säurelösung  verweilt  hat,  bekommt 
es  ein  kreideartiges  Aussehen.  In  dem  Maße  aber ,  wie  die  Ent- 
kalkung fortschreitet,  wird  der  Schmelz  immer  durchsichtiger,  bis  er 
zuletzt  anscheinend  verschwunden  ist.  Nur  eine  feine  Linie  markiert 
die  äußere  Grenze  des  Schmelzes.  Wenn  dieses  Stadium  erreicht 
ist,  läßt  man  das  Celloidin  allmählich  erhärten.  Wegen  der  Schwierig- 
keit, dünnere  Celloidinschnitte  wie  10  bis  1,5  Mikron  zu  erhalten,  bette 
ich  den  Celloidinblock  in  Paraffin  ein  und  erlange  durch  diese  kom- 
binierte Methode  dünnere  Schnitte. 

Das  Quantum  organischer  Bestandteile  im  Schmelz  verschiedener 
Personen  variiert  außerordentlich.  Außer  den  Schmelzfasern  und 
andern  protoplasmatischen  Bildungen,  die  von  meinem  Vater  im  Jahre 
1878^  beschrieben  worden  sind,  habe  ich  zwei  neue  Arten  organischer 
Körper  gefunden.  Der  eine  von  diesen  tritt  auf  in  der  Gestalt  von 
Bündeln  dickerer  organischer  Fasern,  welche  ihren  Ursprung  in  der 
Grenze  zwischen  Schmelz  und  Dentin  haben  und  in  der  Richtung 
nach  außen  laufen.  Diese  Bündel  kommen  öfters  in  Paaren  vor, 
und  können  im  Schliff  mit  der  Form  eines  Büschels  verglichen  werden. 
Die  andern  sind  blattartige,  wellenförmige  Fortsätze,  die  in  ungefähr 
derselben  Richtung  wie  die  Schmelzprismen  verlaufen.  Von  ihrem 
Ursprung  an  der  Dentingrenze  durchziehen  sie  den  Schmelz  öfters 
bis  zur  Oberfläche,  während  die  büschelförmigen  Bündel  nur  ungefähr 
bis  zu  einem  Sechstel  dieser  Länge  eindringen.  Da  die  blattartigen 
Fortsätze  denselben  Verlauf  aufweisen  wie  Sprünge  im  Schmelz,  sind 
sie  bisher  auch  als  solche  aufgefaßt.  Ein  passender  Name  für  diese 
Gebilde  wäre  „Schmelzlamellen". 

Die  Methode  kann  auch  mit  Vorteil  zur  Entkalkung  und  Ent- 
kieselung  der  Schwämme  angewandt  werden.  Die  Entkalkung  wird 
in  der  beschriebenen  Weise  ausgeführt,  während,  die  Entkieselung 
mit  Flourwasserstoff  in  von  Blei  und  Glimmer  speziell  konstruierten 
Gefäßen  vorgenommen  werden  muß ,  worüber  ich  noch  einen  ein- 
gehenderen Bericht  bringen  werde. 

Mit  dieser  Methode  hoffe  ich  mehrere  dunkele  Stellen  in  der 
Entwicklung  des  Schmelzes  aufzuklären.  Auch  werde  ich  die  ver- 
gleichende Anatomie  des  Schmelzes  nach  dieser  Methode  durch- 
arbeiten, und  hoffe  bald  darüber  berichten  zu  können. 


1)  BÖDECKER,  C.  F.  W.,  Dental  Cosmos  vol.  XX,  p.  582. 


192  S  t  r  e  li  1 :  Mikroskopisches  Experiment.  XXII,  2. 

Tab.  II.  Entkalkter  Schnitt  eines  menschlichen  Zahnes;  Färbung 
mit  Gold.  —  Unten  Dentin,  oben  organische  Bestandteile  im  Schmelz 
sichtbar. 

[Eingegangen  am  19.  Juli  1905.] 


Mikroskopisches  Experiment. 

Von 

Karl  Strehl 

in  Erlangen. 

Auf  Seite  IG  meiner  scheint  es  fast  unbekannten  „Tlieorie  der 
allgemeinen  mikroskopischen  Abbildung"  (Erlangen  1900)  zeigte  ich, 
daß  die  Beugungsspektra  komplementärer  Strukturen  (z.  B.  von  Löcher- 
platte  und  Körnerschicht)  Hauptmaxima  von  gleicher,  Nebenmaxima 
von  gegensätzlicher  Phase  liabeu.  Ein  derartiges  Verhältnis  weist 
u.  a.  das  reziproke  Gitter  auf,  bei  Avelchem  die  Striche  zur  einen 
Hälfte  Lücken,  zur  andern  Hälfte  Leisten  sind.  Wenn  die  Maxima  0 
(Hauptmaximum),  1  und  2  (1.  und  2.  Nebenmaximum)  der  oberen 
Hälfte  gleiche  Phase,  d.  h.  die  folgeweisen  Vorzeichen  -| — | — \-  haben 
(dies  ist  z.  B.  der  Fall  bei  dem  Verhältnis  Lückenbreite :  Leisten- 
breite =  1:2),    dann    sind    die   entsprechenden  Vorzeichen  bei  der 

unteren  Hälfte  (mit  dem  reziproken  Verhältnis   2  :  1)  -| ■  — ;  wenn 

man  mithin  das  Hauptmaximuni  abblendet ,  dann  müssen  die  beiden 
Nebenmaxima  (weil  unter  sich  von  gleicher  Phase,  die  einen  -| — |-, 

die  andern ,    und    auch    gegenseitig    von   gleicher  Stärke ,    die 

einen  ebenso  hell  wie  die  andern)  in  beiden  Hälften  das  gleiche  Bild 
erzeugen,  d.  h.  Lücke  auf  Lücke  und  Leiste  auf  Leiste  treffen. 

Diesen  Versuch  hat  Herr  Julius  Rheinberg  (London)  photo- 
graphisch fixiert,  beschrieben  und  in  seiner  Weise  erklärt  in  „The 
intluence  on  Images  of  gratings  of  phase-difterences  amongst  their 
spectra"  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  p.  152),  wovon  er  mir  einen 
Abzug  zu  senden  die  Güte  liatte. 

Auf  Seite  14  meiner  oben  genannten  Schrift  zeigte  ich  auch, 
daß  das  AVandern  einer  Struktur  in  Phasenänderungen  der  sonst 
scheinbar  unveränderten  Nebenmaxima  seine  Erklärung  findet.    Eine 


XXII,  2.  S  t  r  e  h  1 :  Mikroskopisches  Experiment.  1 9  3 

Verschiebung  des  Gitters  vim  die  halbe  Gitterkonstante  entspricht 
einer  Phasenänderimg  von  Maximum  zu  Maximum  um  ^/2  mehr,  mit- 
hin einer  Multiplikation  der  entsprechenden  Vorzeichen  abwechselnd 
mit  —  und  -\-. 

Auch  hierüber  stellte  Herr  Julius  Rheinberg  Versuche  an  laut 
einem  andern  Abzug  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1904,  p.  388  ;  gleicher 
Titel).  Für  mich  ist  nun  wertvoll  zu  zeigen ,  daß  die  Verbindung 
beider  Gesichtspunkte  gestattet,  aus  dem  Beugungsspektrum  der 
zentrierten  (d.  h.  die  Mikroskopachse  mit  einer  Lücke,  nicht  Leiste, 
treffenden)  oberen  Hälfte  das  der  zentrierten  unteren  Hälfte  abzuleiten. 

Wenn  die  Vorzeichen  für  die  obere  Hälfte  -j 1 \~  sind,  dann 

sind  sie  aus  Gründen  der  Reziprozität  (komplementären  Struktur)  für 

die    untere   Hälfte  -| nach    der    Verschiebung   um    die   halbe 

Gitterkonstante,  vor  der  Verschiebung,  d.  h.  für  die  zentrierte  untere 

Hälfte  mithin  -] \ ;  hierin  kommt  der  angeblich  erst  von  A.  E. 

CoNRADY  bemerkte  Phasenwechsel  der  Nebenmaxima  zum  Ausdruck. 

Tatsächlich  ist  der  Vorzeichenwechsel  an  Stelle  der  absoluten 
Minima  (dunkeln  Beugungsringe)  schon  längst  (mindestens  seit  v.  Lom- 
MELS  Arbeiten)  bekannt;  ihm  Rechnung  zu  tragen,  lassen  die  in 
meiner  Mikroskoptheorie  für  die  Beugungsspektra  eingeführten  all- 
gemeinen Koeffizienten  h  i  j  />•  ohne  weiteres  zu.  Daß ,  wenn  eine 
unendliche ,  periodische ,  regelmäßige  Struktur  an  Stelle  einer  konti- 
nuierlichen Beugungsfigur,  wie  sie  durch  eine  einzige  Öffnung  ent- 
steht, durch  das  Zusammenwirken  aller  Öffnungen  isolierte  Maxima 
zeigt,  diese  dann  an  der  örtlichen  verhältnismäßigen  Lichtstärke  und 
Phase  teilnehmeiij  dies  ist  wohl  selbstverständlich.  Einige  Sätze 
über  Zahl  und  Lage  der  positiven  Nebenmaxima  zwischen  Zentrum 
und  1.  absolutem  Minimum  allerdings  sind  interessant  und  erscheinen 
mir  für  den  Augenblick  neu. 

Und  so  begrüße  ich  denn  die  angezeigten  hübschen  und  ver- 
dienstlichen Experimente  als  willkommenen  Anlaß,  Anregung  zu  geben, 
daß  man  auch  bei  uns  —  nicht  nur  in  England  —  sich  eifrig  mit 
beugungstheoretischer  Optik  beschäftige.  Möge  .man  jedoch  auch 
von  dem  Einsicht  nehmen ,  was  schon  vorhanden  ist ;  denn  der 
Rohbau  ist  im  großen  und  ganzen  schon  fertig,  es  wird  sich  meines 
Erachtens  meist  nur  um  die  Ausschmückung  einzelner  Räume  handeln. 

[Eingegangen  am  14.  Juni  1905.] 


Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  2.  13 


194      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 


Die  Fortschritte 

der  botanischen  Mikrochemie  seit  Zimmermanns 

„ Botanischer  Mikrotechnik  ". 

Saminelreferat 
von 
Dr.  Oswald  Richter    . 

in  Prag. 

Einleitung. 

Die  ungeahnte  Höhe,  zu  der  sich  die  Mikrochemie  als  Hilfs- 
wissenschaft der  Botanik  aufgeschwungen  liatte,  veranlaßte  1881 
PouLSEN  auf  Anregung  Warmings  sein  Werkchen  „Die  botanische 
Mikrochemie"  zu  veröffentlichen,  die  sich  als  treffliches  Hilfs- 
mittel in  der  Hand  des  Botanikers  erwies. 

Zu  derselben  Zeit  beschäftigte  sich  W.  Behrens  mit  der  Redak- 
tion seines  Werkes  „Hilfsbuch  zur  Ausführung  mikrosko- 
pischer Untersuchungen",  bei  dem  er  sich  als  Ziel  gesteckt 
hatte ,  die  „wichtigsten  Keaktionsmethoden  und  die  mikroskopische 
Untersuchung  der  Pflanzenstoffe"  in  erschöpfender  Darstellung  zu 
bringen. 

War  PouLSENS  Werk  ein  Führer  für  Anfänger,  so  sollte 
dieses  dem  Fach  manne  gleichzeitig  einen  vollkommenen  Einblick 
in  die  einschlägige  Literatur  bieten  und  dadurch  zu  einem  großen 
wertvollen  Hilfsbuche  werden. 

In  der  richtigen  Erkenntnis,  daß  die  Botaniker  bei  der  Unter- 
suchung der  Nahrungs-  und  Genußraittel  das  Hauptgewicht  auf  die 
Anatomie ,  die  Chemiker  aber  bloß  auf  die  in  den  Objekten  ge- 
fundenen Stoffe  legten ,  veranlaßte  jMolisch  zu  einer  Verbindung 
dieser  getrennten  Standpunkte  und  wies  so  der  Mikrochemie  auch 
die    gebührende    Rolle    in    der   Nahrungsmitteluntersuchung    zu.     Die 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      195 

liäutige  Bezugnalime  auf  seinen  „Grundriß  e  i  n  e  r  H  i  s  1 0  c  h  e  m  i  e 
der  pflanzlichen  Genuß  mittel"  gibt  den  besten  Beleg  dafür, 
wie  notwendig  dieser  Fortschritt  war. 

Somit  war  seit  Poulsen  und  W.  Behrens  etwa  ein  Dezennium 
verstrichen,  während  welchem  die  Mikrochemie  immer  neue  Gebiete 
eroberte,  und  die  Fülle  von  Schriften  botanisch-mikrochemischen  und 
mikroskopisch-technischen  Inhalts,  die  in  den  verschiedensten  Zeit 
Schriften  veröffentlicht  worden  waren,  hatten  das  Bedürfnis  gezeitigt, 
sie  zusammenfassend  und  kritisch  zu  behandeln.  In  wie  ausgezeich- 
neter Weise  Zimmermann  dieser  schwierigen  Aufgabe  gerecht  wurde, 
beweist  die  starke  Verbreitung  seines  Werkes  „Die  botanische 
Mikrotechnik"  und  die  große  Beliebtheit,  deren  es  sich  erfreut. 

Um  dieselbe  Zeit  baute  H.  Behrens  in  Verfolgung  der  durch 
K.  Haushofers  „Mikroskopische  Reaktionen"  gegebenen  Anregungen 
sein  großes  System  der  mikrochemischen  Analyse  aus,  um  es  1895 
bis  1897  in  seiner  „Anleitung  zur  mikrochemischen  Ana- 
lyse" zum  Abschluß  zu  bringen. 

Daß  bei  der  Fülle  von  Stoff,  der  zu  bewältigen  war,  mancher 
geringe  Fehler  unterlaufen  ist,  so  z.  B.  gewisse  Reaktionen  ohne  ge- 
nügende Überprüfung  mit  aufgenommen  worden  sind,  tut  der  Behrens- 
schen  Leistung  keinen  Eintrag  und  wird  dem  Verfasser  des  großen 
Werkes  den  Ruhm  nicht  nehmen,  der  Begründer  des  Systems 
der  mikrochemischen  Analyse  gewesen  zu  sein. 

Es  braucht  kaum  hervorgehoben  zu  werden ,  daß  Behrens  be- 
sonders bei  der  Analyse  der  wichtigsten  Faserstoffe  der  botanischen 
Mikrochemie  gerecht  wurde. 

In  kurzen  Zügen  ist  er  auf  den  technischen  Teil  seiner  Aus- 
führungen im  Jahre  1900  in  seinem  Büchlein  „Mikrochemische 
Technik"  zurückgekommen. 

Inzwischen  gab  W.  Behrens  auch  ein  sehr  beliebt  gewordenes 
Buch  heraus;  seine  „Tabellen  zum  Gebrauche  bei  mikro- 
skopischen Arbeiten",  das  dem  Tier-  wie  dem  Pflanzen- 
histologen  gleich  wert  geworden  ist. 

Kurz  sei  auch  auf  Dünnenbergers  „Chemische  R  e  a  g  e  n  - 
tien  und  Reaktionen"  verwiesen,  die  von  einem  Apotheker  für 
Apotheker  und  Chemiker  geschrieben,  durch  Aufnahme  auch  von 
botanisch- mikrochemischen  Reaktionen  Interesse  für  die  botanische 
Mikrochemie  gewinnen. 

Doch  speziell  mit  dieser  Wissenschaft  bat  sich  seit  Zimmermanns 
erwähntem  Buche  kein  größeres  Werk  beschäftigt. 

13* 


196      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Seit  dem  Erscheinungsjahre  der  „Mikrotechnik"  war  wiederum 
etwa  ein  Dezennium  verflossen  und  die  inzwischen  angehcäufte  Literatur 
hat  ein  neues  großartig  angelegtes  Werk  gezeitigt,  dessen  Verfasser, 
vornehmlich  Ärzte  und  Chemiker,  ihr  Hauptaugenmerk  natürlich  der 
Mikrotechnik  auf  menschen-  und  tier histologischem 
Gebiete  zuwandten,  die  aber,  um  den  Einseitigkeitsstandpunkt  zu 
vermeiden,  sich  auch  mit  Botanikern  in  Verbindung  setzten  und  so 
ein  Werk  zu  schaffen  verstanden,  das  in  der  mikroskopischen  Technik 
einzig  dasteht,  die  „Enzyklopädie  der  mikroskopischen  Technik"  von 
P.  Ehrlich,  R.  Krause,  M.  Moose,  H.  Rosin.  Berlin  u.  Wien  (Verlag 
ürban  u.  Schwarzenberg)   1903. 

Den  botanischen  Teil  übernahm  W.  Magnus,  Berlin. 

Der  schlagwortweisen  Anordnung  der  Enzyklopädie  entsprach 
es  natürlich ,  daß  auch  die  botanischen  Daten  in  derselben  Weise 
geliefert  wurden,  wodurch  sie  sich  wohl  harmonisch  in  den  Rahmen 
des  Ganzen  fügten ,  dabei  aber  sachgemäß  ihren  inneren  Zusammen- 
hang preisgaben. 

Da  nun  W.  Magnus'  Ausführungen  die  letzten  zusammenfassen- 
den Erörterungen  über  botanische  Mikrochemie  enthalten ,  so  ergibt 
sich  hier  eine  Lücke  —  es  fehlt  ein  Sammelreferat  für  botanische 
Mikrochemie  über  die  letzten  12  Jahre  — ,  das  zu  übernehmen, 
beziehungsweise  die  auszufüllen  ich  von  dem  Herausgeber  dieser 
Zeitschrift  gebeten  wurde.  Eine  derartige  Literaturzusammenstel- 
lung über  Arbeiten  auf  dem  Gebiete  der  botanischen  Mikrochemie 
wird  um  so  berechtigter  erscheinen,  als  diese  sehr  an  Bedeutung 
gewonnen  hat. 

Im  Jahre  1867  hat  sie  Wiesner  die  Mittel  in  die  Hand  gegeben, 
seine  „Einleitung  in  die  technische  Mikroskopie"  zu  schreiben.  Und 
wer  heute  die  im  Jahre  1900  erschienene  zweite,  gänzlich  umgearbeitete 
und  erweiterte  Auflage  seines  Werkes  „Die  Rohstoffe  des  Pflanzen- 
reiches" durchsieht  und  auf  die  Einleitung,  dann  gewisse  Kapitel  wie 
„Physikalisch -mikroskopisch -chemische  Charakteristik  des  Indigo", 
„Chemische  p]igenschaften  der  Stärke",  „Chemische  Charakteristik 
des  Holzes  und  der  andern  fibrösen  Pflanzengewebe",  „Chemische 
Eigenschaften  der  Fasern"  genauer  eingeht,  wird  von  der  Bedeutung 
der  botanischen  Mikrochemie  auch  auf  dem  Gebiet  der  Rohstoft'lehre 
und  ihrer  Bedeutung  überhaupt  überzeugt  sein.  —  J^ine  neue  Rich- 
tung der  Wissenschaft,  die  auch  hervorragend  durch  die  Mikrochemie 
gefordert  wurde,  ist  die  Biochemie,  wie  Czapeks  umfassendes  Werk 
beweist.    —    Man   wird   daher   mein  Beginnen,    ihre  Geschichte   seit 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      197 

Zimmermanns  botanischer  Mikrotechnik  zu  schreiben,  für  gerecht- 
fertigt halten. 

Mein  Sammelreferat  schließt  also  unmittelbar  an  Zimmermanns 
Mikrotechnik  an,  was  sich  auch  äußerlich  darin  ausprägen  soll,  daß 
ich  soweit  wie  möglich  die  gleiche  f^inteilung  verwendet  und  damit 
sowohl  in  sachlicher  wie  in  historischer  Beziehung  mit  meinem  Re- 
ferate eine  freilich  äußerst  unvollkommene  Ergänzung  dieses  Werkes 
mich  zu  liefern  bemüht  habe. 

Es  ist  selbstverständlich,  daß  ich  bei  der  Fülle  des  Stoffes  außer 
der  Bewältigung  der  Lektüre  einiger  Arbeiten  im  Originale  mich 
vornehmlich  an  Referate  und  hier  wieder  besonders  an  die  in  dieser 
Zeitschrift  erschienenen  gehalten  habe. 

Um  nun  bei  den  Besitzern  derselben  eine  rasche  Orientierung 
zu  ermöglichen ,  habe  ich  auch  auf  die  Stellen  in  dieser  Zeitschrift 
verwiesen,  indem  ich  den  Titel  der  Arbeit  in  der  Literaturzusammen- 
stellung nur  gekürzt  wiederholte.  In  jenen  Fällen  natürlich ,  wo 
eine  Besprechung  in  ihr  noch  nicht  erfolgt  ist,  und  in  jenen,  wo 
ich  mich  auf  Seitenzahlen  zu  beziehen  hatte,  wurde  die  Arbeit  aus- 
führlich zitiert. 

Nachdem  ich  so  die  Gedanken,  die  mich  bei  Verfassung  meines 
Referates  geleitet  haben,  und  den  Vorgang,  an  dem  ich  bei  der 
Niederschrift  festhielt,  erörtert  habe,  übergebe  ich  es  der  Öffentlich- 
keit und  bitte  die  geehrten  Fachgenossen  um  gütige  Nachsicht. 


I.   Abschnitt : 

Anorganische  Verbindungen. 

Sauerstoff  O.,. 

f. 

Als  empfindlichstes  bisher  bekanntes  Reagens  auf  Sauerstoff  gilt 
die  Engelmann  sehe  Bakterien- Methode. 

Fast  scheint  sie  aber  übertroffen  durch  den  von  Beijerinck  an- 
gegebenen Sauerstoffnachweis  mittels  Leuchtbakterien.  Zieht  man  in 
einer  Eprouvette  mit  chlornatriumhaltiger  Fleischbouillon  Leucht- 
bakterien, so  zeigt  sich,  daß  sie  nur  oben  leuchtet,  dort,  wo  die 
Bakterien  unmittelbar  mit  der  Luft  in  Berührung  kommen,  tiefer 
unten  verlischt  infolge  des  durch  Atmung  erzeugten  Sauerstoffmangels 


198      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII, '2. 

(las  Leuchten  der  geschüttelten  Eprouvette  alsbald.  Wirft  man  ein 
ZweigstUck  von  Fucus  in  die  Bouillon  und  wartet  im  Dunkeln  das 
Dunkelwerden  am  Eprouvettengrunde  ab,  so  genügt  nachher  das  Licht 
eines  Streichhölzchens ,  um  das  Fucusfragment  zum  Leuchten  im 
Dunkeln  zu  veranlassen.  Der  Moment  der  Beleuchtung  hat  genügt,. 
um  die  Kohlensäureassimilation  zu  induzieren.  Und  jene  Spur  ab- 
geschiedenen Sauerstoffes  reicht  aus,  um  die  Bakterien  zum  Leuchten 
zu  bringen.  —  Beijerinck  hat  diese  Methode  später  zur  Unter- 
suchung der  Chlorophyllfunktion  benutzt  und  Moliscu  sie  zum  Nach- 
weis postmortaler  Assimilation  bei  Lamium  album- Blättern  verwendet. 

Das  Problem  der  Assimilation  hat  auch  Kohl  die  alte  Bläschen- 
zählmethode in  eine  neue  mikroskopisch  verwendbare  umsetzen  lassen. 
Er  nennt  die  Modifikation:  die  vol  u  m  e  tr  is  ch  e  B  las  ch  en  z  ä  h  1- 
methode.  Eine  geeignete  Versuchsanstellung  gestattet  nämlich,  die 
Durchmesser  der  sich  bildenden  Bläschen  sofort  abzumessen ,  wo- 
durch die  Möglichkeit  auf  das  Volumen  zu  schließen,  unmittelbar 
gegeben  ist. 

Zumeist  findet  der  Sauerstoff  in  physiologischer  Beziehung  Er- 
wähnung. Molisch  und  Lidforss  beweisen  die  Notwendigkeit  von 
Sauerstoff  zum  Auskeimen  des  Pollens  und  Molisch,  daß  die  Pollen- 
schläuche nur  eine  ganz  bestimmte  0-Spannung  lieben  und  vor  dem 
Sauerstoff  der  Luft  fliehen  („negativer  Aerotropismus").  Im  übrigen 
vergleiche  man  die  übliclien  Lehrbücher. 

Schwefel  S. 

Nach  H.  Behrens  wird  der  Schwefel  als  Calciumsulfat,  als 
Caesiumalaun  und  als  Bleisulfat  nachgewiesen.  Es  wird  wohl  ein- 
mal notwendig  sein,  die  Verwendbarkeit  dieser  mikrochemischen 
Methoden  für  den  Nachweis  des  Elementes  in  der  Pflanze  darzufun. 

Bekanntlich  erscheint  der  Schwefel  in  elementarer  Form  bei 
den  Schwefelbakterien.  In  zusammenfassender  Darstellung  findet  man 
unsere  derzeitigen  Kenntnisse  dieser  Organismen  in  dem  ,, Handbuch 
der  technischen  Mykologie"  unter  dem  Titel  „Der  Kreislauf  des 
Schwefels"  von  W.  Omelianski  wiedergegeben.  —  Einen  neuen 
Schwefelorganismus  hat  Hinze  in  der  Thiophysa  volutans  entdeckt. 
Die  in  den  Zellen  der  Thiophysa  gelegenen  Körnchen  bestehen  ebenso 
wie  die  der  Beggiatoa  aus  Schwefel.  In  reinem  Glyzerin  kristal- 
lisiert der  Schwefel  allmählich  in  monuklinen  Kristallen  aus.  In 
entschwefelten  Thiophysen  scheinen  Schwefelbildner  sichtbar  zu  wer- 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrocheraie.      199 

den.  Auch  bei  OsciUarien  konnte  Hinze  einen  sehr  beachtenswerten 
Befund  verzeichnen,  der  auf  die  „Gasvakuolenfrage"  ein  Streiflicht 
wirft.  Hinze  hat  nämlich  bei  gewissen  OsciUarien  diese  ,,Gasvaku- 
olen"  als  Schwefel  erkannt,  den  er  in  reinem  Glyzerin  zur  Kristal- 
lisation brachte. 

P"'ärbung  des  Schwefels.  Gibt  man  nach  A.  Fischer  ein 
Präparat  von  Chromatium  ohne  vorherige  Entschwefelung  und  Fär- 
bung in  Kanadabalsam  oder  Damarlack,  so  sind  die  Chromatien  nach 
10  Minuten  entfärbt  und  statt  des  Schwefels  sind  schön  rotgefärbte 
Kugeln  und  Körnchen  da.  Bei  Betrachtung  in  Luft  war  Schwefel 
und  Farbstoif  getrennt  vorhanden. 

GoLA  verwendet  die  Rotfärbung,  die  Schwefel  mit  Nitroprussid- 
natrium  gibt,  auch  fiir  mikrochemische  Zwecke.  Besonders  junge 
Triebe  von  Asparagus  sollen  fiir  derartige  Untersuchungen  sehr  ge- 
eignet sein. 


Salzsäure  HCl  und  deren  Salze. 

Die  gebräuchlichsten  Reaktionen  auf  Chlor  führen  zu  den  Fällungen 
als  Thallo-  und  Silberchlorid  und  Thallo-  und  Kaliumchloroplatinat.  Davon 
sind  in  die  botanische  IMikrotechnik  bis  jetzt  die  ersten  zwei  mit  Erfolg 
eingeführt  worden.  In  neuerer  Zeit  hat  Molisch  die  Milchsäfte  mit  den 
gleichen  Reagentien  auf  Chlorgehalt  untersucht  und  sie  je  nach  den  Ver- 
suchsobjekten sehr  verschieden  reich  an  diesem  Stoffe  gefunden.  Chlor- 
kaliumkristalle  erzielte  Monteverde. 


Jod-J. 

Durch  eigenartige  Zellen  von  Bonnemaisonia  asparagoides  wird  nacli 
GoLENKiN  freies  Jod  oder  eine  stärkebläuende  Jodverbindung  ausgeschieden  ; 
diese  Zellen  enthalten  eine  große  stark  lichtbrechende  Vakuole,  welche 
nach  ausgeführten  Reaktionen  weder  Gerbstoffe,  noch  fettartige  Stoffe  ent- 
hält. Hingegen  färben  sich  die  Vakuolen  mit  C^anin  intensiv  braun.  Dieses 
bildet  mit  Jodlösungen  einen  braunen  in  Wasser  ziemlich  schwer  löslichen, 
unbeständigen  Niederschlag.  Golenkin  glaubt  damit  ein  für  botanische 
Zwecke  sehr  gut  verwertbares  mikrochemisches  Reagens  auf  Jod  angegeben 
zu  haben.  Ich  kenne  nun  zwar  diese  Reaktion  weiter  nicht,  weiß  auch 
nichts  von  ihrer  Empfindlichkeitsgrenze,  möchte  aber  doch  denken,  daß, 
so  lange  Reaktionen,  die  auf  Bildung  von  Jodaraylum,  Thallo-,  Silber-, 
Pallado-,  Mercurijodid  und  Kaliumjodoplatinatbildung  beruhen,  existieren, 
man  niclit  zur  Jodcyanin('?)bildung  Zuflucht  nehmen  sollte,  um  so  mehr  als 
in  der  Mikrotechnik  (man  vgl.  das  Kapitel:  „Verkorkte  Membranen")  dem 
zur  Reaktion  verwendeten  Cyanin  ja  noch  eine  Unzahl  anderer  Funktionen 
zukommen. 


200      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 


Schwefelsäure  SO., (OH),  und  deren  Salze. 

Zum  Nachweise  der  Schwefelsäure  fehlt  es  auch  heute  noch  an  einer 
zuverlässig-en  Methode.  Über  den  Nachweis  mit  Baryumchlorid  und  Stron- 
tiumnitrat und  als  Kaliumsulfat  und  Natriumsulfat,  vgl.  Z.  M.  ^,  p.  48. 

Belzung  und  Poirault  haben  sie  im  ausgepreßten  Safte  von  Angio- 
pteris  evecta  nachgewiesen. 


Salpetersäure  NO, OH,  salpeterige  Säure  NO  OH  und  deren 

Salze. 

Während  der  Einwand,  den  man  gegen  Molisch s  Dipheny- 
laminschwefelsäure  -  Probe  machen  könnte,  die  Nitrite  würden  mit 
ihr  gleichzeitig  angezeigt ,  für  die  Pflanze  wegen  des  vollstän- 
digen Fehlens  dieser  letzteren  in  ihr  kaum  in  Betracht  kommt,  ist 
ein  zweiter,  daß  in  verholzten  Membranen  die  Nitratprobe  auch 
bei  großer  Menge  Nitrates  ausbleiben  kann,  unangenehmer.  Ellram 
hat  sich  nun  dem  mikrochemischen  Nachweise  der  Nitrate  in 
Pflanzen  gewidmet,  um  speziell  die  wertvolle  Dipheuylaminprobe 
nach  dieser  Ptichtung  zu  überprüfen.  Wie  bekannt,  hat  Arnaud 
und  Pade  salzsaures  Cinchouamiu  (C\g  H.-,^N.^O)  als  neues  Nitrat- 
reagens empfohlen.  Für  den  mikrochemischen  Nachweis  von  Nitraten 
in  Pflanzen  hat  nach  Ellram  s  Kontrollversucheu  das  neue  Reagens 
gar  keinen   Wert. 

„Die  von  Molisch  empfohlene  Diphenylaminschwefelsäure  ist  nicht 
nur  das  empfindlichste  Reagens  auf  Nitrate  überhaupt,  sondern  auch  in 
Verbindung  mit  Ellram  s  Ligninreagens  das  nach  allen  Richtungen  hin 
am  meisten  genügende  und  unter  allen  Umständen  praktisch  brauchbarste 
Reagens  für  den  mikrochemischen  Nachweis  bei  pflanzenphysiologischen 
Forschungen.     Alle  andern  Methoden  sind  minderwertig. 

Lösungen  von  «-Naphthol,  /S-Naphthol  und  Cinchonamin  in  konzen- 
trierter Schwefelsäure  sind  recht  empfindliche  Reagentien  auf  Nitrate  und 
Salpetersäure,  lassen  sich  aber  bei  phytophysiologischen  Untersuchungen 
kaum  mit  Nutzen  verwerten. 

Außer  in  verholzten  Geweben  ist  bei  pflanzenphysiologischen  Unter- 
suchungen mit  Diphenylaminschwefelsäure  eine  eventuelle  Beeinträchtigung 
der  Oxydation  des  Diphenylamins  vermittels  vorhandener  Nitrate  (Salpeter- 
säure) durch  reduzierende  Wirkung  der  in  den  betreffenden  Gewebearten 
vorhandenen  oder  etwa  sich  bildenden  Stoffe  entweder  ausgeschlossen 
oder  für  die  Beobachtung  der  Reaktion  selbst  praktisch  genommen  un- 
wesentlich. 


^)  Z.  M.  =  Zimmermanns  Mikrotechnik. 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      201 

In  vollkommen  verholzten  Geweben  typischer  Holzgewächse  können 
sich  Nitrate  befinden,  die  sich  dann  mittels  der  Diphenylaminschwefelsäure 
nachweisen  lassen  nach  vorgenommener  Ligninreaktion  mit  dem  Diphe- 
nylaminligninreagens."  ^ 

Ein  neues  Reagens  auf  Salpetersäure  verdanken  wir  R.  Brauns. 
Behandelt  man  einen  Tropfen  der  Lösung,  in  der  man  ein  Nitrat  ver- 
mutet, mit  einem  Tropfen  Baryumclilorid  und  erwärmt  man  auf  dem 
Wasserbade,  so  scheiden  sich  aus  der  nitratlialtigen  Lösung  farblose, 
scharf  ausgebildete  reguläre  Oktaeder  von  Baryumnitrat  aus,  die  meist 
auf  einer  Oktaedertiäche  liegen,  w^eshalb  sie  dreiseitige  oder  sechs- 
seitige Umrisse  zeigen. 

Ob  sich  diese  Reaktion  auch  für  phytophysiologische  Versuche 
wird  verwerten  lassen,  wird  die  Zukunft  zeigen. 

Über  andere  Arten  des  Nachweises  vergleiche  H.  Behrens, 
A.  z.  m.  A."-  p.  118 — 115.  Es  ist  selbstverständlich,  daß  alle  von 
H.  Behrens  angegebenen  Methoden  in  ihrer  Verwendbarkeit  für  die 
Pflanzen  erst  überprüft  werden  müssen.  Bisher  bleibt  nach  Ellram  s 
Befunden  die  Diphenylaminschwefelsäure  das  zweckmäßigste  Nitrat- 
reagens. Es  hat  daher  auch  in  allen  Handbüchern  Aufnahme  ge- 
funden. 

Von  neueren  Experimenten  mit  dieser  Probe  möchte  ich  das 
negative  Resultat  erwähnen,  das  Molisch  bei  Milchsäften  zumeist  er- 
hielt. Bezüglich  Auftretens  von  Kaliumnitrat  in  kristallisierter  Form 
vergleiche  man  Zimjiermanns  Mikrotechnik  p.  50  und  das  im  Kapitel 
„Kalium"   darüber  Erwähnte. 


Phosphorsäure  PO  (OH)^  und  deren  Salze. 

Zum  mikrochemischen  Nachweis  von  Phosphorsäure  werden  be- 
sonders Salpetersäure  mit  molybdänsaurem  Ammon  und  Magnesium- 
sulfat mit  Chlorammonium  verwendet.  Beide  haben  sich  auch  in  der 
botanischen  Mikrochemie  bewälu't,  freilich  fehlt  beiden  der  Vorzug 
der  lokalisierten  Fällung  des  gesuchten  Stoffes. 

Diesem  Mangel  hofften  nun  Lilienpeld  imd  Monti  mit  molyb- 
dänsaurem Ammoniak  und  Pyrogallol  abzuhelfen.  Jedoch  haben 
Raciborskis  kritische  Nachprüfungen    gezeigt,    daß  Lilienpelds  und 


^)  Der  unter  Anführungszeichen  gestellte  Absatz  ist  entnommen  dem 
Referate  von  E.  Roth  (Halle)  im  Bot.  Zentr.  Bd.  LXVII,  1896,  p.  74. 
-)  A.  z.  m.  A.  =  Anleitung  zur  mikrochemischen  Analyse. 


202      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

MoNTis  angebliche  Farbenreaktion  auf  Phosphor  mit  dem  Phosphor 
in  keinem  Zusammenliange  steht,  und  somit  aus  der  mikrochemischen 
Literatur  gestrichen  werden  muß. 

Kurze  Zeit  nach  Raciborskis  kritischem  Referate  versuchte 
PoLLACci  eine  neue  Farbenreaktion  auf  Phosphorsäure  für  Pflanzen- 
untersuchungen einzuführen.  Er  bringt  Schnitte  von  frischem  oder 
Alkohol-Material  unter  Benutzung  von  mit  Platinspitzen  versehenen 
Pinzetten  in  eine  Lösung  von  molybdänsaurem  Ammoniak ,  wäscht 
dann  wiederholt  mit  neutralem,  oder  besser  mit  durch  Salpetersäure 
angesäuertem  destilliertem  Wasser  aus  und  überträgt  scliließlich  in 
Zinnchlorür.  Bei  Anwesenheit  von  Phosphor  entsteht  dann  eine 
dunkelblaue  bis  graue  Färbung,  die  nach  Ansicht  Pollaccis  auf 
der  Bildung  von  Molybdänsesquioxyd  (Mo.,  O3)  beruht.  Bei  Ge- 
weben ,  die  sehr  reich  an  Phosphor  sind ,  muß  eine  verdünnte  Lö- 
sung von  Zinnchlorür  augewendet  werden.  —  Die  so  erhaltenen  Prä- 
parate sollen  ihre  Färbung  in  Glyzerin  oder  auch  in  Wasser  sehr 
gut  behalten,  während  bei  den  nach  der  Methode  von  Lilienfeld  und 
MoNTi  dargestellten  Präparaten  eine  Konservierung  in  Glyzerin  nicht 
möglich  ist.  Außerdem  soll  Pollaccis  Reaktion  empfindlicher  sein. 
Man  könne  mit  ihr  beweisen,  daß  in  den  reproduktionsfähigen  Organen 
und  hier  wieder  in  den  Chromatinkörnern  des  Kerns  der  Hauptsitz 
der  Phosphorsäure  sei. 

Auf  eine  Bemerkung  Fioris  hin,  daß  das  PoLLACcisclie  Reagens 
(Molybdänsäure  und  Zinnchlorür)  in  gerbstofthaltigen  Zellen,  speziell 
in  dem  „sistema  albuminosa  tannico"  nicht  zu  verwenden  sei,  führt 
PoLLAcci  in  einer  späteren  Mitteilung  den  Beweis,  daß  es  sich  in 
diesem  Falle  um  vollkommenen  Mangel  an  Phosphor  in  den  betref- 
fenden Zellpartien  gehandelt  habe. 

Als  eine  Art  Abschluß  kann  man  nach  dieser  Richtung  seine 
Besprechung  der  Methoden  des  mikrochemischen  Nachweises  von 
Phosphor  in  Pflanzengeweben  ansehen. 

Daß  es  an  Gegnern  nicht  gefehlt  hat,  ist  selbstverständlich, 
nachdem  beispielsweise  Xanthoproteinsäure  mit  Zinnchlorür  allein  in 
ähnlicher  Weise  reagiert  wie  Phosphorsäure.  Auch  sollen  sich 
Lecithin-  und  Nukleinphosphor  der  Reaktion  entziehen.  Pollacci  hält 
gegen  alle  Einwände  seine  Probe  aufrecht.  Er  gibt  ein  genaues 
Rezept  an,  mit  dem  man  besonders  günstige  Resultate  erzielt,  weist 
auf  die  Wichtigkeit  gründlichen  Auswaschens  nach  Einwirkung  des 
Reagens  hin,  verwirft  den  Einwand  von  der  Blaufärbung  der  Xantho- 
proteinsäure mit  Zinnchlorür  auf  Grund   neuerlicher  Untersuchungen, 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      203 

redet  der  Verwendung  des  Zinnchloriir  das  Wort,  —  „man  kann  es 
nicht  nur,  soll  es  beibehalten,  da  dadurch  die  Empfindlichkeit  der 
Reaktion  ganz  außerordentlich  gesteigert  werde'^  —  kurz:  Pollaccis 
Reaktion  ist  gut  und  bleibt  verwendbar,  solange  sich  keine  neuen 
Gegner  finden;  sie  lautet:  Molybdänreagens,  dann  Waschen  in  sal- 
petersaurem Wasser  und  darauf  Behandlung  mit  Zinnchlorür. 

Auf  einem  ähnlichen  Prinzipe  beruht  MacCallums  Blaugrün- 
färbung  der  phosphorhaltigen  Zellen.  Nach  seinem  Vorschlage  wird 
der  Phosphor  aus  in  Alkohol  gehärtetem  Material  mit  salpetersaurem 
Molybdänammon  gefällt  und  in  einprozentiges  Phenylhydrazinhydro- 
chlorid  übertragen.  Die  phosphorhaltigen  Zellen  werden  alsdann 
bläulichgrün.  Bei  Cyanophyceen  und  bei  Hefezellen  wurde  so  der 
Phosphor  nachgewiesen. 

Es  scheint  nun  auffällig ,  daß  Iwanoff  nur  die  in  Z.  M.  ange- 
gebenen Reaktionen  genau  in  ihrer  Anwendbarkeit  iÜr  die  Pflanzen- 
untersuchung überprüft  hat.  Er  findet,  daß  sich  beide  in  ergänzender 
Art  verwenden  lassen,  indem  in  Fällen,  wo  mit  dem  Molybdat  Mohl, 
mit  der  Magnesiummischung  keine  Fällung  auftritt,  auf  organische 
Phosphorverbindungen  geschlossen  werden  kann.  Gibt  irgendwo 
Magnesiumsulfat  und  Chlorammonium  weder  die  schönen  Tripelphos- 
phatkristalle ,  noch  elliptische  Körner ,  so  sei  dies  ein  Hinweis  auf 
eine  Bindung  von  Phosphor  an  Eiweiß. 

Die  Mehrdeutigkeit  beider  Reaktionen  käme  bei  Pflanzen  nicht 
in  Betracht,  da  die  Möglichkeit  einer  Arsenausfällung  für  Ptlanzen 
nicht  zu  fürchten  ist,  und  dort,  wo  gewisse  organische  Verbindungen 
die  Molybdänprobe  unmöglich  machen,  die  Phosphorsäure  durch  die 
Magnesiummischung  immer  noch  nachgewiesen  werden  könne. 

Vorkommen.  Belzung  und  Poirault  weisen  Phosphorsäure  im 
ausgepreßten  Safte  der  Angiopteris  evecta  nach.  Die  Fällung  als  Magne- 
siumammoniiunpliosphat  war  wegen  der  gummiartigen  Substanzen  kugel- 
förmig; Belzuxg  fand  in  kaktusartigen  Euphorbien  Culciummalophosphat. 
Zijimerjiann  hat  die  Calciumphosphatausscheidungen  in  lebenden  Zellen 
genauer  untersucht.  Aus  Hansens  und  Leitgebs  Untersuchungen  über 
Sphärokristalle  hatte  sich  ergeben,  daß  die  in  Alkoholmaterial  auftreten- 
den Spliärite  häufig  aus  Calciumphosphat  bestehen.  In  lebenden  Pflanzen 
wurden  nur  von  Nobbe,  Hänlein  und  Councler  derartige  Sphärite  nach- 
gewiesen. Zimmermann  hat  solche  Calciumphosphatsphärite  bei  einer  nicht 
näher  bestimmten  Cyperus-Art  gefunden.  Um  einen  zentralen  organischen 
Teü  bildet  sich  hier  der  Sphärit.  Der  Nachweis  gelang  mit  molybdän- 
saurem Ammoniak  in  salpetersaurer  Lösung,  durch  Lösung  in  öprozentiger 
Essigsäure  und  durch  Erzeugung  von  Magnesiumamraoniumphosphat.  — 
Die  Lilienfeld  sehe   Reaktion   erscheint   vermieden.   —   Re  berichtet   von 


204      Richter:   Die  Fortseliritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Sphäriten  bei  Agave  americana,  die  Calcium  und  Phosphor  mit  organischer 
Substanz  enthalten. 

Heinricher  findet,  daß  beiden  Arten  von  Lathraea,  die  er  unter- 
suchte, das  reichliche  Vorkommen  von  Phosphorverbindungen  gemeinsam 
sei,  die  in  Alkoholmaterial  in  der  Form  kugeliger  Ausscheidungen  von 
wechselnder  Größe  ausfallen.  Sie  sind  im  wesentlichen  lokalisiert  im  unteren 
Teile  des  Tracheidenkopfes.  Die  Ausscheidungen  sind  organischer  Natur, 
da  sie  beim  Glühen  einen  kohligen,  kugelförmigen  Rückstand  lassen.  Magne- 
sium fehlt  ihnen  wahrscheinlich  und  Calcium  sicher,  der  Nachweis  erfolgte 
nach  Z.  M. ;  für  die  Molybdänprobe  wurde  erwärmt.  Auch  Molisch  ver- 
wendete bloß  diese  Methoden  des  Phosphorsäure-Nachweises.  Nach  seinen 
Befunden  ist  der  Phosphor  in  Milchsäften  in  organischer  Bindung  vorhanden. 

Färbung  der  Calciumphosphatsphärite  in  Pflan- 
zen. Bringt  man  Calciumphospliatsphärite  in  Farbstofflösungen, 
so  speichern  die  im  Inneren  eingeschlossenen  Schleimkerne  nach 
H.  Fischer  den  Farbstoff. 

Arsen  As. 

Indem  ich  auf  den  Nachweis  von  Arsen  und  Arsensäure  in  H.  Behrens' 
A.  z,  m.  A.  verweise,  mache  ich  noch  auf  die  physiologische  Art  des 
Arsennachweises  aufmerksam,  die  Plato  und  Guth  mit  Penicillium  brevi- 
caule  bei  22  bis  30**  C.  gelang.  Das  Penicillium  wuchs  auf  Agarplatten 
mit  einem  Zusatz  von  einem  Teil  Arsen  zu  50000  Teilen  Agar.  Bei  seiner 
Entwicklung  erzeugte  der  Pilz  einen  intensiven  Geruch  nach  Knoblauch, 
der  auf  das  vorhandene  Arsen  deutet. 

Kohlenstoff- C. 

Ein  ausgezeichnetes  Reagens  auf  reinen  Kohlenstoff  verdanken  wir 
Wiesner,  dem  es  gelungen  ist,  mit  Hilfe  der  von  Crüger  in  die  Mikro- 
chemie eingeführten  „Chrom-Schwefelsäure"  die  verschiedenen  Formen  der 
Kohle  voneinander  zu  unterscheiden  und  das  Lungenpigment  als  Rußkohle 
zu  erkennen. 

Kohlensäure  CO.. 

Nestler  weist  mit  der  bekannten  mikrochemischen  Methode,  Zusatz 
von  Salzsäure,  in  dem  Sekretwasser -Rückstand  von  Phaseolusblättern 
kohlensaures  Kali  nach. 

Rechinger  konnte  das  Vorkommen  von  Calciumkarbonat  in  Gesneria- 
ceenhaaren  dartun. 

Kieselsäure  SiO.,  und  Silikate. 

Glühen,  Schwefelsäurebehandlung,  Miliarakis  Verfahren,  Lösung 
in    Flußsäure    und    Bildung    von    Kieselfluornatriumkristallen    stellen 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     205 

heute  noch  als  vorzügliche  Methoden  zum  Kieselsäurenachweis  im 
Gebrauche.  Ob  auch  die  Bildung  von  Rubidiumsilicomolybdat  sich 
für  botanische  Zwecke  eignen  wird,  muß  erst  die  Zukunft  lehren. 

In  neuerer  Zeit  hat  sich  Küster  eingehend  mit  dem  Nachweise 
der  Kieselsäure  in  der  Pflanze  beschäftigt  und  gefunden,  daß  Kiesel- 
körper und  verkieselte  Membranen  durch  Aufhellung  mit  Benzol, 
Chloralhydrat  und  Phenol  nachgewiesen  werden  können.  Besonders 
zuverlässig  ist  der  entstehende  rötliche  oder  bläuliche  Glanz.  Am 
geeignetsten  erwies  sich  bei  dieser  Probe  zunächst  das  Phenol.  Bei 
seinen  späteren  Studien  über  Chrysobalaneen  zog  er  auch  das  Ver- 
halten der  Kieselablagerungen  dieser  Pflanzen  gegen  Farbstofl"e  mit 
in  Betracht  und  fand,  daß  gewisse  Formen  sich  analog  wie  Tabaschir 
verhalten.  Sie  speichern  Gentianaviolett  und  Methylenblau.  KtJSTER 
erwähnt  übrigens  auch  eine  interessante  Beobachtung  Ajibronns  über 
das  Braunwerdeu  von  Tabaschir  in  blauen  Jodlösungen  von  Chloro- 
form oder  Schwefelkohlenstoft".  Chrysobalaneenkieselkörper  zeigen 
diese  Reaktion  nicht. 

Es  erübrigt  nur  noch  über  bekannt  gewordene  neue  Vorkommen  zu 
referieren.  Zimmermann  teilt  einen  Fund  in  den  Blättern  von  Cyperus 
alternifolius  mit.  Hier  finden  sich  eigenartige,  meist  halbkugehg  in  den 
Innenraum  der  Zellen  hineinragende  Verdickungen,  bei  deren  näherer 
Untersuchung  sich  ergab,  daß  sie  mit  Kieselsäure  durchsetzte  Membran- 
verdickungen darstellen,  bei  denen  die  Kieselsäure  in  einem  Zellulosegerüste 
sitzt,  was  mit  Flußsäure  nachgewiesen  werden  kann.  Rechinger  erwähnt 
Kieselsäure  in  den  Haaren  der  Gesneriaceen.  Beachtenswert  ist  auch  der 
Befund  Bargaglis  von  intrazellulären  Kieselsäureabsonderungen. 

Kalium  K. 

Die  gebräuchliche  Reaktion  mittels  Platinchlorid  hat  sich  auch  bei 
den  neueren  Untersuchungen  Czapeks  bewährt.  Bei  Wurzelausschei- 
dungen ist  es  nach  Czapek  am  besten,  die  zu  prüfende  Flüssigkeit  lang- 
sam verdunsten  zu  lassen,  dann  einen  Tropfen  des  Reagens  zuzusetzen 
und  das  Deckglas  aufzulegen.  Auch  Nestler  bediente  sich  dieser  Reak- 
tion. Nach  seinen  Beobachtungen  erscheint  es  zweifellos,  daß  im  Sekret- 
wasser der  Bohnenblätter  kohlensaures  Kali  vorhanden  ist,  Kaliumnitrat 
beobachtete  Monteverde.  Ebenso  gelang  ihm  die  Erzeugung  von  Chlor- 
kaliumkristallen. Ähnlich  erzielte  Belzung  tafel-  und  stäbchenförmige 
Kaliumnitratkristalle  bei  Cucurbita  Pepo  intrazellulär  in  Glyzerinpräpa- 
raten. Im  übrigen  wirkt  Salpeter  in  größerer  Konzentration  als  Gift.  Nach 
LiDFORSS  verhindert  er  die  Pollenschlauchbildung.  Man  vergleiche  das 
Kapitel  „Giftwirkung  der  neutralen  Salze  der  Alkalimetalle  in  0.  Loews 
,Ein  natürliches  System  der  Giftwirkungen'",  p.  113—116.  Beachtenswert 
erscheint   auch  die  Beobachtung   Retgers,  wonach   sich  Kalisalpeter  aus 


206      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Milcrocheinie.     XXU,  2. 

Nigrosin-haltigen  Lösungen  in  violetten,  stark  dichroitischen  Säulen  ab- 
scheidet, während  Kaliumsulfat  mit  Bismarckbraun  faserige,  stark  dichroi- 
tische  Kristalle  liefert. 

Natrium  Na. 

Mit  dem  Nachweise  in  der  Pflanze  hat  man  sich  seit  1892  meines 
Wissens  nicht  beschäftigt,  es  bleiben  daher  die  Proben  mit  Uran^'lmagnesium- 
acetat  und  Uranylacetat  vorläufig  die  verwendbarsten.  Nach  H.  Behrens 
werden  von  ihnen  noch  0'8  beziehungsweise  04  Mikromilligramm  Natrium 
angezeigt. 


'ö' 


Ammonium  NH(. 

Bezüglich  der  Reaktionen  vgl.  Z.  M.,  p.  55 — 56. 

Nach  Retgers  Untersuchungen  nimmt  Ammoniumnitrat  Indulin  und 
Nigrosin  auf,  was  für  die  Erkennung  desselben  unter  andern  Kristallen 
von  Bedeutung  sein  kann.  — •  Vorkommen.  Debski  glaubt  nach  dem 
Verhalten  des  Zellsaftes  der  Marantaceen  gegen  Weinsäure  auf  NH^  oder 
eines  seiner  Alkyl -Substitutionsprodukte  als  die  zu  der  vermutlich  vor- 
handenen Äpfelsäure  gehörige  Base  schließen  zu  sollen. 

Calcium  Ca. 

Die  gebräuchlichsten  Fällungsmethoden  der  Mikrochemie  zum 
Nachweise  des  Calciums  sind  die,  welche  zur  Bildung  von  Calcium- 
sulfat,  Calciumtartrat,  Kalium-Calciumferrocyaiiid  und  Calciumoxalat 
führen.  Davon  erscheint  die  Schwefelsäureprobe  am  geeignetsten 
auch  für  mikrochemisch-botanische  Zwecke.  Zum  Nachweise  des  Cal- 
ciums in  Protei'nkörnerii  benutzt  Brien  außer  Schwefelsäure  eine 
Lösung  von  oxalsaurem  Ammon  und  Chlorammonium. 

Molisch  wies  mit  Schwefelsäure  geradezu  Unmassen  von  Cal- 
cium im  Milchsafte  von  Euphorbia  Lathyris  nach.  Bei  anderen  Mileli- 
säften  war  ein  starkes  Schwanken  bezüglich  der  Calciummengen  zu 
bemerken. 

Das  Calcium  kommt  in  der  Pflanze  als  Oxalat,  Karbonat,  Sul- 
fat, Tartrat  usw.  vor.  Ich  werde  die  seit  1892  bekannt  gewordenen 
Vorkommen  von  Calciumverbindungen  in  der  Pflanze  in  der  Pieihen- 
folge  von  Z.  M.  besprechen. 

a)  Calciumoxalat  (COO).jCa.  —  Buscalioxi  hat  die  Calciumoxalat- 
drusen  einer  eingehenden  Untersuchung  unterzogen.  Den  Körper  ihres  in- 
neren Hohlraumes  hält  er  für  harzartig.  Mit  dem  Reagens  von  Unverdorben- 
Franchimont  kann  man  einen  starken  grünblauen  Niederschlag  erzeugen, 
dessen  Analyse  einen  Pektinstoff  oder  einen  verwandten  Körper,  jedenfalls 
aber  nicht  Oxalsäure  anzeigt.    Der  neue  Körper  wurde  „Corpo  mucilaginoso 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortscliritte  der  botanisclien  Mikrocliemic.      207 

delle  druse"  genannt.  Wittlin  beliandelte  aiisführlicli  die  Bildung  der 
Kalkox;datt;ischen.  Krasser  gab  die  Mittel  an,  wie  man  im  Aleuron  leicht 
die  Calciumoxalatdrusen  erkennen  könne.  Es  eignet  sich  das  phosphor- 
saiire  Xatron  dazu  wohl  am  besten.  In  den  sogenannten  „Ölplastiden" 
fand  LiDFORSS  Calciumoxalatkristalle. 

Ein  P"'all  des  Vorkommens  von  gelöstem  Calciumoxalat  wird  von 
Belzung  gemeldet.  Er  fand  nämlich  bei  den  Samen  von  Lupinus  albus 
Calciumoxalat,  und  zwar  wahrscheinlich  in  loser  Bindung  mit  Oxalsäure 
und  Zitronensäure.  Namentlich  diese  konnte  er  in  großer  Menge  aus  den 
genannten  Samen  isolieren.  Das  Calciumoxalat  fällt  beim  Erhitzen  aus  dem 
eingedickten  Extrakte  der  Samen  in  tetraedrischen  Kristallen  aus. 

Ich  schließe  die  Aufzählung  der  Calciuraoxalatvorkommen  mit  dem 
Hinweise  auf  Wehmers  Arbeit,  in  der  er  die  Calciumoxalatnatur  vieler 
Raphiden  in  Frage  stellt  und  auf  die  Möglichkeit  vom  Vorhandensein  von 
Kalkcitratraphiden  aufmerksam  macht. 

b)  Calcium  kar bona t  COgCa.  —  Bekanntlich  erscheint  der  kohlen- 
saure Kalk  gewöhnlich  als  Merabraninkrustation.  Fälle  dieser  Art  sind 
neuerlich  bekannt  geworden.  Rechixger  beschrieb  sie  bei  Haaren  der 
Gesneriaceen  und  Mangin  bei  den  Fruchthyphen  und  Sporangien  der 
Mucorineen.  Yexdo  gab  zur  Entkalkung  des  Korallineenthallus  die  Pere- 
NYische  Flüssigkeit  an. 

c)  Calciumsulfa t  SO^Ca.  —  Nach  Hansen  kommt  bei  Angiopteris 
Gips  in  Form  von  großen  Kristallen  des  monoklinen  Systems  vor.  Schon 
Monteverde  hatte  die  Richtigkeit  dieser  Angaben  bestritten  und  die  be- 
treffenden Kristalle  für  Calciumoxalat  erklärt.  Auch  Belzung  und  Poi- 
RAULT  kamen  zu  diesem  Resultate. 

Belzung  beobachtete  übrigens  die  Bildung  von  Gipskristallen  ge- 
legentlich seiner  Studien  über  den  Asparaginnachweis ,  wenn  er  die 
Schnitte  in  vollkommen  reines  Glyzerin  gab.  Die  entstandenen  Kristalle 
sind  büschel-  oder  pinsel  artig. 

d)  Caiciumphosphat  (P0.2).2(0,2Ca)3?  —  Re  erwähnt  Sphärite  bei 
Agave  americana , "  die  Kalk,  Phosphor  und  organische  Substanzen  ent- 
halten. Zimmermann  beobachtete  Calciumphosphatausscheidungen  in  leben- 
den Zellen.  Zur  Prüfung  auf  Calcium  wurde  Schwefelsäure  verwendet. 
Ließ  man  vor  Zusatz  der  Schwefelsäure  öprozentige  Essigsäure  auf  die 
Präparate  einwirken,  so  entstanden  weniger  Gipsnadeln.  Überdies  wurde 
lOprozentiges  Ammoniumoxalat  mit  lOprozentiger  Essigsäure  zur  Reaktion 
verwendet.  Werden  die  Schnitte  in  dieser  Lösung  erhitzt,  so  werden  die 
Sphärokristalle  in  Klumpen  winziger  Kristalle  verwandelt,  die  in  5pro- 
zentiger  Essigsäure  gar  nicht,  in  Salzsäure  dagegen  sehr  leicht  löslich 
sind.  In  einer  Lösung  von  O'Aprozentigem  Ammoniumoxalat  und  einpro- 
zentiger  Essigsäure  trat  auch  ohne  Erwärmung  die  gleiche  Erscheinung 
nach  Verlauf  einer  halben  Stunde  auf. 

Bezüglich  der  Möglichkeit  der  Farbstoffaufnahme  durch  die  von  den 
Sphäriten  eingeschlossenen  Schleimkerne  vergleiche  das  Kapitel  „Phosphor- 
säure" und  IL  Fischers  einschlägige  Arbeit. 

e)  Calci  umpek  tat.  Mangin  und  Wille  äußerten  die  Ansicht,  daß 
die  Mittellamelle   aus   Calciumpektat   bestehe.     Jüngst    hat   Devaux  Beob- 


208      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

achtungen  gemacht,  die  ihn  allerdings  sehr  zur  Negierung  dieser  Maxgix- 
WiLLE  sehen  Ansicht  aufmuntern  konnten.  (Man  vergleiche  das  Kapitel 
„Pektinstoffe",  Abschnitt  „Mittellamelle".) 

f)  Calcinmmalat  und  -malophosphat.  —  Belzüng  und  Poi- 
RAULT  fanden  bei  Angiopteris  evecta  neutralen  äpfelsauren  Kalk.  Bei 
zweimonatlichem  Stehen  des  Saftes  entstanden  Sphärite  von  C'alcium  mit 
einer  noch  unbekannten  Säure.  Belzung  wies  Calciummalo-  und  Calcium- 
phosphatsphärite  in  kaktusartigen  Euphorbien  nach.  Über  die  Unterschei- 
dung  beider  vgl.  das  Kapitel  „Apfelsäure". 

g)  Calciumcitrat.  —  Wehmer  beobachtete  bei  zwei  Pilzen  Bil- 
dung von  Calciumcitratraphiden  und  konnte  Calciumcitrat  auch  künst- 
lich zur  Raphidenbildung  veranlassen.  Er  vermutet  deshalb,  daß  das, 
was  man  als  Calciumoxalatraphiden  beschrieben  hat,  sich  oft  als  Raphiden 
der  Zitronensäure  herausstellen  dürfte.  Vgl.  diesbezüglich  das  Kapitel 
„Zitronensäure". 

Nach  alledem  erscheint  das  Ca  als  jenes  Element,  das  mit  den  meisten 
Säuren  sich  verbindet,  die  man  als  gewöhnlich  für  Pflanzen  beschreibt. 

Magnesium  Mg. 

Die  bekannteste  Reaktion  auf  Magnesium  ist  die,  welche  zur 
Bildung  des  Magnesiumammoniumphospliates  führt.  Sie  hat  sich  auch 
anläßlich  meiner  Untersuchungen  über  das  Magnesium  in  seinen  Be- 
ziehungen zur  Pflanze  ^  heute  noch  als  die  geeignetste  herausgestellt. 
Zu  kontrollierenden  Versuchen  können  Verwendung  finden : 

1)  Arsenverbinduugen  bei  Gegenwart  von  Ammoniak. 

2}  Kaliumpyroantimoniat. 

3)  Seignettesalz  mit  Ammoniak. 

4)  Ferrocyankalium  und  Ammoniak. 

5)  Ammoniumoxalat  und  Essigsäure. 

6)  Ammoniumoxalat  allein. 

7)  Oxalsäure  und  Zinksulfat. 

8)  Kaliumoxalat. 

9)  Schwefelsäure  mit  und  ohne  Wasser. 

Auszuscheiden  sind  die  Reaktionen  mit  Natriumkarbonat  allein, 
bei  Gegenwart  von  Calcium,  dasselbe  bei  Gegenwart  von  Phosphor, 
Oxal-  und  Essig-,  Fluorwasserstoffsäure,  Ammoniumfluosilikat  und 
Uranylacetat. 

Sind  die  für  die  Bildung  von  Magnesiumammoniumphosphat  not- 
wendigen   Komponenten    Magnesium    und   Phosphor    in    einem  pflanz- 


^)  Zur  Orientierung   über   die  Kristallform    und   deren  optischen  Cha- 
rakter vergleiche  man  meine  Untersuchungen  über  diesen  Gegenstand. 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      209 

liehen  Objekte  frei  vorhanden,  so  kann  man  beide  mit  einem  Schlage 
auch  durch  Ammoniak  allein  nachweisen :  die  Ammoniakreaktion. 
Brien  wies  auch  das  Magnesium  der  Proteinkörner  mit  Natrium- 
phosphat und  ammoniakalische  Chlorammoniumlösung  nach. 

Vorkommen.  Molisch  führt  als  Beispiele  starker  Mg-Anhäufung 
au  die  Milchsäfte  von  Ficus  elastica ,  Galactodendron  utile  und  Eu- 
phorbia mammilaris.  Eschbaum  berichtet  von  Magnesiumammonium- 
phosphatkristallen in  Agarabkochungen  und  führt  deren  Bildung  auf 
Bakterien  und  Pilze  zurück.  Nach  meinen  Versuchen  mit  Gelatine 
glaube  ich,  ist  der  Gedanke  zu  erwägen,  ob  nicht  die  Austrocknung 
des  Agars  allein  schon  die  drei  zum  Tripelsalz  notwendigen  Kom- 
ponenten zur  Bildung  des  Magnesiumammoniumphosphates  zu  ver- 
anlassen vermag. 

Eisen  Fe. 

Wie  bekannt,  haben  Weiss  und  Wiesner  Rhodankalium  als 
Reagens  auf  Eisen  in  Form  von  unlöslichen  Oxyd-  oder  Oxydul- 
verbindungen bei  höheren  Gewächsen  angegeben ;  für  Eisen  bei  Algen 
in  Form  des  Oxydhydrats  war  10  Prozent  Ferrocyankalium,  dem 
etwas  Salzsäure  zugesetzt  war,  von  Hanstein  als  sehr  zweckmäßig 
erkannt  worden. 

Molisch  hat  nun  diese  Reaktionen  nachgeprüft  und  gefunden, 
daß  auch  für  höhere  Pflanzen  Ferrocyankalium  zum  Nachweise  am 
geeignetsten  sei  besonders  wegen  der  lokalisierten  Fällung  von  Ber- 
linerblau. Er  empfiehlt  eine  2prozentige  Blutlaugensalzlösung  und 
lOprozentige  Salzsäure  (bei  15'' C  4*9   Gewichtsteile  HCl). 

Um  die  Lagerung  des  Eisens  in  toto  festzustellen,  wurden  die 
Objekte,  Samen  etc.  je  nach  Bedarf  1  bis  24  Stunden  in  verdünnter 
Blutlaugensalzlösung  liegen  gelassen.  Das  Kaliumferrocyanid  zeigt 
Oxydsalze  an.  Bekommt  man  daher  keine  Reaktion  mit  diesem 
Reagens,  so  kann  noch  das  Eisen  als  Eisenoxydulverbindung  vor- 
liegen. Eine  2prozentige  Ferricyankaliumlösung  und  10  prozentige  Salz- 
säure gibt  darüber  Aufschluß.  Bekanntlich  entsteht  ein  Niederschlag 
von  Turnbullsblau  innerhalb  weniger  ^Minuten. 

Man  hat  es  daher  in  der  Hand,  sich  jederzeit  zu  überzeugen, 
ob  Eisen  vorliegt 

1)  als  Oxyd-  (gelbes  Blutlaugensalz), 

2)  als  Oxydul-  (rotes  Blutlaugensalz), 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  2.  14 


210      Richter:  Die  Fortsclu-itte  der  butanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

3)  als  Oxyd-Oxydulform  (gleichzeitige  Behandlung  einer  Anzahl 
gleicher  Objekte  mit  beiden  Lösungen). 

Der  große  Vorteil  liegt  in  der  lokalisierten  Fällung  des  Berliner 
Blaus,  wodurch  über  die  Verteilung  direkt  nachweisbaren  Eisens  in 
der  PHanze  sichere  Schlüsse  gezogen  werden  können. 

War  mit  den  Reagentien  und  den  mikroskopischen  Schnitten  kein 
Resultat  zu  erhalten,  so  wurde  natürlich  noch  die  Asche  auf  Eisen 
untersucht. 

Bei  seinen  Mitteilungen  über  das  Eisen  erwähnt  Moliscii  auch 
eine  neue  Reaktion  auf  das  von  ihm  „maskiert"  genannte  Eisen. 
Läßt  man  rämlich  Objekte,  in  denen  mit  den  oben  angeführten 
Reagentien  das  Eisen  nicht  nachgewiesen  werden  kann,  Tage  und 
Wochen  oder  Monate  in  einer  gesättigten  „reinsten"  Kalilauge 
liegen ,  so  färben  sie  sich  nachher,  mit  Wasser  ausgewaschen ,  mit 
den  verwendeten  Reagentien  sehr  deutlich  und  zeigen  lokalisierte 
Farbenverteilang.  Besonders  auffallend  war,  daß  Spirogyren,  Holz- 
fasern etc.,  die,  verascht,  nicht  eine  Spur  der  Reaktion  erkennen 
ließen,  nach  jenem  Kalilaugen-Verfahren  eine  ganz  ausgezeichnete 
Färbung  zeigten. 

A.  Meyer  wies  in  seinem  Referate  darauf  hin,  daß  reinste  Baum- 
wolle die  selbst  in  „reinster"  Kalilauge  des  Handels  vorhandenen 
Eisenspuren  speichert  und  so  nachweisbar  macht. 

Molisch  überprüfte  nochmals  seine  Probe.  Die  neuen  Experi- 
mente mit  Fichtenholzspänen  und  Baumwolle  ergaben  die  gleichen 
Resultate,  woraus  sich  für  den  3.  Abschnitt  des  Molisch  sehen  Eisen- 
büchleius  der  Schluß  ergibt: 

„Daß  gewisse  Zellen  oder  Teile  derselben,  z.  B,  die  Globoide 
der  Aleuronkörner  usw.  Eisen  der  Kalilauge  zu  entziehen  und  zu 
speichern  vermögen,  über  die  Verteilung  des  Eisens  in  der  Pflanze 
selbst  lehren  sie  (die  Angaben   des  3.  Abschnittes   nämlich)  nichts." 

Und  aus  dem  Reaktionsregister  scheidet  durch  die  Berichtigung 
von  Molisch  die  Reaktion  auf  das  „maskierte"   Eisen  aus. 

Meyer  und  Molisch  hielten  also  die  käufliche  „reinste"  Kali- 
lauge nicht  für  rein.  Dagegen  wendet  sich  Müller  und  behauptet, 
die  Kalilauge  sei  wohl  eisenfrei,  durch  das  Stehen  in  den  Glasgefäßen 
nehme  sie  aber  Eisen  aus  dem  Glase  auf.  Beweis :  in  Nichtglas- 
gefäßen bleibt  die  Lauge  rein.  Auch  werde  Eisen  als  Berlinerblau 
aus  Blutlaugensalz  durch  Salzsäure  abgespalten  und  mag  so  zu  den 
Schnitten  dazugekommen  sein,  denn  selbst  sehr  stark  verdünnte  Säuren 
scheiden  aus  Blutlaugensalz  allein  Berlinerblau  ab.     Müllers  Aus- 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      211 

führnngen  berühren  somit  bloß  das  „Wober"  des  „maskierten"  Eisens 
und  können  als  Bestätigung  des  obigen  Zitates  angesehen  werden. 
Wie  vorsichtig  man  bei  einem  Urteil  über  die  Verteilung  des  Eisens 
sein  muß ,  haben  die  Ausführungen  bisher  erwiesen.  Darum  wird 
man  Petits  Bemerkungen  vom  Eisen  im  Xuklein  um  so  vorsichtiger 
aufnehmen  müssen,  als  er  auf  Grund  von  makrochemischen  Befunden 
allein  zu  dieser  Ansicht  gelangte. 

Macallum  will  im  Zentralkörper  der  Cyanophyceen,  freilich  nicht 
stets  streng  lokalisiert,  das  Prisen  nachgewiesen  haben :  Alkoholmaterial 
wird  in  Glyzerin  und  Ammoniumsulfat  bei  60^  gehalten.  Der  Zentral- 
körper wird  dunkelgrün.  Schneller  kommt  man  zum  Ziel,  wenn  man 
Alkohol  und  Schwefelsäure,  Ferrocyankalium  und  0"5prozentige  Salz- 
säure oder  O'öprozentiges  Hämatoxylin  verwendet.  Doppelfärbungen 
mit  Umwandlung  nach  Preußisch  Blau  und  Färbung  mit  Pikrokarmin 
lassen  auch  die  Cyanophycinkörncheu  hervortreten.  —  Welche  von 
diesen  Reaktionen  als  echte  Eisenreaktionen  angesehen  werden  können, 
ist  eigentlich  schon  durch  die  Wiedergabe  der  Molisch  sehen  Unter- 
suchungen gesagt. 

Eng  an  die  Molisch -Meyer  sehen  Befunde  von  der  Eisen- 
speicherung  seitens  pflanzlicher  Membranen  schließen  Devauxs  Unter- 
suchungen über  Pektinstoffe  an ,  wonach  letztere  die  Eigentüm- 
lichkeit besitzen  das  Eisen  zu  speichern ;  Holzzellen  speichern  Eisen 
nur  nach  Behandlung  mit  Eau  de  Javelle.  Membranen  speichern 
Eisen  noch  aus  Verdünnungen  von  1  :  10  000  000.  Nach  später  an- 
gegebenen Rezepten  färbte  Devaux  Cellulose  mit  Eisenchlorid  und 
Ferrocyankali  blau,  mit  Kupferacetat  und  Ferrocyankali  rot  und  mit 
Bleiacetat  und  Kaliumbichromat  gelb ,  ebenso  mit  Eisenchlorid  und 
Ammoniumsulfat. 

Mangan  Mn. 

Nacli  H.  Behrens  sind  die  geeignetsten  mikrochemischen  Reaktionen 
auf  Mangan  seine  Füllungen  als  Oxalat,  Ammoniummanganophosphat  und 
Superoxyd.  Besonders  die  zweite  kann  man  nun,  wie  Gössl  gezeigt  hat, 
bei  geeigneter  Versuchsanstellung  dazu  benutzen,  Mangan  gleichzeitig  neben 
Co,  Ni,  Fe  und  Mg  nachzuweisen.  Davon  kommt  bei  der  Pflanze  besonders 
das  Mg  in  Betracht.  Man  braucht  nur  die  erzeugten  MnNH^PO^  +  öH.jO- 
Kristalle  mit  ~]j  KMnO^  zu  beliandeln,  wobei  sie  sich  braun  färben.  Die 
Fällung  geschah  in  mikroskopischen  Schnitten  und  aus  Lösungen.  Durch 
diese  Gösse  sehe  Probe  erscheint  besonders  für  Untersuchungen  an  Pflanzen 
die  Fällung  als  Manganamraoniumphosphat  als  derzeit  beste  mikrochemisch- 


botanische Reaktion  auf  Mangan, 


14^ 


212      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2, 

Alle  übrigen  Arbeiten  über  diesen  Stoff,  die  in  den  letzten  Jahren  er- 
schienen sind,  haben  sich  bloß  mit  dem  ernährungs-physiologischen,  speziell 
stimulatorischen  Werte  dieses  interessanten  Elementes  der  Eisengruppe  be- 
schäftigt oder  sich  der  Giftigkeit  desselben  gewidmet. 

Von  mikrochemischem  Interesse  ist  das  starke  Anschwellen  der  Scheide 
der  Eisenbakterien  bei  Manganfütterung,  wie  es  Molisch  nachgewiesen  hat, 
und  der  Gallertschichte  von  Anthophysa  vegetans,  die  unter  denselben  Be- 
dingungen von  Adler  gezogen  wurde. 

Tonerde. 

Radlkofer  entdeckte  kieselsäuremassenähnliche  Körper  bei  Symplocos- 
Arten.  Man  konnte  sie  mit  Alizarin  und  Brasilin  von  den  gleichzeitig  vor- 
handenen Fettkörpern  differenzieren,  da  sie  sich  intensiv  färbten.  Nach  der 
Aschenanalyse  hat  man  es  hier  mit  Tonerde  zu  tun. 


II.  Abschnitt. 

Org-anisehe  Verbindungen 

[ausschließlich   der  Zellwandstoffe]. 

A.    Fettreihe. 
1.  Alkohole. 

Bekanntlich  hat  Borodin  den  Dulcit  in  der  Weise  nachgewiesen,  daß 
er  auf  die  zu  untersuchenden  Objekte  etwas  Äthylalkohol  gab,  den  er  nach 
Bedecken  mit  dem  Deckgläschen  eindampfen  ließ.  Der  vorhandene  Dulcit 
kristallisiert  so  in  großen  prismatischen  oder  unregelmäßigen  Kristallen  aus. 
Monteverde  hat  dieselbe  Methode  sowohl  für  Dulcit  wie  für  Mannit  ver- 
wendet und  die  auskristallisierten  Substanzen  mit  Borodins  Methode  der 
gesättigten  Lösungen  überprüft. 

2.  Aliphatische  Karbonsäiiren. 

Ameisensäure.  —  Während  Behrens  zum  Nachweise  der  Ameisen- 
säure Merkuronitrat  verwendet,  benutzt  Czapek  Sublimatlösung ;  er  erwärmt 
auf  70  bis  80 '',  worauf  sich  ein  weißer  Niederschlag  von  Kali )mel  bildet,  der 
in  Salzsäure  unlöslich  ist.  Um  nun  Ameisensäure  in  den  Zellen  selbst  nach- 
zuweisen, wurden  Wurzelstücke  in  konzentrierter  Sublimatlösung,  die  mit 
Wasser  auf  das  fünf-  bis  zehnfache  verdünnt  war,  im  Wasserbade  eine 
bis  2  Stunden  lang  erhitzt.  Nach  den  notwendigen  Reinigungen  wird  in 
einprozentiger  Kalilauge  gelinde   erwärmt.     In   den   formiatlialtigen   Teilen 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Milirochemie.      213 

tritt   sofort  Schwärzung   auf  (Niedersclüag  im  Protoplasma,  niclit  im  Zell- 
saft und  Zellkern). 

Oxalsäure.  —  Nachweis.  Tritt  nach  Behkp:\s  der  Nachweis  der  Oxal- 
säure als  Calcium-  gegenüber  dem  als  ötrontiumoxalat  zurück,  und  wird 
er  nur  bei  sehr  verdünnten  Lösungen  empfohlen,  die  eine  Einengung  niclit 
vertragen,  oder  die  man  nicht  einengen  will,  so  spielt  er  in  der  botanischen 
Mikrochemie  eine  desto  größere  Rolle.  Giessler  hat  ihn  daher  aucli  ver- 
wendet, um  die  Verbreitung  der  Oxalsäure  besonders  in  löslicher  Form 
oder  als  Bioxalat  im  Pflanzenkörper  festzustellen.  Die  Objekte  wurden 
unter  Anwendung  der  Luftpumpe  mit  einer  Lösung  von  einem  Teil  Calcium- 
chlorid  in  drei  bis  vier  Teilen  Wasser  injiziert,  oder  es  wurde  das  Pflanzen- 
material direkt  in  eine  kocliende  Clilorcalciumlösung  geworfen.  Nach  dem 
Auswaschen  in  Wasser  war  die  Oxalsäure  als  Calciumoxalat  in  Form  einer 
feinkörnigen  kristallinischen  Masse  oder  in  der  von  Sphäriten  zu  sehen. 
Leider  beeinträchtigten  Gerbstoffe,  die  in  stärkerer  Konzentration  als  grau- 
schwärzliche oder  bräunliche  Massen  niedergeschlagen  werden,  sehr  stark 
die  Reaktion. 

Vorkommen.  Nachdem  ich  bereits  bei  der  Besprechung  des  Calcium- 
oxalats der  Arbeiten  von  Buscalioni,  Belzing  und  Poirault,  Krasseii, 
WiTTLiN,  LiDEORSS  und  Belzung  gedacht  habe,  möchte  ich  hier  noch 
auf  die  letzte  genauer  eingehen.  Es  gelang  Belzung  Calciumoxalat  im 
Zustande  der  Lösung  im  Samen  von  Lupinus  albus  nachzuweisen.  Nach 
seiner  Meinung  dürfte  es  da  in  loser  Bindung  mit  Oxalsäure  und  Citronen- 
säure  vorkommen.  Dickt  man  nämlich  unter  Erhitzen  das  wässerige  Extrakt 
ein,  so  fällt  das  Calciumoxalat  in  Form  tetraedrischer  Kristalle  aus.  — 
Wehmers  Verdacht  von  der  Calciumcitratnatur  vieler  Raphiden  wurde 
oben  schon  erwähnt. 

Äpfel  säure.  —  Indem  ich  kurz  auf  den  Nachweis  der  Äpfelsäure  als 
Silbermalat  oder  durch  Überführung  in  Malein-  und  Fumarsäure  verweise, 
gehe  ich  gleich  auf  die  mir  bekannt  gewordenen  Fälle  charakteristischen 
Vorkommens  die&er  Säure  ein.  In  kaktusförmigen  Euphorbien  erkannte 
Belzung  die  schon  mehrfach  untersuchten  Fällungen  durch  Alkohol 
teils  als  Calciummalophosphat,  teils  als  Calciummalat.  Jenes  bildet  Sphärite, 
die  zunächst  amorph  erscheinen  und  später  eine  radiäre  Struktur  annehmen, 
dieses  prismatische  zu  Sphäriten  geordnete  Kristalle.  Beide  werden  am 
besten  mit  TOprozentigem  Alkohol  erhalten.  Die  Kristalle  konnten  auch 
aus  künstlich  dargestelltem  Calciummalophosphat  mit  Alkohol  erzeugt 
werden.  Durch  Debskis  Untersuchungen  wurde  das  Vorhandensein  von 
Äpfelsäure  in  den  Blättern  und  Blattstielen  von  Marantaceen  sehr  wahr- 
scheinlich.   Vgl.  schließlich  den  Abschnitt  über  Calciummalat  (oben  p.  208). 

Citronensäure.  —  Der  Nachweis  der  Citronensäure  erfolgt  wieder 
am  günstigsten  durch  Silbernitrat.  Das  Calciumcitrat  hält  Behrens  für 
mikroskopische  Erkennung  für  völlig  wertlos.  Wegen  seiner  Unlöslichkeit 
in  Wasser  ist  es  aber  zur  Trennung  der  Citronensäure  von  flüchtigen 
Säuren  von  großer  Bedeutung.  Dieser  Umstand  kam  nun  Wehmer  bei 
seinen  Studien  der  von  zwei  verschiedenen  Hyphomyzeten  ausgeschie- 
denen Calciuracitrate  sehr  zustatten.  Die  Pilze  wurden  in  mit  Kreide  ver- 
setzter Zuckerlösung  kultiviert.    Das  Calciumcitrat  wurde  durch  Erwärmen 


214      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

nachgewiesen,  dabei  füllt  es  sofort  in  Form  von  Raphiden-  und  Sphärit- 
ähnlichen  Körpern  aus.  Wehmer  vermutet  daher,  daß  vielleicht  viele  der 
bisher  für  Oxalatraphiden  gehaltenen  Kriställchen  Kalkcitratraphiden  seien. 
—  Mit  Oxalsäure  zusammen  ist  die  Citronensäure  im  Lupinensamen  von 
Belzung  gefunden  worden. 

Milchsäure.  —  Die  Milchsäure  habe  ich  an  den  Schluß  meiner  Aus- 
führungen über  nicht  flüchtige  aliphatische  Karbonsäuren  gestellt,  weil 
sie  stets  nur  als  mikrotechnisch  wichtig  genannt  wird.  Krasser  hat  ihr 
deshalb  geradezu  eine  Abhandlung  gewidmet.  Seither  empfahl  sie  Lager- 
HEiii  mit  Jod  zum  Stärkenachweis  und  Klebahn  fand  sie  bei  der  Unter- 
suchung von  Herbarmaterial  von  Rostpilzen  in  Übereinstimmung  mit  Lager- 
heim vorzüglich  geeignet. 


8.  Aldehyde. 

Bei  der  Frage  nach  dem  Vorhandensein  von  Aldehj'den  handelt  es 
sich  gewöhnlich  darum  ,  quantitativ  den  Aldehydgehalt  der  Blätter  fest- 
zustellen, um  Stützen  für  die  Bayer  sehe  Assimilationshypothese  zu  ge- 
winnen, also  um  rein  physiologisch-chemische  Probleme,  die  somit  über  den 
Rahmen  dieses  Referates  hinausgehen.  Man  vgl.  diesbezüglich  Bokornys 
„Über  Stärkebildung  aus  Formaldehyd"  und  Reixkes  und  Braunmüllers 
„Untersuchungen  über  den  Einfluß  des  Lichtes  auf  den  Gehalt  grüner 
Blätter  an  Aldehyd".  Pollacci  bringt  neue  Angaben  betreffend  den  Nach- 
weis des  Formaldehyds  in  grünen  assimilierenden  Pflanzenteilen,  besonders 
über  die  Farbenreaktion  mit  Codein  und  Schwefelsäure,  doch  spricht  er 
nicht  von  ihrer  mikrochemischen  Verwendbarkeit. 


4.  01.^ 

Unterscheidung  von  fettem  und  ätherischem  Öle. 
Bisher  war  A.  Meyers  Methode  der  Unterscheidung-  von  ätherischen 
und  fetten  Ölen  wohl  zumeist  im  Gebrauche.  Da  bei  der  Auf- 
bewahrung der  Objekte  im  Brutschrank  bei  130^  das  ätherische  Öl 
abdampft,  hat  man  nachher  eigentlich  bloß  die  fetten  Öle  vor  sich. 
Es  muß  somit  als  ein  Fortschritt  betrachtet  werden,  daß  uns  Mesnard 
mit  einer  Methode  bekannt  macht,  die  direkt  unter  dem  Mikroskope 
die  beiden  so  häutig  vorkommenden  Formen  des  Öles  zu  unterscheiden 
gestattet.  Zu  diesem  Zwecke  nimmt  man  eine  feuchte  Kammer  mit 
zwei  konzentrischen  Ringen  und  gibt  in  den  inneren  Kreis  Glyzerin 
mit  Zucker ,    darauf   die  Schnitte ,    in   den  Hohlring    aber    rauchende 


*)  Man  vergleiche  auch  Biermann,  R.,  „Über  Bau-  und  Entwicklungs- 
geschichte der  Olzellen  und  die  Ölbildung  in  ihnen."   Inaug.-Diss.  Berlin  1898. 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      215 

Salzsäure.  Unter  diesen  Bedingungen  kann  man  bemerken,  daß  sich 
das  flüchtige  Ol  in  goldgelbe  Tröpfchen  zusammenballt,  die  später 
verschwinden,  während  das  fette  Öl  unverändert  erscheint.  Wie  gut 
diese  Methode  zu  sein  scheint,  erhellt  daraus,  daß  man  bei  Orangen- 
blüten mehrere  ätherische  Öle  unterscheiden  kann ,  was  theore- 
tisch den  Schluß  gestattet,  daß  ihr  Geruch  ein  zusammengesetzter 
sein  muß. 

Bei  seinen  Studien  über  die  Lokalisation  der  fetten  Öle  während 
der  Keimung  versuchte  Mesnard  noch  eine  passende  Verbesserung 
seiner  Methode,  und  zwar  mit  gutem  Erfolge.  Nach  Belassung  der 
Präparate  in  Salzsäuredämpfen  während  2ö  —  30  Stunden,  während 
welcher  Zeit  das  ätherische  Öl  zerstört  wurde,  und  der  Zellinhalt  auf 
einen  Tropfen  zusammengezogen  war,  wurden  durch  2  Sekunden  hin- 
durch Joddämpfe  einwirken  gelassen.  Dadurch  tritt  Gelbfärbung  des 
fetten  Öles  ein,  wodurch  es  sehr  deutlich  und  zum  Messen  geeignet 
wird.  Aus  der  Größe  des  Durchmessers  wurde  die  enthaltene  Öl- 
menge  berechnet.  Es  konnte  auf  diese  sinnreiche  Weise  gezeigt 
werden,  daß  sich  die  erhaltenen  Zahlen  nach  Tageszeit,  Belichtung 
und  Entwicklungszustand  ändern. 

Danach  zeigen  also  beide  Arten  von  Öl  Tropfenbildung  in  Salz- 
säuredämpfen, doch  das  ätherische  sofort,  das  fette  erst  nach  etwa 
einem  Tage,  wodurch  die  Möglichkeit  gegeben  ist,  leicht  die  beiden 
Formen  zu  unterscheiden. 

Eine  solche  Methode  erscheint  um  so  wertvoller,  als  erst  in  der 
jüngsten  Zeit  Tschirch  gezeigt  hat,  daß  die  Methode,  durch  Er- 
hitzen des  Präparates  eine  Unterscheidung  beider  Öle  möglich  zu 
machen,  nie  einwandsfrei  ist.  Selbst  bei  100  bis  110^  verflüchtigen 
sich  nicht  alle  ätherischen  Öle.  Die  höher  siedenden  Terpene  und 
Polyterpene  zum  Beispiel,  und  viele  andere  Öle  verharzen  bei  der 
Erhitzung.  Auch  ist  angeblich  keines  der  vorhandenen  Reagentien 
der  fetten  Öle  zur  Unterscheidung  von  Ilarzbalsam  verwertbar. 

Ölkörper  der  Lebermoose.  Passend  dürften  sich  hier 
auch  die  Methoden  zur  Unterscheidung  der  Ölkörper  der  Lebermoose 
von  den  fetten  und  ätherischen  Ölen  anschließen.  Nach  den  bekannten 
Untersuchungen  von  Pfeffer  hat  sich  besonders  v.  Küster  dem  Studium 
der  Ölkörper  gewidmet  und  eine  vielfache  Übereinstimmung  ihrer  Keak- 
tionen  mit  den  der  fetten  und  ätherischen  Öle  gefunden.  Andrews 
hat  später  die  mechanische  Trennung  durch  Zentrifugalkraft  zu 
Hilfe  genommen,  die  die  Ölkörper  infolge  einer  in  ihnen  vorhandenen 
spezifisch    schwereren  Substanz  stets   in   das    zentrifugale    Zellenende 


216      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

schleuderte.     Die  neuesten  diesbezüglichen  Angaben  rühren  vou  Loh- 
mann her.     Danach  sind  die  Ölkörper 

1)  Löslich  in  Petroläther,  Äther,  Aceton,  Chloroform,  Benzol, 
Schwefelkohlenstoft",  Nelkenöl,  starkem  Alkohol,  aber  auch  verdünntem 
Alkohol  (noch  in  bis  40prozentigen),  Eisessig  und  Chloralhydratlösung. 

2)  Kalilauge  und  Säuren  lösen  nicht;  wohl  kann  es  bei  der  Ein- 
wirkung von  Kalilauge  geschehen,  daß  die  Ölkörper  plötzlich  ver- 
schwinden, aber  eine  Verseifnng  in  der  Weise,  daß  erstarrte  Seifen- 
massen sichtbar  werden,  tritt  sogar  bei  vorhergegangener  Kochhitze 
nicht  ein. 

o)  Durch  Osmiumsäure,  Alkanna  und  verschiedene  andere  Farb- 
stoffe färben  sie  sich  leiclit. 

Es  ist  somit  die  Verseifungsmethode,  die  sicherste  zur  Differen- 
zierung der  Ölkörper  von  fetten  und  ätherischen  Ölen. 

Auch  Garjeanne  hat  neuerdings  eine  interessante  Arbeit  über 
die  Ölkörper  der  Jungermanniaceen  veröffentlicht,  die  sich  mit  Ent- 
wicklungsgeschichte ,  Lage ,  Bewegungserscheinungen ,  Vermehrung, 
Bedeutung  und  Vorkommen  der  Ölkörper  beschäftigt.  Für  die  ent- 
wicklungsgeschichtlichen Studien  hat  sich  eine  konzentrierte  wässerige 
Pikrinsäure  als  zweckmäßig  erwiesen.  Die  Hülle  der  Ölkörper,  auf 
die  auch  schon  Küster  aufmerksam  gemacht  hat,  besteht  nach  Gar- 
jeanne wahrscheinlich  aus  gerbsaurem  Eiweiß. 

Fettes  Öl.  —  Unter  den  F  e  ttr  eagentien  spielen,  wie  be- 
kannt, die  Farbstoffe  Alkanniu  und  Cyanin  eine  große  Rolle.  Nachdem 
Rosenthal  die  Verwendbarkeit  von  Sudan  III  für  den  Fettnachweis 
dargetan  hatte,  bürgerte  es  sich  für  diese  Zwecke  bald  ein.  Man  ver- 
gleiche BuscALioNi,  der  das  Reagens  in  die  botanische  Mikrotechnik 
eingeführt  hat,  B.  Fischer,  Herxheimer  und  Kohl.  Dagegen  äußert  sich 
Lewinson  abfällig  über  den  Farbstoff  ebenso  wie  über  die  Osmium- 
säure. Er  gibt  für  tierhistologische  Zwecke  eine  Methode  au,  die 
in  der  Einwirkung  von  Müller  scher  Flüssigkeit,  Kaliumhyperman- 
ganat,  Oxalsäure  und  schwefligsaurem  Kalium  besteht.  Zu  Kontrast- 
färbungeu  sollen  besonders  Karminlösungen  bei  Naclibehandlung  mit 
Säurealkohol  und  gesättigter  Pikrinsäure  und  Einbetten  in  Kanada- 
balsam geeignet  sein.  Dadurch  wird  das  Fett  dunkelblau,  fast 
schwarz,  die  Kerne  rot  und  das  Protoplasma  gelb.  Vielleicht  ließe 
sich  mit  passenden  Änderungen  dieses  Verfahren  auch  auf  pflanz- 
liche Objekte  anwenden.  Auch  andere  Farbstoffe  sind  noch  empfohlen 
worden:  Scharlach  R  von  Lagerheim  zum  Nachweise  fremden  Fettes 
in  der  Schokolade  ,    und  von  B.  Fischer  ,  Alizarin    und  Brasilin   von 


XXII,  2.     nicht  er:   Die  Fortscliritte  der  botanisclien  Mikrochemie.      217 

Radlkoper,  und  Prodigiosin  von  Rosenberg.  Kohl  endlich  gibt  an, 
daß  mittels  Dimethylamidazobenzol  Fett  gelb  gefärbt  wird. 

Es  ist  interessant,  zu  hören,  welches  Ergebnis  eine  kritische 
Untersuchung  dieser  zahlreichen  Methoden  des  (Jlnachweises  ge- 
zeitigt hat.  Eine  solche  danken  wir  Hartwich  und  Uhlmann,  die 
den  Beweis  erbrachten ,  daß  alle  hinter  der  Fettverseifungsmethode 
von  MoLiscii  zurückbleiben,  da  mit  ihr  nicht  nur  das  Öl  an  und  für 
sich,  sondern  sogar  die  Natur  des  fetten  Öles  unter  dem  Mikroskope 
festgestellt  werden  kann ,  wenn  man  nämlich  Kristallform  und  Zeit- 
dauer der  Kristallisation  bei  der  Beurteilung  zu  Hilfe  nimmt. 

Bezüglich  der  Kristallbildung  in  Öltropfen  sei  auch  auf  Bertrand 
und  PoiRAULT  verwiesen,  die  in  Glyzerineinschluß  in  Öltropfen  Kristalle 
entstehen  sahen,  welche  Fett  oder  Cholesterin  sein  mochten,  und  auf 
Kohl,  der  bei  Behandlung  von  Schnitten  durch  die  Blütenblätter  von 
Silphium  perfoliatum,  Calendula  offic.  und  Gazanea  splendens  mit 
alkoholischer  Kalilauge  Phytosterinsphärite  erhielt.  Man  bekommt 
sie  auch  bei  Behandlung  granaführender  Leukoplasten  aus  der  Epi- 
dermis der  Agave  americana  oder  dem  Stengelparenchym  von  Equi- 
setum  arvense. 

Lösung.  Bekanntlich  (Z.  M.  p.  87)  erscheint  nach  genaueren 
Untersuchungen  über  die  Löslichkeitsverhältuisse  von  Ölen  auch  der 
Eisessig  als  vorzügliches  Lösungsmittel.  Davis  nutzte  nun  diese  Er- 
fahrung mit  bei  Verwendung  von  Chromessigsäure  als  Fixierungsmittel 
fett-  und  ölreicher  Zellen  aus,  denn  bei  Anwendung  dieser  Säure  er- 
halte man  die  Zellen  möglichst  frei  von  Fett  und  Öl,  vgl.  diesbezüglich 
auch  Lohmann  1.  -c. 


5.  Wachs. 

Wie  bekannt,  bezeichnet  man  mit  Wachs  gewöhnlich  die  Sub- 
stanz, die  bei  zahlreichen  Gewächsen  alle  oberirdischen  Teile  über- 
zieht und  ihnen  einen  eigenartigen  hell-blaugrünen  Schimmer  verleiht. 

Mit  der  von  Wiesner  eingehender  untersuchten  Substanz  stimmt 
nun  eine  von  Möbius  im  Lmeren  der  Zellen  gefundene  im  wesent- 
lichen überein,  so  daß  man  heute  auch  von  einer  „Wachsausscheidung 
im  Inneren  der  Zellen"  reden  kann.  Das  von  Möbius  entdeckte 
Wachs  fließt  in  heißem  Wasser  zusammen,  löst  sich  in  kochendem 
Alkohol  und  Terpentinöl,  wird  von  Kalilauge,  konzentrierten  Mineral- 
säuren und   kaltem  Alkohol    angegriffen   und    von  Jod    gelb    gefärbt. 


218      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Farbstoffe ,    z.  B.  Fuchsin ,  speichert  es.      Diese  Farbstoffspeicherimg 
wird  für  das  o-ewöhnliclie  Wachs  und  Sudan  III  von  Buscalioni  be- 


stätigt. 


Die  klebrige  Substanz  der  Pollinien  bei  Asklepiadaceen  soll  nach 
Dop  Wachs  sein,  sie  färbt  sich  auch  mit  Sudan  III. 


6.  Kohlehydrate. 

Allgemeiner  Nachweis,  l'ber  den  Bedeutungswandel,  den 
MoLiscHS  beide  Zuckerproben  schon  in  den  ersten  vier  Jahren  durch- 
gemacht hatten,  berichtet  bereits  Zimmermann.  Es  hat  sich  nun  eine 
ganze  Literatur  über  diese  beiden  Proben  entwickelt,  die  in  jüngster 
Zeit  zusammenfassend  von  B.  Reinbold  unter  dem  Titel  „Über  die 
Molisch -ÜDRÄNSKYSche  a-NaphtoI- Schwefelsäure -Reaktion"  behandelt 
worden  sind. 

Glykose  CgH^oO^.  Bereits  Fischers  Arbeit  „Beiträge  zur 
Physiologie  der  Holzgewächse"  hat  den  großen  Wert  der  A.  Meyer- 
schen  mikrochemischen  Reaktion  auf  Glykose  zur  Genüge  gezeigt. 
Wie  sehr  sich  die  Fälle  ihrer  Anwendbarkeit  vermehren  lassen,  geht 
aus  Hoffmeisters  Versuchen  über  den  Nachweis  von  Rohrzucker  her- 
vor. Es  gelingt  ihm  damit  der  Nachweis  von  Rohr-  und  Trauben- 
zucker als  auch  der  Nachweis  von  beiden  nebeneinander. 

Andere  Fälle  der  Verwendung  von  Fehlings  Lösung  vgl.  beiKNUTH 
„Über  den  Nachweis  von  Nektarien  auf  chemischem  Wege",  Molisch 
„Milchsaft  und  Schleimsaft",  Ikeda  „Studies  in  the  physiological 
functious  etc.". 

Daß  endlich  die  Glykose  auch  bei  gewissen  Reaktionen  hemmend 
auftritt,  beweist  der  Ausfall  der  Leptominprobe  nach  den  Mitteilungen 
von  Hunger. 

Riegler  empfiehlt  oxalsaures  Phenylhydrazin  als  Glykose. 
rcagens. 

Rohrzucker  Cj^  H..,.-,  0^^^.  Wesentlich  für  den  Nachweis  der 
Saccharose  war  bisher  gerade  der  negative  Ausfall  der  Trommer- 
schen  Probe.  Es  ist  aber  schon  früher  betont  worden,  daß  wegen 
der  starken  Alkaleszenz  beim  längereu  Kochen  mit  der  Fehling  sehen 
Lösung  sich  Invertzucker  bildet  und  dadurch  das  Reagens  bei  Unter- 
suchungen, wo  es  auf  die  Beantwortung  der  Frage,  ob  Saccharose 
oder  gar  ob  sie  neben  Glykose  vorkommt,  vollkommen  unbrauchbar 
wird.     Auch  Sachs'  Probe  besitzt  erhebliche  Mißstände. 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      219 

Die  Möglichkeit,  Saccliarose  durch  Invertineinwirkung  in  Invert- 
zucker umwandeln  zu  liönnen,  liat  nun  Czapek  zum  mikrochemischen 
Nachweise  dieses  Stoffes  ausgenutzt  und  auf  seine  Anregung  Hoff- 
meister in  weitgehendstem  Sinne  verwertet.  In  seiner  Arbeit  „Über 
den  mikrochemischen  Nachweis  von  Rohrzucker  in  pflanzlichen  Ge- 
weben'' kommt  er  zu  dem  Schlüsse,  daß  sich  Czapeks  Methode  des 
Rohrzuckernachweises  in  der  Tat  allgemein  verwenden  lasse.  Hoff- 
meister verfährt  folgendermaßen :  Auf  frische,  etwa  3 — 4  Zelllagen 
dicke  Schnitte  wird  konzentrierte  Invertinlösung  gebracht.  Nach  zwei 
bis  drei  Stunden  ist  die  Enzym  Wirkung  beendet.  Nun  bringt  man  das 
Präparat  in  A.  Meyers  Kupfersulfat-Seignettesalz-Natronlauge  und 
erhitzt  zum  Sieden.  Durch  Vergleichung  der  Kupferoxydulbildung 
vor  und  nach  der  Invertierung  kann  man  Rohr-  neben  Trauben- 
zucker nachweisen.  KoutroUversuche  mit  Helianthusmark  lehrten, 
daß  sich  auf  diese  Weise  noch  O'Olprozentiger  Rohrzucker  nach- 
weisen ließ. 

Für  den  Nachweis  von  Rohr-  neben  Traubenzucker  in  glukose- 
reichen Geweben  wurden  die  Präparate  in  siedendes  MEVERSches 
Reagens  gebracht,  nach  einer  bis  2  Minuten  in  schwacher  Weinsäure- 
lösung abgespült  und  auf  dem  Objektträger  in  einen  Tropfen  Magnesium- 
chloridlösung gebracht,  worin  der  Kupferoxydul-Niederschlag  sofort 
verschwindet.  Das  Magnesiumchlorid  wurde  mit  weinsäurehaltigem 
Wasser  ausgewaschen  und  nachher  die  Invertinprobe  gemacht.  So 
konnte  bei  Apfel,  Birne,  Hagebutte,  Johannisbrot,  Möhre  und  Peter- 
silienwiirzel  Saccharose  neben  Glykose  nachgewiesen  werden. 

Daß  der  Rohrzucker  auch  in  den  Knollen  des  nordamerikanischen 
Josopyrum  vorkommt  und  vornehmlicli  zur  Winterszeit  angetroft'en  wird, 
hat  Mac  Douüal  mit  der  von  Kraus  187G  angegebenen  Methode  nach- 
gewiesen. Er  verwendete  zum  Einlegen  der  Schnitte  starken,  mindestens 
TOprozentigen  Alkohol,  wobei  er  zahlreiche  Körnchen  erzielte.  Es  wäre 
nicht  uninteressant,  die  Resultate  dieses  Forschers  nach  der  neuen  Methode 
zu  überprüfen  und  auf  breiter  Versuchsbasis  die  Verbreitung  des  Rohr- 
zuckers im  Pflanzenreiche  festzustellen.  Eine  solche  Arbeit  erschiene  um 
so  dankbarer,  als  Grüss  erst  jüngst  eine  Arbeit  über  „Die  Rohrzucker- 
bildung aus  Dextrose  in  der  Zelle"  veröffentlicht  hat. 

luulin  GjoH.jqOjq.  Von  Green  wurde,  wie  bekannt,  Orcin 
als  Reagens  auf  Inulin  empfohlen.  Meyer  und  Behrens  finden  diese 
Reaktion  sehr  verwendbar.  Als  Versuchsobjekte  benutzten  sie  To- 
pinamburstengel. Diese  wurden  zuerst  in  alkoholische  Orceinlösung 
gegeben,  der  Wirkung  starker  Salzsäure  ausgesetzt  und  dann  auf 
dem  Objektträger  erhitzt.     Es  färbt  sich  in   den    oberen  Teilen    der 


220     Richter:   Die  Furtschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

luuliii  fiilirendeu  Region  nur  der  Inhalt  der  Gefäße  orangerot,  in  den 
unteren  Stengelteilen  auch  das  periphere  Mark,  Markstrahlen  und 
Holzparenchym ;  bei  Helianthus  annuus  tritt  nur  Blaurotfärbung  ein. 
Die  Sphärite  werden  orangerot.  Die  Reaktion  glückt  bei  frischem 
und  bei  Alkohohnaterial. 

Bezüglich  des  Vorkommens  in  den  Gefäßen  dürfte  zu  bedenken 
sein,  ob  hier  nicht  durch  die  Präparationsmethode  und  den  negativen 
Luftdruck  das  Inulin  in  die  Gefäße  gelangt  sein  kann,  wie  man  das 
schon  lange  vom  Milchsafte  weiß. 

Daß  das  Wasser  bei  der  Erkennung  von  luulinsphäriten  eine 
wesentliche  Rolle  spielt,  ist  schon  aus  Zimmermanns  Ausführungen  zu 
ersehen.  H.  Fischer  hält  nun  die  Quellbarkeit  der  Sphärite  in 
Wasser  für  sehr  charakteristisch.  Er  hat  trotz  eifriger  Umschau 
nur  noch  bei  Alkoholmaterial  von  Cyclamen  europaeum  in  Wasser 
quellbare  Sphärite  erhalten.  Beim  Erwärmen  in  Wasser  oder  Zus-atz 
von  Alkalien  schmelzen  sie  aber  langsam  ab.  Im  polarisierten  Lichte 
verhalten  sie  sich  wie  Stärkekörner.  Auch  gegen  Farbstofte  zeigen 
sie  ein  ähnliches  Verhalten.  Man  kann  sagen,  daß  sie  die  im  Wasser 
gelösten  Farbstoffe  aufzunehmen  vermögen,  ohne  sie  speichern  zu 
können.  Nicht  vermögen  in  sie  einzudringen :  Nigrosin,  Hessisch 
Purpur,   Diamin- Echtrot  und  Ammoniak-Karmin. 

Glykogen  CgH^pO^.  Nach  den  grundlegenden  Versuchen 
Erreras  aus  dem  Jahre  1886  über  die  Verbreitung  des  Glykogens 
und  seinen  Nachweis,  war  es  wiederholt  Gegenstand  eingehender 
Bearbeitungen;  man  vgl.  G.  Clautriau,  „Etüde  chimique  du  glucogene 
chez  les  Champignons  et  les  levures"  und  Ch.  M.  D.  Creighton, 
„Microscopic  researches  of  the  formative  property  of  glycogen", 
Arbeiten,  die  das  Glykogen  als  einen  sehr  häufigen  Bestandteil  der 
Pilz-  und  Hefezelle  erscheinen  lassen.  Zacharias  und  Hec4Ler  haben 
auch  bei  Cyanophyceen  Glykogen  nachgewiesen.  Nach  Zacharias' 
Meinung  enthalten  die  „Zentralkörper"  einen  Stoff  mit  den  Reak- 
tionen des  Glykogens  und  Hegler  hält  es  geradezu  für  das  erste 
wahrnehmbare  Assimilationsprodukt  der  Oszillarien.  Sehr  verdünnte 
heiße  Jodlösung  färbe  es  mahagonischwarzbraun.  —  Diese  Zunahme 
der  Fundorte  von  Glykogen  macht  es  niclit  unwahrscheinlich ,  daß 
man  es  auch  noch  bei  anderen  Pflanzengruppen  wird  nachweisen 
können.  A.  Fischer  hat  sich  Heglers  Anschauung  angeschlossen. 
Zur  Färbung  des  Glykogens  empfiehlt  Irischer  Safranin  und  andere 
basische  Farbstoffe. 

Seltene  Kohlehydrate.    In  seiner  Arbeit  „Über  die  Kohlen- 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      221 

hydrate  derMonokotyledonen,  insbesondere  Irisin,  Sinistrin  und  Triticin" 
führt  Keller  den  Nachweis  von  der  Identität  von  Irisin  und  Triticin. 
Endlich  hat  A.  Fischer  als  neues  Kohleliydrat  „Anabänin"  bei 
Cyanophyceen  beschrieben. 

Nektarien.  Nach  Knuth  gelingt  der  mikrochemische  Nachweis 
von  Nektarien,  einerseits  mit  Fehling  scher  Lösung,  anderseits  mit  der  von 
Hoppe -Seyler  als  Zuckerreagens  vorgeschlagenen  Ortho -Nitro  -  Phenol- 
Propiol- Säure,  die  bei  Anwesenheit  von  Traubenzucker  einen  tiefblauen 
Niederschlag  von  Indigo  bildet.  Doch  darf  man  nicht  einzelne  Blütenteile, 
sondern  muß  ganze  Blüten  in  die  Reagentien  bringen,  um  lokalisierte  Fäl- 
lungen zu  erzielen.  Die  Blüten  wurden  nach  24stündigem  Verweilen  in  den 
Reagentien  in  ihnen  gekocht  und  dann  in  kaltem  Wasser  ausgewaschen. 

7.  Stärke. 

Allgemeines.  Zur  allgemeinen  Orientierung  mögen  vor  allem 
A.  Meyers  „Untersuchungen  über  Stärkeköruer"  dienen,  von  welchen 
namentlich  das  erste  Kapitel  zahlreiche  wertvolle  Beiträge  für  die 
uns  hier  interessierenden  Fragen  liefert.  Daß  das  Werk  an  Be- 
deutung durch  die  Mängel  nicht  verliert,  welche  Rothert  in  seinen 
kritischen  Bemerkungen  aufdeckt,  ist  selbstverständlich.  —  Ebenso 
kann  auf  Hanauseks  Behandlung  der  Stärke  und  das  diesbezügliche 
Kapitel  in  Wiesners  „Rohstoffen"  verwiesen  werden. 

Reaktionen.  Bisher  erscheinen  die  Jodreagentien  als  die 
empfehlenswertesten  zum  Stärkenachweis ,  gleichviel  ob  das  Jod  in 
Wasser,  Jodkalium,  Chloralhydrat  u.  dgl.  gelöst  ist.  In  neuester  Zeit  ist 
von  Lagerheim  für-  Drogenuntersucliungen  sehr  zweckentsprechend  ge- 
funden worden  eine  Lösung  von  Jod  in  sirupdicker  Milchsäure ;  des 
Jod-Paraftins  von  Harz  wird  später  gedacht  werden.  Bei  dem  all- 
gemeinen Vertrauen  zu  Jodpräparaten  für  diese  Zwecke  erscheint 
eine  Beobachtung  von  Nemec  besonders  erwähnenswert.  Werden  näm- 
lich Wurzeln  von  Allium  Cepa  abnorm  niedrigen  oder  abnorm  hohen 
Temperaturen  ausgesetzt ,  so  färbt  sich  ihre  Stärke  mit  Jod  nicht, 
wie  gewöhnlich,  blau,  sondern  schwach  gelb.  Läßt  man  aber  vor  dem 
Jodzusatz  eine  schwache  Mineralsäure  auf  die  Körner  einwirken ,  so 
tritt  normale  Jodprobe  ein. 

Auch  die  Verkleisterung  findet  noch  immer  ergänzend  eine 
zweckmäßige  Anwendung.  Selbstverständlich  wird  sie  in  Schleim- 
zellen ungemein  schwer  sichtbar.  Walliczek  gelang  es ,  durch  Be- 
handlung der  Schnitte  mit  Alkohol  und  Bleiessig  diese  Schwierigkeit 
zu  überAvinden. 


222      Kichter:   Die  Fortschritte  der  botaniachen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Daß  die  Ergebnisse  der  „Mikrochemie"  auf  diesem  Gebiete  auch 
reiclilicli  praktische  Verwertung  gefunden  haben,  beweisen 
ViNASSAS  „Mehluutersuchungen"  und  die  2.  Aufhige  von  Schimpers 
„Untersuchung  der  Nahrungs-  und  Genußniittel". 

Schichtung  und  Struktur.  Bixz  empfiehlt  zur  Unter- 
scheidung wasserreicher  und  wasserarmer  Schichten  im  Stärkekorne 
verdünnte  Jodjodkaliumlösung,  die  bei  langsamem  Zutritt  bloß  die 
letzteren  färben  soll.  Bei  Pellionia  soll  man  einen  grünen  zentralen 
Teil  von  einem  farblosen  Rande  unterscheiden  können.  Nach  Bus- 
CALiONi  ist  Chloroform  und  Chromsäure  zur  Darstellung  besonders 
der  Quellungserscheinungen  sehr  gut  geeignet. 

Hier  würden  natürlich  alle  jene  Färbemethoden  zu  erwähnen 
sein,  die  außer  der  Färbung  der  Stärkekörner  auch  die  Darstellung 
deren  Schichtung  bezwecken ,  doch  davon  später.  Eine  originelle 
Art  der  Sichtbarmachung  empfiehlt  H.  Fischer,  der  zum  Studium 
der  Schichtung  Mikrophotogramme  herstellt,  was  ihn  in  den  Stand 
setzt,  die  strukturelle  Übereinstimmung  der  geschichteten  Stärke- 
körner mit  in  Gummi  gezüchteten  Inulinsphäriten  zu  zeigen.  Die 
radiäre  Struktur  wurde  besonders  mit  Xylol- Alkohol  und  Erhitzen 
deutlich  gemacht. 

Färbung.  Seitdem  Correns  die  Versilberung  zum  Struktur- 
nachweis der  Membran  und  der  Stärkekörner  angewendet  hat,  wurden 
eine  ganze  Anzahl  Methoden  zu  gleichen  oder  ähnlichen  Zwecken 
empfohlen ,  die  entweder  auf  demselben  oder  dem  von  Zimmermann 
angewendeten  Prinzipe  beruhen.  So  hat  Lagerheim  eine  haltbare 
Stärketinktion  in  die  botanische  Mikrochemie  eingeführt,  die  im 
wesentlichen  darin  besteht,  daß  er  die  mit  einer  bestimmten  .Jodjod- 
kaliumlösung blaugefärbten  Stärkekörner  zunächst  mit  Silbernitrat 
behandelt,  der  Sonne  aussetzt  und  dann  das  so  erzeugte  Jodsilber 
mit  einem  Ilydrochinonentwickler  entwickelt.  Das  gut  ausgefallene 
Präparat  zeigt  die  Stärkekörner  braungefärbt.  Die  zu  hell  gefärbten 
Körner  können  „verstärkt"  werden.  Lagerheim  empfiehlt  die  er- 
zielte Färbung  für  Demonstrationszwecke.  Bei  aller  Anerkennung 
für  seine  Methode  kann  ich  die  Bemerkung  nicht  unterdrücken,  daß 
man  zur  Demonstration  immer  das  Geläufigste,  das  Alltägliche  ver- 
wenden soll,  und  da  scheint  mir  die  Braunfärbung  noch  nicht  die 
richtige  Vorstellung  von  dem  Bilde  der  vom  Zögling  später  hunderte 
Male  selbst  auszuführenden  Jodprobe  zu  liefern. 

Haltbare -Dauerfärbungen  der  Stärke  haben  weiter  noch  Schaff- 
ner   und    DoDGE    angegeben.      Das    Correns -Lagerheim  sehe    Silber- 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      223 

verfahren  fand  neuerdings  Salter  geeignet.  Zur  Tinktion  sollen 
Methyl-,  Gentianaviolett  und  Aramoniakfuchsin,  zur  Doppelfärbung, 
also  gleichzeitigen  Deutlichmachung  der  Chroruatophoren,  aufeinander- 
folgende Anwendung  von  Säurefuchsin  und  Gentiana-  oder  IMethyl- 
violett  gut  sein.  H.  Fischer  rät  behufs  Sichtbarmachung  der  Schich- 
tung an,  auf  die  Stärkekörner  von  Canna  indica  wässerige 
F'arbstotl'lösung  zu  tropfen ,  eintrocknen  zu  lassen  und  nachher 
Pikrinsäure  zuzusetzen.  Geeignet  sind  dazu  Fuchsin,  Safranin, 
Methyl-  und  Methylenblau,  denn  diese  fallen  bei  der  Behandlung  mit 
Pikrinsäure  als  feiner  Niederschlag  in  den  wasserreichen  Schichten 
aus.  Andere  Farbstotfe  sind  deshalb  ungeeignet,  weil  sie  entweder 
diffus  oder  gar  nicht  färben.  So  werden  Lösungen  von  Nigrosiu, 
Hessisch  Purpur,  Echtrot,  Ammoniak -Karmin,  Anilinblau,  Kongorot 
und  Zyanin  in  öOprozentigem  Alkohol  nicht  aufgenommen.  Methylen- 
blau dringt  langsam  ein.  Dagegen  färben  rasch  und  stark :  Fuchsin, 
Safranin,  Chrysoidin,  Malachitgrün,  Methyl-,  Jodgrün,  Gentianaviolett 
auch  in  stark  verdünnten  Lösungen. 

Abgesehen  von  diesen  Allgemeinfärbungen  der  Körner  sind  jeden 
falls  die  oben  angegebenen  über  die  Sichtbarmachung  der  Schichtung 
die  interessantesten,  auch  weil  sie  wiederum  einen  Beitrag  zur  Theorie 
der  Färbungen  zu  liefern  vermögen.  Aus  der  Tatsache  nämlich, 
daß  nur  die  wasserreichen  Schichten  in  den  genannten  Fällen  gefärbt 
erscheinen,  würde  man  sich  zu  dem  Schlüsse  berechtigt  glauben,  daß 
den  weicheren  Schichten  alleia  das  Farbstoffspeicheruugsvermögeu 
zukommt,  während  es  den  dichteren  ganz  abginge.  Dieser  Schluß 
stimmt  nun  mit  anderweitigen  Erfahrungen  Fischers  nicht,  die  ihn 
gerade  die  dichtesten  Partieen  am  intensivsten  gefärbt  erscheiuen 
ließen.  Merkwürdig  ist  auch  der  Befund,  daß  schwache  Lösungen 
der  oben  für  lokalisierte  Fällung  empfohlenen  Farbstoffe  bei  gleicher 
Nachbehandlung  nur  diffus  färben. 

Es  dürften  hier  Avohl  Versuche  wie  die  v.  Wisselinghs  über 
Zellulosefärbung  die  Möglichkeit  einer  iM'klärung  näherrücken.  In 
einer  späteren  Arbeit  hat  sich  H.  Fischer  des  Lagerhelm  scheu  Silber- 
verfahrens für  Dauerfärbungen  bedient  und  es  für  kleine  Stärkekörner 
nicht,  wohl  aber  für  große  ganz  ausgezeichnet  geeignet  gefunden. 
Noch  einfacher  aber  ist  es  nach  seinen  Erfahrungen,  die  stark  mit 
Jod  überfärbten  Stärkekörner  in  Kanadabalsam  zu  legen,  worin  sich 
der  Überschuß  farblos  löst  und  die  Stärkekörner  gefärbt  bleiben.  Eine 
interessante  Doppelfärbung  der  Stärkekörner  selbst  hat  Kkaemer  mit- 
geteilt.    Er  färbt  mit  verdünnten  wässrigen  Lösungen  von  Gentiana- 


224      ßichter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

violett  und  Safranin.  Dabei  färben  sich  nur  die  wasserreichen 
Schichten  und  das  Zentrum.  Mit  Jod  kann  er  nun  die  ungefärbt 
gebissenen  nachfärben.  Die  Doppelfärbung  wird  bei  60  bis  65 ^^  C. 
ausgeführt.  Mit  Clirorasäure,  Calciumnitrat  und  Speichel  kann  man 
noch  den  kristallinischen  Aufbau  deutlich  machen  und  auch  die  Lösungs- 
verhältnisse genauer  studieren.  —  Nach  Red  soll  auch  das  MANNSche 
Membranfärbeverfahren  zur  Tinktion  der  Stärkekörner  sehr  geeignet 
sein.  Im  Prinzipe  stimmt  mit  dem  Jod  -  Kanadabalsamverfahren 
H.  Fischers  eines,  das  Harz  unter  dem  Titel  „Jodparaffinöl,  ein  neues 
Mikroreagens  und  Einbettungsmediura",  in  dieser  Zeitschrift  verötfent- 
licht  hat,  überein.  Bereits  früher  hatte  er  auf  das  farblose  Paraftinöl 
als  gutes  Einbettungsmittel  für  Stärke  hingewiesen.  Nun  färbt  er  sie 
auch  noch  mit  Jod ,  das  im  Verhältnisse  1  :  100  im  Paraffin  gelöst 
wird.  Die  Stärke  wird  gelb  bis  dunkelbraun  und  zeigt  oft  eine 
scharfe  Differenzierung  in  dunkelbrauner  Farbe ,  die  pferdeschweif- 
artig  vom  Kornkern  ausgeht ,  nur  vereinzelte  Körner  werden  blau. 
Dabei  verhalten  sich  die  verschiedenen  Stärkesorten  verschieden. 
Auch  diese  Färbung  soll  für  Demonstrationszwecke  geeignet  sein. 

Und  mag  nun  die  Braunfärbung  noch  so  gut  gelungen  sein,  ein 
Bild  von  der  Blaufärbung  gibt  sie  nicht,  und  bevor  diese  nicht  — 
und  das  wird  wegen  des  nötigen  Wassergehaltes  recht  schwer  sein  — 
„haltbar"  gemacht  wird,  wird  für  die  Demonstration  der  „Jodprobe" 
kein  Fortschritt  zu  verzeichnen  sein. 

F 1 0  r  i  d  e  e  n  s  t  ä  r  k  e.  Wegen  ihres  eigentümlichen  Verhaltens  gegen 
Jodlösungen  wurden,  wie  bekannt,  die  von  VAn  Tieghem  und  Belzung 
untersuchten  stärkeartigen  Körnchen  in  den  Zellen  der  Flnrideen  als  Flo- 
rideenstärke bezeichnet.  Bis  1892  war  über  ihre  chemische  Zusammen- 
setzung noch  nichts  bekannt  und,  wenn  wir  aufrichtig  sein  wollen,  so  gilt 
dies  auch  heute  noch,  denn  die  beiden  großen  Arbeiten,  die  seither  sich 
mit  diesen  interessanten  Körpern  beschäftigt  haben,  enthalten  doch  eigent- 
lich bloß  sehr  wertvolle  Beiträge  zur  Kenntnis  ihres  Verhaltens  gegen  Jod- 
reagentien,  ihrer  Verbreitung  usf.,  ohne  über  ihre  Chemie  Aufschluß  geben 
zu  können.  Es  handelt  sich  um  die  Schriften  von  Kolkwitz  und  BtJTSCHLi. 

Läßt  man  nach  Kolkwitz  Florideenstärke  erst  in  Chloralhydrat  auf- 
hellen und  färbt  dann  mit  Judjodkalium,  so  kann  man  zwei  Farbennüancen 
beobachten,  den  Laurencia-  und  den  Furcellaria-Typus,  wovon  der  letztere 
dem  Kartoffel-,  der  andere  dem  Macistypus  nahekommt.  Beachtenswert  ist; 
daß  sicli  die  Stärke  von  Spermothamnium  Turneri  mit  Chloralhydrat  allein 
bläut.  Vermutlich  macht  dieses  Jod  aus  irgend  einer  Verbindung  frei; 
ganz  ähnlich  wirkt  Schwefelsäure  auf  die  Karposporen  von  Ceramium 
rubrum. 

BÜTSCHLi,  der  auch  die  makrochemischen  Eigenschaften  der  Florideen- 
stärke   berücksichtigt ,   kann    auf   Grund   ihres  Verhaltens   gegen   Jod,    in 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      225 

Daiapfform  oder  in  Lösung,  Jodjodkaliura  nach  Meyer,  Kaliumchh)rid  usf. 
mit  und  ohne  Vorbeliandlung-  mit  Kalihuige  eine  ganze  Skala  von  Farben- 
tönen bei  ihr  feststellen  von  Saccardo  vinosus  bis  zum  Saccardo  violaceus 
und  lividus  Saccardo. 

Trotz  dieser  Untersuchungen  kann  ich  also  wohl  auch  heute  noch 
diesen  Abschnitt  mit  Zimmekmanns  Schlußsatz  beschließen:  „Eine  genauere 
chemische  Untersuchung  über  die  Substanz  der  Florideenstärke  fehlt  zur- 
zeit noch." 

Phäophyceenstärke.  Schmitz  hatte  im  Cytoplasraa  von  Phäo- 
phyceen  farblose  Kcirnchen  beobachtet,  die  sich  mit  Jod  nicht  färben  sollten, 
Bertholi)  hatte  deren  Vorkommen  bestritten.  Haxsex  konnte  wiederum 
fettähnliche  Tropfen  wahrgenommen ,  die  in  Wasser  unlösHch  sind  und  in 
Glyzerin  zusammenfließen,  ohne  sich  darin  zu  lösen.  Sie  werden  mit  Jod- 
jodkalium dunkelbraun.  Kalilauge  läßt  sie  zunächst  deutlich  hervortreten, 
macht  sie  aber  bald  durch  Verseifung  schaumig.  In  90  ^/q  Alkohol  und  Äther 
sind  sie  leicht  löslich.  Hansen  spricht  daher  den  Phäophyceen  echte  Stärke 
vollständig  ab.  Schon  vorher  hat  Crato  die  von  B.  Hansteen  als  organoid 
beschriel)enen  merkwürdigen  Gebilde  der  Phäophyceenzelle  für  organisch 
erklärt  und  durch  Reaktionen  der  verschiedensten  Art  deutlich  zu  machen 
gesucht.  Auch  hatte  er  ihnen  einen  neuen  Namen  „Physoden"  gegeben. 
Die  neuerliche  Prüfung  ließ  nun  Hansteen  zur  Überzeugung  kommen,  daß 
seine  „Fukosankörner"  doch  organoide  und  nicht  organische  Gebilde  sind. 
Ganz  besonders  auffällig  ist  die  von  Crato  zuerst  beobachtete  Phlorogluzin- 
reaktion  dieser  Körper  mit  Linds  Reagens  (Vanillinsalzsäure).  In  jüngster 
Zeit  hat  Hunger  diese  Tatsache  bestätigen  und  hinzufügen  können,  daß 
1  °/o  Osmiumsäure  in  Meerwasser,  Schwärzung  der  Körper  erzeugt.  Hunger 
betont  ausdrücklich,  daß  nur  die  im  Zeillumen  liegenden  Inhaltskörper  von 
Dictyota  die  genannten  Reaktionen  geben. 

Wir  sehen,  daß  heute,  wo  noch  über  die  organische  oder  organoide 
Natur  dieser  Körper  der  Phäophyceenzelle  Uneinigkeit  herrscht,  von  der 
Erschließung  der  chemischen  Natur  dieser  Gebilde  gar  keine  Rede  sein  kann, 
müssen  aber  doch  zugeben,  daß  unsere  Erkenntnis  in  dieser  Richtung  im 
Laufe  der  letzten  10  Jahre  insofern  zugenommen  hat,  als  man  wenigstens 
das  Vorhandensein  derselben  nicht  einfach  mehr  hinwegdisputieren  kann. 
A.  ^Ieyer  findet  übrigens,  daß  die  Fukosankörner  zum  Teile  aus  Volutin 
bestehen. 

Amylinkörner  bei  Beggiatoa.  Hinze  beobachtete  bei  Beggiatoa 
mirabilis  Kiirner,  die  sich  mit  .lodjodkalium  bläulich  oder  bräunlich  färben 
und  die  im  Speichel  langsam  löslich  sind.  Hinze  hat  sie  deshalb  Amylin- 
körner genannt. 

Rote  Stärke  (Amylodextrin  oder  Dextrinstärke).  Der  Name  rührt, 
wie  bekannt,  von  dem  roten  Farbenton  her,  den  diese  Stärkesorte  mit  Jod 
liefert.  Eine  eingehende  Behandlung  hat  sie  durch  Shi.moyama  und  A.  Meyer 
erfahren.  Heinricher  fand  sie  wieder  im  Tracheidenkopf  und  den  Tracheiden 
der  Lathraea  clandestina  und  Squamaria,  während  im  Rindenparenchym  ge- 
wöhnliche Stärke  vorkommt.  Jodalkohol  färbt  gelblich,  Jodjodkalium  rot- 
braun. Einige  Stärkekörner  sind  sogar  aus  „blauer"  und  aus  „roter"  Stärke 
zusammengesetzt,  und  zwar  so,   daß  die  rote  die  Hülle  der  blauen  bildet. 

Zeitsohr.  f.  wiss.  Mikroskorie.     XXII,  2.  l.Ö 


226      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2, 

MacDougal  fand  sie  in  den  Sommerknollen  von  Isopyrura.  Sperlich  beob- 
achtete sie  im  hyalinen  Gewebe  der  inlialtsreichen  Haustorien  von  Rhinan- 
taceen.  Der  Nachweis  gelang  nur  nach  Zerstörung  des  Inhaltes  mit  Eau 
de  Javelle.    • 

Braune  Stärke.  Bei  seinen  Untersuchungen  mit  der  von  ihm  ein- 
geführten Jodrailchsäure  fand  Lagerheim  nun  auch  Amylodextrinkörner, 
die  sich  bräunten,  in  den  Kelchblättern  von  Anemone  nemorosa,  A.  nemo- 
rosaranunculoides,  nicht  bei  A.  ranunculoides,  wodurch  die  „mikrochemischen 
Stärkesorten"  wieder  um  eine  vermehrt  erscheinen. 

Verwandte  Stoffe.  1)  Amyloid.  Nach  v.  Wisselingh  wird  es  durch 
eine  Lösung,  die  0Ü4prozentiges  Jod,  0'4prozentiges  Jodkalium  und  lOpro- 
zentige  Schwefelsäure  enthält,  gebläut.  Zellulose  braucht  einen  höheren 
Schwefelsäuregehalt  zur  Blaufärbung,  daher  können  beide  gut  unterschieden 
werden.  Auch  Riedel  hat  sich  mit  dem  Körper  beschäftigt.  2)  Die  Kis- 
liche  Stärke.  Mit  diesem  Ausdruck  scheint  zweierlei  bezeichnet  zu  werden. 
Die  Botaniker  verstehen  darunter  Körner,  wie  sie  im  Zellsafte  der  Epidermis- 
zellen,  z.  B.  von  Saponaria  ofticinalis  vorkommen,  die  Chemiker  aber  jenes 
Produkt,  das  entsteht,  wenn  man  Kartoffelstärke  mit  Salzsäure  von  7'5  Pro- 
zent übergießt,  2  Tage  bei  Zimmertemperatur  stehen  läßt,  abgießt  und  diese 
Prozedur  zweimal  wiederholt,  worauf  mit  Wasser  ausgewaschen  und  ver- 
dünntes Natriumkarbonat  zugesetzt  wird.  Da  sie  sich  selbst  bei  Kochhitze 
nicht  mit  Gelatine  mischen  läßt,  kann  man  die  erzeugte  Emulsion  nach 
Beijerinck  zu  interessanten  Demonstrationen  verwenden:  Nachahmung 
eines  künstlichen  Zellgewebes,  bei  dem  die  Zwischenwände  aus  Stärke,  der 
„Zellinhalt"  aus  Gelatine  besteht  oder  eine  Art  Imitation  autochthoner 
Stärke  u.  dergl.  mehr.  Bei  Erhöhung  des  Gelatinegehaltes  scheidet  sich  die 
Stärke  in  der  Gelatine  in  Form  von  Körnern  ab,  die  aber  keine  Doppel- 
brechung zeig.^n  und  somit  kein  neues  Licht  auf  die  Struktur  und  Bildungs- 
weise der  Stärke  zu  werfen  vermögen. 


8.  Schwefelkohlenstoff. 

Das  auf  Java  sehr  verbreitete,  auf  alten  abgefallenen  Zweigen  von 
Podocarpus,  toten  Bambusstengeln  und  totem  Zuckerrohr  vorkommende 
Schizophytum  lobatum  Bref. ,  erzeugt  nach  Went  am  Myzel  eigenartige 
kurze  Seitenzweige,  an  deren  Spitze  Tröpfchen  einer  stark  lichtbrechenden 
Flüssigkeit  zu  erscheinen  pflegen.  Gleichzeitig  beobachtet  man  einen  auf- 
fälligen Geruch  nach  Schwefelkohlenstoff.  Um  die  Schwefelkohlenstoff- 
ausscheidung nachzuweisen,  wurde  der  Pilz  in  Kultur  genommen  (Zucker- 
pepton)  und  das  in  alkoholischer  Kalilauge  aufgefangene  Destillat  der 
Kulturflüssigkeit  näher  untersucht.  Der  nach  entsprechender  Behandlung 
entstandene  Niederschlag  von  xanthogensaurem  Kupfer  wies  auf  das  Zu- 
treffen der  Annahme  hin. 

Es  wäre  gewiß  eine  dankbare  Aufgabe,  mikrochemisch  in  den  Gutta- 
tionströpfchen vielleicht  den  Schwefelkohlenstoff"  nachzuweisen. 


XXII,  2.     Ricliter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      227 


9.  Aspar.ngiu  und  Leuciii. 

Von  neueren  Arbeiten  über  Asparagin  seien  genannt:  Die  Belzuxgs 
„Sur  divers  principes  issus  de  la  germination  et  leur  oristallisation  intra- 
cellnlaire"  und  L(iws  „Das  Asparagin  in  pflanzencheiuischer  Beziehung". 

Belzung  teilt  mit,  daß  das  Asparagin  auch  intracellulär  zur  Kristal- 
lisation gebracht  werden  könne,  wenn  man  die  zu  untersuchenden  asparagin- 
haltigen  Schnitte  in  reines  Glyzerin  übertrage.  Es  kristallisiert  dann  in 
rhombischen  oder  rechteckigen  Tafeln  aus. 

Auch  das  Leucin  hat  Belzung  in  analoger  Weise  kristallisieren 
lassen.  Es  fällt  in  Glyzerin  in  herzförmigen  Lamellen  aus.  (Versuchs- 
objekt Lupinus  albus.) 

10.  Blausäure  HCN. 

Treub  ist  es  gelungen ,  die  Reaktion  auf  Blausäure  mikrochemisch 
auszuwerten.  Behandelt  man  nämlich  nicht  zu  feine  Schnitte  von  Pangium 
edule  mit  alkoholischer  Kalilauge,  Eisensulfat-Eisenchlorürlösung  und  20pro- 
zentiger  Salzsäure ,  so  entsteht  in  den  blausäurehaltigen  Zellpartien  ein 
Niederschlag  von  Berlinerblau.  Um  die  Verteilung  der  Blausäure  auch 
makroskopisch  zu  demonstrieren ,  muß  man  die  Blätter  zunächst  durch 
einen  Schlag  mit  der  Bürste  mit  möglichst  vielen  Wunden  versehen;  es 
entstehen  nachher  bei  der  Reaktion  rings  um  die  Wunden  blaue  Flecke. 
Natürlich  ist  bei  Treub s  Versuchsanstellung  der  Einwand  gestattet,  daß 
auch  durch  Zersetzung  entstandene  Blausäure  angezeigt  wird,  doch  kann 
im  Falle  Pangium  davon  abgesehen  werden,  da  Greshoff  makroskopisch 
Blausäure  bei  dieser  Pflanze  nachgewiesen  hat.  In  ausführlicher  Weise  hat 
er  190.5  seine  Erfahrungen  in  der  Arbeit  „Nouvelles  recherches  sur  le 
röle   de   l'acide  cyanhydrique  dans   les  plantes   vertes"   zusammengestellt. 


B.   Aromatische  Reihe. 
1.  Plieuole.^ 

Phloroglucin  €«113(011)3.  Weselsky  hat  bekanntlich  eine,  wie 
man  bisher  meinte,  präzise  Reaktion  auf  Phloroglucin  veröffentlicht,  die 
darauf  beruht,  daß  stark  verdünnte  Lösungen  dieses  Körpers  mit  salpeter- 
saurem Toluidin  und  sehr  verdünnte  Lösungen  von  salpetersaurem  Kalium 
oder  Natrium  ein  Gemisch  liefern,  das  anfangs  farblos,  später  gelblich, 
dann  (u-angerot  wird   und    zum  Schlüsse  einen  zinnoberroten  Niederschlag 


^)  Eine  Übersicht   über   die  Reaktionen   der  Phenole  hat  H.  Behrens 
in  seiner  Arbeit  „Mikrochemischer  Nachweis  und  Unterscheidung  der  Phenole" 


und  in  seiner  A.  z.  m.  A.  d.  0.  V.  gegeben. 


15  = 


228      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

absetzt.  Th.  v.  Weixzierl  hat  AVeselskys  Probe  für  mikroskopische  Zwecke 
ausgewertet.  Später  wurde  nach  den  großen  Fortschritten,  die  die  Holz- 
untersuchung durch  WiESXERS  Holzstoftprobe  mit  Phloroghicin-Salzsäure 
gemacht  hatte  und  nach  der  vermutungsweisen  Feststellung  Singers, 
Vanilhn  sei  der  Träger  der  Holzreaktion,  von  Lindt  Vanillin-Salzsäure  zum 
Phloroglucinnaehweise  verwendet.  Beide  Phloroglucinproben  wurden  bisher 
als  eindeutig  und  unzweifelhaft  sicher  angeselien.  Möller  stellte  nun 
neue  vergleichende  Versuche  über  mikrochemische  Reaktionen  an  und  kam 
in  seiner  Arbeit  „Über  das  Vorkommen  von  Phloroglucin  in  den  Pflanzen" 
zu  dem  Schlüsse,  daß  sowohl  makroskopisch  wie  mikroskopisch  überall  dort, 
wo  LixDTs  Probe  gelinge,  auch  die  Gerbstoffprobe  zu  erzielen  sei,  und  zwar 
mit  gleicher  Intensität  und  gleicher  Lokalisation,  ja  noch  mehr,  er  konnte 
in  denselben  Zellen  durch  Salzsäurebehandlung  die  eine  Probe  in  die  andere 
überfüliren,  so  daß  man,  je  nach  Zusatz  von  Eisensalzen  oder  Salzsäure  und 
Vanillin,  folgende  Farbenfolge  bekam:  Dunkelblau,  gelb,  farblos,  rot,  farb- 
los, dunkelblau.  Dadurch  ist  den  Phloroglucinproben  scheinbar  sehr  viel 
an  Wert  genommen,  und  alle  Fälle  von  Phloroglucinnachweis  vor  und  nach 
Möller,  die  sich  noch  auf  die  Vanillin-Salzsäureprobe  stützen,  sind  heute 
als  doppeldeutig  anzusehen;  vgl.  Klemm s  Nachweis  von  Phlorogluzin  mit 
LiNDTs  Reagens  in  den  Granulationskörnchen,  den  Cratos  bei  seinen 
„Physoden",  Hansteens  „Fukosankörnern",  ebenso  den  Hungers  beim 
Assimilationsprodukte  von  Dictyota,  vgl.  auch  Brexxers  Phloroglueinprobe 
bei  Idioblasten  von  Fettpflanzen.  Aus  demselben  Grunde  erscheint  Czapeks 
Vorschlag,  statt  der  Vanillinsalzsäure  Hadromalsalzsäure  zu  verwenden 
stark  in  seiner  Bedeutung  geschädigt,  der  ohnehin  mit  dem  Nachteil 
zu  rechnen  hatte,  daß  das  Hadromal  erst  dargestellt,  noch  ein  Mixtum 
compositum  ist,  während  Vanillin  leicht  käuflich,  rein  in  Verwendung 
kommen  kann. 

Die  Möller  sehe  Arbeit  scheint  übrigens  Waage  s  Beobachtungen 
über  die  Speicherung  von  Methylenblau  in  „Phlorogluzinzellen"  zu  erklären. 

2.  Säuren. 

Ty  rosin.  Im  großen  und  ganzen  ist  heute  noch  die  Borodin  sehe 
Methode  des  Tyrosinnachweises  üblich.  So  hat  sich  ihrer  Shibata  in  seinen 
„Beiträgen  zur  Wachstumsgeschichte  der  Bambusgewächse"  bedient.  Er 
findet,  daß  die  rote  Auflösung  in  Millons  Flüssigkeit  ein  ganz  ausgezeich- 
netes Erkennungsmerkmal  abgibt.  Zur  Feststellung  der  Verteilung  des 
Tyrosins  sei  das  Einlegen  in  MiLLONsches  Reagens  sehr  zweckmäßig,  wo- 
durch die  tyrosinreichen  Zellen  sofort  intensiv  rot  würden. 

Eine  Verwechslung  mit  der  Eiweißprobe  könne  mit  Auslaugen  der 
Schnitte  in  absolutem  Alkohol  ausgeschlossen  werden.  Saito  beobachtete 
Rotfärbung  der  Bastzellen  verschiedener  Monokotyledonen  mit  Millon  und 
ist  geneigt,  wenigstens  bei  Bambusa,  Tyrosin  als  Ursache  anzunehmen. 

Übrigens  ist  er  mit  dieser  Annahme  nicht  zuerst  vorgetreten,  da  schon 
Correns  gelegentlich  seiner  Widerlegung  Wiesners  auf  die  durch  Millon 
bewirkte  Rotfärbung  der  Membranen  in  Bromeliaceenblättern  zu  sprechen 
kommt  und  sie  auf  Tyrosin  zurückführt. 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      229 


3.  Aldehyde. 

Vanillin  0^11^0^  (Schmelzpunkt  bei  80*').  Zur  Orientierung  über 
das  Vorkommen  des  Vanillins  sei  auf  W.  Busses  „Studien  über  die  Va- 
nille" und  J.  Behrens'  Arbeit  „Über  das  Vorkommen  des  Vanillins  in  der 
Vanille''  verwiesen.  —  Indem  ich  der  geschichtlichen  Entwicklung  etwas 
vorgreife ,  reihe  ich  das  von  Czapek  als  neu  beschriebene  Hadromal  in 
das  Kapitel  über  Vanillin.  Bekanntlich  iiat  Czapek  durch  entsprechende 
Präparation  aus  dem  Holze  einen  aldehydartigen  Körper  isoliert,  der  stark 
nach  Vanillin  roch  und  die  Proben  dieses  Stotfes  in  ganz  besonderer  Weise 
zeigte.  Czapek  hat  ihn,  weil  eine  volle  Identifizierung  nicht  möglich  war,  als 
neu  beschrieben  und  mit  dem  Namen  Hadromal  belegt  (vgl.  Holz).  Da  es 
nun  aber  Gräfe  gelungen  ist,  dessen  Zusammensetzung  aus  Vanillin  (C^H^, 
O3),  Brenzkatechin  (C„IIuO.,)  und  2  bis  5  Methylfurfurol  (C^^HyO^)  zu  er- 
weisen, stehe  ich  nicht  an,  auch  das  Hadromal  unter  Vanillin  zu  subsumieren, 
soweit  es  nicht  aus  den  beiden  andern  Komponenten  besteht. 

Wie  die  Sache  heute  liegt,  gibt  es  kein  Hadromal  mehr  und  die  Zahl 
der  wichtigen  pflanzlichen  aromatischen  Aldehyde  ist  wieder  auf  die  Zahl  fünf 
beschränkt,  wenn  man  nicht  die  von  Geneau  und  LtDFORSS  beschriebenen 
dazu  rechnen  will.  Auf  Grund  von  FarbstoftVeaktionen  (Eintreten  der  Fär- 
bung mit  Schiffs  Reagens)  nimmt  nämlich  Geneau  auch  einen  beson- 
deren Aldehj'dstoflf  in  Cuticulahäuten  an,  und  Lidforss  vermutet  einen 
aromatischen  Aldehyd  in  den  elaioplastenartigen  Gebilden  der  Epidermis- 
2ellen  von  Potamogetonarten. 


4.  Kohlenwasserstoffe  {L\qK^,.)u. 

Über  ätherisches  Öl  vergleiche  das  Kapitel  „Unterscheidung  des 
fetten  und  ätherischen  Öles"  (oben  p.  214). 

Myrrhe.     Über  ein  Reagens  auf  Myrrhe  vgl.  E.  Hirschsohn. 

Harze.  Überblickt  man  die  Erfahrungen  Heckels  und  Schlagden- 
hauffens  über  die  nahe  Verwandtschaft  von  Gerbstoffen  und  Harzen  und 
deren  Entdeckung  eines  Gerbstoffharzes  bei  Spermolepis,  Rymoschs  über 
die  Harzreaktion  eines  Öls  mit  Kupferacetat  und  Buscalionis  über  die 
Rotfärbung  von  Harz  mit  Sudan  III,  so  kann  man  nicht  anders  als  Tschirch 
recht  geben,  wenn  er  meint,  es  gebe  kein  einheitliches  Harzreagens,  denn 
„Harz"  sei  wie  „Gerbstoff"  ein  Sammelbegriff  der  verschiedensten  Sub- 
stanzen. Er  umfasse  Verwandte  der  Öle  und  Fette  und  der  Gerbstoffe. 
Doch  gebe  es  gewisse  Mittel  der  Unterscheidung:  Chloralhydrat  löst  Fette 
schwerer  als  Harzbalsam.  Vorzügliche  Resultate  liefert  die  Verseifungs- 
methode,  die  sich  darauf  gründet,  daß  sich  in  Harzsekreten  fast  immer 
Terpene  finden,  die  unverseif bar  sind,  und  daß  die  Glyzerinester  und  Fett- 
säuren bei  Behandlung  mit  Alkalihydraten  schon  in  der  Kälte  Seifen  liefern, 
die   in  Wasser  löslich   sind.    Doch   versagt  sie  natürlich  überall  dort,  wo 


^)  Behrens,  A.  z.  m.  A.  d.  w.  0.  V.,  1.  H.,  1895,  p.  57 — 63. 


230      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

die  im  Kali  nicht  löslichen  Bestandteile,  Resene  und  Terpene,  in  Harzsekreten 
fehlen  oder  gegen  die  löslichen,  Oleole,  Resinole  und  die  Resinolsäuren,  stark 
zurücktreten.  Handelt  es  sich  aber  nicht  um  genauere  Unterscheidungen, 
so  wird  immer  noch  die  Unverdorben -Franchimont  sehe  Kupferacetat- 
probe  recht  geeignet  sein;  man  sieht  sie  daher  noch  allgemein  in  An- 
wendung. So  benutzte  sie  Frau  Schwabach  bei  ihren  Studien  über  Harz- 
abscheidungen.  Zalewski  verwendete  heißes  Kupferoxalat  zum  Nacliweis 
der  HarzfüUung  der  Resinocysten.  —  Nach  Trotter  gibt  das  eigenartige 
Sekret  mancher  Eichengallen,  das  auf  diesen  einen  glänzenden  Belag  bildet, 
harzartige  Reaktionen  und  Tichomirow  weist  Harze  in  intracellulären  Ein- 
schlüssen nach.  —  Kristallisation.  Molisch  gelang  die  Kristallisation 
des  Aloins  in  den  Aloinzellen  von  Aloe  succotrina  mittels  Glyzerin. 

Kautschuk.  Eine  Unterscheidung  von  Kautschuk  und  Harz  unter 
dem  Mikroskope  ist  nicht  leicht,  auch  existierten  keine  mikrochemischen 
Methoden  der  Unterscheidung.  Man  war  daher  geneigt,  weil  die  makro- 
clieraische  Analyse  z.  B.  beim  Ficusmilchsafte  im  wesentlichen  Kautschuk 
ergeben  hatte,  die  größeren  Kügelchen,  die  die  Hauptmasse  bildeten,  als 
Kautschuk  anzusprechen  und  anzunehmen,  daß  die  kleineren  Harztröpfchen 
seien.  Molisch  hat  gezeigt,  daß  die  Kügelchen  sich  zum  Teil  in  Alkohol 
lösen,  während  der  Rest  nach  den  physikalischen  Eigenschaften  zu  schließen 
aus  Kautschuk  besteht.  Die  Kügelchen  sind  löslich  in  Äther,  Benzol  und 
Schwefelkohlenstoff,  unlöslich  in  Wasser,  Glyzerin,  verdünnten  Sauren  und 
Alkalien.  Chloralhydrat  macht  sie  quellen  und  wandelt  sie  in  amöben- 
artige Massen  um.  Alkanna  fiirbt  sie  wie  ätherisches  Ol  und  Fette.  Hervor- 
gehoben aber  sei,  daß  sie  mit  konzentrierter  Zuckerlösung  und  Schwefel- 
säure sehr  schön  die  RASPAiLsche  Reaktion  geben,  wodurch  zu  weiterer 
Vorsicht  bei  der  Anwendung  von  Eiweißreaktionen  gemahnt  wird,  vgl. 
Krasser.  —  Fritsch  hat  beim  Studium  des  Kautschuks  bei  Hippocrateaceen 
gefunden,  daß  dieser  lebhafte  Doppelbrechung  zeigt,  die  beim  Kochen  mit 
Wasser  und  bei  Einwirkung  heißer  Kalilauge  verloren  geht,  um  nachher 
wieder  aufzutreten.    Beim  Erwärmen  verflüchtigt  sich  dieser  Kautschuk. 

Guttapercha.  Mit  dem  Kautschuk  wird  oft  ein  anderer  Stoff 
pflanzlichen  Ursprungs  verwechselt,  dessen  Studium  sich  Obach  gewidmet 
hat,  die  Guttapercha.  Der  chemischen  Zusammensetzung  nach  besteht  sie 
aus  Kohlenwasserstoffen  der  Terpenreihe,  von  denen  die  wichtigsten  sind 
Isopren  (C^Hg)  und  Kautschin  (C^qÜ^q),  die  nämlichen  Stoffe,  die  auch  aus 
Kautschuk  isoliert  worden  sind.  Sie  ist  das  Rohprodukt  aus  dem  Milch- 
safte des  Guttaperchabaumes  (Taban  Merah,  Palaquium  Gutta),  einer  Sapo- 
tacee.  Da  wir  es  hier  offenbar  mit  einem  sehr  interessanten  Stoffe  der 
Kautscliukgruppe  zu  tun  haben,  habe  ich,  obwohl  mikrochemisch  hier  noch 
nicht  viel  geleistet  ist,  diese  Notiz  in  mein  Referat  mit  aufgenommen. 


5.  Glykoside. 

Trotz  aller  Versuche,  einheitliche  Reagentien  für  die  Glykosidgruppe 
zu  ermitteln,  besitzen  wir  heute  ebensowenig  eines  wie  zur  Zeit  der  Ver- 
öffentlichung der  Mikrotechnik  von  Zimmermann. 


XXII,  2.     Kicliter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      231 

Nachdem  Weevers  darauf  aufmerksam  gemacht  hatte,  daß  die  übliche 
Methode,  Glykoside  durch  Behandlung  der  Objekte  mit  konzentrierter 
Schwefelsäure  nachzuweisen,  keine  einwandfreien  Resultate  liefert  und  daß 
auch  die  von  Molisch  eingefülirte  «-Naphtol-Probe,  auf  Glykoside  ange- 
wandt, entsprechende  Vorsicht  erheische,  schien  Goris  für  kurze  Zeit  das 
Problem  gelöst  zu  haben,  indem  er  Sonnenscheins  eisenhaltige  Salpeter- 
säure und  Ammoniak  auf  glykosidhaltige  Zellen  anwandte.  Daß  er  sich 
auch  getäuscht  hat,  konnte  Cazzani  zeigen  (vgl.  Gerbstoffe).  Es  erübrigt 
daher  eine  kurze  systematische  Besprechung  der  Reaktionen  einiger  Gly- 
koside. Salicin:  Nach  Weevers  ist  es  am  geeignetsten,  die  Spaltungspro- 
dukte dieses  Glykosids  nachzuweisen,  doch  ist  es  bisher  nicht  gelungen, 
diese  sekundär  auftretenden  Körper  lokalisiert  zu  fällen,  nach  Gorris  kann 
es  mit  selensaurem,  in  Schwefelsäure  gelöstem  Natrium  sichtbar  gemacht 
werden.  Aesculin:  Zu  seinem  Nachweis  ist  Sonnenscheins  Reagens  be- 
sonders empfehlenswert.  Es  zeigt  schöne  Rotfärbung.  Fustin  wird  nach 
Goris  mit  Sonnenschein  schem  Reagens  schwach  rot,  Fraxinin  auf  gleiche 
Weise  behandelt :  veilchenblau,  wird  mit  Kalilauge,  Ammoniak  und  Calcium- 
oxydhydrat  gelb  ('?),  Daphnin  wird  mit  Kalilauge  gelb.  Anthokyan  gehört 
nach  Weigert  und  Overton  auch  in  diese  Gruppe  und  soll  an  Gerbstoff 
gebunden  sein.  Gorris  hält  auch  eine  Bindung  der  gewöhnlichen  Glykoside 
mit  Gerbstoff  für  möglich. 

Indikan.  Die  Muttersubstanz  des  Indigo  ist  ein  farbloses  Glykosid, 
das  Indikan,  das  durch  die  verschiedensten  Agentien  in  Indigblau  und  eine 
Zuckerart  gespalten  werden  kann.  Um  nun  diese  Zerspaltung  innerhalb 
der  indikanhaltigen  Zellen  zu  bewirken,  bringt  Molisch  die  lebenden  Pflanzen- 
teile in  Alkoholdampf.  Nach  24  Stunden  ist  die  Abspaltung  des  Indigo- 
blaus erfolgt,  das  durch  Extraktion  des  Chlorophylls  mit  Alkohol  schon 
makroskopisch  sichtbar,  der  SACHSschen  Jodprobe  entsprechend,  einen  Über- 
blick über  die  Verteilung  des  Indigos  und  seiner  Muttersubstanz  gestattet. 
Mikroskopisch  wird  am  besten  in  einer  Chloralhydratlösung  5:2  be- 
obachtet. Man  steht  in  dem  Präparate  Körnchen  oder  Kriställchen  von 
Indigo.  Die  Molisch  sehe  Indikanprobe  läßt  sich  natürlicli  auch  mit  40- 
prozentigem  Alkohol  erzielen,  doch  da  das  Indikan  in  Alkoliol  löslich  ist, 
wird  es  sich  teilweise  der  Beobachtung  entziehen.  Bleibt  uian  dagegen  bei 
der  Alkoholdampfeinwirkung,  so  gelingt  es  auch  bei  einiger  Übung,  den 
Sitz  des  Indikans  im  Chlorophyllkorn  zu  ermitteln.  Behandelt  man  nämlich 
nach  Molisch  Blätter  von  Phajus  grandifolius,  Isatis  tinctoria  mit  Alkohol-, 
Ammoniak-  oder  Chloroformdämpfen,  so  erweist  sich  das  Indigblau  auf  die 
Cidorophyllkörner  der  jungen  Blätter  lokalisiert.  Es  scheint  also  das  In- 
dikan im  Chlorophyllkorn  zu  entstehen.  —  Indikan  beobachtete  Molisch 
auch  bei  seinen  Untersuchungen  über  Milch-  und  Schleimsaft  in  dem  die 
Milchröhren  begleitenden  Mesophylle  von  Echites  religiosa. 

Eine  zusammenfassende  historisch  -  histologisch  -  mikroskopisch  -  mikro- 
chemische Skizze  von  Molisch  ist  in  Wiesners  „Rohstoffen"  erschienen, 
aus  der  nur  die  Verwendung  der  Sublimation  des  Indigos  und  seine  leichte 
Unterscheidbarkeit  von  künstlich  erzeugtem  Indigo  hervorgehoben  sein 
mögen,  Bemerkungen,  die  um  so  wichtiger  sind,  als  es  1878  Baeyer  gelang, 
das  Isatin  und  damit  den  Indigo  künstlich  <larzustellen. 


232      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Saponarin.  Das  von  Barger  genauer  studierte  Glykosid  färbt 
sich  mit  Jod  intensiv  blau.  Es  scheint  einem  Flavonderivat  anzugehören 
und  eine  gewisse  Ähnlichkeit  mit  dem  Scutellarin  von  Molisch  und  Gold- 
SCHMIEDT  zu  haben. 


0.  Farbstoffe. 

a)  Chlorophyll. 

Mikrochemische  Reaktionen.  Die  Zahl  der  raikrocliemi- 
schen  Reaktionen  auf  Chlorophyll  war  nicht  gerade  groß.  Mit  Aus- 
nahme der  Hypochlorin-  oder  Chlorophyllanreaktion,  die  nach  A.  Meyer 
mit  Eisessig  ausgeführt  wird,  sucht  man  in  Zimmermanns  Mikro- 
technik  vergebens  nach  einer  zweiten.  —  Eine  neue  Reaktion  hat 
Molisch  angegeben.  Schon  1892  fand  er  bei  seinen  Untersuchungen 
über  das  Eisen,  daß  das  Chlorophyll  in  gesättigter  Kalilauge  sofort 
hellbraun,  nach  wenigen  Minuten  oder  einer  Viertelstunde  aber  wieder 
grün  wird.  Dieses  Umschlagen  von  Braun  in  Grün  geht  sofort  und 
viel  schöner  beim  Erwärmen  oder  Hinzufügen  von  Alkohol  vor  sich. 
Die  Reaktion  gelingt  bei  zahlreichen  Objekten,  auch  bei  solchen,  die 
jahrelang  im  Herbar  gelegen  hatten.  Das  einmal  gebildete  Alkali- 
chlorophyll läßt  natürlich  nach  dem  Auswaschen  mit  Wasser  und 
neuerlicher  Behandlung  mit  Kalilauge  keinen  Farbenumschlag  mehr 
eintreten.  Auch  wenn  das  Chloropliyll  nur  mit  verdünnter  Kalilauge 
behandelt  wird,  gelingt  die  Reaktion  nicht  mehr.  Bei  Diatomeen  und 
Phaeophyceen  ist  vorherige  Behandlung  mit  siedendem  Wasser  not- 
wendig. Bei  Florideen  und  Cyanophyceen  machen  die  gleichzeitigen 
Farbstoflfreaktionen  die  Chlorophyllprobe  minderwertig.  Tswett  hat 
im  selben  Jahre  mit  Wasserstoffsuperoxyd  und  Ferrocyankalium 
experimentiert  und  die  Hypochlorinreaktion  genauer  studiert.  Essig-, 
Phosphor-  oder  Salzsäure  lassen  deutlich  dichroitische  Kristalle  auf- 
treten. Überdies  scheint  Kaliumpermanganat  zur  Deutlichmachung 
der  Struktur  der  Chloroplasten ,  Schwefel-  und  Salpetersäure  aber 
wegen  der  Lösung  der  Stärke  für  die  Untersuchung  sehr  ge- 
eignet. In  der  Folge  fand  Tswett,  daß  konzentrierte  Lösungen  von 
Dioxybenzolen  (Resorcin,  Pyrokatechin)  Proteinstofie  lösen  und  ver- 
flüssigen. Das  Cytoplasma  wird  in  Resorcin  sofort  gelöst,  die  Chloro- 
phyllköruer  ballen  sich  dagegen  zu  hyalinen,  halbflüssigen  Massen  zu- 
sammen, nachdem  sich  in  ihnen  kleine  grüne  Tröpfchen  abgeschieden 
haben.  Alkalisches  Resorcin,  das  rascher  wirkt,  löst  die  Chloroplasten 
und  der  Farbstoff"  der  ganzen  Zelle  fließt  in  große  Kugeln  zusammen. 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Milvrocheniie.      238 

die  al«  Chloroglobin  bezeichnet  werden.  Beim  Answaschen  mit  Wasser 
oder  Glyzerin  ballt  sich  der  Farbstoff  in  Klumpen  zusammen.  Mit 
Chloralhydrat  erhält  man  ähnliche  Resultate.  Bei  Einwirkung  von 
neutraler  Resorcinlösung  auf  Chloroglobin  entstehen  Karotinkristalle. 
Säuren  rufen  Chlorophyllanbildung  hervor.  Eiweißprobe  gibt  das 
Chloroglobin  nicht. 

Molisch  weist  endlich  Indikan  durch  Indigobildung  im  Chloro- 
phyllkorne der  Indikanptlanzen  nach  (man  vgl.  das  Kapitel  Glykoside). 

Fixierung  und  Färbung  der  C h  1  o r o p  1  a s t e n.  —  Angaben 
über  Fixierung  und  Färbung  bei  Oltmanns,  Salter  u.  a.  —  Buscalioxi 
kann  mit  Sudan  III  iin  Chlorophyllkorn  gewisse  winzige  Körnchen  intensiv 
rot  färben,  während  das  Korn  sonst  zart  rot  bleibt.  Prowazek  benutzt 
einprozentige  Chromessigsäure  zur  Fixierung  und  Gentianaviolett  zur  Fär- 
bung der  Chromatophoren. —  Panachure  und  Chlorose.  Zimmermann 
konnte  Chromatophoren  in  chlorotischen  Blättern  nachweisen ,  auch  bei 
panachierten  kommen  scharf  abgegrenzte  Chromatophoren  vor,  nur  bei  ganz 
weißen  können  sie  fehlen.  Weitere  Aufschlüsse  gibt  Kohls  Arbeit  über 
Karotin.  In  neuester  Zeit  hat  Pantanelli  Sublimat -Pikrinsäure,  Säure- 
fuchsin oder  Gentianaviolett  für  die  Darstellung  der  Chromatophoren  jjana- 
chierter  Blätter  als  zweckmäßig  angegeben. 

b)  Karotin. 

Dem  bisherigen  Nachweise  des  Karotins  gegenüber  stellt  das  von 
Molisch  angegebene  Kristallisationsverfahren  einen  bedeutenden  Fort- 
schritt vor,  auf  dem  auch  die  von  Kohl  vorgeschlagene  Gliederung  in 
Eukarotine  und  Karotinine  beruht. 

Nach  dem  von  Molisch  als  Kalimethode  bezeichneten  Verfahren 
werden  die  frischen  grünen  Blätter  oder  kleine  Stücke  derselben  in 
40voluinprozentigen  Alkohol,  der  20  Gewichtsteile  Kalilauge  gelöst 
enthält,  gelegt  und  darin  mehrere  Tage,  gewöhnlich  solange  bei  Ab- 
schluß von  Licht  belassen,  bis  alles  Chlorophyll  ausgezogen  ist.  Ist 
dies  geschehen,  so  wird  die  Kalilauge  durch  destilliertes  Wasser  aus- 
gewaschen. Schließlich  werden  die  Blattfragmente  zum  Zwecke 
mikroskopischer  Beobachtung  in  Glyzerin  übertragen.  Man  findet 
dann  innerhalb  der  früher  chlorophyllführenden  Zellen  das  Xantho- 
phyll  (Karotin)  in  der  Regel  in  Kristallform  abgeschieden,  selten  in 
Form  gelber  Tröpfchen  oder  den  Zellinhalt  durchtränkend. 

Etwa  bei  100  Phanerogamengattungeu  wurde  auf  diese  Weise 
die  Kristallisation  erzielt.  Auch  eine  neue  Reaktion  auf  diese  Kri- 
stalle konnte  in  Phenol-  oder  Thymol-Salzsäure  angegeben  werden. 
Bei  Algen    tritt    die  Kristallisation    auch    oder  nur    außen    auf.     Bei 


234      Kichter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Oscillaria  leptotrioha  erzielt  man  mit  Essigsäure  allein  die  Kristalli- 
sation. Dabei  geht  Chlorophyll  und  Karotin  aus  den  Zellen,  während 
das  Phykoeyan  allein  in  ihnen  zurückbleibt. 

Zum  direkten  Nachweise  des  Karotins  erwies  sich  nach  Kohls 
kritischer  Behandlung  des  Gegenstandes ,  auf  dessen  Literatur- 
zusammenstellung ich  verweise,  konzentrierte  Schwefel-,  konzentrierte 
Salpeter-  und  Salzsäure,  diese  mit  Phenol  oder  Thymol,  Bromwasser 
und  Bromdampf  am  geeignetsten,  für  den  indirekten  Molisch s  Kali- 
oder Franks  Säuremethode. 

Die  CARNAUDSche  Formel  für  das  Karotin  wird  mit  C^gHog  an- 
gegeben nnd  von  Kohl  akzeptiert. 

Molisch  hat  noch  im  Erscheinungsjahre  von  Kohls  Arbeit  Beobach- 
tungen über  eine  interessante  Verfärbung  grüner  Aloe-  und  Selaginella- 
blätter  nach  Rotbraun,  hervorgerufen  durch  starke  Sonne,  veröifentliclit 
und  gezeigt,  daß  diese  Verfärbung  auf  Umwandlung  des  Chlorophylls  in 
Karotin  beruht.  Auch  die  Hötung  fertiler  Equisetenstengel  ist  aufKarotin- 
neubildung  zurückzuführen.  Das  Karotin  wies  er  mit  den  gebräuchlichen 
Methoden  nach.  Jaxssexs  und  Mertens  fanden,  daß  das  Pigment  der  rosa 
Hefe  neben  anderen  Stotfen  auch  Karotin  enthält. 

Xicht  genügend  begründet  erscheint  heute  noch  die  Ansicht  vom  A"or- 
kommen  des  Karotins  in  den  Wurzeln  von  Dracaena  und  anderen  Liliaceen, 
das  Schmied  aus  den  vorkommenden  rubinroten  Tröpfchen  erschließt,  die 
sich  wohl  mit  Schwefel-  und  Salpetersäure,  nicht  aber  mit  Phenol-Salzsäure 
bläuen  und  nicht  nach  Molisch  kristallisieren  lassen.  Verwiesen  sei  auch 
auf  den  von  Keller  bei  (,'elastrus  s.candens  beschriebenen  Farbstoff. 


c)  Seltenere  Farbstoffe. 

Prodigiosin.  Die  chemische  Analyse  Griffiths,  durchgeführt  mit 
einem  alkoholischen  Extrakte  des  Bacillus  prodigiosus,  ergab  die  empirische 
Formel  Cjs  H56  NO5 .  Absorptionsstreifen  in  Grün  und  Blau.  Nach  Rosen- 
BERG  kann  es  zur  Suberinfärbung  benutzt  werden. 

Violacei'n.  Der  Farbstoff  des  Bacterium  violaceum  läßt  sich  nach 
Matruchot  gleichfalls  in  der  Mikrotechnik  verwerten.  Im  übrigen  scheint 
er ,  das  Chroioogen  von  Fusarium  und  die  Farbstoffe  vieler  Farbstott- 
bakterien  zu  Vitalfärbungen  außerordentlich  geeignet. 

Farbstoff  von  Aposphaeria  violacea  n.  sp.  Bertel  kulti- 
vierte den  auf  dem  Glashauslacke  auftretenden  violetten  Pilz  und  studierte 
die  Bedingungen  der  Farbstoft'bildung.  Sehr  charakteristisch  ist  eine  mit 
Alkalien  auftretende  intensive  Bhiuviolettfärbung  des  im  mikroskopischen 
Bilde  braunrot  erscheinenden  Farbstoffes.  Bei  geeigneter  Versuchsanstellung 
gelingt  es  auch,  das  Chromogen  in  Sphäriten  abzuscheiden.  Eine  Identifi- 
zierung mit  anderen  Farbstoffen  war  unmöglicli. 

Bakteriopurpurin.  Nach  den  Untersuchungen  von  Lankaster 
und  Bütschli  ist  das  Bakteriopurpurin  von  Winogradsky  und  Engelmann 


XXII,  2.     Kichter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      235 

untersucht  worden,  die  eine  starke  Abhängigkeit  des  Stoffes  von  den 
äußeren  Bedingungen  gefunden  haben.  Über  die  Natur  des  Stoffes  herrscht 
vorläufig  noch  vollkommene  Unklarheit. 

Phykoerythrin  und  Phykocyan,  vgl.  das  Kapitel  „Eiweiß". 

C  h  r  0  m  a  t  o  p  h  0  r  e  n  der  0  s  c  i  1 1  a  r  i  e  n.  Fischer  isolierte  die  Chro- 
matophoren  der  Cyanophyceen  mittels  Flußsäure.  Hegler  führt  den  Be- 
weis, daß  Chlorophyll  und  Phykocyan  an  die  nändichen  Farbstoffträger 
i'„Cyanoi)lasten")  gebunden  sind.  Um  das  Chlorophyll  sichtbar  zu  machen, 
verwende  man  Clüoroformwasser.  Gesättigte  Lösungen  von  Magnesium- 
oder Ammoniurasulfalt,  die  mit  Schwefelkohlenstoff"  oder  Chloroform  ge- 
schüttelt waren,  zeigen  das  Phykocyan  sehr  deutlich.  Vgl.  A.  Fischer 
.,üie  Zelle  der  Cyanophyceen." 

Diatomin  und  Phykophaei'n.  Vgl.  insbesondere  die  neuen  Unter- 
suchungen von  Molisch,  die  die  neueste  Literatur  über  den  Gegenstand 
kritisch  behandeln  und  eine  große  Anzahl  wesentlicher  neuer  Befunde 
mitteilen. 

P  seudoindican.  Die  Cystolithen  verschiedener  Acanthaceen  ent- 
halten ein  farbloses  Chromogen,  das  beim  Kontakt  mit  der  atmosphärischen 
Luft  einen  intensiv  blaugrünen  Farbstoff  liefert.  Wegen  des  labilen  Cha- 
rakters ist  dieser  Stoff  scharf  vom  Indigo  bezw.  der  Muttersubstanz  des- 
selben, dem  Indican,  unterschieden.  Molisch,  der  sich  dem  Studium  beider 
gewidmet  hat,  wählte  daher  den  Naiuen  „Pseudoindican".  Es  ist  nicht 
unmöglich,  daß  dieser  Stoff",  oder  wenigstens  ein  sehr  nahe  verwandter, 
auch  in  Lathraea  vorkommt.  Der  Farbstoff'  entsteht  erst  nach  Verletzung. 
Die  Cystolithen  reagieren  alkalisch. 

Scutellarin.  Kocht  man  die  Blätter  von  Scutellaria  altissima  in  ein- 
prozentiger  Salzsäure  etwa  10  Minuten,  so  bemerkt  man  nachher,  namentlich  an 
der  Unterseite  der  Blätter,  zahlreiche  weiße,  mit  freiem  Auge  deutlich  wahr- 
nehmbare Flecke  von  oft  sternartiger  Form ,  die  sich  unterm  Mikroskope 
als  dendritisch  verzweigte,  gewöhnlich  aus  Nadeln  zusammengesetzte  Kristall- 
aggregate erweisen.  Die  Kristalle  entstehen  in  solcher  Menge,  daß  die 
Blattunterseite  oft  weißgrau  erscheint.  Beim  Eintauchen  eines  beblätterten 
Sprosses  in  ein-  bis.oprozentige  kalte  Salzsäure  bilden  sich  nach  ^/..  bis  2  Tagen 
gelbe  sphärokristallinische  Bildungen  in  Gestalt  von  Klümpchen,  Knollen 
oder  Warzen,  die  in  den  Epidermiszellen  liegen.  Kocht  man  die  frisch  ge- 
pflückten Blätter  mit  der  zehnfachen  Menge  Wasser  etwa  ^j^  Stunde  aus, 
so  scheiden  sich  nach  Zusatz  von  zirka  ein-  bis  2prozentiger  Salzsäure  zu 
dem  nitrierten  P^xtrakte  reichlich  Kristalle  in  Form  von  büschel-  oder  kugel- 
artigen Drusen  ab.  Bei  heißer  Fällung  treten  zumeist  stern-,  büschel-  oder 
besenartige  Kristallaggregate  von  hellgelber,  bei  kalter  Fällung  hingegen 
gewöhnlich  Sphärite  von  goldgelber  Farbe  auf.  Die  trockenen  oder  nur 
mit  wenig  Wasser  befeuchteten  Krystalle  werden  mit  etwas  Barytwasser 
momentan  rostrot  und. kurze  Zeit  darauf  an  der  Luft  dunkelgrün.  Durch 
Brom-,  Chlor-  oder  Jodwasser  entsteht  die  grüne  Farbe  nach  vorheriger 
Behandlung  mit  Barytwasser  sofort. 

Der  mikrochemische  Nachweis  des  Stoffes  gelingt  besonders  gut  1)  mit 
konzentrierter  rauchender  Salzsäure  und  Beobachtung  in  Chloralhydrat  (5:2), 
der  Stoff  ist  dann  in  Sphärokristallen  bis  zu  Ol  mm  Durchmesser  ausgefallen 


236      Richter:   Die  Fortscliritte  der  botnnisclien  Mikrochemie.     XXII,  2. 

und  2)  mit  lOprozentiger  Salzsäure,  die  ihn  in  büschelartigen  Aggregaten 
ausfallen  läßt.  Das  Scutellarin  fand  sich  in  allen  untersuchten  Scutellaria- 
Arten,  in  Wurzel,  Stengel,  Blatt  und  Blüte,  in  der  Oberhaut  aber  am  meisten, 
auch  bei  Galeopsis  Tetrahit  L.  und  Teucrium  Chamaedrys  L.  fand  es  sich. 
Die  übrigen  untersuchten  Labiaten  gaben  durchwegs  negative  Resultate. 
Die   von  Goldschmiedt  vorläufig  gefundene  Formel  für  Scutellarin  lautet 

21        20       12  • 

Andere  Farbstoffe  der  Blätter  und  Stämme  höherer 
Pflanzen.  Heixricher  fand  in  den  desorganisierten  Leukoplasten  der 
Lathraea  Squ.  goldgelbe  bis  orangene  Tröpfchen,  die  er  für  das  mit  Sprozen- 
tiger  Salzsäure  extrahierte  Pigment  der  J-athraea  hält. 

MüBius  konnte  feststellen,  daß  der  braune  Farbstoff  der  Vicia-Faba- 
Blüten  mit  keinem  bekannten  identifizierbar  sei.  Er  gab  ihm  daher  einen 
Namen :  Anthophäin.    Die  Reaktionen  des  Körpers  sind  nicht  charakteristisch. 

SCHLOCKOW  hat  bei  Oncidium  sphacelatum  chromatophorenähnliche 
Gebilde  beobachtet ,  deren  Verhalten  gegen  verschiedene  gebräuchliche 
Reagentien  studiert  wurde.  Die  Natur  des  Farbstoffes  ist  noch  unauf- 
geklärt. —  Glan  beschreibt  den  Farbstoff  der  schwarzen  Malve. 

Farbstoffe  in  Samen.  Krömer  untersuchte  die  von  Tschirch  in 
den  Kaffeebohnen  bemerkten  .,Chromatophoren",  und  erkannte  sie  als 
Farbstoffkristalle.  Schröttek  beschreibt  den  Farbstoff  des  Arillus  von 
Afzelia  und  rechnet  ihn  vorläufig  zu  den  Lipochromen,  wahrscheinlich  liegt 
ein  Karotin  vor.  Sehr  interessant  ist  die  Beobachtung,  daß  im  Ravenala- 
arillus  aller  Wahrscheinlichkeit  nach  Berlinerblau  die  Färbung  besorgt, 
was  mit  dem  großen  Eisengehalt  gut  stimmt.  Indigblau  ist  der  Farb- 
stoff'jedenfalls  nicht.  Gestützt  wird  Schrötters  Ansicht  auch  dadurch, 
daß  die  Ravenalasamen  wie  das  Berlinerblau  bei  Sauerstoffentzug,  z.  B. 
beim  Untertauchen  unter  Wasser ,  grünlich  bis  farblos  werden  und ,  an 
die  Luft  gebracht,  sich  wieder  bläuen. 

d)  Anthokyan. 

Auch  bei  diesem  Farbstoffe  kann  ich  mich  kurz  fassen,  da  eine 
umfangreiche  Literaturzusammenstellung  im  Vereine  mit  eigenen  Be- 
obachtungen von  BuscALiONi  und  Traveuso  erst  in  der  jüngsten  Zeit 
veröffentlicht  worden  ist.  Überdies  findet  sich  in  der  Botanischen 
Zeitung  eine  Arbeit  von  Molisch,  worin  auf  die  wichtigsten  Arbeiten 
eingegangen  und  von  der  Kristallisation  dieses  solange  jedem  Kristal- 
lisationsversuche widerstrebenden  Stoftes  berichtet  wird. 

Es  hat  sich  ergeben ,  daß  man  mit  dem  Worte  „Aiitliokyan" 
eine  große  Gruppe  von  Stoffen  bezeichnet,  die  eigentlich  wesentlich 
voneinander  verschieden  sind,  so  daß  man,  Avie  man  einst  von  „Karo- 
tin", jetzt  von  „Karotinen",  auch  von  Antliokyanen  zu  reden  sicli 
genötigt  sieht.  Das  neue  Reagens ,  das  Buscalioni  und  Pollacci 
angegeben    liaben ,    möclite    icli    in    seiner  Güte    vorläufig   anzw^eifeln 


XXII,  2.     Ricliter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      237 

und  erst  die  Frage  aufwerfen,  ob  Nikotin  kein  alkalisch  reagierender 
Körper  ist.  Ist  er  das,  dann  ist  jene  Grün-,  Blau-  oder  Gelbfärbung, 
die  man  nach  Angabe  der  beiden  Autoren  mit  verdünntem  Nikotin 
bei  Anthokyangehalt  erzielt ,  einfach  die  Indikatorfarbe  des  Stoffes 
für  geringe  oder  größere  Alkalescenz. 

Chemische  Natur  und  Auftreten  des  Anthokyans  im 
Zellsafte.  In  dieser  Richtung  verdanken  vvir  Ovehton  wertvolle  Mit- 
teilungen. Er  wies  eine  Proportionalität  nach  zwischen  dem  Zucker-  und 
Anthokyangehalte  der  Pflanzen.  Dies  spricht  für  die  Glykosidnatur  des 
Anthokyans,  wie  sie  schon  Weigert  angenommen  hat. 

Außerdem  aber  scheint  auch  ein  Gerbstoffkomplex  im  Anthokyan 
vorhanden  zu  sein,  wofür  man  vornehmlicii  die  Parallele,  die  zwischen 
dem  Auftreten  anthokyanhaltiger  und  Gerbstoffzellen  in  der  Pflanze  be- 
steht, dann  ihr  Verhalten  gegen  Methylenblau,  Kaliurabichromat,  Koffein 
und  Antipyrin  anführen  könnte.  Man  kommt  durch  die  Annahme  einer 
Glykosid-Gerbstoffverbindung  über  diese  .Schwierigkeit  am  besten  hinweg. 
Ich  möchte  darauf  aufmerksam  machen,  daß  heute,  wo  Lidforss'  und 
Möllers  Arbeiten  über  Glykoside  und  Gerbstoffe  vorliegen,  welche  die 
Unmöglichkeit,  sie  heute  mikrochemisch  zu  scheiden,  unzweifelhaft  nach- 
weisen, Meinungsverschiedenheiten  zwischen  den  Forschern  auf  diesem  Gebiete 
ziemlich  bedeutungslos  erscheinen.  Erst,  wenn  es  gelingen  sollte,  ein  ein- 
deutiges Reagens  für  Glykoside  oder  Gerbstoffe  zu  linden,  wird  dieser 
Frage  neuerdings  mit  Aussicht  auf  Erfolg  näher  getreten  werden  können. 
Man  vergleiche  die  beiden  Kapitel:  „Gerbstoffe"  und  „Glykoside". 


7.  Gerbstoffe. 

Nachweis.  -Bei  der  Behandlung  der. Gerbstoffreaktion  gehört 
in  den  Vordergrund  des  Interesses  die  Lidforss  sehe  Arbeit  „Über 
die  Wirkungssphäre  der  Glykose-  und  der  Gerbstoff- Reagentien". 
Nachdem  Lidforss  gezeigt  hat ,  daß  Tannin  mit  Eisenchlorid  eine 
Grünfärbung  gibt,  wenn  man  einige  Kriställehen  Zitronensäure  zu- 
setzt ,  kann  man  von  der  alten  Einteilung  in  eisenbläuende  und 
eisengrünende  Gerbstoffe  füglich  absehen.  Maßgebend  werden  immer 
die  begleitenden  Umstände  bleiben,  unter  denen  man  die  Gerbstoff- 
probe vollzieht.  Auch  sonst  noch  zeitigte  die  Lidforss  sehe  Arbeit 
beachtenswerte  Ergebnisse :  Es  ist  unmöglich  Glykosen ,  Glykoside 
und  Gerbstoffe  scharf  zu  trennen.  Mit  FEHLiNoscher  Lösung  ist  dabei 
zu  keinem  Ergebnisse  zu  gelangen,  da  es  auch  viele  Stoffe  gibt,  die 
weder  Glykosen  noch  Glykoside  sind  und  doch  die  FEHLiNosche 
Lösung  reduzieren.  Noch  größer  wird  die  Verwirrung,  da  viele 
„Gerbstoffe"  die  Membranreaktioneu  beeinÜusseu  und  Proteinreaktionen 


238      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

geben.  Der  Hilflosigkeit,  in  der  man  sich  befindet,  bester  Ausdruck 
ist  wohl  die  Redeweise:  „Es  ist  ein  Gerbstoff".  Zum  Schlüsse 
empfiehlt  Lidforss  eine  alkoholische  Kupferlösung  statt  der  Fehling- 
schen,  da  man  bei  deren  Anwendung  lokalisierte  Fällungen  erhalte, 
auch  extrahiere  sie  Nicht -Glykosen  und  belasse  Glykosen  in  ihren 
Zellen.  Man  beachte  auch  die  von  Weigert  und  neuerlich  von 
OvERTON  vertretene  Ansicht  von  der  Glykosid -Gerbstotinatur  des 
Authokyans  (vgl.  dieses). 

Von  nicht  geringerem  Interesse  ist  der  Befund  Möllers  von 
dem  Gelingen  der  LiNorschen  Phloroglucinprobe  mit  gerbstoft'haltigen 
Zellen.  Er  konnte  direkt  durch  geeignete  Behandlung  die  Gerbstoff- 
probe mit  Eisenchlorid  in  die  Rotfärbung  mit  Vanillin-Salzsäure  über- 
fuhren. Ich  habe  bereits  in  dem  Kapitel  „Phloroglucin"  eingehender 
diese  Arbeit  besprochen.  Vor  Lidforss  hat  aucli  Moore  eine  ähn- 
liche Untersuchung  durchgeführt  und  Büttner  die  Gerbstoffreak- 
tionen in  der  lebenden  Pflanzenwelt  eingehend  untersucht  und  dabei 
festgestellt,  daß  außer  des  von  Pfeffer  empfohlenen  Methylenblaus 
Eisensalze  allein  die  Fähigkeit  des  zuverlässigen  Gerbstoffnachweises 
in  der  lebenden  Zelle  besitzen  und  dabei  der  Probe  eine  relativ  große 
Empfindlichkeit  verleihen.  Die  Salze  wurden  in  Lösungen  von  0*02 
bis  0'2  Prozent  in  Brunnenwasser  verwendet.  Übrigens  scheint  die 
von  Berthold  angegebene  Methode  der  Injektion  von  Geweben  mit 
konzentrierter  Kaliumbichromatlösung  unter  der  Luftpumpe  behufs 
Gerbstoffnachweises  für  viele  Zwecke  nicht  unvorteilhaft  zu  sein.  Die 
Konservierung  erfolgt  in  konzentriertem  oder  TOprozentigem  Glyzerin. 
Klercker  empfiehlt  zur  Herstellung  von  Dauerpräparaten  gerbstoft- 
haltiger  Objekte  sie  in  Flejimings  Chromosmiumsäure  oder  in  ein 
Gemisch  von  einem  Teil  Pikrinschwefelsäure  und  einem  Teil  5pro- 
zentiger  Kaliumbichromatlösung  oder  in  ein  Gemisch  von  einem  Teil 
Pikrinschwefelsäure  und  einem  Teil  konzentrierter  Kupferacetatlösung 
zu  legen  und  sonst  wie  üblich  zu  verfahren.  Eine  vergleichende 
Studie  über  den  Nachweis  der  Oxycarbon-,  Gallus-  und  Gerbsäure 
rührt  noch  von  Marpmann  her. 

Beim  Rückblicke  auf  die  umfassenden  Arbeiten  über  Gerbstoft"- 
nachweis  haben  wir  als  eines  der  Hauptresultate  die  Unmöglichkeit 
erkannt,  Gerbstoffe  von  Glykosiden  und  Glykosen  scharf  zu  unter- 
scheiden. Es  mußte  daher  als  ein  Fortschritt  betrachtet  werden, 
als  neuerdings  Goius  als  bestes  Reagens  auf  Glykoside  das  von 
Sonnenschein  erklärte,  das  auf  der  Einwirkung  eisenhaltiger  Salpeter- 
säure und  Ammoniak  auf  glykosidhaltige  Zellen  beruht.     Leider  hat 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      239 

Cazzanis  Mitteilung':  „Osservazioni  critiche  sopra  alcune  ricerclie 
deU'esciüina  eseguite  dal  Dott.  A.  Goris"  diese  Hoffnung  rasch  zer- 
stört. Man  kann  nämlich  in  vitro  mit  Tanninlösung  zeigen ,  daß 
bei  Behandlung  mit  Salpetersäure  und  Ammoniak  dieselbe  Rotfärbung 
auftritt,  wie  sie  von  Sonnenschein  für  Äsculin  angegeben  worden 
ist.  Auch  wird  die  Reaktion  durch  Eisenzufuhr  nicht  zuverlässiger, 
wie  GoRis  behauptet  hatte. 

Somit  sind  wir  bezüglich  der  eindeutigen  Gerbstoffreaktionen 
wieder  beim  Alten :  Es  gibt  auch  heute  noch  kein  Reagens,  das  man 
als  spezifisch  für  Gerbstoffe  ansehen  könnte. 

Anderseits  hat  sich  die  Zahl  der  Gerbstoffreagentien  wieder 
um  eines  vermehrt,  von  dem  man  freilich  noch  nicht  den  Um- 
fang seines  Reaktionsgebietes  genau  abgegrenzt  hat.  In  seinem 
Büchlein  über  Milchsaft  und  Schleimsaft  erwähnt  Molisch,  daß  gerb- 
stoft'haltige  Milchsäfte ,  mit  Kalilauge  erwärmt ,  sich  rot  bis  blau- 
violett färben.  Brenner  hat  nun,  offenbar  ohne  Kenntnis  von  der 
erwähnten  Beobachtung,  diese  Reaktion  nochmals  für  Idioblasten  von 
Fettpflanzen  beschrieben ;  er  teilt  mit,  daß  Kalilauge  die  Idioblasten 
der  unter  der  Epidermis  gelegenen  Zellschichte  bläut.  Natronlauge 
gibt  die  gleiche,  Chlorammonium  und  Borax  geben  jedoch  keine 
Reaktion.  Bei  manchen  Zellen  gleicher  Art  entstehe  ein  dunkel- 
brauner Niederschlag,  der  auf  Gerbstoff"  deute.  Der  blau  gefärbte 
Körper  gebe  dagegen  Konkretionen  und  schließlich  tiefblaue  Klumpen. 
Brenner  hält  deshalb  diesen  sich  bläuenden  Körper  für  etwas  anderes 
und  glaubt,  weil  auch  gewisse  „Eiweißreaktionen"  mit  seinen  Idio- 
blasten gelingen,  eine  neue  Ei  weißr  eaktion  beschrieben  zu  haben. 
Wenn  man  aber  in  Betracht  zieht,  daß  Gerbstoftzellen  bei  Fettpflanzen 
lange  bekannt  sind,  und  daß  Gerbstoffe  auch  mit  gewissen  Eiweiß- 
reagentien  Färbungen  liefern,  und  daß  endlich  Molisch  für  Kalilauge 
die  Fähigkeit ,  Gerbstoffe  blau  zu  färben ,  erwiesen  hat ,  darf  man 
wohl  Brenner  als  den  zweiten  Entdecker  der  besprochenen  Gerb- 
stoffprobe bezeichnen. 

Es  scheint  übrigens  auch  Solla  bei  den  Idioblasten  des  Johannis- 
brotes die  gleiche  Reaktion  beobachtet  zu  haben ,  ohne  ihr  damals 
noch  die  richtige  Deutung  geben  zu  können. 

Schließlich  seien  noch  Maneas  rntersuchungen  „Sur  les  acides 
gallotannique  et  digallique"   erwähnt. 

Vorkommen.  Die  sozusagen  unendlicli  weite  Verbreitung  der  Gerb- 
stoffe macht  es  erklärlich ,  daß  nur  interessantere  Funde  Erwähnung' 
finden  können.    So  haben  Heckel  und  Schlag denhauffen  bis  80  Prozent 


240      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Gallusgerbsäure  bei  der  Myrtacee  Spermolepis  gummifera  nachgewiesen, 
auch  scheinen  sie  hier  ein  Gerbstoffharz  entdeckt  zu  haben.  Sie  halten  die 
harzartigen  Überzüge  gewisser  Blattknospen  der  Chinagerbsäure  für  sehr 
nahe  verwandt.  Wallin  fand  bei  Bromeliaceen-Blättern  in  den  Zellen  der 
Gefäßbündelscheiden  Tröpfchen  einer  gerbstoflfähnlichen,  vermutlich  einer 
oxyaromatischen  Substanz.  Molisch  beobachtete  in  den  Cj^stolithen  der 
Acanthaceen  einen  Gerbstoff,  der  sich  unter  den  Keaktionsbedingungen 
grün  färbte,  um  nachher  rot  zu  werden,  was  auf  Eisenoxydhydratbildung 
durch  die  Wirkung  des  Calciumkarbonats  der  Cystolithen  zurückzuführen 
ist.  Nach  Solla  zeigen  die  Johannisbrotidioblasten  Gerbstoffreaktion. 
Busse  fand  in  den  Gerbstoffschläuchen  des  Rindenparenchyms  von  Abies 
alba  in  einem  ganz  bestimmten  Entwicklungszustand  einen  eisenbläuenden 
Gerbstoff'  von  körniger  Beschaffenheit,  außerdem  öltropfenähnliche  Körper, 
die  sich  als  schwach  gerbstofthaltig  erwiesen.  Die  Doppelfärbung  mit  Häma- 
toxylln-Jodgrün  ließ  dieGerbstoff'zellen  grün,  das  Meristem  violett  erscheinen. 
Auch  bei  Pilzen  und  Moosen  sind  Gerbstoffe  nicht  selten,  vgl.  Naumann 
„Über  den  Gerbstoff  der  Pilze",  Czapek  „Zur  Chemie  der  Zellmembranen 
bei  Laub-  und  Lebermoosen",  Kindermann  „Über  das  sogenannte  Bluten 
der  Fruchtkörper  von  Stereum  sanguinolentura  Fries",  Küster  „Die  Ül- 
körper  der  Lebermoose  und  ihr  Verhältnis  zu  den  Elaioplasten".  Solche 
GerbstoftVorkommen  pflegen  in  der  Regel  störend  für  gewisse  beabsichtigte 
z.  B.  Membranreaktionen  zu  sein  (vgl.  Membran).  Einen  solchen  „störenden" 
Gerbstoff,  der  die  RACiBORSKische  Leptominprobe  verhindert,  beschrieb 
Hunger  in  seiner  Arbeit  „Über  die  reduzierenden  Körper  der  Oxyde-  und 
Peroxydasereaktion".  Der  Sitz  dieses  Gerbstoffes  ist  im  Korkgewebe,  Ex- 
traktion mit  80prozentigem  Alkohol  macht  auch  in  dieser  Gewebeart  die 
Leptominprobe  möglich.  Weitere  Vorkommen  von  Gerbstoffen  wurden  be- 
schrieben :  von  Molisch  in  Milchsäften,  von  Brenner  bei  Fettpflanzen  von 
TiCHOMiROW  bei  intrazellularen  Einschlüssen  gewisser  Früchte  etc. 


Alkaloide. 

lu  der  richtigen  Erkenntnis ,  daß  die  sogenannten  Alkaloid- 
Gruppenreaktioneu  nur  unter  ganz  besonderen  Umständen  verwert- 
bare Resultate  liefern,  hat  man  den  Speziaireaktionen  besondere  Auf- 
merksamkeit zugewendet.  Das  prägt  sich  denn  auch  durchwegs  in 
der  neueren  Literatur  aus.  So  hat  Istvanffi  dem  Nachweis  des 
Capsaicins  eine  Arbeit  gewidmet.  Zum  Nachweis  des  Stoffes  verwendet 
er  Kalilauge,  Salpeter-,  Schwefelsäure,  Jodkalium  und  Salzsäure. 
Wegen  Mangels  gut  ausgebildeter  Chromatophoren  hält  er  unreife 
Früchte  für  besonders  geeignet  zum  Capsaicinnachweis.  Rosoll  arbei- 
tete über  den  mikrochemischen  Nachweis  des  Coniins  in  den  vegetabi- 
lischen Geweben,  Guerin  über  den  des  Anagyrins  und  Cytisins, 
DE  Toni  über  den  des  Nikotins.     Belzung   untersuchte  das  Xantliin, 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Milcrochemie.      241 

dessen  Derivate  Wevre,  Schoorl  wie  Wevre  das  Atropin,  Starke 
das  Solanin    und  Rüssel  das  Taxin. 

Auch  sieht  man  vielfacli  die  Tendenz  auftreten,  gewisse  Pflanzeu- 
familien,  die  durcli  ihren  Alkaloidgehalt  bekannt  sind,  nach  dieser 
Richtung  hin  monographisch  zu  behandehi.  So  bilden  die  Solana- 
ceenalkaloide  den  Gegenstand  einer  Bearbeitung  von  Molle,  die  der 
Loganiaceen  seitens  Elfstrand,  die  der  Ranunculaceen  seitens  Vander- 
LiNDEN  und  eine  Monographie  eigener  Art  bildet  die  der  Samen- 
alkoide  von  Clautriau,  der  auch  gemeinsam  mit  Errera  über  die 
lokalisierte  Eällung  der  Alkaloide  wertvolle  Mitteilungen  machte. 
Endlich  haben  Barth,  Siim -Jensex,  Hedebrand  und  Marpmann  vom 
pharmazeutischen  Standpunkte  aus  der  Alkaloidfrage  größere  Auf- 
merksamkeit geschenkt.  Eine  physiologische  Monographie  verfaßte  an 
der  Hand  mikrochemischer  Untersuchungen  J.  Feldhaus. 

Die  vergleichenden  Reaktionsstudien  haben  nach  Erreka  (Di- 
stinction  des  alcaloides  etc.)  ihre  Vertreter  gefunden  in  G.  Clautriau 
(Nature  et  signification  des  alcaloides  vegetaux)  und  E.  Pozzi-Essot 
(Coutributions  a  la  recherche  microchimique  des  alcaloides). 

De  Wildeman  und  Molle  scheinen  bei  Orchideen  bezw.  bei  Clivia 
miniata  neue  Alkaloide  gefunden  zu  haben.  Molisch  kommt  auch 
bei  seiner  Monographie  des  Milch-  und  Schleimsaftes  auf  die  Alkaloide 
zu  sprechen.  Man  beachte  auch  Th.  Weevers  und  C.  J.  Weevers 
DE  Graaffs  Arbeit  „Investigations  of  some  xanthine  derivatives 
in  connections  with  the  internal  mutation  of  plants".  Neu  er- 
scheint Nestlers  Einführung  der  Sublimation  für  Cumarin  und  Thein, 
über  dessen  Lokalisation  in  der  Pflanze  wir  Suzuki  Mitteilungen 
verdanken. 

Aus  den  in  der  Übersicht  angeführten  Arbeiten  mag  das  Folgende 
hervorgehoben  sein : 

Nach  Molle  gibt  es  bislang  fünf  gut  charakterisierte  Alkaloide  der 
Solanaceen:  das  Atropin,  Hyoscyamin,  Hyoscin,  Nikotin,  Solanin.  Als 
gemeinsame  Reagentien  für  ün-en  mikrochemischen  Nachweis  gibt  er  an: 
Jodjodkalium.  Phosphormolybdänsäure,  Kaliumquecksilberjodid,  Pikrinsäure, 
Tannin,  Queeksilbercldorür,  Platin- und  (ioldchlurid.  Es  ist  dabei  stets  not- 
wendig, mehrere  Proben  für  ein  Alkaloid  zu  machen,  da  es  keine  für  ein 
Alkaloid  allein  charakteristische  Reaktion  gibt.  Auch  muß  immer  mit  der 
schon  von  Zimmermann  als  sehr  naheliegend  hervorgehobenen  möglichen 
Verwechslung  mit  Eiweißreaktionen  gerechnet  werden.  Immerhin  erweist 
sich  die  Methode  von  Errera  als  brauchbar ,  um  einem  Irrtume  vor- 
zubeugen. Legt  man  die  Schnitte  vor  der  Reaktion  in  Weinsäurealkohol 
(1  g  kristallisierte  Weinsäure,  gelöst  in  20  cc  abs.  Alkohol)  und  unterbleibt 
die  Reaktion  mit  Phosphormolybdänsäure,  so  deutet  dies  auf  ein  Alkaloid, 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  2.  16 


242      Richter:   Die  Fortscliritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

—  andernfalls  kann  eine  Proteinsubstanz  vorliegen.  Auch  Elfstrand  hielt 
sich  an  Erreras  Methoden.  Er  findet  für  Strychnin  am  besten  Mandelin  s 
Reagens  geeignet,  Brucin  wird  damit  gelbrot.  Auch  Gelsemin  und  Gelse- 
minin  können  damit  nachgewiesen  werden,  desgleichen  Coniin  Für  Curarin 
eignet  sich  aber  am  besten  Vanidinschwefelsäure.  —  Um  im  reiten  Samen 
von  Datura  Stramonium  das  Alkaloid  nachzuweisen,  läßt  Clautriau  Jod- 
jodkalium zu  einem  trockenen  Schnitte  langsam  zufließen.  Alsbald  füllen 
sich  die  Schichten  der  Samenschale  mit  einem  massigen  tiefbraunen  Nieder- 
schlage, der  bisweilen  kristallinisch  wird.  Am  allgemeinsten  anwendbar 
ist  nach  ihm  Jodjod-Kalium.  Nach  Barth  sind  für  den  mikrochemischen 
Nachweis  von  Alkaloiden  am  allerwenigsten  die  flüssigen  Reagentien  ge- 
eignet, dagegen  sehr  gut  die  gasförmigen  wie  Jod-,  Brom-  und  Salzsäure- 
dampf. Bettet  man  dann  auch  noch  in  reinem  weißen  Paraffinöl  ein,  so 
erhält  man  vorzügliche  Präparate  lokalisierter  Fällung.  Einen  mittleren 
Wert  besitzen  für  mikrochemische  Zwecke  die  Färbungen,  doch  gibt  Vanidin- 
schwefelsäure mit  Strychnin  ganz  brauchbare  und  die  nachträglichen  Fär- 
bungen wie  die  mit  Rhodankalium  und  verdünnter  Eisenchloridlösung  ganz 
prachtvolle  Resultate.  Eine  Bestätigung  haben  Barths  Untersuchungen 
durch  Shm- Jensen  erfahren,  von  dem  außerdem  Jodjodkalium  und  Kalium- 
wismutjodid  neben  dem  von  ihm  eingeführten  Bromkalium  besonders  em- 
pfohlen werden.  Das  Bromkalium  übertreffe  Bromwasser  um  das  drei-  bis 
vierfache  an  Empfindlichkeit  und  hätte  den  Vorzug  vorzüglicher  Loka- 
lisation für  sich.  Von  hervorragender  Bedeutung  für  das  Gelingen  der 
Reaktion  sei  der  von  Sum- Jensen  verwendete  Wachsabschluß  des  Deck- 
gläschens. 

Daß  übrigens  die  oben  von  Barth  als  ziemlich  untergeordnet  erklärten 
Farbenreaktionen  unter  gewissen  Umständen  ganz  ausgezeichnete  Resultate 
zu  liefern  vermögen,  beweisen  Rüssels  Untersuchungen  über  das  Taxin, 
in  denen  sich  Mandelin  s  Reagens  und  Schwefelsäure  mit  Ammoniumvanadat 
als  höchst  geeignet  erwiesen  haben,  um  das  Taxin  in  lokalisierter  hell- 
roter Färbung  sichtbar  zu  machen. 

Nach  Molischs  Angaben  über  Alkaloidnachweis  läßt  bei  Milch- 
säften lOprozentige  Salzsäure  den  Milchsaft  geradezu  zu  einem  Kristallbrei 
erstarren. 

Kristallisation.  Belzitng  gelang  es,  aus  einem  Extrakte  von 
Cicer  arietinum-Keimlingen  das  Xanthin  in  undeutlich  kristallinischer  Form 
darzustellen. 

Die  beste  Orientierung  über  die  Versuchsanstellung  bei  Alkaloid- 
reaktionen  und  die  Unterscheidung  der  einzelnen  Alkaloi'de  voneinander 
gibt  wohl  der  Abschnitt  (Pflanzenalkaloide)  in  Behrens'  Anleitung  zur 
mikrochemischen  Analyse  der  wichtigsten  organischen  Verbindungen.  3.  H. 
1896,  p.  46—133. 


9.  Eiweiß. 

Die    bekannten  Eiweißreaktionen    unterzog  Wevre    einer   neuer- 
lichen eingehenden  Überprüfung,  deren  Erfolg  in  übersichtlicher  Weise 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Miicrochemie.      243 

in  A.  Zimmermanns  Referat  in  dieser  Zeitschrift  Bd.  XI,  1894,  p.  407 
bis  410,   dargestellt  ist. 

Hier  sei  nur  erwähnt,  daß  auch  von  Wevre  zur  Fällung  der  Ei- 
weißstoffe der  absolute  Alkohol,  zur  Extraktion  der  Alkaloide  Erreeas 
öprozentige  Weinsäure  in  Alkohol  am  geeignetsten  angesehen  wird, 
daß  nach  ihm  unter  allen  Reagentien  auf  Eiweiß  Jodjodkalium  als 
das  empfindlichste  und  Eosin  unter  allen  Farbstoffen  als  bestfärbender 
gilt.  Aus  der  Zahl  der  mikrochemischen  Eiweißreaktionen  sind  die  mit 
Tannin,  Goldchlorid,  Salzsäure  und  Jorissens  Reagenz  auszuscheiden. 
Damit  erscheint  auch  Mesnards  Mitteilung  von  der  Viotettfärbung 
von  Eiweiß  durch  Salzsäure  und  das  Rosawerden  der  Propeptone 
durch  das  gleiche  Reagens  erledigt.  Eine  vergleichende  Untersuchung 
der  Eiweiß-  und  Tj^rosinreaktionen  rührt  von  Wurster  her. 

Besondere  Erwähnung  verdient  die  Arbeit  O'Briens  über  Ei- 
weiß. O'Brien  ist  es  gelungen,  aus  Weizenmehl  künstliche  Eiweiß- 
kristalle zu  erzeugen,  indem  er  das  in  Kochsalzlösung  gelöste  Globulin 
durch  Alkohol  fällte  und  den  Niederschlag  mit  verdünntem  Alkohol 
auswusch,  dann  wieder  in  Salzsäure  auflöste  und  von  dieser  Lösung 
einen  Tropfen  auf  dem  Objektträger  verdunsten  ließ.  Es  bildeten 
sich  hexagonale  Platten  von  Globulin.  Tanninlösung  diente  zur  Fixie- 
rung. Übrigens  hat  ein  Jahr  vor  O'Brien  Molisch  das  Phykoerythrin 
zur  Kristallisierung  gebracht  hat,  das  sich  als  Eiweißstoff  heraus- 
stellte (vgl.  Phykoerythrin). 

Als  Eiweißreaktion  wurde  jüngst  von  Brenner  die  bei  Sukku- 
lenten auftretende  Blaufärbung  einiger  Zellen  durch  Kalilauge  ge- 
deutet, da  auch  die  RASPAiLsche  Reaktion  mit  diesen  Idioblasten 
gelingt.  Weil  jedoch  auch  Gerbstoffe  nach  Lidforss  Proteinreak- 
tionen  geben,  und  Brenner  selbst  von  der  deutlichen  Reaktion  mit 
LiNDTSchem  Reagens  Mitteilung  macht,  das  erst  neuerdings  von 
Möller  wieder  auch  als  Gerbstoffreagens  betont  wurde ,  dürfte  es 
sich  hier  umsomehr,  als  Molisch  bereits  in  seinem  Milchsaftbüchlein 
die  Blaufärbung  mit  Kalilauge  als  Gerbstoffprobe  angegeben  hat,  um 
einen  Gerbstoff  handeln. 

Besondere  Fälle  von  Eiweißproben  führen  Hartwich  und  Ikeda 
au,  von  denen  der  erste  bei  Strophantus-Samen  mit  Schwefelsäure 
allein  proportional  zu  deren  Verdünnung  alle  Farbentöne  von  Grün 
über  Rot  nach  Blau  erhielt,  der  zweite  in  der  Samenknospe  von 
Liliaceeu  mit  Fehlinc4S  Lösung  Biuret- Reaktion,  aber  keine  Zucker- 
probe bekam. 

Zum    Schlüsse    sei    auf   das    von    Tichomirow   beobachtete   Vor- 

16* 


244     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

kommen   von  Eiweiß   in  intrazellulären  Einsclilüsseu  der  Datteln  etc. 
hingewiesen. 

Eiweißkristalle  und  Eiweißkristalloi'de.  1)  Cy toplas ma 
oder  Zellsaft.  Es  ist  eine  allbekannte  Tatsache,  daß  in  den  der 
Periderraschichte  der  Kartoifelknolle  unmittelbar  anliegenden  Zellschichten 
prachtvolle  würfelförmige  Eiweißkristalle  vorkommen.  Heinricher  konnte 
ein  massenhaftes  Auftreten  von  Kristalloiden  in  den  Laubtrieben  von 
Solanum  tuberosum  feststellen.  Auch  fand  er  derartige  Gebilde  außerhalb 
des  Zellkernes  bei  Lathraea  squamaria.  Bei  Epiphyllum  waren  sogar  ring- 
förmige Kristalloi'de  von  Molisch  beobachtet  worden.  Da  Wakker  einen 
gleichen  Befund  nachher  als  neu  beschrieb,  wurde  von  Molisch  die  ge- 
schichtliche Folge  der  diesbezüglichen  Entdeckungen   genau  fixiert. 

Beim  Nachweis  der  Eiweißkristalle  und  Kristalloide  spielte  stets 
Zimmermanns  Säurefuchsingemisch  eine  hervorragende  Rolle,  Huie  ver- 
weist demgegenüber  auf  Manns  Fixierungsgemisch  und  auf  ein  von  ihr 
verwendetes  Rezept ,  die  angeblich  beide  den  Vorzug  verdienen.  Nach 
MoLLSCH  finden  sich  Unmengen  von  Proteinkristallen  im  Milchsafte  von 
Musa  chin.,  jeder  von  einer  eigenen  feinen  Membran,  von  Molisch  „Pro- 
tei'noplasten"  genannt,  umgeben.  Noll  beschrieb  geformte  Proteiden  im 
Zellsafte  von  Derbesia.  Eine  eingehende  Behandlung  haben  die  Reaktionen 
auf  Prote'inkristalle  erst  jüngst  wieder  durch  Milroy  erfahren. 

2)  Zellkern.  A.  Zimmermann  hat  mit  seinen  bekannten  Färbe- 
methoden eingehende  Studien  über  das  tinktionelle  Verhalten  der  Zellkern- 
kristalloide  angestellt.  Nach  Auerbachs  Nomenklatur  muß  man  sie  als 
typisch  erythrophil  bezeichnen ,  soweit  nach  Fischer  diese  Bezeichnung 
noch  gelten  darf. 

Neuerlich  hat  Molisch  auch  in  den  Blasenkernen,  die  er  im  Musa- 
Milchsaft  vorfand,  oft  mehrere  Kristalle  einer  eiweißartigen  Substanz  fest- 
stellen können.  Sperlich  macht  mit  Eiweißkristalloiden  in  den  Zellkernen 
der  Haustorien  von  Melampyrum  pratense  und  M.  silvaticum  bekannt,  die 
nach  Zimmermann  färbbar  sind. 


Aleuron  und  seine  Kristalle  und  Kristalloi'de. 

Da  die  Zahl  der  dauerhaften  Kristalloidfärbungen  nicht  allzu  zahl- 
reich ist,  scheint  die  Anführung  einer  neuen  nicht  überflüssig,  so  hat 
Krasser  Pikrinsäure  -  Eosin  und  Pikrin  -  Nigrosin  als  besonders  vor- 
teilhaft angeführt.  Gram  teilt  neuerdings  seine  Erfahrungen  mit 
den  gewöhülicheu  Fixierungs-  und  Färbemethoden  an  den  Protein- 
körnern der  Ölgewächssamen  mit.  Er  hält  Pfeffers  Härtungsmethodc 
mit  Sublimatalkohol  für  unzweckmäßig.  Oft  sei  dagegen  Pfeffers 
Natriumphosphat  gut  verwendbar.  Dauerpräparate  stelle  mau  am 
besten  nach  Poulsens  Methode  her.  Zur  Färbung  eigne  sich  besonders 
Boraxweiustein.    Hervorgehoben  sei  noch  die  Arbeit  Reeds:   „A  study 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      24.') 

of  tlie  enzymesecreting  cells  in  the  seedlings  of  Zea  Mays  and  Phoenix 
dactilifera",  in  der  er  die  Fixierungs-  und  Färbemethoden  einer 
eingehenden  kritischen  Nachprüfung  unterzieht  und  findet,  daß  pro- 
portional zur  Säuremenge  des  Fixierungsmittels  die  Eiweißkörner 
besser  erhalten  bleiben,  und  daß  Manns  Eosin-Toluidinblau-Methode 
den  übrigen  Färbeverfahren  vorzuziehen  sei.  Auch  Manns  Pikrin- 
Sublimatlösung  sei  sehr  empfehlenswert. 

Zum  Einbetten  von  Aleuronkörnern  werden  gewöhnlich  fette  Ole 
empfohlen.  Winton  fand  nun  bei  seinen  Untersuchungen  über  Hanf- 
samen Terpentin  für  diese  Zwecke  besonders  geeignet. 

Zum  Schluß  sei  auf  einen  neuen  Einschluß  des  Aleuronkorns 
aufmerksam  gemacht,  dessen  Entdeckung  wir  Meyer  verdanken:  Mit 
Alkohol -Methylenblau -Schwefelsäure  gelingt  es  nämlich  über  den 
Globoiden  Volutinkörner  naclizuweisen. 

Eine  eingehende  Untersuchung  über  Aleuronkörner  haben  auch 
TscHiRCH  und  Kritzler  veröffentlicht,  die  im  wesentlichen  ergab,  daß 
die  Aleuronkörner  der  untersuchten  Pflanzen  hauptsächlich  aus  Glo- 
bulinen bestehen,  ob  sie  auch  Albumosen  enthalten,  ist  derzeit  noch 
fraglich.  Die  Kristalloide  bestehen  mindestens  aus  zwei  Globulinen. 
Über  die  verschiedenen  Lösungsverhältnisse  der  Stoffe  sehe  man  die 
Arbeit  nach. 

Besondere  ^^  o  r  k  o  m  m  e  n  von  E  i  w  e  i  ß  k  ö  r  n  e  r  n  und  Eiweiß- 
1  eisten.  Eiweißkörner  beobachtete  Zimmermann  bei  Tradescantialeuko- 
plasten  („Leukosomen").  Mit  Millon  und  mit  Salpetersäure  reagieren  sie 
ganz  entschieden,  und  Öl,  Stärke  und  Gerbstoff  sind  sie  gewiß  nicht. 

Für  Eiweißleist^en  hält  Nestler  die  leistenförmigen  Bildungen  in  den 
Blasenzellen  von  Antithamnium  Fluraula.  —  HECiLER  wie  Kohl  sehen  die 
Cyanophycinkörner  der  Cyanophyceen  für  Eiweißkörper  an. 

Phykoöry  tlirin  und  Phykocyan.  Schon  Klein  hat  auf  die 
Tatsache  aufmerksam  gemacht,  daß  man  durch  Einlegen  von  Rhodophy- 
ceen  in  Kochsalzlösungen  oder  Weingeist  prachtvolle  intensiv  rotgefärbte 
Kristalle  erhalten  kann  ,  die  nach  Moliscii  als  „  P  h  y  k  o  e  r  y  t  h  r  i  n  - 
kristalloide"  anzusehen  sind.  Hansen  hat  sich  bemüht,  eine  Dar- 
stellungsmethode des  Phykoi'rytlirins  zu  ermittehu  Als  er  eine  wässerige 
Lösung  auf  flachen  Tellern  in  dünner  Schicht  bei  35"  bis  40"  eindampfte, 
erhielt  er  in  der  Tat  spröde  Blättchen,  die  die  ursprüngliche  Farbe  voll- 
ständig bewahrt  hatten,  in  Wasser  aber  unlösflch  waren:  daher  soll  das 
Phykoerytlirin  in  den  Chromatophoren  als  Eiweißverbindung  vorhanden  ge- 
wesen und  als  solche  ausgezogen  worden  sein.  Außer  bei  Florideen  fand 
Hansen  das  Phykoerythrin  auch  bei  Bryopsis  disticha,  wo  Alkohol  die 
Kristallisation  bewirkt,  bei  der  Floridee  Liagora  genügt  bereits  mechani- 
scher Druck  dazu.  Aus  Taonia  und  Dictyota  bereitete  er  sich  mit  destil- 
flertem   Wasser    ein   rotes    Phykoerythrinextrakt.     Auch  Bruns  hat  öfters 


246      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrocheraie.     XXII,  2. 

Phykoerythrinkristalle  aufgefunden,  wie  bei  Nemastoma  cervicornis  und 
Wrangeha  penicillata,  bei  denen  ihm  durch  konzentrierte  Kochsalzlösung-, 
einprozentiges  FonuaHn  die  KristaUisation  gelang. 

Die  eingehendste  Untersuchung,  die  über  die  vermutete  Eiweißnatur 
dieser  Kristalle  gar  keine  Zweifel  mehr  läßt,  ist  IVIolischs  Abhandlung 
über  „Das  Phykoerythrin".  Gibt  man  eine  lebende  Rotalge  in  lOprozen- 
tiges  Natriumchlorid,  dem  einige  Tropfen  Schwefelkohlenstoff  zugesetzt 
sind,  so  kristallisieren  bexagonale  Kristalle  des  Phykoerythrins  mit  geringer 
Doppelbrechung  und  ohne  Pleochroismus  aus.  Sie  sind  unlöslich  in  Al- 
kohol, Äther,  Benzol,  Schwefelkohlenstoff,  Oliven-  und  Terpentinöl.  Nur 
anfangs  sind  sie  in  Wasser  h'ishch,  später  nicht  mehr.  Die  Eiweißreak- 
tionen gelingen  alle.  Durch  plötzliches  Erhitzen  auf  100^  C.  werden  sie 
unlöslich,  ebenso  nach  Behandlung  mit  Alkohol,  sie  sind  durch  Kochsalz, 
Ammonium-  und  Magnesiumsulfat  aussalzbar.  —  Durch  Lösen  in  destil- 
liertem Wasser  bei  35*' C.  im  Dunkeln,  Filtrieren,  Fällen  mit  Alkohol,  wieder 
Lösen  usw.  und  Abdampfenlassen  der  reinen  wässerigen  Lösung  auf  dem 
Objekträger  gelingt  auch  die  Kristallisation  außerhalb  der  Pflanze. 

Nach  Molisch  kann  der  Ausdruck  Cramers  Rhodosperminkristalle 
wegfallen:  sie  sind  entweder  Phykoerythrin-,  oder,  wenn  farblos,  Proteins- 
kristalle;  vgl.  auch  im  Lit.  A'erz.  die  einschl.  Arbeit  Nolls. 

Ebenso  gelang  es  Moliscii  aus  der  durch  Extraktion  von  Oscillaria 
leptotricha  im  Dunkeln  erhaltenen  Farbstofflösung  durch  Aussalzen  mit 
Chlornatrium-,  Chlorkalium-  und  Magnesiumsulfat  das  Phykocyan  zur 
Kristallisation  zu  bringen.  Nach  den  Untersuchungen  von  Becke  dürften 
die  Kristalle  dem  monoklinen  Systeme  angehören  und  die  Kombination 
eines  Prismas  mit  einem  Klinodoma  darstellen.  Sie  sind  prachtvoll  indig- 
blau,  in  Wasser  quellbar,  löslich  in  Wasser,  Glyzerin,  verdünnten  Alkalien, 
unlöslich  in  Alkohol,  Äther,  Benzol,  Schwefelkohlenstoff"  und  verdünnten 
Säuren.  Mit  Salpetersäure  (1  Vol.  Säure  +  1  Vol.  Wasser)  werden  die  Kri- 
stalle unter  Abrundung  schön  karminrot,  dann  gelb,  eine  Farbe,  die  bei 
Zusatz  von  Ammoniak  sehr  intensiv  wird.  Millons  Reagens  färbt  pur- 
pur-,  dann  ziegelrot.  Brorawasser  entfärbt.  Auch  die  farblosen  Kristalle 
geben  die  Eiweißprobe.  Jod,  Eosin,  Fuchsin,  Gentianaviolett  werden  gierig 
aufgenommen.  Bei  Berücksichtigung  aller  dieser  Eigenschaften  ist  es 
zweifellos ,  daß  das  Phykocyan  ein  kristallisierbarer  Eiweißkörper  ist.  — 
Später  fand  Molisch  in  der  konzentrierten  Essigsäure  ein  vorzügliches 
Mittel,  sich  über  die  Verteilung  des  Phykocyans  im  Innern  der  Zellen  zu 
orientieren.  Eisessig  entzieht  nämlich  den  Oscillarien  das  Chlorophyll  und 
den  gelben  Farbstoff,   und  so  bleibt  das  Phykocyan  allein  in  ihnen  übrig. 

Pyrenoide.  Nach  Mitrophanow  erweist  sich  zur  Färbung  von 
Diatomeenp3'renoiden  als  sehr  zweckmäßig  Rubin -Orange -Methylgrün- 
gemisch. Zacharias  empfiehlt  ganz  allgemein  zur  Pyrenoidfärbung  essig- 
saure Glaubersalzlösung,  Fuchsin  S  und  für  Euglenen  soll  nach  Dangeard 
Rubin  S  und  Coccinin  sehr  gut  sein.  Gegen  energische  Mittel  wie  das 
MiLLONsche  Reagens  zeigt  sich  die  sog.  „Pyrenoidmembran"  besonders 
widerstandsfähig;  da  die  Chromatophoren  bei  dieser  Behandlung  ganz  oder 
teilweise  zerstört  werden,  treten,  wie  Boubier  gefunden  hat,  die  Pyrenoide 
sehr  deutlich  hervor.    Das  Kristalloid  ist  von  einer  hyalinen  Zone  umgeben. 


XXII,  2.     Hiebt  er:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      247 

die  durch  Lösung  der  Stärke  zustande  koiunit,  von  der  sich  mit  deutliehen 
doppelten  Konturen  die  Pyrenoidhaut  abhebt.  Die  gleiche  Widerstandsfähig- 
keit gegen  Millon  zeigen  auch  die  schon  von  Nägeli  bei  Spirogyra  beob- 
achteten Leisten,  die  den  Namen  „Pyrenoidbänder"  erhalten  haben.  Außer 
bei  Spirogyra  wurden  sie  auch  bei  Mougeotia  scalaris  nachgewiesen. 

D  a  s  Löw-BoKORN Ysche  Reagens  auf  „  a  k  t  i  v  e  s  A 1  b  u  m  i  n  " .  Eine 
Art  Abschluß  ihrer  Untersuchungen  über  aktives  Albumim  stellt  Löws  und 
BoKORXYs  Arbeit  „Zur  Chemie  der  Proteosomen"  dar,  in  der  sie  die  Unter- 
schiede zwischen  aktivem  und  passivem  Eiweiß  angeben. 

Aktives  gerinnt  mit  lüprozentigem  Alkohol,  passives  nicht. 

„         wird  mit  verdünntem  Ammoniak  gebunden,  passives  ist  dem- 
gegenüber indifferent. 
„        ist   unlöslich  in  konzentriertem  Ammoniak,  koaguliertes  löst 

sich  darin. 
„         reduziert  alkoholische  Silberlösung,  passives  nicht. 
„         verliert   durch  verdünnte  Säuren  dieses  Reduktionsvermögen 
sehr  rasch. 
Daß  Lüw-BoKORNYS  Hypothese   eine  vielfache  Berichtigung  erfahren 
hat,  ist  schon  aus  Zimmermanns  Mikrotechnik,  pag.  237,  ersichtlich,  nur  soll 
noch  Klemms  Befunden  in   dieser  Richtung  gedacht  sein.     Die  von  Löw- 
BoKORXY  angegebene  Silberausscheidung  hätte  darnacli  mit  dem  hypothe- 
tischen aktiven  Albumin   gar  nichts  zu  tun,    sondern    könne  jederzeit   mit 
Gerbsäure,  Koffein  oder  Ammoniak  und  Silberlösung  nachgeahmt  werden. 
Lecithin.     B.  v.  Bittö,   Estimation  of  lecithin  in  plants.     Diese  Z. 
1896,  Bd.  XIII,  pag.  556  und  Stoklasa  „Lecithin  in  der  Pflanze." 


10.  Kern,  Nukleiii,  Plastiu,  Volutiu  etc. 

Als  Vorläufer  seines  Biiclies  über  „Die  Morphologie  und  Pjiysio- 
logie  des  pflanzlichen  Zellkernes"  könnte  man  die  diesbezüglichen  Aus- 
führungen Zimmermanns  in  seiner  Mikrotechnik  bezeichnen.  Mit  dem 
Erscheinen  des  oben  genannten  Buches  war  endlich  die  Möglichkeit 
gegeben ,  die  unendlich  angeschwollene  Kernliteratur  zu  überblicken 
und  an  der  Hand  der  Ausführungen  dieses  geübten  Mikrotechnikers 
die  notwendig  gewordene  Sichtung  durchzuführen.  Seit  1896,  dem 
Erscheinungsjahre  dieses  Werkes ,  haben  sich  die  Kenntnisse  über 
den  Kern  bedeutend  vermehrt  und  sind  auch  in  mehr  als  einer 
Richtung  bedeutend  vertieft  worden.  Weiterhin  liat  sich  Kürnicke 
der  großen  Arbeit  einer  kritischen  Behandlung  der  neuereu  Literatur 
über  den  Kern  unterzogen,  wobei  er  die  Abhandlungen  bis  1903  ein- 
schließlich berücksichtigt  hat. 

Wenn  ich  trotz  der  Literaturzusammenstellung  Körnicke  s,  die 
mit    der  Anführung    der  Arbeiten   ja    gleichzeitig   das   Mittel   an    die 


248      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Hand  gibt,  sich  in  diesen  über  die  verwendeten  niikrochemiscli- 
mikrotechnischen  Methoden  zu  orientieren,  nocii  einiges  erwähne,  so 
geschieht  dies  lediglich  deshalb ,  um  anf  besonders  bewährte ,  neu 
eingeführte  Untersuchungsarten  hinzuweisen,  oder  Mikrochemisches 
über  den  Kern  wieder  aufzufrischen  oder ,  um  an  Werke  zu  er- 
innern, die  als  grundlegend  fiir  die  zu  verwendenden  Methoden  zu 
betrachten  sind. 

So  hat  V.  Wasielewski  die  verschiedenen  Fixierungsmittel  genau 
überprüft  und  dabei  das  Brauchbare  vom  Unbrauchbaren  zu  sondern 
sich  bemüht.  Eine  derartige  Untersuchung  war  gerade  in  dem  Er- 
scheinungsjahre am  Platze,  da  A.  Fischer  in  seinem  Buche  „Fixierung, 
Färbung  und  Bau  des  Protoplasmas"  zu  einer  Schlußfolgerung  kommt, 
die  geeignet  erscheint,  die  ganze  Mikrotechnik  in  Frage  zu  stellen. 
„Die  neuere  Zeliforschung,  besonders  die  Mitosenlehre,  ist  genau  be- 
trachtet, nichts  anderes  als  die  Untersuchung  ausgewählter  Fällungs- 
bilder nach  Fixierung  mit  Flemming  scher  und  Hermann  scher  Lösung, 
ergänzt  durch  einige  andere  Mittel ,  deren  Erfolge  aber  auch  nach 
den  Bildern  der  genannten  Gemische  zurechtgestutzt  werden.'" 

Ist  nun  zwar  mit  diesem  vernichtenden  Urteile  über  die  Be- 
strebungen der  Mikrotechniker  etwas  über  das  Ziel  hinausgeschossen, 
so  kann  man  es  dennoch  begreifen ,  wenn  man  in  Fischers  Buclie 
nach  dessen  logischen  Prämissen  Umschau  hält.  Eigentlich  genügt 
es,  bloß  die  Abbildungen  p.  37,  4.5,  210  und  besonders  p.  222  zu 
betrachten,  und  man  wird  eine  ganze  Menge  bei  den  verschiedensten 
Organismen  „neu  entdeckter  Granula"  als  Niederschlagsbestandteile 
wieder  erkennen.  Ein  Blick  auf  diese  Bilder  und  eine  Unzahl  auf- 
sehenerregende Plasmastrukturen  stellen  sich  als  bloße  Kunstprodukte 
dar.  In  den  engeren  Paihmen  dieses  Referates  gehören  Kapitel  III, 
das  sich  mit  der  Fällungsform  einzelner,  Kapitel  IV,  das  sich  mit 
der  von  mehreren  Eiweißkörpern  in  Mischung  beschäftigt,  und  Ka- 
pitel V,  das  auf  den  Nachweis  der  Albumose  und  der  Nukleinsäure 
genauer  eingeht.  —  Durch  seine  Beobachtungen  fand  sich  Fischer 
veranlaßt,  der  physikalischen  Farbstofftheorie  das  Wort  zu  reden, 
der  sich  Miehe,  Arnoldi    und   andere  Autoren  angeschlossen  haben. 

Dagegen  scheint  Zacharias  noch  an  der  Möglichkeit  festzuhalten, 
Nuklein  als  solches  durch  Farbstoffreagentien  festzustellen ,  um  auf 
seine  Verbreitung  zu  schließen.  Wenigstens  spricht  die  Anführung 
von  Fuchsin  S  in  essigsaurem  Glaubersalz  zur  Unterscheidung  nuklein- 
haltiger  von  nukleinfreien  Teilen  der  Spermatozoon  der  Characeen 
und  gewisser  Tiere  viel    für    ein  Beharren    bei    seinen   früheren  An- 


XXII,  2.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      249 

schauungeii.  Dagegen  sclieinen  die  von  ihm  bei  fixiertem  Materiale 
im  Kernraume  beobachteten  Fasern  Kunstprodukte  im  Sinne  Fischkks 
zu   sein. 

Ein  angeblich  sehr  gtites  mikrochemisches  Reagens  auf  Nuklein, 
das  sicli  an  die  von  Zacharias  empfohlenen  anschlösse ,  ist  nach 
V.  WissELiNGii  öOprozentige  Chromsäure.  Gegen  diese  ist  das  Kern- 
geriist  sehr  lange  widerstandsfähig,  löst  sich  aber  später  wie  das 
Plasma  und  läßt  die  Nukleolen  übrig ,  die  nun  für  sich  wieder  ein 
Fadengerüst  zeigen,  das  noch  bleibt,  wenn  die  Wand  bereits  in 
Lösung  gegangen  ist.  Auch  Glyzerin  läßt  sich  in  ähnlicher  Weise 
verwenden.  Interessant  ist  auch  Meyers  Anschauung  von  der  Natur, 
des  von  ihm  entdeckten  und  beschriebenen  Volutins  als  Nuklei'n- 
körper. 

Eigens  über  das  Vorkommen  des  Nukle'ins  zu  sprechen,  dessen 
große  Verbreitung  bekannt  ist,  scheint  unpassend,  darum  mag  dies- 
bezüglich in  Körnicke s  Sammelreferat  nachgesehen  werden. 

Volutin  und  die  metachromatischen  Körperchen.  Güiller- 
MoxD  beschreibt  leicht  färbbare  Kcu-perchen,  die  als  metachromatisch  be- 
zeichnet wurden.  Zu  ihrer  Darstellung  empfiehlt  er  Pikroformol  und  Foly- 
chromblau.  Villard  hat  bei  Zoochlorellen  diese  metachromatischen  Körnchen 
gleichfalls  nachgewiesen.  Nach  A.  Meyer  sind  die  von  ihm  beschriebenen 
Volutine  identisch  mit  Guillerjioxds  metachromatischen  Körperchen,  es 
soll  eine  Nukleinverbindung  vorUegen.  Ebenso  hält  Meyer  die  von  Kohl 
bei  Schizophyceen  beobachteten  „Zentralkörner"  für  Volutin  und  die  Hax- 
steex  sehen  „Fukosankörner"  der  Braunalgen  enthalten  es  nach  seiner 
Meinung  wenigstens  zum  Teil.  Am  klarsten  differenziert  sich  das  Volutin 
mit  Meyers  Formol -Methylenblau -Schwefelsäure -Methode,  die  auf  der 
Wirkung  der  Schwefelsäure  beruht,  alle  übrigen  eventuell  gefärbten  Zell- 
bestandteile zu  entfärben.  Denn  nur  das  Volutin  hält  unter  solchen  Be- 
dingungen die  Farbe. 

Bei  Pinnularia  radiosa  scheinen  Volutinsphärite  vorzukommen.  Auch 
macht  es  den  Eindruck,  als  ob  es  mehrere  Volutine  gäbe.  So  fand  Meyer 
bei  Mougeotia  sp.  einen  Stotf,  der  in  der  lebenden  Zelle  mit  Methylenblau 
tiefblaue  tropfenförmige  Ausscheidungen  lieferte:  Meyers  1-Volutin;  bei 
Achlya  Körner,  die  sich  mit  Methylenblau  färben,  quellen  und  sich  in  eine 
leichtflüssige  tiefblaue  Lösung  verwandeln:  Meyers  /S- Volutin. 

Plast  in.  Das  von  Reixke  dargestellte  Plastin,  dessen  Reinheit 
übrigens  von  Low  bestritten  wurde,  hat  Zacharias  mikrochemisch  zu 
charakterisieren  versucht  und  die  Ansicht  ausgesprochen,  daß  es  die 
Grundsubstanz  des  Cytoplasmas  sei.  Er  teilt  nun  neuerdings  mit,  daß  auch 
die  von  ihm  im  Kernraume  beobachteten  Spindelfasern  in  bestimmten  Fällen 
Plastin  enthalten  können. 


250     Kicliter:   Die  Fortschritte  der  botanisclien  Mikrochemie.     XXII,  2. 


11.  Fermente  und  Enzyme. 

Myrosin.  Guignard  gibt  konzentrierte  Salzsäure,  die  auf  1  cc  einen 
Tropfen  einer  lOprozentigen  wässrigen  Orcinlösung  enthält,  als  Reagens  auf 
uiyrosinhaltige  Zellen  an.  Er  stellte  damit  fest,  daß  die  von  HEiXRiCHer  als 
Eiweißidioblasten  beschriebenen  eigenartigen  Zellen  vieler  Kruziferen  Myrosin 
enthalten.  Spazier  kommt  nun  bei  seinen  Untersuchungen  „Über  das  Auf- 
treten und  die  physiologische  Bedeutung  des  Myrosins  in  der  Pflanze"  zu 
der  Anschauung,  daß  es  in  den  vegetativen  Organen  stets  in  gelöster,  in 
■  den  Samen  aber  stets  in  körniger  Form  enthalten  sei.  Die  Körnchen  des 
zweiten  Vorkommens  bezeichnet  er  als  „Mja-osinkörner".  Sie  sollen  den 
Aleuronkörnern  sehr  ähnlich  sehen,  doch  sind  sie  stets  farblos,  stark  licht- 
brechend und  einschlußfrei,  auch  leicht  löslich  in  Glyzerin  und  sehr  leicht 
löslich  in  Wasser. 

E  m  u  1  s  i  n  k  ö  r  n  e  r.  Bei  Amygdaleen-Saraen  fand  Spazier  in  den 
Prokambialsträngen  Körner,  die  er  Emulsinkörner  nennt.  Auch  bei  ihnen 
fehlen  Einschlüsse  völlig.  Durch  Guajakharz  erzielte  er  in  den  Emulsin- 
körnerzellen  intensive  Blaufärbung,  weshalb  er  in  ihnen  den  Sitz  der  Spal- 
tung des  Amygdalins  vermutet.  Somit  tritt  diese  Guajakreaktion  ergänzend 
zu  den  von  Guignard  angegebenen  mit  Mielox  und  Kupfersulfat-Kalilauge. 

Diastase.  Gibt  man  pflanzliche  Objekte  zunächst  in  eine  alkoho- 
lische dunkelbraune  ätherfreie  Lösung  von  Guajakharz  und  nach  dem 
Verdunsten  des  Alkohols  in  eine  mehr  oder  weniger  verdünnte  Lösung- 
von  Wasserstoflsuperoxyd,  so  wird  die  mit  Guajak  durchtränkte  gefällte 
Diastase  prächtig  blau  gefärbt  und  in  Wasser  unlösHch.  Diese  Reaktion 
ist  von  Grüss  eingeführt  und  ein  Jahr  darauf  für  Keimungsstudien  ver- 
bessert und  als  Diastasereaktion  gedeutet  worden. 

Leider  gibt  es  eine  ganze  Anzahl  anderer  Substanzen,  die  sich  sehr 
ähnlich  verhalten  (vgl.  Leptomin)  und  noch  unsicherer  wird  die  Reaktion 
dadurch,  daß  es  Stoffe  gibt,  die,  trotzdem  Diastase  vorhanden  ist,  ihren 
Nachweis  unmöglich  machen,  z.  B.  Sauerstoffübertrager,  Eiweiß  und  Gerb- 
stoffe. Grüss  hat  nun  mit  seinem  neuen  Reagens  zunächst  festgestellt,  daß 
die  Diastase  nicht  in  die  Masse  des  Kornes  einzudringen  vermag,  sich 
vielmehr  bloß  im  bezw.  in  der  unmittelbarsten  Nähe  des  Lösungskanals 
betindet.  Auch  zum  Studium  der  Physiologie  der  Keimung  sei  es  außer- 
ordentlich verwendbar,  wenn  es  sich  um  die  Stärkekörner  handle,  ja  auch 
bei  der  Untersuchung  der  Wirkung  diastatischer  Fermente  auf  Zellhäute 
leiste  es  vortreffliche  Dienste.  Eine  zweckmäßige  Kontrolle  sei  dabei  durch 
die  Anwendung  von  Kongorot  gegeben,  das  bloß  die  unangegriffenen  Stellen 
färbe  und  so  auf  rotem  Grunde  die  farblosen  Angriffsstellen  deutlich  hervor- 
treten lasse.  (Merkwürdig,  daß  sich  Präparate  von  Mais  gegen  Kongorot 
gerade  umgekehrt  verhalten.) 

Wie  oben  angedeutet,  mußte  es  schließlich  zu  einer  Auseinandersetzung 
zwischen  dem  Entdecker  der  Diastase-  und  dem  der  Leptominreaktion 
kommen.  So  hat  denn  auch  Grüss  auf  Grund  der  Tatsache,  daß  von 
ScHUCHARDT  gelieferte  Diastase  mit  frischer  Guajaklösung  befeuchtet  und 
dann  in  Wasserstoffsuperoxyd  gegeben  (Raciborskis  Probe)  eine  Bläuung 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortscliritte  der  botanischen  I\likrocheiuie.      251 

zeigt,  den  Schluß  gezogen,  daß  Raciborskis  Leptomin  lediglich  kata- 
lytisch  wirkende  Diastase  sei.  Die  Antwort  Raciborskis  lautete  dahin, 
daß  Grüs.s  mit  Leptomin  verunreinigte  Diastase  von  Schuuhardt  erhalten 
haben  möge. 

Oxydasen  und  Peroxydasen.  Das  günstigste  Material  zum  Nach- 
weise oxydierender  Enzyme  im  Körper  höherer  Pflanzen  bildet  nach  Grüss 
solches,  das  von  Parasiten,  wie  der  Mistel  heimgesucht  ist.  Als  Reagens  wird 
Tetramethylparaphenyldiaminchlorid  empfohlen.  Damit  färbt  sich  das  be- 
fallene Holz  schwach,  die  Rinde  stark.  Die  den  Tracheiden  anliegenden 
Zellen  bleiben  gelbgrün,  färben  sich  aber  mit  Guajak  und  H.,02  stark  blau. 

Behandelt  man  zuerst  mit  Azeton,  Ätherazeton  und  Glyzerin  und  dann 
mit  Guajak,  so  kommt  der  Sitz  der  Aminoxydase  zutage.  Die  Sklerenchym- 
zellen,  die  verholzten  Stränge  und  das  Kambium  zeigen  von  deren  An- 
wesenheit.    Azeton  unterdrückt  somit  nicht  die  Oxydasereaktion. 

Fermente  und  Enzyme  im  allgemeinen.  Es  sei  auch  noch 
auf  die  Arbeit  Dastres  über  die  Extraktion  endozellulärer  Fermente  durch 
Chloroform  verwiesen. 

Reduzierende  und  oxydierende  Substanzen.  Czapek  gibt 
ammoniakalische  Silbernitrat -Lösung  an  als  Mittel,  mit  dem  man  bei  geo- 
tropisch  gereizten  Wurzeln  im  Vergleiche  zu  ungereizten  eine  Vermehrung 
reduzierender  Substanz  nachzuweisen  imstande  ist.  Der  Nachweis  der  Ver- 
minderung der  Sauerstoff  leicht  abgebenden  Substanz  gelingt  dagegen  gut 
mit  Guajaktinktur,  Indigweiß  und  «-Naphtol-Paraphenyldamin. 


12.  Indol. 

Hesse  hat  in  jüngster  Zeit  festgestellt,  daß  man  auch  die  gering- 
sten Mengen  von  Indol  in  gewissen  pflanzlichen  Parfüms  des  Handels 
nachzuweisen  vermöge  mittels  Zusatz  von  Pikrinsäure  zu  den  weniger 
flüchtigen  Substanzen  und  durch  die  charakteristischen  Farbenerscheinungen 
am  Indolpikrat.  Die  verwendeten  Pflanzenparfums  stammten  von  Jasminum 
grandiflorum  und  Citrus  Bigaradia. 

Verschaffelt  gibt  nun  die  Oxalsäure  wegen  der  sehr  charakteristi- 
schen rosa  bis  violetten  Farbentinten,  die  nach  M.  J.  Guerda  beim  Über- 
streichen von  Indoldämpfen  über  Oxalsäure  entstehen,  als  treffliches  makro- 
und  mikrochemisches  Reagens  auf  Indol  in  Pflanzendüften  an.  Wesentlich 
für  das  Urteil,  ob  Indol  vorhanden  ist  oder  nicht,  ist  die  Verwendung 
lebender  Blüten  zur  Reaktion. 

1)  V  e  r  s  u  c  h  s  a  n  s  t  e  1 1  u  n  g :  Auf  den  Grund  eines  Glastrichters  oder 
einer  Kristallisierschale  gibt  man  einen  Wattebausch  oder  besser  Glaswolle, 
die  mit  konzentrierter  Oxalsäure  getränkt  ist  und  darüber,  getrennt  durch 
ein  Stückchen  Glas,  eine  frisch  aufgebrochene  Jasminblüte.  Nach  ^/.,  bis 
1  Stunde  beginnt  die  Rotfärbung  des  Bausches  von  der  Blüte  her.  Die 
Farbe  vertieft  sich  vom  Rosa  bis  ins  Violett.  Nach  einigen  Stunden  ist  die 
Färbung  bis  ins  Innere  des  Pfropfens  vorgedrungen. 

2)  Ver  SU chs ans t eilung:  Mit  Hilfe  einer  Stütze  und  einer  Klemm- 
schraube wurde  über  die  blühende  Trugdolde  des  Jasmins  eine  Kristallisier- 


252      Richter:  Die  Fortschritte  der  butanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

schale  mit  oxalsäuregetränlvtera  GlaswoUenbansche  gestülpt.  Schon  nach 
kurzer  Zeit  konnte  festgestellt  werden,  daß  nun  die  Blüten  in  dem  oben 
angegebenen  Sinne  sich  verfärbten  in  Farben,  die  auch  mikroskopisch 
deutlich  wahrgenommen  werden  konnten. 

Beurteilung  der  Reaktion:  Zwar  Gruppenreaktion  auf  das  Indol 
und  seine  Verwandten,  kann  sie  bei  Blüten  auf  Grund  der  chemischen 
Analj'sen,  die  stets  Indol,  nie  aber  seine  Verwandten  anzeigten,  als  Indol- 
reaktion  gelten  und  in  die  Mikrochemie  als  solche  aufgenommen  werden.  — 
Reaktionspflanzen:  Von  allen  untersuchten  Blüten  gaben  nur  die  des 
Jasmins  und  des  Goldregens  die  Reaktion.  (Erhärtet  durch  Hesse  und 
Verschaffelt.) 


IB.  Yaria. 

Die  C  y  a  n  0  p  h  j'  c  i  n  k  ö  r  n  e  r ,  Z  e  n  t  r  a  1  k  ö  r  p  e  r  und  Zentral- 
k  ö  r  n  e  r  d  e  r  C  y  a  n  o  p  h  y  c  e  e  n.  Die  sogenannten  C  y  a  n  o  p  h  y  c  i  n  k  ö  r  n  e  r 
sind  wiederholt  Gegenstand  wissenschaftlicher  Untersuchungen  gewesen. 
Macallum  teilt  mit,  daß  sie  sich  mit  Pikrokarmin  färben,  Hegler  schließt 
auf  Grund  der  durchgeführten  Reaktionen  auf  Eiweißnatur  der  Körner 
und  Kohl  erklärt  sie  geradezu  für  Eiweißkristalloide  im  Cytoplasma 
Nach  seinen  Beobachtungen  sind  besonders  Säurefuchsin-Anilinwasser  und 
Zimmermanns  Säurefuchsinmethode  zur  Färbung  zu  empfehlen.  Hieronymus 
will  sie  mit  den  von  Schmitz  beobachteten  Schleimkugeln  identifizieren. 
Von  den  Cyanophycinkihmern  sind  die  Zentralkörner  scharf  zu  unter- 
scheiden. Während  nämlich  jene  im  Cytoplasma  vorkommen,  ist  der  Platz 
dieser  im  Zentralkörper.  Kohl  betont  als  deren  Charakteristikon:  1.  Blau- 
färbung mit  Molybdänschwefelsäure  und  2.  große  Widerstandsfähigkeit 
gegen  Eau  de  Javelle  und  Ameisensäure.  A.  Meyer  erklärt  sie  für 
Volutinkörner. 

Zur  Sichtbarmachung  des  Z  e  n  t  r  a  1  k  ö  r  p  e  r  s  sind  nach  Hegler  stark 
reduzierende  Fixierungsmittel  nötig,  nach  Kohl  ist  besonders  Eau  de  Javelle 
dazu  geeignet. 

Fischer  definiert  den  Zentralkörper  als  den  vom  Chromatophor  um- 
schlossenen Hauptteil  des  Protoplasten,  den  Zentralkörper  Bütschlis  bei 
schwefelfreien  Bakterien  dagegen  als  kontrahierten  Protoplasten  und  die 
Kapseln  als  Kunstprodukte,  entstanden  durch  an  der  Basis  verquollene  Geißeln. 
Es  sei  unberechtigt,  die  Färbbarkeit  der  Bakterien  mit  Kernfarbstoffen  zu 
sehr  hervorzuheben.  Verdauungsversuche  könnten  über  die  Kernnatur  des 
Zentralkörpers  der  Cyanophyceen  keinen  Aufschluß  geben,  da  die  ver- 
wendete Pepsin-Salzsäure  bereits  „enzymatische  Kontraktion"  hervorrufe. 
Man  beachte  auch  die  neueste  Arbeit  von  Fischer. 

Die  sogenannten  Gas  Vakuolen.  P.  Richter  hatte  in  Gloio- 
trichia  echinulata  unter  dem  I\Iikroskope  rötlich  erscheinende  Inhaltskörper 
beobachtet  und  für  Schwefel  angesehen.  Klebahn  sprach  sie  in  seiner 
Arbeit  „Gasvakuolen,  ein  Bestandteil  der  Zellen  der  wasserblütebildenden 
Phykochromaceen"  als  Gas  an,  ohne  jedoch  die  wichtige  Frage  zu  beant- 
worten,  welches  Gas   vorliege.     Nur   welches   es   nicht  sei,   konnte  er  mit 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      253 

Bestimmtheit  sagen.  Das  Gas  sei  weder  Kolilensäure  noch  Sauerstoff.  Seiner 
Vermutung  nach  könne  am  ehesten  an  Luft  oder  an  Stickstoff  gedacht  wer- 
den. Daß  überhaupt  kein  Gas  vorliegt,  zeigt  die  Arbeit  von  Moliscii.  Schon 
Brand  hatte  die  Vermutung  ausgesprochen,  mit  Klebahns  Gasvakuolen 
müßte  es  eine  andere  Bewandtnis  haben,  den  Beweis  dafür  hat  erst  Moijsch 
gebracht.  Es  kann  heute  gar  keinem  Zweifel  melir  unterliegen,  daß  die 
„Gasvakuolen"  keine  Spur  von  ^Gas"  enthalten.  Als  den  besten  Beweis 
kann  man  wohl  ansehen,  daß  es  gelang,  die  „Gasvakuolen"  zu  isolieren, 
ohne  daß  sie  sich  verflüchtigt  hätten.  Bringt  man  frisches  Material  von 
Aphanizomonon  flos  aquae  in  eine  lOprozentige  Kaliumnitratlösung,  so  wird 
die  Alge  mazeriert  und  die  frei  werdenden  „Gasvakuolen"  erweisen  sich 
als  Vakuolen  mit  einer  Unzahl  kleinster  Inhaltskörperchen.  Hinze  hat  in 
einer  seiner  neuesten  Arbeiten  die  alte  P.  liiCHTERsche  Anschauung 
wieder  aufgenommen  und  damit  die  Ansicht  über  die  Gasvakuolen"  dahin 
formuliert  hat :  Die  „Gasvakuolen"  vieler  Oscillarien  bestehen  aus  Schwefel. 
—  Dagegen  hält  sie  A.  Fischer  für  das  sogenannte  Anabaenin:  ein  Kohle- 
hydrat, angeblich  das  erste  Assimilationsprodukt. 

Physoden.  Crato  bezeichnet  als  Physoden  bläschenartige  Gebilde, 
die  ein  stärkeres  Lichtbrechungsvermögen  besitzen  als  die  übrigen  Zell- 
bestandteile, sich  selbständig  innerhalb  der  Plasmalamellen  verschieben  und 
auch  ausgedehnte  amöboide  Formveränderungen  zeigen  können.  Bei  den 
Phäophyceen,  die  Crato  eingehender  untersucht  hat,  kommen  die  Physoden 
in  allen  Zellen  vor.  Sie  bestehen  hier  aus  einer  mit  Wasser  mischbaren 
Flüssigkeit,  welche  von  einer  zarten  Plasmalamelle  umgeben  ist,  die 
durch  verschiedene  Reagentien  in  ein  undurchlässiges  Häutchen  verwan- 
delt wird  und  somit  den  Verlauf  der  Reaktionen  in  verschiedener  Weise 
beeinflussen  kann.  Vanillin -Salzsäure  erzeugt  intensive  Rotfärbung,  es 
sei  nicht  unmciglich ,  daß  Phlorogluzin  ein  Bestandteil  der  Physoden  ist. 
Anihnsulfat  und  Kaliumnitrit  färben  die  Physoden  erst  gelb ,  dann  rot. 
Phenolartige  Stoffe  seien  der  Grund  des  Auftretens  gewisser  Eiweiß- 
reaktionen, doch -bestünden  die  in  Rede  stehenden  Inhaltskörper  keines- 
falls aus  Eiweiß! 

Hansteen  suchte  die  schon  vor  Crato  geäußerte  Ansicht  von  der 
organoiden  Natur  der  von  Crato  als  organisch  beschriebenen  Gebilde  durcli 
neue  Tatsachen  zu  stützen.  Er  hätte  die  Körper  als  „Fukosankörner" 
beschrieben  und  könne  nicht  anders  als  sie  noch  so  benennen ,  sie  seien 
mit  Schmitz'  „Phäophyceenstärke"  identisch  (vgl.  diese)..  Nach  Meyer  sollen 
sie  zum  großen  Teile  aus  Volutin  bestehen. 

My  rioph  yllin.  Raciborski  hat  die  schon  mehrfach  beschriebenen 
Inhaltskörper  der  Myriophyllumtrichome,  die  ilirer  Entwicklung  nach  mit 
GerbstoftVakuolen  eine  große  Ähnlichkeit  haben,  einer  eingehenden  mikro- 
chemischen Analyse  unterworfen,  auf  Grund  derer  er  zu  dem  Ergebnisse 
gelangt,  der  Körper  sei  gewiß  kein  Phloroglucin.  doch  sei  es  immerhin 
wahrscheinlich,  daß  ein  glykosidartiger  Körper  vorliege.  Die  mit  ^'anillin- 
Salzsäure  erhaltenen  Resultate  über  Phlorogluzinverbreitung  müßten  sonach 
nachgeprüft  werden,  vgl.  Möller.  Die  Myriophyllinuntersuchungen  wurden 
wieder  aufgenommen  von  Pröscher,  der  sich  besonders  auf  die  Rotfärbung 
des  Myriophyllins  mit  Vanillin-Salzsäure  konzentrierte:  nach  ihm  wird  es  durch 


254      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 

Abspaltung-  von  höchst  oxj^dabel  wirkenden  Hydroxylgruppen  organischen 
oder  anorganischen  IJadikals  hervorgerufen.  Er  hat  das  Myriophyllin  und 
das  Oxymyriophyllin  (die  rote  Verbindung)  isoliert  und  stellt  Mitteilungen 
darüber  in  Aussicht. 

Lep tomin.  Bringt  man  Schnitte  aus  Stengelstücken  von  Saccharum 
officinarum  in  eine  alkoholische  Guajaklösung,  so  färbt  sicluder  parenchyma- 
tische  Teil,  aus  dem  sich  die  Gefäßbündel  farblos  hervorheben.  Die  im 
Zuckerrohre  enthaltene  Oxydase  veranlaßt  die  Oxydation  und  damit  die 
Blaufärbung.  Beim  Erwärmen  auf  60**  und  durch  absoluten  Alkohol  wird 
die  Oxydase  zerstört.  Behandelt  man  jetzt  wieder  mit  Guajak  und  Wasser- 
stojfsuperoxj'd,  so  zeigt  sich  abermals  eine  prachtvolle,  tiefblaue  Reaktion, 
nur  sind  jetzt  gerade  die  Gefäßbündel  gefärbt,  speziell  die  Siebröhren  und 
Geleitzellen  des  Leptoms.  Der  anscheinend  neue  Körper,  auf  den  diese 
Reaktion  zurückzuführen  ist,  wurde  vom  Entdecker  Raciborski  nach  dem 
Orte  seines  Vorkommens:  Leptomin  genannt.  Doch  ist  dieses  nicht  bloß 
auf  die  Siebröhren  beschränkt,  im  Milchsafte,  auch  im  Marke  gewisser 
Pflanzen  kommt  es  vor.  Seine  Bedeutung  soll  analog  der  des  Hämoglobins 
in  der  0-Übertragung  gelegen  sein. 

Die  Widerstandsfähigkeit  des  Leptomins  ist  so  groß ,  daß  es  feucht 
bis  94'*  C,  trocken  sogar  100'^  C.  auszuhalten  vermag,  ohne  eine  Schwächung 
der  Reaktion  zu  zeigen. 

Grüss  hat  nun  zunächst  eingewendet,  daß  Raciborskis  Leptomin 
nichts  weiter  sei  als  eine  katalytisch  wirkende  Diastase  (s.  o.).  Moliscpi 
wendete  sich  besonders  gegen  die  Behauptung  des  Entdeckers  von  der 
prinzipiellen  Lokalisation  seines  Stoffes,  indem  er  zeigen  konnte,  daß 
außer  Sieb-  und  Milchröhren  auch  Bast-,  KoUenchym-,  Phellogen-  und 
Epidermiszellen  die  Raciborski  sehe  Reaktion  zu  geben  A'ermögen.  Die 
Antwort  ist  in  Raciborskis  Demonstrationsversuchen  mit  Leptomin  ent- 
halten. Grüss  mag  mit  Leptomin  verunreinigte  Diastase  verwendet  haben. 
Die  Lokalisation  aber  kann  immer  erzielt  werden,  wenn  man  nur  gewisse 
Vorsichtsmaßregeln  anwendet,  und  vor  allem  das  rasche  Eindringen  des 
Alkohols  in  die  pflanzlichen  Lufträume  durch  Anwendung  einer  Ver- 
dünnungsluftpumpe möglich  macht.  Es  wird  dann  das  Diffundieren  in 
andere  Gewebe  unmöglich. 

Zum  makroskopischen  Nachweis  eignet  sich  nach  Raciborski  am 
besten  Guajaklösung  und  H,  0.,  (Blaufärbung),  die  alkoholische  Lösung 
eines  nicht  zersetzten  Dimethylparaphenylendiamins  und  H,  0„  (rote  Fär- 
bung) und  die  alkoholische  Lösung  gleicher  Teile  «-Naphtol  und  Dimethyl- 
paraphenylendiarain  nebst  einigen  Tropfen  H.,  O.^  (dunkelindig-  bis  schwarz- 
blaue Färbung). 

Für  mikroskopische  Zwecke  sind  Guajak  und  «-Naphtol  am  geeignet- 
sten.    Molisch  empfiehlt  gleichfalls  «-Naphtol. 

Über  einen  reaktionshindernden  Gerbstoff  vgl.  das  Kapitel  „Gerb- 
stoffe". 


XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      255 

Neue  Stoffe. 


Autor 

Neue  Körper 

Anmerkung 

AVETTA,   C. 

CystoHthen  bei  Coccinia- 
Arten 

sind  nicht  Zellulose  und  fär- 
ben sich  mit  Pektinfarb- 
stoffen nicht. 

Belajeff,  W. 

Die  färbbaren  Körperchen 
in  spermatogenen  Zellen 
bei  Characeen,  Filicinen, 
Equisetaceen 

==  Zentrosomen  (auf  Grund 
von  Studien  an  Marsilia  er- 
kannt). 

Belzung,  E.  u.  Poi- 

RAULT,   G. 

Nicht    näher    bestimmte 
organische  Säure  in  cal- 
ciumhaltigen  Sphäriten 

erhalten  im  sirupartigen  Saft 
von  Angiopteris  evecta  nach 
zweimonatlichem  Stehen. 

Benecke,  W. 

Die  „BtJTSCHLi  sehen  ro- 
ten Kugeln" 

sind  durch  Fixieren  mit  Os- 
miumsäure leicht  nachweisb. 

Bruns,  E, 

„Leuchtkörper"  der  Flo- 
rideen 

noch  nicht  ehem.  bestimmt. 
Name  rührt  von  dem  Ver- 
halten gegen  einfallende  und 
reflektierte  Strahlen  her. 

BUSCALIOXI,  L. 

„Corpo  mucilaginoso  delle 
druse" 

bedarf  der  chemischen  Nach- 
prüfung. 

Busse,  W.     , 

Stark  lichtbrechende,  öl- 
tropfenähnliche  Körper, 
die   schwach  gerbstoff- 
artig sind 

beobachtet  im  Gewebe  der 
Knospenscheide  der  Weiß- 
tanne. 

Czapek,  F. 

„Hadromal" 

zusammengesetzt  a.  3  Stoffen. 

Czapek,  F. 

„Sphagnol" 
in  Mooszellhäuten 
vgl.  „Membran  d.  Moose" 

phenolartig, 
reagiert  mit  Millon, 
isolierbar. 

Czapek,  F. 

Sphagnolzellulosid 

vgl.  „Zellulose -Enzyme  und 
Zelluloside". 

Debski,  B. 

Braune    Massen   in    den 
Blattstielen,  Blattschei- 
den   und    Haaren    der 

Marantaceen 

Die  Reaktionen  werden  an- 
gegeben. 

256      Richter:   Die  Fortschritte  der  butanischen  Mikrochemie.     XXII.  2. 


Auto  r 

Neue  Körper 

Anmerkung 

Debski,  B. 

Ein     Membranstoff     bei 
Characeen 

wird     als     neu    beschrieben. 

Debski,  B. 

Die  Inhaltskörper  junger 
Zellen  bei  Characeen 

dürften  mit  den  grobkörn. 
Gebilden  Kaisers  (D.  Z. 
189G,  p.  258)  und  Zimmer- 
mann s  Körnern  v.  bedeuten- 
der Größe  und  abnormaler 
Gestalt  übereinstimmen  (D. 
Z.  1893,  p.  530). 

Fischer,  A. 

Die  mit  Hämatoxylin  rot 
werdenden  Körner  der 
Schwefelbakterien    und 
die   Granulationen    der 
Cyanophyceen 

sind  d.  z.  ehem.  noch  nicht 
aufgeklärt. 

Fischer,  A. 

1)  Anabaenin 

2)  Anabaenase 

1)  Kohlehydrat. 

2)  Ferment. 

Fujii,  K. 

Eine  stark  reduzier.  Sub- 
stanz im  Bestäubungs- 
tropfen V.  Taxus  baccata 

verhindert  die  Stärkeprobe 
mit  Jod,  die  Blaufärbung 
mit  Guajak. 

G^ENEAU  DE  L  AMAR- 
LIERE,   L. 

ein  aromatischer  Aldehyd 

in  Kutikulis  (färbt  sich  nach 
Schiff).  ' 

GOLENKIN,   M. 

Elaioplastenartige  Körper 
in  d.  mittler.  Zellschichte 
V.  Sebdenia  Monardiana 

zweifellos  keine  Olbildner. 
Natur  unbekannt. 

GUILLIERMOND,  A. 

Metachromatische     Kör- 
perchen 

mit  Pikroformol  u.  Hämalaun 
oder  Unnas  Polychromblau 
färbbar. 

Hansen,  A. 

Abgerundet     kegelförm. 
Körper,  die  an  d.  Basis 
eine  Vertiefung  besitzen 

beobachtet  bei  Gracilaria  dura 
und  Phyllophora  nervosa. 
Jodjodkalium  färbt  dunkel- 
braun. 

Hartwich,  C. 

Ein    Körper    im    Semen 
Strophanti 

gibt  m.  Schwefelsäure  propor- 
tional Z.Verdünnung  Farben 
von  grün  über  rot  nach 
blau. 

XXII,  2.     Richter:  Die  Fortscliritte  der  botanischen  Mikrochemie.      257 


Autor 

Neue  Körper 

Anmerkung 

Heinricher,  E. 

* 
Phosphorhaltige  kugelige 
Gebilde 

bei  Lathraea  Squamaria  u. 
clandestina. 

Heinricher,  E. 

Vermutlicli     ein    Kolile- 
hydrat,  vielleicht  Holz- 
gummi 

ein  Umwandlungsprodukt  d. 
verholzten  Membran  der 
Wirtspflanze  infolge  Tätig- 
keit d.  Parasiten. 

Hinze,  G. 

Chromatinkörner  bei  Beg- 
giatoa 

sichtbar  bei  mit  Flemming- 
scher  und  Merkel  scher 
Flüssigkeit  fixierten  und 
mit  Heidenhain  schem  Hä- 
matoxylin  gefärbten  Mikro- 
tommaterial. 

Hunger,  F.  W.  T. 

Inhaltskörper  der  Zellen 
von  Dictyota 

mit  einprozentiger  Osmium- 
säure schwarz,  mit  Vanillin- 
salzsäure rot. 

Ikeno,  S. 

Chromatinkörper  =  nu- 
kleusartiger  Körper 

beobachtet  b.Taphrina-Arten, 
sichtbar  zu  machen  mit 
Flemming  u.  Heidenhains 
Eisenhämatoxylin. 

Irgang,  G. 

Schleiraführende  Idiobla- 

,sten   in   der  Epidermis 

von  Tropaeolum  majus 

mit  Kali  und  Natronlauge 
gelb;  geben  A.  Meyers 
Schleimreaktion  ■,  färben  sich 
mit  Hämatoxylin ,  Anilin- 
farben etc. 

Jahn,  E. 

Ein  Stoff,  der  weder  Cel- 
lulose  noch  Chitin  ist 

entsteht  in  älteren  Kapilli- 
tien  von  Comatricha  obtu- 
sata. 

Jahn,  E. 

Dictydinkörner    =    mit 
Kernfarbstoffen  lebhaft 
färbbare  Körnchen  bei 
Cribrarien  u.  Dictydien 

sollen  widerstandsfähige  Cel- 
lulose  sein;  sind  gegen  Al- 
kalien und  Säuren  ungemein 
widerstandsfähig. 

Kaiser,  0. 

Grobkörnige  Gebilde  m. 
tinktionellen         Eigen- 
schaften d.  Chromatins. 

bei  Characeen. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  2. 


17 


258      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 


Autor 

Neue  Körper 

Anmerkung 

Kolkwitz,  R. 

CeUulinkörner  beiLepto- 
mitus  lacteus 

färben  sich  entgegen  Prings- 
HEiM  mit  Kongorot;  cellu- 
loseähnlich. 

Lagerheim,  G. 

Farbstoffe  des  Torfes 

werden  durch  Oxalsäure  und 

Kaliumnitrat  ausgebleicht. 

• 

LiDFORSS,  B. 

Ölplastiden  Lundströjis 
=  Tröpfchen  vermutlich 
eines   aromatischen  Al- 
dehyds   mit    Kristallen 
von  Kalkoxalat 

Ort  des  Vorkommens:  Epi- 
dermis von  Potamogeton 
praelongus;  leicht  in  vivo 
färbbar  mit  Neutralrot  etc. ; 
löslich  in  lOproz.  Alkohol, 
tauchen  bei  Wasserzutritt 
auf  (vgl.  Zimmermanns  Re- 
ferat). 

Macdougal,  D.  T. 

Ein  bitter  schmeckender 
Stoif  in  den  Epidermis- 
lagen  von  Isopyrum 

Salpetersäure  verändert  ihn 
zu  dunklen  Kristallen.  Viel- 
leicht ein  Gerbstoff,  der  sich 
mit  einem  Chromogen  ver- 
bindet. 

Meves,  Fr. 

Mitochondrien   =    stark 
lichtbrech.    mit    Dahlia 
intra  vitam  lebhaft  färb- 
bare Mikrosomen 

aufgefunden  in  den  Tapeten- 
zellen Jugendhch.  Antheren 
von  Nymphaea  alba. 

MöBius,  M. 

Anthophäin ,     brauner 
Blütenfarbstoff 

aufgefunden  in  den  Blüten- 
blättern von  Vicia  Faba: 
mikrochemisch  wenig  cha- 
rakterisiert. 

Molisch,  H. 

„Luteofilin" ,       genannt 
nach    seiner    Reaktion 
mit    20proz.    Kalilauge 

aufgefunden  in  den  Schleim- 
säften von  Amaryllideen  etc. 

Molisch,  H. 

Sphärokristalle ,   hervor- 
gerufen   mit    Salzsäure 
an  der  Blattmittelrippe 
und    im    Rindenparen- 
chym 

Beobachtungspfianze:  Strobi- 
lanthes  Dycrianus. 

XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      259 


Autor 

Neue  Körper 

Anmerkung 

Molisch,  H. 

Ein  Stoff,  der  mit  konz. 
Schwefelsäure     augen- 
blicklich rotviolett  wird ; 
Salzsäure  wirkt  ebenso 
nach  1/4  bis  V2  Std. 

beobachtet  bei  d.  Membranen 
der  Kompositenpollen.  Stoff 
ist  unbekannt. 

Molle,  Ph. 

Ein  Alkaloid 

bei  Clivia  miniata. 

Möller,  H. 

Möllers  Cholesterinkör- 
per  sind  Prazmowskis 
Eiweißinhaltsstoffe  und 
Franks  Amylodextrin- 
körner 

Ort  des  Vorkommens:  Wur- 
zelknöllchen  von  Pisum  sa- 
tivum. 

Nestler,  A, 

Drüsenhaarsekret      von 
Primel^ 

wurde  zur  Kristallisation  ge- 
bracht ,  ist  sublünierbar 
(vgl.  Ber.  d.  deutsch,  bot. 
Gesellsch.  1901,  H.  6),  ist 
giftig. 

Nexjkirch,  H. 

Körnchen    bei    Aktino- 
myceten 

stark  färbbar  mit  Methylen- 
blau, werden  mit  Jodjod- 
kalium dunkelbraun ,  viel- 
leicht Kerne. 

Palla,  E. 

Karyoide  =  kugelige  Ge- 
-  bilde  der  Conjugaten 

mit  Eosin  oder  Methyleosin 
in  Jodwasser  färbbar.  Pikrin- 
Anilinblau  zur  Färbung  em- 
pfehlenswert ,  Rohrzucker- 
lösung zur  Konservierung 
empfohlen.  Doppelfärbung 
m.Methylenblau-Eosin  macht 
Gerbstoff  Wäschen  blau,  neue 
Organe  rot. 

Plancken,  J.  V., 
u.  BiouGRE,  Ph. 

Sphärokristalle  im  Honig- 
tau der  Rotbuche 

sehr  hygroskopisch,  zucker- 
süß und  klebrig.  Karmin 
färbt  sie  wie  Gummi  rot. 

Plato,  H.,  u. 

GUTH,  H. 

Granula  von  Penicillium 
brevicaule 

färben  sich  vital  mit  Neu- 
tralrot rot,  nach  d.  Neisser- 
schen  Diphtheriebazillen- 
Verfahren  färbbar. 

17* 


260     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  2. 


Autor 

Neue  Körper 

Anmerkung 

Richter,  0. 

Sphärite  einer  nicht  näher 
untersucht.  Substanz   in 

mit  kaltem  Ammoniak  ma- 
zeriertem Kartoflfelperiderm. 

ROTHERT,   W. 

Kristallhcäute  d.  Kristalle 
bei  den  Pontederiaceen 

deren  Natur  noch  unauf- 
geklärt. 

Rywosch,  S. 

Öl  der  Koniferennadeln 

unentschieden  ob  ätherisch 
oder  fett. 

SCHMIDLE,   W. 

Die  „roten  Körperchen" 
V.  Schmitz  in  d.  späteren 
Stadien  des  Trichogyns 
V.  Batrachospermum 

sollen  durch  Fragmentation 
der  Spermatiumkerne  ent- 
standen sein. 

Wallin,  G.  S. 

Eigenartige     Inhaltskör- 
per  in   den  Zellen   der 
Gefäßbündelscheiden  d. 
Bromeliaceenblätter 

vielleicht  ein  oxyaromatischer 
Körper,  die  Substanz  sciieint 
im  Zellsaft  nicht  enthalten 
zu  sein. 

Weber  van  Bosse 

„Grains  de  cellulose" 

in  der  Phyllosiphonee  Phyto- 
physa  Treubii,  geben  die 
Cellulosereaktionen. 

WiLDEMAN,  E.  DE 

Ein  Alkaloid 

bei  Orchideen. 

WiSSELINGH,  C.  V. 

Ein   in  Kalilauge   leicht 
löslicher  Stoff,  der  die 
Cerinsäureprobe     nicht 
gibt, 

beobachtet  in  den  Vittin- 
lamellen  der  Umbelliferen 
neben  Pektinstolfen. 

WiSSELINCtH,  C.  V. 

Gelbbraune  Massen  in  Öl- 
gängen  d.  Umbelliferen 

D.  Z.  unaufgeklärt. 

Zacharias,  E. 

Substanz  von  Glykogen- 
reaktion 

ad  Cyanophycinköner 
ad  Zentralkörner 
sechsseitige  Täfelchen 

im  Zentralkörper  der  Cyano- 
phyceen. 

werden  mit  Essigsäure-Kar- 
min intensiv  rot. 

bleiben  bei  gleicher  Behand- 
lung farblos. 

vorgefunden  bei  Lingbya. 

XXII,  2.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      261 


Autor 

Neue  Körper 

Anmerkung 

Zimmermann,  A. 

„Granula"  =  kugelförm. 

stimmen  mit  den  von  Alt- 

Körper  bei  Tradescan- 

mann  gefundenen  Differen- 

tia discolor 

zierungen    des  Tierplasmas 
überein,  sie  sind  nicht :  Fett, 
Gerbstoff,  Leukosomen,  sie 
sind  vielleicht  Eiweiß.  Fixie- 
rungsmittel :  3proz.  Salpeter- 
säure,  Färbemittel:   öäure- 
fuchsin. 

Anmerkung:  Man  vergleiche  auch  das  Kapitel  „Der  Zellulose  ver- 
wandte Körper"  und  „Die  Kutikula  und  die  verkorkten  Membranen", 
„Neue  dem  Suberin  verwandte  Körper  etc." 

(Schluß  im  nächsten  Heft.) 


[Eingegangen  am  4.  Juni  1905.] 


262  Referate.  XXII,  2. 


Referate. 


1.   Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

Fischler,  F.,  Über  die  Unterscheidung  von  Neutral- 
fetten, Fettsäuren  und  Seifen  im  Gewebe  (Zen- 
tralbl.  f.  allg.  Pathol.  u.  path.  Anat.  Bd.  XV,  1904,  No.  22, 
p.  913—917). 
Verf.  hebt  hervor,  daß  wir  immer  nocli  recht  weit  entfernt  sind 
von  einigermaßen  einheitlichen  Vorstellungen  über  das  Wesen  der 
Prozesse,  welche  beim  Auftreten  oder  Verschwinden  mikroskopisch 
nachweisbaren  Fettes  in  Zellen  und  Organen  bei  ihren  verschiedenen 
Funktiouszuständen  auftreten.  Wir  würden  in  den  Auf-  und  Abbau 
von  Fett  einigermaßen  Einblick  gewinnen  können,  wenn  es  uns  ge- 
länge, die  Spaltungsprodukte  desselben  womöglich  in  loco  zu  fixieren. 
Als  solche  würden  die  Fettsäuren  und  ihre  Salze,  die  Seifen,  eine 
besonders  wichtige  Rolle  spielen.  Anknüpfend  an  die  Methode  von 
Benda  (Beizung  der  Gewebe  mittels  Weigerts  Gliabeize  oder  reiner 
konzentrierter  Kupferacetatlösuug)  hat  Verf.  versucht,  eine  entspre- 
chende mikrochemisch  brauchbare  Methode  zu  finden.  Er  probierte 
zunächst  aus,  wieweit  die  Kupfersalze  der  verschiedenen  Fettsäuren 
mit  Hämatoxylin  eine  Lackverbiudung  eingehen :  es  reagierten  alle 
drei  fettsauren  Kupfersalze,  das  '  Stearin-,  palmitin-  und  Oleinsäure 
Kupfer  mit  WEiGERTSchem  Hämatoxylin  unter  Lackbildung  und  auch 
ihre  gekupferten  Kalium-,  Natrium-  und  Calciumsalze.  Die  fast 
völlige    Unlöslichkeit    der  Kupferlacke    in   Weigert  scher  Difterenzie- 


I 


XXII,  2.  Referate.  263 

rungsflüssigkeit  erlaubt  die  Anwendung  der  Methode  auf  die  Gewebe, 
in  denen  auf  diese  Art  und  Weise  Fettsäuren  auch  in  den  kleinsten 
Tropfen  nachgewiesen  werden  können.  Aber  nicht  nur  Fettsäuren 
lassen  sich  so  fixieren,  aucli  die  Seifen  sind  einer  ähnlichen  Behand- 
lung zugänglich.  Hierzu  ist  nur  die  Umwandlung  der  Seife  in  loco 
in  ein  unlösliches  fettsaures  Salz  nötig,  wofür  sich  ein  leicht  lös- 
liches Calciumsalz,  das  Salizylsäure  Calcium,  bewährte.  Bringt  man 
von  diesem  etwas  in  eine  dünne  Seifenlösung,  so  bildet  sich  sofort 
ein  weißer,  voluminöser  Niederschlag  von  fettsaurem  Kalk.  Bei  den 
Geweben  fixiert  Verf.  Stücke,  die  auf  Seifengehalt  zu  prüfen  sind,  in 
lOprozentiger  Formollösung,  der  salizylsaures  Calcium  bis  zur  Sätti- 
gung zugesetzt  ist.  Überall,  wo  im  Gewebe  Seifenlösung  vorhanden 
ist,  entsteht  sofort  fettsaures  Calcium,  das  hiermit  in  loco  fixiert  ist. 
Dieses  läßt  sich  dann  wieder  verkupfern  und  dann  mit  Hämatoxylin 
nachweisen.  Bei  einfach  mit  Formol  gehärteten  Geweben  geht  even- 
tuell vorhandene  Seife  in  die  Härtungsflüssigkeit  über.  Der  Vergleich 
zwischen  diesen  und  den  mit  Calciumzusatz  gehärteten  Präparaten 
(bei  sekundärer  Ki'ipferuug  und  Hämatoxylinbeizung)  läßt  einen  Schluß 
zu  darauf,  ob  außer  Fettsäure  auch  noch  Seife  im  Gewebe  vorhanden 
ist.  Unter  Seife  wird  hier  das  Kalium-  oder  Natriumsalz  der  Fett- 
säure verstanden.  Versuche,  welche  Verf.  au  Organen  machte,  be- 
stätigten die  bisherigen  Versuche  im  Reagenzröhrchen.  Nun  hat 
Benda  aber  seinerzeit  angegeben,  daß  die  fettsauren,  gekupferten 
Kristalle  in  wässeriger  Hämatoxylinlösung  ihre  blaugrüne  Eigenfarbe 
behielten,  und  mit  Fettgewebsnekrosematerial  angestellte  Versuche 
bestätigten  diese  Angabe.  Als  Grund  dafür  ergab  sich,  daß  sich 
das  reine  Ölsäure  Kupfer  nur  schwer  mit  wässerigem  Hämatoxylin 
färbt,  weil  es  sich  eben  nur  sehr  langsam  darin  löst.  Alkoholische 
Hämatoxylinlösungen  ergaben  daher  auch  eine  Färbung:  Bringt  man 
für'  wenigstens  12  bis  24  Stunden  Stücke  mit  nekrotischem  Fett- 
gewebe in  eine  dünne  Hämatoxylinlösung  in  96-  bis  lOOprozentigem 
Alkohol,  so  färben  sich  auch  die  Nekroseherde  ganz  schwarz,  wider- 
stehen den  entfärbenden  Eigenschaften  der  Ferrocyankalium-Borax- 
lösung  und  können  als  isolierte  blauschwarze  Flecke  in  dem  sich 
sonst  entfärbenden  Gewebe  dargestellt  werden.  Verf.  hebt  besonders 
hervor,  daß  sich  die  gekupferten  Calcium-,  Kalium-,  Natrium-  und 
Magnesiumsalze  viel  rascher  mit  Hämatoxylin  anfärben,  auch  in 
wässeriger  Lösung,  als  die  Verbindung,  welche  man  beim  Zusammen- 
bringen von  reiner  Ölsäure  mit  Kupferacetat  erhält.  Dieses  letztere 
Salz  sieht  auch  am  meisten  grün  aus.     Man  muß  daher  für  die  Aus- 


264  Referate.  XXII,  2. 

führung  der  oben  beschriebenen  Reaktion  im  Gewebe  alkoliolisclie 
Hämatoxylinlitsungen  verwenden  und  möglichst  dünne  Stücke,  also 
am  besten  Gefrierschnitte.  Es  hat  sich  bis  jetzt  die  alkoholische  10- 
prozentige  WEiGERTSche  Hämatoxylinlösung  bewährt,  doch  dürfte  sich 
die  Anwendung  auch  noch  stärkerer  alkoholischer  Lösungen  emp- 
felilen.  Schieferdecker  {Bonn). 

Lenhossek,  M.  V.,  Ramön  y  Cajals  neue  Fibrillenmethode 
(Neurol.  Zentralbl.  Jahrg.  XXIII,  1904,  No.  13,  p.  593— 609). 
Verf.  rühmt  nach  seinen  Erfahrungen  die  Silbermethode  von 
Ramön  y  Cajal  und  empfiehlt,  die  Färbung  noch  durch  das  Tönen 
der  Schnitte  im  Goldbade  zu  ergänzen.  Sein  Assistent,  Dr.  L.  Bakay. 
hat  auf  die  Mitteilung  von  Bielsckowsky  hin  das  folgende  Verfahren 
dafür  ausprobiert :  Nachdem  die  Schnitte  die  Silbermethode  von 
Cajal  bis  zu  Ende  durchgemacht  haben,  kommen  sie  in  destilliertes 
Wasser.  Dann  in  eine  sehr  schwache  Goldchloridlösung:  Von  der 
vorrätigen  einprozentigen  Lösung  werden  4  cc  mit  150  cc  destillierten 
Wassers  verdünnt.  Eine  Ansäuerung  des  Goldbades  (Bielschowsky) 
ist  nicht  nötig.  Die  Schnitte  bleiben  verschieden  lange  Zeit  in  der 
Goldlösung  (10  Minuten  bis  eine  Stunde)  je  nach  der  Beschaffenheit 
des  Objektes  und  der  Dicke  der  Schnitte :  Die  gelbe  Farbe  muß 
vollkommen  einer  stahlgrauen  gewichen  sein,  was  sich  schon  mit 
freiem  Auge  feststellen  läßt,  indessen  kann  man  den  richtigen  Zeit- 
punkt zur  Herausnahme  nur  mit  dem  Mikroskope  feststellen  5  er  ist 
eingetreten,  sobald  die  Fibrillen  intensiv  schwarz,  die  übrige  Sub- 
stanz der  Zellen  und  ebenso  auch  die  Kerne,  abgesehen  von  dem 
bräunlich  gefärbten  Kernkörperchen ,  vollkommen  entfärbt  oder  in 
einem  blaß  violetten  Tone  gefärbt  sind.  Ist  dies  der  Fall,  so  bringt 
man  die  Schnitte  auf  etwa  5  Minuten  in  eine  3-  bis  5prozentige 
Lösung  von  Fixiernatron  und  auf  weitere  10  Minuten  in  fließendes 
oder  öfter  gewechseltes  Wasser,  dann  gründliche  Entwässerung,  Auf- 
hellung, Kanadabalsam.  Übermäßiges  Vergolden  verdirbt  die  Prä- 
parate. Resultat :  Die  Grandsubstanz  der  Nervenzellen  und  ihrer 
Dendriten,  die  früher  eine  gelbliche  Farbe  zeigte,  erscheint  jetzt 
fast  ganz  ungefärbt;  bei  den  Dendriten  lassen  sich  die  Grenzlinien 
kaum  noch  feststellen,  es  sieht  aus,  als  ob  ihre  Neurofibrillen  ganz 
frei,  extrazellulär  lägen.  Die  Neurofibrillen  treten  viel  schärfer  hervor, 
auch  feine,  früher  fast  unsichtbare  Fibrillen  sind  jetzt  sichtbar.  Die 
Fibrillen  sind  dabei  nicht  dicker  als  in  dem  unvergoldeten  Präparate. 
Am  besten  bewährt  sich  die  Methode  bei  den  Zellen  der  Grenzzone 


XXII,  2.  Referate.  265 

zwisclien  innerer  und  mittlerer  Scliicht  (der  ganz  schwach  gefärbten 
und  der  mäßig  gefärbten) ;  Zellen,  mit  denen  man  wegen  der  blassen 
Färbung  der  P^'ibrillen  im  nicht  vergoldeten  Präparate  nicht  viel  an- 
fangen konnte,  werden  jetzt  durch  die  stahlgraue  Färbung  der 
Fibrillen  zu  vorzüglichen  üntersuchungsobjekten.  Die  Präparate  sehen 
nun  ungefähr  so  aus,  wie  die  von  Bielschowski.  —  Verf.  hebt  hervor, 
daß  die  Theorie  der  ganzen  Färbungsmethode  noch  sehr  dunkel  ist. 
Es  handelt  sich  wohl  ziemlich  sicher  um  eine  „Imprägnation"  und 
nicht  um  eine  „Färbung",  doch  ist  dies  nur  theoretisch  zu  er- 
schließen, denn  gelungene  Präparate  zeigen  ganz  das  Bild  einer  rich- 
tigen Färbung.  Die  Niederschlagsmassen  müssen  also  außerordent- 
lich fein  verteilt  sein.  Schiefferdecker  [Bonn). 


2.   Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


A.   Niedere   Tiere. 

Depdolla ,    Ph. ,      Untersuchungen      über      die     Sperma- 
togenese   von    Lumbricus    terrestris    (Zool.    Anz. 
Bd.  XXVIII,   1905,  p.  545—557). 
Zur  Fixierung    wurde    anfangs    die    Hermann  sehe   Platinchlorid- 
osmiumessigsäure Tjevorzugt,  später  aber  ausschließlich  die  von  Benda 
für    Mitochondrien     empfohlene     Chromosmiumessigsäure     angewandt. 
Zur  Färbung  diente  außer  Eisenhämatoxylin  noch  Gentianaviolett  und 
die  Benda  sehe  Mitochondrienfärbung  mit  alizarinsulfosaurem  Natrium 
und  Kristallviolett.     Zwar  erhielt  Verf.   nie ,    wie  Benda  angibt ,  die 
Mitochondrien  allein  blau  und  den  übrigen  Zellinhalt  rötlich,  sondern 
Chromatin  und  Zentralkörner  blau,  trotzdem  aber  waren  die  Resultate 
sehr  befriedigend.     Um  die  gestreckten  Spermatiden  und  die  Sperma- 
tozoon ganz  zu  erhalten,  wurden  Ausstrichpräparate  hergestellt. 

E.  Schoebel  (Neapel). 

Hirschler,  J.,  Weitere  Regenerationsstudien  an  Lepi- 
dopterenpuppen  [Regeneration  des  vorderen 
Körperendes]  (Anat.  Anz.  Bd.  XXV,  1904,  No.  18,  19, 
p.  417—435  m.   5  Figg.). 


266  Reterate.  XXII,  2. 

Verf.  experimentierte  au  drei  eiuheimischen  Arten,  Thais  Poiy- 
xena  Schiff. ,  Bombyx  Lanestris  L. ,  Saturnia  pavonia  L,  und  einer 
ausländischen  Art,  Samia  promethea.  Am  geeignetsten  zur  Reg'ene- 
rationsversucheu  erwiesen  sich  Saturnia,  Bombyx  und  Samia,  gänz- 
lich ungeeignet  war  Thais.  Verf.  schnitt  den  Puppen  mit  einem 
scharfen  Rasiermesser  die  Kopf-  und  Halsgegend,  sowie  den  vorder- 
sten Thoraxteil  vom  Körper  ab.  Gleich  nach  der  Verwundung  floß 
ein  großer  Teil  des  Puppeninhaltes  heraus ;  die  Wunde  wurde  mit 
mäßig  erhitztem  Paraffin  bedeckt  und  so  vollkommen  abgeschlossen. 
Die  sämtlichen  Regenerationsprozesse  dauerten  40  Tage  (bei  ziem- 
lich warmer  Zimmertemperatur),  wonach  die  totale  Falterentwicklung 
eintrat.  So  behandelte  Puppen  wurden  in  bestimmten  Zeiträumen 
fixiert  in  einer  gesättigten  wässerigen  Sublimatlösung  mit  öprozentiger 
Essigsäure.  Jede  Puppe  wurde  vor  der  Fixierung  in  der  Mitte 
durchschnitten  und  außerdem  die  Chitindecke  an  zahlreichen  Stellen 
durchstochen.  Dauer  der  Fixierung  6  bis  7  Stunden.  Nach  Ent- 
wässerung in  steigendem  Alkohol  und  Behandlung  mit  Xylol  spaltete 
Verf.  von  der  rechten  oder  linken  Puppenseite  her  mittels  eines 
flachen  Schnittes  den  Chitinmantel  ab,  um  im  Verlaufe  von  7  Stunden 
eine  Paraffindurchtränkung  zu  ermöglichen.  Gefärbt  wurde  mit 
Hämatoxylin  (Delapield)  ,  Hämatein  (Apathy)  in  Verbindung  mit 
wässerigem  Eosin  oder  Lichtgrün,  Thionin ,  Krauses  Dreifarben- 
mischung und  dem  Eisenhämatoxylin  von  Heidenhain,  das  gute  Dienste 
bei  der  Beobachtung  der  Muskeldegeneratiou  leistete.  Die  GoLGische 
Chromsilbermethode  ergab  zum  Studium  der  nervösen  Elemente  sehr 
ungünstige  Resultate.  Schiefferdecker  {Bonn). 


B,    Wirbeltiere. 

Preisich,    K.,    u.    Heim,   P.,    Über    die    Abstammung    der 

Blutplättchen    (Virchows  Arch.   Bd.  CLXXVHI ,   1904, 

H.   1,  p.  43—60  m.   1   Tfl.). 

Die  Verf.    lassen    die  Blutplättchen    aus    den  Kernen   der  roten 

Blutkörperchen  hervorgehen.     Die  Untersuchungen   wurden   meist  an 

getrockneten    und    gefärbten    Präparaten    ausgeführt.      Zur    Färbung 

wurde    die   folgende  Modifikation  des  Rom anowszky sehen  Verfahrens 

verwendet ,  durch  welche   die  Färbung  einfacher  wurde ;    die    so   er- 


XXII,  2.  Referate.  267 

haltenen  Bilder  unterschieden  sich  wesentUch  von  denen,  welche  nach 
dem  gewöhnlichen  Verfahren  gewonnen  werden.  Methode:  Die 
Methylenblaulösung  und  die  einprozentige  wässerige  Eosinlösuug  wur- 
den genau  nach  der  Vorschrift  von  Romanowszky  angefertigt ;  die 
Modifikation  bestand  in  der  Mischung  der  beiden  Farbstoffe :  Die 
Verff.  bringen  von  der  Stammlösung  des  Methylenblaus  10  Tropfen 
durch  Filtrierpapier  in  10  cc  destilliertes  Wasser,  und  nach  der 
Vermischung  dieser  mit  dem  Wasser  werden  ein  bis  2  Tropfen  der 
Eosinlösung  dazu  gesetzt  und  rasch  gemischt.  Das  Deckgläschen 
mit  dem  aufgetrockneten  Blute  wird  auf  die  Oberfläche  der  so  ge- 
wonnenen Farbmischung  gebracht,  so  daß  es  auf  dieser  schwimmt. 
Wichtig  ist  es  hierbei,  daß  das  Blutpräparat  nach  der  Eintröpfelung 
des  Eosins  sehr  rasch  der  Farbmischung  aufgelagert  wird ,  bevor 
sich  auf  der  Oberfläche  dieser  ein  metallglänzendes  Häutchen  bilden 
kanu,  welches  übrigens  ein  Beweis  für  die  Güte  des  Farbstoffes  ist. 
Man  bekommt  schon  nach  10  Minuten  ganz  schöne  Bilder,  doch 
können  die  Präparate  eine  halbe  Stunde  und  länger  gefärbt  werden, 
ohne  daß  sie  Schaden  nehmen.  Nach  der  Färbung  werden  die 
Präparate  mittels  eines  gelinden  Wasserstrahles  gut,  aber  nicht  allzu 
lange  abgewaschen ,  dann  läßt  man  sie  trocknen  und  montiert  in 
Ivanadabalsam,  Die  zum  Färben  benutzte  Lösung  muß  jedesmal  ganz 
frisch  aus  den  beiden  Stammlösungen  hergestellt  werden.  Die  Methyleu- 
blaustammlösung  hält  sich  6  bis  8  Wochen,  doch  schwächt  sich  ihre 
Färbefähigkeit  während  dieser  Zeit  schon  ab.  Es  empfiehlt  sich 
daher,  auf  je  2  Wochen  des  Alters  der  Methylenblaustammlösung 
über  die  10  Tropfen  einen  Tropfen  mehr  in  die  10  cc  des  destil- 
lierten W^assers  zu  briugen.  Die  mittels  Hitze  fixierten  Präparate 
eigneten  sich  weniger  zur  Färbung  nach  diesem  modifizierten  Ver- 
fahren als  jene,  welche  mittels  einer  Mischung  von  Alkohol  und 
Äther  fixiert  worden  waren.  Man  kann  aber  auch  die  mittels  Hitze 
fixierten  Präparate  zur  Färbung  nach  der  vorliegenden  Methode  ge- 
eignet machen,  wenn  man  sie  vor  der  Färbung  für  einige  Minuten 
in  eine  Mischung  von  Alkohol  und  Äther  bringt.  Die  so  gefärbten 
Präparate  zeigen  folgendes :  Rote  Blutzellen  stahlblau,  Zellkerne  röt- 
lichblau bis  violett,  Protoplasma  der  Lymphocyten  blau,  Granulation 
der  weißen  Blutzelleu  rot,  die  Granula  der  eosinophilen  Zellen  färben 
sich  nicht,  das  Protoplasma  dieser  Zellen  zeigt  eine  lichtblaue  Zeich- 
nung, in  der  ungefärbte,  derbe  Körnchen  wahrnehmbar  sind.  Die 
Blutplättchen  werden  rotviolett  bis  lebhaft  rot,  d.  h.  sie  fttrben  sich 
in  denselben  Farbenschattierungen  wie  die  Granula  der  weißen  Blut- 


268  Referate.  XXII,  2. 

Zellen.  Die  Kerne  abgestorbener  weißer  Blutzellen  werden  lebhaft 
rot  und  zeigen  jede  Schattierung  bis  zum  lichten  Rosenrot.  —  Die 
Untersuchungen  erstreckten  sich  in  erster  Reihe  auf  das  normale 
Blut  von  Kindern  und  Säugetieren  (Kaninchen,  Meerschweinchen). 

ScJiiefferdecke?'  {Bonn). 

Helber,  E.,    Über    die     Entstehung    der    Blutplättchen 

und     ihre     Beziehungen     zu     den     S  p  i  n  d  e  1  z  e  1 1 e  n 

(Deutsches  Arch.    Klin.  Med.    1904.     Bd.   LXXXII,  H.  1,2, 

p.  41  —  59  m.    1  Ttl). 

Froschblut    untersuchte    Verf.    in    der  Weise    auf  Blutplättchen, 

daß  er  es  einer  Bauchvene  entnahm  und    in    einer  Mischpipette    mit 

einer    lOprozentigen  Lösung   von  Natriummetaphosphat    auf   das  30- 

fache    verdünnte.       Die    Beobachtung    erfolgte    in     einer    Zeiss  sehen 

Kammer    von    0'02  mm  Höhe ;    die    besten    Bilder    der  Blutplättchen 

geben     Färbungen     nach    Romanowsky-Giemsa.       Härtung    in     einer 

Mischung  von  gleichen  Teilen  von  Alkohol  und  Äther.    Kernsubstanz 

der    Plättchen    leuchtend     violett-rot,     Protoplasma    in    indifferentem 

Farbentone.     Färbungen  mit  Hämalaun-Eosin  oder    nach  Chenzinsky 

geben    nicht    dieselben    brauchbaren    Bilder,     da    die    Plättchen    nur 

schwach  gefärbt  sind.  Schiefferdecker  [Bonn). 

Kopsch,  F.,  Über  den  Kern  derThrombocyten  und  über 
einige    Methoden    zur    Einführung    in    das    Stu- 
dium    der     Säugetier-Thrombocyten     (Internation. 
Monatsschr.    f.    Anat.  u.  Physiol.    1904,    Bd.  XXI,   H.  4—8, 
p.  344— .353). 
Verf.  gibt  in  dieser  Arbeit  eine   hübsche  Zusammenstellung  der 
für  die  Untersuchung  der  Thrombocyten  oder  Blutplättchen  günstigen 
Methoden.     Ich  werde  versuchen,   dieselben   möglichst  kurz  hier    an- 
zuführen.     1)  Beobachtung  der  Thrombocyten  innerhalb 
der  Gefäßbahn:    Mesenterium    kleiner   Säugetiere   (Ratten,  Meer- 
schweinchen,   Kaninchen)    oder    Fledermaustlügel.      Für    Kurszwecke 
kleine  Stücke  des  großen  Netzes,  entnommen  dem  soeben  durch  Kopf- 
abschneiden getöteten  Tiere,  ohne  ZusatzÜüssigkeit  zwischen  Deckglas 
und  Objektträger;   Umrandung  des  Deckglases  mit  Paraffinum    liqui- 
dum.    Kleines    Blutgefäß    oder  Kapillare,    welche    nur    wenige   Blut- 
körperchen   enthält.      Die    Thrombocyten   in  Brown  scher    Molekular- 
bewegung.     2)  Thrombocyten   im    gewöhnlichen  frischen 
Blutpräparate.      Objektträger,    Deckglas,    scharfe    Nadel    bereit 


XXII,  2.  Referate.  269 

legen,  in  die  mit  Alkohol  gereinigte  Fingerbeere  einstechen,  die 
ersten  Tropfen  abwischen,  mit  der  Unterseite  des  Deckglases  einen 
kleinen  Tropfen  des  eben  herausgequollenen  Blutes  abwischen,  auf 
den  Objektträger  legen  und  ohne  Zeitverlust  diejenige  Stelle  betrach- 
ten, an  der  das  Blut  das  Deckglas  zuerst  berührt  hat :  an  der  Unter- 
fläche des  Glases  kleben  einzeln  oder  in  kleinen  Gruppen  die  hell- 
glänzenden Thrombocyten.  Nach  kurzer  Zeit  Sternform,  Vakuolen  usw.; 
nach  4  bis  5  Minuten  Fibrinfäden.  Man  muß  die  hellen,  von 
roten  Blutkörperchen  freien  Lücken  des  nicht  zu  dicken  Präparates 
aufsuchen.  Au  dem  frischen  Blutpräparate  können  folgende  Versuche 
vorgenommen  werden:  a)  Wegschwemmen  der  Erythro- 
cyten  und  Leukocyten.  An  den  Rand  des  Deckglases  ein 
Tropfen  von  gewöhnlichem  oder  destilliertem  Wasser,  Absaugen  auf 
der  anderen  Seite  mit  Filtrierpapier.  Nach  Wegschwemmen  der 
Blutkörperchen  sieht  man  die  an  der  Unterfläche  des  Deckglases  in 
ungeheurer  Menge  haftenden  Thrombocyten.  Bald  bildet  sich  in 
jedem  eine  Vakuole,  welche  allmählich  größer  wird  und  an  deren 
Peripherie  sich  der  Kern  beflndet.  b)  Behandlung  des  fri- 
schen Bluttropfens  mit  Essigsäure.  Starke  Lösungen  von 
Essigsäure  konservieren  die  Form,  welche  die  Thrombocyten  im 
zirkulierenden  und  frisch  quellenden  Blute  haben,  verdünnte  Lösungen 
wirken  wie  Wasser,  c)  Kalilauge  von  3.3  Prozent  verändert 
die  Gestalt  wenig,  verdünnte  Lösungen  zerstören  sie  sehr  schnell. 
3)  Gewinnung  zahlreicher  isolierter  Thrombocyten 
nach  BtJRKER^.  Vorzubereiten:  eine  feuchte  Kammer  und  ein 
Stück  Paraffin,  dessen  eine  Fläche  durch  Abschaben  mittels  eines 
Objektträgers  oder  durch  Überfahren  mit  heißem  Spatel  glatt  ge- 
macht worden  ist.  Auf  diese  Fläche  läßt  man  einen  reichlich  gToßen 
Bluttropfen  fallen  und  bringt  dann  das  Paraffinstück  in  die  feuchte 
Kammer.  Das  Blut  gerinnt  nicht,  so  daß  eine  Trennung  der  ver- 
schieden schweren  Bestandteile  eintreten  kann.  Oben  befindet  sich 
nach  20  bis  30  Minuten  das  Plasma  mit  den  spezifisch  leichten 
Thrombocyten,  welches  man  mittels  eines  Deckglases  abheben  kann, 
um  die  Thrombocyten  zu  beobachten  und  verschiedenen  Reaktionen 
zu  unterwerfen.  4)  Konservierung  der  Thrombocyten  in 
dem  Zustande,  welchen  sie  im  zirkulierenden  Blute 
haben    unter  Erhaltung    der  E  r  y  t  h  r  o  c  y  t  e  n  und  L  e  u  k  o  - 


1)  BüRKER,  K. ,  Blutplättchen    und  Blutgerinnung    (Arch.   f.    d.    ges. 
Phys.  Bd.  CII,  1904,  p.  36-94,  s.  p.  41). 


270  Referate.  XXII,  2. 

cyten.  Osmiurasäurelösung  0,5  bis  2  Prozent  mit  und  ohne  Essig- 
säure, Jodjodkaliumlösung,  metaphosphorsaures  Natron,  Hayems  Flüs- 
sigkeit u.  a.  Man  bringt  einen  Tropfen  der  gewählten  Flüssigkeit 
auf  die  Fingerkuppe  und  sticht  durch  ihn  mit  der  Nadel  in  die  Haut. 
Der  herausquellende  Bluttropfen  wird  mit  der  Fixierungsflüssigkeit 
durch  Umrühren  mit  der  Nadel  gemischt,  zwischen  Deckglas  und 
Objektträger  gebracht  und  umrandet.  5)  Beobachtung  der 
lebenden  Thrombo  cyten  außerhalb  der  Gefäßbahn 
nachDEETjEN  (vergl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XVIII,  1901,  S.  336  bis 
339  und  S.  341).  6)  Färbung  der  Thrombocyten  im  fri- 
schen Blutpräparate  durch  Methylviolett ^.  Man  läßt 
zu  einem  soeben  angefertigten  Blutpräparate  einen  Tropfen  irgend- 
einer wässerigen  Methylviolettlösung  fließen,  die  Erythrocyten  und 
die  Leukocyten  werden  zum  Teile  weggeschwemmt  oder  nach  einer 
Seite  gedrängt.  Die  au  der  Unterfläche  des  Deckglases  haftenden 
Thrombocyten  nehmen  die  Farbe  schnell  an,  erleiden  aber  dieselben 
Veränderungen  wie  bei  Zusatz  von  Wasser  oder  verdünnter  Essig- 
säure. Ferner  färben  sich  die  Kerne  und  das  Protoplasma  der 
Leukocyten  sowie  die  Membran  der  Erythrocyten.  Für  ein  Dauer- 
präparat muß  recht  stark  gefärbt  werden,  dann  Abheben  des  Deck- 
glases, Abspülen  in  Wasser,  lufttrocken  machen,  noch  etwas  über 
der  Flamme  trocknen,  auf  ein  Tröpfchen  Kanadabalsam  legen.  Je 
nachdem  die  Farbe  gleich  nach  Anfertigung  des  Präparats  oder  später 
zugesetzt  wird,  ist  das  Aussehen  der  Thrombocyten  verschieden,  bei 
der  vierten  bis  fünften  Minute  wundervolle  Färbung  des  Fibrinnetzes. 
7)  Färbung  der  Thrombocyten  durch  Tetrajodfluo- 
resceiu.  Diese  von  Ehrlich^  angegebene  Färbung  ist  außerordent- 
lich wichtig,  da  sie  beweist,  daß  im  Protoplasma  der  Thrombocyten 
ebenso  wie  in  dem  der  Leukocyten  freies  Alkali  enthalten  ist.  Die 
Farblösung  wird  frisch  bereitet:  in  ein  Reagierröhrchen  wird  etwas 
Eosin-  oder  Erythrosinlösung  getan  und  mit  etwas  Salzsäure  ver- 
setzt. Sofort  flockiger  Niederschlag  des  in  Wasser  unlöslichen  Tetra- 
jodfluoresceins.  Nun  wird  etwas  Toluol  oder  Chloroform  zugesetzt 
und  geschüttelt.  Der  Niederschlag  löst  sich  hierin  mit  hellgelblicher 
Farbe.  Etwas  von  dieser  Lösung  kommt  in  ein  zugedecktes  Schälchen 
und    hier    hinein    das    nur    lufttrockene    (sonst    nicht    weiter    fixierte) 


^)  Schäfer,  E.  A.  ,   The  essentials  of  histology.     G.  Aufl.    London 
(Longmans,  .Green  &  Co.)  1902.     p.  22.     Vorschrift  3. 
^)  Ehrlich  u.  Lazarus,  Anämie  Bd.  I. 


XXII,  2.  Referate.  271 

Präparat  für  einige  Minuten.  Abspülen  des  Präparates  in  reinem 
Toluol  oder  Chloroform.  Einschluß  des  feuchten  Präparates  in  Kanada- 
balsam :  Erythrocyten  ungefärbt,  Protoplasma  der  Thrombocyten  und 
Leukocyten  rot,  ihre  Kerne  ungefärbt.  8)  Färbung  der  Throm- 
bocyten im  gewöhnlichen  Bluttrockenpräparat.  Sie 
gelingt  mit  vielen  (vielleicht  mit  allen)  der  bisher  zur  Färbung  von 
Bluttrockenpräparaten  empfohlenen  Farbstoffe  oder  Farbgemische. 
Bei  der  Herstellung  des  Trockenpräparates  äußerste  Sauberkeit  und 
Schnelligkeit;  letztere  namentlich  beim  Lufttrockenwerden  des  Prä- 
parates ;  je  schneller  die  Lufttrocknung  erfolgt,  desto  besser  färben 
sich  die  Thrombocyten:  Unterstützung  der  Verdunstung  durch 
Fächeln  und  dadurch,  daß  man  die  mit  Blut  beschickten  Deckgläser 
auf  eine  körperwarme  Platte  legt.  Man  achte  auch  hier  auf  die 
Stelle  des  oberen  Deckglases,  welche  die  Kuppe  des  Bluttropfens 
zuerst  berührt  hat:  hier  sind  die  Thrombocyten  am  zahlreichsten. 
Die  Fixierung  kann  durch  Hitze  oder  absoluten  Alkohol  oder  Alkohol- 
äther erfolgen.  Erfolgreich  gefärbt  wurde  mit:  Triacid  in  seinen 
verschiedenen  Modifikationen,  Eosin-Methylenblau,  Hämatoxylin-Eosin. 
Der  Thrombocytenkern  ist  meist  nicht  vom  Protoplasma  zu  unter- 
scheiden, nur  bei  Methylenblau-Eosin  nach  Reuter^  gelang  es  manch- 
mal, den  Kern  blau,  das  Protoplasma  rot  oder  rotgelb  zu  erhalten. 
9)  Verdauung  mittels  Pepsinsalzsäure^.  Man  setzt  zu 
einem  schnell  hergestellten  frischen  Blutpräparate  an  den  linken  Rand 
des  Deckglases  tropfenweise  Pepsinsalzsäure  (Pepsin-Glyzerin  von 
Grübler  100  cc  und  Salzsäure  1  cc) ,  während  am  rechten  Rande 
ein  Stück  Filtrierpapier  den  Überschuß  von  Flüssigkeit  absaugt.  Die 
roten  Blutkörperchen  und  ein  Teil  der  Leukocyten  werden  weg- 
geschwemmt. Die  an  der  Unterfläche  des  Deckglases  haftenden 
Thrombocyten  und  Leukocyten  bleiben  zurück;  an  ihnen  wird  die 
Wirkung  des  künstlichen  Magensaftes  mit  Immersion  beobachtet,  auf 
jedem  Thrombocyten  entsteht  eine  Hohlkugel,  an  deren  Wand  der 
Kern  liegt;  die  Wand  derselben  verschwindet  später,  so  daß  nur 
der  etwas  gequollene  und  eine  Anzahl  feiner  Kügelchen  zeigende 
Kern  zurückbleibt.  Jetzt  wäscht  man  die  Pepsinsalzsäure  mit  Wasser 
aus    und    verdrängt    das    Wasser    mit    absolutem    Alkohol    (eine    bis 


1)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XVIII,  1901,  p.  314—317. 

^)  Vergleiche  dieserhalb  auch  Lilienfeld,  L.,  Hämatologische  Unter- 
suchungen (Arch.  f.  Anat.  u.  Phys.  1892;  diese  Zeitschr.  Bd.  IX,  1892, 
p.  363—364). 


272  Referate.  XXU,  2. 

zwei  Minuten).  Färbt  man  jetzt  mit  Methylgrün,  so  werden  die 
kleinen  glänzenden  Kügelchen  des  Throrabocytenkernes  grün  gefärbt. 
10)  Studium  der  Blutgerinnung.  Man  bringt  einen  großen 
Tropfen  Blut  zwischen  Deckglas  und  Objektträger  und  läßt  das  Prä- 
parat 5  bis  10  bis  15  Minuten  und  länger  in  der  feuchten  Kammer. 
Dann  Abheben  des  Deckglases,  Abspülen  in  Wasser,  dann  absoluter 
Alkohol  (10  Minuten),  oder  einprozentige  Osmiumsäurelösung  (eine  bis 
2  Minuten),  dann  Färbung  mit  konzentriertem  Alaunhämatoxylin  oder 
mit  Methylviolettlösung.  Schieffcrdccker  {Bonn). 

Bai) ,  H. ,  Die  Colostr Umbildung  als  pliysiologisches 
Analogon  zu  Entzündungsvorgängen.  Gleich- 
zeitig ein  Beitrag  zur  Lehre  von  den  Leuko- 
cyten  und  deren  Granulationen.  Mit  histori- 
schen Darlegungen.  Berlin  (A.  Hirschwald)  1904. 
97  pp. 
Verf.  hat  bei  seineu  Untersuchungen  intraperitoneale  Milchinjek- 
tionen gemacht  bei  Meerschweinschen  und  bei  Salamandra  maculosa. 
Die  Kuhmilch  wurde  vorher  abgekocht.  Nach  der  Injektion  wurde 
dann  von  Zeit  zu  Zeit  etwas  von  der  intraperitoneal  angesammelten 
Flüssigkeit  entnommen  und  sowohl  frisch  und  ungefärbt  (resp.  mit 
geringem  Methylenblauzusatz)  als  auch  als  gefärbtes  Trockenpräparat 
mikroskopisch  untersucht.  Die  Fixierung  wurde  meist  durch  Formol- 
dämpfe erzielt ,  öfters  auch  durch  Alkohol ,  durch  Erhitzen  in  der 
Flamme,  durch  einfache  Lufttrocknung,  durch  Äther,  durch  Sublimat- 
alkohol oder  endlich  durch  einstündiges  Erhitzen  bei  konstant  bleiben- 
der Temperatur  von  110^.  Am  meisten  bewährte  sich  die  recht 
bequeme  Methode  der  2  bis  3  Minuten  langen  Einwirkung  der  Formol- 
dämpfe in  einer  feuchten  Kammer,  da  hierbei  das  Fett  nicht  gelöst 
wird  und  außerdem  Veränderungen  in  der  Struktur  der  Gewebe  nur 
in  sehr  geringem  Maße  stattfinden.  Gefärbt  wurde  mit  folgenden 
Farbstoffen:  1)  Scharlach  R  (Fettponc^au),  gelöst  in  TOprozeutigem 
Alkohol.  Nachfärbung  mit  Hämatoxylin  zur  Blaufärbung  der  Kerne 
und  Glyzerineinschluß.  Die  Verwendung  von  Scharlach  zur  Fett- 
färbung ist  aufs  wärmste  zu  empfehlen,  da  sie  ausgezeichnet  klare 
Bilder  gibt  und  keinen  Zweifel  läßt,  ob  etwas  Fett  ist  oder  nicht. 
Präparate  viele  Monate  haltbar.  2)  P^osin- Hämatoxylin,  Kanada- 
balsam. 3)  Ehrlich  s  Triacid  (Orange  G,  Säurefuchsin,  Methylgrün) 
zur  Darstellung  der  eosinophilen  und  pseudoeosinophilen  (neutro- 
philen)  Granula.     Kanadabalsam.      4)  Dreifachsaures    Gemisch:     Au- 


XXII,  2.  Referate.  273 

rantia-Eosin-Nigrosin  zur  Darstellung-  der  Eosinophilen  und  Kurloff- 
schen  Nigrosinopliilen.  Kanadabalsam.  5)  Thionin  oder  Methylenblau 
oder  Nilblau  zur  Darstellung  von  Mastzellen.  Kanadabalsam.  6)  Eosin- 
saures  Methylenblau  in  Methylalkohol  nach  May- Grünwald  für  Mast- 
zellen ,  eosinophile  und  neutrophile  Granulationen.  Kanadabalsam. 
7)  FLEMMiNGSches  Säuregemisch  (Chromsäure-Osmiumsäure-F]isessig) 
zur  Fettschwärzung.  Kanadabalsam.  8)  Ehrlichs  Jodgummimethode  : 
LuGOLSche  Lösung  und  dicker  Gummischleini.  Zum  Glykogennach- 
weise.  —  Die  der  Bauchhöhle  entnommene  Flüssigkeit  (Milch  und 
Exsudat)  ist  zuerst  reichlich  und  milchig ,  wird  dann  gelblich  und 
mehr  oder  weniger  fadenziehend  und  zäh,  nimmt  allmühlich  an  Menge 
ab ,  wird  farblos ,  trübserös  und  versiegt  schließlich  gänzlich.  Die 
Gelbfärbung  scheint  in  erster  Linie  von  den  Polynukleären  abzu- 
hängen,  doch  sind   wohl  auch  die  Mononukleären  beteiligt. 

Schieferdecker  {Bonn). 

Rossi,    E.,     L'intima     struttura     delle     cellule     nervöse 
umane    (Le  Nevraxe  vol.  VI,   fasc.   3,   1904,  p.  331 — 349 
av.   16  Fig.). 
Frische  Stücke  von  Nervengewebe,   3  bis  4  mm  dick,  kommen  in 
eine  2prozentige  Lösung  von  Platinnitrat  für  24  bis  48  Stunden.    Dann 
in    eine    0"5prozentige    Goldchloridlösung,    hierauf   kurzes  Abwaschen 
in  destilliertem  Wasser  und  Übertragen  in  eine  einprozentige  Lösung 
von   Ameisensäure  (24  Stunden  im  Dunklen).     Dann  wieder  schnelles 
Abwaschen   in  destilliertem  Wasser,    steigender  Alkohol,    Paraffinein- 
schluß.    Die  Methode  ist  sehr  einfach  und  ergab  immer  gute  Resul- 
tate bei  Katzen,    Hunden    nnd  beim  Menschen,    von   welch    letzterem 
Großhirn-  und  Kleinhirnrinde,   Rückenmark  und   Spinalganglien  unter- 
sucht wurden.  Schic/f'crdecJcer  {Bonn). 

ßamou   J   Cajal,  S.,    La    methode    a    Targent    reduit    as- 

s  0  c  i  e  e  ;\  1  a  methode  e  m  b  r  y  o  n  n  a  i  r  e  p  o  u  r  1'  e  t  u  d  e 

des    noyaux    moteurs    et    sensitifs    (ßibliogr.    Anat. 

t.  XIII,    1904,   fasc.  5,  p.  242—275   av.    12  figg.     Dasselbe 

in    Trab.    Labor.   Investig.  Biol.  Univ.  Madrid  t.  III,   1904, 

fasc.  2,  3,  p.  65—96  av.   12  figg.). 

Verf.  macht  in  dieser  Arbeit   einige  weitere    genauere  Angaben 

in  bezug    auf   seine  Silberfärbung   nach    vorheriger  Fixierung  in  am- 

moniakalischem    Alkohol.      1)  Frische  Stücke  der  Medulla  oblongata, 

des  Mittelhirns   etc.   von    Reptilien,   Vögeln    und    jungen    Säugetieren 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  2.  18 


274  Referate.  XXII,  2. 

kommen    für     12  bis  24  Stunden    zur    Fixierung    in     die     folgende 
Mischung : 

Absoluter  Alkohol 50  cc 

Reines  Ammoniak  von  '24:"  Baume 5  Tropfen. 

Die  Ammouiakmenge  kann  auf  8,  10  und  12  Tropfen  erhölit 
werden,  wenn  man  eine  sehr  zarte  Imprägnation  der  Neurofibrillen 
wünscht.  In  solchem  Falle  dürfen  die  kleinen  Stücke  niclit  länger 
als  12  bis  14  Stunden  in  der  Fixierungsflüssigkeit  verbleiben.  Bei 
Stücken  von  Hühnerembryonen  kann  man  die  knorpelige  Umhüllung 
des  Nervensystems  erhalten,  doch  ist  es  gut,  die  Muskelmassen  zu 
entfernen.  Die  Stücke  dürfen  nicht  dicker  als  4  mm  sein.  2)  Nach 
einem  Auswaschen  von  einigen  Sekunden  in  destilliertem  Wasser 
kommen  die  Stücke  in  eine  reichliche  Menge  einer  einprozentigen 
Silberlösung.  Sind  die  Stücke  verhältnismäßig  groß ,  so  ist  eine 
l"5prozentige  Lösung  besser.  Die  Stücke  verbleiben,  je  nach  ihrer 
Größe,  5  bis  7  Tage  im  Ofen  bei  28  bis  32*^.  Man  kann  auch 
höhere  Temperaturen  verwenden,  35  bis  40^  und  mehr,  aber  dann 
kürzt  sich  das  Reifestadium  sehr  ab  und  man  riskiert,  es  nicht 
richtig  zu  treffen.  3)  Nach  einem  Abwaschen  in  destilliertem  Wasser 
(einige  Sekunden),  um  das  überschüssige  Silbernitrat  von  der  Ober- 
fläche der  Stücke  zu  entfernen ,  kommen  diese  für  24  Stunden  in 
die  folgende  Mischung : 

Hydrochinon  oder  Pyrogallol 1— 15  g 

Destilliertes  Wasser 100    cc 

Formol 5—10   „ 

Absoluter  Alkohol 5—10   ., 

Das  Hydrochinon  ist  im  allgemeinen  vorziehbar  für  embryonale 
Präparate,  da  es  eine  stärkere  P^'ärbung  ergibt.  Der  Alkohol,  der 
übrigens  nicht  unumgänglich  notwendig  ist,  begünstigt  in  etwas  das 
Eindringen  der  Reduktionsflüssigkeit  in  das  Präparat.  Diese  Flüssig- 
keit dringt  in  die  Mitte  der  Stücke  nur  in  geringem  Maße  ein,  man 
muß  daher  die  Dicke  derselben  oft  auf  2  mm  vermindern ,  bevor 
man  sie  in  das  Reduktionsbad  bringt ,  oder  diesem  Alkohol  oder 
Glyzei'in  zusetzen,  um  das  Eindringen  zu  erleichtern.  Der  Alkohol 
scheint  außerdem  den  Kontrast  zwischen  den  Achsenzylindern  und 
dem  Grunde  zu  erhöhen.  Nichtsdestoweniger  kann  man,  wenn  man 
vor  allem  eine  sehr  genaue  Difterenzierung  der  Neurofibrillen  wünscht, 
mehr  als  eine  starke  Färbung  der  Zellen  und  ihrer  Achsenzylinder, 
auch    den  Alkohol    fortlassen.      Dann   muß  man  aber  die  Ammoniak- 


XXII,  2.  Referate.  275 

menge  in  der  Fixieningsflüssigkeit  erhöhen.  4)  Abwaschen  der  Prä- 
parate in  Wasser  während  einiger  Minuten,  dann  Alkohol,  Celloidin- 
einschluß ,  nicht  zu  feine  Schnitte  und  gewöhnliche  Montierung.  — 
Verf.  gibt  dann  noch  einige  allgemeine  Regeln  an.  Zunächst  ist  die 
Höhe  der  Temperatur  und  die  Dauer  ihrer  Einwirkung  von  Wichtig- 
keit. Man  muß  für  jedes  Objekt  durch  Versuche  feststellen ,  wann 
die  Reifeperiode  eintritt.  Sehr  praktisch  ist  es ,  zu  diesem  Zwecke 
Stücke  in  die  Reduktionstlüssigkeit  zu  bringen  nach  einem  Aufenthalte 
im  Ofen  vom  vierten  Tage  an  bis  zum  achten.  In  diese  Zeit  fällt 
gewöhnlich  die  Reifeperiode,  d.  h.  der  Zeitpunkt,  an  dem  die  Neuro- 
fibrillen sich  am  schärfsten  vom  Grunde  abheben  und  am  besten  ge- 
färbt sind.  Man  kann  aber  auch  mit  bloßem  Auge  schon  nach  der 
Farbe  den  Erfolg  beurteilen ,  wenn  man  die  in  dem  Reduktionsbade 
liegenden  Stücke  durchschneidet :  wenn  das  Nervengewebe  bleigrau 
aussieht,  so  ist  sicher  ein  körniger,  grober  Silberniederschlag  vor- 
handen und  die  Imprägnation  verfehlt.  Wenn  das  Stück  dagegen, 
selbst  auf  der  Oberfläche ,  dunkelbraun  oder  schwarz  erscheint ,  so 
ist  das  Resultat  sehr  gut.  In  diesem  Falle  hat  das  Präparat  also 
gerade  die  richtige  Zeit  im  Ofen  verweilt,  im  ersten  Falle  dagegen 
ist  es  zu  kurze  oder  zu  lange  Zeit  darin  gewesen.  —  Liegt  einem 
weniger  an  einer  guten  Neurofibrillenfärbung  als  an  einem  sehr 
scharfen  Kontraste  zwischen  Nervenfasern  und  Untergrund ,  so  muß 
man  weniger  Ammoniak  bei  der  Fixierungsflüssigkeit  verwenden, 
eventuell  sogar  nur  reinen  Alkohol.  —  Ein  dunkelroter  Ton  der 
zentralen  Teile  des  Stückes  mit  einer  grauen  und  körnigen  Ober- 
flächenpartie ist  -ein  Zeichen,  daß  die  Reife  überschritten  ist.  In 
Schnitten  von  solchen  Stücken  findet  man  die  markhaltigen  Nerven- 
fasern ziemlich  gut  imprägniert,  aber  die  Zellen  sind  blaß  oder  un- 
gefärbt und  heben  sich  von  dem  Grunde  nicht  ab.  Nichtsdesto- 
weniger können  manche  Schnitte  noch  brauchbar  sein.  —  Daß  die 
Ammoniakmenge  überschritten  ist,  oder  daß  die  Einwirkungszeit  zu 
lange  gewesen  ist,  erkennt  man  an  drei  Zeichen:  1)  Feinheit  und 
schwache  ziegelrote  Färbung  der  Neurofibrillen.  2)  Körniges  und  un- 
gleichmäßiges Aussehen  der  oberflächlichsten  motorischen  Zellen,  deren 
Dendriten  unvollkommen  gefärbt  sind.  3)  Marmoriertes  Aussehen 
(apparence  jaspee)  der  weißen  Substanz :  Braune  Flecke  und  gelbe, 
durchscheinende  Punkte  durcheinander  in  verschieden  großer  Anzahl. 
Tiefere  Teile  der  Stücke  können  indessen  trotzdem  noch  brauchbare 
Schnitte  liefern.  Eine  zu  geringe  Menge  von  Ammoniak  verrät  sich 
durch    eine  vollständige  Färbung  der  Zellen  und  Achsenzylinder  und 

18* 


276  Referate.  XXII,  2. 

durch  ein  leicht  körniges  Ausselien  ihrer  Neurofibrillen.  —  Die  so 
angewandte,  hier  beschriebene  Silbermethode  läßt  gerade  da  Resultate 
erhalten,  wo  die  Methoden  von  Golgi  und  Ehrlich  uns  im  Stiche 
lassen,  so  bei  der  Färbung  der  großen  Zellen  und  der  dicken  Achsen- 
zylinder. Aber  auch  sie  hat  ihre  Mängel:  1)  Einer  dieser  Mängel 
besteht  in  der  zu  schwachen  Färbung  der  marklosen  F'asern  und 
darin,  daß  nur  einige  Arten  der  nervösen  Endverzweigungen  gefärbt 
werden.  So  kann  man  mittels  der  hier  angegebenen  Methode  weder 
die  Endästchen  der  feinen  Kollateralen  der  weißen  Substanz  im 
Riickenmarke,  im  verlängerten  Marke,  im  Gehirn  etc.  sehen,  noch  die 
pericellulären  Nester  bestimmter  Zellen  in  den  höheren  Zentren  ,  so 
in  den  Deiter  sehen  und  Bechterew  sehen  Kernen  etc.  Dagegen  ist 
die  Imprägnation  der  Körbe  und  Nester  der  Purkinje  sehen  Zellen 
konstant  und  schön.  Ebenso  färben  sich  ausgezeichnet  die  Endkeulen 
von  Auerbach  an  den  motorischen  Zellen  und  den  Zellen  der  oberen 
Oliven ,  allerdings  nur ,  wenn  man  die  Stücke  zuerst  2  bis  3  Tage 
in  absolutem  Alkohol  fixiert  und  dann  24  Stunden  in  ammoniakalischem 
Alkohol ,  bevor  man  sie  in  die  Silberlösung  bringt.  Die  hier  ange- 
gebene Methode  ist  daher  in  bezug  auf  die  Färbung  der  Endigungen 
der  Achsenzylinder  nicht  sehr  wirksam,  die  früher  angegebenen  Me- 
thoden sind  in  dieser  Hinsicht  wirksamer.  Keine  von  allen  aber  ist 
imstande,  alle  Nervenendigungen  darzustellen.  2)  Ein  weiterer  Nach- 
teil ist  die  Färbung  sämtlicher  Fasern  und  Zellen,  wodurch  ein  großes 
Gewirr  entsteht.  3)  Ein  dritter  Nachteil ,  der  allerdings  weniger 
wichtig  ist,  ist  der,  daß  bei  dickeren  Stücken  die  Peripherie  über- 
färbt ist ,  weiter  nach  innen  folgt  dann  eine  günstige  Zone.  Um 
diesen  Nachteil  zu  vermeiden,  muß  man  entweder  nur  kleine  Stücke 
verwenden,  in  welche  die  Silberlösung  schnell  eindringt,  oder  das 
Stück  mit  gleichgültigen  Gewebsteilen  umgeben,  so  daß  diese  dann 
die  zu  starke  Färbung  in  sich  aufnehmen.  Man  kann  indessen  diesen 
Nachteil  einigermaßen  vermindern,  wenn  man  bei  großen  Stücken  die 
folgenden  Vorsichtsmaßregeln  anwendet:  1)  Man  muß  sie  bis  zur 
Reduktion  im  Dunkeln  halten.  2)  Man  muß  sie  mit  einer  gleichgül- 
tigen Substanz  umgeben  (Gelatine,  Blut  etc.).  3)  Während  des  letzten 
Tages  im  Ofen  muß  man  den  Gehalt  an  Silbernitrat  vermindern. 
Diese  letzte  Maßregel  ist  die  wirksamste.  Nehmen  wir  z.  B.  an,  daß 
die  Stücke  6  Tage  in  einer  Silberlösung  von  1  bis  1*5  Prozent  ver- 
weilt haben,  so  würde  man  sie  die  letzten  24  Stunden  hindurch  in 
einer  Silberlösung  von  0*75  bis  0*5  Prozent  belassen. —  Eine  nachträg- 
liche Goldfärbung  verbessert  Schnitte,  welche  zum  Studium  der  moto- 


XXII,  2.  Referate.  277 

rischeii  und  sensiblen  Kerne  wälirend  ihrer  Entwicklun<;-  dienen  sollen, 
gewöhnlich  nicht.  Dagegen  ist  das  Goldbad  mitunter  nützlich,  wenn 
die  Schnitte  z.  B.  einen  sehr  schwach  rötlichen  Ton  haben  oder  wenn 
man  nur  die  feine  Struktur  des  Neurofibrillennetzes  untersuchen  will. 
—  Man  kann  auch  die  oberflächlichen  Schnitte  von  einem  Stücke 
benutzen,  welche  gewöhnlich  zu  stark  imprägniert  sind,  wenn  man  sie 
für  einige  Minuten  in  eine  schwache  (0"25  bis  0'5prozentige)  Lösung 
von  i'erricyankalium  bringt,  die  frisch  zubereitet  ist,  dann  in  eine 
öprozentige  Lösung  von  unterschwefligsaurem  Natrium.  Nach  Ab- 
waschen in  Wasser  behandelt  man  sie  mit  Goldchlorid  bis  zur  ge- 
wünschten Litensität.  Ist  die  Goldfärbung  zu  stark  geworden ,  so 
überträgt  man  sie  wieder  in  die  beiden  eben  genannten  Lösungen, 
wodurch  die  Färbung  abgeschwächt  wird.  Man  muß  hierbei  sehr 
aufmerksam  verfahren,  erhält  aber  mitunter  eine  prachtvolle  schwarze 
Färbung  der  Neurofibrillen  und  der  Achsenzylinder  auf  einem  sehr 
hellen  oder  selbst  farblosen  Grunde.  —  Verf.  geht  dann  weiter  darauf 
ein,  daß  es  nötig  sei,  eine  mechanische  Vorrichtung  zu  konstruieren, 
um  bei  Serienschnitten  immer  genau  dieselbe  Faser  sofort  wieder 
einstellen  zu  können  und  gibt  eine  Methode  an,  wie  sich  das  vor- 
läufig wenigstens  einigermaßen  erreichen  läßt.  Es  wird  dieserhalb 
auf  das  Original  verwiesen.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Kozowsky,  A.  D.,    Zur    F  ä  r  b  u  n  g  s  m  e  t  h  o  d  i  k    der    Nerven- 
fasern    des     Zentralnervensystems     (Neurol.    Zen- 
tralbl.  Jahrg.  XXIII,    1904,  Nr.  2l>,  p.  1041  —  1042). 
Verf.  gibt  einie  Methode  an,  welche  ähnliches  zu  leisten  scheint, 
wie    die    WEioEiiTSche.     Die    Gehirnstücke    werden    in    gewöhnlicher 
Weise  in  MtJi.LER scher  Flüssigkeit  gehärtet,  die  Härtung   muß   mög- 
lichst vollständig   sein,  je    länger    sie  dauert,    um    so    besser    ist    es. 
Einbettung  in  Celloidin.     Färbung  in  der  folgenden  Weise  : 

Hämatoxylin lO'O  g 

Absoluter  Alkohol 60'0  „ 

Destilliertes  Wasser 60'0  „ 

Lithion  carbonicum,  gesättigte  wässerige  Lösung  lO'O  „ 

Nach  einer  Woche  ist  die  Farbe  fertig.  Die  Schnitte  bleiben 
hierin  24  Stunden  bei  Zimmertemperatur,  dann  abspülen  in  Wasser. 
Die  schwarz  gefärbten  Schnitte  werden  in  eine  einprozentige  Lösung 
von  Kalium  hypermanganicum  übertragen  und  verbleiben  darin,  bis  die 
graue  Substanz  braun  wird.  Dann  kommen  sie  in  Liquor  ferri  sescjui- 
chlorati    (2-    bis    3mal    wechseln),    bis    die    graue    Substanz    deutlich 


& 


278  Referate.  XXII,  2. 

weiß  wird.  Sorgfältiges  Abspülen  in  Wasser,  Alkohol,  Xylol  oder 
Origanum-Ül,  Kanadabalsam.  Die  Nervenfasern  erscheinen  schwarz 
auf  weißem  Untergründe.  Wenn  man  schnell  fcärben  will,  müssen 
die  Sclniitte  in  der  Farbflüssigkeit  über  der  Lampe  5  bis  6  Minuten 
erwärmt  werden  (zufällig  dabei  sich  entflammender  Spiritus  ist  zu 
löschen  und  die  Erwärmung  fortzusetzen  bis  zu  der  bestimmten  Zeit). 
Nach  Abkühlung  Abwaschen  der  Schnitte  in  Wasser,  sonst  wie  oben. 
Die  ganze  Färbung  dauert  in    diesem  Falle  nur  30  bis  45  Minuten. 

Schiefferdecker  (Bonn) . 

Cavalie,  M.,  Les  ramifications  nerveuses  dansl'organe 
electrique  de  la  torpille  (Torpedo  Galvani)  [Dis- 
positif  fibrillaire  dans  les  gaines  des  f ihres 
nerveuses  et  autour  d'elles]  (Bibliogr.  anat.  t.  XIII, 
1904,  fasc.  4,  p.  214—220  av.  5  figg.). 
Die  im  vorigen  Referate  angegebene  Methode  von  Nabias  hat 
Verf.  für  das  elektrische  Organ  augewendet  nach  vorheriger  Fixierung 
mit  einer  2prozentigen  Osmiumsäurelösung.  Die  Präparate  werden  dann 
zuerst  zerzupft  und  auf  einem  Objektträger  ausgebreitet.  Die  GuAMSche 
Lösung  wurde  2  bis  5  Minuten  angewendet,  dann  nach  Gelbwerden  der 
Präparate  wurde  mit  einigen  Tropfen  destillierten  Wassers  abge- 
waschen; dann  Zusatz  von  einigen  Tropfen  einer  einprozentigen  Gold- 
chloridlösung (8  bis  6  Minuten,  eine  längere  P^inwirkung  schadet  nichts). 
Dann  nach  wiederholtem  Abwaschen  in  destilliertem  Wasser  Zusatz 
von  einigen  Tropfen  einer  sehr  schwachen  Anilinwasserlösung  oder 
einer  sehr  schwachen  Resorcinlösung  (1  bis  2  Minuten).  Die  violette 
Färbung  der  Präparate  darf  nicht  zu  dunkel  werden.  Dann  wieder 
einige  Tropfen  destilliertes  Wasser ,  Glyzerin  und  Deckgläschen.  — 
Nach  Injektion  mittels  einer  Pravaz sehen  Spritze  von  einigen  Tropfen 
einer  2prozentigen  Osmiumsäurelösung  schneidet  man  das  imprägnierte 
Stück  heraus.  In  dem  direkten  Bereiche  der  Einstichöffnung  sind  die 
elektrischen  Platten  schwarz,  weiterhin  werden  sie  immer  heller  braun. 
Die  eben  genannnte  Goldfärbung  ergibt  verschiedene  Resultate  je  nach 
der  Stärke  der  ursprünglichen  Färbung.  Verf.  hat  ein  klares  Bild 
des  von  ihm  entdeckten  Fibrillcnapparates  nur  an  den  hellbraun  ge- 
färbten Platten  erhalten ,  d.  h.  an  solchen  Stellen,  an  denen  die  Os- 
miumsäure hinreichend  stark  fixierend  gewirkt  hat,  ohne  doch  die 
Gewebe  zu  schwärzen.  Schiefferdecker  [Bonn). 


i 


XXII,  2.  Keferate.  279 

Grabower,   Die  Verteiluni,^   und  Zahl   der   Nervenfasern 
in  den  Kehlkopfmuskeln   und    die   Hinfälligkeit 
des  Erweiterers    der    Stimmritze  (Arch.  f.  Laryng. 
n.  Rhinol.  Bd.   XVI,    1904,  H.   2,  p.  189—207   m.  2  Tlln.). 
Bei  den  Kehlkopfmuskeln  kann  man  sich  recht  gute  Übersichts- 
bilder der  Innervationsfigur  verschatt'en  durch  Anwendung  der  Osmium- 
Essigsäure-Methode  von  Xussbaum,     Allerdings  ist  diese  Methode  so, 
wie  sie  angegeben  ist,  für  den  menschlichen  Muskel  nicht  brauchbar. 
Verf.    hat    die    betreffenden    Muskeln    frieren    lassen ,    sie    mit    dem 
Mikrotom  in  Schnitte  von  50  /t  Dicke   zerlegt    und    hat    sie    alsdann 
nach   Vorbehandlung    mit    verdünnter  Essigsäure    durch   Osmium    ge- 
färbt.    Diese  Methode  gibt  natürlich  nur  Übersichtsbilder ,   über   die 
feinere   intramuskuläre  Nervenversorgung   gibt   sie  keinen  Aufschluß. 
Um  diesen  zu  gewinnen,  hat  Verf.  die  Muskeln  vergoldet,  dann  ge- 
härtet  und   in  Serienschnitte    von   10  /t  Dicke  zerlegt.     Die  Muskeln 
wurden    längs    ihres    Verlaufes    geschnitten.      Verf.    hat    nicht    nur 
Muskelstücke    in  Paraffin    eingebettet    und    dann   geschnitten  (hierbei 
werden  die  Muskelfasern  durch  das  Paraffin  immer  mehr  oder  weniger 
auseinander  gedrängt,  so  daß  die  Nervenfädchen  sich  verschieben  und 
den  Überblick    erschweren),    sondern    auch    die  Muskeln    in  einzelne 
Stücke  zerlegt  und  diese  nach  ihrer  Vergoldung  und  Differenzierung 
lange  Zeit    in  Glyzerin    liegen  lassen ,    das    mit  verdünnter  Ameisen- 
säure  gemischt    war.     Nach    einem    Vierteljahre    oder   länger   gelang 
es  sehr  leicht,   diesen  Muskelstücken  kleine  Stückchen  zu  entnehmen, 
welche  außerordentlich  weich  waren,  sich  ohne  jede  Präparation  auf 
dem  Objektträger  'auseinander  legten    und    durch    den    bloßen  Druck 
des  Deckglases  derart  entfalteten,   daß  man  die  Muskelfasern  in  ihrer 
natürlichen  gegenseitigen  Verbindung  unter  dem  Mikroskope  betrachten 
konnte.     Außerordentlich    klar   konnte    man    dann    die    von  Faser  zu 
Faser  ziehenden  Nervenfädchen  überblicken. 

Schiefferckcker  {Bonn). 

Joris,  H.,  Histogenese  du  Neurone  (Bull.  Acad.  K.  Med. 
Belgique  25  juin  1904,  44  p.  av.  5  pl.). 
Verf.  benutzte  das  Nervensystem  von  menschlichen  Foeten  von 
2,  5,  6  und  8  Monaten;  von  Kaninchen-,  Katzen-  und  Hühnerembryo- 
neu  von  verschiedenen  Entwicklungsstadien.  Um  künstliche  Ver- 
änderungen in  dem  Baue  möglichst  auszuschließen,  wurden  sehr  ver- 
schiedene Fixierungsraittel  verwendet.  Die  besten  Resultate  ergaben : 
die  Flüssigkeit  von  Bouin  (Formol  10,  Essigsäure  2,  gesättigte  wässe- 


280  Referate.  XXII,  2. 

rige  Pikrinsäiirelösung  30),  Anweudungsdaiier  6  bis  24  Stunden;  dann 
abwaschen  in  starkem  Alkohol,  absoluter  Alkohol,  Chloroform,  Lack. 
Sodann  Sublimat-Essigsäure  (Sublimat  8  g,  Essigsäure  5  cc,  destilliertes 
Wasser  100 cc),  Anwendungsdauer  4  bis  6  Stunden,  auswaschen  in 
jodiertem  Wasser  und  in  jodiertem  Alkohol,  Entwässerung,  Einschluß. 
Endlich  einprozentige  Osmiumsäurelösung  für  einige  Minuten;  beson- 
ders für  sehr  junge  Embryonen;  auswaschen  in  einer  wässerigen  5pro- 
zeutigen  Essigsäurelösung,  Entwässerung,  Einschluß.  Gefärbt  wurde 
in  einer  wässerigen  Lösung  von  Toluidinblau  von  0'5  auf  100  (1  bis 
Minuten)  mit  nachfolgender  Fixierung  der  Färbung  durch  Ammonium- 
molybdat.  Ferner  mit  Hämatein  und  Rubin  nach  Apäthy.  Um  die 
chromophile  Substanz  zu  untersuchen ,  wurde  nach  Nissl  verfahren 
(Fixierung  in  Alkohol,  Färbung  mit  Methylenblau).  Das  colloidale 
Gold  Avurde  nach  Fixierung  der  Embryonen  in  Sublimat-Essigsäure 
angewendet;  die  Reaktion  tritt  in  den  Geweben  von  sehr  jungen 
Embryonen  noch  nicht  ein.  Auch  die  Methode  von  Bethe  gelingt 
erst  bei  älteren  Embryonen.  Schiefferclecker  (Bonn). 

Krel)S,  P. ,  Die  Nervenendigungen   im  Musculus  stape- 
dius  mit  besonderer  Berücksichtigung   der   bei 
der     Färbung     angewandten     Technik     (Arch,     f. 
mikrosk.    Anat.    Bd.  LXV,   1905,    p.   704—727   m.   1   Fig. 
u.   1   Tfl.). 
Das    kleine  Objekt    bot    wegen    der    großen    Menge   von   Binde- 
gewebe,    sowie    wegen     des    eingebetteten    Sesambeinchens    bei    der 
Herstellung   der  Präparate   große    Schwierigkeit.     Nur  Methylenblau- 
und    Goldchlorid- Färbung    lieferten    in    geeigneter    Weise    modifiziert 
brauchbare  Präparate.    Da  aus  ökonomischen  Gründen  von  einer  In- 
jektion   der  Methylenblaulösung    in    die  Bliitbahn  Abstand  genommen 
werden    mußte,    wurden  aus  frisch   geschlachteten   gut  ausgebluteten 
Tieren  (Kalb,   Rind,   Pferd,  Hund)  die  Muskeln  möglichst  schnell  und 
zum    großen    Teil    unter    Anwendung    einer    Lupe    herauspräpariert. 
Dieses  geschah  auf  folgende  Weise :    Nach  Eröffnung  des  Processus 
mastoideus    wurden    die  Zwischenwände    der  Cellulae  mastoideae   bis 
auf    den    Canalis  facialis  P'allopii    weggeräumt.     Hierauf   wurde    der 
äußere    Gehörgang    bis    zum    Trommelfell    abgemeißelt,    dieses    dann 
samt  Hammer    und  Amboß    entfernt,  der  Steigbügel  aber,  an  seiner 
Sehne  hängend,   belassen.     Weiter  wurde  dann  in  den  Canalis  facialis 
eingedrungen,    das    diesen    von    der    Höhle    des    Musculus    stapedius 
trennende    Septum    durchbrochen    und    der    Muskel    selbst    mit    einer 


XXII,  2.  Referate.  281 

stumpfen  Nadel  von  seiner  knöchernen  Umhüllung  losgelöst.  Köpfe 
von  jungen  Tieren  sind  zu  bevorzugen,  einmal  wegen  der  leichteren 
Präparation,  anderseits  aber  auch  wegen  der  leichteren  Färbbarkeit 
der  Nerven.  Wurde  nach  Dogiels  Vorschrift  das  Objekt  auf  Glas- 
wolle in  eine  Schale  gelegt  und  bei  37*^  C.  im  Thermostaten  zuerst 
mit  einer  ^/^-  bis  ^/gprozentigen  und  dann  von  Zeit  zu  Zeit  mit  einer 
■^/jgprozentigen  Methylenblaulösung  angefeuchtet,  so  war  immer,  auch 
bei  größter  Sorgfalt ,  die  Randzone ,  besonders  aber  die  zu  unterst 
liegende  Hälfte  stai'k  überfärbt,  während  die  innere  Partie  meist 
keine  Spur  von  Färbung  aufwies.  Um  das  ganze  Präparat  möglichst 
gleichmäßig  und  gleichzeitig  mit  der  Farblösung  zu  imbibieren,  wurden 
die  Präparate  zunächst  an  Ort  und  Stelle  (also  meist  dem  Schlacht- 
hofe) in  ein  Schälchen  mit  ^/^.prozentiger  Methylenblaulösung,  die 
auf  ca.  37^  C.  erwäi-mt  war,  gelegt  und  rasch,  gut  verschlossen  und 
möglichst  vor  Abkühlung  geschützt,  zur  weiteren  Bearbeitung  in  das 
Laboratorium  transportiert.  Hier  wurde  das  Schälchen  auf  ein  Wasser- 
bad von  ca.  40^  C.  und  mit  diesem  in  ein  Vakuum  gesetzt.  In 
diesem  blieben  die  Präparate  unter  allmählicher  Drucksteigerung 
25  Minuten,  um  dann  herausgenommen,  und  sofort  auf  gazeartiges 
Baumwollengewebe  gebracht  zu  werden,  das  über  eine  etwas  physio- 
logische Kochsalzlösung  [warum  nicht  nur  Wasser?  Ref.]  enthaltendes 
Becherglas  gebunden  war.  Dieses  Becherglas  wurde  dann  mit  einem 
größeren  Becherglase  so  überdeckt,  daß  der  Inift  freier  Zutritt  zu 
den  Präparaten  gestattet  war,  und  das  Ganze  in  einen  Thermostaten 
von  ca.  37^  C.  etwa  2  bis  2^/2  Stunden  gestellt.  Die  von  Zeit  zu 
Zeit  notwendige  Befeuchtung  geschah  mit  -^/.^^prozentiger,  auf  37°  C. 
erwärmter  Methylenblaulösung.  Da  ein  etwaiger  Überschuß  von 
Farbflüssigkeit  von  der  Baumwollenunterlage  aufgesogen  wird ,  ist 
eine  Überfärbung  der  Unterseite  der  Präparate  ausgeschlossen.  — 
Von  der  Fixierung  in  pikrinsaurem  Ammonium  mußte  von  vornherein 
abgesehen  werden,  da  es  ganz  unmöglich  war,  die -kleinen,  überaus 
festen  und  bindegewebsreichen  Muskeln  mechanisch  auch  nur  an- 
nähernd so  weit  zu  isolieren,  wie  es  zu  einer,  wenn  auch  nur  ober- 
flächlichen Betrachtung,  notwendig  gewesen  wäre  [?].  Die  Fixierung 
wurde  deshalb  mit  reichlicher,  auf  0°  C.  abgekühlter,  7prozentiger 
Lösung  von  molybdänsaurem  Ammonium  unter  Zusatz  von  1  cc  Wasser- 
stoftsuperoxyd  und  einem  Tropfen  Salzsäure  auf  10  cc  Lösung  nach 
Bethes  Vorschrift  ausgeführt.  Fixierung  mit  reiner  molybdänsauren 
Ammoniumlösung  ohne  den  genannten  Zusatz ,  wie  sie  Dogiel  emp- 
fiehlt,   ergab    immer    unbrauchbare  Präparate.     Sie   zeigten  meistens 


282  Referate.  XXII,  2. 

nur  eine  diffuse  Färbung  aller  Gewebselemente  mit  einer  nur  schwachen 
Differenzierung  der  Nerven.  In  der  Fixierungsflüssigkeit  blieben  die 
Objekte  ca.  12  Stunden.  Dann  wurden  sie  ca.  1  Stunde  in  fließen- 
dem, destilliertem  Wasser  gewaschen,  1  Stunde  mit  75prozentigem, 
eine  weitere  Stunde  mit  96prozentigem  Alkohol  behandelt,  durch 
Bergamottöl  in  Xylol  gebracht  und  schließlich  unter  der  Luftpumpe 
in  Paraffin  eingebettet.  Unter  der  Luftpumpe  wurde  die  Einbettung 
deshalb  vorgenommen ,  weil  dieselbe  so  schneller  und  vollständiger 
vor  sich  geht  und  die  Überführung  durch  Chloroform  und  Chloroform- 
paraffin umgangen  wird  [?].  15  bis  20  jli  dicke  Schnitte  zeigten 
bei  gelungener  Färbung  zerstreut  motorische  Nervenendigungen.  Um 
Übersichtsbilder  zu  erhalten ,  welche  eine  größere  Anzahl  von  Endi- 
gungen im  Zusammenhange  mit  den  Nervenstämmcheu  zeigen,  wurden 
dicke,  ca.  30  fi  dicke  Schnitte  mittels  Xylol  vom  Paraffin  befreit  und 
dann  ungefähr  8  Tage  lang  mit  dickflüssigem  Damarharz  durchtränkt. 
Ein  Zerfallen  der  Schnitte  ist  wegen  des  Biudegewebsreichtum,  nicht 
zu  befürchten,  zumal  auch  die  vorherige  Behandlung  mit  Bergamottöl 
die  Präparate  vor  Sprödigkeit  schützt  ['?].  Nach  der  Durchtränkung 
wurden  die  Schnitte  mit  dem  Spatel  auf  eine  weiße,  glatte  Porzellan- 
platte übertragen  und  nach  sorgfältiger  Entfaltung  durch  Überrollen 
mit  einem  glatten,  mit  Xylol  befeuchtetem  Glasstab  unter  leichtem 
Druck  ausgebreitet.  Auf  diese  Weise  wurden  äußerst  klare  Bilder 
größerer  Nervenstämme  mit  deren  Seitenästchen  erhalten,  an  welchen 
die  Nervenendigungen  deutlich  hervortreten.  Von  einer  Entkalkung 
des  in  dem  Musculus  stapedius  vorkommenden  Sesambeinchens  mußte 
abgesehen  werden ,  da  die  Färbung  bei  allen  probierten  Methoden 
entschieden  litt.  —  Die  verschiedenen  Goldchloridmethoden  gaben 
anfangs  so  gut  wie  keine  Resultate.  Der  negative  Erfolg  war  wohl 
zumeist  der  Schwierigkeit  zuzuschreiben ,  die  Elemente  des  binde- 
gewebsreichen  Objektes  genügend  zu  isolieren.  Deshalb  wurde  der 
Versuch  gemacht,  die  Reduktion  des  Goldchlorids  mit  einer  möglichst 
ausgiebigen  Mazeration  zu  kombinieren.  Dieses  gelang  mit  Hilfe  ver- 
dünnter Salzsäure  unter  gleichzeitiger  Anwendung  höherer  Wärme- 
grade. Die  herauspräparierten  Muskeln  wurden  zunächst  für  5  Minuten 
in  ein  Gemisch  von  1  Teil  Ameisensäure  und  3  Teilen  Wasser  ge- 
bracht und  mittels  eines  Glasstäbchens  dünn  ausgev/alzt;  dann  kamen 
sie  im  Dunkeln  in  ein  Gemisch  von  4  Teilen  ^/^prozentiger  Gold- 
chloridlösung und  1  Teil  Ameisensäure.  Die  Goldchloridlösung  war 
vorher  tagelang  dem  Sonnenlicht  ausgesetzt  gewesen  (Apathy)  und 
das  Gemisch    zum    Sieden    gebracht    und    wieder    abgekühlt    worden. 


XXII,  1.  Referate.  283 

In  dieser  Flüssigkeit  wurden  die  Präparate  unter  den  Rezipienten 
einer  Luftpumpe  gebracht,  um  so  mittels  Luftauspumpen  und  Luft- 
zuströmen eine  möglichst  rasche  und  gleichmäßige  Imbibition  mit 
Goldlösung  herbeizuführen.  Man  evakuiert  hierbei,  bis  keine  Bläschen 
mehr  aus  dem  Objekt  aufsteigen.  Nach  8-  bis  lOstündiger  Behandlung 
mittels  verdünnter  Ameisensäure  (3:1)  im  Dunkeln  folgte  Mazera- 
tion in  verdünnter  Salzsäure  (250  :  1).  In  dieser  wurden  die  Präparate 
einige  Male  bis  zum  Sieden  erhitzt  und  schließlich,  um  die  Säure 
zu  entfernen,  in  reinem  Wasser  aufgekocht.  Nach  einem  jedesmaligen 
Erhitzen  wurde  die  Flüssigkeit  möglichst  bis  auf  0^  C.  abgekühlt, 
wodurch  das  im  kochenden  angesäuerten  Wasser  in  Leim  verwandelte 
Bindegewebe  seine  Zähigkeit  und  Klebfähigkeit  verliert.  Eine  zu 
häufige  und  eine  damit  verbundene  zu  starke  Reduktion  des  Gold- 
chlorids muß  vermieden  werden.  Einen  Maßstab  für  die  genügend 
starke  Reduktion  gibt  die  Verfärbung  der  Präparate  aus  dem  Dunkel- 
violetten ins  Dunkelbraune.  Nach  entsprechender  Reduktion  kamen 
die  Muskeln  für  48  Stunden  in  75prozentigen  Alkohol,  dann  auf  2  bis 
3  Wochen  in  20prozentiges  ameisensaures  Glyzerin  [?] ,  um  schließ- 
lich nach  Pressung  zwischen  zwei  Objektträgern  mit  Nadeln  zerzupft 
zu  werden.  Leider  ist  auch  bei  peinliclister  Sorgfalt  nicht  für  den 
Erfolg  zu  garantieren.  Gut  gefärbte  Präparate  können  während  der 
Alkoholbehandlung  noch  unbrauchbar  werden. 

E.   Schoebel  {Neapel). 

Imhof,  G.,  Anatomie  und  Entwicklungsgeschichte  des 
Lumbal^iarkes  bei  den  Vögeln  (Arch.  f.  mikrosk. 
Anat.  Bd.  LXV,  1905,  p.  498— GIO  m.  30  Figg.  u.  1  Tri.). 
Die  Fixierung  erfolgte  entweder  in  Formol-Pikrinsäure  (Formol, 
lOprozentig,  50  Teile,  Pikrinsäurelösung,  konzentriert,  50  Teile)  oder 
Alkohol -Pikrinsäure  (Alkohol,  9Gprozentig,  65  Teile,  Pikrinsäure- 
lösung, konzentriert,  35  Teile)  oder  aber  Pikrinsäure-Sublimat  (Pikrin- 
säurelösung, konzentriert,  1  Teil,  Sublimatlösung,  konzentriert,  1  Teil, 
Wasser,  destilliert,  1  Teil).  Aus  den  beiden  ersten  Gemischen  kamen 
die  Objekte  nach  2  bis  4  Tagen  in  TOprozentigen  Alkohol,  aus  dem 
letzteren  nach  12  bis  24  Stunden  in  SOprozentigen  und  eventuell 
zur  vollständigen  Beseitigung  des  Sublimates  in  Jodalkohol.  Als 
vorzügliches  Färbemittel  für  den  gegebenen  Zweck  erwies  sich  das 
saure  Hämatoxylin  von  Ehrlich.  Nach  einer  Färbedauer  von  2  bis 
5  Minuten  wurden  die  Schnitte  mehrere  Stunden  im  fließenden  Wasser 
bis  zum  Eintritt  intensiver  Nachdunkelung  ausgewaschen.  Nach  Ditferen- 


284  Referate.  XXII, 


•> 


zierung  in  5prozeiitiger  Essigsäure  und  nochmaligem  Auswaschen  in 
destilliertem  Wasser  erfolgte  rasches  Nachfärben  in  einprozentiger 
alkoholischer  Eosinlösung.  Weiter  kam  noch  die  rasche  doppelte 
Methode  von  Golgi  zur  Anwendung.  Zur  Darstellung  der  Neuroglia 
wurde  das  Mark  erwachsener  Vögel  1  bis  2  Tage  in  Osmium-Bichromat- 
Gemisch  (einprozentige  Osmiumsäurelösung  1  Teil,  3*5prozentige  Lö- 
sung von  doppeltchromsaurem  Kali  4  Teile)  eingelegt  und  nach  kurzem 
Abspülen  in  gebrauchte  Silbernitratlösung  2  bis  3  Tage  in  eine  frische 
0*75prozentige  Silbernitratlösung  gebracht.     E.   Schoebel  (Neapel). 

Illing,  G. ,  Vergleichende  makroskopische  und  mikro- 
skopische Untersuchungen  über  die  s  u  b  m  a  x  i  1  - 
laren  Speicheldrüsen  der  Haussäugetiere  (Anat. 
Hefte,  H.  70,  80  [Bd.  XXVI,  H.  2,  3],  1904,  p.  389—526 
m.  4  Tfln.). 
Untersucht  wurden  die  Drüsen  von  Hund,  Katze,  Pferd,  Esel, 
Rind,  Schaf,  Ziege,  Schwein,  Kaninchen.  Dem  soeben  getöteten  Tiere 
wurden  die  Drüsen  möglichst  schnell  entnommen  (wegen  der  Art  des 
Herausschneidens  vergleiche  das  Original).  Sodann  wurden  sofort  aus 
verschiedenen  Stellen  der  Drüse  kleine  Würfel  von  nicht  mehr  als  5  mm 
Seite  herausgeschnitten  und  sofort  in  die  FixierungsÜüssigkeit  gebracht. 
Als  solche  wurde  durchgängig  eine  heiß  gesättigte  Sublimat-Kochsalz- 
lösung mit  Zusatz  von  etwas  Eisessig  benutzt,  nachdem  vorher  zahl- 
reiche Versuche  mit  der  Podwysotzky sehen  Lösung  (Chromsäurelösung, 
einprozentig  15  cc ,  Sublimatlösung  5prozentig  15  cc,  Osmiumsäure- 
lösung 2prozentig  4  cc  und  Essigsäure  6  bis  8  Tropfen)  ungünstige 
Resultate  ergeben  hatten.  Nachdem  die  Präparate  24  Stunden  in 
der  Sublimatlösung  fixiert  worden  waren,  kamen  sie  auf  24  Stunden 
in  fließendes  Wasser,  dann  in  steigenden  Alkohol  von  70,  80,  90  Pro- 
zent mit  Zusatz  von  Jodtinktur,  von  95  Prozent  und  schließlich  in  ab- 
soluten Alkohol.  Paraffin-  oder  Celloidineinbettung.  Paraffinschnitte 
von  durchschnittlich  2  bis  4  /^  Dicke.  Celloidinschnitte  8  bis  10  /< 
dick  (kleines  Celloidinmikrotom  nach  Ebneu- Weichselbaum).  Auf- 
kleben der  Paraffinschnitte  mit  Wasser  auf  dem  Objektträger. 
F  ä  r  b  u  n  g :  Es  sollte  eine  möglichst  gute  Schleimreaktion  erhalten 
werden  und  die  Sekretkapillaren  sollten  deutlich  hervortreten.  Um 
die  Frage  zu  lösen,  ob  in  den  Drüsenzellen  und  eventuell  in  den 
Zellen  der  ausführenden  Kanäle,  beziehungsweise  auch  in  dem  etwa 
in  den  Drüsenhohlräumen  und  dem  ausführenden  Apparate  vorhan- 
denen Sekretmateriale  Mucin  enthalten  sei  oder  nicht,  hat  Verf.  ver- 


I 


XXII,  2.  Referate.  285 

schiedene  Doppelfärbungeii  angewendet,  bei  denen  die  schleimlialtigcn 
Zellen  und  Sekrete  eine  andere ,  und  zwar  deutlicli  hervortretende 
Färbung  annehmen  sollten  als  die  übrigen  P^lemente  und  Gewebe 
der  Drüsen.  Verf.  hat  zu  diesem  Zwecke  vier  Doppelfärbungen 
benutzt:  1)  Hämatoxylin  (Delafield)  mit  Eosin  oder  Kongorot. 
2)  Muchämatein  mit  Erythrosin.  3)  Hämalaun  mit  Mucincarmin. 
4)  Hämalaun  mit  Bismarckbraun.  Alle  vier  Methoden  ergaben  sehr  be- 
friedigende Resultate ;  es  wurden  daher  die  Schnitte  jeder  Drüse 
mindestens  einmal  mit  jeder  dieser  vier  Methoden  gefärbt.  Ferner 
versuchte  Verf.  Toluidinblau  und  Thionin.  Hierbei  machte  er,  wie 
schon  viele  andere  Autoren,  die  Erfahrung,  daß  sich  die  mit  diesen 
Farbstoffen  behandelten  Präparate  nicht  aufbewahren  ließen,  und  daß 
die  prächtige  metachromatische  Färbung  sofort  verschwand,  wenn 
man  sie  in  Alkohol  brachte.  Für  eine  momentane  Untersuchung  sind 
diese  Methoden  sehr  gut  verwendbar.  Auch  verschiedene  Versuche 
des  Verf.,  diese  Färbungen  haltbar  aufzubewahren,  hatten  keinen 
Erfolg.  Zum  Studium  der  Sekretkapillaren  und  des  Netzes  der  Kitt- 
und  Schlußleisten  wurde  das  Eisenalaun  von  M.  Heidenhain  mit 
immer  gleich  guten  Resultaten  benutzt,  öfter  mit  Nachfärbung  mit 
dünner  wässeriger  Lösung  von  Erythrosin  oder  Rubin  S.  Zum  Nach- 
weise von  Muskelelemeuten  wurden  die  Drüsenschnitte  mit  Pikro- 
karrain  und  Säurefuchsin-Pikrinsäure,  zum  Nachweise  der  elastischen 
Fasern  mit  Fuchsin-Resorcin  gefärbt.  Schicfferdeckei'  {Bonn). 

Backmiiiill ,  K. ,  Entwicklung  der  Haare  und  Schweiß- 
drüsen-der  Katze  (Anat.  Hefte,  H.  79,  80  [Bd.  XXVI, 
H.  2,  ,3],  p.  317—383  m.  4  Tfln.). 
Die  Embryonen  wurden  sofort  nach  dem  Tode  des  Muttertieres 
dem  Uterus  entnommen  und,  nachdem  an  verschiedenen  Stellen  der 
Haut  Einschnitte  gemacht  worden  waren,  in  toto  für  24  Stunden  in 
ZENKERSche  Flüssigkeit  gelegt;  dann  ebenso  langes  Auswaschen  in 
fließendem  Wasser,  dann  steigender  Alkohol  im  Dunklen.  Um  die 
Sublimatniederschläge  zu  entfernen,  wurde  dem  90prozentigen  Alkohol 
Jodtinktur  zugesetzt;  in  diesem  8  bis  14  Tage,  dann  Auswaschen 
in  OOprozentigem  mehrfach  gewechseltem  Alkohol.  Es  wurden  neun 
Entwicklungsstadien  untersucht:  Jedesmal  Stücke  von  der  Haut  des 
Ober-  und  Unterkiefers ,  des  Scheitels ,  des  Rückens ,  des  Bauches 
(Achselhöhle  und  Inguinalgegend)  und  der  Sohlenballen  der  Pfoten, 
ferner  von  der  Aftergegend,  der  Außenfläche  des  Oberarms  und  des 
Oberschenkels.     Einbettung  in  Paraffin,  vollständige  Schnittserien  von 


286  Referate.  XXII,  2. 

5  bis  7'5  und  10 /u  Dicke.  Längsschnitte,  Quer-  und  Horizontalschnitte. 
Aufkleben  der  Schnitte  mit  Eiweißglyzerin,  Färbung-  von  jedem 
Präparate  sowohl  mit  Hämatoxylin  (Hansen)  und  Eosin  als  mit  Eisen- 
hämatoxjiin  und  nachfolgender  Pikrofuchsinfärbung  nach  van  Giesox. 

Schiefferdecke?"  {Bonn). 

Glas ,  E. ,  Über  i  n  t  r  a  e  p  i  t  h  e  1  i  a  l  e  Drüsen,  Cysten  und 
L  e  u  k  0  c  y  t  e  n  h  ä  u  f  c  h  e  n  der  menschlichen  Nasen- 
schleimhaut  (Arch.  f.  Laryngol.  u.  Rhinol.  Bd.  XVI, 
1904,  H.  2,  p.  236—264  m.  1  Tfl.). 
Zur  Färbung  der  intraepithelialen  Drüsen  hat  Verf.  die  folgen- 
den spezifischen  Schleimfärbemittel  verwendet :  Thionin,  Toluidinbh^u, 
polychromes  Methylenblau,  Mucikarmin.  Die  ersten  drei  genannten 
FarbstotFe  wurden  später  verlassen:  Die  Metachromasie,  welche  bei 
den  in  Wasser  untersuchten  Präparaten  vorzüglich  hervortritt,  geht 
bei  eingeschlossenen  Präparaten  bald  verloren.  Ist  die  Fixierung 
der  Präparate  eine  günstige ,  so  färben  sich  die  Schleimzellen  vor- 
züglich rotviolett  mitten  in  dem  blau  gefärbten  Grundgewebe.  Längeres 
Auswässern  schadet  der  Metachromasie  nichts.  Läßt  man  aber  dann 
steigenden  Alkohol  einwirken,  so  blaßt  die  rotviolette  Farbe  ab.  Die 
Präparate,  welche  in  konzentrierter  wässeriger  Subliraatl(3sung  fixiert 
wurden,  sind  in  dieser  Beziehung  günstiger  als  die  Alkoholpräparate, 
da  sie  die  Farbe  erst  nach  längerer  Zeit  abgeben.  Wesentlich  er- 
leichtert wird  infolgedessen  die  Untersuchung,  wenn  man  gleich  nach 
der  Färbung  in  Wasser  untersucht.  Zur  Aufhellung  hat  sich  Nelkenöl 
besser  als  Xylol  bewährt,  da  dieses  letztere  noch  mehr  Farbstolf 
auszog.  Die  Präparate  blieben  längstens  8  bis  14  Tage  schön  ge- 
färbt. Bei  Alkoholpräparaten  erwies  sich  die  polychrome  Metliylen- 
blaufärbung  als  besser  und  haltbarer  als  die  Thioninfärbung  (Unna). 
Eine  lOprozentige  Lösung  von  Kaliumbichromat  fixiert  bei  diesen 
Präparaten  gut  den  Farbstoff  (Unna).  Verf.  hat  daher  später  aus- 
schließlich die  Mucikarminfärbung  verwendet:  Die  mit  Ilämalaun  vor- 
gefärbten Präparate  werden  in  einer  Lösung  von  Mucikarmin  (Staram- 
lösung  auf  -^/^Q  mit  destilliertem  Wasser  verdünnt)  einige  Stunden 
gefärbt,  mit  Wasser  abgespült,  entwässert  und  aufgehellt. 

Schiefferdecker  [Bonn). 

Arnold,  J. ,    t'ber    Bau    und     Sekretion   der    Drüsen    der 
F  r  0  s  c  h  h  a  u  t ;    zugleich    ein    Beitrag   zur  P 1  a  s  m  o  - 


XXII,  2.  Referate.  287 

s  0  m  e  n  -  G  r  a  u  u  hl  I  e  li  r  e  (Arch.  f.  niikrosk.  Anat.  Bd.  LXV, 

1905,  p.  649—665  m.  1  Tfl.). 
Zunächst  ist  hervorzuheben ,  daß  über  die  Beschaffenheit  der 
Driisensekrete  nur  bei  Anwendung  bestimmter  Hxiernngsmittel  und 
bestimmter  Tinktionsraethoden  Aufschluß  zu  erwarten  ist.  FLEMMiNGSche 
Flüssigkeit,  für  Kernstnikturen  besonders  geeignet,  wandelt  das  Sekret 
der  Körnerdrüsen  in  blasige  und  fädige  Massen  um,  während  es  an 
Formol-  und  Sublimatpräparaten  aus  scharf  differenzierten  Körnern 
zusammengesetzt  erscheint.  Es  ist  also  unbedii.gt  nötig,  die  Präparate 
des  auf  verschiedene  Weise  fixierten  Materials  zu  vergleichen.  Was 
die  Färbungen  betrifft ,  so  ist  für  den  Mucinnachweis  Mueikarmin 
nicht  zu  entbehren,  da  an  mit  Thionin  gefärbten  Präparaten  die 
Metachromasie  nicht  konstant  und  nicht  dauerhaft  ist.  Im  übrigen 
sind  an  Tinktionsmethoden  notwendig  das  Eisenhämatoxylinverfahren 
nach  Heidenhain,  Färbung  nach  Heidenhain  -  Biondi  ,  Pianese  und 
VAN  GiESON.  Weiter  sind  unter  andern  noch  empfehlenswert  poly- 
chromes Methylenblau  und  die  WEiGERTSche  Fibrinfärbung.  Zur  Be- 
urteilung der  Kittleistenfrage  verdienen,  nach  Ansicht  des  Verfassers, 
die  Vorgänge  der  Indigabscheidung  in  den  Interzellularräumen ,  wie 
sie  nach  Injektion  von  Indigkarmin  in  das  Blut  des  lebenden  Frosches 
erfolgen,  mehr  Beachtung  als  ihnen  bisher  zuteil  geworden  ist. 

E.  Schoehel  {Neapel). 

Bimting,  P.  L.,    The    Histology    of   Lymphatic    Glands: 
t  h  e    g  e  n  e  r  a  1  S  t  r  u  c  t  u  r  e  ,    t  h  e   R  e  t  i  c  u  1  u  m    and   t  h  e 
Germ  Centres  (Journ.  of  Anat.  a.  Physiol.  vol.  XXXIX, 
1904,  p.  55—68  w.  5  pltes.). 
Die   Untersuchungen  wurden    hauptsächlich    an    Paraffinschnitten 
ausgeführt.  Zur  Fixierung  des  Materials  diente  schwache  FLEMMiNosche 
Lösung  und  ZENKERSches  Gemisch,  zur  P'ärbung  der  Schnitte  entweder 
Carmalaun    allein    oder    kombiniert    mit   Pikrinsäure,    Safranin    oder 
Safranin  und  Kernschwarz ;  ferner  Hämatoxylin  kombiniert  mit  Eosin, 
Thionin  oder  Hansens  Pikrofuchsin ;   ferner  die  von  Thomö  empfohlene 
MALLORYSche  Färbung^  und  die  von  Retterer  vorgeschlagene  Modi- 
fikation   des  Israel-Pappenheim sehen  Gemisches    von  Eosin,    Orange 
und  Aurantia,-   letztere  kombiniert   mit  Hämatoxylin   oder  Weigerts 
Resorciu-Fuchsin.     Eine  Anzahl    von  Drüsen   wurde   außerdem  frisch 


^)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XIX,  1902,  p.  23G. 
2)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XIX,  1902,  p.  105. 


288  Referate.  XXII,  2. 

mit  Silbernitratlösung  behandelt  und  dann  entweder  nach  Paraftin- 
einbettung  oder  nach  Gefrieren  lassen  geschnitten.  Ferner  stellte 
Verf.  Auswaschpräparate  her,  indem  er  Gefrierschnitte  zirka  15  Mi- 
nuten in  halb  mit  Wasser  gefülltem  Reagenzglas  schüttelte  und  von 
Zeit  zu  Zeit  den  Eftekt  kontrollierte.  E.   ScJwebel  (Neapel). 

Koiransky,  Eugenie,  Über  eigentümliche  Gebilde  in  den 
L  e  b  e  r  z  e  1 1  e  n  der  Amphibien  (Anat.  Anz.  Bd .  XXV, 
1904,  No.  18,  19,  p.  435—456  m.  6  Figg.  im  Text). 
Verf.  verwendete  die  Lebern  von  Salamander,  Frosch  und  Triton. 
Fixiert  wurde  in  dem  Gemisch  von  Carnoy,  Sublimat  und  Zenker- 
scher  Lösung.  Das  erste  ergab  die  besten  Resultate.  Je  nach  der 
Größe  blieben  die  Stücke  12  bis  14  Stunden  in  den  Fixierungs- 
Üüssigkeiten ,  dann  kamen  sie  (nach  ZENKERScher  Flüssigkeit  erst 
24stündiges  Auswässern  im  Brunnenwasser)  in  steigenden  Alkohol  bis 
zu  absolutem,  dann  in  Karbolxylol,  Xylol,  Paraffin.  Die  3  bis  4  ju 
dicken  Schnitte  wurden  mit  Wasser  oder  nach  der  japanischen  Me- 
thode auf  den  Objektträger  aufgeklebt.  Besonders  günstig  war  eine 
Färbung  mit  Eisenhämatoxylin  und  Nachfärbung  mit  Pikrorubin  oder 
Erythrosin.  Nicht  nur  die  Zelle ,  sondern  auch  die  Anordnung  des 
Bindegewebes  und  die  Gallenkapillaren  mit  den  Schlußleisten  waren 
leicht  nachweisbar.  Auch  mit  Hämatoxylin-Eosin  und  Toluidinblau- 
Erythrosin  wurde  gefärbt.  Feine  Stäbchen ,  welche  den  Kern  um- 
faßten ,  färbten  sich  mit  Toluidinblau.  Verf.  hat  auch  verdünnte 
chinesische  Tusche  unter  nicht  sehr  starkem  Drucke  vom  Frosch- 
herzen aus  in  die  Gefäße  fließen  lassen,  um  das  feinere  Verhalten 
der  Gefäße  zu  den  Zellen  zu  studieren.  Die  Fixierung  in  Trichlor- 
essigsäure  und  Färbung  mit  Resorcinfuchsin  zur  Darstellung  der 
Trophospongienkanälchen  nach  Holjigren  ergab  keine  verwertbaren 
Resultate.  Schieffenlecker  {Bonn). 

Fichera,  G.,  Über  die  Verteilung  des  Glykogens  in  ver- 
schiedenen Arten    experimenteller  Glykosurie 
(Beitr.  z.  pathol.Anat.  u.z.  allgem.Pathol.  Bd. XXXVI,  1904, 
H.  2,  p.  273— .339  m.   1  Tfl.). 
Verf.  führte  seine  Versuche  au  erwachsenen,  gesunden  Hunden 
aus    und   tötete  sie  zur  geeigneten  Zeit  mittels  Durchschneidung  der 
großen  Halsgefäße ,  so  daß  sie  an  Verblutung  starben.     Die  Organ- 
stückchen wurden  unmittelbar  nach  dem  Tode  entnommen  und  in  abso- 
lutem Alkohol   (der  Alkohol  muß  öfter  erneuert  werden,  um  ihn  ganz 


XXII,  2.  Referate.  289 

wasserfrei  zu  erhalten,  sonst  könnte  er  das  etwa  vorhandene  Glj^kogen 
lösen)  oder  in  Flemming scher  Flüssigkeit  fixiert.  Paraffineinschluß. 
Färbung  mit  den  für  die  einzelnen  Gewebe  geeignetsten  Verfahren. 
Von  den  verschiedenen  Färbungsmethoden  des  Glykogens  hat  Verf. 
die  wichtigeren  einer  genauen  Prüfung  unterzogen.  Nach  Ehrlich 
gebraucht  mau  folgende  Mischung:  LuGOLSche  Flüssigkeit  ein  Teil 
auf  100  Teile  einer  Gummilösung  von  sirupartiger  Konsistenz.  Nach 
Barfurth  färbt  und  konserviert  man  die  Präparate  in  einer  Mischung 
von  einem  Teil  LuGOL  scher  Flüssigkeit  auf  zwei  Teile  Glyzerin.  Nach 
Langhans:  5  bis  10  Minuten  in  Lugol scher  Flüssigkeit,  dann  waschen 
in  einer  Mischung  von  einem  Teil  der  offizinelleu  Jodtinktur  auf  4  Teile 
absoluten  Alkohol;  Ol.  origan.  cret.  Wird  vorher  mit  Boraxkarmin 
(Mayer)  gefärbt ,  so  erscheinen  die  Kerne  rot  und  das  Glykogen 
braungelb.  Nach  Lubarsch  (Gentianaviolett)  werden  nach  Härtung 
in  absolutem  Alkohol  Schnitte  hergestellt,  die  man  in  Boraxkarmin 
(Mayer)  färbt  und  dann  1  bis  2  Minuten  in  eine  leicht  erwärmte  Lösung 
von  Gentianaviolett  in  Anilinwasser  legt.  Nach  Auswaschen  in  Wasser 
bringt  man  sie  für  nur  wenige  Sekunden  (5  bis  10)  in  Lugol  sehe  Lösung 
und  trocknet  sorgfältig;  dann  ditFerenzieren  in  einer  Mischung  von 
zwei  Teilen  reinen  Anilinöls  auf  einen  Teil  Xylol.  Klärung  in  Xylol, 
Kanadabalsam.  Kerne  rot,  Glykogen  dunkelblau  oder  violett.  Nach 
Lubarsch  (Jodhämatoxylin)  färbt  man  die  Schnitte  5  Minuten  lang 
in  Jodhämatoxylin  (altes  Hämatoxyliu  nach  Delafield  10  Teile, 
Gram  10  Teile,  destilliertes  Wasser  5  Teile),  bringt  sie  unmittelbar 
darauf  in  absoluten  Alkohol,  trocknet  sorgfältig,  dann  Xylol,  Kanada- 
balsam. Die  Präparate  bleiben  1  bis  2  Tage  lang  dem  Tageslicht 
ausgesetzt.  Nach  Best:  Einbettung  in  Celloidin,  Färbung  der  Schnitte 
mit  Hämatoxylin  (Delafield),  auswaschen  in  Wasser,  Färbung  mit 
Karmin  (Karmin  O'b,  Ammon.  chlorat.  1,  Lithium  carbon.  0*2,  destil- 
liertes Wasser  50)  15  bis  30  Minuten  in  absolutem  Alkohol  2  Teile 
und  Liqu.  ammon.  caust.  ein  Teil,  auswaschen  in  TOprozentigem  Al- 
kohol, Entwässerung  in  absolutem  Alkohol,  Xylol,  Kanadabalsam. 
Von  den  angegebenen  Methoden  hat  jede  ihre  Vorteile  und  Nachteile. 
Barfurth:  Äußerst  durchsichtige  Präparate,  aber  infolge  der  lösenden 
Wirkung  des  Glj^zerius  tritt  die  charakteristische  Jodreaktion  recht 
bald  zurück.  Laxghans  :  Keine  sehr  schönen  Präparate,  die  sich  nur 
einige  Monate  halten.  Lubarsch  (Gentianaviolett j :  Man  braucht  sehr 
gute  Lösungen  und  viel  Zeit;  dabei  geht  das  Glykogen  durch  die 
zahlreichen  Übertragungen  leicht  in  Lösung  über;  viele  Organe  ver- 
sagen auf  die  Glykogenreaktion,  und  diese  tritt  eigentlich  nur  ein  in 

Zeitscbr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  2.  19 


290  Referate.  XXII,  2. 

der  Leber,  in  den  Muskeln  und  in  der  Plazenta.  Bei  der  Lubarsch- 
schen  Jodhämatoxylinmethode  handelt  es  sich  nicht  um  eine  wirkliche 
Färbung  des  Glykogens,  sondern  um  eine  Kombinierung  von  Jodreak- 
tion und  Hämatoxylinfärbung.  Man  erreicht  mit  dieser  Methode  selten 
gut  gelungene  Färbungen  und  muß  häufig  die  Schnitte  in  reiner 
LuGOL scher  Lösung  nachfärben.  Die  Methode  von  Best  eignet  sich 
nur  für  die  schwer  löslichen  Glykogeusorten ,  da  die  leicht  löslichen 
infolge  der  vielen  Behandlung  mit  wasserhaltigen  Mitteln  zum  Schwinden 
gebracht  werden.  Mit  diesem  Verfahren  kommen  im  Knorpel  und  im 
geschichteten  Epithel  selbst  die  kleinsten  Mengen  Glykogen  zum  Vor- 
schein, während  es  sich  bei  Hoden,  Leber,  Muskeln  und  Hyper- 
nephromen  nicht  bewährt.  Die  Ehrlich  sehe  Methode  bietet,  wenn  sie 
auch  die  gleichzeitige  Untersuchung  auf  Glykogen  und  auf  den  Bau 
der  Zellen  nicht  gestattet ,  doch  die  Vorteile ,  äußerst  einfach  und 
kurz  zu  sein ,  das  Glykogen  nicht  aufzulösen ,  es  im  Gegenteil 
in  jedem  Gewebe  in  einer  schönen  mahagoniroten  Färbung  hervor- 
treten zu  lassen.  Verf.  benutzte  daher  dieses  letztere  Verfahren. 
Er  verwandte  möglichst  feine  Schnitte  und  möglichst  geringe  Mengen 
der  Färbemischung,  um  nicht  undeutliche  Präparate  zu  bekommen, 
bei  welchen  eine  eventuelle  Anhäufung  von  Jodgummi  das  Vorhanden- 
sein von  Glykogen  hätte  vortäuschen  können.  Eine  Verwechslung 
von  Amyloid  mit  Glykogen  ist  leicht  zu  vermeiden ,  da  man  beide 
durch  viele  Mittel  unterscheiden  kann,  wie  Verf.  ausführt.  Der  Nach- 
weis von  Zucker,  Aceton  und  Eiweiß  im  Urin  wurde  mit  den  ein- 
facheren und  sicheren  der  bekannten  Verfahren  ausgeführt. 

Scliiefferdecker  {Bonn). 

Cameron ,   J. ,    The    Development    of   the    Retina    in    Am- 
phibia,      an     Embryological      and      Cytological 
Study  (Journ.  of  Anat.  a.  Phys.  London  vol.  XXXIX,  1905, 
p.  135—152  w.   2  pltes,). 
Zur  Fixierung  der  Netzhäute  wurde  mit   befriedigendem   Erfolg 
ein    Gemisch,  aus    90  Teilen    TOprozentigeu   Alkohol,    3  Teilen  Eis- 
essig und  7  Teile  Formol  angewendet.     In   der   Fixierungsflüssigkeit 
blieben  die  Objekte  eine  Woche,  kamen  dann  direkt  für  24  Stunden 
in  90prozentigen  Alkohol,  zweimal  für  je  24  Stunden  in  absoluten,  um 
nach  24stündiger  Behandlung  mit  auf  55°  C.  erwärmtem  Zedernholzöl 
in  Paraffin  eingebettet  zu  werden.     Gefärbt  wurden  die  mit  Wasser 
aufgeklebten  Schnitte  entweder  mit  Eisenhämatoxylin  oder  Hämalaun, 
kombiniert  mit  Eosin  oder  Methylblau-Eosin.     Schließlich  wurden  die 


XXII,  2.  Referate.  291 

entwässerten  Schnitte    vor   dem  Balsameinschluß  mit  Lavendelöl  auf- 
gehellt. E.  Schoebel  (Neapel). 

Sala ,  G. ,   Beitrag   zum    Studium   der  feineren  Struktur 

der    Netzhaut    (Anat.  Anz.  Bd.  XXV,   1904,  No.  9,  10, 

p.  246—249  m.  2  Tfln.). 

Verf.    hat    die    Silbermethode    von   Cajal    angewendet.     Er  hat 

die    Netzhäute   4  bis  5  Tage   lang    in    einer    ein-  bis  l'öprozentigen 

Silbernitratlösung  im  Ofen  bei  37*'  gehalten,  dann  nach  Auswaschen 

in  der  von  Cajal  angegebenen  Weise  reduziert.    Die  Resultate  waren 

sehr  günstig.  Schiefferdecker  (Bonn). 


Meves,  F.,  Zur  Wirkung  von  Säure  auf  die  roten  Blut- 
körperchen der  Amphibien  (Anat.  Anz.  Bd.  XXV, 
1904,  No.  9,  10,  p.  240—245). 
Kneuttinger  hat  im  Jahre  1865  beschrieben,  daß  die  roten 
Blutkörperchen  des  Frosches  bei  der  Einwirkung  von  Säure  (7"2pro- 
zentige  Essigsäure)  sich  unter  Erhaltung  der  elliptischen  Scheiben- 
form, plötzlich  wie  mit  einem  Rucke  nach  allen  Richtungen  erweitern. 
Verf.  hat  bei  seinen  Blutuntersuchungen  auch  diese  Säureeinwirkung 
(7-  bis  lOprozentige  Essigsäure)  auf  die  roten  Blutkörperchen  der 
Amphibien  untersucht.  Er  verfuhr  in  der  Weise,  daß  er  einen 
Tropfen  frischen  Blutes  und  einen  Tropfen  einer  7-  bis  lOprozentigen 
Essigsäure  in  einiger  Entfernung  voneinander  auf  den  Objektträger 
setzte  und  beide  Tropfen  mit  einem  großen  Deckglase  zusammen 
eindeckte ,  so  daß  sie  sich  erst  dann  vereinigten.  Bringt  man  das 
Präparat  unter  das  Mikroskop,  so  ist  an  der  Berührungsstelle  selbst 
die  Säurewirkung  in  der  Regel  schon  abgelaufen.  Man  muß  in  einiger 
Entfernung  davon  beobachten,  um  noch  die  ersten  Veränderungen 
wahrzunehmen.  Verwendet  man  eine  Essigsäure ,  der  man  0*5  bis 
1  Prozent  Methylgrün  zugesetzt  hat,  so  sieht  man,  daß  der  Kern 
erst  im  Momente  des  Erblassens  beginnt  sich  mit  dem  Farbstoffe  zu 
imbibieren.  Schiefferdecker  {Bonn). 


19' 


292  Referate.  XXII,  2. 


C,   Bakterien, 

Heller,  0.,  Die  RoTHSERGERScbe  Neutr alrotr eaktiou  auf 
Gelatine  bei  37»  (Centralbl.  f.  Bakteriol.,  I.Abt.,  Orig. 
Bd.  XXXVIII,  H.  1). 
Verf.  unterwarf  den  Rothberger sehen  Neutralrotagar  und  die 
von  Oldbkop  angegebene  Verbesserung  dieses  Reaktionsnährbodens 
(0"3  Prozent  Agar)  einer  Prüfung  mit  einer  größeren  Anzahl  Bak- 
terien, die  der  Coligruppe  teils  angehören,  teils  nahestehen.  Er 
konnte  feststellen,  daß  die  Veränderung  des  Neutralrotfarbstofts  bei 
dem  Oldekop sehen  Nährboden  schneller  und  deutlicher  als  bei  dem 
Rothberger  sehen  Agar  eintritt,  jedoch  konnte  er  noch  bessere  Resul- 
tate erhalten,  wenn  er  der  gewöhnlichen  Laboratoriumsgelatine  in 
Reagensgläschen  vier  Tropfen  sterilisierter,  gesättigter,  wässeriger 
Lösung  von  Neutralrot  zusetzte  und  die  geimpften  Röhrchen  in  den 
Brustschrank  von  37**  stellte;  hierbei  trat  deutliche  Fluoreszenz 
schon  nach  6  Stunden  ein,  die  lange  bestehen  bleibt  und  in  ihrer 
Färbung  weder  von  dem  Nährboden  noch  durch  den  Luftsauerstoft' 
beeinträchtigt  wird.  W.  Hoff  mann  (Coblenz). 

Billlmann,  W.,  Über  das  Verhalten  des  im  Erdboden 
eingesäten  Typhusbazillus  (Zentralbl.  f.  Bakteriol., 
I.  Abt.,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  H.  4). 
Als  Fortsetzung  seiner  schon  früher  —  obige  Zeitschrift  Bd.  XXX 
Nr.  8  —  über  denselben  Gegenstand  mitgeteilten  Untersuchungsergeb- 
nisse berichtet  Verf.  über  Resultate,  die  er  bei  dem  P^insäen  von 
Typhusbazillen  in  vorher  sterilisierte  Erdproben  erhielt.  Er  benutzte 
hierzu  sogenannte  Saftflaschen,  die  zu  ein  Drittel  gefüllt,  jedesmal 
nur  50  g  Erdmaterial  enthielten.  Als  Erdproben  benutzte  er  ge- 
waschenen roten  Flußsand,  durchgesiebten  Humus  und  Bauschutt. 
Bei  der  Sterilisation  der  Erden  stieß  Verf.  auf  manche  Schwierigkeit, 
zumal  da  er  eine  sehr  widerstandsfähige,  sporentragende  Bakterien- 
art antraf,  die  auf  den  Platten  sehr  typhusähnlich  wuchs  und  hier- 
nach später  zu  Trugschlüssen  Veranlassung  geben  konnte.  In  ver- 
schieden großen  Zeitabschnitten  entnahm  er  Proben  und  versuchte, 
Typhusbazillen  zu  isolieren,  die  er  mit  besonderer  Berücksichtigung 
eventuell  eingetretener  Änderungen  in  ihrem  morphologischen,  kultu- 
rellen und  biologischen  Verhalten  prüfte. 


XXII,  2.  Referate.  293 

Er  konnte  die  eingesäten  Typliusbuzillen  in  den  zuletzt  staub- 
trocken gewordenen  Erden  nocli  nach   18  Monaten  nachweisen. 

Die  isolierten  Mikroorganismen  hatten  sich  morphologisch  und 
kulturell  nicht  verändert,  dagegen  war  eine  Differenz  in  ihrem  bio- 
logischen Verhalten  zu  verzeichnen,  indem  die  Agglutination  nicht 
mehr  in  einer  Verdünnung  von  1  :  10*000  bis  1  :  40'000,  sondern 
nur  noch  von   1  :  2500  eintrat. 

Nur  auf  den  Humusplatten  beobachtete  er  auch  kulturelle  Ver- 
änderungen, indem  von  diesen  Erdproben  zunächst  Kolonien  wuchsen, 
die  mehr  dem  Bacterium  coli  glichen,  aber  bei  weiteren  Übertragungen 
wieder  durchaus  die  Charakteristika  der  Typhusbazillen  zeigten. 

Die  drei  verschiedenen  Erdsorten  hatten  verschiedenen  Einfluß 
auf  die  Lebensdauer  der  Typhusbazillen,  indem  sie  in  dem  an  or- 
ganischem Nährmaterial  armen  Flußsand  früher  zugrunde  gingen,  als 
in  dem  Humus  und  dem  Bauschutt.         W.  Hoff  mann  (Coblenx). 

Gaehtgens,  W.,  Der  Bacillus  jasmino-cyaneus  und  der 
Bacillus  flavo-aromaticus,  zwei  neue  Farbstoff 
bildende  Bakterien  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.,  I.  Abt., 
Orig.  Bd.  XXXVm,  H.  2,  p.  129). 

Wie  auch  von  anderer  Seite  schon  öfters  erwähnt,  ist  die  Bak- 
terienflora bei  Darmkatarrhen,  im  besonderen  bei  Typhus  und  typhus- 
ähnlichen Erkrankungen  im  allgemeinen  eine  von  der  Norm  abwei- 
chende. In  dem  hygienischen  Institut  der  Universität  Straßburg 
wurden  in  letzter  Zeit  bei  der  Untersuchung  typhöser  Stuhlgänge 
zwei  besondere  Arten  gefunden,  die  sich  durch  Geruch  und  Farb- 
stofi'bildung  auszeichnen. 

Der  Verf.  liatt^.  diese  beiden  Bakterienarten  genauer  studiert. 
Die  eine,  B.  jasmino-cyaneus,  wurde  mittels  der  Ficker-Hoffmann- 
schen  Coft'einbouillon  isoliert.  Er  fand  sich  meist  in  Reinkultur,  wo- 
durch gegebenenfalls  der  Nachweis  der  Typhuserreger  sehr  erschwert 
wurde ;  abgesehen  von  der  Coft'einbouillon  fand  er  sich  auch  auf  den 
Malachitgrüuagarplatten  nach  Lentz-Tietz.  Diese  Bakterienart  steht 
dem  B.  pyocyaneus  sehr  nahe  und  unterscheidet  sich  hauptsächlich 
durch  ihren  ausgesprochenen  Jasmingeruch  ;  auch  die  Virulenz  für  Tiere 
ist  vorhanden.  Die  zweite  Bakterienart  ist  von  dem  Verf.  isoliert  und 
mit  dem  Namen  B.  flavo-aromaticus  belegt  worden;  sein  kulturelles 
Verhalten  beansprucht  kein  besonderes  Interesse,  jedoch  ist  er  nicht 
tierpathogen.  W.  Hoffmann  {Coblenz). 


294  Referate.  XXII,  2. 

Doerr,  R.,  Beobachtungen  über  bazilläre  Dysenterie 
(Zentralbl.  f.  Bakteriol.,  I.  Abt.,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  H.  4, 
p.  420). 

Verf.  hatte  Gelegenheit,  in  einem  Jahre  eine  Ruhrepidemie  in 
Krakau  und  in  Wien  bakteriologisch  zu  untersuchen.  Er  fand  bei 
der  ersten  den  SHiGA-KRusE-Dyseuteriebazillus,  während  es  ihm  in 
Wien  unter  29  Fällen  12  mal  gelang,  den  FLEXNERSchen  Dysenterie- 
erreger nachzuweisen.  Zur  Isolierung  benutzte  er  durchweg  den 
Drigalski  sehen  Typhusnährboden,  jedoch  zog  er  zur  Identifizierung 
noch  Traubenzuckeragar,  den  Barsiekow  sehen  Nährboden,  Kartoffeln, 
Bouillon,  Gelatine,  Peptonwasser  und  Lakmusmolke  und  schließlich 
hochwertiges  Immunserum  heran.  Im  allgemeinen  fand  er  völlige 
Übereinstimmung  der  einzelnen  Individuen,  nur  wichen  seine  isolierten 
SfflGA-KRUSE-Stäbchen  von  einem  ihm  von  Kruse  übersandten  Stamm 
betreffs  des  Wachstums  in  Bouillon  ab. 

Von  Interesse  ist  die  Beobachtung  des  Verf.,  die  auch  von 
anderer  Seite  schon  mitgeteilt  war,  daß  im  Anfang  der  Erkrankung 
die  Ruhrerreger  fast  in  Reinkultur  in  den  Stühlen  vorhanden  waren 
und  daß  die  üblichen  Darmbakterien,  besonders  Bacterium  coli,  numme- 
risch in  den  Hintergrund  traten.  W.  Hoff  mann  (Coblenz). 

Stroß,    0.,    Über     das    Wachstum    der    Gonokokken    auf 
serumh altigen    Nährböden    (Zentralbl.   f.    Bakteriol., 
I.  Abt.,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  H.  4,  p.  491). 
Nach    einer    umfassenden    Literaturübersicht    berichtet    Verf.    in 
eingehender    Weise    über    seine    Versuche,    die    das    quantitativ   ver- 
schiedene Wachstum  der  Gonokokken  auf  menschen-  und    tierserum- 
haltigen   Nährböden    erklären    sollten.     Es    sind    die    verschiedensten 
Variationen  im  Zusatz  einer   großen  Anzahl  von  Eiweißkörpern    vor- 
genommen    worden,     auf    die    im    einzelnen    hier    nicht    eingegangen 
werden   kann;    von   Interesse    dürfte    es    wohl    sein,    daß    Verf.    mit 
zentrifugierten    nnd    gewaschenen    roten    Blutkörperchen    regelmäßig 
die  Gonokokken  in    üppiger  Weise    zum  Wachstum    bringen    konnte, 
wenn  er  die  Blutkörperchen  im  Verhältnis  von   1  :  10  Agar  zusetzte. 
Im    übrigen    fand   Stross,    daß    die   verschiedenen  Tiersera   von 
Tier    zu    Tier    stark    schwankende    Eigenschaften    haben,    während 
Menscheusera  regelmäßige  Resultate  geben ;  bei  den  Tierseris  ist  noch 
hervorzuheben,  daß  sie,  in  kleiner  Menge  dem  Agar  zugesetzt,  wachs- 
tumfördernd wirken,  während  bei  Zusatz  größerer  Mengen  überhaupt 
kein  Wachstum  erfolgt.    Per  Verf.  schließt  hieraus,  daß  in  den  Tier- 


XXII,  2.  Referate.  295 

seris  für  Gonokokken  besondere  wachstumhemmende  Stoife  vorhanden 
sein'  müssen.  W.   Hoff  mann  {Coblenz). 

Dschunkowsky,  E.,  u.  Liihs,  S.,  A  p  p  a  r  a  t  zum  sterilen  B 1  u  t  - 
entnehmen  zwecks  Untersuchung  (Zentralbl.  f.  Bak- 
teriol.,  I.  Abt.,  Orig.    Bd.  XXXVIII.  H.  3,  p.  367j. 

\  erff.  verfolgten  die  Absicht,  einen  bequem  zu  handhabenden 
Apparat  zur  sterilen  Gewinnung  einer  kleineren  Menge  nichtdefibri- 
nierten  Blutes  und  dessen  bakteriologischer  Untersuchung  zu  kon- 
struieren und  empfehlen  zu  diesem  Zweck  folgenden  Apparat: 

In  der  Hauptsache  besteht  er  aus  einer  größeren  Flasche  (3 
bis  100  cc)  mit  langem  ausgezogenem  Halse,  auf  den  ein  gleich 
weites,  ca.  10  cc  langes  Gummirohr  gezogen  wird.  In  die  Flasche 
gießt  man  bis  zu  ein  Zehntel  des  Inhalts  Natrium  citricum,  um  eine 
Gerinnung  des  Blutes  zu  verhüten.  Auf  das  Gummirohr  kommt  be- 
hufs späteren  Verschlusses  ein  Quetschhahn,  sodann  wird  mittels 
einer  Spritze  die  Flasche  bis  zu  einem  gewissen  Grade  luftleer  ge- 
macht, der  Quetschhahn  geschlossen  und  au  das  freie  Ende  des 
Gummischlauches  wird  eine  Hohlnadel  angebracht,  die  durch  ein 
passendes  Reagensgläschen  umschlossen  werden  kann ;  in  dieser  Ver- 
fassung wird  der  ganze  Apparat  sterilisiert  und  ist  dann  jederzeit 
fertig  zum  Gebrauch.  W.  Hoff  mann  {Cohlenx). 

Kral,    F.,    tn^er    einfache    expeditive    Geißelfärbungs- 
methoden   (Verh.     d.     Ges.     deutsch.    Naturf.    u.    Ärzte, 
74.  Vers.  ^z.  Karlsbad,  IL  Teil,  2.  Hälfte  [erschienen  1903], 
p.  621). 
Um    auf   einem    einfachen    und    expeditiven    Wege   die    Geißeln 
aller  beweglichen  Bakterien  in  allen  Intensitätsabstufungen  zu  färben, 
ist    ausreichend    eine    1  ^/.^  Minuten    lange    P^inwirkung    einer    genau 
nach  LöFFLERS  Vorschrift  bereiteten   und  in   luftdicht  verschlossenen 
Gefäßen  aufbewahrten  Beize  mit  darauffolgender  Wasserspülung  und 
ebenso    langer  Färbung    mit   einprozentiger  wässeriger  Fuchsinlösung 
oder  5  bis  8  Sekunden  lauger  Färbung    mittels   Ziehl  sehen  Karbol- 
fuchsins unter  Wegfall  von  Alkoholentfärbung  und  Erwärmen.     Hier- 
bei   sind    vollkommen    niederschlagsfreie    Stellen    in    den    Präparaten 
weit  häufiger  als  bei  nach  andern  Methoden  behandelten  Präparaten. 
Wenn    man    die    Beizdauer    entsprechend    verlängert,    so    kann    man 
dieselbe   Beize    auch    nach    eingetretener    Abschwächung    ihres    Beiz- 
vermögens jahrelang  benutzen. 


296  Referate.  XXII,  2. 

Um  sofortige  Geißelfärbungen  vornehmen  zu  können ,  ohne  daß 
man  über  eine  ausgereifte  und  brauchbare  Beize  verfügt,  verfahre  man 
nach  folgendem  Recept :  Von  einer  Tanninfiiclisiulösung  aus  100  Teilen 
Tannin ,  8  Teilen  kristallisiertem  Fuchsin  und  400  Teilen  Wasser 
bringt  man  20  cc  in  ein  schmales  Becherglas  und  gießt  unter  leb- 
haftem Schwenken  dieser  Lösung  eine  Lösung  von .  5  g  Ferrosulfat 
in  20  cc  Wasser  hinzu.  Nachdem  man  das  Gemisch ,  bedeckt  mit 
einem  Uhrschälchen,  15  Minuten  der  Ruhe  überlassen  hat,  ist  sofort 
mit  der  Geißelfärbung  zu  beginnen ,  weil  das  Beizvermögen  dieser 
Beize  binnen  kurzer  Zeit  verloren  geht.  Die  Beizdauer  beträgt  eine 
bis  l^/o  Minuten;  man  färbt  nach  Spülung  mit  Wasser,  ohne  das 
Deckgläschen  zu  trocknen,  8  Sekunden  lang  mit  Karbolfuchsin,  gleich- 
falls ohne  Erwärmen  und  ohne  Entfärben  mit  Alkohol  nach  dem 
Beizen.  Beide  Methoden  sollen  sich  auch  sehr  gut  zu  einer  negativen 
Kapseldarstellung  eignen. 

Um  möglichst  normale  Geißellagerung  zu  erzielen,  läßt  mau  die 
Bakterienmasse  sich  spontan  ohne  mechanische  Intervention  in  Wasser, 
eventuell  bei  Brutwärme,  verteilen,  benetzt  eine  Seite  der  Deck- 
gläschen durch  Berühren  des  Flüssigkeitsspiegels ,  saugt  rasch  die 
überschüssige  Flüssigkeit  ab  und  läßt  die  horizontal  gelagerten  Deck- 
gläschen unter  einer  Glasglocke  trocknen. 

Wanger  in  {Halle  a.  S.). 

Kral,    F.,    Zur    Differenzierung    und    objektiven    Dar- 
stellung   des  Z  e  1 1  i  n  h  a  1 1  e  s   von  Hefe-  und  Spalt- 
pilzen (Verh.  d.  Ges.  deutsch,  Naturf.  u.  Ärzte,   74.  Vers, 
z.  Karlsbad,  IL  Teil,  2.  Hälfte  [erschienen  1903],  p.  621—622). 
Um    bei    der    mikrophotographischen    Darstellung    der    lebenden 
Hefe-  und  Bakterienzelle  auf  dem  Negativ  Zellkontur  und  -einschlüsse 
gut    differenziert    zu    erhalten ,    ist    es    erforderlich ,    die    Zellen    mit 
Reagentien    zu    behandeln ,  welche ,    ohne  ihre  Größenverhältnisse  zu 
beeinflussen,    verschiedene    Reaktionen    auf   Zellmembran,    Vakuolen, 
Fetttröpfchen ,    Körnehen ,    Plasma   etc.    auslösen.      Am    geeignetsten 
für  diesen  Zweck  hat  Verf.  die  Ernst  sehe  Vitalfärbung  mit  Neutral- 
rot   und    die    Glykogenreaktion    mittels    LuGOLScher    Lösung,    beide 
einzeln  oder  miteinander  kombiniert,  befunden.     Bringt  man  Bakterien, 
Hefen,  Eumyceten  und  Algen  in  Wasser  auf  das  Deckglas  und  fügt 
ein  kleines  Tröpfchen  Jodjodkaliumlösung  zu,  so  weisen  sie  in  ihren 
einzelnen  Zellbestandteilen,  je  nach  der  Beschaffenheit  derselben,  die 
gelbe  Eiweiß-,  eventuell  auch  die  braunrote  Glykogen-  und  die  blaue 


XXII,  2.  Referate.  297 

Granulosereaktiou  auf,  also  Farben,  welche  sich  vorzüglich  zur  Mikro- 
photographie eignen.  —  Neben  Neutralrot  hat  Verf.  zur  Vitalfärbung 
auch  Methylenblau ,  Safranin  und  Thionin  verwendet.  Die  besten 
Resultate  erzielte  er  mit  Neutralrot  an  Hefepilzen;  die  Einschlüsse 
der  Zellen  und  ihrer  Vakuolen  weisen  bei  der  Behandlung  mit  Spuren 
von  Neutralrot  einen  außerordentlichen  Reichtum  an  den  verschieden- 
sten Farbtönen  auf.  Setzt  man  zu  einem  solchen  Präparate  ein 
Tröpfchen  Lugol scher  Lösung  zu,  so  vollzieht  sich  ein  plötzlicher 
Farbenwechsel  des  in  allen  Schattierungen  von  Rot  gefärbten  Zell- 
inhaltes in  Gelb  bis  Braun.  Einzelne  dunkelrote  Körnchen  und  Zellen 
verändern  ihre  Farbe  nicht ;  dagegen  können  einzelne  Zellteile  die 
blaue  Granulosereaktion  annehmen,  andere  farblos  bleiben.  Bakterien, 
die  vorher  gleichmäßig  rot  gefärbt  waren ,  können  nun  braun  bis 
dunkelbrau,  fast  schwarz  erscheinen.  Es  treten  demnach  Farbreak- 
tionen auf,  wie  sie  für  die  Mikrophotographie  nicht  erwünschter  sein 
könnten.  Man  erhält  von  solchen  Präparaten  schon  ohne  Lichtfilter 
und  auf  nicht  orthochromatischen  Platten  gute  Resultate,  kaum  noch 
mit  kurzwelligem  Licht  (Zettnow-  oder  Ferricyankaliumfilter)  und 
orthochromatischen  Platten.  Wangerin  {Halle  a.  S.). 


D.   Botanisches, 

Zacliarias ,  E. ,    Über    die    C  y  a  n  o  p  h  y  c  e  e  n    (Mitt.  a,  d.  botan. 

Staatsinstituten  in  Hamburg,   3.  Beih.  z.  Jahrb.   d.  Hamburg. 

wissenschaftl.  Anstalten  1904,  p.  47). 
Die  Arbeit  bringt  in  erster  Linie  eine  ausführliche  kritische 
Besprechung  der  Kohl  sehen  Bücher  über  Cyanophyceeu.  Die  neuen 
eigenen  Versuche  des  Verf.  beziehen  sich  hauptsächlich  auf  das 
mikrochemische  Verhalten  der  Cyanophycinköruer  und  ihre  Löslich- 
keit in  verdünnten  Säuren.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Claussen ,  P. ,  Zur  Entwicklung  der  Ascomyceten.  Bou- 
DiERA  (Botan.  Zeitg.  Bd.LXIH,  1905,  Abt.  1,  H.  1,  2,  p.  1). 

Zum  Fixieren  des  Materials  benutzte  Verf.  folgende  Flüssig- 
keiten : 

1)  Schwächere  FLEMMiNGSche  Flüssigkeit:  Dauer  der  Fixierung 
10  Minuten,  mehrstündiges  Auswaschen  in  fließendem  Wasser.    Über- 


298  Keferate.  XXII,  2. 

tragung-  in  35prozeutigen  Alkohol,  Härtung  in  üblicher  Weise.    Fixiert 
die  Asci  gut  und  die  schraubigen  luitialorgane. 

2)  MERKELSche  Flüssigkeit:  Dauer  der  Fixierung  etwa  2  Mi- 
nuten, mehrmaliges  Auswaschen  in  öOprozentigem  Alkohol.  Härtung. 
Fixiert  die  Initialorgane  gut. 

3)  VOM  RATHSche  Flüssigkeit  II,  1  -\-  20.  Dauer  der  Fixierung 
2  Minuten ,  gründliches  Auswaschen  mit  öOprozentigem  Alkohol, 
Härtung. 

Bei  der  Einbettung  in  Paraffin  verfährt  man  nach  den  üblichen 
Methoden,  doch  sind  allzu  hohe  Temperaturen  (über  55^  C.)  zu 
meiden.  Schwierigkeiten  macht  die  Färbung  der  Kerne  in  den 
schraubigen  Initialorganen ,  da  das  Plasma  die  Farbstoffe  so  stark 
speichert.  Die  besten  Resultate  bei  Untersuchung  der  Schrauben- 
kerne liefert  Flemmings  Safranin-Gentianaviolett-Orange  G -Verfahren. 
Heidenhains  Häraatoxylin- Eisenalaun  gibt  ebenfalls  gute  Resultate, 
wenn  man  mit  Eosin-Nelkenöl  gegenfärbt ;  die  Ascuskerne  sind  leicht 
zu  färben,  —  am  besten  mit  P^eemmings  Dreifarbengemisch. 

Hat  man  nach  Flemming  oder  Merkel  fixiert ,  so  färbe  man 
mit  Safranin-Gentianaviolett-Orange  G,  nach  Fixierung  in  vom  Rath- 
scher  Flüssigkeit  mit  Heidenhains  Hämatoxylin. 

Küster  {Halle  a.  S.). 

Senft ,  E. ,  Über  den  mikrochemischen  Z  u  c  k  e  r  n  a  c  h  w  e  i  s 
durch    essigsaures     Phenylhydrazin    (Sitzber.    d . 
Akad.    Wiss.    Wien,  math.-naturw.  Kl.,    Bd.   CXIII,    1904, 
Abt.   1,  p.   3). 
Verf.    modifiziert    die    FiscHERSche  Phenylhydrazinmethode    vor 
allem  dadurch,   daß  er  beide  Komponenten  des  Reagens,    das    salz- 
saure   Phenylhydrazin    wie    das    essigsaure    Natrium    in    Glyzerin   im 
Verhältnis    von    1  :  10    löst.     Beide    Vei'bindungen    sind    in    Glyzerin 
leicht    löslich.    —    Die  Lösungen   sind  jahrelang  haltbar;    das  Nach- 
dunkeln   der    Phenylhydrazinlösung    beeinträchtigt    die    Reaktion    in 
keiner  Weise. 

Verf.  benutzt  keine  in  Wasser  aufgeweichten  Schnitte  —  wegen 
der  Löslichkeit  des  Zuckers  — ,  sondern  frisches  Material,  Alkohol- 
oder Glyzerinmaterial  oder  bei  trockenen  Objekten  —  Drogueu  etc.  — 
unaufge weichte  Schnitte.  Auf  dem  Objektträger  wird  von  beiden 
Lösungen  je  ein  Tropfen  aufgetragen ,  die  beiden  Tropfen  gut  ver- 
mischt und  die  Schnitte  hineingelegt.  Die  Präparate  werden  alsdann 
am  siedenden  Wasserbad    eine  halbe  Stunde    erwärmt.     Schon   beim 


XXII,  2.  Referate.  299 

Abkühlen  kann  man  gewöhnlich  unter  dem  Mikroskop  sehr  schöne 
Garben  mid  Büschel  der  Osazonkristalle  wahrnehmen.  —  Das  Er- 
wärmen der  Schnitte  dient  zumeist  nur  zur  Beschleunigung  der  Reak- 
tion ;  in  vielen  Fällen  tritt  auch  in  der  Kälte  schon  die  gleiche 
Reaktion  ein,  —  allerdings  entstehen  nur  kleine  Kristallbüschel  und 
vorzugsweise  Sphärokristalle.  Au  Schnitten ,  welche  nicht  erhitzt 
worden  sind ,  kann  man  auch  die  Lokalisation  des  Zuckergehaltes 
studieren.  —  Je  wasserreicher  die  untersuchten  Gewebe  sind ,  um 
so  schöner  fallen  die  Osazonkristalle  aus. 

Die  Weiterbehandlung  der  nach  des  Verf.  Methode  untersuchten 
Schnitte  macht  keine  besonderen  Schwierigkeiten ,  nur  ist  die  An- 
wendung von  Alkohol  und  alkoholischen  Lösungen  zu  vermeiden ; 
daher  ist  auch  Kanadabalsam  ausgeschlossen.  Gegen  SOprozentige 
Kalilauge  sind  die  Osazonkristalle  widerstandsfähig,  auch  gegen  60pro- 
zentige  Chloralhydratlösung  hinreichend  resistent.  Zur  Anfertigung 
von   Dauerpräparaten   verwende    mau   Glyzerin   und  Glyzeringelatine. 

Küster  {Halle  a.  S.). 

Albanese ,   N. ,    Ein    neuer    Fall    von    E  n  d  o  t  r  o  p  i  s  m  u  s    des 
Pollenschlauches    und    abnormer    Embryosack- 
entwicklung bei  Sibbaldia  procujnbens  L.  (Sitzber. 
d.  Akad.  Wiss.   Wien,  math.-naturw.  Kl.,  Bd.  CXIII,   1904, 
Abt.   1,  p.  653). 
Verf.  färbt    die    Präparate    mit    Hämatoxylin    nach   Heidenhain, 
um    den  Verlauf   des    Pollenschlauches    im  Gewebe   des  Gynaeceums 
deutlich  zu  machen.  —   Safranin  färbt  die  Kerne  des   Embryosackes 
und  besonders  die  Nukleolen  kräftig.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Ernst,  A.,  Zur  Kenntnis  des  Z  e  1 1  i  n  h  a  1 1  e  s  von  D  e  r  b  e  s  i  a 
(Flora  Bd.  XCIII,  1904,  p.  514). 
Die  von  ihm  gefundenen  Eiweißkristalloide  im  Zellinhalt  von 
Derbesia  prüfte  Verf.  mit  verschiedenen  Reagentieu.  Sie  färben  sich 
mit  Jod  etc.  und  nehmen  Eosin,  Säurefuchsin,  Safranin,  Methylen- 
blau, Methylviolett  u.  a.  reichlich  auf.  Werden  kristalloidhaltige 
Schläuche  in  einer  wässerigen  Tanninlösung  gebeizt  und  nach  sorg- 
fältigem Waschen  in  Wasser  in  einprozentige  Osmiumsäure  gebracht, 
so  färben  sich  die  Kristalloide  braun,  Beizung  mit  25prozentiger 
Tanuinlösung  und  Behandlung  des  ausgewaschenen  Materials  mit 
Eisensulfat  bedingt  tiefblaue  bis  schwarze  Färbung. 

Küster  {Halle  a.  S.). 


300  Referate.  XXII,  2. 

Woycicki,  Z.,    Einige  neue  Beiträge  zur  Entwicklungs- 
geschichte    von     B  a  s  i  cl  i  0  b  0  1  u  s     R  a  n  a  r  u  m     (Flora 
Bd.  XCIII,   1904,  p.  87). 
Gute  Resultate  erzielte  Verf.  durch  Fixierung  mit  Merkel  scher 
oder  Kaiser  scher  Flüssigkeit.     Gefärbt  wurde   mit  Hämatoxylin  nach 
Heidenhain  oder  Delafield.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Björkeiiheim,  C.  G.,    Beiträge    zur    Kenntnis    des    Pilzes 
in    den    W  u  r z e  1  a n s  c h  w  e  1 1 u n g e  n    von    A 1 n u s     i n - 
cana  (Zeitschr.  f.  Pflanzenkrankh.  Bd.  XIV,   1904,  p.  128). 
Verf.    fixierte    sein    Material    in    Merkel  scher    Flüssigkeit    und 
brachte    es   nach   dem  Auswaschen   in  Alkohol  steigender  Konzentra- 
tion   bis    98  Prozent    zur    dauernden    Aufbewahrung.      Die    Schnitte 
wurden    mit    Ziehl schein    Karbolfuchsin    gefärbt.  —    Verf.  empfiehlt 
besonders  Freihaudschnitte    an    fixiertem   und   frischem  Material  aus- 
zuführen.    Den  Zerfall  der  Hyphen  in  einzelne  stäbchenartige  Glieder 
konnte  Verf.  bei  Untersuchung  nicht  eingebetteten  Materials  nie  kon- 
statieren ,    vielleicht    handelt  es  sich    bei  dem  Zerfall  um  eine  Folge 
der  Einbettung  (Wasserentziehung).  Küster  [Halle  a.   S.). 

Michniewicz,  H.   R. ,  Über  Plasmodesmen  in  den  Kotyle- 
donen   von   Lupin  US-Arten    und    ihre    Beziehung 
zum    interzellularen    Plasma    (Österr.    Bot.  Zeitschr. 
Bd.  LIV,   1904,  p.    165). 
Um    in    den   Zellwäudeu    der  Kotyledonen  von  Lupinus  angusti- 
folius  die  Plasmodesmen  sichtbar  zu  machen,  kocht  Verf.  angeschnittene 
Kotyledonen    einige  Minuten    mit    absolutem   Alkohol.     Dann    werden 
Schnitte     aus     den     oberflächlichen,     völlig    entwässerten    Teilen    an- 
gefertigt und  in  konzentrierte  Chlorzinkjodlösung  übertragen.^ 

Küster  [Halle  a.  S.). 


1)  Nach  Kny  (Ber.  d.  deutsch.  Bot.  Ges.  Bd.  XXII,  1904,  p.  347) 
handelt  es  sich  nur  um  radikale  Wandstrukturen ,  nicht  um  Plasmo- 
dermen. 


XXU,  2.  Referate.  301 


B,    Mineralogisch  -  Petrographisches, 

Quincke,  G.,  Doppelbrecluing  der  Gallerte  beim  Auf- 
quellen und  Schrumpf  e  n  (Sitzber.  d.  k.  preuß.  Akad. 
d.  Wiss.  1904,  p.  258—265). 
Der  Verf.  nimmt  bei  doppeltbreehenden  Gallerten  das  Vor- 
handensein von  unsichtbaren  Schaumzellen  an,  deren  Menge  schwan- 
ken und  daher  auch  einen  von  Stelle  zu  Stelle  wechselnden  Grad 
der  Doppelbrechung  innerhalb  einer  Gallertmasse  erzeugen  kann. 
Je  nachdem  ein  Aufquellen  oder  Schrumpfen  statttindet,  ist  an  der 
Außenseite  der  Gallerte  der  Charakter  der  Doppelbrechung  positiv 
oder  negativ,  gegen  das  Innere  zu  kehrt  sich  das  Vorzeichen  um. 
Ähnlich  den  festen  Gallerten  verhalten  sich  auch  klebrige  Flüssig- 
keiten, doch  ist  bei  letzteren  die  Doppelbrechung  nur  vorübergehend, 
die  Relaxationszeit  der  diktierten  Flüssigkeit  also  meist  nur  kurz, 
während  starre  Gallerten  festgewordene  Schaumwände  mit  unendlich 
großer  Relaxationszeit  haben  sollen.  Die  Richtung  der  größten 
Quellung  und  Schrumpfung  fällt  mit  der  Richtung  der  größten  Dila- 
tation der  klebrigen  Schaumwände  oder  der  optischen  Achse  der 
Doppelbrechung  an  den  verschiedenen  Stellen  einer  flüssigen  Gallerte 

E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 

Quincke ,  G. ,  Über  Ausbreitung  und  E  x  t  e  n  s  i  o  n  s  k  r  a  f  t 
(Ann.  d.  Phys.  [4]  XV,  1904,  p.  55—60). 
Der  Verf.  weist  auf  den  Zusammenhang  seiner  Theorien  über 
Tropfen-  und  Schaumbildung  (vgl.  d.  vor.  Ref.)  mit  seinen  früheren 
Arbeiten  über  Kapillarität  und  Oberflächenspannung  liin;  sodann 
wendet  sich  derselbe  besonders  gegen  eine  Arbeit  von  G.  van  der 
Mensbuugghe  ,  welcher  bestritten  hatte ,  daß  durch  periodische  Aus- 
breitung von  Seifenlösung  an  der  Grenzfläche  von  Ol  und  Wasser 
die  freiwillige  Bildung  von  Ölemulsionen  herbeigeführt  werden  könne. 
Quincke  weist  nach ,  daß  die  Extensionskraft ,  welche  nach  Mens- 
BRUGGHES  Meinung  das  Öl  in  kleine  Tröpfchen  zerreiße,  lücht  nach- 
weisbar sei,  da  die  Ausbreitung  noch  nicht  während  der  chemischen 
Wirkung  erfolge,  sondern  oft  erst  30  Sekunden  später.  * 

E.  Sormnerfeldt  {Tübingen). 


302  Referate.  XXII,  2. 

Hlawatsch ,  C,    Bestimmung    der    Doppelbrechung    für 
verschiedene    Farben     an     einigen    Mineralien 
(TscHERMAKS  miueral.  u.  petr.  Mitt.  Bd.  XXIII,   1904,  p.  415 
bis  450  m.   3  Fig.). 
Die  Mineralien  Äkermannit ,  Melilith ,  Gehlenit  zeigen  eine  ähn- 
liche Abhängigkeit  der  Interferenzfarben  von  der  Dispersion  wie  der 
vom  Verf.  nach  dieser  Richtung  bereits  früher  untersuchte  Vesuvian. 
Teils    an  natürlichem  Vorkommen ,    teils  an  Hüttenprodukten  werden 
bei  den  drei  erstgenannten  Mineralien  mittels  Polarisationsmikroskopes 
und  Babinet sehen  Kondensators  die  optischen  Eigenschaften  bestimmt, 
wobei    sich    zeigt,    daß    die    zweigliederige    CAucHYSche  Dispersions- 
formel diesen  Erscheinungen  der  Dispersion  der  Doppelbrechung  nicht 
genügt.  E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 

Braun ,  F.,    Einige  Beobachtungen,  die  sich  auf  künst- 
liche Doppelbrechung  beziehen  (Ann.  d.  Phys.  [4] 
XVI,   1905,  p.  278—281   m.   1   Fig.). 
Der  Verf.  beschreibt  mehrere  Verfahren,  um  durch  Übereinander- 
schichten    von    Gelatine-    oder   Kollodiumhäutchen    die    optischen   Er- 
scheinungen ein-  und  zweiachsiger  Kristalle  nachzuahmen.    Neu  sind 
sind  besonders  die  Beobachtungen,  welche  sich  auf  die  Ausscheidung 
mikroskopischer  Teilchen  beim  Einlegen  von  Gelatineplatten  in  Methyl- 
alkohol   und    auf   die    hierbei    entstehende  Doppelbrechung  beziehen; 
dieselbe    verschwindet    nur    zum    Teil    beim    Wiedereintrocknen    der 
Methylalkoholpräparate.  E.   Sommerfeldt  {Tühhigen). 

Braun,  F.,  Herstellung  doppelt  brechender  Körper  aus 
isotropen  Bestandteilen   (Physik.  Zeitschr.  V,   1904, 
p.  199  —  203). 
Der  Verf.  weist    zunächst    theoretisch    nach ,    daß  ein  Gemenge 
zweier    einzeln    isotroper  Medien  doppelt  brechend  sein  kann ,    wenn 
die  Korngröße    des  Gemenges   so  klein  ist,    daß  es  als  homogen  im 
Vergleich  zur  Wellenlänge  aufgefaßt  werden  darf.     Notwendig  hier- 
für   ist ,    daß    die  Dielektrizitätskonstanten    der  sich  durchdringenden 
Medien    verschieden    sind.     Für    elektrische  Wellen    weist    der  Verf. 
auch  experimentell  diese  Entstehungsursache  der  Doppelbrechung  nach 
und    vermutet    daher,    daß    in    vielen    Fällen    auch    optische  Doppel- 
brechungserscheinungeu    (z.  B.    bei    Mischkristallen    die    sogenannten 
optischen    Anomalien)    aus    dem    gleichen    Grunde    entstanden    sein 
können.  E.  Sommerfeldt  {Tübinge7i). 


XXII,  2.  Referate.  303 

Hinden,  F.,    Neue  Reaktionen    zur  Unterscheidung  von 
Caicit  und  Dolomit  (Verli.  d.  natnrforsch.  Ges.  in  Basel 
Bd.  XV  [2],   1904,  p.  201—202). 
Als    mikrochemische  Reaktion  zur  Unterscheidung-  von  Kalkspat 
und  Dolomit    empfiehlt    der  Verf.   die  Behandlung   mit    lOprozentiger 
Eisenchloridlösung ,    wobei  letzterer  unverändert  bleibt ,    ersterer  hin- 
gegen   sich    rotbraun    färbt.      Auch    die    Lösungen    von    Bleiazetat, 
Kupfersulfat,  Quecksilberchlorid  werden  hinsichtlich  ihrer  Einwirkung 
auf  beide  Mineralien  geprüft.  ^    Sommerfddt  {Tübingen). 

* 
Thugutt,    St.  J.,    Fritz  II i n d e n s    „N eue  Reaktionen    zur 
Unterscheidung    von   Caicit    und    Dolomit"    (Zen- 
tralbl.  f.  Min.  Geol.  Pal.   1905,  p.   265—266). 
Der  Verf.  weist    darauf   hin,    daß    bereits   vor  Hinden  (vgl.  d. 
vorige    Ref.)    sehr    ähnliche    und    zum    Teil    noch    vollständiger    aus- 
gearbeitete  Unterscheidungsreaktionen   zwischen    Kalkspat    imd  Dolo- 
mit von  Lemberg  beschrieben  worden  sind. 

E.   Sommerfeldt  {Tübingen). 

Lehmann,  0.,  Flüssige  Misch-  und  Schichtkristalle  (Ann. 
d.  Phys.  [4]  XVI,  1905,  p.  160—165). 
Es  wurde  ein  neuer  Repräsentant  der  kleinen  Klasse  organischer 
Körper  aufgefunden ,  welche  eine  flüssige  doppeltbrechende  Modi- 
fikation aufweisen  (vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904,  p.  104).  Be- 
sonders interessante  Eigenschaften  zeigten  die  flüssig  -  kristallinen 
Mischungen  dieses  Körpers,  des  Anisaldazins,  mit  Methoxj^zimtsäure, 
und  zwar  ließen  sich  bei  geeignetem  Mischungsverhältnis  starke  und 
mit  farbenprächtigen  Erscheinungen  verbundene  Schwankungen  der 
Interferenzfarben  mikroskopisch  nachweisen,  welche  an  die  plötzlichen 
Umwandlungen  polymorplier  Modifikationen  erinnerten.  Jedoch  scheinen 
nicht  solche ,  sondern  nur  Schichtenbildungen  wirklich  statt- 
zufinden, indem  die  beiden  Substanzen  in  einem  beschränkten  Ver- 
hältnis miteinander  mischbar  sind  und  die  sich  übereinander  lagernden 
dünnen  Schichten  ihrer  chemischen  Zusammensetzung  nach  den  End- 
punkten des  Lückeniutervalls  entsprechen.  Von  Interesse  sind  auch 
die  mikroskopischen  Beobachtungen  des  Verf.  über  Ätzfiguren,  welche 
sich  an  den  flachgedrückten  Tropfen  erkennen  lassen. 

E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 


Q 


04  Referate.  XXII,  2. 


Richards,  Th.   W.,   a.  Wells,  R.   Cl.,   The   Nephelometer, 

au    Instrument    for    Detecting    and    Estimating 

opalasceut  Precipitations    (Amer.   Chem.  Journ.  vol. 

XXXI,   1904,  p.   235—243). 

Um  zu  entscheiden,  ob  in  einer  Flüssigkeit  feine  Niederschläge 

suspendiert  sind ,    bestimmt  der  Verf.   die  Intensität  des  reflektierten 

Anteils  eines  auffallenden  Lichtstrahles ,    dessen  Lichtstärke  konstant 

bleibt.     Dadurch  wird  zugleich  ein  quantitatives  Maß  für  die  Menge 

dieser ,    zum    Teil    submikroskopischen    Teilchen    gewonnen ,    da    die 

Intensität    des    reflektierten    Lichtes    dieser    Menge    proportional    sein 

muß.     Die  zu  bestimmende  Lösung  und   die  Vergleichslösung  müssen, 

wenn  die  quantitativen  Angaben  genau  sein  sollen,  vollkommen  gleichen 

Versuchsbediugungen  unterworfen  werden. 

E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 

Donau ,    Über    die  Färbung    der  B  o  r  a  x  p  e  r  1  e    durch   kol- 
loidal   gelöste    Edelmetalle    (Monatshefte    f.    Chem. 
Bd.  XXV,   1904,  p.  913—918). 
Der    Verf.    gibt    einige    Bestimmungsarten   der    Edelmetalle    an, 
welche    die  bisherigen  mikrochemischen  Methoden  an  Empfindlichkeit 
wesentlich  übertreffen  und  auf  den  Färbungen  beruhen,    welche  kol- 
loidal verteilte  Spuren  dieser  Metalle  in  der  Boraxperle  verursachen. 
Von  besonderem  Interesse  sind  die  vergleichenden  Angaben  des  Verf. 
über  die  Empfindlichkeit  der  verschiedenen  Mikroreaktionen  der  Edel- 
metalle.    Es  lassen  sich  z.  B.  beim  Gold  mikrochemisch  durch  Zinn- 
chlorür  nur  2   spektraaualytisch  noch  0,13   durch  kolloidale  Färbung 
aber  sogar  0,002  Mikromilligramme  nachweisen. 

E.   Sommerfeldt  {Tübingen). 

Brauns,  R.,  Mineralogie.  3.  Aufl.,  Leipzig  (J.  G.  Göschens  Ver- 
lag) 1905;  134  pp.,  132  Figg. 
Die  ^Entwicklung  der  Mineralogie  während  der  letzten  Jahre  ist 
in  der  neuen  Auflage  des  Büchleins  nicht  unberücksichtigt  geblieben, 
sondern  die  Seitenzahl  sowie  auch  die  Textfiguren  wurden  im  Ver- 
gleich zur  zweiten  Auflage  vermehrt  (diese  um  zwei,  jene  um  vier). 
Die  in  der  Kürze  ihren  Vorzug  suchende  Tendenz  der  „Göschen- 
Bändchen"  ist  in  zweckmäßiger  Weise  mit  dem  Bestreben,  möglichste 
Vollständigkeit  zu  erreichen,  vom  Verf.  vereinigt  worden. 

E.  Soynmerfeldt  {Tübingen). 


XXII,  2.  Referate.  305 

Behrens,     H. ,     Reaktionen    für    den    mikrochemischen 
Nachweis  organischer  Basen  (Zeitschr.  f.  anal.  Chem. 
Bd.  XXXXIII,   1904,  p.  333—355). 
Im  Anschhiß    an  das  dritte  Heft  seiner  „Mikrochemischen  Ana- 
lyse"   teilt    der  Verf.    zunächst   Reaktionen    zur    Unterscheidung   der 
einzelnen  C4ruppen  organischer  Basen  mit,    z.  B.  zur  Unterscheidung 
von  aliphatischen  und  aromatischen,  sowie  von  primären,  sekundären 
und  tertiären  Basen.    Sodann  wird  auf  einzelne  Gruppen  im  speziellen 
eingegangen,    und    zwar    auf   das  Anilin    und   seine  Homologen,    die 
Naphtylamine,   auf  die  Amidophenole,  die  azetylierten  Basen,  auf  die 
Benz3daraine,  die  Diamine,  Phenylhydrazine,  Naphtylhydrazine,  ferner 
auf  eine  Reihe  von  heterozyklischen  Basen  und  Alkaloiden. 

,  E.  Sommer felcU  {Tübingen). 

Vaniuo ,    S. ,    u.    Hartl ,    F. ,     Über    neue    B  i  1  d  u  n  g  s  w  e  i  s  e  n 
kolloidaler    Lösungen    und    das    Verhalten    der- 
selben  gegen  Baryumsulfat  (Ber.  d.    deutsch,  chem. 
Ges.  Bd.  XXXVII,   1904,  p.   3620—362.3). 
Die  Verf.    beschreiben    eine  Methode ,    um    durch  Schütteln   mit 
Baryumsulfat   zu  entscheiden ,    ob  die  Färbung  einer  Flüssigkeit  von 
einer  gelösten  oder  von  einer  submikroskopisch  verteilten  kolloidalen 
Substanz  herrührt.  ^    Sommerfeldt  {Tübingen). 

Bredi§-,  G.,  u.  Scliukowsky,  G.  V.,  Prüfung  der  Natur  der 
flüssigen  Kristalle    mittels    elektrischer  K  a  t  a  - 
phorese  (Ber.  d.  deutsch,  chem.  Ges.,  Bd.  XXXVII,   1904, 
p.   3419—3425). 
Um    die  Frage    zu    entscheiden ,    ob  die  flüssigen  Kristalle  sub- 
mikroskopische Suspensionen  enthalten,  bedienten  sich  die  Verf.  einer 
elektrochemischen    Methode.      Durch    Wanderung    der    suspendierten 
Teilchen    im     elektrischen    Strome     können    kolloidale    Flüssigkeiten, 
Emulsionen    u.   dgl.    meistens    geklärt    werden ;    es    erwies    sich  aber 
in  allen  untersuchten  Fällen  (p-Azoxyanisol ,  Anisaldizin,   Cholesterin- 
propionat,    Kondensationsprodukte     von    Benzaldahyd     mit    Benzidin, 
ferner  von  Toluylaldehyd  mit  Benzidin)  eine  Trübungsabnahme  nach 
dieser  Methode  als  undurchfühlbar,  so  daß  es  auch  hiernach  naheliegt, 
die  Körper  als  einheitliche  Produkte  aufzufassen. 

E.   Sommerfeldt  {Tübingen). 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  2.  20 


306  Referate.  XXII,  2. 

Braun,  F.,    Über    metallische    Gi  tte  rpolarisatioii,    ins- 
besondere ihre  Anwendung-  zur  Deutung  mikro- 
skopischer   Präparate  (Ann.   d.  Phys.   [4],    Bd.  XYI, 
1905,  p.   238—278). 
Braun ,  F. ,    Der   HertzscIic    Gitter versucli    im    Gebiete 
der  sichtbaren  Strahlung  (Sitzber.   d.  Akad.  d.  Wiss. 
Berlin,   math.-physik.  KL,    1904,  p.    154). 
Zur  Erklärung  des  Pleochroismus  bei  manchen  Färbungen,  Gläsern, 
isomorphen  Mischkristallen  und  anderen  „festen  Lösungen"   hatte   der 
Verf.  bereits  früher  die  Hypothese  aufgestellt,  daß  die  Partikeln  des 
„gelösten"    Stoftes    in    ähnlicher    Weise    wie    ein    submikroskopisches 
Hertz  sches    Gitter    in    dem    festen    Lösungsmittel    angeordnet    seien. 
Bisher    war    diese  Hypothese  nur  durch  Beobachtungen  im    durch- 
gehe n  d  e  n    Licht    geprüft ,    nunmehr  jedoch  geht  der  Verf.  zu  den 
besonders  interessanten  Folgerungen,    welche  sich   für  das    reflek- 
tierte   Licht    aus    seiner    Annahme    ergeben ,    über.      Vorzugsweise 
wurden  die  nach  einer  Methode  Ambronns  hergestellten  Goldfärbungen 
(z.  B.  bei  Pinus  silvestris  ,    Nesselfasern  u.   a.)  untersucht.     Die  Be- 
schreibung   der    Versuchsanordnung    enthält    bemerkenswerte    Einzel- 
heiten über  die  Anwendung  des  neuen  Zelss  sehen  Vertikalilluminators 
für  starke  Vergrößerungen. 

Es  zeigte  sich,  daß  die  Gitterstäbe  in  den  Gefäßwänden  liegen 
und  denselben  parallel  sind ,  daß  ferner  in  den  Gittern  für  alle 
Wellenlängen  eine  Absorption  durch  Joule  sehe  Wärme  stattfindet. 
Auch  für  Metallzerstäubungen  wurde  die  Gitterstruktur  festgestellt, 
indem  z.  B.  bei  zerstörtem  Platin  die  Durchlaßfarbe  gelblich  oder 
grünlich-bläulich  erschien ,  je  nachdem  die  Lichtschwingungen  quer 
oder  parallel  zu  den  Gitterstäbchen  erfolgten.  Auch  hier  bildeten 
— ■  ebenso  wie  bei  den  imprägnierten  Pflanzenfasern  —  die  Er- 
scheinungen im  reflektierten  Licht  die  Ergänzung  zu  denjenigen  im 
durchfallenden  Licht.  E.   Sonimerfeldt  {Tübingen). 

Becke ,  F. ,  Optische  U  n  t  e  r  s  u  c  h  u  n  g  s  m  e  t  h  o  d  e  n  (Denkschr. 

d.  math.-naturw.  Kl.  d.  k.  Akad.  d.  Wiss.,  Wien,  Bd.  LXXV, 

1904,  p.  55—95). 
Zur  mikroskopischen  Bestimmung  der  Mineralien  hat  der  Verf. 
eine  Reihe  von  Methoden  ausgearbeitet,  welche  auf  den  Polarisations- 
erscheinungen im  parallelen  und  konvergenten  Licht  basieren,  teil- 
weise auch  die  Benutzung  von  Hilfskristallplatten  (Gipsblättchen, 
BABiNET-Kompensator  etc.)  bedingen.     Dieselben  werden  in  einer  für 


XXII,  2.  Referate.  307 

die  Praxis  sehr  zweckmäßigen  Art  beschrieben  und  auch  theoretisch 
auf  eine  neue  Weise  behandelt,  nämlich  unter  Zuhilfenahme  der  vom 
Verf.  unter  der  Bezeichnung  „Skiodromen"  eingeführten  Kurven. 
Es  leiten  sich  diese  Kurven  von  den  Kegeln  ab,  welche  der  Forde- 
rung genügen ,  daß  die  Lichtgeschwindigkeit  für  alle  in  ihrer  Ober- 
fläche gelegenen  Richtungen  gleich  ist;  die  Skiodromenmethode  läßt 
die  Haupttypen  der  Isogyren  besonders  einfach  erkennen.  Auch  die 
Methode  des  Verf. ,  den  Winkel  der  optischen  Achsen  mittels  eines 
auf  das  Mikroskop  aufgesetzten  Abbe  sehen  Zeichenapparats  zu  be- 
stimmen, ist  in  erweiterter  Form  und  mit  neuen  Berücksichtigungs- 
verfahren der  Fehlerquellen  beschrieben. 

E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 

Stark ,    M. ,    Zusammenhang    des    B  r  e  c  h  u  n  g  s  e  x  p  o  n  e  n  t  e  n 
natürlicher  Gläser  mit  ihrem  Chemismus  (Tscher- 
MAKS  min.  u.  petr.  Mitt.,    Bd.  XXIII,   1904,  p.   536 — 550). 
Nach    der   mikroskopischen    Methode    F.  Beckes    bestimmt    der 
Verf.  den  Brechungsexponenten  bei  einer  großen  Zahl  von  Gesteins- 
gläsern  und   stellt  die  Abhängigkeit  desselben  von  dem  Kieselsäure- 
gehalt   des  Gesteines  tabellarisch  zusammen.     Auch  wurden  die  von 
dem    GLADSTONSchen   Gesetz    geforderten  Werte    der  Brechungsexpo- 
nenten   mit    den    direkt    beobachteten    verglichen ,    wobei  sich  nur  in 
einem  Falle  eine  Ausnahme  von  diesem  Gesetz  ergab. 

E.  Sommerfeldt  (Tübingen). 


20* 


308  '  Neue  Literatur.  XXII,  2. 


Neue  Literatur. 


1.  Lehr-  und  Handbücher. 


Bayon,  P.  G. ,  Die  histologischen  Untersuchungsmethoden  des  Nerven- 
systems.    Würzburg  (Stuber);  VIII  +  187  pp.  3-60  M. 

Bolles  Lee,  A.,  The  Microtomist's  Vademecum.  A  Handbook  of  the 
methods  of  microscopic  anatomy.  6tii  edit.  London  (J.  a.  A.  CLmrchill) 
1905;  X  +  538  pp. 

Lo  Forte ,  Giac. ,  II  microscopio :  Manuale  pratico  per  i  primi  esercizi  di 
microscopia.     6  Fig.     Milano  (Soc.  edit.  Sonzogno)  1904.     62  pp. 

ten  Siethoff,  E.  G,  A. ,  Handleiding  bij  het  mikrophysisch  onderzoek  van 
urine.     Rotterdam  1904;  308  pp. 


2.   Mikroskop  und  mikroskopische  Apparate. 


a.  Neue  Mikroskope. 

Ladd's  Student's  Microscope  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  238). 
Portable  Microscope  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  239). 
Reichert's   Large   Stand   No.  1  A,  titted  with  Tip-up  Stage-Clips   (Journ. 

R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  243;  vgl.  C.  Reichert s  Katalog  No.  25, 

1904,  p.  17). 
Reichert's  Lai-ge  Mineralogical  Stand  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2, 

p.  247;  vgl.  C.  Reichert s  Katalog  No.  25,  1904,  p.  28). 
Reichert's   Microscope   for  determining  hardness  of  substances  (Journ.  R. 

Microsc.  Soc.   1905,  pt.  2,  p.  247;   vgl.  C.  Reichert  s  Katalog  No.  25, 

1904,  p.  36). 


XXII,  2.  Neue  Literatur.  309 

Eeichert's  New  Mineralogical  Stand   (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2, 

p.  245;  vgl  C.  Reicherts  Katalog  No.  25,  1904,  p.  30). 
Reichert's.  New  Large  Stand  A 1 ,  with   extra  wide  tube  and  new  lateral 

micrometer-screw   (Journ.   R.   Microsc.  Soc.   1905,  pt.  2,    p.  241;   vgl. 

C.  Reicherts  Katalog  No.  25,  1904,  p.  14). 
Zeiss'  New  Laboratory  Stand  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  240; 

vgl.  Carl  Zeiss'  Spezialkatalog  No.  10,  1904). 


b.  Objective. 


H. ,    Construction    of   aplanatic    combinations    of   lenses    with    or   without 

achromatism  IV.  (Engl.  Meclianic  1905,  vol.  LXXX,  p.  595). 
Malassez,  L.,  Sur  la  notation  des  objectifs  microscopiques.    2  Fig.  (Arch. 

d'Anat.  microsc,  t.  VII,  fasc.  2,  p.  270—350). 
Malassez,  L.,  Sur  la  notation  des  objectifs  microscopiques  [3.  Note]  (Compt. 

Rend.  Soc.  Biol.  t.  LVII,  1904,  no.  35,  p.  545). 
Reichert's    Objectives   with  Bourguet's    Spring   safety   action   (Journ.   R. 

Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  249;  vgl.  C.  Reicherts  Katalog  No.  25, 

1904,  p.  5). 


c.  Beleuchtungsaj)parate. 


(Ross,  H.  C.,)   Electric  warm-stage  for  use  with  the  microscope  combined 

with  a  Nernst  lamp   to  illuminate  the  microscope  (Journ.  R.  Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  2,  p.  2.50). 
Troester,  C,     Über  Dunkelfeldbeleuchtung  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  2, 

Bd.  XIV,  190.5,  No.  15,  16,  p.  511). 
Baker's   electric  lamp   for   the   microscope   (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 

pt.  2,  p.  252). 
Improved    methods    of  working   with   the   vertical   Illuminator   (Journ.   R. 

Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  251). 
Reichert's   Swing-out  Condensor   and  Iris  Diaphragm  (Journ.  R.  Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  2,  p.  249;  vgl.  C.  Reicherts  Katalog  No.  25,  1904). 


310  Neue  Literatur.  XXII,  2. 


d.   Ultramikroskop. 

Marpmann,  Über  ultramikroskopisches  Sehen  (Zeitschr.  f.  angew.  Mikrosk. 
Bd.  XI,  1905,  H.  1,  p.  1). 

Raehlmann,  E.,  Das  Ultramikroskop,  seine  Technik  und  seine  Anwendung 
zur  Untersuchung  von  Blut-  und  Sekretbestandteilen  (Zeitschr.  f.  ärztl. 
Fortbildung  Bd.  II,  1905,  p.  149). 

Beschreibung  und  Handhabung  des  Apparates  zur  Sichtbarmachung  ultra- 
mikroskopischer Teilchen,  von  Ernst  Leitz,  Optische  Werkstätte  in 
Wetzlar.  2  Fig.  (Wochenschr.  f.  Brauerei,  Jahrg.  XXII,  No.  7,  p.  99 
—102). 

Über  die  Grenzen  der  miki'oskopischen  Abbildung  und  die  Sichtbarmachung 
„ultramikroskopischer"  Teilchen  (Zentralzeitg.  f.  Opt.  u.  Mech.  Bd.  XXV, 
1904,  No.  5,  p.  51). 


e.  Verschiedenes. 

Braun,  F.,  Über  metallische  Gitterpolarisation  insbesondere  ihre  Anwendung 

zur  Deutung  mikroskopischer  Präparate  (Ann.  d.  Phys.  Bd.  XVI,  1905, 

p.  238-,  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  2). 
Braun,  F.,  Der  Hertz  sehe  Gitterversuch  im  Gebiete  der  sichtbaren  Strah- 
lung (Sitzber.  d.  Akad.  d.  Wiss.  Berlin,  math.-physik.  Kl.,  1904,  p.  154; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  306). 
Crisp ,   Fr. ,  Linnaeus  and  the  use  of  the  Microscope  (Journ.  K.  Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  2,  p.  2.53). 
Fr.  F.  R.  M,  S.,  Amphipleura  Lindheimeri  (English  Mechanic  vol.  LXXX, 

1904,  p.  455). 
Gordon,  J.  W.,  The  theory  of  highly  magniiied  Images  (Journ.  R.  Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  1,  p.  1). 
Guilloz,  Th.,  Sur  la  notation  des  objectifs  et  des  oculaires  de  microscope. 

(Compt.  rend.  Soc.  Biol.,  T.  LVIII,  1905,  No.  3,   p.  139—141.  [Reun. 

Biol.  de  Nancy]). 
Guilloz,  Th.,  Sur  la  relation  qui  doit  exister  entre  le  numero  de  l'oculaire, 

le    numero    de    l'objectif    et    son   ouverture   numerique  pour  pouvoir 

beneficier  dans  l'observation  microscopique  de  tout  le  pouvoir  separa- 

teur  de  l'instrument  (Compt.  rend.  Soc.  Biol.,  T.  LVIII,  1905,   no.  15, 

p.  730—732). 
Hunter,  J.,    „Gross"   formula   (Proc.   Scot.   Micr.   Soc.  vol.  IV,  1903/1904, 

p.  49). 
(Kingstbrd,  T.  G.,)   Method  of  constructing  small  glass  tanks   (Journ.  R. 

Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  253;  vgl.  Journ,  Queckett  Micr.  Club  1904, 

vol.  IX,  p.  117—120). 


XXII,  2.  Neue  Literatur.  311 

place  de  Lepinay,  J.,  u.  Buisson,  H.,)  Über  eine  neue  Methode  zur  Messunj^' 

der  Dicke  und   des  Brechungsindex   von  Planparallelphitten   (Zeitschr. 

f.  Instrumentenk.  Bd.  XXV,  1905,   p.  87;   vgl.  Ann.   de   Chim.   et   de 

Phys.  t.  II,  1904,  p.  78). 
Martin,  K.,  Über  Zonenfehlerkorrektion  durch  geeignete  Glaswahl  (Zeitschr. 

f.  wiss.  Photogr.  Bd.  U,  1904,  p.  231). 
Milne,  J.  R.,  New  form  of  spectrophotometer  (Proc.  Roy.  Soc.  Edinburgh 

1904,  vol.  XXY,  p.  338—354). 
Milne,   J.  R. ,    New  form  of  Juxtapositor   to   bring   into  accurate  contact 

the  edges  of  the  two  beams  of  light   used  in  spectrophotometry  with 

an   apphcation   to  Pohirimetrj^   (Proc.  Roy.  Soc.  Edinburgh  1905,  vol. 

XXV,  p.  355—363). 
(Mostyn,    C.,)    Resolution  of   Amphipleura    pellucida    (Knowledge  vol.  I, 

1904,  p.  307;  vgl.  Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1,  p.  107). 
Porter,   A.  B. ,   On  Abbe's  diffraction   theory  of  microscopic  vision.     Ab- 

stract   of  a   paper   presented  at  the  Chicago  meeting  of  the  Physical 

Society,  April  21,  1905  (Phys.  Rev.  vol.  XX,  386—287,  1905). 
Rheiuberg,  J.     Ernst  Abbe  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  156). 
Schott,    O.,    Über    eine    neue   Ultraviolett -Quecksilberlampe.     UvioUampe 

(Mitteil.  a.  d.  Glaswerk  Schott  u.  Gen.,  Jena,  10  pp.). 
VVinkelmann,  A. ,   Ernst  Abbe,  Rede   bei   der   von  der  Universität  Jena 

veranstalteten  Gedächtnisfeier  am  2.  Mai  1905  gehalten,  23  pp.     Jena 

(G.  Fischer)  1905.  2  M. 

Aperture  table  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1,  p.  107). 


3.  Mikrophotographie  und  Projektion. 

Bellieni,  Methode  pratique  et  simplifiee   de  microphotographie   (C.  R.  Soc. 

Biol.  t.  LVIII,  1905,  no.  7,  p.  339—341). 
Guilloz ,  Th.,    Determination   de   la   grandeur  reelle   des   objets  dans  les 

photomicrographies  (C.  R.  Soc.  Biol.  t.  LVIII,  1905,  no.  7,  p.  343). 
Köhler,  A.,   A  microscopic  arrangement  for  ultra-violet  light  and  investi- 

gations  of  organic  substances,  with  its  use  (The  Opt.  Instrum.  Monthlj- 

vol.  I,  no.  1,  1905,  p.  4). 
Mathet,  L.,  Sur   la   reproduction   des   objets  difficiles  par  la  photomicro- 

graphie  (Rev.  d.  Sc.  photographiques  t.  I,  1904,  p.  18). 
Spitta,  E.  J. ,  On  suiting  contrasts  screens  for  the  photography  of  bacte- 

ria  (Photography  vol.  XVII,  1904,  p.  577—579). 
Zeiss'  reflecting  lantern,  the  epidiascope  (The  Opt.  Instrum.  Monthly  vol.  I, 

no.  1,  1905,  p.  26). 


312  Neue  Literatur.  XXII,  ■>. 


4.  Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

Alfieri  e  Lacroix,   Come   si  devono  fare   gli  originali  per  le  riproduzioni 

fotomeccaniche  (Monit.  Zool.  Ital.,  Anno  XVI,  no.  4,  p.  111 — 116). 
Behring,  E.  v, ,   Über   ultraiuikroskopische   Proteinuntersuchungen  (Beitr. 

z.  exper.  Ther.,  hrsg.  v.  E.  v.  Behring,  1905,  H.  10,  p.  22—29). 
Berg,  W.,  Weitere  Beiträge  zur  Theorie  der  histologischen  Fixation  [Ver- 
suche an  nukleinsaurem  Protamin]  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LX"\', 

1904,  H.  2,  p.  298—357). 
Best,   Über   mikroskopische  Eisenreaktion   (Verh.  d,  deutsch.  Pathol.  Ges. 

8.  Tagg.,  Breslau  1904,  Ergänzungsh.  z.  Bd.  XV  d.  Zentralbl.  f.  pathol. 

Anat.  1905,     p.  147). 
Davidsohn,  C,  Vorzüge  der  Kresylviolettfärbung  (Verh.  d,  deutsch.  Pathol. 

Ges.  8.  Tagg.,  Breslau  1904,  Ergänzungsh.  z.  Bd.  XV  d.  Zentralbl.  f. 

pathol.  Anat.  1905,  p.  150—152). 
Dor,   L. ,  L'essence  de  moutarde  comme   liquide   conservateur   des  pieces 

anatomiques  (C.  R.  Soc.  Biol.  t.  LVIII,  1905,  no.  11,  p.  479—481). 
Briessen,  L.  F.,   Zur   Glykogenfärbung   (Zentralbl.   f.   allgem.   Pathol.    u. 

pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  4,  p.  129). 
Fischler,  F.,  Über  die  Unterscheidung  von  Neutralfetten,  Fettsäuren  und 

Seifen  im  Gewebe  (Zentralbl.  f.  allgem.  Pathol.  u.  pathol.  Anat.  Bd.  XV, 

1904,  No.  22,  p.  913—917 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  262). 
Gerlach,  L.,   Die   anatomisch -histologische  Technik  des  19.  Jahrhunderts 

und  ihre  Bedeutung  für  die  Morphologie.    Erlangen  1904.    38  pp.    8". 

•  M.  1-50. 

Grigorjew,   A. ,   Über   Konservierung   von   Organen  und   Organinhalt   zu 

nachträglicher  mikroskopischer  und  chemischer  Untersuchung  (Viertel- 

jahrsschr.  f.  gerichtl.  Medizin,  F.  3,  Bd.  XXIX,  1905,  H.  1,  p.  79). 
Lenhossek,   M.  v.,   Ramön   y   Cajals    neue    Fibrillenmethode    (Neurol. 

Zentralbl.  Jahrg.  XXIII,  1904,  No.  13,  p.  593—609 ;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  264). 
Liepmann,     Konservierung    von     pathologisch -anatomischen    Präparaten 

(Zeitschr.  f.  Geburtsh.  \\.  Gynäkol.  Bd.  LIV,  1905,  H.  1,  p.  158). 
Liigaro,  E.,  Un  metodo  di  colorazione  delle  neurofibrille  mediante  l'argento 

colloidale  (Monit.  Zool.  Ital.,  Anno  XV,  no.  11,  p.  350—356). 
Lugaro,   E. ,    Sui  metodo   di    demostrazione   delle    neurofibrille    (Ann.    di 

nevrologia,   Anno  XVI,  1904,  fasc.  5,  p.  495—496   [12.  Congresso  d. 

soc.  freniatr.  Ital.  in  Genova  1904]). 
Miodowski,  F.,  Neueste  Vorschläge  zur  histologischen  Technik  (Internat. 

Zentralbl.  f.  Ohrenheilk.  Bd.  III,  1905,  H.  4,  p.  133). 
Osborn,  Fr.  A.,  A  simple  electrical  thermostat  (Journ.  Phys.  Chem.  Bd.  IX, 

1905,  p.  297—298). 

Rosenau,  M.  J.,  Laboratory  course  in  pathology  and  bacteriology  [revised 
edition]  (Treasury  Departm.  Hyg.  Labor.  Washington,  Bull.  no.  8,  1904 
79  pp.). 


XXII,  2.  Neue  Literatur.  313 

Scholz,    Fr.,    Über    Aceton  -  Celloi'din  -  Schnelleinbettun^    (Deutsch,    med. 

Wochensclir.  Bd.  XXXI,  1905,  No.  11,  p.  419). 
Strauch,   Eine   Methode   farbiger   Konservierung   frischer  Leichenteile   für 

ZAvecke   der  somatischen  Anthropologie  (Zeitschr.  f.  Ethnologie  Jahrg. 

XXXVI,  1904,  H.  5,  p.  G71). 
Thilo,   0.,    Vorrichtung    zum    Durchlüften    des    Wassers    von    Aquarien 

(Korrespondenzbl.  d.  Naturf.  Ver.  zu  Riga,  Jahrg.  XL VII,  1904,  p.  5). 
Beiträge   zur  praktischen   Mikroskopie.     1.   Neuere    Präparationsmethoden 

(Zeitsclir.  f.  angew.  Mikrosk.  Bd.  XI,  1905,  H.  3,  p.  57). 


5.  Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


a.   Niedere  Tiere. 

Depdolla,  Ph. ,   Untersuchungen  über  die  Spermatogenese  von  Lumbricus 

terrestris  (Zool.  Anz.  Bd.  XXVIII,  1905,  p.  545—557 ;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  265). 
Hirschler,    J. ,     Weitere     Regenerationsstudien     an    Lepidopterenpuppen 

[Regeneration  des  vorderen  Körperendes]  (Anat.  Anz.  Bd.  XXV,  1904, 

No.  18,  19,   p.  417—435   m.   5  Figg. ;    vgl.   diese   Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  265). 
Jakimoff,  W.  L. ,  Zur   Biologie   der  Trj'panosomen  der  Nagana   und  des 

Mal  de   Caderas   (Zentralbl.   f.   Bakteriol.   Abt.  1,   Orig.  Bd.  XXXVII, 

1904,  H.  5,  p.  668—678). 
Marino,  F.,  Coloration  des  protozoaires  et  observations  sur  la  neutrophile 

de  leur  noyau   (Ann.   de  l'Inst.  Pasteur,  Annee  VIII,  1904,   no.  12, 

p.  761—766). 
Smedley,  R.  D.,   The   cultivation   of  Trypanosomata  (Journ.  of  Hygiene 

vol  V,  1905,  no.  1,  p.  24—47). 


b.  Wirbeltiere. 


Arnold,  J.,  Über  Bau  und  Sekretion  der  Drüsen  der  Froschhaut;  zugleich 
ein  Beitrag  zur  Plasmosomen- Granulalehre  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat. 
Bd.  LXV,  1905,  p.  649—665  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  286). 


314  Neue  Literatur.  XXII,  2. 

Bab ,  H. ,  Die  Colostrumbildun^  als  physiologisches  Analogen  zu  Ent- 
zündungsvorgängen. Gleichzeitig  ein  Beitrag  zur  Lehre  von  den 
Leukocyten  und  deren  Granulationen.  Mit  historischen  Darlegungen. 
Berlin  (A.  Hirschwald)  1904;  97  pp.  (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  l>7-2.) 

Backmund,  K. ,  Entwicklung  der  Haare  und  Schweißdrüsen  der  Katze 
(Anat.  Hefte,  H.  79,  80  [Bd.  XXVI,  H.  2,  3],  p.  317—383  m.  4  Tfln. ; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  285). 

Bunting,  P.  L. ,  The  Histology  of  Lymphatic  Glands:  the  general  Struc- 
ture,  the  Reticulum  and  the  Germ  Centres  (Journ.  of  Anat.  a.  Physiol. 
vol.  XXXIX,  1904,  p.  55— (i8  w.  5  pltes. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  287). 

Cameron,  J.,  The  Development  of  the  Retina  in  Amphibia,  an  Embryo- 
logical  and  Cytological  Study  (Journ.  of  Anat.  a.  Phys.  London 
vol.  XXXIX,  1905,  p.  135—152  w.  2  pltes. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  290). 

Cavalie,  M.,  Les  ramifications  nerveuses  dans  Torgane  electrique  de  la 
torpille  (Torpedo  Galvani)  [Dispositif  tibrillaire  dans  les  gaines  des 
fibres  nerveuses  et  autour  d'ellesj  (Bibliogr.  anat.  t.  XIII,  1904,  fasc.  4, 
p.  214—220  av.  5  figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  278). 

Cesa-Biauclii,  D. ,  Contributo  alla  conoscenza  dell'istogenesi  delle  cisti 
semplici  dell'ovaia  (Arch.  Sc.  med.  vol.  XXIX,  1905,  p.  1). 

Delflno ,  E. ,  Macroglossia  congenita  neuroübromatosa  (Arch.  Sc.  med. 
vol.  XXIX,  1905,  p.  34). 

Donati,  M. ,  Ipernefroma  maligno  del  fegato  (Arch.  Sc.  med.  vol.  XXIX, 
1905,  p.  154). 

Fichera,  G. ,  Über  die  Verteilung  des  Glykogens  in  verschiedenen  Arten 
experimenteller  Glykosurie  (Beitr.  z.  pathol.  Anat.  u.  z.  allgem.  Pathol. 
Bd.  XXXVI,  1904,  H.  2,  p.  273—339  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  288). 

Glas,  E. ,  Über  intraepitheliale  Drüsen,  Cysten  und  Leukocytenhäufchen 
der  menschlichen  Nasenschleimhaut  (Arch.  f.  Laryngol.  u.  Rhinol. 
Bd.  XVI,  1904,  H.  2,  p.  236—264  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  286). 

Goldberg,  B. ,  Über  die  Müller  sehe  Modifikation  der  Donne  sehen  Eiter- 
probe (Zentralbl.  f.  inn.  Med.  Jahrg.  XXVI,  1905,  No.  20,  p.  497). 

Grabower,  Die  Verteilung  und  Zahl  der  Nervenfasern  in  den  Kehlkopf- 
muskeln und  die  Hinfälligkeit  des  Erweiterers  der  Stimmritze  (Arch. 
f.  Laryng.  u.  Rhinol.  Bd.  XVI,  1904,  H.  2,  p.  189-207  m.  2  Tfln.; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  279). 

Halber,  E.,  Über  die  Entstehung  der  Blutplättchen  und  ihre  Beziehungen 
zu  den  Spindelzellen  (Deutsches  Arch.  Klin.  Med.  Bd.  LXXXII,  1904, 
H.  1,  2,  p.  41—59  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  268). 

Illing ,  G. ,  Vergleichende  makroskopische  und  mikroskopische  Unter- 
suchungen über  die  submaxillaren  Speicheldrüsen  der  Haussäugetiere 
(Anat.  Hefte,  H.  70,  80  [Bd.  XXVI,  H.  2,  3],  1904,  p.  389—526  m. 
4  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  284). 


XXII,  2.  Neue  Literatur.  315 

Imhof,  G. ,  Anatomie  und  Entwicklungsgeschichte  des  Lumbaimarkes  bei 
den  Vögeln  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXV,  1905,  p.  498—610  m. 
30  Figg.  u.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p    283). 

Joris,  H.,  Histogenese  du  Neurone  (Bull.  Aead.  R.  Med.  Belgique,  25  juin 

1904,  44  pp.  av.  5  pl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  279j. 
Koiransky,  Eugenie,  Über  eigentümliche  Gebilde  in  den  Leberzellen  der 

Amphibien   (Anat.   Anz.  Bd.  XXV,  1904,   No.  18,  19,   p.  435—456  in. 

6  Figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  288). 
Kopsch,  F.,  Über  den  Kern  der  Thrombocyten  und  über  einige  Methoden 

zur  Einführung   in   das  Studium   der  Säugetier -Thrombocyten  (Intern. 

Monatsschr.  f.  Anat.  u.  Physiol.  Bd.  XXI,  1904,  H.  4—8,  p.  344—353; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  268). 
Kozowsky ,  A.  D. ,  Zur  Färbungsmethodik  der  Nervenfasern  des  Zentral- 
nervensystems (Neurol.  Zentralbl.  Jahrg.  XXIII,  1904,  No.  22,  p.  1041 

—1042;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  277). 
Meves,  F.,   Zur   Wirkung   von   Säure   auf  die  roten   Blutkörperchen   der 

Amphibien   (Anat.  Anz.  Bd.  XXV,  1904,  No.  9,  10,   p.  240—245;  vgl. 

diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  291). 
Meyer ,    P. ,    Ein    Verfahren    zur   Erzielung    haltbarer    Amyloidpräparate 

(ViRCHOWs   Arch.   f.    pathol.   Anat.  Bd.   CLXXX    [Folge   17,  Bd.   X], 

H.  2,  p.  359—361). 
Modica,  O.,  Nuovo  metodo  di  fissazione  di  sangue   (Arch.  farmacol.  speri- 

ment.  e  Sc.  affini,  Anno  3,  vol.  III,  1904,  fasc.  11). 
Palleske,  Eine  neue  Methode  des  Blutnachweises?  (Vierteljahrsschr.  f.  ge- 

richtl.  Med.,  Folge  3,  Bd.  XXIX,  1905,  H.  2,  p.  331—338). 
Pighini,  G. ,   Sulla  struttura  dei  globuli  rossi  (Arch.  Sc.  med.  vol.  XXIX, 

1905,  p.  49). 

Preisich,  K. ,   u.  Heim,  P. ,    Über    die    Abstammung    der    Blutplättchen 

(ViRCHOWs  Arch.   Bd.  CLXXVIII,   1904,  H.  1 ,    p.  43—60  m.   1  Tfl.; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  266). 
Ramön  y  Cajal,  S.,   La  methode  ä  l'argent  reduit  associee  ä  la  methode 

embryonnaire   pour   l'etude  des   noyaux  moteurs  et  sensitifs  (Bibliogr. 

Anat.  t.  XIII,  1904,  fasc.  5,  p.  242—275  c.  12  figg.    Dasselbe  in  Trab. 

Labor.   Investig.  Biol.  Univ.  Madrid   t.  III,  1904,  fasc.  2,  3,  p.  65—96 

av.  12  figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  273). 
Ravenna,  E.,    Sui    cosidotti    tumori    endoteliali.     Memoria    seconda:    Gli 

emoangioendoteliomi    del   fegato.     [Osservazioni    anatomo-patologiche.] 

(Arch.  Sc.  med.  vol.  XXIX,  1905,  p.  124). 
Reichert,   C. ,    Über    das    Vorkommen    kleinster   Körperchen    im    frischen 

Menschenblut  (Zeitschr.  f.  angew.  Mikrosk.  Bd.  XI,  1905,  H.  12,  p.  309). 
Rossi ,  E. ,  L'intima   struttura   delle   cellule    nervöse   umane   (Le   Nevraxe 

vol.  VI,  fasc.  3,    1904,   p.  331—349  av.  16  figg.;   vgl.   diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  273). 
Sala,  G.,  Beitrag  zum  Studium  der  feineren  Struktur  der  Netzhaut  (Anat. 

Anz.   Bd.  XXV,    1904,   No.  9,  10,   p.  246—249  m.  2  Tfln.;   vgl.  diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  291). 
Schridde,H.,  Weitere  Untersuchungen  über  die  Körnelungen  der  Plasmazellen 

(Zentralbl.  f.  allgem.  Pathol.  u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  11,  p.433). 


316  Neue  Literatur.  XXII,  2 

Siethoff,  E.  G.  A.  ten,  Het  urine  onderzoek  bij  gereclitelijke  lijkschoii- 
wing-en  (Nederl.  Tijdschr.  v.  Geneesk.,  11,  1904,  p.  798). 

Simon  et  Spillmann,  L.,  Ai^plication  de  la  Photographie  ä  la  nuineration 
des  elements  figures  du  sang.  (Compt.  Rend.  Soc.  Biol.  t.  LYII,  1904, 
no.  37,  p.  659j. 


c.   Bakterien. 

Asahi,   K. ,   Beitrag   zur   Untersuchung   auf  Hyphouij-ceten   (Prager    med. 

Wochensclir.  Jalirg.  XXX,  1905,  No.  12,  p.  153—154  m.  1  Fig.). 
Austregesilo,  A.,  Über  die  Diazoreaktion  bei  den  tropischen  Krankheiten 

(Arch.  f.  Schiffs-  u.  Tropenhygiene  Bd.  IX,  1905,  No.  5,  p.  22(3). 
Berner,  O,,   En  anaerob  platekulturskaal  (Norsk  Mag.   for  Lägevid.  1904, 

p.  823). 
Biedert,  Über   die  Biedert  sehe  (Mühlhäuser -Czaplewski  sehe)   Methode 

zum  Auffinden  vereinzelter  Tuberkelbazillen  (Hj'gien.Rundsch.  Jahrg.  XV, 

1905,  No.  5,  p.  241). 
Blecher,  C,   Ein  Apparat   zum   Lösen   und   Filtrieren  großer   Quantitäten 

Gelatine,  Agar-Agar  etc.  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  2,  Bd.  XIV,  1905, 

Xo.  12,  13,  p.  415— 41G  m.  1  Fig.). 
Blumenthal,   J.   M.    u.   Lipskerow,   M. ,    Vergleichende   Bewertung   der 

difterentiellen  Methoden  zur  Färbung  des  Diphtheriebazillus  (Zentralbl. 

f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  1905,  H.  3,  p.  359). 
Borden,  J.  H.,  The  Wid.\l  Test  for  practicing  phj^sicians  (Proc.  New  York 

pathol.  Soc.  vol.  IV,  1904,  p.  405). 
Doerr,  R.,  Beobachtungen  über  bazilläre  Ü3^senterie  (Zentralbl.  f.  Bakteriol-. 

1.  Abt.,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  H.  4,  p.  420;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  244). 
Dreuw,  Zur  Züchtung  anaerober  Bakterien  (Verhandl.  u.  Ber.  d.  5.  internat. 

Dermatol.  Kongr.  Berhn  1904). 
Dscliunkowsky,   E.,   u.   Luhs,    S.,   Apparat   zum   sterilen   Blutentnehmen 

zwecks  Untersuchung  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  1.  Abt.,  Orig.  Bd.  XXXVIII, 

H.  3,  p.  367;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  295). 
Dworetzky,  A.,   Erfahrungen   mit   der  Spengler  sehen    Formalinmethode 

zur  Reinzüchtung   von  Tuberkelbazillen  aus  Bakteriengemischen  (Zen- 
tralbl. f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  1904,  H.  4,  p.  626-631). 
Gaethgens,  AV.,  Der  Bacillus  jasmino-cyaneus   und    der  Bacillus  flavo-aro 

maticus,  zwei  neue  Farbstoff  bildende  Bakterien  (Zentralbl.  f.  Bakteriol 

1.  Abt.,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  H.  2,  p.  129 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII 

1905,  p.  292.) 
Galli-Valerio,   Br.,   Etudes   bacteriologiques.      Corynebacterium   vaccinae 

Bacterium  diphterium  avium.   —   Bacterium  candidum   —  (Zentralbl.  f 

Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXVIII,  1905,  No.  4,  p.  465). 


XXII,  2.  Neue  Literatur,  317 

Gortlon,  Mervyu   H.,   Einige   Angaben   zur    Differenzierung   von   Strepto- 
kokken (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  1904,  H.  5, 
p.  728). 
Grossner,     Zur     bakteriologischen    Diagnose    (Müncli.    med.    Wocliensclir. 

Jalirg.  LH,  1905,  No.  8,  p.  347). 
Gradwohl ,   R.   B.   H.,   Importance   de   l'examen  bacteriologique   pratique 
sur   les   cadavres   (Ann.  de  l'Inst.  Pasteur  Annee  VIII,  1904,   no.  12, 
p.  767). 
Guignard,   Alb.,  Beitrag   zum   mikroskopischen   Nachweis   der   Tuberkel- 
bazillen  im   Sputum   u.   Urin.   Diss.   (21   S.)  8°.     Aarau   (H.  R.   Sauer- 
länder u.  Co.)  1905.  M.  —-70 
Heller,  O.,   Die  Rothberger  sehe  Neutralrotreaktion   auf  Gelatine  bei  37" 
(Zentralbl.  f.  Bakteriol.   1.  Abt.,  Orig.   Bd.  XXXVIII,  H.  1;  vgl.  diese 
Zeitschr.  XXII,  1905,  p.  292). 
Hewlett,   R.  T.,    Detection   of  Bacillus   Enteritidis   sporogenes   in   Water 
(Journ.  R.  ^licrosc.  Soc.  1905,    pt.  1,  p.  110;    vgl.  Trans.  Pathol.  Soc. 
vol.  LV,  1904,  p.  123). 
Hill,  H.  W.,  Preparation  of  broth  cultures  for  flagella  staining  (Journ.  of 

med.  research.  vol.  XIII,  1904,  no.  1,  p.  97—98). 
Kaufmann,  Job.,   C.  Hemmigsens  Thermoregulator  beim  Vorwärmen  und 
Pasteurisieren  (Milchwirtsch.  Zentralbl.  Jahrg.  I,  1905,  H.  1,  p.  24—26). 
Klein,  E.,   The   Horace  Dobell  Lecture   on   the   life-history  of  saprophytic 
and  parasitic  bacteria  an   their   mutual   relation  (Lancet  1904,  vol.  II, 
p.  1477—1486). 
Kraft,  E.,  Winke  für  die  Ausführung  chemisch-bakteriologischer  Arbeiten 
auf   dem    Gebiete    der    Harn-,    Sputum-,    Fäces-   etc.    Untersuchungen 
(Berlin,  Selbstverlag  d.  deutsch.  Apotheker-Vereins  1905). 
Kral,  F.,  Zur  Differenzierung  und  objektiven  Darstellung   des  Zellinhaltes 
von  Hefe-  und  Spaltpilzen  (Verh.   d.   Ges.   deutsch.   Naturf.   u.   Ärzte, 
74.  Vers,  zu  Karlsbad,  IL  Teil,  2.  Hälfte  [erschienen  1903],  p.  621-622; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  296). 
Kral,  F.,  Über  einfache  expeditive  Geißelfärbungsmethoden  (Verh.  d.  Ges. 
deutsch.   Naturf.   u.   Ärzte,  74.  Vers,  zu  Karlsbad,   II.  Teil,   2.  Hälfte 
[erschienen  1903],  p.  621;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  295 >. 
Marschall,  F.,  Die  Bedeutung  des  Endo  sehen  Nährbodens  für  die  bakte- 
riologische Typhusdiagnose   (Zentralbl.  f.  Bakteriol.   Abt.  1,   Orig.  Bd. 
XXXVIII,  1905,  No.  3,  p.  347—359). 
3Iiquel  et  Gambier,   Traite   de   bacteriologie   pure   et  appliquee  ä  la  me- 
decine    et    l'hygiene.     8^.     224  Figg.      Paris    (Masson    et    Co.)   1905. 

22-50  M. 
Monti,  E.,  Osservazioni  e  critiche  sperimentali  sul  metodo  di  v.  Drigalski- 
CoNRADi   per  le  ricerche  dei  bacilli  del  tifo  neue  feci  (Arch.  Sc.  med. 
vol.  XXIX,  1905,  p.  70). 
Rullmann,  W.,  Über  das  Verhalten  des  im  Erdboden  eingesäten  Typhus- 
bazillus  (Zentralbl.   f.   Bakteriol.    Abt.  1,    Orig.   Bd.   XXXVIH,   1905, 
H.  4;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  292). 
Russo ,  M. ,   La  bleumetiiene  -  reazione ,   suo   valore   clinico   (Riforma  med. 
Anno  XXI,  1905,  no.  19,  p.  507). 


318  Neue  Literatur.  XXII,  2. 

Scagliosi,  G. ,   Su   un   nuovo   uietodo   di   colorazione   elettiva   delle  spore 

(Rif.  med.  Anno  XX,  1904,  no.  49,  p.  1349—1351). 
Schaudinn,  Fr.,  u.  Hoffmann,  E. ,   Mitteilungen  über  Spirochätenbefunde 

bei  Syphilis  (Sitzber.  d.  Berlin,  med.  Ges.,  17.  Mai  1905;  vgl.  Zentralbl. 

f.  Baivteriol.  Abt.  1,  Ref.  Bd.  XXXVI,  1905,  No.  24,  25,  p.  749). 
Schaudinn,  Fr.,  u.  Hoffmann,  E. ,   Über   Spirochätenbefunde   im  Lymph- 
drüsensaft  Syphilitischer    (Deutsche   med.   Wochenschr.   1905 ,   No.  18, 

p.  759). 
Sellards,  A.  W.,  Some  researcbes  on  anaerobic  cultures  with  phosphorous 

(Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  1904,  H.  4,  p.  632 

—637  m.  2  Fig-g.). 
Serkowski,    St.,     Ein    neuer    Nivellierapparat    und    dessen    Anwendung 

(Zentralbl.    f.    Bakteriol.    Abt.   1,    Orig.    Bd.  XXXVII,    1904,    No.  4, 

p.  637—640). 
Spitta,  E.  J.,  On  suiting  contrast  screens  for  the  photography  of  bacteria 

(Photography  vol.  XVII,  1904,  p.  577). 
Streß,  O.,   Über  das  Wachstum  der  Gonokokken  auf  serumhaltigen  Nähr- 
böden (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  1905,  H.  4, 

p.  491;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  294). 
Tarazzi,  G. ,    Über  ein  leicht  in  aerober  Weise  ausführbares  Kulturmittel 

von  einigen  bis  jetzt  für  strenge  Anaeroben  gehaltenen  Keimen  (Zentralbl. 

f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVIII,  1905,  H.  5,  p.  619-624). 
Vetter,  W. ,  Eine   Methode,   um   Tuberkelbazillen   in  pleuralen  Ergüssen 

aufzufinden    (Zentralbl.    f.    inn.    Med.    Jahrg.    XXVI,    1905,    No.   18, 

p.  449—455). 


d.  Botanisches. 


Albauese,  N.,  Ein  neuer  Fall  von  Endotropismus  des  Pollenschlauches  und 
abnormer  Embryosackentwicklung  bei  Sibbaldia  procumbens  L.  (Sitzber. 
d.  Akad.  Wiss.  Wien,  math.-naturw.  KL,  Bd.  CXIII,  1904,  Abt.  1,  p.  653; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXIII,  1905,  p.  299). 

Björkenheim,  C.  G.,  Beiträge  zur  Kenntnis  des  Pilzes  in  den  Wurzel- 
anschwellungen von  Alnus  incana  (Zeitschr.  f.  Pflanzenkrankh.  Bd.  XIV, 

1904,  p.  128;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  300). 
Claussen,  P.,  Zur  Entwicklung  der  Ascomyceten.    Boudiera  (Botan.  Zeitg. 

Bd.  LXIII,  1905,   Abt.  1,  H.  1,  2,  p.  1;   vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  297). 

Ernst,  A.,   Zur  Kenntnis   des  Zellinhaltes   von  Derbesia  (Flora  Bd.  XCIII, 

1904,  p.  514;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  299). 
(J.  Q.  T.,)  Staining   and   preserving   algae   (Journ.  R.  Microsc.   See.  1905, 

pt.  1,  p.  115;  vgl.  Knowledge  vok  I,  1904,  p.  305). 
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Arten  und   ihre  Beziehung   zum  interzellularen  Plasma  ((Jsterr.  Botan. 

Zeitschr.  Bd.  LIV,  1904,  p.  165 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  300). 


XXll,  2.  Neue  Literatur.  319 

Senft,  E.,  Über  den  mikrochemischen  Zuckernachweis  durch  essigsaures 
Phenylhydrazin  (Sitzber.  d.  Akad.  Wiss.  Wien,  math.-naturw.  Kl., 
Bd.  Cxil.  1904,  Abt.  1,  p.  3;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  298). 

Treadle,  JMounting  Volvox   (English   Mechanic   vol.  LXXX,   1904,  p.  300). 

Villagio,    Mounting  Algae   (English   Mechanic   vol.  LXXX,   1904,   p.  345). 

Woycicki,  Z.,  Einige  neue  Beiträge  zur  Entwicklungsgeschichte  von 
Basidiobolus  Ranarum  (Flora  Bd.  XCIII,  1904,  p.  87;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  300). 

Zacharias,  E.,  Über  die  Cyanophyceen  (Mitt.  a.  d.  botan.  Staatsinstituten 
in  Hamburg,  3.  Beih.  z.  Jahrb.  d.  Hamburg,  wissenschaftl.  Anstalten  zu 
Hamburg,  1904,  p.  47;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  297). 


e.  Mineralogisch -Petrographisches. 

Andrews,  T.,  Microscopical  observations  on  Naval  accidents  (Iron  and 
Steel  Magaz.,  vol.  IX,  1905,  p.  163—168). 

Becke,  F.,  Optische  Untersuchungsmethoden  (Denkschr.  d.  math.-naturw. 
Kl.  d.  k.  Akad.  d.  Wiss.,  Wien,  Bd.  LXXV,  1904,  p.  55;  vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  306). 

Behrens,  H.,  Reaktionen  für  den  mikrochemischen  Nachweis  organischer 
Basen  (Zeitschr.  f.  anal.  Chem.  Bd.  XXXXIII,  1904,  p.  333—355;  vgl. 
diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  305). 

Braun,  F.,  Einige  Beobachtungen,  die  sich  auf  künstliche  Doppelbrechung 
beziehen  (Ann.  d.  Phys.  [4]  Bd.  XVI,  1905,  p.  278—281  m.  1  Fig.;  vgl. 
diese  Zeitschr.-  Bd.  XXII,  1905,  p.  302). 

Braun,  F.,  Herstellung  doppelt  brechender  Körper  aus  isotropen  Bestand- 
teilen (Physik.  Zeitschr.  V,  1904,  p.  199—203;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  302). 

Braun,  F.,  Über  metallische  Gitterpolarisation,  insbesondere  ihre  Anwen- 
dung zur  Deutung  mikroskopischer  Präparate  (Ann.  d.  Phys.  [4], 
Bd.  XVI,  1905,  p.  238—278;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  306. 

Braun,  F.,  Der  Hertz  sehe  Gitter  versuch  im  Gebiete  der  sichtbaren  Strahlung 
(Sitzber.  d.  Akad.  d.  Wiss.  Berlin,  math.-physik.  Kl.,  1904,  p.  154;  vgl. 
diese  Zeitschrift  Bd.  XXII,  1905,  p.  306. 

Brauns,  R.,  Mineralogie.  3.  Aufl.  Leipzig  (J.  G.  Göschens  Verlag)  1905; 
134  pp.  mit  132  Figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  304. 

Bredig,  G.,  u.  Schukowsky,  G.  v.,  Prüfung  der  Natur  der  flüssigen 
Kristalle  mittels  elektrischer  Kataphorese  (Ber.  d.  deutsch,  chem.  Ges., 
Bd.  XXXVII,  1004,  p,  3419—3425 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXU,  1905, 
p.  305). 

Campbell,  W.,  On  the  microstructure  of  metalls  and  alloys  (Electrochem. 
Ind.  vol.  II,  1905,  p.  49). 


320  Neue  Literatur.  XXII  2 


Donau,  Über  die  Färbung  der  Boraxperle  durch  kolloidal  gelöste  Edel- 
metalle (Monatshefte  f.  Chem.  Bd.  XXV,  1904,  p.  913—918;  vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  304). 

Gledhill ,  J.  M. ,  Development  and  use  of  high-speed  tool  steel  (Iron  and 
Steel  Magaz.  vol.  IX,  1905,  p.  19—44). 

Hinden,  F.,  Neue  Reaktionen  zur  Unterscheidung  von  Calcit  und  Dolomit 
(Verh.  d.  naturforsch.  Ges.  in  Basel  Bd.  XV  [2],  1904,  p.  201—202; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  303). 

Hlawatsch,  C,  Bestimmung  der  Doppelbrechung  für  verschiedene  Farben 
an  einigen  Mineralien   (Tschermaks  mineral.  u.  petr.  Mitt.  Bd.  XXIII, 

1904,  p.    415—450  m.   3   Figg.;   vgl.   diese   Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  302). 

Lehmann,  O.,    Flüssige    Misch-    und    Schichtkristalle    (Ann.    d.    Phys.  [4] 

Bd.   XVI,  1905,    p.   160—165;    vgl.    diese    Zeitschr.    Bd.  XXII,    1905, 

p.  303). 
Quincke,  Gr.,   Über  Ausbreitung   und  Extensionskraft   (Ann.  d.   Phys.  [4] 

Bd.  XV,  1904,  p.  55—60;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  301). 
Quincke,  G.,  Doppelbrechung  der  Gallerte  beim  Aufquellen  und  Schrumpfen 

(Sitzber.   d.    k.  preuß.   Akad.   d.   Wiss.   1904,  p.  258—265;   vgl.   diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  301). 
Richards ,  Th.  W. ,  a.  Wells ,  R.  Cl. ,  The  Nephelometer ,   an  Instrument 

for  Detecting  and  Estimating   opalascent   Precipitations  (Amer.  Chem. 

Journ.  vol.  XXXI,   1904,  p.  235—243;   vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  304). 

(Rose,  T.  K.,)  Certain  properties  of  alloys  of  Silver  and  Cadmium  (Journ. 
R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1,  p.  119;  vgl.  Proc.  Roy.  Soc.  vol.  CXXIV, 
1904,  p.  218).  , 

Seaton,  A.  E.,  a.  Jude,  A. ,  Impact  tests  on  tlie  wrought  steels  of  com- 
merce (Proceed.  Inst.  Mechan.  Engineers  1904,  Nov.  18). 

Stark,  M.,  Zusammenhang  des  Brechungsexponenten  natürlicher  Gläser 
mit    ihrem    Chemismus    (Tschermaks   min.   u.   petr.   Mitt.   Bd.   XXIIl, 

1904,  p.  .536;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  307). 

(^Stead,  J.  E.,)  Sulphides  and  Silicates  of  Manganese  in  Steel  (Journ.  R. 
Microsc.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  265;    vgl.  Iron  and  Steel  Magaz.  vol.  IX, 

1905,  1).  105—113). 

Thugutt,  St.  J. ,   Fritz   Hinden  s    „Neue  Reaktionen   zur  Unterscheidung 

von  Calcit  und  Dolomit"  (Zentralbl.  f.  Min.  Geol.  Pal.  1905,  p.  265—266 ; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  303). 
(Turner,)  Ilardness  of  metals  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  1,  p.  118; 

vgl.  English  Mechanic  vol.  LXXX,  1904,  p.  404). 
Vauino,  S.,  ü.  Hartl,  F.,  Über  neue  Bildungsweisen  kolloidaler  Lösungen 

und   das   Verhalten   derselben  gegen   Baryumsulfat    (Ber.   d.    deutsch. 

chem.    Ges.    Bd.  XXXVII,   1904,  p.  3620—3623;    vgl.    diese    Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  305). 


Band  XXII.    Heft  3. 


Die  Tricliloressigsäure  als  Fixierungsmittel. 

Von 

Prof.  i)r.  Martin  Heidenhain 

in  Tübiugen. 


Die  Tricliloressigsäure  yerwende  ich  schon  seit  mehr  als  10  Jahren 
als  Fixierungsmittel.  Anfangs  habe  ich  sie  nur  wenig  benutzt,  später 
mehr  und  mehr;  jetzt,  nachdem  ich  die  Bedingungen  der  Verwend- 
barkeit besser  kennen  gelernt  habe,  möchte  ich  sie  nicht  mehr  missen 
und  verwerte  sie  besonders  zu  Kurszwecken  in  ausgedehnter  Weise. 

Den  Hinweis  auf  die  Trichloressigsäure  verdanke  ich  noch 
meinem  Vater,  welcher  zwar  selber  das  Mittel  für  die  Zwecke  der 
Histologie  nicht  benutzt  hat,  indessen  mir  auf  eine  spezielle  Anfrage 
liin  diese  Säure  als  ein  besonders  stark  und  sicher  eiweißfällendes 
Keagens  bezeichnete.  Inzwischen  haben  auch  andere  Autoren  die 
Trichloressigsäure  oder  analoge  Verbindungen  (Trichlormilchsäure 
Holmgren)  zu  Fixierungszwecken  verwendet ,  indessen  geschah  dies 
nur  selten ,  und  man  scheint  von  den  Residtaten  meist  nicht  be- 
friedigt gewesen  zu  sein.  Aus  diesem  Grunde  ist  es  mein  Wimsch, 
den  Gegenstand  einmal  zur  Sprache  zu  bringen. 

Ich  verwende  diese  Säure  in  5-  bis  lOprozentiger  Lösung;  in- 
dessen dürfte  die  5prozentige  Lösung  für  alle  gewöhnlichen  Fälle 
ausreichen.  Die  Eigentümlichkeiten  und  Vorzüge  des  Mittels  sind 
die  folgenden. 

1)  Die  Trichloressigsäure  fällt  alle  Eiweiße,  auch  die  Mucine ; 
meiner  Beobachtung  nach  konserviert  sie  aber,  —  wie  übrigens  die 
sämtlichen  andern  Fixierungsmittel  auch  —  die  serösen  Drüsen- 
granula nur  längs  der  Oberfläche  der  Stücke. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  3.  21 


322    Heidenhain:  Die  Trichloressigsäure  als  Fixierungsmittel.    XXII,  3. 

2)  Das  Reagens  dringt  sehr  rasch  ein.  Da  es  nicht  wie 
viele  andere  stark  eiweißfällende  Lösnngeu  an  der  Oberfläche  der 
Stücke  eine  dichte ,  harte ,  schwer  dnrchgängige  Krnste  produziert, 
wie  dies  z.  B.  bei  der  Pikrinsäure  und  der  Chromsäure  der  Fall 
ist ,  so  Averden  aucli  große  Stücke  binnen  kurzem  vollständig 
durchfixiert. 

3)  Die  Stücke  gewinnen  eine  gleichmäßige  Konsistenz  und  betten 
sich  leicht  ein.  Die  Durclidringung  mit  Paraffin  wird  (besonders 
nach  Schwefelkohlenstofifdurchtränkung)  eine  so  vollkommene ,  daß 
Paraffin  und  Gewebe  meist  eine  vollkommen  gleichartige,  durchsich- 
tige Masse  bilden.  Dies  tritft  auch  für  solche  Objekte  zu,  welche 
dafür  bekannt  sind ,  daß  sie  sich  verhältnismäßig  schwer  einbetten 
und  schneiden,  wie  Speicheldrüsen,  Pankreas,  Muskulatur,  Haut. 

4)  Da  Schrumpfungen  überhaupt  nicht,  eher  geringe  Quellungen 
statthaben  (etwa  wie  bei  Pikrinschwefelsäure),  wird  die  Größe^  Form, 
Anordnung,  gegenseitige  Orientierung  der  Zellen  vorzüglich  gut  er- 
halten. Schöne ,  typische  Bilder  gewinnt  man  besonders  von  epithe- 
Dalen  Organen  (Drüsen,  Magen,  Darm,  Nebenniere). 

5)  Es  hinterbleibt  eine  ausgezeichnete ,  und  zwar  nicht  modi- 
fizierte Färbbarkeit  (etwa  wie  bei  Alkohol,  Sublimat)  für  Karmin, 
Eisenhämatoxylin  und  Anilinfarben.  Bei  DELAFiELoschem  Hämatoxylin 
muß  man  gewöhnlich  aus  sehr  verdünnten  Lösungen  längere  Zeit 
färben,   um  eine  schöne  Kerntinktion  zu  erhalten. 

6)  Die  feinsten  Details  im  Kern  und  Plasma  erhält  die  Trichlor- 
essigsäure  nicht.  Dagegen  reicht  sie  aus  um  Granula,  Zentralkörper, 
Spindeln,  Chromosomen,  Schlußleisten,  Sekretkapillaren,  die  Muskel- 
struktur etc.  geuügend  zu  konservieren.  Dies  Resultat  ist  sehr  be- 
achtenswert,  da,  wie  gesagt,  Schrumpfungen  gänzlich  fehlen. 

Soweit  wäre  nun  alles  ganz  hübsch  und  gut ,  indessen  müssen 
wir  leider  bei  Trichloressigsäure -Fixierung  einen  großen  Übelstand 
mit  in  Kauf  nehmen,  nämlich  die  Neigung  des  Bindegewebs  in 
Wasser  und  wässerigen  Lösungen  zu  quell  e  n.  Dieser  Umstand 
ist  den  Histologen  bereits  bekannt  und,  er  ist  es  offenbar,  der  einer 
ausgedehnten  Anwendung  des  Mittels   bisher  im   Wege  stand. 

Ich  bin  nun  aber  im  Avesentlichen  über  diese  Klippe  dadurch 
hinweggekommen,  daß  ich  die  Stücke  aus  der  Fixierungsflüssigkeit 
sofort  in  absoluten  Alkohol  übertrage  und  mit  diesem  die  Säure 
extrahiere.  In  der  ersten  Woche  wechsele  ich  den  Alkohol  häufig; 
weiterhin  lasse  ich  die  Stücke  noch  einige  Monate  (eventuell  dauernd; 
in    absolutem    Alkohol    liegen    und    wechsele    denselben    noch    einige 


XXII,  3.    Heidenhain:  Die  Trichloressigsäure  als  Fixierungsraittel.    323 

Male  in  größeren  Zwischenräumen.  Nach  dieser  Behandlung  ist 
die  Neigung  der  Stücke ,  bezw.  des  Bindegewebs ,  zu  quellen ,  in 
hohem  Grade  verringert.  Alsdaim  bette  ich  ein,  schneide  und  klebe 
die  Schnitte  auf  (in  diesem  Fall  mit  Eiweißlösung) ,  denn  die  auf 
einer  Unterlage  fixierten  Schnitte  A'^erhalten  sich  meiner  P>fahrung 
nach  gegenüber  Quellung  und  Schrumpfung  bewirkenden  Mitteln 
weniger  empfindlich. 

Es  ist  also  dringend  nötig  die  Stücke  aus  der  Säure  sofort 
in  absoluten  Alkohol  zu  übertragen ,  letzteren  oft  zu  wechseln  und 
diese  Behandlung  einige  Zeit  fortzusetzen. 

In  den  fertigen ,  gefärbten  Präparaten  präsentieren  sich  alle 
derben  Lagen  fibrillären  Bindegewebs  unter  den  Bilde  einer  mehr 
oder  weniger  glasigen  Masse,  innerhalb  deren  die  Bindegewebszellen 
in  sehr  deutlichem  Grade  hervortreten.  Mithin  habe  ich  anfangs 
geglaubt,  daß  es  sich  um  eine  Zerstörung  des  Bindegewebs  handele. 
Späterhin  bin  ich  indessen  zu  der  Überzeugung  gekommen,  daß  dies 
keineswegs  der  Fall  ist.  Vielmehr  sehen  wir  in  diesen  Präparaten 
das  Bindegewebe  sozusagen  nur  von  einer  andern  Seite  her  als  dies 
gewöhnlich  der  Fall  zu  sein  pflegt.  Denn  gewöhnlich  ist  das  Binde- 
gewebe in  unseren  Präparaten  etwas  geschrumpft,  also  auch  ent- 
stellt, jedoch  in  anderem  Grade  als  bei  den  Trichloressigsäurepräpa- 
raten.  Wendet  man  auf  ein  solches  bindegewebsfärbende  Mittel  an, 
so  zeigt  sich,  daß  die  Bindegewebsbündel  keineswegs  verquollen  und 
zerstört,  sondern  samt  ihrer  fibrillären  Struktur  recht  schön  erhalten 
sind ;  ich  besitze  z.  B.  mit  Chromotrop  2  R  gefärbte  Querschnitte 
einer  Zunge  vom  Hunde,  in  deren  Schleimhaut  durchgehends  präch- 
tige, lockige,  fibrilläre  Bindegewebsbündel  sichtbar  sind.  Es  dürfte 
also  nur  darauf  ankommen ,  aus  jener  scheinbar  glasigen  Masse ,  in 
welche  das  fibrilläre  Bindegewebe  nach  Trichloressigsäure-Behandlung 
übergeht,  die  Struktur  wieder  herauszuarbeiten.  Diese  Aufgabe  dürfte 
allerdings  nicht  sehr  dankbar  sein.  Da  nun  aber  gerade  im  Unter- 
richt bei  denjenigen  Organen,  für  welche  sich  die  Trichloressigsäure 
im  besonderen  Grade  eignet,  wie  Drüsen,  Magen,  Darm,  Muskeln, 
das  fibrilläre  Bindegewebe  eine  geringe  Rolle  spielt,  so  meine 
ich,  daß  man  sich  der  zweifellosen  Vorzüge  des  Mittels  erfreuen  und, 
wenn  eine  Darstellung  der  Bindegewebsstruktur  gewünscht  wird, 
anders  fixieren  soll. 

Übrigens  scheint  dies  alles  nur  vom  fibrillären  Bindegewebe 
zu  gelten,  denn  an  jenen  membranösen  Häutchen,  welche  in  vielen 
Organen  (Muskeln,  Drüsen)  die  feineren  Teile  des  Bindegewebsgerüstes 

21* 


324    Heidenhain:  Die  Trichloressigsäure  als  Fixierungsmittel.    XXII.  3. 

ausmachen,  habe  ich  einstweilen  keine  Veränderung  gewahren  können. 
Daher  erscheinen  Organe,  welche  wenig  librilläres  Bindegewebe  ent- 
halten (Herzmuskel,  Pancreas  etc.),  kaum  verändert. 

Schließlich  will  ich  die  Frage,  ob  man  mit  Trichloressigsäure 
fixieren  soll  oder  nicht,  noch  von  einer  andern  Seite  her  beleuchten. 
Meines  Erachtens  nach  ist  nämlich  unser  neues  Mittel  ein  beachtens- 
werter Konkurrent  der  beliebten,  aber  wenig  dankbaren  Müller  sehen 
Flüssigkeit.  Letztere  wird  aus  Rücksichten  der  Bequemlichkeit  sehr 
viel  gebraucht ;  allein  die  Resultate  der  Konservierung  sind  bei 
diesem  Mittel  mäßig  und  die  Haltbarkeit  der  auf  diesem  Wege  ge- 
wonnenen Präparate  ist  geradezu  schlecht.  Wir  haben  in  Würz- 
burg sehr  viel  mit  Müller  scher  Flüssigkeit  gearbeitet  und  unsere 
Schnitte  möglichst  sorgfältig  eingelegt;  jetzt,  10  bis  15  Jahre 
später  ist  der  größte  Teil  der  Präparate  wegen  des  Zurückgehens 
der  Farben  unbrauchbar  geworden,  ja  selbst  die  solidesten  Carmin- 
präparate  sind  abgeflaut.  Aus  diesem  Grunde  wende  ich  die 
MüLLERSche  Flüssigkeit,  falls  es  nicht  dringend  geboten  ist  (Zentral- 
nervensystem!), nicht  mehr  an.  Wie  ich  vermute,  beruht  das  Ver- 
bleichen der  Präparate  aus  Müller  scher  Flüssigkeit  auf  dem  Gehalt 
an  Chromoxyden,  welche  die  Rolle  von  Sauerstoffüberträgern  zu 
spielen  scheinen,  so  daß  die  Farben  wegoxydiert  werden. 

Es  wäre  also  sehr  zweckmäßig,  wenn  wir  einige  Mittel  hätten, 
welche  sich  an  die  Stelle  der  Müller  sehen  Flüssigkeit  setzen  lassen. 
Hierzu  gehört  nun  die  Trichloressigsäure.  Denn  man  kann  mit  ihrer 
Hilfe  verhältnismäßig  große  Stücke  durchfixieren,  einbetten  und 
schneiden.  Die  Präparate  sind  ferner  leicht  und  schön  färbbar  und, 
soweit  ich  weiß,  vorzüglich  haltbar. 

[Eingegangen  am  16.  September  1905.] 


XXir,3.  Heidenhain:  Färbung  von  Knochenknorpel  zu  Kurszwecken.  325 


Über  die  Färbung  von  Knochenknorpel 
zu  Kurszwecken. 

Von 

Prof.  Dr.  Martin  Heideiihaiii 

in  Tübingen. 

In  den  mikroskopischen  Kursen  legen  wir  unseren  Schülern 
einerseits  Knochenschliife,  anderseits  ungefärbte  und  gefärbte  Schnitte 
von  „Knochenknorpel"  vor.  Es  ist  richtig,  daß  die  gefärbten  Schnitte 
entbehrt  w^erden  können,  da  jeder  einigermaßen  durchsichtige  Rasier- 
messerschnitt durch  entkalkten  Knochen  fast  die  ganze  Struktur  zum 
Vorschein  bringt ;  nichtsdestoweniger  ist  es  wünschenswert  zum  Zwecke 
wiederholter  Untersuchungen  und  für  die  die  Vorlesung  begleitenden 
Demonstrationen  über  gut  gefärbte  Schnitte  zu  verfügen.  Aus  diesem 
Grunde  habe  ich  seit  Jahren  immer  wieder  bei  Gelegenheit  des 
mikroskopischen  Kursus  mich  damit  befaßt  nach  einer  einfachen  gut 
ausführbaren  Methode  der  Färbung  von  Schnitten  durch  Kuochen- 
knorpel  zu  suchen.  Folgendes  Verfahren  kann  ich  auf  das  angelegent- 
lichste empfehlen. 

Die  Färbbarkeit  hängt  beim  Knochen  sehr  wesentlich  von  der 
Vorbehandlung  ah.  Ich  benutze  frische  menschliche  Knochen,  welche 
noch  bedeckt  von  den  Weichteilen  sind,  und  lege  sie  in  96prozen- 
tigen  Alkohol  ein.  Von  diesem  Materiale  decke  ich  meinen  Bedarf. 
Ich  entnehme  dem  Mittelstück  eines  kleineren  Röhrenknochens 
unter  Erhaltung  des  Periosts  Stücke  bis  zu  1  cm  Länge  und  lege 
sie  behufs  Entkalkung  in  öprozentige  Trichloressigsäure  ein ;  nach 
der  Entkalkung  übertrage  ich  in  starken  Alkohol  (96prozentigen), 
welcher  viele  Male  gewechselt  wird,  bette  schließlich  in  Celloidin  ein 
und  fertige  Schnitte  von  20  bis  25  u  Stärke  an. 

Sehr  dicke  Knochen ,  wie  die  Tibia ,  werden  auf  diese  Weise 
weder  gleichmäßig  gehärtet,  noch  gleichmäßig  von  der  Trichloressig- 
säure durchdrungen.  Daher  benutze  ich  entweder  die  dünneren 
Teile  von  Radius  und  Ulna  oder  die  Metakarpalknochen.  Letztere 
geben  sehr  hübsche  Bilder,  da  sie  auch  die  Grundlamellen  in  reicher 
Entwicklung  zeigen,  was  ja  nicht  bei  allen  Skeletteilen  so  der  Fall  ist. 


326  Heidenhain:  Färbung  von  Knochenknorpel  zu  Kiirszwecken.  XXII,3. 

An  eleu  Schnitten  entferne  ich  das  Celloidia  nicht ;  sollte  das 
Knochenmark  noch  Fett  enthalten,  so  entfette  ich  zunächst  in  Äther, 
ehe  ich  färbe. 

Die  Vorteile  der  bisher  geschilderten  Proceduren  bestehen 
darin ,  daß  einmal  der  Alkohol  den  Knochen  samt  seinen  Weich- 
teilen genügend  gut  konserviert,  daß  die  Trichloressigsäure  nicht 
zu  kompakte  Knochenstücke  schnell  und  gut  entkalkt ,  daß  die 
Schueidbarkeit  vorzüglich  ist  und  eine  gute  Färbbarkeit  schließlich 
hinterbleibt. 

Das  Färbungsverfahren  besteht  eiufacherweise  darin ,  daß  man 
die  Schnitte  zunächst  in  DELAFiELoschem  Hämatoxylin  tingiert  und 
weiterhin  B  o  r  a  x  k  a  r  m  i  n  einwirken  läßt.  Da  dieses  letztere  Karmin 
stark  alkalisch  ist ,  so  kommt  an  den  mit  Hämatoxylin  gefärbten 
Schnitten  ein  dreifacher  Etfekt  zustande:  1)  wird  der  Schnitt  alka- 
lisch und  die  Farbe  des  Hämatoxylins  geht  somit  in  ein  reines  Blau 
über ;  durch  die  Alkaleszenz  der  Schnitte  wird  die  Haltbarkeit  des 
Hämatoxylins  garantiert ;  2)  wird  das  Hämatoxylin  teilweise  extrahiert, 
was  in  unserem  Falle  einer  histologischen  „Diiferenzierung"  der 
Schnitte  gleichkommt;  3)  nimmt  der  Schnitt  das  Kai'min  auf,  so  daß 
eine  bestimmt  charakterisierte  Doppelfärbung  entsteht.  Nachdem  die 
Schnitte  alsdann  mit  dünnem  Alkohol  abgewaschen  worden  sind,  können 
sie  in  75prozentigem  Alkohol  beliebig  lange  aufbewahrt  werden.  Beim 
Versuch ,  sie  in  Kanadabalsam  einzulegen ,  schrumpfen  sie  stark  zu- 
sammen, und  ich  lege  sie  daher  in  alkoholischen  Glyzeriuleim  ein, 
dessen  Rezept  ich  weiter  unten  mitteile.  Zunächst  mag  es  erlaubt 
sein,  noch  einige  Einzelheiten,  welche  die  Färbungsmethode  betreffen, 
durchzusprechen. 

Das  DELAFiELDSche  Hämatoxylin  Avende  ich  sehr  verdünnt  an 
und  überfärbe  nicht  gerne,  denn  es  zeigt  sich,  daß  das  Hämatoxylin 
beim  Einbringen  in  die  alkalische  Boraxkarminlösung  stark  nach- 
dunkelt. Wenn  man  ein  überfärbtes  Hämatoxylinpräparat  extrahieren 
will,  so  gebe  man  zu  einer  reichlichen  Menge  destillierten  Wassers 
wenig  Essigsäure. 

Das  DELAFiELDSche  Hämatoxylin  (vgl.  Schaffer,  Artikel  „Knochen 
und  Zähne"  in  der  „Enzyklopädie")  färbt  bei  unseren  Schnitten  in 
sehr  hübscher  Weise  die  „Grenzscheiden"  der  Knocheukanälchen, 
so  daß  das  Kanalsystem  der  Grundsubstanz  gut  hervorzutreten  ptlegt. 
Ferner  färbt  es  die  Grundlamellen  dunkler,  die  Haversi sehen 
Lamellen  heller.  Es  ist  also  von  vornherein  eine  gewisse  färberische 
Differenzierung    der    Lamellensysteme    vorhanden.      Weiterhin    erhält 


XXII,3.  Heidenhain:  Färbung  von  Knochenknorpel  zu  Kurszwecken.  327 

mau  eine  Kernfärbiing  aller  Zejlen ,  sowie  eine  Hervorhebung  der 
(wenig  bekannten)  Kitt-  und  Ansatzlinien  aller  Lamellensysteme  ver- 
schiedener Art  und  verschiedenen  Alters. 

Beim  Einlegen  in  das  Karmin  schreitet  die  Differenzierung  der 
Lamellensysteme  in  gleichem  Sinne  fort :  es  extrahiert  sich  das 
Hämatoxylin  leichter  aus  den  HAVERSischen  Lamellen,  schwerer  aus 
den  Grundlamellen.  Diese  bleiben  daher  dunkler,  jene  werden  in 
stärkerem  Grade  aufgehellt;  umgekehrt  aber  färbt  das 
Karmin  die  H  a  v  e  r  s  i  s  c  h  e  n  Lamellen  dunkler,  die 
G  r  u  n  d  1  a  m  e  1 1  e  n  heller,  wodurch  eine  schöne  ,  unter  Umstän- 
den starke,  prächtige  Kontrastfärbung  der  Lamellensysteme  zustande 
kommt.  Die  Färbung  der  Kerne ,  Grenzscheiden ,  Kitt-  imd  An- 
satzlinien bleibt  bestehen,  bezw.  tritt  noch  deutlicher  zutage  als 
vorher. 

Die  Kontrastfärbung  der  Lamelleusysteme  muß  nun  wohl  einen 
in  der  Sache  selbst  liegenden  Grund  haben.  Nach  sorgfältiger  Durch- 
musterung meiner  Präparate  kann  ich  mich  nur  dahin  entscheiden, 
daß  im  allgemeinen  die  im  Verhältnis  älteren  Lamellen  relativ 
mehr  Hämatoxylin  als  Karmin ,  die  jüngeren  umgekehrt  mehr 
Karmin  als  Hämatoxylin  aufnehmen.  Durch  die  Superposition  beider 
Färbungen  wird  der  lebhafte  Kontrast  bewirkt.  Fast  überall,  wo 
ein  jüngeres  Lamellensystem  sich  an  die  Stelle  eines  älteren  gesetzt 
hat,  gewahrt  mau,  daß  das  jüngere  System  stärker  rot,  das  ältere 
stärker  blau  gefärbt  ist.  Man  würde  also  diese  Methode  der  Färbung 
auch  für  wissenschaftliche   Untersuchungen  benutzen  können. 

Nach  dem  Einlegen  in  Glyzerinleim  findet  im  Laufe  von  Wochen, 
Monaten,  Jahren  eineUmfärbung  der  Präparate  statt.  Diese 
beruht  darauf,  daß  das  Karmin  in  dem  Glyzerinleim  löslich  ist, 
während  das  Hämatoxylin  allerdings  konstant  bleibt.  Die  Karmin- 
färbung pflegt  aus  diesem  Grunde  bei  einigen  Schnitten  diffuse  zu 
werden,  in  andern  erhalten  sich  aber  die  ursprünglichen  Kontraste; 
die  Hauptsache  aber  ist,  daß  das  Karmin  sich  mit  der  Zeit  in  den 
Knochenhöhlen  und  teilweise  auch  in  den  Knochenröhrchen  nieder- 
zuschlagen beginnt,  wodurch  sich  allmählich  eine  prächtige  Färbung 
der  Knochenzellen  und  der  Ausläufersysteme  erzeugt.  Vielfach  findet 
man  späterhin  in  den  Kuochenhöhlen  einen  leuchtend  rot  gefärbten 
Plasmakörper ,  während  die  Ausläufer  zum  Teil  wie  früher  blau, 
zum  Teil  ebenfalls  rot  gefärbt  sind.  Bestenfalls  präsentieren  sich 
die  Lückensysteme  der  Grundsubstanz  so ,  als  ob  sie  mit  Fuchsin 
injiziert  seien.     Weiterhin  gewahrt  man  später  eine  differente  Hervor- 


328  Heidenhain:  r<ärbung  von  Knochenknori)el  zu  Kurszwecken.  XXII, 3. 

hebung-  der  Lamellen  innerhalb  d^  einzelnen  Systeme ,  wobei  die 
dichteren  oder  dunkleren  Lamellen  stärker  gefärbt  erscheinen.  Dies 
beruht  jedoch  nicht  darauf,  daß  die  dunkleren  Lamellen  sich  in  der 
ganzen  Tiefe  des  Präparates  färben,  vielmehr  schlägt  sich  das  Karmin 
auf  der  Oberfläche  des  Schnittes  in  stärkerem  Grade  längs  den 
dichteren  Lamellen  nieder,  so  daß  diese  wie  mit  Karmin  angetuscht 
erscheinen.  Hieraus  resultieren  bei  schwächerer  Vergrößerung  zier- 
liche Bilder. 

Da  an  solchen  Präparaten  alle  Weichteile  erhalten  und  gefärbt 
sind,  kann  man  an  ihnen  das  Periost,  die  oberflächlichen  Resorptions- 
stellen mit  den  Ostoklasten ,  die  Resorption  älterer  Lamellensysteme 
im  Innern ,  die  Neubildung  von  solchen  und  die  zugehörigen  Osto- 
klastenlager,  ferner  die  Gefäße,  die  Volkmann  sehen  Kanäle  das 
Knochenmark,  kurz  alle  in  Betracht  kommenden  Teile  des  lebendigen 
Knochens  zeigen.  Nur  die  Sharpey  sehen  Fasern  treten  nicht  deut- 
lich hervor. 

Alle  Bemühungen  diese  Präparate  in  Glyzerinleim  konstant  zu 
machen,  schlugen  bisher  fehl.  Da  aber  die  umgefärbten  Präparate 
ebenfalls  sehr  tauglich  sind,  so  sehe  ich  keinen  Grund  das  Verfahren 
aufzugeben.  Vielleicht  wird  es  später  gelingen  durch  vorgängige 
Anwendung  einer  geeigneten  Beize  (etwa  Zinn,  Blei  oder  Calcium) 
das  Karmin  unlöslich  zu  machen.  In  diesem  Falle  würden  wir  auf 
die  nämliche  Weise  gar  zwei  Reihen  von  Präparaten  erhalten  können, 
solche  ohne  und  solche  mit  Umfärbung,  je  nachdem  die  Beize  voraus- 
geschickt wurde  oder  nicht. 

Schließlich  ist  noch  nötig  die  wenigen  Punkte  zu  besprechen, 
die  beim  Einlegen  der  Präparate  in  Betracht  kommen.  Peinige  Schnitte 
habe  ich  allerdings  durch  steigenden  Alkohol  allmählich  in  eine 
Mischung  von  Kreosot  und  Terpentin  und  alsdann  in  Balsam  über- 
tragen. Hierbei  schrumpfen  indessen  die  Schnitte  und  da  nunmehr 
dieselbe  Farbmenge  auf  einen  geringeren  Flächenraum  sich  verteilt, 
so  dunkeln  die  Schnitte  gleichzeitig  nach.  Daher  ziehe  ich  es  vor 
die  Schnitte  in  Glyzerinleim  einzulegen.  Eine  passende  Formel  ist 
die  folgende : 

Gelatine 45 

Wasser 210 

Glyzerin 35 

Alkohol,  absoluter 70 

Man  löst  zunächst  die  Gelatine  unter  gelindem  Erwärmen  im  Wasser, 
fügt    das  Glyzerin    hinzu    und    filtriert    im  Wärmeofen    bei  56 1^.     In 


XXII,3.  Heidenhain:  Färbung  von  Knochenknorpel  zu  Kurszwecken.  329 

das  klare  Filtrat  gibt  man  unter  heftigem  Umrühren  tropfen- 
weise den  absoluten  Alkohol  hinein. 

Dieser  Glyzerinleim  fault  und  schimmelt  nicht,  wenigstens  wenn 
man  ihn  einigermaßen  sorgfältig,  in  einem  Glas  mit  eingeriebenem 
Deckel,  aufbewahrt.  Erkaltet  ist  er  in  dünner  Schicht  lederartig 
zäh  und  kautschukartig  dehnbar. 

Man  kann  nun  beim  Einlegen  so  verfahren,  daß  man  den  Schnitt 
aus  Wasser  auf  den  Objektträger  bringt,  ihn  mit  Fließpapier  ab- 
trocknet und  glatt  drückt,  dann  den  Leim  aufträgt  und  das  Deck- 
glas darüber  gibt.  In  diesem  Falle  fängt  man  leicht  Luftblasen. 
Ich  verfahre  daher  lieber  wie  folgt.  Ich  mache  eine  genügende 
Quantität  des  Leims  in  einer  flachen  Glasschale  flüssig,  gebe  die 
Schnitte  in  kleinen  Portionen,  zu  5  bis  6  Stück,  in  den  Leim  und 
übertrage  sie  einzeln  mit  dem  angewärmten  Spatel  auf  den  Objekt- 
träger. Nach  Auflegen  eines  (möglichst  großen)  Deckglases  gebe 
ich  dem  Objektträger  eine  starke  Neigung  und  presse  alsdann  das 
Deckglas  kräftig  an ;  hierauf  ebnet  sich  der  Schnitt  und  der  Über- 
schuß des  Glyzerinleims  quillt  heraus.  Bei  Gelegenheit  dieser  Pro- 
cedur  wird  gewöhnlich  der  Objektträger  und  öfters  auch  das  Deck- 
glas längs  dessen  Rändern  von  der  Leimmasse  überschwemmt,  da 
aber  der  Leim  in  einigen  Tagen  eine  lederartige  Konsistenz  annimmt, 
kann  dann  die  übergequollene  Masse  in  Form  eines  zusammen- 
hängenden Häutchens  reinlich  abgezogen  werden. 

Es  ist  durchaus  notwendig  das  Deckglas  so  fest  auf  den  Schnitt 
aufzupressen,  daß  letzterer  zwischen  Deckglas  und  Objektträger 
völlig  eingeklemmt  wird.  Tritt  nämlich  später  die  allmähliche  Lösung 
des  Karmins  ein,  so  ist,  falls  die  beiden  Flächen  des  Schnittes  sich 
aufs  innigste  mit  den  Glasflächen  berühren,  das  Karmin  gezwungen 
durch  das  Lakunensystem  des  Schnittes  hindurchzudiftundieren.  Dies 
ist,  wie  mir  wenigstens  scheint,  die  Ursache  der  nachträglichen 
Färbung  der  Knochenzellen  und  Knochenkanälchen.  Es  empfiehlt 
sich  daher ,  solange  der  Leim  noch  flüssig  ist ,  mit  dem  verkehrten 
Ende  eines  Nadelhalters  das  Deckglas  auf  den  Schnitt  durch  Massage- 
bewegungen anzudrücken.  Eventuell  eiiipfiehlt  es  sich,  den  Objekt- 
träger für  einige  Minuten  auf  den  Paraffinofen  zu  legen  und  das 
Deckglas  mit  Bleigewichten  so  schwer  zu  belasten,  daß  eine  innige 
Adhäsion  der  Schnittoberflächen  am  Glase  erzielt  wird. 

Mit  diesen  Präparaten  habe  ich  sehr  hübsche  Lehrerfolge  in 
den  mikroskopischen  Kursen  erzielt;  auch  benutze  ich  sie  ständig 
bei  den  Demonstrationen.     Sobald  man  sich  darauf  eingearbeitet  hat 


330  Heidenhain:  Über  Massenfärbung- mikMskopischer  Schnitte.  XXII,  3. 

die  beiden  Färbungen  in  Hämatoxylin  nnd  Karmin  kunstgerecht 
gegeneinander  abzuAvägen,  kommt  man  zu  schönen  Resultaten  und 
ich  hoffe,  daß  dieses  „Kurspräparat"  auch  anderwärts  aufgenommen 
werden  wird. 

[Eingegangen  am  16.  September  1905.] 


Über  die  Massenfärbuug  mikroskopischer  Schnitte 

auf  GlimmerpLatten. 


Von 

Prof.  Dr.  Martin  Heidenliain 

iu  Tübingen. 


Hierzu    zwei  Holzschnitte. 


Als  ich  im  Jahre  1899  nach  Tübingen  übersiedelte,  übernahm 
ich  von  meinem  verehrten  Freunde  und  Vorgänger  M.  v.  Lenhossek 
das  Verfahren  Schnitte  zu  Unterrichtszwecken  en  masse  auf  Glimmer- 
platten zu  färben. 

In  Würzburg  war  es  zu  meiner  Zeit  Sitte,  die  meisten  Kurs- 
präparate „frei"  zu  behandeln,  d.  h.  ohne  vorherige  Aufklebung. 
Aufgeklebt  wurden  nur  wenige  feinere  Präparate,  welche  zuvor 
durchgefärbt  wurden.  Der  Wunsch,  die  feinere  Technik  der  Mikro- 
skopie auch  für  die  Kurse  zu  verwerten,  bewog-  mich  dem  Vorgange 
V.  Lenhossek s  zu  folgen  und  so  habe  ich  in  den  verflossenen  Jahren 
die  Methode  der  Massenfärbung  auf  Glimmerplatten  soweit  aus- 
gebildet, daß  auch  meine  studentischen  Assistenten  dieselbe  sich  an- 
eignen und  ausführen  können. 

Der  allgemeine  Modus  procedendi  ist  selbstverständlich  der  gleiche 
wie  beim  Aufkleben  und  Färben  von  Schnitten  auf  Objektträgern. 
Jedoch  gestaltet  sich  die  Technik  bei  gleichzeitiger  Verarbeitung 
einer  sehr  großen  Anzahl  von  Schnitten  und  Verwendung  entsprechend 
großer  Glimmerplatten  naturgemäß  etwas  anders  und  so  will  ich  für 
diejenigen,  die  der  Sache  noch  nicht  näher  getreten  sind,  den  Vor- 
gang kurz  schildern. 


XXII,  3.  Heidenhain:  Über  Massenfiirbung  mikroskopischer  Schnitte.   331 

1)  Anfertigung  der  P  araffin  sclmitte.  Wenn  eine  sehr 
große  Anzahl  von  Schnitten  auf  Glimmerphxtten  aufgelegt  werden 
soll,  so  ist  es  unvermeidlich,  sämtliche  Schnitte  ohne  Unterbrechung 
hintereinander  abzuziehen  und  sie  auf  einer  reinen  Unterlage  auf- 
zusammeln ;  erst  später  kann  dann  die  ganze  Serie  in  zusammen- 
hängender Arbeit  auf  den  Glimmer  übertragen  werden.  Nur  auf 
diese  Weise  wird  eine  gleichmäßige  schöne  Arbeit  geliefert  und  nur 
so  können  später  gleichmäßige  schöne  Färbungen  entstehen. 

Als  Unterlage  für  die  Schnitte  benutze  ich  Zigarrenkästen,  welche 
zugeschlagen  und  mit  weißem  Schreibpapier  überspannt  Averden.  Die 
auf  diese  Weise  erhaltenen  Tischchen  kann  man  leicht  vor  dem  in 
allen  Laboratorien  reichlich  niederfallenden  Staube  schützen ,  wenn 
man  ein  zweites  Blatt  Schreibpapier  benutzt,  um  eine  Art  Deckel 
oder  Klappe  herzustellen,  welche  über  das  Tischchen  hinweggeschlagen 
werden  kann,  sobald  dasselbe  außer  Funktion  ist. 

Bei  dieser  Gelegenheit  möchte  ich  empfehlen  die  Schnittdicke 
niemals  geringer  zu  nehmen  als  im  Hinblick  auf  die  nachfolgende 
Färbung  notwendig  ist ;  denn  man  sollte  Organe  und  Gewebe,  welche 
dem  elementaren  Unterrichte  in  der  Mikroskopie  dienen ,  nie  in 
stärkerem  Grade  zerschneiden  als  irgend  notwendig  ist. 

2)  Die  Glimmer  platten.  Die  Platten  sollten  so  dünn  wie 
möglich,  aber  noch  von  genügender  Haltbarkeit  sein.  Sind  sie  ver- 
unreinigt, so  kann  man  sie  nicht  durch  Abwischen  mit  nassen  Tüchern 
oder  auf  ähnliche  Weise  reinigen ;  denn  wenn  man  auf  die  Fläche 
einer  Glimmerplatte  einen  irgendwie  stärkeren  Druck  ausübt ,  ent- 
stehen in  ihreiQ  Innern  leicht  feinste  irisierende  Sprünge ,  welche 
späterhin  die  Untersuchung  erheblich  stören.  Vielmehr  entfernt  man 
Staub-  und  Schmutzteilchen  meiner  Erfahrung  nach  am  leichtesten, 
wenn  man  die  Platte  vermittels  eines  kräftigen  Strahles  aus  der 
Spritzflasche  gründlich  abwäscht. 

0)  Das  Auftragen  der  Schnitte  auf  die  Platte.  Die 
angenäßte  Glimmerplatte  wird  in  hinreichender  Weise  mit  Wasser 
oder  Eiweißlösung  beschickt.  Als  Eiweißlösung  verwerte  icli  eine 
schwach  alkoholische  Lösung  von  Serumalbumin  (Albumin  aus  Blut, 
puriss,  von  Merck  in  Darmstadt ;  100  gr  =  2*50  Mark).  Das 
Albumin  wird  in  einer  Reibschale  zu  feinstem  Mehle  gerieben  5  4  gr 
davon  werden  auf  100  Wasser  gegeben  und  die  Mischung  kräftig 
geschüttelt.  Darauf  läßt  man  24  Stunden  lang  absetzen,  dekantiert 
und  filtriert  die  Lösung  und  versetzt  sie  schließlich  mit  dem  gleichen 
Volumen  öO^^rozentigen  Alkohols. 


332   Heidenhain:  Über  Massenfärbung  mikroskopischer  Schnitte.  XXII,  3. 

Mau  kann  nun  die  mit  Flüssigkeit  beschickte  Glimmerplatte 
nicht  leicht  ans  freier  Hand  in  zweckmäßiger  Weise  regieren.  Die 
Flüssigkeit  wird  trotz  Aufwendung  aller  möglichen  Geschicklichkeit 
gelegentlich  über  die  Ränder  der  Platte  hinweglaufen,  wobei  sie  dem 
Arbeitenden  über  die  Hände  fließt ;  zudem  veranlassen  unbeabsichtigte 
Bewegungen  der  Platte  leicht  ein  Fortschwimmen  der  Schnitte  u.  s.  f., 
u.  s.  f.  In  der  Tat  ist  es  nicht  möglich  besonders  größere  Platten, 
—  und  ich  benutze  solche  bis  zu  20  cm  im  Geviert  — ,  mit  voll- 
kommener Sicherheit  in  der  Linken  zu  halten  und  entsprechend  zu 
bewegen,  während  die  Rechte  die  Schnitte  aufträgt;  gelingt  das 
Kunststück  einige  Male,  so  wird  es  ein  ander  Mal  mißglücken.  Der 
Grund  hierfür  liegt  meines  Erachtens  nach  darin,  daß  die  Glimmer- 
platte für  sich  allein  zu  leicht  ist;  es  mangelt  eine  genügende 
Wirkung  der  Schwere  auf  die  Hand  und  es  fehlt  der  letzteren  infolge- 
dessen das  richtige  Gefühl  für  die  feinere  Orientierung  der  Platte 
im  Raum  und  die  Kontrolle  durch  das  Auge  allein  genügt  nicht. 
Es  handelt  sich  mithin  darum  eine  gute,  verläßliche,  sichere  Hand- 
habe für  die  Glimmerplatte  zu  finden ,  vermittels  deren  man  die 
auf  der  Platte  befindliche  Flüssigkeitsschicht  samt  den  Schnitten  in 
geeigneter  Weise  zu  balancieren  vermag.  Nach  einigem  Hin-  und 
Herprobieren  bin  ich  nun  schon  vor  Jahren  dazu  gekommen,  die 
Glimmerplatte  auf  ein  in  einen  Holzrahmen  eingesetztes  Drahtnetz 
zu  legen  (Fig.  1).  Dieses  sehr  einfache  Hilfsmittel  genügt  allen  An- 
sprüchen, denn  wir  fassen  nicht  mehr  die  Glimmerplatte,  sondern 
den  Rahmen,  welcher  mit  der  genügenden  Schwere  in  unserer  Hand 
lastet,  so  daß  wir  in  derselben  ein  sehr  feines  Gefühl  für  die  Neigung 
der  Platte  gegen  den  Horizont  haben.  Demgemäß  gelingt  es  dann 
leicht  die  aufgetragene  Flüssigkeitsschicht  ganz  nach  Belieben  durch 
feine  Bewegungen  der  Hand  auf  der  Platte  hin-  und  herzuleiten. 

Das  Drahtnetz  stellt  man  sich  am  besten  selbst  her.  Man  be- 
nutzt den  Rahmen  einer  Schiefertafel  und  arbeitet  in  denselben  ein 
Netz  ein,  dessen  Drähte  in  einfacher  Weise  rechtwinklig  durch- 
einander geflochten  werden ;  die  Maschen  sollten  etwa  1  qcm  groß 
sein.  Benutzt  man  nicht  ein  Netz,  sondern  eine  solide  Papp-  oder 
Holztafel,  so  ergibt  sich  der  Mißstand,  daß,  sobald  einmal  die  Flüssig- 
keit über  die  Ränder  der  Glimmerplatte  hinausfließt,  sie  sich  in  den 
kapillaren  Spaltraum  unter  der  Platte  hineinzieht ;  alsdann  haftet  die 
Platte  durch  Adhäsion  fest  auf  der  Unterlage  und  man  pflegt  sie 
ohne  Gewaltanwendung,  wobei  leicht  Beschädigungen  eintreten,  nicht 
mehr    loszubekommen.     Die  Verwendung    des  Drahtnetzes  garantiert 


XXII,  3.  Ileiclenliain:  Über  Massenfärbung  mikroskopischer  Schnitte.   333 

außerdem  eine  größere  Reinlichkeit  und  ermöglicht  die  Benutzung 
sehr  großer  Glimmerplatteu. 

Die  aufgelegten  Schnitte  sollten  sich  nicht  nach  allen  Seiten  hin 
vollständig  berühren ;  vielmehr  muß  zwischen  ihnen  immer  noch  soviel 
freier  Raum  bleiben,  daß  sie  sich  bei  der  nachfolgenden  Erwärmung- 
bequem  glatt  strecken  können.  Es  ist  daher  am  besten,  wenn  die 
Paraffinschuitte  nicht  rechteckig  sind  und  sich  nur  mit  einigen 
Spitzen  berühren.  Größe  re  Schnitte  legen  sich  bei  weitem  leichter 
auf  als  kleinere,  weil  sie  schwerfälliger  sind,  nicht  vollständig  schwim- 
men und  daher  teilweise  auf  der  Platte  festliegen. 

4)  Erwärmung  und  Streckung  der  Schnitte.  Fixiert 
man  Schnitte  auf   dem  Objektträger,    so  geschieht  die  Prozedur  des 


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Streckens  auf  dem  BoRNScheu  Tischchen.  Ich  habe  daher  früherhin 
die  mit  Schnitten  beschickte  Platte  in  einiger  Entfernung  über  dem 
BoRNSchen  Tischchen  freihändig  hin-  und  herbalanciert,  bis  die 
Schnitte  vollkommen  gestreckt  waren.  Nunmehr  lasse  ich  zu  diesem 
Zwecke  die  Platte  auf  dem  Drahtnetz  liegen.  Weitei'hin  habe  ich 
das  heizbare  Tischchen  abändern  müssen. 

Es  ist  nämlich  der  Schnabel  des  Born  sehen  Tischchens  so 
schmal,  daß,  wenn  bei  geringem  Luftzug  die  Flamme  seitlich  ausweicht, 
neben  dem  Schnabel  ein  glutheißer  Lufthauch  emporkommt,  wodurch 
die  Schnitte  zum  Schmelzen  kommen.  Auch  ist  die  Anwärmung  der  Luft- 
masse über  dem  Born  sehen  Tischchen  überhaupt  zu  ungleichmäßig,  als 
daß  bei  einer  irgendwie  größeren  Platte  eine  allerseits  gleichartige  Ein- 
wirkung auf  die  Schnitte  erzielt  werden  könnte.     Ich  habe  mir  daher 


334  Heidenhain:  Über  Massenfärbung  mikroskopischer  Schnitte.  XXII,  3. 

ein  größeres  Tischchen  mit  doppelter  Phitte  anfertigen  lassen, 
welches  vortreffliche  Dienste  leistet  (Fig.  2).  Seine  Höhe  beträgt 
15  cm;  die  Form  ist  qnadratisch  bei  21  cm  Seite.  Die  Platte  des 
Tischchens  ist  verdoppelt;  beide  Platten  sind  um  die  Dicke  eines 
starken  Eiseudrahtes  voneinander  entfernt,  welcher  am  Rande  des 
Tischchens  zwischen  dieselben  eingeschaltet  ist.  Auf  diese  Weise 
fassen  die  Platten  einen  schmalen  mehrere  Millimeter  hohen  Luft- 
raum zwischen  sich  und  der  unter  dem  Tischchen  befindliche  Mikro- 
brenner  erhitzt  daher  direkt  nur  die  untere,  indirekt  den  Luftraum 
und  die  obere  Platte.  Das  Tischchen  erwärmt  sich  langsam  und 
gleichmäßig;  bringt  man  also  die  auf  dem  Drahtnetz  ruhende  (ilim- 
merplatte  in  passende  Entfernung  darüber,  so  kann  man  die  Streckung 
leicht  und  gefahrlos  besorgen. 

Ist  dies  geschehen,  so  lasse  ich  den  Überschuß  der  Flüssigkeit 
in  sehr  vollkommener  Weise  ablaufen,  sauge  auch  mit  Fließpapier 
alle  sichtbaren  größeren  Flüssigkeitsmengen  ab.  Die  Platte  wird 
alsdann  in  den  Wärmofen  gebracht,  wo  die  Schnitte  bei  33°  bis 
35°  sich  vollkommen  ausebnen  und  fixieren  können. 

5)  Die    Färbung  wird   jeder    geschickte    Mikroskopiker    ohne 
weiteres  in  entsprechender  Weise  handhaben  können.     Es  sind  daher 
nur   wenige  Worte    nötig,     v.  Lenhossek   benutzte    als  Färbeschalen 
die  bekannten  rechteckigen  photographischen  Glaswannen  und  ich  bin 
dabei  im  wesentlichen  geblieben.  Beim  Wechseln  der  Flüssigkeiten  muß 
jedoch  beachtet  werden,  daß  zwischen  der  Glimmerplatte  und  dem  Boden 
der  Schale  immer  eine  gewisse  Menge  Flüssigkeit  befindlich  ist,  welche, 
wenn   die  Übertragimg  von   einem  Reagens  in  das  andere  eine  voll- 
kommene sein  soll,  hinweg  gewaschen  werden  muß.     Es  ergibt  sich 
daraus  die  Regel,  die  Glimmerplatte  gelegentlich  aufzuheben,  so  daß 
der    Boden    des    Gefäßes    und    die    Unterseite    der    Platte    abgespült 
werden    kann.     Am    besten    hebt    man    die  Platte    auf,    wäscht    den 
Boden  des  Gefäßes  rein,  dreht  die  Platte  um,    wäscht    sie    auf   der 
vormaligen  Unterseite  ab,  wendet  die  Platte  wieder  um  u.  s.  f.    Das 
Wenden  der  Platten  geschieht   am  besten    mit  Pinzetten,  welche   an 
den  Enden  winklig  abgeknickt  und  schwimmhautartig  verbreitert  sind 
(Deckglaspincette). 

Vermöge  dieses  Verfahrens  ist  man  in  der  Lage  alle  möglichen 
feineu  und  feinsten  Methoden  der  Färbung  für  den  mikroskopischen 
Kursus  ausnützen  zu  können.  Was  mich  betrifft,  so  habe  ich  alle 
meine  neueren  feinen  Färbungen  (Eisenhämatoxylin ,  Congofarben, 
Beuzopurpurine,  Blauschwarz,  Violettschwarz,  Neutralfarben,  Chromo- 


XXII,  3.  Heidenhain:  Über  Massenfärbung  mikroslvopischer  Schnitte.   335 

trope  etc.)  für  den  Kursus  nutzbar  gemacht.  Nocli  möchte  ich 
darauf  aufmerksam  machen,  daß  mit  dem  Paul  MAYERSchen  Carm- 
alaun,  einem  vortretf liehen  Farbkörper,  bei  12stündiger  Einwirkung 
prächtige  Schnittfärbungen  erzielt  werden  können,  welche  für  den 
Unterricht  in  hohem  Grade  tauglich  sind.  Da  aber  alle  Karrain- 
lösungen dazu  neigen,  Sedimente  abzusetzen,  muß  die  Glimmerplatte 
in  der  Farblösung  vertikal  stehen.  Für  diesen  Fall  benutze  ich 
daher  als  Färbewanne  die  bekannten  Hachen,  parallelepipedisehen 
Präparatengläser  der  makroskopischen  Anatomie.  Das  Hereinsenken 
und  Herausnehmen  der  Glimmerplatteu  aus  der  Farblösung  kann 
man  sich  erleichtern,  indem  man  die  Platte  auf  einer  als  Handhabe 
dienenden    Glasscheibe    durch    Adhäsion   fixiert.     Zu    diesem    Behufe 


beschickt  man  die  Glimmerplatte  nicht  vollständig  mit  Schnitten, 
sondern  läßt  einen  Streifen  von  2  bis  3  cm  frei.  Dieser  muß  jeder- 
zeit über  dem  Spiegel  der  Farbflüssigkeit  befindlicli  sein,  damit  die 
Adhäsion  wirksam  bleibt. 

6)  Austeilung  der  Glimmerplattenpräparate  im  mikroskopi- 
schen Kurse.  Bezüglich  dieses  Punktes  habe  ich  die  Erfahrung 
gemacht,  daß  es  keineswegs  zweckmäßig  ist,  die  Platten  vor  den 
Kursen  schon  durch  Zerschneiden  in  die  einzelnen  Präparate  auf- 
zulösen, denn  die  letzteren  bestoßen  sich  leicht  gegenseitig;  auch 
ist  die  Austeilung  der  Präparate  erschwert.  Somit  bringe  ich  die 
unter  Xylol  aufbewahrte,  unversehrte  Platte  ins  Kurszimmer,  schneide 
bei  der  Austeilung  Streifen  um  Streifen  herunter  und  trenne  wiederum 
von  jedem  Streifen  den  einzelnen  Schnitt  so  ab ,  daß  er  auf  den 
untergehaltenen  Objektträger    des  Kursisten    fällt.     Auf  diese  Weise 


336   Heidenhain:  Über  Massenfärbung- mikroskopischer  Schnitte.  XXII,  3. 

kann    leb    50  bis   60  Präparate    in    2  Minuten    austeilen ,    eine    Zeit- 
ersparnis, ohne    die  ich  hierorts  gar  nicht  durchkommen  würde. 

7)  Anlegung  eine  r  Sammlung  von  Paraffin  schnitten. 
Da  icli  hierorts  die  sämtlichen  für  den  mikroskopischen  Kurs  be- 
nötigten Präparate  allein,  nur  mit  Hilfe  zweier  jedesmal  ad  hoc 
angelernter,  studentischer  Assistenten  herstelle,  ist  es  mir  unmöglich, 
in  jedem  Jahre  alle  Präparate  von  neuem  anzufertigen.  Daher  lasse 
ich  von  jedem  Präparate  die  doppelte  oder  dreifache  Anzahl  der 
erforderlichen  Schnitte  herstellen  und  sämtlich  auf  Glimmerplatteu 
fixieren.  Die  erübrigten  Schnitte  werden  für  spätere  Jahre  gut  be- 
zeichnet zwischen  Fließpapier  in  Mappen  nach  Materien  geordnet 
aufbewahrt.  Auf  diese  Weise  bin  ich  jederzeit  in  Besitz  einer  ge- 
waltigen Sammhing  von  Paraffinschnitten,  welche  in  jedem  Augen- 
blick gebrauchsfähig  sind.  Diese  Sammlung  erstreckt  sich  über  alle 
Gewebe  tmd  alle  Organe  und  geht  der  Schnittzahl  nach  in  die 
Tausende.  Dabei  sind  schließlich  viele  Reste  von  Präparaten  übrig 
geblieben ,  die  für  den  mikroskopischen  Kursus  wohl  nicht  mehr 
ausreichen,  wohl  aber  gelegentlich  für  Spezialuntersuclumgen ,  für 
Färbungsproben,  für  Organ-  und  Gewebsdiagnosen  im  Examen  etc. 
dienen. 

[Eingegangen  am  16.  September  1905.] 


XXII, 3.  Heidenhain:  Anwendung- des  Azokarmins  u.  der  Chromotrope.  3;^7 


Über  die  Anwendung  des  Azokarmins  und  der 

Chromotrope. 

Von 

Prof.  Dr.  Martin  Heidenhain 

In  Tübingen. 

Unlängst  habe  ich  in  dieser  Zeitschrift  (Bd.  XX,  1903,  p.  179 
bis  186j  darüber  Bericht  erstattet,  daß  einige  Amidoazokörper,  näm- 
lich die  Congofarbstotfe  und  Benzopnrpurine,  mit  großem  Vorteil  aus 
rein  alkoholischen  Lösungen  auf  den  Schnitt  aufgefärbt  werden  kön- 
nen. In  dieser  Art  der  Anwendung  liegt  ein  neues  Prinzip,  da  bisher 
nur  die  wässrigen  Farbstotflösungen  benutzt  wurden.  Während 
nämlich  kein  Zweifel  ist ,  daß  im  letzteren  Falle  der  für  uns  Histo- 
logen  wesentliche  Teil  des  Färbungsprozesses  auf  den  chemi- 
schen Wechsehvirkungen  zwischen  den  Farbkörpern  einerseits  und 
den  Eiweißkörpern  der  mikroskopischen  Schnitte  anderseits  beruht, 
tritt  bei  Färbungen  aus  rein  alkoholischer  Lösung  nach  neueren  Er- 
fahrungen (Bethe  ,  ich)  der  Chemismus  zurück  und  es  bleiben  die 
rein  physikalischen  Verhältnisse  der  Imbibition ,  Adsorption  und  Lö- 
sung der  Farbe  im  Schnitt  als  beherrschende  Faktoren  des  Vorgangs 
bestehen.  Man  kann  also  offenbar  ein  und  denselben  Farbkörper  in 
gänzlich  verschiedener  Weise  anwenden,  je  nachdem  man  ihn  in 
Wasser  oder  Alkohol  löst. 

Der  praktische  Zweck  jener  neuen  Färbungen  aus  alkoholischer 
Lösung  lief  darauf  hinaus  die  Eosine  zu  ersetzen.  Diese 
letzteren  sind,  wie  bekannt,  als  Nachfarbe  nach' Ilämatoxylin  seit 
Jahrzehnten  in  Gebrauch.  Nichtsdestoweniger  sind  Eosinfärbungen 
eigentlich  recht  wenig  leistungsfähig,  denn  1)  ziehen  sie  nur  schwierig 
auf  den  alkalischen  Schnitt,  während  eben  doch  mit  Hämatoxylin 
gefärbte  Schnitte  um  der  Haltbarkeit  willen  alkalisch  gemacht  werden 
sollen ;  und  2)  „schmieren"  sie  stark,  d.  h.  sie  färben  nicht  scharf, 
sondern  überziehen  den  Schnitt  mit  einer  mehr  oder  weniger  gleich- 
mäßigen  roten  Tönung, 

Die  von  mir  empfohlenen  Färbungen  vermittels  der  Amido- 
körper  sind  nun  in  der  Tat  frei  von  den  bezeichneten  Fehlern,   denn 

Zeüschr.  f.  wisR.  Mikroskopie.     XXII.  3.  22 


338  Heidenhain:  Anwendung  des  Azokarmins  u. der  Chromotrope.  XXII,3. 

sie  färben  auch  alkalische  Schnitte  leicht  in  distinkter  Weise;  allein 
bei  vielfachem  Gebrauch  der  alkoholischen  Farbstotflösnngeu  haben 
sich  mit  der  Zeit  doch  einige  Mißstände  deutlich  herausgestellt,  welche 
eine  Verbesserung    des  Verfahrens  wünschenswert  erscheinen  ließen. 

Ein  erheblicher  Übelstand  ist  es  zunächst,  daß  die  alkoholischen 
Lösungen  der  in  Betracht  kommenden  Benzidin-  und  Tolidinfarbstotfe 
wenig  konstant  sind.  Es  zeigte  sich  nämlich,  daß  anfänglich  aller- 
dings verhältnismäßig  viel  von  der  Trockensubstanz  des  Farbkörpers 
durch  den  Alkohol  aufgenommen  wird,  daß  aber  kurze  Zeit  darauf 
der  in  Lösung  befindliche  Stotf  in  einen  neuen,  andersartigen,  weniger 
löslichen  Zustand  übergeht  und  deswegen  sukzessive  wieder  ausfällt. 
Daher  mindert  sich  die  Konzentration  der  Lösung  binnen  wenigen 
Tagen  in  dem  Grade,  daß  sie  unbrauchbar  wird.  Ja  ich  möchte 
glauben,  daß  je  nach  der  Güte  des  absoluten  Alkohols  von  vorn- 
herein bald  mehr  bald  weniger  Farbe  löslich  ist,  so  daß  auch  die 
anfänglich  erhaltenen  Lösungen  nicht  immer  gleich  gut  färben. 

Weiterhin  machte  ich  die  Erfahrung,  daß  die  Haltbarkeit  der 
fertigen  in  Balsam  aufgestellten  Präparate  zu  wünschen  übrig  ließ. 
Hier  kommt  in  erster  Linie  in  Betracht,  daß  die  Congofarbstotfe  und 
Benzopurpurine  bei  den  Technikern  als  nicht-lichtecht  gelten.  In 
den  von  mir  beobachteten  Fällen  allerdings  kann  ich  wohl  mit  gutem 
Grunde  die  Schuld  an  dem  Zurückgehen  der  Farbe  auf  jene  geringen 
Jodmengen  schieben,  welche  in  Sublimatpräparaten  nach  dem  Jodieren 
derselben  bei  nicht  genügender  Vorsicht  leicht  zurückbleiben.  Es 
zeigte  sich  nämlich,  daß  verschiedene,  gleichzeitig  hergestellte  Schnitte 
desselben  Präparates  teils  die  Farbe  bewahrten,  teils  auch  nicht; 
letzteren  Falls  machte  sich  dabei  eine  deutliche  Abänderung  der 
Farbentönung  in  der  Piichtung  nach  Schwarz  kenntlich.  Da  nun  die 
einzige  Variable  nur  in  dem  geringen  Jodgehalt  gegeben  sein  konnte, 
so  stellte  ich  daraufhin  einige  Versuche  an,  und  es  zeigte  sich  sofort, 
daß  durch  Jod  die  roten  Amidoazokörper  aus  wäss- 
r  i  g  e  r  Lösung  in  s  c  h  ^\'  ä  r  z  1  i  c  h  e  n  Massen  ausgefällt 
werde  n.  Da  nach  früheren  Erfahrungen  auch  die  Farben  der 
Triphenylmethangruppe  (Methylviolett,  Fuchsin,  BiONDische  Lösung 
etc.  etc.)  nach  der  Jodierung  der  Schnitte  leicht  verbleichen,  so 
leitet  sich  hieraus  die  Regel  ab,  daß  man  aus  jodierten  Präparaten 
das  freie  Jod  vollständig  entfernen  soll,  z.  B.  durch  kurzes  Eintauchen 
der  Schnitte  in  eine  schwache  Sublimatlösung  (1  :  1000).  Dieser 
Fehler  der  Technik  wäre  also  leicht  zu  beheben ;  allein  da  blieb 
noch  die  Frage  der  Lichtunechtheit  und  der  Inkonstanz  der  Lösungen, 


XXII,3.  Heidenliain:  Anwendung  des  Azokarmins  u. der  Chromotrope.  339 

und  so  erschien  es  mir  besser  noch  einmal  auf  die  Suche  zu  gehen, 
um  Farbkörper  zu  finden,  welche  bei  gleichen  Vorzügen  frei  sind 
von  den  Schwächen  der  Congofarben  und  Benzopurpurine. 

Ich  habe  nun  eine  größere  Reihe  saurer  Farbkörper  in  An- 
wendung gezogen  und  darunter  einige  gefunden,  welche  gute,  zum 
Teil  glänzende  Resultate  liefern,  während  mit  der  Mehrzahl  aller- 
dings gar  nichts  anzufangen  war. 

Sehr  schöne  Resultate  hatte  ich  zunächst  mit  dem  Azokarmiu 
B.  (Bad.  Anilin-  u.  Sodafabr.  Ludwigshafen).  Dieser  Farbkörper  ist 
wiederum  eine  Amidosäure,  nämlich  das  saure  Natriumsalz  der  Phenyl- 
rosindulintrisulfosäure.  Er  löst  sich  einigermaßen  leicht  in  Alkohol, 
mehr  noch  in  Methylalkohol  und  liefert  prachtvolle,  scharfe,  rubin- 
rote Färbungen  des  Bindegewebes,  welches  er  einschließlich  der 
feinen  Basalmembranen  unter  den  Epithelien  vorzüglich  tiugiert.  Die 
Färbung  erstreckt  sich  in  zweiter  Linie  auch  auf  das  Protoplasma, 
besonders  der  Epithelzellen,  Muskelzellen,  Eier  u.  s.  f.  Ebenso  be- 
steht eine  gewisse  Neigung  für  Schleimfärbung,  so  daß  in  einigen 
Fällen  die  Mucingranula  gut  hervortraten. 

Hier  wie  bei  allen  andern  Färbungen  aus  absolutem  Alkohol 
zeigte  sich,  daß  chromierte  Präparate  die  Farbe  schneller  aufnehmen 
als  nichtchromierte  Objekte ;  doch  bedurfte  es  nur  eines  längeren 
Zuwartens,  um  fast  in  allen  Fällen  vortretfliche  Resultate  zu  erhalten, 
so  daß  ich  mit  diesem  Mittel  massenhafte  Präparate  zu  Kurszwecken 
herstellen  konnte. 

Dieser  Farbkörper  soll  nun  ganz  besonders  echt  sein  und 
demgemäß  habe  ich  bisher  ein  Zurückgehen  der  Farbe  nicht  wahr- 
nehmen können.  So  Aväre  nun  alles  in  schönster  Ordnung,  wenn 
nicht  der  Farbkörper  eine  Eigenheit  hätte,  die  bei  vielfachem  Ge- 
brauche öfters  störend  hervortritt;  er  setzt  sich  nämlich  hin  und 
wieder  auf  der  Obertläche  der  Schnitte  in  kleinen  Kristallen  ab. 
Da  die  Lösungen  immer  gut  filtriert  wurden  und  ganz  klar  waren, 
kann  es  nur  die  Rauhigkeit  der  Schnittobertläche  sein,  welche  be- 
wirkt, daß  der  Körper  aus  der  konzentrierten  Lösung  gerade  an 
dieser  Stelle  sich  ausscheidet.  Wurden  aber  nicht-kouzentrierte 
Lösungen  verwendet,  so  fielen  die  Tinktiouen  bei  den  nicht-chromier- 
ten  Präparaten  mangelhaft  aus.  Ich  komme  also  zu  dem  Schlüsse, 
daß  ich  zwar  viele  tadellose,  zum  Teil  prachtvolle  Präparate  ver- 
mittelst des  Azocarmins  erhalten  habe,  daß  der  Körper  aber  trotz- 
dem für  den  fortwährenden  Gebrauch,  besonders  bei  Massenfärbungeu 
für    den  Unterricht    nicht    allgemein    anwendbar   ist.     Will  man  den 

22* 


340  Heidenhain:  Anwendung- des Azokarmins  u. der  Chromotrope.  XXII,3. 

Farbstoff  für  spezielle  Z^vecke  verwerten,  was  ich  nur  anempfehlen 
kann,  so  lasse  man  die  frisch  hergestellte,  konzentrierte  Lösung 
einige  Tage  stehen,  damit  der  Farbstoff,  da  er  die  Neigung  hat  aus- 
zukristallisieren,  so  weit  als  möglich  sich  absetzt.  Hat  man  dennoch 
Kristalle  auf  der  Schnittfläche  erhalten,  so  bringe  man  die  Präparate 
in  Wasser,  in  welchem  die  Farbkörperchen  augenblicklich  in  Lösung 
gehen.  Für  chromierte  Präparate  empfiehlt  sich  die  Verwendung 
nicht  ganz  konzentrierter  Lösungen. 

Bei  weitem  angenehmer  gestalten  sich  alle  Umstände  bei  einer 
zweiten  Klasse  von  Farbkörpern,  bei  den  Chromotropen  (Höchster 
Farbwerke).  Diese  färben  leicht  und  tadellos  aus  alkoholischen 
Lösungen,  welche  nicht  einmal  konzentriert  zu  sein  brauchen.  Sie 
ziehen  auf  den  alkalischen  Schnitt  bei  jeder  Art  der  Vorbehandlung, 
sie  schmieren  nicht,  sondern  zeichnen  differente  Bilder,  sie  tingieren 
in  prachtvoll  roten  Nuancen  und  sind,  Avie  versichert  wird,  in  hohem 
Grade  haltbar.  Diese  Farbkörper  haben,  wie  ich  glaube,  in  der 
Praxis  der  Histologie  eine  große  Zukunft  vor  sich  und  werden  die 
Eosine  vielfach  ersetzen. 

Die  Chromotrope  leiten  sich  sämtlich  von  der  Chromotrop- 
säure  ab  und  sind  Azoderivate  der  letzteren. 

OH    OH 


SO3H.  \y\^y  -so^H 

Chromotropsäure. 

Bei  dieser  so  beschaffenen  Konstitution  sind  für  den  Techniker 
die  beiden  in  Peristellung  befindlichen  Hydroxylgruppen  wichtig. 
Diese  verleihen  dem  Körper ,  auch  wenn  die  beiden  Sulfonsäure- 
gruppen  durch  Na  abgesättigt  sind ,  einen  s  c  h  w  a  c  h  s  a  u  r  e  n  Cha- 
rakter. Das  gleiche  gilt  für  die  von  der  Chromotropsäure  sich 
ableitenden  gelb-  bis  blaurot  getönten  Azofarbstoffe.  Als  Beispiel 
setze  ich  die  Formel  des  Chromotrop  2R  her,  mit  welchem  ich 
in  der  Tat  Tausende  von  Schnitten  fingiert  liabe. 

OH    OH 


N  =  N  •  CßH, 
Chromotrop  2R. 


SO3  Na  •  '         .1  I  •  SO3  Na 


XXII,3.  Heidenliain:  Anwendung  des  Azokarmins  u. der  Chromotrope.  341 

Es  können  nun  diese  Farben  auf  Grund  ihres  schwachsauren 
Charakters  Metall  aufnehmen  (Fe,  Cu  u.  s.  f.J,  wodurch  sie  eine  deut- 
liche Abänderung  ihrer  Nuance  erleiden ,  ein  Umstand ,  der  für  den 
Techniker  sehr  wichtig,  für  den  Mikroskopiker  einstweilen  ohne  Be- 
deutung ist. 

Eine  solche  Konstitutionsformel ,  wie  die  zitierte ,  läßt  nun  ge- 
wisse Vergleiche  mit  dem  Aufbau  des  Alizarins  zu, 

OH 

Alizarin. 

denn  die  beiden  benachbarten  Hydroxyle  verleihen  dem  Alizarin  einen 
ausgesprochen  sauren  Charakter ,  weshalb  es  befähigt  ist,  mit  basi- 
schen Körpern  Salze  zu  bilden,  Avobei  die  gelbliche  Farbe  des  freien 
Alizarins  in  Rot  übergeht. 

Es  kann  daher  nicht  auffallen,  daß  die  Chromotrope  ebenso  wie 
die  Alizarine  beizenziehende  Farbkörper  sind,  nur  mit  dem  Unter- 
schiede ,  daß  die  ersteren  auch  ohne  vorgängige  Beize  aus  Wasser 
oder  Alkohol  aufgefärbt  werden  können.  Aus  allem  diesem  erhellt, 
daß  die  Chromotrope  auf  drei  sehr  verschiedene  Weisen 
verwendet  werden  können.     Man  kann  nämlich  färben : 

1)  aus  wässeriger  Lösung,  und  zwar 

a.  auf  eine  Metallbeize ,  wobei  die  Hydroxyle  ins  Spiel 
kommen ; 

b.  oder  ohne  Beize  unter  Znsatz  freier  Säure ,  w^obei  die 
Sulfonsäuregruppen  aktiv  werden  und'  die  Verankerung 
der  Farbe  am  Schnitt  bewirken. 

2)  aus  alkoholischer  Lösung,  wobei  der  Chemismus  weniger 
wirksam  wird  und  die  physikalischen  Faktoren  des  Färbungs- 
prozesses in  den  Vordergrund  treten. 

Über  die  aus  wässeriger  Lösung  möglichen  Färbungen  stehen 
mir  einstweilen  noch  keine  Erfahrungen  zu  Gebote ;  jedoch  habe  ich 
die  Absicht,  die  Chromotrope  auch  nach  dieser  Richtung  hin  genauer 
zu  bearbeiten.  Man  würde  nämlich,  wenn  man  aus  saurer  Lösung 
auffärbt,    offenbar    die    Hydroxyle    für    die    Einwirkung    einer    nach- 


342  Heidenhain:  Anwendung  des  Azokarmins  u. der  Chromotrope.  XXII,3. 

« 

folgenden  basischen  Farbe  frei  behalten ,  mit  andern  Worten : 
wahrscheinlich  werden  sich  diese  Farbstoife  vorzüglich  für  Neutral- 
färbungen  eignen,  ein  Gebiet,  mit  welchem  ich  mich  bereits  viel- 
fach beschäftigt  habe. 

Die  Tabellen  von  Schultz  und  Julius  führen  neun  verschiedene 
Chromotrope  auf.  Ich  selbst  habe  vier  derartige  Körper  durch- 
probiert, nämlich  die  Chromotrope  2  R,  2  B,  6  B,  7  B,  welche,  obwohl 
sie  der  Konstitntion  nach  teilweise  erheblich  voneinander  abweichen,  ^ 
docli  im  wesentlichen  übereinstimmende,  nnd  zwar  vorzügliche  Eigen- 
schaften aufweisen ,  so  daß  man  bei  der  speziellen  Auswahl  die 
Nuance  der  Farbkörper,  ihre  Löslichkeit  und  andere  Nebeneigen- 
schaften berücksichtigen  kann. 

In  dieser  Hinsicht  erwähne  ich  zur  näheren  Orientierung  folgen- 
des. Die  Chromotrope  2R  und  2B  gehen  mehr  nach  Gelbrot,  6B 
und  7  B  mehr  nach  Blaurot.  2  B  löst  sich  relativ  wenig  in  abso- 
lutem Alkohol  und  die  Tinktionen  gehen  dalier  etwas  langsam  vor 
sich.  Die  an  den  Schnitten  produzierte  Nuance  ist  ein  kräftiges 
Orangerot.  Jedoch  färbt  dieser  Körper  im  Ganzen  nicht  sehr  tief, 
so  daß  feinere  Strukturteile  hell  bleiben,  und  daher  sind  die  andern 
Chromotrope  entschieden  vorzuziehen. 

Der  Chromotrop  2  R  löst  sich  stärker  als  2  B,  jedoch  geht  beim 
Filtrieren  der  alkoholischen  Lösung  ein  guter  Teil  des  aufgeschwemmten 
Farbkörpers  durch  den  Filter  hindurch.  Dies  schadet  nun  nichts, 
denn  beim  Auswaschen  des  gefärbten  Präparates  in  reinem  Alkohol 
löst  sich  das  Sediment ,  welches  sich  auf  den  Schnitten  niedersetzt, 
in  leichtester  Weise.  Außerdem  kann  man  gänzlich  ohne  Schaden 
für  die  nachfolgende  Färbung  das  trübe  Filtrat  so  stark  mit  reinem 
Alkohol  verdünnen,  daß  alle  suspendierten  Teilchen  sich  klar  lösen. 
Die  an  den  Schnitten  erhaltene  Nuance  ist  ein  sehr  schönes,  kräf- 
tiges Kirschrot. 

Die  Chromotrope  6  B  und  7  B  verhalten  sich  ganz  ähnlich  und 
sind  in  ähnlicher  Weise  zu  behandeln.  Jedoch  sind  sie  viel  dunkler 
und  die  an  den  Schnitten  erhaltene  Nuance  ist  ein  prächtiges  Rubinrot. 

Die  histologischen  Färbungsresultate  sind  wirklich  exzellent. 
Die  bindegewebigen  Teile  werden  prächtig  dargestellt ;  auch  die 
Basalmembranen ,  teilweise  selbst  das  Reticulum  der  lymphatischen 
Organe  nehmen  die  Farbe  an.  Die  elastischen  Fasern  bleiben  aller- 
dings ununterscheidbar ;  wo  aber  starke,  elastische  Häute  vorhanden 


^)  Die  Formeln  siehe  in  Pflügers  Archiv  Bd.  XC,  p.  212. 


XXll,o.  Hefdenhain:  Anwendung  des  Azokarmins  u.  der  Chroinotrope.  343 

sind,  treten  sie  stark  gefärbt  hervor.  Embryonale  Knochensubstanz 
färbt  sich  sehr  stark ,  ein  Umstand ,  den  ich  zu  Kurszwecken  aus- 
nützte. Sclileimfärbungen  kommen  nicht  immer  zustande ;  es  gelang 
mir  aber  mittels  des  Cliromotrop  2  R  die  verschleimten  Teile  des 
Oberflächenepithels  des  Magens  präclitig  zu  färben. 

Diese  Farbkörper  wirken  auch  protoplasmafärbend,  und  zwar 
in  günstigem  Sinne,  d.  h.  mit  der  Tendenz  zur  Ditferentiation  sehr 
feiner  Teile.  Hierüber  liegen  mir  mehrfache  Erfahrungen  vor.  Im 
ganzen  habe  ich  bisher  über  30  verschiedene  Gewebe  und  Orgaue 
mit  verschiedenen  Chromotropen  gefärbt  uud  bin  fast  immer  zu  tretf- 
lichen  Resultaten  gekommen,  besonders  auch  bei  den  Massenfärbungen 
für  die  mikroskopischen  Kurse.  Daher  glaube  ich,  daß  diese  Farb- 
stoffe sich  binnen  kurzem  einbürgern  und  ein  dauerndes  Hilfsmittel 
in  der  Hand  der  Mikroskopiker  sein  werden. 

Die  gesammte  Färbungsprocedur  ist  also  denkbar  einfach  uud 
verläuft  in  folgenden  Stationen : 

1)  Kernfärbung  in  DELAFiELDSchem  Hämatoxylin  5  eventuell 
Differenzierung  desselben,  Abwaschen  in  Wasser,  Einlegen  in  96pro- 
zentigen  Alkohol. 

2)  Alkalesziereu  der  Schnitte.  Hierzu  benutze  ich  nach  vielen 
Versuchen  einen  ammoniakalischen  Alkohol,  welcher  auf 
1  Liter  absoluten  Alkohol  1  cbcm  Salmiakgeist  enthält.  Die  Schnitte 
bläuen  sich  in  kürzester  Zeit.  Der  alkalische  Alkohol  wird  darauf 
in  das  Standgefäß  zurückgegossen  und  durch  reinen  Alkohol  ersetzt. 

3)  Färbung  vermittels  einer  alkoholischen  Chromotroplösung  5 
diese  Lösung  kann  konzentriert  sein,  aber  auch  verdünnte  Lösungen 
verlieren  die  Färbekraft  nicht. 

4)  Auswaschen  in  reinem  absoluten  Alkohol,  Xylol,  Balsam. 

[Eingegangen  am  16.  September  1905.] 


344    Pauly:  Methode  zur  Bestimmung  der  Brechungsexponenten.  XXII,  3, 


Über  eine  einfache  Methode   zur  Bestimmung  der 
Brechungsexponenten  von  Flüssigkeiten. 

Von 


Anton  Panly 

Wien. 


Hierzu   eine  Textfigur. 


Zahlreiche  mineral-mikroskopische  Arbeiten,  bei  welcbeu  es 
wünschenswert  war ,  die  Brecliungsexponenten  von  Flüssigkeiten  zu 
bestimmen,  führten  mich  dahin.  Versuche  zu  unternehmen,  um  eine 
Methode  zu  finden,  mittels  welcher  man,  ohne  kostspielige  Apparate, 
an  einer  sehr  geringen  Menge  von  Flüssigkeit  den  Brechungs- 
exponenten bestimmen  kann,  imd  zwar  sollte  dies  mit  einer  erreich- 
baren Genauigkeit  von  2  bis  3  Einheiten  der  vierten  Dezimalstelle 
geschehen  können. 

Die  Methode  beruht  auf  folgender  tlberleguug,  die  eine  glück- 
liche Modifikation  der  AMSRONNSchen  Methode  (siehe:  Ambronn,  H., 
Königlich  sächsische  Akademie  der  Wissenschaften,  1893,  p.  3) 
darstellt. 

Der  geometrische  Ort  aller  Indices  bei  einem  optisch  einachsigen 
Mineral  ist  ein  Rotationsellipsoid.  Jeder  Schnitt  durch  ein  solches 
Rotationsellipsoid,  vorausgesetzt,  daß  er  durch  den  Mittelpunkt  geht, 
bildet  eine  Ellipse.^ 

Sind  die  zwei  Achsen  der  Ellipse  gegeben,  so  läßt  sich  jeder 
Radiusvektor  berechnen ,  wenn  der  Winkel ,  den  er  mit  den  Achsen 
einschließt,  gegeben  ist. 

a  •  h 
1/  h'  sin'^  {ap)  -{-  a^  cos-  {ap) 

Da  aber  die  Achsen  der  Ellipse  gleich  den  Hauptbrechungs- 
exponenteu  des  einachsigen  Minerales  gemacht  werden,  a  =  2f,  6  =  |, 


^)  Vgl.  Rosenbusch,  H.,   Mikroskopische   Physiographie   der  Minera- 
lien, 1904,  p.  68. 


XXII,  3.  Pauly:  Methode  zur  Bestimmung  der  Brechungsexponenten.    345 

so  sind  die  Radiusvektoren  j)  =  7/ ,  gleich  den  zwischen  a  =  ir 
und  6  =  1  liegenden  Breclmngsexponenten  n ,  und  der  unter  dem 
Winkel  (wn)  zu   v  gerichtete  Index  ist  gleich  (nach  obiger  Formel), 

)l  = 


i/"!"^  sin-  {wn)  +  w-  cos-  [wn) 

Beim  Doppelspat  sind  die  Hauptbrechungsexponenten  (bei  Na- 
Licht)  iCna  =  l'G585,  ^,ui  =  1*4864,  alle  andern  Indices  zwischen 
1-6585  und   1-4864  liegen  auf  der  Ellipse. 

Hat  man  also  eine  parallel  zur  Hauptachse  geschnittene  Doppel- 
spatplatte, so  kann  man  damit  alle  Brechimgsexponenten  von  1*4864 
bis  1-6585  messen,  wenn  man  den  Winkel  {ic  n)  kennt,  indem  man 
jenen  Brechungsexponeiiten  sucht ,  der  gleich  dem  Index  der  zu 
untersuchenden  Flüssigkeit  ist,  und  indem  man  die  Richtung,  d.h. 
den  Winkel  {ivn)  bestimmt. 

Bei  der  praktischen  Ausführung-  verfährt  man  auf  folgende  W^eise : 
Man  gibt  von  der  zu  untersuchenden  Flüssigkeit  ein  Tröpfchen  auf 
die  Doppelspatplatte,  bedeckt  mit  einem  Deckglas,  und  schaltet  den 
Polarisator  zur  Festlegung  der  Schwingungsrichtung-  ein.  Der  durch 
den  Nikol  gehende  Strahl  schwingt  nur  in  einer  ganz  bestimmten 
Richtung,  und  nur  der  parallel  zu  dieser  Schwiugungsrichtung  liegende 
Brechungsexponent  kann  zur  Geltung-  kommen.  Da  der  Flüssigkeits- 
tropfen isotrop  ist ,  ist  bei  demselben  der  Breclnmgsexponent  nach 
allen  Seiten  hin  der  gleiche.  Nach  eingeschaltetem  Polarisator  dreht 
man  den  Objekttisch  mit  dem  Präparat  so  lange ,  bis  die  Uneben- 
heiten der  Oberfläche  desselben  oder  die  Grenzen  des  Randes  ver- 
schwinden. (Über  das  Verschwinden  der  Grenzen  und  die  dabei 
auftretenden  Farbenerscheinungen  siehe :  Schröder  v.  d.  Kolk,  Kurze 
Anleitung  zur  mikroskopischen  Kristallbestimmung,  Wiesbaden  1898, 
und  Ambronn,  H.,  Königl.  sächsische  Gesellsch.  d,  Wissenschaften, 
Leipzig   1896.) 

Der  beim  Verschwinden  der  Unebenheiten  am  Rande  des  Ob- 
jekttisches abgelesene  Winkel  sei  A.  Hierauf  dreht  man  weiter  bis 
die  Grenzen  wieder  verschwinden,  die  am  Rande  des  Objekttisches 
nun  abgelesene  Zahl  sei  B. 

Die  halbe  Differenz  der  beiden  Ablesungen,  ^  .,  {A  — B)  =  T  , 
ist  der  Winkel,  um  den  man  den  Doppelspat  drehen  mußte,  d.  h. 
der  Winkel,  den  der  zu  suchende  Brechimgsexponent  mit  dem  Haupt- 
brechungsexponenten einschließt.  Aus  dem  Winkel  T'  läßt  sich  )i 
wie  folgt  berechnen : 


346    Pauly:  Methode  zur  Bestimmung  der  Brechungsexponenten.  XXIl,  3. 


n 


w'ii 


|A|i2gin2^_^^2cos2F 


oder  man  kann  den  Index  n  graphisch  finden,  indem  man  sich  ein 
Schema  anlegt ,  auf  dessen  horizontaler  Koordinate  man  die  n  auf- 
trägt, z.  B.  in  Intervallen  von  0*01  zu  O'Ol  und  auf  dessen  verti- 
kaler Koordinate  man  die  Winkel  V  aufträgt,  z.  B.  von  10^  zu  10*^. 
Beistehende  Figur  stellt  ein  solches  Schema  für  eine  |1  der 
Hauptachse  geschnittene  Calcitplatte  vor :    Man   hat   beim  Aufsuchen 


jßö   fO'r    1'62    1öO    l'se    136     föh     1ö2      120    P/S 


i658S  i'6'1  /Ö2      löO    fJS    /JÖ    -fö^    /.S2    /JO     ISS 


des  Brechungsexponenten  darauf  zu  achten,  ob  der  Winkel  [ivri) 
oder  (|?i)  gemessen  wurde,  da  sich  beide  zu  90*^  ergänzen.  Bei 
diesem  Schema  ist  der  Winkel  {iv  n)  augegeben. 

Hat  man  kein  Mikroskop  mit  drehbarem ,  in  Grade  geteiltem 
Objekttisch,  so  kann  man  das  Präparat  ruhig  liegen  lassen,  und  den 
Analysator  drehen,  anstatt  den  Polarisator  einzuschalten. 

Betrachtet  man  die  Kurve  dieses  Schemas ,  so  sieht  man ,  daß 
bei  kleinen  und  großen  Winkeln  Y  die  Genauigkeit  ziemlich  groß 
ist,  während  bei  mittlerem  V  {V  =^  20*^ — 70^)  die  Genauigkeit  nicht 
so  groß  ist,  da  die  Kurve  im  ersten  Falle  sehr  steil  ist,  d.  h. 
bei  großen  Änderungen  von  V  nur  sehr  kleine  Änderungen  von 
n  stattfinden.  Im  mittleren  Teile  der  Kurve  ist  dies  aber  nicht 
der  Fall. 


XXII,  3.  Pauly:  Methode  zur  Besthumung  der  Brechungsexponenten.    347 

Will  man  nur  Brechungsexponenten  von  n  =  1"567  — n^  1"658 
bestimmen,  so  kann  man  sich  eines  gewöhnlichen  Spaltblättchens  von 
Doppelspat  bedienen. 

Die  bei  der  Spaltung  entstehenden  treppeuförmigen  Uneben- 
heiten geben  dabei  vollkommene  Kanten  ab ,  deren  Grenzlinie  man 
durch  Drehen  zum  Verschwinden  bringen  kann.  Da  die  Ebene  des 
Spaltblättchens  44^36'  zur  Hauptachse  geneigt  ist,  so  ist  der  kleinste 
Brechimgsexponent  |  nicht  1'4864,  sondern  ^^  =  1*567,  da  |^  zu  f 
ebenfalls  44*^36'   geneigt  ist. 

Für  größere  Brechungsexponenten  über  1;658  kann  man  sich 
einer  ebenfalls  parallel  zur  Hauptachse  geschnittenen  Platte  von 
Eisenspat  (Siderit)  bedienen,  deren  |  =  1'643  und  deren  iv  ^=  1'872 
ist.  Man  kann  daher  mit  einer  ||  zur  Hauptachse  geschnittenen 
Calcit-  und  einer  eben  solchen  Sideritplatte  alle  Brechungsindices 
von  1"4864— 1*872  bestimmen,  und  zwar  in  einer  für  die  Praxis 
vollkommen  genügenden  Genauigkeit.  Auch  die  Ausdehnung  der 
Indices  von  1*486  —  1*872  dürfte  für  die  Praxis  vollkommen  aus- 
reichen. Daß  man  natürlich  zur  Herstellung  der  Kristallplatten  nur 
reinstes  Material  nehmen  kann,  ebenso ,  daß  es  vorteilhaft  ist,  die 
Hanptiudices  der  Kristallplatten  refraktometrisch  zu  bestimmen ,  um 
dieselben  möglichst  genau  zu  kennen ,  braucht  wohl  nicht  erwähnt 
zu  werden.  Die  Einfachheit  dieser  Methode  dürfte  wohl  voraussetzen, 
daß  sie  schon  hier  und  da  in  Gebrauch  ist,  da  ich  sie  jedoch  in  der 
einschlägigen  Literatur  nicht  erwähnt  fand ,  so  Avill  ich  dieselbe  in 
der  Art,  wie  ich  sie  schon  über  ein  Jahr  im  Gebrauch  habe,  ver- 
ötfeutlichen. 

Durch  Anwendung  der  Imraersionsmethoden,  wie  sie  von  nach- 
stehenden Autoren  ausgearbeitet  wurden,  und  nachherige  Bestimmung 
des  Brechimgsexponenten  des  Flüssigkeitsgemisches,  kann  man  auch 
die  Indices  fester  Körper,  besonders  von  Mineralien  bestimmen,  was 
sehr  willkommen  sein  dürfte. 

1)  Schröder  van  der  Kolk,   Kurze  Anleitung   zur   mikroskopischen  Kri- 

stallbestimmung, Wiesbaden  1898. 

2)  Lewy,  Michel,  Etüde  sur  la  determination  des  Feldspats,  Paris  1894,  p.  58. 

3)  Ambronn,  H.,  Kgl.  Sachs.  Gesellsch.  d.  Wissenschaft.,  Leipzig  1893,  p.  3. 

4)  Brux,  A.,  Archiv  des  Sciences  phys.  et  mathem.,  Geneve  1894. 

5)  Thonlet,  J.,  Bulletin  de  la  Societe  mineralogique  de  France  1880,  p.  62. 

6)  Brandäo,  V.  DE  SoNSA,  Zentralblatt  1904. 

7)  Über   die  Bestimmung   von  Brechungsexponenten   von  Mineralien   nach 

dieser  Methode:  in  Tschermaks  „Mineralogischen  und  Petrographi- 
schen  Mitteilungen". 


348    Pauly:  Methode  zur  Bestimmung  der  Brecbungsexponenten.  XXII,  3. 

Einige  Beispiele  sollen  die  Brauchbarkeit  und  Genauigkeit  dieser 
Methode  zeigen. 

1)  Es  ist  der  Index  von  Benzol  zu  bestimmen. 

Die  beim  Verschwinden  der  Grenze  abgelesenen  Winkel  seien  unter 
A  und  B  angegeben.  Der  gefundene  Index  =  m,  die  Dift'erenz  der  Ab- 
lesungen ^/.,  {A  —  B)  sei  V. 

A  B                          V                          n 

156-60  298«                     700  42'                  1-5008 

298"  336-8  0                  19"  24'                  1-5008 

336-80  117-6"                  700  24'                  1-5012 

117-60  156-6"                   190                         1-5016 

Der  Durchschnitt  daraus  =  150095. 

Mittels  Prisma  und  Ablenkung  wurde  gefunden  n  =  1-5010. 

2)  Der  Index  von  Nitrobenzol  ist  fraglich. 

Ä  B  V  n 

3570  960  49.50  1.551 

96«  1780  410  1-553 

1780  2740  480  1-555 

2740  3570  41-50  1-554 

Der  Durchschnitt  daraus  =  1-55325. 
Mittels  Prisma  n  =  1-5537. 

3)  Der  Index  von  Zedernöl  ist  zu  suchen. 


A 

B 

V 

n 

680 

1950 

63-50 

1-5157 

1950 

2480 

26-50 

1-5157 

2480 

160 

640 

1-5148 

160 

680 

26" 

1-5148 

Der  Durchschnitt  daraus  =  1-51525. 
Mittels  Prisma  n  =  1-5155. 


Der  Index 

von 

Methylenjodid 

ist? 

A 

B 

V 

n 

2030 

2930 

450 

1-7425 

2930 

23-20 

45-10 

1-7421 

23-20 

1130 

44-90 

1-7429 

1130 

2030 

450 

1-7425 

Der  Durchschnitt  daraus  =  1-7425. 
Mittels  Prismamethode  n  =  17426. 

Sämtlich  bei  Na -Licht  und  15 0  Celsius. 
[Eingegangen  am  29.  September  1905.] 


XXII,  3.  Ambronn:  Über  pleocliroitisehe  Silberkristalle.  349 


[Mitteilung  aus  dem  Institut  für  ^Mikroskopie  an  der  Universität  Jena. 


Über  pleocliroitisehe   Silberkristalle  und  die 
Färbung  mit  Metallen. 

Von 
H.  AmbroDU 

in  Jena. 


Im  Jahre  1890  veröffentlichte  ich  in  den  Berichten  der  Sachs. 
Gesellsch.  d.  Wiss.  eine  Mitteilung  über  die  Färbung  von  pflanz- 
lichen lind  tierischen  P^isern  mit  Gold-  und  Silbersalzen  und  den 
dabei  auftretenden  sehr  starken  Pleochroismus.^  Auch  doppel- 
brechende Gelatine  zeigte  bei  Behandlung  mit  Silbernitrat  oder  Gokl- 
chlorid  eine  ganz  ähnliche  Verschiedenheit  in  der  Absorption.  Ich 
hatte  schon  damals  die  Vermutung  ausgesprochen,  daß  der  Pleo- 
chroismus  in  diesen  Fällen  auf  die  Einlagerung  der  Metalle  in  ihren 
allotropen  Modifikationen  zurückzuführen  sei,  und  daß  wahrscheinlich 
außer  der  regulär  kristallisierenden  Form  des  Silbers  und  des  Goldes 
noch  eine  in  anisotropen  und  pleochroitischen  Kristallen  auftretende 
Form  existiere.  Als  Stütze  für  diese  Vermutung  konnte  ich  damals 
nur  die  weitgehende  Analogie  in  der  Farbe  der  Fasern  und  der 
Gelatine  mit  den  Farben  der  allotropen  oder  kolloidalen  Metall- 
lösungen anführen ;  außerdem  wies  ich  auf  den  starken  Pleochroismus 
der  zuerst  von  Kundt"  durch  Zerstäubung  hergestellten  Metallspiegel 
hin.  Versuche,  die  Fasern  direkt  mit  den  kolloidalen  Metalllösungen 
zu  färben,  hatten  zwar  keinen  Erfolg  gehabt,  ich  konnte  aber  einige 
Jahre  später  in  Gemeinschaft  mit  R.  Zsigmondy^  nachweisen,  daß 
Gelatine  mit  kolloidaler  Gold-  oder  Silberlösung  vermischt  im  ge- 
spannten Zustande    denselben    starken  Pleochroismus    zeigt ,    wie   die 


^)  Sitzb.  d.  math.-naturw.  Klasse  d.  Kgl.  Sachs.  Ges.  d.  Wiss.  Bd.  XL VIII, 
1896,  p.  613-628. 

2)  WiEDEM.  Ann.  Bd.  KXVII,  1886,  p.  61. 

3)  Sitzb.  Sachs.  Ges.  d.  Wiss.  Bd.  LI,  1899,  p.  13—15. 


350  Ambronn:  Über  pleochroitische  Silberkristalle.  XXII,  3. 

mit  den  Metallsalzen  behandelten  Fasern  oder  Gelatinestreifen.  Daraus 
durfte  mit  ziemliclier  Sicherheit  der  Schluß  gezogen  werden,  daß  die 
weitgehende  Übereinstimmung  im  optischen  Verhalten  in  beiden  Fällen 
auf  der  Identität  der  färbenden  Körper  beruhe ,  die  in  dem  einen 
Falle  direkt  durch  Färben  mit  den  allotropen  oder  kolloidalen  Lö- 
sungen, im  andern  Falle  durch  Behandlung  mit  Silber-  und  Gold- 
salzen in  der  Gelatine  eingelagert  werden. 

Neuerdings  ist  es  mir  nun  auch  gelungen,  meine  damals  aus- 
gesprochene Vermutung  noch  nach  einer  andern  Richtung  zu  be- 
gründen. Bei  der  Entstehung  der  Farben  in  den  mit  den  Metallsalzen 
behandelten  Fasern  oder  Gelatinestreifen  spielt  sich  jedenfalls  ein 
Eeduktionsprozeß  ab,  und  zwar  erfolgt  diese  Reduktion  in  sehr  engen 
Räumen ,  nämlich  in  den  Micellarinterstitien.  Welche  Dimensionen 
hier  in  Betracht  kommen ,  läßt  sich  natürlich  nicht  genau  angeben, 
w^ohl  aber  kann  man  mit  einiger  Wahrscheinlichkeit  annehmen ,  daß 
es  sich  um  Strecken  von  nur  wenigen  Milliontelmillimetern  handelt. 
Es  bietet  nun  gar  keine  Schwierigkeit,  auf  andere  Weise  solche 
Räume  herzustellen ,  die  wenigstens  in  einer  Richtung  so  kleine 
Dimensionen  besitzen. 

Wenn  die  chemische  Natur  der  Fasern  keine  wesentliche  Rolle 
bei  dem  Reduktionsvorgang  spielt,  so  war  zu  erwarten,  daß  sich  in 
derartigen  Räumen  die  Reduktion  jener  Metallsalze  in  ähnlicher  Weise 
abspielen  werde,  wie  in  den  Fasern.  Diese  Erwartung  hat  sich  nun 
insofern  erfüllt,  als  in  der  Tat  aus  Lösungen  von  Silbernitrat  bei 
geeigneter  Behandlung  anisotrope  und  sehr  stark  pleochroi- 
tische Kristalle  sich  bilden,  deren  sonstiges  Verhalten  zu  dem 
Schlüsse  drängt,  daß  man  es  mit  einer  1  a  b  i  1  e  n  F  o  r  m  des  Silbers 
zu  tun  habe,  deren  Kristalle  nicht  dem  regulären, 
sondern  e  i  n  e  m  a  n  d  e  r  u ,  vermutlich  d  e  m  r  h  o  m  b  i  s  c  h  e  n 
Kristallsystem   angehören. 

Die  Methode ,  die  zur  Herstellung  jener  äußerst  engen  Räume 
dient,  ist  sehr  einfach ;  sie  beruht  auf  demselben  Verfahren,  das  ich 
schon  früher  zur  Erzeugung  sehr  dünner  Kristalle ,  z.  B.  von  Jod, 
Kongorot,  Methylenblau  angewandt  hatte. -^  Drückt  man  zwei  ebene 
gut  gereinigte  Glasplättchen  fest  aufeinander,  so  entstehen  Newton  sehe 
Farbenringe  und  innerhalb  der  Ringe  meist  auch  mehr  oder  weniger 
ausgedehnte  Flächen,  die  im  auffallenden  Lichte  schwarz  erscheinen. 
Gerade    an    diesen  Stellen   beträgt   nun    die  Dicke  der  zwischen  den 


1)  Berichte  d.  Deutsch.  Botan.  Ges.  Bd.  VI,  1888,  p.  2'28. 


XXII,  3.  Ambronn:  Über  pleochroitische  Silberkristalle.  351 

beiden  Platten    befindlichen  Schicht    nur    noch   wenige  Milliontelmilli- 
meter   (jit/^),    und    dieser    Abstand    dürfte    jedenfalls    den    submikro- 
skopischen Micellarinterstitien  vergleichbar  sein.     Man   verwendet  zu 
den  Versuchen    am    besten  Objektträger   aus    gutem  Spiegelglas  und 
möglichst  ebene  Deckgläser.     Die  Hauptbedingung   für  das  Gelingen 
der  Versuche  ist  eine  äußerst  sorgfältige  Reinigung  der  beiden  Glas- 
flächen;   vor    dem  Auflegen    des  Deckglases    müssen    beide    Flächen 
nochmals  mit  einem  ganz  reinen  Haarpinsel  abgestäubt  werden.     Auf 
den    in    dieser    Weise    vorbereiteten    Objektträger    bringt    man    nun 
mittels  eines  feineu  Glasfadens  eine   sehr  geringe  Menge  der  Silber- 
nitratlösung und  legt  dann  möglichst  rasch  das  gut  abgestäubte  Deck- 
glas   darüber.      Bei    leichtem    Andrücken    des   Deckglases    mit    dem 
Finger  erhält  man  breite  Ringe  in  den  Farben  der  ersten  Ordnungen, 
zugleich  aber  auch  ausgedehntere  Partien,  die  im  auffallenden  Lichte 
nur  Schwarz  zeigen.     Die    so   hergestellten  Präparate   läßt   man  nun 
einige  Tage    an    einem    hellen   Fenster    liegen,    es   verdunstet   dabei 
der  größte  Teil  der  Flüssigkeit    und    in   den  farbigen  Ringen  bilden 
sich  dünne  Kristalle  des  benutzten  Salzes ;  in  den  schwarzen  Partien 
bleibt   jedoch    noch    längere    Zeit    eine    Flüssigkeitsschicht    erhalten, 
deren  Dicke  jedenfalls,  wie  schon  erwähnt,  nur  wenige  ///t  beträgt. 
Meine  Absicht  ging  nun  zunächst  dahin ,   jene    dünnen  Kriställ- 
chen  in  irgendeiner  Weise  so  zu  Silber  zu  reduzieren,  daß  gewisser- 
maßen   Pseudomorphosen    von    Silber    nach    Silbernitrat    entstanden. 
Alle    Versuche    in    dieser    Richtung    schlugen    aber    vollständig    fehl. 
Dagegen    ergab    sich    das    für  die  vorliegende  Frage  viel  Avichtigere 
Resultat,  daß  innerhalb  der  äußerst  dünnen  Flüssigkeitsschicht  stark 
pleochroitische   Kristalle    von    sehr    verschiedener    Gestalt    entstehen, 
deren  Wachstum  und  Formveränderung    mehrere  Tage   hindurch  be- 
obachtet   werden    kann.      Es    scheint    also    hier    die    Reduktion    aus- 
schließlich   durch    den  Einfluß    der  Belichtung   zustande  zu  kommen. 
Meist  bilden   sich  unregelmäßig   geformte  dunkelblaugraue  Plättchen, 
die  bei  Untersuchung   im   polarisierten  Lichte    einen   sehr  deutlichen 
Pleochroismus    indigoblau-gelb    oder    hellblau-rotviolett    zeigen.      Der 
Umstand,  daß  zwei  deutUch  verschiedene  Formen  des  Pleochroismus 
auftreten,  weist  darauf  hin,  daß  es  sich  um  optisch-zweiachsige  Kri- 
stalle handelt ;  die  äußere  Form  der  Plättchen ,  sowie  die  Lage  der 
Auslöschungsrichtungen  läßt  auf  die  Zugehörigkeit  der  Kristalle  zum 
rhombischen  System  schließen ;   eine  genauere  kristallographische  Be- 
stimmung dürfte  bei  der  meist  ganz  unregelmäßigen  Begrenzung  der 
Plättchen,  die  sich  fast  stets  zu  drusenförmigeu  Gruppen  zusammen- 


352  Ambronn:  Über  pleocbroitische  Silbeikristalle.  XXII,  3. 

lagern,  kaum  auszuführen  sein.  Außer  diesen  Formen  treten,  wenn 
auch  seltener,  natlelartige  Kristalle  und  in  ganz  einzelnen  Fällen 
sehr  regelmäßig  gestaltete  Sphärokristalle  auf.  Sowohl  die  Nadeln, 
wie  die  Sphärokristalle  zeigen  nur  den  Pleochroismus  indigoblau- 
gelb  ;  die  Sphärokristalle  besitzen  demnach  über  dem  Polarisator 
zwei  blaue  und  zwei  gelbe  Sektoren ,  und  zwar  geht  die  Polarisa- 
tionsebene des  Polarisators  durch  die  gelben  Sektoren  hindurch. 

Es  kann  ja  allerdings  nun  die  Frage  gestellt  werden,  ob  man 
es  in  diesen  optisch  anisotropen  und  pleochroitischen  Kristallen  wirk- 
lich mit  elementarem  Silber  zu  tun  habe,  oder  ob  nicht  vielmehr 
eine  niedere  Oxydationsstufe  dieses  Metalls  vorliege.  Eine  völlig 
sichere  Beantwortung  dieser  Frage  auf  Grund  der  bis  jetzt  vor- 
liegenden Beobachtungen  wird  sich  allerdings  nicht  geben  lassen, 
doch  sprechen  verschiedene  Gründe  dafür,  daß  die  Kristalle  eine 
labile  Modifikation  des  Silbers  selbst  darstellen.  Der  Charakter  des 
Pleochroismus  ist  derselbe  wie  bei  den  mit  Silbernitrat  behandelten 
Fasern,  und  die  allgemeine  Annahme  geht  doch  wohl  dahin,  daß  in 
diesen  Fällen  eine  Reduktion  zu  elementaren  Silber  vorliege.  Auch 
die  von  Kundt  und  später  von  F.  Braun  ^  durch  Zerstäubung  von 
Drähten  hergestellten ,  doppelbrechenden  Silberniederschläge  zeigen 
ähnliche  Verschiedenheiten  in  der  Absoi-ption.  Kicht  bloß  in  dem 
optischen  Verhalten  besteht  zwischen  den  in  engen  Räumen  gewach- 
senen Kristallen  und  jenen  Silberniederschlägen  eine  weitgehende 
Analogie,  sondern  auch  noch  in  einem  andern  Punkte,  nämlich  darin, 
daß  beide  mit  der  Zeit  ihre  Doppelbrechung  und  damit  natürlich 
auch  den  Pleochroismus  verlieren.  Bei  den  Kundt  sehen  Spiegeln 
tritt  diese  Veränderung  erst  nach  längerer  Zeit  ein,-  bei  den  aus 
Silbernitratlösung  entstandenen  Kristallen  kann  man  sie  auf  zweierlei 
Weise  unter  dem  Mikroskop  direkt  beobachten.  Sprengt  man  nämlich 
das  Deckglas  ab,  so  bemerkt  man  sofort  nicht  bloß  die  Veränderung 
im  optischen  Verhalten,  sondern  es  tritt  auch  in  der  Regel  eine 
wesentliche  Veränderung  der  Form  und  der  Färbung  ein.  Beson- 
ders deutlich  kann  man  diesen  Vorgang  beobachten,  wenn  man 
Präparate  wählt,  in  denen  die  Kristalle  in  drusenförmig  zusammen- 
gelagerten Plättchen  ausgebildet  sind.  Diese  Drusen  wandeln  sich 
nach  Wegnahme  des  Deckglases  in  metallisch  glänzende  Spiegel  um, 


1)  Drude  s  Ann.  Bd.  XVI,  1904,  p.  1—19,  u.  238—281. 

2)  Vgl.  Braun,  F.,  Drude s  Ann.  Bd.  XVI,  1904,  p.  4  und  Kaempp,  F., 
ebenda,  p.  324. 


XXII,  3.  Arabronn:  (l)er  pleocliroitische  Silberkristalle.  353 

wobei  nicht  nur  die  frühere  Begrenzung  stark  verändert  wird,  sondern 
auch  ein  Wechsel  der  Farbe  im  durchfallenden  Licht  von  dunkel- 
blaugrau in  ein  intensives  Stahlblau  eintritt.  Auch  ohne  Entfernung 
des  Deckglases  läßt  sich  die  Umwandlung  leicht  beobachten,  wenn 
das  Wachstum  einer  solchen  Druse  mehrere  Tage  hindurch  unter 
dem  Mikroskop  verfolgt  wird.  Man  sieht  dann ,  daß  in  einer  aus 
lauter  stark  pleochroitischen  Plättchen  bestehenden  Druse  nach  drei 
oder  vier  Tagen  an  einzelnen  Stellen  der  Pleochroismus  völlig  ver- 
schwindet und  eine  wesentlich  anders  begrenzte,  metallisch  glänzende 
Schicht  entsteht.  Diese  Veränderung  breitet  sich  allmählich  immer 
weiter  aus  und  ergreift  schließlich  fast  die  ganze  Druse ;  nur  an 
deren  Rande  entstehen  immer  neue  pleochroitische  Plättchen,  die 
aber  nach  einigen  Tagen  dieselbe  Umwandlung  erfahren.  Diese 
Umwandlung,  sowie  das  Weiterwachsen  der  Kristalle  scheint  ganz 
zu  unterbleiben ,  wenn  man  die  Präparate  nach  Bildung  der  pleo- 
chroitischen Kristalle  im  Dunkeln  aufbewahrt.  Es  ist  mir  sehr  wahr- 
scheinlich, daß  bei  dem  fortschreitenden  Wachstum  der  Drusen  die 
Dicke  an  einzelnen  Stellen  vergrößert  und  infolgedessen  das  Deckglas 
etwas  emporgehoben  wird ;  es  könnte  dadurch  sehr  wohl  die  Ent- 
fernung zwischen  Deckglas  und  Objektträger ,  die  ursprünglich  nur 
wenige  /^//  betrug,  an  diesen  Stellen  beträchtlich  vergrößert  werden. 
Ist  aber  eine  solche  lokale  Erweiterung  des  Raumes  geschaffen,  dann 
erfolgt  die  eben  geschilderte  Umwandlung  der  labilen  Modifikation 
in  die  stabile  des  gewöhnlichen  Silbers. 

Man  würde  demnach  anzunehmen  haben,  daß  in  den  mit  Silber- 
nitrat behandelten  Fasern  die  labile  Modifikation  des  Silbers  in  sehr 
kleinen  gleichsinnig  orientierten  Kristallen  eingelagert  sei ,  und  daß 
in  den  engen  Micellarinterstitien  dieser  labile  Zustand  dauernd  er- 
halten bleibe,  etwa  wie  bei  isodimorphen  Mischkristallen  häufig  die 
eine  Komponente  in  einer  Kristallform  erhalten  bleibt ,  in  der  sie 
unter  gewöhnlichen  Verhältnissen  nicht  bestehen  kann.  Es  soll  hier 
nicht  weiter  auf  diese  Analogie  zwischen  gefärbten  Fasern  und  Misch- 
kristallen, gefärbten  Kristalleu  und  ähnlichen  Geraengen  eingegangen 
werden,  nur  soviel  mag  noch  erwähnt  werden ,  daß  die  Annahme 
des  Dimorphismus  für  Silber  und  auch  für  andere  bislier  nur  als 
regulär  bekannte  Metalle  meines  Eraclitens  gar  nichts  Befremdendes 
hat.  Viele  andere  regulär  kristallisierende  Körper  sind  dimorph ; 
auch  einigen,  dem  Silber  nahestehenden  Metallen,  wie  Palladium  und 
vermutlich  auch  den  anderen  Platinmetallen  kommt  diese  Eigenschaft 
zu.     Bemerkenswert  ist  auch,  daß  ein  Goldamalgam  tetragonalkristalli- 

Zeitsclir.  f.  iviss.  Mikroskopie.     XXII,  3.  28 


354  Ambronn:  Über  pleochroitische  Silberkristalle.  XXII.  3. 

siert,  während   doch  bisher  sowohl  für  Gold  wie  für  Quecksilber  nur 
die  reguläre  Modifikation  bekannt  ist. 

Wenn  die  Annahme  begründet  ist ,  daß  bei  der  Silberfärbung 
die  Einlagerung  des  Metalls  in  einer  nicht  regulären  Form  erfolgt 
und  dadurch  der  starke  Pleochroismus  hervorgerufen  wird ,  so  ist 
auch  zu  erwarten,  daß  bei  Färbung  mit  anderen  Metallen  ganz  ähn- 
liche Erscheinungen  auftreten.  Daß  bei  Behandlung  mit  Goldchlorid 
in  den  verschiedensten  Fasern  ebenfalls  ein  sehr  starker  Pleochroismus 
erzeugt  wird,  habe  ich  schon  früher  nachgewiesen.  Inzwischen  ist 
es  nun  auch  gelungen,  mit  Platin,  Palladium,  Quecksilber^,  ferner 
mit  Selen  und  Arsen  in  Nesselfasern  intensive  Färbungen  und  Pleo- 
chroismus hervorzurufen ;  und  ich  zweifle  gar  nicht  daran,  daß  sich 
bei  Versuchen  mit  anderen  Metallen,  die  noch  im  Gange  sind,  ganz 
ähnliche  Resultate  ergeben  werden.  Es  soll  hier  nicht  näher  auf 
diese  Färbungen  eingegangen  werden,  da  demnächst  au  anderer 
Stelle  darüber  berichtet  werden  wird. 

Es  lag  nun  die  Frage  nahe,  ob  sich  nicht  aus  Goldchlorid-  und 
Platiuchloridlösungen  ebenso  Avie  aus  Silbernitrat  in  sehr  engen 
Räumen  anisotrope  und  pleochroitische  Kristalle  ausscheiden.  Bei 
Goldchlorid  ist  es  mir  iu  der  Tat  gelungen,  nadeiförmige,  stark 
doppelbrechende  Kristalle  zu  erhalten ,  die  denselben  Pleochroismus 
weinrot-blaugrün  zeigen,  wie  er  in  den  mit  Goldchlorid  behandelten 
Fasern  auftritt.  Bei  Platinchlorid  habe  ich  bisher  trotz  vieler  Be- 
niühungen  noch  keine  sicheren  Resultate  in  dieser  Richtung  erhalten ; 
ich  hoffe  jedoch,  auch  bei  Platin  und  den  anderen  Metallen,  mit 
denen  Färbungen  bereits  ausgeführt  Avurden,  zu  ähnlichen  Resultaten 
wie  beim  Silber  und  Gold  zu  gelangen. 

Auch  über  eine  weitere  Frage,  die  von  allgemeinerem  Interesse 
ist,  sollen  noch  Versuche  angestellt  werden.  Da  die  Färbungen  der 
Fasern  mit  Quecksilber  leicht  gelingen,  so  ist  zu  erwarten,  daß  sich 
in  den  Fasern ,  die  bereits  mit  einem  anderen  Metall  gefärbt  sind, 
Amalgame  erzeugen  lassen. 

Zum  Schlüsse  möge  noch  auf  die  Beziehungen  hingewiesen 
Averden,  die  zwischen  den  im  vorstehenden  mitgeteilten  Beobachtungen 
und  den  schon  erAvähnten  Untersuchungen  von  F.  Braun  über  das 
optische  Verhalten  von  Metallspiegeln  bestehen.  Braun  hat  in  seinen 
Mitteilungen   mehrfach   auf   den    Pleochroismus    der    mit    Silber    und 


^)  Vgl.  Fox,  K.,  Beiträge  zur  Kenntnis  der  Färbereivorgänge  (Zeitschr. 
f.  Farben-  und  Textilindustrie,  IV.  Jahrg.,  H.  11). 


XXII,  3.  Ambronn:  Über  pleochroitische  Silberkristalle.  355 

Gold  gefärbten  Fasern  Bezug  genommen ;  er  hat  die  verschiedene 
Absorption  in  den  von  ihm  und  früher  von  Kundt  hergestellten 
Metallspiegeln  auf  eine  Gitterwirkung  zurückgeführt  und  diese  Er- 
klärung auch  auf  die  Erscheinungen  in  den  gefärbten  Fasern  aus- 
gedehnt. In  einem  anisotropen  trüben  Medium  oder  in  einem  Gitter 
mit  verschiedenen  Abständen  in  verschiedenen  Richtungen  können, 
wie  ich  früher  schon  hervorgehoben  habe  ^,  zweifellos  Unterschiede 
in  der  Absorption  auftreten ;  es  ist  nur  nicht  recht  verständlich, 
warum  manche  intensive  Färbungen  von  Fasern ,  auch  solche  mit 
Silber  und  Gold,  absolut  keinen  Pleochroismus  erkennen  lassen.  Daß 
bei  gefärbten  Fasern  in  manchen  Fällen  solche  Gitterwirkungen  zu- 
stande kommen,  ist  keineswegs  ausgeschlossen ;  es  ergibt  sich  aber 
meines  Erachtens  eine  viel  plausiblere  Erklärung  des  starken  Pleo- 
chroismus, wenn  man  nachweisen  kann,  daß  die  färbenden  Substanzen, 
also  z.  B.  Gold,  Jod,  Silber,  Kongorot,  in  optisch  anisotropen  und 
pleochroitischen  Kristallen  existieren,  oder  daß  wenigstens  unter  ge- 
wissen Umständen  aus  den  zur  Färbung  benutzten  Lösungen  Kri- 
ställchen  entstehen,  die  in  ihrem  optischen  Verhalten  mit  dem  der 
gefärbten  Fasern  eine  weitgehende  Übereinstimmung  zeigen. 


1)  Sitzb.  Sachs.  Ges.  Wiss.  Bd.  XLVIII,  p.  621  u.  622. 
Jena,  September  1905. 

[Eingegangen  am  6.  Oktober  1905.] 


23' 


356   Sommerfeldt:  Achsenwinkelbestimmung  b.  Kristallpräparat.  XXII,3. 


Die  mikroskopische  Achsenwinkelbestimmung 
bei  sehr  kleinen  Kristallpräparaten. 


Von 

Erust  Sommerfeldt 

in  Tübingen. 


Hierzu   vier  Holzschnitte. 


Die  Ausmessung  der  Interferenzbilder,  welche  im  konvergenten 
polarisierten  Licht  bei  anisotropen  Kristallen  entstehen ,  ist  einfach, 
solange  das  vorliegende  Präparat  noch  groß  genug  ist,  um  die  Inter- 
ferenzerscheinungen unter  Mitbenutzung  des  Okulars  beobachten  zu 
können;  mag  man  sich  der  Klein  sehen  oder  Bertrand  sehen  Lupe 
bedienen,  so  genügt  stets  die  Anbringung  eines  Mikrometers  im 
Okular,  um  die  Entfernung  der  optischen  Achsen  an  Platten,  welche 
senkrecht  zur  spitzen  Mittellinie  geschnitten  sind,  zu  bestimmen.  Ist 
die  Platte  schief  zu  dieser  Mittellinie  gerichtet,  so  genügt  zwar  ein  ein- 
faches Skalenmikrometer  nicht  mehr,  ist  dasselbe  aber  um  die  Mikro- 
skopachse drehbar  und  der  Drehungswinkel  genau  meßbar,  so  bietet 
gich  wiederum  die  Möglichkeit  den  Achsenwinkel  zu  bestimmen,  denn 
es  ist  alsdann  möglich  beliebige  Punkte  des  luterferenzbildes  durch 
ihre  Polarkoordinaten  festzulegen  und  so  einen  Ersatz  für  die  Becke  sehe 
Zeichenmethode  zu  erlangen.  Man  braucht  ja ,  um  die  Polarkoordi- 
naten eines  beliebigen  Punktes  F  zu  bestimmen,  nur  die  Mikrometer- 
skala aus  ihrer  Anfaugsstellung  soweit  (etwa  im  Betrage  a)  zu  drehen, 
daß  sie  durch  P  hindurchgeht  und  alsdann  den  Abstand  zwischen  P 
und  dem  Mittelpunkt  des  Gesichtsfeldes  auf  dieser  Skala  abzulesen ; 
dieser  Abstand  nebst  dem  Drehungswinkel  a  sind  die  Polarkoordinaten 
von  P. 

Indessen  werden  die  Interferenzerscheinungen  sehr  kleiner  Kri- 
stallplatten bei  Mitbenutzung  des  Okulars  so  liehtschwach,  daß  dieses 
Verfahren  leiclit  versagt,  die  von  Lesaulx  zuerst  angegebene  Beob- 
achtuugsmethode  beim  herausgenommenen  Okular  liefert  viel  deut- 
lichere Bilder ,    erlaubt    aber    ohne  Aveiteres  nur  eine  qualitative  Be- 


XXII,3,  Sommerfeldt:  Achsenwinkelbestimmung  b.  Kristallpräparat.   357 

urteilung,    nicht    eine    Ausmessung    derselben.      Die    Zeichenmethode 
Bkckes    führt    zwar    auch  hier  zum  Ziel,    erfordert   aber  einige  um- 


1. 


ständliche  Zentrierungen  und  überdies  die  Anschaffung  eines  nicht 
ganz  billigen  Mikroskopattributes ,  nämlich  eines  mit  zentrierbarem 
Drehtisch    ausgestatteten    Zeichenapparates.      Die    im    Folgenden    zu 


358   Sommerfeldt:  Achsenwinkelbestimmnng  b.  Kristallpräparat.  XXII, 3. 

bescbreibeucle  Beobacbtungsmetbode  erscheint  mir  sowohl  in  ein- 
facherer Weise  als  auch  mittels  einfacherer  Hilfsmittel  ausführbar, 
sie  beruht  auf  dem  Prinzip,  daß  eine  Skala,  wenn  sie  an  geeigneter 
Stelle  unterhalb  des  Objekttisches  und  parallel  demselben  angebracht 
ist,  gleichzeitig  mit  dem  nach  Lasaulx'  Methode  erzeugten  Achsen- 
bilde scharf  sichtbar  sind.  Auf  meine  Anregung  hin  hat  die  Firma 
R.  FuEss  in  Steglitz  diese  Skala  mit  dem  Kondensor  verbunden,  und 
zwar  derart,  daß  der  Kondensor  aus  drei  Plankonvexlinsen  besteht, 
deren  unterste  auf  ihrer  planen  Seite  die  Skala  trägt ;  der  Kondensor 
ist  so  berechnet,  daß  eine  gerade  dort  befindliche  Skala  gleichzeitig 
mit  dem  Achsenbild  scharf  erscheint. 

Als  Objektiv    ist    besonders    zweckmäßig   das  von  Fuess  eigens 
für    die    Beobachtung   von    Achsenbildern    in    den   Handel    gebrachte 
(vgl.  z.  B.  C.  Leiss,  Die  optischen  Instrumente  der  Firma  R.  Fuess, 
p.  359).    Das    mit  Hilfe    eines    solchen    erzeugte  Interferenzbild  ver- 
trägt eine  nicht  unbeträchtliche  Vergröße- 
rung mittels  der  Laspeyres  sehen  Lupe  ohne 
an   Lichtstärke  wesentlich  einzubüßen. 

Es    läßt    sich    diese   Lupe    wohl    für 
subjektive     als     auch     für    objektive    Er- 
zeugungsmethode   der    Achsenbilder  (d.  h. 
2-  für     Projektion     resp.     Mikrophotographie 

derselben)  anwenden ;  ihre  Stellung  inner- 
halb des  Mikroskoptubus  ist  jedoch  in  beiden  Fälle  eine  verschiedene. 
Man  braucht  indessen  nicht  eine  oft  störend  große  Zahl  von  Durch- 
bohrungen des  Tubus  vorzunehmen ,  sondern  kann  sich  folgender- 
maßen helfen :  Den  „Objektivteller",  mittels  dessen  das  Objektiv  im 
„Zangenwechsler"  festgehalten  wird ,  habe  ich  mit  einem  schmalen 
zylindrischen  Ausatz  (vgl.  Fig.  2)  versehen  lassen,  in  dessen  Durch- 
bohrung die  LASPYREssche  Lupe  eingeschoben  werden  kann.  Die 
Lupe  selbst  ist  in  Figur  3  dargestellt,  und  zwar  trägt  die  Hälfte 
a^b  der  doppelkreisförmigen  Metallhülse  diese  Linse,  die  ihr  kongruente 
Hälfte  a.^b  dient  als  Handhabe  bei  eingesteckter  Lupe,  enthält  aber 
außerdem  eine  als  Blende  wirkende  Höhlung  und  wird  eingeschoben, 
wenn  ohne  Lupe  beobachtet  wird  und  kein  Nebenlicht  durch  den 
Schlitz  bei  A  eindringen  darf. 

Es  ist  zweckmäßig  der  Laspeyres  sehen  Lupe  eine  solche  Brenn- 
weite zu  verleihen,  daß  sie  für  Mikrophotographie  ein  wenig  ober- 
halb des  Innennikols  Platz  findet ;  ich  benutze  in  diesem  Fall  zwei 
vertikale  Stäbchen,  auf  denen  die  Lupe  auf-  und  abgeschoben  werden 


XXII, 3.  SomiuerfeUlt:  Achsen\vinkolI)estiiuranng  b.  KristaIIpräp;irat.   359 

kann,  zu  ihrer  Befestigung.  Diese  Stiibchen  sind  in  die  Schiebehülse 
des  Innennikols  eingeschraubt  und  die  Erweiterung  der  zur  Aufnahme 
des  Innennikols  dienenden  Tubusdurchbohrung  gestattet  es  die  Stellung 
der  Laspeyres  sehen  Lupe  bequem  zu  regulieren. 

Der  Kondensor  kann  vollkommen  unabhängig  von  dem  Polari- 
sator bequem  aus-  und  eingeschaltet  werden ,  entsprechend  einer 
kürzlich  von  Tschermak  an  die  petrographischen  Mikroskope  ge- 
stellten Forderung ;  und  muß  für  unsere  Zwecke  um  die  Instrument- 
achse drehbar  sein  (vgl.  Anmerk.  1);  beide  Möglichkeiten  werden 
dadurch  erreicht,  daß  der  Kondensor  ähnlich  dem  von  ten  Siethoff^ 
konstruierten  in  einer  tellerförmigen  Fassung  sich  befindet;  diese 
paßt  in  eine  au  der  Unterseite  des  Objekttisches  angebrachte  Aus- 
bohrung und  wird  in  ihr  durch  Klammern  festgehalten,  die  genau 
so  wie  gewöhnliche  Objektklammern  beschaffen ,  aber  zu  ihnen  ent- 
gegengesetzt gestellt  sind,  nämlich  gegen  die  Unter- 
seite des  Objekttisches  drücken  (vgl.  Fig.  4).^ 

Die  Drehung  des  Objekts  ist  in  einer  ähnlichen 
Weise  wie  früher  (vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904, 
p.  181)  von  mir  beschrieben  wurde,  durch  eine  gleich- 
zeitige Drehung  der  beiden  Nikols  ersetzt;  da  jedoch 
für  die  vorliegenden  Zwecke  ein  möglichst  großes  Ge- 
sichtsfeld erwünscht  ist,  wurde  nicht,  wie  damals  ein  3. 
auf  den  Mikroskoptubus  aufsetzbarer  Analysator,  son- 
dern ein  „Innennikol"  benutzt  und  drehbar  gemacht,  und  zwar  hierzu 
ober-  und  unterhalb  des  Innennikols  J  der  Tubus  parallel  der  Objekt- 
tischebene durchschnitten.  Der  so  erhaltene  drehbare  Zylindermantel 
wurde  durch  die  Klammer  K  mit  der  Stange  S  verbunden,  welche 
auf  dem  drehbaren  Ringe  Z  senkrecht  steht '^  und  anderseits  den 
Polarisator  P  trägt. 


^)  TEN  SiETHOFF,  Beitrag  zur  Kristalluntersuchung  im  konvergenten 
polarisierten  Lichte  fZentralbl.  f.  Min.  1903,  p.  657;  Ref.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXI,  1904,  p.  109). 

-)  Der  Polarisator  ist  in  dieser  Figur  fortgelassen,  um  den  gesamten 
Kondensor  sichtbar  zu  machen ,  er  würde  bei  Z  in  derselben  Weise  wie 
Figur  1  zeigt,  anzufügen  sein.  Will  man  auch  bei  gesenktem  Kondensor 
beobachten,  so  halte  man  ihn  mit  einem  Ringel  statt  der  Klammern  fest, 
welcher  mittels  der  Stange  D  (Fig.  1)  auf-  und  abschiebbar  ist. 

^)  Auf  dem  Ringe  Z  befindet  sich  eine  Gradteilung,  welche  erstens 
den  Teilkreis  eines  gewöhnlichen  Objekttisches  ersetzt  (vgl.  meine  früheren 
Ausführungen  in  dieser  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904,  p.  183),  zweitens  aber  auch 
die   mit  dem  Kondensor   vorzunehmenden  Drehungen  zu  messen  gestattet. 


360  Sommerfeldt:  Aclisenwinkelbestimmung  b.  Kristallpnäparat.  XXII,3. 

Scliließlicli  ist  für  die  Ausmessung  von  Interferenzbildern  ein 
Kreuzsclilittentisch  von  Wichtigkeit;  derselbe  wird  unentbelirlich,  wenn 
die  Achseubilder ,  welche  die  beiden  ungleich  orientierten  Partien 
eines  Kristallzwillings  aufweisen,  miteinander  verglichen  werden  sollen. 
Es  kommt  dieser  Fall,  in  welchem  eine  Parallelverschiebung  des 
Präparats  ohne  jegliche  Drehung  auszuführen  ist,  bei  der  optischen 
Untersuchung    von  Zwillingskristallen    häufig   vor,    welche    besonders 


zur  Bestimmung    der  Feldspate    und  Pyroxene    für    die  Petrographie 
von  Wichtigkeit  ist. 

Die  meisten  Kreuzschlittentische  würden  nur  derart  an  unserem 
Mikroskopmodell  angebracht  werden  kihmen ,  daß  sie  sich  zugleich 
mit  dem  äußeren  Kinge  B,  drehen  und  daher  für  unseren  Zweck 
nicht  verwendbar  sein.  Denn  eine  Änderung  in  der  gegenseitigen 
Stellung  zwischen  l'olarisatoren  und   Präparat,   auf  die  allein  es  uns 


Letztere  erfolgen  um  solche  Beträge ,  daß  die  Mikrometerskala  des  Kon- 
densors durch  den  jeweilig  zu  bestimmenden  Punkt  P  hindurchgeht  und 
so  der  bei  Z  ablesbare  Drehungswinkel  und  der  alsdann  an  der  Mikro- 
raeterskala  selbst  sichtbare  Centroabstand  von  P  die  anfangs  erwähnten 
Polarkoordinaten  dieses  Punktes  ergeben. 


XXII,3.  Soinmerfeldt:  Achsenwinkelbestimmung  b.  Kristallpräparat.   3(31 

ankommt ,  würde  durch  die  Anwendung  eines  solchen  Kreuz- 
schlittentisches unmöglich  werden.  Ein  von  R.  Winkel  (Göttingen) 
bereits  früher  ausgeführtes  Modell  eines  Kreuzschlittens  läßt  sich 
jedoch  ohne  erhebliche  Kosten  unserem  Zweck  anpassen.  Dieser 
Kreuzschlittentisch  wird  bei  T  und  U  an  denjenigen  Teil  des  festen 
(quadratischen)  Objekttisches  angeschraubt,  welcher  den  Drehring  R 
überragt;  indem  der  Kreuzschlittentisch  über  diesen  Drehring  hin- 
übergreift, bietet  er  dem  Objekt  eine  bei  jeder  Drehung  von  R  fest- 
bleibende Unterlage  dar  und  kann  durch  Lösen  der  (nicht  in  der 
Figur  dargestellten)  Schrauben  bei  T  und  U  momentan  entfernt 
werden ,  sobald  nur  solche  Beobachtungen  angestellt  werden ,  bei 
denen  es  auf  eine  vollkommen  exakte  Parallelführung  des  Präparats 
nicht  ankommt. 

Ein  besonderer  Vorteil  der  Methode,  statt  der  Präparate  die 
Polarisatoren  zudrehen,  besteht  nun  in  unserem  Falle  in  folgendem: 
Befindet  sich  der  Kristall,  dessen  Achsenwinkel  bestimmt  werden  soll, 
in  einem  Gesteiusschliff,  aus  welchem  er  nicht  isoliert  werden  kann,  so 
müssen  die  angrenzenden  Partien  abgeblendet  werden,  um  nicht  durch 
ihre  eigenen  Interferenzerscheinungen  störend  zu  wirken,  und  man 
bediente  sich  hierzu  bisher  ausschließlich  kreisförmiger  Blenden. 
Da  aber  sehr  kleine  Kristalle  meistens  nadelförmig  sind  oder  doch  nur 
höchst  selten  ungefähre  Kreisform  besitzen,  geht  durch  derartige  Blen- 
den viel  von  der  erreichbaren  Lichtstärke  der  Interferenzerscheinung 
verloren.  In  den  meisten  Fällen  wären  spaltförmige  Blenden,  die  so 
gestellt  werden,  daß  ihre  Längsrichtung  mit  derjenigen  übereinstimmt, 
welche  die  Kristalluadel  darbietet,  zweckmäßiger.  Daß  man  dennoch 
solche  Blenden  bisher  nicht  verwandte,  hat  seinen  Grund  otfenbar 
darin,  daß  bei  einer  geringen  Drehung  des  Präparats  die  Längs- 
richtungen der  Blendenöffnung  und  Kristallnadel  sich  bereits  wechsel- 
seitig verdecken  und  bei  solchen  Stellungen  eine  kreisförmige  Blende 
nahezu  gleiches  leistet.  Wenn  aber  —  wie  bei  dem  hier  beschriebenen 
Verfahren  —  die  Interferenzbilder  am  festbleibenden  Präparat  durch 
gleichzeitige  Drehung  der  gekreuzten  Nikols  geprüft  werden,  kann 
man  ohne  weiteres  die  größte  Lichtstärke,  welche  mit  der  Spaltblende 
erreichbar  ist,  bei  jeder  Drehung  ausnutzen,  durch  welche  der  Winkel 
zwischen  der  Längsrichtung  des  Präparates  und  den  Nikolhaupt- 
schnitten  geändert  wird. 

Für  diesen  Zweck  habe  ich  eine  au  anderem  Ort  zu  beschrei- 
bende Reguliervorrichtung  des  Spaltes  konstruiert,  welche  ähnlich  wie 
bei    dem  Spalt   eines  Spektralapparates    die    Breite    der   LichtötFuung 


362       Arbeit:  Der  Leitzsche  Universal -Projektions -Apparat.      XXII,  3. 

zu  verändern  gestattet  und  auch  die  Länge  des  Spaltes  zu  variieren 
erlaubt.  Letzteres  ist  notwendig,  da  bei  zu  großer  Spaltlänge  durch 
die  neben  dem  üntersuchungsobjekt  befindlichen  Mineralien  des  Schlifts 
die  eigentliche  Interferenzerscheinung  gestört  werden  könnte. 

[Eingegangen  am  2.  August  1905.] 


Der  Leitzsche  Universal -Projektions -Apparat. 

Von 

E.  Arbeit 

in  Wetzlar. 

Hierzu   vier   Holzschnitte. 

Die  Umstände,  welche  der  vor  mehr  als  30  Jahren  zuerst  durch 
JoH.  CzERMAK  geübtcu  Lehrmethode  —  Einführung  der  Projektions- 
kunst in  die  medizinischen  Wissenschaften ,  beziehungsweise  in  die 
Hörsäle  überhaupt  —  im  Laufe  der  Jahre  mehr  und  mehr  Anhänger 
zugeführt  haben ,  sind  vornehmlich  in  der  Vervollkommnung  der 
optischen  Hilfsmittel,  der  bilderzeugenden  Linsensj^steme  und  noch 
mehr  in  der  Verbesserung  der  verfügbaren  Lichtquellen  zu  erblicken. 
Die  Mr)glichkeit  einer  glücklichen  Verwendung  aller  dieser  lilrruugen- 
schaften  zeitigte  nach  und  nach  Apparatkonstruktionen,  welche  sich 
durch  universale  Verwertbarkeit  auszeichneten ,  indem  sie  nicht  nur 
für  diaskopische,  sondern  gleichzeitig  auch  für  episkopische  Projek- 
tionen eingerichtet  w^aren. 

Die  Bemühungen  um  Universal-Apparate  solcher  Art  sind  fast 
ebenso  alt ,  wie  die  Projektionskunst  selbst ;  die  ersten  Versuche 
wurden  bereits  vor  einigen  Jahrzehnten  unter  den  Bezeichnungen 
„Wundercamera"  oder  auch  „Megaskop"  bekannt,  sie  konnten  in- 
dessen nicht  befriedigen,  weil  die  i)rojizierten  Bilder  die  notwendige 
Helligkeit  ganz  vermissen  ließen. 

Wenn  auch  spätere  Konstruktionen  bei  aller  Gediegenheit  der 
Ausführung  und  trotz  Benutzung  aller  optischen  und  beleuchtungs- 
technischen Errungenschaften  auch  noch  immer  nicht  voll  befriedigen 


XXII,  3.      Arbeit:  Der  Leitzsche  Universal-Projektions- Apparat.       363 

konnteu,  so  trug  auch  hier  lediglich  der  in  der  ganzen  Apparat- 
anordnung begründete  Lichtverlust  die  Schuld  an  dem  nicht  vollen 
Erfolge ;  überall  nämlich  war  bisher  die  Anordnung  eine  derartige, 
daß  gerade  bei  der  episkopischeu  Projektion ,  wo  es  sich  darum 
handelt ,  opake  Gegenstände  gewissermaßen  „selbstleuchtend"  zu 
machen ,  das  Objekt  von  einem  durch  Reflexionen  bereits 
geschwächten  Lichte  erleuchtet  wird. 

Wenn  ich  mich  hier  nicht  einfach  mit  dem  Hinweis  darauf  be- 
gnügen will,  daß  es  der  optischen  Werkstätte  E.  Leitz -Wetzlar 
gelimgen  ist,  ihren  neuen  Universal-Projektions- Apparat  von  einem 
solchen  störenden  Fehler  so  gut  wie  gänzlich  zu  befreien,  so  ge- 
schieht es  in  gerechter  Würdigung  eines  neuen,  hier  bei  dem  Leitz- 
schen  Apparate  durchgeführten  Konstruktionsprinzipes,  das  abgesehen 
von  dem  tatsächlichen  Nutzeffekt  durch  seine  Einfachheit  überraschen 
muß:  „Beleuchtung  des  zu  projizierenden  Gegenstandes  mit  direk- 
tem, unr eflektiertem  Licht." 

Es  sei  hier  gleich  vorweg  genommen,  daß  der  Schwerpunkt  der 
Leitz  sehen  Verbesserung  in  einer  leicht  und  sicher  funktionierenden 
Einrichtung  liegt ,  mittels  welcher  die  Lichtquelle  aus  der  optischen 
Achse  des  Apparates  gedreht  werden  kann ,  und  zwar  handelt  es 
sich  um  eine  horizontale  Drehung  in  seitlicher  Richtung  und  um 
eine  Drehung  in  vertikaler  Ebene ;  die  Ausführung  der  ersten  Be- 
wegung ermöglicht  direkte  Beleuchtung  seitlich  befindlicher  Gegen- 
stände ,  während  bei  letzterer  Anordnung  undurchsichtige  auf  einem 
horizontalen  Tische  liegende  Körper  oder  Illustrationen ,  Druck  aus 
Büchern  etc.  direktes  Licht  erhalten ;  der  erste  Fall  sieht  also  die 
Projektion  von  Körpern  in  ihrer  seitlichen  Ansicht  vor,  im  andern 
Falle  erscheinen  die  Körper  A'On  oben  betrachtet. 

Bevor  die  Anordnung  der  einzelnen  Apparatteile  und  die  ver- 
schiedenen Handgriffe  besprochen  werden ,  welche  beim  Übergang 
von  einer  bestimmten  Projektionsart  zu  irgendeiner  andern  auszuführen 
sind ,  erscheinen  zunächst  einige  Worte  über  die  Hauptteile  des 
Apparates  angebracht. 

Die  Hauptteile  des  Apparates ,  Lichtquelle  und  optische  Bank 
sind  von  einem  Gestell  umgeben,  über  welches  ein  Dnnkeltuch  ge- 
breitet ist,  um  das  Eindringen  von  störendem  Lichte  in  den  Pro- 
jektionsraum zu  verhindern.  Als  Lichtquelle  dient  eine  sich  automatisch 
regulierende  Bogenlampe  von  30  Amp.  Stromstärke ,  welche  in  ein 
mit  Asbest  ausgelegtes  Gehäuse  eingebaut  ist.  Das  an  der  Vorder- 
seite des  Gehäuses  montierte  Kondensorsystem  hat  einen  Durchmesser 


364       Arbeit:  Der  Leitzsche  Universal -Projektions -Apparat.       XXII,  3. 

von  21  cm.  Es  besteht  aus  drei  Sammellinsen,  von  denen  zwei 
durch  seitliche  Griffe  gegen  die  dritte  verschoben  werden  können, 
um  den  Lichtkegel  nach  Bedarf  regulieren  zu  können.  Vor  dem 
Kondensor  sitzt  auf  einem  seitlichen  Arme  drehbar  montiert  ein 
Kühlgefäß ,  welches  auch  gleichzeitig  den  Rahmen  für  Diapositive 
trägt.  Auf  der  optischen  Bank  befindet  sich  ein  Halter,  der  mit 
zwei  rechtwinklig  zueinander  stehenden ,  drehbaren  Armen  versehen 
ist.  Der  eine  Arm  trägt  das  Objektiv  von  400  mm  Brennweite  für 
episkopische  Projektionen,    der    andere  Arm    ist    zur  Aufnahme    von 


1. 


Objektiven  für  diaskopische ,  beziehungsweise  des  Beleuchtungs- 
apparates für  mikroskopische  Projektionen  bestimmt.  Auf  der  op- 
tischen Bank  befindet  sich  ferner  mittels  eines  Gelenkes  zur  Seite 
geschlagen  der  Tisch  für  mikroskopische  Präparate ,  sowie  davor 
in  gleicher  Stellung  der  die  mikroskopischen  Systeme  tragende 
Tubusständer. 

In  dieser  so  kurz  beschriebenen  Stellung  wird  der  Apparat  durch 
Figur  1  veranschaulicht  und  ist  so  gebrauchsfertig  für  diaskopische 
Projektion.  Zur  Komplettierung  dieser  Ausrüstung  gehört  ein  Wechsel- 
rahraen  zur  Aufnahme  der  Diapositive,  sowie  Einsätze  zu  den  ver- 
schiedenen Plattengrößen,  die  dem  Apparat  beigegeben  .sind. 


XXII,  3.       Arbeit:  Der  Leitzsche  Universal -Projektions -Apparat.       365 

Beim  Übergang  von  dieser  einfachsten  zur  mikroskopischen  Pro- 
jektion sind  nur  einige  kleine  Handgriffe  auszuführen:  das  Objektiv 
wird  durch  den  mikroskopischen  Beleuchtungsapparat  ersetzt,  die  in 
Figur  1  auf  der  optischen  Bank  nach  unten  geklappten  Teile,  Präparat- 
tisch und  Tubus  mit  den  am  Revolver  sitzenden  Objektiven,  auf- 
gericlitet,  d.  h.  in  die  optische  Achse  des  Apparates  eingeschaltet 
und  die  Vorrichtung  für  die  mikroskopische  Projektion  ist  fertig. 


Zur  Projektion  werden  die  bekannten  Leitz sehen  Mikroskop- 
Objektive  bis  No.  6  sowohl  mit,  als  auch  ohne  Projektionsokulare 
verwendet. 

Man  sieht  in  Figur  2 ,  welche  den  Apparat  fertig  für  mikro- 
skopische Projektion  darstellt,  die  drei  Projektionsokulare  auf  einer 
Revolvervorrichtung  zusammengefaßt  derartig,  daß  die  drei  Augen- 
linsen mit  einer  einzigen  Kollektivlinse  verwendet  werden,  wodurch 
ein  besonders  bequemer  Wechsel  der  Okularvergrößerung  ermög- 
licht wird. 

Für  die  Projektion  größerer  Präparate  bei  schwacher  Ver- 
größerung kommen  noch  besonders  die  Leitz  sehen  Mikrosummare 
von    24,   35,    42    und    64  mm    Brennweite    in   Betracht,    eine  Neu- 


;]66       Arbeit:  Der  Leitzsche  Universal- Projektions -Apparat.       XXII,  3. 

konstruktion ,  die  mit  dem  Verzuge  einer  sehr  liolien  Lichtstärke 
ausgezeichnete  anastigmatische  Bildfeldebuung  weiter  Ausdehnung 
verbinden. 

Wendet  man  sich  einer  kurzen  Betrachtung  der  Einrichtung  für 
episkopische  Projektion  zu,  so  sind  zunächst  an  Apparatteilen  noch 
die  beiden  Tische  zu  erwähnen,  die,  verstellbar  eingerichtet,  zur 
Aufnahme  der  Objekte  dienen.    Als  Kernpunkt  der  für  episkopische 


3. 


Projektion  getroffenen  Einrichtung  ist  bereits  vorher  die  drehbare 
Anordnung  der  Lichtquelle  gekennzeichnet  Avorden;  die  Stellung, 
beziehungsweise  Anordnung  der  einzelnen  Api)aratteile  für  episkopische 
Projektion,  zunächst  mit  Beleuchtung  von  oben,  veranschaulicht  Figur  o. 
Um  den  Apparat  für  diese  Projektionsart  einzurichten,  bedarf 
es  der  Ausführung  folgender  Handgriffe :  der  auf  einem  Arm  drehbar 
montierte  Kühler  mit  daran  befindlichem  Diapositivrahmen  wird  nach 
der  Seite  geschlagen,  so  daß  der  Kondensor  frei  wird  und  die  Lampe 
an  dem  an  der  Hinterwänd  angebrachten  Hebel  so  gehoben  werden 
kann,  dnß  Kondensor  und  der  an  ihm  angebrachte  Spiegel  gegen 
den    Objekttisch    um    45^   geneigt    sind.      Das    Bild    des    durch    den 


XXII,  3.       Arbeit:  Der  L'eitzsche  Universal -Projektions -Apparat.       367 

Kondensor    direkt    beleucliteten  Objektes  wird    nun    von  dem  Spiegel 
aufgenommen. 

Es  ist  jetzt  nur  noch  nötig,  auf  der  optischen  Bank  den  Prä- 
parattisch und  den  Tubus  mit  den  Mikroskopobjektiven  aus  der 
optischen  Achse  umzulegen  in  die  schon  aus  Figur  1  ersichtliche 
Stellung,  sowie  durch  Drehung  des  auf  der  optischen  Bank  ruhenden 
zweiarmigen  Objektivträgers  das  große  Projektionsobjektiv  von  400  mm 


Brennweite  in  die  optische  Achse  einzuschalten,  so  daß  das  von  dem 
Spiegel  aufgenommene  Objektbild  durch  dieses  Objektiv  zur  Projek- 
tion gelangt.  Es  muß  an  dieser  Stelle  noch  besonders  darauf  hin- 
gewiesen werden,  daß  die  Anforderungen,  die  hier  an  einigermaßen 
geeignetes  Projektionsobjektiv  gestellt  w^erden,  recht  hohe  sind,  und 
daß  für  diese  Art  der  Projektion  nur  solche  Objektive  verwendbar 
sind,  welche  Gegenstände  von  relativ  sehr  großer  Ausdehnung  eben 
d.  h.  frei  von  Bildwölbung  wiederzugeben  vermögen ;  das  neue 
LEiTZSche  Projektionsobjektiv  genügt  bei  höchster  Lichtstärke  dieser 
Forderung  in  hochvollendeter  Weise. 


368       Arbeit:  Der  Leitzsche  Universal -Projektions -Apparat.       XXII,  3. 

Besondere  Erwälinimg  verdient  noch  die  von  Leitz  absiclitlich 
getroffene  Wahl  der  relativ  großen  Brennweite  von  400  mm ,  um 
für  episkopische  Projektionen  eine  möglichst  große  Tiefe  erzielen  zu 
können,  und  in  der  Tat  genügt  das  Leitz  sehe  Projektionsobjektiv 
auch  in  dieser  Hinsicht  allen  praktisch  in  Frage  kommenden  An- 
sprüchen. 

Für  episkopische  Projektionen  mit  Beleuchtung  von  der  Seite, 
wie  sie  unter  gewissen  Umständen  anzuwenden  ist,  behält  die  optische 
Bank  genau  die  gleiche  Objektivstellung  und  Anordnung,  nur  die 
Stellung  der  Lichtquelle  ist  eine  andere  aus  Figur  4  ersichtliche. 
Die  Lampe  wird  wieder  heruntergelassen,  so  daß  sie  die  in  Figur  1 
veranschaulichte  Stellung  einnimmt,  und  dann  durch  Drehung  auf 
einer  darunter  befindlichen  horizontalen  Drehscheibe  in  die  aus  Figur  4 
ersichtliche  Lage  gebracht.  Die  zu  projizierenden  Gegenstände  finden 
auf  dem  in  die  Höhe  geschraubten  vorderen  Tische  Platz,  wo  sie  in 
dieser  Stellung  direktes  Licht  vom  Kondensor  erhalten.  Um  die 
Aufnahme  dieser  Gegenstände  durch  das  Objektiv  herbeizuführen, 
wird  der  am  Kondensor  angebrachte  Spiegel  um  90^  gedreht,  wie 
aus  der  Figur  ersichtlich ;  der  Spiegel  bildet  in  dieser  Lage  mit  der 
optischen  Achse  einen  seitlichen  Winkel  von  45^  und  läßt  so  durch 
das  Objektiv  das  Objekt  zur  Projektion  gelangen. 

Auf  diese  Art  lassen  sich  nicht  etwa  nur  die  gerade  auf  den 
Tisch  zu  placierenden  Gegenstände  projizieren ,  es  können  so  auch 
Körper  zur  Projektion  gebracht  werden,  welche  sich  in  der  Rich- 
tung des  direkten  Lichtes  daneben  aufgestellt  befinden ,  also  z.  B. 
ganz  besonders  Körperteile  am  Lebenden. 

Es  ist  nicht  Zweck  dieser  Ausführung,  eine  erschöpfende  Be- 
schreibung von  der  I]inrichtung  und  der  Vielseitigkeit,  oder  gar 
ausführliche  Handhabungsvorschriften  für  den  Leitz  sehen  Universal- 
Projektions-Apparat  zu  geben ,  es  sollten  vielmehr  hier  nur  in  mög- 
lichst kurzen  Worten  die  Vorzüge  eines  Apparates  dargetan  werden, 
der  gerechtermaßen  Anspruch  auf  das  weitestgehende  Interesse  hat. 

[Eingegangen  am  11.  Oktober  1905.] 


XXII,  o.     I\ichter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      369 


Die  Fortschritte 

der  l)otanischen  Mikrochemie  seit  Zimmerinaims 

„Botanischer  Mikrotechnik". 

Sammelreferat 


von 


Dr.  OsAvald  Richter 

in  Prag. 

(Fortsetzunj?  und  Schluß. 


III.  Abschnitt. 
Zellmembran. 

1.  Zelliiloseinembraii  uud  die  31eiiil)raneii  der  niederen 

Organismen. 

Man  betrachtet  sowolil  in  der  Chemie  wie  in  der  Mii^rocliemie 
die  glücklich  erfolgte  Kristallisation  eines  Stoffes  als  einen  wichtigen 
Abschnitt  in  der  Erkenntnis  seiner  Eigenschaften.  Infolgedessen 
muß  man  Gilsons  Arbeit  über  die  Kristallisation  der  Zellulose  und 
die  chemische  Zusammensetzung  der  vegetabilischen  Zellmembran  als 
ein  Ereignis  der  Zellwandliteratur  betrachten.  Gilson  ist  es  gelungen, 
durch  Lösung  und  nachherige  Fällung  im  Inneren  der  Zellen  sphärit- 
artige  Kristalle  von  Zellulose  zu  erhalten.  Als  Lösungsmittel  wurde 
Kupferoxydammoniak,  zur  Fällung  Ammoniak  verwendet.  Große  Kri- 
stallaggregate wurden  mit  20-  bis  2r)prozentigem  Ammoniak  erzielt; 
sie  sind  löslich  in  Kupferoxydammoniak,  tVirbbar  mit  Kongorot  und 
reagieren  mit  Chlorzinkjod.  Die  für  die  vorhandene  Lösung  bestehende 
Unmöglichkeit,  durch  die  Mittellamellc  zu  diosmieren,  läßt  die  Sphärite 
im  Zellinneren  entstehen,  doch  gelingt  ihre  Isolation  nach  r>ehand- 
lung  mit  Salzsäure  und  Kalilauge  oder  Ammoniak. 

Es  gibt  nach  Gilsox  nur  einen  einheitlichen,  in  der  Membran 
vorhandenen,  mit  Chlorzinkjod  färbbaren  Körper,  die  kristallisierbare 
Zellulose.      Mit    Ausnahme    der  Pilzmembranen,    bei    denen    wir    den 

Zt'itsfhr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  3.  24 


370      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Grund  des  Mißlin^ens  der  Reaktion  im  Chiting-ehalte  zu  erblicken 
haben  (vgl.  Chitin),  erhielt  Gilson  bei  allen  Membranen  von  Pflanzen 
Sphärite,  desgleichen  bei  Tieren,  z.  B.  aus  dem  Mantel  einer  Tunikate. 
Johnson  bestätigte  die  Befunde  Gilson s,  wendete  sich  aber  gegen 
den  Ausdruck  „Sphärite"  wegen  des  passiven  optischen  Verhaltens 
und  schlug  den  Namen  Kristallite  vor ,  doch  scheint  sich  derselbe 
nicht  eingebürgert  zu  haben,  vermutlich  deshalb,  weil  es  zweckmäßiger 
erscheint,  das  Kugelförmige  der  Gestalt  als  das  optische  Verhalten 
im  Namen  zum  Ausdruck  zu  bringen.  Auch  Love  beschäftigte  sich 
mit  diesem  Gegenstande. 

Die  GiLsoNSche  Methode  gab  später  v.  Wjsselingh  bei  seinen  be- 
kannten „Mikrochemischen  Untersuchungen  über  die  Zellwände  der 
Fungi"  eine  vorzügliche  Kontrolle  seiner  Beobachtungen  über  Dar- 
stellung reiner  Zelluloseskelette  ab.  v.  Wisselinc4h  hatte  nämlich  ge- 
funden, daß  pflanzliche  Zellhäute  nach  sechsstündigem  Verweilen  in 
auf  125*^  erwärmtem  in  zugeschmolzenen  Röhren  befindlichen  Wasser 
infolge  der  zersetzenden  Wirkung  desselben  vollkommen  reine  Zellu- 
loseskelette übrig  lassen.  Erzeugt  man  sich  nun  vor  dem  Kochen 
nach  GiLSON  Zellulosesphärite ,  so  bleiben  in  der  Tat  nach  der 
sechsstündigen  Einwirkung  des  Wassers  nur  diese  Sphärite  übrig. 
Erhitzung  mit  Glyzerin  auf  300^  gibt  dieselben  Resultate  nach 
kürzerer  Zeit. 

Das  Wesentliclie  der  GiLsoNSchen  Methode  ist  die  Fällung  der 
Zellulosesphärite  durch  Ammoniak  aus  ihrer  Lösung  in  Kupfer- 
oxydammoniak. Behandelt  man  nun  nach  Correns  Membranen  von 
Caulerpa  prolifera  mit  konzentrierter  Schwefelsäure  und  dann  mit 
Wasser,  so  entsteht  auch  ein  Haufwerk  von  Sphäriten,  die  100  bis 
300  Prozent  Wasser  aufzunehmen  vermögen ,  doppelbrechend  sind 
wie  Stärkekörner,  von  Jod  und  Schwefelsäure  gelbbraun  gelöst  werden, 
in  Chlorzinkjod  gelbbraun  verquellen,  in  konz.  Essigsäure  löslich  sind 
und  noch  andere  Eigentümlichkeiten  zeigen,  die  sie  von  gewöhnlicher 
Zellulose  unterscheiden  und  dadurch  zu  beweisen  scheinen,  daß  die 
Membranen  der  Caulerpa  nicht  aus  Zellulose  im  engeren  Sinne  be- 
stehen.    Eine  chemische  Analyse  wurde  nicht  ausgeführt. 

Reaktion  und  Färbung.  Mangin  hat  als  das  wichtigste 
Stadium  der  Membranumwandlung  das  der  Bildung  von  Hydrozellu- 
lose  oder  Amyloid  bezeichnet.  Zu  dessen  Erzeugung  sind  Säuren 
ungeeignet,  weil  sie,  verdünnt  verwendet,  das  Ziel  nicht  erreichen, 
und  konzentriert,  darüber  hinausschießen.  Am  geeignetsten  ist  eine 
gesättigte    alkoholische   Kali-    oder  Natronlauge.     Nur    auf   so  präpa- 


XXII,  3.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Milcrochemie.      371 

rierte  Zellulose  wirken  die  gewöhnlichen  Zellulosereageutien  unver- 
züglich ein.  Auch  färben  sich  nur  so  vorbereitete  Membranen  mit 
Mangins  Azofarbstoffen.  Es  gibt  übrigens  eine  ganze  Anzahl  von 
empfohlenen  Membrantinktionen,  die  auf  Farbstotfaufnahrae  durch 
Zellulose  beruhen,  vgl.  Busse,  Roulet,  Lemaire,  die  immer  wieder 
verwendeten  Färbungen  mit  Kongorot  und  Hämatoxylin  (Senn,  Jäger), 
und  andere  Färbeverfahren  mehr.  Um  so  beachtenswerter  erscheint 
der  Rat  v.  Wisselinghs  ,  auf  Farbenreaktionen  nicht  zuviel  Ge- 
wicht zu  legen.  Noch  in  einer  frühereu  Arbeit  war  er  geneigt, 
auf  Grund  des  Verhaltens  von  Membranen  gegen  Farbstoffe  zwei 
Körper  als  Begleiter  der  Zellulose  anzunehmen ,  einen ,  der  sich 
mit  Methylen-  und  Brillantblau  und  einen,  der  sich  mit  Ruthenium- 
rot färbt.  Nun  aber  zeigte  er,  daß  die  Dichtigkeit  des  Objektes, 
also  ein  rein  physikalischer  Faktor  (vgl.  das  Kapitel  ,,Kern")  ,  für 
die  Farbstoffaufnahme  von  ausschlaggebender  Bedeutung  ist.  Eine 
Baumwollfaser  färbt  sich  mit  Kongorot  schwach ,  nach  Behandlung 
mit  Kupferoxydammoniak  intensiv ,  und  bedeutend  zelluloseärmere 
Membranen  können  sich  a  priori  besser  färben.  Noch  sprechender 
scheint  der  Beweis,  daß  Zellulosesphärite  von  bei  300^  in  Glyzei'in 
gereinigter  Zellulose  sieh  mit  Rutheniumrot  nicht  färben,  es  aber 
tun ,  wenn  man  sie  vor  dem  Eintragen  in  den  Farbstoff  einer  Vor- 
behandlung mit  verdünnter  Chromsäure  unterzieht.  Jedenfalls  wird 
man  danach  Ansichten,  wie  die  Chalons,  wonach  Methylenblau  ein 
typischer  Zellulosefarbstoft'  sein  soll,  entsprechend  vorsichtig  auf- 
nehmen müssen.  Ob  Love  auch  nur  Farbstoftreaktionen  empfiehlt, 
und  ob  CuTOLOs^  „New  test  for  cellulose"  auch  bloß  auf  einer  Färb - 
Stoffreaktion  beruht,  bin  ich  leider  nicht  in  der  Lage  mitzuteilen,  da 
mir  weder  die  Originale  noch  Referate  über  diese  zur  Verfügung- 
Ständen.  Es  sind  somit  auch  Fittings  Befunde  hinsichtlich  der  Farb- 
stoffe Kongorot,  Benzoazurin,  Rutheniumrot,  Methylenblau  und  Safranin 
bloß  als  Kontrollergebnisse  seiner  mit  Chlorcalciumjod  und  Kupfer- 
oxydammoniak erhalteneu  zu  betrachten.  Man  vergleiche  auch  die 
Angaben  Lagerheims  über  die  Verwendbarkeit  von  Brillantblau  zum 
Zelluloseuachweis  und  die  von  Forsch  über  die  von  essigsaurem 
Anilinblau  zu  gleichen  Zwecken.  —  Die  beste  Chlorzinkjodlösuug  als 
Reagens  auf  Zellulose  ist  nach  v.  Wisselingh  eine  mit  60prozentigem 
Chlorzink. 

Eine  gesonderte  Besprechung  verdienen  die  auf  der  Metallspeiche- 
rung  bezw.  der  Imbibitionsfähigkeit  für  Metallsalzlösungen  beruhenden 
Färbemethoden.     Correns  hat   nachgewiesen,  daß  sich  die   von  His- 

24* 


372      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Milcrochemie.     XXII,  3. 

Recklingshausen  für  tierhistologische  Zwecke  empfolilene  Versilberungs- 
methotle  auch  auf  die  Pflanzenmembran  anwenden  lasse ,  um  deren 
feinere  Struktur  zu  zeigen.  Als  sehr  geeignet  erwies  sich  eine  2pro- 
zentigc  Silbernitrat-  und  eine  O*75prozentige  Kochsalzlösung  und  Über- 
tragen in  Wasser  mit  darauf  folgender  Exposition.  Je  mehr  Silbernitrat 
eine  Membranpartie  aufgenommen  hatte,  desto  mehr  Chlorsilber  mußte 
sich  bilden,  desto  dunkler  mußte  also  die  Membranpartie  werden. 
Es  ist  dies  ein  ganz  ausgezeichnetes  Mittel,  Streifung  und  Schich- 
tung zum  Ausdruck  zu  bringen.  An  Stelle  von  Silbernitrat  und  Koch- 
salz kann  man  auch  eine  lOprozentige  Lösung  von  gelbem  Blutlaugen- 
salz und  verdünntes  Eisenchlorid  verwenden.  Um  dieselbe  Zeit 
fallen  Molisch s  Erfahrungen  mit  ..maskiertem  Eisen",  die  das  enorme 
Speicherungsvermögen  auch  von  Membranen  besonders  für  Eisensalze 
nachwiesen  (s.  o.).  Devaux  hat  neuerdings  diese  Versuche  aufgenom- 
men ,  erweitert ,  und  den  Beweis  geliefert ,  daß  die  Fähigkeit  der 
Eisensalzspeicherung  der  Zellulose  ohne  Vorbehandlung  mit  Laugen 
vollkommen  abgehe,  während  Pektinstoffe  sie  in  hervorragender  Weise 
besitzen;  das  steht  auch  im  Einklang  mit  den  Erfahrungen  von  Meyer, 
der  darauf  aufmerksam  gemacht  hat,  daß  reinste  Baumwolle  die  selbst 
in  reinster  Kalilauge  des  Handels  vorhandenen  Spuren  von  Eisen 
speichert  und  diese  so  nachweisbar  macht.  Desgleichen  decken  sich 
seine  Beobachtungen  mit  denen  von  Molisch. 

In  einer  neueren  Arbeit  hat  sich  Devaux  besonders  mit  dem 
Metallspeicherungsvermögen  von  mit  Eau  de  Javelle  vorbehandelten 
Membranen  beschäftigt  und  begründet  geradezu  auf  dem  Vermögen 
der  Zellulose,  vornehmlich  Kaliumbichromat  aufzunehmen,  sein  Drei- 
farbenverfahren. —  Die  von  v.  Tompa  empfohlene  Goldtinktion  ist 
analog  dem  Correns sehen  Silberverfahren  ausgearbeitet  und  be- 
ruht auf  der  Reduktionsfälligkeit  von  Zinnchlorür  auf  Goldlösung. 
Nach  LuNDiE  bleibt  die  Zelluloseschicht  der  Fucusmembran  beim  Silber- 
verfahren farblos ;  zwischen  ihr  und  der  Gallertschicht  aber  entsteht 
ein  dunkler  Ring. 

Fälle  des  Ausbleibens  d  e  r  R  e  a  k  t  i  o  n  e  n ,  ihre  Gründe  und 
Beispiele  abnormen  Auftretens  derselben.  Schon  GutJTTLER  be- 
merkt, daß  in  den  Epidermiszellen  und  den  Schleimhaaren  Aon  Lythrarien  die 
Zellulosereaktion  nie  direkt,  sondern  bei  jenen  z.  B.  erst  nach  Vorbeliandlung 
mit  Eau  de  Javelle  gelingt.  In  der  neueren  Zeit  häufen  sich  die  Fälle,  wo 
auf  reaktionshindernde  Körper  und  auf  Zellulo^eumwandlungen  aufmerksam 
gemacht  wird.  Tischler  zeigt,  daß  die  Zellulosebalken  im  Embryosack  von 
l^edicularis  im  Alter  vermutlieh  aus  l*ektin  bestehen,  Czai'ek,  daß  „Sphagnol'" 
und  „Dicranumgerbsäure"   bei   Moosen  reaktionshindernd  wirken,  Manoin, 


XXII,  3.     Ricliter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      373 

daß  Mucorineenzellulose  sich  erst  nach  Vorbehandlung-  mit  Salzsäure  und 
Kalilaug:e  in  ScHWEizERSchem  Reagens  löst,  Rotiieut,  daß  die  homogenen 
Hüllen  der  Kristalle  bei  Pontederiaceen  keine  echte  Zellulose  sind  etc. 

Bekannt  ist  das  Ausbleiben  der  Zellulosereaktion  bei  verholzten  Ele- 
menten. Kaliumpermanganat  läßt  nun  nach  ^IÄule  durch  Zerstörung  des 
reaktionshemmenden  „Hadromals"  die  reine  Zellulose  zutage  treten.  Analog 
ist  nach  Yendo  Zellulosereaktion  bei  den  Wänden  des  Geniculums  der 
Corallineen  möglich,  wenn  die  Gelose  durch  Liisung  entfernt  worden  ist. 
Weiteres  ^ielie  bei  Besprechung  der  Grün-,  Blau-  und  Braunalgen. 

Eine  besondere  Behandlung  erheischen  noch  die  Ergebnisse  des  Re- 
aktionswandels bei  von  Parasiten  befallenen  Pflanzen  in  der  Umgebung  der 
Erkrankungsstelle  und  die  in  den  Zellen  und  Zelhvänden  der  Parasiten. 
So  hat  Heixiucher  darauf  aufmerksam  gemacht,  daß  nur  die  Mittellamelle 
der  Membran  des  Schwellgewebes  in  den  Kapselklappen  von  Lathraea 
clandestina  Zellulosereaktion  liefert,  die  quellbaren  Membranschichten  aber 
nicht,  was  an  Hansens  Befund  bei  Gracilaria  erinnert.  W.  Macjnus  weist 
Zellulosebildung  in  den  von  der  Mykorrhiza  befallenen  Zellen  von  Neottia 
Nidus  avis  nach.  Behandelt  man  nämlicli  die  aus  Pilz-  und  Wirtspflanzen- 
plasmaresten  gebildeten  „Klumpen"  durch  24  Stunden  mit  Eau  de  Javelle 
und  unterzieht  sie  nachher  der  Zelluloseprobe  mit  Chlorzinkjod,  so  tritt 
deutliehe  Reaktion  auf.  Nach  Entfernung  der  Zellulose  mit  Kupferoxyd- 
ammoniak kann  man  mit  Safranin  noch  Pektinstoffe  nachweisen.  Nach 
Nawaschin  bemerkt  man  in  den  Zellen  der  von  Plasmodiophora  Bras- 
sicae  befallenen  Pflanzen  feine  Lamellen,  die  die  Zellulosereaktion  geben. 
Czapek  konnte  feststellen,  daß  durch  die  Lebenstätigkeit  des  Merulius 
lacrymans,  des  Pleurotus  pulmonarius  und  anderer  Pilze  das  „Hadromal" 
frei  und  dadurch  die  Zellulose  des  Holzes  nachweisbar  wird,  die  nun  die 
Zellulosereaktionen  zu  liefern  vermag.  Man  vgl.  auch  das  einschlägige 
Kapitel  aus  Lafars  „Technischer  Mykologie". 

Auch  tierische  Parasiten  scheinen  dieses  Umwandlungs\ermögen  zu 
besitzen.  Bekanntlich  geben  Vaucherienmembranen  die  Zellulosereaktion 
im  Alter  nicht  (vgl.  Membran  der  Grünalgen).  Wird  aber  eine  Vaucheria 
von  der  Rotatorie  Notommata  Werneckii  befallen,  so  wird  nach  Roihert 
ihre  ]\lembran  in  der  Umgelnmg  des  Parasiten  so  verändert,  daß  die  „Kalotte" 
mit  Jodjodkalium  und  Schwefelsäure  stark  rotviolett,  dann  trüb-blau  wird. 
Nachher  tritt  Entfärbung  auf,  doch  kann  Bläuung  durch  verdünnte  Schwefel- 
säure wieder  hervorgerufen  werden. 

Weiterhin  sei  noch  einiger  abnormer  Vorkommen  der  Zellulose  gedacht. 
Eines  hat  Schutt  bei  der  Diatomee  Cyclotella  socialis  beobachtet.  Es 
strahlen  nämlich  von  der  Membran  dieser  Alge  eigenartige  Büschel  von 
Fäden  aus,  die  Schutt  scIiließHch  als  kieselfreie  Zellulosemodifikation  er- 
kannte, i'brigens  hält  auch  Jahx  die  von  ihm  bei  Myxomyceten  beschrie- 
benen Diktydinkörner  für  Zellulose  (vgl.  neue  Stoffe).  Weber  van  Bosse 
hat  schon  viel  früher  stärkeähnliche  Körner  bei  der  neuentdeckten  Phyllosi- 
phonee  Phytophysa  Treubii  beol)achtet.  seine  „grains  de  cellulose",  die  wirk- 
lich Zellulosereaktionen  gegeben  halien,  und  Zalew.ski  erbrachte  den  Be- 
weis, daß  die  halbkugelförmigen  Gebilde  mit  sphäritartigem  Aussehen,  die 
ScHÜNXKTT  „Resinocysten"  genannt  liat,  aus  einem  Zellulosegerüste  bestehen, 


374      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

dessen  Kammern  mit  Harzsubstanz  erfüllt  sind.  Kolkwitz  schließlich  hat 
gefunden,  daß  die  Zellulinkörner  des  Abwasserpilzes  sich  mit  Kongorot 
intensiv  färben,  was  auf  einen  zelhxloseähnlichen  Stoff  schließen  ließe. 

Schließlich  seien  noch  einige  Rezepte  mitgeteilt,  die  sich  auf  die  Deut- 
lichmachung  der  CASPARYschen  Streifen  beziehen.  Krömer  empfiehlt 
Plilorogluzin  -  Salzsäure,  Chlorzinkjod,  Chlorcalciumjod,  Sudanglyzerin, 
konzentrierte  Schwefelsäure,  Chromsäure  und  Kalilauge,  Rumpf  Mäules 
Reaktion,  Anilinhydrochlorat ,  Chloralphenol ,  Hämalaun,  Jodjodkalium, 
Methylgrünessigsäure,  Anilin-.  Methyl-,  Spritblau.  Jodgrün-Fuchsin.  Ruthe- 
niumrot läßt  unter  gleichzeitiger  Färbung  der  Zellulose  die  Caspary sehen 
Streifen  farblos. 


Der  Zellulose  verwandte  Körper. 

GiLsoN  fand,  daß  es  außer  der  kristallisierbaren  Zellulose  noch  andere 
Stoffe  gibt ,  die  ihr  offenbar  chemisch  sehr  nahe  stehen :  Das  Paramannan 
der  Kaffeebohnen,  das  mit  Zellulose  die  Mannoso-Zellulose  Schulze  s  liefert. 
Es  ist  auch  in  verdünnter  Schwefelsäure  löslich;  und  die  Hemizellulose, 
womit  er  alles  das  bezeichnet,  was  in  der  Membran  vorhanden,  sich  aber 
nicht  mit  Chlorzinkjod  violett  färbt.  Später  hat  sich  Schellenberg  mit 
der  Hemizellulose  bescliäftigt. 

Namenlos  ist  der  von  Corren.s  bei  Siphoneen  entdeckte  Körper  ge- 
blieben (vgl.  Zellulose). 

Auch  das  „Fucin"  von  Wisselinghs  scheint  mit  der  Zellulose  nahe 
verwandt  zu  sein,  „Fucin"  ist  ein  Membranstoff  der  Braunalgen,  der  schon 
nacli  Vorbehandlung  der  Membranen  mit  bloß  einprozentiger  Schwefelsäure 
mit  Jod  die  typische  intensive  Bläuung  gibt. 

Grüss  unterscheidet  nach  der  leichteren  oder  schwereren  Hydroly- 
sierung  und  Löslichkeit  bei  der  Reservezellulose  der  Dattelkerne  drei  Be- 
standteile: 1)  Galaktan  und  die  Hydrolysierungsstufen :  2)  f<-Mannan  und 
3)  /i-Mannan,  beide  gehen  über  verschiedene  Manninstufen  in  Mannose  über. 

Auch  die  Zwischenstufen,  die  durch  Jod-Phosphorsäure  unterschieden 
-werden,  erhalten  Namen:  Leuko-  und  Cyanomannin. 

In  neuester  Zeit  hat  Lemahie  bei  seinen  Blaualgenstudien  (vgl.  diese) 
das  \on  Correns  studierte  Scytonemin  untersucht,  einen  Körper  von  Zellu- 
losereaktion, der  die  Oscillarienmembran  imprägniert  und  vor  der  eigent- 
lichen Zelluloseprobe  erst  entfernt  werden  muß.  Schizophykose  nennt  er 
endlich,  eine  alkalisch  reagierende,  mit  Rutheniumrot  sich  nicht  färbende 
Substanz  und  Schizopliycin,  ein  durch  Laugen  erzeugtes  Abspaltungsprodukt 
der  Schizophykose. 


Membran  der  Algen. 

1)  Peridineen.  Unterwirft  man,  wie  ScHtJTT,  dem  wir  ungemein 
wertvolle  Mitteilungen  ül)er  Peridineen  verdanken,  gezeigt  hat,  die  Peridi- 
neen Ornithocercus  quadratus  und  0.  Steinii,  der  Zelluloseprobe,  so  bemerkt 


XXII,  o.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      375 

man.  daß  die  Membranleisten  die  Violettfärbung  mit  Chlorzinkjod  nicht 
geben,  daß  auch  die  sonstigen  Jodreaktionen  zunäclist  unterbleiben,  sich 
aber  nach  Vorbehandlung  mit  Säuren  oder  Laugen  dennoch  zeigen.  Es 
scheint  also  ein  die  Reaktion  verdeckender,  in  Säuren  ausziehbarer  Stoff 
in  diesen  Membranleisten  vorhanden  zu  sein. 

2)  Diatomeen.  Bei  seinen  eingehenden  Studien  der  Diatomeen  fand 
Benecke  nach  Entfernung  des  Zellinhaltes  durch  Eau  de  Javelle  und  Alkohol 
Nelkenöl,  Kanadabalsam  oderStyrax,  bezw.  alkoholische  Methylviolettlösung 
und  Nelkenöl  zur  Untersuchung  der  Membran  ganz  ausgezeichnet  geeignet. 

3)  Grünalgen.  Nach  Senn  gibt  Dictyosphaerium  pulchellura  keine  Reak- 
tion auf  Zellulose,  nach  Debski  unterbleibt  sie  auch  im  großen  und  ganzen 
bei  Characeen  und  Siphoneen,  was  übrigens  auch  schon  Göppert  und  Cohn 
festgestellt  haben  und  was  auch  mit  den  Correns  sehen  Befunden  harmonieren 
würde.  Nur  bei  den  jüngsten  Sproßspitzen  kann  man  von  Zellulosereaktion 
sprechen,  bei  den  alten  versagt  jedes  Zellulosereagens,  da  aber  auch  die 
charakteristischen  Pektinstofiffärhungen  nicht  eintreten,  glaubt  Debski  an 
einen  neuen  Körper  in  der  Characeen-  und  Siphoneenmembran.  Schmidle 
findet,  daß  sich  die  Haare  und  Membranhöcker  der  Alge  Conochaete  Kle- 
bahnii  mit  Chlorzinkjod  nicht  färben,  dagegen  speichern  sie  Hämatoxylin. 
Gerade  umgekehrt  verhalten  sich  die  Haare  von  Aplianochaete  pilosissima. 
Bei  Desmidiaceen  ist  endlich  nach  Lütkemüller  Fuchsin,  Methylviolett, 
Bismarckbraun  und  nachträgliches  Zuleiten  von  essigsaurem  Kali  anzuraten, 
wenn  man  den  Porenapparat  besonders  deutlich  machen  will.  Zum  Schluß 
sei  erwähnt,  daß  Senn  zum  Studium  der  Membran  von  koloniebildenden 
einzelligen  Algen  Kongorot  verwendet,  nachdem  er  durch  Natronlauge 
Quellung  und  Lösung  der  Gallertschichte  erzielt  hat. 

4)  Blaualgcn.  Was  die  chemische  Zusammensetzung  der  Membran 
dieser  Algengruppe  anlangt,  so  scheint  wesentlich  für  die  Beurteilung  der 
Entwicklungszustand,  in  dem  sich  gerade  die  Alge  bezw.  deren  Zellen  be- 
finden. Hegler  zeigt  z.  B.,  daß  die  Heterocystenwände  Zellulosereaktion 
geben,  was  von  ^Brand  bestritten  wird,  die  Wände  der  reifen  Sporen 
dagegen  hält  er  für  verkorkt  (vgl.  Kork).  Iii  den  Zellmembranen  und 
Scheiden  kann  er  endlicli  auch  Gehalt  von  Chitin  nachweisen  (vgl.  Chitin), 
auf  das  er  auch  die  Anisotropie  der  stark  doppelbrechenden  Membranen 
zurückführt.  —  Von  Lemaires  Angaben  über  die  Cyanophyceenscheiden 
war  oben  die  Rede.  —  Nach  Macallum  löst  Pikrinsäure  die  Membran- 
scheiden und  Querwände  der  Cyanophyceen.  Zum'  Schlüsse  sei  noch 
bemerkt,  daß  Correns  mit  Hilfe  von  Karbolfuchsin  nach  Vorbehand- 
lung mit  Pepsin -Glyzerin -Salzsäure,  Chromsäure  und  2prozentiger  Kali- 
lauge ein  rotes  Netz  auf  farblosem  Grunde  innerhalb  der  Membran  hat 
darstellen  können,  das  er  dahin  interpretiert,  daß  das  Gefärbte  die 
dickere  Membran,  das  Farblose  aber  Tüpfel  mit  Gallertausscheidung  ge- 
wesen sind. 

5)  Rotalgen.  Vornehmlich  l)ei  den  Corallineen  macht  sich  bei  der 
Membranuntersuchung  der  hohe  Kalkgehalt  unangenehm  bemerkbar ;  Yendo 
macht  Angaben  über  dessen  rasche  Entfernung. 

Auf  eine  eigenartige  Reaktion  der  Membran  von  Gracilaria  hat  Haxsex 
aufmerksam  gemacht.    Es  färbte  sich  hier  nämlich  die  Mittelschiclite  (Intei*- 


376      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Zellularsubstanz)  mit  Jocljodkaliuiii  schön  karminrot,  mit  .Jod  in  Seewasser 
violett.  Jod  und  Schwefelsäure  färben  dagegen  die  ganze  Membran  violett. 
(Über  Sphaerococcus  vgl.  den  folgenden  Abschnitt.) 

6)  Braunalgen.  Wille  zeigte,  daß  die  Laminarianiembran  aus  einer 
dem  Zellinhalte  zugekehrten  Zellulose-  und  aus  einer  vorzüglich  Calcium- 
pektat  (vgl.  Pektinstoflfe)  enthaltenden  Mittellamelle  besteht,  aus  der  durch 
Säuren  das  Calcium  gelöst  werden  kann,  worauf  in  Sodalösung  Mazeration 
eintritt,  v.  WissELiNdH  fand  bei  Fucus  vesiculosus  und  Sphaerococcus 
crispus  neben  Zellulose  noch  einen  Stoff,  der  durch  einprozentige  Schwefel- 
säure und  Jodjodkalium  gebläut  wird,  der  sich  bei  300"  löst,  und  den  er 
,,Fucin"  nennt.  Der  Sitz  des  Stoffes  ist  vornehmlich  die  gequollene  Mittel- 
lamelle. Interessant  ist  die  Tatsache,  daß  man  bei  Fucinblaufärbung 
zeigenden  Membranen  mit  TGprozentiger  Schwefelsäure  die  Jodfärbung  gerade 
umzukehren  vermag.  Was  blau  war,  wird  weiß  (Fucinmittellamelle),  was 
weiß  war,  wird  blau  (Zelluloselamelle):  Die  Konzenti-ation  der  verwendeten 
Säure  ist  also  ausschlaggebend  für  den  Ausfall  der  Keaktion. 

Schröder  emi)fiehlt  zur  Deutlichmachung  der  Algengallerthüllen  Tusche 
und  die  von  Bütschli  empfohlene  Sepia,  zur  Färbung  Klebs'  und  Haupt- 
fleisch s  Anilinwasser-Safranin,  Dahlia,  Karbolfuchsin  und  Neutralrot. 

Membran  der  Pilze  und  Bakterien. 

1)  Pilze.  GiLSON  findet,  daß  die  Membranen  von  Claviceps  purpurea 
und  Agaricus  cam])estris  frei  sind  von  Zellulose  und  an  ihrer  Stelle  eine 
stickstoft'haltige  ^'erbindung  besitzen ,  die  beim  Zusammenschmelzen  mit 
Kalihj-drat  eine  als  Mykosin  bezeichnete  Substanz  liefert,  welche  mit  Säuren 
echte  kristallisierte  Salze  gibt.  Das  Mykosin  ist  eine  amorphe,  mehr  oder 
weniger  hornartige  Masse,  die  in  der  Pilzmembran  nicht  in  freiem  Zustande 
vorkommt.  Es  färbt  sich,  und  das  sei  besonders  hervorgehoben,  mit  Jod- 
jodkalium, das  eine  Spur  Säure  enthält,  rosaviolett.  Die  gleiche  Färbung 
liefert  Jod  und  Schwefelsäure  und  durch  viel  Wasser  verdünntes  Chlor- 
zinkjod. Daraus  dürften  sich  auch  die  so  widersprechenden  Angaben  der 
verschiedenen  Autoren  ül)er  die  Zellulosereaktion  der  Pilzmembran  er- 
klären. 

V.  WisSELiNGHs  „Mikrochemische  Untersuchungen  über  die  Zellwände 
der  Fungi"  stellen  einen  Markstein  in  der  Erkenntnis  der  chemischen  Zu- 
sammensetzung der  Pilzmembran  dar,  indem  sie  die  von  Gilson  an- 
genommene, in  iiirer  chemiselien  Natur  aber  noch  nicht  erfaßte  N-haltige 
Muttersubstanz  des  Mykosins  als  Chitin  erkannte  und  damit  der  Forschung 
wieder  ein  weites  Arbeitsgebiet  erschloß.  Danach  lautet  der  betreffende 
Erkenntnissatz:  „Es  gibt  Pilze  mit  Chitinmembranen."  Doch  ist  die  Ver- 
allgemeinerung: „die  Membran  der  Pilze  l)estehe  aus  Chitin"  durchaus  un- 
stattliaft,  wie  eine  Reihe  von  Arbeiten  zeigen,  die  der  x.  Wisselingh- 
schen  rasch  nacheinander  gefolgt  sind.  So  beobachtete  Jahn  bei  den 
jungen  Kapillitiumfasern  von  Comatricha  obtusata  Preuß,  wie  dies  schon 
DE  Barv  für  Stemonitis  gezeigt  hat,  Zellulosereaktion  mit  Jod  und  Schwefel- 
säure, docli  nur  oben,  während  sie  beim  Stielansatze  unterblieb.  Nach 
Bräunung  des  Ivapillitium  geht  die  Reaktion  unter  keiner  Bedingung  mehr. 


'e 


XXII,  o.     Richter:  Die  Fortscliritte  der  botanisclien  ^likrocheiuie.      377 

Ebenso  mißlang-  die  Chitinprobe.  Makgin  bringt  den  Beweis  vom  Vor- 
liandensein  von  Zellulose,  Kailose  und  Pektinstoften  bei  Mucorineen.  Die 
vegetativen  Hyphen  bestehen  aus  Zellulose  und  Pektinstoften,  Sitz  der 
Zellulose  innen ,  die  Fruchthyphen  haben  in  den  Öporangien  außerdem  in 
späterem  Alter  Kallose  innen  und  ersetzen  die  Zellulose  durch  Kalkablage- 
rung-en,  die  Membran  der  endogenen  Sporen  reagiert  nach  Vorbehandlung 
mit  Kalilauge  und  Salzsäure  deutlich  auf  Kallose.  Vtillemix  kann  an 
den  Zygosporen  der  .Mukorineen  sogar  fünf  Schichten  unterscheiden  je  nach 
deren  Verhalten  gegen  Jod  und  Schwefelsäure  und  Hämatoxylin.  Für  Hefe 
Öchizosaccharomyces  octosporus  hat  Lindnek  den  Nachweis  erbracht,  daß 
sich  deren  Sporenmembranen  mit  Jod  allein  bläuen.  Ab  und  zu  färben 
sich  auch  die  Membranen  der  Sporenmutterzellen.  Dieser  Befund  schließt 
sich  an  analoge  von  Sordakia  bei  Disco-  und  Pyrenomyceten  und  von 
Hoffmann  bei  Dematiumzelhvänden:  Kinuermanns  Befund  bei  Stereum 
sanguinolentum  zeigt,  daß  sogar  beim  selben  Pilze  die  verschiedenen  Hyphen 
verschieden  ciiitinhaltig  sein,  l)ezw.  reaktionshindernde  Stott'e  enthalten 
können,  wodurch  ganz  instruktive  difterente  Färbungen  erzielt  werden. 

2)  Bakterien.  Die  Untersuchungen  über  die  Membransul)stanz  der 
Bakterien  haben  neuerdings  gezeigt,  daß  neben  Zellulose  auch  N-haltige 
Stofte,  im  besonderen  Chitin,  vorkommen  (Emmerlixc;,  Iwanofe).  Doch 
ist  ein  abschließendes  Urteil  ülier  die  Frage  zurzeit  noch  nicht  zu  geben, 
da  die  Meinungen  der  Autoren  zu  weit  auseinander  gehen.  —  Nach  Hinze 
färben  sich  die  Membranen  von  Beggiatoa  mirabilis  mit  Rutheniumrot, 
Safranin  und  ^lethylenblau,  was  auf  Pektingelialt  deutet.  Chlorzinkjod 
und  Chloralhydrat  spalten  die  Membranen  in  zwei  Teile.  Später  wies  Hinze 
auch  bei  Thiophysa  volutans  Pektinstofl'e  nach. 

Weiterhin  sei  des  Farblosbleibens  von  Bakterienmembranen  gedacht, 
das  Matruchot  bei  seinen  Vitalfärbungen  von  farblosen  durch  Farbstoff- 
bakterien zu  beobachten  (jelegenheit  hatte.  (Vgl.  auch  Lafars  technische 
Mykologie  und  Czapeks  Biochemie.) 

Membran  der  Moose. 

Schon  RuüE  hatte  konstatiert,  daß  die  mechanischen  Zellelemente  der 
Moose  erst  nach  der  Behandlung  mit  Kalilauge  Zellulosereaktionen  geben, 
daß  sie  mit  Kalilauge  vergilben  und  daß  ein  gerbstoft'artiger  Körper  in  ihnen 
vorkommt.  Nach  Cjokics  Untersuchungen  sind  Moosmeihbranen  unverholzt, 
und  zwar  gelingen  die  Jodreaktionen  auf  Zellulose' bei  Lebermoosen  sofort, 
bei  Laubmoosen  erst  nach  Vorbehandlung  mit  Chromsäure  oder  Schulze- 
scher  Mischung.  Mit  Rutheniumses(iuichlorür  geben  alle  ^lembranen  die 
MANUiNsche  Pektinprobe.  Abgesehen  von  den  kürzeren  Notizen  von 
Krasser,  Correns  und  Kamerling  hal>en  erst  wieder  durch  Czapek  die 
Moose,  im  besonderen  ihre  Membranen,  eine  eingehende  Behandlung  er- 
fahren, wobei  zunächst  die  früheren  Forschungsergebnisse  bezüglich  Unter- 
bleiben und  Auftreten  der  Zellulosereaktionen  und  der  Gerbstoftprobe  be- 
stätigt werden  konnten.  Auch  die  Gelbfärbung  mit  Natronlauge  wurde  von 
Czapek  beobachtet  und  festgestellt,  daß  mit  Mooszellhäuten  auch  Millons 
Reaktion   gelingt.     Diese   mit  Millox   reagierende  Substanz   ist  isolierbar, 


378      Kicliter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3- 

ist  phenolartig  und  erhielt  den  Namen  „Sphagnol".  Auch  die  gerbstofif- 
artige  ist  darstellbar  und  wurde  „Dicranumgerbsäure"  genannt.  Sphagnol 
dürfte  in  der  Membran  als  Sphagnolzelluloseäther  vorkommen.  Mit  starker 
Natronlauge  erhält  man  aus  Sphagnum  auch  „Pektinsubstanz".  Die  Dicranum- 
gerbsäure dürfte  in  clilorartiger  Bindung  vorliegen.  Protonemata  sind  stets 
sphagnol-  und  gerbstofifsäurefrei,  sie  geben  daher  immer  die  Zellulose- 
reaktion. 

Endlich  sei  der  Befunde  Schaars  gedacht,  wonach  sicli  die  Ver- 
dickungsschichten  der  Antheridien  mit  Jodtinktur  gelb  färben  und  mit  Jod 
und  Schwefelsäure  zunächst  gelbbraun,  später  erst  blau  werden.  Bei  der 
Mittellamelle  tritt  die  Eeaktion  früher  ein  und  wird  die  Bläuung  dunkler. 
Schwefelsäure  lost  die  ganze  Zellwand.  Schaar  deutet  die  Ergebnisse 
seiner  Untersuchungen  auf  Schleim. 


2.  Die  yerholzteii  31embraneii. 

Chemie.  Im  Mittelpunkte  des  Interesses  steht  bei  der  Be- 
handlung der  Verbolzung  pflanzlicher  Zellmembranen  die  Frage,  welcher 
Körper  die  Ursache  der  bekannten  Farbenreaktionen  mit  Anilinsulfat 
und  Phloroglncin-Salzsänre  sein  mag.  Man  sieht,  wie  sie  sich  immer 
weiter  zuspitzt  zur  Formulierung  der  folgenden  Frage :  „Ist  das 
Vanillin  die  Ursache  dieser  Reaktionen  oder  nicht?"  und  man  kann 
sehen ,  wie  in  der  Literatur  ein  energischer  Kampf  entbrennt ,  den 
Singer  1882  mit  seiner  Vermutung,  der  liypothetische  Körper  sei 
Vanillin,  eröffnet  und  den  nach  heftigen  Wogen  des  Kampfes  Gräfe 
1904  anscheinend  endgültig  zugunsten  Singers  beendet  hat.  Während 
auf  der  einen  Seite  Hegler  1890  Singers  Anschauungen  unterstützte, 
griff  sie  Nickel  ,  der  in  Seliwänoff  einen  Bundesgenossen  erhielt, 
mit  aller  Energie  an. 

In  eine  neue  Phase  trat  der  Streit  nach  zehnjähriger  Pause, 
während  welcher  die  entscheidende  Frage  nur  gelegentlich  gestreift 
wurde  (vgl.  Correns  und  Schellbnberg),  durch  das  Erscheinen  der 
Arbeiten  Czapeks  „Über  die  sogenannten  Ligninreaktionen  des  Holzes" 
und  Mäules  „Das  Verhalten  verholzter  Membranen  gegen  Kalium- 
permanganat, eine  Holzreaktion  neuer  Art".  Nach  einer  eingehenden 
Kritik  der  bisherigen  Methoden  des  Ligninnaehweises,  welche  wiederum 
die  Phloroglucin- Salzsäureprobe  als  beste  anerkennen  muß,  geht 
Czapek  zu  der  Besprechung  seiner  Versuche  über  Reindarstellung 
des  Holzstoffes  über,  den  er  mit  Zinnchlorür  extrahierte.  Der  er- 
haltene Körper  roch  sehr  stark ,  ähnlich ,  aber  nicht  ganz  so  wie 
Vanillin   und    reagierte    außerordentlich    empfindlich    mit  Phloroglucin- 


XXII,  3.     Riclitcr:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      379 

Salzsäure.  Czapek  gab  ihm  den  Namen  „Hadromal".  Der  Name  hängt 
mit  Haberlandts  „Hadrom"  zusammen.  Obwohl  es  Czapek  „in  ein- 
zelnen Versuchen  gelungen  ist,  ganz  geringe  Mengen  farbloser  nadei- 
förmiger Kristalle  des  Körpers  zu  erhalten ,  so  lieferten  dennoch 
sämtliche  Darstellungen  im  größeren  Maßstabe  bisher  keine  tadel- 
losen Produkte".  Trotz  dieser  Mängel  der  isolierten  Substanz,  wird, 
obwohl  sie  zweifellos  als  Aldehyd  erkannt  und  das  Vorhandensein 
von  Vanillin  nicht  ausgeschlossen  war ,  die  Möglichkeit  einer  Iden- 
tität derselben  mit  Vanillin  auf  Grund  der  „Gelbfärbung  mit  Alka- 
lien ,  dem  starken  Reduktionsvermögen  gegenüber  ammoniakalischer 
Silberlösung,  der  braunvioletteu  Eisenreaktion  und  der  abweichend 
nuancierten  Ligninreaktion  und  den  abweichenden  Geruch",  bestritten. 
Schon  wiederholt  ist  ausdrücklich  darauf  aufmerksam  gemacht,  daß 
man  beim  Nachweis  organischer  Stoffe  durch  Farbenreaktionen  auf 
unendlich  viele  Nuancen  einer  Reaktion  gefaßt  sein  muß ,  weil 
man  ja  mit  unendlich  vielen  Zufälligkeiten ,  zufällig  vorhandenen 
unkontrollierbaren  Substanzen  rechnen  muß ,  die  die  Reaktion  ver- 
ändern können.  Es  kann  daher  die  Nuance  der  Ligninreaktion 
ebensowenig  wie  der  „abweichende"  Geruch  die  Möglichkeit  der 
SiNGERSchen  Auffassung  zurückw^eisen.  Ich  komme  später  noch  auf 
die  neuesten  von  Gräfe  in  dieser  Richtung  angeführten,  schlagenden 
Beweise  zurück. 

So  schien  denn  durch  Czapeks  Untersuchungen  über  das  „Hadro- 
mal" das  Vanillin  aus  seiner  hypothetischen  Rolle  vollkommen  ver- 
drängt, und  mai\  mußte  nun  an  die  Hypothese  vom  „Hadromal"  auch 
noch  eine  von  der  Bindung  desselben  mit  der  Zellulose  anfügen. 
Der  Paarung  des  Hadromals  soll  nach  Czapek  Zellulose  sein  und 
mit  dem  neuen  Körper  einen  Hadromal-Zelluloseäther  bilden.  Doch 
soll  in  sehr  geringen  Mengen  Hadromal  auch  frei  in  der  Membran 
vorkommen. 

Mäule  hat  nun  eine  neue  Reaktion  angegeben,  die  im  wesent- 
lichen darauf  beruht,  daß  Holz,  dessen  Reaktionsträger  —  nennen 
wir  ihn  vorläufig  mit  Czapek  Hadromal  —  zerstört  ist ,  —  mit 
Ammoniak  noch  eine  tiefrote  Reaktion  zu  liefern  vermag.  Der  Vor- 
gang dabei  ist  der  folgende:  Man  behandelt  die  Holzraembranen  zu- 
nächst mit  Kaliumpermanganat ,  dadurch  werden  sie  braun ,  danach 
überträgt  man  sie  in  Salzsäure,  —  sie  werden  farblos,  darauf  in 
Ammoniak,  —  es  tritt  eine  tiefrote  Farbe  ein.  Dabei  vermeide  man 
eine  zulange  Einwirkung  des  Kaliumpermanganats ,  da  sonst  der 
Zellulosecharakter  der  Membran  entsteht  und  die  Färbung  unterbleibt. 


380      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Dieser  Ausfall  der  Reaktion  gestattet  die  Annahme ,  daß  der- 
selben ein  Zersetzungsprodukt  des  ..Hadromals"  oder  irgendein 
anderer  Körper  zugrunde  liegt ,  der  aber  jedenfalls  ein  ständiger 
Begleiter  verholzter  Substanz  zu  sein  scheint ,  da  er  auch  in  Bast- 
bündeln vorkommt,  die  Wiesners  Probe  wenig  oder  gar  nicht  geben. 
Dem  „Hadromal"  könne  somit  die  verholzende  Wirkung  keineswegs 
zugeschrieben  werden.  Merkwürdigerweise  sind  gerade  die  Gymno- 
spermen für  die  neue  Reaktion  ungeeignet. 

Die  wichtigen  Resultate,  die  Czapek  und  Mäule  erzielt  hatten, 
lassen  es  selbstverständlich  erscheinen,  daß  nun  das  „Hadromal"  und 
„Mäule s  Reaktion"  im  Mittelpunkt  des  Interesses  standen.  Das 
Vanillin  schien  für  eine  Zeitlang  vergessen. 

Geneau  de  Lamarliere  überprüfte  zunächst,  inwieweit  die  P'ak- 
toren  der  Mäule  sehen  Holzstotfreaktion  durch  andere  ersetzbar  sind, 
und  fand :  1)  Das  Kaliumpermanganat  ist  zur  Reaktion  nicht  not- 
wendig, doch  ist  unerläßlich  die  Anwendung  eines  Oxydationsmittels. 
Das  Kaliumpermanganat  kann  somit  ersetzt  werden  durch  Salpeter- 
säure ,  und  man  erhält  bei  weiterer  Behandlung  nach  Mäule  Gelb- 
färbung; Kaliumhypochlorid  und  Kalilauge  erzeugen  Gelbfärbung, 
einprozentige  Chromsäure  ruft  Rötung  hervor.  Hofmeisters  Flüssig- 
keit ist  besonders  empfehlenswert :  bei  größeren  Mengen  von  Chlor 
entsteht  Rotfärbung.  Bei  Gymnospermen  und  Gefäßkryptogamen  er- 
zielt man  nur  mit  dieser  Flüssigkeit  (gesättigtes  Chlorkalium  und 
verdünnte  Salzsäure)  Mäule  s  Reaktion. 

2)  Mäule s  Salzsäure  kann  durch  andere  Säuren  ersetzt  werden, 
doch  ist  sie  am  geeignetsten. 

3)  Mäule s  Ammoniak  ist  ersetzbar  durch  andere  Alkalien. 

4)  Alle  Gewebe,  die  Wiesners  Phloroglucinprobe  geben,  geben 
Mäule s  Probe  auch,  ein  Resultat,  durch  das  er  sich  mit  Mäule 
selbst  in  Widerspruch  setzt,  und  mit  dem  auch  Fabers  sofort  zu 
besprechende  Befunde  nicht  ganz  stimmen ,  das  aber  die  Tatsache 
für  sich  hat,   mit  bedeutend  verfeinerten  Methoden  gefunden  zu  sein. 

5)  Je  stärker  die  Oxydation,  desto  stärker  die  Mäule  sehe,  desto 
schwächer  aber  die  Wiesner  sehe  Probe. 

In  dem  Grade  also,  in  dem  der  Träger  der  Mäule  sehen  Probe 
auftritt,  verschwindet  der  der  WiESNERSchen ,  und  Förderer  dieses 
Vorgangs  ist  der  Sauerstoff,  daher  wird  nach  Geneau  die  Perman- 
ganatreaktion  durch  ein   „Ligninoxyd"   bedingt. 

6)  Die  Färbung  von  verholzten  Membranen  mit  Anilinfarbstoffen, 
im  besonderu  mit  Jodgrün,  erfolgt  noch,  wenn  die  Mäule  sehe  Reaktion 


XXII,  3.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      381 

bereits  versagt,  wenn  also  Lignin  und  Ligninoxyd  entfernt  sind,  hat 
also  mit  der  Verholzung  gar  nichts  zu  tun.  Geneau  de  Lamakliere 
vermutet,  daß  dieser  Keaktion  die  Stickstoffverbindungen  des  Holzes 
zugrunde  liegen  (man  vgl.  auch  Allen s  Bemerkung,  nach  der  in 
jugendlichen  Holzmembranen  die  Pektiustoffe  in  reinster  Form  vor- 
handen sein  sollen). 

7)  Die  Xylanprobe  mit  Orcein- Salzsäure  ist  auf  „Vanillin"  zu- 
rückzuführen. Geneau  hat  später  auch  einen  Aldehyd  in  dicken 
Kutikulahäuten  entdeckt,  der  ., Schiffs  Probe"  gibt  und  schon  wegen 
seines  Vorkommens  Hadromal  nicht  sein  kann. 

Faber  konzentrierte  seine  Aufmerksamkeit  auf  jene  Fälle ,  wo 
WiicsNERS  Probe  nicht,  Mäules  dagegen  gut  gelingt  und  um- 
gekehrt. Es  muß  hervorgehoben  werden,  daß  er  nur  die  MÄuLESche 
Versuchsanordnung  benutzte ,  nicht  die  verfeinerten  Methoden  von 
Geneau.  —  Beispiele  für  Färbung  nach  Wiesnkr  und  Farblos- 
bleiben nach  Mäule  sind  Hydathoden  von  Anamirta  Cocculus ,  Bast- 
fasern von  Boehmeria  platyphylla,  Beispiele  für  das  entgegengesetzte 
Verhalten  Sklerenchymfasern  von  Anamirta  Cocculus.  Mit  Geneau 
müßten  wir  uns  diese  Beobachtungen  von  Faber  in  der  Weise  er- 
klären ,  daß  eben  in  dem  einen  Falle  Lignin ,  im  andern  Falle  sein 
Oxyd  vorlag. 

Wie  wir  gesehen  haben ,  hat  Geneau  auf  den  alten  Ausdruck 
Lignin  zurückgegriffen,  vielleicht,  um  zu  zeigen,  wie  wenig  sich  mit 
den  beiden  Hypothesen  vom  Vanillin  und  Hadromal  als  Träger  der 
Wiesner  sehen  Probe  erklären  ließ,  und  dem  „Vanillin"  war  bloß  ein 
Platz  für  die  BERXRANDSche  Xylanprobe  eingeräumt  worden.  Faber 
schließt  mit  der  Meinung,  die  HolzstoftYrage  sei  eigentlich  erst  wieder 
aufgerollt  und  nicht,  wie  man  meinte,  gelöst.  Inzwischen  hatte 
Wiesner  einen  Chemiker  angeregt,  mit  den  neuen  Erfahrungen  aus- 
gerüstet, sich  der  Holzuntersuchung  zu  widmen  und  besonders  das 
Czapek  sehe  Isolierungs verfahren  genauer  zu  studieren. 

Sind  nun  zwar  die  Resultate  der  Arbeit  Gräfes  meist  rein 
chemischer  Xatur,  so  ist  diese  Arbeit  doch  wegen  ihrer  allseits  be- 
friedigenden Antworten ,  die  sie  auf  die  Fülle  von  Fragen  über 
Wiesners  und  Mäules  Probe,  welche  sich  beim  Verfolg  der  beiden 
so  wichtigen  Holzstoffreaktionen  aufdrängen,  gibt,  von  solcher  Be- 
deutung,  daß  sie  auch  hier  eine  eingehende  AVürdigung  finden  muß. 

Das  nach  Czapeks  Verfahren  dargestellte  Hadromal  erwies  sich 
für  weitere  Analysen,  im  besonderen  zur  Gewinnung  kristallisierender 
Substanzen  als  unzureichend.     Den  geeignetsten  Weg  gab  erstens  die 


382      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Untersuchung'   der  Sullitablauge  und  zweitens  die  hydrolytische  Spal- 
tung und  Erhitzung  in  Vakuumröhren  auf  180^. 

Das  Resultat  dieser  Untersuchungen  war  die  Reindarstellung: 

1)  von  Vanillin  C^Hj^O.   (Schmelzpunkt  bei  80^). 

2)  von  Brenzkatechin  CgHgO.j  (Schmelzpunkt  bei  103  und  104" 
—  wird  mit  Eisenchlorid  dunkelgrün). 

3)  von  2  bis  5  Methylfurfurol  CeHgO,  (Schmelzpunkt  bei  108^). 
Bekannt  war  bereits  das  Vorhandensein  von  Koniferin  im  Holze, 

Nur  das  Vanillin  gab  von  den  drei  neu  dargestellten  Produkten  eine 
Rotfärbung  mit  Phloroglucin  und  Salzsäure,  es  erscheint  somit  nur 
dieses  als  Träger  der  Wiesner  sehen  Holzstoifreaktion.  Ebenso  ist 
es  aber  auch  die  Ursache  der  violetten  Nuance  der  Koniferinprobe, 
indem  bei  starker  Oxydation ,  z.  B.  mit  Kaliumchlorat  aus  Koniferin 
etwas  Vanillin  abgespalten  wird ,  das  die  bekannte  blauviolette 
Farbe  erzeugt.  Damit  erscheinen  Czapeks  diesbezügliche  Befunde  er- 
klärt. Koniferin  allein  färbt  in  kleinen  Mengen  mit  Phenol-Salzsäure 
und  chlorsaurem  Kali  blauviolett.  Koniferin  und  Brenzkatechin  liefern 
unter  gleichen  Umständen  eine  grasgrüne  Färbung ;  die  Gelbgrünfärbung 
des  Holzes  mit  Salzsäure,  beziehungsweise  die  haltbare  Grünfärbung 
mit  Bromwasserstoff  hat  ihre  Ursache  in  der  Wirkung  von  Koniferin 
und  Methylfurfurol.  Von  großer  Bedeutung  sind  auch  Gräfes  Be- 
merkungen über  den  Wert  von  Nuancen  bei  Farbenreaktionen  und 
seine  Warnung,  allzuviel  auf  die  oft  bemerkten  Farbenverschieden- 
heiteu  zu  geben.  Man  kann  nach  seinen  Erfahrungen  nach  der 
Reaktion  in  der  Eprouvette  nicht  sofort  auf  den  Farbenton  im  Schnitte 
schließen,  um  so  weniger  als  alle  Versuchsbedingungen  im  Präparate 
unbekannt  erscheinen.  Will  man  genau  vergleichbare  Farben  er- 
lialten ,  so  muß  man  Baumwolle  mit  Vanillin ,  Methylfurfurol ,  Brenz- 
katechin tränken ,  mit  Salzsäure  versetzen  und  am  Wasserbade  zur 
Trockene  eindampfen. 

Die  Tatsache ,  daß  das  mittels  Alkohol  aus  dem  Holze  aus- 
gezogene Harz  in  ganz  ausgezeichneter  Weise  Wiesners  Rotfärbung 
zeigt,  veranlaßte  Gräfe  die  Reindarstellung  der  Farbstoff  liefernden 
Substanz  auch  von  dieser  Seite  her  zu  beginnen.  Diesbezügliche 
weitere  Mitteilungen  stehen  noch  bevor. 

Auf  die  Frage ,  woher  die  oben  genannten  drei  Verbindungen 
stammen ,  lautet  nach  Gräfe  die  Antwort :  Vermutlich  aus  der  Zel- 
lulose des  Holzes ,  wenigstens  ist  dies  für  Methylfurfurol  durch 
Fenton  und  Gostling  sehr  wahrscheinlich  gemacht,  die  fanden, 
dal.)    aus    Zellulose    33    Prozent     dieses     Körpers    gewonnen    werden 


XXII,  o.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      383 

können,  t^ber  die  beiden  andern  Substanzen  sind  Untersuchungen 
noch  im  Gange. 

Es  ist  natürlich  noch  von  großem  Interesse,  wie  Gräfe  sich  zu 
Mäules  Reaktion  stellt,  nachdem  er  den  Träger  der  WiESNERSchen 
rein  dargestellt  hat.  Gräfe  erklärt  den  Vorgang  bei  Mäules  Reaktion 
ganz  ähnlich  wie  Geneau.  Das  Perraanganat  ist  ein  Oxydations- 
mittel. Proportional  zur  fortschreitenden  Oxydation  muß  Wiesners 
Probe  schwächer  werden ,  um  bei  vollendeter  Oxydation  vollkom- 
men auszubleiben ,  während  die  Rotfärbung  mit  Ammoniak  besser 
erfolgen  muß  entsprechend  der  größeren  Menge  mit  Ammoniak  sich 
rötender  Substanz. 

Wenn  nun  Vanillin  der  Träger  der  Wiesner  sehen  Probe  ist, 
dann  muß  man  auch  mit  ihm  dieselben  Erscheinungen  hervorrufen 
können.  Auch  das  gelang.  Vanillin  nach  Mäule  behandelt,  liefert 
purpurrote  Farben ,  Koniferin  ebenso ,  Methylfurfurol  brannrote  und 
Rrenzkatechin  bleibt  farblos.  Auch  in  dieser  Frage  hat  Gräfe  noch 
nicht  das  letzte  Wort  gesprochen.  Und  man  kann  nur  wünschen, 
daß  er  noch  recht  zahlreiche  Abhandlungen  wie  seine  letzte  dem 
Holzstoffthema  widmen  möchte. 

Gehen  wir  auf  Geneaus  Erklärung  der  Mäule  sehen  Reaktion 
zurück,  so  können  wir  sie  jetzt,  wie  folgt,  formulieren.  Behandelt 
man  vanilliuhaltige  Präparate  mit  Oxydationsmitteln  irgendwelcher 
Art,  so  bilden  sich  Vanillinoxydationsprodukte,  die  die  Eigentümlich- 
keit haben,  sich  mit  Ammoniak  purpurrot  zu  färben.  Ist  alles 
Vanillin  oxydiert,  dann  kann  natürlich  Wiesners  Probe  mit  Phloro- 
gluzin-Salzsäure,  die  vor  der  Oxydation  prachtvoll  gelang,  nicht  mehr 
eintreten. 

Betrachten  wir  Czapeks  Hadromal  mit  den  neuen  Erfahrungen, 
so  erweist  es  sich  trotz  der  großen  Bemühungen,  es  absolut  rein  zu 
erhalten,  noch  als  Gemenge  der  drei  von  Gräfe  rein  dargestellten  Sub- 
stanzen, wobei  es  natürlich  von  jeder  etwas  zeigt,  vgl.  die  Aldehyd- 
natur, den  eigentümlichen  Geruch  nach  Vanillin  und  die  gewissen 
Farbennuancen. 

Blicken  wir  endlich  zurück  auf  den  Beginn  der  Vanillin-Holz- 
stoftrage,  so  hat  sich  doch  Singers  Vermutung  als  berechtigt  heraus- 
gestellt und  lautet  also  nach  dem  heutigen  Stande  der  Dinge  die  Antwort 
in  unserer  Frage:  Die  beste  Reaktion  auf  Holzsubstanz  ist  Wiesners 
Probe  mit  Phlorogluzin-Salzsäure  und  ihr  Träger  ist  das  Vanillin. 

Dieses  Kapitel  war  soweit  abgeschlossen,  als  mir  V.  Gräfes  neue 
Publikation  „Eine  neue  Reihe  von  Holzreaktionen"  in  die  Hände  kam. 


384      Riclitor:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Er  findet,  daß  primäre  Alkohole  mit  der  Gruppe  (CH,0.,  =  CH  im  Ver- 
eine mit  Sclnvefelsäure  vom  spec.  Gew.  1-84  mit  ^^1nillin  oder  Holzextrakt 
eine  dunkelrote  Färbung-  mit  stark  blauem  Stiche  liefern. 

Rezept:  „30  cm*^  Isobutylalkohol  werden  mit  15  cm''  Schwefelsäure  der 
genannten  Konzentration  vorsichtig  unter  Kühlen  in  fließendem  Wasser 
überschichtet  und  nach  und  nach  durchgeschüttelt.  Die  Mischung  färbt 
sich  hellrot  bis  dunkelrot,  und  es  entwickelt  sich  Schwefeldioxyd  (am  Ge- 
ruch erkennbar).  Setzt  man  von  dieser  Miscliung  einige  Tropfen  zu  einer 
Spur  Holzmehl,  so  wird  dasselbe  schwärzlich  (offenl)ar  infolge  der  Schwefel- 
säurewirkung). Verdünnt  man  aber  mit  wenig  Alkohol  und  schüttelt  die 
Eprouvette,  so  zeigen  die  an  der  Wand  anhaftenden  Holzteilclien  eine  schöne 
blaue  bis  blaugrüne  Farbe,  in  der  Flüssigkeit  ersclieint  genau  das  Rotviolett, 
welches  man  erzeugen  kann,  wenn  man  diesellie  Probe  mit  Vanillinlüsung 
vornimmt."  Schnitte  färben  sich  wie  das  Reagens  deutlich  violett,  nach 
weniger  als  einstündigem  Liegen  im  Reagens  in  Gl^yzerin  übertragen,  wer- 
den aber  die  verholzten  Gewebe  alsbald  blau.  Nuancen  nach  grün  und 
rotviolett  glaubt  Gräfe  auf  die  Verholzungsintensität  zurückführen  zu 
müssen.  —  Auch  der  Amj^l-  und  Hexylalkohol  zeigt  diese  Reaktion.  Die 
Färbung  ist  G  Tage  haltbar. 

Nicht  geben  die  Probe  Kafifee-  und  Fei'ulasäure,  die  mit  Wiesners 
Reagens  nach  Czapek  reagieren.  —  Außer  Holz  zeigen  sie  Vanillin  und 
dessen  Verwandte.  Alipliatische  Aldehyde:  Isobutylaldehyd  analog  wie 
oben  Isobutylalkohol  verwendet,  stellt  mit  Schwefelsäure  auch  wieder 
ein  Holzreagens  vor.  Beim  Übertragen  in  Glyzerin  tritt  weinrote  bis  rot- 
violette Farbe  ein.  —  Einschlägige  Versuche  mit  aliphatischen  Aminen 
werden  noch  eingeleitet  werden. 

Die  Färlmng  ist  auch  bei  starken  ^Vergrößerungen  sichtbar. 

Mikrochemisches  Verhalten.  Von  den  vorgeschlagenen 
Holzstoftreaktlonen  haben  sich,  wie  bekannt,  stets  die  beiden  Wies- 
ner sehen  mit  Anilinsulfat  und  Phoroglucin  am  geeignetsten  erwiesen. 

Da  nun,  wie  Singers  und  Heglers  Untersuchungen  dargetan 
liatten,  anscheinend  Vanillin  einen  konstanten  Begleiter  des  Holzes 
bilden  mochte,  konnte  dieses  auch  für  eine  mögliche  Ursache  der  Rot- 
färbung von  verholzter  Substanz  mit  Millons  Reagens  gelten.  Correns 
glaubte,  diese  Farbenreaktion  wenigstens  bei  BegoniakoUenchym  auf 
Gerbstoff,  bei  Bromeliaceen  auf  Tyrosin  zurückführen  zu  müssen, 
auch  soll  Vanillin  niclit  allgemein  im  Holze  verbreitet  sein.  Auf  die 
verholzten  Zelhnembranen  hat  später  auch  W.  Ellram  bei  seiner 
Arbeit  „Über  den  mikrochemischen  Nachweis  von  Nitraten  in  Pflanzen" 
Bezug  genommen.  Schellenrerg  will  die  Gelbfärbung  des  Holzes 
durcli  Chlorzinkjod  aus  der  Zahl  der  HolzstotFreagentien  ausgeschieden 
wissen.  Er  stimmt  mit  Zimmermann  in  der  Bedeutung  der  Phloro- 
glucin-Salzsäure-Probe  überein,  die  er  für  das  emptindlichste  Holz- 
reagens erklärt.     Freilich  ließe  sich   nicht    beweisen,    ob    alles,    was 


XXIT,  .').     Richter:    Die  Fortsoliritte  der  botanischen  Mikrochemie.      385 

diese  Probe  gäbe,  auch  wirklicli  verholzt  sei.  Der  Begriff  der  Ver- 
holzung sei  noch  unklar.  Auch  Wundsekrete  und  Harze  färbten  sich 
mit  Phloroglucin-Salzsäure  (vgl.  diesbezüglicli  auch  H.  Molisch  und 
die  folg.  Erörterungen  über  Wundgummi).  Weitere  „Beiträge  zur 
Untersuchung  der  verholzten  Membran''  sind  von  Zetzsche  geliefert 
worden.  Wieler  fand ,  daß  die  Membranen  und  Verstopfungen  der 
von  JosT  beschriebenen  Luftpneumathoden  die  Phloroglucin-Salzsäure- 
Probe  liefern.  Bezüglich  der  Zweifel  der  Deutung  vgl.  das  oben 
Gesagte. 

F  ä  r  b  u  n  g.  Wie  bekannt,  wird  Fuchsin  zur  Holzfärbung  sehr 
empfohlen.  Nach  Heinricher  soll  Holzgummi  deren  Ursache  sein. 
Nach  RouLET  ist  auch  konzentrierte  alkoholische  Cyaninlösung  mit 
öprozentiger  ammoniakalischer  Kongorotlösung  für  schöne  Doppel- 
färbungen  von  Holz-  und  Zellulosegewebe  sehr  gut  geeignet.  Bei 
dieser  Versuchsanstellung  wird  Zellulose  rot ,  Holz  blau ,  wieder  ein 
Beispiel  dafür,  wie  wenig  man  auf  die  Farbstoffe  als  Mittel  zur  Er- 
kennung chemischer  Substanzen  geben  darf.  Eine  neue  Doppel- 
färbung für  Gewächse  mit  teilweise  verholztem  Gewebe  verdanken 
wir  Hermann  Pfeiffer.  Sie  hat  den  Vorzug  der  Haltbarkeit  und 
beruht  auf  der  Verwendung  von  Hämalaun  und  Naphthylaraingelb. 
Als  Entwässerungsmethode  wird  die  von  Unna  angegeben.  Die 
Farbenverteilung  stellt  sich  dabei  wie  folgt:  Holz  gelb;  unverholzte 
Teile  violett.     Rezept  vgl.  im  Original. 

Eine  weitere  Methode  zur  Herstellung  haltbarer  Holzfärbungen 
rührt  her  von  Arcangeli,  nach  dessen  Versuchen  eine  0*5prozentige 
Methylgrün-  und"  eine  .5prozentige  Fuchsinli)sung,  beide  im  Verhältnis 
4 :  1  verwendet,  sehr  gute  Resultate  liefern  sollen.  Chalon  verweist 
auf  Neutralrot,  auf  Crocein  in  saurer,  Kongorot  in  alkoholischer 
Lösung  zur  Holzfärbung.  In  wässriger  Lösung  ist  Kongorot  nicht  ver- 
wendbar. Rutheniumrot  färbt  Holz  nicht.  In  späteren  Arbeiten  be- 
richtet er  von  seinen  Erfahrungen  mit  Farbstoffen  vor  und  nach  der 
Behandlung  mit  Eau  de.Iavelle  und  über  zweckmäßige  Doppelfärbungen 
mit   Preußisch-Blau-Safranin  und  Anilinblau-Magentarot. 

Nach  Lagerheim  färbt  sich  bei  Anwendung  des  von  ihm  an- 
gegebenen Farbstoffgemisches  Sudan  HI-Brillantblau-Chloranilin  das  Holz 
blau ;   Fettviolett,  Fettgrün,  Fettrot  färben  Kork,  Kutikula  und  Holz. 

Devaux  hat  sich,  wie  schon  wiederholt  erwähnt,  mit  dem 
auf  Metallspeicheruug  beruhenden  Färbeverfahren  beschäftigt.  Nach 
seinen  Erfahrungen  speichert  Ilolzsubstanz  Metall  nicht.  Erst  Vor- 
behandlung mit  Eau    de  .lavelle    befähigt    sie  dazu.     Dann   aber    ist 

Zeitsclir.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  .8.  25 


386      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

dieses  Speicherlingsvermögen  auch  staunenswert.  Eisen  und  Kupfer 
werden  unter  diesen  Bedingungen  noch  im  Verhältnis  1 :  lO'OOO'OOO 
aufgenommen. 

IIeinricher  fand  bei  den  Lathraea- Arten  zwischen  Saugfortsatz 
und  dem  Gewebe  der  Wirtswurzeln  gelbliche  Massen  liegen,  die  sich  als 
Reste  verflüssigter,  verholzter  Membran  erwiesen  und  besonders  mit 
Wiesners  Phloroglucin-Salzsäure  intensiv  reagierten,  so  daß  es  den  An- 
schein hatte,  als  ob  hier  eine  Anreicherung  der  färbbaren  Substanz  statt- 
gefunden hätte.  25prozentige  Chrorasäure  vermag  diese  gelblichen  Massen 
zu  entfernen,  während  Schwefelsäure  sie  ohne  Ver(juellung  verkohlt. 

Bei  seinen  Studien  über  Hadromal  machte  Czapek  die  interessante 
Beobachtung,  daß  von  Merulius  lacrymans  befallene  Hölzer  mit  Alkohol 
viel  mehr  „Hadromal"  zu  liefern  vermögen  als  pilzfreie.  Diese  Eigentüm- 
lichkeit der  chemischen  Veränderung  ist  dem  Merulius  lacrimans  nicht  allein 
eigen,  auch  Pleurotus  pulmonarius  liefert  die  Hadromalprobe  fördernde 
Extrakte.  Czapek  führt  diese  Wirkung  auf  ein  Enzym  zurück,  dem  er 
den  Namen  „Hadromase"  gibt.  Diese  Befunde  stimmen  mit  früheren  von 
Hartig  gut  überein,  der  vom  Verschwinden  des  die  Holzstoifprobe  liefernden 
Körpers  unter  der  Einwirkung  des  Holzschwammes  berichtete.  Auch  durch 
Kulturen  im  Brautsclirank  konnte  er  diesen  Befund  erhärten.  Angeregt 
durch  C'ZAPek,  beschäftigte  sich  Marpmann  mit  dem  Leben,  Natur  und 
Nachweis  des  Hausschwammes  und  ähnlicher  Pilze  unter  Anwendung 
biologischer  und  mikroskopisch-mikrochemischer  Methoden,  von  denen  er 
sich  nach  berechtigter  Kritik  der  in  der  Pliarmaz.  Zentralhalle  1901  Nr.  3 
angegebenen  mikrochemischen  Erkennungsmethoden  endgültig  für  die  bio- 
logischen entscheidet.  Eine  neuere  Arbeit  auf  diesem  Gebiete  hat  Schorsten 
zum  Verfasser.  Man  vgl.  auch  Tubeufs  Untersuchungen  mit  holzzerstören- 
den Pilzen. 

Koniferin.  Höhnel  hat  bekanntlich  die  von  Tiemanns  und  Haar- 
manns empfohlene  Phenolsalzsäureprobe  auf  Koniferin  mit  Rücksicht  auf 
Hartig  s  Entdeckung  des  Stoffes  im  Holze  der  Koniferen,  für  mikrochemisch- 
botanische  Zwecke  ausgenutzt.  Molisch  beschrieb  später  in  einer  20pro- 
zentigen  alkoholischen  Thymollösung,  die  mit  chlorsaurem  Kali  versetzt 
war,  ein  weiteres  vorzügliches  Koniferinreagens.  Da  sowohl  nach  Höhnel 
wie  nach  Molisch  die  Reaktionen  mit  verholzten  Membranen  gelangen, 
stand  man  nicht  an,  um  so  mehr  als  schon  makrochemische  Analysen  es 
wahrscheinlich  machten,  den  Holzzellen  Koniferingehalt  zuzuschreiben.  Auch 
Hegler  war  von  der  angegebenen  Verbreitung  des  Koniferins  überzeugt. 
Czapek  hat  sich  nun  in  seiner  früher  zitierten  Arbeit  gegen  diese  allge- 
mein verbreitete  Anschauung  gewendet.  Es  sind  abermals  Farbenverschieden- 
heiten, auf  die  er  sich  dabei  stützt.  Indem  ich  nun  noch  auf  das  im  Kapitel 
Chemie  der  verholzten  Zellmembranen  Gesagte  verweise,  wo  jedesmal  an 
passender  Stelle  des  Koniferins  gedacht  ist,  hebe  ich  nur  noch  Gräfes 
Arbeit  hervor,  welche  durch  makrochemische  Analysen  auch  den  Konferin- 
gehalt  des  Holzes  zweifellos  macht  und  die  Czapek  sehen  Befunde  in  der 
geeigneten  Weise  richtig  stellt  bezw.  erklärt.  —  Kristallisation.  Bis- 
her gelang  es  leider  noch  nicht,   das   Koniferin  innerhalb   der  Zelle  zur 


XXll,  3.     Riehtpr:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      387 

Kristallisation  zu  bringen,  doch  sind  unschwer  aus  einer  wässrigen  reinen 
Koniferinlösung  mikroskopische  Kristalle  zu  erhalten.  Daß  es  aus  Holz- 
zellenextrakt nach  makrochemischen  Methoden  zur  Kristallisation  gebraclit 
wurde,  habe  ich  Ijereits  erwähnt. 


3.  Die  Kutikula  und  die  verkorkten  Membranen. 

Chemie.  Auf  Grund  der  Untersuchungen  von  Höhnel  und 
GiLsoN  war  die  Auffassung  von  der  nahen  Verwandtschaft  der  Kuti- 
kula und  der  verkorkten  Membranen  so  gang  und  gäbe  geworden, 
daß  man  die  Ausdrücke  „kutinisiert"  und  „kutikularisiert"  überhaupt 
für  überflüssig  ansah  und  das  Wort  „Kutikula"  bloß  behufs  leichterer 
topographisclier  Bestimmung  beibehielt.  Daß  nun  aber  doch  entgegen 
der  herrschenden  Anschauung  auch  Avesentliche  chemische  Unter- 
schiede bestehen,  gelang  v.  Wisselingh  zu  zeigen,  der  für  acht  ver- 
schiedene Gewächse  die  chemischen  und  physikalischen  Eigenschaften 
der  Kutikula  auf  mikrochemischem  Wege  festzustellen  suchte.  Als 
Reaktionen  benutzte  er  dieselben,  die  er  seinerzeit  beim  Studium  der 
Verkorkung  anwandte.  Die  sich  ergebenden  Zersetzungsprodukte  der 
Kutikula  wurden  namentlich  auf  Phellonsäure  geprüft ,  wobei  natür- 
lich in  erster  Linie  die  Violettfärbung  durch  Chlorzinkjod  in  Be- 
tracht kam.  Das  Ergebnis  dieser  Untersuchungen  lautet:  Zwischen 
Kutikula  und  Suberinlamelle  gibt  es  zwar  Übereinstimmungen  (beide 
sind  frei  von  Zellulose  und  beide  enthalten  teilweise  verüüssig- 
bare  Substanzen) ,  doch  bestehen  so  erhebliche  Verschiedenheiten 
zwischen  ihnen,  daß  ein  Durcheinanderwerfen  beider  unzulässig  ist, 
denn  der  Kutikula  fehlt  die  in  der  Suberinlamelle  stets  vorhandene 
Phellonsäure  und  sie  widersteht  der  Kalilauge  besser ,  ob  diese 
nun  in  Wasser,  Alkohol  oder  Glyzerin  gelöst  erscheint.  Man  wird 
daher  nicht  nur  die  alten  Worte ,  weil  glücklich  gewählt ,  wieder 
herausholen  müssen ,  sondern  auch  mit  v.  Wisselingh  noch  neue  zu 
bilden  haben,  um  diesen  einschneidenden  Unterschieden  gerecht  zu 
werden.  So  nennt  er  die  aus  der  Kutikula  isolierten  Säuren :  „Acides 
cutogeniques".  Es  sei  auch  erwähnt ,  daß  die  Kutikularschichten 
weniger  widerstandsfähig  sind  als  die  Kutikula. 


Eine  weitere  chemische  Charakterisierung  erfuhr  diese  in  der 
allerjüngsten  Zeit  durch  Geneau  de  Lamarliere,  der  verschieden  dicke 
Kutikulae  miteinander  verglich,  besonders  im  Verhalten  gegen  Schiffs 
Reagens  (Fuchsin ,  entfärbt  mittels  schwefeliger  Säure)  und  dabei 
noch  die  Wirkungen  von  Jod,   Sudan  III  und  andern  Stoffen  mit  zum 

2.Ö* 


388      dichter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXTI.  3. 

Vergleiche  heranzog.  Es  zeigte  sich,  daß  starke  Kiitikulae  einen  reak- 
tionsliindernden  Stoff  enthalten.  Die  Reaktion  bedingt  vermutlich  ein 
Aldehydstoff,  der  auch  dieToLLENSSche  und  PASxEURSche  Probe  liefert. 

Dieses  Verhalten  kutiknlarisierter  Membranen  gegen  Fuchsin 
ist  nur  ein  Beispiel  von  den  vielen  Möglichkeiten ,  die  Kutikula  und 
verkorkte  Membranen  durch  Farbstoffe  zu  differenzieren. 

Färbung.  Abgesehen  von  dem  von  Correns  angegebenen 
Chlorophyllfarbstoff'  kann  man  die  von  den  verschiedenen  Forschern 
zur  Färbung  empfohlenen  Farbstoffe  unterscheiden,  1)  in  solche,  die 
von  Fett  aufgenommen  werden ,  2)  solche ,  die  man  gewöhnlich  zur 
Differenzierung  von  Plasma  und  Kern  benutzt,  und  3)  pektinfärbende. 

Zimmermann  wurde  zur  Verwertung  von  Alkannin  und  Cyauin 
für  Korkfiirbung  vornehmlich  durch  den  Gedanken  veranlaßt,  daß 
das  Suberin  oder  Eutin  als  Fett  eben  ein  analoges  Speicherungs- 
vermögen für  diese  Farbstoffe  besitzen  müsse,  und  seither  haben  sich 
die  Angaben  über  neue  Korkreagentien,  d.  h.  neu  verwendete  P"'arb- 
stoffe  außerordentlicli  vermehrt. 

I.  Fettfarbstoff c   als   Korkreagentien: 

1)  Prodigiosin,    den   Farbstoff  des  Bac.  prodigiosus   und    andere 

Bakterienfarbstoffe,   z.  B.   den   des  Bakt.   kiliense,   empfiehlt 

R0.SEN13BR(;. 

2)  Sudan  III,   eingeführt   in  die  botanische  ^likrocheuiie  von  Bus- 

CALiONi,  empfohlen  von  Kroemer  und  für  Doppelfärbungen 
mit  Brillantblau  und  Chloranilin  von  Lagerheim. 

3)  Scliarlach  R.  eingeführt  von  Machaelis,  empfohlen  von  Lager- 

heim, Kroemer  und  Rumpf. 

4)  Fettblau,  Buttergelb,  Meyers  Gelb,  zum  ersten  Male  verwendet 

von  Lagerheim. 

5)  A.  Meyers  Dimetliylparaidienylendiamin  und  «-Naphtol  in  ein- 

prozentiger  Sodalösung,  eingeführt  von  Rumpf. 

II.  Plasma-  und  Kernfarbstoffe  als  Korkreagentien. 

1)  Neutralrot,  verwendet  von  Chalün. 

2)  Mit  Anunoniak  entfärbte  konzentrierte  Lösungen  von  Gentiana- 

violett,  Dahlia  und  Methylgrün  nach  Vorbehandlung  der  Ob- 
jekte mit  Eau  de  Javelle  und  Eintragen  in  5 — lOprozentige 
Salz-,  Schwefel-  oder  Salpetersäure  empfiehlt  Tison.  Dabei 
werden  die  Korkmembranen  violett. 

3)  Essigsaures  Anilinblau,  eingeführt  von  Forsch. 

4)  Fuchsin,  emijfohlen  von  Darbishire. 

5)  „         entfärbt  durch   schwefelige  Säure  (Schiffs  Reagens), 
eingeführt  von  L.  Geneau  de  Lamaruiere. 

III.  Pektinfarbstoffe. 

1)  Mangins  Säuregrün  /  beide   empfohlen   von   Tisox.     Versuchs- 

2)  Pariser  Violett  \  anstellung  wie  in  II.  2). 


XXII,  3.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      389 

Devaux  teilt  mit ,  daß  sich  Kutiii  und  Snberin  bei  seiner  auf 
Metallspeicherung  basierenden  Methode  der  Färbung  nicht  färben 
lassen,  da  ihnen  das  Vermögen  der  Metallspeicherung  abgeht.  — 

Überblicken  wir  den  letzten  Abschnitt ,  so  zeigt  er  uns  nicht 
weniger  als  dreierlei,  anderweitig  häufig  verwendete  Farbstoffe  im 
Dienste  des  Suberiunachweises  und  mahnt  uns  damit  zur  ent- 
sprechenden Vorsicht  bezüglich  der  Schlüsse,  die  man  aus  Farbstoff- 
speicherungen ziehen  darf.  So  scheint  es  mir  jedenfalls  unzulässig, 
aus  der  bei  reifen  Sporen  von  Phycochromaceen  gelungenen  Färbung 
nach  Gram  auf  deren  Suberingehalt  zu  schließen. 

Man  wird  daher  beim  mikrochemischen  Nachweise  außer  den 
Färbungen ,  die  ja  gewiß  bezüglich  Deutlichmachung  ganz  hervor- 
ragende Vorteile  bieten,  schließlich  und  endlich  doch  noch  v.  Hühnels 
Verseifungsprobe  durchführen.  Kroemer  empfiehlt  vor  deren  Aus- 
führung Mazeration  mit  Eau  de  Javelle ,  die  bei  der  genauen  Fest- 
stellung  der  Verkorkung  ausgezeichnete  Dienste  leisten  soll. 

Verwertung-  der  Reaktionen.  Zunächst  machten  es  die  im 
Vorhergehenden  erwähnten  verfeinerten  Methoden  des  Suberinnachweises 
möglich ,  einen  Irrtum  zu  berichtigen ,  der  sich  in  diesem  Gebiete  einge- 
schlichen hatte.  Mattikolo  und  Buscalioni  hatten  nämlich  behauptet, 
daß  bei  den  Samenschalen  der  Papilionaceen  die  Kutikula  chemisch  mit 
der  doppelten  Auskleidung  der  Interzellularen  übereinstimme.  Schips 
konnte  zeigen,  daß  wohl  zwei  Begrenzungsschichten  der  Interzellularen 
vorkommen,  daß  aber  die  median  gelegene  unter  keinen  Umständen  als 
Kutikula  gedeutet  werden  könne,  löse  sie  sich  ja  doch  schon  in  Eau  de 
Javelle.  Derselbe  beobachtete  in  Fruchtepidermen  von  Rohdea  japonica 
eigenartige  Kutikularbildungen ,  die  in  Form  von  mehr  oder  minder  recht- 
eckig gestalteten  Lamellen  mit  abgerundeten  Ecken  zwischen  die  Wände 
der  Zellen  eingelagert  sind.  Wieler  weist  bei  den  Zellmembranen  und  bei 
den  Verstopfungen  der  Interzellularen  in  Luftpneumathoden  typische  Ver- 
korkung nach,  Kroemer  hat  Wurzelhaut,  Hypodermis  und  Endodermis  der 
angiospermen  Wurzel  untersucht.  Neue  dem  Suberin  verwandte  Körper 
fand  V.  WissELiNGH  bei  Umbelliferen.  So  zeigte  er,  -daß  die  die  großen 
und  kleinen  Kammern  der  in  den  Umbellif er enf rückten  enthaltenen  Ülgänge 
umkleidende  ^lembran  aus  einer  mit  Suberin  oder  Kutin  nahe  verwandten 
Substanz  besteht,  auch  in  den  den  Ülgängeu  zugekelu-ten  Epithelzellen 
findet  sie  sich  zum  Teil  neben  Zellulose,  v.  Wisselingh  nennt  sie  Vittin. 
Bei  Astrantia  major  sind  die  Ülgänge  von  korkartigen  Zellschichten  um- 
geben, aus  denen  sich  aber  Phellonsäure  nicht  isolieren  läßt. 

4.  Gallerte,  Gummi,  Schleim. 

Gallerte.  —  In)  allgemeinen  sind  heute  noch  Klebs',  Hauptfleisch s 
und  Erreras  Untersuchungsmethoden   der   Gallerte   maßgebend.     So   hat 


390      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      XXII,  3. 

CoRRENs  zum  Studium  des  Wachstums  der  Gallertblasen  von  Apiocystis 
Brauniana  Naeg.  behufs  „Verdickung"  die  von  Klebs  angegebene  Fütterung 
mit  Glykose  und  Pepton  versucht,  doch  ohne  den  gewünschten  Erfolg ;  Senn 
verwendet  Natronlauge  zur  Quellung  der  Gallertschichte  koloniebildender 
einzelliger  Algen. 

Wie  bekannt,  sind  Öafranin  und  Methylenblau  zum  Färben  der  Gallert- 
scheiden von  Oszillarien  beliebt.  Daß  Pektinstoffe  der  Grund  dieser  leichten 
Färltbarkeit  sein  könnten,  hat  aber  erst  Hegler  ausgespi'ochen  und  durch 
die  Rutheniumrotprobe  nachzuweisen  gesucht.  Von  Schröders  Arbeit 
war  schon  oben  die  Rede. 

Es  wurde  früher  schon  auf  die  von  Klebs  beobachtete  Fähigkeit  der 
Gallertscheiden  aufmerksam  gemacht,  auf  Fütterung  mit  Glykose  und  Pepton 
durch  Verdickung  zu  reagieren.  Clautriau  kommt  nun  auf  Grund  seiner 
Untersuchungen  zum  Schlüsse,  die  gallertartigen  Membranen  der  Braun- 
und  Rotalgen  wären  bei  der  Kohlehydratspeicherung  mit  beteiligt. 

Daß  übrigens  Bakterienmembrangallerten  in  hohem  Grade  gewisse 
Stoffe  zu  speichern  vermögen,  ist  schon  von  Molisch  für  Eisenbakterien 
in  bezug  auf  Mangan  festgestellt  und  in  jüngster  Zeit  von  Adler  für  den 
gleichen  Stoff  bei  dem  Protozoon  Anthophysa  vegetans  bestätigt  worden. 
Es  verbreitert  sich  im  ferrura  mangano  citricum  die  zentrale  Zone  des 
Stieles  der  Anthophysa-Kolonie  etwa  um  das  Dreifache. 

Gelose.  Mit  der  Algengelose  hatte  sich  zunächst  noch  Mangix  zu 
beschäftigen,  als  er  seine  bekannten  Reaktionen  der  Pektinstoffe  zu  be- 
schreiben gedachte.  Er  fand,  daß  sie  sich  ebenso  wie  diese  mit  seinen 
Farbstoffen  färbte,  meint  aber,  daß  eine  Verwechslung  wegen  aller  andern 
charakteristischen  Eigenschaften  ausgeschlossen  sei.  —  Daß  Gelose  auch  im 
Geniculum  von  Corallineen  vorkommt,  ist  später  von  Yendo  gezeigt 
Avorden. 

Gummi.  Man  wußte  bisher,  daß  das  chemische  Verhalten  der  Gummi- 
arten ein  auffallend  verschiedenes  ist.  Die  einen  bläuen  sich  schon  mit  Jod 
allein,  andere  erst  mit  Jod  und  Schwefelsäure  oder  Chlorzinkjod,  wieder 
andere  werden  durch  Jodpräparate  gelb  und  noch  andere  färben  sich  über- 
haupt nicht,  ähnlich  verschieden  ist  ihr  Verhalten  gegen  Kupferoxyd- 
amraoniak.  Diese  merkwürdige  Verschiedenheit  hat  nun  durch  Mangins 
Untersuchungen  über  die  Verwendung  des  Rutheniumrots  in  der  Pflanzen- 
anatomie eine  entsj^rechende  Erklärung  gefunden.  Wie  noch  im  Kapitel 
„Pektinstoflfe"  hervorgehoben  werden  wird,  hat  das  ammoniakalische  Ruthe- 
niumses(iuichlorid  die  Eigentümlichkeit,  von  Gummiarten  und  Schleimen  nur 
die  zu  färben,  die  von  Pektinstoffen  abstammen,  Zelluloseschleime  aber  nicht. 
Dadurch  ist  man  in  den  Stand  gesetzt,  den  Grund  des  oben  erwähnten  ver- 
schiedenen Verhaltens  gegen  Jod  und  Kupferoxydammoniak  zu  ermitteln. 
Mangins  Methode  des  Gumminachweises  hat  später  vielfache  Verwendung 
gefunden.  Mangin  selbst  benutzte  sie  bei  seiner  Arbeit  „Sur  la  gommose 
de  la  vigne",  Lutz  in  der  seinen  „Sur  la  marche  de  la  gommose  dans  les 
Acacias".  Rutheniumrot  ist  ein  vorzügliches  Gummireagens.  Daß  Mangins 
Neutralrot  sich  hier  auch  sehr  gut  verwerten  lasse,  beweisen  die  Unter- 
suchungen von  T^i'TZ.  Färbt  man  nämlich  mit  Rouge  neutre  von  Gasella 
und  Vert  acid  JEEE  (Poirrier),  so  wird  die  Zellulosemembran  grün,  Gummi 


XXII,  3.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      391 

aber  rot  gefärbt.  Dabei  ist  sofortige  Beobachtung  notwendig.  Aus  dem 
Gesagten  geht  hervor,  daß  Pektinstoflf  ein  steter  Begleiter  des  Cxummi  ist. 

Wundgurami.  Nach  den  bisherigen  Untersuchungen  von  Temme 
und  Mf)LiscH  erschien  es  niclit  unwahrsclieinlich,  daß  im  Wundgumrai 
Vanillin  aufgelöst  sei.  Daß  auch  noch  andere  Stoffe  darin  vorkommen, 
haben  M^Cngin  und  Lutz  gezeigt.  Von  einem  typischen  Beispiele  berichtet 
WiELER  in  seiner  Arbeit  „Die  gummösen  Verstopfungen  des  serehkranken 
Zuckerrohres". 

Schleim.  Die  große  Unannehmlichkeit  bei  der  Beobachtung  von  ver- 
schleimten Membranen  lag,  wie  bekannt,  hauptsächlich  in  der  raschen 
Verquellbarkeit  im  Wasser,  es  wurde  daher  zunächst  Untersuchung  im 
Alkohol  empfohlen,  die  aber  wegen  des  raschen  Verdampfens  dieses  Stoffes 
mit  großen  Schwierigkeiten  verbunden  ist.  Diesem  Übelstande  sclieinen  fast 
gleichzeitig  Mangin  und  Walliczek  durch  die  Einführung  von  Bleiacetat  als 
Beobachtungs-  bezw.  Untersuchungsflüssigkeit  abgeholfen  zu  haben.  Um  näm- 
lich die  feinere  Struktur  der  Samenschalen-Epidermis  von  Linum  usitatissimum 
genauer  als  bisher  untersuchen  zu  kcinnen,  übertrug  Mangin  die  Schnitte 
in  eine  lOprozentige  neutrale  Lösung  von  Bleiacetat  und  färbte  mit  einem 
Gemisch  von  Säurefuchsin  und  Neutralrot.  Dabei  gelang  es  ihm  sogar,  in 
den  Schleiraschichten  noch  Zellulose  nachzuweisen,  wenn  er  die  Schnitte 
aus  dem  Bleiacetat  in  Kali-  oder  Natronlauge  übertrug  und  dann  mit  Kongo- 
brillant 4  R,  Kongokorinth  oder  Benzoazurin  ausfärbte.  Bei  Vorhandensein 
von  Zellulose  tritt  Färbung  ein,  auch  verrät  sich  die  Zellulose  im  polarisierten 
Lichte.  Walliczek  hatte  sich  auch  eine  ganz  interessante  Aufgabe  ge- 
stellt, nämlich  den  Stärkenachweis  durch  Verkleisterung  zu  erbringen,  ohne 
dabei  den  Schleim  zerfließen  zu  lassen.  Die  Lösung  des  Problems  war 
durch  die  Verwendung  des  Bleiacetats  gegeben.  Er  fand ,  daß  mit  Aus- 
nahme von  Kakteen-,  Barosma-  und  Cassiaschleim  kein  einziger,  mit  Alkohol 
gehärtet,  in  Bleiacetat  gelegt,  verquillt,  auch  wenn  er  gekocht  wird.  Sämtliche 
von  ihm  beobachteten  Schleime  färbten  sich  mit  Jod  und  Schwefelsäure  gelb 
oder  nicht.  Von  angeblich  günstigen  Schleirafarbstoffen  erwähnt  Mangin  noch 
Naphthylenblau,  Säuregrün,  Safranin,  Methylenblau  und  die  anderen  Mangin- 
schen  Pektinfarb Stoffe.  Doch  meint  Walliczek,  daß  die  Schleimfärbungen 
keinen  praktischen  Wert  haben.  Die  Protoplasten  werden  nach  ihm  inner- 
halb der  Schleimmembranen  mit  Eosin  und  Nigrosin  und  Pikrinsäure  deut- 
lich gemacht.  Bei  Untersuchung  von  Drogen  Avurden  diese  in  feuchten 
Kammern  zunächst  Wasserdämpfen  ausgesetzt,  bis  jener  Feuchtigkeitsgehalt 
erzielt  war,  den  frische  Blätter  besitzen,  dann  wurden  sie  in  Alkohol  ge- 
härtet und  den  weiteren  Prozeduren  unterworfen. 


5.  Chitin. 

Die  genauen  cliemiscben  Analysen  v.  W^isselinghs  über  die  Cliitin- 
und  Pilzmembranderivate  machen  das  Vorkommen  von  Chitin  im 
rilzreicbe  zweifellos.  Zum  mikrochemischen  Nachweise  werden  die 
in  KOH  auf  160^  erwärmten  Membranen  zunächst  in  OOprozentigen 


392      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXll,  o. 

Alkohol  übertragen  und  nachher  in  Wasser  gebracht ,  worauf  eine 
schwache  Lösung  von  Jodjodkalium,  die  mit  Schwefelsäure  angesäuert 
ist ,  zugesetzt  wird.  Es  färben  sich  die  jetzt  mykosin-,  also  früher 
chitinhaltigen  Pilzmembranen  deutlich  violett.  Diese  Reaktion  hat 
nun  bei  Untersuchungen  von  Pilzen  und  Bakterien  wiederholt  An- 
wendung gefunden.  A"gl.  oben  die  Besprechung  der  Pilz-  und 
Bakterienmembranen. 

Auch  bei  Untersuchungen  überPhycochromaceen  hat  v.Wisselings 
Methode  positive  Resultate  gezeitigt.  Heglek  empfiehlt  für  diesen 
Zweck  Vorbehandlung  mit  Salzsäure ,  Kalilauge  und  Kaliumperman- 
ganat oder  mit  Salpetersäure  und  chlorsaurem  Kali.  Jüngst  hat  auch 
Kohl  Heulers  Befund  über  das  Vorkommen  von  Chitin  in  der  Os- 
cillarienmembran  bestätigen  können. 


6.  Kallose. 

So  wie  in  der  Geschichte  der  Pektinstoffe  nimmt  auch  in  der  der  Kallose 
der  Name  Mangin  einen  hervorragenden  Platz  ein.  Die  Untersuchungen 
dieses  Forschers  haben  gezeigt,  daß  man  zwei  wesentlicli  voneinander  unter- 
schiedene Modifikationen  der  Kallose  unterscheiden  kann,  von  denen  die 
erste  ohne  weiteres  die  für  die  Kallose  charakteristischen  Reaktionen  zeigt, 
während  die  zweite  eine  vorherige  Behandlung  mit  kaustischen  Alkalien 
oder  Oxydationsmitteln  oder  mit  beiden  benötigt.  Vgl.  dazu  die  chemisch- 
analytischen Untersuchungen  in  Moores  Arbeit:  „Reactions  of  callus  and 
paracallus."  —  Nach  v.  Wisselingh  wird  Kallose  durch  Brülantblau  ohne 
Essigsäure  gefärbt,  von  Chalon  wird  Benzoazurin,  Benzopurpurin,  Korallin 
und  Kongorot  zur  P'ärbung  empfohlen. 


7.  Pektinstoffe. 

Mit  der  Geschichte  unserer  Kenntnis  von  den  Pektinstoffen  ist 
der  Name  Mangin  eng  verknüpft.  Seine  ersten  ausführlichen  Mit- 
teilungen über  sie  behandeln  „Proprietes  et  reactions  des  composes 
pectiques."  Behandlung  der  Schnitte  mit  Eau  de  Javelle,  l'öprozentiger 
Essigsäure  behufs  Neutralisierung  und  Färbung  mit  Safranin,  Methylen- 
oder Naphthylenblau  macht  Pektinstoffe  besonders  deutlich.  Der  Be- 
weis von  der  Leistungsfähigkeit  der  drei  Farbstoffe  wird  durch  lang- 
dauernde Einwirkung  von  Kupferoxydammoniak,  bei  der  nur  die 
färbbaren  Skelette  bleiben,  und  dadurch  erbracht,  daß  durch  Lösung 
die  färbbaren  Mittellamellen  entfernt  werden,  worauf  natürlich  eine 
Reaktion  unterl)leibt.    Die  l'ektinsäure  soll  als  Calciumpektat  die  Mittel- 


XXII,  2.     Richter:   Die  Foitschritte  der  botanisclien  Mikrochemie.      393 

lamelle  zusammensetzen.  Auch  ist  Pektose  neben  Pektinsäure  nach- 
weisbar. Zwar  zeigen  auch  Algengelose,  Gummi  und  Pflanzenschleime 
die  oben  genannten  Färbungen ,  docli  sind  sie  anderweitig  genug 
unterschieden,  um  eine  Verwechslung  auszuschließen.  Somit  blieben 
Safranin,  Methylen-  und  Xaphthylenblau ,  wie  schon  nach  früheren 
Untersuchungen  des  Autors  (vgl.  Lit.  in  Z.  M.  und  Mangins  Angaben 
über   die   Zelluloseraembran)   die    besten  Reagentieu   auf  Pektinstoffe. 

1893  empfahl  Mangin  Neutralrot;  es  färbt  Pektinstotfe  und 
koagulierte  Schleime  gelborange.  Im  selben  Jahre  stellte  er  die 
Verwendbarkeit  von  Rutheniumrot  für  den  Pektinstoft'uachweis  fest, 
das  seither  in  allen  Arbeiten  dieses  Untersuchungsgebietes  ver- 
wendet wurde.  Das  von  Joly  dargestellte  Reagens  hat  vor  den 
früher  empfohlenen  Auilinfarbstoffen  voraus,  daß  es  einen  Schluß 
auf  den  Ursprung  auch  von  Gummi-  und  Schleimarten  gestattet  und 
nur  die  aus  Pektinstotfen  hervorgegangenen  Gummiarten  oder  Schleime 
färbt  (s.  0.).  Freilich  färbt  es  auch  kutinisierte  Membranen  und  plasma- 
tische Bestandteile,  doch  sind  diese  anderweitig  so  gut  charakterisiert, 
daß  eine  Verwechslung  bei  genügender  Vorsicht  nicht  zu  erwarten  ist. 
Verholzte  Membranen  färben  sich  nur  nach  Vorbehandlung  mit  Alkali 
lebhaft  rosa.  Fiu  großer  Vorteil  besteht  bei  seiner  Verwendung  auch 
darin,  daß  es  weder  durch  Glyzerin  noch  durch  Alkohol  oder  Nelkenöl 
ausgewaschen  wird.   — 

NoACK  vermag  bei  den  „Stäbchen"  der  Orchideenmembranen 
(d.h.  Fortsätzen jderselben  in  die  Interzellularen  des  Rindenparenchyms) 
mit  Bismarckbraun  Pektin  nachzuweisen.  Nach  G.  Tischler  verwan- 
deln sich  die  Zeflulosebalken  des  Embryosackes  von  Pedicularis  an- 
scheinend in  Pektin.  Chalon  empfiehlt  mehrere  der  von  Mangin  schon 
angegebenen  Farbstoffe  zum  Nachweis  der  Pektinstotfe.  Rosenberg 
macht  darauf  aufmerksam,  daß  die  Exinen  von  Pollenkörnern  ver- 
schiedener Antheren  bei  Drosera  rotundifolia  bei  der  liehandlung  mit 
Farbstoffen  je  nach  dem  Wechsel  der  Alkaleszenz  verschiedene  Farben 
liefern.  Parmentier  schlägt  Pheuolsafranin-Methylenblau  für  Intinen- 
iärbung  vor.  Avetta  berichtet  von  vermutlichen  Pektincystolithen. 
BuscALioNi  weist  in  Kalkoxalatdrusen  einen  zentralen  Körper  nach, 
der  die  Pektinreaktionen  Uefert,  Magnus  Pektinstotfe  in  den  „Zellu- 
loseklumpen" der  von  der  Mykorrhiza  befallenen  Zellen  von  Neottia 
Nidus  avis.  Allen  vermag  Hoftüpfeltori  durch  Rutheniumrot  nach 
Vorbehandlung  mit  Salzsäurealkohol  deutlich  zu  machen  u.  a.  m. 
B.  Schröder  erwies  die  chemische  Verwandtschaft  der  tierischen 
Mucine  mit  den  pflanzlichen  Pektinen. 


394     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Mittellamelle.  Mazeration.  Schon  in  seiner  Arbeit  „Sur  la  sub- 
stance  intercellulaire"  hat  Mangin  die  Ansicht  vertreten,  „daß  die  Mittel- 
lamelle der  sogenannten  Zellulosemembranen  aus  Pektinsäure  resp.  einem 
unlöslichen  Salze  derselben  besteht"  und  sich  vornehmlich  darauf  gestützt, 
daß  nach  24  stündiger  Vorbehandlung  mit  alkoholischer  Salzsäure  und  Waschen 
in  Wasser  lOprozentiges  Ammoniak  die  Schnitte  zu  mazerieren  imstande  ist. 
Später  präzisierte  er  seine  Ansicht  dahin,  daß  er  Calciumpektat  als  wesent- 
lichen Bestandteil  der  Mittellamelle  ansah,  immer  in  der  Meinung,  die  Vor- 
behandlung mit  Salzsäure  sei  unumgänglich  nötig.  Wille  schloß  sich  dieser 
Ansicht  auf  Grund  seiner  Algenuntersuchungen  an.  Mir  ist  es  nun  gelungen, 
Mazeration  einer  Menge  von  pflanzlichen  Objekten  durch  konzentrierte 
Ammoniak  allein  zu  erzielen  —  ein  Analogon  zur  Verwendung  von  Ammo- 
niak für  Mazerationszwecke  im  Tierreich.  Dabei  hatte  sich  gezeigt,  daß 
Stärke-,  Aleuronkörner,  diese  mit  Globoid  und  Kristalloid,  Siebröhren,  Choro- 
phyllkörner,  Kalkoxalatki'istalle  u.  v.  a.  in  den  getrennten  Zellen  gut  er- 
halten bleiben.  Dieses  Verfahren  läßt  nun  Mangin  s  Ansicht  fraglich  erscheinen. 
In  neuester  Zeit  hat  Devaux  die  Mangin  sehen  Befunde  einer  genauen 
chemischen  und  miki'ochemischen  Nachprüfung  unterzogen,  nachdem  schon 
Allen  die  Mangin  sehen  Pektinstoflffarbenreaktionen  überprüft  und  als  sehr 
geeignet  gefunden  hatte.  Nur  die  weitgehende  Anwendung  des  Methylen- 
blaus zum  Pektinnachweise  hatte  Allen  eingeschränkt,  da  auch  die  stick- 
stoffhaltigen Verbindungen  gleich  gut  damit  reagieren,  und  dahin  ergänzt, 
daß  er  nachwies,  wie  bei  Pteris  und  Tilia  in  älteren  Geweben  Pektinverbin- 
dungen ganz  verschwinden  und  durch  andere  ersetzt  werden.  Vgl.  auch 
Chalons  Untersuchungen  aus  dem  Jahre  1899. 

Was  nun  Devaux'  Arbeiten  anlangt,  so  vei'dienen  sie,  besonders  im 
Hinblick  auf  den  Widerspruch  zwischen  den  Mangin  sehen  Befunden  und 
denen  über  die  Mazeration,  hervorgerufen  von  Ammoniak  allein,  eine  ein- 
gehende Besprechung.  Das  wesentliche  Ergebnis  der  Devaux  sehen  Arbeit 
ist  die  Negierung  der  Mangin  sehen  Anschauung  von  der  Zusammensetzung 
der  Mittellamelle  aus  Calciumpektat.  Denn  läge  Calciumpektat  vor,  dann 
müßte  alkoholische  Salzsäure  Calciumchlorid  und  Pektinsäure  erzeugen,  die 
in  Wasser  sozusagen  unlöslich  ist,  und  Schnitte  aus  alkoholischer  Salzsäure 
dürften  im  warmen  Wasser  nicht  zerfallen.  Sie  zerfallen  aber  in  der  Tat, 
wie  Devaux  gezeigt  hat.  War  aber  die  Mittellamelle  Pektose,  so  wird  diese 
in  Pektin  verwandelt,  das  seinerseits  wieder  in  Wasser  löslich  ist.  Nun  zer- 
fallen, wie  gesagt,  mit  alkoholischer  Salzsäure  gekochte  Schnitte  in  warmem 
Wasser,  wodurch  die  Devaux  sehe  Anschauung  viel  an  Wahrscheinlichkeit 
gewinnt,  und  diese  muß  um  so  größer  werden,  wenn  es  gelingt,  durch 
Alkalien  den  Zerfall  mit  alkoholischer  Salzsäure  gekochter  Schnitte  in 
Wasser  zu  verhindern.  Dies  gelingt  tatsächlich  durch  Natronlauge.  Es 
hat  sich  eben  nach  Devaux  das  aus  der  Pektose  gebildete  Pektin  in  Pektin- 
säure verwandelt,  die  in  Wasser  fast  unlöslich  ist. 

Bei  diesen  Untersuchungen  kam  Devaux  besonders  Mangin  s  Ruthe- 
niumrot zustatten,  sowie  die  reichliche  Verwendung  von  Alkohol  als  Zusatz 
zu  Säuren,  bei  der  Waschung  u.  dgl.  mehr,  wodurch  Lokalisation  des  Stoffes 
und  gute  Reinigung  der  Reagentien  ermöglicht  wurde.  Die  Zeit  für  das  Kochen 
mit  alkoholischer  Salzsäure  ist  bei  den  verschiedenen  Pflanzen  verschieden. 


XXII,  8.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Milvrochemie.       395 

Devaux  konnte  auf  diese  Weise  zeigen,  daß  es  verschiedene  Pei<^tosen 
gibt,  wodurch  sicli  das  Verhalten  der  verschiedenen  Membranteile  erklärt. 
Die  Pektose  der  Mittellamelle  wird  am  raschesten  angegriffen,  ja  Säuren 
greifen  sie  schon  in  der  Kälte  an,  wobei  ein  Ubergangskörper  zwischen 
Pektose  und  Pektin  entsteht. 

Um  nun  auf  den  Widersi^ruch  zwischen  den  Befunden  Mangins  und 
meinen  zurückzukommen,  so  scheinen  mir  die  Devaux  sehen  nicht  die  Klä- 
rung zu  bringen,  um  so  weniger  als  das  verwendete  Alkali  bei  den  jeweiligen 
Untersuchungen  nicht  das  gleiche  war,  lO^^/oNH^,  konz.  NH.„  Na  OH.  In 
den  zwei  ersten  Fällen  bewirkt,  in  dem  letzteren  verhindert  das  Alkali 
den  Zerfall.  Wenn  sich  zeigen  ließe,  daß  reine  Pektose  in  konz.  NHg 
allein  löslich  ist,  dann  würde  in  Anbetracht  des  Devaux  sehen  Nachweises, 
daß  die  von  Mangin  verwendete  alkoholische  Salzsäure  ohne  Hilfe  von 
10^/0  NH3,  also  allein,  mazeriert,  die  Devaux  sehe  Ansicht  von  der  Pektose- 
natur  der  Mittellamelle  eine  neue,  M-ertvolle  Stütze  erhalten.  —  Weiterhin  sei 
noch  der  praktischen  Ergebnisse  gedacht,  die  Devaux  mit  seiner  Methode, 
Pektinverbindungen  durch  Metallsalze  nachzuweisen,  erzielt  hat.  Pektin- 
verbindungen haben  nämlich  die  Eigentümlichkeit,  Metalle  in  hervorragender 
Menge  zu  speichern.  Um  diese  Metallanreicherungen,  denen  die  Sinnfällig- 
keit abgeht,  sichtbar  zu  machen,  werden  chemische  Reaktionen  zu  Hilfe 
genommen.  So  färben  sich  mit  Eisensulfat  imprägnierte  Wände  mit  Ferro- 
cyankaliura  und  Salzsäure  intensiv  blau.  Tompa  hat  diese  Eigentümlich- 
keit jüngst  für  sein  Dreifarbenverfahren  „Safflor- Berlinerblau -Alkanna" 
verwertet. 

Weitere  Angaben  über  Mazeration :  Wille  mazeriert  Laminariagewebe 
mit  Säuren  und  Sodalösung,  Kroemer  Kork  mit  Eau  de  Javelle,  Molisch 
empfiehlt  konzentriertes  Ammoniak  zur  Mazeration  von  Milchröhren,  lOpro- 
zentiges  Kaliumnitrat  zu  der  von  Aphanizomenon  tlos  aquae,  nach  Macallum 
ist  für  die  Cyanophyceen  Pikrinsäure  sehr  vorteilhaft. 


IV.  Abschnitt. 
Der  Plasmakörper  und  Zellsaft. 

1.  Leukoplasten. 

Von  allen  bekannten  Fixlerimgs-  und  Färbemethoden,  die  zur 
Sichtbarmachung-  der  Leukoplasten  empfohlen  worden  sind,  hält 
Zimmermann  Altmanns  Säurefuchsinmethode,  die  er  auf  Leukoplasten 
übertragen  hat,  für  die  geeignetste.  Als  Versuchsobjekte  dienten 
Leukoplasten  von  Tradescautia.  Die  in  ihnen  sichtbaren  Körnchen 
deutete  er  als  Eiweißkörner.  Salter  konnte  den  Wert  der  Zimmer- 
mann sehen  Methode  durchaus  bestätigen.  Zur  Fixierung  empfiehlt  er 
SubUmatalkohol  (nach  Altmann),  Pikrinalkohol  und  die  Zimmermann  sehe 


396      Riebt  er:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Kombination  beider,  auch  Flemmings  Gemisch,  zur  Färbung:  Säure- 
fuchsin oder  Heidenhains  Eisenhämatoxylin,  zur  gleichzeitigen  Färbung 
derselben  und  der  Stärkekörner :  »Säurefuchsiu  und  Gentiana-  oder 
Methylviolett.  Nach  H.  Fischer  sind  Nigrosin,  Hessisch  Purpur,  Diamin- 
Echtrot ,  Karmin  in  ammoniakalischer  Litsung ,  Anilinblau ,  Kongorot 
und  (,'yauin  zur  Färbung  stärkehaltiger  Leukoplasten  besonders  ge- 
eignet, da  sich  mit  diesen  Farbstoften  Stärke  selbst  nicht  färbt. 
Außer  Shaw  s  Arbeit :  „Detection  of  blepharoplastes  in  Onoclea  and 
Marsilia",  verdienen  die  Prowazeks  und  Beneckes  Erwähnung,  die 
sich  mit  Leukoplasten  kryptogamer  Gewächse  beschäftigen.  Nach 
Prowazek  fehlen  solche  der  Synedra  hyalina,  auch  Benecke  beob- 
achtete bei  der  Diatome  bloß  Inhaltskörper,  die  mit  Jod  und  Osmium- 
säure stets  farblos  bleiben,  mit  Sublimateisessig-Hämalaim-Methylviolett 
aber  deutlich  unterschieden  werden  können.  Vür  echte  Leukoplasten 
war  von  Prowazek  eiuprozentige  Chromessigsäure  und  Geutiaua- 
violett  empfohlen  worden. 

Nach  Molisch  können  Leukoplasten  durch  Wasserzutritt  sehr 
leicht  sichtbar  werden,  ihre  äußerste  Membran  ist  färbbar  und  diffe- 
renzierbar mittels  Säurefuchsin  und  Anilinblau.  Kohl  fand  grana- 
führenden  Leukoplasten  in  der  Epidermis  von  Agave  americana  und 
dem  Steugelparenchym  von  Equisetum  arvense,  die  mit  alkoholischer 
Kalilauge  Phytosterinsphärite  geben,  es  scheinen  Fettbildner  zu  sein. 


2.  Elaioplasteu. 

Die  von  Wakker  beschriebenen  Ölbildner  oder  Elaioplasten  bestehen 
aus  einer  Grundmasse,  einer  Proteinsubstanz,  und  einer  Einlagerung  von 
einem  fettartigen  Kcirper.  Zijimermann,  der  in  eingehender  Weise  Wakker s 
Befunde  übei-prüft  hat.  konnte  diese  Auffassung  von  der  Natur  der  Ölbildner 
im  vollen  Umfange  bestätigen  und  zu  dem  relativ  beschränkten  Vorkommen 
der  neuen  Gebilde,  wie  es  in  der  Arbeit  Wakker  s  zum  Ausdruck  kommt, 
noch  einige  weitere  Fundorte  namhaft  machen. 

Zu  den  Elaioplasten  werden  oder  wurden  auch  gCAvisse  strittige 
Objekte  gezählt,  die  heute  entweder  noch  hierher  gerechnet  werden 
oder  anderswo  untergebracht  worden  sind,  z.  1>.  die  Ölkörper  der  Leber- 
moose (s.  0.  und  Z.  M.  p.  205,  200). 

Bei  den  Algen  hat  G(jlenkin  die  von  Berthuld  als  Liehtschutzorgane, 
von  Hansen  als  Glykogen  beschriebenen  Inhaltskörper  der  Florideen  für 
echte  Elaioplasten  erklärt.  Für  diese  Anschauung  spreche,  abgesehen  von 
ihren  sonstigen  Reaktionen,  auch  deren  Färbbarkeit  mit  Toluidin. 

Wie  bekannt,  hat  Crato  bei  Dictyota  dicliotoma  eigenartige  Körper, 
die  „rhysoden"  beschrieben,  welche  zu  Verwechslungen  Anlaß  geben 
könnten.     Zur    Unterscheidung    emptiehlt   Golenkin    schwache   Lösungen 


I 


XXIT,  8.     Richter:   Die  Fortschritte  der  hotanisehen  Mikrochemie.      397 

von  Methylgrün  in  Seewasser,  in  dem  die  kleinen  Kugeln  (Cratos  Physoden) 
nach  24  Stunden  prachtvoll  grün  werden,  während  die  großen  (Golenkin  s 
Elaioplasten)  fai'blos  bleiben. 

Elaioplastenartige  Körper  fand  Golexrix  auch  bei  Sebdenia  Monar- 
diana,  die  sieh  mikrochemisch  dadurch  wesentlich  von  den  Ölbildnern  unter, 
scheiden,  daß  sie  beim  Glühen  ein  Skelett  zurücklassen.  Doch  konnte  der 
anorganische  Partner  nicht  ermittelt  werden.  Als  Elaioi)lasten  werden 
ferner  aufgefaßt  die  von  Lundström  bescliriebenen  ölbildnerähnlichen  Ge- 
bilde in  den  Epidermiszellen  von  Potamogetonarten.  Lidforss  hat  sich 
neuerlich  wieder  mit  ihnen  beschäftigt  und  beschreibt  als  Inhalt  derselben 
einen  aromatischen  Aldehyd  und  Calciumoxalat. 


3.  Proteosoiuen. 

LoEW  und  BoKORNY  nennen  Proteosomen  diejenigen  Ausscheidungen, 
die  in  verschiedenen  Pflanzenzellen  durch  Coftein  oder  Antipyrin  hervor- 
gerufen werden.  In  ihrer  Arbeit  „Zur  Chemie  der  Proteosomen"  besprechen 
sie  die  Mittel  zur  Herstellung  von  Dauerpräparaten  und  das  Verhalten  dieser 
Körper  bei  den  gewöhnlichen  Eiweißreaktionen,  gegen  verdünnte  Säuren, 
kochendes  Wasser,  10— 20prozentigen  Alkohol  und  Pepsin-Salzsäure  und 
kommen  zu  dem  Schlüsse,  daß  die  Proteosomen  aus  Eiweiß,  aber  aus  einem 
besonderen,  bestehen,  welches  sich  vom  gewöhnlichen  dadurch  unterscheidet, 
daß  es  durch  O'lprozentiges  Ammoniak  in  feste  Kugeln  umgewandelt  wird, 
die  durch  Druck  in  Stücke  zerbrechen,  und  durch  lOprozentige  Salzsäure 
erst  nach  längerer  Digestion  bei  80''  in  Lösung  gebracht  werden  können. 
Beachtenswert  ist,  daß  die  in  abgestorbenen  Zellen  enthaltenen  Proteosomen 
alle  Eigenschaften  des  gewöhnlichen  Eiweißes  l)esitzen.  Gerbstoft'kügelchen 
seien  diese  Fällungsgebilde  nicht.  Dazu  vgl.  die  Kritik  Klemm  s  im  Abschnitt 
„Das  Löw-BoKORxvsche  Reagens  auf  aktives  Albumin"  des  Kapitels  „Ei- 
weiß". —  Nach  jener  Kritik  erscheint  es  doch  am  besten,  bei  den  alten 
Lebensreaktionen  zu  bleiben   und  Plasmolyse  und  Färbung  heranzuziehen. 

Aggregation.  —  Schon  Huoo  De  Vries  hat  darauf  aufmerksam 
gemacht,  daß  man  unrichtigerweise  zwei  getrennte  Prozesse,  die  Zerklüftung 
der  Vakuole  und  die  auftretenden  Fällungen,  mit  Darwin  als  Aggregation- 
Körnchenbildung  zusammenfasse,  der  Referent  von  Kleinims  Arbeit  „Beitrag 
zur  Erforschung  der  Aggregationsvorgänge  in  lebenden  Pflanzenzellen", 
A.  Zimmermanx',  scheint  nun  die  passenden  Bezeichnungen  gefunden  zu  haben. 
Die  von  Klemm  angedeutete  und  von  Zimmermann  geprägte  scharf  unter- 
scheidende Benennung  lautet  wie  folgt:  Granulation  =  die  durch  Ammon- 
salze  und  ähnliche  Stoffe  bewirkte  Fällung,  —  Aggregation  =  physiologische 
Aggregation  im  Sinne  Hugo  de  Vuies'  ist  Vakuolenzerklüftung  und  Proto- 
plastenvergrößerung. 

Zur  Erzeugung  der  Granulation  sind  Ammonsalze  und  Coffein  be- 
sonders geeignet.  Die  entstandenen  Körnchen  enthalten  zumeist  Gerbstoff". 
Ihre  Entstehung  hat  übrigens  mit  dem  Leben,  wie  Bokorny  annimmt,  gar 
nichts  zu  tun  (s.  0.). 


398      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Anhang. 
1.  Die  quantitative  Analyse  in  der  31ikroclieniie. 

Sowie  in  der  Chemie  überhaupt  der  quantitativen  Analyse  die  quali- 
tative vorausgegangen  ist  und  erst  nach  deren  Ausbau  zur  quantitativen 
übergegangen  werden  konnte,  so  auch  bei  der  Mikrochemie.  Erst  mußte 
H.  Behrens  in  seinem  bekannten  Werke  die  Methode  der  qualitativen 
Analyse  niedergelegt  haben,  ehe  an  eine  quantitative  zu  denken  war.  Und 
wurde  nun  der  Schritt  zur  quantitaven  Analyse  getan,  so  ist  er  natürlich 
eben  als  der  erste  derartige  Schritt  zu  betrachten,  als  erster  tastender  Ver- 
such, dem  andere  vielleicht  sicherere  folgen  werden. 

Vor  einigen  Jahren  habe  ich  mich  mit  der  Überprüfung  der  Methoden 
des  Magnesium-Nachweises  beschäftigt,  und  zwar  mit  besonderer  Bezugnahme 
auf  die  Anwendbarkeit  derselben  für  den  Magnesium-Nachweis  in  der 
Pflanze.  Die  Bestimmung  der  Empfindlichkeitsgrenzen,  die  eine  ganze  Skala 
empfindlicher  und  weniger  empfindlicher  Reaktionen  ergab,  drängte  mir 
damals  den  Gedanken  auf,  nach  dem  „Gabelverfahren"  (Ermittelung  des 
Reagens,  mit  dem  eben  noch  eine,  und  jenes,  mit  dem  keine  Reaktion  melir 
eintritt),  die  Menge  des  in  mineralischen  Lösungen,  Preß-,  ]Milch-  und  Schleim- 
säften u.  s.  f.  enthaltenen  Magnesiums  mikrochemisch  quantitativ  zu  bestim- 
men. Bei  diesen  Untersuchungen  hat  sich  auch  herausgestellt,  daß  entgegen 
der  Anschauung  von  Behrens,  wonach  die  Lösungen  der  Reagentien  so  kon- 
zentriert wie  möglich  verwendet  werden  sollen,  gerade  verdünnte  Lösungen 
dei'selben  die  besten  Resultate  geben,  denn  es  ist  nicht  so  sehr  die  Kon- 
zentration maßgebend  für  normale  schöne  und  reicliliche  Entwicklung  von 
Fällungen,  als  daß  man  die  reagierenden  Substanzen  im  Verhältnisse  ihrer 
Verbindungsgewichte  verwendet. 

GössL  konnte  In  seiner  Arbeit  über  das  Mangan  in  seinen  Beziehungen 
zur  Pflanze  für  die  Bildung  des  Manganammoniumpliosphates  dieses  Ergebnis 
bestätigen. 

Als  quantitative  Analyse  im  weiteren  Sinne  kann  man  auch  jene 
Methoden  ansehen,  die  aus  den  Größenverhältnissen  Aon  mikroskopischen 
Objekten  bestimmter  Gestalt  mit  Hilfe  der  geometrisclien  Formeln  eine  Vor- 
stellung von  dem  Volumen  geben,  das  mit  Berücksichtigung  des  spezi- 
fischen Gewichtes  des  untersuchten  Stoffes  auch  dessen  Quantität  wenigstens 
annäherungsweise  bestimmen  läßt.  Auf  diese  Weise  bestimmte  Mesnard 
die  Menge  fetten  Öls  bei  der  Keimung  fetthaltiger  Samen.  Hierher  gehört 
auch  Kohl  s  volumetrische  Bläschenzälilmethode.  Eine  andere  sehr  inter- 
essante quantitative  volumetrische  Analyse  mikroskopischer  Natur  gab 
Gerassimoff  an.  Er  sieht  den  Kern  als  Rotationsellipsoid  an ,  bestimmt 
dessen   große   und  kleine   Achse   und   berechnet   nachher    nach   bekannter 

4 
Formel  (V  =  ~  n  a^h)  das  Volumen.    Auf  diese  Weise  konnte  er  zeigen,  daß 
o 

das  Volumen  und  damit  die  Masse  eines  Kernes  aus  einer  Zygotenfadenzelle 

von  Spirogyra  das  des  gewöhnlichen  Kernes  um  ein  Bedeutendes  übertrift't 
(V  :v==  1240,9,1  ^3:  745,5,5 /.s^ 


XXII,  3.     Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Milirocheraie.      399 


2.  Vitalfärbung  des  Protoplasmas. 

Seit  der  Entdeckung  Pfeffers  von  der  Aufnahme  von  Farbstoffen 
seitens  des  lebenden  Plasmas  sind  eine  ganze  Reihe  interessanter  Beobach- 
tungen veröffentlicht  worden,  die  die  PFEFFERschen  vollauf  bestätigen  und 
den  Beweis  erbringen,  daß  diese  Fähigkeit  des  lebenden  Plasmas,  aus 
mehr  minder  ^•erdiinnten  Lösungen  Farbstoffe  aufzunehmen,  nicht  ein 
Charakteristikon  einiger  weniger  Pflanzen,  sondern  eine  allgemeine  Eigen- 
tümlichkeit ist. 

Man  kann  dabei  Fälle  unterscheiden,  wo  speziell  die  (lerbstoffzellen 
oder  überhaupt  vorhandene  Gerbstoffe  gierig  den  Farbstoff  speichern,  und 
solche,  wo  das  ganze  Plasma  oder  Partien  desselben,  ohne  daß  man  von 
Gerbstoffimbibition  reden  könnte,  den  gebotenen  Farbstoff'  aufnehmen. 

Die  Fälle  der  ersten  Kategorie  habe  ich  bereits  hn  Kapitel  Gerbstoff" 
erledigt.  Hierher  dürften  auch  die  Angaben  von  Nestler  über  die  Lebend- 
färbung der  Blasenzellen  von  Antithamnion  Plumula  mit  arsenfreiera  Ani- 
linblau zu  rechnen  sein,  wenn  man  auch  bisher  den  Träger  dieser  Idioblasten- 
färbung  nicht  genau  ermitteln  konnte.  Interessant  ist  dabei,  daß  man  bei 
sehr  verdünntem  Farbstoffe  die  Speicherung  nicht  direkt  sieht,  wohl  aber 
nach  Zusatz  von  Säuren  oder  Chloralhydrat,  ebenso  macht  erst  Eisenchlorid 
das  intravital  gespeicherte  Tannin  sichtbar.  Die  Fälle  der  zweiten  Kate- 
gorie mögen  an  der  Hand  des  Pflanzensystems  angeführt  sein. 

Bakterien  und  Pilze.  Matruchot  kultivierte  neben  chromogenen 
auf  demselben  Substrate  farblose  Bakterien.  Dabei  zeigte  sich,  daß  das 
Plasma  der  farblosen  das  Chromogen  der  farbigen  aufnahm. 

Weitere  Arbeiten  haben  gezeigt,  daß  sich  gewisse  Schimmelpilze,  z.  B. 
Fusarium  und  Penicillium  sp.,  ganz  analog  verhielten  wie  die  oben  erwähnten 
Bakterien.  In  der  Folge  baute  Matruchot  seine  Methode  noch  weiter  aus 
und  hat  sie  wie  Rosenberg  auch  in  den  Dienst  der  Mikrotechnik  gestellt. 
„Violacein",  der  Farbstoff'  des  Bacterium  violaceum  und  der  von  Fusarium 
polyraorphum  können  für  Vitalfärbungen  verwendet  werden.  Den  tingier- 
baren  Teil  des  Plasmas  nennt  Matruchot  Enchylema,  den  nicht  färbbaren 
Hyaloplasma.  In  seiner  Arbeit  „Sur  le  protoplasme  des  Schizophytes"  em- 
pfiehlt Massart  Methylenblau  zur  Lebendfärbung.  Die  brauchbare  Kon- 
zentration muß  nach  ihm  für  jeden  Organismus  ermittelt  werden. 

Ein  vorzügliches  Versuchsobjekt  für  Vitalfärbungen  ist  die  Bierhefe. 
Küster  empfiehlt  zur  Untersuchung  der  in  den  Vakuolen  der  Bierhefe 
herumschwimmenden  Körnchen  Neutralrot,  mit  dem  sie  sich  im  lebenden 
Zustande  intensiv  färben.  Meine  Angabe  über  die  Vortrefflichkeit  der 
Hefe  als  Versuchsobjekt  für  Vitalfärbung  basiert  jedoch  vornehmlich  auf 
Rosesstiehls  Arbeit,  der  bewies,  daß  die  Hefe  Fuchsin  aus  wässrigen 
Lösungen  bis  zu  8  Prozent,  Malachitgrün  bis  5  bis  6  Prozent  des  eigenen 
Gewichtes  aufzunehmen  imstande  ist,  ohne  abzusterben.  Ebenso  werden  von 
ihr  Rosanilin,  Safranin  und  Thioninfarben  gierig  gespeichert.  Auch  Tannin 
kann  reichlich  aufgenommen  werden. 

Der  Frage,  ob  die  Farbstoft'e  als  solche,  oder  als  Leukoprodukte  in 
das  Plasma  eintreten,  und  dort  erst  reoxydiert  werden,  haben  sich  unter 
anderen  Fragen  Plato  und  Guth  in  ihrer  interessanten  Arbeit  „Über  den 


400      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Nachweis  feinerer  Wachstumsvorgänge  in  Trichophj' ten  und  anderen  Faden- 
pilzen mittels  Neutralrot"  gewidmet  und  für  Neutralrot  im  zweiten  Sinne 
beantwortet.  Bekanntlich  kultivierten  die  beiden  Forscher  Penicillium 
brevicaule  auf  arsenhaltigen  N;ihrl)oden.  Dabei  verwendeten  sie  Neutral- 
rot zur  Vitalfärbung  des  Pilzes  und  einer  aus  einer  Pustel  gezüchteten 
Trichophyton-Art.  Besonders  stark  färbten  sich  die  Granula,  die  im  ab- 
getöteten Zustande  der  Pilze  Neutralrot  nicht  aufzunehmen  vermögen. 

Die  Granulafärbung  gelang  auch  mit  dem  NeissI^.r sehen  Diphtherie- 
bazillenfärbe  verfahren. 

Algen.  Wie  schon  angeben,  hat  Nestler  Vitalfärbung  bei  Anti- 
thamnion  erzielt.  Provazek  führte  sie  bei  Synedra  hyalina,  einer  apo- 
chlorotischen  Bazillarie,  mit  Neutralrot  durch.  Die  FärVtung  ültertrug  sich 
vom  Zellsaft  auf  das  Plasma. 

Höhere  Pflanzen.  Nemec  gelang  es  durch  Vitalfärbung  mit 
Methylenblau  und  durch  geeignete  Fixierungs-  und  Färbemethoden  in  den 
Wurzelspitzen  von  Allium  Cepa  etc.,  vgl.  dazu  Habem-andt  und  Koerxicke. 
deutlich  differenzierte  Stränge  nachzuweisen,  die  er  für  reizleitend  hielt. 

Eine  Art  Monographie  der  Vitalfärbung  hat  Overton  in  seiner  usa- 
führlichen  Arbeit  „Studien  über  die  Aufnahme  der  Anilinfarben  durch  die 
lebende  Zelle"  geliefert,  deren  Hauptergebnis  lautet:  Alle  Farbstoffe,  die 
in  fetten  Ölen  oder  ähnlichen  Lösungsmitteln  leicht  löslich  sind ,  werden 
auch  von  der  lebenden  Zelle  rasch,  dagegen  die  in  Ölen  schwer  oder  nicht 
löslichen  nicht  aufgenommen,  vgl.  dazu  diese  Zeitschr.  Bd.  XVH,  p.  .335. 


BibHographie. 

Die  Abkürzungen  der  Zeitschriftennamen  sind  die  üblichen  und  im 
allgemeinen  ohne  weiteres  verständlieh.  Zu  beachten :  Ann.  Belg.  (Ann.  de 
la  soc.  belg.  de  microsc),  Ann.  Roma  (Ann.  del  R.  Ist.  bot.  di  Roma), 
Ann.  Soc.  Roy.  (Ann.  de  la  Soc.  roy.  des  Sc.  med.  et  nat.),  Bibl.  V.  Stockh. 
(Biol.  Versuchsanst.  Stockholm),  Bull.  H.  B.  (Bull,  de  l'herb.  Boissier),  K. 
A.  A.  (Kon.  Akad.  Wetensch.  Amsterdam),  Mitt.  f.  W.  u.  A.  (Mitteil.  kgl. 
Prüfungsanstalt  f.  Wasserversorgung  u.  Abwasserbeseitigung  Berlin),  — 
Arbeiten,  die  bereits  in  Z.  M.  genannt  worden  sind,  werden  hier  nicht  mehr 
angeführt.  Wegen  der  in  dieser  Zeitschrift  erschienenen  Referate  vgl.  bes. 
Register  H  (Bd.  XI— XX),  1904. 


Adler,  0.,  Eisenbakt.  in  ihrer  Beziehung  zu  d.  tlierapeutisch  verw. 
nat.  Eisenw.  (A.  f.  Bakt.  Abt.  II,  Bd.  XI,  1903,' p.  218).  —  Allen,  Ch.  E., 
Origin  a.  nat.  of  the  middle  lamella  (B.  G.  vol.  XXXIl,  1901,  p.  1).  — 
Andrews,  Fr.  M.,  Wirkung  d.  Zentrifugalkr.  Pr.  Jb.  Bd.  XXXVIII,  1903, 
p.  3-4.  —  Arcangeli,  A. ,  Stiuli  dello  Czapek  sui  tess.  bgnif.  (Bull.  S. 
Bot.  ital.  1899,  p.  IGT).  —  Arnaud,  A. ,  et  Pade,  L.,  Rech.  chim.  de 
l'acide  nitr.  etc.  (C.  R.  T.  XCVHI,  p.  1488).  —  Arnoldi,  W.,  Beitr.  z. 
Morph,  d.  Gymnosp.  IV  (Z.  d.  landw.  Hochsch.  Nowo-Alexandria  Bd.  XVI, 
1903,  fasc.  1).  —  Auerbach,  L. ,  Sexuell.  Gegensatz  in  d.  Chromatophilie 
(Sitzber.  Akad.  Berlin  Bd.  XXXV,  1891,  p.  713). 


XXII,  3.      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      ^01 

Bargagli-Petr  uc  ci,  G.,  Concrez.  silic.  intracell.  nel  legno  second. 
di  alc.  Dicot.  (Malp.  vol.  XVII,  1903,  p.  23).  —  Barg  er,  G.,  Saponarin, 
ein  neues  Glykosid  etc.  (B.  d.  eh.  Ges.  Bd.  XXXV.  1902,  p.  1296).  — 
Barth,  H.,  Stud.  üb.  d.  inikroch.  Nachw.  v.  Alkaloiden  (B.  C.  Bd.  LXXV, 
1898).  —  Beck,  G.  v..  Über  die  Verwend.  d.  Persio-Essigs.  zu  mikrosk. 
Tinkt.  (Lotos  1904,  p.  168).  —  Behrens,  H.,  Mikroch.  Nachw.  u.  Unterscheid, 
d.  Phenole  (Z.  f.  a.  Ch.  1902,  p.  141).  —  Behrens,  J.,  Vork.  d.  Vjiniilins  in 
d.  Vanille  (Tropenptl.  Jahrg.  III,  1899,  p.  299).  —  Beijerinck,  M.  W., 
Culturvers.  m.  Zoochlor,  etc.  (Bot.  Zeitg.  1890,  p.  744);  Photobact.  as  a 
React.  in  the  Investig.  of  the  Chlorophyllfunction  (K.  A.  Amsterd.  1901, 
p.  45);  On  Indigo-Ferment,  on  the  Formation  of  Indigo.  Further  res.  on 
the  Formation  of.  Ind.  (ibid.  1898—1900);  Eigentümlichk.  d.  lös!.  Stärke 
(C.  f.  Bakt.  II.  Abt.,  Bd.  II,  189(5,  p.  697).  —  Benecke,  W.,  Farblose  Diät, 
d.  Kieler  Föhrde  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXV,  1900,  p.  535).  —  Beizung,  E.,  Sur 
divers  principes  issus  de  la  germ.  et  leur  crist.  intercellul.  (J.  de  B.  1892, 
p.  49);  Nat.  des  spherocrist.  des  Euphorbes  cactif.  (J.  de  B.  1893,  p.  221); 
Exist.  de  l'oxal.  de  calc.  ä  I'etat  dissous  (J.  de  B.  1894,  p,  213).  —  B.  et  Poi- 
rault,  G.,  Sur  les  sels  de  l'Angioptcris  evecta  etc.  (J.  de  B.  1892,  p.  286).  — 
Bertel,  R.,  Aposphaeria  violocea  etc.  (Ö.  b.  Z.  1904,  p.  205).  —  Berthold,  G., 
Unters,  z.  Phys.  d.  pH.  Org.  I.  (Leipzig  1898).  —  ßertrand,  G.,  Rech.  s.  1. 
compos.  imm".  d.  tiss.  veg.  (C.  R.  Bd.  CXIV,  1892,  p.  1492).  —  Bier- 
mann,  Bau  u.  Entwickl.  d.  Ölzellen  etc.  (Diss.  Berl.  1898).  —  Binz,  A., 
Beitr.  z.  Morph,  u.  Entwgesch.  d.  Stärke  (Flora,  Ergbl.  1892).  —  Bittö, 
B.  V.,  Estimation  of  lecithin  in  plants  (J.  R.  M.  1896,  p.  484).  — Bokorny, 
Th. ,  vgl.  Loew,  0.  —  Boubier,  A.  M.,  Contrib.  ä  I'et.  du  pyrenoide 
(Bull.  H.  B.  Bd.  VII,  1899,  p.  451).  —  Brand,  F.,  Bern.  üb.  Grenz- 
zellen etc.  (B.  d.  d.  B.  G.  Bd.  XIX,  1901,  p.  1.52).  —  Braunmüller,  E., 
vgl.  Reinke,  J.  —  Brauns,  R.,  Mikrochem.  Reakt.  auf  Salpetersäure.  — 
Brenner,  W.,  Unters,  an.  einig.  Fettptl.  (Fl.  Bd.  LXXXVII,  1900,  p.  387). 

—  Bruns,  E.,  Beitr.  z.  Anat.  einig.  Florid.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XII,  1894, 
p.  178).  —  BuscaJioni,  L. ,  Sulla  strutt.  d.  granuli  d'amido  d.  mais  (N. 
G.  B.  J.  Bd.  XXIII,  1891,  p.  45);  Studl  sul  crist.  di  ossalato  calcio  (Malp. 
Bd.  IX,  X,  1895—1896);  Nuovo  reatt.  p.  I'istol.  veg.  (Malp.  Bd.  XII,  1898); 
Sudan  III  u.  s.  Verw.  in  d.  bot.  Mikrot.  (B.  Zbl.  Bd.  LXXVI,  1898,  p.  398). 

—  Busoalioni,  L.,  e  Pollacci,  G. ,  Antocianine  ed  il  loro  significato 
biolog.  (Atti  di  Pav.  Bd.  VIII,  1903).  —  Buscalioni,  L.,  e  Traverso, 
G.  B.,  Evol.  morf.  del  fiore  (Milano  1904).  —  Busse,  W.,  Beitr.  z.  K.  der 
Morph,  u.  Jahresperiode  d.  Weißtanne  (Diss.  Freiburg,  Flora  Bd.  LXXVII, 
1893,   H.  3);   Stud.   üb.   d.  Vanille   (Arb.   Gesundheitsamt   Bd.   XV,   1898). 

—  Büttner,  R.,  Gerbsäure-Reakt.  in  d.  lob.  Pflanzen.  (Diss.  Erlangen 
1890,  p.  63). 

Cazzani,  E.,  Osserv.  crit.  sopra  alc.  ric.  dell'esculina  etc.  (Atti  di  Pav. 
II.  S.  Bd.  X,  1904).  —  Chalon,  J.,  Nouv.  ser.  d'exp.  s.  1.  col.  microchim.  d. 
parois  cellul.,  id.  III.  ser.  (Bull.  d.  R.  Belgiquc  Bd.  XXXVI,  XXXVII,  1898, 
p.  12  u.  59);  Notes  de  technique  I.  u.  II.  (Bull.  d.  R.  Belgique  Bd.  XXV,  1898 
—1899,  p.  106),  —  Clautriau,  G.,  Localis,  et  signif.  d.  alcal,  d.  q.  grains 
(Ann.  d.  Beige  Bd.  XVIII,  1894,  p.  35);  Les  res.  hydroc.  d.  Thalloph.  (Mise. 
ded.  Giard.  1899,  p.  114);  Nat.  et  signif.  d.  alcal.  veg.  (Ann.  Soc.  Roy.  Bd.  IX, 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  3.  26 


402      Richter:   Die  r'ortscliritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXIT,  ij. 

1900) ;  Etud.  chimiq.  du  glycogene  chez  les  Champignons  et  les  levures  (Mem. 
cour.  et  autr.  Mem.  p.  l'Acad.  roy.  d.  Belg.  1895,  3./1II.).  —  Correns,  C,  Üb. 
d.  veg-.  Zellmembr.,  e.  Kritilc  d.  Ansch.  Wiesners  (Pr.  Jb.  Bd.  XXVI,  p.  587) ; 
Membr.  v.  Caiilerpa  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XII,  1894,  p.  355);  Membr.  u.  d. 
Bew.  d.  Ose.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897,  p.  139).  —  Crato,  E.,  Morph, 
u.  mikrochem.  Unters,  üb.  Phys.  (Bot.  Zeitg.  1893,  p.  157).  —  Creighton, 
Ch.  M.  D.,  Microsc.  res.  on  the  form  property  of  glycogen  (London  1896). 

—  Czapek,  Fr.,  Biochemie  (Jena  1905) ;  Z.  Lehre  v.  d.  Wurzelausscheid. 
(Pr.  Jb.  Bd.  XXIX,  1896,  p.  321);  Leitungsw.  d.  org.  Baust,  im  Pflanzen- 
körper (Sb.  Wien  Bd.  CVI,  1.,  1897);  Befund  an  geotrop.  gereizt.  Wurzeln 
(B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897,  p.  516);  Beitr.  z.  k.  d.  geotrop.  Reizbeweg. 
(Pr.  Jb.  Bd.  XXXII,  1898,  p.  175);  Sog.  Ligninreakt.  d.  Holzes  (Zt.  f.  ph. 
Ch.  Bd.  XXVII,  1899,  p.  141);  Biol  d.  holzbewohn.  Pilze  (B.  d.  d.  b.  G. 
Bd.  XVII,  1899,  p.  166);  Chemie  d.  Zellm.  b.  d.  Laub-  u.  Lebermoosen 
(Flora  Bd.  LXXXVI,  1899,  p.  361). 

Dangeard,  P.  A. ,  Struct.  et  communic.  protopl.  d.  le  Bact.  flav. ; 
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sur  Mamillaria  el.  (A.  of  B.  Bd.  XVIII,  1904,  p.  375).  —  Dastre,  A.,  Rech, 
d.  ferments  endo-cell.  par  la  dialyse  chlorof.  (C.  R.  Biol.  1901,  p.  34).  — 
De  ans,  Exper.  stud.  on  Inulase  (B.  G.  Bd.  XXXV,  1903,  p.  24);  On  Inulin 
(Amer.  ehem.  J.  Bd.  XXXII);  On  Proteol.  Enz.  (B.  G.  Bd.  XXXIX,  p.  321). 

—  Debski,  B.,  Bau  u.  Beweg,  d.  Bi.  d.  Marantaceen  (Anz.  d.  A.  Kr. 
1895,  p.  244);  Beobacht.  an  Chara  foetida  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXII,  1898,  p.  267). 

—  Devaux,  H.,  React.  color.  d.  subst.  pect.  etc.  (Linn.  Bordeaux  1901); 
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Durable  stain  f.  starch  (J.  a.  M.  Bd.  I,  1898,  p.  131).  -  Dop,  P.,  Pollen  d. 
Asclep.  (C.  R.  Bd.  CXXXV,  1902,  p.  710).  —  Dünnenberger ,  C,  Chem. 
Reagent.  u.  Reakt.  (Zürich  1894). 

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Bd.  XI,  1895).  —  Eschbaum,  T.,  Kristallinische  Ausscheid,  i.  Nährböden 
(Ber.  d.  d.  pharm.  G.  Bd.  XII,  1902,  p.  177). 

Paber,  F.  C.  v..  Z.  Verholzungsfr.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XXII,  1904, 
p.  177).  —  Feinberg,  L. ,  Bau  d.  Hefez.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XX,  1902, 
p.  567).  —  Feld  haus,  J.,  Quant.  Unters,  d.  Verteil,  d.  Alkal.  in  d.  Org. 
V.  Datura  (Marburg  1903).  —  Fenton  u.  Gostling,  zitiert  nach  Gräfe 
(Chem.  Soc.  1899  u.  1901,  p.  423  u.  811).  —  Fiori,  zitiert  nach  PoUacci 
(Malp.  Bd.  IX,  1895,  p.  370).  —  Fischer,  A.,  Unters,  üb.  d.  Bau  d.  Cyano- 
phyceen  u.  Bakt.  (Jena  1897) ;  Fixier. ,  Färb.  u.  Bau  d.  Protopl. ;  Krit. 
Unters,  üb.  Technik  u.  Theorie  in  d.  neuer.  Zellforsch.  (Jena  1899);  Zelle 
d.  Cyanoph.  (Bot.  Ztg.  1905);  Neue  ({lykogenfärb.  (Zbl.  f.  w.  A.  Bd.  XXVI, 
1905,  p.  399).  —  Fischer,  B. ,  Fettfä-rb.  m.  Sudan  III  u.  Scharlach  R.  (C. 
f.  a.  P.  Bd.  XIII,  1902,  p.  943).  —  Fischer,  H.,  Üb.  Inulin  etc.  (Cohns 
Beitr.  Bd.  VIII,  1898,  p.  53);  Stärke  u.  Inulin  (Beih.  z.  B.  Zbl.  Bd.  XII,  1902, 
p.  226).  —  Fischer,  K.,  Mikrophotogr.  v.  Inulinspli.  u.  Stärkekörn.  (B.  d. 
d.  b.  G.  Bd.  XXI,  1903,  p.  107).  —  Fitting,  H.,  Bau  u.  Entwicklungsgesch. 
d.  Makrosp.  v.  Isoetes  etc.  (Bot.  Ztg.  Bd.  LVIII,  1900,  p.  107).  —  Fritsch, 


XXII,  o.      Hichtor:    IMc  Fortscliritte  der  botanischen  Mikrochemie.      403 

F.  E.,  Vork.  V.  Kautschuk  b.  Hippocratoaceen  etc.  (Beih.  z.  B.  Zbl    Bd.  XI, 

1901,  p.  283).  —  Fuchs,  F.  C,  Kapliidenzelle  (0.  b.  Z.  (Bd.  XLVIII,  1898, 
p.  324).  —  Fii jii,  K.,  Bestäubungstropf,  d.  Ojiun.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XXI, 

1903,  p.  211). 

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(K.  g.  de  Bot.  Bd.  XV,  1903,  p.  149).  —  Ger  assimof  f,  J.  J. ,  Üb.  d. 
Copulat.  d.  zweikern.  Zellen  b.  Spirogyra  (Moskau  1898).  —  Gießler,  R., 
Lokalis.  d.  Oxals.  (Jen.  Zeitschr.  N.  F.  Bd.  XXVII,  p.  344).  —  Gilson, 
Eugene,  Cristallis.  de  la  cellulose  etc.  (Cellule  T.  IX,  1893,  p.  397) ;  Rech, 
chim.  s.  la  luembr.  cell.  d.  champ.  (ibid.  T.  XI,  1894,  p.  5).  —  Gjokic,  G., 
Chem.  Beschaff,  d.  Zellh.  b.  d.  JMoosen  (Ö.  b.  Z.  Bd.  XL^',  1895,  p.  330).  — 
G  o  I  a ,  G.,  Schwefel  u.  s.  Verbind.  (Malp.  Bd.  XVI,  1902,  p.  368).  —  G  o  1  e  n  k  i  n , 
M.,  Algolog.  Not.  (Bull.  Moscou  1884).  —  Goris,  Alb.,  Rech,  niicroch.  s.  qu. 
glucosidcs  et  qu.  tannins  veg.  (Paris  Tht'se  1903).  —  Gößl,  J.,  Mangan  in  d. 
Ftl.  etc.  (Beul.  z.  b.  Zbl.  Bd.  XVllI,  Abt.  1,  1904,  p.  119).  —  Gostling  u. 
Fenton,  vgl.  diesen.  —  Gräfe,  V.,  Unters,  üb.  d.  Holzsubst.  (Sb.  Wien 
Bd.  CXIII,  Al)t.  1,  1904);  Neue  Reihe  v.  Holzreakt.  ((>.  b.  Z.  Bd.  LV,  1905, 
p.  174).    —    Gram,  B.,  Proteinkörn.  i.  Samen  d.  (»Igcw.   (L.  V.  Bd.  LVII, 

1902,  p.  257).  —  (iraßb erger,  R.  u.  Passini,  F.,  Jodreakt.  f.  bakt. 
Diagn.  (Wien.  klin.  Wochenschr.  1902,  No.  1).  —  Griffiths,  A.  B., 
Mat.  color.  d.  Micr.  prod.  (C.  R.  Bd.  CXV,  1892,  p.  321).  —  Grüß,  J., 
Üiastase  i.  Pflanzenkörp.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XIII,  1895,  p.  2) ;  Beitr.  z.  Phys. 
d.  Keim.  iL.  J.  Bd.  XXV,  p.  384)-,  Eindr.  v.  Subst.  bes.  v.  Diast.  i.  d. 
Stärkekorn  (Beitr.  z.  w.  B.  Bd.  I,  1895,  p.  295);  Stud.  üb.  Reservecell. 
(B.  C.  Bd.  LXX,  1897,  p.  242);  Rohrzuckerbild.  a.  Dextr.  (B.  d.  d.  b.  G. 
Bd.  XVI,  1898,  p.  17);  Oxydasen  u.  d.  Guajakreakt.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XVI, 
1898,  p.  129j;  Peroxydase,  d.  Reversionsenz.  d.  Oxyd.  (B.  d.  d.  b.  G. 
Bd.  XXI,  1903,  p.  356).  —  Grüttler,  W.,  Samensch.  einig.  Lythrac.  (Bot. 
Ztg.  1893,  2.  Abt.,  p.  1).  —  Guerin,  P.,  Rech.  s.  la  local.  d.  l'anagyrine 
et  de  la  cytis.  (Bull,  de  France  1895,  p.  428).  —  Guillier mond,  A., 
Rech.  cyt.  s.  1.  levures  (Rev.  gen.  de  Bot.  Bd.  XV,  1903,  p.  49);  Contr. 
ä  l'et.  de  l'epiplasiue  d.  Ascom.  etc.  (Ann.  Mycol.  Bd.  I,  1903,  p.  201); 
Contr.  ä  l'et.  d.  1.  form.  d.  asques  etc.  '(Rev.  gen.  de  Bot.  Bd.  XVI ,  1904, 
p.  49);  Rech.   s.   la   Karyok.   eh.   1.   Ascom.   (Rev.   gen.   de  Bot.  Bd.  XVI, 

1904,  p.  129). 

Haarmann,  vgl.  Tiemann.  —  Haberlandt.  G.,  Fibrill.  Plasmastr. 
(B.  d.d.  b.  G.  Bd.  XIX,  1901,  p.  569).  —  Hansen,  A. ,  Stoffbild.  b.  d. 
Meeresalg.  (Mitt.  Neap.  Bd.  XI,  1893,  p.  255).  —  Hansteen,  B. ,  Fu- 
cosan  etc.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXV,  1900,  p.  611);  Eiweißsynth.  i.  grün.  Pfl. 
(Pr.  Jb.  Bd.  XXXIII,  1899,  p.  417).  —  Hart  wich,  C. ,  Bern.  üb.  Semen 
Stroph.  (Apotherztg.  1901,  No.  18  ff.).  —  Hart  wich,  C,  u.  Uhlmann, 
W.,  Nachw.  d.  fetten  (Hes  etc.  (Arch.  d.  Pharm.  Bd.  CCXL  u.  CCXLI, 
1902  u.  1903.  p.  471,  111).  —  Harz,  C.  0.,  Paraftinöl  a.  Ersatz  f.  Kanada- 
bals.  etc.,  Jodstärke  (Sitzb.  f.  Morph,  u.  Phys.  Bd.  XIV,  1898,  p.  127). 
—  Heckel,  Ed.,  et  Schlagdenhauf fen.  Fr.,  Rapports  gen.  d. 
mat.  resin.  et  tann.  etc.  (C.  R.  Bd.  CXIV,  1892,  p.  1291)  .—  He  gl  er,  R., 
Organisat.  d.  Phykochromac.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXVI,  1901,  p.  229).  —  Heiden- 
hain, M.,  Nilblaubase  a.  Reagens  etc.  (Arch.  f.  d.  ges.  Phys.  Bd.  (',  1903, 

26='= 


404      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXII,  3. 

p.  217).  —  Heinrich  er,  E. ,  Biol.  Stud.  d.  G.  Lathraea  I.  (Sb.  Wien 
Bd.  CI,  Abt.  1,  1892);  Massenhaft.  Auftr.  v.  Kristall,  i.  d.  Laubtrieb,  d. 
Kartoffelpfl.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  IX.  p.  287);  Saugorg.  d.  Schuppenwurz.- 
Arten  (Cohns  Beitr.  Bd,  VII,  1895).  —  Herxheimer,  G.,  Bemerk,  z.  Fett- 
tarb.  (Zbl.  f.  a.  P.  Bd.  XIV,  1903,  p.  87).  —  Hesse,  zitiert  n.  Verschaftelt,  E. 
(B.  d.  d.  eh.  G.  Bd.  XXXII  u.  XXXIV,  1899  u.  1901,  p.  2G11 ,  2916).  — 
Hieronymus,  G.,  Beitr.  z.  Morph,  u.  Biol.  d.  Algen  I.  u.  IL  (Cohns  Beitr. 
Bd.  V,  p.  461).  -^  Hirschsohn,  Ed.,  Reagens  a.  Myrrhe  (Z.  f.  ang.  Mikr. 
Bd.  IX,  1903,  p.  301).  —  Hinze,  G.,  Thiophysa  vol.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XXI, 
1903,  p.  309) ;  Schwefeltropf,  i.  Inn.  v.  Oscill.  (ibid.  Bd.  XXI,  1903,  p.  394 ; 
Zellen  v.  Beggiatoa  mir.  (ibid.  Bd.  XIX,  1901,  p.  369).  —  Hoffmann,  C, 
zitiert  n.  Lindner  (Zbl.  f.  Bakt.  Bd.  II,  Abt.  2,  p.  537).  —  Hoffmeister,  C.. 
Mikroch.  Nachw.  v.  Rohrz.  i.  pfi.  Gew.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXI,  1898,  p.  668); 
Nachw.  d.  Zellk.  b.  Saccharom.  (Zeitschr.  f.  d.  g.  Brauw.  1902,  p.  225).  — 
Huic,  L.,  Protein  cryst.  a.  their  probable  relat.  etc.  (Cellule  Bd.  XI,  1895, 
p.  83).  —  Hunger,  F.  W.  T.,  Reduz.  Körp.  d.  Oxyd.- u.  Peroxydasereakt. 
(B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XIX,  1901,  p.  374) ;  Assirail.  prod.  d.  Dictyotac.  (Pr.  Jb. 
Bd.  XXXVIII,  1902,  p.  70). 

Ikeda,  T. ,  Funct.   of  antipod.  etc.  in  Liliaceae  (Bull.  Tokyo  Bd.  V, 

1902,  p.  41).  —  Ikeno,  S.,  Sporenbild.  v.  Taphrina  (Fl.  Bd.  XCII,  1903, 
p.  1).  —  Irgang,  G. ,  Üb.  saftaussch.  Elem.  u.  Idioblast.  b.  Trop.  majus 
(Sb.  Wien  Bd.  CXI,  Abt.  1,  1902,  p.  723).  —  Istvanffi,  Gy.,  Rech,  sur 
la  loc.  de  la  subst.  active  dans  le  piment  (Termesz.  Füzetek  Bd.  XIV,  1891, 
p.  197).  —  Iwan  off,  L. ,  Auftr.  u.  Schwinden  d.  Phosphorverb.  i.  d.  Pfl. 
(Pr.  Jb.  Bd.  XXXVI,  1901,  p.  355). 

Jäger,  L.,  Endosp.  bild.  ii.  z.  Embryol.  v.  Tax.  bacc.  (Fl.  Bd.LXXXVI, 
1899,  p.  241).  —  Jahn,  E. ,  Comatricha  obtusata  P.  (Festschr.  Schwend. 
Berl.  1899,  p.  288);  Myxomycetenstudien  I.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XIX,  1901. 
p.  97).  —  Janssens,  Fr.  A.,  u.  Leblanc,  A.,  Rech,  cytol.  s.  la  cell,  de 
lev.  (Cellule  Bd.  XIV,  1898,  p.  203).  —  Janssens,  Fr.  A.  et  Mertens, 
Ad.,  Et.  microch.  et  cytol.  d'une  Torula  rose  (Cellule  Bd.  XX,  1903,  p.  351). 

—  Johnson,  D.  S.,  Cristalliz.  of  cellulose  (B.  G.  1895,  p.  16). 

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p.  1).  —  Keller,  J.  A. ,  Color.  matt,  aril  of  Celastrus  (Philadelphia  1896, 
p.  212).  —  Keller,  IL,  Kohlenhydr.  d.  Monok.  (Münster  1894).  —  Kinder- 
mann,  V.,  Fruchtkörp.  v.  Stereum  (Ü.  b.  Z.  Bd.  LI,  1901,  p.  32).  —  Kl  e  b a h  n , 
H.,  Gasvak.  etc.  (Flora  Bd.  LXXX,  1895,  p.  241).  —  Klemm,  P.,  Beitr.  z. 
Erforsch,  d.  Aggregationsvorg.  in  leb.  Pflanzenzeil.  (Fl.  Bd.  LXXV,  1892, 
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1891,  No.  3).  —  Knuth,  P. ,  Nachw.  v.  Nectarien  a.  ehem.  Wege  (B.  C. 
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1903,  p.  [105]).  —  Kohl,  F.  G.,  Assimil.  Energie  d.  blauen  u.  viol.  Strahl. 
(B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897,  p.  111);  Organisat.  u.  Phys.  d.  Cyanophy- 
ceenzelle  (Jena  1903  >;  Unters,   üb.  Karotin  (Leipzig  1902; ;   Raphidenzellen 


XXII,  3.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      405 

(B.  C.  Bd.  LXXIX,  18Ui),  p.  273).  —  Kolkwit  z,  li.,  Beitr.  z.  Biol.  d.  Florid. 
(W.  M.  Helgol.  Bd.  IV);  Abwasserpilz  Leptom.  lacteus  (Mitt.  f.  W.  u.  A. 
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(D.  Apoth.-Ztg.  Bd.  IV,  1898,  p.  211).  —  Kraus,  G.,  Verhalt,  d.  Zucker- 
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1903).  —  Kruch,  0.,  Kristalloide  v.  Phytohicca  (Atti  Lincei  Bd.  V,  1896). 

—  Küster,  E.,  Charakt.  d.  Chrysobalaneen  (B.  Zbl.  Bd.  LXIX,  1897,  p.  46); 
Kieselablag.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897,  p.  136);  Z.  Kenntn.  d.  Bierhefe 
(Biol.  Zentr.  Bd.  XVIII,  1898,  p.  305).  —  Küster,  W.  v.,  Ölkörp.  d.  Leber- 
moose (Diss.  Basel  1894). 

Lafar,  Fr.,  Handb.  d.  techn  Mykol.  (Jena  1905).  —  Lagerheim,  G., 
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Not.  1901,  p.  75);  Anwend.  v.  Jodrailchs.  etc.  (Svensk.  Farmac.  Tidokr. 
Bd.  V,  1901).  —  Leblanc,  A. ,  vgl.  Janssens,  Fr.  A.  —  Lemaire,  A., 
Rech,  microch.  s.  la  gaine  de  qu.  Schizoph.  (J.  de  B.  Bd.  XV,  1901,  p.  255). 

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p.  321).  —  Lidforss,  B.,  Wirkungssph.  d.  Glykose-  u.  Gorbstoffreag.  (Lunds 
Univ.  Arsskr.  Bd.  XXVIII,  1892);  Biol.  d.  Pollens.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXIX,  1896, 
p.  l);";inhaltsk.  b.  Potamog.  prael.  W.  (B.  Zbl.  Bd.  LXXIV,  1898,  p.  305).  — 
Lilienfeld,  L.  u.  Monti,  A. ,  Mikroch.  Lokalis.  d.  Phosph.  (Z.  f.  ph.  Ch. 
Bd.  XVII,  1892,  p.  410).  —  Lindner,  Schizosacch.  octosp.  (Zbl.  f.  Bakt. 
Bd.  II,  Abt.  2,  p.  537).  —  Lohmann,  C.  E.  J. ,  Beitr.  z.  Chem.  u.  Biol. 
d.  Lebermoose  (Diss.  Jena  1903).  —  Longo,  B. ,  Beitr.  z.  Chromatolyse 
d.  Zellk.  (Ann.  di  Roma  Bd.  IX,  1899,  p.  89).  —  Love,  E.  G. ,  Stain. 
of  cell.  (Journ.  New  York  Microsc.  vol.  X,  1895,  p.  70).  —  Loew,  0., 
Asparagin  i.  pflanzenchem.  Bezieh.  (Chem.  Ztg.  Bd.  XX,  1896,  No.  16) ;  Natürl. 
Syst.  d.  Giftwirk.  (München  1893).  —  Loew,  0.,  u.  Bokorny,  Tii.,  Z. 
Chem.  d.  Proteosomen  (Fl.  Ergbd.  1892,  p.  117).  —  Lundie,  A.,  Not.  on 
micro-methods  (Transact.  Edinburgh  vol.  XXI,  1900,  p.  159).  —  Lütke- 
müller,  J.,  Zellmembr.  d.  Desmid.  (Cohns  Beitr.  Bd.  VIII,  1902,  p.  347). — 
Lutz,  L.,  Gommose  d.  1.  Acacias  (Bull,  de  France  1895,  p.  467). 

Macallum,  A.  B.,  Cytology  of  non-nucleated  org.  (Transact.  Canadian 
Inst.  vol.  VI,  1899,  p.  439) ;  Distrib.  of  assimilated  iron  Compounds  etc.  (Quart. 
Journ.  Microsc.  vol.  XXXVllI,  1895,  p.  175).  —  Magnus,  W.,  Endotr. 
Mykorrh.  v.  Neottia  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXV,  1900,  p.  205).  —  Manea,  A.,  Acid. 
gallotann.  et  digall.  (These  Geneve  1904).  —  M angin,  L. ,  Observ.  s.  1. 
membr.  cellul.  (C.  R.  vol,  CXIII,  1891,  p.  1069);  Constit.  d.  cystolith.  etc. 
(C.  R.  vol.  CXV,  1892,  p.  260);  Empl.  du  rouge  de  ruthen.  (C.  R.  vol.  CXVI, 
1893,  p.  653) ;  Proprietes  et  react.  d.  comp.  pect.  ( J.  de  B.  1892,  p.  206) ; 
Observ.  s.  Tassise  h  mucilage  de  la  graine  de  lin  (Bull,  de  France  1893, 
p.  119);  Observ.  s.  1.  pres.  de  la  callose  ch.  1.  Phan.  (Bull,  de  France  1892, 
p.  260);  Rech.  anat.  s.  1.  Peronosp.  (Nat.  Autun  T.  VIII,  1895,  56  pp.); 
Observ.  s.  1.  membr.  d.  Mucorin.  (J.  d.  B.  vol.  XIII,  1899,  p.  209).  —  Mann, 
(t.,  Behan<ll.  d.  Nervenzellen   f.   e.\p.-liist.    Unters.   (Diese  Zeitschr.  Bd.  XI, 


406      Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      XXII,  3. 

1894,  p.  479).  —  Marpiuann,  G.,  Mikroch.  Nachw.  d.  Oxj'carbons.,  Galluss. 
u.  d.  Gerbs.  (Z.  f.  ang.  M.  Bd.  VI,  1900,  p.  G);  Hefen  u.  üb.  d.  Zellk.  b. 
Sacchar.  u.  I5akt.  (Zbl.  f.  B.  Bd.  IX,  Abt.  2,  1902,  p.  357);  Ilaiisschwamm 
(ibid.  Bd.  VII,  1901,  p.  775) ;  Unters,  u.  Färb.  d.  lebend,  u.  abgestorb.  Zellen 
u.  Gew.  (Z.  f.  ang.  Mikr.  Bd.  I,  189G,  p.  321,  353);  Mikr.  u.  luikroch. 
Unters,  v.  techn.  Stoflf.  (ibid.  Bd.  V,  1889,  p.  11);  Färbungsmeth.  f.  Niicl. 
u.  Paranuclei'nsubst.  (ibid.  Bd.  VIII,  1903,  p.  314).  —  Massart,  J. ,  Rech. 
s.  1.  organisraes  infer.  V.  (Mem.  cour.  et  autres  mein.  vol.  LXI,  1901).  — 
Matruchot,  L.,  Methode  de  color.  du  protopl.  p.  1.  pigm.  bact.  (C.  K. 
vol.  CXXVII,  1898,  p.  830);  Methode  de  color.  d.  protopl.  p.  1.  p.  d.  champ. 
(ibid.  p.  881).  —  Mäule,  C,  Verh.  verholzt.  Membr.  geg.  Kaliumpermang. 
(Beitr.  z.  w.  B.  Bd.  IV,  1900,  p.  176).  —  Mertens,  Ad.,  vgl.  Janssens, 
Fr.  A.  —  Mesnard,  E.,  Rech.  s.  1.  mode  d.  prod.  d.  parf.  dans  1.  fleurs. 
(C.  R.  vol.  CXV,  1892,  p.  892);  Rech.  s.  1.  loc.  d.  huiles  grasses  d.  I. 
germ.  etc.  (ibid.  vol.  CXVI,  1893,  p.  111).  —  Meyer,  A. ,  Ref.  üb. 
Molisch,  H.,  Die  Pfl.  in  ihr.  Bezieh,  z.  Eisen  (Fl.  Ergbd.  1892,  p.  292);  Üb. 
Geißeln,  Reservest.  etc.  d.  Bakt.  (FI.  Bd.  LXXXVI,  1899,  p.  428);  Notiz  üb. 
d.  Verh.  d.  Sporen  u.  Fetttropf,  d.  Bakt.  etc.  (Zbl.  t.  B.  ii.  P.  Bd.  XXIX, 
Abt.  1,  1901,  p.  809,  810);  Üb.  Chhimydosp.  u.  üb.  s.  m.  Jod  blaufärb. 
Zellmembr.  d.  Bakt.  (ibid.  Bd.  VII,  Abt.  2, 1901,  p.  925);  Naphtholblau  a.  Reag. 
f.  Bakt.  (ibid.  Bd.  XXXIV,  Abt.  1,  1904,  p.  578);  Untersuch,  üb.  Stärkek. 
(Jena  1895);  Orient.  Unt.  üb.  Verbr.,  Morphol.  u.  Chem.  d.  Volutins  (Bot. 
Ztg.  Bd.  LXII,  1904,  p.  113).  —  Michaelis,  L. ,  Üb.  Fettfarbst.  (Virch. 
Arch.  Bd.  CLXIV,  1901,  p.  263);  Theorie  d.  Fettfärb.  (Med.  Wochenschr. 
Bd.  XXVII,  1901,  p.  759).  —  Miehe,  H.,  Üb.  Wand.  d.  pfl.  Zellk.  (Flora 
Bd.  LXXXVIII,  1901,  p.  105).  —  Miyoshi,  M.,  Üb.  d.  Chemotropismus  d. 
Pilze  (Bot.  Ztg.  1894,  p.  1).  —  Mitrophanow,  P.,  Beobacht.  üb.  d.  Diät. 
(Fl.  Bd.  LXXXV,  1898,  p.  293).  -  Möbius,  M. ,  Wachsaussch.  i.  Inn.  v. 
Zellen  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897,  p.  435);  Anthophäin  (ibid.  Bd.  XVUI, 
1900,  p.  341).  —  Molisch,  H.,  Pfl.  i.  ihr.  Bezieh,  z.  Eis.  (Jena  1892);  Bemerk. 
z.  J.  H.  Wakkers  Arb.  „Neuer  Inhaltsk.  d.  Pflanzenz."  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  IX, 
1891,  p.  270);  Nachw.  v.  mask.  Eisen  (ibid.  Bd.  XI,  1893,  p.  73—75);  Vork. 
u.  Nachw.  d.  Indicans  etc.  (Sb.  Wien  Bd.  ClI,  1893,  p.  269);  Physiol.  d. 
Pollens  (ibid.  Abt.  1,  p.  423);  Phykoerythrin  etc.  (Bot.  Ztg.  1894,  p.  177); 
Pliykocyan  etc.  (ibid.  1894,  p.  131);  Kristallis.  u.  Nachw.  d.  Xanthophylls 
etc.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XIV,  1896,  p.  18);  Neue  mikroch.  Reakt.  a.  Chlorojjh. 
(ibid.  p.  16);  Zellk.  bes.  Art  (Bot.  Ztg.  Bd.  XVII,  1899,  p.  177);  Bot.  Beob. 

a.  Java  IV  üb.  Pseudoind.  etc.  (Sb.  Wien  Bd.  CVIII,  Abt.  1,  1899,  p.  479); 
Vork.  V.  Indican  i.  Ghlorophyllk.  (ß.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XVII,  1899,  p.  228); 
Indigo  (Wiesners  „Rohstoffe",  2.  Aufl.  1900);  Stud.  üb.  Milch->.  Schleiuisaft 

b.  Pfl.  (Jena  1901);  Üb.  vorübergeh.  Rotfärb.  d.  Chlorophyllk.  etc.  (B.  d.  d. 
b.  G.  Bd.  XX,  1902,  p.  443);  Sog.  Gasvak.  etc.  (Bot.  Ztg.  1903,  p.  47); 
I.  Üb.  d.  braun.  Färbst,  d.  Phäoph.  u.  Diät.,  II.  Üb.  amorph,  u.  kristall. 
Anthokyan  (ibid.  1905,  p.  131,  145).  —  Molisch,  H. ,  u.  (4oldschmiedt, 
G.,  Scutellarin  etc.  (Sb.  Wien  Bd.  CX,  Abt.  1,  1901,  p.  185).  —  Molle,  Ph., 
Localis,  d.  alcal.  d.  I.  Solan.  (Bull.  Soc.  Beige  Micr.  v(.l.  XXI,  1895,  p.  8); 
Reell,  de  microch.  comp.  (Mem.  cour.  Acad.  l>elg.  1895);  Alcal.  d.  Clivia 
iiiiniata  Bertli  (Ann.  Soc.  Sc.  Med.  et  Nat.  Brux.  vol.  XI,  1902,  fasc.  3).  — 


I 


XXII,  3.     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      407 

Möller,  IL,  York.  v.  Plilorogl.  (B.  d.  d.  pharm.  Ges.  Bd.  VII,  1897,  p.  344). 
—  Monte  verde,  N.  A.,  Verbreit.  d.  Mannits  u.  Duicits  (vgl.  d.  Zeitschr. 
Bd.  IX,  1892,  p.  544).  —  Monti,  A.,  vgl.  Lilienfeld.  —  Moore,  S.,  Microch. 
react.  of  tann.  (J.  R.  M.  1891,  p.  832);  React.  of  callus  and  parac.  (ibid. 
1892,  p.  711j.  —  Müller,  C. ,  Unt.  üb.  d.  Nachw.  mask.  Eisens  etc.  (B.  d. 
d.  b.  G.  Bd.  XI,  1893,  p.  252). 

Naumann,  0.,  Gerbst. d.  Pilze  (Diss. Erlangen  1895).  —  N a w a s c h i n ,  S., 
Bau  u.  Umw.  v.  Plasmodioph.  (Fl.  Bd.  LXXXVI,  1899,  p!  404).  —  Nemec,  B., 
Percept.  d.  Schwerkraftreiz.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XX,  1902,  p.  339);  Reizleit. 
u.  d.  reizL  Strukt.  b.Ptl.  (Jena  1901).  —  Nestler,  A.,  Schleimz.  d.  LaubbL  d. 
Malvac.  (Ö.  b.  Z.  1898,  p.  94);  Blasenz.  v.  Antithamnion  (Wiss.  Meeresu. 
Bd.  III,  N.  F.,  1898);  Sekrettr.  an  d.  Laubbl.  v.  Phaseolus  etc.  (B.  d.  d.  b. 
G.  Bd.  XVII,  1899,  p.  332);  Nachw.  d.  Cumarins  u.  Theins  d.  Sublimation 
(ibid.  Bd.  XIX,  1901,  p.  350);  Gift.  Primeln  (Berlin  1903).  —  Neukirch, 
H.,  Strahlenpilze  [2.  Flg.]  (Straßburg  1902).  —  Newcombe,  F.  C,  Cellul.- 
enz.  (Ann.  of  Bot.  vol.  XIII,  1899,  p.  49).  —  Noack,  F.,  Schleimrank.  i. 
d.  Wurzelintercell.  einig.  Orch.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  X,  1892,  p.  645).  — 
NoU,  F.,  Geformt.  Proteide  im  Zells.  v.  Derbesia  (ibid.  Bd.  XVII,  1899, 
p.  302). 

Obach,  Eug.,  Guttapercha  (Dresden  1899). —  O'Brien,  M.,  Proteids 
of  wheat  (Ann.  of  Bot.  vol.  IX,  1895,  p.  172).  —  Oltmanns,  F.,  Sexualorg. 
b.  Coleochaete.  (FL  Bd.  LXXXV,  1898,  p.  Ij.  —  Oraelianski,  W.,  Kreisl.  d. 
Schwefels  (Lafar  Bd.  III,  1905,  p.  233).  —  Oppenheiraer,  C. ,  Fermente 
(Leipzig  1900).  —  Overton,  E.,  Auftr.  v.  rot.  Zells.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXIII, 
1899,  p.  171);  Aufn.  d.  Anilinfarb.  d.  d.  leb.  Zelle  (ibid.  Bd.  XXXIV,  1899, 
p.  669). 

Palla,  E.,  Neues  Organ  d.  Conjug.-Zelle  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XII,  1894, 
p.  153).  —  Pantanelli,  E.,  Albinisraus  (Malp.  Bd.  XV,  1902,  p.  363).  — 
Parmentier,  P.,  Rech,  morph.  s.  1.  poUen  d.  Dialypetales  (J.  d.  B.  vol.  XV, 
1901,  p.  150).  —  Petit,  P.,  Distribution  et  etat  du  fer  dans  l'orge  (CR. 
vol.  CXV,  1892,  p.  246);  Proced.  de  color.  etc.  (Amis  d.  Ronen  1903).  — 
Pfeiffer,  H.,  Neue  Doppelf.  f.  Gew.  m.  teilw.  verholzt.  Gew.  (Diese  Zeitschr. 
Bd.  XIV,  1897,  p.  202).  —  Pfeffer,  W.,  Ölkörp.  d.  Lebermoose  (FL 
Bd.  LVII,  1874,  p.  2).  —  Petri,  L. ,  Strutt.  del  nucl.  (N.  D.  BoL  Ital. 
voLXI,  1904,  p.  394).  —  Plancken,  J.  v.  d.,  et  Biongre,  Ph. ,  Miellee 
du  hetre  rouge  (Cellule  t.  XI,  1896,  p.  371).  —  Piato,  H.,  u.  Guth,  H., 
Nachw.  fein.  Wachstumsvorg.  i.  Trichophyt.  etc.  (Zeitschr.  f.  Hyg.  u.  Infekt. 
Bd.  XXXVIII,  1901,  p.  319).  —  Poirault,  G.,  vgL  Beizung,  E.  —  Pol- 
lacci,  G.,  VerteiL  d.  Phosph.  etc.  (Malp.  Bd.  VIII,  1894);  Mikroch.  Prüf, 
a.  P.  etc.  (ibid.  Bd.  IX,  1895,  p.  370;  Atti  R.  Inst.  Bot.  del  Univ.  di  Pavia 
t.  V,  n.  s.,  1898  u.  t.  VI,  1900,  p.  15);  Üb.  d.  Vork.  d.  Formaldehyds  i.  d. 
Pflanz,  (ibid.  1899,  p.  45);  Migl.  met.  di  ric.  microch.  del  Fosf.  etc.  (ibid. 
vol.  X,  1904,  p.  16).  —  Pozzi-Essot,  M.  E.,  Rech,  microch.  d.  alcal.  (C.  R. 
t.  CXXXl,  1901,  p.  1062).  —  Pröscher,  F.,  Unters,  üb.  Raciborkis  Myrio- 
phyllin  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XIII,  1895,  p.  345).  —  Prowazek,  S.,  Synedra 
hyalina  etc.  (Ö.  b.  Z.  Bd.  L,  1900,  p.  69);  Vitalfärb.  a.  Bakt.  (Z.  f.  ang.  M. 
Bd.  VI,  1900,  p.  141). 


408     Richter:   Die  Fortschritte  der  botanisciien  Mikrochemie.     XXII,  3. 

Raciborski,  M.,  Krit.  Ref.  üb.  Lilienfeld  u.  A.  Monti  etc.  (Bot.  Ztg. 
1893,  p.  245);  Inhaltsk.  d.  Myrioph.  trieb.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XI,  1893, 
p.  348);  Inhaltsk.  d.  Leptoms  (ibid.  Bd.  XVI,  1898,  p.  52);  Weitere  Mitteil, 
üb.  d,  Leptomin  (ibid.  p.  119);  Deiuonstr.  v.  m.  Lept.  (Fl.  LXXXV.  1898, 
p.  36).  —  Radlkofer,  L.,  Tonerdek.  i.  PÜanzenz.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XXII, 
1904,  p.  216).  —  Räthay,  E.,  Auftr.  v.  Gummi  in  d.  Rebe  etc.  (Jahresb. 
d.  k.  k.  önol.  u.  pom.  Lehranst.  Klosterneuburg  1896).  —  Re,  L  ,  Üb.  d. 
Vork.  V.  Sphäriten  b.  Agave  am.  (Ann.  di  Roma  vol.  V,  p.  38).  —  Re- 
chinger,  K.,  Trichom.  d.  Gesneriac  (Ö.  b.  Z  Bd.  V,  p.  89 ff.).  —  Rein- 
bold, B.,  Molisch-Udränszkysche  «-Naphthol-Schwefels.  Reakt.  (A.  ges.  Fh. 
Bd. cm,  1904,  p.581).  —  Reinke,  J.,  u.  Braunmüller,  E.,  Einfl.  d.  Licht, 
a.  d.  Gehalt  gr.  Bl.  a.  Aldehyd  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XVII,  1899,  p.  7).  — 
Reissert,  A.,  Gesch.  u.  Syst.  d.  Indigosynth.  (Berlinl898).  —  Retgers,  J  W., 
Künstl.  Färb.  v.  Krist.  org.  Körp.  mitt.  org.  Färbst.  (Z.  f.  ph.  Ch.  Bd.  XII, 
1893,  p.  600).  —  Richter,  0.,  Neues  Mazerationsmittel  f.  Pflanzengew. 
((>.  b.  Z.  Bd.  LV,  1900,  p.  5);  Mikroch.  Nachw.  d.  Kobalts  a.  Ammonium- 
Kobaltphosphat  (Tschermaks  min.  u.  petrog.  Mitt.  Bd.  XX ,  1901,  p.  99) ; 
Beitr.  z.  K.  d.  Magnesium -Ammonium -Phosphats  Mg  (NHj)  PO^  6  OH.,  (ibid. 
p.  89);  Mg  i.  sein.  Bez.  z.  Pfl.  (.Sb.  Wien  Bd.  CXI,  Abt.  1,  1902,  p.  171).  — 
Riedel,  P.,  Pflanzl.  Amyloid  (Diss.  Berlin  1897).  —  Riegler,  E.,  Zuckerp. 
m.  oxals.  Phenyllliydr.  (D.  med.  Wochenschr.  Bd.  XXIX,  1903,  No.  15).  — 
Rosenberg,  0.,  Verw.  v.  Predig.  (Diese  Zeitschr.  Bd.  XV,  1898,  p.  56); 
Unt.  üb.  Drosera  rotundif.  L.  (Upsala  Univ.  1899).  —  Rosenstiehl,  A., 
Action  d.  tannins  et  des  mat.  color.  s.  l'act.  d.  lev.  (C.  R.  t.  CXIX,  1902, 
p.  134).  —  Rosen  thal,  W.,  Nachw.  v.  Fett  d.  Färb.  (Verh.  d.  d.  Pathol. 
Ges.  München  Bd.  II,  1899,  p.  440).  —  Rosoll,  A.,  Nachw.  d.  Curcumins 
u.  Coniins  (Niederöst.  Landes-Ob.-Realsch.  29.  Jb.,  1894,  p.  1).  —  Rothert,W., 
Gallen  d.  Rotatorie  Notommata  Werneckii  (Pr.  Jb.  Bd.  XXIX,  1896,  p.  525); 
Bern.  z.  A.  Meyers  „Unters,  üb.  d.  Stärkek."  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897, 
p.  231);  Kristallz.  v.  Pontederiaceae  (Bot.  Z.  Bd.  LVII,  Abt.  2,  1900,  p.  75); 
Membr.  d.  pflzl. Gef.  (W.  Krakowie  1899).  —  R o t h  e  r  t ,  W.,  u.  Z  a  1  en  s k  i ,  W., 
Bes.  Kateg.  v.  Kristallbeh.  (B.  Zbl.  Bd.  LXXX,  1899,  p.  1).  —  Roulet,  Ch., 
Nouv.  proc.  de  double  col.  de  membr.  (Arch.  d.  sc.  phys.  et  nat.  Geneve 
Per  3  vol.  XXIX,  1893,  p.  100).  —  Rumpf,  G.,  Rhizod.,  Ilypod.  u.  Endo- 
dermis  d.  Farnwurz.  (Bibl.  Bot.  1904,  p.  Q2).  —  Rüssel,  N.  W. ,  Localis, 
de  la  Taxine  (Assoc.  Montauban  31.  sess.  1902,  p.  693).  —  Russow,  E., 
Auskl.  d.  Interzell.  (Sb.  Dorpat  Bd.  VII,  1884,  H.  1). 

Saito,  Stud.  üb.  wicht.  FaserpÜ.  Jap.  etc.  (J.  Coli,  of  Tokyo  vul.  XV, 
1901,  p.  395).  —  Salter,  J.  H.,  Keiintn.  d.  Stärkek.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXIl, 
1898,  p.  116).  —  Seh  aar,  F.,  Bau  u.  Art  d.  Entleer.  Antherid.  v.  Polytr. 
(B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XV,  1897,  p.  479).  —  Schaffner,  J.  II.,  Perm,  stain  f. 
starch  (J.  a.  Micr.  vol.  I,  1898,  p.  181).  —  Schellenberg,  H.,  Z.  Kenntn. 
d.  verh.  Zeil.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXIX,  1896,  p.  237);  Hemicellulosen  etc.  (B.  d.  d.  b.  G. 
Bd.  XXIII,  1905,  p.  M).  —  Schimper,  A.  F.  W.,  Anleit.  z.  mikr.  Unters, 
d.  veg.  Nahrungs-  u  Gcnußni.  2.  Aufl.  (Jena,  1900).  —  Schips,  K., 
Cuticula  u.  d.  Auskl.  d.  Interzell.  etc.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XI,  1893,  p.  311); 
Eigenart.  Cuticularbild.  (Beitr.  z.  Morph,  u.  Phys.  v.  Pflanzenz.  1893,  H.  3, 
p.  318).  —  Schlagdenliauffcn,  Fr.,  vgl.  lleckcl,  E.  —  Seh  lock  ow,  A., 


XXII,  3.     Rl  eilt  er:   Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      409 

Anat.  (1.  braun.  Bl.  (Diss.  Heidelberg  1903).  —  Schmidle,  W. ,  Algen  a. 
preuss.  Hochmoor.  (Hedw.  Bd.  XXXVIII,  1899,  p.  156) ;  Befrucht.,  Keim-  u. 
Haarins.  v.  Batrachosp.  (Bot.  Ztg.  Bd.  LVH,  1899,  p.  125).  —  Schmied,  H., 
Karotin  i.  d.  Würz.  v.  Dracaena  etc.  (Ö.  b.  Z.  Bd.  LIII,  1903,  p.  313).  — 
Schoorl,  N.,  Eine  mikroch.  Reakt.  a.  Atropin.  (Z.  f.  ang.  M.  Bd.  VII,  1901, 
p.  113).  —  Schor  stein,  J. ,  Z.  Biochemie  d.  Holzpilze  (C.  f.  B.  u.  P. 
Bd.  IX,  Abt.  2,  1902,  p.  44G).  —  Schröder,  B.,  Chem.  Verwandtsch.  d. 
tier.  Mucine  m.  d.  pflanzl.  Pekt.  (Beitr.  z.  B.  Zbl.  Bd.X,  1901,  p.l22);  Gallertb. 
d.  Alg.  (Verh.  d.  Natiirh.  Med.  Ver.  Heidelberg  Bd.  VII,  N.  F.,  1902,  H.  2).  — 
Sehr  Ott  er,  H.  v.,  Färbst,  d.  Arillus  v.  Afzelia  etc.  (Sb.  Wien  Bd.  CII,  Abt.  1, 
1893,  p.  381).  —  Schulze,  E,  Verbreit.  d.  (Glutamins  etc.  (B.  d.  d.  eh.  G. 
Bd.  XXIX,  1896,  p.  12).  —  Schutt,  F.,  Centrif.  Dickenw.  d.  Membr.  etc. 
(Pr.  Jb.  Bd.  XXXIII,  1899,  p.  594);  Centrif.  u.  simult.  Membranverdick,  (ibid. 
Bd.  XXXV,  1900,  p.  470)-,  Porenfrage  d.  Diät.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XVIII, 
1900,  p.  202).  —  Schwabach,  E. ,  Harzabscheid.  in  Conifnadeln  (B.  d. 
d.  b.  G.  Bd.  XVII,  1899,  p.  291).  —  Senn,  G.,  Ein.  kolonieb.  einz.  Algen 
(Bot..  Ztg.  Bd.  LXVII,  1899,  p.  39).  —  Shaw,  N.,  Fertilis.  of  Onoclea  (Ann. 
of  Bot.  vol.  XII,  1898,  p.  261).^  —  S  h  i  b  a  t  a ,  K.,  Wachstumsgesch.  d.  Bambus. 
(Journ.  Coli,  of  Sei.  Tokyo  vol.  XIH,  1900,  p.  427) ;  Amidabspalt.  Enz.  b.  Pilz. 
(Chem.  Phys.  u.  Path.  Bd.  V,  1904,  p.  384);  Cytol.  Stud.  üb.  d.  endotr. 
Mykorrh.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXVII,  1902,  p.  643).  —  Siim-Jensen,  J.,  Bot. 
u.  pharmak.Kenntn.  v.Hyoscyamus  n.(BibI. Bot.  1901,  H.  51).  —  Spazier,W., 
Auftret.  u.  phys.  Bedeut.  d.  Myrosins  (Pr.  Jb.  Bd.  XXV,  1893,  p.  39).  — 
Sp  er  lieh,  A.,  Inhaltsst.  i.  d.  Saugorg.  d.  grün.  Rhinant.  (Beih.  z.  B.  Zbl. 
Bd.  XI,  1902,  p.  437).  —  Starke,  J.,  Pret.  exist.  de  solanine  d.  1.  gr.  d. 
tabac  (Bull.  Class.!  Sc.  Ac.  R.  d.  Belg.  1902,  p.  379).  —  Strasburger,  E., 
Bot.  Prakt. ,  3.  Aufl.,  Jena  1897.  —  Suzuki,  Lokalis.  d.  Theins  i.  d. 
Teebl.  (Z.  f.  N.  u.  G.  1902). 

Tichomirow,  WI.,  Inclusions  intracell.  etc.  (C.  R.  t.  CXXXIV,  1904, 
p.  305).  —  Tiemann  u.  Haar  mann,  Coniferin  u.  s.  Umwandl.  i.  d.  arom. 
Prinz,  d.  Vanille  (B'.  d.  d.  b.  G.  Bd.  VII,  1874,  p.  608).  —  Tischler,  G., 
Verwand!,  d.  Plasmastränge  i.  Cellulose  i.  Embryos  b.  Pedicular.  (Ber.  d. 
Phys.  Ökon.  Ges.  Königsberg  1899).  —  Tison,  A.,  Meth.  nouv.  de  col.  d. 
tiss.  sub.  (C.  R.  I'Assoc.  Franc,  p.  l'Avanc.  d.  Sc.  1899,  p.  454);  Cicatr.  d. 
tissus  secret.  d.  I.  bless.  d.  pl.  (Bull.  Soc.  Linn.  Caen  t.  VIII,  1904).  — 
Tompa,  A.  v..  Zwei  bot.  Tinktionsmeth.  (Diese  Zeitschr.  Bd.  XX,  1903, 
p.  24—28).  —  Toni,  G.  B.  de.  Vorl.  histoch.  Unters,  üb.  d.  Tabakpflanze, 
Lokalisat.  d.  Nikotins  (Atti  del.  R.  Ist.  Veneto  de  Sc.  lett.  ed  arti,  ser.  7, 
vol.  IV,  1893,  p.  17).  —  Traverso,  G.  B.,  vgl.  Buscalioni,  L.  —  Treub,  M., 
Localis,  etc.  de  I'ac.  cyanhydr.  (Ann.  Jard.  Buitenz.  vol.  XIII,  1895,  p.  1); 
Nouv.  Rech.  s.  le  röle  de  I'ac.  cyanhydr.  etc.  (ibid.  Ser.  2,  T.  IV,  p.  86).  — 
T  r  o  1 1  e  r ,  A.,  Secretor.  Syst.  einig,  prosopl.  Gew.  (Ann.  di  Bot.  vol.  1, 1903).  — 
Tschirch,  A.,  Einw.  d.  Fr.  Schwabach  g.  m.  Theorie  d.  Harzbild.  (B.  d. 
d.  b.  G.  Bd.  XIX,  1901,  p.  25);  Bild.  v.  Harzen  u.  äther.  (U.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXV, 
1893,  p.  370).  —  Tschirch,  A.,  u.  Kritzler,  IL,  Mikrochem.  Unters,  üb.  d. 
Aleuronk.  (Ber.  d.  d.  pharm.  G.  Bd.  X,  1900,  p.  214).  -  Tswett,  M.,  Et.  de 
phys.  cell.  (Arch.  d.  Sc.  phys.  et  nat.  vol.  CI,  1896.  p.  336) ;  Chloroglobin  (B.  Zbl. 
Bd.  LXXXI,  1900,  p.  81).  —  T  u  b  e  u  f ,  C.  v.,  Holzzerstör.  Pilze  etc.  (Lafar  1905). 


410      Richter:  Die  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.     XXll,  3. 

Uhlmann,  W.,  Entstell.,  Vork.  u  Nachw.  d.  fett.  Öl.  etc.  (Diss.  Zürich 
1902);  vgl.  Hartwich,  C. 

Vander linden,  E. ,  Rech,  microch.  s.  1.  pres.  d.  alcal.  etc.  (Ann. 
Sog.  Roy.  d.  Sc.  Bruxelles  T.  X,  1901,  fasc.  1).  —  Ver schaffeit,  E., 
React.  permett.  de  deceler  l'indol  d.  1.  parf.  d.  fleurs.  (Rec.  d.  trav.  bot. 
Neerl.  T.  I,  1904,  p.  120).  —  Vidal,  L. ,  Subst.  pect.  d.  la  rac.  d.  Equis. 
(J.  d.  B.  T.X,  1896).  —  Vinassa,  E.,  Mikrosk.  Mehlunters.  (Z.  f.  Nahrungsm. 
Bd.  IX,  1895,  p.  53).  —  Voß,  W.,  Schnallen  u.  Fus.  b.  v.  Ured.  (B.  d.  d. 
b.  G.  Bd.  XXI,  1903,  p.  366).  —  Vuillemin,  P. ,  Rech,  morph.  etc.  s.  la 
membr    d.  Zygosp.  (Ann.  rayc.  T.  II,  1904,  p.  483). 

Walliczek,  H.,  Membranschi.  veg.  Org.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXV,  1893, 
p.  208).  —  Wallin,  G.  S.,  Gerbstoffähnl.  Tröpfch.  i.  Zellsafte  d.  Brom.-Bl. 
(B.  Zbl.  Bd.  LXXV,  1898,  p.  323).  —  Wasiel  ewski,  Walderaar  v.,  Fixie- 
rungsflüssigk.  i.  d.  bot.  Mikrot.  (Diese  Zeitschr.  Bd.  XVI,  1899,  p.  303).  — 
Weber  v.  Bosse,  A.,  Algues  d.  l'Archip.  Malaisien  II  (Ann.  Jard.  Buitenz. 
T.  VIII,  1890,  p.  165).  —  Wehmer,  C,  Charakterist.  d.  citronens.  Kalk.  etc. 
(B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XI,  1893,  p.  333).  —  Weigert,  L. ,  Beitr.  z.  Chem.  d. 
rot.  Ptlanzenfarbst.  (Jb.  1894/95  önol.  u.  pom.  Lehranst.  z.  Klosterneuburgj. 

—  Weinzierl,  Th.  v..  Verbreit.  d.  Phloroglucins  i.  Pflanzenr.  (Ö.  b.  Z. 
Bd.  XXVI,  1876,  p.  285).  —  Went,  F.  A.,  Schwefelkohlenstoft'bild.  d. 
Schizophyllura  lob.  (B.  d.  d.  b.  G.  1896,  p.  158;  Ref.  C.  f.  B.  u.  P.  Bd.  II, 
Abt.  2,  1896,  p.  528).  —  Wesels ky,  F.,  Nachw.  d.  Phlorogl.  u.  d.  sal- 
petrigs.  S.  (B.  d.  d.  eh.  G.  Bd.  IX,  1876,  No.  3).  —  Wevre,  A.  de,  Rech, 
techn.  microch.  d.  albumin.  (Bull,  de  la  Soc.  Beige  de  Microsc.  T.  XX,  1894, 
p.  91);  Local.  d.  l'Atropiu;  Alka!,  d.  narcisses  (ibid.  1887).  —  Weevers, 
Th.,  Phys.  Bedeut.   einig.  Glykoside   (Pr.  Jb.  Bd.  XXXIX,  1903,  p.  229). 

—  Wieler,  A.,  Pneumath.  u.  Aerench.  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXII,  1898,  p.  503); 
Gummös.  Verstopf,  d.  serehkr.  Zuckerr.  (Beitr.  z.  w.  B.  Bd.  II,  1897,  p.  67). 

—  Wiesner,  J. ,  Rohstoffe  d.  Pflanzenr.  (Leipzig  1900);  Einleit.  in  d. 
techn.  Mikr.  etc.  (Wien  1867);  Mikrosk.  Nachw.  d.  Kohle  etc.  (Sb.  Wien 
Bd.  Gl,  Abt.  1,  1892,  p.  379).  —  Wildemann,  E.  de,  Alcal.  d.  qu.  orch. 
(Bull.  Soc.  Beige  Micr.  vol.  XVIII,  1892,  p.  101).  —  Wille,  N.,  Phys.  Anat. 
d.  Lamin.  (Christiania  1897);    Gasvak.   b.  e.  Bakt.  (Biol.  Zbl.  1902,  p.  257). 

—  Winter  st  ein,  E.,  Pilzzellulose  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XI,  1893,  p.  520).  — 
Wisselingh,  C.  van,  Lamelle  suber.  etc.  (Arch.  Neerland.  2.  Sect.  1892, 
No.  1);  Cuticularis.  et  la  cutine  (ibid.  t.  XXVIII,  1895,  p.  373):  Band.  d. 
Ombellif.  (ibid.  XXIX,  1895,  p.  199);  Mikroch.  Unters,  üb.  d.  Zellw.  d. 
Fungi  (Pr.  Jb.  Bd.  XXXI,  1898,  p.  619);  Nucleolus  v.  Spirog.  etc.  (Bot.  Ztg. 
Bd.  LVI,  1898,  p.  196);  Kerngerüst  (ibid.  Bd.  LVII,  1899,  p.  155);  Kern- 
teilung b.  Spirog.  (Flora  Bd.  LXXXVII,  1900,  p.  355) ;  Unters,  üb.  Spirog.  ■ 
4.  Beitr.  (Bot.  Ztg.  Bd.  LX,  1902,  p.  115) ;  Abnorm.  Kernteil.,  5.  Beitr.  (ibid. 
Bd.  LXI,  1903,  p.  201).—  Wittlin,  J.,  Bild.  d.  Kalkoxalttaschen  (B.  Zbl. 
Bd.  LXV,  1896,  p.  33).  —  Wurster,  Eiweiß-  u.  Tyrosinreakt.  (Zbl.  f.  Phys. 
1887,  No.  9). 

Yendo,  K. ,  Corall.  verae  japon.  (J.  Coli.  Tokyo  vol.  XVI,  1902); 
Genicula  of  Corallinae  (ibid.  vol.  XIX). 

Zacharias,  E.,  Mikroch.  Untersuchungsmeth.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd..  XIV. 
1896,  p.  270)     Nachw.  u.  Vork.  v.  Nuklein    (ibid.  Bd.  XVI,  1898,  p.  185); 


XXII,  8.     Ui  eilt  er:   Dio  Fortschritte  der  botanischen  Mikrochemie.      4H 

Cyanoph\  ceen  (Abh.  ;i.  d.  Geb.  d.  Natiirw.  Hamburg  Bd.  XVI ,  11)00, 
No.  2);  Beitr.  z.  K.  d.  Sexualz.  (B.  d.  d.  b.  G.  Bd.  XIX,  1901,  p.  377); 
Achrom.  Bestandt.  d  Zelllv.  (ibid.  Bd.  XX,  1902,  p.  298).  —  Zaiewski,  A., 
Schönnetts  llesinocyst.  (B.  Zbl.  Bd.  LXX,  1897,  p.  50).  —  Z  atz  sehe,  F., 
Unters,  d.  verh.  Membr.  (Z.  f.  a.  M.  Bd.  II,  189G,  p.  225).  —  Zimmer- 
mann, A..  Morph,  u.  Pliys.  d.  pfianzl.  Zellk.  (Jena  1896)-,  Mikroch.  Keakt. 
V.  Kork  u.  Cut.  (Diese  "Zeitschr.  Bd.  IX,  1892,  p.  58);  Tinkt.  Verh.  d. 
Zellkernkristalloide  (ibid.  Bd.  X,  1893,  p.  211);  Chem.  Zusammensetz.  d. 
Zellk.  I.  (ibid.  Bd.  XII,  1895,  p.  458);  Beitr.  z.  Morph,  u.  Phys.  d. 
Pflanzenz.  Stuttff.  1890—1893. 


'■&• 


[Eingegangen  am  4.  Juni  1905.] 


412  Referate.  XXII,  3. 


Referate. 


1.  Lehr-  und  Handbücher. 

3IÖller,  J. ,  Mikroskopie  der  Nahrungs-  und  Geiiiiß- 
m  i  1 1  e  1  aus  de  m  P  f  1  a  ii  z  e  ii  r  e  i  c  li.  Berlin  (Jul.  Springer) 
1905;  XVI  u.  599  pp.,  599  Figg.  2.,  gänzl.  nmgearb.  u. 
unter  Mitwirkung  A.  L.  Wintons  vermehrte  Aufl.  18  M. 

Die  zweite  Auflage  des  bekannten,  anerkannten  Handbuchs  weist 
gegenüber  der  ersten  zahlreiche  wichtige  Verbesserungen  auf.  Viele 
Kapitel  haben  textlich  starke  Veränderungen  und  Ergänzungen  er- 
fahren, die  Disposition  ist  vielfach  (z.  B.  in  den  Kapiteln  Stärke, 
Mehl  und  Mahlprodukte ,  Früchte  und  Samen)  vorteilhaft  geändert 
worden.  Besondere  Anerkennung  verdient  der  reiche  Schatz  an 
Illustrationen :  die  Autophotogramme  sind  sehr  wohlgelungen  und  der 
zeichnerische  aus  Wintons  Originalabhandlungen  her  bekannte  Stil 
seiner  Textliguren  bewährt  sich  auch  hier. 

Die  Einleitung  handelt  von  Präparation,  Reagentien,  von  Messen 
und  Zeichnen.  Es  folgen  Besprechungen  der  Blätter  und  Kräuter, 
Blüten,  Stärke,  Mehl  und  Mahlprodukte,  Früchte  und  Samen,  Hölzer, 
Rinden,  unterirdische  Pflanzenteile,  Pilze,  Algen  und  Flechten. 

Küster  {Halle  a.  S.). 

Senft,  E.,  Mikroskopische  Untersuchung  des  Wassers 
mit  bezug  auf  die  in  Abwässern  und  Schmutz- 
wässern  vorkommenden  Mikroorganismen  und 
V  e  r  u  n  r  e  i  n  i  g  u  n  g  c  n.  1 80  Figg.  im  Text  u.  1 0  lithogr. 
Tfln.,   19G  pp.     Wien  (Jos.  Safar)   1905.  9-GO  M. 


XXII,  3.  Refenite.  413 

Der  allgemeine  Teil  gibt  eine  Schildernng  von  Mikroskop-  und 
Nebenapparaten  und  einige  Winke  für  Sammeln,  Aufbewahren  und 
Untersuchung  der  Wasserproben  und  behandelt  die  saproben  Orga- 
nismen und  die  Selbstreinigung  des  Wassers.  Der  spezielle  Teil 
behandelt  die  im  verunreinigten  Wasser  auftretenden  anorganischen 
Bestandteile  und  die  in  ihm  enthaltenen  Bakterien ,  Pilze ,  Algen, 
Protozoen,  Würmer  und  Arthropoden.  Die  zahlreichen  Textabbildungen 
und  besonders  die  sauber  ausgeführten  farbigen  Tafeln  werden  das 
Buch  zur  Bestimmung  der  in  Frage  kommenden  Lebewesen  geeignet 
machen.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Merck,  E.,  Prüfung  der  chemischen  Ueagentien  auf 
Reinheit.  Darmstadt  1905;  281  pp. 
Das  treffliche,  sehr  übersichtlich  angelegte  Nachschlagebuch  sei 
auch  an  dieser  Stelle  empfohlen ,  da  unter  den  in  ihm  behandelten 
Stoffen  zahlreiche  für  mikroskopische  Färbungen  und  mikrochemische 
Reaktionen  wichtige  sich  befinden.  Küster  {Halle  a.  S.). 


2.    Mikrophotographie  und  Projektion. 

König,  E.,  Über  Bade  platten  (Photogr.  Korrespond.  Bd.  XLII, 
1905,  p.  .399  —  406). 
Da  bekanntlich  die  durch  Baden  farbenempfindlich  gemachten 
Platten  den  in  der  Emulsion  gefärbten  an  Empfindlichkeit  überlegen 
sind,  scheint  es  in  gewissen  Fällen  öfters  geboten,  sich  orthochro- 
matische Platten  durch  Baden  selbst  herzustellen.  Man  pflegt  den 
Sensibilisierungsbädern  Ammoniak  zuzusetzen ,  was  auch  bei  einigen 
Farbstoffen  durchaus  erforderlich  ist,  um  eine  nennenswerte  Sensibi- 
lisierung zu  erhalten.  In  vielen  Fällen  Avirkt  aber  Ammoniakzusatz 
geradezu  schädlich.  Den  schlechten  Ruf,  zur  Sensibilisierung  mit 
Isocyaninen  nicht  geeignet  zu  sein,  weil  Neigung  zur  Schleierbildung 
eintritt ,  verdanken  gewisse  Plattensorten  auch  nur  dem  Ammoniak- 
zusatz. Verf.  konnte  durch  zahlreiche  Versuche  nachweisen ,  daß 
alle  jene  Plattensorten  monatelang  tadellos  klar  arbeitend  bleiben, 
wenn  in  neutraler  Lösung  sensibilisiert  wird.  Die  Empfindlichkeit 
der  mit  Orthochrom  oder  Pinach rom  in  neutraler  Lösung  sensibili- 
sierten    Platten    ist    bei     praktischen     Dreifarbenauf'nalimcn     in     der 


414  Referate.  XXIl.  ?,. 

Kamera  liintor  Grünfilter  gleicli ,  hinter  Kotfilter  etwa  ^/-,  der  der 
araraoniakalisch  sensibilisierten.  Verf.  empfiehlt  demnach  bei  Anwen- 
dung von  Pinachrom  oder  Orthochrom  die  Platten  im  Dunkeln  2  bis 
3  Minuten  lang  in  200  cc  Wasser  -|-  3  bis  4  cc  Farblösung  1  :  1000 
zu  baden ,  dann  etwa  2  Minuten  zu  waschen  und  schließlich  zu 
trocknen.  Ein  besonders  rasches  Trocknen  durch  starken  Luftzug 
ist  nicht  erforderlich ;  die  Platten  schieiern  auch  bei  freiwilligem 
Trocknen  nicht.  Ein  weiterer  Vorteil  des  ammoniakfreien  Sensibili- 
sierungsbades  besteht  darin,  daß  man  zum  Verdünnen  der  Farblösung 
gewöhnliches  Brunnenwasser  nehmen  kann.  Die  unzweifelhaft  günstige 
Wirkung  des  Waschens  der  gebadeten  Platten  besteht  nach  Ansicht 
des  Verf.  lediglich  darin,  daß  die  anhängende  Farblösung,  die  leicht 
in  Flecken  und  Streifen  auf  den  Platten  eintrocknen  würde,  entfernt 
wird.  Da  durch  bloßes  Abspülen  die  anhängende  Farblösung  nicht 
genügend  entfernt  werden  kann,  weil  das  etwas  alkoholhaltige  Farb- 
bad nicht  sofort  gleichmäßig  durch  das  Wasser  verdrängt  wird,  muß 
man  deshalb  so  lange  w^aschen,  bis  die  sogenannten  Fettstreifen  ver- 
schwunden sind.  Verf.  weist  hierbei  noch  auf  die  vielleicht  nicht 
allgemein  bekannte  Tatsache  hin ,  daß  diese  Fettstreifen  nicht  oder 
doch  nur  in  ganz  geringem  Maße  auftreten ,  wenn  man  zum  Lösen 
der  Farbstoffe  nicht  den  gewöhnlichen  Äthylalkohol,  sondern  Methyl- 
alkohol verwendet.  Besonders  auffällig  zeigt  sich  die  Wirkung  des 
Ammoniaks  bei  den  ScHLEussNER-Platten,  die  nach  dem  Sensibilisieren 
im  amnioniakalischen  Pinachrombade  meist  schieiern,  jedoch  vorzüg- 
liche Resultate  geben  und  monatelang  haltbar  bleiben,  wenn  man  sie 
ohne  Ammoniak  sensibilisiert.  Die  neue  Spezialrapidplatte  ist  be- 
sonders gut  geeignet.  —  Daß  Cyanin  gewöhnlich  als  ein  Sensibili- 
sator  gilt,  der  außer  andern  Untugenden  die  Allgemeinempfindlichkeit 
ganz  außerordentlich  herabsetzt,  hat  seinen  Grund  darin,  daß  ge- 
wöhnlieh unreine  Farbstoffe  verwandt  wurden.  Die  mit  sorgfältig 
gereinigtem  Cyanin  (Amylcyanin)  mit  oder  ohne  Zusatz  von  Ammo- 
niak sensibilisierten  Platten  erwiesen  sich  nach  Versuchen  des  Verf. 
ohne  Filter  bei  Tageslicht ,  sowohl  im  Sensitometer  wie  in  der 
Kamera  nicht  merklich  unempfindlicher  als  die  ungebadeten  Platten. 

E.  Schoebel  {Neapel). 


XXII,  3.  Referate.  41 5 


3.   Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

Scholz ,  F. ,  Über  Aceton-CeUoidin-Sclinelleinbettung- 
(Deutsche  med.  Wochenschr.  Jahrg.  XXXI,  190.5,  No.  11, 
p.  419—420). 
Die  ersten  erfolgreichen  Versuche ,  die  zur  Celloidineinbettung 
erforderliche  Zeit  abzukürzen,  rühren,  wie  Verf.  bemerkt,  von  E.  Kauf- 
mann her.  Wenngleich  die  Methode  dieses  schon  eine  wesentliche 
Verbesserung  darstellte ,  so  hat  Verf.  sie  jetzt  nochs  erheblich  ver- 
vollkommnet. Er  basierte  bei  seinen  Versuchen  auf  der  Arbeit  von 
Henke  und  Zeller^  über  „Aceton-Paraffin-Schnelleinbettung"'.  Das 
Aceton  ist  ein  Körper,  der  in  hohem  Grade  die  Eigenschaft  besitzt, 
Wasser  anzuziehen  und  Eiweißkörper  zu  fällen ,  also  zu  fixieren. 
Der  Preis  des  Acetons  ist  allerdings  etwas  höher  (1'25  Mk.  per  kg) 
als  der  des  Alkohols  ,  doch  besitzt  es  vor  dem  letzteren  große  Vor- 
züge: 1)  Ist  die  dadurch  bewirkte  Schrumpfung  der  Gewebsstücke 
geringer ,  2)  läßt  sich  das  Aceton  leicht  wieder  verwenden ,  sobald 
man  nur  in  üblicher  Weise  mittels  geglühten  Kupfersulfates  dafür 
sorgt ,  das  Wasser  wieder  daraus  zu  entfernen.  Verf.  ist  zurzeit 
imstande  mit  Hilfe  des  Acetons  von  jedem  Objekte  spätestens  inner- 
halb 24  Stunden  schnittfähige  Celloidinblöcke  herzustellen.  Methode: 
Die  kleinen  Gewebsstückchen  (nicht  dicker  als  o  mm)  kommen  direkt 
in  reines  Aceton.  ^  Hierbei  ist  es  für  den  Erfolg  gleichgültig,  ob  sie 
frisch  in  dieses  eingelegt  werden,  oder  nachdem  sie  zuvor,  z.  B.  in 
Formol  oder  Alkohol  gelegen  haben.  Im  Aceton  bleiben  sie  in  der 
Wärme  (der  Siedepunkt  des  Acetons  liegt  bei  56")  eine  halbe  bis 
eine  Stunde  liegen ,  ohne  daß  es  unbedingt  nötig  wäre ,  dasselbe 
während  dieser  Zeit  zu  erneuern.  Nach  Ablauf  dieser  Frist  sind 
die  Stückchen  genügend  gehärtet.  Meistens  werden  sie  hierauf  direkt 
in  dünnes  Celloidin  übertragen.  Nur  für  Auskratzungsprodukte  und 
ähnliche  Dinge  empfiehlt  es  sich,  zwischen  Aceton  und  Celloidin  einen 
Aufenthalt  in  Äther -Alkohol  von  15  Minuten  einzuschieben.  Unter- 
läßt man  dieses,  so  vermischt  sich  trotz  sorgfältigen  Abgießens  leicht 
das  in  den  Kitzen  und  Maschen  der  kleinen  Stückchen  zurückgebliebene 
Aceton    mit    dem  Celloidin   zu  einer  milchig  aussehenden  Flüssigkeit, 


')  Zentralbl.   f.  allgem.  Patliol.  11.  pathol.  Anat.   Bd.  XVI,  1905,  H.  1. 


416  Referate.  XXII,  3. 

welche  die  Härtung-  verzi>gert.  In  der  dünnen  Celloi'dinlösung  ver- 
bleiben die  Stückchen  bei  37^  bis  40*^  etwa  4  bis  5  Stunden.  Dann 
setze  man  etwas  dickes  Celloidin  zu  und  gieße  die  Präparate  nach 
weiteren  2  bis  3  Stunden  in  dickes  Celloidin  so  aus ,  daß  dieses 
sie  von  allen  Seiten  eben  bedeckt.  Unter  einer  Glasglocke  werden 
die  Präparate  nun  der  trocknenden  Wirkung  von  Chloroform  aus- 
gesetzt, das  man  in  oftenen  Schälchen  verdampfen  läßt.  Gewöhnlich 
schon  nach  3  bis  4  Stunden  kann  man  die  festgewordene  Oberfläche 
des  Celloidins  vom  Rande  aus  loslösen,  um  die  austrocknende  Wirkung 
der  Chloroformdämpfe  auch  den  tieferen  Schichten  der  Celloidin- 
lösung  zuzuführen.  Dies  ist  nicht  durchaus  erforderlich ;  meist  hat 
sich  auch  ohne  dieses  der  Celloidinblock  nach  12-  bis  14stündigem 
Aufenthalt  unter  der  Glasglocke  zur  Knorpelhärte  verdichtet.  Jetzt 
kommt  der  Block  zur  Nachhärtung  für  einige  Stunden  in  verdünnten 
Alkohol.  Meist  waren  Schnitte  von  8  bis  10  fi  möglich,  mindestens 
solche  von  16  fi.  —  Verf.  hat  diese  Methode  mit  bestem  Erfolge 
auch  bei  fetthaltigen  Organen  versucht,  die  mit  PYemming scher  Lö- 
sung fixiert  waren.  Während  bei  der  bisherigen  Äther- Alkohol- 
behandlung das  Fett  gelöst  wurde,  kann  man  es  nach  Aceton-Celloidin- 
behandlung  ebenfalls  nachweisen.  Bedingung  für  das  Gelingen  der 
Methode  ist,  daß  man  1)  tadelloses,  wasserfreies  Celloidin  zur  Ver- 
fügung hat;  man  darf  also  zur  Herstellung  der  Lösung  nur  voll- 
kommen wasserfreien  Alkohol  verwenden ,  sonst  wird  das  Celloidin 
in  der  angegebenen  Zeit  nicht  hart,  sondern  bleibt  gummiartig, 
2)  muß  das  einzubettende  Objekt  absolut  wasserfrei  sein. 

Schiefferdecker  {Bonn). 

Sternberg,    K. ,     P^ine    Schnittfärbung    nach     der    PtOMA- 
No wsK I  s  c  h  e  n  Methode  (Zentralbl.    f.   allgem.  Pathol.  u. 
pathol.  Anat.  Bd.  XVI,   1905,  No.  8,  p.  293—294). 
Seit    die    RoinANOWSKische    Färbung    durch    Vereinfachung    der 
Methode  leicht  und  sicher  ausführbar  geworden  ist,  findet  sie  immer 
ausgedehntere  Verwendung,    da  sie  für    das  Studium    der  Protozoen 
und  für  die  Blutuntersuclmng   ganz    ausgezeichnete  Resultate    ergibt. 
Man  hat  daher  auch  schon  oft  versucht,   Schnittpräparate  nach  dieser 
Methode  zu  färben,  doch  ist  dies  bisher  nicht  in  genügender  Weise 
gelungen.     Nach    den  Versuchen    des  Verf.    scheint    nun    für    diesen 
Zweck  die  „GiEMSASche  Lösung  für  Romanowski  sehe  Färbung  recht 
empfehlenswert   zu    sein.     Bei    Färbung   von  Ausstrichpräparaten    er- 
gibt sie  ganz  ausgezeichnete  Resultate  und   stellt  wohl  die  einfachste 


XXII,  3.  Referate.  417 

uml  brauchbarste  unter  allen  Modifikationen  der  Romakowski  sehen 
Methode  dar.  Verf.  hat  diese  Lösung  in  folgender  Weise  zur  Schnitt- 
färbung verwendet :  Fixierung  der  Organstückchen  am  besten  in 
Alkohol,  weniger  geeignet  ist  Sublimat-,  Pikrin-  oder  Forraolfixierung. 
Einbettung  in  Paraffin  und  Anfertigung  dünner  Schnitte  von  5  bis  8  // 
Dicke.  Färbung  in  der  Giemsa sehen  Lösung,  die  unmittelbar  vor 
dem  Gebrauche  ungefähr  der  Vorschrift  Giemsa s  entsprechend  ver- 
dünnt wird  (etwa  0*4  bis  0'.5  cc  der  Farblösung  auf  20  cc  ge- 
kochten destillierten  Wassers  ;  die  Mischung  wird  gut  durchgeschüttelt), 
20  bis  24  Stunden,  abspülen  in  Wasser,  kurze  Differenzierung  in 
0"5prozentiger  Essigsäure,  wobei  bläuliche  Wolken  abgehen  und  der 
Schnitt  rötlich  wird,  abwaschen  in  Wasser  und  abtrocknen,  kurze 
Differenzierung  und  Entwässerung  in  absolutem  Alkohol,  wobei  die 
Präparate  wieder  einen  bläulichen  Farbenton  annehmen,  abtrocknen, 
Xylol,  Balsam.  Die  Resultate  waren  zufriedenstellend.  Sehr  schön 
fielen  Schnittfärbungen  aus  von  den  Organen  solcher  Tiere,  die  mit 
Trypanosomen  infiziert  worden  waren.  Auch  Malariaplasmodien  in 
Gehirnschnitten  wurden  sehr  deutlich.  Außerdem  wurde  eine  schöne 
Färbung  der  verschiedenen  Gewebselemente  erzielt:  Zellkerne  (nach 
Alkoholkonservierung)  ebenso  wie  die  Leukocytenkerne  in  Blut- 
präparaten, die  nach  Giemsa  gefärbt  sind,  in  verschiedenen  Nuancen 
rot,  meist  satt  dunkelrot.  Einzelne  Zellkerne  (z.  B,  Leberzellen) 
zeigen  eine  zierliche  Struktur  infolge  distinkter  Färbung  der  Kern- 
körperchen.  Besonders  macht  Verf.  auf  die  I-'ärbung  der  Ganglien- 
zellen aufmerksam ,  die  ähnliche  Bilder  darbieten ,  wie  in  Nissl- 
präparaten.  Was "  die  Leukocytengranulation  anlangt ,  so  sind  die 
eosinophilen  und  basophilen  Granula  sehr  gut  darstellbar,  eine  Fär- 
bung der  neutrophilen  Granula  gelang  bisher  noch  nicht  recht.  Bis- 
weilen glaubte  Verf.  in  den  Leukocyten  einzelne  Granula  zu  sehen, 
die  den  Wolff-Miciiaelis scheu  Azurgranula  entsprechen  könnten. 

Sckiefferd'ecker  {Bonn) . 

Courniout,  J.,  et  Andre,  Ch.,  T  e  c  h  n  i  q  u  e  h  i  s  t  o  1  o  g  i  q  u  e  p  e  r  - 

mettant     de    deceler    sur    les     coupes     les     sub- 

s  t  a  n  c  e  s    du    g  r  o  u  p  e    de     1  a    Purine,     n  o  t  a  m  m  e  n  t 

Tacide    uriciue   (C.  R.   Soc.  Biol.  Paris  t.   LVII ,    1904, 

p.    1.31— 132j. 

Das  Organ  wird  in  absolutem  Alkohol  fixiert.     Auf  die  Schnitte 

läßt  man   eine  Silbernitratlösung  einwirken.     So  erhält  man  mit  zwei 

Gruppen  von  Substanzen  Niederschläge:   1)  Mit  Kochsalz:  Chlorsilber ; 

Ziitselir.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  3.  27 


418  Referate.  XXII,  3. 

2)  mit  den  Substanzen  der  Puringruppe,  so  namentlich  mit  der  Harn- 
säure :  harnsaures  Silber.  Sowohl  das  Chlorsilber  wie  das  harnsaure 
Silber  sind  in  Wasser  unlöslich.  Beliandelt  man  solche  Schnitte  mit 
einem  photographischen  P^ntwickler,  so  werden  die  Silbersalze  redu- 
ziert und  erscheinen  im  Schnitte,  den  man  in  gewöhnlicher  Weise 
färben  kann,  als  schwarze  Körner.  Um  das  Kochsalz  zu  entfernen, 
kann  man  verschiedene  Prozesse  anwenden:  1)  Mau  bringt  die 
Schnitte  nach  ihrer  Behandlung  mit  dem  Silbernitrate  in  ammonia- 
kalisches  Wasser  oder  in  eine  sehr  stark  verdünnte  Lösung  von 
unterschwefligsaurem  Natron.  Das  Chlorsilber  löst  sich  hierbei 
schneller  als  das  harnsaure  Silber,  doch  muß  man  sehr  vorsichtig 
operieren.  2)  Man  bringt  die  Schnitte  vor  der  Behandlung  mit  dem 
Silbernitrate  in  ammoniakalisches  Wasser  (einprozentig) :  das  Koch- 
salz löst  sich,  die  Harnsäure  löst  sich  nicht.  Infolge  ihrer  Erfah- 
rungen raten  die  VertF.  zu  folgender  Methode :  Man  fixiert  das  Organ 
in  absolutem  Alkohol  oder  noch  besser  mit  der  Mischung  von  Carnoy- 
Sauer.  Paraffineinschluß.  Die  Schnitte  kommen,  nachdem  sie  vom 
Parafftn  befreit  sind ,  für  eine  halbe  Stunde  in  eine  einprozentige 
wässerige  Ammoniaklösung,  dann  in  eine  einprozentige  Silbernitrat- 
lösung. Sehr  sorgfältiges  Auswaschen.  Behandlung  mit  einem  photo- 
graphischen Entwickler.  Erneutes  Auswaschen.  Doppelfärbung 
(Hämatein-Eosin  oder  Bismarckbraun-Eosin).  Die  Harnsäure  erscheint 
dann  als  schwarze  Körnchen.  Die  Verff.  heben  den  wesentlichen 
Unterschied  zwischen  ihrer  Methode  und  der  von  Anten  hervor. 
Dieser  läßt  die  Reagentien  auf  den  lebenden  Hund  einwirken ,  um 
sie  in  die  Zirkulation  einzuführen,  wodurch  die  Harnsäureausscheidung 
erheblich  verändert  wird  und  wodurch  fremde  Substanzen  in  die  Ge- 
webe eingeführt  werden.  Bei  der  Methode  der  Verff.  zeigen  die 
schwarzen  Körnchen  die  Lage  und  die  genaue  Menge  der  Harnsäure 
an,  wie  sie  im  Momente  des  Todes  vorhanden  waren. 

Schiefferdecker  {Bonn). 

Regaild,  Cl. ,    et  Diibreuil,    0.,    Sur    un    nouveau    procede 
d  '  a  r  g  e  n  t  a  t  i  0  n    des    e  p  i  t  h  e  1  i  u  m  s     au     m  o  y  e  n     du 
protargol    (C.  R.    de    l'Assoc.    des  Anat.    V.    Sess.  Liege 
190:3.   Bibliogr.   Anat.  Suppl.    1903,  p.    121  —  123). 
Das  Silbernitrat  und  die  sonst  bisher  zum   Versilbern  angewen- 
deten Salze  geben  mit  den  Chloriden  und  anderen  organischen  Sub- 
stanzen   in    den    Geweben    leicht    Niederschläge.      Man    kann    diese 
Schwierigkeit  allerdings  überwinden,    wenn  man    ein   künstliches  iso- 


XXII,  3.  Referate.  419 

tonisches  Serum  herstellt  mit  Hilfe  von  Substanzen,  die  mit  Silber- 
salzen keine  Niederschläge  bilden,  so  mit  Nitraten  und  alkalischen 
Sulfaten  (Deekhursen  1889).  Verf.  hat  einen  anderen  Weg  einge- 
schlagen und  hat  verschiedene  neuere  organische  Silberverbindungen 
versucht:  Das  Protargol,  Argentamin,  Largin,  Itrol,  Nargol,  Argyrol, 
Collargol  und  das  Argonin.  Von  diesen  erwies  sieh  das  Protargol 
als  das  günstigste.  Das  Protargol  ist  ein  gelbes  Pulver,  leicht 
löslich  in  Wasser  und  gibt  eine  Lösung,  die  an  Licht  und  Luft 
ziemlich  rasch  sich  bräunt.  Das  Protargol  ist  eine  Verbindung  des 
Silbers  mit  einem  PHanzenalbumin  und  enthält  8'3  Prozent  Silber. 
Es  wird  verwendet  in  einer  einprozentigen  Lösung  in  destilliertem 
Wasser.  Diese  Lösung  gibt  weder  mit  Chloriden  noch  mit  Eiweiß- 
lösungen Niederschläge.  Das  Verfahren  ist  das  folgende :  1)  Man 
wäscht  die  Oberfläche  der  serösen  Membran  in  physiologischer  Koch- 
salzlösung möglichst  kurz  ab  (um  die  eventuell  darauf  befindlichen 
Körper :  Leukocyten ,  Blutkörperchen  zu  entfernen) ,  nachdem  man 
die  Membran  irgendwie  ausgespannt  hat,  überträgt  sie  dann  in  die 
frisch  bereitete  ProtargoUösung  (2  bis  3  Minuten),  wäscht  von 
neuem  in  dem  Serum  schnell  ab ,  fixiert  die  Membran  durch  Ein- 
tauchen in  Alkohol,  einprozentige  Osmiumsäure  etc.,  färbt  dann  even- 
tuell noch,  dann  Entwässerung,  Aufhellung,  Lack.  2)  Statt  der 
ProtargoUösung  kann  man  auch  eine  Mischung  einer  einprozentigen 
ProtargoUösung  mit  einer  einprozentigen  Osmiumsäurelösung  zu  gleichen 
Teilen  nehmen.  Die  Mischung  ist  nicht  haltbar  und  muß  daher  jedes- 
mal frisch  zubereitet  werden.  Das  weitere  Verfahren ,  wie  oben, 
man  fixiert  mit  Aüvobol.  Dieses  zweite  Verfahren  liefert  eine  voll- 
ständige Fixierung  und  eine  sehr  schöne  feine  Imprägnierung.  Für 
Kurse  reicht  aber  auch  das  erste  Verfahren  vollkommen  aus  und 
die  Präparate  werden  im  allgemeinen  besser  als  die  mit  Silbernitrat 
angefertigten.  Die  Abwaschung  mit  der  physiologischen  Kochsalz- 
lösung kann  man  auch  wegfallen  lasseu,  während  man  bei  Anwendung 
des  Silbernitrates  zuerst  mit  destilliertem  Wasser  abwaschen  muß, 
wenn  man  eine  gute  Imprägnation  erhalten  will  (das  ist  meiner  Er- 
fahrung nach  nicht  nötig.  Ref.).  Nach  der  Imprägnation  mit  Protargol 
kann  man  z.  B.  mit  Pikrokarmin,  Alauukarmin,  Hämalaun  etc.  ebenso- 
gut färben  wie  sonst,  was  nach  Silbernitrat  nicht  der  Fall  ist.  Man 
setzt  die  Präparate  einige  Stunden  lang   auf  einer  weißen  Unterlage 

dem  Lichte  aus,  nicht  der  Sonne.  r>  7  •  /v     77       /  7-.        \ 

öchiefferaecker  [Bonn). 


2T 


420  Referate.  XXII,  3. 

m 

Dubreilil ,  0. ,    L  e  P  i  c  r  o  -  B 1  e  u  ,    n  o  t  e    s  u  r    1'  e  m  p  1  o  i    de    c  e 

r  e  a  c  t  i  f     p  o  u  r     1  a      c  o  1  o  r  a  t  i  o  n      s  p  e  c  i  f  i  q  u  e      des 
f  i b r  i II e  s    c o ii j  o n  c  t  i  v e  s.      Application    a    l '  e  t  u d  e 
du     t  i  s  s  u     r  e  t  i  c  u  1  e     du     g-  a  n  g  1  i  o  u     1  y  in  p  li  a  t  i  q  ii  e 
(C.   R.  Assüc.  Anatom.  Yl.   Sess.    Toulouse   1904,    Bibliogr. 
anat.  Suppl.   1904,  p.  62—66). 
Man   hat   bis  jetzt  zur  Darstellung-  der  Bindegewebsfibrillen  ge- 
wöhnlich   die    Methode    von    van  Gieson    (eventuell    die   Modifikation 
von  Hansen)  oder  die  von  Calleja  benutzt.     Ein  neues  Färbemittel, 
das    saure    Methylblau    (Bleu  de  methyle   acide   ou  bleu  pour  micro- 
graphie,  no.   1),    wurde  von  Zacchauiades  empfohlen.     Die  Färbung 
damit  war  indessen  noch  nicht  elektiv  genug.     Verf.  hat  daher  eine 
Verbesserung  versucht.     Es  zeigte  sich  zunächst,  daß  ein  nahe  ver- 
wandter Farbstoff,    das    „bleu  pour  micrographie  no.   2"    (Usine  des 
produits  cliimiques  et  matieres  colorantes  de  Saint-Deuis,  Paris)  gün- 
stiger   für    die  Färbung   sich    erwies.     Sodann  ergab  sich  als  bestes 
Zusatzmittel  Pikrinsäure.     Verf.  nennt  daher  die  neue  Farbmischung 
„Picro-bleu  no.   2".      Dieselbe  besteht  aus: 

Bleu  pour  micrographie  no.  2,  0*5prozentige  wäs- 
serige Lösung 4  cc 

Pikrinsäure,  gesättigte  wässerige  Lösung  ...     4(3    „ 

Die  Stücke  können  beliebig  tixiert  sein;  die  Schnitte  werden,  z.B. 
nach  Paraftineiubettung,  auf  dem  Objektträger  festgeklebt,  nach  Ent- 
fernung des  Paraffins  (Xylol ,  Alkohol ,  Wasser)  bedeckt  man  den 
Objektträger  mit  der  Färbeflüssigkeit.  Die  Färbung  dauert  etwa 
15  bis  20  Minuten.  Man  muß  dabei,  um  eine  gute  Färbung  zu  er- 
■lialten,  den  Objektträger  hin-  und  herneigen.  In  der  Farbflüssigkeit 
schwimmende  Celloidinschnitte  färben  sich  weit  schneller.  Nachdem 
man  unter  dem  Mikroskope  die  Färbung  als  genügend  festgestellt  hat, 
wäscht  man  mit  Wasser  ab ,  dann  absoluter  Alkohol ,  Karbolxylol, 
Balsam.  Pikrinsäurealkohol  darf  man  nicht  anwenden,  da  er  sehr 
schnell  das  in  den  Geweben  befindliche  Blau  auflöst.  Bindegewebs- 
fibrillen dunkelblau ,  auch  die  feinsten  Fibrillen  treten  sehr  scharf 
hervor,  Protoplasma  hellgrün,  fast  gelb,  Kerne  etwas  dunkler  grün. 
—  Noch  schöner  als  diese  einfache  Färbung  sind  indessen  die  folgen- 
den Doppelfärbungen:  1)  Acridinrot  (rouge  d'acridine) 
und  Picro-bleu  no.  2.  Man  färbt  mit  einer  einprozentigen 
wässerigen  Lösung  von  Acridinrot  5  Minuten ,  dann  Abwaschen  in 
Wasser,  dann  Färbung  mit  Picro-bleu  wie  oben.     Man  muß  die  Ent- 


XXII,  3.  Referate.  421 

iarbunj;'  iu  absolutem  Alkohol  genau  überwachen ,  da  das  Eot  hier 
leicht  ausgezogen  wird ,  und  darf  nicht  Karbolxylol  verwenden. 
2)  Safranin  und  Picro-bleu  no.  2.  Man  färbt  24  Stunden 
mit  der  Safraninl()sung  von  Zwaardemaker,  dann  Abwaschen  in  60pro- 
zentigem  Alkohol ,  dann  in  Wasser.  Färbung  mit  Picro-bleu.  Man 
muß  ebenfalls  die  Entfärbung  in  absolutem  Alkohol  überwachen  und 
darf  kein  Karbolxylol  verwenden.  Nach  beiden  Methoden  erscheinen 
die  Bindegewebstibrillen  tiefblau ,  das  Protoplasma  im  allgemeinen 
hellviolett  und  die  Kerne  rot.  Statt  des  Safranins  kann  man  auch 
das  Korallin  in  einer  wässerig-alkoholischen  Lösung  verwenden. 

Seh  iefferdecker  {Bonn) . 

Fischer ,    A. ,     Eine     neue     G  1  y  k  o  g  e  n  f  ä  r  b  u  n  g     (Anat.    Anz. 
Bd.  XXVI,   1905,  No.  i;},  14,  p.  399—400). 
Bei   einer  Untersuchung   über    die  Cyanopliyceen  hat  Verf.  eine 
haltbare  Glykogenreaktion  gefunden ,    die    auch    für  die  medizinische 
Histologie  von  Wert  sein  könnte.     Die  Methode  geht  davon  aus,  daß 
Glykogen  aus  wässeriger  Lösung  durch  Gerbsäure   gefällt  wird    und 
daß    durch  Alkohol    gefälltes    Glykogen    ebenfalls    Gerbsäure    bindet. 
Methode :    Fixierung   in  Alkohol ;    die  Paraffinsclmitte   werden    bis   in 
Alkohol  gebracht  und  gelangen,   mit  Vermeidung  von  Wasser,   direkt 
mit  dem  anhaftenden  Alkohol  in  eine   lOprozentige  wässerige  Lösung 
von    Tannin    auf    10  bis   15  Minuten.      Das    Tannin    darf   nicht    mit 
Wasser  abgespült  werden :    Man  verwende  eine  einprozentige  Lösung 
von  Kaliumbichromat,   die  mit  Tannin  so  langsam  eine  Fällung  gibt, 
daß  man  Zeit  geniig  hat   alles  überflüssige  Tannin    von    den  Objekt- 
trägern   zu    entfernen.      Dann    kommen    die    Präparate    für     10    bis 
15  Minuten  in  lOprozentige  Kaliumbichroniatlösung,  um  darin  sekundär 
fixiert  zu  werden.    Die  Glykogenmassen  sind  jetzt  fast  unlöslich,  ver- 
tragen Abspülen  mit  Wasser  und  Färbung  mit  wässerigen  Lösungen. 
Die    schönsten  Bilder    ergibt   10  Minuten  langes  Färben   mit  der  be- 
kannten Safranin-Anilinwasserlösung ;  dann  Abspülen  mit  Wasser  und 
möglichst  schnell  durch  Alkohol  und  Xylol  in  Balsam.     Die  Färbung 
ist  durchaus  elektiv :   Glykogen  allein  leuchtend  rot,  behält  die  Form, 
die  es  in  der  Alkoholiixierung  zeigte.     Die  Zellkerne  sind  durch  die 
Tanninbehandlung    völlig    gegen  Farbstoffe    verstopft    und    erscheinen 
durch    die   Chromierung    schwach    gelblich ,    Protoplasma    der  Leber- 
zellen mit  leicht  rötlichem  Stich ;    alles  was  intensiv  rot  ist,  ist  Gly- 
kogen.    Färbung  ist   haltbar.     Statt    des  Safranins    kann    man    auch 
alle  andern  basischen  Farbstoffe  verwenden :    Sehr  schöne,  besonders 


422  Referate.  XXII,  3. 

fiir  Muskeln  zu  empfelüeiule  Färbung  ergibt  Anilinwassergentiana, 
ferner  wässeriges  Metliylcublau,  sogenanntes  Jodgriin.  Bisraarckbrann 
färbt  nur  gelbbraun.  Alle  diese  basischen  Farben  färben,  wie  das 
Safranin ,  nur  die  Glykogenmassen.  Saure  Farben ,  wie  Liclitgrün, 
Säurefuelisiu,  Eosin  sprechen  nicht  an,  auch  Häraatoxylin  (Delafield) 
färbt  nicht.  Eisenalauuhämatoxylin  färbt  zwar,  bietet  aber  keine 
Vierteile.  Mit  Alkoliol  fixierte  Kaninchen-  und  Pferdemuskeln  ergaben 
recht  gute  Resultate ,  die  wohl  dazu  ermuntern  könnten ,  die  Ver- 
teilung des  Glykogens  im  Muskel  damit  zu  demonstrieren.  Bei 
Diabetesleber  unterblieb  die  Färbung.  Prof.  Schmorl  in  Dresden 
hat  dem  Verf.  mitgeteilt ,  daß  die  Färbung  an  pathologischen  Prä- 
paraten versagt  habe.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Driessen,  L.  F.,  Zur  Glykogen  färbung  (Zentralbl.  f.  allgem. 
Pathol.  u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  4,  p.  129—1.31). 
Seit  etwa  10  Jahren  bedient  sich  Verf.  bei  seinen  Unter- 
suchungen auf  Glykogen  in  Geschwülsten,  entzündeten  Organen, 
Schleimhäuten,  Plazenten  etc.  der  folgenden  Methode,  welche  den 
Vorteil  besitzt,  die  kleinsten  Glykogenkörner  scharf  hervorzuheben, 
ohne  dabei  das  Bild  der  histologischen  Struktur  der  Gewebe  zu  ver- 
schleiern. Verf.  bespricht  zunächst  die  Nachteile  der  bisher  gebräuch- 
lichen Methoden,  weswegen  auf  das  Original  verwiesen  wird.  M  e  - 
t  h  0  d  e  :  Der  Celloidin-  oder  Paraffinschnitt  kommt  aus  dem  Alkohol 
1)  in  alkoholische  Cochenillelösung  oder  in  saure  Mayer  sehe  Karmin- 
lösung. 2)  Entfärben  in  96prozentigem  Alkohol.  3)  Absoluter  Alko- 
hol 3  Minuten.  4)  Jod-Karbol-Xylollösung  3  bis  5  Minuten.  5)  Bei 
Überfärbnng  Ausspülen  in  Karbol -Xylol.  6)  Kanadabalsam.  Die 
eben  erwähnte  Jod-Karbol-Xylollösung  wird  in  folgender  Weise  her- 
gestellt: Bringt  man  gleiche  Teile  von  LuGOLScher  Lösung  und  Xylol 
(resp.  Karbolxylol)  in  ein  Reagenzglas  und  mischt  man  beide  Hüssig- 
keiten  durch  energisches  Schütteln,  so  scheidet  sich  das  leichtere 
und  jetzt  Jod  enthaltende  Xylol  als  obere  Flüssigkeit  von  dem 
schwereren  Wasser  ab :  Es  treibt  oben  im  Reagenzglase  eine  pur- 
purrote Xyloljodlösung ;  mit  einer  Pipette  werden  einige  wenige 
Tropfen  dieser  Lösung  entnommen  und  damit  der  Schnitt  aufgehellt 
und  zugleich  das  Glykogen  entfärbt.  Ist  die  Färbung  eine  ge- 
nügende ,  so  entfernt  man  das  überschüssige  Jodxylol  durch  Fließ- 
papier und  bedeckt  den  Schnitt  mit  einem  Deckgläschen,  auf  welches 
ein  Tropfen  Kanadabalsam  kommt.  Schieff'erdeckcr  {Bonn). 


XXIl,  3.  Referate.  423 

Michaelis,  L. ,  Ultramikroskopische  Untersuchungen 
(ViRCHOws  Arch.  Bd.  CLXXIX,  1905,  H.  2,  p.  195—208 
ra.  1  TU. 
Verf.  behandelt  1)  das  Verhalten  von  Farbstoff lösungen.  Besser 
als  die  Farbstoffe  selbst  teilt  man  die  Farbstofflösungen  ein,  da  ein 
und  derselbe  Farbstoff  je  nach  dem  Lösungsmittel  oder  den  sonstigen 
näheren  Nebeuuraständen  zu  jedem  der  drei  Typen  gehören  kann. 
Verf.  unterscheidet  drei  Klassen.  Die  in  diesen  Klassen  enthaltenen 
Farbstoffe  unterscheiden  sich  auch  in  bezug  auf  ihr  Färbevermögen 
in  histologischen  Präparaten;  2)  behandelt  Verf.  das  Verhalten  der 
Farbstoffe  in  gefärbten  Zellpräparaten ;  3)  gibt  er  einige  orientierende 
Bemerkungen  über  die  Beeinflussung  der  Eigenfarbe  durch  das  Ultra- 
mikroskop. Farbstoffe ,  welche  in  wässeriger  Lösung  fluoreszieren, 
scheinen  immer  in  der  Farbe  der  Fluoreszenz  aufzutreten.  Nicht 
fluoreszierende  Farbstoffe,  wie  das  Fuchsin ,  zeigen  ein  wechselndes 
Verhalten.  Bei  Anwendung  der  Abbe  sehen  Zentralblende  mit  axialer 
Beleuchtung  erscheint  das  Fuchsin  gelbgrün  bis  grün,  also  in  derselben 
Farbe ,  wie  sie  als  Oberflächenfarbe  bei  den  trockenen  Kristallen 
des  Farbstoffes  auftritt.  Dagegen  erscheinen  bei  der  senkrechten 
Beleuchtung  und  Anwendung  der  Siedentopf  sehen  Küvette  die  Teil- 
chen einer  Fuchsinlösung  rot.  Manche,  wie  es  scheint,  die  violetten 
Farbstoffe,  zeigen  in  der  Küvette  nicht  eine  einheitliche  Farbe,  son- 
dern Körnchen  von  verschiedener  Färbung ;  4)  bespricht  Verf.  das 
Verhalten  von  Eiweißlösungen  im  Ultramikroskope.  In  jeder  Eiweiß- 
lösung ist  das  Eiweiß  in  zwei  verschiedenen  Zustandsphasen  ent- 
halten :  in  auflösbarer  Form  und  als  unauflösbare  Trübung.  Ob  es 
zu  einem  dritten  Teile  nicht  in  noch  feinerer  Form  enthalten  ist, 
derart,  daß  etwa  zwischen  den  hypothetischen  feinsten  Körnchen, 
aus  welchen  sich  die  unauflösbare  Trübung  zusammensetzen  muß, 
noch  feinere  Teilchen  enthalten  sind,  welche  gar  keine  optische  Er- 
scheinung machen ,  wie  etwa  die  Moleküle  irgendeines  Salzes  in 
wässeriger  Lösung,  von  denen  das  Ultramikroskop  gar  nichts  zeigt, 
ist  zurzeit  noch  nicht  zu  entscheiden.  Aus  den  vom  Verf.  ent- 
wickelten Anschauungen  über  die  Natur  einer  Eiweißlösung  folgt 
ohne  weiteres,  daß  die  von  Römer,  Much  und  Siebert  beschriebene 
Methode  der  quantitativen  Eiweißbestimmung  auf  ultramikroskopischem 
Wege  in  ihrer  Allgemeinheit  nicht  zu  hai 
muß  auf  das  Original  verwiesen  werden. 


Wege  in  ihrer  Allgemeinheit  nicht  zu  halten  ist.     Wegen  des  näheren 


Schiefferdecker  {Bonn) . 


424 


Referate.  XXII,  3. 


4.  Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


A.   Niedere  Tiere. 

Schröder,  0.,  Beiträge  zur  Kenntuis  der  Baiichsin  nes- 
organe  [Bauch  au  gen]  von  Euuice  virides  Graj' 
sp.  [Palolo]  (Zeitschr.  f.  wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX,  1905, 
p.  1.32—149  m.  2  Figg.  u.  2  Ttln.). 
Das  Material  war  in  Osmiumsäure,  Sublimatlösung,  Cliromsäure 
oder  Formol  fixiert  und  in  starkem  Alkohol  konserviert  worden. 
Gefärbt  wurde  unter  anderm  mit  gutem  Erfolg  auf  folgende  Arten: 
Nach  Vorfärbung  mit  Boraxkarmin  und  Differenzierung  mit  schwach 
angesäuertem  Alkohol  wurden  die  Wurmstücke  ungefähr  für  12  Stun- 
den in  eine  ^/gprozentige  Lösung  von  Hämatoxylin  übertragen  und 
dann  eine  gleiche  Zeit  mit  einer  einprozentigen  Lösung  von  chrom- 
saurem Kali  behandelt.  Eine  andere  Färbemethode  bestand  darin, 
daß  die  ebenfalls  mit  Boraxkarmin  vorgefärbten  Objekte  24  Stunden 
in  einprozentige  Osmiumsäure  gebracht  und  dann  die  gleiche  Zeit 
mit  Holzessig  behandelt  wurden.  Nach  längerem  Wässern  wurde  in 
gewöhnlicher  Weise  in  Paraffin  eingebettet.  Von  Schnittfärbuugen 
gab  Eisenhämatoxylin  recht  gute  Resultate,  ferner  kam  noch  die 
VAN  GiESONSche  Methode  und  eine  Doppelfärbung  mit  Boraxkarmin 
und  einer  O'Olprozentigen  Lösung  von  triphenylrosanilintrisulfosaurem 
Natrium  in  gesättigter,  wässeriger  Pikrinsäurelösung  zur  Verwendung. 

E.  Schoebel  (Neapel). 

Heinemami ,    Ph.,    Untersuchungen    über    die    Entwick- 
lung   des    M  e  s  0  d  e  r  m  s    u  n  d    den    Bau    des    R  u  d  e  r - 
Schwanzes    bei    den    A scidi  enlar v en    (Zeitschr.    f. 
wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX,   1905,  p.  1—72  m.  4  Tfln.). 
Zur  Untersuchung    dienten    Embryonen    und    Larven    von    Ciona 
intestinalis,   Clavelina  lepadiformis  und  Molgula  nana.     Die  Fixierung 
der    ersteren    geschah    in  Alkohol -Essigsäure,   Platinchlorid -Osmium- 
Pikrinsäure,  Formol,  Sublimat,  Pikrin-Essigsäure,  Platinchlorid- Chrom- 
Osraiumsäure,   der  zweiten  in  Alkohol  oder  Pikrinschwefelsäure ,   der 
dritten    schließlich    zusammen    mit    dem  Muttertier   in   96prozentigem 


XXII,  3.  Referate.  425 

Alkohol.  Alkohol  -  Essigsäure  glitt  für  Schnittpriiparate  recht  gutes 
Material.  Für  Totalpräparate  freischwimmender  Larven  ist  unter 
anderm  auch  Platinchlorid-Osmium-Pikrinsäure  empfehlenswert,  indem 
durch  die  Osmiumsäure  die  Konturen  der  Muskelzellen  und  die 
Fibrillen  derselben,  ohne  jede  weitere  Färbung  deutlich  werden.  Ein- 
fache Alkoholtixierung  gibt  äußerst  befriedigende  Resultate ,  indes 
dürfte  sie  nur  dann  zu  empfehlen  sein,  wenn  das  Material  bald  zur 
Verarbeitung  kommt.  Eingebettet  wurde  in  gewöhnlicher  Weise  in 
ParafHn ,  und  zwar  blieben  die  Objekte  etwa  6  Stunden  im  ge- 
schmolzenen Paraftin.  Beim  Einschluß  der  Schnitte  in  Balsam  muß 
äußerst  vorsichtig  zu  Werke  gegangen  werden,  da  leicht  Trennung 
und  Verlagerung  einzelner  histologischer  Elemente  eintritt.  Über- 
führen der  Schnitte  vom  absoluten  Alkohol  in  Xylol  erwies  sich  oft 
als  schädlich.  Es  ist  deshalb  besser  beim  Einschluß  zwischen  Alkohol 
und  Balsam  Nelkenöl  als  Zwischenmedium  zu  benutzen.  Die  besten 
Färbungen  gab  DELAFiELDSches  Hämatoxylin,  kombiniert  mit  Alaun- 
karmin, oder  Methylenblau,  kombiniert  mit  Hämatoxylin  nach  Heidex- 
HAiN.  Bei  ersterer  Tinktion  wurden  die  Objekte  in  toto  in  Alaun- 
karmin gefärbt  (Boraxkarmin  gibt  ähnliche  Resultate),  dann  die 
Schnitte  mit  alter  schwacher  Del afield scher  Hämatoxylinlösung  stark 
überfärbt,  eine  Stunde  lang  in  Leitungswasser  gestellt,  mit  70pro- 
zentigem  salzsaurem  Alkohol  differenziert ,  ferner  in  TOprozentigem 
ammoniakhaltigem  Alkohol  neutralisiert  und  dann  durch  steigenden 
Alkohol  und  Nelkenöl  in  Kanadabalsam  übergeführt.  Um  bei  Total- 
präparaten der  freischwimmenden  Larven  das  Detail  der  Muskel- 
zellen des  Schwanzanhanges  zur  Darstellung  zu  bringen,  wurden  die 
Objekte  mit  Methylenblau  gefärbt  und  in  Glyzerin  eingeschlossen. 
Das  Glyzerin  zieht  das  Methylenblau  immer  mehr  und  mehr  aus  und 
auf  einem  gewissen  Zeitpunkte  lassen  sich  Zellkonturen,  Fibrillen  etc. 
deutlich  erkennen,  E.   Schoebel  (Neapel). 

Laß ,    M. ,     Beiträge     zur    Kenntnis     des     histologisch- 
an  atomischen    Baues     des     weiblichen    Hunde- 
flohes [Pulex  canis  Duo  es  s.  Pulex  serraticeps 
Taschen  beug]  (Zeitschr.  f.  wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX,  1905, 
p.   73—131   m.   2  Tfln.). 
Die  Fixierung  bietet  gewisse  Schwierigkeiten,  besonders  die  der 
erwachsenen  Tiere.     Larven  und  Puppen  fixiert  man  am  besten  durch 
Übergießen    mit    einem    auf   55  bis  60^  C.  erwärmten  Gemisch   aus 
konzentrierter  Sublimatlösung    und    absolutem    Alkohol.     Nach    5    bis 


426  Referate.  XXII,  3. 

10  Minuten  sticht  man  die  Objekte  mit  einer  feinen  Nadel  an,  bringt 
sie  in  43prozentigen  Alkohol  und  behandelt  sie  dann  in  üblicher 
Weise  weiter.  Auch  durch  Abtöten  mit  50  bis  60*^  warmem  Wasser 
erhält  man  recht  gute  Präparate.  Schwimmen  die  Objekte  beim 
Fixieren  aut  der  Flüssigkeit ,  so  hilft  meist  alles  Schütteln  nichts, 
und  die  Fixierung  ist  dann  immer  schlecht.  Die  erwachsenen  Tiere 
fixiert  man  am  besten  in  einem  ebenfalls  auf  55  bis  60^  C.  er- 
wärmten Gemisch  aus  gleichen  Teilen  Sublimatlösung  und  absolutem 
Alkohol  mit  einem  Zusatz  von  2  Prozent  konzentrierter  Essigsäure. 
Kopf  und  Thorax  wurden  immer  entfernt.  Zur  Herausnahme  einzelner 
Organe  aus  dem  Körper  der  Imago  wendet  man  vorteilhaft  eine 
starke  Alkohol-Essigsäuremischung  (Essigsäure  ÖOprozeutig,  20  Teile, 
Alkohol  95prozentig,  20  Teile,  Wasser  100  Teile)  an.  Durch  diese 
Flüssigkeiten  werden  die  bindegewebigen  Teile  sehr  stark  angegriffen, 
so  daß  sich  das  Chitin  entfernen  läßt.  Zur  Färbung  der  Schnitte 
diente  Alaunkarmin,  Boraxkarmin  oder  GRENACHERSches  Hämatoxylin. 

E.  Schoehel  {Neapel). 

Böseuberg,    H.,    Beiträge    zur    Kenntnis    der    Spermato- 
genese    bei    den    Arachnoiden    (Zool.    Jahrb.,    Abt. 
f.    Anat.     u.    Ontogen.    Bd.    XXI,    1905,    p.   515—570   m. 
,3  Tfin.). 
Zur  Materialgewinnung  wurden  die  geschlechtsreifen  Tiere  unter 
physiologischer    Kochsalzlösung    vom    Bauch    aus    geöffnet    und    ihre 
Hoden    mit    den    Vasa    deferentia ,    nach    Zurückschlagen    der  Leber- 
lappen, mittels  feinen  Nadeln  herausgehoben.     Zur  ersten  notwendigen 
Orientierung  wurden  in  üblicher  Weise  Ausstrichpräparate  angefertigt. 
Der  Hauptsache  nach  wurden  weiter  aber  Schnitte  untersucht.     Das 
Material  für  diese  Präparate  wurde  im  wesentlichen  in  einem  Sublimat- 
Alkohol -Eisessig -Gemisch    fixiert,    außerdem   zum  Teil  noch  in  Her- 
MANNScher  oder  ZENKERScher  Flüssigkeit.  Wird  beim  Herauspräparieren 
der  Organe  jede,  auch  die  geringste  Austrocknung  vermieden,  so  tritt 
keine  Schrumpfung    in    den  Fixierungsflüssigkeiten,    in    den   man  sie 
am  besten  eine  bis  2  Stunden  beläßt,  ein.     Die  weitaus  beste  Fixie- 
rung lieferte  die  Hermann  sehe  Flüssigkeit.     Zur  Färbung  zeigte  sich 
vor  allem  die  Heidenhain  sehe  Eisenhämatoxylinmethode  als  Einfach- 
färbung oder  kombiniert  mit  Bordeaux-Rot  als  Doppelfärbung  gut  ge- 
eignet.    Ebenfalls    gute    Bilder    wurden    noch    mit    Hämatoxylin    und 
Hämalaun-Orange  erzielt.  E.   Schoehel  {Neapel). 


XXII,  3.  Referate.  427 


B.    Wirheitiere. 

(xias ,  E. ,    Zur  F  rn  i;-  e    der  S  a  r  k  o  1  y  s  e.    [Erste  Mitteilung 
über    quergestreifte    Muskeln    und    deren  'Zer- 
fallsprodukte im  f  0 1 1  i  k u  1  ä r  e  n  G  e  w  e  b  e  d  e  r  T o  n - 
sille]  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,   1905,  No.   6,  p.  155—171 
m.    1   Ttl.). 
Verf.   fand  in  der  Tonsille  eigenartige  Körpercheu,   welche  sich 
bei    näherer    Untersuchung    als    Sarkolyten    erwiesen.      Die    Färbung 
nach  VAN  Gieson  ergab  Gelbfärbung   dieser  Körperchen ,    eine  Blau- 
färbung   trat    bei    der    von  Paulsen   für  pjiweißkristalle  in  Pflanzen- 
zellen angegebenen  Färbung  auf,  welche  zu  einer  tiefblauen  Färbung 
der  Kristalle  führt:    l)  Beizung  in  25prozentiger,  wässeriger  Tannin- 
lösung (eine  Stunde).    2)  Auswaschen.    3)  Behandlung  mit  20prozen- 
tiger  Eisenvitriollösung  (eine  Stunde).     4)  Wasser,  Alkohol,  Nelkenöl, 
Balsam.  Schiefferdeclrr  {Bonn). 

Erclely ,    A, ,    Untersuchungen    über    die    E  i  g  e  n  s  c  h  a  f  t  e  }i 
und    die  Entstehung    der  Lymphe.     Fünfte    Mit- 
teilung.     Über    die    Beziehung     zwischen    Bau 
und    Funktion     des     lymphatischen     Apparates 
des    Darmes  (Zeitschr.  f.  Biol.  Bd.  LXVI,   1904,    H.  2, 
p.   119—152   m.   1   TU.). 
Verf.  hat  am  Darme  der  weißen  Ratte  das  Auftreten  von  ver- 
schieden   beschaffenen  Lymphzellen  untersucht,    die  je  nach  der  Art 
der  Nahrung  sich  zeigten.     Verf.  hat  ira  ganzen  acht  Versuchsreihen 
durchgeführt,    von   denen  jede    in    der  Regel    bestand    aus   je    einer 
llungerratte,  einer  Fleischratte,  einer  Speckratte  und  einer  Kartoti'el- 
ratte.     Den   Tieren   wurde    reichlich  Wasser    geboten.     Die  Hunger- 
perioden dauerten  3  bis  6  Tage,  die  Fütterungsperioden  3  bis  8  Tage. 
Die  Tiere  wurden  durch  Chloroform  getötet.     Sofort  nach  dem  Tode 
Fixierung  der  Därme:    Konzentrierte  Sublimatlösung,  pLEMMiNGSches 
Osmiumgemisch,    Flüssigkeit  von  Mingazzini  (konzentrierte  Sublimat- 
lösung 50  cc,  Alkohol   25   cc,  konzentrierte  Essigsäure  25   ccj.     Vor 
der  Einbringung  in  die  Fixierungsflüssigkeit  wurde  zuerst  das  Darm- 
lumen mit  derselben   erfüllt.     Die    besten  Resultate    hinsichtlich    der 
Erhaltung   der  Formen    und    der  Färbefähigkeit    ergab    die    einfache 
Sublimatfixierung,  insofern    nur   das  lymphatische   Gewebe    der  Zotte 


428  Referate.  XXII,  3. 

und  der  Mucosa  in  Frage  kam.  Für  andere  Teile,  nameutlicli  für 
bestimmte  Abschnitte  des  Darmepithels ,  erhcält  man  sehr  schöne 
Bilder  mit  der  Flüssigkeit  von  Mingazzini.  Verf.  hat  diese  letztere 
bei  seinen  Untersuchungen,  welche  nur  dem  lymphatischen  Gewebe 
galten,  nur  da  mit  Vorteil  benutzt,  wo  es  sich  darum  handelte, 
die  genauere  Lage  der  Leukocyten  und  deren  Beziehung  zum  Epithel 
festzustellen,  sowie  für  einige  Strukturverhältnisse  des  Kernes. 
Paraffineinbettung.  Die  folgenden  Färbungen  wurden  verwendet: 
Ehrlichs  Triacid  für  neutrophile  Granulationen,  Eisenhämatoxylin 
(M.  Heidenhain)  mit  Fuchsinfärbuug,  Hämatoxylin-Eosin ,  Methylen- 
blau-Eosin (Willebrandt),  gelegentlich  auch  die  Ehrlich  sehen  Drei- 
farbgemische für  eosinophile  und  basophile  Zellen  und  das  Ehrlich- 
BiONDische  Dreifarbeugemisch.  Die  besten  Bilder  ergab  das  Ehr- 
LicHSche  Triacid.  Verf.  bemerkt  hierzu,  daß  manche  Autoren  mit 
dieser  für  Blutpräparate  allgemein  günstig  beurteilten  Farbmischung 
bei  Gewebsschnitten  weniger  zufrieden  sind.  Verf.  hat  alles  das, 
was  man  der  Biondi-Heidenhain  sehen  Dreifarbenlösung  nachrühmt, 
mit  Triacid  erzielt  und  meint,  daß  dieses  noch  schönere  Bilder  gibt, 
als  gut  gelungene  BioNDipräparate.  Verf.  teilt  mit,  daß  auf  Ver- 
anlassung von  Professor  Asher  Herr  Dr.  Hollborn  (Inhaber  des 
mikroskopisch-chemischen  Laboratoriums  von  Dr.  G.  Grlbler)  mehrere 
Modifikationen  des  Biondi- Ehrlich -Heidenhain  sehen  Dreifarbenge- 
misches angefertigt  hat.  Die  neuerdings  gelieferte  Trockensubstanz, 
zu  welcher  man  selbst  nach  Vorschrift  Fuchsin  hinzufügen  muß, 
liefert  die  besten  Bilder.  Diese  stehen  aber  den  von  Triacid  ge- 
lieferten nach,  nur  das  bindegewebige  Stroma  und  besonders  die 
Endothelien  der  Kapillaren  werden  besser.  Die  Technik  der  Triacid- 
färbung  ist  einfach :  Nach  Entfernung  des  Paraffins  kommen  die 
Präparate  in  die  käufliche  konzentrierte  Lösung  und  verbleiben  in 
dieser,  je  nach  der  Schnittdicke  und  der  sonstigen  Beschaffenheit 
des  Präparates,  2  bis  15  Minuten,  dann  werden  sie  mit  Wasser 
und  Alkohol  nacheinander  differenziert :  die  Erfahrung  lehrt ,  wie 
lange  in  jeder  Flüssigkeit.  Die  Eisenhämatoxylinmethode  von  Heiden- 
hain diente  zur  Ergänzung  der  Triacidbilder,  besonders  hinsichtlich 
der  Kernverhältnisse ;  irgendwelche  wesentliche ,  neue  Aufschlüsse 
gegenüber  der  Triacidmethode  bietet  sich  aber  bei  den  Leukocyten 
des  Rattendarmes  zumal  dann  nicht,  wenn  es  auf  die  Beziehungen 
derselben  zu  verschiedenen  funktionellen  Zuständen  ankommt. 

Schieferdecker  ( Bo?m) . 


XXII,  3.  Referate.  429 

Zietzscbniaiin ,    0. ,    Über    die     a  c  i  d  o  p  h  i  1  e  n    L  e  u  k  o  c  y  t  e  ii 

( K  ö  r  n  e  r  z  6 1 1  e  n )    des    Pferdes    (Intern.   Monatsschr.    f. 

Anat.    n.    Physiol.  Bd.   XXII,   1905,  H.  1—3,  p.   1—90  ui. 

1  Tri.). 
Um  Körnclienbildiingen  in  Zellen  zur  Klasse  der  a-Granulationen 
rechnen  zu  können ,  genügt  es  nach  Ehrlich  ,  wenn  sich  dieselben 
nach  folgenden  Methoden  färben  :  1)  Mit  stark  rotem  Eosin-Glyzerin. 
2)  Mit  einem  in  Indulin  gesättigten  Glyzerin,  und  o)  mit  einer  kon- 
zentrierten wässerigen  Lösung  von  Orange.  Diese  drei  Methoden  hat 
Verf.  angewendet,  dazu  aber  noch  viele  andere  Färbemittel  auf  ihr 
Verhalten  zu  den  acidophilen  Granula  untersucht,  einesteils,  um  schon 
Gefundenes  nachzuprüfen  (ob  Funde  bei  Zellen  von  Menschen  oder 
Tieren  speziell  auf  die  Einhufer  übertragen  werden  können),  andern- 
teils,  um  neue  Farben  oder  Farbmischuugen  in  ihrer  chemisch  tink- 
toriellen  Affinität  zu  den  a-Granulationen  der  Pferdeleukocyten  kennen 
zu  lernen.  Verf.  gibt  nun  eine  sehr  eingehende  Beschreibung  seiner 
Färbungen,  derentwegen  bei  ihrer  großen  Reichhaltigkeit  auf  das 
Original  verwiesen  werden  muß.  Er  kommt  dann  zu  dem  Schlüsse, 
daß  aus  seinen  Färbeversuchen  hervorgehe,  daß  die  acidophilen  Gra- 
nula der  Leukocyten  des  Pferdes,  wie  schon  längst  bekannt,  mit  den 
gewöhnlichen  Kernfarben  sich  nicht  färben  lassen.  Auch  die  Schleim- 
farben und  die  Reagentien  für  das  elastische  Gewebe  und  andere 
spezifische  Tinktionsmittel  zeigen  keine  Affinität  zu  diesen  Körnchen. 
Dagegen  färben  sich  die  Granula  mit  Hämatoxylin-Eisenalaun  nach 
Heidenhain  ,  mit  Methylgrün ,  mit  Osmiumsäure  und  Indigkarmin. 
Eine  besondere  Affinität  besitzen  die  Körnchen  zu  allen  sauren  Farben 
(Eosin,  Erythrosin,  Säurefuchsin,  Orange  G,  Indulin,  Aurantia,  Pikrin- 
säure). Es  sind  diese  Zellelemente  also  acidophil  im  Sinne  Ehr- 
lich s.  Xach  neueren  Untersuchungen  aber  klassifiziert  man  die 
acidophilen  Granulationen  in  den  Leukocyten  der  Säugetiere  in 
mehrere  Unterabteilungen  ,  je  nachdem  sie  aus  einem  Gemische  ver- 
schiedener saurer  Farben  die  eine  oder  die  andere  aufnehmen.  Die 
Farbmischung ,  die  zur  Unterscheidung  dieser  Unterabteilungen  an- 
gewendet wird,  besteht  aus  gleichen  Teilen  einer  wässerig-glyzerinigen 
Lösung  von  Indulin,  Eosin  und  Aurantia  und  man  unterscheidet  nach 
dem  Elektivvermögen  zwischen  indulino-,  eosino-  und  aurantiophilen 
Körnchen  in  den  Leukocyten.  Verf.  geht  dann  weiter  auf  seine  Färbungs- 
resultate ein,  derentwegen  wieder  auf  das  Original  verwiesen  wird,  und 
dann  auf  die  Chemie  der  Körnchen.  Schiefferdecker  {Bonn). 


430  Referate.  XXII,  3. 

Meves,  F.,  Über  die  Wirkung  gefärbter  Jodsäure  auf 
die  roten  Blutkörperchen  der  Amphibien.  Vor- 
läufige Mitteilung  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905, 
No.  4  u.  5,  S.  97  —  103  ni.  4  Abb.). 
Lawdowsky^  hat  1893  mitgeteilt,  daß  Jodsäure  in  Verbindung 
mit  einigen  Farbstoffen,  besonders  Neuviktoriagrlin  oder  Methylviolett 
6  B,  in  eigenartiger  Weise  auf  die  Blutkörperchen  einwirkt.  Verf. 
hat  nun  diese  Methode  nachgeprüft;  weiter  gibt  er  folgendes  an. 
Jodsäure,  ungefärbt,  in  2-  bis  3prozentiger  Lösung,  am  besten  mit 
einem  Kochsalzzusatze  von  etwa  ein  Prozent,  wirkt  in  ähnlicher  Weise 
wie  eine  Salpetersäure-Kochsalzlösung  (30  Tropfen  Salpetersäure  von 
1'4  spezifischem  Gewichte  auf  100  cc  einer  0*9  bis  einprozentigen 
Chlornatriumlösung),  d.  h.  sie  ist,  wie  diese,  ein  geeignetes  Mittel, 
um  die  Quermembranen  des  Randreifens  (unter  Quellung  desselben) 
darzustellen.  Die  Darstellung  der  Quermembranen  durch  Salpeter- 
säure-Kochsalz scheint  noch  leichter  bei  Anwesenheit  von  etwas 
Sublimat  zu  gelingen.  Verf.  hat  in  letzter  Zeit  mit  besonders  gutem 
Erfolge  folgende  Mischung  angewendet:  Salpetersäure  von  1'4  spezi- 
fischem Gewichte  24  bis  30  Tropfen,  Chlornatrium  1"8-  bis  2prozentige 
Lösung  50  cc,  Sublimat  einprozeutige  Lösung  50  cc.  Ferner  werden 
bei  der  oben  angegebenen  Jodsäuremischung  in  zahlreichen  Blutzellen 
(Salamandra)  die  unregelmäßig  gewundenen  (zuweilen  ringförmigen) 
intracellulären  Fäden  sichtbar,  die  Verf.  ebenfalls  schon  mit  Salpeter- 
säure-Kochsalz erhalten  hatte.  —  Durch  4prozentige  Jodsäure,  der 
man  Neuviktoriagrün  oder  Methylviolett  zusetzt  (wenn  man  Dahlia 
zusetzt,  darf  man  der  Jodsäure  kein  Kochsalz  zufügen ,  da  dieses 
mit  Dahlia  einen  Niederschlag  gibt),  kann  man  die  erwähnten  Quer- 
membranen und  intracellulären  Fäden  gefärbt  erhalten,  am  konstan- 
testen aber  wird  das  Körnerband  gefärbt,  welches  Verf.  bei  Sala- 
mander schon  früher  nach  Behandlung  der  roten  Blutkörperchen  mit 
einer  stärker  verdünnten  Salpetersäure  (3  bis  4  Tropfen  Salpetersäure 
auf  100  cc  einer  0*9-  bis  einprozentigen  Chlornatriumlösung)  als  ein 
körniges  Aussehen  des  Randreifens  wahrgenommen  hatte.  —  Wenn 
man  zu  20  cc  einer  4prozentigen  Jodsäurelösung,  welche  1,5  Pro- 
zent Chlornatrium  enthält,  5  cc  einer  2prozentigen  Osmiumsäure- 
lösung hinzufügt ,  einen  Tropfen  dieser  Mischung  auf  dem  Objekt- 
träger mit  einem  etwas  kleineren  Tropfen  einer  0'5prozentigen  Lösung 
von  Malachitgrün  vermischt  und    einen    kleinen  Tropfen  Salamander- 


1)  Vgl.  diese  Zeitsclir.  \U\.  X,  1893,  p.  4—35  m.  2  Tfln. 


XXII,  3.  Referate.  431 

bliit  liineinrülirt,  das  Präparat  dann  eindeckt  und  mit  einem  Paraffin- 
reifen  umzieht,  so  sieht  man  meistens  nach  einigen  Augenblicken  an 
fast  sämtliclien  Blutkörperchen  ein  scharf  gefärbtes  Fadennetz  auf- 
treten, welches  unmittelbar  au  der  Oberfläche  liegt.  An  Blutkörper- 
chen des  Frosches  gelingt  dies  nicht.  Das  hier  genannte  Malachit- 
grün ist,  wie  Verf.  bemerkt,  der  chemischen  Formel  nach  identisch 
mit  Neuviktoriagrün,  es  wurde  als  Malachitgrün  von  Grübler  in 
Leipzig  bezogen.  Seine  ff erdecker  {Bonn). 

Leuziiianil,  R.,  Über  eine  vereinfachte  Methode  der  Fär- 
bung von  Bluttrockenpräparaten    (Rheinisch- West- 
fälische Ges.  f.  innere  Med.  u.  Nervenheilkunde.     IV.  Vers. 
6.  Nov.  1904  zu  Duisburg;  Ref.  in  Münchener  med.  Wochen- 
schr.  Jahrg.  LI,    1904,  No.   50,  p.   2250—22.51). 
Nur  sehr  dünne    (0'08  bis  O'l   mm),    tadellos  mit  Alkohol    und 
Äther  gereinigte  Deckgläschen    dürfen    verwendet    werden    uud    sind 
nicht    mit    den    Fingern ,     sondern    nur    mit    Pincetteu     zu     führen. 
Die  Fingerkuppe   des  Patienten,   aus  der  das  Blut  entnommen    wird, 
muß    auf    das    sorgfältigste    gereinigt    werden.       Die    lufttrockenen 
Präparate    müssen    zunächst    fixiert    werden.      Die    Fixierung    durch 
Hitze  nach  Ehrlich  ist  für    den  Praktiker    nicht    durchführbar ,    die 
Fixierung  in  Formolalkohol  oder   in  Alkohol  und  Äther    zu    gleichen 
Teilen  braucht  wenigstens  5  bis   10  Minuten  und  ist  unsicher.    Ver- 
fasser hat  daher  versucht,    die  Fixierung  mit    der  Färbung    zu    ver- 
binden.    Was  die  Färbung  anlangt,  so  ist  es  für  den  Praktiker  am 
bequemsten,  wenn  er  solche  Lösungen  benutzt,   die  alle  körperlichen 
Elemente  des  Blutes  zugleich    zur  Anschauung    bringen:    die  eosino- 
philen ,    die    neutrophilen    uud    die    basophilen.      Dieses    leisten    das 
Ehrlich  sehe  Dreifarbengemisch    und    die    Ziemann  sehe    Lösung    (eiu 
Gemisch  von  4  Teilen  Eosinlösuug  [O'l  :  100]  uud  ein  Teil  Methyleu- 
blaulösung    [l  :  lOO]    und    2 '5    Borax).     Diese  sogenannten  panchro- 
matischen Farblösungen  färben  aber    nicht    so    gleichmäßig,    wie    es 
wünschenswert    ist.     Verf.    hat    deshalb    zunächst    mit    einem    Eosin- 
Methylenblaugemisch  gefärbt ,  das  die  eosinophilen  und    neutrophilen 
Elemente  vorzüglich  darstellt  und  hat  dann   zur  Färbung    der    baso- 
philen Elemente  mit  einer  gesättigten  Methylenblaulösuug  nachgefärbt. 
Die  Lösung  des  Verf.  besteht  aus:  Eosin  1"2;  absoluter  Alkohol  lOO'O; 
Formol  5*0;  Sublimat  0*3;  dann  filtrieren.     Zu  10  cc  dieser  Lösung 
wird    zugesetzt    1   cc    der   folgenden    Methylenblaulösung:    Methylen- 
blau   0'8 ;    absoluter    Alkohol     100*0 ;    .Sprozentige    Essigsäurelösung 


432  Referate.  XXII,  3. 

20  Tropfen ,  filtrieren.  Die  sclion  filtrierten  einzelneu  Lösungen 
müssen  nach  der  Mischung  nochmals  filtriert  werden.  Von  diesem 
fertigen,  lange  Zeit  haltbaren  Farbengemische  werden  etwa  10  Tropfen 
auf  das  in  einem  ührschälchen  mit  der  beschickten  Seite  nach  oben 
liegende  lufttrockene  Deckgläschen,  am  besten  wieder  durch  ein 
Filter,  geträufelt.  Nach  einer  Minute  ist  das  Präparat  vorzüglich 
fixiert,  die  neutrophilen  Elemente  sind  deutlich  gefärbt,  die  eosino- 
phileu  Elemente  könnten  aber  intensiver  gefärbt  sein.  Da  sie  sich 
in  wässerigen  Lösungen  am  besten  färben,  so  setzt  Verf.,  nachdem 
das  Präparat  eine  Minute  mit  dem  Farbgemisch  bedeckt  war,  aus  einer 
Spritzflasche  destilliertes  Wasser  hinzu ,  so  daß  das  in  Form  einer 
Kuppe  das  Deckglas  bedeckende  Farbgemisch  zerfließt  und  hellrot 
wird.  Man  braucht  dazu  etwa  die  fünffache  Menge  von  Wasser. 
Das  Deckglas  liegt  nun  auf  dem  Boden  des  Uhrschälchens  in  dem 
mit  destilliertem  Wasser  verdünntem  Farbengemische,  man  muß  es 
durchschimmern  sehen.  Es  verbleibt  in  dieser  verdünnten  Mischung 
etwa  1*5  Minute.  Betraclitet  man  es  jetzt  nach  Abspülen  im  Leitungs- 
wasser mit  Ölimmersion,  so  findet  man  die  eosinophilen  und  neutro- 
philen Elemente  sehr  scharf  gefärbt,  die  basophilen  müssen  noch 
nachgefärbt  werden.  Dies  macht  man  in  folgender  Mischung: 
Methylenblau  2*4;  absoluter  Alkohol  100*0 ;  Borax  2*5;  filtrieren. 
Von  dieser  Lösung  träufele  man  durch  ein  Filter  einige  Tropfen  auf 
das  vorgefärbte  und  in  Wasser  abgespülte  Deckglas,  belasse  diese 
20  bis  30  Sekunden  darauf,  spüle  gründlich  ab,  bis  die  zunächst 
etwas  blaue  beschickte  Fläche  eine  violette  Farbe  angenommen  hat: 
alle  eosinophilen  Elemente  sind  jetzt  rot,  die  neutrophilen  deutlich 
violett,  die  basophilen  tiefblau,  die  Blutplättchen  dunkelviolett.  Die 
Form  der  Blutkörperchen  ist  tadellos  erhalten.  Die  Methode  würde 
also  kurz  die  folgende  sein :  Die  Farblösungen  No.  1  und  2  sind 
fertig,  man  träufelt  No.  1  auf  das  lufttrockene,  mit  der  beschickten 
Seite  nach  oben  gekehrte  Deckglas,  setzt  aus  der  Spritzfläche  nach 
einer  Minute  etwa  die  fünffache  Menge  destillierten  Wassers  zu ; 
nimmt  nach  1'5  Minute  das  Deckglas  aus  dieser  Farblösung,  spült 
in  Leitungswasser  ab,  färbt  mit  Lösung  No.  2,  die  auf  das  mit  der 
Pincette  gehaltene  Deckglas  aufgeträufelt  wird,  20  bis  30  Sekunden 
nach,  spült  wieder  ab,  trocknet  auf  Fließi)apier,  dann  Kanadabalsam. 
Die  ganze  Behandlung  dauert  3  Minuten.  —  Trotzdem  die  Methode 
einfach  ist,  bedarf  es  einer  gewissen  Übung,  um  tadellose  Präparate 
zu  erhalten.  Am  schwersten  ist  es,  Farbstotfniederschläge  zu  ver- 
meiden.     Verf.  rät,    den  Farbstoff   immer  durch    ein    feuchtes  Filter 


XXII,  3.  Referate.  433 

auf  das  Deckglas  zu  träufeln.  Die  Filter  müssen  von  tadelloser  Be- 
schafFeuheit  sein.  Die  besten  sind  die  von  der  Firma  Schleicher 
und  ScHÜLL  in  Düren  (zu  beziehen  durch  Marquakt,  Bonn).  Dem 
Verf.  wurden  von  sachverständiger  Seite  die  sogenannten  gehärteten 
Filter  empfohlen.  Für  die  Filtrierung  der  Lösung  No.  1  sind  diese 
vorzüglich ;  für  die  Lösung  No.  2  muß  das  Filter  noch  dichter  sein. 
Auf  Empfehlung  der  Firma  hat  Verf.  für  diese  letztere  Lösung  ein 
besonders  dichtes  Filter  (Firmanummer  589)  benutzt.  Erst  seitdem 
Verf.  in  dieser  Weise  verfuhr,  hat  er  tadellose  Präparate  erhalten. 
—  Aus  der  Diskussion  ist  das  Folgende  hervorzuheben:  Hoffmann 
(Düsseldorf)  macht  auf  die  Jenner  sehe  Färbung  aufmerksam.  Die 
P^'irma  Burroughs  and  Wellcome  bringt  kleine  Tabletten  in  den 
Handel,  die  in  10  cc  Methylalkohol  gelöst,  in  ähnlicher  Weise  gleich- 
zeitig fixieren  und  färben.  Dieselben  geben  gute  Übersichtsbilder. 
Für  feinere  Untersuchungen  wird  man  die  Triacidfärbung  und  Eosin- 
Methylenblau  färbung  nach  Wärmefixierung  vorziehen.  Auch  die  May- 
GRtJNWALDSche  Färbung  gibt  gute  Resultate.  Minkowski  benutzt 
gleichfalls  für  praktische  Zwecke  die  eben  erwähnten  Soloids  von 
BouRROUGHS  and  Wellcome  nach  Jenner,  und  ist  mit  den  Resultaten 
sehr  zufrieden.  Die  Methode  ist  im  wesentlichen  identisch  mit  der 
von  May-Grünwald.  Für  die  Ausbreitung  der  Blutschicht  ist  4as 
PLEHNSche  Verfahren  des  Ausziehens  eines  Bluttropfens  mittels  eines 
schräg  gehaltenen  Deckglases  sehr  empfehlenswert. 

Scläcfferdccker  {Bonn). 

Haiiseii;  F.  C.  C,  Untersuchungen  über  die  Gruppe  der 
Bindesubstanzeu.     I.    Der    Hyalinknorpel    (Anat. 
Hefte,    H.  83   [Bd.  XXVII,    H.   :?]    1905,    p.  537—820  m. 
5  Figg.   im  Text  u.    10  Tfln.). 
Verf.  bespricht   in    dieser    sehr    umfangreichen  Arbeit    zunächst 
sehr  eingehend  die  bisher  von  anderen  Autoren  angewendeten  Knorpel- 
färbimgen.     Er  hat  eine    sehr    große  Anzahl    von  Färbungen    durch- 
probiert, führt  dieselben  aber  nicht  besonders  auf.     Er  gibt  zunächst 
einige  allgemeine  Sätze  in    bezug  auf  die  Acidophilie  und  Basophilie 
der  Grundsubstanz    des    hyalinen    Knorpels.      1)    Die    Knorpelgruud- 
substanz    enthält    überall    eine  Mischung    basophiler    und    acidophiler 
Stoffe.     2)  Diese  können  sich  gegenseitig  maskieren.     3)  In  der  Regel 
ist  im  frischen   oder   gut   fixierten  Knorpel  (am  besten    mit  Alkohol, 
Formol-Alkohol,  Sublimat,  Sublimat-Essigsäure,  Zenker  scher  Flüssig- 
keit) die  Basophilie  dominierend  und   erstreckt   sich    über  das  ganze 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  8.  28 


434  Referate.  XXII,  3. 

Gebiet,  das  morphologisch  betrachtet,  die  Knorpelgrnndsubstanz  ist.  Die 
Basophilie  als  Totalität  ist  am  stärksten  mitten  im  Innern  des  Knorpels 
und  nimmt  nach  dem  Perichondrium  oder  der  Geleukoberfläohe  hin 
mehr  oder  weniger  ab.  4)  Die  Acidophilie  ist  gewöhnlich  am  meisten 
ausgesprochen  nach  außen  unter  dem  Perichondrium  und  den  freien 
Oberflächen,  wie  auch  um  die  Gefäße  des  Knorpels.  Von  hier  nimmt 
die  Acidophilie  ab,  während  die  Basophilie  zunimmt.  In  der  Tiefe 
des  Knorpels  sind  die  acidophilen  Stofl:e  oft  total  von  den  basophilen 
maskiert,  so  daß  oft  gar  keine  Acidophilie  mehr  angetroffen  wird. 
5)  Gewisse  Strecken  der  Grundsubstauz  sind  mithin  basophil  und 
acidophil  zugleich,  d.  h.  die  Stoffe  haben  einander  nicht  völlig  mas- 
kiert. 6)  Durch  gewisse  Behandlungen  der  Knorpelgrundsubstanz 
kann  man  bewirken ,  daß  diese  ihre  Basophilie  verliert ,  und  (an- 
scheinend ziemlich  unverändert)  überall  stark  acidophil  wird,  selbst 
da,  wo  vorher  keine  Spur  der  Acidophilie  vorhanden  war  (Demas- 
kierung des  acidophilen  Stoffes).  7)  Die  verschiedenen  sauren  und 
basischen  Farbstoffe  zeigen  in  ihrem  Verhalten  gegen  die  Knorpel- 
grundsubstanz bedeutende  Verschiedenheiten.  Nicht  alle  Kom- 
binationen sind  gleich  gut  geeignet.  Die  Verschiedenheiten  der  Farb- 
stoffe lassen  sich  mit  Erfolg  zu  einer  feineren  Analyse  benutzen. 
8)  Die  Knorpelgruud Substanz  färbt  sich  in  der  nicht  zu  starken 
wässerigen  Lösung  gewisser  basischer  Farbstoft'e  metachromatisch  5 
die  wichtigsten  sind :  Methylviolett,  Thionin,  Toluidinblau,  polychromes 
Methylenblau  (oder  eine  Lösung  von  Methylenblau,  die  „Methylen- 
rot"  enthält),  in  diesen  färbt  sie  sich  nämlich  mehr  oder  weniger 
rot,  bezw.  purpurn,  oft  der  Metachromasie  der  Mucine  analog.  Durch 
gewisse  Maßregeln  läßt  die  Metachromasie  sich  aufliebeu.  Wegen 
alles  weiteren  muß  auf  die  sehr  eingehenden  Auseinandersetzungen 
des  Originals  verwiesen  werden.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Schwarz,  G.,    Studien   über   im   großen  Netz    des  Kanin- 
chens   vorkommende    Zell  formen    (Virchows    Arch. 
Bd.  CLXXIX,   1905,  H.  2,  p.  209—265  m.   1  Tfl.). 
Die   Tiere   wurden    durch    Chloroform    getötet,    die    Bauchhöhle 
unter    Vermeidung    von    Blutung    in    dieselbe    geöffnet ,    sodann    ver- 
schiedene Teile  des  Netzes  nach  Maximow  über  abgeschnittene,  mittel- 
weite   Flaschenhälse    gespannt    und    so    in    die    Fixierungsflüssigkeit 
gebracht.    Fixierung  des  Netzes  in  situ  liefert  infolge  von  Schrumpfung 
minderwertige  Präparate.    Bei  Netzen,  die  zu  klein  waren,  um  über 
Flaschenhälse  gezogen  zu  werden ,    suchte   sich  Verf.    durch  vorsieh- 


XXII,  3.  Referate.  435 

tiges  Unterlegen  von  kleinen  Glasplättchen  zu  lielfen  und  spannte  S(» 
die  Präparate  auf.  Zur  Fixierung  erwies  sich  am  besten  warme 
ZENKERsclie  Flüssigkeit.  Nach  Auswaschen  in  Wasser,  Behandlung 
mit  Jodalkohül  von  steigender  Konzentration,  wurden  die  Präparate 
von  dem  Flaschenhalse  gelöst  und  in  beliebig  große  Stücke  zer- 
schnitten. Färbung  nach  verschiedenen  Methoden,  hauptsächlich  mit 
Unnas  polychromem  Methylenblau  und  nachfolgender  Difterenzierung 
in  Glyzerinäther,  mit  Eisenhämatoxylin  nach  Heidenhain,  mit  Pappen- 
iiEiMS  Methylgrün-Pyronin,  modifiziert  nach  Unna,  Ehrlichs  Triacid 
und  Hämatoxylin- Eosin.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Karak.aclieft*,   K.    Iv. ,    Über    das  Verhalten    der    Langer- 
HANSSchen    Inseln    des    Pankreas    bei    Diabetes 
mellitus    (Deutsches    Arch.    f.    klin.    Med.    Bd.  LXXXII, 
1904,  H.  1,  2,  p.  60—89  m.   1   TU.  u.  3  Figg.  im  Text). 
Stücke    von  Kopf,  Körper  und  Schwanz    des   Pankreas   wurden 
in  MüLLER-Formol    (10  Prozent)   gelegt,    nur    bei    einigen  Fällen    in 
FLBMMiNGSche  Flüssigkcit,  dann  steigender  Alkohol,  Celloidin.  Färbung 
der  Schnitte  mit  Hämatoxylin-Eosin,  nach  van  Gieson,  mit  polychromem 
Methylenblau  und  Safranin.     Besonders  geeignet  schien  die  Färbung 
mit  polychromem  Methylenblau   zu   sein,  mit  welchem  die  Zymogen- 
körnchen  sich   dunkel  färben,    so  daß  die  Zellen  der  Drüsenacini  ganz 
dunkel  erscheinen,    während    die    der    Langerhans  sehen   Inseln  hell- 
blau bleiben.     Aber  auch  die  Hämatoxylin-Eosinfärbung  leistete  gute 
Dienste.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Leyeu ,  E.  von  der ,    Über    die  Schleimzone   des  mensch- 
lichen Magen-   und  D  a  r  m  e  p  i  t  h  e  1  s  vor   und    nach 
der  Geburt  (Virchows  Arch.  Bd.  CLXXX,   1905,  No.   1, 
p.  99—107). 
Es  wurde  der  Magen  eines  P^'ötus  von  '21  cm  Länge  untersucht, 
ferner    der   von   Neugeborenen    und    etwas    älteren    Kindern    bis    zu 
einem  Jahre  hin.     Der  Magen  des  Fötus  kam  etwa   16  Stunden  nach 
dem  Abort  in  die  Konservierungsflüssigkeit.    Den  Kindern  wurde,  so- 
weit  es    möglich    war,    möglichst    bald    nach  dem  Tode  eine   lOpro- 
zentige  FormoUösung    in    die  Bauchhöhle    eingespritzt    und   es  wurde 
mittels    eines  Nelaton- Katheters  Formol    in    den  Magen    durch    den 
Mund    eingeführt.      Bei    andern    Fällen,    die    bald    nach    dem    Tode 
seziert  wurden,  wurde  ein  Teil  des  Magens  in   lOprozentige  Formol- 
lösung,   ein    anderer    in    ein  Gemisch  von  Sublimat- Chromsäure  und 

28* 


436  Referate.  XXII,  3. 

Eisessig  gelegt.  Nachgebärtet  wurde  in  Alkohol ,  eingebettet  in 
Paraffin.  Scbuitte  meist  10  fx.  Färbung  mit  Hämatoxylin- Eosin 
und  nach  van  Gieson.  Außerdem  wurden  sämtliche  der  Verfasserin 
bekannte  Schleimfärbemethoden  durchprobiert.  Gute  Resultate  nur 
mit  Thionin  und  Toluidinblau,  die  DissEsche  Färbung  gelang  nicht 
(Ursache  wahrscheinlich  die  etwas  verschiedene  Konservierungsmethode). 
Toluidinblau  färbte  sowohl  nach  Sublimat  wie  nach  Formol,  nach 
letzterem  intensiver.  Mit  Thionin  gefärbte  Präparate  zeigten  in  Wasser 
betrachtet  eine  blaurote  Färbung  des  oberen  Endes  der  Epithelzellen; 
durch  Alkohol  wurde  die  Farbe  sofort  ausgezogen.  Färbt  man  die 
Schnitte  mindestens  24  Stunden  in  einer  verdünnten  wässerigen  Lö- 
sung von  Toluidinblau,  entfärbt  in  verdünntem  Alkohol,  hellt  mit 
BergamottiU  (nicht  mit  Xylol)  auf  und  bettet  in  Kanadabalsam  ein, 
so  färbt  die  Schleimschicht  der  Epithelzellen  sich  dunkelrot-violett 
bis  beinahe  schwarz ,  die  Zellkerne  und  das  übrige  Gewebe  werden 
blau,  die  Mastzellen  rotviolett.  Die  Becherzellen  des  Darms  färbten 
sich  prachtvoll  schwarzviolett.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Illing,    Gr.,    Vergleichende    histologische    Untersuchungen 
über    die    Leber    der    Haussäugetiere  (Anat.  Anz.  Bd. 
XXVI,   1905,  No.  7,  8,  p.  177  —  193  m.   1   Fig.). 
Die  Untersuchungen    erstreckten    sich    auf   eine   größere  Anzahl 
verschiedener  Haussäugetiere.     Den    soeben    getöteten  Tieren   wurde 
die    Leber    lebenswarm    entnommen    und    es    wurden    würfelförmige 
Stücke    von    nicht    mehr  als  0*5  cm  Seite    sofort    in    die  Fixierungs- 
flüssigkeit  gebracht:     Heiß  gesättigte  Sublimat-Kochsalzlösung,  Zen- 
ker sehe  und  Müller  sehe  Flüssigkeit.     Die  erste  war  die  geeignetste, 
die  zweite  ging  auch  noch  an,  die  dritte  ergab  keine  guten  Resultate. 
Nachhärtung  in  Alkohol.     Paraffineinbettung.     Schnitte  von  5  jii  Dicke. 
Färbung  mit  Hämatoxylin-Eosin  oder  Hämatoxylin -Kongorot. 

Schiefferdecker  (Bonn). 

Wllttig,  H.,  Experimentelle  Untersuchungen  über  F  e  1 1  - 

aufnähme     und    Fettablage  r  ung    (Beitr.    z.    pathol. 

Anat.  u.  z.  allgem.  PathoL  Bd.  XXXVII,  1905,  H.  2,  p.  378 

—410  m.   1   Tri.  u.   3  Figg.  im  Text). 

Ausgewachsenen    großen    Kaninchen    wurden    in    Chloralhydrat- 

narkose   je    2  cc    sterilisiertes    auf    37^  erwärmtes  Olivenöl   in    eine 

mittelgroße  Mesenterialvene,   einmal  auch  in  die  Vena  lienalis  injiziert. 

Nach  5  bis   12  Tagen  Tötung   der  Tiere    durch  Nackenschlag,     l'in 


XXII,  3.  Referate.  437 

die  Leber  möglichst  ihres  physiologischen  Fettgehaltes  zu  entledigen, 
wurden  die  Tiere  mit  Ausnahme  eines  Kontrolltieres  3  Tage  vor 
dem  Tode  dem  Hunger  ausgesetzt.  Unmittelbar  nach  dem  Tode 
wurden  Stücke  in  Formol  und  Flemming scher  Flüssigkeit  fixiert, 
erstere  wurden  gefroren  geschnitten ,  letztere  in  Celloidin  oder  Pa- 
raffin eingebettet.  Gefärbt  wurde  mit  Sudan  III  und  Scharlach  R  in 
konzentrierter  alkoholischer  (70prozentiger)  Lösung,  die  Fixierung  in 
Osmiumsäure  wurde  mehr  zum  Vergleiche  verwendet.  Scharlach  und 
Sudan  III  sind  vollständig  gleichwertig;  die  Schnitte  wurden  her- 
gestellt mit  einem  Jung  sehen  sogenannten  Studentenmikrotome  mit 
Kohlensäure -Gefrierkammer.  Bei  guter  Formolhärtuug  und  darauf- 
folgender Auswässerung  gelingt  es  so ,  von  jedem  Organ  genügend 
dünne  Schnitte  herzustellen,  um  eine  Ölimmersion  zu  verwenden. 

Schieffei'decker  {Bonn). 

Srdillko,  0.  T.,  Eine  sichere  Methode  zur  Differen- 
zierung der  Rinden-  und  Markelemente  der 
Nebenniere,  besonders  bei  Säugetieren  und 
Menschen  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905,  No.  6,  p.  172 
—174  m.  1  Fig.). 
Verf.  hebt  hervor,  daß  die  Chromreaktion  bei  der  Untersuchung 
der  Nebenniere  von  Säugetieren  und  vom  Menschen  vollständig  im 
Stiche  läßt,  da  die  dritte  Schicht  der  Rinde  (die  Zona  reticularis) 
von  Natur  braun  gefärbt  ist,  gerade  so  wie  die  Zellen  der  Mark- 
substanz nach  Chrom-Salzsäurelösung.  Verf.  hat  seine  früher  schon 
angegebene  Hämatoxylinmethode  infolgedessen  soweit  vervollkommnet, 
daß  man  selbst  Gruppen  oder  einzelne  in  der  Rindenschicht  ein- 
gestreute Markzellen  sicher  unterscheiden  kann.  Methode:  Die 
Nebenniere  des  Menschen  wird  sobald  als  möglich  nach  dem  Tode 
herauspräpariert  (längstens  24  Stunden)  und  in  eine  4-  bis  öprozen- 
tige  Formollösung  gebracht  für  7  bis  14  Tage,  Erneuerung  der 
Lösung  alle  2  Tage.  Kurzes  Auswaschen  (etwa  30  Minuten)  in 
destilliertem  Wasser,  70prozentiger  Alkohol  24  Stunden,  90prozen- 
tiger  Alkohol  für  die  Dauer,  bis  zur  Einbettung  in  Celloidin  oder 
Paraffin.  Färbung  der  Celloidinschnitte  mit  der  reifen  Böhmer  sehen 
Hämatoxylinlösung  (nach  dem  Rezept  der  Friedländer  sehen  Technik, 
p.  104),  die  Zeit  der  Färbung  schwankt  zwischen  einer  bis  10  Mi- 
nuten. Die  überfärbten  Schnitte  zeigen  zwar  schon  makroskopisch 
eine  Differenzierung  zwischen  Mark-  und  Rindensubstanz,  eignen  sich 
aber    nicht    zu    histologischen    Untersuchungen.     Am   zweckmäßigsten 


438  Referate.  XXII,  3. 

färbt  man  in  einer  Mischung-  der  genannten  Häraatoxylinlösnng  mit 
destilliertem  Wasser  zu  gleichen  Teilen  etwa  5  Minuten ,  dann  Aus- 
waschen von  5  Minuten  in  destilliertem  Wasser,  dann  schließlich 
Einschluß  in  Kanadabalsam.  f]ventuell  kann  man  solche  Präparate 
auch  noch  mit  Eosin  färben.  Diese  Hämatoxylinlösung  kann  man 
auch  nach  andern  Fixierungsflüssigkeiten  verwenden,  so  nach  Sublimat 
oder  Lösung   von  Carnoy,    nach  Formol  wirkt   sie    aber   am   besten. 

Schiefferdecker  {Bon  n) . 

Pensa,  A.,  Osservazioni  sulla  distribuzione  dei  vasi 
sanguigni  e  dei  nervi  nel  pancreas  (Intern.  Monats- 
schr.  f.  Anat.  u.  Physiol.  Bd.  XXII,  1905,  H.  1— 3,  p.  90—126 
m.  6  Tfln.  u.  5  Figg.). 
Verf.  hat  Tiere  aus  allen  Wirbeltierklassen  untersucht.  Die 
Blutgefäße  wurden  entweder  an  dem  injizierten  Pankreas  studiert 
oder  besonders ,  um  die  Beziehungen  zwischen  den  Blutgefäßen  und 
den  Elementen  der  Langerhans  sehen  Inseln  festzustellen,  einfach 
nach  Fixierung  und  Färbung  mit  den  gewöhnlichen  Methoden.  Zur 
Fixierung  wurden  verwendet:  die  Flüssigkeit  von  Mingazzini,  die 
von  GiLSON,  die  von  Rabl,  Sublimat- Essigsäure  (5-  bis  lOprozentige 
Essigsäure),  Zenker  sehe  Flüssigkeit,  Hermann  sehe  Flüssigkeit,  Flem- 
MiNGSche  Flüssigkeit,  die  vier  letzten  erwiesen  sich  als  die  besten. 
Gefärbt  wurde  außer  mit  den  gewöhnlichen  Methoden  mit  dem  Eisen- 
hämatoxylin  von  Heidenhain,  nach  der  Methode  von  Mann,  der  von 
BiONDi,  der  von  Galeotti.  Injiziert  wurde  mit  der  Karmingelatine 
von  Ranvier  (Traite  teclinique  d'histologie ,  p.  103)  der  Karmin- 
gelatine von  Fol  (Zeitschr.  f.  wiss.  Zoologie  1883),  der  Berlinerblau- 
Gelatinemasse  von  Ranvier  (Traite  technique  d'histologie ,  p.  106), 
der  blauen  Leiminjektionsmasse  von  Grübler  ,  der  roten  Leiminjek- 
tionsmasse (nach  Spalteholz)  von  Grübler.  Die  Injektionen  wurden 
ausgeführt  bei  den  Fischen  vom  Bulbus  arteriosus  aus ,  bei  den 
Reptilien  und  Vögeln  direkt  vom  Herzen  aus ,  bei  den  Säugetieren 
vom  letzten  Ende  der  Aorta  abdominalis  aus.  Die  Veneninjektionen 
wurden  ausgeführt  von  einigen  Ästen  der  Venae  meseutericae  aus. 
Alkoholhärtung  und  Celloidineinbettung.  Um  die  Langerhans  sehen 
Inseln  deutlich  zu  machen,  bediente  sich  Verf.  der  Thionin- Karbol- 
färbung von  Grand- Mourcel  und  Tribondeau^  oder  der  aufeinander- 
folgenden Färbung  mit  Thionin   und  Pikrinsäure  von  Perdigeat  und 

1)  C.  R.  de  hl  Soc.  d.  Biol.  t.  LIII,  no.  7,  Paris. 


XXII,  3.  Referate.  439 

Triboxdeau.  ^  Gute  Gefäßinjektionen  wurden  auch  erhalten  durch 
ziemlich  allmähliche  Injektion  von  Leinöl  und  darauffolgende  Fixierung 
in  osmiumhaltigen  Flüssigkeiten  (Hermann scher  und  Flemming scher 
Flüssigkeit).  Auch  diese  Stücke  können  in  Paraffin  eingeschlossen, 
geschnitten  und  mit  allen  jenen  Färbungen  behandelt  werden,  welche 
nach  diesen  F'ixierungsflüssigkeiten  anwendbar  sind.  Diese  Methode, 
welche  eine  ausgezeichnete  Fixierung  und  gute  Färl)ungen  gestattet, 
erwies  sich  besonders  vorteilhaft  bei  der  Untersuchung  der  genauen 
Beziehungen  zwischen  den  Blutgefäßen  und  den  Elementen  der  Langer- 
hans sehen  Inseln.  —  Zum  Studium  der  Nerven  verwandte  Verf.  die 
direkte  und  die  indirekte  schnelle  GoLGische  Chromsilbermethode. 
Mit  der  schnellen  indirekten  Methode  waren  die  Resultate  feiner  und 
vollständiger.  Am  praktischsten  erwies  sich  dabei  die  Behandlung 
mit  einer  halbgesättigten  Lösung  von  Kupfersulfat  und  darauffolgender 
Übertragung  der  Stücke  in  Kaliumbichromat  vor  der  Übertragung  in 
Silbernitrat.  Scliiefferdecker  {Bonn). 

Schmidt,  J.  E. ,    Beiträge   zur  normalen  und  pathologi- 
schen Histologie  einiger  Zellarten  der  Schleim- 
haut   des    menschlichen    Darmkanales     (Arch.    f. 
mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,   1905,  p.  12  —  40  m.   1  Tfl.). 
Außer  Sublimatmaterial  wurde  hauptsächlich    das   in   einem  Ge- 
misch   aus  MtJLLER scher  Flüssigkeit   und  Formol    fixierte    untersucht, 
daneben    solches    aus   10-  oder  4prozentigem  Formol    und    aus  Alko- 
hol.    Die    mit    Glyzerin- Eiweiß    aufgeklebten  Schnitte  wurden    meist 
mit  Hämatoxylin-Eosiu ,  Hämatoxylin-Mucikarmin ,    Alaunkarmin    oder 
nach  VAN  Gieson  gefärbt.  E.   Schoebel  {Neapel). 

Abrikossoff,  A.  J. ,    Über   die   ersten  anatomischen  Ver- 
änderungen   bei    Luugenphthise    (Virchow s    Arch. 
Bd.  CLXXVIII,   1904,  H.  2,  p.  173— 263' m.   1  Tfl.). 
Es    wurden  Stückchen    aus    den  Lungen   und  Lymphknoten  ein- 
gelegt.    Zum  Zwecke    des  Studiums    der  Verbreitung    der  Tuberkel- 
bazillen   aus    den    tuberkulösen  Drüsen  wurden  Stücke   aus    letzteren 
zusammen    mit    den    anliegenden    Bronchial-    und    Gefäßwänden    ent- 
nommen ;    Härtung  in  öprozentiger  FormoUösuug ,  Celloidin-,  seltener 
Paraffineinbettung;    Färbung    der  Schnitte    mit  Hämatein    und  Eosin, 


^)  Extrait   des   proces    verbaux    de   la    Soe.  Linneenne  de  Bordeaux, 
t.  LV,  seance,  26  oct.  1900. 


440 


Referate.  XXII,  3. 


sowie  auf  Tuberkelbazillen  nach  Ziehl.     Lungeiistückchen  wurden  in 
der  ersten  Zeit  gehärtet  in  der  von  Arrigo  und  Stampachia  speziell 
für  tuberkulös  affizierte  Gewebe  empfohlenen  Flüssigkeit:    Nach  der 
Ansicht    dieser  Autoren    wird    durch  Härtung    in    2prozentiger    spiri- 
tuöser  (90prozentiger)  Pyrogallussäurelösung  eine  vollendetere  Färbung 
der  Tuberkelbazillen  erzielt   und  weniger   als  mit  andern  fixierenden 
(Spirituosen)    Flüssigkeiten    das  Gewebe    zur    Schrumpfung    gebracht. 
Verf.  überzeugte  sich  indessen,  daß    bei  Verwendung  der  genannten 
Flüssigkeit  das  Pyrogallol  die  Eigenschaft  besitzt,  die  Gewebe  braun 
zu  färben ;  diese  Färbung  bleibt  sogar  nach  gründlicher  Spülung  mit 
Alkohol  zurück   und  ist  bei  der  nachfolgenden  Färbung  der  Schnitte 
sehr  störend;    ferner  erhält  man  bei  Einbettung  der  Stücke,  welche 
eine    käsige    Masse    enthalten    und    in    der    PyrogalloUösung    fixiert 
worden    sind,    in    Paraffin    eine    so    feste    Konsistenz,    daß    Schnitte 
schwer    herzustellen    sind.      Die    HAVEMSche    Sublimatlösung   ist    nur 
für  sehr  kleine  Stückchen  brauchbar  und  unterscheidet  sich  in  ihrer 
Wirkung    nicht    von    der    gewöhnlichen  Sublimatlösung   in  physiologi- 
scher Kochsalzlösung.     Verf.  hat  weiter   die  Methode  von  Aufrecht 
geprüft :  Härtung  in  öprozentiger  Lösung  von  Kaliumbichromat,  Auf- 
leimen   des   Stückchens    zum    Schneiden    auf   einem  Kork;    diese    ist 
(ohne    Einbettung    in    Celloidin    oder    Paraffin)    völlig    untauglich    für 
feine  Schnitte  oder  Serienschnitte.     Da  Verf.  häufig  Stücke   von   be- 
deutender Dicke    zu    härten    hatte,    benutzte    er    am    häufigsten  eine 
,'iprozentige  Formollösung:  Nur  wo  es  möglich  war,  ein  sehr  kleines 
Stückchen  zu  nehmen,    verwandte    er   eine  gesättigte  Sublimatli)sung 
in   Kochsalzlösung   (24  Stunden   im  Ofen  bei  37*^).     Verf.  hebt  her- 
vor, daß  bei  vergleichender  Bazillenfärbung  ein  Unterschied  zwischen 
der  Härtung  nach  Arrigo  und  Stampachia  und  der  einfachen  Formol- 
härtung nicht  zu  finden  war.     Sämtliche  Lungenstückchen  wurden  in 
Paraffin    eingebettet,    die  Serienschnitte   auf  den  Objektträgern  nach 
Gaule  aufgeklebt,  das  Paraffin  mit  Xylol  entfernt.    Zur  Probefärbung 
wurde  Hämatein  und  Eosin  verwendet.     Um  die  Strukturverhältnisse 
in  dem  von  dem  tuberkulösen  Prozesse  befallenen  Bezirke  des  Lungen- 
gewebes   mögliclist    klar    zu    stellen,    wurden   die  Serienschnitte    mit 
Methoden  zur  Färbung  des  elastischen  Gewebes  behandelt :  Entweder 
der   Weigert  sehe  Farbstotf   mit    vorhergehender  Karminfärbung    der 
Kerne  oder  weit  häufiger  der  von  Minervini.    Bei  letzterem  entfärbt 
sich    bei    der  Differenzierung    das   übrige  Gewebe  viel  vollkommener 
als  bei  der  WEiGEUTSchen  Methode,  -es   treten  daher  die  elastischen 
Fasern    sehr    deutlich   bis    zu    ihren    feinsten  Verzweigungen    hervor. 


XXIT,  3.  Referate.  441 

Ferner  werden  die  Kerne  bei  der  Minervini sehen  Methode  vorlier 
mit  HämateVn  gefärbt,  wodurch  ein  weit  deutlicheres  Bild  entsteht 
als  bei  der  Karrainfärbung  mit  der  WEiGERx-Methode.  Ferner  färbte 
Verf.  auf  Tuberkelbazillen  :  Aus  der  nach  Minervini  gefärbten  Serie 
Avurde  jeder  10.  bis  20.  Schnitt  genommen,  der  Reihe  nach  auf  den 
Objektträger  gebracht  .und  nach  Ziehl  gefärbt.  Sehr  schöne  Prä- 
parate wurden  bei  kombinierter  Färbung  der  elastischen  Fasern,  Ba- 
zillen und  Zellkerne  erhalten :  Färbung  der  Serienschnitte  (auf  Objekt- 
trägern) in  Karbolfuchsin  nach  Ziehl  (30  Minuten  im  Ofen  bei  37''), 
Entfärbung  mit  25prozentiger  Schwefelsäurelösung,  gründliches  Aus- 
waschen in  Wasser,  Färbung  in  der  Lösung  von  Minervini  (4.5  bis 
60  Minuten),  Differenzierung  in  85prozentigem  Alkohol,  Kernfärbung 
in  wässeriger  Methylenblaulösung.  Die  rosarot  gefärbten,  elastischen 
Fasern  waren  gut  von  den  himbeerrot  gefärbten  Bazillen  zu  unter- 
scheiden. Schiefferdecker  {Bonn). 

Pigllini,  G. ,  Sur  l'origine  et  la  formation  des  ceUules 
nerve uses  chez  les  embryons  des  Selaciens 
(Bibliogr.  anat.  t.  XIV,  1905,  fasc.  1,  p.  94—105  av. 
3  figg.). 
Die  Untersuchungen  des  Verf.  beziehen  sich  auf  folgende 
sechs  Arten:  Pristiurus  melanostomus ,  Torpedo  ocellata,  Scyllium 
canicula,  Scyllium  catulus,  Mustelus  vulgaris,  Mustelus  laevis.  Fixiert 
wurde  stets  mit  einer  gesättigten  Sublimatlösung.  In  dieser  ver- 
blieben die  kleinsten  Embryonen  (nicht  größer  als  6  bis  7  mm) 
eine  halbe  Stunde';  die  größeren  (von  8  bis  14  m)  eine  Stunde; 
solche  über  2  cm  höchstens  3  Stunden;  diese  letzteren  wurden  außer- 
dem der  Quere  nach  in  Stücke  von  3  bis  4  mm  Dicke  zerlegt,  um 
die  Fixierungsflüssigkeit  besser  eindringen  zu  lassen.  Was  die  Färbung 
anlangt ,  so  wird  diese  verschieden  ausgeführt ,  je  nach  der  Größe 
der  Embryonen.  Die  Embryonen,  welche  nicht  größer  als  3  cm 
sind ,  werden  in  toto  gebeizt ,  bei  denen  über  3  cm  beizt  man  die 
Schnitte.  Weitere  Behandlung:  1)  Embryonen  von  4  bis 
30  m  ra.  Aus  dem  Jodalkohol  überträgt  man  in  destilliertes  Wasser, 
das  man  während  der  15  bis  30  Minuten  des  Auswaschens  zweimal 
wechselt.     Dann  überträgt  man  in  die  folgende  Beize : 

Sublimat,  4prozentige  Lösung 10  cc 

Ammonluramolybdat  (Merck),  4proz6ntige 

Lösung 40    ,, 

Salzsäure 12  Tropfen. 


442  Referate.  XXII,  3. 

Je  nach  ihrer  Länge  verbleiben  die  Elmbryonen  darin  2  bis  6  Stun- 
den; dann  gründliches  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser  (1  bis 
3  Stunden),  dann  steigender  Alkohol,  Xylol,  Einschluß  in  Paraffin 
(Temperatur  nicht  über  52*^),  Färbung  der  Schnitte  in  einer  Lösung 
von  Thionin  oder  Toluidinbhiu  von  1  :  5000.  Die  Thioninlösung  ist 
vorziehbar.  Nachdem  die  Präparate  15  Minuten  in  der  Farbflüssig- 
keit gewesen  sind ,  muß  man  die  weitere  Färbung  mit  dem  Mikro- 
skope kontrollieren.  Ist  die  Färbung  genügend,  so  werden  die  Schnitte 
schnell  in  Wasser  abgewaschen  und  für  einige  Sekunden  in  gewöhn- 
lichen Alkohol  (alcool  ordinaire)  gebracht,  um  eine  schärfere  Differen- 
zierung zu  erhalten.  Neues  Eintauchen  in  Wasser  und  Übertragen 
für  15  Minuten  in  eine  4prozentige  Lösung  von  Ammoniummolybdat, 
der  man  2  bis  3  Tropfen  Salzsäure  zusetzt;  hierdurch  wird  die 
Farbe  stark  fixiert ;  dann  sorgfältiges  Auswaschen  in  Wasser ,  Ent- 
wässerung in  steigendem  Alkohol,  Xylol,  Balsam.  2)  Embryonen 
von  mehr  als  3  cm  Länge.  Nach  Jodalkohol  steigender  Alkohol 
und  Paraffineinschluß.  Die  mit  Wasser  auf  deu  Objektträger  auf- 
geklebten Schnitte  kommen  für  wenigstens  18  Stunden  in  die 
fols'ende  Beize : 


*o 


Sublimat,  4prozentige  Lösung 50  cc 

Ammoniummolybdat  (Merck),  4prozentige 

Lösung 100    „ 

Salzsäure 25  Tropfen. 


Nach  gründlichem  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser  färbt  man 
wie  oben.  —  Bei  dieser  Methode  werden  alle  Elemente  des  Nerven- 
systems samt  ihren  Fortsätzen  gefärbt,  und  man  vermag  diese  letz- 
teren zu  verfolgen  von  dem  ersten  Stadium  der  bipolaren,  spindel- 
förmigen Zelle  an  (von  den  Zellen ,  welche  zuerst  die  Nervenrinne 
bilden)   bis   zu   der  Differenzierung  in  Nerven-  oder  Neurogliafasern. 

Schiefferdecker  {Bonn). 

Valedinsky,  I.  A.,  Zur  Frage  über  die  Nervenknoten  im 

Herzventrikel   einiger  Säugetiere.     Vorläufige 

Mitteilung   (Anat.  Hefte,    Heft   81    [Bd.    XX VH,    H.    1] 

1904,  p.   287—293  m.   2  Tfln.). 

Es  ist  immer  noch  zweifelhaft,   ob  und  in  welcher  Ausdehnung 

sich  Nervenknoten  im  Herzen   finden.     Verf.   hat    daher    von    neuem 

diese  Frage  in  Angriff  genommen.     Das  Herz    eines    eben    getöteten 

Tieres    wurde    in    Tprozentige    wässerige    KarboUösuug    getan    (nach 

Shuk).    Diese  Prozentzahl  entspricht  nicht  der  Löslichkeit  des  Phenols, 


XXII,  3.  Referate.  443 

die  etwas  niedriger  liegt.  So  wurden  die  Nerven  des  Ventrikels  ge- 
liärtet  nnd  traten  auf  der  ganzen  Oberfläche  sehr  deutlich  hervor. 
In  ihrem  Verlaufe  teilen  sich  die  Nerven  vielfach  und  bilden  Anasto- 
mosen mit  benachbarten  Nervenstämmen.  Im  Verlaufe  der  Stämme 
und  häutiger  noch  an  den  Stellen  der  Anastomosen  können  mit 
bloßem  Auge  sichtbare  Verdickungen  wahrgenommen  werden.  Nach 
genügender  Einwirkung  der  Karbolsäurelösung  (die  Zeitdauer  ist  nicht 
angegeben)  befreite  Verf.  in  einem  Teile  der  Fälle  mittels  einer 
anatomischen  Pincette  irgendeinen  Nervenstamm  von  dem  ihn  um- 
gebenden Gewebe  des  Perikards,  zog  ihn  hervor  und  legte  ihn  auf 
24  Stunden  in  Pikrokarmin,  dann  leichtes  Abspülen  in  Wasser,  an- 
gesäuertes Glyzerin,  Zerzupfen  in  diesem  mit  Nadeln,  Aufheben  in 
demselben  Glyzerin.  In  einem  anderen  Teile  der  Fälle  schnitt  Verf. 
den  Nerven  mit  einem  Teile  des  Perikardiums  und  Myokardiums 
aus  und  bettete  die  Stückchen  in  Celloidin  ein ;  dann  Mikrotomschnitte 
parallel  der  Oberfläche  des  Perikards,  Färbung  mit  Hämatoxylin-Eosin. 
Die  erstere  Behandlung  wurde  da  angewendet ,  wo  die  Nerven  des 
Ventrikels  mehr  oder  weniger  dick  waren,  häufige  Verdickungen  auf- 
wiesen und  sich  leicht  zerzupfen  ließen ,  wie  dieses  in  den  oberen 
Teilen  des  Ventrikels  der  Fall  ist.  Die  zweite  Art  der  Behandlung 
wurde  angewendet  bei  der  Untersuchung  der  Herzspitze,  wo  die  Nerven 
dünn  sind  und  der  Herstellung  von  mikroskopischen  Zupfpräparaten 
größere  Schwierigkeiten  bieten.  Schiefferdecker  [Bonn). 

Ramöu  y  Cajal,  S.,  y  Grarcia,  D.  D.,   Las  lesiones  del  reti- 
culo    de    las    c  einlas  nerviosas  en  la  rabia  (Trab. 
Labor.  Investig.  Biol.  Madrid  t.  III,   1904,  fasc.  4,  p.  213 
—266  c.   28  figg.). 
Um  die  Veränderungen   in   den  Nervenzellen  bei  der  Hundswut 
(Kaninchen,  Hund)  festzustellen,  kann  man  zunächst  die  gewöhnliche 
von  Cajal  angegebene  Methode   benutzen :    Die  Stücke   kommen   für 
3  Tage   in   eine  Silberlösung  von   1*5  Prozent  (im  Ofen  bei  28  *'  bis 
40*^),  kurzes  Abwaschen  in  destilliertem  Wasser,  24  Stunden  in  die 
Pyrogallol-Formolmischung,  dann  Abwaschen  in  Wasser  ein  paar  Mi- 
nuten lang,   6  Stunden  in  Alkohol,  dann  Aufkleben  der  Stücke,  ohne 
sie    in  Celloidin    einzubetten,    mit    einem    heißen  Skalpell    auf   einen 
Parafiinblock.     Von  den  Schnitten,  die  man  auf  diese  Weise  erhält, 
soll  man  weder  die  oberflächlichen  noch  die  tiefen,  sondern  die  mitt- 
leren untersuchen,  welche  hellbraun  gefärbt  sind.     Auf  diese  Weise 
färben    sich    die    hypertrophischen  Neurofibrillen    bis    zu    den  kleinen 


444  Referate.  XXII,  3. 

Nervenzellen  liin.  Indessen  muß  man ,  um  gute  Präparate  zu  er- 
halten, die  folgenden  Regeln  beobachten:  1)  Die  Stücke  des  Nerven- 
gewebes dürfen  höchstens  2  bis  3  mm  dick  sein,  und  es  dürfen  nicht 
mehr  als  5  bis  6  in  die  Silberlösung  eingelegt  werden.  2)  Die 
Menge  der  Silberlösung  soll  groß  sein  im  Verhältnis  zu  den  Stücken; 
so  soll  man  z.  B.  für  4  bis  6  Nervenstückchen  150  bis  200  cc  der 
Silberlösung  verwenden.  3)  Wenn  man  am  Hunde  arbeitet,  und  die 
Nervenstücke  verhältnismäßig  groß  sind ,  so  soll  man  dieselben  in 
verschiedene  Stücke  zerlegen  und  die  Einwirkungszeit  der  Silber- 
lösung vergrößern  (um  einen  bis  2  Tage).  —  Wenn  man  nicht  sehr 
rasch  arbeiten  muß,  ist  die  Methode  mit  Fixierung  in  Alkohol  noch 
vorziehbar.  Man  erhält  mit  dieser  eine  größere  Anzahl  von  brauch- 
baren Schnitten ,  fast  durch  das  ganze  Stück  durch ,  mit  einziger 
Ausnahme  der  oberflächlichsten.  Man  erhält  ferner  neben  dem  Zell- 
netze auch  alle  markhaltigen  und  einen  großen  Teil  der  marklosen 
Nervenfasern  gefärbt.  Man  erhält  weiter  in  vielen  Zellen  eine  sehr 
scharfe  und  ausschließliche  Färbung  der  hypertrophischen  Neuro- 
fibrillen. Endlich,  und  das  ist  ein  unschätzbarer  Vorteil,  kann  man 
für  diese  Färbung  auch  Stücke  verwenden ,  die  schon  eine  Reihe 
von  Tagen  in  Alkohol  gelegen  haben ,  und  das  ist  bei  den  Verhält- 
nissen, welche  notwendigerweise  in  den  zur  Heilung  der  Hundswut 
errichteten  Instituten  herrschen,  sehr  wichtig.  Die  Organe  des  Nerven- 
systems werden  am  besten  in  einem  Alkohol  von  40^  (Cartier)  oder 
in  absolutem  Alkohol  gehärtet.  Im  übrigen  wird  nach  den  früher  von 
Cajal  gemachten  Angaben  verfahren.  ScMefferdecker  {Bonn). 


ßamon  y  Cajal,  S.,  N  e  u  r  o  g  1  i  a  y  n  e  u  r  o  f i  b  r  i  1 1  a  s  d  e  1  l u  m  - 
bricus    (Trab.  Labor.  Investig.  Biol.  Madrid  t.  III,   1904, 
fasc.  4,  p.  277—285   c.   4  iigg.). 
Die    nervösen  Organe    von  Lumbricus    müssen  eine  andere  che- 
mische Beschaffenheit  besitzen  als  die  von  Hirudo,  denn  sie  ergeben 
mit  der  von  Cajal  angegebenen  Silbermethode  nieüaals  eine  Färbung 
der  Neurofibrillen,  wie  sie  bei  Hirudo  so  gut  gelingt.     Die  gewöhn- 
liche Methode    (direkte  Silberfärbung  in  3-  bis  Gprozentiger  Lösung, 
3   Tage  im  Ofen)    läßt  nur  die  Holmgren sehen  Kanälchen   vortreten. 
Dagegen  ergibt  sich  eine  schöne  Neurogliafärbung,   wenn  man  vorher 
mit  P^ormol  oder  mit  Formol  und  Ammoniak  fixiert:    1)  Stücke  vom 
Regenwurm   kommen    für    24  Stunden    bei    Stubentemperatur    in    die 
folgende  Mischung:    Destilliertes  Wasser  40  cc ;  Formol   10  cc;  Am- 
moniak 4  bis  6  Tropfen.     2j  Mehrstündiges  Auswaschen  der  Stücke 


XXII,  3.  Referate.  445 

ia  destilliertem  Wasser.  3)  Übertragen  in  eine  Sprozentige  Silber- 
lösimg,  4  bis  5  Tage  im  Ofen  bei  30*'  bis  35**.  4)  Reduktion  in 
der  Pyrogallol-Formolmisclmng  etc.  Wenn  man  die  Stücke  nach 
Behandlung  mit  der  für  die  Forraol -Ammoniakfixierung  angegebenen 
PyrogalloUösung  6  bis  24  Stunden  lang  in  Alkohol  legt,  und  dann 
in  eine  0"2prozentige  Lösung  von  neutralem  Goldchlorid  (für  2  Tage), 
so  erhält  mau  eine  violette  Imprägnierung  der  Neurofibrillen  in 
den  Clanglienzellen.  Diese  Reaktion  entsteht  durch  den  Nieder- 
schlag des  Goldes  durch  den  Rest  des  Pyrogallols ,  der  von  dem 
Alkohol  aus  den  Stücken  nicht  ausgezogen  worden  ist.  Wie  alle 
Goldfärbungen  der  Neurofibrillen,  so  ist  auch  diese  unsicher.  In  den 
wenigen  Fällen,  in  denen  Verf.  gute  Präparate  erhalten  hat,  handelte 
es  sich  immer  um  kleine  oder  junge  Regenwürmer.  Verf.  ist  noch 
dabei ,  die  Bedingungen  zu  untersuchen  ,  welche  für  die  Herstellung 
guter  Präparate  nötig  sind.  ScMefferdecker  [Bonn). 

Tarela  de  la  Iglesia ,  ß. ,    C  o  n  t  r  i  b  u  c  i  ('>  n    a  1    e  s  t  u  d  i  o   d  e  1  a 

medula   espinal   (102  pp.,    c.   22    laminas    en    fototipia. 
Madrid   1904,  Ricardo  Fe   [Der  Text  ist  spanisch  und  fran- 
zösisch]). 
Verf.    hat    versucht    das  Nervenmark  aufzulösen    und    dann    die 
gewöhnlichen  Färbungsmethoden    mehr   oder    weniger    modifiziert  an- 
zuwenden.     Die    Rückenraarkstücke    wurden    fixiert    in   MtJLLER  scher 
Flüssigkeit  und  dann  in  steigendem  Alkohol  gehärtet  in  gewöhnlicher 
Weise ;    noch    besser    wirkt  die  Fixierung    in   der  Kultschizky sehen 
Flüssigkeit.     Auch  "kann  man  in  einer  gesättigten  Lösung  von  Kupfer- 
acetat    und  Kaliumbichromat    in   50prozentigem  Alkohol   fixieren   und 
dann    in    steigendem  Alkohol    nachhärten ,    wobei   man  jede  Lichtein- 
wirkung vermeidet.    Auch  die  Methode  von  IIaug^  liefert  sehr  schöne 
Resultate.    Alle  Flüssigkeiten,  bei  denen  Kupfersalze  verwendet  wer- 
den ,    sind    brauchbar.      Die    fixierten ,    gehärteten    und    entwässerten 
Objekte  wurden  für  einige  Tage  in  Schwefelkohlenstoff  oder  Chloro- 
form gebracht.     Sodann    Avurden    die  Stücke    in   immer  stärker  kon- 
zentrierte  Lösungen    der    Einbettungsmasse    gebracht ,    schließlich    in 
diese  in  reinem  Zustande  bis  sie  durchtränkt  waren.    Als  Eiubettungs- 
masse    wurde    im    allgemeinen   Pfianzenwachs  („Gera  vegetal",   „cire 
vegetale"),  welches  in  bestimmter  Weise  behandelt  war,  verwendet. 
Verf.    gibt    verschiedene  Methoden    an ,    um    dieses  Pflanzenwachs  in 


1'  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  VII,  1890.  p.  154. 


446  Referate.  XXII,  3. 

richtiger  Weise  herzustellen.  Er  hat  jene  Sorte  genommen,  welche 
in  seiner  Heimat  (Santiago)  als  „cera  del  Japon"  bezeichnet  wird. 
Eine  sehr  gute  Masse  wurde  aus  diesem  Stoife  erhalten  durch  Be- 
handlung derselben  mit  Chloroform.  Welche  Methode  der  Behand- 
lung dieses  Pflanzenwachses  auch  angewandt  wurde,  so  wurde  schließ- 
lich die  Masse  von  ihren  flüssigen  Teilen  durch  Auspressen  befreit 
und  auf  ein  Schälchen  gebracht,  das  man,  bis  zur  völligen  Verdunstung 
der  Flüssigkeit,  in  den  Ofen  stellte.  Wurde  Paraffin  angewendet, 
so  wurde  Schwefelkohlenstoff  als  Lösungsmittel  gebraucht,  bei  Pflanzen- 
wachs dagegen  Chloroform.  Die  5  bis  10  ju  dicken  Schnitte  wurden 
auf  dem  Deckgläschen  befestigt,  bald  mittels  des  STRASSERschen 
Kollodiums  No.  0^,  bald  mittels  der  Methode  von  Fraenzel^  (Lösung 
von  Gummi  arabicum  mit  Zusatz  von  wässeriger  Lösung  von  Chrom- 
alaun). Die  so  behandelten  Deckgläschen  wurden  in  Chloroform 
gebracht  zur  Härtung  des  Kollodiums,  zur  Lösung  des  Pflauzeuwachses 
und  hauptsächlich  zur  Einwirkung  auf  das  Nervenmark  (12  bis  24  Stun- 
den mit  zwei-  bis  dreimaliger  Erneuerung  der  Flüssigkeit,  ein  längerer 
Aufenthalt  schadet  nichts).  Mit  Schwefelkohlenstoff  wurde  ebenso 
verfahren,  und  zwar  noch  nach  der  Behandlung  mit  Chloroform. 
Dann  wurden  die  Deckgläschen  an  der  Luft  liegen  gelassen,  bis  der 
Schwefelkohlenstoff  vollständig  verdunstet  war,  darauf  wurden  sie 
mit  einer  Mischung  von  gleichen  Teilen  von  96-  bis  98prozentigem 
Alkohol  und  Benzin  befeuchtet  und  darauf  mit  95prozentigem  Alkohol. 
Hierauf  übertragen  durch  immer  schwächere  Alkohole  bis  in  die  zur 
Beizung  nötige  Flüssigkeit.  Gebeizt  und  gefärbt  wurde  nach  der 
Methode  von  Wolters^  (Vanadiumchlorid  mit  Aluminiumacetat,  Hä- 
matoxylin-Essigsäure,  Salzsäurealkohol).  Verf.  bespricht  dann  weiter 
eingehend  die  Behandlung  und  Aufbewahrung  von  Serienschuitten  in 
verschiedener    Weise ,    weswegen   auf  das    Original   verwiesen    wird. 

ScMefferdecker  ( Bonn) . 

Donaldsoll,  H.  H. ,  a.  Hoke,  G.  W. ,  On  the  Areas  of  the 
A X i s  C i  1  i n d e r  and  m e d u  1 1  a r y  S h e a t h  a s  s e e n  in 
cross  Sectio  US  of  the  Spinal  Nerves  of  Verte- 
b  rat  es  (Journ.  Compar.  Neurol.  and  Psychol.  vol.  XV, 
1905,  no.   1,  p.  1—16  w.   1   flg.). 


1)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  VII,  1890,  p.  309. 

-)  BoLLES  Lee  et  Henneguy,  Traite  des  methodes  techniques. 

•')  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  VII,  1890,  p.  471. 


XXII,  3.  Referate.  447 

Die  Nerven  wurden  Tieren  aus  allen  Wirbeltierklassen  ent- 
nommen ,  welche  durch  Chloroform  getötet  wurden.  Die  Nerven, 
gewöhnlich  vom  Armijlexus ,  wurden  freigelegt  und  teilweise  in  situ 
mit  einprozentiger  Osmiumsäurelösung  fixiert.  Nach  einer  halben 
Stunde  wurde  der  Nerv  herausgenommen  und  auf  ein  Stück  Karton 
übertragen,  um  Schrumpfung  zu  verhindern,  und  wieder  in  eine  ein- 
prozeutige  Osmiumsäurelösung  für  24  Stunden  gebracht.  Die  3  bis 
5  im.  dicken  Schnitte  wurden  in  Kolophonium  aufgehoben. 

Seh  iefferdecker  ( Bonn) . 

Ruf fini ,  A, ,  Di  u  n  a  n  u  0  v  a  g  u  a  i  n  a  [  g  u  a  i  n  a  s  u  s  s  i  d  i  a  r  i  a  ] 
nel  tratto  terminale  delle  fibre  nervöse  di 
senso  nell'uomo  (Zeitschr.  f.  wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX, 
1905,  p.  150—170  c.  2  tavv.). 
Zur  Darstellung  der  neuen  Nerveuscheide  bringt  man  am  besten 
kleine  Stücke  Haut  oder  Muskeln  für  wenigstens  eine  halbe  Stunde 
in  ein  frisch  bereitetes  Gemisch  aus  66  Teilen  lOprozentiger  Ameisen- 
säure (oder  falls  die  vorhandene  Säure  keine  konzentrierte  ist,  der 
Verdünnung  entsprechend  höhere  Prozente),  und  34  Teile  gesättigter 
Sublimatlösung  und  dann  nach  flüchtigem  Waschen  in  fließendem 
Wasser  für  20  oder  40  Minuten  in  eine  einprozentige  Lösung  von 
Goldchlorid.  Nach  sorgfältigem  Abtrocknen  der  Stücke  mit  Fließ- 
papier oder  einem  reinen  Tuch  werden  sie  12  bis  15  Stunden  mit 
einprozentiger  Ameisensäure  in  einem  Glasgefäß  behandelt  und  dann, 
ohne  die  Flüssigkeit  zu  wechseln ,  6  bis  8  Stunden  den  direkten 
Sonnenstrahlen  ausgesetzt;  hierbei  dreht  man  das  Gefäß  von  Zeit 
zu  Zeit ,  damit  die  Stücke  gleichmäßig  von  allen  Seiten  besonnt 
werden.  Nach  Ablauf  der  entsprechenden  Zeit  trocknet  mau  wieder 
sorgfältig  mit  Fließpapier  ab  und  bringt  die  Objekte  für  8  bis  10  Tage 
in  Glyzerin,  um  sie  nachher  zu  zerzupfen  und  in  Glyzerin  einzuschließen. 
Bei  gelungener  Färbung  ist  die  Markscheide  dunkelviolett,  bei  stär- 
kerer Färbung  fast  schwarz ,  bei  leichter  Färbung  rötlichviolett ,  die 
Hilfsscheide  hellviolett ,  stellenweise  mit  einem  Stich  ins  Rosa ,  die 
HENLESche  Scheide  rosa  mit  einem  leichten  Schein  ins  Violett. 

E.  Schoebel  {Neapel). 

London,   E.   S. ,    Zur   Lehre   von    dem    feineren   Bau    des 
Nervensystems    (Arch.    f.    mikrosk.    Anat.    Bd.    LXVI, 
1905,  p.  111—115  m.   1  Tfl.). 
Als  Untersuchsmaterial  wurden  Blutegel,  Maus  und  Hund  benutzt. 


448  Referate.  XXII,  P,. 

Außer  der  Ap.athy sehen  Goldmethode,  die  leider  nur  selten  be- 
friedigende Resultate  gab,  kam  vor  allem  die  neue  Ramon  y  CAjALsche 
Fibrillenraethode  zur  Anwendung,  die  nach  den  Erfahrungen  des  Verf. 
am  besten  in  folgender  Weise  ausgeführt  wird :  Stücke  beliebiger 
Größe,  sogar  ganze  Tiere,  wenn  es  sich  um  embryologische  Studien 
handelt,  kommen  in  ammoniakhaltigen  Alkohol  (4  cc  Ammoniak,  96  cc 
Alkohol).  Nach  24  Stunden  werden  die  Stücke  in  Scheiben  von 
2  bis  3  mm  Dicke  zerlegt  und  in  frischen  ammoniakhaltigen  Alkohol 
gebracht,  wo  sie  weitere  24  bis  48  Stunden  verbleiben.  Nach  5  bis 
10  Minuten  langem  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser  wird  im 
Brutschrank  bei  35  bis  37^  C.  3  bis  6  Tage  mit  l^/^prozentiger 
Silbernitratlösung  imprägniert ,  dann  nach  sorgfältigem  Abtrocknen 
mit  Fließpapier  bei  diffusem  Licht  mit  PyrogalloUösuug  (2  g  Pyro- 
gallol,  5  cc  Formol,  100  destilliertes  Wasser)  behandelt  und  dann 
durch  die  verschiedenen  Alkohole  und  Chloroform  in  Paraffin  über- 
geführt und  eingebettet.  Die  vom  Paraffin  befreiten  Schnitte  werden 
dann  5  bis  10  Minuten  mit  einprozentiger  Goldchloridlösung  ver- 
goldet und  schließlich  noch  die  gleiche  Zeit  mit  einer  öprozentigen 
Lösung  von  unterschwef ligsaurem  Natron  behandelt  und  in  üblicher 
Weise  eingeschlossen.  So  bearbeitete  Stücke  sind  frei  von  Nieder- 
schlägen und  liefern  fast  durch  die  ganze  Dicke  des  Stückes  be- 
friedigend gefärbte  Schnitte.  E.  Schoebel  (Neapel). 


C.   Bakterien, 

Koch ,  A. ,    Jahresbericht   über   die  Fortschritte   in  der 
Lehre  von   den  Gärungsorganismen.     Jahrg.  XIII, 
1902.     Leipzig  (S.  Hirzel)   1905;  VIII  u.   672  pp.       16  M. 
Der  vielseitige  Inhalt  des  Jahresberichts  berührt   die  Interessen 
unserer  Zeitschrift  vornehmlich  in  dem  Abschnitt,  der  über  „Arbeits- 
verfahren ,  Apparate  etc."    handelt    und    in    dem   einige  neue  Färbe- 
verfahren zur  Sprache  kommen.     Auf   die    betreffenden  Referate  sei 
um  so  mehr  verwiesen ,    als    nicht    über  alle  im  „Jahresbericht"  be- 
sprochenen Arbeiten  in  den  Bänden  dieser  Zeitschrift  berichtet  worden 
ist.    Im  besonderen  machen  wir  aufmerksam  auf  v.  Wendts  Methode 
„Bakterien    ohne  Trocknen    an    Deck-  und  Objektgläser   zu  fixieren" 
(Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Bd.  XXXI),  bei  welcher  die  Bakterien  durch 
koagulierendes  Eiweiß ,   das  als  Eiweißglyzerin    auf   die    Gläser    auf- 


XXII,  3.  Referate.  449 

g-etrageii  wird ,  befestigt  werden  und  iiiclit  solche  Struktiirverände- 
riingen  erfahren,  wie  beim  Fixieren  durcli  Trocknen.  Ficicer  (Hygien. 
Kund  seh.)  färbt  die  Körnchen  der  Bakterien  mit  Methylenblau-Milcli- 
säure,  die  durch  Kampferzusatz  haltbar  gemacht  wird.  Guiraud  und 
Gautie  (C.  R.  Soc.  Biol.  1901)  beschreiben  eine  Methode  zur  Färbung 
alten  schwer  tingierbaren  Bakterienmaterials.  —  Auch  auf  die  Kapitel 
Nährböden,  Sterilisation,  Thermostaten,  Züchtung  von  Anaerobien  sei 
verwiesen.  Küster  (Halle  a.  S.). 

Giemsa,  G.,   Eine  Vereinfachung  und  Vervollkommnung 
meiner     M  e  t  h  y  1  e  n  a  z  u  r  -  Methylenblau  -  E  o  s  i  n  - 
Färbemethode  zur  Erzielung  der  Romakowsky- 
NocHTSchen  -  Chromatinfärbung    (Zentralbl.    f.    Bak- 
teriol,  Abt.   1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  H.  2,  p.  308). 
Die   bisher   von   dem  Verf.    angegebenen   Färbemethoden  waren 
—  auch   nach   seiner   eigenen    Ansicht  —  nicht    frei    von    störenden 
Niederschlägen  und  Ungenauigkeiten,  so  daß  auch  nicht  allseitig  gute 
Resultate    bei    der  Chromatinfärbung    erzielt   wurden.     Durch  zweck- 
mäßiges Ausprobieren   empfiehlt  jetzt  Giemsa   seine  neue  Farblösung 
unter  dem  Namen  „GiEMSASche  Lösung  für  die  RoMANOwsKv-Färbung"; 
sie  wird  folgendermaßen  hergestellt: 

Azur  II- Eosin 3-0  g-  und 

Azur  II 0-8  „ 

werden  im  Exsikkator  unter  Schwefelsäure  getrocknet,  aufs  feinste 
gepulvert,  durch  ein  feines  Sieb  getrieben  und  in 

Glyzerin  (Merck  ehem.  rein) 250-0  g 

bei  60  ^^  unter  Schütteln  gelöst,  hierauf  wird 

Methylalkohol  (Kahlbaum  I) 250  g 

hinzugefügt,  den  man  vorher  auf  60*^  erwärmt  hat,  gut  geschüttelt, 
24  Stunden  bei  Zimmertemperatur  stehen  gelassen  und  filtriert.  Die 
Ausführung  der  Färbung  geht  dann  folgendermaßen  vor  sich : 

1)  Härtung  des  lufttrockenen  Ausstrichs  in  Äthyl  oder  —  2  bis 
3  Minuten  —  Methylalkohol. 

2)  Verdünnung  der  fertigen  Farblösung  mit  Wasser  in  einem 
weiten  graduierten  Reagensglas  (1  Tropfen  der  Farblösung  auf  etwa 
1   cc  Aq.  dest.),  wobei  man  am  besten  eine  TropfHasche  benutzt. 

3)  Übergießen  der  Präparate  mit  der  frischen  verdünnten  Lö- 
sung (10  bis   15  Minuten). 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  3.  29 


450  Referate.  XXII,  3. 

4)  Abwaschen  in  «charfem   Wasserstrahl, 

5)  Abtupfen  mit  Fließpapier,  trocken  werden  lassen  und  ein- 
betten in  Kanadabalsam.  W.  Hoffmanu  (Berlin). 

Zlatogoroif,  S.  J. ,    Zur    Mikrobiologie    der    Masern    (Zen- 
tralbl.  f.  BakterioL,  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  H.  2,  p.  249). 

Obwohl  schon  von  einer  größeren  Zahl  von  Autoren  bei  Masern- 
erkrankungeu  teils  Protozoen,  teils  Bakterien  gefunden  sind,  ist  doch 
eine  Einigung  auf  diesem  Gebiete  bisher  noch  nicht  erfolgt.  Verf. 
hat  sich  deshalb  erneut  der  Ätiologie  der  Masern  zugewendet  und 
bei  ca.  30  Masernkrauken  den  Nasenschleim,  das  Konjunktivalsekret 
und  das  Blut  untersucht,  und  zwar  in  demjenigen  Krankheitsstadium,  wo 
Fieber  und  die  katharrhalischen  Erscheinungen  auf  dem  Höhepunkt  waren. 
Er  benutzte  neben  Glyzerinagar  auch  Blut-  und  Ascitesnährböden. 

In  dem  Nasenschleim  fand  er  nur  einmal  eine  Bakterienart, 
die  dem  im  Blut  und  im  Konjunktivalsekret  gefundenen  ähnlich  war. 
Aus  dem  Augenbindehautsack  wuchs  gewöhnlich  das  Xerosestäbchen, 
sowie  ein  diesem  sehr  ähnlicher,  aber  sehr  wenig  widerstandsfähiger 
Bacillus ,  der  auf  den  Nährböden  äußerst  kümmerlich  wuchs  und 
bald   einging. 

Von  dem  Blut  wurde  stets  1  cc  auf  25  bis  150  cc  Nährflüssig- 
keit geimpft.  17  mal  konnte  ein  Bacillus  von  folgenden  Eigenschaften 
isoliert  werden.  Färbbarkeit  mit  den  gewöhnlichen  Anilinfarbstoffen 
und  nach  Gkam.  Er  ist  wenig  beweglich,  liegt  gewöhnlich  in  Doppel- 
exemplaren oder  in  Gruppen ,  zeigt  hier  und  da  Polfärbung.  Er 
wächst  in  flüssigen  Nährböden  als  feinflockiger  Niederschlag,  am 
besten  zwischen  36  und  37 '^  C.  Er  ist  wenig  beweglich  und  bildet 
keine  Sporen.  Er  geht  auf  den  Nährböden,  selbst  den  optimalsten, 
leicht  zugrunde.  Die  Tierversuche  sind  nicht  eindeutig.  Bei  Kontroll- 
untersuchungen  konnte    diese  Bakterienart  niemals  gefunden  werden. 

Verf.  ist  hiernach  nicht  in  der  Lage ,  ohne  weiteres  diesen 
Bacillus  mit  den  Masernerkrankungen  in  ätiologische  Beziehung  zu 
bringen  und  behält  sich  eine  kritische  Würdigung  seiner  Befunde 
im  Vergleich  mit  den  bisher  erhobenen  für  eine  spätere  Verötfent- 
lichung  vor.  W.  Hoffma7in  {Berlin). 

Dworetzky,  A. ,  Erfahrungen  mit  der  SpENGLEuschen 
F  0  r  m  a  1  i n m  e  t  h  0  d  e  z u  r  R  e  i  n z  ü  c  h  t u  n g  von  Tu  1 )  e  r  - 
kelbazillen  aus  Rakteriengemischen  (Zentralbl.  f. 
BakterioL,  Abt.  1,   Orig.  Bd.  XXX VII,   H.  4,  p.  626). 


XXII,  3.  Referate.  451 

Die  von  Spengler  angegebene  Methode  —  Zeitschr.  f.  Hygiene 
u.  Infektionskrankli.  Bd.  XLII  —  mittels  Forraalin  die  Begleitbakte- 
rien in  einem  tuberkulösen  Sputum  abzutöten  und  dann  die  dem 
Formalin  gegenüber  resistentereu  Tuberkelbazillen  auf  einem  be- 
stimmten Somatose-HEYDEN-Glyzerinagar  zu  kultivieren,  ist  von  dem 
Verf.  in  einer  größeren  Anzahl  von  Versuchen  mit  negativem  Er- 
gebnis nachgeprüft  worden.  Auch  selbst,  wenn  er  mit  der  Formalin- 
menge  weit  unter  die  von  Spengler  angegebene  Dosis  ging,  ver- 
mochte er  niemals  ein  Wachstum  von  Tuberkelbazillen  zu  konstatieren. 
Nach  seiner  Ansicht  werden  auch  die  etwas  resistentereu  Tuberkel- 
bazillen durch  das  Formalin  auch  derartig  alteriert ,  daß  sie  sich 
auf  festen  Nährböden  nicht  mehr  zu  vermehren  vermögen.  Von 
anderer  Seite  wird  die  Methode  besser  bewertet. 

W\  Hoffmann  (Berlin). 

Ücker-Blom,    M.,    Bestimmung    der    elektrischen    Leit- 
fähigkeit     mit      Bezug      auf      bakteriologische 
Zwecke  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.,  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII, 
H.  1,  p.  150). 
Verf.  gibt  eine  Methode  an,  um  in  bakterienhaltigen  Nährböden 
die    elektrische  Leitfähigkeit    zu    bestimmen ,    nachdem    er   früher  an 
anderer  Stelle  auf  ähnliche  Weise  interessante  Mitteilungen  über  die 
elektrische  Leitfähigkeit    der    Eiweißspaltung    bei  Verdauungserschei- 
nungen gemacht  hat.     Der  Apparat  ist,  wie  folgt,  zusammengesetzt: 
Das  mit  einem  gut  geschliftenen  Glasstöpsel   versehene  Widerstands- 
gefäß   nebst    seinen    Platinelektroden    wird    mit    zwei   in  den  Stöpsel 
eingeschmolzenen  Zuleitungsröhren,    welche,    mit  Quecksilber  gefüllt, 
die  Leitung  zu  diesen  vermitteln,  ausgestattet.     Ein  drittes,  ebenfalls 
durch   den  Stöpsel   gehendes  Glasrohr   ist   der  Zugang  zu  der  Nähr- 
flüssigkeit   behufs    bakterieller    Impfung    derselben. .    Der    mit    dem 
Nährboden    beschickte  Apparat    kann    mit  Dampf  sterilisiert  werden. 
Verf.  teilt  seine  mit  diesem  Apparat  angestellten  Versuche  nicht  mit 
und  will  hauptsächlich  zu  derartigen  Versuchen   über  die  elektrische 
Leitfähigkeit  der  Nährböden  unter    dem  Einfluß  —   auch  pathogener 
Bakterien  —  die  Anregung  geben.  W.  Hoffmann  (Berlm). 

Schüller,   31.,    Über    die    Chromati nkörper    der    Krebs- 
und  Sarkomparasiten  des  Menschen    (Zentralbl.   f. 
Bakteriol.,  Abt.  1  ,  Orig.  Bd.  XXXVII,  H.  4,  p.  547). 
Verf.  hat    durch   sorgfältige  Färbungen    die  von  ihm   als   angeb- 

29* 


452  Referate.  XXII,  3. 

liehe  ätiologische  Momente  für  Krebs-  und  Sarkomgeschwülste  ge- 
fundenen Parasiten  in  bezng  auf  ihre  innere  Struktur  untersucht. 
Er  fand,  daß  überall  im  Carcinom-  und  Sarkomgewebe  des  Menschen 
kleinste  runde,  blasen-  oder  scheibenartige  und  keulenförmige  Gebilde 
mit  typischer,  höchst  eigenartiger  Anordnung  der  Chromatinsubstanz 
verbreitet  sind ,  und  zwar  als  wesentliclie  Bestandteile  der  früher 
von  ihm  beschriebenen  Parasiten.  Er  sieht  hierin  einen  Beweis,  daß 
diese  Parasiten  zu  derjenigen  Gruppe  von  Protozoen  gehören,  bei 
welchen  typische  Chromatinverteihmg  in  den  kleinsten ,  einfach  ge- 
bauten Entwicklungsformen  ein  wesentliches  Kriterium  ist  und  spricht 
seine  Ansicht  hierüber  dahin  aus,  daß  in  diesen  Parasiten  die  erste 
und  wichtigste  Ursache  der  Krebs-  und  Sarkomentwicklung  beim 
Menschen  gefunden  ist.  Trotz  des  langen  Bekauntseins  der  „Schll- 
LER scheu  Parasiten"  haben  sie  eine  allgemeine  Anerkennung  nicht 
finden  können.  W.  Hoffmann  {Berlin). 

Zlatogoroif,  S.  J. ,  Zur  Morphologie  und  Biologie  des 
Mikroben  der  Bubonenpest  und  des  Pseudo- 
tuberkulosebacillus  der  Nagetiere  [Bac.  pseudo- 
tuberculosis  rodentium]  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.,  Abt.  1, 
Orig.  Bd.  XXXVII,  H.  3,  p.  345). 

Verf.  unterzog  sich  der  Aufgabe,  an  einer  größeren  Anzahl  von 
in  den  verschiedensten  Ländern  isolierten  Peststämmen  festzustellen, 
ob  sie  morphologisch,  kulturell  und  biologisch  in  ihren  charakteristi- 
schen Eigentümlichkeiten  übereinstimmen  und  stellt  in  dem  letzten 
Teil  seiner  ausführlichen  Arbeit  dem  Pestbacillus  den  Erreger  der 
Pseudotuberkulose  der  Nagetiere  in  seinem  Verhalten  denselben  Nähr- 
böden und  demselben  Immunserum  gegenüber. 

Zlatogoroff  wies  nach ,  daß  sämtliche  22  Peststämme  sich 
durchaus  gleichmäßig  auf  den  verschiedenen  Nährböden  verhielten 
und  da  er  Abweichungen  von  dem  normalen,  allgemein  bekannten  Ver- 
halten nicht  konstatierte,  erübrigt  es  sich,  hierauf  näher  einzugehen. 

Von  Interesse  dürfte  es  aber  sein,  die  beiden  Bakterienarten  in 
ihrem  kulturell-biologischen  Verhalten  miteinander  zu  vergleichen. 

In  Bouillon  ist  das  Wachstum  völlig  gleich  (keine  Trübung, 
kleine  Flocken) ,  beide  verflüssigen  die  Gelatine  nicht ,  die  Kolo- 
nien sind  nur  wenig  am  Band  verschieden,  jedoch  tritt  das  sichtbare 
Wachstum  bei  der  Pest  einen  Tag  später  ein,  auf  Agar  sind  die 
Pestkolonien  stärker  gekörnt  und  ihre  Ränder  spielen  im  Gegensatz 
zur  Pseudotuberkulose  in  allen  Regenbogenfarben,    beide    bilden   auf 


XXII,  3.  Referate.  453 

Agar  mit  oprozeiitigem  Koclisalzzusatz  Involutionsformeii,  Während 
das  Wachstum  des  Pestbacillus  auf  der  Kartoffel  kaum  wahrzunehmen 
ist,  bildet  der  Pseudotuberkulosebacillus  häutig  eine  blaßgelbe  Membran, 
Verhalten  in  Milch,  zuckerhaltigen  Nährböden  und  Indolbildung  — 
negativ  —  ist  beiderseits  gleich,  ebenso  ilir  färberisches  Verhalten. 
In  der  Pathogenität  jedoch  besteht  ein  deutlicher  Unterschied,  indem 
der  Mensch ,  Atfe  und  die  Ratte  von  Pest  infiziert  werden  können, 
während  die  Pseudotuberkulose  Hühner,  Kaninchen,  Meerschweinchen, 
Hasen,  selten  den  Menschen  befällt.  Beide  Bakterienarten  werden 
von  dem  Pestheilserum  agglutiniert ,  während  die  Präcipitinreaktion 
nur  mit  einem  Pestbazillenfiltrat  eintritt.  Der  Hauptunterschied  be- 
steht aber  darin,  daß  Pestheilserum  gegen  eine  Pestinfektion  schützen 
kann,  während  dies  bei  der  Pseudotuberkulose  der  Nager  nicht  der 
Fall  ist.  W.  Hoffmann  {Berlin). 

Nowack,  K.,  Über  die  Grenzen  der  Verwertbarkeit  des 
Malachitgrünagars  (Arch.  f.  Hygiene  Bd.  LIII,  H.  4, 
p.  374). 
Verf.  prüfte  im  Anschluß  an  die  Veröft'entlichungen  von  Klinger 
und  Jörns  den  Malachitgrünagar  zum  Nachweis  von  Typhusbazillen 
in  den  menschlichen  Stuhlentleerungeu,  indem  er  neben  dem  Drigalski- 
CoNRADi  sehen  Lakmusnutrosemilchzuckeragar  auch  den  Endo  sehen 
Fuclisinagar  in  den  Bereich  seiner  Untersuchungen  vergleichsweise 
zog.  Was  die  Konzentration  des  zu  verwendenden  Malachitgrüns 
betrifft,  so  fand  er  in  Übereinstimmung  mit  den  obigen  Autoren,  daß 
die  Konzentration  von  1  :  2000  bis  1  :  2500  von  Malachitgrün  No.  120 
die  besten  Resultate  liefert.  Auch  das  Malachitgrün  superfein  be- 
nutzte er  für  seine  Versuche ,  was  er  in  entsprechend  stärkerer 
Verdünnung  ebenfalls  ebensogut  brauchbar  fand.  Ein  Vorteil  des 
Malachitgrünnährbodens  den  andern  Kulturmethoden  gegenüber  be- 
steht nach  den  Erfahrungen  des  Verf.  besonders  darin,  daß  man 
erheblich  mehr  Stuhlmaterial  auf  den  Platten  ausstreichen  kann,  wo- 
durch die  Aussicht,  den  Typhusbacillus  auch  in  quantitativ  geringer 
Verteilung  noch  aufzufinden ,  eine  bessere  wird ;  allerdings  besteht 
auch  hierin  eine  Grenze  und  in  Fällen,  wo  man  nur  auf  einige  und 
vielleicht  noch  geschädigte  Typhusbazillen  in  der  Aussaat  rechnen 
muß,  versagt  auch  der  Malachitgrünnährboden,  auch,  wenn  die  Zahl 
der  Begleitbakterien  eine  verhältnismäßig  geringe  ist. 

Auch  der  ENDOSche  Nährboden  erwies  sich  dem  Verf.  als  sehr 
brauchbar.  W.  Hoff  mann  (Berlin). 


454  Referate.  XXII,  3. 

Bordet,  J.,  U n e  m  e  t h o  d  e  de  c  u  1 1 u r  e  des  m i c r  o  b  e  s  a n a e r  o - 
bies  (Ann.  de  Tlust.  Pasteur  t.  XVIII,  1904,  p.  332). 
Verf.  verbindet  die  beiden  bisher  üblichen  Methoden  zur  Her- 
stellung eines  Sauerstoff-freien  Raumes.  Nachdem  die  Kulturen  in 
ein  zylindrisches  Grlasgefäß  gestellt  sind,  wird  auf  dieses  eine  Glas- 
glocke ,  deren  Boden  in  der  Mitte  eine  Ofinung  mit  nach  innen  er- 
höhtem Rande  hat,  und  die  einen  mit  einem  Hahne  versehenen  Stopfen 
besitzt,  gestülpt,  nachdem  ein  Stück  mit  Pyrogallussäure  getränktes 
Fließpapier  auf  den  Boden  der  Glocke  gelegt  ist.  Der  Apparat  wird 
schief  gestellt,  das  Fließpapier  an  die  höchste  Stelle  des  Bodens 
gebracht ,  Ätzkali  in  die  Glocke  gegossen ,  so  daß  das  Fließpapier 
nicht  getroft'en  wird,  und  nun  wird  die  Luft  möglichst  ausgepumpt. 
Wird  dann  das  Gefäß  horizontal  gestellt ,  so  mischen  sich  Ätzkali 
und  Pyrogallussäure  und  jede  Spur  Sauerstoff  wird  absorbiert. 

Freund  {Halle  a.  S.). 

Triollet,  M.,  D  i  s  p  o  s  i  t  i  f  p  o  u  r  s  t  e  r  i  1  i  s  e  r  1  e  c  a  t  g  u  t  ä  1'  a  u  t  o  - 
clave  (Ann.  de  l'Inst.  Pasteur  t.  XVIII,  1904,  p.  267). 
Um  Catgut  wasserfrei  zu  sterilisieren,  nach  der  Sterilisation 
aber  mit  Wasser  ohne  Luftzutritt  in  Berührung  zu  bringen,  wickelt 
Verf.  den  Catgut  um  eine  offene,  mit  Wasser  gefüllte  Flasche,  setzt 
diese  in  eine  andere  mit  Essigsäure  gefüllte  Flasche ,  verschließt 
hermetisch  und  sterilisiert  bei  120^  40  Minuten  lang.  Nach  dem 
Erkalten  kehrt  er  den  Apparat  um ,  wobei  Wasser  und  Essigsäure 
sich  mischen.  Freund  {Halle  a.  S.). 

Nicolle,  F.,  S  u  i  t  c  d '  e  X  p  e  r  i  e  n  c  e  s  relatives  au  p  h  e  n  o  m  e  n  e 
de    l'agglutination    des    raicrobes    (Ann.    de    l'Inst. 
Pasteur  t.  XVIII,   1904,  p.  210). 
Verf.  wünscht  für  die  Untersuchung  der  Agglutination  eine  ein- 
heitliche   Methode.      Für    die    Untersuchung    der    Agglutination     bei 
Typhusbazillen  schlägt  er  als  Reagens   eine  Mischung  von  5  Tropfen 
einer  einprozentigen  neutralen  Bleiacetatlösung  in   100  cc   einprozen- 
tiger  Kaliumbikarbonatlösung  vor,    die    im  Reagierrohr  einer   16  bis 
18  Stunden  alten  Typhusbazillenkultur  in  Bouillon  sehr  ähnlicli  sieht. 
Stets    werden  Bouillonkulturen    von    35^  und   16  bis   18   Stunden  alt 
benutzt.     Eine  Bildung  eines  Schleiers  oder  spontaner  Häufchen  ver- 
hütet   Verf.    durch    Anwendung    neutraler    Bouillon ,     die    allerdings 
weniger  Mikroben   enthält  als  eine  alkalische.     Die  Versuche  werden 
stets    eingestellt ,    wenn    das  Serum    eine  Stunde   auf   die  Kultur  ge- 


XXII,  3.  Referate.  455 

wirkt  hat.  Zur  Beurteilung  des  Agglutinatiousvermögens  stellt  man 
fest,  bei  welcher  maximalen  Verdünnung  bereits  unter  dem  Mikroskop 
Bakterienhäufchen  von  5   bis   10  Individuen  sichtbar  sind. 

Freund  (Halle  a.  S.). 


D.   Botanisches. 

Fischer,  A.,  Die  Zelle  der  Cyanophyceen  (Bot.  Zeitg. 
Abt.  1,  Orig.  Bd.  LXIII,  1905,  H.  4  u.  6,  p.  51). 
Schon  früher^  hat  Verf.  eine  Methode  angegeben,  die  Chro- 
matophoren  der  Cyanophyceen  mit  Flußsäure  zu  isolieren. 
Nachdem  verschiedene  Autoreu  —  Kohl,  "Wager,  Zacharias  —  sich 
abfällig  über  das  Verfahren  ausgesprochen  haben,  kommt  Fischer  in 
der  vorliegenden  Abhandlung  ausführlich  auf  seine  Methode  und  deren 
Begründung  zurück.  —  Verf.  verwendet  30-  bis  40prozentige  Fluß- 
säure, am  besten  ist  45prozentige.  Die  Algenmassen ,  die  auf  ihre 
Chromatophoren  hin  untersucht  werden  sollen,  werden  auf  Fließpapier 
abgetupft  und  in  den  mit  Flußsäure  gefüllten  Platintiegel  gebracht, 
dann  wird  dieser  mit  seinem  Deckel  bedeckt  und  vorsichtig  erwärmt: 
„Man  hält  den  Bunsenbrenner  in  der  Hand  und  fährt  mit  der  großen 
Flamme  rhythmisch  unter  den  Tiegel,  bis  drei  bis  vier  (fünf)  kurze 
Aufstöße  der  Flüssigkeit  hörbar  gewesen  sind.  Sofort  nimmt  man 
mit  Platiudraht  oder  geeigneter  Pinzette  das  Material  heraus  und 
wäscht  es  in  einer  großen  Schale  mit  ruhigem  Wasser  gut  aus.  Um 
schöne  Färbungen  zu  erhalten,  empfiehlt  es  sich,  mehrere  Stunden 
bis  einen  Tag  lang  auszuwaschen.  Bei  richtiger  Behandlung  bleiben 
die  Algenfäden,  weil  die  Cellulose  nicht  zerstört  wird,  ganz  und  lassen 
sich  bequem  weiter,  bearbeiten.  Das  ausgewaschene  Material  gelangt 
in  eine  ein-  bis  zweiprozentige  wässerige  Lösung  von  Lichtgrün, 
wodurch  die  Chromatophoren  eine  fast  natürliche  Färbung  annehmen  . . . 
In  Lichtgrün  darf  nicht  kürzer  als  2  Stunden  gefärbt  werden,  nicht 
länger  als  4  Stunden,  damit  die  Zellwände  sich  nicht  zu  stark  färben 
und  beim  langsamen  Entwässern  in  Alkohol  wieder  ganz  entfärben. 
Überführung  durch  steigenden  Alkohol,  Alkohol-Xylol,  Xylol,  Balsam. 
Statt  mit  Lichtgrün  kann  auch  mit  Säurefuchsin  oder  mit  basischen 
Farben,  wie  Gentianaviolett,  gefärbt  werden.     Methylgrün  mit  Amyl- 

')  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XIV,  1897,  p.  2(31,  262. 


456  Referate.  XXII,  3. 

alkoliol  gereinigt,  spricht  nur  au,  wenn  er  mit  Borax  .  .  .  versetzt 
ist,  liefert  aber  dann  Präparate,  deren  Färbung  bei  blaugrünen  Algen 
durch  größte  Natürlichkeit  überrascht."  Behandelt  man  die  Objekte 
längere  Zeit  mit  kalter  Flußsäure  (Spirogyra  bis  30  Minuten) ,  so 
bleiben  die  Chromatophoren  zwar  gut  erhalten ,  doch  das  Plasma 
verschwindet  nicht  völlig.  —  Der  Schutz  gegen  die  Flußsäure,  den 
das  plasmatische  Stroma  der  Chromatophoren  durch  den  Chlorophyll- 
Farbstoff  erfährt,  ist  nach  Verf.  dadurch  zu  erklären,  daß  das  Chloro- 
phyll eine  durch  Flußsäure  nicht  lösliche  Verbindung  ist,  die  durch 
das  Erhitzen  noch  besonders  gleichmäßig  über  den  Chromatophoren 
verteilt  wird:  der  Schmelzpunkt  von  Hoppe-Sevlers  Chlorophyllan 
liegt  bei  110^,  Flußsäure  von  35  Prozent  Fl  H  siedet  bei  120^. 
So  schützt  das  Pigment  die  Chromatophoren  vor  der  Ätzung,  wie 
ein  Wachsüberzug  das  Glas.  —  Verf.  erprobte  seine  Methode  nicht 
nur  an  Cyanophyceen  und  Conjugaten,  sondern  auch  an  den  Chro- 
matophoren von  Diatomeen  und  Moosblättern. 

Die  Untersuchung  des  Glykogen  in  den  Zellen  der  Cyanophyceen 
führte  zur  Auffindung  einer  neuen  mikrochemischen  Gly- 
kogenr e akti 0 n  („Tannin-Safraninfärbung  des  Glykogens"),  über 
die  Verf.  in  einer  besonderen  Arbeit  gleichzeitig  noch  berichtet  hat.^ 
Auf  die  m  i  1 0  s  e  n  ä  h  n  1  i  c  h  e  n  Zustände  des  Zentral- 
körpers  werfen  mikrochemische  Reaktionen  neues  Licht.  Vor  allem 
ist  wichtig,  daß  Jodpräparate  keine  Gelbfärbung  der  „Pseudomitosen" 
hervorrufen.  Vergleichende  Färbungsversuche  an  Mikrotomschnitten 
durch  Oscillariamaterial  und  Antheren  von  Lilium  (Fixierung  in  Alkohol, 
auch  in  Pikrinschwefelsäure)  zeigten,  daß  die  mitosenähnlichen  Figuren 
der  Oscillarien  im  Gegensatz  zu  den  Chromosomen  von  Lilium  mit 
Karminlösungen  (Essigkarmin,  Pikrokarmin,  Ammoniakkarmin)  nicht 
gefärbt  werden  können.  Ebenso  versagt  an  ihnen  Delafields  Häma- 
toxylin  nahezu.  Außer  den  genannten  und  einigen  anderen  Farb- 
stoffen bringt  Verf.  noch  zahlreiche  weitere  Medien  zur  Anwendung 
—  Kochsalz,  Soda,  -Kupferoxydammoniak,  Millons  Reagens,  Säuren, 
Ammoniak,  Pepsin-  und  Pankreatinglyzerin,  kochendes  Wasser  u.  v.  a. 
fvergl.  p.  100  ff.)  —  und  kommt  zu  dem  Schluß,  daß  die  „Pseudo- 
mitosen" ebenso  wie  die  Zentralkörper  der  Cyanophyceen  nicht  aus 
Proteinstoft'en  bestehen,  sondern  aus  einem  Kohlehydrat :  „Anabaenin". 
Außer  den  bereits  angeführten  Resultaten  der  Färbungsversuche 
waren    für    diese    Schlußfolgerung    bestimmend    die    Unverdaulichkeit 


>)  Vgl.  diese  Zeitsclir.  Bd.  XXII,  1905,  p.  l'il. 


XXII,  3.  Referate. 


457 


der  Gebilde  in  Pepsin  und  Trypsin  im  Verein  mit  den  vom  Verf. 
aufgeführten  Lösiiugsrealctionen,  die  Niclitfällbarkeit  der  autolytisclien 
Lösungsprodukte  mit  Fälliingsmitteln  für  P:iweißki3rper  und  die  Um- 
wandlung von  Pseudomitosen  in  Glykogen,  als  dessen  Kondensations- 
produkt das  Anabaenin  zu  betrachten  ist.  —  Als  Fixierungsmittel 
der  Pseudomitosen  nennt  Verf.  Alkohol,  Jodalkohol,  wässrige  und 
alkoholische  Sublimatlösung,  Pikrinsäure,  Pikrinschwefelsäure,  Formal- 
dehyd, FLEMMiNGSche  uud  Hermann  sehe  Lösung.  „Es  bedarf  nicht  ein- 
mal der  Fixierung,  schon  einfaches  Auftrocknen  der  unverriebenen  oder 
verriebenen  Fäden  konserviert  die  Pseudomitosen  vollständig.  Da  sie 
aus  einem  in  Wasser  unlöslichen  Kohlehydrat  bestehen,  so  ist  die  ,scliwie- 
rige'  Aufgabe  ihrer  Fixierung  —  [Hegler]  —  keine  andere  als  die, 
Stärkekörner  oder  Zellmembranen  zu  fixieren.  Auch  die  Färbung 
bietet  keine  Schwierigkeiten,  gut  ist  Methylenblau  bei  rechter  Differen- 
zierung in  Alkohol.    Viel  besser  ist  Heidenhains  Eisenhämatoxylin." 

Die  physikalischen  Eigentümlichkeiten  der  Ana- 
baeninkörper  werden  dadurch  bedeutungsvoll,  daß  diese  zwischen 
gekreuzten  Nikols  aufleuchten:  die  sog.  Gasvakuolen  sind  nichts 
anderes  „als  das  luterferenzbild  der  aus  anisotropem  Anabaenin  be- 
stehenden Pseudomitosen,  deren  knäuelig  verschlungene  Massen  in 
komplizierter  Weise  auf  das  durchgehende  Licht  einwirken.  Neben 
völligen  Auslöschungen  erscheinen  auch  rote  Interferenzfarben,  und 
alles  das  mischt  sich  zu  den  sonderbaren  Bildern,  die  als  Gasvakuolen 
gedeutet  worden  sind."  Die  von  Klebahn  und  Molisuh  in  den  viel- 
umstrittenen Gebilden  beobachteten  Erscheinungen  werden  von  diesem 
Gesichtspunkte  aus  vom  Verf.  überzeugend  erklärt :  so  erklärt  sich 
das  Schwinden  der  „Gasvakuolen"  nach  kräftigem  Drücken  daraus, 
daß  der  Druck  die  Anisotropie  der  Pseudomitosen  zerstört;  daß  ge- 
ringe Mengen  von  Äther  etc.  die  „Gasvakuolen"  zum  Schwinden 
bringen,  beruht  vermutlich  darauf,  daß  nach  der  Tötung  der  Zellen 
durch  Äther  etc.  die  autolytische  Zersetzung  der  Anabaeuinkörper 
beginnt,  die  schon  nach  wenigen  Minuten  weit  genug  vorgeschritten 
ist,  um  das  Zustandekommen  eines  Interferenzbildes  auszuschließen. 
—  Angaben  von  Klbbahn  und  Molisch  über  die  „Fixierung"  der 
Gasvakuolen  durch  einprozentige  Osmiumsäure  werden   widerlegt. 

Schließlich  sei  noch  auf  die  Kritik  der  K  o  h  l  s  c  h  e  n  Metho- 
den^ verwiesen,  die  Verf.  besonders  bei  Besprechung  der  Chroma. 
tophoren  und  der  Pseudomitosen  gibt.  Küster  (Halle  a.   S.). 


1)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XX,  1903,  p.  240. 


458  Referate.  XXII,  3. 

Brand,  F.,  Über  die  sogenannten  Gasvakuolen  und  die 
differenten    Spitze nzellen    der    Cyanopliyceen, 
sowie    über    Sehne  II  färbung    (Hedwigia    Bd.    XLV, 
1905,  p.  1). 
Im    letzten  Abschnitt    seiner  Arbeit   kommt  Verf.  auf  die  schon 
früher  empfohlene  „Schnellfärbung"  zurück,^  d,  h.  zu  seiner  Methode, 
lebendes  Material  durch  kurz  dauerude  Behandlung  mit  konzentrierten 
Farbstoff lösuugen  (Eosin,  Kongorot,  Methylenblau,  Methylviolett)   zu 
fäi'ben  und  dabei  pathologisch  verändertes  Material  oder  tote  Anteile 
an    ihrer    intensiven  Farbstoffspeicherung   erkennen  zu  können.     Die- 
selbe Methode  wird  auch  gestatten,  kleine,  schlecht  auffindbare  Formen 
bei    der    Durchmusterung    irgendwelcher  Algengemische    leicht    nach- 
weisbar zu  machen.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Fischer ,  H. ,  Über  die  kolloidale  Natur  der  Stärke- 
k  ö  r  n  e  r  und  ihr  Verhalten  gegen  Farbstoffe. 
Ein  Beitrag  zur  Theorie  der  Färbung  (Beih.  z. 
Botan.  Zentrabi.  Bd.  XVIII,  1905,  Abt.  1,  p.  409). 
Farbstofflösungen  gegenüber  verhalten  sich  Stärkeköruer  (Kar- 
toffelstärke) verschieden :  manche  Farbstoffe  dringen  überhaupt  nicht 
oder  erst  nach  wochenlanger  Einwirkung  in  die  Stärkekörner  ein 
(Karmin,  Hessisch  Purpur,  Diamin- Echtrot,  Kougorot,  Anilinblau, 
Cyanin ,  Benzoschwarzblau ,  wasserlösliches  Nigrosin) ,  andere  färben 
langsam ,  aber  nicht  sehr  intensiv ,  so  daß  auch  nach  Tagen  die 
Stärkekörner  kaum  stärker  gefärbt  sind  als  die  umgebende  Hüssig- 
keit  (Fuchsin  S,  Korallin,  Eosin,  Crocein,  Tropaeolin  00  und  000, 
Pikrinsäure  ,  Methylblau ,  Methylenblau  ,  Indigkarmin  ,  Hämatoxylin, 
Bismarckbraun) ,  noch  andere  Farbstoffe  werden  von  den  Stärke- 
körnern sehr  schnell  und  sehr  reichlich  aufgenommen  (Fuchsin,  Neu- 
tralrot ,  Safranin ,  Chrysoidin  ,  Malacliitgrün  ,  Methylgrün ,  Jodgrün, 
Brillantgrün,  Nilblau,  Gentianaviolett,  Thionin,  spritlösliches  Indulin). 
Unter  den  Farbstoffen  der  letzten  Gruppe  verdient  das  spritlösliche 
besondere  Beachtung,  weil  es  der  einzige  wasserunlösliche  Farbstoff 
ist,  der  von  den  Stärkekörnern  intensiv  gespeichert  wird.  —  Verf. 
schließt  an  die  Mitteilung  seiner  experimentellen  Resultate  ausführ- 
liche Erwägungen  über  die  kolloidale  Natur  der  Stärkekörner  und 
den  Vorgang  der  Färbung,  kritisiert  die  Micellentheorie  und  die 
Versuche,  die  Färbungserscheinungen  auf  Adsorption  zurückzuführen. 

1)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XX,  1903,  p.  244. 


XXII,  3.  Referate.  459 

Nach  des  Verf.  Ansicht  handelt  es  sich  bei  der  Färbung  der  Stärke- 
körner um  Lösungsvorgänge  und  um  chemische  Reaktionen :  „Der 
Farbstotf  wird  von  dem  zu  färbenden  Kolloid  in  Lösung  aufgenommen 
oder  nicht ;  je  nach  der  chemischen  Natur  beider  kann  in  den  Fällen 
der   ersteren  Art   dann   auch   eine    chemische  Verbindung  eintreten." 

Küster  {Halle  a.  8.). 

Harz ,    C.    0. ,     A  m  y  1  u  m  ,     A  m  y  1  o  d  e  x  t  r  i  n     und     Erythro- 
d  e X  t r i n   in   ihrem  Verhalten  gegen  C  h r  o m s ä u  r  e 
(Beih.  z.  Botan.   Zentralbl.  Bd.  XIX,   1905,  Abt.   1,  p.  45). 
Durch  Behandlung   mit  Chromsäure  (einen  bis   20  Prozent)  und 
Chromschwefelsäure  verlieren  die  Stärkekörner   nicht  nur  die  Eigen- 
tümlichkeit  mit  Jod  sich  blau  zu  färben,  sondern  auch  die,  in  kochen- 
dem Wasser  zu  verkleistern.     Über  die  Färbungserscheinungen ,  die 
sich  gelegentlich  bei  vorzeitig  unterbrochener  Chromsäurewirkung  an 
den  Stärkekörnern    wahrnehmen    ließen ,  vergleiclie  im   einzelnen  das 
Original.  Küster  {Halle  a.  8.). 

Moliscli ,  H. ,  Über  amorphes  und  kristallisiertes  An- 
thokyan  (Botan.  Zeitg.  Bd.  LXIII,  1905,  Abt.  1,  H.  7,  8, 
p.  145). 
Verf.  macht  mit  einigen  neuen  Fällen ,  die  durch  Vorkommen 
von  amorphem  oder  kristallisiertem  Anthokyan  gekennzeichnet  werden, 
bekannt.  Auch  in  weitverbreiteten,  oft  untersuchten  Ptlanzen  konnte 
Verf.  mikroskopische  Anthokyankristalle  nachweisen ,  z.  B.  in  den 
Blättern  des  Rotkrautes  (Brassica  oleracea  capitata) ,  wofern  das 
Material  vor  der  Untersuchung  in  niedriger  Temperatur  sich  befunden 
hat.  —  Besonders  verwiesen  sei  auf  die  Angaben  über  „die  Kristal- 
lisation des  Anthokyans  außerhalb  der  Zelle".  Bei  den  Blumen- 
blättern von  Pellargonium  zonale  (Scharlachpelargonium)  beispielsweise 
gelingt  die  Erzeugung  mikroskopischer  Anthokyankristalle  dann,  wenn 
man  unter  dem  Deckglas  den  roten  Zellsaft  aus  einem  zerquetschten 
Blumenblatt  austreten  und  langsam  eindiinsten  läßt.  Noch  vor- 
teilhafter ist  es,  sich  dabei  der  reinen  Essigsäure  zu  bedienen:  diese 
tötet  die  Zellen ,  nimmt  den  Farbstoff  auf  und  „läßt  ihn  beim  Ver- 
dampfen namentlich  unter  dem  Rande  des  Deckglases  in  Form  von 
mehr  minder  feinen  Nädelchen,  Pinseln,  Doppelpinseln,  Garben, 
Nerven,  Drüsen  und  Sphärokristallen  von  tief  karminroter  Farbe  aus- 
fallen". Küster  {Halle  a.  8.). 


460  Referate.  XXII,  3. 

Strasl)urger,  E.,  T  y  p  i  s  c  h  e  und  a  1 1  o  t  y  p  i  s  c  h  e  K  e  r  n  t  e  i  1  u  n  g. 

Ergebnisse    und    Erörterungen  (Pringsheims  Jahrb. 

f.  wiss.  Bot.  Bd.  XVII,  1905,  p.  1). 
Für  das  Studium  von  Kernstrukturen  ist  Färbung  der 
Scliuitte  mit  Eisenhämatoxylin  nach  Heidenhain  zu  bevorzugen,  be- 
sonders wenn  die  Objekte  mit  Chroraosmiumessigsäure  fixiert  worden 
sind.  Die  aufgeklebten  Paraffinschnitte  läßt  Verf.  1-^/.,  Stunde  im 
Wärmeschrank  bei  52  ^^  C,  dann  gelangen  sie  noch  warm  in  Xylol 
zur  Beseitigung  des  Paraffins,  dann  in  Alkohol  und  Wasser.  Es  folgt 
einstündige  Behandlung  mit  Wasserstoffsuperoxyd,  dessen  Einwirkung 
zu  kontrollieren  und  so  lange  fortzusetzen  ist,  bis  die  Schwärzung  der 
Schnitte  beseitigt  ist.  Hiernach  werden  die  Schnitte  wieder  aus- 
gewaschen und  kommen  auf  etwa  eine  Stunde  in  4prozentige  Lösung 
von  schwefelsaurem  Eisenoxydammon  nach  Heidenhain.  Dann  wird 
einige  Minuten  in  Wasser  gespült  und  etwa  eine  Stunde  lang  mit 
Hämatoxylinlösung  (Grübler  &  Co.)  gefärbt.  Dann  werden  die 
Schnitte  abermals  mit  Wasser  ausgewaschen  und  kommen  wiederum 
in  die  Eisenammonlösung,  in  der  sie  bleiben,  bis  der  gewünschte 
Grad  von  Differenzierung  erreicht  ist ;  schließlich  Wasser ,  90pro- 
zentigen  Alkohol^  Nelkenöl,  Kanadabalsam. 

Küste?-  {Halle  a.  S.). 

Oyertoil,  J.  B.,    Über  R e d u k t i o n s t e i  1  u n g   in  den  Pollen- 
mutterzellen  einiger  Dikotylen  (Prtngsheim s  Jahrb. 
f.  wiss.  Bot.  Bd.  XLII,   1905,  p.  121). 
Verf.  fixierte    mit    Flemmings  Chromosmiumessigsäure,    mit  ein- 
prozentiger  Chromessigsäure   und  Carnoys  Alkoholeisessig.     Zur  Fär- 
bung dienten  die  üblichen  Methoden  nach  Flemming  und  Heidenhain. 
Die  Struktur  des  ruhenden  Kerns  und  des  Synapsisstadiums  wird  durch 
Behandlung    mit  P^isenhämatoxylin    hervorragend    klar.   —  Läßt   sich 
das  Synapsisstadium    schlecht    färben ,    so  werden   die  Präparate  zu- 
nächst    mit     Eisenhämatoxylin     behandelt,     dann    entfjirbt ,     bis    der 
Synapsisknäuel    hell    erscheint    und    dann    mit  Gentianaviolett  gegen- 
gefärbt. Küster  {Halle  a.  S.). 

Miyake ,     K. ,     Über    R  e  d  u  k  t  i  o  n  s  t  e  i  1  u  n  g    in     den    Pollen- 
mutterzellen    einiger    Monokotylen    (Pringsheims 
Jahrb.  f.  wiss.  Bot.  Bd.  XLH,   1905,  p.  83). 
Bei  Untersuchung    des  Knäuelstadiums ,    besonders  der  Segmen- 
tierung des  Knäuels,  sind  Schnitte  von  üblicher  Dicke  zu  dünn,    so 


XXII,  3.  Referate.  461 

(laß  solclie  von  12  bis  15  /<  mul  mehr  hergestellt  wurden.  —  Verf. 
färbte  mit  Flemmixos  Dreifarbengemisch  und  Heidenhains  Eisen- 
alaunhämatoxylin.  Küster  [Halle  a.  S.). 

Allen,  Ch.  E.,    N  u  c  1  e  a  r    d  i  v  i  s  i  o  n    in    t  h  e    p  o  1 1  e  n    m  o  t  h  e  r  - 
ceUs    of   Lilium    canadense    (Ann.    of  Bot.    vol.  XIX, 
1905,  p.  198). 
Es    kamen    die    üblichen  Methoden    zur  Anwendung.     Zu  Fixie- 
rungen   empfiehlt  Verf.  besonders  Elemmings  stärkere  Mischung  und 
MoTTiERs  Rezept  \  Küste?'  (Halle  a.  S.). 


o 


Leake,  H.  M.,  T  li  e  1  o  c  a  1  i  z  a  t  i  o  n  o  f  t  h  e  i  n  d  i  g  o  -  p  r  o  d  u  c  i  n  g 
substance  in  indigo-yielding  plants  (Ann.  of  Bot. 
vol.  XIX,   1905,  p.  297). 
Bei  der  Untersuchung  verschiedener  Indigopflanzen  verfuhr  Verf. 

in    der    Weise ,    daß    er    kleine    Stücke    des    Materials    in    folgender 

Lösung  fixierte : 


'o 


Eisessig 2     cc 

Konz.  Schwefelsäure 1       „ 

Ammoniumpersulfat 0*5  g 

Wasser 100     cc. 

Gewebstücke  mit  kleinen  lutercellularräumen  müssen  entsprechend 
länger  in  der  Fixierungsflüssigkeit  verbleiben ,  da  sie  nur  langsam 
von  ihr  durchdrungen  werden:  man  richte  die  Größe  der  Gewebs- 
stücke  so  ein ,  daß  nach  4  bis  6  Stunden ,  allerhöchstens  nach 
12  Stunden  eine  völlige  Durchdringung  der  Objekte  erreicht  ist. 
Nach  der  Fixierung  werden  sie  in  täglich  gewechseltem  50prozentigem 
Alkohol  3 — 4  Tage  lang  gewaschen.  —  Die  Dicke  der  Schnitte  ist  in 
Einklang  mit  der  Zellengröße  der  Objekte  zu  bringen ;  bei  ludigofera 
sind  4 — 5  jli  erforderlich,  bei  Polygonum  tinctoriunv  8  ju^  bei  Isatis, 
Strobilanthes,  Phajus  und  Calanthe   10 — 12  //. 

Die  vom  Paraffin  befreiten ,  mit  Alkohol  schnell  gespülten 
Schnitte  kommen  in  Delafields  Hämatoxylin  (50  cc,  hierzu  .300  cc 
Wasser),  in  dem  sie  mindestens  12  Stunden  verbleiben,  hiernach  in 
Salzsäurealkohol  (1  Prozent  NCl  in  50prozentigen  Alkohol).  Er- 
scheinen die  Schnitte  dann  für  das  unbewaftnete  Auge  farblos ,  so 
werden  sie  auf  mindestens  eine  Stunde  in  eine  einprozentige  Lösung 


^)  Vgl.  diese  Zeitscbr.  Bd.  XV,  1898,  p.  269. 


462  Referate.  XXII,  3. 

des  Grübler  sehen  wasserlöslichen  Eosins  gebracht.     Dann  Entwässe- 
rung in  absolutem  Alkohol ;  Xylol,  Kanadabalsam.  — 

Die  nach  der  geschilderten  Methode  behandelten  Schnitte  zeigen 
sehr  deutlich  den  Indigogehalt  der  Zellen.    Küster  {Halle  a.  8.). 

York,  Harlan  H.,    The  Agar-Agar  and  Paraffin  Method 
for    imbedding   Plant    Tissues    (The  Ohio  Naturalist 
vol.  V,  p.  .344 — 345.    May  1905. 
Man    bereite    zwei  Lösungen    von  Agar-Agar   mit   folgender  Zu- 
sammensetzung : 

1)  Agar-Agar  2  Teile  auf  Wasser   100  Teile. 

2)  Agar-Agar  5     „         „  „         100      ,, 

Zu  jeder  Lösung  setze  man  nach  dem  Filtrieren  für  9  Volumteile 
einen  Volumteil  Formalin  zu.  Wenn  das  zu  schneidende  Material  trocken 
ist,  läßt  man  es  in  heißem  (70^  C.)  Wasser  eine  Stunde  lang,  und  dann, 
wenn  es  kieselhaltig  ist,  12  Stunden  in  einer  lOprozentigen  Fluß- 
säurelösung liegen.  Man  bringe  es  dann  in  die  2prozentige  Agar- 
lösung  bei  einer  Temperatur  von  70*^.  Wenn  das  Material  frisch 
und  lebendig  ist,  bringe  man  es  direkt  in  den  Agar.  Nach  zwei 
Stunden  werden  die  Objekte  in  die  5prozeutige  Lösung  übertragen, 
in  dem  sie  noch  eine  Stunde  liegen  bleiben.  Man  bestreiche  ein 
kleines  Stückchen  Holz  mit  dem  5prozentigen  Agar,  lege  ein  Stück  des 
Untersuchungsobjektes  darauf  und  bedecke  mit  Agar.  Nach  dem  Ab- 
kühlen wird  der  feste  Agar  und  das  eingeschlossene  Objekt  vom  Holz 
losgemacht  und  in  70prozentigen  Alkohol  eingetaucht.  Es  wird  jetzt 
entwässert  und  in  Paraffin  eingebettet  und  in  gewöhnlicher  Weise 
geschnitten.  Zum  Kleben  auf  dem  Objektträger  ist  nichts  nötig.  Es 
wird  mit  DELAFiELDSchem  Hämatoxylin  oder  Safranin-Gentianaviolett 
oder  einem  anderem  Färbmittel  gefärbt ,  wobei  der  Agar  gefärbt 
(DELAFiELDSches  Hämatoxyliu)  oder  nicht  gefärbt  wird. 

Ernst  A.  Besseij  {Washington). 

Shoemaker,  D.   N.,    On    the    Development    of   Hamamelis 

Virginia  na    (Botanical   Gaz.    vol.  XXXIX,    p.   248 — 266, 

plates  VI  and  VII,  April   1905). 

Die  angewandte  Fixierungslösung  wurde  folgendermaßen  zubereitet: 

Zu  einer  gesättigten  wässerigen  Lösung  von  Sublimat  wurden  5  Teile 

pro  Hundert  Eisessig  zugesetzt.    Diese  Flüssigkeit  wurde  sowohl  kalt 

als  heiß  verwandt.    Als  bestes  Färbemittel  ließ  sich  das  FlemmingscIic 

Dreifarbengemisch    bezeichnen.     Der  Autor  hat  Keimung  der  Pollen- 


XXII,  3.  Referate.  463 

körner  in  einer  IGprozentigen  Rohrzuokerlösimg  mit  Zusatz  von 
1^/2  Teilen  pro  Hundert  Gelatine  bekommen.  Die  Poüeuscbläuehe 
wurden  durch  Metliylgriin-Essigsäure  fixiert  und  gefärbt. 

Ernst  Ä.  Bessey  {Washington). 

Shattuck,  Charles  H.,   A  morphological   Study   of  Ulmus 
americana    (Botanical    Gaz.    vol.  XL,    p.  209 — 223,    pl. 
VII— IX,    Sept.  1905). 
Beim  Fixieren    muß    man    die  Samenknospen  wegen  ihrer  zahl- 
reichen Haare  in  Oöprozentigen  Alkohol  eintauchen,  um  die  Luft  zu 
entfernen,  und  dann  sogleich  in  die  Fixierungsflüssigkeit  übertragen. 
Eine    2prozentige  Chromessigsäure-Lösung    ergab    sich    als   die  beste 
für  alle  Stadien,  außer  den  ältesten.    Um  die  Schnitte  an  den  Objekt- 
träger    anzukleben ,     benutzte     Autor     ein     Gemisch     von    40  Teilen 
Leim    („Le  Pages"),    10    Teilen    Wasser    und    50  Teilen    Glyzerin. 
Das    Meyer  sehe    Eiweißfixativ    hat    keine    guten    Resultate    gegeben. 
Das    Leim-Glyzeringemisch    klebt    die    Schnitte    fester    an    das    Glas, 
bleibt  länger  verwendbar,  und  wird  nicht   so  leicht  durch  die  Hitze 
koaguliert. 

Für  Färbung  der  Samenknospen  zeigte  sich  Safraningeutiana- 
violett  als  die  beste  Kombination.  Beim  Zusatz  von  Orange  G 
wurden  die  Pollenschläuche  und  männliche  Zellen  am  besten  gefärbt. 

Ernst  A.  Bessey  {Washington), 


E,   Mineralogisch  -  Petrographisches. 

Doelter,  C. ,    Die    Silikat  schmelzen  (Sitzber.  d,   k.  Akad.    d. 

Wiss.  Wien,  math.-naturw.  Kl.,    Bd.  CXIII,   1904,    Abt.    1, 

p.  177—249,  495—511). 
Für  die  mikroskopischen  Beobachtungen  des  Verf.  wurde  von 
demselben  auf  den  Objekttisch  eines  Kristallisationsmikroskopes  ein 
kleines  elektrisches  Widerstandsöfchen  aufgesetzt,  welches  von  Heraeus 
speziell  für  diesen  Zweck  konstruiert  und  mit  Endflächen  aus  Quarz- 
glas versehen  war.  Auch  die  Objektträger  bestanden  aus  Quarzglas. 
Die  Vorrichtung  gestattet  Temperaturen  bis  1400  ^^  zu  erreichen  und 
ermöglichte  dem  Verf.  seine  zahlreichen  früheren  Untersuchungen  über 
die  Schmelzung  der  Silikatmaterialien  und  -gesteine  wesentlich  zu 
erweitern.     Kürzlich  hat  der  Verf.   auch  in  einem  zusammenfassenden 


464  Referate.  XXII,  S. 

Werk  (betitelt  Pliysikaliscli-chemisclie  Mineralogie,  Leipzig  1905) 
seine  Ergebnisse  nebst  dem  mit  ihnen  zusammenhängenden  Arbeits- 
gebiet dargestellt  und  die  einschlägige  Literatur  sehr  vollständig 
berücksichtigt.  E.  Sommerfeldt  (Tübingen). 

Becke,  F.,  Messung  des  Winkels  der  optischen  Achsen 
aus    der    H  y  p  e  r  b  e  I  k  r  ü  m  m  u  n  g    (Tschermak  s   mineral. 
u.   petr.  Mitt.    Bd.  XXIV,    1905,    p.  35  —  44     m.  3  Figg.). 
Um  den  Achsenwinkel  zweiachsiger  Mineralien,  welche  im  Gesichts- 
feld des  Mikroskopes  nur  eine  der  optischen  Achsen  zeigen,  zu  bestim- 
men, wendet  der  Verf.  folgende  Methode  an :    Unter  Benutzung  eines 
Zeichenapparats  wird  der  Ort  der  einen  Achse,  ferner  der  Kreisbogen, 
welcher  der  Ebene  der  optischen  Achsen  entspricht,  und  die  Isogyre 
in  ihrer  Diagonalstellung  markiert.     Wird  für  einen  Punkt  der  letz- 
teren   der  FRESNELSche  Satz   —  welcher    den  Winkel    der    von   ihm 
durch  die  beiden  Achsen  gelegten  Ebenen  in  Beziehung  setzt  zu  der 
Schwingungsrichtung  —  angewandt,  so  läßt  sich  der  Ort  der  anderen 
Achse  in  diesem  Diagramm  konstruieren. 

E.  Sonimerfeldt  {Tübingen). 

Luczizky,   W.,  t^ber  die  Dispersion  der    optischen  Ach- 
sen  bei     den     rhombischen    P  y  r  o  x  e  n  e  n     (Tscher- 
MACKS  min.  u.  petr.  Mitt.  Bd.  XXIV,   1905,  p.  140 — 143). 
Durch  Anwendung   der    mikrokonoskopischen  Methoden    Becke  s 
(vgl.  d.  vor.  Ref.)  ermittelt  der  Verf.  die  Abhängigkeit  der  optischen 
Eigenschaften    der    rhombischen    Pyroxene    von    ihrem    Fundort    und 
stellt  fest,    daß    als  physikalische  Ursache    für   die   auffallenden  Än- 
derungen in  der  Dispersion  bei  diesen  Mineralien  die  Beimischungen 
zu  betrachten  sein   dürften ,    welche    aus    Aluminium-,    Calcium-    und 
Eisenoxyd,  z.  T.  auch  aus  Manganoxyd  bestehen. 

E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 

Stead,  J.  E.,    Micro-Metallography   with  practical  De- 
monstration (Journ.  of  the  Roy.  micr.  Soc.   1905,  pt.  2, 
p.  274—283  w.   1  Fig.). 
Der  Verf.  gibt  Methoden  zur  Auswahl  geeigneter  Proben  für  die 
mikroskopische  Untersuchung    von   Metallen    an    und    beschreibt    die- 
jenigen Apparate    zur    Bearbeitung  (Schneiden ,    Schleifen ,    Polieren) 
derselben,   welche  sich   nach    seinen  Erfahrungen    bewährten.     Auch 
Angaben  über  die   besten  Ätzungsmethoden  und   über  Mikroskoptypen 


XXII,  3.  Referate.  465 

und  Illuminatoren,  welche  zur  Beobachtung-  undurchsichtiger  Objekte 
im  auffallenden  Licht  geeignet  sind,  werden  beigefügt. 

E.   Sommer feldt  {Tübingen). 

Stead,   J.  E.,    Methods  for  Detecting    the    more    Highly 
Phosphorised  Portious  in  Iron   and  Steel  (Journ. 
of  the  Pioy.  micr.  Soc.  190.5,  pt.  2,  p.  284—289  w.  2  THn. j. 
Zur  Unterscheidung  der  an  Phosphor  reicheren  Arten  des  Stahles 
und  Eisens  benutzt  der  Verf.  zwei  Methoden :    Die  erste  beruht   auf 
der  Beobachtung  der  Anlauffarbe ,  welche  die  betr.  Probe  beim  Er- 
hitzen   in    bestimmten  Temperaturen    annimmt,    die    andere    auf   der 
Erzeugung  von  Ätzfiguren;    und  zwar  werden   als  Ätzungsmittel    be- 
nutzt: Jod  in  Jodkalium  gelöst,  Pikrinsäure,  Salpetersäure.    Die  Be- 
schreibung der  Ätzungsgebilde  wird    durch    die   Wiedergabe    von  elf 
Mikrophotographien  vervollständigt.    E.   Sommer  feldt  {Tübingen). 

Seddig,     31.,     Über      „Wachstums"  -  Er s  cheinuugen     an 

Quecksilbertropfen  (Physikal.  Zeitschr.  Bd.  VI,   1905, 

p.  153—154). 

Winzige  Quecksilbertröpfchen  besitzen,  wie  der  Verf.  beobachtete, 

die    Tendenz,    pilzförmige    Wachstumsbildungen    anzunehmen,    deren 

Gestalt  stark  davon  abhängt,  ob  im  Sonnenschein  oder  Schatten  das 

Wachstum  stattfindet.    Diese  Erscheinung  ist  jedoch  nicht  der  Licht-. 

sondern    der    Wärmewirkung    der    Sonne    zuzuschreiben ,    indem    ein 

Hinüberneigen  der  Gebilde  nach  der  Seite  der  stärkeren  Verdunstung 

(also  der  Lichtseite)  wegen  der  dort  stattfindenden  Kontraktion  erfolgt. 

E.  Sommerfeldt  {Tiibiyigen). 


Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  3.  30 


466  ^'eiie  Literatur.  XXII,  3. 


Neue   Literatur 


1.  Lehr-  und  Handbücher. 


Abel,  Riid.,  Bakteriologisches  Taschenbuch,  entli.  die  wichtigsten  techn. 
Vorschriften  zur  bakteriolog.  Laboratoriumsarbeit.  9.  Aufi.  (VI,  117  pp.j 
8».    Würzburg  (A.  Stuber)  1905.  Geb.  2  M. 

Böhm,  A.  A.,  a.  DaTidoff,  M. ,  Textbook  of  Histology  including  Micro- 
scopic  Technics.  Translated  by  II.  A.  Cushing.  M.  Fig.  2.  revised 
and  enlarged  edition.     Philadelphia  1904.     528  pp.     8*^.  17-50  M. 

Hall,  Walker,  J.,  a.  Herxheimer,  G.,  Methods  of  morbid  Histology  and 
clinical  Pathology.  Edinburgh  and  London  (Green  a.  Sons);  XVI  a. 
290  pp.    8'\  9  Sh. 

Merck,  E.,  Prüfung  der  chemischen  Reagentien  auf  Reinheit.  Darmstadt 
1905;  281  pp.     (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  413.) 

Möller,  J.,  Mikroskopie  der  Nahrungs-  und  Genußmittel  aus  dem  Pflanzen- 
reich. Berhn  (Jul.  Springer)  1905;  XVI  u.  599  pp.,  599  Figg.  2.,  ganzl. 
umgearb.  u.  unter  Mitwirkung  A.  L.  Wixtons  vermehrte  Aufl.  (Vgl. 
diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  412.)  18  M. 

Scales,  F.  S.,  Elementary  Microscopy.  Handbook  for  Beginners.  W.  Fig. 
London.    192  pp.    8".  3-20  M. 

Schuster,  A.,  Introduction  to  Theory  of  Optics.  London  iE.  Arnold)  1904. 
356  pp. 

Senft,  E. ,  Mikroskopische  Untersuchung  des  Wassers  mit  bezug  auf  die 
in  Abwässern  und  Schmutzwässern  vorkommenden  Mikroorganismen 
und  Verunreinigungen.  180  Figg.  im  Text  und  10  lithogr.  Tfln., 
19G  pp.  Wien  (Jos.  Safäf)  1905.  (Vgl  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  412.)  9-60  M. 

Zsigiiiondy,  R.,  Zur  Erkenntnis  der  Kolloide.  Über  irreversible  Hydrosole 
und  Ultramikroskopie.  (VI,  18G  pp.  m.  6  Figg.  u.  4  Tfln.)  gr.  8".  Jena 
(G.  Fischer)  1905.  4  M. 


XXII,  o.  Neue  Literatur.  4(57 


2.   Mikroskop  und  mikroskopische  Apparate. 


a.   Nene  Mikroskope. 

Finlaysou,  D.,  The  Ashe-Finlayson  „Comparoscope"  (Journ.  R.  Microsc. 

Soe.  1904,  pt.  4,  p.  414). 
Studnicka,  F.  K. ,  Über  eine  neue  Konstruktion  des  Präpariermikroskops 

(Sitzber.  Böhm.  Ges.  d.  Wiss.  1905,  4  pp. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI, 

1904,  p.  440). 

Kohistka's  Large  Model  mineralogic:d  ]Microscope  (Journ.  R.  Microsc.  Soc. 

190.5,   pt.  4,  p.  492;  vgl.   Koristka's   Katalog,   No.  12,   1905,   p.  31, 

Fig.  15). 
Leitz'   Demonstrations   Microscope    (Journ.   R.   Microsc.   Soc.   1905 ,   pt.  4, 

p.  495;  vgl.  Leitz'  Katalog,  No.  41,  1905). 
Leitz'  Mechanical  Stage  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  497;   vgl. 

Leitz'  Katalog  1905,  No.  41). 
Leitz'  Mineralogical  Stand  No.  I  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  492 ; 

vgl.  Leitz'  Katalog  1905,  No.  41). 
Leitz'  Mineralogical  Stand  II  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  495; 

vgl.  Leitz'  Katalog  1905,  No.  41). 
Reichert's   Medium   dissecting  Microscope   (Journ.  R.  Microsc.   Soc.  1905, 

pt.  3,  p.  3G6;  vgl.  C.  Reicherts  Katalog  1904,  No.  25,  Fig.  19). 
Reichert's   new   Microscope   for   Brain  Sections   (Journ.   R.   Microsc.  Soc. 

1905,  pt.  3,  p.  367;   vgl.  C.  Reicherts  Katalog  1904,  No.  25,  p.  36, 
Fig.  17  d). 

.1.  E.  Stead's  Engineer's  metallurgical   Microscope   (Journ.  R.  Microsc.  Soc. 

1905,  pt.  o,  p.  364;  vgl.  J.  Swift  and  Son's  Catalogue  1904,  p.  35). 
Svvift's  new  Compound  metallurgical  Microscope   (Journ.  R.  Microsc.   Soc. 

1905,  pt.  3,  p.  366:  vgl.  J.  Swift  and  Sox's  Catalogue  1904,  p.  36). 
Tafner's  new  Preparation  Stand  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  368; 

vgl.  Reichert's  Katalog  1904,  No.  25,  p.  41,  Fig.  20a). 


b.   Objektive  und  Okulare. 


(Chalmers,  S.  D.,)  Theory   of  symmetrical  optical   Objectives  (Journ.  R. 

Microsc.   Soc.    1905,   pt.  4,   p.  501;    vgl.   Proc.   R.   Soc.   vol.  LXXIV, 

no.  482,  p.  267,  no.  504,  p.  396). 
Conrady,  Ä.  E. ,   On   the  chromatic  correction  of  Object-glasses  (Monthly 

Not.  R.  Astron,  Soc.  vol.  LXIX,  1904,  p.  274). 
Dowdy,  S.  E.,   Attachable   Object-finder   (Engl.  Mech.  vol.  LXXIX,  1904, 

p.  410). 

30* 


468  Neue  Literatur.  XXII,  3. 

H. ,  Construction  of  aplanatic  Combinations  of  Lenses  with  or  without 
Achromatism  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  501;  vgl.  Engl. 
Mechan.  nn.  -JOIJS.  p.  321;  no.  2069,  p.  340;  no.  2072,  p.  400;  no.  2080, 
p.  595). 

Trozewitsch,  S.  E.,  Anfertigung  von  Objektiven  für  Teleskope,  Mikro- 
skope und  pliotograpliische  Apparate,  die  optische  Technik  der  Mikro- 
skope und  Teleskope  [Russisch].     Warschau  1903.     322  pp. 

Trozewitsch,  S.  E.,  Zur  Frage  über  das  aplanatische  System  (Zeitschr.  f. 
Math.  u.  Phys.  Bd.  LI,  1904,  p.  100). 

Leitz'  New  Objectives  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  500;  vgl. 
Leitz'  Katalog  1905,  No.  41). 

Leitz'  triple  Revolver  with  lai'ge  Protection  Diaphragm  Mourn.  R.  Microsc. 
Soc.  1905,  pt.  4,  p.  507;  vgl.  Liaxz'  Katalog  1905,  No.  41,  p.  110). 

New  formula  Object-glass  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  499;  vgl. 
Leitz'  Katalog  1905,  No.  41). 

Reichert's  new  erect  Image  Preparation  System  for  Preparation  Micro- 
scopes  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  3G8;  vgl.  C.  Reicherts 
Katalog  1904,  No.  25,  p.  40,  Fig.  20). 


c.   Linsen. 

Berger,  E. ,  Über  das  bei  meiner  binokularen  Lupe  verwendete  Linsen- 
system (Deutsche  Mechan.-Zeitg.  1905,  p.  155). 

Blakesley,  T.  H.,  Single-piece  lenses  (Proc.  Phys.  Soc.  London  vol.  XVIII, 
1903,"  p.  591). 


d.  Beleuchtungs-  und  Heizapparate. 

Davis,  D.  J.  A.,  A  method  of  microscopic  Observation  by  means  of  lateral 

Illumination  (Trans.  Chicago  Pathol.  Soc.  vol.  VI,  1904,  p.  90). 
Greil,    Beleuchtungsapparate    mit    NERNSTSchera    Glühlicht     (Anat.    Anz. 

Ergänzungsh.  Bd.  XXV,  1904,  p.  178). 
Kalälme,   A. ,  Über   das   WooDsche   Lichtfilter   für   ultraviolette  Strahlen 

(Phys.  Zeitschr.  Bd.  V,  1904,  p.  415). 
Pflüger,  A.,    Die    Quecksilberlarape    als    ultraviolette    Lichtquelle    (Phys. 

Zeitschr.  Bd.  V,  1904,  p.  414). 
Studnicka,  F.  K.,  Über  eine  neue  Anwendung  des  Abbe  sehen  Kondensors 

(Sitzber.  Böhm.  Ges.  d.  Wiss.  1905,  4pp.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI, 

1904,  p.  432). 
Koristka's  Illuminator   for  opaque  Objects   (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 

pt.  4,  p.  510;  vgl.  Leitz'  Katalog  1905,  No.  41,  p.  50). 


XXII,  3.  Neue  Literatur.  469 

Leitz'  Thermometric  Stages   ( Journ.  1\.  Mierosc.  Soc.  1905 ,  pt.  4 ,  p.  507  • 

vgl.  Leitz'  Katalog  1905,  No.  41,  p.  85). 
Monochrumatic  Trough   (Journ.  R.  Mierosc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  507;   vgl. 

K.  a.  J.  Beck's  Special  Catalogue  1905). 
New  vertical  lUuiuinator  for  metallurgical  Examinations  (Journ.  R.  Mierosc. 

Soc.  1905,  pt.  4,  p.  506 ;  vgl.  Knowledge  vol.  II,  1905,  p.  43  und  R.  a. 

J.  Beck's  Special  Catalogue  1905). 
Pfeiffer's  Hot-Air  Chamber   (Journ.  R.  Mierosc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  371 ; 

vgl.  Reichert  s  Katalog  1904,  No.  25,  p.  53,  Fig.  2Gb). 
Reichert's  new  chromatic  Condensor  (Journ.  R.  Mierosc.  Soc.  1905,  pt.  3, 

p.  371;  vgl.  Reicherts  Katalog  1904,  No.  25,  p.  13). 
J.  E.  Stead's  Illuminator  for  opaque  Objects  (Journ.  R.  ^licrosc.  Soc.  1905, 

pt.  3,  p.  372;  vgl.  J.  Swift  and  Son's  Catalogue  1904,  p.  35), 


e.   Polarisationsmikroskop. 

(Holmes,  E.,)  Polariscope  (Journ.  R.  Mierosc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  509 ;  vgl. 

Engl.  Median,  vol.  LXXXI,  1905,  p.  383). 
Rinne,  F.,  Le  Microscope  polarisant  (Trad.  par  L.  Pervinguiere  av.  pre- 

face  par  A.  de  Lapparent,  Paris  1904,  160  pp.). 


f.  Zeiclienapparate. 


Bausch  and   Lomb's  -adjustable   Drawing  Board  (Journ.   R.   Mierosc.   Soc. 

1905,  pt.  4,  p.  512;  vgl.  Bausch  a.  Lomb's  Catalogue  1904,  p.  70). 
Bausch  and  Lomb's  improved  Form  of  Camera  lucida   (Journ.  R.  Mierosc. 

Soc.  1905,  pt.  4,  p.  511 ;  vgl.  Bausch  a.  Lomb's  Catalogue  1904,  p.  68). 
Leitz'  Drawing  Board  [simple  Form]   (Journ.  R.  ]\Iicrosc.  Soc.  1905,  pt.  4, 

p.  508;  vgl.  Leitz'  Katalog  1905,  No.  41,  p.  Sl). 


g.  Ultramikroskop. 


3Ieyer,  Das  Ultramikroskop  (Kosmos  Bd.  I,  No.  I). 

Siedentopf   a.   Zsigraondy,    New    microscopic   Apparatus    for    rendering 

visible  ultra-microscopic  Particles   in  Glasses  and  Liquids    (Reichert"s 

special  circular). 


470  ^^eue  Literatur.  XXII,  3. 


3.  Mikrophotographie  und  Projektion. 

Köhler,  A.,  Eine  mikroskupische  Einrichtung'  für  ultraviolettes  Licht 
(>.  =  27.5  ^u/u)  und  damit  angestellte  Untersuchungen  organischer  Ge- 
webe (Verh.  76.  Vers.  D.  Naturf.  u.  Ärzte,  Breslau  1904,  Bd.  II  [1], 
1905,  p.  29—33). 

(Köhler,  A. ,  a.  Rohr,  M.  v.,)  Photomicrograph\-  with  ultra-violet  Light 
(Journ.  R.  Microsc.  See.  1905,  pt.  4,  p.  513;  vgl.  Zeitschr.  f.  Instru- 
mentenk.  Bd.  XXIV,  1904,  p.  341). 

König,  E.,  Über  Badeplatten  (Photogr.  Korrespond.  Bd.  XLII,  1905, 
p.  399—406:  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  413). 

Langlet,  E.,  Methodes  employees  au  Laboratoire  d'Essais  du  Conservatoire 
national  des  Arts  et  Metiers  pour  l'Etude  des  Objectifs  photographiques 
(Sog.  Franc,  de  Phys.  no.  233,  1905,  p.  2—3). 

Leitz'  Universal  Projection  Apparatus  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4, 
p.  504-,  vgl.  Leitz'  Katalog  1905,  No.  41,  u.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI, 

1904,  p.  30.5). 

Vorrichtung  zum  Wechseln  der  Bilder  im  Projektionsapparat  (Deutsche 
Mechan.-Zeitg.  1905,  p.  127:  vgl.  Bayr.  Ind.- u.  Gew.-Bl.  Bd.  XXXVII, 

1905,  p.  114). 


4.  Präparationsniethoden  im  allgemeinen. 

Barnabö,  Valentino.    Liquidi    fissatori    alcalini:    Contributo    alla    tecnica 

istologica  (Boll-  Soc.  Zool.  Ital,  Anno  XIV  [8er.  2,  vol.  VI],  fasc.  1  3, 

p.  55—73). 
Bethe,  Albr.,  Die  Einwirkung  von  Säuren  und  Alkalien  auf  die  Färbung 

und  Färbbarkeit  tierischer  Gewebe  (Beitr.  z.  ehem.  Physiol.  u.  Pathol. 

Bd.  VI,  1905,  H.  9,  10,  p.  399—425). 
(Breuil,  P.,)  Examining  Caoutchouc  by  the  Aid  of  the  Microscope  (Journ. 

R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  389;  vgl.  C.  R.  Acad.  Sc.  Paris  t.  CXL, 

1905,  p.  1142). 
Courmont,  J. ,   et  Andre,    Ch. ,    Teehnique    histologique    permettant    de 

deceler  sur  les  coupes  les  substances  du  groupe  de  la  Purine,  notam- 

ment  l'acide  urique  (C.  R.  Soc.  Biol.  Paris  t.  LVII,  1904,  p.  131—132: 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  417). 
Curreri,  Giuseppe ,   Metodi   nuovi   e  semplici  per  tissare   e  ritrovare  dei 

punti   interessanti   di    preparati    microscopici    (Atti    Accad.    Peloritana 

vol.  XIX,  fasc.  2,  8  pp.  8«). 
(Curtis  a.  Lemoult,  P.,)   Affinity   of  artificial  colouring  Matters  for   con- 

nective  Tissue  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905.  pt.  4,  p.  530;  vgl.  C.  R. 

Acad.  Sc.  Paris  t.  CXL,  1905,  p.  1606). 


XXII,  3.  Neue  Literatur.  471 

Delamare,  Gabriel,  Melange  tetrachrome  [coloration  elective  et  simultanee 

des  noyaux  cellulaires,  des  fibres  conjonctives,  elastiques  et  luusculaires] 

(C.  R.  Süc.  Biol.  t.  LVIII,  no.  18,  p.  828—829). 
Dixon,  W.  E.,  a.  Inchley,  O.,  The  Cilioscribe,  an  Instrument  for  recording 

the  Activity   of  Cilia,   4  figg-.   (Journ.  of  Phys.  vol.  XXXII,  no.  5,  tj, 

p.  395—400). 
Dubreuil,  G.,  Le  Picro-Bleu,  nute  sur  remploi  de  ce  reactif  pour  la  colo- 
ration  specifique   des   tibrilles   conjonctives.     Application  ä  l'etude  du 

tissu   reticule   du   ganglion   lymphatique  (C.  R.  Assoc.  Anat.  VI.  Sess. 

Toulouse  1904,  Bibliogr.  anat.  Suppl.  1904,  p.  62—66 :  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  420). 
Fick,  Job.,  Aufklebemethode  und  Scliälclienmethode  bei  der  Färbung  von 

Paraftinschnitten  (Zentralbl.  f.  allgem.  Pathol.  u.  patliol.  Anat.  Bd.  X\'I. 

1905,  No.  15,  p.  596). 
Fischer,  A. ,   Eine    neue   Glj^kogenfärbung   (Anat.  Anz.  Bd.  XXYI,  1905, 

No.  13,  14,  p.  399—400:  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  421). 
Forster,  W.  H.  C. ,  A  simple  technique  for  the  enumeration  of  organisms 

in  any  fluid  (Lancet  vol.  I,  1905,  no.  24,  p.  1641—1642). 
Fuld ,  E. ,  Über  einen  neuen  Indikator  (München,  med.  Wochenschr.  1905, 

No.  25,  p.  1197). 
Halphen ,  G. ,   et  Riebe,  A. ,   Cuntribution  ä   Tetude   des   teintures   liisto- 

logiques  (Corapt.  rend.  Acad.  Sc.  t.  CXL,  no.  21,  p.  1408—1410). 
(Halijheu,  G.,  a.  Riebe,  A.,)   Theory   of  histological    Staining  (Journ.   R. 

Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,   p.  530;   vgl.  C.  R.  Acad.  Sc.  Paris  t.  CXL, 

1905,  p.  1408). 
(Harnian,  N.  B.,)   Accessory  for  freezing  Microtomes   (Journ.  R.  Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  4,  p.  528;  vgl.  Lancet  vol.  I,  1905,  p.  1505). 
( Josepb,  F.  H.,)  Fugent:  a  new  Stain  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3, 

p.  384;  vgl.  Brit.  Med.  Journ.  vol.  L  1905,  p.  136). 
Julius,  W.  H. ,   Bemerkungen  über  erschütterungsfreie  Aufstellung  (Ann. 

d.  Phys.  Bd.  XYIII  [4],  1905,  p.  206—209). 
Lemanissier,  J. ,   L'etude   des   corps  iiltramicroscopiques  (These  de  Pari:^ 

1905,  80). 
(Mair,  W.,)  Method  for  freeing  Paraffin  from  Cedarwood  Oil   (Journ.  R. 

Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  533;    vgl.  Brit.  Med.  Journ.  vol.  I,  1905, 

p.  1381). 
Medea,   E. ,    L'applicazione    del    nuovo   metodo   di   Ramön   y   Ca.jal   alio 

studio  del  sistema  nervoso  periferico   (Communicazione  alla  Soc.  med.- 

cliir.  di  Pavia,  14.  gennaio  1905). 
(Merlin,  A.  A.  C.  E.,)  Modification   of  the  Rousselet  Live-box  (Journ.  R. 

Microsc.   Soc.  1905,    pt.  4,   p.  532;    vgl.  Journ.  Quekett  Microsc.  Club 

vol.  IX,  1905,  p.  169). 
Michaelis,   L. ,    Ultramikroskopische    Untersuchungen    (V^irchows    Arch- 

Bd.  CLXXIX,  1905,  H.  2,   p.  195-208  m.  1  Tft.;   vgl.   diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  413). 
(Miller,  E.  F.,)  Multiplex  Slide-holding  Device  for  staining  Sections  (Journ. 

R.  Microsc.  Soc.  1905,   pt.  4,   p.  530;   vgl.   John  Hopkins  Hosp.  Bull. 

vol.  XV\,  \^05,  p.  132). 


472  Neue  Literatur.  XXII,  3. 

(Osterhout,  W.  J.   V.,)   Simple   freezing   Microtome   (Journ.   R.   Microsc. 

Soc.  1905,  pt.  4,  p.  528 :  vgl.  Univ.  California  Publ.  Bot.  vol.  II,  1904. 

p.  73  u.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904,  p.  527). 
(Osterhout,  W.  J.  V.,)  Fixation  in  Vacuo   (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 

pt.  4,  p.  527;   vgl.  Univ.  California  Publ.  Bot.  vol.  II,  1904,  p.  78  u. 

diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904,  p.  527). 
(Osterhout,  W.  J.  V.,)    Rapid   Method    of   Mounting    in    aqueous    Media 

(Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  4,  p.  532;  vgl.  Univ.  California  Publ. 

Bot.  vol.  II,  1904,  p.  83  u.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904,  p.  527). 
(Osterhout,  W.  J.  V.,)  Simple  Slide-holder  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905, 

pt.  4,   p.  532;   vgl.  Univ.  California  Publ.  Bot.  vol.  II,  1904,  p.  81  u. 

diese  Zeitschr.  Bd.  XXI,  1904,  p.  527). 
l^Powell,  J.  G.  R.,)  Copal  as  a  mounting  Medium  (Journ.  R.  Microsc.  Soc. 

1905,  pt.  3,  p.  387;  vgl.  Engl.  Mechan.  vol.  LXXXI,  1905,  p.  133). 
Regaud,  Cl.,  et  Dubreuil,  G.,  Sur  un  nouveau  procede  d'argentation  des 

epitheliums  au  moyen  du  protargol  (C.  R.  de  l'Assoc.  des  Anat.  V.  Sess. 

Liege  1903,  Bibliugr.  anat.  Suppl.  1903,  p.  121 — 123;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  418). 
Ribadeau-Dumas,  Application  de  la  methode  ä  l'argent  de  Ramön  y  Cajal 

ä  Tetude  de  la  rate  (Bull,  et  Mem.  de  la  Soc.  anat.  de  Paris,  Annee  LXXX, 

Ser.  6,  T.  7,  No.  4,  p.  281-222). 
Sereni,  S. ,   Sull'uso   di  formalina   come  mezzo  di  conservazione  dei  sedi- 

menti  delle  urine,  dei  liquidi  ascitici,  pleurici  ecc.  (BoU.  d.  Soc.  Lanci- 

siana  degli  Ospedali  di  Roma  Anno  XXV,  1905,  fasc.  3,  11  p.  2  figg.). 
Sternberg,  K.,  Eine  Schnittfärbung  nach  der  Romanowski  sehen  Methode 

(Zentralbl.   f.   allgem.   Pathol.    u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  8, 

p.  293—294;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  41G). 
Wederhake,    Zur  mikroskopischen  Schnelldiagnose  (Zentralbl.  f.  Gynäkol. 

Jahrg.  XXIX,  No.  25,  p.  785—790). 
Wolfrum,  Celloi'dintrockenmethode  (Klin.   MonatsbL  f,  Augenheilk.  Jahrg. 

XLIII,  Bd.  II,  p.  61—64). 
Reichert's  Medium  Microtome  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  382; 

vgl.  Reichert  s  Katalog  1904,  No.  25,  p.  58). 


5.  Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


a.   Niedere  Tiere. 

Bösenberg,  H.,  Beiträge  zur  Kenntnis  der  Spermatogenese  bei  den 
Arachnoiden  (Zool.  Jahrb.,  Abt.  f.  Anat.  u.  üntogen.  Bd.  XXI,  1905, 
p.  515—570  m.  3  Tfln;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  426). 


XXII,  3.  Neue  Literatur.  473 

Gemelli ,   Fra  A. ,   Su  di  una   fine   particolaritä  di  struttura    delle   cellule 

nervöse  dei  vermi.     Nota  preventiva.     1  Tav.    (Riv.  di  Fisica,  Matern. 

e  Scienze  nat.  Pavia,  Anno  VI,  no.  (J6,  p.  518 — 532). 
(rienisa,  G. ,  Coloration  des  protozoaires   (Ann.  de  l'Inst.  Pasteur,  Annee 

XIX,  1905,  no.  5,  p.  34G-352). 
Heluemann ,  Ph. ,   Untersuchungen  über  die  Entwicklung  des  Mesoderms 

und  den  Bau  des  Ruderschwanzes  bei  den  Ascidienlarven  (Zeitschr.  f. 

wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX,  1905,  p.  1—72  ra.  4  Ttin. ;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXll,  1905,  p.  424). 
Laß,  M. ,   Beiträge   zur  Kenntnis   des  histologisch-anatomischen  Baues  des 

weiblichen    Hundeflohes     [Pulex    canis     Duges    s.     Pulex    serraticeps 

TaschexbergJ    (Zeitschr.  f.  wiss.  Zool.   Bd.  LXXIX,  1905,  p.  73—131 

m.  2  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  425). 
Lewis,  J.,  a.  Williams,  H.  U. ,  The    results   of  attempt  to  cultivate  try- 

panosomes  from  frogs  (American  med.  t.  IX,  1905,  p.  491). 
Montgomery,  Th.  H.,  The  Spermatogenesis  of  Syrbula  and  Lycosa,  with 

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chromosomes.     2  Tfln.  (Proc.  of  the  Acad.  of  Nat.  Sc.  of  Philadelphia 

vol.  LXVII,  pt.  1,  p.  162—205). 
Schröder,  O.,  Beiträge  zur  Kenntnis  der  Bauchsinnesorgane  [Bauchaugen] 

von  Eunice  virides  Gray  sp.  [Palolo]  (Zeitschr.  f.  wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX, 

1905,  p.  132—149  m.  2  Figg.  u.  2  Tfln. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  424  t. 
Schuberg,   A. ,    Über  Cihen  und  Trichocysten   einiger  Infusorien.     2  Tfln. 

(Arch.  f.  Protistenk.  Bd.  VI,  H.  1,  p.  61—110). 
Thon,  K.,  Über  den  feineren  Bau  von  Didinium  nasutum  0.  F.  M.    2  Tfln. 

u.  3  Figg.  (Arch.  f.  Protistenk.  Bd.  V,  H.  3,  p.  281—321). 


b.  Wirbeltiere. 

Abrikossoll",  A.  J, ,  Über  die  ersten  anatomischen  Veränderungen  bei 
Lungenphthise  (Virchows  Arch.  Bd.  CLXXVIII,  1904,  H.  2,  p.  173 
—263  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  439). 

Asahi ,  K. ,  Beitrag  zur  Untersuchung  auf  Hyphomyceten  (Prager  med. 
Wochenschr.  1905,  No.  12). 

Davis,  D.  J.,  Ultramicroscop  observations  on  cerebrospinal  fluid  and  blood. 
1  flg.  (Trans,  of  the  Chicago  Pathol.  Soc.  vol.  VI,  no.  7,  p.  225—229). 

Donaldson,  H.  H.,  a.  Hoke,  G.  AV.,  On  the  Areas  of  the  Axis  Cihnder 
and  meduUary  Sheath  as  seen  in  cross  Sections  of  the  Spinal  Nerves 
of  Vertebrates  (Journ.  Compar.  Neurol.  and  Psychol.  vol.  XV,  1905, 
no.  1,  p.  1—16  w.  1  flg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  446). 

Erdely,  A. ,  Untersuchungen  über  die  Eigenschaften  und  die  Entstehung 
der  Lymphe.  Fünfte  Mitteilung.  Über  die  Beziehung  zwischen  Bau 
und   Funktion   des  lymphatischen  Apparates   des  Darmes   (Zeitschr.  f. 


474  Neue  Literatur.  XXII,  3. 

Biol.  LXVI,    1904,   H.  2,  p.  119—152   m.   1  Tri.;    vgl.    diese   Zeitsclir 

Bd.  XXII,  1905,  p.  427). 
Ferrata,  Ad.,  Sul  nucleolo  della  cellula  nervosa  (Monit.  Zool.  Ital.,  Anno 

XVI,  no.  G,  p.  170—171). 
Fischel,  R.,  Zur  Teclmik  der  KROMAYERsclien  Epithelfasern  (Zentralbl.  f. 

allgem.  Pathol.  u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  15,  p.  593). 
Glas,  E.,   Zur  Frage   der  Sarkolyse.  [Erste  Mitteilung-  über  quergestreifte 

Muskeln  und  deren  Zerfallsprodukte   im  follikulären  Gewebe  der  Ton- 
sille] (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905,  No.  Ü,  p.  155—171  m.  1  Tri.;   vgl. 

diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  427). 
Hansen,  F.  C.  C,  Untersuchungen  über  die  Gruppe  der  Bindesubstanzen. 

I.  Der   Hyalinknorpel   (Anat.    Hefte,   H.  83    [Bd.   XXVII,   H.  3]    1905. 

p.  537—820  m.  5  Figg.  i.  Text  u.  10  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII. 

1905,  p.  433). 
Homburger,    A.,   Über   die    Gründe    der    mangelhaften    Haltbarkeit    und 

die  Wiederherstellung  abgeblaßter   Weigert  scher    Neurogliapräparate 

(Zentralbl.  f.   allgem.   Pathol.   u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  15, 

p.  600). 
Illing,  G.,  Vergleichende  histologische  Untersuchungen  üb^r  die  Leber  der 

Haussäugetiere  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905,  No.  7,  8,  p.  177—193  m- 

1  Fig.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  436). 
Karakaeheff,  K.  Iy.,  Über  das  Verhalten  der  Lagerhans  sehen  Inseln  dos 

Pankreas  bei  Diabetes  mellitus  (Deutsches  Ar  eh.  f.  klin.  Med.  Bd.LXXXll. 

1904,  H.  1,  2,  p.  60—89  m.  1  Tfl.  u.  3  Figg.  i.  Text;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXH,  1905,  p.  4.35). 

Lenzniauu,  R. ,  Über  eine  vereinfachte  Methode  der  Färbung  von  Blur- 
trockenpräparaten  (Rheinisch-Westfälische  Ges.  f.  inn.  Med.  u.  Nerven- 
heilkunde. IV.  Vers.  6.  Nov.  1904  zu  Duisburg;  Ref.  in  München,  med. 
Wochenschr.  Jahrg.  LI,  1904.  No.  50,  p.  2250—2251;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905.  p.  431). 

Leyen,  E.  von  der,  Über  die  Schleimzone  des  menschlichen  Magen-  und 
Darmepithels  vor  und  nach  der  Geburt  (Virchows  Arch.  Bd.  CLXXX, 

1905,  No.  1,  p.  99—107;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  435 1. 
London,  E.  S.,  Zur  Lehre  von  dem  feineren  Bau  des  Nervensystems  (Arcli. 

f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  1905.  p.  111—115  m.  1  Tfl.:  vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  447) 

Mahaim,  A. ,  Les  terminaisons  cylindraxiles  pericellulaires  de  Held  (Bull, 
de  l'Acad.  R.  de  Med.  de  Belgique,  ser.  4,  t.  XIX,  no.  4,  5,  p.  256—268 

Maresch,  R.,  Über  Gitterfasern  der  Leber  und  die  Verwendbarkeit  der 
Methode  Bielschowsky s  zur  Darstellung  feinster  Bindegewebsfibrillen 
(Zentralbl.  f.  allgem.  Pathol.  u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  16,  17, 
p.  641). 

Meves,  F.,  Über  die  Wirkung  gefärbter  Jodsäure  auf  die  roten  Blut- 
körperchen der  Amphibien.  Vorläufige  Mitteilung  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI, 
1905,  No.  4,5,  p.  97—103  m.  4  Abb.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  430). 

Michotte,  A.,  Contribution  h  l'etude  de  l'histologie  fine  de  la  cellule 
nerveuse  (Le  Nevraxe  t.  VI,  fasc.  3). 


XXII,  o.  Neue  Literatur.  475 

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par  M.  Sergent  dans  le  sang  des  paludeens  (Compt.  Rend.  Soc.  Biol. 
t.  LVIII,  no.  16,  p.  760—762). 

Pascucci,  0.,  Die  Zusammensetzung  des  Blutscheibenstromas  und  die  Hä- 
molyse.  1.  Mitteil.:  Die  Zusammensetzung  des  Stromas.  2.  Mitteil.: 
Die  Wirkung  von  Blutgiften  auf  Membranen  aus  Lecithin  und  Cliole- 
sterin  (Beitr.  z.  ehem.  Phj^siol.  u.  Pathol.  Bd.  VI,  H.  11,  12,  p.  543—566). 

Pensa,  A.,  Osservazioni  suUa  distribuzione  dei  vasi  sanguigni  e  doi  nervi 
nel  pancreas  (Intern.  Monatsschr.  f.  Anat.  u.  Physiol.  Bd.  XXII,  1905, 
H.  1—3,  p.  90—126  m.  6  Tfln.  u.  5  Figg. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  438). 

Pighini,  G. ,  Sur  l'origine  et  la  formation  des  cellules  nerveuses  chez  les 
embryons  des  Selaciens  (Bibliogr.  anat.  t.  XIV,  1905,  fasc.  1,  p.  94—105 
av.  3  figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,   1905,  p.  441). 

Pighini,  G. ,  Sulla  struttura  dei  globuli  rossi  [Anfibi,  Uccelli,  Mammiferi 
compreso  l'uomo].  1  tav.  (Arch.  Sc.  med.  vol.  XXIX,  1905,  fasc.  1,  2, 
p.  49—66). 

Ramon  y  Cajal,  S.,  Neuroglia  y  Neurofibrillas  dei  Lumbricus  (Trab.  Labor. 
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Bd.  XXII,  1905,  p.  444). 

Ramöu  y  Cajal,  S. ,  y  Garcia,  D.  D. ,  Las  lesiones  dei  reticulo  de  las 
celulas  nerviosas  en  la  rabia  (Trab.  Labor.  Invest.  Biol.  Madrid  t.  III, 

1904,  fasc.  4,   p.  213—266  c.  29  figg.;   vgl.  diese  Zeitschr.   Bd.  XXII. 

1905,  p.  443). 

Rufflni,  A.,  Di  una  nuova  guaina  [guaina  sussidiaria]  nel  tratto  terminale 

delle  fibre  nervöse  di  senso  nell'uomo  (Zeitschr.  f.  wiss.  Zool.  Bd.  LXXIX, 

1905,  p.   150—170   c.   2   tavv. ;    vgl.   diese  Zeitschr.   Bd.   XXII,  1905, 

p.  447). 
Schmidt,  J.  E.,  Beiträge  zur  normalen  und  pathologischen  Histologie  einiger 

Zellarten    der    Schleimhaut    des    menschlichen    Darmkanales    (Arch.    f. 

mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  1905,  p.  12— 40  m.  ITA.;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  439). 
Schridde ,   H. ,  Die   Darstellung    der    Leukocytenkörnelungen   im    Gewebe 

(Zentralbl.  f.   allgem.  Pathol.  u.  pathol.  Anat.  Bd.  XVI,  1905,  No.  19, 

p.  769). 
Schwarz,  G.,  Studien  über  im  großen  Netz  des  Kaninchens  vorkommende 

Zellformen   (Vmciiows  Arch.  Bd.  CLXXIX,    1905,   H.  2,   p.  209—265 

m.  1  Tfl. ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  434). 
Srdinko,  O.  V.,  Eine  sichere  Methode  zur  Differenzierung  der  Rinden-  und 

Markelemente  der  Nebenniere,  besonders  bei  Säugetieren  und  Menschen 

(Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905,  No.  6,  p.  172—174  m.  1  Fig.;  vgl.  diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  437). 
Tartuferi,  F.,   Su  di  una  terza  nuova  impregnazione  metallica  dei  tessuti 

e  specialmente  della  cornea   (Ann.  Ottalmol.   Anno  XXXIV,  fasc.  1,  2, 

p.  74—78,  u.   Bull.   Sc.   med.  Anno  LXXV,  ser.  8,  vol.  IV,  fasc.  12, 

p.  589—592). 
LThleuhuth,  P. ,  Über  den  Stand  der  forensischen  Blutuntersuchung  (Med. 

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470  Neue  Literatur.  XXII,  3. 

Valediusky,  I.  A..  Zur  Frage  über  die  Nervenknoten  im  Herzventrikcl 
einiger  Säugetiere.  Vorläufige  Mitteilung  (Anat.  Hefte,  H.  81  [Bd.  XXVII, 
H.  1],  1904,  p.  287—293  m.  2  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  442). 

Varela  de  la  Iglesia,  R.,  Contribuciön  al  estudio  de  la  ruedula  espinal 
(102  pp.,  c.  22  laiuinas  en  fototipia.  Madrid  1904,  Ricardo  Fe  [Der  Text 
ist  spanisch  u.  französisch] ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  445). 

Wederhake,  Zur  Untersuchung  menschlicher  Samenflecke  für  gerichtliche 
Zwecke  iDeutsclie  med.  Wochenschr.  1902,  No.  25). 

Weidenreich ,  F. ,  Studien  über  das  Blut  und  die  blutbildenden  und  -zer- 
störenden Organe.  3.  Über  den  Bau  der  .A.mphibienerythrocyten.  1  Tti. 
u.  2  Figg.  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  H.  2,  p.  270—298). 

Wuttig,  H.,  Experimentelle  Untersuchungen  über  Fettaufnalime  und  Fett- 
ablagerung (Beitr.  z.  pathol.  Anat.  u.  z.  allgem.  Pathol.  Bd.  XXXVII, 
1905,  H.  2,  p.  378—410  m.  1  Tfl.  u.  3  Figg.  i.  Text;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  43G). 

Zietzschmann,  O.,  Über  die  acidophilen  Leukocyten  (Körnerzellen)  des 
Pferdes  (Intern.  3Ionatsschr.  f.  Anat.  u.  Physiol.  Bd.  XXII,  1905, 
H.  1—3,  p.  1—90  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  429). 


c.   Bakterien. 


Eandi,  I.,  u.  Simonelli,  Fr,,  Über  die  Anwesenheit  der  Spirocliaete  pallida 
in  sekundär-syphilitischen  Manifestationen  und  über  die  zu  ilirem  Nach- 
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Boit,  H.,  Einfache  und  sichere  Identifizierung  des  Typhusbacillus.  48  pp. 
Jena  (G.  Fischer)  1905.  1  M. 

Bolduan ,  Ch. ,  The  addition  of  marble  or  other  calcium  Compounds  to 
nutrient  broth;  a  reliable  and  convenient  method  for  growing  the 
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Bordet,  J. ,  Une  methode  de  culture  des  microbes  anaerobies  (Ann.  de 
rinst.  Pasteur  t.  XVIII,  1904,  p.  332;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  454). 

Buerger,  L. ,  Eine  neue  Methode  zur  Kapselfärbung  der  Bakterien;  zu- 
gleich ein  Beitrag  zur  Morphologie  und  Difterenzierung  einiger  ein- 
gekapselter Organismen.  3  Tfln.  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig. 
Bd.  XXXIX,  H.  2,  p.  216—224). 

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Cache ,  A, ,  Über  die  Frage  der  bakteriologischen  Technik  (Zentralbl.  f- 
Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  1905,  No.  1,  3,  p.  47—52,  4  Figg.). 


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zur  Eeinzüclitung  von  Tuberkelbazillen  aus  Bakteriengeiuisclien   (Zen- 

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(Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.   Bd.  XXXIX.  1905,  H.  3,  p.  230 

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Giemsa,  G. ,  Eine  Vereinfachung  und  Vervollkommnung  meiner  Methylen- 
azur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur  Erzielung  der  Romanow^sky- 

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Bd.  XXXVII,  H.  2,  p.  308;  vgl.  diese  Zeitschr.  XXII,  1905,  p.  449). 
Giemsa,  G.,   Bemerkungen  zur  Fiirbung  der  Spirochaeta  pallida   [Schau- 

dinn]     (Deutsche    med.    Wochenschr.    Jahrg.    XXXI,    1905,     No.   2tj, 

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Gravagna,  Sulia  coltura  artiticiale  del  bacillo  di  Hansex  fnori  deU'organismo 

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Gwyu,  N.  B,,  a.  Harris,  N.  3Iac  L.,  A  comparison  between  the  results  of 

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p.  26.5—279.  2  Tfln.). 
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bei  Lues  vorkommenden  Spirochaete  pallida  (Deutsche  med.  Wochenschr. 

Jahrg.  XXXI,  1905,  No.  26,  p.  1023—1026,  1  Fig.). 
Kern ,  F. ,  Ein  neues  Bakterienfilter   (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1 ,  Orig. 

Bd.  XXXIX,  1905,  IL  2,  p.  214-216,  1  Fig.). 
Koch,   A.,    Jahresbericht   über    die   Fortschritte    in    der    Lehre    von    den 

Gärungsorganismen.    Jahrg.  XIII,  1902.    Leipzig  (S.  Hirzel)  1905;  VIII 

u.  672  pp.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905.  p.  448).  16  M. 

Körte,  W.   E.   de,    The    cultivation    of   the   parasites    of   small-pox   and 

vaccinia  in  vitro  (Practitioner.  vol.  LXXV,  1905,  p.  378—384,  2  Tfln.). 
Kraft,  E.,  Winke  für  die  Ausführung  chemisch-bakteriologischer  Arbeiten 

auf  dem  Gebiete  der  Harn-,  Sputum-,  Fäces-  etc.  Untersuchungen.  Berlin 

(Verlag  d.  deutsch.  Apotheker-\'er.)  1905;  35  pp.  8^'.  1  M. 

Lentz  u.  Tietz,  J.,  Weitere  Mitteilungen  über  die  Anreicherungsmethode 

für   Typhus-  und  Paratyphusbazillen   mittels   einer  Vorkultur   auf  Ma- 

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478  Neue  Literatur.  XXII,  'S. 

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p.  1262). 

(3Iencloza,  A.,)  Staining  the  Tubercle  Bacillus  with  Eosin  (Journ.  R.  Microsc. 
Soc.  1905,  pt.  4,  p.  529;  vgl.  Bolet.  Inst.  Alfonso  XIII.  vol.  I,  1905, 
p.  9). 

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oxydchlorid (Zeitschr.  f.  Hygiene  u.  Infektionskrankh.  Bd.  LI,  1905, 
H.  1,  p.  1—17). 

NicoUe,  F.,  Suite  d"experiences  relatives  au  phenomene  de  l'agglutination 
des  microbes  (Ann.  de  l'Inst.  Pasteur  t.  XVIII,  1904,  p.  210-,  vgl. 
diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  454). 

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im  Blut  Syphilitischer  (München,  med.  Wochenschr.  Jahrg.  LH,  1905, 
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Nowack,  K.,  Über  die  Grenzen  der  Verwertbarkeit  des  Malachitgrünagars 
(Arch.  f.  Hygiene  Bd.  LIII,  H.  4,  p.  374:  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  453). 

Ocker-BIom.  M.,  Bestimmung  der  elektrischen  Leitfähigkeit  mit  bezug  auf 
bakteriologische  Zwecke  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII, 
1905,  H.  1,  p.  150;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  451). 

Omelianski ,  W. ,  Ameisensaures  Natron  enthaltende  Bouillon  als  Nähr- 
boden zur  difterentiellen  Diagnostik  der  Mikroben  (Zentralbl.  f.  Bakteriol. 
Abt.  1,  Bd.  XIV,  1905,  No.  2:>,  23,  p.  (373— G75). 

Oppenheim,  M.,  u.  Sachs,  O.,  Eine  einfache  und  schnelle  Methode  zur 
deutlichen  Darstellung  der  Spirochaete  pallida  (Deutsche  med.  Wochen- 
schr. Jahrg.  XXXI,  1905,  No.  29,  p.  1156). 

(Parkes,  \V.  C.  C,  a.  Josejih,  F.  H.,)  Use  of  acid  Media  in  Isolation  of 
the  Plague  Bacillus  (Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  378;  vgl. 
Brit.  Med.  Journ.  vol.  I,  1905,  p.  136). 

(Perotti,  R. ,)  Methods  for  isolating  the  micro-organisms  of  nitrification 
(Journ.  R.  Microsc.  Soc.  1905,  pt.  3,  p.  376;  vgl.  Atti  R.  Accad.  Lincei 
vol.  XIV,  1905,  p.  228). 

Proca,  G.,  et  Vasilescu,  V.,  Sur  un  procede  de  coloration  rapide  <lu 
Spirochaete  pallida  (Compt.  Rend.  Soc.  Biol.  t.  LVIII,  1905,  no.  23, 
p.  1044-104.5). 

Reischaiier,  Über  den  Nachweis  von  Typhusbazillen  in  den  Darment- 
leerungen mit  Verwendung  der  neueren  Anreicherungsmethoden  (Zen- 
tralbl. f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXIX,  1905,  H.  1,  p.  116-128). 

Reitniauu,  K.,  Zur  Färbung  der  Spirochaete  pallida  Schaudinn  (Deutsche 
med.  Wochenschr.  Jahrg.  XXXI,  1905,  No.  25,  p.  997). 

Schaer,  Ed.,  Über  eine  neue  Form  von  Reagiergläsern  zu  chemischen  und 
bakteriologischen  Zwecken  (Zeitschr.  f.  analyt.  Chemie  Jahrg.  XLIV, 
1905,  H.  6,  7,  p.  396-397). 
Schüller,  M. ,  Über  die  C'hromatinkörper  der  Krebs-  und  Sarkomparasiten 
des  Menschen  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  1904, 
H.  4,  p.  547 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  451). 


XXII,  o.  Neue  Literatur.  47 y 

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1905,  p.  13,  321). 
Taylor,  A.  E.,    On    the  Preparation   of  salt-free   culture   Media    and   the 

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1905,  No.  3-2,  p.  1279).  —  Antwort  von  Giemsa  (ibid.,  No.  1279). 
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1905,  pt.  3,  p.  378;   vgl.   Rept.    on   the    Plague  in   Natal   1902—1903. 

By  E.  Hill,  London  [Cassell  a.  Co.];  192  pp.,  1904). 
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pest  und   des   Pseudotuberkulosebacillus  der   Nagetiere   [Bac.  pseudo- 

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H.  3,  p.  345;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  452). 
Zlatogoroff,  S.  J. ,  Zur  Mikrobiologie  der  Glasern   (Zentralbl.  f.  Bakteriol. 

Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  H.  2,  p.  249;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  4501 


d.  Botanisches. 

Allen,  Ch.  E.,  Nuclear  division  in  the  pollen  mother-cells  of  Lilium  cana- 
dense  (Ann.  of  Bot.  vol.  XIX,  1905,  p.  198;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  461). 

Brand,  F.,  Über  die  sogenannten  Gasvakuolen  und  die  differenten  Spitzen- 
zellen der  Cyanophyceen,  sowie  über  Schnellfärbung  (Hedwigia  Bd.  XLV, 
1905,  p.  1 ;  vgl.  \liese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  458). 

Fischer,  A.,  Die  Zelle  der  Cyanophyceen  (Bot.  Zeitg.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  LXIII, 
1905,  H.  4  u.  6,  p.  51 ;   vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  455). 

Fischer,  H.,  Über  die  kolloidale  Natur  der  Stärkekörner  und  ihr  Verhalten 
gegen  Farbstoffe  (Beih.  z.  Bot.  Zentralbl.  Bd.  XVIII,  1905,  Abt.  1, 
p.  409;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  458). 

Harz,  C.  0.,  Amylum,  Amylodextrin  und  Erythrodextrin  in  ihrem  Ver- 
halten gegen  Chromsäure  (Beih.  z.  Botan.  Zentralbl.  Bd.  XIX,  1905, 
Abt.  1,  p.  45;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  459). 

Leake,  H.  M.,  The  locaUzation  of  the  indigo-producing  substance  in  indigo- 
yielding  phmts  (Ann.  of  Bot.  vol.  XIX,  1905,  p.  297;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  461). 

Miyake,  K.,  Über  Reduktionsteilung  in  den  Pollenmutterzellen  einiger 
Monokotylen  (Pringsheims  Jahrb.  f.  wiss.  Bot.  Bd.  XLII,  1905,  p.  83; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  460). 

Molisch,  H. ,  Über  amorphes  und  kristallisiertes  Anthokyan  (Botan.  Zeitg. 
Bd.  LXIII,  1905,  Abt.  1,  H.  7,  8,  p.  145 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  459). 


480  ^eue  Literatur.  XXII,  3. 

lOsterhout,  W.  J.  V.,)  Iinbedding  Microscopic  Algae  (Journ.  R.  Microsc. 

Soc.  1905,  ])t.  4,  p.  r)30;  vgl.  Univ.  California  Publ.  Bot.  vol.  II,  1904, 

p.  8")  u.  diese  Zeitschr.  ßd.  XXI,  1904,  p.  527). 
Overton,  J.  B.,  Über  Reduktionsteilung  in  den  Pollenmutterzellen  einiger 

Dikotylen   (Pringsheims  Jahrb.  f.  wiss.  Bot.  Bd.  XLII,  1905,  p.  121; 

vgl.  diese  Zeitschr.  XXII,  1905,  p.  460). 
Shattuck,  eil.  H. ,  A  morphological  Study  of  Ulmus  americana  (Bot.  Gaz. 

vol.  XL,  1905,  p.  209:  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  4(53). 
Shoemaker,  D.  N.,  On  the  Development  of  Hamamelis  virginiana  (Botan. 

Gaz.  vol.  XXXIX,  p.  248—266,  plates  VI  a.  YII,  April  1905;  vgl.  diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  462). 
Strasburger,  E.,  Typische  und  allotypische  Kernteilung.     Ergebnisse  und 

Erörterungen  (Pringsheims  Jahrb.  f.  wiss.  Bot.  Bd.  XVII,  1905,  p.  1: 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  460). 
AVichniauu  u.  Zikes,    Ein   neues  Verfahren   zur   Reinzüchtung  von   Hefe 

(Zeitschr.  f.  Spiritusindustr.  Bd.  XXVIII,  1905,  No.  31,  p.  303). 
York,  H.  H. ,   The  Agar-Agar   and  Paraffin  Method   for   imbedding  Plant 

Tissues    (Ohio    Naturalist    vol.  V,    1905,    p.  344;    vgl.    diese   Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  462). 


e.  Mineralogisch  -  Petrographisches. 

Becke,  F.,  Messung  des  Winkels  der  optischen  Achsen  aus  der  Hj^perbel- 
krümmung  (Tschermaks  mineral.  u.  petr.  Mitteil.  Bd.  XXIV,  1905, 
p.  35—44  m.  3  Figg.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  4(54). 

Doelter,  C,  Die  Silikatschmelzen  (Sitzber.  d.  k.  Akad.  d.  Wiss.  Wien, 
math.-naturw.  Kl.,  Bd.  CXIII,  1904,  Abt.  1,  p.  177—249,  495-511:  vgl. 
diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  463). 

Luczizky,  AV. ,  Über  die  Dispersion  der  optischen  Achsen  bei  den  rhom- 
bischen Pyroxenen  (Tschermaks  mineral.  u.  petr.  Mitteil.  Bd.  XXIV, 
1905,  p.  140—143;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  464). 

Seddig,  M. ,  Über  „Wachstums" -Erscheinungen  an  Quecksilbertropfen 
(Physikal.  Zeitschr.  Bd.  VI,  1905,  p.  154—154;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  465). 

Stead,  J.  E.,  Methods  for  Detecting  the  more  Highly  Phosphorised  Por- 
tions in  Iron  and  Steel  (Journ.  of  the  Roy.  micr.  Soc.  1905,  pt.  2, 
p.  284—289  w.  2  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr.    Bd.  XXII,  1905,   p.  465). 

Stead,  J.  E.,  Micro-Metallography  with  practical  Demonstration  (Journ.  of 
the  Roy.  micr.  Soc.  1905,  pt.  2,  p.  274—283  w.  1  tig. ;  vgl.  diese  Zeit- 
schr. Bd.  XXII,  1905,  p.  464). 


Band  XXII.    Heft  4. 


Ultramikroskopie  der  Oleosole. 

Von 

Josef  Schneider  u.  J.iroslav  Just^ 

in  Prag. 
I. 

Bei  den  bisherigen  nltraniikroskopisclien  Arl)eiten  mit  fein- 
verteiltem Golde  wurden  wässerige  Verteilungen  und  gefärbtes  Glas 
untersucht.  Bei  den  ersteren  verhindert  die  sogenannte  Molekular- 
bewegung ein  genaueres  Beobachten  der  den  Goldteilchen  entsprechen- 
den Scheibchen ,  bei  dem  Glase  ist  der  Umstand  imangenehm ,  daß 
das  Gold  quantitativ  schwer  zu  bestimmen  ist  und  daß  an  der  Lage 
und  Gruppierung  der  Teilchen  nichts  geändert  werden  kann.  Dies 
führte  mich  dazu,  Gold  und  andere  edle  Metalle  in  einer  viskosen, 
jedoch  vollständig  gleichmäßigen  und  durchsichtigen ,  verbrennlichen 
Flüssigkeit  zu  fällen  und  dann  ultramikroskopisch  zu  untersuchen. 

Zu  diesem  Zwecke  eignen  sich  besonders  gut  sowohl  fette, 
als  auch  ätherische  Öle,  da  dieselben  sehr  leicht  Edelmetalle  redu- 
zieren und  sich  mit  den  Reduktionsprodukten  lebhaft  färben. 

Das  Goldchlorid  reagiert  schon  in  wässeriger  Lösung  sehr  gut 
mit  Fetten  und  fetten  Ölen  und  ,  wenn  diese  Reaktion  in  der  tech- 
nischen Analyse  als  eine  zu  wenig  verläßliche  keine  große  Beachtimg 
gefunden  hat,  so  ist  der  Grund  davon  darin  zu  suchen,  daß  die 
Färbung,  welche  von  einer  bestimmten  Feinheit  des  Goldes  abhängt, 
sich  sehr  rasch  ändert  infolge  der  Gruppierung  der  Teilchen. 

Zu  dieser  Reaktion  genügen  sehr  kleine  Mengen  des  Öles  oder 

^)  Der  erste  Abschnitt  ist  von  Josef  Schneider,  der  zweite  von 
Jaroslav  Just. 

Zeitsclir.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  4.  31 


482  Sclineider-Just:  Ultiamikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

Fettes.  Man  kann  auf  Deckgläser  mittels  einer  Sclireibfeder  feine 
Tröpfclien  von  Öl  oder  geschmolzenem  Fett  auftragen,  das  Deckglas 
auf  der  Goldchloridlösung  schwimmen  lassen  und  man  wird  sehen, 
wie  bei  manchen  Fetten  die  Reaktion  fortschreitet.  Auf  manche 
Öle  und  Fette,  z.B.:  Paraffin,  Vaseline,  Walrat,  Wollschweißfett 
und  Kokosnußöl  hat  die  Goldlösung  keinen  Einfluß.  Bei  Wachs, 
Stearin,  Talg  und  Degras  sehen  wir,  daß  die  Einwirkung  zwar  sehr 
schwach  ist  und  erst  nach  einer  Woche  bemerkbar  wird ,  daß  aber 
doch  an  der  01)erfläche  wolkenfih-mige ,  oder  kristallinische  blaue, 
violette  oder  graue  Goldniederschläge  sich  zeigen.  Einen  hiUieren 
Grad  der  Einwirkung  können  wir  beim  Olivenöl,  Elai'n  und  Eizinusöl 
finden,  wo  sich  durch  die  tiefere  Einwirkung  eine  blaue,  oder  violett- 
graue gleichmäßige ,  oder  aus  sichtbaren  Punkten  bestehende  Haut 
bildet,  die  später  in  eine  grobkörnige,  kristallinische  Kruste  über- 
geht. Besonders  interessant  sind  jedoch  diejenigen  Öle,  welche  sich 
in  der  ganzen  Masse  diffus  färben.  Das  Walratöl  färbt  sich  licht- 
purpurrot bis  schwarz ;  die  Färbung  sammelt  sich  jedoch  mit  der 
Zeit  und  bildet  einen  blauen ,  violetten  bis  schwarzen  Niederschlag. 
Das  Leinöl  färbt  sich  rotviolett  bis  schwarz.  Die  schönsten  Färbungen 
traten  beim  Lebertran  und  bei  dem  Leinölfirnisse  ein.  Der  Leber- 
trau färbte  sich  dunkelrot,  später  blau  bis  schwarz  und  man  konnte 
bei  einem  und  demselben  Tropfen  alle  Stufen  der  Färbung  beobachten. 
Während  das  Zentrum  noch  farblos  war^  war  das  Öl  weiter  vom 
Zentrum  rosarot  bis  rubinrot,  an  der  Oberfläche  war  schon  die  blaue 
Haut  und  eine  schwarze  Kruste  von  grob  niedergeschlagenem  Golde. 
Der  Leinölfirnis  war  indigoblau  gefärbt ;  wenn  sich  jedoch  diese  blaue 
Färbung  als  blauer  Schlamm  kranzartig  in  dem  Tropfen  sammelte, 
blieb  eine  rote  ditFuse  Färbung  zurück. 

Ähnliche  Färbungen  ergaben  nach  derselben  Methode  ätherische 
Öle  und  Harze.  Bei  diesen  ist  die  Oberflächenfärbung  sehr  bunt 
und  es  tritt  nicht  nur  die  blaue  und  rote ,  sondern  an  manchen 
Stellen  auch  die  gelbe  Färbung  ein. 

Nocli  viel  größere  Unterschiede  in  der  Färbung,  jedoch  nicht 
so  schöne  Farben  finden  wir  bei  Osmiumsäure.  Bei  Silber  und  Platin 
ist  dagegen   die  Zahl  der   sich  färbenden  Fette  und  Öle    sehr  klein. 

Die  genannten  Reaktionen  zeigen,  daß  sich  Öle  und  Fette  diftus 
durch  ultramikroskopisches  Gold,  resp.  andere  Metalle  färben  lassen, 
und  daß  sich  die  ultramikroskopischen  Teilchen  mit  der  Zeit  mikro- 
skopisch als  Punkte  und  Krusten  ausscheiden.  Wenn  auch  die 
mikrochemischen  Reaktionen   der  einzelnen  Öle   an    demselben  Nach- 


XXII,  4.        Schneider- Just :  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  433 

teil  leiden,  wie  die  in  der  Histologie  verwendeten  Goldraethoden, 
d.i.  der  Unverläßlichkeit,  so  war  doch  zu  hotten,  daß  bei  diesen 
einfacheren  Körpern,  d.  i.  Fetten  und  Ölen,  durch  die  uitramikro- 
skopische  Kontrolle  der  Reaktionen  die  Prüfung  mit  Goldchlorid  zu 
einer  verläßlicheren  ausgearbeitet  werden  könnte. 

Bei  der  Ausführung  der  Reaktionen  für  die  ultramikroskopische 
Kontrolle  finden  wir  zwei  Hindernisse.  Bei  großen  ()lmengen  tritt, 
wie  man  unten  sehen  wird ,  zu  leicht  die  Gruppierung  von  ultra- 
mikroskopischen Teilchen  zu  groben  Ausscheidungen  ein ;  kleine 
Mengen  von  Ol,  z.  B.  Tropfen,  werden  bei  den  bisherigen  Küvetten 
zur  Füllung  derselben  nicht  reichen.  Es  mußte  deshalb  zur  Reaktion 
etwa  1  cm''  genommen  werden;  zur  Aufnahme  des  untersuchten 
Öles  wurden  besondere  von  der  optischen  Werkstätte  Carl  Zeiss 
ausgeführte  Küvetten  verwendet.  Dieselben  bestehen  aus  einem 
niedrigen,  oben  und  unten  abgeschliffenen  Glaszylinder  von  2  mm 
Höhe  und  18  mm  Durchmesser,  welcher  in  der  Mitte  hohl  ist,  und 
zwar  so,  daß  die  zylindrische  Höhlung  3  mm  Durchmesser  hat.  Dieser 
Glaszylinder  ist  der  Achse  parallel  so  abgeschliffen,  daß  in  den 
inneren  Raum  durch  eine  angekittete  Quarzplatte  von  1  mm  Dicke 
das  Licht  zugeführt  werden  kann.  Der  Glaszylinder  ist  wie  bei 
einer  feuchten  Kammer,  jedoch  am  Rande,  an  ein  Objektglas  an- 
gekittet, und  wird  nach  dem  Füllen  mit  einem  gewöhnlichen,  oder 
mit  einem  von  der  Firma  Carl  Zeiss  vorgeschlagenen,  versteiften 
Deckglase  bedeckt.  Das  Quarzfensterchen,  d.  i.  der  Teil  der  Quarz- 
platte, welcher  die  Höhlung  des  Zylinders  von  der  Seite  abschließt, 
ist  ebenso  breit  wie  hoch  (2  mm). 

Diese  Küvette  eignet  sich  sowohl  für  die  Untersuchung  der 
Oleosole,  als  auch  für  die  der  Hydrosole.  Ein  Absetzen  von  Nieder- 
schlägen während  der  Beobachtung  wurde  selbst  bei  langen  Beob- 
achtungen nicht  bemerkt.  Der  größte  Vorteil  ist  aber  der,  daß  zur 
ultramikroskopischen  Beobachtung  ein  Tropfen  von  jeder  Flüssigkeit 
genügt.  Die  Diuiensionen  des  für  das  Ol  bestimmten  Raumes  könnten 
noch  etwas  kleiner  gewählt  werden;  ebenso  könnte  die  Konstruktion 
vielfach  abgeändert  Averden  und  haben  wir  der  Firma  Zeiss  außer 
der  beschriebenen  Konstruktion  besonders  vorgeschlagen,  in  Metall - 
platten  an  einer  Seite  eine  kleine  Höhlung  ausdrehen  und  mit 
einem  eingefaßtem  Quarzfensterchen  versehen  zu  lassen,  um  ein  Ver- 
kitten der  Bestandteile  zu  vermeiden.  Die  Wahl  des  Kittes  bei 
Glasküvetten  muß  sich  nach  dem  untersuchten  Materiale,  sowie  nach 
der  nötigen  Spültlüssigkeit  richten. 

31* 


484  Schneid  er- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.         XXII.  4. 

Bei  der  Verwendimg-  dieser  Küvetten  muß  man  sich  ebenso  wie 
bei  den  bisherigen  für  Durchfluß  eingerichteten  am  meisten  vor 
Luftblasen  hüten,  da  dieselben  das  Licht  seitlich  brechen  und 
dann  Teilchen  sichtbar  maclien,  welche  sonst  unsichtbar  wären.  INIan 
muß  deshalb  einen  so  großen  Tropfen  der  untersuchten  Flüssigkeit 
in  den  Glaszylinder  fallen  lassen,  daß  die  Flüssigkeit  an  der  Ober- 
tläche  einen  in  die  Höhe  kappenförmig  steigenden  Kugelabschnitt 
bildet,  auf  welchen  man  das  Deckglas  langsam  legt.  Das  ausfließende  Öl 
muß  dann  von  dem  Fensterchen  durch  Filtrierpapier  entfernt  werden. 

Zur  Untersuchung  der  Öle  eignen  sich  besser  Trockensysteme 
als  diejenigen  mit  Wasserimmersion,  weil  das  Öl  leicht  zum  Wasser 
kommt  und  dann  auf  demselben  in  die  Höhe  steigt.  Bei  der  Ver- 
wendung dieser  Küvette  ist  noch  darauf  zu  schauen,  daß  das  Licht 
genau  senkrecht  auf  das  Glasfensterchen  falle,  weshalb  es  angezeigt 
wäre,  anstatt  des  hochstellbaren  Objekttisches  No.  26  des  Zeiss sehen 
Preisverzeichnisses,  M.  163,  einen  solchen  zu  verwenden,  der  eine 
Neigung  nach  rückwärts  und  vorwärts  erlauben  würde.  Bei 
wenig  durchsichtigen  PTüssigkeiten  kann  es  auch  darauf  ankommen, 
ob  der  Lichtkegel  dem  Deckglase  näher,  oder  von  demselben  ent- 
fernter steht.  Die  andern  Vorsichtsmaßregeln  ergeben  sich  aus  der 
Beschreibung  der  Arbeit  im  zweiten  Teile. 

um  auch  feste  Fette,  Wachs,  Harze  etc.  ultramikroskopisch 
untersuchen  zu  können ,  wurde  die  Firma  Carl  Zeiss  um  die  An- 
fertigung einer  heizbaren  Küvette  in  Form  der  oben  genannten, 
mit  Höhlung  und  Fensterchen  verseheneu,  jedoch  auch  für  Durchfluß 
von  heißem  Wasser  eingerichteten  Metallplatten  gebeten.  Diese  heiz- 
bare Küvette  hat  sich  im  Laufe  der  Arbeit  auch  für  Öle  notwendig 
gezeigt,  um  die  festen,  leichtsclimelzenden  Ausscheidungen  von  Fett- 
teilchen aus  Ölen  zum  Verschwinden  zu  bringen. 

Endlich  mußte  derselben  Firma  der  Antrag  gestellt  werden, 
Doppelultramikroskope  mit  einer  Lampe  zu  bauen,  um  die 
Reaktionen  zweier  Körper  bei  derselben  Lichtintensität  vergleichen 
zu  können,  da  sehr  oft  das  Resultat  von  Zählungen  und  Messungen 
bei  einem  und  demselben  Öle  nach  der  Intensität  des  Lichtbogens 
variiert  und  durch  die  angeführte  Konstruktion  dieser  Einfluß  be- 
seitigt werden  könnte.  Es  genügt  nicht  in  dem  Leitungsdraht  den- 
selben Strom  zu  erhalten. 

Das  Studium  der  ersten  und  einfachsten  bei  Fett-  und  Harz- 
körpern  sich  darbietenden  Aufgabe,  die  Prüfung  der  Reaktionen  mit 
Edelmetallsalzen  und  besonders  mit  Goldchlorid  bei  fetten  Ölen  über- 


XXII,  4.         Sclineider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  435 

nahm  mein  Schüler  Jaroslav  Just  und  führte  dieselben  in  meinem 
Laboratorium  aus.  Seine  Resultate  und  Schlüsse  sind  im  nachfolgen- 
den beschrieben.  Es  sei  nur  noch  bemerkt,  daß  alle  Zahlen  von 
mir  nachkontrolliert  und  richtig  befunden  wurden ;  die  Kontrolle  war 
deshalb  wichtig,  um  jedes  Bedenken,  daß  die  Zahlen  von  der  Emp- 
tindlichkeit  des  Auges  abhängen  könnten,  zu  beseitigen. 


IL 

Li  der  chemischen  Technologie  und  besonders  in  deren  Hilfs- 
wissenschaft, der  technischen  Analyse,  ötfnet  sich  ein  weites  Arbeits- 
feld dadurch,  daß  man  eine  große  Zahl  von  unerklärten  Erscheinungen 
mit  Hilfe  des  Ultramikroskopes  von  Siedentopp  und  Zsigmondy  stu- 
dieren kann,  und  daß  man  dort,  wo  die  bisherigen  Prüfungsmethoden 
nicht  ausreichten,  über  eine  neue  Kontrolle  verfügt. 

Die  gegenwärtige  Arbeit  ist  ein  Vei'such,  eine  sehr  interessante, 
jedoch  wenig  erklärte ,  und  wenig  verläßliche  makroskopische  und 
mikroskopische  Reaktion  der  fetten  Öle  ultramikroskopisch  zu  über- 
prüfen :  die  Reaktion  mit  dem  Goldchloride.  Die  fetten  Öle  müssen 
ihrer  chemischen  Zusammensetzung  entsprechend  im  Goldchloride  und 
den  Edelmetallsalzen  überhaupt  eine  Reduktion  hervorrufen ,  bei  der 
man  erwarten  kann ,  daß  die  reduzierte  Menge  und  die  Heftigkeit 
der  Reduktion  mit  der  Jodzahl  steigen  wird.  Es  wird  jedoch  jedes 
Ol  nach  seinen  besonderen  physikalischen  Eigenschaften  verschieden 
fähig  sein,  das  Reduktionsprodukt,  d.  i.  das  Gold  in  sich  schwebend 
zu  erhalten.  Wirkt  die  Goldchloridlösuug  auf  Öle  ein,  so  tritt  ent- 
weder ein  Ausscheiden  von  metallglänzendem  Golde  ein,  oder  eine 
Blaufärbung  durch  mehr  oder  weniger  grobe ,  leicht  zum  Absetzen 
geneigte  Teilchen,  oder  eine  Rotfärbung  durch  ultramikroskopisches 
Gold,  in  besonderen  Fällen  eine  Gelbfärbung,  oder  es  ist  keine  Ver- 
änderung sichtbar.  Daß  diese,  bei  manchen  Ölen  besonders  schön 
auftretende  Reaktion  praktisch  wenig  geschätzt  ist  und  selbst  in  der 
Analyse  der  Fette  und  Wachsarten  von  Benedikt  und  Ulzer  nicht 
berücksichtigt  wurde,  hat  seine  Ursache  darin,  daß  die  Resultate 
der  Reaktion  von  den  Bedingungen  zu  sehr  abhängig  sind.  Je  nach 
dem  Lösungsmittel ,  der  Temperatur ,  der  Zeit ,  der  Bewegung  und 
der  Ölmenge  bleibt  die  Reaktion  auf  einer  immer  anderen  Stufe 
stehen  und  man  kann  deshalb  aus  derselben  nur  dann  Schlüsse 
ziehen ,   wenn  man  durch  vergleichende   Versuche  die,   den  betreffen- 


486  Schneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII.  4, 

den  Bedingungen  zugehörige  Reaktionsstiife  auch  bei  sicheren  Typen- 
mustern hervorgerufen  hatte. 

Sehr  interessant  ist  aueli  die  mikrochemische  Reaktion,  wo  nicht 
nur  die  verschiedenen  Formen  der  makroskopischen  Reaktion  be- 
trachtet, sondern  auch  deren  Übergang  verfolgt  werden  kann. 
Es  ist  jedoch  wichtig,  hier  der  prinzipiellen  Unterschiede  zwischen 
den  mikrochemischen  Reaktionen  der  Ole  und  solchen  in  der  Histo- 
logie bei  der  Prüfung  von  Zellgeweben  vorkommenden  Reaktionen 
zu  gedenken.  Bei  den  Ölen  hängt  das  Resultat,  von  den  oben  ge- 
nannten Bedingungen  abgesehen,  nur  von  zwei  Faktoren  ab,  d.  i.  von 
der  Reduktion  durch  das  Ol  und  von  der,  der  lihysikalischen  Zu- 
sammensetzung entsprechenden  Fähigkeit  des  Öles,  Goldteilchen  in 
Verteilung  zu  erhalten. 

Die  Reaktion  bei  komplizierten  Geweben  ist  dagegen  abhängig- 
von  der  Reduktionsfähigkeit  sämtlicher  in  den  Zellen  vorkommenden 
Stoffe,  von  dem  Quellungsgrade ,  welcher  nach  der  Anwendung  von 
Fixier-  und  Aufhellungsmitteln  eingetreten  ist,  von  der  Lichtwirkung 
und  von  den  Reagentien  mit  welclien  man  nach  der  Tränkung  mit 
den  Lösungen  von  Goldverbindungen  die  Reduktion  im  untersuchten 
Gegenstande  vollendet,  manchmal  auch  mäßigt  oder  einstellt.  Es 
kann  sich  auch  das  Gold  der  verschiedenen  Goldpräparate  und 
Goldlösungen,  welche  oft  auch  Auroverbindungen  enthalten,  von  den 
zahlreichen  vorhandenen  Eiweißstoffen  nicht  gleichmäßig  sammeln, 
binden  und  reduzieren. 

Um  die  Goldreaktion  der  fetten  Öle  mit  Hilfe  des  Ultra mikro- 
skopes  aufzuklären,  wurde  eine  Anzahl  derselben  aus  der  Reihe  der 
industriell  wichtigsten  Öle  zur  Prüfung  gewählt,  und  zwar  so,  damit 
jede  chemisch  charakterisierte  Gruppe  vertreten  sei.  Außerdem 
wurden  auch  einige  Fabriksprodukte  untersucht.  Die  ausgewählten 
Ole  und  öligen  Fabrikate  hatten  folgende  Farbe   und  Beschaffenheit ; 

1.  Leinöl  war gelb,  klar. 

2.  Leinölfirnis braunorangegelb,  schwach  trüb. 

3.  Hanföl gelb,  klar. 

4.  Nußöl gelb,  schwach  trüb. 

5.  Mohnöl farblos,  klar. 

(i.  Japanisches  Holzöl lichtgelb,  klar. 

7.  OHvenöl gelblich,  ganz  schwach  trüb, 

8.  Arachisöl gelblich,  klar. 

9.  BaumwoUsamenöl gelb,  trüb. 

10.  Sesaiuöl röthch,  klar. 

11.  Rapsöl gelblich,  schwach  getrübt. 


XXII,  4.        Sclineider-Just:  Ultraiuikroskopie  der  Oleosole.  437 

12.  Rizinusöl furblos,  klar. 

13.  Pferdeöl lichtgelb,  fast  klar. 

14.  Elain- Destillat orungegelb,  fast  klar. 

15.  Ela'in-Saponifikat     ...  .     .  orangegelb,  getrübt. 

16.  Lebertran gelb,  klar. 

17.  Dreikronentran rotbraun,  klar. 

18.  Walratöl orangegelb,  klar. 

19.  Gelbes  Mineralöl gelb,  klar. 

20.  Paraffinöl farblos,  klar. 

Es  sei  ausdrücklich  bemerkt ,  daß  bei  diesen  Versuchen  ab- 
sichtlich auch  getrübte  Handelsöle ,  oder  Öle ,  die  beim  Stehen  und 
geringer  Abkühlung  Trübungen  ausschieden,  in  die  Arbeit  genommen 
wurden,  und  zwar  aus  dem  Grunde,  weil  die  Versuche  auch  den 
Einfluß  der  Trübungen  auf  die  Reaktionen  zeigen  sollten  und 
überhaupt  die  Handels  öle  und  nicht  durcli  Ausfrieren  und  Pressen 
präparierte  Öle  untersuclit  werden  sollten. 

Bei  der  mikroskopischen  Untersuchung  der  genannten 
( >le  wurden  bei  Sesam-,  Rizinus-  und  Rapsöl  keine  Verunreinigungen 
gefunden,  bei  Leinöl,  Leinölfirnis,  japanischem  Holzöl,  Hanf-,  Oliven-, 
Arachis-,  Walrat-,  Mineral-  und  Paraffinöl  fand  man  nur  ausnahms- 
weise Teilchen  von  Verunreinigungen,  dagegen  bei  Nuß-,  Mohn-, 
Baumwollsamen  und  Pferdeöl ,  bei  Elain  -  Destillat  und  Saponifikat 
wurden  zahlreiche  Klumpen  von  Fettkristallen,  bei  Leber-  und  Drei- 
kronentran wurden  einzelne  und  zu  2  oder  3  gruppierte  etwa  2  f.t 
lange  Stäbclien  aus  Fett  gefunden. 

Bei  der  ultramikroskopischen  Prüfung  wui'de  folgender 
Vorgang  eingehalten :  Noch  vor  dem  Einstellen  des  Mikroskopes 
wurde  notiert,  in  welcher  Farbe  und  Lichtintensität  der  Lichtkegel 
dem  freien  Auge  erscheint,  und  zwar  wie  er  gleich  hinter  dem 
Fensterchen  und  wie  er  rückwärts  beschaffen  ist ;  nach  Bedarf 
wurde  auch  sichergestellt,  welches  Licht  sich  hinter  der  beobachteten 
Flüssigkeit  in  den  Glaszylinder  ausbreitet.  Nach  der  Einstellung 
des  Mikroskopes  auf  den  Kegel  wurde  die  Farbe  und  Lichtintensität 
des  Kegels  im  Mikroskop  notiert,  dann  die  Anzahl,  die  Farbe,  die 
Leuchtkraft  und  Größe  respektive  Sichtbarkeit  der  leuchtenden 
Punkte,  der  m  i  t  I  n  t  e  r  f  e  r  e  n  z  k  r  e  i  s  e  n  u  m  g  e  b  e  n  e  n  P  u  n  k  t  e 
und  der  Punktegruppen.  Mit  Rücksicht  darauf,  daß  die  An- 
zahl der  Punkte  und  Gruppen,  die  im  Ultramikroskope  sichtbar 
sind,  oft  sehr  klein  ist,  wurde  für  diesen  Fall  neben  den  18  Qua- 
draten des  Okularzählapparates,  die  zusammen  als  Flächeneinheit  beim 
Zählen  dienen,  noch  eine  größere  Einheit  eingeführt,   und  zwar  der 


488  Schneider-Just:  Ultraiuikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

ganze  Lichtkegel,  soweit  er  im  Sehfelde  sichtbar  ist,  bei  einer 
solchen  Einstellung  des  Spaltes ,  daß  die  engste  Stelle  des  Kegels 
der  dreifachen  Seite  eines  Zählquadrates  gleich  sei ,  wobei  noch  zu 
bemerken  ist,  daß  sämtliche  Zählungen  mit  dem  Objektive  C  und 
Okulare  4  (Zelss)  vorgenommen  wurden.  Ein  Quadrat  des  Zähl- 
okulares  entspricht  im  l>bjekte  einer  Fläche  von  225  /i^,  die 
18  Quadrate  4050  /t-^,  der  ganze  Kegelschnitt  etwa  45  000  //"-.  Es 
ist  also  die  genannte  neue  Einheit  elfmal  größer  als  die  18  Quadrate 
zusammen,  was  auch  bei  Zählungen  bestätigt  wurde.  Die  Höhe  des 
Spaltes  wurde  auf  0*2  mm  eingestellt. 

Beim  Heben  des  Tubus  mittelst  der  feinen  Einsteilvorrichtung 
umgeben  sich  manchmal  die  Punkte  und  Gruppen  mit  luterferenz- 
ringen  in  verschiedener  Zahl ;  die  Ringe  werden  immer  größer,  dabei 
jedoch  auch  lichtschwächer,  bis  sie  dem  Auge  verschwinden.  Beim 
Senken  des  Tubus  verschwinden  die  Punkte  und  Gruppen  ohne  die 
Bildung  von  Ringen.  Die  Höhendifferenz  zwischen  jener 
Einstellung,  wo  die  Punkte  und  Gruppen  bei  der 
Senkung  d  e  s  T  u  b  u  s  verschwanden  und  z  w  i  s  c  h  e  n  j  e  n  e  r 
Einstellung,  wo  der  letzte  größte  Kreis  bei  der 
Hebung  des  Tubus  v  e  r  s  c  h  w  and,  ist  c  h  a  r  a  k  t  e  r  i  s  t  i  s  c  h 
für  die  Feinheit  der  Goldteilchen  und  Gruppen.  Diese 
Höhendifferenz,  in  /t  ausgedrückt,  ist  im  folgenden  mit  dem  Buch- 
staben J  bezeichnet.  Mit  diesem  Werte  hängt  zusammen  der  Durch- 
messer des  größten  Kreises  vor  dem  Verschwinden ;  soweit  nur  diese 
Größe  bestimmt  wurde,  ist  sie  angeführt  und  ist  mit  dem  Buchstaben 
$  bezeichnet,  u.  zw.  wurde  bei  deren  Ermittlung  als  Längeneinheit 
die  Seite  eines  Quadrates  des  Zählokulars  gewählt.  Durch  die 
Division  aller  bestimmten  J  durch  die  zugehörigen  CP  wurde  ge- 
funden, daß  z/  meistens  22  bis  25  ^  gleich  ist.  Bei  beweglichen 
Teilchen  in  Hydrosolen  mußten  wir  uns  mit  der  Bestimmung  von 
0  begnügen ;  ist  dagegen  der  Kegel  und  mit  ihm  auch  die  Quadrate 
unsichtbar,  so  ist  wieder  die  Bestimmung  von  _/  verläßlicher.  Außer 
den  durchschnittlichen  Werten  von  A  und  0  wurden ,  wo  es  be- 
lehrender zu  sein  schien,   deren  Maxima  bestimmt. 

Da  die  mit  Kreisen  umgebenen  Punkte  verschiedenen  Teilchen 
und  Gruppen  angehören  können ,  so  wurden  neue  Unterscheidungs- 
merkmale gesucht.  Bei  den  Interferenzringen ,  die  sich  um  Punkte 
und  Gruppen  bilden,  wurde  die  Anzahl,  die  Farbe  und  die  Licht- 
intensität, angegeben,  u.  zw.  nicht  nur  bei  der  scharfen  Einstellung 
auf  den   Kegel    resp.    auf   die  Mehrzahl    der  Punkte ,    sondern    auch 


XXII,  4.        Schneider- Just:  Ultrauiikroskopie  der  Oleosole.  489 

bei  einer  um  20  jii  liiiheren  Einstellung-.  Es  wurde  auch  der  mittlere 
Durchmesser  der  äußersten  Ringe  bei  den  mit  Kreisen  umgebenen 
Punkten  nach  der  Hebung  des  Tubus  von  20  /<  durch  Messungen 
bestimmt.  Bei  diesem  letzten  zeigte  sich  jedoch  kein  praktischer 
Wert :  derselbe  war  in  keiner  Beziehung  zu  anderen  Befunden  und 
Eigenschaften,  weshalb  diese  Zahlen  bei  den  Yersuchsergebnissen 
nicht  angeführt  werden.  Dagegen  bewähi'te  sich  die  Sicherstelluug 
der  Anzahl  der  mit  Ringen  umgebenen  Punkte ,  sowie  die  Sicher- 
stellung der  Zahl,  der  Farben,  der  Lichtintensität  und  der  Schärfe 
der  Kreise  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ju  als  sehr  belehrend 
und  wichtig. 

Bei  den  Zählungen  wurden  die  mit  Interferenzkreisen  umgebenen 
]*unkte  oder  Systeme  konzentrischer  Kreise  ohne  sichtbare  Mittel- 
punkte überall  zu  den  Punkten  gezählt,  obzwar  man  annehmen  muß 
und  es  sich  auch  oft  durch  die  scharfe  Einstellung  beweisen  läßt, 
daß  sich  die  Kreise  nur  um   Punktepaare  und  Gruppen  bilden. 

Den  letzten  Teil  der  ultramikroskopischeu  Untersuchung  eines 
jeden  Öles  bildete  die  Sicherstellung  des  Befundes  bei  Anwendung 
des  Polarisations-Analysators.  Bei  den  Angaben,  wie  sich  die  Farben 
durch  das  Drehen  des  Analysators  verändern ,  bedeutet  die  erste 
Farbe  diejenige,  die  zu  sehen  ist,  wenn  der  beleuchtende  und  der 
abgebeugte  Strahl  in  der  Symmetrieebene  des  Zeiss sehen  Analy- 
sators liegen. 

Da  zu  erwarten  war ,  daß  die  vorerwähnten  Öle  und  Fabriks- 
produkte im  normalen  Zustande  auch  ultramikroskopische  Teilchen 
enthalten  werden ,  so  wurde  die  ultramikroskopische  Untersuchung 
zuerst  bei  den  Ölen  selbst,   d.  i.   vor  der  Reaktion  vorgenommen. 


Ultramikroskopisehe  Befunde  bei   den   Ölen  vor   der 

Reaktion. 

1.  Leinöl.  Das  treie  Auge  sah  einen  lichtschwachen,  blassen  Kegel, 
im  Ultramikroskope  war  derselbe  bläulich  weiß,  wenig  hell,  und  man  sah 
meistens  keine  Punkte,  ausnahmsweise  1  oder  2  im  ganzen  Kegel.  Die 
Punkte  waren  weiß  oder  oi-angegelb  ohne  Hinge  oder  mit  bis  3  Ringen.  _/(30. 
Bei  der  Beobachtung  mittels  des  Analysators  verdunkelte  sich  beim  Drehen 
desselben  der  Kegel,  die  Farbe  der  Punkte  veränderte  sich  und  sciiwankte 
zwischen  der  roten  und  der  grauen. 

2.  Leinölfirnis.  Das  freie  Auge  sali  einen  grünlichweißen  Kegel: 
auch  im  ültramikroskope  war  der  Kegel  grünlichgelbweiß,  gewöhnlich  ohne 
Punkte.     Ausnahmsweise   wurden  im   ganzen   Kegel   2  bis  o  Punkte   ohne 


490  Schneider-Just:  Ulti-amikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

Kreise  oder  mit  denselben  oder  auch  Doppelpunkte  und  Gruppen  von  18 
stark  leuchtenden  Punkten  gefunden.  J  bei  Punkten  44.  Durch  den 
Analysator  trat  keine  Veränderung  in  der  Farbe  ein ,  beim  Drehen  des- 
selben verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  einzelnen  Punkte,  sowie  diejenigen 
in  den  Gruppen  verblaßten,  veränderten  aber  nicht  auffallend  die  Farbe. 

3.  Hanföl.  Das  freie  Auge  sah  einen  blaugrünlichen  Kegel.  Im 
Ultramikroskope  war  derselbe  hell,  milchweiß  und  enthielt  feine  weiße 
Punkte,  etwa  10  auf  ein  Quadrat;  außerdem  fand  man  im  ganzen  Kegel 
8  weiße,  größere  Punkte  ohne  Kreise,  oder  mit  einem  Kreise,  und  aus- 
nahmsweise Gruppen  z.  B.  von  11  Punkten.  J  60.  Durch  den  Analysator 
wurde  die  Farbe  nicht  verändert,  beim  Drehen  desselben  verdunkelte  sich 
der  Kegel,  die  kleinen  Punkte  und  diejenigen  in  den  Gruppen  verschwan- 
den, die  größeren  verblaßten. 

4.  Nußöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel.  Im  Ultramikro- 
skope war  derselbe  milchweiß,  wenig  hell,  und  enthielt  40  Gruppen  von 
verschiedener  Größe,  von  solchen,  welche  6  Punkte  zählten  bis  zu  solchen, 
welche  sich  über  G  Quadrate  ausbreiteten  und  in  einem  Quadrate  32  weiße 
Punkte  enthielten.  Zwischen  den  Gruppen  waren  aucli  einzelne  Punkte. 
Durchschnittlich  kommen  auf  18  Quadrate  im  ganzen  30  Punkte.  Beim 
Heben  des  Tubus  umgaben  sich  nur  die  einzelnen  Punkte  mit  Kreisen.  Die 
Kreise  waren  nur  lichtschwach ;  J  54.  Im  Analysator  erschien  die  weiße 
Farbe  der  Punkte  nicht  verändert,  beim  Drehen  desselben  verdunkelte  sich 
der  Kegel,  die  feinen  Punkte  verschwanden,  <lie  hellen  verblaßten. 

5.  Mohnöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  bläulichen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  der  Kegel  bläulich ,  wenig  hell ,  und  enthielt  höchstens 
14  Punkte,  welche  teilweise  mit  bis  4  bunten  Kreisen  umgeben  waren. 
J  44.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  feinen 
Punkte  verschwanden,  die  mit  Kreisen  umgebenen  veränderten  die  Farbe. 

6.  Japanisches  Holzöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel ; 
im  Ultramikroskope  war  der  Kegel  hell ,  blauweiß  und  enthielt  18  Punkte 
mit  3  bis  5  Kreisen  und  eine  Gruppe  von  10  Punkten.  J  174.  Im  Analy- 
sator erschienen  die  Punkte  bunter,  beim  Drehen  desselben  verdunkelte 
sich  ein  wenig  der  Kegel  und  die  Punkte  verschwanden.  —  Wenn  sich 
das  Öl  in  der  Kälte  trübte,  so  fand  man  im  Kegel  1  bis  2  Gruppen  von 
gelben ,  sternartig  gruppierten  Nadeln ,  die  mit  lichteren  Punkten  bedeckt 
waren.  Im  Analysator  veränderten  diese  Punkte  die  Farbe,  die  Nadeln 
verschwanden. 

7.  Olivenöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  derselbe  dunkel  und  enthielt  85  Punkte ,  von  denen  die 
Mehrzahl  mit  6  Kreisen  umgeben  war.  Auffallend  war  die  bunte  Färbung. 
J 174.  Außerdem  fand  man  im  ganzen  Kegel  2  Gruppen  von  3  und 
7  Punkten.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel  ganz, 
und  die  Farben  der  Punkte  und  der  Kreise  veränderten  sich  z.  B.  von 
hellrot  in  blaßgrünlich.  —  Für  die  Reaktionen  mit  den  Verbindungen 
anderer  Metalle  als  Gold  wurde  ein  anderes  gelberes  Öl  verwendet,  bei 
welchem  das  freie  Auge  einen  rosaroten  Kegel  sah  und  dieser  im  Ultra- 
mikroskope dunkelrot,  wenig  leuchtend  war.  Der  Kegel  enthielt  8  bis  12 
verschieden  gefärbte  Punkte  ohne  Kreise  oder  mit  bis  2  Kreisen.    J  5(). 


XXII.  4.         Schneider-. I  iist:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  491 

8.  A  r  a  c  h  i  s  ö  l.  Das  freie  Auge  sah  einen  kauiu  deutlichen ,  bläu- 
lichen Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  dunkel  und  bläulich  und 
enthielt  13  Punkte  ohne  Kreise  oder  mit  farbigen  Kreisen  und  eine  Gruppe 
von  13  Tunkten.  Jmax  86.  Beim  Drehen  des  Analysators  verschwanden 
sowohl  der  Kegel  als  auch  die  Punkte  und  Kreise. 

9.  Baum wollsamcnr)!.  Infolge  der  Trübung  war  der  Kegel  nicht 
scharf  abgegrenzt  und  man  sah  nur  das  Sehfeld  durch  einen  lichteren 
Streifen  geteilt.  In  den  18  Quadraten  waren  6  bis  10  Kreise  schwach  sicht- 
bar; ihr  Durchmesser  betrug  eine  halbe  bis  anderthalb  Quadratseiten. 

10.  Sesam  öl.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  derselbe  milchweiß  und  verdunkelte  sich  beim  Drehen  des 
Analysators  in  grau.     Es  waren  keine  Punkte  zu  sehen. 

11.  Rapsöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  bläulichen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  derselbe  bläulichweiß  und  enthielt  110  Punkte,  die  teil- 
weise mit  bis  4  sehr  bunten  Kreisen  umgeben  waren.  Unter  den  Farben 
war  auch  die  violette  vertreten.  Die  großen  Kreise  waren  auf  jeder  Seite 
verschieden  gefärbt,  z.  B.  die  eine  Hälfte  rot,  die  andere  grün.  A  84.  Beim 
Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel  und  veränderte  die 
bläuliche  Farbe  in  grau.    Die  Punkte  verblaßten,  die  Kreise  verschwanden. 

12.  Rizinusöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  grauen,  wenig  leuchtenden 
Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  milchweiß,  jedoch  nicht  hell  und 
enthielt  höchstens  25  weiße  Punkte,  von  denen  einige  mit  bis  4  farbigen 
Kreisen  umgeben  waren.  J  240.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte 
sich  der  Kegel,  die  Punkte  verblaßten,  die  Kreise  verschwanden  fast  und 
veränderten  die  Farbe. 

13.  Pferdeöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskoi^e  war  derselbe  fast  unsichtbar.  Nur  wo  die  Punkte  dichter 
waren,  war  er  schwach  weiß.  Man  sah  in  demselben  etwa  35  weiße  Punkte 
von  J  GO  und  20  bis  40  Gruppen,  davon  eine  oder  2  besonders  leuchtende. 
Die  Gruppen  waren,  bis  4  Quadrate  groß  und  enthielten  in  einem  Quadrate 
etwa  20  weiße  Punkte  ohne  Kreise.  Die  Punkte  der  Gruppen  schienen 
auf  nadelförmigcn  Kristallen  zu  liegen.  Im  Analysator  waren  die  Punkte 
nicht  bunter,  beim  Drehen  desselben  verdunkelte  sich  der  Kegel  fast  bis 
zur  Unsichtbarkeit  und  die  Punkte  verblaßten. 

14.  Elain-Destillat.  Das  freie  Auge  sah  einen  hellblauen,  sehr 
lichten  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  milchweiß  und  enthielt 
etwa  12  weiße,  stärker  leuchtende  Punkte,  davon  einen  mit  1  Kreise,  J  140, 
außerdem  etwa  50  kaum  sichtbare  Punkte.  Im  Analysator  blieb  alles  weiß, 
beim  Drehen  desselben  verdunkelte  sich  der  Kegel  und  die  Punkte  ver- 
schwanden. 

15.  Elain-Saponifikat.  Das  freie  Auge  sah  einen  lichtblauen, 
hellen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  milchweiß,  jedoch  nicht 
besonders  lichtstark.  Er  enthielt  etwa  20  weiße,  blasse  und  20  schwach 
gefärbte,  helle  Punkte;  die  letzteren  hatten  bis  (3  farbige  Kreise,  z.B.  rote 
und  grüne  oder  violette  und  gelbe.  J  IGO.  Im  Analysator  erschienen  die 
Farben  bunter,  beim  Drehen  desselben  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die 
feinen  Punkte  verschwanden ,  die  hellen  und  die  Kreise  veränderten  die 
Farbe  und  H-elligkeit. 


492  Öchneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

16.  L  e  b  e  r  t  r  a  n.  Das  freie  Auge  sah  einen  hellen,  blaugriinen  Kegel ; 
im  Ultramikroskope  war  derselbe  weiß,  lichtschwach  und  enthielt  7  weiße 
Punkte  von  verschiedener  Größe.  1  Punkt  hatte  2  farbige  Kreise.  _/  50.  Beim 
Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  blassen  Punkte 
verschwanden,  die  stark  leuchtenden  verblaßten,  bei  den  Kreisen  veränderte 
sich  die  Farbe  und  Helligkeit. 

17.  Drei  k  ronen trän.  Dem  freien  Auge  erschien  der  Kegel  grün- 
lich weiß ,  rückwärts  orangegelb ;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  hell- 
gelbbraun, ohne  Punkte.  Beim  Drehen  des  Analj'sators  verdunkelte  er 
sich.  Ausnahmsweise  fand  man  im  ganzen  Kegel  1  oder  2  Punkte  ohne 
Kreise,  oder  eine  Gruppe  von  40  Punkten,  welche  beim  Drehen  des  Ana- 
lysators nacheinander  verschwanden. 

18.  Walratöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  liellen,  blaugrünen  Kegel : 
im  Ultramikroskope  war  derselbe  hell,  gelbgrün  und  enthielt  entweder  keine 
Punkte  oder  höchstens  10  sehr  schwach  sichtbare,  ausnahmsweise  Punkte 
mit  Kreisen.  J  20.  Einmal  wurde  eine  Gruppe  von  30  Punkten  gefunden. 
Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  helleren 
Punkte  verblaßten,  die  andern,  sowie  auch  die  Kreise  und  die  Gruppe 
verschwanden. 

19.  Gelbes  Mineralöl.  Dem  freien  Auge  erschien  der  Kegel  vorne 
blau,  rückwärts  grün ;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  deutlich  und  blau, 
und  enthielt  1  bis  10  weiße,  wenig  helle  Punkte  ohne  Kreise.  J  12.  Aus- 
nahmsweise erschien  eine  Gruppe  von  20  Punkten  und  einzelne  hellere 
Punkte  mit  bunten  Kreisen.  J  70.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
dunkelte sich  der  Kegel,  die  Punkte  und  die  Kreise  verschwanden. 

20.  Paraffin  öl.  Das  freie  Auge  sah  einen  himmelblauen  Kegel; 
dieselbe  Farbe  hatte  der  Kegel  im  Ultramikroskope  und  war  frei  von 
Punkten.  Beim  Drehen  des  Analysators  blieb  er  blau.  Ausnahmsweise 
wurden  im  ganzen  Kegel  bis  25  Punkte  gefunden,  welche  fast  durchwegs 
mit  farbigen  Kreisen  umgeben  waren  und  beim  Drehen  des  Analysators 
verschwanden.  Ein  andermal  kam  eine  Gruppe  von  40  hell  leuchtenden, 
schwach  gefärbten  Punkten  vor ,  welche  beim  Drelien  des  Analysators 
verblaßten.  — 

Fassen  wir  die  vorerwähnten  Befunde  zusammen,  so  sehen  wir 
folgendes :  Der  Kegel  erscheint  dem  freien  Auge  nm  so  weißer, 
je  mehr  Fettgruppen  er  enthält.  Wo  nur  Punkte  vorkommen,  dort 
ist  der  Kegel  blaß ,  bhin  oder  nach  der  Farbe  des  ()les  blaugrün 
bis  orangegelb  gefärbt.  Die  einzelnen  den  Fettteilclien  entsprechen- 
den Punkte  sind  weiß.  Sind  sie  fein ,  so  verschwinden  sie  schnell 
beim  Heben  des  Tubus ,  ohne  sich  mit  Kreisen  zu  imigeben ,  und 
auch  beim  Drehen  des  Analysators  verschwinden  sie,  ohne  die  Farbe 
zu  verändern.  Am  zaldreichsteu  sind  sie  beim  Hanföle,  10  in 
1  Quadrat.  Umgeben  sich  die  dem  Fette  entsprechenden  Punkte 
beim  Heben  des  Tubus  mit  Kreisen,  so  sind  diese  Kreise  entweder 
undeutlich    blaß,    wenig    gefärbt,    von    kleinem    J   und   ^,    und    es 


XXII,  4.         Sclineider-Just:  Ultraraikroskopie  der  Oleusole.  493 

werden  diese  Kreise  beim  Drehen  des  Analysators  nicht  bunter  und 
verändern  dieselben  nicht  die  Farbe,  sondern  verblnssen  oder  ver- 
schwinden ,  —  oder  es  sind  die  Kreise  bunt ,  deutlich ,  hell ,  von 
großem  zl  und  ^,  ihre  Farbe  erscheint  im  Analysator  noch  buntir 
und  es  wechselt  beim  Drehen  desselben  die  gelbe  und  die  violette, 
die  rote  und  die  grüne  Farbe  ab.  Diese  Farbenveränderung  sehen 
wir  manchmal  auch  ohne  den  Analysator  beim  langsamen  Heben  des 
Tubus.  Ein  Beispiel  der  ersteren  ist  das  Nuß-,  Hanf-  und  Pferdeöl, 
ein  Beispiel  der  anderen  ist  das  Oliven-,  Raps-  und  Rizinusöl,  sowie 
das  Elain  -  Saponifikat.  Die  den  Fettteilchengruppen  entsprechenden 
Punktegruppen  bestehen  entweder  aus  blassen  oder  aus  hellen,  aus 
weißen  oder  aus  bunten  Punkten,  die  zu  ,3  bis  200  beisammen  sind 
und  sich  beim  Heben  des  Tubus  entweder  mit  Kreisen  umgeben  oder 
nicht.  Die  feinen  Punkte  der  Gruppen  verschwinden  gewöhnlich 
beim  Drehen  des  Analysators,  die  hellen  ändern  meistens  die  Farbe. 
Diese  dem  gefällten  Fette  entsprechenden  Befunde  sind  überall  von 
den  nach  der  Reaktion  sichergestellten  ultramikroskopischen  Befunden 
abzurechnen. 


Vergleichende  Versuche  zur  Sicherstellung  des  Einflusses 
des  Goldchlorids  auf  verschiedene  Öle. 

Bei  diesen  Versuchen  war  zuerst  zu  entscheiden,  welches 
Lösungsmittel  für  das  Goldchlorid  genommen  werden  sollte.  Bei 
wässerigen  Lösungen  war  zu  befürchten ,  daß  sich  dieselben  mit 
den  Ölen  absolut  nicht  mischen  und  deshalb  auch  unvollkommen  ein- 
wirken werden ;  anderseits  lösen  wieder  die  Fettlösungsmittel  nicht 
das  Goldchlorid.  Bei  alkoholischen  Lösungen  konnte  wenigstens 
eine  geringe  Mischbarkeit  mit  den  Fettölen  erwartet  werden,  dafür 
aber  wurde  die  Reaktion  bei  Gegenwart  eines  dritten  Körpers,  d.  i. 
des  Alkohols,  ausgeführt,  der  bei  günstigen  Verhältnissen  selbst  eine 
Reaktion  verursachen  oder  unterstützen  konnte.  Infolgedessen  und 
auf  Grund  von  Vorversuchen  wurde  die  Reaktion  sowohl  mit  einer 
alkoholischen  als  auch  mit  einer  wässerigen  Goldchloridlösung  aus- 
geführt. Zu  diesen  Grundversuchen  wurde  je  ein  Gramm  eines 
jeden  Öles  abgewogen  und  0*05  cm  ■'  einer  Lösung  von  6  g  Gold- 
chlorid per  Liter  zugesetzt. 

Bei  den  mit  der  alkoholischen  Lösung  versetzten  Ölen  trat 
schon    nach    einem    halbstündigen    Erwärmen    im    Wasserbade    ohne 


494  Schneicler-Just:  Ultrainikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

Schütteln     eine     deutliche  Veränderung     ein ,     weshalb    die    Reaktion 
unterbrochen  wurde. 

Makroskopischer  Befund.  Die  beim  Vergleiche  mit  der 
ursprünglichen  Farbe  der  Öle  gefundenen  Farbenveränderungen  lassen 
sich  nach  der  Deutlichkeit  in  die  folgende  Skala  zusammenstellen : 
Am  meisten  färbte  sich  das  Mohnöl ,  u.  zw.  blauviolett ,  dann  das 
Olivenöl  rotviolett ,  das  Sesamöl  violett ,  das  Hanföl  und  der  Leber- 
tran rot,  der  Leinölfirnis  und  das  Walrätöl  blutrot,  das  japanische 
Holzöl  grauviolett ,  das  Rizinusöl  grau ,  das  Leinöl  orangegelb  (mit 
einem  schwarzen  Niederschlage) ,  das  BaumwoUsamenöl  bräunlich, 
das  gelbe  Mineralöl  ein  wenig  orangegelber,  das  Pferdeöl  und  die 
Elaine  grünlicher,  das  Rapsöl  gelblich  ;  der  Dreikronentran  war  etwas 
dunkler  und  trüber,  das  Arachisöl  etwas  lichter.  Es  traten  keine 
Veränderungen  ein  beim  Nußöle  und  dem  Paraffinöle. 

Nach  14  Tagen  wurden  dann  folgende  Veränderungen  des  vor- 
erwähnten Befundes  beobachtet :  Aus  dem  Mohnöle  setzte  sich  ein 
blauschwarzes  Pulver  ab  und  das  Öl  war  fast  entfärbt ;  aus  dem 
Olivenöle  setzte  sich  auch  ein  blauer  Niederschlag  ab ,  und  das  Ol 
blieb  bläulich  rosa ;  aus  dem  Sesamöle  setzte  sich  ein  blauer  Nieder- 
schlag ab  und  das  Öl  blieb  rosa ,  die  Farbe  entsprach  dann  einer 
coupierten  Farbe  des  Rubinglases.  Aus  dem  Lebertrane  setzte  sich 
ein  purpurroter  Niederschlag  ab  und  das  Öl  behielt  die  Farbe  des 
Rubinglases.  Aus  dem  Firnis  setzte  sieh  nur  ganz  wenig  eines 
blauen  Niederschlages  an  der  Wand  ab,  und  die  Farbe  blieb  un- 
verändert. Das  Rapsöl  wurde  grünlich  und  zeigte  einen  schwachen 
Goldscliimmer.  Beim  Nußöle  trat  eine  rosarote  Färbung  ein ;  die 
anderen  Öle  blieben  unverändert. 

Weil  bei  einem  ähnlichen  Erwärmen  mit  der  av  ä  s  s  e  r  i  g  e  n 
Ooldchloridlösung  ohne  Schütteln  nur  eine  schwache  Reaktion,  u.  zw. 
bei  dem  Mohnöle  in  Form  einer  Blaufärbung,  beim  Olivenöle  als 
■eine  rotviolette  und  beim  Rizinusöle  als  eine  graue  Färbung  eintrat, 
so  wurde  noch  weiter,  im  ganzen  zwei  Stunden  lang,  ohne  Schütteln 
erwärmt.  Die  Reaktion  trat  nun  auch  bei  einigen  Ölen  ein,  wo  sie 
früher  fehlte. 

M  a  k  r  o  s  k  o  p  i  s  c  h  e  r  Befund.  Am  deutlichsten  war  die 
Färbung  beim  Olivenöle ,  u.  zw.  rotviolett ;  bei  den  anderen  Ölen 
wurden  in  folgender  Reihe  abnehmende  Veränderungen  gefunden : 
eine  Violettfärbung  beim  Mohn-,  Pferde-,  Nuß-,  Sesam-,  Rizinus-  und 
Baumwollsamenöle ;  eine  Färbung  ins  Grünliche  beim  Leinöle  (mit 
einem    schwarzen    Niederschlage) ,    bei  den  Elainen  und  dem  Leber- 


XXII,  4.         Schneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  49;") 

träne ;  eine  Färbung-  in  orangegelb  bei  dem  Walrat-  und  dem  Hanf- 
öle. Beim  Aracliisöle  trat  eine  Entfärbung,  beim  Dreikronentrane 
eine  schwache  Verdunkelung  ein.  Das  Rapsöl,  das  japanische  Holz- 
öl,  das  Mineralöl  und  das  Paraffinöl   waren  unverändert. 

Nach  14  Tagen  wurden  folgende  Veränderungen  beobachtet: 
Aus  der  roten  Farbe  des  Olivenöles  blieb  nur  das  Kot  zurück ,  es 
zeigte  sich  ein  goldener  Schimmer  und  es  setzte  sich  ein  gold- 
glänzender Niederschlag  ab.  Beim  Hanf-  und  AValratöle  zeigte  sich 
auch  der  goldene  Schimmer  und  der  goldglänzende  Niederschlag, 
beide  waren  jedoch  dunkler  als  beim  Olivenöle.  Das  Mohnöl  ent- 
färbte sich  und  die  Wand  überzog  sich  mit  einem  goldglänzenden 
Belage.  Aus  der  Farbe  des  Pferdeöles  blieb  nur  die  rote  Kompo- 
nente zurück  und  es  setzte  sich  ein  goldglänzender  Niederschlag  ab. 
Im  Nußöle  blieb  ebenso  nur  die  rote  Komponente  der  Farbe  zurück 
und  es  setzte  sich  ein  goldglänzender  Niederschlag  ab.  Das  Sesamöl 
bekam  die  ursprüngliche  Farbe  und  schied  einen  schwarzen  Nieder- 
schlag aus.  Das  Rizinusöl  bekam  eine  lichtgraue  Farbe ,  es  trat 
Goldschimmer  ein  und  an  der  Wand  setzte  sich  ein  goldgläiTzender 
Belag  ab.  Die  Elaiue  bekamen  ihre  ursprüngliche  Farbe  und  es 
bildete  sich  ein  geringer,  schwarzer  Niederschlag.  Beim  Lebertrane 
blieb  nur  ein  roter  Strich  der  Färbung  deutlich  und  es  setzte  sich 
ein  geringer ,  goldglänzender  Niederschlag  ab.  Beim  japanischen 
Holzöle  blieb  nur  ein  rötlicher  Stich  zurück,  das  Paraffinöl  färbte 
sich  bräunlich -weiß  durch  ausgeschiedene  P"'ettteilchen. 

Ultramikroskopischer  Befund.  Bei  den  nachfolgenden 
Befunden  sind  dre  bei  der  alkoholischen  Goldchloridlösung  sicher- 
gestellten Befunde  mit  dem  Buchstaben  A ,  bei  der  wässerigen  mit 
dem  Buchstaben  W  bezeichnet.  Es  ist  hier  nur  dasjenige  be- 
schrieben, was  sich  von  dem  Befunde  beim  ursprünglichen  Ole  unter- 
scheidet oder  was  besonders  hervorzuheben  war. 

1.  Leinöl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen,  rückwärts  gelb- 
lichen Kegel;  im  Ultramikroskope  war  der  Kegel  weiß,  jedoch  sehr  wenig 
hell  und  enthielt  36  orangegelbe  Punkte;  hiervon  waren  31  mit  Ringen. 
Jnvix  140.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  /x  waren  im  ganzen  Kegel 
40  Punkte  mit  Kreisen.  Beim  Drehen  des  Analysators  war  die  Farben- 
veränderung der  Ringe  etwas  deutlicher  als  vor  der  Reaktion. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war 
derselbe  milchweiß  und  enthielt  t)  Punkte,  davon  7  mit  1  bis  3  Kreisen, 
außerdem  eine  Gruppe  von  "28  Punkten.  Die  Kreise  waren  bunter,  rötlich 
und  grünlich.  Jmax  212.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  fi  waren  im 
ganzen  Kegel  12  Punkte  mit  Kreisen  sichtbar;  die  Farbenveränderung  beim 
Drehen  des  Analysators  war  noch  auffallender  als  im  vorigen  Falle  A. 


496  Schneidei-Just:  Ultramikroskopie  der  Oledsole.        XXII,  4. 

2.  Leinölfirnis.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  orangeroten  Kegel; 
derselbe  war  im  Ultramikroskope  licht  orangegelb.  In  18  Quadraten  waren 
40  Punkte.  Nach  14tägigem  Stehen,  als  sich  ein  blanschwarzer  Xieder- 
sclilag  absetzte,  waren  im  ganzen  Kegel  nur  ö  Punkte,  davon  einer  mit 
1  Kreise  und  außerdem  eine  Gruppe  von  G  Punkten  zu  sehen.  Jnmx  80. 
Beim  Drehen  des  Analysators  veränderte  sich  die  Farbe  der  Punkte;  die 
Farbe  des  Kegels  veränderte  sich  zwischen  einem  gelblichen  Rosa  und 
einem  Grau  mit  einem  rötlichen  Stiche. 

W.  Das  freie  Aiage  sah  einen  bläulichen,  rückwärts  grünlichen  Kegel ; 
im  Ultramikroskope  war  derselbe  weiß,  wenig  hell  und  enthielt  32  Punkte 
und  10  Gruppen  zu  3  bis  8  Punkten.  Jaws  IGO.  Nach  dem  Heben  des 
Tubus  um  20  ,m  waren  im  ganzen  Kegel  17  Punkte  mit  undeutlichen  Kreisen 
zu  sehen.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die 
Punkte,  die  Kreise  und  die  Gruppen  verschwanden. 

3.  Hanföl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  roten  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  derselbe  orangerot;  die  Zahl  der  feinen  Punkte  (10  im 
Quadrat)  veränderte  sich  nicht.  Die  Farbe  war  jedoch  nicht  mehr  weiß, 
sondern  orangegelb.  Außerdem  verschwanden  alle  Punkte  mit  Kreisen  und 
Punktegruppen.  Beim  Drehen  des  Analysators  war  der  Kegel  abwechselnd 
hellgelb  und  dunkelrot.     Die  Punkte  verschwanden. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  gelben  Kegel ;  im  Ultramikroskope  sah 
man  nur  einen  gelblich  schimmernden  Kegel.  In  18  Quadraten  wurden  nur 
128  Punkte  gefunden.  Diese  Verminderung  läßt  sich  dadurch  erklären, 
(laß  viele  feine  Punkte  durch  hellleuchtende  Punkte  mit  1  bis  3  Kreisen 
verdeckt  wurden.  Von  diesen  letzteren  Punkten  wurden  in  18  Quadraten 
40  gefunden ;  ihre  Kreise  waren  zum  Teil  bunt  und  es  kamen  auch  rote 
Kreise  vor.  Außej;dem  wurde  im  ganzen  Kegel  eine  Gruppe  mit  5  Punkten 
gefunden.  Jmax  3G0  ist  der  höchste  Wert ,  der  bei  den  Ölreaktionen  mit 
Goldchlorid  gefunden  wurde.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20 ,«  waren 
in  18  Quadraten  57  Punkte  mit  gelben  oder  orangegellien  Kreisen  zu  sehen. 
Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  Kreise  ver- 
änderten die  Farbe  und  die  feinen  Punkte  verschwanden. 

4.  Nuß  öl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  gelben  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  derselbe  grünlichgelb.  In  18  Quadraten  fand  man  12G  Punkte, 
davon  27  mit  Kreisen.  Jma.c  160.  Die  Punkte  waren  nicht  weiß,  sondern 
gelb  oder  orangegelb.  Auch  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  (x  fand 
man  in  18  Quadraten  24  Punkte  mit  Kreisen.  Beim  Drehen  des  Anal^^- 
sators  veränderte  sich  die  P^'arbe  des  Kegels  in  Dunkelrot.  Da  das  'U  an 
dem  betreffenden  Tage  klar  war,  fand  man  keine  (iruppen. 

W.  Makroskopisch  zeigte  sich  dieselbe  Veränderung,  jedoch  in  er- 
höhtem Grade.  Der  ultramikroskopiscbe  Befund  war  aber  weniger  ab- 
weichend von  dem  ursprünglichen,  da  das  Ol  bei  der  Beobachtung  getrübt 
war  und  deshalb  die  Reaktion  durch  große ,  weiße  Gruppen  von  hellen 
Punkten  verdeckt  war ,  welche  beim  Drehen  des  Analysators  die  Farbe 
zwischen  einer  hellen  gelblichweißen  und  einer  dunkleren  violettweißen 
Farbe  veränderten.  —  Das  freie  Auge  sah  einen  rosagefärbten  Kegel  mit 
gelbem  Stich;  im  Ultramikroskope  war  der  Kegel  weiß.  In  18  Quadraten 
wurden  87  orangegelbe  oder  gelbe  Punkte  gefunden,  davon  .')  mit  1  Kreise. 


XXII,  4.        Sclineider-Just:  Ultriimikroskopie  der  Oleosole.  497 

^max  190.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ^  wurden  23  Punkte  mit 
Kreisen  in  18  Quadraten  gefunden.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
dunkelte sich  der  Kegel  und  wurde  rot,  die  Farbe  der  Punkte  und  Kreise 
veränderte  sich  deutlich. 

5.  Mohnöl.  A.  Das  freie  Auge  sieht  einen  weißen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope ist  derselbe  weiß,  wenig  intensiv.  Gleich  nach  der  Reaktion 
enthielt  der  ganze  Kegel  170  Punkte ,  die  Mehrzahl  ohne  Kreise.  Nach 
14  Tagen  wurden  nur  38  Punkte  gefunden,  davon  32  mit  Kreisen.  Die 
Zahl  der  Kreise  stieg  bei  den  Punkten  von  5  auf  7  und  deren  Farbe  wurde 
so  bunt,  daß  alle  Regenbogenfarben  bei  einem  Punkte  gefunden  wurden. 
Die  Farbe  der  Punkte,  die  nach  der  Reaktion  orangegelb  oder  gelb  war, 
war  jetzt  meistens  weiß  und  wurde  auch  eine  Gruppe  von  (3  weißen  Punkten 
gefunden.  Jmax  200.  Bei  Drehen  des  Analysators  wurde  der  Kegel  ganz 
schwarz  und  die  Kreise  veränderten  die  Farbe. 

W.  Die  Reaktion  war  schwächer  als  im  Falle  A,  wie  der  Befund  am 
ersten  Tage  zeigte.  Einen  noch  größeren  Unterschied  konnte  man  nach 
14  Tagen  beobachten.  —  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel ;  derselbe 
war  im  Ultramikroskope  blauweiß.  Der  Kegel  enthielt  zuerst  96  Punkte, 
deren  Mehrzahl  mit  bis  4  Kreisen  umgeben  war;  diese  Zahl  sank  auf  62 
und  waren  dann  nur  20  Punkte  mit  Kreisen  umgeben,  dafür  aber  mit  bis 
5  sehr  bunten ,  in  allen  Regenbogenfarben  gefärbten  Kreisen.  Jmax  326. 
Nach  dem  Heben  des  Tubus  hatten  31  von  den  62  Punkten  Kreise.  Beim 
Drehen  des  Analysators  wurde  der  Kegel  fast  schwarz,  die  feinen  Punkte 
verschwanden.     Die  Kreise  veränderten  auffallend  die  Farbe. 

6.  Japanisches  Holzöl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  rosagefärbten 
Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  hellorangegelb  gefärbt.  In  18  Qua- 
draten wurden  127  gelbe  und  orangegelbe  Punkte  gefunden,  davon  2  mit 
je  einem  Kreise.  Jmax  64.  Auch  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  jx 
waren  in  18  Quadraten  nur  4  Punkte  mit  einem  unbestimmten  Kreise  zu 
sehen.  Beim  Dreheii  des  Analysators  veränderte  sich  die  hellgelbe  Farbe 
des  Kegels  in  Dunkelorangegelb ,  die  feinen  Punkte  verschwanden ,  die 
großen  verblaßten,  aber  die  Farbe  veränderte  sich  nicht. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel ;  im  Ultramikroskope  war 
derselbe  milchweiß.  In  18  Quadraten  wurden  3(j  orangegelbe  Punkte  ge- 
funden, von  denen  16  mit  1  oder  2  deutlichen  Kreisen  umgeben  waren. 
Jmax  308.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  2()  ,i<  wurden  18  Punkte  mit 
Kreisen  in  18  Quadraten  gefunden.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
dunkelte sich  der  Kegel,  die  feinen  Punkte  verschwanden,  bei  den  hellen, 
sowie  bei  den  Kreisen  verblaßte  die  orangegelbe  Farbe. 

7.  Olivenöl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel  mit  einem 
schwachen  roten  Stich;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  dunkel,  schwach 
rötlich  gefärbt.  In  18  Quadraten  fand  man  nur  12  Punkte,  davon  6  mit 
einem  oder  2  Kreisen.  Außerdem  waren  im  ganzen  Kegel  5  Gruppen  zu 
3  bis  7  Punkten,  J  durchschnittlich  60,  _/,««.?•  268.  Nach  dem  Heben  des 
Tubus  um  20  u  fand  man  in  18  Quadraten  9  Punkte  mit  bis  4  Kreisen. 
Auffallend  ist  außer  der  kleinen  Punktezahl  und  der  Verminderung  des 
durchschnittlichen  J  die  geringe  Färbung  der  Mehrzahl  der  Punkte  selbst 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  4.  o2 


498  Schneider-Just:  Ultraraikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

l)eim  Drehen  des  Anah^sators.    Die  Farbe  des  Kegels  bewegte  sich  zwischen 
Grau  und  Dunkelrot. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  rosagefärbten  Kegel  mit  Gelbstich;  im 
Ultramikroskope  war  derselbe  ziemlich  dunkel,  gelblich.  In  18  Quadraten 
fand  man  IGO  Punkte,  davon  G4  hellere,  und  unter  diesen  33  mit  1  oder 
2  undeutlichen  Kreisen.  Die  Punkte  waren  auch  weit  außerhalb  des  Kegels 
zu  seilen.  Die  Farbe  der  Punkte  war  orangegelb.  Jmax  124.  Nach  dem 
Heben  des  Tubus  um  20  ^  wurden  in  18  Quadraten  30  Punkte  mit  Kreisen 
gefunden.  Im  Analysator  erschienen  die  Punkte  nur  wenig  bunter,  beim 
Drehen  desselben  bewegte  sich  die  Farbe  des  Kegels  zwischen  gelb  und  rot. 

8.  A  r  a  c  h  i  s  ö  1.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  sehr  schwachen,  weiß- 
lichen Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  kaum  deutlich,  bläulich 
und  enthielt  6  bis  11  Punkte,  davon  die  Hälfte  mit  bis  2  deutlichen  bunten 
Kreisen.  Jmox  220.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  fx  wurden  nur 
5  Punkte  mit  weniger  bunten  Kreisen  gefunden.  Beim  Drehen  des  Analy- 
sators veränderte  sich  der  Kegel  nicht,  die  Punkte  und  die  Kreise  nur 
wenig. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  blassen,  gelblichen  Kegel;  im  Ultra- 
mikroskope war  derselbe  dunkel,  bläulich.  In  18  Quadraten  waren  5  bunte 
Punkte  zu  sehen,  davon  4  mit  bis  5  Kreisen.  Nach  dem  Heben  des  Tubus 
um  20  fi,  waren  2  Punkte  mit  Kreisen  umgeben.  Jmax  256.  Beim  Drehen 
des  Analysators  wurde  der  Kegel  fast  schwarz,  die  Farbe  der  Punkte  und 
der  Kreise  veränderte  sich. 

9.  Baumwollsaraenöl.  A  und  W.  Der  Befund  wich  von  dem- 
jenigen vor  der  Reaktion  nicht  ab.  Das  freie  Auge  sah  einen  rosastichigen, 
nicht  genau  begrenzten  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  das  ganze  Sehfeld 
weiß,  lind  dort,  wo  der  Kegel  zu  sein  pflegt,  war  es  heller.  Beim  Drehen 
des  Analysators  wechselte  ein  rötlicher  und  ein  orangegelber  Stich  ab. 

10.  Sesam  öl.  A.  Untersuchte  man  das  Öl  bald  nach  der  Reaktion, 
so  sah  das  freie  Auge  einen  roten  Kegel ;  im  Ultramikroskojie  war  derselbe 
fast  schwarz  und  enthielt  150  ziemlich  bunte,  zum  Teil  rote  Punkte,  die 
höchstens  mit  einem  breiten  Kreise  umgeben  waren.  _/  72.  Nach  14  l'agen, 
als  sich  die  blaue  Farbe  abgesetzt  hatte  und  das  Öl  nur  mt  war,  sah  das 
freie  Auge  einen  schwach  rosagefärbten  Kegel;  im  Ultrauiikroskope  war 
derselbe  dunkel  und  rötlich,  und  enthielt  25  gelbe  oder  orangegelbe  Punkte, 
davon  14  mit  Kreisen,  Jmax  174,  und  eine  Gruppe  von  7  Punkten.  Nach 
dem  Heben  des  Tubus  um  20  ja  waren  jetzt  15  mit  Kreisen  umgebene 
Punkte  im  Kegel  sichtbar.  Im  Analysator  sah  man  auch  violette  Punkte 
und  Kreise,  beim  Drehen  desselben  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  Farb<t 
der  Punkte  und  Kreise  veränderte  sich  auffallend :  im  verdunkelten  Kegel 
traten  rotleuchtende  Punkte  hervor. 

W.  Das  freie  Auge  sah  bei  der  Prüfung  des  <>les  gleich  nach  der 
Reaktion  einen  weißen  Kegel ;  derselbe  war  im  Ultramikroskope  fast  schwarz 
und  enthielt  55  Gruppen  von  2  bis  9  orangegelben  Punkten ,  die  teilweise 
mit  Kreisen  umgeben  waren.  Jmax  124.  Nach  14  Tagen,  als  sich  die  blau(* 
Farbe  absetzte  und  <lie  ursprüngliche  Färbung  eintrat,  sah  das  freie  Auge 
einen  blassen  Kegel,  derselbe  war  im  Ultramikroskope  grau  und  enthielt 
7  Punkte  ohne  Kreise,  (>  mit  Kreisen,  und  (5  Gruppen  von  3  bis  <!  Punkten. 


I 


XXII,  4.        Schneider-Just:  Ultruiuikroskopie  der  Oleosole.  499 

Jmax  15G.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ^  waren  im  ganzen  Kegel 
21  Punkte  mit  Kreisen  zu  sehen.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte 
sich  der  Kegel  nur  wenig  und  die  Punkte,  die  Kreise  und  die  Gruppen 
veränderten  nur  wenig  die  Farbe. 

11.  Rapsöl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  rosagefärbten  Kegel ;  der- 
selbe war  im  Ultramikroskope  fast  schwarz.  In  18  Quadraten  waren  81 
(»rangegelbe  Punkte  zu  sehen,  davon  40  mit  1  bis  2  Kreisen.  Anmx  124. 
Auch  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ,m  wurde  dieselbe  Zahl  von  Punkten 
mit  Kreisen  gefunden.  Beim  Drehen  des  Analj^sators  verdunkelte  sich  der 
Kegel,  die  Farbe  der  Punkte  und  Kreise  bewegte  sich  zwischen  Orange- 
gelb und  blassem  Grün. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel;  im  ültramikroskope  war 
derselbe  blaß,  blaugrau  und  enthielt  166  orangegelbe  Punkte,  davon  137 
mit  1  bis  2  bunten ,  auch  violetten  Kreisen.  Jmax  320.  Nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  fx  wurden  nur  94  Punkte  mit  Kreisen  im  ganzen  Kegel 
gefunden.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel  ein 
wenig,  die  Punkte  und  die  Kreise  veränderten  ihre  Farbe. 

12.  Rizinusöl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  schwach  rosagefärbten, 
gelbstichigen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  orangegelb.  In 
18  Quadraten  waren  98  Punkte  enthalten,  davon  war  die  Mehrzahl  gelb, 
8  rot,  die  anderen  blaß  grünlich.  Die  Mehrzahl  war  mit  1  oder  2  unbe- 
stimmten verschwommenen  gelben  Kreisen  umgeben;  nach  dem  Heben  des 
Tubus  um  20  jx  sind  fast  bei  allen  Punkten  Kreise  zu  sehen.  Jmax  180. 
Beim  Drehen  des  Analysators  bewegte  sich  die  Farbe  des  Kegels,  der 
Punkte  und  der  Kreise  zwischen  Rot  und  Grüngelb. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  gelbstichig  rosagefärbten  Kegel.  Im 
Ultramikroskope  war  derselbe  gelb  ins  Orangegelbe.  In  18  Quadraten 
fand  man  52  orangegelbe  oder  rote  Punkte  mit  3  deutlichen  Kreisen. 
Jmax  200.  Beim  Drehen  des  Analysators  bewegte  sich  die  Farbe  der 
Kreise  zwischen  Rot  und  Gelbgrün  und  der  Kegel  wurde  fast  schwarz 
und  zeigte  nur  kleine  Unterschiede  zwischen  einem  schwachen  roten  und 
einem  gelben  Scheine. 

13.  Pferde  öl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  gelblichen  Kegel:  der- 
selbe war  im  Ultramikroskope  kaum  sichtbar  und  enthielt  63  weiße  Punkte: 
davon  waren  51  mit  1  bis  3  bunten  Kreisen  umgeben.  Jmax  250.  Auch 
nach  dem  Heben  des  Tubus  befanden  sich  65  Punkte  mit  Kreisen  im 
Kegel.  Wurde  auf  die  mit  Kreisen  umgebenen  Punkte  scharf  eingestellt, 
so  zeigten  sich  an  derselben  Stelle  2  bis  3  Punkte  beisammen.  Beim  Drehen 
des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  Farbenveränderung  war 
nur  bei  jenen  Kreisen  so  deutlich,  welche  durch  Punktegruppen  gebildet 
wurden. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  rosagefärbten  Kegel.  Im  Ultramikro- 
skope war  derselbe,  wenn  man  seine  engste  Stelle  nahe  dem  Quarzfenster- 
chen  entstehen  ließ,  gelb,  wenn  dies  im  rückwärtigen  Teile  der  Küvette 
geschah,  rosa.  Gleich  nach  der  Reaktion  wurden  im  Kegel  70  Punkte  mit 
4  Kreisen  gefunden,  Jmar  240,  nach  14  Tagen  nur  6  Punkte  ohne  Kreise, 
7  mit  1  bis  3  Kreisen  und  7  Gruppen  mit  3  bis  5  Punkten;  Jmax  140. 
Beim  Drohen   des  Analvsators   bewegte  sich  die  Farbe   zwischen  Gelbweiß 


500  Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

und    dunklem   Rot.     Die  Punkte    veränderten   gleich   nach    der  Reaktion 
die  Farbe,  später  nur  unbedeutend. 

14.  Elain- Destillat.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blauen, 
rückwärts  grünlichen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  blaugrau 
und  enthielt  GG  orangegelbe  Punkte,  von  welchen  52  (nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  [x  42)  mit  1  bis  3  Kreisen  umgeben  waren.  Jmnx  IGO. 
Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  Farbe  der 
Punkte  und  der  Kreise  veränderte  sich  auffallend. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blauen,  rückwärts  grünen  Kegel. 
Im  Ultramikroskope  war  derselbe  bläulichgrau  und  enthielt  47  meistens 
mit  Kreisen  umgebene,  orangegelbe  Punkte.  Amux  248.  Beim  Drehen  des 
Analysators  wurde  der  Kegel  dunkler,  bei  den  Kreisen  wechselte  die  rote 
und  die  grüne  Farbe  ab. 

15.  Elain-Saponif ika t.  A.  Das  freie  Auge  sah  bei  einer  inten- 
siven Beobachtung  einen  roten,  bei  einer  schwächeren  einen  rosagefärbten 
Kegel.  Im  Ultramikroskope  war  derselbe  blaß,  bläulich  grün  und  enthielt 
122  Punkte,  davon  34  (nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  jj.  16)  mit  1  bis 
i]  Kreisen.  Jmux  130.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der 
Kegel,  die  Punkte  und  die  Kreise  veränderten  ein  wenig  die  Farbe. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blauen,  rückwärts  grünen  Kegel. 
Im  Ultramikroskope  war  derselbe  grau ,  und  enthielt  22  Punkte ,  von  wel- 
chen 7  mit  1  bis  4  bunten  Kreisen  umgeben  waren.  Außerdem  wurde 
1  Gruppe  von  G  Punkten  gefunden.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ^/ 
wurden  27  Punkte  mit  Kreisen  gefunden.  Jinax  200.  Beim  Drehen  des 
Analysators  veränderte  sich  der  Kegel  fast  gar  nicht,  die  Farbe  der  Punkte 
und  der  Kreise  veränderte  sich  auffallend. 

IG.  Lebertran.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  weißen,  rück- 
wärts rosagefärbten  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  hellrosa  ge- 
färbt und  enthielt  59  Punkte  und  Gruppen  zusammen.  Einzelne  Punkte 
sind  nur  selten,  die  Gruppen  enthalten  4  bis  32  Punkte.  Beim  Heben  des 
Tubus  um  20  ,u  umgeben  sich  die  Gruppen  nur  mit  1  unbestimmten  Kreise, 
der  bald  verschwindet  und  die  Farbe  des  Kegels  besitzt.  Jmax  84.  Rot- 
leuchtende Punkte  kommen  nicht  vor.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
ändert sich  die  Intensität  des  Kegels  und  der  Punkte,  dagegen  nicht  die 
Farbe.  —  Nach  14  Tagen ,  als  sich  eine  große  Menge  eines  roten  Belages 
an  der  Wand  ausgeschieden  hatte,  war  der  Kegel  nur  noch  grau  und  ent- 
hielt 17  einzelne  Punkte  und  13  Gruppen  zu  3  bis  40  Punkten.  Jnnix  144. 
Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ,«  wurden  IG  mit  verschwommenen 
Kreisen  umgebene  Punkte  gefunden.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
dunkelten sich  sowohl  der  Kegel  als  auch  die  Punkte.  Der  genannte  rote 
Fettniederschlag  schmolz  nicht  beim  Erwärmen  und  löste  sich  in  der  Hitze 
nur  sehr  langsam. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war 
derselbe  schwarzgrau  und  enthielt  47  Punkte  und  3  Gruppen  von  5  bis 
11  Punkten.  Von  den  Punkten  waren  3G  (nach  dem  Heben  des  Tubus 
um  20  t/  22)  mit  bis  5  bunten  Kreisen  umgeben.  Jmax  314.  Beim  Drehen 
des  Analysators  wurde  der  Kegel  fast  schwarz;  die  Farbe  der  Punkte  und 
der  Ringe  veränderte  sich  auffallend. 


XXII,  4.         Sclincitler-J  iist:  Ultraniikro.skoijio  der  Uleosolo.  501 

17.  Dreik  ronen  t  ran.  A.  Das  freie  Auge  sali  einen  vorne  weißen, 
rückwärts  orangegelben  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  licht- 
orangegelb.  Gleich  nach  der  Reaktion  wurden  im  ganzen  Kegel  zusammen 
80  Punkte  und  Gruppen  gefunden.  Die  Gruppen  zählten  3  bis  5  Punkte. 
Nach  14  Tagen  war  der  Kegel  im  Ultramikroskope  nur  grau  mit  rosa  Stich 
und  zählte  nur  4  rote  oder  orangegelbe  Punkte  und  1  oder  2  Gruppen 
zu  9  bis  24  roten  Punkten;  von  den  Punkten  waren  3  (nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  fx  1)  mit  1  oder  2  Kreisen  umgeben.  Jmax  114.  Charak- 
teristisch ist,  daß  beim  Drehen  des  Analysators  die  Farben  nicht  bunter 
wurden  und  sich  nicht  veränderten,  sondern  rot  blieben;  es  trat  nur  eine 
Verdunkelung  des  Kegels,  der  Punkte  und  der  Gruppen  ein. 

W.  Der  Befund  war  derselbe  wie  bei  A,  nitr  wurden  gleich  nach  der 
Reaktion  28  Punkte  und  Gruppen  zu  2  bis  3  Punkten  im  Kegel  gefunden, 
nach  14  Tagen  nur  4  Punkte,  davon  einer  mit  1  Kreise  (nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  ,«  4  mit  Kreisen),  außerdem  ausnahmsweise  eine  Gruppe 
von  33  Punkten.     Jma.r  128. 

18.  Walrat  öl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  orangegelben  Kegel; 
ein  ebensolcher  war  auch  im  Ultramikroskope  zu  sehen.  In  18  Quadraten 
wurden  70  orangegelbe  Punkte  ohne  Kreise  gefunden;  diese  Zahl  ist  je- 
doch nicht  ganz  verläßlich,  denn  die  Punkte  waren  meistens  so  klein,  daß 
sie  in  den  Quadraten  nur  schwer  zu  unterscheiden  waren.  Infolge  der 
Feinheit  gaben  die  Punkte  beim  Heben  des  Tubus  nur  ausnahmsweise 
Kreise.  Jmax  42.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  [x  wurden  in 
18  Quadraten  nur  2  Punkte  mit  Kreisen  gefunden.  Beim  Drehen  des 
Analysators  schwankte  die  Farbe  des  Kegels  zwischen  einer  gelb-  und  einer 
rotstichigen;  die  Punkte  verschwanden  bis  auf  4  in  18  Quadraten  und 
diese  4  veränderten  dann  die  Farbe  wie  der  Kegel. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  orangegelben  Kegel;  im  Ultramikro- 
skope war  derselbe  gelb.  In  18  Quadraten  wurden  146  Punkte  gefunden, 
jedoch  waren  auch  hier  die  Punkte  so  fein,  daß  sie  zwischen  den  Qua- 
draten nicht  genau  zählbar  waren.  9  von  ihnen  waren  mit  einem  unbe- 
stimmten Kreise  umgeben  (nach  dem  lieben  des  Tubus  um  20  [x  11); 
Jmax  140.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Tubus,  die 
feinen  Punkte  verschwanden,  die  mit  den  Kreisen  sich  umgebenden  wurden 
etwas  bunter.  —  Die  feinen  Punkte  bei  den  beiden  letzten  Versuchen 
rühren  von  dem  durch  Abkühlung  sich  ausscheidenden  Fette  her. 

19.  Gelbes  Mineralöl.  A.  Der  Befund  stimmte  mit  demjenigen 
vor  der  Reaktion  überein. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blauen,  rückwärts  grüngelben 
Kegel.  Im  Ultramikroskope  war  derselbe  lichtgrau,  das  übrige  Sehfeld 
grau.  In  18  Quadraten  waren  172  weiße,  wenig  helle  Punkte  zu  sehen, 
welche  nicht  mit  Kreisen  umgeben  waren  und  von  denen  nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  [x  5  mit  Kreisen  umgeben  waren.  Jmax  54.  Beim  Drehen 
des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel  vollkommen,  alle  Punkte  und 
Kreise  verschwanden.  —  Wurde  das  Öl  erwärmt  und  der  Niederschlag 
aufgelöst,  war  der  Befund  derselbe  wie  vor  der  Reaktion  und  es  wurden 
nur  ausnahmsweise  3  bis  8  Punkte  im  ganzen  Kegel,  davon  höchstens  einer 
mit  einem  Kreise  gefunden. 


502  Schnei  der-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

20.  Paraffin  öl.  A.  Das  freie  Auge  sah  einen  blauen  Kegel;  der- 
selbe war  im  Ultramikroskope  bläulichweiß  und  enthielt  19  sehr  verschieden 
lichte  Punkte  mit  bis  4  auffallend,  auch  blau-  und  violettgefärbten  Kreisen, 
außerdem  eine  Gruppe  von  20  Punkten.  Beim  Drehen  des  Analysators 
verdunkelte  sich  der  Kegel  und  die  Kreise  veränderten  die  Farbe.  Nach 
14  Tagen  war  der  Kegel  noch  blau  und  undeutHch,  und  enthielt  12  Punkte, 
davon  8  mit  höchstens  3  Kreisen.  Jmax  106,  außerdem  eine  Gruppe  von 
4  Punkten ;  beim  Drehen  des  Analysators  verschwanden  sowohl  die  Punkte 
als  auch  die  Kreise. 

W.  Das  freie  Auge  sah  einen  blauen,  wenig  deutlichen  Kegel;  im 
Ultramikroskope  war  derselbe  bläulich  weiß  und  enthielt  111  Punkte  mit 
höchstens  2  Kreisen  und  seltene  Gruppen  zu  3  bis  4  Punkten.  Unter  den 
Punkten  kamen  zahlreich  blaue  vor.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
dunkelte sich  der  Kegel,  die  Punkte  und  die  Kreise  verschwanden.  -~ 
Nachdem  sich  mit  der  Zeit  die  Fetttrübung  in  Form  von  Häutchen  an 
der  Wand  und  auf  dem  Tropfen  der  wässerigen  Goldlösung  ausgeschieden 
hatte,  war  der  Kegel  nur  noch  dunkelblau  und  enthielt  43  Punkte,  davon 
3G  mit  bis  5  Kreisen  und  eine  Gruppe  von  G  Punkten.  Die  Kreise  waren 
auffallend  bunt,  vorherrschend  violett;  schwach  vertreten  war  Rot.  Nach 
dem  Heben  des  Tubus  um  20  fx  wurden  im  Kegel  18  Punkte  mit  Kreisen 
gefunden.  Wurde  auf  die  mit  Kreisen  umgebenen  Zentren  scharf  ein- 
gestellt, so  zeigten  sich  Punktegruppen.  Jiimx  236.  Auch  hier  verschwanden 
beim  Drehen  des  Analysators  die  feinen  Punkte ;  die  hellen,  besonders  die- 
jenigen in  den  Gruppen,  verblaßten  nur.  — 

Die  in  den  vorangehenden  Befunden  beschriebenen  Beobach- 
tungen können  entweder  als  Kesultate  der  Reaktion  mit  Goldchlorid 
oder  als  Folgen  einer,  von  dem  Charakter  des  Öles  abhängenden 
Fettausscheidung  erklärt  werden.  Bei  dem  Mineral-  und  Paraffinöle 
wurde  durch  das  wässerige  Reagens  die  Bildung  von  Fettkörperu 
unterstützt,  die  sich  als  eine  Trübung  oder  als  ein  Niederschlag  oder 
als  eine  Haut  ausschieden.  Eine  solche  Fettausscheidung  zeigte  sich 
im  Ultramikroskope  ebenso  wie  vor  der  Reaktion  entweder  in  der 
Form  von  Gruppen  von  hellleuchtenden  Punkten,  deren  Farbe  sich 
zwischen  violettweiß  und  gelblichweiß  bewegte  (siehe  z.  B.  Nußöl  W), 
oder  in  Form  von  Punkten  mit  Kreisen,  die  im  Analysator  die  Farbe 
veränderten  (siehe  z.  B.  Rapsöl  A),  oder  in  Form  von  Punkten  ohne 
Kreise  (siehe  z.  B.  japanisches  Holzöl  A  und  Walratöl  W).  Beim 
Ausscheiden  des  Fettes  kann  auch  der  Fettfarbstoff  mitgerissen 
werden ,  so  daß  das  Öl  mehr  oder  weniger  entfärbt  wird  (siehe 
Leinöllirnis  W). 

Was  die  eigentliche  Reaktion  betrifl't ,  so  wurde  das  Gold  auf 
dreifache  Weise  ausgeschieden.  Entweder  blieb  es  amikroskopisch  und 
färbte  rot,  oder  es  wurde  submikroskopisch  ausgeschieden ;  in  diesem 
Falle  verlieh  es  den  Ölen  entweder  eine  blaue  P'arbe  oder  es  bildete 


XXII,  4.         Schneider -Just:  Ultramikroskopie  der  Uleosule.  503 

einen  Goldscliimmer  im  Ole.  In  den  beiden  letzten  Fällen  scheidet 
sich  das  anfangs  verteilte  Gold  leicht  aus,  und  zwar  als  ein  blau- 
schwarzer Niederschlag,  resp.  als  ein  goldglänzender  Belag  an  der 
Wand.  Die  Entscheidung,  welche  von  den  beobachteten  Punkten 
submikroskopischeil  Teilchen ,  und  welche  mikroskopischen  Teilchen 
entsprechen ,  stößt  wider  Erwarten  auf  große  Hindernisse  bei  der 
mikroskopischen  Untersuchung ,  weil  sich  bei  der  Untersuchung  des 
(Mes  in  dünner  Schicht  die  Teilchen  auf  einer  Seite  sammelten,  so 
daß  ihre  Anzahl  nur  dann  bestimmbar  wäre ,  wenn  alle  in  einem 
Tropfen  vorkommenden  gezählt  und  auf  die  Einheit  umgerechnet 
werden  könnten.  Zählt  man  sie  auf  die  gewöhnliche  Weise,  so  findet 
mau  an  einer  Stelle  deren  mehr,  als  man  im  Ultramikroskope  Punkte 
und  Gruppen  im  ganzen  gefunden  hat,  an  einer  anderen  Stelle 
weniger  als  man  Gruppen  und  mit  Kreisen  umgebene  Punkte  ge- 
sehen hat.  So  viel  geht  aber  aus  den  mikroskopischen  Beobachtungen 
hervor,  daß  in  denjenigen  Fällen,  wo  im  Ultramikroskope  Punkte 
mit  Kreisen  gesehen  wurden ,  im  Mikroskope  auch  schwarze  Punkte 
zu  sehen  waren ,  dagegen  scheinen  die  feinen  Punkte  ohne  Kreise 
eher  submikroskopischen  Teilchen  zu  gehören. 

Die  rote  Färbung,  oder  der  Eintritt  einer  roten  Kompo- 
nente in  die  Farbe,  wurde  überhaupt  bei  dem  Leinöllirnisse  A,  dem 
Hanföle  A,  dem  Nußöle  A  und  W,  dem  japanischen  Holzöle  A,  dem 
Olivenöle  A  und  W,  dem  Baumwollsamenöle  AV,  dem  Sesamöle  A, 
dem  Pferdeöle  W,  dem  Lebertran  A  und  dem  Walratöle  A  gefunden. 
Diese  Färbung  wurde  begleitet  durch  eine  entsprechende  Rotfärbnng 
des  mit  dem  freien  Auge  betrachteten  Kegels  und  durch  eine  eben- 
solche Färbung  des  Kegels  im  Ultramikroskope.  Diese  letztere  ver- 
schwand nicht  beim  Drehen  des  Analysators,  so  daß  die  Farbe  des 
Kegels  bei  allen  Ölen  sich  beim  Drehen  des  Analysators  in  eine, 
wenn  auch  sehr  dunkle  und  schwache  Rotfärbung  verwandelte. 
Nirgends  konnte  konstatiert  werden,  daß  mit  dem  .Eintritte  der  roten 
Färbung  oder  eines  roten  Stiches  bei  der  Reaktion  sich  irgendwelche 
besondere  charakteristische  Punkte  oder  Punktegruppen  gezeigt  hätten, 
und  wo  in  den  eben  angeführten  Ölen  Punkte  und  Gruppen  zu  sehen 
waren,  konnten  dieselben  immer  mit  einer  andern  Ursache  z.  B.  mit 
der  gleichzeitigen  Blaufärbung,  mit  dem  Goldschimmer  oder  mit  der 
Fettausscheidung  in  Zusammenhang  gebracht  werden. 

Die  genannten  drei  Merkmale  traten  bei  dem  Leinölfirnisse  A, 
dem  Hanföle  A,  dem  Olivenöle  A,  dem  Banmwollsaraenöle  W,  dem 
Lebertran  A  und  dem  Walratöle  A  alle  deutlich  hervor.     Beim  Hanf- 


-)04  Schneider- Just:  ültramikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

öle  A  waren  die  iirsprüngiieli  weißen  Punkte  infolge  der  Bestralilung 
mit  dem    durch    das   rote   Öl    kommenden  Lichte  orangerot.     Ebenso 
wurden  auch  bei  Lebertran  A  die  der  Fettausscheidung  entsprechen- 
den Punktegruppen    mit    einem    roten  Liclite    beleuchtet,  und  es  be- 
währte   sich    nicht    die  Vermutung,    daß  in  dem  Niederschlage  auch 
die  rote  Farbe  niedergeschlagen  sein  wird ,    und    daß    es    noch  eine 
andere,  als  amikroskopisehe  rote  Farbe  geben  wird.    Audi  bei  dem 
Walratöle,  wo  beim  Stehen  eine  durch  Wärme  verschwindende  Trübung 
eintrat,    waren    die    feinen    Punkte    durcli    das,    die    rotgefärbte    01- 
schicht  passierende  Licht,  orangegelb  gefärbt.  —  Beim  Olivenöle  W 
war    die    rote  Farbe    des  Kegels   durch    die  dem  Goldschimmer  ent- 
spreclienden  gelbleuchtenden  Punkte  verdeckt,  und  zwar  sowold  bei 
der    Betrachtung    mit    freiem   Auge,    als    auch    im    ITltramikroskope ; 
man    konnte   jedoch    mit    dem    freien  Auge    sehen,    wie    sich   in  die 
Glaswand  der  Küvette  hinter  dem  Kegel  rosa  Licht  ausbreitet,  und 
auch  beim  Drehen  des  Analysators  bewegte  sich  die  Farbe  zwischen 
gelb    und    rot.     Beim  Nußöle  A    konnte  weder    bei  der  Betrachtung 
mit  dem  freien  Auge,    noch    im  Ultramikroskope  die  rote  Farbe  ge- 
sehen werden ,    und   zwar    deshalb ,  weil  die  zahlreichen ,    dem    aus- 
geschiedenen   Fette    angehörenden    Punkte    und    Gruppen     ein    sehr 
helles ,    weißes  Licht    ausbreiteten ;    dafür    konnte    aber  wieder   beim 
Drehen    des    Analysators    die    rote    Farbe    entdeckt    werden.      Beim 
Nußöle    W    und    dem   japanischen    Holzöle    A,    war    aus    demselben 
Grunde    die    rote  Farbe    im  Ultramikroskope    erst   beim  Drehen   des 
Analysators  sichtbar,  sie  trat  jedoch  auch  beim  Beobachten  mit  freiem 
Auge  hervor.    Beim  Pferdeöle  W  war  die  rote  Farbe  im  Ultramikro- 
skope   nur    dann    sichtbar,    wenn    auf  eine  tiefere,   d.  i.  vom  Quarz- 
fensterchen    entferntere  Stelle,   eingestellt  wurde.     Beim  Sesamöle  A 
war  es  unmöglich,  sicher  zu  stellen,  ob  der  Kegel  beim  Drehen  des 
Analysators    rötlich    gefärbt    bleibt,    weil    der    Kegel    selbst   bei   der 
größten  Verdunkelung  noch  ziemlich  hell  war  und  darin  rotleuchtende, 
der  Blaufärbung  des  Öles  zugehörende  Punkte  hervorragten. 

Die  Blaufärbung  oder  der  Zutritt  der  blauen  Komponente 
zur  Farbe  des  Öles  Avurde  bei  dem  Mohnöle  A  und  W,  bei  dem 
Rizinusöle  A  und  W,  bei  dem  Leinöle  A  und  W  und  bei  den  Elainen 
A  und  W  konstatiert.  Bei  dem  Dreikronentrane  A  wurde  ein  ge- 
ringer blauer  Satz  gefunden,  eine  Veränderung  der  dunkeln  Farbe 
war  nicht  sichtbar. 

Die  Blaufärbung  wurde  mit  folgenden  Erscheinungen  begleitet: 
Es  zeigten   sich   gelbe,    orangegelbe,    zum   großen   Teile    aber    auch 


XXII,  4.        Seil neider- Just :  Ultramikroskopie  der  Oleosolc.  505 

rote  Punkte ,  welche  entweder  schon  bei  der  schärfsten  Einstellung 
auf  den  Kegel  mit  bis  7  gelben,  rötlichen  oder  grünlichen  Kreisen  um- 
geben waren  oder  sich  beim  Heben  des  Tubus  durcli  die  feine  Ein- 
stellvorrichtung,  mit  solchen  umgaben.  J  und  (Z»  waren  sehr  groß. 
Beim  Drehen  des  Anal.ysators  veränderte  sich  die  Farbe  der  Punkte 
und  der  Kreise  zwischen  rot  und  blaßgrüu ,  die  Lichtintensität  ver- 
änderte sich  jedoch  nur  unbedeutend.  Punktegruppeu  waren  manch- 
mal in  größerer  Anzalil  vorhanden.  Bei  allen  Ölen  außer  dem 
Rizinusöle  verschwand  wieder  die  blaue  Farbe  und  es  setzte  sich 
ein  pulveriger  blauschwarzer  Niederschlag  ab.  Dieser  Verändeining 
entsprach  die  Bildung  von  Gruppen  mit  einer  immer  größeren  Punkte- 
zahl und  die  Zunahme  von  J  und  <Z>.  Aus  dem  was  durch  das  Ab- 
setzen der  Farbe  im  ultramikroskopischen  Bilde  verschwand,  ist  am 
besten  zu  selien,  was  die  blaue  Färbung  verursacht  hat,  und  zwar 
um  so  deutlicher,  je  blauer  die  Farbe  nach  der  Reaktion  war;  am 
deutlichsten  also  bei  dem  Mohn-  und  dem  Sesamöle.  Eine  stärkere 
Blaufärbung  war  gewöhnlich  durch  eine  größere  Anzahl  von  Punkten 
mit  Kreisen ,  durch  eine  verhältnismäßige  Anzahl  von  roten  und 
orangegelben  Punkten,  durch  größeres  J  und  ^,  durch  eine  größere 
Buntheit  der  Ringe  bei  der  Betrachtung  mit  dem  Analysator  und 
auch  olnie  ihn ,  und  endlich  durch  eine  auffallendere  Veränderung 
der  Farbe  der  Puukte  und  der  Ringe,  beim  Drehen  des  Analysators 
ausgezeichnet.  Die  Buntheit  der  Ringe  konnte  am  besten  an  dem 
Auffallen  der  roten  Farbe  gemessen  werden.  —  Wenn  bei  einem 
blaueren  Öle  eine  geringere  Anzahl  von  Punkten  gefunden  wurde 
als  bei  einem  weniger  blauen  (z.  B.  beim  Leinöl  W  mehr  als  bei  A), 
so  war  diese  Abnahme  des  einen  Merkmals  hinreichend  durch  höhere 
Stufen  der  anderen  Merkmale  ausgewogen.  Daß  manchmal,  je 
schwächer  die  Blaufärbung  war,  desto  größeres  A  und  <D  und  eine 
um  so  größere  Anzahl  von  mit  Kreisen  umgebenen  Punkten  gefunden 
Avurde ,  läßt  sich  dadurch  erklären ,  daß  das  Gold  schon  nahe  der 
gänzlichen  Ausscheidung  und  deshalb  auch  in  Form  von  schweren, 
mehr  Punkte  zählenden  Gruppen  gesammelt  war.  Deshalb  war  auch 
die  Bildung  von  Kreisen  bei  den  Pimkten  nach  14  Tagen  auffallen- 
der, als  gleich  nach  der  Reaktion  und  deshalb  wurden  auch  bei  der 
Blaufärbung  manchmal  Gruppen  gefunden ,  manchmal  nicht.  Das 
Vorkommen  von  größeren  Gruppen  weist  auf  eine  größere  Ge- 
schwindigkeit im  Absetzen  und  einen  baldigen  Eintritt  der  voll- 
kommenen Ausscheidung  hin. 

Das  ursprünglich  gelblichweiße  Arachisöl  entfärbte  sich  in  beiden 


506  Schneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

Fällen  gänzlich.  Diese  Veränderung  ist  mit  einer  Veränderung  von 
ultramikroskopiseben  Erscheinungen  begleitet ,  welche  für  die  Blau- 
färbung charakteristisch  sind;  daraus  ist  zu  sehen,  daß  die  Blau- 
färbung durch  sehr  auffallende  ultramikroskopische  Merkmale  aus- 
gezeichnet ist  und  daß  eine  geringe,  ultramikroskopisch  schon  nach- 
weisbare Ausscheidung  der  blaufärbenden  Teilchen  mit  dem  freien 
Auge  noch  nicht  sichtbar  ist. 

Der  Goldschimmer  war  deutlich  bei  dem  Hanföle  W,  bei 
dem  japanischen  Holzöle  A,  bei  dem  Olivenöle  A,  bei  dem  Eapsöle 
A,  bei  dem  Rizinusöle  W  und  am  auffallendsten  bei  dem  Walrat- 
öle W.  Bei  allen  diesen  Ölen  wurde  eine  wenn  auch  schwache 
Blaufärbung  beobachtet,  am  deutlichsten  bei  dem  japanischen  Holz- 
öle ,  dann  in  Form  eines  Blaustiches  bei  dem  Olivenöle ,  in  Form 
einer  grauen  Farbe  bei  dem  Rizinusöle ,  als  ein  Umschlag  in  gelb- 
grün bei  dem  Rapsöle  und  als  eine  Verdunkelung  der  Farbe  bei 
dem  Hanf-  und  Walratöle.  Bei  dem  Olivenöle  und  dem  japanischen 
Holzöle  war  auch  eine  ziemlich  starke  Rotfärbung  zu  sehen.  Der 
Goldschimmer  wurde  begleitet  durch  eine  sowohl  beim  Betrachten 
mit  dem  freien  Auge  als  auch  im  Ultramikroskope  sichtbare  starke 
gelbe  Färbung  des  Kegels  und  durch  das  Auftreten  von  großen, 
deutlichen,  gelben,  mit  1  bis  3  schwachen,  gelben  Kreisen  umgebenen 
Punkten.  Beim  Drehen  des  Analysators  verlor  sich  die  gelbe  Farbe 
des  Kegels ;  die  genannten  hellen  Punkte  verschwanden  nicht  und 
veränderten  die  Farbe  entweder  gar  nicht  oder  nicht  auffallend. 
Von  diesen  Merkmalen  wurden  diejenigen ,  welche  die  Punkte ,  die 
Kreise ,  sowie  deren  Verhalten  beim  Drehen  des  Analysators  be- 
treffen, leicht  durch  solche  Erscheinungen  verdeckt,  welche  für  andere 
Reaktionsformen  charakteristisch  sind ,  u.  zw.  schon  bei  einem  sehr 
geringen  Grade  dieser  anderen  Formen.  Deshalb  veränderten  sich 
z.  B.  beim  Hanföle  die  Farben  beim  Drehen  des  Analysators,  und 
bei  dem  Rizinusöle,  wo  der  Goldschimmer  am  schwächsten  war,  war 
der  Befund  überhaupt  für  die  Blaufärbung  charakteristisch. 

Der  Umstand ,  daß  mit  dem  Goldschimmer  immer  eine  Blau- 
färbung, nie  aber  ein  blauschwarzer  Niederschlag  verbunden  war, 
läßt  sich  so  erklären,  daß  sich  die  blauen  Teilchen  mit  den  gold- 
schimmernden zusammen  absetzten  und  daß  in  dem  metallglänzen- 
den Wand-  und  Bodenbelage  der  blauschwarze  Niederschlag  ein- 
geschlossen war.  Es  ist  nicht  anzunehmen ,  daß  sich  die  blauen 
Teilchen  in  die  gelben  umwandelten,  weil  selbst  die  hellsten,  den 
Goldschimmer    bildenden     Punkte     nach    den    maximalen    J    und    <I> 


XXII, 4.         Öchneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  507 

nicht  gröber  zu    sein   scheinen  als    die  der  Blaiifärbung  entsprechen- 
den Punkte. 

Zu  den  angeführten  Resultaten  ist  zuzufügen ,  daß  es  vorläufig 
ohne  eine  Heizküvette  nicht  gut  möglich  war,  das  Verhalten  von 
Staub  und  anderen  Verunreinigungen  der  Öle  neben  den  Fettteilchen 
zu  verfolgen.  Als  dem  Staube  entsprechend  können  im  Olivenöle 
die  Punkte  angesehen  werden ,  welche  im  Analysator  die  rote  und 
die  grüne  P\irbe  vertauschten.  Es  war  ein  älteres  Muster,  in  wel- 
ches beim  oftmaligen  Öffnen  der  Flasche  der  Staub  gelangte ;  die 
anderen  Muster  waren  frisch.  Die  genannten  Punkte  zeigten  keinen 
Finfluß  auf  die  Reaktion  und  setzten  sich  wahrscheinlich  gleich  am 
Anfange  mit  dem  ersten  grob  ausgeschiedenen  Golde  zum  Boden. 
Beim  Olivenöle  verschwanden  die  mit  bis  6  Ringen  umgebenen 
Punkte  und  das  -Imax  sank  (bei  A  stieg  dasselbe,  weil  sich  Gruppen 
bildeten). 


Der  Einfluß  der  Umstände  auf  die  Reaktion  von  fetten  Ölen 

mit  Goldchlorid. 

Bei  den  im  vorhergehenden  beschriebenen  Versuchen  war  der 
große  Einfluß  des  Lösungsmittels  des  Goldchlorids  auf  den  Verlauf 
und  das  Resultat  der  Reaktion  deutlich.  Zur  Sicherstelhmg  der 
Einflüsse  anderer  Umstände  wurde  das  Olivenöl  gewählt,  und  zwar 
deshalb,  weil  bei  demselben  alle  drei  Formen  der  Reaktion,  d.  i.  die 
Rotfärbung,  die  Blaufärbung  und  der  Goldschimmer  zugleich  auf- 
treten. Die  ultramikroskopischen  Bilder  enthielten  nichts  Neues,  und 
die  am  Schlüsse  der  vorigen  Versuchsreihe  zusammengefaßten  Resul- 
tate gelten  auch  hier.  Interessant  war  jedoch  der  Zusammenhang 
zwischen  der  eingetretenen  Reaktionsform  und  den  Umständen,  unter 
welchen  die  Reaktion  ausgeführt  wurde,  das  ist :  der  Temperatur,  der 
Erhitzungsdauer,  der  Bewegung  und  der  Verdünnung  mit  Äther. 
Dagegen  ergaben  alle  Beobachtungen,  die  zu  dem  Zwecke  ausgeführt 
wurden ,  um  den  Einfluß  des  Lichtes  zu  ermitteln ,  bei  Gold  nur 
negative  Resultate  und  es  zeigte  sich,  daß  das  Licht  eine  Ölfärbung 
und  Reaktion  nicht  hervorrufen  kann. 

Zu  1  g  Olivenöl  wurde  zugesetzt:  1)  0"05  cm^  einer  alkoholi- 
schen Goldchloridlösung  (6  g  per  1)  und  es  wurde  eine  Stunde  ohne 
zu  schütteln  im  Wasserbade  so  erhitzt,  daß  das  Proberöhrchen  durch 
die  Stöße    des   siedenden  Wassers   nicht   erschüttert  wurde.     2)  Mit 


508  Schneider-Just:  ültramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

dem  gleichen  Zusätze  wurde  eine  Stunde  ebenfalls  im  Wasserbade 
erhitzt  und  das  Proberöhrchen  beständig  geschüttelt.  3)  u.  4)  Es 
wurden  die  beiden  beschriebenen  Versuche  mit  dem  wässerigen  Reagens 
Aviederholt.  5)  Es  wurde  nach  dem  Zusätze  von  O'Oö  cm^  der 
alkoholischen  Goldchloridlösung  und  1  cm^  Äther  eine  Stunde  im 
Wasserbade  auf  50 '^  C.  ohne  zu  schütteln  erwärmt.  Bei  den  letzten 
zwei  Versuchen  sollte  der  Äther  während  der  Zeit  bis  zu  seiner 
Verflüchtigung  in  den  Ölen  eine  Art  Umrührung  hervorrufen. 

Die  rote  Farbe  entwickelte  sich  am  meisten  bei  einem 
längeren  Erwärmen  mit  einer  alkoholischen  Goldchloridlösung,  und 
zwar  sowohl  beim  Umschütteln,  als  auch  ohne  dasselbe.  Geringer 
war  die  rote  Färbung  bei  dem  wässerigen  Reagens  und  am  ge- 
ringsten bei  den  nur  auf  50^  erwärmten  Ölen.  Diese  waren  direkt 
nach  den  Erwärmen  farblos  und  erst  nach  dem  Stehen  über  die 
Nacht  zeigte  sich  eine  blasse  Rosafärbung,  und  zwar  bei  dem  nicht- 
geschüttelten  Öle  eine  stärkere  als  bei  dem  geschüttelten.  Auch 
diese  Reihe  von  Versuchen  zeigte,  daß  die  rote  Färbung  mit  keinen 
mikroskopischen  oder  submikroskopischen  Teilchen  im  Zusammen- 
hange ist,  denn  alle  beobachteten  Punkte  konnten  entweder  durch 
die  zugleich  eintretende  Blaufärbung  oder  den  Goldschimmer  erklärt 
werden ,  und  besonders  hat  darauf  das  mit  der  alkoholischen  Gold- 
chloridlösung ohne  Umschütteln  erwärmte  Öl,  welches  sehr  wenig 
Punkte  überhaupt  (12  in  18  Quadraten)  und  keine  feinen  enthielt, 
hingewiesen. 

Die  blaue  Färbung  trat  besonders  bei  dem  mit  dem  wässe- 
rigen Reagens  geschüttelten  Öle  hervor,  weniger  bei  dem  mit  der  alko- 
holischen Lösung  geschüttelten,  noch  weniger  bei  dem  mit  Äther  ver- 
setzten und  geschüttelten.  Eine  viel  schwächere  Blaufärbung  fand 
man  bei  dem  mit  dem  wässerigen  Reagens  ohne  Schütteln  erwärmten, 
noch  schwächer  bei  dem  unter  Zusatz  von  Äther  ohne  Umschütteln 
erwärmten  und  die  schwächste  Blaufärbung  trat  bei  dem  mit  der 
alkoholischen  Goldchloridlösung  ohne  Schütteln  erwärmten  Öle  ein. 

Rücksichtlich  des  ultramikroskopischen  Befundes  ist  zu  bemerken, 
das  die  blaue  Farbe  mit  der  Zahl  der  Punkte  überhaupt ,  mit  der 
Zahl  der  mit  Kreisen  umgebenen  hellen  Punkte  und  der  Zahl  der 
Gruppen  zunahm.  Bei  dem  mit  dem  wässerigen  Reagens  geschüttel- 
ten Öle  Avurden  in  18  Quadraten  222  Punkte  gefunden,  davon 
110  stark  leuchtende  und  von  diesen  37  mit  Kreisen  umgebene; 
das  hier  sichergestellte  ^mnx  ^06  ist  die  kleinste  für  diesen  Wert 
bei  Olivenöl  gefundene  Zahl.     Das  am  schwächsten  blaugefärbte  mit 


XXII,  4.        Schneid  er- Just:  Ultraiuikroskopie  der  Oleosole.  509 

der  alkoholischen  Lösung  geschüttelte  Ol  zeigte  in  18  Quadraten  nur 
12  Punkte,  u.  zw.  durchgängig  helle,  davon  6  mit  Kreisen.  Das 
hier  gefundene  Jmax.  268  ist  die  für  diesen  AVert  bei  Olivenöl  ge- 
fundene höchste  Zahl.  Als  die  Öle  nach  der  zunehmenden  Blaufärbung 
zusammengestellt  wurden  und  die  Anzahl  der  Punkte  überhaupt,  die- 
jenige der  hellen  Punkte  und  die  der  kaum  sichtbaren,  mit  der 
Färbung  verglichen  wurde,  so  wurde  allerdings  gefimden,  daß  diese 
Zahlen  nicht  genau  mit  der  Blaufärbung  steigen ;  dies  läßt  sich  aber 
dadurch  erklären,  daß  unter  den  hellen  Punkten  auch  solche,  welche 
den  Goldschimmer  bilden,  gezählt  wurden  und  unter  den  feinen  auch 
solche,  welche  den  sich  ausscheidenden  Fettteilchen  gehören.  End- 
lich sei  bemerkt,  daß  neben  den  hellleuchtenden  Punkten  die  feinen 
in  der  Nähe  liegenden  wenig  leuchtenden  Punkte  dem  Auge  ent- 
gangen sind. 

Der  größte  Goldschimmer  kam  bei  denjenigen  Ölen  vor, 
welche  mit  der  wässerigen  Goldchloridlösung  ohne  Schütteln  er- 
wärmt wurden,  dann  bei  denjenigen,  welche  mit  derselben  Lösung 
geschüttelt  wurden.  Der  starke  Goldschimmer  wurde  von  einer  ent- 
sprechenden Undurchsichtigkeit  begleitet.  Ein  schwächerer  Schimmer 
kam  bei  den  nur  auf  50 "  erwärmten  (mit  Äther  verdünnten  Ölen) 
vor ;  hier  entstand  jedoch  mit  der  Zeit  am  Boden  ein  pulveriger 
goldgiänzeuder  Niederschlag.  Bei  den  mit  der  alkoholischen  Gold- 
chloridlösung erwärmten  Ölen  trat  weder  der  Goldschimmer  noch 
eine  Verminderung  der  Durchsichtigkeit  ein.  Aus  den  ultramikro- 
skopischen Befunden  ist  hier  hervorzuheben,  daß  in  Übereinstimmung 
mit  der  vorigen  Tersuchsreihe  die  am  meisten  goldschimmernden, 
das  sind  die  ohne  Schütteln  mit  der  wässerigen  Goldchloridlösung 
erwärmten  (He,  eine  große  Anzahl  hellleuchtender  Punkte  (bis  96  in 
18  Quadraten)  gezeigt  haben,  wcilche  im  Analysator  die  Farbe 
meistens  nur  wenig  veränderten  und  beim  Heben  des  Tubus  keine 
Piinge  bildeten ;  als  dann  nach  dem  Heben  um  20  ;«  die  genannten 
Punkte  nur  undeutlich  zu  sehen  waren,  traten  die  sich  um  die  roten 
und  orangegelben  Punkte  bildenden  und  auf  die  Blaufärbung  deuten- 
den Kreise  hervor,  und  beim  Drehen  des  Analysators  war  das 
Schwanken  der  Ringe  zwischen  der  roten  und  blaßgrünen  Farbe  viel 
besser  zu  sehen.  Es  war  auch  die  gelbe  Färbung  des  Kegels  durch 
die  goldschimmernden  Teilchen  und  das  Verdecken  der  roten  Farbe 
des  Kegels  durch  die  gelbe  sehr  schön  zu  sehen,  u.  zw.  sowohl  bei 
der  Betrachtung  mit  dem  freien  Auge  als  auch  im  Ultraniikroskope. 
Die    letzte  Erscheinung    zeigte    besonders    ein  Öl ,    bei    welchem    die 


510  Schnei<ler-.Iust:  Ultraraikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

Reaktion  vor  4  Monaten  MXisgeführt  wurde ;  der  Kegel  leuchtete  im 
Ultraniikroskope  mit  einem  schönen,  gelbgrünen  Lichte. 

Zu  der  eben  beschriebenen  Versuchsreihe  ist  noch  folgendes 
zuzufügen :  Der  Unterschied  zwischen  der  Färbung  nach  dem  Er- 
hitzen auf  50 '^  und  100^  und  das  Nichtfärben  bei  gewöhnlicher 
Temperatur  selbst  im  Lichte  zeigt,  dal.)  wir  ohne  eine  größere  Tem- 
peraturerh(>hung  keine  von  den  drei  Formen  der  Reaktion  im  höhe- 
ren Grade  erreichen  können.  Als  sehr  günstig  für  die  Reaktion 
zeigte  sich  das  Schütteln,  denn  selbst  beim  Erhitzen  mit  dem  wässe- 
rigen Reagens  trat  in  5  Minuten  eine  blauviolette  Färbung  ein  und 
schon  nach  einer  Viertelstunde  konnte  der  Anfang  des  Goldschimmers 
im  reflektierten  Lichte  konstatiert  werden,  wogegen  ohne  das  Schüt- 
teln selbst  nach  einer  Stunde  die  Farbe  nur  rosarot  war.  —  Der 
oben  erwähnte  Zusatz  von  Äther  sollte  beim  P^rwärmen  im  lauwarmen 
Wasser  am  Anfange  eine  Strömung  des  Öles  hervorrufen ,  welche 
die  Berührung  der  beiden  einwirkenden  Körper,  d.  i.  des  Öles  und 
des  Goldchlorids ,  unterstützen  sollte.  Daraus ,  daß  hier  die  Öle 
gleich  nach  der  Reaktion  noch  ungefärbt  waren,  geht  hervor,  daß 
hier  die  niedrige  Temperatur  entscheidend  war  und  daß  bei  der- 
selben weder  das  Schütteln  noch  die  genannte  Strömung  nichts 
nützte.  —  Sehr  vorteilhaft  ist  die  Verwendung  der  alkoholischen 
Goldchloridlösung.  Selbst  wenn  man  nicht  scliüttelt,  tritt  bald  eine 
deutliche  Färbung  ein,  woraus  man  ersieht,  daß  sich  das  Reagens 
mit  der  Mehrzahl  der  Öle  gut  mischt;  der  vollkommenen  Verteilung 
ist  zuzuschreiben ,  daß  bei  der  alkoholischen  Goldchloridlösung  die 
schönsten  roten  Farben  vorkamen,  dagegen  die  blaue  Farbe,  welche 
in  der  Fällung  von  mikroskopischen  und  submikroskopischen  Teil- 
chen ihren  Ursprung  hat,  nur  im  geringen  Maße  und  der  Gold- 
schimmer überhaupt  nicht  vorkam. 

Endlich  ist  zu  bemerken ,  daß  auch  die  Ölmenge  einen  großen 
Kintluß  auf  die  Reaktion  hatte.  Beim  Ausführen  der  Reaktion  im 
großen  gelang  es  nie,  unter  den  bei  1  g  ausprobierten  Bedingungen 
eine  Rotfärbung  zu  bekommen ,  es  trat  immer  eine  blaue  Trübung 
oder  ein  blauer  Niederschlag  oder  die  plötzliche  Ausscheidung  eines 
goldglänzenden  Belages  am   Boden  und   an  den   Wänden  ein. 


XXII,  4.         Schneider-Just:  Ultraniikroskoyie  der  Oleosole.  511 


Reaktionen  von  Fettölgemischen  mit  Goldchlorid. 

Weil  es  sich  bei  der  Ölanalyse  für  den  Handel  und  die  In- 
dustrie auch  um  die  Prüfung  von  Ölgemischen,  z.  B.  von  mit  fremden 
Ölen  verfälschten  Ölen,  handeln  wird,  so  war  es  notwendig,  wenigstens 
nur  teilweise  den  Einfluß  des  Mischens  auf  die  Reaktion  und  ihre 
drei  Hauptformen :  die  Rot-,  die  Blaufärbung  und  den  Goldschimmer, 
durchzuprüfen.  Es  wurden  deshalb  solche  Öle  ausgesucht,  bei  wel- 
chen die  Goldreaktion  charakteristisch  hervortritt  und  es  wurden  die 
(lemische  von  je  1  g  Öl  eine  Stunde  im  siedenden  Wasserbade  mit 
Ol  cm''  der  alkoholischen  Gohlchloridlösung  (6  g  per  1)  ohne  Schüt- 
teln  erwärmt. 

2  -j-  .5.  Das  Geraisch  des  Leinölfirnisses ,  der  sich  durch  eine  starke, 
dem  llubinglase  entsprechende  Rotfärbung  auszeichnete,  und  des  Mohn- 
öles, bei  dem  eine  besonders  starke  Blaufärbung  und  eine  schnelle 
Ausscheidung  des  blauschwarzen  Niederschlages  hervortrat,  gab  eine 
dunkelrubinrote  Färbung  und  nur  Spuren  eines  blauen  und  violetten  Nieder- 
schlages. 

2  +  14.  Das  Gemisch  des  Leinölfirnisses  mit  dem  Elain- Destillate, 
das  sich  allein  nur  sehr  schwach  grünlich  färbte,  gab  keine  rote  Färbuno^ 
mehr,  sondern  einen  reichHchen  blauen  Niederschlag. 

2  -\-  20.  Das  Gemisch  des  Leinölfirnisses  mit  dem  Paraffinöle,  bei  dem 
die  Reaktion  makroskopisch  überhaupt  nicht  sichtbar  war,  färbte  sich  dunkel- 
oran^'egelb,  trübte  sich,  und  schied  an  der  Wand  bei  der  Oberfläche  einen 
geringen  violetten  und  schwarzen  Niederschlag  aus. 

3  -j-  5.  Das  Gemisch  des  Hanföles,  welches  eine  Rotfärbung,  jedoch 
eine  blauere  als  das  Rubinglas  zeigte,  und  des  Mohnöles  gab  keine  Rot- 
färbung, sondern  eine  schnell  sich  setzende,  grünliche,  im  reflektierten 
Lichte  hellbraune  Färbung. 

3  +  10.  Das  Gemisch  des  Hanföles  mit  dem  Sesamöle,  welches  außer 
dem  blauen  Niederschlage  noch  eine  Blaufärbung  gab,  zeigte  nur  eine 
grüne  Färbung  durch  einen  sich  lan.2:sam  an  die  Wand  ausscheidenden 
Niederschla«;-. 

4 -p  7.  Das  Gemisch  des  Nußöles,  welches  sich  schwach  rosa  färbte 
und  lichtvioletten  Niederschlag  bildete,  mit  dem  OHvenöle,  welches  allein 
eine  rote  Färbung  und  einen  blauschwarzen  Niederschlag  gab,  zeigte  eine 
starke  rubinrote  Färbung  ohne  jeden  Niederschlag. 

4  -|-  8.  Das  Gemisch  des  Nußöles  mit  dem  Arachisöle ,  bei  welchem 
fast  gar  keine  Reaktion  eintrat,  gab  eine  stärkere  Rosafärbung  und  einen 
reichlicheren  dunkler  violetten  Niederschlag  als  das  Nußöl  allein. 

.^)  +  G.  Das  Gemisch  des  Mohnöles  mit  dem  japanischen  Holzöle,  bei 
welchem  ein  starker  Goldschimmer  und  Rosafärbung  eintraten,  gab  eine 
graue  Färbung  (wie  das  Rizinusfil  allein) ,  dann  Spuren  eines  schwarzen 
Niederschlages  und  einen  starken,  aber  dunklen  bronzeglänzenden  Schimmer. 


512  Schneider-. Tust:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII, -1. 

5  +  12.  Das  Gemisch  des  Mohnöles  mit  dem  Rizinusöle,  welches  sich 
durch  eine  graue  Färbung  auszeichnete,  gab  eine  blaugraue  Färbung  und 
an  der  Wand  einen  goldglänzenden,  im  durchgehenden  Lichte  roten  Belag. 

.')  J-  14.  Das  Gemisch  des  Mohnöles  mit  dem  Elain- Destillate  gab 
eine  rotbraune  Färbung  und  einen  geringen  schwarzen  Niederschlag.  Das 
Resultat  ist  deshalb  interessant,  weil  die  einzelnen  Öle  keine  Rotfärbung 
zeigten  ;  deshalb  ist  auch  der  ultramikroskopische  Befund  unten  beschrieben. 

5  +  20,  Das  Gemisch  des  Mohnöles  mit  dem  Paraffinöle  gab  an 
der  Wand  einen  geringen  goldglänzenden,  im  durchgehenden  Lichte 
blauen  Belag. 

7  +  18-  Das  Gemisch  des  Olivenöles  mit  dem  Walratöle,  welche 
beide  starke  Rotfärbungen  gaben  und  das  Olivenöl  außerdem  ein  sich  ab- 
setzendes Blau,  färbte  sich  rein  blau  und  enthielt  keinen  Niederschlag. 

10  +  12.  Das  Gemisch  des  Rizinusöles  mit  dem  Sesaraöle  gab  eine 
Graufärbung ,  in  welcher  schichtenweise  ein  .blauer  Niederschlag  zu  sehen 
war;  dieser  war  auch  am  Boden  abgesetzt  zu  sehen. 

12-1-14.  Das  Gemisch  des  Rizinusöles  mit  dem  Elain -Destillate 
gab  eine  Färbung,  die  der  Summe  der  Färbungen  bei  den  einzelnen  Ölen 
entspricht. 

12  -\-  20.  Beim  Erwärmen  des  Rizinusöles  mit  dem  Paraffinöle  und 
dem  Reagens  mischten  sich  die  Öle  nicht,  das  Paraffinöl  blieb  farblos,  das 
Rizinusöl  darunter  färbte  sich  bräunlichgelb. 

14  -\-  16.  Das  Gemisch  des  Lebertranes,  welcher  sich  allein  rot  färbte 
und  einen  rosagefärbten  Niederschlag  ausschied,  mit  dem  Elain -Destillate, 
gab  eine  rubinrote  Färbung,  wie  der  Lebertran  allein,  jedoch  ohne  jeden 
Niederschlag. 

16  -f-  20.  Das  Gemisch  des  Lebertranes  mit  dem  Paraffinöle  gab  nur 
eine  rosarote  Färbung  und  an  der  Wand  einen  geringen  blauen  Nieder- 
schlag. 

Diese  Resultate  zeigen,  daß  die  Reaktion  des  Gemisches 
nicht  der  8  u  ni  ni  e  der  R  e  a  Iv  t  i  o  n  e  n  mit  den  einzelne  n 
Ölen  gleich  ist,  außer  in  dem  Falle,  wo  das  eine  Ol  fast  keine 
Reaktion  gibt  und  die  P^igenschaften  des  anderen  wenig  verändert, 
wie  bei  12  -|-  14.  Gewöhnlich  verändert  sich  die  Fähigkeit,  das 
Gold  in  einer  bestimmten  Form  zu  fällen,  und  es  dann  in  Verteilung 
zu  erhalten,   selir  stark. 

Bei  dem  Mohn-  nnd  dem  Sesamöle  konnte  man  erwarten ,  daß 
dieselben  ein  Niedersclilagen  der  Färbungen  bei  den  anderen  Ölen 
liervorrufen  werden.  Dieser  Einfluß  kam  wirklich  bei  dem  Mohnöle 
vor,  und  zwar  stark,  wenn  dasselbe  mit  Hanföl,  und  schwach,  wenn 
es  mit  Rizinusöl  gemischt  war ;  bei  dem  Leinöltirnisse  und  dem  ja- 
panischen Holzöle  hat  sich  dieser  EinHuß  nicht  verwirklicht.  Bei 
dem  Sesamöle  ist  er  ebenso  wie  beim  Mohnöle  im  Hanf-  und  Rizinus- 
itle  eingetreten. 


XXII,  4.        Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  51;^ 

Beim  Elain  -  Destillate  war  mir  eine  Abschwäcbiing ,  nicht  aber 
eine  Verhinderung  oder  eine  Verstärkung  der  Reaktion  zu  erwarten. 
Bei  den  Mischungen  mit  dem  Lebertrane  und  dem  Rizinusöle  trat 
auch  wirklich  dieselbe  oder  eine  abgeschwächte  Färbung  ein ;  im 
Leinölfirnisse  verhinderte  dagegen  das  Elain-Destillat  die  Rotfärbung 
(es  entstand  nur  ein  schwarzer  Niederschlag)  und  beim  Mohnöle 
entstand  fast  gar  kein  blauschwarzer  Niederschlag,  dafür  aber  eine 
rotbraune  Färbung. 

Bei  dem  Paraffinöle  war  zu  erwarten ,  daß  dasselbe  die  Misch- 
barkeit der  anderen  Öle  mit  dem  alkoholischen  Reagens  vermindern 
und  deshalb  die  Reaktionen  stark  abschwächen  wird.  Diese  Er- 
wartung erfüllte  sich;  der  Leinölfirnis  wurde  nicht  rot,  das  Mohnöl 
gab  nur  einen  ganz  geringen  blauen,  im  reflektierten  Lichte  bronze- 
glänzenden Belag  an  der  Wand,  das  Rizinusöl  gab  nur  eine  schwache 
gelbe  Färbung,  welche  sich  nach  24  Stunden  deutlich  in  den  Gold- 
schimmer verwandelte,  der  Lebertran  gab  nur  eine  Rosafärbung  und 
einen  geringen  blauen  Niederschlag. 

Was  die  nach  der  Reaktion  sich  ausscheidenden  festen  Fett- 
körper betrifft,  so  ist  hervorzuheben,  daß  der  Lebertran  die  cha- 
rakteristische schwersehmelzende  Fettausscheidung  nach  dem  Ver- 
mischen mit  dem  Elain -Destillate  oder  dem  Paraffinöle  nicht  gab, 
und    ebenso    das  Nußöl    hei    Gegenwart    von    Olivenöl    den    violetten 

t 

Niederschlag  nicht  bildete,  wohl  aber,  und  zwar  im  erhöhten  Maße, 
in  der  Mischung  mit  dem  Arachisöle. 

Von  allen  bei  den  Mischungen  ausgeführten  Reaktionen  war 
besonders  diejenige  interessant ,  wo  eine  neue,  b  i  s  d  a  h  i  n 
nicht  beobachtete  Färbung  eintrat,  nämlich  die  Gelb- 
färbung des  Rizinusöles,  welches  mit  dem  Paraf  f  inöl  e 
und  der  alkoholischen  G  0 1  d  c  h  1 0  r  i  d  1  ö  s  u  n  g  erwärmt 
wurde.  Der  ultramikroskopische  Befund,  der  sich  bei  dem  mit 
einer  Pipette  von  dem  Paraffinöle  getrennten  Rizinusöle  ergab ,  ist 
deshalb  hier  ausführlich  wiedergegeben : 

Das  freie  Auge  sah  einen  goldgelben  Kegel ;  in  das  Glas  ver- 
breitete sich  hinter  dem  Kegel  ein  weißes  Licht.  Im  Ultramikroskope 
ist  der  Kegel  schwarz.  In  18  Quadraten  wurden  278  Punkte  ge- 
funden, davon  1.5  besonders  helle,  gelbe,  etwas  mehr  rote,  noch 
mehr  lichtgrüne ,  am  zahlreichsten  waren  blasse ,  blaugrünlichgraue 
Punkte.  Gruppen  kamen  nicht  vor.  Die  Punkte  sind  fast  durch- 
gängig frei  von  Kreisen.  Im  mittleren  Teile  des  Kegels  wurde  aus- 
nahmsweise   ein  Punkt    mit    einem  undeutlichen  Kreise  gesehen ,  am 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  4.  b'o 


514  Schneider-Just:  Ultraraikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

Rande  sind  die  Kreise  weniger  selten.  /J„(„.r:  180.  Nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  [x  sind  alle  dann  sichtbaren  Punkte  mit  1  bis  3 
blassen  verschwommenen  Kreisen  umgeben ,  die  meisten  Kreise  sind 
grünlichgelb,  seltener  sind  orangegelbe,  sehr  selten  rote  Kreise.  Im 
Analysator  waren  die  P'arben  dieser  Kreise  bunter  und  beim  Drehen 
desselben  verdunkelten  sich  oder  verschwanden  die  Kreise,  nur  6  hellste 
Punkte  zeigten  die  Kreise  in  unveränderter  Helligkeit.  Bei  der 
scharfen  Einstellung  blieb  der  Kegel  beim  Drehen  des  Analysators 
beständig  schwarz,  der  gelbe  Schein  bei  den  hellsten  Punkten  verlor 
sich,  die  Farbe  derselben  bewegte  sich  zwischen  einer  rötlichen  und 
<?iner  grünlichen,  bei  den  anders  gefärbten  Punkten  war  die  Farben- 
veränderung weniger  auffallend,  die  blassen  Punkte  verschwanden 
gänzlich. 

Bei  einer  Rizinusölprobe ,  in  welcher  dieselbe  Reaktion  unter 
denselben  Verhältnissen  schon  vor  4  Tagen  ausgeführt  wurde  und 
bei  welcher  sich  die  gelbe  Färbung  schon  in  einen  Goldschimmer 
und  zum  großen  Teile  in  einen  goldglänzenden  Belag  an  der  Wand 
umgewandelt  hatte,  ergab  sich  folgender  ultramikroskopischer  Befund : 

Das  freie  Auge  sah  einen  goldglänzenden  Kegel ;  hinter  dem- 
selben verbreitete  sich  in  das  Glas  ein  weißes  Licht.  Im  ültra- 
mikroskope  war  der  Kegel  nur  ganz  schwach  grünlichgrau  beleuchtet. 
In  18  Quadraten  sah  man  nur  noch  110  Punkte,  davon  waren  nur 
10  hellleuchtend  und  gelb,  die  andern  waren  meistens  rot  oder 
orangegelb ,  seltener  waren  grünlichgraue  Punkte.  Bei  keiner  Ein- 
stellung Avaren  die  Punkte  so  frei  von  Kreisen  wie  gleich  nach  der 
Reaktion.  In  18  Quadraten  wurden  20  Punkte  mit  einem  Kreise  ge- 
funden. Am  Tnifange  des  Sehfeldes  hatten  die  Punkte  bis  3  Kreise, 
diese  waren  jedoch  nie  so  deutlich  abgegrenzt,  wie  bei  den  blau- 
gefärbten Ölen.  A„Mx  460.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  a 
wurden  in  18  Quadraten  22  Punkte  mit  bis  4,  zum  Teil  rot-,  zum 
'J\'il  grünstichig  gelben  Kreisen  gefunden.  Beim  Drehen  des  Analy- 
sators verdunkelte  sich  der  Kegel  vollkommen ,  die  blassen  Punkte 
und  Kreise  verschwanden ,  bei  den  hellen  trat  in  einer  Lage  die 
rotgelbe,  in  einer  darauf  senkrechten  Lage  die  grüngelbe  Farbe  auf, 
die  Farbe  wechselte  aber  nicht  zwischen    der  roten    und  grünen  ab. 

in  diesem  Falle  wurde  also  eine  Methode  gefunden,  wie  man 
den  in  den  früheren  Versuchen  schon  beobachteten  Goldschimmer 
selbständig  hervorrufen  kann  und  wie  man  sogar  dessen  Anfang, 
d.i.  eine  gelbe,  jedes  jMetallglanzes  freie  Färbung  erhalten  kann, 
und  es  wurde  gefunden,   daß   auch   feine  bunte  Punkte  dieser  gelben 


I 


XXn,  4.        Schneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  515 

Färbung  zugeliören ,  was  aus  den  Reaktionen ,  welche  in  zwei  oder 
drei  Formen  auftraten,  nicht  entnommen  werden  konnte. 

Es  sei  noch  der  Befund  beschrieben,  den  das  Gemisch  von 
Mohnöl  und  Elain-Destillat  ergeben  hat: 

Das  freie  Auge  sah  einen  bläulichen ,  rückwärts  gelbweißen 
Kegel.  Im  Ultramikroskope  war  derselbe  milchweiß.  In  18  Qua- 
draten wurden  6  Punkte  gefunden,  davon  ein  auffallend  heller  und 
gelber,  2  weniger  helle  und  3  kaum  sichtbare  blaßgrüne.  zJ„,rta;  340. 
Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  /t  umgaben  sich  die  ersten 
3  Punkte  mit  bis  4  Kreisen,  welche  beim  Drehen  des  Analysators 
ihre  Farbe  zwischen  rötlichgelb  und  grünlichgelb  veränderten ;  der 
Kegel  verdunkelte  sich  ein  wenig.  Dieser  Befund  entspricht  einer 
schwachen  gelben  Färbung ;  die  Zeichen  einer  roten  Färbung  wurden 
nicht  gefunden;  vielleicht  waren  dieselben  sehr  schwach  und  durch 
die  auffallende  blaue  Farbe  des  Kegels  verdeckt. 


Versuche  zur  Sicherstellung  des  Einflusses  von  Verbindungen 
der  andern  edlen  Metalle  auf  verschiedene  Öle. 

Um  zu  sehen,  wie  weit  auch  die  Ölreaktionen  mit  den  Ver- 
bindungen anderer  edlen  Metalle  ultraraikroskopisch  verfolgt  werden 
ki»nnen ,  wurden  zuerst  bei  ausgewählten  Ölen  parallele  Reak- 
tionen mit  wässerigen  Lösungen  von  Platinchlorid,  Silber- 
nitrat, Osmiumsäure  und  Rutheniumchlorid  ausgeführt.  Es  wurde 
dazu  das  Olivenöl  gewählt,  weil  es  alle  drei  Formen  der  Goldreak- 
tion gab,  dann  das  Leinöl,  weil  es  die  höchste  Jodzahl  aufweist, 
das  Mohnöl,  weil  es  sich  am  stärksten  blau  färbte  und  die  Farbe 
am  schnellsten  ausschied,  das  Hanföl,  weil  es  sich  nur  wenig  orange- 
gelb färbte  und  schon  vor  der  Reaktion  durch  eine  große  Anzahl 
von  feinen  Punkten  ausgezeichnet  war  und  endlich  das  Paraffinöl, 
auf  welches  die  Goldchloridlösung  keinen  Einfluß  ausübte.  Es  wurden 
wässerige  Lösungen  der  Metallverbindungeu  benutzt,  um  einem  even- 
tuellen Einfluß  von  Alkohol  vorzubeugen  •,  dafür  wurde  die  Berührung 
des  Öles  mit  dem  Reagens  durch  Schütteln  unterstützt.  Es  wurden 
so  wie  bei  Goldchlorid  0'6prozentige  Lösungen  dargestellt,  und  eben- 
falls 1  g  Öl  mit  0*0.5  cm"^  der  Lösungen  im  Wasserbade  erhitzt. 
Da  nach  einer  halben  Stunde  die  Reaktion  nur  beim  Leinöle  als 
eine  Dunkelfärbung    mit    Silbernitrat    und    eine  Weißfärbuug  mit  Os- 

•  33* 


516  Schneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

miumsäure  eintrat,  so  wurde  die  Menge  des  Reagens  auf  1  cm"^ 
ergänzt  und  weitere  2  Stunden  erhitzt. 

Reaktionen     mit     Osmium  säure.  Makr  oskopiscli 

wurden  dreierlei  Veränderungen  beobachtet:  1)  eine  schwache  Braun- 
färbung; dieselbe  trat  am  stärksten  beim  Olivenöle  hervor,  dann 
beim  Mohnöle,  am  schwächsten,  grünlichbrauu  färbte  sich  das  Leinöl; 
2)  eine  schwache  Graufärbung  und  die  Ausscheidung  eines  schwarzen 
Niederschlages  an  der  Berührungsstelle  des  Öles  mit  der  Lösung ; 
dieselbe  trat  ein  beim  Paraftinöle ;  3)  die  Ausscheidung  eines  weißen 
Fettniederschlages ;  diese  Reaktionsform  trat  beim  Leinöle  (ein  grün- 
lichweißer Satz)  und  beim  Hanföle  (ein  gelbweißer  Satz)  ein. 

Der  ultramikroskopische  Befund  war  infolge  der  Fett- 
niederschläge beim  Lein-  und  Hanföle  und  der  Trübungen  durch 
Fett  beim  Oliven-  und  Mohnöle  nur  beim  Paraffinöle  belehrend.  Der 
Kegel  enthielt  33  Aveiße,  mit  bis  3  Kreisen  umgebene  Punkte  von 
A„,a.v  200 ;  ausnahmsweise  wurden  auch  Gruppen  von  Punkten  be- 
obachtet. Im  Analysator  trat  trotz  des  großen  _/  keine  Färbung 
bei  den  Punkten  und  Kreisen  ein,  beim  Drehen  desselben  verschwand 
alles,  bis  auf  die  hellsten  Punkte ;  der  Kegel  verdunkelte  sich,  blieb 
jedoch  blau.  Dieser  Befund  bei  den  Punkten  kann  dem  gefällten 
Osmium  zugeschrieben  werden,  weil  das  Öl  nach  der  Reaktion  klar 
blieb  und  weil  Fettteilchen  eher  auffallende  Gruppen  und  bunte,  im 
Analysator  zwischen  blauviolett  imd  gelb  die  Farbe  verändernde 
Kreise  gebildet  hätten.  Das  Hanföl  konnte  infolge  der  großen 
Emulsion  mit  der  wässerigen  Lösung  gar  nicht  untersucht  werden. 
Beim  Lein-,  Mohn-  und  Olivenöle  wurden  in  sehr  großer  Zahl  so 
feine  Punkte  gefunden,  daß  sie  gar  nicht  gezählt  werden  konnten. 
Außerdem  kamen  auch  Punkte  mit  Kreisen  vor,  die  sich  ebenso 
verhielten,  wie  die  beim  Paraffinöle  beschriebenen  Kreise  und  des- 
halb auf  die  hellbraune  Färbung  mit  Osmiumsäure  zurückgeführt 
werden  können.  Mit  Rücksicht  darauf,  daß  die  Osmiumsäure  be- 
sonders in  dem  Hanf-  und  Leinöle  Fettkörper  bildete,  welche  selbst 
bei  100^  nicht  schmolzen  und  welche  dem  Ole  eine  außerordentliche 
Emulsionsfähigkeit  erteilten,  ist  es  hier  nicht  zu  hoifen,  daß  die 
Frage ,  welche  von  den  Punkten  dem  gefällten  Osmium  und  welche 
dem  ausgeschiedenen  Fette  angehören ,  selbst  mit  einem  auf  Er- 
wärmung eingerichteten  Ultramikroskope  gelöst  werden  könnte. 

Reaktionen  mit  Platinchlorid.  Makroskopisch  wurde 
außer  der  Entfärbung  von  Leinöl  keine  Veränderung  in  der  Farbe 
beobachtet.     Es  traten   aber  Fettausscheidungen  ein ;    beim  Paraffin- 


XXII,  4.        Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  517 

öle  setzte  sich  die  Trübung  in  Form  eines  Häiitchens  an  der  Be- 
rührungsstelle des  Öles  und  der  Lösung  ab.  Das  Mohnöl  blieb 
deutlich  getrübt ,  ohne  einen  Niederschlag  zu  bilden.  Das  Olivenöl 
trübte  sich  bis  zur  Undurchsichtigkeit,  und  -zwar  nicht  nur  infolge 
der  Fettausscheidung,  sondern  auch  infolge  der  Emulsion.  Das  Leinöl 
trübte  sich  und  schied  einen  Niederschlag  an  der  Wand  aus.  Beim 
Hanföle  sammelte  sich  auch  das  ausgeschiedene  Fett,  es  konnte  sich 
jedoch  infolge  der  zu  großen  Dickflüssigkeit  nicht  absetzen  und  bil- 
dete nur  Streifen  und  Häutchen,  die  im  Öle  schwammen.  Bei  diesem 
letzten  Öle  war  allein  eine  Reduktion  von  Platin  sichtbar,  und  zwar 
setzte  sich  aus  der  wässerigen  Lösung  ein  schwarzer  Niederschlag 
am  Boden  und  an  der  Wand  ab. 

Der  ultramikroskopische  Befund  entspricht  nur  Fettaus- 
scheidungen. Am  kompliziertesten  war  derselbe  beim  Hanföle ,  wo 
wir  viererlei  Erscheinungen  sahen :  1)  feine  weiße  Punkte,  die  sowohl 
beim  Drehen  der  feinen  Einstellung  als  auch  beim  Drehen  des 
Analysators  sofort  verschwinden ;  2)  größere  weiße  mit  bis 
4  Kreisen  umgebene  Punkte  von  Amax  106,  welche  sich  beim  Drehen 
des  Analysators  nicht  färben,  sondern  nur  verblassen;  .3)  Gruppen 
von  6  bis  18  weißen  Punkten ,  welche  beim  Drehen  der  feinen 
Einstellungsvorrichtung  ohne  Kreisbildung  verschwinden  und  deren 
Farbe  sich  beim  Drehen  des  Analysators  zwischen  einer  orangegelb- 
stichigen und  einer  rotstichigen  bewegt;  4)  breite  Ströme  heller 
orangegelber  Punkte,  von  welchen  auf  ein  Quadrat  etwa  20  kommen 
und  welche  sich  wie  die  Punkte  der  Gruppen  verhalten.  Der  Kegel 
ist  im  Ultramikroskope  milchweiß  und  seine  Farbe  schwankt  beim 
Drehen  des  Analysators  zwischen  einer  helleren  gelblichen  und  einer 
dunkleren  bläulichen. 

Beim  Oliven-,  Lein-  und  Mohnöle  sehen  wir  auch  große  und 
kleine  Punkte  und  Gruppen,  jedoch  keine  Ströme  von  Punkten.  Das 
Paraffinöl  zeigte  im  ganzen  Kegel  39  Punkte,  einige  davon  mit  bis 
3  Kreisen  und  seltene  Gruppen  zu  etwa  7  Punkten.  Als  sehr  wich- 
tig muß  hier  hervorgehoben  werden,  daß  die  Kreise  trotz  eines 
kleineren  Jmnx  (HO)  gefärbt  waren,  und  zwar  meistens  violett  und 
gelb,  seltener  rot  und  grün. 

Beim  Olivenöle  und  dem  Paraffinöle  scheint  es,  daß  sich  die 
ursprünglichen,  große  Kreise  bildenden  und  wahrscheinlich  den  Staub- 
teilchen zugehörigen  Punkte  mit  Kreisen  trotz  der  Fettausscheidung  er- 
halten haben.  Das  Olivenöl  zählte  ursprünglich  im  ganzen  Kegel  85  helle 
gelbe  bis  rote  Punkte  mit  bis  4  Kreisen,  welche  im  Analysator  sehr  bunt 


518  Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.         XXII,  4. 

waren  und  beim  Drehen  desselben  die  Farbe  veränderten.  Nach 
der  Reaktion  fand  man  noch  14  solche  Punkte.  Das  Paraffinöl 
zeigte  derartige  Punkte  vor  der  Reaktion  nur  stellenweise ;  nach  der 
Reaktion  wurden  dieselben  zwischen  den  Punkten  mit  violetten  und 
gelben  Kreisen  wiedergefunden.  Beim  Lein-,  Hanf-  imd  Mohnöle 
verschwanden  solche  Punkte  nach  der  Reaktion.  Daß  sich  die  be- 
treifenden Punkte  in  den  zwei  Fällen  erhalten  haben,  würde  auch 
beweisen,  daß  hier  eine  Reduktion  des  Metalles  im  Öle  und  eine 
Ausscheidung  desselben  nicht  eintrat. 

Reaktionen  mit  Silbe rnitrat.  Makroskopisch  wurde 
eine  Farbenveränderung  nur  beim  Leinöle  konstatiert,  welches  sich 
bräunte  und  an  der  Wand,  sowie  an  der  Berührungsstelle  mit  der 
wässerigen  Lösung  einen  schwarzen  Niederschlag  absetzte.  Das 
Hanföl  trübte  sich;  am  Boden,  unter  der  wässerigen  Lösung  schied 
sich  ein  kleiner  schwarzer  Niederschlag  aus.  Das  Mohnöl  trübte 
sich  weiß ;  an  der  Berührungsstelle  mit  der  wässerigen  Lösung 
bildete  sich  ein  weißes  Häutchen.  Das  Olivenöl  trübte  sich  stark 
weiß  und  an  der  Berührungsstelle  mit  der  wässerigen  Lösung  bildete 
sich  ein  schwarzes  Häutchen.  Das  Paraffinöl  blieb  klar,  aber  an 
der  Wand  und  an  der  Berührungsstelle  mit  der  wässerigen  Lösung 
bildete  sich  ein  schwarzes  Häutchen. 

Bei  der  Beurteilung  der  Fettniederschläge  ist  nicht  zu  vergessen, 
daß  alle  Öle,  am  meisten  jedoch  das  Lein-  und  Hanföl,  schon  beim 
Erhitzen  im  Wasserbäde  mit  bloßem  Wasser  weiße  Fettniederschläge 
oder  Häutchen  bilden,  und  daß  diese  Ausscheidungen  ein  Fällen  von 
Silber  mit  dem  Fette  und  eine  Verhinderung  der  Gruppierung  des 
Silbers  zur  Folge  haben  können. 

Der  ultramikroskopische  Befund  unterscheidet  sich  in 
einigen  Fällen  von  dem  Bilde,  welches  das  durch  Formaldehyd 
aus  dem  Silbernitrat  ausgeschiedene  Silber  darbietet.  In  diesem 
Falle  sieht  das  freie  Auge  einen  auffallenden  blauen  Kegel.  Im 
Ultramikroskope  ist  derselbe  milchweiß  und  wird  beim  Drehen  des 
Analysators  dunkler.  Er  enthält  feine  weiße  Punkte ;  bei  einer 
heftigen  Reaktion  sind  dieselben  grünlichweiß,  zum  Teil  auch  orange- 
gelb und  selten  rot.  Fast  alle  Punkte  umgeben  sich  beim  Heben 
des  Tubus  mit  Kreisen.  zJ„,«:r  70.  Beim  Drehen  des  Analysators 
veränderte  sich  die  Farbe  nicht. 

Bei  manchen  Ölen  sahen  wir  keine  bläulichweißen  Kegel  und 
es  kommen  auch  Punkte  mit  mehr  und  größeren,  bunter  gefärbten 
Kreisen  vor,  was  darauf  hindeutet,    daß  das  Gruppieren  von  Silber- 


I 


XXII,  4.        Schneider-.)  ust :  Ultrauiikruskupie  der  Oleosole.  519 

teilchen  vorgeschritten  ist.  Deutlich  sieht  man  dieses  in  den  folgen- 
den Befunden ,  in  welchen  natürlich  das  abzusondern  ist ,  was  Fett- 
teilchen entspricht  und  was  sich  schon  nach  dem  Erwärmen  mit 
bloßem  Wasser  zeigen  könnte. 

1.  Leinöl.  Der  Kegel  war  nur  schwach  beleuchtet  und  enthielt  iiu 
ganzen  173  Punkte;  die  Mehrzahl  davon  hatte  bis  5  Kreise.  Jmax  1^0.  Die 
Färbung  der  Punkte  und  Kreise  war  auffallend  bunt.  Im  Analysator  wurde 
sie  nicht  bunter;  beim  Drehen  desselben  veränderte  sich  die  Farbe  von 
Rosa  in  Blaßgrün,  die  feinen  Punkte  verschwanden  dabei  und  der  Kegel 
verdunkelte  sich  vollkommen.  Im  ganzen  Kegel  wurden  auch  7  Gruppen 
zu  8  bis  12  Punkten  gefunden. 

0.  Hanföl.  Der  Kegel  war  milchweiß,  beim  Drehen  des  Analysators 
wurde  er  blasser.  Man  sah  drei  Arten  von  Punkten.  Die  ersten  waren 
mäßig  licht,  blaßblaugrün  oder  rot.  Im  ganzen  Kegel  fand  man  von  den- 
selben 13G;  beim  Heben  des  Tubus  bildeten  sie  durchwegs  Kreise,  jedoch 
schwache,  verschwommene,  welche  sich  bald  verloren  und  beim  Drehen  des 
Analysators  die  Farbe  wenig  veränderten,  ^max  76.  <Pmax  2^jo.  Die  zweite 
Art  waren  einzelne  auffallende  Punkte,  mit  0max  6.  Zwischen  beiden  diesen 
Arten  von  Punkten  waren  lichtere  Stellen  zu  sehen,  welche  den  ganz  feinen 
Punkten  vor  der  Reaktion  entsprechen  würden. 

5.  Mohnöl.  Der  Kegel  war  nur  durch  einen  ganz  schwachen  bläu- 
lichen Schein  beleuchtet,  der  beim  Drehen  des  Analj'^ators  noch  abnahm. 
Im  ganzen  Kegel  waren  270  Punkte  zu  sehen,  zum  Teil  weiße,  zum  Teil 
gefärbte ,  und  zwar  kamen  alle  Regenbogenfarben  vor.  Fast  durchwegs 
waren  bei  den  Punkten  1  bis  4  Kreise  zu  sehen.  Beim  Drehen  des  Analy- 
sators zeigte  sich  bei  den  Punkten  und  Kreisen  auffallend  häufig  die 
violette  und  grünliche  Farbe.  Punktegruppen  kamen  unregelmäßig  vor, 
dieselben  waren  groß  und  entsprachen  der  Fettausscheidung. 

7.  Olivenöl.  Der  Kegel  war  im  Ultramikroskope  milchweiß  und 
bestand  aus  lauter  feinen  unzählbaren  Punkten.  Unter  denselben  waren 
nur  etwa  29  Punkte  in  18  Quadraten  etwas  deutlicher,  sie  bildeten  aber 
keine  Kreise.  Im  ganzen  Kegel  kamen  noch  28  helle  Punkte  mit  Kreisen 
vor.  Im  Analysator  wurden  die  hellen  Punkte  rot  oder  grün;  beim  Drehen 
des  Analysators  vertauschten  sich  diese  Farben,  die  feineren  Punkte  ver- 
änderten die  Farbe  zwischen  silberweiß  und  rosa,  die  feinsten  verschwanden 
gänzlich,  der  Kegel  verblaßte. 

20.  Paraffinöl.  Der  Kegel  war  undeutlich  weiß  mit  einem  Stiche 
in  blauviolett  und  enthielt  160  deuthche  Punkte,  fast  durchwegs  mit 
Kreisen,  und  zwar  mit  bis  7  Kreisen.  Die  Farben  waren  ziemlich  bunt 
und  auffallend  war  die  Menge  der  violetten  Punkte  und  Kreise.  Gruppen 
kamen  nicht  vor.  Beim  Drehen  des  Analysators  nahm  die  Helligkeit  der 
Punkte  und  Gruppen  stark  ab. 

Diese  Befunde  unterscheiden  sich  sowohl  von  denjenigen  bei 
dem  ursprünglichen  Öle,  als  auch  von  den  Befunden  bei  Goldchlorid. 
Da  sich  das  Silber  mit  Metallgiauz  oder  als  schwarzer  Niederschlag 


~)20  Schneider-Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

aus  den  Ölen  und  nicht  aus  der  darunter  liegenden  wässerigen  Lösung 
4iusscliied ,  so  muß  man  daraus  schließen ,  daß  die  oben  erwähnten 
Punkte  Avenigstens  zum  Teil  zu  dem  Silber  gehören. 

Aus  den  beschriebenen  Befunden  geht  hervor,  daß  alle  ,')  unter- 
suchten Öle  Abweichungen  von  den  Befunden  vor  der  Reaktion 
aufweisen ,  und  daß  sich  diese  Abweichungen  von  denjenigen  Er- 
scheinungen unterscheiden ,  welche  Fettausscheidungen  begleiten ;  es 
sprechen  deshalb  die  angeführten  Befunde  für  eine  Reduktion  von 
Silber.  Beim  Olivenöle  könnten  die  submikroskopischen,  noch  keine 
Kreise  beim  Heben  des  Tubus  bildenden  und  zwischen  den  Quadraten 
des  Zählapparates  imdeutlichen  Punkte  für  Silberteilchen  gehalten 
werden ,  die  einen  Übergang  zwischen  den  beiden  Formen ,  unter 
Avelchen  das  Silber  bei  der  Reaktion  des  Silbernitrates  mit  Formal- 
dehyd auftritt,  bilden,  nämlich  zwischen  den  amikroskopischen  Teil- 
chen, welche  die  Blaufärbung  des  Kegels  verursachen  und  zwischen 
den  submikroskopischen  Teilchen,  welchen  bunte  beim  Heben  des 
Tubus  Kreise  bildende  Punkte  entsprechen.  Wie  weit  alle  an- 
geführten Befunde  dem  Silber  und  wie  weit  dieselben  dem  Fett- 
niederschlage zuzurechnen  wären,  könnte  jedenfalls  nur  mit  Hilfe  des 
Ultramikroskopes  mit  Heizvorrichtung  genau  entscliieden  werden. 

Reaktionen  mit  R  u  t  h  e  n  i  u  m  c  h  1  o  r  i  d.  Ob  zwar  die  charak- 
teristischen Reaktionen  bei  Schleimen  mit  einer  ammoniakalischen 
Lösung  ausgeführt  werden,  wurde  doch  der  Einfluß  der  nicht  am- 
moniakalischen geprüft,  um  das  Reaktionsergebnis  durch  die  Bildung 
von  Ammoniakseifen  und  die  dadurch  erhöhte  Emulsionsfähigkeit 
nicht  zu  ändern.  Daß  bei  einem  Reagens ,  welches  so  außerordent- 
lich die  Verteilung  und  Vermischung  der  wirkenden  Körper  erhöht, 
wie  die  ammoniakalische  Lösung,  eine  Reaktion  eintreten  muß,  Avar 
schon  im  voraus  sicher.  Bei  der  Prüfung  mit  der  nichtammoniaka- 
lischen  Lösung  mußte  die  Reaktion  zwar  schwächer  ausfallen,  sie 
Avar  aber  dann  charakteristisch  nur  für  das  Ol  und  wurde  nicht 
durch  Nebenumstände,  z.  B.  durch  die  Menge  der  beim  Ranzigwerden 
freigewordenen  Fettsäuren  beeinflußt. 

Um  den  Charakter  der  Rutheniumteilchen  im  Ultramikroskope 
sicherzustellen,  wurde  zuerst  eine,  durch  Kochen  mit  Formal- 
dehyd reduzierte  Rutheniumchloridlösung  untersucht  und  dabei 
folgendes  beobachtet : 

Das  freie  Auge  sah  keinen  Kegel  und  auch  im  Ultramikroskope 
war  derselbe  nicht  sichtbar.  An  seiner  Stelle  schwammen  weiße, 
gelbliche,    grünliche    und  orangegelbliche  Punkte,    welche    sich  beim 


XXII,  4.        Sclineider- J  ust :  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  521 

Heben  des  Tubus  mit  Kreisen  umgaben.  Es  Avaren  auch  Gruppen 
von  '}  bis  4  Punkten  siclitbar.  Die  Kreise  waren  bei  den  Punkten 
weiß ,  bei  den  Gruppen  ein  wenig  gefärbt,  ^max  4.  Beim  Drehen 
des  Analysators  verschwanden  die  blassen  Kreise,  die  hellen  wurden 
abgescliwächt.  Farbenveränderungen  sind  höchstens  bei  den,  den 
größeren  Gruppen    zugehörenden  Kreisen    deutlich ,    und   nur  gering. 

Makroskopisch  war  nur  eine  Färbung  bei  dem  Mohnöle  zu 
sehen,  und  zwar  eine  Brannfärbung.  Die  anderen  Ole  blieben  un- 
verändert. Die  ultramikroskopische  Untersuchung  zeigte,  so- 
weit man  dieselbe  vornehmen  konnte,  nur  Veränderungen,  welche 
Fettkörpern  entsprechen,  die  sich  auch  durch  zweistündiges  Erhitzen 
mit  bloßem  Wasser  und  Auskühlen  ausscheiden.  Das  Hanföl  war 
so  trüb  und  dick ,  daß  es  gar  nicht  untersucht  werden  konnte ;  erst 
nach  vielen  Tagen  konnte  eine  Scheidung  in  eine  braune  ölige,  in 
eine  lichtbraune  feste  und  in  eine  wässerige  Schicht  beobachtet 
werden. 

Reaktionen  mit  a  m  m  o  n  i  a  k  a  1  i  s  c  h  e  n  Lösungen, 
a.  mit  a  mm  oniakali  scher  Silb  ernitratlösung.  Da  sich 
bei  der  Reaktion  mit  der  wässerigen  Silbernitratlösung  außer  beim 
Leinöle  trotz  des  Schütteins  und  der  langen  Erhitzung  keine  makro- 
skopischen Veränderungen  zeigten,  wurde  der  Versuch  bei  allen 
anfangs  genannten  20  Ölen  mit  0'05  cm^  einer  ammoniakalischen 
Lösung  wiederholt.  Bei  der  Darstellung  der  letzteren  wurden  6  g 
^Nitrat  per  1  verwendet  und  nur  soviel  Ammoniak  zugesetzt ,  als 
davon  zum  Fällen  des  Nitrates  und  zum  Wiederlösen  des  Nieder- 
schlages nötig  war.  Dieses  geschah,  um  nicht  durch  einen  größeren 
Ammoniakzusatz  eine  Verseifung  von  größeren  Mengen  freier  Fett- 
säuren hervorzurufen,  da  dann  das  Ergebnis  mehr  die  Folge  der 
Verseifung  als  die  der  charakteristischen  Öleigenschaften  hätte  sein 
müssen. 

Makroskopischer  Befund.  Bei  den  Elainen  und  dem 
Nußöle  konnten  keine  Veränderungen  beobachtet  werden.  Der  Drei- 
kronentran trübte  sich  schwach.  Das  Paraffinöl  setzte  schwarze 
Silberhäutchen  ab.  Das  Mineralöl  war  gleich  nach  der  Reaktion 
klar ,  trübte  sich  aber  mit  der  Zeit ;  die  Silberlösung  am  Boden 
wurde  ebenso  wie  beim  Paraffinöl  braun  imd  schied  einen  schwarzen 
Niederschlag  aus.  Das  Mohnöl  setzte  weiße  Flocken  ab ;  beim 
Pferdeöl  wurde  die  Farbe  nur  unbedeutend  grünlicher;  bei  Rizinusöl 
gelblicher.  5  Öle  färbten  sich  orangegelb,  und  zwar  am  meisten 
der  Leinölfirnis  (dunkel  und  bräunlich),   dann  das  japanische  Holzöl, 


522  Schneider -Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

das  Walratöl,  das  Leinöl,  am  schwächsten  das  Hanföl.  Das  Baiim- 
wollsameuöl  färbte  sich  braun;  das  Olivenöl  wurde  gelber  und 
schied  einen  braunen  Niederschlag  aus ;  braune  Färbungen  und 
Niederschläge  gaben  noch  das  Arachisöl,  das  Sesamöl  und  natürlich 
besonders  stark  das  Rapsöl.  Der  Lebertran  ergab  eine  Braunfärbimg 
mit  starker  grüner  Fluoreszenz  und  einen  dunklen,  am  Lichte  schnell 
schwarz  werdenden  Niederschlag. 

Bei  der  ultramikroskopischen  Beobachtung  wurde  leider 
bis  auf  zweifelhafte  Ausnahmen  nichts  gefunden,  was  auf  reduziertes 
Silber  hingedeutet  hätte.  Der  für  Silber  charakteristische  blaue 
Kegel  wurde  nur  beim  Nuß-,  Sesam-  und  Rizinusöl  gefunden ,  und 
zwar  auch  hier  nur  blaß.  Eine  Vermehrung  von  Punkten  um  solche, 
welche  sich  beim  Heben  des  Tubus  mit  undeutlichen  Kreisen  um- 
geben, trat  nur  beim  Hanföle  ein.  Es  waren  aber  nicht  rote,  son- 
dern nur  weiße  Punkte.  Beim  Lebertrane ,  der  allein  eine  grüne 
Fluoreszenz ,  später  einen  schwarzen  Niederschlag  gab ,  zeigten  sicli 
in  18  Quadraten  67  feine,  wenig  gefärbte  Punkte,  davon  7  mit  bis 
4  Kreisen  und  im  ganzen  Kegel  2  Gruppen  von  3  bis  4  Punkten ; 
Jniax  170.  Beim  Heben  des  Tubus  um  20  /<  nahm  aber  die  Anzahl 
der  mit  Kreisen  umgebenen  Punkte  nicht  zu,  wie  es  hätte  nach  dem 
Befunde  bei  der  mit  Formaldehyd  reduzierten  Silberlösung  geschehen 
sollen.  Wo  eine  Gelb-  oder  Orangegelbfärbung  eintrat ,  war  dies 
nicht  vom  Silber,  sondern  schon  von  dem  bloßen  Erhitzen  mit  einer 
Nitratlösung  überhaupt  und  mit  Ammoniak.  Im  Ultramikroskope 
war  hier  nur  eine  gelbe  Färbung  des  Kegels  auffallend ,  und  zwar 
wenigstens ,  wenn  man  an  den  rückwärtigen  Teil  der  Küvette  ein- 
gestellt hatte;  beim  Leinölfirnis  war  der  Kegel  graubraun,  beim  ja- 
panischen Holzöle  gelb.  Die  Braunfärbung,  welche  durch  die  Fällung 
von  Schwefelsilber  verursacht  wird  und  deshalb  beim  Rapsöl,  welches 
den  meisten  Schwefel  enthält,  am  stärksten  hervortritt ,  wurde  auch 
nur  durch  eine  orangegelbe  Färbung  des  Kegels  bei  der  Betrachtung 
desselben  mit  freiem  Auge  begleitet ;  beim  Baumwollsamenöle  war 
diese  Kegelfärbung  nur  gelb.  In  dem  nach  der  Reaktion  dunklen 
und  trüben  Dreikronentrane  war  sowohl  bei  der  Betrachtung  mit 
dem  freien  Auge  als  auch  im  Ultramikroskope  die  starke  Rotfärbung 
des  Kegels  auffallend;  beim  Paraffinöle  nahm  die  Zahl  der  Punkte 
in  18  Quadraten  um  40  zu,  dieselben  entsprachen  aber  den  Fett- 
teilchen, die  sich  schon  nach  dem  Kochen  mit  Wasser  und  Aus- 
kühlen ausscheiden  und  stimmten  deshalb  mit  den  bei  der  wässerigen 
Goldchloridlösung  gesehenen  Punkten  überein.     Außer  dem  Hanf-  und 


XXII,  4.         Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Uleosole.  523 

Walratüle  zeigten  alle  Öle  mehr  oder  weniger  Gruppen,  bis  18  in 
18  Quadraten,  manche  Gruppen  hatten  bis  160  Punkte;  bei  allen 
war  aber  klar,  daß  sie  Fett-  und  öeifenteilchen  darstellen.  Das 
Fett  und  die  Seife  zeigten  sich  jedoch  auch  in  Form  von  feinen 
Punkten  und  Punkten  mit  Kreisen,  wie  z.  B.  bei  Walratöl.  Der 
Kegel  war  der  Zahl  dieser  Gruppen  und  Punkte  entsprechend  weiß 
und  hell. 

Aus  dem  Vorangehenden  ist  zu  sehen,  daß  bei  dieser  Versuchs- 
reihe der  Fett-  und  Seifenniederschlag  die  Beobachtung  des  redu- 
zierten oder  in  Verbindungen  gefällten  Silbers  verhindert  hatte,  und 
daß  man  nur  mit  Anwendung  eines  Ultramikroskopes  mit  Heizvor- 
richtung die  den  Fettniederschlägen  entsprechenden  Eindrücke  be- 
seitigen und  die  eigentliche  Silberreaktion  erkennen  könnte. 

b.  Reaktionen  mit  ammoniakalischer  Ruthenium- 
chloridlösung. Die  mit  1  cm^  einer  ammoniakalischen  Ruthenium- 
chloridlösung wie  bei  den  nichtammouiakalischen  Lösungen  der  anderen 
Edelmetalle  ausgeführte  Reaktion  hatte  außer  bei  dem  Paraffinöle 
eine  solche  Schwarzfärbung  zur  Folge  und  es  entstand  selbst  bei 
dem  Olivenöle  eine  so  starke  Emulsion,  daß  man  diese  Öle  der 
ultramikroskopischen  Beobachtung  gar  nicht  unterwerfen  konnte.  Die 
Reaktion  bei  dem  Mohnöle  war  deshalb  sehr  interessant,  weil  sich 
in  der  unter  dem  Öle  gesammelten  wässerigen  Flüssigkeit  ein  durch 
Rutheniumrot  wie  bei  den  Schleimen  satt  gefärbter  Niederschlag  ab- 
gesetzt hat.  Die  Versuche  mußten  mit  0*05  cm^  wiederholt  werden. 
Dabei  wurden  die  Öle  zwei  Stunden  erwärmt,  und  zweimal,  nämlich 
am  Anfang  und  in  der  Mitte  des  Erhitzens  mit  dem  Reagens  um- 
geschüttelt. 

Der  makroskopische  Befund  war  der  folgende :  Das Paraffinöl 
veränderte  sich  gar  nicht;  aus  dem  Reagens  setzte  sich  ein  schwarzer 
Niederschlag  ab.  Das  gelbe  Mineralöl  verdunkelte  sich  kaum  merk- 
lich in  Orangegelb ;  das  Reagens  schied  ebenfalls  einen  schwarzen 
Niederschlag  aus.  Bei  allen  anderen  Ölen  sehen  wir  auffallende 
Veränderungen  in  dreierlei  Richtung,  und  zwar  entweder  rotbraune 
oder  schwarzbraune  oder  schwarze  Färbungen.  Die  rotbraune  Fär- 
bung ist  am  schwächsten  beim  Dreikronentrane  und  fortschreitend 
deutlicher  beim  Nußöle,  Sesamöle,  dem  Lebertrane,  dem  Leinölfirnis, 
dem  japanischen  Holzöle ,  dem  Lein-,  Baumwollsamen-,  Hanf-  und 
Walratöle.  Die  schwarzbraune  Färbung  ist  am  schwächsten  beim 
Mohnöle,  steigt  dann  beim  Rizinus-  und  Pferdeöle  und  ist  am  größten 
beim  Rapsöle.     Eine  schwarze  Färbung  finden  wir  beim  Oliven-  und 


524  Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Oloosole.         XXII,  4. 

Aracliisöle ;  bei  dem  ersteren  ist  noch  ein  branner  Sticli  sichtbar, 
das  andere  ist  rein  schwarz  nnd  zeigt  außerdem  einen  reichlichen 
schwarzen  Niederschlag.  Einen  deutlichen  blassen  Fettsatz  schied 
das  Pferde-,  Nuß-  und  Sesamöl  aus,  das  Elain-Sapouifikat,  der  Leinöl- 
firnis, das  japanische  Holzöl ,  das  Leinöl  und  das  Baumwollsamenöl, 
welches  überhaupt  erstarrte.     Getrübt  waren  die  Trane. 

Der  ultramikroskopische  Befund  war  trotz  der  hervor- 
tretenden Niederschläge  sehr  interessant,  weshalb  er  hier  ausführlich 
wiedergegeben  ist. 

1.  Leinöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blauweißen,  rückwärts 
g'elben  Kegel.  Im  Ultramikroskope  war  derselbe  blauweiß  und  enthielt 
41  Punkte ,  von  welchen  22  mit  bis  5  Kreisen  umgeben  waren ,  außerdem 
22  Gruppen  von  3  bis  14  Punkten;  die  Punkte  waren  gelb,  die  Kreise 
und  Gruppen  bunt.  Größere  Kreise  waren  aus  radialen  Strichen  zu- 
sammengesetzt. Jmax  400.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  /,<  waren 
im  ganzen  Kegel  nur  noch  G  Punkte  mit  Kreisen  sichtbar;  diese  Kreise 
waren  weder  bunt  noch  deutlich.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte 
sich  der  Kegel,  die  Kreise  und  die  Punkte  verschwanden  vollkommen,  die 
Gruppen  verblaßten. 

2.  Leinölfirnis.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  weißen,  rück- 
wärts dunkelorangegelben  Kegel.  Im  Ultramikroskope  war  derselbe  hell 
und  gelbweiß  und  enthielt  35  gelbweiße  Punkte,  von  welchen  3  mit  einem 
blassen  Kreise  umgeben  waren,  außerdem  10  Gruppen  zu  8  Punkten. 
^')im'.r  80.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  /x  sah  man  ebenfalls  3  Punkte 
mit  blassen,  gelbweißen  Kreisen.  Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte 
sich  der  Kegel,  die  Punkte,  die  Gruppen  und  die  Kreise  verschwanden. 

3.  Hanföl.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  gelben,  rückwärts 
dunkelorangegelben  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  orangegelb, 
sehr  hell  und  man  sah  deshalb  in  ihm  nur  15  sehr  undeutliche,  ebenfalls 
orangegelbe  Punkte,  davon  einen  mit  einem  undeutlichen  Kreise.  Jmax  76. 
Auch  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ft  sah  man  bei  einem  Punkte  einen 
undeutlichen  Kreis  von  der  Farbe  des  Kegels.  Gruppen  kamen  nicht  vor. 
Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  Punkte  und 
die  Kreise  verschwanden. 

4.  Nuß  öl.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blaugrünen,  rückwärts 
grünen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  blaß  blaugrün.  In  18  Qua- 
draten waren  18  weiße  Punkte;  im  ganzen  Kegel  waren  5  Punkte  mit  bis 
4  in  allen  Regenbogenfarben  gefärbten  Kreisen  und  10  sehr  blasse  und 
undeutliche  Gruppen;  ausnahmsweise  waren  auch  große,  hellleuchtende, 
6  Quadrate  große  Gruppen  zu  sehen.  Jinax  130.  Auch  nach  dem  Heben 
des  Tubus  um  20  fA  kamen  im  ganzen  Kegel  nur  5  Punkte  mit  Kreisen 
vor,  teilweise  mit  bunten  und  deutlichen,  teilweise  mit  blassen,  undeut- 
lichen. Beim  Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die 
blassen  Punkte  und  Kreise  verschwanden,  bei  den  hellen,  sowohl  einzelnen 
als  auch  gruppierten  Punkten,  vertauschten  sich  die  Farben,  vorzugsweise 
die  gelbe  und  die  violette. 


XXII,  4.        Schneider-.]  ust:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  525 

5.  Mohnöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  blassen,  bläulichen  Kegel ;  im 
Ultramikroskope  war  derselbe  blaß,  blauweiß.  In  18  Quadraten  wurden 
55  weiße,  ungleich  dicht  verteilte  Punkte  gefunden;  4  davon  hatten  1  bis 
2  undeutliche  weiße  Ivreise.  Jmax  V.'A.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um 
20  fx  wurden  in  18  Quadraten  7  Funkte  mit  Kreisen  gefunden ;  bei  5  Punkten 
waren  die  Kreise  blaß,  bei  2  bunt.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
dunkelte sich  der  Kegel,  die  Punkte  und  die  Kreise  verschwanden. 

G.  Japanisches  Holzöl.  Der  Kegel  erscheint  dem  freien  Auge 
blaßgrün,  rückwärts  grün ;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  hell,  blauweiß. 
In  18  Quadraten  wurden  9  Punkte  gefunden,  davon  3  mit  bis  4  wenig 
bunten  Kreisen;  außerdem  waren  im  ganzen  Kegel  2  Gruppen  mit  5  bis 
7  hellen  Punkten.  Jmax  120.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  fi  wurden 
in  18  Quadraten  nur  3  Punkte  mit  Kreisen  gesehen;  dieselben  waren  ent- 
weder blaß  und  undeutlich  oder  etwas  bunter  und  deutlicher.  Beim  Drehen 
des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  Kreise  verschwanden,  von 
den  Punkten  blieben  nur  die  hellsten  Punkte  in  den  Gruppen  sichtbar. 

7.  Olivenöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  bläulichweißen  Kegel;  im 
Ultramikroskope  war  derselbe  bläulich,  sehr  wenig  hell.  In  18  Quadraten 
wurden  32  Punkte  gefunden,  7  davon  mit  bis  3  nicht  sehr  deutlichen  in 
allen  Regenbogenfarben  gefärbten  Kreisen.  Rote  Punkte  gab  es  im  ganzen 
Kegel  2.  Auch  waren  in  demselben  (3  Gruppen  mit  3  bis  11  Punkten. 
Jmax  136.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  (x  waren  in  18  Quadraten 
13  Punkte  mit  wenig  deutlichen,  aber  ziemlich  bunten  Kreisen.  Beim 
Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel,  die  hellsten  Punkte 
der  Gruppen  verblaßten,  alles  übrige  verschwand. 

8.  Arachisöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  wenig  hellen,  weißen 
Kegel:  im  Ultramikroskope  war  derselbe  dunkel.  In  18  Quadraten  waren 
9  einzelne  Punkte  zu  sehen,  davon  3  mit  1  unbestimmten,  blassen  Kreise, 
und  7  Gruppen  mit  3  oder  4  Punkten.  Die  Punkte  sind  meistens  weiß, 
nur  einige,  besonders  in  den  Gruppen  waren  blaßgefärbt;  in  18  Quadraten 
war  ein  Punkt  rot.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ^  waren  in  18  Qua- 
draten 14  Punkte  mit  Kreisen  zu  sehen,  und  zwar  mit  wenig  deutlichen 
und  schwach  aber  buntgefärbteu  Kreisen.  Beim  Drehen  des  Analysators 
wurde  der  Kegel  vollkommen  dunkel,  einige  Punkte  in  den  Gruppen  ver- 
blaßten nur,  alles  übrige  verschwand. 

9.  Baumwollsamenöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  roten  Kegel; 
im  Ultramikroskope  war  derselbe  orangegelb,  undeutlich  begrenzt;  beim 
Drehen  des  Analysators  verdunkelte  er  sich  bedeutend.  Anderes  konnte 
infolge  der  Trübung  nicht  bestimmt  werden. 

10.  Öesamöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  Idaßbläulichen,  rückwärts 
grünen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  grau.  In  18  Quadraten 
waren  4  weiße  Punkte  und  3  Gruppen  mit  3  bis  4  Punkten  zu  sehen, 
Punkte  mit  Kreisen  kamen  im  ganzen  Kegel  8  vor,  nach  dem  Heben  des 
Tubus  um  20  u  12 ;  die  Kreise  waren  undeutlich  blaß.  Jmax  <>4.  Beim 
Drehen  des  Analysators  verdunkelte  sich  der  Kegel  (ebenso  bei  allen  nach- 
folgenden Ölen),  die  hellsten  Punkte  verblaßten,  alles  übrige  verschwand. 

11.  Rapsöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  blauen,  rückwärts  grünlichen 
Kegel;  im  Ultramikroskope    war   derselbe   bläulichweiß.     In    18    Quadraten 


526  Schneider- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

wurden  38  weiße  oder  gelbliche  Punkte ,  welche  samtlich  frei  von  Kreisen 
waren ,  gefunden  und  im  ganzen  Kegel  4  Gruppen  mit  3  bis  4  Punkten. 
Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  fx  fand  man  im  ganzen  Kegel  8  Punkte 
mit  Kreisen.  Soweit  diese  Punkte  bei  der  scharfen  Einstellung  Punkte- 
gruppen gaben,  waren  sie  bunt  gefärbt ;  die  übrigen  waren  ganz  blaß,  un- 
deutlich, ^max  80.  Beim  Heben  des  Analysators  verschwanden  die  Punkte, 
die  von  Gruppen  gebildeten  Kreise  verblaßten. 

12.  Rizinusöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  bläulichen,  rückwärts 
grünlichen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  blaßblau.  In  18  Qua- 
draten befanden  sich  4  weiße  oder  gelbliche  Punkte;  im  ganzen  Kegel 
5  Punkte  mit  einem  sehr  undeutlichen  Kreise  und  2  Gruppen  mit  3  bis  6 
teilweise  hellen  Punkten.  Jmax  154.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  fx 
fand  man  im  ganzen  Kegel  17  Punkte  mit  Kreisen.  Diejenigen  Kreise, 
welche  bei  der  scharfen  Einstellung  helle  Gruppen  zeigten,  waren  bunt 
gefärbt,  die  andern  blaß,  undeuthch.  Beim  Drehen  des  Analysators  ver- 
schwanden die  blassen  Punkte  und  Kreise,  die  hellen  Punkte  und  die 
bunten  Kreise  verblaßten. 

13.  Pferdeöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  blaugrünen  Kegel;  im 
Ultramikroskope  war  derselbe  blauweiß.  In  18  Quadraten  fand  man  3  weiße 
Punkte,  im  ganzen  Kegel  4  Punkte  mit  sehr  unbestimmten,  blassen,  un- 
gefärbten Kreisen  und  2  Gruppen  mit  3  bis  6  Punkten.  Jmax  88.  Nach 
dem  Heben  des  Tubus  um  20  ^/  sah  man  im  ganzen  Kegel  9  Punkte  mit 
ebensolclien  Kreisen  wie  früher.  Beim  Drehen  des  Analysators  verschwand 
alles  vollkommen. 

14.  Ela'i  n-Destillat.  Das  freie  Auge  sah  einen  weißen,  rückwärts 
orangegelben  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  gelb  und  enthielt 
entweder  keine  Punkte  oder  nur  einen  gelben  mit  einem  undeutlichen 
Kreise  umgebenen  Punkt.  Ausnahmsweise  fand  man  1  bis  6  Gruppen  mit 
etwa  12  Punkten.  Beim  Drehen  des  Analysators  verschwand  fast  alles,  die 
hellsten  Punkte  verblaßten  nur. 

15.  Elain-Saponifikat.  Das  freie  Auge  sah  einen  wenig  hellen, 
weißen,  rückwärts  gelblichen  Kegel ;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  blaß- 
gelb und  enthielt  41  gelbe  Punkte,  und  zwar  15  hellere  und  26  kaum 
sichtbare,  ausnahmsweise  auch  eine  Gruppe  mit  5  Punkten.  Im  ganzen 
Kegel  waren  nur  2  Punkte  mit  einem  sehr  vindeutlichen  gelben  Kreise  zu 
sehen;  dasselbe  fand  man  auch  beim  Heben  des  Tubus  um  20  ^u.  JmaxlO. 
Beim  Drehen  des  Analysators  verblaßten  die  hellsten  Punkte  in  den  Grup- 
pen, alles  andere  verschwand. 

16.  Lebertran.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  weißen,  rückwärts 
gelben  Kegel ;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  gelbweiß.  In  18  Quadraten 
wurden  34  gelblichweiße  Punkte  gesehen,  davon  einer  mit  einem  sehr  un- 
<leutlichen  Kreise.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  //  wurden  im  ganzen 
Kegel  13  Punkte  mit  ebensolchen  Kreisen  gefunden.  Jmax  54.  Gruppen 
kamen  nicht  vor.  Beim  Drehen  des  Analysators  verblaßten  stark  die 
hellsten  Punkte,  alles  übrige  verschwand. 

17.  Dreikronen  trän.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  weißen, 
rückwärts  orangegelben  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  orange- 
gelb.    In  18  Quadraten   befanden   sich    5  orangegelbe  Punkte;  im  ganzen 


XXII,  4.        Schnei  der -Just:  Ultraiuikroskopie  der  Oleosole.  527 

Kegel  war  nur  ein  Punkt  mit  einem  sehr  schwachen  Kreise  zu  sehen  und 
ebenso  auch  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ja.  Jma.r  18.  Gruppen 
kamen  nicht  vor.  Beim  Drehen  des  Analysators  verschwanden  sowohl  die 
Punkte  als  auch  die  Kreise.' 

18.  Walrat  öl.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  orangegelben,  rück- 
wärts dunkelroten  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  schön  rot. 
Punkte  waren  entweder  gar  nicht  zu  sehen  oder  höchstens  3  im  ganzen 
Kegel,  und  zwar  ohne  Kreise  und  von  derselben  Farbe  wie  der  Kegel. 
Ausnahmsweise  fand  man  im  ganzen  Kegel  eine  Gruppe  von  10  Punkten. 
Jmax  4G.  Beim  Drehen  des  Analysators  verblaßten  die  Punkte  in  der 
Gruppe,  alles  andere  verschwand. 

19.  Gelbes  Mineralöl.  Das  freie  Auge  sah  einen  vorne  blauen, 
rückwärts  grünen  Kegel;  im  Ultramikroskope  war  derselbe  blaßblau.  In 
18  Quadraten  sah  man  IG  weiße  Punkte  durchwegs  ohne  Kreise  und  im 
ganzen  Kegel  2  Gruppen  mit  8  und  30  hellleuchtenden,  wenig  bunten 
Punkten.  Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  fx  sah  man  im  ganzen  Kegel 
nur  einen  Punkt  mit  ganz  undeutlichen  schwachen  Kreisen.  Beim  Drehen 
des  Analysators  verblaßten  die  Gruppen,  veränderten  jedoch  die  Farbe 
nicht;  die  Punkte  verscliwanden. 

20.  Paraffin  öl.  Das  freie  Auge  sah  einen  blaßblauen  Kegel:  im 
Ultramikroskope  war  derselbe  kaum  sichtbar  und  enthielt  bis  10  weiße  oder 
wenig  gefärbte  Punkte  ohne  Kreise ;  ausnahmsweise  fand  man  kleine  Gruppen 
von  undeutlichen  Punkten  und  ganze  Streifen  von  Punkten;  diese  Streifen 
waren  4  Quadrate  breit  und  hatten  etwa  12  Punkte  in  einem  Quadrate. 
Nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  ^m  fand  man  im  ganzen  Kegel  3  Punkte 
mit  undeutlichen  gelblichen  Kreisen.  Jmax  66.  Beim  Drehen  des  Analysators 
verschwand  alles  bis  auf  die  hellsten  Punkte  und  die  aus  denselben  sich 
bildenden  Kreise.  — 

Die  in  diesen  Befunden  enthaltenen  Resultate  kiinnen  wir  im 
folgenden  ziisamme'ufnssen : 

Das  Mineral-  und  das  Paraffinöl,  die  sich  fast  gar  nicht  ver- 
änderten, die  sich  aber  sonst  bei  anderen  wässerigen  Reagentien 
mehr  oder  weniger  trübten,  zeigten  Punkte  ohne  Kreise  und  Gruppen, 
die  ausgeschiedenem  Fette  entsprechen.  Reim  lieben  des  Tubus 
zeigten  sich  Punkte  mit  Kreisen ;  bei  Drehen  des  Analysators  traten 
keine  Farbenveränderungen  ein. 

Die  sich  rotbraun  färbenden  Ole  (vom  Dreikronentran  bis  zum 
Walratöle)  zeigten  dem  freien  Auge  und  auch  im  Ultramikroskope 
einen  immer  gelberen  und  röteren  Kegel ;  die  Farbe  des  Kegels  war 
um  so  gelber  und  röter,  je  mehr  diese  Farben  sclion  makroskopisch 
hervortraten.  In  keinem  Falle  konnte  eine  Zunahme  der  Punkte  mit 
Kreisen  nach  dem  Heben  des  Tubus  sichergestellt  werden  (bei  dem 
Sesamöle  umgaben  sich  mit  neuen  Kreisen  nur  die  Gruppen).  Eine 
Zunahme    von    Punkten    überhaupt    nach    der  Reaktion    kam   nur  bei 


528  Schneid  er- Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.        XXII,  4. 

solchen  Ölen  vor,  welche  eine  Trübung  oder  einen  Satz  abschieden 
und  es  stellten  diese  Punkte  auch  ihrem  Charakter  nach  Fettteilchen 
vor.  Auch  wo  bei  der  Reaktion  Punkte  mit  Kreisen  zunahmen,  ent- 
sprechen dieselben  der  Fetttrübung.  Daß  die  Rotbraunfärbung  bei 
Ruthenium  nur  durch  mikroskopische  Teilchen  erzeugt  wurde ,  be- 
weist am  besten  das  Elain-Destillat,  welches  bei  einer  starken  Bräunung 
keine  Punkte  zeigte. 

Die  anderen  Öle,  bei  welchen  entweder  nur  eine  Schwarzfärbuug 
oder  außerdem  auch  eine  Braunfärbung  makroskopisch  sichtbar  war, 
zeigten  im  Ultramikroskope  eine  Vermehrung  der  Punkte.  Bei  dem 
Pferdeöle  nahmen  zwar  die  Punkte  überhaupt  ab,  weil  weniger  Fett- 
teilchen ausgeschieden  waren ,  dafür  nahmen  die  mit  Kreisen  um- 
gebenen Punkte  zu.  Auch  in  dem  Mohn-  und  Arachisöle  ist  eine 
Zunahme  der  Punkte  mit  Kreisen  nach  der  Reaktion  eingetreten. 
Alle  Öle,  bei  welchen  eine  Schwarzfärbung  sichtbar  war,  hatten  das 
Gemeinsame ,  daß  bei  ihnen  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  [x 
mehr  Punkte  mit  Kreisen  gefunden  wurden  als  vor  der  Reaktion, 
was  auch  mit  dem  Befunde  bei  mit  Formaldehyd  reduzierter 
Rutheniumchloridlösung  in  Übereinstimmung  war.  Die  beim  Heben 
des  Tubus  sich  bildenden  Kreise  waren  außer  beim  Pferdeöl  mäßig 
bunt.  Obzwar  diese  Öle  bis  auf  das  Pferdeöl  klar  waren,  so  wurden 
doch  bei  ihnen  zahlreiche  Gruppen  gefunden ;  beim  Mohnöle  kam 
anstatt  der  Gruppen  eine  auffallend  ungleiche  Verteilung  der  Punkte 
vor,  was  als  ein  Anfang  des  Gruppierens  angesehen  werden  kann. 
— -  Das  Raps-,  Rizinus-  und  Pferdeöl,  welche  außer  der  schwarzen 
Farbe  auch  deutlich  eine  braune  angenommen  haben ,  zeigten  dem 
freien  Auge  eine  Färbung  des  Kegels  in  Gelb ;  im  Ultramikroskope 
war  keine  Gelbfärbung  zu  sehen;  eine  Färbung  des  Kegels  in  Rot 
war  bei  diesen  Ölen  überhaupt  nicht  zu  bemerken. 


Zusammenfassung. 

1)  Das  Ultramikroskop  eignet  sich  zur  Sicherstellung  der  Iden- 
tität und  der  Reinlieit  der  Öle  und  zur  Prüfung  von  Ölgemischen. 

2j  Man  prüft  die  Öle  mit  dem  Ultramikroskope,  nachdem  man 
sie  durch  die  Reaktionen  mit  Edelmetallverbindungen  in  Oleosole 
dieser  Metalle  umgewandelt  hat. 

3)  Bei  dem  ultramikroskopischen  Studium  bewährte  sich  das 
Zählen    der  spärlich  vorkommenden  Punkte  und  Gruppen    im  ganzen 


XXII,  4-        Schnei  der -Just:  Ultramikroskopie  der  Oleosole.  529 

Kegel ,  die  Bestimmung  von  a  und  <?,  das  Zählen  der  mit  Kreisen 
umgebenen  Punkte  nach  dem  Heben  des  Tubus  um  20  jli  und  die 
gesonderte  Untersuchung  der  ohne  Kreise  vorkommenden  Punkte, 
der  mit  Kreisen  umgebenen  Punkte  und  der  Gruppen,  und  zwar 
sowohl  ohne  den  Analysator  als  auch  mit  demselben, 

4)  Bei  den  ausgeführten  Untersuchungen  der  Handelsöle  waren 
die  verschiedenen  Formen,  unter  welchen  sich  im  Ultramikroskope 
das  aus  dem  Öle  ausgeschiedene  Fett  zeigt,  der  Betrachtung  der 
Metallteilchen  sehr  hinderlich  und  es  zeigte  sich  für  die  weiteren 
Arbeiten  die  Verwendung  von  Ultramikroskopen  mit  Heizvorrichtuug 
notwendig. 

5)  Das  Ergebnis  der  Reaktion  wird  durch  viele  Umstände  be- 
einflußt, hauptsächlich  durch  das  Lösungsmittel,  die  Temperatur,  die 
Bewegung,  die  Zeit  und  die  Ölmenge.  Ein  Einfluß  von  Licht  wurde 
nur  bei  Silber  beobachtet,  und  zwar  ein  selbständiger,  und  keine 
bloße  Abänderung  des  Verlaufes,  der  Form  und  des  Grades  der 
Ölreaktion. 

6)  Die  besten  Resultate  werden  beim  ultramikroskopischen 
Prüfen  der  Öle  nach  der  Reaktion  mit  Goldchlorid  gefunden.  Es 
tritt  entweder  eine  Rotfärbung  durch  amikroskopische  Teilchen  ein, 
oder  eine  Blaufärbung  durch  submikro-  und  mikroskopische  Teilchen, 
welche  sich  zu  einem  blauschwarzen  Niederschlage  sammeln,  oder 
eine  Gelbfärbung  durch  submikro-  und  mikroskopische  Teilchen, 
welche  sich  zu  einem  Goldschimmer  und  einem  goldglänzeuden  Satze 
sammeln.  Es  kann  entweder  nur  eine  Form  oder  zwei  oder  alle 
drei  zugleich  vorkommen. 

7)  Aus  Silberlösungen  werden  entweder  amikroskopische  Teil- 
chen gefällt,  welche  ein  Blaufärben  des  Kegels  verursachen,  oder 
submikro-  und  mikroskopische  Teilchen.  Außer  der  Silberreduktion 
gibt  auch  die  Reaktion  mit  dem  in  manchen  Ölen  enthaltenen  Schwefel 
Kegelfärbungen  durch  amikroskopische  Teilchen. 

8)  Bei  den  Reaktionen  mit  dem  Rutheniumchloride  kommt  ent- 
weder eine  gelbe  oder  auch  eine  rote  Kegelfärbung  durch  amikro- 
skopische Teilchen  vor  oder  es  scheiden  sich  submikro-  und  mikro- 
skopische Teilchen  aus. 

9)  Die  mit  Osmiumsäure  und  mit  Platinchlorid  ausgeführten 
Versuche  ergaben  keine  praktisch  brauchbaren  Resultate  und  es  sind 
andere  günstigere  Verhältnisse  für  die  Reaktion  und  die  Prüfung 
zu  suchen. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  4.  34 


530  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  XXII,  4. 

10)  Der  gesuchte  Zusammenhang  des  ultramikroskopischen  Be- 
fundes mit  einer  in  Ziffern  ausdrückbaren  Eigenschaft  oder  quanti- 
tativen Reaktion  wurde  nicht  gefunden  und  es  zeigte  sich ,  daß  es 
vor  allem  darauf  ankommt,  wie  fein  die  Emulsion  ist,  deren  ein  Öl 
mit  dem  betreffenden  Reagens  unter  den  obwaltenden  Verhältnissen 
fähig  ist. 

[Eingegangen  am  5.  Dezember  1905.] 


[Aus  dem  Anatomischen  Institut  der  Universität  Würzburg.] 

Der  Anstrich  der  Eichtebene. 

Von 
Dr.  Karl  Peter, 

a.  o.  Professor  in  Greifswakl. 


Mit  Tafel  III   und   IV. 


Die  Technik  der  Rieht-  oder  Definierzeichen,  welche 
ein  exaktes  Aufeinanderlegen  der  Zeichnungen  von  Serienschnitten 
behufs  graphischer  oder  plastischer  Rekonstruktion  gestatten,  ist  fast 
so  alt,  wie  die  Rekoustruktionsmethoden  selbst. 

Ihre  Einführung  geschah  durch  Kaschtschenko  und  Strasser. 
Anfangs  wurden  zu  diesem  Zwecke  sehr  verschiedenartige  Verfahren 
empfohlen,  doch  hat  sich  allein  die  Idee  als  lebensfähig  erwiesen, 
den  Kontur  des  Blockes  selbst,  welcher  das  Präparat  eingebettet 
enthält,  als  Richtebene  zu  benutzen.  Nicht  als  ob  die  älteren  Me- 
thoden, über  welche  Strasser  (1887)  ausführlich  Bericht  erstattet, 
nicht  auch  zum  Ziele  führten,  —  ich  selbst  habe  bei  der  Herstellung 
eines  Modells  aus  einer  Serie,  welche  nach  Borns  Angabe  einen 
Eiweißstreifen  als  Richtzeichen  trug,  die  Exaktheit  dieses  Verfahrens 
sehr  schätzen  gelernt,  —  aber  sie  waren  umständlich ,  nicht  leicht 
zu  handhaben  und  ergaben  teilweise  recht  unvollkommene  Resultate. 
Jetzt  wird  also  allgemein  eine  zur  Schnittrichtung  senk- 
rechtstehende, mit  Leisten  oder  Ritzen  versehene 
Fläche  des  Blockes  selbst  zur  Definierebene  gemacht. 


XXII,  4.  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  531 

Nur  selten  wird  diese  Definierebene  in  das  Objekt  selbst  hinein- 
verlegt; in  diesem  Falle  gibt  der  Kontur  des  Schnittes  das  Richt- 
merkmal ab ,  und  ein  besonderes  Hervorheben  dieser  Linie  durch 
Auftragen  einer  Farbe  ist  natürlich  unnötig.  Meist  wird  man  aber 
das  Präparat  nicht  verletzen  dürfen  und  muß  dann  die  Richtebene 
an  dem  Paraffin-  oder  Celloi'dinblock  in  einiger  Entfernung  von  dem 
eingebetteten  Objekt  anbringen.  Dann  muß  die  Definierfläche,  um 
in  den  Schnitten  nach  Auflösung  des  Paraffins  oder  Eindecken  des 
Celloidins  sichtbar  zu  sein,  mit  einem  farbigen  Überzug  ver- 
sehen   werden. 

Solcher  Farbmasseu  sind  eine  große  Menge  empfohlen  worden. 
Doch  konnte  bisher  kein  Anstrich  alle  Anforderungen  erfüllen ;  ein 
solcher  soll  nämlich : 

1)  im  Schnitt  eine  scharfe,  saubere,  dunkle  Linie  geben, 

2)  die    Prozeduren    des    Nachfärbens    der     Schnitte    aushalten 
können,  und 

3)  ist  größtmögliche  Einfachheit  der  Anwendung  erwünscht. 
Ich    habe    nun    für    eine  Technik    der    Rekonstruktionsmethoden 

die  in  der  Literatur  empfohlenen  Verfahren  des  Färbens  der  Richt- 
ebene sämtlich  selbst  versucht  und  bin  dabei  auf  einen  für  alle  Fälle 
anzuwendenden  Anstrich  gekommen,  der  allen  drei  Forderungen  ge- 
nügen dürfte.  Doch  bevor  ich  diesen  und  seine  Vorzüge  beschreibe, 
möchte  ich  kurz  meine  Erfahrungen  mit  den  bekannten  Farbmasseu, 
die  in  ihrer  Brauchbarkeit  durchaus  nicht  gleichwertig  sind ,  vor- 
legen. Genügende  Resultate  geben  sie  alle ,  das  beweisen  schon 
die  vielen ,  mit  ihrer  Hilfe  angefertigten  Modelle ;  doch  sind  die 
meisten  nur  für  Paraffinblöcke  verwendbar,  einige  gestatten  das  Nach- 
färben nicht,  andere  liefern  keine  scharfen  Linien  u.  s.  f.  Die  Be- 
rechtigung einer  solchen  Zusammenstellung  sehe  ich  in  der  Kritik 
der  Resultate  der  Verfahren ;  die  Methoden  sind  beschrieben  worden, 
der  Effekt  ist  aber  meist  nicht  oder  nur  kurz  erwähnt  worden. 

Die  empfohlenen  Farbmassen  sind  sehr  verschiedenartiger  Natur. 
Ich  zähle  sie  nach  ihrer  Brauchbarkeit  auf,  wobei  Exaktheit  der 
Linie,  Einfachheit  der  Anwendung  und  Haltbarkeit  den  Ausschlag 
geben. 

1)  Schwarzer  Alkohollack  für  mikroskopische 
Zwecke  von  der  Firma  Hutstein,  Breslau,  Schmiedebrücke 
(Born  und  Peter  1898).  Die  genaue  Zusammensetzung  dieser 
Flüssigkeit  ist  uns  nicht  bekannt ;  es  soll  eine  Lösung  von  Nigrosin 
in  alkoholischer,   mit  Dammar   versetzter  Schellacklösung   sein.     Vor 

34* 


532  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  XXII,  4. 

dem  Gebraucli  verdünnt  man  einige  Tropfen  mit  dem  gleichen  Quan- 
tum absoluten  Alkohols.  Mit  weichem  Pinsel,  der  in  die  Flüssigkeit 
getaucht  wurde ,  fahre  man  einmal  über  die  Richtebeue.  Dieser 
Farbüberzug  darf  nur  ganz  dünn  sein,  das  Paraffin  soll  bläulich 
durchscheinen ,  und  auch  das  eingeschlossene ,  der  Definierebene 
nahe  anliegende  Objekt  muß  sichtbar  bleiben.  Je  dünner  man  den 
Lack  aufträgt,  desto  zarter  ist  im  Schnitt  die  Linie.  Der  Lack 
trocknet  schnell ,  doch  habe  ich  es  für  gut  befunden ,  den  Block 
einige  Stunden  stehen  zu  lassen,  ehe  ich  ihn  wieder  in  erhitztes 
Paraffin  tauche,  um  den  sekundären,  schützenden  Paraffinüberzug 
herzustellen.     Dieser  haftet  der  Ebene  gut  an. 

Die  Definierlinie  ist  im  Schnitt  sehr  dunkel,  scharf  und  sauber, 
übertriö't  an  Zartheit  sogar  noch  den  unten  zu  erwähnenden  eng- 
lischen Lack. 

Leider  ist  diese  schwarze  Farbe  außerordentlich  empfindlich 
gegen  Alkohol  und  Wasser;  ihre  Anwendung  beschränkt  sich  dem- 
nach auf  nicht  nachzufärbende  Präparate.  Aber  auch  für  diese  Fälle 
habe  ich  eine  Anzahl  von  Vorsichtsmaßregeln ,  welche  ein  Gelingen 
garantieren,  ausprobieren  müssen.  Denn  einige  Male  blich  mir  die 
Richtebene  im  Xylol  oder  gar  erst  noch  im  Kanadabalsam  aus.  Es 
stellte  sich  heraus,  daß  das  Xylol  nicht  rein  war,  und  daß  der  Balsam 
in  nicht  ganz  reinem  Xylol  geliist  war.  Seitdem  ich  die  Schnitte 
in  reinem  Xylol  von  Paraffin  befreie  und  in  demselben  auch  den 
Balsam  oder  das  Dammarharz  auflöse ,  habe  ich  keine  Mißerfolge 
mehr  zu  verzeichnen  gehabt ;  die  Richtlinie  hat  Jahre  hindurch  ihre 
tiefschwarze  Farbe  behalten. 

Diese  Flüssigkeit  ergibt  also  die  schönsten  Definierlinien,  dürfte 
aber  wegen  der  Empfindlichkeit  und  beschränkten  Anwendungs- 
mögliclikeit  durch  den  unten  zu  besprechenden  Nubian  Blacking  ver- 
drängt werden. 

2)  Die  Schuhlacke  Indian  Blacking  und  Nubian  Blacking 
empfahl  ich  (1899  und  1903),  Aveil  leichter  zu  erhalten,  an  Stelle 
des  Alkohollacks  von  Hutstein.  Ersteren  habe  ich  nicht  mehr  be- 
kommen ,  über  Nubian  Blacking  siehe  unten ;  da  ich  diesen  damals 
nur  als  Ersatz  für  den  Alkohollack  gebrauchte,  so  machte  ich  keine 
Versuche  mit  nachgefärbten  Schnitten  und  wurde  auf  seine  allgemeine 
Verwendbarkeit  nicht  aufmerksam. 

3)  Eine  saubere  Richtlinie  erhält  man  auch ,  wenn  man  nach 
Borns  (1888)  Vorschlag  Bismarck braun  in  eine  dünne,  alkoho- 
lische S  c  h  e  1 1  a  c  k  1  ö  s  u  n  g  schüttelt  und  die  Farbe  auf  die  Definier- 


XXII,  4.  Peter:  Der  Anstrich  der  Kiclitebene.  533 

tläche   aufträgt.     Der    Überzug    löst    sich    iu   Alkohol ,    verträgt    also 
kein  Nachfärben  der  Schnitte. 

4)  Str^^sser  (1887)  füllte  die  Ritzen  der  Richtebene  mit  der 
Paste  der  blauen  Glasschreibstifte  von  Faber  aus. 
Diese  Masse  gab  mir  sehr  gute  Resultate ;  ich  schnitt  sie  aus  den 
Stiften  heraus,  löste  sie  in  Chloroform  und  bestrich  damit  dünn  die 
Definierfläche.  Es  ist  noch  nötig,  wie  Strasser  auch  angibt,  die 
Paste  mit  einer  dünnen  alkoholischen  Schellackli)sung  zu  fixieren, 
da  sonst  die  Farbe  nicht  hält.  Hat  man  aber  die  Fixierung  vor- 
genommen, so  erhält  man  im  Schnitt  eine  sehr  scharfe,  dunkelblaue 
Linie.  Die  Schnitte  lassen  sich  nachfärben,  ohne  Schädigung  für 
die  Richtlinie ;  auch  auf  Celloidin  haftet  die  Farbmasse,  die  man  auf 
die  abgetrocknete  Fläche  des  Blockes  aufstreicht ;  die  Celloidiuschnitte 
können  ebenfalls  nachgefärbt  werden. 

Ein  wenig  umständlicher  als  die  Lackarten  ist  die  Verwendung 
dieser  Paste  doch,  da  sie  erst  gelöst  und  dann  fixiert  werden  muß. 

5)  Schwarze  Ölfarbe  ist  von  Kaschtschenko  (1886  und 
1887)  und  von  Strasser  (1887)  angewendet  Avorden. 

a.  Der  russische  Forscher  verdünnte  die  Ölfarbe  „Lam- 
pe n  s  c  h  w  a  r  z  "  mit  Terpentin  (anfangs  empfahl  er  aufs  zehnfache 
zu  verdünnen ,  später  nur  einen  geringen  Zusatz  zu  nehmen)  oder 
Xylol.  Mit  dieser  Masse  bestrich  er  die  Richtebene,  ließ  trocknen 
und  hüllte  sie  in  den  sekundären  Paraffiuttberzug  ein.  Fixation  wird 
nicht  erwähnt.  Diese  Richtlinie  hält  das  Nachfärben  der  Schnitte 
unverändert  aus,  ist  aber  nicht  besonders  scharf,  sondern  ähnelt  den 
mit  Ruß  hergestellten  Definierlinien.  Auch  bleibt  die  Farbe,  wenn 
der  sekundäre  Paraffinüberzug  sich  beim  Schneiden  ablöst,  was  mir 
hier  vorgekommen  ist,  nicht  völlig  auf  der  Richtebene  haften,  sondern 
klebt  zum  Teil  an  dem  abgehobenen  I'araffin,  so  daß  die  Linie 
doppelt  erscheint ;  dies  ist  wohl  auf  Rechnung  des  mangelnden 
Fixierens  zu  schieben. 

b.  Komplizierter  ist  Strassers  Vorschrift :  „Einreiben  der  Ab- 
guß-(Richt-)fläche  mit  dunkler  Ölfarbe  (Lithographenschwarz 
z.  B.)  von  der  Konsistenz  der  Tubenfarben ;  Reinigen  der  Haupt- 
fläche durch  vorsichtiges  Abwaschen  mit  einer  Mischung  von  Glyzerin 
und  Alkohol,  Trocknenlassen,  Firnissen  mit  sehr  verdünnter  alko- 
holischer Schellacklösung."  Das  Einreiben  der  Definierfläche  wird 
man  wohl  besser  durch  das  schonendere  Bestreichen  mit  einem 
weichen  Pinsel  ersetzen.  Das  Resultat  ist  das  gleiche  wie  bei 
Kaschtschenko  s    Methode:     eine     bri^ckelige ,     unscharfe    Richtlinie, 


534  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  XXII,  4. 

welche  das  Nachfärben  aushält ;  ein  Vorzug  vor  derselben  ist  das 
Firnissen ,  wodurch  die  Farbe  au  der  Fläche  festgehalten  wird ,  ein 
Nachteil  die  Umständlichkeit  des  Verfahrens. 

6)  Auch  schwarze  Temperafarbe  (N  eutr  alschwarzi 
ist  empfohlen  worden.  Ich  habe  selbst  eine  brauchbare  Anwendungs- 
weise beschrieben  (1898),  die  ich  mit  Professor  Born  ausprobiert 
hatte.  Es  werden  10  Tropfen  Mayer  scher  Klebmasse  aus  frischem 
Hülmereiweiß,  1  Tropfen  einprozentige  Essigsäure  und  Neutralschwarz 
soviel ,  daß  die  Mischung  dünnflüssige  Konsistenz  erhält ,  verrieben 
und  auf  die  Richtfläche  aufgetragen.  ^/^  Stunde  Trocknen  auf  dem 
Wärmeschrank,  Tauchen  in  absoluten  Alkohol,  abermaliges  Trocknen 
^1^  Stunde  lang,  Firnissen  mit  Schellackfixativ,  Trocknen,  sekundärer 
Paraffinüberzug.  Die  Methode  hat  mir  beim  Modellieren  gute  Dienste 
geleistet;  beim  Nachfärben  leidet  die  Richtlinie  nicht.  Doch  ist 
dieselbe  auch  nicht  sehr  sauber,  wenngleich  etwas  exakter  als  bei 
Anwendung  der  Ölfarbe,  und  so  habe  ich  das  komplizierte  Verfahren 
verlassen  zugunsten  anderer  einfacherer. 

7)  Vielfach  ist  Ruß  zur  Herstellung  einer  Definierlinie,  welche 
beim  Nachfärben  der  Schnitte  nicht  leidet,  benutzt  worden.  Alle 
diese  Verfahren  leiden  darunter,  daß  ein  Hantieren  mit  Ruß  immer 
Unsauberkeiten  im  Gefolge  hat.  Auch  kann  die  Linie  sich  an 
Exaktheit  nicht  mit  der  durch  Lack  hergestellten  messen.  Es  ist 
nicht  immer  zu  vermeiden,  daß  Partikelchen  des  Rußes  sich  los- 
lösen und  die  Schnitte  verunreinigen.  Zumal  beim  Nachfärben  geht 
stets  etwas  von  dem  Ruß  verloren  und  macht  die  Linie  unvollständig. 
Die  Schnitte  müssen  übrigens  mit  Eiweiß-Cllyzerin  aufgeklebt  werden, 
da  der  Ruß  sonst  nicht  haftet. 

Ruß  stellt  man  sich  nach  der  „Enzyklopädie  der  mikroskopi- 
schen Technik"  am  besten  selbst  her,  indem  man  Terpentinöl  oder 
Kampfer  verbrennt  und  den  Ruß  mittels  einer  Glas-  oder  Metall- 
glocke auffängt. 

a.  Am  saubersten  und  beständigsten  wird  die  Richtlinie  noch, 
wenn  man  mit  Neumayer  (1890)  den  Ruß  mit  etwas  Zaponlack 
mischt.  So  läßt  sich  eine  zarte,  ziemlich  gleichmäßige,  das  Nachfärben 
gut  aushaltende  Richtlinie  herstellen.  Ein  in  Zaponlack  getauchter  Pinsel 
mengt  die  Flüssigkeit  mit  dem  auf  der  Platte  befindlichen  Kohlenstaub 
und  trägt  die  Farbe  in  dünner  Schicht  auf  die  Richtebene  auf. 

b.  RoETHiG  (1904)  nimmt  in  gleicher  Weise  Kampferruß  mit 
Chloroform  auf.  Die  angestrichene  Richtebene  läßt  er  24  Stimden 
trocknen.     Die  Linie  ähnelt  der  mit  Zaponlack  hergestellten. 


XXII,  4.  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  535 

c.  Born  (1888)  brachte  anfangs  den  Ruß  trocken,  mittels  eines 
quer  abgestutzten  dicken  Pinsels,  auf  die  Riclitfläclie ,  bestäubte  die 
Ebene  mit  einer  dünneu  alkoholischen  Schellacklösung  und  bestrich 
sie  dann  noch  einmal  mit  derselben  Flüssigkeit.  Das  Schellack- 
häutchen  trocknet  in  5 — 10  Minuten.  Die  Richtlinie,  welche  ich 
auf  diese  Weise  hergestellt  habe  —  nur  habe  ich  den  Schellack 
gleich  vorsichtig  aufgestrichen  —  gibt  den  eben  erwähnten  wenig  nach. 

d.  Später  zog  Born  (Born  und  Peter  1898)  eine  Auf- 
schwemmung von  Ruß  in  e i n p r o z e n 1 1  g e r  C e  1 1  o i d i u - 
lösung  vor,  nach  Gaupps  Vorschrift.  Entweder  wird  Ruß  mit 
einem  Pinsel  im  Uhrschälchen  mit  Celloidinlösung,  die  durch  Alkohol 
absolutus  verdünnt  ist,  gemischt  und  damit  die  Richtebene  bestrichen, 
oder  Ruß  wird  in  einprozentige  Celloidinlösung  geschüttet,  ordentlich 
umgeschüttelt  und  mittels  Zerstäubers  auf  die  Definierfläche  geblasen. 
In  beiden  Fällen  empfiehlt  es  sich  die  angetrocknete  Fläche  noch 
mit  einer  Schicht  Schellackfixativ  zu  bedecken,  welche  das  Anhaften 
des  sekundären  Paraffinüberzugs  begünstigt.  Die  Richtlinie  ist  ziem- 
lich grob  und  bröckelig,  teilt  also  die  Nachteile  jeder  Rußlinie. 

8)  Endlich  muß  ich  noch  eine  Farbmasse  erwähnen,  die  Pro- 
fessor Born  und  ich  anwandten,  um  die  Richtfläche  von  Celloidin- 
blöcken  anzustreichen,  (Born  und  Peter  1898)  übrigens  ist  dieselbe 
auch  für  Paraffinblöcke  verwendbar.  10  Teile  Preußischblau 
werden  mit  50  Teilen  Terpentinöl  verrieben  und  mit  150  Teilen 
Äther  aufgenommen.  Die  etwas  getrocknete  Definierebene  wird 
damit  dünn  bestrichen.  Da  es  uns  früher  nicht  gelingen  wollte,  einen 
anderen  brauchbaren  Anstrich  für  Celloidin  zu  erhalten,  so  benutzten 
Avir  diese  Farbe  trotz  zweier  Unannehmlichkeiten :  bei  der  Herstellung 
ist  nämlich  ein  Verstreuen  des  Preußischblau  nicht  zu  vermeiden; 
auch  setzt  sich  der  Farbstoff  nach  einigen  Monaten  ab,  ohne  daß 
man  durch  Schütteln  wieder  die  ursprüngliche  Flüssigkeit  herstellen 
könnte.  Die  Linie  ist  scharf  und  ähnelt  der  mit  der  Faber  sehen 
Glasstiftpaste  angefertigten. 

Zählen  wir  die  besprochenen  Farbmasseu  nach  dem  Grade  ihrer 
Anwendbarkeit  auf,  so  sind: 

1)  für  alle  Fälle ,   für  Paraffin  und  Celloidin  empfohlen  worden 

a.  die  Paste  der  blauen  Faber  scheu  Glasstifte, 

b.  Preußischblau  in  Äther. 

2)  Nur  für  Paraffinblöcke  ist  verwendbar : 
a.    mit  Möglichkeit  des  Nachfärbens 


536  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  XXII,  4. 

n.    Ölfarbe  nach  Kaschtschenko  oder  Strasser, 

/)'.    Temperafarbe, 

y.    Ruß  in  verschiedenen  Anwendungsformeu. 

b.    ohne  Möglichkeit  des  Nachfärbens 
a.    Alkohollack, 
ß.    Schellacklösung  mit  Bismarckbraun. 

Die  Flüssigkeit  nun ,  welche  ich  für  alle  Zwecke ,  für  Paraftin- 
oder  Celloidinblöcke  geeignet  halte  ,  ist  ein  Schuhlack  „  N  u  b  i  a  n 
Waterproof  Blacking",  den  ich  schon  früher  an  Stelle  des 
Hutstein  sehen  Alkohollackes  empfohlen  hatte.  Das  Präparat  ist 
englischer  Herkunft  (prepared  by  the  Nubian  Manufacturing  Co., 
Ltd. ,  Lorrimore  Buildings ,  Lorrimore  St. ,  London  S.  E.)  und  in 
den  größeren  Scliuhwarengeschäften  zu  haben ;  auch  hat  sich  Herr 
Dr.  Gtrübler- Leipzig  auf  meine  Bitte  hin  freundlichst  bereit  erklärt, 
den  Lack  vorrätig  zu  halten.  Wegen  des  schnellen  Trocknens  be- 
wahre man  den  Lack  luftdicht  verschlossen  auf,  gieße  ihn  also  aus 
der  Originalflasche  in  eine  andere  mit  engem  Hals,  welche  fest  ver- 
korkt wird. 

Die  Anwendungsweise  ist  höchst  einfach.  Man  taucht  einen 
feinen,  weichen  Pinsel  in  die  Flasche ,  streicht  ihn  etwas  ab  und 
fährt  schnell  einmal  über  die  Definierebene  des  Paraffinblocks  oder 
des  etwas  abgetrockneten  Celloidinblocks  herüber.  Der  Überzug  soll 
ganz  dünn  sein  —  auch  hier  wird  die  Richtlinie  um  so  eleganter, 
je  feiner  der  Lack  aufgetragen  wird  — ,  er  soll  das  Paraffin  durch- 
scheinen lassen,  darf  also  nur  grau  erscheinen.  Er  trocknet  fast 
augenblicklich,  und  schon  nach  wenigen  (5)  Minuten  kann  man  den 
sekundären  Paraffinüberzug  über  den  Block  anfertigen.  Derselbe 
haftet,  wenn  das  Paraffin  die  richtige  Temperatur  (75*^)  hat,  fest 
an  Block  und  Definierebene.  Vor  dem  Auflösen  des  Paraffins  aus 
den  Schnitten  muß  der  Objektträger  in  absoluten  Alkohol  getaucht 
werden,  da  die  Linie  sich  sonst  kräuseln  kann.  Im  übrigen  ist  die 
Behandlung  der  Schnitte  durchaus  die  gewöhnliche. 

Im  Schnitt  erscheint  die  so  hergestellte  Richtlinie  als  scharfe, 
schwarze  Zackenlinie,  welche  sehr  genau  nachgezeichnet  werden  kann. 
Sie  ist  ein  wenig  dicker,  vielleicht  auch  etwas  heller,  als  die  mit 
dem  Hutstein  sehen  Alkohollack  angefertigte,  so  daß  letztere  für  nicht 
nachzufärbende  Präparate  noch  vorzuziehen  wäre ;  indes  bestimmt 
mich  die  Empfindlichkeit  des  Hutstein  sehen  Lackes  und  der  Wunsch, 
einen  für  alle  Fälle  anwendbaren  und  allen  Ansprüchen   genügenden 


XXII,  4.  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  537 

Anstrich  der  Richtebene  zn  besitzen,  den  Nubian  Waterproof  Blacking 
als  allgemein  brauchbaren  Überzug  der  Definierebene  zu  empfehlen. 
Dies  wird  bewiesen  durch  die  Verscbiedenartigkeit  der  Behand- 
lung, der  ich  die  Präparate  unterwerfen  konnte,  ohne  daß  die  Richt- 
linie gelitten  hatte.  Icli  habe  sowohl  Versuche  an  Paraffin-  als  auch 
an  Celloidinblöcken  angestellt. 

I.  Paraffinblöcke.  Die  Schnitte  wurden  mit  Wasser  oder 
mit  Eiweiß  -  Glyzerin  und  Wasser  auf  den  Objektträger  aufgeklebt. 
Darauf  wurde  das  Präparat  ohne  Nachfärbung  eingedeckt  oder  mit 
Hämatoxylin-Eosin  oder  Pikrokarmin  iiachgefärbt.  Ich  ließ  die  Schnitte 
absichtlich  tagelang  in  Alkohol  oder  Wasser,  ohne  eine  Veränderung 
an  der  Linie  wahrzunehmen.  Dabei  sei  bemerkt,  daß  ich  das  früher 
empfohlene  Überstreichen  der  angeklebten  Schnittserien  mit  Strassers 
Rizinusöl-Kollodium  jetzt  unterlasse. 

II.  Ce  Heidin.  Auch  die  Celloidinschnitte  deckte  ich  ohne 
Färbung  ein  oder  führte  sie  durch  Hämatoxylin-Eosin.  Die  Linie 
behielt  ihre  Farbe.  Eigentlich  bedarf  ja  nach  einer  Hämatoxylin- 
färbung  der  Celloidinblock  keinen  Anstrich  mehr,  da  durch  dieselbe 
das  Celloidin  selbst  einen  leichten  Ton  erhält ,  und  sein  Rand  deut- 
lich sichtbar  ist,  doch  kann  man  der  Sicherheit  wegen  noch  den 
Lack  auftragen. 

Figur  1  und  2  auf  Tafel  III  und  IV  zeigen  Schnitte  durch 
Eidechsenembryonen,  welche  Richtlinien,  mittels  Nubian  Blacking 
hergestellt,  besitzen.  Die  Embryonen  wurden  mit  Boraxkarmiu  durch- 
gefärbt und  in  Paraffin  eingebettet.  In  Figur  1  sind  bei  etwa  zwölf- 
facher Vergrößerung  mehrere  Schnitte  einer  Sagittalserie  abgebildet, 
welche  mit  Eiweiß-Glyzerin-Wasser  aufgeklebt  und  mit  Hämatoxylin- 
Orange  nachgefärbt  wurden.  Jeder  Schnitt  besitzt  eine  gleich  scharfe 
Definierlinie.  Figur  2  zeigt  einen  Schnitt  durch  eine  andere  Serie  bei 
stärkerer  Vergrößerung ;  er  ist  nicht  nachgefärbt  worden.  Die  Photo- 
gramme zu  diesen  Abbildungen  verdanke  ich  der  Freundlichkeit  von 
Herrn  Professor  Sobotta  ,  dem  ich  auch  hier  für  seine  bereitwillige 
Hilfe  herzlich  danke. 

Nubian  Waterproof  Blacking  empfiehlt  sich  also : 

1)  Durch  die  Schärfe  und  Sauberkeit  der  Richt- 
linie, welche  besonders  die  der  R  u  ß  s  u  s  p  e  n - 
s  i  0  n  e  n  bedeutend  übertrifft; 

2)  Der  Lack  ist  für  alle  Fälle  anwendbar:  für 
Paraffin-  wie  für  Celloidinblöcke,  bei  Stück- 
färbung,    wie    Schnittfärbung,     bei     Aufkleben 


538  Peter:  Der  Anstrich  der  Richtebene.  XXII,  4. 

der    Paraffiuscliui tte    mittels    Wasser    oder   Ei- 
weiß-Glyzerin nnd  Wasser; 
3)  Endlich    ist    die  A  n  w  e  n  d  u  n  g  s  w  e  1  s  e  die  denkbar 

einfachste. 
Somit   erfüllt   dieser  Lack  die  eingangs   aufgestellte  Forderung ; 
speziell    möchte    ich    noch   darauf  aufmerksam   machen,    wie   einfach 
die    Prozedur    bei     nachzufärbenden    Objekten    wird,    welche    früher 
einen  umständlichen  und  schmutzenden  Kußüberzug  verlangten. 


Verzeichnis  der  zitierten  Literatur. 

1888.    Bork,  G. ,    Noch   einmal   die   PlattenmodeUiermethode    (Zeitschr.   f. 
wiss.  Mikrosk.  Bd.  V). 

1898.  Born,  G.,  u.  Peter,  K.,  Zur  Herstellung  von  Richtebenen  und  Richt- 

linien (Ebenda  Bd.  XV). 

1886.  Kaschtschenko  ,  N. ,  Methode   zur  genauen  Rekonstruktion  kleiner 

makroskopischer  Gegenstände  (Arch.  f.  Anat.  u.  phys.-anat.  Abt.). 

1887.  Derselbe.    Die  graphische  Isolierung  (Anat.  Anz.  Bd.  II). 

1899.  Neumayer,  L.  ,  Studie  zur  Entwicklungsgeschichte  des  Gehirnes  der 

Säugetiere  (Festschrift  f.  Kupffer). 

1898.  Peter,  K. ,  Die  Entwicklung  und  funktionelle  Gestaltung  des  Schä- 

dels von  Ichthyophis  glutinosus  (Morph.  Jahrb.  Bd.  XXV). 

1899.  Derselbe.    Demonstration  des  Bors-Peter  sehen  Verfahrens  zur  Her- 

stellung von  Richtebenen  und  Richtlinien  (Verhandl.  Anat.  Gesellsch. 
Tübingen). 

1903.  Derselbe.    Artikel  „Plastische  Rekonstruktion"  in  Enzyklopädie  der 

mikroskopischen  Technik. 

1904.  RoETHiG,  P.,  Handbuch  der  embryologischen  Technik.     Wiesbaden. 
1887.    Strasser,  H. ,  Über  die  Methoden  der  plastischen  Rekonstruktion 

(Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  IV). 

Greifswald,  den  '20.  Oktober  1905. 

[Eingegangen  am  21.  Oktober  1905.] 


XXII,  4.     Cagnetto:  Per  la  colorazioiie  delle  cellule  ciomofile  etc.     539 


[Istituto  di  Anatomia  Patologica  della  R.  Universitä  di  Padova.    Diretto  dal 

Prof.  A.  BoNOME.l 


Per  la  colorazioiie  delle  cellule  cromofile 
delFHypopliysis  cerebri. 

Nota  di  tecnica  istologica 

del 
Dr.  Giovauni  Cagiietto, 

aiuto  e  liboro  docente. 

L'estensione  acquistata  in  questi  Ultimi  tempi  dalle  ricerche 
auatomiclie  e  sperimentali  sull' hy  popliy  sis  cerebri  ha  fatto 
sentire  negli  istologi  piii  vivo  il  bisogno  di  un  metodo  facile  e  ra- 
pido,  che  serva  alla  dimostrazione  di  quelle  cellule  cromofile, 
suUa  cui  presenza  sembra  imperniarsi,  per  consenso  orraai  generale,  la 
funzione  della  parte  glandolare  di  quest'orgauo  tuttora  cosi  enigmatico. 

II  piü  semplice  degli  artifici  ancora  in  uso  e  quello  stesso  che  ha 
servito  al  Flesch,  ^  nei  suoi  vecchi  studi  sulla  glandola  pituitaria,  per 
differenziare  l'una  dall'altra  le  due  varieta  fondamentali  di  cellule  del 
lobo  glandolare:  iB  cellule  cromofile  e  le  cromofobe.  E  il 
metodo  molto  elementare  e  comodo  della  colorazione  del  tessuto  con 
Teraatossilina- eosina . 

Col  perfezionarsi  della  tecnica  microscopica  altri  metodi  piii 
delicati  e  piü  spiccatamente  specific!  entrarono  nell'uso  comune  degli 
istologi.  In  Italia,  ad  es.,  ebbero  larga  applicazione  e  buona  for- 
tuna  quelli  del  Vassale'-  e  del  Galeotti^;  in  Germania  particolar- 
mente  il  metodo  di  Benda*,  il  quäle  del  resto  ha  trovata  auche  nel 
nostro  paese  tutt'affatto  recentemente  la  migliore  accoglienza. 


1)  Flesch,   Tageblatt   der   57.  Versammlung  deutscher  Naturforscher 
und  Ärzte  in  Magdeburg,  1884. 

^)  Vassale,    Rivista    sperimentale    di    J'reniatria,    1901,    Fase.   3—4, 

p.  1078. 

ä)  Galeotti,  Arch.  f.  mikrosk.  Anatomie  Bd.  XLVIII,  1896,  p.  305. 
*)  Benda,  Neurologisches  Zentralblatt,  1900,  p.  78G. 


540     Cagnetto:  Per  la  colorazione  delle  cellule  cromofile  etc.     XXII,  4. 

Impegnato  da  qualclie  tempo  in  alcune  ricerche  sistematiclie  di 
fina  anatomia  sul  lobo  glandolare  della  pituitaria  nello  stato  normale 
e  patologico,  lio  cercato  apportare  ai  metodi  tecnici  ora  in  uso  modi- 
iicazione  tale,  che  conciliasse  in  essi  l'economia  dei  reagenti  con  la 
celeritii  del  procedimeuto  di  colorazione.  Di  questa  desiderata 
semplificazione  di  metodo  ho  avuto  modo  di  valiitare  particolar- 
mente  i  vantaggi  in  quei  casi  nei  qiiali  gli  artifici  di  colorazione 
universalmente  adottati  non  rispondevano  perfettamente  allo  scopo  o 
in  quelli  altri  nei  qiiali  mi  premeva  il  bisogno  di  uu  raggnaglio 
soUecito  e  siciiro  intorno  allo  stato  di  maggiore  o  minore  attivitä 
funziouale  del  tessuto  glandolare  deiripofisi  su  preparati  in  serie. 
Siccome  penso  che  molti  di  coloro  che  si  occnpano  al  di  d'oggi  di 
questioni  attinenti  Tistologia  della  glandola  pituitaria  si  sieno  giä 
trovati  o  possano  trovarsi,  nei  corso  delle  loro  indagini,  in  circostanze 
analoghe  alle  mie,  non  credo  del  tutto  superfluo  il  dedicare  poche 
parole  all'  esposizione  del  metodo  ch'  io  da  qnalche  tempo  segiio 
nelle  mie  ricerche. 

Io  soglio  tissare  uua  meta  delF  ipofisi  umana  in  soliizione  di 
formolo  commerciale  al  10  ^/^  per  3 — 4  giorni,  rinnovando  il  liqnido 
dopo  le  prime  24  ore  ed  anche  prima,  se  si  e  fatto  rossigno.  II 
pezzo  tolto  dal  formolo  e  lavato  in  acqiia  corrente  per  qualche  mi- 
niito ,  viene  tosto  immerso  in  una  soliizione  acqnosa  dihiita  di  acido 
cromico  al  0,1  ^/^  per  dne  giorni  e  in  nuova  soliizione  cromica  al 
0,25 ^/q  per  altri  diie  giorni,  possibilmente  esponendo  il  liquido,  du- 
rante  qiiesto  tempo,  in  termostato  alla  temperatiira  di  37°.  La  for- 
miila  di  fissazione  non  varia  dal  metodo  gia  ricordato  del  Benda,  se 
non  per  qiianto  riguarda  la  titolazione  della  soliizione  cromica,  ch'io 
credo  eccessiva  se  portata  al  0,50°/o,  come  il  Benda  prescrive. 
L'acido  cromico  molto  dihiito  penetra  piii  profondamente  nei  tessuto, 
poiche  non  determina ,  alla  superficie  del  pezzo ,  la  formazione  di 
quella  crosticina  coriacea,  impermeabile,  che  inevitabilmente  si  costi- 
tiiisce  allorquando  il  titolo  della  soliizione  cromica  e  im  po'alto :  in 
tal  caso  e  facile  infatti  constatare  che  l'impregnazione  del  pezzo  si 
limita  al  solo  strato  piü  superficiale,  senza  raggiungere  le  parti  pro- 
fonde.  AI  contrario,  con  l'acido  cromico  diluito  si  ottiene  in  ogni 
caso  una  uniforme  e  completa  impregnazione  del  tessuto  anche 
se  il  pezzo  e  discretamente  vohiminoso  (2 — 3  cm  quadrati  di  larghezza 
per  3 — 4  mm  di  spessore). 

Dopo  la  cromizzazione  il  pezzo  va  lavato  in  acqua  fiuo  a 
che   non  ceda  quasi  piü   acido  cromico  (30 — 40  ore),  ed   in    seguito 


XXII,  4.     Cagnetto:  Per  la  colonizione  delle  cellule  cromofile  etc.     541 

vien  passato  attraverso  alla  serie  degli  alcool  fino  a  disiclratazione^ 
chiariiicato  in  xilolo  ed  incluso  in  paraffina. 

A  tal  pnnto  l'ipofisi  sarebbe  pronta  per  applicarvi  la  colorazione 
del  Benda  airalizariuato  di  soda  e  bleu  di  toluidina :  pero  io  pre- 
ferisco  procedere  diversamente. 

Le  sezioni  microtomiche  sottili,  attaccate  al  portaoggetti  con 
albume  glicerinato  molto  diluito  (goccie  2  in  un  ditale  d'acqua),  son 
colorite  per  5' — 10'  con  ima  soluzione  satura  acquoso-anilinata  di  fuxina 
acida  e  riscaldate  nel  frattempo  cautamente  alla  iiamma  di  una  lampada 
a  spirito  tincbe  si  soUevauo  i  primi  vapori.  Quando  il  portaoggetti  e 
freddo ,  si  toglie  la  fuxina  con  un  filo  d'acqua  e  si  differenzia  per 
4' — 5'  mediaute  una  soluzione  acquosa,  satura  a  freddo,  di  acido 
picrico.  E  opportuno,  durante  il  differenziamento,  impartire  al  porta- 
oggetti leggieri  movimenti  di  oscillazione  laterale  cosi  da  agevolare 
la  decolorazione  della  sezione,  procurando  che  essa  rimanga  bagnata 
costantemente  da  soluzione  picrica  fresca.  Disponendo  di  sezioni  un 
po'  spesse  e  utile  procedere  al  differenziamento  sotto  l'azione  di  un 
temperato  calore ,  tenendo  il  preparato,  ad  es. ,  sopra  una  lampada 
BuNSEN  ad  ima  certa  altezza  dalla  fiamma :  lo  stesso  risultato  con  un 
po'  di  pazienza,  impiegando  qualche  minuto  di  piü,  lo  si  ottieue  del 
resto  anche  col  differenziamento  a  freddo.  AUorquando  la  sezione 
ha  acquistato  un  color  rosso-mattone  leggermente  tendente  al  gial- 
liccio ,  si  toglie  la  soluzione  picrica  sotto  il  filo  d'acqua  e  si  vede 
tosto,  durante  il  lavaggio,  il  color  rosso-mattone  trasformarsi  in  rosso 
chiaro.  E  questa  la  tinta  confaciente :  qualora  il  preparato  dopo  il 
lavaggio  risultasse  colorito  ancoi'a  troppo  intensamente ,  converrebbe 
prolungare  il  differenziamento  fino   ad    offenere  la  tinta  voluta. 

In  seguito  si  disidrata  rapidamente  con  alcool  assoluto, 
asciugando  la  sezione  con  carta  bibula,  si  rischiara  con  lo  xilolo  e 
si  monta  in  balsamo. 

10  sento  di  poter  affermare  con  tutta  sicurezza  che  Tapplica- 
zione  del  metodo  di  colorazione  suesposto  all'ipofisi  fissata  in  formolo- 
acido  cromico  rappresenta ,  per  il  rilievo  delle  cellule  cro- 
mofile, un  procedimento  meno  infido  sia  del  metodo  originale  del 
Benda  che  di  quello  stesso  del  Galeotti,  eh'  e  cosi  prezioso  per 
altri  dettagli  citologici  dell'ipofisi.  A  me ,  ripeto,  e  accaduto  spesso 
di  veder  colorite  distintamente  le  cellule  cromofile  di  ipofisi,  nelle 
quali  i  suindicati  metodi  mi  avevan  dato  risultato  incerto  e  pre- 
parazioni  di  complesso  poco  dimostrative. 

11  procedimento  da  me  adottato,  oltre  che  avere  il  doppio  pregio 


542    Cagnetto:  Per  la  colorazione  clelle  cellule  cromofile  etc.    XXII,  4. 

deU'economia  nel  fissatore  e  della  rapidita  nella  colorazione,  ha  sugli 
altri  due  sopradetti  una  decisa  superioritji :  quella  di  dare  a  colpo 
d'occhio  all'osservatore  una  sicura  nozione  del  n  u  m  e  r  o  delle  cellule 
cromofile  esistenti  in  una  data  sezione  di  ipofisi.  Con  esso  si  colo- 
rano,  infatti,  specificamente  in  rosso-vivo  brillante 
le  sole  cellule  cromofile:  le  cellule  pallide,  prive  di  granula- 
zioni  protoplasmatiche ,  prendono  una  tinta  caffe-latte ,  il  connettivo 
una  tinta  rosa,  come  nel  metodo  di  v.  Gieson,  e  le  emazie  un  colore 
aranciato  cupo.  La  constatazione  della  quantitä,  sia  pur  approssima- 
tiva,  degli  epiteli  granulosi  presenti  in  un  preparato  di  ipotisi  riesce 
perciö  oltremodo  facile ,  impiegando  a  tal  uopo  un  obbiettivo  di 
media  potenza,  come,  ad  es.,  il  No.  5  Koristka  o  anche  un  obbiet- 
tivo di  minor  forza. 

Questo  trattamento  ha  eziandio  il  vantaggio  di  dare  buoni 
risultati  anche  nelle  mani  di  un  tecnicista  poco  esperto :  esso  riduce 
il  metodo  di  colorazione  delle  cellule  cromofile  ad  una  pratica  asso- 
lutamente  elementare,  evitando  le  lungaggini  e  le  difficolta  del  me- 
todo di  Benda,  che  abbisogna  di  una  certa  maturita  nel  preparatore, 
e  quelle  non  sempre  facilmente  superabili  del  metodo  originale  del 
Galeotti  alla  fuxina  e  verde  di  metile. 

Riassumo  qui    in    forma    cronologica  e  sintetica  il  procedimento. 

1*^  Fissazione  di  una  metji  dell'ipofisi  in  formolo 
commerciale  al  IO^/q  per  3 — 4  giorni. 

2^  Passaggio  in  soluzione  cromica  al  0,10%  per 
due  giorni    ed  al  0,25%  per  altri  due  giorni. 

3^^    Lavaggio  prolungato  in  acqua. 

4*^    Serie  degli  alcool  fino  a  disidratazione. 

5^    Xilolo. 

6°    Par  a  f  finazione. 

7^  Trattamento  delle  sezionisparaffinate,acaldo, 
per  5'^ — -10'  con  soluzione  acquoso-anilinata  satura  di 
fuxina  acida.  Si  prepara  il  liquido  in  questo  modo. 
Si  sciolgono  a  caldo  (70^ — 80**)  in  una  Capsula  di  por- 
cellana,  cc3  di  olio  di  anilina  in  cc  100  di  acqua  dis- 
tillata  e,  lasciata  raffreddare  la  soluzione,  la  si  versa 
a  poco  a  poco  in  un  mortaio  contenente  gr  2  di  fuxina 
acida  finemente  polverizzata.  Si  adopera  la  miscela 
colorante  dopo  24  ore,  previa  filtrazione. 

8°    Lavaggio  in  acqua  corrente. 


XXII,  4.     Cagnetto:  Per  la  colorazione  delle  cellule  cromofile  etc.    543 

9^  Diff er enziamento  per  4'  —  o'  con  una  soluzione 
acquosa  satura  a  freddo  di  acido  picrico. 

10^    Nuovo  lavaggio  in  acqua  corrente. 

11*^  Rapida  disidratazione  in  alcool  assoluto; 
xilolo  e  balsamo  del  Canad;i. 

II  metodo  si  presta  bene  anche  pel  rilievo,  nella  tiroide,  delle 
cosidette  Kolloidzellen  di  Langendorff  ed  inoltre  per  lo  studio 
delle  isole  di  Langerhans  del  pancreas,  le.  quali  spiccano  sul 
resto  del  tessuto  per  un  bei  color  rosso-vivo,  al  pari  dei  nidi  di 
cellule  cromofile  dell'  ipofisi. 

[Eingegangen  am  30.  Dezember  1905.] 


544  Referate.  XXII,  4. 


Referate. 


1.   Mikroskop  und  mikroskopische  Apparate. 

Abbe ,  E.,  Gesammelte  Abhandlungen.  Band  II.  (Wissen- 
schaftliche Abhandlungen  aus  verschiedenen  Gebieten,  Patent- 
schriften, Gedächtnisreden.)  Jena  (Gustav  Fischer)  1906; 
IV  +  346  pp.,   7  Tfln.  u.   16  Fig.  i.  Text.  geb.   9  M. 

Der  Herausgeber  Dr.  E.  Wandersleb  hat  in  diesem  Bande  die 
wissenschaftlichen  Arbeiten  Abbes  gesammelt,  die  im  Gegensatze  zu 
den  Abhandlungen  des  ersten  Bandes  nicht  speziell  dem  Gebiete  der 
Mikroskopie  angehören.  Neben  Abbes  erster  wissenschaftlicher  Publi- 
kation, seiner  Dissertation,  enthält  der  vorliegende  Band  eine  Reihe 
von  Veröffentlichungen  astronomischen  und  astrophysikalischen  Inhalts, 
Arbeiten  über  einige  für  den  Physiker,  speziell  für  den  Optiker  be- 
stimmte Meßinstrumente ;  so  z.  B.  die  Beschreibung  des  Spektro- 
meters,  des  Refraktometers  und  des  Fokometers ;  ferner  zehn  Patent- 
schriften, die  zwar  von  der  Firma  C.  Zeiss  eingereicht  worden  sind, 
aber  von  Abbe  herrühren,  und  schließlich  drei  Gedächtnisreden,  näm- 
lich auf  Joseph  Fraunhofer  ,  Carl  Zeiss  und  Hermann  Schäffer. 
Für  den  Mikroskopiker  von  besonderem  Interesse  ist  eine  Arbeit  über 
die  Berechnung  des  wahrscheinlichen  Fehlers  bei  der  Bestimmung 
von  Mittelwerten  durch  Abzählen. 

Henker  {Jena). 


XXII,  4.  Referate.  545 


2.    Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

Böhmer ,  C. ,  Anleitung  zur  Untersuchung  landwirt- 
schaftlich wichtiger  Stoffe.  Zum  Gebrauch 
in  landwirtschaftlichen  und  agrikulturchemi- 
schen Laboratorien  und  für  die  Praxis  zu- 
sammengestellt und  bearbeitet.  Berlin  (P.  Parey) 
1906.     135  pp.  ,3-50  M. 

Ein  vielseitiges  Büchlein,  das  in  anerkennenswerter  Kürze  über 
erprobte  Methoden  zur  Untersuchung  landwirtschaftlich  wichtiger  Stoffe 
berichtet.  Mechanische  und  chemische  Bodenanalyse ,  die  Unter- 
suchung der  künstlichen  Düngemittel  (Phosphorsäure- ,  Stickstoff-, 
Kalk-,  Kalibestimmung),  der  Futtermittel  und  der  Milch  und  die  Be- 
stimmung des  Zuckergehalts  der  Rübe  werden  besprochen.  ■ —  Hier 
und  da  wird  auch  das  Mikroskop  zu  Rate  gezogen. 

Küster  {Halle  a.  S.). 

Stoeltzuer,  W.,  Über  Metallfärbungen  verkalkter  Ge- 
webet eile  (ViRCHOws  Arch.  Bd.  CLXXX,  1905,  H.  2, 
p.  362  —  365). 
Verf.  hat  im  Jahre  1900  zusammen  mit  Salge  Untersuchungen 
darüber  angestellt,  welche  Resultate  man  erhält,  wenn  man  histo 
logische  Schnitte  denjenigen  Manipulationen  unterwirft,  die  man  in 
der  Photographie  anwendet,  um  an  belichteten  Chromsilberplatten 
das  photographische  Bild  hervorzurufen.  In  der  damaligen  Veröffent- 
lichung ist  es  unterlassen  worden,  mitzuteilen,  was  die  Methode  für 
Verkalkungen  leistet.  Da  die  Resultate  hierbei  gerade  sehr  gute 
waren,  so  veröffentlicht  Verf.  jetzt  die  Methode :  Die  Schnitte  kommen 
aus  destilliertem  Wasser  auf  5  Minuten  in  ein  zweites  Schälchen 
mit  destilliertem  Wasser ,  in  dem  man  einige  Tropfen  einer  Lösung 
von  Silbernitrat  verteilt  hat.  Nach  Abspülen  in  destilliertem  Wasser 
überträgt  man  die  Schnitte  in  eine  dünne  Lösung  von  z.  B.  Pyro- 
gallol,  in  welcher  augenblicklich  die  Silberfärbung  der  verkalkten 
Stellen  hervortritt.  Verf.  hat  .^un  diese  früheren  Untersuchungen 
dadurch  ausgedehnt,  daß  er  versuchte,  ob  nur  das  Silber  oder  auch 
andere  Metalle  eine  ähnliche  Affinität  besitzen.  Es  wurden  zu  diesem 
Zwecke  die  Schnitte  mit  der  wässerigen  Lösung  irgendeiner  Metall- 
verbindung   behandelt    und    dann    nach    gründlichem   Auswaschen    in 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  -1.  35 


546  Referate.  XXII,  4. 

destilliertem  Wasser  der  Einwirkung  eines  Reagens  ausgesetzt,  das 
mit  der  betreffenden  Metallverbindung  einen  charakteristischen,  mög- 
lichst dunklen  Niederschlag  gibt.  Es  ergab  sich ,  daß  alle  unter- 
suchten Metalle  (Silber,  Blei,  Kobalt,  Kupfer,  Eisen)  eine  starke 
Affinität  zu  verkalktem  Gewebe  haben,  daß  also  die  Affinität  des 
Silbers  nur  einen  speziellen  Fall  einer  viel  allgemeineren  Erscheinung 
darstellt.  ScMefferdeckefr  {Bonn). 

Halphen,  G.,  et  Riebe,  A.,  Contribution  a  l'etude  des 
teintures  histologiques  (C.  R.  Acad.  Sciences  Paris 
t.  CXL,  1905,  no.  21,  p.  1408—1410). 
Die  Verfi",  haben  versucht,  unsere  jetzigen  Färbungsprozesse 
durch  Versuche  vom  chemischen  Staudpunkte  aus  zu  erklären.  Zu 
diesem  Zwecke  haben  sie  die  Einwirkung  von  Farbstofien  auf  Schnitte 
von  verschiedenen  tierischen  Geweben  nach  Alkoholhärtung  unter- 
sucht, indem  sie  immer  auf  dieselbe  Weise  arbeiteten :  der  Farbstoff 
wurde  in  dem  Tausendfachen  seines  Gewichtes  an  Wasser  gelöst  und 
die  Färbung  wurde  direkt  in  dieser  Farblösung,  bei  gewöhnlicher 
Temperatur  ausgeführt.  Der  Überschuß  an  Farbstoff"  wurde  durch 
Wasser  entfernt ;  entwässert  wurde  nicht  mit  Alkohol ,  welcher  die 
Farbstoffe'  löst,  sondern  mit  einer  Mischung  von  einem  Volumenteil 
absoluten  Alkohols  und  3  bis  4  Volumeuteilen  Petroläther,  eine 
Mischung,  die  das  Wasser  auszieht,  ohne  den  Farbstoff  in  merkbarer 
Weise  zu  lösen.  Es  ergab  sich ,  daß  die  Zufügung  von  geringen 
Säuremengen  zu  Lösungen  von  „sauren"  Farbstoffen  deren  färberische 
Fähigkeit  erhöht;  ebenso  wurde  bei  den  basischen  Farbstoffen  die 
Färbbarkeit  durch  geringe  Mengen  von  Alkali  erhöht.  Indem  die 
Verff.  diese  Tatsachen  praktisch  verwendeten,  gelang  es  ihnen ,  mit 
demselben  Farbstoffe  verschiedene  elektive  Färbungen  auszuführen 
und  auch  mit  sauren  Farbstofien  Färbungen  zu  erhalten,  welche  man 
gewöhnlich  nur  mit  basischen  Farbstoffen  erhält,  besonders  eine 
elektive  Färbung  der  Nucleinsäuren  der  Zellkerne  .mit  sauren  Farb- 
stoffen. Diese  Resultate  erklären  sich  leicht,  wenn  man  an  die 
gleichzeitig  sauren  und  basischen  Eigenschaften  (proprietes)  der 
Albuminoide  denkt.  Da  jeder  Farbstoff  ein  Salz  des  färbenden 
Prinzipes  ist ,  je  nachdem  sauer  oder  basisch ,  so  muß  das  Prinzip 
sich  unter  bestimmten  Bedingungen  auf  der  wirksamen  basischen 
oder  sauren  Gruppe  des  Albuminpids  fixieren  können,  und  diese  Be- 
dingungen hängen  ab  von  der  resp.  Kraft  dieser  wirksamen  Gruppen, 
von  ihrem  gegenseitigen  Einflüsse  "und  von  dem  Stabilitätsgrade  des 


XXII,  4.  Referate.  547 

Salzes ,  welches  den  Farbstoft'  darstellt.  Diese  Stabilität  aber  des 
Farbstoffes  kann  leicht  verändert  werden,  wenn  man  die  Zusammen- 
setzung des  Farbstoffbades  ändert.  Wenn  man  z.  B.  eine  minera- 
lische Base  auf  eine  basische  Farbe  einwirken  läßt,  so  wird  das 
färbende  Prinzip  frei  zu  werden  suchen  und  infolgedessen  leichter 
eine  Verbindung  mit  dem  sauren  Radikal  des  Albuminoids  eingehen, 
daher  dann  eine  stärkere  Färbung.  Wenn  man  umgekehrt  die  Lösung 
eines  sauren  Farbstoffes  ansäuert ,  so  wird  das  frei  gewordene 
Prinzip  sich  leichter  auf  dem  basischen  Teile  des  Albuminoids 
fixieren.  Legt  man  in  dasselbe  Farbbad  die  die  tierischen  Gewebe 
bildenden  Stoffe,  so  kann  man  feststellen,  daß  sie  in  verschiedenem 
Maße  die  Fähigkeit  besitzen  den  Farbstoff  zu  fixieren.  Man  kann 
daraus  schließen,  daß  die  sauren  und  basischen  Gruppen  der  ver- 
schiedenen Albumiuoide  verschiedene  chemische  Kraft  besitzen.  Es 
folgt  daraus,  daß  die  Untersuchung  der  Färbungsbedingungen  zu  der 
Feststellung  ihrer  relativen  Werte  führen  muß.  Um  diese  Werte 
abzuschätzen,  haben  die  Verff.  die  Wirkung  festzustellen  versucht, 
welche  die  Fixierungs-  und  Härtungsflüssigkeiten,  die  gewöhnlich  ver- 
wendet werden ,  auf  die  Gewebe  ausüben.  Sie  haben  so  gefunden, 
daß  das  Formol  und  die  Müller  sehe  Flüssigkeit  die  Kraft  der 
Einwirkung  der  sauren  und  basischen  Gruppen  der  Albuminoide 
wesentlich  verändern ;  dasselbe  gilt,  wenn  auch  in  geringerem  Grade, 
für  den  Alkohol  und  die  Wärme.  Man  mußte  daher  versuchen,  die 
Gewebe  auf  andere  Weise  zu  härten  als  mau  es  gewöhnlich  in  der 
Histologie  tut.  Die  Verff.  haben  die  Organstückchen  daher  bei  ge- 
wöhnlicher Temperatur  unter  Glocken  getrocknet,  indem  sie  Wasser 
anziehende  Substanzen  wie  Glyzerin  oder  noch  besser  Schwefelsäure 
gleichzeitig  unterstellen  und  eventuell  noch  Chloroform ,  um  durch 
dieses  die  Mikroben  zu  töten.  Von  solchen  Präparaten  augefertigte 
Schnitte  unterscheiden  sich  wesentlich  von  denen,  die  man  nach  den 
gewöhnlichen  Methoden  erhält.  Einige  von  ihnen  entfärben  all- 
mählich das  Fuchsin,  mit  welchem  sie  zuerst  gefärbt  worden  sind; 
sie  verlieren  diese  Eigenschaft,  wenn  man  sie  vor  der  Färbung  in 
Alkohol  legt.  Diese  Erscheinungen  scheinen  abhängig  zu  sein  von 
der  Gegenwart  von  proteolytischen  Fermenten  in  den  Präparaten, 
welche  fehlen,  wenn  man  die  Härtung  durch  Alkohol  bewirkt  hat. 
Die  Verff.  heben  schließlich  hervor ,  daß  in  den  Schnitten  von  in 
der  oben  angegebenen  Weise  getrockneten  Präparaten  weder  Kerne 
noch  Zellen  irgendwelcher  Art  direkt  oder  nach  Färbung  zu  sehen 
sind,  während  diese  Elemente  in  den  nämlichen  Schnitten  sofort  auf- 

35* 


548  Referate.  XXII,  4. 

treten,  wenn  mau  sie  vorher  mit  Alkohol  behandelt.    Die  Verflf.  werden 
ihre  Studien  fortsetzen.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Mark,   E.  L. ,    A    paraffine    bath    heated    by    electricity 
(American  Natural,  vol.  XXXVII,  1903,  no.  434,  p.  115—119 
w.   2  figg.). 
Verf.  beschreibt  ein  durch  Elektrizität  erwärmtes  Paraffinwasser- 
bad, dessen  Konstruktion  durch  zwei  Abbildungen  erklärt  wird.    Es 
muß  hier  dieserhalb   auf  das  Original  verwiesen  werden.     Es  kostet 
ein  solches  Bad  inklusive  der  zur  Erwärmung  dienenden  elektrischen 
Rollen    25    bis    30  Dollar.      Geliefert    werden    solche    Apparate    von 
Clark    and    Mills    23    Church    St. ,    Cambridge    und    543    Boylston 
St.,  Boston.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Ruzicka,  V.,    Über    tinktorielle    Differenzen    zwischen 
lebendem      und       abgestorbenem      Protoplasma 
(Pflügers    Arch.     Bd.    CVII,    1905,    H.    10—12,    p.  497 
—534). 
Verf.  hebt  hervor,  daß  bis  jetzt  zwei  Methoden  angegeben  worden 
sind,    die    zur    tinktoriellen    Differenzierung    zwischen    lebendem    und 
totem   Protoplasma   dienen   sollen:    von  Mosso^  und  von  Rhumbler.- 
Beide    beruhen    auf   der    Färbung    mit   Methylgrüu.      Beide    genügen 
nicht :  Es  geht  aus  ihnen  hervor,  daß  das  Methylgrün  imter  gewissen 
Bedingungen  zur  tinktoriellen  Veranschaulichung  des  Todes  der  Zellen 
herangezogen    werden   kann,  doch  wird  der  Zweck,  eine  tinktorielle 
Unterscheidung    der    lebenden    von    der    toten    zu  ermöglichen,  nicht 
erreicht.     Bei  der  Methode  von  Mosso  färben  sich  nicht  die  lebenden 
Zellen,  sondern  erst  die  absterbenden  und  toten,  weil  das  Methylgrün 
eine  rasche  Giftwirkung  entfaltet ;  daß  abgestorbenes  und  totes  Proto- 
plasma der  Färbung  zugänglich  ist,  ist  aber  nichts  Neues.     Neu  ist 
nur,  was  jedoch  Mosso  nicht  hervorhob,    daß    sich   bei  seinem  Ver- 
fahren schließlich  die  ganze  Zelle  diffus  mit  dem  Methylgrün  tingiert, 
während  sonst  nur  die  Kerne  Verwandtschaft  mit  demselben  zeigen. 
Bei    der  Methode    von  Rhumbler    wird   überhaupt  totes  Substrat  ge- 
färbt.    Früher    nahm    man    an,    daß    sich    die    lebende  Substanz   im 
Gegensatze    zu    der    abgestorbenen    nicht    färbe.     Heute   wissen   wir, 
daß    die    lebende  Substanz    gefärbt   werden   kann.     Vorzugsweise  ist 


1)  Vgl.  ViRCHOAVs  Arch.  Bd.  CXIII,  1888,  p.  397. 
-)  Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  X,  1893,  p.  473—474. 


XXII,  4,  Referate.  549 

es  das  Cytophisma ,  welches  in  gewissen  Teilen  färbbar  erscheint, 
doch  besitzt  nach  Verf.  auch  der  Zellkern  die  Fähigkeit  der  intra- 
vitalen Färbbarkeit.  Während  man  aber  behaupten  kann,  daß  sich 
die  Körnungen  des  Cytoplasmas  bei  der  Anwendung  gewisser  Farb- 
stoife  regelmäßig  färben,  sind  wir  heute  noch  nicht  in  der  Lage,  die 
Bedingungen,  unter  welchen  eine  intravitale  Färbung  des  Kernes 
zustande  kommt ,  auch  nur  annäherungsweise  präzisieren  zu  können. 
Das  Verfahren,  welches  Verf.  angewendet  hat,  nach  vielfachen  Ver- 
suchen, ist  das  folgende :  Mau  mische  O'Oöprozentige  Lösungen  von 
Neutralrot  und  Methylenblau  (medic.  Höchst)  in  destilliertem  Wasser 
zu  gleichen  Teilen.  Von  dem  Gemische,  welches  dauerhaft  ist,  tropfe 
man  auf  gut  gereinigte  Objektträger  und  lasse  die  Tropfen  bei  35^ 
im  Thermostaten  verdampfen.  War  der  Tropfen  nicht  zu  groß,  so 
bildet  sich  eine  gleichmäßige  Farbschicht,  die  man  einige  Zeit  auf- 
bewahren kann.  Besser  ist  es,  frisch  bereitete  Schichten  anzuwenden 
(höchstens  3  Tage  alt).  Die  Objektträger  und  Deckgläser  müssen 
stets  aufs  sorgfältigste  gereinigt  werden ,  um  allen  (eventuell  Meta- 
chromasie verursachenden)  schädigenden  Einfluß  auszuschalten.  Verf. 
geht  dann  auf  die  Resultate  ein,  welche  er  bei  Rhizopoden,  Flagel- 
laten ,  Diatomeen,  Chlorophyceen,  Würmern,  am  Flimmerepithel  des 
Frosches  und  bei  Muskelfasern  erhalten  hat.  Es  ergab  sich ,  daß 
die  Methode  in  der  Tat  geeignet  war,  einen  Unterschied  zwischen 
der  Farbenauswahl  der  toten  und  lebenden  Substanz  festzustellen. 
Verf.  hat  dann  weiter  untersucht,  wie  sich  konserviertes  Material 
seinem  Verfahren  gegenüber  verhielt.  Es  wird  dieserhalb  auf  das 
Original  verwiesen.  Das  lebende  Protoplasma  färbt  sich  bei  der 
Methode  des  Verf.  rot,  das  tote  blau.  Verf.  hält  sich  für  berechtigt 
anzunehmen,  daß  diese  rote  Färbung  einer  tatsächlichen  vitalen  Reak- 
tion gleichkommt.  Er  sucht  dann  eine  Erklärung  zu  finden  für  die 
von  ihm  festgestellten  färberischen  Unterschiede  zwischen  lebendem 
und  totem  Protoplasma.  Es  muß  wegen  des  Nähereh  auf  das  Original 
verwiesen  werden.  Er  kommt  zu  dem  Schlüsse ,  daß  die  von  ihm 
beobachteten  Färbeerscheinungen  auf  chemische  Beziehungen  zwischen 
dem  Protoplasma  und  den  angewandten  Farbstoften  zurückzuführen 
sind.  Diese  Beziehungen  konnten  so  weit  verfolgt  werden,  daß  durch 
die  Supposition  von  zwei  verschiedenen  reduktionsfähigen  Gruppen 
im  Protoplasma  die  Resultate  am  leichtesten  erklärt  werden  konnten. 
Wenn  wir  diese  supponierten  Gruppen  des  Eiweißmoleküls  kennen 
würden,  so  würden  wir  auch  imstande  sein,  den  chemischen  Unter- 
schied zwischen  dem  lebenden  und  toten  Protoplasma  zu  präzisieren. 


550  Referate.  XXII,  4. 

Hierübei"    lassen    sich    aber    vorläufig    noch    keine   Vermutungen   auf- 
stellen. Schiefferdecker  {Bonn). 

Schridde,  H.,  Beiträge  zur  Lehre  von  den  Zeilkörne - 
lungen.  Die  Körueluugen  der  Plasmazellen 
(Anat.  Hefte,  H.  85,  86  [Bd.  XXV'III,  H.  2,  3],  1905, 
p.  691—768  m.  1  Tfl.). 
Verf.  unterzieht  zuerst  die  Altmann  sehe  Methode  einer  Be- 
sprechung, berichtet  über  seine  Versuche,  mit  andern  Fixierimgen 
die  gleichen  Resultate  zu  erhalten  und  veröffentlicht  dann  eine  von 
ihm  angewendete  Fixierungs-  undBeizungsmethode,  die  sich  im  wesent- 
lichen auf  den  Altmann  sehen  Prinzipien  aufbaut,  sich  aber  durch 
Vermeidung  der  Nachteile  dieser  Methode  imd  durch  Einfachheit  und 
Billigkeit  von  dieser  unterscheidet.  Die  nach  der  Altmann  sehen 
Methode  fixierten  Stücke  werden  nach  Einbettung  in  einem  Paraffin 
von  58*^  Schmelzpunkt  in  Schnitte  zerlegt,  die  nicht  dicker  als  2  /i 
sein  sollen  und  dann  auf  eine  von  Metzner  angegebene  Weise  ge- 
färbt (Anilinwasser  -  Säiirefuchsin  ,  differenzieren  mit  Pikrinalkohol). 
Ist  die  Färbung  in  der  richtigen  Weise  gelungen,  so  treten  die 
Granula,  welche  überhaupt  mit  dieser  Methode  erreichbar  sind,  durch 
ihren  spezifisch  roten  Ton  scharf  gefärbt  hervor,  während  die  übrigen 
Teile  keinen  oder  nur  einen  graugelblichen  Farbenton  zeigen.  Die 
Altmann  sehe  Methode  hat  nun  die  folgenden  Nachteile:  1)  Ist  es 
sehr  schwer,  ohne  Schädigung  der  einzelnen  Gewebsbestandteile  von 
frischen  Organen  so  kleine  Stückchen  zu  gewinnen,  wie  sie  die 
Methode  erfordert  (1 — 2  mm  dick).  Es  lassen  sich  hierbei  Zerrungen 
und  Quetschungen  nicht  vermeiden.  2)  Bringt  die  bei  der  Färbung 
angewandte  Erwärmung  auch  bei  längerer  Übung  doch  häufig  störende 
Veränderungen  und  falsche  Bilder  hervor.  Wollte  man  diese  Nach- 
teile verbessern ,  so  mußte  man  vor  allem  eine  Fixierungsflüssigkeit 
nehmen ,  die  sowohl  in  bezug  auf  die  Schnelligkeit  des  Eindringens 
in  die  Gewebe ,  wie  auch  in  bezug  auf  die  einwandfreie  Fixierung 
der  einzelnen  Elemente  den  höchsten  Anforderungen  entsprach.  Man 
durfte  daher  auf  keinen  Fall  ein  Osmiumsäuregemisch  nehmen,  da 
ein  solches  nur  wenig  und  langsam  eindringt.  Verf.  hat  daher  als 
Fixierungsflüssigkeit  Formol-MtJLLER  gewählt  und  nachträglich  osmiert. 
Die  Methode  ist  so  die  folgende:  1)  Fixierung  in  Formol  -  Müller 
(1:9);  2)  gründliches  Auswaschen  in  fließendem  Wasser;  3)  6stün- 
diges  Verweilen  in  destilliertem  Wasser;  4)  Einlegen  auf  24  Stunden 
in  eine  einprozentige  Osmiumlösung  bei  Lichtabschluß ;   5)  gründliches 


XXII,  4.  Referate.  551 

Auswascheu  in  fließendem  Wasser ;  6)  steigender  Alkohol  (50prozentig 
bis  absolut) ;  7)  Alkohol-Chloroform,  Chloroform  (6  und  7  im  Dunklen) ; 
8)  Chloroform  -  Paraffin ,  Paraffin  58  o.  Von  diesen  Paraffiublöcken 
werden  Schnitte  von  1  bis  2  /^  Dicke  angefertigt  und  auf  einen  mit 
einer  sehr  dünnen  Lage  von  Eiweißglyzerin  versehenen  Objektträger 
entweder  direkt  oder  mit  Hilfe  von  erwärmtem  Wasser  aufgeklebt. 
Die  Färbung  kann  entweder  mit  der  Altmann  scheu  Methode  durch 
Erwärmung  oder  auf  kaltem  Wege  geschehen.  Nach  seineu  Ver- 
suchen empfiehlt  Verf.  die  Objektträger  mit  den  Präparaten  aus 
85prozentigem  Alkohol  heraus  2  bis  24  Stunden  in  die  Anilinwasser- 
Säurefuchsinlösung  senkrecht  zu  stellen.  Diese  Lösung  wird  in  folgen 
der  Weise  hergestellt :  Zu  100  cc  einer  kalt  gesättigten  und  filtrierten 
Lösung  von  Anilin  in  destilliertem  Wasser .  setzt  man  20  g  Säure- 
fuchsin und  filtriert.  Dann  diiferenziert  man  in  Pikrinalkohol.  Am 
sichersten  verfährt  mau,  wenn  man  die  von  Metzner  ungegebene 
Lösung  II  verwendet,  die  aus  einem  Teile  gesättigter,  alkoholischer 
Pikrinsäurelösung  und  7  Teilen  20prozentigen  Alkohols  besteht.  Von 
dieser  gießt  man  etwas  auf  den  Objektträger  und  wiegt  das  Präparat 
hin  und  her ;  man  gießt  so  lange  Pikrinalkohol  nach  und  differenziert, 
bis  die  Schnitte  einen  hellgelblichroten  Farbenton  bekommen.  Das 
Eesultat  soll  eine  vorzügliche  Darstellung  der  Zeilkörnelungen  sein, 
wobei  die  Körner  der  verschiedeneu  Zellen  in  einem  voneinander  so 
abweichenden  und  charakteristischen  Farbentone  erscheinen,  daß  auch 
für  den  weniger  Geübten  die  Unterscheidung  der  Zellen  nach  der 
Färbung  der  Körner  sehr  leicht  fällt.  So  färben  sich  die  Körner 
der  Belegzellen  violettrot,  die  der  Hauptzellen  rotbraun,  die  der 
eosinophilen  Zellen  schwarzrot,  die  der  Plasmazellen  ziegelrot,  die 
der  neutrophilen  Leukocyten  bräunlichrot,  während  die  der  Mastzellen 
kein  Rot  aufweisen,  sondern  einen  grauschwarzen  Ton  besitzen.  — 
Ganz  die  gleichen  Resultate  erhält  man,  wenn  man  Paraffinschnitte, 
die  von  Präparaten  aus  MüixER-Formol  herstammen. (natürlich  lebens- 
warm fixiert)  2  Stunden  oder  länger  in  einprozentige  Osmiumsäure 
stellt,  dann  kurz  in  destilliertem  Wasser  abspült  und  in  der  an- 
gegebenen Weise  färbt.  Dieses  Verfahren  ist  insofern  noch  vorteil- 
hafter, als  mau  an  den  Schnitten  des  gleichen  Blockes  außer  der 
Färbung  der  in  Rede  stehenden  Körnelung  auch  jede  andere  Zell- 
körnelung  mit  jeder  Farbe  darstellen  kann,  während  an  osmierten 
Präparaten  die  Färbung  mehr  oder  weniger  schwierig  ist.  —  Auch 
in  einfacher  Formollösung  (1  Teil  Formol,  9  Teile  Wasser)  lebeus- 
frisch  fixierte  Präparate  geben  nach  der  Doppelbeizung  mit  Kalium 


552  Referate.  XXII,  4. 

bichromat  (12  bis  24  Stunden  bei  30*^)  imd  Osmiumsäure  ganz  die 
gleichen  Resultate.  Will  man  indessen  von  vornherein  die  Organ- 
stücke zum  Studium  der  Zeilkörnelungen  verwenden,  so  ist  die  erste 
Methode  die  sicherste  und  beste ,  da  hier  die  Details  am  feinsten 
und  deutlichsten  herauskommen.  Über  die  Theorie  der  Vorgänge  bei 
diesen  Fixierungsmethoden  sagt  Verf.  das  Folgende.  Die  Fixierung 
geschieht  durch  das  Formol -Kaliumbichromatgemisch;  beide  Stoffe 
können  zu  den  besten  Fixierungsmitteln  gerechnet  werden,  und  be- 
wirken beide  eine  homogene  Gerinnung  mit  bester  Formerhaltung. 
Das  Kaliumbichromat,  das  nach  Tellyesniczky  als  ein  Plasmakonser- 
vierer  bester  Art  bezeichnet  werden  muß,  wirkt  außerdem  als  Beize 
und  wird  hierin  durch  die  nachfolgende  Osmiumsäure  unterstützt. 
Durch  diese  letztere  wird  eine  Veränderung  in  keiner  Weise  hervor- 
gerufen. Bei  der  nun  folgenden  Färbung  mit  Anilinwasser -Säure- 
fuchsin wirkt  das  Osmium  einesteils  oxydierend  auf  das  Anilin  und 
gibt  so  durch  die  Bildung  von  Anilinschwarz  die  üntertönung,  ander- 
seits stellt  es  auch  ein  Fixierungsmittel  des  Farbstoffes  dar.  Die 
Affinität  der  Zeilkörnelungen  gegenüber  dem  Säurefuchsin  wird  da- 
durch erhöht,  daß  sich  die  basischen  Eigenschaften  des  Anilinschwarz 
zu  den  in  den  Körnelungen  schon  vorhandenen  hinzuaddieren.  — 
Verf.  hat  dann  weiter  durch  vergleichende  Untersuchungen  mit  ver- 
schiedenen andern  Methoden  festzustellen  versucht,  ob  die  durch  die 
oben  angegebene  Methode  erzielten  Resultate  uns  ein  richtiges  Bild 
der  wirklichen  Verhältnisse  geben,  oder  ob  sie  eventuell  als  Kunst- 
produkt anzusehen  sind.  Er  entscheidet  sich  für  das  erstere :  Ein 
wahrheitsgetreues  Spiegelbild  des  natürlichen  Aufbaues  der  Zelle,  so 
weit  das  überhaupt  mit  den  uns  zu  Gebote  stehenden  Mitteln  mög- 
lich ist.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Degen ,  A. ,    Untersuchungen   über    die    kontraktile    Va- 
kuole und  die  Wabenstruktur  des  Protoplasmas 
(Botan.  Zeitg.  Bd.  LXIII,   1905,  p.  163). 
Von  großem  Interesse  für  den  Mikroskopiker  ist  der  Nachweis, 
daß    Schaumstrukturen,    wie    sie    von   Bütschli   beschrieben    worden 
sind,  sich  an  Objekten  der  verschiedensten  Art  —  Protozoen,  Bak- 
terien, Pilzhyphen,  Wurzelspitzen,  Wurzelhaaren,  Brennhaaren  etc.  — 
durch  Behandlung  mit  bestimmten  Reagentien  hervorrufen  lassen.     Als 
Wabenbildner  ersten  Ranges  haben  die  Basen  zu  gelten : 

Kalilauge  bei 001  Prozent 

Natronlauge 0-02         „ 


XXII,  4.  Referate.  553 

Amraoniumhydroxycl 0"02  Prozent 

Calciumliydroxyd 0-02         „ 

Baryumhydroxyd O'Oö         „ 

Kaliumkarbunat O'l  bis  0"05         „ 

Natriumkarbonat 0-1     „    005 


» 


geben  schöne  Wabenbilder.  Besonders  deutlich  werden  die  Schäume, 
wenn  man  die  Alkalien  mit  Wasser  auswäscht.  Tannin  und  Säuren 
(Essig-,  Salz-,  Salpeter-,  Schwefelsäure)  geben  weder  vor  noch  nach 
dem  Auswaschen  mit  Wasser  Waben,  sondern  erst  bei  nachfolgender 
Behandlung  mit  Alkali.  Verf.  nimmt  an,  daß  durch  Behandlung  mit 
diesem  im  Plasma  kleine  Mengen  von  Niederschlägen  entstehen,  die 
sich  dann  wieder  lösen  und  die  Bildung  zahlreicher  kleiner  Lösungs- 
vakuolen  hervorrufen.  —  Von  Interesse  ist,  daß  dieselben  Schaum- 
strukturen auch  durch  Deckglasdruck  und  bei  Behandlung  mit  hypo- 
tonischen Lösungen  (Übertragen  der  Objekte  aus  der  Kulturflüssigkeit 
in  reinfcs  Wasser)  erzielt  werden  können.  In  beiden  Fällen  liegt 
vielleicht  eine  Entmischung  im  Protoplasma  vor  —  bedingt  durch 
allzu  reichliche  Wasseraufnahme. 

Sehr  ausführlich  äußert  sich  Verf.  über  die  Fixierung  wabigen 
Protoplasmas  (Untersuchungen  an  Glaucoma  colpidium).  Besonders 
wirksam  sind  Osmiumsäure ,  wässerige  Sublimatlösung  und  Formal- 
dehyd. Osmiumsäure  kam  in  einprozentiger  Lösung  zur  Anwendung, 
doch  genügen  oftenbar  auch  noch  viel  schwächere  Konzentrationen. 
Osmiumsäure  „gelatiniert  die  Objekte,  was  besonders  für  die  Konser- 
vierung unwabiger  Protoplasten  von  Vorteil  ist ,  indem  eine  stark 
körnige  oder  gerüstige  Fällung ,  wie  sie  z.  B.  Platinchlorid ,  Jod, 
Pikrinsäure  imd  Pikriuschwefelsäure ,  überhaupt  die  meisten  andern 
Fixierungsmittel  hervorbringen,  leicht  den  Eindruck  einer  Waben- 
struktur erzeugen  kann.  Es  empfiehlt  sich  jedoch  mit  einprozentigem 
Platinchlorid  nachzufixiereu ,  was  keine  Nachteile  bringt ,  aber  die 
Fällungen  haltbarer  macht."  —  Sublimat  in  Tprozentiger  Lösung 
fixiert  gut,  aber  außerordentlich  stark  körnig;  dieser  Übelstand  tritt 
bei  Anwendung  ein-  oder  2prozentiger  Lösung  weniger  hervor. 
Formaldehyd  ist  besonders  in  2prozentiger  Lösung  sehr  leistungs- 
fähig. Empfehlenswert  sind  auch  die  osmiumsäurehaltigen  Fixierungs- 
gemische. —  Die  Angaben  des  Verf.  über  wenig  geeignete  Fixierungs- 
flüssigkeiten sind  im  Original  (p.  203)  nachzulesen. 

Zur  Färbung  empfiehlt  sich  nach  Verf.  Säurefuchsin -Lichtgrün, 
mit  dem  sich  das  Plasmagerüst  gut  färbt. 

Beim    Entwässern    wurden    die  .Tiere    in    Alkohol    verschiedener 


554  Referate.  XXII,  4. 

Konzentration  —  von  5  zu  5  Prozent  ansteigend  in  absoluten  über- 
tragen ,  wobei  die  Zentrifuge  gute  Dienste  leistet.  Aus  Alkohol 
absolutus  überträgt  man  direkt  in  venezianischen  Terpentin  —  oder 
nach  zwei  vermittelnden  Alkohol  -  Xylolkonzentrationen  und  reinem 
Xylol  in  Kanadabalsam.  Küster  {Halle  a.  8.). 


3.   Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


A,    Wirheitiere. 

Liebreich,    0.,    tlber    Blutkörperchenzählung    mit    dem 
TnoMA-ZEissschen    Apparat     (Physiol.     Ges.     Berlin, 
Sitzung  24.  Febr.   1905;  Ref.  in  Arch.  f.  Anat,  u.  Physiol. 
1905,  Physiol.  Abt.,  H.  3,  4,  p.  385—389). 
Verf.    hebt    hervor,    daß    mittels    des    Thoma-Zeiss sehen    Blut- 
körperchenzählapparates   mit  Sicherheit    festgestellt  worden  ist,    daß 
eine  Vermehrung    der  Blutkörperchen  beim  Aufstieg    zu   einem   hoch 
gelegenen  Orte    sofort   eintritt    und    ebenso   ein  Herabsinken   der  ur- 
sprünglichen Zahl  unmittelbar  nach  der  Rückkunft  in  die  Ebene.     Er 
bespricht  die  Versuche,  diese  Beobachtungen  durch  irgendwelche  mit 
dem  Apparate  verbundene  Fehlerquellen   zu  erklären   und  stellt  eine 
neue  Theorie  auf,  welche  sich  auf  die  Veränderlichkeit  der  Schwer- 
kraft in  verschiedener  Höhe  und  an  verschiedenen  Stellen  der  Erdober- 
fläche in  gleicher  Höhe  gründet.    Diese  Verschiedenheiten  der  Schwer- 
kraft wirken  durch  die  Oberflächenspannung  wieder  auf  die  Verteilung 
der  Blutkörperchen  in  dem  Apparate  ein.     Wegen  des  Näheren  der 
sehr    interessanten    Ausführungen    muß    auf   das    Original    verwiesen 
werden.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Bürker ,    K. ,    Notiz    über    eine    neue    Form    der    Zähl- 
kammer   (Münchn.  med.  Wochenschr.,  Jahrg.  LH,  No.  19, 
p.   912). 
Verf.  stellt  zuerst  die  Mängel  der  Thoma-Zeiss  sehen  Zählkammer 
kurz    zusammen:    1)  Die    Schwierigkeit    tadelloser   Zusammensetzung 
der    Kammer ;     2)    Die   leicht   eintretende   ungleichmäßige  Verteilung 
der    Blutkörperchen    auf   der    Zählfläche ;     3)   Die    Abhängigkeit    der 
Zählkammer    vom  Luftdruck,    wenn    dieser   sich  plötzlich   verändert; 


XXII,  4.  Referate.  555 

4)  Es  macht  das  Zählnetz  mir  einen  kleinen  Bruchteil  (etwa  ein 
Fünfzigstel)  der  gesamten  Zählfläche  aus.  Eine  neue  Zählkammer, 
auf  welche  schon  in  einer  Arbeit  von  E.  Meissen^  hingewiesen  worden 
ist,  vermeidet  diese  Mängel:  Den  ersten  dadurch,  daß  das  Deckglas 
schon  vor  dem  Einbringen  der  Blutmischung  aufgelegt  wird,  wodurch 
sich  in  aller  Kühe  Newton  sehe  Streifen  sogar  0.  bis  1.  Ordnung 
erzeugen  lassen,  dabei  haftet  das  Deckglas  fest.  Der  zweite  Fehler 
wird  dadurch  beseitigt,  daß  die  Blutmischung  durch  Kapillarität  nahezu 
momentan  in  den  Zählraum  eindringt,  wodurch  auch  eine  sehr  gleich- 
mäßige Verteilung  der  Blutkörperchen  aut  der  Zählfläche  zustande 
kommt.  Der  dritte  Mangel,  die  Abhängigkeit  der  Zählkammer  vom 
Luftdruck,  kommt  nicht  mehr  in  Betracht,  weil  die  Zählkammer  an 
zwei  Seiten  völlig  offen,  also  mehr  Schlitzkammer  ist  als  die  Meis- 
SENSche  Kammer.  Der  vierte  Fehler  wird  dadurch  vermieden,  daß 
entweder  überhaupt  kein  Zählnetz  eingegraben  ist,  oder  daß  dieses 
9  Quadratraillimeter  statt  1  Quadratmillimeter,  wie  in  der  alten 
Kammer,  beträgt.  Die  neue  Zählkammer  wird  in  zwei  Formen  geliefert: 
Bei  der  einen  ist  ein  Zählnetz  überhaupt  nicht  eingegraben,  der 
Zählraum  wird  bei  dieser  Form  vielmehr  durch  entsprechende  Blenden 
im  Okular  abgegrenzt,  welche  mit  Hilfe  eines  beigegebenen  Objekt- 
mikrometers ausgewertet  werden  können.  Diese  Form  ist  für  sehr 
genaue  Zählungen  bestimmt.  Für  den  Praktiker  eignet  sich  besser 
die  zweite  Form,  mit  dem  Zählnetz,  welches  sowohl  zur  Zählung 
roter  wie  weißer  Blutkörperchen  benutzt  werden  kann.  Die  neue 
Kammer  ist  viel  leichter  zusammen  zu  setzen  als  die  alte;  die 
Zählungen  werden  "bei  der  viel  gleichmäßigeren  Verteilung  der  Blut- 
körperchen auf  der  Zählfläche  genauer.  Statt  200  Quadrate  und 
mehr,  wie  bei  der  alten  Kammer,  braucht  man  bei  der  neuen  nur 
80  durchzuzählen,  um  einen  gut  verwendbaren  Mittelwert  zu  erhalten. 
Dazu  kommt  noch,  daß  bei  ein  und  derselben  Deckglasauflage  zwei 
Zählungen  vorgenommen  werden  können,  weil  die  Zählfläche  in  zwei 
getrennte  Abschnitte  geschieden  ist.  Die  .Firma  C.  Zeiss  in  Jena 
liefert  beide  Formen  der  Zählkammer.        Schiefferdecker  {Bonn). 

Myers,  B.  D.,   Fixation  of  tissues  by  injection  into  the 
arteries  (Johns Hopkins Hosp.  Bull.  vol.  XVI,  1905,  no.  167, 
6  pp.  w.   1  flg.). 
Verf.  rühmt  die  gute  Wirkung  der  von  Mc  Farland  angegebenen 


1)  Vgl.  Münehn.  med.  Wochenschr.  1905,  No.  12,  p,  655. 


556  Referate.  XXII,  4. 

Inj ektionsm etil ocle.  Immerhin  ist  die  Vorrichtung  für  dieselbe  etwas 
umständlich  und  erlaubt  keine  ganz  genaue  Abmessung  des  Druckes. 
Außerdem  ist  die  Methode  mehr  für  billigere  Injektionsmassen  zu 
benutzen.  Verf.  beschreibt  nun  eine  Vorrichtung,  bei  welcher  der 
Druck  geliefert  wird  von  einem  Wasserluftdruckapparat.  Dieser  trägt 
ein  Rohr ,  welches  sich  T-förmig  teilt :  Der  eine  Schenkel  geht  zu 
einem  Quecksilbermanometer  hin,  der  andere  mündet  durch  einen 
durchbohrten  Stopfen  in  die  obere  Öffnung  einer  Flasche,  aus  deren 
unterem  Ende  der  Injektiousschlauch  abtritt.  Man  füllt  die  Flasche 
zuerst  mit  der  erwärmten  physiologischen  Kochsalzlösung,  spült  das 
Gefäßsystem  des  Tieres  mit  dieser  durch,  entleert  dann  die  Flasche 
und  gießt  die  ebenfalls  erwärmte  Injektionsmasse  hinein.  Es  ist  nicht 
immer  nötig  das  Gefäßsystem  zuerst  auszuwaschen,  doch  wird  die 
Fixierung  im  allgemeinen  besser,  wenn  es  geschieht ;  bei  Anwendung 
von  Sublimat  macht  es  nicht  viel  aus,  bei  Formol  und  Hermann  scher 
Flüssigkeit  dagegen  ist  es  für  eine  gute  Fixierung  vorteilhaft.  Als 
beste  Fixierungsmittel  erwiesen  sich  Sublimat,  Formol,  Hermann  sehe 
Flüssigkeit  und  Alkohol.  Sckiefferdecker  {Bonn). 

Meves,  F.,  Über  die  Wirkung  von  Ammoniakdämpfen 
auf  die  roten  Blutkörperchen  von  Amphibien 
(Anat.  Anz.  Bd.  XXVII,  1905,  No.  8,  9,  p.  177  —  186  m. 
17  Abb.). 
Um  über  den  Konzeutrationsgrad  des  augewendeten  Ammoniak 
genauere  Angaben  machen  zu  können,  ist  Verf.  in  der  Weise  ver- 
fahren, daß  er  die  käufliche  konzentrierte  Ammoniaklösung  (mit  etwa 
25prozentigem  Ammoniak)  in  bestimmtem  Verhältnisse  mit  Wasser 
verdünnte  und  den  Dampf,  der  aus  einer  abgemessenen  Menge  der 
Mischung  aufstieg,  auf  die  Blutkörperchen  wirken  ließ.  Er  gab  jedes- 
mal 6  Tropfen  der  Mischung  in  eine  Böttcher  sehe  feuchte  Kammer, 
welche  aus  einem  5  mm  hohen,  dickwandigen  Glasringe  bestand 
(innerer  Durchmesser  18  mm),  der  auf  einem  Objektträger  aufgekittet 
war  und  oben  mit  Hilfe  von  Vaselin  durch  ein  Deckglas  geschlossen 
wurde,  an  dessen  untere  Seite  das  Blut  gebracht  war.  Die  Unter- 
suchungen wurden  ausgeführt  an  dem  Blute  vom  Frosch  (Rana 
esculenta)  und  Feuersalamander  (Salamandra  maculosa).  Der  Am- 
moniakdampf übte  eine  höchst  eigenartige  Wirkung  auf  den  Rand- 
reifen  der  roten  Blutkörperchen,  besonders  des  Salamanders  aus. 
1)  Salamander.  Setzt  man  rote  Blutkörperchen  den  Dämpfen 
aus,    welche    von    einigen   Tropfen    einer    Mischung    von    einem  Teil 


XXII,  4.  Referate.  557 

Ammoniak  und  20  bis  40  Teilen  Wasser  aufsteigen,  so  wickeln  sich 
die  beiden  Längshälften  des  Randreifens  spiralig  umeinander.  Bringt 
man  in  die  feuchte  Kammer  eine  stärkere  Ammoniakmischung  (1  Teil 
Ammoniaklösung  auf  6  bis  10  Teile  Wasser),  so  bleibt  die  Zusammeu- 
drehung  des  Randreifens  zu  einem  Strange  aus.  Dagegen  tritt,  wie 
auch  bei  der  vorigen  Lösung ,  eine  Zuspitzung  der  Blutscheibe  an 
dem  einen  Pole  ein.  Später  rundet  sich  dieser  Pol  wieder  ab  und 
es  werden  im  Innern  der  Zelle  der  Randreifen  und  eine  Anzahl 
glänzender  Körner  oder  Vakuolen  sichtbar.  Die  Dämpfe  von  einigen 
Tropfen  konzentrierter  Ammoniaklösung  oder  von  solcher,  die  nur 
mit  einem  bis  3  Teilen  Wasser  verdünnt  ist,  bewirken,  daß  die  roten 
Blutkörperchen  sofort  kugelig  werden.  Im  Zellleibe  tritt  ein  reich- 
licher körniger  Niederschlag  auf.  Der  Kern  bläht  sich  auf,  noch 
bevor  der  Zellleib  sein  Hämoglobin  abgegeben  hat.  2)  Frosch. 
Die  Erscheinungen  sind  hier  ähnlich ,  aber  nicht  so  ausgeprägt.  — 
Dieselben  Wirkungen ,  welche  man  durch  Ammoniak  dampf  erhält, 
erhält  man  auch,  wenn  man  Blut  und  Ammoniak  1  ö  s  u  n  g  zusammen 
eindeckt.  Zusatz  von  Kalilauge  dagegen  ruft  solche  Erscheinungen 
nicht  hervor.  Schiefferdecker  {Bonn). 

Takayaina,  M.,  Beiträge  zur  Toxikologie  und  gericht- 
lichen Medizin,  nebst  einem  Vorwort  von  Prof. 
Dr.  R.  KoBERT.    4  Tfln.    Stuttgart  (Ferdinand  Enke)  1905. 

Das  vorliegende  Buch  bringt  im  wesentlichen  neue  Untersuchungen 
über  die  Chemie  des  Blutfarbstoftes.  Zwei  Abschnitte  sind  auch  für 
Anatomen  und  Mikroskopiker  von  großem  Interesse ;  es  sind  dies  der 
fünfte  und  siebente  Teil. 

Der  fünfte  Teil  behandelt  die  Frage ,  warum  die  mit  Formalin 
konservierten  Leichenorgane  beim  Eintragen  in  Alkohol  rot  werden 
und  hat  besonders  für  die  Forscher  Bedeutung,  die  sich  mit  dem 
Problem  befassen,  Museumsstücke  in  ihren  natürlichen  Farben  nach 
den  Methoden  vouJores,  Melnikow-Raswedenkow,  Kayseuling  u.  a.  zu 
konservieren. 

Durch  eine  Reihe  von  Versuchen  wird  festgestellt,  daß  das 
Formaldehyd,  gleichgültig  ob  es  schwach  sauer  od^r  neutral  reagiert, 
auf  das  geuinne  Blut,  sowie  auf  Blutlösungen  erst  methämoglobin- 
bildend  (bräunend)  einwirkt.  Durch  Mischung  dieses  Formol-Methämo- 
globin-Blutes mit  Alkohol  entsteht  nach  Verf.  nicht,  wie  von  anderer 
Seite  behauptet  worden  ist ,  Hämatin,  sondern  K  a  t  h  ä  m  0  g  1  o  b  i  n  , 
das  ist  eine  Zwischenstufe  zwischen  Methämoglobin  und  Hämatin,  und 


558  Referate.  XXII,  4. 

bedingt  die  bei  diesem  Versuch  im  Reagenzglas  und  in  den  lege  artis 
konservierten,  anatomischen  Präparaten  auftretende  rote  Farbe. 

Im  siebenten  Teil  teilt  der  Verf.  eine  Verbesserung  der  so- 
genannten Floeence  sehen  Spermareaktion  mit.  Die  FLORENCE-Kristalle, 
die  zwar  für  Sperma  durchaus  nicht  spezifisch  sind,  sondern  auch 
von  Vaginal-  und  Uterinsekret,  faulenden  Organen  der  verschiedensten 
Art  etc.  gegeben  werden,  entstehen  nach  Verf.  am  schönsten  mit  seinem 
neuen  Reagenz:  2prozentige  Kaliumjodat- ,  2prozentige  Jodkalium- 
lösung ana  (erst  vor  dem  Gebrauch  mischen  oder  das  fertige  Gemisch 
mit  verdünnter  Sodalösung  schwach  alkalisieren).  Damit  wird  das 
zu  untersuchende  Objekt  behandelt ;  dann  sehr  vorsichtige  Ansäuerung, 
dann  Mikroskopieren.  Handelt  es  sich  um  Sperma,  so  sieht  man  hell- 
braune, ganz  regelmäßig  erscheinende  rhombische  Stäbchen,  d.  h. 
FLORENCESche  Kristalle,  in  enormen  Mengen  herausschießen. 

Die  zunächst  kleineu  Kristalle  wandeln  sich  nach  einigen  Stunden 
in  schöne  Kristalle  um,  welche  in  bezug  auf  die  Farbe  und  auf  die 
Kristallform  mit  Teichmann  sehen  Häminkristallen  fast  vollkommen 
identisch  sind.  Die  Kristallformen  sind  auf  einer  Tafel  wieder- 
gegeben. Levij  {Halle  a.  S.). 

Edens,    Über    Amyloidfärbung    und    Amyloid  degener  a- 
tion    (ViRCHOws  Arch.  Bd.  CLXXX,   1905,  H.  2,  p.  346 
—359  m.   1  Tfl.). 
Verf.    hebt    hervor,    daß    der  Untersuchung   der   feineren  histo- 
logischen Vorgänge  bei  der  Amyloiddegeneration  bisher  die  Schwierig- 
keit der  Herstellung  einwandfrei  spezifisch  gefärbter  und  aufgehellter 
Präparate  entgegenstand.   Verf.  geht  dann  auf  die  einzelnen  Schwierig- 
keiten ein  und  empfiehlt  die  folgende  Methode :  Die  noch  in  Paraffin 
eingeschlossenen  Schnitte  (5  bis  10  fx  dick)  werden  24  Stunden  in  der 
folgenden  salzsauren  Methylviolettlösung  gefärbt.    Man  setzt  zu  100  cc 
absoluten  Alkohols  Methylviolett  5  B  (Grübler,  Leipzig)  im  Überschusse 
hinzu,  schüttelt  durch,  läßt  absetzen  und  filtriert  nach  24  Stunden.    Mit 
Hilfe  dieser  Stammlösung  stellt  man  sich  folgende  Farbflüssigkeit  her : 

Salzsäm-e  (spez.  Gew.  1-124) l'O 

DestilUertes  Wasser  bis  zu 300-0. 

Dieser  Lösung  setzt  man  hinzu : 

Konzentrierte,  alkoholische  Methylviolettlösung- .     .     lO'O. 

Nach    der    Färbung    läßt    man    die    Schnitte    gerade    lufttrocken 
werden,  bringt  sie  in  Xylol  zur  Entfernung  des  Paraffins  und  bettet 


XXII,  4.  Referate.  559 

in  Kanadabalsam  ein.  Es  wird  eine  sehr  distinkte  Kernfärbung  er- 
halten ,  die  im  wesentlichen  abhängig  ist  von  dem  Salzsäiiregehalte 
der  Lösung;  bei  hohem  Gehalte  wird  die  Kernditferenzierung  ver- 
wischt, bei  zu  geringem  Gehalte  tritt  keine  ganz  scharfe  Metachromasie 
ein.  Innerhalb  dieser  Grenzen  besteht  ein  ziemlich  breiter  Spiel- 
raum für  den  Salzsäuregehalt.  Die  oben  angegebene  Zusammen- 
setzung der  Farbflüssigkeit  hat  Verf.  die  besten  Resultate  ergeben. 
Die  Kerndifferenzierung  wird  bei  Benutzung  einer  alkoholischen  Stamm- 
lösimg schärfer  als  bei  einer  wässerigen.  Unter  den  von  Grübler 
in  den  Handel  gebrachten  Methylviolettsorten  scheint  bei  dem  an- 
gegebenen Salzsäuregehalte  Methylviolett  5  B  am  geeignetsten  zu  sein. 
—  Man  kann  auch  von  Paraffin  befreite  Schnitte  färben ,  nach  der 
Färbung  mit  Fließpapier  trocknen  und  mit  Oleum  linaloes  aufhellen, 
dann  Einschluß  in  Kanadabalsam.  Die  Schönheit  der  Farben  leidet 
allerdings  etwas  unter  der  Einwirkung  des  Öls ,  doch  bleibt  eine 
scharfe  Metachromasie  bestehen  an  gut  gefärbten  Präparaten.  Es 
ist  unnötig,  die  in  der  salzsauren  Lösung  gefärbten  Schnitte  zu 
wässern,  kurzes  Abspülen  genügt;  bei  längerem  Wässern  leidet  die 
Schönheit  der  Färbung.  Paraffinschnitte  in  Lävulose  eingebettet, 
nachdem  die  überschüssige  Farblösung  durch  ein  kleines  Glasrohr 
abgeblasen  war,  und  solche  in  Kanadabalsam  haben  nach  Monaten 
bis  jetzt  völlig  unveränderte,  scharfe  Metachromasie  gezeigt.  Um 
rasch  ein  sicheres  Urteil  über  Amyloiddegeneratiou  frischer  Präparate 
zu  erhalten,  genügt  es,  einen  Tropfen  der  Lösung  auf  den  Schnitt 
zu  bringen,  in  einer  Minute  ist  die  Reaktion  da.  Man  kann  jetzt  in 
Lävulose  einschließen  oder  den  Schnitt  in  der  Farblösung  auflegen, 
absaugen  und  umranden.  Für  den  makroskopischen  Amyloidnachweis 
ist  die  Lösung  nicht  geeignet.  Eine  Doppelfärbung,  wie  die  von 
BiRCH- Hirschfeld  angegebene,  hält  Verf.  für  unzweckmäßig,  da  sie 
die  Amyloidreaktion  der  Kerne  verdecken  kann.  Eine  Überfärbung 
der  entparaffinierten  oder  frischen  Schnitte  ist  auch  bei  tagelanger 
Einwirkung  der  Lösung  ausgeschlossen.  Ein  der  Methylviolettfärbung 
überhaupt  anhaftender  Mangel,  die  metachromatische  Färbung  von 
Schleim  und  Knorpel,  tritt  auch  bei  der  vom  Verf.  angegebenen 
Methode  ein.  Verf.  geht  näher  auf  diesen  Mangel  der  Färbung  ein, 
weshalb  auf  das  Original  verwiesen  wird.  Wesentlich  ist,  daß  immer 
eine  frisch  hergestellte  Lösung  benutzt  wird,  da  alte  Lösungen  selbst 
in  einen  roten  Farbenton  umschlagen  und  die  Präparate  diflus  rot 
färben.  Schiefferdecker  {Bonn). 


560 


Referate.  XXII,  4. 


Bllimstein-Judilia,    B.,    Die  Pneumatisation    des   Markes 
der    Vogelknoclien    (Anat.  Hefte,  H.  87,    [Bd.  XXIX]. 
1905,  p.   1—52  m.   3  Tfln.). 
Die  Untersuchungen  wurden  ausgeführt  an  der  Taube,  und  zwar 
an    verschiedenen    Knochen    derselben,    da    sich    verschiedene    Modi- 
fikationen   in    den    einzehien    Fällen    ergaben.      Die   jüngsten    Tiere 
waren  3  Wochen  alt;  sie  werden  um  diese  Zeit  ßü^ge  und  befinden 
sich  gerade  in  dem  Stadium,  in  welchem  die  Knochenpneuraatisation 
im  Humerus    und  Sternum  beginnt.     Es  wurde  sorgfältig   darauf  ge- 
achtet,   daß    beim  Herausschneiden    der   Knochen  Blut    nicht    in   die 
Lufträume    eindrang.     Das  Tier    wurde    durch   Dekapitation    getötet, 
die  Haut  von  Brust  und  Rücken,  Schulter,  Oberarm  und  Oberschenkel 
wurde    entfernt,    das    Schulterblatt    vom    Paimpfe    abgelöst,    und    es 
wurde,  indem  man  bei  nach  oben  gewendeter  Brustseite    des  Tieres 
vorne  zu  schneiden  begann,  der  ganze  für  die  Lokomotion  besonders 
wichtige  Komplex:  Flügel,   Schultergürtel  und  Brustbein  mit  den  zu- 
gehörigen Muskeln,    sowie   mit  Herz    und  Herzbeutel   vom  Reste  ge- 
trennt,   wobei  die  Achselarterie    sowie  die  Rippen  (letztere  ungefähr 
an    der    Knickungsstelle)    durchtrennt    werden    mußten.      Dabei    ent- 
bluteten   die    Brustmuskeln    in    genügender  Weise,  um  bei  nachträg- 
licher Entfernung  derselben  weder  eine  Verunreinigung  des  Humerus 
noch    des  Sternums    und   Coracoides    mit  Blut    befürchten    zu   lassen. 
Beim  Herausschneiden  des  Humerus  wurde  darauf  geachtet,  daß  die 
um    den   Porus    pneumaticus    herum    endigenden  Muskeln    im  Niveau 
der  Ränder  der  dort  liegenden  Nische  möglichst  glatt  durchschnitten 
wurden.     Wegen  der  weiteren  makroskopischen  Manipulationen   wird 
auf   das  Original    verwiesen.     Fixiert    wurde  vorzugsweise   mit  einer 
lOprozentigen    Formollösung    in     90prozentigem    Alkohol;     entkalkt 
wurde  mit  5prozentiger  Salpetersäurelösung.     Es  ergab  sich  hierbei 
als  wichtig,  schon  bei  Beginn  dieser  Prozedur  auf   irgendeine  Weise 
für    möglichste  Verdrängung    der  Luft    aus    den  Knochen  zu  sorgen. 
Man    kann    das    auf   verschiedene  Weise  bewirken,   besonders  durch 
die  Eröffnung    größerer  Lufthöhlen,    so    daß    beim  Untertauchen  der 
Knochen    in   die   Flüssigkeit   die   Luft    in    Blasen    heraustreten   kann. 
Wenigstens    müssen    die  Knochen    bald    nach    der  Entkalkung    soviel 
als    möglich    zerlegt    werden.      Dann    Auswaschen    in    destilliertem 
Wasser,    steigender  Alkohol,    Einbettung  in  Celloidin   oder   Paraffin. 
Letztere  Einbettung    wird    für    den    Knochen    meist   als   unbrauchbar 
bezeichnet,  für  Knochen  (auch  Humerus,  Femur)  halbwüchsiger   und 
erwachsener  Tauben    ergibt  sie  indessen   ganz  brauchbare  Resultate. 


XXII,  4.  Referate.  561 

Verfahren  für  die  Paraffineiubettimg :  Die  entkalkten  Knoclieu 
müssen  möglichst  weitgehend  zerschnitten  sein,  am  besten  in  der  Rich- 
tung der  gewünschten  Schnittebene,  z.  B.  bei  Längsschnitten  durch  den 
Humerus  durch  Längsspaltung.  Die  Objekte  kommen  dabei  aus 
absolutem  (oder  auch  95prozentigem)  Alkohol  in  Karbolxylol,  nach 
völliger  Aufhellung  in  Xylol ,  dann  in  X3dol  -  Paraffin  (24  Stunden 
und  mehr  auf  dem  Brutofen) ,  dann  in  reines  Paraffin  (6  bis 
12  Stunden  im  Brutofen),  Wechseln  des  Paraffins  nach  einer  Viertel- 
stunde ,  erstnrren  lassen  (fingerhoch  mit  Paraffin  bedeckt) ,  in  einem 
Blechgefäße,  das  auf  kaltem  Wasser  schwimmt,  schneiden,  Auf- 
kleben der  Schnitte  mit  sehr  dünner  Schicht  Strasser  scher  Klebe- 
masse (CoUodium  duplex  und  Rizinusöl  zu  gleichen  Teilen)  auf 
reines  Glas,  Xylol,  90prozentiger  Alkohol  mit  Chloroform,  verdünnte 
Hämalaunlösung,  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser,  90prozentiger 
Alkohol,  Karbolxylol,  dem  Kreosoteosin  zugesetzt  ist,  Xylol,  Kanada- 
balsam, Deckglas.  Zwischen  den  letzten  Manipulationen ,  von  dem 
Auswaschen  in  destilliertem  Wasser  an,  jeweilen  Abtrocknen  mit 
Filtrierpapier.  Die  Schnitte  können  auch  auf  Naturpauspapier  ge- 
klebt und  in  vollständig  analoger  Weise  nachbehandelt  werden,  bis 
zum  Einlegen  der  gefärbten  Schnitte  in  Xylol.  Eine  besondere  Vor- 
behandlung des  Papiers ,  um  seine  Färbbarkeit  herabzusetzen ,  war 
nicht  nötig.  Nach  dem  Xylol  werden  die  Bänder,  mit  den  Schnitten 
nach  unten ,  auf  Glas  gebracht ,  das  mit  einer  Mischung  von  einem 
Volumteil  Damarharz  (Damarharz  3  und  Xylol  2  Teile)  mit  ^/-  Volum- 
teil gesättigter  Guttapercha-Schwefelkohlenstofflösimg  dick  bestrichen 
ist.  Man  läßt  daim  24  Stunden  am  Fenster  und  24  Stunden  im 
warmen  Ofen  trocknen,  dann  Abziehen  des  Papierbandes  vom  Glase 
auf  der  heißen  Metallplatte ,  Überstreichen  der  Schnittseite  mit  ver- 
dünnter Harz-Guttaperchalösung,  Trocknen  auf  dem  Nagelbrett,  Auf- 
heben zwischen  Filtrierpapier.  Nachträgliches  Abklatschen  beliebiger 
herausgeschnittener  Schnitte  von  der  Papierunterlage  auf  Glas  ist 
jederzeit  möglich.  Strasser  verfährt  dabei  neuerdings  folgender- 
maßen: Auflösen  des  Harzes  in  Xylol  oder  Chloroform,  Abtrocknen 
des  Papierstückes  mit  Filtrierpapier,  Aufkleben  der  Platte,  mit  dem 
Schnitte  nach  unten,  auf  den  Objektträger,  welcher  mit  einer  ziem- 
lich dickfiüssigen  Lösung  von  Kautschuk  in  Xylol  -  Chloroform  be- 
strichen ist.  Die  Platte  muß  sorgfältig  aufgepreßt  werden,  so  lange 
die  Klebeschicht  noch  feucht  ist.  Sofortiges  Einlegen  in  ein  Acetonbad. 
Nach  einigen  Minuten  läßt  sich  das  Papier  abziehen,  während  der 
Schnitt  auf  dem  Objektträger  zurückbleibt.     Man  nimmt  den  Objekt- 

Zeitsehr.  f.  -n-iss.  Mikroskopie.     XXII,  i.  36 


562  Referate.  XXII,  4. 

träger  aus  dem  Bade ,  läßt  das  Aceton  etwas  abdimsten  und  über- 
gießt mit  Kollodium  oder  überstreicht  mit  der  Strasser  sehen  Klebe- 
masse. Einlegen  in  ein  Bad  von  Karbolxylol  und  Chloroform  für 
eine  Viertelstunde,  Kanadabalsam,  Deckglas.  Verfahren  bei 
der  C  e  1 1 0  i  d  i  n  e  i  n  b  6 1 1  u  n  g  (nach  dem  von  Strasser  besonders 
für  den  vorliegenden  Zweck  ausprobierten  Verfahren).  Die  Knochen 
müssen  möglichst  weitgehend  zerschnitten  sein,  so  daß  das  Celloidin 
in  die  früher  mit  Luft  erfüllten  Höhlen  eintreten  kann.  Aus  abso- 
lutem Alkohol  kommen  die  Stücke  in  dünnes  Celloidin  und  dann  in 
dickertlüssiges ,  in  welchem  sie  wochenlang  unter  Verschluß  ver- 
bleiben. Eingebettet  wird  in  kleiner  Photographenschale ;  in  diese 
Schale  legt  man  ein  Papierkästchen.  In  dieses  kann  mau  eine 
Mehrzahl  von  Objekten,  z.B.  alle  Stücke  eines  Humerus  oder  Sternum, 
nebeneinander  in  genügenden  Abständen  hineinlegen,  eventuell  jedes 
Stück  auf  ein  mit  einer  Nummer  bezeichnetes  Papierchen.  Über- 
gießen mit  dickflüssigem  Celloidin.  Die  Schale  wird  dann  nicht 
ganz  luftdicht  bedeckt ,  so  daß  allmähliche  Erstarrung  fast  ohne 
Krustenbildung  stattfindet.  Sobald  eine  Kruste  sich  bilden  will,  oder 
die  Objekte  aus  der  sich  zusammenziehenden  Masse  aufzutauchen 
beginnen.  Nachgießen  von  Celloidin.  Erst  wenn  alles  gleichmäßig 
durch  und  durch  bis  zur  Schneidbarkeit  erstarrt  ist  und  die  Objekte 
dabei  genügend  dick  bedeckt  sind ,  wird  das  ganze  Papierkästchen 
mit  Inhalt  in  85prozentigen  Alkohol  zur  völligen  gleichmäßigen  Er- 
härtung gebracht  und  nach  Zerschneiden  in  Stücke  weiter  darin  be- 
lassen. Später  kann  man  die  Blöcke  zurechtschneiden ,  abtrocknen 
und  mit  ganz  dickflüssigem  Celloidin  auf  eine  Schiefer-  oder  Stabilit- 
platte  aufkleben.  Erstarrenlassen  der  Klebmasse  an  der  Luft,  Wieder- 
einlegen des  Ganzen  in  85  prozentigen  Alkohol.  Zum  Schneiden 
wurde  das  gewöhnliche  Paraffinmikrotom  mit  Objekttisch  (nicht 
Klammer)  und  breitem  STRASSERSchen  Messer  und  Messerhalter  be- 
nutzt. Die  Schieferplatte  des  Blockes  wird  unten  abgetrocknet  und 
mit  heißem  Spatel  und  Paraffin  auf  den  Objekttisch  aufgeklebt. 
Nach  wenigen  Minuten  kann  geschnitten  werden.  Bei  Unterbrechung 
der  Arbeit  wird  das  Objekt  mit  der  Stabilitplatte  vom  Objekttische 
abgelöst  und  wieder  in  Alkohol  von  85  Prozent  gebracht.  Es  wurde 
trocken  geschnitten,  d.  h.  ohne  wiederholte  Befeuchtung  des  Blockes 
oder  des  Messers.  Die  Weiterbehandlung  der  auf  Glas  oder  Papier 
aufgeklebten  Celloidinschnitte  geschieht  ganz  so,  wie  bei  den  Paraffin- 
schnitten ,  nur  daß  sie  zuerst  statt  in  Xylol  in  Karbolxylol  und  von 
da  in  90  prozentigen  Alkohol  kommen.     Das  Übertragen  der  Schnitte 


XXII,  4.  Referate.  563 

von  der  Papierimterlage  auf  eine  Glasunterlage  kann  ganz  wie  bei 
Paraffinschnitten  gescliehen.  Es  gibt  für  Cello Tdinschnitte 
ein  noch  einfacheres  A  b  k  1  a  t  s  c  h  v  e  r  f  a  h  r  e  u  :  Man  entfernt 
im  Xylolbade  das  Harz ,  trocknet  die  Platte  gut  ab  und  klebt  sie, 
den  Schnitt  nach  unten,  auf  den  mit  Strasser  scher  Klebemasse  be- 
strichenen Objektträger.  Das  Ganze  kommt  sofort  in  ein  Bad  von 
Karbolxylol.  Nach  Erstarrung  der  Klebeschicht  trocknet  man  wieder 
ab  und  bringt  nun  den  Objektträger  ins  Acetonbad ,  aber  nur  für 
eine  halbe ,  längstens  für  eine  Minute.  Man  kann  jetzt  das  Papier 
vom  Schnitte  abziehen ,  läßt  abdunsten ,  überstreicht  allenfalls  noch 
mit  Klebemasse  und  bringt  den  Objektträger  auf  einige  Zeit  ins 
Karbolxylolbad.  Xylol,  Kanadabalsam,  Deckglas.  Wie  Verf.  hervor- 
hebt, hat  sich  selbst  für  die  relativ  kleinen  Objekte,  mit  denen  sie 
arbeitete ,  bei  denen  sofortiges  Montieren  aller  Schnitte  auf  Glas 
sich  allenfalls  durchführen  läßt ,  das  Aufkleben  der  Schnitte  auf 
Papier  doch  als  ein  besonderer  Vorteil  erwiesen,  und  zwar  ganz  be- 
sonders im  Anfange  der  Arbeit ,  bis  die  besonders  wichtigen  und 
brauchbaren  Färbungen,  Schnittführungen,  die  günstigen  Objekte  und 
Objektstellen  gefunden  sind,  und  bis  die  erste  topographische  Über- 
sicht gewonnen  ist.  Handelt  es  sich  dann  weiter  aber  um  die  feine 
histologische  Untersuchung  bestimmter,  bekannter,  eigens  ausgesuchter 
Objekte  und  Objektstellen  mit  erprobten  Färbungsmethoden ,  dann 
werden  mit  Vorteil  von  vornherein  alle  Schnitte  direkt  auf  Glas 
montiert.  Schiefferdecker  (Bonn). 

Donaggio,  A.,  Cblorazione  positiva  delle  fibre  nervöse 
nella    fase  iniziale   della  degenerazione  prima- 
ria   e    secondaria,    sistematica    or    diffusa    del 
sistema    nervoso    centrale  (Riv.  Sperim.  di  Freniatr. 
t.  XXX,  fasc.   1). 
Lugiato,  L.,  Degenerazionisecondarie  spe-rimentali  [da 
strappo  dello  sciatico]    st u diäte    col    metodo   di 
DoNAGGio    per    le    degenerazioni  —   prima    e    se- 
conda    note    (Riv.  Sperim.  di  Freniatr.  t.  XXX,    p.   135. 
Beide  Arbeiten  ref.  n.  Ref.  in  Neurol.  Zentralbl.  Jahrg.  XXIV, 
1905,  No.  11,  p.  522—523). 
DoNAGGio  hat  die  empirisch  gefundene  Tatsache,  daß  degenerie- 
rende Fasern    nach    intensiver   Färbung    weit    resistender   gegen  alle 
Prozesse  der  Entfärbung  sind,  benutzt,    um  eine  neue  Methode  auf- 
zustellen,   die    scheinbar  recht  gute  Resultate  geliefert  hat.     Die   in 

36* 


564  Referate,  XXII,  4. 

Chromsalzen  gehärteten  Stücke  werden  in  wässeriger  Hämatoxylin- 
lösung  gefärbt,  mit  einem  Metallsalze  (am  besten  mit  ammoniakalischem 
Zinncblorür)  gebeizt  und  nach  Pal  differenziert.  Beizung  und  Diiferen- 
zierung  können  gleichzeitig-  vorgenommen  werden,  wenn  man  nach 
der  Färbung  mit  Hämatoxylin  die  Schnitte  in  eine  10-  bis  20pro- 
zentige  Eisenchloridlösung  bringt  (Modifikation  III  des  Verf.).  Die 
Methode  soll  folgende  Vorzüge  besitzen :  1)  Gibt  sie  schon  dann 
Resultate,  wenn  die  MARcm-Methode  noch  versagt;  2)  ist  sie  eine 
positive  Methode  ;  3)  ist  sie  die  einzige  Methode,  die  Veränderungen 
an  den  Nervenfasern  zeigt,  die  einer  langsamen  Atrophie  unterliegen, 
also  keinen  Zerfall  zeigen ;  ein  Prozeß ,  den  mau  als  Wirkung  ge- 
wisser Intoxikationen  auftreten  sieht ;  die  Atrophie  sieht  Verf.  als 
das  erste  Stadium  der  primären  Degeneration  an ;  4)  ist  die  Methode 
auch  bei  Material  anwendbar ,  das  monatelang  in  Chromsalzen  ge- 
härtet worden  ist. 

LuGiATO  hat  die  eben  beschriebene  Methode  von  Donaggio  an 
Kaninchen  geprüft,  denen  der  Ischiadicus  der  einen  Seite  heraus- 
gerissen war.  Er  kommt  zu  dem  Resultate,  daß  die  neue  Methode 
bereits  32  Stunden  nach  der  Operation  deutliche  positive  Resultate 
ergibt,  während  die  Marchi  -  Methode  erst  nach  72  Stunden  Ver- 
änderungen erkennen  läßt.  Bis  zum  30.  Tage  nach  der  Operation 
liefern  beide  Methoden  identische  Bilder;  von  da  ab  wird  der  Wert 
der  DoNAGGioschen  Methode  geringer,  während  die  MARCHi-Methode 
bis  zum  90.  Tage  gute  Resultate  liefert.     Schi  e  ff  er  decke  r  (Bonn). 

SchaiFer ,  K. ,    N  e  u  r  o  f  i  b  r  i  1 1  e  n  p  r  ä  p  a  r  a  t  e   nach   der  B  i  e  l  - 
s  c  H  o  w  s  K  y  s  c  h  e  n    Methode    (Psychiatrisch  -  neurologische 
Sektion  d.  königl.  Ärztevereins  Budapest,  Sitz.  16.  Jan.  1905, 
Ref.    in    Neurol.    Zentralbl.    Jahrg.  XXIV,    1905,    No.   12, 
p.   588—589). 
Die  Methode    ist    nach  Verf.    nicht   nur  bei  normalem,  sondern, 
was    sie   besonders  wertvoll  macht,    auch  bei  krankhaft  verändertem 
Materiale  ausgezeichnet  brauchbar,   wodurch  sie  der  im  übrigen  vor- 
züglichen Fibrillenmethode  von  Ramon  y  Cajal,   welche  nur  eine  be- 
stimmte   gürtelartige   Partie    des    Präparates    imprägniert,    überlegen 
ist.      Die   Imprägnation    erscheint    voller ,    wenn    man    statt    der    von 
BiELSCHOwsKY    vorgeschricbeüen    2prozentigeu  Silbernitratlösung    eine 
4prozentige  benutzt  und  die  Schnitte   nicht  24,    sondern  48   Stunden 
lang  in  der  Flüssigkeit  beläßt.».  Schiefferdecker  {Bonn). 


XXII,  4.  Referate.  565 

Dogiel,  A.  S. ,  Der  fibrilläre  Bau  der  Nervenend- 
apparate in  der  Haut  des  Menschen  und  der 
Säugetiere  und  die  Neuronentheorie  (Anat.  Anz. 
Bd.  XXVII,  1905,  No.  4,  5,  p.  97—118,  ni.  3  Tfln.). 
Es  ist  dem  Verf.  gelungen ,  mit  der  Silbermethode  die  Endi- 
gung der  Neurofibrillen  in  den  im  Epithel  gelegenen  Tastscheiben, 
in  den  typischen  und  modifizierten  Vater-Pacini  sehen  Körperchen, 
in  den  typischen  und  modifizierten  Meissner  sehen  Körperchen  und 
schließlich  in  den  „papillären  Büscheln"  von  Ruffini  genau  zu  stu- 
dieren. Als  Material  diente  die  Haut  der  Finger-  und  Zehenkuppen 
vom  Menschen ,  die  von  Haaren  befreiten  Hautteile  der  Finger  und 
Zehen  der  Katze,  sowie  das  Mesenterium  der  letzteren.  P^ine  hin- 
reichende Färbung  der  Neurofibrillen  in  diesen  Nervenendapparateu 
bei  der  Bearbeitung  der  Haut  mit  Silber  nach  dem  Verfahren  von 
Ramön  y  Cajal  wird  nur  dann  erhalten,  wenn  das  Material  vollkommen 
frisch  ist.  Von  den  verschiedenen  von  Cajal  angegebenen  Verfahren 
eignet  sich  für  diesen  Zweck  am  besten  das  von  ihm  in  der  Arbeit 
„Un  sencillo  metodo  de  coloracion  selectiva  del  reticulo  protoplasmico 
etc."  (Trab.  Labor.  Investig.  Biol.  Univ.  Madrid,  t.  2,  1903  fasc.  4) 
beschriebene.  Verf.  verwendete  gewöhnlich  eine  ein-  bis  2  prozentige 
Lösung  von  salpetersaurem  Silber ,  in  der  kleine  Hautstückchen  bei 
34  bis  36^  C.  3  bis  5  Tage  verblieben,  worauf  dieselben  nach 
raschem  Auswaschen  in  destilliertem  Wasser  in  das  reduzierende 
Gemisch  von  Formol  und  Pyrogallol  für  einen  bis  2  Tage  übertragen 
wurden.  Dann  abermaliges  kurzes  AusspiUen  in  destilliertem  Wasser, 
Härtung  in  absoluleiu  Alkohol,  Celloidineinbettung. 

Schiefferdecker  (Bonn). 

(xOldstein ,    K. ,     Untersuchungen    über    das    V  o  r  d  e  r  h  i  r  n 
und  Zwischeuhirn  einiger  Knochenfische  [nebst 
einigen    Beiträgen    über   Mittelhirn    und  Klein- 
hirn   derselben].       (Arcli.  f.   mikrosk.  Anat.    Bd.  LXVI, 
1905,  p.    135  —  219   m.  23  Fig.  u.   5  Tfln.). 
Außer    der  Degenerationsmethode,    die  nur   selten  befriedigende 
Resultate    gab    und    der  WEiGERTSchen    Markscheidenfärbung    kamen 
noch  eine  Reihe  anderer  Methoden  zur  Anwendung,  so  Färbung  der 
Fasern    mit    Osmium.     Sie   zeigt   viel   reichhaltigere  Fasermassen  als 
die    WEiGERTSche    Methode,    läßt    aber    bei    stärkerer    Vergrößerung 
und     besonders    in    Faserfilzen    weg^n    der    starken    Körnung    keine 
sicheren  Schlüsse  zu.    Weiter  kam  zur  Verwendung  Silberimprägnation 


566  Referate.  XXII,  4. 

der  Achseuzylincler  nach  Ramon  y  Cajal  (Fixierung-  in  Ammoniak- 
alkohol ;  Beliandlung  mit  Sibernitrat,  Reduktion  mit  Hydrocbiuon).  Die 
Resultate  waren  äußerst  zufriedenstellend.  Die  Vorzüge  der  Methode 
gegenüber  der  WEiGERTSchen  bestehen  darin,  daß  sie  einerseits  auch 
die  marklosen  Fasern  zur  Anschauung  bringt,  anderseits  neben  den 
Fasern  auch  die  Zellen  färbt,  so  daß  man  die  Faserzüge  viel  deut- 
licher bis  in  ihre  Kerne  verfolgen  kann.  Ein  Nachteil  der  Methode 
liegt  jedoch  zweifellos  in  der  großen  Fülle  des  Gefärbten,  die  be- 
sonders die  Abgrenzung  der  größeren  Systeme,  die  bei  der  Weigert- 
schen  Färbung  so  gut  zum  Ausdruck  kommen,  erschwert.  Schließ- 
lich wurden  noch  Zellfärbungen  mit  Thionin  nach  Nissl  und  mit 
Alaunkocheuille    nach  Fixation    in  Zenker  scher  Flüssigkeit    gemacht. 

E.  Schoehel  {Neapel). 

Berliner,  K.,  lieiträge  zur  Histologie  und  Entwick- 
lungsgeschichte des  Kleinhirns,  nebst  Be- 
merkungen über  die  Entwicklung  der  Funk- 
tionstüchtigkeit derselben  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat. 
Bd.  LXVI,  1905,  p.  220—269  m.  19  Figg.  u.  1  TU.). 
Der  erste  Teil  der  Arbeit  ist  den  von  Denissenko  als  Eosin- 
zellen  bezeichneten  Gebilden  der  Körnerschicht  des  Kleinhirns  ge- 
widmet. Was  die  Technik  der  diesbezüglichen  Untersuchungen  be- 
trifft, so  lieferten  zur  Fixierung  Alkohol,  ZENKERsche  Flüssigkeit, 
Pikrinsublimatlösung,  Chromoxalsäure  nach  Graf,  5prozeutige  Lösung 
von  doppelt  chromsaurem  Kali,  Müller  sehe  Flüssigkeit,  das  Erlicki- 
sche  Gemisch  und  Formol  brauchbare  und  prinzipiell  übereinstimmende 
Resultate ;  allerdings  erwies  sich  das  letztgenannte  Reagens  nicht 
immer  als  zuverlässig.  Das  hauptsächlichste  Charakteristikum  für 
das  Verhalten  der  eosinophilen  Körper  bei  der  Färbung  ist  die  aus- 
gesprochene Affinität  zu  sauren  Farbstoffen :  Eosin ,  Bleu  de  Lyon, 
Orange  G,  Rubin  S,  sowie  zu  besonderen  Farbgemischen,  wie  z.  B. 
dem  von  Mallory  angegebenen  phosphor-wolframsaurem  Plämatoxylin. 
Für  die  Doppelfärbung  mit  Eosin  und  polychromem  Methylenblau 
nach  Unna  erwies  sich  folgendes  Vorgehen  als  bestes :  Fixierung  in 
Zenker  scher  Flüssigkeit,  Paraftineinbettung ,  Färbung  erst  etwa 
15  Minuten  in  einer  konzentrierten  wässerigen  Eosinlösung  und  dann 
6  bis  12  Stunden  bis  zur  Durchsichtigkeit  (ca.  1  :  50)  verdünnten 
Lösung  von  Unnas  polychromem  Methylenblau,  schließlich  Differen- 
zierung in  96prozentigem  Alkohol  bis  das  Präparat  eine  rotviolette 
Farbe  zeigt.  E.   Schoehel  {Neapel). 


XXII,  4  Referate.  567 

Porta,  A.,  1^  i  c  e  r  c  h  e  a  n  a  t  o  m  i  c  h  e  s  u  11 '  a  p  })  a  r  e  c  c  li  i  o  v  e  I  e  - 
nifero  di  alciini  pesci  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905, 
No.  9,  10,  p.  232—247  c.  2  tavv.). 
Es  wurde  eine  Anzahl  verschiedener  Arten  von  Phigiostomen 
und  Teleostiern  untersucht.  Zur  Fixation  wurden  verwandt:  Subli- 
mat in  gesättigter,  wässeriger  Lösung,  alkoholische  Subliniatlösung 
mit  Eisessig,  Pikrinsäure  und  Chromsäure.  Entkalkt  wurde  mit  2pro- 
zentiger  Chromsäurelösung  und  mit  der  Methode  von  Rousseau:  Die 
fixierten  und  gut  in  Celloidin  eingebetteten  Stücke  kommen  in  90prozen- 
tigen  Alkohol,  dem  20  Prozent  Salpetersäure  zugesetzt  sind,  für  12  bis 
24  Stunden ,  dann  in  90prozentigen  Alkohol  mit  Zusatz  von  kohlen- 
saurem Kalk  zur  Neutralisierung  (aber  allmählich  bis  ungelöste  Stückchen 
übrig  bleiben).  Dann  Übertragen  in  reinen  90prozentigeu  Alkohol  und 
Schneiden.  Verf.  hat  gute  Resultate  mit  der  gemischten  Einbettung  er- 
halten. Die  Serienschnitte  wurden  gefärbt  mit  dem  Neapeler  Borax- 
karmin, mit  HämalauH  und  mit  Thionin.      Schiefferdecker  (Bonn). 

Haaiie ,  (x. ,  Über  die  C  a  r  d  i  a  d  r  ü  s  e  n  und  C  a  r  d  i  a  d  r  ü  s  e  n  - 
zone  des  Magens  der  Haussäugetiere  (Arch.  f. 
Anat.  u.  Physiol.  1905,  Anat.  Abt.,  H.  1,  p.  1—32  m.  1  Tfl.). 
Der  den  eben  getöteten  Tieren  rasch  entnommene  Magen  wurde 
sofort  aufgeschnitten  und  entleert ;  dann  wurden  Stücke  ausgeschnitten : 
längere  Schleimhautstreifen  aus  verschiedenen  Stellen  der  Cardiaregion, 
besonders  aber  von  den  Grenzpartien  derselben :  Cardia  -  Pylorus- 
grenzregion  ,  Cardia  -  Fundusgrenzregion  ,  Cardia  -  Oesophagusgrenz- 
region;  beim  Schweine  auch  Schleimhautstücke  aus  dem  Diverticulum 
ventriculi.  Die  vorsichtig  und  rasch  gereinigten  Schleimhautstreifen 
■wurden  in  die  Fixierungsflüssigkeit  gebracht:  heiß  gesättigte  Sublimat- 
Kochsalzlösung  mit  einigen  Tropfen  Eisessig.  Nach  24  Stunden  Aus- 
waschen in  fließendem  Wasser ;  steigender  Alkohol ;  Paraffineinbettung. 
Färbung  gewöhnlich  mit  Hämatein  und  Eosin ;  für  Mucin:  Ij  Häma- 
toxylin - Delafield  und  Eosin;  2)  Hämatein  und  Mucikarrain  oder 
Bismarckbraun ;  3)  Muchämatein  und  Erythrosin ;  4)  Toluidinblau. 
Für  elastische  Fasern  Fuchsin-Resorzin ;  für  M u s k e I g e w e b e 
Hämatein  mit  Säurefuchsin  -  Pikrinsäure  ;  für  S  e  k  r  e  t  k  a  p  i  1 1  a  r  e  n  , 
Kitt-  und  Schlußleisten  Eisenalaunhämatoxylin  mit  Erythrosin. 
Zur  Feststellung  der  mikrochemischen  Eigenschaften  der  Cardiadrüsen- 
zelle  wurde  noch  eine  Reihe  weiterer,  neutraler,  basischer  und  saurer 
Anilinfarben  verwendet,  wie  Aurantia,  Indulin,  Orange  etc. 

Schiefferdecker  (Bonn) . 


568  Referate.  XXII,  4. 

Bartel,  J. ,  u.  Stein,  R. ,  Lymphdrüsenban  und  Tuber- 
kulose (Arch.  f.  Anat,  u.  Pliysiol.  1905,  Anat.  Abt.,  H.  2,  3, 
p.  141—158  m.  1  Tfl.). 
Die  Methode,  welche  die  Verf.  angewendet  haben,  um  das  binde- 
gewebige Gerüst  in  den  Lymphdrüsen  zu  studieren,  beruht  im  wesent- 
lichen auf  einer  modifizierten  Mallory scheu  Methode,  wie  sie  bereits 
von  WoöLLEY^  angewendet  worden  ist.  Die  Methode  war  die  folgende: 
Die  in  ZENKERScher  Flüssigkeit  fixierten  Objekte  werden  in  Paraffin 
eingebettet.  Die  Schnitte  werden  in  gewöhnlicher  Weise  auf  dem 
Objektträger  durch  Antrocknen  fixiert  und  nach  Entfennmg  des 
Paraffins  durch  Xylol  mit  Alkohol  und  Wasser  abgespült.  Dann 
werden  sie  mit  einer  O'lprozeutigen  wässerigen  Säurefuchsinlösung 
2  bis  3  Minuten  gefärbt  und  dann  in  Wasser  ausgewaschen.  Sie 
verbleiben  in  einer  einprozentigen  Lösung  von  Phosphor -Molybdän- 
säure 5  bis  7  Minuten ,  werden  sorgfältig  in  Wasser  abgespült  und 
kommen  dann  in  ein  Farbgemisch  bestehend  aus : 

Anilinblau 0-5  g 

Orange  G 0-2  „ 

Oxalsäure 2*0  „ 

Destilliertes  Wasser 100  cc 

Hierin  bleiben  die  Präparate  etwa  20  Minuten ,  dann  kurzes 
Abspülen  in  Wasser,  absoluter  Alkohol,  Ditt'erenzierung  in  ein  paar 
Tropfen  Anilinöl ,  Xylol ,  Kanadabalsam.  Man  tut  gut  daran ,  die 
Phosphor  -  Molybdänsäurelösung  möglichst  oft  zu  erneuern ,  da  sich 
dieselbe  leicht  zersetzt  und  dann  eine  grünliche  Färbung  annimmt. 
Die  Differenzierung  mit  reinem  Anilinöl  ist  ferner  nicht  so  gut  als 
eine  solche  mit  Anilin  und  Xylol  zu  gleichen  Teilen ,  da  die  mit 
reinem  Anilinöl  behandelten  Schnitte  sich  leichter  falten  und  ferner 
dadurch,  daß  sie  Spuren  von  Anilin  in  sich  zurückbehalten,  rasch 
abblassen.  Die  so  gefärbten  Lymphdrüsenschnitte  zeigen  die  Kapsel, 
die  Trabekel,  das  Reticulum  der  Follikel  und  Markstränge  und  end- 
lich das  in  den  Rindensinus  und  tiefen  Lymphbahnen  ausgespannte 
Fasernetz  vollständig  deutlich,  bis  zu  den  feinsten  Fäserchen  hin 
leuchtend  blau  gefärbt.  Die  Lymphocyten  zeigen  die  braunrote  Kontrast- 
farbe des  Fuchsins  und  heben  sich  von  dem  blauen  Reticulum  besser 
ab,    als    dies   nach    der  Mallory  sehen  Hämatoxylinfärbung  der  Fall 


^)  WoOLLEY,  F.  G.,  A  study  of  the  reticular  supporting  network  in 
malignant  neoplasms  (Johns  Hopkins  Hospital  Bull.,  Jan.  1903,  vol.  XIV, 
no.  142). 


XXII,  4.  Referate.  509 

ist.  Die  roten  Blutkörperclien  liegen  deutlich  orangegelb  gefärbt  in 
den  Blutgefäßen ,  von  welchen  auch  die  feinsten  noch  durch  die 
deutliche  Blaufärbung  ihrer  Wand  plastisch  hervortreten.  Das  elastische 
Gewebe,  Colloid  und  Schleim  werden  ebenfalls  intensiv  blau  gefärbt 
und  lassen  sich  von  dem  rotgefärbten  Protoplasma  deutlich  unter- 
scheiden. Die  Verflf.  machen  im  allgemeinen  auf  die  außerordentliche 
Verwendbarkeit  dieser  modifizierten  MALLOUY-Färbung  zur  Darstellung 
bindegewebiger  Substanzen  und  Fasernetze  aufmerksam. 

Schiefferclecker  (Bonn) . 

Petersen ,  0. ,   Über   sekretorische  Änderungen    im   Epi- 
thel   der     ableitenden    Haruwege     bei     einigen 
Säugetiereu    (Anat.    Anz.  Bd.  XXVII,    1905,    No.  8,  9, 
p.  187  —  199  m.  4  Tflu.). 
Das  Material  wurde  teils  im  frischen  Zustande  untersucht,  teils 
in    Formol -MtJLLER,    Sublimat,    50-  bis  20prozentiger    Formollösung, 
absolutem  Alkohol,   einprozentiger  Osmiunisäure  fixiert.     Die  Paraffiu- 
schnitte    wurden    gefärbt    mit    Hämatoxylin  (Hansen)  ,    Eosin ,    Eisen- 
hämatoxylin,  Mucikarmin,  der  Ehrlich-Biondi sehen  Dreifarbenmischung, 
Toluidinblau  und  Thionin  (beide  in  wässeriger  Lösung). 

Schiefferdecker  (Bonn). 

Steril ,  M. ,  Histologische  Beiträge  zur  Sekretion  der 
Bürzeldrüse  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  1905, 
p.  299—311  m.  1  Tri.). 
Fixiert  wurde  meist  mit  lOprozentigem  Formol.  Nach  ein-  bis 
2stündigem  Wässern  wurden  die  Drüsen  dann  mit  dem  Gefriermikro- 
tom geschnitten.  Die  Färbung  erfolgte  sofort  darauf  entweder  mit 
Scharlachrot  nach  Herxheimer  allein  (eventuell  kombiniert  mit  Häm- 
alaun-Kernfärbung)  oder  mit  einer  Mischung  von  gleichen  Teilen 
Scharlachrot  und  einprozentiger  Osmiumsäurelösung.-  In  diesem,  un- 
mittelbar vor  dem  Gebrauch  herzustellenden  Geraisch,  blieben  die 
Schnitte  6  bis  24  Stunden ;  wurden  dann  für  eine  bis  2  Stunden  in 
mehrmals  gewechseltes,  destilliertes  Wasser  gebracht,  auf  dem  Objekt- 
träger mit  Fließpapier  abgetrocknet  und  in  Glyzerinleim  eingeschlossen. 
Die  Osmium -Scharlachrot -Mischung,  die  nicht  filtriert  werden  darf, 
obgleich  sich  beim  Zusammengießen  beider  Flüssigkeiten  ein  starker 
Niederschlag  bildet,  ergab  die  besten  Resultate.  Versuche,  die  gleichen 
färberischen  Effekte  mit  getrennter  Behandlung  (zuerst  Scharlachrot 
und  nachher  Osmium  und  umgekehrt)  zu  einhalten,  blieben  ohne  Er- 


570  Referate.  XXII,  4. 

folg.  Um  Niederschläge  im  Scliuitt  tunlichst  zu  vermeiden ,  wurden 
die  Gefriei'ßchnitte  häufig  vor  und  nach  der  Behandlung  mit  Osmium- 
Scharlachrot,  die  übrigens  immer  in  dunkeln  Flaschen  vorgenommen 
wurde,  auf  einige  Minuten  in  öOprozentigen  Alkohol  gelegt.  Außerdem 
wurden  Schnitte,  die  9  bis  16  Tage  mit  Osmium  oder  Osmiumalaun 
behandelt  und  nachher  24  Stunden  in  destilliertem  Wasser  gewässert 
worden  waren,  in  Cllyzerinleim  untersucht.  Zum  Studium  der  lipoiden 
Körnchen  wurden  die  Gefrierschuitte  nach  Behandlung  mit  öOpro- 
zentigera  Alkohol  24  Stunden  mit  einprozentigem,  wässerigem  Safranin 
gefärbt,  mit  angesäuertem,  absolutem  Alkohol  ditferenziert,  dann  für 
24  Stunden  in  96prozentigen  Alkohol  gebracht,  schließlich  entwässert 
und  in  Xylol-Balsam  eingeschlossen.  E.   Sehoebel  {Neapel). 

lUing,  Cr.,  Über  einen  eigenartigen  Befund  in  den 
Glandulae  v  e  s  i  c  u  1  a  r  e  s  und  den  Glandulae 
ductus  deferentis  des  Rindes  (Arch.  f.  mikrosk. 
Anat.  Bd.  LXVI,  1905,  p.  121  —  127  m.  1  Tfl.). 
Um  zu  zeigen,  daß  die  eigentümlichen  bläschenförmigen  Gebilde, 
wie  sie  nach  Fixierung  in  Sublimatkochsalzlösung  und  Färbung  mit 
Hämatoxylin  und  Eosin,  basal  von  den  hohen  zylindrisclien  Zellen 
des  sekretorischen  Epithels  der  betreffenden  Organe  zu  konstatieren 
sind,  nicht  etwa  Hohlräume  sind ,  sondern  daß  es  sich  vielmehr  um 
eigenartige  Zellen,  etwa  Fettzellen,  handelt,  wurden  zunächst  die 
Resultate  verschiedener  Fixationsmittel  geprüft.  Sublimateisessig, 
Formol  und  ZENKERSche  Flüssigkeit  gaben  keinen  weiteren  Aufschluß; 
wohl  aber  die  in  Podwyssotzki  scher  Lösung  (einprozentige  Chrom- 
säure 15  cc,  ^/^prozentige  Sublimatlösung  15  cc,  2prozentige  Osmium- 
säure 4  cc  und  Eisessig  6  bis  8  Tropfen)  fixierten,  mit  Chloroform 
behandelten  und  in  Paraffin  eingebetteten  Präparate,  die  die  basalen 
Kugelzellen  intensiv  schwarz  gefärbt  zeigen.  Zur  definitiven  Fest- 
stellung, daß  der  Zelleninhalt  tatsächlich  Fett  sei,  wurden  noch  die 
gebräuchlichen  Fettfarben  Scharlach  R,  Sudan  III  und  Indophenol 
angewendet.  Für  die  Färbung  mit  Scharlach  R  wurden  die  Organ- 
stücke in  lOprozentiger  Formollösung  24  Stunden  fixiert,  in  fließen- 
dem Wasser  mehrere  Stunden  ausgewaschen  und  mit  dem  Gefrier- 
mikrotom geschnitten.  Die  Schnitte  kamen  vom  Mikrotom  ins  Wasser, 
wurden  dann  kurz  mit  70prozentigem  Alkohol  abgespült  und  in  die 
von  Herxheimer  angegebene  Farblösung  (absoluter  Alkohol  70, 
lOprozentige  Natronlauge  10,  destilliertes  Wasser  10,  Scharlach  R 
zur  Sättigung)  2  bis  3  Minuten  eingelegt.     Dann   wurde   wieder  mit 


XXII,  4.  Referate.  57 1 

TOprozentigem  Alkohol  kurz  abgespült  und  mit  einer  dünnen  wässe- 
rigen Hämatoxylin-,  Tohiidinblau-  oder  Methylenblaulösung  nach- 
gefärbt ,  mit  Wasser  abgespült  und  in  Lävulose  oder  Glyzerin  ein- 
gelegt. Die  fraglichen  basalen  Kugelzellen  erscheinen  bei  dieser 
Methode  intensiv  rot  gefärbt.  Sudan  III  wurde  in  ganz  gleicher 
Weise  angewandt,  auch  die  Farblösuug  ganz  analog  der  von  Schar- 
lach R  hergestellt,  nur  betrug  die  P'ärbdauer  etwa  5  bis  10  Minuten. 
Die  Resultate  waren  die  gleich  guten.  Indophenol  kam  in  einer,  in 
TOprozentigem  Alkohol  gesättigten  Lösung  bei  einer  Einwirkung  von 
ca.  20  Minuten  zur  Verwendung.     Die  Resultate  waren  weniger  gut. 

E.  Schoebel  (Neapel). 

Meyer,  P. ,  Ein  Verfahren  zur  Erzielung  haltbarer 
Amyloid  Präparate  (Virchows  Arch.  Bd.  CLXXX,  1905, 
p.  359—361). 
Verf.  hebt  hervor,  daß  es  sehr  schwer  ist,  Amyloidpräparate 
als  brauchbare  D  a  n  e  r  p  r  ä  p  a  r  a  t  e  (Xylol ,  Kanadabalsam)  herzu- 
stellen. Die  Herstellung  eines  solchen  Präparates  scheitert  daran, 
daß  die  Anilinfarben,  insbesondere  das  Methylviolett,  welches  für 
Kurszwecke  am  prägnantesten  die  Metachromasie  zeigt,  durch  die 
der  Färbung  folgende  entwässernde  Alkoholbehandlung  ausgezogen 
werden.  Ebenso  löst  bei  der  Jodreaktion  der  Alkohol  das  Jod  auf. 
Allerdings  kann  man  mittels  der  Methode,  die  Schnitte  vor  der  Ent- 
paraffinierung  zu  färben ,  sehr  leicht  Balsampräparate  herstellen ,  in 
denen  die  rote  Metachromasie  der  amyloiden  Teile  sehr  deutlich 
hervortritt  und  beschränkt  haltbar  bleibt  (Schmorl),  aber  für  Kurs- 
zwecke ist  diese  Methode  nicht  geeignet.  Nach  verschiedenen  Ver- 
suchen hat  Verf.  die  Trocknung  angewendet.  Das  mit  Methylviolett 
gefärbte,  mit  stark  verdünnter  Essigsäure  in  bekannter  AVeise  diffe- 
renzierte und  in  Wasser  abgespülte  Präparat  wird  an  der  Luft  ge- 
trocknet, dann  sofort  in  Xylol  mit  nachfolgendem  Kanadabalsam  ge- 
bracht. Auf  diese  Weise  bleibt  die  Metachromasie  deutlich  erhalten: 
in  intensiv  leuchtend  roter,  fast  rubinroter  Farbe  treten  die  amyloiden 
Teile  hervor.  Die  Gewebsstruktur  leidet  allerdings  etwas,  doch  ist 
diese  bei  Methylviolettfärbung  immer  nur  undeutlich.  Kommt  es 
darauf  an ,  den  Farbenunterschied  festzuhalten ,  wie  dies  für  Kurs- 
zwecke der  P'all  ist,  dann  sind  die  Bilder  genügend.  Die  Jodreaktion 
auf  diese  Weise  dauernd  zu  erhalten ,  war  leider  nicht  möglich ; 
Verf.  schreibt  dies  der  Paraffineinbettung  zu.  Dagegen  gelingt  es, 
Corpora    amylacea  der  Prostata  durch  die  Trocknung   dauernd  gelb- 


572  Referate.  XXII,  4. 

brauu  zu  erlialteu,  während  das  übrige  Gewebe  kaum  durch  die 
Jodierung  gefärbt  erscheint.  Das  von  Harz  für  Stärkekörner  an- 
gegebene Jodparaffinöl  hat  Verf.  bisher  ohne  Erfolg  versucht  zur 
Amyloidrealvtion  zu  benutzen.  Die  Trockenmethode  ist  natürlich  nur 
für  aufgeklebte  Parafünschnitte  verwendbar;  Gefrierschnitte  und 
Celloidiupräparate  können  nicht  getrocknet  werden. 

Schieferdecker  {Bonn). 

Kraus,  A. ,  Zur  Färbung  der  Hyphomyceten  im  Horn- 
gewebe  (Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Orig.  Bd.  XXXVII,  1904, 
H.  1,  p.  153—155). 
Verf.  stellt  sich  aus  Methylenblau  medicinale  die  nötige  Farb- 
stofflösung —  nach  Michaelis  —  derart  her,  daß  2  g  Farbstoff  in 
100  ccm  Wasser  gelöst,  dann  zur  Lösung  10  ccm  ^/^^  Normal-Natron- 
lauge zugefügt  werden  und  die  Flüssigkeit  zum  Sieden  erhitzt  und 
eine  Viertelstunde  im  Sieden  erhalten  wird.  Dann  läßt  man  erkalten 
und  setzt,  um  eine  vollständige  Neutralisation  zu  erreichen,  10  ccm 
^\^Q  Normal-Schwefelsäure  hinzu.  Mit  der  so  gewonnenen  „Methylen- 
azur"-Lösung  färbt  Verf.  die  pilzhaltigen  Schuppen  5  Minuten  lang 
und  wäscht  aus  bis  keine  Farbwolken  mehr  abgehen;  hiernach 
Alkohol,  Xylol,  Kanadabalsam.  Verf.  erprobte  sein  einfaches  Ver- 
fahren, bei  dem  die  Hyphomyceten  sich  blau  färben,  an  Favus-Haaren 
bei  Pityriasis  versicolor,  Herpes  tonsurans ,  Eczema  marginatum  und 
Erythrasma.  —  Brauchbare,  doch  minder  zuverlässige  Färbungen 
der   Pilze  erhielt  Verf.   mit  Methylgrünpyronin. 

Küster  {Halle  a.  S.). 


B.   Bakterien, 

IJoit,  H.,  Einfache  und  sichere  Identifizierung  des 
T  y  p  h  u  s  b  a  c  i  1 1  u  s.  Jena  (G .  P^ischer)  1 905  ;  48  pp.  1  M. 
Nach  einem  etwas  weit  ausgeholten  historischen  Überblick  über 
die  zahlreichen  Nährböden,  die  zur  leichteren  Isolierung  von  Typhus- 
bazillen im  Laufe  der  Jahre  angegeben  worden  sind^  geht  Verf.  zur 
Behandlung  seines  Themas  über.  Er  benutzte  eine  größere  Anzahl 
von  Typhusstämmen,  die  er  auf  dem  Lakmusnutroseagar  von  Drigalski- 
CoNRADi  prüfte  im  Vergleich  zu  andern  dem  Typhusbacillus  nahe- 
stehenden Bakterien  (hauptsächlich  der  Gruppe  der  Paratyphusbazillen). 


XXII,  4.  Referate.  57 


o 


Zur  genaueren  Identifizierung  benutzte  er  dann  die  Agglutination  und 
außerdem  noch  die  Kultur  in  der  Petrüschky sehen  Lakmusmolke. 
Die  andern  Differeuzierungsnährböden ,  welche  häufig  bei  Unter- 
suchungen auf  Typhusbazillen  zur  Sicherstellung  der  wahren  Typhus- 
bazillennatur der  isolierten  Mikroorganismen  noch  herangezogen  werden, 
glaubt  Verf.  bei  Anwendung  des  Drigalski  Conradi sehen  Nährbodens, 
spezifischer  einwandfreier  Agglutination  und  der  PETRUscHKYSchen  Lak- 
musmolke bei  der  praktischen  Typhusdiagnose  entbehren  zu  können.  Eine 
besondere  Behandlung  erfährt  noch  das  Bacterium  faecale  alkaligeues 
Petrüschky,  welches  von  allen  typhusähnlichen  Bakterien  demTyphus- 
bacillus  selbst  kulturell  wohl  am  meisten  ähnelt ,  so  daß  in  letzter 
Zeit  Versuche  angestellt  wurden ,  den  Alkaligenes  in  den  Typhus- 
bacillus  überzuführen,  wie  nunmehr  aber  von  Berghaus  nachgewiesen 
ist,  mit  negativem  Erfolg.  Durch  spezifische  Agglutination  und  die 
Kultur  in  Lakmusmolke  wird  sich  der  „Alkaligenes"  — ■  selbstverständ- 
lich eine  Reinkultur  vorausgesetzt  —  stets  vom  Typhusbacillus  unter- 
scheiden lassen.  W.  Hoffmann  {Berlin). 

Seiter,  Über  Sporenbildung  bei  Milzbrand  und  andern 
sp  or  en  b  ii  d  e  n  d  en  Bakterien  fZentralbl.  f.  Bakteriol. 
Abt.    1,   Orig.  Bd.   XXXVIL  H.   2,  p.  186). 

Über  die  Sporenbildung  der  Milzbrandbazillen  und  dir  not- 
wendigen Ursachen  hierfür  sind  bisher  trotz  vielfacher  diesbezüglicher 
Untersuchungen  übereinstimmende  Resultate  nicht  erzielt  worden,  be- 
sonders ist  die  Frage,  ob  der  Milzbrandbaeillus  auch  unter  anaeroben 
Bedingungen  sporifizieren  könne,   einwandsfrei  noch  nicht  erledigt. 

Selter  hat  «ich  diesen  Untersuchungen  erneut  zugewandt  und 
systematisch  die  Sporenbildung  in  flüssigen  und  auf  festen  Nährböden 
und  die  Sporenbilduug  einiger  Anaerobier  untersucht.  Die  Resultate 
seiner  ausgedehnten  Experimente  sind  folgende: 

1)  Die  günstigsten  Nährböden  zur  Erzielung  einer  reichlichen 
Sporenbildung  bei  Aerobiern  sind  einfache  Bouillon  und  Agar  und 
besonders  nach  Zusatz  von  2prozentigem  Milchzucker. 

2)  .5prozentiger  Glyzerinzusatz  zu  den  Nährböden  übt  auf  die 
Sporeubildung  einen  hindernden  Einfluß  aus,  in  nicht  so  erheblichem 
Maße  auch  2prozeutiger  Traubenzucker. 

3)  Es  gelingt  schon  durch  einige  wiederholte  Überimpfungen 
auf  Glyzerinagar  asporogene  Stämme  zu  erzeugen. 

4)  Die  Sporenbildung  kommt  bei  eintretendem  Ernährungs- 
mangel zustande,  aber  nur,   wenn  die  Bazillen   auf  der  Höhe  ihrer 


574  Referate.  XXII,  4. 

Entwicklung    stehen ,    d,  h.   noch    keinen    regressiven   Veränderungen 
unterlegen  sind. 

5)  Die  Spore  bei  Milzbrand  wird  durch  Zusammenziehung  des 
Protoplasmas  gebildet. 

6)  Auch  in  unverdünntem  Blutserum  kann  Sporenbildung  bei 
Milzbrand  eintreten. 

7)  Je  reichlicher  die  Sauerstotfzufuhr,  um  so  besser  die  Sporen- 
bildung. 

8)  Bei  Sauerstoffabschluß  ist  bei  Milzbrand  keine  Sporenbildung 
zu  erzielen. 

9)  Quitten-  und  Eibischschleim  sind  nicht  imstande,  den  Sauer- 
stoff zu  ersetzen  —  was  früher  von  Weil  behauptet  worden  war.    [Ref.] 

10)  Die  Sporenbildung  der  Anaerobier  wird  durch  Zusätze  von 
Traubenzucker  und  Glyzerin  nicht  beeinträchtigt,  sondern  im  Gegen- 
teil begünstigt. 

Die  Arbeiten  Selters  sind  mit  großer  Sorgfalt  durchgeführt, 
immerhin  wäre  eine  Bestätigung  seiner  Resultate  besonders  betreffs 
Absatz   10)  auch  von  anderer  Seite  wünschenswert. 

W.  Ho  ff  mann  {Beiiin). 

Turban,  Demonstration  und  Erläuterung  mikrosko- 
pischer Präparate  von  Tuberkulose  (Verhandl.  d. 
22.  Kongresses  f.  innere  Med.,  1905,  p.  438). 
Der  Verf.  demonstrierte  auf  dem  obengenannten  Kongresse  fol- 
gende Präparate  von  Tuberkulose,  indem  er  sich  anschließend  über 
die  angewandten  Färbemethoden  eingehender  aussprach.  Die  ersten 
Präparate  dienten  dem  Versuch,  „Sporen"  in  dem  Tuberkelbazillus 
nachzuweisen.  Um  zu  einem  Resultate  zu  kommen ,  wandte  der 
Verf.  eine  äußerst  intensive  Färbemethode  an,  da  der  Tuberkel- 
bazillus, an  sich  schon  ziemUch  resistent  gegen  Farbstoffe,  wenn  über- 
haupt, dann  solche  Sporen  bilden  dürfte,  die  hochgradig  widerstands- 
fähig gegen  den  Färbeprozeß  sind.  Zu  diesem  Zweck  wandte  Verf. 
längere  Zeit  heißes  alkalisches  Karbolfuclisin  an.  Färbte  man  hier- 
mit 1^/2  Stunden,  ohne  es  aber  zum  Kochen  kommen  zu  lassen, 
dann  färbten  sich  in  den  Tuberkuloseerregern  auch  die  sonst  un- 
gefärbt bleibenden  Lücken  und  außerdem  wurden  sowohl  an  den 
Enden,  als  auch  im  Verlauf  des  Stäbchens  dunkelrote  große  Kugeln 
oder  Körner  sichtbar :  diese  Körner  überragten  den  Bazillenleib  meist 
an  Dicke  und  waren  auch  intensiver  gefärbt.  Der  Verf.  läßt  die 
Frage    aber    unentschieden,    ob    die   Körner    als  „Sporen"    oder    nur 


XXIT,  4.  Referate.  575 

als  ERNSTSche  Körpercbeu  aufzufassen  sind;  er  neigt  der  Ansicht 
zu,  daß  es  sich  um  eine  Chromatindifferenzierung  im  Bakterienplasma 
handehi  könnte,  aus  der  —  bei  anderen  Arten  —  dann  später 
Sporen  hervorgehen.  Der  Tuberkelbazillus  läßt  es  hiernach  vielleicht 
bei  diesem  Anlauf  zur  Sporenbildung  bewenden.  Läßt  man  längere 
Zeit  trockene  Hitze  einwirken ,  so  werden  nur  noch  vereinzelte 
Kugeln  gefärbt,  während  der  Bazillenkörper  vernichtet  ist.  Hiernach 
wäre  diesen  Kugeln  eine  höhere  Widerstandsfähigkeit  zuzusprechen. 
Weiter  machte  Verf.  darauf  aufmerksam ,  daß  Tuberkelbazillen  in 
Trockenpräparaten ,  welche  1  ^j.^  Stunden  im  Trockenschrank  bei 
180^  gehalten  wurden,  sich  mit  gewöhnlichen  wässerigen  oder  ver- 
dünnt alkoholischen  Anilinfarben  tingieren  und  ihre  Säurefestigkeit 
bei  der  Entfärbung  verloren  haben. 

Ferner  konnte  der  Verf.  mit  Delafields  Hämatoxylin  in  Prä- 
paraten von  ein  bis  2  Jahre  alten  Reinkulturen  Hüllen  um  die 
Tuberkelbazillen  nachweisen;  letztere  selbst  konnten  mit  einer  Kon- 
trastfarbe gefärbt  werden. 

In  Sputis  lassen  sich  Tuberkelbazillen  und  elastische  Fasern 
getrennt  färben  durch  folgende  Färbemethoden.  Das  Präparat  wird 
mit  gewöhnlichem  Karbolfuchsin  gefärbt,  mit  .3prozentigem  salzsauren 
Alkohol  entfärbt  und  mit  Weigert s  Färbung  nachbehandelt.  Die 
Tuberkelbazillen  sind  rot,  die  elastischen  Fasern  grau -blau.  In  an- 
deren Präparaten  demonstrierte  der  Verf.  Auflagerungen  auf  ela- 
stischen Fasern ,  welche  durch  „Ansintern"  von  Fett  an  die  elasti- 
schen Fasern  entstanden  sind.  In  einem  mit  Hämatoxylin-Eosin  ge- 
färbten Schnitt  konnte  Turban  eine  Mischinfektion  von  Tuberkulose 
und  Karzinom  —  in  Alveolen  benachbart  —  demonstrieren. 

W.  Hoffmann  {Beo'lin). 

Herxheimer,  K.,  u.  Hübner,  H.,  Über  Dar  st  ellungs  weise 
und  Befund  der  bei  Lues  v  0  r  k  0  m  m'  e  n  d  e  n  S  p  i  r  0  - 
chaete  pallida  (Deutsche  med.  Wochenschr.  1905,  No.  26, 
p.  1023). 
Obgleich  von  Schaudinn  betreffs  Färbung  der  Spirochaete  pallida 
mitgeteilt    worden    ist,    daß    Präparate    mit    dem    Romanowsky sehen 
Eosin -Methylenblaugemisch  gefärbt,   wenig  günstig  ausfallen,    haben 
die  Verflf.    mit   dieser  Farblösung   häufiger   gut   gefärbte   Spirochäten 
gesehen ;    diese    Spirochäten    wurden    aber    von  Schaudinn   nicht   als 
die  Syphiliserreger,   sondern  als  die  nicht  selten  zu  findenden  Spiro- 
chaete refringentes   gedeutet.     Die  Verff.    färbten    hierauf   nach    der 


576  Referate.  XXII,  4. 

modifizierten  Giem.sa  sehen  Färbemethode  (Färbung  über  Nacht  in 
einer  Mischung  von  12  Teilen  Eosinlösung  —  2,5  cc  einer  einpro- 
zentigen  wässerigen  Eosinlösung  in  500  cc  Wasser  —  3  Teilen 
Azur  I  —  Lösung  1  :  1000  Wasser  - —  3  Teile  Azur  II  —  Lösung 
0,8  :  1000  Wasser  — )  und  erhielten  trotz  Farbstoftniederschlägen 
gute  Bilder,  wenn  die  Niederschläge  das  Aufsuchen  auch  erschwerten. 
Sie  versuchten  Modifikationen  und  benutzten  eine  filtrierte  wässerige 
Lösung  von  Nilblau  BR  oder  Capriblau  je  1  :  1000  über  Nacht 
16  bis  24  Stunden.  Mit  Nilblau  sind  die  Spirochäten  dunkell)lau 
und  scharf  gefärbt ,  mit  Capriblau  grau ;  jedoch  stellen  die  Verfi'. 
über  diese  Methode  noch  weitere  Mitteilungen  in  Aussicht.  Sie  emp- 
fehlen ferner,  die  Giemsa- Lösung  nicht  fertig  zu  beziehen,  sondern 
sie  aus  den  Stammlösungen  jedesmal  frisch  herzustellen. 

W.  Hoffm.ann  {Berlin). 

Giemsa,  G.,  Bemerkungen  zur  Färbung  der  S  p  i  r  o  c  h  a  e  t  e 
pallida  (Deutsche  med.  Wochenschr.  1905,  No.  26, 
p.  1026). 
Da  über  die  von  dem  Verf.  angegebeneu  Methoden  der  Roma- 
NOwsKYSchen  Färbung,  wie  aus  Publikationen  hervorgeht,  verschiedene 
irrtümliche  Auffassungen  bestanden ,  hält  Verf.  einige  Aufklärungen 
über  die  zu  verwendenden  Farbstotfe  für  notwendig.  Während  die  ur- 
sprüngliche RoMANOwsKYSche  Färbung  zur  Darstellung  der  Chromatin- 
substanz  in  blutschmarotzenden  Protozoen  aus  einem  Gemisch  von 
Eosin  und  alter  Methylenblaulösung  bestand,  hat  Verf.,  nachdem  von 
anderer  Seite  das  wirksame  Agens  in  dieser  Farbmischung  erkannt, 
dieses  Färbemittel  dargestellt  und  als  Azur  eingeführt.  Darauf  baute 
sich  seine  erste  Färbemethode  auf,  die  in  der  Anwendung  zweier 
wässerigen  Lösungen  bestand ,  von  denen  die  eine  die  basischen 
Farbstoffe  (Azur  II -reines  Methylenazur  -|-  reines  Methylenblau  ää), 
die  andere  den  sauren  Farbstoff  des  Eosin  enthielt.  Diese  Methode 
gab  und  gibt  bei  einiger  Übung  gute  Präparate,  doch  verderben  die 
Lösungen  leicht  und  die  Herstellung  des  richtigen  Mischungsverhält- 
nisses ist  infolgedessen  mit  einigen  Schwierigkeiten  verbunden.  Eine 
einzige,  gebrauchsfertige  Lösung  war  hiernach  sehr  erwünscht.  Giemsa 
empfahl  hierauf  folgende  Lösung: 


Azur  II -Eosin 30 

Azur  II 0-8 

Glyzerin  (Merck) 250-0 

Methylalkohol  (Kahlbaum  I) 250-0 


XXII,  4.  Referate.  577 

Ausführung  der  Färbuug :  Härten  des  sehr  dünnen  Ausstrichs 
in  Alkohol  absolutus  (15  bis  20  Minuten).  Verdünnung  der  Farb- 
lösung mit  destilliertem  Wasser  in  einem  weiten  graduierten  Reagens- 
glas unter  Umschütteln ,  wobei  man  die  Farblösung  am  besten  aus 
einer  Tropfflasche  hinzufließen  läßt.  Übergießen  der  Präparate  mit 
der  soeben  hergestellten  Farblösung.  Fäi-bedauer  10  bis  15  Minuten. 
Abwaschen  im  scharfen  Wasserstrahl  etc. 

Für  manche  Zwecke  —  auch  für  die  Spirochätenfärbung  —  ist 
es  empfehlenswert,  zu  dem  Wasser  vor  der  Mischung  mit  dem  Farb- 
stoff etwas  Kaliumkarbonat  (1  bis  10  Tropfen  einer  einprozentigen 
Lösung)  hinzuzufügen. 

Die  Spirochaete  pallida  ist  nach  dieser  Methode  schon  nach 
15  Minuten  gefärbt,    am    schönsten    und    schärfsten  aber  nach  einer 

^*""*^^®-  W.  Hoffmann  {Berlin). 

Reitmann ,  K. ,  Zur  Färbung  der  Spirochaete  pallida 
(Deutsche  med.  Wochenschr.   1905,  No.  25,  p.   997). 

Da  sowohl  mit  der  Giemsa  sehen  Azur-Eosinmischung  als  mit 
anderen  Farbstofl'en  die  Darstellung  der  Spirochaete  pallida  besonders 
für  den  in  diesen  Untersuchungen  noch  nicht  Geübten  manchmal 
mit  Schwierigkeiten  verbunden  ist,  suchte  Verf.  eine  Färbemethode 
auszuarbeiten,  mit  der  sich  die  Spirochäte  schnell  und  intensiv  färbt, 
so  daß  sie  sich  auch  von  dem  „Anfänger"  leicht  auffinden  läßt.  Die 
Methode  besteht  in  folgendem :  Die  gutgereinigten  Deckgläser  werden 
mit  dem  Untersuchungsmaterial  in  möglichst  dünner  Schicht  beschickt, 
und ,  nachdem  sie  lufttrocken  geworden  sind ,  in  reichlicher  Menge 
absoluten  Alkohols  fixiert,  und  dann  durch  aqua  destillata  auf  5  Mi- 
nuten in  2  prozentige  Phosphorwolframsäurelösuug  übergeführt.  Hier- 
auf wird  diese  Beize  mit  destilliertem  Wasser  und  70prozentigem 
Alkohol  gründlich  abgespült,  das  Präparat  wieder  in  destilliertes 
Wasser  gebracht  und  dann,  nach  Abtrocknung  der  nicht  beschickten 
Fläche  mit  Karbolfuchsin  unter  Erwärmen  über  der  Flamme  bis 
zur  intensiven  Dampfbildung,  wobei  aber  ein  Aufwallen  der  Lösung 
möglichst  zu  vermeiden  ist ,  gefärbt.  Dann  folgt  Abspülen  mit 
Leitungswasser^  Schwenken  in  70prozentigem  Alkohol,  Waschen  in 
Wasser  —  bis  keine  Farbwolken  mehr  abgehen  —  und  schließlich 
Trocknen. 

Zellkerne  erscheinen  dunkel,   die   Spirochäten  intensiv  rot. 

W.  Hoffmann  {Berlin). 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.    XXII,  4.  37 


578  Referate.  XXII,  4. 

Thesing",  C,  Ein  Wort  zu  dem  Aufs  atze  von  Dr.  Giemsa 
„Bemerkungen    zur    Färbung    der    Spirochaete 
pallida"     (Deutsche    med.    Wochensclir.    1905,    No.    32, 
p.   1279). 
Der  Verf.  wendet  sich  gegen  Äußerungen  von  Dr.  Giemsa  über 
Bemerkungen,    die    der  Verf.    über    das    leichte  Verderben  etc.    von 
Farblösungen  gemacht  hat,  indem  er  anführt,  daß  er  die  neue  Farb- 
stofflösung Giemsa s  nicht  erwähnt  habe,    welche  sich  aus  absolutem 
Methylalkohol  und  konzentriertem  Glyzerin  zusammensetze.     Er  habe 
nur  behauptet,   daß  die   „alte"  GiEMSA-Lösung  leicht  zur  Verschimme- 
lung    neige ,    wofür    vielleicht    der  Zusatz  von  Dextrin ,    der  von  den 
Händlern  des  leichten  Abwägens  wegen  zugesetzt  werde,    anzuschul- 
digen sei.  —  Weiter  wendet  er  sich  gegen  Giemsa  s  Behauptung,  daß  die 
von  dem  Verf.  in  den  Farblösungen  gesehenen  Bakterien  Kristalle  (!) 
gewesen  wären.  W.  Hoffmann  (Berlin). 

(xiemsa,  G.,  Erwiderung  zu  vorstehenden  Bemerkungen 
(Deutsche  med.  Wochensclir.  1905,  No.  32,  p.  1279). 
In  einigen  kurzen  Sätzen  nimmt  Giemsa  Stellung  zu  den  The- 
siNGSchen  Behauptungen  und  schließt  mit  den  Worten,  daß  sich  die 
Einwände  Thesings  durch  die  inzwischen  von  den  verschiedensten 
Seiten  eingetroffenen  Bestätigungen  über  die  mit  Giemsa -Lösung 
färberisch  dargestellten  Erreger  des  Syphilis  —  Spirochaete  pallida 
—  als  grundlos  erwiesen  hätten.  W.  Hoffmann  (Berlin). 

Noeggerath  u.  Staehelin,  Zum  Nachweis  der  Spirochaete 
pallida  im  Blut  Syphilitischer  (Münchener  med. 
Wochensclir.  1905,  No.  31,  p.  1481). 
Zum  Nachweis  der  Spirochaete  pallida  im  Blut  sekundär  syphili- 
tischer Menschen,  was  für  die  Entscheidung  der  von  Schaudinn  und 
Hofpmann  entdeckten  Spirochaete  pallida  als  Ätiologie  des  Syphilis 
von  eminenter  Bedeutung  war,  empfehlen  Noeggerath  und  StachelIxX 
folgendes  Verfahren.  Mindestens  1  cc  Blut  (aus  einer  Vene  oder 
aus  dem  Ohrläppchen)  wird  in  einer  ungefähr  zehnfachen  Menge 
^gprozentiger  Essigsäure  aufgefangen,  die  Flüssigkeit  zentrifugiert 
und  die  mit  dem  Bodensatz  hergestellten  Ausstrichpräparate  nach 
Giemsa  gefärbt.  Diese  Färbungsmethode  wird  durch  die  Vorbehand- 
lung mit  der  stark  verdünnten  Essigsäure  nicht  merkbar  beeinträch- 
tigt, wenn  man  die  Farblösung  frisch  herstellt  und  sie  mehrere 
Stunden  einwirken  läßt. 


XXII,  4.  Referate.  579 

Auf  diese  Weise  fanden  die  Autoren  die  Syphiliserreger  leicht 
und  meist  in  großer  Anzahl  in  luetischem  Blut,  während  Kontroll- 
untersuchungen bei  Nicht-Syphilitikern  stets  negative  Resultate  ergab. 

W.  Hoffmann  (Berlin). 

Baudi    u.    Simonelli,    Über    die    Anwesenheit    der    Spiro- 
chaete  pallida  in  sekundär  syphilitischen  Mani- 
festationen   und    über    die    zu    ihrem    Nachweis 
angewendeten  Färbungsmethoden  (Münchener  med. 
Wochenschr.   1905,  No.  35,  p.  1668). 
Bei    der    Färbung    der    Schaudinn- Hoffmann  sehen    Spirochäten 
wandten   die   Verff.    außer    der    gewöhnlichen    GiEMSASchen    Methode 
mehrere  andere  Färbemethoden  an,  die  sogar  meistens  bessere  Bilder 
boten,  so  die  ZiEHLSche  Flüssigkeit  und   die  in  der  bakteriologischen 
Praxis    gebräuchlichen     alkoholischen     Lösungen     der     gewöhnlichen 
Anilinfarben,  und  zwar  fixierten   sie  die  Präparate  zuerst  in^  Alkohol 
oder    mittels  Hitze     und     ließen     dann    die    Farblösungen    bei    Hitze 
wenige  Sekunden  einwirken.    Besonders  heben  die  Verif.  hervor,  daß 
sie  häufig    die  Spirochäten    innerhalb    der  Zellen  vorgefunden  haben, 
und  zwar  meist  innerhalb  der  Kernsubstanz,  weswegen  sie  von  einem 
Zellparasitismus    sprechen.      Letztere    Beobachtung    ist    von    anderen 
Spirochätenforscheru  nicht  gemacht  worden.     [Ref.] 

W.  Hoffniann  {Berlin). 

Oppenheim,  M.,  u.  Sachs,  0.,  Eine  einfache  und  schnelle 

Methode   zur  deutlichen  Darstellung   der  Spiro- 

chaete  pallida  (Deutsche  med.  Wochenschr.  1905,  No.  29, 

p.  1156). 

Die    Verff.    empfehlen    folgende    Färbemethode    zur    Darstellung 

der  Spirochaete  pallida  : 

Die  dünnen,  trocknen,  nicht  vorher  fixierten  Deckglasausstrich- 
präparate werden  mit  einer  alkoholischen  Karbol-Gentianaviolettlösung 
(5prozentige  wässerige  Karbolsäurelösung  100  cc,  konzentrierte  alko- 
holische Gentianaviolettlösung  10  cc)  übergössen  und  über  einer 
Bunsenflamme  bis  zur  Dampfbildung  vorsichtig  erwärmt.  Dann  werden 
die  Präparate  vorsichtig  mit  Wasser  abgespült,  mit  Filtrierpapier 
getrocknet ,  in  Kanadabalsam  eingeschlossen  und  dann  untersucht. 
Die  Spirochaete  pallida  ist  deutlich  blau. 

Die  Vertf.  empfehlen  die  Methode  wegen  ihrer  leichten  Ausführ- 
barkeit. W.  Hoffmann  {Berlin). 

37* 


580  Referate.  XXII,  4. 

Suiith ,  E.  F. ,  B a c t e r i a  in  r e  1  a t i o u  t o  plant  diseases. 
Vol.  1.  Methods  of  work  and  general  literature 
of  bacteriology  exclusive  of  plant  diseases. 
Washington  D.  C,  1905. 
In  einem  Kapitel  gibt  Verf.  eine  Reihe  von  Färbungsrezepten. 
Von  Geißelfärbungsmethoden  erwähnen  wir:  1)  V.  A.  Moores  Geißel- 
färbung. Nachdem  man  das  Bakterienhäutchen  auf  dem  Deckglas 
dadurch  befestigt  hat,  daß  man  es  5  bis  10  Minuten  lang  einer 
Temperatur  von  120^  bis  140^  ausgesetzt  hat,  bringt  man  das  Objekt 
zur  Beize  in  ein  Reagierrohr,  das  folgende  Beize  enthält:  10  cc 
20prozentige  Tanninlösung,  5  cc  kalte,  gesättigte,  wässerige  Eisen- 
sulfatlösung ,  1  cc  gesättigte ,  alkoholische  Lösung  von  basischem 
Fuchsin,  oft  vorteilhaft  auch  ^/.^  cc  einprozentige  Natronlauge.  Man 
erhitzt  bis  zur  Dampfentwicklung  und  läßt  das  Objekt  5  bis  10  Mi- 
nuten lang  in  der  heißen  Flüssigkeit.  Dann  wäscht  man  das  Objekt 
in  Wasser  aus  und  färbt  wieder  in  einem  Reagierrohr  mit  Ziehls 
Karbol-Fuchsin ,  indem  man  1  bis  3  Minuten  lang  bis  zur  Dampf- 
entwicklung erhitzt.  Ein  gekrümmter  Platin draht  dient  zum  Heraus- 
holen des  Objektes  aus  dem  Reagierrohr.  2)  Hugh  Williams  Me- 
thode. Bakterium  und  Geißel  werden  schwarz  gefärbt.  Man  beizt, 
indem  man  das  Deckglas  nicht  ganz  eine  Minute  lang  mit  folgender 
Beize  bedeckt :  1  Teil  einprozentige  Aliimnollösung  (Meister,  Lucius 
und  Brüning),  1  Teil  2prozentige  Osmiumsäure,  3  Teile  20prozen- 
tige  Tanninlösung.  Nach  Schütteln  der  Mischung  muß  man  3  Tropfen 
Eisessig  zufügen  und  wieder  schütteln.  Dann  bedeckt  man  das  Ob- 
jekt mit  einprozentiger  Silbernitratlösung,  der  einige  Tropfen  Ammoniak- 
wasser zugefügt  sind.  Dabei  werden  die  Geißeln  mit  Silber  imprägniert. 
Auswaschen  mit  Wasser.  Um  den  Austritt  von  Silber  und  ein  Fest- 
setzen austretender  Silberteilchen  auf  dem  Deckglas  zu  verhüten, 
wäscht  man  aus  mit  0"6prozentiger  Chlornatriumlösung,  mit  30pro- 
zentigem  Ammoniakwasser ,  dann  mit  Wasser.  Nun  verstärkt  man 
die  Luprägnation  durch  Gold  und  Quecksilber  auf  folgende  Weise. 
Nachdem  man  einige  Tropfen  photographischen  Entwickler  Ortol 
hinzugefügt  hat ,  wäscht  man  mit  Wasser ,  bedeckt  einige  Sekunden 
mit  einprozentiger  Chlorgoldlösuug,  wäscht,  gibt  Entwickler  zu,  wäscht, 
bedeckt  einige  Sekunden  mit  Quecksilberchlorid  (einprozentige  Lösung), 
wäscht  und  fügt  wieder  Entwickler  hinzu.  Das  Waschen,  Bedecken 
mit  Chlorgold  und  Entwickler  muß  zwei  oder  mehrere  Male  wieder- 
holt werden.  Nach  jeder  Behandlung  mit  Chlorgold  muß  man  den 
Verlauf    der    Färbung    mit    starken    Vergrößerungen     kontrollieren. 


XXII,  4.  Referate.  581 

3)  Duckwalls  Metliode,  Ausstriche  auf  2prozentigem  Agar  in  Petri- 
Schalen  von  jungen  Bouillonkulturen.  Suspensionen  in  Wasser.  Pigment 
und  Schleim  werden  durch  Schütteln  mit  Chloroform  entfernt.  Die 
Beize  muß  stets  frisch  verwendet  werden.  Färbung  nach  Löffler 
ohne  Überhitzuug.  Vorsichtig  in  Alkohol  und  Wasser  waschen,  in 
Xylol  aufhellen  und  ohne  vorhergehende  Prüfung  einbetten. 

Von  den  Kapselfärbungen  teilen  wir  mit:  Richard  Muirs  Kapsel- 
färbung. Die  getrockneten  Häutchen  werden  2  Minuten  gebeizt  mit : 
Gesättigte,  wässerige  Quecksilberchloridlösung  2  Teile,  20prozentige, 
wässerige  Tanninlösung  2  Teile,  gesättigte,  wässerige  Kaliumalaun- 
lösung 5  Teile.  Dann  waschen  mit  Wasser ,  Alkohol ,  wieder  mit 
Wasser,  2  bis  3  Minuten  lang  bei  leiser  Hitze  mit  Karbolfuchsin 
färben ,  waschen  mit  Wasser ,  2  bis  3  Minuten  wiederum  beizen, 
wieder  waschen.  Dann  färben  mit  gesättigter,  wässeriger  Lösung 
von  Methylenblau  2  Minuten  lang ,  bleichen  in  Methylalkohol ,  auf- 
hellen in  Xylol.  Freund  {Halle  a.  8.). 


C.   Botanisches. 

Gräfe,  V. ,  Eine  neue  Reihe  von  H  o  1  z  r  e  a  k  t  i  o  n  e  n  (( Jsterr. 
Botan.  Zeitschr.  Bd.  LV,   1905,  p.  174). 

Das  Interesse  der  vorliegenden  Mitteilung  liegt  darin ,  daß  sie 
mit  einigen  neuen,  der  aliphatischen  Reihe  entstammenden  Holz- 
reagentien  bekannt  macht. 

Verf.  setzt  zu  einer  Lösung  von  Vanillin  einige  Tropfen  Iso- 
butylalkohol  und  läßt  an  der  Reagenzglaswand  ein  wenig 
Schwefelsäure  (spez.  Gew.  1'84)  hinabfließen.  unter  starkem  Er- 
wärmen färbt  sich  dabei  die  Probe  dunkelrot  mit  starkem  Stich  ins 
Blaue.  Nach  kurzer  Zeit  erscheint  die  Flüssigkeit  im  durchfallenden 
Licht  violett,  im  auffallenden  blau,  nach  längerem  Stehen  wird  sie 
durchaus  blau ;  nach  entsprechender  Verdünnung  mit  Alkohol  und 
abermaligem  Säurezusatz  blaugrün  bis  hellgrün.  Die  Nuance  ist 
übrigens  weniger  von  der  Probenkonzentration  als  von  der  Menge 
des  zugesetzten  Reagenz  abhängig.  Verf.  empfiehlt  ein  einheitliches 
Reagenz  sich  herzustellen:  Auf  30  cc  Isobutylalkohol  15  cc  Schwefel- 
säure. Die  Mischung  färbt  sich  hell-  bis  dunkelrot ,  es  entwickelt 
sich  Schwefeldioxyd.  Behandelt  man  Holzmehl  mit  einigen  Tropfen 
der  Reagenzmischung,  so  färbt  sich  das  Holz  (infolge  der  Schwefel- 


582  Referate.  XXII,  4. 

Sälire  Wirkung)  schwärzlich ;  verdünnt  man  mit  wenig  Alkohol  und 
schüttelt  man  das  Reagenzglas,  so  zeigen  die  an  der  Wand  anhaften- 
den Holzteilchen  hlaue  bis  blaugrüne  Färbung,  die  Flüssigkeit  nimmt 
dasselbe  Rotviolett  an,  wie  es  vorhin  für  die  Vanillinlösung  angegeben 
wurde.  —  Behandelt  man  mikroskoijische  Schnitte  durch  verholzte 
Gewebe  mit  dem  Reagenz ,  so  färben  sich  diese  zunächst  rotviolett 
und  erst  nach  längerer  Zeit  blau.  Verf.  hält  es  für  ratsam ,  die 
Schnitte  nicht  länger  als  etwa  eine  Stunde  in  dem  Reagenz  liegen 
zu  lassen,  uud  sie  dann  in  Glyzerin  zu  übertragen.  Im  allgemeinen 
erscheinen  dann  die  Zellen  prächtig  blau,  einige  aber  auch  grün  und 
rotviolett;  vielleicht  hängt  die  Verschiedenheit  in  der  Färbung  mit 
dem  Grad  der  Verholzung  zusammen ;  es  wäre  möglich ,  daß  das 
Reagenz  die  Verholzungs  Intensität  zu  beurteilen  gestattet.  Warum 
die  Blaufärbung  erst  im  Glyzerin  deutlich  wird ,  ist  noch  nicht  er- 
mittelt. 

Ebenso  wie  Butylalkohol  wirken  auch  Amyl-  und  Hexylalkohol. 
Verf.  hebt  hervor,  daß  einige  Substanzen,  die  keinen  „Holzstoff"  ent- 
halten und  gleichwohl  mit  den  WiESNERSchen  Reagentien  sich  färben 
(Katfeesäure,  Ferulasäure),  mit  dem  neuen  Reagenz  keine  Färbung 
geben.  Pikronat  liefert  zwar  ein  intensives  Rotviolett,  das  aber 
schnell  in  Grasgrün  übergeht.  —  Die  mit  Isobutylalkohol- Schwefel- 
säure gefärbten  Schnitte  sind  nur  für  5  bis  6  Tage  haltbar. 

Weiterhin  findet  Verf.,  daß  Isobutylaldehyd,  mit  Schwefel- 
säure zusammengebracht ,  ebenfalls  ein  brauchbares  Holzreagenz  ab- 
gibt. Bringt  man  mikroskopische  Schnitte  in  einen  Tropfen  der 
Mischung ,  so  färben  sie  sich  nach  und  nach  rötlich ;  legt  man  sie 
nach  etwa  einer  Stunde  in  Glyzerin,  so  werden  sie  weinrot  bis  rot- 
violett. Küster  {Halle  a.  S.). 

Hus,   Henri    T.    A.,    Spind  le    Formation   in   the    Pollen- 

M  0 1  h  e  r  -  C  e  1 1  s    o  f    C  a  s  s  i  a    t  o  m  e  n  t  o  s  a    B.    (Proc.    of 

the    California    Acad.    of   Sei.    3.  Ser.    Bot.    vol.  II,    1904, 

110.    11,  p.   329 — 354). 

Beim  Fixieren   hat  Verf.   36  verschiedene  Lösungen   verwendet. 

Am   besten    wirkte    konzentrierte  FLEMMiNGSche  Lösung,    wenn  nicht 

länger  als   10  bis   12  Stunden  fixiert  wurde.    Bei  längerem  Fixieren 

und    bei    allen    andern    Lösungen     (außer    der    Telliesniczky sehen 

Flüssigkeit)  schrumpfte  das  Gewebe  etwas.     Sogleich  beim  Sammeln 

muß     fixiert    werden.      Das    Waschen    darf   nicht    länger    als    6    bis 

8   Stunden    dauern ;    langer  Aufenthalt   in    den   schwächeren  Alkohol- 


XXII,  4.  Referate.  583 

lösiingen  ist  gloichfalls  schädlich.  Zum  Einbetten  wurde  Paraffin 
mit  einem  Schmelzpunkt  von  71^  C.  verwendet.  Beim  Färben  ver- 
fährt Verf.  folgendermaßen :  Nach  Ablösen  des  Paraffins  durch  Xj'lol 
und  zweimaligem  Waschen  mit  95prozentigem  Alkohol  wurde  in 
Safraninlösung  (gleiche  Teile  von  gesättigter  alkoholischer  und  ge- 
sättigter wässeriger  Lösungen)  £  Minuten  gefärbt ,  danach  mit  ab- 
solutem Alkohol  (Zusatz  von  O'lprozentiger  Salzsäure)  entfärbt  und 
mit  Wasser  abgespült ,  bis  keine  Spur  mehr  von  Salzsäure  blieb. 
Dann  wurde  5  Minuten  in  gesättigter  wässeriger  Gentianaviolett- 
lösung  gefärbt,  20  Sekunden  mit  Jodjodkalilösung  (Jod  1  Teil, 
Jodkali  4  Teile,  Wasser  3000  Teile)  differenziert,  eine  Sekunde  mit 
absolutem  Alkohol  entwässert  und  in  Nelkenöl  aufgehellt.  So  bleiben 
die  achromatischen  Fäden  blaugefärbt;  bei  Zusatz  von  Orange  Gr, 
statt  Jodjodkalilösung,  werden  sie  total  entfärbt. 

Ernst  A.  Bessey  ( Miami). 

ThomsOU,  ß.  B.,  The  Megaspore-membrane  of  the  Gym- 
n  0  s  p  e  r  m  s  (University  of  Toronto  Studios,  Biological  Series, 
1905,  no.  4). 
Außer  bei  den  Taxaceen  besitzt  bei  jeder  Gruppe  der  Gymno- 
spermen das  Prothallium  (Makrospore)  eine  Sporenmembran.  Bei 
den  Araucarien  ist  sie  einfach ;  bei  den  übrigen  Familien  besteJjt  sie, 
wie  bei  den  Pteridophyten ,  aus  zwei  Schichten  (Exine  und  Intine). 
Durch  Chlorzinkjod  wird  die  Exine  gelbbraun,  die  Intine  dagegen 
äußerlich  braun,  mitten  violett  und  innerlich  weniger  intensiv  violett 
gefärbt.  Durch  Schwefelsäure  und  Jod  wird  die  Exine  dunkel  gelb- 
braun gefärbt.  Von  außen  nach  innen  nimmt  die  Intine  folgende 
Farben  an :  gelblichbraun,  gelb,  grüngelb,  blau  und  wieder  grüngelb. 
Diese  Farben  sind  bezw.  dunkelrot,  rötlichviolett,  violett,  dunkel- 
und  hellgelb  nach  Behandlung  mit  einer  sehr  verdünnten  Lösung 
von  EHRLiCHsehem  saurem  Häraatoxylin  und  Alaunlösung  und  danach 
mit  verdünnter  wässeriger  Safraninlösung.  Dabei  wird  die  Exine 
kirschrot  gefärbt. 

Verf.  schließt  aus  diesen  verschiedenen  Reaktionen,  daß  die 
Exine  verkorkt  ist;  die  Intine  dagegen  soll  nur  äußerlich  verkorkt, 
mitten  reine  Zellulose  sein  und  innen  aus  Pektinverbindungen  be- 
stehen. Ernst  A.  Bessey  (Miami). 

Ferguson,  Marg-aret  C. ,   C  o  n  t  r  i  b  u  t  i  o  n  s  t  o  the  k  n  o  w  1  e  d  g  e 
of   the    life    history    of    Pinus    with    special    re- 


584  Referate.  XXII,  4. 

f  e  r  e  n  c  e    t  o    s  p  o  r  o  g  e  n  e  s  i  s ,    t  h  e    d  e  v  e  1  o  p  m  e  n  t    o  f 
tlie  gametophytes  and  fertilization    (Proc.    Wash- 
ington Acad.  Sei.  vol.  VI,   1904,  p.  1—202,  pls.  1—24), 
Das    zu    fixierende  Material    wurde    von    mehreren   Bäumen   ge- 
nommen, um  irgendwelche  individuelle  Eigentümlichkeiten  bei  einzelnen 
Bäumen    auszuschließen.      Folgende    FixierungsÜlissigkeiten    wurden 
probiert:   Chromosraiumessigsäure,  Chromessigsäure,  Sublimat  (wässe- 
rige Lösung),  absoluter  Alkohol  und  das  CARNOvsche  Gemisch.    Die 
beste    Formel    war    folgende ,    die    fast    ausschließlich    von    der  Ver- 
fasserin verwendet  worden  ist : 

Cbromsäure  (Kristalle) 1'3  g 

Osminrasäure 0"5  „ 

Eisessig 8'3  „ 

Destilliertes  Wasser 160"0  cc 

Beim  Fixieren  vom  Prothallium  mit  nur  noch  einer  wandstän- 
digen Plasmaschicht  mit  freien  Kernen  wurde  diese  Flüssigkeit  auf 
die  Hälfte  verdünnt  und  nur  15  Stunden  lang  angewendet;  für  andere 
Entwicklungsstadien  wurde  sie  unverdünnt  24  Stunden  lang  benutzt. 
Bei  Schwarzwerden  der  Lösung  wurde  frische  zugesetzt.  Das  Waschen 
hat  2  bis  12,  meistens  6  Stunden  gedauert.  Es  wurden  8  Konzentra- 
tionsstufen des  Alkohols  beim  Entwässern  benutzt.  In  den  niederen 
Stufen,  sowie  im  absoluten  Alkohol  darf  man  das  Material  nicht  über 
6  Stunden  liegen  lassen.  Nach  12  stündigem  Entwässern  in  85pro- 
zentigem  Alkohol  wurde  durch  folgende  Lösung  entfärbt:  35  Teile 
pro  Hundert  Wasserstoffsuperoxydlösung  in  95prozentigem  Alkohol. 
Das  Aufhellen  in  Zedernöl  dauerte  mitunter  3  bis  4  Wochen  ohne 
Nachteil.  Beim  Einbetten  benutzte  Verf.  Gemische  von  25,  50  und 
75  Teilen  pro  Hundert  Paraffin  mit  Zedernöl  und  endlich  Paraffin 
mit  einem  Schmelzpunkt  von  54^  C.  Der  FLEMMiNGSche  Dreifarben- 
prozeß und  das  Heidenhain  sehe  Hämatoxylin  erwiesen  sich  als  die 
besten  beim  Färben.  Beim  Gebrauch  des  letzteren  wurde  oft  nach- 
träglich mit  Orange  G,  Bismarckbraun,  FLEiiMiNGSchem  Gemisch  oder 
Gentianaviolett  und  Orange  G  gefärbt,  um  den  kinoplasmatischen  Bau 
deutlich  sichtbar  zu  machen.  Ernst  A.  Bessey  {Miami). 

Haberlandt,  0.,  Über  die  P 1  a  s  m  a  h  a  u  t  der  C  h  1  o  r  o  p  1  a  s  t  e  n 

in  den  A  s s i m i l a t i o n s z  e 1 1 e n  von  S  e  1  a g i n e  1 1 a 
Martensii  Spring.  (Ber.  d.  deutseh.  bot.  Ges.  Bd.  XXIII, 
1905,  H.  9,  p.  441). 


XXII,  4.  Referate.  585 

Auf  den  muldenförmigen  Cliloroplasten  der  Trichterzellen  von 
Selaginella  Martensii  findet  Verf.  eine  besondere  Plasmaliaut,  die 
durch  ihr  starkes  Lichtbrechungsvermögen  und  ihre  scharfe  Um- 
grenzung auffällt.  —  Besonders  wenn  man  frische  Schnitte  mit  Alkohol 
fixiert  und  entfärbt.  Parakarmiu  und  Boraxkarmin,  Eosin,  Safranin 
und  F'uchsin  färben  die  Plasmahaut  nur  schwach,  besser  färben  Pikrin- 
anilinblau,  Methylenblau  und  Methylgrün.  Verf.  empfiehlt  die  Schnitte 
unter  dem  Deckglas  mit  Alkohol  zu  fixieren  und  zu  entfärben,  dann 
mit  Fließpapier  einige  Tropfen  ziemlich  stark  verdünnter  Pikrinanilin- 
blaulösuug  durchzuziehen  und  diese  einige  Minuten  wirken  zu  lassen. 
Wenn  das  Cytoplasma  sich  bläut,  die  Chloroplasten  aber  noch  ungefärbt 
sind,  ersetzt  man  die  Farblösung  durch  Glyzerin.  Von  dem  violettblauen 
Cytoplasma  hebt  sich  dann  in  Zellen,  deren  Färbung  gut  gelungen 
ist,  die  Plasmahaut  grünlichblau  ab.  —  Mit  der  folgenden  Methode 
läßt  sich  eine  gute  Doppelfärbung  erzielen.  Man  läßt  die  mit  Alkohol 
vorbehandelten  Schnitte  10  bis  20  Minuten  in  ziemlich  stark  ver- 
dünnter Fuchsin-Methylgrünlösung  liegen  —  eventuell  noch  länger  — 
und  überträgt  sie  dann  in  Glyzerin:  das  Cytoplasma  erscheint  blaß- 
rot, die  Chloroplasten  intensiv  rot,  die  sie  bedeckende  Plasmahaut 
blau.  Minder  vorteilhaft  sind  die  mit  Eosin -Methylenblau  erzielten 
Färbungen.  —  Verdünnte  Kalilauge  und  Salzsäure  bringen  die  Plasma- 
haut zum  Quellen,  in  Eau  de  Javelle  löst  sie  sich.  Bemerkenswert 
ist  die  ü  n  V  e  r  d  a  u  1  i  c  h  k  e  i  t  der  mit  Alkohol  vorbehandelten  Plasma- 
häute in  Pepsinsalzsäure  (bei  34"  C).  —  Die  feinere  Struktur 
der  Plasmahäute  wird  an  Material  deutlich,  das  mit  Chromosmium- 
essigsäure oder  Kaiser schem  Sublimateisessig  fixiert  und  nach  Bendas 
Eisenhämatoxylinmethode  gefärbt  wird.  Die  Plasmahaut  erweist  sich 
dabei  zusammengesetzt  aus  regelmäßig  aneinandergereihten  kleinen 
Körnchen.  Küster  {Halle  a.  S.). 

Chamberlain ,  Ch.  J. ,  Methods  in  IMant  Ilistology.  Se- 
cond  edition  Chicago  (Univ.  of  Chicago  Press)  1905;  262  pp. 
Das  vorliegende  Lehrbuch  erscheint  bereits  in  zweiter  Auflage, 
die  gegen  die  erste  mancherlei  Bereicherungen  erfahren  hat.  Der 
erste  Teil  berichtet  über  das  Technische  im  allgemeinen ,  über  den 
Gebrauch  der  nötigen  Apparate ,  über  Fixierimgs-  und  Färbungs- 
methoden, Aufhellungs-  und  Einschlußmittel  etc.,  der  zweite  über  die 
Behandlung  besonderer  Materialien.  Algen,  Pilze,  Moose  etc.  werden 
der  Reihe  nach  durchgesprochen,  die  Gewinnung  des  geeigneten 
Materials  wird    behandelt   und   neben  vielem  Bekannten  mancher  be- 


586  Referate.  XXII,  4. 

achtenswerte  neue  Wink  gegeben.  Die  Namen  mancher  bekannter 
europäischer  Autoren  wiederholt  Verf.  konsequent  in  falscher  Ortho- 
graphie. Küster  [Halle  a.  8.). 


D.   Mifiev alogisch  -  PetrographiscJies, 

Rosenbusch,    H. ,     Mikroskopische     Phy siographie     der 
Mineralien   und    Gesteine.     Ein  Hilfsbuch  bei  mikro- 
skopischen Gesteinsstudien.     4.  Aufl.,  Bd.  I,  2.  Hälfte ;    VIII 
-]-  402  pp.  m.  20  Tfln.,  206  Figg.  und  einem  Anhang:  Hilfs- 
tabellen   zur    mikroskopischen  Mineralbestimmung.     Stuttgart 
1905. 
Ebenso  wie    der    erste   allgemeine  Teil   des  Werkes  (vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXI,   1904,  p.   540)    hat    auch    der  jetzt   vorliegende 
zweite  Teil  des  ersten  Bandes  in  der  neuen  Auflage  eine  völlige  Um- 
gestaltung erfahren.  Entsprechend  den  vielfachen  Anwendungen,  welche 
graphische  Methoden  während    des   letzten   Jahrzehnts   in   der  Petro- 
graphie  erlangt  haben,  treten  dieselben    auch    in    diesem  Buch    weit 
mehr    als    früher    hervor ,    so  z.  B.    sind    7  neue  Tafeln ,    welche    in 
stereographischer  Projektion  die  zur  mikroskopischen  Bestimmung  der 
Feldspate  dienenden  Diagramme  enthalten,  besonders  hervorzuheben. 
Während  die  kristalloptischen  und  Struktureigenschaften  der  Minera- 
lien natürlich  den  Hauptinhalt  dieses  Bandes  bilden,   sind  doch  auch 
die  mikrochemischen  Eigenschaften  eingehend  berücksichtigt.   In  einem 
Anhang  sind  die  wichtigsten  optischen  und  kristallographischen  Kon- 
stanten der  gesteinsbildenden  Mineralien  tabellarisch  zusammengestellt; 
der  Anhang    ist   im  Vergleich    zu    den    früheren  Auflagen  neu,   und 
war    bisher    nur    separat    in    einer    weniger    vollständigen    Form    er- 
schienen.    Der  zweite  Band  des  umfangreichen  und  einzig  dastehenden 
Werks  erst  wird  die  Gesteine  behandeln,    obgleich    auch    in    diesem 
Teil  schon  viele    für   die  Struktur    der   Gesteine   wichtige  Tatsachen 
ausgeführt    und    in    erschöpfendster    Weise    die    Grundlagen    für    die 
eigentliche  Petrographie  dargelegt  werden. 

E.   Sommerfeldt  (Tübingen). 

Briiiinee ,   R. ,    Polarisation  s- Mikroskoppoly  meter   (Zen- 

tralbl.  f.  Min.,  Geol.  Paläont.  1905,  p.  59.3—595  m.  1  Fig.). 

Das    Instrument    unterscheidet    sich    von     einem    gewöhnlichen 


XXII,  4.  Referate.  587 

mineralogischen  Mikroskop  nur  tlurcli  die  Art  der  Feineinstellung. 
Es  ist  die  Mikrometerschraube  durch  eine  am  Tubus  angebrachte 
Trommel  ersetzt,  in  welcher  sich  ein  kreisförmiger  Keil  mit  schwacher 
Steigung  befindet.  Die  Feineinstellung  des  Objektivs  erfolgt  durch 
Gleiten  eines  Schiebestückes ,  welches  mit  dem  Objektiv  verbunden 
ist,  längs  dieses  Keiles ,  so  daß  eine  gleichzeitige  Drehung  des  Ob- 
jektivs um  die  Instrumentachse  während  der  Feineinstellung  erfolgt. 
Dieser  Mechanismus  erleichtert  zugleich  eine  Drehung  des  Innen- 
nikols ,  die  sowohl  unabhängig  vom  Polarisator ,  als  auch  zugleich 
mit  diesem  (mittels  einer  nicht  neuen  Zahnradübertragung)  erfolgen 
kann.  Bedenklich  scheint  dem  Ref.  nur  das  vermutlich  hohe  Ge- 
wicht der  Vorrichtung,  worüber  sich  Angaben  nicht  vorfinden.  Nament- 
lich bei  dem  oft  notwendig  werdenden  Einsetzen  weiterer  Hilfsattribute 
auf  den  Tubus  würde  die  Triebbewegung,  welche  sich  weit  außer- 
halb der  Instrumentachse  befindet,  einer  sehr  starken  Abnutzung 
unterliegen ,  indem  sowohl  die  Feineinstellungstrommel  als  auch  son- 
stige am  Tubus  befindliche  Teile  mit  einem  großen  Hebelarm  auf 
die  Zahn-  und  Triebbewegung  drücken. 

E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 

Weinsclieuk, E.,  Über  die  Skelettteile  der  Kalkschwämme 
(Zentralbl.  f.  Min.,  Geol.  u.  Paläont.  1905,  p.  581—588). 
Angeregt  durch  zoologische  Untersuchungen  von  0.  Maas  über 
die  Skelettbildung  der  Kalkschwämme  verfolgt  der  Verf.  die  hierbei 
auftretenden  physikalisch-chemischen  Prozesse  hinsichtlich  ihrer  Be- 
deutung für  die  Geologie.  Es  zeigte  sich,  daß  die  Spongien  den  im 
Meerwasser  enthaltenen  Kalk  nur  insofern  zum  Aufbau  ihrer  Nadeln 
brauchen  können,  als  er  in  der  Form  des  Bikarbonats  sich  in  Lö- 
sung befindet,  daß  dagegen  der  Kalksulfatgehalt  des  Meerwassers 
hierfür  unverwertbar  ist.  Der  Verf.  untersucht  nun  die  spezielle 
Reaktion,  welche  zur  Karbonatausscheidung  führt  und  weist  die  An- 
nahme BtJTSCHLis,  daß  ein  Doppelsalz  von  Calcium-  und  Kalium- 
karbonat existiere  und  bei  diesen  Vorgängen  in  Betracht  komme, 
zurück.  Sodann  wird  aus  der  relativ  leichten  Angreifbarkeit  der 
Skelette  durch  Kalilauge ,  sowie  aus  einigen  weniger  wichtigen  Ur- 
sachen auf  das  Vorhandensein  von  submikroskopischen  Einschlüssen 
organischer  Stoffe  innerhalb  der  Kalksubstanz  geschlossen.  Schließ- 
lich wird  das  gegenseitige  Verhältnis  der  verschiedenen  Modifikationen 
des  CaCOo  —  nämlich  des  Aragonit,  Calcit  und  Conchit  bei  diesen 
Vorgängen  behandelt.  E.  Sommerfeldt  {Tübingen). 


588  Referate.  XXII,  4. 

Prytz,  K.,  Mikroskopisclie  Bestimmung  der  Lage  einer 
spiegelnden  Fläche.  Optischer  Kontakt  (Ann. 
d.  Phys.  [IV]  Bd.  XVI,  1905,  p.  735—746). 
Um  die  Orientierung  einer  spiegelnden  Fläche  auf  mikroskopi- 
schem Wege  zu  ermitteln,  benutzt  der  Verf.  ein  der  Autokollimations- 
metbode  ähnliches  Verfahren.  An  Stelle  des  sonst  üblichen  total- 
reflektierenden Prismas  oder  schräge  gestellten  Spiegels  wird  jedoch 
ein  hakenförmiger  Glasstab  in  den  Tubus  eingeführt,  welcher  sowohl 
das  zu  reflektierende  Signal  trägt ,  als  auch  die  Beleuchtung  des- 
selben vermittelt.  Das  Signal  befindet  sich  au  der  sehr  kurzen  und 
dem  Objektiv  zugekehrten  Spitze  des  Glashakens ;  dieser  ist  ver- 
silbert und  es  wird  das  Licht  einer  seitwärts  aufgestellten  Licht- 
quelle mittels  dieses  „Lichtleiters"  in  die  Instrumeutachse  abgelenkt, 
um  bei  geeigneter  Stellung  des  Mikroskopes  senkrecht  auf  die  spiegelnde 
Fläche  aufzufallen.  Da  das  Signal  aber  durch  die  Krümmung  des 
Glashakens  verdeckt  wird ,  bedient  sich  der  Verf. ,  um  es  dennoch 
bei  senkrechter  Incidenz  sichtbar  zu  macheu,  zweier  Prismen  mit  sehr 
kleinem  brechendem  Winkel,  welche  das  reflektierte  Licht  um  einen 
bekannten  Betrag  ablenken.  Dem  Ref.  will  scheinen,  daß  mittels 
des  gewöhnlichen  Autokollimationsverfahrens ,  wie  es  für  mikrosko- 
pische Zwecke  namentlich  von  Fedorow  ausgearbeitet  ist,  der  vom 
Verf.  erstrebte  Zweck  bequemer  erreicht  wird. 

.  E.  Sommer felclt  {Tübingen). 

Bäckström,  H.,  Ein  K  u  g  e  1  g  r  a  n  i  t  von  Spitzbergen    (Geol. 

Föreningens:    Stockholm    Förhandlinger   Bd.  XXVII,    1905, 

p.  254—259  m.  1  Taf.). 
Während  in  den  meisten  Fällen  die  kugelige  Absonderung  bei 
Eruptivgesteinen  mit  einer  wesentlichen  Änderung  der  chemischen 
Zusammensetzung  verbunden  ist,  ist  der  vom  Verf.  neuaufge- 
fundene Granit  aus  Spitzbergen  innerhalb  und  außerhalb  der  Kugeln 
gleich  konstituiert,  was  durch  mikroskopische  Miueralbestimmung  an 
den  GesteinsschliftVn  nachgewiesen  wird.  Hieraus  werden  einige 
Folgerungen  über  die  Aufeinanderfolge  der  einzelnen  Mineralien  bei 
der  Erstarrung  des  Gesteinsmagmas  gezogen. 

E.   Sommerfeldt  {Tübingen). 


XXII,  4.  Neue  Liteiutur.  589 


Neue  Literatur 


1.  Lehr-  und  Handbücher. 


Abbe.  E.,  Gesammelte  Abhandlungen.  Bd.  IL  (Wissenschaftliche  Abhand- 
lungen aus  verschiedenen  Gebieten,  Patentschnften.  Gedächtnisreden.) 
Jena  (Gust.  Fischer)  1906;  IV  +  346  pp.,  7  Tfln.  u.  16  Figg.  i.  Text. 
(Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  544.)  geb.  9  M. 

Böhmer,  C,  Anleitung  zur  Untersuchung  landwirtschaftlich  wichtiger 
Stoffe.  Zum  Gebrauch  in  landwirtschaftlichen  und  agrikulturchemischen 
Laboratorien  und  für  die  Praxis  zusammengestellt  und  bearbeitet. 
Berlin  (P.  Parey)  1906.  135  pp.  (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  545.) 

Chamberlain,  Ch.  J,,  Methods  in  Plant  Histology.  Second  edition  Chicago 
(Univ.  of  Chicago  Press)  1905 ;  262  pp.  (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  585.) 

Ehrmaun,  S,,  u.  Fick,  J.,  Einführung  in  das  mikroskopische  Studium  der 
normalen  und  kranken  Haut.  Ein  Leitfaden  für  Ärzte  und  Studierende. 
Wien  (Holder)  1905;  V,  104  pp.,  1  Tfl.  u.  21  Figg. 


2.  Präparationsmethoden  im  allgemeinen. 

Degen,  A.,  Untersuchungen  über  die  kontraktile  Vakuole  und  die  Waben- 
struktur des  Protoplasmas  (Botan.  Zeitg.  Bd.  LXIII,  1905,  p.  163; 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  552). 

Halphen,  G.,  et  Eiche,  A. ,  Contribution  h  I'etude  des  teintures  histo- 
logiques  (C.  R.  Acad.  Sc.  Paris  t.  CXL,  1905,  p.  1408—1410;  vgl. 
diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  546). 


590  Neue  Literatur.  XXII,  4. 

Mark,  E.  L.,  A  paraffine  bath  heated  by  electricity  (American  Natural, 
vol.  XXXVn,  1903,  no.  434,  p.  115—119  w.  2  figg. ;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  548). 

Nabias,  B.  de,  Les  anilines  substituees  et  les  composes  phenoliques  comme 
agents  de  virage  de  l'or  dans  les  tissus  (Compt.  Rend.  Soc.  Biol. 
t.  LVIII,  1905,  no.  25,  p.  152—154). 

Remlinger ,  P.,  Une  cause  d'erreur  dans  l'etude  des  organismes  ultra- 
microscopiques  (C.  R.  .Soc.  Biol.  t.  LVIII,  1905,  no.  23,  p.  1052—1053). 

Ruzicka,  V.,  Über  tinktorielle  Differenzen  zwischen  lebendem  und  ab- 
gestorbenem Protoplasma  (Pflügers  Arch.  Bd.  CVII,  1905,  H.  10—12, 
p.  497—534:  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  548). 

Schridde ,  H. ,  Beiträge  zur  Lehre  von  den  Zellkörnelungen.  Die  Körne- 
lungen der  Plasmazellen  (Anat.  Hefte,  H.  85,  8(3  [Bd.  XXVIII,  H.  2,  3], 
1905,  p.  691—768  m.  1  Tfl.-,  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  550). 

Stoeltzner,  AV.,  Über  Metallfärbungen  verkalkter  Gewebeteile  (Virchows 
Arch.  Bd.  CLXXX,  1905,  H.  2,  p.  362-365;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  545). 

Tartuferi,  FeiTUCcio,  Su  di  una  terza  nuova  impregnazione  metallica  dei 
tessuti  e  specialmente  della  Cornea  (Ann.  Ottalmol.,  Anno  XXXIV, 
Fase.  1,  2 ,  p.  74—78  u.  Bull.  Sc.  med. ,  Anno  LXXV,  Ser.  8,  vol.  IV, 
Fase.  12,  p.  589—592). 

Wederhake,  Zur  mikroskopischen  Schnelldiagnose  (Zentralbl.  f.  Gynäkol. 
Jahrg.  XXIX,  1905,  No.  25,  p.  785—790). 

Wolfrum,  Celloi'dintrockenmethode  (Klin.  Monatsbl.  f.  Augenheilk.  Jahrg. 
XLIII,  1905,  H.  2,  p.  61—64). 


3.  Präparationsmethoden  für  besondere  Zwecke. 


a.  Wirbeltiere. 

Bartel,  J.,  u.  Stein,  R. ,  Lymphdrüsenbau  und  Tuberkulose  (Arch.  f. 
(Anat.  u.  Physiol.  1905,  Anat.  Abt.,  H.  2,  3,  p.  141 ;  vgl.  diese  Zeitschr. 
Bd.  XXII,  1905,  p.  568). 

Berliner,  K. ,  Beiträge  zur  Histologie  und  Entwicklungsgeschichte  des 
Kleinhirns,  nebst  Bemerkungen  über  die  Entwicklung  der  Funktions- 
tüchtigkeit derselben  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  1905,  p.  220 
—269  m.  19  Figg.  u.  1  TU.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  566). 

Blumstein-Jiulina,  B.,  Die  Pneumatisation  des  Markes  der  Vogelknochen 
Anat.  Hefte,  H.  87  [Bd.  XXIX],  1905,  p.  1—52  m.  3  Tfln.;  vgl.  diese 
Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  560). 


XXII,  i.  Neue  Literatur.  .-)91 

Bürker,  K.,  Notiz  über  eine  neue  Form  der  Zählkammer  (München,  med, 

Wochenschr.,  Jahrg.  LH,  No.  19,  p.  912 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  554). 
Dogiel,  A.  S.,  Der  fibrilläre  Bau  der  Nervenendapparate  in  der  Haut  des 

Menschen   und   der   Säugetiere   und   die  Neuronentheorie   (Anat.  Anz. 

Bd.  XXVII,  1905,  No.  4,5,  p.  97—118  m.  3  Tfln.;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  565). 
Donaggio,  A.,    Colorazione   positiva  delle  übre  nervöse  nella  läse  iniziale 

della   degenerazione   primaria   e   secondaria,   sistematica  or  diffusa  del 

sistema   nervoso   centrale   (Riv.   Sperim.   di  Freniatr,   t.  XXX,  fasc.  1; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  563). 
Edens,  Über  Amyloidfärbung  und  Amyloiddegeneration  (Viuchows  Arch. 

Bd.  CLXXX,  1905,  H.  2,  p.  346—359;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 

1905,  p.  558). 
Goldstein ,  K, ,   Untersuchungen   über   das  Vorderhirn   und   Zwischenhirn 

einiger   Knochenfische    [nebst  einigen   Beiträgen    über    Mittelhirn    und 

Kleinhirn  derselben]  (Arch.  f.  mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  1905,  p.  135 

—219   m,   23   Figg.   u.  5  Tfln. ;   vgl.   diese   Zeitschr.   Bd.  XXII,   1905, 

p.  565). 

Haane,  G.,  Über  die  Cardiadrüsen  und  Cardiadrüsenzone  des  Magens  der 

Haussäugetiere    (Arch.    f.   Anat.    u.   Physiol.   1905,   Anat.  Abt.,   H.  1, 

p.  1—32  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXH,  1905,  p.  567). 
Illing,  G,,  Über   einen   eigenartigen  Befund  in  den  Glandulae  vesiculares 

und   den   Glandulae   ductus   deferentis   des   Rindes   (Arch.  f.  mikrosk. 

Anat.   Bd.   LXVI,   1905,   p.  121—127   m.   1  Tfl.;    vgl.    diese    Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  570). 
Kraus,  A. ,  Zur  Färbung  der  Hyphomyceten  im  Horngewebe  (Zentralbl.  f. 

Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  1904,  H.  1,  p.  153—155;  vgl.  diese 

Zeitschr.  Bd.  XXH,  1905,  p.  572). 
Liebreich,  O.,   Über  Blutkörpevchenzählung  mit  dem  Thoma-Zeiss sehen 

Apparat  (Physiol.  Ges.  Berlin,   Sitzung  24.  Febr.  1905;  vgl.   Arch,   f. 

Anat.  u.  Physiol.  1905,  Physiol.  Abt.,  H.  3,  4,  p.  385—389 ;  diese  Zeitschr, 

Bd,  XXII,  1905,  p.  554). 
Liigiato,    L.,    Degenerazioni   secondarie    sperimentali    [da    strappo    dello 

sciatico]    studiate   col   metodo  di   Donaggio   per   le    degenerazioni   — 

prima  e  seconda  note  (Riv.  Sperim.  di  Freniatr.  t.  XXX,  p.  135;   vgl. 

Neurol.   Zentralbl.    Jahrg.   XXIV,  1905,   No.    11,   p.   522—523;    diese 

Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  563). 
Medea,  E.,  L'applicazione  del  nuovo  metodo  di  Ramön  y  Cajal  allo  studio 

del  sistema  nervoso  periferico   (Communicazione  alla  Soc.  med.-chir.  di 

Pavia,  14.  gennaio  1905). 
Meves,  F.,  Über  die  Wirkung  von  Ammoniakdämpfen  auf  die  roten  Blut- 
körperchen  von   Amphibien   (Anat.   Anz.   Bd.  XXVII,   1905,   No.  8,  9, 

p.  177—186  m.  17  Abb.;   vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  556). 
Meyer,    P. ,    Ein    Verfahren    zur    Erzielung   haltbarer    Amyloidpräparate 

(ViRCHOws  Arch.  Bd.  CLXXX,  1905,  p.  359—361;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  571). 


592  Neue  Literatur.  XXII,  4. 

Myers,  B.  D.,    Fixation   ot   tissues   by   injection   into  tlie  arteries  (Johns 

Hopkins   Hosp.   Bull.  vol.  XVI,   1905,   no.  167,   6  pp.  w.   1  flg.;   vgl. 

diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  55G). 
Peter.sen,  O. ,  Über  sekretorische  Änderungen  im  Epithel  der  ableitenden 

Harnwege  bei  einigen  Säugetieren  (Anat.  Anz.  Bd.  XXVII,  1905,  No.  8,  9, 

p.  187:  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  569). 
Porta,  A.,  Ricerche  anatomiche  suU'apparecchio  velenifero  di  alcuni  pesci 

(Anat.  Anz.  Bd.  XXVI,  1905,   No.  9,  10,  p.  232—247  c.  2  tavv.;   vgl. 

diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  567). 
Ribadeau-Dumas,  Application  de  la  methode  h  l'argent  de  Ramön  y  Cajal 

ä  letude  de  la  rate  (Bull,  et  mem.  de  la  soc.  anat.  de  Paris,  Annee  LXXX. 

Ser.  6,  T.  7,  1905,  no.  4,  p.  281—282). 
Scliaffer,  K.,  Neurofibrillenpr.äparate  nach  der  Bielschowsky sehen  Methode 

(Psych.-neurok  Sekt.  d.  kgl.  Ärztevereins  Budapest  1905;  vgl.  Neurol. 

Zentralbl.  Bd.  XXIV,  1905,  No.  12,  p.  ,588;   diese  Zeitschr.  Bd.  XXH, 

1905,  p.  564). 
Sereni,  S.,  SuU'uso  della  formalina  come  mezzo  di  conservazione  dei  sedi- 

menti  dell'urine,  dei  liquidi  ascitici,  pleurici,  ecc.  (BoU.  d.  Soc.  Lancisiana 

degli  Ospedali  di  Roma,  Anno  XXV,  1905,  fasc.  3,  11  pp.,  2  figg.). 
Stern,  M.,  Histologische  Beiträge  zur  Sekretion  der  Bürzeldrüse  (Arch.  f. 

mikrosk.  Anat.  Bd.  LXVI,  1905,  p.  299—311  m.  1  Tfl.;  vgl.  diese  Zeitschr. 

Bd.  XXII,  1905,  p.  569). 
Takayama,  M.,  Beiträge  zur  Toxikologie  und  gerichtlichen  Medizin,  nebst 

einem  Vorwort  von  Prof.  Dr.  R.  Robert.   4  Tfln.     Stuttgart  (F.  Enke) 

1905.     (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  557). 


b.   Bakterien, 

Buerger,  L.,   A  new  method  for  staining  the  capsules  of  bacteria  (Proc. 

of  the  New  York  pathol.  Soc.  vol.  IV,  1904,  fasc.  7). 
Fischel,  R. ,  Bemerkungen  zu  den  Methoden  der  Mikroorganismenfärbung 

von  Waelsch  und  von  Kkaus  (Arch.  f.  Dermatol.  u.  Syph.  Bd.  LXXVI, 

1905,  H.  3,  p.  399—402). 
Foä,    Di   un    nuovo    apparecchio    per    prelevare    il    campione    nell'esame 

batteriologico  dell'acqua  (Atti  della  Soc.  fiorent.  d'Igiene  1904). 
Gordon ,  M.  H. ,  A  read}'  method  of  differentiating  Streptococci  and  some 

results  already  obtained  by  its  application  (Lancet  vol.  II,  1905,  no.  20, 

p.  1400—1403). 
Horder,  Tli.  J. ,  Observations  upon  the  importance  of  blood-cultures  with 

an   account   of  the   technique   recommended  (Practitioner  vol.  LXXV, 

1905,  no.  5,  p.  611—622,  4  tavv.). 
Kirstein,  F.,   Ein  Besteck   für  die  Blutentnahme   bei  typhusverdächtigen 

Personen   (Zeitschr.   f.   Medizinalbeamte,   Jahrg.  XVIII,  1905,   No.  16, 

p.  510—511,  1  Fig.). 


XXII,  4.  Neue  Literatur.  593 

Kraft,  E.,  Winke  für  die  Ausführung  chemisch-bakteriologischer  Arbeiten 

auf   dem    Gebiete  der   Harn-,   Sputum-,   Fäces-   etc.   Untersuchungen. 

Berlin  1905;  35  pp.    8'^.  1  M. 

Levaditi,   Sur  la   coloration   du   Öpirochaete  pallida  Schaudinn   dans  les 

coupes  (C.  R.  Soc.  Blol.  t.  LIX,  1905,  no.  29,  p.  326—327). 
Schütze,  A. ,   Über  den  Nachweis   Eberth-Gaffky scher  Bazillen   in    der 

Cerebrospinalflüssigkeit  bei  Typhus  abdominalis  (Berliner  klin.  Wochen- 

schr.,  Jahrg.  XLII,  1905,  No.  47,  p.  1465—1468). 
Seiter,  Über  Sporenbildung  bei   Milzbrand    und   andern    sporenbildenden 

Bakterien  (Zentralbl  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXVII,  H.  2,  p.  186; 

vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  573). 
Smith,  E.  F.,  Bacteria  in  relation  to  plant  diseases.     Vol.  1.    Mothods  of 

work  and  general  literature  of  bacteriology  exclusive  of  plant  diseases. 

Washington  D.  C,  1905.    (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  580.) 
Tartuferi,  F.,  Su  di  una  terza  nuova  impregnazione  metallica  dei  tessuti 

e    specialmente    della    Cornea    (Ann.    Ottalmol.    Anno  XXXIV,    1904, 

fasc.  1,  2,  p.  74—78;   Rendic.   Accad.  Soc.   med. -chir.   Bologna  1904, 

p.  589—592;  Bull.  Sc.  med.  Anno  LXXV,  1904). 
Willson ,  H.  S. ,   The   isolation   of  B.  typhosus   from   infected  water,  with 

notes  on  a  new  process  (Journ.  of  Hyg.  vol.  V,  1905,  no.  4,  p.  429—443). 
Winkler,   H.   v. ,    Über   einige    Hilfsmittel   für   bakteriologische    Arbeiten 

(Zentralbl.  f.  Bakteriol.  Abt.  1,  Orig.  Bd.  XXXIX,  1905,  H.  4,  p.  483—487, 

1  Fig.). 


c.  Botanisches. 


Ferguson,  M.  C,  Contributions  to  the  knowledge  of  the  life  history  of 
Pinus  with  special  reference  to  sporogenesis,  the  development  of  the 
gametophytes  and  fertihzation  (Proc.  Washington  Acad.  Sei.  vol.  VI, 
1904,  p.  1—202,  pls.  1—24;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  584). 

Gräfe,  V.,  Eine  neue  Reihe  von  Holzreaktionen  (Österr.  Botan.  Zeitschr. 
Bd.  LV,  1905,  p.  174 ;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  581). 

Haberlaudt,  G.,  Über  die  Plasmahaut  der  Chloroplasten  in  den  Assiinila- 
tionszellen  von  Selaginella  Martensü  Spring.  (Ber.  d.  .deutsch,  bot.  Ges. 
Bd.  XXHI,  1905,  H.  9,  p.  441;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905, 
p.  584). 

Hus,  H.  T.  A.,  Spindle  Formation  in  the  Pollen -Mother-Cells  of  Cassia 
tomentosa  B.  (Proc.  of  the  California  Acad.  of  Sei.  3.  Ser.  Bot.  vol.  II, 
1904,  no.  11,  p.  329—354;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  582). 

Thomson,  R.  B.,  The  Megaspore-membrane  of  the  Gymnosperms  (University 
of  Toronto  Studies,  Biological  Series,  1905,  no.  4;  vgl.  diese  Zeitschr, 
Bd.  XXII,  1905,  p.  583). 


Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  4.  38 


594  Neue  Literatur.  XXII,  4. 


d.   3Iineralogisch  -  Petrograpbisches. 

Bäckströni ,  H. ,  Ein  Kugelgranit  von  Spitzbergen  (Geol.  Föreningens : 
Stockliolm  Förhandlinger  Bd.  XXYII,  1905,  p.  254—259  m.  1  Tfl.;  vgl. 
diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  588). 

Brunnee,  R. ,  Polarisations- Mikroskoppolymeter  (Zentralbl.  f.  Min.,  Geol. 
u.  Paläont.  1905,  p.  593—595  m.  1  Fig.;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  586). 

Prytz,  K.,  Mikroskopische  Bestimmung  der  Lage  einer  spiegelnden  Fläche. 
Optischer  Kontakt  (Ann.  d.  Phys.  [IV]  Bd.  XVI,  1905,  p.  735— 74G: 
vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  588). 

Rosenbusch,  H. ,  Mikroskopische  Physiographie  der  Mineralien  und  Ge- 
steine. Ein  Hilfsbuch  bei  mikroskopischen  Gesteinsstudien.  4.  Aufl., 
Bd.  I,  2.  Hälfte;  VIII  +  402  pp.  m.  20  Tfln. ,  206  Figg.  und  einem 
Anhang:  Hilfstabellen  zur  mikroskopischen  Mineralbestimmung.  Stutt- 
gart 1905.     (Vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII,  1905,  p.  586). 

AVeinschenk,  E.,  Über  die  Skelettteile  der  Kalkschwämme  (Zentralbl.  f. 
Min.,  Geol.  u.  Paläont.  1905,  p.  581—588;  vgl.  diese  Zeitschr.  Bd.  XXII, 
1905,  p.  587). 


Autoren  -  Register. 


Abbe,  E.,  544. 
Abi-ikossütf,  A.  J.,  439. 
Albanese,  N.,  299. 
Allen,  Ch.  E.,  461. 
Ambronn,  H.,  .349. 
Andre,  Ch.,  417. 
Arbeit,  E.,  3G3. 
Arndt,  G.,  104. 
Arnold,  J.,  286. 

Bab,  H.,  272. 
Backmund,  K.,  285. 
Bäckström,  H.,  588. 
Ballowitz,  E.,  160. 
Bartel,  J.,  .568. 
Baudi,  579. 
Beck  V.  Managetta,  G., 

166. 
Becks,  F.,  306,  464. 
Behrens,  H.,  305. 
Berliner,  K.,  566. 
Björkenlieim,   C.   G., 

300. 
Blumstein  -  Judina ,   B., 

560. 
Bödecker,  C.  F.,  190. 
Böhmer,  C,  545. 
Bösenberg,  H.,  426. 
Boit,  H.,  572. 
Borchert,  M.,  153. 
Bord  et,  J.,  4.')4. 
Brand,  F.,  458. 
Braun,  F.,  302,  306. 
Brauns,  E.,  304. 
Bredig,  G.,  305. 
Brunnee,  R.,  586. 
Bürker,  K.,  554. 
Bunting,  P.  L.,  287. 


Cagnetta,  G.,  539. 
Cajal,  8.  R.,  siehe  Ramön 

y  Cajal. 
Cameron,  J.,  290. 
Cavalie,  M.,  278. 
Charaberlain ,     Ch.     J., 

585. 
Claussen,  P.,  297. 
Courmont,  J.,  417. 
Cristina,  Di,  99. 

Degen,  A.,  552. 
Depdolla,  Ph.,  265. 
Doelter,  C,  463. 
Doerr,  R.,  284. 
Dogiel,  A.  S.,  565. 
Donaggio,  A.,  563. 
Donaldson,  H.  H.,  446. 
Donau,  304. 
Dreuw,  137. 
Driessen,  L.  F.,  422. 
Dschunkowsky,  E.,  295. 
Dubreuil,  G.,  418,  420. 
Dworetzky,  A.,  450. 

Jlidens,  558. 
Erdely,  A.,  427. 
Ernst,  A.,  299. 

Ferguson,  M.  C,  583. 
Fernandez,  M.,  142. 
Fichera,  G.,  288. 
Fischer,  A. ,   100,  421, 

455. 
Fischer,  H.,  458. 


Fischler,  F.,  262. 
Fleischer,  B.,  162. 
Floyd,  R.,  143. 

G^adzikiewicz,  W.,  141. 
Gaehtgens,  W.,  293. 
Galli,  G.,  148. 
Garcia,  D.  D.,  443. 
Giemsa,  G.,   449,  576, 

578. 
Glas,  E.,  286,  427. 
Goldstein,  K.,  565. 
Grabower,  279. 
Gräfe,  V.,  581. 
Groot,  J.  G.  de,  136. 

Oaane,  G.,  567. 
Haberlandt,  G.,  .584. 
Halphen,  G.,  546. 
Hansen,  F.   C.  C,  45, 

433. 
Hardesty,  I.,  157. 
Hartl,  F.,  ,305. 
Harz,  C.  0.,  459. 
Heidenhain,  M.,  321, 325, 

330,  337. 
Heim,  P.,  266. 
Heinemann,  Ph.,  424. 
Helber,  E.,  150,  268. 
Heller,  0.,  292. 
Henneberg,  125. 
Herxheimer,  K.,  575. 
Hinden,  F.,  .303. 
Hirschler,  J.,  265. 
Hlawatsch,  C,  302. 
HoÖendahl,  K.,  144. 
Hoke,  G.  W.,  446. 

38* 


596 


Autoren  -  Register. 


Hübner,  H.,  575. 
Hus,  T.  A.,  582. 

lUing,  G.,  284,  436,  570. 
Imhof,  G.,  283. 

JoUy,  J.,  148. 
Joris,  H.,  279. 
Just,  J.,  481. 

Jvamon,  K.,  161. 
Karakacheft",  K.  Iv.,  435. 
Keinath,  K.  Tli.,  145. 
Koch,  A.,  448. 
König,  E.,  413. 
Koiransky,  E.,  288. 
Konaschko,  P.,  179. 
Kopsch,  F.,  268. 
Kozowsky,  A.  D.,  277. 
Kral,  F.,  295,  296. 
Kraus,  A.,  572. 
Krebs,  P.,  280. 

L/ams,  H.,  166. 
Laß,  M.,  425. 
Leake,  H.  M,  461. 
Lehmann,  0.,  303. 
Lenhossek,  M.  v.,  264. 
Lenziuann,  R.,  431. 
Lesage,  140. 
Leyen,  E.  von  der,  435. 
Liebreich,  0.,  554. 
Lindner,  P.,  135. 
London,  E.  S.,  447. 
Luczizky,  W.,  464. 
Lugiato,  L.,  563. 
Luhs,  S.,  295. 

Mark,  E.  L.,  548. 
Melissinos,  K.,  130. 
Merck,  E.,  413. 
Metz,  C,  114. 
Meves,  F.,  291,430,556. 
Meyburg,  H.,  153. 
Meyer,  P.,  571. 
Michaelis,  L.,  423. 
Miclmiewicz,  H.  R.,  300. 
Miyake,  K.,  460. 
Möller,  J.,  412. 
Molisch,  H.,  459. 
Mulon,  P.,  138. 
Myers,  B.  D.,  555. 

Nabias,  B.  de,  139. 
Neumayer,  L.,  181. 


NicoUe,  F.,  454. 
Noeggerath,  578. 
Nowack,  K.,  453. 

ücker-BIom,  M.,  451. 
Oppenheim,  M.,  579. 
Overton,  J.  B.,  460. 

Pauly,  A.,  344. 
Pavlow,  W.,  186. 
Pensa,  A.,  438. 
Peter,  K.,  530. 
Petersen,  0.,  569. 
Phillips,  D.  P.  A.,  168. 
Pighini,  G.,  441. 
Pinkus,  F.,  160. 
Pötzsch,  0.,  161. 
Porcile,  V.,  164. 
Porta,  A.,  567. 
Preisich,  K.,  266. 
Prytz,  K.,  588. 

viuincke,  G.,  301. 

Kamön  y  Cajal,  S.,  155, 

273,  443. 
Regaud,  Gl.,  418. 
Reitmann,  K.,  577. 
Richards,  Th.  W.,  304. 
Riche,  A.,  546. 
Richter,  0.,  194,  369. 
Rosenbusch,  H.,  .586. 
Rossi,  E.,  273. 
Rubaschkin,  W.,  158. 
Ruffini,  A.,  447. 
RuUmann,  W.,  292. 
Rüzicka,  V.,  91,  548. 

oachs,  0.,  579. 
Sala,  G.,  291. 
Schaffer,  K.,  564. 
Schmidt,  J.  E.,  439. 
Schmorl,  G.,  134. 
Schneider,  J.,  481. 
Scholz,  F.,  415. 
Schonten,  S.  L.,  10. 
Schridde,  H.,  550. 
Schröder,  0.,  424. 
Schüller,  M.,  451. 
Schukowski,  G.  v.,  305. 
Schwarz,  G.,  434. 
Seddig,  M.,  465. 
Seiter,  573. 


Senft,  E.,  298,  412. 
Shattuck,  Ch.  H.,  463. 
Shoemaker,  D    N.,  462. 
Siding,  A.,  177. 
Signer,  M.,  187. 
Simonelli,  579. 
Skrobansky,  138. 
Smidt,  E.  F.,  580. 
Sommerfeldt.  E.,  356. 
Srdinko,  0.  V.,  437. 
Staehelin,  578. 
Stark,  M.,  ,307. 
Stead,  J.  E.,  465,  467. 
Stein,  R.,  568. 
Stern,  M.,  569. 
Sternberg,  K.,  416. 
Stoeltzner,  W.,  545. 
Strasburger,  E.,  460. 
Strehl,  K.,  1,  192. 
Stroß,  0.,  294. 

iakayama,  M.,  557. 
Tellyesniczky ,    K.   v., 

137. 
Thesing,  C.,  578. 
Thlroux,  140. 
Thomson,  R.  B.,  583. 
Thugutt,  St.  J.,  303. 
Tiberti,  N.,  164,  165. 
Triepel,  H.,  118. 
Triollet,  M.,  454. 
Turban,  574. 

Valedinsky,  I.  A.,  442. 
Vanino,  S.,  305. 
Varela  de  la  Iglesia,  R., 
445. 

\\  eidenreich.  F.,  146. 
Weinschenk,  E.,  587. 
Wells,  R.  GL,  304. 
Winslow,  Ch.-E.A.,  135. 
Woycicki,  Z.,  300. 
Wuttig,  H.,  436. 

York,  H.  H.,  462. 

Zacharias,  E.,  297. 
Ziegler,  K.,  145. 
Zietzschmann,  0.,  429. 
Zlatogoroff,  S.  J.,  450, 
452. 


Sacli- Register. 


Abbes  Theorie,  Allgemeines  1. 
Abrikossoifs  Methode,    tuberkulöses 

Lungengewebe    zu    untersuchen 

439. 
Absorptionsbild,  Allgemeines  1. 
Aceton-  Celloidineinbettung,     nach 

Scholz  415. 
Achsenwinkelbestimmung  bei  kleinen 

Kristallpräparaten  356. 
Achsenzyhnder ,  Untersuchung  nach 

Ramön  y  Cajal  272  if. 
Ackermannit,     optisches    Verhalten 

302. 
Acridinrot-Pikroblau  420. 
Apfelsäure ,   mikrochemischer   Nach- 
weis 213. 
Agar-Agar,    zum    Einschließen    vor 

der  Paraffinbehandlung  462. 
Agglutination,  Beurteilung  nach  Ni- 

colle  454. 
Alaunkarmin,  Färbung  von  Ascidien- 

larven  425. 
— ,  —    —  Schneckenembryonen  162. 
Aldehyde,     mikrochemischer     Nach- 
weis 214. 
Aleuronkörner,  Mikrochemisches  244. 
Algen,  Isoheren  nach  Schonten  11  ff. 
— ,  Membran  374. 
Alkahen,  Wirkung  auf  das  Plasma 

552. 
Alkaloide,  Mikrochemisches  240. 
Alkohol ,    Fixierung    von    Ascidien- 

larven  425. 
— ,  mikroskopischer  Nachweis  212. 
Alkohol-Pikrinsäure  nach  Imhof  283. 
Alnus,  Wurzelanschwellungen  300. 


Ambronns  Methode,  mikroskopische 
pleochroitische  Silberkristalle  zu 
erzielen  349  flf. 

Ameisensäure,  mikrochemischer  Nach- 
weis 212. 

Amidoazokörper ,  Verhalten  zu  Jod 
338. 

Amöben,  Isolieren  nach  Scheuten 
11  ff. 

— ,  Kultur  nach  Lesage  140. 

Ammoniak,  Wirkung  auf  rote  Blut- 
körperchen 556. 

Ammoniakalkohol ,  Fixierung  von 
Nervengewebe  273. 

— ,  —  —  Retina  nach  Ramön  y 
Cajal  156. 

Ammonium,  Nachweis  und  Vorkom- 
men bei  Pflanzen  296. 

Amphibien,  Blutkörperchen,  rote  291. 

— ,  Leberzellen  288. 

— ,  Nebennieren  164. 

— ,  Retina  290. 

Amylinkörner,  Mikrochemisches  225. 

Amylodextrin,Behandlung  mit  Chrom- 
säure 459. 

Amyloid,  Mikrochemisches  226. 

— ,  Präparation  nach  Meyer  571. 

Amyloiddegeneration,  Untersuchung 
nach  Edens  558. 

Ajuylum,  siehe  Stärke. 

Anabaenin  457. 

Anaerobe,   Kultur  nach  Bürdet  454. 

Analyse,  quantitative  in  der  Mikro- 
chemie 398. 

Anilin.  Differenzierung  der  Kern- 
färbungen  nach  Nabias  139. 


598 


Sach- Register. 


Anilinblau-Orange  G-Oxalsäure,  Fär- 
bung von  Bindegewebe  5G8. 

Ankleben  von  Schnitten  nach  Shat- 
tuck  463. 

Anthokyan,  amorphes  und  kristalli- 
siertes 459. 

— ,  Mikrochemisches  236. 

Apäthys  Stellung  zu  Abbes  Theorie  1. 

Arachnoiden,  Spermatozoen  426. 

Arndts  mikroskopische  Doppelsäge 
104. 

Arnolds  Methode,  Drüsen  der  Frosch- 
haut  zu  untersuchen  286. 

Arrigo-Stampachias  Methode,  Lungen- 
gewebe zu  fixieren  440. 

Arsen,  mikrochemischer  Nachweis 
204. 

Ascidien,  Larven  424. 

Askomyceten ,  Untersuchung  nach 
Claussen  297. 

Asparagin,  Mikrochemisches  227. 

Aufkleben  von  Celloidinschnitten 
nach  Di  Cristina  99. 

—    —    —    —  V.  Tellyesniczky  137. 

Aufrechts  Methode ,  Lungengewebe 
zu  fixieren  440. 

Augenmuskeln,  Neurofibrillen  in  den 
Nervenendigungen  nachweisen 
nach  Ramön  y  Cajal  157. 

Aurantia-Eosin-Nigrosin,  Färbung  der 
Leukocyten  273. 

Ausbreitungspräparate ,  Tunikaten 
143. 

Azokarmin,  Anwendung  nach  Heiden- 
hain 339. 


Jjabs    Methoden ,    Leukocyten     zu 

färben  272. 
Backmunds    Methode ,     Haare     und 

Schweißdrüse  der  Katze  zu  unter- 
suchen 285. 
Badeplatten,  Sensibilisierung  413. 
Bakterien,  alte,  Färbung  nach  Cluiraud 

und  Gautie  449. 
— ,  Farbstolfe  293. 
— ,  Fixierung  am  Deckglas  448. 
— ,  Geißeln,  siehe  diese. 
— ,  Isolieren  nach  Schouten  11  if. 
— ,  Membran  376,  391. 
— ,  Pleomorphie  S3ff. 
— ,  Vitalfärbung  nach  Kral  296. 
Ballowitz'  Methode,  Riechzellen  von 

Petromyzon  zu  untersuchen  160. 
Bartel-Steins  Methode,  Bindegewebe 

der  Lymphdrüsen  zu  untersuchen 

568. 


Barj'umsulfat,    zur   Erkennung   von. 
kolloidalen  Lösungen  305. 

Basidiobolus,  Färbung,  Fixierung  300. 

Bauchaugen,  Eunice  424. 

Bauchsinnesorgane,  Eunice  424. 

Becks  Methode,  Zellkerne  mit  Persio- 
Essigsäure  zu  färben  167. 

Beckes  Methoden  zur  mikroskopi- 
schen Bestimmung  von  Mineralien 
306. 

—  mikrokonoskopischeMethode  464. 

—  Skiodrome  307. 

Behrens'  Methoden,  organische  Basen 
nachzuweisen  305. 

Beizen,  Cj^anophyceen  169. 

Bendas  Methode  zur  Neurogliaunter- 
suchung  157,  158. 

Benzopurpurin,  alkoholische  Lösun- 
gen, Benutzung  nach  Heidenhain 
.->  .■>  -- 

Berliners  Methode ,  Eosinzellen  zu 
färben  566. 

Beugungsbild,  Allgemeines  1. 

Beugungstheorie,  Allgemeines  1. 

Bindegewebe,  Färbung  nach  Mallorv- 
Woolley  568. 

— ,  Fibrillen,  Färbung  mit  Pikroblau 
421. 

Björkenheims  Methode,  Wurzelknoten 
der  Erle  zu  untersuchen  300. 

Blausäure,  Mikrochemisches  227. 

Blei,  Affinität  zu  verkalktem  Gewebe 
545. 

Bleu    de    Lyon  -  Pikrinsäure    nach 
Skrobansky  138. 

Blumstein -Judinas  Methode,  Pneu- 
matisation des  Vogelknochen- 
marks zu  untersuchen  560. 

Blut,  Entnahme,  nach  Dschunkowsky- 
Luhs  295. 

— ,  Farbstoff,  Chemie  557. 

— ,  Trockenpräparate,  Färbung  nach 
Lenzmann  431. 

Blutgefäßsystem,  Allgemeines  142. 

— ,  Tunikaten  142. 

Blutkörperchen  für  Gonokokken- 
nährboden  294. 

— ,  Fixierung  und  Färbung  nach 
Jolly  150. 

— ,  Kernteilung  150. 

— ,  Regeneration,  Triton  148  ff. 

— ,  rote ,  Behandlung  mit  Jodsäure 
430. 

—  von  Amphibien,  Behandlung  mit 
Ammoniakdämpfen  556. 

—  —    — ,  —  —  Säuren  291. 

— ,  Zählung,  Mischer  nach  Galli  148. 


Sach- Register, 


599 


Blutkörperchon,  Zählung  mit  Bürkers 
Apparat  554. 

— ,  —    —  Thoma-Zeiß  554. 

Blutlymphdrüsen  des  Schafes  14(). 

— ,  Färbung,  Fixierung  nach  Weiden- 
reich 147. 

— ,  Injektion  nach  Weidenreich  147. 

Blutplättchen,  Abstammung  26(}. 

— ,  Färbung  nach  Helber  '2G8. 

— ,  —    —  Preisich-Heim  2G6. 

— ,  —    —  Romanowsky  '2G6. 

— \  Zählung  nach  Helber  150. 

Bödeckers  Methode,  Zahnschmelz  zu 
entkalken  190. 

Bösenbergs  Methode,  Spermatozoen 
der  Arachnoiden  zu  untersuchen 
426. 

Boits  Methode,  Typhusbacillus  zu 
identifizieren  572. 

Boraxkarmin,  Färbung  von  Knochen- 
schnitten 327. 

Boraxperle,  Nachweis  von  Edel- 
metallen nach  Donau  304. 

Borcherts  Methode ,  Markscheiden 
mit  Osmiumsäure  zu  färben 
153. 

Bordets  Methode,  Anaeroben  zu  kul- 
tivieren 454. 

Bornsches  Tischchen ,  Modifikation 
nach  Heidenhain  333. 

Bouins  Fixierungsflüssigkeit,  Nerven- 
system von  Foeten  279. 

Brands  „Schnellfärbung"  458. 

Brasilin,  Oxyderivate  83. 

Brauns  Methode,  künstliche  Doppel- 
brechung zu  erzielen  302. 

braune     Stärke ,     Mikrochemisches 
226. 

Brechungsexponent  von  Flüssigkeiten 
bei  sehr  kleinen  Mengen  zu  be- 
stimmen nach  Pauly  344. 

Bredig-Schukowskys  Methode,  flüs- 
sige Kristalle  zu  untersuchen 
305. 

Brillantschwarz  -  Toluidinblau  -  Safra- 
nin, Färbung  der  Sekretgranula 
nach  Fleischer  163. 

Brunnees  Polarisations  -  Mikroskop- 
polymeter 586. 

Bürkers  Methode,  Thrombocyten  zu 
gewinnen  269. 

—  Zählkammer  für  Blutkörperchen 
554. 

Bürzeldrüse,  Fixierung  und  Färbung 
nach  Stern  569. 

Buntings  Methoden ,  Lymphdrüsen 
zu  untersuchen  287. 


(vagnettos  Methode,  Hypophysis  zu 
färben  539. 

Cajals  Methoden,  siehe  Ramön  y 
Cajal. 

Calcium,  Nachweis  206. 

Camerons  Methode,  Retina  von  Am- 
phibien zu  untersuchen  290. 

Cardiadrüsen  des  Magens ,  Unter- 
suchung nach  Haanc  567. 

Carnoysche  Flüssigkeit,  Leber  von 
Amphibien  288. 

Cavalies  Methoden,  elektrisches  Or- 
gan der  Torpedo  zu  untersuchen 
278. 

Celloi'din,  Einbettung  beim  Entkalken 
190. 

— ,  —  mit  Aceton  415. 

— ,  Schnitte,  Ankleben  nach  Di  Cri- 
stina  99. 

— ,  — ,  —  —  V.  Tellyesniczky  137. 

Chitin,  Mikrochemisches  391. 

Chlor ,  mikrochemischer  Nachweis 
199. 

Chlorophyll,  Mikrochemisches  232. 

Chloroplasten,  siehe  Chromatophoren 
585. 

Chromalaun,  Herstellung  von  Chrom- 
hämateinen  67. 

Chromalauncochenille ,  Herstellung 
und  Anwendung  nach  Hansen 
87  tf. 

Chromalaundioxyhämatein  nach  F.  C. 
C.  Hansen,  Herstellung,  Zusam- 
mensetzung 70  ff.,  74. 

—  -Hämatein,  Kernfärbung  69. 

—  —  -Schwefelsäure,  Kernfärbung 
69. 

Chromalaunpentaoxyhämatei'n  70 ff. 

Chromalauntetraoxyhämatein  70  ff. 

Chromalauntrioxyhämatein  70  ff. 

Chromatophoren,  Selaginella  585. 

— ,  Untersuchung  mit  Flußsäure  nach 
Fischer  455. 

Chrom,  Fixierung  zur  Hämatoxylin- 
färbung,  Chemie  66. 

Chromhämateine,  Chemie  64. 

— ,  Herstellung  nach  F.  C.  C.  Han- 
sen 67. 

— ,  färberische  Eigenschaften  69  ff'. 

— ,  Herstellung  der  Lösungen  70. 

Chromhämatoxylin  nachApäthy,  Fär- 
bung von  Malakostraken  142. 

Chromosmiumessigsäure ,  Fixierung 
von  Blutkörperchen  150. 

—  nach  Ferguson  584. 
Chromotrope,  Anwendung  nach  Hei- 
denhain 340. 


600 


Sach- Register. 


Chromsilbermethode  nach  Oppel,  Fär- 
bung- des  Bindegewebes  in  Blut- 
lymphdrüsen 147. 

Cilien,  Cyanophyceen  1(39. 

— ,  siehe  auch  Geißeln. 

Citronensäure,  mikrochemischerNach- 
weis  213. 

Claussens  Methode,  Askomyceten  zu 
untersuchen  298. 

Colostrum ,  Babs  Untersuchungen 
272. 

Courmont- Andres  Methode,  Harn- 
säure nachzuweisen  417. 

Cristinas  Methode ,  Celloidinschnitte 
anzukleben  99. 

Cyanophyceen,  Allgemeines  297. 

— ,  Anabaenin  457. 

— ,  Beizung,  Färbung  nach  Philips 
168. 

— ,  Chromatophoren  455. 

— ,  Cilien  169. 

— ,  Gas  Vakuolen  457,  458. 

— ,  Mikrochemisches  252. 

— ,  Pseudomitosen  456. 

— .  Schnelliärbung  458. 

^,  Spitzenzellen  458. 

— ,  Untersuchung  nach  A.  Fischer 
455. 

— ,  —  —  Kohl  457. 

— ,  Zellinhalt  169. 

— ,  Zentralkörper  456. 

Cyanophycinkörner ,  Nachweis  169, 
297. 


JJarmepithel,  Schleimzone,  Färbung 
435. 

Darmkanal,  Schleimhaut  439. 

Detinierlinie,  Herstellung  nach  Peter 
530. 

Degens  Methode,  Wabenstruktur  im 
Plasma  hervorzurufen  und  zu 
fixieren  552. 

Derbesia,  Eiweißkristalle  299. 

Dioxyhämatein  59  ff. 

—    -Eisenlack  59  ff". 

Doelters  Heizvorrichtung  für  sehr 
hohe  Temperaturen  463. 

Dogiel-Bethes  Färbung  der  Haar- 
scheiben 160. 

Dolomit,  Unterscheidung  von  Kalk- 
spat 303. 

Donaggios  Methode ,  degenerierende 
Nervenfasern  zu  untersuchen  563. 

Donaus  Methode,  Metalle  durch  kol- 
loidale Färbung  der  Boraxperle 
nachzuweisen  304. 


Doppelbrechung    für    verschiedene 

Farben  302. 
— ,  künstliche  302. 

—  von  Gallerte  301. 
Doppelsäge  nach  G.  Arndt  104. 
Doppelultramikroskop  Zeiß  484. 
Dreuws    Exstirpations-    und    Opera- 
tionsfeder 137. 

Driessens  ^Methode  der  Glykogenfär- 

bung  422. 
Dschunkowsky-Luhs'    Apparat    zur 

Blutentnahme  295. 
Dubreuils    Methoden   mit    Pikroblau 

zu  färben  420. 
Duckwalls  Geißelfärbung  588. 
Dunkelfeldbeleuchtung  von  Leitz  114. 
Dysenterie,  Amöben,  Kultur  140. 
— ,  Bakterien  294. 

-cLdens  Methode,  Amyloiddegenera- 

tionen  zu  untersuchen  558. 
Eier,  Osmerus  166. 
Einbetten  in  Pflanzenwachs  445. 

—  nach  Pavlow  186. 
Einschließen  in  Glyzeringelatine  329. 
Eisen,   Affinität  zu  verkalkten  Ge- 
weben 546. 

— ,  mikrochemischer  Nachweis  209. 

Eisenalaun  für  Hämatoxylinfärbung, 
Chemisches  49  ff. 

Eisenchlorid ,  Unterscheidung  von 
Kalkspat  and  Dolomit  309. 

Eisenhämatoxylin ,  Darstellung  der 
Sekretgranula  163. 

— ,  Färbung  von  Blutkörperchen  150. 

— , Malakostraken  141,  142. 

— ,  —  —  Schneckenembryonen  162. 

— , Tunikaten  143. 

Eisenhämatoxylin-Erythrosin,  Leber- 
zellen der  Amphibien  288. 

—  -Pikrorubin,  Leberzellen  der  Am- 
phibien 288. 

Eisenlacke  der  Hämatoxylinoxyda- 
tionsprodukte  60  ff. 

Eiweiß,  Kristalle,  Derbesia,  Färbung 
299. 

— ,  Lösung,  Mikrochemisches  242. 

— ,  — ,  Ultramikroskopisches  423. 

Elaioplasten,  Färbung,  Nachweis  396. 

elektrisches  Organ,  Torjjedo,  Nerven- 
fasern 278. 

Endotropismus  des  Pollenschlauches 
299. 

Entkalkung  nach  Bödecker  190. 

—  —    Rousseau  567. 

—  von  Zahnschmelz  190. 


Sach- Register. 


Gül 


entmilzto  Tiere,  Pankreas  165. 
Entwässern,  Verfahren  Pavlows  186. 
Eosin,  Färbung,  Allgemeines  337. 

—  -Hämatoxylin,  Färbung  von  Leu- 
kocyten  272. 

—  -Methylenblau,  Färbung  von  Blut- 
trockenpräparaten 431. 

—  — ,  polychromes,  Färbung  der 
Eosinzellen  566. 

eosinsaures  Methylenblau  -  Methyl- 
alkohol, Färbung  von  Mastzellen 
273. 

Eosinzellen,  Färbung  566. 

Ernsts  Methode,  Eiweißkristalle  von 
Derbesia  zu  färben  299. 

Erythrodextrin ,     Behandlung     mit 
Chromsäure  459. 

Essigsäure,  Untersuchung  von  Throm- 
bocyten  269. 

— ,  Wirkung  auf  Antliocyan  459. 

Eunice,  Bauchsinnesorgane  424. 

Exstirpationsfeder  nach  Dreuw  137. 

-T  ärbetrog  nach  Melissinos  130. 

Färbung,  Theoretisches  546. 

Farben,  Lösungen,  Ultramikroskopi- 
sches 423. 

Fermente,  Mikrochemisches  250. 

Fernandez'  Methoden,  Tunikaten  zu 
untersuchen  142. 

Ferricochenillelösung ,  Herstellung 
und  Anwendung  nach  F.  C.  C.  Han- 
sen 86  ft'. 

Ferrodioxyhämatein,Herstellungnach 
F.  C.  C.  Hansen  61. 

FerrohämateVn ,  Herstellung  nach  F. 
('.  C.  Hansen  60. 

Ferrolacke  des  Hämatoxylin  und  der 
Hämatei'ne  60  ff. 

Fett,  Färbung  durch  Osmiumsäure, 
Theoretisches  138. 

— ,  Nachweis  im  normalen  Muskel 
145,  146. 

— ,  —  nach  Keinath  145,  146. 

— ,  Verhalten  bei  Aceton -Celloidin- 
behandlung  416. 

Fettsäuren ,  mikroskopischer  Nach- 
weis nach  Fischler  262. 

Fickers  Methode,  Körnchen  der  Bak- 
terien zu  färben  449. 

Filter,  gehärtete  433. 

Fiorentini-Signers  Methode,  Harnsedi- 
mente zu  färben  187. 

Fischers  Glykogenfärbung  421. 

—  Methode,  Chromatophoren  zu 
untersuchen  455. 


Fischers  Jletliode,  Cyanophyceen  zu 
untersuchen  455. 

—  Sperrvorrichtung  für  Einstellung 
am  Mikroskop  100. 

Fischlers  Methoden,  Fettsäuren  und 
Seifen  im  Gewebe  nachzuweisen 
262. 

Fixierungsflüssigkeit  für  Neuroglia 
nach  Rubaschkin  158. 

— ,  Wirkung  auf  Sekrete  der  Frosch- 
haut 287. 

Fleischers  Methode ,  Tränendrüsen 
und  Sekretgranuhi  zu  unter- 
suchen 162 

Florencesche  Kristalle ,  Erzeugung 
nach  Takayama  558. 

Florideenstärke,Mikrochemisches224. 

Floyds  Methode ,  Nerven  von  Peri- 
planeta  zu  untersuchen  143. 

flüssige  Kristalle  303. 

Flußsäure,  Untersuchung  der  Chro- 
matophoren 455. 

Foetus,  Nervensystem,  Untersuchung 
nach  Joris  279. 

Formaldehyd,  Wirkung  auf  Blut 
557. 

Formolpikrinsäure  nach  Imhof  283. 

Frosch,  Hautdrüsen  286. 

Fuchsin,  Färbung  der  Hypophysis 
541. 

— ,  Ultramikroskopisches  423. 

—  -Resorzin ,  Färbung  von  elasti- 
schen Fasern  567. 


(jadkiewicz'  Methoden,  Malakostra- 
ken  zu  untersuchen  141. 

Galeotti,  Färbung  für  Nebenniere 
und  Pankreas  165,  166. 

Gallerte,  Doppelbrechung  301. 

— ,  Mikrochemisches  389. 

Gallis  Älischer  für  Blutkörperchen- 
zählung 148. 

Ganglienzellen,  Färbung  nach  Roraa- 
nowskischer  Methode  427. 

Gasvakuolen ,  sogen. ,  der  Cyano- 
phyceen 457,  458. 

Gehlenit,  optisches  Verhalten  302. 

Geißeln ,  Färbung  nach  Duckwall 
581. 

— ,  —    —  Hugh  Williams  580. 

— , Kral  295. 

— ,  —    —  Moore  580. 

— ,  siehe  auch  Cilien. 

Gerbstoffe,  Mikrochemisches  237. 

— ,  Vorkommen  239. 

Geruchknospen,  Fische  161. 


602 


Sach- Register. 


Giemsas  Modifikation  der  Romä- 
nowski-  Noclitschen  Cliromatin- 
fiirbung  449. 

Gitterpoliirisation  30(i. 

Glas,  Brechungsexponent  307. 

— ,  chemische  Zusamiuensetzung  307. 

Glas'  Methode,  Nasenschleimhaut  zu 
untersuclien  28(j. 

—    — ,  Sarkolyten  zu  fiirben  427. 

Glimmerplatten  für  Massenfiirbung 
von  Mikrotomschnitten  330. 

Glykogen,  Färbung  nacli  Driessen 
'  422. 

— ,  —    —  Fischer  421. 

— ■,  — ,  vergleichende  Untersuchun- 
gen 288. 

— ,  Mikrochemisches  220. 

Glykoside,  Mikrochemisches  230. 

Glykosurie,  Glykogen  288. 

Glyzeringelatine,  Wirkung  auf  Kar- 
minfärbungen 327. 

Goldchlorid,  Färbung  des  Nerven- 
systems nach  Nabias  139. 

Gonokokken,  Kultur  nach  Stroß  294. 

Grabowers  Methoden,  Nervenfasern 
in  Kehlkopfmuskeln  zu  unter- 
suchen 279. 

Gräfes  Methoden,  verholzte  Mem- 
branen zu  färben  581. 

Granulationen,  Fixierung  mit  Formol- 
Miiller  550. 

— ■,  Theoretisches  552. 

— ,  Untersuchung  nach  Altmann  550. 

— ,  —    —  Schridde  550. 

Grenzscheiden  der  Knochenkanäl- 
chen,  Färbung  mit  Hämatoxvlin 
326. 

Groots  Gelatine-Zinkweißkitt  für  Prä- 
paratengläser 136. 

Guiraud-Gauties  Methode,  altes  Bak- 
terienmaterial zu  färben  449. 

Gummi,  Mikrochemisches  289. 

Guttapercha,  Mikrochemisches  330. 

Gymnospermen ,  Makrosporenmem- 
bran 583. 


fiaanes  Methode,  Cardiadrüsen  des 
Magens  zu  untersuchen  567. 

Haare,  Katze  285. 

Haarscheiben ,  Untersuchung  nach 
Dogiel-Bethe  160. 

— ,  —    —  Pinkus  160. 

Ilämalaun  -  Bismarckbraun ,  Speichel- 
drüse 285. 

—  -Mucikarmin ,  Nasenschleimhaut 
286. 


Hämalaun-Mucikarmin,  Speicheldrüse 
285. 


—   -Orange  -  Rubin  S,  Färbung 


von 


Blutlymphdrüsen  147. 
Hämatein,  Chemie  45,  46  ff. 
— ,  Herstellung  von  Lösungen  nach 

F.  C.  C.  Hansen  81  ff. 
— ,  Oxydationsstufen  59  ff". 
Hämatein  -  Bismarckbraun ,    Färbung 

von  Mucin  567. 

—  -Ferrolack  60. 

—  -Mucikarmin.  Färbung  von  Mucin 
567. 

—  -Säurefuchsin -Pikrinsäure,  Fär- 
bung von  elastischen  Fasern 
567. 

Hämatoxylin,  Anwendung  nach  Fisch- 
ler beim  Fettsäurenuchweis  263, 
264. 

— ,  Chemie  45  ft'. 

— ,  Färbung  von  Bindegewebe  in 
Blutlymphdrüsen  nach  Mallorv 
147. 

— ,  —    —  Cyanophyceen  168. 

— ,  —    —  Knoclienschnitten  326  ff. 

— ,  —    —  Muskeldegeneration  266. 

— ,  —    —   Nebenniere  nach  Srdinko 


löi. 


Nervenfasern     nach     K( 


zowsky  277. 
— ,  —    pflanzlicher  Zellkerne  460. 
— ,  —    von  Pollenschläuchen  299. 
— ,  —    —  Spermatozoon  426. 
— ,  —    des  Synapsisstadiums  460. 
— ,  Oxydation  und  Oxydationsstufen 

48  ff. 
Hämatoxylin- Alaunkarmin  ,    Färben 

von  Ascidienlarven  425. 

—  -Eisenalaun  nach  F.  C.  C.  Hansen 
55  ff'. 

—  — ,  Regeneration  alter  Lösungen 
nach  F.  C.  C.  Hansen  56. 

—  -Eosin,  Färbung  von  Mucin  567. 

—  — ,  Speicheldrüse  285. 

—  -Erj'throsin,  Färbung  von  Sekret- 
kapillaren und  Kittleisten  567. 

—  -Kongorot,  Speicheldrüse  285. 

—  -Rubin  nach  Head  145. 
Hämatoxyline,  methylierte  84. 
Hansens  Methode,  Cochenille-Lösun- 
gen herzustellen  84  ff'. 

—  —    der  Hämateingewinnung  und 
-Verwendung  45  tW 

—  — ,  Hyalinknorpol  zu  untersuclien 
433. 

Hardestys    Methode ,    Neuroglia    zu 
untersuchen  157. 


Sach- Register. 


GO: 


Harn,    Seiliuiente    zu    färben    nach 
Fiorentini-Signer  187. 

Harnsäure,  Nachweis  nach  Courmont- 
Andre  417. 

Harze,  Mikrochemisches  229. 

Hautsinnesorgane ,     Untersuchung 
nach  Pinkus  IGO. 

Hayems    Sublimatlösung ,    Fixierung 
von  Lungengewebe  440. 

Heads    Methode ,    Solenogastres    zu 
untersuclien  144. 

Heidenhains  Methode,  Knochenknor- 
pel zu  färben  325. 

—  — ,  Mikrotomschnitte    zu   färben 
auf  GHmmerplatten  330. 

—  — ,  —  zu  strecken  333. 

—  — ,  mit    Azokarmin    zu    färben 
339. 

—  — ,  —  Chromotropen   zu  färben 
340. 

—  — ,  —  Trichloressigsäure  zu  fixie- 
ren 321. 

Heinemanns     Methoden,     Ascidien- 

larven  zu  untersuchen  424. 
Heizvorrichtung  nach  Doelter  (1400^) 

4ti3. 
Helbers   Methode,   Blutplättchen   zu 

untersuchen  und  zu  zählen  150, 

268. 
Hellers  Neutralrotgelatine  292. 
Henlesche    Scheide,    Färbung    nach 

Ruffini  447. 
Henneberg-Leitzsches  Mikrotom  125. 
Hermannsche    Flüssigkeit ,    Fixieren 

von   Arachnoiden  -  Spermatozoon 

426. 
Hertzsches  Gitter  306. 
Herz,  Malakostraken  141. 
— ,  Tunikaten  142. 
— ,  Ventrikel,  Nervenknoten  442. 
Hexaoxyhämatein,  Färbkraft  iio. 
Hilfsscheide    der    Nerven,    Färbung 

nach  Ruffini  447. 
Hindens  Methode,  Dolomit  und  Kalk- 
spat zu  unterscheiden  303. 
Hirschlers  Methoden,  Lepidopteren- 

puppen  zu  untersuchen  265. 
Holz,  Gräfes  Reaktionen  581. 
Horngewebe,  Färbung  von  Hyphomy- 

ceten  572. 
Hugh  Williams'  Geißelfärbung  580. 
Hundswut,    Veränderungen   in    den 

Nervenzellen  443. 
Hyalinknorpel,  Färbung  433. 
Hydrochinon ,     Untersuchung     von 

Nervengewebe  274. 


Hyphomyceten,    Färbung  im   Horn- 
gewebe 572. 
Hvpophysis,  Färbung  nach  Cagnetto 
'  539. 


lUings  Methode ,  Kugelzellen  der 
Glandulae  vesiculares  zu  unter- 
suchen 570. 

—  — ,  Leber  zu  untersuchen  436. 

—  — ,  submaxillare  Speicheldrüse  zu 
untersuchen  284. 

Imhofs  Methoden,  Lumbaimark  der 
Vögel  zu  untersuchen  283. 

Indigo,  Nachweis  nach  Leake  461. 

Indikan,  Mikrochemisches  231. 

Indol,  Mikrochemisches  251. 

Indulin-Eosin-Aurantia,  Färbung  von 
Leukocytengranulationen  429. 

Injektion  nach  Konaschko  179. 

—  —    McFarland  555. 

—  —    Myers  555. 
Interferenzfarben,  Abhängigkeit  von 

der  Dispersion  302. 

— ,  flüssige  Kristalle  303. 

Inulin,  Mikrochemisches  219. 

intravitale  Färbung,  siehe  vitale  F. 

Isobutylalkohol  -  Schwefelsäure ,  Fär- 
bung verholzter  Membranen  582. 

Isolieren  von  Mikroorganismen  10  ff. 


J  od,  mikrochemischer  Nachweis  199. 

Jodgummimethode  Ehrlichs ,  Gly- 
kogennachweis  273. 

Jodsäure-Methylviolett,  Wirkung  auf 
rote  Blutkörperchen  430. 

—  -Neuviktoriagrün,  Wirkung  auf 
rote  Blutkörperchen  430. 

JoUys  Methoden,  Blut  zu  unter- 
suchen 148. 

Joris'  Methoden ,  Nervensystem  von 
Foeten  zu  untersuchen  279. 


Ivalilauge,  Untersuchung  von  Thruiii- 

bocyten  269. 
Kalium,    mikrochemischer    Nachweis 

205. 
Kaliumbichromat  zur  Oxydation  der 

Hämateine  72  if. 
Kaliumchromat    zur    Oxydation   der 

Hämateme  72  ff. 
Kaliumkarbonat ,     Unterscheidung 

seiner  Modifikationen  587. 
Kalkschwämme,  Skelett  587. 


604 


Sach- Register. 


Kalkspat,  Unterscheidung  von  Dolo- 
mit 303. 

Kallose,  Mikrochemisches  392. 

Kamons  Methode,  Genichknospen  zu 
untersuchen  1(51. 

Kapselfärbung    nach    Richard   Muir 
581. 

Karakacheffs  Methode,  Pankreas  zu 
untersuchen  435. 

Karbdi,  Lösung,  Fixierung  des  Her- 
zens 442. 

Karbolfuchsin ,  Färbung  von  Alnus- 
wurzelknoten  300. 

Karbonsäuren,   aliphatische,    mikro- 
chemischer Nachweis  212. 

Karotin,  Mikrochemisches  233. 

Karzinom,  Parasit  451. 

Kataphorese,  zur  Untersuchung  kol- 
loidaler Lösungen  305. 

Katgut,  Sterilisieren  454. 

Kathämoglobin  557. 

Kautschuk,  Mikrochemisches  230. 

Kehlkopfmuskeln,  Untersuchung  nach 
Grabower  279. 

Keinaths    Methoden,     Fett    nachzu- 
weisen 145,  146. 

Kern,  Cyanophyceen  169. 

— ,  Färbung  mit  Chromhämatein  nach 
F.  C.  C.  Hansen  69,  76  ff. 

— ,  —    —  Hämatoxylin   nach    F.    C. 
C.  Hansen  57  ff. 

— ,  —    —    Persioessigsäure     nach 
Beck  167. 

— ,  Mikrochemisches  247. 

Kieselsäure ,   mikroskopischer   Nach- 
weis 204. 

Kitt  für  Präparatengläser    nach   de 
Groot  136. 

Kittleisten,  Färbung  285,  287. 

— ,  —  mit   Hämatoxylin- Ery throsin 
567. 

Knochen,  Einbettung  und  Schneiden 
nach  Blumstein- Judina  561. 

— ,  Untersuchung    nach    Meyburg 
153. 

Knochenfische ,    Hirn ,    Nervenfasern 
565. 

Knochenknorpel,  Färbung  nach  Hei- 
denhain 325. 

Knochenlamellen,  Färbung  nach  Hei- 
denhain 326,  327. 

Knorpelgewebe,  Färbung  433. 

Kobalt,  Affinität  zu  verkalkten  Ge- 
weben 546. 

Kohle ,     mikrochemischer    Nachweis 
204. 

Kohlehydrate,  Mikrochemisches  218. 


kohlensaure  Salze,  mikrochemischer 
Nachweis  204. 

Koiranskys  Methoden,  Leberzellen 
der  Amphibien  zu  untersuchen 
288. 

kolloidale  Lösungen  von  Edelmetal- 
len 304. 

—  — ,  Erkennung  nach  Vanino- 
Hartl  305. 

—  — ,  Untersuchung  mittels  elek- 
trischer Kataphorese  305. 

—  Natur  der  Stärkekörner  458. 

Konaschkos  Injektionsmethode  179. 

Kongofarbstofte,  alkoholische  Lösun- 
gen, Benutzung  nach  Heidenhain 
337. 

Kongokorinth,  Färbung  der  Tränen- 
drüse 163. 

Kopsch"  Methoden,  Thrombocyten  zu 
untersuchen  268. 

Korallin-Pikroblau  421. 

Kozowskys  Methode,  Nervenfasern 
zu  färben  277. 

Krals  Methoden  der  Bakterienfärbung 
296. 

—  —  —  Geißelfärbung  295. 

— Hefefärbung  296. 

Kraus'  Methode,   Hyphomyceten   zu 

färben  572. 

Krebs'  Modifikationen  der  Vergol- 
dungsmethoden 282. 

— ,  siehe  Karzinom. 

Kreosot  zum  Einbetten  186. 

Küvette,  heizbare,  Zeiß  484. 

Kugeigranit  588. 

Kugelzellen  in  den  Glandulae  vesi- 
culares  570. 

Kultur  von  Amöben  nach  Lesage  140. 

—  —  Mikroorganismen  nach  Schon- 
ten 10  ff. 

—  —  Trypanosoma  Paddae  nach 
Thiroux  140. 

Kupfer,  Affinität  zu  verkalkten  Ge- 
weben 546. 
Kupferacetat  zum  Fettsäurenachweis 

262. 
Kutikula,  Mikrochemisches  387. 


L/acke  des  Ilämatoxylins ,  Chemie 
50  ff. 

Lams'  Methode,  Teleostierei  zu  unter- 
suchen 166. 

Langerhanssche  Inseln,  Untersuchung 
nach  Karakacheft'  435. 

—  — ,  Färbung  mit  Thionin-Karbol 
438. 


Sach- Register. 


605 


Laß'  Methode,  Piilex  zu  üxieren 
425. 

Leakes  Methode,  Indigo  nachzuwei- 
sen 461. 

Leber,  Fixierung  436,  437. 

— ,  Plasinazellen  1(j4. 

Leberzellen.  Ampliibien  288. 

Lecithine,  Färbung  durch  Osraium- 
säure  138. 

Leinöl,  Injektion  von  Pankreasge- 
fäßen  439. 

Leitfähigkeit,  elektrische,  Bestim- 
mung nach  Ocker-Blom  451. 

Leitzsche  Dunkelfeldbeleuchtung  bei 
Verwendung  von  Ölimmersion 
114. 

Lenhossek-Bakays  Modifikation  der 
Cajalschen  Versilberungsmethode 
264. 

Lenzmanns  Methode,  Bluttrockenprä- 
parate zu  färben  431. 

Lepidopteren,  Puppen -Regeneration 
265. 

Leptomin,  Mikrochemisches  254. 

Lesages  Methode,  Dysenterieamöben 
zu  kultivieren  140. 

Leucin,  Mikrochemisches  227. 

Leukocyten,  Färbung  272,  395. 

— ,  Granula,  Färbung  429. 

— ,  —  acidophilc  429. 

Leyens  Methode,  Schleimzone  des 
Magen-  und  Darmepithels  zu  fär- 
ben 435. 

lipoide  Körnchen,  Untersuchung  nach 
Stern  570. 

Londons  Methode,  Nervenfibrillen  zu 
versilbern  448. 

Lumbricus,  Spermatogenese  265. 

Lunge,  Fixierung  nach  Abrikossoif 
440. 

Lungenphthise,  Anatomie  439. 

Lupinus,  Plasmodesmen  300. 

Lymphdrüsen,  Färbung  nach  Bartel- 
Stein  568. 

— , Bunting  287. 

Lymphocyten,  Färbung  nach  Bartel- 
Stein  568. 

—    von  der  Ratte  427. 


-Alagen,  Cardiadrüsen  567. 

— ,  Epithel,  Schleimzone,  Färbung 
4.35. 

Magnesium,  mikrochemischer  Nach- 
weis 208. 

Malachitgrünagar,  Nachweis  von  Ty- 
phus 453. 


Malakostraken,  Herz,  Struktur  141. 

Malariaplasmodien,  Nachweis  in  Ge- 
hirnschnitten 417. 

Mangan ,  mikrochemischer  Nachweis 
211. 

Manganhämatein,  Herstellung  nach 
F.  C.  C.  Hansen  79. 

]\Iarchis  Methode,  Vergleich  mit  der 
Donaggioschen  564. 

Marks  Paraffinwasserbad  548. 

Markscheiden,  Färbung  mit  Osmium- 
säure nach  Bor  eher  t  154. 

— ,  —  nach  Ruffini  447. 

—  von  niederen  Wirbeltieren,  Unter- 
suchung nach  Borchert  153. 

Masern,  Bakteriologisches  450. 

Massenfärbung  auf  Glimmerplatten 
330. 

Mastzellen,  Färbung  nach  Bab  272. 

Meißnersche  Körperchen ,  Versilbe- 
rung der  Neurofibrillenenden 
565. 

Melangeur  nach  GalH  148. 

Melilith,  optisches  Verhalten  302. 

Melissinos'  Färbetrog  130. 

Membran,  pflanzliche,  Gitterstruktur 
306. 

— ,  siehe  auch  Zellmembran. 

metachromatische  Körner,  Mikro- 
chemisches 249. 

Metalle,  Nachweis  durch  kolloidale 
Färbung  der  Boraxperle  304. 

Metailfärbungen  pflanzlicher  Häute, 
Pleochroismus  349  fl". 

—  —    — ,  verkalkter    Gewebsteile 
545. 

Methylenazur,  Färbung  von  Hyplio- 
myceten  572. 

—  -Methylenblau-Eosin ,  Chromatin- 
färbung  nach  Giemsa  449. 

Methylenblau,  Färbung  von  Mast- 
zellen 273. 

— ,  pt)lychromes,  Färbung  von  Pan- 
kreas 435. 

— ,  — ,  Metachromasie  286. 

— .  — ,  Untersuchung  von  Hantödem 
nach  Ziegler  145. 

— ,  —  -Eisenhämatoxylin  vanGieson, 
Färbung  von  Hautödem  145. 

—  -Eosin,  Färbung  des  Thrombo- 
cytenkerns  271. 

—  -Hämatoxylin,  Färben  von  Asci- 
dienlarven  425. 

—  -Milchsäure,  Färbung  von  Bakte- 
riengranula 449. 

—  -Neutralrot ,  vitale  Färbungen 
nach  Ruzicka  548. 


606 


Sach  -  Register. 


Methylp3"ronin,  Färbung  der  Plasma- 
zellen  der  Leber  1(34. 

Methylviolett,  Färbung  von  Amyloid 
558. 

— ,  —    —  Thrombocyten  270, 

Meyburgs  Methode ,   Knochenschliffe 
zu  untersuchen  153. 

Meyers  Methode,  Amyloid  haltbar  zu 
färben  571. 

Michniewicz'  Methode,  Plasmodesmen 
zu  untersuchen  300. 

Mikrochemie,  botanische  194  ft'. 

Mikrometerschraube ,     Sperrvorrich- 
tung nach  A.  Fischer  100. 

Mikroorganismen ,     Isolieren     nach 
Schonten  10  ff. 

Mikrotom  nach  Henneberg  von  Leitz 
125. 

Milchsäure ,    mikrochemischer    Nach- 
weis 214. 

Mingazzinische  Flüssigkeit,  Fixierung 
von  Lymphzellen  427. 

Mischbild  7. 

Mischer    für   Blutkörperchenzählung 
nach  Galli  148. 

Mitochondrien,  Färbung  nach  Benda 
265. 

Moores  Geißelfärbung  580. 

Moose,  Membran  377. 

Muchämatei'n-  Erythrosin ,     Färbung 
von  Mucin  567. 

—    — ,  —  —  Speicheldrüse  285. 

Mucin,  Färbemittel  567. 

Müllersche  Flüssigkeit,  Nachwirkung 
bei  gefärbten  Präparaten  324. 

Muirs  Kapselfärbung  581. 

Musculus  stapedius,  Nervenendigun- 
gen, Präparation  280. 

Muskel,  Gehalt  an  Fett  145,  146. 

Muskeldegeneration ,     Lepidopteren- 
Färbung  266. 

Myers'  Injektionsmethode  555. 

Myriophj'ilin,  Mikrochemisches  253. 


JN  ablas'  Methode ,   Nervenfasern  zu 

untersuchen  139,  278. 
Nährböden,  elektrische  Leitfähigkeit 

451. 
Nasenschleimhaut ,    Drüsen ,    Leuko- 

cyten  286. 
Natrium,  mikrochemischer  Nachweis 

206. 
Nebennieren,  Amphibien  164. 
— ,  Färbung  nach  Srdinko  437. 
Nephelometer    von    Richards- Wells 

304. 


Nerven,  Periplaneta  143. 

— ,  Solenogastres  144. 

Nervenfasern,   degenerierende,  Fär- 
bung nach  Donaggio  563. 

— ,  Kehlkopfmuskeln  279. 

Nervenknotendes  Herzventrikels  442. 

Nervensystem,   Färbung    mit    Gold- 
chlorid nach  Nabias  139. 

Nervenzellen ,     Veränderungen     bei 
Hundswut  443. 

— ,  Vergoldung  nach  Rossi  273. 

— ,  Versilberung  nach  Ramön  y  Cajal 
443. 

Netz,  Präparation  und  Untersuchung 
nach  Schwarz  434. 

Netzhaut,  Untersuchung  nach  Came- 
ron  290. 

— ,  Versilberung  291. 

Neumayers  Objektträgergestell  181. 

N'eurofibrillen ,    Färbung    nach    Ko- 
zowsky  277. 

Vergolden  nach  Ramön  y  Cajal 
445. 

Versilberung  nach  Bielschowsky 
564. 

—  —  Ramön  y  Cajal  273,  448, 
565. 

—  von    Endigungen    bei    Tast- 
körperchen etc.  565. 

—  -Vergoldung    nach     Lenhos- 
sek-Bakay  264. 

—  von  Lumbricus  444. 
Neurotibrillennetz,  Retina  155. 
Neuroglia ,     Färbung    nach    Benda- 

Huber  157. 
— ,  —   —  Rubaschkin  158. 
— ,  Vergoldung  nach  Ramön  y  Cajal 

444. 
— ,  —    von  Lumbricus  444. 

279. 
nach    Rothber^er 

292. 

Neutralrotgelatine  nach  Heller  292. 
Nicolies     Methode ,     Agglutination 

der   Bakterien   zu   untersuchen 

454. 
Niederschläge,  feinste,  Konstatierung 

nach  Richards- Wells  304. 
nigrosinophile    Granulationen ,    Fär- 
bung nach  Bab  273. 
Nilblau,  Färbung  von  Mastzellen  273. 
Nißl-Substanz ,   chromophile    Körner 

144. 

—  — ,  von  Periplaneta  144. 
Nubian   Waterproof  Blacking,   Her- 
stellung von  Richtlinien  .532  ff". 

Nuklein,  Mikrochemisches  247. 


Neuron,  Histogenese 
Neutralrotagar 


Sach- Register. 


607 


Objektträgergestell  nach  Neumayer 
181. 

Ocker -Bloms  Methode,  elektrische 
Leitfähigkeit  von  Nährböden  zu 
bestimmen  451. 

Ödem  der  Haut,  Untersuchung  nach 
Ziegler  145. 

Öle,  ätherische  '214. 

— ,  fette,Nach\veis  inPflanzen  214,21G. 

— ,  Reinheit,  Prüfung  mit  dem  Ultra- 
mikroskop 487  If. 

■;— ,  Umwandlung  in  Oleosole  485  fi". 

Ölkörper,  Lebermoose,  Mikrochemi- 
sches 215. 

Öffnungsbeugung  3. 

Oldekops  Nährboden ,  Neutralrot- 
färbung 292. 

Oleinsäure,  Färbung  durch  Osmium- 
säure 138. 

Oleosole,  Ultraraikroskopisches  481. 

opaleszierende  Niederschläge,  Unter- 
suchung nach  Richards- Wells  304. 

Operationsfeder  nach  Dreuw  137. 

optische  Achsen,  Dispersion  464. 

—    — ,  Winkelmessung  4()4. 

organische  Basen,  Mikrochemisches 
305. 

Osmerus,  Eier  166. 

Osmiumessigsäure,  Fixieren  vonKehl- 
kopfrauskeln  279. 

Osmiumsäure,  Färbung  von  Fett, 
Theoretisches  138. 

— ,  —  —  Markscheiden  nach  Bor- 
chert  153. 

— ,  Fixierung  von  Ascidienlarven425. 

— ,  —  desNervensy.stemsvonFoeten 
280. 

— ,  —  von  Plasmastrukturen  553. 

Oxalsäure,  Nachweis  und  Vorkommen 
im  Pflanzenreich  213. 


r  alladiumchlorür ,  Fixierung  von 
Haut  nach  Pinkus  160. 

Pankreas  entmilzter  Tiere  165. 

— ,  Färbung  nach  Karakacheff  435. 

— ,  Injektion  und  Untersuchung  nach 
Pensa  438. 

Paraffinwasserbad  nach  Mark  548. 

Paulys  MetlKjde,  Brechungsexpo- 
nenten von  Flüssigkeiten  zu  be- 
stimmen 344. 

Pavlows  Einbettungsverfahren  186. 

Pektinstoffe,  Mikrochemisches  392. 

Pensas  Methoden,  Pankreas  zu  unter- 
suchen 438. 

Pentaoxyhämatein,  Färbkraft  63. 


Periplaneta,  Nerven  143. 
Persio,  Farbstoff  166. 
Persio- Essigsäure,     Färbung     von 
Prianzenkernen  167. 

—  —    -Gentianaviolett  168. 

—  —    -Kernscliwarz  167. 

—  —    -Methylgrünessigsäure  167. 

—  —    -Nigrosin  167. 
Pest,  Mikroben  452. 

Peters  Methode,  Richtebene  zu  mar- 
kieren 530. 

Petromyzon,  Riechzellen  160. 

Pflanzenwachs ,   zum   Einbetten  445. 

Phäophyceenstärke,  Mikrochemisches 
225. 

Phenole,  Mikrochemisches  227. 

Phenylhydrazin ,     mikrochemischer 
Zuckernachweis  298. 

Phillips'  Methoden,  Cyanophyceen 
zu  untersuchen  169. 

Phloroglucin,  Mikrochemisches  227. 

Phosphorsäure ,     mikrochemischer 
Nachweis  201. 

— ,  Vorkommen  im  Pflanzenreich  203. 

Physoden,  Mikrochemisches  253. 

Pighinis  Methode,  Selachierembryo- 
nen  zu  untersuchen  441. 

Pigmente  von  Bakterien,  Pilzen, 
höheren  Pflanzen,  Mikrochemi- 
sches 234. 

Pikrinsäure,  Fixierung  der  Sekret- 
granula 163. 

Pikrinsäure -Säurefuchsin ,  Differen- 
zierung von  Bindegewebs-  und 
Muskelfasern  142. 

—  -Sublimat  nach  ludiof  283. 
Pikroblau  nach  Dubreuil  420. 
Pilze,  Membran  376,  391. 

Pinkus'  Methode,  Hautsinnesorgane 
zu  untersuchen  160. 

Planorbis,  Niere,  Herz,  Perikard  161. 

Plasma,  Mikroclieiuisches  395. 

— ,  Vitalfärbung  399. 

— ,  Wabenstruktur  552. 

Plasmazellen,  Körnelungen  550. 

— ,  Leber  164. 

Plasmodesmen ,  Präparation  nacii 
Michniewicz  300. 

Platinchlorid,  Fixierung  von  Plasma- 
strukturen 553. 

Platinnitrat,  Fixierung  von  Nerven- 
gewebe nach  Rossi  273. 

Pleochroismus  bei  Silberkristallen  349. 

— ,  Erklärung  von  Braun  30(). 

—  nach  Metallfärbungen  349  ff. 
Poecilasma,  Untersuchung,  Färbung 

144. 


608 


Sach- Register. 


Pötzsch'  Methode,  Schneckenembryo- 
nen zu  untersuchen  161. 

Polarisations  -  Mikroskoppolymeter 
nach  Brunnee  586. 

Pollenschläuche,  Endotropismus  299. 

— ,    Färbung  299,  463. 

Porciles  Methoden,  Plasmazellen  der 
Leber  zu  untersuchen  164. 

Präzisionssäge  nach  G.  Arndt  104. 

Preisich-Heims  Methoden,  Blutplätt- 
chen zu  untersuchen  266. 

Projektionsapparat  Leitz  362. 

Protargol  zur  Versilberung  nach 
Regaud-Dubreuil  418. 

Proteosomen,  Färbung,  Nachweis 
397. 

Protoplasma,  siehe  Plasma. 

Prytz'  Methode,  Lage  einer  spiegeln- 
den Fläche  mikroskopisch  zu 
bestimmen  588. 

Pseudomitosen  der  Cyanophyceen 
456. 

Pulex,  Fixierung  425. 

Pyrenoide,  Nachweis  246, 

'Quantitative  Analyse  in  der  Mikro- 
chemie 398. 

Quecksilbertropfen ,     Wachstums- 
erscheinungen 465. 

Quinckes  Theorie  der  Tropfen-  und 
Schaumbildung  301. 


xvaggi,  Pilzkulturen  davon  41. 
Ramön  y  Cajals  Vergoldungsmethode 
445. 

—  —    Versilberungsmethode    155, 
273,  443,  448. 

—  —  — ,  modifiziert  nach  Lenhos- 
sek-Bakay  264. 

Raths  Gemisch,  Fixierung  von  Ner- 
vengewebe 145. 

Reagentien,  Prüfung  auf  Reinheit 
413. 

Refraktionsbild  5. 

Regaud  -  Dubreuil's,  Versilberungs- 
methüde  418. 

Resorcin,  Differenzierung  der  Kern- 
färbungen nach  Nabias  139. 

—  -Fuchsin ,  Färbung  elastischer 
Fasern  in  Bhitlymphdrüsen  147. 

Retina,  Neurofibrillennetz  155. 
Riiizopus  Oryzae,  Mutation  41. 
Richards-Wells'  Nephelometer  304. 
Richtebene,  Markierung  nach  Peter 
530. 


Riechzellen,  Petromyzon  160. 

Rohrzucker,  Mikrochemisches  218. 

Romanowskische  Methode,  Schnitt- 
färbung nach  Sternberg  416. 

Romanowski  -  Nochtsche  Chromatin- 
färbung,  modifiziert  von  Giemsa 
449. 

Rossis  Methoden,  Nervenzellen  zu 
vergolden  273. 

rote  Stärke,  Mikrochemisches  225. 

Rubaschkins  Methode,  Neuroglia  zu 
untersuchen  158. 

—  Fixierungsflüssigkeit  158. 
Rückenmark ,     Untersuchung    nach 

Varela  de  la  Iglesia  445. 
Ruffinis  Methode,  Nervenscheiden  zu 

färben  447. 
Rüzickas  Methode  der  vitalen  Färbunir 

548. 

—  Theorie  der  vitalen  Färbung  91. 


bafranin,  Färbung  von  Glykogen 
421. 

Safranin-Bendasche  Mischung,  Fär- 
bung von  Blutkörperchen  150. 

—  -Pikroblau  421. 
salizylsaures    Calcium     zum    Seifen- 
nachweis 263. 

Salpetersäure,  mikrochemischer  Nach- 
weis 200. 

salpetrige  Säure ,  mikrochemischer 
Nachweis  200. 

Saponarin,  Mikrochemisches  232. 

Sarkolyte,  Färbung  427. 

Sarkom,  Parasit  451. 

Sauerstoff',  Nachweis  197. 

Scharlachrot-Hämatoxylin ,  Färbung 
von  Leukocyten  272. 

—  -Osmiumsäure,  Färbung  der  Bür- 
zeldrüsen 569. 

Schleim,  Färbung  mit  Hämatei'nen  64. 

— ,  Mikrochemisches  389. 

Schleimhaut  des  Darmkanals  439. 

Schleimkugeln,  Cyanophyceen  169. 

Schleimzone  des  Magen-  und  Darm- 
epithels, Färbung  435. 

Schmelzlamellen  191. 

Schneider- Justs  Methode,  Oleosole 
herzustellen  und  zu  untersuchen 
481  ff. 

Schnellfärbung  nach  Brand  458. 

Schnitte,  Färbung  mit  der  Roma- 
nowskischen  Methode  416. 

Schnittstrecken  nach  Siding  177. 

Scholz'  Methode  der  Aceton-Celloidin- 
einbettung  415. 


Sacli- Register, 


G09 


Öchoutens  Methode,  Mikroorganismen 
zu  isolieren  lOflF. 

Schröders  Methode ,  Bauchsinnes- 
organe von  Eunice  zu  unter- 
suchen 424. 

Schüllersclie  Parasiten  45"2. 

Schwämme,  Entlvalkung  191. 

Schwarz'  Methode ,  Netz  des  Kanin- 
cliens  zu  untersuchen  434. 

Schwefel,  mikrochemischer  Nachweis 
198. 

Seh  wefelkohlenstofit".  Mikrochemisches 
2'2G. 

Schweißdrüse,  Katze  285. 

Sediment  des  Harns ,  Färben  nach 
Fiorentini-Signer  187. 

Seifen,    mikrochemischer  Nachweis 
263. 

Sekretgranula,  Fixierung  mit  Pikrin- 
säure 103. 

Sekretkapillare ,     Darstellung     mit 
Sublimat  162. 

— ,  Färbung  mit  Hämatoxyhn-Ery- 
throsin  567. 

— ,  Speicheldrüse  284. 

Selacliier,  Embryonen,  Untersuchung 
nach  Pighini  441. 

Selaginella,  Plasmahaut  der  Chloro- 
plasten  585. 

Senfts  Methode,Zucker  mikrochemisch 
nachzuweisen  298. 

Shattucks  Methode,  Mikrotomschnitte 
aufzukleben  463. 

Sidings  Metliode  des  Paraftinsclinei- 
dens  und  Schnittstreckens  177. 

Silber,  Aftinität  zu,  verkalktem  Ge- 
webe 545. 

— ,  Kristalle  349. 

Silikatschmelzen,  mikroskopische  Un- 
tersuchung 463. 

Skiodrome  nach  Becke  3u7. 

Skrobanskys  Methode  der  Bleu  tle 
Lyon  -  Pikrinsäurefärbung  138. 

Solenogastres,  Fixierung  144. 

Sommerfeldts  Methode,  Achsenwinkel 
bei  kleinen  Kristallpräparaten  zu 
bestimmen  35(j. 

Speicheldrüse,  submaxiUare  284. 

Spenglers  Formalinmethode  zur  Rein- 
züchtung von  Tuberkelbakterien 
450. 

Spermareaktion  nach  Takayama  558. 

Sperrvorrichtung  für  die  Einstellung 
am  Mikroskop  nach  A.  Fischer 
100. 

spiegelnde  Fläche ,  mikroskopische 
Lagebestimmung  588. 

Zeitschr.  f.  wiss.  Mikroskopie.     XXII,  4. 


Spirochaete  pallida,  Färbung  575  ff. 

—  — ,  —  nach  Baudi-Simonelli  579. 

—  — ,  —  —  Giemsa  576. 

—  — ,  —  —  Oppenheim -Sachs  579. 

—  — ,  —  —  Reitmann  577. 

—  — ,  —  mit  Kapriblau  576. 

—  — .  —  —  Karbolfuchsin  576,579. 

—  — ,  —  —  Karbolgentianaviolett 
579. 

—  — .  —  —  Methylenazur  576. 

—  — , Nilblau  BR  576. 

—  — ,  Nachweis  nach  Noeggerath- 
Staehelin  578. 

Spitzenzellen  der  Cyanophyceen  458. 

Sporen,  Bakterien  573. 

— ,  Lsolieren  nach  Scliouten  Ulf. 

Srdinkos  Methode,  Nebenniere  zu 
untersuchen  437. 

Stärke,  Färbung,  Mikrochemisches 
221. 

Stärkekörner,  Behandlung  mit  Chrom- 
säure 459. 

— ,  Färbung  nach  Fischer  458. 

— ,  kolloidale  Natur  458. 

Stahl,  phusphorreicher,  Erkennung 
465. 

Sterns  Methode.  Bürzeldrüse  zu  un- 
tersuchen 569. 


Sternbergs  Methode, 


Schnittfiirbung 


mit  Romanowskis  Verfahren  zu 
erzielen  416. 

Stoeltzners  Methode,  verkalkte  Ge- 
webe zu  fiirben  545. 

Strecken  der  Mikrotoraschnitte  nach 
lleidenhain  333. 

Stroß'  ^lethode,  Gonokokken  zu  kul- 
tivieren 294. 

Stückfärbung  mitChromhämatein  69  ft'. 

—    —  lläuiateinen  64. 

Sublimat.  Darstellung  von  Sekret- 
kapillaren 162. 

— ,  Fixierung  von  Geruchsknospen 
161. 

— ,  —  —  Lymphzellen  427. 

— ,  —  —  Selacliierembryonen  441. 

Sublimat-Ameisensäure,Fixierungvon 
Nervengewebe  447. 

Sublimateisessig,  Fixieren  des  Ner- 
vensystems von  Foeten  280. 

submaxiUare  Speicheldrüsen  284. 

1  akayamas  V^erbesserung  der  Me- 
thode ,  Florencesche  Kristalle 
nachzuweisen  558. 

l'anninsafraninfärbung  des  Glyko- 
gens 421,  456. 

39 


610 


Sach-Reffister. 


Tastscheiben,  Versilberung  der  Neu- 

rolibrillenenden  565. 
Teleostier,  Ei  1(5G. 
Tetrajotlfluorescin,      Färbung     von 

Thrombocj^ten  270. 
Tetraüxyliämatein-Eisenbick  G3,  G4. 
— ,  Färbkraft  63. 
— ,  Herstellung  etc.  59  ff. 
Tliionin,   Färbung   von   Blutkörper- 
chen 150. 

— . Mastzellen  273. 

— ,  —  der    Schleimzone    des   Darm- 
epithels 435. 
— ,  Metachroraasie  286,  287. 
Thionin-Karbol,  Färbung  der  Langer- 

hansschen  Inseln  438. 
—    -Fikrinsäure,Färbungder  Langer- 

hansschen  Inseln  438. 
Thiroux'  Methode,  Trypanosomen  zu 

kultivieren  14o. 
Thoma-Zeiß,  Zählapparat  für  Blut- 
körperchen 554. 
Thrombocvten,   Färbung   nach  Ehr- 
lich 270. 
— ,  Konservierung  nach  Kopsch  269. 
— ,  —  —  Kopsch  268. 
— .  Untersuchung  nach  Bürker  269. 
— ,  Verdauung  nach  Kopsch  271. 
Tibertis  Methoden,  Nebennieren  und 
Pankreas    zu    untersuchen    164, 
165. 
Toluidinblau ,    Färl.)ung    von   Leber- 
zellen der  Amphibien  288.' 
— .  —  —  Mucin  567. 
— ,  —  der    Schleimzone    des    Darm- 
epithels 435. 
— ,  Metacliromasie  285  ff. 
Toluidinblau  -  Ammoniumnjolybdat, 
Nervensystem  von  Foeten  280. 

—  -Thionin,  Speicheldrüse  285. 
Tonerde,  mikroskopischer  Nachweis 

212. 
Tonerdehämatei'n ,   Herstellung  nach 

F.  C.  C.  Hansen  79. 
Torpedo,  elektrisches  Organ  278. 
Tränendrüse,  Mazeration  163. 
— ,  Untersuchung     nach     Fleischer 

162. 
Traubenzucker ,      Mikrochemisches 

218. 
Triacid  nach  Ehrlich,   F'ärbung  von 

Harnsedimenten  187. 

—  —  — ,  —  —  Leukocyten  272. 

—  —  — ,  —  —  Lymphzellen  428. 
Trichloressigsäure,  Darstellung  von 

Sekretkapillaren  163. 
— ,  Fixierungsmittel  321. 


Triepels     Zylinderrotationsmikrot(  »m 
118. 

Trioxj^hämatein  59  ff. 

— .  Eisenlack  63,  64. 

— ,  Herstellung   von   F.   C.  C.   Han- 
sen 62. 

Triton,  Blutkörperchen  150. 

Trypanosoma  paddae,  Färbung  141. 

—    — ,  Kultur  140. 

Tr  jq3anosomen,  Nachweis  in  Schnitten 
417. 

Tuberkelbazillen ,      Färbung      nach 
Abrikossoff  439. 

— ,  Reinzüchtung  450. 

Tunikaten ,    Ausbreitungspräparate 
142,  143. 

— ,  Blutgefäßsystem  142. 

Typhus,  Bakterien,  auf  Humusnähr- 
boden 293. 

— ,  — ,  Identifizierung     nach     Boit 
572. 

— ,  — ,  Sporen  574. 

— ,  — ,  A^erhalten  in  Erde  292. 

Tyrosin,  Mikrochemisches  228. 

U  niversalprojektionsapparat     Leitz 
362. 


>  aledinskys  Methode,  Nervenknoten 

der  Herzventrikel  zu  untersuchen 

442. 
Vanillin,  Mikrochemisches  229. 
Vanino-Hartls    Methode,     kolloidale 

Lösungen  zu  erkennen  305. 
Varela     de     la    Iglesias     Methode, 

Rückenmark     zu     untersuchen 

445. 
Vater- Pacinische  Körperchen,   A^er- 

silberung  der  Neurofibrillenenden 

565. 
Verdauung  von  Thrombocyten  271. 
Vergoldung  nach  Krebs  282. 

—  —  Rossi  273. 

verholzte  Membranen ,  Mikrochemi- 
sches 378. 

—  — ,  Nachweis  durch  aliphatische 
Reagentien  581. 

verkalkte  (lewebe,  Metallfärbungen 
545. 

verkorkte  Membranen,  Mikrochemi- 
sches 378. 

Versilberung  mit  Protargol  nach 
Regaud-Dubreuil  418. 

—  nach  Ramon  y  Cajal  siehe  diesen. 
— ,  Theoretisches  265. 


Sach- Register. 


011 


Versilberung-  verkalkter  Gewebe  nach 

Stoeltzner  545. 
Vcrtikalilluminiitor  von  Zeiß  30G. 
Vitaltarbung,  Allgemeines  548. 
— ,  Bakterien  297. 

—  mit  Methylenblau  549. 

—  —  Methylgrün  548. 

—  —  Neutralrot  549. 

— ,  Theorie  nach  Rüzicka  91. 
Vögel,  Knochenmark  5G0. 
— ,  Lumbalraark  2^;!. 
— ,  Neuroglia  284. 
Volutin,  Mikrochemisches  249. 

Wabenbiklner  552. 

Wabenstruktur,  Fixierung  553. 

— ,  Zustandekommen  552. 

Wachs,  Mikrochemisches  21  <. 

Wachstumserscheinungen  an  Queck- 
silbertropfen 4(35. 

Weidenreichs  Methoden,  Blutlymph- 
drüsen zu  untersuchen  14G. 

Weigerts  Neurogliafärbung ,  modi- 
fiziert von  Rubaschkin  159. 

Wendts  Methode,  Bakterien  am  Deck- 
glas zu  fixieren  448. 

Wuttigs  Methode,  Leber  auf  Fett- 
gehalt zu  untersuchen  436. 

Yorks  Methode,  pflanzliche  Objekte 
in  Agar  einzubetten  462. 

Zählkanimern  für  Blutplättchen  152. 
Zahnschmelz,  Entkalkung  190. 


Zellgrenzen,   Darstelhing   nach    Fer- 

nandez  143. 
ZeHmembran,  Chitingeiialt,  Naciiweis 

391  ft". 
— .  Mikrochemisches  369. 
— ,  PektinstoÖe,  Nachweis  392. 
— .  verholzte,  Mikrochemisches  378, 

581. 
— ,  verkorkte,  Mikrochemisches  387. 

—  von     Algen,     Mikrochemisches 
374. 

—  —  Bakterien ,     ^likrochemisches 
376. 

—  —  Moosen  ,      Mikrochemisches 
377. 

—  —  Pilzen,  Mikrochemisches  376. 
Zellsaft,  Mikrochemisches  395. 
Zellulose,  Mikrochemisches  369. 
Zenkersche    Flüssigkeit ,     Fixierung 

von  Blutlymph(lrüsen  147. 

—  — ,  —  vom  Netz  435, 
Zentralkörper     der     Cyanophyceen 

456. 
Zieglers  Methode,  Odem  der  Haut  zu 

untersuchen  145. 
Ziemannsche  Lösung,  Färbung  von 

Bluttrockenpräparaten  431. 
Zietzschmanns     Methoden,      Leuko- 

cytengraniüa  zu  färben  429. 
Zinkweiß-Gelatinekitt  nach  de  (iroot 

136. 
Zucker,  Mikrochemisches  218. 
— ,  Nachweis  nach  Senft  298. 
Zwergrasse  von  Rhizopus  41. 
Zylinderrotationsraikrotom  nach  Trie- 

pel  118. 


Druck  von  Fischer  &  Wittig  in  Leipzig. 


Zeitsclir.  f. wiss.Mikrosk.  Bd.XXH. 


Taf .  I . 


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P.  Fiorentini 


lüh  Ar^t  JufcBmöardt  Je^ns- 


Verlag   von  S.Hirzel,  Leipzig. 


Zeitschr.   f.  wiss.   Mikrosk.  Bd.  XXII. 


Taf.  II. 


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Verlag  von  S.  Hirzel.  Leipzig. 


Lichtdruck  v.  Sinsel  &  Co.,  (i.  ni.  b.  H.,  Oetzsch-Leipzig. 


Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXII. 


Taf.  III. 


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Verlag  von  S.  Hirzel  in  Leipzig. 


Lichtdruck  v.  Sinsel  &  Co.,  G.  m.  b.  H.,  Oetzsch-Leipzig. 


Zeitschr.  f.  wiss.  Mikrosk.  Bd.  XXII. 


Taf.  IV. 


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Verlag  von  S.  Hirzel  in  Leipzig. 


Lichtdruck  v.  Sinsel  &  Co.,  G.  m.  b.  H.,  Oetzsch-Leipzig. 


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