Z F Immunitätsforsch Exp Therap Originale 10.1911

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1

Library Bureau Cat* no, 1197

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I m m u n i t a t s f a r $:C;® jg

und experimenteIfe:Tliei^]^ie

I. Teil: Origiitiale •' •

Unter Mitwirkuug von:

H. Apolant, Frankfurt a. M., Y. Babes, fiukarest, 0. Bail, Frag, E. F. Bashford,
London, E. T. Behring, Marburg, 8. Belfanti, Mailand, A. Besredka, Paris, J. Bordet,
Brussel, A. Breinl, Liverpool, L. Brieger, Berlin, A. Calmette, Lille, A. Diendonnb,
Munchen, B. Doerr, Wien, H. Dorset, Washington, E. v. Dnngern, Heidelberg.

P. Ehrlieb, Frankfurt a. M., 8. Flexner, New York, U. Friedemann, Berlin,

P. Froeeh, Berlin, 6. Caffhy, Berlin, H. von Gruber, Munchen, M. Hahn, Miinchen,

A. Hellter, Berlin, L. Hektoen, Chicago, H. Jacoby, Berlin, C. 0. Jensen, Eopen-
hagen, 8. Kitasato, Tokio, W. Eolle, Bern, W. Kruse, Ednigsberg i. Pr., K. Land-
steiner, Wien, C. Levaditl, Paris, L. von Llebermann, Budapest, F. Loelller, Greifs-
wald, Th. Madsen, Eopenhagen, C. J. Martin, London, E. Metsehnikoff, Paris,

L. IDehaelis, Berlin, B; Muir, Glasgow, C. Moresehi, Pavia, P. Th. Mblier, Graz,

M. Nelsser, Frankfurt a. M., F. Neufeld, Berlin, F. Nnttail, Cambridge, B. Ostertag,
Bwlin, B. Paltauf^ Wien, A. Pettersson, Stockholm, B. Pfeiffer, Breslau, E. P. Plek, *
Wien, P. BSmer, Marburg, C. J. Salomonsen, Eopenhagen, A. 8chattenfroh, Wien,

CL 8ehilling, Berlin, Th. 8mith, Boston, 0. Sobemhelm, Berlin, Y. C. Yanghan, Ann
Arbor, A. t. Wassermann, Berlin, W. Welehardt, Erlangen, A. Wladlmiroff, St Peters¬
burg, A. E. Wright, London, D. Zabolotny, St Petersburg

heransg^eben von:

E. FRIEDBER6ER R. KRAUS H. SACHS P. UHLENHUTH

(Berlin.) (Wien.) (Frankfurt a. M.) (Gr.-Lichterfelde-Berlin.)

Zehnter Band.

Mit 9 Tafeln, 9

^abellen.

54 Eurven, 29 Figuren un^d' 2 Skizzen im Text.

Jena

Verlag von Gustav Fischer
1911

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InhaltsTerzeielmis.

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Heft 1 nnd 2. (Ausgegeben am 5. Jali 1911.)

Seite

T. Plrqnet, C., Ueber die Terschiedenen Formen der allerguchen Be-
aktioD bd der Bevacciaation. Mit 5 Tafeln und 13 Figuren im

Text. 1

Grifenbergy und Thies, J.y BeitrSge zur Biolo^e der mannlichen
Geschleditezdlen. [Atis dem Pharmakologischen Inatitut der
Universitat Berlin; Direktor: Geheimrat Prof. Dr. A. Heffter
(AbteBang fiir Immunitatsforachung und experimentelle Thmipie;

Ldter: Prof. Dr. E. Friedberger)]. 24

Deldy Ueber die Giftigkeit von wfiaserigen Organextrakten und
die entgiftende Wirkung frischen Serums. [Aus dem Kaiserlichen
Gesundheitsamt in Berlin]. 63

Landstelner, Karl, und Praieky Emily Ueber die Bedehung der Anti<
kdrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. [Aus der Fro>

sektur dee k. k. Wilhelminenspitales in Wien]. 68

Apolanty Hugo, Ueber die Immunit&t bd Doppdimpfungen von
Tumoien. [Aus dem KdnigL Institut fOr experimentelle Therapie
zu Frankfurt a. M. (Direktor: Geh. Obermed.-Bat Prol Dr. P.

Ehrlich).] Sfit 9 Tabellen.103

Marxery A.y Experimentelle Tuberkuloeestudien. 11. Vers^dchende
Immuniderungsversuche am Meerschwdnchen. [Aus der bak>
teriologischen AbteQung der diem. Fabrik auf Aktien (vorm.

E. Schering), Berlin].118

T. Diugern und Hlnehfeldy Ueber das Verhalten des Eomplementes
in phydoh^ischen BaC4- und GaCI,-L6eungen und in hyper*
tonisdier NaCl*L5snng. [Aus dem Erebsinstitut der Univwdtat

Hdddberg (Direktor: Exzdlenz Czerny)].131

Basajiky Stephaiiy Die Wirkungswdse des Antitoxins. [Aus dem
n. pathologjach-anatomischen Institut Budapest; Direktor: Hofcat
Prof. O. Pertik.] Mit 2 Figuren im Text.135

4

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IV

Inhaltsverzeichnis.

Apolant, H.y und Marks, L. H., Zur Frage der aktiven Geschwulst-
immunitat. [Aus dem Kdnigl. Institut fiir experimentdle Therapie
(Direktor: Geh. Ober-Medizinaliat Prof. Dr. Paul Ehrlich).]

Mit 3 Tafdn.159 /

Mttller, Paul Th., Versuche iiber aktire imd passive Abaphylaxie bei
Streptokokken. [Aus dem Hygienischen Institut der Universitat
Graz].164

Daniels, Polak L., Ueber die Bedeutimg der Verwendung von
Antigenen verschiedener Herkunft bei der Wassermannschen
Beaktion.206

Friedberger, E., iind Mita, S., Ueber Anaphylaxie. XVIII. Mit*
teilung. Die anaphylaktische Fieberreaktion. [Aus dem Pharma*
kologischen Institut der Universitat Berlin; Direktor: Geheimrat

Prol Dr. A. Heffter (Abteilung fiir Immunitatsforschung und
experimentelle Therapie; Leiter: Prof. Dr. E. Friedberger).]

Mit 43 Eurven im Text.216

Hirsehfeld, L., Zur Frage der Spezifitat der Phytagglutinine. Be-
merkungen zu der Arbeit von Baubitschek (diese Zeitschrift,

Bd. 9, p. 237). [Aus dem Institut fi'ur Krebsforschimg in Heidel*
berg].281

Heft 3. (Ausgegeben am 17. Juli 1911.)

Omorokow, L., Ueber die Wirkung des Cobragiftes auf die Kom*
plemente. [Aus der experimentell-biolo^schen Abteilung (Prof.

H. Sachs) des Kdnigl. Institutes fiir experimentelle Therapie in
Frankfurt a. M. (Direktor: Geheimer Ober-Medizinabat Prof. Dr.

P. Ehrlich)] .285

Bauereisen, A., Zur Frage der biologischen Differenzierung der Milch*
eiweillkoiper. [Aus der Eonigl. UniverBitat8*Frauenklmik Kiel
(Direktor: Prof. Dr. Stoeckel)].306

Lnije, Marie, Ueber die pathologisch*anatomischen Yeranderungen
der Lungen bei der intrapulmonalen Immunisierung mit Diphtheiie*
torin. [Aus der Abteilung fiir experimentelle Pathologie und
pathologische Anatomie (Vorstand: Privatdozent Dr. S. A bra*
movr) des Ghemisch*bakteriologischen Institute von Dr. Ph.
Blumenthal in Moskau.J Mit 1 Tafel. 314

Rossi, Ottorino, Ueber die Methodik der Wassermannschen Syphilis*
reaktion. Ein Verfahren zwecks Absorption der im Menschen*
serum normalerweise enthaltenen Ambozeptoren g^n rote
Hammelblutkorperchen. [EHinik fiir Nerven* und Gdsteskrank*
heiten am Institute fur hShere Studien in Florenz (Leitung:

Prof. E. Tanzi)].321

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lahaltsrerzeichnis.

V

S«ite

Thomsen, Olal^ imd Boas, Harald, Ueber die ThermoresisteDZ der
in der Wassenuannschen Beaktion virksamen ,^tikdi:i)er‘' in
den verschiedenen Stadien der Syphilis and bei anderen Krank*
heiten. [Aus Statens Seruminstitut (Direktor: Dr. Th. Madsen)
and aus Budolph Berghs Hospital (Direktor: Prof. Dr. Erik
Pontoppidan) Kopenhagen.] Mit 1 Figur im Text.337

Friedberger, E., und Mlta, 8., Ueber Anaphylaxie. XIX. Mitteilung.

Die Anaphylaxie des Frosches und die Elinwirkong dee Ana*
phylatoxins auf das isoUerte Froschherz. [Aus dem Pharma*
kologischen Institut der Unirersitat Berlin; Direktor: Qeheimrat
Prof. Dr. A. Heffter (Abteilung fur Immunit&tsforschang und
experimentelle Therapie; Leiter: Prof. Dr. E. Friedberger).]

Mit 2 Skizzen und 18 Eurven im Text.362

FrKnkel, Ernst, Ueber Serumhamolysine. (II. Mitteilung.) [Aus dem
Staatlichen Hygienischen Institut zu Hamburg; Direktor: Prof.

Dr. Dunbar (Abteilung fiir experimentelle Therapie und Im*
mnnitatsforsehung)].388

MtUler, B., Ueber das Vorkommen von Antituberkulin im mensch*
lichen Blutserum. [Aus der serodiagnostischen Station der Elinik
fiir Ueschlechts* und Hautkrankheiten (Prof. E. Finger) in
Wien].419

Heft 4. (Ausgegeben am 9. August 1911.)

Dellnuuin, Otto, Ueber die spezifischen Stofie des Tuberkdbacillus
und anderer saurefester BacUlen. [Aus dem Institut fiir experi*
menteUe Therapie des Eppendorfer Erankenhauses (Oberarzt
Dr. Much)].^1

€lallI-Yalerio, B., et Bomand, M., Becherches sur la fixation du
complement par le precede de Sabrazes*Eckenstein. [Institut
d’Hygiene et de Parasitologie de I’Universite de Lausanne]. . . 440

Friedberger, E., and Mlta, 8., Ueber Anaphylaxie. XX. Mitteilung.

Die Bedeutung quantitativer Verhfiltnisse fur den Anaphylaxie*
rersuch mit besonderer Beriicksichtignng der Bakterienanaphylaxie.

[Aus dem Pharmakologischen Institut der Unirersitat Berlin;
Direktor: Qeheimrat Prof. Dr. A. Heffter (Abteilung fiir Im*
munitfitsforschung und experimentelle Therapie; Leiter: Prof.

Dr. E. Friedberger)].453

T. Liebermann, L., und t. Fen)’Tessy, M., Ueber das Wesen der
Eomplemente. [Aus dem Hygienischen Institut der Universitat
Budapest] .479

Preufie, Hans, Studien fiber das Auftreten der Area bei der kutanen
Tuberkulinimpfung. [Aus der Unirersitfits-Einderklinik in Breslau
(Direktor: C. 7. Pirquet).] Mit 3 Eurven im Text.503

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VI

InhalteverzeichmB.

R«it«

Snziild, Sf Versuche zu dner ErU&nmg der Milzbrandinfektion.

[Aub der eerologischen Abtdlong dee HygienischeD Institutes der
deutschen UniTersitilt in Prag (Vorstand: Ptoi O. Bail)] . . . 515

JJeftnann. Pipettenstander. [Aus der Bakteriologischen Ab-
teilung dee Rudolf Virchow»Krankenhauses zu Berlin.] Mit

1 Figur im Text.536

Idefmaniiy Ein Wasserbad ftir serologische Zwecke. [Aus der Bakterio¬
logischen Abt^ung des Rudolf Virchow-Krankenhauses zu]Berlin.]

Mit 1 Figur im Text.537

Banbitsehek, H., Zur Frage der Spezifitat der Phytagglutinine. E^e
Antwort auf die Bemerkungen von Dr. (L. Hirschfeld (diese
Tieitschrift, Bd. 10, Heft 1/2, p. 281). 538

Heft 6 tmd 6. (Ansgegeben am 26. August 1911.)

Hertle und Pfeiffer, Hermann, Ueber Anaphylaxie g^en artgleiches
blutfremdes Eliw^. [Aus dem Institute fur geridiUiuhe Medizin
der k. k. Universitat Graz (Vorstand: Prof. Dr. J. Eratter)] . 541

Pfeiffer, Hermann, Weitere Beitrage zur Eenntnis der Ueberempfind-
lichkeit und anderer Toxikosen des akuten, parenteralen Eliweifi-
zerfalls. [Aus dem Institute fur gerichtliche Medizin der k. k.
UniTersitat Graz (Vorstand: Prof. Dr. Julius Eratter).] Mit
11 Elguren im Text.550

Bledl, A., und Kraus, B., Bemerkungen zu der Arbeit ron H. Pfdffer:
„Weitere Bdtrfige zur Eenntnis der Ueberempfindlichkeit und
anderer Toxikosen des akuten, parenteralen E!iweiBzerfalls“ . . . 711

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Autorenyerzeichnls.

Apolant 103.

ApoUmt und fifarkg 159.

Baaeteisen 306.

Biedl und Eiuas 711.

Danieb 206.

Deilmann 421.

Dold 53.

T. Dongem und Hirschfeld 131.
Fi&nkel, R 388.

Friedberger und Mita 216, 362, 463.
Gain* Valerio und Bomand 440.
Gi&fenberg und Hues 24.

Hertle und Pfeiffer, H. 541.
Hirachfeld 281.

Landsteiner und Prai^ 68.

liefmann 536, 537.]

T. liebennann und v. Fenyvessj 479.
Luije, Marie 314.

Marzer 118.

Muller, P. Th. 164.

MMer, B. 419.

Omorokow 285.

Pfeiffer, H. 550.

V. Pirquet 1.

PreuSe, H. 503.

Baubitschek 538.

Boesi 321.

Busznyik 135.

Suzuki 515.

Thomsen und Boas 337.

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MtsiMt t ImiimtitdMiuie. 01 i g i D ^

Nachdruek verboten.

Ueber die yersehiedenen Formen der allergiseben Beaktion
bei der Bevaccinatlon.

Von Prof. O. v. Pirqnet in Breslau.

Mit 5 Tafeln und 13 Figuien im Text.

(E^g^angen bei der Bedaktion am 15. MSrz 1911.)

Allen Impf&rzten ist es bekannt, dafi die Revaccination
sehr verschiedenartige Resultate liefern kann. Die Unter*
scheidung der Reaktionsart wird gew5hnlich nach der Aus-
bildnng gemacht, welche die Impfstelle am 8. Tage zeigt, und
danach [Bolin(l)] ein voller, mittelmUBiger, niederster, nega-
tiver Erfolg unterschieden.

Ich babe in meinen ^Studien flber Vaccination and
vaccinale Allergic" (5) versucht, eine systematische Einteilung
der revaccinalen Erscheinungen zu geben. Sie stfltzt sich auf
die Analyse von Rurven, die durch tSgliche Beobachtung der
Impfstellen gewonnen sind. In der vorliegenden Arbeit babe
icb diese Analyse welter ausgedebnt. Ferner babe icb neben
der kutanen Impfung mit frischer Kfilberlympbe die Injektion
von erbitzter und verdQnnter KS.lberlymphe ausgefflbrt
{Knoepfelmacher); die dabei auftretenden Stichreaktionen
warden ebenfalls genau beobachtet und in Vergleicb mit den
kutanen Reaktionen gezogen. 'Daraus ergaben sicb Schlflsse
fiber den Zusammenbang von Ueberempfindlicbkeit und Im-
munitfit bei der Vaccine.

Versuchsreihe vom 18.1, bis 2. II. 1911.

Versuchsobjekt: 4 MMchen im Alter von 11—19 Jahien, in der
Bekonvaleszenz nach leichtem Scharlach, sonst gesund, wurden zu den
Versuchen verwendet.

Methods der Impfung: Am 18.1. wurden auf der rechten Schulter,
am 30.1. auf der linken Schulter je 3 Vacdnationsstellen und darunter
eine intrakutane Injektion von Lymphe gemacht. Die Vaccination wurde
in der Weise ausgefiihrt, dafi zuerst an 3 Stellen frische GlyzerinkiQber-
Zcitochr. f. ImmunitllUfoitchanc* Oris. Bd. X. 1

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2

C. V. Pirquet,

lymphe (von der Kgl. PreuB. Impfanstalt zu Oppeln) aufgetragen, dann
innerhalb dieser Stelle je eine Bohrung mit meinem Impfbohrer gemacht
wurde.

Zur intrakutanen Injektion wurde Lymphe aus derselben Anstalt be-
nutzt, die mit 9 Teilen 30-proz. Glyzerins verdiinnt, durch 1 Stunde auf
80® erhitzt und dann mit einigen Tropfen Toluol versetzt worden war.

Die Injektion wurde mit einer feinen Pravazspritze moglichst ober-
flachlich in die Haut gemacht; ca. 7,0 ccm (0,05 g der 10-proz. Losung,
also 0,005 g der urspriinglichen Lymphe) wurde einverleibt.

Methode der Beobachtung: An jedem Morgen wurden die Hautstellen
einer genauen Besichtigung unterzogen, die aufgeti-etenen Eeaktionen mit
dem Millimetermafle gemessen und die auf die Langsachse des Armes
queren Durchmesser notiert Bei Verschiedenheiten des Langs- und des
Querdurchmessers wurden auch die Langsdurchmesser angegeben. Ferner
wurde die Tastbarkeit und die Intensitat der Hyperamie nach einer sub-
jektiven Skala notiert: oberhalb der Durchmesserzahlen die Tastbarkeit,
unterhalb die Farbe, wobei ^ deutlich, cv^ undeutlich, — nicht tastbar
bezw. hypenUnisch bedeutet. So bezeichnet z. B. 11 : 3 eine Effloreszenz

CO

von einem queren Durchmesser von 11, einen Langsdurchmesser von 3 mm,
die deutlich tastbar, aber nur undeutlich gerotet ist. Fiir sehr starke
Hyperamie ist das Doppelzeichen ir; verwendet.

15mal wurden die Eeaktionen von mir gezeichnet, 7mal von dem
Maler Hahn-Halm in Aquarell gemalt.

I. Anna F., 11 Jahre alt. Scharlach seit 30. XII. Eraftig.

Eeine sicheren Narben der ersten Impfung; die Eevaccinatiou im
11. Lebensjahre ist noch nicht erfolgt.

18.1. 11. Impfung an 3 Stellen und Injektion.

Alle 4 Stellen kommen zur Beaktion.

An der Injektionsstelle ist schon nach 24 Stunden eine Papel
10:11, stark gerbtet, zu sehen, mit einer Area von 20 mm Durchmesser;
nach 48 Stimden weitere Vergr66erung der Papel auf 17 :12, der Area
auf 30 : 35. Von da an Abklingen der Erscheinungen; jedoch erfolgt dne
nochmalige voriibergehende Hyperamie gleichzeitig mit der Ausbildung der
Area um die Vaccinationsstellen.

Diese b^innen erst nach 48 Stunden ihre Entwicklung, und zwar
jede von ihnen in v^schiedener Weise.

Impfstelle la bringt es nur zu einer roten Papel von 4 mm Aus-
dehnung, verschwindet dann allmfihlich.

Ib wachst als hochrote Papel rasch an auf 20 :14; 5 Tage p. v. zeigt
sich eine grofie Papille von 2 mm Durchmesser. Merkwurdigerweise wachst
diese aber nicht weiter, sondem wird stark erhaben, braunlich, und es
bildet sich ein dicker Schorf von 3 mm Durchmesser. Moglicherweise hangt
die Entwicklungsstbrung damit zusammen, dafi 6 Tage p. v. die SteUe auf-
gekratzt erschien.

I c entwickelt eine typische beschleunigte Beaktion. Die Papille, 5 Tage
p. V. deutlich difierenziert, ist hautfarben und w^hst in 4 Tagen auf 7 mm

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nach dcr Imphing

Verschied. Formen der allergischen Reaktion bei der Revaccination. 3

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45 : 35 50 : 57

4

C. V. Pirquet,

5 T^e p. T.
bei ImpfsteUe a Beste
einer minimalen Be-
aktion

b, c in Entwicklung
d im Abblaasen

7 Tage p. y.
nur bei c entwickelt sich
die Papille wdter

8 Tage p. v.
das Zentrom von c be-
ginnt tiockener zu
werden

d ist verschwunden

10 Tage p. T.

die Area verkleinert
sich; die Papille yon
c w^hst nocn, tiock-
net dabei zentral dn

14 Tage p. v.

bei b ist der kleine
Schorf abgef alien; bei
c besteht noch ein
^cker Schorf (Impf-
bocke)

Fig. 1. Entwicklung der Impfstellen la, Ib, Ic und der
Injektionsstelle Id.

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Verschied. Formen der allei^ischen Beaktion bei der Bevaccmation. 5

Duichmeeser an, rertiocknet hierauf vom Zentnun aua und verborkt wie
due ErsUmgspapille. EIntaptechend der starkeien Ausbildung der Papille
wild auch die Area um Ic grOfier als um Ib nnd halt langer an.

Am 30. L, 17 Tage nach dem fruheren Versnche, nochmalfl Impfung
an 3 Stellen und Injektion. Ebenfalls reagieren alle 4 Btellen. Die In-
jektionsstelle reagiert nicht weeentlich verschieden rom eraten Male; bd
den Impfetellen aber ist eine deutliche Differenz dadurch g^ben, da 6
echon nach 24 Stunden daa Maximum errdcht ist. Bd der Impfetelle 2
findet dch dne Andeutung von Areabildung. Nach 48 Stunden sind die
Beaktionen rerschwunden.

Der Gang der EntwicUung der Impf* Ilg. 3.

stdle c des ersten Versuches imd der Impf-
stelle f des zwdten Versuches ist hier gra-
phisch dargestellt Die Abszisse steUt die
Zdt in Tagen, die Ordinate die Ausdehnung
der Beaktion in Millimeter Durchmesser dar.

E^. 2. Anna F. Beschleunigte und sofortige Beaktionen
nach Bevaccination.

Fig. 2.

W

T £ J ^ rw# 7 s 9

E%. 3. Anna F. Sofortige und beschleunigte Beaktionen
nach Injektion steriler Lymphe bei einem allergischen In*
diriduum^).

Bd 0 ' sehen wir den Moment der ersten Bevaccmation; in gestrichdter
Linie erhebt dch sofort die traumaiische Beaktion [nach fruheren Ver-

1 ) Anf den E'iguren 3, 4, 6 und 9 sind die InjektionssteUen der
zwdten VeiBnchBreihe irrtiimlich mit g statt mit h bezdchnet.

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6

C. V. Pirquet,

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Buchen (4) scheraatisch eingezeichnet], gefolgt tod dem plStzlichen E^insetzen
der spezifischen Beaktion am Ende dee 2. Tages. Der Durchmeeser
der Hyperamie steigt nun konstant waiter. Am Beginn des 5. Tages
zeigt Bich die Differenzierong; dae Papillenwachstum (Strichpunktlinie) er>
hebt sich langsam biB auf 8 mm, um dann gleichzeitig mit der Area (der
Hyperamie) abzufallen.

Bei 12 wild die zweite Bevaccination ausgefiihrt. Schon innerhalb
24 iStunden erreicht die BpezifiBcbe Beaktion ihr Maximum.

Beide InjektionsBtellen zeigen das Maximum ihrer entziindlichen Ekit-
wicklung nach 48 Stunden; wahrend aber nach der zweiten Injektion die
Stdle bald fast ToUstiindig Terschwindet, bleibt die erste Injektionsstelle
als livider Fleck siditbar und rdtet sich unter geringer Vergrdfierung am
7. Tage.

Siehe Tafel 1, II, III.

U. Martha P., 16 Jahre. BekonTaleezenz nach leichtem Scharlach.
Kraftig. Am rechten Oberarm drei seichte Impfnarben von der Erst-
vaccination (ror ca. 15 Jahren), links ebenfalls drei Narben von der gesetz-
lichen Bevaccination (vor ca. 5 Jahren).

Impfung an drei Stellen und Injektion wie im vorigen Falle am
18. I. und 30. I. 1911.

Von den drei Impfstellen des ersten Versuches kommt nur b zu einer
sehr intensiven Ausbildung, bei a und c ist eine „sofortige Beaktion" fiber-

OO

haupt nicht nachzuweisen, da die Ausdehnung 3 auch auf traumatische

CO

Beaktion bezogen werden kann. Immerhin kann eine Andeutung von be-
schleunigter Beaktion in dem geringen Anstieg der beiden Stellen a und c

am 6. Tage von 2 auf 3 mm gesehen werden,
der mit der Entwicklung der Area im Punkte b
zusammenhangen kdnnte.

Die drei Impfetellen der zweiten Beihe sind
absolut n^ativ.

Die Injektionsstelle d gibt eine sofortige,
aber lange protrahierte Beaktion, wahrend die
zweite Injektion g ein scharfes Maximum nach
24 Stunden mit Areabildung zeigt (Fig. 4).

Nur die Impfstelle b verdient genauere Be-
trachtung. Die spezifische Beaktion setzt am
2. Tage ein, und schon am 3. finden wir die An¬
deutung einer zentralen Differenzierung. bUdet
sich aber nicht, wie gewohnlich, eine scharf ab-
gesetzte PapilJe von der Farbe der Haut, die
blasser ist als die umgebende hyperamische Areola, sondem dne rotbraune
Erhabenheit.

5 Tage p. v. (s. Taf. IV) sehen wir ein braunlich-rotes, stark erhabenes
Zentrum, von dem aus die Hyperamie und Elxsudation staffelformig nach

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Fig. 4. Verhalten
der Injektionsstel-
len in Versuch II.

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l*ro;tokoll II.

Voile Tage nach der Impfung

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Verschied. Formen der allergischen Beaktion bei der Revaccination. 7

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Googlf

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1) V bedeutet einen reaktioDBlosen Schorf. — 2) Hinter der Klammer bedeutet die obere Zahl den Durchmesser des
zentralen Teiles, die untere Zahl den der gesamten Efdoreazenz.

8

C. V. Pirquet,

Fig. 5. Verhalten der Impf-
stelle Ilb.

aiiUen abnimmt. Die papillare Zeich-
niing der Haiit tritt dabei sehr stark
hervor und erinnert an der stark
hyperiimischen Stelle an eine Maiil-
beere. Ich mochte deshalb fur diese
Art der Revaccinationsentwicklung
den Terminus M a u 1 b e e r f o r m vor-
schlagen.

Wegen des staffelformigen Ab-
fallens der Hyperamie ist eine scharfe
Messung viel schwieriger als bei
der schon ausgebildeten Papille; so
koramt es, dafi im Protokolle vier
verschiedene Zahlenangaben gemacht
sind, von denen nur die letzte, die
der auBersten Hyperamie, einiger-
mafien exakt ist. Erst bis das Zen-
trum eintrocknet, liiBt es sich scharf
abgrenzen (6 Tage p. v.), es bildet
spiiter eine Kniste und ist in diesem
Stadium kaum von einer regular
eingetrockneten Papille zu unter-
scheiden.

Die Area erreicht eine bedeu-
tende Ausdehnung mit dem Maxi¬
mum am 7. Tage p. v., gleichzeitig
schwellen die axillaren Lymph-
driisen an.

Siehe Tafel IV und V.

III. Hedwig W., 19 Jahre, Re-
konvaleszentin nach leichtem Schar-
lach. Kraftig. Rechts keine, links
vier deutliche Impfnarben (von der
gesetzlichen Revaccination im 11.
Lebensjahre).

Impfung an drei Stellen und
Injektion wie oben, am 18. 1. und
30. 1.

An alien Impfstellen ist beide
Male die Reaktion absolut negativ:
1 ram nach 24 Stunden und

CO

weiterhin.

Dagegen gibt die Injektion
beide Male sofortige Reaktion.

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Verschied. Formen der aUergischen Eeaktion bei der BeTaccination. 9

ProtokoU III.

Beaktion nach Tagen

1

2

3

4

5

6

7

am 15. I.

igio

iiTio

3o725

CO

I 7 T 13

157io

15?10

CO'

undeutlich,

schuppend

am 30. I.

777

CO

23:20

CO

878

CO

23:20

CO

CO

7:6

CO

i

1

Wieder, wie in den vorigen Fallen, zeigt sich eine Beechleunigung im
Ablaufe der Stichreaktion, und zwar beeonders in ihrem Verschwinden:
die Ehcsudationsprodukte werden das zweite Mai
rascher w^geschafft. Dag^en findet sich bei Hedwig
nicht, vie in den fruheren Versuchen, eine Ver>
grQfiening der Ausdehnung der zweiten Beaktion.

lY. Oeitrad G.y 17 Jahre, Bekonvaleszentin
nach Idchtem Scharlach. Eraftig. Bechts keine,
links (Bevaccination im 11. Lebenqahre) vier grofie
Impfnarben.

Impfung an diei Stellen, Injektion am 18. 1.
und 30. L, vie oben.

In mehreren Punkten unterscheidet sich der
Ausfall dee Versuches bei Glertrud von alien fruheren:
das ist in dem Yerhalten der Injektionsstelle d, bei
der die Beaktion zuersst yoUkommen n^ativ ist und
erst am 5. Tage ihr Maximum erreicht, und zveitens
in der Impbtelle b.

Bd b erfolgt zun&chst gar keine Beaktion;
erst 5 Tage p. t. bemerken vir dne mlnimale un>

1

/

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:

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i

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1

1

1

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1

1

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1

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1!

—X

I|

1*

1 '

J Th00 a #

Fig. 6. Verhal-
ten der Injek-
tionsstellen in
Versuch III.

OO

dchere Bdtung und Erhebung 2. E!ine Ausdehnung von 2 mm, ohne

CO

deutliche Bdtung und Erhebung, kann — abeolut genommen — nodi
nicht ale Beaktion gdten, venn man nicht die Haut des betrefienden
Menschen kennt und veifi, daA er keine traumatische Beaktion gibt.
Bd Qertrud hatten vir nach 24 Stunden keine Bpur einer Bdtung
gesehen (a—d) und haben darum das Becht, schon die rainimalste Bdtung
(e, f, g; Oder a am 7. Tage) als spezifisch yaccinale Beaktion aufzufassen.
Tatsachlich entvickdt sich nun bei b aus der unsicheren eine dchere Be¬
aktion dgener Art; de vadist anf 3 mm, vird am 6. Tage deutlich gerdtet,
am 8. stark gerdtet, am 9. deutlich tastbar und vergrdfiert sich vdterhin

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InjektioDBstelle h

10

C. T. Pirquet

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Voile Tage nach der Impfuug

Verschied. Formen der.allergischen Beaktion bei der B«TacciDation. H

Doch aiii 4—5 mm Durchmesser. Sie stellt eine kirschFOte, stark erhabene
und 7ollkommen scharf, ohne Aula von der Umgebong abgesetzte Papd
dar. Bei Druck blaSt sie ab und laQt teils kleine Aederchen, teils braune
kleinste Pigmentpiinktchen erkennen. Am 20. Tage entsteht pldtzlich eine
Area, die nicht weiter \rachst. Erst einen Monat nach der Vaccination
b^;innt die Papel zu verschwinden.

Diese eigentflmliche Entwicklung ver-
dient geoauer verfolgt zu werden.

12 Tage p. v. 4, kirschrot, ebenso 13 und
14 Tage p. v.

20 Tage p. 7. Bisher hatte die kirschrote Papel
ohne jeden Hof auf der normalen Haut gestanden.
Heute findet sich eine frischrote, sehr zarte Area
(von ca. 15 mm Durchmesser). Die Papel hat ihre
Farbe in rotbraun verandert und zeigt nicht mehr
mne glatte, sondern eine borkige Oberflache.

Die Area hat eine ganz andere Farbe als die
verblafiten, nur noch undeutlich lividen und pig-
mentierten Areas der Impfstellen a und c, sie
macht den Eindruck einer frisch eintretenden Be¬
aktion.

21 Tage p. t. Die Papel rotgelb, borkig, von
4,5 mm Durchmesser. Die Area ist schon heute
undeutlich, ca. 11 mm Durchmesser, und in der
Farbe kaum mehr verschieden von den Areas a
und c.

Ta^ nach
der Impfung

5

11 ©

15 ©

27 Tage p. v. Auf der Papel hat sich eine
dunne Elruste gebildet, die sich abldsen l^t. Dar-
unter ist nicht, wie unter der sich ebenfalls abldsen-
den Kruste bei a, eine flache und gefaSarme Narbe,
sondern wieder eine rote solide Granulation von
4,5 mm Durchmesser. Die Papel ist jetzt aber
weniger erhaben als vor einer Woche.

23 Tage p. v. Die Papel ist wieder zi^lrot,
bei Druck gelblich abblassend mit braimen Punkten
(Blutpigment); nach dem Aufhoren des Druckes tritt
lebhafte Bdtung ein, es besteht aber eine starke Vas-
kularisation.

27 Tage p. v. Es hatte sich wieder eine Schuppe
auf der Papel gebildet, die jetzt abgefallen ist. Die
ziegelrote Papel ist danach viel flacher als friiher.

29 Tage p. v. Die Papel ist viel blasser, kaum
noch gerStet, von zarten Bchuppen bedeckt und um-
geben. Auch die Tastbarkmt ist fast verschwunden.

22

V

I

27

Fig. 7. Entwicklung
eines Keloids.

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12

C. V. Pirquet,

Die Impfstellen a und c entwickeln sich in gleicher Art.
Wir sehen nach einer vollsttiDdigen Latenz 2 Tage p. v. die
erste Spur der spezifischen Reaktion, die dann rasch in die
Hdhe geht. Dabei ist wieder, wie in dem vorigen Falle, be-
merkenswert, dafi es zu keiner Papillenausbildung kommt.
3 Tage p. v. ist wohl eine unsichere Differenzierung zu finden,
aber das Zentrum erweist dadurch seinen nicht-papillkren Cha-
rakter, daB es schon 24 Stunden spSter auf 7—8 mm Durch-
messer gewachsen ist, br&unlich-violett aussieht und unscharf
in die Area Qbergeht Einen zweiten Ansatz zur Papillen-
bildung finden wir 6 Tage p. v., indem sich brfiunliche Zentren
von 4,5 mm resp. 5 mm Durchmesser abgrenzen; sie wachsen
aber dann nicht weiter und gehen in braune Krusten fiber,
Shnlich wie im vorigem Falle die Stellen a und b. Es besteht

dabei keine maulbeerfdrmige
Ausbildung der natfirlichen
Hautpapillen, sondern wir
haben es mit einer dritten
Form der beschleunigten Re¬
aktion zu tun.

Fig. 8. Beschleunigte Beaktionen (TV a und IV c) ohne Papillenbildung.

Fig. 9. InjektioDsstellen in Versuch IV.

Die Injektionsstellen d und h (Fig. 9) zeigen einen sehr
charakteristischen Bau; eine beschleunigte Reaktion bei der
ersten Injektion, die 3 Tage p. v. einsetzt und nach 48 Stun¬
den ein bescheidenes Maximum von 7 mm erreicht (d) und eine

Fig. 9.

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1

1

1

1

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1

1

1

1

1

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Fig. 8.

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Verschied. Formen der allergischen Beaktion bei der Beraccination. 13

sofortige Reaktion bei der zweiten iDjektion mit typischer
Ueberempfindlichkeit (h). Das schon nach 14 Stunden erreichte
Maximum h ist dreimal so hoch als das Maximum der In-
jektion d.

ZusammenfassuDg der Versuche.

Vier MSdchen im Alter von 11 bis 19 Jahren, von denen
alle die Erstimpfung im 1. Lebensjahre, dann die Wieder-
impfung im 11. Lebensjahre durchgemacht batten, werden an
je 3 Stellen mit frischer Kuhpockenlymphe geimpft und gleich-
zeitig mit abgetoteter und verdflnnter Kuhpockenlymphe in-
jiziert. Die Reaktionen wurden Uglich genau beobachtet.

Bei dieser ersten Versuchsreihe zeigten alle Injektions-
stellen und 9 von den 12 Impfstellen eine spezifische, auf das
Virus der Kuhpocke zurflckzufuhrende Reaktion; allerdings
in sehr verschiedener Ausdehnung und mit einem Maximum
an verschiedenen Tagen.

12 Tage spftter wurde der Versuch wiederholt. Dabei
ergaben wieder alle lojektionsstellen positive Reaktion, von
den 12 Impfstellen aber nur 3, wUhrend die hbrigen negativ
blieben. Diesmal war die Reaktionsart viel gleichm&lliger
sowohl nach der Ausdehnung als auch besonders nach dem
zeitlichen Eintritte des Maximums.

18.

I.

30.

I.

Fall

Impfung

Injektion

Impfung

Injektion

a

b

c

d

e

f

g

h

I

Maximum nach Tagen

4

7

8

2

1

1

1

2

in Millimetern

4

37

37

32

4

7

3

53

11

Maximum nach Tagen

6

7

6

2

e

e

1

in Millimetern

3

95

3

8

20

m

Maximum nach Tagen
in Millimetem

©

©

«

2

27

e

e

0

1

23

IV

Maximum nach Tagen

7

20

6

5

0

e

0

i

1

in MilUmetern

39

15

33

7

21

Gehen wir nun auf die einzelnen Formen der spezifischen
Reaktionen ein, so finden wir bei den insgesamt 24 Impf¬
stellen unter den 12, die iiberhaupt positiv waren, auf den

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14

C. V. Pirquet,

ersten Blick so verschiedene Arten, daB eioe Klassifizierung
schwer Blllt: durch die Beachtung der Diflferenzierung von
Papille und Area, durch die Beachtung der Zeit des Auf-
tretens und der Grofie der Hyperaraie, endlich auf Grund
von Form und Farbe mQssen wir 6 verschiedene Ausbildungs-
arten unterscheiden, die aber noch weiterer Unterteilungen
fahig sind.

Impfstelle

1. Beschleunigte Areareaktion mit voUkommener Papillenbildung 1 c

PapUlenbildung durch aufiere Einwirkung unterbrochen I b

2. Beschleunigte Areareaktion ohne Papillenbildung IV a, c

dieselbe in Maulbeeiform II b

3. Toroide Papelbildung I a

4. Friinreaktion I e, g

5. Friihreaktion und nachfolgende beschleunigte Beaktion ohne

Papillenbildung IT a, c

6. Ausbildung eines Keloids IV b

1. Beschleunigte Areareaktion mit voUkommener

Papillenbildung.

Als vollkommenen Erfolg der Revaccination ist nur eine
Impfstelle anzuerkennen, Ic. Das Charakteristische hierfQr
ist die Ausbildung der Papille, eines graugelblich ge-
nabelten Zentrums, das, wie ich nachweisen konnte (5, p. 79),
genau dieselben Wachstumsgesetze zeigt wie bei der Erst-
vaccination.

Eine solche Papille enthtllt, wie wir aus den Versuchen
der Mteren Aerzte wissen, virulente Keime (ein verimpfbares
Fluidum, Bohn) und ist als eine Kolonie der Vaccineerreger
in der Haul aufzufassen (5, p. 142).

Einen wesentlichen Unterschied von einer Erstvaccination
erkennen wir aber aus der Art, wie die Papille eingeleitet
wird, wie die Diiferenzierung erfolgt und aus der Zeit, zu
der die Papille eintrocknet.

Zum Vergleich hierfflr bringe ich die Erstimpfung eines
erwachsenen M§.dchens.

V. Mary W., 25 Jahre alt, gesund, war im Alter von 7 und 15 Jahren
ohne Erfolg vacciniert worden.

Am 25. XI. 1910 an der linken Schulter an 4 Stellen. Ueberall tritt
spezifische Reaktion ein.

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Verschied. Formen der allergischen E€aktion bei der BeTSCcination. 15

Tage

Impfstelle

p. V.

a 1

b

c

d

4

3 5 —

2

5 -

2 5 —

3 5 -

b^innende Differenriemng

5

4 7 14

3

7 15

2 5 8

3 7 10

6

4,5 7 14

3,5

8 17

3 8 9

3 9 10

7

5,5 10 13

5

9 15

3,5 8 12

4 8 16

8

6,5 12 15

6

TO 15

5 8 13

6 10 15

Schwellong der axillaren
Drusen

9

8—15

7,6

— 14

6—13

8—18

allgemeines Unwohlsein
Fiebergefuhl, zarte Area
externa

10

9,5 18 30

9

10 30

8 18 25

9 22 35

11

11,5 17 60

11

17 40

8.5 16 35

10,5 22 40

nur noch abends Fieber

12

11,5 23 70

11

20 65

9;5 18 55

11,5 23 55

13

11 30 90

12

30 80

10,5 20 70

11 28 60

14

10 30 —

12

30 —

9,5 25 -

12 25 —

Area externa verschwunden

15

10 30 -

11

30 —

10 18 —

11 20 —

Papillen trocken, gelb-
braonlich

r ‘

,

in Impfstelle links die Ab-

Das ProtokoU V enthalt bei jeder einzelne

messungen der Papille, rechts die des aufiersten Eandea der Hyperamie;
dazwiachen ist fast durchw^ noch ein Durchmesser notiert, der dem un-

scharf abgegrenzten, dimkleren Mittelteile der Bdtung (Aola und Area
interna) entspricht.

Auf Fig. 10 sind zu>
nfichst die Abmessungen
der Impfstelle V a einge-
tragen und mit denen
der Impfstelle des ersten
Versuches Ic verglichen.
Die Papille Va beginnt
4 Tage p. v., wSchst ganz
regelmiUSig, urn ihr Maxi¬
mum am 12. Tage zu er-
reichen. Die innere Aula
folgt in ihrem Wachstum
der Papille, aber nicht
so dicht, wie wir es bei
jungen Erstvaccinierten
zu sehen gewohnt sind.

Die &u&ere Aula
zeigt ein eigentflmliches
Verbalten, das einiger-
maBen an eine beschlen-

10. V^gleich der Erstvaccination
einer u^achsenen (Va) mit der beschlen-
nigten Arcnreaktion ^er revaocinierten E^r-
wachsenmi (Ic).

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16

C. T. Pirquet,

><7

nigte Reaktion erionert und der Aula erstvaccinierter Kinder
fremd ist; sie erhebt sich schon 5 Tage p. v. zu bedeutender
Hdhe und bleibt dann im Wachstum stehen. Ich vermute
darin eine Wirkung unspezifischer Antikdrper: der Organismus
hat, so stelle ich mir vor, bis zum Alter von 25 Jahren schon
mit einer groBen Zahl Mikroorganismen Bekanntschaft gemacht,
unter denen auch solche waren, die mit Vaccinekeimen einige
Aehnlichkeit besaBen, nun bildet er zuntlchst solche unspezi-
fische Antikdrper innerhalb weniger Tage aus, die aber anf
den vaccinalen ProzeB, auBer einer geringen Apotoxinbildung,
keinen EinfluB haben; erst mit dem Auftreten des spezifischen
Antikorpers am 10. Tage wird das Papillenwachstum gehemmt,
die Keime abgetdtet.

Der ganze Versuch V war nur ein Exkurs, um das Ver-
halten von Impfstelle Ic zn erkl&ren. Wir wollen nunmehr
zu diesem Ausgangspunkt zurflckkehren.

Auf Fig. 10 sind Papille und Area von I und V ein-
gezeichnet.

Die Papille schlieBt sich anfangs fast vollstUndig an die
Erstlingspapilie Va an: sie erscheint am 4. Tage und wllchst
langsam weiter; ein wesentlicher Unterschied stellt sich aber
am 10. Tage ein: hier vertrocknet die Papille I c, wfihrend die
Erstlingspapilie noch weiter sich ausbildet. Den Grund ftlr
dieses frflhzeitige Vertrocknen werden wir verstehen, wenn
wir die Areakurve Ic betrachten: der steile Anstieg beginnt
hier schon am Ende des zweiten Tages und erreicht seinen
Hdhepunkt am 8.-9. Tage, wShrend bei der Entimpfung V
die steile Area am 10. Tage einsetzt und der HShepunkt am
11. Tage erreicht wird. Eigentflmlich erscheint es immerhin,
daB bei dieser Revaccination eine so lange Zeit zwischen dem
Auftreten der Area und dem Beginne der Involution des
Prozesses verstreicht. —

Nun kommen wir zur Besprechung der Impfstelle Ib
(s. Fig. 1). Der Beginn ist v611ig wie bei I c. Aus einer sehr
bedeutenden Papel von 20:14 mm tritt eine deutliche Differen-
zierung ein; die Papille von 2 mm wllchst aber dann nicht
weiter, vermutlich durch HuBere Einflusse; am 6. Tage
zeigt sich die Papille verkratzt.

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Verschied. Formen der alleigischen Beaktion bei der Kevacdnation. 17

Trotz der geringen Ausdehnung der Papille wSchst die
Area noch welter, involviert sich aber vom 8. Tage an, wfihrend
die Involution von Ic erst spMer nachkommt.

2. Beschleunigte Areareaktion ohne Papillen-

bildung.

In meinem Buche fiber Vaccination batte ich dieser Form
keine weitere Aufmerksamkeit geschenkt (s. p. 79, 80), indem
ich den Hauptwert auf die Abmessungen der Area legte und
dann bei der beschleunigten Reaktion die Papille nicht als
Einteilungsgrund heranzog. Diese Form verdient jedoch noch
ein genaueres Studium, well sie zeigt, dafi die Allergie der
Haut auch die Kolonienbildung in ganz andere Formen
bringen kann. Es besteht also hier nicht blofi eine zeitliche
und quantitative, sondern auch eine qualitative Allergie:
wfihrend beim Erstvaccinierten die Kolonienbildung stets
durch die ganz charakteristisch gedellte Papille gekennzeichnet
ist, kann sich beim Revaccinierten eine wachsende Kolonie unter
nnregelmfifiiger, maulbeer-
artiger Schwellung der Haut-
papillen verbergen Oder unter
einer gleichmfiiligen, dunklen
Rfitung. Erst bei der Involution
entstehen nekrotische Krusten,
welche wieder fast vSllig den
Krusten nach regulfiren Papil-
len gleichen. Dali es sich hier
wirklich urn das Wachsen einer
Kolonie handelt, mfissen wir
erstens aus Kurven der Area
entnehmen, die sich allmfihlich
bilden, zweitens aus der Inten-
sitfit der Area, welche dem
Apotoxin aus der geringen bei
der Impfung eingebrachten
Ljrmphmenge nicht entspricht. Fig. ll. Vennehnmg dea Aller-

IV a und c entsprechen Impfet^en bei be-

^ scnleumgter Areareaktion trotz man-

dieser Form. Am 2. Tage er- geinder PapmenbUdimg.

Zelttchr. f. lmmDititXtaforfoha]i^. Ori(. Bd. X. 2

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18

C. V. Pirquet,

scheint die spezifische Papel, am 3. scheint eine Differen-
zierung einzusetzeo, es bilden sich aber keine Papillen, sondern
rotbraune Zentreo, die viel grCfier sind als Papillen um diese
Zeit. Die Area w&chst jedoch auf 40 mm. Sp&ter verkrustet
das Zentrum.

Aus dem Vergleiche der Kurven von IV a und c mit dem
Verhalten der gleichzeitigen Injektionsstelle ist ersichtlich,
dafi eine vielfache Vermehrung des Inhaltes der Impfstellen
stattgefunden haben muB. Am Impfungstage betr&gt die in-
jizierte Quantit&t Lymphe noch ein Vielfaches des eingeimpften
Allergens, wie wir aus den Vergleichen von kutaner und
intrakutaner Tuberkulinreaktion wissen; zur Zeit der be-
schlennigten Nachbildung der Antikdrper aber geben die Impf¬
stellen viel mehr Apotoxin ab als die Injektionstellen, sie ent-
halten also um diese Zeit eine viel grdBere Quantit&t von
Virus.

Noch viel intensiver tritt dieses Verhaltnis hervor bei
II b, welche Reaktion schon frflher als Maulbeerform be-
schrieben wurde, und bei der entsprechenden Injektionsstelle
II d. Trotz des Mangels der Papillenbildung erreicht die Area
einen Durchmesser von 115 mm, w^hrend die Injektionsstelle,
trotzdem sie sofort, also mit maximalem Materiale, zur Reaktion
kam, nur 8 mm Durchmesser der Hyperamie erzeugt

3. Torpide Papelbildung.

Die Impfstelle la zeigt als einzige in dieser Versuchs-
reihe das Verhalten, das ich (5, p. 160) torpide Reaktion
genannt habe. Es tritt ganz langsames Wachstum ein, das
aber schon nach 3—4 Tagen mit einer maximalen Ansdehnung
von wenigen Millimetem stille steht, und an der Papel wieder
in Involution tlbergeht, ohne eine Area abzugeben (Fig. 1).

DaB hier keine Vermehrung des Virus, kein Aufgehen
der Eolonie stattfindet, kann man aus den Vergleichen mit
der gleichzeitigen Injektion sehen: Beide erreichen ihr
Maximum fast zur selben Zeit (48 Stunden p. v., die starke
ROtung '3 bedeutet mehr als die Abmessung £ am 4. Tage)
und in einer Ansdehnung, die ihrem ursprflnglichen Gehalt

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Verschied. Formen der allergischen Eeaktion bei der Revaccination. 19

an Allergen entspricht: die Impfstelle a mit 3 mro, die In-
jektionsstelle mit 33 mm.

4. Frfihreaktion.

In der ersten Versuchsreihe kommt, entsprechend den
langen Intervallen seit der letzten Impfung (6—10 Jahren),
keine einzige Frtlhreaktion mit einem Maximum innerbalb
24 Stunden vor. Dagegen erscheiuen bei der zweiten Versuchs¬
reihe, nachdem die Antikdrperbildung wieder angeregt worden
war, nicht nur alle Stichreaktionen frlihzeitig, sondern auch die
3 Impfstellen, die iiberhaupt nachweislich reagieren, tun dies
innerbalb 24 Stunden. Auf Fig. 2 ist If graphisch dargestellt.

Bei der FrQhreaktion haben wir keine Differenzierung,
sondern nur die Entwicklung flfichtiger Papeln, die im vor-
liegenden Falle nur 3,5, 4,5, 7 mm Durchmesser erreichten,
und schon nach 48 Stunden im Abfallen begrififen sind. Bei
hoher Empfindlichkeit (5, p. 108) kann es allerdings auch bei
der vaccinalen Frtthreaktion, Hhnlich wie bei den hdchsten
Graden der Tuberkulinreaktion, zur Blttechenbildung kommen.
Diese Blasen sind aber dann toxische Produkte und nicht
flberimpfbar wie die regelrechten, graugelblichen, vaccinalen
Papillen (4).

5. Frfihreaktion mitnachfolgenderbeschleuni gter
Reaktion ohne Papillenbildung.

In frfiheren Versuchsreihen ist es mir begegnet, dall aus
einer Impfstelle, die zuerst Frfihreaktion gab, spfiter doch eine
Kolonie wurde, welche Papille und beschleunigte Area zeigte.
Diese Form ist bier nicht vorgekommen, dagegen die Andeutung
einer Doppelreaktion [Serumkrankheit (7), p. 87] ohne Ver-
mehrnng des Virus.

Die Impfstellen II a und c zeigen nach 24 Stunden die
minimalen Anzeichen einer Frfihreaktion, die bis zum 4. Tage
geschwunden sind; am 5. Tage, gleichzeitig mit dem starken
Anwachsen der Area an der Stelle mit Eolonienbildung, tritt
auch an den beiden abgetfiteten Stellen a und c wieder leichte
Rfitung ein, die am 6. Tage ein bescheidenes Maximum von
3 erreicht.

2 *

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20

C. V. Pirquet

6. Keloidbildung.

Wenn auch Bohn in seinem Handbuche der Vaccination
die Keloidbildung bei Revaccination nicht erwUhnt, so dUrfte
dieses Vorkommnis doch vielen ImpfUrzten bekannt sein.
Meines Wissens ist aber noch nie ein Fall verdfifentlicht worden,
bei dem die Ausbildung des Keloids von Tag zu Tag verfolgt
wurde, wie bier bei Impfstelle IV b (Fig. 7).

Die Keloidbildung f&llt quantitativ, zeitlich und qualitativ
aus alien Gesetzen der vaccinalen Allergie heraus, muQ aber
doch mit Allergie gegen Lymphe zu tun haben: ich habe sie
wenigstens nie bei Erstimpflingen, dagegen mehrmals bei
Revaccinierten beobachtet.

Im vorliegenden Falle erschien die erste spurenweise
Papel am 6. Tage, zeigte dann am 9. Tage die typische kirsch-
rote Farbe, wuchs allm&hlich auf 4,5 mm Durchmesser. 20 Tage
p. V. zeigte sich urn die Papel eine kleine Area, und von da
an begann die Papel sich zu hfiuten, und allm&hlich, wie sie
gekommen war, zu involvieren.

7. Negative Reaktion.

Ich hatte in meinem Buche (5) die Ansicht ausgesprochen,
daB die negativen Reaktionen bei der Revaccination so auf-
zufassen seien, daB hier die Reaktion unter der Schwelle der
traumatischen Reaktion verlaufe: durch die Erfahrnngen mit
den kutanen Tuberkulinreaktionen und der vaccinalen Stich-
reaktion bin ich jedoch zu der Ansicht gekommen, daB die
Reaktion nicht deswegen unsichtbar sei, weil sie kleiner
sei als die traumatische, sondern deswegen, weil das gebildete
Apotoxin keine gentigende Konzentration erreiche, um ent-
zttndungserregend zu wirken. Wenn wir gentigende Mengen
von Virus einfflhren, erreichen wir positive Reaktion. Das
kann aber, ebenso wie bei Tuberknlin, durch die kutane Ein-
verleibung nicht immer geschehen, wohl aber durch die sub-
kutane oder intrakutane. In der vorliegenden Versuchsreihe
sehen wir den negativen Effekt der kutanen Impfung bei
Abtdtung des Virus neben mittelstarker Reaktion auf intra¬
kutane Injektion; erst bei noch hdherer Empfindlichkeit, die
sich durch sehr Starke Stichreaktion &uBert (Fall I, 2. Versuchs¬
reihe) gibt auch die kutane Impfung Reaktion.

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Verechied. Formen der allergischen Reaktion bei der Bevaccination. 21

Verhalten der Injektionsstellen.

Wie En5pfelmacher gezeigt hat, entstehen bei Injek-
tion von Lymphe Reaktionen, die dieselben zeitlichen Gesetze
befolgen me die Erscheinungen nach kutaner Einimpfnng des
vaccinalen Virus.

Hier wurde abgetbtete Lymphe injiziert, es war also keine
Vermehrung des Virus unter der Haut mit der entsprechenden
beschleunigten Ausbildung zu erwarten, sondern die VorgSnge
sind blofi auf die Abspaltung von Apotoxin
aus dem von Anfang an eingebrachten Virus
zu beziehen.

Bei der ersten Injektionsreihe seben
wir in 2 Fkllen (II, III) Reaktionen inner-
halb 24 Stunden auftreten, die nach 48 Stun-
den ihr Maximum erreichen.

Fig. 12.

Fig. 13.

/ X 4.

Fig. 12. InjektioDBBtellen Id uod IVd beim ersten Versuche.
Fig. 13. Injektionsstellen Ih und IV h beim zweiten Versuche.

Bei IV zeigt sich eine beschleunigte Reaktion mit Maximum
am 5. Tage, die schon frflher besprochen wurde.

Bei I endlich ist die Andeutung einer Doppelreaktion zu
finden: ein Maximum am 2. und eihe ; ZWQit^:Ecbebupg: .aHi ; ;

7. Tage. ' - •

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22

C. V. Pirquet,

Bei der zweiten Ausfdhrung der Injektion finden sich die
Charaktere der quantitativen und zeitlichen Allergie aasge-
pr&gt: Ueberempfindlichkeitund schnellereReaktion. Das
Maximum wird bei II und IV am 1. Tage erreicht (gegenflber
dem 2. und dem 5. Tage) und es erhebt sich bei I auf 53 mm,
durchschnittlich auf 29 mm, gegendber einem Durchschnitte
von 18 mm der ersten Serie. Nur III zeigt das zweite Mai
keine hdhere, wohl aber auch eine schnellere Reaktion als das
erste Mai.

Vergleichen wir nun das Verhalten der Injektionsstellen
mit dem der Impfstellen. Im allgemeinen geht ja bei der
Vaccination die Ueberempfindlichkeit mit der Immunit&t im
Sinne der Schutzwirkung Hand in Hand.

Nehmen wir als Mallstab der Schutzwirkung die Anzahl
der Impfstellen, die in ihrer Entwicklung vollst&ndig gehemmt
werden, in denen keine Kolonien aufgehen, und als MaBstab
der Ueberempfindlichkeit die Ausdehnung der Stichreaktion nach
24 Stunden, so ist die Reihenfolge diese:

Immunitat:

Anzahl der Impfstellen, die nicht
zur kolonialen Entwicklung
kommen

Ueberempfindlichkeit:
Grofie der Stichreaktion nach
24 Stunden

IV

I

II

III

II

III

IV
I

Erste Versuchsreihe

e alle Keime gehen auf 6 Reaktion setzt erst nach einigen

Tagen ein

^/g zwei Keime gehen auf 20

7* ein Eeim gent auf 7

Tollstandig, kein Eeim geht auf 12

Zweite Versuchsreihe
Eeim geht auf 20
„ 21
V 21

„ 40 Fruhreaktion sogar an alien
Impfstellen

Tollstiindig, kein

r ??

7 ?

Beim Fehlen jeder Ueberempfindlichkeit (IV)
gehen alle Keime auf, bei starker Ueberempfind¬
lichkeit (zweite Versuchsreihe) werden alle Keime ab-
getotet. Fall I der ersten Serie beweist jedoch, dafi die
Uebereinstimmung keine ganz vollstfindige zn sein braucht;
'ISdK §^;’ii?Q<z: ^tailfdr UeUerempfindlichkeit an 2 von den
• ' ’ *3 'Impfet^leif KeimV iikht-zur Abtdtung gelangt.

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Verschied. Formen der allergischen Beaktion bei der B«vaccination. 23

Jedenfalls kdonen wir aber sehen, dafi Ueberempfiodlich-
keit and Immunitat keine GegensMze sind: sie sind beide
Korrelate der Antikdrperbildung, und auf ihnen beruhen die
mannigfachen klioischen Formen der ver^nderten Reaktions^
Rlhigkeit, die wir bei der Vaccinerkrankung als vaccinale
Allergie studieren.

Zusammenfassung.

Bei genauer Analyse der klioischen Effekte der Re¬
vaccination lassen sich folgende Formen unterscheiden:

1) Beschleunigte Areareaktion mit Papillenbildung;

2) Beschleunigte Areareaktion ohne Papillenbildung;

3) Torpide Papelreaktion;

4) Frtlhreaktion;

5) Doppelreaktion (frflhzeitige und beschleunigte an der-
selben Impfstelle);

6) Eeloidbildung.

Die einzelnen Formen sind durch das Verhalten der
vaccinalen Kolonie und durch die vorhandenen bezw. be-
schleunigt nachgebildeten Antikorper zu erklS.ren.

Ueberempfindlichkeit (gemessen durch den Ausfall der
intrakutanen Reaktion auf abgetdtete Vaccine) und Immunit&t
(gemessen durch die Anzahl der in ihrer Entwickelung ab-
geschnittenen Impfstellen) sind bei der vaccinalen Allergie in
inniger Weise verbunden.

Literatnr.

1) Bohn, Handbuch der Vaccination, Leipzig (Vogel) 1875.

2) Enoepfelmacher, Subkutane Vacdneinjektionen am Menschen. Zeit-
schrift f. experim. Pathol, u. Ther., Bd. 4, 1907, p. 880.

3) Y. Pirquet, Die friihzeitige Beaktion bei der Bchutzpockenimpfung.
Wien. klin. Wochenschr., Bd. 29, 1906, p. 855.

4) —, Ist die vaccinale Fruhreaktion spezifisch? Wien. klin. Wochensdir.,
1906, No. 47.

5) —, IGinische Studien uber Vaccination und vaccinale Allergie, Wien
(Deuticke) 1907.

6) —, Allergie, Berlin (Springer) 1910.

7) —, Die Doppelreaktion bei der Euhpockenimpfung. Miinch. med.
Wochenschr., 1911, No. 18.

8) — und Schick, Die Serumkrankheit. Wien (Deuticke) 1907.

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24

E. Grafenberg und J. Thies,

Nachdruck verboten.

[Aus dem Pharmakologischen Institat der Uniyersit&t Berlin;
Direktor: Geheimrat Prof. Dr. A. Heffter (Abteilong ftlr Im-
mnnitatsforschang und experimentelle Tkerapie, Leiter: Prof.

Dr. E. Friedberger).]

BeitrSge znr Blologie der mSnnllclien Gesehlechtszellen.

Von Dr. E. Gr&fenberg and Dr. J. Thies, Berlin^).

(Eing^angen bei der Bedaktion am 25. Miirz 1911.)

Eine Reihe von Arbeiten haben fiber die biologische Be-
deutung der mfinnlichen Geschlechtszellen nene und interessante
Aufschlfisse gegeben. Ihre Erfolge resultieren ans der Ver-
wertung moderner biologischer Untersuchungsmethoden. Sie
bewegen sich fast alle in gleicher Richtung. Alle Untersucher
erstreben durch die Injektion von Spermatozoenanfschwem-
mnngen beim Versuchstier ein Immunsernm zu schaffen, mit
dem eine spezifische, diagnostisch verwertbare Reaktion auszu-
Idsen ist. Die Summe der zahlreichen Versuche, die sich an
die Namen von Landsteiner*), Uhlenhuth®), Strube*),
Farnum®), Schfitze^, Pfeiffer’), C. Bruck*) n. a.
knfipfen, mufiten ergebnislos verlaufen, vreil immer neben even-
tuellen spezifischen Spermatozoenimmunkorpern noch Partial-
antikfirper gegen das Blntserum auftreten, die jede organ-
diagnostische Verwertung des Immnnserums illnsorisch machen.
Deshalb steht Uhlenhuth ihrer diagnostischen Bedeutung
ablehnend gegenfiber. Auch die interessanten Beobachtungen

1) Die Besultate dieser Versuche sind kurz vorgetragen: Sitzung des
Verdns fur innere Medizin, 9. Jan. 1911 (Deutsche med. Wochaischr.,
1911, No. 7, Vereinsbeilage); Sitzung der Ges. der Charitdirzte, Febr. 1911.

2) Landsteiner, CentralbL f. Bakt., 1899; Miinch. med. Wochen*
schrift, 1903.

3) Uhlenhuth und Weidanz, Anleitung zur Ausfuhrung des
biologischen EiweiildifferenzierungsTerfahrens. Jena 1909.

4) Strube, Deutsche med. Wochenschr., 1902.

5) Farnum, The Joum. of the American Med. Ass., 1901.

6) Schutze, Deutsche med. Wochenschr., 1902.

7) H. Pfeiffer, Wien. klin. Wochenschr., 1905.

8) C. Bruck, Berl. klin. Wochenschr., 1907.

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Beitrage zur Biologic der mannlichen Geechlechtszellen. 25

von C. Brack, der mit Hilfe der Komplementablenkungs-
methode die Diagnosestellung zu fdrdem suchte, sind ohne
Best&tigung geblieben.

Erst Dnnbar^) hat die Biologie der Geschlechtszellen
auf Grund nenerer wichtiger Versuche ganz erbeblich zu
kl&ren vermocht. Wir verdanken seinen Studien an Pflanzen
nnd Fischen die Erkenntnis, dafi die weiblichen wie die m&nn-
lichen Geschlechtszellen der von ihm untersuchten Organismen
sich gegeneinander nnd gegen den Trftger der Geschlechts¬
zellen vdllig artfremd verhalten. Die Resultate seiner mit
Hilfe der PrUzipitinreaktion, der Eomplementablenknng und
schlieillich auch der Anaphylaxiereaktion angestellten Versuche
zeitigten das tkberraschende Ergebnis, dafi die Geschlechts¬
zellen biologisch den Qbrigen Kdrperzellen fern
stehen.

Dunbars Versuche beschr&nkten sich bisher auf die
Geschlechtszellen der Pflanzen und Fische. Die
Biologie der Geschlechtszellen der hbheren Tiere ist noch
ungeklUrt geblieben. Diese zu studieren waren unsere Ver¬
suche bestimmt. Wir bedienten uns zu dem Zweck aus-
schliefilich der empfindlichen Anaphylaxiereaktion und be-
nutzten zu den Versuchen Kaninchen and Meer-
sch weinchen.

Bevor wir an die Umstimmung des Tierkdrpers durch
sensibilisierende Injektionen herangingen, prtkften wir den
EinfluB, den die mfinniichen Geschlechtszellen bei
der intravendsen Einverleibung auf normaleXiere
ausfiben. Zu diesem Zweck stellten wir uns Hoden-
emulsionen vom Kaninchen, Meerschweinchen und vom
Stier her, die durch Verreibung des zerkleinerten frischen
Hodens mit Kochsalzldsung gewonnen waren. Grdbere korpns-
kulftre Elemente warden durch die Filtration der Emulsionen
ferngehalten.

Bei diesen Versuchen stellte es sich heraus, dafi Ka¬
ninchen gegen Hodeninjektionen aufierordentlich
empfindlich sind und schon bei der intravendsen Zufuhr
kleinster Mengen nnter heftigen StreckkrIUnpfen schnell zu-

1) Dunbar, Zeitechr. f. Immunitatsf., 1910.

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26

E. Griifenberg und J. Thies,

grande gehen^). Es wiederholt sich stets der gleiche Sym-
ptomenkomplex nach der Injektion, die Tiere werden nach
wenigen Sekunden unruhig, laufen herum, wobei eine Inkoordi-
nation der SprQnge auffftllt, dann fallen sie auf die Seite and
verenden nnter Streckkr&mpfen, die mit extremem Opistho-
tonas and hUnfig &ngstlichem Schreien verbunden sind.

Eine so deatliche LangenblShang wie beim Meerschwein-
chen haben wir beim Kaninchen nie beobachtet, meist fanden
sich pnnktfdrmige Hfimorrhagien anf der Pleara visceralis.
Stets aber war das noch schlagende Herz and das Gef&fisystem
obne Thromben.

Die Intensitlt derWirknng der Hodenfiltrate bei
den Kaninchen variiert erheblich bei den verschiedenen
Extrakten der gleichen Tierart. Die Ursache scheint weniger
in einer Differenz der Wirksamkeit des Hodens zn liegen als
eine Folge der Zabereitnng zn sein. Das eine Mai war der
Hoden besser verkleinert and verrieben, so dafi mehr wirk-
same Sabstanzen in das Filtrat iibergehen konnten Oder aber
die Extraktion war besser gelangen, trotzdem die Art der
Zabereitnng im Prinzip stets die gleiche war.

Alle Hodenextrakte warden darch Vermischnng mit der
doppelten Gewichtsmenge physiologischer Kochsalzldsang her-
gestellt. Wenn — in den anfSnglichen Versuchsreihen — ein
von diesem Standardwert 1:2 abweichendes Verhaltnis ge-
wMilt war, so sind die Kilogrammzahlen anf diese Konstante
umgerechnet worden.

Bei diesen Injektionen der Hodenfiltrate verschiedener
Tierarten hat sich nan heraasgestellt, dafi beim Kaninchen
hdchst anfftiiligerweise der Hoden der eigenen
Art die stUrkste toxische Wirkang besitzt. Schon
ganz geringe prozentaale Mengen des Kaninchenhodens ge-
nfigen, am nach intravendser Injektion den aknten Krampftod
binnen wenigen Minaten aaszal5sen.

Die H5he der letalen Dosis des Kaninchenhodens schwankt
in der gleichen Versnchsreihe, d. h. bei Versnchen mit dem

1) Anm. bei der Korr.: Aehniiche Symptome hat nach einem Vortrag
Uhlenhuths (Berl. klin. Wochenschr., 1911, No. 15) Bold bei intra-
▼endser Zufohr von Ektrakten normaler Organe ganz allgemein beobachtet;
vergl. auch die alteren Vereuche von Brieger und Uhlenhuth.

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Beitrage zur Biologic der mannlichen Greechlechtszellen. 27

gleichen Hodenextrakt zwischen recht erheblichen Grenzwerten.
Die Bedeutnng dieser Differenzen wurde erst gekl&rt, als die
letale Dosis ffir geschlechtsreife mlbnliche und weibliche Tiere
gesondert bestimmt wurde. Eine derartige Versuchsreihe,
die am gleichen Tag mit der gleichen Hodensubstanz an
mJlnnlichen resp. weiblichen Tieren angestellt worden ist, folgt
nachstehend (Tabelle I, II).

Tabelle I.

Mannl. Kaninchen mit Kaninchenhoden intraTenos gespritzt. 1 Teil Hodeii:
2 Teile physiol. KochsalzldsuDg

MSnnl. Kaninchen

Glewicht

Hodenmenge

pro kg Grewicht

Tod in Min.

No. 64

1840 g

3,7 g

2,0 g

1

„ 65

1750 „

1,8 „

1,0 „

i‘A

„ 70

1620 „

1,1 „

0,7 „

IV.

„ 70a

1325 „

0,8 „

0,6 „

1

» 72

1410 „

0,8 „

0,6 „

1

„ 66

1580 „

0,8 „

0,5 „

lebt

„ 73

1400 „

0,7 „

0,5 „

lebt

£s ergibt sich aus der Tabelle, daB bei mBnnlichen
geschlechtsreifen Kaninchen durch die intravenbse
Injektion von 0,6 g Eaninchenhodenemulsion pro kg
Tier der aknte Tod hervorgerufen wird.

TabeUe II.

WeibL Kaninchen mit Kaninchenhoden intravends gespritzt. 1 Teil Hoden:
2 Teile phyaiol. Kochsalzldsung.

Wdbl. Kaninchen

Grewicht

Hodenmenge

pro kg Gewicht

Tod in Min.

No. 68

1850 g

1,9 g

1,0 g

IV,

„ 74

1520 „

1.6 „

1 1,0 „

1

„ 71

1490 „

1,4 „

0,95 „

—

„ 69

1570 „

1,3 „

i 0,85 „

—

„ 67

1950 „

1,4 „ 1

1 0,7 „

—

FQr die weiblichen geschlechtsreifen Kanin¬
chen ist die letale Dosis des Kaninchenhodens 1,0 g
pro kg Tier.

Aus diesem Versuch geht hervor, dafi dem weiblichen
Kaninchen fast das Doppelte der ftlr das mSnnliche Tier
letalen Dosis eingespritzt werden muB, wenn es akut unter
Kr&mpfen zugrunde gehen soil.

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28

E. Grafenberg und J. Thies,

Mannl. Kan. Weibl. Elan.

Grofie Tier© 0,6 t 1>0 t Kaninchenhoden 1:2

0,5 lebt 0,9 lebt

Diese differente Reaktion der mfinnlichen and weiblichen
Tiere konnte auch in der nachstehenden Versuchsserie wieder
bestatigt werden.

Tabelle III.

Mannl. £[aninchen mit ElaninchenhodeD (1 : 2) intraveDds geimpft.

1

1

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Gewicht

Tod in Min.

No. 115

1690 g

1,0 g

1,0 g

2

„ 117

1220 „

1,0

0,8 ,.

2

„ 121

1160 „

0,8 „

0,7 „

1

„ 122

1260 „

0,8 „

0,6 „

1

„ 116

1620 „

0,8 „

0,5 „

—

TabeUe IV,

Wdbl. Elaninchen mit Kaninchenhoden (1:2) intrarenbs gespitzt.

Weibl. Kaninchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Gewicht

Tod in Min.

No. 118

1570 g

1,4 g

0,9 g

2

„ 120

1770 „

1,4 „

0,8 „

lebt

M^nlich 0,6 f Weiblich 0,9 f

0,5 lebt 0,8 lebt

Die genaue Auswertung der toxischen Dosis, wie in
den beiden an erster Stelle angefilhrten Versnchen, haben wir
weiterbin nicht wiederholt. Unsere Resultate wiesen aber
stets auf den Unterschied der beiden Geschlechter bin. Als
Beweis seien folgende Versucbe gebracbt.

TabeUe V.

Mannl. Kaninchen mit Kaninchenhoden intravends gespritzt. 1 TeU Hoden:
2 TeUe physiol. Kochsalzldsung.

Mannl. Kaninchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Gtewicht

Tod

No. 51

1620 g

3,5 g

2,1 g

t

„ 48

2400 „

3,5 ,,

1,5 „

t

„ 50

1700 „

0,9 „

0,5 „

—

Aucb bier geben die mannlicben Kanincben nacb der
Injektion von 1,5 pro kg Tier zugrunde.

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Beitr^e zur Biologic der mannlichen Geschlechtezellen.

29

TabeUe VI.

Wdbl. Kaninchen mit KaniDchenhoden (1:2) intravenSB gespritzt.

Weibl. Eaninchen

I Gewicht

Hodenmenge

pro kg Gewicht

Tod

No. 55

1020 g

3,1 g

3,0 g

„ 54

1600 „

3,2 „

2.0,,

—

Die weiblichen Kaninchen erwiesen sich in diesem
Versuche sehr resistent gegeniiber dem Hodenextrakt. Selbst
3,0 Hoden pro kg Tier vermochten die weiblichen Tiere nicht
zu tdten, wfthrend die mSnnlichen Kaninchen sofort eingingen,
wenn ihnen 1,5 g und 2,0 g pro kg Tier intravends einge-
spritzt wurde.

Die ToxizMt des kdrpereignen Hodens ist fttr das
frisch kastrierte Tier die gleiche wie ffir andere mfinn-
liche Kaninchen.

Der Unterschied in der prim&ren Giftigkeit des arteignen
Hodens zwischen den beiden Geschlechtern verwischt sich
beim Kaninchen, wenn der Hodenextrakt jnngen, noch
nicht geschlechtsreifen Tieren intravends ein-
gespritzt wird.

TabeUe VII.

Kleine Eaninchen, mannUch, mit Eaninchenhoden (1:2).

Eleine m^nl. Kim.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Gewicht

Tod in Min.

No. 75

620 g

0,4 g

0,6 g

2

„ 76

650 „

0,3 „

0,4 „

2

„ 81

600 „

0,24 „

0,4 „

2

„ 78

500 „

0,15 „

0,3 „

—

„ 77

520 „

0,1 „

0,2 „ I

—

Die letale Dosis fQr m&nnliche, noch nicht ge-
schlechtsreife Tiere betrdgt 0,4 g pro kg Kaninchen.
GroBe geschlechtsreife Kaninchen ertrugen von dem gleichen
Extrakt etwas mehr (0,6 g pro kg Tier).

TabeUe VIH.

Eleine weibUche Eaninchen mit Eaninchenhoden (1:2) intrayenSs gespritzt.

Kleine weibl. Kaninchen

Gewicht

Hodenmengej

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 80

410 g

0,2 g

0,5 g

1

„ 79

590 „

0,2 „

0,3 „

—

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30

E, Griifenberg und J. Thies,

Es unterscheidet sich bei den jungen Kaninchen die
tddliche Dosis des Kaninchenhodens nicht bei den beiden Ge-
schlechtern.

M^nl. Kaninchen Weibl. Kaninchen

Kleine Tiere 0,4 f t Kan.-Hoden 1 :2

0,3 lebt 0,3 lebt

Mftnnliche und weibliche Kaninchen reagierenalso
im nicht geschlechtsffihigen Alter auf die Injektion von
Kaninchenhoden in gleicher Weise. Die relative
tddliche Dosis ist geringer als bei geschlechts-
f^ihigen Tieren, sie ist sogar noch etwas kleiner als
bei den mfinnlichen grollen Tieren, die, me oben ge-
zeigt wurde, nur die Hfilfte der weiblichen Grenzdosis ver-
tragen. Zur Uebersicht werden die letalen Mengen des Ka¬
ninchenhodens fflr die beiden Geschlechter zu den verschiedenen
Zeiten der Geschlechtsentwicklung nochmals nebeneinander
gestellt. Die Aufstellung hat besondere Bedeutung, weil ffir
alleVersuche der Hodenextrakt des gleichen Ka¬
nin che ns verwandt wurde.

TabeUe IX.

Kaninchen mit Kaninchenhoden (1 :2) intrarenos gespritzt.

Mannlich Weiblich
Grofie Tiere 0,6 f t

0,5 lebt 0,9 lebt

Kleine Tiere 0,4 t 0.5 t

0,3 lebt 0,3 lebt

Auch andere Versuchsreihen lehrten, daB die geschlecht-
lich noch unentwickelten Kaninchen sich den Kaninchenhoden-
injektionen gegentiber gleich verhalten.

TabeUe X.

Kleine mannhche Kaninchen mit Kaninchenhoden (1:2) intravends gespritzt.

Kleine mannl^ Kaninchen

(Jewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

No. 49

640 g

2,0 g

3.0 g

t

„ 56

640 „

1 7

>1

2,7 „

t

„ 50

670 „

1,5 „

2,3 „

Die kleinen m&nnlichen Kaninchen sterben nach
der Injektion von 2,7 g pro kg Tier.

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Beitrage ziir Biologie der mlumlichen Geschlechtezellen.

31

TabeUe XI.

Kleine weibliche Kaninchen mit Xaninchenhoden (1:2) intraveDds geapritzt.

EUeine weibl. Eaninchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

No. 52

520 g

1,5 g

2,8 g

t

„ 54

570 ,,

1,3 „

2,2 „

Die kleinen weiblichen Kaninchen vertragen bier
wieder nicht mehr wie die gleichaltrigen mSnn-
lichen Tiere, auch sie sterben nnter Kr&mpfen bei der In-
jektion von 2,8 g Hoden pro kg Tier.

Ans unseren ersten orientierenden Versuchen batten wir
den Schlufi zu ziehen geglaubt, dall die East ration die
m&nnlicben Kaninchen erheblich empfindlicher gegen die in-
travenSse Zufuhr von arteigenem Hoden macht, so dafi sie
ebenso wie die kleinen, nicht geschlechtsreifen Kaninchen schon
durch die Injektion einer kleinen Menge des arteignen Hodens
getdtet werden. Diese Annahme konnte in weiteren Versuchen
nicht bestiltigt werden. Wir geben hier eine Versuchsreihe
an kastrierten Kaninchen wieder und stellen ihr gegeniiber
eine Kontrollserie mit normalen mgnnlichen Tieren. An
weiteren Versuchen wurden wir durch den Ausbruch einer
Seuche gehindert, die alle vorbereiteten Kaninchen tbtete.

Alle Tiere dieses Versuches wurden mit dem gleichen
Hodenextrakt injiziert, dessen Wirksamkeit aus Tabelle XII
zn ersehen ist.

TabeUe XII.

Mannliche Eaninchen mit Eaninchenhoden (1:2) intraTenos geapritzt.

MSiml. Eaninchen

Grewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 115

1690 g

1,6 g

1,0 g

2

„ 117

1220,,

1,0 „

0,8 „

2

„ 121

1100 „

0,8 „

0,7 „

1

„ 122

1260 „

0,8 „

0,6 „

1

., 116

1620 „

0,8 „

0,5 „

—

Die akut letale Dosis dieses Hodenextraktes ist ffir m kn n -
liche Kaninchen 0,6 pro kg Tier. Auch von ihm vertragen
die weiblichen Eaninchen wieder mehr, erst 0,9 pro 100 g
Kaninchen vermag die weiblichen Tiere zn tdten (Tabelle XII a).

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32

E. Grafenbe'rg und J. Thies,

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TabeUe Xlla.

Weibliche E^aninchen mit Kaninchenhoden (1:2) intravenSs gespritzt.

Weibl. Kaninchen

Gewicht

Hodenmenge

j pro kg Tier

Tod in Min.

No. 118

1570 g

1,4 g

0,9 g

2

„ 120

1770,,

1 4

0,8 „

—

Die Reaktion der kastrierten Kaninchen aaf die
Injektion des gleichen Kaninchenhodens unterscheidet sich
nicht von der der normalen mftnnlichen Tiere. Die
Kastration war 24 Tage znvor ausgefahrt.

TabeUe XIII.

Kastrierte m^nliche Kaninchen mit Kaninchenhoden (1 :2) intravenos

gespritzt.

Kastrierte Kaninchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg
Tier

Tod
in Min.

No. 61, kastriert vor 24 Tagen

2940 g

2,1 g

0,7 g

2

» 6® » yj 24 „

1770 „

1,1 „

0,6 „

2

63 „ „ 24 „

2800 „

1,4 „

0,5 „

—

TabeUe XUIa.

Frisch kastrierte mannhche Kaninchen mit eigenem Hoden (1:2)

gespritzt.

Frisch kastrierte Kaninchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg
Tier

Tod
in Min.

No. 114

2070 g

1,1 g

0,7 g

2

„ 113

i 2200 „

1,2 „ !

0,5 „

—

Die Resultate der Hodenextraktinjektionen bei kastrierten
Tieren und m&nnlichen und weiblichen Kaninchen stellen wir
zum besseren Vergleich bier noch einmal nebeneinander:

m&nnliche Kaninchen 0,6 f weibliche Kaninchen 0,9 f
0,5 lebt 0,8 lebt

mannhche, ror 24 Tagen kastrierte Kaninchen 0,6 f

0,5 lebt

mannhche, frisch kastrierte Kaninchen 0,7 f

0,5 lebt

Wir heben nochmals hervor, dafi die weiblichen Ea-
ninchen auch in diesen Versuchen eine grbfiere Menge
Hodenextrakt vertragen, und dafi die kastriert-en
mSnnlichen Tiere nach der Injektion der gleichen relativen

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Beitrage zur Biol(^e der mannlichen Gteschlechtszellen.

33

Mengen wie die normalen m&nnlichen Eaninchen akut
zugrunde gehen.

Aach der Hodenextrakt anderer Tierarten ist
fftr Kaninchen sehr giftig. Es wurde der frisch ent-
nommene Hoden von Meerschweinchen wiederum mit der
doppelten Menge physiologischer Kochsalzldsung fein verrieben
und zur Vermeidung grdberer korpuskul&rer Beimengungen
filtriert Diesen Extrakt der Meerschweinchenhoden haben mr
Kaninchen in die Ohrvene injiziert. Wir konnten auch mit
diesem Extrakt jene Erscheinungen auslOsen, die wir nach der
Injektion von Kaninchenhoden beobachteten.

Allerdings waren die relativen Mengen, die fdr den aknten
Tod der Tiere ndtig waren, erheblich hdher als bei der Ein-
spritzung des arteigenen Kaninchenhodens (Tabelle XIV).

TabeUe XIV.

Mannliche S[aninchen mit Meerschweinchenhoden (1: 2) gespritzt.

MinnL E^aninchen

Gewicht

HodenmeDge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 99

1400 g

8,4 g

6,0 g

2

„ 89

1350 „

6,7 „

5,0 „

4

„ 92

1350 „

5,4 „

4,0 „

—

93

1450 „

4,4 „

3,0 „

—

Die m&nnlichen Kaninchen sterben erstdann, wenn
ihnen 5,0 unseres Extraktes von Meerschweinchenhoden pro
kg Tier intravends einverleibt wurde, jedoch unter den gleichen
Symptomen wie jene Kaninchen, die den arteigenen Hoden
injiziert erhielten. Die anfkngliche motorische Unruhe geht
schnell in Krimpfe fiber, die Tiere stfirzen nach wenigen un-
koordinierten Sprfingen nieder und sterben unter den hef-
tigsten Streckkrfiropfen.

Weibliche Kaninchen verhalten sich auch gegenfiber
dem Meerschweinchenhoden anders wie die mfinnlichen Tiere.

TabeUe XV.

Weibliche Kaninchen mit Meerschweinchenhoden (1:2) gespritzt.

1

Qewicht

Hodenmenge

pro kg Her

Tod in Min.

No. 101

1150 g

11,5 g

10,0 g

1

„ 97

870 „

7,0 „

8,0 „

—

„ 90

1300 „

7,8 „

6,0 „

—

„ 91

1400,,

7,0 „

5,0 „

—

Ztitselir. t IrnmnnlUttfortchaDf. Ori;. Bd. X. 3

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34

£. Grafenberg und J. Thies,

Die weiblichen Kaninchen vertragen also auch tod
dem Meerschweinchenhoden mehr als die mfinn-
lichen Tiere.

ElanincheD, mannlich 5,0 t Weiblich 10,0 f IMeerschw.-Hoden (1:2)
4,0 lebt 8,0 lebtj pro kg Tier

Um bei den weiblichen Kaninchen durch eine intra-
venbse Injektion von Meerschweinchenhoden den
akuten Tod herbeiznfOhren, mufi etwa die doppelte
Menge der ftlr die mftnnlichen Kaninchen tddlichen
Do sis intravends eingespritzt werden. Das differente Ver-
halten der verschieden-geschlechtlichen Kaninchen gegeniiber
dem Meerschweinchenhoden entspricht vollstfindig jenen Be-
obachtungen, die wir bei der intravenbsen Injektion von art-
eigenem Hoden bei den Kaninchen gemacht haben. Zwar sind
die relativen letalen Mengen dort geringer als bei der In¬
jektion von Meerschweinchenhoden, aber hier wie dort ist die
tddliche Dosis ffir die weiblichen Kaninchen steta
etwa doppelt so grofi wie fhr die m&nnlichen
Tiere.

Noch weniger giftig wie Meerschweinchenhoden ffir das
Kaninchen erweist sich der Extrakt von Stierhoden
bei der intravendsen Injektion. Um die Gefahren der Injektion
eines fiberm^lfiig grollen Volnmens zu vermeiden, haben wir
den Extrakt des Stierhodens durch eine Vermischnng mit der
gleichen Menge Kochsalzldsung hergestellt*). Damit aber
der Vergleich mit den flbrigen Tabellen nnd der Verdfinnnng
von 1:2 anch beim Stierhoden mbglich wird, sind die Werte
auf die Verdflnnung von 1:2 umgerechnet worden.

TabeUe XVL

Mannliche EanincheD mit Stierhoden (1:2) gespritzt.

Mannl. Kanmchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

No. 129

1160 g

7,0 g

6,0 g

t

„ 131

1220 „

5,7 „

4,6 „

„ 128

1410 .,

4,6 „

3,2 „

—

„ 127

1420 „

2,9 „

1,9 „

—

1) Dabei kann freilich eine etwas geringgradigere Extraktion dea
giftigen Prinzips erfolgt sein.

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Beitrfige zur Biologic der m&Dolichen Gleschlechtszellen.

35

Es liegt also die tddliche Dosis des Stierhoden-
extraktes fiir Kaninchen zwischen 4,6 und 6,0 pro kg
Tier. Die gleiche Dosis wirkt auch fQr die weiblichen
Kaninchen tSdlich.

Tabelle XVn.

Weibliche Kaninchen mit Stierhoden (1:2) geapritzt.

WeibL Kaninchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

No. 130

1120 g

7,0 g

6,2 g

t

„ 132

1300 „

6,5 „

5,2 „

t

„ 32

900 „

2,3 „

3,5 „

Die Gegenflberstellung der tSdlichen Dosis fflr die mfinn-
lichen und weiblichen Kaninchen lehrt, da3 bei der In-
jektion von -Stierhoden eine deutliche Differenz der
Geschlechter in diesen Versuchen nicht znm Ausdrnck
kam ^).

Mfinnlich: 6,0 t Weiblich: 5,2 f \ Stierhoden

4,6 lebt 4,6 lebt / pro kg Tier

Aehnlich sind die Resultate, wenn man die intravendsen
Injektionen nicht bei Kaninchen macht, sondern Meer-
schweinchen den Hodenextrakt in die Vena jugu-
laris injiziert. KleineMengen des arteigenen Hodens
wirken nicht tbdlich. Die Meerschweinchen bekommen Kr&mpfe
Oder sie sitzen mit gestr&ubten Haaren zusammengekauert
und djspnoisch atmend in der Ecke. Erst nach einigen
Stunden sind die Tiere wieder vollstilndig erholt. Nach der
Injektion groiler Mengen sterben die Meerschweinchen im
Laufe einiger Minuten unter beftigsten Kr&mpfen, die vdllig
denen gleichen, unter denen die Meerschweinchen im anaphy-
laktischen Shock zugrunde gehen. Der Thorax bleibt in In-
spirationsstellung stehen, die Lunge wird maximal gebl&ht, und
ihre Pleura ist hHufig von unz&hligen punktfbrmigen HUmor-
rhagien flberdeckt. Dabei schlSgt das Herz noch eine lange
Zeit weiter.

Diese Wirkung des Meerschweinchenhodenextraktes wird
durch Aufkochen der Flfissigkeit v611ig zerstSrt. Wir haben

1) Das ist vielleicht auf die allgemeine hohe Giftigkeit des Binder-
eiweifieB (z. B. Serum) zuTiickzufiihien.

3*

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36

E. Gr&fenberg und J. Thies,

einem m^nlichen Meerschweinchen pro kg 16,0 ccm gekochten
und filtrierteu Meerschweincheohodenextrakt pro kg Kdrper-
gewicht iutravends injiziert, oboe daB das Tier Krankheits-
erscheinungen darbot. Ein Kontrolltier, dem die gleiche Menge
des ungekochten Materiales eiugespritzt war, verendete dagegen
sofort unter Krampfen.

Auch die Meerschweinchen reagieren auf die intraTendsen
Hodeninjektionen je nach ihrem Geschlecht verschieden.

TabeUe XVIII.

Mannliche Meerschweinchen mit Meerschweinchenhoden (1:2) gespritzt.

Mannl. IL-Schw.

Grewicht

Hoden menge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 388

180 g

2,7 g

15,0 g

t 3

„ 392

180 „

2,5 „

14,0 „

Ejampfe,lebt

„ 389

1 170 „

2,2 „

13,0 „

71 17

Es sterben also die rngnulichen Meerschweinchen,
wenn ihnen 15,0 g Meerschweinchenhodenextrakt
pro kg Tier intravenSs eingespritzt wird.

Dagegen liegt fflr weibliche Meerschweinchen die
tddliche Dosis erst bei 17,0 g Meerschweinchenhoden
pro kg Tier.

TabeUe XIX.

WdbUche Meerschwanchen mit Meerschweinchenhoden (1:2) gespritzt.

Weibl. M.-Schw.

Qewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 391

200 g

3,4 g

1

17,0 g

t 10

„ 387

200 „

3,2 „

16,0 „

Krampfe,lebt

„ 390

180 „

2,7 „

15,0 „

77 77

MiinnUch: 15,0 f WeibUch: 17,0 f

Auch bei einer zweiten Versuchsreihe wird die hier aller-
dings geringe Differenz der Geschlechter offenbar.

TabeUe XX.

Miinnli che Meerschweinchen mit Meerschweinchenhoden (1:2) gespritzt.

Mannl. Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

No. 321
„ 327

270 g
250 „ 1

4,9 g

4,0 „

18,0 g

16,0 „

1

„ 317

300 „

4,5 „

15,0 ..

Krampfejlebt

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BeitrSge zur Biol(^e der mannlichen Gteschlechtazellen.

37

FQr m&nnliche Meerschweinchen ist die tOd-
liche Dosis 16,0 g Meerschweinchenhoden pro
kg Tier.

Dagegen liegt fflr die weiblichen Meerschwein¬
chen die letale Dosis erst bei 18,0 g pro kg Tier.

Tabelle XXI.

Weibliche MeerBchweinchen mit MeerBchwdnchenhoden (1:2) gespritzt.

Wdbl. Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Her

Tod

No. 326

260 g

4,5 g

18,0 g

t _

„ 325

250 „

4,0,,

16,0 „

E[rampfe,lebt

Mannlich: 16,0 f Weiblich: 18,0 f \ v* Tioi.

Iblofebt 16 ,blebtlP~^^®*^

Im Gegensatz zn den Kaninchen vertragen die Meer¬
schweinchen im Verhftltnis recht erheblich grOfiere Mengen
des eigenen Hodens, anch ist bei ihnen die Differenz der Re-
aktion der beiden Geschlechter nicht so augenfMlig wie beim
Kaninchen.

Empfindlicher gegen die Injektion des arteigenen
Hodens erweisen sich die mknnlichen Tiere nach der
Eastration.

Tabelle XXn.

Eastriote mannl. Meerschw. mit MeerBchweinchenhoden (1:2) geepritzt.

MfionL Meerschweinchen

Gewicht

Hodenmenge

pro kg
Tier

Tod in Min.

No. 324, kastriert vor 8 Tagen
» 2^ „ „ 8 „

„ 308 „ „10 „

320 g
420 „
400 „

4.5 g

5.5 ,,

4.0 „

14,0 g
13,0 „
10,0 ,.

t 1
t 7
t 11

Eontrolle.

No. 388 mannL, nicht kastriert

” ^ ”

„ ooy „ ,, ,,

180 g
180 „
170 „

2,7 g

2,2 „

15,0 g
14,0 „
13,0 „

t 3

_____

Bereits aos diesem orientierenden Versuch dtlrften wir
eine vermehrte Empfindlichkeit der kastrierten
mfinnlichen Tiere gegen die intravenbse Injektion von
Meerschweinchenhoden schlieBen, denn ein m&nnliches Meer¬
schweinchen ging erst nach der Einspritzung von 15,0 g Meer¬
schweinchenhoden pro kg Tier ein, wkhrend die kastrierten

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38

E. Grafenberg und J. Thies,

Tiere nicht einmal 10,0 g pro kg intravends vertragen, ob-
wohl sie bedeutend grdfier waren, and wir beim Kaninchen
gesehen haben, daB kleine Tiere an sich weniger vertragen.

Wenn nach der Kastration Iftngere Zeit ver-
strichen ist, so ist das kastrierte Meerschweinchen
sehr empfindlich gegen die intravendse Injektion von
Meerschweinchenhoden geworden. Ein Meerschwein-
chenbock (No. 61), der 14 Tage zuvor doppelseitig kastriert
war, wurde durch die Injektion von 4,0 g Meerschweinchen¬
hoden pro kg Tier akut getdtet, dessen Toxizitfit fQr normale
inS.nnliche Tiere auf 15 g pro kg Tier vorher bestimmt war.

Eastriertes Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

Meerechweinchen 61

750 g

3,0 g

4,0 g

1 Std.

Auch unmittelbar nach der Kastration ist der
Meerschweinchenbock schon empfindlicher gegen die
Injektion des arteigenen Hodens geworden. In zwei
FUllen sind die kastrierten 65cke einer Hodeninjektion er-
legen, die nur die Hglfte der akut letalen Dosis enthielt.

TabeUe XXIII.

Frisch kastrierte manDl. Meerschw. mit Meerschw.-Hoden (1:2) gespritzt.

Mannl. Meerschw.

Gtewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod

t

No. 598, frisch kastriert

550 g

5,5 g

10,0 g

14 Std. iinter
Erampfen

76

>7 77

1 320 „

2.5 „

8,0 „

t 7 Mm.

77 77 77

1 520 „

1,5 „

3,0 „

—

„ 39 „

1 540 .,

1,5 „

2,5 „

—

Die Hoden scheinen eine schhtzende Rolle gegen die
Injektion von Hodenmaterial zu besitzen (Metschnikoff).
mit ihrer Entfernung ist der Organismus des Meerschwein-
chens nicht mehr in der Lage, die toxische Wirkang des art¬
eigenen Hodens zu paralysieren, schon kleine Mengen fflhren
den akuten Tod herbei.

Noch empfindlicher als die kastrierten Tiere gegen die
Injektion des arteigenen Hodens sind die trSchtigen Meer-
schweinchen. Sie gehen schon bei kleinen Injektionsmengen
ein, wie die folgenden Versuchsreihen erkennen lassen.

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Beitrage zur Biologic der m&nnlichen Geschlechtszellen.

39

TabeUe XXIV.

Tr&chtige MeerBchveincheii mit MeerschweincheDhodeD (1:2) geepritzt.
Wdbliche, nicht trachtige Here als Eontrolle.

Meerschweinchen

Gewicht

Hodenmenge pro kg Tier

Tod in Min.

a.

No. 391 weiblich

„ 393 trachtig

200 g
180 „
850 „

3,4 g

2,7 „

10,5 .,

17,0 g

12,0 „

t 10

b.

No. 42 wdblich
w 43 „

„ 40 trachtig

620 g

300 „
750 „

1,5 g
0.75 „

1,5 „

2,5 g

2,5 „

2,0 „

Krampfe, lebt
Sprunge, lebt
t 10

No. 59 wdblich
» 56 „

„ 58 trachtig

290 g
330 „
730 „

c,

1,5 g

1,0 „

1,5 „

5,0 g

3,0 „

2,0 „

heft. Ejrampfe,
lebt

d.

No. 28 weiblich
„ 25 trachtig

600g

650 „

1,5 g

1,0 „

2,5 g

2,0 „

f~8

No. 612 weiblich
„ 614 trachtig

170 g
910 „

e.

2,9 g

11,0 „

17.0 g
12,0 1

t IV* Std.

In jedem Versuch sind den tr&chtigen Meerschweinchen
gesunde Tiere gegenhbergestellt, an denen zuvor entweder
die normale letale Dosis der intravendsen Hodeninjektion fest-
gestellt war, oder die die Unsch&dlichkeit der fttr das trfichtige
Tier letalen Dosis erkennen liefien. Es geht aus diesen Ver-
suchen hervor, dafi schon geringe Mengen des arteigenen
Hodens, intxavenos injiziert, trkchtige Meerschweinchen zu
t5ten vermSgen^).

Einen exakten Vergleich der ToxizitHtsdifferenzen fQr
normale, kastrierte m^nnliche und trhchtige Meerschweinchen
gestattet auch eine Versuchsreihe, in der das gleiche Meer-
schweinchenhodenmaterial bei diesen drei Kategorien intravends
injiziert wurde. Der Hodenextrakt war sehr toxisch; fiir mfinn-

1) Bei dieser Differenz in dem Verhalten der trachtigen und nicht*
trachtigen Here ist allerdings zu beachten, daS die triichtigen Here durch
das Gewicht ihrer Fdten, dee Fruchtwassers und der Placenten schwerer
erschdnen, als ihrem wirklichen Gewicht entspricht.

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40

E. Grafenberg und J. Thies,

liche Normaltiere waren schon 12,0 g pro kg Tier akut
tdtlich, wILbrend 8,0 pro kg Kdrpergewicht keine Erscheinungen
machten.

TabeUe XXV.

Tozizitat dee MeerBchwemchenliodeDs (1:2) ftir Meerschwemchen, a normal,
b mannlich, c kastriert und d trachtig.
a.

MannL Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 623

170 g

2,6 g

15,0 g

2

„ 624

180 „

2,2 „

12,0 „

3

„ 625

200 „

1,6 „

8,0 „

—

MSoDliche Meerschweinchen, denen am gleichen Vormittag
beide Hoden entfernt waren, waren schon viel empfindlicher
gegen die intravendse Injektion des Hodenextrakts als die
m&nnlichen Kontrolltiere. Sie starben bereits nach der intra-
vendsen Einyerleibnng von 8,0 ccm Hodensubstanz pro kg
Tier, einer Menge, die von den m&nnlichen Normaltieren
anstandslos vertragen wurde.

b.

Mannl. Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 622 friedi kastr.

540 g

4,3 g

8,0 g

4

„ 621

620 „

3,7 „

6,0 „

—

Noch geringer war die relative Menge von Meerschweinchen-
hoden, die jene mSnnlichen Meerschweinchen vertragen, die
bereits vor l&ngerer Zeit kastriert waren.

c.

MknnL Meerschw.

Gtewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 615 kastr. y. 7Tg.

700 g

4,2 g

6,0 g

4

„ 343 „ „89 ,,

900 „

4,5 „

5,0 „

Er%mpfe

Diese Tiere starben bereits nach der Injektion von 6,0 Meer-
schweinchenhoden pro kg Tier. Es hatte auf den Ausfall der
Reaktion keine Bedeutnng, wenn noch l&ngere Zeit nach der
Kastration verstrichen war. Ein m&nnliches Tier, das 89 Tage
znvor kastriert war, bekam zwar nach der Injektion von 5,0

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BeitrSge kut Biologic der mannlichen GeschlechtszeUeD.

41

Hodenextrakt pro kg Tier heftigste ErSmpfe in Seitenlage,
ging aber nicht zugrunde.

Noch empfindlicher gegen die intravenbse Zufohr
von Meerschweincbenhoden erwies sich das tr&chtigeMeer-
schweinchen. Dieses reagierte noch auf 5,0 g pro kg Tier
mit sofortigen Kr&mpfen und Exitns.

d.

Tracht. Meeischw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min-

No. 626

750 g

3,8 g

6,0 g

3

Wir dflrfen deshalb nach diesen konstanten Ergebnissen
anch bei der nicht sehr grofien absolnten Differenz resumieren,
da& die intravendse Injektion des arteignen Meer-
schweinchenhodens am besten vertragen wird von
den weiblichen Meerschweinchen, dali die m&nn-
lichen Tiere schon empfindlicher sind, dafi die Em-
pfindlichkeit der kastrierten m&nnlichen Meer¬
schweinchen nnmittelbar nach der Kastration schon erhdht
ist nnd mit der Zunahme des Intervalles nach der Operation
noch vermehrt wird und dafi wahrscheinlicham stfirksten
die trfichtigen Meerschweinchen auf die Injektion
des artgleichen Hodens reagieren.

Meerschweinchen mit Stierhodenextrakt gespritzt.

Anch fOr Meerschweinchen ist der wfisserige Extrakt
fnscher Stierhoden bei der intravendsen Injektion giftig,
aber er steht ebenso wie beim Kaninchen an toxischer Kraft dem
arteignen Hoden erheblich nach. Es wurde deshalb anch bier
znr Vermeidung grofier absoluter Injektionsmengen der Stier¬
hodenextrakt in einer Verdtlnnung von 1:1’) physiologischer
Kochsalzldsung hergestellt. In den Tabellen haben wir jedoch
die absolnten und relativen Mengen auf unsere Standard-
verdflnnnng 1:2 umgerechnet, nm brauchbare Vergleichswerte
zu erhalten.

1) Unter Beriickaichtigimg des Gewichts der Schwangerschaftsprodukte.

2) Siehe FuBnote p. 34.

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42

E. Grafenberg und J. Thies,

TabeUe XXVI.

Mannliche Meerschweinchen mit Stierhoden (1:2) gespritzt.

Mannl. Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 435

200 g

12,0 g

60,0 g

1

„ 436

200 „

10,0 „

50,0 ,,

1

„ 441

180 „

7,2 „

40,0 „

2

„ 442

190 „

6,4 „

34,0 „

—

„ 437

190 „

5.8 „

30,0 „

—

Es liegt fdr diese Versuchsreihe dietddliche Dosis
des Stierhodenextraktes fttr m&nnliche Meer¬
schweinchen zwischen 34 und 40 g pro kg Meerschweinchen.
Der arteigene Hoden Ubertrifft die Toxizitfit des artfremden
Stierhodens um fiber das Doppelte der letalen Dosis. Es
ist dieser Unterschied in der Giftigkeit des Stierhodens und art-
eigenen Hodens auf Meerschweinchen vollstfindig analog der
Differenz zwischen der Wirksamkeit des artgleichen Kaninchen-
hodens und des artfremden Stierhodens bei den Kaninchen. Beim
Kaninchen, das gegen seinen arteigenen Hoden so fiberaus
empfindlich ist, ist der Unterschied in der toxischen Kraft
noch erheblicher. Der Kaninchenhoden ist, wie wir oben
gezeigt haben, ffir das arteigene Tier zehnmal so giftig
wie der artfremde Stierhoden, wfihrend ffir das Meer¬
schweinchen das Toxizitfitsverhfiltnis nur etwa
1:2 ist.

Es bestfitigt sich wiederum bei der Injektion von Stier¬
hoden auf Meerschweinchen die Beobachtung, daB die weib-
lichen Tiere auf den Hodenextrakt anders reagieren
als die mfinnlichen Meerschweinchen. Die weiblichen Tiere
sind gegen die Hodeninjektion resistenter als die Bficke.

TabeUe XXVU.

Weibliche Meerschweinchen mit Stierhoden (1:2) gespritzt

Weibl. Meerschw.

Gtewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 439

200 g

12,0 g

60,0 g

1

„ 445

190 „

10,0 „

50,0 ,,

1

„ 443

200 „

9,2 „

46,0 „

—

444

tj

200 „

8,0 „

40,0 „

—

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Beitxage zor Biologic der mannlichen GcschlechtszeUen.

43

Meerschweinchen mit Stierhoden (1:2) gespritzt.

Mfinnlich: 40,0 f Weiblich: -50,0 f

34,0 lebt. 46,0 lebt.

Auch gegen StierhodeniDjektionen sind tr&chtige
Meerschweinchen empfindlicher als die nichttrSchtigen
Tiere.

TabeUe XXVm.

Trachtige Meerschweinchen mit Stierhoden (1; 2) gespritzt.

Tracht Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 403

680 g

19,0 g‘)

28,0 g

1

434

850 „

10,0 „

12,0 „

Krampfe, lebt

Meerschweinchen mit Kaninchenhoden gespritzt.

Eigenttlmlicherweise verhalten sich die Meerschwein¬
chen gegen die intravendse Injektion von Kaninchen¬
hoden relativ refraktSr.

TabeUe XXIX.

MannUche Meerschweinchen mit Kaninchenhoden (1:2) gespritzt.

Hfinnl. Meerschw.

Gewicht

Hodenmenge

kg pro Tier

Tod in Std.

No. 312

300 g

12,0 g

40,0 g

20

„ 311

200 „

6,0 „

30,0 „

20

„ 310

285 „

5,7 „

20,0 „

20

„ 309

360 „

3,6 „

10,0 „

20

Ein akuter primirer Tod konnte selbst trotz der Injektion
der sehr grofien absoluten Menge Kaninchenhodenextrakt
von 12,0 g nicht herbeigefiihrt werden, die einer relativen
Menge von 40,0 g auf 1 kg Tier gleichkommt. Nicht einmal
KrUmpfe wurden im Gefolge der Injektion beobachtet. Aller-
dings gingen die Tiere, denen mehr als 20,0 pro kg Gewicht
injiziert worden war, im Laufe der nScbsten Nacht zugrnnde.

Auch die weiblichen Meerschweinchen wurden
durch die gleichen Injektionsmengen nicht getdtet.

In einer anderen Versuchsreihe war allerdings der
Kaninchenhodenextrakt fUr Meerschweinchen toxischer.

1) Eb sei auch hier nochmals betont, daU die grofien absoluten Mengen
nicht injiziert wurden, sondem nur durch Umrechnung in die Normal-
extraktmischung entstanden sind.

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44

E. Grafenberg und J. Thies,

TabeUe XXX.

Manoliche MeeiBchwdnchen mit Eaninchenhoden (1:2) gespritzt

MwdL Meerschw.

Grewicht

HodenmeDge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 273

170 g

3.4 g

20,0 g

3

„ 279

180 „

2,7 ,.

15,0 „

4

„ 280

200 „

2,6 „

13,0 „

—

„ 277

200 „

2,0 „

10,0 „

—

„ 276

220 „

1 1,1 „

5,0 „

—

15,0 gEaninchenhoden (1:2) pro kg Meerschweinchen
war die akut letale Dosis f(ir mfinnliche Tiere. Die tddliche
Gabe war die gleiche fiir weibliche Meerschweinchen,
wie der folgende Versuch zeigt.

TabeUe XXXI.

WeibUche Meerschwemchen mit Eaninchenhoden (1:2) geepritzt.

Weibl. Meerachw.

Gtewicht

Hodenmenge

pro kg Tier

Tod in Min.

No. 281

180 g

2,7 g

15,0 g

6

„ 282

200 „

2,8 „

14,0 „

—

Wir m5chten die Dififerenz in der primliren Toxizitfit des
Kaninchenhodenextraktes dieser beiden Versuchsreihen — hier
wirkte 1,5 g pro 100 g Meerschweinchen akut tddlich, wfihrend
dort noch 4,0 g pro 1(X) g Tier gut vertragen wurden — nicht
auf eine Verschiedenartigkeit der Herstellung der Extrakte
zurUckfQhren. Wir glauben vielmehr in der Herkunft des
Organmaterials die Ursache suchen zu mussen. Die Hoden
der zweiten Versuchsreihe waren n&mlich ausnahmsweise von
Kaninchen gewonnen, die schon zu anderen Versuchen benutzt
waren und denen unter anderem Hammelserum injiziert war.
Es ist m5glich, dafi die erhdhte Giftigkeit des Hodens dieser
Tiere mit jener Vorbehandlung im Zusammenhang steht

TrSchtige Meerschweinchen haben die Injektion
Yon 7,0 g Eaninchenhoden pro kg Tier ohne Reaktion ilber-
standen. Anch hierin erblicken wir einen neuen Beweis f(ir
die auffallend geringe prim&re Toxizitftt des Eaninchenhodens
fflr Meerschweinchen.

Alle unsere Versuchsreihen fOhren zu dem gemeinsamen
Schlufi, dafi sowohl beim Eaninchen wie beim Meerschweinchen

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Beitrage zur Biologie der mannlichen Greschlechtezellen.

45

die intravendse Injektion von wfisserigem Hodenextrakt akuten
Tod unter Krftmpfen hervorruft Dabei wurde die auffallende
Beobachtung gemacht, daB der arteigene Hoden fQr die
Tiere we it toxischer ist als der Hodenextrakt einer anderen
Tierart and daO fiir mSnnliche geschlechtsreife Tiere
die letale Dosis des Hodenextraktes erheblich geringer
ist als fflr weibliche Tiere. Noch nicht geschlechtsreife
Tiere reagieren empfindlicber als ausgewachsene Tiere,
besonders wenig Organextrakt vertragen kastrierte m&nn-
liche and tr&chtige Meerschweinchen.

Die Tiere reagieren auf die Injektion mit arteigenem
Hodenextrakt gerade so, als ob ihnen ein artfremdes
Organ injiziert wnrde. Die Hodensubstanz hat selbst fdr
ihren TrBger, d. h. fiir das individaengleiche Tier, aafierordent-
lich toxische Eigen schaften. Das Versnchstier geht ebenso
aknt zngrande, wenn ihm der Hodenextrakt eines anderen
artgleichen Tieres eingespritzt wird, als wenn man den In-
jektionsextrakt aas seinem eigenen Hoden hergestellt hat.

Artfremd verb&lt sich der arteigene Hoden nicht
nnr bei der Prdfung der primiu’en Toxizit^t nach intravendser
Injektion, sondern anch dann, wenn erzn Sensibilisie-
rangsversucben verwandt wird. Es gelingt ohne Mdhe,
Meerschweinchen and Kaninchen dnrch Hodenextraktinjektionen
zn sensibilisieren, so daB sie bei der zweiten Injektion mit
snbletalen Dosen des artgleichen Hodens aknt eingehen.

TabeUe XXXII.

Subkutane SeDsibilisieruiig von EanincheD. Beinjektion mit der gleichen

Organeubstanz.

Kan.

Ge-

schlecht

Ge* I
wicht 1

Subkutan

Beinjektion nach

pro kg

Tier

Tod in
Min.

124

w.

1450 g

0,1 g Stierhoden (1:2)

10 Tg. 1,5 Stierhod. (1:2)

10,0

3

111

m.

1220 „

0,3 „M8.-Hod.{l:2)

20 „ 3,5MS.-Hod.(l:2)

3,0

2

109

m.

1200 „

0,2 „ E£m.-Hod.(l: 2)

17 „ 0,4Kan.-H. (1:2)

0,3

2

Die sabkatan sensibilisierten Kaninchen der
Tabelle XXXII reagierten aaf die 2—3 Wochen spBter folgende
intravendse Beinjektion der gleichen Hodensnbstanz mit dem
Ansbrach des anaphylaktischen Shocks and gingen binnen
wenigen Minaten zngrande. Die relativen Mengen der zweiten

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46

E. Grafenberg und J. Thies,

Injektion waren nattirlich geringer als die zuvor fdr den be-
natzten Organextrakt bestimmte letale Dosis.

Auch subkutan sensibilisierte Meerschweinchen
werden durch die Reinjektion des Antigens sofort getdtet. Sie
sprechen zwar nicht so leicht auf die zweite Injektion an, aber
auch bei ihnen wird der anaphylaktische Shock durch subletale
Injektionsmengen ausgelbst. Kleine Mengen bedingen wohl
krampfhafte Sprhnge und den anapbylaktischen Temperatur-
sturz, ffihren aber nicht zum akuten Tod.

TabeUe XXXTTT .

Subkutane Sensibilisienmg von Meerschweinchen. Eeinjektion mit der

gleichen Substanz.

MS.

No.

Ge-

schlecht

Ge-

wicht

Subkutan

Eeinjektion nach

pro kg
Tier

Tod in
Min.

456

m.

250 g

0,1 MS.-Hod. (1

:2)

16Tg.3,0MS.-Hod. (1:2)

12,0

8

460

m.

170 „

0,1 (1

••2)

1

15 „ 1,7 „ (1:2)

10,0

E[ifimpfe4d)t,

Temp.-8iim

416

m.

280 „

0,2 Ean.-Hod. (.

1:2)

27 „ 2,0Kan.-H. (1:2)

10,0

4

502

m.

300 „

0,2 Stierhoden (!

l:2)i

32 „ 6,0Stierhod. (1:2)

20,0

3

Durch die intraperitoneale Injektion von Serum sensibili-
sierter Tiere konnten wir nach Art der passiven Ana-
phylaxie Meerschweinchen dberempfindlich machen gegen
die Reinjektion des artgleichen Hodens. Das zur passiven
Uebertragung benutzte Serum war von Kaninchen gewonnen,
denen Meerschweinchenhoden intravends zugeftlhrt war.

TabeUe XXXIV.

Passive Anaphylaxie durch intraperitoneale Injektion des g^en Meer-
schwrinchenhoden sensibilisierten Eaninchenserums. Beinjektion mit Me^-
schweinchenhoden.

MS.

No.

Ge- 1
schlecht

Ge-

wicht

Intraperitoneal

Eeinjektion nach

pro kg
Tier

Tod

nach

80

m.

200 g

0,25 Kan.-S. 26

2Tg. 2,0MS.-Hod.(l;2)

10,0

20 St.

92

m.

250 „

1,0 dgL

3 Tg. 2.0 dgl.

7,0

6 „

91

w.

150 ,,

1,5 ^1.

3Tg. 1,0 dgl.

7,0

5 «

94

m.

250 „

2,0 l^n.-S. 25

3Tg. 1,7 dgl.

7,0

4 „

78

w.

210 „

1,5 Kan.-S. 26

2 Tg. 1,0 dgl.

5,0

20 „

98

w.

190 „

0,4 ^1.

3Tg. 1,0 dgl.

5,0

5 „

93

w.

250 „

1,0 ]^n.-S. 25

3Tg. 1,0 dgl.

4,0

5 „

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Beitiiige zur fiiologie der mftnnlichen Qeschlechtszellen.

47

Der Eintritt des Todes ist nicht genau festgestellt, die
Tiere warden zu den angegebenen Stunden totgefunden. Stets
war eine LungenblSbiung sehr deutlich nachweisbar.

Die subkutane Sensibilisiernng gelingt nicht nnr mit dem
arteigenen Hoden, sondern l&Bt sich auch erzielen, wenn
Extrakt des eigenenHodens dem Versuchstier eingespritzt
wird. Die zweite Injektion mit dem Hodenextrakt eines Tieres
der gleichen Art macht alsdann akuten anaphylaktischen Tod.

TabeUe XXXV.

Subkutane Sensibilisierung mit dgenem Hoden. Eeinjektion mit art-

gldchem Hoden.

Tier

Ge-

schlecht

Ge-

'wicht

Subkutan

Eeinjektion nach

Kan. 95

m.

1440 g

0,1 eig. Hoden (1:2)

21Tg.0,4Kan.-H. (1:2)

0,25

3

MS. 453

m.

450 „

0,1 „ „ (1:2)1

16 „ 5,0MS.-Hod.(l:2)

11,0

4

Nach diesen Beobachtungen schien es auch mbglich, dafi das
Versuchstier nicht allein mit seiner eigenen Hodensub-
stanz sensibilisiert werden kann, sondern dafi auch nach
dieser Sensibilisierung durch eine intravendse Reinjektion
mit dem eigenen Hoden der anaphylaktische sWk nnd
Tod hervorgerufen wird (Tabelle XXXVI).

TabeUe XXXVI.

Subkutane Sensibilisierung und Eeinjektion mit eigenem Hoden.

Tier

Ge-

schlecht

Ge-

wicht

Subkutan

Eeinjektion nach

Tier

Tod in
Min.

S[an.l06

m.

1400 g

0,5 eig. Hoden (1:2)

20 Tg. 0,4 g eig. Hod. (1:2)

0,27

3

MS. 454

m.

0,2 „ „ ri: 2 )

16 „ 3,2,, „ „ (1:2

7,0

E[rmnpfe

„ 407

m.

670 „

0,3 ,, „ (1:2)

21 „ 6,7„ „ „ (1:2)

10,0

4

Es wurde bei dieser Versuchsreihe dem Tier zuerst ein
Hoden entfernt und sein Extrakt zur subkutanen Sensibilisierung
benutzt. Nach mehreren Wochen wurde auch der zweite
Hoden abgetragen und dieser zur intravenbsen Reinjektion
benutzt. Es unterscheidet sich der Ausfall dieses Versuches
nicht von Sensibilisiernngsversuchen mit anderen artfremden
Organextrakten.

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48

R Orafenberg imd J. Thies,

Hit der gleichen Methodik, die den Versuchen Uhlen-
hnths^ fiber die Biologie der Linse entlehnt ist, hat Uhlen-
huth exakt nachweisen kfinnen, daB die Linse des tierischen
Auges ein dem fibrigen Organismus artfremdes Gebilde ist.
Die exzeptionelle Stellung des LinseneiweiBes gegenfiber dem
fibrigen Kfirpereiweifi findet in unseren Versuchen ein Analogon.

Wir fiberzeugen uns, daB nichtnur die Linse, sondern
ebenso auch das Hodengewebe ffir das eigene In-
dividuum wie artfremdes EiweiB wirkt.

Die Parallele zwischen der biologischen Sonderstellnng
der Linse und dem artfremden EiweiB des eigenen Hodens
IfiBt sich noch enger ziehen. Uhlenhuths interessante Ver-
suche zeigten nicht nur, daB die Linse kdrperfremdes EiweiB
enthfilt, sondern sie wiesen auch exakt nach, daB die Linsen-
substanz in der ganzen Tierreihe die gleiche biologische Wertig-
keit hat. An die Stelle der Artspezifizitfit trat die Organ-
spezifizitfit der Linse.

Auch der Hoden erscheint ffir seinen Trftger nicht art-
spezifisch. Aus den Untersuchungen Dunbars wissen wir,
daB diemfinnlichenGenerationszellenvonPflanzen
und Fischen eine ausgesprochene Organspezifizitfit
besitzen.

Mit Hilfe der Komplementablenkung und der Prfizipitation
hat Dunbar bei der biologischen Prfifung der Pollenextrakte
spezifische Differenzen gegenfiber dem Extrakte der fibrigen
Pflanzenteile gefunden. Es verhielt sich das PolleneiweiB der
Roggenpflanze zu dem EiweiB der Blfitter, der Stengel und
der Wurzeln derselben Pflanze wie artfremdes EiweiB. Selbst
in starken Verdfinnungen der Extrakte trat eine vollstllndige
Komplementablenkung ein und das Pollenserum gab keine
Prfizipitation mit den Extrakten der fibrigen Pflanze. Auch
die biologische Prfifung mit Fischsperma lehrte Dunbar,
daB die mfinnlichen Geschlechtszellen dieser Tiere sich gegen
andere Gewebebestandteile desselben Organismus artfremd
verhalten.

Die Ergebnisse der komplementbindenden und prfizi-
pitierenden Versuche an Fischen wurden auf eine breitere

1) Uhlenhuth, Festschrift zum 60. Grebnrtstage R. Kochs, 1903.

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Beitrage zur Biologic der maimlichen Goschlechtszellen.

49

Basis gestellt, als Danbar die Biologie der mEnnlichen Ge*
schlechtszelleD der Fische mit Hilfe der anaphylaktischen
Methodik erforschte. Wenn auch diese Methode fiir die Be-
antwortung der Fragestellung nicht sonderlich geeignet war,
so konnte dock auch im anaphylaktischen Versuch eine Organ-
spezifizit&t des Rogen- und Spermaeiweifies nicht selten be-
obachtet werden.

Wir haben die bedeutungsvollen Beobachtungen Dunbars
eingehender wiedergegeben, weil sie im Zusammenhang mit
den Ergebnissen unserer Untersuchungen einen interessanten
Einblick in die biologisch unabhUngige Stellung der Geschlechts-
organe gestatten. WShrend die eigentumliche prim^e Toxizitit
des arteigenen und sogar auch des individuumeigenen Hodens
im Verein mit den weiteren erfolgreichen Sensibilisierungs-
versuchen fflr eine ftlr den eigenen Organismus artfremde Be-
deutung der Hodensubstanz sprechen, wurden die Beziehungen
zwischen dem HodeneiweiB der verschiedenen Tiere erst durch
folgende Versuchsreihe gekllb't. Wir haben Kaninchen und Meer-
schweinchen mit Hodensubstanz verschiedener Tiere subkutan
sensibilisiert und diesen Tieren nach einigen Wochen Hoden-
extrakte injiziert, die von anderen Tierarten gewonnen waren
als von jenen, die das Material fiir die subkutane Sensibili-
sierung geliefert batten. Es waren also die Extrakte der ersten
und der zweiten Injektion aus vdllig artfremden Organen
hergestellt.

TabeUe XXXVII.

Kaninchen. SensibUisierung und Beinjektion mit artverschiedenen Hoden'

extrakten.

Tier

Gie-

schlecht

Ge-

•fflicht

Subkutan

Beinjektion nach

pro kg
Tier

Tod in
Min.

Kan. 123

w.

1640 g

0,2 Stierhoden (1:2)

16Tg.9,0MS.-Hod. (1:2)

5.0

3

„ 125

m.

1500 „

0,1 MS.-Hoden (1:2)

20 „ 4,5Stierhod. (1:2)

3,0

4

» 96

w.

1650 „

0,1 K^.-Hod. (1:2)

18 „ 6,6 MS.-Hod. (1:2)

4,0

4

Trotz der SensibUisierung mit Hodenextrakt differenter
Tierarten wurde durch Reinjektion mit subletalen Mengen von
Hodensubstanz der akute anaphylaktische Krampftod ausgeldst.
Diese Erfolge stimmen mit unseren Erfahrungen bei Meer-
schweinchen hberein.

Zeitaehr. f. ImmanitMtsfonchung. Orlg:. Bd. X. 4

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50

E. Griifenberg und J. Thies,

Tabelle XXXVIII.

Meerschweinchen. Sensibilisierung und Eeinjektion mit artverBchiedenen

Hodenextrakten.

Tier

Ge-

schlecht

Ge-

wicht

Subkutan

Reinjektion nach

Tier

Tod in
Min.

MS. 457

m.

240 g

0,2 MS.-Hoden (1:2)

37 Tg. 9,6 Stierhoden (1:2)

40,0

2

„ 417

m.

220 „

0,4Kan.-Hod. (1:2)

20 „ 3,1 M8.-Hod. (1:2)

14,0

5

„ 431

m.

400 „

0,2 Stierhoden (1:2)

1

22 „ 3,0Kan.-Hod.(l:2)

1

7,5

Unrnhe,

schlapp,

Temper.-

StUTZ

„ 459

m.

150 „

0,2MS.-Hoden (1:2);15 „ 2,0Kan.-Hod. (1:2)

13,0

Elrampfe

Auch Meerschweinchen werden bei der Reinjektion von
differentem Hodenextrakt akut getdtet. Es sei erwfihnt,
dafinichtsensibilisierteKontrolltierediegleiche
Menge Hodenmaterial anstandslos vertragen
haben.

Es ist also nicht notwendig, bei den Versuchen mit
Hodenextrakten fur die Reinjektion das gleiche Material wie
fdr die Sensibilisiernng zu verwenden. Ein mit Stierhoden
vorbehandeltes Kaninchen gebt im anaphylaktischen Shock auch
zugrunde, wenn man ihm bei der zweiten Injektion Meer-
schweinchenhoden oder Kaninchenhoden einspritzt in einer
Dosis, die beim normalen Tier nicht toxisch wirkt.

Diese biologische Substitutionsfhhigkeit ist nur mdglich,
wenn das Eiweifi der artverschiedenen Hoden biologisch bia
zu einem gewissen Grade verwandt ist. Die mSnnliche
Geschlechtsdrflse besitzteinegewisse Organspezifi-
zitht, wie sie fdr die Linse des Auges (Uhlenhuth) und
die Hornsubstanzen der KdrperoberflSche [Krusius^)]
ermittelt ist.

Gegendber der Organspezifizitdt des Hodenge-
webes tritt die Artspezifizitdt mehr in den Hintergrund.
Sie ist aber vorhanden, wie nnsere Sensibilisierungsversuche
lehren. Kaninchen reagieren nach Vorbehandlung mit art-
eigenem Hoden doch exakter auf die Reinjektion mit dem
gleichen arteigenen Material, als wenn ihnen die Hodensubstanz
einer anderen Tierspecies einverleibt wurde.

Auch die Linse entbehrt trotz ihrer OrganspezifizitSt
nicht einer gewissen Artspezifizitdt, die nur nach den neuesten

1) Krusius, Zeitschr. f. Immunitatef., 6d. 5.

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Beitr^e zur Biologie der m^nlichen Greschlechtszellen.

51

UntersuchuDgen von Krusius hinter der OrganspezifizitS.! er-
heblich zurficktritt.

Worauf die grdBere Empfindlichkeit normaler Tiere gegen
die Injektion des arteigenen Hodens beruht, mfissen wir
dahingestellt sein lassen.

Schon von verechiedenen Sdten ist das Problem der biologischen
Bedeutung der Geschlechtszellen zu losen versucht worden. Bereits
Metschnikoff‘) und Landsteiner*) machten die Entdeckung, dafi
ein Immunserum gegen Spermatozoen ekiatante, sch^igende Wirkung auf
Bpermatozoen anszuuben pflegt und diese durch die Produktion lytischer
Substanzen schnell zu zerstdren vermag. Diese Untersuchungen weisen vor
allem auch auf die SondersteUung der mannlichen Greschlechtszellen hin.
Es liefien sich namlich die Versuchstiere nicht nur gegen die Spermatozoen
fremder Tierspecies immunisieren, sondem auch gegen die arteigenen Sper¬
matozoen, das Immunserum war sogar toxisch fiir die Spermatozoen des
gleichen Tieres, von dem das Immunserum gewonnen war. Diese bio-
logische Eigentiimlichkeit wird uns jetzt ohne weiteres verstandlich, es ver-
hiQt sich das Spermatozoon wie ein artfremdes Produkt des eigenen Korpers,
deshalb l^t es sich zu Immunisierungszwecken bei artgleichen Individuen
benutzen.

Da6 man bei Heren mit mehrfacher Injektion von artfremdem Sperma
Erschdnungen ausldsen kann, die wir jetzt als anaphylaktische Symptome
zu deuten pflegen, hat auch Wolff-Eisner*) schon zeigen kdnnen. Wenn
Meerschweinchen menschliche Spermaflussigkeit in einer relativen Menge
von 1,0 pro 100 g Tier einmal eingespritzt worden war, so pflegte die Re-
injektion nach einem Intervall von mindestens einer Woche den vom ana-
phylaktischen Shock bekannten Symptomenkomplex, der mit Temperatur-
sturz, Mattigkeit, Dyspnoe und Tod einhergeht, hervorzurufen.

Pfeiffer^) hat durch wiederholte Injektionen von Nebenhodenextrakt
dee Stieres keine ausgepi%ten Anaphylaxiesymptome bei der Beinjektion
auszuldeen vermocht. Nur mit Hilie der durch Pfeiffer ausgearbeiteten
und verfeinerten Methodik zum Nachweis der anaphylaktischen Beaktion
liefien sich spezifische Beaktionen nachweisen, die zwar auch nach Injektion
von Niereneiweifi oder Blutserum auftraten, aber doch graduell so von
diesen different waren, dal3 sie als spezifische Immunisierungssubstanzen
gedeutet werden konnten. Es mufite demnach das EiweiB des Nebenhodens
von dem der iibrigen Edrperzellen biologisch so different sein, dafi es von
diesen durch die Differenz in dem Aus&ll der anaphylaktischen Beaktion
getrennt werden konnte.

1) Metschnikoff, Ann. de I’Inst. Pasteur, 1900.

2) Landsteiner, Centralbl. f. Bakt., 1899.

3) Wolff-Eisner, Centralbl. f. Bal^, 1904.

4) Pfeiffer, Zeitschr. f. Immunitatsl, Bd. 7, 1910.

4*

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52 Grafenberg und Thies, Biologic der mannL Geschlechtszellen.

Becht interessant sind die Beobachtungen von Dungern und Hirsch>
feld*) an Eaninchen, denen Hodengewebe in die Subkutis des Ohres ein>
gespritzt war. Normale mannliche und weibbche Tiere zeigten keine lokale
Erscheinungen, wenn ihnen arteigenes oder artfremdes Hodengewebe in-
jiziert wurde. Dagegen reagierten alle trachtigen Eaninchen sofort mit der
Auebildung einee erheblichen lokalen Ocdcms, und zwar trat diese Beaktion
bei trachtigen Tieren auf die Injektion mit Hodengewebe einee jeden Tierea
auf. Dieee Versuche, die alsbald von Schenk®) bestatigt werden konnten,
fielen bei nicht trachtigen Tieren stete negativ aus.

Auch unsere Versuche haben gelehrt, daO die trachtigen Here auf
die Injektion von Hoden kraftiger reagieren als die nichttrachtigen Tiere.
Ebenso wie Dungern-Hirschfeld und Schenk eine lokaleSchadigung
der Haut des tr^htigen Tieres durch die subkutanen Hodeninjektionen
hervomifen konnten, die bei den nichttrachtigen Tieren fehlte, konnten wir
nachwcisen, daB die trachtigen Tiere weniger Hodensubstanz bei der intra-
venosen Zufuhr vertragen. Hier wie dort war es ohne Belang, ob art¬
fremdes Hodengewebe fur die Injektionen benutzt worden war.

Diese erhohte Empfindlichkeit der trachtigen Tiere gegeniiber der
intravenosen Injektion von Hodenextrakt ist auch nicht ohne ElinfluB auf
das Schwangerschaftsprodukt. Fast r^elmiiBig wird die intravenbse In¬
jektion des Hodengewebes von den triichtigen Heren mit dem schleunigen
Eintritt der Geburt bezw. Abort beantwortet.

Die Deutung unserer Versuchsergebnisse, die primare Toxizitat des
arteignen und gar des individuumgleichen Hodenextraktes wird angesichts
der Beobachtungen Dunbars bei Pdanzen und Fischen verst&ndlich.

Zusammenfassung.

1) M^nliche geschlechtsreife Tiere siod gegen Hoden-
substanzen physiologischerweise empfindlich und vertragen bei
der intravenbsen Injektion von Hodenextrakten weniger als
gleichgroBe weibliche Tiere.

2) Noch empfindlicher sind noch nicht geschlechtsreife,
kleine Tiere, doch zeigen sie keinen Unterschied in der Re-
aktion der Geschlechter.

3) Am empfindlichsten gegen die Hodeninjektion sind
kastrierte mannliche und trkchtige Tiere.

4) Der Hoden wirkt fflr seinen TrSger wie eine artfremde
Substanz, die eine ausgesprochene Organspezifizittlt besitzt.

1) Dungern und Hirschfeld, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd.4,1910.

2) Schenk, Miinch. med. Wochenschr., 1910.

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Dold, Ueber die Giftigkeit von wasserigen Orgiuiextrakten etc. 53

Naehdncck verboien.

[Aus dem Kaiserlichen Gesundheitsamt in Berlin.]

Ueber die Giftigkeit Ton wSsserlgen Oi^anextrakten nnd
die enl^iftende Wirknng ft’isehen Serums.

Von H. Dold.

(E^ingegangen bei der Eedaktion am 29. M^z 1911.)

Gelegentlich einer Reihe von Tuberkulosestudien, welche
auf der bakteriologischen Abteilung des Kaiserlichen Gesund-
heitsamtes unter Leitung von Herrn Regierungsrat Neufeld
ausgefQhrt warden, sind auch einige neuere Arbeiten fiber
Tuberkulosefiberempfindlichkeit und Tuberkulosegifte nach-
geprfift worden. So wurden die Angaben Bails, dafi es
mdglich sei, durch intraperitoneale Injektion von tuber-
kulfisem Organbrei die Tuberkulinfiberempfindlichkeit passiv
auf gesunde Meerschweinchen zu fibertragen, von Neufeld
und mir einer Nachprfifnng unterzogen. Wir kamen dabei
in Uebereinstimmung mit den inzwischen erschienenen Arbeiten
von Joseph und Kraus, Lfiwenstein und Volk zu nega-
tiven Resultaten; eine Uebertragung der Tuberkulin¬
fiberempfindlichkeit ist uns nie gelungen, dagegen
fanden wir eigentfimliche Giftwirkungen der verriebenen
Organe.

Wir haben ferner die Mitteilung Friedbergers, daB
sich aus verschiedenen Bakterien und auch aus Tuberkelbacillen
durch Zusammenwirken von Ambozeptor und Komplement ein
ffir Meerschweinchen bei intravendser Injektion akut tddliches
Gift gewinnen IfiBt, bestfitigen kfinnen, allerdings mit der Ein-
schrfinkung, daB die Gewinnung des Giftes, im Gegensatz zu
anderen Bakterien, bei Tuberkelbacillen schwieriger nnd
unregelmfiBiger erfolgt.

Auch Friedberger hat nach einer neueren Mitteilung
in Gemeinschaft mit Schfitze nur in einem Teil seiner Ver-
suche ein akut tddliches Gift erhalten. Die Autoren erklfiren
dies damit, daB ein bestimmtes Mengenverhfiltnis zwischen
Antigen, Ambozeptor und Komplement ffir die Gewinnung
des Giftes nfitig sei, wfihrend wir auf Grund unserer zahl-

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54

H. Dold,

reichen Versuche den Eindruck gewonnen haben, dafi die
Virulenz des Tuberkelbacilleostammes neben anderen Faktoren
auch ein wesentliches Moment darstellt, und dafi die Bildung
geniigender Giftmengen aus weniger virulenten Tuberkel-
bacillen leichter erfolgt, als aus hochvirulenten Bacillen. Die
erwUhnten Versuche werden alsbald an anderer Stelle aus*
fflhrlich mitgeteilt werden.

Auf Veranlassung von Herrn Regierungsrat Neufeld
babe ich auch die Angaben von Kraus und Volk, dafi sich
aus tuberkuldsen Meerschweinchenorganen durch Extraktion
mit physiologischer Kochsalzlosung akut giftige Stoffe gewinnen
lassen, nachgeprfift. Diese giftigen Extrakte warden in der
Weise hergestellt, dafi die frisch entnommenen tuberkuldsen
Organe im Morser zerquetscht und mit physiologischer Koch-
salzldsung extrahiert wurden. Der Organbrei wurde sofort
durch steriles Filterpapier filtriert. Das Filtrat erwies sich
bei intravenoser Injektion akut giftig fflr Meerschweinchen.
Auf dieselbe Weise hergestellte Extrakte normaler Organe
wirkten nicht giftig. In einer neueren Mitteilung fanden die
Autoren nunmehr auch Extrakte normaler Meerschweinchen-
lungen giftig, wILhrend Extrakte aus anderen normalen Organen
ungiftig waren. Damit scheinen die Autoren ihre erste Auf-
fassung von der SpezifitSt der Gifte aufgegeben zu haben.
Bei meinen NacbprQfungen babe ich mich an die von Kraus
und Volk angegebene Technik gehalten.

Die Organe (Milz, Lungen) wurden den frisch getoteten tuberkuldsen
Tieren mit sterilen Instrumenten entnommen, im Mdrser zerschnitten und
mit sterilem Scesand unter langsamem Zusetzen von 10 —25 ccm steriler,
physiologischer Kochsalzlosung zerquetscht. Der Organbrei wurde teils
durch steriles Filtrierpapier filtriert, teils durch ein sterUisiertes Tuch koUert
und dann noch zentrifugiert. In jedem Falle erhalt man einen von grdberen
Fartikeln freien Extrakt. Dieser Extrakt wurde sofort intravends teils
Eianinchen, teils Meerschweinchen injiziert.

Auf Grund zahlreicher Versuche kann ich in Ueberein-
stimmung mit Kraus, Volk und L5wenstein feststellen,
dafi die auf die oben geschilderte Weise gewonnenen wfisserigen
Extrakte tuberkulSser Meerschweinchenorgane bei intra-
venSser Injektion akut giftige Wirkungen entfalten, und
kann hinzufilgen, dafi dasselbe von tuberkuldsen Organextrakten
von Kaninchen, Ziegen und dem Menschen gegenfiber

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Ueber die Giftigkeit von wasserigen Oiganextrakten etc.

55

Meerschweinchen uod Kanmchen, die ich als Versuchstiere
benutzte, gilt.

Aber im Gegensatz zu den genannten Autoren
ergab sich aus meinen Versuchen, daB auch die
auf dieselbe Weise hergestellten wilsserigen Ex-
trakte aus alien untersuchten normalen Organen
(Lunge, Milz, Niere, Hoden, Gehirn, Muskel,
Leber) eine solche akute Giftwirkung bei intra-
vendser Injektion zeigen, wenn man nur an-
nfihernd gleiche Organmassen extrahiert und
vergleicht. Es w&re natdrlich falsch, wenn man z. 6. den
Extrakt aus einer normalen Meerschweinchenmilz mit dem
aus einer vielleicht um das 10-fache vergrSBerten tuberkuldsen
Milz vergleichen wollte.

Wenn sich auch danach die Auffassung von Kraus, Volk
und Ldwenstein, daB es sich bei diesen Giften um spezi-
fische Tuberkulosegifte handelt, wohl kaum aufrecht erhalten
l&Bt, so haben doch diese Versuche mit den wBsserigen Ex-
trakten in anderer Hinsicht so interessante, allerdings mehr
ins Gebiet der Physiologie fallende Resultate gezeitigt, daB eine
tabellarische Wiedergabe der Versuche gerechtfertigt erscheint.

In den folgenden Tabellen sind der E^infachhdt halber nur die Todee-
fade rermerkt; wo kein Todesfall eintrat, ist die Wirkiing als 0 bezeichnet.
Bei Meerschweinchen, wo die Wirkung der Ehctrakte im allgemeinen weniger
akut ist, liegt das Tier bis zu seinem Tode in einem von Krampfen unter-
brochenen komatdsen Zustand. Auffallend war in einigen Fallen, dafi bei
solchen im Koma dali^enden Meerschwdnchen die bloSe Beruhrung E^rampfe
verursachte.

Die Extrakte wurden samtlich intravenos injiziert, mit
Ausnahme der Versuche, wo ausdriicklich ein anderer In-
jektiousmodus vermerkt ist.

Wirkung tuberkuldser Meerschweinchen-Organ extrakte auf
gesunde Meerschweinchen.

No.

Extrakt aus

Injizierte

Menge

1 ccm 1

Injiziertes

Tier

Wirkung

1

1 Lun^ + 1 Milz mit 25 ccm
physiol. Kochsalzldsung

3,0

Meerschw.

t 2(y

2

Derselbe Extrakt

2,5

j?

t 3'

3

1 Lunge -f 1 Milz mit 20 ccm
EbchsaMfieung

4,0

>7

t 4'

4

Derselbe Extrakt

3,0

77

t 8'

5

» >»

2,0

77

t 3'

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56

H. Dold,

No.

Extrakt aus

Injizierte

Menge

ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

6

7, Lunge (stark tuberkulos) mit
25 ccm Kochsalzlosung

! 1,0

;

Meerschvv.

0

7

Derselbe Extrakt

4,0

t 5-

8

Vo Lunge (stark tuberkulos) -h

1 *25 ccm Kochsalzlosiing

1,0

>>

9

Derselbe Extrakt

2,0

1 t 20'

10

1 2,0

1 t 15'

Wirkung tuberkiiloBcr Kaninchen-Organextrakte
aiif gesunde Kaninchen.

No.

Extrakt aus

Injizierte

Menge

ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

11

Perlsuchtlunge mit 25 ccm

1,0

Kaninchen

0

physiol. Kochsalzlosiing

1

1

12

Dersdbe Extrakt

2,0

1

0

13

4,0

' i

t 3'

14

1 Perlsuchtlunge mit 30 ccm

5,0

1

t 3'

15

4,0

t 3'

Kochsalzlosung

16

Derselbe Extrakt

1,0

t 3'

17

ff

0,25

0

18

0,1

0

19

V, Perlsuchtlunge mit 15 ccm

4,0

11

0

Kochsalzidsung (durch Berke-

feld-Filter filtriert)

Wirkung tuberkuloser Meerschweinchen-Organextrakte
auf gesunde Kaninchen.

No.

Extrakt aus

Injizierte
Menge 1
ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

20

1 Lunge + 1 Milz mit 25 ccm
physiol. Kochsalzlosung (der¬
selbe Extrakt wie bei No. 1 u. 2)

5,0

Kaninchen

0

21

Derselbe Extrakt

6,0

11

0

22

1 Lunge + 1 Milz mit 20 cem
phvsiol. Kochsalzlosung (der¬
selbe Extrakt wie bei No. 3,
4 und 5)

5,0

1

11

. 1

0

23

V 2 Lunge (stark tuberkulos) mit
25 ccm phvsiol. Kochsalzlosung
(derselbe ^Ixtrakt wie bei No. 6
imd 7)

5,0

11

0

24

V, Lunge mit 25 ccm physiol.
Kochsalzlosung (derselbe Ex¬
trakt wie bei No. 8, 9 und 10)

4,0

11

0

25

Derselbe Extrakt

8,0

11

0

25a

1 Lunge + 1 Milz mit 12 ccm
physiol. Kochsalzlosung

10,0

intrap.

19

0

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Ueber die Giftigkeit von wasserigen Organextrakten etc.

57

Wirkung tuberkuloeer Kaninchen-Organextrakte
auf gesunde Meerschweinchen.

No.

Extrakt aus

Injizierte

Menge

Injiziertes

Tier

Wirkung

ccm

26

Perleuchtlunge mit 25 ccm physiol.
Kochsalzldsung (derseloe Ex-

2,0

Meerschw.

0

trakt wie bei No. 11—14)

27

Derselbe Extrakt

3,0

0

28

5,0

0

29

Perbuchtlunge (stark tuberkulos)

4,0

>>

t 5'

mit 30 ccm physiol. Kochsalz¬

ldsung (derselM Extrakt wie
bei I^. 15—18)

i

30

Derselbe Extrakt

1,0

7?

t 12'

Wirkung tuberkuloser Organextrakte einer Ziege
auf gesunde Meerschweinchen und Kaninchen.

Na

Elxtrakt aus

Injizierte

Menge

Injiziertes

Tier

Wirkung

ccm

31

32

15 g tuberkuldse Ziegenlunge mit
15 ccm physiol. Kochsalzldsung
Derselbe Extrakt

5,0

2,0

Kaninchen

Meerschw.,

mittelgrofi

t 2'

t I*-

Wirkung einestuberkulosenLungenextraktes vom Menschen
auf ein gesundes Kaninchen.

No.

Extrakt aus

Injizierte

Menge

ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

33

15 g tuberkuldser Menschenlunge
mit 15 ccm physiol. Kochsalz¬
ldsung

4,0

Kaninchen

t 3'

Wirkung erhitzter Organextrakte auf gesunde Meer¬
schweinchen und Kaninchen.

No.

Extrakt

Dauer der
Erhitzung

Injizierte
j Menge
ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

34

Derselbe Extrakt wie
bei No. 1 u. 2

V,'* bei60»C

4,0

Meerschw.

' 0

35

Derselbe Extrakt

dgl.

5,0

77

0

36

Derselbe Extrakt wie
bei No. 3, 4 u. 5

20' bei 58®C

5,0

77

i t 10^

37

Derselbe Extrakt

dgl.

5,0

77

1 t8'

38

Derselbe Extrakt wie
bei No. 11—14

•/«'■ babO^C

5,0

Kaninchen

1 0

39

Derselbe Extrakt

dgl.

5,0

77

0

40

Derselbe Extrakt wie
bei No. 15—18

V,"* bei 60® C

1,0

77

t 3'

41

Derselbe Extrakt wie
bei No. 35 u. 36

dgl.

3,0

0

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58

H. Dold,

Abschwachung der Wirkung der Extrakte durch Stehen-
lassen bei Zimmertemperatur.

No.

Extrakt

Bei Zimmer¬
temperatur

Injizierte j
Menge
ccm

iDjiziertes

Tier

Wirkung

42

Derselbe Extrakt wie

3 Tage

2,0

Kaninchen

0

bd No. 15-18

Wirkung tuberkuloser Organextrakte auf tuberkulose Tiere.

No.

1 Ektrakt

1 injizierte
Menge
ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

43

Derselbe Extrakt wie bei No. 6 u. 7

0,4

Meerschw.

0

44

Derselbe Extrakt wie bei No. 15—18

0,1

Kaninchen

0

45

Derselbe Extrakt wie bei No. 32

0,04

Meerschw.

0

Wirkung von Extrakten normaler Organe auf gesunde
Kaninchen und Meerschweinchen.

No.

Extrakt aus

Injizierte

Menge

ccm

Injiziertes

Tier

Wirkung

46

2 Lxmgen + 2 Miizen von Meer¬
sch weinchen rait 20 ccm physiol.
Kochsalzlosung

4,0

Meerschw.

Eoma
t 5“

47

Lunge + Milz von Kaninchen
mit 20 ccm Kochsalzlosung

4,0

Kaninchen

t 3'

48

Derselbe Extri^t

2,0

t 5'

49

4,0

>»

t 3'

50

4.0

Meerschw,

t 15

51

1

1 Gehirn von Kaninchen mit
20 ccm Kochsalzlosung

4,0

Kaninchen

t 3'

52

Derselbe Extrakt (durch Berke-
feld-Filter filtriert)

9,0

»

0

53

1 Lunge von Kaninchen mit
20 ccm Kochsalzlosung

4,0

t 2'

54

Derselbe Extrakt (durch Berke-
feld-Filter filtriert)

4.0

>>

0

55

2 Miizen von Kaninchen mit
10 ccm Kochsalzlosung

. 2,0.

n. 3' weitere
3,0 ccm

0

56

1 Gehim von Kaninchen mit
20 ccm Kochsalzlosung, I** auf
56® erhitzt

4,0

>>

t 3'

57

Derselbe Extrakt, 1** auf 60—61 ®
erhitzt

4,0

7t

0

58

1 Leber + 1 Lunge + 1 Milz
von Meerschweincnen rait 20 ccm
Kochsalzlosung

15,0

intrap.

Meerschw.

0

59

Derselbe Extrakt

12,0

subkutan

0

60

1 Lunge + 1 Milz von Kaninchen
mit 15 ccm Kochsalzlosung

12,0

intrap.

Kaninchen

0

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Ueber die Giftigkeit von wasserigen Organextrakten etc.

59

Aus einer Betrachtung der tabellarisch wiedergegebenen
Versuchsresultate mit den w&sserigen Extrakten normaler und
tuberkulSser Organe ergibt sich:

1) Dafi sich sowohl aus gesunden wie aus tuber-
kulbsen Organen mit physiologischer Kochsalzldsung Ex-
trakte gewinnen lassen, welche — intravenbs eingespritzt —
auf Kaninchen und Meerschweinchen akut tddlich wirken.

Wird eine nntertddliche Dosis eingespritzt, so Qberstehen
die Tiere meist den Eingriff (cfr. Versuch No. 6, 8, 11, 12, 17,
18); das gleiche ist oft der Fall, wenn eine an sich tddliche
Dosis nicht auf einmal eingespritzt wird (cfr. Versuch 55). Die
Giftigkeit der Organextrakte scheint der Starke der Extrakte
zu entsprechen, d. h. proportional der extrahierten Organmasse
und umgekehrt proportional der zur Extraktion verwendeten
Menge physiologischer Kochsalzldsung zu sein.

2) Die Organextrakte wirken bei intraperitonealer und
subkutaner Verabreichung nicht toxisch (cfr. Versuch No. 25 a
58, 59 und 60). Obgleich die Tiere zum Teil die 3—4-fachen
Mengen der intravends akut tddlichen Dosis subkutan bezw.
intraperitoneal injiziert bekamen, zeigten sie keinerlei be-
merkenswerte Erscheinungen nach der Injektion.

3) Die Organextrakte sind fdr die homologe
Tierart relativ giftiger als fflr die heterologe.
Dies geht besonders aus den Versuchen 13 und 14 und 26—28
hervor, die mit demselben Perlsuchtlungenextrakt angestellt
wurden. W&hrend 5 ccm dieses Extraktes Kaninchen inner-
halb 3 Minuten tdteten, vertrugen die viel kleineren Meer¬
schweinchen 2, 3 ja 5 ccm desselben Extraktes. Eine Hhnliche
relativ grdfiere Widerstandsf&higkeit zeigten Meerschweinchen
in den Versuchen 29 und 30. Ein starker Perlsuchtlungen¬
extrakt, von dem 1 ccm ein Kaninchen innerhalb 3 Minuten
tdtete, wirkte auf Meerschweinchen relativ viel schw^her,
indem 4 ccm innerhalb 5 Minuten, 1 ccm erst innerhalb
12 Minuten tdteten.

Andererseits wirkten Meerschweinchenorganextrakte, welche
Meerschweinchen in Dosen von 2—4 ccm tdteten, in Dosen
von 4—8 ccm auf Kaninchen nicht tddlich (cfr. Versuch 1—10
und 20—25).

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60

H. Dold,

Die Wirkung der Organextrakte (der homologen wie der
heterologen) auf Kaninchen und Meerschweinchen ist in
mehreren Punkten verschieden. WShrend die Kaninchen fast
unmittelbar nach der Injektion taumeln, fallen und innerhalb
2—3 Minuten zugrunde gehen, dauert es beim Meerschwein¬
chen bis zum Tode 3—20 Minuten, wShrenddessen das Tier
meist in einem komaahnlichen, oft scheintodartigen Zustande
daliegt und bei Berflhrungen krampfartige Bewegungen macht.

4) Die Giftigkeit der Extrakte wird abgeschw&cht bezw.
ganz vernichtet:

a) durch mehrtagiges, einfaches Stehenlassen bei Zimmer-
temperatur (cfr. Versuch No. 42). Dies haben schon Kraus
und Volk for ihre tuberkulbsen Organextrakte festgestellt;

b) durch V 2 —l-stiindiges Erhitzen auf 60® C (cfr. Ver-
suche 34—41 und 57). Eine halbstiindige Erhitzung auf 60®
geniigt nicht imraer; dies zeigt Versuch No. 40. Bei der Er¬
hitzung auf 60—61 ® C wird ein Prazipitat gebildet, das sich
durch SchQtteln fein verteilen und so injizieren ISfit Die Ent-
giftung der Extrakte h&ngt mbglicherweise mit der Bildung
dieses Prtizipitates zusammen;

c) durch Filtration durch Berkefeld-Filter (cfr. Versuch
19, 52 und 54). Die vollige Entgiftung durch Filtration
geht besonders deutlich aus Versuch 51 und 52 hervor, wo
9 ccm des filtrierten Extraktes ungiftig waren, wS,hrend 4 ccm
des unfiltrierten Extraktes innerhalb 3 Minuten tbteten.

5) Tuberkuldse Tiere zeigen zum mindesten keine starke
Ueberempfindlichkeit gegenOber den Extrakten aus tuber-
kulbsen Organen. Dies ergibt sich aus den Versuchen No. 43,
44 und 45. Der zehnte Teil der fflr gesunde Kaninchen und
Meerschweinchen letalen Dosis des Extraktes wurde von dem
tuberkulosen Kaninchen (No. 44) und den tuberkulosen Meer¬
schweinchen (No. 43 und 45) anstandslos vertragen.

Die wUsserigen Extrakte aus tuberkulosen Organen ent-
halten also keine Gifte von tuberkulinahnlicher Wirkung.

Es handelt sich demnach um ein nicht-spezi-
fisches, aus alien bisher untersuchten Organ-
geweben (Lunge, Milz, Gehirn, Leber, Niere, Hoden, Muskel)

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Ueber die Giftigkeit von wasserigen Organextrakten etc.

61

durch physiologische Kochsalzl5sung extrahier-
bares Gift, das, wie es scheiot, den Physiologen bisher
nicht bekannt ist.

Aus den uns bekannten Angaben der Literatur dber Gift-
wirkungen von Extrakten aus normalen Organen seien znn&chst
die Mitteilungen von Brieger und Uhlenhuth hervor-
gehoben, die insofern eine besondere Stellung einnehmen, als
dort unseres Wissens zum ersten Male fiber die giftige Wirkung
von Organen der gleichen Tierart berichtet wird. Brieger
und Uhlenhuth injizierten Meerschweinchen subkutan mit
verschiedenen, in Kochsalzlosung verriebenen Organen (ca. 1 g
Substanz) derselben Tierart und fanden, daB die Tiere inner-
halb 12—24 Stunden zugrunde gingen. Die Tiere zeigten bei
der Sektion meist eine eigentflmliche Rotung der N6bennieren.
Bei sorgfBltiger Verreibung des Organbreies nach der Ein-
spritzung und guter Resorption des Organbreies zeigte sich
keine Giftigkeit. Die Gifte vertrugen eine viertelstttndige
Erhitzung auf 70®, nicht aber eine halbstOndige auf 80®.

Con radi injizierte Organprefisafte heterologer Tierarten sowie Auto¬
lysate von Organen homologer und heterologer Tiere Kaninchen intravends
und beobachtete dabei oft akute Todesf^e.

W. A. Schmidt spritzte ELaninchen mit Binder- und Menschen-
muskelpreiSsaften subkutan. Die meisten Tiere starben, insbesondere, wenn
diese Injektionen mehrfach wiederholt wurden, nach 3—4 Tagen. Der
Autor zitiert Grund, der mit OrganpreUsiiften Immunisierungsversuche
machte und nur die MuskelprelSsafte „8pezifisch toxisch" fand; femer
As col i, dem zahlreiche Kaninchen ebenfalls nach der Injektion von Binder-
muskelsaft starben; endlich Piorkowski, der im Fleischauszug „giftige
Toxalbumine“ nachwies. Schmidt gelang es durch Filtration durch
Berkefeld-FUter die Prefisiiftc ungiftig zu machen; er schlieSt daraus: ,,die
Giftigkeit beruht daher nicht auf Toxalbuminen, sondern allein auf Bak-
terien, die sich im MuskelpreQsaft entwickeln“.

Bei unseren Versuchen haben wir nur bei intravenSser,
nicht bei subkutaner Oder intraperitonealer Einspritzung Todes-
f^e erzielt ^). Auch wird von den zuletzt erwUhnten Autoren

. 1) Auch bei intraperitonealer Einspritzimg des Breies von normalen
Organen haben wir in unseren eingangs erwahnten Versuchen ebensowenig
wie Bail (a. a. O.) und die anderen Autoren, welche seine Versuche nach-
priiften, tddliche Vergiftungen gesehen.

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62

H. Bold,

zam Teil ausdrticklich betont, dafi nur Muskelprefisfifte giftig
waren. Trotzdem kbanten bei alien diesen Versuchen, die sich,
da ja die Verarbeitung der Organe in recht verschiedener
Weise geschah, nicht direkt miteinander vergleichen lassen,
analoge Stoffe beteiligt gewesen sein. Die von Schmidt fest-
gestellte Entgiftung der PreBsafte durch Filtration, welche
von ihm allerdings ganz anders gedeutet wird, wiirde dafUr
sprechen.

Kflrzlich hat Schickele in einer interessanten Arbeit
fiber die Wirkung von PreBsaften, die er durch Auspressen
unter 4—500 Atmospharen Druck aus Ovarium, Corpus luteum
und Uterus erhielt, berichtet. Die Angaben stimmen in man-
chen Punkten mit unseren eigenen, oben beschriebenen und
weiter unten noch zu beschreibenden Beobachtnngen fiberein
(Gerinnungshemmung, hauptsachlich in vitro, aber auch in
vivo beobachtet; akute Giftwirkung), weichen aber doch
in anderen wesentlichen Punkten von unsern Befunden
ab. Vor allem beschreibt Schickele die oben erwahnten
Wirkungen (Gerinnungshemmung) als charakteristisch
ffir PreBsafte und Extrakte aus Ovarium, Corpus luteum und
Uterus, und besonders ffir Jene Uteri, welche wegen Myom-
blutungen oder sogenannten unstillbaren Blntungen bei nor-
malem anatomischen Befunde exstirpiert worden sind^, wfihrend
PreBsafte anderer Organe (Gehirn, Leber, Nieren, Muskel,
Placenta)^) eine gerinnungsbefordernde Wirkung besaBen.
Ferner wurde die Wirkung dieser PreBsafte durch Erhitzen
und Kochen nicht zerstfirt; bei Extraktion mit Alkohol ging
die wirksame Substanz in den Alkohol fiber. Extrakte, die
aus denselben Geweben durch physiologische Kochsalzlosung
gewonnen wurden, hatten in den Versuchen von Schickele,
intravends injiziert, keine derartige Wirkung.

1) Weichardt und Piltz sowie Freund haben gefunden, dafi
Prefisafte aus menschlichen Placenten, Tieren (Kaninchen), intravenbs in¬
jiziert, giftig wirken. Freund konnte analoge Wirkungen bei Prefisaften
driisiger Organe (Leber, Pankreas, Niere) feststellen, wahrend Prefisafte
Yon nichtdriisigen Organen (Muskel, Gehirn) sich ungiftig erweisen.
Burch Mischung vnrksamer Placentarprefisafte mit frischen menschlichen
Seren erzielte er eine Hemmung der Giftwirkung.

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Ueber die Giftigkeit von wasserigen Organextxakten etc.

63

Martin spritzte tr&chtigen Kaniochen 0,5 g von Kanin-
chen-Placentarsubstanz, in 2 ccm Kochsalzldsnng, intravends
ein. Die Tiere vertrugen diese Injektion, ebenso wie die nicht-
tr&chtigen Kontrolltiere, reaktionslos. Auch anf Kaninchen,
welche an parenchymatbser Nephritis litten, hatte die intra-
venOse Injektion von 0,5 g Placentarsubstanz in 2 ccm Koch-
salzlbsung keinen sichtbaren Einflufi.

In jOngster Zeit haben Kraus, LCwenstein und Volk
die Giftigkeit der Extrakte von normaler Meerschweinchen-
lunge fflr die gleiche Tierart bei intravenSser Injektion fest-
gestellt, ferner haben Uhlenhuth, Haendel und Steffen-
ha gen (Centralbl. f. Bakt., Bd. 47, Beiheft, Vereinigung fflr
Mikrobiologie, 1910, p. 158 und Arb. a. d. Kaiserl. Gesundheits-
amt, Bd. 36, Heft 4) mitgeteilt, daB Prefisflfte, resp. Kochsalz-
extrakte von Rattentumoren (Sarkome) sowie von normalen
Meerschweincbenorganen (Leber) bei intravenoser Injektion
fflr die gleiche Tierart akut tddlich wirkten und dafi durch
Berkefeld-Filtration Oder Erhitzen auf 60® eine Entgiftung
eintrat.

DaB es sich bei diesen Giftwirkungen nicht um Produkte
bakterieller Verunreinigung oder Zersetzungsprodukte handeln
kann, wie es Schmidt fflr die von ihm untersuchten PreB-
sflfte angenommen hat, geht aus der ganzen Art der Gewinnung
der Gifte, die aus den frischen Organen nnter aseptischen
Eautelen vor sich geht und innerhalb von 10—20 Minuten
beendet ist, hervor. Auch der Einwand, daB die Todesfillle
durch Injektion von grbberen Orgaupartikelchen und dadurch
erzeugten Embolien hervorgerufen sein kdnuten, ist hinfflllig
angesichts der Tatsachen, daB die Extrakte vor der Injektion
filtriert und zentrifugiert werden, daB einstflndiges Erwflrmen
auf 60® C die Extrakte ungiftig macht und daB bei der
Obduktion nie eine Embolie gefunden wurde, vielmehr stets
ein ganz charakteristischer Blutbefund, die Ungerinnbar-
keit des Blutes anzutreffen ist. Schon Kraus und Volk
beschreiben den flflssigen Zustand des Blutes ihrer durch
tuberkulbse Organextrakte getbteten Tiere. Auch wir fanden
bei alien durch wflsserige Organextrakte getdteten Tieren bei
der Obduktion das Blut flflssig, und man kann das Blut

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64

H. Dold,

tagelan g sogar bei Bratschranktemperatur aufbewahren, ohne
daB es gerinnt. Nicht selten finden sich Gerinnsel in der
Vena portae, w&hrend alles tlbrige Blut ungeronnen ist. Eine
H&molyse erzeugt das Gift nicht.

Bei der Frage nach der Natur dieser Gifte kdnnte man
zuntichstan Seifen undFetts&uren denken, die von Korschun
und Morgenroth, sowie von Levaditi als htlmolytisch wirk-
same Stoffe aus autolysierten Organen extrahiert wurden; diese
Stoffe waren allerdiogs im Gegensatz zu den von uns ge-
fundenen kochbest&ndig. In der Tat ergab die von Dr. H a i 1 e r
in liebenswflrdiger Weise ausgefflhrte chemiscbe Untersuchung
eines aus einer friscben Rindermilz mit physiologischer Koch-
salsldsung hergestellten Extraktes das Vorhandensein von
Seifen. Das von Dr. Hailer zur Isolierung der Seifen aus
dem Milzextrakt angewandte Verfahren v?ar wie folgt:

Der durch Papierfilter oberflachlich filtrierte Milzprefisaft wurde durch
Absorption in etwas mehr als der berechneten Menge wasserfreien Natrium-
Bulfats in eine feste, durch organische Lbsungsmittel extrahierbare Form
gebracht; der entstandcne Kuchen wurde gepulvert und mit 50® warmem
absoluten Alkohol mehrfach ausgezogen; die Ausziige wurden vereinigt und
bei einer 60® nicht iibcrstcigenden Temperatur euigedunstet. Der etwas
Bchmierige Riickstand wurde in einigen Kubikzentimetern 5-proz. Schwefel-
saure suspendiert und die Suspension mehrfach mit Aether extrahiert; der
die Fettsiiuren, Neutralfette, Lecithin usw. enthaltenden atherischen Lbsung
werden die Fettsauren durch mehrmaliges Schiitteln mit 5-proz. Natron-
lauge entzogen, die alkalische Losing mehrfach wieder mit Aether zur Ent-
femung der Fette ausgeschiittelt, die Lange durch Einleiten von Kohlen-
saure abgestumpft imd eingedampft; dem Riickstand wurden durch Alkohol
die fettsauren Salze entzogen und die alkoholische Losung mit Bleiacetat-
losung versetzt; es entstand eine weifie voluminbse Ausfiillung, die sieh
allm^lich zu Boden setzte und aus den Bleisalzen der Fettsauren bestand.
Sie wurde abfiltriert, getrocknet imd mit Aether extrahiert; oleinsaures Blei
lieS sich nicht in nennenswerter Menge im Verdampfungsriickstand des
Aethers nachweisen, die Hauptmenge des Niederschlages bestand also aus
palmitinsaurem und stearinsaurem filei.

Es wurden hierauf Versuche mit intravenSser Injektion
von Seifen gemacht Dabei ergab sich, daB 5—6 ccm einer

1- proz. Seifenldsung (oleinsaures Natrium) oder 2—3 ccm einer

2- proz. Seifenlosung notig sind, um Kaninchen akut zu ver-
giften. Davon, daB in den von mir injizierten giftigen Organ-
extraktmengen die obige Seifenmenge, welche sich als akut

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Ueber die Grftdgkeit von wasserigen Organextrakten etc.

65

giftig erwies, enthalten ist, kann natfirlich keine Rede sein.
Die durch die Organextrakte erzeagte akute Vergiftuog kann
demnach nicht auf eine Seifenwirkung zurflckgeffihrt werden.
Dazu kommt, daB das Blut der durch Seife getdteten Tiere
seine GerinnangsfShigkeit nicht verliert im Gegensatz zu
dem Blnte der durch Organextrakte getdteten Tiere.

Dafi es sich bei der Giftwirkung von Organextrakten nicht
um einfache chemische Gifte handelt, wird auch durch das
Ergebnis der Erhitzungs- und Filtrierversuche, ferner durch
den bemerkenswerten Umstand, daB die Giftigkeit ffir die
faomologe Tierart deutlich erhdht war, sowie endUch durch den
Verlauf unserer weiteren Versuche nahegelegt. Wenn man
statt der physiologischen Kochsalzldsung frisches Serum in
den gleichen MengenverhEltnissen als Extraktionsmittel ver-
wendet, so ist bei richtiger Wahl der Mengenverh&ltnisse
zwischen Extraktionsmittel und dem zu extrahierenden Ge-
webe der Serumextrakt — in gleichen Mengen wie der
w&sserige Extrakt injiziert — nicht giftig. Verwendet man
dagegen inaktiviertes Serum (1 Stunde auf 60" erhitzt) als
Extraktionsmittel, so entsteht ein giftiger Extrakt. Darans
geht hervor, daB das frische Serum entweder das Gift nicht
aus den Organen herauszuholen vermag oder daB das Gift
zwar extrahiert, aber durch im frischen Serum enthaltene
Stoffe entgiftet wird.

DaB dem frischen Serum in der Tat eine entgiftende
Wirkung zukommt, geht aus den folgenden Versuchen hervor.

Wenn man sich in der hblichen Weise, z. B. aus frischen
Kaninchenorganen, einen Extrakt herstellt und zu der an sich
tddlichen Dosis dieses Extraktes die gleiche bis doppelte
Menge einerseits von frischem, andererseits von inaktiviertem
Kaninchenserum zusetzt uud die Mischungen ca. 1 Stunde bei
37" h&lt, so erweist sich der mit dem frischen Serum versetzte
Extrakt als ungiftig, wUhrend der mit inaktiviertem Serum
gemischte Extrakt in derselben Weise wie der wtlsserige Ex¬
trakt allein akut giftig wirkt.

Damit ist gezeigt, daB frisches homologes
Serum die aus alien Organgeweben durch physio-

Zeiuchr. U ImmaniUUforscbanc. Orig. Bd. X. 5

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66

H. Dold,

logische Kochsalzldsung extrahierbaren giftigen
Substanzen zu entgiften vermag. Dieser Prozefi der
Entgiftung durch frisches Serum nimmt eine gewisse Zeit in
Anspruch. Injiziert man den mit dem frischen Serum ver-
setzten Extrakt s o f o r t nach der Mischung, so ist noch keine
vollstSndige Entgiftung eingetreten. Das mit der Mischung
injizierte Kaninchen stirbt meist nicht so akut; die ersten
Symptome stellen sich sp&ter ein, das Tier fMIt in einen
schwer komat5sen Zustand und geht dann meist erst nach 5
bis 15 Minuten ein. Die Entgiftung durch frisches Serum
spricht tlbrigens, ebenso wie die Thermolabilit&t des Giftes^
gegen die Annahme, dafi es sich bei dem Gift um ein Pepton
Oder „Peptozym“ handeln kSnnte.

Ob es sich bei dieser Entgiftung durch frisches Serum
um eine Komplement- oder um eine Fermentwirkung handelt,
ist noch nnentschieden ^). Will man annehmen, dail auch in
vivo die Bildnng und Ausscheidung dieser Gifte in gewisser
Menge in der Art einer inneren Sekretion erfolgt, so wflrde
mit dem Nachweis der entgiftenden Wirkung des frischen
Serums auch das Mittel gezeigt sein, wodurch der Organismus
dieses giftige innere Sekretionsprodukt fflr sich unschtldlich
macht.

Zusammenfassung.

1) Es lassen sich nicht blofi aus tuberkuldsen Organen,
sondern auch aus alien normalen Organgeweben (Lunge, Milz,
Leber, Niere, Gehirn, Muskulatnr, Hoden) durch phjsiologische
Kochsalzl5sung Gifte extrahieren, welche bei intravenOser In-
jektion Meerschweinchen und Kaninchen akut toten. Es handelt
sich hier also um ein allgemeines Prinzip.

2) Diese Gifte sind ffir die homologe Tierart relativ giftiger
als fflr die heterologe.

3) Tuberkulbse Tiere zeigen zum mindesten keine starke
Ueberempfindlichkeit gegenflber Yon Extrakten aus tuber-
kul5sen Organen.

1) Die inzwischen ausgefiihrteD weiteren Untersuchungen, iiber die
demniichst berichtet wird, sprechen dafiir, daii es sich bei der Entgiftung
durch frisches Serum nicht um eine Eomplementwirkung handelt.

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Ueber die Giftigkeit von wiisserigen Organextrakten etc.

67

4) Die Extrakte werden durch mehrtfigiges Stehenlassen,
dnrch Filtration dnrch Berkefeld-Filter und dnrch V*—1-sttln-
diges Erhitzen auf 60 G ungiftig.

5) Die Extrakte werden dnrch frisches (homologes) Serum
entgiftet.

Llteratnr.

Ascoli, Biochem. CentralbL, Bd. 2, p. 227.

Bail, ^tBchr. f. Immunitatsf. etc., Bd. 4, 1909, Heft 4.

Brieger und Uhlenhuth, Deutsche med. Wochenschr., 1898, No. 10.
Conradi, Hofmeisters Beitr. zur cheni. Physiol, u. Path., Bd. 1, Heft 3
und 4.

Freund, Centralbl. i Qynak., Bd. 26,1907, p. 778. — Berl. klin. Wochen-
schrift, 1909, No. 157.

Friedberger, BerL klin. Wochenschr., 1910, No. 32 und 42.

— und Schutze, Berl. klin. Wochenschr., 1911, No. 9.

Grund, Deutsch. Arch. f. klin. Med., Bd. 87, 1906, p. 157.

Joseph, Beitr. z. Xlinik d. Tub., 1910.

Korschun und Morgenroth, Berl. klin. Wochenschr., 1902, No. 37.
Kraus und Volk, Wien. klin. Wochenschr., 1910, No. 8.

Kraus, Ldwenstein und Volk, Deutsche med. Wochenschr., 1911,
No. 9.

Levaditi, Ann. de ITnst. Pasteur, 1903, p. 187.

Martin, Ed., Monatsschr. 1 Geburtsh. u. Gynak., Bd. 24, Heft 5.
Neufeld und Dold, BerL klin. Wochenschr., 1911, No. 2.
'Piorkowski, Centr^bL f. Bakt., Bef., Bd. 31, p. 553.

Schickele, Miinch. med. Wochenschr., 1911, No. 3.

Schmidt, Biochem. Zeitschr., Bd. 5, 1907, p. 422.

Weichhardt und Piltz, Deutsche med. Wochenschr., 1906, p. 1854.

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68

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

Naehdruck verhoten.

[Aus der Prosektur des k. k. Wilhelminenspitales in Wien.]

Ueber die Bezlehang der Antlkbrper zu der prftzlpitablen
Snbstanz des Semins.

Von Dr. Earl Landsteiner und Dr. Emil Pr^ek.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 29. Marz 1911.)

Die Ansicht, dafi die Antikdrper des Blutserums Eiweifi-
stoffe sind, gilt vielen als wahrscheinlich. Fflr diese Anschau-
UDg spricht die in mehreren Richtungen bestehende Ueberein-
stimmung der Antikorper mit EiweiBstoffen, besonders ihr Ver-
halten bei der Behandlung mit eiweiBf&llenden Stoffen^), und
zweitens die dfters beobachteten Beziehungen zu der prkzi-
pitablen Substanz des Serums, wie sie nach den Versuchen
von Dehne und Hamburger*), Kraus und Pfibram*)
u. a. anzunehmen sind (vgl. Bordet, Pfeiffer und Fried-
berg er). Die EiweiBnatur dieser ist aber bekanntlich durch
eine Reihe von Griinden, von denen nur die Herstellung prkzi-
pitierender Sera gegen gereinigte EiweiBsubstanzen (Kasein,
kristallisiertes Hemoglobin, Hemocyanin, kristallisiertes Edestin)
und die bekannten Ergebnisse vonObermayer und Pick*)
fiber die Entstehung von Prfizipitinen gegen diazotiertes,
nitriertes, iodiertes EiweiB und die per analogiam wichtigen,
sehr sorgffiltigen Untersuchungen fiber Anaphylaxie durch
mfiglichst rein dargestellte, zum Teil kristallisierte Eiweifi-
kfirper von Wells und Osborne®), erwfihnt seien, so gut
wie gesichert

1) Literatur bei PHbram in Kraus und Levaditi, Handb. der
Technik u. Meth. d. Immunitatsf., Bd. 2.

2) Wien. klin. Wochenschr., 1904, p. 807, s. Ges. d. Aerzte in Wien.
Wien. klin. Wochenschr., 1904, No. 16. — Hamburger, Munch, mediz.
Wochenschr., 1907, No. 6.

3) Centralbl. f. Bakt., Bd. 39, 1905, p. 72.

4) Wien. klin. Wochenschr., 1906.

5) Joum. Infect. Diseases, Vol. 8, 1911, p. 66.

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Beziehung der Antikorper zu der pr&cipitableu tJubstanz des Serums. 69

Im gleichen Sinne spricht wohl auch die von D o e r r and
Moldovan^) durchgefQhrte Identifizierung prUzipitabler und
anaphylaktisierender Substanzen ^).

Gerade das Verh&ltnis zur prfizipitablen Substanz wurde
jedoch von manchen Autoren auf Grund ihrer Versuche in
entgegengesetztem Sinne gedeutet und der Schluli gezogen,
dafi die Antikdrper keine Eiweifistoffe seien (s. u.).

Da die Beantwortung der schwebenden Frage in gewissem
Sinne als Grundlage fQr alle weiteren Untersuchungen fiber
die chemische Natnr der Antikorper zu betrachten ist, haben
wir nochmals Untersuchungen fiber den Zusammenhang dieser
und der prfizipitablen Substanz aufgenommen, um zu einem
eigenen Urteil fiber die bestehenden Widersprficbe zu kommen
undaufierdem womfiglich quantitative Beziehungen zwischen
der Antikdrperwirknng und der prfizipitablen Substanz fest>
zustellen.

Wir wollen mit der Beschreibung unserer Versuche be-
ginnen und die Besprechnng der Literatur im Anschlufi daran
vornehmen.

I. Untersnohungen an Agglutininen normaler Sera.

Die hemmende Wirknng der durch Injektion von Serum
hergestellten Immunsera gegenfiber Hfimagglutininen des
Normalserums IfiBt sich, wie Bordet®) [vgl. Ford*)] zuerst
feststellte, ohne Schwierigkeit nachweisen.

Wenn die Agglutinine des Serums prfizipitable Substanzen
sind und die Antiagglntininwirkung durch spezifische Immun¬
sera auf der Anwesenheit von Prfizipitinen beruht, so Ififit sich
bei diesen Immunseren ein Parallelismus zwischen ihrer anti-
agglutinierenden und prfizipitierenden Wirkung erwarten. In

1) Zeitschr. f. Immimitatsf., Bd. 5, 1910, p. 125.

2) Entscheidende ArgumeDte g^en die f^iweifinatur der prazipitablen
Bubetanzen durften auch in den neuen Arbeiten von Friedemann und
Isaac, Zeitschr. f. exp. Path., Bd. 1, 1905, und Franceschelli, Arch,
t Hyg., Bd. 70 (vgl. M. 69) nicht vorli^en.

3) Ann. Inst. Pasteur, T. 13, 1899, p. 273.

4) Zeitschr. f. Hyg., Bd. 40, 1902, p. 363. Auf die Unzulanglichkeit
der Schlusse von Ford haben wir schon bei anderer Gelegenheit hingewiesen.

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70

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

einigen Versuchen, die wir darilber anstellten, war die erwartete
Uebereinstimmung annSbernd nachweisbar.

Zum Versuch kamen 7 Immuosera (IS.) von Kaninchen,
die mit Ziegenserum vorbehandelt waren. Die Sera No. 22,
73, 89, 42, 32, 65 wurden nach dreimaliger intravendser, in ffinf-
tSgigen Intervallen vorgenommener Injektion von je 3 com
Ziegenserum, Serum No. 30 nach einer solchen Injektion
(6 Tage nach der letzten Injektion) abgenommen ^). Die Pr&zi-
pitinwirkung war bei 73, 22, 89, 42, 32 stark, Serum 65 prSzi-
pitierte spurenweise. Serum 30 nicht. Im Antiagglutininver-
such, der so angestellt war, daO die Immunsera und zum Ver-
gleich mehrere Normalsera mit einer durch Abspaltung aus
agglutininbeladenen Blutkdrperchen hergestellten Agglutinin-
Idsung (RA.)^) zusammengebracht wurden [(iber den Gehalt
solcherLdsungen an pr&zipitablerSubstanz vgl. Landsteiner
und Jagic’) und die verwandten Ergebnisse von Sachs^)]
zeigte sich nun, dafi die Sera 22, 73, 89, 42, 32 Starke,
Serum 65 betr&chtlich weniger starke und Serum 30 geringe
antiagglutinierende Wirkung aufwiesen.

Ein ^Ihnliches Resultat ergab sich auch in einigen Ver¬
suchen bei der Prttfung der Immunsera in bezug auf die Art-
spezifizitEt der Antiagglutinine und PrEzipitine.

1) Die Sera konserrieiten wir in der Regel durch Filtration nach dera
Ton Uhlenhuth ang^benen Verfahren (Handb. d. Technik u. Method,
d. Immimitatsf., Bd. 2, p. 804).

2) Im folgenden wird haufig von solchen gereinigten Agglutininlosungen
die Redesein (vgL Landsteiner, Miinch. med. Wochenschr., 1902, No.46;
1903, No. 18), die wir der Eurze halber mit RA. bezeichnen werden, eventuell
unter Beifugiing der Bezeichnung des Serums und des Blutes, mit dessen
Hilfe die Losuhgen hergestellt wurden (z. B. Ziegen-RA. fur Pferdeblut).

In der R^el wurden die RA.-Ldsungen folgendermaSen bereitet: Zu
einem gut wirksamen Normalserum wurden pro Eubikzentimeter 1 bis
2 Tropfen gewaschenen Blutbodensatzes zugefiigt, nach mehrstiindiger (12
bis 20 Stunden) Absorption in der Ealte drei- bis viermal mit eiskalter Eoch-
salzldsung gewaschen, mit '/so—'/lo ^es Serumvolumens an Eochsalzldeung
bei 48—50® C */, Stunde digeriert, dann mdglichst rasch mit einer starken
Zentrifuge warm abzentrifugiert imd nach dem Erkalten abermals zentri-
fugiert. Bei Immunseren wurde ahnlich verfahren, aber von entsprechend ver-
diinntem Serum ausgegangen.

3) Miinch. med. Wochenschr., 1903, No. 18.

4) Fr. Ver. f. Mikrobiol. Centralbl. f. Bakt., Bd. 42,1908. Ref., BeU., 174.

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Beziehung der Antikdrper zu der prazipitablen hiubstanz des Serums. 71

Ein Immunserum (42), das Ziegenserum stark prSzipitierte,
wirkte ziemlich stark prtlzipitierend auf Rinderserum, schwach
auf Pferde-, gar nicht auf Hflhnerserum. Es stimmt damit
dberein, dafi die Antiagglutininwirkung dieses Immunserums
auch gegenuber dem Agglutinin des Rinderserums sehr deut-
lich war, schwHcher gegen normales Pferdeagglutinin, w9.hrend
Htihneragglutinin nicht beeinfluJlt wurde (Versuche mit ge-
reinigten Agglutininldsungen). Immerhin RUlt es auf, dafi
manchmal die Antiagglutininwirkung heterologer PrSzipitinsera
im Verhilltnis anscheinend betrtlchtlicher ist als ihre recht
geringe heterologe Prfizipitinwirkung, z. B. in einigen der
folgenden Versuche.

Die zugeset^teo Mengen sind in Tropfenzahlen ang^eben. Zusatz des
Blutes bezw. der Bakterien '/a Stunde nach Herstellung der Mischung. Die
yerwendeten Immunsera wurden von Eaninchen gewonnen. Die Prozent-
zahlen des (dreimal gewaschenen) Blutes beziehen sich auf das ursprung-
liche Volumen. Die Typhusbacillenemulsion wurde durch Auischwemmen
einer schiefen Agarkultur in 10 ccm 1-proz. NaCl-Lbsung hergestellt. Ab-
lesung nach einer Stunde Zimmertemperatur, 24 Stunden Eiskasten, bei
Blutkbrperchen mikioskopisch, bei Bakterien mit Hilfe der Lupe.

+ + + + sehr Starke, + + + starke, ++ deutliche, + schwache
Agglutination.

Versuch A.

1

'a

la

1

EontroUe

ico

iS

73 rH

fe d

Id

o'*

&d

1 o

73 rH

III

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11

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§

Ww
i ^

:e4 S

m i

Prfizipitin
Zi^n-BA. f.

1

1

1

1

1

1

1

1

1

Kui.-Blnt

4

4

4

4

4

4

4

4

4

4

l^ioz. NaCl-
LOsung

7

6

6

6

6

6

6

6

1

6

6

lOjptoz. Ea-
ninchenblut
Ag^utinin*

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

wirkung

+ + + +

+ + +

+ +1

+ + +

+

+

+ +

+ + +

+ + +

+ +

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72

Karl Landsteiner und Emil PraSek

Versiich B.

Kontrolle

Priizipit. Pferde-
antiserum No. 16

Prazipit. Pferde- 1
antisenim No. 154

Priizipit. Ziegen-
antisenim No. 102

■5.2

^ G

Ph ci

Priizipit. Hunde-
antiserum No. 110

Priizipit. Rinder-
antisenim No. 162

Kaninchen-Normal-
serum

Hamol. Kaninchen-
senim f.Hanimelblut

Prazijpitin

1

i 1

1

1

1

1

1

1

Pferde-RA. fiir

Kaninchenblut

4

4

4

4

4

4

4

4

4

l^roz. NaCl-

Losung

7

6

6

6

6

6

6

6

6

10-proz. Kanin¬

1

chenblut

1

1

1

1

1

1

1

AgglutinmN\irk.

i + + + +

+

+ +

+ + + +

+ + +

' + + '

+ + + +

! + +++

!++ +

Versuch C.

Kontrolle

Priizipit. Pferde-
antiserum No. 3

Prazipit. Pferde-
antiserum No. 16

Priizipit. Pferde-
antiserum No. 154

Prazipit. Ziegen-
antiserum No. 102
F5:iizipit. Ziegen-
antiserum No. 4
Prazipit. Hunde-
antiserum No. 110
Prazipit. Rinder-
antiseruni No. 162
Prazipit. Rinder-
antiserum No. 37

Kanin chen-Normal-
seriim

Hamol. Kaninchen-,
serum LHammelblut;

Prazipitin

1

1

1

1

1 1 11 1

1 ' 1

Rinder-RA. fiir

1

Kaninchenblut

4

4

4

4

4 4 4 14 4

4 4

l^roz. NaCl-

1

Losung

7

6

6

6

6 6 6 6 6

6 6

10-proz. Kanin¬

chenblut

1

1

1

1 1

11111

1 1 1

Agglutininwirk.

+ + + +

+ + +

+ +

k++

+ +++++ +

+ + + , +

Versuch D.

Prazipitin [llllllll 1 1

Pferde-RA. fur Ty-

phusbacillen 4 4444444 4 4

1-proz. NaCl-Losg. 9 8888888 8 8

Aufschwemmung v.

Typhusbacillen 2 2222222 2 2

Agglutinin^irknng + + + + + + + ++++ + +++ + + +

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Beziehung der Antikorper zii der priizipitablen Substanz des Serums. 73

Versuch E.

Kontrolle

Pnizipit. Pferde¬
antiserum No. 3

Prazipit. Pferde¬
antiserum No. 16

Priizipit. Pferde¬
antiserum No. 154

Prazipit. Ziegen-
antiserum No. 102

Priizipit. Ziegen-
antiserum No. 4

Priizipit. Hunde-
antisenim No. 110 j

Priizipit. Rinder-
antiseruin No. 162

Priizipit. Kinder- 1
antiserum No. 37

Kaiiinchen-Normal-

serum

Hiimol. Kaninchen-
seru m f. Hammelblu t|

Prazipitin

1

1

1

1

1

1

1 1

1 ^

1

1

1

1

Rinder-RA. fur

1

1

Typhusbacillen

6

6

6

6

6

6

' 6

6

6

1 ®

i ®

1-proz. NaCl-

1

Ldsung

5

! 4

4

4

4

4

1 4

4

4

4

4

Aufschwemm. v.

1

Tynhusbacillen

2

2

2

2

2

2

2

2

2

2

2

A^lutininwirk.

+ + + +

+ + +

+ + +

+ + + +

+ + +

+ + +

;+ ++'

+ + +

+

+ + +

+

Kontrollversuch: Wirkung der prazipitierenden Sera auf Typhusbacillen.

Prazipit. Pferde¬
antiserum No. 3

Priizipit. Pferde-
antisenim No. 16

Prazipit. Pferde¬
antiserum No. 154

Priizipit. Ziegen-
antisenim No. 102

Priizipit. Ziegen-
antiserum No. 4

Prazipit. Hunde¬
antiserum No. 110

Priizipit. Rinder-
antisernm No. 162

Priizipit. Riuder-
antiserum No. 37

Normal. Kaninchen-
serum

Hiimol. Kaninchen-
serumlHammelblut

Pr^pitin

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

l-proz.NaCl-L6sung
Aufschwemmung v.

10

10

10

10

10

10

10

10

10

10

Tynhusbacillen

Agglutininwirkung

2

2

2

2

2

2

2

2

2

2

+

+ + +

+ + +

-I- + +

0

e

e

+

0

Man sieht, daU im allgemeinen die homologen Immunscra die Ag¬
glutination am stiirksten hemmen; auUerdem wirken ofters Sera in solchen
Fallen deutlich hemmend, in denen sie auch eine nicht geringe heterologe
Pr^pitinwirkung besitzen, z. B. bei der Kombination von Ziegen- und
Rinderserum und deren Antiseren. Femer beim Versuch B und D, wo
Hundeantiserum No. 110 eine starke Antiagglutininwirkung zeigt, ein
Serum, das aber auch auffallend starke Priizipitation im Pferdesenim her-
voiTuft. Andererseits kommen einzelne Sera vor, die die Agglutination
stark Oder deutlich hemmen, obwohl sie nur sehr geringe, oder bei unserem
auf den Nachweis ganz geringer Prazipitinmengen nicht Riicksicht nehmenden
Priifungsmodus keine sicher erkennbaren Pnizipitinwirkungen mit den be-
treffenden Seren zeigen, so ein hochwertiges Hundeantiserum No. 110 im
Versuch A und C mit starker Antiagglutininwirkung bei nur schwacher
Prazipitinwirkung, ferner ein hochwertiges Pferdeantiserum No. 16 im Ver¬
such A und C bei nur angedeuteter Prazipitinwirkung und endlich in

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74 Karl Landsteiner und Emil Prasek,

mehreren Versuchea das durch Blutinjektionen heigestellte Hammelhamo-
lysin A, das nur minimale Spuren von Prazipitation zeigte.

Wir miissen es dahingestellt sein lassen, ob diese iibrigens nicht
quantitatir ausgewerteten Hemmungswirkungen auf in einzelnen Immun-
seren vorhandene Hemmungsstoffe besonderer Art oder auf hetcrologe
Immunstofie zu beziehen sind, die zwar mit SerumeiweiH Verbindungen
geben, aber keine Fallungen bewirken, da vrir eine genaue Untersuchung
der Erscheinung noch nicht durcbgefuhrt haben. Derartige nichtf^ende
AntiniweiUstofTe sind von den Eomplementbindungsreaktionen bekannt, und
aufierdem ist es durch Bordet'), Kraus und Pribram*) nachgewiesen
vorden, dall Prazipitine, die durch Erhitzen die F^gkeit der Nieder-
schlagsbildung verloren haben, noch Agglutinine unwirksam machen kdnnen,
dafi also nur die Bindung, nicht die Niederschlagsbildung der maSgebende
Faktor ist. Auch ist darauf hinzuweisen, dafi nach den Ergebnissen von
Doerr und Moldovan*) die Anwesenheit von Prazipitinen leicht iiber-
sehen werden kann, wenn man nicht die giinstigsten Bedingungen wahlt,
und dafi wir, wie erwahnt, den Nachweis sehr geringer Prazipitinmengen
nicht versucht haben.

ErSftige Prfizipitinsera wirkten bei homologen HUmagglu-
tininen (RA.) regelmkfiig hemmeDd *). Bei Bakterienagglatininen
fanden wir vereinzelnte Ffille, in denen trotz starker Prftzipitation
aus noch unbekaonten Griinden die Hemmungswirkung sehr
gering war (Versuch E, Rinderantiserum No. 162). Vielleicht
ist die Erscheinung, ebenso wie die gleichartige Beobachtung
von Andrejew^) an Rotzagglutininen (wenn hier nicht etwa
die zugesetzte Pr^lzipitinmenge ungentigend war), dadurch zu
erkl&ren, dafi ein und dasselbe Serum verschiedene prfizipitable
Substanzen enth^t, die nicht mit alien PrS.zipitinen reagieren.
[Vgl. die analoge Erscheinung bei Immunseren ®).]

Wenn nach dem Gesagten auch manche Details der an-
gefdhrten Versuche noch nSherer Aufkikrung bedQrfen, so

1) 1. c. Ann. Pasteur, T. 13.

2) 1. c. p. 80.

3) Zeitschr. £. Immunitatsf., Bd. 5, 1910, p. 161.

4) Es mufi natiirlich darauf geachtet werden, ob das angewendete
Prazipitinserum nicht selbst hamagglutiniert. In dieser Hinsicht hatten
wir bei einigen Rinderserum prazipitierenden Kaninchenseren die Be¬
obachtung gemacht, dafi diese einen ganz auffallig hohen Titer fiir Pferde-
blut besafien. Es ware von Interesse, zu imtersuchen, ob diese Erscheinung
haufig zu beobachten ist. Vgl. diesbezuglich F. Bauer, Miinch. med.
Wochenschr., 1911, No. 2.

5) Arbeiten aus d. Kaiserl. Gesundheitsamte, Bd. 33, p. 94.

6) Siehe Kraus xmd Pribram 1. c. und diese Arbeit unten.

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BeziehuDg der Antikdrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 75

lassen sich die Resultate unserer Meinung nach doch ohne
Schwierigkeit mit der Annahme vereinigen, dafi die Anti-
agglutininwirkong mit der Anwesenheit prilzipitierender Anti-
eiweiCsera, vielleicht auch solcher, die keine makroskopische
Reaktion geben, im Zusammenhang steht.

Zur SicherstelluDg der AntiagglutininwirkuQg und um den Effekt
der Niederschlagsbildung als solcher auszuschliefien, haben wir Yersuche
angestellt, in denen parallel mit den homologen Pr^ipitinseren aueh
heterologe prazipitierende Sera, und zwar unter Zusatz des diesen hetero-
logen Seren entsprechenden Antigens, angewendet wurden. (Ygl. die ana-
logen Yersuche von Eraus und Pribram.) Die auftretenden Anti-
agglutininwirkungen waren in diesen Fallen bei Zusatz von Antigen nicht
starker als ohne dieses, so daS eine Wirkung der Niederschlagsbildung als
solcher nicht nachweisbar war.

Bezeichnung wie oben.

Zi^n*BA. fur Eaninchenblut

4

4

4

4

4

4

4

y,oo Pferdeserum

Iiiizipitierendes Ziegenantiserum

4

4

4

No. 62

1

Prazipitierendes Pferdeantiserum

No. 16

1

1

Eaninchennormalserum

1

1

1-proz. NaCl-L6sung

6

5

1

5

5

1

2

10-proz. Eaninchenblut

1

1

1

1

1

1

1

Agglutininwirkmig

+ +

+ =

= +

e

+ +

+ +

+ +

Weiterhin untersuchten wir die Wirkung der durch
Seruminjektion gewonnenen Pr&zipitinsera einerseits auf voiles
Serum bezw. dessen Verdflunungen und andererseits auf ge-
reinigte Ldsuugen, in denen die Agglutinine im Verhilltnis zu
den tlbrigen Serumbestandteilen angereichert sind. Es war
von vorneherein vorauszusetzen, daB bei RA.-Lbsungen die
Antiagglutininwirkung deutlicher in Erscheinung tritt, denn
auch wenn die Agglutinine keine EiweiBstoffe und die Anti¬
agglutininwirkung nicht auf Pr&zipitine zu beziehen w&re,
also durch Serumeiweifi nicht beeinfluBt wflrde, sind doch
immerhin im Serum auBer dem einen geprhften Agglutiuin
andere Antikdrper vorhanden, die das Antiagglutinin binden
(cf. B 0 r d e t).

Die Verhaitnisse werden durch folgenden Versuch ver-
anschaulicht:

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76

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

Es wurde die Antiagglutminvirkung eines Zi^nprazipitios g^enuber
Zif^eneerum und mit Eaninchenblut aus Ziegeneerum heigestelltem KA.
gepriift Der Agglutininwert des Zi^n-BA. war etwa gleich dem des
Serums. Der Glehalt an prazipitabler Substanz betrug im Ziegen-BA. nur
V( 4 o der im Serum vorhandenen. Zum Versuch auf Antiagglutininwirkung
wuMen in zwei Beihen von kleinen Bdhrchen in gleicher Weise fallende
Mengen von Immunserum, angefangen von der Verdunnung Vs iri einer
Menge von 0^ ccm dngefiillt. In jedes Bdhrchen der einen Reihe kam
dann 0,1 ccm V 4 Zi^nnormalserum, in die Bdhrchen der anderen Beihe
0,1 Zi^en-BA. Nach 20 Minuten wurde jedem Bdhrchen 1 Tropfen einer
5-proz. Aufschwemmung von Kaninchenblut zugesetzt. Ablesung der
Agglutininwirkung nach Aufbewahrung im Eiskasten am nachsten Tag.

Ergebnis:

VerdiinnuDg des
Immimserums

V,

V*

^ Vs

V,e

Vs,

1/

/e 4

V4 Zi^en*NS.

4-

+

++

-I-I--I-

-i--l-++

!

+ + + +

V4 Zi^en*BA.

e

e

e

e

+.

VerdiinnuDg des
Immunserums

1/

/l*8

V

/366

V

/513

‘A„4

^Iq04S

Vcx)

V 4 Zi^en*NS.

^/^ Ziegen*BA.

+ -I- + +

1 + +

+ + + +
+ + +

++++

+++

+++-1-

+++

+ + + +
+ ++-I-

+ -I-4- +
+ + + -t-

Man ersieht aus dem Versuch deutlich die st&rkere Anti¬
agglutininwirkung bei gereinigter Agglutininlosung im Ver-
gleich zum Serum.

Nicht bei alien Serumarten war die Erscheinung nachweisbar. Dies
wurde dadurch bedingt, dafi bei manchen Kombinationen, z. B. bei Binder*
serum-Eaninchenblut, eine Hemmung durch nor males Serum zu beob-
achten war. Da diese Hemmung nur dem VoUserum, nicht aber der BA.*
Ldsung gegeniiber auftrat, mu 6 te der beschriebene Versucb eine Stoning
erleiden. In ahnlicher Weise wirkte bei der Kombination Pferdeserum bezw.
Pferde*BA. und Eaninchenblut der Umstand, da 6 die BA.*Ldsungen, nicht
aber das VoUserum durch normales Eaninchenserum eine Verstarkung ihrer
Agglutininwirkung erfuhren. [Vgl. die Beobachtungen von Altmann^).]

Versuche.

Die verwendeten Mengen sind in Tropfenzahlen angegeben. Zusatz
des Blutes ca. V» Stunde nach HersteUung der Mischung. Ablesung nach
24 Stunden.

1^ Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 8 , 1910, p. 27.

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Beziehung der Antikorper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 77

1-proz. NaCl-Losung

7

1

4 7

4

7

4

7

4

InaktiTes Rinderserum

3

3 i 3

3

Binder-RA. fiir Kaninchen-

blut

3

3

3

3

Aktives normales Kanin-

chenserum

3

3

Prazipitierendes Rinder-

antisenim

3

3

lO-proz. Kaninchenblut

1

1 1

1

1

1

1

Agglntininwirkung

+-I-

+ ++

+

++

++

++

+

l-nroz. Nad-Ldson^ ! 7

Pfieatde-RA. fiir Kamnchenblut | 3

5

9

7

7

5

9

7

7

5

9

7

7

5

9

7

3

3

3

3

3

3

3

NormaleB inaktivee Pferdesenim
Ptizipitierendes Antipferdeserum ;

1

1

1

1

1

1

1

1

No. 3 '

PtSzipitierendes inaktives Antipferde-
aerum No. 3 '

Ncvmales aktives Kaninchensenim
Nonnales inaktives Kaninchensenim

2

2

2

i

2

2

2

2

2

lO-pTOz. Kaninchenblut i 1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

1

Agglntininwirkang 1 4 -

++I

+

+

+

++

+

+

+

Spur

+

Spur

+

Spuri-f

Spur

In besonderen Versuchen bemflhten wir nns, quantitativ
festzostellen, in welchem Grade die Agglntininwirkung durch
agglutininreiche Losungen im Verh&ltnis znm Vollserum ab-
gesfittigt wird.

Wir nahmen mit Kaninchenblut hergestelltes Ziegen-KA.
nnd ermittelten jene Menge Ziegenpr^ipitin vom Kaninchen,
durch die die Agglntininwirkung fOr Kaninchenblut aufgehoben
wurde. In parallel angestellten Reihen brachten wir die derart
bestimmte neutralisierende Menge des Antiserums erstens mit
absteigenden Mengen eines mit Hilfe von Taubenblut herge-
stellten Ziegen-RA. (das auf Kaninchenblut nicht wirkte) und
zweitens mit absteigenden Mengen von Vollserum zusammen,
und ermittelten, durch welche Mengen in jedem der beiden
F^lle die Antiagglntininwirkung in gleich starker Weise beein-
tr&chtigt wurde, wenn wir nach einiger Zeit (20 Minuten) das
mit Kaninchenblut hergestellte Ziegen-RA. und Kaninchenblut
hinzufflgten. Auilerdem werteten wir die relativen Mengen
an prEzipitabler Substanz im Vollserum und im Tauben-RA.
durch Herstellung zweier VerdQnnungsreihen und Zusatz von
Prftzipitinserum aus. Das Resultat war, dafi die an Agglutinin

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78

Karl Landsteiner und Emil Prasek.

angereicherten Losungen, auf gleichen Gehalt von pr&zipitabler
Substanz bezogen, das Antiagglutinin 1,5—3mal so stark ab-
sHttigten wie das Serum. Das Resultat ist am einfachsten
dadurch zu erklfiren, daB die pr&zipitablen Substanzen (Eiweifi-
korper) des Serums die F&higkeit besitzen, Antiimmunkdrper
zu binden, aber nicht alle EiweiBkOrper in gleichem Grade
wirken. Es wSre aber, wie wir oben bemerkten, fflr den
Versuch als solchen eine andere Erkl&rung nicht aus-
geschlossen.

Die bisher angeftlhrten Resultate lassen sich gut mit der
Annahme vereinigen, daB die Antiagglutinine, allgemeiner ge*
sagt die Antiimmunkdrper AntieiweiBstoife sind, die mit den
als pr&zipitable Substanzen zu betrachtenden Immunkdrpern
des Serums, sei es unter Niederschlagsbildung oder ohne diese,
reagieren (cf. Bordet, Dehne und Hamburger, Kraus
und Pribram).

Ergebnisse, die unserer Meinung nach entscheidend sind,
lieferte uns die im folgenden zu beschreibende Versuchs-
anordnung.

Wir versuchten n^mlich, Agglutininldsungen soweit zu
reinigen, daB das Agglutinin einen sehr groBen Bruchteil der
gesamten, in der Ldsung enthaltenen pr&zipitablen Serum-
bestandteile ausmacbte. Ein Kriterium dafQr, ob das gelungen
ist, besteht im folgenden:

Hat man eine im immunchemischen Sinne vdllig reine
Agglutininldsung, so muB bei der Behandlung mit dem homo-
logen Antigen nicht nur das Agglutihin, sondern anch die
der vorl&ufigen Voraussetzung nach damit identische prSzi-
pitable Substanz verschwinden. Je nachdem die Absorption
der pr&zipitablen Substanz mit der des Agglutinins mehr oder
weniger fibereinstimmt oder nicht, wird demnach die Reinheit
der Agglutininldsung einzusch&tzen sein.

Wir haben mit Hilfe dieses Merkmals Ldsungen unter-
sucht, die wir in der schon mehrfach erw&hnten Weise durch
Zerlegung der Agglutininverbindungen hergestellt haben. Zu-
n&chst erhielten wir mit diesen Ldsungen keine befriedigenden
Resultate, so daB wir daran gingen, die Reinheit der Ldsungen

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Beziehung der Antikdrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 79

dadnrch zu erhdhen, dafi wir den ProzeB der Absorption und
der Abspaltung zweimal vornahmen ^).

27, Liter stark agglutinierendes, bei 56" maktiviertes Binderserum
wurden mit 150 ccm ernes zweimal gewascheuen Bodensatzes you Pferdeblut
rermischt, bis zum nachsten Tag im Eliskasten stehen gelassen, dann das
Serum scharf abgegossen, das Sediment zunachst durcb Dekantieren, dann
auf der Zentrifuge mit in Eis gekuhlter Kochsalzlosung dreimal gewaschen,
hierauf der Bodensatz in 100 ccm Eochsalzldsung aufgeschwemmt, eine
halbe Stunde auf 46—48" erw&rmt und wahrend des Erwfirmens mehrmals
umgeschuttelt. Nun wurde mit einer sehr kr&ftig wirkenden Zentrifuge
rasch ausgeschleudert (in erwarmten Hiilsen), die Fliissigkeit abgegossen
und nochmals langere 2jeit kraftig zentrifugiert. Man erhalt eine leicht
opalisierende rote Flussigkeit (RA. I). Von der Fliissigkeit wurden 100 ccm
mit 3 ccm gut gewaschenem Bodensatz von Pferdeblut versetzt und bis
zum nachsten Tag im Eiskasten stehen gelassen. Die agglutinierten Blut-
kdrperchen wiuden 4mal mit je 30 ccm gekuhlter Eochsalzldsung ge¬
waschen, dann 7, Stunde mit 8—12 ccm Eochsalzldsung bei 46—48" unter
mehrmaligem Umschiitteln erwarmt, unter mdglichster Vermeidung von
Abkiihlung rasch ausgeschleudert und nochmals bis zur vdlligen Elarung
abzentrifugiert (BA. II). Die ganze Herstellung der Ldsung erfordert
dnige Sorgfalt, und nicht jedesmal gelingt die Herstellung von Ldsungen,
die fur die zu beschreibenden Verauche genugend wirksam und rein sind.

Die so bereiteten Agglutininldsungen versetzten wir
mit verschiedenen Blutarten und mafien den durch die Be-
handlung mit Blut vernrsachten Verlust an Agglutinin und
prizipitabler Substanz.

Versuch.

In 5 kleine Rdhrchen wurden je 20 Tropfen der Lbsung
RA. II gegeben. Der Agglntininwert von RA. II betrug un-
geflhr die HUlfte des zur Herstellung verwendeten inaktiven
Rinderserums. Ein Rbhrchen diente als Kontrollprobe, in die

1) Nach unseren Erfahrungen nehmen BlutkSrperchen aus ver-
schiedenartigen Seien, mit denen sie zusammengebracht werden, prazi-
pitable Substanzen auf, die sie an Eochsalzldsung zum Teil wieder ab-
geben, so daS es, um reine Losungen herzustellen, ndtig ist, die Agglutinine,
mit wenig anderen prazipitablen Substanzen vermengt (BA.-I-Ldsnng) zur
Beladung anzuwenden. Aehnliche Beobachtungen iiber die Absorption von
Eiwei£ durch Zellen machten Sleeswijk (Zeitschr. f. Immunf., Bd. 2,
1909, p. 133, Levaditi und Baijchman, Soc. Biol., Vol. 66, 1909,
p. 1078; Braun, Zeitschr. f. Immunf., Bd. 3; Doerr und Moldovan,
Zeitschr. f. Immunf., Bd. 5, p. 125; vgl. Doerr, Zeitschr. f. Immunf.,
Beferate, Bd. 2, 1910, p. 85.

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80

Karl LaDdBteiner und Emil Prasek,

anderen kamen je 10 Tropfen kriLftig abzentrifugierten Boden-
satzes verschiedener Blutarten. In den Rdhrchen mit Pferde-
blut trat Starke Agglutination ein, bei Kaninchenblut schwache
Agglutination, bei Htihner- und Taubenblut war keine Agglu¬
tination sichtbar. Nach halbstdndiger Digestion bei Zimmer-
temperatur wurde zentrifugiert und die FlQssigkeit auf ibren
Gehalt an Agglutinin und pr&zipitabler Substanz mit Hilfe
von Pferdeblut bezw. mit einem Rinderserum gut prftzipi-
tierenden Kaninchenserum ausgewertet. Der Agglutinin titer
fflr Pferdeblut war in der mit Pferdeblut versetzten Probe auf
Vi6 dos ursprdnglichen Wertes heruntergegangen, in den drei
mit Kaninchen-, HOhner- und Taubenblut versetzten Proben
wurde er nicht deutlich geringer als in der Kontrollprobe
(Auswertung durch Verdiinnung des Agglutinins, ZufQgen einer
kleinen Blutmenge (0,05 ccm 5-proz. Blut zu 0,2 ccm Lbsung).
Zur Bestimmung des Prtizipitingehaltes wurde fdr jede Probe
eine Reihe von Rbhrchen mit zunehmenden Verdfinnungen
der Lbsung angesetzt und zu jeder Probe 0,1 ccm des stark
wirksamen Rinderprbzipitins zugefugt. Es ergaben sich
folgende Prbzipitinreaktioneu:

VerdiiD nungsgrad

V.

V,

V.

Vb

V,B

Kontrollprobe RA. II

deutl.

schwach

Spur

Spur

0

rPferd

Spur

e

Proben nach

Kaninchen

deutl.

schwach

minimale

0

Bdiandlong .

Spur

1

mit Blut Ton

Taiibe

>>

Spur

e

iHuhn

ff

0

inaktives Rindersenim,

stark

deutl.

schwach

Jf

min ini ale

0

j

1

Spur

Dieser Versuch und eine Reihe analoger zeigten, daB die
prbzipitable Substanz ebenso spezifisch ab-
sorbiert wird, wie das Agglutinin, so daC man unter den
Proben mit Hilfe der Prtlzipitation sofort jene er-
kennen kann, die mit dem agglutinablen Blut in BerQhrung
gewesen war. Es ist demnach zu schlieBen, daB das Agglu¬
tinin eine pr&zipitable Substanz ist, und daB die von uns
hergestellten Agglutininlbsungen nicht viel andere prazipitable
Substanzen enthalten, als die Agglutinine selbst, also einen
bemerkenswerten Reinheitsgrad besitzen.

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Beziehung der Antikdrper za der pr^ipitablen Subetanz des Serums.

Hier kann der Einwand gemacht werden, dafi die prJlzi-
pitable Substanz in der Probe mit Agglutinin absorbierendem
Blute nicht spezifisch absorbiert werde wie das Agglutinin,
sondern aus dem Grunde verschwinde, weil die in den be-
treffenden Proben stark agglutinierten BlutkSrperchen fdr
prSzipitable Substanz (Eiweifi) ein grofieres Absorptions-
vermdgen bes&Ben, als nicht agglutinierte Blntkdrperchen. Wir
haben, um diesen Einwand auf seine Stichhaltigkeit zu prflfen,
bei der Wichtigkeit, die der beschriebene Versuch ffir unsere
Schlflsse besitzt, eine Reihe verschiedenartiger Eontrollproben
angestellt.

1) Wir fiigten zu den Kontrollproben mit andersartigem Blute solche
gereinigte Agglutininldsungen, die mit den betrefiendeu Blutarten her-
gestellt waren und auf diese stark agglutinierend wirkten, und zu deren
Herstellung ein Serum genommen werden muSte, das mit dem verwendeten
Prazipitinserum keinen Niederschlag gibt. Wir nahmen also z. B. folgende
Proben ror (Verfahren im ubrigen wie im rorhergehenden Versuch):

Zugefugt ein
gleiches Volumen
von

1

j

Versetzt mit

1

Agglutination

1 ) Binder-BA. II fiir Pferdeblut

l-proz. NaCl-L5s.
Pierde-BA I fiir
Taubenblut

Pferdeblut

stark

2 ) »

>1 Jt

99

Taubenblut

stark btUrker
als bei 1)

3)

9f 97

99

Pferde-BA. I fiir
Kaninchenblut

Eaninchen-

blut

stark

4)

99 99

99

l-proz. NaCl-Loe.

Taubenblut

—

5)

99 99

99 .

l-proz. NaCJl-Lds.

Kaninchen¬

blut

Auch in dieser Anordnung trat eine deutliche Abnahme der pr&zipi- .
tablen Substanz bd der Prufnng mit Binderprazipitin nmr in der Probe 1 auf.

Aehnliche Besultate gaben analog angeordnete Versuche mit anderen
Blutarten und mit Znsiitzen von agglutinierenden Elaninchenimmunseren
statt der BA.-L5sungen. Nur in einzelnen Yersuchen war eine etwas stiirkere
Absorption der (von dem verwendeten Agglutinin artrerschiedenen) prazipi-
tablen Substanz in den agglutinierten Proben zu bemerken und auch hier
war die Differenz bedeutend geringer als bei geniigend gereinigten
Lbeungen jenes Agglutinins, das dem zur Prazipitation benutzten Serum
homolog war, so dafi wir nicht sicher angeben kSnnen, ob uberhaupt Bint*
kdiperchen w&hrend der Agglutination oder im agglutinierten Zustande
zugesetztes Eliweifl leichter absorbieren als normale Blntkdrperchen. Die
Besultate waren auch nicht deutlicher positir, ab wir zur Agglutination
Zdtiobr. f. ImmimlUtifortohimg. Orig. Bd. X. 0

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82

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

von Pferdeblut Rinder-RA.-II-Losung fiir Pferdeblut und als Eiweiii-
zuBatz verdiinnte Losung von Eiklar imd Huhnerserum anwendeten und
dann mit E^arprazipitin und Huhnerserumpr^ipitin reagierten, um eine
Eiweifiabeorption nachzuweisen.

Weitere analoge Versuche stellten wir in der Art an, daS wir zu
Rinder-RA.-L68ung II stark verdiinntes Rinderserum und dann Pferdeblut
zufiigten. Durch Ansetzen einer Kontrollprobe mit einem Zusatz von
NaCl-Ldsung statt des verdiinnten Rinderserums und Auswertung der
prazipitablen Substanz in den Abgiissen lie6 sich zeigen, dafi von den
agglutinierten Blutkorperchen zwar ytie gewohnlich die prazipitale Substanz
der RA.-II-L6sung zum grdfiten Teile, aber nicht im nachweisbaren Ma6e
die aufierdem zugesetzte prazipitable Substanz des Rinderserums auf-
genommen wurde. Man konnte nun wohl denken, da3 die Diiferenz in
der Absorbierbarkeit zwischen der pr^ipitablen Substanz der RA.-II-Losung
und der des gewdhnlichen Rinderserums auf der chemischen Besonderheit
der Eiweifikdiper in der Agglutininlosung und nicht darauf beruhe, dafi
die Agglutinine selbst prazipitable Substanzen sind. Um auch diesem Ein-
wand zu begegnen, haben wir in anderen Versuchen die verdiinnte Losung
des Rinderserums durch eine aus Rinderserum, aber mit anderem Blute
als Pferdeblut (Taubenblut) hergesteUte und mit der Rinder-RA.'II-Losung
fur Pferdeblut auf annahemd gleichen Titer an prazipitabler Substanz ge-
brachte Agglutininlosung ersetzt.

Wir batten 5 Proben:

I. 8 Tropf. Rinder-RA.II fiir Pferdeblut -f- 4 Tropf. Pferdeblut (Bodensatz)

II. 16 yy yy yy yy + 4

JJ J} Jf

^•{s ” Rinder-RA.I’kr Taube }+^ »

IV. 8 Tropf. Rinder-RA. II fiir Pferdeblut -H 2 Tropf. NaCl ‘).

Das Resultat blieb dasselbe. In der Probe I xmd II wurde, wie durch
Vergleich mit Probe IV zu erkennen war, der grofite Teil der prazipitablen
Substanz absorbiert, in Probe III blieb etwa so viel prazipitable Substanz
iibrig, als dem zugesetzten RA.-Taube entsprach.

2) Eine andere Prufung des erwahnten Einwandes nahmen wir in der
Weise vor, dafi wir der gereinigten Agglutininlosung andersartiges
Serumeiweifi in verhaltnismaSig grower Menge zusetzten. Ware die
im oben beschriebenen Versuch beobachtete Absorption der prazipitablen
Substanz der Agglutininldsung nur eine Folge der Agglutination, und
nicht eine spezifische Absorption, miifite ofienbar, wenn man zu den
agglutinierenden Blutkorperchen ein andersartiges Eiweifi (prazipitable
Substanz) in grofier Menge zusetzt, vorzuglich dieses aufgenommen wurde
und die sehr geringen Mengen der prazipitablen Substanz der RA.-Losung
vor der Absorption geschiitzt bleiben.

1) Als Ersatz fiir den Gehalt des Blutkorperchensedimentes an Koch-
salzlosung.

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Beziehiing der Antikorper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 83

V ersuch:

Wir nahmen 4 Proben mit je 20 Tropfen Blnder-RA.-II-Lbsung fiir
Pferdeblut, denen wir (Verfahren wie oben) 8 Tropfen Blut, und zwarvon
Huhn, Taube, Eanmchen und Pferd zusetzten. Nach der Absorption des
Agglutinins war die prazipitablc Substanz aus der uberstehenden Fliissigkeit,
entsprechend dem oben angefiihrten Versuche, fast voUstandig verschwunden,
eine geringe, aber merkliche Abnahme hatte in der Probe mit Kaninchen-
blut stattgefunden, dem Umstand entsprechend, dafi dieses Blut von der
Agglutininlbsung, wenn auch betriichtlich schwacher als Pferdeblut, agglu-
tiniert wirrde und eine geringe Menge Agglutinin absorbierte.

In einem Parallelversuch wurde ebenso vorgegangen, nur kam zu den
Proben von vomherein noch ein Tropfen konzentriertes Kaninchen-
serum. Trotzdem blieben die Besultate der PrSzipitation unverandert
wie in der ersten Versuchsreihe. Der Zusatz einer Menge pr^pitabler
Substanz des Eaninchenserums, die mehr als 20-mal soviel betrug, als das
vorhandene Eiweifi des Pferdeserums (in der BA.-II-Losung) hatte an der
Absorption dieser nichts geandert. Die Besultate blieben auch dieselben als
wir die Art der zugesetzten fremdartigen prazipitablen Substanz variierten
(Menschen-, Batten-, Meerschweinchen- und Hiihnerserum) und deren
Menge um das 2—4-fache vermehrten, so da£ die zugesetzte fremdartige
prazipitable Substanz etwa in 100-fachem Ueberschusse vorhanden war.

Den angefQhrten Kontrollversuchen zufolge ist die An-
nahme, die von nns beobachtete Aufnahme pr&zipitabler Sub¬
stanz sei eine unspezifische Absorption durch agglutinierte
Blntkdrperchen, nicht zulllssig. Die demnach festgestellte Tat-
sache, dafi Agglntinine spezifisch absorbierbare, pr&zipitable
Snbstanzen sind, damit zusammengehalten, dafi es gelingt,
Agglntininldsnngen in gentlgend reinem Zustande herzustellen,
gibt offenbar dieMdglichkeit einer neuen indirekten Metbode
der quantitativen Bestimmnng von Agglutinin
durch Titration deren pr^ipitabler Substanz, eine Bestimmung,
die vollstSndig unabhSngig von der direkten Auswertung ist
und sich zu dieser etwa so verhUlt, wie die indirekte Toxin-
bestimmung zu der direkten.

In dem angeftthrten Versuche enthielt ein Volumen der
RA. - II - LOsung halb so vie! Agglutinin als ein gleiches
Volumen des nrsprttnglichen Rinderserums. Nach unserem
Versuch besteht ferner die pr^ipitable Substanz dieser LOsung
sicher znr H^fte aus Agglutinin; der Versuch whrde den
Wert von Vs ergeben, wir wollen aber, um sicher keinen
Fehler zu begehen, nur die Zahl Vs zur Grundlage der Be-
rechnung machen. Da das Serum doppelt so stark aggln-

6 *

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84

Karl Landsteiner und Emil Pral^ek,

tioierend wirkte als ein gleiches Volumen der RA.-II-Losung
und wir die halbe Eiweifimenge dieser Ldsuug als Agglutinin
in Rechnung setzen, so ist demnach die im gesamten ur-
sprfinglichen Serum enthaltene prSzipitable Substanz
der auf Pferdeblut wirkenden Agglutinine an Konzentration
jener Menge pr^ipitabler Substanz gleichznsetzen, die in der
RA.-II‘L5sung im ganzen enthalten ist. Wir haben nun diese
Menge mit der gesamten pr&zipitablen Substanz des Serums
zu vergleichen. Aus dem Protokoll des angefdhrten Versuches
ergibt sich fdr RA. II ein Gehalt an prUzipitabler Substanz
von Viooo des urspranglichen Serums. Daraus folgt, da man
von der besonderen Beschaffenheit der verschiedenen prSzi-
pitablen Substanzen des Serums fflr den Zweck einer an-
n^bernden SchSltzung absehen darf, und da vorausgesetzt
werden darf, dafi die Immunstoffe im allgemeinen sich
gegen Pr&zipitin llhnlich verhalten wie die untersuchten
Agglutinine, daB in einem Volumen des verwendeten Serums
keine grdfiere Menge von Agglutininen verschiedener Art, bezw.
Immunstoffen dberhaupt vorhanden sein kann, als an-
nMiernd etwa das lOOO-fache jener Snbstanzmenge, die die im
Serum vorhandenen, nur auf Pferdeblut wirkenden Agglutinine
ausmachen. Diese Zahl ist eine Maximalzahl und mdglicher-
weise in Wirklichkeit betrlichtlich kleiner, weil auBer den als
Immunstoffe anzusprechenden Kdrpern auch andere pr^ipi-
table Substanzen im Serum vorhanden sein kbnnen. Eeines-
falls kann, wie dies oft angenommen wurde, ein
normales Serum eine auBerordentlich groBe Zahl
verschiedener stark spezifischer Immunstoffe
enthalten. Die bei den Immunreaktionen des normalen
Serums, z. B. der Agglutininreaktion, wirkenden Substanz-
mengen sind in Wirklichkeit nicht, wie man nach dieser Vor-
stellung annehmen mhBte, beispiellos klein, sondern von der-
selben GrdBenordnung wie die durch Pr^ipitinreaktion nach-
weisbaren Mengen pr^ipitabler Substanz^).

1) z. B. Ton dem Umstande, dali gleidhe Mengen verschiedener prazi-
pitabler Substanzen nicht notwendig gleiche Niederschlagsmengen bei der
Prazipitinreaktion geben.

2) Anhaltspunkte fur one absolute Schatzung dieser Gr56e geben
die Versuche von Muller und Ide.

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fieziehung der Antikorper zu der pr^pitablen Substaoz des Serums. 35

n. XTntersaohmigen an Immnnagglntininen.

Entsprechend den Befunden von Dehne und Ham¬
burger*) an Antitoxinen haben Kraus und Pribram*)
gezeigt, daB beim Zusammenbringen von verddnnten Bakterien-
immunagglutininen mit genflgenden Mengen entsprechender
PrBzipitinsera die Agglutinine unwirksam gemacht werden.

Anffallenderweise waren die Resultate nicht konstant. Be-
stimmte Priizipitinsera waren gegenttber gewissen Agglutininen
wirksam, andere in gleicher Weise hergestellte versagten,
wirkten aber manchmal wieder auf andere Agglutininsera.

Gleiche Ergebnisse batten auch v. E i s 1 e r und T s u r u *).
Bei nnseren eigenen Versuchen haben auch wir ghniiche Er-
fahrungen gemacht wie Kraus und Pfibram. Gegenfiber
einem und demselben sehr hochwertigen Pferde-Typhusagglu-
tinin [Besredka^] erwiesen sich einzelne Prizipitinsera
wirksam, andere nicht.

Versuch:

1 ccm Vioo Pferde-Typhusagglutmin (Besredka) wird mit je 0,5 ccm
yerschiedener Prazipitinsera in einer Kontrollprobe mit 0,5 ccm NaCl ver-
setzt. Die Proben werden 1 Stunde bei 37®, ca. 20 Stunden im Eiskasten
gehalten, dann von den Prazipitaten abzentrifugiert, die Abgiisse mit
Typhusbadllen titriert. (0,5 ccm der Verdiinnnngen + 0,2 ccm einer Auf-
schwemmung von einer schiefen Agarkultur in 10 ccm NaCl 1-proz.).

EontroUe

Prazipitierendes

n

= Vuo Serum
rferdeantiserum No. 186

jy

148

154

16

Agglutininwerte der Abgiisse
480
20
160
1280
640

Man ersieht aus dem Versuchsprotokoll, daB eine anti-
agglntinierende Wirknng von dem (am st^ksten prtlzipitieren-
den) Serum No. 186, auBerdem auch vom Serum No. 148 aus-
gefibt wurde. Unwirksam waren hingegen die Sera No. 16
und 154, obwohl sie ebenso starke NiederschlBge erzeugten

1 ) c. 1. In bezug auf die E^wande von Manteufel, Miinch. med.
Wochenschr., 1906, No. 41 cf. Pribram, ebenda No. 51.

2) Zeitschr. f. Immunitiitsf., Bd. 6, 1910, p. 608.

3) Fur die giitige Ueberlassung von agglutioierenden Immunseren
Bind wir den Herren Besredka, Buppel, Uhlenhuth, Pribram zu
Dank rerpflichtet.

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86

Karl Landsteiner und Emil Prasek

als 148. Bei Serum No. 154 ist sogar eine ansehnliche Ver-
st&rkung der Agglutination zu bemerken, und die gleiche Be-
obachtung machten wir noch Sfters bei analogen Versuchen.
Das Resultat wurde durch mehrmalige Wiederholung der Ver-
suche sichergestellt. Das Serum No. 186 wirkte aufierdem
noch auf mehrere andere Pferdeagglutinine hemmend (Cholera-
serum Bern, Typhusserum Bern, Typhusserum Wien),
ferner auf ein Eselimmunserum. Die Sera No. 148 und 154
pruften wir auch gegentlber Choleraserum von Pferd und Esel;
sie erwiesen sich in diesem Falle unwirksam.

Serum No. 16 hatte bei keinem der damit geprhften Sera
(Typhusserum HSchst, Choleraserum Pferd, Esel) einen ab-
scWachenden Effekt, und ebensowenig Pr^ipitin 286, 287,
bei Typhusserum Besredka und Wien.

Auiler den schon angefQhrten zwei wirksamen Seren
fanden wir noch ein drittes (No. 168), ebenfalls stark prSzipi-
tierendes. Die Hemmung trat hier bei alien von uns geprttften
Pferdeagglutininen ein (Typhusserum Besredka, Bern,
Wien, H6chst, Paratyphusserum Bern, Choleraserum
Bern), aufierdem bei Choleraeselserum.

Eine sichere Erkl^ung ftlr das differente Verhalten der
PrSzipitine anzugeben sind wir vorl&ufig nicht imstande und
mtissen zunachst ebenso wie Kraus und Pribram daran
denken, dafi die einzelnen Prtizipitinsera nicht in gleicher Weise
auf verschiedene in Pferdeseren vorhandene prtLzipitable Sub-
stanzen wirken. Bei der Abs&ttigung von Antilysinen durch Prtl-
zipitinsera wurden gleichartige Beobachtungen von v. Eisler
und Tsuru^) mitgeteilt.

Eines Umstandes miissen vrir noch Erwahnnng tun. Die als wirksani
befundenen Sera No. 186 imd 148 waren durch Immunisierung mit einem
hochwertigen Typhusserum (Besredka) hergestellt worden, und auch das
eehr wirksame Serum No. 168 stammt von einem Tier, dem zuerst eine
intraperitoneale Injektion von 30 ccm Typhusimmunserum (Hochst) und
nach einem Abstande von mehreren Wochen mehrere intravenose Injektionen
von normalem Serum gemacht nurden.

Man konnte demnach daran denken, der Injektion von Immun-
seren eine Bedeutung fiir die Entstehung von Antiimmunagglutininen bei-
zumessen.

1 ) 1. c.

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Beziehong der Antikdrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 87

Dem widersprechen aber die Angaben von Kraus und PHbram,
und auch wir erhielten bei einem neuen Versuche, in dem wir parallel
normales und Immunserum zur Injektion benutzten, in den Seren bdder
Gruppen von Versuchstieren keine Antiagglutininwirkung. Die erhaltenen
Piiizipitioe wirkten allerdings zum Teile ziemlich schvrach.

Auch Atkinson und Banzhal’) fanden keinen Unterschied in
der E^wirkung auf Antitoxin, wenn sie Prazipitinsera einerseits mit
normalem, andererseits mit Antitoxinglobulin herstellten. (Der sich auf
diese Frage beziehende Befund von Ford*) ist wegen der geringwertigen
Immnnsera, die der Autor verwendete, wohl nicht zu verwerten.)

Immerhin sind zur endgiiltigen Losung der Frage neue griindliche
Versuche wiinschenswert.

Die Sicherstellung der Beziehung zwischen spezifischer
Pr&zipitation und Antiimmunkdrperwirkung suchten Kraus
und P fib ram auch noch durch Erzeugung heterologer PrS-
zipitate und durch die Untersuchung der spezifischen Nieder-
schlUge zu erreichen.

Was den ersten Punkt betriift, haben auch wir uns davon
iiberzeugt, dafi heterologe Pr&zipitate Agglutinin nicht in
merklichem MaBe binden, z. B. bei der Versuchsanordnung:
Pferdeagglutinin + Kinder-, Ziegen- oder Hundeserum und
nachfolgendem Zusatz von Kinder-, Ziegen-, Hundeprazipitin.

Auch die Untersuchung der NiederschlUge haben wir
durchgeffihrt und ebenso wie Dehne und Hamburger,
Kraus und Pribram gefunden, daB, wenn wir durch anti-
agglutinierend wirkende Sera Pr^zipitate in den Immunpferde-
seren erzeugten, nach Auflbsung dieser mit Hilfe von normalem
Pferdeserum die Agglutinine zum grdBten Teile wiederge-
wonnen werden. Wir haben dabei nur eine Schwierigkeit ge¬
funden, n9.mlich die agglutinierende Wirkung des Pferdeserums
selbst, das zur Auflosung verwendet wird. Um jede Storung,
die sich daraus ergeben kdnnte, zu vermeiden, sind wir so
vorgegangen, daB wir nach dem Auflbsen der Pr^ipitate in
schwacher S&ure die Agglutinin wirkung prflften. Bei der Ver-
dQnnung der schwach saueren Aufldsung der Niederschl^Lge zum
Zwecke der Titration kdnnen die PrBzipitate teilweise wieder
ausfallen, so daB man sich vor einer Verwechselung mit

1) Proc. Soc. exp. Biol. a. Med., VoL 7, 1910, No. 5; vgl. Atkinson,
Med. News, Vol. 84, 1904, p. 375; zitiert nach Atkinson und Banzhaf.

2) 1. c.

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88

Karl Landsteiner und Emil Praiek,

Bakterienagglutination bei der Betrachtuog ihit freiem Auge
Oder Lupe hflten mufi. Ein Irrtum I&fit sich aber, wenn die
Niederschlage ausfallen, durch Aufstellung von Parallelreihen
ohne Bakterien leicht vermeiden.

Auch kann man nach eingetretener Agglutination vor Ab-
lesung der Proben jeder derselben eine sehr kleine S&uremenge
zusetzen, wodurch die Prfizipitate anfgelSst werden. (Die
Agglutininwerte Underten sich in unseren Versuchen dadurch
nicht.)

Versuch:

Je 1 ccm 7io* Pferde-Typhusagglutiniii (Beared ka) wird veraetzt mit:

1) 1 ccm pr^pitierendem Antipferdeaerum No. 148 und 0,1 ccm
l-proz. NaCl-Loaung.

2) 1 ccm prazipitierendem Antipferdeaerum No. 16 und 0,1 ccm
l-proz. NaCl-LSaung.

3) 1 ccm prazipitierendem Antirinderaerum No. 39 und 0,1 ccm
V,o Rinderaerum.

4) 1 ccm pr^ipitierendem Antihundeaerum No. 110 und 0,1 ccm

Hundeaerum.

5) 1,1 ccm l-proz. NaCl-LSaung.

Die Proben werden 1 Stunde bei 37**, ca. 20 Stunden im Eiakasten
gehalten, dann von den Prazipitaten abzentriiugiert. Die Niederachlage
werden einmal mit 10 ccm l-proz. NaCl gewaachen, in je 2 ccm l-proz.
NaCl-Loaung aufgenommen.

Je 0,2 ccm dieaer Aufachwemmiuigen werden mit 1,8 ccm l-proz.
NaCl-Ldaung verdiinnt und die Niederachlage durch Hinzufugen von
2 Tropfen n/10 HCl klar gelSat. Titration der Zentrifugate und der
Niederachlagaldaungen mit Typhusbacillen. (Auafuhrung wie im vorher-
gehenden Verauch.)

Agg.uflnin.ert der Abgflrte ""

1) 160

320

2) 960

160

3) 960

20

4) 960

20

5) 640 *)

—

Man erkennt aus dem Versuche, dafi das aus der Fliissig-
keit nach Zusatz von PrSzipitin verschwindende Agglutinin
sicher der Hauptsache nach in den Niederschlag dbergeht,
sich also bei Anwendung geeigneter Sera als spezifisch pr§-
zipitable Substanz verhSlt.

1) Entapricht ungefahr Serum.

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Beziehung der Antikorper zu der prazipitablen Subetanz des Serums. 39

Bemerkenswert ist es, dafi die Untersuchun^ des Niederschlages auch
in jenen Fallen manchmal (z. B. bei Ser. 16) betrachtliche Mengen von
Agglutinin im Niederschlag auffinden lafit, in denen die Lbsung nach Zn-
satz Ton Prazipitin keine Abnahme des Agglutinins zeigte, so dafi man
neben der Fallung eines Teiles des Agglutinins wohl eine Verstarkung der
Agglutination dnrch das zugesetzte Immunserum anzunehmen hat.

Die durch frflherp Arbeiten und unsere Untersuchungen
festgestellte Tatsache der spezifischen F&llbarkeit der Agglu-
tinine des Immunserums macht es mSglich, auch in diesem
Falle eiue quantitative Beziehung zwischen dem Agglu¬
tinin und der gesamten prlizipitablen Substanz des
Serums herzustellen. Wir gingen, um einen Maximalwert zu
erhalten, derart vor, daB wir wieder gereinigte Ldsungen von
Typhnsimmnnagglutinin durch Beladung von Bakterien mit
Immunserum und Abspalten des Agglutinins mit Hilfe von
HCl herstellten und zur weiteren Reinigung der gewonnenen
Ldsung das Verfahren wiederholten. In der so hergestellten
Ldsung wurde der Titer des Agglutinins und der pr&zipitablen
Substanz bestimmt und mit den analogen Werten des Immun¬
serums, das zur Herstellung diente, verglichen.

Versuch:

100 com Vto Typhusimmunserum (Hdchst) werden mit dem Basen
Ton 10 Flatten Typhusbacillen zusammengebracht; nach 24-8tund. Aufbe-
wahmng im Eiskasten scharf abzentrifugiert, dreimal mit je 60 ccm mit
Eis gekiihlter l-proz. NaCl-Lbsung gewaschen, in 20 ccm 1-proz. NaCl-
Ldsung aui^enommen, mit 5 ccm n/,o HCl versetzt, nach 10 Minuten
zentrifugiert, fiir Lackmus nentralisiert, nochmals scharf zentrifugiert =
Spaltimg I.

20 ccm Spaltung I nrerden mit dem Basen einer Typhusbacillenplatte
versetzt, nach 24 Stunden Aufbewahrung im Eiskasten abzentrifu^ert, ein-
mal mit 60 ccm in Eis gekiihlter 1-proz. NaCl-Ldsung gewaschen; in
1,5 ccm NaCl-Lbsung aufgenommen, mit 0,5 ccm n/,, HCl versetzt, nach
10 Minuten zentrifugiert, nochmals bis zur Elarheit zentrifugiert = Spal¬
tung n.

Das Ergebnis des Versuches war folgendes:

Der Agglutininwert der gereinigten L6sung (Spaltung II)
betrug Vss gesamten Agglutiningehaltes des Serums; der
Gehalt an pr&zipitabler Substanz (ermittelt mit dem das Agglu¬
tinin neutralisierenden Prfizipitinserum No. 168) war in der
gereinigten L5sung V2000 von dem des Immunserums.

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90

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

Daraus ergibt sich, dafi das ganze im Serum enthalteue
Typhusagglutinin nicht mehr als ^/go gesamten Ge-
haltes des Serums an pr£lzipitabler Substanz ausmacht
(bezw. auch nicht mehr als denselben Bruchteil des ganzen
Eiweifigehaltes). Die gefundene Zahl wird in bezug auf den
Eiweifigehalt noch kleiner, wenn man annimmt, dafi nicht
alles EiweiB fiberhaupt oder durch ein bestimmtes Immun-
serum prazipitierbar ist.

In KontroUversuchen haben wir gefunden, dafi durch Einwirkung von
HCl die Fallbarkeit der pr^ipitablen Substanz nicht betrachtlich starker
geschadigt wird als der Agglutiningehalt, so dafi aus diesem Gnmde kein
Einwand gegen die Berechnung der Maximalzahl abzuleiten ist.

Wir haben, um unser Ergebnis zu uberpriifen, auch untersucht, ob
sich nach Absorption mit Typhusbacillen ein erheblicher Verlust an EiweiB
des Immunserunis nachweisen lasse.

V ersuch:

2 ccm normales Pferdeserum bezw. sehr hochwertiges Pferdetyphus-
immunserum (Besredka) werden mit je 108 ccm 1-proz. NaCl-Losung
verdiinnt, davon je 53 ccm abgenoramen; zu je einer der Proben des nor-
malen bezw. Immunserums je 1 ccm einer Aufschwemmung von Typhus-
bacillen an zwei aufeinanderfolgenden Tagen eingetragen.

Die Kontrollen werden mit je 2 ccm 1 -proz. NaCl-Losung versetzt.
Nach 24-stundiger Aufbewahrung in Eis werden die Proben zentrifugiert.
Der Agglutininwert des Immunserums hat nach der Absorption auf V 4 ^b-
genommen. Je 50 ccm der Proben werden nun im Exsikkator unter Toluol-
zusatz auf 10 ccm eingeengt, mit 150 ccm 95-proz. Alkohol gefallt, nach
mehrtagigem Stehen filtriert, die Niederschlage mit Alkohol gewaschen, bei
100—110® getrocknet und mit Berucksichtigung des Aschengehaltes gewogen.

Die durch Behandeln mit der Bacillenaufschwemmung bewirkte Ab-
nahme des Eiweifigehaltes betrug beim Normsdserum 2,7 mg, beim Immun-
serum 3,4 mg, so dafi, wenn man aus der Differenz der beiden Werte die
Menge des absorbierten Immunagglutinins berechnet, dieses 1,7 mg, also,
da der gesamte Eiweifigehalt des verwendeten Typhusserums 90,5 mg be¬
trug, ungefahr des gesamten Eiweifles ausmacht. SelbstverstandUch
kann der so in einem Versuche ermittelte Wert nur die Bedeutung einer
vorlaufigen, sehr ungenauen Schiitzung beanspruchen und ist nur angefiihrt,
um eine fiir weitere Versuche moglicherweise brauchbare Methode anzudeuten.

1) Die verwendete Bacillenemulsion wmde durch Aufschwemmen des
Rasens von 15 Agarplatten in 6 ccm NaCl-Losung hergestellt. Die Typhus-
bacillen wurden vor der Verwendung zur Absorption, um das Zentrifugieren
zu erleichtern, mit 15 ccm Vtooooo (sehr wirksamen) Pferdetyphusimmun-
serum (Besredka) bei 37® versetzt, dann zweimal mit je 60 ccm NaCl-
Losung gewaschen.

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Beziehung der Antikdrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 91

Eine Schwierigkeit ergibt sich bei dieser VersuchsaDordnung aus der Mog-
lichkeit eines Uebertrittes von Bakterienbestandteilen in die Losung. Es
ware daber angezeigt, ahnliche Versuche mit abgetdteten und mit Form-
aldehyd oder anderen Eiweiii denaturierenden Stoffen behanddten Bakterien
anzustellen.

Unsere Versuche stehen mit den Versuchsergebnissen von
Kraus und Pribram^) in einem Punkte nicht in Einklang,
da diese Autoren angaben, dali Agglutininsera durch Behandeln
mit Formalinbakterien ihre gesamte prizipitable Substanz
einbiilien. Wir haben ein gleiches Resultat beim Wiederholen
der Versuche (Absorption bei 37®) allerdings erhalten kdnnen,
wenn wir mit Formalin versetzte Bakterienemulsionen, aber
eine bei dieser Versuchsanordnung merkliche Abnahme nicht
gefunden, als wir native Bakterienemulsionen verwendeten,
so dafi wir die von Kraus und Pribram beobachtete Er-
scheinung auf eine Behinderung der PrSzipitation durch den
angewendeten Formaldehyd zurtickffihren mhssen^).

Eine solche Hemmung tritt wirklich leicht schon beim
Erw^men mit kleinen Formalinzushtzen ein.

Aus unseren Versuchen fiber die Absorption der prfizipi-
tablen Substanz durch Bakterien geht hervor, daB der Gehalt
an spezifischen Immunstoffen keinen sehr groBen Bruchteil
des GesamteiweiBgehaltes eines Immunserums ausmacht®).

Vergleicht man dieses Resultat mit dem bei der Unter-
suchung von Normalhfimagglutininen von uns gefundenen, so
wird der auch durch andere Momente*) gestfitzte Gedanke
nahe gelegt, daB die starke Wirkung eines Immunserums nicht

1 ) 1. c. p. 80.

2) Bei einer Ueberprilfung ihrer damaligen Angaben kommen Kraus
und Pribram jetzt ebenfalls zu der Annahme, dafi der relatir gering-
fugige Formalingebalt der Bakterienaufscbwemmung die Pr^pitations-
fabigkeit des Agglutininserums aufzubeben imstande ist. Bei Verwendung
nativer Bakterien tritt das Pbanomen nicbt ein. (MiindUcbe Mitteilung.)

3) Es wird nicbt obne Interesse sein, zu untersucben, inwieweit nacb
der Entfemimg der spezifiscben Stoffe eines Immunserums aucb andere
nicbt nabe verwandte Serumwirkungen verloren geben, um zu seben, in¬
wieweit verscbiedene Wirkungen an die gleicben Eiweifiteilcben gebunden
sind. Nacb der Erscbbpfung von Typbusimmunserum (Esel) fanden wir
beispielsweise eine deutUcbe Abnabme des Agglutininwertes fur Taubenblut.

4) Siebe Landsteiner und Beicb, Zeitscbr. f. Hyg., Bd. 58, 1907,
p. 213.

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92

Karl Landeteiner und Emil Prai^ek,

notwendig auf eine Anreicherung von Stoffen, wie sie im nor-
malen Serum vorhanden sind, zuruckzufQhren ist, sondern auch
auf der Entstehung neuer, starker wirksamer Sub-
stanzen beruhen kdnne. Um eine solche Annahme auf dem
angegebenen Wege gendgend zu beweisen, vrfire es allerdings
notig, analoge Versuche, wie die von uns berichteten, am Serum
derselben Tiere vor und nach der Immunisierung anzustellen
und mdglichst hochwertige Sera zu verwenden. (Das von uns
zur Answertung der prdzipitablen Substanz benutzte Serum
Hbchst hatte einen Titer von ca. 6000. Auswertung wie oben.)

m. Ueber einige gegen die Eiweifinator der Immonstofib
voi^ebracMe Einw&nde.

In Bemerkungen von Moreschi^) werden zwei Momente
angefQhrt, die gegen die Eiweifinatnr der Immunhdmolysine
sprechen sollen. Die eine Bemerkung bezieht sich darauf,
dafi eine antikomplementSre Wirkung ausbleiben kann, wenn
Blut mit hdmolytischen Immunkdrpern beladen und ein ent-
sprechendes Prftzipitinserum zugefdgt wird. Nach Moreschi
wiirde diese Erscheinung demonstrieren, dafi der Immunkorper
kein Eiweifikdrper sein kann. Wir haben aber demgegendber
anzufdhren, dafi wir hdufig die Aufnahme prdzipitabler Sub¬
stanz bei der Behandlung von Blutkdrperchen mit Serum
nachweisen konnten (s. oben) und verweisen auf die gleich-
artigen schon erwdhnten Beobachtungen anderer Autoren,
besonders einen Versuch von Sachs^), der durch Injektion
mit Immunserum beladener Blutkdrperchen Prdzipitinbildung
erzielen konnte.

Das zweite Argument von Moreschi besteht im folgen-
den: M. glaubte eine Trennung von Prdzipitinogen und Immun-
kdrper dadurch herbeigefdhrt zu haben, dafi er Kaninchen
mehrmals mit einem fdr Ochsenblut hdmolytischen Ziegen-
immunserum behandelte. Einige Zeit nach der letzten Injektion
war zwar Hfimolysin, aber nicht mehr Ziegeneiweifi durch die
Prdzipitinreaktion nachweisbar. Diesem Experiment gegendber
ist die Mdglichkeit einer Bildung von Hdmolysinen durch die

1 ) Berl. klin. Wochenschr., 1906, p. 100.

2) Centralbl. f. Bakt., Beilage, Bd. 42, 1908, p. 174.

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Beziehung der Antikorper zu der pr^ipitablen Bubstanz des Serums. 93

Injektion von Serum anzufflhren. So berichtet Morgenroth^)
fiber die Bildung von Rinderhfimolysin nach Injektionen von
Ziegenserum bei Kaninchen, und auch wir beobachteten bei
dem Serum eines derart behandelten Kaninchens ein ziemlich
starkes Lfisnngsvermdgen ffir Rinderblut. £s ist daher mdg-
lich, dafi die in den Versuchen von Moreschi gefundenen
Hfimolysine gar nicht dem Ziegenserum entstammten, sondern
durch aktive Immunisierung der Kaninchen gebildet waren.
Die von Moreschi verwendete Kombination ist demnach zur
Beurteilung der Frage ungeeignet. Sollte der angeffihrte Ein-
wand, weil zufSlligerweise bei den Tieren von Moreschi
keine aktive Hfimolysinbildung stattfand, ohne Bedeutung sein,
so wfirde das Resultat Moreschis mit fihnlichen Versuchen
Rfimers fibereinstimmen. Eine Diskussion dieser folgt spfiter.

Wir haben nach dem Beispiele von Moreschi ebenfalls einige hetero-
loge passive Immunisierungen vorgenommen und die eingespritzten Hamo-
lysine bezw. Agglutinine einerseits, die prudpitable Substanz andererseits
un Serum der behandelten Tiere aufgesucht.

Einem grofien Meerschweinchen wurden 5 ccm hochwertigen, fur
Hammelblut hamolytischen Kaninchenserums intxaperitoneal injiziert. Nach
einem und nach sechs Tagen wurden dem Meerschweinchen Semmproben ent-
nommen und ihr Gehalt an Hamolysin fiir Hammelblut und an pr&zi-
pitabler Substanz (mit Hilfe eines vom Huhn stammenden Immunserums)
ausgewertet. Die Probe, die nach einem Tag entnommen wurde, entsprach
sowohl in bezug auf den Gehalt an Htoolysin als an pr&zipitabler Substanz
etwa einer V»o*Verdunnung des injizierten Kaninchenserums. In der Probe
vom 6. Tag entsprach der Hamolysingehalt etwa die Menge der prazipi-
tablen Substanz */,,, jener des Kaninchenserums. Es zeigte sich also, daS
die beiden gepriift^ Eigenschaften ungefahr im gleichen Grade abnahmen.

ESn analoger Versuch wurde bei einem 700 g schweren Kaninchen
gemacht, dem 3 ccm Pferdetyphusimmunserum (Hdchst) intraperitoneal
und 3 ccm intravends injiziert wurden. Auch hier stimmten die Werte des
Agglutinins und der pi&zipitablen Substanz soweit iiberein, als es bei der
geringen Genauigkeit der Auswertungsmethoden erwartet werden kann. Die
Werte, auf das eingespritzte Serum bezogen, waren nach einem Tage fiir
das Agglutinin Vm* ^ prazipitable Substanz des Pferdeserums Vmi
nach 7 Tagen fiir das Agglutinin Vto«) *be prazipitable Substanz V 4 oo«

Auch Zebrowski^O gelangt auf Grund seiner Unter-
suchungen dazu, die Eiweifinatur der Antikorper (Hfimo-

1) Miinch. med. Wochenschr., 1902, p. 1033.

2 ) Oentralbl. f. Bakt, Bd. 45, 1907, p. 49.

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94

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

lysine) in Abrede zn stellen. Er geht von der folgenden
Ueberlegung aus. Da ein Tier in seinem Sernm keine H&mo-
lysine fttr das eigene Blut besitzt, so kOnnen durch Immuni-
siernng mit diesem Serum keine echten Antikdrper gegen
Lysine, die dieses Blut auflosen, entstehen. Hat man also
das Sernm einer mit Rinderblut immunisierten Ziege, und
bringt es mit einem von Kaninchen durch Injektion von Rinder-
serum gewonnenen Pr&zipitin zusammen, so kann wohl eine
Pr&zipitation eintreten, da das Ziegeneiweifi dem Rinder-
eiweifi nahe verwandt ist und durch die Pr&zipitinreaktion
nicht scharf von diesem zu unterscheiden ist, aber es
wird ein solches Pr&zipitinserum, wenn es auch aus dem
oben angeffihrten Grunde einen Niederschlag erzeugt, nach
Zebrowski keine echten Antikdrper gegen die auf Rinder*
blut wirkenden H3,molysine von Ziegenserum enthalten kdnnen.
Das Experiment bestd,tigte anscheinend die Erwartungen
Z ebrowskis.

Als wir die Experimente nachprhften, fiel nns znn£chst
auf, daB in der Arbeit von Zebrowski keine Parallel-
versuche mit einem durch Injektionen von Kaninchen mit
Z i e g e n serum erhaltenen Pr&zipitin angefflhrt sind, urn daraus
zu entnehmen, ob sich ein solches Serum in bezug auf die
antilytische Wirkung wesentlich anders verh^t als das Rinder-
prdzipitin. Wenn das nEmlich nicht der Fall ist, so w^re daraus
zu schlieBen, daB die Versuchsanordnung von Zebrowski
nicht im Sinne seiner Ueberlegungen zu deuten ist Wir haben
solche Parallelversuche ausgefflhrt und erhielten dabei, wenn
wir die Versuchsanordnung von Zebrowski verwendeten,
Resultate, die darauf schlieBen lieBen, daB unter diesen Be-
dingungen die Komplementbindung durch Prazipitate stark
zur Geltung kommt und deshalb gingen wir, urn die Kom¬
plementbindung moglichst auszuschalten, so vor, daB wir Lysin
und Prtizipitin zusammenbrachten, erst nach einiger Zeit
zentrifugierten und die abgehobene FlUssigkeit, mit Komplement
und Blut versetzt, auf hamolytische Wirkung priiften. Um
den EinfluB des Prazipitationsvorganges als solchen kennen
zu lernen, stellten wir auch noch Parallelproben mit einem
priizipitierenden Pferdeantiserum an, das wir allein und mit
Antigen verwendeten.

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Beziehong der AntikSrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 95

Versuch

Yjgo hamolytisches Zie^n-
immunserum f. Binderblutl

l>pioz. NaCl-Lbsung
V,o normales Pferdeserum
Pi^pitieFendes Ziegenanti-
serom ronKan. 62 inakt.
Prazipitierendes Binderaoti-
aenim von Kan. 36 inakt.
PrSzipitierendes Pferdeanti-
serum von Kan. 16 inakt.
Normales Kaninchenserum
inakliviert

10,5

0,35

0,5

0,05

0,3

0,5

0,05

0.3

0,5 [0,5 0,5
- 0,05 0,05
0,05'

0,3

0,3

0,5

Die Proben bleiben
2 Stundcn bei Zim-
mertcraperatur und
20 Stunden im Eis*
kasten. Bei Probe
2 und 4 ist ein sebr
starker, bei Probe 3
^ ein weniger reich-
licher Niederscblag
entstanden. Die Pro¬
ben werden dann
sebarf zenlrifugiert.
Von den Zentrifu-
gaten werden je 0,5
cem abgeboben.

Abgiisse

1 1

2 ’ 1

3

4 1

5

6

7

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Normales aktives Kanin-

chenserum

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0^

5 -proz. gewaschenes Rin-

derblut

0,3

0,3

0,3

0,3

0,3

0,3

0,3

Htoolytische Wirkung

nach 30'

f. kompl.
kompl.

0

e

Spur

kompl.

deutl.

0

dgl. nach 45'

e

Spur

kompl.

kompl.

0

60'

,j jj KAJ

deutl.

f. kompl.

>>

0

In diesem Versuche bewirkte anch das Rinderprfizipitin
entgegen den Angaben von Zebrowski eine deutliche
Hemmung der HSmolyse. Dafi diese Hemmung geringer ist
als die des Ziegenantiserums, entsprach der geringeren pr3-
zipitierenden Wirkung des Serums. Weitgehende Schlflsse
kdnnen wir ans unseren Versuchen nicht ziehen, weil die
Resnltate nicht konstant waren, vielleicht wegen der nicht
ganz auszuschaltenden Komplementbindung. Im hbrigen ver-
lieren die Versnche Zebrowskis an Bedentnng mit RQck-
sicht anf das an Agglutininen von Kraus und Pfibram,
V. Eisler und Tsurn und nns festgestellte ungleiche Ver-
halten einzelner Pr&zipitinsera in bezug auf die Neutralisation
Yon Antikdrpern.

Unter dem gleichen Gesichtspunkt ist wohl auch die
zweite Versuchsanordnung von Zebrowski — Rinderh&mo-
lysin von Hund, Hnndepr^ipitin von Eaninchen — und die
Untersuchung von Wassermann und Bruck^) zu beur-

1) Zeitschr. f. Hyg., Bd. 50, 19(^, p. 309.

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96

Karl Landsteiuer und Emil Pralek,

teilen. Die Beobachtung dieser Autoree, dafi ein durch In-
jektion von HdhnereiweiB hergestelltes Pr&zipitin nicht anti-
lytisch gegen normales HQhnerserum wirkt, obwohl es mit
Serumeiweifi eine PrSzipitinreaktion gibt, ist nicht besonders
auffallend, sobald man eine Multiplizit&t der prSzipitablen
Substanzen des Serums annimmt, von denen nur solche, die
mit dem Lysin nicht identisch sind, durch das Eieranti-
serum gef&llt wiirden. Fiir die Beurteilung dieser Versuche
ist es auch nicht unwichtig zu bemerken, dafi die Umst&nde
fflr die Antilysinwirkung wegen der Verwendung von kon-
zentriertem HQhnerserum ungUnstig lagen (vgl. Kraus und
Pfibram)^).

Die Angaben von Frouin*) Qber die Extraction von
Antikdrpern aus koaguliertem Serum scheinen uns fQr die
Beurteilung der chemischen Natur der Antikorper nicht ver-
wertbar zu sein, da sie einen exakten Vergleich des Gehaltes
der Ldsungen an Eiweifi und an Immunstoffen vermissen
lassen, und ebensowenig die Mitteilungen von Liebermann
und Fenyvessy^), denn es ist wahrscheinlich, dafi das
Fehlen der Eiweifireaktion in den von diesen Antoren dar-
gestellten gereinigten Ldsungen einfach auf ihrem zu geringen
Gehalt an Antikdrpern beruhte, deren spezifische Reaktionen
empfindlicher sind als die gewdhnlichen Eiweifireaktionen.

BetrQchtliches Interesse fQr die vorliegende Frage scheinen
uns hingegen Befunde zu besitzen, die Rdmer und seine
Mitarbeiter^) zum Teil in Gemeinschaft mit Much,
Sames und Sohma erhalten haben.

1 ) 1. c. Nebenbei eei angefuhrt, dafi auch in Huhnereiem Stofie, die
aich ahnlich verhalten vde Serumantikbrper, vorhanden sind. So fanden
>nr ziemlich schwache Hamagglutininwirkungen von Eiereiweifildsungen
g^niiber Kaninchenblut, stiirkere bei Dotterldsungen g^en Kanindien*
und Taubenblut.

2) Soc. Biol., T. 65, 1908.

3) Centralbl. f. Bakt, Bd. 47, 1908, p. 274, 511; Arch. f. Hyg., Bd. 62.

4) Marb. Sitzber., 1906, No. 5, p. 51; Jahrb. f. Eanderheilk., Bd. 63,
p. 684; Munch, med. Wochenschr., 1907, p. 2589; Handbuch der Milch*
kunde, Wiesbaden 1909; Marb. Sitzber., 1908, No. 6, p. 145; Zeitschr. £.
Immunf., Bd. 1, 1909, p. 171; Zdtschr. f. Immunf., Bd. 3; Monatsschr. f.
Geb. u. Gyn., M. 30, 1909; Zeitschr. t Immunf., Bd. 4, 1909, p. 270.

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Beziehung der Antikdrper zu der prazipitablen Substanz des Serums. 97

Salge^), R5mer und Much fanden, dafi saugende
Kinder and junge Tiere heterologe Antikdrper, die ihnen in
der Milch durch passive Immunisierung des Muttertieres zu-
geffihrt werden, viel besser resorbieren als Antitoxin, das der
verffltterten Milch in vitro zugemischt wurde. Beim Nach-
forschen fiber die Ursachen dieser Erscheinung fand nun
Rdmer, dafi auch homologe Antikdrper sich bezfiglich der
Resorbierbarkeit in Milch fihnlich verhalten wie heterologe,
aufierdem zeigte sich aber die auffallende Tatsache, dafi die
nach passiver Immunisierung eines Rindes mit Pferdeantitoxin
sezernierte antitoxinhaltige Milch zum Unterschied von einer
in vitro mit einer entsprechenden Menge Antitoxin vermischten
Milch keine Reaktion mit Pferdeprfizipitin gab (Rdmer und
Much).

Dieentgegengesetzten Resultate von Hamburger^) sind
vermutlich durch die abweichenden Versuchsbedingungen zu
erkifiren and so steht man nach den Versuchen von Rdmer
and Much scheinbar vor der Tatsache, dafi die Antikdrper-
wirkung von der durch die Prfizipitinreaktion nachweisbaren
Substanz zu trennen ist. Ueber die Ursache dieses Verhaltens
sind mehrere Hypothesen mdglich. Eine einfache Umwandlung
von Serumeiweifi zu gleichartigem Milcheiweifi dfirfte bei dem
fihnlichen Verhalten dieser beiden Kdrper gegen die Prfizi-
pitinreaktion kaum hinreichen, um das Phfinomen zu erklfiren,
hingegen kdnnte man vermuten, dafi „eine Umwandlung von

1 ) Jahrb. £. Einderh., Bd. 60, Heft 1.

2) Miinch. med. Wochenschr., 1907, No. 6. Die Versuche von Ham¬
burger sind zum Teil an laktierenden Elaninchen angestellt. Bei diesen
Tieren fanden auch wir in 3 Versuchen nach Injektion von Pferdetyphus-
agglutinin Agglutinin und prazipitable Substanz des Pferdeserums in der
Milch in ungefahr korrespondierenden Mengen.

Agglutinin-

titer

Titer der pr&zipi-
tablen Substanz

Serum vor der Injektion

16

e

Serum nach der Injektion

1280

640

Milch vor der Injektion

e

©

Milch nach der Injektion

160

160

Eingespritztes Typhusimmunserum

32 000

16000

Zeltschr. f. ImmnnitVtifonchanf. Orig. Bd. Z. 7

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98

Karl Landsteiner und Emil Prasek,

Pferdeantitoxin in Rinderantitoxin stattfindet, dafi also ein
Ueberspringen der antitoxischen Funktion von Pferdeserum-
eiwei£ auf das Euhmilcheiweifi eintritt" (R5mer und Much),
Oder es kbnnte, wie Rdmer und Much es ftlr mdglich
halten, das Pferdeserumeiweifi aus irgendeinem Grunde seine
F&llbarkeit verlieren. Trotz den referierten Ergebnissen ist
man also nicht gezwungen, eine dritte mdgliche Annahme zu
machen, nftmlich die, dafi die Antikdrper entweder keine Eiweifi-
stoffe sind Oder aber bei Erhaltung ibrer spezifischen Wirk-
samkeit vom Eiweifi abgetrennt werden kbnnen.

TatsSchlich haben wir gefunden, dall es mdglich ist, einem
Antikdrper enthaltenden Serum in vitro seine Ffillbarkeit
durch spezifisches Pr&zipitin zu nehmen, ohne die Antikdrper-
wirkung aufzuheben, und ohne dafi dabei eine Zerstdrung des
EiweiJles angenommen werden kdnnte.

Um die Antikdrper unter Bedingungen zu bringen, die
denen, wie sie bei der passiven Immunisierung vorliegen,
verwandt sind, haben wir Typhusagglutinin vom Pferd mit
normalem Schafserum vermengt und das Gemisch erwSrmt.

Versuch:

Wir verdunnten hochwertiges Pferdetyphnsagglutinin (Besredka)
auf das 500-faclie einmal durch Zufugen von Kochsalzlosung (Verd. Na),
das andere Mai mit normalem Schafserum (Verd. Sch.). Von jeder der
beiden Losimgen wurde eine Probe V» Stunde auf 60®*) erwarmt, eine zweite
wahrend dieser Zeit bei Zimmertemperatur belassen und dann die Aus-
wertung des Agglutinins und der Substanz bei alien vier Proben vorge-
nommen.

Titration der prazipitablen Substanzen. 0,2 ccm mit 2 Tropfen Pferde-

antiserum No. 287.

Verdiinnung

V.

1/

/«

•A

Vs

V..

v„

V.4

Verd. Sch-
kalt

Verd. Sch.
warm

Verd. Na kalt

Verd. Na warm

starker
Nied.
kein
in all*

starker
Nied.
Niede
sn Boh

starker
Nied.
irschla
rchen ge
deutl.
Nied.
deutl.
Nied.

ziemlich
St. Nied.

S-

irmge Opa
^w.
Nied.
schw.
Nied.

schw.

Nied.

leszenz

Spur

Nied.

Spur

Nied.

Spur

Nied.

e

0

Spur

Nied.

1) 6d erheblich niedrigerer Temperatur scheint die Keaktion seln;
lange Zeit zu beanspruchen.

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BeziehuDg der Antikdrper zu der prazipitablen Substanz des Semms. 99

Titration des Agglutmins. 0,5 com + 4 Tropfen TyphusbacillenemulBion

(wie oben).

Verdimnung

Vx

V,

Ve

V.4

Verd. Sch. kalt

+++

+++

++

+ +

++

+

e

Verd. Sch. warm

+++

++

++

+ +

+

+

e

Verd. Na kalt

+++

++

++

+ +

H-

+

e

Verd. Na warm
Hammelserum auf 60 ** er¬
warmt, Vr Stunde

+++

+

++

+/»

++

0

+ +

-1-

+

e

Analog war das Ergebnis von Versuchen, bei denen die
VerdtinnuDg mit normalem Kaninchenserum statt mit Hammel-
semm vorgenommen wurde.

In anderen Versuchen variierten wir die Mengenverhait-
nisse und untersuchten auch Mischungen vorher erwSrmter
Sera.

Versuch:

Norm ales Pferdeserum wird mit normalem Rinderserum im Ver-
haltnis 1:10 nnd 1:1 gemischt. Von jeder der beiden Mischungen wird
wieder eine Probe */, Stunde auf 60 ® erwfirmt, eine bei gewohnlicher Tem-
peratur gehalten. Aufierdem werden Pferdeserum und Binderserum getrennt
Vs Stunde auf 60** erhitzt und erst nachher die Mischungen (1:10 und
1:1) hergestellt. Die Pr&dpitinreaktion wurde nach Verdunnung der Proben
bis zu einem Gehalt von ’/coo Pferdeserum durch Versetzen von 0,2 ccm
der Ldsungen mit 2 Tropfen Antiserum vorgenommen.

’ Mischung bei Zimmertem- starker Niederschlag, die iiber-
peratur gehalten stehende Fliissigkeit klar

. PI I , Mischung auf 60** erwarmt starke OpaleszenzV, kein
''I Niederschlag

nach Yorhergehendem fk’- starker Niederschlag, die uber-
warmen gemischt stehende Fliissigkeit klar

' Mischung bei Zimmertem- starker Niederschlag, die iiber-
. p£ , 1 p . peratur gehalten stehende Fliissigkeit klar

■ ■ Mischung auf 60 ** erwarmt starker Niederschlag, Fliissig-

keit klar

Unsere Versuche zeigen, dali durch Erwarmen von Pferde-
sernm in Mischung mit andersartigen Blutseren bei Erhaltung

1) Die Opaleszenz scheint um so starker zu sein, je geringer der
Ueberschufi des fremdartigen Serums ist; bei grofiem Ueberschufi und sehr
geringer Konzentration des der Priizipitinprobe unterworfenen E^iw^fies
durfte daher die Opaleszenz der Beobachtung entgehen kdnnen nnd vielleicht
eine Wirkung des Immunserums nicht zu beobachten sein.

7*

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100

Karl Landsteiner und Emil Fra^ek,

(oder mSJliger VerringeruDg) des Agglutinationsvermogens das
Verhalten gegen Prfizipitinsera eine betrachtliche Veranderung
erfahrt, so dafi sedimentierende Niederschiage ttberhaupt nicht
entstehen.

Die Erwarmung als solche kann, wie die angefakrten
Kontrollversuche zeigen, nicht die Ursache der Veranderung
sein und auch nicht der Zusatz des fremdartigen Serums allein,
sondern man mufi annehmen, dafi beim Erwarmen der Mischungen
EiweiBteilchen der beiden verschiedenen Sera Adsorptionsver-
bindungen miteinander eingehen, ebenso wie bei der Er-
warmung nur eines Serums die EiweiBteilchen sich zu grOBeren
Komplexen zusammenlagern ^). (Vgl. die Versuche von Ober-
meyer und Pick fiber Prazipitine gegen erhitzte Sera.) Es
ist wohl verstandlich, daB derartige Komplexe aus aggluti-
nierendem PferdeeiweiB mit normalem andersartigen, z. B.
HammeleiweiB noch immer die Agglutininwirkung auf Bacillen
besitzen, daB aber durch die Zusammenlagerung der zwei
verschiedenen EiweiBarten die auf ein bestimmtes EiweiB ein-
gestellte Prazipitinreaktion eine Storung erffihrt.

In einem Versuche, in dem wir normales Binderserum mit dem
lO-fachen Volumen normalen Pferdeserums vermischten, trat die Ehscheinung
nicht nur dann ein, wenn wir die Mischung erwarmten, sondern auch,
wenn die vorher erwarmten Sera nachtraglich gemischt wurden. Bei der
Friifung mit einem Binderprazipitin bildete sich nur in der kalt gehaltenen
Probe ein Niederschlag (klare iiberstehende Ldsung), wahrend die, sei es
vor, sei es nach dem Erw^men gemischten Losungen auf Prazipitinzusatz
eine starke Trubung zeigten, ohne daS ein Niederschlag sich bildete.

Wir halten es nicht ffir unwahrscheinlich, daB ahnliche
Veranderungen, wie wir sie in vitro bei unserer Versuchs-

1) Analoge Adsorptionsvorgange scheinen haufig beim Erwarmen rer-
schiedener Stoffe mit EiweiBlosungen einzutreten und eine generelle Be-
deutung zu besitzen. Wir erinnem an die unter solchen Umstanden ein-
tretende Inaktivierung von hamolytischen Lipoiden und Staphylolysin
(Landsteiner und v. Bauchenbichler, Zeitschr.f. Immunitatsf., Bd.l,
1909, p. 439), und wir haben femer beobachtet, daS ausgelithertes, von
Cholesterin befreites Serum eine starke Hemmung der Saponinhamolyse
hervorruft, wenn man die serumhaltige Saponinldsung stark erwUrmt, z. B.
auf 100®.

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Beziehimg der Antikorper zn der priizipitablen Substanz des Serums. IQl

anordnung beobachteten, anch im Tierkdrper nach Injektion
eines fremdartigen Serums stattfinden kOunten, denu es wUre
mSglich, daB im TierkSrper die Verfinderungen, wie wir sie
in vitro sahen, leichter eintreten, etwa wegen der Bewegung
des Blutes, die eine Koagulation begtinstigen kdnnte, oder
unter dem EinfluB der lebenden Gewebe, und es ist auch m5g-
lich, daB die Verhfiltnisse bei der Milchsekretion die Ver-
Snderung leichter herbeiftihren — Annahmen, die zum Teil der
experimentellen Untersuchung zug^glich wUren. In jedem
Falle zeigen aber unsere Versuche, daB ein Ausbleiben der
Pr^ipitinreaktion bei Erhaltenbleiben spezifischer Antikdrper-
wirkungen nach passiver Immunisierung mit fremdartigem
Serum nicht als ein genOgender Beweis gegen die EiweiB-
natur der Antikdrper angesehen werden kann.

Zusammenfassung.

Bei Prfizipitinseren war jedesmal gegenflber normalen
H&magglutininen, zumeist auch gegenuber Bakterienagglutininen
eine Hemmungswirkung nachweisbar, die deutlicher bei ge-
reinigten Agglutininldsungen als bei vollem Serum zu be-
obachten ist. Die vorliegenden Beobachtungen sind mit der
Annahme zu vereinigen, daB die Hemmungswirkung durch
AntieiweiBkSrper bedingt ist.

Aus gendgend gereinigten LOsungen normaler Hdm-
agglntinine wird durch Zusatz entsprechenden Blutes die
prdzipitable Substanz gleichzeitig mit den Agglutininen
in spezifischer Weise absorbiert. Die Agglntinine
sind daher als prdzipitable Substanzen, also mit aller
Wahrscheinlichkeit als Eiweifikdrper anzusehen.

Die Herstellung gereinigter Agglutininldsungen und die
Identifizierung der Agglntinine mit pr&zipitablen Suhstanzen
ergibt die Mdglichkeit einer quantitativen Bestimmung der
Agglntinine mit Hilfe der Prdzipitinreaktion, die der indirekten
Toxinbestimmung vergleichbar ist. Es kann auf diesem Wege
nachgewiesen werden, daB die auf ein Antigen wirkenden
Antistoffe eines Normalserums in Mengen der gleichen GrdBen-
ordnung wirksam sind wie EiweiBkdrper bei der PrSzipitin-

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102 Landsteiner und Prasek, Prazipitable Substanz dee Serums.

reaktioo, und dafi demgem&6 die Wirkungen normaler
Seraauf zahllose Antigene unmdglichauf ebenso-
viele pr&formierte, spezifische, wirksame Substanzen
zurflckgefdhrt werden kdnnen.

Durch Herstellung gereinigter Lbsungen von Immun-
agglutininen und Bestimmung ihres Titers an Agglutinin und
prdzipitabler Substanz im Vergleich zum Ausgangsserum ist
es moglich, einen Maximalwert fdr den Eiweifigehalt der spezi-
fischen Immunsubstanz sch&tzungsweise festzustellen.

Mit Edcksicht auf die angeftihrten Ergebnisse fiber Anti-
kbrper normaler Sera ist die Mbglichkeit zu erwfigen, dafi die
hohe Wirksamkeit der Immunsera nicht nur von quantitativen,
sondern auch qualitativen Verfindernngen der ImmunstofTe her-
rfihren kann.

Eine Betrachtung der in der Literatur vorliegenden, gegen
die Eiweifinatur der Antikfirper vorgebrachten Einwfinde ergibt
deren ungenfigende Beweiskraft.

Die unter gewissen Verhfiltnissen beobachtete Erscheinung,
dall bei passiver Immunisierung der injizierte Immunstoff
durch seine Wirkung nachweisbar bleibt, wfihrend die prfi-
zipitable Substanz des injizierten Serums zu verschwinden
scheint, liefert keinen Beweis gegen die Eiweiilnatur der Anti-
kdrper. Es Ififit sich ein fihnliches Phfinomen aufierhalb des
Tierkorpers nachweisen, wenn man ein Gemisch von einem
Immunserum mit einem andersartigen Blutserum erhitzt.

Die Stbrung der Prfizipitinreaktion beruht unter
diesen Umstanden den Versuchsresultaten zufolge auf der
Bildungvon Eomplexen, die ausden beiden verschieden-
artigen Eiweillkbrpern bestehen.

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H. Apolant, ImmuBitiit bei Doppelimpfungen von Tumoren. 103

Nachdruck verboten.

[Aus dem Kdnigl. Institut f(ir experimentelle Therapie zu Frank-
fTU*t a. M. (Direktor: Geh. Obermed.-Rat Prof. Dr. P. Ehrlich).]

Ueber die ImmimitSt bel Boppelimpfiingen ron Tmnoren.

Von Prof. Hugo Apolant.

Mit 9 Tabellen.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 30. Marz 1911.)

Ueber die Natur der erworbenen Resistenz gegen das
Haften geimpfter Geschwulstzellen, ein Zustand, den wir kurz,
wenn auch vielleicht nicht ganz korrekt als erworbene Ge-
schwulstimmnnitkt bezeichnen, sind die Ansichten der Autoren
noch geteilt Vor allem besteht noch keine Einigkeit dardber,
ob man die erworbene Geschwulstimmunitkt von einem ein-
heitlichen Gesichtspunkt aus betrachten oder mit Ehrlich
zwei Formen unterscheiden soli, je nachdem der Schutz gegen
eine zweite Impfung durch eine erfolglose Vorimpfung und
durch einen schon bestehenden, schnell wachsenden Tumor
erzeugt ist. Fflr den letzteren Fall hatte Ehrlich seinerzeit
eine besondere Form, die athreptische Immunitkt anfgestellt,
welche aussagt, dafi die Erfolglosigkeit der zweiten Impfung
auf einer Nichtdisponibilitfit der zum Geschwulstwachstum
notwendigen spezifischen N^rstoffe beruht, welch letztere durch
den exhaustiv wuchernden ersten Tumor vollkommen absor-
biert werden.

Zu diesen Versuchen mit Doppelimpfungen wurde Ehr¬
lich durch die Beobachtung veranlafit, daB Metastasen bei
schnell wuchernden Impftumoren auBerordentlich viel seltener
gefunden werden als bei langsam wachsenden Spontantumoren.
Eine BestStigung von hoher Beweiskraft hat die Ehrlichsche
Anschauung neuerdings durch Clunet^) erhalten, der unter
145 nichtbehandelten Geschwulsttieren seines Stammes M keine
einzige makroskopische Metastase fand, unter 11 operierten
Tieren mit Rezidiven dagegen 5, und bei einem anderen Ge-
schwulststamm F unter 230 nicht operierten Tieren zweimal,

1 ) Recherches exp^rimentales sur les tumeurs malignes. Paris 1910.

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104

Hugo Apolant,

unter 24 operierteo Tieren dagegen 9mal Metastasen be-
obachtete. Clunet bemerkt selbst, dafi sich diese Differenz
Dicht aus der relativ unbedeutenden Lebensverl&ngerang bei
den operierten Tieren erklSren Ikfit, sondern nur mit der
athreptischen Theorie verstandlich wird. Auch die zuerst von
Haaland beobachtete und allseitig bestktigte Immunit^t
gravider und laktierender Tiere bildet eine wichtige Stfitze
der Athrepsie.

Andererseits haben nun zahlreiche Autoren in vdlliger
Verkennung dessen, was Ehrlich unter dem Ausdruck
„Athrepsie‘‘ verstanden wissen wollte, der Theorie auf Grund
der Tatsache widersprochen, dafi auch bei bestehendem Tumor
eine zweite Impfung angehen kann. Ehrlich^) zeigte, daB
dies vorzugsweise dann eintritt, wenn die benutzten Tumoren
keine maximale Virulenz aufweisen, oder wenn die Entwicklung
des ersten Tumors noch nicht genftgend vorgeschritten ist,
um die zur Verfhgung stehenden spezifischen Nahrstoffe voll-
stiindig in Anspruch zu nehmen.

Borrel*), der das Versagen der zweiten Impfung nur
dann beobachtete, wenn die vorhergehende Impfung mit Brei,
nicht, wenn sie mit Stiickchen erfolgt war, erklkrt das Ph&-
nomen, wie schon vor ihm Clowes®), mit einer aktiven
Immunisierung, die nor bei der Breimethode wegen der Re*
sorption genugend groBer immunisierender Men gen zustande
komme. Bei einer Nachprttfung der Borrelschen Angaben
im Frankfurter Institut zeigte sich jedoch, daB die Athrepsie
auch nach Sthckchenimpfung nachweisbar ist und sich in
einem erheblich geringeren Gewicht der aus der zweiten
Impfung hervorgegangenen Tumoren im Gegensatz zu dem der
Kontrollen dokumentiert. Besonders macht Ehrlich darauf
aufmerksam, daB, wenn die Borrelsche Annahme richtig
w&re, die aktive Immunisierung auch eine Wachstumshemmung
des ersten Tumors bewirken mhBte, denn die Hilfshypothese,
daB die Zellen dieses Tumors gegen die betreffenden Antikbrper
festgeworden sind, ist nicht anwendbar, da ja auch die Zellen

1) Verb. d. Deutsch. Path. Ges., Kiel 190S.

2) Bullet, de I’lnst Pa.st., 1907.

3) Brit. med. Journ., 1906, Dec.

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Ueber die Immunitat bei Doppelimpfungen von Tumoren. 105

des nachgeimpften Tumors durch die fortgesetzten Tierpassagen
dieselbe Festigkeit erlangt haben mflfiten. Nun beobachtet
man aber gerade bei der Breiimpfung ein viel schnelleres
Wachstum als bei der Stiickchenimpfnng, und dies ist auch
nach Ehrlich der Grund, weshalb bei der letzteren Methode
die Athrepsie weniger ausgesprochen ist. Bashford und seine
Mitarbeiter, die eine Athrepsie bei Doppelimpfungen nur fttr
das letzte kachektische Stadium gelten lassen, im hbrigen aber
auf dem Standpunkt stehen, daB das schlechte Angehen der
Nachimpfung auf aktiver Immunisierung beruht, glauben einen
Beweis fflr ihre Anschauung darin zu sehen, daB nach ihren
Erfahrungen der zweite Tumor hHufig urn so besser w^chst,
je besser der erste gewachsen ist. Dies steht jedoch schein-
bar im Widerspruch zur Athrepsie. Nach den neueren For-
schungen kann es nkmlich keinem Zweifel unterliegen, daB die
for das Tumorwachstum notwendigen spezifischen NahrstofiFe,
die wir uns natOrlich als Produkte der inneren Sekretion vor-
znstellen haben, quantitativ groBen individuellen Schwankungen
unterliegen. Fflr die natOrliche Tumorimmunitat, die allein
mit dem Fehlen dieser Stoffe befriedigend erkiart werden
kann, ist der Beweis derartiger individueller Differenzen jOngst
von Cu6not und Mercier^) erbracht worden. Es gelang
ihnen namlich, ans ihrem Mausebestand einzelne Familien mit
konstant hoher (80—100 Proz.) und andere mit konstant ge-
ringer Empfindlichkeit (0—20 Proz.) zu zQchten. Die In-
tensitat in der Bildung der hier in Frage kommenden Stoffe
ist also erblich. Auf Grund dieser experimentellen Fest*
stellungen ist es durchaus verstandlich, wenn bei Tieren mit
besonders reichlicher Produktion dieser Stoffe auch die Nach¬
impfung gut angeht Trotzdem ist aber in der uberwiegenden
Mehrzahl der Falle der athreptische EinfiuB des ersten Tu¬
mors auf die Einwirkung der nachgeimpften Zellen, besonders
bei BerOcksichtigung der Kontrollen, evident.

Es lag nahe, die Frage nach der Natur der Tumor-
immnnitat bei Doppelimpfungen durch Exstirpation der Ge-
schwulst mit folgender Nachimpfung zu entscheiden. Man
durfte annehmen, daB, wenn es sich urn eine aktive Immunitat

1 ) C. r. de la Soc. de Biol., T. 69, 1910, No. 38.

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106

Hugo Apolaut,

handelte, die Nachimpfung negativ ausfiele, wfihrend im anderen
Fall durch Entfernung der die NS,hrstoffe absorbierenden Ge-
schwulst dem Anwachsen der nachgeimpften Zellen keia
Hindernis im Wege stflnde. Diese Versuche sind bereits vor
Jahren von Schone^) bei M&usen und von Sticker*) bei
Hunden ausgefUhrt worden. Schdne, der ilber dieselben
summarisch in den Verhandlungen der Deutschen Gesellschaft
fQr Chirurgie berichtete, stellte bei einer grdfieren Anzahl von
Tieren fest, dafi eine zweite, 8 Tage bis 3 Wochen nach der
Exstirpation des ersten Tumors vorgenommene Impfnng eben-
sogut wie bei normalen M^iusen anging. Aus technischen
Grunden war es nicht moglich, die Impfnng der Operation
friiher folgen zu lassen. Sticker, der zum Teil sofort nach
der Operation impfte, kam bei Hunden zu den gleichen Resul-
taten, die jedoch wegen der klinischen Besonderheiten des von
ihm verwandten Lymphosarkoms nur bedingt zu verwerten sind.

Uhlenhuth, Haendel und Steffenhagen, die vor
einiger Zeit*) fiber analoge Versuche bei Ratten berichteten,
erwfihnen die Arbeiten von Schdne und Sticker nicht, ver-
mutlich, weil die Literatur erst in der ausffihrlichen Publikation
in den „Arbeiten aus dem Eaiserl. Gesundheitsamt^^ *) berfick-
sichtigt werden sollte®). Ihre von den Schdneschen abweichen-
den Resultate verdienen eine besondere Beachtung, da es ihnen
angeblich gelungen ist, in dem Angehen sekundfir geimpfter Tu-
moren nach Operation der ersten Geschwulst ein gesetzmfiBiges
Verhalten aufzudecken. Die zweite Impfung soli nfimlich nur
dann angehen, wenn die erste Geschwulst nicht radikal operiert
ist, also rezidiviert. Tritt jedoch kein Rezidiv auf, so ist das
Tier gegen das Angehen der zweiten Impfung immun. Dabei
soil es gleich sein, ob die Nachimpfung sofort oder erst einige
Zeit nach der Operation erfolgt. Dem Einwand, dafi es sich
in dem einen Fall um immune, in dem anderen um nicht

1) Verb. d. Deutsch. Ges. f. Chir., 1907.

2) Munch, med. Wochenschr., 1906.

3) Diese Zeitschr., Bd. 6, 1910, p. 654.

4) Ist wahrend der Korrektur dieser Arbeit erschienen.

5) Die an Zahl geringen Beobachtungen Clunets 1. c. und Gays
(Fifth rep. of the canc. comm, of Harvard University) tragen zur Klarung
der Frage nichts bei.

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Ueber die Immunitat bei Doppelimpfimgen von Tumoren. 107

immune Tiere handelt, begegnen sie mit der Behauptung, daJi
es ganz im Belieben des Operateurs steht, durch Zuriicklassen,
wenn auch geringer Geschwulstmengen das Angehen der zweiten
Impfung zu sichern oder durch sorgfllltige radikale Operation
zu verhindern. Leider geben die Autoren wohl im Hinblick
auf die in Aussicht gestellte, aber meines Wissens bisher noch
nicht erfolgte ausfiihrliche Publikation in den ^Arb.a. d. Kaiserl.
Gesundheitsamt^, keine genaueren Protokolle, auch keine An-
gaben fiber die Zahl der von ihnen operierten Tiere, was die
Beurteilung ihrer Resultate aufierordentlich erschwert Sie
erkl&ren ihre Befunde, auf die die athreptische Theorie nicht
passe, mit einer Bildung von Schutz- und Abwehrstoffen und
einer antagonistischen Wechselwirkung zwischen diesen und den
wuchernden Geschwulstzellen. Werden die Tumoren radikal
operiert, so kfinnen die im Kfirper zirkulierenden Abwehrstoffe
bei einer zweiten Impfung voll zur Wirkung gelangen, d. h.
die nachgeimpften Zellen an der Weiterentwicklung hindern.
Bleiben dagegen entwicklungsffihige Zellen bei der Operation
zurfick, aus denen ein Rezidiv entsteht, so werden die Abwehr¬
stoffe von diesen Zellen so vollkommen paraljsiert, daJl sich
jetzt die nachgeimpften Zellen frei entwickeln kdnnen.

Diese auf den ersten Blick vielleicht plausibel erscheinende
Erklfirung ist nun aber schon mit den weiteren experimentellen
Ermittelungen Uhlenhuths und seiner Mitarbeiter un-
vereinbar. Zunfichst bereitet es den Autoren sichtlich groile
Schwierigkeiten, das schnellere Wachstum der Rezidive zu er-
klfiren. Es ist ja auch in der Tat ganz unverstfindlich, dafi
die wenigen nach der Operation zurfickbleibenden Tumor-
zellen, die ja nun, nach der Uhlenhuthschen Anschaunng,
unter der Wirkung der gesamten im Blut kreisenden Abwehr¬
stoffe stehen, unter diesen ffir sie eigentlich sehr ungfinstigen
Verhaltnissen zu besonders lebhaftem Wachstum angeregt
werden sollen. Die Autoren meinen zwar, dafi diese Zellen
„nach der Entfernung der Hauptmasse der Geschwulst durch
die Operation auf ihrem alten Mutterboden jetzt sogar unter
bessere und gfinstigere Ernfihrungsbedingungen gesetzt sind,
als sie es zuvor beim Bestehen des ganzen primfiren, bereits
zur maximalen Grdfie ausgewachsenen Tumors waren^^; sie
scheinen jedoch von der pathologisch nicht recht verstfind-

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108

Hugo Apoiant,

lichen Beweiskraft dieses Argumentes selbst nicht so vdllig
hberzeugt, dail sie der weiteren Annahme einer Serumfestig-
keit dieser Tumorzellen entbehren kdnnten. Wie oben er-
w&hnt, ist diese Hilfshypothese aber schon von Ehrlich bei
der Kritik der Borrelschen Anschauung widerlegt worden,
denn, um es noch einmal zu sagen, wenn eine Serumfestigkeit
tats&chlich vorhanden w&re, so mtifite sie alien Impftumoren
desselben durch zahlreiche Generationen gezQchteten Stammes
zuerkannt werden, ganz gleich, ob es sich um eine Vor- Oder
Nachimpfung oder um ein Rezidiv handelt. Direkt widerlegt
wird die Serumfestigkeit aber durch die von Uhlenhuth
und seinen Mitarbeitern selbst konstatierte Tatsache, dafi nach
rezidivfreier Operation auch die Impfung mit demselben
Tumor erfolglos ist. Nach den Autoren erklart sich dies
dadurch, „dall durch die rezidivfreie Operation einmal alle
Abwehrstoffe des Organismus frei verfflgbar werden und ferner,
dafi das von seinem Mutterboden losgelbste Tumorgewebe
durch die Einpflanzung an anderer Stelle in seiner ErnShrung
und seinen Entwicklungsbedingungen so gestbrt iind ge-
schfidigt wird, dafi es unter diesen ungQnstigen Bedingungen
im wechselseitigen Kampf unterliegen mufi*^. Hiernach sind
die Zellen also wieder nicht serumfest, denn sonst kbnnten
sie ja von den Abwehrstoffen nicht geschildigt werden, und
was die Loslbsung des Tumorgewebes vom Mutterboden be-
trifft, so bedeutet das gewifi eine ZellschMigung, ist aber im
iibrigen die einzig mbgliche Impfmethode, mit der doch in
den letzten 10 Jahren die gl&nzendsten Resultate erzielt
worden sind.

Es ist nicht recht verstUndlich, warum sich die Autoren
dagegen strfiuben, das schnellere Wachstum der Rezidive mit
Ehrlichs Athrepsie zu erkl&ren. Neben den erwahnten
Beobachtungen Clunets fiber das Wachstum der Metastasen
kann ich mir keinen zwingenderen Beweis ffir die Richtigkeit
der Ehrlichschen Anschauungen vorstellen als gerade dieses
schnellere Wachstum der Rezidive. Dasselbe Quantum spe-
zifischer NfihrstoflFe, das vor der Operation ffir den grofien
Tumor ausreichen mufite, steht jetzt einer relativ geringen
Anzahl von Tumorzellen zur Verffigung, was die schnellere
Proliferation derselben durchaus verstfindlich macht.

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Ueber die Immunitat bei Doppelitnpfungen von Tumoren. 109

Das Nichtangehen eiaer Nachimpfung wird uns weiterhin
beschUftigen, zuvor mOchte ich auf weitere Angaben Uhlen-
huths und seiner Mitarbeiter eingehen, fOr die ich ebenfalls
nur die Athrepsie als ausreichende Erkl&rnng ansehen kano.

Die Autoren machten zunlchst gleichzeitige Mehrfach-
impfungen und konstatierten, dafi zwei und sogar drei Impfun-
gen mindestens ebenso schnelle Entwicklung zeigten wie eine
einzelne Impfung. Sie behaupten, das dies im Widerspruch
steht mit Athrepsie, Qbersehen aber, dafi Ehrlich von Anfang
an die vorherige Ausbildung eines stark wnchern-
den Tumors als unbedingte Voraussetzung einer athrep-
tischen Immunit&t aufgestellt hat. Immerhin ist es interessant,
dafi Uhlenhuth und seine Mitarbeiter bei den Dreifach-
impfungen ein selteneres Angehen beobachtet haben, und zwar
in 50 Proz. gegentiber 83 und 88 Proz. bei Einfach- und
Doppelimpfnngen. Wenn es sich hierbei nicht um einen Zu-
fall handelt, den ich fdr durchaus mbglich halte, und den
auch die Autoren nicht ganz ausschlieOen, so ist jedenfalls die
Uhlenhuthsche Deutung wenig hberzeugend, nSmlich, „dafi
bei einem grbfieren Teil der Tiere wie sonst, durch die an
drei Stellen gesetzte Tumorimplantation, die Ausbildung von
Abwehrstoffen in besonders starkem Malle angeregt wurde, so
dad in diesem Falle schon bei der einen HMfte der geimpften
Tiere die Geschwulstentwicklung von vornherein unterdrilckt
werden konnte, w&hrend bei der anderen der Organismus in
seinen Abwehrbestrebungen unterlag und es so an alien drei
Stellen zu einem besonders starken Tumorwachstum kommen
konnte*^. Da nach Ansicht der Autoren doch offenbar die
Abwehrstoffe in jedem Fall gebildet werden, — denn sie geben
ja an, dafi nach radikaler Operation die Nachimpfung eben
wegen dieser Abwehrstoffe stets negativ verlfiuft, — so ist
es nicht recht verst&ndlich, wie gerade bei Dreifachimpfungen
der Organismus in seinen Abwehrbestrebungen gelegentlich
unterliegen soli. Auch mflfiten ja dann gerade spfite Nach-
impfungen, nachdem der erste Tumor sich reich entwickelt
und so die Abwehrbestrebungen des Organismus unterdrfickt
hat, erfolgreich sein, was selbst Uhlenhuth und seine Mit¬
arbeiter, wie wir sogleich sehen werden, negieren. Die Autoren
haben nfimlich weiter konstatiert, dafi, wenn die Doppel-

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no

Hugo Apolant,

impfangen nicht gleichzeitig oder sukzessive gemacht werden,
bei einem Intervall von einer Woche nur 40 Proz., bei einem
Intervall von 2 Wochen nur noch 20—30 Proz. der Impfangen
angingen, w&hrend bei noch l&ngerem Intervall von 3—4
Wochen alle Nachimpfnngen negativ verliefen. Dieses Resultat
entspricht so vollkommen den Forderungen der athreptischen
Theorie, daB eine NStigung, znr Erklflrung gftnzlich un-
bewiesene Abwehrstoffe heranzuziehen, in keiner Weise vor-
liegt. Der Zusatz der Autoren, dafi der nachgeimpfte Tamor
auf den Tieren am besten wBchst, auf denen schon der erste
Tumor das beste Wachstum zeigte, steht, wie schon erwBhnt,
nicht im Widerspruch zur Athrepsie, sondern erklBrt sich
ohne weiteres aus den von C u 6 n o t and M e r c i e r bewiesenen
individuellen Differenzen in der quantitativen Produktion der
spezifischen N§.hrstofire.

Wie steht es nun aber mit dem von Uhlenhnth und
seinen Mitarbeitern vertretenen und offenbar die Basis aller
ihrer theoretischen ErwSgungen bildenden Gesetz, daB nfim-
lich der Erfolg der Nachimpfung ganz davon abhBngt, ob der
erste Tumor radikal entfernt worden ist oder nicht?

Ich habe die Versuche mit 2 Rattensarkom- und 2 MBuse-
carcinomstftmmen nachgeprtift und bin dabei doch zu wesent-
lich anderen Resultaten gelangt.

Betrachten wir zunBchst die Rattenversuche. Die ver-
wendeten 2 SpindelzellensarkomstBmme stimmen in Struktur,
Impfausbeute und Wachstumsschnelligkeit mit dem von
Uhlenhuth benutzten Bashfordschen Sarkom ttberein.
Die Bedeutung der nicht selten bei unserem Tumor zu beob-
achtenden spontanen Resorption von bereits recht erheblichen,
bis hhhnereigroBen Tumoren fQr die vorliegenden Fragen wird
uns spMer beschtlftigen. In den beifolgenden 5 Tabellen sind
die Protokolle dieser Rattenversuche wiedergegeben. Die
schwarzen Tumoren entsprechen der ersten Impfung resp. den
Rezidiven, die roten den Nachimpfungen. Letztere erfolgten
1—9 Tage nach der Operation. In den F&llen, in denen ich
bestrebt war, mSglichst radikal zu operieren, wurde der mit
der Geschwulst verwachsene Teil der Haut stets mit entfernt,
ebenso die infiltrierten Muskelpartien. Die zuweilen not-
wendige Eroffnung der Bauchhdhle erwies sich in keinem Falle

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Ueber die Immunitat bei Doppeliinpfungen von Tumoren. m

sch&dlich. Dagegen sah ich prinzipiell von alien weiteren
Manipulationen ab, namentlich von dem, vrie es scheint, hS.ufig
von Uhlenhuth angewendeten Ausbrennen der Wunde.
Absichtlich wurden Tumorreste nnr bei Tier 5 bis 8 auf
Tabelle I sowie bei Tier 7 auf Tabelle III zurflckgelassen.

Betrachten wir nun die Protokolle genauer, so sehen wir
in der Tat zahlreiche F&Ile, in denen die Resultate den An-
gaben Uhlenbuths und seiner Mitarbeiter entsprechen, so
auf Tabelle 1, wo die Nachimpfung nur bei Tier 3 dauemd
positiv blieb, das auch ein krUftig wachsendes Rezidiv auf-
wies. Trat dagegen kein Rezidiv auf, so war auch die Nach¬
impfung erfolglos. Allerdings ist zu bemerken, dall bei Tier
5 bis 8 trotz nnvollst&ndiger Operation das Rezidiv ausblieb.
Es handelt sich hier urn immune Tiere, bei denen der erste
Tumor ohne Operation zur spontanen Resorption gekommen
w9xe, was sich ans ihrer langsamen Entwicklung und dem
sehr geringen, in 18 Tagen erreichten Gewicht von 2,5 bis 5 g
ergibt.

Auch die zweite Tabelle entspricht im ganzen den Uhlen-
huthschen Angaben, zumal wenn wir berflcksichtigen, daB
bei dem Tier 4, das nur eine sehr geringe Entwicklung der
snbkutanen Nachimpfung zeigt, bei der Sektion 2 groBe Ab-
dominaltumoren gefunden wurden, die, wie der identische
histologische Ban wahrscheinlich macht, durch unvorsichtige
Impfnng entstanden waren. Nur Tier 3 entspricht insofern
nicht ganz dem Uhlenhuthschen Gesetz, als hier bei offen-
bar nicht radikaler Operation das Rezidiv allmUhlich resorbiert
wurde, w&hrend die Nachimpfung sich nur khmmerlich ent-
wickelte und bei Ifingerem Leben des Tieres wohl auch negativ
geworden wfire. Die Erkllu'ung dieses Falles werden wir
spHter geben.

Auf Tabelle III widerspricht Tier 2 dem Uhlenhuth¬
schen Gesetz, da sich trotz radikaler Operation aus der Nach-
impfnng ein mfichtiger Tumor entwickelte. Noch stfirkere
Abweichungen zeigt Tabelle IV, wo wir bei 4 unter 5 rezidiv-
frei operierten Tieren ein ausgezeichnetes Angehen der zweiten
Impfung konstatieren, und endlich trifft dies auf Tabelle V
in 50 Proz. der rezidivfreien Tiere zu, trotzdem hier die
Nachimpfung einen Tag nach der Operation gemacht wurde

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112

Hugo Apolant,

Bei den Mliaseversuchen, fttr die die CarcinomstSmme 5
und 11 zur Verwendung kamen, waren die Resultate folgende:

Tabelle VI entspricht vollkommen dem Uhlenhnthschen
Gesetz. In Tabelle VII macht Tier 2 und 4 eine Ausnahme,
in der folgenden Tabelle VIII Tier 1 und 2, und endlich ist
in Tabelle IX die Nachimpfung zwar nur bei einem rezidiv-
freien Tier 13 angegangen, doch ist zu betonen, dafi sie sich
unter den ersten 7 absichtlich unvollst&ndig operierten Tieren
nur bei einem einzigen (Tier 6) gut entwickelt hat, bei den
anderen dagegen, und zwar offenbar unter dem athreptischen
Einflufi des ersten Tumors, nur sehr kiimmerlich gewachsen ist.

Aus diesen Resultaten ergibt sich zun^hst, dafi von einer
gesetzmfifiigen Abhfingigkeit des Erfolges der zweiten Impfung
von dem Auftreten oder Ausbleiben eines Rezidivs keine Rede
sein kann. Wir haben bei Ratten in etwa 20 Proz. und bei
Mausen in 15 Proz. offenkundige Ausnahmen konstatiert und
sind, da wir die Ursache des Phfinomens erkannt zu haben
glauben, der Meinung, dafi der Prozentsatz dieser Aus¬
nahmen bei geeigneter Versuchsanordnung betrfichtlich ge-
steigert werden kann.

Hieran findert sich nichts Wesentliches, auch wenn man
die beiden rezidivfreien und mit positivem Erfolg nachge-
impften Tiere als nicht ganz beweiskrfiftig ausschaltet, die bei
der Sektion Lungenmetastasen aufwiesen. In dem einen Fall,
Mans 13 auf Tabelle I, war die Metastase stecknadelkopf-
grofi, in dem anderen, Ratte 3 auf Tabelle V, war der untere
rechte Lungenlappen vollstfindig von Tumormassen durchsetzt.
NatUrlich bleibt es eine ofifene Frage, ob die Metastasen von
dem ersten oder zweiten Tumor herrfihren, so dafi derartige
Beobachtungen hdcbstens dann im Uhlenhuthschen Sinne
zu verwerten wSren, wenn sie konstant oder doch in einem
hohen Prozentsatz gemacht wurden, aber nicht, wenn sie, wie
in unseren Versuchen, seltene Ausnahmen bilden.

Immerhin ist es auffallend, dafi das Gesetz in einem
hohen Prozentsatz der FSlle scheinbar stimmt. Wie ist dieser
Widerspruch zu erklfiren?

Der Grundfehler in den Deduktionen Uhlenhuths und
seiner Mitarbeiter liegt meiner Ansicht nach darin, dafi sie
das Ausbleiben des Rezidivs von einem einzigen Moment

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Ueber die Immunitat bd Doppelimpfungen von Tumoien. 113

abhfingig machen, n&mlich von der radikalen Operation. Diese
Auffassung ist in hohem Grade einseitig und pafit auf viele
F&lle nicht. ZunS^hst scheiden hier schon diejenigen Tiere
aus, in denen der Tumor so wie so zur spontanen Resorption
gekommen w&re. Unsere recht grofien Erfahrungen an Ratten-
tumoren haben uns gelehrt, dafi man durchaus nicht immer
aus dem anffinglichen Wachstum Schltisse auf die sp&tere
Resorption ziehen kann. Gewifi kdndigt sich die spontane
Heilung h&ufig von vorneherein durch ein langsameres Wachs¬
tum an, doch gibt es auch Ausnahmen. Ich verfQge fiber
eine nicht geringe Anzahl von Beobachtungen, in denen
das anffinglich fippige Wachstum zu Pflaumen- bis Eigrfifie
die dennoch eintretende spontane Resorption nicht ahnen
liefi. Die Verhfiltnisse liegen hier ganz fihnlich wie bei
den Impfungen auf die fremde Rasse. In beiden Ffillen
handelt es sich um eine natfirliche Immunitfit, die nach
unserer Auffassung nur mit dem Fehlen spezifischer Nfihr-
stoffe ausreichend erklfirt wird. Wenn wir aber trotzdem bei
4er Impfung von Mfiosegeschwfilsten auf Ratten nicht selten
anfangs ein Wachstum beobachten, das hinter dem auf der
Maus kaum zurficksteht, so kann es nicht wnnder nehmen,
wenn die gleiche Erscheinung in noch verstfirktem Mafie bei
dem athreptisch immunen, artgleichen Tier beobachtet wird,
wo die betreffenden Stoffe vielleicht nicht ganz fehlen, sondern
nur in einer ffir die dauernde Zellproliferation ungenfigenden
<2uantitfit produziert werden. Bei den Tieren 5—8 der Ta-
belle I ist die Immunitfit offenkundig, es entzieht sich aber
vollkommen der Beurteilung, ob nicht auch manches der
scheinbar empffinglichen Tiere in Wahrheit doch immun ist,
so dafi der nicht operativ entfernte Tumor doch zur spontanen
Resorption gekommen wfire. Allerdings ist eine Grenze vor-
handen, fiber die hinaus eine Spontanheilung nicht mehr vor-
kommt, und folgerichtig kann daher die natfirliche Immunitfit
nur bei denjenigen radikal operierten und mit negativem Er-
folg nachgeimpften Tieren ausgeschlossen werden, bei denen
diese Grenze fiberschritten war. Hieraus ergibt sich ohne
weiteres, wie wichtig ffir unser Problem ein genaues Urteil
fiber das Wachstum des operierten Tumors ist, vor allem

Zettsdir. f. ImmonlttittfonekaDf. Orif. Bd. X. 8

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114

Hugo Apolant,

dariiber, ob in der letzten Zeit ein Nachlassen oder gar Still-
stand in der Proliferation eingetreten ist.

Ein ebenfalls zu berflcksichtigender, nicht nnwichtiger
Punkt ist die Schkdignng des Tieres dnrch die Operation.
Es ist eine Tatsache, die wohl von alien liber reiche Er-
fahrungen verfilgenden Experimentatoren best&tigt warden
ddrfte, dafi Tumorimpfungen nnr auf absolut gesunden Tieren
angehen. Das geht so weit, dafi nach nnseren Erfahrnngen
bei von aufierhalb gesandten Tieren ein viel besseres Resultat
erzielt wird, wenn die Impfnng nicht sofort im Anschlufi an
die Raise, sondern erst 24 Stnnden spSter erfolgt Nun ist
zwar znzugeben, dafi Ratten sowohl wie Mfinse selbst schwere
Eingriffe fiberraschend gnt vertragen. Ich selbst babe, abge-
sehen von drei dnrch unvorsichtige Narkose bedingten Todes-
fSllen, kein einziges Tier an den direkten Folgen der Operation
verloren. Dafi dnrch letztere jedoch gelegentlich bei einem
vorher empffinglichen Tier eine Immnnitftt erzielt warden
kann, wird direkt bewiesen dnrch Tier 3 anf Tabelle II. Der
erste Tnmor hat anf dieser Ratte in knapp einem Monat ein
Gewicht von 26 g erreicht, ein Wachstnm, das nicht mehr in
den Grenzen der natfirlichen Immnnitfit liegt. Die Operation
war nicht radikal, doch heilte das kleine Rezidiv spontan,
nnd anch der nachgeimpfte Tumor wnchs nnr khmmerlich
nnd zeigt in der letzten Woche dentlich regressive Tendenz.
Es ist nicht einzusehen, welches Moment aufier der Operation
diesen Umschwung in der Empfllnglichkeit herbeigefQhrt haben
soil. Uhlenhuths ErkllLrung pafit nicht, denn es bestand
ja ein deutliches Rezidiv.

Dafi die dnrch die Operation gesetzte SchSdigung, zu der
ich vor allem anch das von Uhlenhuth, wie es scheint,
vielfach angewendete Ausbrennen der Wnnde zMile, sich
h^ufiger bei radikaler als bei unvollst^lndiger Entfernung des
Tumors bemerkbar macht, ist ganz selbstverstfindlich, da der
Eingriff ceteris paribus naturgemtlfi im ersten Fall grbfier ist.
Ich will es dahingestellt sein lassen, in welchem Prozentsatz
die erworbene Immnnitllt auf die Operation zu beziehen ist.
Sicherlich steht dieses Moment in seiner Bedeutnng hinter
dem nunmehr zu besprechenden, das mir den eigentlichen
Schlfissel zur Losung des Problems zu bilden scheint, zurfick.

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Ueber die Immunitat bei Doppelimpfimgen von Tumoren. 115

£s erhebt sich n&mlich die Frage: 1st denn wirklich in alien
Fallen, in denen kein Rezidiv auftritt, radikal operiert worden,
in dem Sinne, dail operativ alles Krankhafte entfernt ist? Die
Frage ist berechtigter, als es aof den ersten Blick scheint.
Auch wenn man von den sicher konstatierten einschlEgigen
Beobachtungen bei menschlichen Tumoren, besonders Ghorion-
epitheliomen ^), bei denen es im Anschlufi an unvollst&ndige
Operationen zu Spontanheilungen gekommen ist, absieht, ist
die MSglichkeit analoger VorgSnge bei TiergeschwOlsten durch-
aus vorhanden, besonders wenn man sich die bier in Betracht
kommenden speziellen VerhOltnisse vergegenwOrtigt. Sind
auch dem malignen Wachstum der Ratten- und Mftusege-
schwfllste, wie ich das schon vor Jahren betont habe, gewisse
Schranken gesetzt, die anscheinend niemals fiberschritten
werden, so gehdrt doch eine meist sogar frOhzeitige infiltrative
Durchsetzung der Haut und Muskulatnr zu den typischen
Erscheinungen. Will man daher von besonderen Mafinahmen,
wie Brennen etc., Abstand nehmen, so ist eine radikale Ope¬
ration grdfierer Tumoren nur durch Fortnahme umfangreicher
Hantpartien mdglich. Zuweilen, namentlich bei Mausen, werden
hierdurch grofie Defekte gesetzt, die schwer und nur unter
starker Spannung der Haut zu decken sind. Bleiben unter
diesen Umstfinden kleine, dem Auge entgangene Geschwnlst-
reste zurfick, so kfinnen dieselben unter der straff gespannten
Haut sehr leicht in ihrer Ernfihrung geschfidigt werden,
nekrotisieren und zur Resorption gelangen. Diese Gefahr
besteht nur bei kleinen, der Beobachtnng leicht entgehenden
Tnmorresten, nicht bei grbfieren Geschwulststflcken, die breitere
Verbindnngen mit der Zirkulation haben und nicht so leicht
von dieser abgeschnitten werden. So erklfirt sich das differente
Resultat der Nachimpfung, je nachdem scheinbar radikal oder
nicht radikal operiert worden ist. Im ersteren Fall tritt
durch Resorption der Tumorreste eine aktive
Immunit&t ein, im letzteren kommt es zu gar
keiner Resorption, also auch zukeinerlmmunitfit.

1) Eine Zusammenstellung der wesentlichsten Falle findet sich bei
Schdne im Jahresbericht fiber die Ergebnisse der Immunitatsforschnng,
Bd. 2. Bericht fiber das Jahr 1906.

8 *

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116

Hugo Apolant

Nach dieser Auffassung, und hierin befinde ich mich in
diametralem Gegensatz zu Uhlenhuth und seinen Mit-
arbeitern, sind also nur diejenigen rezidivfreien Tiere radikal
operiert worden — von den mit dem Paquelin gebrannten
sehe ich aus den oben besprochenen Grflnden ab —, bei denen
die Nachimpfong angeht.

Zugunsten dieser Anschauung sprechen noch folgende
Momenta.

Es ist sicher kein Zufall, dafi auf der Tabelle IV bei 4
unter 5 rezidivfreien Tieren die Nachimpfung anging. Dieser
hohe Prozentsatz erkl^t sich nngezwungen daraus, dafi die
erstgeimpften Tumoren schon nach 14 Tagen operiert warden,
also zu einer Zeit, die eine hohe Gew&hr fflr eine radikale
Entfernung hot. Auch ist in alien diesen Fkllen ebenso wie
bei den Tieren der Tabelle V die Wundheilung geradezu ideal
verlaufen, so dafi nach 10 Tagen nur eine strichfSrmige glatte
weifie Narbe sichtbar war.

Man kann mir nicht entgegenhalten, dafi die Nachimpfung
deswegen anging, weil bei der Jugend der Tumoren noch nicht
genfigend Abwehrstoffe gebildet waren. Denn aus den An-
gaben Uhlenhuths und seiner Mitarbeiter ist ohne weiteres
zu entnehmen, dafi die Abwehrbestrebungen des Organismus
gerade in der ersten Periode des Tumorwachstums besonders
intensiv sind, da es sonst unbegreiflich w^re, dafi dieselben,
wie es die Autoren fflr die gelungenen Dreifachimpfungen
annehmen, bei weiterem Wachstum allmfihlich erlahmen und
schliefilich Qberwunden werden.

Weiter spricht gegen die Theorie Uhlenhuths und
seiner Mitarbeiter die besonders aus Tabelle III und V er-
sichtliche Tatsache, dafi die Nachimpfung zunfichst gewdhnlich
angeht and die Neubildung erst nach einiger Zeit allmilhlich
resorbiert wird. Dies ist mit vorgebildeten Abwehrstoffen
unvereinbar, denn es ist absolut nicht einzusehen, warum in
diesem Falle die geimpften Zellen hberhaupt, wenn auch nur
vorfibergehend, zur Entwicklung kommen sollen, zumal sie als
Impfdepot sich unter sehr ungfinstigen Ernfihrungsbedingungen
befinden. Auch hierin liegen die Verhiiltnisse wie bei der

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Ueber die Immunitiit bei Doppelimpfnngen von Tumoren. 117

Impfung auf die fremde Rasse. Aus der Tatsache^ daB die
M&usetuinorzellen im Rattenorganismus zunflchst angehen,
hatte Ehrlich ja gerade geschlossen, daB die Ratte keine
vorgebildeten Antistoffe gegen M&usezellen enthalten konne.
Wird aber dieselbe Ratte nach Resorption der ersten Geschwulst
zum zweiten Male mit Mfiusesarkom geimpft, so findet auch
kein anffingliches Wachstum mehr statt, well die geimpften
Zellen nun durch die inzwischen gebildeten Antistoffe sofort
abgetbtet werden. Wenn nun auch bei der aktiven Immuni-
siernng gegen Tumoren Antikbrper mit Sicherheit bisher noch
nicht nachgewiesen werden konnten, so besteben doch nach
den Ehrlichschen Ermittelungen gerade hinsichtlich des zeit-
lichen Auftretens und der Daner zwischen der erworbenen
Resistenz gegen das Angehen einer Tumorimpfung und der
gewdhnlichen aktiven Zellimmunittit weitgehende Analogien.
Gehen die nachgeimpften Zellen daher zuerst an und beruht
die schlieBliche Resorption auf der Bildung von Abwehrstoffen,
so kann die Produktion der letzteren bei der Nachimpfung
nicht schon beendet, sondern hdchstens im Gauge sein, und
zwar durch die Resorption liegen gebliebener Tumorreste.
Damit steht aber das zwischen 1 und 9 Tagen schwankende
Zeitintervall zwischen Operation und Nachimpfung, wie es von
mir innegehalten wurde, in bester Uebereinstimmung.

Zusammenfassung.

Unsere Versuche haben uns also zu Resultaten gefflhrt,
die denen von Uhlenhuth, Haendel und Steffenhagen
zum Teil diametral entgegengesetzt sind. Ich fasse sie dahin
zusammen:

1) Bei dem Wachstum der Tumoren werden von seiten
des Organismus keine Abwehrstoffe gebildet, die die Ent-
wicklung nachgeimpfter Geschwulstzellen irgendwie beein-
flussen.

2) Das schnellere Wachstum von Rezidiven beruht darauf,
daB den zurflckgebliebenen Zellen nach der Entfernung der
Hauptmasse des Tumors relativ groBe Mengen spezifischer
Nahrstoflfe zur Verffigung stehen.

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118

A. Marxer,

3) Die NachimpfuDg bei nicht rezidivfrei operierten Tieren
geht an, well nach Entfernung der Haupttumormasse genQgend
spezifische NUhrstoffe im Organismns vorhanden sind und well
eine Zellresorption von seiten des Rezidivtumors nicht statt-
gefunden hat.

4) Die Nachimpfung rezidivfreier Tiere ist erfolgreich,
wenn die Operation ohne sonstige Sch&digung der Tiere wirk-
lich radikal ausgefiihrt worden ist; sie ist erfolglos, wenn, sei
es durch Brennen oder sonstige Umstande, der Wundverlauf
kein idealer ist, oder wenn bei der Operation zurQckgebliebene
Geschwulstpartikel durch Hautspannung oder sonstige Schk-
digung nekrotisch werden und zur Resorption gelangen.

5) Eine gesetzmaCige Beziehung zwischen dem Resultat
der Operation und dem Angehen nachgeimpfter Tumorzellen
besteht nicht.

Nachdruck verboten,

[Aus der bakteriol. Abteilnng der chem. Fabrik aaf Aktien
(vorm. E. Schering), Berlin.]

Experlmentelle Taberknlosestadien.

11 .

Vergleichende Immunisierungsversuche am Meerechweinchen.

Von Dr. A. Marxer.

(Eingegangen bd der Bedaktion am 31. Marz 1911.)

E. Levy versuchte zuerst mittels GlyzerinlSsungen ohne
hdhere Erhitzung als KOrpertemperatur betragende Warme-
grade Tuberkelbacillen abzuschwachen bezw. abzutdten. Er
behandelte Meerschweinchen zunachst mit derartig abgetdteten,
dann mit abgeschwachten Tuberkelbacillen und konnte in
dieser Weise 5 Meerschweinchen einen vblligen Schutz verleihen.

1) E. Levy, Centralbl. f. Bakt., Bd. 33, 1903.

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Elzperimentelle Tuberkulosestudien.

119

Die vorbehandelten Tiere reagierten nur mit einem schnell
abheilenden eiterigen lokalen Prozefi, wSbrend zablreiche
Kontrolltiere an progredienter Tuberknlose starben. Zu-
sammen mit Pfersdorff ist es dann Levy^) weiter ge-
langen, 2 Binder durch Vorbehandlnng mit 3-t&gigen, 2-tfigigen
und einttlgigen glyzerinierten Tnberkelbacillen mit Erfolg zu
schutzimpfen. Bei der Fortsetzung der Immunisiernngs-
versuche mit glyzerinierten Bacillen konnte dann noch ein
Meerschweinchen vbllig geschfltzt werden in einem Versuche, in
welchem 3 Tierchen in derselben Weise vorerst abgetdtete
und daranf geringe Mengen abgeschwHchte Tuberkelbacillen
erhalten batten. Das Meerschweinchen ging 7 Monate nach
der Infektion mit virulenten Bacillen interkurrent zugrunde
and zeigte sich bei der Autopsie frei von Tuberkulose; an
der Injektionsstelle war nur eine mit wasserklarem Inhalte
gefflllte Cyste zuriickgeblieben. Aber auch die anderen Tiere,
sowohl die mit toten und abgeschwkchten, als auch die mit
toten Bacillen allein geimpften, hatten eine erhohte Widerstands-
fkhigkeit erworben. Sie blieben 4—6 Wochen l^ger am Leben
als die zuletzt gestorbenen Eontrollen. Eine weitere BestS-
tigung der Glyzerinversuche brachte die Nachprflfung von Haw¬
thorn*). Hawthorn vermochte 4 Meerschweinchen, welche
4 Monate lang jeden Monat eine Dosis glyzerinisierter Tuberkel¬
bacillen bekommen hatten, mit virulenten Tuberkelbacillen zu
impfen, ohne dafi eine Infektion der behandelten Tiere erfolgt
wtlre. 6 Meerschweinchen, welche nach erfolgter Immunisierung
mit tuberkuldsem Sputum gespritzt worden waren, bekamen
an der Impfstelle einen Abszefi, der nach Erdffnung vdllig
abheilte. Bei der Sektion waren die Tiere frei von Tuber¬
kulose.

Bei der Weiterverfolgung der Glyzerinversuche benutzte
ich nur abgetdtete Tuberkelbacillen zur Immunisierung. Und
zwar waren die Bacillen teils nur durch Schfitteln in 80-proz.

1) E. Levy, Med. Elinik, 1905, No. 43.

2) E. Levy, F. Blumenthal und A. Marxer, Centralbl. f. Bakt.,
Bd. 47, 1908.

3) Hawthorn, Compt rend, de la Soc. de Biolog., 1909, No. 8.

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120

A. Marxer,

Glyzerin abgetdtet, teils auch noch aufierdem 1 Stunde im
Wasserbade bei 70—72® erhitzt worden.

Tabelle I.

Meer-

schw.

No.

Ge-

wicht

g

Vorbehandlung

Injektion

Resultat

65

66

67

68

69

70

71

420

385

335

435

500

390

390

3. II. 2 mg 8-tag^ly-
zerin. Tbk. L. a£

28. II. 4 mg idem R. AH.
wie 65

3. II. 5 mg wie 65

28. II. 10 mg wie 65
wie 67

3.11. 5 mg wie 65

28. II. 5 mg wie 65
wie 69

3. II. 10 mg wie 65

28. II. 20 mg wie 65

'/iOOM ®g

Tbk. iTT.

dgl.

yy

yy

yy

yy

23. V. tot: Druse L.I.
geschwollen

lebt

26. VIII. tot: nur
Driise L. I.

23.1.11. tot: allge-
meine Tbk.

26. IX. tot: Tbk.

19. XII. tot: allge-
meine Tbk.

20. X. tot: Tbk.

74

505

3. II. 5 mg 8-tag. glvz.

dgl.

20. VI. tot: nur

Tbk. L. AH. 1 Std.

Drusen L. I.

auf70®erhitzt

28. II. 5 mg idem

75

380

3. II. 10 mg wie 74

yy

13. V. tot: L.I. Driise

28. II. 20 mg wie 74

geschwollen

76

310

|wie 75

yy

15. XI. tot: wie 70

L. AH. == linke Achselhohle, R. AH. = rechte AchselhShle, L. I. =
linke loguinalgegend.

Herstellung des Praparates: 1 g Tuberkelbacillen : 50,0 g 80-proz.
Glyzerin wurden 8 Tage im Schiittelapparate bei 37 ® geschiittelt. Die Ei*-
hitzung auf 70* wurde nach 4-tagigem Schiitteln vorgenommen und dann
die Emulsion wieder 4 Tage in den Schiittelapparat gebracbt.

EontroUen siehe Tabelle II.

Zu den Vereuchen in den Tabellen I, II, III, V und VI ist ein
Typus humanus, in den Tabellen IV und VII ein Typus bovinus ver-
wandt worden.

Um mir ein richtiges Bild von dem eventuellen Erfolge
der Schutzimpfiing machen zn kbnnen, hatte ich zn gleicher
Zeit mit den behandelten Meerschweinchen 15 Kontrolltiere
roit Viooooo rog einer Bouillonkultur vom Typus humanus viru¬
lent geimpft.

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Experitnentelle Tuberkulosestudiea.

121

Tabelle II (EontroUen).

Meer-

6chw.

No.

Ge-

wicht

g

Infektion

Beeultat

28a

340

19. IV. 10.

19.1.11. tot: allgem. hocbgradige Tbk.

28 b

320

*/tOOOOO

dgl.

15. X. tot: allgem. hochgradige Tbk.

30a

330

17. X. tot: wie 28b. Eavernen.

31a

300

12. XII. tot: allsem. hochgradige Tbk.

17. V. tot: L. I. Driise, Milz stark vergrofiert
und Tbk.

39 a

530

»

40 a

620

27. X. tot: allgem. hochgradige Tbk.

48 a

520

1. XI. tot: wie 40a.

72 a

550

>> 1

20. X. tot: allgem. Tbk.

73 a

390

yy

28. XII. tot: allgem. hocbgradige Tbk.

15 a

570

yy 1

15. XI. tot: dlgem. hocbgradige Tbk.

27. VI. tot: L. 1. Driise. Milz Tbk.

16a

565

18 a

430

12. XII. tot: allgem. hochgradige Tbk.

19 a

455

yy

14. IX. tot: allgem. Tbk.

54 a

420

yy

18. IX. tot: allgem. hochgradige Tbk.

61a

370

yy

22. IX. tot: allgem. hocbgradige Tbk.

L. I. = linke Inguinalgegend.

Kontrollen zu den Tabellen I, III, V und VI.

Und in der Tat zeigte es sich, dafi einzelne Tiere eine
besondere Widerstandsfahigkeit gegen Tuberkulose besitzen.
Wfthrend die meisten Kontrollmeerschweinchen etwa 5—6
Monate nach der Infektion an generalisierter Tuberkulose zu-
grunde gingen, starb ein Tier erst nach 9 Monaten an all-
gemeiner hochgradiger Tuberkulose.

Leider gingen einige Tiere des Schutzimpfungsversuches
frilhzeitig interkurrent ein. Diese zeigten keine inneren Ver-
^nderungen, wohl aber liefien die Kontrolltiere, welche frflh
verendeten, bereits immer eine Affektion innerer Organe er-
kennen; die Milz war stark vergr511ert und wies tuberkuldse
Kndtchen auf (Tabelle II, No. 39a und 16a). Von den Tieren,
welche erhitzte glyzerinierte Bacillen erhalten batten, starben
zwei frilhzeitig interkurrent ohne innere VerUnderungen, eines
ging nach 7 Monaten an Tuberkulose zugrunde. Trotzdem
die Meerschweinchen, welche nur geschtlttelte glyzerinierte
Bacillen erhalten batten, grbiltenteils l&nger lebten als die.

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122

A. Marxer,

welchen geschttttelte und erhitzte Bacillen gespritzt worden
waren, lUfit sich aus diesem Versuche noch keine Ueberlegen-
heit der nur bei 37 ® geschflttelten Glycerinbacillen in immuni-
satorischer Hinsicht ableiten. Meerschweinchen No. 66, welches
Bacillen bekommen hat, die nicht hdheren Temperaturen aus-
gesetzt waren, hatte verh^UtnismUSig wenig Bacillen zur Schutz-
impfung erhalten. Die Tiere derselben Versuchsreihe, welche
ebenfalls grdllere Injektionsmengen eingespritzt erhielten,
zeigten auch keinen hdheren Immunit&tsgrad als die, welchen
erhitzte Bacillen injiziert waren. No. 66 lebt nun schon 1 Jahr
nach der Infektion und 3 Monate l&nger als die letzte Kon-
trolle, die die anderen Eontrolltiere wieder um einige Monate
hberlebt hatte. Wir mtissen also diesem Tiere einen erhdhten
Schutz infolge der Vorbehandlung zuerkennen.

In Tabelle VII ist ein Heilversuch mit glyzerinierten
Bacillen, die geschhttelt und erhitzt waren, angefdhrt. In
diesem hatte No. 83 infolge Injektion von 3mal 1 mg Bacillen
einen derartigen Schutz erhalten, dafi es beinahe 14 Monate
die Infektion uberstanden hat und etwa 8 Monate linger lebte
als die letzte Kontrolle.

Die Abtdtung der Tuberkelbacillen durch 80-proz. Gly-
zerinldsung infolge Schtittelns bei 37® schtdigt mithin die
spezifisch antigene Natur der Tuberkelbacillen nicht; derartig
abgetdtete Bacillen sind zur erfolgreichen Tuberkuloseimmuni-
sierung verwendbar. Dasselbe lEfit sich auch von den ge-
schtittelten Glyzerinbacillen sagen, die aufierdem 1 Stunde auf
70—72 ® erhitzt waren. Wir kbnnen uns diesen letzteren Be-
fund nur so erkhlren, dafi das Glyzerin die Entartung des
spezifischen Eiweifies der Tuberkelbacillen durch die Erhitzung
verhfltet hat. Denn Tuberkelbacillenprfiparate, die auf hdhere
Temperaturen erhitzt wurden, haben ja sonst im Tierversuch
keinen immunisatorischen Effekt.

Gleichzeitig mit den Versuchsreihen mit glyzerinierten
Tuberkelbacillen wurden Meerschweinchen mit durch 51saures
Natron abgetdteten Bacillen vorbehandelt. Auch hier war
es mir darum zu tun, zu eruieren, ob erhitzte weniger
wertvoll zur Immunisierung sind als nur bei 37 ® geschttttelte
Emulsionen.

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Experimentelle Tuberkulosestudien. 123

TabeUe III.

Meer-

schw.

No.

Ge-

wicht

g

Vorbehandlung

Infektion

Besultat

25

320

3. II. 4 mg Oelseife Tbk.
L. AH. 8-tag. in 1 St.
auf 70—72® erhitzt

19- “g

Tbk. XTl..

lebt

26

610

30. XII. 09 2 mg wie 25
3. II. 10 4 mg wie 25
E.AH.

wie 25

23.1.11 tot: aUgemdne
Tbk.

27

320

3.11. wie 25.

dgl.

1. X. tot: Tbk.

29

415

wie 26

>>

9. II. 11 tot: Lungen
und Milz tbk.

32

380

wie 26

yj

2.1. 11 tot: aUgemdne
Tbk.

33

340

3. II. 10 mg wie 25

)>

10. XII. tot: wie 32

34

510

30. XII. 5 mg wie 25
3. II. 10 mg wie 25

yj

29. XI. tot: wie 33

35

460

wie 34

yy

7. VII. tot: nur L.I.
Driise, sonst n^atir

36

340

3. II. wie 33

yy

lebt

37

490

30. XII. 09 2 mg Oel-
sdfe Tbk. Kiffl.
8-tag. unerhitzt
3. II. 4 mg idemR.AH.

dgl.

13. V. tot: Driise L.I.

38

460

30. XII. tde 37

3. 11. 5 mg idem

yy

9. II. 11 tot: Lungen
und Milz tbk.

41

450

wie 38

yy

17. II. Lunge und Milz
tbk.

42

460

wie 38

»y

10. Xn. tot: nur Lunge
einige ^dtchen.
Bronchialdriiaen

43

310

3.11. 5 mg wie 37

yy

24.11.11 tot: allgemeine
Tbk.

44

430

wie 38

yy

19.x. tot: Lungen tbk.
Milz 1 Endtchen.
Druse L.I.

45

310

3. II. 10 mg wie 37

30. XII. tot: wie 32

46

470

30. XII. 5 mg wie 37
3. II. 10 mg wie 37

yy

12. V. tot: L.I. Driise

47

570

wie 46

yy

16. XII. tot: wie 32

L.AH. = linke Achselhdhle, B.AH. = rechte Achselhdhle, L.I. =
linke Ingoinalgegend. Herstellung dee Praparates: 1 g Tuberkdbacillen:
50,0 2-proz. Natrium oleinicum wiirden 8 Tage bd 37 ® gescliuttelt, bd der
erhitzten Emulsion ist die Schiittelung nach 4 Tagen zwecks Erhitzung im
Wasserbade unterbrochen und aodann noch 4 Tage fortgesetzt worden.

KontroUen siehe TabeUe II.

Wenn aus den Experimenten am Meerschweinchen mit
glyzerinierten Bacillen, erhitzt oder nur bei 37® geschflttelt,
ein Unterschied bezQglich des immnnisatorischen Vermbgens
nicht konstatiert werden konnte, so erwiesen sich die erhitzten

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124

A. Marxer,

Oelseifebacillen als besser als die nur geschfittelten. Eine be-
sondere Widerstandsfllhigkeit erwarben in dieser Reihe Meer-
schweinchen No. 25 und 36. Es sind dies nur einmal vor-
behandelte Tiere, und zwar No. 25 mit 4 mg und No. 36 mit
10 mg erhitzten Oelseifebacillen. Jedenfalls ist hier ein Vor-
zug der zweimaligen Vorbehandlung nicht zu ersehen. Es
scheint bei den Schutzimpfungen mit solchen Bacillen, die
nicht sofort zur Resorption gelangen, wie den Tuberkel-
bacillen, nicht von besonderem Vorteil zu sein, mehrmals vor-
zubehandeln bei subkutaner Anwendung kleiner Infektions-
mengen, da die Bacillen an und ftlr sich schon lange liegen
bleiben und erst allm&hlich aufgenommen werden, so dall fort-
vfihrend, solange die Bacillendepots vorhanden sind, immer
von neuem Antikdrper produziert werden. Meines Erachtens
h&lt die WiderstandsfUhigkeit des Organismus gegenhber einer
subkutanen Tuberkuloseinfektion meistens nicht viel Itinger an,
als der Kdrper unter der Einwirkung der gelagerten, nicht
resorbierten Tuberkelbacillen steht Ich verzichte daher in
spfiteren Versuchen auf die mehrmalige Vorbehandlung und
impfe die Tiere nach der subkutanen Infektion mit einer
kleinen Dosis virulenter Bacillen immer dann wieder nach,
wenn die frhhere Injektionsstelle nahezu zur Aufsaugung
gelangt ist Ich glaube, dafi dann auch bei Meerschweinchen-
versuchen ghnstigere Resultate erzielt werden, d. h. daB viel
mehr dieser Qberaus tuberkuloseempfindlichen Tiere dann
eine Immunitht erlangen werden.

Die Resultate aus der Tabelle III stehen im Einklang
mit einem Versuch von mir mit Oelseifebacillen und mit
den Ergebnissen der experimentellen Untersuchungen von
Noguchi und Broil.

Noguchi^) hat im Rockefeller Institute for Medical
Research zu New York umfangreiche Erhebungen fiber die
Wirkungsweise des filsauren Natrons auf Tuberkelbacillen an-
gestellt und dann versucht, Meerschweinchen mit verseiften
Bacillen zu immunisieren. 2 Meerschweinchen wurden 3 Monate,
nachdem sie abgetdtete Natriumoleatbacillen erhalten hatten,
mit 2 Kontrollen mit einer Dosis infiziert, der letztere in

1) Noguchi, Centralbl. f. Bakt, Bd. 52, 1909.

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Experimentelle Tuberkulosestudien.

125

36 und 25 Tagen erlagen. Nach 50 Tagen trat dann auch
bei den vorgeimpften Tieren Abmagerung ein und sie warden
bei der Rflckkehr aus den Ferien vermiSt Mit 2 weiteren
Tierchen hatte Noguchi mehr Gliick. Die Kontrollen ver-
endeten hier wieder nach 22 und 36 Tagen, das eine der
Immuntiere starb nach 3 Monaten an einer nicht tuberkuldsen
Erkrankung, das andere blieb bestfindig von Tuberkulose ver-
schont.

BrolH) fand das Oelseifepraparat nach Zeuner*) und
Noguchi zu Immunisierungsversuchen an Meerschweinchen
insofern wenig geeignet, als nach dieser Vorbehandlung hfiufig
sterile Abszesse entstanden, denen die Tiere grdlltenteils er¬
lagen. Immerhin gelang es ihm, dieselben soweit zu immuni-
sieren, daB bei ihnen nach Infektion mit virulenten Bacillen,
der die Kontrolltiere regelmBBig nach 4—6 Wochen erlagen,
der Tod viel spSter ein trat, einige Male erst 4 Wochen nach
dem Tode des letzten (siebenten) Kontrolltieres. Ein Meer¬
schweinchen ging 71 Tage nach dieser letzten Eontrolle an
einer Darmentztindung ein. Bei der Autopsie wurde auBer
einem bazillenhaltigen, ca. erbsengroBen Herde in der Leber
nichts Tuberkuldses nachgewiesen. Ermuntert durch dieses
Resultat impfte dann Broil 2 EBlber mit durch Natriumoleat
abgetOteten Tuberkelbacillen. Ein Kalb erhielt 2 subkutane
Injektionen, das zweite wurde in derselben Weise 3mal vorbe-
handelt. 4 Wochen nach der letzten Einspritzung erhielten
die Kinder intravenOs mit einer Kontrolle 0,0025 g Bacillen.
Der Tod trat bei dieser nach 50 Tagen ein. Die behandelten
Tiere warden 10 Wochen nach der Infektion getdtet. Ein Kalb
wies bei der Sektion m&Big verEnderte Bronchial- und Media-
stinaldrhsen, einige Herde im sonst nicht verEnderten Lungen-
gewebe, sowie einen kleinen Tuberkel in der linken Niere
auf. Bei dem anderen Kalb wurde ein stecknadelkopfgroBes
Kndtchen auf der Pleura und ein hanfkorngroBer grauer Herd
mit verkEstem Zentrum in einer Bronchialdrttse gefunden.

Bei einem Versuche, der zeitlich vor dem in Tabelle III
angefQhrten liegt, konnte ich ebenfalls eine schtttzende Wirkung

1) Broil, Berl. tierarzU. Wochenschr., 1910, No. 47.

2) Zenner, ZdtBchr, 1 Taberkuloee, Bd. 15, 1909.

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126 -A.* Marxer,

der Oelseifenbacillen feststellen. Aber auch in diesem war
bereits die vorteilhaftere Anwendung der erhitzten Seifen-
bacillen ersichtlich. Das Natriumoleat hat also dieselbe F&hig-
keit wie das Glyzerin, eine Beeintrfichtigung der Antigene
durch die Erwfirmung auf 72 ® zu verhindern, worauf ich schon
in einer frflheren Mitteilung^) hingewiesen babe.

TabeUe IV.

Meer-

Ge-

BChw.

wicht

Vorbehandlung

Infektion

Besultat

No.

R

1

400

18. XII. 09 20 mg 8-tag.

12. II. Vioooo *^8
R.AH.

1. HI. tot: D^atir

camphenilansaur.

Natr.Tbk.*)L.AH.

2

500

wie 1

4. II. tot: n^atiT
24. HI. tot: aUgem.

3

450

dgl.

wie 1

Tbk.

4

320

3. II. wie 1

dgl.

10. V. tot: aUgem.

Tbk.

5

290

3. II. 10 20 mg 7-t&g.

dgl.

21. XII. tot: Lunge

oleiDsaur. Natr.Tbk.^
L. AH. uud 1 Stunde
auf 70® erhitzt

keine Hepatisa*
tionsherde, aber
mehrere Enotch.,
Milz 2 Enotchen,
Im.-SteUe Druse
29. XH tot: aUgem.

6

520

18. XH. 09 wie 5

M

Tbk.

7

650

27. Xn. 09 wie 5

11. X. tot: aUgem.

Tbk.

9

680

18. XII. 09 20 mg 7-

dgl.

6. X. wie 7

tag.*) (nicht erhitzte)

Wie 5

10

290

3. U. 10 wie 9

19. VIH. wie 7

11

700

18. XH. 09 wie 9.

5. VII. wie 7

12

470

wie 9

fj

19. VII. wie 7

32

510

6. IV. tot: Milzu.

>>

Lebertbk.

33

700

))

30. VII. wie 7

34

320

EontroUen

yf

19. III. tot: Milz

miiiareTbk. Bron-
chialdriise

35

310

>>

15. VII. wie 7.

L. AH. = linke Achselhohle. B. AH. = rechte AcheeUibhle.

1) A. Marxer, Berl. tier&rztl. Wochenschr., 1911, No. 7.

2) Darstellung des Praparates siehe TabeUe V.

3) DarsteUung des Praparates siehe TabeUe lU, nach dem Ekhitzen
im Wasserbade noch 3 Tage bd 37 ® weitergeschiittelt Eonzentration 0,1:50,0
Natrium oleinicum, 1:60 Aqu. dest.

4) Darstellung wie sub 2, nur ohne Erhitzung auf 70® C.

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Experimentelle Tuberkaloeestudien.

127

Die Mehrzahl der mit Seifenbacillen immunisierten Tiere
hat die Kontrollen um ein Betrftchtliches Oberlebt, 2 sogar bis
zu 5 Monaten. Das Ergebnis der Vorbehandlung war mithin
durch zweimalige iDjektionen des PrUparates (Tabelle III) nicht
besser geworden. Die ersten 4 Meerschweinchen der Tabelle IV
waren mit Tuberkelbacillen vorbehandelt, welche durch 8*tfigiges
Schtltteln in einer 2'proz. Ldsung von camphenilansaurem
Natron abgetdtet worden waren. Diese Tiere haben nun alle
eher eine Ueberempfindlichkeit als eine Immunit&t gezeigt und
waren vor den Kontrollen an Tuberkulose verendet.

In folgendem Parallehersuche (zu Tabelle I, III und VI)
waren noch eine Anzahl Meerschweinchen mit dem gleichen
Prfiparate geimpft worden. Die Tiere, welche nicht erhitzte,
nur geschtlttelte Emulsion erhalten hatten, sind alle 2mal, die
mit erhitzten Emnlsionen nur Imal gespritzt.

TabeUe V.

Meer-

Bchw.

No.

Ge-

wicht

g

Vorbehandlung

Infektion

Kesultat

13

440

29. XII. 09 2 mg cam-

19- iY: V.aoftomg

Tbk. L. 1.

dgl.

3. II. tot; allgem.

14

530

^enilansaur. Natr.
Tbk. 8-tag. L. AH.

3. II.4mgidemBJLH.
3. II. wie 13

Tbk.

14. XI. tot: allgem.

17

370

dgl.

>>

Tbk.

3. MI. tot: wie 14

20

320

J?

11. XII. tot: allgem.

21

290

29. XH. 5 mg wie 13

Tbk.

27. V. tot: allgem.

22

540

3. II. 10 mg wie 13

3. II. wie 21

yy

yy

Tbk.

10. 1.11 tot; wie21
2. VI. tot: n^ativ

23

400

3. n. dgl.

yy

28. IV. tot: allgem.

24

280

Tbk.

49

350

3. n. 10mgwiel3, nur

dgl.

29. IX. tot: aU^m.
hochgradige Tbk.
Eavemen

4. XI. tot: allgem.

50

330

noch 1 SW. auf 70—
72® erhitzt
wie 49

yy

51

290

dgl.

yy

Tbk.

1. XI. tot: aUgem.

52

340

yy

Tbk.

23. V. tot: L.I.
Driisegeechwollen

L. AH. = linke Achselhohle. B. AH. = rechte AchselhShle. L. I. =
linke Inguinalg^end.

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128

A. Marker,

Darstellung des Praparatee: 0,1 g Tuberkelbacillen: 50,0 2-proz. cam-
pheDilaDsaurem Natron warden 8 Tage lang im Brutschranke bei 37** ge-
echiittelt. Bei der erhitzten Emulsion ist die Schuttelung nach 4 Tagen
zxir Erwarmung auf 70® im Wasserbade unterbrochen and darauf wieder
fortgesetzt worden.

KontroUen siehe Tabelle 11.

Einen Schutz hat auch hier keines der Meerschweinchen
durch die Behandlung mit camphenilansauren Natronbacillen
erhalten. Das Natronsalz der Camphenilans&ure, einer S&ure
aus der Kampfergruppe mit der Formel CgHijCOOH, ist
nicbt geeignet zur Abtdtung von Tuberkelbacillen, die zur
Schutzimpfnng Verwertung finden sollen.

Einen weiteren Vergleichsversuch macbte ich noch mit
Tuberkelbacillen, die durch ricinolsaures Natron, einer Oelseife,
die nicbt aus der Oels&urereihe stammt, unsch&dlich gemacht
worden waren. Wie in den anderen Versuchsreihen sind auch
in dieser wieder nicbt erhitzte Emulsionen erhitzten gegen-
dbergestellt.

Tabelle VI.

Meer-

8chw.

No.

Ge-

wicht

g

Vorbehandlung

Infektion

Eesiiltat

53

370

3.11. 2 mg ricinolsaur.
Natr. Tmc. 8-tag. L.
AH.

28.11. 4 mg id. B. AH.

19. Vioow

Tbk. L. 1.

15. Vn. tot: Tbk.

55

315

3. 11. 5 mg wie 53

28. 11. 10 mg wie 53

dgl.

10. XII. tot: aUgem.
Tbk.

56

315

wie 55

10.1.11. tot: Seuche
nur Milz tbk.

57

420

3. 11. wie 55

28. 11. 5 mg wie 55

10. XI. tot: wie 55

58

390

i

3. 11. 10 mg wie 55
28. 11. 20 mg wie 55

23. V. tot: n^ativ

59

490

3.11. 5 mg wie 53, nur
1 Std. auf 70-72®
erhitzt

28. 11. wie 59

dgl.

6. VIU. tot: nur
Druse L. 1.

62

355

3. n. 5 mg wie 59

28. 11. 20 mg wie 59

10.III. 11 tot: Milz
und Lunge tbk.

63

405

1 3. 11. 10 mg wie 59
28. 11. wie 59

24. XII. tot: wie 55

64

335

3. 11. 10 mg wie 59 i
28. 11. wie 59

4.1.11 tot: allgem.
Tbk.

L. AH. = linke Achselhohle, B. AH. = rechte Achselhdhle, L. 1. =
linke Inguinalgegend.

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Expeiimentelle Tuberkiilosestudien.

129

Darstellung des Praparates: 0,1 g Tuberkelbacillen : 50,0 2-proz-
ricinolsaurem Natron warden 8 Tage im Schiittelapparat bei 37** be-
handelt. Bei der erhitzten Emulsion iat zwecks Erhitzung die Schiittelung
nach 4 Tagen unterbrochen worden. Dann wurde noch 4 Tage weiter
geschiittelt.

Kontrollen siehe Tabelle II.

KeiD Meerschweinchen dieser Tabelle hat l&nger als die
letzte Kontrolle gelebt. Nur bei No. 56 mull eine gewisse
WiderstandsfUhigkeit erzeugt worden sein, da es bei seinem
Tode, der infolge der bekannten Meerschweinchenseuche ein-
getreten ist, nur Ver&nderungen der Milz and der Drflse an
der Injektionsstelle hatte.

Zu gleicher Zeit und unabh&ngig von Noguchi hat
Zeuner^) das Natrium oleinicum iu einer Ldsung 1:60 Aqua
destillata zur Abtbtung von Tuberkelbacillen benutzt. Zur
Anstellung seiner Heilversuche kamen nur Emulsionen, die
vorerst einige Tage bei 37** geschiittelt, dann 1 Stunde auf
70—72® erhitzt und nochraals mehrere Tage bei Brutschrank-
temperatur im Schflttelapparat behandelt worden waren. Darauf
warden durch scharfes Zentrifugieren and nachheriges Filtrieren
durch Kieselgur die Bacillen aus den Emulsionen entfernt. Mit
dieser bacillenfreien Emulsion behandelte Zeuner infizierte
Meerschweinchen und konnte durch diese spezifische Behand-
lung die betreffenden Tiere viel Iftnger am Leben erhalten als
diejenigen, welcbe nur mit einer Oelseifenldsung 1:60 gespritzt
waren. Die ersteren tlberdauerten die Kontrollen urn 5 bis
,13 Wochen, die letzteren starben gleichzeitig mit den Kontroll-
tieren.

Mein Heilversuch war wieder ein Parallelversuch. Ich
verwandte, abweichend von Zeuner, Bacillenemulsionen
(Vollemulsion), die teils mit einer Oelseifen-, teils mit einer
Glyzerinlbsung geschiittelt und auf 72® erhitzt worden
waren.

1) Zeuner, Centralbl. L Bakt., Bd. 50, 1909.

Zeltschr. f. louBunlttttfonchaiig. Orlf. Bd. X. 9

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130

A. Marxer, Experimentelle Tuberkulosestudien.

TabeUe VII.

Meer-

schw.

No.

Ge-

wicht

g

Infektion

Nachbehandlung

Resultat

77

350

12. 10
mg Tbk. L. AH.

26. II. 1 mg 8-t^. *)
Oelseife Tbk. erhitzt
18. III. idem

4. IV. 2 mg dgl.

27. X. tot: allgem.
Tbk.

78

310

wie 77

wie 77

15. IV. tot: L.AH.
Driisa Milz und
Bronchialdr. tbk.

80

270

dgl.

1

wie 77

1. V. tot: nur MUz
1 Knotchen u. ver-
kaste Driise an der
Injektionsstelle

81

280

wie 77

24. UI. tot: L.AH.
Driise. Milz ein
Ehotchen

82

320

V

16. 11. 1 mg 8-tag. *)
glyzerin. Tbk. erhitzt

11. UI. tot: L.AH.
Driise

83

310

yj

16. II. wie 82

18 . m. dgl.

4. IV. „

25. in. 11 einem
Darmkatarrh erl.
Nur eine Lungen¬
spitze u. Milz tbk.

84

370

7J

wie 83

7. VIII. tot: aU-
gem. Tbk.

85

410

wie 83

18. IV. tot: aUgem.
Tbk.

L. AH. = linke Acbselhdhie.

Kontrollen siehe Meerschwemchen No. 32—35 (Tabelle IV).

2 Tiere haben durch die Nachbehandlung eine erhdhte
Widerstandskraft erworben, No. 77, welches mit Oelseifebacillen
geimpft war und die letzte Kontrolle um 3 Monate fiberlebt
hat, sowie No. 83, das mit glyzerinierten Bacillen nach der
Infektion gespritzt war und erst etwa 14 Monate darauf einer
Darmentzttndnng erlegen ist, nachdem das letzte Kontroll-
meerschweinchen bereits 8 Monate tot war. Bei der Autopsie
wurde ermittelt, dali nur eine Lungenspitze tuberkulds ver-
hndert war. Anfierdem fanden sich in der nicht vergroBerten
Milz am Rande 3 alte Herde.

1) Herstellung der Emulsion wie bei Tabelle III.

2) Hm^tellung der Emulsion wie bei TabeUe I.

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V. Dungern u. Hirschfeld, Verhalten des Komplementes etc. 131

Zusammenfassnng.

Bei den vergleichenden Untersuchungen fiber Immuni-
siernng gegen Tuberkulose mit Tuberkelbacillen, die durch
Behandlung mit Lfisungen von Glyzerin, filsaurem Natron,
camphenilansanrem Natron und ricinolsaurem Natron nnschfid-
lich gemacht worden waren, erwiesen sicb nur die Glyzerin-
und Oelseifenprfiparate als geeignet zur Scbutzimpfung and
Behandlung der experimentellen Taberkulose beim Meer*
schweinchen.

Nachdruck verboten.

[Aus dem Krebsinstitat der Universitat Heidelberg (Direktor:

Ezzelleoz Czerny).]

Ueber das Yerhalten des Komplementes in physiologisehen
BaCl,* and CaCls-Ldsnngen and in hypertonlscher NaCl-

Ldsnng.

Von Prof. y. Dtingem and Dr. Hirschfeld.

(E^gegangen bei der Bedaktion am 2. April 1911.)

Das Stadium der antihfimolytischen Wirkungen hat eine
ganze Reihe von Bedingungen bekannt gemacht, unter denen
die Komplementhfimolyse ausbleibt. So kommt keine Hfimo-
lyse zustande, wenn die mit Komplement versetzte Flfissigkeit
bei gehalten wird (Ehrlich and Morgenroth), wenn
sie bestimmte Mengen von H-Ionen enthfilt (Mich a el is und
Skwirski), wenn sie hypertonisch ist Oder wenn CaClg-
oder BaClg-Losung als isotonische Salzlfisnng benutzt wird
(v. Dungern und Coca). Der Mechanismus beruht hfiufig
darauf, daC das Komplement als Ganzes nicht an die sensi-
bilisierten Blutkfirperchen gebunden wird (Ehrlich und
Morgenroth ffir Kfiltetrennungsversuch, Dungern und
Coca ffir isotonische CaClg- and BaCls-Lfisungen). Spfitere
Untersuchungen zeigten, dafi die VerhSltnisse anders liegen,
wenn man stark sensibilisierte Blutkfirperchen benutzt. Ffir
Behinderung der Hfimolyse durch Sfiuren konnte Mich a el is

9*

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132

V. Dungern und Hirschfeld,

und S k w i r s k i nachweisen, dafi bei groBen Ambozeptordosen
das MittelstOck an die Blutkdrperchen gebunden wird. Aehn-
liche VerhS-ltnisse wurden auch beim KUltetrennungsversuch
von Sachs und Bolkowska festgestellt. Ftlr die hyper-
tonischen Kochsalzldsungen und physiologischen CaCl}- und
BaCl2-L5sungen lagen noch keine Versuche vor. Wir haben
daher diese Untersuchungen vorgenommen.

TabeUe I.

Blut 30
BaCl,

Blut 30
CaC4

Blut 30
4-proz.
NaCl

Blut 30
1-proz.
NaCl

Blut 5
1-proz.
NaCl

Blut 30
physioL
NaCl +
Mittel-
stiick

Abgu6 30 BaCl,

kompl.

Spur

kompl.

0

0

kompL

kompl.

kompl.

yy

0

0

yy

Al^afi 30 CaCl,

f. kompL

yy

0

0

yy

kompl.

yy 1

kompl.

stark

yy

Abgu6 30 4 -pfoz.

0

.0

yy

0

0

stark

NaCl

stark

Spur

yy

0

kompl.

Endatiick

»

stark

f. kompl.

0

0

yy

f. kompL

kompL

yy

0

0

yy

Endstuck + Mittel-

kompl.

kompl.

kompl.

L

Btiick

>>

fj

yy

yy

I. kompl.

TabeUe II.

Blut 5
BaCl,

Blut 5
CaCl,

Blut 5
4-proz.
NaCl

Blut 30
physiol.
NaCl

Blut 5
physiol.
NaCl

Abgu6 5 BaC4

stark

schwach

kompl.

kompl.

yy

Spur

f. kompl.

kompl.

yy

f. kompL

AbguB 5 CaC4

yy

0

yy

yy

schwach

kompl.

stark

yy

yy

1 kompL

Abgufi 5 4-proz. NaCl

Spur

0

stark

yy

schwach

f. kompl.

maSig

kompl.

yy

f. kompl.

Endstuck

0

0

schwach

0

0

Spur

Spur

f. kompl.

0

0

Endstuck -|- Mittelstuck

0

0

kompl.

kompl.

Spur

Spur

Spur

yy

yy

f. kompl.

1) Nach 1 Stunde.

2) Nach 3 Stimden.

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Ueber das Verhalten des Komplementes etc.

133

Protokoll.

Je 80 ccm einer 5-proz. Rinderblutaufschwemmung werden mit 2 ccm
bezw. ‘/g ccm Kaninchenserum (Titer ‘/uoa komplett Ibsende Dose, also .SO-fache
bezw. 6 -fache komplett iSsende Dose) sensibilisiert.

Die abzentrifugierten Bodensatze in 4 Bdhrchen verteilt, mit physiol.
NaCl, CaClg, BaClg, 4-proz. NaCl gewaschen, abzentrifugiert, auf 2 ccm mit
den betrefienden Salzldsungen aufgefiillt.

In jedes Bohrchen je 0,5 ccm frisches Meerschweinchenkomplement
Nach einer Stunde abzentrifugiert. Die Ca- und Ba-Abgiisse mit aqiumole-
kularen Losungen von Na-Oxalat bezw. Na-Sulfat versetzt. Niederschlag
abzentrifugiert. Der resultierenden Fliissigkeit (5 ccmj 0,5 10>proz. NaCl
zugesetzt, 4-proz. NaCl-AbguQ mit gleichen Mengen destillierten Wassers
auf 2-fach physiol. Lbsung gebracht

Die BlutkSrperchen werden in physiol. NaCl-Lbsung gewaschen. In
9-proz. NaCl-Losung war ein Teil des Blutes aufgeldst, in CaClg- und
BaC^-Losung spurweise bei 30-fach sensibilisierten Blutkdrperchen.
Die Aufschwemmung wurde nach dem AugenmaU gleich dicht gemacht.
Die Abgiisse wurden mit sensibilisierten, persensibilisierten sowie mit in
betreffender Salzlosung mit Komplement behandelten Blutkdrperchen
versetzt.

Abgu 6 von 30-fach sensibilisierten, in BaCl, mit Komplement versetzten
Blutkorperchen = Abgu 6 30 Ba.

Abgufi von 30-fach sensibilisierten, in CaCl, mit Komplement versetzten
Blutkdrperchen = AbguU 30 Ba etc.

Die Blutkdrperchen nennen wir entsprechend: Blut 30 BaCl,, Blut 5
BaCl,, Blut 4-proz. NaCl etc. Die Hamolyse wurde nach einer und nach
drei Stunden abgelesen.

Das Komplement wurde nach Sachs und Altmann durch V 300 *
norm. Salzsaure gespalten.

Wie die Protokolle zeigen, vermag das Endstdck die
stark sensibilisierten, in BaClj-, CaClj- oder 4-proz. NaCl-
Ldsung mit Komplement versetzten Blutkdrperchen zu Idsen,
wenn auch die Ldsung langsamer vor sich geht als bei stark
sensibilisierten Blutkdrperchen, welchen man das Mittelstiick
und Endstiick, dargestellt nach Sachs und Altmann,
zusammen zusetzt. Die in BaCl 2 , CaClg und in 4-proz.
NaCl-Ldsung mit Komplement versetzten Blutkdrperchen
werden demnach, wenn man sie vorher stark sensibilisiert
hat, persensibilisiert. Die Abgiisse vermdgen sensibilisierte
Blutkdrperchen nicht mehr zu Idsen, die Ldsung kommt aber

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134 V. Dungern u. Hirschfeld, Verhalten des Komplementes etc.

zustande, wenn man der Blutaufschwemmung noch Mittelstfick
zusetzt. Die Abgiisse enthalten demnach das reine Endstdck.
Bei BaClj- und 4-proz. NaCl-Ldsung wird das Mittelstttck
quantitativ gebunden, bei GaCl}-Ldsung nur teilweise. Bei
schwach sensibilisierten Blutkbrperchen konnten wir im Abgufi,
wie Dungern und Coca, das gesamte Komplement nach-
weisen. Erw&hnen mdchten wir noch, daJi die in den be-
treffenden Salzldsungen mit Komplement versetzten Blut-
kdrperchen sich gegen die Einwirkung von End- und Mittel-
stiick viel resistenter erweisen als die entsprechenden sensi¬
bilisierten Blutkdrperchen, was wohl auf Salzreste zuriick-
gefdhrt werden kann.

Zusammenfassung.

Stark sensibilierte Blutkdrperchen, die in physiologischer
BaCl}- und CaCl,- Oder in 4-proz. NaCl-Ldsung mit Kom¬
plement versetzt werden, reiBen das Mittelstfisk quantitativ
(BaClj, 4-proz. NaCl) oder teilweise (CaC4) an sich. Die
Blutkdrperchen lassen sich demnach auf diese Weise mit
Leichtigkeit persensibilisieren. Bei schwach sensibilisierten
Blutkdrperchen Idfit sich dagegen das gesamte Komplement
im AbguB nachweisen. Der Mechanismus der Hemmung ist
demnach unter den verschiedensten Bedingungen (Kdlte,
Sduren, oben erw&hnte Salze) derselbe.

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Stephan Rusznyak, Die Wirkungsweise des Antitoxins. 135

Ncushdruck verboUn.

[Aus dem II. pathologisch-anatomisohen Institut Budapest;

Direktor: Hofrat Prof. 0. Pertik.]

Die Wirkungsweise des Antitoxins.

Von Stephan Basznyak.

Mit 2 Figuren itn Text.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 2. April 1911.)

1. Einleitnng.

Es ist schon eine geraume Zeit, dafi bestimmten Sub-
stanzen, die die Eigenschaft besitzea, im Tierkbrper die Bil-
dung Yon spezifischen Reaktionskbrpern auszuldsen, erhdhte
Aufmerksamkeit gescbenkt wird. Man nennt diese Substanzen
mit dem von Detre vorgeschlagenen Namen Antigene. Mit
der Zeit hat es sich heransgestellt, dafi diese Antigene in zwei
grofie Kategorien zerfallen. In die erste Kategorie gehdren
die Eiweifisubstanzen, tierische und pflanzliche Zellen und ge-
wisse Lipoide, in die zweite die Sekrete von Zellen, Toxine
und Fermente. Es zeigte sich, dafi nach dem Einverleiben
der StofFe der ersten Gruppe im Tierkdrper eine erhbhte
„Empffinglichkeit‘^, Anaphylaxie entsteht, wlUirend die Antigene
der zweiten Kategorie eine spezifische Unempfindlichkeit, Im-
munitUt \erursachen. Bis die Frage nach der Konstitution
der Toxine und Fermente nicht geldst ist, kann man natQrlich
die Mdglichkeit nicht ausschliefien, dafi diese Substanzen auch
durch ihre eventuelle Eiweifinatur als Antigene wirksam sein
kdnnten. Zur Kl&rung des Wesens der Anaphylaxie haben
aufier vielen speziell serologischen Untersuchungen besonders
die chemischen Untersuchungen von Abderhalden mit Hilfe
der „optischen Methode*^ beigetragen. Er konnte zeigen, dafi
nach parenteraler Einfflhrung von kdrper- resp. blutfremden
Substanzen der Organismus die F&higkeit erlangt, diese Sub¬
stanzen auf fermentative Weise abzubauen. Die hierbei ent-
stehenden Spaltungsprodukte sind giftig und verursachen den
nnter dem Namen „anaphylaktischen Shock*^ bekannten Sym-
ptomenkomplex. Dieses Abbauen von kdrperfremden Substan-

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136

Stephan Busznyak,

zen, welcher Vorgang in erster Linie wahrscheinlich die ErnSh-
rungzum Zwecke hat, scheint ein allgemein gflltiges biologisches
Grundgesetz zu sein. Betrachten wir daher die VerhUltnisse
vom Standpunkt der Bakterien; diese sind auch Organisroen
und fQr sie bedeuten die chemischen Bausteine des tierischen
Organismus die kdrperfremden Substanzen. Tatsfichlich
trachten nun die Mikroorganismen ihrerseits diese abzubauen;
wir kennen proteolytische und lipolytische Enzyme bakterieller
Herkunft und wahrscheinlich stellen auch die Toxine solche
abbauende Fermente dar, wie wir das noch weiter unten aus-
fflhrlicher besprechen werden. Aus diesem Gesichts-
punkte entspricht also die Virulenz (resp. Viru-
lenzsteigerung) der Bakterien der Anaphylaxie
der Tiere^). Wir sehen auch tatsSchlich, daft durch Be-
handeln der Bakterien mit fttr sie kdrperfremden Substanzen
(Tierpassage) ihre F&higkeit mit diesen, in Reaktion zu treten,
bedeutend erhdht wird, wdhrend durch langes Kultivieren auf
kfinstlichen NUhrbdden die Bakterien diese F&higkeit einbhfien,
avirulent werden, genau so wie Tiere, die vor sehr langer
Zeit z. B. mit fremden BlutkSrperchen behandelt wurden. Der
Unterschied besteht nur im Resultat, denn wdhrend die Meta-
zoen den Abbau iminnern ihres eigenen Korpers verrichten
und so durch die Spaltprodukte selbst vergiftet werden, tun
das die Protozoen durch ihre Sekrete selbstverst^dlich auHer¬
bal b ihrer einzigen Zelle, wobei wiederum nur der tierische
Organismus geschHdigt wird.

Trotzdem das PhHnomen der ImmunitHt vie! linger be-
kannt ist, als das der Anaphylaxie, sind wir doch mit dem
Chemismus der Toxinwirkung viel weniger im klaren, als mit
den VorgHngen, die bei der Injektion einer EiweiHmenge im
Tierkbrper vor sich gehen. Das hat seine Ursachen; denn
w&hrend die SHfte eines sensibilisierten Tieres die entsprechen-
den kdrperfremden Substanzen auch in vitro energisch ab-
bauen, entfalten natiirlich die Toxine ihre vergiftende Wirkung
im Tierkdrper selbst, wodurch sich der ProzeB unserer un-
mittelbaren Beobachtung entzieht. Das heifit, wenn wir bei

1) Dies bezieht sich natiirlich nur auf die aktive Komponente der
Yirulenzsteigerung, denn die passive, die Resistenzerhdhung, entspricht eher
der „histogeDen“ Immunitat.

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Die WirkungsweiBe des Antitoxins.

137

der Anaphjlaxie eine Gleichuog mit einer UnbekaonteD batten,
so haben wir bei der Toxinwirkung eine mit zwei Unbekannten,
n&mlich dem TierkCrper und dem Toxin. Die BemQhungen,
an die Stelle des Tierkdrpers etwas Bekanntes stellen zu
kdnnen, leiten nns zu den Fermenten fiber. Morgenroth
war der erste, der, urn den eventuell stOrenden Einflufi der
„lebendigen Substanz^ (die nfiberlebenden^^ Blutkdrperchen mit
inbegriffen) zu vermeiden, die Wirkung des Labenzyms auf Milch
nfiber untersuchte. Es zeigte sich, dafi in der Wirkungsweise
Lab, Antilab und Milch sich ebenso verhielten, wie z. B. Ricin,
Antriciii und Blutkfirperchen, oder Diphtherietoxin, -antitoxin
undMeerschweinchenkdrper. Morgenroth zdgerteauch nicht,
die Toxine mit den Fermenten in eine Parallele zu setzen.

Die Ansicht, dafi Toxine und Fermente gleichartig wirkende
Substanzen sind, ist nicht neu; den ersten Forschern, die sich
mit Bakterientoxinen befaCt haben, ist besonders die kolossale
Wirkungskraft aufgefallen, die diese Gifte kennzeichnet, man
weifi, dafi millionstel Teile von einem Gramm Tetanustoxin
die Ffihigkeit besitzen, eine weiJle Mans in einigen Stunden
zu tdten. Eine Analogie zu einer solcben Wirkung haben
wir nur in den Fermenten, von denen verschwindend kleine
Mengen genfigen, urn eine betrfichtliche Menge von Eiweifi
Oder Fett zu zerstfiren. Frfiher legte man den physikalischen
Eigenschaften dieser Kdrper eine grofie Bedeutung bei. Wenn
wir solche Zusammenstellungen betrachten (Fermi-Per-
nossi), dann finden wir wirklich eine grofie Uebereinstimmung:
die relative Thermolabilitfit, die Empfindlichkeit gegen gewisse
Strahlen, chemische Gifte, spontane Schwfichung mit der Zeit,
sowie die Ldslichkeitsverhfiltnisse, langsame Dialysierbarkeit
gehen alle bei Enzymen und Toxinen parallel. Heute wissen
wir schon, dafi diese Uebereinstimmung nicht viel ffir die
Identitfit der beiden Kdrper bedeutet, da sfimtliche diese Eigen¬
schaften eine Folge ihrer kolloidalen Natur sind. Nach Sachs
kdnnen wir die Toxine durch vier Funktionen charakterisieren,
und zwar:

1) die Reaktion mit dem Antitoxin,

2) die Bindung an die Zellrezeptoren,

3) die Ffihigkeit der Ausldsung von Antitoxin,

4) die Toxizitfit.

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138

Stephan Rusznyak

Es ist eine wichtigere Uebereinstitnmung, als die vorher
erw&hnten, da& wir diese 4 Funktiooen auch bei den Enzymen
antreffen kdonen. Die Fermente haben die F&higkeit, im Tier-
kdrper die Bildung von Antifermenten auszuldsen (Achalme,
Bergmann-Bamberg), sie reagieren natdrlich mit diesen.
Dafi ein Enzym seine Wirknng auf ein Substrat auszaflben
imstande sei, muB es sich zuerst damit binden, diese Bindung
entspricht der Bindung des Toxins an die Zellrezeptoren;
was die ToxizitUt anbelangt, ist- Trypsin toxisch fflr Kasein,
Ricin fflr BlutkSrperchen, und Tetanusgift fflr die Nerven-
substanz.

Der Umstand, daB trotz dieser Uebereinstimmung einige
Forscher doch prinzipielle Unterschiede zwischen der Enzym-
und Toxin wirknng zu finden glauben, hat nach unserer Meinung
in der falschen Definierung der Enzyrareaktion seine Ursache.
Wir kdnnen nur wiederholen, was wir bei der Besprechung
der Komplementwirkung gesagt haben. Wenn man von einem
Enzym verlangt, daB es auch nach der Reaktion seine Anfangs-
konzentration beibehSIt, so kSnnten Trypsin, Pepsin etc, auch
keine Enzyme sein, denn sie verschwinden alle mehr oder
weniger bei der Reaktion, wie wir das noch weiter unten aus-
fhhrlicher auseinandersetzen werden. Der Unterschied zwischen
anorganischen Katalysatoren und organischen Enzymen liegt
also nicht ausschlieBlich in der Existenz einer „spezifischen
Bindung" bei den letzteren, wie Oppenheimer und
Michael is behaupten, und die Analogie zwischen Toxinen
und Enzymen bezieht sich nicht nur auf diese Bindung,
souderu auch auf die Wirkungsweise, auf die ^ergophore"
Gruppe. Wenn Liebermann zeigt, daB Ricin bei der
HUmolyse verschwindet, so beweist dieser Umstand nichts
gegen die enzymatische Natur der wirksamen Substanz, son-
dern zeigt im Gegenteil ein fQr organische Enzyme fiuBerst
charakteristisches Verhalten.

Es ist nicht der Zweck der vorliegenden Untersuchungen,
die Enzymnatur der Toxine zu beweisen, wir wollten vorlSufig
nur zeigen, daB einer solchen Auffassung nicht nur nichts im
Wege steht, sondern daB die vorhandenen VerhBltnisse direkt
zu einer solchen Annahme auffordern. Muller, Eisler und
Pribram etc. betonen auch die Analogie und die Moglichkeit

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

139

einer Identitit, sie meinen aber, dafi durch diese Annahme
nicht viel gewonnen wSre. Unsere Untersuchungen wftnschen
zu zeigen, daB durch die Identifizierung der Toxin-
wirkung mit einer enzymatischen Reaktion s&mt-
liche Tatsachen der AntikSrperbindung, die Spezifizit&t, die
Reaktionen zwischen Toxin und Antitoxin, die Wirkungsweise
der Toxine etc. einer chemischen Erkl&rnng zug^nglich werden.
Um nns besser verst&ndlich machen zu kbnnen, halten wir es
f(ir nOtig, unsere wichtigsten Kenntnisse fiber enzymatische
Kinetik kurz zu besprechen.

2. Die Enzymwirkung.

Katalysatoren sind Kfirper, die die Geschwindigkeit einer
Reaktion findern kfinnen, ohne dabei verfindert zu werden.
Unter Katalysatoren in engerem Sinne verstehen wir solche,
die die betreffende Reaktion beschlennigen. Es ist ein groBer
Erfolg der physiologischen Chemie, daB sie zeigen konnte,
daB viele bei dem Stoffwechsel hervorragend beteiligte Sub-
stanzen, die Enzyme, prinzipiell ebenfalls solche Katalysatoren
darstellen. Der grdBte Teil der bekannten Enzyme sind
^hydrolysierende**, das heiBt, daB durch ihre Wirkung die
unter normalen Verhfiltnissen unmeBbar langsam erfolgende
hydrolytische Spaltung von EiweiBstoffen, Fetten etc., in ihrer
Oegenwart eine solche Geschwindigkeit erreicht, die den wohl-
bekannten, zwischen „anorganischen‘‘ Kdrpern stattfindenden
Reaktionen nahekommt. Es hat sich gezeigt, daB solche Hydro-
lysen nicht so lange weitergehen, bis das ganze Substrat ge-
spalten ist, sondern sie hdren schon frfiher auf, sie streben
einem Gleichgewicht zn. Dieses Gleichgewicht ist natfirlich
von beiden Seiten erreichbar. Mit andern Worten muB also
ein Enzym, wenn es die Spaltung von einem Substrat hat
beschlennigen kfinnen, ebenso die Synthese des Substrates
aus den Spaltungsprodukten beschlennigen. Tatsfichlich konnte
man ffir die meisten Enzyme eine synthetisierende bezw. Syn¬
these beschleunigende Wirkung nachweisen. Die Verhilltnisse
sind zwar noch nicht fiberall gekl&rt, doch kfinnen wir jetzt
schon mit Bayliss sagen, daB „keine zwingende Evidenz
ffir die Annahme vorliegt, daB Enzyme andere Stoffe auf
synthetischem Wege darstellen, als die, welche sie auch zn

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140

Stephan Rusznysik

hydrolysieren verm6gen‘‘. Die Enzymwirkung setzt sich also
aus zwei Koraponenten zusammen: aus einer spaltenden und
einer synthetisierenden Wirkung; da diese beiden Reaktionen
in entgegengesetzten Richtungen verlaufen, wird die tats^k-
liche Geschwindigkeit einer Hydrolyse durch die Differenz
zweier Geschwindigkeiten dargestellt. Die bekannte Formel ist:

V = k, (a — x) — kj X®

a ist die Anfangskonzentration vom Substrat, x die zurzeit
umgewandeite Menge. £s ist leicht ersichtlicb, dak ^ein Zu-
satz von Reaktionsprodukten den Fortschritt einer umkehr-
baren Reaktion hemmen mull'* (Euler). Eine solche hem-
mende Wirkung konnte zuerst KQhne fiir die Pepsinverdauung
nachweisen, indem er zeigte, da6 die schon stillstehende Reak¬
tion weitergeht, wenn die Spaltungsprodukte aus der FlQssigkeit
durch Dialyse entfernt werden. Seither wurden diese Verhait-
nisse fiir andere Enzyme mit demselben Erfolg untersucht.
Fiir unsere Untersuchungen sind besonders die Befunde von
Bayliss wichtig, der die hemmende Wirkung der EiweiB-
spaltprodukte auf die tryptische Kaseinverdauung zeigen
konnte.

Die Reaktionsprodukte Qben auch noch auf eine andere
Weise einen verzdgernden EinfluB auf die Geschwindigkeit
der Enzymreaktion, und zwar dadurch, daB sie sich mit dem
Enzym verbinden. Der Grad, in welchem dieser Umstand die
Enzymreaktion beeinfluBt, variiert mit den verschiedenen
Enzymen, bei Trypsin ist dieser EinfluB z. B. sehr hervor-
tretend, wkhrend er fQr Invertase vernachlUssigt werden kann.
Wir haben hier die beiden wichtigsten Faktoren besprochen,
die wkhrend der Reaktion die Enzymwirkung beeinflussen
kbnnen, die iibrigen Ursachen, die hier noch in Frage kommen
kdnnten, findet man bei Bayliss zusammengestellt. AuBer
diesen kdnnen noch eine Reihe von organischen und anorga-
nischen Kbrpern hemmend auf die Enzymr-eaktion einwirken,
diese sind die sogenannten „Gifte‘‘; wir beniitzen hier wieder
die Gelegenheit auf die Analogie, die auch in diesem Punkte
zwischeu Enzymen und Toxinen besteht, hinzuweisen.

Es gibt nur eine einzige Art von Hemmungskdrpern, die
eine spezifische Wirkung auf die Enzyme ausflben kdnnen,
diese sind die schon oben erw&hnten Spaltungsprodukte. Es

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

141

ist natarlich, dafi die Produkte einer Eiweifihydrolyse von
keinem Einflufi auf eine Spaltung durch Lipase sein werden
und umgekehrt. Aber wenn wir nur die Proteasen be-
trachten, kdnnen wir auch eine gewisse SpezifizitM in der
Wirkungsweise der Abbauprodukte bemerken. Nehmen wir
z. B. zwei Proteasen a und b, und sagen wir, a kbnnte eine
viel tiefere Spaltung von Eiweifisubstanzen zuwege bringen,
als b; dann ist evident, dad die einfacher zusaromengesetzten
Spaltungsprodukte fdr a noch eine hemmende Wirkung besitzen
werden, wShrend sie fflr b indifferent sind; dagegen kbnnten
Abbauprodukte hdherer Ordnung sowohl a als auch b in ihrer
spaltenden Wirkung hemmen.

Wir haben frflher gesehen, dad auch die Fermente antigene
Eigenschaften besitzen, parenterale Einfflbrung von Trypsin in
den TierkSrper bewirkt z. B. ein vermehrtes Auftreten von ^anti-
tryptisch‘‘ wirkenden Substanzen im Blutserum. Von Rosen¬
thal ist nun neuerdings der Beweis gefhhrt worden, dad diese
autitryptischen Substanzen nichts anderes als Eiweidabbau-
produkte darstellen. Aus dem frQher Gesagten ist der ganze hem¬
mende Mechanismus leicht verst&ndlich. Die widersprechenden
Angaben ttber Thermoresistenz kdnnten auch ihre Erkldrung
darin finden, dad sowohl hochmolekulare thermolabile wie ein-
fachere thermostabile Eiweidspaltprodukte eine verlangsamende
Wirkung auf die tryptische Verdauung ausdben kbnnen. Da-
mit w9.re auch die Angabe Bauers, dad das Antitrypsin
keine einheitliche Substanz ist, erkldrt. Das ist wichtig, denn
gerade wegen der Thermoresistenz leugnen mehrere Unter-
sucher (Rosenthal, Dbblin, Bauer etc.) die nechte*^
AntikCrpernatur des Antitrypsins. Ist nun die ThermolabilMt
fiir echte Antitoxine ein charakteristisches Merkmal? Wir
mflssen sagen: nein; denn die Thermolabilittlt ist nur eine
relative Eigen schaft, die verschiedenen Antikdrpern in ver-
schiedenem Made zukommt; anderdem haben wir eben gesehen,
dad thermostabile und thermolabile Antitrypsine mdglich sind.
Welchen Grad von Thermoresistenz ein Antiferment erreicht,
h9jigt ausschliedlich davon ab, wie tief das betreffende Enzym
das Substrat zu spalten imstande ist. Eine andere Einwendung,
dad n&mlich nach einer Trypsininjektion viel schneller Anti¬
trypsine im Blutserum auftreten, .als wir das sonst bei echten

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142

Btephan Rusznyak,

Antitoxinen gew5hnt sind, wurde von K. Meyer abgetan.
Die einzige Eigenschaft, die einen Antikdrper charakterisiert,
ist seine Relation zu seinem Antigen. Toxin und Antitoxin
heben beiderseits ihre Wirksamkeit auf. Genau dasselbe sehen
wir auch fflr Trypsin und Antitrypsin; wir haben schon oben
gesagt, daB das Antitrypsin die fermentative Wirkung des
Trypsins hemmt; aber umgekehrt wissen wir auch von Bittorf
und Jochmann-Kantorowicz, dafi in Fallen, wo der
Kbrper entweder artificiell Oder durch zerfallende Zellen (bei
Pneumonie) mit proteolytischem Enzym tiberschwemmt wird,
die normale antitrypische F&higkeit des Blutserums bedeutend
abnimmt. Nach diesen Ueberlegungen behaupten wir also,
daB trotz eventueller Thermoresistenz keine prinzipiellen
Unterschiede zwischen Antifermenten und Antitoxinen bestehen.

Da wir von dem Standpunkt ausgegangen sind, daB die
Toxine Fermente sind, miissen wir annehmen, daB die Anti-
toxine aus der fermentativen Einwirkung der Toxine auf den
Organismus resultierende Spaltungsprodukte darstellen. Die
Reaktionen zwischen Toxin und Antitoxin sind durch die Arbeit
langer Jahre genau durchgearbeitet und die Resultate, die man
dabei erhalten hat, dienen zur Grundlage mehrerer Theorien.
Um uns von der Richtigkeit unserer Annahmen Bberzeugen
zu kdnnen, haben wir uns die Aufgabe gestellt, zu erforschen,
ob in einem einfachen Falle, bei der Hemmnng eines Fermentes
durch ein Spaltungsprodukt dieselben GesetzmS.Bigkeiten zutage
treten werden, die wir bei der Einwirkung von Antitoxin auf
Toxin kennen gelernt haben. Wir glauben vorausschicken zu
kdnnen, daB nach unserer Meinung der Beweis vollkommen
gelungen ist.

Die Methodik, deren wir uns bedienten, warfolgende;
An Stelle des Toxins nahmen wir eine Trypsinldsung, statt
Antitoxin Glykokoll, als Indikator vertrat in unserem Falle
die Stelle des Tierkorpers Oder von roten Blutkdrperchen eine
2-prom, lackmusnentrale Ldsung von Kasein. Die Ldsungen
bereiteten wir uns ungef^hr nach der Technik von v. Berg-
mann und Meyer, wie sie von MB Her in „Serodiagnostische
Methoden^ beschrieben ist. Leider konnte die sonst so aus-
gezeichnete Methode von Sdrensen zur Verfolgung der
Kaseinverdauung nicht gebraucht werden und so muBten wir

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

143

uns mit relativen Werten begniigen; die Deutung der Yersuchs-
ergebnisse wird dadurch natUrlich nicht beeintr&chtigt, da die
Werte fdr To}(iDe und Antitoxine ebenfalls nur einen relativen
Wert besitzen. Um uns von dem Fortschritt der Kaseinver-
danung zu dberzeugen, haben wir nach einer bestimmten Zeit
3—4 Tropfen einer Mischnng von 5 ccm Essigsaure und von
45 ccm Alkohol zu dem Enzym-Kaseingemisch zugefQgt; wenn
unverdautes Kasein noch in der Ldsung ist, bildet sich ein weifier
Niederschlag. Es kommt vor, dafi man bei einer grdfieren
Verddnnung Oder bei Anwesenheit einer groBen Quantitat von
Glykokoll keine so prazise Grenze fflr die ndtige Enzym-
quantitat bekommt wie bei der Benutzung von konzentrierteren
Ldsungen. In diesem Falle ist es gut, die Fldssigkeit mit der
zugegebenen Menge von saurem Alkohol zu vermischen und
dann auf 1 Stunde in den Thermostat zu stellen, wobei sich
in der homogen milchigen Ldsung ein flockiges Prazipitat
bildet, wahrend die Gemische ohne nativem oder mit sehr
wenig unverdautem Kasein homogen bleiben. Es gilt hier
also dieselbe Regel wie fflr die Toxinuntersuchungen. Fflr
eine Versuchsreihe mflssen dieselben Ldsungen am selben Tage
benutzt und alle Untersuchungen womdglich gleichzeitig parallel
gemacht warden. Da Glykokoll schon in maBigen Konzen-
trationen so saner ist, daB es das Trypsin aus der benutzten
schwach alkalischen Ldsung ausfallt, haben wir behufs Neu¬
tralisation zu 100 ccm 20-proz. Glykokolldsung 10 ccm n-
Natronlauge zugefflgt. Um die aus einer eventuell unvoll-
standigen Ldsung des Trypsins resultierenden Ungenauigkeiten
zu eliminieren, haben wir die Trypsinldsung vor Gebrauch
immer filtriert. Es ist anch wichtig, fflr das grflndliche Mischen
der Flflssigkeiten Sorge zu tragen.

3. Das Qesetz der Multipla und das „Ehrliolisclie FhEnomen**.

Es ist Ehrlichs Verdienst, die chemische Denk’weise auf
die Erscheinungen der Immunitat ausgedehnt zu haben. Es
konnte gezeigt werden, daB das Toxin bei seiner Reaktion
nicht zugrunde geht und durch geeignete Versuchsanordnung
aus seiner Verbindung mit dem Antitoxin unversehrt wieder
zu erhalten ist. Der zweite wichtige Nachweis, den Ehrlich
und seine Mitarbeiter geliefert haben, besteht darin, daB sie

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144

Stephan Busznyak,

gezeigt haben, dafi die Reaktion zwischen Toxin und Antitoxin
gesetzmilBig verlSaft, indem wenn zum Unsck^dlichmachen einer
Dose „x‘‘ z. B. „y“ Dosen Antitoxin ndtig waren, dann bendtigen
2, 3 . . . n-mal x Dosen ebenfalls 2, 3 . . . n-mal y Dosen.
Dies ist das Gesetz der Multipla; es wurde daraus gefolgert,
da6 Toxin und Antitoxin miteinander chemisch reagieren, und
zwar nach der Art von starken S&uren und Basen, d. h. sie
„neutralisieren‘‘ sich gegenseitig.

Betrachten wir jetzt die VerhSltnisse bei Trypsin und
Glykokoll. Nachfolgender Versuch soli gleichzeitig die hem-
mende Wirkung des Glykokolls auf die Trypsinverdauung
illustrieren.

In 3 Beihen von Beagenzgiaschen kommen absteigende Dosen einer
l-prom. schwach alkalischen Trypsinldsung (Trypsin sicc. Griibler); in die
erste Beihe wird noch je 2 ccm, in die zweite je 1 ccm dner 10-proz. Glyko-
kolldsung (Glykokoll puriss. Merck) gegeben, in die dritte Beihe kommt
kein Glykokoll. AUe Bohrchen werden mit physiol. NaCl auf 3 ccm auf-
gefiillt und dann mit je 2 ccm einer 2'prom. Easeinldsung gemischt. Die
Bdhrchen kommen auf V* Stunde in den Thermostaten und werden dann
mit 3 Tropfen saurem Alkohol versetzt. In den mit + bezeichneten Bdhr-
chen bildete sich nach einer Stunde der bekannte Niederschlag. Folgende
Tabelle fafit die Besultate zusammen.

TabeUe I.

V, Stunde bei 37 * C, je 2 ccm Kaseui.

Trypsinmenge in ccm

1,0

0,9

I 0,8

0,7

0,6

o

p

1 0,3

0,2

0,1

Beihe 1

_

_

, - -

_

- ! +

+

+

+

») 2

—

—

—

—

—

— j —

+

+

+

„ 3

1 “■

—

—

* - 1

—

— 1 —

—

+

+

Die Menge von Trypsin, bei welcher sich eben kein Nieder-
scblag gebildet hat, wird „komplett verdauende Dose‘s genannt.
Sie betr&gt nach der Tabelle bei Reihe 1 0,5 ccm, bei Reihe 2
0,4 ccm und bei Reihe 3 0,3 ccm. In der Reihe 2 hat die
zugeffigte Glykokollbsung 0,4—0,3 = 0,1 ccm Trypsin „neu-
tralisiert“, wfihrend die zweifache Menge in Reihe 1 0,5—0,3
= 0,2 ccm Trypsin, d. h. genau die zweifache Menge „neu-
tralisiert*^ hat. Es ist also zu sehen, daB das Gesetz der
Multipla auch fflr Trypsin und Glykokoll gdltig ist; wir ziehen

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

145

daraus natflrlich nicht mehr den SchluB, daB Trypsin und Glyko-
koll sich gegenseitig „neutralisiert‘‘ hfttten, sondern erklfiren
die Tatsache einfach aus den Gesetzen der Enzymwirkung. Die
Trypsinwirkung ist nSmlich wenigstens in der ersten Zeit mit
der Trypsinmenge proportional (Bayliss), wUhrend sie mit
der Konzentration der Spaltungsprodukte umgekehrt propor¬
tional ist. Vermehren wir also die eine, so mtissen wir, um
die gleiche Wirkung zu erlangen, die andere genau nro so viel
vermehren.

Die weiteren Untersnchungen flber die Beziehnngeu
zwiscben Toxin und Antitoxin fdrderten interessante Einzel-
heiten zutage. Wenn die VerhEltnisse einfach liegen wflrden,
d. h. wenn es sich um einfache Neutralisation handeln wflirde,
miiBte die Differenz Lf—Lo gerade eine dosis letalis betragen,
man findet aber, daB die Differenz viel grSBer ist:

Lf—Lo = 5 bis 50 dos. let.

Ehrlich muB zur Erkl&rung dieser Tatsache annehmen,
daB in Kulturfiltraten Substanzen vorhanden sind, die mit dem
Toxin nur den Besitz einer ^haptophoren^ Gruppe gemeinsam
haben und sich auch durch die geringere Avidit&t dieser Gruppe
gegen das Antitoxin von den Toxinen unterscheiden („Toxone‘‘).
Wir wollen nun zeigen, wie einfach sich die Tatsachen von
unserem Gesichtspunkt aus gestalten; um uns an bestimmte
Werte halten zu kdnnen, teilen wir die Resultate des folgenden
Versuches mit.

Je 2 ccm einer 3-prom. Trypsinlosung wird einmal mit 20 ccm dner
physiol. NaCI-Ldsung imd einmal mit 20 ccm einer 10-proz. Glykokoll-
l5sung gemischt Die Mischungen stehen '/« Stunde bei 37 ” C und wetden
dann titriert, d. h. absteigende Quantitaten (natiirlich auf das gleiche Volum
aufgefullt) werden mit je 2 ccm Kaseinlosung in den Thermostat gebracht
und nach */* Stunde der Fortschritt der Verdauung untersucht.

TabeUe II.

Vj Stunde bei 37* C, je 2 ccm Kasein.

Fliissigkeitsmengen in

ccm

2,0

1,75

1,5

1,25

1,0

0.8

0,6

0,4

1. Mischung

_

1

_

■_ ■

+

2* M

—

—

-1-

+

+

+

+

4-

Zdtschr. f. ImmuDlUtsfonchooif. Ori;. Bd. X. 10

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146

Stephan Busznydk,

In der ersten Mischung ist die komplett verdauende Dose
0,6 ccm, in der zweiten 1,75 ccm; die hemmende Wirkung
des Glykokolls ist also sehr ausgesprochen. Untersuchen
wir jetzt, welche Werte in unserem Falle den Begriffen von
dosis letalis, Limt und Limo entsprechen. Die dosis letalis
ist die Menge Trypsin, die in 0,6 ccm der ersten Mischung
vorhanden ist, denn diese Menge konnte die maximale sicht-
bare Wirkung auf den Indikator ausflben; diese Wirkung ist
in unserem Falle die Verdaunng des Kaseins bis zu einem
gewissen Grade, welcher bei Diphtherietoxin dem Tode des
Versuchstieres entspricht. Wenn wir also die dosis letalis
ausrechnen, so erhalten wir 0,00006 g. Dem Wert Lf ent¬
spricht diejenige Menge Trypsin, die bei einer willkQrlich ge-
wldilten Menge von Glykokoll dieselbe Wirkung aushbt; diese
Menge ist in 1,75 ccm der zweiten Mischung enthalten. Lf
ist also = 0,000175 g. Was entspricht aber dem Begriffe von
Lo bei einer Enzymreaktion ? Offenbar diejenige von Enzym,
bei welcher bei einer gegebenen Menge von Spaltprodukten
die Reaktion nicht weitergeht; dieser Wert ist aber Lo=0
(ansgenommen wenn die Spaltprodukte in einer solchen Kon-
zentration zugegen sind, daC schon das bewuilte Gleichgewicht
eingetreten ist, welcher Fall bei dem Tierversuch nie vor-
kommt). Eine langsame Spaltung wird also jede noch so kleine
Enzymmenge verursachen. Im Tierversuche sind aber die Ver-
hS^Itnisse ganz anders (auch bei Blutkdrperchen in vitro, denn
die Beobachtungen k6nnen nie ttber einige Stunden ansgedehnt
werden), denn der Organismus besitzt in seiner nattlrlichen
Toleranz und in seiner Flihigkeit, die entstehenden giftigen
Spaltungsprodukte zu eliminieren, zwei Faktoren, die den Wert
Lo grdfier als 0 machen kdnnen. Hauptsache ist es nur, dafi
die entstehenden Giftstoffe keine solche Konzentration erreichen
sollen, die bei dem Tiere Vergiftungssymptome auslosen konnte.
Demnach hangt der Wert Lo hauptsSchlich von den Eigen-
schaften des Tieres ab. Nehmen wir an, in unserem Falle
kdnnte ein Tier eine solche Menge von Giftstoffen ohne Reaktion
ertragen, die aus der Differenz der Geschwindigkeit seiner
Eliminationsfunktion und aus der fermentativen Wirkung von
z. B. 0,00002 g Trypsin (bei der bestimmten Menge von Glyko¬
koll) resultieren. Dann wQrde der Wert Li—Lo ffir diesen

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

147

Fall 0,000155 g Trypsin betragen, d. h. 2,58 letale Dosen.
Wir glauben mit nnseren Ausfiihrnngen deutlich genug gezeigt
zu haben, dafi zwischen dem Wert Lf—Lo und der dosis letalis
flberhaapt kein Zusammenhang besteht und daher die Annahme
von Toxonen in diesem Falle vdllig Qberfltissig ist.

4. Die Methode der MPertielleii Abslttigniig".

Da nun einmal die komplexe Konstitntion der Bakterien-
gifte angenommen war, suchte man nach Methoden, mit der
man die einzelnen Bestandteile differenzieren konnte; diese
Bestrebungen haben die Methode der partiellen AbsSttigung
geschaffen. Sie besteht darin, dad nicht die ganze Toxinmenge
abgesHttigt wird, sondern nur ein Teil derselben, und man
untersucht, wie sich die Toxizit&t der Mischung zn der Menge
des zugesetzten Antitoxins verhSlt. Man hat mit den ver>
schiedenen Giften auch sehr verschiedene Resnltate erhalten.
Man hat Toxine gefunden, z. B. Cobragift, bei denen ver¬
schiedene Mengen von Antitoxin proportionale Toxinmengen
neutralisiert haben; wieder andere Gifte zeigten die Eigen-
schaft, dafi bei ihnen z. B. eine zweifache Menge von Anti¬
toxin nicht die zweifache Menge von Toxin, sondern weniger
kompensierte. Man hat hberhaupt die grdfite Mannigfaltigkeit
gefunden. Zur Erklfirnng dieser Tatsachen mufite die Ehr-
lichsche Schule auf dem schon eingeschlagenen Wege weiter-
gehen, und tats&chlich wurde von ihr die Existenz einer
ganzen Menge von Giftkomponenten angenommen, was
nicht viel zur Einfachheit und leichten Verstlindlichkeit der
Theorie beitrug. Diesem Umstande abzuhelfen, versuchten nun
Arrhenius und Madsen die Erscheinungen auf einer ganz
anderen Grundlage zu erkl^Lren. Zu diesem Zwecke versuchten
sie das Gesetz von Guldberg und Waage auf die Immuni-
t&tsvorg&nge zu Qbertragen. In einer Reihe von geistreichen
Untersuchnngen und Ueberlegungen konnten sie tatsfichlich
zeigen, dafi die bei der partiellen Absiittigung von Toxinen
beobachteten Erscheinungen grofie Aehnlichkeit mit VorgUngen
haben, die bei der Einwirkung von schwachen S&uren und
Basen anfeinander zutage treten. Leider wurden gleich nach
der Verdffentlichnng ihrer Ansichten wichtige Bedenken laut,
und heute kdnnen wir schon sagen, dafi der Arrhenius-

10 *

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148

Stephan Rusznyak,

Madsen sche Erkl^rungsversuch als nicht gelungen betrachtet
werden kann. Die wichtigste Einwendung war die, welche
die Reversibilit&t der VorgSnge betraf. Die Arrhenius-
Mad sen sche Hypothese basiert nUmlich auf der vollst^digen
Reversibilitat dieser Vorgange; diese Annahme stimmt aber
mit den Tatsachen nicht flberein.

Neuerdings wird immer 5fter (Bordet, Michaelis,
Zangger, Bayliss Ostwald, Biltz-Steiner etc.) dar-
anf hingewiesen, welche wichtige Rolle bei diesen Erschei-
nungen die kolloidale Adsorption spielen kdnnte. Tatsachlich
haben die Adsorptionserscheinungen die Eigenttimlichkeit, daB
die absorbierte Menge nicht in linearer Proportion za der
Menge des Adsorbenten steht. Wenn wir eine Adsorptions-
kurve betrachten (Fig. 2), finden wir in dieser Beziehung
wirklich eine Aebnlichkeit mit der Madsenschen Kurve
fttr Tetanolysin. Wir werden sehen, daO die Adsorptions¬
erscheinungen auch in unserer Deutung eine wichtige Rolle
spielen.

Wir haben die „partielle Absattigung“ des Trypsins durch
Glykokoll ganz nach dem Arrhenius-Madsenschen Schema
bewerkstelligt Eine bestimmte Quantitat einer Trypsinldsnng
wurde mit verschiedenen Mengen einer Glykokollosung ver-
setzt und dann auf ihre „Toxizitat‘‘ geprflft; dies geschah in
der Weise, daB aus der Mischung absteigende Quantitaten
genommen wurden und die grdBten Dosen, die gerade die
bestimmte Menge Kasein in einer halben Stunde nicht
losen konnten, fiir gleich toxisch genommen. Aus den Dosen
wurde die Toxizitat durch die Annahme berechnet, daB die
bendtigten Mengen mit der Toxizitat umgekehrt proportional
sind. Wir geben hier die Beschreibung einer solchen Ver-
suchsreihe:

Die Trypsinlosung war 3-prom, und enthielt in 100 ccm 0,4 ccm einer
normalen Na^COg-Losung. Als „Antitozin‘‘ benutzten wir eine 20-proz.
GlykokolUosung, mit 10 ccm n.-NaOH auf 100 ccm. Als Indikator diente,
wie gew5hnlich eine 2-piom. Easeinlosung. Zu je 2 ccm TrypsuildBung
haben wir 0, 5, 10, 15, 25, 35 ccm Glykokollosung gefiigt und mit physio-
logischer Eochsalzlosung auf 42 ccm aufgefiillt. Die Mischungen standen
4 Stunden im Thermostat und wurden dann titriert. Folgende Tabelle
zeigt die Besultate zusammengefaHt. Mit -f bezeichnen wir die gleich
toxischen Quantitaten.

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

149

TabeUe III.

Je 2 ccm Trypsin.

FQr die Toxizit&t der einzelnee QaantitHten ergeben sich
folgende Werte:

TabeUe IV.

Zugesetzte Menge
GlykokoU in ccm
35
25
15
10
5
0

Dosen von der
gleichen Wirkung

3,0

2,2

1,7

1,3

0,9

0,3

Toxizitat auf 1 ccm
gerechnet

0,33

0,45

0,59

0,77

1,11

3,33

Die Resultate werden flbersichtlicher, wenn wir die ent-
sprechenden Werte in ein Koordinatensystem eintragen.

Fig. 1.

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150

Stephan Busznjdk,

Die aus den Werten resultierende Kurve hat dieselben
Eigenschaften wie die, welche Arrhenius und Madsen mit
Hilfe der „partiellen Abs^ttigung*^ bei Diphtherietoxin und
Tetanolysin erhalten haben. Das charakteristische Merkmal,
dafi die zweifache Menge des Antitoxinquantums, die die erste
H^lfte des Toxins neutralisiert, nicht das ganze Toxin zu
neutralisieren imstande ist, tritt auch hier hervor. Wie lassen
sich nun diese VerhSltnisse erklSren? Wenn ein Spaltungs-
produkt die entsprechende enzymatische Reaktion nur wegen
der Reversibilitfit hem men wflrde, so mflfiten wir mit Hilfe
der Methode der „partiellen Neutralisation" eine gerade Linie
erhalten (siehe Fig. 2), denn die Geschwindigkeit einer Enzym-
reaktion ist mit der Konzentration der Spaltnngsprodukte ver-
kehrt proportional. Tatsilchlich sind solche Enzyme bekannt,
z. B. die Invertase, und wir kennen auch Toxine, die sich so
verhalten, wie z. B. Cobragift.

Was verursacht aber das Abweichen von der geraden
Linie? Die Antwort auf diese Frage kann nur durch die
Bindungen zwischen Enzym und Reaktionsprodukten gegeben
sein. Da es sich dabei hauptsSchlich urn Kolloide handelt,
sind diese Bindungen wahrscheinlich Adsorptionsbindungen.

Fig. 2.

Hier liegt also die Wichtigkeit der Adsorptionserscheinungen
fflr die Neutralisation von Toxin und Antitoxin. Die Kurve
der partiellen Abs&ttigung wQrde also durch die Interferenz
der beiden Faktoren, die Verlangsamung wegen der Rever-
sibilitat (Fig. 2) und die Hemmung durch Adsorption (Fig. 2)
entstehen. Die VerhEltnisse sind also gar nicht so einfach, wie

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Die WirkuDgsweise des Antitoxins.

151

Arrhenius meint, und Ehrlich hat recht, wenn er die
mathematische Behandlungsweise fiir diese Erscheinungen
noch nicht fQr ang&ngig hUlt.

Wie verhUlt es sich nun mit den Toxonen und den fibrigen
Toxinderivaten ? Wir glauben, dafi nach unseren Untersuch-
ungen, auch bei der ^partiellen Abs^ttigung^ die Notwendig-
keit nicht besteht, die Existenz von Bakterienprodukten mit
Toxoncharakter anzunehmen. Auch wir stehen mit Arrhenius
und Bordet auf dem Standpunkt, dafi die fttr Toxonwirkung
gehaltenen Erscheinungen durch eine ungenilgende Neutrali¬
sation des Toxins hervorgerufen werden, freilich verstehen
wir unter „Unvollst§.ndigkeit“ und ^Neutralisation^ etwas ganz
anderes als sie. DaJS im Tierkdrper eine groBe Menge Enzym,
dessen Wirkung durch Spaltungsprodukte verlangsamt wird,
teilweise andere Erscheinungen hervorrufen kann (Morgen-
roth), wie eine durch Spaltungsprodukte nicht verlangsamt
wirkende kleine Menge, erscheint nur natiirlich. Prin-
zipiell IBBt sich ja gegen die Annahme einer Existenz von
Toxinbestandteilen mit Toxoncharakter nichts einwenden und
ihre eventuelle Richtigkeit ist fhr unsere Theorie gleichghltig.
Wir wollten nur zeigen, daB die bekannten Erscheinungen
auch auf eine einfachere Weise verstUndlich werden kdnnen.
Was die Existenz der sog. Syntoxoide anbelangt, halten wir
sie auch fflr Enzyme erwiesen (Bayliss), woven noch weiter
unten die Rede sein wird. Ob Kdrper mit groBerer AviditUt
als die Toxine (Prototoxoide) in Kulturfiltraten vorkommen,
ist fflr unsere Theorie gleichgQltig, da die AviditBtsverhBltnisse
von den Adsorptionskoeffizienten abhBngen, wie Michaelis
gezeigt hat. Jedenfalls ist es charakteristisch, daB gerade bei
Toxinen, bei dessen „Neutralisation* die Adsorptionserschei-
nungen keine oder eine sehr untergeordnete Rolle spielen, wie
wir eben gezeigt haben, ihre Gegenwart nicht bewiesen werden
konnte.

6. Die nFestigung" der Bindimg. Dae Phanomen von Danysz-

V. Dungem.

Der Standpunkt von Arrhenius wurde, wie gesagt, un-
haltbar, als der Beweis erbracht worden ist, daB die Verbin-
dung von Toxin und Antitoxin nicht nur irreversibel ist.

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152

Stephan Busznyak,

sondern dafi sie schon nach relativ kurzer Zeit eine betx&cht-
liche Festigung erleidet. Die Versuche von Danysz ttber
Ricin und von v. Dungern mit Diphtherietoxin zeigten, dafi
fiir die resultierende Toxizitfit nicht gleichgfiltig ist, ob man
Toxin und Antitoxin auf einmal oder fraktioniert vermischt.
Diese Versuchsergebnisse wurden in der verschiedensten Weise
gedeutet. Die Ehrlichsche Schule sab darin einen Beweis
fflr die IrreversibilitSt und fflr das Vorhandensein der Toxone;
Eisenberg versuchte dasMassenwirkungsgesetz anzuwenden.
Es bleibt ein grofies Verdienst von Bordet und Michaelis,
dafi sie gerade bei diesem Punkt auf die grofie Aehnlichkeit
dieser Vorg&nge mit bekannten Adsorptionserscheinungen bin-
gewiesen baben. Wie bei der fraktionierten Adsorption immer
weniger Farbstofif adsorbiert wird, und wie aucb dort die
Bindung eine Tendenz bat, mit der Zeit irreversibel zn
werden, genau so steben die Verbfiltnisse bei Toxinen und
Antitoxinen.

In unserem Falle bei Trypsin und Glykokoll konnten wir
dasselbe finden. Zuerst k5nnen wir zeigen, dafi in der
Miscbnng das Trypsin und Glykokoll mit der Zeit in ein
engeres Verbfiltnis zueinander treten, indem eine solcbe
Mischung in den ersten 3 Stunden an Aktivitfit verliert.

Das Gemisch enthalt 4 ccm Trypsin (3-prom.) -|- 20 ccm Glykokoll
(20-proz-) -h 20 ccm physiol. NaCl-L6sung; das Gemisch „B“ 2 ccm Tryp¬
sin -f 20 ccm Glykokoll -f- 20 ccm physiol. NaCl. Die Gemische werden
sofort und nach einem vierstiindigen Aufenthalt im Thermostat titriert,
das heiUt die in einer halben Stunde komplett rerdauende Dosis bestimmt.

TabeUe V.

V, Sttmde bei 37® C je 2 ccm Kasein

3

2,5

2,0

1,75

1,5

125

1,0

0,8

. „ / sofort

i.

+

-f-

(nach 4 Std.

—

—

i

—

+

+

+

-1-

/ sofort

- ■

—

+

+

+

-1-

-1-

-1-

” 1 nach 4 Std.

+

+

+

+

+

+

+

+

Wie aus der Tabelle zu sehen ist, ttbt das Glykokoll nach
einem Kontakt von 4 Stunden eine betrachtlich st&rkere
hemmende Wirkung aus, wie gleich nach dem Vermischen.

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Die WirkungBweise des Antitoxins.

153

Diese Erscheinung wird dadarch verursacht, da£ das Glykokoll
zur Adsorptionsverbindung mit dem Trypsin Zeit braucht,
w&hrend seine hemmende Wirkung im Sinne der Reversibilit&t
sofort einsetzen kann.

Dafi das Serumantitrypsin das Phlinonien von Danysz
und von Dungern hervorbringen kann, haben schon
K. Meyer and Rond on i zeigen kdnnen; wir fanden, daS
das Ph&nomen anch bei der gegenseitigen Einwirkung von
Trypsin and Glykokoll zustande kommt. Die Methodik war
die folgende:

Zwei fieihen von Glasern erhalten je 10 ccm Glykokollosung (20-proz.)
+ 20 ccm einer physiol. Eochsalzldsung. Je zwd wurden mit 0,2, 0,4, 0,7
und 1,0 ccm einer Trypsinldsung (3-prom.) gemischt, wahrend die ersten
Glaser der zwd Sdhen 2 resp. 2,5 ccm Trypsinlosung erhielten. Die Glaser
standen nun 18 Stunden hindurch bei Zimmertemperatur und eine bd 37 ” C;
dann wuide noch soviel Trypsinldsimg zugefugt, dafi in der ersten Beihe
die GlSser je 2 ccm, in der zweiten je 2,5 ccm von dem E^zym enthidten;
dann wurde nach weiteren 2 Stunden bei jeder Mischung die komplett
verdauende Dose bestimmt. Die Werte der folgenden Tabelle bedeuten die
komplett verdauenden Dosen in Eubikzentimetem. Zur Titrierung wurde
wieder 2-prom. EaseinlSsung behutzt.

Tabdle VI.

7, Stunde bei 37® C je 2 ccm Easdn.

Die anfangs zugesetzte Menge Trypsin

2,5

2,0

1 0,2

0,4

0,7

1,0

Die gesamte Menge des 12,0
Trunins in den Gliisem \ 2,5

1,3

2,5

2,5

1,2

2,0

1,1

1,3

1,0

1,3

0,9

Wenn koine Adsorptionserscbeinungen interferieren wiirden,
mtlfiten die borizontalen Reihen mit je 2 resp. 2,5 ccm Trypsin
bei der Titrierung dieselben komplett Idsenden Dosen ergeben,
wir sehen aber im Gegenteil, dafi die Ldsungen bei der frak-
tionierten „Neutralisation“ immer toxischer werden, indem
znr Verdauung derselben Kaseinmenge eine immer kleinere
Menge gentigt. Wir akzeptieren daher in diesem Punkt die
Erkl&rnng Bordets, dafi die Zunahme der Toxizitfit bei der
Fraktionierung in Eigentiimlichkeiten der fraktionierten Ad¬
sorption ihre Erklfirung findet.

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154

Stephan Eusznyak

6. Die Eigensohaften der t^utptophoren** Gruppe.

Wir mfissen noch kurz einiger Beobachtungen gedenken,
die wir am besten unter dem Xitel ^die Eigenschaften der
haptophoren Gruppe*' zusammenfassen kbouen. Ehrlich
hat ntimlich zeigen konnen, daB wenn ein Toxin mit der Zeit
seine Giftigkeit einbiiBt, es seine Bindungsftlhigkeit gegen
Antitoxin noch unvermindert oder nur wenig verSndert bei-
behfilt. Er erkl&rte diese Tatsache durch die Annahme von
zwei MolekUlgruppen im Toxin, von denen die bindende
flhaptophore", die vergiftende „toxophore“ an StabilitSt iiber-
trifft. Nun stehen zwar die VerhSltnisse nicht fftr jedes Toxin
genau so, wie Grassberger und Schattenfroh fflr
Rauschbrandgift gezeigt haben, doch war die Erscheinung bei
anderen Toxinen (z. B. Diphtherietoxin) so konstant, daB wir
unbedingt darauf RQcksicht nehmen mtissen. Es ist Bayliss
gelungen, auch im Trypsin eine Modifikation nachzuweisen,
die noch ihre BindungsfShigkeit ftlr das Substrat besitzt, aber
nicht mehr hydrolytisch wirksam ist. Er verspricht auch
Immunisierungsversuche mit diesem „Zymoid*‘ vorzunehmen;
wie diese ausgefallen sind, wissen wir nicht, nach unserer
Ansicht mtissen sie negativ ausfallen; denn abgesehen davon,
daB es auch mit nativem Trypsin schwieriger ist, Antikbrper
zu erhalten als mit den bekannteren Toxinen, ist die Toxoid-
immunisierung, wie Bruck gezeigt hat, vdllig verschieden
von dem Immunisierungsvorgang mit Volltoxinen. Es ent-
steht zwar eine Art histogene ImmunitUt, doch werden Anti-
toxine in das Serum nicht „sezerniert“, da, wie sich die
Ehrlichsche Schule ausdriickt, der Reiz der toxophoren
Gruppe fehlt, der die AbstoBung der neugebildeten Rezeptoren
bewirken sollte. Wir erkl^en die Tatsache ganz einfach da-
mit, daB das Toxoid sich zwar noch binden kann, aber da es
seine fermentative Eigenschaft eingebtiBt hat, konnen keine
Spaltungsprodukte entstehen. Worin flberhaupt eine histogene
ImmunitUt besteht, kdnnen wir nns bei dem heutigen Stande
der Chemie vorlHufig noch keine Vorstellung machen.

Noch eine ftir kolloide Verbindungen charakteristische
Eigenschaft konnten Grassberger und Schattenfroh bei
den Toxin-Antitoxingemischen nachweisen, nSmlich die gegen-

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Die Wirkungsweise des Antitoxins.

155

seitige Stabilisierung. Wird ein Toxin durch Erhitzen auf
z. B. 60® C zerstSrt, so vertrSgt es diese Temperatur in Gegen-
wart von Antitoxin viel besser. Ein Gemisch von Toxin und
Antitoxin auf 60® G erw&rmt entspricht dann nicht einer reinen
Antitoxinldsung (das Antitoxin wird bei 60® C nicht zerstort).
Aehnlicbe VerhSltnisse existieren auch ffir Glykokoll und
Trypsin. Wir konnten zeigen, dafi ein Gemisch von beiden,
welches einige Zeit im Thermostaten gestanden hat (!), nach
einem einstttndigen Erhitzen auf 100® C sich immer noch
nicht wie eine reine Glykokolldsung benahm, sondern sich in
seiner hemmenden Wirksamkeit vermindert zeigte. Diese
Tatsachen kdnnen nicht anders als durch die oft beobachtete
gegenseitige Stabilisierung in Adsorptionsverbindungen gedeutet
werden.

7. Zasammen&ssung.

Wir sind von dem Standpunkt ausgegangen, daO die
Toxine fermentartig wirkende Substanzen darstellen und die
Antitoxine die entsprechenden Spaltnngsprodukte sind. Wir
konnten zeigen, dafi in dem einfachen Falle bei Trypsin-
Glykokollgemischen in der Aenderung der AktivitSt der
Fltlssigkeit dieselben Gesetzmftfiigkeiten zutage treten, die
man bei Toxin-Antitoxinverbindungen beobachtet hat. Auf
der von uns befolgten Weise erhalten diese Gesetzm3.fiigkeiten
eine chemische und den Umst&nden angemessen eine relativ
einfache Erkl&rung. Unsere Theorie ist die erste, die eine
chemische Deutung der sonst so mystischen Spezifitlt geben
kann; schon in der Einleitung haben wir darauf hingewiesen,
dall die Gegenwart der Spaltnngsprodukte die einzige spe-
zifische Hemmung fhr die Enzymreaktionen bedeutet Diese
Spezifizit&t kann sehr weitgehend sein. Sie kann darauf be-
ruhen, daQ die einzelnen Fermente oder Toxine auf verschiedene
Substrate einwirken und damit verschiedene Spaltnngsprodukte
entstehen lassen. Die Spezifizit&t kann auch, wie gesagt,
durch die verschieden tiefe Spaltung der Substrate bedingt
sein. Auf den nach unserer Meinung wichtigsten Umstand
haben die Untersuchnngen von NeubergundAbderhalden
die Aufmerksamkeit gelenkt; sie konnten zeigen, dafi die
Spaltung von gewissen Substraten auf verschiedenen Wegen

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156

Stephan Rusznyak,

erreicht werden kann; sie nennen dies bei Krebs ^atypische^^
Fermentwirkungen. Wenn die MikroorganismeD sich wfihrend
der phylogenetischen Eotwicklung in diesem Sinne differenziert
haben, dann ist es bei der komplizierten Zusammensetzung
der Eiweifikdrper leicht verstUndlich, dafi, wenn auch silmt-
liche Toxine Proteasen wSren, was noch durchaus nicht be-
wiesen ist, die intermediSren Spaltungsprodukte nur gegen
jene Toxine wirksam sein kbnnen, bei welchen die von den-
selben verursachte fermentative Spaltung einen Weg geht, bei
der die betreffenden Produkte eine Zwischenstation bilden.
Es ist auch a priori sehr unwahrscbeinlich, was Landsteiner
meint, dafi n&mlich die Antigene keinen Teil an der Zusammen¬
setzung der Antikdrper haben sollten und der Organismus
allein die F^higkeit hJltte, auf eine so verschiedene Weise
gegen die verschiedenen Toxine zu reagieren.

Wir stellen uns den Vorgang, der sich im Tierkorper
nach der Injektion einer Toxinmenge abspielt, folgendermafien
vor: Zuerst wird das Toxin durch die Substanz, auf die es
seine Wirkung ausQben kann, gebunden, ebenso wie eine
Enzymmenge von Qberschhssigem Substrat gebunden wird.
Erst dann kann das Toxin seine Wirkung entfalten; die be-
treffende Substanz wird gespalten, wobei giftige und nngiftige
Reaktionsprodukte entstehen. Die Produkte entsprechen voll-
sUlndig den Ptomainen, die auch durch bakterielle Fermentation
von kompliziert gebauten Stoffen abgespalten werden und
auch teils giftig, teils ungiftig sind. Die giftigen Stoffe reizen
den Organismus eben durch ihre Giftigkeit zur Verteidigung,
und der Organismus sucht sie zu zerstbren oder zu eliminieren.
Wenn diese Giftstoflfe mit der Zeit doch eine solche Kon-
zentration erreichen kbnnen, dafi der Organismus darunter
leidet, dann treten die ersten Symptome auf. Die Inkubations-
zeit setzt sich also aus der Zeit der Giftbindung + Produktion
von GiftstoflFen bis zu einer bestimmten, auch vom Tier ab-
hUngigen Konzentration zusammen. Wird die nbtige Kon-
zentration nicht erreicht, dann werden die giftigen Spalt-
produkte zerstdrt resp. eliminiert, w3,hrend zur Eliminierung
der ungiftigen, indifferehten kein Grund vorhanden ist. Diese
bleiben im Serum zurhck und kbnnen ihre Schutzwirkung als

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Die Wirkungswdse des Antitoxins.

157

Antitoxine in der geschilderten Weise manifestieren ^). Hier
liegt ein Unterschied zwischen den fQr eine Tierart homologen
Fermenten und heterologen Toxinen vor. Da nSmlich die
Spaltprodukte der ersteren Bestandteile des normalen StofF-
wechsels sind, werden sie teils verbraucht, teils eliminiert,
und verschwinden dadurch schneller aus der Blutbahn als die
heterologen indiiferenten Spaltprodukte der Toxine. Das ist
die Ursache der Schwierigkeiten, die sich einer Immunisierung
gegen Fermente entgegenstellen.

Es ist ein Grundgesetz der organischen Materie, daB Re-
aktionen nach Wiederholung schneller und ausgiebiger ab-
laufen als zum ersten Male.

Wenn der Organismus die Reaktion gegen die erwBhnten
giftigen Ptomaine einmal durchgefflbrt hat, erscheint es sehr
verstBndlich, daB er bei einer Wiederholung noch prompter
und ausgiebiger wird reagieren kdnnen. Das ist vielleicht die
Grundlage der „histogenen‘‘ Immunittlt. Wenn wir unsere
Theorie von der Wirkungsweise von Toxin und Antitoxin be-
trachten, finden wir, daB sich darin ungef&hr sftmtliche
Faktoren, auf die wBhrend der Zeit von verschiedenen Seiten
hingewiesen wurde, einen Platz finden. Das Massenwirkungs-
gesetz bei dem Prinzip der Reversibilittt, die Adsorption bei
Bindung von Enzym und Reaktionsprodukt und die komplexe
Konstitution der Gifte alle haben einen EinfluB auf die be-
obachteten PhBnomene, und ein ErklBrungsversuch muB ihnen
alien Rechnung tragen. Es ist wohl kaum notig, zu be-
merken, daB in unserer Darstellung diese Faktoren eine ganz
andere Verwendung gefunden haben als bisher. Auf Grund
unserer Untersuchungen kommen wir zu folgenden Resultaten:

1) Es gibt keine Argumente gegen die Fermentnatur der
Toxine.

2) Durch die Annahme, daB Antitoxine spezifische
Spaltungsprodukte sind, finden sBmtliche GesetzmBBigkeiten
der Toxin-Antitoxinverbindungen eine einheitlicbe Erklftrung,

3) und die Erscheinungen der Antitoxinbildung und Spe-
zifizit&t werden einer chemischen Deutung zugBnglich.

1) Wir sind geneigt, anch die Erscheinungen der Antianaphylaxie auf
eine Xhnliche Weise aufzufassen.

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158 Stephan Rusznyak, Die Wirkungsweise des Antitoxins.

Literatur.

Abderhalden, Zeitechr. f. Krebsf., 1910.

— imd Mitarbeiter, Zeitschr. f. physik. Chemie, 1909—1910.

Achalme, Ann. Pasteur, 1901.

Arrhenius, Immunochemie, Leipzig 1907.

— und Madsen, Zeitschr. f. physik. Chemie, 1903.

-, Centralbl. f. Bakt., Bd. 36 u. 37.

Bauer, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 5.

Bay lies. Das Wesen der Enzymwirkung, Dresden 1910.

—, Arch, des scienc. Biol., T. 11, Suppl., 1904.

Bergmann und Bamberg, Berl. klin. Wochenschr., 1908.

Bergmann-Meyer, Berl. klin. Wochenschr., 1908.

Biltz-Steiner, Biochem. Zeitschr., 1909.

Bittorf, Deutsches Arch. f. klin. Med., 1907.

Bordet, Ann. Pasteur, 1903.

—, Centralbl. f. Bakt., Eef., Bd. 45.

Bruck, Zeitschr. f. Hyg., Bd. 46 u. 48.

Danysz, Ann. Pasteur, 1899 u. 1902.

Ddblin, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 4.

V. Dungern, Deutsche med. Wochenschr., 1904.

Ehrlich, Gesamm. Arbeiten zur Immunitatsf., Berlin 1904.

—, in Eraus-Levaditis Handbuch, Bd. 1.

Eisenberg, Centralbl. f. Bakt., Bd. 34.

V. Eisler-Pfibram, in Eraus-Levaditis Handbuch, Bd. 1.

Euler, Allgemeine Chemie der Enzyme, Wiesbaden 1910.
Fermi-Pernossi, CentralbL f. Bakt, Bd. 15.

Grassberger und Schattenfroh, Ueber die Beziehungen von Toxin
und Antitoxin, Leipzig und Wien 1904.

Jochmann und Eantorowicz, Miinch. med. Wochenschr., 1908.
Landsteiner, Wien. klin. Wochenschr., 1909.

Liebermann, Deutsche med. Wochenschr., 1905.

Madsen, in Eraus-Levaditis Handbuch, Bd. 1.

Madsen-Walbum, Centralbl. f. Bakt. Bd. 36.

Meyer, E., Berl. klin. Wochenschr., 1909.

—, Biochem. Zeitschr., 1910.

Michaelis, Die Bindungsgesetze von Toxin und Antitoxin, Berhn 1905.
—, in Eor4nyi-Richters Handbuch, Bd. 1.

—, in Oppenheimers Handbuch.

Morgenroth, Centralbl. f. Bakt., Bd. 26.

—, Zeitschr. f. Hyg., Bd. 48.

—, Berl. klin. Wochenschr., 1904.

Muller, Vorlesungen iiber Infektion und Immunitiit, Jena 1909.

—, Serodiagnostische Methoden, Jena 1910.

Neuberg, Zeitschr. f. Erebsf., 1910.

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H. Apolant und L. H. Marks, Aktive Geschwulstimmunitiit. 159

Oppenheimer, Deutsche med. Wocbenschr., 1905.

Ostwald, Grundrifi der KoUoidchemie, Dresden 1910.

Bondoni, Berl. klin. Wochenschr., 1910.

Rosenthal, Folia Serolog., Bd. 6, 1910.

Ruszny^k, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 8.

Sachs, in Oppenheimers Handbuch.

—, Centralbl. f. Bakt., Bd. 37.

—, Berl. klin. Wochenschr.. 1904.

Zangger, Zeitschr. f. Inununitiitsf., Bd. 1.

Naehdnick verboten.

[Aus dem Kbnigl. Institut fdr experimentelle Therapie (Direktor:

Oeh. Ober*Medizinalrat Prof. Dr. Paul Ehrlich).]

Znr Frage der aktlyen Oeschwalstimmmiitftt.

Von H. Apolant nnd L. H. Marks ^).

Mit 3 Tafeln.

(E^g^angen bei der Bedaktion am 8. April 1911.)

Die Natur der aktiven Tumorimmunitat bildet trotz der
zahlreichen dieses Thema behandelnden Arbeiten ein noch
durchaus ungeldstes Problem. Wenn auch in dem zeitlicheo
Auftreten und Abklingen der kttnstlich erzeugten Resistenz
weitgehende Analogien mit der gewbhnlichen aktiven Immunitat
vorliegen, so besteht andererseits doch eine durchgreifende
Differenz in der Unmbglichkeit, mit der Prazipitations- oder
Komplementbindungsmethode Antikdrper nachznweisen. Dem-
gemaa sind bisher auch alle der Kritik standhaltenden Ver-
snche einer passiven Immunisiernng erfolglos geblieben. Eine
Ansnahme machen lediglich die Angaben v. Dungerns^),
der bei den von ihm und Coca studierten Hasensarkomen
eine erfolgreiche passive Immunisiernng beschreibt Es ist

1) Die Mitarbeit des einen von uns (Marks) erfolgte auf Grund einer
„FellowBhip of the Rockefeller Institute (New York)*'.

2) Diese Zeitschrift, Bd. 5, 1910.

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160

H. Apolant und L. H. Marks,

nun aber in hohem Grade wahrscheinlich, daB diese auf Ka-
ninchen leicht ttbertragbaren Hasensarkome eine Sonderstellung
einnehmen, so daB es nicht statthaft erscheint, die bei ihnen ge-
wonnenen Resultate ohne weiteres zu verallgemeinern. Hierfur
spricht 1) die typische Lokalisation am Kopf, 2) das offenbar
endemische Auftreten, 3) die gewbhnlich spontane Resorption,
4) die stets eintretende Immunit^t, ganz gleich ob die erste
Impfung erfolgreich war oder nicht, und endlich 5) die hierbei
auftretenden Erscheinungen einer lokalen Ueberempfindlichkeit,
die sonst bei Geschwulstimpfungen nicht gefunden werden.
V. Dungern, der mit Coca die Immunitat aus der lokalen
Anaphylaxie erklart, bezieht daher die passive Immunitat auf
die Uebertragung des anaphylaktischen Antikorpers.

Die auf den Untersuchungen Jensens und Bashfords
uber die Stromareaktion der Impftumoren beruhende An-
schauung Russels^), daB durch eine immunisierende Impfung
eine Umstimmung des Organismus erzielt wird, die letzteren
der Fahigkeit beraubt, auf den von den Tumorzellen aus-
gehenden fibroplastischen und angioplastischen Reiz zu rea-
gieren, hat neuerdings eine, wie wir glauben, beweiskraftige
Widerlegung durch Goldmann*) erfahren, der eine Stroma¬
reaktion und reichliche Vaskularisation auch bei der Tumor-
resorption nachweisen konnte. Ebenso darf der Versuch Da
Fan os®), die aktive Tumorimmunitat durch cellulare Analyse
zu erklaren und den Lymphocyten und Plasmazellen die Haupt-
rolle hierbei zu vindizieren, nach den Studien Goldmanns
als gescheitert angesehen werden. Nach wie vor harrt das
Problem seiner Losung.

Unter diesen Umstanden verdienten die Angaben Wog-
loms^), daB es mdglich ist, durch Injektion der korpereigenen
exstirpierten Milz eine Resistenz gegen das Haften einer
spateren Tumorimpfung zu erzielen, erhbhte Beachtung. DaB
unter den normalen Organen, deren immunisierende Kraft

1) Third scient. report on the investig. of the Imp. canc. res. fund., 1908.

2) Studien zur Biologic der bosartigen Neubildungen. Tubingen 1911.

3) Diese Zeitschrift, Bd. 5, 1910.

4) Joum. of exper. med., VoL 12, 1910, No. 1.

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Zur Frage der aktiren GeschwulBtimmimitiit.

161

zuerst von Bashford und Schone ermittelt wurde, der
Milz eine besonders starke Wirkung zukommt, wissen wir aus
den vielseitig bestktigten Beobachtnngen B o r r e 1 s und
Bridrds^). Dafi sich diese Wirkung aber auch auf die
korpereigene Milz erstreckt, war ein prinzipiell auGerordentlich
wichtiges Novum, dessen BestMigung eine Antik5rperimmunit£t
mit ziemlicher Sicherheit ausschlieBen wQrde, da die vdllig
dysteleologische Bildung von Autolysinen, abgesehen von den
doch etwas anders aufzufassenden Spermotoxinen, bisher nicht
nachweisbar war.

Die Angaben Wogloms forderten um so mehr zu einer
Nachprdfung auf, als er lediglich fiber einen Versuch be-
richtet, in welchem laut beigefflgter Tabelle nur bei einem
nnter 11 mit der eigenen Milz vorbehandelten Tier die Tumor*
impfung positiv ausfiel, wEhrend die Ausbeute unter den Kon*
trollen etwa 75 Proz. betrug. Auf einen schon wachsenden
Tumor hatte die nachfolgende Immunisierung mit der eigeoen
Milz keinen Effekt, auch zeigten vorher zum Absterben ge-
brachte Milzzellen keine immunisierenden Eigenschaften mehr.
Dieses Resultat bedeutete also eine weitgehende Ueberein-
stimmung zwischen der Immunisierung mit kdrpereigenem und
korperfremdem Gewebe. Ein Punkt war dabei freilich sehr
merkwiirdig, der von vornherein zu einer gewissen Skepsis
gegen die Woglomschen Befnnde aufforderte, nfimlich die
Tatsache, daG zu solch erfolgreichen Immunisierungen, wie sie
Woglom beschreibt, gewdhnlich sehr viel grdGere Mengen
Impfmaterial notwendig sind als das Quantum Milz eiuer nor-
malen Maus von 15 g. Borrel und Bridrd geben aus-
drhcklich an, daG sie die Tiere dreimal in 12-t&gigen Abst&nden
mit Milz vorbehandblt haben, und zwar kam jedesmal nach
Borrels Mitteilung 1 ccm eines dicken Breies zur Ver-
wendung. Nehmen wir an, daG die Verddnnung, worQber die
Autoren nichts aussagen, etwa mit der gleichen Menge Koch-
salz hergestellt ist, was uns zur Erzielung eines dicken Breies
sehr reichlich bemessen zu sein scheint, so wdren zu jeder

1) Bull, de I’Inst. Pasteur, 1907.

2) Ann. de I’lnst. Pasteur, 1907.

Zeittchr. f. ImmaniUUfortchiiiif. Ortf. Bd. Z. H

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162

H. Apolant uiid L. H. Marks,

Injektion 0,5, im ganzen also 1,5 g Milzsubstanz verwandt
worden.

Vergleichen wir mit diesen relativ enormen Mengen das
Milzgewicht normaler Mause, wie es in Tafel III angegeben
ist. Wir stellen hier die Zahlen noch einmal tlbersichtlich
zusammen.

1 Milz =0,07 g

2 Milzen = 0,08 „

2 „ = 0,1 „

1 Milz =0,11 „

1 Milz = 0,16

1 „ =0,17

1 „ = 0,21

1 „ = 0,22

1 „ =0,27

g

V

9t

Das Durchschnittsgewicht betragt hiernach nur rund 0,14 g,
d. h. noch nicht Vio der von Borrel und Bridr4 verwendeten
Mengen. Woglom berdhrt diesen, wie uns scheint, Oberaus
wichtigen Punkt mit keinem Wort.

Schon im Hinblick auf diese Mengen differenzen waren
unsere Erwartungen auf einen Erfolg unserer Nachprflfung
von vornherein sehr gering, und, wie das spatere Resultat
zeigte, mit Recht.

In Versuch 1 (Tafel I) wurden 6 Tiere am 23. IX. ent-
milzt und mit der eigenen Milz immunisiert, 4 Kontrollen
am folgenden Tage nur entmilzt. Die Nachimpfung dieser
10 Mause nebst 12 Kontrolltieren geschah am 3. X. mit
0,025 ccm Carcinombrei. Irgendein greifbarer Unterschied
in dem Angehen der GeschwQlste ist nicht zu konstatieren.
Keinesfalls wuchsen die Tumoren auf den immunisierten Tieren
schlechter, eher kdnnte man dies von einigen der Kontrollen
behaupten.

In Versuch 2 (Tafel II) wurden neben den bisherigen
noch weitere Kontrollen mit Entmilzung und Immunisierung
mit fremder Milz gemacht. Die Operation resp. Immunisierung
geschah teils am 29. IX., teils am 30. IX., die Tumorimpfung
am 10. X. Unter den 4 mit eigener Milz gespritzten Mausen
ist allerdings eine erfolglose Impfung zu verzeichnen, dieselbe
beweist jedoch nichts, da auch die vorletzte Kontrolle als
negativ angesehen werden kann, und ferner die letzten 3 der
nur entmilzten Tiere, die, wie wir in Uebereinstimmung mit
Woglom konstatierten, sonst durchaus empfanglich sind,

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Zur Frage der aktiven Cieschwulstimmtinitat.

163

relativ immun zu sein scheinen. Viel wichtiger ist die Tat-
sache, dafi bei den mit fremder Milz vorbehandelten Tieren
die Impfung durchweg gut angegangen ist, als Beweis daflir,
dafi selbst unter diesen VerhlUtnissen die Immunisierung sich
als unzureichend erwiesen hat.

Das gleiche Resultat ergab der dritte Versuch in Tafel III,
auf der sowohl die Gewichtszahlen der injizierten Milzen als
die der entwickelten Tumoren angegeben sind. Mit Ausnahme
eines Versagers sind die Tumoren bei fast alien mit eigener
Oder fremder Milz immunisierten Tieren gut gewachsen, im
Durchschnitt sogar besser als anf den nicht vorbehandelten
Kontrollen.

Zusammenfassung.

Unsere Versuchsergebnisse stehen also durchaus im Gegen-
satz zu den Angaben Wogloms, da wir nicht den geringsten
immunisierenden Einfiufi der Injektion der kdrpereigenen Milz
haben konstatieren kdnnen. NatQrlich ist damit nicht behauptet,
dafi in dieser Beziehung ein prinzipieller Unterschied zwischen
der kdrpereigenen und korperfremden Milz besteht, denn eine
einmalige Injektion der letzteren genfigt eben auch nicht zur
Erzielung einer Immunitfit. Das geht aus unseren Versuchen
wie aus denen von Borrel und Bridr4 ohne weiteres hervor.
Ob die kdrpereigene Milz, wenn genttgende Quantit^ten injiziert
warden kdnnten, eine resistenzerhdhende Wirkung ausflben
wtirde, ist eine durchaus offene Frage. Jedenfalls halten wir
den aus einem einzigen Versuch gezogenen und fflr die Auf-
fassung der Tumorimmunitfit schwerwiegenden Schlufi Wog¬
loms, dafi die aktive Geschwulstimmunitkt auch mit kdrper-
eigenen Organen zu erzielen ist, fttr gUnzlich unbewiesen.

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Paul Th. Muller,

Nachdruck verboten.

[Aus dem Hygienischen Institut der Universit&t Graz.]

Yersache fiber aktire and passiye Anaphylaxie bei
Streptokokken.

Von Prof. Paul Th. Mflller.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 13. April 1911.)

I. Eiuleitung.

Dafi es gelingt, mit Bakterieosubstanz ganz ebenso wie
mit anderen EiweiBkdrpern Anaphylaxie zu erzeugen,
unterliegt heute nicht mehr dem geringsten Zweifel. Immer-
hin hat es aber den Anschein, daB die Bakterienanaphylaxie
denn doch nicht mit der gleichen Regelm&Bigkeit zu erzielen
ist, wie z. B. die Serumanaphylaxie, oder richtiger gesagt,
daB es bei ihr mehr als bei der letzteren auf Einhaltung
ganz bestimmter und besonderer Bedingungen ankommt, wenn
sie in Erscheinung treten soil.

Nachdem Kraus und Doerr^) auf der 2. Tagung der
Freien Vereinigung fflr Mikrobiologie in Berlin 1908 fiber eine
Anzahl positiver Ergebnisse berichtet batten, bei denen es
gelungen war, Meerschweinchen durch eine einmalige sub*
kutane Injektion kleiner Dosen — V*—1 Oese — von Typhus-
und Dysenteriebacillen, Cholera Nasik- oder El Tor-Vibrionen
zu sensibilisieren, kam Braun®) zunfichst zu negativen Re-
sultaten, indem seine Versuchstiere zwar, wie die Kontroll-
tiere, nach der Reinjektion mit groBen Mengen von Bakterien-
extrakten an Vergiftung eingingen, aber niemals irgend Sym-
ptome eines anaphylaktischen Zustandes zeigten.

Auch Holobut”), der im Paltaufschen Laboratorium
arbeitete, hatte unter den geschilderten Versuchsbedingungen
Gelegenheit, die gleiche Erfahrung zu machen und sich zu
fiberzeugen, daB es entweder gar nicht oder nur sehr selten
gelingt, Meerschweinchen anaphylaktisch zu machen, wenn

1) Centralbl. f. Bakt., Ref., Bd. 42, 1909.

2) Folia serolog., 1909.

3) Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 3, 1909.

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Versuche iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 165

man sie einmal oder wenige Male mit einer groBeren oder
kleineren Menge Bakterienaufschwemmung injiziert. Hingegen
gelange man meist zum Ziele, wenn man je Vioo Oese auf
70^ erhitzter Bakterienaufschwemmung durch
10 Tage hintereinander subkutan injiziere.

Etwas anders scheinen die VerhBltnisse bei den Anaphy-
laxieversuchen zu liegen, die sich auf eine andere Bakterien-
art, auf den Milzbrandbacillus, beziehen. Rosenau
und Anderson*) haben mitgeteilt, dafi es mdglich sei, Meer-
schweinchen durch subkutane Einspritzung von Milzbrand-
bacillenextrakten zu sensibilisieren, wobei sich — im Gegen-
satz zu den eben erwkhnten Befunden Holobuts — die
durch eine Woche hindurch tSglich vorgenommene Injektion
weniger zuverlhssig erwies als die einmalige Vorbehandlung.

Sobernheim, der die Versuche der genannten beiden
Autoren einer eingehenden Nachprhfung unterzog, konnte
dieselben jedoch nicht bestatigen. Von alien 29 Tieren, die
der einmaligen Vorbehandlung mit Bacillenextrakten unter-
worfen worden waren, reagierte kein einzigesmitaus-
gesprochenen anaphylaktischen Symptomen; die
Symptome, die sich bei den meisten Tieren unmittelbar nach
der Reinjektion einstellten, waren teils nur geringffigiger und
nnbestimmter Natur, teils als KarbolsJlurewirkung zu deuten
(die Extrakte waren u&mlich mit 0,5 Proz. KarbolsSure kon-
serviert) und traten demgemkB auch bei den Kontrolltieren
auf. Eine sichere ErklBrung dafQr, dad trotz genauer Ein-
haltung des von Rosenau und Anderson empfohlenen
Verfahrens zur Herstellung der Bakterienextrakte, zur Sensi-
bilisierung und Reinjektion der Tiere doch nur negative Er-
gebnisse erzielt wurden, war Sobernheim allerdings nicht
in der Lage zu geben. Wenn er auch die Mbglichkeit zugibt,
„da6 vielleicht bei verfinderter Versuchsanordnung der ein-
wandfreie Nachweis ftlr die Existenz einer Milzbrandanaphylaxie
erbracbt werden kdnnte‘^, so neigt er doch der Auffassung zu,
die sich ihm ans seinen sorgf&ltigen Experimenten aufdrdngen
muBte, und die er in den Schlullshtzen seiner Mitteilung da-

1) Treasury Department, Hygienic Lab. Bulletin, Xo. 36, Washing¬
ton 1907.

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166

Paul Th. Muller,

hin pr^zisiert, es habe sich kein Anhaltspunkt dafiir
ergeben, dafi sich bei Milzbrand eine Bakterien-
anaphylaxie erzeugen l&fit. Was ihm besonders ge-
eignet schien, die Ricbtigkeit dieser seiner Auffassung zu
statzen, war die Tatsache, „daB die Zellsnbstanz der Milz-
brandbacillen sich von dem BakterieneiweiB fast aller iibrigen,
speziell der zur Erzeugung der Anaphylaxie geeigneten
Bakterienarten sowohl in chemischer wie in biologischer Hin-
sicht auf das deutlichste nnterscheidet^. Einmal entbehren
nSmlich die Milzbrandextrakte — im Gegensatz zu den Ex-
trakten aus Typhus-, Dysenterie-, Coli-, Heu-, Tuberkelbacillen,
Choleravibrionen etc. — fast jeder giftigen Wirkung und
rufen selbst in grdfiten Mengen weder subkutan, noch intra-
peritoneal, noch intravenos nennenswerte Krankheitserschei-
nungen hervor. Aufierdem ver.sagt aber nach den Er-
fahrungen Sobernheims bei den Milzbrand-
bacillen sowohl die PrBzipitinreaktion wie das
Phi.nomen der Komplementbindung, eine Tat¬
sache, die mitRttcksicht auf die nahengenetischen
Beziehungen, welche nach den Forschungen der
letztenJahrezwischendiesenbeidenPh&nomenen
bestehen, zweifellos auBerordentlich interessant ist
und wohl geeignet erscheinen dtirfte, die nega-
tiven Versuchsergebnisse Sobernheims in be-
sonderes Licht zu rficken.

Wie man sieht, glaubt also Sobernheim auf Grund
dieser Beobachtungen dem Milzbrandbacillus gegeniiber den
anderen Bakterienarten, die bisher auf ihre anaphylaxie-
erzeugende Wirkung gepriift wurden, eine besondere Aus-
nahmestellung vindizieren zu sollen. Nicht minder wichtig
erscheint mir jedoch fflr die vorliegende Frage, daB sich der
Milzbrandbacillus auch noch in einer anderen Beziehung, die
Sobernheim in seiner oben zitierten Arbeit nicht besonders
hervorhebt, von den fruher genannten Mikroorganismen unter-
scheidet: darin nBmlich, daB die Immunkbrper, die
er erzeugt, „keine antibakteriellen bezw. bak-
teriolytischen der gewohnlichen Art^ sind und
nicht die Eigenschaften von bakteriolytischen
Ambozeptoren besitzen. (Sobernheim, in: Kraus

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Versuche uber aktive iind passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 167

und L e V a d i t i, Handbuch d. Technik u. Methodik d. Immuni-
tatsforschung, Bd. 2.) Diesen Mangel bakterizider Wirkungen
last das Milzbrandimmunserum nicht nur im Reagenzglas,
sondern genau ebenso auch im Tierkorper erkennen, weshalb
denn auch Sobernheims Versuche, das Pfeiffersche
Phanomen im Meerschweinchenperitoneum mit Milzbrand-
bacillen hervorzurufen, im grofien und ganzen ein negatives
Resultat ergaben. „Eine Einschmelzung der Bakterien zu
Granula Oder gar eine rasche Aufldsung der Bakterien liefi
sich nicht beobachten/ Wie gesagt, scheint mir diese Tat-
sache ganz besonders wichtig zu sein.

Denn, da man nach den Untersuchungen der jflngsten
Zeit, die wir besonders Friedemann, Friedberger,
H. Pfeiffer und anderen Forschern verdanken, alien Grund
hat, die Entstehung des Anaphylatoxins auf einen parenteralen
Verdauungsvorgang zurhckzufhhren, bei welchem — durch
lytische Prozesse, unter Beteiligung von Kom-
plement —aus dem Antigen peptonartige Gift-
stoffe in Freiheit gesetzt werden, so war die An-
nahme sehr naheliegend, daB diese fermentativen
Abbauprozesse sich bei den zelligen Antigenen
— speziell den roten BlutkSrperchen und Bakterien — in
Form der Gytolyse hufiern dhrften, und daB dem-
entsprechend das refraktSre Verhalten des Milz-
brandbacillus im Anaphylaxieversuch vielleicht
gerade auf dem Fehlen dieser cytolytischon Vor-
g&nge beruhen konnte. Es wUre dies eine Anffassung,
die in der Tat durch mancherlei in der Literatur niedergelegte
Erfahrungen und Anschauungen eine Sttktze finden wiirde.
Abgesehen von der schon vor Iftngerer Zeit ausgesprochenen
Vermutung von Pfeiffer und Wolff-Eisner, nach der
ganz allgemein die Ueberempfindlichkeit gegen artfremde
Zellen auf die Wirkung cytolytischer Immunkbrper zurtlck-
zufiihren w&re, hat sich in neuerer Zeit besonders Friede¬
mann bemhht, diesen Nachweis fflr die Blutkbrperchen-
anaphylaxie zu erbringen, indem er zeigte, daB der betreffende
Reaktionskdrper sich nicht nur in bezug auf seine Thermo-

1) Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 2 , 1910.

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168

Paul Th. Miiller,

stabilit&t und Affinit&t zu den Erythrocyten vollkommen
analog verhMt, wie die h&molytischen Ambozeptoren, sondern
dafi auch die anaphylaktisierende Wirkung der
hSmolytischen Imniunsera ihrem Ambozeptor-
gehalt, also ihremh^lmolytischen Titer anffallend
parallel geht. Friedemann htUt daher die Identitit der
fflr diese beiden Wirkungen in Betracht kommenden Immun-
kSrper — des anaphylaktischen Reaktionskdrpers und des
hamolytischen Ambozeptors — fflr sehr wahrscheinlich. DaB
unter diesen Umstlinden aber auch fflr die Bakterienanaphy-
laxie ahnliche Annahnien zu machen wflren, ist natflrlich eine
sehr naheliegende Konsequenz dieser Auffassung, und in der
Tat halt es denn auch Doerr^) fflr „sehr wahrscheinlich,
daB der Reaktionskflrper bei der Bakterienana-
phylaxie mit dem lytischen Ambozeptor identisch
ist**. DaB, wie die neuesten Untersuchungen von Fried-
berger, Pfeiffer und Bessau und Neufeld und Dold®)
gelehrt haben, eine zu lange ausgedehnte oder zu intensive,
bis zur Grannlabildung und darflber hinaus fortgeschrittene
Bakteriolyse kein Anaphylatoxin entstehen laBt, ja, im
Gegenteil, vor der Giftbildung schfltzt, braucht
dieser Auffassung keineswegs zu widersprechen. Offenbar
entsteht aber, wie Neufeld und Dold hervorheben, „das
Gift aus den noch in der Form erhaltenen, und
zwar weitaus am leichtesten aus den lebenden^)
Bakterien durchirgendeineWechselwirkungder-
selben mit Ambozeptor und Komplement**, wahrend
ein weiterer Abbau zu ungiftigen Spaltungsprodukten fflhrt.
Das Anaphylatoxin ist hiernach also nur als ein inter-
mediares, giftiges Abbauprodukt aufzufassen, das bei
weiterem Fortgang der Verdauungsprozesse rasch entgiftet
wird.

Jedenfalls ist es beachtenswert, daB ein groBer Teil der
Versuche flber Bakterienanaphylaxie gerade mit Mikroorga-

1) Zeitschr. f. ImmunitStsf., Ref., Bd. 2, 1910.

2) fieri, klin, Wochenschr., 1911, No. 2.

3) fieziiglich der angeblichen besseren Eignung lebender fiakterien
zur Darstellung von Anaphylatoxin siehe die Anmerkung im ScbluSkapitel
dieser Arbeit (p. 201).

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Versuche iiber aktive und passive Anapbylaxie bei Streptokokken. 169

Dismen angestellt wurde, die der Bakteriolyse sehr leicht zu-
gSnglich sind; so mit den Vertretern der Typhus-, Coli-, Dys-
enteriegruppe, mit verschiedenen Vibrionen (Cholera, El Tor,
Nasik, Metschnikoff) u. dgl. Im Gegensatz hierzu scheint es
nach den Versuchen von Neufeld und Dold^) bei weitem
schwieriger zu sein, aus den — der Bakteriolyse nicht merk-
lich unterliegenden — Tuberkelbacillen Anaphylatoxin
zu gewinnen. „nnter 32 Versuchen, die mit wechselnden
Bacillenmengen (3—50 mg) mit lebenden und zerriebenen
Bacillen und mit verschiedenen Stftmmen des Typus humanus
und bovinus angestellt wurden, gelang es .. nur in 2 FfUlen,
aknte Erscheinungen und Tod innerhalb einiger Minuten zu
erzielen, wShrend in alien anderen Fallen die Tiere nach der
Injektion entweder gar keine oder nur vorflbergehende Er¬
scheinungen aufwiesen/ Friedberger’) dagegen gelang
es, auch bei Tuberkelbacillen stets ohne Schwierigkeit zum
Ziele zu gelangen, wenn nur gewisse quantitative Verh&ltnisse
eingehalten wurden. Selbst durch Normalmeerschweinchen-
serum allein, ohne Immunserum, konnte bei Berflcksichtignng
dieser gfinstigen MengenverhMtnisse aus den Tuberkelbacillen
Anaphylatoxin in tbdlicher Dosis extrahiert werden, so dafi
also Friedberger nicht geneigt ist, die von Neufeld und
Dold angenommene Sonderstellung des Tuberkelbacillns an-
znerkennen.

Wflrden sich die bisher erw&hnten Tatsachen noch ohne
allzugroBe Schwierigkeit mit der Auffassung von Do err und
Friedemann vereinen lassen, daB der anaphylaktische Re-
aktionskOrper mit dem bakteriolytischen Ambozeptor identisch
ist, so scheinen die in jfingster Zeit von Neufeld und Dold
an Pneumokokken gesammelten Erfahrungen dieser Annahme
direkt zu widersprechen. Auch die Pneumokokken gehdren
nSmlich zu jenen Bakterienarten, gegeniiber welchen die resp.
Immunsera keine bakteriziden Wirkungen entfalten, und offen-
bar auch keine bakteriolytischen Ambozeptoren zu enthalten
scheinen. Trotzdem gelangesdengenanntenbeiden

1) Berl. klin. Wochenschr., 1911, No. 2.

2) Berl. klin. Wochenschr., 1910, No. 32; Munchn. med. Wochenschr.,
1910, No. 50/51; Deutsche med. Wochenschr., 1911, No. 11.

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170

Paul Th. Muller

Forschernohneweiteres.auchausPneumokokken
durch Einwirkung von Komplement und Immun-
serura Anaphylatoxin abzuspalten, woraus sie
sich zu dem Schlufi berechtigt fdhlen, ^daB der
bei der Bildung dieses Giftes wirksame Anti-
kbrper nicht mit dem bakteriolytischen Ambo-
zeptor identisch ist“. Ob er etwa mit anderen bekannten
Antikdrpern — den Tropinen, Opsoninen Oder den Bordet-
schen AntikSrpern — zu identifizieren sei, lassen Neufeld
und Dold dagegen einstweilen noch dahingestellt.

Von diesem Gesichtspunkte aus war es nun von grSBtem
Interesse, festzustellen, ob sich auch mit anderen sol-
chen Bakterienarten, welche der Bakteriolyse
nicht unterliegen, Anaphylaxie erzeugen l&Bt
Oder nicht. War Doerrs Vermutung richtig, dann war zu
erwarten, dafi bei diesen Species die Hervorrufung des ana-
phylaktischen Zustandes entweder vollkommen miBlingen wiirde
Oder doch wenigstens auf besondere Schwierigkeiten stoBen
wtirde.

Als willkommenes Objekt fttr diese Studien boten sich
uns zunUchst die Streptokokken dar. Levaditi hat die
Frage der Streptokokkenbakterizidie in dem 11. Band
des Handbuches der Technik und Methodik der Immunitats-
forschung einer grflndlichen Bearbeitung unterzogen, so daB
wir uns hier auf seine Literaturzusammenstellung beziehen
konnen und nur das aus derselben resultierende Ergebnis kurz
anfiihren wollen. Nach demselben hat man zwar gelegentlich
beobachtet, daB die Streptokokken in spezifischem Immunserum
eine leichte BeeintrSchtigung des Wachstums erfahren, eine
Erscheinung, die Qbrigens keineswegs konstant ist und z. B.
bei vom Pferde stammendem Immunserum vollkommen fehlt;
eine wirkliche bakterizide Wirkung konnte je-
doch niemals mit Sicherheit nachgewiesen werden,
und alle vermeintlichen Beweise dafhr muBten, als einer
sorgfaitigen Kritik nicht standhaltend, fallen gelassen
werden.

Auch diePrftzipitinreaktion begegnet bei den Strepto¬
kokken, wie bei alien Kokken, groBen Schwierigkeiten. v. Eisl er

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Vereuche iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 171

berichtet in dem oben erw&hnten Handbuch, dafi es ihm weder
mit Bouillonkulturfiltraten noch mit Kochsalzagarfiltraten ge-
langen sei, Niederschl^ge zu erbalten und daB auch durch
Kochen mit Slluren und Alkalien kein PrS^ipitinogen aus den
Kokkenleibern zu extrahieren war. Hdchstens war bei Strepto¬
kokken nach Eonzentrierung des Filtrates das Auftreten leichter
Triibungen zu konstatieren. Auch Aronson hatte bei Ver-
wendung von Bouillonkulturfiltraten durchwegs negative Er-
gebnisse und nur durch Extraktion der Kokken mit 1-proz.
Aethylendiaminldsung gelang es ihm, FlQssigkeiten zu erhalten,
die mit passenden Dosen von Immunserum versetzt innerhalb
einiger Stunden einen Niederschlag ausfallen lieBen.

Schliefilich scheint, wie aus den Literaturangaben zu ent-
nehmen ist, auch die Komplementbindungsreaktion bei den
Streptokokken nicht immer ganz so glatt zu verlaufen, wie
sonst. So hat Besredka im Aronsonschen Streptokokken-
serum nur Spuren von komplementbindender Substanz gegen-
fiber dem homologen Streptokokkenstamm nachweisen kbnnen,
wfihrend er allerdings mit dem von ihm selbst nach einem
etwas anderen Immunisierungsverfahren (intravenSse Einsprit-
zungen von Agarkulturen) hergestellten Serum stets positive
Besultate zu verzeichnen hatte, und auch andere Forscher, wie
Eysbroek^), Ciuka*), Altmann fiber fihnliche Versuchs-
ergebnisse berichten.

Nach alledem muBten also gerade die Streptokokken ein
recht geeignetes Objekt ffir die Beantwortung der oben auf-
geworfenen Fragen darstellen, und ich habe daher eine Anzahl
von Versuchen in der gedachten Richtung unternommen, die
sich sowohl auf die Erzeugung der passiven wie der
aktiven Anaphylaxie gegen diese Mikroorganis-
men erstreckten.

n. Passive Anaphylaxie.

Zu den Versuchen fiber passive Anaphylaxie wurden zu-
nfichst eine Reihe von hochwertigen Streptokokkenimmunseren
benutzt: vor allem das Menzersche, Aronsonsche und

1) Centralbl. f. Bakt., Ref., 1907.

2) Conipt. rend. Soc. Biol., 1909.

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172

Paul Th. Muller,

T a V e 1 sche Serum, dann aber noch einige aus dem P a 11 a u f •
schen Institute stammende tillere Scharlachstreptokokken-
sera, die in den Originalfl&schchen unerdffnet l&ngere Zeit
aufbewahrt worden waren. Die Streptokokkensttimine, die zu
diesen Experimenten dienten, waren aus Phlegmonen- und
Abscefieiter frisch isoliert und bildeten s&mtlich schdne lange
Ketten. Sie sind im folgenden als Streptococcus 1, 7, 45 und
331 bezeichnet. Die Bakterien wurden aus GrQnden,
auf die ich sp&ter noch zurtickkomme, stets in
lebendem Zustande injiziert.

Die Versuchsanordnung war eine verschiedene.

Bei einer ersten Reihe von Versuchen wurde das Serum
(1—2 ccm) mit den Streptokokken (meist 1—2 ccm 24 Stunden
alter Bouillonkultur) in vitro gemischt und in die Bauch-
h6hle der Versuchstiere eingespritzt.

Bei einer z w e i t e n Serie von Experimenten wurden Serum
und Streptokokken getrennt in die Bauchhdble injiziert, und
zwar mit einem zeitlichen Interval! von 24 Stunden.

Bei einer dritten Reihe wurden Serum und Strepto¬
kokken wieder simultan, und zwar nach dem von Morgen-
roth angegebenen Verfahren, direkt ins Herz der Versnchs-
tiere eingebracht. Um hierbei einerseits grSBere Streptokokken-
mengen einftihren zu kSnnen, und andererseits doch das
injizierte Fliissigkeitsvolumen nicht allzu grofi werden zu lassen,
wurde diesmal eine viel konzentriertere Streptokokkenauf-
schwemmung (eine 48-standige Kultur auf einer Agarfl&che
von 10:6 cm, in 2 ccm Kochsalzldsung suspendiert) in der
Dosis von ccm (=74“ Vs Agarflasche) verwendet.

Bei einer vierten Versuchsserie endlich wurde das
Serum intraperitoneal, die Streptokokken, dagegen
24 Stunden spater intracardial eingefiihrt; auch hier wurde
eine konzentrierte Streptokokkenaufschwemmung, und zwar in
der Menge von 1 ccm (= V*—1 ganze Agarflasche) benutzt.

SchlieBlich wurde bei einer Anzahl von Versuchen auch
der intravendse Reinjektionsmodus gewShlt, nachdem die
Tiere tags zuvor das Streptokokkenimmunserum injiziert be-
kommen batten.

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Verauche iiber aktire und passive Anaphjlaxie bei Streptokokken. 173

Im folgenden gebe ich zun&chst die Versuchsprotokolle
wieder, deren Ergebnisse dann in einigen Uebersichtstabellen
zusammengestellt sind.

I. Simultane intraperitoneale Injektion.
a) 1 ccm Ser. Aronson + 1 com Strept. 331J

c l ;; ;; Xa^l + 1 , 5 ” ;; i}[48-8tun(iigeBouillonkulturen

d) 2 „ „ Menzer +1 „ „ l'

Datum

u.Zeit

a

Datum

u.Zeit

b

Datum

u.Zeit

C

Datum

u.Zeit

d

1. I.

3«

39,4

23. I.

3*6

38,8

26. I.

93®

39,9

30. I.

916

38,9

40

39,2

340

38,4

946

39,5

945

38,6

415

39,2

4®

38,8

10®

39,1

10®

38,6

446

39,4

4*5

39,0

108®

39,0

10»®

38,6

5®

39,6

446

39,5

11®

39,5

11®

39,2

5 B 0

39,9

5®

40,4

11»®

40,0

113®

39,2

6®

39,9

6®

40,4

12®

40,2

Maximale Temperatvirandenmg

1-0,2 + 0,51 1-0,4 + 1,61 1-0,9 + 0,31 1-0,3+0,3

II. Zeitlich getrennte intraperitoneale Injektion.
(Intervall 24 Stunden.)

a)

1 ccm Ser. Aronson + 1

ccm

b)

2

+ 2

c)

2

„ Tavel

+ 2

d

2

jj

„ Tavel

+ 2

99

e) 2

?>

„ Menzer

+ 1

»9

1

331

45

f)

48-8tundige fiouillonkulturen

Datum

u.Zeit

a

Datum

u.Zeit

b

Hi

Datum
u. Zeit

e

11. I.

23. I.

26. I.

30. I.

9I6

38,2

910

39,0

916

39,0

39,0

9*8

38,6

943

37,8

98O

39,2

98O

38,6

39,0

9“

38,6

10®

37.6

10®

39,2

946

38,4

39,2

10»»

38,6

10*®

38 ;o

1030

39,2

10‘®

38,8

39,6

10**

38,8

10^-’

38,2

11®

39,3

10«*

39,4

40,0

11®

39,5

11®

38,8

11*»

39,4

11®

39,6

40,0

11*0

39,4

12®

39,0

12®

39,0

12®

39,8

42,2

12®

39,5

123 *

40,0

42,2

12*®

39,6

180

39,0

39,6

1®

39,4

Maximale Temperaturanderung

1-0,6 + 0,81 I 0 + 0,4 I 1-0,6 + 1,01 0 +1,2 1 1 0 + 1,0

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174

Paul Th. Muller,

III. Int racardiale Injektion, simultan.

2. II. Je 1 ccm Serum + 1 ccm dichte Streptokokkenaufschwemmung
(Strept. 1 ) (1 Flasche Agarkultur + 2 ccm Bouillonkultur).

a

b

Serum Menzer

Normalpferdeserum

940

39,0

39.0

10 '®

38.0

38,4

1030

37,6

39,0

11 ®

36.4

39,1

1130

35.7

39.6

12 ®

35,0

394

1230

34.0

40,0

1 ‘®

33,6

40,0

145

33,4

40,0

3»®

32.6

40,2

430

445

32,6

33,0

Maximale Temperaturandening

— 0,6 + 1,2

Tier a stirbt in der Nacht. Bei der am nachsten Morgen verge-
nommenen Sektion findet sicb der Herzbeutel mit fliissigem Blut gefiillt.
Tier b bleibt gesund.

4. II. 11. Streptokokkenserum Menzer; Streptokokkenserum Orlow (1900)
1 ccm Serum + 1 ccm Streptokokkenaufschwemmung (Strept. 1)
(1 Flasche Agarkultur + 2 ccm Bouillonkultur) intracardiaL

a

Serum Menzer

b

Serum Orlow

330

39,2

39.2

345

37,8

38,6

415

37,0

39,6

5®

36,2

39,7

63®

Anscheinend gesund. Tier beim Mes-

39.2

5®

sen der Temperatur sehr unge-

38,6

7®

berdig; pldtzliche Krampfe, Exitus.

38,6

Im Herzbeutel nur geronnenes
Blut

Maxim. Temperaturiind.
0,6 -}* 0,5

Streptokokkenserum Menzer und Tavel.

4. II. 1 ccm Serum + 0,5 ccm Streptok. 1 (1 Agarflasche + 2 ccm Bouillon)
intracardiaL

Serum Tavel

Streptokokken allein

4®

39,0

39,4

430

38,6

39,2

446

39,2

39,4

510

40,2

39,6

6 «

40,2

39,4

030

40,2

39,6

70

39,8

39,6

Maximale Temperaturiinderung

I —0,4+ 1,2 I —0,2+ 0,2

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Versuche uber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 175

2. II. 11. fcjtreptokokkensera aus dem Paltaufschen Institut (vom Jahre
1900; steril aufbewahrt). Je 1 ccm Serum + 1 ccm Streptokokken-
axifschwemmung intracardial (1 Agarflasche + 2 ccm Bouillon).
£^e Kontrolle ohne Serum.

Scharlach-
Serum 2

Scharlach-
Serum 16

Scharlach-
Serum 14

Aronson- j
Serum

Ohne Serum

10*

40,0

39,2

39,6

39,8

39,2

10*«

40,0

38,6

39,4

38,8

39,2

10*»

40,6

39,0

39,2

39,4

39,0

111#

41.2

39,3

39,4

39,6

39,4

IP*

41,0

40,0

40,0

40,0

40,3

12»

41,2

40.0

40,4

40,0

40,4

1‘*

41,0

39,6

39,9

40.0

1 40,2

Maximale Temperaturiinderung

I +1,2 1-0,6 + 0,81-0,4 + 0,81-1,0 + 0,21-0,2 + 1,2

10. II. Streptokokkenserum Menzer und Tavel. 1 ccm Serum + 0,6 ccni
Streptokokkenaufschwemmung (Str. 1), (1 Agarflasche + 2 ccm
BouQlon) intracardial._

a

Serum Menzer

b

Serum Tavel

1

Vor d. Injekt.
12“

39,0

39,2

12**

38,2

39,4

12-’“

38,5

39.6

1"

39,4

39,6

2 30

40,4

41,2

2“

40,4

41,0

230

39,9

40,4

3“

40,0

40,3

330

40,0

40,4

40

40,0

40,0

4<io

39.7

39,8

580

39,6

—

Maximale Temperaturandening

1

1 -0,8+ 1,4 1

+ 2,0

IV. Peritoneale Serum- und cardiale Streptokokkeninjektion.

13. I. Serum Tavel und Menzer. Getrennte Injektion. 1 ccm Serum

intraperitoneal.

14. I. 0,5 ccm Strept. 1 (1 Agarflasche + 2 ccm Bouillon intracardial.

Serum Menzer

Serum Tavel

Kontrolle

Streptokokken allein

Vor d. Reinjekt.

910

39,0

38,9

39,0

10®

39,4

38,0

39,4

11*

40,0

40,0

39,3

1146

39,5

39,3

39,3

12**

39,4

39,2

39,3

480

38,9

39,2

39,2

2*

38,9

38,9

39,5

1

Maximale Temperaturandening
— 0,1 + 1,0 1 — 0,9 + 1,1 1 + 0,5

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176 Paul Th. Muller,

21. 11. Je 2 ccm Serum Menzer und Tavel, 4 ccm Serum Aronson intra-

peritoneal.

22. II. 1 ccm dichter Streptokokkenemulsion (1 AgarflaBche + 1 ccm

Bouillon) cardial.

a

Serum

Menzer

b

Serum

Tavel

c

Serum

Aronson

Anmerkimg

V.d. Reinj.

Tier a liegt wenige Sekunden nach

910

39,2

39,0

39,0

der Injekt. auf der Seite, den Kopf

10“

37,4

38,5

38,8

krampfh, verdreht, mit gestraunt

1030

34.4

39,2

39,0

Fell; Urinabgang. 10*® noch sehr

11“

34.4

40,0

40.0

schwach, aber wi^er auf d. Beinen.

1180

34.2

40,3

40,8

3® nachra. ziemlich munter, 23.11.

12“

34,8

40,2

41,0

wird das Tier getotet und seziert:

1*

35,4

40,4

40,3

im Pericard ein etwa den ganzen

3“

38,4

40,2

40,3

linken Ventrikel bedeckendes

5“

39,2

40,0

40,6

Blutgerinnsel. Stichoflfnung im
linken Ventrikel.

Maximale Temperaturiinderung
1 -5,0 1-0,5+1,41-0,2+1,0;

22. II. Je 2 ccm Serum Menzer intraperitoneal.

23. II. Je 1 ccm dichte Streptokokkenaufschwemmung (1 Agarflasche +

1 ccm Bouillon) intracardial.

a

b

Vor d. Beinjektion
960

39,0

39,4

10“

38,0

38,8

10*0

38,4

38,8

10"“

39,4

40,6

1116

39,8

40,6

12'*

40,0

40,5

12«

39,8

40,5

1"“

39,6

40,0

Maximale Temperaturiinderung

— 0,6 + 1,0

1 -0,6+ 1,2

V. Peritoneale Serum- und intravenose Streptokokken-

injektion.

23. II. Tier a: 2 ccm Tavel-Serum 1

„ b: 2 „ Menzer-Serum | intraperitoneal.

„ c: 4 „ Scharlachserum 14 j

24. II. Beinjektion 2 ccm Streptokokken 7 (1 Agarkultur, Flasche 10:6 cm,

in 2 ccm Bouillon) intravenos.

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Yersudie uber aktive und passive Anaphylazie bei Streptokokken. 177

a

b

c

910

39,6

39,2

39,4

9«

nach Op. 37,8

—

—

10 »

36,8

nach Op. 37,4

i -

10 ^»

37,7

37,4

nach Op. 37,6

10 «*

37,7

37,8

37,6

1110

38.0

38,0

1 39,0

1180

38,8

38,6

39,4

1145

38,6

40,0

12 ®

39,0

39,0

40,4

12 »«

39,4

39,4

41,4

1 ®

40,0

39,5

41,5

2 ®

39,6

39,2

41,2

3®

39,8

39,3

41,3

4®

40,0

39,4

1 40,8

Mittlere Temperaturver&ndening.

I -2,8+ 0,4 1 -1,8+ 0,2 I -1,8+ 2,1

28. II. 2 Tieren je 4 com Aronson-Serum intraperitoneal injiziert

1 . in. Her a: 2 ccm Streptokokken (= 1 Agarflasche ) I intravenos
„ b ■ 3 „ ,, (= Agarflasch en ) j

a

b

98 O

vor Oper. 38,0

39,0

nach f, 36,2

—

940

35,8

nach Op. 37,4

10 ®

36,2

36,2

10 »o

37,6

37,6

11 ®

39,0

38,2

1180

39,0

39,0

12 ®

39,4

39,8

1 ®

39,9

39,5

180

40,0

39,4

2 ®

40,0

39,5

Maximale Temperatuireranderung.

- 2 , 2 + 2,0 I - 2 , 8 + 0.8

Ueberriehtetabellen.

I. Simultane intraperitoneale Injektion.

Datum

Senunart

Serum-

menge

ccm

Strratokokken

(^uillon-

kuitur)

An-

fangs-

temp.

Maxi¬

male

Temp.

Temperatnr-

andenmg

Mittd

11. L
23. L
26. L
30. L

Aronson

TarS

Menzer

1,0

2,0

2,0

2,0

1 ccm Str. 331
1 „ 1

1,5 „ „ 331

^ 1

39,4

38.8

39.9

38.9

39,9

40,4

402

392

— 02 + 6,0
-0,4+ 1,6

— 0,9 + 0,3

— 0,3+ 0,3

1 +

Zdttchr. f. liiuiioiiIttt*fflnebiiii(. Orif. Bd. X. 12

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178

Paul Th. Miiller,

IL Zeitlich getrennte intraperitoneale Injektion.
(Intervall 24 Std.)

Datum

Serumart

i Serum-
menge
ccm

Streptokokken

(Bouillon-

kultur)

An-

fangs-

temp.

Maxi¬

male

1 Temp.

Temperatur-

anaerung

Mittel

11.1.

Aronson

1,0

1 ccm Str. 331

38,2

.39,0

- 0,6 + 0,8

23. I.

>>

2,0

1 „ „ 1

39,0

39,4

0 +0,4

26. I.

Tavel

2,0

2 „ „ 331

39,0

40,0

— 0,6 + 1,0

o®

2,0

2 „ „ 45

39,0

40,2

0 +1,2

1 +

30. I.

Menzer

2,0

1 ,, 1

38,6

39,6

0 + 1,0

III. Simultane iniracardiale Injektion.

Da¬

tum

Serumart

Senim-

menge

ccm

Strepto¬

kokken

(Agarkultur)

An- j
fangs- 1
tempe-i
ratur

Maxi¬

male

Tempe-

ratur

Tempe-

ratur-

iinderung

Mittlere

Temp.-

Aenae-

ning

Anmerkung

2.II.

Scharlach-S. 2

1,0

V, Fl. Str. 1

40,0

41,2

1 1

„ 16

1,0

dgl.

39,2

40,0

— 0,6 + 0,81

-0,4 1

» 14

1,0

>>

39,6

40,4

- 0,4 + 0,8

1 -f 0,8

4.II.

Serum „Orlow‘‘

1,0

39,2

39,7

— 0,6+ 0,5

I

2.II.

Serum Aronson

1,0

V, Fl. Str. 1

39,8

40,0

-1,0+ 0,2

10.11.

„ Menzer

1,0

V, Fl. Str. 1

39,0

40,4

-0,8+ 1,4

. — 0,5

10.11.

„ Tavel

1,0

dgl.

39,2

41,2

0 +2,0

+ 1,2

4.n.

ff n

1,0

>>

39,0

40,2

-0,4 + 1,2

2.II.

_

e

v, Fl. Str. 1

39,2

40,4

-0,2+ 1,2

1

Kontrollen

Normalpferde-S.

1,0

dgl.

39,0

40,2

-0,6+ 1,2

ohne Strepto-

4.II.

—

e

V. Fl. Str. 1

1 39,4

39,6

— 0,2 + 0.2

1 + 0,8

kokkenserum

—

e

dgl.

39,0

39,5

0 +0,5

i

IV. Peritoneale Serum- und intracardiale Strep tokokken-

injektion.

Datum

Serumart

Serum-
men ge

ccm

Strepto-

kokKen

(Agarkultur)

An- 1 Maxi-
fangs- male
tempe- Tempe-
ratur ' ratur

1

Tempe-

ratur

iinderung

Mittlere

Temp.-

Aenae-

rung

13. I.

Menzer

1,0

V, Fl. Str. 1

39,0

40,0

0 + i,oj

13. I.

Tavel

1,0

dgl.

38,9

40,0

-0,9 + 1,11

21. II.

j)

2,0

1 Fl. Str. 1

39,0

40,4

-0,5 + 1,4

- 0,5

Aronson

4,0

dgl.

39,0

41,0

— 0,2 1,0

+ 1,1

22. II.

Menzer

2,0

39,0

40,0

— 0,6 -j-1,0

22. II.

n

2,0

39,4

40,6

-0,6+ 1 , 2 !

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Versuche iiber aktive und passive Anuphylaxie bei Streptokokkeu. 179

V. Peritoneale Serum- und intravendse Streptokokken

in jektion.

Datum

Serumart

Serum-
men ge

ccm

Strepto¬

kokken

(Agarkultur)

An-

fangs-

tempe-

ratur

Maxi¬

male

Tempe¬

ratur

Tempe-

ratur-

wderung

Mittlere

Temp.-

Aenae-

rung

23. II.

Tavel

Menzer

Scharlach-Ser. 14

2,0

2,0

4,0

1 FI. Str. 7
dgl-

39,6

39,2

39,4

1

40,0
39,4
; 41,5

1

-2,8+ 0,4
-1,8+ 0,2
-1,8 + 2,1

-2,3

+ 14

28. II.

Aronson

4,0

4,0

IV, Fl” Str. 7

38,0

39,0

40,0

39,8

-2,2+ 2,0
-2,8+ 0,8

Betrachten wir nun, um zu eiaem Ueberblick Ober die
gewoonenen Versucbsergebnisse zu gelaogen, zunSchst die
beiden Tabellen I und II, welche die Experimeute mit simul-
taner und zeitlich getrennter intraperitonealer
Einverleibung von Immunserum und Streptokokken um-
fassen, so zeigt sich, daB keines der Versuchstiere eine stUrkere
Abnahme der Temperatur als um 0,9** C aufwies. Im Durch-
schnitt war die Temperaturabnahme sogar noch erheblich
geringer und betrng in Reihe I 0,45 **, in Reihe II nnr 0,25 **;
auch die Dauer dieser Temperaturabsenkung war nur eine
kurze; meist war schon 1 Stunde nach der Injektion die Aus-
gangstemperatur wieder erreicht oder sogar flberschritten.

^ Denn an die anf&ngliche geringfflgige Temperaturabnahme
schlofi sich dann meist ein mehr oder minder langandauerndes
Stadium mit gesteigerten Temperaturen an, die im Mittel 0,7
bis 0,9** hbher lagen als die ursprtingliche Temperatur der
Tiere vor Beginn des Versuches. Irgendeine Storung im
Wohlbefinden der Tiere war die ganze Zeit des Versuches
fiber nicht zu bemerken, so daB also zweifellos bei dieser
Versuchsanordnung jede Spur eines anaphjlak-
tischen Shocks ausgeblieben war.

Dieser MiBerfolg war die Veranlassung dazu, daB die Ver¬
suche mit verfinderter Methodik fortgesetzt wurden. Da es
denkbar war, daB der peritoneale Injektionsmodus im vor-
liegenden Falle ffir die AuslOsung des anaphylaktischen Shocks
nicht geeignet war, so wnrde Serum und Antigen znnfichst
direkt in die Blutbahn eingeffihrt, und zwar auf dem Wege
der intracardialen Injektion, die ja Morgen roth^) vor

1) Zeitschr. f. Hyg., 1904.

12 *

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180

Paul Th. Muller,

I&Dgerer Zeit mit groBem Erfolg zum Studium der quanti-
tativen VerhSltnisse bei der Bindung zwischen Diphtherietoxin
und -antitoxin benutzt hatte. Bei einigen dieser Versuche betrug
das injizierte Fldssigkeitsvolumen 2 com; meist jedoch wurden
nur IV 2 ccra, d. i. 1 ccm Serum und 0,5 ccm Streptokokken-
aufschwemmung, eingespritzt. Wie bereits erwahnt, wurden zu
diesen wie zu alien folgenden Versuchen nicht Bouillonkulturen
benutzt, sondern eine dicke, sehr stark getriibte Aufschwem-
mung von 48-stiindigen Agarkulturen, da mdglicherweise aucb
die zu geringe Bakteriendosis fQr den negativen Ausfall der
frflher besprochenen Experimente verantwortlich gemacht
werden konnte. Holobut gibt namlich in seiner bereits
zitierten Arbeit an, dafi zur Reinjektion, also zur Ausldsung
des anaphylaktischen Shocks, 1—2 ccm einer Aufschwemmung
von einer Flasche Agarkultur — gemeint sind wohl die allge-
mein fiir Massenkulturen gebrauchlichen K 0 11 e schen Flaschen
— in 10—15 ccm Vio Normalsodaldsung zu verwenden seien.
Da nun die Agarflache dieser Flaschen etwa der einer Petri-
schale, also etwa 60 qcm, gleichkommt, so entspricht dieselbe
vollkommen der Oberflache des Nahrbodens in unseren vier-
eckigen Flaschen von 10 :6 cm. Trotzdem ist aber in unserem
Falle ein Vergleich der auf diesen Flachen zur Entwicklung
gelangten Bakterienmengen mit den von Holobut geernteten
nicht ohne weiteres mSglich, weil ja bekanntlich die Strepto-
kokkenkolonien so auBerordentlich weniger tippig zu wachsen
pflegen als z. B. die von Bact. typhi Oder Bact. coli. Um nun
trotzdem Bakterienmengen von ungefahr der gleichen GroBen-
ordnnng, wie oben gefordert, zur Injektion zu benutzen, wurde
nicht wie bei den Versuchen Holobuts Y 15 —Vs der Massen-
kultur Oder wie bei den analogen Versuchen von Kraus und
Amirad 2 ibi, V 2 o~V 40 Massenkultur eingespritzt, sondern
eine halbe bis eine ganze Kultur, wodnrch wohl
der Unterschied in der Wachstumsdppigkeit der
gedachten Bakterienarten in genfigender Weise
wettgemacht sein dQrfte. Diese Annahme ist wohl um
so mehr berechtigt, als es Neufeld und DoldV gelungen
ist, aus 2 Oesen Typhusagarkultur, ja aus 20 und selbst 10 ccm

1 ) Berl. klin. Wochenschr., 1911, No. 2.

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Versuche iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 181

Pneumokokkenbouillonkultur in vitro die fflr Meerschweinchen
tddliche Dosis des Anaphylatoxins in Freiheit zu setzen, and
als Friedberger bei einer Anzahl von Experimenten selbst
mit dem ans Vio Oese einer Typhusagarkultur abgespaltenen
Gifte seine Versuchstiere zu tdten vermochte.

Das Ergebnis dieser Versuche, das in Tabelle III zu-
sammengestellt ist, war nun ein ganz fihnliches wie bei der
peritonealen Applikationsweise der Streptokokken. Die grbfite
Temperaturabnahme, die beobachtet wurde, betrug 1 ® C; die
durchschnittliche Abnahme aber nur 0,4—0,5 ® C, wfihrend sich
an diese vorttbergehende, kaum liber 1 Stunde dauernde Tem-
peraturerniedrigung eine Steigerung um durchschnittlich 0,8
bis 1,2® C anschlofi. Irgendwelche Zeichen anaphy-
laktischen Shocks waren auch bei diesen Ver>
suchstieren nicht zu beobachten und dieselben ver*
hielten sich in jeder Beziehung ganz ebenso wie die am Schlusse
dieser Tabelle aufgefOhrten Kontrolltiere, deren Temperatur-
schwankungen nach der Injektion sich auch in denselben all-
gemeinen Grenzen bewegten.

Nur zwei Versuchstiere, die zwar in die Versuchsprotokolle
aufgenommen (Versuch vom 2. II., Tier a, und vom 4. II.,
Tier a), aber nicht in der Tabelle aufgefiihrt warden, erheischen
wegen ihres abweichenden Verhaltens eine kurze Besprechung.
Das am 4.11. um 3 Uhr 30 Minuten injizierte Meerschweinchen
zeigte noch um 5 Uhr eine sehr erniedrigte Temperatur von
36,2 ® G; bei der Temperaturmessung fiel auf, daB das vorher
anscheinend ganz gesunde und muntere Tier pldtzlich Streck-
krUmpfe der hinteren Extremit&ten bekam und mit einem Mai
sehr schlafif wurde, sich aber, in Ruhe gelassen, bald wieder
erholte. Um 5 Uhr 30 Minuten wurde die Messung wieder-
holt. Das Tier war dabei sehr ungeberdig and im Gefolge
seiner lebhaften Abwehrbewegungen traten auch diesmal wieder
die schon erw&hnten heftigen Streckkr&mpfe ein, die jedoch
binnen wenigen Minuten unter tiefen dyspnoischen Atembe*
wegungen zum Tode fhhrten. Wie die sofort vorgenommene
Sektion ergab, war der Herzbeutel strotzend mit
Blut angefttllt and der Tod offenbar infolge

1) Berl. klin. Wochenschr., 1910, No. 32.

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182

Paul Th. Muller,

Herzshocks eingetreten. Irgendwelche auf Anaphylaxie
hindeutende KrankheitserscheinuDgen waren dagegen wkhrend
der ganzen Zeit nicht zu beobachten. Aehnlich, nur viel lang-
samer, war der Verlauf des Versuches vom 2. II. Das am
Vormittag injizierte Tier zeigte den ganzen Nachmittag stark
erniedrigte Temperaturen und ging im Laufe der darauffolgen-
den Nacht zugrunde. Auch bei diesem Tier zeigte sich bei
der am nUchsten Morgen vorgenommenen Sektion der Herz-
beutel voll zum Teil noch flfissigen Blutes, so daB auch hier
kein Zweifel an der Todesursache bestehen konnte.

Dafi die durch den Blutaustritt in die Pericardialbdhle
bedingte Bebinderung der HerztHtigkeit und die dadurch ge-
setzte Zirkulationsstdrung wohl geeignet sein muBte, die Edrper-
temperatur des gerade in dieser Beziebung so empfindlichen
Meerschweinchens berabzusetzen, mufi wohl obne weiteres zu-
gegeben werden. Ich glaube daher mit Recht diese beiden
Versuchstiere bei der Diskussion unserer Versuchsergebnisse
ganz ausschalten zu dflrfen, da ja sicher weder die bei
ihnen beobachtete Temperaturabnahme noch ihr
Tod auf anaphjlaktische Shockwirkung zurtlck-
zuffihren war.

Zur £rklS.rung, wesbalb es gerade bei diesen beiden Tieren
zum Blutaustritt in den Herzbeutel gekommen war, mbchte
ich nur noch hinzufhgen, dafi bei diesen ersten Versuchen
etwas zu weite Kantilen zur Injektion benutzt wurden (die bei
alien folgenden Experimenten ilbrigens durch engere ersetzt
wurden) und dafi aufierdem, wie schon Morgenroth bei
Beschreibung seiner Methode hervorhebt, anBinglich, solange
man noch nicht die nOtige Uebung in der intracardialen In¬
jektion erlangt hat und infolgedessen noch nicht ruhig genug
operiert, leicht eine Zerreifiung der Herzwand eintreten kann,
die nathrlich je nach ihrem Grade verschieden schnell zu t6d-
lichen Blutungen fiihrt. SpS,ter hatte ich Qbrigens derartige
Mifierfolge nicht mehr zu beklagen.

Das Gesamtergebnis dieser Versuche mit
simultaner intracardialer Injektion von Serum
und Streptokokken mufi also zweifellos als ein
vSllig negatives angesehen werden.

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Versuche iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 133

Ein gleiches gilt aber auch von den in Tabelle IV zu-
sammengestellten Experimenten, bei denen das Streptokokken-
immnnserum in die Bauchhdhle, die Kokken dagegen
24 Stunden spfiter ins Herz injiziert wurden. Die mittlere
Temperaturabnahme betrug bei dieser Reihe 0,5 ^ die Tem-
peratursteigerung 1,1 ®, also vOllig analogs Werte wie bei den
frflher besprochenen Experimenten.

Nur ein Versuchstier (vom 21. II, Tier a) fiel auch hier
wieder aus der Reihe. Wenige Sekunden nach der Injektion
kg es auf der Seite, den Kopf krampfhaft verdreht, das Fell
gestr&ubt. Eine Stunde nach der Injektion war es noch sehr
schwach, stand aber wieder auf den Beinen und zeigte eine
Temperatur von 34,4 ® C; nach 2 Stunden war es bereits ganz
munter bei unver^ndertem Tiefstand der Temperatur; nach
5 Stunden dagegen war die Temperatur fast wieder normal.
Das Tier war am nilchsten Tag vollkommen frisch und wurde,
des Obduktionsbefundes wegen, getdtet. Es fand sich im Peri-
card ein etwa den ganzen linken Ventrikel bedeckendes dickes
Blutgerinnsel; die Stichdifnung war deutlich im linken Ven¬
trikel zu sehen. Ich glaube, es kann mit RQcksicht auf die
frflher berichteten Tatsachen und die daran geknflpften Er-
flrterungen kaum zweifelhaft sein, daB auch hier die unmittel-
bar nach der Injektion aufgetretenen Krankheitserscheinungen
nicht als anaphjlaktische zu deuten waren, sondern auf den,
wenn auch in diesem Falle geringeren, Blutaustritt in die
Pericardialhflhle bezogen werden mufiten.

SchlieBlich haben auch die in Tabelle V wiedergegebenen
Experiments, bei denen das Serum in die Bauchhdhle,
die Streptokokken dagegen intravends eingespritzt
wurden, ein durchwegs negatives Resultat gehabt, was um so
schwerwiegender ist, als hier die Serummenge bis auf 4 ccm,
die Streptokokkenmenge bis auf 2—3 ccm einer dichten Auf-
schwemmung 48-stflndiger Agarkulturen gesteigert wurde. Auch
bei dieser Versuchsreihe waren die Tiers unmittelbar nach der
Injektion vollkommen frisch und munter und zeigten auch in
der Folgezeit keinerlei Krankheitserscheinungen, die auf ana-
phylaktische Krankheitserscheinungen hfltten bezogen werden
kdnnen. Die Kdrpertemperatur war allerdings kurz nach der
Injektion betrflchtlich — im Durchschnitt um 2,3® C — ab-

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184

Paul Th. Muller,

gesonken; bereits nach eioer halben bis einer Stunde begann
dieselbe jedoch wieder anzusteigen, und es unterliegt keinem
Zweifel, dafi wir es bei diesem ^Temperatursturz*^
lediglich mit dem bereits bekannten Effekt der
Fesselung und Operation der Tiere zu tun haben.

Im Anschlufi an diese Versuche soil nun noch einer
weiteren Reihe von Experimenten gedacht werden, bei welchen
Kanincben mit Injektionen von Streptokokken-Bacillenkultnren
behandelt wnrden, urn dann, nach l&ngerer Pause, auf die
anaphylaktisierende Wirkung ihres Serums geprflft zu werden.
Der Unterschied dieser Versuchsreihe gegenflber den frOheren
liegt einmal in der Verwendung einer anderen Tier species
— n&mlich des Eaninchens — als Serumspender, andererseits
aber in der MOglichkeit, zur Injektion der Meer-
schweinchen den gleichen Bakterienstamm zube-
nutzen, der zur Herstellung des Immunserums
gedient hatte.

Ich lasse sofort die Versuchsprotokolle folgen.

I. Eaninchen A und B. Intraperitoneale Injektion.

21 . XII. 0,1 ccm Streptokokkenbouillon 331

23. Xn. 0,1
25. xn. 0,1
29. XII. 0,1

31. XII. 0,1 ,, „ ,,

2. I. Blutentnahme
5. 1. 0,5 ccm Streptokokkenbouillon 331

8 . 1 . 1,0 „

24. I. Blutentnahme

n

Versuch mit dem Serum rom 2. I.
a) Simultane intraperitoneale Injektion. 1 ccm Serum + 1 ccm
Streptokokkenbouillon 331.

Serum A

Serum B

Torher 9*®

38,6

38,6

9“

39,0

38,6

10 “'

39,4

37.8

ICH®

39,7

38;6

12 ®

39,8

38,8

2 ®

39,2

39.0

Maximale Temperaturanderung

I 0+1,2 I -0,8+ 0,4

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Versuche iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Btreptokokken. 135

b) Getremite intraperitoneale Injektion. 2. I. 1 ccm Serum; 3. L
1 ccm StreptokokkenbouilloD 331.

Serum A

Serum B

vorher 3‘®

38,8

38,8

320

38,4

38,4

40

39,0

38,5

415

39,0

38,8

5®

39,5

39,2

5:10

40,6

40,4

Maximale Temperaturanderung

1 -0,4+ 1,8 I • -0,4+ 1,6

Versuch mit dem Serum vom 24. I.
a) Simultane intraperitoneale Injektion. 1,5 ccm Serum + 1,0 ccm
Streptokokkenbouillon 331.

Serum A

Serum B

vorher 3*®

38,4

39,0

3«

38,0

38,6

413

38,2

38,8

5®

38,7

39,0

5:10

39,0

39,8

6 ®

39,4

40,4

Maximale Temperaturfinderung

1 -0,4+ 1,0 I -0,4+ 1,4

b) Getrennte intraperitoneale Injektion. 24.1. 1,5 ccm Serum; 25.1.
1 ccm Streptokokkenbouillon 331.

Serum A

Serum B

vorher 9®®

39,2

39,2

10 ®

38,4

39,4

11 ®

38,2

39,2

11 *®

39,0

39,6

12 ®

39,6

39,9

Maximale TemperaturiLnderung

I -1,0+0,4 I 0 + 0,7

II. Kaninchen C und D. Intraperitoneale Injektion.

9. 1. 2 ccm Streptokokkenbouillon 331

13w I. 2 „ „ „ — Infiltrate an der Injektionsstelle

23. I. Abezesse an der fnjektionssteUe. 25. 1. Blutentnahme
3. II. Blutentnahme

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186

Paul Th. Muller,

Versuch mit dem Serum vom 25. I.

Simultane intraperitoneale Injektion. 1,5 ccm Serum + 2,0 Strepto-
kokkenbonillon 331.

iSerum C

Serum D

vorher 3’®

39,6

38,6

3‘®

39,2

38,5

42.1

38,8

38.4

5®

39,5

40.0

5™

40,4

39;2

6 ®

40,2

39,2

Maximale Teniperaturandemng

I —0,8+ 0,8 I -0,2+ 1,4

Verauch mit dem Serum vom 3. II.

Simultane intraperitoneale Injektion. 2 ccm Serum + 2 ccm Strepto-
kokkenbouillon 1 (1 Agarkultur + 4 ccm Bouillonkultur).

Serum C

Serum D

vorher 9^®

39,1

39,6

10 ®®

38,6

38,8

11 ®

38,6

38,6

11 '®

39,0

39,6

12 "

39,2

40,2

12 ""

39.4

40,6

1 ®

39,4

40,0

Maximale Temperaturanderung

I —0,5+ 0,3 I —0,8+ 1,0

III. Eaninchen E und F. Intraperitoneale Injektion.

11. I. 5,0 ccm Strept. 331
14. I. 10 „ „ „

16. I. 20 ,, „ „

23. 1. Blutentnanme

24. I. 20 ccm Strept. 331
3. II. Blutentnahme

10. II. 5 ccm Strept. 1 (Agarkultur, 1 Flaache + 2 ccm Bouillon).

Verauch mit Serum vom 23. I.
a) Simultane intraperitoneale Injektion. 1,5 ccm Serum + 1 ccm
Streptokokkenbouillon 331.

Serum E

Serum F

vorher 3®®

39,2

39,0

3®®

.38,6

39.0

4\-

38,4

39,0

5®

39,2

40.2

6 "

39,6

40,0

Maximale Temperaturanderung

I -0.8+ 0,4 1 0 + 1,2

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Versuche iiber aktiye und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 187

b) Getrennte intraperitoneale Injektion. 23. I. 2 ccm Serum; 24. I.
1,5 ccm StreptokokkenbouilloD 331.

Serum E

Serum F

vorher 9'®

39,1

39,6

9*®

38,6

39,5

10®

38,6

39,5

10'®

39,0

39,8

11®

39,4

40,0

12®

39,6

40,2

Maximale Temperatur^dening

I _ 0,5+ 0,4 I -0,1+ 0,6

Versuch mit Serum vom 3. II.

a) Simultane peritoneale lujektion. 2 ccm Serum + 2 ccm Strepto-
kokkenbouillon 1 (1 Agarflasche + 4 ccm Bouillonkultur).

Serum E

Serum F

vorher 9“

39,6

39,6

10®«

39,0

39,0

11®

39,0

39,1

11*0

39,9

39,3

12®

40,4

40,3

12*0

40;8

40,3

1®

40,7

40,8

2®

40,7

40,5

Maximale Temperaturanderung

I -0,6+ 1,2 1 -0,6+ 1,2

b) Simultane intracardiale Injektion. 2 ccm Serum E + Streptokokken-
bouillon 1 (1 Agarflasche + 4 ccm Bouillonkultur).

Serum E

vorher 9*®

39,0

10‘®

38,4

10*0

39,0

11®

39,1

IP®

39,6

12®

39,4

12»®

40,0

1®

40,0

Maximale Temperaturanderung

I — 0,6 + 1,0

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188

Paul Th. Muller,

Uebersichtstabelle VI.

An-

Maxi-

Da¬

tum

Serum

Serum-

menge

Strepto-

kokken

fangs-

tempe-

male

Tempe-

TemTOratur-

Underung

Mittel

Anmerkong

ccm

ratur

ratur

2.1.

A

1,0

1 ccm Str. 331

38,6

39,8

0 + 1^

Simultane intraperi-

B

1,0

1 „ „ 331

38,6

39,0

- 0,8-H 0,4

toneale Injektion

24.1.

A

1,5

1 „ ,. 331

38,4

39,4

-0,4-1-1,0

B

1,5

1 „ „ 331

39,0

40,4

-0,4+ 1,4

-0,5

25.1.

C

1,5

2 „ „ 331

39,6

40,4

— 0,8 -j- 0,8

D

1,5

2 ,. „ 331

38,6

40,0

-0,2 + 1,4

.+0,96

3. II.

C

2,0

2 „ „ 1

39,1

39,4

— 0,5 “j- 0,3

D

2,0

2 „ „ 1

39,6

40,6

— 0,8 -f-1,0

23.1.

E

1,5

1 „ 331

39,2

39,6

— 0,8+ 0,4

F

1,5

1 „ „ 331

39,0

40,2

0+1,2

3. II.

E

F

2,0

2,0

V, FI. Str. 1

/a „ »

39,6

39,6

40,8

40,8

- 0,6 + 1,2
- 0,6 + 1,2

jAgarkultur

2.1.

A

1 ccmStr.331

38,8

40,6

-0,4+ 1,8

Getrennte intraperi-

B

1,0

1 „ „ 331

38,8

40,4

-0,4+ 1,6

-0,4

toneale Injektion

24.1.

A

1,5

1 „ „ 331

39,2

39,6

—1,0 + 0,4

+0,9

23.1.

B

1,5

1 „ „ 331

39,2

39,9

0 +0,7

E

2,0

1,5 „ „ 331

39,1

39,6

— 0,5 + 0,5

F

2,0

1,5 „ ,, 331

39,6

40,2

- 0,1 + 0,6

3. II.

E

2,0

v* FI. Str. 1

39,0

40,0

— 0,6+ 1,0

Simultane intracar-
diale Injekt. Agar-
kultur

2. n.

E

4,0

2,0 ccm Str. 1

38,4

1

40,0

-1,7+ 1,6

Qetrennte intraven.
Injekt. Agarkultur

Wie man den Protokollen entnimmt, waren die Kaninchen
A und B 8-mal injiziert worden, und zwar zuerst mit sehr
kleinen, dann allm&hlich bis auf 5 ccm Bouillon-
kultur ansteigenden Bakterienmengen; Kaninchen
C und D batten 3 Einspritzungen von 2 bezw. 5 ccm erhalten;
E und F endlich waren mit viel grdlleren Strepto-
kokkenmengen (5, 10 und 20 ccm Bouillonknltur) 4-mal
behandelt worden. — Auch bier entsprachen die Versuchs-
ergebnisse vollkommen den Erfahrungen, die wir bei unseren
frbher aufgefQhrten Experimenten gemacht batten. Die mit
dem Kaninchenimmunserum und Streptokokken behandelten
Meerschweinchen blieben vollkommen gesund und zeigten nur
einen Temperaturabfall von im Mittel 0,4—0,5 ® C, der dann
von einer Temperatursteigerung von durchschnittlich 0,9—1,0®C
gefolgt war.

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Yersuche uber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. ] 39

Gegen die Yersuche konnte nun, wie gegen die in Tabelle I
und II aufgeftihrten, der Einwand erhoben werden, dafi die
injizierten Kokkenmengen vielleicht zu gering waren, um einen
deutlichen anaphylaktischen Temperatnrsturz ausznldsen. Ich
babe daher noch einige analoge Yersuche angestellt, bei denen
ganz massive Bakteriendosen eingespritzt wurden,
die durch Abschwemmung von 4, ja von 6 und 9 Agarflaschen-
kulturen, Zentrifugieren und Aufnehmen des Bodensatzes in
2 ccm Bouillon gewonnen wurden und dicke, opake, milchige
FlQssigkeiten darstellten. Zur Kontrolle wurden einige Tiere
nur mit Bakterienaufschwemmung behandelt, um zu sehen,
welchen Effekt dieselbe an und fbr sicb, ohne Mitwirknng des
Immunserums, hervorrnfen wbrde.

Versuch mit Serum rom 2. III.

a) 4 ccm Serum E intraperitoneal; 3. III. 2ccm Strept.1 (1 Agar-
flasche -|- 2 ccm Bouillon) intravenos.

b) 2. III. 3 ccm Serum E intraperitoneal; 3. III. 2 ccm Strept. 1
(6 Agaxflaschen -f 2 ccm Bouillon) intravenos.

c) 2. III. 3 ccm Serum F intraperitoneal; 3. III. 3 ccm Strept. 1
(9 Agarflaschen + 2 ccm Bouillon) intravends.

d und e) EontroUen ohne Serum; 3. III. 2 ccm Strept. 1 (4 Agar¬
flaschen -H 2 ccm Bouillon) intravends.

a

Serum E

b

Serum E

6 Agar¬
flaschen

c

Serum F

9 Agar¬
flaschen

d

Kontrolle
4 Agar¬
flaschen

e

Kontrolle
4 Agar¬
flaschen

vorher 11*

38,4

38,6

38,7

39,8

39,4

nachher 11^‘

37,2

37,0

37,8

38,4

38,0

11*“

36,6

35,2

34,4

37,3

36,4

11«

36,6

34,2

32,4

35,5

36,0

12“

37,6

32.0

31,4

36,4

34,6

12*“

39,0

31,4

29,6

37.0

34,8

1“

39,6

31,4

28,2

37;9

34,7

146

40,0

32,3

28,7

39,5

35,0

21*

- {

33,0

29,0

40,0

35.5

3“

—

34,2

30,0

—

' 36,0

5“

—

35,0

30,0

—

1 35,5

Maximale Temperaturanderung
1-1,8+1,61 —7,2 I -10,5 1-4,3+0,21 -5,8

Unmittelhar nach der Injektion zeigt keines der Tiere
irgendwelche besonderen Erschemunran, insbesondere
wurden keine Ktfimpfe, dyspnoische Atembewegnngen
und dergl. anaphylaktische Symptome beobawtet.

Tier b nach 48 Std. i

j ” o? ”

d ,, 24 ,,

>1

If

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190

Paul Th. Muller,
Uebersichtetabelle.

Datum

Serum

Serum-

menge

ccm

Stxept.

No. 1

Anfangs-

tempe-

ratur

Tempe-

ratur-

abfall

Tot nach
Stunden

2. III.

E

3,0

6 Flaechen

38,6

- 7,2

48

F

3,0

9 „

38,7

— 10,5

12

2. III.

e

0

4

39,8

— 5,3

_

e

0

4 „

39,4

- 4,8

24

Wie aus der vorstehenden Uebersichtstabelle zn entnehmen
ist, wurde bei diesen Versuchen tats&chlich ein nicht un-
betrS.chtlicher Temperatursturz beobachtet. Der-
selbe trat aber nicht nur bei den mit Serum vorbehandelten
Meerschweinchen auf, sondern auch bei den Kontrollen,
nnd zwar ist ohne weiteres zu erkennen, wie der Abfall der
Temperatur direkt mit der einverleibten Bakterienmenge an-
steigt: denn bei einer Bakteriendosis

von 4 Agarflaschen betrug dieselbe

>J § M > J>

Q

4,3 und 5,8®,
7,2®,

10,4®.

Es ist also nicht zu bezweifeln, dafi dieser Temperatur¬
sturz nur auf die Einverleibung der kolossalen
Bakterienmengen zu beziehen ist, nicht aber ein
eigentliches anaphylaktisches PhS.nomen dar-
stellt. Dem entsprach denn auch das iibrige Verhalten der
Versuchstiere. Unmittelbar nach der Bakterieneinspritzung
waren dieselben zwar begreiflicherweise etwas matt, zeigten
aber sonst keinerlei Erankheitserscheinungen, wie sie sonst
den anaphylaktischen Shock charakterisieren. Insbesondere
traten weder KrUmpfe noch dyspnoische Atem-
bewegungen Oder Husten noch Abgang von Kot
und Urin ein. Die Tiere sallen vielmehr mit gestr&ubtem
Fell ruhig zusammengekauert da; wurden sie angestoBen, so
liefen sie einige Schritte weiter, um dann wieder ruhig sitzen
zu bleiben. Trotzdem sie nach der Injektion, und besonders
auch im spkteren Verlauf des Versuches, sehr schwach wurden,
kam es doch niemals dazu, dafi sie sich — wie die Tiere im
anaphylaktischen Shock — auf die Seite legten. Auch in dieser
Beziehung verhielten sich fibrigens die Kontrolltiere ganz
ebenso wie die mit Serum behandelten; eines von ihnen ging
auch, wie diese, nach Ablanf lllngerer Zeit zngrunde.

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Versnche uber aktive und passive Anaphylaxie bei Stieptokokken. 191

Nach alledem kann also auch das Ergebnis dieser Versnche
nur als ein absolut negatives angesehen werden.

Alle nnsere Bemuhnngen, mit Hilfe der be-
nQtzten Streptokokkenimmnnsera passive Ana¬
phylaxie zn erzeugen, sind somit als vollkommen
gescheitert anznsehen. Trotzdem wir nicbt nnr
verschiedene Streptokokkenstilmme verwendeten
nnd die Dosen wiederholt recht hoch bemessen
haben, konnte doch niemals eine ansgeprUgte
anaphylaktische Shockwirknng, ja nicht einmal
eindentlicheranaphylaktischer Tern per atnrstnrz
erzielt werden.

m. Versuohe snr Abspaltong von Ansphylatozm ans

Streptokokken.

Znr Vervollst&ndignng der eben mitgeteilten Experimente
fiber passive Streptokokkenanaphylaxie wnrde nnn noch ver-
sncht, ob es nicht gelingt, ans diesen Mikroorganismen in
fihnlicher Weise Anaphylatoxin zn gewinnen, wie diesFried-
berger^) bei Typhnsbacillen, Tnberkelbacillen nnd Bact.
prodigiosnm beschrieben hat. Freilich waren die Erwartnngen
mit Rficksicht anf den dnrchwegs negativen Verlanf der bis-
herigen Versnche von vornherein keineswegs hoch gespannt,
nnd wfire es wohl eher fiberraschend nnd befremdend ge-
wesen, wenn sich hier positive Ergebnisse hfitten verzeichnen
lassen.

Bei einer ersten Versnchsreihe wnrden die dnrch Digestion
der sensibilisierten Streptokokken mit Meerschweinchenkom-
plement gewonnenen Flfissigkeiten in die Banchhdhle der Tiere
eingespritzt, bei einer zweiten Serie wnrde dagegen die intra-
venfise Injektion gewfihlt. Die Details der Versnchsanordnnng
gehen ans den nachfolgenden Protokollen hervor.

VerBuchsreihe A.

Je 2 ccm Btreptokokkensenun Tavel, Menzer und Aronson
werden mit 4 ccm stark getriibter Streptokokkenaufschwemmung (Btrept 1)

1) BerL klin. Wocbenschr., 1910, No. 32; Zeitschr. t Immunitfitsf., 1911.

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192

Paul Th. Muller,

(2 Agarflaschen + 6 ccm Bouillonkultur) versetzt, 6 Stunden stehen gelasaen
(Zimmertemperatur), dann abzentrifugiert; der Bodensatz wild mit je 4 ccm
aktiven Meerschweinchenserums aufgenommen und nach 2-Btuudiger Be*
briitung bei 37® C fiber Nacht stehen gelassen. Die Mischung wurde dann
am nachsten Tag intraperitoneal injiziert. Eine genau ebenso behandelte
Kontrollprobe war ohne Streptokokkenserum, nur mit Bouillon angesetzt,
dann aber, wie die anderen Proben, mit Meerschweinchenserum digeriert
worden.

Aronson-Serum

Tavel-Serum

Menzer-Serum

Kontrolle

(9»

38,6

39,5

40,2

38,6

9«

38,5

39,4

40,0

39,0

10»®

38.4

39,4

40,0

38,8

1116

39,4

40,8

41,0

39,0

1146

39,6

40.8

41,2

40,0

12*®

39,6

40,0

40,8

1 39,0

1®

40,0

39,8

40,6

39,0

145

39,6

39,4

40,6

39,0

3®

39:6

39,0

41,0 1

39,0

4®

39,8

39,0

40,8

38,8

Mazimale Temperaturanderung
I -0,2+ 1,4 1-0,1 + 1,3 1 -0,2+ 1,0 I 0 + 1,4

Versuchsreihe B.

Je 2 ccm Serum Aronson und Scharlachserum 14 wetden mit 2 ccm
konzentrierter Streptokokkenaufschwemmung (1 Agarflasche Str. 7 + 2 ccm
Bouillon) gemischt, 1*/, Std. bei 37 ® und dann noch 17* Std. bei Zimmer¬
temperatur stehen gelassen; dann wird zentrifugiert, das Serum abg^ossen
und der aus Kokken bestehende Bodensatz mit je 4 ccm frischen Meer¬
schweinchenserums zusammengebracht. Das Demisch wird 2 Std. lang bd
37®, dann 18 Std. bd Zimmertemperatur digeriert imd schlieQlich intra-
vends injiziert.

Aronson-Serum

2 ccm

2 ccm Aronson-Serum
+ 2 ccm Scharlach¬
serum 14

Scharlachserum 14

2 ccm

10®

39,0

nach Op. 37,6

38,8

39,4

10‘*

37,0

—

nach Op, 38,0

10*®

37,2

nach Op. 37,2

37,2

11®

37,8

37,0

37,6

11*®

39,5

38,6

37,8

12*®

40,4

40,2

39,4

1®

40,2

40,0

40,0

2®

39,4

39.8

40,1

Mazimale Temperaturanderung
-2,0 +1,4 I -+8 + 1,4 I -2,2+ 0,7

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UNIVERSITY OF IOWA

Versuche iiber aktire und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 193

Uebersichtstabelle VI.

Versuchs-

reihe

Sernmart

Injizierte

Flussigk.-

menge

ccm

An-

fangs-

tempe-

ratur

Maxi-

male

Tempe-

ratur

Maximale

Tempe-

ratur-

Underung

Mittel

An-

merkung

A

Aronson

Tavd

Menzer

4,0

4,0

38,6

39,5

40,2

40,0

40,8

41,2

-0,2+ 1,4
- 0,1 +1,3
-0,2+ 1,0

1-0,2
( + 1,2

] Intraperi-
> ton^e
j Injektion

0

4,0

38,6

40,0

0 +1,4

B

Aronson
Scharlach 14
Aronson +
Scharlach 14

2,0

2,0

4,0

39,0

39,4

38,8

40,4

40.1

40.2

-2,0+ 1,4
-2,2+ 0,7

-1,8 + 1,4

,-2,0

1 + 1,2

Intra-
' vendee
Injektion

Wie die Uebersichtstabelle VI lehrt, war auch hier das
Versuchsergebnis kein anderes als bisher. Die mtraperitoneal
gespritzten Meerschweinchen zeigten, abgesehen von einer
ganz unbedeutenden, nur wenige Zehntelgrade betragenden
Temperaturabnahme und der uns bereits wohlbekannten darauf-
folgenden Temperatursteigerung von 1,2*^ im Mittel, keinerlei
Krankheitserscheinungen. Bei den intravends behandelten
Tieren trat vdeder der auf die Fesselung zu beziehende
Temperatnrsturz von etwa 2^ G ein, den wir bereits bei
Disknssion der Tabelle V besprochen haben, im flbrigen fehlte
auch hier jedes Anzeichen eines anaphylaktischen Shocks
vollkommen.

Fassen vir also zum Schlusse dieses Ab-
schnittes das Ergebnis aller bisherigen, mdg-
lichst mannigfach variierten Versuche kurz zu«
sammen, so kbnnen wir sagen, daB es uns mit
keiner der sonst Qblichen und bewfthrten Me-
thoden gelungen ist, in unseren zum Teil sicher
sehr hochwertigen und polyvalenten Strepto-
kokkenimmunseren anaphylaktische Reaktions-
kdrper nachzuweisen.

Von um so grdBerem Interesse mufiten daher die weiteren
Versuche sein, die in der Absicht unternommen wurden,
aktive Anaphylaxie gegen Streptokokken zu erzeugen,
und deren Ergebnisse im folgenden Abschnitt besprochen
werden sollen.

Ztttaehr. L iBmaaltllilioneliuif. Orlf. Bd. X. 13

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194

Paul Th. Muller,

IV. Aktive Anaphylaxie.

Auch hier wurde die Versochsanordnung ein wenig
variiert, am mdglichst verschiedenartige Versuchsbedingangen
darchzuprflfen. Bei einer ersten Reihe von Experimenten
warden die Tiere nar 3mal mit relativ groBen intraperi-
tonealen Dosen von Streptokokkenagarknltnren vorbehandelt.
Bei einer zweiten Serie von Tieren warden kleine Bakterien-
dosen znerst nnter die Hant, dann, spSter, in die Banchhdhle
eingespritzt, wobei die Zahl der Injektionen 8 betrng and die
Einspritznngen sich t&glich oder in Intervallen von wenigen
Tagen folgten. Eine dritte Reihe von Versnchstieren endlich
wnrde ansschliefilich snbkntan, and zwar 4mal mit kleinen
and 3mal mit etwas grbBeren Bakterienmengen behandelt

Die Reinjektion erfolgte nach 21—34 Tagen, und zwar
mit groBen Bakteriendosen (ca. 4 Agarflaschen), die znm
Teil in die Vena jngnlaris, znm Teil in die Banchhdhle einge¬
spritzt warden. Znr Vorbehandlnng wie znr Reinjektion warden
anch hier stets die lebenden Mikroorganismen verwendet.

Ich lasse die Versnchsprotokolle sofort folgen.

Versuchsreihe 1.

3 Meerschweinchen erhalten intraperitoneal am:

3. 11. 2 ccm Streptokokken 1 (2 Agarflaschen + 2 ccm Bouillon) mit
KarboMure konserviert.

14. II. 2 ccm Btrept. 1 (2 Agarflaschen + 2 ccm BouiUon) mit Karbol-
saure konserviert + 2 ccm Btrept. 1 frisch (2 Agarflaschen +
2 ccm Bouillon).

18. II. wie am 14. II.

Reinjektion von

Meerschwdnchen a am 11. III. 1 intravends mit je 2 ccm Btrept. 1 =
„ b u. c am 13. III.) 6 Agarflaschen.

11 . m. I a

13. UI.

b

c

9®

38,6

9*®

37,2

94i

35,6

10®

35,2

10“

35,0

1115

35,4

1116

35,6

12 "®

36,0

2 ®

37,0

350

38,0

4»o

38,8

6 ®

39,2

Keine Spur von
anaphylakt. Er-
scheinungen. Tier
bleibt am Leben.

3®

38,8

39,0

315

38,0

39,0

3“

37,2

38,4

4®

36,8

36,0

4“

t

t

Die Tiere sind immittelbar nad

b der Injektion voll-

kommen munter, zeigen weder Krampfe noch Dyspnoe,
noch Urin- und Kotabgang; nach etwa V 4 Std. werden
8 ie schwach, sitzen mit gestraubtem Fell nihig da; die
Atmung ist sehr oberflachlich. Die Mattickeit nimmt
zu, sie kSnnen sich kaum noch aufrecht nalten, und
nach wenigen, etwas st^keren Atemzugen tritt der
Tod ein.

Sektionsbefund: Lungen kollabiert, keine Spur von
Blahung; an einzelnen Stellen rote Inft^kte. Im Herzen
diissiges Blut.

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Versuche iiber aktire und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 195

Versuchsreihe 11.

4 Meerschweinchen (a, b, c, d) erhalten am:

16. n. 1 ccm Bouillonkultur Strept. 1 sabkutan

17. II. 1 „ „ „ 1 „

19. U. 1 „ ,, „ 2 mtraperitoneal

20. II. 4 ^uillonkulturen, zentxifugiert, in0^ ccm Bouillon aufgesohwemmt,

intxaperitoneal

21. II. 2 ccm Bouillonkultur, mtraperitoneal

22. n. 2 „ „ „

23. II. 2 „ „ ,,

2. III. 1 Agarflasche, in 2 ccm Bouillon aufgeschwemmt, intraperitoneal.
Beinjektion am 27. III.

a und b intravenSs 3,5 Agarfiaschen in 2 ccm Bouillon
c und d intraperitoneal 4,5 bezw. 10 Agarflaschen.

Unvorbehanddte Eontrolle 4,5 Agarflaschen intraperitoneaL

27. m.

a

b

27. III.

c

d

Eon¬

trolle

915

38,4

38,2

1130

39,8

38,8

38,8

980

37,8

_

1146

39,0

39,4

38,0

945

35,4

38,5

12 ®

39,0

39,6

37,8

10 ®

t

37,8

1280

38,0

40,0

37,5

1080

35,8

1 ®

38,1

40,2

38,0

11 ®

36,0

18®

38,0

40,0

38,4

ir®

36,0

2®

38,0

39,7

38,5

1130

35,8

280

38,0

39,7

39,0

12 ®

35,4

3®

38,4

39,4

39,4

1280

35,8

4®

39,0

—

38,8

1 ®

36,8

180

37.9

2®

38,4

23®

38,8

3®

39,4

nach der Injektion ganz
munter, wirddann, ohne

Maximale Temperaturanderung

— 2,8 —1,8 0 —1,3

+ 1,2 + 1,4 + 0,6

scniieulicn mit ausge-
streckten Extremitaten
auf dem Bauch und ver-
endet unter einigen
Zuckungen der Ek&e-
mitaten und des Eopfes.
DierSektion ergibt schwa-
che Lungenbmhung. —
Tier b ist stets voU-
kommen munter, trotz
niedriger Tempstar.
Edne Erampfe.

VerBuchsreihe III.

6 Meerschwdnchen. Subkutane Injektion.

21. U. 0,5 ccm Streptokokkenbouillonkultur (Str. 1)

^. 11 . 1,0 „

23. n. 1,0 „ „ „

24. II. 2,0 „ „ „

1. III. 7a Agarflasche Str. 1

l S5- :(• ”

Zur Seinjektion: Je 4 Agarflaschen in 2 ccm; intravenos.

13^

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196

Paul Th. Muller,

29.111.

a

KontroUe

30.m.

b

c

KontroUe
(2 Agarfl.)

KontroUe
(4 Agaifl.)

10 «

39,0

38,6

9**

38,6

38,2

39,2

10 ®

38,0

11 ®

38,2

37,6

10 ®

37,0

37,2

10 “

37,0

11 «

37,5

35,4

10 **

36,0

10 ®®

34,0

11 «

36,6

34,4

11 ®

35,8

35,8

10 **

32,6

12 ‘»

36,2

34,4

12 ®

36,0

34,2

37,8

11 “

31,8

12 »®

35,8

34,6

12 *»

36,4

34,0

36,8

11 *®

31,6

1 ®

36,0

34,6

1 *®

36,0

33,4

37,8

12 ®

31,6

2 ®

36,7

35,6

3®

37,0

33,9

37,8

1 ®

33,3

3®

37,2

37,4

4*®

37,8

35,9

39,2

2 ®

35,2

4®

38,8

37,1

6 ®

38,2

36,2

39,8

4®

6 ®

39,0

37,8

7®

37,0

39,8

7®

39,4

38,8

Maximale Temperaturanderung

_ 3,2 +0,41-4,2 +0,21 | _2,8 l-4,8i-2,4 + 0,6| 1 -6,4

Meerschweincheu c, d, e, f erhalteu je 4 Agarflaschen intravenos.
Meerschweinchen g erhalt 7 Agarflaschen intraperitoneal.

3i.in.

c

d

3. IV.

e

g

7. IV.

f

10 ®

38,6

38,2

10 ®

39,0

39,2

9®

38,5

10 ®

37,0

10 “

37,8

39,2

gso

37,0

10 “

37,2

10 *®

36,8

10 ®

35,0

10 *»

36,0

35,8

11®

36,0

39,2

10 *®

31,6

11 ®

35,8

34,2

11 *®

36,0

39,0

10 *®

39,0

12 ®

36,0

34,0

12 **

35,8

39,7

128 ®

36,4

33,4

1 ®

35,6

40,0

1 *®

36,0

33,9

2 ®

36,2

40,4

3®

37,0

35,9

3*®

38,4

39,4

4»®

37,8

36,2

5®

39,4

39,4

6 ®

38,2

37,5

Maximale Temperaturandenuig

Tier f zei^nochwahrdndd.
Operation einige krampf-
hafte Zuckungen u. Unn>
abgang. Li^ dann aof
der S«te, swwerkrank,
mit mtihsamer Atmung,
10 *® wird esgetdtet: die
Lungen sind nicht ge-
blaht. Darm undMa^n
stark hyperamisch, 1^-
terer zem deutL Schleiin-
hautekcuymosen. Das
Tier befindet sich im An-

1-2,81-4,81 1-3,41+1,21

fangsstad. der GraviditSt

Uebersiehtstabelle.

1 . Intraperitoneale Reinjektion.

Datum
der Re¬
injektion

Tage nach
derletzten
Injektion

Strepto-

kokken-

menge

Anfangs-

tern-

peratiir

Minimale

Tem-

peratur

Maximale

Temperatur-

anderung

Mittel

27.m.

25 1

4,5Fla8chen

39,8

38,0

-1,8

1

27. III.

25

10.0 „

38,8

38,8

0

1-0,7

3.rv.

30 1

7,0 „

39,2

39,0

-0,2

I

27. m.

KontroUe'

4,5Fla8chen

38,8

37,5

-1,3

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Versuche iiber aktive und passive Anaphylazie bei Streptokokken. 197

2. Intravendse Beinjektion.

a) Tiete bleiben am Leben.

Datum
der Be-
injektion

Tagenacli

denetzten

Injektion

Strepto-

kokken-

menge

Anfangs-

tem-

peratur

Minimale

Tem¬

peratur

Maximale

Temperatur-

anaerung

Mittel

ii.m.

21

6 Flaschen

38,6

35,0

— 3,6

27.m.

25

3.5

38,2

35.4

-2,8

29.III.

25

4

yy

39,0

35,8

-3,2

30.m.

26

4

yy

38,6

35,8

-2,8

O K

30.m.

26

4

yy

38,2

33,4

-4,8

— 0,0

3i.m.

27

4

yy

38,6

35.8

-2,8

27

4

yf

38,2

33,4

— 4,8

3. IV.

30

4

ft

39,0

35,6

-3,4

30.m.

Eontrolle

2 Flaschen

39,2

36,8

-2,4

29.m.

jy

4

38,6

34,4

-4,2

2. IV.

yy

4

yy

39,8

35,5

-4,3

-4,6

4

39,4

33,6

-5,8

30.III.

ft

4

ft

38,0

31,6

-6,4

b) Here gehen zugrunde.

Datum
der Be¬
injektion

Ta^nach

derletzten

Injektion

Strepto-

kokken-

menge

Tod nach
Stunden

Erschein ungen

ii.in.

21

6 Flaschen

IV,

Eeine Zeichen v. anaph. Shock

27.m.

21

6

iv.

ft ft » n

25

3,5 ,,

ca. 2

f> if ft >1 >7

7. IV.

34

4

£[rampfe und Urinabgang kurz
nach der Injektion. ^ock?

3.m.

Eontrolle

4 Flaschen

24

Eeine Zeichen v. anaph. Shock

Wie frfiher haben wir auch diesmal wieder die Versuchs-
ergebnisse in Form von Uebersichtstabellen zusammengefafit,
die wir gesondert betrachten wollen. Die erste dieser Tabellen
lehrt uns, dafi die intraperitoneale Reinjektion selbst
grofier Streptokokkenmengen (4—10 Agarflaschen) weder einen
wesentlichen Temperatursturz noch sonst irgendwelche Er-
scheinungen anaphylaktischer Nator hervorzurufen vermochte.
Ebenso negativ waren die Ergebnisse bei jenen Versuchstieren,
die in Tabelle IIa anfgefiihrt sind. Da es sich bier um intra¬
vendse Injektion handelte, so war bier zwar ein stdrkeres
Absinken der Temperatur zu bemerken, das aber keineswegs
die Grenzen tlberschritt, welche bei den nicbt vorbebandelten
Eontrolltieren eingebalten waren. War ndmlicb bei den letz-

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198

Paul Th. Muller,

teren ein mittlerer Temperatursturz von 4,5 ® C zu verzeichneu
gewesen, so hatten die vorbehandelten Tiere im Mittel eioen
Abfall von 3,5® C gezeigt. Dabei waren bei ihnen,
ebensowenig wie bei den intraperitoneal ge-
spritzten Meerschweinchen der ersten Reihe,
irgendwelche auf Anaphylaxie zu beziehende
Krankheitserscheinungen aufgetreten, die Tiere
waren vollkommen munter und zeigten weder Kr&mpfe noch
Dyspnoe.

Eine etwas eingehendere Besprechung erfordern dagegen
die in Tabelle II b zusammengestellten Versnche, bei denen
die Tiere binnen relativ kurzer Zeit zugrunde gegangen waren.
Auch die ersten drei dieser Tiere hatten keinerlei
Krankheitssymptome dargeboten, die irgendwie
fiir Anaphylaxie charakteristisch gewesen wfiren.
Sie waren unmittelbar nach der Einspritzung vollkommen
frisch; nach etwa einer Viertelstunde begannen sie matter zu
werden, sallen mit gestrSubtem Fell ruhig da, ohne irgend¬
welche Kr&mpfe pder Dyspnoe darzubieten. Schliefilich konnten
sie sich nicht mehr aufrecht erhalten und verendeten unter
einigen etwas heftigeren AtemzQgen. Die Sektion ergab bei
zweien dieser Tiere vollkommen kollabierte Lungen, bei dem
dritten bestand eine geringe Lungenblfthung.

Anders verh^lt sich dagegen das vierte Tier dieser Tabelle.
Kurz nach der intravendsen Injektion bekam es einige krampf-
hafte Zuckungen der ExtremitILten und entleerte Urin. Vom
Operationsbrett heruntergenommen, war dasselbe sofort sehr
binfallig, lag auf der Seite und atmete dyspnoisch, wobei deut-
liche rasselnde Gerftusche zu hdren waren. Die Temperatur
sank im Verlauf der n&chsten IV 2 Stunden auf 29® C. Das
Tier, das dem Verenden nahe war, wurde durch Nackenschlag
getdtet; die Sektion ergab vollkommen kollabierte Lungen;
Magen und Darm zeigten sich stark hyperfimisch und dtlster
rot verffirbt. Auf der Magenschleimhaut waren einige Ecchy-
mosen zu sehen. Das Tier befand sich flbrigens in den ersten
Stadien der Graviditfit. — Fafit man alle diese Symptome zu-
sammen, so ergibt sich also bei diesem Tiere tatsHchlich ein
Bild, das vollkommen mit dem eines etwas protrahierten ana-
phylaktischen Shocks flbereinstimmt.

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Versuche Uber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 199

Von 13 Versuchstieren hatte somit nur ein
einziges Erscheinungen dargeboten, die an Ana-
phylaxie denken lieBen; ein akut tOdlicher Shock
war jedoch auch in diesem Falle nicht zustande
gekommen, obwohl die injizierten Bakterienmengen recht
betrlchtliche waren. Alle Qbrigen Experimente waren
vollkommen negativ yerlaufen und batten nicht
einmal einen stfirkeren Temperatursturz aufge-
wiesen als die Kontrollversuche an unvorbe-
handelten Tieren. — Die Deutung dieses einen, aus der
Reihe fallenden Versuches ist infolgedessen nicht ganz leicht.
Man kbnnte vielleicht annehmen, daB es sich hierbei um einen
nur zuf&lligen Befund gehandelt babe, bei dem die GraviditSt
des Tieres eine Rolle gespielt haben kdnnte. Erinnern wir
uns jedoch der bereits zitierten Arbeit von Neufeld und
Dold, bei der es unter 32 Versuchen nur zweinial gelungen
war, aus Tuberkelbacillen Anaphylatoxin zu gewinnen, so er-
scheint es wohl vorsichtiger, sich einstweilen der Meinungs-
SuBerung zu enthalten und das Ergebnis weiterer diesbezflg-
licher Versuche abzuwarten.

Jedenfalls geht aber das eine aus unseren bisherigen Ex-
perimenten hervor, daB auch die Erzeugung einer
aktivenStreptokokkenanaphylaxieaufSchwierig-
keiten stbBt und — wenigstens bei Anwendung
des bei den flbrigen Bakterienarten leicht zum
Ziele fhhrenden Versuchsmodus — fast stets
versagte.

SoMofi.

Nachdem also fast alle unsere Versuche, aktive Oder passive
Streptokokkenanaphylaxie zu erzeugen, vollkommen fehlge-
schlagen waren, muBte man sich naturgemiUl die Frage vor-
legen, worin denn diese negativen Ergebnisse
ihren Grund hBtten.

FQr die Versuche fiber die passive Anaphylaxie liegt
nun vielleicht mit Rficksicht auf die groBen Unterschiede und
individuellen Differeuzen, welche die Streptokokkenstfimme
bekanntermaBen aufweisen, die Deutung nahe, daB die von
uns benutzten Stfimme vielleicht gerade solche

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200

Paul Th. Miiller,

gewesen seien, die durch die gew&hlten Immun-
sera nicht beeinflafit warden. Allerdings mufite diese
Vermutung im Hinblick darauf, dafi sowohl das Menzersche
wie das Tavelsche and Aron son sche Streptokokkenserum
ein polyvalentes ist, als nicht gerade sehr wahrscheinlich
bezeichnet werden. — Vollkommen unznl&ssig ist jedoch diese
Annahme natfirlich bei den Versuchen fiber aktive Ana-
phylaxie, bei denen ja der gleiche Streptokokkenstamm zur
^Sensibilisierung^^ wie zur Reinjektion benutzt wurde, and bei
denen also die anaphylaktischen Reaktionskbrper — wenn
Qberhaupt welche gebildet worden waren — notgedrnngen zu
den EiweiBkbrpern der Streptokokkenleiber passen muBten.

Ueberlegt man nun ganz allgemein, woher es kommen
mag, daB alle unsere Versuche — bis auf einen einzigen —
negativ verlaufen sind, so ergeben sich zun&chst zwei ver-
schiedene Moglichkeiten: entweder warden von den
vorbehandelten Tieren flber-haupt keine anaphylak¬
tischen Reaktionskbrper produziert, oder aber die-
selben waren zwar vorhanden, k o n n t e n aber aus irgendeinem
Grande nicht zur Wirkung gelangen and vermochte'n
daher nicht, Anaphylatoxin aus den Bakterien in Freiheit zu
setzen.

Mit Beziehung auf diese beiden Mbglichkeiten mfissen wir
nun hier eine Bemerkung einschalten, die vielleicht ffir die
Beurteilung unserer negativen Versuchsergebnisse von Wichtig-
keit sein kdnnte. Wir sind n&mlich absichtlich in einem nicht
unwesentlichen Punkte von der zur Erzeugung der Bakterien-
anaphylaxie meist gehandhabten Methodik abgewichen, indem
wir sowohl zur ^Sensibilisierung* der Versuchstiere, wie zur
Reinjektion prinzipiell nur lebende Streptokokkenkulturen be¬
nutzt haben, w&hrend z. B. Ho lob at und Kraus und
Amirad2ibi zur Vorbehandlung stets abgetbtete, auf 70®
erwSrmte Bakterien verwendeten. Die Grfinde, die uns zu
dieser Abweichung bestimmten, waren mehrfacher Art. Da
zun&chst nach den von Friedberger jiingst geSuBerten,
zweifellos sehr bestechenden Anschauungen ein groBer Teil der
im Verlaufe von Infektionskrankheiten sich einstellenden
Symptome als anaphylaktisch angesehen werden muB, and da
gerade auch fQr die Streptokokkenerkrankungen und die bei

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VerBuche uber aktive iind passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 201

ihnen so hfiufigen, auffallenden Temperaturschwankungen eine
Shnliche Vermutung sehr nabe lag, so schien es wQnschens-
wert, sich insofern im Experimente den natflrlichen Beding-
ungen der spontanen Infektionsvorgfinge zu n&hero, als, wie
bei diesen, nicht abgetbtete, sondern lebende Erankheitserreger
in den Organismus eingefflhrt wurden. Dazn kamen aber
noch einige weitere Ueberlegungen, die zu dem gleichen Re-
sultate fQhrten. Eine Reihe yon Autoren, die sich mit der
Herstellnng von Streptokokkenimmunseren befallt nnd darliber
Erfahrung gesammelt haben, wie Marmoreck, Neufeld,
Zangemeister, empfehlen nS.mlicb die Verwendung leben-
der Kulturen als besonders geeignet, um eine krkftige Anti-
kdrperproduktion in Gang zu bringen, was ja bekanntlich ge-
rade bei den Streptokokken nicht immer leicht zu erreichen
ist. Wir hofften daher, auch bei unseren Versuchen durch
Einspritzung lebenden Bakterienmateriales die Chancen fdr
die Entstehung der Antikdrper, speziell der anaphylaktischen
Reaktionskdrper zu verbessern. Was endlich die Benutzung
lebender Bakterien zur Reinjektion der vorbehandelten
Tlere betrifft, so schien uns dieselbe durch die bereits zitierte
Bemerkung von Neufeld und Dold nahegelegt, nach der
das Anaphylatoxin weitaus am leichtesten aus lebenden Bak¬
terien gewonnen werden kann^).

Alle diese Momente mufiten daher eher im Sinne
einer Befdrdernng des anaphylaktischen Zustan-
des bezw. des Eintrittes der Vergiftungserschei-
nungen wirken, als im Sinne einer Verzdgernng oder Hem-
mnng, und lessen es daher als im hdchsten Grade nn-
wahrscheinlich erscheinen, dafi diese Benutzung
von lebenden Bakterien als Ursache unserer ne-
gativen Resnltate anzusehen sein kdnnte.

Kehren wir nun nacb dieser kleinen Abweichung wieder
znr Diskussion der oben erwShnten beiden MOglichkeiten
znrhck und fassen wir zunkchst die erstere derselben ins

1) AUerdiogs scbeint dies nicht fiir alle Bakterienarten Geltung zu
haben, da Friedberger und Schutze bei vergleichenden Versuchen mit
rohen und gekochten Tuberkelbacillen gefunden haben, dafl regelmafiig
die gekochten Bakterien ceteris paribus eine bessere Gift-
ausbeute lieferten (Berl. klin. Wochenschr., 1911, No. 9).

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202

Paul Th. Muller,

Auge, SO sind hier wieder zwei verschiedene FSlle denkbar.
Entweder rdhrt nUmlich der supponierte Mangel an anaphy-
laktischen Reaktionskdrpern bei unseren vorbehandelten Tieren
daher, daB die Streptokokken fiberhaupt nicht be-
f§.higt sind, die Produktion von Antikdrpern
dieser Art auszuldsen, oder aber daher, daB zwar Re-
aktionskdrper gegen StreptokokkeneiweiB gebildet werden, daB
sie aber bei dem eingeschlagenen Immunisierungsverfahren
nur in unzureichender Menge entstehen, und daB es daher
in diesem Falle im Gegensatz zn den anderen
Bakterienarten einer in ganz besonderer Weise
geleiteten, vielleicht auch durch viel Itlngere
Zeit hindurch fortgesetzten Vorbehandlung be-
dhrfte, um anaphylaktische Erscheinnngen aus-
zuldsen.

Wie man sieht, wurde es sich also im erstgenannten
Falle um einen prinzipiellen, quantitativen Unter-
schied zwischen den Streptokokken und den meisten anderen
Bakterienarten handeln. Im zweiten Falle dagegen h§.tten
wir es mit einem lediglich quantitativen Unterschiede
zu tun, der aber immerhin betrSU^htlich genug sein kdnnte,
um praktisch ins Gewicht zu fallen.

Welche von diesen beiden eben besprochenen Eventuali-
t&ten wirklich vorliegt, war natflrlich nur auf experimentellem
Wege zu entscheiden. 1st man geneigt, den einzigen unserer
Versuche, bei denen es zu anaphylaxieMinlichen Krankheits-
erscheinungen kam, als echte Streptokokkenanaphylaxie gelten
zu lassen, so ist naturlich die erstgenannte EventualitBt damit
bereits ausgeschlossen und die Annahme berechtigt, daB ein
prinzipieller Unterschied zwischen den Streptokokken und den
anderen Bakterienarten in dieser Hinsicht nicht besteht. Ob
auch das refraktare Verhalten der Milzbrandbacillen in
der gleichen Weise gedeutet werden darf, ist nathrlich nicht
ohne weiteres zu sagen. Immerhin ist die Annahme sehr
naheliegend, daB bei lingerer Vorbehandlung der Versuchstiere,
die sich nicht, wie bei den Versuchen Sobernheims, auf
eine einzige sensibilisierende Injektion beschrSnken wiirde,
doch auch hier positive Resultate zu erzielen w^en.

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Versuche iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 203

Wie dem auch sei, jedenfalls mufiten die bisherigen Er-
gebnisse meiner Versuche iiber Streptokokkenanaphylaxie dazu
auffordern, die Experimeute unter ver&nderten Bedingungen
fortzusetzen, um festzustellen, ob es vielleicht doch gelingt,
bei l&nger fortgesetzter Immunisierung, eveutuell mit steigen-
den Bakteriendosen, zum Ziel zu kommen und regelmilfiig
eine typische Streptokokkenanaphylaxie hervorzurufen. Ueber
das Ergebnis dieser bereits in Gang befindlichen Experimente
werde ich demnSchst berichten.

Was nun die zweite der frflher dargelegten Mdglichkeiten
betrifft, nach der also zwar die Anwesenheit von Reaktions-
kdrpern im Serum der vorbehandelten Tiere angenommen
vrerden milBte, die aber in diesem speziellen Falle, bei den
Streptokokken, nicht imstande w&ren, aus den Bak-
terienleibern genhgende Mengen von Anaphyla-
toxin in Freiheit zu setzen, so w&re dieselbe zunftchst
wohl als lediglich hypothetisch zu betrachten, ohne dafi einst-
weilen irgendwelche Tatsachen vorlfigen, die eine solche An-
nahme rechtfertigen wQrden. VergegenwHrtigt man sicb jedoch,
daB die Bakterienarten, bei denen die Erzeugung der Ana-
phylaxie auf gewisse Schwierigkeiten gestoBen ist, also sowohl
der Milzbrandbacillus, als die Streptokokken der Bakteriolyse
nicht unterliegen und auch keine bakteriolytischen AntikSrper
zu produzieren vermdgen, dafi also bei ihnen das
Freiwerden von Bakterieninhaltsstoffen in den
Kdrpers&ften weniger leicht erfolgen dfirfte, als
bei anderen Arten, so ynSjce es wohl nicht unbegreiflich,
wenn sie sich auch in bezng auf die Abgabe von Anaphyla-
toxin von den letzteren unterscheiden wiirden, die eben wegen
ihrer leichten Angreifbarkeit und Zerstdrbarkeit durch die
Bakteriolysine rascher und in groBerer Menge anaphylaktisches
Gift in die Umgebung flbertreten lassen kdnnten.

Im Zusammenhang mit dieser Bemerkung darf vielleicht
noch erwfthnt werden, dafi Milzbrandbacillen und Strepto¬
kokken auch insofern in eine gemeinsame Gruppe gehdren,
als sie nach A. Fischer zu den osmotisch permeablen
nicht plasmolysierbaren Bakterienarten zu rechnen sind, bei
denen also osmotische Stdrungen, die zum Austritt von
Bakterieninhaltsstoffen ftlhren, nicht leicht eintreten kdnnen.

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204

Paul Th. Miiller,

Um MifiversUindnissen vorzubeugen, mbchte ich aber bier
gleich betonen, dafi hiermit nicht gesagt sein soli, dab die
bakterioljtischen oder osmotischen Vorg&nge an und ffir sich
irgendetwas mit der Entstebung des Anapbylatoxins zu tun
baben mbBten. Icb mdcbte Tielmebr nur auf die Mdglicbkeit
bingewiesen baben, dail der besondere Ban der be-
treffenden Bakterienarten, die Durcbg&ngigkeit
ibrer Membran fflr die verscbiedenen geldsten
Substanzen sowobl der Korpersbfte wie des Bak-
terieninneren auf die Scbnelligkeit und Intensi-
tbt der Giftproduktion oder die Abgabe des
Giftes an die Umgebung von Einflufi sein kbnnte
und daber trotz gleicber sensibilisierender
F&bigkeitdesBakterieneiweiilesdocbwesentlicbe
Unterscbiede im Verbalten dieser Mikroorga-
nismen beim anapbylaktiscben Versucb bedingen
konnte.

Dafi sicb die Pneumokokken, wie wir aus den Ver-
sucben von Neufeld und Dold wissen, in bezug auf ibre
Fbbigkeit, Anapbylaxie zu erzeugen, den leicbt bakteriolysier-
baren Mikroorganismen anscblieHen, obwobl ibr Immunserum
keine lytiscben Wirkungen auf sie ausQbt, braucbt mit dieser
Annabme nicbt in Widersprucb zu steben. Denn zweifellos
sind die Pneumokokken den Einwirkungen des umgebenden
Mediums bei weitem zug&nglicber, als z. B. die Streptokokken,
wie ja scbon ibre, durcb Neufeld^) zuerst festgestellte Auf-
Ibsbarkeit durcb Galle beweist. Aucb die merkwQrdigen,
gleicbfalls von Neufeld^) bescbriebenen Quellungserscbei-
nungen, welcbe die Pneumokokken unter dem Einflusse des
Immunserums darbieten, lassen eine derartige Sonderstellung
dieser Mikroorganismen als zum mindesten nicbt unwabr-
scbeinlicb erscbeinen.

Ein experimenteller Aufscblufi darbber, ob diese von uns
in Erw&gung gezogene Mbglicbkeit wirklicb zu Recbt bestebt,
ware in der Weise zu gewinnen, daB die sensibilisierten Tiere
nicbt mit den intakten Bakterien, sondern mit

1) Zeitechr. f. Hyg., 1900, Bd. 34.

2) Zeitechr. f. Hyg., 1902, Bd. 40.

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Versache iiber aktive und passive Anaphylaxie bei Streptokokken. 205

eiweifihaltigen Extrakten derselben reinjiziert
wflrden, da man sich wohl vorstellen kdnnte, dafi
nnter diesen Umst&nden, wenn n&mlich die
schwer aufldsbaren Streptokokkenleiber bereits
in anfgeschlossener Form verwendet werden, die
Bedingnngen zur Toxinbildung gtlnstigere sein
kdnnten.

Auch solche Versache sind jetzt im Gange.

Ergebnisse.

1) Weder mit Tavelschem noch mit Menzerschem and
Aronsonschem Streptokokkenirnmnnsernm noch aach mit
dem Seram von vorbehandelten Kaninchen gelang es, bei
Meerschweinchen passive Anaphylaxie gegen Streptokokken zn
erzengen.

2) Aach in vitro lieB sich ans Streptokokken mit Hilfe
der genannten Immansera kein Anaphylatoxin abspalten.

3) Von 13 mit Streptokokken vorbehandelten and nach
21—34 Tagen reiigizierten Meerschweinchen erkrankte nor
eines nnter anaphylaxie&hnlichen Erscheinnngen. 9 dieser
Tiere zeigten nicht einmal einen tieferen Temperatarstarz als
die nnvorbehandelten Kontrolltiere.

4) Ob die Sonderstellnng, die somit den Streptokokken
gegentlber anderen Bakterienarten in bezng anf die F&higkeit,
Anaphylaxie zn erzengen, zaznkommen scheint, anf eine ge-
ringere ^sensibilisierende^ Wirknng ihres Zellinhaltes znrilck-
znfQhren ist, oder aber anf eine geringere Eignnng znr Ab-
spaltnng von Anaphylatoxin ans den intakten Zellindividnen,
mflssen weitere, bereits im Gang befindliche Untersnchnngen
lehren.

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206

L. Polak Daniels,

Nachdruek verboten.

Ueber die Bedentung der Yenrendnlig tou Antigenen rer-
schledener Herkunft bei der Wassermannscben Beaktlon.

Yon L. Polak Daniels,

Prosektor am stadtischen Krankenhause Haag (Holland).

(Eingegangen bd der Bedaktion am 15. April 1911.)

Das Wesen der Wassermannschen Reaktion ist un-
bekannt. Die ursprtlngliche Idee, dafi sie eine Bindung des
Komplementes sei, eine Verankerong des spezifischen Ambo-
zeptors, wie es Bordet und Gengou auffafiten, hat viele
AnhSnger verloren. Die Meinung, dafi diese Reaktion eine
spezifische sein sollte, ist nicht mehr absolut haltbar. Unter
mehreren Grflnden, die dafilr sprechen, daB die Reaktion nicht
spezifisch sei, sind folgende zwei von grQfiter Bedeutnng:

1) Die Reaktion kommt nicht allein bei Syphilis zustande,
sondern sie kann auch bei oder infolge anderer Erankheiten
auftreten, wie bei Scarlatina, Lepra, UrSmie, schwerer Tuber-
knlose, Malaria usw.

2) Man braucht nicht immer ein spezifisch luetisches Ex-
trakt als Antigen zu verwenden; alkoholische Extrakte normaler
Lebern, Muskeln, Herzmuskeln usw., wenn auch nicht mensch-
licher Herkunft, sogar Verbindungen von mehr weniger be-
kannter chemischer Konstitution, wie das Lecithin, kann man
als Ersatz Terwenden.

Meiner Ansicht nach sind diese zwei Grfinde, obwohl ihre
praktische Bedeutung unanfechtbar zu sein scheint, nicht
stichhaltig.

Von Neisser, Brnck und Schucht ist eine Methode
angegeben, um die Stfirke der Reaktion zu bestimmen. Eine
bestimmte Einheit, wonach man die StBrke der Reaktion mifit,
gibt es nicht Genannte Autoren machen die Wertbestimmung
der Sera in der Art, daB sie das antikdrperhaltige Serum eines
Luetikers in vacuo eintrocknen und als Standardsernm auf-
bewahren. Mit diesem, an einem Standardantigen (hereditlU’-
Inetischem Fbtalleberextrakt) austitrierten Serum, werden andere
zu prttfenden Seren auf ihren Antikdrpergehalt gemessen.

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Verwendung von Antigenen Terschiedener Herkunft etc. 207

Nachstehendes Protokoll veraDschanlicht dieses Verfahren.

Standard-

antigen

0,1 Standard-
serum

0,1 Serum eines
selnind. Luetikers

0,1 normales
Menschenserum

0,2

0,1

0,075

0,05

0,025

0,01

0,005

TdUige Hemmung

vSllige Hemmung

komplette Ldsung

fast Hemmung
inkompL Losung
komplette Losung

in^ompl. £,58ung
komplette Ldeung

» 1

» 97

99 99

??

99 99

99 99

99 99

Sormani^) hat nach diesem Prinzip die Dosieruog ge-
&ndert; immer arbeitend mit demselben Antigen hat er in
dieser Weise die Stfirke vieler Seren von Luetikern in ver-
schiedenen Stadien bestimmt.

Wenn man weifi, 'wieviel Antigen man brancht, bis spontan
keine Hemmnng anftritt, und dann die H^te des gefnndenen
Wertes nimmt, so kann man mit einer physiologischen NaCl-
Ldsnng eine Verdhnnung bis anf 1 ccm herstellen, die diesem
Quantum entspricht. Die Probe wird dann fhr jedes Serum
nach nachstehendem Protokolle angestellt.

Bdhr-

No.

Verdunntes

Antigen

ccm

Serum

ccm

Physiolog.

NaCl-LSsung

ccm

V-oKom-

plement

ccm

Besoltat

1

1,0

0,1

0,9

1,0

s

t 51I. Hemm.

2

0,8

0,1

1,1

1,0

OD

99 99

3

0,6

0,1

1,3

1,0

99 99

4

0,4

04

1,5

1.0

99 99

5

0,2

0,1

1,7

1,0

99 99

6

0,2

1,8

1,0

'o

Ldsung

7

1,0

0,1 normales

0,9

1,0

S

99

8

1,0

1,0

n

99

Obwohl diese Titrierung gar keinen absoluten Wert be¬
stimmt, kann man sie, wenn man immer dasselbe Antigen
nimmt, verwenden. Nehmen wir an, dafi ein Serum, welches
sich verh&lt wie im obenstehenden Protokoll, 100 Proz. der
Antikdrper enthlilt; ein Serum dagegen, welches in RShrchen
1—3 eine Hemmung zeigen whrde und im 4. und 5. schon
komplette L5snng, h&tte dann im Vergleich damit nnr 60 Proz.
der Antikdrper.

1 ) Nederl. lijdBchr. v. Geneesk., 1909.

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208

L. Polak Daniels,

Wenn man diese Methods mit demselben Serum, jedoch
mit 2 Antigenen verschiedener Herkunft ausfdhrt, und diese
beiden Wassermannschen Reaktionen mit alien zu unter-
suchenden Seren ausfQhrt, so wird man finden, dafi ein Antigen
luetischer Herkunft fast immer st&rker positiv reagiert als
der Ersatz. Ab und zu verhtUt es sich aber umgekehrt, wie
diese Protokolle zeigen.

E5hr-

chen

No.

Antigen

(aLkoholiscL Cavia-
herzextrakt

Serum

(Lues)

Physiol.

NaCl-

Ldsung

VtoKom-

plement

Besultat

ccm

ccm

ccm

ccm

1

1,0

0,1

0,9

1,0

vdll. Hemmung

2

0,8

0,1

1,1

1,0

3

0.6

0,1

1,3

1,0

9 * 99

inkompl. Losung

4

0,4

0,1

1,5

1,0

s

5

0,2

0,1

1,7

1,0

1

kompl. „

6

2,0

1,0

00

QQ

99 99

Antigen

1 (alkohol. nereditar

s

M

luet Leberextrakt

o

.22

7

1,0

0.1

0,9

1,0

vdll. Hemmung

8

0,8

0,1

i 0,1

1,0

i

:o3

99 99

9

0,6

0,1

1,3

1,0

99 99

10

0,4

0,1

1,5

1,0

w

kompl. L5sung

11

02

0,1

1,7

1.0

J? 99

12

2,0

1,0

99 99

13

0,2

1,8

1,0

1 99 99

Man erh9,lt also bei diesem Serum, wenn man das Cavia-
herzextrakt verwendet, die Wassermannsche Reaktion
bei 70 Proz., und wenn man das heredit&r luetische Leber-
extrakt verwendet, bei 60 Proz.

Es kommen auch Seren vor, bei denen es gar nicht gelingt,
mit dem luetischen Leberextrakt eine Bindung zu bekommen,
und diese bei der Verwendung von alkoholischem „Meer-
schweinchenherzextrakt** doch prompt auftritt.

Ich kann diese Erscheinung in keiner anderen Weise er-
klSren, als durch die Annahme, dafi es sich bei Verwendung
von Extrakten verschiedener Herkunft, sowohl luetischer wie
nicht-luetischer, um verschiedenartige Reaktionen handelt. Es
l&fit sich dieses verschiedenartige Verhalten schwerlich als ab-
hfingend von quantitativen Unterschieden in der Konzentration
der Extrakte denken. Wfire dieser Unterschied ein qnanti-

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Verwendung von Antigenen verBchiedener Herkunft etc. 209

tativer, dann mfifite die Reaktioo immer stUrker mit demselben
Antigen sein und immer schw&cher mit dem anderen. Sogar
wenn das Inetische Antigen immer eine stSrkere Reaktion
heryorrufen wQrde, dann noch wilre die Annahme, dafi es sich
urn rein quantitative Unterschiedsverhfiltnisse handelte, nicht
erlaubt.

Wfihrend es nnn, wie oben scbon betont, nicht immer
vorkommt, dafi das luetische Extrakt st&rker bindet als das
nicht-luetische, so ist dock das umgekehrte Verbfiltnis viel
seltener. Es ist meiner Ansicht nach denn auch ganz an-
nehmbar, dafi, obgleich natflrlich die spezifisch syphilitische
Ifatnr des Extraktes eine grofie Rolle spielen wird, noch etwas
ganz Besonderes ffir jedes Serum hinzukommt. Dieses Be-
sondere, das jedes syphilitische Serum an sich hat, zeigt sich
klar in den Ffillen, wo ein nicht luetisches Extrakt besser zu
reagieren vermag, als ein geprOftes, gutes, luetisches Leber-
extrakt, denn hier kann zweifelsohne nicht der luetische
Charakter des Extraktes daran schuld sein. Noch viel weniger
ist dieses anzunehmen, wenn ein Serum sicher luetischer Her¬
kunft mit einem luetischen Leberextrakt gar nicht und mit
■einem Caviaherzextrakt prompt reagiert.

Im folgenden mbchte ich noch mehrere Grfinde aufftlhren,
urn zu betonen, dafi die Komplementbindungsreaktion nach
Wassermann eigentlich aus mehreren Reaktionen besteht.

Zunfichst mufi ich aber meine Arbeitsmethode, die mich
zu obengenannter Annahme veranlafite, auseinandersetzen.

Mit derselben Menge eines syphilitischen Serums versetzt
man mehrere Antigene verschiedener Herkunft. Bevor man
aber ein zweites Antigen hinzufflgt, mufi man die Gewifiheit
haben, dafi das syphilitische Serum mit dem ersten Extrakt
gesilttigt sei. Man mufi also eine Methode haben, wobei man
1) eine bestimmte Menge eines syphilitischen Serums mit einer
Antigenart sfittigt uud 2) nachher zu diesem ein Quantum ei^es
andersartigen Antigens hinzufflgt.

Wenn wir die Wassermannsche Syphilisreaktion in der
flblichen Weise als eine Antigen-Ambozeptorenwirkung des
syphilitischen Serums auffassen und nns dabei denken, dafi
oin syphilitisches Antigen spezifisch Inetische Rezeptoren be-

Zelltohr. t ImnaiiltKtiforflcbttiif. Orif. Bd. Z. 14

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210

L. Polak Daniels,

sitzt, SO tritt jetzt an uns die Frage, ob es iiberhaupt m5g-
lich sei, dafi, nachdem zu einem syphilitischen Serum syphili-
tisches Antigen hinzugeftigt und daran gebunden worden ist,
freie Ambozeptoren ubrig bleiben.

Als bekannt darf vorausgesetzt werden, dafi bei der
Wassermannschen Reaktion immer darauf zu achten ist,
dafi man nur die Hfilfte eines spontan gerade nicht mehr
hemmenden Quantnms des Antigens und des zu untersuchenden
Serums verwenden darf. Haben wir einmal diese Quanta
bestimmt, dann verdtlnnen wir die zu verwendende Menge des
Antigens bis auf 1 ccm mit einer pbysiologischen NaCl-L6sung.

Jetzt gestaltet sich die Versuchsordnnng wie im folgenden;

Wir bringen in mehrere Beagenzrohrchen 0,1 ccm syphilitiscbea
Serum, 1 ccm des verdunnten Antigens und 0,1 ccm des Eomplementes;
erwkrmen diese Mischung wahrend 1 Stunde bei 37 ° C. Dann wird in das
erste Bdhrchen die ndtige Menge des h&molytischen Systems gebracht,
gerade so, wie bei einer gewbhnlichen Wassermannschen Beaktion. Zur
gleichen Zeit bekommen alle anderen BShrchen 1 ccm derselben Antigen-
menge und 0,1 ccm des Eomplementes. Nachdem das Ganze nun wieder
1 Stunde bei 37*’ C erwarmt worden ist und man gesehen hat, dafi der
Inhalt des ersten Bohrchens nicht h^olytisch geworden ist, wird das
hamolytische System in das zweite Bohrchen getan und bekommen alle
anderen Eohrchen wieder 1 ccm des Antigens und 0,1 ccm des Eom¬
plementes. Nun kommt das Ganze wieder wkhrend 1 Stunde bei 37* C
und wenn auch dann keine Hamolysis des zweiten Bdhrchens wahrgenommen
wird, bekommt das dritte das hamolytische System und bekommen alle
iibrigen Bdhrchen znm dritten Male 1 ccm der Antigenmenge und 0,1 ccm
des Eomplementes. So fahrt man immer weiter, bis man endlich auf ein
Bdhrchen mit HSmolysis kommt. Gerade in diesem Momente sind alle
Ambozeptoren des Serums, welche sich unter Bindung des Eomplementes
zur Verankerung des gebrauchten Antigens eigneten, gesattigt, so dafi das
zuletzt dabei gebrauchte Eomplement frei bleibt und eine Hamolysis zu
erzeugen imstande ist.

Diese Reaktion braucht aber eine Eontrolle, damit man
wisse, dafi sich wirklich das Antigen dem Serum gebunden
hat Diese KontroUe werde ich unten besprechen. Znerst
scheint es mir bequemer, erst die Frage zu Idsen, ob man
jetzt noch mit einem zweiten Antigen anderer Herkunft
Bindung zu erzeugen vermag.

Also wenn der syphilitische Ambozeptor des Serums an
das spezifische Antigen verankert ist und alle diese Ambo-

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Yerwendung von Antigenen yerschiedener Herkunft etc. 211

zeptoren gesfittigt sind, mflssen mr erproben, ob es gelingt,
mit einem nicht aus syphilitischen Organen bereiteten Antigen
auch wieder Eomplement zu binden. Wenn z. B. in dem
6. Rbhrchen erst eine H&molysis eingetreten ist, dem also
6mal dieselbe Menge Antigen und Komplement beigeftigt
worden ist, dann war in diesem Rdhrchen das Komplement
frei, was sich eben zeigte durch das Auftreten der H&molyse.
Setzt man dem 7. Rbhrchen keine nene Menge desselben
Antigens, sondern eines Antigens aus nichtsyphilitischen Lebern
bereitet, hinzn, dann ist dieses Antigen noch imstande, das
Eomplement an das Serum zu binden. Die Arbeitsmethode
und Resultate verdeutlicht nachstehendes Protokoll.

In diesem Protokoll bedeutet:

A* = bis auf 1 ccm verdiinntes alkoholisches Antigen, aus syphilitischen
Lebem bereitet

A* = bis auf 1 ccm yerdiinntes alkoholisches Antigen, aus Meer-
schweinchenherzen bereitet

S = Serum eines Syphilitikers.

C = 1 ccm eines 10-&ch verdunnten Eomplementes.

Ham. = Hammelblutkdrperchen + hamolytisches Serum.

Rbhr-

chen

No.

Nach

1 Std.
bei

37* C

Nach

2 Std.
bei

37* C

Nach

3 Std.
bei

37® C

Nach
4 Std.
bei

37* C

Nach
5 Std.
bei

37* C

Nach
6 Std.
bei

37* C

Nach
7 Std.
bei

37* C

Resultat

1

2

S+A*+C

dgl.

Ham.

A“

vdllige Hemmung

yy yy

3

A*+0

yy

yy yy

4

5

yy

yy

dgl.

yy

A*+C

yy

nac^ 3 Std. eine

Spur von Ldsimg

6

yy

yy

dgl.

A“

Hun.

vdllige Hemmung

7

yy

yf

yy

A‘+C

yy

vdllige Ldsung,

2 Btunden spater

8

yy

yy

yy

dgl.

A“

Ham.

vdllige Hemmung

9

yy

V

yy

yy

A*+C

yy

komplette Ldsung
na<m 1 Stunde

10

yy

yy

yy

dgL

A“

Ham.

unvoUk. Hemmg.

11

1 yy

yy

yy

yy

A'+C

yy

komplette Ldsung

12

yy

yy

yy

yy

yy

d^.

A*

Hhm.

yy yy

13

yy

yy

1 yy

yy

yy

yy

A*+C

yy

yy yy

In diesem Protokolle sind beide Versnche zngleich dar-
gestellt, daher ist sofort das A° zum S+A*-|-C-Gemenge nach
1 Stnnde beigeftigt.

14*

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212

L. Polak Daniels,

Besprechen wir jetzt die Kontrollreaktionen, woven oben
die Rede war: 1) Ich babe schon angedeutet, dafi uns noch
der Beweis fehlt, dafi die S^ttigung des Antigens wirklich
daranf hinweist, dafi ganz bestimmt das Antigen gebunden
worden ist. Es kbnnte nSmlich auch mdglich sein, dafi sich
allein das Komplement dem frfiheren Gemisch von Serum,
Antigen und Komplement angeheftet h&tte. Das Gemisch der
gebrauchlichen Mengen Serums, Antigens und Eomplementes
vertrfigt, nachdem sich dieses in einer Stunde bei 37® C ge¬
bunden hat,, noch einmal den Znsatz von der gleichen Menge
des Komplementes. Diesen etappenfSrmigen Zusatz des Kom-
plementes allein vertrftgt es nicht nur einmal, sondern oft mehr-
mals; dies ist sehr verschieden und scheint sich der St&rke
des syphilitischen Serums nach zu ^ndern. Jedenfalls gelang
es mir nie, in alien F&llen, wo ich es untersuchte, so oft das
Komplement allein hinzuzusetzen, als das Komplement mit
Antigen zusammen ^). Hieraus darf man schliefien, dafi es sich
beim jedesmaligen Hinzuftlgen von Antigen und Komplement
wirklich um eine S&ttigung mit dem ersteren handelt

Zweitens kann man den Einwurf machen, dafi es sich beim
Gebrauch des zweiten Antigens nicht um eine Bindung des-
selben mit dem dazu passenden Ambozeptor des Serums
handelt, sondern dafi durch das Zusammentreffen der zwei
Antigenarten eine Komplementresorption znstande kam. Dieser
Fehler wSre mdglich; ich habe mich aber immer davon ilber-
zengt, dafi ich nie Antigene verwendete, welche untereinander
eine Komplementbindungsreaktion erzeugen kdnnten. Ebenso
gelang es mir nie, statt eines syphilitischen Serums ein
normales Serum oder physiologische Salzldsung mit einem
positiven Erfolg zu verwenden.

Man kann diese Reaktion auch in umgekehrter Folge ans-
fahren, indem man zuerst das Serum mit einem aus nicht-
syphilitischen Organen bereiteten Antigen s&ttigt, daran noch
ein Antigen syphilitischen Ursprunges bindet. Nachstehendes
Beispiel ist einer Versuchsanordnnng mit demselben Serum,
wie in voriger Tabelle, entnommen.

1) Weil ich mich nicht gleich im Anfang bedacht hatte, dafi diese
Kontrolle notwendig sei, ist sie nicht in alien Versuchen angestellt worden.

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Verwendung von Antigenen verschiedener Herkunft etc.

213

lUihx-

chen

No.

Nach

Nach

Nach

Nach

Nach

Nach

Nach

■

1 Std.
bd

2Std.

bei

3 Std.
bei

4Std.

bei

5 Btd.
bei

6Std.

bei

7 Std.
bei

BesiUtat

37® C

37® C

37® C

37® C

37® C

37® C

37® C

1

A-+S+C

A-

voll. Hemmung

2

dgl.

V

A"+C

Ham.

If

3

dgl.

A*

Haro.

yy yy

4

}}

yy

A“+C

Ham.

yy yy

5

>>

fy

dgl.

A*

Hiim.

yy yy

6

yy

yy

A“+C

Hiim.

nach 2 Std. Spur

7

yj

yy

yy

dgl.

A*

Ham.

Hamolysis
voll. H^mung
nach 1 StkompL

8

yy

yy

yf

yy

A"+C

Haro.

9

»

yy

yy

dgl.

A*

Ham. i

Hamolysis
v5ll. Hemmung

10

)y

yy

1 yy

yy

yy

A»+C

H^.

Hamolysis

11

yy 1

1 yy

yy

yy

dgl.

A*

Ham.

yy

12

yy

1

yy

1

yy

yy

yy

yy

A"+C

Ham.

yy

13

yy

yy

yy

yy

yy

dgl.

A-

14

yy

yy

yy

yy

yy

yy

yy

A"+C

Alle diese Versuche lassen mit gaoz gleichen Resultaten
sich viel eiufacher veranstalten.

Wenn man weiB, daB ein Quantum, z. 6. 0,1 ccm eines
luetischen Serums, mit dem Caviaherzextrakt, sowie mit dem
luetischen Leberextrakt positiv reagiert, kann man austitrieren
mit welchem kleinsten Quantum dieses Serums man mit beiden
Extrakten noch gerade eine positive Reaktion bekommt.
Ftlhrt man mit diesen kleinsten Mengen des Serums dieselbe
oben beschriebene Probe des etappenfdrmigen Zusetzens des
Antigens und Komplements aus, so ergibt sich, daB schon
nach Imaliger oder 2maliger Zusetzung des Antigens und
Komplements die Reaktion beendet ist.

Bei mehreren syphilitischen Seren babe ich immer bei
diesen Versuchen genau dieselben Resultate bekommen. Immer
gelingt es, nachdem man ein syphilitisches Serum mit einem
aus syphilitischen Organen bereiteten alkoholischen Extrakt
geshttigt hat, daran mit einem andersartigen Antigen ein
Eomplement winder zu binden. Auch umgekehrt gelingt .es
immer, nachdem man ein syphilitisches Serum mit einem nicht-
spezifischen Antigen geskttigt hat, damit noch eine positive
Wassermannsche Reaktion mit einem syphilitischen Antigen
ansznfhhren.

Wenn es sich nun bei der Wassermannschen Reaktion
nm eine Eomplementbindung in der uns gel&nfigen Auffassung

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214

L. Polak Daniels,

der ErklSrung der Reaktion handeln sollte, so lifit sich aus
dem oben Gesagten folgendes schliefien.

Nacbdem man in ein Quantum eines syphilitischen Serums
die nichtsyphilitischen Ambozeptoren mit alkoholischem Antigen
nichtsyphiiitischen Ursprungs verankert hat, gelingt es noch,
darin spezifische Ambozeptoren zu finden; dieselben kann
man dann mit einem alkoholischen luetischen Leberextrakt
aufdecken. Auch wenn man annShme, dafi das Komplement
einfach absorbiert wurde, so zeigen meine Versuche, daB es
in einem syphilitischen Serum mehrere Stoflfe gibt, welche,
sobald sie mit alkoholischen Organextrakten in Berflhrung
kommen, imstande sind, Komplemente zu absorbieren. Aus
diesen Versuchen geht hervor, daB sich jedenfalls fflr syphi-
litische und nichtsyphilitische Organextrakte verschiedene Re-
zeptoren im luetischen Serum befinden.

Nun gibt es aber syphilitische Seren, welche mit einem
Antigen nichtsyphilitischen Ursprungs gar keine Wasser-
mannsche Reaktion zeigen. Es ist selbstredend, daB ich
damit keine Versuche habe anstellen kbnneu, und meine
Schlfisse sich darauf auch nicht beziehen. Umgekehrt gibt
es Seren, welche nicht von Syphiliskranken herstammen und
eine positive Wassermannsche Reaktion zeigen. So kennen
wir das Vorkommen einer Wassermannschen Reaktion bei
Malaria, Lepra, Framboesia, schweren FS.llen von Tuberkulose,
ur&mischen Zustanden usw., auch wenn von einer Syphilis
gar nicht die Rede ist, wie ich schon ein gangs betonte.
Obwohl ich nicht in der Lage war, solche Seren zu unter-
suchen, so kann ich doch sagen, daB sich hier die bei der
Wassermannschen Reaktion reagierenden Gifte als Pro-
dukte anderer Krankheiten in der Zirkulation befinden. Diese
Krankheitszust&nde sind die AeuBerungen einer allgemeinen
Krankheit, wobei mehrere wichtige Organe angegriffen sind
und wodurch die Organprodukte sehr verSndert werden.
Dasselbe gilt von der Syphilis, so daB es sehr begreiflich ist,
daB auch hier eine Ueberschwemmung eigenartiger Organ¬
produkte in die Gewebsstfte auftritt. Wie man sich nun auch
die Wassermann sche Reaktion mit einem Antigen nicht¬
syphilitischen Ursprungs denken will, nSmlich ob es sich um
Autoisolysine degenerierter Organe und Organprodukte handelt

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Venvendung von Autigenen verschiedener Herkunft etc. 215

Oder nicht, sicher ist es, dafi bei diesen schweren Allgemein-
krankheiten Stofife in der Zirkulation vorhanden sein kOnnen,
welche, sobald sie mit alkoholischen Organextrakten zusammen-
kommen, ein Komplement zu binden vermdgen. Auch bei
Syphilis brauchen die Stoffe mit dem ursprQnglichen Krank-
heitserreger nicht in direktem Zusammenhang zu stehen; sie
sind Nebenprodukte, zu deren Entstehung das syphilitische
Virus die Veranlassung gibt, wie zu der Entstehung rein
spezifischer Antistoffe. Diese letzteren sind sehr wahrschein-
lich vorhanden; die besseren Resultate einer Wassermann-
schen Reaktion bei Verwendung luetischen Leberextraktes als
Antigen sprechen sehr dafOr. In dem Momente aber, wo
man die Wassermannsche Reaktion anstellt, sind die
spezihschen Antistoffe nicht immer mehr da, man kann dann
noch eine positive Reaktion bekommen, welche wir dann auf
Rechnung der noch anwesenden Nebenprodukte stellen. In
den Fallen kann es gelingen, dafi nicht spezifisch luetische
Antigene ein besseres Resultat geben. Zu diesen Neben-
produkten rechnen wir auch diejenigen Substanzen, welche
mit Lecithin und derartigen chemischen Verbindungen eine
Komplementabsorption zu bewirken vermdgen. Diese Kom-
plementabsorption kann keine Ambozeptorenwirkung sein,
weil das Lecithin nicht als ein echtes Antigen zu be-
trachten ist.

Zusammenfassung.

Aus alien meinen Versuchen und Ueberlegungen meine
ich zu der Annahme berechtigt zu sein, daB im Grunde das
Wesen der Wasserman nschen Reaktion beim Gebrauche
von Antigenen verschiedener Herkunft ein nicht identisches
ist. Diese Annahme spricht daffir, daB man die echte
Wassermannsche Reaktion als eine spezifische auffassen
darf, wBhrend dieselbe Reaktion, bei anderen nichtsyphilitischen
Krankheiten auftretend, im Wesen der Reaktion eine andere
Bedeutung hat. Jedoch spricht auch das Resultat einer posi-
tiven Wassermannschen Reaktion bei Verwendung von
Ersatzantigenen nicht gegen die Diagnose der Syphilis.

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216

E. Friedberger und S. Mita,

Nachdruek verboUn,

[Aus dem Pharmakologischen Institut der Universit&t Berlin;
Direktor: Geheimrat Prof. Dr. A. Heffter (Abteilung ftlr Im-
munit&teforschang und ezperimentelle Therapie, Leiter: Prof.

Dr. K Friedberger).]

Ueber Anaphylaxie.

XVIII. Mitteilung.

Die anaphylaktieche Fieberreaktion.

Von E. Friedberger and S. Mita (Tokio).

Mit 43 Kurven im Text.

(Eing^angen bei der Redaktion am 17. April 1911.)

Auf der Naturforscherversammlnng in Kdnigsberg im
Jahre 1910 berichtete Friedberger dber das eigentdmliche
Verhalten von mit EiweiB prSparierten Tieren bei der Re-
injektion infinitesimaler Mengen der homologen Eiweifikdrper
im Vergleich zu unprkparierten Kontrolltieren. Er demonstrierte
damals (Sitzung der hygienischen Sektion am 21. September;
Allgemeine Sitzung am 22. September) die verschiedenartigsten
Fieberkurven, die bei mit verschiedenen Eiweifiarten prS-
parierten Tieren durch die Reinjektion des homologen EiweiB-
kbrpers gewonnen worden waren. Eine vorlkufige Mitteilung
fiber die wichtigsten unserer Ergebnisse erfoigte kurz darauf
in der Berliner klin. Wochenschr., 1910, No. 42. (Vgl. auch
den Vortrag von E. Friedberger, Verein fQr innere
Medizin in Berlin, 9. Januar 1911, Deutsche med. Wochen-
schrift, 1911, No. 11. Daselbst sind auch einige Kurven
reproduziert.)

DaB artfremdes EiweiB in grbBeren Dosen Temperatur-
sturz und Tod, in kleineren Fieber bedingt, ist seit langem
bekannt. Neu ist aber und zunkchst unerwartet die millionen-
fache Steigerung auch der Fieberreaktion beim prfiparierten
Tier. Doch wollen wir im nachstehenden zunftchst die von
uns ansgeffihrten Versuche schildern und erst im AnschluB

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Ueber Aoaphylaxie.

217

(laran die theoretische Bedeutang der Ergebnisse diskatieren.
Dabei wird auch zugleich die einschl&gige Literatur eine nfihere
Besprechung finden.

Es war eine zuffillige Beobachtung, die uns veranlafite,
den EinfluB minimaler EiweiBmengen auf die Kbrpertemperatur
bei prBparierten Tieren im Vergleich zu normalen Kontrollen
zn untersnchen. Wir batten eine Reihe mit Hammelserum prtl-
parierter Kaninchen auf aktive Anaphylaxie gepriift. Soweit
die Tiere die Reinjektionen Qberstanden, untersuchten wir
nach 24 Stnnden bei nochmaliger Zufuhr des gleichen EiweiBes
anf das Bestehen einer eventuellen Antianaphylaxie. Es handelte
sich bei diesen Versucben um die Nachprttfung der auffBlligen
Angaben in der Literatur, wouach beim Kaninchen Antiana¬
phylaxie nicht zustande kommen soli, eine Behauptung, die, wie
wir auf Grund unserer zahlreichen eigenen Versuche (vgl. auch
Friedberger und Grbber, XL Mitteilung ttber Anaphy¬
laxie, diese Zeitschr., Bd. 9) feststellen mflssen, voll-
st&ndig unbegrilndet ist. Da auch in den nachstehenden
FBllen, wie zn erwarten, die zum zweiten Mai reinjizierten
Tiere im Gegensatz zu ihrem Verhalten bei der 24 Stunden
zuvor erfolgten ersten Reinjektion keinerlei ausgesprochene
Symptome einer Krankheit zu erkennen gaben, so nahmen wir
bei ihnen noch genauere Temperaturmessungen im Rectum vor,
da wir immerhin an die Mdglichkeit dachten, wenigstens durch
den von H. Pfeiffer und Mita zuerst stndierten Temperatur-
sturz noch das Weiterbestehen einer Anaphylaxie nachweisen
zu kdnnen. Denn da das Kaninchen an sich weniger empBlng-
lich ist als das Meerschweinchen, so schien uns das Ausbleiben
markanter, objektiv wahmehmbarer Symptome zunBchst nicht
absolut beweisend und wir benutzten die Temperaturmessung
als ein feineres Reagens. Zu unserer grdBten Ueberraschung
konstatierten wir aber bei den mittels einer dritten Injektion
anf Antianaphylaxie geprfiften Tieren keinen Temperatur-
sturz, sondern eine ausgesprochene Steigerung fiber die
Norm, wie sie ffir die Antianaphylaxie inzwischen auch un-
abhfingig von uns H. Pfeiffer gefunden hat. In der nach¬
stehenden Tabelle I der Versuchsreihe 1 sind diese Experi-
mente zusammengestellt.

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218 E. Friedberger und S. Mita,

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Ueber Anaphyiaxie. 219

Am Tage nach der Bebjektion erfolgt die dritte Injektion mit den
gldchen Dosen wie am Tag zuvor zur Priifung auf Antianaphylaxie.

Vereuch

No.

No. des
Tieres

Eeinj.-Dosis
pro Tier

Sym-

ptome

vorher

Tempe

1

mtur

1 nachher

1

ccm

15'

30'

1 45'

60'

1 75'

I

M

22

1,17

0

38,8 0

l38,8“

40,0“

40,2“

II

M

20

3,4

0

38,0“

138,1 “

38,5“

38,7“

39,0“

39,5“

m

M

32

7,0

0

39,0“

39,0“

39,3 “I

40,0“

40,2“

40,2“

IV

M

27

6,0

0

38,0“

38,2“

39,0 “|

39,1“

39,2“

VI

M

21

8,0

0

38,2“

38,3“

38,5“

39,0“

VII

M

23

4,0

0

38,0“

38,3“

3y,0“

VIII

M

16

8,0

0 i

38.4“

38,5"

39.0“

IX

M

19 1

8,0

0

38,2“

37,5“

37,8“

38,3"

X

M

28 1

9,0

0

38,0“

38,0“

38,1 “!

38,2“

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XI

M

24 1

11,0

0

38,8“ I

38,8 “j

39,0“

39,0 “1

1

XIV

M

31 :

8,0

0

39,0“ '

39,0“

39,0“

39,0“

XVI

M

30

5,0

0

38,5“ i

i38,6“.

39,0“!

XVIII

M

17 1

10,0

0 i

38,0“ ■

39,1“:

40,0 “i

40,0“

40,0 “|

1

Es ergibt sich also aus vorstehender Tabelle, daC die zur
Priifung auf Antianaphylaxie eingespritzte Dosis des homo-
logen EiweiBes weder sichtbare Erankheitssymptome noch Tem-
peratursturz, sondern fast in alien FMlen eine betriichtliche
Steigerung der Temperatur bis um 2° fiber die Norm (Ver-
such No. XVIII) hervorgerufen hatte. Eine Erklfirung ffir
diese Tatsache suchten wir auf Grund unserer Auffassung
fiber das Wesen der Antianaphylaxie zu gewinnen.

Nach Friedberger istja die Antianaphylaxie gewisser-
mafien eine Anaphylaxie refracta dosi, d. h. sie beruht auf
einem partiellen Antikdrperverbrauch durch die Reinjektion,
so dafi das Eiweifi bei der dritten Injektion nicht mehr Oder
nur unvollkommen durch die geringe Menge der noch vor-
handenen Antikdrper abgebaut werden kann. Es kommen
dann eben auch von noch so grofien Mengen des bei der
dritten Injektion eingeffihrten Eiweifies nur soviel ffir den
Organismus im Augenblick in Frage, als mit den Ueberresten
der Antikdrper zu reagieren vermdgen. Diese kleinen Mengen
aber schienen Fieber zu erzeugen. WardieseVorstellung
richtig, so mufite es beim prfiparierten Tier von
vornherein gelingen, bei Verwendung ent-
sprechend minimaler Eiweifimengen primfir
Fieber hervorzurufen.

Nun wissen wir freilich aus den Untersuchungen von
Pfeiffer und Mita, dafi im Gegenteil beim aktiv pra-

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220

E. Friedberger und S. Mita,

parierten Tier untertddliche Dosen einen betrftchtlichen T e m -
peratursturz zur Folge haben und sogar noch scheinbar
sehr kleioe Dosen des homologen Eiweifi diesen hervorrufen.
Das ist ja nicht weiter verwunderlich in Anbetracht dessen,
dafi schon die todliche Dosis bei der Reinjektion relativ
niedrig liegt.

Aber die Wirkung von Dosen, die jenseits der Grenze
liegen, die gerade noch Temperatursturz hervorrnft, war seit-
her beim pr&parierten Tier Qberhaupt noch nicht systematisch
untersucht worden. Auf Grand der Ergebnisse bei der Anti-
anaphylaxie des Eaninchens stellten wir nun entsprechende
Versuche am Meerschweinchen an.

Zur Technik sei kurz folgendes bemerkt: Fflr die PrS-
parierung benutzten wir ausschliefilich gesunde, zuvor nie
gebrauchte Meerschweinchen von ca. 200—300 g K6rper-
gewicht. Die Pr§.parierung geschah durchgehend subkutan
mit 0,01—0,02 ccm artfremden Eiweifies, meist Hammelserum
Oder Pferdeserum, das stets frisch mdglichst bald nach der
Entnahme verwandt wurde.

Die Reinjektion erfolgte in der Regel friihestens nach
10 Tagen intravends in die freigelegte Vena jugularis oder
intraperitoneal mit abgestumpfter Kaniile, urn Verletzungen
des Darmes zu vermeiden.

In einer Zahl von Versuchen haben wir auf absolute
Keimfreiheit des zur Injektion benutzten Serums (Filtration
durch Kerzen) wie auf strenge Asepsis bei der Operation
geachtet, um mit Sicherheit auszuschliellen, dah es sich bei
einer eventuellen Temperatursteigerung um sekundSre Infektion
handelt. Wir beobachteten jedoch, dad die Temperatursteige¬
rung im Gefolge der Injektion bereits nach 15—30 Minuten
auftritt und weit vor jener Zeit, zu der wir eine Bakterien-
entwicklung im Organismus (auch allerfriihestens) annehmen
durften, bereits wieder vdllig abgeklungen war. So haben wir
spfiter auf absolute Keimfreiheit wegen der groden technischen
Schwierigkeiten verzichtet, da sie in unseren Versuchen be-
langlos war. Doch sei hervorgehoben, dad wir das zur Re¬
injektion benutzte Serum gleichwohl mdglichst frisch und
keimfrei verwandten. Die Kochsalzldsung, die zur Ver-
dunnung des Serums benutzt wurde, war natQrlich steril und

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Ueber AnaphylaxLe. 221

ebenso wurden die VerdttnnuDgen des Serums mdglichst steril
hergestellt.

Die Mengen, durch die wir noch Fieber hervorrufen konnten,
waren im fibrigen meist derartig gering, dafi vereinzelte sapro-
phytiscbe Keime im Serum keineswegs bei den angewandten
Verdiinnungen unsere Resultate irgendwie beeinflussen konnten.
Dazu kam noch, daG bis zu lOOOOOmal grSGere Mengen des
gleichen Serums bei den prGparierten und den als KontroUen
benutzten Normaltieren kein Fieber hervorriefen.

£s sei noch hervorgehoben, daO alle Injektionsflfissigkeiten
annUhernd auf KQrpertemperatur erw^rmt waren. Sofern das
Volumen weniger als 1,0 ccm betrug, wurde stets auf 1,0 ccm
mit physiologischer Eochsalzldsung aufgefflllt.

Soweit wir das Antigen intravends injizierten, geschah es
stets in die freigelegte Vena jngularis. Fine Fesselung des
Tieres zur Ausfithrung der Operation erschien uns fQr qnan-
titatives Arbeiten unerl&Blich, da man beim nicht gefesselten
Tier immer Gefahr l&uft, daG die Flussigkeit nicht ganz in die
Blntbahn gelangt. Mit der Fesselung an sich ist bekanntlich
eine S e n k u n g der Temperator verknflpft, die von der Daner
dieser Prozedur abh&ngig ist. Schon aus diesem Grunde waren
wir bestrebt, die Operation mbglichst gleichm&Gig, vor allem
auch bezflglich der Dauer, in den einzelnen Versnchen
zu gestalten.

Bei der von uns gefibten Technik wilhrte
der gesamte Eingriff dnrchschnittlich gleich-
mftGig etwa 3 Minuten. Dabei ist natflrlich
ein gewisser Abfall der Temperatur unter
die Norm nicht zu vermeiden. Das zeigt die
nebenstehende Kurve eines normalen Meer-
schweinchens, dem physiologische Kochsalz-
Ibsung an Stelle des artfremden EiweiGes
injiziert wurde (etwas lUngere Fesselung).

Da wir die Operation stets gleichmfiGig ansfflhrten
(Tiere, bei denen Stdrungen eintraten, wurden nicht weiter
verwendet), so dtirfen wir die Temperatursenkung durch die
Fesselung als konstant ansehen; sie ist deshalb bei nnseren
Versuchen mit intravenbser Injektion nicht weiter berfick-
sichtigt, weil es sich ja fQr uns nur um Vergleichswerte

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UNIVERSITY OF IOWA

222

E. Friedberger und S. Mita,

handelte. Die absoluten Fieberwerte aber liegen danach in
den Versuchen mit intravenSser Injektion um etwa 2®
h5her.

Die Temperaturmessung erfolgte stets vor der Injektion
und nachher von 15 zu 15 Minuten, meist bis die Temperatur
wieder zur Norm zurQckgegangen var.

Man kann gegenuber der Bewertung dieser Temperatur-
messungen beim Meerschweinchen und gegenilber Temperatur-
messungen beim Tier flberhaupt den Einwand machen, dafi
die Temperaturen bekanntlich gewissen Schwankungen unter-
liegen.

Dabei sind aber zwei Dinge auseinanderzuhalten:

1) die absoluten Schwankungen, die die Tem¬
peratur im Rectum bei verschiedenen Individuen
zeigt;

2) die Schwankungen innerhalb der Tages-
kurve bei einem und demselben Individuum.

Was die ersteren Schwankungen anlangt, so kommen sie
fur unsere Versiiche weniger in Betracht, da es sich ja hier
nur darum handelte, die relativen Ver&nderungen der Tem¬
peratur, die ein Tier durch die Einspritzung gegentlber der
normalen Temperatur erf&hrt, zu ermitteln.

Was die Tagesschwankungen bei ein und dem¬
selben Tier anbelangt, so spielen anch sie in unseren Ver¬
suchen deshalb keine wesentliche Rolle, weil wir ja die Tem¬
peratur meist nur durch eine sehr kurze Zeitperiode hindurch
verfolgten, wkhrend deren wir sie, wie unsere zahlreichen
Kontrollmessungen ergaben, praktisch als konstant annehmen
dflrfen.

Zu skmtlichen Temperaturmessungen bedienten wir uns
zweier vollkommen tlbereinstimmender exakter Thermometer,
deren unteres Ende in genau gleicher Weise (ca. 2 ccm lang)
stumpfwinklig abgebogen war. Das Thermometer wurde stets
bis zu dieser Abknickung in den After eingeffihrt. Das be-
treffende Endstflck war so dflnn, dafi Verletzungen der Darm-
wand unbedingt vermieden wurden, zumal auch stets vor der
Einfhhrung mit Vaselin eingefettet wurde.

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Ueber Anaphylaxie.

223

I. Das Verhalten der Temperatur bei eiomaliger parenteraler
Znltihr minimaler Eiweifimengen bei prSparierten Tieren im
Veigleloh sa Eontrollen.

Da es sich bei der Eiweifi-Antieiweifireaktion beim prli-
parierten Tier, wie Doerr zuerst angenominen hat und wir
gezeigt haben, nur um die Steigerung physiologischer Vor-
gSnge handelt, so war zunfichst der Einflufi der parenteralen
Znfuhr minimaler EiweiUmengen beim normalen Tier
nSher zu untersuchen.

Wir kbnnen von jedem artfremden EiweiC ftlr das nor¬
mals Meerschweincben eine Dosis ermitteln, die den Tod des
Tieres nnter anaphylaktischen Symptomen hervorrnft. Diese
Dosis zeigt bei den einzelnen EiweiHarten ganz erhebliche
Diiferenzen. Sie betrSlgt beim Aalsernm Brnchteile eines Milli-
gramms, beim Rinderserum etwa 0,1 pro 100 g Tier, beim
Pferdesernm liegt sie etwa bei 6,5 ccm pro 100 g und ent-
spricht hier ann&hernd der Flfissigkeitsmenge, die man fiber-
hanpt intravenbs einspritzen kann. Bestehen so fbr das Meer-
schweinchen bezQglich der einzelnen Eiwweifiarten weitgehende
Differenzen, so ist doch die Toxizit&t bei einem and dem-
selben Eiweifi ann&hernd konstant, wenn anch nattlrlich
gewisse geringgradige Schwanknngen vorhanden sind. Mengen,
die unterhalb der tddlichen Dosis liegen, bewirken, wie bereits
erwShnt nnd wie von Pfeiffer und Mita zuerst systematisch
untersncht worden ist, einen nicht unerheblichen Temperatur-
sturz. In den folgenden Versuchen snchten wir non zu-
n&chst die minimale Dosis artfremden Eiweiiles zn ermitteln,
die gerade noch diese Temperatnrsenkung hervorrief, nnd
stndierten dann weiterhin den Einflufi noch kleinerer Dosen
von Eiweifi.

Wir bringen im nachstehenden Versuchsreihen, in denen
normales Hammelserum intravends, intraperitoneal oder sub-
kntan an normals Meerschweincben gespritzt wnrde, and femer
eine Serie mit intraperitonealer Einspritznng von normalem
Pferdesernm.

Znnfichst folgt ein Versnch mit intravenfiser Einspritznng
fallender Mengen von Hammelserum. Das Verhalten der Tem-
peratnr zeigen die folgenden Tabellen und Enrven.

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224

E. Friedberger und S. Mita,

5. IX. 10. Eine Reihe normaler Meerschweinchen erhalten fallende
Mengen frischen Hatnmelserums intravenbs. Das Verhalten der
Temperatur zeigt die foigende Tabelle.

No. des Tieres

M 198

M 199

M 245

M 222

M 223

Gtewicht

200 g

1 200 g 1

320 g

290 g

280g

Injektionsdosis

1,0

: 0,5 !

0,01 i

0,005 1

0,001

Temperatur vorher |

38,4“

1 :38,2‘' 1

38,0"

; 38,3" 1

1 38,0"

Temperatur nach

15'

37,8“

1 37,8“

38,0“

38,5"

:38,0"

der Injektion |

30'

37,4“

38,0"

38,0"

38,6*

38,0*

45'

37,0“

38,2"

38,0“

38,6*

38,0*

60'

37,2“

38,3"

38,0“

38,6"

38,0*

75'

37,5“

38,4“

38,0"

.38.6*

38,0*

90'

38,0“

38,5“

38,0*

38,5*

38,0*

105'

38,5*

38,5*

:38,0“

38,5*

38,0*

120'

38,5“

38,5*

38,3*

135'

38,5"

38,5*

38,2"

\

<

—

Es ergibt sich aus diesen Versuchen, dafi man bezCg-
lich des Verhaltens der Temperatur bestimmte Grenzwerte
erhftlt.

Die Dosis, die gerade noch eine Senkung der Temperatur
herbeifflhrt, bezeichnen wir als Greuze fur den Tem-
peratursturz. Sie liegt in unserem Versucb bei 0,5 com.

Gehen wir mit der injizierten Eiweifimenge weiter her-
unter, so bleibt die Temperatur konstant, aber nur bis zu
einer gewissen Greuze, die wir als ,,obere Konstanz-
grenze** bezeichnen (in unserem Fall 0,01).

Bei weiterer Verringerung der zu injizierenden Eiweifi-
menge tritt nun regelm&Big Fieber ein bis zu einer gewissen
Dosis, der „Grenze fflr Fieber** (0,005 in unserem Fall).

Bei weiterer Verringerung kommen wir dann zu Dosen,
die fflr die Temperatur des Tieres indiflferent sind, Wir be¬
zeichnen sie deshalb als die „untere Konstanzgrenze**
(0,001 in dieser Versuchsreihe).

Aus dem Verh^tnis zwischen der Grenze fflr Temperatur-
sturz und der Grenze fflr Fieber ergibt sich ohne weiteres,
dail die ohere Konstanzgrenze im Gegensatz zu der unteren
keinen Schwellenwert darstellt, sondern bedingt ist dadnrch,

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Ueber Anaphylaxie.

225

dafi der Senkungseinflufi grdBerer Mengen mit der Fieber er-
regenden Wirkang kleinerer Mengen in dieser Breite inter-
feriert.

Natttrlich sind die Grenzwerte nur innerhalb gewisser,
relativ weiter Grenzen ermittelt; meistens haben wir die In-
jektionsdosen jedesmal um das zwei- bis fiinffache verringert.
Dock zeigten uns Versuche, in denen wir die Dosen feiner
abstuften, keine genaueren Resultate, so daB die von nns ge-
wShlten Intervalle (znmal es sich nur um Vergleichswerte
handelt und die AusschlBge namentlich bei pr&parierten Tiermi
ziemlich groBe sind) vbllig ausreichten.

Fiir die Grenzwerte benutzten wir der Einfachheit halber
folgende Zeichen. Es bedeuten:

\ Grenzdosis ffir Temperatursturz,

< obere Konstanzgrenze,

/ Grenzdosis fflr Fieber,

— untere Konstanzgrenze.

(Das Zeichen < fflr die obere Konstanzgrenze soil als
Kombination des Zeichens fflr Temperatursturz mit dem fflr
Fieber die Entstehung dieses Grenzwertes zum Ausdruck
bringen.)

In den Kurventafeln sind auf der Abszisse die Zeiten der
Temperatnrmessnng von 15 zu 15 Minuten eingezeichnet, auf
der Ordinate die Temperaturen. Die Temperatursturzgrenze
und die Fiebergrenze sind in vollen Linien dargestellt, die
obere Konstanzgrenze durch eine.Linie, die untere Kon¬

stanzgrenze durch eine — •—•— Linie. Die Zahlen unmittelbar
an den Kurven bedeuten die Dosen (i.v. = intravends, Lp. =
intraperitoneal), die Zahlen am Ende der Kurven die Nummern
der Tiere. An den Kurven, die durch mehrmalige EiweiB-
injektionen entstanden sind, bedeuten die Pfeile die Zeit der
Antigenzufuhr, die daranstehenden Zahlen die Dosen des
Antigens.

Mit den normalen Tieren wurden gleichzeitig mit dem-
selben Serum die Grenzwerte des Hammelserums bei einer
Reihe von Meerschweinchen bestimmt, die 55 Tage zuvor mit
0,01 Hammelserum subkutan prflpariert waren.

Zeitschr. f. Immunitltsfonchiuig. Orig. Bd. X. 15

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226

E. Friedberger und S. Mita,

Die Dachstehende Tabelle und Kurve zeigen den Einflufi
des Hammelserums auf die Temperatur dieser Tiere.

Hammelseruminjektion bd praparierten Heren.
Vorbehandlung: 0,01 ccm subkutan. Zdt: 55 Tage. Beinjektion:
intravenbs.

No.

C 73

C 70

C 80

C 85

Glewicht

325 g

325 g

370 g

370 g

BdnjektioDsdosiB

0,0005

0,0001

0,00005

0,00001

Temperatur vorher

382"

37,8"

38,0"

38,0*

Temperatur nach

15'

37,5"

37,8"

382®

der Beiujektion

30'

37,0"

37,8"

38,3®

382®

45'

36,8"

37,8"

38,5"

382®

60'

37,0"

37,8"

39,0"

382®

75'

37,5"

37,9"

39,1*

382®

90'

38,2"

37,9"

39,1*

382®

105'

39,0"

382®

120'

39,0®

135'

39,0"

150'

39,0"

165'

39,0"

\

<

/

—

Kurve 2.

Normale Here.

Praparierte Here.

In der folgenden Tabelle sind die Grenzwerte mit diesem
Hammelserum for pr&parierte und nicht prftparierte Tiere noch-
mals zusammengestellt. Es ergibt sich, dafi durch die Prfiparie-
rung nicht nur die Tiere, wie wir schon wissen, ffir die gewohn-
liche Erscheinungsform der Anaphylaxie eine bedeutend er-
hdhte EmpfUnglicbkeit zeigen, sondem auch gegendber alien
den Grenzwerten, die die Temperatur des Tieres beeinflussen.

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Ueber Anaphylaxie.

227

Dabei zeigt sich die merkwfirdige Tatsache, dafi inner-
halb der Versuchsfehlergrenzen das Verhftltnis der einzdnen
Grenzwerte beim pr&parierten Tier und nicht prUparierten Tier
bis zu einem gewissen Grade konstant ist.

Injdction

Grenzwert beim
Normal tier

Grenzwert beim
praparierten Tier

Anaplwlaktischer

index

iv.

\

(0.05)

0,0005

100

<

o;oi

0,0001

100

/

0,005

0,00005

100

0,001

0,00001

100

Wenn man einen der ermittelten Grenzwerte beim normalen
Tier zu dem mit demselben Serum beim pr&parierten Tier
ermittelten entsprechenden Grenzwert in Beziehung setzt, so
ergibt sich ein Quotient, der anzeigt, urn wieviel mal durch
die PrSparierung die Empfindlichkeit gegeuflber dem be-
treffenden EiweiB gestiegen ist. Wir wollen diesen Wert in
Zukunft als „anaphylaktischen Index‘d bezeichnen. Er
betrfigt gegenQber unserem Hammelserum fQr die schon 55 Tage
vorher prSparierten Tiere 100. DaB die ErhShungen der Em¬
pfindlichkeit beim pr&parierten Tier gegenfiber dem normalen
eine streng spezifische ist, zeigt der folgende Kontrollversuch,
in dem mit Hammelserum vorbehandelte Tiere auch mit
Pferdeserum und Rinderserum reinjiziert wurden.

Zunfichst bringen wir einen Versuch wiederum mit
Hammelserum, jedoch erfolgten die Injektioneu nicht intra-
YenOs, sondern Intraperitoneal. Dadurch erkl&rt es sich, daB
zunfichst beim normalen Tier die Grenzwerte durchgehends
hdher liegen. Wenn gleichwohl beim prfiparierten Tier be-
deutend geringere Grenzwerte ermittelt wurden, trotz der an
sich ungflnstigeren intraperitonealen Injektion, so liegt es wohl
daran, daB im vorliegenden Versuch die Reinjektion bei dem
prfiparierten Tiere bereits nach 20 Tagen, also zu jener Zeit
Yorgenommen wurde, zu der die Ueberempfindlichkeit am
stfirksten ausgesprochen zu sein pflegt.

Zunfichst folgt die Versuchsreihe mit den normalen
Kontrolltieren.

15*

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228

E. Friedberger und S. Mita,

E^ine Beihe nonnaler Tiere erbalten fallende Dosen frisdien Hammel-
Berums. iDj'ektion intraperitoneal. Das Verhalten der Temperatur nach der
Injektion zeigt die folgende Tabelle.

No.

M 21

M 22

M 23

M 24

M 25

Grewicht

180

200

200

210

200

Injektionsdosis

1,0

0,5

0,1

0,05

0,01

Temperatur vorher

38,6"

39,0''

38,0®

38,0®

38,3®

Temperatur nach

15'

38,6®

39,1®

38,3®

38,4®

38,3®

der Injektion

30'

38,6®

39,2®

38,5®

38,8®

38,3®

45'

38,6®

39,5®

39,0®

39,0®

38,3®

60'

38,5®

39,4®

39,0®

39,5®

38,3®

75'

38,5®

39,3®

39,0®

40,0®

38,3®

90'

38.5®

39,0®

38,8®

40,0®

38,3®

105'

38,5®

39,0®

38,8®

40,0®

38,3®

120'

38,6®

39,0®

38,5®

39,8®

38,3®

<

/

—

Ganz anders ist der Einflufi des Hammelsernms beim
praparierten Tier.

Praparierte Here. Vorbehandlung: 0,02 Hammelserum subkutan. Zeit:
21 Tage. Beiojektioii intraperitoneal. Die Beinjektion erfolgte gleichzeitig
mit der Behandlong der Tiere der vorigen Tabelle und mit demselben
Hammelserum.

No.

M 10

M27

M39

M32

M33

M7

Glewicht

250

250

250

200

250

250

Beinjektionsdosis

1,00001

,000005

1,000001

,0000005

1,0000001

1,00000005

Temperatur vorher

! .39,2® 1

38,2® 1

38,5® 1

38,0® 1

38,2® 1

38,8®

Temperatur nach

15'

39,0®

38,2®

38,7®

38,4®

39,0®

CO

00

00

o

der Reinjektion

30'

39,8®

38,2®

39,0®

38,5®

39,0®

38,8®

45'

38,6®

38,2®

39,2®

38,8®

39,2®

38,7®

60'

;38,6®

38,3®

39,7®

39,0®

39,5®

38,7®

75'

38,6®

38,2®

40,0®

39,0®

39,4®

38,7®

90'

38,8®

38,3®

40,0®

38,8®

39,2®

38,8®

105'

39,2®

38,3®

39,7®

38,6®

38,8®

38,8®

\

<

/

—

Kurve 4.

Kurve 5.

Praparierte Tiere.

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

229

In der nachstehenden Tabelle sind die Grenzwerte fur
prSparierte Tiere und Kontrollen nochmals zusammengestellt.

Normale Tiere

1 Praparierte Tiere

Anaphylaktischer Index

\ > 1,0 (5,0)

0,00001

100000

< 1,0

0,000005

200000

/ 0,05

0,0000001

500000

— 0,01

0,00000005

200000

Diese DiflFerenz zwischen prSparierten und normalen Tieren
schwindet vollig, wenn zur Reinjektion artfremdes Pferde¬
serum verwendet wird.

Das zeigen die beiden folgenden Tabellen.

Normale Tiere. Injektion: Pferdeserum intraperitoneal.

No.

M 15

M 11

M 12

M 13

M 14

Gewicht

200

200

200

210

210

InjektioDsdosis

1 5,0

1 1,0

0,5

1 0,1

1 0,05

Temperatiir vorher

1 38,0"

1 38,0"

38,0"

1 38.0"

1 38,0"

Temperatur nach

15'

1 37,0"

1 38,0"

38,3"

:38,1" ,

38,0"

der Injektion

30'

1 37,0"

. 38,0"

38,6"

38,2" '

38,0"

45'

37,3"

: 38,2"

.38,8"

38,4"

38,0"

60'

37,5"

38,2"

38,9"

38,6"

38,1"

75'

.37,8"

38,2"

39,0"

.38,8"

38,1"

90'

38,0"

38,2"

38,8"

38,8"

38,2"

210'

38,0"

38,0"

38,6"

38,0"

38,0"

225'

38,0"

38,0"

38,0"

38,0"

38,0®

\

<

/

—

Praparierte Tiere. Yorbehandlmig: 0,02 Hammelserum subkutan. Zeit
20 Tage. Beinjektion: Gleichzeitig mit den Tieren voriger Tabelle und mit
demselben Pferdeserum intraperitoneal.

No.

M 40

' M 31

M 37

M 23

M 8

Gewicht

' 240

230

1 230

240

240

Keinjektionsdosis

5,0

1,0

0,5

0,1 I

1 0,05

Temperatur vorher

38,2"

38,0" 1

38,5"

38,0"

1 39,4"

Temperatur nach

15'

37,5"

38,0"

38,6"

38,4"

39,4"

der Beinjektion

30'

37,4"

38,0"

.38,7"

38,6"

39,4®

45'

37,5"

38,1"

38,7"

38,8"

39,3"

60'

37,5"

38,1"

38,6"

39,0"

.39,4"

75'

37,6"

38,2"

38,5"

39,4"

39,5"

210'

38,3"

38,2"

38,5"

39,0"

39,5"

225'

38,2"

38,2"

38,2"

38,4®

39,4"

\

<

/

—

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UNIVERSITY OF IOWA

230

E. Friedberger und S. Mita,

Kurve 6.

Normale Tiere.

Kurve 7.

Priiparierte Tiere.

Prapariertes Tier

Normales Tier

V

5,0

5,0

<

1,0

1,0

0,1

0,1

0,05

0,05

Wird an Stelle des Pferdeserums das Seram des dem
Hammel n&her stehenden Rindes benutzt, so zeigt sich eine
allerdings minimale Steigerung der Einwirknng beim pr&pa-
rierten Tier. Sie ist jedoch so gering, dafi sie die Spezifitftt
der Reaktion nicht st5rt.

Normale Tiere. Injektion: BinderBerum intraperitoneal.

No.

M 16

M 17

M 18

M 19

M 20

Qewicht

250

250

250

250

250

InjektionsdoBis

0,5

0,1

0,05

0,01

0,005

Temperatur vorher

38,0"

38,0"

37,5"

38,0"

38,2"

Temperatur nach

15'

37,7"

38,0"

37,8"

38,2®

38,2"

der Injektion

30*

37,6"

38,0"

38,0"

38,5"

38,2®

45'

37.8"

38,0"

38,4"

38,5"

38,2"

60'

38,0"

38,0"

38,6®

38,3"

38,2®

75'

38,1"

38,0"

38,4"

38,2®

38,2®

90'

38,0"

38,0®

38,2"

38,0"

38,2"

105'

\

<

/

/

—

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

231

Vorbehandlung: 0,02 Hammebenim subkutan 21 Tage vorher. Be-
mjektion: lUnderBenun intraperitODaL Gleichzeitig mit den lieren der
vorigen Tabelle und mit demselben Bindersenun.

No.

M 6

M36

M 17

M35

M29

M34

Gewicht

250

220

250

200

200

200

Injektionsdosis

0,5

0,1

0,05

0,01

0,005

0,001

Temperatur vorher

39,10

38,0*

39,0“

38,0*

38,0“

38,4“

Temperatur nach

15'

37,2“

37,5“

39,0“

38,5*

38,2“

38,4“

der Injektion

30'

37,2“

36,0*

39,0*

39,0*

38,6“

38,4*

45'

37,4“

36,0“

39,0“

39,2“

38,6“

38,4*

60'

37,8*

36,5*

39,0*

39,3“

38,4“

38,4“

75'

38,2“

37,0“

38,9*

39,3“

38,2*

38,4*

90'

39,0“

37,8“

38,9“

39,3“

38,0“

38,4*

105'

39,0“

38,0“

39,0“

39,0*

38,0“

38,4*

120'

39,0*

38,0*

39,0“

38,5“

38,0“

38,4®

\

\

<

/

—

Kurve 8.

Normale Here.

Kurve 9.

Prapariertee Tier

Normales Tier

Index

\

0,1

0,5

5

<

0,05

0,1

2

/

0,005

0,01

2

0,001

0,005 1

5

Wir haben also bier eine Reaktion von weitgehender
Spezifitat, auf deren praktische Verwendbarkeit der
eine von nns bereits an anderer Stelle hingewiesen hat DaB
man z. B. fflr forensische Zwecke die absolute Eiweifimenge,
mit der man arbeitet, ebensowenig wie bei der Pr&zipitation
kennt kann die Brauchbarkeit der Reaktion an sich nicht

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232

E. Friedberger und 8. Mita,

beeintrSchtigen. £s handelt sich eben nur darum, daB z.
der Anszug eines anf Menschenblut yerdSchtigen Blatflecks
bei mit MeDScheneiweiB prS-parierten Tieren die Fieber-
temperator durch Dosen hervorruft, die weit unter denen
liegen, in denen der gleiche Anszug normale Meerschweinchen
beeinflnfit, falls er bier flberhaupt noch eine Reaktion auslbst.

Die Fieberprobe ist also an Spezifizit^t den sonstigen
forensischen Methoden nicht nachstebend, an Empfindlich-
keit weit fiberlegen. Daher halten wir es fdr
erwflnscht, wenn fflr wichtige forensische £nt-
scheidnngen nnsere Probe neben den sonst flb-
lichen und bew&hrten zur besseren Sicherung
der Diagnose mit herangezogen wird.

Auch der folgende Versuch wurde mit intraperitonealer
Injektion von Hammelserum bei normalen und pr&parierten
Tieren ausgeffthrt.

22. X. Eine Beihe normaler Meerschweinchen erhalten fallende
Dosen von frischem Hammelserum intraperitoneal. Das Verhalten
der Temperatur vor und nach der Injektion zeigt die folgende Tabelle.

No.

M 276

M 271

M 272

M 273

M 274

M 275

Ebrpergewicht

350 g

320 g

240 g 1

200 g

320 g

340 g

Injektionsdosis

3,0

1,0

0,5

0,1

0,05 1

0,01

Temperatur vorher

38,0®

38,1®

38,2®

37,8®

38,0®

38,0®

Temperatur nach

15'

37,3®

38,1®

38,4®

38,8®

38,3®

38,0®

der Injektion

30'

36.8®

38,1®

38,6®

38,9®

38,4®

38,0®

45'

35;2®

38,1®

39,0®

39,1®

39,0®

38,0®

60'

35,0®

38,1®

39,1®

38,9®

39,0®

38,0®

75'

34,5®

38,1®

38,9®

38,6®

39,0®

38,0®

90'

34,0®

38,1“

38,5®

38,4®

39,0®

38.0®

105'

34,1®

38,1®

38,2®

38,0®

39,0®

38,0®

—

38,0®

\

<

/

—

Ganz anders verhalten sich die prBparierten Tiere, die
gleichzeitig mit demselben Hammelserum reinjiziert wurden,
bezflglich der Grenzwerte.

22. X. Gldchzeitig mit den in der vorigen Tabelle aufgefiihrten
Normaltieren wurden prapaiierte mit Hammelserum gespritzt.

Vorbehandlung: 0,02 Hammelserum aubkutan. 20 Tage zuvor. Re-
injektion intraperitoneal.

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Ueber Anaphylazie.

233

No.

M 265

M 253

M 249

M 257

M 263

Kdrpei^wicht

270 g

270 g

260 g

270 g

280 g

260 g

250 g

KeinjektioDsdosis

0,00001

0,000005

10,000001

0,0000005

0,0000001

0,00000005

0,00000001

Temperat. rorher

o

CO

39,0®

37,8"

O

o

37,1®

38,4®

38,0®

Tempera-

15'

37,4®

39,0®

37,9®

38,1®

37,5®

38,5®

38,0®

tar nach

30'

37,2®

.39,0®

38,1®

38,4®

38,0®

38,7®

38,0®

der Be*

45'

37,4®

.39,0®

38,2

38,6®

38,2®

38,8®

38,0®

injektioD

60'

37,8®

39,0®

38,3®

38,8®

38,4®

39,0®

38,0®

75'

38,0®

39,0®

38,3®

38,9®

38,6®

39,5®

38,0®

90'

39,0®

38,3®

39,1®

39,4®

39,5®

38,0®

105'

39,0®

38,5®

39,3®

39,0®

39,8®

38,0®

120'

39,0®

39,0®

39,6®

38,6®

40,2®

38,0®

135'

39.0®

40,2®

39,7®

38,0®

40,2®

38,0®

150'

39,0®

40,2®

.39,7®

38,0®

40,2®

38,0®

165'

39,5®

39,7®

38,0®

40,0®

180'

39,0®

39,7®

38,0®

39,0®

\

<

/

—

Kurve 10. Kurve 11.

Normale Tiere.

In der nacbstehenden Tabelle sind noch einmal die Grenz-
werte bei den pr&parierten Tieren und die gleichzeitig bei
Normaltieren ermittelten zusammengestellt.

Art d^r
Injektion

Grenzdosis beim
Normaltier

Grenzdosis beim
prXparierten Her

Anap^laktischer

Index

ip.

\

5,0

0,00001

500000

<

1,0

0,000005

500000

/

0,05

0,0000005

1000000

0,01

0,00000001

1000000

Der anaphylaktische Index fflr die prftparierten Tiere be-
tr&gt bier 500000 bis 1 Million.

Nachstehend bringen wir nocb eine Versuchsreihe mit
Pferdesernm bei intrapeiitonealer Einspritzung. Da das
Pferdesernm an sich ftlr Meerscbweincben so gut wie ungiftig

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234 E* Friedberger und S. Mita,

ist, so liegen die Grenzwerte bedeutend hdher wie beim Hammel-
serum.

Den Einflufi des Pferdeserums auf die Temperatur der
normalen Tiere zeigt die folgende Tabelle und Eurve 12. Die
Einwirkung ist sehr gering, was in Anbetracht der geringen
Giftigkeit des Pferdeserums nicht weiter verwunderlich ist.

4. X. Fine Keihe normaler Meerschweinchen erhalten fallende
Dosen frischen Pferdeserums intraperitoneal.

No.

M266

M 267

M 268

M 269

M270

KSrpergewicht

250 g

255 g

260 g

260 g

270 g

Injektionsdoeis

5,0

1,0

0,5

0,05

0,01

Temperatiir vorher

38,0“

38,0“

:38,0“

38,0“

38,5“

Temperatur nach

15'

37,5“

38,0“

38,2“

38,2“

38,5“

der Injektion

80'

37,2“

38,0“

38,3“

38,2“

38,5“

45'

37,0“

38,0“

38,3“

38,2“

38,5“

60'

37,5“

38,0“

38,2“

38,2®

38,5“

75'

38,0“

38,0“

33,2“

38,0“

38,5“

90'

38,0“

38,0“

38,0“

38,0“

38,5“

105'

38,0“

38,0“

38,0“

38,0“

38,5“

\

<

/

—

Bedeutend intensiver als bei den Normaltieren ist natflr-
lich die Wirkung des Pferdeserums bei den prUparierten,
obwohl auch bier wieder die geringe Giftigkeit des Pferde¬
serums zum Ausdruck kommt. Die Dosen ftlr die Grenz¬
werte liegen bedeutend h5her als bei mit Hammelserum vor-
behandelten Tieren.

4. X. Gleichzeitig mit den in der vorigen Tabelle au^efuhrten Normal-
tiermi wurden praparierte mit demselben Pferdeserum gespritzt.

Vorbehandlong: 0,02 Pferdeserum subkutan. 24 Tage rorher. Be-
injeklion intraperitoneaL

No.

M 216

M 206

M 207

M 208

|M 218

M 220

K5rpergewicht

300 g

310 g

310 g

320 g

320 g.

320 g

Eeinjektionsdosifi

0,5

0,1 1

0,05

1 0,01

0,005

0,001

Temperatur vorher

38,8“

38,3“

37,8“

1 38,0“

38,0“

383“

Temperatur nach

15'

38,6“

38,4“

38,6“

39,0“

38,2“

38,2“

der Injektion

30'

38,4“

38,3“

38,6“

393*

38,9“

383“

45'

38,0“

38,3“

38,5“

39,3“

38,6“

383“

60'

37,4“

38,3“

38,0®

39,0“

383*

75'

37,0“

38,3“

38.0“

90'

37,0“

38,3“

38,0“

ISC'

37,5“

165'

37,7“

180'

38,5“

195'

38,8“

\

<

—

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Ueber Anaphylaxie.

235

Kurve 12.

Kurve 13.

Die folgende Tabelle zeigt wiederum die Grenzwerte beim
pr&parierten Tier und beim normalen. Hier betrfigt der ana-
phylaktische Index nur 10.

Ort der
Injektion

Grenzwerte beim
normalen Tier

Grenzwerte beim
praparierten Tier

Anaphylaktischer

Index

ip.

\

5,0

0,5

10

>>

<

1,0

0,1

10

/

0,05

0,005

10

0,01

0,001

10

Wesentlich andere sind die zur Erzengung der Grenz¬
werte n5tigen Dosen, wenn das Antigen nicht intraperitoneal
Oder intravenOs, sondefn snbkutan zugefQhrt wird, wie in den
folgenden Versucben.

Was zunSchst die Wirknng beim normalen Tier an-
langt, so sehen wir, dafi die Dosen fOr die Grenzwerte bei
snbkutaner Zufiihr noch bedeutend hdher liegen als bei intra-
peritonealer und hdher als bei intravendser.

Wenn wir die Empf&nglichkeit bei subkntaner Injektion
= 1 setzen, so verhalten sich bezQglich ihrer Wirksamkeit
die snbkntane zur intraperitonealen zur intravendsen Einfuhr
etwa gleich 1:10:100.

Nachstehend folgen die Versuche, die den Einflufi des
Hammelsernms auf normale Tiere zeigen.

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UNIVERSITY OF IOWA

236

E. Friedberger und S. Mita,

4. L 11. Subkutane Injektion Ton HammelBerum an normale
Tiere in fallenden Doeen.

No.

M 501

M502

M 503

M 504

M 506

Edrpergewicht

200 g

200 g

190 g

210 g

200 g

Infektionsdosis

1 5,0

3,0

1,0

0,5

1 0,1

Temperatur vorher

1 38,0*

38,3"

38,0"

38,2"

1 38,0*

Temperatur nach
der Injektion

15' i

38,0*

38,3“

1 38,0*

38,2*

38,0“

30'

37,9*

38,2*

! 38,1"

38,3*

38,0*

45'

37,5"

38,3"

38,4*

38,3*

38,1*

60'

37,0"

38,2*

38,5"

38,2*

38,0*

75'

37,0"

38,1"

38,7"

38,3*

38,1*

90'

37,0"

38,2"

39,0"

38,4*

38,0*

105'

37,0"

38,0*

39,0*

38,5*

38,0*

120'

37,1"

38,2"

39,1*

38,7*

38,0*

135'

37,2"

38,2"

39.0*

38,7*

38,0*

150'

37,2"

38,2"

38,9"

38,8*

38,1*

165'

180'

37,5"

38,3"

38,8*

38,7*

38,1*

1

410'

38,0"

\

38,4*

<

38,5"

38,5*

38,2*

Auch beim prfiparierten Tier liegen naturgem&fi bei snb-
kutaner Zufuhr die Grenzwerte relativ hdher als bei intra*
venOser oder intraperitonealer.

4. I. 11. Gleichzeitig mit den Tieren der vorigen Sene erfolgte
subkutane Injektion desselben Hammelsenuns an praparierte Tiere.

Vorbehandlung: 0,02 ccm Hammelserum subkutan. 47 Tage vorher.
Injection: subkutan.

No.

M 499

M 490

M 480

1 M 7

M 12

M 492

Kdrpergewicht

200 g

200 g

220 g

200g

210 g

230 g

Beinjcktionsdosis

0,5

0,05

0,01

1 0,005

0,001

0,0005

Temperatur vorher

38,0*

38,0*

38,2"

1 37,0"

37,2*

38,2*

Temperatur

30'

37,8*

38,0"

38,2*

37,6"

37,6*

38,2*

nam der

60'

37,2*

38,0*

38,2*

38,0*

37,8*

385*

Bdnjektion

90'

37,0*

38,0*

38,2*

38,1*

37,8*

38,2*

120'

37,0*

38,0*

38,2*

38,3*

37,9*

38,2*

ISC'

37,1*

38,0*

38,2*

38,5*

37,9*

38,3*

180'

37,3*

38,0*

38,2*

38,6*

37,9*

38,3*

210'

37,5*

38,0*

38,2*

38,8*

38,0*

38,3*

240'

38,0*

38,2*

38,2"

38,9*

38,0*

38,3*

270'

38,0*

38,1*

38,2*

39,8"

38,2*

38,2*

300'

38,0*

38,1*

38,1*

39,4*

38,0"

38,2*

330'

38,0*

1 38,0*

38,0*

39,0*

O

00

cc

38,2*

360'

\

t

<

! / i

—

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

237

Kurve 14. Kurve 15.

Doch zeigt die folgende Tabelle, in der die Grenzwerte
beim pr&parierten Tier denen beim normalen noch einmal
gegenfibergestellt sind, daB die relativen Grenzen recht be-
trSx^htliche sind, zumal wenn man bedenkt, daB die prB-
parierten Tiere bereits die optimale Zeit fflr die Ueberem-
pfindlichkeit Bberschritten batten (mit 47 Tagen).

Art

Nonnales Tier

Prapariertea Tier

Hammelserum

subkutan

\

— 5,0

0,5

<

3,0

0,01

1,0

0,001

0,1

0,0005

In der folgenden Versuchsreihe wurde als Antigen nicht
mehr tierisches EiweiB, sondern eine Bakterienknltar (Vibrio
Metschnikoff) benutzt. Die Priparierung der Meerschweinchen
geschah bier mit 0,2 g 2 Stunden bei 60 ® abgetSteter feucbter
Bakterienmasse (gewonnen von Agarmassenkulturen subkutan).
FQr die Reinjektion, bezw. fiir die Bebandlung der normalen
Kontrolltiere wurde das Antigen wie folgt vorbereitet: Die
von Agarmassenkulturen gewonnenen Bakterien wurden in
pbysiologiscber Kocbsalzlosung aufgescbwemmt und 2 Stunden
bei 60® abgetStet.

Dann wurde zentrifngiert, der Bodensatz einmal mit
reicblicben Mengen pbysiologiscber Eocbsalzldsung gewascben
und im Faustscben Apparat bei 37® getrocknet. Das ge-
trocknete Material kam nocb 24 Stunden in den Exsikkator
fiber Scbwefelsliure und wurde dann^in abgewogenen Mengen
(siebe die Tabelle) als Antigen benutzt Injektion intraperitoneal.

Die folgende Tabelle und Kurve zeigt die Grenzwerte
bei normalen Tieren.

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238

E. Friedberger und S. Mita,

31. III. 11. Eine R«ihe normaler Meerschweinchen erhalteo fallende
Dosen von bei 60° abgetbteten Agarkultoren des Vibrio Metschnikoff.

No.

M 8

M 9

M 7

MIO

Gtewicht

200 g

190 g

200g

210 g

JnjektioDsdosis

i 0,005

0,001

0,0005

OfloSi

Temperatur vorher

o

O

o

00

CO

37,8®

38,4®

Temperatur nach

15'

^7,7°

38,0®

00

00

o

o

38,4®

der Injektion

30'

’37.5®

38,0®

38,4®

38,5®

45'

37,3®

o

o

' 38,8®

38,5®

60'

37,3®

38,0®

39,0®

38,6®

75'

37,5®

38,2®

39,4®

38,5®

90'

38,0®

38,5®

39.8®

38,5®

105'

38,1®

38,3®

39,8®

38,4®

120'

38,1®

38,2®

39‘8®

38,4®

135'

38,0®

38,2“

39,5®

38,4®

150'

38,0®

38,2®

39,3®

38,3®

165'

38,1®

38,1®

39,0®

38,4®

180'

38,0®

38,2®

39,8®

38,4®

195'

\

<

/

—

Die Dosen, mit denen wir zunEchst beim normalen Tier
die Grenzwerte erzielten, sind scheinbar lOOmal geringer
als die von Hammelserum und Pferdeserum. Wenn wir aber
bedenken, dafi wir das Bakterienmaterial vdllig getrocknet,
das Serum aber in nativem Zustand benutzten, so sind diese
Differenzen erheblich geringer.

31. 111. 11. Intraperitoneale Beinjektion desselben Materials von
Vibrio Metschnikoff.

Vorbehandluog: 0,2 g feuchte Bakterien subkutan zweimal. Zdt:
10 Tage nach der letzten Vorbehandlung.

No.

M5

M454

M 2

M500

M467

Gewicht

180 g

190 g

180 g

200 g

240 g

JReinjektionsdosis

0,001

0,0005

0,0001

0,00005

0,00001

Temperatur vorher

38,0®

38,0®

38,1®

38,4®

38,0®

Temperatur nach

15'

38,0®

38,0“

38,4®

38,5®

38,0®

der Beinjektion

30'

37,8®

38,0®

38,6®

38,6®

38,0®

45'

37,6®

38,0®

38,9®

38,8®

38,1®

60'

37,4®

38,0®

39,4®

39,0®

38,2®

75'

37,5®

38,1®

39,8®

39,3®

38,5®

90'

37,5®

38,1®

39,8®

39,7®

38,6®

105'

37,6®

38,0®

39,6®

40,0®

38,6®

120'

37,8®

38,1®

39,4®

40,0®

38,8®

135'

38/)®

38,1®

39,0®

40,0®

38B®

150'

38,1®

38,0®

38,8®

40,0®

38,8®

165'

38,0®

38,0®

38,4®

39,7®

38,5®

180'

38,1®

38,1®

38,0®

39,0®

38,3®

195'

38,1®

38,2®

38,0®

38,4®

38,3®

1

\

<

/

—

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

239

Kurve 16 . Kurye 17 .

Der aDaphylaktische Index betr&gt in diesem Versuche
zwischen den prUparierten Tieren und den entsprechenden
Eontrollen nur 10, das ist zum Teil darauf zurQckzufQhren,
dafi bei den Versuchen seit der Prfiparierung erst 10 Tage
verflossen waren, die Tiere also noch nicht maximal iiber-
empfindlich waren. Ferner aber haben wir auch bei der ak-
tiyen Bakterienanaphylaxie mit tddlichen Dosen wiederholt
die Beobachtnng gemacht, dafi die Differenzen in der Minimal-
dosis bei prfiparierten Tieren einerseits, bei Eontrollen anderer-
seits, nicht soweit auseinander liegen wie bei Verwendung yon
Eiweifi. Dem entsprechen also yollkommen unsere Erfahrungen
bei der Feststellnng der Grenzwerte fflr die Temperatnr.

Art dor
Injektion

Grenzwerte
beLm Normaltier

Grenzwerte beim
pr&parierten Tier

Anaplwlaktischer

Lidex

ip.

s

0,005

0,001

5

<

0,001

0,0005

5

/

0,0005

0,00005

10

0,0001

0,00001

10

In der folgenden Tabelle sind die Wirknngen dreier yer-
scbiedener Eiweifikdrper auf die Temperatnr noch einmal zu-

sammengestellt.

Intraperitoneale

Injektion

Normaltier

Prapariertes Tier

Index

Hammelserum
Vorbeh. 20 Tage

\

<

5,0

1,0

0,00001

0,000005

, 1000 000

0,05

0,01

0,00000005

0,00000001

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UNIVERSITY OF IOWA

240

E. Friedberger und S. Mita

Intraperitoneale

Injektion

Normaltier

Prapariertes Tier

Index

Pferdesenim

\

5,0

0,5

1

Vorbeh. 24 Tage

<

1,0

0,1

i 10

0,05

0,005

0,01

0,001

)

Vibrio Metschn.

\

0,005

0,001

1

Vorbeh. 10 Tage

<

0,(X)1

0,0005

i 5—10

/

0,0005

0,00005

0,0001

0,00001

1

Aus den vorstehenden Versuchen ergibt sich
unzweideutig, dafi der normale Organismus des
Meerschweinchens (and natiirlich auch anderer
Tiere), wie lange bekannt (s. unten), die F&higkeit hat,
das in geringen Dosen parenteral zugefflhrte
artfremde EiweiQ unter Bildung von fieberer-
regenden Stoffen abzubauen. Beim prSparierten Tier
ist fnfolge des Yorhandenseins ron Antikdrpern diese FShlg-
kelt ganz enorm gesteigert, so daB sich die Bildung fieber-
erzeugender Mengen von Oift oft schon aus yieltausend*
fach, Ja miilionenfach kleineren Eiweifimengen ermi^*
lichen IftBt als beim normalen.

Wir haben hier nur 9.aGerlich eine besondere Reaktion,
in Wirklichkeit handelt es sich natiirlich um weiter nichts als
eine empfindlichere Form der Anaphjlaxie, eine Reaktion, bei
der weniger Antigen und weniger AntikSrper miteinander in
Aktion treten, so daQ nur fiebererzeugende „pyrogene‘‘,
nicht aber mehr todliche Dosen des Anaphylatoxins sich
bilden kbnnen.

n. Die zeitliohen Verh&ltnisse der Antikdrperbildung auf
Grand der Fieberreaktion.

Unter diesen UmstS.nden mufi die Fieberreaktion bei ihrer
Speziht§,t sich sowohl zum Nachweis kleiner Antigenmengen als
auch zum Nachweis geringer Mengen von Antikbrpem eignen,
von Antikdrpermengen, die durch die gewohnlichen Reaktionen
noch nicht nachweisbar sind. Zur Ausbildung der Anaphylaxie
bedarf es, wie bekannt, eines Inkubationsstadiums von etwa

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

241

8 Tagen. Wir k5nnen annehmen, wie das seither meist ge-
schah, dafi sich die Antikdrper etwa urn diese Zeit kritisch
bilden bezw. kritisch in die Blatbahn hineingelangen.

Wir kdnnen aber auch annehmen, dafi sie schon bedentend
frflher da sind und nur dem Nachweis deshalb entgehen, weil
ihre Menge nicht groB genng ist, nm die gewdhnliche Ana-
phylaxiereaktion (geschweige denn die noch viel grdberen
Reagenzglasreaktionen Pr&zipitation nsw.) auszuldsen, d. h.
die Bildnng einer tddlichen Dosis von Anaphylatoxin zu be-
wirken. Dann milfiten sie sich schon durch die empfind-
lichere Fieberreaktion, die ja bedentend weniger Antikbrper
erfordert, nachweisen lassen. Von derartigen Erw&gungen
ausgehend, haben wir in einer Reihe von Versuchen zu er-
mitteln gesucht, zu welcher Zeit prSparierte Meerschweinchen
die erhohte Empf^nglichkeit fdr das Fieber gegenQber von
EiweiBdosen zeigten, die beim normalen Tier noch bedeutend
jenseits der unteren Konstanzgrenze liegen. Wir haben eine
• Serie von normalen Meerschweinchen mit je 0,02 Hammel-
serum in der iiblichen Weise subkutan prUpariert und zu ver-
schiedenen Zeiten nach der Vorbehandlung die Grenzwerte ftlr
Fieber bei der Reinjektion ermittelt. Wir gingen dabei so vor,
dafi wir nach 1, 3, 7,13 und 19 Tagen den Einflufi des Hammel-
serums auf die Temperatur auswerteten.

Nachstehend folgen die Grenzwerte bei Kontrolltieren und
gleichzeitig am 1. Tag nach der PrS,parierung.

Kontrolle: Normale Here mit Hammelserum intraperitoaeal gespritzt.

No.

M 391

M 389

M 387

M 388

Edrpergewicht

230 R

240 g

200g

240 g

BeinjektioDsdosis

0,1

0,05

0,01

0,005

Temperatur vorher

38,0®

37,8®

38,0®

37,5®

Temperatur nach

15'

38,0®

38,2®

38,5®

37,6®

der Bcanjektion

30'

38,0®

38,6“

38,6®

37,6®

45'

38,0®

38,7®

38,7®

37,6®

60'

38,0®

38,8®

38,8®

37,6®

75'

38,0"

38,9®

39,0®

37,6®

180'

38,0®

40,0®

40,0®

37,8®

240'

38,0®

40,0®

40,0®

37,8®

270'

38,0®

40,0®

40,0®

37,8®

300'

38,0®

39,5®

39,6®

330'

39,0®

39,0®

360'

38,5®

38,5*

<

/

—

Zaitschr. f. InunaDitlitsfonchang. Orig. Bd. X. Ig

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242

E. Friedberger und S. Mita
Kurve 18.

Tiere mit Hammelserum 0,02 subkutan vorbehandelt. Iteiniektion intraperi-

toneal naeh 1 Tag.

No.

M 348

M 328

M 370

ohne No.

M 361

M 345

Korpergewicht

200g

190 g

180 g

200 g

200 g

340g

Beiujektionsdosis

0,1

1 0,05

1 0,01

1 0,005

1 0,001

0,0005

Temperatur vorher

39,0®

38,0“

1 ;i8,2“

38,0“ 1

38,0“

:38,0“

Temperatur nach

15'

38,6“

37,6"

38,2“

38,4“

38,8“

:38,0“

der Beiujektion

30'

38,4“

37,4“

38,2“

38,4“

38,9“

38,0“

45'

38,0“

37.0“

38,2“

38,5“

39,0“

38,0“

60'

37,5“

37,3“

38,2“

38,6“

39,2“

38,0*

75'

37,0“

37,4“

38,2“

38,8“

39,5*

38,0“

QO'

36,9“

37,5“

38,2“

38,8“

39,8“

38,0“

105'

36,8“

37,5“

38,2“

38,8“

40,0“

38,0“

120'

36,8“

37,5“

38,2“

38,8“

40,0“

38,0“

135'

36,8“

37,5“

38,2“

38,6“

40,0“

38,0“

150'

36,8“

37,5“

38,2“

38,2*

40,0*

38,0“

240'

37,8“

36,8“

38,2“

39,0“

38,5“

\

<

/

—

Kurve 19.

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

243

Tiere mit 0,02 Hsmmelserum subkutan vorbehandelt. Beinjektion intra-

peritoneal naeh 3 Tagren.

No.

M 327

M 355

M 367

M 336

M 337

Edrpergewicht

240 g

230 g

250 g

240 g

250 g

Beinjektionsdosis

0,01

0,005

0,001

1 0.0005

1 0,0001

Temperatur vorher

39,0"

37,5“

38,0°

1 :i8,o°

1 38,7"

Temperatur naeh

15'

38,4®

.37,4°

38,5°

38,4°

:i8.7"

der Beinjektion

SO'

.38,2"

37,5°

38,6°

39,0°

.•18,7*

45'

38.4°

37,5°

38,8*

39,0°

.38,7“

60'

38,6"

37,5°

39,0*

39,0*

38,7°

75'

38,7"

37,5°

39,0*

39,2*

38,7“

90'

38,9®

37,5"

39,0*

39,3*

38,7°

105'

.39,0®

37,8°

39,0*

.39,5*

38,7°

120'

39,0°

37,9°

.39,0°

39,7*

38,7“

225'

39,0°

38,0°

39,0°

40,2*

38,7*

\

<

—

Kurve 20.

Tiere mit 0,02 HammelBerum subkutan vorbehandelt. BeiDjektion intra-

peritoneal naeh 7 Tagren.

No.

M 325

M 326

M 363

M 334

M 335

M 343

KSrpergewicht

250 g

270 g

260 g

260 g

280 g

270 g

Beinjektionsdosis

0,001

0,0005

0,0001

10,000051

0,00001

0,000005

Temperatur vorher

38,3°

38,0*

1 38,0°

1 38,0°

37,5°

38,0°

Temperatur naeh

15'

37,9°

38,0*

CO

00

38,4°

37,8°

38,0°

der Beinjektion

30'

37,9*

38,0*

38,5*

38,4°

37,9°

38,0°

45'

38,0*

38,0°

38,7*

38,4°

38,0*

38,0*

60'

38,2*

38,0*

38,8*

38.4*

38,2*

38,0°

75'

38,3*

38,0*

38,9°

38,5*

38,3*

38,0*

225'

38,3°

38,0*

40,0*

O

O

40,0*

38,0*

\

<

1

/

16*

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UNIVERSITY OF IOWA

244

E. Friedberger und S. Mita,
Kurve 21.

Jim

Zu der Zeit (13. Tag), zu der auch schon eine ausgesprochene
typische Ueberempfindlichkeit bei der Reinjektion besteht, ist
die pyrogene Wirkung wiederum bedeutend gesteigert.

Here mit 0,02 Hammelserum subkutan vorbehandelt. Bdnjektion intra-

peritonea] naeh 13 Higren.

No.

M 351

M 383

M 346

M 376

E5rpergewicht

300g

190 g

240 g

220g

Beinjektionsdosis

1 0,00001

0,000005

0,0000005

0,0000001

Temperatur vorher

1 39,6“

38,2"

38,0“

38,2“

Temperatur nach

15'

39,6“

39,0"

39,0"

38,2“

der Banjektion

30'

39,6“

39,0"

39,1“

38,2“

45'

39,6“

39,0®

39,2*

38,2“

60'

39,6"

39,5“

39,6“

38,2“

75'

39,6“

40,1"

40,0“

38,2“

90'

39,6"

40,3"

40,2“

38,2“ ‘

105'

39,6"

40,5“

40,4“

38,2“

120'

39,6®

40,7“

40,6“

382*

135'

39,6"

40,9“

40,6“

382*

150'

39,6“

41,0"

40,6“

382*

165'

39,6“

40,8“

40,4“

382*

ISC'

39,6“

40,6“

40,3“

382*

195'

39,6“

40,4“

40,1“

382*

210'

40,2"

40,0“

382*

<

/

—

Kurve 22,

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylazie.

245

Am 19. Tag, etwa die Zeit des Optimums fflr die Ana-
phylaxiereaktion, gentlgt 1 Zehnmillionstel com Hammelserum,
das ist ein Hundertmillionstel Kubikzentimeter EiweiB, um
eine Steigeruug der Temperatur um 3** zu bewirken.

Tiere mit 0,02 Hammelseram subkatan vorbehanddt. Bemjektion intra-

peritoneal naeh 19 Tagen.

No.

M 372

M 353

M 354

M 366

M 341

M 358

KSrpergewicht

250 g

230 g

240g

230 g

280g

320g

Beinjektionsdosis {

0,00001

!0,000005i0,0000011

0,0000005

0,0000001

0,00000005

Temperatur vorher

1 38,5“

38,0®

1 38,0®

37,5®

38,0®

O

Temperatur nach
der Beinjektion

15'

30'

45'

60'

ISC'

38,0"

37,8"

38,2®

38,4®

38,5®

\

38,0“

38,0®

38,0®

38,0®

38,0®

<

38,6®

39,0®

39,2®

39,4®

40,0®

38,0®

38.4®

38,5®

39,0®

39,4®

38,5®

39,5®

40,0®

40,2®

41,0®

/

38,4®

38,4®

38,4®

38,4®

38,4“

Kurre 23.

Die folgende Uebersichtstabelle zeigt noch einmal die
Grenzwerte an den einzelnen Tagen nebeneinandergestellt.
Zngleich ist der anaphylaktische Index gegenfiber der normalen
EontroUe berechnet Im Anschlufi daran haben wir in einer
Knrve noch einmal die Fiebergrenzwerte an den einzelnen
Tagen dargestellt (Eurve 24).

Norm.

Tier

Praparieite Tioe

0 Tage

1. Tag

3. Tag

7. Tag

13. Tag

19. Tag

\

' < ■

/

oj

0,01

0,005

0,05

0,01

0,001

0,0005

0,01

0,005

0,0005

0,0001

0,001

0,0005

0,00001

0,000001

0,00001

0,0000005

0,0000001

0,00001

0,000005

0,0000001

0,00000005

anaphyL Index ca.

1 - 1 10 1

20

1000

50000

100000

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246 E. Friedberger und S. Mita,

Kurve 24.

Die vorstehenden Versuche zeigen also, daB bereits nach
24 Stunden ein anaphylaktischer Index von 10 gegeniiber der
Norm durch die Fieberreaktion nachweisbar ist. Nach 3 Tagen
ist die Empfindlichkeit urn das Doppelte gestiegen; nach
7 Tagen betragt sie das Tausendfache, nach 19 Tagen das
Hunderttausendfache.

Vollstandig neu und zunSchst unerwartet ist in diesen
Versuchen die Tatsache, daB bereits 24 Stunden nach der
Autigenzufuhr eine Antikorperbildung durch die Fieberreaktion
nachweisbar ist. Ebenso laBt sich mit dieser Reaktion der
allmahliche konstante Anstieg der Antikbrpermengen in jener
Zeitperiode nachweisen, die wir seither als „Inkubations-
stadium“ bei der Antikorperbildung zu betrachten gewohnt
waren, well wir mit den roheren Reagenzglasmethoden inner-
halb dieser Zeitperiode keine Antigen-Antikorperreaktion zur
sinnlichen Wahrnehmung zu bringen vermochten.

Wir haben aber nach unseren Versuchen
keineswegs, wie man das seither annahm, eine
kritische AntikSrperbildung, etwa nach 7 bis 9
Tagen, sondern das kritische Auftreten der
Antikbrper wurde nur durch unsere unzulSng-
licheMethodik zum Nachweis geringer Mengen
vonAntikorpern vorgetauscht. Die Bedeutung, die die

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Auaphylaxie.

247

Tatsache eines so frflhen Auftretens der Antikdrper beim
pr&parierten Tier fQr die Erkl&rung gewisser Antigenwirkungen,
namentlich fflr die des Tuberkulins hat, warden wir waiter
unten besprechen.

m. Ueber den Einflnfi des im Beagenzglase gebildeten

Anaphylatozins anf die Temperatur beim normalen
Meersohweinohen.

In den seitherigen Versuchen haben wir die Anaphylatoxin-
bildung aus dem parenteral eingeftthrten EiweiB im Organismus
erfolgen lassen. Wir haben also in diesen Fieberversuchen
ein Analogon zu der aktiven Anapbylaxie, eine aktive Ana-
phylaxie, bei der nur „pyrogene‘‘, nicht aber mehr Temperatur-
senkung bewirkende oder tddliche Dosen des Anaphylatoxins
erzeu^t wurden.

Es erschien nun interessant, den Einflnfi des imReagenz>
glas gebildeten Anaphylatoxins anf die Temperatur beim
normalen Meerschweinchen zu prttfen. Die Darstellung des
Anaphylatoxins geschah in der Qblichen Weise aus Hammel-
sernm und Antihammelkaninchenserum.

Eb warden mehrere Bdhrchen mit je 2 ccm 1:100 veidunntem Hammel-
eerum und 2 ccm Eaninchenimmunserum angeeetzt; 1 Stunde 37 ", 24 Stun*
den Zimmertemperatur, zenthfugiert; Prazipitate reichlich mit Kochsalz*
Idsung gewaschen, Zusatz von je 4,5 Eomplementserum. 1 Stunde 37°,
24 Stunden Zimmertemperatur, zentrifugiert.

ZunUchst wurde die tddliche Dosis des Abgusses fflr
normale Meerschweinchen ermittelt, sie betrug 3,0 fflr ein
normales Tier von 200 g Kflrpergewicht. Den Einflnfi
kleinerer Dosen dieses Anaphylatoxins auf die Temperatur
beim normalen Meerschweinchen zeigt die folgende Tabelle.

Eine Reihe normaler Meerschweinchen wurden mit fallenden Mengen
des anaphylatoxinhaltigen Normalmeerschweinchenserums intraperiton^
gespritzt.

No.

1 M 380

M 387

M 374

M 375

M 376

Korpeigewicht

200 g

200 g

200 g

200g

200 g

Injektionsdosis

2,0

1,0

1 0,5

0,1

0,05

Temperatur vorher

38,0“

38,0°

38,0°

38,0°

38,2°

Temperatur nach

15'

38,0"

38,3"

38.2°

38,4°

38,2°

der Injektion

30^

37,4"

38,2°

38,3°

38,5°

38,3"

45'

37,0°

38,2°

39,0°

38,4°

38.2°

60'

37,2°

38,2°

39,2"

38,0°

38,2°

75'

37.3°

38,1°

39,4°

38,0°

38,2°

90'

38,0°

38,2°

39,4°

38,0°

38,2°

\

<

(/)

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UNIVERSITY OF IOWA

248

E. Friedberger und S. Mita,

Kurve 25.

Analog verlief ein weiterer der-
artiger Versuch mit einem anderen Anti-
Hammelkaninchenserum und Hammel-
serum. Darstellung des Anaphyla-
toxins wie oben, nur Hammelserum
1:10 statt 1 :100.

Ferner wurden gleichzeitig unter
Verwendung der gleichen Bestand-
teile Proben angesetzt, in denen die
gewaschenen Pr^zipitate mit inakti-
vierten Quoten derselben Komplement-
serummischung versetzt waren.

Normale Meerschweinchen erhalten fallende Mengen des anaphyla'
toxinhaltigen Normalmeerschwemchenserums intraperitoneal (Eurre 26).

No.

M 58

M 59

M 62

M 63

Gewicht

170

180

170

170

InjektioDsdosis

2,0

1,0

0,5

0,1

Temperatur vorher

38,0*

38,0®

38,0®

38,0®

Temperatur nach

15'

37,6®

38,0®

38,3®

38,0*

der Injektion

30'

37,8®

38,0®

39,0®

38,0®

45'

38,0®

38,0®

39,2®

38.0®

60'

38,0®

38,0®

39,0®

38,0®

75'

38,1®

38,0®

38,9®

38,0®

90'

38,2®

38,0®

38,5®

38,0®

105'

.38,2®

38,0®

38,4®

38,0®

\

<

/

—

Normale Meerschweinchen erhalten fallende Mengen des wie oben be*
reiteten Abgusses von InaktiTiertem Meerschweinchenserum intraperitoneal
(Kurve 27).

No.

M 60

M 61

M 64

M 65

Gewicht

180

180

170

170

Injektionsdosis

2,0

1,0

0,5

0,1

Temperatur vorher

^,3"

38,3®

38,0“

38,0®

Temperatur nach

15'

38.2®

38,3®

38,0®

38,0®

der Injektion

30'

38,3®

38,3®

38,0®

38,0®

45'

38,3®

38,3®

38,0®

38,0®

60'

38,3®

38,4®

.38,0®

38,0®

75'

38,2®

38,4®

38,0®

38,0*

90'

38,2®

38,4®

38,0®

38,0®

105'

38,3®

38,4®

38,0®

38,0®

—

—

—

—

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

249

Kurve 26.

Kurve 27.

Der Versuch zeigt in Uebereinstimmnng mit dem vorigen
eine Beeinflussung der E5rpertemperatur durch untertdd-
liche Dosen von Anaphylatoxin, w&hrend anaphyla-
toxinfreie, mit inaktiviertem Meerschweinchen-
serum hergestellte Abgiisse unter gleichen Be-
dingnngen wirkungslos sind.

Die Differenz zwischen der tddlichen Dosis und dem
Grenzwert fQr das Fieber ist in diesen Versuchen ganz be-
dentend geringer als in jenen, in denen die Bildung pyrogener
bezw. tddlicher Dosen des Anaphylatoxins im Organismus er-
folgte. Da haben wir ganz andere Distanzen zwischen der
akttt tdtenden und der pyrogenen Dosis. Der Unterschied IfiBt
sich aber wohl auf Grund der Natur des ganzen Prozesses er-
klfiren. Bei den frfiheren Versuchen erfolgte der ganze ProzeB
der Giftbildnng ans dem nativen Eiweifi im Organismus, und
wir kbnnen annehmen, daB eine Reihe von Spaltprodnkten
des EiweiBes pyrogene Wirkung entfalten, daher gentlgen
relativ geringe Men gen von Antigen, nm Fieber zu erzeugen.
Im letzteren Fall aber findet die Spaltnng znm grdBeren Teil
schon auBerhalb des Kdrpers im Reagenzglas statt, so daB dann
im tierischen Organismus vielleicht ein schnellerer weiterer
Abbau fiber die pyrogenen Spaltprodukte hinaus zu niederen
unwirksamen erfolgt. Auf diese Weise liegen die tOdliche und
pjrrogene Dosis nfiher zusammen.

rv. Ueber den BlnfluB der pr&parierenden Dosis anf die
Temperatnrreaktion beim anaphylaktis<dien Meersohweinohen.

In den voranfgehenden Versuchen war die Prfipariernng
durch gehend mit 0,01—0,02 Hammelserum in der ffir den

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250

E. Friedberger und S. Mita,

typischen aktiven Anaphylaxieversuch flblichen Weise erfolgt.
Es gait nun auch die Grenzdosis des Antigens fttr die Pr&-
parierung festzustellen, bei der die Reinjektion gerade noch
eine gegen die Norm erhbhte pyrogene Wirkung ergab.

Zu diesem Zweck wurde je eine Gruppe Meerschweinchen
mit Dosen von Hammelserum subkutan vorbehandelt, die
zwischen 0,01 und 0,000001 Hammelserum schwankten.

18 Tage nach der PrSparierung erfolgte die Bestimmung
der die Temperatur beeinflussenden Dosen bei intraperitonealer
Reinjektion.

Nachstehend folgen diese Versuche.

Torbehandlung mit 0,01 Hammelserum sobkutan.

Reinjektion nach 18 Tagen intraperitoneal.

No.

M 50

M51

M52

M53

M54

M55

Gewicht

200

210

220

200 1

210

220

Eeinjektionsdosis

t ,00001 1

1,000005

1,000001 i

1,0000005

1,00000011

,00000005

Temperatur vorher

1 38,0“

1 38,0“

1 38,3“

1 38,0“

38,0“

1 38,0“

Temperatur nach

15'

37,6“ I

38,0“

38,4“

38,2“

38,0“

38,0"

der Reinjektion

30'

37,4“

38,0“

38.5“

38,3“

38,0“

38,0“

45'

37,4“

! 38,0“

38,6“

38,4“

38,0“

38,0“

60'

37,6“

; 38,0“

.38.8“

38,5“

38,0“

38,0“

75'

37,7“

38,0“

:38,9“

38,8“

38,0“

38,0“

90'

37,8“

38,0“

39,1“

39,0“

38.0“

38,0“

105'

38,0“

38,0“

39,3“

39,1“

38,0“

38,0“

120'

38,0“

:38,0“

39,5"

39,2“

38,0“

38,0“

135'

38,0“

38,0“

39,8“

.39,2“

38,0“

38,0"

150'

38,0“

38,0“

40,0“

39,2“

38,0“

.38,0“

300'

38,0“

38,0“

39,0“

38,6“

38,0“

38,0“

\

<

/

—

Torbehandlung mit 0,001 Hammelserum subkutan.
Reinjektion nach 18 Tagen intraperitoneaL

No.

M26

M29

M30

Gewicht

200

200

220

Reinjektionsdosis

,001 1

,0005

,0001

Temperatur vorher |

1 38,5“ 1

.38,0“

1 38,0“

Temperatur nach

15'

38,5“

38,6“

38,0"

der Reinjektion

30'

,38.5“

.38,8“

38,0“

45'

38,5“

38,9“

38,0"

60'

38,5“

39,0“

38,0“

75'

38,5“

39,1“

38,0"

90'

38,5“

39,2“

38,0"

105'

38,5“

39,5“

38,0"

120'

38,5"

39,7“

38,0"

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Original from

UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

251

Vorbehandlang: mlt 0,0001 Hammelseram sabkatan.
BeiDjektion nach 18 Tagen intraperitoneal.

No.

M32

M33

M36

M37

Oewicht

200

220

220

170

Beinjektionsdosis

,01

,005

,001

,0005

I'emperatur vorher

38,0®

o

O

CO

00

o

o

38,0“

Temperator nach

15'

38,0“

38,0"

38,5"

.38,0“

der Beinjektion

30'

38,0"

38,3“

38,7"

38,0“

45'

38,0“

38,4“

38.7"

38,0“

60'

38,0“

38,5“

38,7"

38,0"

75'

38,0“

38,8“

38,8"

38,0“

90'

38,0“

39,0"

38,8“

38,0"

105'

38,0“

39,0"

38,9"

38,0“

120'

38,0"

39,0“

39,2"

38,0"

135'

38,0“

38,8“

39,5"

38.0"

150'

38,0“

38,8"

39,5"

:38,0"

165'

38,0"

38,8“

39,3"

38,0"

180'

1 38,0“

38,8"

39.0“

38,0"

—

/

—

Torbehandlong mit 0,00001 Hammelseram sabkatan.
Beinjektion nach 18 Tagen intraperitoneal.

No.

M38

M40

M42

M43

Gewicht

220

220

220

210

Beinjektionsdosis

0,1

0,05

0,01

0,005

Temperatur vorher

38,0"

38,0"

38,2"

38,0"

Temperatur nach

15'

38,0“

o

O

38,3"

38,0“

der Beinjektion

30'

37,0“

38,0“

38,5“

38,0"

45'

36,8“

38,0“

38,5"

38,0“

60'

37,0“

38.0“

38.6“

38,0“

75'

37,5"

38,0“

38,8"

38,0“

90'

37,8"

380"

39,0“

38,0“

105'

37,8“

38,1“

39,0“

38,0"

120'

37,8“

38,2“

39,0“

38,0“

135'

38,0“

38,2“

39,0“

38,0“

150'

38,0"

38,2“

38,8"

38,0"

165'

38,0“

38,2“

38,6“

38,0"

W

38,0“

38,2“

38,5“

38,0"

195'

38,0“

382"

38,5"

38,0“

\

<

/

—

Digitized by

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UNIVERSITY OF IOWA

252

£. Friedberger und S. Mita,

Torbehandlmig mit 0,000001 Hammelseniin sabkntan.

Beinjektion nach 18 Tagen intraperitoneaL

No.

M49

M45

M66

M67

M68

Oewicht

220

220

210

200

200

Relnjektionsdosis

1,0

0.5

0,1

0,05

1 0,01

Temperatur vorher

38,5"

1 38,0"

38,2“

38,1“

38.2“

Temperatur nach

15'

38,0“

38,0“

38,3“

38,1“

38,2“

der Beinjektion

37,5“

38,0“

38,6“

38,2“

38,2“

45'

37,0“

38,0“

38,7“

38,3*

38,2“

60'

37,0“

38,0“

38,8“

38,4*

38,2*

75'

37,0“

e

O

38,8*

38,6*

38,2“

90'

37,0“

38,0“

38,6*

39,2*

38,2*

105'

37,1“

38,0“

38,6“

39,4*

38,2*

120'

37.2“

38,0“

38,5*

39,6“

38,2*

135'

37;3“

38,0"

38,5“

39,6*

38,2*

150'

37,5“

38,0"

38,4*

39,6*

38,2“

300'

38,0“

38,0"

38,2“

39,0*

38,2"

\

<

/

—

In der folgenden Tabelle sind die Temperaturgrenzwerte
bei der Vorbehandlung mit den einzelnen Dosen noch einmal
tibersichtlich znsammengestellt.

Vorbehandl.
mit Hammel-
serum

0

(Kontr.)

0,01

0,001

0,0001

0,00001

0,000001

\

0,00001

0,1

1,0

<

1,0

0,000005

0,001

0,01

0,05

0,5

/

0,05

0,0000005

0,0005

0,001

0,01

0,05

0,01

0,0000001

0,0001

0,0005

0,005

0,01

Die Versnche ergeben, dafi bei Dosen von
Hammelsernm zwischen 0,01—0,000001 flir die
Priparierung die Empfindlichkeit mit Verringe-
rung der prftparierenden Antigenmenge abnimmt,
0,000001 ccm Hammelsernm stellt die Grenze
dar. Die mit dieser Dosis pr&parierten Tiere verhalten sich
bereits wie die normalen Eontrollen.

V. Ueber den Einflofi wiederholter Biweifiznfuhr anf die Tem-
perstnr normaler und pr&parierter Meersohweinohen.

In alien vorstehenden Versuchen wurde der Einflull einer
einmaligen parenteralen Eiweifizufuhr nntersucht. Es war aber
von vornherein auch eine fortgesetzte fiebererregende Wir-
kung bei wiederholter parenteraler Einverleibnng kleiner
Eiweiilmengen beim normalen wie beim pr^parierten Tier zu

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie.

253

erwarten. Bei letzterem wird ja durch die einmalige Einfahr
einer geringfdgigen pyrogenen EiweiBdosis von dem Antikdrper
nur wenig aufgebraucht und neu eingefflhrte Dosen kdnnen
immer wieder nnter neuer Fieberentwicklung abgebaut verden.

Beim normalen Tier haben wir andererseits, wie nns
unsere Versuche gezeigt haben, ein so schnelles Auftreten
von Antikdrpern, daB auch bier die Bedingungen ffir die Ent-
stehung eines kontinuierlichen Fiebers gegeben sind; dabei
wird die Art des EiweiBes fttr den Charakter der Kurve keine
wesentliche Rolle spielen, sofern man nur eben bei Ver-
wendung kleiner Dosen die Versuche bei homolog prilparierten
Tieren ausfQhrt bezw. immer wieder dasselbe Eiweifi ver-
wendet. So ist es ohne weiteres klar, dafi, wie der eine von
uns bereits ansgesprochen und durch Demonstration ent-
sprechender Kurven belegt hat, „es ganz in der Hand des
Experimentators liegt, ein intermittierendes oder remittierendes
Fieber oder einen kritischen Temperatursturz zu gewisser Zeit
zu erzeugen^ (Berl. klin. Wochenschr., 1910, No. 42). Ja wir
kdnnen sogar mit einem einzigen Eiweifikbrper, sofern wir nur
die quantitativen VerhtUtnisse bei einer Reihe von Tieren
vorher genhgend ausprobiert haben, jede Kurve irgendeiner
Infektionskrankheit kfinstlich reproduzieren. Ueber die Be-
deutung dieser Befunde zur Erkl&rung der Natur des Fiebers
bei Infektionskrankheiten werden wir weiter unten ausfflhr-
licher sprechen. Im nachstehenden bringen wir zuntlchst
eine Reihe von Versuchen fiber die wiederholte parenterale
EiweiOzufuhr bei Meerschweinchen ^).

In den folgenden 3 Versuchen wurden norm ale Meer-
schweinchen zun&chst intravends mit Hammelsernm behandelt
und am Tag danach mit bedeutend kleineren Mengen intra-
peritoneal reinjiziert. Am folgenden Tage wurde dann die
intraperitoneale Einspritzung nochmals wiederholt.

W&hrend bei der ersten Injektion 0,5, intravenSs ge>
geben, noch eine geringe Temperatursenkung hervorruft und
0,01 annUhernd die Grenzdosen fQr das Fieber darstellt,
genhgt nach 24 Stunden diese Dosis schon, nm sogar bei
intraperitonealer Injektion ein Ansteigen der Temperatur zu

1) Vgl. auch die unabhhngig von uns neuerdings gevonnenen Besul*
tate Vaughans in Bd. 9 dieser Zeitschrift.

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254

E. Friedberger and S. Mita,

bewirken. Nach weiteren 24 Stunden Ififit sich wiederum der
gleiche Effekt erzielen. Wir haben schon oben darauf hinge-
wiesen, dafi diese erhOhte ReaktionsfShigkeit bei der zweiten
Injektion zum Teil offenbar darauf bernht, dafi durch die erste
bereits innerhalb von 24 Stunden eine hinlftngliche Antikdrper-
bildung neu erfolgt ist.

5. IX. 3 Meerschweinchen erhalten je 0,5, 0,3, 0,01 Hammelamun
intraTenda. Den E]influl} aof die Temperatur zdgt die folgende Tabelle.

No.

M 199

M 200

M 201

E5rpei^wicht

200 g

220 g

250 g

InjektioDsdosis

0,5 iv.

0,3 W.

0,01 iv.

Temperatur vorher

38,2®

38,0®

3S^i®

Temperatur nach

15'

37,8®

38,0®

38?®

der Injektion

30'

38,0®

38,2®

38,4®

45'

38,2®

38,3®

38.6®

60'

38,3®

38,5®

38,8®

75'

38,4®

38,6®

38,8®

90'

38,5®

38,8®

39,0®

105'

38,5®

38,9®

39,1®

120'

38,5®

38,9®

39,2®

135'

38,5®

38,9®

39,2®

6. IX. Beinjektion mit Hammelserum, jedoch intraperitoneal.

No.

M 199

M 200

M 201

Beinjektionsdosis

0,01 ip.

0,01 ip.

0,01 ip.

Temperatur vorher

38,3®

38,1®

3gJ*

Temperatur nach

15'

38,5®

38,3®

38^5

der Bdnjektion

30'

38,6®

38,6®,

38,7®

45'

39,0®

38,9®

38,5®

60'

39,1®

39,0®

38,3®

75'

38,7®

39,3®

38,0®

90'

38,5®

39,9®

105'

39,9®

Kurve 28. Kurve 29.

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Ueber Anaphylaxie.

255

7. IX. III. Injektion mit Hammelsenmi intraperitoneal.

No.

M 199

M 200

M 201

BeiDjektioDsdods

0,02 ip.

0,02 ip.

0,02 ip.

Temperatur rorher

38,0®

39,2“

37,8“

Temperatur nach

15'

38,3“

39,4“

38,0“

der Beiojektion

30'

39,0“

40,0“

38,3“

45'

38,4“

39,8“

38,6“

Entsprechende Versuchs*
reihen wurden an pr&pa-
r i e r te D Tieren angestellt.

Bei einem Tier (No. 46, p. 256),
bei dem wir durch die Injektion
einer fQr ein 10 Tage lang pri-
pariertes Tier relativ grofien
Dose von Antigen (0,001 com)
einen Temperatursturz urn
fiber 3® herbeigeftlhrt haben,
rief am nSchsten Tag die In-
jektion einer lOmal grdBeren Dosis keinen weiteren Tem¬
peratursturz, aber auch keine Steigerung der Temperatur
hervor. Wir haben also hier eine vollkommene Anti-
anaphylaxie, nicht nur gegenflber den gewdhnlichen Sjm-
ptomen der Anaphylaxie, sondern auch nachgewiesen durch
die feinste uns seither bekannte Reaktion, die Fieber-
reaktion.

Am folgenden Tag jedoch reagiert dasselbe Tier bei der
intraperitonealen Injektion einer kleinen Eiweifimenge wieder «
mit Fieber, offenbar deshalb, weil auch hier inzwischen neue
Antikdrper gebildet sind.

Bei einem zweiten entsprechend prftparierten Tier (No. N 62)
yrar die am ersten Tag gegebene Dosis bedeutend geringer, und
dementsprechend haben wir auch nur einen relativ geringen
Temperatursturz um 1,5®.

Dagegen bewirken jetzt bei der am folgenden Tag vor-
genommenen intraperitonealen Injektion die gleiche Menge
(0,01 ccm) Hammelserum im Gegensatz zu dem vorigen Ver-
such hohes Fieber, eine Steigerung innerhalb einer Stunde um
fiber 2®.

Kurve 30.

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256

E. Friedberger und S. Mita,

Wahrend also im vorigen Versuch durch die groBere
Antigendosis, die eine starkere Reaktion hervorgerufen hatte,
die Antikorper verbraucht waren, sind jetzt oflFenbar bei der
Injektion einer kleineren Menge von Antigen noch soviel
iibrig geblieben, daB bei der Nachspritzung noch eine zur
pyrogenen Wirkung genfigende Menge von Anaphylatoxin er-
zeugt werden konnte.

In dem dritten Versuch (No. N 67), in dem eine Haramel-
serumdosis reinjiziert wurde, die die untere Eonstanzgrenze
darstellt, bewirkte gleichfalls am nachsten Tag 0,01 Hainmel-
seruin wieder eine Fiebersteigerung.

5. IX. 10. Drei 19 Tage zuvor mit je 0,02 Hammelserum subkutan
praparierte Meerschweincheii erhalten untertodliche Dosen Hammel¬
serum intravenos.

No.

N 46

N 62

N 67

Korperge^vicht

220 g

bC

o

I>

CM

250 g

Reinjektionsdosis

0,001

0,0005

0,00001

Temperatur vorher

38,2“

38,6“

38,4“

Temperatur nach

15'

37,3“

37,6“

38,4“

der Reinjektion

30'

34,8“

38,0“

38,4“

45'

36,0“

38,4“

38,4“

60'

36,5“

38,5“

38,4“

75'

36,8“

38,7“

38,4“

90'

37,5“

38,8“

38,4“

105'

38,0*

39,0“

38,4“

120'

38,2“

39,0“

38,4“

135'

38,2“

39,0“

38,4“

6. IX. Zweite Reinjektion mit je 0,01 Hammelserum intraperitonea 1.

No.

N 46

N 62

N 67

Reinjektionsdosis

0,01

0,01

0,01

Temperatur vorher

38,1“

38,0“

38,0“

Temperatur nach

15'

38,1“

38,2*

38,2“

der Reinjektion

30'

38,1“

39,0“

38,3“

45'

38,1“

39,4“

38,5“

60'

38,1“

40,2“

38,5“

75'

38,1“

40,3“

38,5“

90'

40,1“

38,5“

105'

39,8“

39,0“

120'

39,0“

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Ueber Anaphjlaxie.

257

7. IX. Dritte B^jektion mit 0,02 HammeLserum intraperitoneal.

No.

N 46

N 62

N 67

Beinjektionsdosis

0,02

0,02

0,02

Temperatur vorher

.38,0“

38,0®

38,0®

Temperatur nach [ 15'

38,4®

38,4®

38,2®

der Beinjektion I 30'

38.6®

39,0®

38,4®

' 45'

3‘»,0®

39,4®

38,6®

60'

39,0®

Kurve 32.

Kurve 31.

Kurve 33.

1

m4 «

/ :

-1

1

LZ_

1^

1

i. _

: 1

if

» « 4 * 7

f ft *

n /!« f

N 67.

Wir bringen dann noch einen entsprechenden Versuch
bei einem bereits 55 Tage zuvor pr&parierten Tier; auch bier
haben wir 24 Stunden nach der Darreichang einer Dosis, die
eine Temperatursenkung bewirkt, dnrch 0,02 Hammelserum
eine XemperatnrsteigeruDg. Sobald die Temperatur wieder
zn sinken beginnt, genftgt die Zufahr der gleichen Dosis, um
das Fieber von neuem anzuregen, ja sogar noch intensiver
zn gestalten (vgl. anch sp&tere Versuche).

Zaittchr. f. ImmaaiUtaforwhaiif. Oilf. Bd. X. 17

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UNIVERSITY OF IOWA

258

E. Friedberger imd S. Mita,

Meerschweinchen mit 0,01 Hammelserum intraperitoneal Torbehandelt.

Zeit: 55 Tage.

13. IX. 14. IX.

No.

C 73

Korpergewicht

325 g

Reinjektionsdosis

1 0.0005 iv.

Temperatiir vorher

1 38,2«

Temperatiir nach

15'

■ 37,5“

der Reinjektion

3(y

37,0“

45'

36,8“

60'

37,0“

75'

37,3*

90'

38.2“

Reinjektion 8-
dosis

Zeit

C 73

0'

38.4“

0.02 ip.

15'

1 38,7“

30'

39,3“

45'

39,4*

60'

39,0“

0,02 ip.

75'

39,5“

90'

40,0“

1 105'

39,8“

120'

39,2“

0.02 ip.

135'

39,2“

150'

39,4“

165'

38,8“

Kurve 34.

Sowohl beim normalen wie
beim prftparierten Tier lUfit sich
also im AnschluB an eine In-
jektion, die Temperatursen-
kung hervorruft, Temperatur-
steigerung bewirken. Dock
liegen die Verh&ltnisse beim
normalen and beim prUparier-
ten Tier bezflglich der quanti-
tativen Verh§Itnisse nicht iden-
tisch. Beim normalen Tier er-
zielen wir den Temperatursturz mit relativ groBen Dosen and
kdnnen dann nacb 24 Stunden dank der neuen Bildung der
Antikbrper mit relativ kleinen Mengen schon Fieber erzeugen.

Beim praparierten Tier wird umgekehrt die Senkung
durch minimale Mengen verursacht, nnd der dabei zustande
kommende teilweise Verbrauch der Antikdrper bedingt, dafi
nach 24 Stunden durch weit hdhere Dosen keine stirkere
Temperatursenkung, sondern nur mehr Fieber erzeugt wird.

In weiteren Versuchen haben wir, urn die Verh&ltnisse
bei Infektion mehr nachznahmen, fortgesetzt hintereinander
in kurzen Intervallen minimale EiweiBmengen bei prBparierten

C 73.

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Ueber Anaphylaxie.

259

Tieren injiziert, nachdem wir vorher bei entsprechend vor-
behandelten Tieren die Grenzwerte genan ermittelt batten.
Wegen der notwendigen hUnfigen Wiederholung konnten die
Injektionen schon aus technischen Grtinden nicht mehr intra-
vends geschehen, sondern intraperitoneal.

Wir bringen znnilchst einige Beispiele von derartigen
Fieberkurven, gewonnen an mit Pferdeserum vorbehandelten
Meersch weinchen.

In dem nachstehenden Versuch, bei dem ein 27 Tage zuvor
prfipariertes Tier benutzt wurde, war am 23. Tag die Konstanz-
grenze mit 0,02 bestimmt worden, eine Dosis, die eben noch
eine minimale Temperatursteigerung hervorrief. Dafi die
Verh&ltnisse am 27. Tag, dem Tage nnseres Versuches, ent¬
sprechend lagen, zeigt die Folge der ersten Pferdeserum-
injektion. Wir haben nur einen minimalen Anstieg der
Temperatur, und innerhalb von 30 Minuten ist sie fast
zum Ausgang zurflckgekehrt. Viel intensiver aber ist die
Wirkung der gleichen Dosis, wenn sie zu der Zeit, in der
die Temperatur infolge der ersten Injektion wieder zu sinken
beginnt, von neuem intraperitoneal gegeben wird. Wir haben
dann einen weit bedeutenderen Anstieg der Temperatur zu
verzeichnen. Durch eine dritte Injektion erfolgt wiedenim
eine etwas stfirkere Steigerung. Nachdem die Temperatur
wieder vdllig zur Norm zurflckgekehrt war, liefi sich der
gleiche Effekt von neuem durch die gleiche Dosis erzielen.

30. IX. Meerschweinchen No. 181, 230 g, 27 Tage zuvor mit 5,0 Pferde¬
serum subkutan pramriert. Das Tier erhmt in kwzen Intervallen (siehe
Tabelle) mehrmals 0,02 Pferdeserum intraperitoneal.

Seinjektionsdosis

Zeit

Temperatur

Eeinjektionsdoeis

Zeit

Temperatur

0,02

0'

37,80

0,02

300'

38,60

15'

38,20

315'

38,6®

0,02

30'

38,0*

0,02

330'

38,40

45'

39,00

345'

38,40

60'

38,90

360'

38,70

0,02

375'

38,40

75'

39,20

0,02

90'

39,10

390'

39,20

285'

38,00

0,02

405'

39,10

420'

39.30

435'

39,10

17*

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UNIVERSITY OF IOWA

260

E. Friedberger und S. Mita,
Kurve 35.

Der folgende Versuch wurde mit Meerschweinchen einer
Serie angestellt, die 24 Tage zuvor mit 0,02 Pferdeserum sub-
kutan vorbehandelt war. Die untere Konstanzgrenze lag bei
den so vorbehandelten Tieren bei 1 mg. 5 mg stellt die Fieber-
grenze dar (s. folgende Tabelle).

4. X. Meerschweinchen, 24 Tage zuvor mit 0,02 Pferdeserum sub-
kutan vorbehandelt. Ermittelung der Grenzwerte bei intraperitonealer Re¬
in jektion.

No.

M 216

M.206

M 208

M 218

M 220

KSrpergewicht

300 g

310 g

320 g

320 g

320 g

Elein jektion sdosis

1 0,5

1 0,1

1 0,01

1 0,005

0,001

Temperatur vorher

1 38,8“ 1

38,3“

1 :i8,0“ 1

1 38,0“

38,2“

Temperatur nach' 15'

1 38,6“

38,4“

1 39,0“

38,2“

38,2“

der Reinjektion , 30'

38,4 «

38.3“

i 39,3“

38,9“

38,2“

45'

, 38,0“

.38,3“

39,0“

38,6“

38,2“

1 60'

37,4“

38,3“

i 75'

37,0“

.38,3“

1 90'

37,0“

38,3 “

1 1

\

<

1

/

—

Wir sehen, dafi im nachstehenden Versuch durch diese
Dosis nur ein geringes und kurzdauerndes Fieber dement-
sprechend hervorgerufen wurde. Wenn man nun hier wiederum
in dem Moment, in dem die Temperatur eben zu sinken be*
gonnen hatte, neue Injektionen vornahm, so genbgten noch
Dosen, die betr9.chtlich unterhalb der Fiebergrenze lagen, um
das Fieber von neuem anzufachen, ja noch intensiver zn ge-
stalten, als es die Grenzdosis bei einmaliger Zufuhr vermochte.
So sehen wir, dail die Dosis, die beim prEparierten Eontrolltier

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Ueber Anaphylaxie.

261

die untere Eonstanzgrenze darstellte, nfimlich 1 mg, 45 Minuten
nach der ersten Injektion verabfolgt, eine bedeutend hbhere
Fiebersteigernng bewirkte als vorher die fQnffach hdhere
Grenzdosis fflr das Fieber. Ja selbst der zehnte Teil der Kon-
stanzgrenze vermochte bei diesem Tier das Fieber noch auf
einer gewissen Hdhe zo erhalten.

4. X. Meerechweinchen No. M218, 320 g, 24 Tage zuvor mit 0,02
Pferdeserum subkatan rorbehandelt Das Tier erhalt in kurzen Interrallen
Dosen von 0,005—0,0001 Pferdesemm intraperitoneal

1

1

Zeit

Temperatur

Beinjektionsdosis

Zeit

Temperatur

j

O'

38,00

0,0001

0,005

150'

39,20

15'

38,2“

165'

39,2®

30'

38,9®

ISO'

39,2®

45'

38,60

195'

39,2®

0,001

210'

39,0®

60'

38,8*

225'

38,8®

75'

39,00

0,0001

90'

39,40

1

240'

38,6®

105'

39,30

255'

38,2®

0,0005

270'

38,0®

120'

39.50

285'

38,0"

135'

39,20

Kurve 36.

£s ergibt sich also aas dem vorhergehenden Versuch, daC,
sobald das Fieber angeregt ist, die Grenzdosis bei wieder-
holter Zufuhr in kurzen Intervallen die Temperatur immer
hdher treibt und andererseits auch subfebrile Dosen nunmehr

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262

E. Friedberger imd S. Mita,

die Temperatur noch welter zu steigern imstande sind. In
analoger Weise mit diesen Versuchen mit Pferdeserum ver-
liefen auch Experimente, bei denen andere Eiweifiarten be>
nutzt wurden.

Wir bringen als Beispiel noch einen Versuch von einem
mit Hammelserum prUparierten Meerschweinchen, bei dem
die absoluten Mengen fur die Fiebererzeugung bedeutend ge-
ringer waren.

Die untere Grenzdose lag, wie sich auch aus dem folgen-
den Versuch ergibt, bei 0,000005, eine Dosis, die jedoch nur
einen Anstieg um einige Zehntelgrade bewirkte; wurde aber,
sobald die Temperatur eben zu sinken begann, nur die H&lfte
dieser Dosis nachgespritzt, so erfolgte eine ganz bedeutende
Temperatursteigerung, um 2®, und noch der fQnfte Teil der
Grenzdosis, d. h. ein Millionstel Kubikzentimeter Hammelserum,
Oder ein Zehnmillionstel HammeleiweiB, vermochte die wieder
sinkende Temperatur eine Zeitlang auf der H6he von 40® zu
erhalten. Kleinere Dosen konnten dann zwar das Fieber nicht
mehr unterhalten, doch kehrte erst nach 6 Stunden die Tem¬
peratur wieder znr Norm zurfick.

4. X. 10. Meerschweinchen No. C 81, 360 g, 77 Tage zuvor mit 0,01
Hammelserum intraperitoneal prapariert Das Tier erhMt in kurzen Inter-
vallen minimale Mengen (s. Tabelle) von Hammelserum intravenos.

.Reinjektionsdosis

Zeit

Temperatur

O'

37,8®

0,000005

15'

38,1®

30'

38,4®

45'

38,0®

0,0000025

60'

38,4"

75'

39,0®

90'

39,9®

105'

39,7®

0,000001

120'

39,8®

135'

39,8®

150'

39,8®

165'

39,8®

180'

39,8®

195'

39,8"

210'

39,6®

Beinjektionsdosis

Zeit

Temperatur

0,0000005

225'

39,2®

240'

39,0®

0,000005

255'

38,8®

270'

38,6®

285'

37,6®

300'

37,5®

315'

37,8®

330'

37,8®

345'

37,8®

365'

37,8®

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Original from

UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylazie. 263

Kurve 37.

7S or » M m /jt iiJ » ^ tit JS » » 58 B*

C 81.

Ganz analog verlief zun&chst der folgende Versuch bei
einem 49 Tage zuvor mit 0,02 Hammelserum pr&parierten Tier.
Hier trieben noch 5 Zehnmillionstel Kubikzentimeter des homo-
logen Eiweifies die Temperatur fiber 40®. Doch bewirkte die
Darreichnng einer bedeutend grdfieren Dosis (0,75) ionerhalb
von 45 Minuten eine Temperatnrsenkung yon fast 8®, also
eine kfinstliche Krise, die dem kritischen Temperaturstnrz bei
gewissen Infektionen zu vergleichen ist

Meerschweinchen No. 498, 250 ^ 49 T^e zuvor mit 0,02 Hammel¬
serum subkutan vorbehandelt. Dasher erhmt in kiirzen Interrallen die
in der Tabelle rerzdchneten Mengen von Hammelserum intraperitoneal.

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264

E. Friedberger und S. Mita,
Kurre 38.

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Etwas allm&hlicher erfolgte die Krise in dem folgenden
Versuch.

Meerschweinchen No. 28. 30 Tage zuTor mit 0,02 Hammelaerum

snbkutan rorbehandelt. Beinjektion intraperitoneal.

InjektionsdofiiB

Zdt

Temperatur

o

o

0,000001

15'

38,5*

30'

38,7*

45'

38,5*

0,000001

60'

38.8*

75'

39,0®

90'

39,2®

105'

39,5®

120'

39,6®

135'

40,0*

150'

40.0°

165'

39,8®

Google

Injektionsdoais

Zeit

Temperator

0,000001

180'

39,9®

195'

40,0®

210'

40,0®

225'

40,0“

240'

40,0®

255'

39,8*

0,000001

270'

39,6*

285'

39,6®

0,75

300'

39,0®

315'

38,0*

330'

38,0®

345'

38,0°

360'

37,6®

375'

37,2®

390'

37,5®

405'

38,0®

420'

38,0®

435'

38,0®

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UNIVERSITY OF IOWA

Ueber Anaphylaxie. 265

Kurve 39.

Wenn wir z. B. die Kurven 37 und 38 vergleichen,
so koDstatieren wir, da6 sie einen vollkomoien verschiedenen’
Charakter haben, obwohl sie doch alle drei bei mit Hammel-
serum priLparierten Tieren durcb ReiDjektioD mit Hammel-
serum erzeugt worden sind, also unter Verbaitnissen, unter
denen sicb nur ein einbeitlicbes Gift im Tierkorper bilden
kann. Auf die Bedeutung dieser scbeinbar so paradoxen
Tatsacbe, daB durcb ein und dasselbe Eiweifi die verscbieden-
sten Fiebertypen erzeugt werden konnen, werden wir in der
allgemeinen Besprechung im AnscbluB an unsere Versucbe
nocb n§.ber eingeben.

VI. Ueber den EinfluB der zweiten^) Beinjektion („dritte
Izdektaon**) bei antianaphylaktischn Tieren.

Es erscbien uns interessant und wicbtig, aucb die Anti-
anapbylaxie mit der Fieberreaktion n&ber zu untersucben.
Nacb der Auffassung des einen von uns stellt die aucb fbr
die Deutung des Wesens der Anapbylaxie so wicbtige
Antianapbylaxie eine Anapbylaxie refracta dosi dar,
d. b. eine verminderte oder aufgebobene Reaktionsf^bigkeit
bei einer dritten Zufubr von EiweiB infolge partiellen oder
totalen Verbraucbs der Antikbrper bei der Reinjektion.

Die Metbode der Beurteilung der Antianapbylaxie nacb
sicbtbaren Krankbeitssymptomen ist ja relativ rob. Aucb bier

1) Wir bezeichnen im nachstehenden als zweite Keinjektion die ,,dritte
Injektion“, also die bei priiparierten Tieren (erste Injektion) auf die Re-
injektion (zweite Injektion) folgende Einspritzung.

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266

E. Friedberger und S. Mita,

war die Methods der Fiebererzeugung geeignet, uns feinere
Ausschllige noch anzazeigen.

Es war einmal zu untersuchen, wie sich die Temperatur
bei einer Serie gleichartig prEparierter Tiers, die mit ver-
schieden grofien Dosen reinjiziert warden, bei der dritten
Injektion verhielt.

Ferner muGte man das Verhalten verschiedener EiweiB*
dosen bei der dritten Injektion bei Tieren prtifen, die mit
gleichen EiweiBmengen gleichlange vorher reinjiziert
waren. Im ersteren Falle (Variierung der Reinjektionsdosen)
muBte, wenn unsere Vorstellung fiber das Wesen der Anti*
anaphylaxis richtig war, bei kleineren Reinjektionsdosen mit
Temperaturstnrz die dritte Injektion auch gr5fierer Dosen
Fieber hervorrufen, weil der Rest von ungesflttigten Antikorpern
wohl noch zur Erzeugung einer pyrotoxischen, nicht aber mehr
zur Erzeugung einer anaphylatoxischen Dosis ausreichte.

Wurde bei der Reinjektion eine Dosis gegeben, die gerade
' nur etwas unter der tbdlichen lag, so war ein vollkommener
Verbrauch der Antikdrper zu erwarten und bei einer gewissen
Dosis dttrfte bei der zweiten Reinjektion innerhalb eines nicht
zu groBen Zeitintervalls hberhaupt keine Fieberreaktion mehr
zustande kommen.

Wir haben bereits weiter oben Versuche mitgeteilt, die
auch bezhglich der Antianaphylaxie mit dieser Voraussetzung
vollkommen flbereinstimmen. Da haben wir z. B. bei Re¬
injektion mit der unteren Konstanzgrenze nach 24 Stunden
durch dritte Injektion von 0,01 Fieber; ebenso wenn zur
Reinjektion Dosen verwandt wurden, die nur geringen Tem-
peratursturz bewirkten. Wurde dagegen die Reinjektion mit
einer Dosis vorgenommen, die einen enormen Temperatur¬
stnrz herbeiftihrte, d. h. nahe der tddlichen lag, so ruft tat-
s&chlich 0,01 bei der dritten Injektion im Gegensatz zu den
beiden vorigen Ffillen kein Fieber mehr hervor, ganz ent-
sprechend unserer Voraussetzung.

Bei konstanten Reinjektionsdosen, bei prfiparierten
Tieren, die Fiebersturz aber nicht vblligen Verbrauch der
Antikbrper bedingten, muBten unseren Annahmen entsprechend
grSBere Dosen von EiweiB bei der dritten Injektion keinen
Temperaturstnrz mehr herbeifflhren, weil die l^stantikdrper.

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Ueber Anaphylaxie.

267

sich auf eine zu grofie ADtigenmenge verteilend, nicht mehr
eine toxische Dosis abzubauen vermochten. Bei Verringerung
der Dosen fttr die dritte Injektion mufite dagegen wieder
Fieber entstehen und bis zu einem gewissen Grade urn so
st&rkeres, je welter wir mit der Dosis heruntergiugen. Die
Richtigkeit dieser Voraussetzung zeigen die folgenden Versuche.
Es wurde eine Reihe normaler Meerschweinchen mit je 0,02
Pferdeserum subkutan vorbehandelt.

24 Tage nachher erhielten alle Tiere 0,02 Pferdeserum
intraperitoneal. Es zeigten nun vdllig fibereinstimmend inner-
halb etwa einer Stunde alle Tiere eine Temperatursenkung
um 2—4**. 24 Stunden spMer erhielten diese vier in gleicher
Weise antianaphylaktisch gemachten Tiere eine dritte Injektion
von Pferdeserum intraperitoneal, jedoch in wechselnden Dosen.
Das Resultat der Reinjektion sowohl wie der dritten Injektion
zeigen die folgenden Tabellen und Kurven.

Meerschweinchen, vorbehandelt mit 0,02 Pferdeserum subkutan. Zeit:
24 Tage. Eeinjektion intravenbs. II. Reinjektion intraperitoneal.

No.

M 202 No.

M 202

Korpergewicht

300 g Dosis der III. Injektion

1,0 ip.

Beinjektionsdosis |

0,02 iv. Temperatur vorher

1 39,0“

Temperatur vorher

:38,4® Temperatur nach

15'

30'

45'

60'

90'

135'

39,0®

39,0®

39,0®

39,0®

39,0®

39,0®

Temperatur nach
der Reinjektion

15'

30'

45'

180'

195'

210'

225'

368® Injektion

^^2®

35,0®

36,5®

37,0®

37,8®

38,4®

Meerschwanchen: Vorbehandlung, Zeit, Ort der Reinjektion, Ort der

II. Reinjektion wie oben.

No.

1 M 217 No.

M 217

Kdrpergewicht

300 g Dosis der III. Injektion

0,5 ip.

Beinjektionsdosis

0,02 iv. Temperatur vorher

39,0®

Temperatur vorher |

38,5® Temperatur nach

15' 1
30'
45'
60*
75'
90'
135'

I 39,6®
39,8®
39,8®
39,8®
39,8®
39,8®
39,0®

Temperatur nach
der Reinjektion

15'

30'

45'

60'

195'

210'

36,2® Reinjektion

34^4®

34,4®

34,8®

38,0®

38,5®

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268

E. Friedberger und S. Mita,

MeerschwemcheD. Vorbehandlung usw. wie oben.

No.

M 213

KSrpergewicht

290 g

ReinjektionsdosiB

0,02 ccm iv.

Temperatur vorher

38,1®

Temperatur nach

15'

36,2»

der Beinjektion

30'

35,4®

45'

35,0®

60'

35,0®

75'

35,0®

90'

35,2®

225'

37,4®

240'

37,8®

255'

38,0®

270'

38,1®

No.

M 213

Dosis der III. Injektion

0,01 ccm ip.

Temperatur vorher

39,0®

Temperatur nach

1 15'

39,4®

der Beinjektion

30'

40,0®

45'

40,0®

60'

39,8®

75'

39,7®

90'

39,5®

135'

39,0®

Meerschwdnchen. Vorbehandlong usw. wie oben.

No.

M 221

Korpergewicht

200 g

Reiujektionsdosis

0,02 ccm iv.

Temperatur vorher

1

c

O

Temperatur nach

15'

36,5®

der Reinjektion

30'

35,8®

45'

35,0®

60'

34,2°

75'

34,0®

90'

34,5®

210'

38,0®

No.

M 221

Dosis der III. Injektion

0,005 ccm ip.

Temperatur vorher

38,0®

Temperatur nach

15'

38,6®

der Reinjektion

30'

38,8®

45'

39,0®

60'

39,2®

75'

39,5®

90'

39,2®

135'

39,2 ®

Kurve 40.

Kurve 41.

M 202. M 217.

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Ueber Anaphylaxie.

269

Kurve 42. Kurve 43.

M 213. M 221.

Wir sehen tatsSchlich, dafi bei Verwendnng grOfierer Oosen
zur dritten Injektion (1,0) die Temperatur konstant blieb, bei
0,5 haben wir Temperatursteigemng von 0,8®, bei 0,01 um
1® und bei noch kleinerer Dosis (0,005) um 1,5®.

vn. SohltifibetTaohtcuigeii.

Das wichtigste Ergebnis der vorstehenden Versuche dilrfte
in der Mdglichkeit liegen, beim prftparierten Tier eine enorme
Steigerung der K5rpertemperatar auf die Zufuhr von Mengen
des homologen Eiweifies zu erzielen, fiber deren Winzig-
keit wir uns fiberhaupt kaum noch eine Vorstellung machen
kdnnen. Dafi artfremdes Eiweifi beim normalen Tier in kleinen
Dosen Fieber, in grfifieren Temperatnrsenkung bewirkt, dafi
hier keine scharfen Grenzen bestehen, sondem Uebergfinge mit
zahkeicben Zwischenstnfen, wissen wir bereits dnrch die be-
deutsamen Untersnchungen Krehls und seiner Mitarbeiter ^).

Erehl hat sogar bereits wenigstens ffir das abgetfitete
Bakterieneiweifi an die Mdglichkeit gedacht, „dafi bei der
Ldsung der Bakterienkdrper im lebenden Organismus erst
Substanzen gebildet werden kdnnten, welche chemisch be-
sonders different sind‘‘, eine Vermutung, die durch den uns
geglfickten Nachweis von Anaphjlatoxin aus Bakterien und

1) Archir f. experim. Pathol., Bd. 35, 38, 40. Daselbst auch die altere
Literatur.

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270 E. Friedberger und S. Mita,

den Nachweis der Fieberreaktion auch durch Anaphylatoxin
bewiesen ist^.

Er hat speziell bei wiederholter Zufuhr an mehreren Tagen
hintereinander protrahiertes Fieber zu erzeugen vermocht und
zwar mit immer kleineren Dosen; diese Beobachtung steht
gleichfalls mit den Befunden von Erehl sowie vonMatthes
in Einklang, wonach ^gebrauchte^ Tiere, d. h. schon einmal
mit EiweiB gespritzte, ganz allgemein leichter auf die Zufuhr
von Antigen reagieren als ungebrauchte. Das gilt sogar bei
Verwendung grSBerer Dosen und gegenflber heterologem
EiweiB.

In nnseren Versuchen, in denen wir mit den Grenzdosen
gearbeitet haben, trat dagegen die Spezifitit deutlich in Er-
scheinung.

Auch Vaughan hat vor nunmehr 2 Jahren beim normalen
Kaninchen Untersuchnngen fiber den EinfluB parenteraler Zu¬
fuhr von EiweiB auf die Korpertemperatur angestellt.

Obwohl bereits vor einiger Zeit F. Kraus (v. Noordens
Handbuch) die Vorgfinge bei der Immunisierung mit dem er-
hfihten EiweiBverbrauch im Fieber in Verbindung gebracht,
und damit zum ersten Mai ein besonderes Verhalten des im-
munisierten Organismus gegenfiber der parenteralen Antigen-
zufuhr festgestellt hat, so erkannte man doch nicht klar, daB
wir es hier mit einer enormen Steigerung einer physiologischen
Reaktion beim prfiparierten Tier zu tun haben.

Die quantitativen Verhfiltnisse, die hier ermittelt wurden,
gestatteten unbedenklich die kfinstliche Fieberreaktion mit

1) Krehl hat ubrigens auch bereits lange 2^it, bevor wir die Be-
deutung der parenteralen Zufuhr des Antigens fiir die Immunitatsreaktion
erkannt haben, betont, dafi zur Fiebererzeugung die toten Bakterien direkt
in den Saftestrom gelangen miifiten. Die Versuche von Bubner, der
durch Ueberfiitterung von Hunden mit EiweiB Fieber erhielt und die
analogen Resultate von Finkler am hungemden Meerschweinchen sprechen
nicht gegen die Richtigkeit dieser Tatsache fur das EiweiB im allgemeinen.
In diesen Fiitteningsversuchen lagen die Bedingungen so, daB geringe
Mengen des EiweiBes der enteralen Verdauung entgehen und direkt in die
Blutbahn gelangen konnten. Eine Analogie zu diesen Versuchen bilden
jene von Bosenau und Anderson, die ja auch Anaphylaxie beim Meer¬
schweinchen durch Fiitterung mit EiweiB erzeugen konnten.

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Ueber Anaphylaxie. 271

der nattirlichen Fieberreaktion bei Infektionskrankheiten in
Beziehung zu setzen.

Darauf soli welter unten noch n&her eingegangen werden.

Hier miissen wir uns zun&chst fiber die Ursache des
Fiebers bei der parenteralen Zufuhr so minimaler Eiweifi-
mengen beira prfiparierten Tier Klarheit verschaffen.

Es handelt sich (daffir spricht der ganze Zusammenhang
der Erscheinung, vor allem auch die Mfiglichkeit der Fieber-
erzeugung darch Anaphylatoxin) um eine anaphylaktische
Reaktion, sofern wir den Begriff der Anaphylaxie nicht mehr
rein symptomatisch fassen, als die tddliche Wirkung kleiner
Eiweiilmengen beim prfiparierten Tier, sondern ganz allgemein
als eine bedeutende Steigerung der ReaktionsfShigkeit im
Vergleich zur Norm gegenfiber artfremdem Eiweifi.

Wir mfissen annehmen, dafi die gewfihnliche Anaphylaxie
dadurch zustande kommt, daB aus dem parenteral eingeffihrten
Eiweifi Spaltprodukte entstehen, die tfidlich wirken, und
ebenso ist es bei der Darstellung des Anaphylatoxins in vitro.

Genau wie wir nun hier durch Verringerung der ein¬
geffihrten Menge znerst statt Tod Temperatursturz, dann nach
einer Dosis, die die Temperatnr scheinbar unbeeinflufit Ififit,
Temperatursteigerung haben, bis wir schliefilich an einen
unteren Schwellenwert kommen, genau so verhfilt es sich,
wenn in den prfiparierten Organismus nicht fertiges Ana¬
phylatoxin, sondern Eiweifi in untertddlicher Dosis eingeffihrt
wird.

Dem bei der aktiven, der passiven Anaphylaxie und der
primfiren Antiserum wirkung im Kdrper sich bildenden sowie
dem im Reagenzglas gebildeten und in den Organismus ein¬
geffihrten Anaphylatoxin kommt also auf den Organismus, je
nach der Dosis, eine dreifache Wirkung zu:

1) die mehr oder weniger akut tddliche grfifierer Dosen;

2) die „psychrogene“mittlerer Dosen;

3) die npyrogene'^ minimaler Dosen.

1) Von (richtiger wiire wohl die Ableitung von

xo <]>5xo( = die Ealte, doch wird peychogen in anderem Sinne bereits
gebraucht).

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272

E. Friedberger imd 8. Mita,

Schon aus der Tatsache der v511ig einheitlichen Wirkung
des im Reagenzglas aus den verschiedensten Antigenen dar-
gestellten akut tCdlichen Anaphylatoxins batten wir auf die
Einheitlichkeit des Giftes geschlossen.

Das gilt wenigstens in funktioneller Beziehung.

Unsere Fieberversuche brachten uns weitere Argnmente
in der gleichen Richtung.

Wir haben gesehen, und anch die vorstehenden Versuche
liefern dafbr Beweismaterial, daB bei parenteraler Zufuhr
minimaler Eiweifimengen beim pr^parierten Tier sich die ver¬
schiedensten Fiebertypen durch ein und dasselbe EiweiB er-
zeugen lassen, je nach dem Ort der Injektion, der Dosis und
dem zeitlichen Interval! zwischen den einzelnen Injektionen.
Durch die beiden letzteren Faktoren wird vor allem auch die
Antianaphylaxie beeinflufit, deren hohe Bedeutung fiir den
Charakter der Fieberkurve die Versuche des 6. Teiles des
experimentellen Abschnittes dieser Arbeit hberzeugend dartun.

Aus einem EiweiB kann aber nur ein einheitliches
Gift Oder ein einheitliches Gemenge verschiedener Gifte resp.
Korper mit einer bestimmten giftigen Gruppierung sich bilden,
und daraus folgt, wie der eine von uns bereits an anderer
Stelle (Deutsche med. Wochenschr., 1911, No. 11) ausge-
sprochen hat:

,.daQ man die Verechiedenheit der Symptome keinesw^ als Kriterium
fiir dne Verschiedenheit der Gifte bei derartigen komplizierten biologischen
Prozessen von vomherein anzusehen braucht.

Wie bei der enteralen Verdauung einheitliche Abbauprodukte aus den
verschiedensten Eiweifikorpem sich bilden, so kdnnen wir annehmen, dafi
auch bei dem parenteralen Eiweifiabbau ein einheitliches Gift entsteht. Da
die Bakterien bei der Infektion im Organismns nichts anderes sind als
parenteral vorhandenes EliweiS, so ist es nicht einzusehen, weshalb nicht
auch das aus Bakterien entstehende Gift mit dem iibrigen Anaphylatoxin
als identisch anzusehen ist.

Entsprechend den eben geschilderten Variationen, die man im Sym-
ptomenbild mit dem einheitliehen Gift aus einem einzigen EiweiBkorper
erzeugen kann, diirfen wir annehmen, dafi auch die Verschiedenhdten im
Veriauf der einzelnen Infektionskrankheiten keineswegs die Annahme be-
sonderer differenter, spezifischer Gifte notwendig machen.

Die Verschiedenheiten der Krankheitsbilder finden v5llig geniigende
jind befriedigende Erklarung mit einem Anaphylatoxin, das sich aus den
verschiedensten Bakterien abspalten liil^t.

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Ueber Anaphylaxie.

273

Ob daneben auch besondere spezifische Oifte fiir die eiazelnen Id-
fektionekrankheiten beetehen, sei dahingestellt; bewiesen ist es nlcht, und
ndtig ist ihre Annahme nicht.

Die Verschiedenheiten der Enmkheitsbilder bd den einzelnen In-
fektionen sprechen nicht dagegen. Man kann sich vorstellen, da6, ebenso
wie die kunstlich erzeugbaren ,^wei£kTankheiten“, die einzelnen Infektionen
zum Teil nur dadurch in ihrem Verlaufe differieren, da6 das parenterale
MikroorganismeneiweiS verschieden lokalisiert ist, eine verschiedene Ver-
mehrungsintensitat besitzt, Antikorperbildung in quantitativ verschiedenem
Grade veranlaOt und sich dem Abbau (der Anaphylatoxinbildung) gegen-
iiber verschieden resistent verhalt, Faktoren, durch die die Anaphylatoxin-
kurve und damit das KrankheitebUd selbst die verschiedensten Variationen
er&hren kann.

Wir sehen z. B., dafi ganz verschiedene Krankheitserreger ein iden-
tisches Krankheitsbild erzeugen, wenn sie gleichartig lokalisiert sind und
gleichartig sind in ihrem Wachstum tind sonstigen biologischen Verhalten.
Die Symptome von Cholera und Cholera nostras, obwohl durch zwei ganz
verschiedene, einander fernstehende Bakterienarten, einen Vibrio und einen
BaciUus, hervorgerufen, kSnnen so vdllig identisch sein, dafi eine Differential-
diagnose unter Umstanden nur durch eine genaue bakteriologische Unter-
suchung mdglich ist. Aber beide Mikroorganismenarten zeigen iihnliches
Verhalten und sind an gleicher Stelle angesiedelt.

Die Pneumonie kann sowohl durch den BaciUus Friedl&nder wie
durch den Pneumococcus erzeugt werden, mit ganz analogen Symptomen,
weil beide Male die Lokalisationsstatte der verschiedenen Erreger die
gleiche ist.

Andererseits sehen wir, wie ein und derselbe BaciUus, je nach seiner
LokaUsation und seinem sonstigen biologischen Verhalten, ganz verschiedene
ErankheitsbUder erzeugt. Ich erinnere da nur an den TuberkelbacUlus,
der bald aUgemeine chronische Tuberkulose, bald akute MiUartuberkulose,
bald lokale Affektionen hervorruft.“

Die quantitative]! Verh&ltnisse beim kiinstlichen EiweiB-
fieber stehen mit denen beim Infektionsfieber nicht in Wider-
spruch. Zur Erzeugung von Eiweififieber beim Normaltier
durch amorphes EiweiiS Oder mit toten Bakterien (Krehl)
brauchen wir freilich Antigenmengen, deren Zerfall bei einer
Bakterieninfektion uns schlechterdings ausgeschlossen er-
scheint.

Wir mflssen aber andererseits bedenken, wie schnell eine
verst&rkte Fieberreaktion bei pr&parierender Zufuhr von
Antigen in unseren Versuchen zu erreichen ist, und dafi dem
Ausbruch der Symptome bei der Infektionskrankheit erst das
Inkubationsstadium vorausgeht, das der Pr&parierung gleich-
zusetzen ist.

Zeitschr. f. ImmimitlttforschaDg. Orir. Bd. Z. 18

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274

E. Friedberger und S. Mita,

Dann verstehen wir, dafi ein infiziertes Tier sich wie ein
pr^pariertes verhS,lt und sein Fieber wohl unterhalten werden
kann durch den Zerfall solcher Minimalmengen von Eiweifi,
wie sie bei einer Bakterieninfektion in Betracht kommen. Wenn
also auch die quantitativen Verh&ltnisse vollkommen
einheitlich betrachtet werden kdnnen, so ist andererseits
der Annahme eines einheitlichen Spaltproduktes (oder,
was als dasselbe betrachtet werden kann, eines einheitlichen
Gemenges) als Ursache der Symptome bei den verschiedensten
Infektionen Widerspruch natflrlicherweise begegnet.

Weniger wegen der Mannigfaltigkeit der Symptome bei
den einzelnen Infektionen.

Da miissen wohl auch Gegner unserer Anschauungen die
Berechtigung unserer frQheren Anseinandersetzungen (diese
Zeitschr., Bd. 9, Heft 3) anerkennen, die darin gipfeln, „dafi ja
trotz der Mannigfaltigkeit im Verlauf der einzelnen Infektions-
krankheiten die Hauptsymptome immer dieselben und identisch
sind mit jenen, die wir durch kleine EiweiUmengen beim prfi>
parierten Tier und auch mit dem Anaphylatoxin in kleinen
Dosen hervorrufen konnen.‘‘

„Fieber, entzflndliche Gewebsverftnderungen und toxische
Einwirkung auf das Zentralnervensystem, das sind ja die
Kardinalsymptome aller Infektionen, nur wenige T6ne im
Grunde, aus denen durch die mannigfachsten Variationen die
verschiedenartigsten Melodien entstehen.”

Unsere Theorie erfuhr vielmehr deshalb von einzelnen eine
Ablehnung, well sie der Lehre von der Spezifitat der Antikbrper
zu widersprechen schien. Der eine von uns hat diesen Ein-
wand schon an anderer Stelle zurtickgewiesen (Deutsche med.
Wochenschr., 1911, No. 9), doch ist er immer wieder von
manchen Seiten vorgebracht worden.

Denken wir uns, wir haben ein spezifisches Antigen (Ei-
weifi) A, das im Reagenzglas oder im Organismus eines pra-
parierten Tieres mit seinem spezifischen Antikdrper Ai und
mit Komplement zusammentrifft. Dann wird ja das Eiweifi
abgebaut (Nachweis der Spaltprodukte mit positiver Biuret-
reaktion, Pfeiffer und Mita, Abderhalden, Fried¬
berger und Mita). Die Spaltprodukte resp. die Gruppen von
Spaltprodukten, die dabei hintereinander entstehen, seien a—i.

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Ueber Anapbylaxie.

275

Es ist nun ohne weiteres die Annahme verst&ndlich, daB
die hOchsten dieser Spaltprodukte, etwa a—c, noch spezifische
Gruppierungen der Muttersubstanz haben und dementsprechend
spezifisch sind und als Antigen wirken, also spezifische
Antikdrper erzeugen.

Wenn wir die Annahme machen, daB die sich weiter
bildenden Spaltprodukte d—f im wesentlichen nicht mehr spe¬
zifisch sind, so haben sie dementsprechend ohne Rficksicht auf
das EiweiB, aus dem sie stammen, die einheitliche Wir ku n g, in
grdBeren Dosen akuten Tod mit einem bestimmten Symptomen-
bild (Anaphylaxie) hervorzurufen. In kleineren Dosen wirken sie
psychrogen und in noch kleineren „pyrogen‘‘. g—i, die letzten
Spaltprodukte, sind entsprechend dieser, wie noch einmal aus-
drficklich betont sei, natfirlich rein hypothetischen Klassifizie-
rung noch weniger spezifisch und auBerdem atoxisch.

Schema.
Eiweifi A

wird durch AntieiweiBkorper A,

plus Kompleraent abgebaut.

, 1 1

a b c

1 1

d e

1

i f

1 1 1

g h i

spezifisch,

autigen,

(relativ) uugiftig

unspezifisch (?),
antigen (?),
hochgiftig

(in groBeren Bosen tddlich,
in Ueineren psychrogen,
in kleinsten pyrogen)

unepeziflBch,
nicht antigen,
ungiftig

Durch die Entstehung aspezifischer Stoffe aus einem
spezifischen EiweiB durch spezifische Antikdrper wird
aber natfirlich das Gesetz der Spezifitfit nicht tangiert.

Damit bei der parenteralen Zufuhr des Antigens A in
kleiner Menge die toxischen Gruppierungen sich derart akut
bilden kdnnen, daB eine genOgende Giftdosis, sei es zum Tod,
sei es zur Beeinflussung der Kdrpertemperatur, sich im K5rper
anh&uft, muB eben in der Regel ein spezifisch gegen A gerich-
teter Antikdrper Ai vorhanden sein, wie das beim pr&parierten
Tier der Fall ist; dann entstehen durch den ^spezifischen
Modus der Giftbildung*^ unsere aspezifischen Gifte.

Im normalen oder heterolog pr&parierten Organismus
dagegen, in dem der Antikdrper Aj fehlt, yollzieht sich der

18 *

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276

£. Friedberger und S. Mita,

Abbau des eiDgefdhrten Antigens A nur allmfiblich, so dafi
erst aus sehr grofien Dosen sich eine toxische Menge von
Spaltprodukten anh&ufen kann.

Ueber die chemische Natur der Spaltprodukte von toxischer
QnalitUt, wie sie im Organismus bei der Anaphylaxiereaktion
(Fieber resp. Temperatursturz resp. akuter Tod) und im Re-
agenzglas bei der Entstehung des Anaphylatoxins anftreten,
wissen wir nichts. Unter den Bedingungen, unter denen die
Anaphylaxie zustande kommt, entstehen freilich regelmSSig
Spaltprodukte, die positive Biuretreaktion geben (Pfeiffer
und Mita, Abderhalden), und ebenso l&Bt sich regelm&fiig
positive Biuretreaktion mit anaphylatoxinhaltigem Serum er-
zielen (Friedberger und Mita). Das kdnnte an sich noch
eine rein sekund&re Begleitreaktion sein, die mit der Ent¬
stehung des Anaphylatoxins nichts zu tun hat. Doch spricht
dagegen die Tatsache, dafi man ja auch mit hydrolytischen Spalt¬
produkten des Eiweifies echte Anaphylaxie erzengen kann.

Schon lange vor der Zeit, da das AnaphylaxiephSnomen
bekannt war, haben Schmidt-Mtlhlheim und Fano ein
Yergiftungsbild durch parenterale Peptonzufuhr beim normalen
Tier beschrieben, das, wie Biedl und Kraus hervorheben,
dem bei der Anaphylaxie vdllig gleicht.

Durch Eiweifispaltprodukte haben ferner Anaphylaxie er-
zeugt und derartige Symptome zum Teil nachtr&glich, zum
Teil von vornherein als anaphylaktische gedeutet Weichardt,
Vaughan und Wheeler, Friedberger und Grdber,
Hartoch und Scirensky usw.

Wir haben also bei der Anaphylaxie nicht nur das regel-
mkfiige Auftreten von Spaltprodukten mit positiver Biuret¬
reaktion, sondern wir vermdgen auch mit auf beliebige Weise
hergestellten hydrolytischen Eiweifispaltprodukten je nach der
Dosis die Trias der anaphylaktischen Symptome zu erzeugen.

1) Die Tatsache, daQ Schenk bei Verarbeitung grofier Serum-
mengen auch mit diesem allein positive Biuretreaktion beobachtet hat,
spricht nicht gegen die Versuche von Pfeiffer und Abderhalden und
unsere eigenen, in denen bei Verwendung kleiner Serummengen, wie sie
zum Anaphylatoxinversuch in Frage kommen, die KontroIIen stets negativ
ausfielen.

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Ueber Anaphylaxie.

277

Damit aber diirfte der Beweis dafflr, daB die bei der Anaphy-
laxie auftretenden hydrolytischen Spaltprodukte auch die Ur-
sache des Ph&nomens sind, erbracht sein.

Ueber die chemische Natur dieser Spaltprodukte wissen
wir freilich nichts N&heres, dock ergeben neuere eigene Unter-
suchungen, dafi sie den prim&ren Albomosen nahestehen
dfirften.

Wenn die Kdrper, die wir unter dem Sammelnamen der
Albumosen zosammenfassen, nun tatsHchlich bei ibrer paren-
teralen Entstehnng die Anaphylaxie bedingen, so muBten sie
auch bei der mildesten Anaphylaxievergiftung, die wir kennen,
dem Fieber, eine Rolle spielen; denn die fieberhaften In-
fektionen mit Mikroorganismen unterscheiden sich von der
eigentlichen Anaphylaxie nach nnserer Auffassung nur quali-
tativ, nicht quantitativ („sie ist eine mildere und protrahiertere
Form der Anaphylaxie").

Nun spielen ja bekanntlich die Albumosen bei fieberhaften
Infektionen eine groBe Rolle. Wir finden sie regelmfiBig im
Harn (v. Jaksch, Raubitschek), bei Tuberkuldsen im
Sputum (Kossel), sogar in den infizierten Drflsen (Matthes).
Interessant ist es nun, daB ihnen auch in erster Linie, wie
Matthes gefunden hat, die nach Krehl alien EiweiBkdrpern
bei parenteraler Zufuhr eigentfimliche Beeinflnssung der
Kdrpertemperatur zukommt.

Und besonders macht sich diese Wirknng bei infizierten
Tieren (bei der von Matthes speziell studierten Tuberknlose-
infektion) geltend.

Bei der Sektion ergeben sich hdchst interessante Befunde.
Die mit Albnmose vergifteten normalen Kontrolltiere zeigen
durchgehend eine HyperUmie des Dflnndarms (die jedoch
bei Hungertieren fehlt). Die tuberkuldsen Tiere weisen
auBerdem eine Hyperd,mie der Krankheitsherde auf, die der

1) NeuereUntersuchungen von Barger uod Dale (Jonm. of PhysioL)
haben ergeben, dafi durch das ^-Imidazolylathylamin beim normalen Her
Symptome erzeugt werden konnen, die mit denen bei der Anaphylaxie
vbllig identisch sind. Ob diese oder eine iihnliche Gruppierung in den beim
Abbau entstehenden ESrpem enthalten ist und deren Toxizitat bedingt,
miissen wir freilich vorerst noch dahingestellt sein lassen.

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278

E. Friedberger und S. Mita,

Herdreaktion bei Tuberkulinzufuhr vollkommen gleicht. Wir
haben eben auf die Albumosenzufahr nach Matthes da eine
Reaktion, wo schon Albamosen vorhanden suid. Es diirfte
sich also bier um eine einfache Kumulationswirkung handeln.
Zu den an sich gerade noch nicht weiter krankmachenden
Dosen von Anaphylatoxin, wie sie im Krankheitsherd auf-
gespeichert sind, kommen nunmehr Mengen hinzu, die dann
eine entzdndungserregende Dosis ausmachen, w&hrend beim
Gesunden, bei dem sich anfier im Darm keine Albumosen
befinden, nur dort eine Entzttndnng ausgeldst wird. Wir sehen
darin einen weiteren Beweis ffir die Rolle der Albumosen bei
der Infektion resp. bei der anaphylaktischen Vergiftung.

Die Allgemeinreaktion w§,re dann dadurch zu erkl&ren,
dafi die aus den Krankheitsherden in die Zirkulation gelangten,
nnter dem Schwellenwert liegenden Albumosenmengen durch
die kiinstliche Neuzufuhr zu toxischen Dosen komplettiert
werden. So wtirde zwanglos die fiebererregende Wirkung von
Dosen der Albumose beim tuberkuldsen Tier verstfindlich, die
beim gesunden Tier ohne Einflufi sind.

Die Aehnlichkeit der Tuberkulinwirkung mit der der Albu¬
mosen speziell beim tuberkulbsen Tier fand Matthes so weit-
gehend, dafi er die Tuberkulinwirkung direkt zum Teil als
eine Wirkung von Albumose betrachtete.

Nur quantitativ bestehen groJle Differenzen insofern, als
die Wirkung beim Tuberknlin mit bedentend kleineren Mengen
im tuberkulOsen Organismus erzielt wird als mit Eiweifi und
dessen Spaltprodukten.

Das ist aber bei der Auffassung der Infektion als ana-
phylaktische Reaktion ohne weiteres verstfindlich.

Aus dem Tuberkulin vermag der Tuberkulbse mit seinen
Antikdrpern das wirksame Prinzip in ganz anderer Weise ab-
zuspalten, auch bewirkt das Tuberkulin eine neue Antikdrper-
bildung und damit eine Neuentstehung giftiger Spaltprodukte
im Herd und fiberall da, wo sonst Tuberkelbacillen im
Organismus vorhanden sind.

So gewinnen auch diese sorgffiltigen und interessanten
filteren Ergebnisse klinischer experimenteller Forschung im

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Ueber Anaphylaxie.

279

Lichte der Lehre von der Anaphylaxie eine erneute Bedeutung
und ein weitergehendes VerstSndnis.

Bei unserer Auffassung der Infektionskrankheiten er-
scheint auch die von den Klinikern so oft diskntierte Frage
nach dem Nutzen oder Schaden des Fiebers in einem anderen
Lichte.

Der ^teren Ansicht von Liebermeister, wonach das
Fieber als unbedingt sch^dlich zu bektmpfen sei, steht dia¬
metral die Anffassung zahlreicher Kliniker entgegen, die im
Fieber einen Heilfaktor sehen, eine Anschanung, die Pfltiger
mit den Worten, daO es den Organismus „durch Feuer reinige^,
treffend znm Ausdruck gebracht hat.

Wenn wir die Infektion als einen anaphylaktischen Prozefi
ansehen, so tritt die Frage, ob das Fieber eine teleologische
Oder dysteleologische Einrichtung ist, in den Hintergrund.
Das Fieber ist dann jenseits von gut und b5se eine Folge
resp. eine unzertrennliche Begleiterscheinung des Heilnngs-
vorganges, der in dem Bestreben des Organismus besteht,
das parenteral eingedrungene vermehrungsf9.hige Eiweifi ab-
zubauen.

Hierbei entstehen allerdings Spaltprodukte, die hoch-
gradig toxisch bezw. pjrrogen sind. Durch deren Anhfiufung
kann unter Umst&nden der Heilungsvorgang resp. die Heilungs-
tendenz den Tod des Organismus zur Folge haben.

Unsere auf der Erkenntnis der anaphylaktischen Natur des
Infektionsprozesses beruhende Methode der Fiebererzeugung
durch minimalste EiweiBmengen dtlrfte auch mit Erfolg dazu
verwandt werden, urn weiter in die Pathologie des Fiebers ein-
zudringen.

Seither batten wir zur ktinstlichen Fiebererzeugung nur
die Methode der Zufuhr relativ grofier Antigenmengen beim
normalen Tier (Erehl) oder die Methode des Fieberstichs
(Aronsohn und Sachs).

Die erstere Methode bedingt eine Zufuhr kdrperfremder
Elemente in Mengen, wie sie den natflrlichen VerhMtnissen
nicht entsprecben und beeintr^chtigt dadurch die Beurteilung
experimenteller Ergebnisse. Die letztere Methode, bei der dieser

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280 ^ Friedberger und 8. Mita, Ueber Anaphylaxie.

Uebelstand freilich wegf&llt, stimmt im Qbrigen noch weniger
mit den natflrlichen Verhfiltnissen Qberein.

Bei UDserer Methods der parenteralen Zufuhr des homo-
logen Eiweifies beim prftparierlen Tier sind die Eiweifimengen,
die zur Erzeugung des Fiebers zngeffihrt werden, so gering,
dafi sie als Muttersubstanz fflr die W&rmeproduktion kaum in
Frage kommen. Ob die aus ihnen entstehenden Gifts direkt
auf das WtU'mezentrum wirken oder indirekt, indem sie zu-
nSchst Gewebszerfall bedingen, miissen wir o£fen lassen^).

Auch wissen wir nichts fiber den nfiheren Mechanismus
dieses Fiebers. Nach Fr. M filler beroht die Verfinderung
der Kdrperwfirme bei Infektionskrankheiten darauf, dafi ein
erhdhter toxischer Zerfall von Kdrpereiweifi statthat, wodurch
eine erhfihte Warmeproduktion erfolgt.

Wenn wir fur das EiweiBfieber beim prfiparierten Tier
mit einer gewissen Wahrscheinlichkeit fihnliche Verhfiltnisse
annehmen dfirfen, so kommt bier wohl vielleicht noch eine ver-
minderte Wfirmeabgabe hinzu, ffir die wir bei der Anaphylaxis
in der Verengernng der HantgeffiBe bei gleichzeitigem Zustrom
des Blutes in die inneren Organs eine Grundlage haben.

Zusammenfassung.

Die Arbeit enthfilt in ausffihrlicher Darlegnng der bereits
in der Berl. klin. Wochenschr., 1910, No. 42, und Deutsche
med. Wochenschr., 1911, No. 11, mitgeteilten Resultate Unter-
suchungen fiber die Beeinflussung der Korpertemperatur durch
artfremdes EiweiB, Serum, Bakterien etc.

Es sind hier vier Grenzwerte ermittelt:

1) Senkungsgrenze,

2) obere Konstanzgrenze,

3) Fiebergrenze,

4) untere Kontrastgrenze.

Man kann dementsprechend drei Erscheinungsformen der
Anaphylaxis unterscheiden:

1) akut toxische (todliche),

2) psychrogene,

3) pyrogens.

1) Wir mochten uns Untersuchungen daruber vorbehalten.

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L. Hirschfeld, Zur Frage der Spezifitat der PhTtagglutinine. 281

Beim prfiparierten Tier erfahren diese Werte eine ganz
enorme Steigerung gegen die Norm.

Den Qnotienten der Werte beim Normaltier einerseits und
dem pr&parierten Tier anderereeits bezeichnen mr als ana-
phylaktischen Index.

Mittels der Fieberreaktion l&iit es sich nachweisen, dafi
die Antikdrperbildung nicht kritisch, sondern allmShlich erfolgt.

Anch das im Reagenzglas mit artgleichem Serum erzeugte
Anaphylatoxin, nicht aber das mit inaktivem Serum hergestellte
bewirkt Fieber.

Es werden ferner die fflr die Temperaturreaktion ndtigen
Grenzdosen zur Prfiparierung ermittelt.

Durch protahierte Zufuhr kleiner Eiweifidosen lassen sich
Fieberkurven erzielen, die denen bei Infektionskrankheiten
entsprechen.

Nachdruck verboten,

[Aus dem Institut fUr Erebsforschang in Heidelberg.]

Zar Frage der Speziflt&t der Phytagglntinlne.

Bemerkungen zu der Arbeit von Raubitschek.

(Diese Zeitschrift, Bd. 9, p. 237.)

Von Dr. L. Hirsohfeld.

(Eingegangen bd der Bedaktion am 16. Mai 1911.)

In einer 1907 unter Leitung von Friedemann ausge-
ffihrten Arbeit versuchte ich den Nachweis zu erbringen, daB
der AgglutinationsefPekt aus zwei Faktoren: aus der Agglntinin-
stftrke einerseits und der AgglutinabiliUlt der Erythrocyten
anderseits additiv zusammengesetzt ist. Die Agglntininst&rke
suchte ich nicht bloB anf die Quantitftt der fftUenden Faktoren,
sondern auch anf die physikalischen Qnalit&ten, und zwar nach
meinen Salzversuchen vor allem auf die Elektroaffinitfit zurtlck-
znfQhren. Bei den Phytagglutininen nahm ich dieselben Ver-
hftltnisse an.

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282

L. Hirschfeld,

Diese Beobachtungen an und fflr sich brauchen der An-
nahme einer Multiplizit&t der Normalagglutinine, die durch
Absorptionsyersuche demonstriert werden kdnnen, nicht zu
widersprechen. Da aber bei Salzen, anorganischen Kolloiden
und Phytagglutininen die Absorptionsyersuche stets eindentig
ansfallen, und zwar so, dafi jede Blutsorte das gesamte Agglu¬
tinin der Ldsung entziehen kann, so scheint diese Regel, die
lediglich den physikalischen Faktoren Rechnung trJlgt, den
Sachyerhalt ybllig zu erschdpfeu. Es lag keiue Veranlassung
vor, an der Einfachheit der Phytagglutinine zu zweifeln.

In Bd. 9, p. 287 dieser Zeitschrift nimmt Raubitschek
diese Untersuchungen unter Hinweis auf meine Arbeit wieder auf.

Die far die Ldsung der Frage der SpezifitSt bis jetzt
ablichen Absorptionsyersuche 19Jlt er nicht gelten. Dagegen
findet er, daB die Blutkdrperchen das stOrkere Phytagglutinin
aus einer schw&cheren Konzentration in hdherem Grade ab-
sorbieren wie das schwEchere aus einer stOrkeren Konzentration.
Den Einwand, dafi aus yerdhunten L5sungen die Stoffe starker
absorbiert werden wie aus einer konzentrierten, will er dadurch
widerlegt haben, daB in Versuchen, in denen die VerdQnnung
durch Samenextrakte geschah und nicht durch Kochsalzldsung,
ahnliche Verhaitnisse yorliegen. Warnm dieser Versuch diesen
Einwand widerlegen soil, ist mir unyerstOndlich.

Der Fehler dieser ganzen Ueberlegung aber beruht auf
Verwechslung einer elektiyen Absorbierbarkeit, die far die
Annahme yon spezifischen Beziehungen notwendig wOre und
einer allgemeinen unspezifischen Absorbierbarkeit. So wirken
z. B. Stoffe mit schwacher Elektroaffinitat stOrker failend, sie
werden dabei leichter absorbiert — eine elektiye Beziehung
zu dem Antigen braucht aber deswegen bei ihnen nicht an-
genommen zu werden. Durch ungleichmOBige Verdannung
yon zwei ungleich absorbierbaren, also ceteris paribus ungleich
stark wirkenden Agglutininen kann man die Agglutinations-
stOrke gleich gestalten, die Differenzen in der Absorbierbarkeit
bleiben aber bestehen. Nehmen wir an, der Absorptions-
koeffizient wSre bei Abrin Vs* Ricin Vi* Um also einen
Agglutinationseffekt zu erzielen, welcher A gebundenen Ag-
glutinationseinheiten entsprechen whrde, brauchen wir bei
Abrin 2 A, bei Ricin 4 A. Der Titer des Abrins wftre nach der

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Zur Frage der Spezifitat der Phytagglutinine. 283

ersten Absorption dann im Agglutinationsversuch V, A, bei
Ricin dagegen V 4 ^so Verhfiltnisse, die Ranbitschek
gefunden. £s ist klar, dafi dies mit spezifischen Beziehungen,
geschweige denn mit einer Vielbeit der Agglutinine nicht das
geringste zu tun hat. Was er auf ^charakteristische Avidit&t
des Rezeptorenapparates" zurdckffihrt, kann lediglich der Ans-
druck einer besseren Absorbierbarkeit des Ricins sein. DaS der
Absorptionskoeffizient der Phytagglutinine mit verschiedenen
Blutsorten ein verschiedener sein wird, ist ohne weiteres zu-
zugeben. Die Hauptsache ist, dafi er sich bei alien Blutsorten
gegentlber alien Phytagglutininen gleichsinnig ver&ndert. Der-
selbe Einwand gilt ftir seine Peptonversuche. Es lS6t sich eben
das besser absorbierbare Agglutinin durch Pepton nicht ent-
fernen.

Aufierdem nahm Raubitschek Agglutinationsversuche
mit einer Mischung von Hhhner- und Schafblut vor und be-
obachtete unter dem Mikroskop, ob die Klfimpchen aus ge-
mischten Zellen bestehen oder nicht. Bei stSrkeren Konzen-
trationen der Phytagglutinine bestanden die Klumpen aus
beiden Arten von Blutkdrperchen, dagegen war in hdheren Ver-
dflnnungen die Tendenz, Agglomerate homologer Blutkbrper-
chen zu bilden, unverkennbar, so dafi Raubitschek eine
Spezifit&t der Agglutinine annimmt. Der Fehler des ganzen
Versuches besteht darin, daC ziemlich gut aggiutinable (Htihner-)
und schlecht aggiutinable (Hammel-)Blutkdrperchen zusammen
untersucht werden. Es ist von vornherein zu erwarten, daB
in grdfieren Agglutininkonzentrationen, bei welchen die beiden
Blutkdrperchen noch agglntiniert werden, die H&ufchen aus
beiden Blutkdrperchenarten bestehen werden, und zwar so,
daB das besser aggiutinable Blut das Zentrum, das schlechter
aggiutinable die Peripherie bilden werden; dagegen kdnnen
bei schwachen Eonzentrationen des Agglutinins die H&nfchen
lediglich noch aus dem noch agglutinablen (Htlhner-)Blnt be¬
stehen. In der Tat findet Raubitschek:

ZwiBchen 0,1—0,04 Bidn: Elumpen auB Huhnerblut, daran angelagert

Schafblut.

Zwischeu 0,02—0,01 Ricin: veidnzelteSchafbluth&ufchen, keinednzdnen

Huhnerblutkdrperchen.

ZwiBchen 0,006—0,002 Ricin: keine Schafbluthkufchen, aus-

achliefilich Huhnerbluthfiufchen.

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284 L. Hirschfeld, Zur Frage der Spezifitat der Phytagglutinine.

Die Tatsache, daS der Titer des Agglutinins im Mischungs-
versuch fflr das Hammelblnt geringer ist, spricht schon zur
Gen&ge dafQr, dafi das besser agglutinable Htthnerblut, das
Agglutinin fflr Hammelblut auch absorbiert hat. Diese Proto-
kolle sprechen mit solcher Deutlichkeit fflr die Bedeutnng der
Agglutinabilitflt der Blutkdrperchen, sowie fflr die Unspezifitkt
der Phjtagglutinine, dafi mir die Mdglichkeit einer anderen
Schlufifolgerung vollkommen unverstfindlich ist.

Zusammenfassung.

Es ist nicht erwiesen, dafi die Phytagglutinine eine Vielheit
verschiedener Agglutinine enthalten, die zu bestimmten Blut-
sorten besondere AffinitHten haben. Raubitscheks Schlufi-
folgernngen bernhen auf Verwechslung einer allgemeinen
besseren mit einer elektiven Absorbierbarkeit, sowie auf
Nichtberflcksichtigung der ungleichen AgglutinabilitSt des
Hflhner- und Hammelblutes.

Frommannsche Buchdrockerei (Hermann Pohle) in Jena, — 3956

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Mtwliiift t iMMtitsIMiiiig. Otiginala Bil Ia3.

I^achdruek verboien*

{Aos der experimentdll-biologiscben Abteilong (Prof. H. Sachs)
des KSnigL Institutes ftlr experimentelle Therspie in Frankfurt a. M.
(Direktor: Geheimer Ober-Medizinalrat Prof. Dr. P. Ehrlich).]

Ueber die Wirknng des Cobragfftes auf die Eomplemente.

Von Dr. L. Omorokow, St. Petersburg.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 20. April 1911.)

Wie bereits durch die Untersuchungen von Flexner
end Noguchi^), sowie Noc*) bekannt war, and wie in
nenerer Zeit im besonderen Morgenroih und Kaya^,
sowie H. Sachs^) gezeigt haben, kommt dem Cobragift eine
antikomplement&re Wirkung zu. Diese komplementzerstdrende
Fihigkeit ist jOngst auch von Braun ^) zum Gegenstand der
Analyse gemacht worden, und es ergab sich hierbei ein eigen-
artiges Phftnomen. Warden nkmlich absteigende Mengen Meer-
schweinchenserum mit derselben Cobragiftmenge in gleichem
Volumen l&ngere Zeit vor dem Blutzusatz digeriert, so trat
bei geringeren Dosen des Meerschweinchensernms partielle
H&molyse auf, wkbrend bei einem Ueberschufi von Meer-
schweinchenserum die H&molyse bis auf Spuren aufgehoben
war. In der Kontrolle, in welcher zu den n&mlichen Mischungen
von Cobragift und Meerschweinchenserum das Blut sofort zu-
gesetzt wurde, war die H&molyse dagegen der Menge des
Meerschweinchensernms proportional. Es handelt sich bei
dieser Eombination um eine durch Cobragift bedingte H&mo¬
lyse, bei welcher, wie Kyes und Sachs^ erwiesen haben.

1) S. Flexner and Noguchi, The Joum.of exper.Med., VoL6,1903.

2) F. Noc, Ann. Inst Pasteur, T. 19, 1905.

3) J. Morgenroth und B. Kaja, Biochem. Zeitschr., Bd. 8, 1906.

4) H. Sachs, Miinch. med. Wochenschr., 1906, No. 9.

5) H. Braun, Biochem. Zeitschr., Bd. 31, 1911.

6) P. Kyes und H. Sachs, Berl. klin. Wochenschr., 1903, No. 2/4.

Zeitschr. f. ImimiiiitltsforschaDE. Orig. Bd. X. 19

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286

L. Omorokow,

der Komplementgebalt des Meerschweinchenserums eine
wesentliche Rolle spielt^). Eine Aktivierung des Cobra-
giftes durcb den Lecitbingebalt des Serums kommt nacb
den genannten Autoren bei der Verwendnng von aktivem
Meerscbweincbenserum nicbt in Betracbt. Braun bat nun
die von ibm beobacbtete paradoxe Tatsacbe, dafi beim
vorberigen Lagern der Gemiscbe von Cobragift und Meer¬
scbweincbenserum nur bei bestimmter, relativ geringer
Konzentration des Meerscbweincbenserums Hftmolyse nach-
weisbar ist, in dem Sinne zu deuten versucbt, dafi bier-
bei ein durcb Einwirkung des Cobragiftes aus den Serum-
lipoiden entstandenes Hkmolysin, das nur unter ganz be-
stimmten quantitativen YerbMtnissen entstebt, zur Aktion
gelangt. Diese Annahme, nacb welcber es sicb bei der Hftmo-
lyse durcb Cobragift und Meerscbweincbenserum urn die Inter-
ferenz zweier verscbiedenartiger Prozesse, Eomplementwirkung
einerseits, Lipoidspaltung andererseits, bandeln wfirde, kann
natbrlich die bescbriebene Unregelm&fiigkeit des Versucbs-
ergebnisses erklftren. Jedocb wfirde es sicb urn Verbkltnisse
bandeln, die dem Verstkndnis gewisse Scbwierigkeiten
bereiten diirften. Eine weitere Analyse und KlSrung des
interessanten Befundes scbien daber um so mebr geboten, als
das von Braun bescbriebene Pb&nomen eine weitgebende
Analogie zu Versucbsbefunden aufweist, wie sie von Sacbs
und Teruucbi erboben wurden.

Sachs und Teruucbi^ haben nflmlich gezeigt, dafi die
Eomplementwirkung des Meerschweinchenserums durcb vor-
hedges Verdfinnen im salzarmen Medium aufgehoben wird,
dafi aber dieser Vorgang bei einer zu starken Verdflnnung
des Serums unterbleibt In der betreffenden Arbeit befinden
sicb in der Tat Tabellen, welche dem von Braun mitgeteilten
Ergebnis finfierst fihnlich erscheinen, und die Analogie wird
dadurch noch eine engere, dafi Sachs und Teruucbi fOr

1) Eb Bei in bezug auf die Uer intereBsierenden Fragen auch aui die
Arbeiten Ton v. Dungern und Coca, Miinch. med. WochenBchr., 1907,
No. 47, und Biochem. Zeitschr., Bd. 12, 1908, sowie H. SachB, 1. c.,
verwiesen.

2) H. Sachs und Y. Teruuchi, BerL klin. Wocbenschr., 1907,
No. 16/17 u. 19.

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Ueber die Wirkung dee Cobragiftee auf die Komplemente. 287

die Inaktivierang im salzfreien Milieu die Wirkung eines
kompleroentzerstdrenden Fermentes verantwortlich gemacht
haben, wie es ja auch als Ursache der antikomplement^en
Wirkung des Cobragiftes von Morgenroth und Kay a an-
genommen wurde. Es lag daher ftir die Erkl&rung des
Braunschen Versuches die Auffassung nahe, dafi auch die
komplementzerstdrende Wirkung des Cobragiftes bei zu starker
VerdQnnnng des Serums reduziert ist, und dail demnach die
von Braun gerade bei geringeren Serumkonzentrationen be-
obachtete HSmolyse durch den Komplementgehalt des Serums
und nicht durch ein neu entstandenes H&molysin veranlafit
wird. Die Untersuchungen, fiber die im folgenden berichtet
werden soli, haben die Richtigkeit dieser Betrachtungsweise
in der Tat bestfttigt.

Zu den Versuchen dienten l-proz. Stammloeimgen tou Cobragift und
7—8-proz. Aufechwemmungen von gewazchenem Hammelblut

I.

Znnfichst sei bemerkt, dafi das von Braun mitgeteilte
Versnchsergebnis ohne weiteres reproduziert werden konnte.
Um aber fiber die Natur der zu analysierenden hfimolytischen
Wirkung etwas NSheres zu erfahren, schien es geboten, einer-
seits das in den Gemischen von Cobragift und Meerschweinchen-
serum enthaltene Hfimolysin auf Thermolabilitfit zu prfifen,
andererseits den Versuch mit inaktiviertem Meerschweinchen-
serum zu wiederholen. Es wurde demnach folgendermafien
verfahren.

Absteigende Mengen von MeerschwetncheuBerum wuiden mit je 0,04 ccm
l-proz. CJobragift 1 Btunde bei 37** (Brutschrank) digeriert (Gesamtvolumen
1,2 ocm).

Beihe A: Aktives MeerschwdncheDeemm. Nach dem Digerieren
Zuaatz TOU je 1 ccm Hammelblutaufechwemmung.

Beihe B: Inaktives Meerschwemchenserum, sonst wie A.

Beihe C: Aktives Meerschweincheneerum. Nach dem Digerieren
*/,-etundige8 Ekhitzen auf 55** (Waseerbad), Zueatz yon je 1 ccm Hammel-
blntaufschwemmung.

Beihe D (KontroUe): Direkte Mischnng des Hammelblutes mit Cobra¬
gift und Meerschweincheneerum.

Das Ergebnis zdgt Tabelle I.

19*

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288

L. Omorokow,

TabeUe I.

Mengen des
Meerschweincben-
serums

ccm

Hamolyse von Hammelblut

A

B

c

D

0.25

Spiirchen

0

0

komplett

0,15

0

0

iy

0,1

0

0

yy

0,05

wenig

0

0

yy

0,025

maSig

0

0

fast komplett

0,015

>>

0

0

mSJiig

0,01

wenig

0

0

wenig

0

0

0

0

0

Die Tabelle bestEtigt in Kolumne A voil-
stUndig das von Braun mitgeteilte Versuchs-
ergebnis, indem sie zeigt, dafi beim Digerieren von Meer-
scbweinchenserum und Cobragift vor dem Blutzusatz bei Ver-
wendung grofier Serumdosen die H&molyse fast vollstSndig
aufgehoben ist, dagegen bei geringeren Sernmmengen mehr
Oder weniger stark zum Ausdruck kommt. Nimmt man bierbei
aber mit Braun an, dafi gerade durch das Zusammenwirken
kleiner Sernmmengen und Cobragift ein Hfimolysin als Spal-
tungsprodukt des Lecithins entsteht, so sollte man erwarten,
dafi der gleiche Vorgang auch bei Verwendung inaktivierten
Meerschweinchenserums stattfindet, und dafi das hfimolytische
Produkt sich vom Komplement durch Thermostabilitfit unter-
scheidet. Beide Voranssetzungen treffen, wie die Kolumnen B
und C der Tabelle zeigen, nicht zu. Der in Tabelle I ent-
haltene Tatsachenkomplex mufite daher schon darauf hin-
weisen, dafi der nur bei geringeren Sernmmengen in Er-
scheinung tretende hfimolytische Prozefi im Gegensatz zn der
Annahme Brauns als Eomplementwirkung anzusprechen
sein dtirfte.

Allerdings erscheint die bisherige BeweisfQhrung nicht
zwingend. Man kdnnte nfimlich annehmen, dafi einerseits das
Lecithin durch das Inaktivieren des Serums der Wirkung des
Cobragiftes entzogen wird, dafi andererseits das gebildete
Hfimolysin nur durch das eiweifihaltige Milieu eine Thermo-
labilitfit Yortfiuscht. Ffir die letztere Hypothese wfirden auch
Analogien aus der Literatnr zur Verfflgung stehen.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftea auf die Eomplemente. 289

Bei dieser Sachlage waren weitere Hilfsmittel zur Auf*
klSrung erwflnscht, und diese boten sich in einer quantitativen
Analyse der Geschwindigkeit der interferierenden Vor-
gftnge. Bei einem Entstehen eines H&molysins durch Spaltung
des Lecithins im Sinne von Braun kbnnte man n&mlich er*
vrarten, dafi die hSmolytische Wirkung mit der Zeitdauer des
Digerierens vor dem Blutzusatz zunimmt, wlihrend die Auf-
fassung, nach welcher es sich nur um eine durch die besonderen
quantitativen Bedingungen hervorgerufene Abschwfichung der
antikomplementllren Wirkung des Cobragiftes handelt, zu der
Folgerung fQhren mtlllte, dafi durch die verlSngerte Reaktions-
zeit eine Abnahme der hSmolytischen Kraft veranlafit wQrde.
Tatsftchlich spricht das Experiment im letzteren Sinne, wie
folgendes Versuchsbeispiel zeigt.

Abeteigende Mengen aktiven MeerschweinchenBerams werden in vier
Parallebeihen mit je 0,04 com 1-proz. Ctobragiftes bei 37 ^ digeriert. Zusatz
von je 1 com Hammelblutaufachwemmung erfolgt in:

Beihe A: nach */« Stunden

B* V

» l> /f

n ^ 1 >j

„ D: „ 2 „

Das Besultat ist in Tabelle II notiert.

TabeUe II.

Mengen des
Meerschwdnchen-
serums

ccm

H&molyse von Hammelblut, das den Oemischen von
Cobrafdft und Meerschwmnchenserum zugesetzt ist

A

nach Std.

B

nach */, Std.

c

nach 1 Std.

D

nach 2 Std.

0,25

komplett

Spur

Spiirchen

0

0,15

17

wenig

77

0

0,1

17

stark

jj

0

0,05

77

fastkompl.

Spur

0

0,025

fast komplett.

stark

wenig

0

0,015

wenig

wenig

wenig

Spur

0,01

0

8

71

0

Sgur

Spiirchen

0

Die Tabelle ist dnrchans demonstrativ. Sie zeigt, dafi
nach Vi'Stflndigem Digerieren der antikomplement&re Prozefi
noch nicht merklich in Erscheinung getreten ist. Nach Vs Stunde
kann die Eomplementzerstdrung bereits dentlich wahrgenommen
werden, aber sie kommt, und das ist charakteristisch, zunfichst
nur mit den grdllten Serummengen znm Ausdruck. Bei kleineren

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290

L. Omorokow,

Serumdosen ist die hSLmolytische Wirksamkeit noch unge-
schwlU:ht vorhanden. Bei l&ngerer Einwirkung vor dem Blut-
zusatz bleibt der qualitative Charakter des Eudresultates zwar,
wie die Eolumnen G und D der Tabelle zeigen, der n&mliche,
aber wesentlich ist, dail sich das zunfichst bei mittleren Serum-
mengen vorhandene Optimum der h&molytischen Wirksamkeit
immer mehr nach den niedrigeren Serumdosen verschiebt.
Da mithin die zun&chst der antikomplementHren Wirkung
entgangenen Serumdosen mit dem Fortgang der Reaktion
gleicbfalls inaktiviert werden, an ihrer Stelle aber geringere
Mengen noch die h^molytische Wirkung ausiiben, so dQrfte
als Erklarung die Annahme hinreichen, daB es sich um
eine einheitliche komplementzerstdrende Funk-
tion des Cobragiftes handelt. Die letztere ist
aber dadurch charakterisiert, daB dieGeschwin-
digkeit desProzesses bei grdBeren Serummengen
als eine hdhere erscheint wie bei geringeren.

Allerdings darf man nicht ohne weiteres folgern, daB die
Geschwindigkeit des Vorganges den Serummengen propor¬
tional ist Denn bei den bisherigen Versuchen war stets mit
physiologischer Kochsalzlosung gleiches Volumen hergestellt
worden, und der Abnahme der absoluten Mengen des Serums
entsprach daher auch eine Abnahme seiner Konzentration. Es
war daher weiterhin die Frage zu entscheiden, ob die Re-
aktionsgeschwindigkeit von den Serummengen oder von der
Konzentration abhSngig ist^). Zu diesem Zwecke wurde zu-
n&chst folgendermaBen verfahren:

Absteigende Mengen 4-fach verdiinnten Meerschwdnchenserums wurden
in 2 Parallelreihen von Beagenzgl^m eingefullt.

A. In Beihe A wurde in jedem Rohrchen durch Auffiillen mit
phyBiolo^scher Kochsalzlosung gleiches Volumen von 1 ccm hergestellt
Nach Zusatz von je 0,2 ccm 0,2-proz. Cobragiftes und “/rstiindigem Dige-
rieren der Gemische bei 37 ** wurde iiberall je 1 ccm Hammelblutaufschwem*
mung zugefiigt.

1) Zwar spricht bereits Braun (L c.) davon, dafi die von ihm sup-
ponierte Entstehung eines Hamolysins aus dem Zusammenwirken von Cobra-
gift und Meerschweinchensenim nur bei einer bestimmten Konzentration
dee letzteren nachweisbar ist, jedoch lassen seine Versuche eine Entsch^dung
der hier diskutierten Frage nicht zu.

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Ueber die Wirkung des C!obragiftes auf die Komplemente. 291

B. In Beihe B wurde ohne vorheriges AuffiilleQ mit Kochsalzlosung
direkt je 0,2 ccm 0,2-proz. Cobragiftes zugefiigt. Erst nach */^-stundigem
Digerieren der Gtemische bei 37 * wiirden die Volumina der dnzelnen Rohr-
chen mit physiologlscher Kochsalzlosung auf je 1,2 ccm gebracht. Daran
schloS sich sofort der Zusatz von je 1 ccm Hammelblutaufschwemmung.

In den einzelnen Gliedern der beiden Beihen wirkten also iiberein-
stimmende Mengen von Cobragift und Meerschweinchenserum aufeinander
ein. Der Unterschied ist nur darin gelegen, dafi vor dem Blutzusatz in
Beihe A die Serumkonzentration mit der Serummenge abnahm, in Beihe B
uberall annahemd die gleiche war. Das Ergebnis zeigt TabeUe III.

TabeUe HI.

Mengen des 4>fach
verdiinnten
Meerschweinchen -
serums

ccm

Hamolyse von Hammelblut durch Gemische von
CJobragift und Meerschweinchenserum nach deren
Digerieren

A

in gleichem Volum

B

in verschiedenem Volum

1,0

Spur

Spur

0,6

Spiirchen

wenig

0

0,2

m^ig

0

0,1

starK

0

0,05

mafiig 1

0

0

0 1

0

Die TabeUe lehrt mit aller Deutlichkeit, daB das Aus-
bleiben der Komplementzerstorung durch Cobragift nicht durch
die Verminderung der Mengen des Meerschweinchenserums
bedingt ist. Ware dem so, dann batten die beiden Versuchs-
reihen A und B iibereinstimmend ausfallen mQssen. Die
Differenz ist aber nur in dem Sinne zu erkiaren, daB lediglich
die bei der tiblichen und auch in der Reihe A der TabeUe
befolgten Versuchsanordnung eintretende Verminderung der
Serumkonzentration fflr die verschiedenartige Ein wirkung
des antikomplementaren Agens verantwortlich zu machen ist.
Es weisen daher die bier bescbriebenen Verbaltnisse eine groBe
Aebnlicbkeit mit denjenigen auf, welcbe von Sacbs undTe-
ruucbi far die Inaktivierung der Komplemente im salzfreien
Medium bescbrieben worden sind (cf. TabeUe VII der oben
zitierten Arbeit der Autoren).

Man kann den Nacbweis der Abbangigkeit der Cobragift-
wirkung von der Konzentration desMeerscbweincbenserums
aucb auf mebrere andere Arten erbringen. Daffir darf icb
vieUeicbt nocb einige Versucbsbeispiele anfbbren.

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292

L. Omorokow,

Eb wiirden folgende Gemische berdtet:

A: 0,3 ccm l-proz. Cobragift + 2,0 ccm Meerschweinchenserum
B:0,3 „ „ „ +1,0

C: 0,3 „ „ „ + 0,5

D:0,3 „ „ „ +0,25

E: 0,3 „ „ ,, + 0,125

ff

ff

Das Yolumen betrug in alien Gemischen 2,3 ccm. Nach 74*Btun<ligem
Verweilen un Brutschrank wurde der Eomplementgehalt der Gemische in
der Art festgestellt, dafi abeteigende Mengen derselben mit je 1 ccm Hammd>
blntaufschwemmung unter Zusatz von je 0,04 ccm l-proz. CJobragiftes im
GesamtTolumen von 2,2 ccm digeriert wurden. Bei einem Vergleich des
Komplementgehaltes ist zu beruckaichtigen, da6 von Anfang an die Ge-
mische B, C, D, E nur V„ V4> V*> Vie ™ Gemisch A vorhandenen
Menge an Meerschwdnchenserum enthalten. Dementeprechend Bind in der
folgmiden Tabelle IV, welche das Versnchsergebnis enthalt, die Mengen des
Meerschweinchensemms in Eonzentrationsgraden in bezug auf das Gemisch A
als Einheit angegebmi, so da6 die nebeneinanderstehenden Werte direkt ver-
gldchbar sind.

TabeUe IV.

Eonzentration des
MeerschweincheneerumB
(A = l)
je 0,5 ccm

Hamolyse von Hammelblut durch Cobragift und
0,5 ccm der Gemische resp. ihrer Verdunnungmi

A

B

C

D

E

V.

Spiirchen

-

--

V,

ff

Spur

—

—

—

V 4

0

Spiirchen

Smir

—

—

Vs

0

0

0

wenig*

—

*/

/16

0

0

0

Spur

stark

V

0

0

0

0

wenig

Die Tabelle zeigt dentlich, wie trotz der Abnahme dea
Serumgehaltes der Gemische die antikomplementfire Wirkung
des Cobragiftes sukzessive schwftcher wird.

Sebr anschanlich erwies sich auch folgende Versuchsan-
ordnung.

Es wurde ein Gemisch bemtet aus:

3 ccm Meerschweinchenserum + 2,4 ccm 0,2-proz. Cobragift + 6,6 ccm
Eochsalzlbsung.

Teil A des Gemisches blieb Ve Stunden b« 37®, wurde sodann in
absteigenden Mengen mit je 1 ccm Hammelblutaufschwemmung unter Zu¬
satz Ton je 0,04 ccm l-proz. Cobragiftes digeriert.

Teil B des Gemisches wurde sofort nach der Herstellung in absteigen¬
den Mengen in eine Beihe von Reagenzglasem (Volumen 1,0) abgefiillt.
Nach '/^-stiindigem Verweilen bei 37 ® erfoigte Zusatz von Hammelblut und
0,04 ccm Cobragift.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftes auf die Komplemente. 293

Teil C des GemiBches wurde sofort nach der Herstellung in absteigeD-
den Mengen mit je 1 ccm Hammelblutau&chwemmung + 0,04 ccm Cobra*
gift digeriert (Kontrolle).

Das Endvolumen berug iiberall 2,2 ccm. Das Ergebnis zeigt Tabelle V.

TabeUe V.

Mengen des
Gemiscbes
ccm

Hamolyse von Hammelblut

A

B

C

1,0

Spur

1

Spur

komplett

0,5

Spiirchen

Spur

i}

0,25

0

wenig

n

0,15

0

miLSig

0

stark

fast komplett

0

0

0

0

Auch in den Reihen A und B der Tabelle V dokumentiert
sich sehr markant der Unterschied des Ergebnisses. Trotzdem
in beiden Reihen die aufeinander wirkenden Mengen von Cobra-
gift nnd Meerschweinchenserum in gleicher Proportion standen^
so ist dock lediglich durch die in den Gliedern der Reihe B
zunehmende Verdfinnnng des Gemiscbes eine immer grbfier
werdende Hemmung der antikomplementfiren Cobragiftwirkung
bedingt worden, wfihrend im Gegensatz dazn in Reihe A, in
welcher das Cobragift vor dem Verdfinnen des Gemiscbes auf
das Meerschweinchenserum einzuwirken Gelegenheit hatte, die
Komplementwirkung der Serummenge proportional ist. Nach
alledem steht also nichts im Wege, ein einheitliches komple-
mentzerstdrendes Prinzip im Cobragift anzunehmen und ftir
den scheinbar paradoxen Charakter seiner Wirkung den Ver-
dfinnungsfaktor verantwortlich zu machen. Besonders be-
weisend erscheint in diesem Sinne auch die in Tabelle II zum
Ansdruck gebrachte Tatsache, nach welcher geeignet verdflnnte
Gemische von Cobragift und Meerschweinchenserum, deren
Komplementwirkung noch zu einer Zeit erhalten ist, zu welcher
sie bei st&rkerer Konzentration bereits nicht mehr in Erschei-
nung tritt, bei ISngerer Einwirkungszeit gleichfalls inaktiv
warden.

II.

Allerdings kdnnte man trotz aller bisher erdrterten Tat-
sachen, welche fflr das Ausbleiben der antikomplementfiren
Cobragiftwirkung und nicht fQr das Entstehen eines nenartigen

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294

L. Omorokow,

Hfimolysins sprechen, einen Einwand erheben. Man kSnnte
nUmlich annehmen, dafi unter geeigneten Bedingungen aus
dem Zusammenwirken von Cobragift und Meerschweinchen-
serum ein Hemolysin im Sinne Brauns entsteht, das aber
nur eine Zwischenstufe des vorliegenden Prozesses darstellt
und bei dessen Fortdauer wieder seine hfimolytische Wirksam-
keit verliert. Um diesen Einwand auszuschalten, erschien es
angezeigt, eine Versuchsanordnung zu treffen, in der nur die
Komplementwirkung des Meerschweinchenserums zum Aus-
druck gelangen kann, und um dieses Ziel zu erreichen, wurde
weiterhin die h^molytische Wirkung des Meerschweinchen¬
serums auf Hammelblut durch Vermittlung spezifischer im-
munisatorisch erzeugter Ambozeptoren als Testobjekt gewfthlt
DaB das Cobragift auch auf die H&molysine des Blut-
serums eine antikomplementhre Wirkung ausUbt, ist bereits
durch die Untersuchungen von Noc (1. c.) sowie Morgen-
roth und Kay a (!• ^0 bekannt. Jedoch gelang es den letzt-
genannten Autoren nur, die Komplementwirkung ffir immuni-
satorisch erzeugte Ambozeptoren partiell aufzuheben. Nach-
dem aber die hier mitgeteilten Versuche zu der Annahme
berechtigen, daB die komplementzerstorende Wirkung des Cobra-
giftes wesentlich von der Konzentration des Meerschweinchen¬
serums abhILngig ist, muBte es von vorneherein sehr wahr-
scheinlich erscheinen, daB die nur unvollst3.ndig von Morgen-
roth und Kaya erzielte Aufhebung der Komplementwirkung
auf ungeeignete quantitative Bedingungen zurfickzufdhren ist,
und daB bei geeigneter Modifikation der Versuchsanordnung
auch eine vollsttindige Aufhebung der Aktivierung immnni-
satorisch erzeugter Ambozeptoren durch Einwirkung des Cobra-
giftes auf Meerschweinchenserum hervorgerufen werden wflrde.
Wenn es nun gelingt, bei geeigneten Gemischen von Cobra¬
gift und Meerschweinchenserum, d. h. solchen, welche Hammel¬
blut nicht Oder nur in geringem Grade Ibsen, dagegen auf
ambozeptorbeladenes Hammelblut ausgesprochen h9.molytisch
wirken, dieselben Verhaltnisse zu reproduzieren, wie sie oben
fiir das alleinige Zusammenwirken von Cobragift und Meer¬
schweinchenserum beschrieben worden sind, so ist in der Tat
der oben erbrterte Einwand zurhckgewiesen. Und daB dem
so ist, zeigen die folgenden Versuche.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftes auf die Komplemente. 295

Zu den Versuchen diente ein ron Eaninchen durch Vorbebandeln
mit Hammelblut gewonnenes Lnaktiviertes Immunsenim als Ambozeptor.
Das Hammelblut wurde mit etwa 20 Ambozeptoreinheiten sensibilisiert. Die
Ambozeptordosis wurde absichtlich hoch gewiihlt, um womoglich geringere
Meerschweinchenserummengen zur Aktiviening gclangen zu lassen, als sie
fiir die hamolytische Wirkung des Cobragiftes erforderlich sind. Fiir den
Nachweis der antikomplementiiien Cobragiftwirkong waren dadurch die
Bedingungen natiirlich etwas ungiinstiger gestaltet.

Zun9.chst handelt es sich darum, die minimale zur
Komplementzerstdrung noch hinreicheude Cobragiftmenge zu
bestimmen. Es wurde daher folgendermafien verfahren.

Je 0,5 com Meerschweinchenserums wurde gemischt mit;

A: 0,2 ccm 1-proz. Cobragift'

B: V, -0^

C: V 4 .0,2
D: Vs .0,2

E: V..-0,2.

F: 0,2 „ 0,85-proz. Eochsalzlosung

Das Volumen betnig in alien Gemischen 0,7 ccm. Nach V*- resp*
l-stiindigem Digerieren wurde durch Zusatz von je 4,3 ccm Kochsalzlosung
eine 10-proz. Losung des Meerschweinchenserums bewirkt, und die Gremische
wurden nunmehr durch Digerieren absteigender Mengen mit 1 ccm sen-
sibilisierten Hammelblutes auf Komplementwirkung gepriift^) (Gresamt-
volumen 2 ccm).

Das Ergebnis zeigt Tabelle VI.

Tabelle VI.

Mengen des
Meerechw.-
Beroms

ccm

Hamolyse von sensibilisiertem Hammelblut nach Vt*B^^digem
Digerieren der Qemische

A

B

C

D

E

F

Spiirchen

Spur

stark

komplett

komplett

komplett

0,05

Spiirchen

wenig

if

if

0,025

0

0

Spur

mkfiig

maflig

t kompL

0,015

0

0

Spiirchen

wenig

wenig

stark

0,01

0

0

0

Spur

Spur

mkSig

0

0

0

0

0

0

0

Nach l-stiindigem Digerieren der Gemische

0,1

Spiirchen

Spiirchen

Spiirchen

Spur

komplett

komplett

0,05

0

0

0

Spiirchen

wenig

9}

0,025

0

0

0

0

Spur

f. kompU

0,015

0

0

0

0

Spiirchen

stark

0,01

0

0

0

0

0

maSig

0

0

0

0

0

0

0

1) Bevor die Titration erfolgte, wurden die Gemische in diesen und
den folgenden Versuchen durch Aufbewahren in zerschlagenem Eis auf 0"

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296

L. Omorokow,

Aus der Tabelle ergibt sich, dafi durch die Ein-
wirkung des Cobragiftes auf Meerschweinchen-
serum auch eine vollst&ndige Inaktivierung der
die immunisatorisch erzeugten Ambozeptoren
aktiYierendenKomplementeerzeugtwerdenkann,
und dafi der Prozefi mit der Dauer des Einwirkens fort-
schreitet. Bei l-stttndigem Digerieren dfirfte ein Gemisch von
0,5 com Meerschweinchenserum und Ve * ccm Cobragift
1-proz. die geeigneten Bedingungen darstellen, unter denen
noch eine annfihernd vollstfindige Komplementzerstorung ein-
tritt. Dabei waren die quantitativen Verhfiltnisse so gewkhlt, dafi
das Meerschweinchenserum fast konzentriert war, und es handelte
sich nunmehr darum, festzustellen, ob auch hier hei weitfort-
schreitender Verdfinnung eine Abnahme der antikomplemen-
tkren Wirknng in Erscheinung tritt. Schon der erste Ver-
such zeigte, dafi dem so ist.

Es wurden Gemische hergestellt aus je 0.5 com Meerschweinchenserum
und 1-proz. Cobragift unter Zusatz von:

A:

B:

C:

D:

E:

0

1,8

4.3

9.3
19,3

ccm

physiologischer EochsalzlSsung

Jf J}

yj

97

79

79

»>

Die Gemische blieben 1 Stunde im Brutschrank bei 37**, sodann er-
folgte Zusatz von 4^ ccm physiologischer Kochsalzldsung zu A, von
2,5 ccm physiologischer Eochsalzldsung zu B.

Die Vetdiinnung des Meerschweinchenserums betrug also:

Wahrend des Digerierens
bei 37®

Nachher

A

'U

B

V 5

V..

C

’/,0

V,o

D

‘/to

‘/to

£f

'U

Uo

abgekiihlt. Da namlich unsere Untersuchungen in Ueberdnstimmung mit
denjenigen von Morgenroth und Eaya ergeben haben, dafi bei 0° die
komplementzerstdrende Wirkung des Cobragiftes aui^ehoben ist, konnte
hiaxlurch in einfacher Weise ein Fortschreiten des Prozesses w&hrend der
zur Ausfuhrung der Beagenzglasversuche erforderlichen Zdt verhindert
werden.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftes auf die Komplemente. 297

Die WirkuDg der einzelnen Gemische auf eensibilisiertee Hammelblut
eigibt sich aus Tabelle VTI, in der unter F als Eontrolle die Wirkung des
natiren MeerschweinchenserumB angefuhrt ist.

TabeUe VII.

Mengen des
Meenchw.-S.

com

Hamolyse von sensibilisiertem Hammelblut

A

B

c

D

E

F (Eontrolle)

0,1

0

wenig

komplett

-

_

komplett

0,05

0

Spur

mimig

komplett

—

0,025

0

0

wenig

mwig

f. kompl.

fast komplett

0,0125

0

0

Spur

Spur

maBig

m&fiig

0,0075

0

0

Spiirchen

Spurchen

wenig

wenig

0

0

0

0

0

0

0

Die Tabelle zeigt, dail aucb bei der Aktivierung
immunisatorisch erzeugter Ambozeptoren die
komplementzerstbrende Wirkung des Cobragiftes
in hohera Made von der Konzentration des Meer-
schweinchenserums abh&ngig ist. Bereits bei fflnf-
facher VerdUnnung erweist sich die Cobragiftwirkung redu-
ziert. Mit weiterer Verdflnnnng nimmt sie immer mehr ab,
um bei 40-facher Verdflnnnng unter den bier gewSblten Be-
dingungen bberhaupt nicbt mehr in Erscheinung zu treten.
Allerdings nahm in diesem Versuch mit der Konzentration
des Meerschweinchens aucb die Konzentration des Cobragiftes
ab. Besondere Untersuchungen zeigten aber, dad aucb bei
gleicbbleibender Konzentration des Cobragiftes
und alleiniger Ver&ndernng der Konzentration
des Meerschweinchenserums in den verdflnnten
LOsungen trotz der erheblich grdderen *abso-
luten Cobragiftmengen die komplementzer-
storende Wirkung in geringerem Made in Er-
scbeinung trat, als in den konzentrierten.

Dad nun wirklich die nach dem Einwirken von Cobragift
auf verdbnntes Meerschweinchenserum vorhandene aktivierende
Kraft durch Komplementwirkung und nicbt etwa dnrch die
Bildung eines H&molysins aus Cobragift und Meerschweinchen¬
serum bedingt ist, ergab sich aus dem verschiedenen Ver-
halten auf intaktes und sensibilisiertes Hammelblut.

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298

L. Omorokow,

Um diesen Unterschied mdglichst markant hervorzurufen,
war es angezeigt, noch geringere Cobragiftmengen zur Kom-
plementzerstbruDg zn verwenden, damit die eigene dem Cobra-
gift im Verein mit Meerschweinchenserum zukommende hfimo-
lytische Wirkang auf ein Minimum reduziert wird. Nun batten
besondere Versuche gezeigt, dafi die zur KomplementzerstOrung
erforderliche Cobragiftmenge der Zeitdauer der Wirkung um-
gekehrt proportional ist. Die Zeitdauer des Digerierens von
Cobragift und Meerschweinchenserum wurde daher auf 3 Stun-
den ausgedehnt, und es zeigte sich hierbei, dafi 0,2 ccm
0,02-proz. Cobragiftes noch ausreichten, um 0,5 ccm Meer¬
schweinchenserum Yollstftndig Oder fast vollst&ndig der Eom-
plementwirkung zu berauben^).

Zwar wurde nun auch bei Verwendnng dieser geringen
Cobragiftdose eine absolute Differenz nicht erhalten, well die
Cobragiftmenge noch immer ausreichte, um im Verein mit
Meerschweinchenserum eine geringgradige hfimolytische Wir¬
kung zu entfalten. Immerhin war aber der quantitative Unter¬
schied groB genug, um die aus folgendem Versuchsbeispiel
gezogene Konsequenz zu rechtfertigen.

Ee warden folgende Qemieche angesetzt:

Meerschw.-

Serum

0 ,02-proz.

Cobragift

OBb-proz.

NaCI-LSs.

0 ,8^roz.

NaCl-Lbs.

Yerdunnung

des

ccm

ccm

ccm

ccm

Meerschw.-S.

A

0,5

0,2

0

l-stun-

4,3

% (V,«)

B

0,5

0,2

1,8

digerAuf-

2,5

V, (V,.)

C

0,5

0,2

4,3

enthalt

0

1 /

/lO

D

0,5

0,2

9,3

19,3

4,5

bei 37®

0

1 /

/to

E

F

0,5

0,5

“(f

0

0

1/

no

Die Wirkung der Giemische auf sensibilisiertes und natives Hammel-
blut zeigt Tabelle VIII.

1 ) Auch bei groBen Cobragiftmengen war iibiigens nach S-stundigem
Digerieren noch immw Eomplementwirkung nachzuwdsen, wenn das Gtemisch
hinreichend verdunnt war. Bei weniger starker Verdiinnung wurde bam
l^geren Digerieren die zunachst erhalten gebliebene Eomplementwirkung
anfgehoben, so dafi die Verhaltnisse denen entsprechen, die fur das Zu-
sammenwirken von Cobragift und Meerschwemchenserum ohne Immun-
ambozeptor beschrieben worden ^d.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftee auf die Eomplemeiite. 299

TabeUe VIH.

Mengen des
Meerechw.-S.

Hamolyse Ton sensibilisiertem Hammelblut

ccm

A

B

C

D

E

F

0,1

0,05

0,025

0,0125

0,0075

0

Spur

Spiirchen

0

0

0

komplett
f. kompl.
wenig
Spur
Spurchen
0

komplett

stark

wenig

Spurchen

0

komplett

mwig

Spur

Spurchen

0

komplett

stark

Spurchen

0

komplett

*> ,
stark

wenig

0

Hamolyse von nativem Hammelblut

0.1

0,05

0,025

0,0125

0,0075

0

0

0

0

0

0

0

wenig

Spiircnen

0

0

0

0

wenig

Spur

Spurchen

0

0

0

Spur

Spurchen

0

0

0

Spurchen

0

0

0

Spiirchen

0

0

0

0

0

Wie sich aus der Tabelle ergibt, sind also diejenigen
Gemische, in welchen Cobragift und Meer-
schweinchensernm in geeigneter Verdftnnung
anfeinander eingewirkt haben, wirksam geblie-
ben. Sie h&molysieren aber nur das sensibili-
sierteBlut, nicht oder nur in sehr geringem Malle
das native Blut Damit ist wohl anch auf diesem
Wege der einwandsfreie Beweis daftlr erbracht,
da£ das vorhandene aktive Prinzip anf Komple-
mentwirkung bernht.

Fassen wir das Resnltat der Analyse zusammen, so er¬
gibt sich, daH die komplementzerstdrende Wirkung des Cobra-
giftes in hohem Made von der Konzentration abh&ngt, nnd
zvar mud im wesentlichen die Konzentration des Meer-
schweinchensemms ftlr den verschiedenen Ausfall der Ver-
snche verantwortlich gemacht werden, indem selbst bei gleicher
Gobragiftkonzentration die inaktivierende Wirkung dann in
erheblich geringerem Made zum Ausdruck kommt, wenn das
Meerschweinchenserum verdtlnnt ist FQgen \7ir noch hinzu,
dad die Komplementzerstbrnng durch Cobragift bei niedriger
Temperatur ansbleibt, so ergeben sich, wie schon im Anfang
vermutet, enge Analogien zu dem von Sachs und Teruuchi
beschriebenen Verhalten bei der Inaktivierung der Komple-
mente im salzfreien Medium; denn auch hier bleibt die Zer-

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300

L. Omorokow,

stdrung des Komplementes bei niedriger Temperatur und bei
zo starker VerdttDnung des Serums aus.

Nun haben Sachs und Alt maun gezeigt, daB die Zer-
stdrung der Komplemente beim Verdflunen des Serums mit
destilliertem Wasser bei geeigneter alkalischer oder saurer
Reaktion ausbleibt ^). Es wnrde daber untersucht, ob sich das
nftmliche Verhalten auch bei der Eiuwirkung des Gobragiftes
auf Meerschweinchensernm feststellen liefi.

Je 0,5 ccm Meerschwemchenseram und 0,2 ccm ^/,-proz. Gobragiftes
vrurden gemischt:

A mit 4 ccm physiol. KochsalzlSsung,

B mit 4 ccm SalzslluTe (in physiol. Kochsalzlbeung),

C mit 4 ccm Vtoo'^^ Natronlauge (in physioL Eochsalzldsung).

Nach 2-stundigem Verweilen bei 37** warden hinzugefugt:
zu A 0,4 ccm physiol. Eochsalzldsung,
zu B 0,4 ccm V 2 O n-Natronlauge (physiol. Eochsalzldsung),
zu C 0,4 ccm Vt» n-Salzsaure (in physiol. Eochsalzldsung).

Die aktiyierende Wirkung der derart neutralisierten Gemische wuzde
dmrch Digerieren absteigender Mengen mit je 1 ccm sensibilisierter SLammd-
blutau&chwemmung ermittelt. Das Eigebnis zeigte Tabelle IX, in der in
der Eolumne D die Wirkung dee natiren Meerschweinchenserums zur
Eontrolle verzeichnet ist.

Tabelle IX.

Mengen des
Meerechw.-Ser.

ccm

Hamolyse yon sensibilisiertem Hammelblut

A

B

c

D

SpY

komplett

komplett

komplett

0,05

Spiirchen

>1

if

0,025

0

fast komplett

fast komplett

0,015

0

mafiig

maOig

stark

0,01

0

wenig

wenig

mafiig

0

0

0

0

0

Aus der Tabelle ergibt sich, dafi sowohl durch alkalische,
als auch durch saure Reaktion die komplementbindende Wir¬
kung des Gobragiftes fast vollst&ndig gehemmt wird. Die
Benrteilung der Versuche wird aber dadurch erschwert, dafi
sich die Einwirkung yon S&ure und Alkali bereits auf das im
Gobragift enthaltene antikomplementEr wirkende Agens von

1 ) Die Versuche, uber deren Ergebnisse bisher nur kurz berichtet
wurde (CentralbL f. Bakt., Abt. I, Bef., Bd. 42, Beiheft 1906), sollen dem-
nachst publiziert werden.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftes auf die Komplemente. 301

<lelet!irem Einflufi erwies. Eine Aufhebung der komplement-
zerstSrenden Fanktion war nfimlich anch dann zu konstatieren,
wenn die Gemische nach erfolgter Neutralisation weiter
digeriert wurden, oder wenn lediglich Cobragift mit Salzsfture
und Natronlauge bebandelt und erst nacb dem Neutralisieren
Meerscbweincbenserum binzugefQgt wurde. Hierfflr sei folgen-
des Versucbsbeispiel angefiibrt.

Es wurden folgende Gtemische angesetzt:

ia

45 a
'SbS

at?

'§3

S'-s

m

. to

•12

5^

H

O'-S

1

U

11

53

W J

a S

d

53 2

d

d

ll

s

ccm

ccm

ccm

ccm

ccm

ccm

ccm

A

0,5

0

4,6

0

0

0

0

0

0

B

0,5

0,2

4,0

0

0

§o

0,4

0

0

0

C

0,5

0,2

0

4,0

0

'2i>

0

0

0,4

0

D

E

0,5

0

0,2

0,2

0

4,0

0

0

s ^

0

0.4

0,4

0

0

0

0

0,5

F

0

0,2

0

4,0

0

(M

0

0

0,4

0,5

G

0

0,2

0

0

4,0

0

0,4

0

0,5

Samtliche €iemiBche blieben nun weitere 2 Stunden bd 37**. Sodann
erfolgte die Bestimmung ihrer hamolytischen Wirkung auf sensibilisiertes
Blut Das E^rgebnis zeigt Tabelle X.

Tabelle X.

Mengen des
Meerschw.-S.

ccm

Hamolyse

Ton sensibilisiertem Hammdblut

A

B

C

D

E

F

G

0,1

komplett

Spiirch.

kompL

komplett

milfiig

kompl.

komplett

0,05

0

f. kompl.

Spur

f. kompl.

0,025

stark

0

maSig

Spur

Spiirch.

7}

wenig

0,015

0

wenig

Spurch.

0

stark

Spurcm

0,01

rnHOig

0

Spur

V

0

maSig

y

0

0

0

0

0

0

0

0

Es zeigt sicb also, dafi daskomplementzerstbrende
Prinzip des Cobragiftes sowobl durcb Salzs&ure,
als aucb durcb Natronlauge seiner Funktion be-
raubt wird, und zwar in den gleichen Eonzentrationen
(Vsoo'^Ofin^l^sungen), unter welchen, wie Tabelle IX zeigte,
die antikomplement&re Wirkung verhindert ist^). Welcber
Art diese Inaktivierung der komplementzerstdrenden Eompo-

1 ) V 4 oo*Normalldsungen ubten nur noch dnen minimalen Einflufi aus.

ZeitKhr. f. Immanitltsforaehaiic. Orif. Bd. X. 20

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302

L. Omorokow,

nente ist, und ob es etwa gelingt, auf diesem Wege zu einer
Isolierung des im Verein mit Meerschweinchenserum h§nio*
lytisch wirkenden Agens zn gelangen, darflber mfissen weitere
Versuche entscheiden. Jedenfalls zeigen aber die sich aus
Tabelle X ergehenden Tatsachen, dafi es nicht ang^ngig ist, aos
den in Tabelle IX erhaltenen Befunden auf eine Hemmung der
komplementzerstCrenden Wirknng durch verUnderte Reaktion
des Mediums zu schlieilen, wenn auch diese Mdglichkeit keines-
wegs ausgeschlossen werden kann. Ein geringer Unterschied
ist immerhin zwischen den Reihen B und C der Tabelle IX
einerseits, C und D der Tabelle X andererseits zu bemerken.
Es handelt sich bier urn Paralleluntersuchungen, die gleich-
zeitig ausgefObrt wurden und direkt vergleichbar sind. Will
man also die vorhandenen Differenzen berhcksichtigen, so
wiirden sie in der Tat darauf hinweisen, dafi vielleicht aufier
der zerstdrenden Funktion noch ein hemmender Einfluil der
sauren oder alkalischen Reaktion vorhanden sein kdnnte, aber
zu einer Entscheidung dieser Frage dfirfte eine Berechtigung
nicht vorliegen, und es muB daher offen bleiben, ob in bezug
auf den EinfluB der Reaktion eine Analogie zwischen Eom-
plementzerstdrung durch Cobragift und im salzfreien Medium
besteht.

Allerdings babe ich zwei weitere Kriterien, die von
Sachs und Ternuchi f(ir die Inaktivierung im salzfreien
Medium beschrieben wurden, bei der Cobragiftwirkung ver-
miBt. Die Komplementzerstdrung im salzarmen Medium bleibt
n&mlich aus, wenn Mteres, bereits gelagertes oder kurze Zeit
erhitztes Meerschweinchenserum verwendet wird. Eine der-
artige Bedeutung der Beschaffenheit des Serums konnte nun
in den bisher ausgefhhrten Versuchen nicht festgestellt werden,
da sowohl bei der Untersuchung verschieden alter Serum-
proben als auch bei Verwendung erhitzten Meerschweinchen-
serums stets dieselben VerhMtnisse aufgefunden wurden wie
bei frischem.

Wenn man nun der von Sachs und Teruuchi ftlr die
Inaktivierung im salzfreien Medium gegebenen ErklSrung
folgt, nach welcher einem im Meerschweinchenserum vor¬
handenen fermentativen Stoff die Wirkung zukommt und das
salzarme Medium nur die Bedingung fur dessen Funktion

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Ueber die Wirkung des Ck>bragiftes auf die Komplemente. 303

darstellt, so wird die erdrterte Differenz nicht daran hindern,
die beiden in Diskussion gezogenen Vorg&nge als verwandt
anzusehen. Denn bei der Komplementzerstbrung dnrch Cobra-
gift wird ja das wirksame Ferment in Form der Cobragift-
Ibsung zugesetzt und die Beschaffenheit des Meerschweinchen-
serums, die bei der Inaktivierung im salzfreien Medium von
Sachs und Teruuchi auf den wechselnden Fermentgehalt
bezogen wurde, durfte daher hier keine Rolle spielen. Nun
besteht freilich fQr die vergleichende Auffassung der beiden
VorgUnge insofern eine Schwierigkeit, als die Komplement-
zerstbrung durch Cobragift von dessen Konzentration, also
dem Fermentgehalt, nicht in dem Mafie abh&ngig ist wie von
der Konzentration des Meerschweinchenserums. AUerdings
haben spHtere Untersnchungen von Sachs und Altmann^)
es wahrscheinlich gemacht, dad die Fermenthypothese fQr die
Komplementzerstbrung im salzfreien Medium entbehrlich sein
dhrfte. Die Autoren neigen aus verschiedenen Grtinden, deren
Erbrterung hier zn weit fQhren wQrde, dazu, den Globulinen
und ihren Ver&nderungen eine Rolle bei dem Zustandekommen
des PhQnomens zu vindizieren.

Was aber die komplementzerstbrende Wirkung des Cobra-
giftes anlangt, so ist es naheliegend, hier die Interferenz eines
fermentativ wirkenden Stoffes verantwortlich zu machen, wie
dies von Morgenroth und Kay a bereits geschehen ist In
diesem Sinne spricht auch die Tatsache, daB bei Temperatur-
erniedrigung (0 ®) der ProzeB der Komplementzerstbrung voll-
stOndig sistiert, wenn man auch die Bedeutung dieses Kriteriums
im Sinne der fermentativen Wirkungsart nicht Qberschktzen
darf, zumal auch die Inaktivierung im salzarmen Medium
durch Temperaturerniedrigung nach Sachs und Teruuchi
aufgehoben wird.

Bei der Auffassung des im Cobragift enthaltenen anti-
komplementOr wirkenden Agens im Sinne eines fermentartigen
Prinzips ist die AbhSngigkeit des Vorganges von der Kon¬
zentration des Meerschweinchenserums in seinem Wesen nicht
ohne weiteres dem VerstQndnis zug&ngig. Man kbnnte daran

1 ) cf. Sachs tmd Altmann, Handbuch der pathogenen ACkro-
organismen, 2. Ex^knzungsbd., 1909, p. 459. Die ausfiihrliche Publikation
erfolgt demnachst

20 *

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304

L. Omorokow,

denken, daB die durch hdhere Konzentration des Meerschwein-
chenserums gegebene Art des Milieus von Bedeutuog fOr das
Zustandekommen des Vorganges ist. In dieser Hinsicht babe
ich untersucht, ob die bei hinreichender Verdiinnung aus-
bleibende Inaktivierung durch eine vertlnderte Reaktion erzielt
werden kann, bin aber zu negativen Ergebnissen gelangt.
Vielleicht liegt aber der komplementzerstdrenden Wirkung des
Cobragiftes ein komplizierterer Mechanismus zugrunde. So
kdnnte man annehmen, daB der Vorgang in zwei Phasen ver*
l&uft, indem das Cobragift zun&chst auf die Bestandteile des
Serums eine derartige Wirkung ausiibt, daB nunmehr eine
autoantikomplement&re Wirkung resultiert, fdr welche man
auch lipoidartige Spaltprodukte verantwortlich machen kdnnte.
Man wilrde dann den Einflufi der Konzentration nicht unbe-
dingt auf die eigentliche fermentartige Wirkung beziehen
mClssen, sondern auch an die Interferenz in der zweiten Phase
denken kdnnen. In dieser Hinsicht besteht, gerade wenn man
an die Beteiligung von Lipoiden denkt, vielleicht eine Analogic
zu Beobachtungen von Satta und Donati^), welche die
Wassermannsche Reaktion bei groBerer Konzentration der
gleichen Men gen reagierender Stoffe in verst&rktem Mafie
eintreten sahen. Untersuchungen, die Herr Dr. Alfred Marx
im hiesigen Institut ausgefhhrt hat, haben diese Befunde der
Antoren insofern erweitert, als sich zeigen lieB, daB auch die
antikomplementSre Wirkung der Extrakte (ohne Zusatz von
Patientenserum) nicht unerheblich markanter in Erscheinung
tritt, wenn das Volumen beim Digerieren mit Meerschweinchen-
serum reduziert ist.

Wenn aber die antikoraplementSre Wirkung des Cobra¬
giftes erst indirekt vermittelt wird, dann wttrden sich weitere
Ausblicke eroffnen, die den Vorgang mit der Inaktivierung
im salzfreien Medium als wesensgleich erscheinen lassen
kdnnten, und vielleicht lassen sich diese Phtlnomene dann in
letzter Hinsicht einem allgemeineren Prinzip unterordnen, wie
ein solches jflngst von Friedemann^) far die verschieden-
artigsten antikomplementaren Fnnktionen in der Globnlin-

1) O. Satta und A. Donati, diese Zeitschr., Bd. 7, 1910.

2) U. Friedemann, Zeitschr. f. Hyg., Bd. 67, 1910.

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Ueber die Wirkung des Cobragiftes auf die Komplemente. 305

wirkung angenommen worden ist. Wie dem aber auch sei,
jedenfalls zeigen die vorliegenden Untersuchungen, dafi die
paradoxen Erscheinungen, welche bei der komplement-
zerstdrenden WirkuDg des Cobragiftes zur Beobachtung ge-
langeD, in der besonderen Eigenart des Vorganges und seiner
Abh&ngigkeit von der Serumkonzentration eine hinreichende
ErklSrung finden.

Zusammenfassung.

1) In Best&tigung der Angaben von Braun konnte fest-
gestellt werden, dafi beim Digerieren absteigender Men gen
von Meerschweinchenserum mit Cobragift und nachtrtlglichem
Blntzusatz die Hdmolyse bei den grdfiten Serumdosen aus-
bleibt, bei geringeren mehr oder weniger stark in Erschei-
nung tritt.

2) Die Ursache hierfur ist darin gelegen, dafi die Reaktions-
geschwindigkeit der antikomplementaren Wirkung des Cobra¬
giftes der Serumkonzentration proportional ist. Fdr diese Er-
klfirung und gegen die Auffassung eines durch das Zusammen-
wirken kleiner Serum mengen mit Cobragift entstehenden
H&molysins sprechen folgende Faktoren:

a) Beim Digerieren inaktivierten Meerschweinchenserums
mit Cobragift wird eine h&molytische Zone nicht erhalten.

b) Das in der h&molytischen Zone wirkende Prinzip ist
thermolabil.

c) Mit dem Fortscbreiten der Dauer der Einwirknng von
Cobragift auf Meerschweinchenserum verschiebt sich die h§mo-
lytische Zone nach den kleineren Serummengen zu.

d) Das Ausbleiben der komplementzerstSrenden Wirkung
des Cobragiftes ist lediglich von der Konzentration und nicht
von den absoluten Mengen des Meerschweinchenserums ab-

hangig.

3) Der EinfluB der Serumkonzentration auf die anti-
komplementHre Wirkung des Cobragiftes dokumentiert sich
auch bei der Aktivierung immunisatorisch erzeugter Ambo-
zeptoren.

4) Bei geniigender Konzentration des Meerschweinchen¬
serum s gelingt auch hierbeieine vollstBndige Inaktivierung

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306

A. Bauereisen,

des Komplements. Die h&mol3rtische Wirkung, welche anch
unter diesen VerhUltnissen bei der EinwirkuDg von Cobragift auf
verdfinntes Meerschweinchenserum resultiert, spricht wiederom
in dem Sinne, daB eine Komplementwirkung vorliegt.

5) Die komplementzerstdrende Wirkung des Cobragiftes
wird durch Digerieren mit Salzsiure und Natronlauge (V*oo"
normal) erheblich abgeschw&cht. Ob die Reaktion auch auf
den Vorgang der Komplementzerstdrung einen EinfluB austlbt,
konnte daher nicht entschieden werden.

6) Es wird versucht, die manche Analogien aufweisenden
Vorgange der Komplementinaktivierung durch Cobragift und
durch die Salzarmut des Mediums auf einheitliche Prinzipien
zuriickzufQhren.

Nachdruck verboten,

[Aus der Konigl. Universitats-Frauenklinik Kiel (Direktor;

Prof. Dr. StoeckeL)]

Zur Frage der blologischen Differenzierang der Milch-

etweiBkdrper.

VoQ Privatdozent Dr. A. Bauereisen.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 20. April 1911.)

Seitdem es gelungen ist^, eine Trennung der Eiweifi-
stoffe in der reifen Milch durch Lab, Sauren, Salze, Filter
verschiedener Art herbeizufuhren, existiert die Frage nach den
gegenseitigen Beziehungen dieser EiweiBstoffe. Es war natdr-
lich, einen physikalisch und chemisch genau charakterisierten
EiweiBkdrper wie das Kasein, das nur bei den Saugetieren
und zwar als nmonopolisierte^^ Leistung der Milchdriisen vor-
kommt, als selbstandigen, von den Proteinen der Molke ver-
schiedenen EiweiBkdrper aufzufassen. Die Mehrzahl der
Autoren nahm auch eine Verschiedenheit der MilcheiweiB-
kdrper an.

1 ) Siehe Baudnitz, Allgemeine Chemie der IVIilch im Handbuch
der Milchkunde. Wiesbaden (Bergmann) 1909.

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Biologische Differenzierung der Milcheiweifikdrper.

307

Nur einzelne Forscher stellten die Behauptimg auf, daS ee sich bei den
Terschiedenen Eiweifikdrpern der Milch um dne urspriinglich einheitliche
Substanz handele. Vor allem war es DuclauxO> der nur einen einzigen
EiweLSkdrper der Milch, das Elasein anerkennt, das in Terschiedenen Zu-
standsformen als Albumin, Globulin und Easein, in der Milch vorhanden
ist. Eh begriindet seine Annahme von der E^inheitlichkeit der Milcheiwdfi*
koiper darauf, da6 dem auf dem Filter bleibenden Easestoff durch Aus-
waschen immer neue Mengen dnes ESweifikbrpers entzogen werden kbnnen,
der durch Hitze koagulabel ist. In neuerer Zdt ist die These von der ESn-
hdtlichkdt der Milcheiweifisubsttmzen von E. Pfeiffer, Vandevelde,
Biedert und Morochowetz verteidigt worden. Stichhaltige Bewdse
sind aber von den Verfechtem der Einheitstheorie nicht geliefert worden.

Die Wagschale b^ann sich zugunsten der Anhanger der Anschauung
von der Verschiedenheit der Miichdweil3kdrper zu senken, als die biologische
Methode der Prazipitation in Anwendung karo. Es ist bekannt, dafi zahl*
rdche Eiweifikdrper pflanzUchen oder tierischen Ursprungs die Bildung be-
stimmter Antikorper im artfremden tierischen Edrper hervorrufen. Ent-
stehen Ehazipitine, dann erhalten wir bei der Verdnignng von Antigen und
Antikorpem die Prazipitation als sinnfallige Beaktion. Diese Antikdrper,
die u. a. auch durch Vorbehandlung geeigneter Tiere mit Milcheiweifi-
korpem gewonnen werden konnen, weisen einerseitseine Art-Spezifitat
auf mit der Einschrankung, daB sie auch mit der Milch verwandter Tiere
reagieren, wenn auch graduell geringer; andererseits eine graduelle
konstitutive Spezifitat, die chemisch verschiedeneE^iweiUkorper der-
selben Tierart biologisch bis zu einem gewissen Grad unterscheiden iMAt.
Als erster hat Hamburger versucht, die konstitutive Spezifitat derEuh-
milcheiweifikdrper festzustellen. Ein Easeinantiserum bewirkte Fallung in
Easein und im kaseinfreien (!) Binderserum, aber nicht im Laktalbumin;
ein Albuminantiserum bewirkte Fallung im Albumin aber nicht im Easein
und auch nicht im albuminhaltigen (I) Binderserum. Die Besultate waren
nicht so eindeutig, dafi man von einer absoluten konstitutiven Spezifitat
der Milcheiweifikdrper sprechen konnte. Immerhin durfte auf Grund der
Ham burgerschen Beobachtungen die These von einer gewissen kon¬
stitutiven Spezifitat aufgestellt werden.

Mit Hilfe der Prilzipitininethode babe icb^) gleicbfalls
Untersucbungen fiber die Beziebungen zwiscben den ver-
scbiedenen Eiweifikdrpern des Menscben angestellt und konnte
den Nacbweis ffibren, dafi Antisera, gewonnen durcb Injektion
von Blutserum, Kasein, Laktalbumin, Colostrum, nicht nur
mit den entsprechenden, sondern mit alien eben genannten
Eiweifildsungen eine positive Reaktion geben, dafi demnach

1 ) Le lait, Paris 1894.

2) Die Beziehungen zwischen dem Eiweifi der Frauenmilch und dem
Berumeiweifi von Mutter und Bond. Arch. f. Gyn., Bd. 90, Heft 2.

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308

A. Bauereisen,

keine absolute konstitutive Spezifit&t der EiweiB-
kbrper existiert, wohl aber eine gewisse konstitutive
SpezifitSt in gradueller Abstufung vorhanden ist.
Im einzelnen wurde dabei konstatiert, dail die Proteine der
Colostralmilch und der spkteren Milch sowohl unter sich
als mit dem BlutserumeiweiJl von Mutter und Kind eine nahe
Verwandtschaft zeigen, dall aber das Kasein eine so
deutliche konstitutive SpezifitSt, wenn auch nur
in gradueller Abstufung, erkennen 1^6t, daH es
gewissermafien eine Sonderstellung unter den
flbrigen Eiweifikdrpern gleicher Species ein-
n i m m t.

Wahrend es anderen Forschern nicht gelungen war, ffir
die Globuline und das Albumin des Blutserums auch nur
eine gewisse graduelle konstitutive Spezifitat nachzuweisen,
besteht also kein Zweifel, daB das Kasein gegenflber den
Proteinen der Milch und des Blutserums der gleichen Art
eine gewisse konstitutive Spezifitat in gradueller Abstufung
aufweist. Wenigstens kdnnen wir diesen SchluB aus den Er-
gebnissen der Prazipitinmethode ziehen.

Zur Differenzierung der MilcheiweiBkdrper wurde in
neuerer Zeit auch die Komplementbindungsmethode in An-
wendung gebracht. Besonders war es I. Bauer, der mit
diesem Verfahren Untersuchungen anstellte. In seiner letzten
Arbeit^) kommt er auf Grund eingehender Untersuchungen
zu dem Resultat, daB .das Kasein sich sowohl von den EiweiB-
stoffen der Molke wie von den flbrigen EiweiBkdrpern des-
selben Individuums durch die Komplementbindung differen-
zieren laBt*^. Man hat wohl Recht, anzunehmen, daB Bauer
diese Trennung des Kaseins von den flbrigen EiweiBkdrpern
im absoluten Sinne auffaBt, also dem Kasein eine absolute
konstitutive Spezifitat zuschreibt. Die ausfflhrlichen
Protokolle der von Bauer verwerteten Untersuchungsergeb-
nisse sind von Kollmeyer’^) verdffentlicht worden. Sind nun
die ausfflhrlichen Protokolle wirklich imstande, die These von

1) Ueber den Artcharakter der Milcheiweiflkdrper. Berl. klin. Wochen-
schrift, 1910, No. 18.

2) Ueber die biologische Differenzierung von Milch und MilcheiweiQ-
korpem. Zeitschr. f. Biol., Bd. 54.

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Biologische DifTerenzierung der Milcheiweifikorper.

309

der absoluten konstitutiven Spezifit^t des Kaseins mit Erfolg
zu verteidigen?

Die Tabellen in der III.. Versucbsreihe Kollmeyers
zeigen, dafi bei Einwirkung eines Laktoseroms (gewonnen
durch Injektion von kaseinreicher SpStmilch von Kuh, Ziege
and Esel) aof das Blutsernm der zugehdrigen Tiere keine
einwandfreie komplette H&molyse in bestimmten Eonzentra-
tionen der Eiweififliissigkeiten anftritt. Es kann also nicht
der Schlnll gezogen werden, daB sich „mit Hilfe eines Lakto-
serums bei der Komplementbindung das Blutsernm durcbaus
von der Milch diflferenzieren IMlt*', sondern das Ergebnis l&Bt
nur den Schlull zu, daB ein Laktoserum der sp&teren Kuh-
milch, deren Proteingehalt gegentiber dem Kasein verschwin-
dend klein ist, natUrlicherweise nur sehr schwach mit dem
BlutserumeiweiB reagieren wird. Wenn aber eine auch nur
schwache positive Reaktion vorhanden ist, dann kann man
doch nicht dem Kasein eine absolute konstitutive
SpezifitUt zuschreiben, wohl aber eine gewisse kon¬
stitutive SpezifitSt in gradueller Abstufung. Man
kann dann auch nicht davon sprechen, daB man praktisch in
der Lage ist, Milch vom Blutsernm biologisch mit absoluter
Sicherheit zu unterscheiden. Auch ist es meines Erachtens
nicht richtig, der Komplementbindungsmethode grOBere Spe-
zifitUt zuzuschreiben. Diese ist nur eine scheinbare wegen
der besonderen quantitativen VerhMtnisse, unter denen
wir in der Regel Komplementbindungsversnche anstellen. Die
Komplementbindungsmethode arbeitet mit st&rkeren Ver-
dhnnungen des jeweiligen Antiserums und kann so minuti5sere
Reaktionen geben wie die gewohnliche Pr&zipitinmethode. Es
handelt sich dann aber nur um quantitative, nicht um quali¬
tative Abstufungen.

In den Tabellen der V. Versucbsreihe sind die Ergeb-
nisse der Einwirkung der Kasein- und Proteinantisera auf die
einzelnen MilcheiweiBkdrper verzeichnet. Wie Tabelle 13 er-
gibt, ist bei den angefQhrten VerdQnnungen eine absolute
Trennung des Kuhmilchkaseins vom Kuhmilchalbumin vor¬
handen. Doch vermindert sich die Sicherheit der absoluten
DifTerenzierung dadurch, daB der Vergleich nur mit sehr
starken VerdUnnungen des Antigens ausgefdhrt ist. Dagegen

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310

A. BauereiBen,

lassen die Untersuchungen mit Frauenmilchkasein-Antiserum
(Tabelie 16) und mit Kuhmilchalbumin-Antiserum (Tabelle 14)
lediglich den Schlufi einer gewissen konstitutiven Spezifit&t
der untersuchten Eiweifikdrper zu. Die Autoren versuchen
diese graduelle konstitntive SpezifitUt des Kaseins dadurch zu
erkl^ren, daB es sich urn eioe ungenflgende Reinheit der Ei-
weiBprSparate handelt Wenn es fQr die Frauenmilch zuge-
geben werden kann, so wird man dem von der Firma Merck
dargestellten Kuhmilchalbumin diesen Vorwurf kaum machen
konnen. Wenn es aber so wfire, so kdnnten auch die Qbrigen
auf Grund ihrer Komplementbindungsversuche von Bauer
und Kollmeyer gezogenen Schliisse nicht Anspruch auf
absolute Richtigkeit machen.

Bereits eine epikritische Betrachtung der von Bauer-
Kollmeyer mit Hilfe der Komplementbindungsmethode fest-
gestellten Tatsachen fiihrt zur Ablehnung der These —
wenigstens in der apodiktischen Form —, daB sich „die Ei-
weiBkbrper einer Milch, Kasein einerseits und die Albumin-
Globulinsubstanzen andererseits mit Hilfe der Komplement-
ablenkung differenzieren lassenIch babe noch eigene
Untersuchungen^) mittelst der Komplementbindungsmethode
dber die Beziehungen der EiweiBkbrper der Frauenmilch
unter sich und zum Blutserum von Mutter und Kind ange-
stellt, auf Grund deren ich zu dem Schlusse gelange, daB auch
die Komplementbindungsmethode eine absolute
Differenzierung nicht gestattet, sondernnur eioe
graduelle konstitutive Spezifit&t des Kaseins
gegentiber den Molkeproteinen und dem Blut-
serumeiweiB erkennen l&Bt, somit das gleiche Ergebnis
liefert wie die von mir frQher angewandte PrSzipitinmethode.

Nach Einstellung der h&molytischen Ambozeptordosis, die
fiir vollstandige HUmolyse 0,25 einer 100-fachen VerdOnnung des
h^molytischen Antiserums (bei Verwendung von 0,5 ccm 5-proz.
SchafblutkSrperchen und 0,5 ccm 10-proz. Meerschweinchen-

1 ) Ich hatte die freundliche Erlaubnis erhalten, die Untersuchungen
an der experimentellen Abteilung des Institute fiir Hygiene und experi-
mentelle ITierapie in Marburg a. L. auszufiihren, wofiir ich dem Vorstand
dieser Abteilung, Herrn Professor Dr. R6 mer, auch an dieser Stelle ver-
bindlichsten Dank sage.

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Biologische DiSerenzienmg der Milchdweifikdrper.

311

serum) betrug, wurde als Antiserumdosis der zu prflfenden
Antisera fflr Blutserum-Antiserum (Serum-A.S.) 0,2, fflr Protein-
Antiserum (Protein-A.S.) 0,5 und ftir Kasein-Antiserum (Kasein-
A.S.) 0,2 einer 10-fachen Verdfinnung festgestellt. Die doppelte
Dosis dieser Antiserummengen zeigte keine Eigenhemmung.
Als Antigendosis wurde 0,5 von quantitativ abgestuften Ver-
ddnnungen der Antigene (Nabelschnurblutserum, Mutterblut-
serum, Proteinldsung aus Frauenmilch, Kaseinldsung ans
Frauenmilch und Spfitfrauenmilch) gewShlt, die gleichfalls in
der Doppeldosis der hdchsten Konzentration keine Eigen¬
hemmung aufwiesen. Aus der beigegebenen Tabelle ist ersicht-
lich, dafi das Serumantiserum am stkrksten mit dem Blutserum
von Mutter und Kind, am schwachsten mit Kaseinldsung eine
positive Reaktion gibt, das Proteinantiserum am stUrksten mit
ProteinlOsung, am schwHchsten mit kindlichem Blutserum und
Kaseinldsung, das Kaseinantiserum am stdrksten mit Kasein
und Frauenmilch, am schwdchsten mit kindlichem Blutserum
eine positive Reaktion gibt. Bemerkenswert ist die
schwache Reaktion des Proteinantiserums mit
dem eiweififirmeren kindlichen Blutserum gegen-
hber dem Mutterblutserttm, aber die Tatsache
derpositiven,wennauchquantitativschwdcheren
Reaktion des Nabelschnurblutserums mit Molken-
proteinantiserum kann durch die Komplement-
bindungsmethode ebenso nachgewiesen werden,
wie ich sie bereits in der oben zitierten Arbeit
durch das PrS.zipitinverfahren konstatieren
konnte.

Tabelle,

Mengen

des

Antigens

0,5

Antigen

Eindliches Serum

Antigen

Miitterliches Serum

Antigen

Proteinldsnng aus
Frauenmilch

Serum-

A.S.

Protein-

A.S.

Kasein-

A.S.

Serum-

A.S.

Protein-

A.S.

Serum-

A.S.

Protein-

A.S.

Kasein-

A.S.

7,00.

0

Spur

Spur

0

0

Spur

0

S !

0

If

IBWO

0

stark

stark

0

wenig

wenig

Spur

0

Spur

1 /

/lOOOO

wenig

kompL

kompL

wenig

stark

stark

wenig

0

wenig

/fOOOO

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>1

11

stark

11

11

stark

Spur

stark

>•

11

11

11

11

wenig

stark

^uoooo

^80000

kompl.

11

11

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kompl.

kompL

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11

11

/lOOOOO

11

11

11

>• 1

1 11

kompl.

11

11

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312

A. Bauereisen,

Mengen

des

Antigens

0,5

Antigen

Kaseinlosuns aus
Frauenmilch

Antigen

Frauenmilch

iSerum-

A.S.

Protein-

A.S.

Kasein-

A.S.

Serum-

A.S.

Protein-

A.S.

1

0 •
■sxi

j/lOOO

Spur

Spur

0

0

0

0

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wenig

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stark

yy

Spur

stark

Spur

Spur

/20000

yt

stark

wenig

kompl.

wenig

wenig

40000 j

koinpl.

kompl.

stark

yy

mllBig

stark

Jnoooo

yy

yy

yy

1

stark

yy

Aooooo

yy

yy

kompL

1 yy

>y

yy

Kontrollen ohne Antigen oder ohne Antiserum ergaben stets komplette

Hiimolyse.

Weon auch zugegeben werden muB, daB gerade bei der
Frauenroilch die Herstellung reiner Kasein- und Protein-
Idsungen besonderen Schwierigkeiten begegnet, so kdnnen
doch bei den starken Verdflnnungen der angewandten EiweiB-
Idsungen und Antisera, besonders angesichts der durch das
viel reinere Kuhmilchkasein und Euhmilchalbumin gewonnenen
Ergebnisse, Schliisse mit groBer Wahrscheinlichkeit in dem
Sinne gezogen werden, daB auchdieKomplementbindungs-
methode eine absolute konstitutive Spezifitdt
des Kaseins nicht beweist, sondern nur in gra-
dueller Abstufung.

Ein gleiches Resultat babe ich bereits durch die Pr&zipitin-
methode erhalten. Voraussetzung ist, daB bei dieser Methode
mit quantitativ genau bestimmten Mengen gearbeitet wird. In
der oben zitierten Arbeit habe ich — um ein Beispiel heraus-
zugreifen — eine positive PrSzipitinreaktion des Proteinanti-
serums auf Kolostrum und Molkenproteine bei einer Ver-
dOnnung von 1:10000 und auf Kasein erst bei einer Ver-
dfinnung von 1:500 erhalten (Tabelle II). Hlitte ich die
Versuche erst mit Verdflnnungen von 1:1000 begonnen, so
hatte ich scheinbar eine absolute Differenzierung der Molken¬
proteine vom Kasein erreicht. In einem anderen Versuche
prflzipitierte das Kaseinantiserum Kasein bei einer Verdflnnung
von 1:10000, Molkenproteine und Blutserum bei einer Ver-

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Biologische Difierenzierung der MilcheiweiSkdrper.

313

dfinnung von 1:1000 (Tabelle III). Auch hier w&re scheinbar
eine absolute konstitutive Spezifit&t des Kaseins eklatant ge-
wesen, wenn ich mit der Verdfinnung 1:1500 erst eingesetzt
h9.tte. Es ist mir nicht ganz verst&ndlich, warum Bauer die
PrUzipitinmethode fQr v611ig wertlos halt zur Difierenzierung
der Milcheiweifikdrper. Sie ermbglicht im Gegenteil wegen
ihrer Einfachheit die Anstellung zahlreicherer quantitativ
abgestufter Versuchsreihen, worauf es hier hauptsachlich
ankommt.

Zusammenfassung.

Sowohl auf Grund der Bauerschen wie meiner eigenen
Versuche mittelst der Komplementbindung komme ich zu dem
Schlusse, daC ebensowenig wie das Prazipitinver-
fabren die Komplementbindungsmethode eine
Differenzierung der MilcheiweiBkSrper gegen-
fiber den tlbrigen Eiweifikorpern des gleichen
Individuums im absoluten Sinne ermdglicht,
sondern beide Verfahren sind nur imstande, beim
Kasein eine in der Tat vorhandene konstitutive
Spezifitat als eine graduelle zu kennzeichnen.
Die Prazipitinmethode, die mit quantitativ genau bestimmten
Mengen arbeitet, ergibt die gleich sicheren Resultate wie die
Komplementbindungsmethode. Es mufi eingeraumt werden,
dafi das Endresultat durch die unvollkommene Reindarstellung
der einzelnen MilcheiweiUkdrper beeintrachtigt wird. Solange
aber noch absolnt sichere Methoden zur Herstellung voll-
kommen reiner Kasein- und Proteinldsungen fehlen, mfissen
wir uns mit dem gegebenen Endresultat begnugen.

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314

Marie Lurje

Naehdmek verboUn.

[Ans der Abteilung fiir ezperimentelle Pathologie and pathologische
Anatomie (Vorstand: Privatdozent Dr. S. Abramow) desChemisch-
Bakteriologischen Institnts von Dr. Ph. Blnmentbal in Moskau.]

Ueber die pathologisch-anatomischen TerSndernngen der
Langen bei der intrapnlmonalen Immnnisiemng mlt

JDlphtherletoxin.

Von Dr. Marie Lnije.

Mit 1 Tafel.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 21. April 1911.)

Im Jahre 1908 empfahl Dr. Ph. BlumenthaP) eine
neue Methode der Immunisierung gegen Diphtherie, n&mlich
die intrapulmonale. Das Verfahren entsprang dem Wunsche,
„das Diphtherietoxin in m5glichst enge r§.umliche Beziehung
zu mdglichst grofien Zellmassen zn brio gen, um sie dadurch
zu erhShter TStigkeit, zu gesteigerter Giftbindung und Gegen-
giftsekretion anzuregen*^. Diesen Anforderungen entsprach am
besten die Lunge. Dieses Organ, das an zelligen Elementen
iiberaus reich ist und einen schwammigen Ban besitzt, gestattet
die Einfflhrung grSBerer Toxinmengen als andere Organe.

Bei der makroskopischen Untersuchung der
Lungen entbluteter Pferde, die nach der bezeichneten Methode
immunisiert worden waren, konnten in der Regel folgende Ver-
Underungen festgestellt werden. Bei der Palpation der Lungen
wurden in ibrem Parenchym ziemlich grofie Infiltrationsherde
durchgefflhlt. Auf dem Durchschnitt waren diese Herde derb,
luftleer. Beim Vergleichen der verschiedenen Herde mitein-
ander vermochte man gew5hnlich zu bestimmen, welcher von
ihnen der letzten Toxininjektion seinen Ursprung verdankte.
Er hot nBmlich das Bild eines gewdhnlicben Infarktes dar.
Das Lungengewebe erwies sich in ihm als luftleer, von der
SchnittflUche konnte Blut ausgepreBt werden. Bisweilen war
das Zentrum in Form eines Sequesters nekrotisch geworden.

1) BctI. klin. Wochenschr., 1906, No. 26.

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Intrapulmonale Iimnunisierung mit Diphtherietoxin.

315

In Herden Slteren Ursprungs traten die Hfimorrhagien
und die Nekrose in den Hintergrund und ihre Stelle nahm
gewdhnlich die Organisation des Infarktes ein. Das Lnngen-
gewebe wurde derb, und die alten Herde waren in der Regel
bereits vernarbt, wobei sie aus ziemlich derbem, blassem Binde-
gewebe bestanden.

Bei der mikroskopischen Untersuchnng der
frischen Herde wurde eine Nekrose der Alveolarwande ge-
funden. Diese fSj'ben sich schlecht; in den Zellen sind Er-
scheinungen der Earjorrhexis zu bemerken. Die Alveolen sind
mit roten Blutkdrperchen erfdllt, unter denen eine geringe
Menge schlecht erhaltener Zellen des Alveolarepithels ange-
troffen wird. In den Bezirken, wo der Infarkt in normales
Lnngengewebe iibergeht, kommen die Erscheinungen der Ne¬
krose zum Stillstand. Die Alveolarsepten sind besser erhalten,
ihre Kapillaren sind mit Blut tiberfhllt, in den Hohlrkumen
der Alveolen behnden sich reichliche Ansammlungen von
Erythrocyten.

In den Herden Ulteren Ursprungs sind die Alveolarwtlnde
hochgradig verdickt und bestehen aus Fibroblasten verschiedenen
Alters. Die Lungenlumina sind verengt nnd weisen die Reste
von Blutanstritten anf. In den verschiedenen Herden ftndert
sich das Bild je nach dem Alter des Prozesses. Die Lungen-
alveolen werden allmUhlich enger und die ZwischenwHnde
dicker, wShrend das Gewebe der letzteren aus einem rein
zelligen allmShlich in ein zellenreiches fibrbses Gewebe tlber-
geht. Endlich sind auch Herde zu finden, in denen von der
Struktur der Lunge nicht die geringsten Spuren tibrig geblieben
sind. Sie bestehen aus zellenreichem Bindegewebe. In der-
artigen alten Herden ist es uns in mehreren F&llen gelungen,
Anh&ufnngen von Eosinophilen zu beobachten, die bisweilen
eine sehr betrftchtliche GrdBe erreichten. Die Eosinophilen
lagen bald in Hfiufchen zu 10—20 Stflck und mehr, bald zer-
streut in vereinzelten Exemplaren zwischen den Fasern und
Zellen des Bindegewebes. Die Erscheinungen der Eosinophilie
wnrden von uns recht h&ufig beobachtet, jedoch durchaus nicht
regelm&fiig.

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316

Marie Lurje,

Wie aus dem oben Gesagten erhellt, gelingt es nicht, an
dem von immunisierten Pferden gewonnenen Material die ersten
Ver^derungen in der Lunge unter dem EinfluQ des Diphtherie-
toxins zu verfolgen. Da Literaturangaben flber die Einwirkung
des Diphtherietoxins auf Gewebe sehr sp&rlich vorhanden sind,
so setzten wir uns auf Veranlassung von Herrn Dr. Ph.
Blumenthal zum Ziel, diese Veranderungen mittelst Ver-
suchen an Hunden aufzukiaren.

Die Dosis letalis minima des Toxins, mit welchem wir
experimentierten, betrug 0,005 (fflr ein Meerschweinchen von
250 g Gewicht).

Unsere Versnche zerfallen in zwei Serien. In der einen
Serie war die injizierte Toxinmenge derart berechnet, dafi auf
je 250 g Lebendgewicht des Hundes 0,005 g Toxin kamen,
wobei das Toxin unverdtinnt appliziert wurde. In der andern
Versuchsserie war die Dosis lOOmal kleiner, d. h. sie betrug
0,00005 g auf je 250 g Gewicht des Hundes, und das Toxin
wurde in 100-facher Verdflnnung appliziert. Die Nadel wurde
in den zweiten rechten Interkostalraum zwischen Sternum und
Lin. axillaris eingefflhrt und gelangte in den oberen Lungen-
lappen. Die Hunde wurden am 1. Tage bis zum 10. nach der
Injektion getotet. Die Fixierung wurde in Nikiforowscher
Fliissigkeit (5-proz. Kalii bichromici -j- gesattigte Sublimat-
Idsung aa), sowie in 4-proz. Formalinldsung vorgenommen.
Farbung mit Hamatein-Eosin und nach van Gieson. Auch
wurde die Reaktion auf Eisen mit Berlinerblau nach Peris
ausgefiihrt.

Versuche mit einer geringen Menge von 100-
fach ver diinn tern Toxin (je 0,00005 g auf 250 g Lebend¬
gewicht des Hundes).

An der Einstichstelle wurde am ersten Tage ein hyperamischer In-
filtratbezirk von verschiedener 6r56e gefunden, der bisweUen mehr als die
Halfte eines Lungenlappens, manchmal jedoch 1—1*/, cm im Durchmesser
nicht iibertraf. Von der Schnittflache sickerte eine blutige, triibe, schaumige
Fliissigkeit. Der affizierte Bezirk ging ohne scharfe Grenzen allmlihlich in
das normale Lungengewebe iiber.

Diese Veranderungen kamen nnr in demjenigen Lappen
zur Beobachtung, in welchen die Injektion gemacht wurde.

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Intrapulmonale Immunisierung mit Diphtherietoxin. 317

Die fibrigen Lappen der rechten und die gesamte linke Lunge
boten makroskopisch keine VerS,nderangen dar.

Je spfiter die Hunde getdtet wurden, desto blasser wurde
der Herd; seine F&rbung nahm einen grauen Ton an nnd von
der SchnittflSohe konnte eine trflbe schaumige Flflssigkeit mit
nur geringer Blutbeimengnng ausgeprefit werden.

Die mikroskopische Untersuchung zeigte fol-
gendes:

Am ersten Tage nach der Toxininj^ktion ist an der Einstichstelle eine
hochgradige Hyper^ie zu bemerken, die Grefiifie sind mit Blut iiberfiillt,
die Kapillaren gewunden und reichen in das Lumen der Alveolen hinein,
die Alveolen sind mit Anhaufungen von polynukleiiren Leukocyten gefuUt,
zwischen denen vereinzelte Erythrocyten nnd runde protoplasmareiche Zellen
mit exzentrisch gelegenem, rundem blaschenfdrmigen, gut farbbarem Kem,
in dem ein undeutliches Chromatinnetz und ein Kernkorperchen, also Al-
veolarepithel, angetroffen werden (Fig. 1). Die Kapillaren der Bronchen
sind hyperamisch, im Lumen der Bronchen bedndet sich ein Exsudat, das
fast ausschlieOlich aus Polynukleiiren mit einer geringen Beimengung von
Erythrocyten besteht. Hier und da st53t man auf Alveolen, die mit Blut
gefullt sind. Eine bedeutende Gr56e erreichen die Blutaustritte nie. Die
Alveolenwande sind iiberall erhalten.

3 Tage nach der Injektion &ndert sich das Bild ein wenig:

Die Hyperamie ist noch deutlich ausgepragt, die Emigration der Poly-
nuklearen jedoch wird weniger intensir, neben den Leukocyten tritt im
Hohlraum der Alveole in grofier Menge Alveolarepithel aiif, das in vielen
Fallen die Hauptmasse des Inhaltes ausmacht. In diesem Stadium sind
die Veriinderungen der Alveolarwande deutlich ausgepragt. Ihre Kapillaren
sind hyperamisch und die Zwischenwande selbst verdickt (Fig. 2). Die
Zellen der Zwischenwande sind hochgradig gequoUen, saftreich, mit grofien
chromatinreichen Kernen. Zwischen ihnen sind polynukleare Zellen und
vereinzelte Erythrocyten verstreut. Zu beiden Seiten sind die Alveolar¬
wande mit hochgradig gequollenem Alveolarepithel ausgekleidet, das dne
kubische Form angenommen hat. Die Lungenzeichnung ist noch gut er¬
halten, die Hdhlen der Alveolen deutlich sichtbar.

Je filter der Prozefi, desto intensiver wird die Proliferation
der zelligen Elemente, und zwar sowohl die des Epithels als
auch die der Zellen der Alveolarwandungen. Die Alveolar-
Inmina verengern sich immer mehr infolge der hochgradigen
Wuchernng der Wandungen (Fig. 3 u. 4); ihr Inhalt besteht
am 5. nnd 7. Tage fast ausschliefilich aus Alveolarepithel,

Zdttcbr. f. Immgnittttlionehaiig. Oriff. Bd. X. 21

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318

Marie Lurje,

dessen Zellen etwas gequollen siad und ein saftreiches Proto¬
plasma und einen gut flu'bbaren Kern besitzen. In dem Proto¬
plasma mancher von diesen Zellen sind ausgelaugte, meist zer-
fallene, selten erhaltene phagocytierte Erythrocyten zu sehen.
Die Proliferation der Zellen der Alveolarwandungen erreicht
am 7. Tage einen derart betrSchtlichen Grad, daB die Lungen-
struktur bereits verwischt erscheint. In den Bezirken, wo der
alveolire Bau noch deutlich ist, sind die Alveolen mit stark
gequollenem Epithel von kubischer Form ausgekleidet (Fig. 5).

Versuche mit groBen Toxindosen (je 0,005 g auf
250 g Lebendgewicht des Hundes). Bei der Obduktion bieten
die Lungen folgende Veranderungen dar:

An der Injektionsstelle wird bereits am ersten Tage stets ein luft-
undurchl^iger hamorrhagischer Infarkt gefunden, von dessen Schnittdache
Blut auBzupressen ist. Die Grenze gegen das normals Lungengewebe ist
bedeutend scharfer ausgepragt als in der voraufgehenden Versuchsserie.
Ebenso wie in den Versuchen mit kleinen Toxindosen zeichnet sich der
altere ProzeS durch Blasserwerden der Fubung des affizierten Bezirkes
aus, der mit der Zeit einen grauen Ton annimmt.

Die mikroskopische Untersuchung zeigt fol-
gendes:

Am ersten Tage ist an der Einstichstelle eine hochgradige Hamorrha^e
zu bemerken. Die Lunge ist nekrotisiert, mit Blut derb gefiillt (Fig. 6).
Die Zwischenwande sind von blasser Farbe und bieten Erscheinungen von
Karyorrhexis dar. Je mehr man sich vom hamorrhagischen Herds ent-
fernt, desto vreniger ausgepragt wird die Nekrose; die Lunge ist weit von
der Injektionsstelle hocbgradig hyperiimisch, die Alveolen mit Erythrocyten,
denen Polynukleiire und desquamiertes Alveolarepithel beigemengt sind,
erfiillt. In den spateren Stadien bestehen die Veranderungen in folgendem:
Im Gebiete der Injektion sind eine H^orrhagie und Nekrose der Lunge
zu konstatieren, etwas entfemter hiervon ist hingegen eine Reaktion der
Lunge in Form einer lebhaften Proliferation der fixen Zellen der Alveolar¬
wandungen, einer Abschuppimg des Epithels in das Alveolarlumen hinein
und eine Emigration der Polynuklearen zu bemerken. Je alter der Prozefi,
desto mehr tritt die Emigration in den Hintergrund. Abgesehen vom Al¬
veolarepithel schlieSen die Alveolen noch eine ziemlich bedeutende Menge
Blut ein, das in weiter Entfemung von der Injektionsstelle in Form von
Inseln angetroden wird.

Weit von der Applikationsstelle des Toxins entfernt geht
gleich von den ersten Tagen an eine Proliferation der Zellen
der Alveolarwandungen vor sich, wodurcb diese mit der Zeit

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Intrapulmonale Immunisierung mit Diphtherietoxin. 319

sich hochgradig verdicken. Ihre Zellen miissen fast ausschlieB-
lich za den Granulationselementen (epithelioide Zellen, Fibre-
blasten von verschiedenen Entwicklungsstadien, Leukocyten)
gezfihlt werden. Vom 3. Tage an treten in den Zwischen-
wfinden in groBer Anzahl Riesenkerne, sovrie Chromatinsub-
stanzschollen der verschiedenartigsten Form auf, die sich mit
HSmatein intensiv fSrben.

In den peribronchialen und perivaskulUren Riiumen sind
ziemlich erhebliche Blutungen vorhanden.

Wenden wir nns nun zur Literatur der von uns be-
handelten Frage, so ist ihre SuBerste Geringfflgigkeit hervor-
zuheben. Die meisten Autoren bebandeln die VerUnde-
rungen, die in den inneren Organen und dem Zentralnerven-
system nach Einwirknng des Diphtherietoxins sich einstellen.
[NShere Angaben bei Virhuff^)]. Was aber die VerSnderung
in loco applicationis des Toxins anbetrifft, so waren Roux
und Yersin®) die ersten, die das Auftreten eines starken
hUmorrhagischen Oedems nach subkutaner Einffihrung des
Diphtherietoxins beschrieben. SpBter Tvurden diese Beobach-
tungen von E. v. Behring®) bestStigt.

Vor mehreren Jahren machte Hom^n^) auf verschiedene
VerBnderungen, die sich nach Aufhbren der Giftznfuhr ein¬
stellen, aufmerksam; dieselben bestehen in Zellen- und Binde-
gewebsneubildung mit nachfolgender Schrumpfung, die meist
als sekund^ angesprochen werden muB. Er h^t es filr mdg-
lich, daB an Gewebselementen Gift haften bleibt und des
weiteren einen EinfluB auf dieselben ausiiben kann. Er macht
auf die Bedeutung der Konzentration des Toxins aufmerksam:
Starke Konzentration fflhrt n&mlich zu degenerativen Ver-
{Lnderungen in den Geweben, wBhrend bei schwacher Kon¬
zentration proliferative Vorgange in den Vordergrund treten.

1) Virch. Archiv, Bd. 201.

2) Ann. de I’lnst. Pasteur, 1888—1889.

3) Deutsche med. Wochenschr., 1890.

4) Ueber den Dinflufi der Bakteriengifte, insbesondere der sogenannten
echten Toxine auf die verschiedenen Gewebe des menschlichen Organismus.
Berlin 1906.

21 *

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320 Lurje, Intrapulmonale ImmunUierung mit Diphtherietoxin.

Unsere Beobachtungen konnten nur die Richtigkeit der
Angaben von Hom^n fiber den Unterschied in der Wirkung
grofier Dosen unverdfinnten und kleiner Dosen verdfinnten
Toxins bestfitigen.

Bei der Untersuchung frischer, nach Injektion von kon-
zentriertem Toxin entstandener Herde in den Lungen von
Pferden und Hunden konnten wir stets eine ausgesprochene
Nekrose des Lungengewebes, die mit einer Hfimorrhagie in
den Alveolen einherging, beobachten. Diese Befunde ent-
sprechen vollkommen den Beobachtungen von Roux, Yersin
und Behring fiber den Einflufi des Diphtherietoxins auf die
Gewebe. — Ganz andere Bilder bieten die Lungen nach In¬
jektion stark verdfinnten Toxins. Nekrose sowie hllmorrhagische
Infarzierung fehlen vollstfindig. In dieser Versuchsreihe treten
in den ersten 3 Tagen entzfindliche Erscheinungen — Emi¬
gration von Polynuklefiren —, nach 3 Tagen formative Reizung
der Gewebe, die in einer energischen Proliferation der fixen
Zellen der Alveolarsepta ihren Ausdruck findet, in den
Vordergrund. Wie Hom6n ganz richtig bemerkt, bleibt es
nicht bei der Poliferation der Bindegewebselemente; des
ferneren kommt es vielmehr zu regressiven Verfinderungen,
zur Bildung von Narbengewebe. Diese Tatsacbe konnten wir
relativ frfih bei Hunden, besonders klar aber an alten Lungen-
herden bei immunisierten Pferden feststellen.

Zusammenfassung.

1) Das Diphtherietoxin stellt in grofien Dosen und kon-
zentriert ein starkes Zellgift dar, wirkt nekrotisierend auf die
Zellen und ruft Blutungen hervor.

2) In kleineren Dosen und verdfinnt

a) ruft es entzfindliche Erscheinungen hervor (positive
Chemotaxis);

b) zerstort nicht die Zellelemente, sondern verursacht
lebhafte Proliferation derselben;

c) diese Zellproliferation ist nicht von Ifingerer Dauer,
weicht bald regressiven VerSnderungen, die sich in Narben-
bildung fiufiern.

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O. Rossi, Methodik der Wassermannschen Syphilisi'eaktion. 321

Erklttran^ der Tafel.

Fig. 1. Lunge von einem Hund nach Injektion einer kleinen Dosis
Teidiinnten Toxins am ereten Tage. Kapillaren mit Blut iiberfullt In den
Alveolenlumina Anhaufungen von Polynuklearen. Am unteren Bande des
Geaichtsfeldes eine geringe Hamorrbagie. Hamatoxylin-Eosin. Veigrdfierung
350-fach.

Fig. 2. Dasselbe am 3. Tage. Alveolenwandungen verdickt, zellen-
reich. In den Alveolenlumina eine betrachtUche Menge von Polynuklearen
und Epitbelzellen. Farbung und Vergrdflerung wie Fig. 1.

Fig. 3. Dasselbe am 5. Tage. Alveolenwandungen im Zustande leb-
bafter Proliferation. Hamatoxylin-Eosin. Vergrbfierung 500-facb.

Fig. 4. Derselbe Versucb. Wucberung der Alveolarwandungen und
Desquamation des Alveolarepitbels. Farbung und Vergrbfierung wie Fig. 3.

Fig. 5. Dasselbe am 7. Tage. Hocbgradig verdickte Alveolarwand,
die zu beiden Seiten mit gequollenem Epitbel ausgekleidet ist. Hamatoxylin-
Eosin. Vergrofierung 450-facb.

Fig. 6. Lunge von einem Hund am 3. Tage nacb der Injektion von
unverdiinntem Toxin. Alveolenwandungen nekrotisiert; Lungenstruktur
undeutlicb. Alveolen mit Blut gefullt. Links unten ein durcb den Blut-
austritt zerstorter Bezirk von Lungenparencbym. Hamatoxylin-Eosin. Ver-
grdfierung 300-facb.

Nachdruck verbolen.

[Klinik fQr Nerven- und Geisteskrankheiten am Institute ftir
hdhere Studien in Florenz (Leitung: Prof. E. Tanzi).]

Ueber die Methodik der Wassemiannschen Syphilisreaktlon.
Min Yerfakren zwecks Absorption der Im Menschensemm
normalerweise enthaltenen Ambozeptoren gegen rote
HammelblntkOrperchen.

Von Dr. Ottorino Bosai,

Interims-Direktor der Elinik fiir Nerven- und Geisteskrankbeiten an der
Edniglicben Universitiit in Siena.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 22. April 1911.)

Das Verfahren, welches ich in dieser Arbeit vorschlagen
will und fiber welches ich in der Sitzung vom 2. Mfirz 1911
der hiesigen Accademia Medico-Fisica Fiorentina (1) berichtete,
mnfi nicht als eine Modifikation der Wassermannschen Lues-

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322

Ottorino Rossi,

reaktion aufgefafit werden. Wie ich schon in meinen Arbeiten
hervorgehoben babe und in einem Vortrage in der II. Ver-
sammlung der Society Italiana di Neurologia (Genua, Oktober
1909) betont babe, ist es gerade die klassiscbe Wassermann-
scbe Metbodik, welcbe in der Praxis die besten und sicbersten
Resultate gibt.

Icb bescbranke micb darauf, fttr die Absorption jener
Ambozeptoreu, welcbe normalerweise im Menscbenserum vor-
banden sein konnen und nacb der Meinung mebrerer Forscber
die Resultate der Wassermannscben Reaktion zu verscbleiern
imstande sind, ein, wie mir diinkt, geeignetes Verfabren an-
zugeben.

DaB die Menscbensera eine solcbe Art bamolytiscber Ambo-
zeptoren entbalten kbnnen, ist eine unzweifelbafte Tatsacbe.
Wassermann selbst erwabnt in einer seiner Arbeiten liber
die YOU ibm gefnndene Reaktion, daB diese Ambozeptoreu in
menscblicben Seris, wiewobl sebr wecbselnd, gewobnlicb in so
groBer Menge entbalten sind, daB 0,1 ccm des Serums 1 ccm
einer 5*proz. Aufscbwemmung von roten Hammelblutkorpercben
aufzulosen vermag. Ancb aus meinen Untersucbungen in dieser
Ricbtung gebt bervor, daB das Menscbenserum gewiB oft einen
grdBeren, oft einen geringeren Reicbtum an gegen rote Hammel¬
blutkorpercben gericbteten Ambozeptoreu besitzt. Es fiel mir
ancb im Laufe meiner Beobacbtungen auf, daB mancbe Sera
auffMlig wenige dieser Ambozeptoreu Oder sogar keine auf-
wiesen. Icb kdnnte aber, auf meine Erfabrungen gestdtzt, die
Annabme Bauers (2), daB die Sera, welcbe weniger dieser
Arobozeptoren entbalten, die luetiscben seien, nicbt be-
stHtigen.

Unter 30 inaktivierten Sypbilitikerseren, welcbe icb von
diesem Standpunkte ausgebend untersucbt babe, zeigten sicb
23 in einer Menge unter 0,1 ccm, mit 0,1 ccm friscbem Meer-
scbweincbenserum reaktiviert, f&big, 1 ccm einer 5-proz. Auf¬
scbwemmung von roten Hammelblutkdrpercben in 2 Stunden bei
37 ® zu 16sen. Secbs verursacbten in der Menge von 0,1 ccm und
in denselben VerbUltnissen eine inkomplette HUmolyse; nur eins
zeigte keine bamolytiscben Eigenscbaften. Unter den erst-
erwUbnten 23 an Ambozeptoreu reicben Seren stammten 10

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Ueber die Methodik der Wassermannschen Syphilisreaktion. 323

von Individuen, welche eine energische spezifische Kur durch-
gemacht hatten, 7 von nicht Behandelten ab; f(ir die fibrigen 6
war es mir unmdglich, sichere Nachweise fiber Behandlung zu
sammeln. Andererseits stammte das einzige, keine H&molyse
ausflbende Serum von einero Manne, welcher fortgesetzt den
energischsten Kuren nnterzogen wurde und wenige Tage vor
der Blutentnahme eine Enesolkur zu Ende gebracht hatte.
Die Behandlung scheint im allgemeinen die normalen Ambo-
zeptoren zu vermehren, aber diese Wirkung ist nicht
konstant.

Von demselben Standpunkte betrachtet, beobachtete ich
bei 10 Paralytikerseren, daB 5 gar keine Ambozeptoren, die
anderen 5 dagegen viele enthielten: 3 Sera von Tabikern
waren reich an Ambozeptoren.

Unter 86 Seren von Nichtluetikern waren in 53 die Ambo¬
zeptoren in groBer Menge vorhanden, in 22 in mittelmSlBiger,
11 waren davon frei. Die diese letzteren Sera liefernden Per-
sonen sind, wie folgende Tabelle zeigt, einzuteilen:

Diagnose

groSe

Arabozeptomenge

mittelmaflige

null

Cerebral-Arteriosklerose

11

4

2

Alkoholismus

7

6

4

Cerebrale Kinderl^mung und Epilepsie

14

4

0

Dementia praecox

5

2

1

Manisch-depressives Irresein

Normale^ Oder an leichten Nervositats-

4

2

0

erschemungen Leidende

12

4

4

Aus diesen Beobachtungen sehen wir, daB der Prozentsatz
der Sera, welche viele gegen rote HammelblutkSrperchen ge-
richtete Ambozeptoren besitzen, auf 76 Proz. fflr Luetiker, nur
auf 57 Proz. fflr Nichtluetiker steigt.

Wirkung der normalen Ambozeptoren auf die Wassermannsohe

Beaktion.

Aus der Erfahrung des Vorhandenseins normaler Ambo¬
zeptoren im Menschenserum entsteht spontan die Frage, ob
dieselben die Wassermannsche Reaktion beeinflussen
kOnnen; mit anderen Worten, ob diese Ambozeptoren die hflmo-

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324

Ottorino Bossi,

lysehemmenden Eigenscbaften, welche die Sera von Luetikern
in dieser Reaktion ausiiben, zu flbertreffen imstande seien.

Schon Sachs und Altmann haben auf die Mdglichkeit
hingewiesen, dafi sich in gewissen Ffillen bei behandelter Lues
eine grofie Menge dieser Ambozeptoren findet, die der positiven
Reaktion entgegenwirken und eine solche mbglicherweise ver-
schleiern kdnnen. Andere Forscher bestfitigten diese Moglich-
keit und stellten, um diesen Uebelstand zu vermeiden, ver-
schiedene Methoden auf, fiber welche ich noch spfiter sprechen
werde.

Schon a priori kdnnte man denken, dail diese Ambozep¬
toren einen solchen stfirenden EinfluB ausfiben kdnnten. Um
diese Behauptung zu erklfiren, stellen wir eine kurze Betrach-
tung der Anordnung und des Vorganges der Wassermann-
schen Reaktion auf ein Luetikdrserum an.

In der ersten Periode dieser Reaktion bringen wir das
sog. Antigen (wfisseriger Extrakt einer hereditfir syphilitischen
Leber) — das Serum, in welchem die sog. syphilitischen Anti-
kfirper enthalten sind — und eine bestimmte Menge des Kom-
plements (frisches Meerschweinchenserum) in Berfihrung. Durch
die Reaktion zwischen Antigen und Antikfirper wird das Kom-
plement gebunden. Wenn wir spfiter dieser Mischung eine
bestimmte Menge von immunisatorisch erzeugten Ambozep¬
toren gegen rote Hammelblutkfirperchen (gewfihnlich 2 Ambo-
zeptoreinheiten) und ein bestimmtes Volumen einer Aufschwem-
mung von roten Hammelblutkfirperchen hinzuffigen, tritt ent-
weder keine Hfimolyse ein oder eine partielle, je nachdem
das ganze Quantum des Komplements oder nur ein Teil des-
selben abgelenkt wurde. Wenn in dem luetischen Serum so-
viel komplementbindende Stoffe vorhanden sind, daB sie das
ganze Eomplement binden, dann vermag keine Vermehrung
des Ambozeptors eine Hfimolyse herbeizuffihren. Dies ist der
Fall, welcher bei Verwendung von Paralytikersera, die ge-
wdhnlich sehr reich an komplementbindenden Stoffen sind,
vorkommt. Arbeiten wir aber mit einem Serum, welches arm
an denselben ist, wird eine gewisse Menge des Komplements
ungebunden bleiben. In diesem Falle wirft sich die Frage auf,
ob ein so groBes hfimolytisches Vermdgen entstehen kann.

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Ueber die Methodik der Wassermannschen Syphilisreaktion. 325

welches die hfimolysehemmendeD Eigenschaften des mit Antigen
reagierenden Serums zu iiberwinden imstande ist, wenn sich
infolge Vorhandenseins normaler Ambozeptoren eine grdfiere
als die gewdhnlich gebrauchte Menge der Ambozeptoren in
dem hilmolytischen System findet.

Diese Frage bezieht sich auf eine grdfiere, d. h. jene fiber
die quantitativen Verhfiltnisse, welche in bezug anf Ambo-
zeptormenge und Komplementbedarf und umgekehrt bestehen.
Wie die eingehenden Versuche von v. Dungern, Gruber,
Morgenroth und Sachs erwiesen haben, liegen in dieser
Frage die Verhfiltnisse durchaus nicht einbeitlich; daher warden
verschiedene Momenta zur Erklfirung herangezogen. Ich kann
nicht alle diese erwfihnen; ich beschrfinke mich darauf, an
einige Schlufifolgerungen von Sachs (3), welcher dieses
Problem eingehend analysiert hat, zu erinnern. Er schreibt:
„Die Verhfiltnisse schwankten aullerordentlich, je nach der
herangezogenen Kombination. Am ausgesprochensten erwies
sich die Herabsetzung des Komplementbedarfs bei Steigerung
der Ambozeptormenge ffir den von Ziegen gewonnenen Immun-
ambozeptor ffir Hammelblut unter Verwendung von Meer-
schweinchenserum als Komplement. Hier variierten die er-
forderlichen Eomplementmengen bis zu einem 20-fachen Mul¬
tiplum. Bei Verwendung der vom Kaninchen gewonnenen
Ambozeptoren ffir Rinderblut hatte die Relation weit engere
Grenzen, indem die Komplementmenge maximal auf den 5. bis
6. Teil und dies schon bei einem geringffigigen Ambozeptor-
fiberschufi herabgesetzt wurde.‘‘

Wenden wir diese Schlufifolgerung ffir unsern Fall an, so
werden wir verleitet anzunehmen, dad sich die Mdglichkeit,
anf welche wir aufmerksam machten, erffillen kdnnte. Zu er-
wfihnen darf ich jedoch nicht unterlassen, dad OlufThomsen
(4), welcher sich kfirzlich mit der quantitativen Ausffihrung
der Wassermannschen Reaktion beschfiftigte, zu dem Schlud
kam, dad sich wohl eine geringe Zunahme der HSmolyse in¬
folge Vermehrung der Ambozeptormenge zeigte. In dem
Schludergebnis der hfimolytischen Reaktion ist der Unterschied
ein geringer, aber es Ifidt sich ein deutlicher Unterschied der
Schnelligkeit der Hfimolyse konstatieren, je nachdem wir eine

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326

Ottorino Rossi

Ambozeptoreinheit Oder ein Multiplum derselben gebrauchen.
Mir scheint aber der Unterschied nicht immer ein geringer zu
sein; in der Tat, aus den Tabellen, welche Thomsen auf
p. 391 seiner Arbeit aufstellt, geht hervor, daB unter manchen
Bedingungen 8 Ambozeptoreinheiten eine doppelte Menge roter
Blutkdrperchen Idsen als eine einzige Einheit.

Diese letzteren experimentellen Daten kOnnten wir nicht
ohne weiteres fttr die AufschlieBung unserer Frage anwenden.
Wir wissen, daB die Erythrocyten den verschiedenen Ambo-
zeptoren gegeniiber eine verschiedene Bindungskapazit&t be-
sitzen. Die Thomsenschen Versuche wurden mit in Ka-
ninchen immunisatorisch erzeugten Ambozeptoren gegen rote
HammelblutkQrperchen durchgeftthrt. Im Gegensatz in unserem
Falle wird der AmbozeptorflberschuB durch normale Menschen-
serumambozeptoren verursacht. Betrachten wir das Problem
von einem allgemeinen Standpunkt aus, werden wir in eine
Reihe von verwickelten Nebenfragen fallen und vielleicht eine
eindeutige Lbsung nicht hnden. Deshalb will ich, nachdem ich
gezeigt habe, wie breit die Grenzen des allgemeinen Problems
sind, zu unseren praktischen Bedingungen zurhckkehren und
formuliere die Frage folgendermaBen: Gibt es Sera von
sicher luetischen Personen, reich an normalen,
gegen Hammelblut gerichteten Ambozeptoren,
welche mit der Wassermannschen Reaktion nega¬
tive Befunde geben, wenn diese Ambozeptoren
ihre Wirkung austlben kbnnen, wbhrend sich,
wenn diese vermieden wird, der negative in einen
positiven Befund verwandelt?

Um die Wirkung der normalen Ambozeptoren zu ver-
meiden, kann man verschiedene Wege einschlagen.

Bauer (2—5) machte den Vorschlag, die hamolytischen normalen
Ambozeptoren des menschlichen Serums alldn die Hamolyse bewirken zu
lassen und das Kanincbenimmunserum ganz auszuschalten. Dieser Vor-
schlag, gegen dessen theoretische Begrundung nichts einzuwenden ist,
sdieint nicht praktiscb. Die Menge der normalen Ambozeptoren ist eine
sebr wechselnde, manche Sera enthalten sehr wenige derselben und wenige
Sera iiberhaupt keine. Fiir diese soUte man noch andere hamolytische
Ambozeptoren anwenden. Tatsachlich schdnt die Bauersche Modifikation

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Ueber die Methodik der Wassermannschen ^yphilisreaktion. 327

keine grofie Verbreitung gefunden zu haben, zumal Tetgleichende Unter-
suchungen von C. Stern, Meirowski, Noguchi u. a. sich weder be-
ziiglich der Einfachheit, noch der Sicherheit zuguosten dieser Methodik
aussprachen.

Hecht hat die Methode B a tiers noch weiter verelnfacht, indem er
au6er den normalen Hammelblutambozeptoren des Menschenserums auch
dessen Komplementgehalt fur das hamolytische System mit Hammelblut-
kdrperchen verwendet. Dieser Methodik kann man die gleichen Einwande
entgegenhalten, die fiir Bauers Verfahren giiltig sind, und aulierdem
jene, welche, wie folgend erwahnt wird, fiir den Gebrauch aktiver Sera in
Betracht kommen.

Wie bekannt, hat M. Stern geraten, aktive Sera ohue Zusatz anderer
Komplemente in der Wassermannschen Beaktion anzuwenden. Mit
ihrem Verfahren hatte sie mit Luetikersera dnen groQeren Prozentsatz
positiver Befunde gehabt als mit urspriinglicher Wassermannscher
Methodik. Um den Unterschied zu erklaren, schreibt die Verfasserin, da6
es auf der Hand lage, anzunehmen, daB bei Anwendung des Meerschwein-
chenkomplements in der ublichen Dosis von 0,1 ccm ein derartiger Kom-
plementuberschufi in dem ganzen System vorhanden ist, daS — noch dazu
auch die Wirkung des starken Ambozeptors — der Ausschlag eines
schwiicher positiven Luesserums verdeckt ist. Aber der geringere Eom>
plementgehalt in Sternscher Methodik ist nach der Meinung der Forscherin
nicht die einzige Ursache der Verschilrfung der Beaktion.

Es wurde jedoch gegen dies Verfahren eingewandt, daS es leicht sei,
positive Befunde auch mit Nichtluetikersera zu erhalten. Wassermann
selbst betont, dafi es eine Verringerung der Zuverlassigkeit bedingt. Dutch
die Verwendung des aktiven Serums wird n&mlich das ganze System viel
zu scharf und labil, so daS nun auch andere Krankheiten leicht eine posi¬
tive Beaktion geben. Die Besultate der Sternschen Modifikation sind
nur in dem Sinne als giiltig anzusehen, dafi man sich, wenn beide Me-
thoden n^ativ ausfielen, mit grofierer Sicherheit g^en das Bestehen von
Lues aussprechen kann.

Andere Forscher schalten die Wirkung der normalen
Ambozeptoren aus, indem sie ein h&molytisches System an-
wenden, in welchem die gebrauchten Erythrocyten nicht empfind-
lich gegen diese Ambozeptoren sind. Als Typus dieser Me-
thoden kdnnen wir den von Noguchi ansehen. Er arbeitet
mit einem antimenschlichen hamolytischen System. Der Vor-
teil der Verwendung von Menschen- anstatt roten Hammelblut-
kdrperchen soli wesentlich darin liegen, dafi die schon oft
erwfihnten im Menschenserum enthaltenen Hammelblutambo¬
zeptoren dadnrch ansgescbaltet werden; und well sich im
Menschenserum naturgemaH keine Menschenblutkbrperchen-

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228

Ottorino Eossi,

ambozeptoren befinden, wird ein Ambozeptorfiberschufi ver-
mieden.

Der Methode Noguchis, welche dieser Forscher fort-
wShrend strong verteidigt, wird aber von vielen kompetenten
Beobachtern vorgeworfen, daB sie auch mit Nichtluetikersera
positive Befundo liefern kann.

Der einfachste Weg, urn die stSrenden normalen Ambo¬
zeptoren zu entfernen, scheint die spezifische Absorption zu
sein. Das gewohnliche Verfahren der Absorption besteht
darin, daB wir ein inaktiviertes Serum mit solchen Erythro-
cyten mischen, gegen welche es passende Ambozeptoren be-
sitzt, und dann ffir eine bestimmte Zeit die Mischung bei 37 ^
digerieren lassen. In dieser Weise binden die Erythrocyten
die Ambozeptoren, und das Serum, welches man raittelst
Zentrifugation wieder erhalten kann, wurde von denselben
befreit. Bauer folgte zuerst diesem Weg, urn ihn aber bald
wieder zu verlassen, weil er dabei die Erfahrung machte, daB
nun das menschliche Serum, befreit von den Ambozeptoren
gegen rote Hammelblutkdrperchen sehr Starke hemmende Eigen-
schaften zeigte, wenn es einem antihammelhimolytischen System
hinzugefflgt wurde. Bauer beobachtete fiberdies, daB die
hemmenden Eigenschaften starker hervortraten, wenn das
Serum mit wSsserigem Extrakt syphilitischer Leber gemischt
wurde, mit anderen Worten, daB das mit Hammelblut vorbe-
handelte Menschenserum also dieselbe Reaktion, die sonst fflr
das Serum eines Luetikers charakteristisch ist, zeigte.

Kurzlich haben fast gleichzeitig Jacobaeus (6) und
Mintz (7) wieder diesen Weg betreten. Die Resultate dieser
Forscher wichen von denen Bauers ab, weil die Sera an
sich keine hILmolysehemmenden Eigenschaften erhalten h&tten.
Jedenfalls sind die Ergebnisse dieser Forscher als Urteils-
elemento in dieser Frage beachtenswert; sie stehen aber in
Widerspruch mit manchen allgemeinen biologischen Regeln,
von denen sie eine Ausnahme zu bilden scheinen.

In der Tat, die Versuche von Sachs (8) lehrten uns,
daB jenes Ph^omen, welches Pfeiffer und Friedberger
unter der Benennung antibakteriolytische Wirkung normaler

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Ueber die Methodik der Wassermannschen Syphilisreaktiou. 329

Sera beschrieben, auch erscheint, wenn wir die an normalen
Ambozeptoren reichen Sera mit dem frtther genannten Absorp-
tionsprozeB behandeln.

Nehmen wir ein inaktiviertes, normale Ambozeptoren
gegen eine Art von Rotblutkdrperchen enthaltendes Serum
und lassen wir es mit einer bestimmten Menge dieser Erythro-
cyten digerieren; das Serum wird von Ambozeptoren befreit,
erhtlt aber neue Eigenschaften. Wird es z. B. einem h^mo-
lytischen System hinzugeftlgt, welches aus immunisatorisch
erzeugten Ambozeptoren, wirkend gegen jene Art von Erythro-
cyten, fhr welche das native Serum Ambozeptoren enthielt,
+ einer gewissen Quantittlt dieser Erythrocyten -|- Komplement
besteht, so hemmt es die Htlmolyse.

Vor der VerSiFentlichung der Arbeiten von Jacobaeus
und Mintz hatte ich analoge Versuche hergestellt mit un-
gefkhr 50 Seris von Luetikern und Nichtluetikern. Meine
Technik war folgende:

2 ccm von inaktiviertem Serum warden mit 8,9 ccm einer 10-proz.
Aufschwemmung von roten Hammelblutkdrperchen gemischt und Vj Stunde
bei 37 ** digeriert. Die Verhaltnisse zwiachen Serum und Blutau&chwemmung
waren so gerechnet, dafi 1 ccm der Flilssigkeit, welche mittelst Zentrifugation
dieser Mischung zu erhalten war, 0,2 ccm des Serums enthielt, d. h. die
Menge, welche wir gewdhnlich bei Wassermannscher Beaktion anwenden
sollen. ^

Meine Ergebnisse stimmten mit denen Bauers iiberein.
Die Sera wurden von den normalen Ambozeptoren befreit,
zeigten aber nachher meistenteils das Friedberger-Sachs-
sche Ph^nomen; dieses erschien am ausgesprochensten in
jenen Seris, welche reicher an normalen Ambozeptoren
waren. In dieser Reihe von Versuchen begegnete ich keinen
Seris, in welchen die hSmolytischen Ambozeptoren fehlten.
Nach meinen Ergebnissen wtire das von Sachs geschilderte
Gesetz auch in unserem Falle gtiltig, deshalb ist das Ver-
fahren der Absorption bei 37° als gef&hrlich und ungeeignet
beiseite zu lassen.

Die SchluBfolgerung dieser Betrachtungen besagt, dafi bis
jetzt keine Methode in die Praxis eingefQhrt wurde, welche
ohne UebelsUlnde die normalen Ambozeptoren auszuschalten
erlaubt; infolgedessen sind wir nicht in der Lage, zu erfahren.

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330

Ottorino Rossi

welche Wirkung diese in der Wasserman n schen Reaktion
austtben kbnnen.

Ich halte es darum nicht als unniitz, eine von mir ver-
suchte Methods, welche imstande zu sein scheint den Zweck
zu erreichen, mitzuteilen.

In einem Zentrifugerohrchen, welches man schon vorher in einen mit
Eis gefiillten Behalter eingestellt hat, werden 1*/* ccm des zu untersuchenden
inaktivierten Serums mit Vi roter Hammelblutkdrperchen gemischt.
Diese mussen sorgfaltig gewaschcn und gut zentrifugiert sein, damit die
zwischen den Korperchen bleibende Fliissigkeit ad minimum reduziert sei.
Dieser Behalter wird fiir 20—30 Minuten in einem Eiskasten gehalten.
Nach Ablauf dieser Zeit wird das Bohrchen aus dem Eise genommen, und
man zentrifugiert nun rasch mit einer guten elektrischen Zentrifuge. SoUte
die Temperatur des Arbeitsraumes eine ziemlich hohe sein, wird geraten,
das Rohrchen wahrend der Zentrifugation mit Eis zu dmgeben. Nach der
Zentrifugation wird das Serum abgegossen und fiir die W assermannsche
Reaktion verwendet. Die Ausfuhning dieser erfolgt, was das Antigen und
die Dosen betrifit, genau nach der ursprunglichen Wassermannschen
Methodik.

Mit diesem Verfahren erhalte ich folgende Tatsachen:

I. Alle die normalenAmbozeptoren des Serums
werden absorbiert, wenn auch in groBen Mengen
vorhanden. In der Tat, wenn wir0,6ccm, oder mehr, des
Torbehandelten Serums + 0,1 ccm Komplement (frisches Meer-
schweinchenserum) -}- 1 ccm einer 5-proz. Aufschwemmung von
roten Hammelerythrocjrten fflr 2 Stunden bei 37 ® zum Reagieren
bringen, tritt keine Spur von HUmolyse auf. Ueberdies, wenn wir
die roten BlutkSrperchen, die fflr die Vorbehandlung des Serums
gedient haben, sorgfflltig waschen und dann diesen eine be-
stimmte Menge Komplement hinzufflgen, die Mischung dann
bei 37^ in den Brutschrank bringen, wird eine Menge der
Blutkdrperchen gelost, welche dem Reichtum des Serums an
normalen Ambozeptoren proportional ist.

II. Das vorbehandelte Serum gibt nicht das
Sachssche Phflnomen. Tatsflchlich, 0,4 ccm des Serums
(d. h. eine Menge doppelt so groB wie jene, welche wir in der
Wassermannschen Reaktion mit Antigen reagieren lassen)
hindert weder, noch verlangsamt sie die Hflmolyse des folgenden
hflmolytischen Systems: zwei Ambozeptoreinheiten eines Anti-
hammelserums + 0,1 ccm Komplement (frisches Meerschwein-

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Ueber die Methodik der Wassermannschen Syphilisreaktion. 331

chenserum) + 1 ccm einer 5-proz. Aufschwemmung von roten
Hammelblutkdrperchen.

Wenn wir, um das Sachssche Ph&nomen zn erklaren,
die scharfsinnige ErlSuterung dieses Forschers annehmen, d. h.
daB die sogenannten antagonistischen Eigenschaften der Sera
sich auf spezielle hemmende Antikdrper beziehen, welche im
nativen Serum bereits vorhanden sind und darin nur durch
die gleichzeitig vorhandenen und mitwirkenden normalen
Ambozeptoren verdeckt werden, dann kSnnen wir, um zu ver-
stehen, warum mit meinem Verfahren diese antagonistischen
Eigenschaften nicht zutage treten, denken, daB, w&hrend mit
dem gewohnlichen AbsorptionsprozeB nur die Ambozeptoren
absorbiert werden, mit meinem im Gegenteile das Serum
auch von jenen Eigenschaften befreit wird. Nachdem diese
Eigenschaften nur die immunisatorisch erzeugten und nicht
die normalen Ambozeptoren vor dem Herantritt des Kom-
plementes hindern, ist es leicht verstSndlich, wie die fiir Vor-
behandlung des Serums angewandten Erythrocyten gelost
werden kbnnen, wenn das Komplement zugesetzt wird.

III. Die Substanzen, welche die Wassermann-
scheReaktion verursachen, verfindern sichdurch
das Verfahren in keiner Weise. Die Sera, welche in
nativem Zustande die Eomplementablenkung produzierten,
behalten diese Eigenschaft im gleichen Verh&ltnisse.

IV. Das Prozent von Sicherluetikersera, die
die Komplementbindungsreaktion geben, wird
mit meinem Verfahren erhOht. Unter 60 Seris, welche
von Patienten stammten, in welchen die luetische Infektion
sicher nachweisbar war, erhalte ich durch Wassermann-
sche Reaktion ohne Vorbehandlung der Sera 50, mit Vorbe-
handlung 56 positive Befunde. Nur 4 Sera gaben immer
negative Resultate. AuBerdem wurde in vielen Ftillen die
H&molysehemmung bei der Wassermannschen Reaktion
nach Vorbehandlung der Sera viel deutlicher.

Ich halte es ffir ndtig, die klinische Geschichte der
6 Patienten, deren Serum nur wenn von normalen Ambo¬
zeptoren befreit, Eomplementablenkung gab, kurz zu skiz-
zieren.

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332

Ottorino Rossi.

Krankheitsgeschichte

Ambo-

zeptor-

ieinheitdes

Serums

ccm

1) M. G.. 30 Jahre alt, Prostituierte,
Lues zugegeben, gut kuriert, letztc
Kur von Siiblimateinspritzungen
vor 3 Jahren. Trotzdem 3 Fehl-
geburten, ein Kind mit Kenn-
zeichen hereditiirer Lues. Die Pa-
tientin leidet an Erscheinungen
von Pachymeningitis luetica

2) F. C., 50 Jahre alt, Bauer. Patient
bekam Lucs vor 20 Jahren von
seiner Frau, welche von einem
fremden Brustkind angesteckt war.
Ungcniigende Behandlung nur im
Beginn der Krankheit. Keine
Tertiiirerscheinungen. Steht jetzt
in Behandlung wegen Cerebral-
Arteriosklerose

3) C. M., 30 Jahre alt. Lues zuge¬
geben, ziemlich gut kuriert, zur-
zeit keine Erscheinungen, leidet
an Lungentiilierkulose

4) L. A., 20 Jahre alt, Tischler. Lues
vor 2 Jahren l)ekommen; im
ersten Jahre fortgesetzte Sublimat-
einspritzungen. keine Erscheinun¬
gen. Moraliscn schwachsinnig

5) R. A., 55 Jahre alt, Taglohner.
8. Aug. 1909 Ansteckung erworben,
sofort gut kuriert mit Sublimat-
einspritzungen. Im Febniar 1910
universelles maculo-papuloses Ex¬
anthem; wurde mit Sublimatein-
spritzungen geheilt. Mai 1910
neuerdings Exanthem und wieder
mit Sublimat und Calomel kuriert.
September 1910 wurde er in unsere
Klinikaufgcnommen; Erscheinun¬
gen von Leptomeningitis luetica
(Cephalaea, Benommenheit,
Schwindel, Parese des linken Ab-
ducens). Es sind Papulae madi-
dantes ad genitalia, Plaques mu-
queuses an Unterlippe. Spiro-
(matenbefund im Exsudat von
Papulae positiv.

29. September 1910

1. Oktober 1910 Einspritzung mit
45 ctg „606*^ (Altsche Teclmik);
in 10 Tagen verschwinden die
Krankheit^rscheinungen vollkom-
men.

0,04

0,03

0,05

0,017

0,025

Resultate der Wassermann-
schen Reaktion

ohne Vor-
behandlung
des Serums

nach Vor-
behandlung
des Serums

iiegativ

'

positiv + + +

negativ

positiv + +

negativ

positiv + + +

negativ

1

1

i

!

1

positiv + + +

i

1

1

i

1

negativ

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Ueber die Methodik der Wassermannschen Syphilisreaktion. 333

1

Ambo¬
zeptor¬
einheit des
Serums

ecm

Beeultate der Wassermann¬
schen Beaktion

Krankheitsgeschichte

ohne Vor¬
behandlung
des Serums

nach Vor¬
behandlung
des Serums

28. Oktober 1910

20. November 1910

Im Dezember entstehen wieder
Cephalaea und Schwindel, am 5.
tritt eine peripherische Lahmung
des linken Nervus facialis ein.

0,020

negativ

negativ

n^tir

7. Dezember 1910
Enesoleinspritzungen bringen die
Paralyse zur Heilung, nachher
fielen beide Proben der Wasser-
mannschen Reaktion negativ aus.

6) M. J., 35 Jahre alt, Beamter.
Schanker am Glied vor 3 Monaten.
Sofort Starke Quecksilberschmier-
kur, trotzdem sind im Momente
des Examens noch Papulae madi-
dantes ad genitalia vorhanden.
3pirocliatentef und in dem Exsudat

0,020

negativ

positiv -f +

derselben positiv.

0,05

negativ

positiv -1- + +

Was die sog. metasyphilitischen Krankheiten betrifft, so babe
ich 10 Paralytiker- und 3 Tabikersera untersucht. Die ersteren
gaben positive Wassermannsche Reaktion ebenso mit wie
ohne Vorbehandlung. Es war auch kein bedeatender Unter-
schied in dem Grade der Hemmung zn sehen. Wie ich schon
erw&hnt babe, kann das davon abh&ngig sein, da6 diese Sera
immer sehr reicb an komplementbindenden Stoflfen sind. Unter
den 3 Seren von Tabikern, welche ohne Vorbehandlnng negative
Befunde bei Was sermannscher Reaktion lieferten, zeigte
eines, dessen Ambozeptoreinheit 0,033 war, nach der Vor-
bebandlung leicht positive Befunde.

Znm Schlusse will ich kurz fiber einige Ffille berichten,
welche auf die Wirkung der Behandlung der Syphilis auf die
Wassermann sche Reaktion and auf den Reichtum der Sera
an normalen Ambozeptoren gegen rote Hammelblutkfirperchen
hindeuten kfinnen.

Zeitichr. f. InuDanittitsfonchang. Orig. Bd. X. 22

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334

Ottorino Roesi,

E[ran kheitsgeschichte

Ambo-

zeptor-

einheitdes

Serums

com

Resultate der Wassermannscheii
Reaktion

ohne Vor-
behandlung des
Serums

nach Vor-
behandlung des
Serums

1) F. 8., 50 Jahre alt, Bauer. Luesan-
steclrang vor 14 Jahren, zug^eben.
Keine Behandlung. Heut. &ank-
heit Arteriitis Cerebri Luet., rechte
Hemiparese. 3. XII. 10.

0,04

positiv + + +

positiv

Behandlung des Patienten mit
Huile giis.

6. I. 11

0,04

j positiv -t- + +

positiv + + + +

9.1. Einspritzung Ton 30 eg „606‘‘
30. I.

0,03

zweifelhaft -f

positiv +-F-f-

Behandlung mit Huile gris fort-
geeetzt

0,04

positiv -f-l-

positiv -f + -f

2) B. A., 40 Jahre alt, Bauer. Lues
vor 8 Jahren erworoen, zugegeben.
Kdne Behandlung. Diagnose Lues
Cerebri. Am 20. I. 11.

0,07

1 positiv + + +

positiv + + -1-

Behandlung mit Huile gris.

7. H.

0,05

positiv -}- +

positiv + + +

22. 11. 55 eg ^,606“ eingespritzt
(Altsehe Technik). Keine braeu-
tende Yerbesserung im Zustande
des Patienten.

Am 17. lU. 11

0,03

negativ

positiv + +

3) B. G., 40 Jahre alt, Gesehaftsmann.
Lues negiert. Typisehe progressive
Paralyse.

5. IX. 10. Aueh in Cerebrospinal-
fliissigkeit Wassermannsehe Be-
aklion stark positiv

Am 12. IX. 10 Einspritzung
von 45 eg ,,606“ (Altsehe Teeh-
nik).

18. IX.

3. X.

0,05

positiv + + + +

positiv + + +
negativ

positiv + +

Ersiehtliche, aber voriibergehende
Besserung

28. X.

positiv + +

positiv + + -h

Der Patient wird von apoplekti-
formen Anfallen ergriden.

20. XI.

0,1

positiv + + +

positiv + + -\-

Ich mufi auch erwShnen, dafi manche, aber seltene
Syphilitikersera, welche keine bedeutende Menge der normalen
Ambozeptoren besitzen, nach der Yorbehandlung stSrkere
Wassermannsche Reaktion lieferten als wie vor derselben.
Diese Ergebnisse kdnnte man mit der Erfahrung Wechsel-
m a n n s (9) erklkren, welcher bedeutet, daS sich in syphilitischen

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Ueber die Methodik der WassermanDBchen Syphilisreaktion. 335

Seris, die wie jedes Serum die verschiedensten Komplemente
enthalten, bei der gewdhnlichen Art der Inaktivierung (durch
Erw&rmen auf 56°) Komplementoide bilden kOnnen, welche die
komplementophile Gruppe des Ambozeptors derartig besetzen
and verstopfen, dafi dadurch die Bindaug des zugesetzten
Meerscbweinchenkomplements verhindert werden kdnnte. Um
diese Komplementoidverstopfung zu vermeiden, schlug er vor,
das Serum mit einer Bariumsulfataufschwemmung vorzube-
haudeln.

Es ist mbglich, dafi auch mit meinem Verfahren diese
Komplementoide aus dem Serum entfernt werden.

Auf die Resultatemeiner vorliegendenUnter-
suchungen gestdtzt, bin ich versucht zu bejahen,
dafi die in dem Menschenserum normal enthal¬
ten en hkmolytischen Ambozeptoren gegen rote
HammelblutkSrperchen die positiven Befunde
der Wassermannschen Reaktion verschleiern
kdnnen.

Bevor man die Methode als geeignete in der Praxis anrSt,
soil man sich natfirlich fiberzeugen, dail kein Serum von Nicht-
luetikern damit positive Befunde geben kann.

Die von mir zur L5sung dieser Frage untersuchten Sera

stellen sich auf 132 wie folgt verteilte Ffllle:

Cerebral-Arteriosklerose

25

Nonnale, oder an leichten Nervo-

AlkobolistnuB

17

BitatseiBcheinungeD Leidende

22

Dementia praecox

12

Tuberkuloee

7

Manisch-depressiTes Irreeein

20

IVphuB

1

Tumor cereDri

2

Maltafieber

1

Cerebrale EinderlahmuDg

8

Septikopyamie aus Streptococcus

Epilepeie

16

pyogenes aureus

1

Alle diese F&lle gaben ebenso mit wie ohne Vorbehand-
lung negative Resultate bei Wassermannsober Reaktion.

GewiB sind in dieser Richtung andere Kontrollversuche
wflnschenswert, besonders fflr Erankheiten, welchen ich, da
ich in der Elinik fflr Nerven- und Geisteskranke arbeite, nicht
leicht begegnen kann. Meine Kontrollen beweisen jedoch, daB
die Gefahr, mit meiner Methodik eine positive Reaktion von
Nichtlnetikerseris bei Nerven- und Geisteskrankheiten zu be-
kommen, nicht zu fflrchten zu sein scheint.

22 *

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336 O- Rossi, Methodik der Wassermannschen Syphilisreaktion.

Zusammenfassung.

Ich schlage die folgend beschriebene Vervollkomranung
der Wassermannschen Reaktion vor.

Der gut bekannten Reihe der Kontrollen bei dieser Probe
ist noch ffir jedes zu untersuchende Serum das folgende bin-
zuzufiigen:

0,2 ccm des inaktivierten Serums-j-0,1 ccm Eomplement
(frisches Meerschweinchenserum) + 1 ccm einer 5-proz. Hammel-
erythrocytenaufschwemmung + 2,8 ccm normale Kochsalzlbsung,
d. h. eine Kontroile, welche den Zweck hat, das Vorhandensein
normaler hSmolytischer Ambozeptoren in dem Serum aufzu-
decken. Wenn das Serum in dieser Kontroile nach 2 Stunden
bei 37 ® alle Oder fast alle Erythrocyten gel6st hat und gleich-
zeitig mit der Wassermannschen Reaktion ein negatives
Resultat gibt, mull man eine neue Menge dieses Serums mit
der von mir vorgeschlagenen Methode von Ambozeptoren be-
freieu und dann die WassermannscheReaktion wiederholen.

Wenn diese noch einmal negativ ausfallen sollte, ist uns
gestattet, unter den Grenzen der biologischen Proben dieser
Art, zu schlieBen, daB das Serum keine sog. syphilitischen Anti>
korper enth^lt.

Literatorverzeiehiiis.

1) Rossi, 0., Accad. Medico-fisica fiorentina, 2 Marzo 1911.

2) Bauer, J., Berl. klin. Wochenschr., 1908, No. 17, p. 804.

3) Sachs, H., Handbuch d. Techuik u. Methodik d. Immuaitatsf., Bd. 2,
p. 950.

4) Thomsen, Oluf, Zeitschr. f. Immunitiitsf. u. exp. Then, Bd. 7, Heft 4,
p. 389.

5) Hallion et Bauer, Compt. Rend. Soc. Biol., 29. X. 1910.

6) Jacobaeus, H. C., Zeitschr. f. Immimitatsf. u. experim. Then, Bd. 8,
Heft 5—6, p. 615.

7) Mintz, 8., Zeitschr. f. Immunitatsf. u. exp. Then, Bd. 9, Heft 1, p. 29.

8) Sachs, H., Deutsche med. Wochenschr., 1905, No. 18.

— Centralbl. f. Bakt., Bd. 40, 1906, Heft 3.

9) Wechselmann, Zeitschr. f. Immunitatsf. u. exp. Then, Bd. 3, Heft 5,
p. 525.

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O. Thomsen und H. Boas, Ueber die Thermoresistenz etc. 337

Nachdruck verboten.

[Ans Statens Seraminstitut (Direktor: Dr. Th. Madsen) und
aus Rudolph Berghs Hospital (Direktor: Prof. Dr. Erik Pon-
toppidan) Kopenhagen.]

Ueber die Thermoresistenz der in der Wassermannsehen
Reaktion wirksamen „AntikSrper** in den yerschiedenen
Stadien der Syphilis nnd bei anderen Krankheiten.

Von

Dr. Oluf Thomsen und Dr. Harald Boas,

Abteilun^vorsteher an Statens Assistenzarzt an Rudolph Berghs

^ruminstitut Hospital.

Mit 1 Figur im Text

(Eingegangen bei der Redaktion am 22. April 1911.)

Sachs und Altmann^) sind die ersten, die bemerkt
haben, daH Serum von Patienten mit Syphilis st^kere
Wassermannsche Reaktion geben kann, wenn es ohne
vorhergehende Erwftrmung bei 56® verwendet wird, als wenn
es erst wShrend 30 Minuten auf 56® erwkrmt (^inaktiviert^')
worden ist, obgleich fur beide Proben dieselbe Menge Meer-
schweinchenserum als Eomplement gebraucht wird. Von vorn-
herein kdnnte man geneigt sein, das Gegenteil zu erwarten,
weil das nicht erwSrmte frische Menschensernm eine nicht
geringe Menge Komplement enthfilt, so dafi die gesamte Kom-
plementmenge (Mensch + Meerschweinchen), die gebunden
werden soil, bei der Verwendung von frischem Menschensernm
bedeutend grdSer ist, als bei der Verwendung von aufge-
wfirmtem. Ans Sachs und Altman ns knrzer Bemerkung
fiber dieses Verhfiltnis mufite es eigentlich klar sein, dail die
syphilitischen ^Antikfirper*^ durch die Erwfirmung auf 56® ge-
schwficht werden mfifiten, was fibrigens mit der Auffassung
dieser Stoffe als syphilitische Antikfirper mit Ambozeptor-
charakter schlecht harmonierte.

Diese Abschwachung der wirksamen Stoffe durch die ,Jnaktivierung'‘
des Serums veranlafite Margarethe Stern und spater Tschernogubow

1) Berl. klin. Wocbenschr., 1906, No. 14.

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338

Oiuf Thomsen und Harald Boas,

dazu, die Technik der Wassermannschen Probe dahin zu modifizieren,
dafi das Serum ohne vorhergehende Erwkrmung angewandt wurde. Die
Probe sollte dadurch „feiner“, feinfiihliger werden und in einer Beihe von
Syphilisfallen positive Beaktion ergeben, in denen man mit der urspriing-
lichen, von Wassermann ausgearbeiteten Technik keine Beaktion fand.
Besonders die Modifikation M. Sterns hat eine gewisse Verbreitung ge-
funden, eben weil sie scheinbar eine Verfeinerung der Technik war. Wir
haben jedoch verschiedentlich davor gewarnt, sich auf eine Modifikation zu
verlassen, die nur nichterwaxmtes Serum anwendet; man lauft dabei Gefahr,
in einer sehr betrachtlichen Anzahl von Fallen, in denen die Syphilis
sicher ausgeschlossen ist, positive Beaktion zu fiuden.

In einer friiheren Arbeit hat Boas‘) das Besullat einer Beihe von
Untersuchungen mit nichterwarmtem und mit erwarmtem Serum von
Syphilitikem und von Patienten mit verschiedenen nicht syphilitischen
Krankheiten vorgelegt. Es ergab sich hierbei, dafi die Beaktion in nicht
erwarmtem Serum durchweg weit starker war und sich hier kiirzere Zeit
nach der Infektion zeigte, sowie auch dafi die Behandlung mit Quecksilber
das Serum in der Weise veriinderte. dafi die Beaktion in dem ,4naktivierten“
Serum schwand, in nicht erwarmtem Serum dagegen positiv blieb. Das
Serum von einer grdfieren Anzahl von Patienten mit Krebs, Tuberkulose,
Nephritis und mehreren anderen £[rankheiteu ergab in nicht erwkrmtem
Zustand oft positive Beaktion, aber diese schwand in samtlichen Fallen,
wenn das Serum wahrend 30 Minuten auf 56** erwarmt worden war.

Eine eingehendere Prufung der ThermoresLstenz der wirksamen Serum-
stoffe ist, soweit uns bekannt geworden ist, nur von Noguchi*) unter-
nommen worden. Dieser Verfasser fand, dafi die betreffenden Stoffe schon
bei der Erwarmung des Serums auf 45* wahrend 20 Minuten erheblich
reduziert wurden. Durch die Erwarmung auf 50“ in gleicher Zeit setzte
sich die Destruktion fort, so dafi die Menge der Stofle bis auf etwa die
Halfte der in nicht erwarmtem Serum vorhandenen Menge reduziert wuide.
Bei einer Temperatur von 55* wurde die Menge bis auf */« reduziert. Die
Destruktion war verhaltnismafiig am grofiten wahrend der ersten 5 Minuten
der Erwarmung (55*); im Verlauf dieser Zeit war die Menge auf ca. Vt
herabgegangen, nach 30 Minuten betrug die Menge */«— Vs ^*1 nach
1 Stunde ca. (die begleitenden Kurven stimmen jedoch nicht ganz mit
diesen Angaben imText iiberein). In einem Leprafall mit positiver Was-
sermannscher Beaktion fand Noguchi ganz dieselbe Kurve fiir die
Destruktion.

Als wir an die genauere Untersuchung der Thermo-
resistenz herantraten, zeigte es sich, dafi die Verhfiltnisse etwas
komplizierter waren, als nach der Darstellung Noguchis zu
erwarten war.

1) Bert klin. Wochenschr., 1909, No. 9.

2j Serum Diagnosis of Syphilis. Philadelphia imd Loudon 1910.

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Thermoresistenz der ia der W. Beaktion wirksamen „Autik6rper“ etc. 339

Urn die Menge der aktiven Stoffe so genau als mdglich
messen zu kdnnen, baben wir eine Tecbnik angewandt, die so
eingestellt war, dafi alle Faktoren der Reaktion mit Ausnabme
des zu untersucbenden Serums in ibrer wecbselseitigen Wir-
kung soweit wie m5glicb konstant blieben. Diese Tecbnik
baben wir frdber^) ausfttbrlich bescbrieben nnd wollen daber
an dieser Stelle nnr das Folgende zum besseren Verstfindnis
der im nacbstebenden tabellariscb dargestellten Resultate der
Untersucbnngen bervorbeben:

Als „ADtigen“ wurde angewandt alkohoUscher Elxtrakt aus Menschen-
herz in der Menge 0,1 ccm. Dieser Extrakt enthalt, wie in der erwahnten
fruheren Arbeit ausfiihrlicher auseinandergesetzt ist, immer dieselbe Menge
wirksamer Lipoide. Als hamolytisches System diente 0,5 ccm 5-proz.
Schlafbliitkdrperchenemuluon, als Eomplement die geringste total I3sende
Menge Meerschweinchenserum + die durch das Herzextrakt neutrali-
sierte Menge, als Ambozeptor 2—3mal eine Einheit Kaninchenimmun-
serum. Das Ablesen der Besultate (Grad der Hamolyse bei den absteigenden
Mengen von Menschenserum) erfolgte durch Vergleichen mit einer aus
demselben Blut, das zor Untersuchung benutzt wurde, hergestellten Hamo*
globinskala (Blut in destilliertem Wasser geldst). Die Ziffer 0 bedeutet:
keine Hamolyse = maximale Beaktion; die Ziffer 100: totale Hamolyse
= keine Beaktion; die dazwischen li^enden Ziffern geben alle Grade der
partiellen Hamolyse an, die Ziffer 20 z. B., dail 20 Proz. der Blutkdrper-
chen geldst sind, die Ziffer 45, dafi 45 Proz. der Blutkdrperchen geldst
sind uBw.*).

Die Erw&rmung der Serumprobe wurde in der Weise vorgenommen,
dafi das Serum gleich in kleinen Glasem verteilt wurde mit dner Menge
Ton 0,3—0,4 in jedem; sie wurden dann zusammen in das Wasserbad mit
der betreffenden Temperatur eingesetzt und nach yerschieden langer Zeit
wurden die einzelnen Proben heraiisgenommen und sofort in kaltes Wasser
gesetzt. Da es sich namlich bald herausstellte, daS auch eine Erwdrmung
auf 56® von sehr kurzer Dauer erheblich destruierende Wirkung haben
kdnnte, war es wichtig, daff die Menge der Fliissigkeit mdglichst klein
wiirde, damit die gewiinschte Temperatur so bald als mdglich erreicht
werden kdnnte.

SyphilisfSlle.

Die FUlle 1—6 zeigen die Verbfiltnisse bei 6 zuf&llig aus-
gewfiblten Serumproben von 6 Patienten mit feststebender

1) O. Thomsen, Zeitschr. f. ImmunitHtsi., Bd. 7, 1910, Heft 4.

2) Im iibrigen verwdsen wir hierfiir auf Th. Madsens Artikel in
Kraus und Levaditis Handbuch, Bd. 1, 1906, p. 63 und auf eine friihere
Arbeit von O. Thomsen.

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340

Oluf Thomsen und Harald Boas

1

1

Meerschweinchenkomplement
+ 0,1 com alkohol. Herz- :
extrakt und

0,1 Fat.-berum allein

Bemerkungen

s

s 1

;

53

s

3

lO *-• '

§41

cS

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1

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1'

I

Nicht erwarmt

0

0

0

60

100

100

1

90] Angesteckt Mitte Nov. 1909. Be-

31.1.1910

Erwiirmt auf 56 ®

1

1

handelt mit 29 Schmierkuren a 3 g

wahrend 2'

10

20

35

80

100

100

141

sowie mit Quecksilberpillen (50).

dgl. 4',

60

80

90

100

100

100

6

31. I. St. pr.: Indurierte Narbe am

» 6'

60

90

90

100

100

100

2|

Penis. Fleckformiges Svphihd.

„ 10'

60

95

100

100

100

100

01

Fleckfonniger Haarausfall. Pa-

» 30'

60

100

100

100

100

100

o'

1

peln iin der Unterlippe.

II

Nicht en^iirmt

0

0

0

25

80

100,

70|

Bekam im Sommer 1909 eine In-

31.1.1910

Erwarmt auf 56®

duration an r. Paljpebra sup. Be-

wahrend 2'

0

0

12

70

90

100 1

16

handelt mit 48-1-27 Schmierkuren

dgl. 4'

! 6

10

20

80

90

100!

4

ii 3 g. Letzte Schmierkur den

» 6']

8

10

30

90

100

100 1

0

28. I. 10.

» 10'

0

0

25

90

100

100 1

0

31.1. 10. St. pr.: Induration an r.

„ 30'

0

0

40

90

100

100

0

Palpebra. Leucoderma colli. Neu-

1

1 1

1 ritis optica dupl.

m

Nicht erwiirmt

0

0

10

60

100

100

80

Erster Ausbruch vor 6 Mon. Wurde

31.1.1910

Erwarmt auf 56®

damals mit 64 Schmierkuren ^ 3 g

wahrend 2'

^ 20

18

60

80

90

100

8'

bchandelt; spiiter (19. I.—26. 1.

dgl. 4'

45

45

70

90

100

100

6

10) mit 3 Scnmierkuren.

„ 6'

40

50

80

90

100

100

0

' 31.1.10. St. pr.: Papeln im Mund.

„ 10'

25

60

90

100

100

100

0

„ 30'

30

80

10

100

100

100

0

IV

Nicht erwiirmt

' 0

0

0

80

100

100

98

Angesteckt Anfang November 1909.

31.1.1910

Erwarmt auf 56 ®

Wurde behandelt mit 15 Schmier-

wahrend 2'

0

0

20

90

100

100

16

kuren a 3 g.

dgl. 4'

0

0

45

90

100

100

8

31.1.10. Exkoriierte Induration in

6'

0

0

70

100

100

100

0

Orific. urethrae. Fleckformiger

„ 10'

0

10

80

100

100

100

0

Haarausfall.

„ 30'

0

10

90

100

100

100

0

V

Nicht erwarmt

0

0

0

35

100

100

90

Angesteckt Anfang November 1909.

31.1.1910

Erwarmt auf 56®

1

31.1.10. Indurierte Narbe in Sulc.

wahrend 2'

0

0

0

80

100

100

12

coron. Fleckformiges Syphilid.

dgl. 4'

0

0

0

70

90

100

8

Nicht behandelt.

„ 6'

0

0

0

70

100

100

0

„ 10'

0

0

6

90

100

100

0

„ 30'

0

0

10

90

100

100

0

VI

Nicht erwarmt

0

0

0

0

60

100

80

Zeitpunkt der Ansteckung unbe-

31.1.1910

Erwarmt auf 56 ®

kannt. Wurde behanddt mit 5

wahrend 2'

0

0

10

80

100

100

12

Schmierkuren k 3 g.

dgl. 4'

1 0

0

14

70

100

100

4

31.1. 10. St. pr. Indurierte Narbe

» 6'

1 0

0

25

80

100

100

0

an Praeput. Leucoderma colli.

„ 10'

1 0

0

40

100

100

100

0

» 30'

1 0

0

70

100

100

100

0

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Thermoresistenz der in der W. Eeaktion wirkBamen „Antik6rper“ etc. 341

Syphilis. Die ersten 6 Kolumnen in jeder Tabelle geben den
Grad der HSlmolyse mit absteigenden Mengen von Patienten-
serum an (Mengen 0,1—0,05— 0,025—0,012—0,006—0,003 ccm);
die 7. Kolumne zeigt die H&molyse bei der Einwirkung der
grbfiten Menge des benutzten Patientenserums (Dosis 0,1) anf
sensibilisierte Blutk5rperchen ohne Beifhgung von Meer-
schweinchenserum (natfirlich anch ohne Herzextrakt), und gibt
also ein Biid von der Menge des disponiblen Komplementes
in dem Serum des Patienten vor der Erw&rmung nnd zu den
verschiedenen Zeitpunkten innerhalb ihrer Dauer. Diese Probe
wurde mit ausgefflhrt, damit man immer beurteilen kdnnte,
wieviel wirksames (Menschen-) Komplement zu der jeweils
angewandten Menge von Meerschweinchenkomplement beige*
fflgt wurde.

Eine genauere Betrachtung der Faile I—VI wird sofort
zeigen, dafi die Thermoresistenz der syphilitischen nAntikOrper^
nicht in alien F§.Uen gleich ist. Die Nummern I, II, IV und V
geben fast ganz dasselbe Resultat fQr die Untersnchung des
Serums in nicht erwILrmtem Zustand, nftmlich totale H&molysen-
hemmung mit Serum in den Mengen 0,1—0,25 ccm; erst bei
Verwendung der nSchsten Dosis (0,012 ccm) ist die Hemmung
nnvollstlindig; die Verschiedenheiten der Hfimolysenziffern sind
verhfiltnismUBig so gering, dail sie vielleicht innerhalb der
Fehlergrenzen bleiben. Betrachtet man dagegen das Ergebnis
der Probe mit dem w&hrend 30 Minuten auf 56° erw&rmten
Serum, so wird man eine bedeutende Verschiedenheit der
Resultate finden, obwohl der anf&ngliche Titer (des nicht er-
w&rmten Serums) derselbe war. In dem Fall I sind die wirk-
samen Stoffe fast g&nzlich destruiert, im Fall II geben noch
0,1 ccm und 0,05 ccm totale Hamolysenhemmnng, wfthrend
erst 0,025 ccm annMierungsweise dasselbe Resultat ergeben
wie 0,1 ccm im Fall I. Der Titer der „Antik6rper“ ist also
nun in dem w&hrend 30 Minuten erw&rmtem Serum im Fall II

= 4mal so hoch geworden wie in Fall I. Der Fall V

nahert sich sehr dem Fall II. Der Fall IV steht zwischen den
Fallen I und II. In der nachstehenden Kurve ist das Er¬
gebnis der Faile I und V graphisch dargestellt, indem die Zeit-

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342

Oluf Thomsen und Harald Boas,

dauer der Erw&rmung als Abszisse, der Titer des Serums als
Ordinal abgesetzt ist.

Alle 6 Ffille zeigen, daB die Abschwfichung der „Anti-
kSrper^, welche ira Verlauf der 30 Minuten dauernden Er-
w&rmung eintritt, im wesentlichen innerhalb der ersten 4 Mi¬
nuten erfolgt. In diesem Punkt
kbnnen wir also die Angabe
Noguchis best&tigen. DaB
die grbBte Destruktion w§,hrend
der ersten Minuten erfolgt, ist
an sich nicht flberraschend,
sondern stimmt nur mit dem
Uberein, was man sonst im
allgemeinen bei thermolabilen
Substanzen findet; was zu
beachten ist, ist aber dies, daB bei der Erw&rmung
w&hrend 30Minuten nicht derselbe Bruchteil der
in nicht erwBrmtem Serum wirksamen Substanzen
in den Einzelf9,llen destruiert wird.

Da es nun, wie erwahnt, nicht selten vorkommt, daB Seren
von Patienten mit anderen Erankheiten als Syphilis (Krebs,
Tuberkulose, Nephritis etc.) positive Wassermann -Reaktion
ergeben, wenn das Serum ohne vorhergehende ErwSxmung
benutzt wird, so war es von Interesse, zu sehen, wie schnell
die aktiven Stoffe hier destruiert wttrden. DaB sie jedenfalls
in der Regel nach 30 Minuten langer Erw^rmung auf 56^
total destruiert sein mttssen, ergibt sich daraus, daB das Serum
von Patienten mit den erwUhnten Erankheiten bei dem ge-
w5hnlich befolgten Verfahren (Inaktivierung durch Erwkrmung
auf 56® wShrend 30 Minuten) keine positive Wassermann-
Reaktion gibt.

Wir haben deshalb die Destruktionskurve untersucht bei
Patienten mit Scarlatina (6 Ffille), Krebs (7 Ffille),
Tuberkulose (11 Ffille), Nephritis (4 Ffille) und Lepra
tuberosa (2 Ffille). DaB nicht erwfirmtes Serum solcher
Patienten positive Wassermann-Reaktion ergibt, ist, wie
erwfihnt wurde, keine Seltenheit; konstant scheint es bei der
Lepra tuberosa der Fall zu sein, wenigstens zeigten Unter-

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Fig. 1.

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ThermoFesiBtenz der in W. Eeaktion wirksamen „Antikdrper“ etc. 343

suchungen ^), die einer von uns frflher im Verein mit S. Bjarn-
hjedinson angestellt hat, daC von 18 Patienten mit Lepra
tuberosaalle mit nicht erw^rmtem Serum positive Wasser-
m a n n - Reaktion ergaben, wShrend nur bei 6 von ihnen die
Reaktion positiv blieb, wenn das Serum w&hrend 30 Minuten
auf 56® erwdrmt wurde. Bei 18 Patienten mit Lepra anae-
sthetica dagegen war die Reaktion vor der Erw^rmung nur
einmal positiv, und auch bei diesem Patienten schwand die
positive Reaktion nach der Erwtlrmung wkhrend 30 Minuten.
Das Serum der Patienten mit diesen beiden Haupterscheinungs-
formen der Lepra zeigt also einen sehr bedeutenden Unter-
schied. Auch die sUmtlichen 6 Scarlatina-Fklle ergaben
Komplementbindung vor der Erwftrmung, aber nicbt nach der
ErwUrmung auf 56 ® wShrend 30 Minuten. Indessen kann das
Serum von Scarlatina-Patienten bekanntlich in vereinzelten
Fallen auch nach halbstiindiger Erwarmung Wassermann-
sche Reaktion ergeben.

Als Beispiele fflr die Art der Wirkung der Erwarmung
geben wir im nachstehenden2Falleder Scarlatina und einen
Fall der Lepra tuberosa (p.344). Besonders in dem Lepra-
fall zeigte das Serum vor der Erwarmung einen betrachtlichen
Titer, aber sowohl in diesem als in den beiden
Scarlatinafailen und in samtlichen anderen
Fallen nichtsyphilitischerKrankheitenwaren die
reagierenden Substanzen nach einer Erwarmung
von 4 Minuten Dauer total destruiert.

Kehren wir zu den zuerst besprochenen 6 Syphilisfailen
zurtlck, so kdnnte man, indem man das Resultat der Erwar¬
mung bei diesen mit dem vergleicht, was sich aus der Ein-
wirkung der Erwarmung auf die Sera der nichtsyphilitischen
Patienten ergibt, vielleicht denken, daB wir es in den Syphilis-
fallen mit einem zufailigen Zusammentreffen zweier verschie-
dener Arten von „Antik6rpem“ (Reaginen) zu tun haben, und
zwar einem nichtspezifischen, sehr thermolabilen, der bei
einer ganzen Reihe von verschiedenen Erankheiten auftreten
kann, und einem relativ thermostabilen, der fdr die Syphilis

1) J. 0. Thomsen und S. Bjarnhjedinson, Zeitschr. f. Immu-
nitiitsf., Bd. 7, 1910, Heft 4.

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344

Oluf Thomsen und Harald Boas,

Meerschweinchenkomplement

+ 0,1 ccm alkohol. Herz-

a

extrakt und

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E

E

E

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Scarlatina

Nicht envaxmt

0

10

100

100

100

100

98

4. I. 1910

Erwarmt auf 56 *

wahrend 2*

80

100

100

100

100

100

20

11. Tag der
Krankheit

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

6

100

100

100

100

100

100

2

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100

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100

100

100

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100

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100

100

100

100

0

Scarlatina

Nicht erwarmt

0

0

20

70

100

100

40

I 10. Tag der
Krankheit

4. I. 1910

Envarmt auf 56 ®

wahrend 2'

20

25

80

90

100

100

8

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100

100

100

100

100

100

0

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100

100

100

100

100

100

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100

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100

100

100

100

0

„ 30'

100

100

100

100

100

100

0

Lepra

Nicht erwarmt

0

0

0

70

90

100

16

tuberosa

Erwirmt auf 56 ®

wahrend 2'

25

20

35

90

100

100

0

dgl. 4'

90

100

100

100

100

100

0

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100

100

100

100

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100

100

100

100

0

„ 30'

90|

1001

100

100

100

1001

1 0

charakteristisch (oder vielleicht spezifisch) ist. Dies wflrde
ja die Tatsache erklaren, daB eine Erwarmung auf 56® von
30 Minuten Dauer ganz verschiedene Wirkungen auf die beiden
Syphilissera hat, welche in nicht erwarmtem Serum gleichen
Titer haben.

Verfolgt man aber die einzelnen Syphilisfalle mehr in
Einzelheiten, so mufi man, glauben wir, zu einer etwas anderen
Ansicht gelangen. Aus den nachstehenden, in Details unter-
suchten Fallen ergibt sich namlich folgendes:

Wo ein bisher gesunder Mensch mit Syphilis angesteckt
wird, konnen in der Zeit von der Infektion, bis die seknndaren
Symptome entwickelt sind, 3 Phasen der „Antik6rper‘‘-Pro-

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Thermoresistenz der in der W. Eeaktion wirksamen „Antik5rper“ etc. 345

duktion nachgewiesen werden. In der ersten Phase, welche
wahrscheinlich mit der Zeit von der Infektion bis zu der Ent-
wicklung des Schankers zusammenfUIlt, finden sich keine „Anti-
k6rper‘‘ oder doch nur geringe Mengen, die nach 30 Minuten
langer ErwSrmung auf -56^ vollkommen destruiert sind^).
In der zweiten Phase, ungefEhr von der Entwicklung des
Schankers bis zum Ausbruch der sekund&ren Symptom e, ent-
h&lt das Serum wachsende Mengen von thermolabilen (durch
4 Minuten lange ErwUrmung auf 56 ° vollkommen destruierten)
nAntikorpern^*. In der dritten Phase, die gleichzeitig mit oder
ganz wenige Tage vor oder nach der Manifestation der ersten
sekundfiren Symptome anfangt, treten in dem Serum (relativ)
thermostabile Antikdrper auf, deren Menge schnell zunimmt.
Wird der Patient einer passenden Behandlung (insbesondere
mit Quecksilber) unterworfen, so wird die Menge der thermo-
stabilen Stoffe schnell geringer, w&hrend das Serum dagegen,
wenn es in nicht erw&rmtem Zustande nntersucht wird, noch
lange unver&nderten Titer aufweisen kann, auch dann noch,
wenn das wtlhrend 30 Minuten erwSrmte Serum keine Reaktion
mehr ergibt. Durch eine energische Behandlung schwinden in
der Regel auch die thermolabilen Substanzen jedenfalls teil-
weise, jedoch erheblich langsamer.

N&hern sich Rezidive, so wiederholt sich dieselbe Ent¬
wicklung; die thermolabilen Stofife, die vielleicht schon ganz
geschwunden waren, zeigen sich aufs neue, und wenn das
Rezidiv noch klinisch manifestiert, enth&lt das Blut auch
thermostabile ^Antikerper** (bisweilen kdnnen die klinischen
Rezidivsymptome wenige Tage vor den thermostabilen „Anti-
k5rpem“ auftreten, meistens aber ist die Reihenfolge die um-
gekehrte).

Da der besprochene Entwicklungsgang sich in den einzelnen
Fallen vollkommen regelmlfiig wiederholt, mfissen wir die An-
nahme im hdchsten Grade gezwungen finden, dafi das Vor-
handensein der thermolabilen nAntikdrper" hier auf einem zu-

1) Natiirlich werden in dieser Phase durch ein Zusammentrefien mit
einer der anderen erwahnten Krankhdten thermolabile „Antikdrper“ ent-
stehen kdnnen.

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346

Oluf Thomsen und Harald Boas,

f^ligen Zusammentreffen mit einer der anderen Krankheiten
beruhen sollte, die ebenfalls solche erzeugen kdnnen. Meistens
sind es ja auch yorher vollkommen gesunde jtlngere Menschen,
die mit Syphilis angesteckt werden, und wir glauben daher
unbedenklich, dafi sowohl die thermolabilen als die relativ
thermostabilen Stoife als eine Reaktion des Organismus gegen
das eindriugende Syphilisvirus aufzufassen sind.

DaB auch die thermolabilen Stoffe, sei es, daB sie im
Einzelfalle der Syphilis Oder einer anderen Ursache zuzu-
schreiben sind, als eine Reaktion auf einen pathologischen
ProzeB aufzufassen sind, ergibt sich, wie wir meinen, daraus,
daB unter 200 Neugeborenen, bei denen das Vorhandensein
einer Syphilis aller Wahrscheinlichkeit nach als ausgeschlossen
gelten konnte, in keinem Falle solche Stoffe nachzuweisen
waren; ferner daraus, daB das Serum von 24, soweit man fest-
stellen konnte, yollstfindig gesunden Personen im Alter von
20—40 Jahren nur bei einem einen geringen Gehalt an „Anti-
kdrpern** aufwies, die nach 2 Minuten langer ErwSrmung auf
56 vollkommen schwanden.

Betrachtet man unsere angeftigten SyphilisfBlle genauer,
so scheint es uns, daB etliche unter ihnen deutlich darauf
hinweisen, daB es die ursprhnglich thermolabilen
Substanzen sind, welche allmBhlich einerelative
Thermoresistenz erwerben, daB, mit anderen
Worten, die „thermostabilen‘‘ Substanzen nicht
neben den ^thermolabilen*^ entstehen, sondern
ein in jedem Einzelfalle groBerer oder kleinerer
Teil derselben eine vermebrte Thermoresistenz
erwirbt. Ob diese vermehrte Resistenz auf einer Modifi-
kation der Substanzen selbst beruht oder auf einer Neubildung
anderer Substanzen, welche ihnen die Thermoresistenz mit-
teilen, oder endlich auf einem Wegfall von Fnnktionen, die
als Eatalysatoren die Geschwindigkeit der Reaktion (WBrme-
destruktion) befdrdern, darilber wollen wir uns hier nicht
nBher Hufiern. Eine der beiden letzten Mdglichkeiten scheint
uns doch am n^chsten zu liegen.

Als ein einzelnes Beispiel aus der groBen Masse erwBhnen
wir den Fall VII (N. C. C.), welcher die oben erw&hnte cha-

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Thermoresisteaz der in der W. S«aktion wirksamen „Antik6rper“ etc. 347

rakteristische Entwicklung der Antikdrper zeigt. Der Patient,
der vermutlich Anfang August angesteckt wurde, sucht Anfang
September ^ztlichen Beistand, well in diesem Zeitpunkt eine
Wunde am Penis entstanden ist, die sich bei der Untersuchnng
(am 13. IX.) als typische ulcerierte Induration (-{- Sp. pallida)
darstellt. Das an demselben Tag entnommene Blut ergibt
keine Wass ermann sche Reaktion mit Serum, ^eder vor
noch nach der Erwfirmung. Am 20. IX. ist die Reaktion mit
nichterw&rmtem Serum positiv, und der Titer ist sehr be-
trgchtlicb, indem noch 0,012 ccm totale Hamolysebemmung
geben. Die aktiven Substanzen sind — trotz des hohen Titers
— nach Erwarmung wahrend 4—6 Minuten destruiert. Zu
diesem Zeitpunkt sind noch keine sekundaren Symptome er-
schienen. Bei der nachsten Blutuntersnchung (am 27. IX.)
ist der Titer in dem nichterwarmten Serum unverandert, aber
auch das wahrend 30 Minuten auf 56 ^ erwarmte Serum ergibt
positive Reaktion (totale Hemmung mit 0,1 ccm, fast totale
[Hamolyse 10] mit 0,05 ccm). Zu dieser Zeit sind sichtbare
sekundare Symptome noch nicht vorhanden, aber 3 Tage spater
(am 1. X.) wird ein fleckfOrmiges Exanthem am Abdomen be-
obachtet. Das Blut zeigt fast genau dieselbe Reaktion wie
bei der Untersuchnng am 27. IX. Waren die bei den
beiden Untersuchungen (am 27. IX. und 1. X.) ge-
fundenen thermoresistenten Substanzen neu bin-
zugekommen, so miifite der Titer des nicht¬
erwarmten Serums entsprechend hoher geworden
sein, es zeigt sich aber, dafi dies in diesem wie
in zahlreichen anderen von unseren Kranken-
berichten nicht der Fall war. Der weitere Verlauf des
Falles VII bestatigt unsere Auffassung noch weiterhin. Der
Patient wird sofort nach dem Erscheinen des Exanthems einer
Schmierkur unterworfen, und bei der nachsten Untersuchnng
(am 18. X.), als die sekundaren Symptome unter der Be-
handlung geschwunden waren, fanden wir einen erheblich ge-
ringeren Titer (0,1 ccm Hamolyse 35) des wahrend 30 Minuten
erwarmten Serums, als bei der vorigen Untersuchnng, wahrend
dagegen der Titer in dem nichterwarmten noch wenig beein-
flufit war. Endlich war bei der letzten Untersuchnng (nach

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348

Oluf Thomsen und Harald Boas,

30 Schmierkuren) die Thermoresistenz wieder ganz geschwunden
und der Titer in dem nichterwJlrmten Serum auch bedeutend
vermindert.

Kehren wir nun zu den KrankheitsfUllen nichtsyphilitischer
Natur (Krebs, Tuberkulose etc.) zurttck, in denen das Serum
vor der ErwUrmung nicht selten positive Reaktion ergibt, so
finden wir bier eine Erwarmungs-Destruktionskurve, die mit
derjenigen ganz zusammenfailt, die wir in der zwischen dem
Zeitpunkt des Erscheinens des Schankers und dem Ausbruch
der sekundaren Syraptome liegenden Periode der Syphilis an-
treffen, welche charakterisiert ist durch eine sehr schnelle
(innerhalb von 2—6 Minuten vollzogene) Destruktion. Nach
obigen Darlegungen finden wir es daher nattir-
lich, die mit Lipoiden komplementbindenden
„Antikbrper“ bei Syphilis, Lepra, Krebs, Tu¬
berkulose, Nephritis etc. unter demselben Ge-
sichtswinkel zu betrachten, so dafi die Syphilis
und Lepra nur insofern eine Ausnahme bilden,
als die Substanzen hier haufiger und gewdhnlich
in grdlleren Mengen auftreten und in gewissen
Stadien der Krankheit eine relative Thermo-
stabilitat erwerben (bei Syphilis konstant, bei
Lepra tuberosa haufig).

Ein besonderes Interesse kommt der angeborenen
Syphilis zu, weil hier die aktiven Serumstoffe durchweg in
weit grdfierem Umfang als bei der akquirierten Syphilis die
Thermoresistenz erwerben; es besteht hier mit anderen Worten
in der Regel ein erheblich geringerer Unterschied zwischen
dem Titer in nicht erwarmtem und dem in wahrend 30 Mi¬
nuten auf 56 * erwarmten Serum, wie es die Faile kongenitaler
Syphilis (XV—XXIV) zeigen. Das Maximum ist in den
Fallen XXIII und XXIV erreicht, wo der Titer in dem nicht-
erwarmten und in dem wahrend 30 Minuten erwarmten Serum
ganz derselbe ist Solche Faile bilden somit den einen auHersten
Punkt einer Reihe, deren anderer auBerster Punkt Krankheiten
wie Krebs, Tuberkulose etc. darstellen. Als Glieder der
Reihe finden wir die Lepra und die akquirierte Syphilis in ihren
verschiedenen Stadien.

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Thermoresistenz der in der W. Reaktion wirksamen „Antik6rper“ etc. 349

Wird die Erwarmung iiber 30 Minuten hinaus fort-
gesetzt, so sieht man, daB die Destruktion sich sehr lang-
sam vollzieht. Als Beispiele mSgen die nachstehenden beiden
Falle (V. J. J. und Pat. No. 69/1910) dienen. Erfolgt die
Erwarmung bei niedrigerer Temperatur als 56®, so sieht
man aus dem beigefiigten Beispiel, daB die „Antik6rper“ in
einem Stadium, in dem sie bei 56® sehr schnell zerstort
werden, bei 45® nur sehr langsam destruiert werden. 50,2®
zeigen eine Kurve, die der fiir 56® erheblich naher liegt
als der fiir 45,2®.

Einwirkiing einer Enviirmung auf 56° von liingerer Dauer (bis zu
6 Stunden) auf das Serum von Patienten mit Ausbruch sekund^r
Syphilis.

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+ 0,1

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Ph

0,1 Pat.-Serum
allein

Bemerkungen

Beispiel 1.

Nicht erwiirmt

0

0

0

10

80

100

50

Wahrscheinlich

V. J. J.

Erwarmt auf 56 ®

angesteckt An-

10. I. 1911

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0

0

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100

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0

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0

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100

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„ 30'

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80

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100

0

Penis und Scro¬

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0

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100

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100

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Nicht behandelt

» 6“

0

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90

95

100

0

Beispiel 2.

Nicht erwiirmt

0

0

0

6

80

90

90

Zeitpunkt d. An-

No. 69/1910

Erwarmt auf 56 ®

steckung unbe-

28. I. 1910

wahrend 2'

0

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0

6

80

90

20

kannt

dgl. 4'

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0

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12

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90

4

28. I. 1910 St.

„ 6'

0

0

0

10

80

100

0

pr.: Papein an

„ 10'

0

0

0

10

80

100

0

Clenitaha und

„ 30'

0

0

0

18

100

100

0

um den Anus

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0

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0

35

100

100

0

Nicht behandelt

» S'*

0

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80

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100

0

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0

0

18

90

100

100

0

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0

0

30

90

100

100

0

Zeltschr. U ImmaniUtsforschung. Orig:. Bd« X. 23

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UNIVERSITY OF IOWA

350

Oluf Thomsen und Harald Boas,

Elinwirkung verschiedener Temperatureo aiif die „Antik5rper'‘ in einem
Stadium der Syphilis, in dem der Schanker 3 Wochen bestanden hat, die
sekundaren Symptome aber noch nicht zur Ehitwicklung gelangt sind.

Meerschweinchenkomplement + 0,1 alkohol. Herzblut und

6

E

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E

1

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0,025 Pat.-Seruni

0,012 Pat.-Serum

0,(X)6 Pat.-Senim

0,1 Pat.-Senim

0,05 Pat.-Serum

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0,012 Pat.-Serum

0,006 Pat.-Serum

0,1 Pat.-Serum

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1

1

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P-I

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0,025 Pat.-Senim

0,012 Pat.-Senim

0,006 Pat-Serum

0,1 Pat.-Serum

0,05 Pat.-Serum

e

1

1

cd

Ph

iO

o'

0,012 Pat-Senim

0,006 Pat.-Serum

45,20

48,0“

50,2

0

56,0

0

Nicht erwarmt

0

0

0

10

40

0

0

0

10

40

0

0

0

10

40

0

0

0

10

40

Erwarmt

wahrend 2'

0

0

0

10

30

0

0

0

10

45

0

0

0

25

90

0

0

60100

100

dgl.

4'

0

0

0

0

30

0

0

10

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0

0

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100100

100

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8'

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100

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100! 100100 100

32'

0

0

0

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90

90

100

100

100

100

100

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47'

0

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100

100

100

100

100

lOOilOO

lOOilOO

67'

0

0

0

20

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100

100

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100

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160'

0

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100

lOOjlOO

lOOllOO

100

100

100

100100

100100

In fast alien als Beispiele gewahiten Schemas ist zu beobachten, dali
die Beaktion mit 0,1 ccm Patientenserum dutch die E^armung etwas
verstmrkt wird; weniget ausgesprochen ist dies mit 0,05 ccm Serum, und
bei geringeren Mengen kommt es gar nicht zur Qeltung. Dies beruht
mdglicherweise darauf, dafl das Eomplementmittelstuck in dem benutzten
Menschenserum erst allmahlich unter der E^rw^mung destruiert wird und
somit in einem gewissen Zeitraum innerhalb dieses Prozesses mit dem
Mittelstiick des Meerschweinchenkomplements zusammenwirkt und so einen
Komplementuberschull erzeugt. Die begleitende Eontrolle, die jederzeit
den Gehalt des erwarmten Menschensenims an hamolytischem Eomplement
zeigt, zeigt allerdings, dafi diese Funktion zum weitaus grofiten Teil schon
nach 2 Minuten Erwarmung aufgehbrt hat; aber teils ist es m5glich, daB
das „Elndstuck“ etwas schneller destruiert wird, teils ist die Fimktion des
Mittelstiickes in der Hamolyse mdglicherweise thermolabiler als seine
Fahigkdt, in der Wassermannschen Beaktion gebunden zu werden.

Beispiele.

Die hier mitgeteilten Beispiele sind nur etwa Vs der
untersuchten F^lle; weil aber die iibrigen ganz gleichartige
VerhSltnisse zeigen, lassen wir sie mit Rflcksicht anf den
Raum beiseite.

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UNIVERSITY OF IOWA

Thermoresistenz der in der W, Beaktion wirksamen ,,Antikdrper‘* etc. 351
Vn. N. C. C., 26 Jahre alt

Meerschw.-Komrfement +
0,1 ccm alkohol. Herzextr. u.

0,1 Pat.-8er.
allein

Bemerkungen

a

Ph

si

CLi

si

Oli

O

CM

§1

CM

§1

13. IX. 1910

Nicht erwarmt

100

100

100

100

100

100

100

Im Sept 1910 wurde ein indu-

Erwarmt auf 56 ®

riertes Ulcus penis konstatiert.

wahrcnd 2'

100

100

100

100

100

100

14

Wahrscheinlich Anfang Aug.

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

4

angesteckt.

» 6'

100

100

100

100

100

100

0

13. IX. 10. St. pr.: Indurierter

» 10'

100

100

100

100

100

100

0

Schanker am Penis (+ 8p.

„ 30'

100

100

100

100

100

100

0

palhda). Nicht behandelt.

20. IX. 1910

Nicht erwarmt

0

0

0

0

20

90

98

Noch keine sekund. Symptome.

Ilrwannt auf 56 ®

Nicht behandelt.

wahrend 2'

0

0

0

0

70

100

10

dgl. 4'

0

20

90

100

100

100

0

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100

100

100

100

0

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70

100

100

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100

100

0

„ 30'

70

100

100

100

100

100

0

27. IX. 1910

Nich erwarmt

0

0

0

0

18

80

100

Noch keine sekund. Symptome.

Erwarmt auf 56 ®

Nicht behandelt.

wahrend 2'

0

0

0

12

80

90

18

dgl. 4'

20

25

20

80

90

100

6

» 6'

18

20

35

80

90

100

0

„ 10'

8

12

70

90

90

100

0

„ 30'

0

10

80

90

100

100

0

1. X. 1910

Nicht erwarmt

0

0

0

0

50

100

90

1. X. Ein fleckfSrmiges Exan¬

Erwarmt auf 56 ®

them ist am Abdomen ent-

wahrend 2'

0

0

0

20

90

100

10

standen.

dgl. 4'

30

25

40

70

90;

;100

4

Rp. Schmierkuren.

» 6'

16

30

601

90

100

100

0

„ 10'

14

25

80

100

100

100

0

„ 30'

0

20

80

100

100

100

0

18. X. 1910

Nicht erwarmt

0

0

0

4

70

100

90

Hat ietzt 17 Schmierkuren k 3 g

Erwarmt auf 56 ®

bekommen. Alle Symptome

wahrend 2'

25

25

55

65

90

100

8

geschwunden.

dgl. 4'

18

30

50

70

80

100

0

„ 6'

8

20

70

80

90

100

0

„ 10'

18

25

80

90

90

100

0

„ 30'

35

90

90

100

100

100

0

3. XI. 1910

Nicht erwarmt

0

40

60

90

100

100

70

Hat jetzt 30 Schmierkiuen be¬

Erw&rmt auf 56 ®

kommen.

wahrend 2'

70

80

90

90

100

100

4

dgl. 4'

90

80

90

100,

100

100

0

» 6'

90

50

100

100

100

100

0

„ 10'

90

90

100

100

100

100

0

„ 30'

90

100

100

100

100

100

0

Be sum 6: Dieser Fall betrifil eine bisher gesiinde Person (26 Jahre alt), die mit ^philis
angesteckt wird. Bei dem Erscheinen des Schankers sind nocn keine komplementbindend^
„Antik6rper'‘ vorhanden, weder vor noch nach der Erwarmiing. Wenige Ta^ spater hat die
„Antik6rp^‘-Menge einen betrachtlichen Titer erreicht, die Substanzen sind aber sehr thermo-
labil. 3 Tage vor dem Erscheinen der sekimdaren Symptome sind die „Antik6g)er“ teilweise
thermoresistent geworden. Unter der Quecksilberbehandlung schwindet zuerst die Thermoresi¬
stenz, erst dann wird die Menge der jjAntikSrper'* geringer.

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23 ♦

Original from

UNIVERSITY OF IOWA

352

Oluf Thomsen und Harald Boas,
VIII. C. F. F. H. W., :W Jahre alt.

i

1

Meer
+ <

U, '

cT^

Ch

schweinchenko
3,1 ccm alkoho
extrakt unc

£ E E

^ Ei 'ic u |cvi 2

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cj 1 C3 ' c3

CL, I ^

mplement
1. Herz-
i

S' s

II tl
-

0,1 Pat.-Serum
allein

Bemerkiuigen

19. XI. 1910

Nicht erwiirmt

35

1

60

i

90:

1

100 1

100

100

95

WahrscheinUch angesteckt

Erw iirmt auf 56 ®

1

I

1

Anfang Okt. 1910.

wilhrend 2'

100

100

100

100

100

100

6

19. XI. 8 1. pr.: Ulcera indurat.

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

4

praeput. (+ Sp. pallida).

100

100

100

100

100

100

0

Nicht behaindelt

» 10'

100

100

100

100

100

100

0

„ 30'

100

100

100

100

100

100

0

26. XI. 1910

Nicht erwiirmt

0

0

0

4

6

60

100

Noch keine sekundaren Sym-

Erwiirmt auf 56 "

1

ptome. Nicht behandelU

wiihrend 2'

50

20

30

80

90

100

10

dgl. 4'

70

80

80

100

100

100

4

„ 6'

50

55

70

100

100

100

0

„ 10'

60

1 65

65

100

100

100

0

„ 30'

45

70

100

100

100

100

0

axil. 1910

Nicht erwarmt

0

0

0

6

^ 90

100

95

30. XI. 10. Es sind Flecke

Erwurmt auf 56 ®

1

und Papeln erschienen.

wahrend 2'

4

0

8

80

100

100

12

Kp. Schnuerkuren k 3 g.

dgl. 4'

6

0

16

95

100

100

0

» 6'

10

0

30

95

100

100

0

„ 10'

0

6

35

95

100

100

0

„ 30'

0

4

65

95

100

100

0

31. xn. 1910

Nicht erwiirmt

0

0

20

90

: 100

100

90

Hat jetzt 30 Schmierkuren be-

Erwarmt auf 56®

i

1

kommen.

wiihrend 2' |

90

95

100

100

100

100

8

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

2

„ 6'

100

100

100

100

100

100

0

„ 10'

100

100

100

100

100

100

0

„ 30'

100

100

100

1100

|100

100

0

Resum6: Bisher gesunde 35-jahrige Person, die bei der Einbringung
einen indurierten Schanker (+ Sp. pallida) hat. Das nichtenvarmte Serum
gibt positive Reaktion. Titer niedrig. Rejiktion nach 2 Minuten Er-
waxmung vollkommen geschwunden. 4 Tage vor Ausbruch der sekundaren
Symptome ist der Titer in dera nichterwarmten Semm bedeutend erhoht
und gleichzeitig sind die Substanzen teilweise thermoresistent geworden.
Bei der Untersuchung 12 Tage spiiter ist der Titer in dem nichterwarmten
Serum unvenindert, die Thermoresistenz aber erhoht. Unter der Be-
handlung schwindet die Thermoresistenz und gleichzeitig wird der Titer
vermindert.

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UNIVERSITY OF IOWA

Thermoresisteiiz der in der W. Reaktion wirksamen jjAntikdrper^* etc. 353
IX. L, E. J., 23 Jahre alt.

Met
0,1 c

^1

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'

10,5

s ^

implement
>1. Herzexi

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Pui| ^

+

tr. u.

§1

1

0,1 Pat-Ser.
allein

Bemerkungen

8. X. 1910

Nicht erwannt

40

90

100

100

100

100

80

8. X. wurde eine ulzeiierte In*

Erwarmt auf 56®

duration am Penis konstatiert

wahrend 2'

60

100

100

100

100

100

16

(+ Sp. pallida). Nicht be-

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

6

bandit.

» 6'

100

100

100

100

100

! 100

0

„ 10'

100

100

100

100

100

100

0

» 30'

m

100

100

100

100

100

0

13. X. 1910

Nicht erwarmt

10

40

55

90

90

100

98 '

Noch keine sekundaren Sym-

Eirwarmt auf 56 ®

ptome. Nicht behandelt.

wahrend 2'

90

60

90

100

100

100

10

dgl. 4'

80

90

! 90

100

100

100

0

„ 6'

80

90

i 90

100

100

100

0

„ 10'

90

90

100

100

100

100

0

„ 30'

90

90

100

100

100

100

0

20. X. 1910

Nicht erwarmt

20

60

80;

90

90

100

98

20. I. Ein Roseola-Ehcan them

Erwarmt auf 56®

ist am Truncus erschienen.

wahrend 2'

90

90

90

100

100

100

16

Rp. Schmierkuren h 3 g.

dgl. 4'

90

90

100

100

100

100

6

6'

90

90

100

100

100

100

0

„ 10'

90

100

100

100

100

100

0

„ 30'

90

100

lOO

100

100

100

0

27. X. 1910

Nicht erw&rmt

0

0

0

0

8

80

98

Hat 7 Schmierkuren bekommen.

Erwarmt auf 56 ®

Das ExanUiem geschwunden.

w&hrend 2'

20

18

4

10

25

90

14

dgl. 4'

45

40

30

70

70

90

4

„ 6'

30

30

45

40

80

100

2

„ 10'

35

60

65

70

70

100

0

„ 30'

40

60

70

90

90

100

0

10. XI. 1910

Nicht erwarmt

80

90

90

90

100

100

95

Hat 22 Schmierkuren bekommen.

Erw&rmt auf 56®

wahrend 2'

100

100

100

100

100

100

10

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

6

6'

100

100

100

100

100

100

2

10'

100

100

100

100

100

100

0

„ 30'

100

100

IlOO

100

100

110

0

Besum^: 23-jahrige, bisher gesunde Person. Hat bei der Einbringung
einen indurierten Schanker (+ Sp. pallida). Das Serum ergibt schwache
Wassermannsche Reaktion, die Substanzen sind aber durch Biwarmung
Bchnell destmiert. Der weitere Verlauf zeigt, dafi der Titer der „Anti-
k6rper“ langsam steigt. Bald nach dem Erscheinen des Exanthems ist der
Titer in dem nichterwarmten Serum sehr betrachtUch und die Thermo-
resistenz nimmt zu, indem ein (verh^tnismafiig geringer) Teil der Sub¬
stanzen noch nach 90 Minuten Erw^mimg vorhanden ist. Unter dem
Einflufi der Behandlung schwinden die „Antik6rper‘‘ fast ganzlich.

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UNIVERSITY OF IOWA

354

Oluf Thomsen und Harald Boas,

X. A. W., 20 Jahre alt.

Meerschweinchenkomplement

*a5

1 +0,1 ccm alkohol. Herz-

extrakt und

w

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1

7. IX. 1910

Nicht erwiirmt
Erwarmt auf 56®

0

0

0

8

1

70

1

100

1

90

!

Die ersten Symptome
im September 1910

wiihrend

2'

0

0

35

80

90

100

16

beobacntet. Zeitpunkt

dgl.

4'

0

0

30

80

90

100

4

der Infektion unbe-

6'

0

0

45

80

90

100

0

kannt.

yj

10'

0

0

65

85

90

100

0

7. IX. 1910. St. pr.:

1}

30'

0

0

60

95

100

100

0

Papeln an den Geni-
t^a, Krusten L Haar-
lx)den, Leucoderma.
Rezidiv: Nie behan-

delt.

28. IX. 1910

Nicht erwarmt

0

0

0

18

80

100

100

Hat 19 Schmierkuren

Erwiirmt auf 56®

k3g bekommen. Fast

wiihrend

2'

0

0

45

80

90

100

10

alle Symptome ge-

dgl.

4'

70

90

90

90

100

100

0

schwunden.

yy

6'

80

90

90'

100

100

100

0

yy

10'

90

90

100

100

100

100

0

30'

90

100

100

100

100

101

0

12. X. 1910

Nicht erwarmt

0

0

0

16

30

80

70

Hat 33 Schmierkuren

Erwarmt auf 56®

bekommen. Alle Svm-

wiihrend

2'

6

18

35

60

90

100

8

ptome geschwunclen.

dgl.

4'

50

50

80

80

90

100

0

yy

6'

70

70

75

75

90

100

0

yf

10

70

80

90

90

90

100

0

yj

30'

80

90

100

100

100

100

0

26.x. 1910

Nicht enviirmt

0

0

0

0

8

60

80

Hat 36 Schmierkuren

Erwarmt auf 56 ®|

bekommen.

wahrend

2'

8

6

6

10

70

20

8

dgl.

4'

80

90

95

95

95

95

4

yy

6'

90

90

100

100

100

100

2

yy

10'

100

100

100

100

100

100

0

n

30'

100

100

100

100

100

100

0

Resura^: 20-jahrige, bisher gesunde Person, mit Ausbruch von Papeln
(Rezidiv) eingebracht. Das Serum zeigt hohen Antikorpertiter und bedeu-
tende Thermoresistenz. Unter der Behandlung erhiilt der Titer sich unver-
andert, die Thermoresistenz dagegen schwindet total. Bei der letzten Unter-
Buchung ist (trotz der 36 Schmierkuren) die „Antik6rper^‘-Menge weiter
vermehrt, aber schon nach 4 Minuten ist die Destruktion total.

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UNIVERSITY OF IOWA

Thermoresistenz der in der \V. Keaktion wirksamen „Antik6rper“ etc. 355
XL M. R., 32 Jahre alt.

Meerschweinchenkomplement -
+ 0,1 ccm alk. Herzextrakt und g

0,1

Pat.-Serum

§ E i

C C oj C

® ^ p J ® ^

a cs ^

Oh 1 Ph Ph

! S S.^-S

|CP C c3 r3

o ^ o .j

55 eS O

P Ph

10. IX. 1910 Nicht erwiirmt

0

o

o

o

8 90 100 Im Sept. 1910 wurde ein

Erwiirmt auf 56 ®

Schanker am Penis

wiihrend 2'

0

0 0 10

70 90 18 konstatiert.

dgl. 4' 0 0| 0 20 90 100 6 10. IX. 1910. Stpr.:

„ 6' 0 0 1 0 30 95 100 0 Grofies papelfdrniiges

„ 10' 0 , 0 0 35 95 100 0 Syphilia. induration

„ 30' 0 0 0 35 95 100 0 in Sulc. coronar.

24. IX. 1910 Nicht erwiirmt 1 0 0 0 0 20 80 , 90 Hat 14 Schmierkuren

Erwiirmt auf 56 ® ! il 3 g bckommen. AUe

wiihrend 2' 0 0 0 10 70 90 14 Antiille geschwunden

dgl. 4' 0 0 0 20 90 100 6

„ 6' 0 0 0 25 90 100 0

„ 10' 0 0 0 35 90 100 0

„ 30' 0 0 0 45 95 100 0

15. XI. 1910 Nicht erwiirmt 70 80 90 100,100 100 90 Hat 50 Schmierkuren

Erwiirmt auf 56® < I bekommen. Behand-

wiihrend 2' 80 90 90 100 i 100 100, 16 lung aufgehort

dgl. 4' 90 90 100'1001100 100 1 4

„ 6' 100 100 100 100 100 1001 0

„ 10' 100 100 100 100 100 100! 0

„ 30' 100 100 100 100 100 100 j 0

I. 1911 Nicht erwiirmt 0 0 4 45 80 100 90 Kein Anzeichen von Re-

Enviirmt auf 56 ® zidiv.

wahrend 2' 50 50 80 90 100 100 12

dgl. 4' 90 100 100 100 100 100 6

„ 6' 100 190 100 100 100 100 0

„ 10 ' 100 100 100 100 100 100 0

„ 30' 100 100 100 100 100 100 0

7. HI. 1911 Nicht erwiirmt 0 0 25 60 90 100 90 7. HI. Noch kein An-

Erwiirmt auf 56 ® zcichen von Rezidiv.

wahrend 2' 0 20 40 80 90 100 18 13. III. Noch kein An-

dgl. 4' 12 35 70 90 100 100 8 zeichen von Rezidiv.

„ 6' 6 40 80 90 100 100 4 23. HI. Es aind Pa-

„ 10' 0 55 90 90,100 100 0 peln am Scrotum

„ 30' 0 60 100 1001100 100 0 erachienen.

Reaum^: 32-iahrige, biaher gesunde Person mit groBem Auabruch
von papelfdrmigem Syphilid. Der „Antik6rper“-Titer iat betriichtlich und
ein verhiiltniamaUig grower Teil iat thermoresiatent. Unter der Queckailber-
behandiung achwinden die Antikorper ganzlich, aber bald nach dem Auf-
horen der Behandlung kehren sie wieder, eine Zeitlang sind aie jedoch
thermolabil; bei der letzten Untersuchung iat die Thermoresistenz gestiegen,
so dafi ein Teil von ihnen nach 30 Minuten Erwarmung noch erhalten ist.

Bald darauf erfoigt ein Rezidiv.

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UNIVERSITY OF IOWA

356 Oliif Thomsen und Harald Boas,

XIL V. H., 19 Jahre alt.

Meerschweinchenkomplement
+ 0,1 ccm alk. Herzextrakt und

-IbIiIiIiI §1

® -s ®-S cT-S o'-s o'-§ o--§

fi, pL, Ch| Ph ph

0,1 Pat.-fSerura
allein

19. IX. 1910

Nicht erwiirmt

0

0

0

0

18

90

100

Wiihrscheinl. an-

Enviirmt auf 56®

gesteckt i. Au-

wahrend 2'

0

0

60

100

100

100

20

gust 1910.

dgl. 4'

90

100

100

100

100

100

8

19.IX.10.St.pr.:

„ 6'

100

100

100

100

100

100

0

Multiple Indu-

„ 10'

100

100

100

100

100

100

0

rationen a. den

„ 30'

100

100

100

100

100

100

0

Grenitalia (+

Sp. pall.). Ade-

nitis universal.

21. IX. 1910

Nicht erwiirmt

0

0

0

0

12

80

95

21.IX.10. Heute

Erwiirmt auf 56 ®

erschien ein

wahrend 2'

30

90

100

100

100

100

18

fleckfdrmiges

dgl. 4'

40

90

100

100

100

100

0

Exanthem.

„ 6'

60

90

100

100

100

100

0

Rp. Schmierkur

„ 10*

55

90

100

100

100

100

0

^ 3 g.

„ 30'

55^

100

100

100

100

100

0

30. IX. 1910

Nicht envurmt

0

0

0

0

30

90

90

Hat 9 Schmier-

Erwiirmt auf 56®

kuren k 3 g

wahrend 2'

0

8

12

30

70

90

10

bekommen.

dgl. 4'

30

30

40

55

80

90

10

Dieindurationen

» 6'

35

20

60

80

90

100

0

geheilt. Das

„ 10'

12

10

70

90

100

100

0

Exanthem ge-

„ 30'

0

10

70

100

100

100

0

schwiinden

14. X. 1910

Nicht erwarmt

0

0

20

, 70

100

100

80

Hat 23 Schmier-

Erwarmt auf 56 ®

1

kuren bekom¬

wahrend 2'

80

90

100

100

100

100

6

men.

dgl. 4'

80

90

90

100

100

100

0

6'

90

90

100

100

100

100

0

„ 10'

90

90

100

100

100

100

0

1

„ 30'

90

100

100

100

100

100

0

28. X. 1910

Nicht erwarmt

0

60

60

100

100

100

90

Hat 35 Schmier-

Enviirmt auf 56 ®

kuren bekom¬

wahrend 2'

10

80

80

100

100

100

14

men.

dgl. 4'

60

90

90

100

100

100

6

» 6'

90

,100

100

100

100

100

0

„ 10'

100

ilOO

100

100

100

100

0

„ 30'

100

100

100

100

100

100

0

Resume, 19-jahrige, bisher gesimde Person, eingebracht mit miiltiplen In-
durationen (+ Sp. pallida). Der Titer sehr betrachtlich, aber samtliche „Anti-
k6rpeP‘ thermolabil. An demselben Tag, an dem das erste Exanthem erscheint,
ist ein kleiner Teil der „Antik6rper“-Menge, die im iibrigen unverandert ist, thermo-
resistent geworden. Diese Thermoresistenz nimmt in der nachstfolgenden Zeit zu,
trotz der Behandlung, erreicht aber (wohl infolge der Behandlung) keine bedeu-
tende Hohe iind ist nach 3-wochiger Behandlung ganz geschwunden unter gleich-
zeitiger Vermindenmg der „Antikorper“-Menge.

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Original from

UNIVERSITY OF IOWA

Thermoresistenz der in der W. Reaktion wirksamen „Aiitik6rper“ etc. 357

XIIL H. C. J., 19 Jahre alt.

Meerschweinchenkomplement
+ 0,1 cem alkohol. Herz-
extrakt und

0,1 Pat.-Serum
allein

Bemerkungen

B

_ S

S'?:

§

S

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Ph

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CM 2

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Ch

E

„ 3

§1

cC

pL,

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ss 2

8 c?

8. XJ. 1910

Nicht erwarmt

10

10

14

50

90

100

90

8. XI. 1910. St. pr.:

Erwiirmt auf 56®

Ulcera indurat. prae-

wiihrend 2'

65

80

90

90

100

100

10

put. (+ Sp. pallida).

dgl. 4'

80

90

90

100

100

100

6

Adenitis inguin. Nicht

„ 6'

80

90

90

100

100

100

4

behandelt

„ i(y

70

90

90

100

100

100

0

30'

80

90

100

100

100

100

0

15. XL 1910

Nicht erwarmt

4

4

6

60

100

100

90

9. XI. Ein schwaches

Erwiirmt auf 56 ®

fleckformiges Exan-

wiihrend 2'

14

22

50

80

100

100

10

them ist erschienen.

dgl. 4'

18

30

80

100

100

100

8

Rp. Schmierkur h 3 g.

» 6'

20

45

70

100

100

100

0

15. XI. Schwache Reste

„ 10'

12

20

80

100

100

100

0

des Exanthems. Hat

„ 30'

8

60

100

100

100

100

0

7 Schmierkuren be-

kommen.

26. XI. 1910

Nicht erwarmt

4

4

12

35

100

100

100

Erwarmt auf 56 ®

wiihrend 2'

90

100

100

100

100

100

12

dgl. 4'

90

100

100

100

100

100

4

„ 6'

70

100

100

100

100

100

4

„ 10'

80

100

100

100

100

100

0

„ 30'

90

100

100

100

100

100

0

31. XII. 1910

Nicht erwarmt

20

90

90

95

100

100

100

Erwarmt auf 56 ®

wiihrend 2'

90

100

100

100

100

100

18

dgl. 4'

100

100

100

100

100

100

4

» 6'

100

100

100

100

100

100

0

„ 10-

100

100

100

100

ICO

100

0

„ 30'

100

100

: 100

100

100

100

0

Resume: 19-jahrige, bisher gesunde Person, eingebracht mit ulce-
rierter Induration (+ Sp. pallida). Die Reaktion positiv in nichterwarmtem
Serum. Nach dem Erscheinen des Exanthems bleibt ein Teil der ,jVnti-
korper^^ noch nach 30 Minuten erhalten, diese Resistenz schwindet aber
unter der Quecksilberbehandlung, die erst nach Verlauf langerer Zeit die
Menge der „Antik6rper‘* im ganzen vermindert.

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Original from

UNIVERSITY OF IOWA

358

Oluf Thomsen und Harald Boas,

XIV. E. B. K. J., 19 Jahre alt.

Meerschweinchenkoraplement
+ 0,1 ccm alkohol. Herz-
extrakt und

a

2

Beraerkungen

0,1

Pat.-Serum

6

C §

Q-*

o

Ph

0,025

Pat.-Senun

0,012

Pat.-Seruin

900‘0

E

« g

SJ,

<=>^

Ok

0,1 Pat.-S
allein

9. XI. 1910!Nicht erwarmt

8

6

16

50

80

100

90

Wahrscheinlich Anfang

Enviirmt auf 56 ®

Sept. 1910 angesteckt.

wiihrend 2*

80

90

90

90

90

100

20

9. XI. 1910. St pr:

dgl. 4'

80

80

90

90

90

100

9

Ulcus indurat. genit

» 6'

90

90

90

100

100

100

6

(+ Sp. pallida). Oede-

10'

90

90

90

100

100

100

0

ma indurat. lab. maj.

„ 30'

90

100

100

100

100

100

0

— Adenitis inrain. sin.

Nicht behandelt.

16. XI. 1910

Nicht envarmt

16

18

70

90

100

100

100

Noch keine sekundaren

Erwarmt auf 56 ®

Symptome.

wiihrend 2'

80

80

85

90

100

100

12

dgl. 4'

80

85

90

100

100

100

4

„ 6'

80

85

90

100

100

100

0

„ 10'

90

90

100

100

100

100

0

„ 30'

90

100

100

100

100

100

0

23. XI. 1910

Nicht envarmt

0

0

0

8

18

80

90

21. XI. Einzelne Flecke

Erwarmt auf 56 ®

sind am Truncus er-

wiihrend 2'

0

0

14

90

90

100

8

erschienen, jedoch kein

dgl. 4'

20

10

50

100

100

i 100

0

unzweifelhaftes Exan¬

» 6'

4

6

35

100

100

100

0

them.

„ 10'

4

4

55

100

100

[lOO

0

25. XI. Heute unzweifel¬

„ 30'

0

0

60

100

100

100

0

haftes syphil. Exan¬

them.

Rp. Schmierkur k 3 g.

12. XII. 1910

Nicht erwarmt

12

60

90

100

100

100

95

Hat 17 Schmierkuren

En\’armt auf 56 ®

bekoramen. Die Sym¬

w’iihrend 2'

90

100

100

100

100

100

14

ptome fast geschwuin-

dgl. 4'

80

100

100

100

100

100

6

den.

6'

90

100

100

100

100

100

0

„ 10'

70

100

100

100

100

100

0

„ 30'

50

100

100

1001

100

100

0

Resum^: IQ-jahrige bisher gesimde Person, eingebracht mit indu-
rierter Ulzeration (+ Sp. pallida). Reaktion positiv im Serum vor der
Erwarmung. Gleichzeitig mit dem Erscheinen des Exanthems ist der Titer
der „Antik6rper^‘-Menge sehr gestiegen und die Thermoresistenz nunmehr
sehr bedeutend geworden. Unter der Behandlung werden die „Antikorper‘‘
im ganzen weniger.

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Original from

UNIVERSITY OF IOWA

Thermoresistenz der in der W. Beaktion wirksamen „Antik6rper“ etc. 359

Eongenitale Syphilis.

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Bemerkungen

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XV.

Nicht erwamt

0

70

100

100

100

100

65

3-iahriges Kind. Ausbnich kon-

Erwarmt auf 56®

geniwer Syphilis im Alter ron

wahrend

2'

0

60

100

100

100

100

12

3 Jahren, seitdem kein Aus-

dgl.

4'

6

50

100

100

100

100

4

bnich now Behandlung

6'

14

60

100

100

100

100

0

10'

18

80

100

100

100

100

0

W

20

90

100

100

100

100

0

XVI.

Nicht erwarmt
Elrwarmt auf 56®

0

0

0

0

10

90

80

IV^jahriges Kind, wiederholt mit
Quecksilber bdiandelt. Jetzt

wahrend

2'

0

0

0

0

40

100

14

keine Symptome

dgl.

4'

0

0

0

0

90

100

4

6'

0

0

0

0

80

100

0

10'

0

0

0

0

90

100

0

f7

30'

0

0

0

0

100

100

0

XVII.

Nicht erwarmt

0

0

0

20

90

100

70

1-jahriges Kind mit Bezidiv, vor

Ehwarmt auf 56®

3 Monaten behandelt

wahrend

2'

0

0

0

40

90

100

10

dgl.

4'

0

0

0

40

90

100

8

6'

0

0

0

65

90

100

0

10'

0

0

0

80

100

100

0

7J

30'

0

0

0

90

100

100

0

XVIIL

Nicht erwarmt

0

0

0

0

20

100

80

l®/ 4 -jahiiges Kind. Ausbruch

Erwarmt auf 56 ®
wahrend 2'

0

0

0

12

40

100

16

kongenitaler Syphilis im Skug-
lingsalter. Seitdem kein Aus¬

dgl.

4'

0

0

0

10

50

100

4

bruch. Wiederholt behandelt

6'

0

0

0

12

60

100

0

10'

0

0

0

30

80

100

0

30'

0

0

0

20

90

100

0

XIX.

Nicht erwarmt
Erwarmt auf 56®

0

0

0

70

100

100

20

2-jiihiwes Sand. Vor dnem Jahr
auf sWhilis oongenit. behandelt.
Jetzt kein Anzeichen Ton der

wahrend

2'

0

0

40

90

100

100

6

dgl.

4'

0

0

50

90

100

100

0

E^tmkheit

6'

0

0

45

90

100

100

0

10'

0

0

40

100

100

100

0

»

30'

0

0

60

100

100

100

0

XX.

Nicht erwarmt
Elrwarmt auf 56®

0

0

0

0

10

100

60

IVt'i&hriges Kind. Zuletzt Tor
V, Jahr mit Ealometpulrem k

wahrend

2'

0

0

0

0

12

100

10

1 eg behandelt. Jetzt kein

dgl.

4'

0

0

0

0

30

100

4

Anzeichen von der Krankheit

)}

6'

0

0

0

0

40

100

0

yy

10'

0

0

0

0

30

100

0

97

30'

0

0

0

0

40

100

0

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Google

Original from

UNIVERSITY OF IOWA

360

Oluf Thomsen und Harald Boas,

1 1

1

1

1

!

Meerschw.-Komplement +
0,1 alkohol. Herzextrakt und

6

I.S

i-H

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Bemerkungen

i‘o

1

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1

0,025

Pat.-Ser.

Ml

p-sl

CU j

0,006

Pat.-Ser.

0,003

Pat.-Ser.

XXI.

Nicht erwarmt

0

0

0

0

1

80

45

4-jahrige8 Kind. Wiederholt auf

Erwarmt auf 56 ®

1

1

Ausbriiche von kongenitaler

wiihrend

2'

0

0

0

10

90

100

14

Syphilis behandelt. Jetzt keine

•

dgl.

4'

0

0

0

30

90

100

0

Manifestationen

6'

0

0

0

55

90

100

0

10'

i 0

0

0

70

90

100

0

30'

i ^

0

0

70

100

100

0

XXII.

Nicht erwarmt

0

0

60

90

100

100

20

2^/'-jahriges Kind. Ener^ch mit

Erwarmt auf 56 “

1

Quecksilber auf wiedernolte Re-

wahrend

2'

1 0

8

80

90

100

100

4

zidive kongenitaler S^hilis be¬

dgl.

4'

0

10

90

100

100

100

2

handelt. Jetzt keine Symptome

V

6'

10

55

90

100

100

100

0

Ji

10'

16

90

100

100

100

100

0

30'

20

90

100

100

100

100

0

XXIII.

Nicht erwarmt

0

0

0

0

0

60

0

5 Tage altes Eand mit ange-

Erwarmt auf 56 ®

borener Syphilis

wahrend

2'

0

0

0

0

0

70

0

dgl.

4';

0

0

0

0

0

60

0

6'

0

0

0

0

0

80

0

10'

0

0

0

0

0

65

0

30'!

0

0

0

0

0

70

0

Meerschw'.-Komplemcnt +
0,1 alkohol. Herzextrakt und

2

- 1

t

05

1

X

o'

0,05 Pt.-S.

0,025 Pt.-S.

0,012 Pt.-S.

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1

X

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0,003 Pt.-B.

0,0015 Pt.-S.

0,0007 Pt.-S.

ai

1

•tj

X

rH

0

Bemerkungen

XXIV.

Nicht erwarmt
Erwarmt auf 56 ®

0

0

0

0

0

0

0

90

80

13-iahriger Knabe. Die Syphilis
des Kindes, die vor V, Jahr

. wahrend

2'

0

0

0

0

0

0

0

100

16

zuerst erkannt wurde, ist wieder-

dgl.

4'

0

0

0

0

0

0

0

80

4

holt mit Schmierkuren behan- ^

delt worden, welche auf den

jj

6'

0

0

0

0

0

0

0

90

0

}}

10'

0

0

0

0

0

0

0

70

0

Gesundheitszustand des Kindes

99

30'

0

0

0

0

0

0

0

85

0

einen ausgezeichneten EinfluS
hatten, am die Wassermann-
sche Reaktion aber in keiner

Weise eingewirkt haben. AuBer
vollkommener Unzugiinglich-
keit gegeniiber den Wu-kimgen
der 30 Min. langen Envarmung
zeigen die yjAntikoroer'* hier 1

einen ganz ungewohnuch hohen 1

Titer (den hckjhsten, der je in
diesem Institutgefunden wurde)

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Thermoresistenz der in der W. Beaktion wirksamen „Antikorper“ etc. 361

Zusammenfassung.

Bei einer Ian gen Reihe von Krankheiten: Syphilis, Lepra,
Tuberkulose, Krebs, Scarlatina, Nephritis etc., treten im
Blut „Antik6rper‘‘ auf, die in Verbindung mit verschiedenen
Lipoiden (bezw. Lipoid-EiweiHverbindungen) eine Komplement-
ablenkung ergeben. Wahrscheinlich sind diese „Antik6rper‘‘
bei s&mtlichen genannten Krankheiten gleicher Art und unter-
scheiden sich nur durch verschiedene Thermoresistenz, was
mdglicherweise in seknnd^ren Ver§,nderungen in dem die
^Antikdrper^ nmgebenden Medium begrhndet ist.

Die Thermoresistenz ist in dem ersten Stadium der
Syphilis (bis zum Ausbruch der sekundtlren Symptome) ebenso
gering wie bei der Mehrzahl der genannten Krankheiten; sie
nimmt dann zu in dem sekundtu'en Stadium und nimmt unter
dor Quecksilberbehandlung wieder ab. In manchen FMlen
zeigt es sich, dafi die Thermoresistenz ganz geschwunden ist,
noch ehe die Menge der „Antik6rper‘‘ vermindert ist, und
erst sp&ter fUhrt die fortgesetzte Quecksilberbehandlung auch
eine Verminderung der Menge der ^Antikdrper^ herbei, welche
nunmehr sehr wenig thermoresistent geworden sind.

Bei angeborener Syphilis ist die Thermoresistenz in der
Regel erheblich deutlicher ausgeprtigt als bei akquirierter Syphilis,
in einzelnen FMlen fdhrt sogar eine ErwtLrmung auf 56
wShrend 30 Minuten keine Verminderung der „Antik6rper“-
Menge herbei.

Bei Lepra tuberosa findet man konstant nAntikdrper^,
aber nur in einem Teil der Ftllle sind diese relativ thermo¬
resistent. Bei Lepra anaesthetica fehlen, jedenfalls als Regel,
die mit Lipoiden komplementbindenden ^Antikbrper^ ganz.

Bei Scarlatina kann die Thermoresistenz der nAntikorper*^
bisweilen etwas verstSxkt sein.

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362

E. Friedberger und S. Mita,

Nachdruek verboUn,

[Aus dem Pharmakologischen Institnt der Umversitftt Berlin;
Direktor: Geheimrat Prof. Dr. A. Heffter (Abteilung flir Im-
munitktsforscliung and experimentelle Therapie; Leiter: Prof.

Dr. E. Friedberger).]

Teber Anaphylaxie.

XIX. Mitteilung.

Die Anaphylaxie des Froaches und die Einwirkung dee
Anaphylatoxine auf dae ieoiierte Froechherz^.

Von E. Friedberger und S. Mita (Tokio).

Mit 2 Skizzen und 18 Eurren im Text.

(Eingegangen bei der Eedaktion am 24. April 1911.)

Bisher ist es nicht gelungen, bei Ealtbliltern die Bildung
von Anti-Eiweifikdrpern nachzuweisen. Dafi gegendber dem
Warmblflter bier prinziell ein Unterschied besteht, ist von
vornherein kaum anzunehmen. Offenbar ist aber die Anti-
kbrperproduktion bei dem trdgen Stoilwechsel der Kaltblflter
eine so geringe, dad sie sich dem Nachweis durch unsere
Reagenzglasmethoden eher entzieht.

Eine viel feinere Methode zum Nachweis der Bildung
speziell von Anti-Eiweifik5rpern ist nun, wie bekannt, die
aktive und passive Anaphylaxie. Sie zeigt auch da, wo die
Methoden der Prdzipitation und Komplementablenkung vdllig
im Stiche lassen, durch die charakteristische Wirkung des
Reinjektionsserums bei der aktiven Anaphylaxie und durch
die Uebertragnngsmdglichkeit bei der passiven Anaphylaxie
die Bildung von Anti-Eiweifikdrpern an.

Es schien uns von Interesse, zu nntersuchen, ob unter
entsprechenden Bedingungen auch beim Kaltbliiter durch diese
empfindlichere Methode Anti-Eiweifikdrper zur Erscheinung
gebracht werden kdnnen. Wir wllhlten als Versuchstier aus-

1) Die Resultate sind vorgetragen und die Eurren, aue denen die
hier publizierten Abschnitte stammen, Bind zum Teil demonstriert auf der
Naturforscherrersammlung in Ednigsberg L Pr., September 1910 (Hygien.
Sektion), ausfiihrlicher auf dem Mikrobiologentag in Dresden 1911.

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Uebcr Anaphylaxie. 363

schliefilich den Frosch, und zwar Rana esculenta und Rana
temporaria.

Die Mdglichkeit, bei niederen Tieren Anaphylaxie zn er-
zeugen, wSxe nicbt nur an sich interessant gewesen, sondern
sie h9,tte zugleich die Gelegenheit gegeben, bei Tierspecies,
die leichter als Warmbltiter eine Reihe operativer Eingriffe
flberstehen, weitere experimentelle Uniersuchungen anzustellen,
um tiefer in das Wesen des Ph&nomens einzndringen. Nach-
dem bereits im Jahre 1909 der eine Ton uns (Friedberger)
mit Castelli an Winterfrdschen Untersuchungen angestellt
hatte, die jedoch zu keinem positiven Resultat fOhrten, haben
wir im Frfibjahr des Jabres 1910 die Versuche wieder auf-
genommen, in der Erwartung, beim Sommerfrosch mit dem
regeren Stofifwechsel eher zn einem positiven Resnltat zu ge-
langen. Nachdem ja bei alien den SSugerspecies, die man
irrigerweise frflher ftlr refrakt^ gehalten hat, die Anaphylaxie
doch ausznlbsen war, war es nicbt einzusehen, weshalb bei
den Ealtbldtern nicbt die gleicben Bedingungen vorliegen
sollten. Andererseits durfte man naturgem&fi beim Frosch
nicbt ein Symptomenbild erwarten, wie wir es beim Meer-
schweinchen zu sehen gewohnt sind. Sind ja doch schon die
Mehrzahl der Warmbliiter in keiner Weise gleich empfUnglich
wie jene Tierspecies. Die Kaltblbter vertragen wohl an sich
schon i. R. von Giften und wohl auch von dem Anaphylaxie-
gift mehr. Dann wirkt bekanntlich das Anaphylatoxin in
hervorragendem Malle auf die Respiration, und gerade die
Lunge spielt ja beim Frosch mit seiner Hautatmung natur-
gemSfi nur eine untergeordnete Rolle. So ist es verstUnd-
lich, dafi man bei der Anaphylaxie des Frosches ganz
andere Symptome als bei der Warmblflteranaphylaxie zu er¬
warten hat.

Nach mancherlei Fehlschl&gen ist es uns regelm^ig ge-
lungen, beim Frosch Anaphylaxie durch folgendes Behand-
lungsschema zu erzeugen:

Die gesunden Frdsche erhalten 0,1—0,5 Hammelserum
in die Banchvene oder in den RQckenlymphsack. 1—4 Wochen
spilter erfolgt die Reinjektion des homologen Serums intra-
vends.

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364

E. Friedberger und S. Mita,

Man sieht dann, dafi diese Eiweifidosis, die voni unvor-
behandelten Tier glatt vertragen wird, bei dem sensibilisierten
Frosch ein ganz bestimmtes charakteristisches Krankheitsbild
bedingt. Die Tiere werden sehr bald nach der Injektion auf-
fallend matt, atonisch, sie strecken alle Beine von sich, der
Kopf sinkt nach unten. Bald vermag das Tier nicht mehr zu
httpfen und, auf den Rdcken gelegt, bleibt es unbeweglich
liegen. Tod in wenigen Minuten, wie beim Meerschweinchen,
wurde n i e beobachtet. Das ist auch beim Kaltblflter kaum zu
erwarten. Dagegen stirbt die Mehrzahl der reinjizierten Tiere
bereits in den ersten 12—24 Stunden nach der Reinjektion.

Wenn man nun die Reinjektion am gefensterten Frosch
vornimmt, so sieht man ^ufierst charakteristische Vertlnde-
rungen im Verhalten des Herzens. Es tritt alsbald eine
bedeutende Pulsverlangsamung ein, deutliche Irregularitfit,
Herzperistaltik und schlieBlich Herzstillstand in Diastole.

DaB tibrigens auch bei WarmblQtern schon in dem ersten
Stadium der anaphylaktischen Vergiftung gleichfalls schwere
Zirkulationsstdrungen bestehen mtissen, zeigen die Pulskurven
von anaphylaktischen Kaninchen, die Friedberger in Ge-
meinschaft mit Grbber auf dem Mikrobiologentag 1910 de>
monstriert hat (XI. Mitteilung fiber Anaphylaxie). Wenn also
auch bei Warmblfitern schlieBlich die Wirkung des Anaphyla-
toxins auf die Atmungsorgane das Symptomenbild beherrscht,
so wirkt das Gift doch zweifellos, wie besonders H. Pfeiffer
schon frfiher betont hat, intensiv auf die Zirkulation ein.

Im Nachstehenden folgen einige Protokolle von Ana-
phylaxieversuchen am Frosch.

Versuch A,

Bana temp., cJ, 35 g, vor 7 Tagen mit 0,1 Hammelserum intravenos vor-

behandelt.

6. VI. 10. Pulsfrequenz vor der Reinjektion 75 pro Minute.

6** 0,25 ccm Hammelserum intravenos reinjiziert.

6“ Pulsfrequenz 70.

Pulsfrequenz 52.

7* Herzaktion sehr schwach und unregelmaSig, Pulsfrequenz 30,
Tier bleibt mit langgestreckten Beinen liegen. Tonus verschwunden,
reagiert nicht mehr auf mechanische Beize.

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Ueber Anaphylaxie.

365

Kontrolle A:

Eana temp., 35 g, normalea Tier.

6. VI. 10. Pulafrequenz vor der Injektion 57 pro Minute.

6^’ 0,4 ccm Hammelserum intrarends injiaiert.

6*** Pulsfrequenz 65, Herzaktion unverandert.

6** Pulsfrequenz 65.

7** Pulsfrequenz 65, Herzaktion unTei&Ddert, Tier rea^ert lebhaft
auf mechanische Bme.

Versuch B.

Rana temp., 35 g, vor 9 Tagen mit 0,1 Hammelserum intrarends ror-
behandelt.

17. VI. 10. Pulsfrequenz ror der Beinjektion 50 pro Minute.

11*** 0,5 ocm Hammelslhim intrarenOs reinjiziert.

11“ I^frequenz 35.

11“ Pulsfrequenz 34.

12** Systolische und diastolische Bew^ung der Eammer sehr be-
Bcbr&nkt

Tier liegt ohne Tonus auf dem Biicken, reagiert nicht mehr
auf mechanische Bdze.

Kontrolle B:

Rana temp., (S, 30 g, normales Tier.

17. VL 10. Herzbew^ung vor der Injektion 66 pro Minute.

11“ 0,5 Hammelserum intravends injiziert.

11“ Pulsfrequenz 60.

12* Tier reagiert lebhaft auf mechanische Reize.

Herzbew^ung unverandert.

Versuch C.

Rana temp., 40 g, vor 9 Tagen mit 0,1 Hammelserum intravends vor-
behandelt.

17. VI. 10. Pulsfrequenz vor der Rdnjektion 60 pro Minute.

10“ 0,5 ocm Hammelserum intravends rdnjiziert
11“ Pulsfrequenz 50, Tier 1^ sich matt nieder, vie gel&hmt, reagiert
sehr langsam auf mechanische Reize.

11“ Pulsfrequenz 40.

12* Reagiert nicht mehr auf Reize. Pulsfrequenz 25.

Kontrolle C:

Rana temp., 35 g, normales Tier.

17. VI. 10. Pulsfrequenz vor der Injektion 66 pro Minute.

11* 0,5 ccm Hammelserum intravends injiziert.

11“ Pulsfrequenz 66.

Kdrperhaltung, Reaktion auf mechanische Reize normal.

12* Pulsfrequenz 67, keine Symptoms.

ZeiUehr. f. Immanltltsfonchnnf. Orig. Bd. Z. 24

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366

E. Friedberger und 8. Mita,

Versuch D.

Kana temp., 40 g, ror 10 Tagen mit 0,1 Hammeleenun intravenos ror-
behandelt

18. VI. 10. Pulsfiequenz vor der Beinjektion 62 pro Minute. )

12'* 0,5 HammeLaemm intravoads reinjiziert.

12** Herzbew^ung, inabesondere diastoliache Bewegung der Kammer
aehr beachrankt.

12" Polsfrequenz 40.

Tier blttbt wie gelfihmt liegen, reagiert sehr langsam auf
mechaniache Beize.

Eontrolle D:

Rana temp., (J, 40 g, nonnalea Her.

18. VI. 10. Pulaftequenz Tor der Injektiaa 66 pro Minute.

12** 0,5 com Hammelserum intravenOa injizieit.

12** Pulsfrequenz 66.

12*’ Pulafrequenz 66.

Tier iat ganz munter, kdne Symptome.

Die ausgesprochenen Erschemungen von seiten des Herzens
veranlaBten uns nun, die Einwirknng des Anaph^latoxins auf
die Zirknlation dieser Tierspecies etwas nfther zu analjsieren.
Zun&chst haben wir mit Hilfe der Engelmannscb^n Me-
thode die Pnlskurve beim aktiven anaphylaktischen Frosdi im
Vergleich zum normalen nach der Injektipn mit Hammelserum

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Ueber Anaphylaxie. 367

aufgezeichnet. Die VersuchsanordnuDg demonstriert die vor-
stehende Skizze').

Knrve la—c zeigt die Wirkung des normalen Hammel-
serums auf den onvorbehandelten Frosch.

Die einzige Folge der Injektion ist eine minimale Ver-
langsamung der Pulsfrequenz und eine geringe Yergr5fierung der
Exkursion. Das zeigen die beiden Kurvenabschnitte a nnd b,
die das Verhalten des Ventrikels vor der Injektion und
472 Minuten nachher darstellen. Die absolute UnschUdlichkeit
der von uns angewandten Hammelserummenge fiir den Frosch
ergibt sich daraus, daB auch weiterhin keine Beeinflussung des
Herzens statt hatte. Dieser Versuch dauerte fiber 15 Stunden,
und noch zu dieser Zeit (c) haben wir nur eine gewisse Ver-
langsamung des Pulses und eine geringe Druckerniedrigung,
das zeigt fibersichtlich die folgende Tabelle.

Versuch 45 (Kurve 1). [15. IX. 10.]

Normalee Tier. Rana temp., 40 g, erhiilt 0,5 Hammelserum intra-
venSs. R^strieruDg der Bew^ung des freigel^ten Ventrikels mit dem
Engelmannschen Apparat.

1

Zeit

Verhalten des Pulses

Zahl
pro Min.

Hohe

1

Eigenschaften

Vor der Injektion

1'

53

7,5

3'

53

7,5

5'

53

7,5

regelmafiig

Nach der Injektion rait

3'

45

8,5

1

0.5 Hammelsenim

10*

44

8,5

intravends

20'

45

8,5

regelmaUig

890'

37

6,0

fy

900'

37

6,0

1 »

b.

Kurve 1.

^1) Nach Heinz, Handb. d. exper. Pathol, u. Pharm., Jena (Gustav
Fischer) 1905.

24*

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368

E. Friedberger und S. Mita,

Ganz anders ist das Verhalten des Ventrikels bei Re-
injektion von Hammelserum in einen zuvor pr&parierten
Frosch.

Vereuch 44 (Kurve 2). [15. IX. 10.]

Prapariertes Tier, Sana temp., J, 30 g.

Vorbehandlung: 0,5 Hammelserum intraTends

Zeit: 35 Tage

Reinjektion: 0,5 Hammelserum intravends.

Verhalten des Pulses

jjdt

Zahl

Hdbe

Eigenschaften

Vor der Reinjektion

1'

44

1

6,5

1

3'

43

6,5

5'

42

6,5

regelmaSig

Nach d. Reinjektion

1'

45

5,5

mit 0,5 Hammel¬

4'

44

5,0

serum intravenos

14'

42

4,0

82'

31

2,5

106'

30

1,5

130'

22

1,5

unregelmiillig; Diastole verlangert

144'

26

1,5

unregelmafiig; Diastole verlangert

153'

22

1,5

unregelmiiQig

157'

18

1,5

unregelmiillig; Diastole verlangert

if /j f ^ /■» (V y t

b.

^^4 Hu

c.

Kurve 2.

Wir bringen dann noch einen Versuch, in dem Vorhof-
und Ventrikelkontraktionen zugleich registriert warden. Der
Versuch zeigt, daB bei der aktiven Anaphylaxie sowohl eine
Schadigung des Vorhofes wie des Ventrikels statthat.

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Ueber Anaphylaxie.

369

Versuch 40 (Kurve 3). [9. VIII. 10.]
Prapariertes Tier, Bana temp., cf, 30 g.

Vorbehandlung: 0,5 Hammelserum intravenos
Zeit: 8 Tage

Reinjektion : 0,5 Hammelserum intravenos.

1

1

Zeit

1

Verhalten des Pulses

Vorhof

! Kamm?r

i Zahl !

Hohe

Zahl

Hohe

Vor der Reinjektion

P

28

4,5

28

1,5

5'

28

4,5

28

1,5

Xach der Reinjektion

1'

33

2,5

33

10'

32

1,5

32

2,0

11'

22

0,5

22

2,1

Aus den vorhergehenden Versuchen ergibt es
sich also, daB sich auch der Frosch mit Sicher-
heit anaphylaktisieren l§.Bt unter analogen Be-
dingungen, wie wir sie zur Erzeugung der Ana¬
phylaxie beim Warmbliiter anwenden. Als cha-
rakteristisches Symptom haben wir neben den
schweren allgem einen Erse he in un gen eine Be-
einflussung der Zirkulation, die wir auch
graphisch zur Darstellung bringen konnten.

Es erschien uns nun von Interesse, auch die Wirkung des
im Reagenzglas gebildeten Anaphylatoxins beim Frosch zu
unter suchen.

Mit Rttcksicht auf die intensive SchUdigung, die offenbar
das Herz bei der aktiven Anaphylaxie des, Frosches erfahrt,
haben wir Versuche angestellt, in denen wir Anaphylatoxin auf
das isolierte Froschherz einwirken lieBen. Wir bedienten
uns dabei der Versiichsanordnung von Straub^). Es wird in
die eine Aorta des Froschherzens nach DurchstoBung der

1) Arch. f. esperim. Pathol., Bd. 45.

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37G

E. Friedberger und 8. Mita,

AtriO'Ventrikalarklappe eine Glaskanflle eingebunden. Alle
anderen Gefftfie warden unterbunden, oberhalb der Unter-
bindungsstelle wird dann durchschnitten, das isolierte Herz darch
die Kanttle mit Ringerldsung grflndlich ausgewaschen, bis alias
Blut entfernt ist, dann wird die Herzhdhle von nenem mit einer
in den einzelnen Versuchen stets gleichen Menge von Ringer*
/ 15sung gefQlIt, in einer fenchten Kammer frei aufgeh&ngt.
Die Herzspitze wird mit einem Schreibhebel verbnnden, der
die Herzkontraktionen auf eine berufite Trommel flbertrfigt
(Skizze 2). Nachdem unter dem Einflufi der Ringerldsung die
Kobtraktionsverh&ltnisse des normalen Herzmoskels festgestellt
sind, wird die Ringerldsung herausgenommen and die zu
untersnchende FlQssigkeit in unseren Versuchen, also das
Anaphylatoxin, in das Herz eingefflllt Die vermittelst des
Schreibhebels zur Darstellung kommenden Ver&nderungen der
Kontraktion des Herzens zeigen unter dem Einflufi der ein*
gefdhrten FlQssigkeit entstandene Schfidigungen des Organes an.
Die nachstehende Skizze demonstriert die Versuchsanordnung.

Skizze 2. Versuchsanordnung nadi Straub, isolieites Herz; f Eanule.

Benutzt warden zu diesen Versuchen ansschliefilich die
Herzen gesunder, normaler Frdsche. Nachdem das Verhalten
der Kontraktion bei der FQllung mit Ringerldsung ermittelt
war, geschah die NachfQllung ansschliefilich mit Anaphylaitonn,
das durch Normalmeerschweinchensernm aus Prfizipitaten abge*
spalten war. Die PrQzipitate ihrerseits waren durch Einwirkung

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Ueber Anaphylaxle.

371

Von Antihammel-Kaninchenserum auf Hamtnelserum gewonnen
und vor der Digerierung sorgfaltig gewaschen. Es wurden zu
unseren Versuchen durchgehend nur solche Komplement-
abgdsse verwandt, die in einer Dosis von 4,0 ccm normale
' Meerschweinchen akut zu tdten itn stande waren. In diesen
'Versuchen wirkte also auf das normale Froscbherz normales
Meerschweinchenserum ein, das zuvor mit PrSzipitat aus
HammeleiweiB und AntihammeleiweiB in Kontakt war. Deshklb
gal,t es, zun^chst einmal festzustellen, welchen EinfluB alle
diese Komponenten all ein auf das Froscbherz auszuUben im
stande waren. Dann muBte natbrlich auch geprflft werden, wie
sich ein AbguB verbielt, der unter sonst gleichen Bedingungen
mit inaktivem Normalmeerschweinchenserum hergestellt war,
also unter Bedingungen, in denen sich kein Anaphylatoxin aus
den Pr^ipitaten abspaltet.

In zahlreicben Versuchen konnten wir feststellen, daB das
- normale aktive Meerschweinchenserum all ein auf das isolierte
Froscbherz keine ausgesprochene Schkdigung ausfibt.

Als Beispiel fdhren wir einen derartigen Versuch an.

Vereuch E (Kurve 4). [5. VII. 10.]

Normales Herz, Bana temp., (J, 32 g.

Fiillung des Herzens
(und Zeit der Einwirkung)

Zeit

Verhalten des Pulses

Zahl I

Hohe

Eigenschafteii

Eingerldsung (Ky)

2'

36

12,0

6'

40

11,0

KV

41

11,0

regelmaSig

Komplement (50')

2'

46

13,5

regelmafiig

6'

44

14,0

yy

13'

45

13,5

yy

30'

44

10,5

yy

50'

44

11,0

ff

b.

Kurve 4.

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372

E. Friedberger und S. Mita,

Obwohl wir die Prflzipitate zur Giftabspaltung nur mit
geringen Mengen von Antigen und relativ kleinen Dosen von
Antiserum bereiteten und zudem vor dem Zusatz des nor-
malen Meerschweinchenserums durch Waschen die Reste dieser
beiden Komponenten vollst^ndig zu entfernen suchten, so
haben wir es doch fQr notig gehalten, auch mit den Mutter-
substanzen des Pr^zipitates allein zun&cbst einmal Versuche
am isolierten Froschherzen anzustellen.

Es folgt ein Versuch, in dem nach der Ringerlbsung das
Herz mit unverdflnntem inaktivierten Normalhammel-
serum gefiillt wurde. Abgesehen von einer minimalen Puls-
beschleunigung ergibt sich keine Beeinflussung.

Versuch A (Kurve 5). [2. VII. 10.]
Nonnales Herz, Rana temp., (J, 30 g.

Fullung des Herzens

Zeit ^

Verhalten des Pulses

(und Zeit der Elinwirkung)

Zahl

Hohe

Eigenschaften

Bingerldsung (10 Min.)

1'

34

11,0

6'

34

11,0

10'

34

11,0

regelmafiig

Normales Hammelsenim

1'

36

11,5

regelm^ig

56" (20 Min.)

20'

41

11,0

ff

a. b.

Kurve 5.

Ebensowenig tibt das inaktivierte Kaninchen-Antihammel-
serum einen wesentlichen EinfluB auf das normale Frosch-
herz aus.

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Ueber Anaphylaxie.

373

Vereuch B (Kurve 6). [4. VII. 10.]

Normales Herz, Rana temp., (^, 40 g.

FiilluDg des Herzens

Zeit

Verhalten des Pulses

(iind Zeit der Einwirkung)

Zahl

Hohe

Eigenschafben

Ringerlosung (10 Min.)

1'

40

11,0

6'

40

11,0

10'

40

11,0

regelmafiig

Kaninch.-Hammeliramun-

1'

34

12,0

serum 56® (30 Min.)

20'

34

12.5

; 30'

34

12,0

regelmafiig

a. b.

Kurve 6.

Wesentlicher noch als die vorhergehenden erschienen uns
die Kontrollversuche, in denen wir Abgiisse von mit inakti-
viertem normalen Meerschweinchenserum digerierten Prfizipi-
taten prflften.

Da3 auch diese Abgiisse, denen ja das Anaphylatoxin
vollst^ndig mangelt, ohne erheblicben EinfluB waren, dafiir
m6ge als Beispiel der folgende Versuch dienen.

Versuch 12 (Kurve 7). [9. VII. 10.]

Normales Herz, Bana escul., 40 g.

Fullung des Herzens
(und Zeit der Einwirkung) |

Zeit

Verhalten des Pulses

Zahl

Hohe 1

Eigen schaf ten

Ringerlosung (10 Min.)

r

47

9,0

6'

43

11,0

10'

43

11,0

regelmaBig

AbguB aus
ftiizip. Serum 2,0

1'

46

13,5

Hammelserum (1:10) 2,0

20'

45

12,5

regelroaSig

Meerschw.-Serum (56 ®)

30'

45

11,5

regelmafiig, keine Ver-

4,0 (30 Min.)

iinderung

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374

E. Friedberger und S. Mita,

Auf Grund aller dieser Kontrollversuche sind wir zu
dem Schlusse berechtigt, dafi das normale Meerschweinchen-
serum, das Antihammel-Kaninchenserum, das normale Hammel-
serum und das inaktivierte Meerschweinchenserum, das mit
Pr&zipitaten digeriert war, keinen scb&dlichen EinfluB auf das
normale Froschherz ausiiben. Damit waren die Bedingungen
gegeben, um auch im Meerschweinchenversuch wirksames
Anaphylatoxin in seiner Wirkung auf das Froschherz n&her
zu studieren. Wir bringen im nachstehenden eine Reihe der-
artiger Versuche.

Wir sehen, dafi bald nach der Einftlllung des Anaphyla>
toxins in das Froschherz an Stelle der Ringerlbsung der Puls
periodisch auszusetzen beginnt. Die Diastole wird fortlaufend
grbfier, schliefilich haben wir zeitweiligen Herzstillstand.

Vereuch D (Kurve 8). [5. VII. 10.]
Normals Herz, Rana temp., cf, 30 g.

Fiilluug des Herzens
(und Zeit der Ein>virkung)

Zeit

Verbal ten des Pulses

Zahl

Hohe

Eigenschaften

Ringerlosung (10 Min.)

1'

34

12,5

6'

35

11,0

regelmaflig

10'

36

11,0

Anaphylatoxin

1'

36

12.0

Aussetzen des Pulses

Priizip. ^rum 2,0

30'

22

ii;5

If

Hammelserum (1:10) 2,0

47'

25'' dauernd. diast. Stillst.

Komplement 4,0

50'

10

14,0

Unregelm. Diast. verlang.

Gnippenbildung

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Ueber Anaphylaxie.

376

TT-rnrrirrnnmir?nrTirrTi fni i ii r!i! trn i i i ni iiirri n T

a. b.

Kurve 8.

In dem folgenden Verauch wurde zuerst mit Ringerldsung,
dann mit normalem Meerschweinchenserum geprflft

Beide Flflssigkeiten sind ohne Einflufi auf das Froschherz.
Sehr bald nach der Einffihrung des Anaphylatoxins aber haben
wir genau wie im vorigen Verauch eine bedeutende Verlang-
samung des Pulses und hier auch schliefilich langdauernden
diastolischen Stillstand.

Verauch G (Kurve 9). [6. VII. 10.]
Normales Herz, Raua temp., <^, 30 g.

Fullung des Herzens

Verbal ten des Pulses

(und Zeit der Einwirkung)

zjGIv

Zahl

H5he

Eigenschaften

Ringerlosung (10 Min.)

1'

6'

35

36

8,0

8,0

, 10'

36

8,0

r^elm^ig

Normal. Meerschweirichen-

1'

36

8,0

serum (10 Min.)

1 10'

36

8,0

r^elmaSig

Anaphylatoxin

1 1'

36

7,0

Prazfp. Serum 2,0
Hammelserum (1 :100)2,0
Komplement4,0 (45 Min.)

; 6'
10'
ir

19'

30'—45'

17

9,0

Diastole verl^gert
iAussetzen des Pulses
liiber 40' dauemder dia-
stollsciier Stillstand

50" wahrender diastolisch.
Stillstand

langdauemde Unterbrech.
der Herzkontraktion, ab
und zu Herzsystole

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376

E. Friedberger uiid S. Mita,

Kurve 9 a.

\

Kurve 9 b.

In dem folgenden Versuch erfolgt unmittelbar nach
der Einfiihrung des offenbar diesmal besonders wirksamen
Anaphylatoxins in das Froschherz die charakteristische Ver-
anderung der Pulskurve und sehr bald eine Reihe sehr lange
dauernder diastolischer Stillstande.

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Ueber Anaphylaxie.

377

Vereuch F (Kurve 10). [5. VII. 10.]
Normales Here. Rana temp., (J, 30 g.

Fiillung des Herzens

Zeit

Verbal ten des Pulses

(imd Zeit der Einwirkung)

Zahl

H6he

Eigenschaften

Bingerlosung (lO')

1'

40

12,5

6'

41

12,5

10'

41

12,5

n^elmafiig

Anaphylatoxin

1'

27

15,0

Prazip. Serum 2,0

7'

7

16.5

Aussetzen des Pulses

Hammelserum 2,0(1:100)

11'

30'' dauemder diast. Still-

Komplement 4,0

stand

(350

21'—35'

langdauernde Unterbrech.
der Herzkontraktion; ab
und zu Herzsystole

ririirrirmniinirTTiii n ;ii:irriiM»:rii!ii

/"A

imiinii nniirriFnfjriTTMir!

^ Si ! I'iiiiiiiiiiiiiiiiiniiiiiii

Gift o'

PI II ■■ 1 III IIII11 nil 11 iir II1 • 1 II rill II III

1 IIII iiiiiMiIIIII IIiiiinill! 1 •

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t>

ll II

Kurve 10.

Das mit ADaphylatoxin vergiftete Froschherz erholt sich
sehr schnell wieder, sobald man nach Entfernung des Ana-

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378

E. Fried berger und S. Mita,

phylatoxins mit Ringerldsung auswd^cht. Die Auswaschang
mufi jedoch l&ngere Zeit mit stets erneuter L5suDg vorge-
nommen werden, dann schreibt nachber das Herz sowohl mit
Ringerldsung als auch bei Einfflllung von inaktivem Abgufi
wieder fast vollkommen wie das normale. Das zeigen die
drei folgenden Versnche.

Versuch 14 (Kurve 11). [9. VII. 10.]

Normales Herz. Bana escul., ^ E-

FiilhiDg des Herzens
(und Zeit der Einwirkung)

Zeit

Verhalten des Pulses

Zahl

Hohe

Eigenschaften .

Kingerlosung (10')

2‘

43

13,5

6'

44

13,5

lO'

45

'13,5

i^elniafiig

Anaphylatoxin

2'

35

11,0

unregelm^ig. Diastole ver-

Hammelserura 2,0 (1; 100)

l^gert

Kan.-Immunserum 2,0

6'

23

13,0

Diastole sehr verl^gert

Komplement 4,0

12' 16"

1

81" wahrend. diast. Htillst.

(220

15' 25"

120" „

19' 8"

104" „

21' 57"

135" „

1

Gnippenbildung

35' lang mit Ringerloeiing
wiedernolt ausgewaschen

1

I

1

Abgufi aus Meerschwein-

4'

regeltnafiig

chensenim (56®)

(4')

i

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Ueber Anaphylaxie.

379

Vereuch 11 (Kurve 12). [9. VII. 10.]
Normales Herz. Bana escul., (f, 50 g.

Fiillung des Herzens
(und Zeit der Einwirkung)

Zeit

Verhalten des Pulses

Zahl

H5he

Eigenschaften

Ringerlosung (l(y)

2'

50

13,0

6'

49

12,0

10'

50

10,5

regelmafiig

Anaphylatoxin

2'

24

11,0

Distole sehr verlangsamt

Prazip. Serum 2,0

6'

23

11,0

1

Hammelserum 2,0(1:100)
Komplement 4,0

9'

9' 10"

iinregelmafiig

49" dauemder diast. Stillst.

(21')

10' 31"

If ff ff

13' 20"

'JO ff ff ff

14'

15' 19"

34

13,0

i

62" w^render diast. Stillst

16*20"

28

13,0

.

15' mit Ringerlosung
wiederholt ausgewascnen

Abgu6 aus

2'

55

15,0

Prazip. Serum 2,0
Hammelserum 2,0 (1:100)

4'

55

14,0

Meerschw.-Ser. (56®) 4,0
(40

*

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Kurve 12.

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380

E. Friedberger und S. Mita,

Versuch 9 (Kurve 13). [8. VII. 10.]

Normales Herz. Rana escul., c^, 44 g.

Fiillung des Herzens

Zeit

Verhalten des Pulses

(und Zdt der Einwirkung)

Zahl

Hohe

E^genschaften

Bingerldsung (10')

1'

54

6,0

6'

54

6,0

i(r

51

6,0

regelmafiig

Anaphylatoxin

V

39

1—2,5

unr^elm^ig

Prazip. Serum 2,0
Hammelserum 2,0 (1:100)
Eomplement 4,0
(12')

i(y

Idiast. Stillstand

1

Waschen

3'

AbguQ aus

18'

30

20,0

regelm^ig

Pr^ip. Senim 2,0
Hammelserum 2,0 (1:100)
Meerschw.-Serum (56®) 4,0
(18')

b.

Kurve 13.

Es spricht heute vieles dafiir, dafi das Anaphylatoxin auf-
zufassen ist als ein intermedi^res Produkt der hydrolytischen
Eiweifispaltung. Wir haben deshalb auch den Einilufi ver-

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Ueber Anaphylazie.

381

schiedener Peptonarten des Handels and eines uns in liebens-
wtlrdiger Weise von Herrn Prof. Abderhalden znr Ver-
fdgung gestellten reinen Seidenpeptons anf das isolierte Frosch-
herz nntersncht Wir kOnnen bier in Bestfttigung filterer Ver-
snche von A. Heffter^) tatsfichlich eine stark giftige Bin-
?rirknng konstatieren, did aber doch an Intensitftt bedentend
hinter der des reinen Anaphjlatoxins znrflcksteht. Das wider-
spricht nicht der Tatsache, dafi im TierkOrper das Pepton
Witte unter Umstftnden eine intensivere, mit der des Ana-
phylatoxins nahezu identische Wirkung ausQben kann. Im
Organismns kann eben ans dem Gemisch, das wir als Pepton
Witte bezeichnen, noch ein weiterer Abbau der hSheren Spalt-
produkte in das eigentliche Anaphylatoxin dnrch die Mit-
wirknng des Organismns erfolgmi; dafflr sprechen die von uns
angestellten Versuche, wonach auch dnrch Digeriernng mit
Komplement im Reagenzglas das Wittepepton bezw. einzelne
Fraktionen eine erhbhte Toxizitfit erhalten. Im von Bint v5llig
l)efreiten Froschherz sind natflrlich die Bedingnngen ftlr eine
weitere Aufspaltung kanm gegeben. In diesem Sinne aber
sprechen nnsere Versuche mit Anaphylatoxin auch dafOr, daB
wir im Reagenzglas tats&chlich ein fertiges Gift Tor uns haben,
das, wie schon Friedberger frdher hervorgehoben hat, im
Organismns ohne weitere VerBnderungen zu erfahren, seine
giftige Wirkung primftr entfalten kann.

Vereuch 18 (Kurve 14) [12. VII. 10] mit 5 Proz. Wittep^ton.
Normalee Herz. Bana escul., (S', 40 g.

Follung des Herzens
(und Zeit der Einwirlcung)

Zeit

Verhalten des Pulses

Zahl

Hdhe

i^enschaften

Ringerldsung (10^)

1'

28

6'

28

4,0

10'

28

4,0

regelm&fiig

5 Proz. Wittepepton in

1'

28

4,5

Ringerldsung (24')

7'

&st 2'* dauemder diast.

StiUstand

22'

1' dauemder diast. Still-

stand

24'

6

5,0

Waschen

30'

Bingeridsung (16')

16'

25

5,5

regelmafiig (Erholung)

1) Arch. f. expeiim. Pathol., Bd. 29, p. 50.

Zaittchr. f. Immimltlttfonchiiiig. Orif. Bd. X. 25

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382

E. Friedberger und S. Mita,

rriri’iirnni n’liMii

'liliiliiiHliliiiiii Iiiniiiiii"iiriirl[ii' . II 'll|.;i Jli, U llli!

mmiiimmMmmiiimmmiwjiiWM

iL/L-JlJl iL-fl

Kurve 14.

Versiich 19 (Kurve 15) [13. VII. 10] mit 3 Proz. Wittepepton.

Normales Herz, Kana escuL, (J, 45 g.

Fullung des Herzens
(und Zeit der Einwirkung)

Zeit

1

Verbal ten des Pulses

Zahl

Hohe

Eigenschafteu

Kingerlosung (10')

1'

48

10,0

6'

48

10,0

10'

48

10,0

regelmafiig

Wittepepton 3 Proz. in Rin-

1'

52

10,0

gerlosung (53')

10'

34

12,0

unregelmalSig

25'

20

12,5

y j

30'

11

12,0

unregelmafiig. Aussetzen

des Pulses

53'

diastolischer Stillstand

Waschen

15'

1

Ringerlosung (10')

10'

40

8,0

regelmaSig

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Ueber Anaphylaxie.

383

Kurve 15 a.

Kurve 15 b.

25*

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384

E. Friedberger und S. Mita,

Versuch 21 (Kurve 16) [13. VII. 10] mit 3 Proz. Seidenpeptoo.
Normales Here, Rana temp., (J. 45 g.

Fiillung des Herzens

1

Zeit ,

Verbal ten des Pulses

(und Zeit der Einwirkung)

Zahl

Hohe

Eigenschaften

Eingerlosung (lOQ

1'

60

8,5

6'

58

7,0

10'

58

6,5

regel mafiig

Seidenpeptoo 3 Proz. in
Bingeridfiung (30')

1'

9'

oo

CO (M

1 7,5

i 4,5

unregelinafiig

13'

1

iiber 30" dauemder dia-

stolischer Stillstand

30'

11

3,0

unregelmaUig

Waschen

20'

Ringerlosung (10')

10'

30

12,0

regelmaSig

Kurve 16.

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Ueber Anaphylaxie.

385

Vereuch 22 (Kurve 17) [14. VII. 10] mit 1 Proz. Seidenpepton.
Normales Herz. Kana escul., (j, 40.

Flillung dee Herzens

Zeit

1

Verbal ten des Pulses

(iind Zeit der Einwirkung)

Zahl

Kobe

Eigenschaften

Ringerlosung (10'?

1'

43

7.0

6'

44

8,0

10'

44

8.0

regelniaiiig

Seidenpept. (Abderhalden)

1'

48

7,0

1 Proz. in Ringerlosung

3' 1

21

7.0

unregelmafiig

(50')

1 20' !

21

7,0

1 HO' i

14

8,0

unregelmaSig, Aussetzen

des Pulses

40' 1

14

8,0

Aussetzen des Pulses

Auswaschen

Ringerlosung

1 50' j

i

41

4,0

Erholung, r^elm^ig

Kurve 17.

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386 E. Friedberger und S. Mita,

Vereuch 20 (Kurve 18) [13. VII. 10] mit 3 Proz. Pepton Schering.
Normales Herz. Rana temp., 35 g.

Fiilluiig des Herzens

Zeit

Verbal ten des Pulses

(imd Zeit der Einwirkung)

Hohe

Zaiil

Eigenschaften

Ringerlosung (10')

V

40

6,5

\ 6'

41

6,5

10'

42

6,5

regelmafiig

Pepton Schering 3 Proz. in

1'

63

8,0

Ringerlosung (35')

15'

22

7,0

Diastole verlangert
unr^elm^ig, Diastole yer-

20'

18

10,0

1

langert

1 25'

10

11,0

unr^elmaBig

1 35'

11

11,0

unr^elmafiig, Diastole ver¬
langert

Auswaschen

15'

Ringerlosung (5')

! 5'

60

3,5

Erholung, regelmaBig

Kurve 18.

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Ueber Anaphylaxie.

387

Die Methode der Untersuchnng an isolierten Froschherzen
nach Straub hat sich uns fQr das Studiam des Anaphyla-
toxins sehr bewfihrt; wir zweifeln nicht, dafi diese Methode
auch fflr andere Toxine anwendbar ist und auch fflr Toxin*
Antitoxinversnche mit Erfolg herangezogen werden kann.
Untersnchnngen darflber mdchten wir nns vorbehalten.

Zusammenfassung.

Die Arbeit enthftlt Untersnchnngen fiber die aktive Ana-
phylaxie des Frosches, sowie fiber den Einflnfi des Anaphyla*
toxins nnd Peptons auf das normale Froschherz.

Resultate: Frdsche lassen sich aktiv anaphylaktisch
machen. Es tritt besonders eine Schftdigung des Herzens in
Erscheinung.

Diese IfiBt sich auch dnrch die En gelmannsche Methode
graphisch zur Darstellnng bringen.

Das im Reagenzglas gebildete Anaphylatoxin fibt einen
ungemein schfidlichen Einflufi auf das isolierte Froschherz in
der Versuchsanordnungvon Straub aus, wShrend dieeinzelnen
Komponenten des Anaphylatoxins unschftdlich sind.

Eine fihnliche Giftwirkung kommt, wie wir im Anschlufi
an filtere Untersuchungen von A. Heffter bestfttigen kdnnen,
auch dem Pepton zu.

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388

Ernst Frankel,

Naehdmek verboUn.

[Aqs dem Staatlichen Hygienischen Institot zu Hamburg; Direktor:
Prof. Dr. Dunbar (Abteilung fdr experimentelle Therapie und

Immunitfttsforschung).]

Ueber Seramhimolyslne.

(II. Mitteilung.)

Von Dr. Ernst FrftnkeL
(EingegaDgen bei der Bedaktion am 24. April 1911.)

I. Ueber das Verhalten des h&molytisohen Komplements bei
wedhselnder Eonsentration.

Id Fortsetzung meiner Studien fiber das Verhalten des
hkmolytischen Komplements babe ich unter anderem anch die
interessanten Angaben von Scbeller einer Nachprftfnng
unterzogen, wonach bei abnehmender Eonzentration des Kom-
plementes die zur Ldsung der roten Blutkbrperchen er-
forderliche Komplementmenge gesetzm&fiig in einem be-
stimmten Verhftltnis zunahm. Da ich nun bei meinen Unter>
suchungen fiber die Komplementteile ebenso wie andere
Forscher optimale Verhftltnisse beim hftmolytischen ProzeB
beobachtet hatte, schien es mir von vornherein wahrscheinlichy
daB auch die Hfimolyse dnrch das Komplement innerhalb be-
stimmter, nach oben wie nach unten begrenzter, optimaler
Konzentrationen verlfinft In der Tat entsprachen die
an einer groBen Anzahl verschiedener, teils gut, teils schlecht
wirksamer Komplemente gemachten Erfahrungen hfiufig dieser
Erwartung. Nur in einer kleinen Anzabl von Komplementen,
etwa bei 10 Proz., war die zur Lfisung nOtige Komplement-
menge annfihernd proportional der Abnahme der Kon-
zentration. In den fibrigen Ffillen ergab sich oft eine untere
Grenze, die nach unten schon fiberschritten war, so daB in
der stfirkeren Eonzentration die Hfimolyse weniger weit ging
als in der schwficheren.

Die Untersuchungen wurden zuerst in der Art vorge-
nommen, daB fallende Mengen des Komplements mit der
gleichbleibenden zweifach Idsenden Ambozeptor-

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Uebei SerumMmoIysme.

389

menge and 1 com 5-proz. Aufschwemmung von Hammelblut-
kdrperchen in drei verschiedenen Konzentrationen bei 10 ccm,
5 ccm and 2,5 ccm Gesamtflflssigkeitsvolumen angesetzt warden.
Die Ablesang der Resnltate erfolgte einmal nach Vi Stnnde
and das zweite Mai nach 2 Stnnden Anfenthalt im Brntschrank
bei 37Dabei erwies es sich als gleichgflltig, ob ich, wie
dies Scheller tnt, jedesmal die zagesetzte Komplement-
menge in 1 ccm Flflssigkeit binzafflgte oder, wie ich das
sp9.ter meist tat, die angesetzten Flhssigkeiten mit der jeweiligen
Komplementmenge anffflllte. Bei der Ablesang nach Vs Stande
war oft ein EinfluH der Konzentration sehr dentlich in dem
von Scheller behanpteten Sinne nachweisbar, so dall bei
2,5 ccm Gesamtvolnmen die HSmolyse weiter ging als in den
beiden anderen Konzentrationen, bei 5 ccm weiter als bei
10 ccm, oft aber anch bei 2,5 ccm Volamen die Hkmolyse nnr
bis zn einer gr5fieren Dosis als bei 5 ccm.

Doch war am diese Zeit noch nicht der Endpankt des
h&molytischen Prozesses erreicht. Dieser ging meist weiter
and gelangte erst nach iVs—2-sttlndigem Stehen bei 37^ zu
einer ann&hernden Konstanz. Nach dieser Zeit war in sehr
vielen F&llen die HUmolyse in alien drei Konzentrationen anf
nahezu demselben Pnnkte angelangt. Hierans ergibt sich
ein wesentlicher EinfluB der Konzentrationen vor alien Dingen
anf den zeitlichen Ablanf der H&molyse. Die wichtige
Angabe dartlber, wann die Ablesang erfolgte, fehlt bei
Scheller.

(Siehe Tabelle I auf p. 390.)

Bei den mit -f- bezeichneten FMlen war die optimale
Grenze nach nnten tlberschritten. Jedenfalls geht ans
der angeftthrten Anzahl von 20 Komplementen,
zu denen in der Zwischenzeit noch eine ganze
Anzahl anderer hinznkamen, eine bestimmte Ge-
setzm&Bigkeit nicht hervor.

Im ganzen hatte es den Anschein, als ob die optimalen
Grenzen bei den besser losenden Komplementen weiter aus-
einandergerttckt werden, so dafi die untere Grenze bei dem
Volamen 2,5 ccm noch nicht tlberschritten war, and infolge-
dessen die Ldsnng hier noch besser erfolgte als bei 5 ccm
Volamen.

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390

Ernst Frankel,

Tabelle I.

Minimale komplett Ideende Komplementdosis bei wechselnder Konxentiation
und zweifacher AmboteptordosiB.

No.

Datum

Qesamt-

volumen

ccm

Komplett 15s.
Komplement¬
dosis nach

2 Stunden

No.

Datum

Oesamt-

Yolumen

ccm

Komplett Ids.
Komplement¬
dosis nach
30 Miauten

Komplett Ub.
Komplemaii-
doBiB nach

2 Stunden

1

6. 11.

10,0

0,06

11

4 . II.

10,0

0,06

0,03

5,0

0,06

5,0

0,03

0,03

2,5

0.06

2,5

+ 0,04

0,03

2

10. II.

10,0

0,02

12

5 . II.

10,0

0,05

0,04

5,0

0,02

5,0

0,04

0,03

2,5

+ 0,03

2,5

0,04

+ 0,04

3

14. II.

10,0

0,05

13

6. II.

10,0

0,03

0.02

5,0

0,05

5,0

0,02

o;o2

2,5

0,05

2,5

0,02

0,02

4

16. II.

10,0

0,05

14

9. II.

10.0

0,03

0,02

5,0

0,05

5,0

0,04

0,02

2,5

0,05

2,5

0,03

0,01

5

21. II.

10,0

0,05

15

11. 11.

10,0

0,03

0,02

5,0

0,03

i

5,0

0,02

0,02

2,5

+ 0,05

2,5

0,01

0.02

6

28. II.

10,0

0,06

16

16. II.

10,0

0,03

0,03

5,0

0,04

5,0

0,02

0,02

2:5

+ 0,06

1

2,5

0,02

0,01

7

1. ni.

10,0

0,05

17

25. II.

10,0

0.03

0,02

5,0

0,05

5,0

0,02

0,02

1

2,5

0,03

2,5

0,04

0,02

8

4. 111.

10,0

0,03

18

2. III.

10,0

0,04

0,03

5,0

0,04

5,0

0,03

0,02

2,5

0,04

2,5

0,02

0,02

9

9. lU.

10,0

0,05

19

14. III.

10,0

0,05

0,04

5,0

0,05

5,0

0,04

0,04

2,5

+ 0,08

2,5

0,03

0,03

10

13. III.

10,0

0,04

20

1 15. III.

10,0

0,08

0,04

5,0

0,04

j

5,0

0,06

0,03

2,5

+ 0,05

2,5

+ 0,08

*4“ 0,05

Auf Shnliche Verhftltnisse stieB ich bei Anwendung
wechselnder Ambozeptordosen. W&hrend bei schwacher
Sensibilisierung (1—4-fache Ambozeptordosis) mitnnter ein
deutliches Optimum der Hftmolyse bei 5 ccm Volnmen
vorhanden war nnd die Lbsung bei 2,5 ccm Volumen erheb-
licb schlechter von statten ging, war bei einem Ueberschufi
(100-fache Ambozeptordosis) auch hier eine weitergehende
Ldsung in der Konzentration von 2,5 ccm zu beobachten.
Doch mbchte ich hervorheben, dafi bei verschiedenen Korn-

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Ueber Seramhilmolyaiiie.

391

plementen die Grenzwerte wechselnde Ergebnisse zeigten, so
dafi ich darauf verzichten mdchte, bindende GesetzmSBigkeiten
aufzustellen.

Tabelle II.

GesamtvolumeD

ccm

Ambozeptoieinheit

Komplett Ideende Komplementdoais
nach 2 Stunden

10,0

1

0,06

5,0

1

0,05

2,5

1

0,05

10,0

2

0,04

5,0

2

0,03

2,5

2

0,05

10,0

4

0,04

5,0

4

0,03

2,5

4

0,04

10,0 1

100

0,04

5,0 :

100

0,03

2,5

100

0,02

Zar Erkl&rung fdr diese Begrenzung der optimalen Ver-
hSltnisse nach unten glanbe ich am ehesten die von Lief-
mann and Cohn (2) zuerst gefandenen, von Bail and
Snznki (3) als ^methfimolytische Reaktionen^^ bezeichneten
Gegenreaktionen, die einen Verbranch von Eomplement resp.
Ambozeptor nach eingetretener H&molyse znr Folge
hatten, annehmen zn kdnnen. Derartige, nnter Umstftnden
hemmende Reaktionen treten vielleicht bei stUrkerer Kon-
zentration in pr&valierendem Malle in Erscheinnng.

n. Verhalten der Eomplementteile bei weoheelnder
Amboseptormenge.

Vom nngespaltenen Komplement ist bekannt, dafi es in
gewisser Weise dnrch Erhbhnng der Ambozeptormenge ersetzt
werden kann. Es schien mir von Interesse, anch das ge-
spaltene Eomplement nach dieser Richtnng hin systematisch
zn nntersnchen. Dabei ergab sich znnSchst einmal, daB bei
groBem AmbozeptorQberschnB (100-fache Ambozeptordosis) in
Fftllen, in denen die Spaltnng scheinbar vollkommen gelnngen
war and bei 1—8-facher Ambozeptormenge Mittel- and End-
sttlck fflr sich keine Spar von LOsnng zeigten, das Endsttlck
eine schwache HBmolyse anfwies, das Mittelstflck dagegen nicht.
Ferner war ebenso wie beim nngespaltenen Eomplement nach-

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392

Ernst Frankel,

zuweisen, dafi da, wo bei schwacher Ambozeptordosis gar
keine oder nur uoTollkommene Hftmolyse vorhanden war,
durch Erhdhung der Ambozeptordosis die Komplementhftmo-
lyse vollkommen wurde. Es liefi sich also auch bier in den
kleineren Dosen sowohl der Teil A als auch der Teil B
durch einen Ambozeptortlberscbufi bis zu einem
gewissen Grade vertreten. Auch bier ging die Ldsung
bei Verringerung des Albuminteiles weniger weit als bei Ver-
ringerung des Globulinteiles. Dagegen war der hemmende
Einflufi auf die H&molyse bei einem Ueberschufi von Mittel*
stack auch durch Ambozeptoraberschull nicht immer voll¬
kommen zu beseitigen.

Tsbelle III.

Verhalten von Mittel- und Endstuck bei wechselnder Ambozeptormenge.

Ambo-

M.A. Endstuck

M.B. Mittelstiick

Hamolyse nach

zeptor-

einheit

(1:10)

(1:10)

30 Min.

60 Min.

2 Btd.

1

1,0-0,1

1,0-0,1

0

«

0

0

2

1,0

+ +

+ +

+ + +

2

1,0

0,5

+ +

+ +

+ +

2

0,5

1,0

0

+

+

2

0,5

0,5

0

0

+

4

1,0

1,0

+++

+++

+ + +

4

1,0

0,5

+++

+++

+ + +

4

0,5

1,0

+++

+++

+ + +

4

0.5

0,5

+++

+++

+ + +

4

0,5

0,2

++

++

+ +

4

0,2

1,0

0

+

+

4

0,2

0,5

+

+

+ +

4

0,2

0,2

+

+

+ +

8

1,0

1,0

+++

+++

+ + +

8

1,0

0,5

+++

++ +

+ + +

8

0,5

1,0

+++

+++

+ + +

8

0,5

0,5

+++

+++

+ + +

8

0.5

0,2

+

+

+

8

0,2

1,0

0

+

+

8

0,2

0,5

+

++

+ +

8

0,2

0,2

+

+

+

100

1,0

1,0

+++

+++

+ + +

100

1,0

0,5

+++

+++

+ + +

100

1,0

0,2

+ + +

+++

+ + +

100

1,0

0,1

+++

+++

+ + +

100

0,5

1,0

-I-++

+ + +

+ + +

100

0,5

0,5

+++

+++

+ + +

100

0,5

0,2

+++

+++

+ + +

100

0.5

1 0,1

+ +

+++

+ + +

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Ueber Senunhamolysine.

393

m. Ueber den WnflnB einiger Normaleera anf die
Komplementhimolyse.

Es ist aus der Literatur bekannt, dafi der hftmolytische
Prozefi durch Immnnsera und Normalsera eine Verstftrkung
erfahren kann. Ueber den verstSrkenden EinfluB von Immnn-
seris haben zuerst Friedberger, Morescbi and Bezzola
berichtet Diese Autoren fanden, dafi das vom Kaninchen
gewonnene Antiserum gegen einen Ziegenblutambozeptor eine
deuUiche verstfirkende Wirknng ftlr die Hfimoljse hatte. Im
wesentlichen richtete sich die Verstfirknng gegen den Ambo-
zeptor, so dafi Friedberger als theoretische Erklftrung fQr
den Vorgang eine Znlenknng des Komplements zum Ambo-
zeptor annahm. Die Analoga dieser die H&molyse verstSrkenden
Substanzen im normalen Kaninchenserum hat zuerst A1 tm an n
aufgefunden. Auch hier richtete die fdrdernde Wirkung sich
im wesentlichen gegen den Ambozeptor.

Eine VerstSrkung der Komplementwirkung ist,
abgesehen von einigen chemisch bekannten Substanzen, bisher
von Noguchi und ManwaringbeiNormalseren beschrieben,
die vorher auf 66® erhitzt waren.

Ich habe nun in einigen Versuchen zunSchst den Einfluh
des Schweineserums auf die Ldsung von Hammelblut-
kdrperchen allein, unter Hinzufhgen von Komplement (Meer-
schweinchenserum) und von Ambozeptor (Kaninchen 331) unter-
sucht und dann sein Verhalten bei der Spaltnng nach der
Liefmannschen Methode^) in Mittel- und Endstflck und
den Einflnil des nativen Serums und seiner Teile auf die
EomplementhSmolyse einer genaueren Analyse unterzogen.

* Bei frhheren Untersuchungen fiber die Vertauschung der
Mittelstficke verschiedener Tiersera war mir, ebenso wie

1 ) Bezuglich der Technik und der Wahl der abkurzenden Bezdch-
nungen in den folgenden Tabeilen aei auf meine fruhere Arbeit (Zeitschr.
t Immunitatsf., Bd. 8, Heft 5 u. 6: E. Frankel, Ergebnisse bei der
Spaltung des hamolytischen Komplements) verwiesen. In den Tabeilen selbst
sind manche notwendige Kontrollen, die natiirlich ausg^uhrt wurden, nicht
aufgenommen, um diese nicht unndtig zu Terlangem; wo sich bei den
Kontrollen Bedenken ergaben, sind sie angefuhrt und diskutiert.

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394

Ernst Friinkel,

anderen Antoren (Marks und Brann) aufgefallen, dafi gerade
das Mittelsttlck des Schweineserums eine sehr starke hftmo-
lytische Wirksamkeit fflr die Hammelblutkdrperchen in Eom-
bination mit dem Meerschweiochenserum-EndstQck entwickelt
hatte. Diese Wirksamkeit ging bis in viel weitere VerdQn-
nungen als bei Verwendung des Meerschweinchenserum-
MittelstQckes. Nun hatte die Untersuchung gezeigt, dafi in
demSchweineserum eingut wirkendesHfimolysin
der Hammelblutkdrperchen enthalten war.

Tabelle I.

Die folgenden Versuche warden stets bei gleichem Volumen von 5 ccm
angesetzt.

a.

5 Proz.

Schw.Ser.

Hamolyse nach

50 Min.

2 Std.

1,0

1,0

+ + +

+ + +

0,2 ist also die in

1,0

0,5

+ + +

+ + +

2 Stunden alldn

1,0

0,2

+ +

+ + +

losende Docds

1,0

0,1

0

+

b.

5 Proz.

Schw.Ser.

+ M.Eompl.

Hamolyse nach

50 Min.

2 Std.

1,0

1,0

0,1

+ + +

+ + +

0,1 ist also fhr Ifeer-

1,0

0,5

0,1

+ + +

+ + +

schw.-Eomplement

1,0

0.2

0,1

+ + +

+ + +

+ Schw.-S^m =

1,0

0,1

0,1

+ + +

+ + +

ein^h IdsendeAm*

1,0

0,05

0,1

1 +

+ +

bozept-Doeis (in 2^)

c.

H.Blk.

5 Proz.

Schw.Ser.

+Amboz.314
0,2 (1:200)
2-fach Idsend

Hamolyse nach

50 Min.

2 Std.

1,0

1,0

0,2

+ + +

+ + +

0,1 ist also die in 2**

1.0

0,5

0,2

+ + +

+ + +

mit 0,2 (2-fach ISe.

1,0

0,2

0,2

+ + +

+ + +

Dosis) Amboz^tor

1,0

0,1

0,2

+ +

+ +

1 wirksame, totallOe.

1,0

0,05

0,2

+

+ +

Einheit an EompL

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Ueber Serumhamolysine. 395

d.

Schw.Ser.

>/,Std.bei50®

Kompl.

1 Hamolyse nach

60 Min.

j 2 Std.

1,0

+ 0,1

+ +

+ + -1-

0,5

0,1

+ +

+ + +

0,2

0,1

+ +

+ + +

0,1

0,1

+ +

1 + +

Es loste also 0,2 ccm des Schweineserums 1 ccra Hammel-
blutkorperchen in 5-proz. Aufschwemmung in 2 Stunden
komplett. Beim Hinzutun von 0,1 Meerschweinchenkomplement
16ste 0,1 des Schweineserums komplett. Ebenso beim Hinzu¬
tun von der 2-fach losenden Dosis des Immunambozeptors;
0,1 des Schweineserums enthielt also die einer Komplement-
einheit entsprechende Komplementmenge und ebenso die einer
Ambozeptoreinheit entsprechende Ambozeptormenge. Doch
verhielt sich der Ambozeptor nicht wie ein Immunambozeptor,
da er beim Erhitzen auf 50“ bereits erheblich abgeschwacht
wurde.

Auch die Spaltung des nativen Schweineserums in Mittel-
und Endstuck setzte seine hamolytische Wirksamkeit herab,
so daB es nachher mit der zweifach Ibsenden Ambozeptordosis
(No. 314) nicht mehr bei Anwendung von 0,1 S.A. (Schweine-
serumendstuck) und S.B. (Mittelstiick des Schweineserums)
komplett I6ste, ja auch bei der VergrSBerung von S.A. oder
S.B. auf 0,2 die HSmolyse noch nicht komplett wurde.

TabeUe II.

M.B. und S.B. binden stets Stunde mit den sensibilisierten Blk.

H.Blk. 5-proz. !

S.A.

S.B.

Amboz. No. 314
(1:200)

Hamolyse nach

1 30 Min.

1 75 Min.

1,0 J

0,2

0.1

0,2

1

i + +

+ +

1,0

0,2

0,05

0,2

+ +

+ + +

1,0

0,2

0,02

0,2

+ +

+ +

1,0

0,2

0,01

0,2

-h

+ +

1.0 1

0,1

0,1

0,2

+ +

+ +

1,0 i

0,1

0,1

0,2

+ +

+ +

1,0 1

0,1

0,05

0,2

0

0

Die Kombination von S.A. mit M.B. (Mittelstiick des Meer-
schweinchenserums) ergab mitunter eine schwache Hamolyse,

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396

Ernst Fr&nkel,

mitunter dagegen nicht. Dagegen Idste M.A. (Meerschweinchen-
endsttlck) 0,1 mit S.B. bis 0,01 komplett in einer Stunde.

TabeUe III.

a) H31k. 5-proz.

S.A.

+ M3.

Amboz. No. 314
(1:200)

Hfimoljse nadi

30 Min.

75 Min.

1,0

0,2

0,1

0,2

0

0

1,0

0,2

0,05

0,2

0

0

1,0

0,1

0,2

0,2

0

0

1,0

0,1

0,1

0.2

0

0

M.A.

S.B.

30 Min.

60 Min.

1,0

0,2

0,2

0,2

+ + +

+ + +

1,0

0,1

0,1

0,2

+ + +

+ + +

1,0

0,1

0,05

0,2

+ + +

+ + +

1,0

0,1

0,02

0,2

+ + +

+ + +

1,0

0,1

0,01

0,2

+ + +

+ + +

1.0

0,2

0,2

0.2

+ +

+ + +

1,0

0,2

0,1

0,2

+ +

+ + +

1,0

0,2

0,05

0,2

+ + +

+ + +

1,0

0,2

0,02

0.2

+ +

-^ + +

1,0

0,2

0,01

02

+ +

+ “h

1,0

0,2

0,1

0,2

+ + +

+++

1,0

0,2

0,05

0,2

+ + +

+++

1,0

0,2

0,02 •

0,2

+ + +

+++

1,0

0,2

0,01

0,2

+ + +

+++

b) Ohne Amboz.

EompL

8.A.

0,1

0,2

0

0

EontroUen

S.A.

0,2

0

0

Mit 0,2 Amboz.!

M.A.

0,2

0

0

(314) 1:200 1

S.B.

0,2

0

0

2-facnl5s.Dos.|

M.B.

0,2

0

0

c) Ohne Amboz.

H.Blk.

8.B.

+ Eompl. M.

30 Min.

1 Std.

5*j>roz.

0,2

0,1

+ + +

+ + +

1,0

0,1

0,1

+ + +

+ + +

1,0

0,05

0,1

+ +

+ + +

1,0

0,02

0,1

+

+ +

1,0

0,01

0,1

0

0

S3, enthalt also Ambozeptoren, so dafi 0,1 M.Kompl. mit S.B. 0,1
in 30 Minuten komplett Idste.

Der Albuminteil des Schweineserums enthielt in den unter-
suchten Mengen von 0,2 und 0,1 keine nachweisbaren Ambo-
zeptoren, so daB mit 0,1 Meerschweinchenserum keine H&mo-
lyse eintrat.

Der Globulinteil dagegen Ibste in der Menge von 0,1 mit
0,1 Komplement komplett nach 30 Minuten, in der Menge
0,05 auch komplett nach 60 Minuten. Es war also hier nach

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Ueber Serumhiimoljsme.

397

einer Stunde bei Verwendung desselben Eomplementes die
HUmolyse weitergegangen als bei der Verwendung
von ungespaltenem Schweineserum (0,1 Idste in 50
Minnten). Der Grnnd dafflr ging wohl aus den folgenden Ver-
suchen hervor.

TabeUe IVa.

15. II.

Kompl.

S.B.

Amboz.

Hamolyse
n. 30 Min.

1,0

1,0

1.0

1.0

1,0

1,0

0,02
0,02
0,02
0,01
0,01 1

0,01 1

0,1

0,05

0

0,1

0,05

i 0

oooooo

+ + +

+ + +

0

+ + +

+ + +

0

Da S.B. 0,05 com nur etwa V*
Ambozeptoranheit enthalL ist
die Starke Fbrderung der Eom-
plementh^olyse wohl nicht
auf die VermdDrung des Ambo-
zeptors zuruckzufiuiren.

TabeUe Va.
15. n.

H£lk.

Eompl.

S.B.

Amboz.

Hamoljse
n. 30

1,0

0,05

0,1

0,2

+

0,1 8.A. hemmt die Eomplement-

1,0

0,05

0,05

0,2

+ +

h^olyse.

1,0

0,05

0

0,2

+ +

TabeUe IVb.
28. II.

Eompl.

83.

(Amboz. .331, 0,2 1:500)
2-fach Ids. Dosis

HSmoljse nach

30 Min.

60 Min.

0,02

04

0,2

+ + +

+ + +

0,02

0,05

0,2

+ +

++

0,02

0 ,

0,2

0

0

0,01

0.1 '

0,2

+ + +

+ + +

0,01

0,05

0,2

0

+

0,01

0 1

1 0,2

0

0

TabeUe Vb.

28 . n.

Eompl.

SJl

Ambozeptor 331,0,2 (1 :500)
2-^h Ids. Dosis

Hamolyse nach

30 Min.

60 Min.

0,05

0,05

0,05

Zeltschr.

0,1

0,05

0

f. ImmoiiitMuf

0,2

0,2

0,2

onchang. Oiig. Bd. X.

0

0

+ + +

0

0

+ + +

26

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398

Ernst Frankel,

Fordemde Wirkung des Schweineserums auf die Eomplementh&molTse.

28. II.

H.Blk. 5-proz.

Amboz, 0,2

+ Eompl.

+ Schw.-Serum
1:10

Hamoljse nach

30 Min.

2 Std.

1,0

0.2

0,05

1,0

+ + +

+ + +

1,0

0.2

0,05

0,5

+ + +

+ + +

1,0

0,2

0,05

0

+ +

+ + +

1,0

0,2

0.02

1,0

+ + +

+ + +

1,0

0,2

0,02

0,5

+ + +

+ + +

1,0

0,2

0,02

0

0

+ + +

1,0

0,2

0,01

1,0

+ + +

+ + +

1,0

0.2

0,01

0,5

+ + +

+ + +

1,0

0,2

0,01

0

0

0

Der Albuminteil des Schweineserums hatte also beim Hin-
zutun zu dem gewdhnlichen h&molytischen System eine deut-
lich hemmende Wirkung (Tabelle Va und Vb).

Wurde dagegen der Globnlinteil hinzugesetzt, so fdrderte
er die Komplementh&molyse, jedoch nicht in weitergehendem
Mafie, als dies das ungespaltene Schweineserum tat, trotzdem
mit dem Albuminteil eine hemmende Substanz Yon ibm ent-
fernt war (Tabelle IV a und IV b). Es erhob sich nun die Frage,
welcher Art von Substanzen diese fdrdernde Wirkung des
Globulinteiles zuzuschreiben sei. Im wesentlichen kamen
3 verschiedene Mdglichkeiten in Betracht:

1) die im Globnlinteil enthaltenen Normalambozeptoren,

2) das darin enthaltene Komplementmittelstiick,

3) andersartige fdrdernd wirkende Substanzen.

Die quantitativen Verhkltnisse sprechen dagegen, dafi die
Ambozeptoren die Fdrderung verschulden, denn die Dosis
0,05 S.B., welche die Komplementhilmolyse noch derartig fdr-
derte, dafi Vs sonst Idsenden Komplementdosis zur H9.mo-
lyse ausreichte, entsprach beim Austitrieren kaum einer Ambo-
zeptoreinheit. Die Vermehrung des Ambozeptors von der
zweifach auf die dreifach Idsende Dosis bewirkt aber auch
nicht annidiernd eine derartige Verstfirknng des Komplements.

Die zweite Mdglichkeit wire nun die, dall das Mittelsthck
des Schweineserums in besonders grofier Menge vorhanden
wJlre und damit die Verringerung der anderen Eomponenten

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Ueber SenimhamolyBine.

399

des im Meerschweinchenserum enthaltenen Endstflckes ge-
stattete. Da sich nach meinen eigenen Untersuchungen und
nach denen anderer Autoren (Braun) gezeigt hatte, da£ sich
die Komplementteile bis zu einem gewissen Grade vertreten
kdnnen, wfire dies von vomherein nicht besonders verwunder*
lich. Um nun die Frage zn entscheiden, ob die fdrdernde
Substanz mit dem Mittelstdck identisch sei, wurde folgender
Versuch angesetzt.

TabeUe VI.

2 Beihen, 1—5, la—5a, werden mit steigenden Ambozeptormengen
(0—50-fach iSsende Doeis) und mit S.B. 0,1 angesetzt

S.B. 1:10

Amboz.

5-proz.

1

1,0

0

1,0

2

1,0

2

1,0

3

1,0

4

1,0

4

1,0

8

1,0

5

1,0

50

1,0

In zwei Reihen von Zentrifugenglftschen wurde je 1 ccm
5-proz. H.Blk. mit steigenden Ambozeptormengen von 0 bis
zur 50-fach Ibsenden Dosis und mit je 1 ccm 1:10 verdflnnten
S.B. angesetzt. Nach i||-stfindigem Aufenthalt im Brutschrank
warden die persensibilisierten BlutkOrperchen abzentrifugiert
und die Abgflsse der einen Reihe auf ihren MittelstQckgehalt,
die der anderen Reihe auf ihren Gehalt an der die HEmolyse
beschleunigenden Substanz geprhft.

Tabelle VH.

1 .

Abgufi

H31k. 5-proz.

-F Eompl. 1:10

-F Amboz.

Hamolyse nach

30 Min.

24 Std.
Zimmertemp.

1

1,0

0,5

0,2

0

-F-F

2

1,0

0,5

-F-F-F

+ -F-F

3

1,0

0,5

-F + -F

-F-F-F

4

1,0

0,5

0,2

-F + -F

-F-F-F

5

1,0

0,5

0,2

-F + -F

+ -F-F

6

1,0

0,5

0,2

0

0

26*

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400

Ernst Frankel,

2 .

AbguB

H.Blk. 5-proz.

+ M.A.

+ Amboz.

20 Std. im Brutschrank

la

1,0

0.1

0,2

o±

2 a

1,0

0,1

0,2

Oi

3a

1,0

0,1

0,2

0 ±

4a

1,0

0,1

0,2

Odb

5a

1,0

0,1

0,2

++i

Kontrollen

1,0

0,1

0,2

0

1,0

0,1

0,2

0

1,0

0,1

0,2

0

1,0

0,1

0,2

0

1,0

0,1

0,2

0

M.A. ist in Tabelle VII verwendet, hatte also gut Idsende Wirksamkeit.
0,05 ist die unterldsende Doeis des schlecht lOsenden Eomplementes.

In der Tat schien der erste derartige Versuch zu beweisen,
daB die beiden Snbstanzen nicht identisch miteinander wftren,
denn wSbrend der AbguB eine Starke fdrdernde Wirkung auf
eine unterldsende Komplementdosis besafi, war kaum eine Spur
von MittelstQck in der entsprechenden anderen Reihe nach-
weisbar. DaB in dem ersten Glase von den obne Ambozeptor
persensibilisierten Blntkdrperchen mit dem AbguB eine viel
langsamere HBmoljse eintrat als in den 4 folgenden, erklftrt
sich wohl aus den relativ geringen Ambozeptormengen, die im
Globulinteil des Schweineserums enthalten waren. Wenn da-
gegen nach 20>stQndigem Anfentbalt im Brutschrank die Ab-
gdsse von der 0- bis 8-fachen Ambozeptordosis nicht Idsten, die
von der 50-fachen dagegen wohl, so spricht dies auch wiederum
daftkr, daB es sich vielleicht um die Wirkung flberschfissiger
freier Ambozeptoren auf das Meerschweinchenendstdck handelte.
Denn die Kontrollen mit Meerschweinchenendstttck nnd sensi-
bilisierten Blutkdrperchen zeigten auch ohne Mittelstflckzusatz
besonders bei den grbBeren Ambozeptormengen eine allerdings
etwas schw&chere H&molyse. Es war also hier das Endsttlck
des Meerschweinchenserums bei der Spaltung nicht vollkommen
isoliert worden. (Siehe Tabelle VIII.)

Dieser KontroUversuch muBte zeigen, ob die persensi¬
bilisierten Blutkdrperchen noch Mittelstiick und H&molyse be-

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Ueber Serumhamolysine.

401

Tabelle VUI.

Sediment von persenBibiliBierten Blutkorperchen mit M.A. 0,1>

Sediment

+ M.A., auf 5 com mit
NaCl aufgefuUt

Hamolyse nach

30 Min.

60 Min.

1

0,1

0

0

2

0,1

0

+

3

0,1

+

+ +

4

0,1

+ +

+ + +

5

0,1

+ + +

+ + +

Amboz. 0

0,1

0

0

2

0,1

0

0

4

0.1

±

+ i

8

0,1

+±

50

0,1

+±

+ +

la Eompl. 0,01 Ids. Dos.

0

0

2a

0,01

0

0

3a

0,01

0

0

4a

0,01

0

0

5a

0,01

0

—

schleunigende Substanz gebunden enthielten. Zu dem Zwecke
wnrde in einer Reihe 0,01 Komplement hinzugeftigt, das die
halbe Idsende Dosis darstellte. Diese konnte nicht mehr so
weit gefdrdert werden, dafi HSmoljse eintrat. In der zweiten
Reihe wurde Endstflck vom Meerschweinchensernm (1,0 1:10)
hinzugesetzt. Dock konnte der Nachweis, dafi eine Persensi-
bilisiernng stattgefnnden hatte, nnr durch eine Beschleunignng
gegenflber den auch mit dem Endstflck allein besonders unter
Anwendnng grflfierer Ambozeptormengen Iflsenden Kontrollen
erbracht werden.

Indessen waren bei der Wiederholung dieses Versnches
die Resultate nicht so konstant, dafi ich darans den Schlufi
anf eine Verschiedenheit von Mittelstflck und fflrdernder Sub-
stanz mit zwingender Gewifiheit ziehen kflnnte. Konstant war
nur die Beschleunignng der Komplementhflmolyse durch S.B.
und speziell bei Verwendung grdfierer Ambozeptordosen die
beschlennigende Wirkung des Abgusses. Dagegen trat mit
dem Abgnfi beim Hinzutun von Meerschweinchenendstflck
eine nach 1—2 Stunden beginnende LOsnng der Erythrocyten

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402

Ernst Frankel,

ein, die nach 24 Stnnden bei alien Ambozeptordosen komplett
war. Wahrend jedoch in dem zur Kontrolle angesetzten S.B.
schon die Dosis 0,02 in 30 Minuten komplett mit 0,1 M.A.
Idste, war bier nach 2 Stnnden nur der Abguil von dem ohne
Immunambozeptor gebundenen Glaschen komplett hamolysiert,
so dafi also nur ein verschwindend kleiner Teil des Mittelstflcks
im Abgufi wirksam war. Ein anderer Kontrollversuch zeigte
allerdings, daB schon 0,08 desselben S.B. ausreichte, um die
Hamolyse dnrch dieselbe Dosis von 0,03 (unterlbsende Dosis)
desselben Komplements deutlich zu fbrdern.

Diese Analyse zeigt, dafi im Schweineserum
Substanzen enthalten sind, welche die Komple-
menthamolyse befbrdern und im wesentlichen die
Wirkung des Komplementes selbst verstfirken.
Zugleich aber geht daraus hervor, dafi aus dem
Schweineserum mit Hilfe der Komplement-
spaltung nach Liefmann zwei verschiedene Teile
zu isolieren sind, von denen der eine, mit dem
Globulin ausfallende fdrdernd, der andere, im
Albuminteile enthaltene, hemmend auf die Kom-
plementhamolyse wirkt Die fdrdernde Wirkung
des Globulinteiles ist wohl kaum auf die darin
enthaltenen Normalambozeptoren zurflckzu-
fdhren. Vielleicht sind die fdrdernden Sub¬
stanzen auch nicht identisch mit dem im Globulin
enthaltenen Mittelstfick. Komplementdosen unter
der einfach Idseuden Dosis kOnnen durch die
fdrdernden Substanzen zur Ldsung der Blut-
kdrperchen ausreichend gemacht werden.

Eine weitere Frage war nun die, wie sich diese Sub¬
stanzen gegen Temperatureinfltlsse verhielten. Da nach den
Untersuchungen von Noguchi und Manwaring bekannt
ist, dafi gewisse Normalsera beim Erhitzen auf 57° solche
fdrdernden Eigenschaften gewinnen und sie bei 70° wieder
verlieren kdnnen, babe ich auch fiir meine Untersuchungen
diese Temperaturen angewendet. Die folgenden Tabellen
zeigen die erhaltenen Resultate.

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Ueber Serumhamolysine.

403

TabeUe IX.

Eiiifluli dea Erbitzens auf 57 und 70** Vi Stunde auf die komplement-
fordemde Wirkung des SchweineeeruiDS und aeiner Teile.

a) Natives Schwdneserum.

Schw.-Serum

Kompl.

H^olyse nach

nicht erhitzt

30 Min.

60 Min.

2 Std.

0,1

0,05

+ + +

+ + +

Deutliche Fdrderung der

0,05

0,05

+ + +

+ + +

+ + +

Eomplementhamolyse

0

0,05

0

+ +

+ +

0,1

0,02

+ + +

+ + +

+ + +

0,05

0,02

+ + +

+ + +

+ + +

0

0,02

0

0

0

0,1

0,05

0,01

++

+ + +

0,01

+

+ + +

+ + +

0

0,01

0

0

0

Schw.-Serum

‘/-Std.bei57*

i

0,1

0,05

0

++

+ +

Die Fdrderung ist aufge-

0,05

0,05

0

+-I-

-f +

hoben

Schw.-Serum

V,Std.bei70'>

0,1

0,05

0,05

0

+++

+ + +

Eeine Fdrderung

0,05

0

+++

+ + +

b) Auf den Globulinteil des Schwdneserums.

S.B.

nicht erhitzt

Eompl.

Hao
30 Min.

aolyse na
60 Min.

ch

2 Std.

0,1

0,05

+ + +

+ + +

+ + +

Fdrderung

0,05

0,05

+ + +

+ + +

-I- + +

0,1

0,02

+ + +

-1- + +

-I- + +

0,05

0,02

+ + +

+ + +

+ + +

0,1

0,01

+ + +

+ + +

+ + +

0,05

0,01

+ +

+ + +

+ + +

S.B. bei 57®

04

0,05

+ + +

+ + +

+ + +

Fdrderung schwacher, aber

0,05

0,05

+ + +

+ -1- +

+ + +

nicht au^hoben.

0,1

0,02

-F-l-

+ + +

+ + -I-

(In einem 2. Versuch ist

0,05

0,02

+

+ + +

+ + +

die Fdrderung noch viel

0,1

0,01

0

0

+ +

weniger abgeschwacht)

0,05

0,01

0

0

+ +

S.B. bei 70®

0,1

0,05

0

+ +

Fdrderung aufgehoben

0,05

0,05

0

+ +

04

0,02

0

0

0,05

0,02

0

0

0,1

0,01

0

0

0,05

0,01

0

0

1

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404

Ernst Frankel,

c) Auf den AlbuminteU des Schweineserums.

S.A. 1

Kompl.

H^olyBc nach

nicht erhitzt|

30 Min.

60 Min.

2 Std.

0,05

0,05

0

+

+ +

+ + +

+ -I- +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

Hemmung der Komple-
menthkmoljBe

S.A. bei 57*
0,2

0,1 !

0,05

0,05

+ + +
+ + +

+ + +
+ + +

+ + +
+ + +

Hemmung aufgehoben

S.A. bei 70®
0,2

0,1

0,05

0,05

+ + +
+ + +

+ + +
+ + +

+ + +
+ + +

Keine Hemmung

Das native Schweinesernm wurde dnrch £r-
hitzen auf57^0/t Stunde) in seiner f5rdernden Wirkung
entweder sehr erheblich geschwficht oder verier sie
voUkommen, nnd anch bei 70" (^/, Stunde) verhielt es sich
ebenso. Hingegen zeigte es sich mehrfach, dafi der Globulin-
teil allein beim Erhitzenauf 57" entweder gar nicht in
seiner fSrdernden Wirkung abgeschwftcht wurde oder doch er¬
heblich weniger als das native Schweinesernm
(Tab. IX). Erhitzen auf 70" dagegen beraubte auch ihn seiner
fdrdernden Wirkung. Dieses Resultat scheint mir nur die
Deutung znznlassen, da& beim Erhitzen innerhalb des Serums
entweder gewisse Bindnngs- oder Abbauprozesse stattfinden,
zu denen Substanzen erforderlich sind, welche teilweise oder
ganz mit Hilfe der KohlensHureausBUlung vom Niederschlag
getrennt werden. Auch auf den AlbuminteU hatte das Er¬
hitzen eine deutliche Wirkung, so daft es schon bei 57"
(Vs Stunde) seine hemmenden Eigenschaften fttr die Kom-
plementh&molyse zum grofien Teil verier. Es schien ferner-
hin von Interesse, zu untersuchen, ob die hemmenden Sub¬
stanzen des Albuminteiles nach Ehrlichscher Auffassung als
Komplementoide anfzufassen wfiren, d. h., ob sie an ambozeptor-
beladene Blutkbrperchen gebunden wfirden. In der Tat liefi sich
zeigen,' daB der Abgufi so vorbehandelter BlutkSrperchen die
hemmenden Eigenschaften des Albuminteils nicht mehr be-
sitzt. In der Frage, ob die fdrdernde Substanz mit dem
Mittelstdck identisch sei, brachten auch die Versuche mit er-
hitztem Globulin teil keine Klftrnng, well sich heraussteUte, daB

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Ueber Serumhamolysine.

405

beim Erhitzen aaf 57*^ im Gegensatz zum MittelstQck des
Meerschweinchenserums bier die zur HUmoljse ndtigen Sub-
stanzen nur abgeschwSchtfaber nie vollsUlDdig zerstOrt waren,
so dafi anch bier beim Hinzutun von MeerscbweincbenendstUck
noch Hftmolyse auftrat (Tabelle X). Die Differenz, die sicb
bier im Verbalten verscbiedener Mittelstticke
zeigte, war aucb bei anderen Versucben nacbweisbar. Wie
Liefmann und Gobn gezeigt batten, kann Cbolestearin
dnrcb Hemmung der Mittelstflckbindung die H&moljse ver-
hindem Oder verzbgern. Icb babe nun diesen Versucb mit
dem Mittelstflck vom Scbwein einerseits und mit dem des
Meerscbweincbens andererseits angestellt (Tabelle XV). Dabei
zeigte es sicb, da£ das Cbolestearin die H&moljse gar nicbt
beeinflufite, wenn das Mittelstflck vom Scbwein verwendet
wurde, dall sie dagegen erbeblicb gebemmt wurde, wenn icb
das Mittelstflck des Meerscbweincbens verwandte. Aucb der
Globulinteil des Hammelserums wurde durcb Cbolestearin ge¬
bemmt (Tabelle X-XVI).

TabeUe X.

SJB. wird durch Erhitzen auf 57 ** nicht zersetzi, eondem iSet noch mit M.A.

S.B (1:10)

V, Std. bei 57*

M.A.

(1:10)

Hamolyse nach

30 Min.

60 Min.

2 Std.

1,0

1,0

+

+ + +

+ + +

0,5

1,0

+

+ + +

+ + -I-

0.2

1,0

+

+ + +

+ + +

0,1

1,0

0

+ +

+ +

0

1,0

0

0

0

TabeUe XI.

S.B. 24 Stonden in NaCl-Ldeung ist nicht verandert, so dafi ee mit und
ohne Bindung mit MA. Idst und die Eomplementhamolyse stark fdrdert

Eomplement

S.B. (1:10)

Hamolyse nach

30 Min.

60 Min.

2 Std.

0,05

1,0

+ + +

+ + +

+ + +

0,05

0

0

+ +

+ + +

0,02

1,0

+ + +

+ + +

+ + +

0,02

0

0

0

0

Mit V, Std. Bdg. M.A. (1:10)

1,0

. 1.0

+-I-+

+ + +

+ + +

Ohne Bdg. 1,0

1,0

+++

+ + +

+ + +

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406

Ernst Frankel,

TabeUe XII. (ProtokoU 26. UI. 11.)

Das 83. loste also ohne Bindung langsamer. Es ist also auch vei^dert.
Doch hat es fur das Komplement noch immer fdrdemde Eigenschaften.

Komplement

S.B. (10:1) 1

H^olyse nach

30 Min.

60 Min.

2 Std.

Mit Bdg. V, Std. M.A. (1:10) 1,0
Ohne Bdg. 1,0

Mit Bdg. V, Std. M.A. 1,0

Ohne Bag. 1,0

1,0

0,1

M.B. 1,0

1,0

+ + +

0

+ + +

0

+ + +

+ + +

+ + +

0

+ + +

+ + +

+ + +

0

TabeUe XIIl.

K.B. hemmt nach 24 Std. in NaCl die Komplementhkmolyse und lost
weder mit noch ohne Bindung mit M.A.

Komplement

K3. (1:10)

Hamolyse nach

60 Min.

2 Std.

.0,05

1,0

0

0

0,05

0

+ +

+ +

Mit Bdg. V, Std. M.A. (1:10)

1,0

1,0

0

0

Ohne Bdg. 1,0

1,0

0

0

0,05

M.B. (1:10)
1,0

0

0

0,05

0

++

+ +

M.B. V, Std. Bdg. M.A. (1:10)

1,0

1,0

0

+

Ohne Bdg. 1,0

1,0

0

0

TabeUe XIV.

24 Stunden in NaCl aufbewahrtes M.B. und H.B. bei 10-facher Ambo-

zeptordosis.

M.A.

Hamolyse nach

(1:10)

30 Min.

60 Min.

Mit V, Std. Bdg. H.B. (1:10) 1,0

1,0

Amboz. 10-fach

Ids. Dos.

+ +

M3. (1:10)1,0

1,0

+ + +

+ + +

Ohne Bdg. H.B. (1:10) 1,0

1,0

+ +

+ + +

M.B. (1:10)1,0

1,0

+ ++

+ + +

H.B. Idst ohne Bindung besser als mit Bindung

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Ueber SerumhamolyBine. 407

ALB. und H.B. 24 Stonden in NaCl-Ldsung. Ambozeptor 2-fach losende Dosis.

H3. (1:10)

Eompl.

Hamolyse nach

M.B.

(1:10)

Hamolyse nach

30 Min.

60 Min.

30 Min.

60 Min.

2,0

0,06

±

+ +

2,0

±

+ +

1,0

0,06

+ +

+ + ±

1,0

+ +

+ + ±

0

0,06

+ + +

+ + +

0

+ + +

+ + +

Beide hemmen die KomplementhamolyBe.

TabeUe XV.

Hemmungsversuch mit Cholestearin. (0,1 Proz.) Globulin vom 8. und M.

15 Minuten Bindung

V.StBdg.
“1” M.B.
(1:10)

n. V* Std.

Hamolyse nach

H.Blk.

5-ptoz.

Ambo-

zeptor

■T” Chole*
stearin

Zusatz

yonM.A.

30 Min.

60 Min.

2 Std.

1,0

0,2

1,0

1,0

1,0

+

+

+ + +

1,0

0,2

• 0,5

1,0

+

+

+ + +

1,0

0,2

0

1,0

1,0

+

+ + +

+ + +

1,0

0,2

1,0

+ S.B.
(1:10)
1,0

1,0

+ + +

+ + +

+ + +

1,0

0,2

1,0

1,0

1,0

+ + +

+ + +

+ + +

1,0

0,2

0

1,0

1,0

+ + +

+ + +

+ + +

V.

ip

8td. Bindt

0,2

mg

+ M.B.
(1:10)
1,0

15Min.Bg.
+ Chole-
stearin
1,0

1,0

j

0

+

+ + +

1,0

0,2

1,0

0,5

1,0

0

+

+ + +

1,0

0,2

1,0

0

1,0

+

+ +

+++

1,0

0,2

S.B.

(1:10)

1,0

1,0

1,0

+++

+ + +

+ + +

0,2

1.0

0.5

1,0

+++

+ + +

+++

1,0

0,2

1,0

0

1,0

+++

+ + +

+++

Das Cholestearin wuide in ein wenig heifiem Methylalkohol gelbst und
eine 0,l>pioz. Au&chwemmung in 0,85-proz. NaCl'LOsung hergestellt. Diese
Btellte dann eine fdnflockige Suspension dar.

TabeUe XVI.

Hemmungsversuch mit Cholestearin, Globulin von H. und M.

H.B. (1:10)

+ Cholest.

+ M.A. bd 10-fach

H&molyse nach

(1:1000)

iSeender Ambozeptordosis

30 Min.

1 60 Min.

1,0

1,0

(1:10) 1,0

0

+

1,0

0,5

0

1,0

0

+

1,0

M.B. (1:10)

1,0

+ +

+ +

1,0

1,0

1,0

+ +

+ +

1,0

0,5

1,0

+ +

+ +

1,0

1

1,0

+ + +

+ + +

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408

Ernst Frankel,

Verschiedenheitenim Verhalten der Mittelstficke
hatten sich auch bei der Untersnchung des 24-stttndigen so-
genannten Kochsalzmittelstflckes ergeben. Meist war
nach dieser Zeit das Meerschweinchenmittelsttkck, wie Brand
zuerst gezeigt hatte, derart ver&ndert, dafi das Endstdck nur
nach Yorhergegangener Vs'Stdndiger Bindung von M.B. Idste,
dagegen nicht bei sofortigem Znsatz. Zugleich hatte das
MittelstQck (Hecker) hemmende Eigenschaften ftlr die Eom-
plementbindungsh&molyse bekommen. Anders verhielt sich
das Schweineserum, meist Idste S.B. mit M.A. bei sofortigem
Zusatz ebenso wie nach vorangegangener Bindung, doch konnte
ich einmal beobachten, dafi in der ohne Bindung angesetzten
Probe die Ldsung erheblich verzdgert war (Tabelle XII). Fttr
die Komplementh&molyse allerdings behielt es immer seine
fdrdernden Eigenschaften bei. Es schien also in diesen
24 Stunden in NaCl-Ldsung gar nicht Oder nur ausnahmsweise
einmal ein wenig in seinem Aufbau verilndert zu sein (Ta¬
belle X nnd XI).

Die Untersnchung eines Globulinteiles von Kaninchen-
serum nach 24 Stunden (Tabelle XIII) in NaCl zeigte mit
M.A. weder mit noch ohne Bindung eine H&molyse. Auch
hatte es hemmende Eigenschaften fiir die Komplementhftmo-
lyse, so dafi hier starke Ver&nderungen in der Strnktur vor
sich gegangen sein mflssen. Der Globulinteil des Hammel-
serums (Tabelle XIV) Idste nach 24 Stunden in NaCl etwas
besser ohne vorangegangene Bindung als mit solcher. Die
hemmende Wirkung fQr die H&molyse der Hammelblutkdrper-
chen durch das h&molytische System (Eaninchenambozeptor:
Meerschweinchenkomplement) hatte er behalten.

Doch kann man aus diesem Verhalten nicht darauf
schliefien, daJl die Mittelstdcke verschiedener Tiere durch ver-
schiedene chemische Substanzen dargestellt werden, da mdg-
licherweise auch hier Bindungs- Oder Abbaureaktionen an
demselben Edrper vor sich gehen kdnnen, die durch im
Serum sonst enthaltene Bestandteile verschieden beeinfluilt
werden.

2) Auch einige andere Normalsera warden der Analyse
unterzogen. Beim Rinderserum war ein Eomplement fhr

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Ueber SenimhamolyBine.

409

Hammelblatkdrperchen nnd Eaninchenambozeptor nicht nach-
weisbar. Dagegen enthielt es einen thermostabilen (Vt Stunde
bei 56 Ambozeptor, der bis etwa auf 0,1 mit 0,1 des Meer-
schweinchenserums die Hammelblutkdrperchen Idste. Wie zu
erwarten, besafien die Komplementteile zusammen anch
keine komplettierende Wirkung. Das EndstQck 15ste in
den Mengen 0,2 and 0,1 nicht mit dem Mittelstflck des Meer-
schweinchenserums, ganz gleichgflltig, ob dieses vorher ge-
bunden war oder zugleich zugesetzt wurde (selbst nicht bei
10-facher Ambozeptordosis). Sein Mittelstflck dagegen
Idste mit dessen Endstflck sowohl bei gleichzeitigem Zusatz
als auch bei vorangegangener Mittelstflckbindnng. Keiner der
Teile Idste fflr sich allein, M.A. Idste gut mit M.B. Merk-
wflrdig war die dabei gelegentlich gemachte Beobachtung, dafi
das frische R.B. nach vorangegangeder Bindung schlechter
Idste als ohne seiche (Tabelle XVII). Weniger verwunderlich
war, dafi grdfiere Dosen R.B. schlechter Idsten als kleinere.
Auf die Komplementhflmolyse hatten beide Teile des Rinder-
serums einen hemmenden Einflufi. Da die Hemmung anch
bei vorhergehender Bindung von M.B. eintrat, ist es wahr-
scheinlich, dafi die Stdrung darin bernht, dafi das Endstflck
des Meerschweinchenserums von seiner Bindung an das Mittel-
stflck femgehalten wird. Das Rinderserum hatte gleichfalls
eine Hemmung der Komplementhflmolyse zur Folge. Die
Hemmungskdrper gehen sowohl im Serum wie in seinen
Teilen bei halbstflndigem Erhitzen auf 57 ^ zugrunde.

Tabelle XVII.

2-fach loeende Ambozeptordosis.

T> T5 /I . 1A\

Ttf A /"I .

Hamolyse nach

• Xvf J

60 Minuten

2 Stunden

1 . Ohne Bindung von B.B.

2,0

1,0

+

+ +

1,0

1,0

+ +

+ +

0,5

1,0

+ +

+ +

2. Mit Bindung von R.B.

2,0

1,0

0

0

1,0

1,0

±

+

0,5

1,0

db

+

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410

Ernst Frankel,

Tabelle XVin.

EinfluA des Erhitzens auf die hemmeode Wirkung dee Brnderserums und
seiner Teile fur die EomplementMmolyse.

R.Ser.

Komplement

i

Ambozeptor

Hamolyse nach

30 Minuten

60 Minuten

0,2

0,05

2-fach losende Doeis

0

+±

0.1

0,05

dgl.

!

0

+±

0

0,05

+ + +

+++

R.Ser. 57®

0,2

0,05

yy

+ + ±

+++

0,1

0,05

yy

+ + i

+++

R.A.

0,2

0,05

yy

+±

++±

0,1

0,05

yy

+±

++i

R.A. 57®

0,2

0,05

yy

+++

+++

0,1

R.B.

0,05

yy

+++

•

+++

0,2

0,02

yy

0

0

0,1

0,02

yy

+

++

0

0,02

yy

+

++

R.B. 57®

0,2

0,02

yy

+

++

0,1

0,02

yy

+

+ +

3) Das Hundesernm enthfilt ein Hilniolysin fQr die
Hammelblutkdrperchen, das sowohl als Komplement als auch
als Ambozeptor bis 0,1 resp. 0,2 in einer Stunde komplett
Idst. Bei der Komplementspaltung 15st die Kombination
beider Teile und die Kombination von Hundemittelstfick mit
Meerschweinchenendstflck, letztere sogar sehr gut. Bei zwei-
facher Ambozeptordosis 15st dagegen nicht das Endstfick des
Hundeserums mit dem MittelstQck des Meerschweinchenserums.
Der Globulinteil enthielt nachweisbare Ambozeptoren, der
Albuminteil dagegen nicht. Der Globulinteil besafi eine
fdrdernde, der Albuminteil eine hemmende Wirkung auf die
Komplementhfimolyse, so dall bier fihnliche Verh&ltnisse vor-
liegen wie beim Schweineserum. Nach Liefmann und
Stutzer erh&lt das Hundeserum durch Erhitzen auf 57 ^
antihfimolytische Eigenschaften, die bei 70" vrieder schwftcher
wurden. In nnseren Versuchen fbrderte das native Hunde¬
serum die Komplementhftmolyse, wie dies bei seinem Gehalt

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Ueber Serumhamolysine.

411

an Normalambozeptoren und Komplement zn erwarten war.
Erhitzen anf 57 ** verhinderte die Fdrdernng, lieB aber noch
keine deutliche antih3,molytische Wirkung hervortreten, da-
gegen war diese bei V 2 ~stdndigem Erhitzen anf 70 ^ angedeutet.
Ueberhaupt wurde hknfig bei Verwendung anf 70" erhitzter
Sera, noch hkufiger aber bei Verwendnng ihrer Albuminteile eine
Komplementhemmung beobachtet. Ich erklkre dies dadurch,
daB bei dieser Temperatur die Ausflocknng des Eiweifies ein-
setzt, die in dem mit CO, bei der Spaltung angesftnerten
Albuminteil eher eintritt als im nicht vorbehandelten Serum.
Durch die fein ausgeflockten Eiweifiteilchen wird wohl das
Komplement ebenso absorbiert, wie z. B. durch eine Mastix-
snspension.

Tabelle XIX.

Eliiiflufi des Hundesenims und seiner Teile auf die Eomplementhamolyse.

Hundeeerum

KomplemeDt

Ambozeptor

Hamolyse nach

30 Minuten

2 Stunden

0,2

0,02 '

2-fach Ibsende Dosis

+ + ±

+ + +

0,1

0,02

dgl.

+ ±

+ +

0

0,02

V

+

+

H.u.A.(l:10)

1,6

0,02

?)

0

+

0,5

0,02

0

+

0

0,02

+

+ +

H.u.B.Jl:10)

0,02

+ + +

+ + +

0*5

0,02

+ ±

+ + +

0

0,02

+

+ +

4) Den EinfluB des Kaninchenserums auf die Kom-
plementhfimolyse hat Alt man n bereits einer genauen Analyse
unterzogen und dabei gefunden, daB eine Forderung der
Am bo zep tor wirkung durch eine vielleicht mit dem Mittel-
stQck des Kaninchenserums identische Substanz stattfindet.
Ich untersuchte auch dieses Serum ebenso wie die vorber-
gehenden. Es enthielt Komplement und reichlich Ambo-
zeptoren gegen Hammelblutkdrperchen. Auch das gespaltene
Kaninchenserum 16ste diese nach der Kombination der beiden
Teile. Das Endstfick Idste mit dem Mittelsthck des Meer-
schweinchenserums nach lingerer Zeit nicht sehr stark. Das
Mittelstflck dagegen gut mit dem Endstflck des Meerschwein-

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412

Ernst Frankel,

chenserams, und zwar besser bei Verwendung von 0,1 M.A.
als bei Verwendung von 0,2. Diese Beobachtung war von
anderen Autoren filr die Verwendung gleichartiger Eomplement-
teile bereits Mher gemacht worden. In beiden Teilen waren
Ambozeptoren nachweisbar, ein Befund, der nach frdheren
Untersuchnngen allerdings schwankend sein kann. In grdfieren
Dosen batten beide Teile einen hemmenden, in mittleren eher
einen fdrdemden EinfluB auf die HBmolyse, dock waren die
Unterschiede zu gering, als dafi ich irgendwelche Schlfisse
darans ziehen mochte. Deshalb verzichte ich auch auf die
detaillierte Wiedergabe der Protokolle. Durch ErwBrmen auf
57 ° V 2 Stunde lang wurde der Globulinteil in der fOrdernden
Wirkung etwas verstfirkt. HalbstQndiges Erhitzen auf 70°
verlieh dem Serum und dem Albuminteil hemmende Wirkung.
Dock ist dies wohl wieder als eine physikalische Adsorption
des Komplements durch die bei dieser Temperatur beginnende
AusfSllung der EiweiBsubstanzen aufzufassen.

Eaninchen 405 (mit Hammelserum geimpft).

Wldirend der Impfung stieg der Ambozeptorgebalt etwas,
offenbar weil das Serum Blutkdrperchenreste enthielt. Von
einer Vermehrung eines der Eomplementteile war ebenso
wenig etwas zu merken, wie bei Verimpfung von Blutkdrper-
chen in frtlheren Versuchen. Eher hatte es den Anschein,
als ob die Ldsung des Mittelstuckes mit M.A. etwas schwScher
geworden w&re als im Normalserum. Auch hier war, wie bei
den Ambozeptorsera, die Hauptmenge der Ambozeptoren im
Albuminteile enthalten. Das Eaninchenserum an sich hatte
eine geringe fdrdernde Wirkung auf die Eomplementhkmolyse,
seine Teile hemmten in grdBeren, fdrderten in mittleren Dosen,
wie beim Normalserum, aber auch hier war der EinfluB nicht
erheblich und etwas schwankend.

5) Es ist bekannt, daB das Serum schfltzende Eigen-
schaften fQr die eigenen Blntkdrperchen enthBlt Liefmann
und Stutzer haben dies fflr das Hammelserum in einer
genauen Analyse nachgewiesen. Sie konnten zeigen, daB es
mit dem Immunambozeptor vom Eaninchen nicht Idste, merk-
wtirdigerweise aber mit seinem Normalambozeptor. Auf 56 •
erwBrmtes Serum verlangsamte die HBmolyse, bei 70 ° dagegen
hatte es seine Schutzwirkung bereits gfinzlich verloren. Auch

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Ueber Serumhamolysine.

413

wiesen sie nach, dafi es sich weder urn antireaktive Eigeo-
schaften, noch um Komplementbindung, noch um Komplemen-
toide handelte. Da der Globulinteil des Hammelserums mit
dem Albuminteil des Meerschweinchens Idste, mit dem ganzen
Komplement aber hemmte, nehmen sie einen sch^digenden
Einflufi auf den Globulinteil des Komplements an. Ich babe
diese Verhaltnisse ebenfalls untersucht und gebe im folgenden
die Protokolle wieder (Tabelle XX).

Tabelle XX.

Wirkung des Hammelsenims und seiner Teile auf das Komplement.

Hammel-

senim

Komplement

Ambozeptor

Hiimolyse nach

30 Minuten

60 Minuten

0,2

0,05

2-fach losende Dosis

+

4" + i

0.1

0,05

dgl.

+++

0

0,05

+++

+ + +

H.Ser. 57®

0,2

0,05

r?

++ +

+++

0.1

0,05

..

++ +

4- + 4-

0

0,05

V'

+ + +

+++

H.A.

0,2

0,02

««

0

0

0,1

0,02

0

0

0

0,02

y*

+ + i

H.A. 57®

i

0.2

0,02

,, 1

+ +

++±

0.1

0,02

+ +

++±

0

0,02

yy

+ +

+ + i

H.B.

0.2

0,02

0

+ i

0,1

0,02

++

+ + i

0

0,02

++

+ + ±

H.B. 57®

0,2

0,02

+

0,1

0,02

+

+ +

0

0,02

ij

++

+ + i

Auch bier zeigt es sicb, dafi das Hammelsernm in der
Tat seine hemroenden Eigenscbaften bei 57 ** und bei 70 °
eingebdfit hatte. Doch besaBen nacb meinen Untersucbungen
sowobl der Albuminteil als aucb der Globulinteil die bemmende
Wirkung, letzterer allerdings in hdberem MaBe. Da ich aus
frtlher erSrterten Grflnden stets eine geringe Ambozeptor-
menge (2-fach Idsende Dosis) anwendete, gelang es nicht
immer, die Ldsnng der Blutkdrperchen herbeizufflhren, wenn

Zeltschr f. ImmnoltiiUforBchuD^. Oiif. Bd. X. 27

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414

Ernst Frankel,

der Globulinteil des Hammelserums mit dem Albuminteil des
Meerschweinchenserums kombiniert wurde. Dafi in der Tat
die geringe Ambozeptordosis einen grofien Einfiufi hat, geht
aus dem Versuche gleichfalls hervor, da bei Verwendung der-
selben Reagentien in denselben QuantiUiten bei 10-facher
Ambozeptordosis eine bedeutend weitergehende Hfimolyse
eintrat als bei 2-facher. Der Albuminteil des Hammelserums
Ibste nie mit dem Globulinteil des Meerschweinchenserums,
auch nicht bei Anwendung einer 10-fach Idsenden Ambo¬
zeptordosis (Tabelle XXI).

Tabelle XXI.

H.A.

H.B.

M.A.

M.B.

Ambozeptor¬

dosis

Hamolyse nach

30 Min. ! 60 Min.

0,1

0,1

2-fach

0

0

0.1

0,2

—

—

dgl.

0

0

0,1

—

0,1

0

0

0,1

—

—

0.2

0

0

0,1

0,2

—

,,

+

+

—

0,2

0,1

—

T7

+

H-

0,2

—

0

0

o"^

- 1

_

0

0

—

0,2

- ^

J j

0

0

—

—

0.2

77

0

0

—

—

0,1

0,1

77

++

+ + ib

0,2

0,1

_

—

lO-fach

0

0

0,1

0,2

—

—

dgl.

0

0

0,2

—

0,1

77

0

0

0,1

—

—

0,2

77

0

0

0,1

0,2

77

+++

+++

-

0,2

o;i

—

77

+ +

+ + ±

0.2

—

77

0

0

—

0,2

—

—

77

0

0

—

0,2

—

77

0

0

—

—

0,2

77

0

0

—

—

04

0,1

77

+ + +

+++

Die beiden Teile bhfiten ihre hemmende Wirkung beim
Erhitzen auf 57® und 70® in der Regel ein. DaB der Globulin¬
teil beim Erhitzen auf 70® einmal direkt fdrdernde Wirkung
auf die Komplementhkmolyse hatte, mochte ich erwfihnen,
ohne daB ich in der Lage wkre, dies zu erkRlren. Auch
mdchte ich dem nur ein einziges Mai beobachteten Phknomen
keine grdBere Bedeutung beimessen.

Zum SchluB mdchte ich noch einmal auf die weitgehende
Aehnlichkeit in der Wirkung der SerumhBmolysine mit der

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Ueber Serumhamolysine.

415

von Enzymen hinweisen. Jedenfalls sind sicher auch bei der
Hftmolyse eine Reihe von Faktoren beteiligt, die an dem
Frozen in hemmendem oder fdrderndem Sinne teilnehmen.
Ob sich bier nnd bei den Fermenten im allgemeinen alle Er-
scheinungen vollst&ndig durch die Theorie kolloidaler Ldsungen
nnd eine rein physikalische Auffassung erkl&ren lassen werden,
wie dies Arrhenius, Landsteiner nnd andere Forscher
versuchen und wie es auch jfingst Tran be wieder fQr die
Immunitntsreaktionen unternommen hat, lEBt sich wohl zurzeit
noch nicht entscheiden. Sicherlich ist aber auch die in der
Ehrlichschen Seitenkettentheorie niedergelegte struktur-
chemische Auffassung bei der Deutung mancher PhS.nomene
auf komplizierte Hilfshypothesen angewiesen, durch die das
VerstSndnis der Vorgange durchaus nicht immer erleichtert
wird. Es dttrfte sich darum vielleicht einmal spater empfehlen,
in Analogic mit den fibrigen Enzymen und Fermenten auch
bei der HSmolyse von hSmolytischen Fermenten und Pro-
fermenten, von HSmolysinogen etc. zu sprechen, wodurch zu-
gleich auch die Serologie eine fflr eine groBe Anzahl von
Nichtserologen verstandliche Sprache bekSme.

rv. Untersaohung des Froschbamolysins.

Die Untersuchungen von Sachs tiber das Arachnolysin
und die von Friedberger und Seelig fiber das HSmolysin
von Frfischen hatten gezeigt, daB es sich dabei um Kfirper
handelt, die keine komplexe Natur besitzen und deswegen
zum Unterscbied von den Hfimolysinen der hoher organisierten
Tiere als echte Hfimotoxine angesprochen werden. Da die
Mdglichkeit vorlag, daB dieser nichtkomplexe Bau vielleicht
nor vorgetluscht wurde, weil die bisher angewandten Methoden
nicht geeignet waren, habe ich auch mit der neuen Methode
der Komplementspaltung versucht, das Hfimolysin des Frosch-
serums zu spalten. Das Serum wurde von Rana esculenta
gewonnen, und zwar von hungernden Tieren im Winterschlaf.
Da aus finfieren Grfinden die Versuche nicht zu weit ausge-
dehnt werden konnten, will ich mich damit begnfigen, die
Protokolle von zwei Versuchsreihen wiederzugeben. Auch bier
wurde wie gewfihnlich die Spaltung durch COs-Einleiten in
das mit destilliertem Wasser auf 1:10 verdfinnte Froschserum

27*

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416

Ernst Friinkel,

versucht. Da indes bei dem ersten Versuche nach 30 Minuten
kaum eine Triibung auftrat, wurde ein Tropfen 1-proz. Essig-
s&ure hinzugefbgt und weitere 30 Minuten CO; eingeleitet.
Als Blntkdrperchen wurde eine 5-proz. Aufschwemmung von
den nach Friedberger und Seelig am besten geeigneten
Kaninchenblutkbrperchen verwendet.

Tabelle I.

Kaninchenblutkdrperchen in 5-proz. Aufechwemmung.

Froschsenim

K.Blk.

5-proz.

Hamolyse nach

30 Min.

90 Min.

24 Std.

0,2

1,0

-1- + +

+ + +

+ + +

0,1

1.0

+

+

-f-

Fr.A

L.

0,2

1.0

0

0

0

0,02

1,0

0

0

0

Fr.B.

0,2

1.0

0

0

0

0,02

1.0

0

0

0

Fr.A. -f

Fr.B.

0,2

0,2

1,0

0

0

-1-

0,1

0,1

1,0

1 0

0

-f

Fr.A. +

M.B.

1

0,2

0.1

1,0

1 0

1 0

+

M.A. -f

Fr.B.

0,1

0,2

1,0

+

++

+ +

Fr.B -1-

M.A.

1

0,2

0,1

1,0

0

0

0

Fr.B. -1-

0.2

M.B.

0,1

1,0

0

0

0

£s hatte also den Anschein, als ob durch die Spaltung
das Froschserum in seiner Wirksamkeit zwar abgeschw&cht
wurde, aber doch in zwei Teile zu zerlegen ware, von denen
jeder fiir sich unwirksam, die Kombination dagegen hamolytisch
fflr die Kaninchenblutkdrperchen war.

Auffallenderweise war dabei der Albuminteil des Frosch*
serums, sowohl durch den Globulinteil als auch in noch
starkerem Mafie durch den Albuminteil des Meerschweinchen-
serums aktivierbar, wahrend sein Globulinteil durch keinen
der beiden Teile hamolytisch gemacht werden konnte. Einen
abweichenden Verlauf nahm der zweite Versuch.

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Ueber Serumhamolysine. 417

TabeUe II.

Froschserum

H.Blk.

5-proz.

Hamolyse nach

30 Min.

60 Min.

2 Std. 1

24 Std.

0,1

1,0

0

Oi

0±

o±

Fr.A. 0.2 1

1,0

0

+

+

Fr.B. 0.2

1,0

f)

0

0

0

M.A. 0.2

1,0

6

0

0

0

M.B. 0,2 i

1

1.0

0

0

0

1 0

Fr.A. + Fr.B.

0.2 0,2

1,0

0

+

+

+ +

0,1 0,1

1,0

0

+

+

+

Fr.A. + M.B.

0,2 0,1

1,0

0

+

+

+ +

Fr.A. + M.A.

0,2 0,1

1,0

0

+

+

1

+ + zn

M.B. + Fr.B.

1

0,1 0,2

1,0

0

0

0

0

M.A. + Fr.B.

0,1 0,2

1.0

0

0

0

0

Wir sehen daraas, daB schon der Albuminteil allein die
hamolytische Wirkung besaB. Es ist nun nicht zu entscheiden,
ob, wie das nach dem Ausfall des ersten Versuchs mdglich
erscheint, ein Fall vorlag, welcher der unvollkommenen Spal-
tung des Komplementes analog zu setzen ware, Oder ob es
sich um ein Haniotoxin handelt, das als Toxalbumin eben im
Albuminteil allein enthalten war. Es wflrde sich also lohnen,
init Frosch- und Aalserum derartige Versuche in grSBerem
Umfange anzustellen.

Zusammenfassung.

1) Bei der Untersuchung der Komplementwirkung bei ver-
schiedener Konzentration waren gesetzmaBige Verhaitnisse, wie
sie S c h e 11 e r gefunden hatte, weder bei gleichbleibender (2-fach
Idsender) noch bei steigender Ambozeptordosis festzustellen.

Doch hatte die Konzentration einen deutlichen EinfluB
auf den zeitlichen Ablauf der Hamolyse und schien inner-
halb einer optimalen Zone zu verlaufen, deren untere Greuze
bei 2,5 ccm Gesamtvolumen oft bereits iiberschritten war.

2) Jeder der beiden Komplementteile kann bis zu einem
gewissen Grade durch VergroBerung des Ambozeptors ersetzt
werden.

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418 Ernst Frankel, Ueber SerumMmolysine.

3) Die Untersuchung des Normalschweineserums zeigte,
dafi in diesem eine die Komplementhftmolyse fdrdernde Sub*
stanz enthalten war, die bei 56 abgeschwScht wurde. Diese
Substanz fiel mit der Eu*6Iobulinfraktion (CO^-Spaltung) aus
und wurde dann durch Erhitzen auf 56 ** weit weniger ge-
schftdigt als im nativen Serum. Bei 70 ging sie auch hier
zugruude. Sie ist sicher nicht mit dem Ambozeptor, vielleicht
auch nicht mit dem Mittelsttick identisch. In der Albumin-
fraktion war eine hemmende Substanz enthalten, die bei 56*^
ihre hemmenden F^higkeiten verier und, da sie an rote Blut-
kSrperchen gebunden wurde, sich wie ein Komplementoid
verhielt.

4) Die Mittelsttlcke verschiedener Tiere (Meerschweinchen,
Schwein, Hammel, Kaninchen) verhielten sich verschieden
sowohl chemischen Einflussen gegeniiber (Cholestearin) als
auch gegen physikalisch-chemische (24 Stunden Aufenthalt in
NaCl-L9sung, Erhitzen auf 57®).

5) Untersucht wurden ferner die Sera vom Rind, vom
Kaninchen (normal und mit Hammelserum geimpft), vom
Hund und vom Hammel. Die Ergebnisse stimmen grdRten-
teils mit denen von Altmann, Liefmann und Stutzer
iiberein, die in einigeii Punkten erganzt werden konnten.

6) Weiterhin wurde der Versuch gemacht, das Hamolysin
aus dem Froschserum (gegen Kaninchenblutkdrperchen), das
als komplex gilt, zu zerlegen. Ein Versuch fiel positiv aus,
der zweite zweifelhaft. Der Albuminteil wurde in seiner hamo-
lytischen Fahigkeit durch die beiden Komplementteile des
Meerschweinchenserums gefSrdert.

Llterator.

1) Scheller, Centralbl. f. Bakt., I. Abt., Orig., Bd. 56, 1910, Heft 2.

2) Marks, Zeitscbr. f. Immunitatsf., Bd. 8, Heft 4.

3) Frankel, E., Zeitscbr. f. Immunitatsf., Bd. 8, Heft 5 und 6.

4) Braun, Zeitscbr. f. Biocbem., Bd. 31, Heft 1 und 2, p. 65.

5) Altmann, Zeitscbr. f. exper. Tberapie und Immunitatsf., Bd. 7,1910,
Heft 1.

6) Friedberger und Seelig, Centralbl. f. Bakt., Orig., Bd. 46, p. 421.

7) Friedberger und Bezzola, Centralbl. f. Bakt., 1908, Heft 5.

8) Friedberger und Morescbi, Berl. klin. Wocbenscbr., 1906, No.31.

9) Liefmann und Cohn, Zeilsehr. f. Immunitatsf., Bd. 7, Heft 6;
Bd. 8, Heft 1; Bd. 6, Heft 1.

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UNIVERSITY OF IOWA

K. Muller, Vorkommen von Antituberkulin im menschl. Blutserum. 419

10) Sachs, Hofmeisters Beitr., Bd. 1, 1902; Miinch. med. Wochenscbr.,
1908, No. 9.

11) Kossel, Berl. kiln. Wochenscbr., 1898, No. 7.

12) Man waring, (.ontralbl. f. Bakt., Bd. 42, 1906.

13) Noguchi, Centralbl. f. Bakt., Abt. I, Bd. 34, 1903, p. 283, 286.

14) Bachs, Handb. ron Kraus u. Levaditi, Bd. 2, Komplemente, p. 984.

15) Bachs imd Bauer, Arb. a. d. Inst. f. exp. Therapie. Frankfurt 1907.

16) Bachs und Morgenroth, Berl. klin. Wochenscbr., 1902, No. 27.

17) Liefmann und Btutzer, Centralbl. f. Bakt., I. Abt., Orig., Bd. 56,
Heft 5 und 6.

18) Bordet und Gay, Annal. de I’Inst. Past., 1908, No. 8.

19) Traube, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 9, Heft 2.

Naehdruck verboten.

[A us der serodiagnostischen Station der Klinik ftir Geschlecbts-
und Hautkrankheiten (Prof. E. Finger) in Wien.]

Ueber das Yorkommen von Antitaberkulin im mensch*

lichen Blntsernm.

Von Dr. B. Mflller.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 14. Juni 1911.)

Im 5. Heft des 9. Bandes dieser Zeitschrift kommt
J. H. Schultz in einer Arbeit „Ueber das Vorkommen von
Antituberkulin im menschlichen Blutserum*^ zu dem SchluB,
dafi manchmal der Nachweis von geringen Antikbrpermengen
gegen Tuberkulin und Bacillenemulsion im Blutserum h&ufig
gelingt, ohne dafi daraus diagnostische Schliisse gezogen werden
dhrfen. ^Auch starke Reaktionen (++ und 4-+-]-) finden
sich bei Eranken, deren Untersuchung keinerlei Anhaltspunkte
gibt, besonders bei der Verwendung von Alttuberkulin als
Antigen. Bei Verwendung von Bacillenemulsion als Antigen
scheinen die stark positiven (++4*) Reaktionen nur bei
tuberkulosen Affektionen vorzukommen.**

Da nun £. Silfi und ich bereits vor einiger Zeit in zwei,
dieses Thema behandelnden Arbeiten^), die dem Autor ent-
gangen sein diirften, zu Shnlichen SchlQssen kamen und auch

1) B. Muller und E. Biiss, Vergleichende serologischeUntersuchungen
bd Tuberkulose und Syphilis. Wiener klin. Wochenscbr., 1910, No. 16,
und 1911, No. 16.

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420 Miiller, Vorkommen von Antituberkulin im menschl. Blutserum.

gewisse Tatsachen fanden, die zar Erkllirung der positiven
Tuberkulinreaktion mit nicht tuberkulbsen Seren fflhren kbnnten,
mbchte ich bier kurz unsere bisherigen Resultate anfuhren.

Bei vergleichender Untersuchung tuberkuloser Seren mit
Antituberkulin und bacillenfreier Bouillon, resp. Pep-
tonlbsung fanden wir gleichsinnige Resultate mit alien
3 Antigenen, die hbchstens manchmal quantitativ diiferierten.
Eine besondere AbhSngigkeit von Tuberkulinbehandlung
konnten wir nicht konstatieren. Auch luetische Sera reagierten
mit Antituberkulin resp. Bouillonldsung, ohne daB sie f(ir
Tuberkulose irgendwelche Anhaltspunkte gaben. SchlieBlich
zogen wir Lepra in den Kreis unserer Untersuchungen und
fanden gleichfalls parallele Reaktionen mit Tuberkulin und
Peptonldsung. Wir konnten auch feststellen, daB tuberkulose
Sera, die mit Antituberkulin resp. Peptonlbsung reagierten,
meist eine, wenn auch sehr schwache Reaktion mit alkoholi-
schem Herzextrakt zeigten. Das VerhSltnis gegenOber lueti-
schen Seren war ein solches, daB Luessera im Vergleich zur
StSrke der Herzextraktreaktion schwache Peptonreaktion gaben,
daB dagegen tuberkuldse Sera im VerhSltnis zur Herzextrakt¬
reaktion stark mit Pepton reagierten ’). Weiterhin fanden wir,
daB peptonarmes Tuberkulin die Reaktion nicht Oder in sehr
verringertem MaB gab.

Aus unseren Untersuchungen zogen wir den SchluB „daB
Tuberkulin als Antigen zum Nachweis spezifischer komplement-
bindender Substanzen unbrauchbar ist und daher die positiven
Resultate jener Autoren, die in ihren Versuchen das gewdhn-
liche Tuberkulin (Kochs Alttuberkulin) verwendeten, nicht
zum Beweise fQr das Vorhandensein spezifischer Immunsub-
stanzen im untersuchten Serum herangezogen werden dflrften.
Nur solche Tuberkuline, die nicht mehr Substanzen ffir das
Bacillenwachstum enthalten, die fiir sich allein imstande sind,
im tuberkuldsen Serum Komplemente zu fixieren, kdnnten
vielleicht hierzu dienen.**

1) Die Beaktion tuberkuloser Sera mit Herzextrakt liefi sich gewohn-
lich nur im Verlaufe des Versuches durch Vergleich mit Normalseren kon¬
statieren, wahrend sie am SchluB des Versuches v611ig negativ reagierten.

Frommannacho Buchdruckerei (Hermann Pohle) in Jena. — 3956

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ZeitsiMt £ IiniuiititsMiiuis^ Originala Bil Ha4

Nachdruck verboten. /

[Ans dem Institut fttr ezperimentelle Tberapie des Eppendorfer
Erankenhanaes (Oberarzt Dr. Much).]

Ueber die speziflschen Stoffe des Tnberkelbacillus nnd
anderer sftnrefester Bacillen.

Von Otto DeUmazin.

(EJmgegangen bd der Bedaktion am 27. April 1911.)

Seitdem zuerst von Wassermann und Citron nach-
gewiesen worden ist, dafi eine Reibe von tuberkuldsen Seren
komplementbindende Stoffe gegen Tuberkulin entbalten, baben
sicb eine ganze Reibe von Untersucbungen mit der Frage be-
scbiftigt, ob diese mit Tuberkulin komplementbindenden Stoffe
in den Seris Tuberkuldser als streng spezifisch anznseben sind
Oder nicbt. Diese Frage ist durcb die Untersucbungen von
Much und Hoessli^) dabin entscbieden worden, dafi diese
mit Tuberkulin komplementbindenden Stoffe durcbaus spezi-
fiscber Natur sind. Much und Hoessli baben ibre Korn-
plementbindungsversucbe nicbt nur wie die frflberen Unter-
sucber anf das Tuberkulin beschrknkt, sondern aucb eine ganze
Reibe von anderen Bacillensubstanzen in Form von Emulsionen
verscbiedener patbogener und nicbt patbogener s&urefester
Bacillen, sowie die isolierten Eiweifi-* und Fettsubstanzen der
Tuberkelbacillen auf ibre komplementbindenden Eigenscbaften
gepruft und sind dabei zugleicb von ganz anderen Frage-
stellungen ausgegangen. Sie kamen dabei zu dem Ergebnisse,
dafi die Tuberkelbacillen die spezifiscben kom¬
plementbindenden Stoffe mit den ibnen ver-
wandten nicbt patbogenen stlurefesten Bacillen
gemeinsam baben und sicb von ibren barmlosen
Verwandten nur durcb die grdfiere Menge dieser
spezifiscben Substanzen, d. b. nur quantitativ,
unterscbeiden. Sie neigen sicb damit der von Arloing zu-

1) H. Much und H. Hoessli, Tuberkulosestudien. Beitriige zur
Elinik der Tuberkulose und spezifiscben Tuberkuloeeforschung, 1910.

ZeitBchi. L ImmanitMtifofBchuiii:. Orig. Bd. X. 28

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422

Otto Oeilmann,

erst ausgesprochenen Ansicht zu, dafi die Tuberkelbacillen
nichts anderes seien als pathogen gewordene s&urefeste Sapro-
phyten. Dabei handelt es sich wahrscheinlich nicht um eine,
sondern um zwei^) spezifische Substanzen, von denen die
eine an die nur ziehlfllrbbare Fetts&uresubstanz
geknfipft ist und die andere wahrscheinlich an die nur g r a m -
fftrbbare Substanz oder an die Eiweillsubstanz. Eine
weitere Stiitze fOr diese Anschauungen erbrachten Much
und H o e s s 1 i aufier durch die eben angefiihrten Komplement-
bindungsversuche durch T i e r v e r s u c h e. Sie konnten zeigen,
dafi die lediglich mit Tuberkelbacillenldsungen
(Neurin-T.B.-Ldsung) behan d el ten Tiere nicht nur
Antikdrper gegen Tuberkulin und Tuberkel¬
bacillen bilden, sondern gleichfalls solche gegen
andere nicht pathogene s&urefeste Bacillen (Harn-
und Blindschleichentuberkelbacillen). Ebenso bildeten Tiere,
denen nur Harnbacillen injiziert waren, komple-
mentbindende Antikbrper sowohl gegen Harn¬
bacillen- als auch gegen Blindschleichen- und
Tuberkelbacillenemulsion, sowie gegen Tuber¬
kulin.

Diese Untersnchungen von Much und Hoessli habe
ich auf Veranlassung von Herrn Much weitergefQhrt und auf
andere s&urefeste Bacillen (Leprabacillen) und auf isolierte
Tuberkelbacillensubstanzen (Fetts&ure, Nastin, Eiweifi) ausge-
dehnt. Die Ergebnisse der Untersuchungen sind im folgenden
so angeordnet, dafi zunfichst die Komplementbindungsversuche
gegen die verschiedenen pathogenen und nicht pathogenen
sfiurefesten Bacillen, sodann die mit den isolierten Tuberkel-
bacillenbestandteilen gewonnenen Ergebnisse behandelt und
schliefilich die Frage nach dem Zusammenhange komplement-
bindender Stoffe im Serum mit einer frflheren Tuberkulose-
infektion auf Grund der von mir untersuchten 239 Sera er-
ortert sind.

I.

Bei den Komplementbindungsversuchen mit
Emulsionen saurefester Bacillen benutzte ich das

1) Neuerdings noch andere forrauliert, siehe spSiter.

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Spezifische Stoffe des Tuberkelbacillus u. and. saurefester Bacillen. 423

von Much und Hoessli angewandte Verfahren, von Bouillon
befreite Kulturen im Achatmdrser mit Karbol-NaCl-L5snng zu
verreiben. Ich stellte mir auf diese Weise Stammemulsionen
her, die in 30 ccm 0,5 g Bacillensubstanz enthielten. Und
zwar benutzte ich

1) Tuberkelbacillen (Typus humanus),

2) Harnbacillen. Zur Charakterietik dieser Bacillen
sei erwkbnt, dafi sie auf Tuberkelbacillennlbrbdden sehr schnell
und sehr tippig wacbsen, aber auch auf den gewdhnlichen
NSbrbbden, wenn auch weniger Qppig, so doch schnell und
ausgiebig gedeihen. Sie wacbsen stets skurefest und stimmen
auch darin mit den ecbten Tuberkelbacillen iiberein, dafi sie
die von Much gefundenen Granula aufweisen. Dagegen sind
sie nicht fkhig, irgendwelche tuberkulose Ver^nderungen in
den Organen hervorzurufen, haben also mit den Tuberkel¬
bacillen sensu strictiori nichts zn tun. FQr Kaninchen sind
sie avirulent, ftir Meerschweinchen in kleinen und mittleren
Dosen avirulent und erst in sehr grofien Dosen virulent
(a. a. 0. p. 201 ff.),

3) Thimotheebacillen,

4) Blindschleichen-Tuberkelbacillen, die fttr
WarmblQtler gleichfalls nicht virulent sind,

5) Leprabacillen. Diese wurden in der Weise ge-
wonnen, daB Leprome zerkleinert und mit Antiformin einige
Stunden bei 37 ® digeriert wurden. Nach erfolgter Aufldsung
der hbrigen organischen Bestandteile wurden die antiformin-
festen Leprabacillen abzentrifugiert, ausgewaschen und in
physiologischer NaCl-L5sung aufgeschwemmt,

6) Schliefilich wurden die Seren auch gegen Tuberkulin-
Behringwerk gepriift.

Die Bacillenemulsionen wurden stets vorher auf Selbst-
hemmung austitriert und in folgenden Verdiinnungen benutzt
(auf 1 ccm):

1) Tuberkelbacillenemulsion

0,06

ccm

2) Harnbacillenemulsion

0,1

n

3) Thimotheebacillenemulsion

0,05

V

4) Blindschleichenbacillenemulsion

0,2

r>

5) Leprabacillenemulsion

0,1

n

6) Tuberkulin

0,04

1)

28 *

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424

Otto Deilmann,

Die KomplementbinduDgsversuche wurden mit 0,2 ccm
Serum, 1 ccm Eomplement 1:10 und der eben angefflhrteD
Testdosis der Bacillenemulsionen angesetzt. Die Resultate
wurden nach 1 und nach 15 Stunden abgelesen.

Im folgenden babe ich die Ergebnisse der Komplement-
bindungsversuche so geordnet, dafi ich zun&chst die mit Tuber-
kulin sehr stark (H—1-+)» dann die stark (++) und mittel-
stark (-)-) reagierenden Seren zusammengestellt babe. Hierauf
folgen die Seren, die zwar mit Tuberkulin keine Komplement*
bindunggegeben haben, wobl aber mit Tuberkelbacillenemulsion.
Auch sie sind nach der SUrke ihrer Reaktion geordnet.

Tuberkulin

Tuberkel¬

bacillenemulsion

Ham-

bacillenemulsion

Thimothee-

bacillenemulsion

Blindschleichen-

Tuberkel-

bacillenemulsion

Lepra-

bacillenemulsion

Klinische Zeichen
fiir Tuberkulose

1. Ha.

2. Scha.

3. Bra.

4. Os.

5. Ost.

6. Kei,

7. Neu.

8. Ka.

+ + +
+ + +
+ + +
+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +
+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +

+

+ + +

+

+

+ + +

e

e

e

1

+

+ + +

e-)

e

0

e

0

klinisch 6, bei 2 mg

Tuberkulin 38,3®
Temperatur
e

Vater lungenleid.,
selbst e

9. Schii.

+ + +

+ +

+

+ + +

+

1 1

! 0

e

10. U.

+ + +

+ +

+

+

e 1

e

11. G6.

+ + +

+ +

e

0

e

12. P.

+ + +

+ +

e

e

0

6, Pirquet +

13. F.

+ + +

+ +

e

e

e

e

14. Lo.

+ + +

+ +

e

15. Bin.

+ + +

+

+++

+ + +

+ +

e

16. Si.

+ + +

+

+++

+ + +

4-

e

17. ScW.

+ + +

+

+++

+ +

+ +

e, Pirquet 0

18. 8p.

+ + +

+

0

e

0

e

Vater luugenldd.,

1

selbst 0

19. LL

+ + +

+

0

e

e

0

0

20. Sim.

+ + +

+

e

e

e

0

21. We.

+ + +

+

e

e

e

0

22. Eck.

+ + +

+

0

23. Ele. 1

+ + +

+

0

1) e = Weder klinisch noch anamnestisch nachweisbare Tuberkulose-
iofektion.

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Spezifische Stoffe des Tuberkelbacillus u. and. saurefester Bacillen. 425

Tiiberkulin

Tuberkel-

bacilleoemulsion

Harn-

bacillenemulsion

Thimothee-
bacillenemulsion ,

1

Blindschleichen-
Tuberkel-
bacilleneraulsion,

Lepra-

bacillenemulsion

Klinische Zeichen
fiir Tuberkulose

24. Ea.

+++

0

+++

++

+++

' Mutter an Tbk. f,

ebenfalls 1 Kind,

1

selbst 0, Pirquet 0

25. Co.

+++.

0

e

0

0

+++I

Tbk. in der Familie,

selbst Spitzenaffekt.

26. Luk.

+ + +

1 ^

0

0

0

0

27. Hav.

+++

e

0

28. Me.

+++

e

0

29. Sche.

+++

e

0

30. Ro.

+++

e

i

0

31. Pr.

+++

e

0

.32. Schl.

+++

e

!

1

0

33. Had.

:+ + +

e

1

1

0

34. E.

I+ + +

0

0

35. Fi.

+ + +

0

0

36. Kl.

+ +

'+++

+

0

0

0

37. Ga.

+ +

++

++

«

0

1

0

38. .Ta.

++

0

0

0

+++I

0

39. Earn.

+ +

++

e

0

0

+ '

0

40. Mol.

+ +

++

e

0

0

0

0

41. Erl.

++

+ +

0

0

0

0

42. Js.

+ +

++

0

0

0

Vater 13 J. liingen-

leidend, Schwesterin

e. LungenheilstStte

gewesen, selbst 0

43. Bar.

+ +

++

0

0

0

0

44. Ul.

+ +

++

0

0

0

0

45. Fu.

++

++

0

0

0

1

Tbk. des rechten

Daumens, Lunge 0

46. Bu.

+ +

++

0

0

0

1

Frau lungenkrank,

i

selbst a. d. Lunge 0

47. Al.

+ +

++

0

0

0

Klinisch 0 nach-

weisbar, doch rea-

gierte A. auf 1 mg

Tuberk. stark positiv

48. Fra.

+ +

++

0

0

0

0

49. Air.

+ +

++

0

0

0

0

50. Dr.

+ +

+

+ + +

+ + +

+ + +

0

51. Tr.

+ +

+

0

0

0

0

52. Lii.

+ +

+

0

0

0

0

53. Ru.

+ +

+

0

0

0

0

54. Vo.

+ +

+

0

0

0

An der Lunge 0,

anamnestisch 0, je-

doch Pirquet +;

Diagnose: Gehim-

tuberkel ?

55. Bov.

+ +

+

0

0

0

0

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426

Otto Deilmann,

Tuberkulin

Tuberkel-

bacillenemulsion

Harn-

bacillenemulsion

Thimothee-

bacillenemulsion

Jilin d scnieicnen -
Tuberkel-
bacilleneraulsion

Lepra-

bacillenemulBion

Klinische Zeichen
fiir Tuberkulose

56. Ti.

+ +

+

e

0

0

1 Bruder skrofulos

selbst 0

57. Har.

"f" “f*

+

e

0

0

0

0; bis 5 mg Tiiter-

58. Sz.

++

+

e

kulin nicht reagiert

59. Luck.

++

+

Skrofulose gehabt;

objektiv 0

60. Schul.

++ i

0

0

0

1

0 1

0

Lunge und anam-

!

nestisch 0; Diagnose:

1

Caries pelvis

61. Le.

+ +

e

0

0

0 1

Alte u. floride Tbk.

1

Bacillenbefund +

62. Ew.

+ +

^ 1

0

0

0

0

Schro.

+ + !

0

0

0

0

64. Ko.

++

e 1

0

65. No.

++ 1

e '

0

66. Ko. Frl.

++ '

e 1

0

67. Ka.

+

+ + + I

0

68. Ku.

+

I+++I

0

69. Had.

+

++

0

0

0

0

70. Kli.

4-

+

+ +

1 ^

0

71. Oh.

+

+

+

+

0

0

72. Mo.

+

+

0

0

0

0

0

73. Bui.

+

+

0

0

0

0

0

74. Tie.

+

+

0

0

0

0

Rechtseitip Nieren-

tuberkulose

75. Bo.

+

+

0

0

0

0

76. Pet.

+

+

0

0

0

0

77. Br.

+

+

0

0

0

0

78. Qu.

+

+

0

0

0

0; Pirquet 0

79. Bes.

+

+

0

0

0

0

80. Ku.

+

0

0

0

Mutter an Tbk. t,

selbst 0

81. Kr.

+

+

0

0

0

0

82. Ba.

+

4-

0

0

0

0

83. PI.

+

+

0

0

0

Vater u. Schwester

an Tbk. t> selbst 0

84. St.

+

+

0

0

0

85. PIu.

+

+

0

0

0

86. Bom.

+

+

0

0

0

0

87. Kre.

+

+

0

0

0

1 Bruder lungenlei-

dend, selbst Spitzen-

affektion genabt,

ausgeheilte Tbk.

88. Fu.

+

+

An Miliartbk. f

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Spezifische Stoffe des Tuberkdbacillus u. and. saurefester BacUlen. 427

Tuberkulin

Tuberkel-

bacillenemulsion

Harn-

bacillenemulsion

Thimothee-

bacillenemulsion

Blindschleichen-

Tuberkel-

bacillenemulaion

Lepra*

bacillenemulsioD

Elinische Zeichen
fiir Tuberkulose

89. Scha.

+

e

e

e

0

0

Vater an Tbk. pul-

1

moniun f, selbet 0

90. Ger.

+

e

e

e 1

0

0

91. Be.

+

e

e

e

0

0

92. Zi.

+

e

e !

e

0

Mutter an Tbk. pul*

monum f, selbst 0

93. Bch.

+

0

e

e

0

0

94. Blon.

+

e

e

e

0

Vater an Phtbise f,

selbst 0

95. Nar.

+

e

e

e

0

Tbk.pulmon um, Pir-

quet -1-+; Familie 0

96. LorL

+

e

0

0

0

0; aui 2 mg Tbk.

38^° Temp.

97. FrL

+

e

+

98. Pe.

+

e

1

1

0

99* Alb.

+

e

i

0

100. Hei.

e

++

++

0

0

i

i ^

101. Be.

e

++

++

0

0

0

102. Eit.

e

-r +

++

0

0

0

103. Ha.

e

+ +

e

0

0

0

104. Pu.

0

+ +

0

105. Kie.

e

+ +

1

Bruder u. Schwester

der Mutter luDgen-

1

krank: selbst stark

1

1

veraachtig auf

Spitzenkatarrh

106. SchL

e

+

++

0

+

0

107. Lie.

e

+

++

0

0

0

106. Mel

+

++

0

i e

0

109. Ea.Ma>

e

+

+

0

0

0

110. lier.

e

+

+

0

0

0

111. 8chu.

0

+

+

0

0

0

112. Eag.

e

+

e

0

0

0

113. Mil.

e

e

+ i

0

0

^ e ^

114 Gi.

e

e

+

1 ^

0

0

115. Vo.

e

e

+

!

0

116. Eel.

e

e

+

anamuestisch und

selbst Tbk.

:17. Lo.

0

e

+

0

118. Era.

e*

e

+

0

Es reagierten also:

Gegen

Positiv

>

1

Proz. der positiven
Seren

Ibberkuloeeantigen

118

_

100,0

Tuberkulin

99

18

84,6

Tuberkelbacillenemulsion

82

36

69.5

Leprabacillenemulsion

5

10

333

Harnbacillenemulsion

29

59

31,8

Thimotheebacillenemulsion

10

73

12,04

Blindschleichen-Tuberkelbacillenemulsion

7

75

8,5

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428

Otto Deilmann,

Durch diese Versuche erf^hrt also die bereits von Much
und Hoessli festgestellte Tatsache, dafi im Tuberkel-
bacillus spezifische komplementbindende Sub-
stanzen enthalten sind, die dieser mit anderen
verwandten Bacillen gemeinsam hat, die aber bei
den verwandten Arten in geringerem Mafie vor-
handen sind, eine neue Best&tigung. Und zwar kann man
den Grad dieser Verwandtschaft sogar quantitativ
auf Grund dieser grdfieren Untersuchungen dadurch aus-
drQcken, dafi man den Prozentsatz der gegen die verschiedenen
sSurefesten Bacillen positiv reagierenden Seren vergleichend
zusammenstellt.

Bei graphischer Aufzeichnung stellt er sich folgender-
mafien dar:

100 Proz.

95

yj

90

yy

85

yy

80

yy

75

yy

70

yy

65

yy

60

yy

55

yy

50

yy

45

yy

40

yy

35

yy

30

yy

25

yy

20

yy

15

y*

10

yy

5

yy

0

yy

Antigen

84,6 Proz.

69,5 Proz.

33,3 Proz.

31,8 Proz.

12 Proz.

8,5 Proz.

Tuber-

kulin

Tuberkd-

bacillen-

Emulsion

Lepra-

bacUlen-

Emulsion

Ham-

bacillen-

Emulsion

Thimo-

thee-

bacillen-

Emulsion

Blindschlei-

chentuberkel-

bacillen-

Emulsion

Es stehen also den Tuberkelbacillen die
Leprabacillen und die Harnbacillen in diesea
Versuchen biologisch am n&chsten, wahrend die
saprophytischenThimothee-undBlindschleichen-
bacillen einen weit geringeren Grad der Ver¬
wandtschaft aufweisen.

¥

K

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4

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Spezifische Stoffe dee Tuberkelbacillus u. and. saurefester Bacillen. 429

Dieselben verwandtschaftlichen Beziehungen hat Wills
im hiesigen lastitute mit Hilfe der Komplementbindung gegen-
Qber Seren von Leprakranken gefunden. Much^) und
Leschke^) haben schon friiher im Serum von Ziegen, die
mit Aufldsungen von Tuberkelbacillen in organischen S&uren
vorbehandelt waren, spezifische komplementbindende Stoffe
nicht nur gegen Tuberkulin und Tuberkelbacillen, sondern
auch gegen andere sEurefeste Bacillen und gegen die von
ihren Kulturen abfiltrierte Bouillon nachgewiesen.

Wenn wir oben von spezifischen Substanzen des Tuberkel¬
bacillus und anderer sUurefester Bacillen gesprochen haben,
so mflssen wir uns stets bewufit bleiben, dafi wir damit nicht
Eigenschaften ausdrficken wollen, die nur einer ganz be-
stimmten Bakterienart zukommen. Sowohl der Begriff der
Spezifitat wie der Art ist, vom erkenntnistheoretischen
Standpunkte aus, worauf auch Much wiederholt nachdrilcklich
hingewiesen hat, eine willkfirlich gesetzte menschliche Ab-
grenzung, die nur dann ein wirkliches Recht beanspruchen
kann, wenn man sich bewuQt bleibt, dafi sie lediglich mensch-
lichen Interessen dient, d. h. dafi sie den Ueberblick er-
leichtert und so dem Menschen in seinem Streben nach Er-
kenntnis geeignete Dienste erweist und sich in dieser Form
fflr die Auffindung neuer Tatsachen leichter handhaben lailt
(a. a. 0., p. 207). Gerade am Beispiele des Tuberkelbacillus
sehen wir, dafi wir den Begriff der Spezifitat ffir die in
ihm enthaltenen Substanzen auch auf andere ihm verwandte
Bacillen ausdehnen mtissen, von denen er sich nur durch die
grdfiere Menge dieser spezifischen Substanzen unterscheidet.
Es handelt sich also auch hier nicht urn qualitative
Wesensverschiedenheiten, sondern nur urn gra-
duelle Unterschiede der Quantitat mit zahlreichen
Zwischenstufen und Uebergangen. Natura non facit saltus.

1) Wills, The rdationship of add-hist bacilli. Centralbl. f. Bakt.,

1911.

2) Much, Ueber neuere Verfahren zur Tuberkelbadllenaufschliefiung.

3) Leschke, Ueber Aufschliefiung von Tuberkelbacillen und Elr-
zeugung von spezifischen Antikdrpern durch Tuberkelbadllenaufschliefiungen.
Biol. Verein Hamburg, Jan. 1911; Munch, med. Wochenschr., 1911, No. 11.

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430

Otto Deilmann,

Aus den Versuchen geht weiterhin hervor, daB, wie bereits
Much und Hoessli gefunden haben, die Tuberkulin-
komplementbindungsreaktion keineswegs immer
parallel geht mit der Bacillenkomplementbin-
dungsreaktion. Die Reaktion ist sogar in kaum mehr
als der Hklfte der Fklle gegenhber beiden Reagentien positiv.
Von 118 gepriiften Seren reagierten nfimlich nur 69 sowohl
gegen Tuberkulin als auch gegen Tuberkelbacillenemulsion
positiv = 58,4 Proz. (Much und Hoessli fanden bei ihren
Fallen das Verhaitnis 19:33 = 57,6 Proz., also nahezu den-
selben Wert). 13 Seren reagierten nur gegen Tuberkelbacillen-
eroulsion und 30 nur gegen Tuberkulin, in Tabellenform:

Von den gegen Tuberkelbacillen-Emulsion und
Tuberkulin gepriiften 118 Seren teagieren positir

Sera

Proz.

G^n Tuberkelbacillenemulsion und Tuberkulin

69

58,4

Nur gegen Tuberkelbacillenemulsion

13

11,0

Nur g^n Tuberkulin

30

25,0

Diese Verschiedenheiten erkiaren sich zweifellos am ein-
fachsten, wenn man sie nach dem Vorgehen von Much und
Hoessli aufKosten quantitativer Unterschiede der
spezifischen Snbstanzen in den verschiedenen Re¬
agentien setzt, ebenso me sich auch die Abstufungen in der
Starke der Komplementbindung gegen die verschiedenen
saurefesten Bacillen durch quantitative Unterschiede der in
ihnen gemeinsam enthaltenen spezifischen Substanzen erkiaren.

II.

DieFrage, in welchen Teilen der baciliaren Leibes-
substanz die spezifischen Stoffe der saurefesten Bacillen zu
suchen sind, haben Much und Hoessli auf Grund ihrer
Untersnchungen dahin beantwortet, daB wahrscheinlich sowohl
die ziehlfarbbare Fettsauresubstanz als auch die gramfarbbare
Substanz Oder die EiweiBsubstanz imstande ist, solche spezi¬
fischen Reaktionen auszuldsen. Bekanntlich besteht der Tu-
berkelbacillus nach den Untersnchungen von Much und
Deycke^) aus zwei Hauptbestandteilen:

1) Deycke und Much, Ueber einige strittige Punkte in der Biologic
dee Tuberkelbacillus. Berl. klin. Wochenschr., 1910, No. 42.

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Bpezifische Stofie des Tuberkelbacillus u. and. saurefester Bacillen. 431

I. Eiweifi;

II. Fettsubstanzen. Diese zerfallen wiederum in
Neutralfette und FettsS.uren. In dem Rfickstand, der
die Neutralfette enth91t und als Tuberkulo-Nastin be-
zeichnet worden ist, findet sich auch ein hochmolekularer
Fettalkohol, w&hrend die Lipoide in dem Gemisch der
Fetts&uren enthalten sind. Die Stlurefestigkeit und Ziehl-
fUrbbarkeit ist an die Fetts&uren geknfipft. In einem Schema
stellen sich diese Substanzen folgendermafien dar (entnommen
aus Much, Ergebnisse der wissenschaftlichen Medizin, M&rz
1911):,

Tuberkelbadllus

Eivreifi Fettsubstanzen

Neutralfette Fettsauren

+ Fettalkohole + Lipoide

= Tuberkulo-Nastin

Much hat neuerdings mit Leschke diese Bestandteile
einem genaueren Studium unterzogen, worfiber in ausfflhr-
licher Weise in kurzer Zeit von ihnen berichtet warden wird ^).
Auch mir wurden diese Substanzen von ihm zur Verfflgung
gestellt mit der Mafigabe, sie bei meinen mit Tuberkulin
positiv reagierenden Seris zu prhfen. Ueber den Ausfall
dieser Untersuchungen will ich kurz berichten:

1) Das Tuberkelbacillen-Eiweill wird nach den
Angaben von Deycke und Much in der Weise gewonnen,
daJB Tuberkelbacillen mit Benzoylchlorid entfettet warden. Der
Rfickstand enthftlt dann nur noch die Eiweifikfirper. Man
kann sie durch Zusatz von Dimethylharnstoff in Ldsung bringen,
jedoch babe ich ffir die Komplementbindungsversuche die
entfetteten Tuberkelbacillen mit destilliertem Wasser im
Achatmfirser zu einer gleichmfiBigen 1-proz. Emulsion ver-
rieben. Diese 1-proz. Emulsion wurde auf Selbsthemmung
geprfift und ergab den Titer 0,04; die ffir die Eomplement-
bindungsversuche verwandte Verdfinnung ist demnach 1:2500.

2) Die Tuberkelbacillen-Fettsfiuren warden nach
der von Deycke*) im Jahre 1907 beschriebenen Methode in

1) Beitrage zur Klinik der Tuberkulose, 1911.

2) Deycke, Deutsche med. Wochenschr., 1907.

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432

Otto Deilmann,

der Weise erhalten, dafi man gut gewaschene Tuberkelbacillen
mit zwei- oder mehrprozentiger Kalilauge emulgiert and l&ugere
Zeit kocht. Daun tritt ein Moment ein, wo s&mtliche Bacillen
durch Verseifung entfettet werden und zerfallen, also alle
sSurefesten Stabchen verschwunden sind. Wird nun mit Salz-
skure gefailt, so tritt ein starker Niederschlag auf, der sich
leicht abfiltrieren lafit. Das klare Filtrat enthait Salze, Ex-
traktivstoife, albumosenabnliche Substanzen und Glyzerin,
letzteres als Zeichen, daB Neutralfette verseift sind. Der vbllig
chlorfrei gewaschene Filterrtlckstand wird mit absolutem Alkohol
extrahiert und sehr ausgiebig gewaschen. Der alkohplische
Extrakt enthait Fettsauren und Lipoidstoffe. Er stellt nach
dem Veijagen des Alkohols eine hellbraunliche erstarrende
Masse dar, die sich nach Z i e h 1 intensiv rot, in etwas dickerer
Schicht fast schwarzrot farbt. Die Lipoidstoffe kommen fflr
diese auBerordentlich starke Saurefestigkeit nicbt in Frage,
bleiben also die Fettsauren, und diese Eigenschaft teilen sie
bezeicbnenderweise mit anderen bekannten Fettsauren, wie
Palmitin- und Stearinsaure. Diese hellbraunliche starre Masse,
die die Fettsauren und Lipoide enthait, babe ich nach der
Vorschrift von Much (a. a. 0.) mit Alkohol im Verhaitnis
1:20 im Achatmdrser verrieben. Von dieser alkoholischen
L5sung wurde daun eine l*proz. wasserige Emulsion herge-
stellt, deren Titer bei der Auswertung auf Selbsthemmung sich
als 0,03 ergab. Die fflr die Komplementbindungsversucbe
benutzte Verdflnnung ist demnach 1:3000.

3) DasTuberkulo-Nastin(Neutralfett + Fettalkohol)
wird nach den Angaben von Deycke und Much (a. a. 0.)
in der Weise erhalten, daB der aus der Benzoylchloridlflsung
gewonnene Fettbestandteil nach der Extraktion der Fett¬
sauren mit Alkohol weiterhin mit Aether extrahiert wird.
Das Aetherextrakt stellt einen festen kristallinischen Stoff
dar. Er besteht aus dem intrabakteriellen Neutralfett und
einem hochmolekularen Fettalkohol, der sich nach der Ziehl-
schen Methode schwach rosa farbt, also fflr die Saure¬
festigkeit neben den intensiv farbbaren Fettsauren nicht in
Betracht kommt.

An dieser Stelle muB einem fundamentalen Irrtume be-
gegnet werden, der in den Arbeiten von Babes enthalten

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Spezifische Stoffe des Tuberkelbacillas u. and. saurefester Bacillen. 433

ist. Babes hat mit Aetherextrakten von Tuberkelbacillen
gearbeitel, die er Nastin neont, und weswegen er seine Er-
gebnisse mit &hnlichen von Mach vergleicht. Er sagt selbst,
dafi das Aetherextrakt eine olige FlQssigkeit darstellt. Nun
ist aber 1) Nastin ganz etwas anderes als ein Aetherextrakt
sSlurefester Bacillen. Fiir die Nastinbereitung miissen zuerst
die Bacillen durch ein besonderes Verfahren entfettet werden.
Aus dem gewonnenen Fettbestandteile werden dann zuerst
die Fettslluren und Lipoide extrahiert, und der dann hbrig
gebliebene Rlickstand wird erst mit Aether extrahiert.
Dieses Aetherextrakt stellt das Nastin dar. 2) Dieses Nastin
ist alles andere als eine dlige FlQssigkeit, vielmehr be-
steht es aus reinen Fettkristallen. Es ist ein fester
Korper. Die Untersuchungen von Babes baben also gar
nichts zu tun mit den Feststellungen Muchs und seiner
Schiller.

Das Nastin ist bekanntlich als fester Fettkdrper in Wasser
unloslich, man kann deshalb nur mit Emulsionen arbeiten.
Bisher war es sehr schwierig, eine fflr serologische Zwecke
gendgend gleichmgBige Emulsion eines Fettes herzustellen.
Eine solche fiir Kompleinentbindungsreaktion geeigneteEmulsion
hat zuerst Much^) angegeben. Er erhitzt 1 g Nastin mit
20 ccm absolutem Alkohol iiber der Flamme, dabei lost sich
das Nastin. Dann werden 80 ccm warmes destilliertes Wasser
zu der alkoholischen Losung hinzugegeben, wodurch eine
milcbige 1-proz. Emulsion entsteht. Diese wurde mit physio-
logischer NaCl-Losung weiter verdOnnt und nach der Aus-
titrierung auf Selbsthemmung in der Verdflnnung 1:5000 fiir
die Komplementbindungsreaktionen verwandt.

Mit diesen aufierordentlich stark verdiinnten Emulsionen
warden die mit Tuberkulin positiv reagierenden Seren gepriift.
Die Ergebnisse dieser Komplementbindungsversuche sind in
der folgenden Tabelle zusammengestellt und nach der Starke
ihrer Komplementbindung gegenflber dem Tuberkulin ge-
ordnet.

1) Much, Nastin, ein reaktiver Fettkorper. Miinch. med. Wochen-
schrift, 1909,/No. 36.

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434

Otto Deilmann,

Tuberkulin

Tuberkulo-

Nastin

Tuberkel-

bacillen-

Fettsauren

Tuberkel-

bacillen-

EiweiS

4. Os.

+++

+ + +

4-

e

25. Co.

+++

+ + +

0

4-

18. Sp.

+++

+ +

e

e

19. Li.

+++

+ -F

o

e

9. Schii.

+++

e

+++

e

2. Scha.

+++

e

+++

e

12. P.

+++

e

e

e

21. We.

+++

e

38. Ja.

++

++-I-

0

e

40. Md.

++

e

e

39. Kam.

++

+

e

60. Schmt.

++

e

0

e

53. Eu.

++

e

56. Ti.

++

e

73. Bui.

+

+ +

e

e

89. Schii.

+

+

e

e

84. Sti.

+

e

0

0

74. Tie.

+

e

e

0

92. Zi.

+

e

e

69. Had.

+

e

94. Blon.

+ 1

e

Wenn wir die Anzahl der positiven und negativen Re-
aktionen zusammenstellen, erhalten wir folgeode Zahlen:

Es reagierten:

G^en

Positiv

N^ativ

Proz. der
poeitiven Seren

Tuberkulin

99

18

84.6

Tuberkulo-Nastin

9

7

56.2

Tuberkelbacillen-Fettsauren

3

18

14.3

Tuberkelbacillen-Eiweifi i

1

13

7,1

Es zeigt sich also, dall sowohl das Tuberkel-
bacillen-EiweiQ als auch die Neutralfette und
die Fetts&uren eine spezifische Kompiement-
bindung mit tuberkuldsen Seren zu geben vermdgen.
Jedoch bestehen Unterschiede in der Stfirke der
komplementbindenden F&higkeit zwischen diesen drei
Substanzen. Die meisten und die st&rksten Hem-
inungen gibt das Tuberkulo-Nastin, wShrend die

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Bpezdfische Stofie des Tuberkdbacillas u. and. saurefester Bacillen. 435

Tuberkelbacillen-FettsEuren und das Tuberkel-
bacillen-EiweiGnurbeieinigenwenigenbesonders
stark reagiereDden Seren Koroplementbindung geben.
Dabei gehen, wie aus der Tabelle ersichtlich ist, die Kom-
plementbindungen mit diesen drei Substanzen durchaus nicht
parallel, sondern es bestehen auch bier die gleicben Unter-
schiede, die wir oben im Verhalten der Seren gegen Tuberkulin
und Tuberkelbacillenemulsion gefunden haben. Einige Seren
reagieren nur gegen Tuberkulo-Nastin, andere nur gegen
Tuberkelbacillen-Fetts^luren. Die quantitativen Unterschiede
in der H&ufigkeit und Stllrke der mit diesen drei Tuberkel-
bacillensubstanzen erhaltenen Komplementbindungen lassen
sich dadurch anschaulich machen, dafi man die Prozents&tze
der mit ihnen erhaltenen positiven Reaktionen graphisch neben-
einander stellt:

100 Proz.
95 „

90 „

^ ”
80 „

75 „

70 „

65 „

60 „

55 „

50 „

45 „

40

35 „

30 „

25 „

20 „
15 „

10 „

5 „

0 „

77 Proz.

56,2 Proz.

14,3 Proz.

roz.

Antigen

Tuberkulin und
Tuberkelbacillen¬
emulsion

(Mittelwert)

Tuberkulo-

Nastin

Tuberkel-

bacillen-

Fettsauren

Tuberkel-

bacillen-

EiwelB

Prozentsatz der gegen Tuberkelbacillensubstanzen positiv reagierenden Sera.

Es ergibt sich nun aus dieser Tabelle eine quantitative
Uebereinstimmung zwischen der Summe der mit

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436

Otto Deilmann,

den drei isolierten Tuberkelbacillenbestand-
teilen erhaltenen Komplementbindungenundden
mit Tuberkulin und Taberkelbacillenemulsion
gefundenen positiven Reaktionen. ZSlhle ich die mit
Tuberkulin und mit Tuberkelbacillenemulsion reagierenden
Sereu zusammen und nehme den Mittelwert, so erhalte ich:

Tuberkelbacillenemulsion 69,5 Proz.

Tuberkulin 84,6 „

mttel; 154,1:2 = 77,05 Pro^

Zfihle ich nun die mit den isolierten Tuberkelbacillen-
bestandteilen erhaltenen positiven Reaktionen zusammen, so
erhalte ich:

Tuberkulo-Nastin 56,2 Proz.

Tuberkelbacillen-Fettsiiuren 14,3 „

Tuberkelbacillen-EiweiU 7,1 „

Summe 77,6 Proz.

also annilhernd die gleiche Zahl.

Es geht hierans hervor, dall die spezifischen Stoffe der
Tuberkelbacillen nicht einheitlicher Natur sind, sondern sich
auf das Eiweill, die Fettslluren und das Neutralfett verteilen,
so zwar, daB die Summe der in jedem dieser drei
Bestandteile enthaltenen spezifischen Sub-
stanzen gleich ist derMenge der spezifischen
Substanz, die der Tuberkelbacillus alssolcher
und in gleicher Weise d a s Tuberkulin enthalt.
Dasselbe Verhalten gegenuber den 3 Bestandteilen des Tu¬
berkelbacillus ist hier im Institute auch von Wills in Kom-
plementbindungsversuchen von Lepraseren und von Much
und Leschke mit dem Serum von Ziegen gefunden worden,
die mit einer Aufldsung von Tuberkelbacillen in Milchsllure
vorbehandelt waren.

Wichtig erscheint es mir, noch einmal besonders auf die
positiven Ausf&lle der Reaktionen mit einem reinen Fett-
k^rper binzuweisen. DaB es neben den EiweiBantikbrpern
auch spezifische Lipoidantikdrper gibt, hat die Forschung der
letzten Jahre verschiedentlich gelehrt. Lipoide sind aber sehr
kompliziert zusammengesetzt und deshalb schwer zu studieren.

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Spezifische Stoffe des Tuberkelbadllus u. and. B&urefester Bacillen. 437

Much war dann der erste, der auch ffir reine Fette
spezifische Antikdrper oachwies. Dadurch und durch
fortgesetzte neue Untersuchaugen hat er ein ganz neues
Stndium der FettantikdrperbilduDg erschlossen uud damit,
wie ich glaube, gerade fQr die Tuberkulose ganz neue Bahnen
der Forschung ermdglicht.

III.

Diese Untersuchungen fiber spezifische komplementbindende
Stoffe in menschlichen Seren gegenfiber Tuberkelbacillensub-
stanzen werfen zugleicb einiges Licht auf die Frage nach dem
Znsammenhang zwischen biologischer Tuber-
kulosereaktion und klinisch n a c h w e i s b a r e r
Tuberkulose.

Man ist an diese Frage bisher immer von der Seite heran-
getreten, dafi man Seren von klinisch Tuberkuldsen auf kom¬
plementbindende Stoffe gegenfiber Tuberkuloseantigenen ge-
prfift hat, und dabei hat sich herausgestellt, dafi nur ein sehr
geringer Prozentsatz dieser Patienten eine positive Reaktion
gab. Ich habe nun bei meinen Untersuchungen 239 Seren
von Kranken jeglicher Art, bei denen in der fiberwiegenden
Mebrzahl der Ffille keinerlei klinisch nachweisbare Tuberkulose
bestand, untersucht und in 118 Seren, d. h. in 50 Proz.,
einepositiveTuberkulin-Komplementbindungs-
reaktion erhalten.

Die Angaben, ob klinisch oder anamnestisch Tuberkulose
vorgelegen bat oder nicht, habe ich bereits im I. Abschnitt
in der grofien Zusammenstellung (Tabelle I) angeffihrt. Es
ergeben sich dabei folgende Zahlen.

Von 118 positiv reagierenden Seren stammten

11 Seren von klinisch Tuberkuldsen,

90 Seren von klinisch Nichttuberkuldsen,

12 Seren von klinisch Nichttuberkuldsen aus tuber-
kulosebelasteten Familien,

5 Seren von klinisch Nichttuberkuldsen mit geprfifter
positiver Tuberkulinreaktion (Allgemeinreaktion).

Es geht also auch aus diesen Untersuchungen mit aller
Deutlichkeit hervor, dafi spezifische biologische Tuber-

Zeitsdur. f. ImmaotUUifonchaDg. Orif. Bd. X. 29

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438

Otto Deilmann,

kulosereaktionen keineswegs der Ausdruck einer
aktiven Tuberkulose zu sein brauchen, wie bereits durch
die aasgedehoten Untersuchungen von R6mer^) und neuer-
dings von Much mit aller Sicherheit festgestellt worden ist.
Um eine Tuberkulosereaktion zu erhalten, ist es nicht nbtig,
dafi der betreifende Kdrper tuberkulbs ist, er kann ebensogut
immunisiert sein. „Gerade das interessante Kapitel der Selbst-
immunisierung bei Tuberkulose und der sogenannten Latenz
hat mit Deutlichkeit ergeben, dafi wir bei den betreffenden
Individuen bei positivem Ausfall biologischer Tuberkulose-
reaktionen keineswegs immer mit einer nachweisbaren Tuber¬
kulose zu rechnen baben. Von dem Pferde sind wir Iftngst
herunter, dafi eine biologische Tuberkulosereaktion immer
einer nachweisbaren Tuberkulose entsprechen intisse. Dagegen
haben wir die Einsicht gewonnen, dafi bei nicht nacbweisbarer
Tuberkulose dennoch die Tuberkulosereaktionen positiv sein
konnen, und zwar in spezifischem Sinne, d. h. also im Sinne
von Selbstimmunisierungsvorgfingen oder Latenz. Eine positive
Reaktion bedeutet immer nur, dafi der Kdrper mit dem be¬
treffenden Virus irgendwie und irgendwann einmal in Berttbrung
gekommen ist. Zeitangaben fiber das Wie und Wann kann
nicht der Biologe, sondern nur der Kliniker machen, soweit
ihm dies fiberhaupt mdglich ist^ (Much und Hoessli, a.a. 0.,
p. 211). Dafi die Komplementbindungsmethode gegenfiber
Tuberkelbacillen und Tuberkulin nicht in noch mehr als
50 Proz. der Ffille eine positive Reaktion ergibt, fihniich wie
die lokalen Tuberkulinreaktionen, liegt an dem Vorhandensein
gewisser an sich Ifisender Stoffe in den Seris. Wenn man
diese Stoffe nach einer im hiesigen Institut ausgearbeiteten
Methode von Holmgren durch Absfittigen mit Hammelblut-
kdrperchen entfernt, findet man in einem weit hdheren Prozent-
satze bei alien fiber 14 Jahre alien Menschen eine positive
Komplementbindung gegenfiberTuberkuloseantigen (cf. Much,
Immunitfitswissenschaft, p. 244).

Dafi im fibrigen die Komplementbindnngsversuche mit
Tuberkulin als spezifisch im Sinne einer Tuberkuloseberfihrung

1) R6mer, Weitere Versuche Tiber Immunitiit g^en Tuberkulose.
Beitr. z. Klinik d. Tuberk., Bd. 13, 1909, Heft 1.

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Spezifische Stofie des Tuberkelbacillus u. and. saiirefester Bacillen. 439

anzusehen sind, darauf einzugehen erspare ich mir, am
Wiederholungen zu vermeiden. Ich verweise auf die Aus-
fOhrangeo von Much uadHoessli, worin auf die spezifische
und unspezifische Kompouente geuauer ROcksicht genommen
wnrde.

Zusammenfassung.

1) Im Tuberkelbacillus sind spezifische komplementbin-
dende Substanzen enthalteu, die er auch mit anderen ver-
wandten siiurefesten Bacillen gemeinsam hat. Der Grad der
Verwaudtschaft zwischen diesen s9,urefesten Bacillen lUfit sich
quantitativ bestiromen auf Grand der Mengenunterschiede der
in ihnen entbaltenen spezifiscben Substanzen. Dem Tuberkel¬
bacillus am nSchsten stehen die Lepra- and Harnbacillen, am
entferntesten die saprophytischen Thimothee- und Blind-
schleichentuberkelbacillen.

2) Die spezifiscben Stoffe des Tuberkelbacillus sind nicht
einheitlicber Natur. Sowohl das Tnberkelbacilleneiweifi als
auch die Neutralfette (Tuberkulo-Nastin) und die Fettsfiuren
vermdgen eine spezifische Reaktion zu geben. Dabei reagiert
am stfirksten das Tuberkulo-Nastin, weniger stjirk die Fett-
sauren und nur sehr schwach das Tnberkelbacilleneiweifi.

3) Das Vorhandensein komplementbindender Stoffe in
menschlichen Seren gegenfiber Tuberknloseantigenen steht in
keinerlei Zusammenhang mit klinisch nachweisbarer Tuber-
kulose, sondern weist ebenso wie die anderen biologischen
Tuberkulinreaktionen nur auf eine frOher erfolgte Tuberkulose-
berfihrung bin.

29*

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440

B. Galli-Valerio et M. Bornand

Nachdruek verboten.

[Institut d’Hygi^ne et de Parasitologie de I’Universit^ de Lausanne].

Recherches snr la fixation du complement par le procede
de Sabrazds-Eckcnsteln.

Par B. Galli-Valerio et M. Bornand.

(Eingegangen bei der Bedaktion am 28. April 1911.)

Parmi les nombreux precedes proposes pour simplifier la
technique deWassermann pour la fixation du complement
dans la syphilis, celui de Sabrazes-Eckenstein est cer*
tainement un des moins connus. Derive de la methode de
Hecht, ce precede simplifie tellement les recherches sur la
fixation du complement qu'il pourrait permettre au medecin
lui mSme de pratiquer ce genre de recherches.

Si nous nous sommes decides i I’experimenter, e’est que
le precede typique de Wassermann est, nooobstant son
exactitude, tellement sujet des causes d’erreur vu sa com¬
plication, qu’il ne peut etre employe que dans des instituts
et par des personnes ne s’occupant que de pareilles recherches.
Et meme dans ces conditions on a souvent des resultats tout
k fait contradictoires, la reaction faite avec un mSme serum
etant indiquee comme positive dans des laboratoires, negative
dans d’autres.

Ainsi par exemple dans une discussion qui a eu lieu k la Soci^te de
m^decine berlinoise'), Freudenberg a signal^ le fait que des laboratoires
diff^rents, lui ont donn4 avec le rn^me s^rum, des r^ponses difiiSrentes; un
m4nie institut avec un m4me s^rum a doon4 successivement r4ponse
affirmative, puis douteuse ou vice-versa. Ces affirmations ont 4t4 con¬
firmees par Cohn, Dreuw, Wossidlo qui dans 20 cas n’a eu que

1) Semaine M4dicale 1910, p. 287 et 299.

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Fixation du complement par le proc^de de Sabrazee-Eckenstdn. 441

7 fois des reponses concordantes des differents institute, tandis que 13 fois
elles etaient en contradiction.

Or, si des m6thodes plus simples ^liminent une quantity
de manipulations qui agissent certainement comme cause
d’erreur dans la technique de Wassermann, tout en 6tant
par elles-mSmes moins exactes, elles pourront donner des
r4sultats fort analogues k ceux qui sont donn4s par la m6thode
typique de Wassermann. Les bons r^sultats qu’on obtient
par les simplifications de Hecht, Noguchi etc. sont 1^
pour le ddmontrer.

La technique au proc6d6 Sabraz^s-Eckenstein est
la suivante^:

1** Antigone: 20 gr. de coeur de Thomme, lave, hache, triture dans un
mortier, et melange arec 100 c.c. d’alcool abeolu. On agite et on chauffe
pendant 2 '‘ au bain'marie k 60**. On absmdonne 24^ k la temperature de
la chambre puis on decante I’alcool et on le conserve b I’abri de la lumibre
dans un flacon bouche k I’emeri.

2** Le serum de I’homme: II faut I’employer le plus vite possible, en
CBS coutraire il perd son pouvoir hemolytique. En tout cas, il est prefe¬
rable de le garder en contact avec son caillot plutOt que separe de ce
dernier.

3** Les globules rouges du mouton: On defibrine le sang de mouton
et on en melange 5 c. c. avec 95 c. c. d’une solution aqueuse de chlorure
de likxlium & 97«o> Avant de proceder aux recherches il est necessaire de
titrer I’antigbne, c’est b dire etablir b quelle dilution il faut I’employer. Dans
ce but, il faut disposer d’nn serum provenant d’une personne sUrement
syphilitique et d’un provenant d’une personne sUrement non syphilitique.
La dilution la plus faible de I’antiglme dans la solution physiologique,
dilution qui empbche I’hemolyse en presence du serum du syphilitique et
qui n’exerce aucune action en presence d’un serum d’un sujet indemne est
adoptee.

Four &ire les dilutions de I’antigbne il est b recommander de projeter
la solution physiologique unite par unite sur I’extrait alcoolique, car de
la Borte, on obtient une dilution trbs opalescente, qui comme Sachs et
Rondoni ont demontre, lie plus energiquement le complement.

Cette dilution est fraichement prepares pour chaque serie d’ex-
periences.

1) J. Sabrazbs et £. Eckenstein, Diagnostic de la Syphilis par
un precede simplifie de deviation du complement, Paris 1910.

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442

B. Galli-Valerio et M. Bornand,

L’antig^ne titr4, void la marche de la reaction:

On prend trois ^prouvettes dons chacune desquelles on verse Vio
de c. c. du B^rum humain k examiner. A la premiere on ajoute Vio
de solution physiologique k V,o I’antigfene dilu4; a la 2*,

*/,o de C.C. du m^me antigbne, et k la 3* de c.c. de solution physiologique
^ 97oo* vivement les ^prouvettes et on les place i l’4tuve k 37®

pendant 1‘‘ et '/*• Ensuite on ajoute il chacune de ces trois ^prouvettes
Vio de C.C. de la solution de globules rouges de mouton h 5®/o. On place
de nouveau h I’^tuve et on examine api^ 1 h 2'*, c.-h-d. apr^ que l’4prouvette
t4moin est h4molys^.

Si la fixation du complement est negative, les 3 eprouvettes
sont compietement hemolysees, si au contraire elle est positive,
la 1 et la 2 presentent les globules au fond et le liquide est
clair. chose qui s'accentue en gardant les eprouvettes dans la
glaciere ou dans un endroit frais. Dans quelques cas, on
pent constater que la seule eprouvette 2 ne presente pas d’bemo-
lyse; et, pour Sabrazes et Eckenstein, ces cas doivent
etre consideres generalement comme negatifs.

Sabrazes et Eckenstein disent que la methode peut
etre aussi appliquee au liquide cephalo-rachidien, k condition
d’employer comme unite Vio et V 2 <1® c. c., et comme hemoly-
tique VlO de c. c. de serum d’un individu normal. Les resultats
obtenus par Sabrazes et Eckenstein correspondent assez
e ceux obtenus par la methode typique de Wassermann,
et dans une lettre adressee k Tun de nous (9 novembre 1910),
Sabrazes nous disait que sa statistique portait maintenant
sur 2500 cas, chose qui lui permettait d’affirmer que le precede
en question ne le cede en rien au precede de Wasser-
mann.

Pour pratiquer nos recherches, nous avons prepare le
12 octobre 1910 I’antigene suivant la technique indiquee, et
e’est cet antigene que nous avons employe pour toutes nos
experiences, en le diluant chaque fois au moment oh la
recherche devait etre pratiquee. Toutes nos experiences etaient
en mSme temps control6es par le precede typique de Wasser-
m a n n dans des laboratoires tout h fait independants du
ndtre.

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UNIVERSITY OF IOWA

Fixation du complement par le proc^de de Sabrazes-Eckenstein. 443

Dans une s6rie de recherches pr6alables, nous avons pu
6tablir que le proc6d4 Sabraz4s-Eckenstein,en employant
I’antigbne dilu6 jusque 1:100, permet r4ellement de pratiquer
la fixation du complement avec des sdrums provenants d’in-
dividus sfirement sypbilitiques, tandis qu’avec des s4rums de
personnes sfirement non sypbilitiques; I’bemolyse 4tait com¬
plete dans les 3 dprouvettes.

Quant e la dilution de I’antigene qui se pr4te le mieux
poor les recbercbes, nous avons constate que c’est la dilution
1:45, 1:50; dilution qui correspond aussi e celle utilisee par
Sabrazes et Eckenstein. C’est pour cela que nous
avons utilise pour la plus grande partie de nos recbercbes
I’antigene diloe 1:45. Cette dilution doit etre, comme nous
avons indique, preparee en projetant petit k petit dans I’extrait
alcoolique la solution pbysiologique, car de la sorte, on
obtient les dilutions opalescentes qui se pretent mieux pour
la reaction.

Les serums de I’bomme que nous avons utilises, nous
ont ete envoyes en partie dej4 separes de leur caillot, en
partie en contact avec ce dernier.

Comme on le verra, nous en avons trouve qui n’avaient
pas de pouvoir bemolytique, cbose qui rendait la reaction
nulle. Sabrazes et Eckenstein^) ont eu 28 de ces cas
sur 500 examines (le 5 k Q%), et ils ont tourne la difficulte
en ajoutant aux eprouvettes une unite de serum frais normal
sfirement bemolytique. Nous I’avons dans quelques cas tournee,
en employant une dilution de globules rouges de mouton k
2% au liea de 5Vo-

Nous resumerons dans des tableaux le resultat de nos
recbercbes et en ferons apr^s la discussion^).

1) Travail cit4 p. 8.

2) Dans ces tableaux C aprbs la date de la prise du sang, indique que
le B^rum a 4t4 en contact avec le caillot; -|- indique fixation positive du
complement; —fixation negative [precedes Sabrazbs-Eckenstein (S.E.)
et Wassermann (W.)].

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UNIVERSITY OF IOWA

444

B. Galli-Valerio et M. Bornand.

Date

Dilution

K^sultats

de

1 =

des proc4d48

de la prise

de

ObseiratioDB

1

I’anti-

gfene

° cl

bc&o

C2"

■v

du sang

Texp^rience

S.E.

w.

1

l/XI. 10

3/XI. 10

1:50

5%

+

+

1:100

id.

+

+

20/11.11

21/11. 11

1:45

J>

—

21 jours apr^ la 3* in¬
jection de ISalvarsan

2

7/XL 10

8/XL 10

1:100

yr

+

+

3

7/XL 10

8/XI. 10

1:100

yj

4-

+

4

11/XI. 10

15/XL 10

1:100

yy

—

Traits au Hg.

16X1. 10

1:50

+

+

5

ll/XL 10

16/XI. 10

1:50

6

14 XL 10

16/XI. 10

1:50

yy

+

+

16/1.11

17/1. 11

1:45

yy

+

+

Inj. Salvaisan le 10/1. 11

7

14/XL lU

15/XI. 10

1:100

>7

—

+

Tmt4 a fond par Hg.

8

14/XI. 10

15,'XI. 10

1:100

—

9

14/XL 10

15/XL 10

1:100

—

—

10

14/XI. 10

15/XI. 10

1:100

—

+

14/XI. 10

16/XI. 10

1:50

+

+

12/XII. 10

13/XIL 10

1:45

yy

Inj. Salvarsan le 22/XI. 10

11

14 XI. 10

15/XI. 10

1:100

—

—

12

14/XI. 10 C

15/XI. 10

1:100

77

—

+

14/XI. 10

15/XI. 10

1:50

77

—

4”

13

14/XI. 10 C

15/XI. 10

1:100

yy

—

Faiblement

Entre les 2 recherches

24/1.11 C

27/1. 11

1:45

yy

—

positive

il n ’7 a pas eu de traite-
nient

14

14/XL 10 C

15/XI. 10

1:100

yy

_

_

14/XL 10

15,XI. 10

1:50

yy

—

_

15

14/XI. 10 C

15/XI. 10

1:50

77

—

—

16

18 XI. 10 C

19/XI. 10

1:45

77

—

—

17

18/XL 10 C

19/XI. 10

1:45

7*

—

—

18

21/XI. 10 C

22/XI. 10

1:100

77

—

—

Syphilis 4nergiquement

12/XlI. 10

13/XII. 10

1:45

77

1

—

—

trait^e au mercure. Inj.
de Salvarsan le 29/XL

19

21/XL 10 C

22/XI. 10

1:100

77 ]

+

+

Non traitd

20

22/Xl. 10

22/XI. 10

1:100

77

— tube I
+ tube 2

+

Syphilis en plein traite-
ment

21

22/XI. 10

22/XI. 10

1:100

77

—

—

Traits par H^.

22

22 XL 10

22 XI. 10

1:100

yy

+

+

Non traits

23

23/XI. 10

23/XI. 10

|1 : 45

77

24

25/XI. 10 C

29/XI. 10

1:45

•7

+

+ 1

25

28/XI. 10

29/XL 10

11:45

yy

+

+ I

Inj. de Salvarsan 0,4 et 0,3

12 XII. 10

13/XIL 10

1:45

1

77 1

+

le 29/XI. et 13/Xn.

26

28 XL 10

29/XL 10

•1:45

yy

+

T

Inj. Salvarsan 0,2 et 0,4 le

27

12/XIl. 10

13/XIL 10

1:45

77

+

26/XL et 3/XIL

28/XI. 10

29/XL 10

11:45

77

+

+

28

28/XL 10

29/XI. 10

|l:45

yy

1

+

Pas de renseignements

29

28 XI. 10

29/XI. 10

1:45

yy

1

1

—

30

28/XI. 10

1 29/XI. 10

!1:4.5

1 ,

-r

+

Pas de traiteraent

31

28/XI. 10

! 29/XI. 10

1:45

1 ” ^

—

32

28/XI. 10

i 29/XI. 10

,1:45

n

1 —

—

33

29/XI. 10

I 30/XI. 10

1:45

77

1 +

+

Pas de traitement

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UNIVERSITY OF IOWA

fixation du complement par le procede de Sabrazes-Eckenstein. 445

6

Date

Dilution

Besultats

Sh

de

J S

des proc^^s

a>

de la prise
du sang

de

I’experience

•a'ta fl

Observations

1

I’anti-

g^ne

des gtobi
rouges
mouto

S. E.

w.

34

29/XI. 10

30/XI. 10

1:45

5 7o

+

+

Pas de traiteroent

35

29/XI. 10

30/XI. 10

1:45

id.

—

Trbs bien traite

36

5/XII. 10

6/XII. 10

1 :45

Pas

d’h^^molyse

—

Syphilis soignee depuis
plusieurs ann^es

5/Xn. 10

6/XII. 10

1:45

2 7o

id.

—

37

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

5 7o

yy

—

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

2 7„

jy

—

Pas de traitement

38

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

5®/.

+

+

39

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

5 7o

Pas

d’h^molyse

Inj. Salvar8.0,4 le 3/XlI. 10

5^X11. 10

6 XII. 10

1:45

9 0,

+ '

—

20/11.11

21/n. 11

1:45

5 7o

+

+

3 semainee aprfes la 3* inj.

40

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

id.

—

—

de fSalvarsan

41

5/XII. 10

6/XIl. 10

1:45

>>

—

+

Pas de traitement

42

5/XIl. 10

6/XII. 10

1:45

+

+

Inj. de Salvarsan 03 le

19/XII. 10

20 /xn. 10

1:45

+

+

9/XII.

43

5 XII. 10

6/XII. 10

1:45

—

+

Pas de traitement

26/XII. 10

27/XII. 10

1:45

—

+

Inj. de Salvarsan le 24/XII.

44

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

—

+

Pas de traitement

45

5/XlI. 10

6/XII. 10

1:45

+

Une inj. de Salvarsan

46

5/XlI. 10

6/XII. 10

1:45

—

—

47

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

—

—

48

5/XII. 10

6/XII. 10

1 :45

—

—

49

5/XII. 10

6/xn. 10

1:45

>>

Pas

d’hemolysc

—

5/XII. 10
5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

2 7o

—

—

50

6/XII. 10

1:45

5 7o

—

+

Pas de traitement

51

5/XII. 10

6/XII. 10

1:45

id.

—

+

idem

52

12 XII. 10 C

15/XII. 10

1:45

+

+

53 1

12/Xn. 10 C

15/XU. 10

1:45

28 II. 11 C

2/III. 11

1:45

fy

—

+

54

12/XII. 10

13/XII. 10

1:45

»

—

55

12/XII. 10

13/XII. 10

1:45

yy

—

—

56

12/XII. 10

13/XII. 10

1:45

yf

+

—

Pas de renseignements

57

12 XII. 10

13/XII. 10

1:45

yy

+

+

58

12/XII. 10

13/XII. 10

1:45

yy

Inj. avec Salvarsan

59

12 Xn. 10

13/xn. 10

1:45

yy

+

—

60

12/XII. 10

13/XII. 10

1:45

yy

—

—

61

13/XII. 10

14/XII. 10

1:45

yy

—

—

62

13/XII. 10

14/XlI. 10

1:45

yy

—

—

63

13/XII. 10

14/XIl. 10

1:45

yy

—

—

64

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

yy

+

—

Ancienne lues, soign^
^nergiquement avec Hg.

65

19/xn. 10

20/XII. 10

1:45

1 yy

—

Chancre suspect de la

20 /n. 11 c

21 /n. 11

1:45

yy

_

j

1

verge

2 mois aprfes la I'* inj. de

I

Salvarsan

66

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

yy

+

+

Syphil. des paupiferes. Pas
de traitement depuis avril

8/1.11

9/1. 11

1:45

+

+ i

1910

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UNIVERSITY OF IOWA

446

B. Galli-Valerio et M. Bornand,

—

—

6

Date

Dilution

R^sultats

de

S 3

des proc6d6s

de la prise

de

3*0 C

Observations

■§

Fanti”

o

'3

dll sang

Texpi^rience

gfene

c s ^

S. E.

w.

67

19/XII. 10

20. XII. 10

1 :45

5“/o

+

Iritis suspecte

68

19,XII. 10

20/XII. 10

1:45

id.

—

idem

69

19,'XII. 10

20/XII. 10

1 :45

ff

—

—

70

19/XII. 10

20,XII. 10

1:45

»

+

+

Pas de traitement

71

19/XII. 10

20/XII. 10

1 :45

—

Traits au Hg.

72

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

»>

—

—

idem

73

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

iJ

—

_

74

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

V

—

—

75

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

fj

+

+

Chancre Svphil., Ros6ole
aprfes le Wassermann

76

19/XII. 10

20/XII. 10

1:45

fy

—

77

19/XII. 10 C

20/XII. 10

1:45

yf

—

—

78

26/XlI. 10

27/XII. 10

1 :45

—

Faiblement

positive

Traits ^nergiquement avec
Hg pendant plusieurs

ann^

79

26/XII. 10

27/XII. 10

1 :45

—

_

80

26 XII. 10

27/XII. 10

1 :45

+

+

81

24.11

31. 11

1 :45

—

Chancre dur

82

2/1.11

3/1. 11

1:45

yi

—

83

84

2/1. 11

8/1.11

3/1. 11

1 :45

y*

+

+

Inj. de Salvarsan 0,3 le
26/XII.

9/1. 11

1:45

yy

—

—

85'

8/1. 11

9 1. 11

1:45

yy

+

+

86

8/1. 11

9/1. 11

1 :45

yy

—

Soign6 par Hg.

87

8/1.11

91. 11

1 :45

yy

—

—

Inj. Salvarsan 26/Xll.

88

8/1. 11

9 I. 11

1:45

I -

—

89

8/1.11

i 9/1. 11

1:45

yt

1 "1“

+

90

8/1. 11

9/1. 11

1:45

Pas

91

jd*h6molysc

8'1.11

9/1. 11

1 :45

yy

1

+

Pas de renseignements

92

8/1.11

9/1. 11

[1:45

yy

' Pas

d*h6molyse

—

93

81.11

9/T. 11

1:45

I —

1

94

8/1.11

1 9/1. 11

1:45

' +

+

Inj. Salvarsan 0,4 le 27/XII.

95

8;1. 11

9/1. 11

1:45

yy

; +

+

96

16/1. 11

17/1. 11

1 :45

+

Pas de renseignements

97

16 I. 11

1 17/1. 11

1:45

1 —

—

98

16 1.11

; 17/1.11

1:45

yy

—

_

99

100

16/1.11

17,1. 11

1

1:45

1 ’’

1 —

—

Ancienne Syphilis soignee
par le Hg.

16/1.11

17/1. 11

1:45

yy

—

—

101

16/1.11

1 17/1. 11

1:45

yy

—

_

23/1.11

' 24 I. 11

1:45

yy

—

—

Inj. Salvarsan l*^!.

102

16/1.11

! 17/1. 11

1:45

+

+

Inj. Salvarsan 4/1.

23/1.11

24/1. n

1:45

yy

Inj. Salvarsan 9/1.

103

16/1.11

17/1. 11

1:45

+

+

104

16/1.11

17/1. 11

1:45

yy

Pas

+

15 jours aprfes la 1^* inj.

d’h^moI>'sc

de Salvarsan

13/11. 11

1 14/n. 11

1:45

* Pas

-

105

Id’hemolyse

16/1. 11

17/1. 11

1:45

yy

1 —

—

106

16/1. 11

17/1. 11

1:45

„

1 —

—

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UNIVERSITY OF IOWA

Fixation du complement par le procede de Sabrazes-Eckenstein. 447

d

Date

Dilution

Resultats

de

1 =

des procedes

de la prise
du sang

de

rexp^'rience

5'^ S

Observations

Tanti-

gfene

^ o

o S a

h£) bo 0

ss®

T3

8. E.

w.

107

16/1. 11

17/1. 11

1:45

^ -0

Pas

d*hcmoIyse

+

Keratite syphilitique

108

16/1. 11

17/1. 11

1:45

id.

—

—

109

23/1. 11

24 I. 11

1:45

+

+

13/U. 11 C

14/11. 11

1:45

“H

15 jours aprbs la I'* inject, de

Smvarsan et frictions mer-
curielles

110

23/1. 11

24/1. 11

1:45

jy

+

+

111

23/1. 11

24 I. 11

1:45

yy

—

—

112

23 I. 11

24 I. 11

1:45

yy

+

113

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

—

—

114

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

—

—

Trfes bien soigne par Hg.

115

23/1. 11

24 I. 11

1:45

yy

_

—

116

23/1. 11

24/1. 11

1:45

+

—

Pas de traitement. Ue serum

soumis ult^rieurement au
Wassermann a donn4
reaction positive

117

23/1. 11

241. 11

1:45

yy

—

—

118

23/1. 11

24 I. 11

1:45

_

—

3 semaines apr^s inject, de

119

23/1. 11

24/1. 11

1:45

jy

—

+

Salvarsan

14/11. 11

15/11. 11

1:45

yy

—

10 jours aprbs la 2* inj. de

i

Salvarsan

120i 23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

+

—

Pas de renseignements

121

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

Pas

d’hemolyse

+

1 mois api^ la 1* inj. de

28/11. 11 C

l./in. 11

1:45

yy

1 +

+

1

Salvarsan

122

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

—

3 semaines apr^s inj. de

123

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

1

1

+

Salvarsan

14/11. 11

15/n. 11

1:45

yy

—

—

10 joqrs aprbs la 2* inj. de

Salvarsan

124

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

\

1

1

+

Pas de traitement. On a
constate aprbs que le
tient n’etait sypni-

1

litique

125

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

—

—

126

23/1. 11

24/1. 11

1:45

yy

—

—

127

23/1. 11

24/1. 11

1 :45

yy

—

—

128

24/1. 11 C

27/1. 11

1:45

yy

+

+

129

31/1. 11 C

l./ll. 11

1:45

yy

—

+

130

6/II. 11 C

7/11. 11

1:45

yy

+

+

27/11. 11 C

l./llL 11

1:45

yy

+

Nul

3 sem. aprbs inj. de Sal¬

131

6/II. 11 C

7/11. 11

1:45

—

—

varsan

27/11. 11 C

l./ni. 11

1:45

yy

—

—

15 jours aprbs la 2* inj. de

S^varsan

132

6/II. 11 C

7/II. 11

1:45

yy

+

1 +

Traite au Hg.

133

6/II. 11 C
6/II. 11 C

741. 11

1 :45

yy

—

] —

134

7/n. 11

1:45

yy

—

1 —

135

13/11. 11 C

14/11. 11

1:45

yy 1

—

1

1

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UNIVERSITY OF IOWA

448

B. Galli-Valerio et M. Bornand,

d

Date

Dilution

B^sultate

55

de

Tanti-

gfene

des proc4d^

de la prise
du sang

de

Texp^rience

3 C

Obserrations

"S

1

des glob
rouges
mouto

S. E.

w.

136

13/11. 11 C

14/TI. 11

1:45

p; 0 /

^ 0

+

+

137

13/11. 11 C

14/11. 11

1:45

id.

+

—

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

+

+

Inj. de Salv. aprbs le 13/11.

138

13/11. 11 C

14A1. 11

1:45

yy

—

—

139

13/11. 11 C

14/11. 11

1:45

yy

+

+

140

13/11. 11 C

14/11. 11

1:45

yy

—

—

141

13/11. 11 C

14/11. 11

1:45

yy ' +

+

142

13/11. 11 C

14/11. 11

1:45 ; „

—

—

18 jours apr^s la 1” inj. de

Salvarsan

143

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

—

—

Pas de traitement

144

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

—

+

145

20/11. 11 C
20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

)•

+

+

Bien soign^ au Hg.

146

21/11. 11

1:45

—

—

147

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

yy

—

—

148

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

yy

—

—

Paralysie g<5n6rale

149

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

yy

—

+

150

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

yy

—

—

151

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

—

—

152

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

*y

+

+

153

2011. 11 C

21/11. 11

1:45

+

+

154

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

—

+

Traits par Hg.

155

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

+

+

2 mois apr^ la 1” inj. de

156

20/11 11 C

21/11. 11

1:45

yy

—

+

1:45

yy

Salvarsan

157

20/11. 11 C

21/11. 11

1:45

+

+

158

23/11. 11 C

24/11. 11

1:45

yy

—

+

28/11. 11 C

2/111. 11

1:45

yy

—

—

159

27/11. 11 C

1/111. 11

1:45

Pas

d’hcmolysc

—

160

27/11. 11 C

l/IIl. 11

1:45

„

—

—

10 jours aprfes inj. de

161

27/11. 11 C

l/Ill. 11

1:45

+

Douteux

SaJyarsan

162

28/11. 11 C

l/lll. 11

1:45

yy

—

—

163

28/11. 11 C

l/Ill. 11

1:45

yy

—

—

164

28/11. 11 C

1/111. 11

1:45

yy

—

165

28/11. 11 C

1/111. 11

1:45

yj

—

1

166

28/11. 11 C

l/lll. 11

1:45

yy

—

+

Trait<5 par Hg.

167

6/111. 11 C

7/111. 11

1:45

yy

+

+

168

6/I1I. 11 C

7/111. 11

1:45

yy

Pas

d^hemolysc

—

169

6/111. 11 C

7/II1. 11

1:45

yy

—

—

170

6/111. 11 C

j 7/111. 11

1:45

yy

Pas

d^h^molysc

—

171

6/111. 11 C

7111. 11 1

1:45

yy

—

—

172

6/111. 11 C

1 7/111. 11

1 :45

—

—

173

6111. 11 C

7/111. 11 1

1:45

yy

—

—

Bien traits par Hg.

174

6/111. 11 C

! 7/111. 11

1:45

yy

—

—

175

7/111. 11 0

7/111. 11

1:45

—

—

176

7/111. 11 Oi

7/111. 11

1:45

yy

--

—

177

7/111. 11 C!

7/111. 11

1:45

yy

—

—

178

6,III. 11 C|

1 8,111. 11

1:45

yy

—

—

179

6/111. 11 cl

81111. 11

1:45

yy

+

+

21 piqilres d’huile grise

180

6/111. 11 C

8/III. 11

1:45

yy

+

+

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Fixation du complement par le precede de Sabrazes-Eckenstein. 449

Un coup d’oeil jet6 sur ces tableaux, nous ddmontre:

Que sur 180 cas examines par le proc4d6 Sabraz4s-
Eckenstein, dans 12 (6,6%) le s^rum n’4tait pas h4mo-
lytique pour les globules rouges du mouton. Mais nous devons
noter que dans deux de ces cas (No. 39 et 49), en utilisant
une dilution des globules rouges k 2 % au lieu de 5 7o> iieus
avons quand m4me constat4 Tb^molyse, et dans une 3^ cas
(No. 121), rh4molyse qui avait fait d4faut en utilisant le s4rum
s4par4 de son caillot a eu lieu quand nous I’avons laiss4 en
content avec ce dernier.

2** Que sur 158 cas dans lesquels le s4rum 4tait h4nio-
lysant, et ob Ton a pratiqu4 parallbleraent la r4action de S. E.
et de W. nous avons eu 131 cas ob les deux r4actions out
concord4 (82,8%) et 27 cas (17%) ob les deux r4actions
4taient contradictoires. Ces r4sultats se r4partissent comme
suit: Sur 103 s4rums sans coagulum, 80 (77,6%) resultats
concordants et 23 (22,37o) en contradiction; et sur 59 s4rums
avec coagulum, 51 (92,7 7o) r48ultats concordants et 4(7,3%)
en contradiction.

.3® Que sur 170 s4rums h4molysants, nous en avons eu
13 (7®/o) eb les deux r4actions ayant 4te pratiquees 2 fois
nous avons eu une fois concordance et I’autre discordance des
r4sultats.

De ces recherches, pouvons nous conclure que la m4thode
de S.E. est une m4thode b d4conseiller? Certainement pas,
car 1® Les s4rums non h4molysants pour les globules rouges
du mouton sont relativement rares, et en outre, on peut obvier
b cet inconv4nient, soit en diminuant la proportion des globules
rouges de mouton, soit en ajoutant, comme proposent S.E.,
une unit4 d’un s4rum normal sbrement h4molysant

2® Les r4sultats contradictoires obtenus entre la m4thode
de S.E. et de W. ont une importance moindre de ce qu’au
premier abord pourrait sembler, parce que quelques uns ont
4t4 obtenus en employant des dilutions trop fortes de I’anti-
gbne (1:100) et la preuve nous I’avons dans le fait que, par
example dans le cas No. 10, avec le dilution 1:100 nous avons
4t4 en contradiction et avec celle b 1:50 d’accord; parce que
nous avons souvent travaill4 avec des s4rums qui nous 4taient
envoy4s d4jb s4par4s de leur caillot et dans un 4tat de

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450

B. Galli-Valerio et M. Bornand,

mauvaise conservation; parce que, un grand nombre de ces
r^sultats contradictoires, ont 4t6 obtenus avec des scrums d’indi-
vidus trait6s, parfois mSme dnergiquement, s6rums qui, rnSme
avec leWasserraann typique, donnent souvent des r4sultats
fort variables. Mais ces differences apparaitront encore moins
importantes, quand en examinant quelques uns des cas en
contradiction nous constatons que c’etait le precede S. E. qui
avait donne I’indication exacte tandis que le W. I’avait donn^e
fausse, de la sorte que dans ces cas la balance penche k la
faveur de la 1” et non de 2^® methode (voir par ex. les cas No. 13,
116, 124, 137 et 158). II est fort probable, que s’il nous avait
ete possible d’avoir des renseignements sur d’autres cas dans
lesquels les 2 methodes ont et6 en contradiction, on aurait
trouve I’explication de la discordance observ6e. Nous croyons
done etre dans le vrai en disant, que la m^thode de S. E.
pour la fixation du complement, k cause de sa simplicite et des
resultats fort analogues k ceux obtenus par la methods de W.
qu’elle peut donner, merits d’entrer dans la pratique pour le
diagnostic de la syphilis. Les resultats qu’on en obtiendra
seront du rests d’autant plus surs qu’on utilisera le serum
frais du malade garde en contact avec son caillot. Comme
nous avons pu constater dans quelques cas, I’antigene prepare
avec le coeur de Thomme, peut etre remplace par I’antigene
prepare avec le foie d’un feetus syphilitique.

Ces constatations faites, nous nous sommes demandes si
le precede de S.E. pourrait aussi etre applique k I’etude de
la fixation du complement dans d’autres maladies, et nous
avons pratique quelques recherches dans ce but, et en meme
temps dans le but de verifier si dans des affections autres
que la syphilis, en employant le meme antigene utilise dans
les experiences precedentes, on ne pourrait pas avoir aussi
une fixation positive.

Dans ces experiences nous nous sommes servis comme
antigene, soit de cultures preparees de la faqon indiquee dans
les tableaux qui vont suivre, soit de tuberculine ou d’emulsion
bacillaire, soit d’extraits de nodules lepreux, comparant toujours
Ics resultats avec I’antigene utilise dans les experiences sur la
syphilis, dilue tl 1:45 (A. S.), et avec iin serum provenant
d’un individu normal. Avant de pratiquer ces recherches nous

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Fixation du complement par le proc^de de Sabrazes-Eckenstein. 451

Malade

Date

Antigone,

t B

R^sultat du pro-
oMA M.E.

de la prise

de

Preparation et
dilution

-CoS

serum du

serum

du sang

I’experience

— bo 3

Q

malade

normal

No. 1

15 XII. 10 C

16,XII. 10

1 anse cult. Ilact. rhino-

5%

+

EMnoscierome

scleromatis dans ‘
sol. phfsiolog. chauffee 1“

(constate bacte-

riologiquement)

ail bain-marie a 80®,

Portee a ^®/,„ de c.c.
Idem, mais avec culture

Bact. coli.

Idem avec A. S.

—

—

No. 2

17/1. 11 C

18/T. 11

Extrait alcool. nodules le-

„

+

—

Lepreux ^consta¬
te bacteriologi-

preux 1:20 dilue dans sol.
physiolog. a 1:40

que ment)

T.

—

—

E. B.

A. S.

—

—

No. 3

lO/I. 11 C

11,1. 11

E. B.

-f- faible

Tqberculose non

T.

+ faible

—

traitee

A. S.

>>

—

—

No. 4

14/11. 11 C

14/11. 11

T.

_

—

Tuberculose non

A. S.

—

—

traitee

No. 5

23/1. 11 C

25/1. 11

T.

>>

Hem part.

—

Tuberculose non

T. (1 anse dans 2 c.c.)

jf

idem

—

traitee

T. (1 anse dans 1 c. c. s^rum

ff

nulle

dilu4 1:10)

No. 6

23/1. 11 C

25/1. 11

T.

ff

Hem.part.

—

Tuberculose non

T. (1 anse dans 1 c.c.)

yf

idem

—

traitee

1

T. (1 anse dans 1 c. c. s^nim

jf

nulle

dilii4 1 : 10)

No. 7

23/1. 11 C

25/1. 11

T.

jy

Hem part.

—

Tuberculose non

T. (1 anse dans 2 c.c.)

yy

idem

—

traitee

1

T. (1 anse dans 1 c.c. s^nim

yy

nulle

dilu4 1 : 10)

No. 8

31/1. 11 C

31,1.11 :

T.

yy

+

—

Tuberculose. Le

A. S.

yy

—

jour avant 90
centig. E.B.

1

No. 9

31/1. 11 C

31,'I. 11

T. i

_

Tuberculose. A

A. S.

yy

—

—

refu 3—4 jours
avant 1 V, milli¬

1

1

grammes E.B. !

1

No. 10

17/1. 11 C

18/1. 11

E. B.

-f faible

—

Tubercul. traitee.

T.

+

_

Jusqu’k 0,70 gr.
d’E.B. '

1

A. S.

_ 1

No. 11

lO/I. 11 c

10/T. 11 '

1

E. B.

yy

- 4 -

—

Tubercul. traitee.

T.

+

—

Jusqu’k 2 gr.
E.B.

1

A. S.

a

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452 Galli-Valerio et Bornaod, Becherches eur la fixation etc.

avons voulu verifier si la tuberculine serait capable k elle seule,
d’emp§cher Themolyse. Daos ce but, par le proc4d6 S. £., nous
avons mis en presence le s^rum d’un individu normal avec
de la tuberculine dilute k la dose d'une anse dans Vs* Viot
Vio de c.c. de solution physiologique, mais dans tons les cas
nous avons eu h6molyse complete. Dans nos experiences nous
avons employe la tuberculine (T.) et I’emulsion bacillaire (E. B.)
diluees k la dose d’une anse dans 1 c.c. de solution physio¬
logique. Voici resumes les resultats obtenus employant la
meme technique que dans les recherches sur la syphilis.
(Cf. tableau p. 451.)

Ces quelques recherches, que nous nous proposons de
poursuivre et de completer plus tard, surtout au point de vue
de la tuberculose et de son traitement par la tuberculine,
ddmontrent que par le precede S.E.:

1® Utilisant I’antigene coeur de Thomme, employe pour le
diagnostic de la syphilis, on n’obtient pas de fixation do com¬
plement en presence du serum de tuberculeux et meme d’un
lepreux.

2® Que cette methode peut etre appliquee k I’etude de la
fixation du complement dans des affections autres que la sy¬
philis, en utilisant comme antigene, un antigene specifique.

Zusammenfassung.

Die einfache Methode vonSabrazes und Eckenstein
fQr die Komplementbindongsreaktion kann in der Diagnose
der Syphilis gute Resultate geben.

Wenn man statt alkoholische Extrakte von Menschenherz
als Antigene spezifische Antigene verwendet, kann diese Me-
tho'le auch fflr Untersuchungen fiber Komplementbindungs-
reaktion bei anderen Krankheiten Verwendung finden.

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£. Friedberger uud S. Mita, Ueber Anaphylazie.

453

Nachdruck verhoten.

[Aus dem Fharmakologischen Institut der Universit&t Berlin;
Direktor: Geheimrat Prof. Dr. A. Heffter (Abteilung fflr Im-
munit&tsforschnng nnd experimbntelle Tberapie, Leiter: Prof.

Dr. E. Friedberger).]

Ueber Anaphylaxle.

XX. Mitteilung.

Die Bedeutung quantitativer Verhaltniaae fUr den Anaphylaxiever-
such mit beeonderer Berticksichtigung der Bakterienanaphylaxie ^).

Von E. Friedberger and 8. Mita (Tokio).

(Eingegangen bei der Kedaktion am 29. April 1911.)

Wobl nirgends ist im Tierversuch die Beurteilung der
Dosierung schwieriger als bei der Anapbylaxie.

Denn wir filbren bier in den Organismus des (prSparierten)
Tieres kein fertiges Gift ein, sondern lassen die Anapbyla-
toxinbildung im KOrper des Versucbstieres durcb dessen
eigene Tfttigkeit erfolgen. Dabei wird natfirlicb das individuelle
Verbalten des betreffenden Tieres eine gewisse Rolle spielen,
obwohl das fraglos nur von untergeordneter Bedeutnng sein
dtirfte. Es wurde das namentlich im Anfang der Entwicklung
der Lebre von der Anapbylaxie, da man die scbeinbar ver-
wickelten quantitativen GesetzmS.Qigkeiten nocb nicbt kannte,
sicker Qbersch9.tzt.

Viel wesentlicher, ja in erster Linie ausschlaggebend,
ist der Stand der PrSparierung.

Wftbrend von den gewdhnlichen toxikologisch erforschten
Giften die Dosen bei ein nnd derselben Tierspecies zu alien
Zeiten konstant sind (wenn wir von klaren nnd durchsichtigen
KumulatiOnswirkungen absehen), seben wir bier, dafi an sich
mehr oder weniger ungiftige EiweiBkdrper bei priparierten
Tieren, heute in gewissen Dosen indifferent, schon nach wenigen
Tagen in lOOO-fach geringeren Men gen tddlich sein kdnnen.

1) Die im dritten Teil dieser Arbeit Terdffentlichten Vereuche uber
Anapbylaxie mit Vibrio Metschnikoff sind rorgetragen auf dem Mikro*
biologen-Kongrefi in Dresden 1911, Sitzung vom 8. Juni. Gleichzeitig
wurde daselbst iiber analogs Veisuche mit Tuberkelbacillen berichtet.

Zeittchr. f. ImmonltMUforschung. Orig. Bd. X. 30

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454

E. Friedberger und !S. Mita,

UDd bei einem Tier, das heute gerade noch nach einer schweren
Vergiftung mit dein Leben davon kam, bewirkt morgen ein
lOOO-faches Multiplum der tddlichen Dosis nicht einmal irgend-
welche Krankheitssymptome.

Es ist ohne weiteres verstS.nd]ich, daO man bei einem
scheinbar so paradoxen Verhalten in den ersten Entwicklungs-
stadien der Lehre von der Anaphylaxie, solange man das
Wesen der Ueberempfindlichkeit und die quantitativen Gesetz-
mSfiigkeiten nur unvollkommen kannte, bei Versuchen selbst
mit der empfindlichsten Tierspecies, dem Meerscbweinchen,
hSufig zu negativen Resultaten kam.

TatsScblich berichten die filteren Forscher noch fiber
Fehlschifige in der Hfilfte der Ffille und inehr bei dieser Tier-
art, bei der wir heute — seitdem uns Doerrs bekanute
Untersuchungen die quantitativen Gesetze erschlossen haben
— in 100 Proz. positive Resultate erhalten. Noch ungfinstiger
lagen die Verhfiltnisse bei weniger empfllnglicben Tierarten.
Braun, Doerr und Russ, wir selbst (Friedberger und
Hartoch), Trommsdorff u. a. muBten die Mans auf Grund
unserer Versuche ffir scheinbar refraktiir ansehen, wfihrend wir
heute durch die sorgfliltigen Experimente von Ritz wissen,
dafi davon keine Rede ist.

1. Versuohe fiber passive Anaphylaxie.

Noch mehr fallen die angeffihrten Schwierigkeiten bei der
passiven Anaphylaxie ins Gewicht. Dean hier spielt nicht nur
die Zeit und Dosis der Prfiparierung und die Reinjektionsdosis
eine ausschlaggebende Rolle ffir das Gelingen des Versuches,
sondern auch die Beschaffenheit des zur Prfiparierung dienenden
AntieiweiBserums. Nach den Untersuchungen von Fried¬
berger und Caste Hi, vor allem aber nach den unter un¬
serer Leitung angestellten Versuchen von Burckhardt wissen
wir, daB ffir die Eignung prfizipitierender Sera zur PrSparierung
ffir passive Anaphylaxie zwei Faktoren in Betracht kommen;
neben dein Gehalt an AntieiweiBkfirpern (ausgewertet in der
Form der Prfizipitine) spielt noch ein zweiter Faktor eine
ausschlaggebende Rolle, als welchen wir auf Grund unserer
Versuche die in einem AntieiweiBserum enthaltenen mehr oder
weniger abgebauten Antigenreste ansehen.

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Ueber Anaphylaxie.

455

Unter diesen Umstanden ist es verstandlich, daB ein
Parallelism us zwischen PrSzipitiogehalt uad praparierender
Fahigkeit derartiger Sera zwar in vielen Fallen bestehen
kann (Doerr und Russ), aber keineswegs bestehen muB.
Wir verweisen bezQglich der naheren Diskussion dieser Ver-
haitnisse auf die bereits zitierten Arbeiten.

So beweisen die zweifellos ricbtigen Befunde einer Reihe
von Autoren, die wir ja selbst nur bestatigen kdnnen, daB in
dem und jenem Fall stark prazipitierende Sera unter /
gewissen Versuchsbedingungen Meerschweinchen
nicht passiv praparierten, im Prinzip nichts gegen die Identitat
des anapbylaktischen Reaktionskdrpers mit dem AntieiweiB-
kbrper; bei gewissen Seris und gewissen Mengenverhaitnissen
kann der Parallelismus ausnahmslos fehlen, ohne daB dadurch
anderweitige positive Befunde entkraftet wflrden.

Man sollte aber mit allgemeinen SchlQssen aus derartigen
negativen Versuchen vorsicbtig sein, denn die eigentilmlichen
quantitativen Mengenverhaitnisse bringen es eben mit sich,
daB ebenso gut mit einem Serum in 100 Proz. positive Re-
sultate erzielt werden kdnnen, wie 100 Proz. negative bei
gleicher Versuchsanordnung aber geanderten Mengenverhait¬
nissen Oder mit einem anderen Serum.

Der eine von uns hat gegenflber Kraus und Novotny
gezeigt, daB sich mit KaninchenantieiweiBserum die Anaphy¬
laxie passiv nicht nur auf Meerschweinchen, sondern auch auf
Kaninchen flbertragen laBt; natQrlich sind bei der vielfach
geringeren Empfindlichkeit des Kaninchens ganz andere Do-
sierungen erforderlich. Unseren damaligen positiven Versuchen
hat Kraus neuerdings (diese Zeitschr., Bd.8, H. 3) wieder eine
Reihe negativer gegeniibergestellt. Nun sind bei einer so wenig
empfanglichen Tierspecies, wie dem Kaninchen negative Resul-
tate natQrlich haufiger als beim empfanglichen Meerschweinchen,
aber sie beweisen im Prinzip nichts gegenQber positiven,
namentlich wenn, wie bei den neueren Versuchen von Kraus,
weder auf die quantitativen Verhaltnisse im allgemeinen noch
auf die geringe Empfindlichkeit des Kaninchens im besonderen
genQgend Bedacht genommen ist. In den Protokollen sind
passive Anaphylaxieversuche am Meerschweinchen solchen
am Kaninchen bei Verwendung eines und desselben pra-

30*

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456

E. Friedberger und S. Mita,

parierenden Serums gegenflbergestellt. Die Gewichte der Tiere
sind nicht angegeben; wenn wir einmal auDehmen, daB es sich
urn Meerschweinchen von 200 g und urn Kaninchen von 2 kg
gehandelt hat, so haben beide Tierspecies auf das Korper-
gewicht bestenfalls gleichviel des prSparierenden Serums
erhalten.

Nun hat es sich aber in alien drei mitgeteilten Versuchs-
reihen offenbar nur um sehr schwach prilparierende Kaninchen-
sera gehandelt, weil die Prftparierung der Meerschweinchen bei
einer Reinjektionsdosis von 0,5 des ja an sich schon toxischen
Kinder-, Schweine- bezw. Menschenserums nach den verdffent-
lichten Versuchen nur „sofort Erscheinungen", nicht einmal den
Tod hervorrief. Da kann man allerdings bei dem nach unseren
Untersuchungen so viel weniger empfiodlichen Kaninchen keine
deutlichen Symptome erwarten. Von einem gut prSparierenden
Kaninchenserum mull man verlangen, dail es in Dosen von
1,0—0,5 Meerschweinchen derart prSpariert, dafi sie bei nach-
heriger Injektion von 0,01, d. h. bei lOOinal kleineren Dosen
als sie hier angewandt sind, akut eingehen; dann kann
man bei entsprechenden Dosen auch beim Kaninchen positive
Resultate erhalten, wie Friedberger frUher gezeigt hat. Auf
derartig ftir das Meerschweinchen unwirksame Sera, wie sie
hier verwendet wurden, aber htitten die Kaninchen selbst dann
kaum reagiert, wenn sie noch relativ hdhere Dosen als die
Meerschweinchen erhalten hatten.

Wir k5nnen also nicht anerkennen, daB durch diese er-
neuten negativen Versuche, deren Resultat.nicht beweisend
ist, unsere positiven erschflttert sind; nidchten aber hier
einmal hervorheben, daBunzweifelbafteaitere Befunde
fiber die Moglichkeit der passiven Uebertragung
derAnaphylaxie auf Kaninchen durch Kaninchen-
antiserum von Kraus selbst vorliegen in der
Arbeit mit Doerr und Sohma fiber Linsenanaphy-
laxie (Wien. klin. Wocbenschr., 1908; p. 4 des Separatums).

Diese Versuche hat Kraus oflfenbar vergessen, wenn er
1910 schreibt; -Die passive homologe Anaphylaxie ist beim
Kaninchen fiberhaupt weder Uhlenhuth noch Kraus und
Novotn^ gelungen, nur Friedberger will auch passive
Anaphylaxie mit prfizipitierendem Kaninchenserum gesehen

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Ueber Anaphjlaxie.

457

haben^ (diese Zeitschr., Bd. 7, p. 215). Wir haben deshalb
auch darauf verzichtet, an der gleichen Tierspecies neue Ver-
snche anznstelien.

Dagegen geben uns die negativen Versuche von Kraus
mit ZiegenantieiweiBserum Veranlassung, seinen zwei negativen
Versuchen einen positiven gegeniiber zu stellen, der zeigt,
dafi auch bier Verallgemeinerungen aus negativen Resultaten
nicht angEngig sind. Zun^lchst folgen die Angaben fiber die
Behandlung der Ziege und die Toxizitflt ihres Serums; danach
ein passiver Uebertragungsversuch.

Toxizitfltsbestimmung des Normalserums.

20. VI. 1910.

Meerschweinchen M 3, 210 g, normales Tier.

1'* Injektion mit 2,0 ccm (0,95 Proz.) des Ziegenserums intravenSs.
1*’ Tier wirft sich auf die Seite. Krampfe.

1‘^ Beflexe erloschen, agonale Atmimg.

!»• Tot.

Meerschwemchen M 4, 200 g, normales Her.

1“ Injektion mit 1,0 ccm (0,5 Proz.) des Ziegenserums intravenos.
1“ K^mpfe.

1*^ Legt sich auf die Seite.

1“ Tot

Meerschweinchen M 6, 200 g, normales Tier.

7*** Injektion mit 0,7 ccm (0,35 Proz.) des Zi^enserums intravenSs,
Tier etwas matt, sonst keine Symptome, bleibt am Leben.

Die Ziege erhalt 20,0 ccm Kaninchenserum intravends.
25. VI. 1910 (5. Tag).

Meerschweinchen M 71, 210 g, normales Tier, erhalt 0,7 ccm (0,33 Proz.)
des an diesem Tage entnommenen Serums der Zi^ intravenSs.

7®* Injektion.

7” Beschleunigte Atmung, Eriimpfe und Spriinge, Sdtenlage.

7®* Neue heftige Krampfe.

7®» Tot

Meerschweinchen M 72, 200 g, normales Tier, erhalt 0,5 ccm (0,25 Proz.)
des gleichen Serums intravends.

7^® Injektion.

7“ Matt, straubt die Haare, sonst keine Symptome, bleibt am Leben.
Prazipitation: 1:500 —.

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458

E. Friedberger und S. Mita,

30. VL 1910 (10. Tag).

Meerschwdnchen M 73, 210 g, normales Tier, erhfilt 0,7 ccm (0,33 Proz.)
des heute entnommenen Zi^ensenims intravenbs.

10“® InjektioD.

10°® stxaubt die Haare, deutlich krank, Bchwere Dyspnoe, aber erholt
sich bald wieder, bleibt leben.

Prazipitation: 1; 500 —.

13. Vn. 1910.

DieZiege erhalt eine erneute intravenoseInjektion ron
20 ccm Kaninchenserum.

18. VII. 1910 (5. Tag).

MeerBchwmchen M 105, 200 g, normales Tier, erhalt 0,5 ccm (0,25 Proz.)
des heute entnommenen Serums intrarenSs.

3‘® Injektion.

3®‘ Krkmpfe und Spriinge.

3” sich auf die Seite, Reflexe erloschen.

3” Tot.

Meerschweinchen M 110, 190 g, normales Tier, erhalt 0,3 ccm (0,15 Proz.)
desselben Serums.

6** Injektion.

6®® Zittert, straubt die Haare.

6“ Schwere Dyspnoe.

6®“ Erholt sich, bleibt am Leben.

Prazipitation: 1:100 +.

Passive Anaphylaxie.

Meerschweinchen M 106, 210 g.

18. vn. Mit 1,0 ccm des heute entnommenen Zi^ensmuns intraperi-

toneal vorbehandelt.

19. VII. 0,5 ccm (0,23 Proz.) Normalkaninchenserum intrarends.

5** Injektion.

5*^ Krampfe und Sprunge.

5*^ Reflex erloschen, agonale Atmung.

5” Tot.

Meerschweinchen M 108, 190 g.

18. VII. Wie voriges vorbehandelt.

19. VII. 0,1 ccm (0,05 Proz.) Eaninchenserum intravenSe.

5*® Injektion, straubt die Haare, beschleunigte Atmung, sonst keine
Symptome, bleibt am Leben.

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Ueber Anaphylaxie.

459

n. Die prim&re Antiserumanaphylaide dnroh Eaniiudion-
antipferde- und -antirindersenim.

Der eine von uns hat in einem Vortrag in der Phjsio-
logischen Gesellscbaft in Berlin (Januar 1910) und sp&ter in einer
ausfQhrlichen Publikation mit G. Gas tel li (diese Zeitschr.,
Bd. 6) fiber Versuche berichtet, denen zufolge Antihammel-
eiweiQ-Kaninchenserum eine prim&re Toxizit&t gegenOber nor-
malen Meerschweinchen zukommt, die ihrer Entstehung und den
Sjmptomen nach zweifellos als anaphylaktisch aufzufassen ist

Wir konnten damals durcb genaue Kurven die recht er-
beblichen Schwankungen der Toxizit&t zahlenm&fiig feststellen
und ihre Ursachen erkennen.

Unsere tats&cblichen Befunde erfuhren eine Best&tigung
durcb Doerr und Moldovan, Biedl und Kraus,
Graetz.

Doch betonen diese Autoren tlbereinstimmend, mit
anderen Antieiweifiseris, speziell mit solchen vom Pferd, nur
negative Resultate erhalten zu haben.

Die Versuche wurden damals, ebenso wie unsere Ver¬
suche fiber aktive Anaphylaxie, ausschliefilich mit Anti-
ham me leiweifiseris ausgefOhrt, weil es uns bei den beengten
Verh&ltnissen eines kleinen Laboratoriums nicht ratsam er-
schien, mit zu vielen verschiedenen AntieiweiBseris gleichzeitig
zu arbeiten^).

Die Ergebnisse dieser Forscher veranlaBten uns, die Ver¬
suche auch mit anderen AntieiweiBseris zu wiederholen *).

1) Wir haben damals nur noch Versuche mit Antibakterienseris an-
gestellt, deten Besultate, mit denen von Antihammelseris vollstandig uber-
einstimmend, deshalb nur kurz erwahnt wurden, weil wir infolge hiiufigen
Todes der Serumspender keine vollkommenen Kurven erzielt batten.
Oleichwohl erscheint der Zweifel, den v. Dungern g^eniiber derartigen
Versuchen vorbringt, nicht gerechtfertigt. Wir werden demnachst neue
Versuche, vor allem mit Antibierhefeseris, bringen, die gleichfalls eine Zu-
nahme der Giftigkeit wfihrend des Immunisierungsprozesses zeigen.

2) Die Ansicht, daS die Giftigkeit „davon abhangig sein durfte, ob
ein primar giftiges oder ungiftiges Serum verwendet wurde“ (Biedl und
Kraus), ist nicht haltbar, da, wie wir demgegeniiber betont haben, in den
toxischen Dosen von Antihammel-Kaninchenaerum im giinstigsten Falle
lOOOmal wenig^ Hammelserum vorhanden war, als der toxischen Dosis
entspricht

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460

E. Friedberger und S. Mita,

£s erschien uns von voroherein nnwabrscheinlich, dafi
das HammeleiweiB, an sich nicht viel toxischer als das Pferde-
eiweifi und bedeutend weniger giftig als das vom Rind, eine
derartige Sonderstellung einnebmen sollte.

Da ja die Abbauf§.bigkeit der verscbiedenen artfremden
Eiweifiarten im Organismus des Kanincbens, wie besonders
Hintze unter Haendels Leitung gezeigt bat, eine ganz
verscbiedene ist und gerade der Antigenrest bei der Giftig-
keit nacb unseren Untersucbungen mit AntibammeleiweiB eine
groBe Rolle spielt, so war zu erwarten, daB aucb bei Vor-
bebandlung des Kanincbens mit anderen EiweiBarten die
Giftigkeit der Sera wenn aucb unter anderen zeitlicben Be*
dingungen zutage treten wbrde.

Freilicb mbBten systematiscbe Priifungen in kurzfristigen
Intervallen unternommen werden und eine genaue Auswertung
im Vergleicb zu demselben Serum vor jeglicber Bebandlung
erfolgen; wissen wir docb aucb vom Antihammel-Kanincben-
serum, wie sebr die Toxizit&tskurve scbwanken kann.

Wir bringen nun im nacbstebenden, kurz in Tabellen*
form, Versucbe fiber die Zunabme der Giftigkeit des Serums
von mit PferdeeiweiB bebandelten Kanincben, die, im Gegen-
satz zu Doerr und Moldovan, Biedl und Kraus,
Kraus und Mfiller, sowie Graetz, unzweideutig dartun,
daB derartige Sera sicb zwar quantitativ etwas anders, aber
im Prinzip gleicb verbalten wie Antihammel-Kanincbensera^).

Kanincben M 50, Grewicht 2070 g.

No. desMeer-
schweinchens

Gtewicht

des

Tieres

Tage

nacb dem
Bemnn
d^

Versucbes

Dosis des Serums
E^incben M 50

1

Besultat

Prazipitation

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 426

240

0

2,8

1,2

lebt

M 428]

220

>5

4,5

2,0

lebt

Das Kanincben erhalt 20,0 ccni Pferdeserum intraperitoneal.

M 442

200

3

2,0

! 1,0

lebt

1

M 443

190

2,4

1,2

lebt

U:50-

M 444

200

3,0

! ils

lebt

1

1) Die Resultf^ dieser Versucbe sind teilweise auf die erste Ein-
wendung Ton Kraus in der Arbeit von Biedl und Kraus (diese Zeit>
Bcbrift, Bd. 7, p. 413) bereits kurz mitgeteilt.

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Ueber Anaphylaxie.

461

No. dea Meer-
schweincbens

I Tage

1 Grewicht nach dem

1 T>_:_

Dosis des Serums
KaniDchen M 50

Besultat

Prazipitation

Tieree

des

Versuches

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 456

170

5

2,2

1.5

lebt

1:50 —

M 459

200

8

3,0

1,5

lebt

1:500 +

M 114

200

12

3.0

1,5

lebt

1:50000 +

M 475

210

14

3,0

1.4

tot (4')

]

M 476

200

yy

2,0

1,0

tot (3')

n:50000 +

M 477

200

1,6

0,8

lebt

/

Kaninchen M 51, Grewicht 2500 g.

ii

Tage

Dosis des Serums

Grewicht

nach dem

Kaninchen M 51 .

dee

Tieree

Beeultat

Pr^pitation

ll

ill

DeKUin

des

Versuches

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 429

300

0

4,5

1.5

lebt

M 427

200

4,0

2,0

tot (40

Das Elaninchen enthalt 5,0 ccm Pferdeserum intraperitoneal.

M 436
M 437

200

200

3

yy

2,0

3,0

1,0

1,5

lebt

tot (110

[ 1:50 —

M 455
M 457

170

170

5

yy

1,7

1,4

1,0

0,8

tot (50
tot (40')

} 1:50 +

M 460

200

8

2.0

1,0

lebt

\ 1:50 +

M 461

150

yy

1,8

1,2

tot (40

f 1:100 +

Kaninchen M 52, Qawicht 2200 g.

Ge-

wicht

4 31

II

III

Dosis des Serums
Kaninchen M 52

Kesultat

Pr^ipitation

sl|

dee

Tieree

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 430

230

0

3,9

1,7

lebt

Daa Eaninchen erhfilt 20 ccm Pferdeeerum intravenbe.

M

435

150

3

2,4

1,6

tot (60

M

445

190

>>

2,8

1.5

lebt

M

454

170

5

1,7

1,0

lebt

M

390

170

yy

2,0

1,2

tot (40

M

462

190

8

2,3

1,2

tot (140

Jl:50 -
|}l:60_

I 1:500 +

1:1000 +

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462

E. Friedberger und S. Mita,
Kaninchen M 53, Gewicht 2050 g.

1

Ge¬

wicht

jH G S

Dosis des Benims
Kaninchen M 53

Besultat

1

Pi^pitation

des

Tieres

^E>

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 431

220

1 0

4,5

2,1

lebt

Das Kaninchen erhalt 20 ccm Pferdesenim subkutan.

M 438
M 439

200

200

3

3,0

3,8

1.5

1,9

lebt
tot (5')

|l:50 -

M 458

170

5

2,8

1,7

tot (30')

1:50 -

M 465

200

8

3,6

1,8

tot (170

1:500+ 1:1000 +

KanincheD M 54, Giewicht 2350 g.

8 J

Gtewicht

des

Tieres

Befi^n

des

Versuches

Dosis des Serums
Kaninchen M 54 ,

Kesultat

1

Pr&zipitation

o §

pro Tier

pro 100 g
'Tier

1

M 432

210

0

4,6

2,2

lebt

Das Kaninchen erhalt 5 ccm Pferdesenim intravends.

M 434

190

3

3,6

1,9

tot (5')

M 441

200

99

2,4

15

tot (3')

M 440

200

99

2,0

1,0

lebt

M 452

170

5

1,4

0,8

tot (30

M 453

190

99

1,1

0,6

lebt

M 463

150

8

1.2

0,8

lebt

M 464

200

99

2,4

1,2

tot (30

M 115

190

12

3,0

1,5

tot (30

M 116

200

99

2,4

1,2

tot (6')

M 117

200

99

1,6

1 0,8

tot (50

M 118

200

99

1 0,7

0,35

lebt

M 119

210

9 *

1,25

0,6

lebt

M 120

200

99

0,7

lebt

M 473

210

14

1 1

1 1,7

0,8

tot (40

M 472

210

!

9 *

' 1,3

0,6

lebt

M 523

160

19

1,2

0,8

lebt

M 524

1 210

1

2,1

1,0

lebt

M 525

1 180

1

2,7

1,5

tot (40

1:50±

11:50 +

n: 100 ±

\ 1:100 +
/1:500±

1:500 +
1:1000 +

} 1:1000 +

1 1:1000 +
f 1:5000 +

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Ueber Anaphylaxie.
Kaninchen M 68, G«wicht 2700 g.

463

o S

Tage

Qewicht nach dem

des

Tieres

Be^n

<&8

Vereuchesl

Doeis des Serums
Kaninchen M 68

pro Tier

pro 100 g
Tier

Besultat. Prazipitation

M 478
M 479

250

250

0

7,0

6,3

2,8

2,5

tot (5')
lebt

Das Kaninchen erhiilt 5,0 ccm Pferdeserum intravends.

}l:50-

11:100 +

ill 100 -h
{ 1:500±

\ 1:500 +

/ 1:1000 ±

Am 3. XII. 10 erhalt das E[aninchen 13,0 ccm Pferdeserum intraperitoneal.

i\l:500 +

1 / 1:1000 ±

j 1:1000 +

Jl:5000 +

M

521

200

3

3,0

1,5

lebt

M

522

150

»

3,0

2,0

tot (30

M

40

200

6

3,0

1,5

tot (60

M

41

180

>>

1,8

1,0

lebt

M

47

220

9

1.8

0.8

lebt

M

48

190

ij

1,9

1.0

tot (50

M

71

220

13

1,9

0,8

lebt

M

72

200

JJ

2,0

1,0

tot (40

M

87

180

16

1,8

1,0

lebt

M

88

150

f)

2,3

1,5

lebt

M

91

220

18

2,2

1,0

lebt

M

92

230

3.3

1,5

tot (40

M

126

200

21

2,0

1,0

lebt

M

127

170

2,3

1,5

tot (50

Kaninchen M 69. Gewicht 3450 g.

Na des
Meerschw.

Gewicht

des

Tieres

Tag

nach dem
B^inn
des

Versuches

Dosis des Serums
Elaninchen M 69

Besultat

Pr^ipitation

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 67

200

0

5,0

2,5

1

tot (30 I

M 68

200

4,0

2,0

tot(4'

M 60

200

»>

3,0

1,5

lebt

Das Kaninchen erh&lt 5,0 ccm Rinderserum intravends.

1:50 —

M

80

190

3

1,9

1,0

lebt

M

89

210

6

2,1

1,0

tot (40

M

90

220

1,5

0,7

lebt

M

123

200

9

1,0

0,5

lebt

M

124

170

1,2

0,7

lebt

M

125

200

2,0

1 1,0

lebt

1:50 +
1:100 +

b:

50 +
100 +

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464

E. Friedberger und S. Mita,

Tage

Gewicht

nach dem

des

Tieres

B^inn

des

Versuches

Dosis des Serums
Kaniuchen M 69

pro Tier

pro 100 g
Tier

Resultat

Prazipitation

Das Kaniuchen erhalt 16,0 ccm Binderserum intraperitoneal

M 136
M 137
M 138

200

200

200

13

yy

yy

2,0

1,0

1.4

1.0

0,5

0,7

tot (3')

lebt

lebt

1 1:500 +

M 163
M 164

170

160

16

y*

1,2

0,8

0,7

0,5

tot (3')
lebt

j 1: 5000 +

M 167
M 169

200 1
180

23

yy

1,4
i 1,8

0,7

1,0

lebt

lebt

\ 1:5000+
/1:10000±

Kaninchen M 71.

Gewicht 3330 g.

'O'g

Glewicht

des

Tieres

Tage

nach dem
Bemnn
d^

Versuches

Dosis des Senims
Kaninchen M 71

Resultat

Prazipitation

d »

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 274

210

0

5,0

2,4

lebt

Das Kaninchen erhalt 5,0 ccm Ffeideserom intravenos.

M 287

170

5

2,5

1,0

tot (4')

11:50 +

M 288

170

yy

1,7

1,0

lebt

/ 1:100 i

M 305

200

10

2,0

1,0

lebt

1 1:100 +

M 306

200

yy

3,0

1,5

lebt

/1:500±

Kaniuchen M 72. Giewicht 3400 g.

No. des
Meerschw.

Ge¬

wicht

des

Tieres

r.A

Beginn

des

Versuches

Dosis des Serums
Kaninchen M 72

Resultat

!

1 1

Prazipitation

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 276 210 0 5,0

2,3

lebt

Das Kaninchen erhalt 5,0

M 289

200

5

2,0

M 290

220

1,5

M 291

230

yy

1,2

M 307

200

10

3.0

Das

Kaninchen erhalt 5,0

M 344

180

15

1,8

M 342

240

”

1,7

M 343

180

1.4

ccm Pferdeserum intravende.

1,0

0,7 1

tot (4')
tot (3')

}l:50 +

0,5

lebt

1:100 ±

1,5

lebt 1

1:100+ 1:500±

ccm Pferdeserum intravends.

1,0

0.7

0,8

tot (50

lebt

lebt

1 1:1000 +

1 1:5000 +

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Ueber Anaphylaxie.

465

No. des
Meerechw.

Ge-

wicht

des

Tieres

Tage

nach dem
Beginn
des

Versuches

Dosis des Serums
Kaninchen M 72

Resultat

Prazipitation

pro Tier

pro 100 g
Tier

M 371

200

20

1,4

0,7

lebt

1 1:10000 +

M 370

200

t9

2,0

1,0

tot (6')

/ 1:50000 +

Das Kaniachen erhalt 6,0

cem Pferdeserum intraperitoueal.

M 3851

190

23

1,3

0,7

lebt

11:10000 +

M 3861

190

fl

1,9

1,0

lebt

j 1:50000 +

HL Die quantitativen Verhaltnisse bei der Bakterienanaphylaade.

DaB wir fflr die aktive Eiweifianaphjlaxie sowohl zur
Pr&parierung, wie zur Reinjektion unter gewisse minimale
Dosen nicht heruotergehen diirfen, ist jedem Forscher auf
diesem Gebiet gel^ufig. Freilich wissen wir aus den Unter-
sucbungen von Rosenau und Anderson, Auer und Lewis,
Doerr und anderen, wie unendlich gering gerade f(ir die
Pr&parierung die Grenzdosen sein konnen und daB fOr die
Reinjektion zur Auslbsung der Anaphylaxie auch sehr kleine,
wenn auch relativ h5bere Dosen notwendig sind.

Es ist aber zu bedenken, daB bei derartigen Grenzdosen
die Anaphylaxie keineswegs regelm^Big auszulosen ist und
noch weniger die schwersten Symptome, vor allem akuter Tod,
eintreten. Um das zu erreichen, bedflrfen wir fQr die PrS-
parierung und Reinjektion doch tausend- und selbst zehn-
tausendfach hSherer Men gen. Wir baben auf Grund unserer
ausgedehnten Erfahrungen speziell mit Hammelserum als opti-
male PrSparierungsdosis 0,01 bis 0,02 und annMbernd die gleiche
Dosis ftir die Reinjektion als optimal gefunden.

Unter diesen Verhaltnissen erzielen wir ausnahmslos
akuten Tod in 100 Proz. der Falle. Etwas grOBer liegen die
Reinjektionsdosen beim Pferdeserum, das ja an sich ungiftiger
ist, doch sind die Differenzen nicht sehr erhebliche. Es er-
scheint uns heute ganz selbstverstandlich, daB wir, wenn wir
bei der EiweiBanaphylaxie konstante Resultate, d. h. 100 Proz.
akute Todesfalle erhalten wollen, wir nicht beliebige, son-
dern genau abgemessene Mengen von EiweiB zur Pra-
parierung und zur Reinjektion benutzen.

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466

E. Friedberger und S. Mita,

Um so auffalleoder ist es, dafi die Autoren, die iiber
Bakterienanaphylaxie gearbeitet haben, wie der eine von uns
schon an anderer Stelle (Deutsche med. Wochenschr., 1911, No. 9)
betont hat, von dieser selbstverstSndlichen Forderung abge-
wichen sind und die quantitativen VerhSltnisse nur ganz an-
n&hernd nach „Kulturen‘‘ berechnen, wodurch je nach der ver-
schiedenen Wachstumsintensitat der verschiedenen Bakterien-
arten vdllig unkontrollierbare Mengen eingespritzt wurden.
Da wir gewdhnlich bei Bakterien (Laboratoriumsinfektions-
versuch) mit infinitesimalen Mengen zu arbeiten gewbhnt sind,
so sind auch in den Fallen, in denen die Autoren enorme Mengen
von Bakterien einzuspritzen vermeinten, in Wirklichkeit
sowobl zur Praparierung wie zur Reinjektion meist Dosen ver-
wandt worden, in denen nach der einfachen Berechnung die er-
forderlichen EiweiBdosen weder zur Praparierung noch zur Re¬
injektion vorhanden sein konnten. Das gilt noch roehr von
jenen Forschern, die von falschen Vorstellungen ausgehend mit
Bakterien ext rakten gearbeitet haben, bei denen Qberhaupt
jegliche Dosierung vernachiassigt wurde. So ist es ohne
weiteres verstandlich, dafi den positiven Resultaten, wie sie ge-
legentlich zufailiger Beobachtungen von Rist und systematisch
zuerst von Axaniit, Rosenau und Anderson, Kraus und
Do err erhoben wurden, Zweifel begegneten und von anderer
Seite nur negative Versuchsresultate mitgeteilt wurden.

Regelmafiige positive Resultate konnen eben naturgemafi
nur dann erzielt werden, wenn man auch fhr das Bakterien-
eiweiB die fOr das Qbrige artCremde EiweiB ermittelten, quanti¬
tativen Bedingungen einigermaBen einhalt. Nach den Analysen
von Cramer wissen wir, daB die Bakterien etwa 75 Proz.
Wasser enthalten und von der Trockensubstanz nur 50 Proz.
im Mittel aus EiweiB bestehen. Erst in fur unsere Vor-
stellung ganz enormen Mengen von Bakterien ist also soviel
EiweiB enthalten, wie wir von Serum zur Praparierung und
Reinjektion benStigen. Dort erscheinen uns allerdings diese
Mengen sehr gering.

Unter Zugrundelegung dieser Werte und Einspritzung
entsprechender EiweiBmengen haben wir beim Meerschweinchen
aktive und passive Anaphylaxie mit Bakterien genau so gut und
genau so regelmaBig und konstant zu erzeugen
vermocht, wie mit irgendeinem anderen EiweiB-

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Ueber Anaphylaxie.

467

kdrper, sofern nur Mengen ann^hernd von Bak-
terieneiweifi verwandt wurden, die nicht zu weit
entfernt sind von denen, die sich auf Grund
unserer Erfabrungen bei anderen Eiweifikdrpern
als optimal erwiesen.

Zur Dosierung der PrlLparierungs- wie der Reinjektions-
mengen benutzten wir beim Vibrio Metscbnikoff das Material
von Agarmassenkulturen, das mit einem besonderen Spatel
vorsicbtig abgekratzt wurde, so dafi von dera N§brboden nicbts
mitgenommen wurde. Die WSgung erfolgte, um eine Wasser-
verdunstnng mdglicbst zu vermeiden, in gescblossenen WSge-
glkscben auf der analytiscben Wage. Die abgewogenen Bak-
terienmassen wurden in steriler pbysiologiscber Kocbsalzldsung
gleicbmgfiig emulgiert, und zwar so, dafi im Kubikzentimeter
0,1 bezw. 0,01 g feucbter Bakterien entbalten waren. Die
Emulsionen zur Vorbebandlung wurden stets, roeist aucb die
zur Reinjektion benutzten, vorber 2 Stnnden bei 60® abgetdtet.

Wir bringen eine Reibe von Beispielen, die zeigen, dafi
tatskcblicb zwiscben aktiver und passiver Eiweifianapbylaxie
und Bakterienanapbylaxie bei Einbaltung der quantitativen Ver-
bkltnisse kein Unterscbied in bezug auf die Regelmkfiigkeit
des PbUnomens bestebt.

NatQrlicb wirken von Bakterien ebensogut wie von art-
fremdem Serum grSfiere Mengen, intravenos eingespritzt, aucb
beim normalen Tier toxiscb. Es ergab sicb, dafi die akut
tddlicbe Dosis fur das unprSparierte Tier von 200 g K6rper-
gewicht beim Vibrio Metscbnikoff regelmSfiig zwiscben 0,2
und 0,25 g (feucbte Agarkulturmasse) toter Bakterien lag ^).

Bestimmung der t)rSparierenden Grenzdose des
Vibrio Metscbnikoff.

Zunacbst sucbten wir die Bakterienmenge festzustellen,
die bei subkutaner Zufubr Meerscbweincben so prSparierte,
dafi bei intravendser Reinjektion ein Brucbteil der fiir normale
Tiere tddlicben Dosis akut toxiscb wirkte.

Wir baben eine Reibe normaler Meerscbweincben zu dem
Zweck mit Dosen abgetSteter feucbter Bakterien vorbebandelt,
die in den einzelnen Serien zwiscben 0,2 und 0,000002

1) In epateren Versuchen war der Vibrio Metscbnikoff aber erheblich
ungiftiger (siehe p. 477).

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468

E. Friedberger und S. Mita,

schwankten. 14 Tage nach der PrSparierung wurde dann bei
den Tieren diejenige Menge wiederum von abget5teten
Vibrionen bestimmt, die akut unter typischen anaphylaktischen
Symptomen totete. Zur Kontrolle wurde von derselben
Emulsion die toxische Dosis fflr nicht praparierte normale
Tiere ermittelt. Nachstehend folgen diese Versuche:

Meerschwemchen M 485, 180 g, normales Tier.

18. III. 0,2 g Proz. *) (3,6 ccm Emulsion) intravenos.

9*® Injektion, striiubt die Haare, beschleunigte Atmung, sonst kerne
Symptome, bleibt leben.

Meerschweinchen M 486, 180 g, normales Tier.

18. III. 0,25 g Proz. (4,4 ccm Emulsion) intravenos.

9^® Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

9^® Legt sich auf die Seite, Keflexe erloschen, agonale Atmung.

9*’ Tot.

Meerschweinchen M 474, 200 g, vor 15 Tagen rait 0,2 g feucht gewogener
Bakterien subkutan vorbehandelt.

18. III. 0,025 g Proz. (0,5 ccm Emulsion) intravenos.

11*® Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

11** Legt sich auf die Seite, Keflexe erloschen, agonale Atmung.

11** Tot.

Meerschweinchen M 449, 200 g, vor 15 Tagen mit 0,02 g feucht gewogener
Bakterien subkutan vorbehandelt.

18. III. 0,15 g Proz. (3.0 ccm Emulsion) intravenos.

10^* Injektion, sofort vereinzelte Krampfe, erholt sich bald wieder,
bleibt am Leben.

Meerschweinchen M 452, 170 g, Vorbehandlung wie voriges.

18. III. 0,20 g Proz. (3,4 ccm Emulsion) intravenos.

10** Injektion.

10*^ Krampfe und Spriinge.

10'^* Legt sich auf die Seite.

10** Keflexe erloschen, agonale Atmung.

10*^ Tot.

Meerschweinchen M 458, 200 g, vor 15 Tagen mit 0,(X)2 g feucht gewogener
Bakterien subkutan vorbehandelt.

18. III. 0,15 g Proz. (3,0 ccm intravenos).

9** Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

9** Tier erholt sich, bleibt am Leben.

Meerschweinchen M 455, 210 g, Vorbehandlung wie voriges.

18. III. 0,20 g Proz. (4,2 ccm Emulsion) intravenos.

9** Injektion, sofort heftige Klrampfe und Spriinge.

9*® Legt sich auf die Seite, Keflexe erloschen, agonale Atmung.

9** Tot.

1) Proz. = Dosis pro 1(X) g Tier.

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Ueber Anaphylaxie.

469

MeerschweincheD M 463, 150 g, vor 15 Tagen mit 0,0002 g feucht gewogener
Bakterien subkutan vorbehandelt.

18. III. 0,20 g Proz. (3,0 ccm Emulsion) intravends.

9®* Injektion, vereinzelte Krampfe, legt sich auf die Seite.

9“ Steht wieder auf, schwere Dyspnoe, bleibt am Leben.
Meerechweinchen M 461, 120 g, Vorbehandlung "wie voriges.

18. III. 0,25 g Proz. (3,0 ccm Emulsion) intravends.

9** Injektion, heftige Krampfe.

9*^ Neue Krampfe, legt sich auf die Seite.

9** Reflexe erloschen, agonale Atmung.

9« Tot.

Meerechweinchen M 469, 180 g, vor 15 Tagen mit 0,00002 g feucht ge¬
wogener Bakterien subkutan vorbehandelt.

18. III. 0,20 g Proz. (3,6 ccm Emulsion) intravends.

11® Injektion, vereinzelte Krampfe.

11®‘ Tier erholt sich, bleibt leben.

Meerechweinchen M 471, 220 g, Vorbehandlung wie voriges.

18. III. 0,25 g Proz. (5,5 ccm Emulsion) intravends.

11®® Injektion, kurz nach der Injektion Krampfe und Spriinge.

11®' Legt sich auf die Seite.

11®® Beflexe erloschen, agonale Atmung.

11** Tot.

Id der folgeoden Tabelle sind Docb einmal die erhaltenen
Kesultate tlbersichtlich zusaiDmeDgestellt.

Tabelle I.

Besdmmung der praparierenden Dosis.

No.

des

Meer-

schw.

Gewicht
des Tieres

Vorbehandelt mit

Zeit bis
zur Re-
injektion

Dosis feucht
gewogener
Bakterien pro
100 g Tier

Resultat

M 485

180

_

_

0,20

lebt

M 486

180

—

—

0,25

tot

M 474

200

0,2 g feucht gewogener Bakt. subk.

15 Tage

0,025

tot

M 449

200

0,02 g feucht gewogener Bakt. subk.

15 Tage

0,15

lebt

M 452

170

S » » >» »

ff ff

0,20

tot

M 458

200

0.002 g feucht gewogener Bakt. subk.

15 Tage

0,15

lebt

M 455

210

0,002 g „ „ „

V •*

0,20

tot

M 463

150

0.0002 g feucht gewogen. Bakt. subk.

15 Tage

0,20

lebt

M 461

120

0,0002 g „ „ „ „

0,25

tot

M 469

180

0,00002 g feucht gewog. Bakt. subk.

15 Tage

0,20

lebt

M 471

220

0,00002 g ,.

f) •f

0,25

tot

Zeitschr. f. Immuoltiltsfortchiing. Ori^. Bd. X. 31

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470

E. Friedberger und S. Mita,

Aus dieser Tabelle ergibt es sich, daB recht betrftcbtliche
Mengen von Bakterien notwendig sind, um eine derartige
Praparierung herbeizufahren, daB bei der Reiojektion akuter
Tod erzielt wird. Leider war ein Toil der mit den grdBeren
Dosen vorbehandelten Tiere im ^Inkubationsstadium^^ ein-
gegangen, so daB wir in dieser Versucbsreihe von einer
genauen Titrierung bei den mit 0,2 prftparierten Tieren ab-
seben muBten. Docb ergibt es sicb immerbin, daB die Ueber*
empfindlicbkeit derart gesteigert war, daB der zebnte Teil der
sonst akut tdtenden Grenzdosis nocb wirksam war. Bei Ver-
wendung kleinerer Dosen zur Pr&parierung wird dagegen ein
nur sebr geringer Grad von Ueberempfindlicbkeit im Vergleicb
zur Norm erzielt, und bereits bei 0,000002 verbalten sicb die
prftparierten Tiere nicbt anders wie die Kontrollen. Vergleicben
wir diese Werte mit jenen bei der EiweiBanapbylaxie und
nebmen wir der Einfacbbeit der Berecbnung balber einmal
an, daB die Bakterien rund 10 Proz. EiweiB entbielten, so
ergibt es sicb, daB von den Bakterien sogar nocb etwas grbBere
Dosen zur Vorbebandlung ndtig sind, wie z. B. vom Hammel-
serum. Von diesen genOgen 0,02, entsprecbend etwa 2 mg
EiweiB, um die Tiere so zu praparieren, daB eine regelm&Bige
maximale Wirkung bei der Reinjektion erzielt wird. Die etwa
gleicbe Dosis von BakterieneiweiB aber bewirkt nur eine
sebr geringe Steigerung der Empfindlicbkeit und erst bei
zebnfacb bbberen Mengen zur PrSparierung werden deutlicbere
AusscblBge erzielt.

Zum groBen Teil ist das wobl auf das besondere Ver-
halten des tieriscben Organismus gegenOber der Bakterien-
anapbylaxie zurOckzufQbren. Vor allem ist wobl die Resorption
morpbologiscber Gebilde wie der Bakterien eine scbwierigere
als die von amorpbem SerumeiweiB.

Da der Organismus gerade das BakterieneiweiB offenbar
sebr leicbt unter Bildung giftiger Spaltprodukte abzubauen
vermag, so liegen scbon die ffir das Normaltier akut toxiscben
Dosen sebr bocb, und dadurcb ist der relative Grad der Ueber¬
empfindlicbkeit ein geringerer als z. B. bei der Anapbylaxie
gegenOber Hammel- oder Rinderserum.

Wir baben aucb bereits in den Fieberversucben gefunden,
daB bei der Bakterienanapbylaxie ein sebr niederer Index er-

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Ueber Anaphylaxie.

471

zielt wird. Doch ist keineswegs etwa das BakterieneiweiB fflr
normale Tiere prinzipiell erheblich giftiger als artfremdes
Serum. Wenn wir mit 0,02 z. 6. fOr Metschnikoff-Eiweifi die
Grenzdosis baben, so ist das eine Giftdosis, die kaum weseut-
lich hiuter der von Rinderserum- Oder gar Aalserumeiweifi
zurQcksteht.

Nachdem wir die gQnstigen Bedingungen fQr die Prfi-
parieruDg bei Vibrio Metschnikoif kennen gelernt batten,
gingen wir daran, bei einer Reibe von mit gleicben Dosen
pr&parierten Tieren systematiscb die akut tddlicbe Reinjektions-
dosis, im Vergleicb zu den Kontrollen, d. b. den „anapb7lak-
tiscben Index** festzustellen.

ZunScbst erfolgen Versucbe bei einer Serie von Tieren,
die mit 0,1 feucbter, bei 60® abgetSteter Vibrionen vorbebandelt
waren und 27 Tage sp&ter fallende Dosen zur Ermittlung der
akut tCdlicben Reinjektionsmenge erbielten.

Gleicbzeitig war wieder die tbdliche Dosis der gleicben
Bakterienaufscbwemmung fQr Normaltiere zu ermitteln. Da
uns leider in dieser Versucbsreibe nicbt genug Bakterien-
material zur VerfQgung stand, so sind wir bei den Kontrollen
nicbt bis zur tddlicben Dosis vorgedrungen. Docb dQrfen wir
in Analogic mit den zablreicben sonstigen Versuchen, die
damals das gleicbe Resultat ergaben, annebmen, daB ancb
diesmal die akut tddlicbe Dosis fQr Normaltiere zwiscben 0,2
und 0,25 lag.

A. Normaltiere.

Meerschweinchen M 283, 250 g, norniales Tier.

28. I. 0,05 Proz. (2,5 ccm Emulsion) intravenos.

4* Injektion, keine Symptoms.

Meerschweinchen M 284, 250 g, normales Tier.

28. I. 0,05 Proz. (2,5 ccm Emulsion) intravenos.

4** Injektion, keine Symptoms.

Meerschweinchen M 285. 300 g, normales Tier.

28. I. 0,07 Proz. (4,0 ccm Emulsion) intravenos.

5'® Injektion, keine Symptoms.

Meerschweinchen M 286, 250 g, normales Tier.

28. I. 0,08 Proz. (4,0 ccm Emulsion) intravenos.

6® Injektion, keine Symptome.

.31*

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472

E. Friedberger und S. Mita,

B. PraparierteTiere.

Meerschweinchen M 185, 290 g, vor 27 Tagen mit 0,1 g feucht ge>vogener
Bakterien subkutan vorbehandelt.

28. I. 0,07 Proz. (4,0 ccm Emulsion) intravenos.

5^* Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

Legt sich auf die Seite.

5 '^ Neue Krampfe.

5-^ Reflex erloschen, agonale Atmung.

5^ Tot.

Meerschweinchen M 146, 300 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. 1. 0,07 Proz. (4,0 ccm Emulsion) intravenos.

4^* Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

4*’ Tier wirft sich auf die Seite.

4^8 Agonale Atmung.

4"® Tot.

Meerschweinchen M 180, 250 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. I. 0,05 g Proz. (2,5 ccm Emulsion) intravenos.

4^^ Injektion.

4^^ Starke Dyspnoe.

4*® Deutlich krank. Tod ira Laufe der Nacht.

Meerschweinchen M 181, 250 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. I. 0,05 g Proz. (2,5 ccm Emulsion) intravenos.

3^® Injektion, kurz nach der Injektion Krampfe und Spriinge.

3*^ Legt sich auf die Seite, neue Krampfe.

3*® Reflex erloschen, agonale Atmung.

3^® Tot.

Meerschweinchen M 195, 220 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. I. 0.04 g Proz. (2,0 ccm Emulsion) intravenos,

4*® Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

4'^ Legt sich auf die Seite.

4‘® Erholt sich wieder, bleibt leben.

Tabelle 11.

No.

des

Meer-

schw.

Grewicht
des Tiercs

Vorbehandelt mit

Zeit bis
zur Re¬
in jektion

Dosis feucht
gewogener
Bakterien pr<
100 g Tier

Besultat

M 283

250

_

0.05

lebt

M 284

250

—

—

0.05

lebt

M 285 300

--

—

0 07

lebt

M 286 250

—

1

0,08

lebt

j

M lao 290

0,1

feucht.

Bakterien subkut.

27 Tage

0,07

tot

M 146 3(X>

0.1

jt

27 „

0,67

tot

M 180 250

0,1

ff

yj

27 „

0.05

spat tot

M 181

250 0.1

TJ

1

27 „

0,05

tot

M 195|220|0,1

»»

V yy

27

>1

0,04

lebt

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Ueber Anaphylaxie.

473

Aus dieser Versuchsreihe ergibt es sich, dafi beim pra-
parierten Tier noch der fQnfte Teil der Grenzdosis fiir das
normale akut tdtete.

Wesentlich gttnstigere Resultate warden erzielt in einer
weiteren Versuchsreihe, in der zur Praparierung die doppelte
Dosis des in gleicher Weise zubereiteten Bakterienmateriales
verwandt wurde und die Reinjektion nach 19 Tagen mit ab-
getdtetem Bakterienmaterial erfolgte. Auch hier wurde zu-
nachst die Toxizitat fur normale Tiere mit derselben Bakterien-
emulsion bestimmt.

A. Normale Tiere.

Meerschweinchen M 436, 200 g, normales Tier.

28. II. 0,075 g Proz. (3,0 ccm Emulsion) intravends.

3** Injektion.

3” Leichte Krtimpfe.

3*® Schwere Dyspnoe, sonst keine Symptome, bleibt am Leben.
Meerschweinchen M 437, 250 g, normales Tier.

28. II. 0,1 g Proz. (5,0 ccm Emulsion) intravends.

4*® Injektion, kurz nach der Injektion leichte Elrampfe, erholt sich
bald wieder, bleibt am Leben.

Meerschweinchen M 438, 230 g, normales Tier.

28. II. 0,1 g Proz. (4,6 ccm Emulsion) intravends.

4** Injektion, sofort leichte Erampfe, erholt sich bald wieder, bleibt
leben.

Meerschweinchen ,M 439, 240 g, normales Tier.

28. II. 0,15 g Proz. (3,6 ccm Emulsion) intravends.

4®* Injektion, keine Symptome.

Meerschweinchen M 441, 250 g, normales Tier.

28. II. 0,20 g Proz. (5,0 ccm Emulsion) intravends.

5® Injektion, beschleunigte Atmung, sonst keine Symptome, bldbt
am Leben.

Meerschweinchen M 442, 180 g, normales Tier.

28. U. 0,25 g Proz. (4,5 ccm Emulsion) intravends.

5'® Injektion.

5" Erampfe und Spriinge.

Legt sich auf die Seite, vereinzelte Erampfe.

5‘® Eeflex erloschen, agonale Atmung.

5'® Tot,

Meerschweinchen M 440, 260 g, normales Her.

28. n. 0,25 g Proz. (6,5 ccm Emulsion) intravends.

5® Injektion, kurz nach der Injektion Erampfe und Sprunge.

5® Legt sich auf die Seite, Reflex erloschen, agonale Atmung.

5* Tot.

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474

E. Friedberger und B. Mita,

B. Praparierte Tiere.

Meerechweinchen M 350, 260 g. vor 19 Tagen mit 0,2 g feuchten Bakterien
subkutan vorbehandelt.

28. II. 0,1 g Proz. (5,2 ccm Emulsion) intravenos.

3“ Injektion, kurz nach der Injektion Elrampfe und Spriinge.

3*^ Legt sich auf die Seite, Reflex erloscben, agonale Atmung.

3“’ Tot.

Meerechweinchen M 326, 230 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. II. 0,075 g Proz. (3,4 ccm Emulsion) intravenos.

4° Injektion, sofort Krampfe und Bprunge.

4‘ Tier legt sich auf die Seite, Reflex erloschen, agonale Atmung.

4* Tot.

Meerechweinchen M 363, 270 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. II. 0,05 g Proz. (2,7 ccm Emulsion) intravenos.

4‘ Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

4* Legt sich auf die Seite, Reflex erloschen, agonale Atmung.

4» Tot.

Meerschweinchen M 366, 220 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. II. 0,025 g Proz. (1,1 ccm Emulsion) intravenos.

4* Injektion, sofort Krampfe und Spriinge.

4^ Tier legt sich auf die Seite, Reflex erloschen, agonale Atmung.

4“ Tot.

Meerschweinchen M 360, 180 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. II. 0,025 g Proz. (0,9 ccm Emulsion) intravenos.

6 ^ Injektion, kurz nach der Injektion Krampfe und Spriinge.

6 “ Tier wirft sich auf die Seite, Reflex erloschen, agonale Atmung.
6 ’ Tot.

Meerschweinchen M 353, 200 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. II. 0,01 g Proz. (0,4 ccm Emulsion) intravenos.

4*® Injektion, kurz nach der Injektion Krampfe und Sprunge.

4** Tier legt sich auf die Seite.

4** Tier erholt sich, bleibt leben.

Meerschweinchen M 361, 160 g, Vorbehandlung wie voriges.

28. II. 0.015 g Proz. (0,5 ccm Emulsion) intravenos.

6 ® Injektion, sofort leichte Krampfe.

6 “ Schwere Dyspnoe, macht einen schiver kranken Eindruck, doch
bleibt leben.

In der nebenstehenden Tabelle sind die Resultate der
Versuchsreihe noch einmal zusammengestellt. Es ergibt sich
aus ihr, daB durch die Prflparierung eine zehnfache Steige-
rung der Empfflnglicbkeit gegentlber dem normalen Tier er-
zielt wurde. Diese Versuchsbeispiele fiber aktive Bakterien-
anaphylaxie lehren also, daB auch gegenfiber Vollbakterien

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Ueber Anaphylaxie.
TabeUe UI.

475

No.

des

Meer-

Bchw.

Glewicht
des Tieres

Vorbehandelt mit

Zeit bis
zur Re¬
injektion

Dosis feucht
gewogener
Bakterien pro
100 g Tier

Resultat

M 436

200

0.075

lebt

M 437

250

—

—

0,10

lebt

M 438

230

—

—

0,10

lebt

M 439

240

—

—

0.15

lebt

M 441

250

—

—

0,20

lebt

M 442

180

—

—

0.25

tot

M 440

260

—

—

0,25

tot

M 350

260

0,2 g feucht gewogener Bakt. subk.

19 Tage

0,100

tot

M 326

230

0»2 g ,y ,, ,, ,,

11 11

0,075

tot

M 363

270

0,2 g „ „ „ „

1 11 n

0,050

tot

M 396

220

0,2 g „ „ „ „

11

0,025

tot

M 360

180

0,2 g „ „ „ „

11 11

0,025

tot

M 36i

160

0,2 g „ ,, „

11 11

0,015

lebt

M 353

200

0,2 g ,, ,, ,, ,,

1 11 11

0,010

lebt

regelm&fiig eine aktive Anaphylaxie durch ge-
eignete PrSparierung mit geeigneten Dosen er-
zielt warden kann. Allerdings ist der anaphylaktische
Index bedeutend geringer, als wir ihn bei der Eiweifianaphylaxie
zu seben pflegen. Ob daran die an sich hdhere Giftigkeit
des Bakterieneiweifi auch fdr das Normaltier schuld ist, Oder
der Umstand, daB wir bier mit morphologischen Gebilden,
dort mit amorphem EiweiB arbeiten, sei dahingestellt. Jeden-
falls zeigt aber gerade die geringe Differenz, wie notwendig
es auch bei der Bakterienanaphylaxie ist, quantitativ vorzu-
gehen und sie erkitrt zugleich die h&ufigen negativen Resultate,
die von anderen erzielt wurden.

Wir fQhren dann noch einige Versuchsbeispiele an, die
uns zeigen, daB auch die passive Anaphylaxie bei Verwen-
dung geeigneter Sera zur PrSparierung und bei Injektion ge-
eigneter Dosen zur Reinjektion ebenso gesetzmSBig gelingt,
wie die passive Anaphylaxie mit jedem anderen EiweiB. Das
ist ja nach unseren Ergebnissen bei der aktiven Anaphylaxie
auch gar nicht weiter verwunderlich.

Doch haben gerade hier, wo ja nicht nur die Antigendosen,
sondern auch die des Antiserums eine so ausschlaggebende
Rolle spielen, die besonders hHufigen negativen Resultate zu

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476

E. Friedberger und S. Mita,

falschen Deutungen Veranlassung gegeben, well man sowohl
vom Antiserum wie vom Antigen meist zu wenig gegeben hat.
Namentlich in den Versuchen, in denen man bestrebt war,
anaphylaktische Reaktionskorper im Serum von Patienten nach-
zuweisen, hat man ganz unbeachtet gelassen, daO davon i. R.
nicht soviel vorhanden sein kann, als im Serum ktinstlich durch
aktive Immunisierung hochgetriebener Tiere, so daB der Nach-
weis um so mehr miBlingen muBte, als man auch beziiglich der
Antigenzufuhr bei der Reinjektion die quantitativen VerhUltnisse
aufier acht gelassen hat. So sind namentlich die zahlreichen
negativen Versuche bei passiver Uebertragung der Tuberkulose-
flberempfindlichkeit zu erkl&ren. Aber schon das Auftreten
von Fieberreaktionen in den Versuchen von Yamanouchi
spricht far eine passive AntikCrperdbertragung, wenn auch die
Mengenverhaitnisse nicht derartige waren, daB Symptome einer
intensiven Vergiftung ausgeldst wurden.

Im Nachstehenden bringen wir einige Versuche von passiver
Uebertragung der Anaphylaxie gegenQber Vibrio Metschnikofif.

Meerschweinchen M 445, 180 g, vor 24 Stunden mit 3,5 ccm Antivibrio-
kaDinchensenun intraperitoneal vorbebandelt.

2 . III. 0,05 g Proz. (1,8 II. Emulsion) intravenos.

5‘® Injektion.

5'^ Heftige Krampfe und Spriinge.

5*® sich auf die Seite, Eeflexe erloschen, agonale Atmung.

5« Tot.

Meerschweinchen M 446, 180 g, Vorbehandlung wie roriges.

2. III. 0,025 Proz. (0,9 ccm II. Emulsion) intravends.

5*® Injektion.

5®® Spriinge und Krampfe.

5®* Legt sich auf die Seite, neue Krampfe.

5®^ Reflexe erloschen, agonale Atmung.

5*® Tot.

Meerschweinchen M 447, 160 g, normales Tier.

2. III. 0,2 g Proz. (3,2 ccm I. Emulsion) intravenos.

5*® Injektion, keine Symptome.

Meerschweinchen M 435, 200 g, normales Tier.

2. III. 0,2 g Proz. (5,0 ccm 1. Emulsion) intravenos.

5*® Injektion, sofort Krampfe und Spriinge,

5®' Legt sich auf die Seite.

5^* Reflexe erloschen.

5^* Agonale Atmung.

5^‘ Tod.

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Ueber Anaphylaxie.

477

Auch die folgende Tabelle zeigt die Mdglichkeit der
Uebertragung der passiven Anaphylaxie mit Anti-Metschnikoif-
Eaninchenserum.

Tabelle IV.

No.

des

Tleres

KSrper-

gewicht

Vorbehandelt mit

Zeit nach
Vorbe-
handlung

Injektions-
dosis der
Vib. Met. pro
100 g Tier

Resultat

M 170

210

0,25 g

lebt

M 171

210

0.35 „

lebt

M 172

220

—

—

0.45 „

lebt

M 173

170

—

—

0,65 „

lebt

M 174

190

—

—

0,70 „

tot in 8'

M 161

220

3,0 ccm Kan.-Imra.-Ser. ip.

24 Btund.

0,25 g

tot in 4'

M 162

220

» yj yy yy yy yy

yy yy

0.07 „

tot in 4'

M 163

210

yy y* yy yy yy yy

yy yy i

0,05 „

tot in 4'

M 165

240

yy yy yy yy yy yy

»• yy

0.025 „

tot in 4'

M 164

200

yy yy yy »y yy yy

yy yy

0,02 „

lebt

M 166

220

2,0 ccm Immunserum intrap.

24 Stund.

0,025 g

tot in 4'

M 167

210

yy yy yy yy

yy yy

0,015 „

lebt

M 168

240

1,0 ccm Immunserum intrap.

24 Stund.

0,015 g

lebt

M 169

200

yy yy » yy

yy yy

0,02 „

tot in 4'

Hier ist also mit einer relativ ungiftigen Bacillenemulsion
ein recht betrSchtlicher Index (ca. 30) erzielt*).

1 ) Agglutmationstiter des Serums V6o«*

2) Anm. bei der Korrektur: Im AnschluQ an diese Verauche haben
wir analoge Experimente mit Tuberkelbacillen ausgefuhrt. Wir sind hier,
wie UDsere auf dem Mikrobiologentag in Dresden demonstrierten Tabellen
gezeigt haben, zu ganz den gleichen Besultaten gelangt wie mit dem Vibrio
Metschnikoff. Auch vom Tuberkelbacillus sind Bakterienmengen fur die
Praparieruug notwendig, die denen des Vibrio Metschnikoff annkhernd
enteprechen (0,02 trockene gepulverte Bacillen) und ebenso wird bei der
Beinjektion ein erheblicher „Index“ gegeniiber den Eontrollen erzielt.

Die Dosen, die von Tuberkelbacilleneiwei6 notwendig sind, um
Anaphylaxie zu erzeugen, lessen es ohne weiteres verstandlich erscheinen,
dafi man mit Tuberkulin scheinbar keine Anaphylaxie erhalt.

Es ist kein Anhaltspunkt dafiir vorhanden, dafi im
Tuberkulin besondere Gifte vorhanden sind , dafi etwas
anderes als die Spuren von Tuberkelbacillen ei weifi im Tuberkulin die
spezifische Reaktion bedingen.

Wenn man nun bedenkt, wie grofi schon die Mengen von Tuberkel-
bacillenleibessubstanz fiir die Anaphylaxie sein mufi, so wird man verstehen.

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478

E. Friedberger und S. Mita, Ueber Anaphylaxie.

Zusammenfassung.

Die Arbeit enthSit Untersuchuogen:

1) Ueber die MQglichkeit der Uebertragung
der passiven Anaphylaxie durch Ziegenseram.

Sie ist im Gegensatz zu den Angaben von Kraus vor-
handen.

2) Ueber die primiire Antiserumanaphylaxie
durch Kaninchenantipferde-undAntirinderserum.

Derartige Sera werden analog dem Antihammelserum
toxischer als das normale Kaninchenserum.

3) Ueber aktive und passive Bakterienana-
phylaxie.

Es wird bier gezeigt, dafi in der RegelmSiligkeit positiver
Resultate (akuter Tod) zwischen Bakterien- und Serum-
anaphylaxie kein Unterschied bestebt, wenn nur die Mengen
von Bakterieneiweifi f(ir PrSparierung und Reinjektion an-
nSbernd jenen entsprecben, die wir von Serumeiweifi ver-
wenden.

dafi beim gesunden Tier die Erregung der Tuberkuloseanaphylaxie durch
Tuberkulin an Stelle von Leibem nur durch riesige Dosen zu erzielen
ware, Dosen, die wegen der Giftigkeit der gleichzeitig vorhandenen Albu-
mosen vom gewohnlichen Tuberkulin gar nicht gegeben werden kdnnen.

Wenn man demgegeniiber mit Eecht darauf hinw'eist, mit wie mini-
malen Mengen von Tuberkulin man eine spezifische Beaktion im tuber-
kulosen Organismus erzielen kann, so ist daran zu erinnern, dafi es sich
bei einer echten Infektion natiirlich um eine ganz andere Art der Pra-
parierung handelt, als bei der durch einmalige Injektion abgetdteter
Bacillenleiber.

Trotz dieser erheblichen quantitativen Differenzen miissen wir aber
zu dem SchluO kommen: Es lafit sich auch mit Tuberkulin eine Ana^
phylasie erzeugen, und die Tuberkulinreaktion ist in diesem Sinn, wie das
ja schon frtiher angenommen, von Landmann u. a. aber neuerdings be-
stritten worden ist, eine echte Anaphylaxiereaktion.

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V. Liebermann und v. Fenyvessy, Weeen der Eomplemente. 479

Nachdruck verbolen.

[Aus dem Hygienischen Institut der Universitat Budapest]

Ueber das Wesen der Komplcmente.

Von L. y. Liebermann und B. v. Fenyvessy.

(Eing^angen bd der Bedaktion am 1. Mai 1911.)

Der Frage nach dem Wesen des Komplements ist der
eine von uns im Jahre 1906 nShergetretenEs sollte da-
mals zunachst entschieden werden, ob die Komplemente (sowie
auch die hSmolytischen Immunkbrper) Fermente sind, wie das
manche vermutet haben. Die Antwort fiel verneinend aus.
Es wurde also ein anderer Weg betreten und nach Korpern
gesucht, die sich an der H^moljse nach Art eigentlicher
chemischer Reaktionen direkt beteiligen. Es gelang zunkchst,
die hamolytischen Immunkdrper in bemerkenswerter Reinheit,
eiweififrei in trockenem Zustand darzustellen *). Eine Iso-
lierung eines Kdrpers mit den Eigenschaften eines Komplements
wollte aber durchaus nicht gelingen. Durch verschiedene Be-
obachtungen und Erwkgungen wurde der eine von uns zu der
Ansicht gefiihrt, daO die Seifen und seifenkhnlichen Bestand-
teile (GallensSuresalze) des Blutserums in Verbindung mit
gewissen anderen, gleichfalls im Serum vorhandenen StofiFen
(Eiweifi, Kalk, Magnesia), die die Seifen ihrer unmittelbar
hamolytischen Fahigkeit berauben, wohl diejenigen Stoffe sein
kdnnten, die man Komplemente nennt^).

Unabhangig biervon und fast gleichzeitig ist Noguchi^)
mit derselben Ansicht hervorgetreten, ja er ging noch weiter
mit der Angabe, dall es ihm gelang, die Komplementnatur
der Seifen auch an Bakterien nachzuweisen ^).

1) L. V. Liebermann, Deutsche med. Wochenschr., 1906, No. 7.

2) L. T. Liebermann und B. v. Fenyvessy, Centralbl. f. Bakt,
Abt. I, Bd. 47, p. 274.

3) L. V. Liebermann, Archiv f. Hygiene, Bd. 62, 1907, p. 328. —
Biocbera. Zeitschr., Bd. 4, p. 25.

4) Hideyo Noguchi, Biochem. Zeitschr., Bd. 6, p. 327. — Proc.
of the Soc. for exper. Biol, and Med., Vol. 4, 1907, No. 3.

5) Auch Landsteiner und seine Mitarbeiter halten es fiir mSglich,
da6 die Eomplemente den Lipoiden nahestehen, vielleicht Lipoid-Eiweifi-

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480

L. y. Liebermann und B. v. Fenyveasy,

Diese Ansicht begegnete mannigfachen Zweifeln, denn wenn
auch im allgemeinen zugestanden wurde, dafi gewisse Aebn-
lichkeiten vorhaDden sind, so wurde doch mit grSBtem Nach-
druck auf Unterschiede hingewiesen, die es einstweilen nicht
gestatteu, die Seifen resp. Seifenverbindungen als identisch
mit den wirklichen Komplemeoten auzusebeu^).

Wir haben uns in einer Reihe von Arbeiten®) bemtiht,
die vorgebrachten EinwSnde zu entkrSften — auf einige seither
erschienene Arbeiten woilen wir weiter unten ntlher eingehen
— trotzdem blieb aber eine fiir die Beweisfflhrung wichtige
Frage unaufgekl^rt, ntiralich die, ob es gelingt, mitHilfe
einer fUr normale (nicht sensibilisierte) Blut-
kSrperchenunwirksamen Seifen verb indung (kiinst-
liches Komplement) ein System zu aktivieren,
daseinennatarlichenlmmunkdrper(Ambozeptor)
enthBlt.

Die Versuche von Noguchi (1. c.), welche die Frage
zuerst in positivem Sinue beantwortet haben, sind von
V. Dungeru und Coca (1. c.) nachgeprfift worden, und zwar
mit dem Resultat, daB Noguchis Befunde nicht fttr die
Komplementnatur der Seifen verweftet werden kdnnen, sondern
auf den natflrlichen Korn piemen tgehalt der gleichzeitig ver-
wendeten, nicht gentlgend inaktivierten Sera zurflckzufQhren
sind. V. Dungern und Coca, sowie Hecker (1. c.) fanden
im Gegenteil, daB sensibilisierte Blutkdrperchen gegen Seife
resistenter sind als nicht sensibilisierte, w&hrend M. Friede-
mann und F. Sacbs tlberhaupt keinen Unterscbied fest-
stellen konnten. Endlich fand v. Knaffl-Lenz^), daB
sensibilisierte Hammelblutkbrperchen durch Seife sowie durch

verbmdungen sind (Dautwitz und Landsteiner, Hofmeieters Beitr.,
Bd. 9 — Landsteiner und Ehrlich, Centralbl. f. Bakt., Bd.45, p.247).

1 ) V. Dungern und Coca, Berl. klin. Wochenschr., 1908, No. 7. —
Hecker, Arbeiten aus d. Kais. Institut f. cxper. Therapie zu Frankfurt,
Heft 3. — H. Bachs und K. Altmann, Berl. klin. Wochenschr., 1908,
No. 10. — M. Friedemann und Fr. Sachs, Biochem. Zeitschr.,
Bd. 12, p. 259.

2) L. V. Liebermann und B. v. Fenyvessy, Berl. klin. Wochen-
schrift, 1908, No. 27. — Zeitschr. f, Immunitiitsf., Bd. 2, p. 436.

3) Knaffl-Leuz, Biochem. Zeitschr., Bd. 20, p. 1.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

481

Seifen-Serumgemische bedeutend rascher aufgelost warden als
nicht sensibilisierte.

Wir selbst haben uns l§ngere Zeit hindurch bemfiht, uns
liber diese Frage Klarheit zu verschafFen, ohne daB es uns
gelungen w&re, einigermaBen eindeutige Resultate zu er-
halten. Inzwischen wandten wir uns abermals zu Versuchen,
die die Isolierung des Komplements bezweckten, bis das
Unbefriedigende der Isolierungsversuche uns in unserer
frflher vertretenen Ansicht bestarkt hat, daB die Isolierung
wohl darum nicht gelingt, weil die komplettierende Eigen-
schaft nicht einem Kbrper oder einer Verbindung zukommt,
sondern einem System von KSrpern, die sich in
einem bestimmten chemischen Gleichgewichts-
zustand befinden mussen, einem Gleichgewicht,
welches nur der Immunkorper bezw. die mit ihm
beladenen Blutkorperchen oder Bakterien zu
stSren vermogen (normale Blutkorperchen aber
nicht) in demSinne, daBeszueinerhS.molytischen
bezw. bakteriolytischen Wirkung kommt.

Beziiglich der Zusammensetzung eines solchen Squili-
brierten Gemisches konnten wir also in qualitativer Be-
ziehung auch nach der soeben geschilderten Auffassung an
unserem bisher vertretenen Standpunkt festhalten, d. h. Ge-
mische von Seife mit gewissen, in den normalen Seris vor-
kommenden seifeninaktivierenden Stoflfen (Kalk, Magnesiasalze,
EiweiB etc.) herstellen; das Neue an unserem Plane war der
Versuch, eine in quantitativer Beziehung richtige Kom-
bination derselben aushudig zu machen, die nunmehr die
Eigenschaft besitzen sollte, sensibilisierte, nicht aber normale
Blutkorperchen aufzuldsen, und die auch in ihrem sonstigen
Verhalten mOglichst weitgehende Analogien mit den natflr-
lichen komplementhaltigen Seris aufweisen sollte.

Beschreibung der Versuche.

1. Bedingungen fiir die Sensibilisierung; Ausschaltuug
Btdrender Momente.

Wir haben gefunden, daB sich zu diesen Versuchen Rinder-
blutkOrperchen und das Serum gegen diese immunisierter

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482

L. y. Liebermann und B. v. Fenyvessy,

Eaninchen am besten eignet. Urn mbglichst klare Verh&lt-
nisse zu scbaffen, haben wir zu unseren Versuchen 5-proz.
Aufschweromungen seasibilisierter und nicht sensibilisierter
BlutkSrperchen bentttzt, die auf folgende Weise hergestellt
waren: Abgemessene Mengen einer 5-proz. Emulsion ge-
waschener Rinderblutkdrperchen wurden in markierte Reagenz-
glaschen gefdllt, sodann inaktiviertes Kaninchenimmunserum
in einer Menge zugesetzt, die einer etwa 5—10-fachen Ambo-
zeptordosis pro 1 ccm Blutemulsion entsprach. Nach grttnd-
lichem Durchmischen blieben die Proben eine Stunde lang im
Thermostaten, dann wurden die Blutkorperchen auf der Zentri-
fuge 3—4mal gewaschen und endlich mit physiologischer
Eochsalzldsung auf das urspriinglicbe Volumen aufgeftillt. —
Als Vergleichsobjekte, die wir im nachstehenden als nicht
sensibilisierte Blutkdrpercben bezeichnen, dienten solche, die
aus derselben ursprOnglichen Emulsion genau in derselben
Weise und in demselben Verh&ltnis wie die obigen, jedoch
mit einem inaktivierten normalen Eaninchenserum be-
handelt worden waren.

Nebenbei sei bemerkt, daB wir auch die Methode der
K&ltetrennung mit gutem Erfolge angewendet haben.

Die GrOnde, die uns veranlaBt haben, zur Sensibilisierung
der Blutkdrpercben diesen Weg einzuschlagen, waren folgende:

Verwendet man durch Hitze inaktiviertes Immunserum,
dem man das kunstliche Eomplement zuftlgt, und andererseits
zur Kontrolle durch Hitze inaktiviertes Normalserum, so hat
man ungleiche VerhSltnisse geschaffen, da die einzelnen Sera
ilberhaupt, daher auch normale und h^molytische Immunsera
gegen zugefiigtes kttnstliches Eomplement (Seifengemisch) sich
ungleich verhalten; sie hemmen die direkte h^molytische Wir-
kung der Seife in ganz verschiedenem MaBe.

Diese seifeninaktivierende Wirkung der Immunsera rflhrt,
wenigstens zum Teil, von einem Edrper her, der bei der
Sensibilisierung von den Blutkdrpercben gebunden wird, was
wir daraus schlieBen, daB die von den Blutkdrpercben nach
der Sensibilisierung abgegossene FlQssigkeit auf Seife eine
wesentlich geringere inaktivierende Wirkung ausQbt, wie
folgender Versuch zeigt:

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Ueber das Wesen der Komplemente.

483

3 ccm einer 20-proz. EinderblutkoTperchenemulsion verden mit 1 ccm
eines ioaktivierten Immunserums (Rinder-Kaninchenambozeptor) */« Stunde
lang im Thermostaten gehalten, dann zentrifugiert.

Vereuch,

1) Urspningliches inaktiviertes Imraunserum 0^5 + physiologische
NaCl-LdsuDg 0,75 + Natrium-OIeinat-LdsuDg (0,1-proz.) 1,0 ccm.

2) Von den Blutk5rperchen abgegossenes Immunserum 1,0 (= 0,25
nnverdunnt) + Natrium Oleinat 1,0.

Zusatz Ton je 1 ccm 5-proz. Sinderblutemulsion. Nach 1 Stunde:
in 2) komplette H&molyse, in 1) Spuren.

Das Resultat ist dasselbe, wena statt Rinderblut Schweine-
blut verwendet wird.

Dies spricht schon dafQr, dafi dieser seifeniDaktivierende
Bestandteil des Immunserums, der ihm durch die Blutkorper-
chen entzogen wird, nicht etwa der spezifische Immunkdrper
selbst ist, was wir auch daraus scbliefien, dafi auch inaktivierte
Normalsera, wenn sie vorher mit Blutkdrperchen behandelt
waren, an ihrer FShigkeit, Seife zu inaktivieren, einbflfien.

Wenn wir somit in unseren Versuchen das Verhalten der
sensibilisierten Blutkdrperchen mit solchen verglichen baben,
die mit Normalseris behandelt waren, so mufiten wir die
Wirkung der in den letzteren vorhandenen Normalambozep-
toren mit in den Kauf nehmen, was uns die Aussichten, grofie
Unterschiede zwischen sensibilisierten und nicht sensibilisierten
Blutkdrperchen in ihrem Verhalten gegen unsere kOnstlichen
Komplemente zu finden, natdrlich von vorneherein ver-
mindert hat.

Es wftre aber falsch gewesen, wenn wir die in der obigen
Weise hergestellten sensibilisierten Blutkdrperchen etwa mit
der ursprQnglichen Emulsion hfitten vergleicben wollen, da
wir gefunden haben, dafi das einstiindige Verweilen im Thermo¬
staten, sowie das wiederholte Auswaschen auf der Zentrifuge
an sich die Resistenz der Blutkdrperchen gegen Seifen und
Seifengemische wesentlich herabsetzt. Wir glaubten auch, das
obige Vorgehen wtlblen zu mussen, urn etwaige nichtspezilische
Wirkungen der Kaninchensera auszuschalten.

Es sei endlich besonders hervorgehoben, dafi wir zu
unseren Versuchen nur solcbe hkmolytische Immunsera ver-
wenden konnten, die keine agglutinierende Wirkung besitzen.

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484 V. Liebermann und B. v. Fenyvessy,

Es hat sich nSmlich in Uebereinstimmung mit unseren frtiheren
Angaben (Berl. klin. Wochenschr., 1908, No. 27) gezeigt, daB
agglutinierte Blutkorperchen gegen Seife resistenter sind als
Dormale, und zwar kann dieser bamolysehemmende Einflufi
der Agglutination so stark sein, daB er die durch die Sensi-
bilisierung selbst bewirkte grbBere Empfindlichkeit der Blut-
kbrperchen uberkompensiert.

Es ist bekannt, daB sich diese stbrenden Einfitisse nicbt
nur bei unseren kunstlichen Komplementen, sondern auch
beim Arbeiten mit nornialen komplettierenden Seris geltend
machen. Wir verweisen auf den hemmenden EinfluB der
Agglutination, sowie den jedera Experimentator bekannten
antikomplementSren EinfluB inaktivierter Normalsera.

DaB sich diese Stbrungen bei der Anwendung unserer so
einfach zusaminengesetzten kiinstlichen Komplemente starker
geltend machen, ist ja nicht verwunderlich, da wir ja schon
jetzt eine ganze Reihe von im Serum vorkommenden Stoffen
kennen, die der unmittelbar h^molytischen Wirkung der Seife
entgegenarbeiten (Kalk und Magnesiasalze, EiweiBkdrper,
Lecithin, Cholesterin, auch gewisse neutrale Fette, ferner auch
verschiedener Grad der Alkalizitat), so daB es bei der immensen
Anzahl der Kombinationsmbglichkeiten fast aussichtslos er-
scheint, ein kUnstliches Gemisch herzustellen, das sich in
alien Einzelheiten vollkommen wie ein natflrliches Serum
verhielte.

2. Das kiinstliohe Komplement.

In alien unseren Versuchen war der wesentliche Be-
standteil das blsaure Natrium (Natrium oleinicum puriss.
Merck, zum Teil auch das oleinsaure Natrium von Kahl-
bau m), entsprechend unserer schon seit langer Zeit vertretenen
Ansicht Qber die Natur der Komplemente.

Versuch.

1 ) 0,2 ccm 0,01-proz. Natrium-OIeinat-Losung +1,8 ccm phyaiologische
NaCl-Losung + 1 ccm sensibilisiertes Bioderblut.

2) 0,2 ccm 0,01-proz. Natrium-Oleinat-Lbsung + 1,8 ccm physiologische
NaCl-Losung + 1 ccm nicht sensibilisiertes Einderblut.

Beobachtung bei Zimmertemperatur nach Vs Stunde: 1) fast komplett
gelost, 2) Spuren von Hamolyse.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

485

Dieses aus einer groBen Anzahl ibnlicher Versuche her-
ausgegriffene Beispiel zeigt also, daB ambozeptorbeladene
Blutk5rpercben von SeifenlSsungen rascber b&molysiert werden
als nicbt sensibilisierte.

Wdr mScbten diese fflr unsere weiteren AusfQbrungen
wicbtige Tatsacbe um so scblirfer betonen, als sie im scbroffen
Gegensatze zu den Versucben von Hecker, sowie von
V. Dungern und Coca stebt. Die genannten Autoren geben
n&mlich — wie bereits erwabnt — an, daB das sensibilisierte
Blut durcb dlsaures Natron in geringerem Grade gelost wird
als das nicbt sensibilisierte, und erblicken bierin einen
wicbtigen Beweis gegen die Identitat der Seifen und der
Komplemente.

Obwobl wir wiederbolt darauf aufmerksam gemacbt baben,
daB es nicbt die Seifen allein, sondern nur ibre Kombinationen
mit gewissen anderen Blutbestandteilen sind, die wir fQr
Komplemente balten, mfissen wir docb darauf besteben, daB
der von uns bebauptete Unterscbied selbst bei Anwendung
reiner Seifenlbsungen zu konstatieren ist.

Wir glauben auf Grund unserer Versucbe bebaupten zu
dfirfen, daB die von den zitierten Autoren gefundenc erbdbte
Resistenz der sensibilisierten Blutkdrpercben gegen Seife
nicbt durcb den Ambozeptor selbst bedingt war.

Wir baben bereits eingangs darauf bingewiesen, in welcb
betracbtlicbem Grade scbon eine ganz geringfOgige Agglu¬
tination die Resistenz der BlutkSrpercben gegen Seife erboben
kann und baben aus diesem Grunde zu unseren Versucben
nur Blutkbrpercben verwendet, die nicbt im geringsten agglu-
tiniert waren. Da Hecker nicbts uber Agglutination er-
w&bnt, so scbeint ibm die Wicbtigkeit dieses Momentes fflr
den Ausfall der Versucbe entgangen zu sein. v. Dungern
und Coca geben aber ausdriicklicb an, daB die von ibnen
benntzten Blutkdrpercben, wenn aucb ganz leicbt, agglutiniert
waren. Somit glauben wir annebmen zu miissen, daB die von
den erwBbnten Autoren gefundene erbdbte Resistenz sensibili-
sierter Blutkdrpercben nur durcb die Agglutination bedingt war.

Ein weiterer Umstand, der die Resultate derartiger Ver¬
suche beeinflnssen kann und aucb die uns widersprechenden

ZelUchr. f. ImmunitXtsforichiing. Oiig. Bd. 2. 32

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486

L. V. Liebermann und B. t. FeDyvessy,

Befunde der zitierten Autoren vielleicht zum Teil erkl§U*en
kdonte, dQrfte unseres Erachtens in der Verschiedenheit der
SeifenprSparate liegen.

Die HandelsprUparate, wenigstens die beiden von uns be*
nntzten (von Merck bezw. von Kahlbaum) enthalten nfim-
lich, wie die in dem hiesigen hygienischen Institnt von Herrn
Assistenten Dr. L. Dienes ausgefUhrten Analysen zeigten,
OelsHure und Na bezw. Alkali nicht in demselben VerhMtnis.
So warden bei der Titration in alkoholischer Lbsung unter
Verwendung von Phenolphthalein auf 1,0 g des Merckschen
Prfiparates 3,85 ccm, auf 1,0 g des Kahlbaumschen aber
4,9 ccm n/io NaOH verbraucht.

Wie wir aber noch welter unten ausftthrlicher erdrtern
werden, spielt bier die AlkalizitSt eine sehr wichtige Rolle, und
zwar so, daB bei einem nicht entsprechenden Alkalizitfttsgrad
der Unterschied zwischen sensibilisierten und nicht sensibili-
sierten Blutkbrpercheu verschwinden, ja sogar in umgekehrtem
Sinne erscheinen kann.

Wir wollen Qbrigens auf diesen Punkt bier nicht nfiher
eingehen, da wir das Hauptgewicht gar nicht auf die mit reinen
Seifenlbsungen ausgeffihrten Versuche, sondern auf jene legen,
die mit Seifengemischen, und zwar von entsprechend einge*
stellter AlkalizitUt (siebe welter unten) ausgefOhrt waren.

Bekanntlich haben schon unsere friiheren Versuche ge-
zeigt, daB man die unmittelbare h&molytische Wirkung der
Seifen durch Zusatz verscbiedener Stoffe, die Bestandteile des
Serums (Kalk and Magnesiasalze, Eiweifikbrper usw.) bilden,
paralysieren kann, es war bisher nur nicht gelungen, die Ver-
haltnisse ausfindig zu machen, bei denen solche fhr normale
Blutkbrperchen unwirksame Mischungen auf sensibilisierte
Blutkdrperchen komplettierend (hamolytisch) wirken.

Die Bedingungen, die erfiillt werden mufiten, betrafen
einerseits die Zusammensetzung der kflnstlichen Gemische,
andererseits die Ausschaltung gewisser storender Umstande,
die sich aus der Art und Weise der Sensibilisierung ergaben
und die wir im vorhergehenden bereits eingehend erdrtert haben.

Wir sind bei Anwendung verscbiedener Kombinationen zu
qualitativ gleichen Ergebnissen gelangt Einige dieser Kom-
binationen sollen im nachstehenden besprochen werden.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

487

A. Natrium-01 einat 4* Magnesiumhydrokarbonat.

Man kann diese Ldsungen entweder nach dem VerhMtnis
2 CisHssOgNa + MgCO, + H^COs

Oder

2 CigHssOjNa + 2 MgCOs + 2 HgCOs
herstellen. Letzteres haben wir fQr besser gefunden, weil
dann die h&molytische Wirkung des Systems auf normale Blut-
kbrperchen in geringerem MaBe zur Geltung kommt. Auf
ein MolekQl Natrium-Oleinat fkllt also in letzterem Falle ein
MolekQl Magnesium-Karbonat.

Wir haben mit Ldsungen gearbeitet, welche 0,5 Voo Oleinat
enthielten und diese wie folgt hergestellt:

In 50 ccm 0,9-proz. Kochsalzldsung wurden 20 mg Ma-
gnesiumkarbonat suspendiert und in die Fliissigkeit solange ein
Strom von gewaschenem Kohlensfiuregas eingeleitet, bis voll-
stSndige Ldsung eingetreten war. Diese Ldsung reagiert gegen
Lackmuspapier nach einigem Stehen deutlich alkalisch. Auf
die Bedeutung dieses Umstandes kommen wir noch zurflck.
Von dieser, in gut verschlossenen Flaschen aufbewahrten
Ldsung wurden vor jedem Versuch Mischungen mit dem
gleichen Volum 0,1-proz. Natrium-Oleinatldsung (mit physio-
logischer NaCl-Ldsung bereitet) hergestellt.

Versuch.

Maguesium-Oleinat 0,5 ccm + NaCl-L5sung 1,5 ccm.

1) Bensibilisierte Blutkorperchen.

2) nicht sensibilisierte Blutkbrperchen, je 1 ccm.

Beobachtung bei Zimmertemperatur. Nach 15 Minuteu 1) komplette
L5suDg, 2) schwache Hamolyse.

Dieser Versuch beweist also, daB sensibilisierte Blutkdrper-
chen durch die Magnesium-Karbonathaltige Seifenkombination
bedeutend rascher geldst werden als normale.

Die Herstellung einer auf normale BlutkSrperchen fast
unwirksamen, jedoch fQr sensibilisierte wirksamen Mischung
war durch Vermehrung des Magnesiumsalzes nicht zu erreichen
aus GrQnden, die wir weiter unten angeben werden.

B. Natrium-OleinatCalciumchlorid.

Fine zweckmaBige Kombination war z. B. die folgende:

0,1 ccm 0,1-proz. Natrium-Oleinatidsuag + 0.9 ccm 0,1-proz. Calcium-
chloridldsung. Durch dieses Qemisch wurden sensibilisierte BlutkSrperchen

32*

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488

L. V. Liebermann und B. v, Fenyvessy,

(0,5 ccm) nach einstiiDdigem Verweilen im Thermostaten komplett, nicht
sensibilisierte gar nicht gel5st.

Eine weitere AnnliheruDg an die Verhaltnisse, wie sie im
natiirlichen Serum gegeben sind, erzielten wir durch Anwen-
dung von SerumeiweiBstoflFen, Globulin und Albumin. Ersleres
wurde durch Halbsattigung mit Ammonsulfat, letzteres durch
schwaches Ansauern des Globulinfiltrates aus Pferdeblutserum
gewonnen. Die Niederschlage wurden in Wasser gelSst,
48 Stunden lang gegen destilliertes Wasser dialysiert und
kamen schliefilich in moglichst konzentrierter Ldsung von
physiologischem NaCl-Gehalt zur Verwendung. Zur Inakti-
vierung der Seife wurden diese EiweiBldsungen entweder allein
Oder mit Mg- oder Ca-Salzen kombiniert verwendet.

Einige Beispiele hierfiir (Versuche im Thermostaten)
m5gen im folgenden angefiihrt werden.

C. Natrium-Oleinat -f- Globulin.

Oelsaures Natron 0,1-proz. 0,5 ccm + Globulinlosung 0,25 + NaCl-
Losung 1,25.

a) Sensibilisierte Blutkdrperchen nach einer Stunde komplett geldst,

b) nicht sensibilisierte Blutkorperchen spurenweise geldst

D. Magnesium-Oleinat + Serum-Albumin.

1 ccm Serum-Albuminlosung + 1 ccm Magnesium-Oleinat (wie unter A).

a) Bensibilisiertes Blut nach 20 Minuten komplett,

b) nicht sensibilisiertes Blut spurenweise geldst.

E. Natrium-Oleinat + CaClj + Globulin.

0,3 ccm Natrium-Oleinat 0,1-proz. -b 1 ccm CaCl, 0,1-proz. -4- 0,1 ccm
Globulinldsung 0,6 ccm NaCl-Ldsung.

Nach I'/y-Btiindigcr Einwirkung: sensibilisierte Blutkdrperchen kom-
plctt, nicht sensibilisierte spurenweise geldst.

F. In vielen Versuchen haben wir zur Inaktivierung der
Seife auf 56® erhitztes normales Eaninchenserum
und zwar allein oder aber mit Ca- oder Mg-Salzen kombiniert
verwendet. Eine solche etwas komplizierte, aber fur gewisse
spSter zu besprechende Zwecke sehr geeignete Kombination
war die folgende:

0,05 ccm inaktiviertes Normal-Kaninchenserum -b 0,05 ccm NaOH
-b 0,25 ccm Natrium-Oleinat 0,1-proz. -b 0,75 ccm CaCl, 0,1-proz. -b 0,9 ccm
NaCl-Ldsung.

Nach halbstundigem Versuch sensibilisiertes Blut komplett, nicht sen¬
sibilisiertes gar nicht geldst.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

489

Endlich sei bemerkt, daB in einer tleihe von Versuchen
auch eine Emulsion von Lanolin als inaktivierender Zusatz
zur Verwendung kam. Ueber einen solcben Versuch berichten
wir bei der Besprechung der Arbeit von Michaelis und
Skwirsky.

Ueber den EinfluB der Alkalizit&t.

Die mitgeteilten Versuche beweisen also, daB bei passend
gew&hlten Mengen- bezw. Konzentrationsverhkltnissen die kom-
plettierende Wirkung der Seife auf ambozeptorbeladene Blut-
kbrperchen scbarf bervortritt. Trotzdem baftete alien diesen
Versucben eine gewisse Unsicherbeit an, solange wir die Rolle,
die der Alkalizit^t der Gemiscbe zukommt, nicbt erkannt haben.

Wir haben bereits bei den Versuchen mit der Kombination
A (Natrium-Oleinat + Magnesiumhydrokarbonat) darauf hin-
gewiesen, daB eine Vermehrung des Magnesiumsalzes fur die
Demonstration der Differenz zwischen sensibilisierten und
nicbt sensibilisierten Blutkorperchen ungiinstigere VerhBltnisse
schaift. Diese Differenz wird nkmlicb bei Steigerung der Kon-
zentration des Magnesiumhydrokarbonats vermindert oder ge-
radezu aufgehoben, ja es kann sogar ab und zn dazu kommen,
daB nicbt sensibilisierte Blutkorperchen rascher hSmolysiert
werden. Allerdings fallen diese Unterschiede schon innerhalb
der Grenzen der Versuchsfehler. Ein solcber Fall tritt z. B.
ein, wenn auf ein Molekiil Natrium-Oleinat statt ein Molektil
Magnesiumhydrokarbonat zw ei Molekble des letzteren kommen.

Da unsere Magnesium-Carbonatldsungen, wie scbon er-
wUhnt, alkalisch reagierten, so kam fiir die Erkl^rung der
erw&bnten Beobacbtungen zunkchst die Alkalizit9,t des Systems
in Betracht, die sich bei der HSmolyse in ziemlich komplizierter
Weise geltend macht.

Wir wissen zunkchst seit unseren friiheren Versuchen,
daB eine Erhbhung der Alkalizit9.t auch die HSmolyse sensi-
bilisierter Blutk5rperchen mit Normalserum hemmen kann.
Die Ursache dieser Hemmung wurde ja seither vielfach er-
6rtert, einerseits auf die Abspaltung des Ambozeptors, anderer-
seits auf die Einwirkung auf das Komplement zurbckgefbhrt.

Waiter muB darauf hingewiesen werden, daB Alkali in
bestimmten Eonzentrationen selbst hUmolytisch wirkt, und

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490

L. V. Liebermann und B. v. Fenyvessy,

zwar sowohl auf normale wie auf sensibilisierte Blutkdrpercheu.
Auch hier sehen wir, daB die seosibilisierten Blutkdrperchen
etwas rascher gel6st werden, aber der Unterschied ist nicht
so grofi und auch nicht so konstant wie bei der Seifenhtlmolyse,
insbesondere bei Anwendung der Kombination mit CaClg oder
Eiweifistoffen.

Untersucht man nun die kombinierte Wirkung von Alkali
und Seife, so findet man ganz verschiedene Dinge, je nachdem
man die Alkaliwirkung vorausgehen oder gleichzeitig mit der
Seife stattfinden l^Bt.

Bebandelt man Blutkdrperchen mit nicht Idsenden Mengen
von Seife und setzt nachtrdglich Alkali zu, so tritt momentan
Losung ein, wie dies schon Fritz Sachsgefunden und
mit einer kataljtischen Beschleunigung der Reaktion durch
die Hydroxylionen erklkrt hat, obwohl er weiter angibt, daB
dies nicht geschieht, wenn die Lauge vor der Seife zugesetzt
wird. Wir kdnnen diese Beobachtung dahin erweitern, daB in
letzterem Falle gegeniiber der reinen SeifenhUmolyse eine
betrdchtliche Verzdgerung eintritt, die sich damit erkltrt,
daB bei einer etwas Idngeren Einwirkung der Lange — auch
ohne sichtbare Hamolyse — ganz betrdchtliche Mengen Eiweifi
in Losung gehen, die eine gewisse Menge von Seife inakti-
vieren kdnnen.

Weit wichtiger fiir die vorliegende Frage sind unsere
Beobachtungen (iber den EinfluB sehr geringer Alkalikonzen-
trationen auf die Seifenh&molyse.

Der folgende Versuch gibt hierflber Aufschlufi.

Komplette
nacn —

sensibilis.

Blutk.

Hamolyse

Minuten

nicht sens.
Blutk.

1) Natrium-Oleinat 0,1-proz. 0,5 ccm + NaOH

0 ccm + NaCl-Losung 1,5 ccm

3

7

2) Natrium-Oleinat 0,1-proz. 0,5 ccm + NaOH n/,^
0,25 ccm -f NaCl-Losung 1,25 ccm

5

8

3) Natrium-Oleinat 0,1-proz. 0,5 ccm -F NaOH n/,o(,
0,50 ccm NaCl-Losung 1,00 ccm

10

10

4) Natrium-Oleinat 0,1-proz. 0,5 ccm -f NaOH n/,oo
1,00 ccm -F NaCl-Losung 0,50 ccm

20

20

1) Fr. Sachs, Biochem. Zeitschr., Bd. 12, p. 278.

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Ueber das Wesen der Eomplemente.

491

Der Versuch zeigt zun^chst, was der eine von uns bereits
in seiner ersten Publikation angegeben hat, daC nUmlich
niinimale Alkalimengen im Gegensatz zu grdfieren die Seifen-
hamolyse hemmen. Eine eigenartige Kombination der F6rde-
rung und Hemmung war im obigen Versuch No. 4 sowohl an
den sensibilisierten als auch an den Kontrollblutkdrperchen
zu beobachten. Hier trat fast momentan starke HSmoIyse
ein (die Emulsion ist durchscheinend geworden), dann ging
aber der Prozefi bis zur kompletten Lbsnng sehr langsam
vor sich.

Zweitens lehrt der Versuch, dafi die verminderte Resistenz
der sensibilisierten Blutkbrperchen im Vergleich zu den nor-
malen nur bei einer bestimmten optimalen Reaktion der Seifen-
Idsung zutage tritt und bei erhdhter AlkalizitSt der Unterschied
nicht zur Geltung kommt.

Ganz in dem soeben erwShnten Sinne, nur noch auf-
fallender, werden Seifeneiweillgemische durch Aenderungen der
Alkalizittlt beeindufit.

Wir wollen hierfflr folgende Beispiele anffihren:

Versuch L

1) Globulinlosung 0,2 + Natriumolemat 0,1-proz. 0,5 ccm + NaCl-
Lbsoug 1,3 ccm.

2) Globulinlbsung 0,2 + Natriumolemat 0,5 + NaOH n/50 0,05 +
Natiiumcblorid 1,25.

3) GlobulinlosuDg 0,2 + Natriumolemat 0,5 + NaOH n/50 0,1 +
NaCl 1,2.

AUe drd Mischungen liefien wir einerseits auf je 1 ccm sensibilisierter,
andererseits auf je 1 ccm nichtsensibilisierter Blutkdrperchen im Thermo-
Staten einwirken.

Besultat;

Hamolyse

von

1

sensibilisiert.

nicht senBibilis. filut

Nach Vj Stunde: Gemisch No. 1 '

Nach 1*/^ Stunden: Gemisch No. 2
Nach 2*/, Stunden: Gemisch No. 3

komplett

m^ig

e

stark

1) L. V. Liebermann, Gamagglutination und G^atolyse. Arch,
f. Hyg., Bd. 65, p. 332.

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492

L. V. Liebermann und B. v. Fenyvessy,

Vereuch EL.

1) Natriumoleinat 0,1-proz. 1 ccm + inaktiv. Normalkaninchenserum
0,1 + NaCl 1,8.

2) Dasselbe + NaOH n/50 0,1 ccm.

3) Dasselbe + NaOH n/50 0,2 ccm.

4) Dasselbe + NaOH n/50 0,4 ccm.

Im tibrigen alles wie im Verauch I.

Resultat:

■

Hamolyse von

sensibilisiert.

nicht sensibilis. Slut

Nach 1 Stunde: Gemisch No. 1

Nach 1*/, Stunden: Gemisch No. 2
Nach 2‘/j Stunden: Gemisch No. 3
Nach 2'/j Stunden: Gemisch No. 4

fast komplett
dgl.

sehr stark
stark

fast komplett

0

mafiig

stark

Auch diese Versuche zeigen also: 1) dafi bei erhdhtem
Alkaligehalt die Wirkung unserer kflnstlichen Komplemeote
abnimmt, 2) dall eine Aenderung der optimalen Reaktion
unseren Gemischen die Eigenschaft nimmt, eine st^rkere
hUmolytische Wirkang auf sensibilisierte als auf nicht sensibili-
sierte Blutkorperchen auszudben.

Ganz analog liegen bekanntlich die Verh&ltnisse bei den
natttrlichen komplementhaltigen Seris. Wir erinnern nur an
die von Liebermann und Noguchi zuerst nachgewiesene,
dann von Hecker u. a. bestStigte, zum Teil reversible Inakti-
vierung der Komplemente durch Alkalien (auch durch SMren).

Fassen wir die Resultate unserer bisherigen Ausfflhrungen
kurz zusammen, so konnen wir folgendes aussagen:

Es gelingt durch Vermischen von Natronseife
mit verschiedenen in den normalen Seris vor-
kommenden Substanzen Gemische herzustellen,
die sich den natflrlichen Komplementen darin
fthnlich verhalten, dafi sie sensibilisierte Blut-
kSrperchen viel stfirker hUmolysieren, als nor-
male bezw. bei einer bestimmten Versuchszeit
erstere komplett, letztere gar nicht aufldsen.

Als besonderszweckmiiBigerweisen sich Kom-
binationen , die aufier Seife Serumglobulin und
CaClg enthalten und eine bestimmte, fttr jede
Kombination eigens zu ermittelnde Alkalizittlt
besitzen.

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Ueber das VVesen der Komplemente.

493

Soweit stimmen also unsere Versuche mit denjenigen von
V. Knaffl-Lenz (1. c.). Im Gegensatz zu diesem 'Autor
mflssen wir jedoch betonen, daS es kaum angeht, einen Unter-
schied zwischen St9,rke der himolytischen Wirkung und Re-
aktionsgeschwindigkeit zu statuieren, wie er es getan hat. Alle
derartigen Versuche — besonders bei den einschl&gigen Fragen
— beziehen sich auf gewisse, willkdrlich gewiblte Zeiten und
es wirkt eben jenes hamolytische Agens starker, das die Re-
aktion in ktirzerer Zeit beendigt. — Selbst von einer isoto-
nischen NaCl-L5sung kann man nicht sagen, dafi sie hamo-
lytisch tiberhaupt unwirksam sei. Auch sie hamolysiert und
es ist nur eine Frage der Zeit, wann diese Wirkung auch
mefibar wird.

Man kbnnte gegen unsere obigen Versuche einwenden,
dafi es sich hier vielleicht nicht urn einen durch den spezi-
fischen Immunkdrper, sondern um eine, durch die vorher-
gehende Manipulation (Digerieren mit Serum, wiederholtes
Auswaschen, Zentrifugieren) bewirkte Resistenzverminderung
der BlutkSrperchen gehandelt hat. Dem widerspricht vor
allem die Kontrolle der mit Normalserum ebenso behandelten
BlutkOrperchen.

Dafi das beobachtete Verhalten der sensibilisierten Blut-
kdrperchen in der Tat auf die spezifische Ambozeptorwirkung
zurtickzufQhren ist, geht weiter aus dem folgenden und vielen
ahnlichen Versuchen hervor:

Vereuch:

Das kiinstliche Komplement hat die Zusammensetzung: 0,05 inaktiv.
NormalkaDinchenserum + 0,05 NaOH n/50 + 0,75 Natriiunoleinat 0,1-proz.
+ 0,75 CaC4 0,1-proz. -i- 0,4 NaCl-LOsung.

Je 2 ccm dieser Mischung erhalten folgende Zusatze:

1) Rinderblutemulsion mit Binderblutantiserum behaodelt und ge-
waschen.

2) Rinderblut mit Normalserum behandelt und gewaschen.

3) Eaninchenblut (5-proz.) mit Rinderblutantiserum behandelt und
gewaschen.

4) Eaninchenblut mit Normalserum behandelt und gewaschen.

Nach IVf-Btiindiger Beobachtung: 3) und 4) gleichstark, fast komplett
geldst; 1) fast komplette, 2) keine Hamolyse.

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494

L. V. Liebermann imd B. v. Fenyvessy,

Die Proben 1 und 2 zeigen also die dfters besprocheae
Erscheinung, w&hrend aus 3 und 4 ersichtlich ist, daB Ka-
ninchenblut durch Rinderblutantiserum nicht bezw. nicht
anders als durch ein normales Kaninchenserum beeiufluBt wird.

Man konnte endlich sagen, die sensibilisierten Blut-
kdrperchen seien in ihrer Resistenz im allgemeinen geschUdigt,
ihre erhbhte Empfindlichkeit gegen Seife stelle einen Spezial-
fall dieser allgemeinen Debilitat dar. Hiermit berQhren wir
den alten Streit fiber das Wesen der Ambozeptorwirkung.

Dem von Baumgarten und in einer anderen Fassung
auch von Bordet vertretenen Standpunkt, der die Annahme
einer Schfidigung der Blutkfirperchen durch die Sensibilisierung
enthait, steht bekanntlich die heutzutage fast allgemein aner-
kannte Ehrlich-Pfeiffersche Ansicht gegenfiber, die eine
Resistenzabnahme der sensibilisierten Blutkorperchen bezw.
Bakterien in Abrede stellt.

Eine wesentliche Stfitze ffir diese letztere Ansicht lieferten
die Arbeiten von Friedberger (Centralbl. f. Bakt, Bd. 37,
Heft 1) und RfiBle (Mfinch. med. Wochenschr., 1904, No. 22),
aus welchen hervorging, daB sensibilisierte Blutkorperchen
(nach Friedberger auch Bakterien) gegen osmotische
zum Teil auch thermische und chemische Einwirkungen die
gleiche (nach RdBle sogar eine erhfihte) Resistenz aufweisen,
wie die normalen, bezw. mit Normalseris behandelten.

Wir haben die Versuche der genannten Autoren mit
hypotonischen Eochsalzlfisungen wiederholt, um nachzusehen,
ob diese Angaben auch ffir die von uns angewendete Ver-
suchseinrichtung Geltung haben. Wir ffihren einen solchen
Versuch an.

ClNa-Gehalt des Reaktions-
gemisches inklusive Blut

Hamolyse nach 1 Stunde von

sensibilisiertem

nicht sensibilis. Blut

0,54 Proz.

fast komplett

fast komplett

0.57 „

sehr stark

stark

0,60 „

mafiig

Bchwach

0,66 „

8pur

0

0,72 „

0

0

0,78 „

0

0

Der Versuch zeigt also, daB bei der von uns benfitzten
Versuchsanordnung (wobei der EinfluB der Agglutination und

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Ueber das Wesen der Komplemente.

495

des anhaftenden Blutserams eliminiert wird) die sensibilisierten
Blutkdrperchen gegen osmotische EiDflQsse sich etwas weniger
resistent erweisen als normale. Der Unterschied ist allerdiags
sehr gering und wir wiirden ihm auch keine weitere Be-
obachtUDg schenken, wenn sich Shnliche Unterschiede nicht
aoch UDter anderen EinflQssen gezeigt hStten. So haben wir
gefunden, dafi auch galleusaure Salze, Saponin, sowie NaOH
gewdhnlich, wenn auch nicht in alien Versuchen gleich deut-
lich, st&rker auf sensibilisierte als auf nichtsensibilisierte Blut-
kbrperchen einwirken ^). Weiter haben wir wiederholt die Be-
obachtung gemacht, daB von sensibilisierten und nichtsensibili-
sierten Blutkorperchenemulsionen, wenn sie einige Tage im
Eisschrank standen, die ersteren frflher HSmolyse zeigten als
die letzteren. — Wir mochten auch daran erinnern, daB wir
schon vor Jahren bei verschiedenen Gelegenheiten erwfihnt
haben, daB sensibilisierte, namentlich aber agglutinierte Blut-
kdrperchen schon beim starken SchUtteln Hemoglobin abgeben.
Es haben neuerdings Bail und Susu ki (Zeitschr. f. Immuni-
tetsforschung, Bd. 9, Heft 1) auf diese Erscheinung aufmerk-
sam gemacht. Sie fanden, daB stark sensibilisierte Blut-
kdrperchen sich auch ohne Mitwirkung eines Komplementes
wenigstens teilweise aufldsen.

Endlich mbchten wir in diesem Zusammenhang darauf
hinweisen, daB hemolytische Immunsera in der Regel auch
hemotrope Wirkung besitzen, d. h. die Resistenz der Blut-
kOrperchen gegen die Phagocyten herabsetzen •).

Aus alien diesen Tatsachen glauben wir schlieBen zu
miissen, daB die Sensibilisierung mit einer Schedigung der
Blutkdrperchen einhergeht und daB diese Verminderung der
Resistenz eine wesentliche Rolle spielt, sowohl in der durch
unsere kflnstlichen Gemische, als auch durch die natOrlichen
Komplemente bewirkten HSmolyse der sensibilisierten Blut-
kbrperchen.

Wenn wir uns somit auf den Standpunkt stellen, daB die
von uns beobachtete Erscheinung, daB namlich sensibilisierte
Blutkdrperchen durch unsere kflnstlichen Komplemente rascher

1) Vgl. die ahnlicheD Versuche bei von Knaffl-Lenz 1. c.

2) Ueber die Frage der Identitat der agglutinierenden, hamolytischen
uud Mmotropen Substanzen s. unaere Arbeit, dieee Zeitechr., Bd. 2, p. 431.

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496

L. V. Liebermann und B. v. Fenyvessy,

als nichtsensibilisierte aafgel5st werden, der Ausdruck einer
durch die spezifische Ambozeptorwirkung bedingten Debilitkt
der sensibilisierten Zellen ist. so rniissen wir andererseits mit
Nachdruck darauf binweisen, daB diese Resistenzabnahme sich
nicht etwa jeder beliebigen Sch^digung gegeniiber in gleichem
Mafie geltend macht, daB vielmehr eine ganz bestimmte Kom-
bination von Substanzen, Bestandteilen der normaleo Sera,
diejenige ist, bei welcher der Unterschied in dem Verhalten
der sensibilisierten nnd nichtsensibilisierten BlutkSrperchen
am sch^rfsten hervortritt.

Dies ist einer der Grunde, die uns veranlassen, unsere
erw&hnten Mischungen fiir etwas den natiirlicben Komple-
menten Bhnliches zn halten.

Weitere Analogien ergeben sich aus den folgenden Ver-
suchen.

1. Inaktivierung des kiinstliohen Komplementes doroh ein
halbstdndiges Erhitzen auf 66*^.

Schon in seiner ersten Publikation fiber das vorliegende
Thema zeigte der eine von uns, daB hSmolytisch wirksame
Gemische von OelsSure, Seife und EiweiB bei 56® inaktiviert
werden kdnnen.

Es lieB sich nun ohne weiteres zeigen, daB dies auch
unter den oben erwfihnten Versucbsbedingungen gelingt.

Versuch I.

Kiinstliches Komplement: 0,5 ccm Natriumoleinat, 0,1-proz. + 0,25
ccra Globulinlosung + 1,25 NaCl-LosuDg.

1) Kiinstliches Komplement + sensibilisiertes Blut.

2) Dasselbe auf 56® erhitzt + sensibilisiertes Blut.

3) Kiinstliches Komplement (nicht erhitzt) + nicht sensibilisiertes Blut.
l-stiindiger Thermostatversuch.

Resultat: 1) komplette Losung, 2) und 3) keine Losung.

Versuch II.

Kiinstliches Komplement: 0,05 ccra Normalserum (inakt.) + 0,05 ccm
NaOH n/50 + 0,75 Natriumoleinat 0,1-proz. + 0,75 CaCl, 0,1-proz. + 0,4
NaCl-Losung.

1) Kiinstliches Komplement + sensibilisiertes Blut.

2) KQnstliches Komplement auf 56® erhitzt + sensibilisiertes Blut.

3) Kiinstliches Komplement nicht erhitzt + normales Blut.

1 '/,-stundiger Thermostatenversuch,

Resultat: 1) fast komplett, 2) und 3) gar nicht gelost.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

497

2. Spaltnng des kiinstliohen Komplementes.

Natflrliches komplementhaltiges Serum wird durch Dialyse
[Ferrata*), Brand*)], durch Verdunnen mit destilliertem
Wasser und Zusatz von SalzsSure [Sachs und Altraann*)]
Oder durch Einleiten von KohlensSure [Liefm ann*)] in zwei
Fraktionen (Globulin-Fraktion = Mittelstuck, Albumin-Fraktion
= EndstOck) zerlegt, die einzeln keine komplettierende Wirkung
haben, wohl aber vereint.

Wir haben diesen Versuch mit unseren kunstlichen Kom-
plementen von nachstehend angegebener Zusammensetzung
und unter Anwendung von KohlensSure wie folgt ausgeftihrt.

Kiinstliches Eomplement: hergestellt aus 5 ccra der im obigen Ver-
siich II beniitzten Eombination, der 2 com Globulinlosung und 13 ccm
destilliertes Wasser zugefiigt wurden. Einleiten von Kohlensiiure, Abzentri-
fugieren, Niederschlag in 2 ccm NaCl-I^osung aufgeschwemmt, AbguQ mit
1,3 ccm 10-proz. NaCl-Ldsung auf physiol. Konzentration gebracht. Die
betrelfende Mischung, von der wir hierbei ausgegangen sind, Idst in einer
Dosis von 2 ccm (bei physiol. NaCl-Gehalt) in 2 Btunden sensibilisiertes
£lut komplett, nicht sensibilisiertes gar nicht.

Versuch mit den Spaltungsprodukten:

1) Globulinfraktion 0,2 ccm + NaCl-Ldsung 2 ccm.

2) Albuminfraktion 2 ccm + NaCl-Ldsung 0,2 ccm.

3) Globulinfraktion 0,2 ccm + Albuminfraktion 2 ccm.

Zusatz von je 1 ccm sensibilisiertem Blut. Nach 2 Stunden: Probe
3) fast komplett gelost, 1) und 2) keine Hamolyse.

Der Versuch zeigt also, dafiunserkQnstliches
Komplement sich bei dem Spaltun gsversuch
genau so verh&lt wie das nathrliche komplement-
haltige Serum.

Durch die Feststellung dieser weiteren Analogie werden
unsere Versuche also auch jener Forderung gerecht, die Lief-
mann und Cohn®) aufgestellt haben, die die Schwierigkeiten,
die der Ferrata-Brandsche Spaltungsversuch der Losung

1) A. Ferrata, Berl. klin. Wochenschr., 1907, No. 3.

2) Brand, ebenda. No. 34.

3) Sachs und Altmann, Handbuch der Technik und Methodik
der Immunitatsforschimg, Bd. 2, p. 969.

4) Liefmann, Miinch. med. Wochenschr., 1909, No. 41.

5) Liefmann und Cohn, Diese Zeitschrift, Bd. 6, p. 88.

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498 -L. ▼. Liebermann und B. v. Fenyveesy,

des Komplementrfttsels eatgegenstellen, besonders scharf be-
toneo.

Wir sind vorl&ufig nicht tiefer in den Mechanismus dieser
Erscheinung eingedrungen. Scbon die mannigfaltigen Bedin-
gungen, die erfiillt werdeo muBten, um ein mit den natQr-
lichen Komplementen vergleichbares Gemisch zu erhalten,
lassen es aber vermuten, wie verwickelt sich die Verhfiltnisse
erst nach der Spaltung eines solchen Gemisches gestalten
mOssen. Soviel ist aber von vornherein klar, daB die einzelnen
Spaltungsprodukte unserer kdnstlichen Gemische nicht einfach
mit den betreffenden Fraktionen der natiirlichen Sera identi-
fiziert werden dOrfen und auch nicht zu erwarten ist, daB sie
sich gegenseitig ohne weiteres ersetzen werden kbnnen. Aus
demselben Grunde mdssen wir aber die Versuche von Lief-
mann und Cohn, die den Zweck verfolgt haben, den einen
Oder den anderen Teil des natQrlichen Komplements durch
Lipoide oder LipoideiweiBgemische zu ersetzen, fiir ungeeignet
erklSren, fiber die Berechtigung unserer Auffassung zu ent-
scheiden.

3. Die Frage der epezifisohen Komplementbindung.

Eine charakteristische Eigenschaft der natfirlichen Kom-
plemente, auf die im Zusammenhang mit unseren Versuchen
zuerst A. v. Kordnyi*) hingewiesen hat, besteht bekanntlich
darin, daB es durch spezifische Antigen-Antikorpersysteme
gebunden wird. Wir muBten daher versuchen, ein solches
Verhalten auch ffir unsere kfinstlichen Komplemente nachzu-
weisen. Dies ist uns aber bis jetzt nicht einwandfrei gelungen.
Wir haben zahlreiche Kombinationen aus den in Frage
kommenden Substanzen hergestellt, verschiedene Antigen-
Antikfirpersysteme verwendet, aber niemals konnten wir eine
Hemmung der Hfimolyse nachweisen, die mit der Komplement-
bindungsreaktion hfitte verglichen werden kdnnen.

Aber wenn wir auch diese anscheinend gegen unsere
Ansicht gerichtete Tatsache feststellen, so sind wir — in An-
betracht aller anderen, fibereinstimmenden — doch nicht ge-
neigt, sie ffir etwas besonders Wichtiges zu halten. Wir

1) A. V. Koranyi, Biochcm. Zeitschr., Bd. 11, p. 82.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

499

glauben vielmehr diese Sache eiofach so erklSren zu kbnnen,
dafi in unseren Mischungen ein Bestandteil fehlt Oder ein Be-
standteil durch eioen anderen, zweckm&fiigeren ersetzt werden
rndfite.

Wir haben zur Inaktivierung der Seife bisher solche Sub-
stanzen verweodet, die mit der Seife Kombinationen geben,
die nur anf ambozeptorbeladene Blutkdrperchen Idsend wirken,
anf normale nicht bezw. viel schwacher. Diese seifeinakti-
vierenden Sobstanzen sind aber noch immer nicht derart, daB
sie mit den Seifen verbunden auch diejenige Eigenschaft
des natflrlichen Komplements batten, von einem beliebigen
Antigen-AntikSrpersystem starker gebunden zu werden als von
der Blutkdrperchen-Ambozeptorverbindung. Es ist das also
nichts anderes als eine Frage der relativen Affinitatsgrbfie,
die mit den tibrigen Eigenschaften bezw. Wirkungen des
Komplements in keinem notwendigen Zusammenhang zu stehen
braucbt. Wir halten es fOr ganz gut mdglich, daB es gelingen
wird, endlicb auch jenen Serumbestandteil zu finden — etwa
den gerade entsprechenden EiweiBkbrper, wie er im natflr-
lichen Zustand im Serum enthalten ist (wahrend wir nur
chemische Praparate verwenden k5nnen), bezw. die gerade
ndtige Kombination, die zu dem einen Antigenantikbrper
eine starkere chemische Affinitat besitzt als zu dem anderen,
dem Blutkbrperchenambozeptor, wobei es nicht ausgeschlossen
ist, daB es sich nicht nur um chemische Prozesse im eigent-
licben Sinne, sondern auch um Adsorptionsvorgauge und dgl.
handeln kann.

Wenn also die Frage der Komplementbindung nur auf die
Frage einer verschieden starken Affinitat reduziert werden
kann, so glauben wir berechtigt zu sein, sie fUr etwas zu
halten, was fQr das Wesen der Komplemente von unter-
geordneter Bedeutung ist.

Die neuen Beweise, die die obigen Versuche fflr die von
uns seit Jahren vertretene Ansicht fiber die Natur der Kom¬
plemente liefern, berechtigen uns — wie wir glauben — dazu,
an dieser Ansicht festzuhalten. — Es ist nicht unsere Ab-
sicht, hier sfimtliche gegen uns vorgebracbten Argumente

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500

L. V. Liebermann iind B. v. Fenyvessy,

neuerdlDgs einzeln zu widerlegen und die von der unserigen
abweichenden Hypothesen ausftihrlich zu besprechen. Ins-
besondere wtirde die neuerdings wieder aufgegriffene Ferment-
hypothese eine eingehende Erorterung und Kritik beanspruchen,
was uns bier nicht am Platze zu sein scheint. Wir gedenken
hierauf an anderer Stelle zurflckzukommen.

Diesmal mSchten wir nur fiber eine jfingst erschienene
Arbeit von Michael is und Skwirsky*) einige Bemer-
kungen anffigen.

Die genannten Autoren haben gefunden, dafi das Kom-
plement durch das proteolytische Ferment des Pankreatins,
das sie von den sonstigen Fermenten, insbesondere von den
Lipasen, getrennt haben, inaktiviert wird.

Daraus schlieGen die Verfasser, daG das Komplement ein
EiweiGkorper sei.

So naheliegend auch diese Folgerung ist, so schien sie
uns aber von vorneherein nicht zwingend zu sein, schon aus
dem Grunde, da wir gefunden hatten, daG frische Sera nach
dem Digerieren mit diesem Ferment keine nachweisbaren
Mengen von EiweiGspaltungsprodukten enthalten.

Einen direkten Beweis gegen die Geltung dieses Schlusses
liefern aber folgende Beobachtungen.

Wie wir schon oben erwfihnt haben, kann die hfimo-
lytische Wirkung einer Seifenlfisung auch durch Zusatz einer
Emulsion von Lanolin geschwficht werden. Auch ein solches
Gemisch ist dem natfirlichen Komplement insofern fihnlich,
daG es durch natfirlichen Ambozeptor sensibilisierte Blut-
kfirperchen rascher lost als nicht sensibilisierte.

Wir haben ein solches Gemisch, welches also keinen
EiweiGkorper enthfilt, mit dem nach Michaelis und
Sk wir sky isolierten proteolytischen Ferment zusammen-

1) Nach Abschlufi dieaer Arbeit kam uns due in Bd. 9^ Heft 2 der
Zeitechrift fiir Immnnit&tsforschnng erschienene Arbeit von P. Bondoni
zu Gesicht. Wir konnen zunacbst so viel feststellen, dafi er auf p. 213
und 214 den schon von uns entkrafteten Einwand Ton Hecker,
T. Dlingern und Coca u. a. wiederholt, namlich dafi sensibilisierte Blut-
korperchen sich gegen Seifengemische resistenter verhielten als normale.
Im iibrigen bestiitigt Rondoni wohl fast alle unsere Befunde, weigert
sich jedoch, aus ihnen die entsprechenden Eonsequenzen zu ziehen, ohne
klar anzugeben, warum unsere Bchliisse kdne Geltung haben sollten.

2) Michaelis und Skwirsky, diese Zeitschrift, Bd. 1, p. 497.

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Ueber das Wesen der Komplemente.

501

gebracht und — wie der folgende Versuch zeigt — eine Ab-
nahme der hS.molytischen Wirkung erzielt, Ehnlich wie es die
genanDten Autoren bei Anwendung frischen Serums gefunden
habeu.

Versuch.

1,5 ccm des Seifen-Lanolingemisches enthalten 0,4 ccm einer 0,1-pFOz.
Natriumoleinat- uud 1,1 ccm einer Lanolinemulsion. (Letztere wurde her-
gestellt durch EingieBen von 2—3 ccm einer heiSgesattigten methylalko-
holischen Lanolinlosung in 100 ccm physiologischer NaCl-LSsung.)

Probe 1: 1,5 ccm Seifen-Lanolingemisch + 0,5 ccm Fermentldsung
(mit physiologischer NaCl-Losung bereiteter, sorgfaltig filtrierter Auszug
aus Pankreatin-Rhenania 1:100). Nach einstiindigem Verweilen im Thermo*
Staten Zusatz von 1 ccm sensibilisierter Rinderblutkdrperchenemulsion.

Probe 2: 1,5 ccm Seifen-Lanolingemisch und 0,5 ccm Fermentldsung
werden getrennt 1 Stunde lang im Thermostaten gehalten, dann ver-
einigt und mit 1 ccm sensibilisierter Blutemulsion vermischt.

Probe 3 enthalt dieselbe Mischung wie die beiden ersten, wird aber frisch
hergestellt, nachdem diese aus dem Thermostaten entfemt wurden. Nach
Zusatz der Blutemulsion kommen samtliche Proben in den Thermostaten.

Reeultat nach ^|^ Stunden: In den Proben 2 und 3 komplette Hamo-
lyse, in Probe 1 Spuren.

Der Versuch zeigt also, dafi die h&molytische Wirkung
des Seifen-Lanolingemisches durch die einsttlndige Einwirkung
der Fermentldsung (bei 37 ® C, Probe 1) im Vergleich zu den
Eontrollproben (2 und 3) deutlich vermindert wurde.

Den Mechanismus dieser Reaktion haben wir nicht weiter
verfolgt, doch zeigt dieser Versuch, dafi die Aufhebung der
h^molytischen Wirkung eines Gemisches durch eine Ldsung,
die ein proteolytisches Ferment enth^t, noch keinen Schlufi
auf die Natur des hamolytischen Kdrpers gestattet.

Zusammenfassung.

Wie in alien unseren Publikationen fiber das Wesen der
komplexen Hfimolysine, so haben wir uns auch in dieser be-
mfiht, den Nachweis zu ffihren, dafi ihre wichtigsten Eigen-
schaften an einfach zusammengesetzten und aus wohlcharakte-
risierten chemischen Individuen bestehenden Gemischen wieder-
gefunden werden konnen.

Wir haben es wiederholt ausgesprochen und wollen es
nochmals betonen, dafi es zunfichst nicht unsere Absicht war,
wirkliche, den natfirlichen in alien Dingen gleichende kfinst-
liche Sera herzustellen. Wir haben genug Daten daffir an-

Zeitschr. f. Immanitltsfonchang. Oiig. Bd. X. 33

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002 T. Liebermann und t. Fenyvessy, Weeen der Komplemente.

gefQhrt, daB bei der ungeheuren Mannigfaltigkeit der unter
den schon bisher bekannten Serambestandteilen mbglichen
Kombinationen ein planm&Biges Suchen in dieser Richtung
fast aussichtslos ist. Man mflfite sich auf einen glflcklichen
Zufall verlassen, der einem mdglicherweise die genau stimmende
Kombination, die gerade genau den natfirlichen entsprechenden
GleichgewichtsverbMtnisse etc., in die H^nde spielt.

Man denke hierbei nur daran, wie schwierig es ist, ein
einem natflrlichen genau entsprechendes kfinstliches Mineral-
wasser herzustellen, und vergleiche diese Schwierigkeiten mit
denen, die sich bei der Herstellung eines kflnstlichen Serums
ergeben mtissen, dessen Bestandteile teils unbekannt, teils so
ver&nderlicb sind, daB das hergestellte PrSparat kaum mehr
dem Zustande entspricht, in welchem sich der E5rper im
Serum gelOst befunden bat.

DaB es uns aber trotz dieser groBen Schwierigkeiten ge-
lungen ist, nachzuweisen, daB mit gewissen seifenhaltigen Ge-
mischen alle wesentlichen Erscheinungen der Komplemente
bezw. der Normalsera nachgeahmt werden konnen, und daB
wir in der vorliegenden Arbeit nun auch gezeigt haben, daB
das kfinstliche Komplement auch mit nattirlichen
ImmunkSrpern (Ambozeptoren) beladenen Blut-
kSrperchen gegeniiber sich wie natiirliches, kom-
plettierendes Serum verhait — daB wir also damit
den letzten und am schwersten wiegenden Einwand beseitigt
haben — dflrfte doch zu der Meinung berechtigen, dafi wir
in der Kenntnis der ImmunhSmolyse einen Schritt vorwSrts
getan haben. Da es uns ja schon fruher gelungen ist, auch
den hamolytischen Immunkdrper (Ambozeptor)
in bemerkenswerter Reinheit, zum mindesten
eiweiBfrei, in trockenem Zustande und in wag-
baren Mengen zu isolieren^), so dOrfte auch die An-
sicht berechtigt sein, daB unsere Arbeiten flber die Natur der
komplexen Hamolysine nun zu einem gewissen voriaufigen
AbschluB gelangt sind, der allerdings nur den bescheidenen
Rahmen fflr weitere Arbeit bildet.

1) L. V. Liebermann und B. v. Fenyvessy, Centralbl. f. Bakt.,
Bd. 47, p. 274.

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Preufie, Auftreten der Area bei der kutanen Tuberkulinimpfung. 503

Nachdruck verbolen.

[Aus der Universitats-Kinderklinik in Breslau (Direktor:

C. V. Pirquet).]

Stadlen fiber das Auftreten der Area bei der kutanen
Tuberkulinimpfung.

Von Dr. Hans Preufie, Assistenten der Xlinik.

Mit 3 Kurven im Text.

(Eingegangen bei der JEtedaktion am 1. Mai 1911.)

Bei AnweaduDg der kutanen Tuberkulinprobe bildet sich
hftufig urn das bei Tuberkuldsen auftretende spezifische In-
filtrat (Papel) ein rbtlicher Hof (Area), der meist am 2. Tage
erscheint, relativ fldchtig ist und Ikngst vor dem Verschwinden
der Papel wieder vergeht. Ein entsprechendes Verhalten stellte
Am berg bei der Kutanreaktion mit dem Blochschen Tricho-
phytin fest, das bei Personen, die an Trichophytie gelitten
batten, ebenfalls Papel und Area hervorruft.

Nach V. Pirquets Ansicht (3) ist die Papel das Re-
aktionsprodukt auf das sekundkre Gift (Apotoxin), das sich
durch Zusammentreffen von Allergen (Tuberkulin bezw. Tricho-
phytin) mit dem im Edrper vorhandenen Antikbrper (Ergin)
bildet. Die Area entsteht nach der Ansicht von Am berg (4)
durch Reagieren des flbrig gebliebenen Allergens (Tricho-
phytins), das in die Uragebung der Papel diffundiert, mit
nachgebildeten Antikorpern, und wkre somit eine Wieder-
holung der Papel am 2. Tage.

Aebnliche Vorgknge finden bei der durch v. Pirquet (1)
studierten Vaccination statt, bei der freilich lebende Erreger
an Stelle bloBer Bakteriengifte angewendet wurden. Bei der
Erstvaccination dehnt sich der die Impfpapille umgebende
schmale rote Saura am 8. bis 11. Tage zu einem weiten in-
filtrierten Hofe aus. Impfungen, die zwischen der Erstimpfung
und dem Auftreten der Area angelegt wurden, umgaben sich
zur gleichen Zeit wie die erste Impfpustel mit einem roten
Hofe. Vaccinationen, die man nach dem Auftreten der Area
anlegt, haben ein anderes Ergebnis als die Erstimpfung. So-

33*

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504

Hans Preufie,

fern sie nicht vollig negativ bleiben, tritt die Reaktion sehr
rasch auf (Fruhreaktion) und erreicht innerhalb 24 Stunden
ihren Hohepunkt. Ein zentrales Kndtchen ist nach Art einer
Mamille von einer kleinen Areola umgeben. Die hbchsten
Grade der FrQhreaktion erzielte v. Pirquet an sich selbst,
indem er aus der Pustel eines Erstimpflings am 6. Tage nach
der Impfung Lymphe entnahm und sich einimpfte. Es ent-
standen hierbei innerhalb 24 Stunden unter Zusammenfliefien
der zwei Vaccinationsstellon zwei stark erbabene gelbe Blasen,
die sich mit einer ausgedehnten Area (37:31 mm) umgaben.
Die Area war schon nach 24 Stunden wieder geschwunden,
entsprach in ihrem Verhalten somit einer fliichtigen lokalen
Begieiterscheinung der Papel.

An der Hand von Beobachtungen soli im folgenden er-
Ortert werden, ob die Area bei der Tuberkulinimpfung mehr
der Area bei der Erstvaccination oder bei der FrQhreaktion
mit Lymphe entspricht, ob sie mehr den Charakter eines
allgemeinen PhQnomens oder einer Qrtlichen entzundlichen
Begieiterscheinung der Papel hat.

Es wurden an der Breslauer Kinderklinik fQnf Kinder im
Alter von 3—8 Jahren und eine erwachsene Person, die
sQmtlich mit Papel und Area reagierten, systematisch zu ver-
schiedenen Tageszeiten in AbstQnden von 5—12 Stunden
niittelst des v. Pirquetschen Bohrers mit unverdQnntem Alt-
tuberkulin kutan geimpft. Durchschuittlich alle 4—6 Stunden
wurde der Durchmesser von Papel und Area, in Millimetern
ausgedrQckt, notiert. Urn ein Zusammenfliefien der Areae zu
verhuten, wurden die Bohrungen in entsprechenden drtlichen
AbstSnden angelegt. Bisweilen war es hinderlich fflr die Be-
obachtung, dafi schwache Areae wShrend der Nacht kleiner
und undeutlicher begrenzt erschienen als bei Tage.

Die bei der Messung gewonnenen Zahlen wurden auf den
Ordinaten, die zugehSrigen Zeiten auf der Abszisse eines
Koordinatensystems eingetragen. Durch Verbindung der ein-
gezeichneten Punkte ergaben sich Kurven, auf denen man
nach Ablauf der traumatischen Reaktion (bezw. Inkubations-
zeit) das Wachstum der Papel und den Verlauf der Area
graphisch dargestellt verfolgen konnte. Als Beispiele sollen
drei Kurven dienen.

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Protokolle.

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Das Auftreten der Area bei der kutanen Tuberkulinimpfung. 505

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Anna Dobrofichke, 6 Jahr.

Allmahliche Verkleinerung der Area im Verlaufe der Kutanimpfung.

506

Hans PreuSe,

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Paula Eau. Sehr starke Reaktionen. Mehrfach Blasenbildung auf der Papel.

Das Auftreten der Area bd der kutanen Tuberkulinimpfung. 507

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( 11 ) ( 20 ) ( 22 )

Hild^ard Adamek. Basches Verechwinden der Area.

508

Hans Preufie,

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Das Auftreten der Area bei der kutanen Tuberkalinimpfung. 509

Die erste stammt von einem 8-jfihrigen Knaben W. B.,
der aufier AnUmie keine klinischen Zeichen von Tuberkulose
darbot. Die Kutanreaktion war stark positiv. Auf der Eurve
sieht man, dafi der punktiert dargestellten traumatischen
Reizung die Bildung der Papel folgte, die nach 24 Stnnden

Kurre 1. DurchschnittsTerlauf von Papel und Area.

11 mm Dnrchmesser hatte. Nunmehr begann die Entwick-
lung der Area, die nach weiteren 24 Stnnden ihr Maximum
erreichte. Zu dieser Zeit stellte dieselbe eine kreisfbrmige
gerdtete Fl&che von 40 mm Dnrchmesser dar, deren Zentrum
die inzwischen zu 18 mm Dnrchmesser angewachsene Papel
bildete. Die Area verschwand wShrend der n&chsten beiden
Tage v511ig, wEhrend die Papel noch eine Zeitlang weiter be-
stehen blieb.

Die 2. Kurve stammt von demselben Knaben. Diesmal
war bei der Inoknlation nur schwach gebohrt worden, so
dafi weniger Tuber-

kulm m die Haut ^->-«

eindringen konnte.

Papel und Area zeig- ' ‘\

ten geringere Dimen- /' '\

sionen und versp&tete ^— -^

Entwicklung. Die Bil- .

dung der Area setzte «--—-i-

erst nach 36 Stun- Kurve 2. Verzogerune und geiin^ Aus-
den ein bildung von Papel und Area bei scbwacher

Bohrung.

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510

Hang Preufie,

Eine weit st!irkere und raschere Ausbreitung der Area
siebt man auf Eurve 3. Die Kurve stammt von einer W&rterin
der Klinik, die zur Zeit des Versuchs keine klinischen Zeichen
von Tuberkulose darbot, aber einige Monate vorher anf einer
Phthisikerstation beschftftigt gewesen war. Die Figur IftBt

erkennen, daB sich die
Papel sehr rasch ent-
wickelte. Schon nach
9 Stunden trat auch eine
Area auf; damit gleich-
zeitig verkleinerte sich
die Papel deutlich. Man
gewinnt den Eindruck,
als ob beide Bildungen
anfangs undifferenziert
gemeinsam fortschritten
und sich erst sp&terhin
schUrfer voneinander ab-
grenzten. Im weiteren
Verlaufe breitete sich
dann die Papel inner-
halb der Area noch etwas
weiter aus, wie man am
Ansteigen der Kurve
sieht. Die Area zeigte
nach ihrem Beginn yfSh-
rend des Nachmittags
einen l&ngeren Stillstand,
der in die Nachtstunden
fiel. Der Anstieg setzte
sich erst am folgenden Morgen fort und fhhrte rasch zu
einem hohen Maximum.

Die GrbBenverh&ltnisse der Area waren in den
einzelnen F3.11en sehr verschieden. Am groBten war sie bei
der Erwachsenen mit einem Querdurchmesser bis zu 90 mm.
Der Durchschnitt betrug 20 bis 30 mm; doch fanden sich
auch nicht selten nur ganz schwache Hbfe, mitunter bloB
einzelne zackige Ausstrahlungen der Papel, besonders dann,
wenn schon mehrere Kutanimpfungen vorangegangen waren.

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Fiff. 3. RaBcher, durch Stillstand
wahrend der Nacht untk’brochener Anstieg
der Area.

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Das Auftreten der Area bei der kutanen Tuberkulinimpfung. 511

Eine Erweiterung der Area kam in inanchen FS.nen dadurch
zustande, dafi sich die abfiihrenden LymphgefUBe an dem ent-
zQndlicben Vorgang beteiligten. Meist waren es nur schmale
Streifchen, die sich von der Peripherie der Area zentripetal
1 bis 2 cm weit verfolgen lieBen. Bei der stark reagierenden
Erwachsenen bildete sich indessen, von der Area einer Impfungs-
stelle am Oberarm ausgehend, ein schmerzhafter, dentlich
palpabler gerbteter Strang von 2 cm Breite und 12 cm L§nge,
der sich bis zu der nSchstgelegenen Axillardrflse fortsetzte,
die merklich geschwollen und empfindlich war. Mit dem Ruck-
gang der Lymphangitis schwand auch die Area rasch.
Noch auff^lliger zeigten sich derartige Erscheinungen bei
einem Kollegen, Dr. Bessan, dem ich an dieser Stelle fQr
seine Angaben bestens danken mdchte. Bei ihm traten nach
Anlegung von 9 Impfungen mit auf die H&lfte verdQnntem
Tuberkulin auBer deutlichen Areae dicke lymphangitische Str&nge
und Starke LymphdrQsenschwellung auf. Die Temperatur stieg
urn 0,9 Grad.

Im Anschlufi an diese Beobachtungen lieBe sich eine
Skala der Lokalerscheinungen bei der v. Pirquet-
schen Kutanreaktion aufstellen:

a) bloBe Papel, b) Papel mit zackigen Ausstrahlungen,
c) Papel mit Area, d) Papel und Area mit Lymphangitis
eventuell Lymphadenitis verbunden, e) (sehr selten) bei mehr-
fachen gleichzeitigen Impfungen Hinzutritt von Fieber zu den
letztgenannten Erscheinungen.

Was die zeitlichen Verhaltnisse betrifft, so dauerte
es meist etwa 24 Stunden, bis die Papel sich mit einer Area
umgab, bei einem Kinde nur 17—20, bei der hochempfindlichen
Erwachsenen sogar bloB 9 bis 14 Stunden. Da sich die Area
fast immer erst eine gewisse Zeit nach der Inokulation und
nach dem Auftreten der Papel zeigte, so konnte man, wenn
mehrere Impfungen in zeitlichen AbstSnden vorher angelegt
waren, diese zu einem sp&teren Termin in verschiedenen
Stadien der Entwicklung vor sich sehen. So war z. B. bei
der 5-jtihrigen Franziska M. am 18. Februar 1911 um VsH Uhr
morgens, um 6 Uhr nachmittags und am 19. um 4 Uhr in der
Frtlhe je eine Tuberkulinimpfung angelegt worden. Um 11 Uhr
morgens sah man an der zuletzt angelegten Stelle nur eine

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512

Hans Preufie,

nicht erhabene Rdtung von 3 mm Durchmesser (nach v. Pir-
qnets Bezeichnung 3), an der vorhergehenden eine deutlich
tastbare Papel von 10 mm Durchmesser (10), an der zuletzt
angelegten Impfstelle eine R5tung von 15 mm mit einer zen-
tralen Papel 10 (15). Aehnlich bei der Erwachsenen. Hier
waren am 3. August 1910, 9 Uhr abends, drei verschieden
entwickelte Impfungsstellen sichtbar, von denen die erste 50,
die zweite 12, die dritte 7 Stunden zurflcklag. Die Reaktions-
gr53e an der erstgenannten Stelle betrug 20 (90), an der

zweiten 10 (20), an der letzten 9.

Uebten nun die zeitlich vorausgegangenen
Eutanimpfungen einen erkennbaren Einflufi auf
diefolgenden aus? Einigemale scbieu dies der Fall zu sein.
Bei der 3-jlihrigen H. A. z. B. ergab sich bei der 2. Tuberkulini-
sierung eine Reaktion 10 (26); bei der 8 Tage sp&ter an¬
gelegten 6. Impfung bildete sich nur ein Infiltrat von 15 mm
Durchmesser mit ganz leichten zackigen Ausstrahlungen. Bei
der 6-j9hrigen A. D. stellte sich anfangs die lokale Tuber-

kulinreaktion in der Grofie 13 (27) dar, 5 Tage sp&ter, nachdem
inzwischen noch siebenmal mit Tuberkulin kutan geimpft
worden war, kam nur noch eine Infiltration von 15 mm Durch¬
messer mit kaum angedeuteter Area zustande.

Wichtig war endlich die Frage, ob die Tageszeit auf
die Bildung der Area Einflufi hatte. Unter 15 Eutanimpfungen,
die auch nachts einigermafien genau beobachtet werden konnten,
begann die Area neunmal in den Morgenstunden von 6 bis
12, viermal in den Nachmittagstunden bis 6 Uhr und nur
zweimal in der Nacht. Vereinzelt wurde auch, vgl. Fig. 3, nach
bereits eingetretener Areabildung, ein Stillstand w9hrend der
Nachtzeit beobachtet, dem erst am n9chsten Morgen neues
Wachstum folgte.

Schliefilich sei noch bemerkt, dafi sich Area und Papel
nicht immer scharf trennen lieCen. Oefter dauerte es Stunden,
bis der periphere, etwas flachere Abschnitt der Papel sich
deutlich vom Zentrum abhob und als wirklicher Hof erschien.
Manchmal vergrbBerte sich auch die Papel nachtrtglich und
drang in das Gebiet der ursprQnglichen Area hinein vor, wie
dies die Zahlen bei der erwachsenen Patientin zeigen, die

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Das Auftreten der Area bei der kutanen Tuberkulinimpfung. 513

den Beobachtungszeiten nach gesetzter Tuberkulinimpfung
entsprechen: 7, fl, 6(34), 10(33), 10(55), ^(55), 24 (70).
Das Zeichen ~ bedeutet undeutlich tastbar, — Interessant war
auch der Selbstversuch v. Pirquets, der bei der Kutan-
impfung mit einer Verdiinnung 1:512 keine Area mehr auf¬
treten sah, wShrend diese bei starkerer Konzentration prompt
eintrat.

Lafit sich nach dem Angefuhrten etwas Bestimmtes be-
zQglich des Charakters der Area sagen? 1st die Area
eine Srtliche Begleiterscheinung der Papel oder
kommt ihr die Bedeutung eines selbstandigen
Phanomens zu? Fur die zweitgenannte Auffassung spricht
vielleicht die Beobachtung, dafi die Area in den Morgenstunden
relativ haufig auftritt und sich vergroCert. Man konnte an-
nehmen, daB zu dieser Tageszeit mehr AntikSrper im Orga-
nismus gebildet und dadurch mehr Apotoxin an der Impf-
stelle abgespalten wird. Dafi die Entstehung aber nicht allein
auf solche Vorgange zuruckzuftihren ist, sondern in der Haupt-
sache von anderen Umstanden abhangt, zeigt sich darin, dafi
eine Reihe sukzessiv entstandener Papeln nicht mit einem
Male sich mit einem Hofe umgeben, sondern dafi die Area
erst bei einer gewissen Entwicklungsstufe der Papel auftreten
und den jeweilig gemachten Kutanimpfungen fast ausnahmslos
im gleichen Abstande nachfolgen, und endlich darin, dafi bei
EinfObrung von wenig oder von stark verdunntem Tuberkulin
die Area sich verspatet bezw. ausbleibt

Nach Am bergs Ansicht entsteht die Area so, dafi am
ersten Tage nur ein Teil des eingeimpften Tuberkulins durch
Hinzutritt von spezifiscben Antikorpern zu Apotoxin abgebaut
wird und die Papel hervorruft, wahrend die flbrig gebliebene
Menge in die Umgebung difTundiert und mit neu im K6rper-
innern nachgebildeten Antikorpern die Area entstehen lafit.
Das unabgebaute Tuberkulin mQfite danach sehr stark in
seiner Diffusionsfahigkeit innerhalb der Haut schwanken, da
die GroBe der Area so aufierordentlich verschieden ist. Viel¬
leicht hatte es mehr fQr sich, anzunehmen, dafi die Papel
bezw. der enge Bezirk urn die Impfstelle der Sitz der Apo-
toxinbildung ware, wahrend die Area und die entztindlichen
Erscheinungen im Lymphsystem durch das Ausstromen und

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514 Preufie, Auftreten der Area bei der kutanen Tuberkulinimpfung.

den Weitertransport von apotoxischen, leichter diffundierenden
Abbauprodukten des Tuberkulins entstSnden. Es wiirde dazu
auch die Beobachtung passen, daB bei hdudger wiederholten
Kutanimpfungen die Area schlieBlich ausbleiben kann; der
Kdrper hS,tte dann die F^igkeit erlangt, das Tuberkulin, etwa
mit Hiffe st3.rker wirkender Antikorper, im Bereiche der
Papel bis zu nngiftigeu Produkten abzubauen, die keinen
sichtbar entziindungserregenden EinfluB auf die Nachbarschaft
mehr hMten.

Kehren wir zu dem eingangs gewahlten Vergleichsobjekt
der klinisch studierten Vaccination zurflck, so dflrfen wir wohl
jetzt sagen, daBdieArea bei derTuberkulinimpfung
der bei der Erstvaccination auftretenden nicht
gleichgesetzt werden kann. Diese erscheint erst nach
8 Tagen, die Tuberkulinarea bereits am nUchsten Tage. Ferner
stimmt die Erstvaccination den KSrper in der Weise um, daB
die am 8. bis 11. Tage in ihrer Umgebung erscheinende Area
auch bei den dbrigen, an den der Erstvaccination folgenden
Tagen angelegten Impfungstellen in ^hnlicher Weise auf-
tritt, w^rend bei der Tuberkulinimpfung Hbnliches nicht be-
obachtet wird. — Setzt man hingegen die Erstvaccination der
Erstinfektion des Korpers mit Tuberkelbacillen gleich und
nimmt an, daB nach einer gewissen Zeit der Kdrper in den
Stand gesetzt ist, mit dem betreifenden Antigen Oder dessen
GiftstolTen spezifisch zu reagieren, so kdnnen wir die Area
bei der Tuberkulinreaktion dem fliichtigen roten
Hofe bei der Revaccination analog setzen. Dazu
kommt, daB im Gegensatze zur Erstvaccination die kutane
Tuberkulin- und die Revaccinationsreaktion sich darin gleichen,
daB sie die betreifenden gleichartigen Nachimpfungen nur
wenig Oder gar nicht beeinflussen.

Zusammenfassung.

Zusammenfassend konnen wir sagen, daB die Area bei
der Tuberkulinimpfung in der Hauptsache ein lokales Phanomen
sein diirfte, das von der Entwicklung der Papel abhangt und
einen EntzQndungsbof darstellt, der durch Abstromen toxischer
Abbauprodukte des Tuberkulins in die Umgebung hervor-
gerufen wird. Nebenher scheint eine gewisse Abhangigkeit

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S. Suzuki, Yersuche zu einer Erkliiruug der MilzbrandinfektioD. 515

von der Tageszeit zu besteheo, die ihren Grund darin haben
kdnnte, dafi nach der Nachtruhe ein st&rkeres Auftreten von
Antikdrpern im Blot statthat und dafi in der Uingebung des
Tuberkulindepots sich mehr Apotoxin bildet und in die Kach-
barschaft abstrdmt.

Literatur.

1) T. Pirquet, Elinische Studien uber Vacciuation und vaccinale Allergic.
Leipzig-Wien, Franz Deuticke, 1907.

2) — Quantitative experiments with the cutaneous tuberculin reaction.
Joum. of Pharmacology and experim. Therapeutics, Vol. 1, June 1909,
No. 1, p. 151.

3) — Allergic. Eh'gebnisse der inneren Medizin und Kinderheilkunde,
Bd. 5, p. 459.

4) Amberg, The cutaneous trichophytin reaction. Joum. of experim.
Medicine, Vol. 12, 1910, p. 435.

Nachdruck verboten.

[Aus der serologischen Abteilung des Hygienischen Institutes der
deutschen Universitfit in Prag (Vorstand: Prof. 0. Bail).]

Yersuche zu einer Erklftrung der Milzbraudinfektion.
Von Dr. S. Suzuki, Tokio.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 2. Mai 1911.)

Die folgenden Versuche batten den Zweek, die nkheren
Umstknde, welche fQr das Zostandekommen der Milzbrand-
infektion bei Meerschweinchen wichtig sind, zu erforschen.
Als Grundlage dietiten die Versuche von Bail und Weil
fiber den gleichen Gegenstand. Diese batten zu dem SchluB
geffihrt, dafi das Meerschweinchen trotz seiner groBen Em-
pffinglichkeit dennoch fiber Schutzkrfifte gegen die Infektion
verfugt. Diese lassen sich im Reagenzglasversuche als anti-
bakterielle Wirkungon der Leukocyten erkennen, welche be-
sonders dann mfichtig hervortreten, wenn die Zellen in dem
an sich unwirksamen Serum des gleichen Tieres aufgeschwemmt
werden. Auch im Tierkorper tritt diese Wirkung bei intra-
peritonealer Infektion insofern hervor, als bekanntlich bei einer

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516

S. Suzuki,

solchen die iDjizierten Bacillen aus der Bauchhohle fQr l§.ngere
Zeit verschwinden. Diesem Verschwinden gehen extra- und
intracellulSre Degenerationen der Bacillen voran, welche wohl
ebenso wie bei dem Reagenzglasversuche auf eine von dem
Tier ausgeQbte Bakterizidie zn beziehen sind. Die groBe
Empfindlichkeit des Meerschweinchens gegen Milzbrandinfek-
tion ware dann unverstandlicb, wenn man nicht annimmt, daB
diese iinmerhin betrSchtlichen antibakteriellen Effekte schlieB-
lich auf irgendeine, durch die Bacillen selbst veranlaBte Weise
paralysiert werden kbnnen.

Es fallt nun bei der Beobachtung des Verlaufes intra-
peritonealer Infektion auf, daB die aus der Bauchhdhle ver-
schwundenen Bacillen nach einiger Zeit wieder auftreten und
sich daselbst trotz der bestehenden starken Leukocytose ohne
Hemmung vermehren. Das steht natilrlich im Widerspruche
zu den Reagenzgiasversuchen, welche gerade bei groBem Zell-
reichtum starke Keimvernichtung erwarten lassen.

Allerdings haben sich die Bacillen selbst verSndert und
jenen Zustand angenommen, welche Bail als tierischen Oder
animalisierten bezeichnet hat. In diesem Zustande sind die
Milzbrandbacillen zwar der Phagocytose nicht mehr zug&nglich,
aber sie sind deswegen gegen die Bakterizidie von KSrper-
saften und Kbrperzellen empf^nglich geblieben, wie namentlich
Toyosumi nachgewiesen hat. Man kann sich davon leicht
tiberzeugen, sobald man Bacillen aus dem Exsudate eines
intraperitoneal infizierten Meerschweinchens der Wirkung von
frischen Meerschweinchenleukocyten aussetzt. Sie werden in
groBer Zahl und in kurzer Zeit abgetbtet. Alle im folgenden
anzufflhrenden Reagenzglasversuche sind mit solchen Bakterien
aus dem Tierkorper angestellt. Da nun im Peritoneum des
Meerschweinchens in der zweiten Infektionsphase eine Leuko-
cytenwirkung in keiner Weise zu sehen ist, so schlossen Bail
und Weil, daB im Exsudat selbst der Grund fflr das Versagen
der sonst machtigen Zells^tewirkung gelegen sein miiBte. In
der Tat gelang es ihnen durch Zusatz des zellfrei zentrifugierten
und sterilisierten Peritonealexsudates infizierter Tiere zu Zellen
normaler Meerschweinchen, die sonst mdgliche Milzbrand-
abtotung zu verhindern oder doch zu verringern.

Eigene Versuche bestfitigen diese Befunde.

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Versuche zu einer Erklamng der IVlilzbrandinfektion.

517

Tabelle I.

' NachSStd.

1 ) 0,4 ccmMeerschw.-Ser. akt.+ 0,1 ccm Exsudatfl.norm. 56®‘/a*’ 543 000

2) 0,4 „ „ „ +0,1 „ „ „ 56® Va"

+ Meerechweinchenleukocvten 6

3) (0,4 ccm Meerschw.-l^r. akt. + 0,1 ccm Exsudatfl. norm. 56 * */,*■

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 240

4) Wie 3, zellfrei zentrifugierter AbguQ 208

5) Zellnickstand von 4. in 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,1 ccm

Exeudatfliiss. 56® '/«'* 4 336

6) 0,4 ccm Meerschw.-&r. aktiv. + 0,1 ccm Aggressin 56® 1075000

7) 0,4 ., „ „ + 0,1 „ „ 56® ‘/,-

+ Meerschweinchenleukocyten 4 800

8) (0,4 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,1 ccm Aggressin 56 ® ‘/a*’

4- Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 1 016

9) Wie 8, zellfrei zentrifugierter Abgufi 1 400

10) Zellriickstand von 9, in 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt.. + 0,1 ccm

Aggressin 56 ® */,•* 5 600

11) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Exsudatfliiss. 56® ‘/a'* 351 000

12) 0,25,, „ „ +0,25 „ „ 56® Va-

+ Meerschweinchenleukocyten 128

13) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,26 ccm Exsudatfliiss. 56®

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 320

141 Wie 13, zellfrei zentrifugierter Abgufl 1104

15) Zellriickstand von 14, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv

+ 0,25 ccm Exsudatfliiss. 56® V.*’ 13 700

16) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv+ 055 ccm Aggressm 56 ® V.'" iiber 1000 000

5 600
351 000

13 700

5) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv+ 055 ccm Aggressm 56 ® */»'" iiber 1000 000
7) 0,25 „ ,, „ +0,25 „ „ 56®'/.^

+ Meerschweinchenleukocyten

18) (055 ccm Meerschw.-Ser. aktiv + 055 ccm Aggressin 56® ‘/a*

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

19) Wie 18, zellfrei zentrifugierter Abgufl

20) S^Uriickstand von 19, m 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv
+ 0,25 ccm Aggressin 56" ‘/a"

Einsaat

26000
17 400

Weitere Versuche, die im Zusammenhang mit anderer
Fragestellung welter unten angefiihrt werden, ergaben gleiche
Resultate. BezQglich der Techuik der Versuche ist folgeudes
zu bemerken: £s wurde das Exsudat des iufizierten Tieres
durch starkes Zentrifugiereu von alien Zellen und dem weitaus
groBten Teile der Bakterien befreit und durch halbstOndiges
Erwfirmen auf 56 ° vSllig sterilisiert, dann wurde es in wechseln-
den MengenverhSltnissen einer Mischung von Serum und Leuko-
cyten eines normalen Meerschweinchens zugesetzt. Die Leuko-
cyten wurden durch intraperitoneale Injektion von 20 ccm
steriler Bouillon gewonnen, mittels Pipette der Bauchhdhle
des verbluteten Tieres entnommen, auf der Zentrifuge isoliert

/eitschr. f. ImmunltiiisfonchaDff. Orig. Bd. X. 34

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518

S. Suzuki,

und verteilt. Die vod den Leukocyten abzentrifugierte Exsudat-
flflssigkeit des normal^n Tieres wurde in gleicher Weise wie
das Exsudat des infizierten Tieres zentrifugiert, erw&rmt und
als Kontrolle fQr dieses benutzt.

Man ersieht aus dem Versuche der Tabelle I, dali die
Mischung von Serum und Leukocyten mit normaler Exsudat-
fliissigkeit eine starke Milzbrandabtdtung zulfiBt, wfibrend das
infizierte Exsudat die Wirkung bedeutend herabdrttckt, wenn
es dieselbe auch nicht vollstS.ndig aufzuheben vermag. Man
wird daher in dieser antibakteriziden F§.higkeit des infizierten
Exsudates leicht die Ursache erkennen, infolge deren die
Leukocyten des Milzbrandtieres unwirksam sind. Da diese
F&higkeit offenbar ffir das Zustandekommen der Milzbrand-
infektion von groBer Wichtigkeit ist und auf die aggressive
Wirkung der im Exsudate gewachsenen Milzbrandbacillen zu-
rtlckgefflhrt werden muB, so werden solche Exsudate weiter-
hin kurz als Milzbrandaggressine bezeichnet.

Bekanntlich ist zur Entfaltung antibakterieller Leukocyten-
wirkung die Vitalitat der Zellen nicht unbedingt nbtig, womit
gleichzeitig gesagt wird, daB die Phagocytose als ein vitaler
Akt fiir diese Art der Bakterizidie nicht erforderlich ist Man
sieht auch, daB gefrorene Leukocyten fast ebenso stark, bis-
weilen noch sttlrker wie lebende wirken. Die Versuche zeigen
weiter, daB die Entfernung der nach dem Gefrieren zurfick-
bleibenden Zellreste die Bakterizidie der FlQssigkeit nicht auf-
hebt Es muBten daher bei der Zerstbrung der Zellen die
bakterizid wirksamen Stoffe in die Suspensionsfltlssigkeit fiber-
gegangen sein. Damit stimmt gut fiberein, daB diese Zell¬
reste, wenn sie neuerlich in derselben Flfissigkeit aufge-
schwemmt werden, einen groBen Teil ihrer bakteriziden Wir¬
kung verloren haben. In Uebereinstimmung mit den Ergeb-
nissen von Bail und WeiV lehrt der Versuch weiter, daB
die Mischung von Serum, Leukocyten mit Aggressin nach dem
Gefrieren wieder bis zu einem gewissen Grade bakterizid wird,
ebenso verhfilt sich die von dem Zellreste abzentrifugierte
Flfissigkeit, die Zellreste selbst werden in ihrer noch fibrigen
Wirkung einigermaBen durch das Aggressin beeinfluBt. Das
gleiche lehrt

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Versuche zu einer Erklaruog der Milzbrandinfektion.

519

TabeUe II.

VersuchsanoidniuQg wie im Versuche der TabeUe 1.

NachbStd.

1) 0^5 ccm Meerschw.-Ber. akt. + 0^5 ccm Exsudatfl. norm.

56* VA 18470

2) 0^5 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0^5 ccm Exsudatfl. norm.

56* Vj'* + Meerschweinchenleukocyten O

3) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -|- 0,25 ccm Exsudatfl. norm.

56® + Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefiroren 0

41 Wie 3, zellfrei, zentrifugierter Abgufl O

5) ZeUruckstand von 4, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f- 0,25

ccm Exudatfliissigkeit norm. 56* V,‘' 291

6) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f 0,25 ccm Aggressin 56® V.’’ 314200

7) 0,25 „ „ „ -f- 0,25 „ „ 56* V,-

-H Meerschweinchenleukocyten 6400

8) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -1- 0,25 ccm Aggressin 56 ®

-f Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 0

91 Wie 8, zellfrei, zentrifugierter Abgufl 0

10) ZeUruckstand von 9, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -1- 0,25

ccm Aggressin 56® V?** 176 300

Einsaat 4 957

0,25 ccm Aggressin 56® ‘/j* 0

Daraus kann man sicher schliefien, daU das Aggressin
des Milzbrandbacillus keine B i n d u n g der bakteriziden
Leukocjtenstoffe herbeifUhrt; denn wenn diese einmal
dnrch Zerstdrung der Leukocyten in Freiheit gesetzt sind,
vermag es nur wenig mehr zu wirken. Hingegen muU man
auf eine Verhinderung der Abgabe dieser Stoffe nach
aufien schlieGen.

Es ist klar, daG unter solchen Verh&ltnissen der Milz¬
brandbacillus in einer aggressinhaltigen K5rperh5hle trotz An-
wesenheit zahlreicher Leukocyten, die ja in ihrer Vitalit&t und
ihrem sonstigen Verhalten nicht verSndert werden, in seiner
Vermehrung nicht mehr gehemmt wird. Es bleibt aber noch
die Frage zu entscheiden, wie sich in der Peritonealhbhle
Aggressine bilden oder ansammeln konnen.

Vorher aber mOgen noch einige Versuche fiber das Ver¬
halten der Leukocyten verschiedener Tierarten mitgeteilt sein.
Bereits Bail und Weil hatten gefunden, daG das gleiche,
von Meerschweinchen gewonnene Aggressin wohl imstande ist,
die Wirkung von Meerschweinchenleukocyten, nicht aber
die von Leukocyten der Taube, also eines milzbrandfesten
Tieres zu unterdrficken. Es liegt nahe, in diesem Verhalten
mindestens eine der Ursachen der natfirlichen Immunitfit zu
suchen, denn die bakteriziden Ffihigkeiten des Taubenorganis-

34*

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UNIVERSITY OF IOWA

520

S. Suzuki,

mus sind ao sich, soweit dies die Reagenzglasversuche er-
kennen lassen, nicht so sehr viel hober als die des Meer-
schweinchens, um damit allein die viel stfirkere Resistenz der
Taube zu erklSren. Wenn aber die Taubenleukocyten durch
das Aggressin des Bacillus nicht gel&hmt werden, so ist von
vornherein klar, daB der Milzbrand sich in diesem Tiere
niemals ungehindert entwickeln kann. Es war daher die
weitere Aufgabe, Leukocyten empfindlicher und unempfanglicher
Tiere bei Anwesenheit des Aggressins zu untersuchen.

Um die Leukocyten von M&usen zu gewinnen, wurde jedes-
mal fQnf Tieren je 1 ccm Aleuronatemulsion intraperitoneal in-
jiziert. Nach 18 Stunden lieB sich durch AusspQlen der Bauch-
hdhle der verbluteten Tiere eine trfibe FlOssigkeit gewinnen, aus
welcher durch Zentrifugieren leicht genug Leukocyten ftir etwa
fflnf Versuchsproben gewonnen werden konnten. Taubenleuko¬
cyten i) und Hflhnerleukocyten wurden ebenfalls durch intra-
peritoneale Aleuronatinjektion in geniigender Menge gewonnen.
Dasselbe war ftir Kaninchen bei intrapleuraler Injektion leicht
zu erreichen.

Tabelle III.

1) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Exsudatfl.

2) 0,25 „ „ » + 0>25 „ „

+ Mauseleukocyten

3) (0,25 ccm MeerscJiw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Exsudatfl.
-f Mauseleukocyten) 3mal gefroren

4) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -|- 0.25 ccm Aggressin

5) 0,25 ,, „ „ -|- 0,25 „ „

-I- Mauseleukocyten

6) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Aggressin
+ Mauseleukocyten) 3mal gefroren

7) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Exsudatfl.
-j- Taubenleukocvten

8) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -f 0,25 ccm Exsudatfl.
-f Taubenleukocyten) 3mal gefroren

9) 0,25 ccm Meerschw.-^r. aktiv. -t- 0,25 ccm Aggressin
+ Taubenleukocvten

10) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -f 0,25 ccm Aggressin
■+• Taubenleukocvten) 3mal gefroren

11) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -b 0,25 ccm Exsudatfl.
4- Meerschwcinchenlcukocvten

12) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Exsudatfl.

-f Meerschweinchenleukocyten) 3raal gefroren

13) Wie 12, zellfrei zentrifugierter Abgufl

Nach5St<L
56®*/,“ 685000

56® 7,“

56® */*“

56® V,*-
56® V*”

56® V,”

56® V,"

56® V,”

56® 7,“

56® 7,'’

56® V,"

56® 7/

237 000

140000
707 000

377 500

174000

0

e

3 624
a

4400

296

1112

1) Bei einigen Versuchen, wo in der Bauchhdhle der Taube nicht
genug Leukocyten zu gewinnen waren, wurde auch das Knochenmark mit
verwendet.

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Versiiche zii einer Erkliirung der Milzbrandinfektion.

521

Nach 5 Std.

14) Zellriickstand von 13, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. +

0,25 ccm Exsudatfliissigkeit 56 ® V**" 61 200

15) 0,4 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,1 ccm Aggressin 56® Vt** 1 300000

16) 0,4 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,1 ccm Aggressin 56®

+ Meerschweinchenleukocy ten 28 500

17) (0,4 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0.1 ccm Aggressin 56®

+ Meerschweinchenleukocvten) 3mal gefroren 25 200

18) Wie 17, zellfrei zentrifugierter Abgufi 19 000

19) Zellriickstand von 18, in 0,4 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -f- 0,1

ccm Aggressin 56® 227 500

20) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Aggressin 56® Vj*"

4- Meerschweinchenleukocvten 31 810

21) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Aggressin 56® 7*2**

+ Meerschweinchenleukocy ten) Sinai gefroren 20000

22) Wie 21, zellfrei zentrifugierter Ab^ifl 11 000

23) Zellriickstand von 22, in 0,25 ccm ^leerschw.-Ser. aktiv. + 0,25

ccm Aggressin 56® ^ 283 200

Einsaat 28 700

Der Vergleich zeigt, dafi die MSuseleukocyten schon an
sich so gut wie wirkungslos waren, dafi die Meerschweinchen-
leukocyten ebenfalls verhkltnisin&fiig schwach wirken und durch
Aggressin ganz wirkungslos wurden, w&hrend die Tauben-
leukocyten gut widerstandsf3,hig waren.

Tabelle IV.

1) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Eksudatfl.

2) 0,25 „ ., „ + 0,25 „

+ Meerschwdnchenleukocyten

3) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. atrtiv. 0,25 ccm Exsudatfi.
-H Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren
Wie 3, zellfrei zentrifugierter AbguS
Zellruckstand von 4, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv.
ccm Exsudatflussigkeit 56* V,'*

0,25 ccm Meerschw.-Ser. {^v. -f 0,25 ccm Aggressin
0,25 „ „ „ + 0.25 „ .,

Meerschweinchenleukocyten

8) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -|- 0,25 ccm Aggressin
-f Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

9) Wie 8, zellfrei abzentrifugierter Al^iu

10) Zellruckstand von 9, in 0,25 ccm Mfeerschw.-Ser. aktiv.
ccm Aggressin 56® 'U'.

11) 0,25 ccm Meerschw.-^r. aktiv. + 0,25 ccm Elxsudatfl.
+ Miiuseleukocyten

12) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -|- 0,25 ccm Exsudatfi.
+ Mauseleukocyten) 3mal gefroren

13) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -f 0,25 ccm Aggressin
-f Mauseleukocyten

14) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -|- 0,25 ccm Aggressin
-|- Mauseleukocyten) 3mal gefroren

15) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25 ccm Exsudatfi.
4- Kaninchenleukocyten

16) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -|- 0,25 ccm Exsudatfi.
.f Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren

56* V,**
56* V,"

56 * 71 “

+ 0,25

56* •/,-
56*

56*7,“

, + 0,25
56* 7,“
56* 7,“
56“7,“
56*7,''
56* ■/,•■

56* 7,“

Nach 5 Std.
91000

11300

6

e

13

480 000

38 750

2 940
1300

19 440

44 400

26200

140000

50000

16

e

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522

S. Suzuki,

Nach5Std.

17) Wie 16, zellfrei zentrifugierter Ab^Q 0

18) Zeliruckstand von 17, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. + 0,25

ccm ExBudatdussigkeit 56® 0

19) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. -1- 0,25 ccm Aggreesin 56® V**"

4- Kaninchenleukocyten 13 530

20) (0^5 ccm Meerschw.'-Ser. aktiv. -f 0,25 ccm Aggreesin 56 ® */,'■

+ Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren 288

21) Wie 20, zellfrei zentrifugierter Abgufi 24

22) Zellruc^tand von 21, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aktiv. +

0,25 ccm Aggreesin 56® Vj"* 2431

f^saat 19 000

0,25 ccm Aggressin 56® */»'’ ^

Bezttglich der M^laseleukocyten gilt das zum vorigen Ver-
suche Gesagte, MeerschweiDchenleukocyten wirken diesmal
relativ scbwach, was gelegentlich vorkommt, und warden durch
Aggressin stark beeinflufit, ebenso tritt die Aggressinwirkung
bei den sebr starken bakteriziden Kaninchenleukocyten aufs
deutlichste bervor.

Ein Versuch mit Eaninchen and Meerschweinchenleuko-
cyten bei dem Aggressin scbwach, wenn auch immer erkennt-
lich wirkte, gibt

Tabelle Va.

Nach 5 Std.

1) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f 0,25 ccm Exsudatfl. 56® */»“ 15900

2) 0,25 „ „ „ 4- 0,25 „ „ 56® 7,“

-f Meerschweinchenleukocyten

3) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. 0,25 ccm Exsudatfl. 56®

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

4) Wie 3, zellfrei zentrifugierter Abgufi

5) Zeliruckstand von 4, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -1- 0,25
ccm Exsudatfliissigkeit 56® */,*•

6) 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f 0,1 ccm Aggressin

7) 0,4 ,, „ „ + 0,1 ccm Aggressin

-f- Meerschweinchenleukocvten

8) (0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f- 0,1 ccm Aggressin

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

9) Wie 8, zellfrei zentrifugierter AbguS

10) Zellriickstand von 9, in 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. -4- 0,1
ccm Aggressin 56®

/^ or: ___1_ CJ.

56® V,**

56® V***

56® V."

11) 0,25 ccm Meerschw.-^fer. akt. + 0,25 ccm Aggressin 56® V 2 **

12) 0,25 „ „ + 0,25 „ „ 56®

+ Meerschweinchenleukocyten

13) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Aggressin 56® V 2 **

-f Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

14) Wie 13, zellfrei zentrifugierter Abgufi

15) Zellriickstand von 14, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. +
0,25 ccm Aggressin 56® Vj*"

16) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® Vj*"
+ Kaninchenleukocyten

17) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® Va**

+ Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren

e

e

e

e

70000

63

e

e

83

122 500

550

e

28

8 900

0

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Verauche zu einer Erklarung der Milzbrandinfektion.

523

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Nach 5 Std.

18j Wie 17, zellfrei zentrifugierter AbguU e

19j Zellruckstand von 18, in 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. +

0,25 ccm Ebcsudatfliissigkdt 56® '/a'' ^

20) 0,4 ccm Meerechw.-Ser. akt. + 0,1 ccm Aggreesin 56®

4 - Kaninchenleukocyten 672

21) (0,4 ccm Meerechw.-Ser. akt. -|- 0,1 ccm Aggressin 56* ‘/s'*

-f- Kaninchenleukocyten) 3mal ge^ren ‘ 0

22) Wie 21, zellfrei zentrifu^erter Abgu6 69

23) Zellruckstand von 22, in 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,1

ccm Aggressin 56® '/a'" 73

24) 0,25 ccm Meerschw.-^r. akt. + 0,25 ccm Aggressin 56® V/

+ Kaninchenleukocyten 3 400

25) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -|- 0,25 ccm Aggressin 56* •/,*“

4 - Kaninchenleukocyten) 3mal ge^ren 83

26) Wie 25, zellfrei zentrifu^erter Abgufi 153

27) Zellruckstand von 26, m 0,25 ccm Meerechw.-Ser. akt. -f-

0,25 ccm Aggressin 56® ‘/a’"- 203

28) 0,5 ccm Ex8udat&. 56® */*'■ 5 070

29) 0,5 „ „ 56® Va’’ + Kaninchenleukocyten 0

30) (0,5 „ „ 56® Va- + » )3malge.

froren e

31) Wie 30, zellfrei zentrifugierter Abgufi O

32) Zellruckstand von 30, in 0,5 ccm Elxsudatdiissigkeit 56® V,** 0

33) 0,5 ccm Aggressin 56® '/a'" 234 000

34) 0,5 „ „ 56 ® -f- Kaninchenleukocyten 5 770

35U0,5 „ „ 56® V,- -f „ )3malge-

froren O

36) Wie 35, zellfrei zentrifugierter Abgufi 90

37) Zellruckstand von 36, in 0,5 ccm Aggressin 56® 131

Elinsaat 51

0,25 ccm Aggressin 56® ‘/a*" ^

TabeUe Vb.

1) 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. -|- 0,1 ccm Exsudatfl. 56®

2) 0,4 ,. „ „ + 0,1 „ „ 56®

+ E^inchenleukocyten

3) (0,4 ccm Meerechw.-Ser. akt. -j- 0,1 ccm Exsudatfl. 56®

4- Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren

4) Wie 3, zellfrei zentmugierter Abgul}

5) Zellruckstand von 4, in 0,4 ccm Meerechw.-Ser. akt. -f-
ccm Exsudatfliissigkeit 56®

6) 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,1 ccm Aggressin 56®

7) 0,4 „ „ -1-0,1 „ „ 56®

-4- ELaninchenleukocyten

8) (0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f 0,1 ccm Aggressin 56®

+ Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren

9) Wie 8, zellfrei zentrifugierter Aogu6

10) Zellruckstand von 9, in 0,4 ccm Meerschw.-Ser. akt. +
ccm Aggressin 56® */,*"

11) 0^5 ccm Meerschw.-^r. akt. -{- 0,25 ccm Exsudatfl. 56®

12) 0,25 ,. „ „ + 0,25 „ „ 56®

-f Kaninchenleukocyten

13) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f 0,25 ccm Exsudatfl. 56®

-f- Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren

14) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -f 0,25 ccm Aggressin 56®

15) 0,25 „ ,. „ -I- 0,25 „ „ 56®

-I- Kaninchenleukocyten

Nach 5 Std.

V,"

1/ h

37 200

/*

424

V

0

0,1

0

6

1/ h

'2

171800

V

11800

*/.“

23

0,1

46

280

V,"

Va-

26200

510

Va-

e

Va-

323 750

1, h
/2

13 600

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524

S. Suzuki

Nach 5 Std.

16) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 c«m Aggressin 56® V,*

+ Kaninchenleukocyten) 3mal gefroren 88

17) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -|- 0,25 ccm Elxsudatfl. 56® ‘/s'’

-f Meerschwemchenleukocyten 29

18) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. att. 0,25 ccm Exsudatfl. 56 ® ‘/j*’

-f- Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 80

19) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. aict. 0.25 ccm Aggressin 56® */,'■

-f Meerschweinchenleukocyten 12 200

20) (0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. -(- 0,25 ccm Aggressin 56®

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 3130

^nsaat 24 000

0,25 ccm Aggressin 56® ‘/j" ^

Man sieht aus den Versuchen sofort, daB die Leukocyten
der drei empfanglichen Tiere Mans, Meerschweinchen und
Eaninchen sich ira Reagenzglasversuche der Wirkung des
Meerschweinchenaggressins gleichmUBig zug§.nglich erweisen;
besonders bemerkenswert scheint es, daB das empf§,nglichste
Tier, die Mans, von vornherein fast nichts von einer anti-
bakteriellen Leukocytenwirkung erkennen IdBt. Im Gegensatz
dazu stehen folgende Versuche mit den Zellen natdriich im-
muner Tiere, als welche Tauben und Huhner verwendet wurden.

Tabelle VI.

Nach 5 Std.

1) 0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. -(- 0,1 ccm Exsudatfl. 56 ® +

Mischung von Taubenleukocyten und -Knochenmark

2) 0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. -|- 0,1 ccm Aggressin 56® */,'■ -f
Mischung von Taubenleukocyten und -Knochenmark

3) 0,25 ccm Meerschw.-Serum akt. -f 0,25 ccm Exsudatfl. 56 ® ‘Z,"
+ Mischung von Taubenleukocyten xmd -Knochenmark

4) 0,25 ccm Meerschw.-Serum akt. -f 0,25 ccm Aggressin 56 ®

Mischung von Taubenleukocyten und -Knochenmark

5) 0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. -f 0,1 ccm Exsudatfl. 56 ®

6) 0,4 „ „ „ „ -1-0,1 „ „ 56® •/,'■

-1- Meerschweinchenleukocyten

7) (0,4 ccm Meerwhw.-Serum akt. -|- 0,1 ccm Exsudatfl. 56®

-f- Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

8) 0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. -|- 0,1 ccm Aggressin 56®

6) 6,4 ,, „ ,. ,, -1- 0,1 ,, ,, 56 ®

-h Meerschweinchenleukocyten

10) (0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,1 ccm Aggressin 56 ®

4- Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

11) 0,25 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® ‘/j*'

12) 0,25 „ „ „ „ +0,25 „ „ 56®‘/,-

+ Meerschweinchenleukocyten

13) (0,25 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® ‘/s'*

-f Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren

14) 0,25 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56 ®

15) 0,25 ,, ,, ,, ., + 0,25 „ ,, 56® ‘/j*"

+ Meerschweinchenleukocyten

16) (0,25 ccm Meerschw.-Serum'akt + 0,25 ccm Aggressin 56®

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren
^nsaat

V."

11 h

It

v,-

e

543 000
e

940

1075000

4800

1016

351000

128

320

iiber

1000 000

8100

1136
17 400

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Versuche zu einer Erklarung der Milzbrandinfektion.

525

Man sieht aus diesem Versuche, dafi die Mischung von
Taubenleukocyten und -Enochenmark in Meerschweinchenserum
dem Aggressin vollstindig Widerstand geleistet hatte, noch
besser als im Versuche der Tabelle III, wEhrend das gleiche
Aggressin die Leukocyten des Meerschweinchens, die an sich
nahezu ebenso stark wirksam waren wie die Taubenleukocyten,
schwer beeintrachtigt hatte. Es blieb nun die Untersuchung,
wie sich die Wirkung von Tauben- und Meerschweinchenleuko-
cyten in Taubenserum verhalten wurde.

Tabelle VII.

NachSStd.

1) 0,25 cctn Taubenserum akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56 * 132 307

2) 0,25 „ „ +0,25 „ „ 56“ 7,“

+ Taubenleukocyten 0

3) (0,25 ccm Taubenserum akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56 ® */*'“

+ Taubenleukocyten) 3mal gefroren 0

4) 0,25 ccm Taubenserum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56 ® ^/j*’ 2 460 000

5) 0,25 „ „ +0,25 „ „ 56® V,-

+ Taubenleukocyten 1744

6) (0,25 ccm Taubenserum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56®

+ Taubenleukocyten) 3mal gefroren 0

7) 0.25 ccm Taubenserum akt. + 0^5 ccm Exsudatfl. 56 * Vj'’

+ Meerschweinchenleukocyten 752

8) (0,25 ccm Taubenserum akt. + 0,25 ccm Eksudatfl. 56 ® ‘/j®

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 14

9) 0,25 ccm Taubenserum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56® V*''

+ Meerschweinchenleukocyten 30 583

10) (0,25 ccm Taubenserum a^ + 0,25 ccm Aggressin 56 ® 7'»'’

+ Meerschweinchenleukocyten) 3mal gefroren 14866

Einsaat 28 333

0,5 ccm Aggressin 56® 7»'‘ 297

Man sieht, dafi das Taubenserum nicht imstande ist, die
Aggressinwirkung abzuschwHchen, d. h. dafi es sich bei der
natiirlichen ImmunitUt der Taube nicht so sehr um ein in den

Kdrpersfiften normalerweise vorhandenes Antiaggressin handelt,
sondern dafi die Taubenleukocyten einfach der Aggressinwirkung
nicht zugUnglich sind.

Tabelle VIII.

Nach5Std.

1) 0,25 ccm Huhnerserum akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® V.® 106 600

2) 0,25 „ „ „ +0,25 „ „ 56® V

+ Huhnerleukocyten 0

3) (0,25 ccm Huhnerserum akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56 ® ^7*“

+ Huhnerleukocyten) 3mal gefroren 0

41 Wie 3, zellfrei zentrifugierter Ab^fl 0

5) Zelhriickstand von 4, in 0,25 ccm Hiihnerser. akt. + 0,25 ccm

Exsudatfl. 56® V»'' ^

6) 0,25 ccm Huhnerserum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56® V*’’ 460000

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526

S. Suzuki,

Nach 5 Std.

7) 0,25 ccm Huhnereerum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56°

+ Hiihnerleukocyten 0

8) (0,25 ccm Huhnereerum akt. + 0,25 ccm Aggressin 56 °

+ Hiihnerleukocyten^ 3mal gefroren 0

9^ Wie 8, zellfrei zentrirugierter Abgufi 0

10) Zellruckstand von 9, in 0,25 ccm Huhnerserum akt. + 0,25 ccm

Aggressin 56° V*** ^

Emsaat 6600

0,25 ccm Aggressin 56° V**" ^

Man sieht daraus, dafi das Huhn sich im Prinzip wie die
Taube verhSlt, nur daB die Leukocyten dieses Tieres sich dnrch
auBerordentUch wirksame Milzbrandyernichtung auszeichnen,
wie dies schon Gruber, Futaki und Toyosumi bekannt
gewesen war.

Es hat somit die Voraussetzung, von welcher diese Ver-
suche ausgegangen waren, zugetroffen, und es besteht aller
Grund zur Annahme, daB die nattirliche ImmunitUt mindestens
zu einem Teile auf der Unwirksamkeit des Milzbrandaggressins
gegen die Leukocyten dieser Tiere zurflckzufflhren ist.

3)

6 )

P

8 )

9)

10 ^

11 )

12 )

13)

14)

15)

161

17)

18)

Tabelle IX,

0,4 ccm HuhnerBerum akt. + 0,1 ccm Exsudatfl.
-4- Hulinerknociienmark

0,4 ccm Huhnerserum akt. + 0,1 ccm Exsudatfl.
+ Meerschweinchenleukocyten
0,4 ccm Huhnerserum akt. + 0,1 ccm Aggressin
,) 7 , „ + 0,1 „ „

+ Huhnerknochenmark

0,4 ccm Huhnerserum akt. + 0,1 ccm Aggressin
+ Meerschweinchenleukocyten
0,25 ccm Huhnerserum akt. + 0,25 ccm Ezsudatfl.
0,25 ., „ „ +0,25 „

+ Huhnerknochenmark

0,25 ccm Hiihnersenim akt. + 0,25 ccm Exsudatd.
+ Meerschweinchenleukocyten
0,25 cciu Huhnerserum akt. + 0.25 ccm Aggressin
0 25 - 4 - 0 ^5

+ Huhnerknochenmark

0,25 ccm Huhnerserum akt. + 0,25 ccm Aggressin
+ Meerschweinchenleukocyten
0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,1 ccm Ezsudatd.
0,4 ,, ,, ,, ,, + 0,1 ,, „

+ Huhnerknochenmark

0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,1 ccm Ezsudatfl.
-f Meerschweinchenleukocyten
0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,1 ccm Aggressin
0,4 ,, ,, ,, ,, + 0,1 ,, ,,

+ Hiihnerkochenmark

0,4 ccm Meerschw.-Serum akt. + 0,1 ccm Aggressin
+ Meerschweinchenleukocyten

56® V*”
56 * */;•■

56® V,"

56® */,“
56®

56® V,"

56® Va"
56® V?

56® V,'*

56® Vi"
56® Vi"

56® Vi"

56®

56® Vi"

56® V,"

56® V,"
56® V,"

56® V,"

Nach 5 Std.
115 454

a

a

418 000

57

388
125 620

a

649000

14

806

110625

89

90

326000

97

1184

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Yersuche zu einer Erklarung der Milzbrandinfektion.

527

19) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® V*'"

20) 0,25 „ „ „ „ +0,25 „ „ 56® V.-

+ Hiihnerknochenmark

21) 0,25 ccm Meerechw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Exsudatfl. 56® ‘Z,**
+ Meerschweinchenleukocyten

22) 0,25 ccm Meerechw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Aggressin 56® */»'’

23) 0,25 ., „ „ „ +0,25 „ „ 56®*/,"

+ Hiiiinerknochenmark

24) 0,25 ccm Meerschw.-Ser. akt. + 0,25 ccm Aggressin 56 ® V*’’
+ Meerschweinchenleukocyten

Einsaat

Nach 5 Std.
171580

80

e

473 330
4

2480
12 790

Dieser Versuch zeigt klar, dafi die Meerschweinchenleuko-
cjten, gleichgtlltig, ob sie im MeerschweincheDserum oder im
Hiihnerserum anfgeschwemmt sind, der Wirkong des Aggressins
nicht zu widerstehen vermdgen, hingegen werdeu Hflhnerleuko-
cyten bezw. Hahnerknochenmarkzellen durch Aggressin in
keinem Medium beeinfluBt; nur ganz wenige Andeutungen
wie in diesem Versucbe sprechen dafflr, daB in Hiihnerserum
eine Spur von Antiaggressinwirknng vorhanden sein kdnnte.
Denn es ist im ganzen die Wirkung des Aggressins auf Zellen
in Meerschweinchenserum eine merklich stArkere als auf die
in HQhnerserum suspendierten Zellen. Der‘Unterschied ist
aber so gering, daB daraus bindende Schlilsse nicht gezogen
werden kdnnen.

Die Folgerung, die aus alien untereinander iibereinstim-
menden Versuchen mit empfindlichen und natflrlich resistenten
Tieren gezogen werden muB, geht dahin, daB fiir die natilrliche
Immunit&t die Resistenz der Leukocyten des betreffenden Tieres
gegen die Aggressinwirkung des Bacillus entscheidend ist.
Besteht eine solche, so kann der Bacillus, auch wenn er
tierische Form annimmt, zu keinem erheblichen Wachstum
gelangen. Ist sie nicht vorhanden, so hftngt es nur von der
Zeit ab, bis zn welcher Aggressin in geniigender Menge im
Tierkdrper gebildet ist. Ist dieser Zeitpunkt erreicht, so sind
alle Schutzmittel des Organismus ohne unmittelbaren Effekt
auf die Vermehrung der Bakterien. Dabei ist nochmals auf
die Erscheinung hinzuweisen, daB es sich sicher nicht um eine
vollstS.ndige Bindung antibakterieller Zellkr&fte handelt, wie
die Yersuche mit gefrorenen Leukocyten in Aggressin beweisen.
Die antibakterielle Ftlhigkeit der Zellen bleibt an sich erhalten,
nur die Mbglichkeit ihrer Abgabe nach auBen, damit auch die

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528

S. Suzuki,

%

an die Bakterien heranzutreten, wird durch das Aggressin ver-
hindert. In dem auf diese Weise schutzlos gewordenen Tiere
entfaltet sich dann ungehemmtes Wachstum der Bakterien.

BezQglich der Art, wie es zur Aggressinbildung und
weiterhin AggressinOberschwemmung des milzbrandinfizierten
Tieres koinmt, sei auf die von Bail entwickelte Theorie hin-
gewiesen. Nach derselben vermag der in die Peritonealhdhle
des Meerschweinchens injizierte Kulturmilzbrand den daselbst
angesammelten oder rasch zutretenden Leukocyten nicht zn
widerstehen; er stirbt teilweise, wie dies ja mikroskopisch an
extra- oder intracelluiaren Degenerationserscheinungen zu er-
kennen ist, ab, teilweise ist er zur Auswanderung in Korper-
gebiete genotigt, wo die Schutzkrafte ein minder gflnstiges
Verhaltnis fflr ihre Tatigkeit finden. Die Untersuchung er-
gibt, dafi solche Stellen in den Organen in erster Reihe in
der Milz vorhanden sind. Daselbst beginnt die Vermehrung,
gleichzeitig unter Animalisierung der neu entstehenden Bak¬
terien. Diese fafit Bail als den Ausdruck einer abnormen
Hypersekretion der Bakterienzellen auf; dadurch kommt es
einerseits zur Ausbildung der mikroskopisch sichtbaren schleim-
artigen Kapseln, andererseits zu Ausscheidung von Aggressin
im engeren Sinne. Durch dieses werden zunfichst innerhalb
eines kleinen Umkreises die Kdrperschutzkrafte paralysiert
und dadurch die Vermehrung der Bacillen ermdglicht. Hit
dieser wieder geht eine quantitativ gesteigerte Aggressin¬
bildung einher und so kommt es, dafi das Aggressin des
Milzbrandbacillus in den Kreislauf aufgenommen wird und
frflher als die Bacillen selbst in andere Organe gelangt. Wohin
es kommt, werden dberall die Schutzkrafte paralysiert, so dafi
das Tier frQher schutzlos ist, ehe noch die Bacillenseptikamie
einsetzt. Das ist dann auch der Zeitpunkt, wo die Bakterien
in der Bauchhdhle, trotz der daselbst angesammelten Leuko¬
cyten, wieder erscheinen und sich jetzt ohne Hemmung ver-
mehren kdnnen.

Man wird sich wohl vorstellen dfirfen, dafi im TierkSrper
selbst die Verhaitnisse fttr die Paralysierung der Leukocyten-
tatigkeit durch Aggressin noch ghnstiger liegen als im Reagenz-
glase, wo immerhin die Wirkung des Aggressins sich nur auf
Ei%chwerung, nicht auf vollstandige Verhinderung der Bak-

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Vereuche zu einer Erklarung der Milzbrandinfektiou.

529

terizidie der Zellen erstreckt. In dieser Hinsicht muB auch
noch darauf hingewiesen werden, daB in den vorstehenden mit-
geteilten Versuche die Aggressinwirkung mehrfach scbwScher
zum Ansdruck kommt, als in den sonst vollstandig ilberein-
stimmenden Versuchen von Bail und Weil. Das ist ohne
Zweifel darauf zuruckzufiihren, daB wir stets mehr Leuko-
cyten fiir jede einzelne Probe verwenden konnten und natiir-
lich die Aggressinwirkung durch die Menge der Leukocyten
beeinfluBt wird. Ueberdies darf man fflr die Reagenzglas-
versuche den Umstand nicht auBer Acht lassen, daB stets eine
gewisse Anzahl von Leukocyten durch das Waschen, Zentri-
fugieren etc. vor Beginn des Versuches abstirbt und daB auch
wahrend des mehrstundigen Aufenthalts der Versuchsproben
bei 37® Zellen zugrunde gehen. AVie die Versuche mit ge-
frorenen Leukocyten lehren, tritt aber unter solchen Um-
standen Bakterizidie auf. Im Tierkorper ist nathrlich, wie
auch die mikrokkopische Untersuchung lehrt, von einer solchen
Zerstdrung nicht die Rede, so daB bereits dieses Moment die
starkere Aggressinwirkung im Tierkorper zu erkiaren vermag.

Ist die eben skizzierte Theorie der Milzbrandinfektion
des Meerschweinchens richtig, so muBte sich erweisen lassen,
daB tatsachlich bei der Infektion an bestimmten Kdrperstellen
des infizierten Tieres frQher Aggressine als Bacillen vorhanden
sind.

Als geeignete Methode fiir dieses Studium bot sich die
intraperitoneale Infektion des Meerschweinchens dar. Es
muBte nach Ablauf der ersten Infektionsperiode, wahrend
welcher die BauchhShle steril bleibt, ein Zeitpunkt eintreten,
wo das angesammelte Exsudat bereits aggressiv ist, ohne daB
noch Bacillen in demselben auftreten. Es handelt sich also
darum, den Beginn der zweiten Infektionsperiode abzuwarten
und urn diese Zeit das Exsudat zu untersuchen. Dasselbe
ist, wie die zahlreichen Versuche zeigen, sehr reich an Leuko¬
cyten, welche bei dieser Gelegenheit meist mituntersucht
wurden. NaturgemaB aber forderten diese Versuche viele
Uebung und nicht alle konnten gelingen, da ja fQr den Ein-
tritt der zweiten Infektionsperiode charakteristische Erschei-
nungen auBer den wieder auftretenden Bacillen nicht vor¬
handen sind. Die besten Resultate wurden erzielt, wenn es

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530

S. Suzuki,

gelang, das Exsudat zu eioer Zeit zu entnehmen, wo dasseibe
mikroskopisch bei der genauesten Untersuchung zwar keine
Bacillen erkennen lieB, bei der kulturellen Untersuchung des
abzentrifugierten Zellsatzes hingegen vereinzelte Bakterien-
kolonien ergab.

TabeUe X.

Meerschweinchen a erhielt 0,000006 ocm Bouillonkiiltur in 10 ccm
steriler Bouillon intraperitoneaL Meerschweinchen b 0,000012 ccm der-
selben Bouillonkultur, ebenfalls in 10 ccm steriler Bouillon. Meerschwein*
chen c erhalt nur 10 ccm steriler Bouillon. Meerschweinchen d wurde mit
2 ccm reiner Milzbrandbacillenbouillonkultur infiziert. Nach 14 Stunden
wurde zunachst das bereits kranke Tier d verblutet. Es zeigte sich der
gewdhnliche Befund schwerer Milzbrandinfektion und das Tier lieferte das
Aggressin fiir diese Versuche. Die Tiere a, b imd c lieferten je einige
Kubikzentimeter triiben sehr zellreichen Exsudates, aus dem die Zellen
durch Zentrifugieren isoliert wurden. Strichkultur des Satzes lieferte von
Tier b mehrere, von Tier d reichliche Eolonien des Milzbrandes. Mikro-
skopisch wurden Bacillen nicht gefunden.

Nach 5 Std.

1) 0,3 ccm Exsudatfl. c + 0,2 ccm Exsudatfl. c 56 * V**' 13 360

2) 0,3 „ „ „ + 0,2 „ „ „ 56® V,” + Meer-

schweinchenleukocyten c 0

3) (0,3 ccm Exsudatfl. c + 0,2 ccm Exsudatfl. c 56® */**' + Meer-

Bchweinchenleukocyten c) 3mal gefroren 0

4) 0,3 ccm Exsudatfl. c + 0,2 ccm Aggr. 56 ® 633 330

5) 0,3 „ „ ,, + 0,2 „ „ 56® V»'‘+MeerBchw.-

Leukocyten c 3 608

6) (0,3 ccm Exsudatfl. c + 0,2 ccm Aggr. 56® V*’’ + Meerschw.-

Leukocyten c) 3mal gefroren 0

7) 0,3 ccm Exsudatfl. a + 0,2 ccm Exsudatfl. c 56 ® V**" 164 546

8) 0,3 „ „ „ + 0,2 „ „ „56*V + Meer.

schwcinchenleukocyten a 201

9) (0,3 ccm Exsudatfl. a + 0.2 ccm Exsudatfl. c 56® 7*^ + M.eer-

schweinchenleukocyten a) 3mal gefroren ’ 2

10) 0,3 ccm Exsudatfl. a + 0,2 ccm Aggr. 56® ‘Z,** 1550000

11) 0,3 „ „ ,, + 0,2 „ „ 56® 7,“+Meer8chw.-

Leukocyten a 10910

12) (0,3 ccm" Exsudatfl. a + 0,2 ccm Aggr. 56® 7*** + Meerschw.-

Leukocyten a) 3mal gefroren 17

13) 0,3 ccm Exsudatfl. b + 0,2 ccm Exsudatfl. c 56® 72** 693 770

14) 0,3 „ „ + 0,2 „ „ „ 56® V.^ + Meer.

schweinchenleiikocyten b 464

15) (0,3 ccm Exsudatfl. "b + 0,2 ccm Exsudatfl. c 56® 72** + Meer-

schweinchenleukocyten b) 3mal gefroren 0

16) 0,3 ccm Exsudatfl. b + 0,2 ccm Aggr. 56® 7,** 1000000

17) 0,3 „ „ „ + 0,2 „ „ 56® V,**+Meer8chw.-

L^ukocyten b 13 000

18) ((>,3 ccm Exsudatfl. b + 0,2 ccm Aggr. 56® 72** + Meerschw.-

Leukocyten b) 3mal gefroren 372

Elnsaat 13 800

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Versuche zu einer Erklfirung der Milzbrandinfektion.

531

Man sieht aus diesem Versuche deutlicb, dafi die Leuko-
cyten eines jeden der drei Tiere in der zugehorigen Exsudat-
flflssigkeit um so weniger gewirkt haben, je weiter die In-
fektion vorgeschritten war, nicht minder deutlich ist zu sehen,
daB das Aggressin in jenen Proben, welche von den infizierten
Tieren herstammten, viel energischer als bei den Proben aus
dem normalen Tiere gewirkt hat.

Das Serum der Tiere a bis d wurde am folgenden Tage
zusammen mit Leukocyten eines normalen, mit Bouillon vor-
behandelten Meerschweinchens untersucht. Wie die folgende
Tabelle zeigt, enthielt nur das Serum des schwer infizierten
Tieres d sicher nachweisbares Aggressin, indem es mit nor¬
malen Leukocyten nur wenig bakterizid wirkte.

Tabelle XI.

Nach5 Std.

1) 0,5

ccm

Serum c

aktiv

53 590

2) 0,5

V

if if

a

+ Meerschwemchenleukocyten

312

3) (0,5

V if

if

+ Meerschwemchenleukocyten) 3mal
gefroren

e

4) 0.5

ccm

Serum a

aktiv

29 310

5) o;5

if if

if

+ Meerschwemchenleukocyten

976

6H0,5

if if

a

+ Meerschwemchenleukocyten) 3mal
gefroren

0

7) 0,5

ccm

Serum b aktiv

25000

8) 0,5

n if

if

+ Meerschwemchenleukocyten

300

9) (0,5

if if

if

+ Meerschwemchenleukocyten) 3mal
gefroren

e

10) 0,5 ccm

Serum d aktiv

75 000

11) 0,5

jj

if if

if

+ Meerschwemchenleukocyten

1072

I2h0,5

if

if if

if

+ Meerschwemchenleukocyten) 3mal

gefroren O

ESnsaat 17 630

Tabelle XII.

MeerBchwdnchen a erhielt 10 com steriler Bouillon, Meerschweinchen b
ebenso viele Bouillon mit 0,00002 ccm Milzbrandbouillonkultur, Meer-
achweinchen c mit 0,00004 ccm, Meerschweinchen d 2 ccm reiner Milzbrand-
bouillonkultur intraperitoneal. Eine Eapillarenentnahme nach 14 Stunden
zeigte beim Tier d massenhafte, bei den ubrigen keine Milzbrandbacillen.
Die Tiere wurden verblutet, doch lieferten sie kein freies Exsudat, so daS
nicht untersucht werdeu konnte, ob der Beginn der zweiten intraperitonealen
Infektionsstadiums ausschliefilich durch den Aggressingehalt der Korper-
fliissigkeit oder auch durch die Verringerung des bakteriziden Vermdgens
der Zellen charakterisiert wird. Es wurde daher das Serum der Tiere mit
normalen Leukocyten gemischt und die Bakterizidie der Mischungen mit
und ohne das vom Tier d stammende in gewohnlicher Weise zubereitete
Aggressin untersucht.

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532

S. Suzuki

Nach 5 Std.

1) 0,35 com Scrum a akt. + 0,15 com Exsudatfl. 56* 37 400

2) 0,35 „ „ „ „ +0,15 „ „ 56* Vi*’+ Meer-

schweinchenleukocyten 886

3) 0,35 ccm Serum a akt. + 0,15 com Aggressin 56® ‘/s’* 452 000

4) 0,35 „ „ „ „ +0,15 „ „ 56" ‘ j!'* + Meer-

sohweiuchenieukocyten 17 000

5) 0,35 ccm Senim b akt. + 0,15 ccm Exsudatfl. 56* 186 000

6) 0,35 „ „ „ „ +0,15 „ „ 56* *, ■'■ +Meer-

schweinchenleukocyten 186

7) 0,35 ccm Serum b ^t. + 0,15 ccm Aggressin 56® ‘/j’’ 607 500

8) 0,35 ., ,, „ +0,15 „ ' „ 56* >/■..''+Meer-

sehweinchenleukocytcn 10 875

9) 0,35 ccm Serum c akt. + 0,15 ccm Exsudatfl. 56® 208330

10) 0,35 „ ,, „ „ +0,15 „ „ 56* V," + Meer-

schweinchenleukocyten 8 520

11) 0,35 ccm Serum c akt. + 0,15 ccm Aggressin 56® 1023 300

12) 0,35 „ „ „ +0,15 „ 56® »/,*■ +Meer-

schweinchenleukocyten 32 400

13) 0,5 ccm Serum a aktir. 81 600

14) 0,5 ccm Serum b aktiv. 140000

15) 0,5 ccm Serum c aktiy. 183 300

Einsaat 20 050

Man sieht daraus, dafi das Serum des Tieres c bereits
einen gewissen Aggressin gehalt haben mu6, da die Bakterizidie
der Dormalen Leokocyten in demselben sehr wenig ausge-
sprochen war.

Es war nunmehr erforderlich, festzustellen, ob die Leuko-
cyten der infizierten Tiere, mit dem zugehbrigen und mit
normalem Exsudate zusammen uotersucht, einen Unterschied
ihrer Wirkung aufweisen.

TabeUe XIH.

Meerschweinchen a erhielt 10 ccm steriler Bouillon intraperitoneal,
Meerschweinchen b und c ebensoviel mit 0,00002 ccm bezw. 0,00004 ccm
Bouillonkultur. Nach 14 Stiinden lieferten die verbluteten Tiere gleich-
miiUig je 7 ccm triiben leukocytenreichen Exsudates. In keinem Exsudate
waren mikroskopisch Milzbrandbacillen nachweisbar. Plattenkultur mit je
0,5 ccm des Exsudates lieferten bei keinem Tiere Milzbrandkolonien.

Nach 5 Std.

1) 0,5 ccm

Exsudatfl. a

456

2) 0,5

„ „ + Meerschw.-Leukocyt.

a

e

3) (0,5

yy yy yy yy

„) 3mal gefroren

e

4) 0,5

fJ

y, b

130000

5) 0.5

,, „ + Meerschw.-Leukocyt.

a

e

6) (0,5

yy

yy yy » yy

„) 3raal gefroren

e

7) 0,5

yj

yy ^

470 800

8) 0.5

yy

,, „ + Meerschw.-Leukocyt.

a

1848

9) (0.5

yy

yy yy “H yy yy

3raal gefroren

0

10) 0,5

yy

yy U -f- ,, ,,

b

0

11) (0,5

yy

yy yy yy ^y

„) 3mal gefroren

0

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Verauche zu einer Erkliirung der ]Vlilzbrandinfektion.

533

Nach 5 Std.

12) 0,5 ccm Exsudatfl. b + Meerechw.-Leukocyt. b

270

131(0,5 „

yy

yy

j,) 3mal gefroreu

e

14 0,5 „

Jf +

y*

yy

8390

15)(0,5 „

>>

yy

yy

„) 3mal gefioren

520

16) 0,5 „

„ a +

yy

yy

c

e

17) {0,5 „

jj “t"

yy

>y

„) 3mal gefroren

e

181 0,5 „
19){0,5 „

yj b +

ty

yy

c

720

yy yy H"

yy

yy

„) 3mal gefroren

e

201 0,5 „

yy +

yy

yy

c

5000

2lH0,5 „
Einsaat

^y yy +

yy

yy

„) 3mal gefroren

17

15 261

Der mitgeteilte Versuch ist der am besten gelungene der
ganzen Serie. Offenbar ist namentlich bei Tier c gerade der
Zeitpunkt des Beginnes der zweiten Infektionsperiode getroffen
worden. Dementsprechend vermag die Exsudatfldssigkeit dieses
Tieres weder mit Leukocyten vod Tier a noch von b und c be-
friedigend zu wirken. Hingegen wirken sowohl die Leukocyten
von Tier b und c in der normalen Exsudatfldssigkeit a genau
so voIlstSndig abtdtend, wie die Leukocyten des normalen
Tieres a. Dafi die ExsudatflQssigkeit a in diesem Versnche
eine deutliche Bakterizidie zeigt, ist eine grolle Seltenheit, auf
die man gelegentlich bei der Untersuchung zablreicher Tiere
stdBt, die aber die Beweiskraft des Versuches eher erhdht als
vermindert. Nach diesem Versuche kann es nicht zweifelhaft
sein, dafi die Leukocyten der Meerschweinchen b und c, also
die infizierter Tiere, sich nicht wesentlich von denen eines
normalen unterscheiden. An sich bleiben sie wirksam und
nur das Medium im infizierten Tiere, also die Exsudatflhssig-
keit, welche bereits Aggressin aufgenommen hat, ist die Ur-
sache, dafi die Zellwirkung nicht mehr in entsprechendem
Malle zum Vorschein kommt

Der Versuch wurde noch durch die Untersuchung des
Serums der drei Tiere erg&nzt, welches mit normalen Leuko¬
cyten gemischt wurde. Es stellte sich aber heraus, dafi keines
der Sera der drei Tiere nachweisbare Men gen von Aggressin
enthielt, denn die normalen Leukocyten mit je 0,5 ccm Serum
der drei Tiere tdteten Qberall ca. 9000 Bacillen ab.

Die Versuche entsprachen somit den theoretischen Voraus-
setzungen, von denen sie ausgegangen waren. So grofie
Schwierigkeiten dieselben auch naturgemfifi darbieten, so liefi
sich doch nachweisen, dafi eine Verhinderung der antibakteri-

ZeiUchr. L InmiDiiltitUfonGhaDg. Orig. Bd. Z. 35

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534

S. Suzuki,

ellen Schutzkrafte der eigentlichen Vermehrung der Bakterien
fiber den ganzen Korper des Tieres vorausgeht. Sowohl im
Serum, wie in der intraperitonealen Exsudatflfissigkeit liefien
sich Aggressinwirkungen zu einer Zeit nachweisen, wo von
Bakterienfiberschwemmung noch keine Rede sein konnte. Der
Reagenzglasversuch hat also zu denselben Ergebnissen geffihrt,
wie ein filterer Versuch bei Bail (Verhandlungen des 14. Inter-
nationalen Kongresses ffir Hygiene). Dieser konnte zeigen,
dafi man mit Blut, bezw. mit Serum von milzbrandinfizierten
Kaninchen, in dem noch keine Bacillen vorhanden sind, andere
normale Tiere aktiv immunisieren kann. Auch dies ist nur
so zu erklfiren, dafi das Aggressin ins Blut der Tiere Ifingere
Zeit vor dem Eintreten der Septikfimie fibergeht. Da nun
innerhalb dieser Zeit, fihnlich wie bei den angeffihrten Meer*
schweinchenversuchen, lediglich in den Organen Milzbrand-
vermehrung nachzuweisen ist, so muB von diesen Stellen aus
die Aggressinfiberschwemmung als notwendige Vorbedingung
der Bakterienvermebrung ausgehen.

In Kfirze sei nochmals auf die VerhSltnisse beim natfirlich
immunen Tiere eingegangen. Wohl zum ersten Male ergeben
sich sichere Anhaltspunkte ffir eine Erklfirung der natfirlichen
Immunitfit fiberhaupt. Sie ist nur zum Teil dadurch bedingt,
daB die resistenten Tiere fiber stiirkere antibakterielle Wir-
kungen ihres Organismus verffigen als empfindliche Tiere.
Ebenso wichtig aber ist, daB die Leukocyten bezw. Leukocyten-
serumwirkungen dem ungfinstigen Einflusse, den das bakterielle
Aggressin auszufiben vermag, widerstehen. Dadurch wird es
unmoglich, daB die infizierten Bacillen ohne Hemmung sich
vermehren, weil ja die Leukocyten und die SSfte vereint be-
stfindig, wenn auch wahrscheinlich nicht sehr rasch, an ihrer
Beseitigung zu arbeiten vermfigen.

Ob man sagen darf, daB diese Nichtbeeinflussung durch
Aggressin auf einen besonderen Zustand der Zellen immuner
Tiere zurfickzuffihren ist, oder daB sie einfach fiber quantitativ
stfirkere Leukocytenwirkung verffigen, iSBt sich nach dem
Reagenzglasversuche kaum entscheiden. Es ist fibrigens noch
bemerkenswert, daB wahrscheinlich die Leukocyten nur einen
Teil der natfirlichen Schutzkrfifte darstellen und es muB
weiteren Untersuchungen vorbehalten bleiben, inwiefern die

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Versuche zu einer Erklanmg der MilzbrandinfektioD.

535

von Gruber und Futaki sowie von Schneider studierten
antibakteriellen Wirkungen der Blutpl^ttchen bei der Infektion
eine Rolle spielen und beeinflufibar sind.

Ebenfalls deutet bis jetzt nichts darauf bin, da3 die
KdrpersSfte des nattirlich resistenten Tieres eine ausschlag-
gebende Rolle fttr das Nichteintreten der Milzbrandinfektion
spielen. In dieser Hinsicht scbeint ein ganz wesentlicher
Unterschied zwischen der natflrlichen und kdnstlichen Milz-
brandimmuniUt zu bestehen, deren Charakteristikum in dem
Auftreten von Antiaggressinen besteht, welche durcb die
Paralysierung des wkhrend der Infektionsperiode gebildeten
Aggressins das ungestdrte Funktionieren der natdrlicben
Schutzkrkfte ermbglichen.

Znsammenfassung.

1) Die Versuche von Bail und Weil, dafi die bakterizide
Wirknng der Leukocyten auf tierische Milzbrandbacillen durch
Znsatz von sterilisiertem Exsudate infizierter Tiere (Aggressin)
vermindert wird, konnten bestktigt werden.

2) Das Aggressin wirkt nur auf die von den Leukocyten
empf&nglicher Tiere (Mans, Meerschweinchen, Kaninchen) aus-
gehende Milzbrandbakterizidie, nicht auf die von Leukocyten
immuner Tiere (Taube, Huhn).

3) Es IkJlt sich wfthrend des Verlaufes der intraperitonealen
Meerschweincheninfektion mit Milzbrand ein Zeitpunkt auf-
finden, wo das in der BauchhOhle angesammelte zellreiche
Exsudat seine bakterizide Wirkung verloren hat und selbst
Aggressin enthielt, obwohl Milzbrandbacillen in demselben
noch nicht oder nur erst in sehr geringer Zabl vorhanden sind.

Literatnr.

1) Bail, Folia Serologica, Bd. 1, 1906, Heft 2, p. 65—82.

2) Bail und Weil, ArcWv f. Hyg., M. 73, 1911, p. 218.

3) Gruber und Futaki, Centralbl. f. Bakt. etc., Abt. I, Beferate, Bd. 38,
1906, Beiheft.

4) -Miinchner med. Wochenschr., 1907, No. 6.

5) Toyosumi, CentralbL f. Bakt. etc., Abt. I, Orig., Bd. 51, Heft 3.

35*

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536

Liefmann, Ein Pipettenstander.

Nachdrack verboUn,

[Aus der bakteriologischen Abteilung des Rudolf-Virchow-Kranken-

hauses zu Berlin.]

Ein Pipettenstander.

Von Priv.-Doz. Dr. Liefinann.

Mit 1 Figur im Text.

(Eingegangen bei der Redaktion am 5. Mai 1911.)

Bei serologischen Arbeiten leistet der untenstehend ab-
gebildete Pipettenstander giite Dienste. Die Pipetten werden
durch eine Klammer in der gewiinschten Lage festgehalten;
das untere Ende der Pipetten bleibt bei der gewahlten Art
der Befestigung unberuhrt, so daB hochstens Luftkeime eine

Verunreinigung bedingen konnen. Unterhalb jeder Pipette
ist Platz, um mit Blaustift eine Bemerkung uber ihre Ver-
wendung zu notieren. Ein leichter Druck geniigt, die Pipette
festzumachen, und ebenso bequem ist die Abnahme. Der
Apparat wird von der Firma F. & M. Lautenschlager in Berlin
zum Preise von Mk. 42,— geliefert.

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Liefiuann, Ein Wasserbad fur serologische Zwecke.

537

Nachdruck verbolen.

[Aus derBakteriologischen Abteilang des Rudolf-Virchow-Kranken-

hauses zu Berlin.]

Elii Wasserbad fdr serologische Zwecke.

Von Priv.-Doz. Dr. Lieftnami.

Mit 1 Figur im Text.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 5. Mai 1911.)

Im Laufe des letzten Jahres habe ich filr alle serologischen
Untersochungen (Wassermannsche Reaktionen, Hkmolyse-
versuche etc.) ein Wasserbad verwendet, dessen Konstruktion

aus vorstebender Abbildung ersicbtlicb ist. Es bestebt aus
einem Glaskasten mit einem vernickelteu Einsatzgestell filr
80 Reagenzrobrcben. Die Rdbrcben sind terrassenartig ange-
ordnet. Ferner ist eine Reguliervorricbtung filr die Tempe-

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538

H. Baubitgchek,

ratur vorhanden. Die Beheizung geschieht durch zwei ver-
stellbare Mikrobrenner. Der Hauptvorteil des Apparates ist
der, daB er gestattet, die sich abspielenden Reaktionen in
jedem einzelnen GlSschen zu verfolgen '). Das Instrument steht
in der Mitte unseres Laboratoriums, ein Blick darauf gentigt,
urn festzustellen, ob z. B. bei der Wassermannschen Re-
aktion die Kontrollen gel5st sind oder nicht.

Am meisten Nutzen babe ich von dem Apparat bei den-
jenigen Arbeiten gehabt, bei denen theoretische Fragen der
H^oljse und Komplementbindung studiert werden. Hier
kommt es nicht nur darauf an, das Endresultat der Reaktion
nach 2 oder 24 Stunden zu bestimmen, sondern die Schnellig-
keit der Hamolyse in verschiedenen Rbhrchen zu ver-
gleichen. Das kann aber einigermafien exakt nur im Wasser-
bad geschehen, weil nur in diesem der Inhalt der Reagenz-
rbhrchen schnell die Temperatur von 37" annimmt. 5 ccm
Flfissigkeit von 20® werden im 37® warmen Wasser in 2 bis
3 Minuten auf 35® erwarmt, wfthrend im Brutschrank dazu
nicht weniger als 74 Stunden ndtig sind. Wenn wir sagen,
daB wir unsere (serologischen) Reaktionen im Brutschrank bei
37® anstellen, so ist das also nur teilweise richtig. Das Wasser-
bad ist in dieser Beziehung ein viel exakteres Instrument.

Der Apparat wird von der Firma F. & M. Lautenschlager
in Berlin zum Preise von Mk. 128,50 hergestellt Es empfiehlt
sich, die Fallung nicht mit Leitungswasser, sondern mit destil-
liertem vorzunehmen, um NiederschlBge zu vermeiden.

Nachdruch verboten,

Znr Frage der SpezlfitSt der Phyta^latinine.

Eine Antwort auf die Bemerkungen von
Dr. KHirschfeld (diese Zeitschrift, Bd. 10, Heft 1/2, p.281).

Von H. Baubltsohek, Czernowitz.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 10. Juli 1911.)

Ich hStte kaum Veranlassnng, ausMhrlicher auf die oben
zitierte Bemerkung Hirschfelds einzugehen, da diese offen*

1) sei bemerkt, dafi durchsichtige Wasserbader zuerst von Q. Meier
empfohlen worden sind. Jiingst hat auch P. Schmidt anen derartigen
Apparat konstruiert.

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Zur Frage der Bpezifitat der Phytagglutinine.

539

bar einer durchaus mifiverstandenen Auffassung meines Artikels
fiber ein ganz anderes Tbema (diese Zeitschrift, 6d. 9, p. 237)
ihre Entstehung verdankt. Denn in dieser Arbeit babe icb
nicbts anderes gezeigt, als daB sicb eine Diiferenz im Ver-
balten der einzelnen Erytbrocytenarten zu den verscbiedenen
Hfimagglutininen pflanzlicber Provenienz aucb dann geltend
macbt, wenn man zwei beliebige, aber diiferent wirksame
Agglutinine ffir eine Blutart durcb eine entsprecbende Ver-
dfinnung auf denseiben Titer einstellt. In dieser Versucbs-
anordnung gelingt es, die Menge des von einer Erythrocyten-
art verankerten Agglutinins zu bestimmen und festzustellen,
daB unter sonst gleicben Bedingungen die empfindlicbere
Blutart mebr Agglutinin zu verankern imstande ist als die
weniger empfindlicbere. Wenn Hirscbfeld demnacb seine
Bemerkung unter anderem in den Satz zusammenfaBt, daB es
nicbt erwiesen ist, daB die Phytagglutinine eine Vielheit ver-
scbiedener Agglutinine entbalten, die zu bestimmten Blut-
sorten besondere Affinitfiten baben, so bleibt mir nicbts anderes
fibrig, als ibm nabezulegen, sicb von der Wabrbeit dieser
Beobacbtung mit Hilfe der Malkoffscben Versucbsanordnung
(Deutsche med. Wochenschr., Bd. 26, 1900, p. 229) selbst zu
fiberzeugen. Wenn Hirscbfeld weiter meint, daB icb eine
allgemeine bessere mit einer elektiven Absorbierbar-
keit verwecbselt babe, so wfire dieser Irrtum ffir mich um so
bedauerlicher, als icb leider fiberhaupt nicbt in der Lage bin,
anzugeben, was Hirscbfeld darunter versteht, noch aucb
wfiBte, wo icb mich diesbezfiglich in der Literatur klar in-
formieren kdnnte.

Meine Beobacbtung, sowie die daraus gezogenen SchluB*
folgerungen zeigen eben, entgegen den frfiher publizierten Re-
sultaten von Hirscbfeld, daB eine allgemein geltende
Empfindlicbkeitsreihe der Blutsorten ffir die Hfimagglu*
tinine pflanzlicber Provenienz eben so wenig existiert, wie ffir die
Agglutinine des Normalserums, und aucb von anderen Seiten
konnte mehrfach nicbt die geringste diesbezfigliche Gesetz-
mfifiigkeit beobachtet werden. Ffihrt man fiberdies mit irgend-
einem pflanzlichen Hfimaggiutinin den oben erwSbnten Mal-
koffschen Versuch durcb, so muB man sehen, daB der Titer
wohl ffir die verwendete Blutart besonders stark abnimmt.

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540 Baubitschek, Zur Frage der Spezifitat der Phytagglutmine.

dafi aber auch der Agglutinationseffekt fttr andere Blutarten,
ohne irgendeine Gesetzm&fiigkeit erkennen zu lassen, verEndert
wird. Bei nochmaliger Absorption kann es gelingen, eine
FlQssigkeit zu erhalten, die auf die verwendete Blutart flber-
haupt nicht mehr agglutinierend wirkt, wohl aber in verschieden
starker Weise noch auf andere Blutarten. Ich kann mir diese
Tatsachen nicht anders plausibel erkl&ren als mit der An-
nahme, daB in den Phytagglutininen eine nicht anzugebende,
aber bestimmte Zahl verschiedener Agglutinine vorhanden
ist, von denen jedes einzelne die Eigenschaft hat, sich mit
sehr vielen verschiedenen Blutarten, aber in ungleichem Mafie,
zu verbinden und parallel damit diese zu agglutinieren. Wird
nun ein derartiges, ein Phytalbumin zusammensetzendes Ag¬
glutinin gemenge mit einem bestimmten Blut behandelt, so
wird dieses vorwiegend solche Agglutinine daraus absorbieren,
zu denen es eine betrachtliche AffinitBt besitzt, und daher
nimmt jede Blutart ein anders zusammengesetztes Gemenge
von Stoffen auf.

Fflr diese Annahme, die sich stark an Landsteiners
Anschauungen fiber die Hfimagglutinine des Normalserums
anlehnt, babe ich in meiner oben zitierten Arbeit neuerdings
Beweise experimenteller Natur finden kfinnen, deren Richtig-
keit durch die Bemerkung Hirschfelds um so weniger er-
schfittert werden kann, als er das Wesentliche meiner Arbeit
miBverstanden zu haben scheint. (Dasselbe ist fibrigens in
besonders hohem MaBe auch meinem in Tabelle IV meiner
Arbeit [p. 306] wiedergegebenen Versuch widerfahren, in dem
ich Ricin absichtlich auf zwei sehr different agglutinable
Blutarten [Schafblut und Hfihnerblut] gleichzeitig wirken lieB.
Warum gerade dieser Versuch im Rahmen meiner damaligen
Beweisffihrung ein wichtiges Moment abgibt, das zu erlfiutern
wfirde hier zu weit ffihren. DaB Hirschfeld den Versuch
selbst, seine Technik und die daraus gezogene SchluBfolgerung
nicht richtig auffaBt, zeigt am besten, daB er mir vorwirft, daB
ich die ungleiche Agglutinabilitllt des Hfihner- und Hammel-
blutes vernachlfissigt habe.)

Frommannwho Buchdruckcrei (Uerniann l^ohle) in Jena. — 35>56

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Zeitsclmltl Immtitglbrsiihiuie. Otiginala Bil HaS/B.

Naehdruck verboten.

[Aas dem Institute fUr gerichtliche Medizin der k. k. Universitat
Graz (Vorstaud: Prof. Dr. J. Krafter).]

Ueb«r Anaphylaxie gegen artglelches blntfremdes ElweiA.
Von Primarius Dozent Dr. Hertle und Prof. Dr. Hermaim PfeifRar.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 9. Mai 1911.)

Fflr den Sonderfall der Ueberempfindlichkeit haben zuerst
Kraus, Doerr und Sohma, dann And rejew durch ihre
Untersuchungen fiber das sensibilisierende Vermdgen des
Eiweifies von' Augenlinsen nachgewiesen, dafi dadurch eine
organspezifische Anaphylaxie erzielt werden kOnne und daB
nicht nur artfremde, sondern auch artgleiche, ja kdrpereigene
Linsen in demselben Sinne umstimmend auf die Reaktions-
ffihigkeit des Meerschweinchenorganismus wirken. Mit Hilfe
des exakteren Kriteriums des anaphjlaktischen Temperatur-
sturzes haben dann H. Pfeiffer und S. Mit a diese filteren
Erfahrungen bestfitigt, sie auf die Erythrocyten ausgedehnt
und zugleich unverkennbare Beziehungen einer organspezi-
fischen Linsenanaphylaxie zur allgemeinen artspezifischen Re-
aktion nachgewiesen, Angaben, die mittlerweile durch die
umfassenden und grfindlichen Versuchsreihen von Krusius
mit derselben Technik bestfitigt wurden. Weitere Versuche
von Dunbar und davon unabhfingige von H. Pfeiffer
haben ffir artfremde Geschlechtszellen, bezw. ffir die Spermato-
zoen gleichfalls die Entwicklung einer organspezifischen Ueber¬
empfindlichkeit sichergestellt. Mit demselben art-, ja korper-
eigenen Material hat frfiher schon v. Dungern eine spezi-
fische Spermatozoenanaphylaxie gegen Kaninchenspermatozoen
auf dem Wege der Cutanreaktion dargetan.

In den vorliegenden Versuchen haben wir uns in Konse-
quenz dieser filteren Erfahrungen die Frage gestellt, ob nicht
auch mit anderen artgleichem, aber blutfremdem
Material eine spezifische Ueberempfindlichkeit hervorgerufen

ZeiUchr. ImmuDiUitafonchaDg. Oiig. Bd. X. 36

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542

Hertle und Hermann Pfeiffer,

werden k5nne, und ferner — als wir hier zu einem positiven
Resultat gekommen waren — ob nicht, fihnlich mit den Ver-
suchen v. Dnngerns an Spermatozoen, eine Anaphylaxie
sich entwickle, wenn kdrpereigenes, blutfremdes Eiweifi
in grolier Menge zugrunde gebe.

Zu den ersten Versuchen wurden 50 Meerschweinchen
mit den Aufschwemmungen fein zerriebener Meerschweinchen-
organe vorbehandelt, die unter den von H. Pfeiffer anl&B>
lich seiner Arbeit fiber Spermatozoenanaphylaxie des nfiheren
ausgeffihrten nnd erprobten Kautelen zubereitet waren. Wir
legten auch diesmal sowohl ffir die Sensibilisierung als ffir
die Reinjektion besonderes Gewicht auf mfiglichste Reingewin-
nung des Zellmaterials, indem wir den fein zerriebenen Organ-
brei 3—6mal in der Zentrifuge mit immer neuen Mengen von
Kochsalzlfisung wuschen.

Die Sensibilisierung erfolgte intraperitoneal mit grofien
Mengen des Gewebsbreies. Als nach 3 Wochen durch Re¬
injektion einiger der vorbehandelten Tiere ein stfirkerer, an
der Temperaturreaktion gemessener Ausschlag im Vergleiche
zu den unvorbehandelten Tieren nicht erfolgte, wiederholten
wir die Antigeneinspritzung nochmals und nach einem mehr-
tfigigen Intervall neuerdings und liefien nun, in Erinnerung
an die von Doerr und seinen Mitarbeitern festgestellte Tat-
sache, daB bei schwachem Sensibilisierungsvermfigen eines
Antigens die Ueberempfindlichkeit erst nach dem 21. Tage
auftritt, 40 Tage bis zur Probeinjektion verstreichen. Sodann
wurde an gleichschweren unvorbehandelten Tieren das mehr-
mals gewaschene Antigen — dicke Aufschwemmung von
Nieren-, Hoden- und Nebennierengewebe — auf seine ihm
eignenden, temperaturherabsetzenden Eigenschaften in der
bekannten und oft erprobten Weise ausgewertet und diese
Werte mit jenen der vorbehandelten Tiere verglichen, bezw.
bei positivem Ausfall durch Abzug des von der Injektions-
flfissigkeit an sich ausgelfisten Shock, der „reduzierte Shock"
berechnet. Dieser war ausschlieBlich auf Kosten der Ueber¬
empfindlichkeit zu setzen, wie die nachtrfigliche Prfifung auf
Antianapbylaxie ergab.

Von unseren 50 Versuchstieren konnten wir nur die relativ
kleine Zahl von 28 Tieren der Tabelle I bis zur Probeinjekton

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Ueber Anaphylaxie g^en artgleiches blutfremdes EiMreifi. 543

am Leben erhalten. Die Tiere waren durchaus gesund, die
6 Kontrollen von gleichem Gewicht.

Tabelle I.

Anaphylaxie gegen arteigenes blutfremdes Eiwei6.

No

Sensibilisiert

Inter-

rall

Beinjektion

Tem-

peratur

Zeit

Shock

Bed.

Shock

1

Hoden

39 Tg.

4 ccm Niere

7

120

420

330

2

Nebenniere

dgl.

^ ff ff

24

300

3600

3 510

3

Niere

ff

4

^ ff ff

28

375

5250

5160

4

—

4

^ ff ff

4

45

90

0

5

Hoden

40 Tg.

^ ff ff

5

120

300

120

6

dgl.

4 „ Hoden

0

0

0

0

7

ff

4

’ ff ff

0

0

0

0

8

Nebenniere

ff

4 „ Niere

16

180

1440

1260

9

ff

4 „ Hoden

0

0

0

0

10

Galle

ff

4 „ Niere

25

270

3 377

3195

11

)>

ff

4 » ,,

27

270

3 645

3 465

12

JJ

ff

4 „ Hoden

0

0

0

0

13

}}

ff

4

^ ff ff

0

0

0

0

14

Niere

4 „ Niere

30

330

4950

4 770

15

ff

4 „ „

39

420

8190

8010

16

ff

4 „ ,

38

390

7 410

7 230

17

>>

ff

I. 4 ccm Hoden

2

120

120

0

11.4 „ Niere

40

420

8400

8220

18

! -

—

4 ccm Niere

6

60

180

0

19

—

—

4 „ Hoden

0

0

0

0

20

Galle

41 Tg.

4 „ Leber

13

240

1560

435

21

dgl.

I. 4 ccm Leber

3

60

90

6007

II. 4 „ Niere

33

375

6187

435

22

f}

ff

I. 4 ccm Leber

13

240

1560

0

II. 4 ., Niere

32

420

6720

6540

23

ff

ff

4 ccm Leber

3

60

90

0

24

ff

ff

4

4

60

120

0

25

Nebenniere

ff

2 „ G^e

7

90

315

75

26

ff

4ccm Nebenniere

0

0

0

0

27

>>

*f

4

* ff ff

0

0

0

0

28

ff

4 „ ,,

0

0

0

0

29

ff

ff

4 >j

0

0

0

0

30

^f

ff

I.4ccmNebenn.

0

0

0

0

II. 4 „ Niere

37

510

9435

9 255

31

Niere

ff

1.4 „ Nebenn.

3

120

180

0

11.4 „ Niere

53

540

14 310

14130

32

—

ff

4 ccm Leber

10

225

1125

0

33

—

ff

4 „ Galle

8

60

240

0

34

—

ft

4 „ Nebenniere

10

120

600

0

Sieht man bier von den einzelnen Reaktionen zunUchst
ab und betrachtet die in Tabelle II daraus berechneten Dnrch-
schnittswerte, so ergeben sich die folgenden Yerhaltnisse:

36*

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544

Hertle iind Hermann Pfeiffer,

TabeUe II.

Anaphylaxie gegen artgleiches blutfremdes Eiweifl.
(Uebersichtstabelle.)

V orbehandlung

Beinjektion

Zahld.F^e

MitUere Beaktion
(Bed. Shock)

Niere

Niere

6

7921

Nebenniere

3

4665

Hoden

jj

2

225

Galle

4

5284

Hoden

Hoden

4

0

Nebenniere

ff

1

0

Galle

Jf

2

0

Niere

ff

1

0

Keine

?»

Leber

0

GaUe

5

178

Eeine

jy

1125

Nebenniere

Nebenniere

5

0

Niere

yy

1

0

Keine

f?

600

Nach Abzug der toxischen Eigenwirkung der lojektions-
flfissigkeit auf die Kontrollen reagierten wiederholt mit Meer>
schweiochennieren vorbehandelte Tiere auf Meerschweinchen-
nieren mit 7921 E., also mit mittleren bis zu schweren Shocks.
Die Tiere waren am folgenden Tage vollkommen wieder her-
gestellt und reagierten bei der Prttfung auf Antianaphylaxie,
die nach 48 Stunden vorgenommen wurde, nur mit ganz
kleinen oder gar keinen AusschlUgen mehr.

Es kann demnach durch wiederholte Vor-
behaudlung mit Meerschweinchenniere ein Zn-
stand der Ueberempfindlicbkeit erzengt werden,
der wohl in Anbetracht ftlterer Erfahrnugen mit
artgleichen Angenlinsen und Spermatozoen auch
in Anbetracht der folgenden Antianaphylaxie
als echte NiereneiweiB-Anaphylaxie aufgefaOt
werden muB.

Wurden andere, mit Nebennieren, Hoden und Galle vom
Meerschweinchen wiederholt vorbehandelte Tiere mit Nieren-
emulsion gespritzt, so reagierten die erst- und letztgenannten
Versuchsgruppen gleichfalls wesentlich shirker, als die Normal-
tiere, die Hodentiere aber mit nur so geringen AnsschlSgeu,
daB von einer deutlich ausgesprochenen Ueberempfindlichkeit

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Ueber Anaphylaxie gegen artgleiches blutfremdes Eiweifi. 545

hier wohl nicht die Rede sein kann. Interessant ist in dieser
Hinsicht die starke Reaktion der Nebennieren- und Hodentiere,
die Dur um weniges hinter jener der Nierentiere zurfickblieb.

Es konnte demnach durch Vorbehandlung mit
verschiedenartigem Organeiweifi an der Reaktion
gegen Nierengewebe geprfift, eine Spezifitllt der
Empfindlichkeit nicht deutlich nachgewiesen
werden.

Wohl aber zeigen die Nierentiere, die, wie erwShnt, auf
Niereninjektion deutliche Erscheinungen der Ueberempfindlich-
keit darboten, iusofern ein unzweifelhaft ^organspezifisches^^
Verhalten ihrer Anaphylaxie, als sie gegen die Injektion von
Hoden- und Nebennierengewebe vollkommen refrakt&r waren.

Die PrQfnng der Hodentiere mit dem zur Vorbehandlung
verwendeten Material lieferte ein vollkommen negatives Er-
gebnis. Sie wurden dadurch ebensowenig gesch^digt wie die
Kontrollen. Auch Nebennieren- und Gallentiere reagierten
nicht.

Ueberraschend war das Resultat, als mit Meerschweinchen-
galle vorbehandelte Tiere mit Lebergewebe reinjiziert wurden.
Diese Injektionsflflssigkeit hatte in der Menge von 4 ccm ein
nicht unbetrftchtliches toxisches Eigenvermbgen, indem sie die
Temperatur der Kontrollen um 1,0® C w&hrend einer Zeit
von 226 Minuten herabsetzte, also einen Ausschlag von 1125 E.
lieferte. Von 5 Gallentieren reagierten 2 (No. 20 und 22) an-
nHhernd im Ausmafie der Kontrollen, drei andere aber wesent-
lich schwilcher mit 90, 90 und 120 E. Sie waren also weit
weniger empfindlich (ca. ^jg) als die Kontrolle. Wurden sie
aber 2 Stunden sp&ter mit Nierengewebe gespritzt, so reagierten
sie so stark wie mit Nierengewebe vorbehandelte Tiere auf
Niere.

Ganz gleichsinnig verliefen die Versuche an den Neben¬
nieren tieren No. 26—30. Die normale Kontrolle reagierte

X 120 _ vorbehandelten Tiere tiberhaupt nicht.

Als aber zwei der Tiere gegen Nierengewebe geprfift wurden,
gaben sie 9435 und 14310 E.!

Es ist nicht leicht, diese eigentflmliche Unempfindlichkeit
der Tiere gegen das organgleiche und artgleiche Antigen der

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546

Hertle imd Hermann Pfeiffer,

Vorbehandlang bei voller Ueberempfindlichkeit gegen das
organfremde und artgleiche Eiweifi zu erkl^en. Mdglich w&re
vielleicht die folgende, mit allem Vorbehalt gegebeoe, keines-
wegs erwiesene Deutung, die dabei auf die wiederholten In-
jektionen zur Sensibilisierang rekurriert. Bei organspezifischen
ImmunitS.tsreaktionen wird die Spezifit&t bedingt durch das
Ueberwiegen der auf das OrganeiweiB eingestellten Partial-
ambozeptoren Uber die artspezifischen. Das bat sich ffir das
Beispiel der Ueberempfindlichkeit dem einen von uns und
Krusius bei der Augenlinsenanaphylaxie und ebenso bei der
Spermatozoenanaphylaxie erwiesen. Wird nun in einen der-
artigen, mit einer grofien Zahl organspezifischer, einer kleineren
Zabl artspezifischer Immunprodukte beladenen Organismus
nach der ersten Injektion, wie es bier gescbeben ist, neuerlicb
das durcb Wascben gereinigte Zellmaterial der Vorbebandlung
injiziert, so erbalt er dabei groBe Mengen nach dem Organ,
sehr kleine Mengen nach der Art differenzierter EiweiBkfirper.
Beide reagieren nun miteinander und die Immunprodukte
verschwinden aus dem Kreislaufe. Dabei braucht es zu keinem
klinisch nachweisbaren Shock zu kommen, was auch in unseren
Beobachtungsreihen nicht der Fall war. Nun ist es aber
eine wiederholt von H. Pfeiffer gemachte Erfahrung, daB
nach sehr kompakten Antigendosen das refraktSxe Stadium
IBnger anh&lt, als nach kleinen. Hier wurden nun groBe
Mengen organspezifischer, kleine Mengen artspezifisch differen¬
zierter EiweiBkdrper gegeben, und es w&re denkbar, daB dem-
entsprechend beide Partialanaphylaxien — organ- und art-
spezifische — auch zu verschiedenen Zeiten auftreten, im
konkreten Falle die erstere spgter als die letztere. Solche
Tiere mQBten dann, was dem hier beobachteten Verhalten
entspricht, zu einem gegebenen Zeitpunkte gegen das Zell-
eiweiB der Vorbebandlung refraktfir, ja antianaphylaktisch sein,
wenn bei der zweiten Injektion Immunkdrperverbrauch im
Tiere erfolgt ist, konnten aber daneben gegen anderes art-
gleiches, aber nicht organgleiches EiweiB schon in das Stadium
der Ueberempfindlichkeit eingetreten sein. Efifekt: Voile Re-
aktionsMigkeit gegen Nierengewebe, Unterempfindlichkeit
gegen Nebennieren- bezw. Lebergewebe.

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Ueber Anaphylaxie g^en artgldches blutfremdes EiweiS. 547

Von den mit verschiedenen arteigenen Organ-
emulsionen vorbehandelten Tieren erwiesen sich
gegen dasEiweifi der ersten Inj ektion ausschliefi-
lich die Nierentiere dberempfindlich.

FQr verschiedene weitere klinische Fragestellungen war
es weiterhin von Bedeutung, festzustellen, ob denn, wenn im
Tierkdrper kdrpereigenes, aber blutfremdes Zell-
material zugrunde geht, Ueberempfindlichkeit besteht. Um
das zu untersuchen, wurde bei 4 Meerschweinchen mittels
Lumbalschnitt eine Niere aufgesucht, die Gefdfie ligiert, das
Organ zerquetscht oder mehrfach eingeschnitten und reponiert.
Die Tiere vertrugen diesen Eingriif ausgezeichnet, die Opera-
tionswunde heilte per primam. 30 Tage nach der einseitigen
Nierenzertrfimmernng erhielten die Tiere und 2 normale Kon-
trollen je 4 ccm einer wiederholt gewaschenen Nierenemulsion.
Bei Versuchen mit Nierengewebe ist es dringend zu fordern,
daC die Organemulsion wiederholt mit neuen Mengen von
Kochsalzlosung gewaschen wird. Denn ungewaschenes Material
duBert Starke toxische (und temperaturherabsetzende) Wir-
kungen auch auf das unvorbehandelte Meerschweinchen, die
dem Zelleiweifi nicht anhaften und, wie gesagt, durch das
wiederholte Waschen fflr die Kontrollen v611ig oder fast vbllig
entfernt warden kdnnen.

Eine derart bereitete Emulsion schddigte zwei gleich-
schwere normale Versuchstiere im AusmaBe von 87 und 157 E.,
also in einem Mittelwerte von 122 E. Die durch Nierenzer-
trflmmerung vorbehandelten Tiere hingegen lieferten unter
recht betr&chtlichen und typischen Erankheitserscheinungen
Shocks, welche die Kontrollen um das 10-fache und mehr noch
tibertrafen. Flir die einzelnen Tiere sind nach Abzug der
toxischen Eigenwirkung des Injektionsmateriales die berech-
neten reduzierten Shocks in der letzten Eolonne der Tabelle III
angegeben (siehe p. 548).

Die Tiere wurden nach Vornahme der Versuche getOtet.
Die operierte Niere war in eine groBe, blasse, mit Kalkkon-
krementen dnrchsetzte und von Bindegewebe eingehtlllte
Masse umgewandelt, die andere Niere gesund und deutlich
hypertrophisch.

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548

Hertle und Hermann Pfeiffer,
Tabdle III.

Anaphylaxie nach Organzertrummerung.

No.

Gewicht

Vor¬

behandlung

Inter¬

val!

Injektion

Temp. 1

Zeit

Shock

Bed.

Shock

1

M.

450

Nieren-

zertriimmerung

30 Tage|

4 ocm Nieren E.

13

615

1073

951

2

M.

370

dgl.

dgl.

dgl.

15

40

300

188

3

M.

395

>>

11

11

15

150

1125

1003

4

M.

336

11

11

21

180

1890

1778

5

M.

372

11

11

5

35

87

6

M.

410

—

11

11

7

45

157

7*)

E.

2415

Nieren-

zertrummerung

11

10 ccm Hoden E.

32

510

8160

6360

8')

E.

1440

—

11

dgl.

12

300

1800

Es kann demnach fttr den Fall der Zertrttm-
meruDg einer Niere fflr das Meerschweinchen
ausgesagt werden, dall dadurch einer Reinjektion
von Nierengewebe gegeniiber recht betr^lchtliche
Grade von Ueberempfindlichkeit ausgelost
werden.

Parallel gerichtete Versuche am Kaninchen verliefen in
3 Fallen vollst&ndig negativ. Die einseitig operierten Tiere
reagierten auf die Injektion von Kaninchenniere nur im Aus-
malle der normalen Kontrollen. Eines der Tiere aber, das in
der Tabelle mit No. 7 bezeichnete Versuchstier, erkrankte
wesentlich (7mal) stArker als das halb so leichte normals
Kontrolltier. Aehnliche Versnche an Kaninchenbbcken, durch
einseitige oder doppelseitige ZertrQmmernng der eigenen
Hoden und Reposition, um Ueberempfindlichkeit gegen Re-
injektion von Hodengewebe zu erzielen, verliefen gleichfalls
resultatlos, weshalb dieser allgemeine Hinweis gentlgt

Nach dem Abschlusse des experimentellen Teiles dieser
Arbeit lasen wir eine vorl&ufige Mitteilung von E. Abder-
balden, daH es ihm mit Hilfe der optischen Methods ge-
lungen sei, durch Vorbehandlung mit blutfremdem, artgleichem
EiweiB das Auftreten proteolytischer Ferments im Serum der

1) Neben diesen 2 poeitiven 3 negative Nieren- und 1 n^atirer Hoden-
versuch.

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Ueber Aoaphylazie gegen artgleiches blutfremdes Eiweifi. 549

Versachstiere festzustelleD, welche das Antigen in vitro zn
spalten vermochten. Dieses Ergebnis deckt sich vdllig mit
den positiven der hier wiedergegebenen Erfahrungen. Es ist
mdglich, dafi bei der feineren optischen Methodik hfiufigere
und st&rkere Ausschl&ge erhalten werden kdnnen als im Tier-
versuche.

Zusammenfassung.

1) Es gelingt durch wiederholte Vorbehandlung von Meer-
schweinchen mit Meerschweinchenniere damit eine Ueber-
empfindlichkeit gegen die Reinjektion von Meerschweinchen¬
niere zu erzeugen.

2) Wiederholt mit Nebenniere und Hoden von Meer-
schweinchen vorbehandelte Meerschweinchen erwiesen sich
nach einem Zeitranme von 40 Tagen gleichfalls, wenn auch
nicht in so starkem Ausmafie ttberempfindlich gegen Nieren-
gewebe, nicht aber gegen die Reinjektion vom ZelleiweiB der
Vorbehandlung.

3) Durch Zertrflmmerung einer Niere des Meerschwein-
chens, nicht aber des Kaninchens, und Reposition des Gewebes
gelang es durch Wiedereinspritzung von artgleicher Nieren-
emnlsion betrSchtliche Grade von Ueberempfindlichkeit nach-
zuweisen.

Llteratur.

Abderhalden, E., Freund, R, und Pinkussohn, L., Praktische
Ergebnisse der Geburtshilfe und Gjnkkologie^ 1910, 11. Jahrgang.
Andre jew, Arb. a. d. Eaiserl. Ges., Bd. 30, 1909, Heft 2.

Dunbar, W. P., Zeitschr. f. Inununitataf., Bd. 7, Heft 4.
y. Dungern, Munch, med. Wochenschr., 1909, No. 35.

Kraus, Doerr und Sohma, Wien. klin. Wochenschr., 1906, No. 28 u. 30.
Erusius, F., Arch. f. Augeiiheilkunde, Bd. 67, 1910, Heft 1.

Mit a, 8., Zdtschr. f. Immunitatsf., Bd. 5, Heft 3.

Pfeiffer, H., Zeitschr. f. Immunitatsi, 8, Heft 3.

Pfeiffer, H., und Mita, 8., Zdtschr. f. Immunitatsf., Bd. 4, Heft 4;
Bd. 6, Heft 5.

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550

Hermann Pfeiffer,

Nachdruck verboten,

[Aas dem Institute fur geiichtliche Medizin der £. K. Universit^t
Graz (Vorstand: Prof. Dr. Julius Kratter).]

Weitere Beltrftge znr Eenntnls der Ueberempfindlichkeit
and anderer Toxlkosen des akaten, parenteralen Eiwelfi>

zerfalls ^).

Von Prof. Dr. Hermann Pfeiffer.

Mit 11 Figuren im Text.

(Eingegangen bei der Redaktion am 9. Mai 1911.)

L Einleitung.

Unsere Kenntnis fiber das Wesen der Ueberempfindlich-
keit hat in den letzten zwei Jahren insbesondere durch zwei
Arbeitsrichtungen eine wesentliche Fdrderung und Kl&rung
erfahren, und zwar durch die von Do err und seinen Mit-
arbeitern begrOndete quantitative Arbeitsmethode in vivo, und
dann durch die von Friedberger und H. Pfeiffer aus
verschiedener Fragestellung heraus und in verschiedener Ver-
suchsanordnung durchgefiihrte Verlegung des Prozesses in
das Reagenzglas. Die erstgenannte Arbeitsrichtung hat uns
dank der Arbeiten von Friedberger, Doerr und ihren
Mitarbeitern trotz der heute wohl endgflltig zurflckgewiesenen
Widersprfiche von R. Kraus das Phanomen der Ueber¬
empfindlichkeit als eine in vivo erfolgende Eiweill-Antieiweifi-
reaktion unter wesentlicher Mitbeteiligung des Eomplementes
kennen gelehrt. E. Friedbergers zum erstenmale syste-
matisch durchgefiihrte und klassische Versuche fiber sein „Ana-
phylatoxin*^ haben dann gezeigt, wie durch die Einwirkung
des lmmunk5rpers auf sein zugehdriges Antigen unter Zu-
tritt des Komplementes aus an sich ungiftigen Muttersub-
stanzen ein Gift entsteht, welches in vivo die Erscheinungen
des anaphylaktischen Todes bewirkt. Auch in diesem Punkte
milssen die Versuche von Biedl und Kraus, die Stich-

1) Ausgefiihrt mit UnterstiitzuDg der K. Akademie der Wiasen-
schafteu in Wien, aus dem Legate Wedl.

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Weitere Beitr^e zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. 551

haltigkeit seiner Befunde zn entkrUften, als vollst&ndig ge-
scheitert angesehen werden. AuBerdem sei hier mit allera
Nachdrucke betont, dafi Verfasser aus den Weicbardtschen
Versnchen mit Syncytialzellen- and PolleneiweiB seine Priorit&t
in der Frage der Anaphylatoxinbildung gegenflber E. Fried-
berger nicht ableiten kann. Sie berechtigten im besten Falle
hbchstens zu Vermutnngen in dieser Richtnng zu einer Zeit,
wo das ganze Problem der Eiwei&anaphylaxie noch vollstiindig
im Dunklen lag. Die Priorit&t mufi vielmehr unzweifelhaft
jenem Forscher aof einem Gebiete zuerkannt werden, welcher
zuerst mit exakter Technik exakte Beweise fQr eine Tatsache
zu erbringen vermochte. Und da steht es aufier Zweifel, daB
dieses Verdienst E. Friedberger zugerechnet werden muB.

Nachdem endlich durch E. Abderhalden and seine
Schule mit Hilfe der optischen Methode an anderen Bei>
spielen gezeigt worden war, daB durch die parenterale Zu-
fuhr der differentesten Stoffe im Tierorganismus Reaktions-
produkte auftreten, welche diese im Sinne des fermentativen
Abbaues abzubauen vermSgen, wurde fflr den Sonderfall
der EiweiBanaphylaxie des Meerschweinchens von H. Pfeiffer
in Gemeinschaft mit S. Mita der Beweis erbracht, daB die
Krankheitserscheinungen bedingt sind durch den fermentativen
Abbau des eingefflhrten Antigens (wahrscheinlich auch des
EiweiBes des Versuchstieres). Daran, daB diese Versuche tat-
sSchlich den Beweis des Entstehens von Abbauprodukten von
Peptoncharakter in Gemischen von Seren anaphylaktischer
Meerschweinchen mit dem Antigen der Vorbehandlung in
spezifischer Weise erbracht haben, muB ich heute trotz der auf
vermeidbare Fehler bei der EnteiweiBung zurhckzufQhrenden
Einwendungen von F. Schenk festhalten. Ich muB betonen,
daB bei den von uns gewBhlten kleinen Versuchsmengen es
in Hunderten von Kontrollen regelmIUlig gelang, vollkommen
abiurete FlQssigkeiten nach der EnteiweiBung zu erlangen,
wBhrend regelmBBig von anaphylaktischen Seren, noch inten-
siver von antianaphylaktischen Seren 4—6 Tage nach der
zweiten Injektion und dem zugehdrigen Antigen intensive
Biuretreaktionen erhalten warden. Auch in neuen Versuchs-
reihen bin ich zu vbllig gleichartigen and eindeutigen Er-
gebnissen gekommen, verweise iibrigens auch auf die gleich-

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552

Hermann Pfeiffer,

zeitigen Erfahrangen von E. Abderhalden und Pinkus-
sohn, sowie auf die bestHtigenden Resoltate von E. Fried-
be r ger. Die Erstgenannten haben auf ganz anderen, vielleicht
exakteren und weniger Uebung erfordernden Versuchswegen
(optische Metbode, Digerierung der Gemische und ihre Dialyse)
gleichfalls einen Abbau in vitro mit voller Sicherheit erh&rten
kdnnen.

Durch diese Trias von Beweisen, die Identifizierung des
anaphylaktischen ReaktionskQrpers mit dem Immunkdrper, die
Entstehung eines Giftes in vitro durch Hinzutritt des Kom-
plementes zur Verbindung EiweiB-Antieiweifi, und das spezi-
fische, proteolytische Abbauvermdgen der Seren anaphylakti-
scher Meerschweinchen dem Antigen der Vorbehandlung gegen-
fiber, war es znm erstenmale sichergestellt, dafi wir in der
Erscheinung der Anaphylaxie nichts anderes vor uns haben
als eine, parenteral sich abspielende, unter dem Freiwerden
von Giften einhergehende Eiweiiiverdauung, die gerade durch
ihre Lokalisation in der Blutbahn von den deletflren Folge-
erscheinungen des anaphylaktischen Shocks gefolgt ist.

Bevor ich auf die in der vorliegenden Arbeit mitgeteilten
Versuche zu sprechen komme, ist es aber zu ihrem Ver-
stUndnis absolut notwendig, in aller Kdrze auf Versnchs-
ergebnisse zurfickzukommen, die schon vor 8 Jahren beim
Studium scheinbar fernab liegender Erkrankungen, des Ver-
brflhungstodes und der Urfimie, erhalten wurden und seither
fast v511ig unbeachtet geblieben sind^*

Eiu Eingehen auf die einschlEgige Literatur darf ich wohl
vermeiden. Betonen mdchte ich nur, dafi schon von ver-
schiedener Seite das Auftreten giftiger Produkte im Kdrper
von Verbrannten beobachtet wurde. Freilich haben diese von
seiten ihrer Beobachter die verschiedenartigste Beurteilung
erfahren. Kein Wunder, wenn ihre Arbeiten, die ohne die
notwendigsten Kontrollen durchgeftibrt wurden, und die darauf
sich aufbauenden Autointoxikationshypothesen nichts Ueber-

1) Es sei hervorgehoben, dafi ich mich hier nur auf die Wiedergabe
prinzipiell wichtiger Tatsachen beschranken werde. Hinsichtlich der experi*
mentellen Belege verweise ich auf meine 1905 in Virchows Archiv und
1905—1907 in der Zeitschrift fiir Hygiene und Infektionskrankheiten er-
schienenen Arbeiten.

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Weitere Beitr^ zur Kenntnis der UeberempfindUchkeit etc. 553

zeugendes an sich hatten. So wurden immer wieder Stimmen
laut, welche dieses Utiologische Moment leugneten, und auf
die Wichtigkeit anderer Faktoren — so namentlich der Blut-
sch&digung and des Shocks — hinwiesen.

Als ich Tor 8 Jahren an eine experimentelle Bearbeitnng
der Aetiologie des Todes nach ausgedehnten Verbrennungen
herantrat, prQfte ich zun^chst die Angaben der Autoren anf
ihre Stichhaltigkeit. Dabei bestHtigen sich mir Beobachtungen,
die Reiss fiber das Ansteigen der ToxizitUt des Harnes Ver-
brannter gemacht hat. In alien Versnchen wurden meine
Tiere — 90 kr&ftige, erwachsene Kaninchen, 3 Meerschweinchen
nnd ein Hund — wShrend eines Zeitrauines von hdchstens
90 Sekunden fiber einen grofien Teil ihrer Kdrperoberflfiche
mit siedendem Wasser in tiefer Narkose verbrfiht. Nach dem
Eingriff wurden die Erankheitserscheinungen geprfift, Harn
und Serum nach spfiter zu erorternden Gesichtspunkten unter-
socht und endlich nach dem Tode der Tiere auch die patho-
logisch-anatomischen und histologischen Verfinderungen ge-
nanestens beobachtet.

Die Kr ankheitserscheinungen des Kaninchens
waren folgende:

Sofort nach dem Eingriff kam es zu Hfimoglobinfimie und
Methfimoglobinurie, also zu Symptomen der erfolgten Blut-
schfidigung, die wohl ausnahmslos vorhanden, in vielen FSllen
aber recht geringgradig ausgesprochen waren.

Nach der 24. Stunde verschwanden sie ausnahmslos
aus dem Krankheitsbilde. Nun kam es zum Auftreten pro¬
fuser, sich immer steigernder Diarrhden, die bis zum Tode
der Tiere anhielten. Die Symptome von seiten des Zentral-
nervensystems sind beim Kaninchen recht vage und unaus-
gesprochene, bestehen in Somnolenz, oft auch in terminaler
Reflexsteigerung. Es fehlt hier das vom Menschen und Hunde
her so bekannte terminale Erbrechen.

Wie ich einer spfiteren Arbeit von H els ted entnehme,
tritt bei verbrfihten Kaninchen, und zwar zu einer Zeit, wo
von Kollapsteroperaturen nicht die Rede sein kann, ein aus-
giebiges Absinken der Kdrpertemperatur urn mehrere Grade
ein, das, allmfihlich bis zum Tode der Tiere zunehmend, oft
ganz exorbitante Grade erreicht.

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554

Hermann Pfeiffer,

Die pathologisch-anatomischeD Ver&Dderangen
waren, von den Ver&nderungen der VerbrQhungsstelle und
der Blutsch&digung abgesehen, in den rasch tddlich ver-
laufenden Fallen negative. Dagegen fanden sich bei l&ngerem
Ueberleben auBerordentlich charakteristische und regelmSJiig
zu erhebende schwere Sch&digungen an der Schleimhaut des
Magendarmtraktes. Es fanden sich bier neben den Erschei-
nungen einer Gastroenteritis, namentlich aber im Magen loka-
lisiert, zahllose ekchymotische Geschwiirsbildungen. Diese Ver-
gnderungen sind beim Kaninchen im Gegensatze zum Menschen
ein regelmtlBig wiederkehrender Befund. AuBer ihnen traf
ich bier auch immer mehr minder schwere fettige Oder
parenchymat5se Degenerationen der Nieren, der Leber und
des Herzmuskels an.

So viel fiber die auatomischen Tatsachen. Der Grund-
versuch non, dessen weitere Analyse mich zum Beweise
des Vorliegens einer Aotointoxikation beim Verbrfibungstode
bracbte, ist der folgende.

Brachte ich weiBen Mtiusen^) subkutan den Harn
Oder das Serum von verbrtthten Kaninchen in der Menge von
1,0—0,25 ccm ein, so zeigten die Tiere am Orte der Ein-.
wirkung keinerlei Verfinderung. Dagegen erkrankten sie kurze
Zeit darauf unter Etablierung eines auBerordentlich typischen
Symptomenkomplexes von seiten des Zentralnervensystems.
Es treten nflmlich charakteristische tonisch-klonische Krampf-
anf&lle auf, die durch Beriibren oder Kneifen der Tiere will-
kflrlich hervorgerufen werden kSnnen, sich immer mehr hHufen
und endlich zu einem rauschahnlichen Zustandsbilde fuhren,
in welchem die Tiere wie betrunken bin und her taumeln.
Nach lang hingestreckter Agone erfoigt dann der Tod unter
Entwicklung des Cheyne-Stokesschen Atmungstypus.

Anders die Meerschweinchen! Sie verhalten sich
gegen die toxische Allgemeinwirkung ungleich torpider, er-

1) Die so charakteristische Korpertemperatur der Tiere wurde damals
noch nicht rerfolgt. Ygl. dazu die spater mitzuteilenden Ergebnisse am
Anaphylaxie- und Normalham, aus denen hervorgeht, dali im Zentnim
des Vergiftungsbildes beim Meerschwdnchen sowohl wie bei der Maus ein
Temperaturabfall steht, nach dessen Ausmafi dann auch die anderen
Symptome in die Erscheinung treten.

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Weitere Beitr^e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 555

kranken auch nur unter ganz uncharakteristischen Erankheits-
symptomen, dagegen entwickelt sich auch am Injektionsorte
eine schwere Nekrose. Die zunderartig-morsche Epidermis
nekrotisiert scbon mehrere Stunden nach der Einbringung;
sie verwandelt sich im weiteren Verlaufe, ohne daC es zu
einer Abszefibildung kommen whrde, in einen derben, leder-
artig-trockenen Schorf, der sich dann unter Hinterlassung
eines tiefgreifenden, schdn granulierenden Geschwtlres ab-
st56t. Nach einigen Wochen ist der Lokaleffekt zu einer
glatten, strahiigen Narbe verheilt.

So oft ich an Stelle dieses Materiales von verbrChten
Tieren in denselben Versuchsmengen jenes von gesunden zur
Kontrolle heranzog, so konnte ich, das Kriterium des akuten
und typischen Mfiusetodes und jenes der Nekrosenbildung am
Meerschweinchen verwendend, doch niemals irgend einen toxi-
schen Elfekt wahrnehmen.

Ich muOte aber auch konstatieren, dafi keineswegs jedes
Serum und jeder Harn meiner Versuchstiere die genannten
Giftwirkungen zu ftufiern vermochte. Vielmehr wurde neben
hochtoxischem Material auch solches angetrofPen, welches voll-
kommen oder doch relativ ungiftig war. Da ich fiber 90 ein-
schlfigige Ffille verffigte, konnte ich den dabei aufgedeckten
Verhfiltnissen kurvenmfiBigen Ausdruck geben. Die so kon-
struierte Kurve zeigte, dad die prozentuelle Zahl
giftiger Harne innerhalb der ersten 24 Stunden
rasch ansteigt, um die genannte Stunde ihren Hdhepunkt
erreicht, nachher aber nicht unbetrachtlich wieder
abffillt. Anders das Serum! Hier steigt diS pro¬
zentuelle Zahl toxischen Materials allmfihlich
und gleichmadig bis zum Tode an.

Der erwfihnte Grundversuch mit seinen Kontrollen ge-
stattete zunfichst nur den Schlufi, dafi es im Harne und Serum
verbrfihter Kaninchen zum Auftreten von Kfirpern kommt,
die vor der Verbrfihung innerhalb der eingehaltenen Grenzen
nicht im Tierexperimente nachzuweisen waren und auf Mans
und Meerschweinchen in ganz verschiedener und dabei spezi-
fischer Weise giftig wirken. Darfiber, ob diese Kfirper auch
eine fitiologische Bedeutung ffir das Zustandekommen des

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556

Hermann Pfeiffer,

VerbrQhuQgstodes besitzen, durfte daraus ein Schlufi noch
nicht gezogen werden.

Sollte sich eine solche Vermutung zum Beweise erh&rten
lassen, so mufiten zuerst folgende zwei Tatsachen experi-
mentell festgelegt sein: 1) Dafi der im Harn and Serum auf-
tretende Giftkdrper tatsHchlich auch an der Species des Gift-
produzenten selbst als Gift sich erweise, and dafi 2) das Gift
in solcher Menge zur Beobachtong komme, dafi daraus eine
letale oder doch schwere Schfidigung des verbrQhten Tieres
abgeleitet werden konnte.

Der erste Beweis konnte fur die nekrotisierende Wirkung
jedesmal leicht und einwandfrei erbracht werden. Es zeigte
sich nfimlich, dafi nekrotisiereud wirkender Harn auch beim
Kanincben, also bei dem Giftproduzenten, dieselbe Giftwirkung
hufierte wie beim Meerschweinchen.

Schwieriger gestaltete sich das hinsichtlich der allgemein
toxischen Wirkung, da hier die im Mhuseversuche vorhandene
Grbfiendifferenz und die Empfindlichkeitsunterschiede zwischen
Kaninchen und Mans in Wegfall kamen. Dennoch gelang es
auch hier wiederholt, junge Tiere durch den giftigen Harn
verbrflhter Tiere teils durch intraperitoneale, teils durch intra-
venose Injektion akut zu tdten. Ebenso konnte fhr den Harn
von verbrflhten Meerschweinchen der Beweis erbracht werden,
dafi er sowohl hinsichtlich seiner allgemeintoxischen, als seiner
lokal yrirksamen Eigenschaften die Species des Giftproduzenten
selbst in derselben Weise zu schhdigen vermdge.

Was den zweiten Beweis anlangt, so setzte dieser eine
Mefibarkeit des in Rede stehenden Giftkdrpers voraus. Da, wie
aus spater zu erw&hnenden Versuchen klar werden wird, fOr
den letalen Ausgang einer mit Verbrennungsmaterial gesetzten
Vergiftung die lokal wirkende Komponente, von der Nieren-
schhdiguug abgesehen, belanglos ist, so konnte ich mir daran
geniigen lassen, eine brauchbare Gifteinheit fhr die allgemein
toxische Wirkung auf die Mans festzusetzen.

Nun konnte daran gegangen werden, zu untersuchen:

1) Wie denn bei einem und demselben Tiere das Auf-
treten der ToxiziUt im Harn und Serum vor sich gehe und
' dann 2) wie grofi die Menge des nach der Verbrflhung be-
obachtetcn Giftes sei. Was die erste Frage betrifiFt, so steigt

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 557

auch im Einzelfalle sehr rasch nach dem Eingriffe die Toxizit&t
des Harnes enorm an, fgllt aber nach der 24. Stunde regel-
mSfiig und intensiv bis zum Tode. Im Serum dagegen steigt
die ToxizitM viel langsamer. dafttr aber konstant bis zum
Tode des Tieres an, so zwar, daB terminal eine Kurvenkreuzung
stattfindet, d. h. also, dafi terminal die Toxizit^lt des Serums
jene des gleichzeitig sezernierten Harnes Qbertrifft.

In betreflF der nach der Verbrflhung auftretenden Gift-
mengen konnte tatsBchlich fiir eine grofie Gruppe meiner
Versuchstiere auf dem Umwege fiber den Mfiuseversuch und
unter Berficksichtigung der Empfindlichkeitsverhfiltnisse des
Kaninchens der Beweis erbracht werden, dafi der Giftproduzent
durch diese Mengen eine letale Oder doch eine schwere
Schfidigung erfahren haben mufite. Es mnfi aber auch betont
werden, dafi neben Ffillen, in denen der rechnerische Beweis
gelang, auch solche zur Beobachtung kamen, in denen dies
nicht mdglich war.

Durch die oben angeffihrte Trias von Beweisen, und zwar
durch den Beweis des Auftretens eines Giftes im Harne und
Serum der Tiere, durch den Beweis ihrer Wirksamkeit auf
den Giftproduzenten und endlich durch die Mengenbestimmung
des Giftes gelang es also ffir eine ganz bestimmte Gruppe
meiner Versuchstiere auch exakt, die fitiologische Bedeutung
der Autointoxikation zu erhSrten.

Weitere Versuche galten der biologischen Gharakterisierung
des in Rede stehenden Giftkdrpers. Es sei nur hervorgeboben,
dafi z. B. die Toxizitfit des Harnes nicht zusammenbfingt mit
der Konzentration seiner Salze, nicht mit seiner alkalischen
Oder sauren Reaktion, nicht mit seinem Eiweifi- Oder HSmo-
globingehalte. Vielmehr handelt es sich bei diesem Gifte um
einen Kfirper, dessen beide Komponenten voneinander vfillig
unabhfingig sind, die isoliert voneinander im Harn biologisch
nachweisbar werden und ebenso isoliert zerstdrt werden
konnen. Besonders betont soli werden, dafi auch noch so
hochgradig toxisches Material, welches die Cutis des Meer-
schweinchens, innerhalb weniger Stunden vollkommen zerstdrte,
doch niemals irgeudeine lokale Wirkung auf die Erythrocyten
irgendeiner der untersuchten Tierarten erkennen liefi, selbst
dann nicht, wenn mit den gebrSucblichen komplettierenden

Zeitschr. f. ImmunlthUfortchanf. Orig. Bd. X. 37

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558

Hermann Pfeiffer^

Substanzen eine Aktivierung versucht wurde. Es macht einen
ganz eigenttlmlichen Eindruck, wenn man wahrnimmt, wie
die so labilen Formelemente des Blutes von einem K5rper
in keiner Weise angegriffen zu werden verm5gen, der die
resistenten Zellen der Cutis so energisch zerstdrt.

Es tauchten nun folgende Fragen auf: Handelt es sich
bei dem beobachteten Giftkdrper urn eine Substanz, die etwas
dem normalen Organismus Fremdes darstellt, Oder handelt es
sich um die einfache Retention eines normalerweise schon in
Spuren den Organismus passierenden Giftes, oder handelt es
sich endlich um die Ueberproduktion und eine damit zu-
sammenh&ngende Retention eines solchen Giftes. Die Frage 2,
die sich ja in ihrem Prinzipe auf das Vorliegen einer reinen
Retentionsur&mie zugespitzt h&tte, mullte schon von vornherein
im Hinblicke auf die quantitativen Verhfiltnisse zurQckgewiesen
werden. Eine einfache Retention eines toxischen Prinzipes
war bei dem gleichzeitigen Ansteigen der Toxizit&t von Harn
und Serum nicht mdglich.

Anders und schwieriger lag die Entscheidung zwischen
den beiden anderen Fragen. Sie konnte nur auf Grund ge-
nauer Kenntnis der normalen Verh&ltnisse geffillt werden.
Denn wenn auch die eingangs erwShnten Kontrollversuche
mit normalem Kaninchen- und Meerschweinchenserum und
Harn gelehrt batten, daB innerhalb der gebr&uchlichen Ver-
suchsmengen eine toxische Wirkung (akuter Mtiusetod, Nekrose
am Meerschweinchen) niemals beobachtet werden konnte, so
war es immerhin mdglich, dafi entweder durch Verwendung
grdBerer Versuchsmengen oder durch schonende Einengung
des Materiales im Vakuum eine identische Giftwirkung h&tte
beobachtet werden kdnnen.

Was zunfichst das Serum anlangt, so war es ja schon
lange Zeit bekannt, daB auch die Seren unserer gewohnlichen
Versuchstiere, anderen Species eingebracht, als Gifte zu wirken
vermdgen. Diese Tatsache hat auf dem Breslauer Natur-
forschertage Uhlenhuth veranlaBt, allerdings hjpothetisch,
gegen meine VerbrQhungsresultate den Einwand zu erheben,
daB sie vielleicht auf diese Fehlerquelle zurtlckgefflhrt werden
miissen. Ich konnte diese Einwtbide schon damals, und zwar
im Hinblick auf die Kontrollen und auf die Tatsache zurhek-

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Weitere Beitr^e znr Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 559

weisen, dafi ja der in Rede stehende Kdrper anch auf die
artgleicbe Species giftig wirke. Dennoch babe icb ansgedebnte
Untersncbungen fiber die Giftwirkung beterologer normaler
Tierseren angestellt, Versnche, von denen bier nur das Wesent-
licbste bervorgeboben sei.

Es zeigte sicb, da£ die in ibrer Erscbeinungsform aller-
dings fiberrascbend fibnlicbe Giftwirkung beterologer Normal-
seren parallel gebt mit ibrem bfimoljtiscben Vermfigen einer
bestimmten Tierart gegenfiber. Sie vermag nur gegen jene
artfremde Species zu wirken, deren Erytbrocjten sie aucb
anzngreifen vermag und das erzengte Krankbeitsbild deckt
sicb mit jenem einer intensiven H&molysinwirkung. Das im
Verbrfibungsserum nacbgewiesene Gift bingegen wirkt im
Gegensatze dazu gerade auf die Species des Prodnzenten.
Scbon diese Differenzen gestatten es, exakt zwiscben beiden,
streng voneinander zu trennenden toxiscben Faktoren zu unter-
scbeiden. Obgleicb, wie frfiher erwSbnt, die Feblerquelle der
toxiscben Wirkung beterologer Normalseren mit der bei den
Verbrfibungsfbllen verwendeten Versucbstecbnik (Kanincben-
blut wirkt nicht Idsend auf Mauserytbrocyten, nur wenig oder
gar nicbt auf jene des Meerscbweincbens) nicht in Betracht
kam, so war es dock immerhin mfiglich, daC durch Variation
der Technik, z. B. bei Verwendung von Hunden Oder Rindern
zu derartigen Versuchen, diese Fehlerquellen als stfirend
sicb erweisen. Icb war daher bemfiht, aucb ffir diesen Fall
den in Rede stebenden Faktor zu vermeiden. Das gelingt
leicht, wenn man die tiefgreifenden Unterschiede beider
Kdrper in der Thermoresistenz und in ibrem Verhalten gegen
Alkohol heranzieht, Wie icb scbon vor Jahren festgestellt
babe, gelingt es durch Erhitzen eines Serums auf 56" C
mit der Zerstdrung seiner Hfimolysine ihm aucb seine, nur
Individuen anderer Species gegenfiber sicb fiuHernde Gift¬
wirkung zu nehmen, wfthrend die Wirkung toxischer Ver-
brfibungsseren und Harne bei dieser und bei noch hdheren
Temperaturen gar keine Schfidigung erffihrt.

Die alkoholischen, im Vakuum zur Trockene gebrachten
und in Kochsalzldsung aufgenommenen Extrakte normaler,
artfremder und vermdge ibrer Hfimolysine toxischer Seren
sind nngiftig, jene von toxiscben Verbrfihungsseren unverfindert

37*

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Hermann Pfeiffer,

5C)0

giftig, die wirksamen Korper also im Gegensatz zu Kom-
plement und Arabozeptor alkoholloslich.

Die genannten Tatsachen gestatten es also, leicbt zwischen
der normalen, nur auf artfremde Species wirkenden Toxizitit
und der Giftwirkong der VerbrQhungsseren zu unterscheiden.

Anders und recht flberraschend gestalteten sich dagegen
die Untersuchungen fiber die Toxizitflt normalen Harnes.

Ich babe Mher schon hervorgehoben, dafi ich nach In-
jektion normalen Harnes und das im Gegensatze zum Ver-
brOhungsmateriale selbst dann nicht irgendeine Giftwirkung
bei subkutaner Applikation auf meine Versuchstiere beob-
achtet hatte, wenn ich auch Versuchsmengen injizierte, welcbe
jene bei dem VerbrQhungsmaterial wirksamen urn ein Viel>
faches iibertrafen ^).

Engte ich aber normale Harne vom Menschen oder von
Tieren nach Ausf&llung ihrer alkoholf&llbaren Bestandteile im
Vakuum bei einer 40® C nicht fibersteigenden Temperatur ein,
so zeigten diese RQckstUnde, auf die Maus ttberimpft, gleich-
falls am Orte ihrer Einverleibung sich als wirkungslos, er-
zeugten jedoch dasselbe nervbse und so aufierordentlich
charakteristische Krankheitsbild, als wenn ich toxisches Ver-
brtlhungsserum oder Earn verwendet h&tte.

Die Meerschweinchen jedoch verhielten sich gegen die
allgemein toxische Wirkung der Rfickst&nde scheinbar ziemlich
torpide, erkrankten gleichfalls nur unter dem Auftreten ganz
vager Mattigkeit, Paresen der hinteren Beine und Singultus.
Doch entwickelte sich hier wieder am Orte der Einverleibung
dieselbe typische Nekrose wie durch toxisches Verbrennungs-
material. AuBer diesen beiden Giftwirkungen konnte aber bei
den RuckstSnden eine, dem unverUnderten Harne nicht eigen-
tQmliche Giftwirkung auf die Erythrocyten wahrgenommen
werden. Diese Formbestandteile des Blutes wurden nSmlich
noch durch auBerordentlich kleine Mengen der neutra-
lisierten Rfickstande selbst in Verdfinnungen agglutiniert,
welche die Konzentration des Ausgangsmateriales um ein Viel-

1) Beachte die Korrektur, welche diese fiir die damals gangbare Ver-
suchstechnik trotzdem gultige Tatsache durch die in den vorliegenden Ver-
suchen systematisch erfolgte Analyse der Temperaturreaktion erfahrtl

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Weitere Beitx^e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 561

faches flbertraf. So zeigten z. B. gelegeatlich noch 0,0005 ccm
eines Rflckstandes die in Rede stehende Wirkung. Dafi diese
Trias von Giftwirkungen nicht zurflckgefflhrt werden darf auf
die bekannten Harnsalze oder etwa gar auf eine Hypertonie des
Mediums, geht schon daraus hervor, dafi es durch vorsichtiges
Erhitzen eines solchen Rtickstandes gelingt, die einzelnen Gift-
komponenten isoliert voneinander zu zerstdren. Dabei erweist
sich die agglutinierende Gruppe als die hinf^lligste, dann
koromt die nekrotisierende, endlich die neurotoxische, so zwar,
dafi man endlich zu ungiftigen RfickstEnden kommt. In dem-
selben Sinne spricht die Tatsache, dafi es gelingt, die agglu¬
tinierende Gruppe isoliert durch Vorbehandlung mit Erythro-
cyten abzus^ttigen. Dafi aber die genannten Wirkungen
unabhtlngig voneinander sind, geht endlich auch aus dem
Dialyseversuch hervor. Wahrend jene, die neurotoxische und
nekrotisierende Eigenschaft der Rtkckstande bedingenden Sub-
stanzen bei der Dialyse durch Schweinsblasen in 48 Stunden
in die Aufienfltissigkeit wandern, wird die agglutinierende
zurflckgehalten. Sie entspricht also einem nicht dialysablen
Korper.

Die detaillierte Angabe dieser Untersuchungen wQrde mich
zu weit von meinem Ziel ablenken. Es sei nur betont, dafi
die auffallende und weitgehende Uebereinstimmung der Wirkung
toxischen Verbrhhungsmateriales mit den RQckstUnden normalen
Harnes die Vermutung wachrufen mufite, ob es sich denn in
beiden Fallen nicht urn das Vorliegen derselben E5rper handeln
kdnnte. Diese MdgUchkeit einmal angenommen, konnten dadurch
meine friiher mitgeteilten Befunde bei verbriihten Tieren nur in
dem Sinne eine Beeinflnssung erfahren, als dann die oben auf-
geworfenen Fragen im Sinne einer Ueberproduktion
eines, normalerweise schon in Spuren den Orga-
nismus passierenden Kdrpers entschieden waren.

Sollte diese Vermutung der Identitat beider Kdrper an
Wahrscheinlichkeit gewinnen, so mufite das Postulat auf-
gestellt werden, dafi die toxischen Verhaitnisse des
Serums uramisierter Tiere, die dabei zutage tretenden
pathologisch-anatomischen Veranderungen und gleicherweise
die klinischen Allgemeinsymptome identisch sind mit den beim
Verbrflhungstode erhobenen.

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562

Hermann Pfeiffer,

Ich konnte nun tats&chlich an 16 beiderseitig nephrek-
tomierten Kaninchen nachweisen, dafi im Serum dieser Tiere
ganz dieselbe ToxizitUt auftritt, wie bei den verbrtlhten Tieren.
Toxisches Uramieserum nnd toxisches VerbrQhungsserum sind
schlechterdings voneinander in ihrer Giftwirkung anf Mans
nnd Meerschweinchen nicht zu unterscheiden. Diese Analogie
geht sogar so weit, dafi auch bei der Ur&mie ganz ilhnlich
wie bei den verbrtthten Tieren anf rechnerischem Wege fiber
den Mfiuseversuch eine letale Schfidignng des Giftproduzenten
— diesmal also des urfimisierten Tieres! — nur ffir den
gleichen Prozentsatz der Ffille durch das im Serum nachweis-
bare Gift erbracht werden konnte.

Was die pathologisch-anatomischen Erscheinungen anlangt,
so sind sie, wie eingangs erwfihnt, beim verbrfihten Kaninchen
durch die konstanten Befunde der so charakteristischen Darm-
verftndernngen auilerordentlich prfignante. Es zeigten nun
meine Urfimietiere gleichfalls nnd in demselben Prozentsatz
der Ffille das Auftreten einer Gastroenteritis nnd die so
typischen, zahllosen, ekchymotischen Geschwfirsbildungen, die
in keiner Weise von den durch Verbrfihung erzeugten nnter-
schieden werden konnten, sowie schwere fettige Degeneration
der drfisigen Organe.

Die klinischen Erscheinungen von seiten des Zentral-
nervensystems sind, wie frfiher schon hervorgehoben, ffir das
Kaninchen so wenig charakteristisch, daB sie zu Analogie-
schlfissen nicht verwertet werden kOnnen.

Anders, wenn wir hier auf die Erfahrungen am Menschen
rekurrieren. Die weitgehende Analogie des nervosen Sympto-
menbildes bei Urfimie und Verbrfihung ist ja allbekannt. Sie
hat seinerzeit Lesser dazu veranlaBt, seine Urfimietheorie
des Verbrfihungstodes aufzustellen, allerdings ohne sie be-
weisen, noch mit toxikologischen Tatsachen stfitzen zu kdnnen.

Diese eindeutigen und fiberraschenden Resultate bei der
Urfimie sprachen im Hinblick auf die frfiher mitgeteilten Be¬
funde eine beredte Sprache daffir, daB die im Gefolge
einer Verbrfihung auftretende Autotoxikose be-
dingt sei durch die Ueberproduktion eines schon
normalerweise den Organismus in Spuren pas-
sierenden toxischen Agens, welches auch ffir das

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Weitere Bdtrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkat etc. 563

Zustandekommen der UrEmie, bier allerdings
nur durch einfache Retention, Etiologische Be-
deutung besitzt.

Weitere Versncbe warden nun unternommen, urn in den
Entstebnngsmecbanismus der beobacbteten Giftkdrper einen
Einblick zu erlangen.

Es spracben damals scbon bier nicbt wiederzugebende
Erfabrungen dafQr, dafi es sicb bei diesem toxiscben Prinzipe
um Abbauprodukte der durcb die Hitze nekrotisierten Eiweifi-
kdrper handeln dflrfte. Sollten sie nun, wie es ja wahrscbein-
lich war, nichts fQr die Verbrbbung allein Spezifiscbes dar-
stellen, so stand zu erwarten, daB auch durch einen chemischen
Abban ungiftiger EiweiBkbrper Substanzen analoger Wirkung
entstehen.

Es gelang mir nun tatsfichlich, durch Yerdauen von Serum-
eiweiB und Fibrin mit PepsinsalzsEure einerseits, mit Pankreatin
bei alkalischer Reaktion andererseits LOsungen zu erbalten,
die sicb in ihrer Wirkung im Tierexperimente in nicbts von
dem toxiscben Verbrennungsmateriale unterschieden.

Weitere Versuche bewiesen ferner, und das in voller
Uebereinstimmung mit den UrEmie- und Normalharnbefunden,
daB die jene Verbrflhungstoxikose erzeugenden Giftkdrper nicbt
am Verbrflhungsorte durch die Hitzewirkung sicb bilden,
sondern daB es sicb dabei um Abbauprodukte der resorbierten,
zerstdrten EiweiBkdrper handelt, die scbon normalerweise bei
dem parenteralen EiweiBzerfall in Spuren entstehen.

Diese Wahrscheinlichkeit muBte dadurch noch an Ueber-
zeugungskraft gewinnen, wenn zu erweisen war, daB sicb auch
unter anderen YerhEltnissen und ganz allgemein zu Zeiten
lebhaft vermehrten EiweiBzerfalles im Harne bezw. in letalen
FEllen auch im Serum eine Ehnlicbe ToxizitEt wie bei Yer-
briihung zeigte. Ich verfQgte damals fiber zwei einschlEgige
FElle vom Menschen. Ein Fall betraf eine akute fieberhafte
Erkrankung, ein anderer einen Fall von Chorea major, wo es
infolge der Bewegungsstdrung der Patientin zu hochgradiger
Erschdpfung gekommen war, beides also FElle, in denen ein
gesteigerter EiweiBzerfall vorausgesetzt werden konnte.

Im Harne beider Kranken war unter Berficksichtigung
seines spezifischen Gewichtes dieselbe Giftwirkung, dasselbe

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564

Hermann Pfeiffer,

Ansteigen seiner Toxizit&t zu beobachten, wie bei meinen
verbrfihten Tieren, eine Tatsache, die nach dem Vorhergesagten
wohl zu erwarten war.

Anlafilich ineiner, in Gemeinschaft mit 0. Mayer durch-
gefdhrten Untersuchungen fiber die parathyreoprive Tetanie
der Huude babe ich in zahlreichen FfUlen, and zwar regel-
milBig nach dem bei diesen Tieren so schwer verlaufenden
aknten tetanischen Anfall dasselbe toxische Prinzip wie im
Harn meiner verbrflhten Tiere biologisch direkt nachweisbar,
also betrfichtlich vermehrt angetroffen.

Alle damals gemachten Erfahrungen sprachen in dem-
selben beredten Sinne daftir, dafi wiresbeieinergrofien
Gruppe der Verbrfihungsfaile mit einer Auto-
intoxikation zu tun haben, hervorgerufen durch
Substanzen, die nichts ffir diese Erkrankung
Eigenttlmliches sind, sich vielmehr schon nnter
normalen Verhaltnissen in Spuren als Abkdmm-
linge des zerfallenden Eiweifies bilden.

Im Gefolge einer Verbrflhung erfahren sie
aber eine solche, auf resorptivem Abbau der
durch die Hitze zerstSrten Eiweifikdrper be-
ruhende Ueberproduktion, dafi die Niereu ihrer
Aufgabe nicht mehr gerecht werden konnen, sie
zurflckhalten, und dah es dann in Konsequenz
der Nierenschadigung zur Autointoxikation mit
tSdlichem Verlaufe kommt.

Was die Bedeutung anderer atiologischer Faktoren fflr
den Eintritt des Todes anlangt, so mufite ich die Rolle der
Blutveranderungen strikte negieren. Sie waren bei meinen
Versuchstieren zwar vorhanden, waren aber doch so gering-
gradig ausgebildet und warden nach ihrem Verschwinden so
lange Zeit flberlebt, dafi ich ihnen keinerlei Bedeutung ffir
den letalen Ausgang zuerkennen konnte. Anfierdem finden sich
beim Menschen Faile mit tddlichem Ausgange, wo diese Ver-
anderungen nicht einmal erweisbar sind.

Dagegen stand ich nicht an, dem mit der VerbrQhung
verbundenen Shock eine gewisse Wichtigkeit zuzuerkennen.
Ich bin der Meinung, dafi meine perakut eingegangenen
Versuchstiere (3 Proz.) infolge der Shockwirkung starben.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 565

Inwiefern auch ffir die iibrigen Fllle neben dem Moment der
Antointoxikation jenes in Rede stehende in Betracht kommt,
ist schwer zu entscheiden, und mdchte ich mich vorlEufig
eines Urteils darflber enthalten.

Desgleichen wage ich es, wie eingangs betont, nicht,
dartiber zu urteilen, inwiefern die hier mitgeteilten tier-
experimentellen Tatsachen anf den Menschen tlbertragen
werden dflrfen. Das muii Sache klinischer Nachprdfung sein.
Immerhin sei aber betont, dafi die drei von mir untersucbten
Ftille am Menschen dasselbe Ansteigen der Toxizit&t des
Harnes zeigten wie meine Kaninchen. Das Serum der schwer
erkrankten Patienten konnte ich nicht prhfen.

Mit ein paar Worten sei noch die Aetiologie der Organ-
veranderungen, insbesondere der Gastroenteritis sowie der
ekchymotischen Geschwursbildung im Magen-Darmtrakt, er-
ortert.

Was die BlutverSuderungen betrifft, so konnte ich damals
den exakten Beweis erbringen, dafi es sich dabei nicht, wie
Dietterichs in seiner mittlerweile auch schon von anderer
Seite widerlegten Arbeit meint, nm die Wirkung eines Blut-
giftes, sondern dafi es sich dabei einzig und allein um den
Einflufi der Hitze handelt.

Dafiir spricht, abgesehen von anderen, hier nicht nkher
zu erdrternden Befunden, schon der Umstand, dafi sich diese
Veranderungen unmittelbar nach der VerbrQhung zeigen, also
zu einem Zeitpunkte manifest sind, wo es erwiesenermafien
noch zu keiner Anreicherung des toxischen Prinzips im Orga-
nismus gekommen ist.

Andererseits fehlen sie gerade zu einer Zeit, wo die
Toxizitat des Serums nachweisbar geworden ist. Endlich
konnte, wie schon frfiher erwahnt, niemals irgendeine Wirkung
toxischen Verbrflhungsmaterials auf die Erythrocyten erwiesen
werden.

Anders scheinen mir die Dinge ffir die Magen-Darmver-
anderungen zu liegen. Ihr Auftreten zu einer Zeit und in
Fallen, wo die Giftanreicherung des Organismus nachweisbar
ist, spricht ebenso dafiir, dafi wir es hier tatsachlich mit einer
Giftwirkung zu tun haben, wie der Umstand des Entstehens
bei der Uramie, also unter scheinbar so wesentlich ver-

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566

Hermann Pfeiffer,

schiedeDen VersuchsbediDgungen. Jedenfalls hat heute diese
Auffassung mehr Berechtigung als die keiner exakten Eritik
standhaltenden Hypothesen von Decker und Eden bn izen,
die eigentbmliche und unbewiesene Wirbelbildungen in der
Blutbahn der Darmwand fQr ihr Zustandekommen verantwort-
lich machen mOchten.

Diese Erfahrungen insgesamt, die mich den Verbrahungs-
tod als eine im biologischen Versucbe wohl nacbweisbare
Autotoxikose des parenteralen Eiweifizerfalls ansehen lehrten,
legten nun den Gedanken nahe, zu priifen, ob und inwiefern
die dort genau studierten wirksamen EOrper auch bei der
Anaphylaxie eine Rolle spielen. Hatten wir bier docb, wie
die eingangs zitierten Studien des abgelaufenen Jahres be-
wiesen, gleichfalls eine Erkrankung gegeben, die auf ge-
steigerten parenteralen Eiweifizerfall zurbckgeftthrt, demnach
dem scheinbar so heterogenen Verbrtlhungstod wesensverwandt
sein mufite, sollten anders die in jahrelanger Arbeit gewonnenen
Resultate zu Recht bestehen.

Bevor ich im folgenden auf die bei der Ueberempfindlich-
keit sich ergebenden Verh&ltnisse eingehe, mdchte ich zunSchst
fiber neue Versucbe, die Toxizitiit normalen Harnes und seiner
im Vakuum nach Alkohol^llung gewonnenen Rflckstllnde be-
treffend, Mitteilung macben, Versucbe, welche, unter Heran-
ziebung der in frbheren Studien fiber die Anaphylaxie ge¬
wonnenen Resultate, filtere Ergebnisse fiber seine Giftwirkung
zu ergfinzen geeignet erscheinen. Wie seinerzeit bei meinen
Studien fiber den Verbrfihungstod, so ergab es sich auch bier,
dafi erst das genaueste Studium der normalen Verhfiltnisse
eine richtige Deutung pathologiscber Befnnde gewfibrleistet.

n. Zur Eenntiiis der Giftwirkung mensohlioher und tierisoher
Hame sowie ihrer Vakunmrii<^st&nde.

Injiziert man den Harn gesunder, nicht im Zustande eines
gesteigerten Eiweifizerfalls befindlicher Menscben oder Tiere
(Meerschweinchen, Kaninchen, Pferd, Rind, Hund) sofort
nach seiner Gewinnung und nach vorhergehender Sfittigung der
freien Sfiure mit Natronlauge in der Menge von 0,5—1,0 ccm
in die Subcutis von Mfinsen, so zeigen die Tiere, von einer

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Weitere Beifoiige zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 567

voriibergehenden Mattigkeit und Polyarie abgeseheo, keine
aaffmiigen ErankheitserscheinuDgen. Der Harn wird rasch,
ohne am Injektionsorte Ver&Dderungen zu setzen, resorbiert.
Dasselbe gilt fflr das Meerschweinchen. Die Erythrocyten
derselben oder anderer Tierarten als jene des Harnspenders
bleibee vollkommen intakt. Weder H&molyse noch Agglatination
wird jemals wahrgenommen. Diese auch in den vorliegenden
Versuchsreihen oft sichergestellte Tatsache bestfttigt vielfache,
schon in frflheren Arbeiten niedergelegte Erfahrungen.

Verfolgt man aber nnmittelbar nach der Injektion bei
beiden Arten von Versuchstieren die Edrpertemperatnr, so wird
man auch nach Einspritzung des Harnes in die Species des
Harnspenders (Meerschweinchen aof Meerschweinchen) die Er-
fahrung machen, dail manche Harne die Temperatur im Sinne
eines Abfalles nicht zu beeinflussen vermbgen, andere aber sie
im Verlaufe der ersten Vi bis V 2 Stunde urn mehrere Zehntel
(bis zu 1 C) herabdrQcken. Sie steigt dann rasch, meist inner-
halb 1 Stunde, wieder zur Norm an und macht sodann einer
deutlichen Fiebersteigerung Platz. Entsprechend den Grbllen-
differenzen zwischen Mans und Meerschweinchen, ist die Wir-
kungsintensitUt der normalen Hame bei gleich groBer Dosis
hier und dort sehr verschieden, insofern als die kleinere Mans
schon auf die Einbringung von 1,0 ccm normalen Harnes nicht
unbetrUchtliche Temperaturstiirze erkennen IfiBt, w&hrend das
Meerschweinchen darauf meist flberhaupt nicht reagiert. Dabei
macht man die Erfahrung, daB diese, wie gesagt, nur durch
die Temperaturmessung, nicht aber in anderen Krankheits-
erscheinungen sich BuBernde Wirknng normaler Harne keines-
wegs parallel geht mit ihrem spezifischen Gewicht, also nicht
der Ausdruck der Konzentration des Harnes, seines Gehaltes
an Harnsalzen sein kann. Als Beleg dafhr m5ge Tabelle I
dienen. Die dort wiedergegebenen Resultate entnehme ich
mit giltiger Zustimmung umf&nglichen Untersuchungen meines
Frenndes Dr. R. Franz (iber die Giftwirkung menschlicben
Harnes unter normalen und bestimmten krankhaften' Verb9.lt-
nissen, die an anderem Orte verdffentlicht werden sollen.

Die in der Tabelle (p. 568) wiedetg^eben^ Versuche wurden von ihm,
der von mir bei den Anaphylaxieversuchen geiibten Technik folgend, bo ange-
Btellt, daS meiBt auf dem Wege des Katheterismus gewonnener Menschoiliant

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568

Hermann Pfeiffer,

Tabelle 1.

Spezifisches Gewicht, unabhanpg von Hamtoxkitat.

No.

Gewicht
des Tieres

Spezifisches
Gewicht des
Harnes

Tagesmenge

Temperatur

Zeit

Shock

E in 1 ccra j

Gesamt-

toxizitat

Anmerkung

1

345

1008

1290

1

45

22

11

14190

2

350

1008

10

210

1050

525

3

340

1009

22

300

3300

1650

Gesteigerter Eiw^eifizerfall

4

280

1010

2050

4

60

120

60

123000

5

1010

1340

5

90

225

112

150080

6

310

1010

4

290

725

362

7

1010

14

210

1470

735

Gesteigerter EiweiBzerfall

8

1010

24

195

2340

1170

>7 77

9

1012

15

210

1570

787

77 77

10

1012

30

240

3600

1800

77 77

11

1013

2

120

120

60

12

1013

10

60

300

150

13

350

1015

1010

5

75

187

93

93 930

14

1015

18

225

2020

1010

Gesteigerter EiweiOzerfall

15

1015

1200

32

300

4800 2400

77 77

16

1016

15

180

1350

675

77 77

17

1018

9

120

540

270

18

1019

3

120

180

90

19

360

1020

1000

2

30

30

15

20

1020

5

i 135

337

168

21

342

1020

7

105

367

183

22

320

1020

840

20

120

1200

600

504000

Gesteigerter Eiweifizeffall

23

360

1020

40

300

6000 3000

71 77

24

330

1020

1200

64

570

18240 9120

77 77

25

341

1021

i 6

135

405

202

26

330

1022

j

19

180

1710

855

Gesteigerter EiweiUzerfall

27

362

1023

1400

1 10

240

1200

600

77 77

28

350

1027

10

120

600

300

29

330

1028

1 10

120

600

300

30

330

1030

1 5

105

262

131

sofort nach seiner Qewinnung mit einigen Tropfen Chloroform zur beeseren
Koneervierung versetzl rind mbglichst bald, fast immer innerhalb einiger
Stunden nach vorhergehender exakter Neutr^isation der freien Sliure zum
Tierversiiche verwendet ivurde. Er wurde Meerschweinchen im Gtewichte
von 300—350 g in der Menge von 2 ccm intraperitoneal eingebracht und
ihre Korpertemperatur vor und alle 15 Minuten nach der Injektion bis zur
Riickkehr zur Norm vom Mastdarme aus mittels jener kleinen Tierthermo-
meter gemessen, wie ich sie anlafiiich mdner Studien iiber den anaphy-
laktischen Temperatursturz verwendet hatte. In Eolonne 5 ist die Tempe-
raturabnahme in Zehntelgraden Celsius, in Eolonne 6 die Zeitdauer in
Minuten verzeichnet, die das Tier brauchte, um seine Ausgangstemperatur
wieder zu erlangen. Eolonne 7 und 8 mdge vorl&ufig nicht berucksichtigt
werden.

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Weitere Beitr^e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 5G9

Sieht man zunllchst von den pathologischen Fallen, die
in der letzten Kolonne der Tabelle durcb die Anmerkung
^gesteigerter EiweifizerfalP kenntlich gemacht sind, ab, so
zeigt es sich, daB Normalharn des differentesten
spezifischen Gewichtes eine gleich groBe und
dabei minimale temperaturherabsetzende Wir-
kung ausBbt. So vermochte der Harn No. 5 (sp. G. =
1010), No. 13 (sp. G. = 1015), No. 20 (sp. G.==1020), No. 30
(sp. G. = 1030) nur in demselben AusmaBe von 0,5® C die
Kdrpertemperatur der Tiere zu beeintrBchtigen, wBbrend an-
dererseits in KrankbeitsfBllen Harn von niedrigerem
spezifiscben Gewicbte urn ein Vielfacbes stBrker
wirksam sicb erwiesen bat, als Normalbarn des bdberen
spezifiscben Gewicbtes. Als Beleg dafiir diene Harn No. 3
mit dem spezifiscben Gewicbte 1009 und seiner temperatur-
berabsetzenden Wirkung von 2,2® C, Harn No. 15 (sp. G.==
1015) und seiner temperaturberabsetzenden Wirkung von 3,2®
einerseits, die Harne No. 20 (sp. G. = 1020) und No. 30
(sp. G. = 1030) andererseits, welcbe die KOrperwBrme der
Versucbstiere nur urn 0,5® C zu beeintrScbtigen vermocbten.
Nocb scblagender zeigen dies die Harne No. 19—24, die bei
gleicbem spezifiscben Gewicbt (1020) unter normalen Ver-
bBltnissen die Kdrpertemperatur urn 0,2—0,7® C, bei ge-
steigertem EiweiBzerfall jedocb um 2,0—6,4® C berabdrflckten.
Auf die anderen Krankbeitserscbeinungen, die solcbe bocb-
giftige Harne im MBuse- und Meerscbweincbenversucb ber-
vorrufen, soil erst spBter eingegangen werden.

Scbon daraus gebt bervor, dafi die temperaturberab-
setzende Wirkung des Harnes nicbt zusammen-
bBngen kann mit seinem, in den Schwankungen
des spezifiscben Gewicbtes sicb BuBerndenGebalt
an Harnsalzen. DaB sie nicbt bedingt ist durcb
die Wirkung von freierSBure Oder (beiTierbarnen)
von freiem Alkali, erbellt aus der Tatsacbe, daB in alien
diesen Versucbsbeispielen mit sorgfBltig neutralisierten Harnen
gearbeitet wurde, daB sie nicbt zurQckzufflbren ist
auf einen EiweiB- Oder Blutgebalt aus dem Umstande,
daB in alien oben zitierten FBllen nur solcbe Harne ver-
wendet warden, die sicb als absolut frei von diesen K5rpern

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570

Hermann Pfeiffer,

erwiesen batten. Dafi nicht die Wirkung irgendeines
die Erythrocyten des Meerschweinchens schfidi-
genden Kdrpers daran schuld tragen kdnne, wie Po-
pi el ski jflngst annahm, ergibt die Tatsache, dafi bier wie in
zablreicben scbon vor Jabren angestellten gleicbartigen Ver-
sucben unter normalen, wie unter patbologiscben Umstfinden
der neutralisierte, sonst aber unverSnderte Earn den roten
BlutkSrperchen dieser Oder einer anderen Tierart gegenflber
aucb nacb Zusatz von Eomplement flberbaupt inaktiv ist, sie
weder zu Idsen, nocb zu agglutinieren vermag.

Dieses Ergebnis veranlafite, zu untersuchen, ob denn nicbt^
wie dies scbon frfiber fflr die an der Mans ausgewertete all-
gemein toxiscbe und die am Meerscbweincben nacbweisbare
lokal in Nekrosenbildung sicb Hufiernde Giftwirkung, aucb
jene den Temperatursturz bedingende, in der Harnfraktion
gesucbt werden. mbfite, die nacb vorberiger AlkobolfSllung und
Einengungim Vakuumin den alkobolldslicben Bestand-
teilen gegeben ist.

Zu diesem Zwecke ging icb in der folgenden Weise vor:

Normaler Menschen- und Tierham wd mit der doppelten Menge
absoluten Alkohols nach vorheriger Neutralisation der freien Saure ver-
setzt, Tom ausfallenden Niederschlag abfiltriert und das Filtrat im Vakuum
bei einer 45® C nicht ubersteigenden Temperatur bis zur Sirupdicke ein-
geengt. Neuerliches Ausfkllen der alkoholfkllbaren Bestandteile und neuer-
liches Einengen im Vakuum. Nun werden die Kiickstftnde in einem Ver-
haltnis in Wasser aufgenommen, dafi 1 ccm der Ldsung = 10 ccm des
Ausgangsmateriales entsprach. Dabei tritt eine neuerliche Ausscheidung
eines voluminSsen Niederschlages auf, der gleichfalls durch Filtration ron
dem Extrakte getrennt wird. Vor seiner Verwendung fiir den Tierversuch
neuerliche EontroUe der Beaktion.

W^rend nun die alkobolfSllbaren Substanzen, in Kocb-
salzldsung aufgenommen, sowobl der Mans als aucb dem
Meerscbweincben gegenbber sicb wirkungslos verbielten, und
im Reagenzglase in keinerlei Weise die Erytbrocyten zu
8ch§.digen vermocbten, zeigten die alkobolldslicben Bestand¬
teile im Tierversncbe und in vitro geprdft, wie dies zum
Teile scbon im Jabre 1906 mitgeteilt wurde, die nacbfolgendea
Giftwirki^ngen:

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc, 571

1. Versuche an der weiBen Mans (Tabelle II).

Bringt man derartige Harnriickstande (in den Tabellen
mit HR bezeichnet) in fallenden Mengen, wie dies das Ver-
suchsbeispiel der Tabelle lehrt, in steigenden VerdQnnungen
1:10:5:2,5:1,2:05 ccm Ansgangsmaterial in die Subcutis, so
bleiben Tiere, welche 0,5 ccm des Riickstandes 1:0,5 Ham
erbalten batten, gesund. Aucb ibre Korpertemperatur wird
durcb diese Dosis nicbt beeindufit und bleibt innerbalb nor-
maler Grenzen. Steigert man die Dosis auf 0,5 ccm der
nacbst bOberen Konzentration (0,5 Harn in 1 ccm der Injek-
tionsfltissigkeit = 0,25 alkoboll5slicbe Bestandteile des Harnes),
so tritt bei den Tieren scbon ein ausgiebigerer Temperatur-
abfall urn 2,0® C unter die Norm, auf und zwar beginnt die
Temperatur sofort nacb dem Einbringen der Losung rapid
abzusinken, verbarrt kurze Zeit in einem Minimum, urn dann
ebenso rascb wieder anzusteigen. Wabrend innerbalb der
ersten Minuten nacb der Injektion die Mause munter sind,
werden sie, je weiter ibre Korpertemperatur absinkt, um so

Tabelle 11.

Mause versuche mit Harnriickstanden.

No.

Injektionsmaterial

, Tempe-
1 ratiir

Zeit

Shock

Sonstige

Kran kheitserscnein ungen

1

2

!

1 ccm HR. 1:10 (= 10 Ha.)

0,5 „ „ 1:10 (= 5 Ha.)

»> »» 1 • 1®

0,5 „ „ 1:10

; 182
tlio

tl40

tl45

t 30
t 55
t 80
t 80

1

1

!

/Sofort schwerste Somnolenz
bei hochgradiger Dyspnoe.
'Bei Temperaturen uiiter 25®
schwerster s. t. Tod im
* Temperaturminim iim,
jZiierst Somnolenz, Paresen,

5

0,5 ccm HR, 1:5 (= 2,5 Ha.)

tl90

tl60

1

bei Temp, unter 25® schwer-

6

0,5 „ „ 1:5

tl90

tl40

1

1

1

:ster s. t., rauschahnliches

7 1

0,5 „ „ 1:5

tl85

t300

1

1

Erregungsbild. TodimTem-

0,5 ccm HR. 1:2,5 (=1,2 Ha.)

360

1

1

1

l peraturmin imum.

Ausgespr. Mattigkeit, bei

8

90

16200i

Eintritt in das Temperatur-

9

0,5 „ „ 1:2,5

1

150

600

45000

minimum Fufiklonus, ^estei-
gerte Reflexerr^barkeit.
Zuerst Mattigkeit, dann
Somnolenz bei Eintritt in das
Temperaturminimum Fufl-
klonus, gesteigerte Reflex-

10

11

0,5 ccm HR. 1:1 (= 0,5 Ha.)
0>5 „ „ 1:1

20

20

300

360

3000
3 600

I

erregbark. u. schwerer s. t.

12

0,5 ccm HR. 1:0,5 (= 0,25 Ha.)

0

0

0

j Keine Krankheitserschei-

13

0,5 „ „ 1:0,5

0

0

0

\nungen.

HR. = Hamruckstand. Ha, =Harn. s. t. = status typicus.

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572

Hermann Pfeiffer,

matter, so zwar, dafi diese Erscheinung bei Eintritt in das
Temperatarminimum am deutlichsten ausgesprochen ist und
beim Wiederansteigen der KSrperwarme rasch schwindet.
Reizt man die Tiere im Stadium der niedersten Eigenw^me
durch Kneifen in den Schwanz oder in die Hinterpfoten, so
bemerkt man htlufig, dafi sie nicht wie gesunde Tiere sich
dagegen wehren, sondern als Ausdruck einer, bei hbheren
Giftdosen deutlicher ausgesprochenen, gesteigerten Reflex-
erregbarkeit von klonischen Zuckungen in den Hinterbeinen
befallen werden, die bei Fortdauer des Reizes einige Zeit
anhalten, mit seinem Aufhbren rasch schwinden. Im all-
gemeinen ist aber unter den hier gew&hlten Versuchsbedin-
gungen das Absinken der EigenwHrme und dieMat-
tigkeit desTieres das regelmSlligste und ein ganz
konstantes Phtlnomen.

Verwendet man noch grdfiere Mengen des Rflckstandes,
so tritt unter raschem Absinken der Kbrpertemperatur urn
9,0—15,0® C beim Ueberschreiten einer Temperaturgrenze
unter etwa 30® C von der frflher erw9,hnten Mattigkeit ab-
gesehen, die sich jetzt zu einem soporbsen Zustandsbilde ent-
wickelt hat, und zwar um so deutlicher, je tiefer die Tempe-
ratur sinkt, zunichst wieder das als „Fufiklonus‘‘ bezeichnete
Symptom in die Erscheinung. Nur ist es jetzt derart ge-
steigert, dafl ein leichtes Kneifen der Tiere genfigt, um schwere,
das ganze Tier erfassende klonische KrUmpfe auszulbsen, die
sehr bald in das Bild einer tetanischen Muskelstarre
Obergehen. In diesem Zustande liegen die Tiere bei vbllig
sistierter Atmung mit starrem, gebeugtem Rumpfe, krampf-
haft an den Brustkorb geprefiten vorderen Extremittlten, steif
von sich gestreckten Hinterbeinen und gerade gestrecktem,
steifem Schwanze da. Nachdem der Krarapfanfall einige Zeit
angehalten hat, Idst sich die tonische Starre und die Tiere
verharren weiterhin in dem soporbsen Zustande. Geht die
Temperatur noch weiter herunter, unter 25® C, so befSllt die
Tiere nunmehr ein eigentiimliches, rauschShnliches
Krankheitsbild, in dem sie wie betrunken herumtaumeln.
In diesem Stadium mit exzessiv herabgesetzter Temperatur
(bis zu 25® C und darunter) kbnnen die Tiere stunden- und
tagelang verharren. Ich habe Md.use gesehen, die drei und

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Weitere Beitrage zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. 573

vier Tage bei solchen Teiiiperaturgraden in diesem, so aufier*
ordentlich typischen Zustande fortlebten. Man meint, jeden
Augenblick miisse der Tod eintreten, doch kommt es gerade
bei der in Rede stehenden toxischen, aber eben noch sob-
letalen Giftdosis fast ausnahmslos noch zur Erholnng der
Tiere nach Stunden oder Tagen. Das erste Anzeichen
der Erholnng ist ein Wiederansteigen derKdrper-
wUrme. Nach Mallgabe dieses Anstieges verschwindet dann
zuerst das rauschUhnliche Zustandsbild, spMer die durch Reiz
auslbsbaren tonischen KrampfanfMle, endlich, wenn sich die
Temperatur der Norm nMhert, auch die Somnolenz und
Mattigkeit der Tiere. Dieser Parallelismus zwischen Korper-
temperatur und den anderen Symptomen von seiten des
Nervensystems ist so absolut, dafi man aus dem Abfall der
Temperatur unter 30, bezw. 25® den Eintritt der anderen
Erscheinungen voraussagen, ja die Schwere des Krankheits-
bildes, die Grdfie der ein verleibten Giftdosis
nach dieser, im Zentrum des ganzen Vorganges
stehenden Erscheinung absch^tzen kann. Von
welch wesentlicher Bedeutung fiir die Schwere des Erkrankungs-
bildes die Kdrperw^irme der Tiere ist, erhellt auch aus dem
Umstande, dafi man selbst tddlich vergiftete Tiere oft noch
retten kann, wenn man sie rechtzeitig dem Sonnenlichte aus-
setzt. Unter einem raschen Anstieg der Eigenwfirme erholen
sich solche Tiere rasch, w&hrend die im Dunklen gehaltenen
Kontrollen erst nach Stunden und Tagen gesunden, oder aber
eingehen.

Verwendet man Rhckst&nde der Konzentration 1:5 Harn
in der Menge von 0,5 ccm subkutan (= 2,5 Harn) und darhber,
so endigt die Erkrankung wohl ausnahmslos mit dem Tode
der Tiere und veriauft urn so schneller, je grSBer die ver-
wendete Giftdosis war. Hier sind nun, je linger die Tiere
hberleben, die Temperaturabstttrze nm so grdfier und oft ganz
enorme von 18—20® C unter die Norm. Sie treten aber in
diesem AusmaBe nur dann in die Erscheinung, wenn die Tiere
linger als 1 Stunde ttberleben. Sterben sie frtther, so ist der
Absturz der Eigenwtrme zwar auch noch sehr groB (14, 10,
8® C); es zeigt sich aber immer wieder, daB bei raschem

Zeltscbr. f. Immanitiittfonchung. Orig. Bd. X. 38

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574

Hermann Pfeiffer,

(unter 1 Stunde) Todeseintritt diese Abnahme geringer ist,
als wenn die Tiere Iftnger ttberleben, so zwar, daS bier die
Gr5fie der TemperaturabDahme der Schnelligkeit des Todes-
eintrittes verkehrt proportioniert ist. Die Tiere sterben aus-
nahmslos im Temperaturminimum. Geschieht dies nach einem
nur etwas protrahiertem Erankheitsverlaafe, so ItlBt sich bei
sorgf&ltiger Beobachtung bier feststellen, wie bei Eintritt in
die frfiher erwfihnten unteren Temperaturgrenzen von unter
30 und unter 25** C zuerst der Fufiklonus auslbsbar wird,
dann die Anfblle tonischer Starre auftreten und endlich das
rauschartige Zustandsbild erscheint. In diesem tritt unter
Erlbschen der Reflexe der Tod ein.

Waren die Giftmengen so groBe, dafi innerhalb ^|^ Stunde
Oder gar innerhalb weniger Minuten der Tod erfolgt, so sind
die einzelnen Stadien verwischt. Unter lebhafter inspiratorischer
Dyspnog und lebhafter Cyanose, grofier motorischer Unruhe,
kurz dauernden klonischen KrUmpfen, Polyurie verenden die
Tiere, indem sich mauchmal selbst hier auf einige Minuten
das ranschShnliche Zustandsbild entwickelt. Die Tiere rollen
sich wie betrunken urn ihre LUngsachse. Wie auch aus der
Tabelle hervorgeht, ist der pr&mortale Temperaturabfall weniger
ansgesprochen, als bei den sp9.ter verendenden M&usen. Ver-
sncht man solchen, in einem betrkchtlicheil Temperaturminimum
sich befindenden Tieren durch Aufsuchen und Oeffnen der
HalsgeftLBe Blut zu entnehmen, so ist es im Gegensatz zn
normalen Tieren auffallend, wie schwer es gelingt, selbst nor
ein paar Tropfen Blutes zu bekommen. Selbst bei Dekapi-
tation ist die Blutong eine verschwindende im Vergleiche zom
gesunden Tiere.

Die Zergliederung der tSdlich vergifteten Tiere
ergibt bei akotem Exitus eine hochgradige Hyperftmie der
Bauchorgane, eine bis zum Platzen prall mit Galle ge-
fflllte Gallenblase als Ausdruck einer lebhaft gesteigerten
Gallensekretion, hier und da Blutungen in der Darmwand,
etwas gebl&hte Lungen, flfissiges Blut im Herzen, welches
manchmal noch Eontraktionen ausffihrt. Ist der Tod nach
Iftngerer Agone eingetreten, so sind die Blutungen im Darm-
rohr htlnfiger anzntreffen, die Nieren meist deutlich, die Leber
weniger stark degeneriert.

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Weitere fieitriige zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 575

Um es nochmals kurz zu rekapitulieren, ftuBert sich die
Einwirkung solcher Harnrilckst&nde auf die weifie Maus in
kleinen Dosen lediglicb in einem rasch vorfibergehenden T e m -
peraturabfall, der um so grSBer wird, je grbBere
Giftmengen eingebracht werden, oft auch bei Er-
holungsfBllen ganz exzessive Grade erreichen kann. Zu ihm
tritt innerhalb gewisser Temperaturgrenzen zunfichst, und das
in gesetzm&Biger Reihenfolge, ein Zustand gesteigerter
Reflexerregbarkeit, dann tetanische KrBmpfe und
endlich ein rauschBhnliches Krankheitsbild hinzu.
Auch bei tbdlich verlaufenden Yergiftungen sind Shnliche
VerhBltnisse, wenn auch wesentlich zeitlich zusammengedrBngt
zu beobachten. Der auch hier eintretende Temperatur-
abfall ist um so deutlicher ausgesprochen, und
dominiert das Krankheitsbild um so mehr, je
spBter nach der Injektion der Tod eintritt. Lokal
vermag bei welBen M&usen, was alten eigenen Erfahrungen
entspricht, auch der konzentrierteste Riickstand keine Ver-
&ndcrung zu setzen.

2. Versuche an Meerschweinchen.

Bei intraperitonealer Einverleibungtoxischer Mengen
von HarnrflckstBnden in Meerschweinchen sieht man auch hier
sowohl in FBllen von Erholung, als in solchen, die einen tdd-
lichen Ausgang nehmen, im Zentrum desVergiftungs-
bildes einen Temperaturabfall stehen, der bei ge-
ringeren Giftmengen oder bei einer spfiter zu besprechenden,
kfinstlich erzengbaren Unterempfindlichkeit oft nur mehrere
Zehntelgrade betrBgt, mit steigender Dosis in Erholungsf&llen
7—8** C betragen kann. Dabei sei gleich hier bemerkt, daB
der Verlauf der Temperatnrkurve durchaus und in alien Ein-
zelheiten jenen entspricht, die von mir, sp&ter auch in Ge-
meinschaft mit S. Mita ffir den anaphylaktischen Shock be-
schrieben wurden. W&brend in solchen Fftllen die GrdBe des

I

Temperaturabsturzes parallel geht mit den flbrigen Krank-
heitserscheinungen, auf die gleich nfther eingegangen werden
soil (vgl. Tabelle III), ist bei tddlich endigenden Yergiftungen
wie bei der Maus und im anaphylaktischen Shock die Er-
fahrung zu machen, daB bei l&ngerem Ueberleben die Tem-

38*

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576

Hermann Pfeiffer

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 577

peraturabnahroen groBer und oft ganz exzessive (bis zu 10
und darflber!) sind, wfthrend sie bei rascb, oft blitzartig ein-
tretendem Tode viel weniger ausgeprftgt sind. Auch bei diesen
tbdiichen Fallen ist die GrdBe der intravitalen Temperatur-
abnahme verkehrt proportioniert der Schnelligkeit des Todes-
eintrittes.

Was die anderen Krankheitserscheinungen anlangt, so
zeigen Tiere, die nar eben toxische Mengen erhalten haben,
neben einer leichten Spannung der Bauchdecken, oft als einziges
Symptom Paresen der Hinterbeine and das vom Bilde
des leichten anaphylaktischen Shocks her so wohlbekannte
StrSubendesFelles. Ist die Vergiftung eine schwerere,
aber nicht letale, so zeigen die Tiere unmittelbar nach der
Injektion bretthart gespannte Bauchdecken, Singultus, leb-
haften Horn- und Kotabgang, Mattigkeit, schwere Paresen der
hinteren Extremitfiten, mhhsame Atmung, kurz ein Bild,
das vom protrahiert verlaufenden anaphylak¬
tischen Shock nicht unterschieden werden kann.
BetrUgt der Temperatursturz 4—5® unter die Norm, so machen
die Tiere einen schwerkranken Eindruck, liegen geltlhmt und
somnolent auf der Seite, atmen rndhsam, schluchzend. Es treten
profuse Diarrh5en auf. Wird sehr giftiges Material intraperi-
toneal injiziert, so bemerkt man hSufig einen raschen, selbst
blitzartigen Tod, der unter dem klassischen Bilde der
perakut endigenden Meerschweinchen-Anaphylaxie eintritt. Die
Meerschweinchen geraten zunlchst in einen hochgradigen Auf-
regungszustand, zeigen pl5tzlich einsetzende schwere Dyspnob,
lebhafte klonische Kr&mpfe, die sich insbesondere auf die
Brustmuskeln, das Zwerchfell und die Bauchmuskeln lokali-
sieren, werden cyanotisch and gehen unter alien Zeichen einer
Erstickung zugrunde.

Oeffnet man sofort nach dem Tode der Tiere den Brust-
korb, so sinken die Lungen nicht wie bei anderweitig getdteten
in den Brustraum zurfick, nur sein hinterstes Drittel ein-
nehmend, sondern sie bleiben als starre gebl&hte SBcke, das
Herz fast ganz flberlagernd, in ihrer ursprtlnglichen Lage. Sie
sind dabei hHufig blaB, immer maximal geblBht, meist auch
trocken, lassen aber manchmal kapill&re Blutungen und ein
mehr minder deutlich ausgesprochenes Oedem erkennen. Das

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578

Hermann Pfeiffer,

Herz, iu dem sich, wie in den Ge^fien, flfissiges Blut be>
findet, trifft man hgufig noch schlagend an. In den Bauch*
organen findet sich eine lebhafte Hyper&mie, die Gallenblase
ist bis zum Platzen mit Galle gefQllt, im Magen und Darm
sind hSufig Ekchymosen und auch grOfiere Blutungen wahr-
zunehmen.

Bei langer iiberlebenden Tieren, insbesondere aber bei
solchen, welche einer eben subletalen Vergiftung entgangen
sind und dann getdtet wurden, fehlen die Zeichen der Lnngen-
blahung und der Erstickung vdllig, daffir sind meist die
Nieren, seltener die Leber deutlich degeneriert und ins¬
besondere der Magen manchmal wie besat mit kreisrunden
Ekchymosen, nach langerem Erankheitsverlaufe mit eben
solchen, oft bis in die Muscularis reichenden Geschwfiren.

Haben sich subletal, wenn auch sehr schwer vergiftete
Tiere von ihrem Temperatursturz und damit auch von den
(ibrigen Erscheinungen der Harnvergiftung erholt, so bieten
sie durchaus den Anblick von normalen Tieren dar, sie sind
munter und freBlustig. Prflft man bei solchen Tieren die
Kdrpertemperatur, so wird man regelmafiig finden, dafi diese
nicht nur zur Norm zurUckgekehrt ist, sondern einer lebhaften,
oft 2 und raehr Grade Celsius betragenden und durch Stun-
den und Tage anhaltenden Fiebersteigerung Platz ge-
roacht hat. Verwendet man ganz kleine Mengen dieser RUck-
stande verdUnnt intraperitoneal oder noch besser, um die Re-
sorptionsverhaitnisse ungtinstiger, die Aufsaugung also lang-
samer zu gestalten, eine subkutane Einbringung in die Tiere,
so tritt regelmafiig entweder nach einem ganz geringffigigen
Temperaturabfall ein starkerer Fieberanstieg der Temperatur
ein, Oder aber das letztere ereignet sich ohne vorherigen Tem¬
peratursturz. Ganz dasselbe kann man bei den Harnen ver-
schiedenster Provenienz, z. B. auch an Meerschweinchenharnen
dem Meerschweinchen gegentlber beobachten.

Als Beispiel sei die Tabelle IV angefuhrt. Sie bringt die Versuchs-
ergebnifise einer Eeihe teils im akuten (anaphylaktischen) MweiQzerfall ge>
wonnener toxischer Meerschweinchenharne (Tier No. 1, 3, 6, 8, 10, 14, 19,
21, 24), teils die Hurne von normalen Tieren (die ubrigen Nummem), teils
bei intraperitonealer, teils bei subkutaner Einfiihrung in das Versuchstier.
Da bier die Vorbedingungen fiir die wechselnde Giftigkeit vorderhand be-

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Weitere Beitrage zur Eeniitnis der Ueberempfindlichkeit etc. 579

TabeUe IV.

Harnfieber.

No.

Injektionsart und
Menge

— Tem¬
peratur

Zdt

— Shock

-F Tem¬
peratur

Zeit

+ Shock

1

^ 2 H, intraperitoneal

45

4

90

7

2

2 H. subkutan

2

30

30

26

3

2 H,

15

90

675

12

4

2 H, intraperitoneal

1

30

15

15

5

2 H,

0

00

0

11

6

2 H,

19

300

2 850

7

2 H,j subkutan

4

120

240

11

8

2 H« intraperitoneal

40

600

12000

9

i 2 Hg subkutan

9

120

540

20

10

| 2 Hi intraperitoneal

18

140

2160

10

11

2 Hi subkutan

0

0

0

7

12

2 H, intraperitoneal

6

90

270

13

2ELg subkutan

i

0

0

13

14

2H^ intraperitoneal

30

360

5 400

15

2 Hs subkutan

0

0

0

17

16

2 H. intraperitoneal

0

0

0

8

1800

7 200

17

2 H,

0

0

0

25

1440

18000

18

2 H,

0

0

0

20

600

6000

19

2 H;

17

240

2 040

20

2 H 7 subkutan

0

0

0

10

210

1050

21

2 Hg intraperitoneal

29

270

3 915

10

22

2 Hg subkutan

0

0

0

5

23

2 H 0 intraperitoneal

22

270

2 970

24

2 Hj, subkutan

0

0

0

5

90

225

langlc^ Bind und lediglich daa Verhalten der Temperatur der Tiere von
Bedeutuug ist, wurde auch die Art der Giewinnung des InjektioDsmaterialee
bier nicht angefuhrt, sondem in den zngehorigen kleinen unter „— Tem-t
peratur^' der Temperatursturze in Zehntelgraden und die Zeitdauer bis
zur Riickkehr zur Norm in Minuten, unter „+ Temperatur" die Grofle
der Fiebersteigerung und ihr ZeitausmalS angefuhrt Nach der Art der
quantitativen Auswertung der anaphylaktischen Shocks wurden, wie dies
spater noch nMher b^iindet werden soil, unter „— und + Shock" aus den

angegebenen GrdOen nach der Forme! S = - - - 2 -

um Vergleichspunkte zu schafien, die angefiihrten Werte berechnet Wo
fur den Fieberansti^ der Shock nicht in der TabeUe ang^eben wurde,
unterblieb das, weU entweder die Tiere nicht bis zur Riickkehr zur Normal-
temperatur gemessen werden konnten, oder aber das Fieber tagelang
anhielt.

Bei genauerer Betrachtung der TabeUe ergibt sich nun,
dafi ausnahmslos der Einverleibnag des Harnes ein mehr
minder lebhafter Fieberanstieg folgte und das zun&chst gleich-
gtiltig, ob die Temperatur zuerst infolge der Giftwirkung ge-

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580

Hermann Pfeiffer,

fallen war oder nicht Weiterhin zeigt die Auswertung ein
und desselben Harnes an zwei Tieren, bei dem einen intra-
peritoneal, bei dem anderen snbkutan, dafi auf dem zweiten
Versuchswege, also bei ungdnstigeren ResorptionsverhlLltnissen,
der Temperatursturz wesentlich geringer war als auf dem
ersten oder bier ganz fehlte, wkhrend er dort ausgesprochen
in die Erscheinung trat, der Fieberanstieg aber gerade von
der Subcutis aus ein lebhafterer und l&nger danernder ist.
Besonders instruktiv in dieser Hinsicht ist z. B. Harn 1
(Tier 1 und 2), Harn 3 der zweiten Abteilung (Tier 14 und 15).
Endlich ersieht man, daB g^nzlich ungiftige Harne (wie No. 4,
5 und 6 der zweiten Abteilung), denen eine temperaturherab-
setzende und demnach auch eine anderweitige Giftwirkung
Tollst&ndig mangelte, dennoch immer noch deutliche Fieber-
reaktion auslosten.

Es sind das auch fQr Harnrflckst&nde gflitige Ergebnisse,
die nicht anders gedeutet werden k5nnen, als dafi dieselbe
Substanzoder dieselben Substanzen im Harne, welche
in grbBerer Dosis oder bei pidtzlichem Eintritt in
den Organismus einen oft auBerordentlich intensiven Tem¬
peratursturz hervorrufen, in kleiner Menge oder
bei allmahlicher Passage Fieber erzeugen. Wah-
rend die Tiere in der Hyperthermie — sei sie nun ein Folge-
zustand nach einem Temperatursturz oder unmittelbar der
Einspritzung gefolgt — munter sind und bei einfacher Be-
obachtung sonst keinerlei Krankheitserscheinungen erkennen
lassen, bieten sie wahrend des Temperaturabfalles,
und das strong proportional seiner Starke, Ver-
giftungsbilder dar, wie sie dem protrahiert ver-
laufenden, im schwersten Falle dem akut zum
Tode ftihrenden anap^hjlaktischen Shock durch-
aus entsprechen.

Diese bisher beschriebene Uebereinstimmung in der Wir-
kung von Harnrflckstanden mit dem Vergiftungsbilde, das ich
in mehr als zweijahrigen Erfahrungen bei der Ueberempfind-
lichkeit zu sehen gewohnt bin, war so weitgehend und voll-
standig, daB es wunschenswert erschien, auch das Blutbild
der mit Harn vergifteten Meerschweinchen des
genaueren zu verfolgen. Sollten wirklich zwischen beiden

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TabeUe V.

Leukopenie bei Harnvergiftung.

Weitere Beitrage zur Eenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 581

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582

Hermann Pfeiffer,

VergiftuDgsbildern nHhere BeziehuDgen bestehen, so mufite
erwartet werden, daB auch bier zur Zeit des Temperatur-
stiirzes die Leukopenie aufzufinden sei, welche nach der Er-
holung in eine ausgesprochene polynuklekre Leukocytose
iibergehe.

Tabelle V gibt einige der einschlBgigen Versuche im
Detail wieder, Tabelle VI eine knappe Uebersicht fiber die
Resultate.

Die Besultate wurden in der Weise gewonnen, dafi an einer Beihe
von Meerschweinchen vor der Einspritzung der Hamldsung durch einen
Schnitt ins Ohr oder Stich in die rasierte und gereinigte Grenickhaut Blut
entnommen imd mit dem Zeifischen Ziihlapparat die Leukocytenzahl be-
stimmt wurde. In verschiedenen Abstanden nach der Injektion wurden
dann fortlaufend sowohl die Korpertemperatur der Here als auch das Ver-
halten der weifien BlutkSrperchen gepruft. Dabei stiefi ich haufig im
Stadium des tiefsten Temperatursturzes insofern auf Schwierigkeiten, als
dann, so leicht dies fruher moglich war, aus der Haut und dem Unter-
hautzellgewebe des Tieres oft nicht ein einziger Bluttropfen zu erhalten
war. Unter solchen Umst^den war ich insbesondere bei starken Be-
aktionen, um keinen Versuchsfehler zu schaffen, gendtigt, aus der Vena
jugularis das Blut zur Untersuchung zu entnehmen. Auch dies fiel oft
schwer, da das Gefafi haufig koUabiert und fast blutleer angetrofien wurde
und sich erst nach vorhergehender zentraler Ligatur allmahlich fiillte.

Alle derartigen Versuche fielen gleichsinnig und eindeutig
aus. Es zeigte sich nfimlich, daB in demselben AusmaBe, als
mit zunehmender Reaktion auf die Harninjektion die Kfirper-
temperatur abfiel, auch die Zahl der Leukocyten eine
betrfichtliche Verminderung erfuhr, so zwar, daB sie
bis zu 50 und mehr Prozent der Ausgangsmenge verringert
wurde, weiterhin, daB die stfirkste Entwicklung dieser
Leukopenie mit dem Temperaturminimum, nach
dem frfiher Gesagten auch mit der stfirksten Entwicklung der
anderen Krankheitserscheinungen zusammenfiel, wfihrend an-
dererseits bei eintretender Erholung, und das nach MaB-
gabe der Rfickkehr der Temperatur zur Norm
auch die Zahl der Leukocyten wieder zunahm, um
endlich die ursprfinglichen Werte wieder zu erreichen, ja sie
in Form einer ausgesprochenen Leukocytose um ein
Betrfichtliches zu fibertreffen. Die letztere ist, wie ich hier
hervorheben mfichte, eine polynukleSre und halt stunden-
und tagelang an.

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Uebererapfindlichkeit etc. 583

So ist z. B. Tier 9 der Tabelle, welches zu Beginn des Versuches die
Zahl von 28000 Leukocyten auswies, ein Meerschweinchen gewesen, welches
2 Tage zuvor eine schwere Harnvergiftung diirchgemacht hatte, also, wenn
man die Durchschnittszahl der weiBen Blutkdrperchen fiir das normale
Meerschweinchen etwa mit 12—13000 annimmt, noch immer im Ziistand
einer ausgesprochenen Leukocytose sich befand. Gleichwohl reagierte es
auf die Haminjektion mit einem ausgesprochenen Leukocytensturz, dem
nach dem Abklingen der ICrankheitserscheinungen neuerlich eine Ver-
niehrung der weiUen Blutkdrperchen uber die normalen Verhiiltnisse hinaus,
und zwar bis zu 31300, gefolgt war. Vgl. dazu auch die Fig. 1, die einen

einschlagigen Versuch kurvenmiiSig wiedergibt. Die ausgezogene Kurve
entspricht den Temperaturverhiiltnissen, welche durch die Einteilung linker-
seits veranschaulicht wird, die unterbrochene Linie spiegelt die Verhiiltnisse
der weifien Blutkdrperchen desselben Tieres wider. Diese Werte finden
sich in der Einteilung rechterseits.

In der Uebersichtstabelle VI sind Temperaturreaktionen,
Leukopenie und Leukocytose, sowie die Summe der Schwan-
kungen in der Zahl der weiBen Blutkdrperchen fur eine Aus-
wahl von 11 Versuchstieren wiedergegeben. Sie soli die vor-
gefundenen Verhaltnisse noch anschaulicher niachen (s. p. 584).

Wir sehen also auch hinsichtlich dieses Phano-
mens der Leukopenie und der ihr folgenden
Leukocytose eine vdllige Uebereinstimmung mit
dem Bilde des anaphylaktischen Shocks, das sich
au^h noch durch Bestimmung der Gerinnungszeit des

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584

Hermann Pfeiffer,

TabeUe VI.

Leukopenie bei Harnvergiftung.
Uebersichtstabelle.

No.

Teinperatur-

stiirz

Leukopenie

von

Leukocytose

von

Summe der Leukocyten
tSchwankung

1

— 7,5°

7250

2250

9 500

2

— 6,2°

12 785

750

13 535

3

— 5,5°

4300

2200

6 500

4

— 4,0°

4 200

1050

5 250

5

-3.2°

7 300

4000

11300

6

— 2,8°

2 600

2300

4900

7

O r,o

6250

—

6255

8

— 2,5°

3450

2300

5 750

9

— 1,8°

11000

3050

14050

10

-1,5°

5000

2500

7 500

11

-1,5°

1850

8000

9 850

Blutes der Tiere vor und wahrend der Dauer der Vergiftung
vervollstandigen lieCe. Ich fflhre die einschlagigen Versuche
deshalb nicht an, weil das hier gewahlte Versuchstier, das
Meerschweinchen, vermdge der grofien Gerinnungsfahigkeit
seines Blutes und der nur geringen Ausschlage, die es in
dieser Hinsicht sowohl im anapbylaktischen Shock als auch
bei der Peptonvergiftung gibt, wenig zu solchen Versuchen
geeignet erscheint und ich gerade diese Analogic an einer ge-
eigneteren Species, am Hunde, spater noch eingehend ver-
folgen m5chte. Immerhin kann ich aber betonen, dafi ich in
mehreren einschlagigen Versuchen, selbst am Meerschweinchen,
wenn ich die Gerinnungszeit seines Blutes im Verlaufe einer
Vergiftung mit Harnrflckstanden prflfte, eine deutliche Ver-
zbgerung der Gerinnungszeit selbst um mehrere Minuten im
Vergleich zur Norm feststellen konnte. Eine Aufhebung des
Gerinnungsvermdgens erfolgte niemals, wie das hbrigens auch
bei der Ueberempfindlichkeit und bei der Peptonvergiftung im
Gegensatze zum Hunde nicht der Fall ist.

Prflft man derartige Rlickstande, wie dies schoh in
frtiheren Arbeiten wiederholt beschrieben wurde, bei sub-
kutaner Einftthrung, so wird man im Gegensatz zur
weiBen Maus, die lokal keinerlei Erscheinungen zeigt, regel-
maBig sehen, wie am Orte der Einwirkung rasch ein teigiges
Oedem sich entwickelt. Die Haut wird nun rasch in weitem

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Weitcre Beitrage zur Kenntnis der Ueberenipfindlichkeit etc. 585

AusmaBe blaB, mit Hamorrhagien durchsetzt, die Epidermis
laBt sich durch Dariiberstreifen in Fetzen von der Cutis ab-
losen. Diese selbst wird zunderartig, morsch und imbibiert
sich haufig mit BlutfarbstofT. Am Tage nach der Injektion
ist die Haut vbllig nekrotisiert, tief dunkelbraun gefarbt. Im

Figur 2.

weiteren Verlaufe vertrocknet die zugrunde gegangene Haut-
stelle zu einem dunkelbraunroten, derben, lederartigen Schorf,
der sich scharf von der umgebenden nicht zerstorten Haut
demarkiert und von einem entziindeten Hofe umgeben ist.

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586

Hermann Pfeiffer,

Im Verlaiife einer Woche stofit sich der Schorf ab. Es liegt
dann ein kreisrundes Oder ein Ifingliches, oft bis in die tieferen
Schichten der Bauchwand ubergreifendes, wie mit einem Loch-
eisen ausgeschlagenes Geschwiir mit lebhaft granulierendem
Grunde vor, das aufgeworfene, stark infiltrierte RSnder besitzt.

Figur 3.

Es heilt im Verlaufe weniger Wochen unter Bildung einer
strahligen Narbe.

Man erkennt aus dieser Beschreibung, noch besser aus den
beigegebenen Figuren 2 und 3, die von einem subkutan mit Harn-

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc, 587

rQckstand behandelten Meerschweinchen gewonnen wurden, daB
sich hier am Orte der Gifteinwirkung ein ProzeB
abspielt, welcher nicht unterschieden werden
kann von den als ^Arthussches PhS-nomen** be-
schriebenen lokalen Nekrosen- und Geschwtlrs-
bildungen Oberempfindlicher Tiere mit dem fiir
unvorbehandelte unsch&dlichen Antigen der Vorbehandlung.

Werden derartige, die Meerschweinchen- und Kaninchen-
hant im Gegensatz zu jener der Mans in einigen Stunden
vollstfindig zerstbrende Rflckst&nde, etwa durch Eintr&ufeln in
den Bindehautsack, auf intakte Schleimhaut gebracht,
so vermdgen sie diese nicht zu sch&digen.

3. Reagenzglasversuch.

Ich kann mich fiber diesen Teil meiner Versuche sehr
kurz fassen, da sie im wesentlichen nur eine Bestfitigung der
schon vor Jahren in der Zeitschrift ffir Hygiene (1906 und
1907) wiedergegebenen Resultate bringen, auf die ich bezfig-
lich der Einzelheiten verweise.

Verffihrt man bei der Gewinnung der Rfickstfinde un-
vorsichtig, indem man sie bei zu hohen Temperaturen einengte,
Oder Ifingere Zeit dem Lichte ausgesetzt stehen liefi, und prfift
sie in fallender Menge an den Erythrocyten einer beliebigen
Tierart nach exakter Neutralisation, so verhalten sich die
Lbsungen vbllig inaktiv. Sie vermbgen die roten Blutkbrper-
chen weder zu agglutinieren noch zu Ibsen, auch dann nicht,
wenn man Eomplement zusetzt.

Geschah die Einengnng vorsichtig und wird die Lbsung
der Rfickstfinde sofort oder innerhalb der ersten zwei Tage
nach ihrer Gewinnung in derselben Weise geprfift, so tritt
eine stfirmische Agglutination in die Erscheinung. Wie frfiher
schon wiederholt hervorgehoben, ist dieses von mir zuerst
beschriebene und mit dem Namen nHamagglutinin^ bezeichnete
Produkt auBerordentlich labil, so daB Temperaturen von 60°
es schon zu schfidigen, solche von 80° in kfirzester Zeit vbllig
zu zerstbren vermbgen. Dnrch Schweinsblasen dialysiert bleibt
es auch bei tagelanger Dialyse in der Innenflfissigkeit und
entsteht bei der Einengung des Harnes aus einer weder agglu-
tinierenden noch hemmend wirkenden Substanz.

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588

Hermann Pfeiffer,

Sie ist sowohl von der nekroseerzeugenden als auch von
der allgemein toxischen Giftwirkung strong zu scheiden. Ferner
gelingt es, den agglutinierenden K6rper durch beliebige Ery-
throcyten quantitiv zu binden, bezw. isoliert durch Erhitzen
auf 60° zu zerstdren. Derartig behandelte, ursprdnglich den
Erythrocyten gegenflber aktive Rttckst&nde haben nunmehr
ihre Wirkung auf die Blutkorperchen vdllig eingebtlOt, w&hrend
sie in demselben Ausmafie wie frfiher die Meerschweinchen-
cutis in wenigen Stunden zu zerstdren vermdgen, diese Tiere
und die weifien Mduse unter einem schweren Temperatursturz
in typischer Weise und in einem ganz unverfinderten AusmaGe
wie fruher sch&digen. Auch auf einem anderen Wege, fUr den
hier neuerlich ein Versuchsbeispiel gebracht sei (Tabelle VII),
gelingt es mancbmal, nicht immer, ohne weiteres zu zeigen, dafi
nicht nur diese agglutinierende Fdhigkeit von den Qbrigen beiden
Komponenten getrennt, sondern auch diese beiden isoliert
voneinander zerstdrt werden kdnnen, und zwar auf dem Wege
einer Erhitzung auf 80—100° C (vgl. dazu die zahlreichen
und ausfhhrlichen Belege der beiden eben zitierten klteren
Arbeiten).

TabeUe VII.

Harnriickstande (Erhitzung, Dialyse).

No.

Ge-

wicht

g

Ham riickstand

Injektion
intraperiton.
bezw. subk.

ITemperat,

Zeit

Shock

Leuko-

penie

Lokal-

wirkung

3 -

ccm

lu. 2

380

HR 1:8 unverandert

2 ccm

55

510

14025

— 4 300

N = 3,5:2,0

0,04

3„ 4

350 1

„ 1:8 1 Std.auf lOO'C

2 „ I

25 360

4500

- 6200

N = 0,5:0,5 !

0

5„ 6

.316

1 „ 1:8 2 „ „ 100”C

221240

2 640

- 3 500

glatt ]

0

7„ 8

400 j

„ 1: 10 unverandert i

2 „ 65|540

17 550

— 11000

N = 3,5:4

0.25

9 „ 10

425

„ 1 : 10 24 Std. dialvsiert'

9

15120

900

- -

glatt

0,25

11„12

400 1

„ 1:2024 „ ; 1

2 „ |] 8,240

2160

- 2000i

013

Ein aus Menschenham durch vorsichtiges Einengen gewonnener
neutralisierter Riickstand vermag, intraperitoneal beigebracht (Tier 1 der
Tabelle), unter schweren Krankheiteerscheinungen einen TemperaturabfaU
von 5,5” C beim Mecrschweinchen auszulosen, subkutan die Haut eines
anderen Tieres in dem AusmaHe von 3,5:2,0 cm zu zerstdren und 5-proz.
Meerschweinchenblutkdrperchen noch in einer Menge von 0,04 ocm voll-
stlindig zu agglutinieren. Nach einstiindigem Erhitzen auf 1(X)” C und
Absattigung des gebildcten Ammoniaks mit Salzsaure hat er seine Wirkung
auf die Erythrocyten voUig eingebiifit, seine allgemeinen und lokalen Wir-
kungen sind zwSr geschadigt, aber immerhin noch vorhanden. Wurde die

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Weitere Beitr^e zur Kenntnis der Ueberempfindlicbkeit etc. 589

Erhitzuog noch welter auf 2 Stunden auBgedehnt, so war, ohne dafi die
allgemelDe Wirkung welter weseotlich beeintrachtigt worden ware, die lokale
Nekrose nicbt mehr nachweisbar, natlirlich auch bier der Buckstand voUig
unwlrksam g^en Erythrocyten. Im Gregensatze dazu batten andere Ruck-
stande (Versucbstiere 7—12), wabrend sie unverandert intensir nekrotisierend
zu wirken vermocbten und scbwere allgemeine Vergiftungserscbeinungen
vom Peritoneura aus erzeugten, nacb einer 24-stundigeD Dialyse durcb
eine dicbte Scbweinsblase diese Wirkung fast voUig eingebiifit, wabrend
ibr agglutinierender Titer quantitativ erbalten war.

Setzt man die Dialyse lange genug, durch 2 oder 3 Tage
gegen oftmals gewechseltes Wasser fort, so gelangt man, wie
ich seinerzeit zeigen konnte, zn einer InnenflQssigkeit, welche
vdllig reaktionslos von den Meerschweinchen und M^usen
vertragen wird, hingegen ihr Agglutinationsvermdgen vollauf
bewahrt hat.

Ich will, wie gesagt, hier auf diesen merkwfirdigen Kdrper
nicht wieder eingehen, da er, wie aus den spelter mitzuteilen-
den Versuchen dber Anaphylaxie und H&molysinvergiftung
hervorgeht, fttr das durch toxischen Harn gesetzte Vergiftungs-
bild vdllig bedeutungslos ist. Das aus dem Grunde, weil er
in dem genuinen Harn noch niemals angetroffen werden konnte.
Dieses Faktors sei hier nur Erwfthnung getan, urn einen iQcken-
losen Ueberblick fiber die einschlfigigen Erfahrungen zu geben
und um zugleich filtere Resultate neu zu bestfitigen. Hingegen
seien noch die beiden anderen konstant anzutreffenden Gift-
wirkungen besprochen, die wir spfiter bei den hochtoxischen
Harnen anaphylaktischer und mit Hfimolysinen vergifteter
Tiere regelmfifiig antreffen werden.

Dafi beide nichts mit der Wirkung konzentrierter Salz-
Idsung zu tun haben, geht trotz ihrer leichten Dialysierbarkeit
durch vdllig intakte Schweinsblasen aus der eben erwilhnten
und neuerlich sichergestellten Tatsache hervor, dall sie durch
protrahierte Erhitzung getrennt voneinander zerstdrt werden
kdnnen, was zugleich beweist, daB sie selbst auf zwei von¬
einander vdllig unabhfingige Kdrper zurfickgeffihrt werden
mfissen ^). Diese Folgerung ergibt sich weiterhin mit zwingen-

1) Vgl. in dieser Hinsicbt auch die im folgenden Kapitel in der
Tabelle „paradoxe Hame“ bei der Anaphylaxie angefuhrten Erfahrungen,
wonacb beide Komponenten vdllig unabh^gig voneinander zu verschiedenen
Zeiten im Ham auftreten kdnnen.

Zeiuchr. f. ImmaniUtsfortchaDC. Orif. Bd. X. 39

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590

Hermann Pfeiffer,

der Notwendigkeit auch aus den in Tabelle VIII zusammen-
gestellten Beobachtungen, dafi verschiedene, anf demselben
peinlichst eingehaltenen Versuchswege dargestellte RflckstSnde,
welche das vbllig gleicbartige, von ein und derselben Person
abgeschiedene Ausgangsmaterial in derselben Eonzentration
enthielten, hinsichtlich ihrer allgemeinen Giftwirknng auf das
Meerschweinchen tiefgehende DiflFerenzen aufwiesen.

TabeUe VIII.

Eonzentration und Wirkung von HB.

No.

Eonzen¬

tration

Menge

ccm

EntsprichtHam-
menge von
ccm

Tempera-

tur

Zeit

Shock

1

1:25

1,0

2,5

23

480

5520

2

dgl.

1,0

2.5

33

480

7920

3

1:5

2,0

10,0

10

150

750

4

dgl.

1,0

5,0

16

180

1440

5

jj

1,0

5,0

33

270

4455

6

2,0

10,0

40

300

6000

7

1,0

5,0

t95

t 90

145 725

8

1:10

1,0

10,0

10

150

750

9

dgl.

1,0

10,0

21

180

1890

10

jj

2,0

20,0

27

300

4050

11

fj

2,0

20,0

35

360

6300

12

JJ

2,0

20,0

t30

1 t 30

149 550

So Bind die bei den Versuchstieren 1 und 2 ausgewerteten Ruckstande
der Eonzentration 1:2,5 wesentlich giftiger als der nachstfolgende, welcher
doppelt 80 konzentriert ist. Von Riickstanden dieser Eonzentration (1:5)
vermag der eine ein Meerschweinchen kaum krank zu machen (l^er 3),
ein anderer in derselben Menge (Tier 7) es akut unter einem Temperatur-
abfall von 9° C zu tdten. Dieselben Verhaltnisse ergeben sich fiir die
nfichsthohere Eonzentration 1:10.

In ebenso beredter Weise sprechen Erfahrungen mit
Riickstanden, die lUngere Zeit aufbewahrt werden. H^nfig
zeigt sich innerhalb der ersten Tage (was ilbrigens manchmal
auch bei der Erhitzung auf dem Wasserbade vorkommt) eine
betr&chtliche Zunahme, spSter, ohne dafi Niederschlage aus-
fallen, Oder sonst der Harn sich verS,hdern wiirde, eine ebenso
deutliche Abnahme seiner Wirksamkeit. Hier ein Beispiel:

Ein von menschlichem Ham nach Ekitfernimg der alkohoUosIichen
Bestandteile in gewohnter Weise gewonnener Riickstand zeigt bei der intra-
peritonealen Prufung an 4 Meerschwdnchen im Gewichte von 310—350 g
in der Menge von 2,0 ccm Temperaturabnahmen (und dementsprechend

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Weitere Beitriige ziir Kenntnis der Ueberempfindlichkeit ete. 591

Starke anderweitige Vergiftungserscheiniuigen) von 2^, 2,3, 2,7 und 2,5 ® C.
Die Tiere haben sich nach 6 Stunden vollig wieder erholt. AIs dieser
Kiickstand nach 9 Tagen neuerdings an vier gleich schweren Versuchstieren
gepriift wurde, gingen zwei von ihnen innerhalb weniger Minuten unter
dem typischen Vergiftungsbilde ein, zwei andere Tiere kamen eben noch
mit dem Leben davon, nachdem sie Temperatursturze von 5,0 und 5,9 ” C
durchgemacht batten.

Andererseits erwiesen sich wiederholt hochgiftige Riick-
strode, die durch mehrere Wochen dem diffusen Tageslichte
ausgesetzt waren, nach dieser Zeit als beinahe wirkungslos.
Auch in dieser Hinsicht kann ich die Wiedergabe von Details
vermeiden und auf meine vielfUItigen tilteren Erfahrungen
hinweisen, die am angegebenen Orte niedergelegt und durch
die jdngeren, exakteren, weil an dem empfindlicheren Kriterium
der Temperaturreaktion gewonnenen, nor vollauf bestdtigt
werden.

DaB flbrigens die allgemeine Giftwirkung auch unver-
^derter Harne — und dasselbe muB dann auch fdr ihre
Vakuumrflckst&nde Ghltigkeit haben — nichts mit der Kon-
zentration ihrer Salze zu tun hat, ergibt sich, worauf ich
nochmals verweisen mdchte, schon aus Tabelle I, dnrch welche
gezeigt werden konnte, daB die Wirkung verschiedener Harne
desselben spezifischen Gewichtes ganz riesige Unterschiede
aufweisen. Mit dieser Feststellung mdchte ich es vorlBufig
bewenden lassen, bis eine kritische Sichtung der bei akutem
EiweiBzerfall im anaphylaktischen Shock und bei der HS,mo]ysin‘
vergiftung gewonnenen Erfahrungen weitere Direktiven darftber
geben werden, was ftir K6rper filr die beschriebenen Ver-
giftungen in Betracht kommen konnen. Ich mbchte aber doch
darauf hinweisen, daB von Abelous und Bardier aus dem
Harn ein als „Urohypotensin“ und ^Urohypertensin** be-
schriebener Edrper isoliert wurde, der die Eigenschaften hat,
in kleinen Dosen den Blutdruck der Versuchstiere intensiv
herabzusetzen, bezw. zu steigern, eine Wirkung, die allerdings
in neuester Zeit von Popielski auf die Wirkung eines
HUmolysines zurhckgeftihrt wird. Da nun jede Blutdruck-
senkung mit Temperaturabnahmen einhergeht, diese aber, wie
erwdbnt, im Zentrum des allgemeinen Vergiftungsbildes stehen,
so beweisen auch diese Ergebnisse der franzdsischeu Autoren,
daB wir es bei den durch Harn erzeugbaren allgemeinen Wir-

39*

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5D2

Hermann Pfeiffer,

kuDgen nicht mit dem Effekt der Summe der Harnsalze,
sondern mit dem eines bestimmten Kdrpers zu tun haben.

Das bisher fixierte Bild fiber die Wirkungen derartiger
RQckstfiDde w&re kein vollst&Ddiges, wenn nicht der oft ge-
machten Beobachtung Erw&hnung getan wflrde, dafi das
Ueberstehen einer Harnvergiftung eine sofort
auftretende und einige Tage, wenn auch in
schwflcheremAusmafieanhaltendeUnterempfind-
lichkeit gegen eine neuerliche Einbringung des-
selben Giftes schafft. In Tabelle IX ein Beleg dafQr:

Tabelle IX.

Harnwirkung in kurzen Intervallen.

d

S',

Ge¬

wicht

g

Temperatur-
abnahme nach
1. Injektion
= 2 ccm HR
1:2,5

Inter¬

val!

Temperatur-
abnahme nach
2. Injektion
= 1 ccm HR
1:5

Inter-

rall

Temperatur-
abnahme nach
3. Injektion
= 2 ccm HR
1:5

1

248

18

90 Min.

1

60Min.

2

2

257

20

dgl.

5

dgl.

4

3

215

13

6

yy

OA!

4

' 254

25

OA!

yy

OA!

5

256

18

yy

OAI

yy

OA!

6

! 298

18

yy

9

yy

5

7

1 251

20

yy

OA!

yy

OA!

8

i 225

13

i yy

OA!

y»

OA!

9

235

17

1

yy

2

yy

3

10

1 253

12

1 yy

2

yy

13

Mittel

1 17

—

2

—

1,4 >)

HR = Hamruckstand, A = sofortiger Anstd^ der Temperatur.

10 Meerschweinchen, deren Gewicht in der zweiten Koloune
angefuhrt ist, erhalten je 2 ccm eines HarnrQckstandes, der
durch Verdiinnen der Stammflussigkeit mit Kochsalzlosung in
einem Verh&ltnis von 1:2,5 hergestellt war, in 1 ccm dem-
nach 2,5 ccm Harn enthielt, also eine Giftmenge, die 5 ccm
Harn entspricht. Die Tiere reagierten darauf mit ausgiebigen
TemperaturabfUIlen und deutlicben Paresen. Erstere sind in
Kolonne 3 in Zehntelgraden Celsius verzeichnet und schwankten
zwischen 1,2:2,5®. Nach 90 Minuten waren die Tiere in ihr
Temperaturminimum eingetreten; sie erhielten nunmebr je
1 ccm desselben verdflnnten Harnrflckstandes in der Kon-

1) Nach Ausschaltung des nicht geschiitzten Tieres.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 593

zentration vod 1:5, also dieselbe Harnmenge wie frOber, nur
doppelt so koDzeotriert. Gegen diese neuerliche Giftzufuhr
ewiesen sich die Tiere 4, 5, 7 und 8 als v611ig geschfitzt.
Ihre Temperaturen blieben nicht nur gleich, sondern stiegen
sogar unmittelbar betrSchtlich an, so wie wenn die Tiere nicht
neuerdings injiziert worden wfiren. Die anderen Tiere reagierten
minimal und, wie aus Kolonne 5 hervorgeht, nur mit Bruch-
teilen jener Temperaturabnahmen, welche der ersten Injektion
gefolgt waren, wtdirend doch zu erwarten stand, dafi sie auf
eine doppelt so konzentrierte Giftldsung intensiver reagieren
wOrden. Nach Verlauf einer weiteren Stunde erhielten nun
sEmtliche Tiere je 2 ccm desselben Riickstandes in seiner
ursprtinglichen Konzentration, also eine doppelt so grolle und
doppelt so konzentrierte Menge, als bei der ersten wirksamen
Einspritzung.

5 Tiere (No. 3, 4, 5, 7, 8) verhielten sich vollkommen
refraktfir. Ihre Kbrpertemperatur stieg weiter an mit einer
fortschreitenden Besserung ihres AUgemeinbefindens; 4 weitere
Tiere reagierten in ganz unzultlnglicher Weise und nur mit
Bruchteilen jenes Ausschlages, den sie auf die halb so groBe
und halb so konzentrierte Giftdosis zum erstenmale gegeben
batten. Nur ein Tier, welches wohl der zweiten Reinjektion
gegeniiber fast vdllig geschdtzt gewesen war, erwies sich als
ungeschfltzt und reagierte (allerdings auf die doppelte Gift-
menge!) in dem Ausmafie, wie (auf die halbe Dosis!) 2 V 2 Stunden
frtther.

Aus diesem und Hhnlichen gleichsinnigen Resultaten er-
gibt sich die Tatsache, daB Meerschweinchen unter Ver-
suchsbedingungen, welche eher eine Summation
der Giftwirkungen erwarten lassen sollten, also
innerhalb knrzer Intervalle durch gesteigerte Zufnhr
des Harngiftes auf intraperitonealem Wege vdllig oder
fast vdllig geschfitzt werden kdnnen gegen das
Multiplum einer Giftmenge, welche zum ersten¬
male eine deutliche Giftwirkung an demselben
Tiere zu fiuBern vermochte.

DaB es sich bei diesem Phfinomen nicht etwa darum
handeln kann, daB neuerlich zugeffihrte Giftmengen an den
ohnehin schon vdllig gelfihmten, hier in Betracht kommenden

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594

Hermann Pfeiffer,

Apparaten nicht mehr angreifen kdonen, demnach dieser Schutz
nur ein scheinbarer ist, geht, abgesehen von den gleich zu er-
w^hnenden und bei den Anapbylaxieversuchen zu besprechenden
Ergebnissen schon allein aus dem Umstande hervor, daB bier
die Scb&digung dnrcb die erste Injektion nur eine ganz leicbte
war und von einer kompletten Lkbmung gar keine Rede sein
kann. Injizierte ich n3.mlich unvorbebandelte Kontrollen zum
erstenmale mit demselben HR der Konzentration 1:5 in Ver-
suchsmengen von 2 ccm intraperitoneal, so erkrankten sie
schwer unter Temperaturabstflrzen von 50—60 Zebntelgraden
Celsius, boten dementsprecbend aucb ein schweres allgemeines
Vergiftungsbild dar, wfihrend, wie die Tabelle lebrt, dieselben
an den anfangs nur in viel geringerem AusmaBe geschSdigten
Tieren zum grdBten Teile v611ig wirkungslos vordbergingen.

Aebnlicb, wenn aucb nicbt ebenso gflnstig, liegen die Ver-
hdltnisse, wenn man zwiscben erster und zweiter Injektion
einen Zeitraum von 24 Stunden verstreicben laBt, Versucbe,
die in Tabelle X wiedergegeben sind.

Tabelle X.

Unterempfiudlichkeit durch Harninjektion.

No.

Gewicht

Beaktion auf 2 HR
1:10

Intervall

Reaktion auf 2 HR
1:10

Schutz

1

320

^ = 3780

24 Stund.

28X240_33qq

2

420

2

365

600 ^ 75QQ

dgL

40 X 390 _ ,j,gQQ

0

3

280

^ X 450 ^

>>

?^X3^ = 4680

2

2070

4

350

25X480_gQQQ

2

>>

32 X 330 __ gggQ

2

720

5

315

27 ^^ = 7290

yy

^X 660 = 5850

1440

6

350

22 X 540 _

yy

??_X 300 ^ 3300

2

2640

7

315

2o X 485 _

22X_3»_3(|fi„

?2_X 390 ^ gggQ

2

2227

8

300

??.X ^ = 6600

2

yy

750

In dieser Tabelle ist die gleich naher zu erortemde Auswertung des
Shocks vorw^ genommen, welchen die Here durch derartige Vergiftungen
erleiden, und welcher, wie gleich hier betont werden mdge, paralld gdit

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 595

der Or56e der Temperaturabnahme. Die ersten zweistelligen Zahlen der
Kolonnen 3 und 5 geben die Temperaturstiirze in 2jehntelgraden Celsius,
die zweite dreiatelligc Zahlenrdhe die Zeitdauer in Minuten an, bis wieder
die Ausgangstemperatur erreicht war, die dritte vierstellige die aus beiden
Faktoren berechneten ShockgroQen.

E^s handelt sich hier urn 8 Meerschweinchen, welche in einem Interrall
Ton 24 Btunden je 2 ccm eines Riickstandes menschlichen Hames in der
Konzentration 1:10 erhalten batten. Dabei zeigte es sich im allgemeinen,
dali zwar die Grofie der Temperaturabnahmen bei der ersten und zweiten
Injektion nicht wesentlich voneinander verschieden war, wohl aber, da6 die
EIrkrankung dort wesentUch kiirzer und leichter verlief als hier. Wilhrend
die Tiere das erstenial im Durchschnitt durch 8—10 Stunden erkrankten,
waren sie bei der neuerlichen Injektion schon nach 5—6 Stunden im Mittel
ToUig wieder hergestellt. (Vgl. dazu auch die im Kapitel iiber Anaphylaxie
wiedergegebenen einschlagigen und viel iiberzeugenderen Besultatel).

Zusammenfassend sei nochmals hervorgehoben, daS
der Harn des Menschen und der der untersuchten Tierarten
(Meerschweinchen, Kaninchen, Pferd, Rind) Substanzen ent-
h&lt, die unter normalen Verhiiltnissen am uneingeengten
Harn kaum nachweisbar sind nnd sich nur in Form eines
ganz geringfQgigen und rasch vortlbergehenden Temperatur-
abfalles ^ufiern, in vorsichtig eingeengten Rtickst&nden aber,
an der Mans wie am Meerschweinchen geprftft, schwerste
Giftwirkungen ausldsen. Sie bestehen im wesentlichen in
einer Leukopenie, in einem ganz enorme Grade erreichenden
Absturz der Kdrpertemperatur nnd, mit diesem absolut
parallel gebend, in schweren St5rungen des Allgemein*
befindens, die sich bei Meerschweinchen bis in alle Einzelheiten
von dem protrahiert verlaufenden bezw. perakut zum Tode
fabrenden Symptomenbilde des anaphylaktischen Shocks in
keinerlei Weise unterscheiden. Das Ueberstehen einer solchen
Vergiftnng vermag gegen kurz darauffolgende neuerlicbe
Zufuhr auch grdfierer Giftmengen, als sie das erstemal
injiziert warden, zu schQtzen. Dieser Schutz verschwindet
bald wieder. Auch der Obduktionsbefund letal vergifteter
und akut zugrundegegangener bezw. schwer gesch&digter, aber
tiberlebender und durch Nackenschlag getdteter Tiere ent-
spricht in alien Einzelheiten dem von der Serumkrankheit her
gelanfigen und charakteristischen pathologiscb-anatomischen
Bilde. Auch im Zentrum des Vergiftungsbildes der weifien
Mans steht ein schwerer Temperatursturz, dem wieder die

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596

Hermann Pfeiffer,

Stdrungen des Allgemeinbefiodens parallel gehen. Diese SuBern
sich hier unterhalb gewisser Temperaturgrenzen in auBer-
ordentlich charakteristischen nervdsen Stbrungen, die identisch
sind mit den friiher mit toxischen Verbrtihungsbarnen er-
haltenen Symptomen.

Es erClbrigt noch, in aller Kflrze Versuche zu erwahnen,
welche die kilnstlich durch Uretherenunterbindung
geschaffene Meerschweinchen- und Kaninchen-
u ramie betreffen und das Ziel batten, zu prtifen, ob das
oben beschriebene, durch Injektion toxischer Harnrflckstande
erzeugbare Bild der Uramie auch auf diesem Wege geschaifen
werden kann.

Frflhere Studien, in denen den Temperaturverhaitnissen
und Blutbefunden keine Rechnung getragen worden war, batten
ergeben, daB beide Species nach beiderseitiger Nephrektomie
Oder isolierter Ureterenunterbindung unter Erscheinung der
Somnolenz erkranken, ihr Serum im Verlaufe der Krankheit ins-
besondere agonal giftige Eigenschaften erhait, wie sie denen des
VerbrQhungsharnes und der HarnrQckstande absolut gleichen
und die pathologisch-anatomischen Befunde — fettige Ent-
artung der drtisigen Organe, Auftreten massenhafter Ekchy-
mosen im Magen und Darmkanal, Erscheinungen der Gastro¬
enteritis toxica — sich gleicbfalls mit den dort und bei ver-
briihten Tieren derselben Species absolut decken. Insbesondere
was die so charakteristische Bildung ekchymotischer Geschwfire
anlangt, wurden meine Ergebnisse mittlerweile von Sauer-
bruch, Heyde und Birkelbach vollauf bestStigt.

Es konnte nun untersucht werden, wie sich die Kdrper-
temperatur solcher urftmischer Tiere verhklt, ob
auch sie, den Erfahrungen bei der Harnvergiftung ent-
sprechend, dauernd unter der Norm bleibt und ob auch hier
eine Leukopenie nachgewiesen werden kdnne. Ein absoluter
Parallelismus — kritischer Temperaturabfall und ebensolche
Leukopenie — konnte dabei freilich nicht wie dort erwartet
werden, wo der Organismus pldtzlich durch groBe Mengen von
Harngift flberschwemmt wird, wEhrend er hier nur all-
mShlich sich anreichern kann.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 597

TabeUe XI.

Uramie (Temperatur und Leukocyten).

Zdt

Meerschweinch. 1

Meerschweinch. 2

Meerschweinch. 3

Temp. Leukoc.

Temp.

Leukoc.

Temp.

Leukoc.

Beginn der Operation

39,5

13150

38,5

13 750

38,0

12050

Nach der Operation

32,0

33,8

33,0

4 Std. nach aer C

)perat

34,6

8 „

97 97

9)

34,5

13150

12 „

jf

34,0

12 000

35,0

13 750

7750

16 „

jj

34,0

31,0

20 „

99

iy

33,5

13 800

28,4 t

6000 t

24 „

99

79

28,0 t

45 000 t

27,5 t

6000 t

40 „

7f

48 „

99 79

9'

64

99 79

77

68 ,

99 99

72

• -* jf

99 99

99

1

Zeit

Meerschw. 4

Meerschw. 5

Kaninchen 1

Kaninchen 2

Temp.

Leuk.

Temp.

Leuk.

Temp.

Leuk.

Temp.

Leuk.

B^nn der Operation

38,0

15 750

38,3

15000

39,0

8250

39,5

15000

N^h der Operation

33,7

32,0

36,0

36,8

4 Std. nach aer Operat.

34,0

38,0

23000

8 „

99

99

37,0

12 700

37,5

15 750

12 „

99 99

99

37,5

9000

16 „

99 99

99

32,0

32300

28,0

37,0

20 „

99 99

99

27,81

22000

27,01

9000t

37,0

14000

24 „

99 99

99

t

38,0

40 „

99

37,5

14000

48 „

99 99

99

37,4

64 „

79 99

99

36,0

68 „

99 79

99

35,3

72 „

99 99

99

33,0

7500

getot.

Die eiDSchl&gigen Erfahrungen sind in Tabelle XI wieder-
gegeben. Sie betreffen 5 Meerschweinchen und 2 erwachsene
Kaninchen. Die KontroUversuche — einseitige Ureteren-
unterbindung — sind in der Tabelle nicht wiedergegeben. Die
Operationen wurden durchwegs in Narkose mittels Lumbal-
schnitt ausgefQhrt, die Ureteren beiderseits ligiert, die Nieren
reponiert, die Wunde durch Naht und Kollodium versorgt.

W&hrend nun einseitig operierte Tiere nach der Operation
sich sehr rasch wieder erholen, munter und frelllustig sind,
ihre durch die Fesselung bei der Operation gesunkene Kdrper-
temperatur rasch zur Norm zurdckkehrt und sich ira Blutbilde

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598

Hermann Pfeiffer,

hinsichtlich der Leukocyten nichts wesentlich Sndert, bleiben
beiderseitig operierte Tiere matt, somnolent. Ihre K6rper-
temperatur bleibt, wie aus der Tabelle hervorgeht und wie
nach den Ergebnissen der Harnvergiftung nicht anders zu
erwarten stand, konstant weit hinter der Norm zurflck. DaB
es sich auch dabei nicht um Kollapstemperaturen handelt,
geht aus der Tatsache hervor, daB auch tagelang uberlebende
Tiere vom Beginn an subnormale Korpertemperaturen auf-
weisen und diese pramortal Grade erreicht (28, 27® C), wie
wir sie bei anderen Vergiftungen oder tSdIichen Erkrankungen
nicht vorfinden. Insbesondere bei Meerschweinchen fallen dann

'1

Figur 4.

bald die vom anaphylaktischen Shock her so wohlbekannten
Paresen der Hinterbeine und die charakteristische „Igelstellung“
auf. Das Fell straubt sich eigentiimlich, die Tiere erschauern,
zeigen hie und da terminale KrSmpfe und gehen endlich unter
znnehmender Somnolenz zugrunde.

Verfolgt man — was wieder der Blutleere der peripheren
Gef^Be wegen mit fortschreitender Erkrankung immer schwerer
failt und terminal haufig nur durch Aufsuchen der Halsvenen
mdglich ist — die Leukocyten naher, so lassen sich zweierlei
Arten von Befunden voneinander abgrenzen. In einer Zahl

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 599

der Falle kam es sofort zu einem gleichmSlSigen und zu-
nehraenden Abfall der Leukocytenzahl (vgl. Fig. 4), so zwar,
dafi terminal die Leukopenie 50 Proz. und mehr der
ursprunglichen Zahl der weiBen Blutkorperchen betragt.

In anderen Fallen aber, und das war insbesondere bei
den langer uberlebenden Kanincben ausgesprochen, tritt zu-
nachst eine oft ganz
exzessive polynuk-
leareLeukocytose
ein, so zwar, daB sich
die Zahl der im Blut-
strome zirkulierenden
weiBen Blutkorperchen
— und das bei sub-
normaler Kbrpertem-
peratur — verdoppelt
und sekundar erst eine
intensive Leukopenie
eintritt (vgl. Fig. 5).

Ueberleben die
Tiere langere Zeit (wie
dies insbesondere beim
Meerschweinchen 1 u.

2, sowie beim Kanin-
chen 5 der Fall war),
so ergibt die 0 b d u k-
tion, was wieder aiteren Erfahrungen entspricht, in dem meist
prall mit Futter gefiillten Magen zahlreiche, im Darm weniger
zahlreiche ekchymotische Geschwiire, welche die ganze Mucosa
durchsetzend oft bis in die Muscularis reichen, sowie eine
schwere Degeneration der Leber bei prall mit Galle gefullter
Gallenblase und schwere fettige Entartung des Herzmuskels.

Untersuchungen am Serum der Tiere beziiglich seiner
Toxizitat wurden, da ich in dieser Hinsicht iiber hinreichendes
aiteres Material verfttgte, nicht vorgenommen.

Wir sehen also in voller Uebereinstimmung mit dem durch
Injektion konzentrierter Harnrtickstande erzeugbaren Bilde der
Meerschweinchenuramie auch hier sofort nach
der Operation subnorm ale Kdrpertemperaturen,

Figur 5.

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600

Hermann Pfeiffer,

Leukopenie und vollkommen identische, aufier-
ordentlich charakteristische, pathologisch-ana-
tomische Befunde.

Wie aus den folgenden Abschnitten dieser Arbeit hervor-
gehen wird, hatte es sich bei der biologiscben Analyse von
Harnen, die unter normalen Verh&ltnissen und in einem patho-
logisch gesteigerten Eiweifizerfall (anaphylaktischer Shock,
HSmolysinvergiftnng usw.) sezerniert wurden, als absolut not-
wendig herausgestellt, nicht nur die toxische Wirkung des
Untersuchungsmaterials an sich zu untersuchen, sondern auch
untereinander vergleichen zu kdnnen. Sollte, mit anderen
Worten, eine Einsch&tzung des Gehaltes derartiger Exkrete
hinsichtlich ihrer Giftwirkung mbglich sein, so war die Schaf-
fung einer quantitativen Arheitsmethode eine
Grundvoraussetzung.

Eine solche ergab sich ohne Schwierigkeit aus einer
weiteren Verfolgung des im Mittelpunkte des Vergiftungsbildes
stehenden Temperaturabfalles und der Mdglichkeit, aus seiner
Intensittit und Dauer zu einem ziffernmiBigen Ausdruck zu
gelangen.

Bei der Besprechung des am Meerschweinchen und an
der weiBen Mans durch HarnrQckst&nde erzeugbaren Ver¬
giftungsbildes wurde hervorgehoben, daB hier stets ein ab-
soluter Parallelismus besteht zwischen den all-
gemeinen Krankheitserscheinungen — Mattigkeit,
Paresen, Dyspnoe, Storungen von seiten des Darmkanals —
und der IntensitUt, sowie der Dauer des Tem¬
peraturabfalles unter die Norm (vgl. die friiher ge-
bracbten Tabellen II und III). Dasselbe ergab sich beim
Studium zahlreicher, unter normalen Bedingungen und in
Zeiten gesteigerten EiweiBzerfalls gewonnener Menschenharne
in den Versuchen von Dr. R. Franz, von denen in Tabelle I
eine kleine Auswahl gebracht wurde. Nicht parallel ging,
wie gleichfalls schon erortert wurde, diesen allgemeinen
Wirkungen der Gehalt der Harnrhckst&nde und
der pathologischen Menschenharne an jenen, die Meer¬
schweinchen cutis unter Nekrosenbildung zer-
storenden Edrpern insofern, als diese Wirkung bei nor-

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Weitete Beitrage zur Kenntnis der UeberempfiDdlichkeit etc. 001

malen Harnen Uberhaupt fehlte, bei pathologischen ganz un-
abhllngig von der erstgenannten bald vorhanden war, bald
fehlte. Von dieser also abgesehen, war es aus den angefQhrten
GrQnden durchaus zulUssig und erwies sich in der Folgezeit
als flufierst fruchtbar, die Allgemeintoxizit&t der Materialien
zu bewerten und aaszudrflcken einerseits durch die St&rke
des Temperaturabfalles und andererseits der Zeit-
dauer, welche vergeht, bis nach der Injektion gleichzeitig
mit dem Allgemeinbefinden die normale Ausgangstemperatur
wieder erreicht ist. Diese Wertbestimmung, die nach dem
Muster der von mir seinerzeit durchgefiihrten quantitativen
Auswertung des anaphylaktischen Shocks gedacht war, ist auch
hier urn so eher zul^ssig, als wie gesagt das Vergiftungsbild
nach Injektion von HarnrQckst^nden oder toxischen Harnen
jenem der Ueberempfindlichkeit in alien Details gleicht und,
wie gleich hier betont, im dritten Kapitel aber des Ausftthr-
licheren dargetan werden soil, ich in der Folgezeit den Beweis
erbringen konnte, dafi wir es bei den hier wirksamen Kdrpcrn
mit dem Anaphylaxiegift selbst zu tun haben.

TabeUe XII.

Wertbestimmung des menschlichen Harnes.

No.

Spez.

Gewicht

Zeit

Shock

E. in 1 com

Oinische Erscheinungen

1

1008

1

54

22

11

2

1013

2

30

30

15

3

1020

2

120

120

60

4

1019

3

120

180

90

5

1010

4

60

120

60

Eeine Erscheinungen

6

1015

5

75

187

90

7

1010

5

90

225

112

8

1030

5

105

262

131

9

1020

5

135

337

168

10

1013

10

60

300

150

11

1027

10

120

600

300

Leichte Paresen und

12

1023

10

240

1200

600

Mattigkeit

13

1010

14

210

1470

735

14

1012

15

210

1575

787

15

1015

18

255

2295

1147

Starke Paresen, Mattig¬

16

1020

20

120

1200

600

keit, gestraubtes Fell

17 !

1010

24

195

2340

1170

18

1012

30

240

3800

1800

jWahrend desTempera-

19

1015

32

300

4800

2400

Iturminimums das Bild

20

1020

40

300

6000

3000

Ides schweren anaphy-

21

1020

64

570

18240

9120

1 laktischen Shocks

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602

Hermann Pfeiffer,

Tabelle XII soil die Berechtigung eines solchen Vorgehens deutlich
machen. Sie wurde gewonnen durch eine Auswahl der Versuchseigebnisee
Ton R. Franz an einer groQen Zabl von Menschenhamen, die teils unter
physiologischen Bedingungen, teils zn Zeiten gesteigerten EiweifizerfaUs ab-
geschieden worden waren. Nach vorheriger Neutralisation der freien Sfiure
mit Natronlauge wurden sie Meerschweinchen in der Menge von je 2 ccm
intraperitoneal eingebracht. Die mit „Temperatur“ uberschriebene Eoionne
der Zusammenstellung gibt in Zehntelgraden Celsius die Temperaturab-
nahmen, „Zeit“ die 2^tdauer in Minuten an, bis wieder die Ausgangs-
temperatur erreicht war. Die Eoionne „Elinische Erscheinungen“ schildert
in Schlagworten die Schwere des allgemeinen Vergiftungsbildes.

Wfthrend bei Temperaturabnahmen bis zu 1 ® C die Tiere
munter bleiben, erkrankeo sie bei Aboahmen ttber diese Tem-
peraturgrenze hinaus teils mit leichteren, teils mit schwerereo
Erscheinungen des anaphylaktischeD Shocks, die urn so hdhere
Grade erreichen, je starker die Temperaturabnahme ist und
um so langer anhalten, je langere Zeit bis zur Wiedererlangung
der Ausgangstemperatur verstreicht. Da nun auch hier beide
Faktoren, wie dies von S. Mita beim anaphylaktischen Shock
auf Grund meiner Angaben des nkheren ausgefdhrt wurde,
direkt proportional sind der Schwere der Erkrankung, die
Temperaturkurve auch hier die Form eines Dreieckes hat,
so kann die durch eine Harninjektion erzielte allgemeine
Schadigung des Versuchstieres ausgedrdckt
werden durch den Fiacheninhalt eines Drei¬
eckes, dessen Hdhe der Grdfie des Temperatur-
abfalles in Zehntelgraden Celsius, dessen Basis
der bis zur Wiedererlangung der Ausgangs¬
temperatur verflossenen Zeitdauer, in Minuten
angegeben, entspricht. Wir kdnnen demnach auch hier
in Fallen von Erholung die Schwere der Erkrankung nach

der Formel berechnen: S = d. i. mit Worten: die

GroBe des Vergiftungsshocks = dem Produkte
aus der Temperaturabnahme (in Zehntelgraden)
und der Zeit (in Minuten), welche im Einzelfalle
vergeht, bis die Kdrperwarme wieder zur Norm
zurflckgekehrt ist. Auf diese Weise sind in der mit
„Shock‘‘ fiberschriebenen Eoionne 4 dieser und der vorher-
gehenden Tabelle die Reaktionen berechnet und man ersieht,
wie die auf dem geschilderten Wege gefundenen Zahlen ein

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Weitere Beitriige zur Eenntuis der Ueberempfindlichkeit etc. 603

deatliches Bild von der Schwere der anderen Erkrankungs-
erscheinungen geben. So bieten Meerschweinchen bis zu 300
solcher Shockeinheiten (E.) keine Allgemeinsymptome dar, bis
zu 1500 erkrauken sie leicht, dber 2000 bieten sie schon das
deutlich erkennbare typische Vergiftungsbild, wkbrend einer
Reaktion von 4—18000 E. schwere und schwerste Erkrankungen
entsprechen.

Ganz dasselbe gilt, wie aus der frdher abgedruckten
Tabelle III hervorgeht, fflr die Wirkung der auf dem Wege
der Alkoholextraktion und Vakuumdestillation gewonnenen
HarnrQckstllnde von nienschlichen und tierischen Harnen,
insolange durch sie su bletale Vergiftungen erzeugt werden,
nur mit dem Unterschiede, als wir hier entsprechend der
durch die Einengung erzielten hdheren Konzentration weitaus
betrkchtlichere, sonst aber wesensgleiche Reaktionen bekommen,
als mit den unverknderten Harnen.

Was die mit diesem Materiale leicht erzielbaren, tdd-
lichen Vergiftungen anlangt (vgl. Tier 21—24 der Tabelle III),
so wurde gleichfalls frdher schon hervorgehoben, dall hier im
Gegensatze zu den mit Erholung ausgehenden Fkllen die
Temperaturabnahme verkehrt proportioniert ist
der Schwere des Vergiftungsbildes und der Zeit-
dauer, welche vom Momenta der Einverleibung
des Giftes bis zum tddlichen Ausgange vorgeht,
also wieder VerhSltnisse obwalten, wie wir sie vom letal
endigenden anaphylaktischen Shock kennen. Es war demnach
zulSssig, dieselbe Methode, die dort ausffihrlich begriindet
wurde, auch hier direkt anzuwenden, mit anderen Worten,
durch die von H. Pfeiffer fflr tSdliche anaphylaktische Falle
empirisch gefundene und aufgestellte Formal St = 30000

-}-( 20000 — die Schwere des Vergiftungsbildes aus-

zudrtlcken. Dabei ist zu bemerken, dafi 30000 E. jener
Schwellenwert an Gifteinheiten ist, welcher erfahrungsgemkfi
von einem 350 g schweren Meerschweinchen eben noch er-
tragen werden kann, ohne dafi es eingeht, 20000 E. jene grdfite
Zahl ist, die man bei tddlichen Ausgkngen erhS.lt, wenn man
aus dem Grade der dabei in die Erscheinung tretenden Tem-
peraturabnahmen und der Zeitdauer bis zum Todeseintritt

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604

Hermann Pfeiffer,

nach der Formel fflr ErholungsfSlle die Zabl der Einheiten
berechnet. Man erhfilt sie bei Fllllen von Tod nach Iflngerem
Krankheitsverlaufe; sie schliefit sich dem eben angegebenen
Schwellenwert von 30000 fiir ErhoInngsfMle enge an. Da
nun aus praktischen GrQnden gefordert werden mufi, daB die
Sf-Formel einmal immer grdQer sein muB, als dieser letzt-
genannte Schwellenwert, andererseits aber auch ein ziflfern-
mBBiges Bild fQr die tatsilchlich w&hrend des Lebens be-
obachtete ShockgrdBe geben muB, die Zahl der Einheiten
aber um so grSBer sein nouB, je rascher der Tod eingetreten
ist, je kleiner also die tatsHchlich wBhrend des Lebens er-
hobene ShockgrdBe ist, so ISBt sich, wie in der Sf-Formel
ausgedrQckt ist, diese Beziehung durch die Differenz aus
20000 E. (den grdBten eben noch tddlichen GrenzfBllen) und
dem tatsdchlich im tddlichen Einzelfalle beobachteten Produkte

^®^rstellen. Da aber weiter die letalen Ffille den Grenz-

wert von 30000 E. flbertreflfen mtlssen, so muB eben dieser
Schwellenwert zu der durch den Versuch selbst bestimmbaren
Differenz addiert werden und wir gelangen zu der oben an¬
gegebenen Sf-Formel, in welcher taf der bis zum Eintritt des
Todes beobachtete Temperaturabfall, Zf die Zeitdauer be-
deutet, die vom Momente der Injektion bis zum Tode ver-
IBuft. Hinsichtlich der Einzelheiten bei der Aufstellung dieser
Formel verweise ich auf die einschlfigige Arbeit meines frflheren
Mitarbeiters S. Mita in dieser Zeitschrift.

Der auf diesem Wege erhaltene ziffernmBBige Ausdruck
fQr die SchQdigung eines Versuchstieres betrifift nur die all-
gemeinen Erscheinungen und besagt nichts Qber die lokale
Wirkung eines Harnes oder Harnruckstandes. Um diese
gleichfalls quantitativ annQhernd einschQtzen zu kdnnen, erwies
es sich als notwendig, einem zweiten Meerschweinchen 2 ccm
auszuwertenden Materiales unter die vorher rasierte Bauchhaut
einzubringen und nun nach 3, 12 und 24 Stunden zu prQfen, wie
sich die Injektionsstelle verhklt. Bei lebhaft nekrotisierenden
pathologischen Harnen oder giftigen RQckstSnden sieht man
schon nach dem ersten der angegebenen Zeitabschnitte die Haut
in groBem Umfange zerstdrt, bei anderen erst nach 12 oder
24 Stunden die Schorfbildung auftreten. Bei lokal nicht wirk-

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 005

samen Harnen oder RQckst&nden ist nach wenigen Stunden
(bis nach 24 Stunden) die injizierte Flflssigkeit, ohne ein In-
filtrat zu setzen, glatt resorbiert (das „glatt!‘‘ der Tabellen),
in anderen ein mehr minder derbes Infiltrat (1+ der Tabellen)
unter der intakten Haul gebildet, welches sich erst im Ver-
laufe mehrerer Tage aufsaugt. Um auch hier zu einem an-
nfthernd genauen Ausdruck Mr die Wirkungsintensitat zu
gelangen, hat es sich als zweckmaBig erwiesen, beim Auftreten
einer Nekrose ihre 6r5Be mit einem Mafistabe zu messen.
Demnach bedeuten die in den weiteren Tabellen immer wieder-
kehrenden AusdrQcke „N =3,5:0,5“, „N=0,5:0,5‘‘ oder „N—“
Nekrosen von der Gr 66 e von 3,5:0,5, oder Nekrosen von der
GrSBe von 0,5:0,5 cm oder keine Nekrose, die Ausdrficke
I 4 . = nach 24 Stunden noch ein deutliches Infiltrat, ^glattl^
vdllige Resorption nach 24 Stunden.

Es wurde demnach bei den einschiagigen Untersuchungen
das folgende Versuchsschema beibehalten:

Die Meerschwemchenharne werden durch Ligatur der Harnrdliren-
miindung wahrend eines angegebenen Zeitabschnittes gesammelt und durch
leichten Druck anf die Blase entleert. Dabei macht man die Elrhihnuig,
dais solche Tiere, je starker ihre Blase mit Ham sich erfiillt, in ganz un>
spezifischer Weise Temperaturabnahmen erkennen lassen, die vielleicht auf
Bechnung eines durch den Shock bedingten starken Seizes zu setzen sind,
bei Entleerung der prall gefuUten Blase rasch wieder veischwinden, sonst aber
bis zum Tode des Times anhalten und sogar zunehmen. Dieser Umstand
stbrt selbstredend die Berechnung des anaphylaktischen Shocks oder der
Wirkung eines Hamolysins, weil dadurch die Siickkehr zur Normaltempe-
ratur verzbgert oder aber verhindert wird. In solchen Fallen wurde das
innerhalb der ersten I'/j Stunden erreichte Temperaturminimum bestimmt,
welches als dem Shock zugehdiig zu betrachten ist und die Zeitdauer nach
zahlreichen fruher gewonnenen Mittelwerten bd gleich grofien Temperatur-
stiirzen gleichgesetzt. Man rersetzt den Harn mit 1—2 Tropfen Chloro¬
form, zentrifugiert von den emulgierten Hamsalzen klar und injiziert
sofort nach der Gewinnung 1. intraperitoneal die Menge von 2,0 ccm
einem frischen, 350 g schweren Meerschweinchen. Vor und nach der
Injektion wird die Temperatur bis zur Suckkehr zur Norm alle 15 Minuten
durch rektale Messung bestimmt und die St^ke des eingetretenen Shocks
nach den oben wiedergegebenen Formeln berechnet. Da zu dem Versuche
immer je 2 ccm verwendet wurden, es aber zweckdienlich erschien, die so
erhaltenen Werte fiir 1 ccm Harn zu berechnen, so erhalt man die Zahl
der Gifteinhdten in dieser Menge, indem man den berechneten Shock
noch durch 2 dividiert Hatte demnach ein Meerschweinchen auf die Ein-
fiihmng von 2 ccm Meerschweinchenhames mit einer Abnahme von 6,4 ** C
Zdtschr. f. ImmaaitMUfortchan^. Orlf. Bd« X. 40

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606

Hermann Pfeiffer,

reagiert und seine Ausgangstemperatur nach 9*/, iStunden wieder erreicht,
64 V 570

60 ware S = —^-— =18 240; der Ham enthielte im Kubikzentimeter

= 9120 E. Ein anderes babe auf einen anderen Harn mit einem Tem-
peratursturz von 1,0® C wahrend einer 2^it von 2 Stunden reagiert, sein
10 V120

S betriigt demnach = —^-= 600, die Zahl der Einheiten im Kubik¬

zentimeter betr&gt 300.

2. Zur Auswertung der lokal wirksamen Komponente wird
von demselben Harn einem ebenso grofien Meerschweinchen
gleichfalls 2 cem subkutan am Bauche injiziert, die Einstich-
difnung ligiert und nun von Zeit zu Zeit beobachtet. Besitzt
der Harn nekrotisierende Wirkung, so ist schon zu einer Zeit
dies deutlich in Form von Bl&sse und H§morrhagien in der
zunderartig morschen Haut leicht erkennbar, wo von irgend-
einer Bakterienwirkung nicht die Rede sein kann. Bei der
Injektion achte man aber auf zwei Momenta! Erstens nicht
intrakutan zu injizieren, da sonst durch Gef^fizerreiBung etc.
auch ganz indifferente FKissigkeiten rein mechanisch Nekrosen
erzeugen konnen, zweitens nicht intramuskulSr die FlQssigkeit
zu deponieren. Der ProzeB spielt sich dann in der Tiefe ab,
in den Bauchmuskeln, uber denen die Haut intakt bleiben kann.
Nach 24 Stunden untersuche man die Tiere wieder, messe die
GrdBe der eventuell gebildeten Nekrose der Mnge und Breite
nach, konstatiere die Anwesenheit eines Infiltrates Oder die
glatte Resorption der FIflssigkeit.

m. Die Hamtoxizit&t anaphylaktisoh erkrankter Tiere und
ihre Beziehung zum anaphylaktischen Shook.

Bei der unter den geschilderten Gesichtspunkten und
Versuchsanordnungen geprflften Harngiftigkeitgesunder
und anaphylaktisch erkrankter Meerschweinchen
fergeben sich zuniichst die folgenden VerhSltnisse:

Bringt man, wie dies frflher schon erwahnt wurde
und in Tabelle XVI, XVII und XVIII (Kontrollen!) des
n&heren ausgefdhrt wird, in der Menge von 2 cem den Harn
gesunder, unvorbehandelter Meerschweinchen oder von Tieren
ein, denen man indifferente Fltissigkeiten, wie Kochsalzlosung,
wirklich vollig inaktiviertes, also auf den unvorbehandelten
Harnspender auch unwirksames Pferde- oder Rinderserum

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. (>07

intraperitoneal injiziert hatte, so erfolgt bei Meerschweinchen
im Gewichte von 350—400 g ein leichter Temperaturabfall
um einige Zehntelgrade bis zu 1 ° C, der sich meistens inner-
halb 1 Stunde ausgleicht und von keinen anderen Krankheits-
erscheinungen gefolgt ist. Von der Subcutis aus wird der
Harn, ohne dort eine SchEdigung zu setzen, glatt resorbiert.
Wie aus den 15 Versuchen der eben erw&hnten Tabelle sich
ergibt, betrug die mittlere Toxizit&t dieser Exkrete 77 E. im
Mittel. In der Regel erreicht der normale Harn, wie auch
aus den zahlreichen in den anderen Tabellen dieser Versuchs-
reihen verstreuten normalen Kontrollen sich ergibt, wenn er
bei sparlicher Fliissigkeitszufuhr durch das Futter sehr kon-
zentriert ist, hochstens einen Mittelwert von 150—200 E. im
Mittel, bleibt aber fast ausnahmslos unter dieser Normal-
grenze bei weitem zuriick.

Bringt man im Gegensatz dazu von Meerschweinchen,
welche in einem schweren, protahiert verlaufenden, also durch
intraperitonealeinjektion des entsprechenden Antigens
erzeugten anaphylaktischen Shock stehen, den wahrend der
Erkrankung abgeschiedenen Harn in den eben geschilderten
Vcrsuchsmengen in die Bauchhbhle, so wird man, wenn anders
der Shock ein ausgiebiger gewesen ist, immer wieder die Er-
fahrung machen, daB die Tiere nunmehr schwer erkranken,
einen intensiven Temperaturabfall erkennen lassen, der 5,0
und mebr Grade Celsius betragen kann und einen ebensolchen
Kurvenverlauf aufweist, wie im anaphylaktischen Skock ge-
wonnene Temperaturkurven Oder wie solche, welche durch die
Injektion konzentrierter Riickst^nde von Menschen- oder Tier-
barn erzielt werden konnen.

Absolut parallel mit diesem im Zentrum des Vergiftungs-
biides stehenden Symptom des Temperaturabfalles gehen die
anderen Krankheitserscheinungen, die in Igelstellung, Paresen
der Hinterbeine, Mattigkeit, Somnolenz, bei hbheren Graden
in praller Spannung der Bauchdecken, Kot- und Harnabgang,
Singultus, Dyspnoe usw. bestehen, kurz in einem Bilde, welches
im zweiten Abschnitt als typisch und identisch sowohl fur die
Harnvergiftung als fQr den anaphylaktischen Shock beschrieben
wurde. Wahrend des Temperaturabfalles tritt intensive Leuko-
penie auf, die spater in eine polynukleare Leukocytose iiber-

40*

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608

Hermann Pfeiffer,

geht. Die Gerinnbarkeit des Blates ist, wenn auch nar
schwach, so doch herabgesetzt. Man kann schlechterdings
das durch derartig toxisch gewordenen, w&hrend
des anaphylaktischen Shocks gewonnenen Harn
gesetzte Krankheitsbild nicht unterscheiden von
jenem, welches der Harnproduzent selbst eben
durchgemachthat. Injiziert man solchen fOr die Erythro-
cyten vollkommen unscbUdlichen Harn znr Verst&rkung seiner
Giftwirkung intravends den Tieren, so gehen sie akut Oder
perakut unter dem klinischen und anatomischen Bilde des
blitzartig eintretenden Anaphylaxietodes zugrunde Oder er-
kranken, wenn die Toxizitftt des Harnes nur eine geringere war,
schwer in der geschilderten Weise. Nach der Erholung aus
dem Temperaturabfall tritt eine lebhafte Fiebersteigerung ein,
welche tagelang anh&lt. Zum Belege mbge die schon frhher
darliber AufschluB gebende Tabelle IV angesehen -werden, die
ausschlieBlich mit Anaphylaxieharnen gewonnen wurde.

Bringt man denselben Harn in die Subcutis eines
anderen Tieres derselben Art ein, so sieht man hier bei der
flberwiegenden Mehrzahl der Harne in kurzer Zeit Nekrosen
der frOher nlher geschilderten Art auftreten. Im Reagenz-
glasversuch lassen sie aber die Erythrocyten absolut intakt.

Es hat also, wie aus Tabelle XIII, welche eine Auswahl
derartigen Materials uhd verschiedener Kontrollen von Harnen
gesnnder Tiere (No. 1—6) bringt, hervorgeht, der Harn
derartigerTieretoxischeEigenschaftenerhalten,
die dem normalen Harne nicht oder nur in ge-
ringem Umfange zukommen und nur an sorgfMtig ein-
geengten RflckstUnden, wie frflher geschildert, kenntlich werden.
Diese ToxizitUt ist, zunUchst nur das dadurch erzeugbare
Vergiftungsbild in Betracht gezogen, absolut identisch
mit dem, welches konzentrierte RQckstftnde nor-
maler Harne hervorrufen kdnnen. Es kann demnach
die enonne Steigerung ihrer ToxizitSt in dieser Hinsicht
nicht auf dem Neuauftreten einer unter normalen UmstSnden
das Nierenfilter nicht passierenden Substanz beruhen, sondern
es kann sich nur urn die Mehrproduktion eines K5r-
pers handeln, der auch physiologischerweise in
Spuren gebildet und abgeschieden wird.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 009

TabeUe XIII.

Bestimmung der Toxizitat der allgemeinen Wirkung des

Anaphylaxieharnes.

1

CG

c ^
o 8c

U

P

1

No.

^ s

•s'®

S,

s

•4.3

*53

S3

Shock

E. in

1 ccm

Nekrose

Klinische Erscheiniingen

V-H

ccm

ccm

1

2,0

0

0

0

0

keine Paresen

2

2,0

2

45

45

22

—

3

2,0

4

45

90

45

—

17 11

4

2,0

, 7

75

262

131

—

leichte „

5

2,0

9

90

405

202

—

6

10

150

750

; 375

7

8
q

11

15

16

90

420

225

240

495

3150

1800

' 247

1575
000

1 ,2:2,0 '

deutliche Paresen, Meteo-
rismus, gestraubtes Fell zur

U

10

J. VJ

18

2160

1080

0,5:1,0 1

Zeit des Temperatursturzes

11

13

330

2145

1072

—

12

20

600

6000

3000

—

13

21

210

2205

1102

—

14

25

420

5250

2625

1,5:1,5

Mattigkeit, starke Paresen,

15

27

300

4050

2025

—

muhsame Atmiing, Diar-

16

0,5

30

420

6300

12600

1,5:2,0

rhoen, gestraubtes Fell zur

17

2,0

32

420

6720

3360

?

Zeit des Temperatursturzes

18

34

390

6630

3315

1:2

19

40

600

12000

6000

+

1

20

21

22

40

44

47

360

720

390

7200

15840

9165

3600

7920

4582

+

2,5:2,5
4,0:2,0

(Bild eines schweren ana-
j phylaktischen Shocks

23

3,0

50

980

24500

8166

3,0:2,0

)

Bevor diese Identifizierung des weiteren durchgefflhrt
werden wird, moge in Tabelle XIII auch an diesem, im ana-
phylaktischen Shock gewonnenen Material begrflndet werden,
wie tatsichlich parallel mit der Schwere des allgemeinen Ver-
giftungsbildes auch die Starke der temperaturherabsetzenden
Wirkung geht und in der frflher ausgefflhrten Weise auch
hier zu einem ziffernmaBigen Ausdruck fiir die allgemeine
Toxizitat, demnach zu einer Wertbestimmung dieser verwendet
werden kann. So zeigt sich auch in diesen, durchwegs mit
Anaphylaxieharnen gewonnenen Versuchen, daB bei Temperatur-
abnahmen zwischen 1,0 und 2,0® C nur vage Krankheits-
erscheinungen vorhanden sind, die sich bei Temperaturstiirzen
zwischen 2,0 und 4,0® C schon zu dem Bilde eines anaphy-
laktischen Shocks verstarken, fiber diese Grenze hinaus aber
eine schwere und unter denselben Symptomen verlaufende Er*

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610

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krankung setzen. Die Berechnung der ShockgrOBen und der
darnach in 1 ccm Harn enthaltenen Gifteinheiten geschah nach
den iin vorigen Abschnitte ausgefuhrten GrundsStzen.

Bei naherer Betrachtung der Tabelle aber ergibt es sich
des weiteren, wie keineswegs parallel mit dem allgemeinen
toxischen Vermogen der Harne die lokale Giftwirkung geht
insofern als hochgradig das Meerschweinchen in seinem
Allgemeinbefinden alterierende Harne manchmal machtige,
manchraal gar keine lokalen Nekrosen erzeugen, andererseits
aber auch bei fehlender oder nur gering ausgebildeter Allge-
meinwirkung eine intensive Schadigung der Cutis erfolgen kann.

Schon die bier niedergelegten Beobachtungen beweisen
die friiher bei Verbruhungsharnen und bei Harnriickstanden
oft gemachten Erfahrungen der volligen Unabhangigkeit
beider im Harn wahrend des anaphylaktischen
Shocks in vermehrtem AusmaBe auftretenden
giftigen Komponenten, was in Tabelle XIV nicht nur

TabeUe XIV.

Unabhangigkeit der Giftwirkungen voneinander.
(Paradoxe Harne.)

No.

Eingriff in den Harn-
spender

Harn-

gewinnung

Injektion

Temperatur

Shock

E. in 2 ccm

Lokal-

wirkung

1

Kaninchen, anaphyl. Shock

n. 5'-

2 ccm ip. u. sbk.

15

150

1125

562

N = 3:2

2

f*

yy yi

dgl.

dgl.

32

240

3840

1920

glatt!

3

Meerschw., „ ,,

y>

77

4

45

90

45

N = 2:1

4

77

40

600

12000

6000

N —1 +

5

77 77

77

77

15

420

3150

1575

O,

(M

II

6

77

77

33

300

4950

2475

glatt I

7

Kinderser.-Verg.

77

13

180

1170

585

N = 0,8:0,8

8

77

27

270

3645

1822

N —1 +

9

77

77

18

240

2160

1080

N = l:l

10

77

77

77

30

360

5400

2700

glatt I

11

yj

Peptonvergift.

77

77

11

120

660

330

N = 2:l

12

77

yi

10

300

1500

750

glatt I

13

77

77

23

300

3450

1725

N = 1:1

14

y»

77

77

35

360

6300

3150

glatt!

15

\2 Stunden Bogenlicht nach

77

77

30

450

6750

3375

glatt 1

16

) 0,005

Hiiraatoporphyrin

77

77

2

60

60

30

N = 3:2

17

1

subkutan

17

77

18

180

1620

810

glatt!

N = Nekrose, 1 = Infiltrat, glatt! = glatte Resorption, ip. = intra-
peritoneal, sbk. = subkiitan.

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Weitere Beitr^e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 611

for den anaphylaktischen Shock, sondern auch fOr bei der
Hamolysinvergiftung, PeptonvergiftuDg und beim Tode nach
photodynamischeD Einwirkungen beobachteten Harne vorweg
nehmend, zasammengestellt sei.

Von den letztgenannten, erst im spfiteren Verlaufe dieser
Mitteilung zu erOrternden Befunden abgesehen, ergibt sich die
vdllige Unabhftngigkeit speziell fOr das Beispiel des anaphy¬
laktischen Shocks aus den vom Oberempfindlichen Kaninchen
und Meerschweinchen gewonnenen Harnen 1—6.

Wahrend Harn 1 mit 562 E. Nekrosen im Ausmafie von 3:2 ocm
erzeugt, verraag der nachste Ham mit 1920 E. keine SchMigung des In-
jektionsortes zu setzen. Noch scblagender erkennt man das aus Ham 3
und 4. Der erstere hat 45 E. in 1 ccm und wirkt nekrotiderend, der
andere 6000 E. und wird glatt resorbiertl

Diese UnabhOngigkeit spricht also, abgesehen von dem
allgemeinen Vergiftungsbilde beim Meerschweinchen, durchaus
fOr die IdentitOt des wkhrend des anaphylaktischen Shocks im
Harn auftretenden KOrpers mit jenen in dieser Hinsicht sich
ebenso verhaltenden Substanzen, welche spurenweise schon
nach entsprechender Einengung im normalen Menschen- und
Tierharn vorgefunden wurden.

Das beweist auch schlagend der MOuseversuch insofern,
als auch diese Tiere in charakteristischer Weise erkranken,
wenn man vorher am Meerschweinchen ausgewerteten und hin-
sichtlich der allgemeinen Wirkungen hochtoxisch gefun-
denen Harn in der Menge von 0,5—1,0 ccm ihnen einbringt.
Sie zeigen das so typische, im frOheren Abschnitt geschilderte
Bild der M&useurOmie: enorme TemperaturstOrze, weit Ober
jene normaler Harne hinaus und mit ihnen parallel gehend
zunkchst Somnolenz, dann Tetanus, dann jenes rauschOhnliche
Zustandsbild, welches freilich nur im Temperaturminimum und
bei sehr stark wirksamen Exkreten wahrgenommen wird.

Die Identit&t der wirksamen KOrper dort und hier erhellt
des weiteren aus dem Umstande, dafi Anaphylaxieharn, wie
ausgedehnte einschlOgige Versuche beweisen, seine Toxizit&t
nicht der Konzentration seiner Salze, nicht dem h&ufig vor-
handenen EiweiJl, nicht der alkalischen oder hier (nur in
AusnahmeBlllen) beobachteten saueren Reaktion verdankt,
sondern dafi ebenso wie im normalen Harn die durch die

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612

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doppelte Menge Alkohol nicht Hlllbare, also alkoholldsliche und
durch VakuumdestillatioD gewonnene Fraktion die Trftgerin
der allgemeinen und lokalen Giftwirkung ist. Durch Schweins*
blaaen ist auf dem Wege einer 48—72-stflndigen Dialyse auch
solchen Harnen und HarnrQckst&nden ihre Giftwirkung v511ig
zu nehmen. Erhitzen zerstdrt, wie das in Tabelle XV wieder-
gegebene Versuchsbeispiel zeigt, erst bei hGheren Graden und
bei l&ngerer Einwirkung zun&chst den lokal wirksamen, dann
erst und in weitaus schwftcherem Ausmafie den das allgemeine
Vergiftungsbild ausl5senden Kdrper.

TabeUe XV.

Erhitzung von Anaphylaxie-HaBenharn.

No.

Ham

Injektion

Temp.

Zeit

Shock

1 Lokal-
wirkung

1, 2 iHani 1 eenuia

2ccmip.u.8bk.

20

215

2150

In = 3 : lOcm

3, 4

„ 1 9(y auf 100® C

dgl.

16

210

1680

Iglatt I

5, 6l

„ 3 genuin

25

165

2062

N = 2:2 cm

7, 8i

1 „ 3 90'auf 100*C

23

270

3105

Iglatt!

Zusammenfassend kann also gesagt werden, dafi es im
anaphylaktischen Shock des Meerschweinchens,
ganz wie beimVerbr{lhungstode,zu einer enormen
Zunahme der Giftigkeit des Harnes kommt, die
auf die Ueberproduktion von KOrpern zurtlck-
gefhhrt werden mull, welche schon unter nor-
malen Verhfiltnissen, wenn auch in weit gerin-
gerem Ausmafie, ausgeschieden, die Toxizitfit der
Harnrttckstfinde normaler Harne ausmacht und
die Versuchstiere unter einem Vergiftungsbilde
schfidigt, welches von dem des anaphylaktischen
Shocks nicht getrennt werden kann.

Sollten diese Ergebnisse irgendwelche Beziehungen zur
anaphylaktischen Erkrankung bezw. zum Anaphylaxiegifte
haben, so mflfiten folgende Postulate experimentell erffillbar
sein:

1) Das Phfinomen des Ansteigens der Harngiftigkeit mufite
konstant sein.

2) Diese Toxizitfit des Harnes mttfite parallel gehen mit
der Schwere der anaphylaktischen Erkrankung,

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Weitere Bdtrage zur Kenntnis der Uebereiupfindlichkeit etc. 613

3) beim Fehlen des anaphylaktischen Shocks fehlen,

4) auch in F&llen von passiver Anaphylaxie erweis-
bar sein,

5) bei antianaphylaktischen Tieren ausbleiben und endlich

6) auch im Harn peptonvergifteter Tiere nachweisbar sein,
die ja nach den Versuchen von Biedl und Kraus am Hunde
und eigenen, in Gemeinschaft mit S. Mita gewonnenen Er-
fahrungen am Meerschweinchen eine wesensgleiche Vergiftung
durchmachen, Oder mit anderen Worten: auch das toxische
Prinzip dieses Gemenges von Abbauprodukten des EiweiBes
mQBte ein harnf^higer Kbrper sein und im Harn ausgeschieden
werden.

Die eben aufgestellten Forderungen konnten nun tat-
skchlich Punkt fur Puukt erfiillt werden.

ZunBchst bringt Tabelle XVI, nach der Schwere des
anaphylaktischen Shocks, den der Harnspender durchgemacht,
geordnet, die Ergebnisse der biologischen Priifung der zuge-
hdrigen Harne, durchgeftkhrt an je zwei Meerschweinchen.

Die linke HSlfte der Tabelle (bezeichnet als „Au8wertung des Shocks")
gibt die VorbedioguDgen wieder, unter deoen der Ham sezemiert wurde.
Es handelt sich dabei — von den 4 an letzter Stelle gemachten Eochsalz-
kontroUen abgesehen — um 25 durchw^s mit Pferdeserum in wechselnder
Menge und verschieden langen Zeitintervallen peritoneal sensibilisierte
Meerschweinchen, die zur Zeit der Hamgewinnung je mit 2 ccm inaktivem
Pferdeserum reinjiziert worden waren. Das Beinjektionsmaterial war fur
die KontroUen, welche in Tabdle XVIII, p. 617, unter den Nummem 9—15
angefiihrt sind, vdllig unschadlich. Den fruher von mir ausgearbeiteten
Wertbestimmungen des anaphylaktischen Shocks folgend, wurde in diesen
Versuchen die GroUe der Erkrankung nach dem Temperatursturz und der
Zeitdauer der Erholung ausgewertet und wahrend der Eh'krankung der
Ham der Tiere durch sorg&ltige Ligatur der Urethra nach der Beinjektion
(ausgenommen. sind Tier 11 und 12!) gesammelt. Um him* nicht durch
schon Yor dem Versuch in der Blase befindUchen, naturgemaU atoxischen
Ham getauscht zu werden, ist es notwendig, vor der Ligatur durch sanften
Dmck auf die Blase diese zu entleeren bezw. sich zu iiberzeugen, daU sie
vdlUg leer ist Waren die Here aus dem Shock erholt, so wurden sie,
und zwar immer 5 Stunden spater, durch Entbluten getdtet. die Bauch-
hdhle sofort gebffnet, die Blase beim Blasenhals mit einer Sperrpinzette
gefaUt, imterhalb abgetragen und der Ham in eine sterile Eprouvette ent-
leert Zusatz einiger Tropfen Chloroform, Zentrifuge und sofort an-
schUefiaide Auswertung intraperitoneal und subkutan an Zwei verschiedenen
Tieren je in der Menge von 2 ccm.

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614

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Tabelle XVL Harntoxizitat im anaphylaktischen Shock.

Weitere Beitr^e zur Kenntnis der UeberempfiDcUichkeit etc. 015

Es zeigt sich beim Durchlesen dieser Tabelle, d a 6 g a n z
konstant in alien Fallen eines etwas bedeuten-
deren anaphylaktischen Shocks desHarnspenders
die Giftigkeit desHarnes enorm jene von Normal-
tieren flbertraf.

Nehmen wir nach den mit Kochsalzldsung injizierten
Kontrollen No. 26—29 der Tabelle als hochsten Normalwert
der allgemeinen Giftwirkung 150 E, obwohl sich das Mittel
betr§,chtlich niedriger stellt, so haben wir in den Fallen
stfirkeren anaphylaktischen Shocks ToxizitStswerte vom 4700
bis 3300 E im Kubikzentimeter, also 30—40*fach hShere Werte.
Wahrend in der erstgenannten Gruppe Nekrosenbildung nicht
beobachtet wurde, wird dort in alien F&llen eine hochgradig
lokale Wirkung der Harne gesetzt.

Fafit man weiterhin nach der Schwere der anaphylaktischen
Erkrankung die Versuche zu Gruppen so zusammen, daH in
der ersten Fftlle von fiber 10000, in der zweiten solche von
fiber 5000, in der dritten solche von fiber 2000, in der vierten
solche von fiber 1000, in der ffinften solche von fiber 500
und in der letzten von unter 500 E eingereiht werden, und
berechnet aus den dabei geprfiften Harnen hinsichtlich ihrer
allgemeinen und lokalen Wirkung ihr mittleres Wirkungs-
vermfigen, so ergibt sich, wie es in der letzten Vertikalkolonne
geschehen ist, dall den Ffillen der ersten Gruppe Harn mit
3861 E und 100 Proz. Nekrosenbildung, der zweiten Gruppe
Harn von 2230 E, der dritten 2662 E und 50 Proz. Nekrosen,
der vierten Gruppe 3080 E und 50 Proz. Nekrosen, der ffinften
420 E mit 0 Proz. Nekrosen, der letzten sechsten endlich
388 E mit 0 Proz. Nekrosen entspricht.

Wir sehen also, wie parallel mit dem schwer-
sten anaphylaktischen Shock auch die giftigsten
Harne gefunden werden, wfihrend umgekehrt bei
nur leichter Erkrankung fast oder gar ganz un-
wirksame Harne abgeschieden werden, Harne,
die sich nur unbetrfichtlich von der Wirkung
normaler unterscheiden.

Innerhalb dieser beiden Extreme sehen wir zwar kein
ganz gleichmfifiiges, aber doch stufenmfiBiges Absinken der
Giftigkeit und konnen demnach die zwei ersten der auf-

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616

Hermann Pfeiffer,

gestellten Postulate, die Konstanz der Befunde und
den Parallelismus zwischen Erkrankung und
Harngiftigkeit als erfflllt ansehen.

Welcbe innigen Beziehungen zwischen diesen beiden Er-
scbeinungen bestehen, ersehen wir flbrigens auch aus dem
Versucbe 11 und 12 dieser Tabelle, wo nicht, wie gewdhnlich,
sofort, sondern erst 24 Stunden nach der Injektion des Antigens
in das bberempfindliche Tier, also nach dem Eintritt vOlliger
Erholung der Harn gewonnen und geprfift wurde. Obwohl
dem Shock nach hohe Harngiftigkeit bestanden haben mufite
(erfahrungsgemSB zwischen 2 und 3000 E mit starker nekro-
tisierender Wirkung), betrug urn diese Zeit die Toxizitftt nur
mehr 990, bezw. 450 E bei fehlender Nekrose.

Dafi die eben geschilderten VerhUltnisse innerhalb ge-
wisser Grenzen auch fflr das anaphylaktische Eanincben gelten,
ergibt die nachstfolgende Zusammenstellung der Tabelle XVII.

Die vier ersten Versucbe bringen die normalen Kontrollen
mit einer durchschnittlicben Toxizitat fbr den Kaninchenharn
von 125 E bei fehlender nekrotisierender Wirkung. Bei den
nun folgenden anaphjlaktischen Tieren, die allerdings nur sehr
unausgesprochen auf das inaktive Antigen reagierten, finden
wir wahrend der Reaktion meist hohe Giftwerte bei stark
nekrotisierendem Verm6gen, wahrend im allgemeinen nach
dem Abklingen diese beiden Eigenschaften des nunmehr ab-
geschiedenen Harnes wesentlich abnehmen. Eine Ausnahme
machen nur jene Falle (z. B. Tier 9), wo im Anschlufi an die
Temperaturabnahme Fieber fortbestand, was nach E.Fried-
b e r g e r s wohlbegrttndeten Anschauungen auf Abspaltung ge-
ringerer Giftmengen als im anaphylaktischen Shock zurflck-
gefahrt werden mu6. In solchen Fallen bleibt manchmal die
Harngiftigkeit noch durch langere Zeit erhalten.

Es ist abrigens bezeichnend und beweist schlagend die
Beziehung zwischen anaphylaktischem Shock und Harntoxizitat,
dafi bei diesem, nach E. Friedberger 400mal, gegen die
Ueberempfindlichkeit weniger empfindlichen Versuchstiere bei
weitaus schwacheren Reaktionen auch niemals so hohe Gift¬
werte far den Harn verzeichnet werden konnten, als bei dem
klassiscben Versuchstiere, dem Meerschweinchen.

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Tabelle XVII. Kaninchen-Anaphylaxie.

Weitere Beitriige zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 617

Lokal-

wirkung

»—1 lO lO

1 —( r-H of CO CO (M CO CQ i-H ^

s _ J Ml II INI 1! ^ II ^ _ 11 1

li) ’3

Lokal-

wirkung

iC

cm"

lO 1 ^ 1

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^ 11—I 'Sd

E in

1 ccm

iOQt>OuOl>COiOC<li-HiOiO»OOiCQ(M C

lO UO CO C35 ^ CD CO l>(M CM (M CO Q 05 fc

f-iCOCMOiOOCO(Mi:^05I>iCOO 3

rH»- i-l -Hrl ,-H y

o S

,

7920

3000

1260

2250

157

0

0

78

Shock

90

900

15

0

2310

675

2587

2150

1125

2062

750

450

3450

3840

1530

3000

1785

b)

1 ^

1 ^

15 840
6000
2 520
4 500
315
0
0
157

Zeit

QQQOOuOiOiCQOOQQOQQO

1-H CO CM 1-H lO CO ^ Q00 Q »-H

rH CM (M OQ f—1 r-H CO CM CO CM

Zeit

SS288®®S

c5 03 CO rH

Tem¬
pera-
til r

COCMi-HOCMOCOOiCiOOOCO(MI>Ol>

03 1 -H CM CM r—1 CM Ol rH CM CO »““• CM '

Tem-

pera-

tur

Injektions-
art u. -menge
(intraperitoii.
ii. subkutan)

(l5

fl

c 03

CM ^

a.

oS

Injektions-
art u. -menge
(intraperiton.
u. subkutan)

S_:

R R R R R R

CM

c?

^ £
i «

C

1 1 1 1 ^lOQkOCMQ'^OOOOOp ^ M

1 1 1 1 CM CO OO I-H rH OO CO CM CM 1 -H CM 03 O

Harn

nach

5, « R R R R R R

Harn-

winniing

nach

i 'i i 5 cS

fa fa 2

M M M M

M ^ ja M M 05 ja M 05 a x 05

I—l'^kOiC03^CMCM05^CM05 0J

Shock

1 (D

1 tc

1

fe 1 1 1 1 1 • 1 1 1 1 1 1 1 a

^ ^ CM CM CM CM

Zeit

TH CVJ Oi

Shock

1170

900

900

2625

787

1440

belle X

Tem-

pera-

tur

O5coicoicooo

CM

Zoit

1 1 1 1 s ss s s § ^

Reiujektion

ccm

> >

<2 M3

.3]d .34

o3 03

.S .9 tio

C

£ . Eg.

S'Sc R rES'Sc r

-rt Si

^ .2 S

fa Bii4

(M (M (M

Tem-

pera-

tur

c

1 1 1 1 CO ICO ic IC CM

1 1 1 1 rH 1 —1 1 -^ CM r-l t-H . ^

c

c

o

5 £

« o

1

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. . . . _• ^ «

1 1 1 1 ^ w

fa ^ fa fa

O IC ic T3

rH 1 -H rH

Inter¬

val!

bc bh&i) bb ti) bb o

1 1 1 1 H HH H H H

05 05Ttt CO CO

CM CM CO CO CO CO a>

Inter¬

val

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A • "S SF

fa

1 I 1 1 ® ^

1 I 1 1 M ^ R t I as

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i!, , bO

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JC3-^

OQ

a

CM

•ox

f-iCMCO'^iC coo 00 05 o

r-l

•ox

rHCMCO^»OCOI>00

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618

Hermann Pfeiffer,

Eine sehr bezeichnende Ausnahme von dem eben ge-
schilderten, fflr das Meerschweinchen von 350—400 g Gewicht
vorgefundenen Parallelismus zwischen der Schwere des ana-
phylaktischen Shocks und der Toxizit&t des wShrend der Er-
kranknng sezernierten Harnes machte eine Versuchsreihe, die
enter der Bezeichnung „groBe Bbcke" in Tabelle XVIII
wiedergegeben ist.

Sie betriift alte, zwischen 600 und 800 g schwere Zucht-
bocke, die ich deshalb zu den Versuchen verwendete, um zu
den im wesentlichen schon wiedergegebenen Erhitznngs- und
Dialyseversuchen moglichst viel Harn zu erhalten. Die Tiere
warden mit 2 ccm Pferdeserum sensibilisiert und erhielten
(Tier 1—4) je 2 ccm inakt. Pferdeserum, zum Teile (Tier 5)
2 ccm inakt. Rindersernm, zum Teile (Tier 6—8) 2 ccm Koch-
salzlosung. Die groBen Tiere reagierten nur ganz schwach
auf die Einbringung des gleichartigen Antigens, lieferten aber
dennocb, wie aus der rechten, die HarntoxizitS.t betreffenden
Abteilung der Tabelle hervorgeht, auBerordentlich giftige
Harne. Das mit inaktivem Rinderserum gespritzte Tier schied
einen durchaus innerhalb normaler Werte sich bewegenden
Harn ab, desgleichen die mit Kochsalzlbsung injizierten Tiere,
welche gar nicht darauf reagiert batten.

Ich stehe nicht an, dieses Ergebnis im Hinblicke auf die
so zahlreichen, an kleineren Tieren gewonnenen Erfahrungen
so zu deuten, daB bei den ungewohnlich groBen und wider-
standsf^higen Tieren oflFenbar trotz einer lebhaften Giftbildung
vermbge ihres Alters und ihrer GroBe eine Unempfindlichkeit
gegen die in Rede stehenden Korper bestand und sie deshalb
trotz der Produktion giftiger Harne nur schwach reagierten.

Diese Versuchsserie beweist Obrigens, wie auch noch
spSter zu bringende Versuche in gleicher Weise die SpezifizitSt
des Ansteigens der Harngiftigkeit, die nur eintritt nach Re-
injektion des zur Vorbehandlung verwendeten, nicht aber eines
anderen Antigens in ein sensibles Tier.

Schon dieser Versuch, ebenso wie die Kochsalzkontrollen,
zeigen fernerhin, daB auch das dritte Postulat: Fehlen der
Harngiftigkeit bei fehlendem anaphylaktischen
Shock, im Versuch tatsSchlich erfflllt wird. In dieser Hin-
sicht sei auch auf die nun folgende Tabelle XIX verwiesen.

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Uebererapfindlichkeit etc. 619

Tabelle XIX.

Harntoxizitiit nach Einwirkung inaktiver Seren (Normaltiere).

1

.

Injektions-

1

Cw

d

Injektion

s-c

Zeit

O

o

43

Cf2

s

§

No.

Harn

nach

art ii. -menge
(intraperiton.
u. subkutan)

Temper

tur

Zeit

Shoci

E in

1 ccm

Lokal-

wirkung

1

2 R.-S. in.

12

180

1080]

1125

1 u. 2

5'’

2 ccm

4

30

60

30

glatt

2

dgi.

13

180

1170(

3

71

7

180

6301

1080

3 u. 4

dgl.

dgl.

6

90

270

133

dgl.

4

77

17

180

1530/

5

77

5

30

75

—

5

77

77

5

90

225

112

77

0

77

3

30

45

—

6

77

77

7

90

315

157

77

7

77

9

60

270

—

7

77

77

6

90

270

135

77

8 1

3

50

75

—

8

77

' 77

3

75

112

56

77

9

2Pf.-S.in.

0

0

0

—

9

77

7 *

0

0

0

0

77

10 i

dgl.

2

60

60

—

10

77

77

8

105

420

210

77

11

1 77

0

0

0

—

11

77

7 *

0

0

0

0

77

12

i 77

165

412

1 —

12 j

77

77

10

135

675

337

77

13

^ 77

1 0 '

0

0

—

13

' 77

77

0

0

0

0

77

14

7 ^

i 13

120

780V

(>82

14U.15

' 77

77

0

0

0

0

77

15

1 77

1 13

1 90

585/

1

Die erste Reihe von Versuchen (1—8) betrifift gegen
PferdeeiweiB sensibilisierte, zur Zeit der erfahrungsgemafi voll
entwickelten Anaphylaxie (22 Tage) mit inaktiviertem Rinder-
serum in den Versuchsmengen von 2 ccm gespritzte Tiere.
Sie reagierten (wie Kontrollversuche lehrten) auf diese groBe
Menge eines nur schwer in solchen Mengen vollig zu ent-
giftenden, artfremden EiweiBkorpers im AusmaBe der Normal¬
tiere und lieferten durcliwegs Harne, welche glatt resorbiert
warden und sich hinsichtlich ihrer allgemeinen Giftwirkung
innerhalb der Grenzen von Normalharnen bewegten. Die
Tiere 9—15 waren unvorbehandelte Tiere, die mit inaktivem
Pferdeserum gespritzt warden. Auch ihr Harn iiberschritt
die Giftigkeit des normalen in keinem einzigen der Versuche.

Die eben mitgeteilten Erfahrungen und die
friiher besprochenen der Tabelle XVII beweisen
es zur Evidenz, daB bei fehlendem anaphylakti-
schen Shock die Harngiftigkeit sich durchaus in
normalen Grenzen bewegt, somit das dritte der
Postulate als erfiillt angesehen werden muB.

Vollig iibereinstimmend mit den eben geschilderten Er-
gebnissen der aktiven Meerschweinchen-Anaphylaxie liegen
die Verhaltnisse bei der passiven, heterologenUeber-

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620

Hermann Pfeiffer

empfindlichkeit. Das erhellt aus den beigegebenen
Tabellen XX und XXL

TabeUe XX.

Passive Anaphylaxie.

a) Anaphylaktischer Shock.

d

!2;

Vorbehand-

lung

ccm

Inter¬

val!

Eeinjektion

ccm

Tern-

pera-

tur

Zeit

Shock

1

3 Pf.-Priiz. inp.

2 Tage

3 Pf.-S. inp.

42

480

10080

2

dgl.

•y

dgl.

53

540

14 310

3

yy

3 Tage

*y

35

360

6300

4

yy

yy

yy

75

720

27000

5

yy

1 ”

55

480

; 13200

6

y*

1

yy

61

480

14 640

7

yy

6 Tage

25

420

5 250‘)

8

—

yy

0

0

0

9

_

1 _

yy

2

60

60

10

_

_

yy

0

0

0

11

—

—

iy

5

165

412

Mittel

12 195
16 650

13 920

Tabelle XXI.
Passive Anaphylaxie

b) Harntoxizitiit.

No.

Ham

nach

Injektionsmenge
und -art

Tern-

pera-

tur

Zeit

Shock

E in

1 ccm

Lokal-

wirkung

1 U.2

5'-

3 ccm intrap. u. subk.

50

980

24 500

8166

N = 3:2

3 u. 4

dgl.

2 „ subkutan

15

150

1125

—

N = 2:2

5 u. 6

2 ,, intrap. u. subk.

40

330

6 600

3300

glatt

7

dgl.

4

45

90

45

N=2:0,8

8

yf

yy

0

0

0

0

glatt

9

yy

8

150

420

210

yy

10

yy

0

0

0

0

yy

11

yy

10

135

670

335

yy

Tabelle XX bringt die Versuchsanordnung der passiven Sensibilisierung
von 7 Meerschweinchen mit einem hochwertigen, gegen PferdeeiweiU ge-
richteten Prazipitin vom Kaninchen, das in der Menge von je 3 ccra intra-
peritoneal einverleibt worden war. 2 und 3 Tage nachher wurden den
Versuchstieren 1—6 je 2 ccm inaktives Pferdeserum reinjiziert. Die Tiere
reagierten darauf mit schweren anaphylaktischen Shocks. Da es sich um
junge kleine Tiere handelte, wurden die Harne von je 2 Meerschweinchen
vereinigt und in der gewohnten Weise ausgewertet. Ueber das Ergebnis

1) Diese Eeinjektion war die zweite. Eine erste war 3 Tage vorher

53 V 300

gleichfalls mit 2,0 Pferdeserum gemacht worden. Reaktion: —^ -= 7950.

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Weitere Beitr^e zur Kenotnis der Ueberempfindlichkeit etc. 621

berichtet Tabelle XXI. Els ergaben sich Giftwerte von 8160—3300 E im
Kubikzentimeter mit lebhaft nekrotisierenden Eigenschaften. Tier 7 bildet
eine Ausnahme. Els hatte aber 3 Tage nach der Injektion des Prazipitins
zum ersten Male Antigen erhalten, und war darauf mit einem erst
schweren, 7950 E betragenden Shock erkrankt. Als es 6 Tage nach der
passiven Sensibilisierung neuerlich mit Pferdeserum geprult wurde, betrug
sein Shock nur mehr 5250 E. Es war also eine relative, wenn auch
noch keine absolute Antianaphylaxie eingetreten. Sein Ham wirkte, wie
spatere Versuche iiber Antianaphylaxie noch verstwdlich machen sollen,
nur innerhalb der Grenzen von normalen Haraen. E^ wurden nur 45 E
im Eubikzentimeter festgestellt, doch war eine intensive, gewebsschadigende
Wirloing noch vorhanden. Die 4 Kontrollen, die normale Tiere bei In¬
jektion von inaktivem Pferdeserum betreffen, bestatigen neuerlich die Un-
giftigkeit des Hames bei diesen Versuchsbedingungen. Die relativ hohe
Giftigkeit vom Harn des Tieres 11 mit 335 E im Eubikzentimeter wird
nach den Erdrterungen iiber das Verhalten des Harnes ba Einfiihrung
aktiven artfremden Semmantigens und der Folgen einer Hamolysinvergif-
tung verstandlich werden. Hier sei nur darauf hingewiesen, da6 der Ham-
produzent auf die Einbringung eines ofienbar nicht ganz inaktiven Semms
mit einem Shock von 412 E reagiert hatte.

DieVersucbe ingesamt ergeben demnacb, dafi
auch bei der passiv flbertragenen Ueberempfind-
lichkeit, wenn es durch Reiujektion des bei der
Vorbebandlung desPr&zipitinbildners verwende-
ten Eiweifies zum anaphylaktischen Shock kommt,
ganz ebenso wie bei der aktiven Ueberempfind-
lichkeit eine gleichartige und enorme Zunahme
der Toxizitftt des Harnes eintritt.

Bei Versuchen, die Harntoxizitilt im an tianaphylakti-
schen Zustande durch neuerliche Reiujektion des Antigens
der Vorbebandlung zu prQfen, ist es unerlUfilich, daB das
refraktSre Verhalten der Tiere ein vollstllndiges Oder doch
nahezu vollstSndiges sei, mit anderen Worten: nicht frQher
den Harn auf seine Giftigkeit auszuwerten, bevor nicht eine
Probeinjektion den Eintritt einer kompletten Anaphylaxie
erwiesen bat.

Wie ich das schon in frQheren Arbeiten wiederholt betont
babe, geht insbesondere bei intraperitonealer Einverleibung des
EiweiB die Abs&ttigung des Immunkdrpers nicht pl5tzlicb,
sondern innerhalb von Tagen allmllhlich vor sich, so zwar,
daB Tiere erst durcb wiederholte Injektion so weit ihrer
Ueberempfindlichkeit berAubt werden konnen, daB sie gar

ZeiUchr. f. ImmuDitH(8fors<^hQDg. Orfg. Bd. X. 41

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622

Hermann Pfeiffer,

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keine Vergiftungen mehr durchmachen. Das erharten neuer-
dings die Versuche der Tabelle XXII.

TabeUe XXII.

Harntoxizitat bei Antianaphylaxie.
a) Desensibilisierung.

No.

Vorbehand-

lung

ccm

Inter¬

val!

Keinjek-

tion

No.

Keinjektion

mit

Tem-

pera-

tur

2^t

Shock

1

0,1 Pferde-S.

21 Tg.

1.

2 ccm Pf.-S.

50

720

18000

2

dgl.

1.

32

660

10560

3

1.

42

720

15120

48Std.

2.

2 jj jy

30

180

2 700

3.

2 „

7

45

157

4

}}

21 Tg.

1.

^ fy yy

29

660

9 570

48Std.

2.

2 „

22

210

2 310

3.

2 yy

0

0

0

5

21 fg.

1.

1

40

660

13200

48Std.

2.

2 yy iy

26

180

2340

3.

^ yy yy

5

45

112

6,

21 Tg.

1.

^ yy yy

30

660

9 900

48Std.

2.

2 „

17

210

1785

P

3. 1

3 yy yy

0

0

0

b) Harntoxizitat.

No.

Harngewinnimg
nach Injektion

Injektions-
menge u. Art

Tem¬

pera-

tur

Zeit

Shock

E in

1 ccm

Lokal-

wirining

1

5 Std. nach 3. Inj.

2 ccm ip. u.sk.

47

390

9165

4582

N = 4:2

2

dgl.

dgl.

34

390

6630

3315

N = l:2

3

yy

11

90

495

247

glatt

4

yy

7

75

262

262

yy

5

yy

yy

16

225

1800

900

yy

6

yy

yy 1

1

45

23

12

yy •

Der zweite Teil der Tabelle bringt die Ergebnisse bei der Deaensi-
bilisienmg von 6 Meerschweinchen, die 21 Tage vor der Beinjektion mit
Pferdeserum gespritzt worden waren. Tier 1 und 2, die ala neuerliche
Kontrollen fur die anderen Versuche aufzufassen sind, reagierten auf die Ein-
bringung von inaktivem Pferdeserum in der Menge von 2 ccm mit schweren
Shocks von 18000 und 10560 E, lieferten demgema6 Hame mit 9165
und 6630 E im Kubikzentimeter und lebhaft nekrotisierenden Eigenschaften.
Die anderen Here vrurden wiederholt in Intervallen von je 2 Tagen mit
Pferdeserum gespritzt, und zwar das erstemal mit 1, das anderemal mit je
2 und 3 ccm, also der doppelten und dreifachen Menge. Trotzdem hat ihre
Reaktionsfahigkeit schon bei der zweiten Injektion stark abgenommen und
ist bei der dritten teils vollstandig aufgehoben (No. 4 und 6), teils nur mehr
in minimalem AusmaUe eben noch nachweisbar (Tier 3 und 5 mit 157 und
112 E). Der Ham dieser Here, die also, was bier von Wichtigkeit ist, bei der

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempiindlichkeit etc. 623

ersten Injektion als hochempfindlich sich gezeigt batten, wurde 5 Stunden nach
der dritten Injektion gepriift. Die Tiere 4 und 6, die voUst^dig refraktu
waren, lieferten dabei Hame von normaler, bezw. sogar subnormaler Giftig-
kdt (131 und 12 E im Kubikzentimeter bei glatter Beaorption), die beiden
anderen, die mit kleinen Sbocke reagiert batten, besafien dementsprecbend
aucb eine bdbere Harngiftigkeit von 247 und 900 E, gleicbfalls obne lokale
Scbfidigung der Versucbstiere.

Diese Versuche zeigen, wie im wirklich antianaphy-
laktischen Tier bei fehlender anaphylaktischer
Reaktion auch die Harngiftigkeit durchaus inner-
halb normaler Grenzen sich bewegt, der anti-
anaphylaktische Zustand demnach im Gegen*
satz zu dem der Ueberempfindlichkeit bei Ein-
verleibung desAntigens in dem Fehlen derHarn-
giftigkeit einen exakten Ausdruck findet. Welche
Scbldsse aus diesen Tatsachen fflr das ganze Problem der
Ueberempfindlichkeit und das noch viel weiter zu fassende
des parenteralen Eiweillzerfalls gezogen warden kdnnen, bleibt
spfiteren Erdrterungen vorbehalten.

Mit dem 6. der aufgestellten Postulate wurde gefordert,
dafi bei der heute sichergestellten Identitfit der beiden Ver-
giftungsbilder, des anaphylaktischen Shocks einerseits, der Er-
krankung nach Peptoninjektionen andererseits, sollten nfihere
Beziehungen zwischen Harngiftigkeit und Anaphylaxiegift an-
nehmbar erscheinen, Peptonharn dieselbe Giftigkeit zeigen
miisse, wie Anaphylaxieharn. Mit anderen Worten: daB der
durch das Pepton Witte im Organismus sich bildende Gilt-
kdrper (das Peptozym der klassischen Versuche von E. Pick
und Spiro, das Vasodilatin der neueren Untersuchungen von
P op i el ski) als ein harnffihiger Kdrper sich erweise.

Daruber liegen schon filtere Angaben in der Literatur vor.
Schon die Entdecker der gerinnungshemmenden Eigenschaften
des Peptons, Schmidt-Mtthlheim, Hofmeister, Neu-
meister, Shore und Starling haben, in voller Ueberein-
stimmung mit der Tatsache des raschen Verschwindens von
Pepton aus der Blutbahn, diese Kdrper mehr minder reichlich
in alien Exkreten, also auch im Harn und in der Niere nach-
weisen kdnnen. Schon nach diesen Ergebnissen war es bei
der vdlligen Uebereinstimmung des Krankheitsbildes des ana¬
phylaktischen Shocks mit dem einer Peptonvergiftung einer-

41*

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624

Hermann Pfeiffer,

seits, aodererseits einer Harnvergiftung mit der erstgenaniiten
Erkrankung wahrscheinlich, daB jenes eben wiederholte Postulat
sich experitnentell werde erfQlIen lassen.

Bevor darauf naher eiagegangen warden soli, m5ge in
aller Kflrze das bisher ttber die Peptonvergiftung bekannt ge-
wordene Tatsachenmaterial fixiert und in einem fOr diese Ver-
suche wesentlichen Punkte noch ergUnzt warden.

Die Peptonvergiftung Hufiert sich bekanntlich 1) in einer
peripher ausgelosten, durch L&hmung der vasomotorischen
Endapparate bedingten Blutdrucksenkung; 2) in dem dadurch
bedingten Temperatursturz (H. Pfeiffer) und parallel gehen-
den Krankheitserscheinungen allgemeiner Art, die identisch
sind mit dem Bilde des anaphylaktischen Skocks; 3) einer
Leukopenia mit sekund&rer, polynuklelu'er Leukocytose; 4) Un-
gerinnbarkeit des Blutes (Schmidt-Miilheim); 5) bei
subkutaner Applikation in das Meerschweinchen Nekrosen-
bildung (H. Pfeiffer, seither von Doer bestHtigt) bei
vblliger Inaktivitlt gegen Erythrocyten und intakte Schleim-
hSute (H. Pfeiffer). Gerade auf diesen schon vor 2 Jahren
beschriebenen und tiberraschenden Gegensatz mdchte ich hier
besonders hinweisen und im Qbrigen betonen, wie bis in alle
Einzelheiten die Peptonwirkung der oben geschilderten Wir-
kung von RQckstSnden normaler Harne und von toxischen
Harnen im akuten EiweiBzerfall sich deckt.

Um diese Kongruenz aber bis in alle Einzelheiten erweisen
zu kbnnen, war es notwendig, das Vergiftungsbild des Pepton
Witte auch an der weiBen Mans zu studieren, die in ihrem
Verhalten gegen Harnvergiftung durch ihre Unempfindlichkeit
gegen die lokale Giftwirkung und durch das rauschUhnliche,
bezw. tetanusidinliche Vergiftungsbild bei Kdrpertemperaturen
unter 30® C eine typische Sonderstellung einnimmt.

Eine Anzahl einschl&giger Versuche gibt Tabelle XXIII.

Sie behandelt eine Reihe von 12 weiBen Mfiusen, 15 g
schwer, denen Pepton in fallender Menge subkutan beige-
bracht wurde. SSmtliche Tiere erkrankten kurze Zeit nach
der Einspritzung zunfichst unter Symptomen von Mattigkeit,
die ein mehr minder starker Temperaturabfall begleitete und
bei den grdBeren Giftdosen nach MaBgabe des Abfailes der
KSrpertemperatur immer in Somnolenz flberging. Die Tiere,

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Ueberempfindiichkeit etc. 025

Tabdle XXIII.

Mauseversuch mit Witte-Pepton.

d

S?

iDjektioDsmaterial

a.

S

Zeit

Shock

Mittel

1

0,1

Pept.

in 10-proz.Los.

180

1

720164 800

} 55 800

2j0,l

yy yy

yy

130

72046800

1

3 0,05

ff

yy

yy

1

23 480

1

i 5 520'

J 5760

4 0,05

»

yy yy

yy

25 480

1 1

60001

5!o,025

yy

„ 5-proz.

yy

28

300

4200 !

. 3300

6

0,025

yj

yy yy

yy

I 16

!300!

2400

7

0,013

>y

„ 2,5-proz.

yy

13

300

1950

1725

8

0,013

yy yy

yy

101300

1500

9

0,006

„ 1,5-proz.

yy

161

240

1920

1860

10

0,006

yy yy

15

240

1800

11

0,003

yy

„ 0,5-proz,

12

120

720

840

12

0,003

yy

yy yy

yy

16

120

960

Bonstige

KrankheitserB^einungen

Ischwerete Somnolenz,
unter 25 " starke Eeflex-
steigerung, schwerster,
dutch Std. anhalt. s. t.
deutliche Mattigkeit im
Temperaturmiiiimum
Fufiklonus

deutl. Mattigkeit, leich-
ter FuUklonus.
etwas matt, sonst keine
E[rankheiteer8chemung

dgl.

i7

welche mit 0,05 Pepton vergiftet worden waren, zeigten einen
deutlichen FuBklonus, die 0,1 PeptoD erhalten batten, gerieten
bei Temperaturgrenzen von 30® in den von der Harnver-
giftung her so wohlbekannten Zustand erhShter Reflex-
erregbarkeit, indem durch Kneifen oder Berflhren minutenlang
anhaltende tetanische Krampfanf&lle bei vdllig sistierter
Atmung ausldsbar warden. Bei Temperataren von 25 and
24® setzte das rauschUhnliche Zustandsbild ein, kurz, wir
finden auch bier bis in alle Einzelheiten jenes
Vergiftungsbild wieder, welches in dem ersten
exp erimentellen Abschnitt fflr die Harnver-
giftung, frflher schon fflr die Wirkung von Harnen
and Seren verbrtlhter and urSmisierter Tiere be-
schrieben worden ist. In seinem Zentrum steht aucb
bier der Temperaturabfall als Ausdruck der am Hunde n&her
studierten Blutdracksenkang, so zwar, daB es mdglich war,
mit Hilfe der Intensitat and Dauer der Temperaturreaktion
einen ziffernmaBigen Ausdruck fflr die Schwere der Erkrankung,
also fflr die Gr6Be der einverleibten Giftdosis zu geben.
Diese and andere Tiere bleiben tagelang in Beobachtung und
zeigten lokal, im Gegensatze zum Meerschweincben, keinerlei
entzflndliche Erscheinungen oder Nekrosen. Die FlQssigkeit
wurde reaktionslos resorbiert.

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626

Hermann Pfeiffer,

Nicht nur beim Meerschweinchen, sondern
auch bei der weifien Maus ist also das durch
Wittepepton in entsprechend grofien Dosen er-
zeugbareVergiftnngsbildidentischmitdemtoxi-
scher, im EiweiBzerfall gewonnener Harne oder
von sorgfUltig eingeengten RflckstJlndennormaler
Tier- und Menschenharne.

Noch hinsichtlich eines anderen, durch die Versuche
E. Friedbergers fiber die Symptome geringffigiger anaphy-
laktischer Shocks wichtig gewordenen Phfinomens sei hier be-
richtet. Es scheint niir ein nicht unwesentlicher Beitrag zu
der von Biedl und Kraus zum erstenmale durchgeffihrten
Analogisierung der Peptonvergiftung und des anaphylaktischen
Shocks zu sein.

E. Friedberger bewies zuerst einwandfrei die Tatsache,
dafi bei der Einverleibung von sehr kleinen Antigenmengen
in dagegen fiberempfindliche Meerschweinchen an Stelle des
Temperatursturzes eine Steigerung der Kdrpertemperatur ein-
tritt, so daB es ihm in Gemeinschaft mit S. Mita gelang,
durch sorgfllltige, zeitliche und quantitative Abstufung seiner
Versuche alle von den Infektionskrankheiten her bekannten
Fieberformen und kritischen Temperaturabstfirze auf diesem
^aseptiscben*^ Wege nachznahmen. Er zieht aus diesen Ver-
suchen u. a. mit Recht den SchluB, daB groBe Mengen des
Anaphylaxiegiftes Temperaturabstfirze, kleine Mengen hingegen
Fiebersteigerung veranlassen. Auch in diesen Punkte sei hier
die Prioritfit E. Friedbergers gegenfiber den jfingst vor-
gebrachten Ansprfichen von Schittenhelm und Weichardt
betont.

Dasselbe IfiBt sich nun auch ffir das Pepton Witte zeigen *).

Tabelle XXIV bringt einschlfigige Versuche, auf die ich
spfiter, das chemische und physikalische Verhalten des wirk-
saroen Kfirpers besprechend, zurfickzukommen habe. Hier
mdge nur die aus der Zusammenstellung ohne weiteres er-
sichtliche Tatsache Berficksichtigung finden, daB an toxische

1) Nach Abscblufi der vorliegenden Arbeit bekam ich Kenntnis von
alteren Versuchen von Erehl und Mat the 8 (Arch, f, exp. Path., Bd. 35
u. 36, 1895), welche gleichfalls, ohne aber natiirlich den Zusammenhang
mit der Anaphylaxie zu kennen, das Peptonfieber behandeln.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 627

TabeUe XXIV.

Peptou fieber.

M

d

Peptoninjektion

a

1

a

8

_i.

1

+

+

1

Alkohollbslicbe Bestandteile 10-proz. 4

ccm

2

intraperitoneal

Alkohoildsliche Beatandteile 10-proz. 4

ccm

5

30

75

17

480

1

4080

subkutan

0

0

0

18

420

3 780

3i

Alkobolfallbare Bestandteile 10-proz. 4

ccm

4

intraperitoneal

Alkobolfallbare Bestandteile 10-proz. 4

ccm

1

60

30

17

300

2550

sublnitan

0

0

0

11

480

2 640

5

10-proz. Pepton 1 8tunde anf 100® 3

ccm

I

1

i

6

intraperitoneal

10-proz. Pepton 1 Stunde auf 100® 3

ccm

17

600

5100

subkutan

0

0

0

11

1440

7 920

7

10-proz. Pepton 3 Stunden auf 100® 3

ccm

intraperitoneal

20

600

6000

8

10-proz. Pepton 3 Stunden auf 100® 3

ccm

subkutan

3

30

45

15

1440

10800

QjlO-proz, Pepton dialysiert 3 ccm intraperitoneal

27

540

7290

10

10|

„ „ „ 3 ,, subkutan

1

5

30

75

15

1440

10900

mit Temperatursturz („— Shock“) einhergehende intraperi-
toneale Peptonvergiftungen sich anschliefiend regelm&fiig fdr
das Meerschweinchen betrfichtliche und lange anhaltende
Fiebersteigerungen auftreten, wie demnach mit dem Kleiner-
werden des in den Peritonealsack deponierten Vorrates an
Gift, also beim Passieren von kleineren Giftmengen durch den
Orgauismus der Temperatursturz in Fieber sich verwandelt.

Noch sinnf&lliger wird dies, wenn man ein und dieselbe
Peptonldsung in nicht allzugrofien Dosen an zwei verschiedenen
Tieren intraperitoneal und subkutan unter Berticksichtigung
der Temperaturverhkltnisse auswertet, wie dies bei den Tieren
1—6 geschehen ist. Wahrend bei gflnstigen Resorptionsver-
haitnissen (peritoneale Injektion), also beim Passieren grofier
Giftmengen in der Zeiteinheit, Temperatnrsturze und spater
erst Fiebersteigerung bemerkbar wird, zeigen die subkutanen
Tiere, den hier ungflnstiger liegenden Resorptionsverhaitnissen
entsprechend, flberhaupt keinen Temperaturabfall, sondern so-
fort eine durch Stunden und Tage anhaltende Hyperthermie.

Wir finden also auch hier nicht nur vbllige Ana-
logien zum anaphylaktischen Shock, sondern

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628

Hermann Pfeiffer,

auch zur Harnvergiftung. DiesbezQglich erinnere ich
an die in Tabelle IV gebrachten Versuche fiber Harnfieber,
die sich in ihren' Ergebnissen mil den bier wiedergegebenen
vdllig decken.

Was nun die frflher erorterte Forderung nach einer
gleichsinnigen Erhbhung der Harngiftigkeit nach Pepton-
injektionen aniangt, so erscheint sie in Tabelle XXV erfQllt.

TabeUe XXV.

Toxizitat von Peptonharn.

PeptoDgabe

k

Zeit

Shock

Harn

Temp.'

Zeit

Shock

E in

1 ccm

Lokal-

wirkung

1 0,3 Pepton

1

10-proz. Lbs.

36

480

86402H

ip. u. Bk.

3115 172

86

N4:2

2 dgl.

39

420:

8190

dgl.

10 300 1500

750

N —I +

3

45

360'

8100

131180 1170

585

N3:l

4

15

420

3150

Hi 120 660

330

Nl:3

5

52

730 18 720 1 ccm subk.

20180 1 800,>2000

N-I +

6

30 630

9 450,2 ccm ip. u. sk.

19'360 3 420

1710

! N2 + 2

7

33 420

6930j

dgl.

22 360 3 960

1980

N —I-

8

28:360

5040'

23 300 3 450

1725

Nl:l

9

33 420

6930;

351360 6 300

3150

N-I +

10 „ j

3714801

7 880;

601450113 500

6750

N2:2

Sie berichtet fiber die Ergebnisse der nach dem bewUhrten
Muster durchgefQhrten Prflfung der Harne von 10 mit Witte-
pepton vergifteten Meerschweinchen, die wahrend der ersten
5 Stunden nach der Einverleibung, also wahrend des grofien
Temperaturabfalles, gesammelt worden waren an derselben
Species, Wir finden unter diesen Harnen solche (wie Harn
5—10), die hinsichtlich ihrer Wertigkeit im Meerschweinchen-
versuch hinter jenen von schwer anaphylaktisch vergifteten
Tieren nicht zurflckstehen und auch lebhaft nekrotisierende
Wirkungen ausfiben. Wie dort, so finden wir aber auch hier
Harne (vgl. dazu die Zusammenstellung in Tabelle XIV), die
ich als nparadoxe^ bezeichnet babe. Ich verstehe darunter
solche, die bei stark ausgebildeter Allgemeinwirkung lokal nicht
zu schadigen vermbgen (Harn 5 und 7), und wieder andere, die
das umgekehrte Verhalten zeigen (Harn 1). Die Prflfung von
Harn 9 und 10 an der weifien Mans lieferte das von den Ver-
brflhungs- und Anaphylaxieharnen her bekannte typische Ver-
giftungsbild. Die Extraktion der Harne mit Alkohol lieferte

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 629

(was ja selbstverstandlich ist und hier oicht nSher belegt werden
muB) wieder den Beweis der Alkoholldslichkeit des wirksamen
Kbrpers. Dasselbe zeigte sich mir, altere Erfahrungen anderer
Autoren bestStigend, in den Versuchsreihen der Tabelle XXVI
(Versuche 1—12).

Tabelle XXVI.

Pepton versuche.

M

No.

Behandlung des Peptons

Injektion von

s

H

O

lu.2
3u.4
5 U.6
7u.8

9

10

11

12

13 u. 14
15U.16
17 u. 18
19 U.20
21 U.22
23U.24

25 U.26

27U.28

29n.30

( 5-proz. wtisserige Pmtonlosung + 2 Vol.!
Aik. abs., Filtrat (F) und Niederschlag
d(N) getrennt und auf 10 ccm 50-proz. 3
I Irepton gebracht 3

llO-proz. wasserige Peptonlos. + 2 Vol. g
'Aik. abs., F. u. N. getrennt auf 40-proz.jg
I (Pepton gebracht I

j20 g trockenes Pent, niit 500 Aik. abs.|
lextrahiert, das Filtrat im Vakum zurjS
iTrockene gebracht und zu 100 Proz. in '
IXaCl aufgenommen
10-proz. Pepton 1 Htunde auf 100® C
2 fcjtunden auf 100® C
3 „ ., 100® C

4 ccm F lO-proz. ip. u. subk.

1 Stunde auf 100® C

f 10-proz. Pepton, 96 Stunden dialysiert,
[auf 10-proz. gebracht
(10-proz. Pepton, 72 Stunden dialysiert,'
(auf 10 Proz. gebracht i

10-proz. Pepton, nicht dialysiert

N 10-proz.
F 50-proz.
N 50-proz.

F 40-proz.
N 40-proz.

F intraperitoneal
Fintraperit. u. subk,

dgl.

5i 30
11 60
47 840
24:360

24!200
8; 80

90

901

171600!
5 90
20600

630!

540

540

300

75

19 7^
4 320

2 400
320

450

360

5100
225
60001
12 600
8100
152201

3900

40 600,12000
40|630!i2 600

Die Prufung der Filtrate und Niederschlage von Pepton-
losungen nach Zusatz der 2—5-fachen Volumina von Alkohol
absolutus bewiesen die weitaus groBere Giftigkeit der ersteren,
somit die AlkohollSslichkeit des wirksamen Korpers. Hingegen
ergab die Extraktion von trockenein Pepton rait absolutem
Alkohol ein negatives Resultat bei der Prflfung eines auf
100 Proz. des Ausgangsmateriales gebrachten Extraktes. Also
auch in diesem Punkte ein Verhalten wie bei dem im Harn
wirksamen Korper.

Hingegen ergaben sich bei der Dialyse von Wittepepton
durch Schweinsblasen Unterschiede gegeniiber dem Verhalten
der Harne und auch der Harne peptonvergifteter Meerschw'ein-
chen. Wie oben erwahnt, konnten diesen durch ISnger fortge-

+

+

+++
+ +
+

+++

+

+

+

+

+

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630

Hermann Pfeiffer,

setzte Dialyse die allgem ein und lokal wirkenden E5rper
v511ig Oder fast vdllig entzogen werden. Anders verhielt sich
die in den Versuchen 25—30 ausgewertete Peptonldsung. Eine
durch 72 Stnnden fortgesetzte Dialyse gegen oft gewechseltes
Wasser ^nderte an der Giftigkeit der InnenflQssigkeit nichts,
nach 96 Stunden war hinsichtlich der Allgemeinwirkung eine
leichte Abnahme zu konstatieren, die Nekrosenbildung war
ungeschw&cht erhalten.

Diese Differenz mufite um so mehr flberraschen, als ja
die giftigen Eigenschaften von Peptonharnen, die sich in nichts
von dem des einverleibten Giftes biologisch unterschieden,
so wie das Ham gift als leicht dialysabel sich erwiesen hatten.
Dieses Verhalten lieBe sich vielleicht so erkltren, daB wir bei
den im Harn ansgeschiedenen Anteilen des Peptons Kbrper
niedrigeren molekularen Aufbaues von uns haben, welche das
Nierenfilter passiert haben, demnach auch die tierische Mem-
bran passieren, im Wittepepton aber eine Menge verschieden
hoch und tiefstehender Bausteine des zerfallenen EiweiB-
molekales enthalten sind, in denen der wirksame Kdrper
noch in Form einer hdher molekularen Vorstufe gegeben und
damit ein Passieren der Dialysemembran unmbglich ist. In
diesem Sinne sprechen ja auch die Anschauungen, die fiber
das Wesen der Peptonvergiftung schon vor Jahren gewonnen
warden und in der Arbeit von E. Pick und Spiro zur An-
nahme ffihrten, daB im Pepton der wirksame Kfirper in Form
einer hdher molekularen Vorstufe, des sogenannten Pepto-
zymogens enthalten sei, aus der durch den lebenden Organis-
mus erst der eigentlich wirksame Kdrper, das Peptozym ge-
bildet werde. DaB es sich bei letzterem um ein relativ ein-
fach gebautes Bruchstfick des EiweiBmolekfils handeln muB,
welches als solches sicherlich leicht dialysiert, ergibt fernerhin
die von Pick und Spiro zuerst festgestellte Tatsache, daB
der wirksame Kdrper keine Biuretreaktion mehr gibt und die
neueren Versuche von Popielski, die dem ganzenchemischen
Verhalten seines sogenannten „Vasodilatins" nach gleichfalls
im Sinne eines relativ niedrig stehenden dialysablen Spalt-
produktes sprechen.

DaB meine oben ausgespr-ochene Annahme Wahrschein-
lichkeit besitzt, ergibt sich fibrigens auch aus einem Versuch,

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Weitere Beitr^e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 031

den ich in der Weise anstellte, daB ich eine 10-proz. Pepton-
15sung Witte mit dem fflnffachen Volumen Alkohol ^llte, also
damit die h5her molekularen Bestandteile entfernte, das
alkoholische Extrakt im Vakuum einengte, den Rttckstand za
einem bestimmten Verh&ltnis in Kochsalzldsung aufnahm und
eine Hklfte durch 48 Stunden dialysierte. Nunmehr hatte die
Innenflflssigkeit, nachdem sie neuerlich im Vakuum auf das
alte Volumen gebracbt worden war. Hire allgemeine Wirkung
v511ig eingebiik. Sie vermochte lokal nur mehr Infiltrate,
aber keine Nekrosen zu erzeugen, wfihrend die nicht dialy¬
sierte Probe beide Eigenschaften in hohem MaBe besaB. Auch
Untersuchungen, die ThermolabilitBt des wirksamen Kdrpers
im Peptou betreffen, die sich in dieser Tabelle XXVI finden,
ergeben, wenn man von der hoheren Giftigkeit des verwendeten
Prfiparates absieht, Hhnliche Verhftltnisse wie ftlr den Harn.
Hier wie dort wird die Giftigkeit auch durch stundenlanges
ErwSrmen auf 60® nicht verftndert Ein Erhitzen auf 100®
hingegen beeintr&chtigt die nekrotisierende Komponente stark,
zerstdrt aber auch die allgemeine toxische Wirkung.

Es geht also bei der fibrigens bis hierher festgestellten
Uebereinstimmung in der Wirkung der Harne anaphylaktischer
und peptonvergifteter Tiere, sowie der Rflckst&nde normaler
Harne nicht an, aus den auf andere Weise erkllLrbaren Difife-
renzen der Dialysierbarkeit Schlttsse im Sinne einer Wesens-
verschiedenheit der K5rper zu ziehen, um so weniger, als
dies nur ftlr Peptonlosungen, nicht aber fQr die alkoholischen,
also von den hdher molekularen Anteilen befreiten Extrakte
aus Witte-Pepton und nicht ftlr den bei der Peptonvergiftung
im Harn ausgeschiedenen giftigen Peptonbestandteil gilt, der
also auch in diesem Punkte identisch sich verhUlt mit den
wirksamen Kdrpern des Harnes anaphylaktischer Tiere.

Nicht ohne Interesse fflr das Problem der EiweiBanaphy-
laxie scheinen mir weitere Versuchsreihen zu sein, welche die
von Biedl und Kraus zuerst am Hunde, dann von mir in
Gemeinschaft mit S. Mita auf das Meerschweinchen ausge-
dehnte Tatsachen betreffen, daB eine bestehende Ueberempfind¬
lichkeit durch eine vorausgehende Peptonvergiftung aufgehoben
werden kann und wie sich hier der Harn der mit dem Antigen
reinjizierten Tiere verhSlt.

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632

Hermann Pfeiffer,

Zuerst seien Dochmals, und das mit Hilfe der Berechnung
der Shockgrdfien aus dem Verlaufe der Temperaturkurven,
frOhere Angaben fiber die schon seit Ifingerer Zeit an der
Blutgerinnbarkeit und dem Verhalten des Blutdruckes fest-
gcstellte Tatsachen der Peptonimmunitit gegen nachfolgende
neuerliche Peptoninjektion erginzt, Angaben, die sich seiner-
zeit nur auf die GrdOen der Temperaturabnahmen bezogen,
heute aber auch unter Berficksichtigung der Zeitdauer der
Erkrankung noch wesentlich gestfitzt werden kfinnen. Die
Versuche sind in Tabelle XXVII zusammengestellt. Sie be-
treffen 8 Versuchstiere des angegebenen Gewichtes, die zum
ersten Male auf 0,3 g Pepton intraperitoneal mit den, in Ko-
lonne 3 berechneten Shocks erkrankten. Den Tieren wurde
24 Stunden spiter neuerlich dieselbe Giftmenge eingespritzt.

TabeUe XXVII.

Peptonunterempfindlichkeit.

No.

Gewicht

Beaktion auf 0,3
Pepton

Intervall

Beaktion auf 0,3
Pepton

Schutz

1

317

■'X480 _ 33 ^

24 Stand.

1740

2

270

2 250

dgl.

675

3

290

—^-^ = 18000

i

»

22X210 _ 23,0

15 690

4

250

_ j] 343

^X270^3,33

7 560

5

300

4800

1J

3 450

6

287

2^X180 _ 3433

jy

2^X180 _ 343 „

0

7

274

22X480 ^ .gg.

»

3075

8

284

12X480 ^ 2ggQ

yy

2«Xieo_334o

540

Beaktionsmittel bei der ereten Injektion: 6292.
Beaktionsmittel bei der zweiten Injektion: 2201 = Vt*

Das aus beiden Versuchsreihen berechnete Beaktionsmittel
betrug bei der zweiten Injektion nur ein Drittel von dem der
ersten, so dafi also ein deutlicher Schutz ganz unverkennbar
ist. Betrachtet man aber die einzelnen Beaktionstjpen der
Tiere, so sieht man, dail bei einigen der Tiere die Intensitit

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Uebcrempfindlichkeit etc. G33

des im Zentrum des Vergiftungsbildes steheiiden Temperatur-
abfalles weit hinter jener der ersten Vergiftung zurfickbleibt,
bei anderen aber kaum oder gar nicht, daC aber, und das
verdient im Vergleich zu parallelen Ergebnissen mit der Harn-
vergiftung hervorgehoben zu werden, die Zeitdauer der
Erkrankung in alien Fallen betrachtlich abgekiirzt war, die
Beriicksichtigung beider Faktoren also uns erst die Schutz-
wirkung in ibrem vollen Umfange erkennen laBt.

Versuche mit einem Witte-Peptonpraparat batten vor
Jabren eine vollstandige Aufbebung der Reaktionsfabigkeit
sensibler Tiere durcb die Vergiftung ergeben, wobei aucb
ganz kleine Peptondosen nocb eine deutlicb abscbwacbende
Wirkung auf den Verlauf des anapbylaktiscben Shocks zeigten
und die Tatsacbe festgestellt werden konnte, daB bei Meer-
scbweincben, die intraperitoneale Einspritzung vorausgesetzt,
diese „Immunitat“ gegeu das Antigen der Reinjektion be-
sonders deutlicb nacb einem Zeitraume von 2—4 Tagen aus-
gepragt ist.

Tabelle XXVIII.

Aufbebung der Anaphylaxie durcb Pepton.

a) Berecbnung der Scbutzwirkung.

6

Vorbe-

bandlung

Inter¬

val!

Re¬
in jektion

Temperatiir I

Zeit

Shock

Inter¬

val!

Re¬

injektion

Temperatiir

*53

S3

Shock

Schutz

1

0,01Pf.-S.

20Tag.

0,25 Pept.
10 Proz.

23

495

5 693

4 Tag.

2,0Pf.-S.

inaktiv.

60

510

15300

9 260

2

dgl.

dgl.

dgl.

15

465

3 487

dgl.

dgl.

13

270

1755

22 805

3

yy

26

645

9 395

yy

yy

4

105

210: 24 350

4

yj

yy

' ft

22

585

6435

yy

28,270

2 780 21 780

5

yy

yy

!

ft

19

480

4 560

1

yy

40210

4 200120360

6

yy

yy

25

615

7 687,

yy

yy

13 240

1560,23000

7

yy

yy

yy

29

705

0222

yy

6 105

315'24 245

8

yy

Jf

27

705

9517

y*

7

240

aw

23 720

9

yf

” 1

0,3 Pept.
10 Proz.

50

630

15 750

sfag.

7

30

105

24 455

10

yy

7J 1

dgl.

22

570

6270

24 Tag.

751720

27 000

0

11

yy

yy

0 „

_

—

—

dgl.

yy

5^30

17 328

—

12

yy

yy

0 „

—

—

—

yy

28 930

13020

—

13

yy

y^

0 „

—

—

—

yy

108:810

43 740

—

14

0 „

—

—

—

yy

V i

701690

24150

—

Beaktionsmittel der sensibilisierten Tiere = 24 560.
Reaktionsmittel der desensibilisierten Tiere = 5 506.

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634

Hermann Pfeiffer,

TabeUe XXIX.

Aufhebung der Anaphylaxie durch Pepton.
b) Harntoxizitat

Tier

No.

Harn-

menge

Injektionsmenge
und Art

Tempe-

ratur

Zeit

Shock

TOX.-E
in 1 ccm

Lokal-

wirkung

3

4 ccm

2 ccm ip. u. subk.

9

165

742

371

glatt!

6

4 „

2

33

300

4950

2475

—

7

4

2

9

90

405

202

glatt!

8

4 „

2

21

210

2205

1102

N - J +

9

4 „

2

}9 99 99 99

29

255

3697

1848

glatt!

10

4 „

2

99 99 99 99

32

420

6720

3360

—

Zu den vorliegenden Versuchen der Tabelle XXVIII und
XXIX wurde ein neues PrS-parat der Firma Merck verwendet,
welches weitaus gleichm&fiiger auf alle Versuchstiere wirkte
und eine bedeutend hdhere Giftigkeit fdr das Meerschweinchen
zeigte, als jenes frtther verwendete, welches aber hinsichtlich
seines nDesensibilisierungsvermdgens*^ wenn auch durchaus
befriedigende, so doch lange nicht so konstante Ergebnisse
lieferte und so hochgradige Schutzwirkungen fiuQerte. Aehn-
liche Erfahrungen scheinen tibrigens in jhngster Zeit auch
Biedl und Kraus gemacht zu haben, wie wir gleichsinnigen
Mitteilungen in ihren AusfQhrungen fiber Anaphjlaxie im
Erganzungsbande des Handbucbes der Technik und Methodik
der Immunitfitsforschung entnehmen.

Meine neugewonnenen Resultate sind die folgenden:

Eine Beilie von 14 Meerschweinchen wird mit 0,01 Pferdesenim iutra-
peritoneal sensibilisiert, davon 10 Tiere nach 20 Tagen mit 0,25, bezw. 0,3
Pepton in einem Ausmafie geschadigt, welches ziffemmafiig aus den Tem-
peraturabf^en fiir jedes Tier in der TabeUe entnommen werden kann. Die
4 sensiblen KontroUen reagieren am 24. Tage nach der Beinjektion im Mittel
auf 2,0 inaktiviertes Pferdesenim mit 24 560 E, die Peptontiere nur mit
5506, also mit weniger als */« der Werte der KontroUtiere. Von den desensi-
biUsierten Tieren erweisen sich 2 (No. 1 und 10) nicht oder fast nicht
geschiitzt, die anderen aber aUe in hohem Ma6e refraktar. Insbesondere
Tier 3, 7, 8 und 9 reagierten gar nicht.

Dazu sei bemerkt, da6 man durch Verwertung des Tem-
peratursturzes nicht nur zu einer ziffernmfifiigen Darstellung
der Groile des Shocks, sondern, wie dies in der vorliegenden
Tabelle geschehen ist, auch zu einer ganz exakten Darstellung
des Schutzes derartiger prfiventiver Peptoninjektionen gelangen

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Weitere Beitrage zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. 635

kann. Indem man aus den Kontrollen den Mittelwert fiir die
sensiblen Tiere berechnet und aus dieser mittleren Reaktions-
breite durch Subtraktion der Shockwerte der geschiitzten Tiere
die Differenz beider, fixiert, kann man somit auch den Unter-
schied in der Schwere der Erkrankung, somit auch den Schutz,
den die Peptoninjektion im Einzelfalle gew&hrt hat, feststellen.
Interessant ist es, dafi bei diesen Versuchen die refraktSxen
Tiere 3, 7, 8 und 9 jene sind, welche auf die Peptoninjektion
am st&rksten reagiert hatten, wkhrend die fast ungescbQtzten
Tiere das zweite Mai nur schwach erkrankt waren.

Wir kdnnen demnach den Satz aufstellen, dad eine
vorhergehende Peptoninjektion ceteris paribus
urn so stUrker desensibilisierend auf anaphylak-
tische Tiere zu wirken vermag, je starker diese
durch die erste Vergiftung geschkdigt wurden.

Die Auswertung der Harngiftigkeit der 5 Stunden nach
der Antigenreinjektion abgeschiedenen Harne findet sich in
Tabelle XXIX. Entsprechend der Tatsache, dad die Auf-
hebung der Ueberempfindlichkeit keine vollsUindige, sondern
nur eine partielle, bei einzelnen Tieren eine recht geringfflgige
war, finden wir unter den Harnen solche, die auch eine recht
betrdchtliche, die Norm weit Qbersteigende Giftigkeit besitzen.
Dabei ist es wieder bedeutungsvoll, dad gerade jene Tiere,
die durch das Antigen nicht Oder fast nicht geschddigt wurden,
auch die ungiftigen Harne lieferten (Tier 3 und 7), das am
schwersten geschftdigte Tier (No. 10) einen hochgradig giftigen
Harn abschied, die anderen nach Madgabe der Schwere der
durchgemachten Erkrankung auch mehr Oder weniger giftige
Exkrete darboten.

Den eben aufgestellten Satz ergdnzend, kann
hinzugefiigt werden, dad der Harn von durch
Pepton gegen die anaphylaktische Erkrankung
geschtttzten Tieren nach Madgabe dieses Schutzes
seine giftigen Eigenschaften verliert, somit auch
hier, wenn wir die Wesenheit des Prozesses be-
riicksichtigen, in der Harngiftigkeit ein exakt
bestimmbarer Ausdruck fflr den Eiweidzerfall
gegebenist, dersich unter deninRede stehenden
Versuchsbedingungen im Organismus vollzieht.

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636

Hermann Pfeiffer,

DaK diese Tatsache zu Recht besteht, ergibt auch eiue
zweite ebenso angeordnete Versuchsreihe, die in ihren wesent-
lichsten Ergebnissen Tabelle XXX wiedergibt. Die 5 Versuchs-
tiere waren durch vorausgebende Peptoninjektionen wieder
mehr mieder gegen die Antigenreiojektion geschQtzt, ihre
Harne zeigen nach MaBgabe des Shocks hdhere oder geringere
(bis subnorraale!) Toxizit&t bei der biologischen Auswertung.

Tabelle XXX.

Harn durch Pepton desensibilisierter und mit Antigen

reinjizierter Tiere.

Injek¬

tion

Tempe-

ratiir

Zeit

Shock

Harnmenge
und Injektionsart

Tempe-

ratur

Zeit

Shock

T0X.-E
in 2 ccm

Lokal*

wirkung

2 Pf.-S.

10

75

375

2 ccm ip. u. subk.

8

90

360

180

glattl

2 „

10

120

600

o

" >> jj

9

60

270

135

91

2 „

15

120

900

2

^ n jy n

2

45

45

22

11

2 „

, 20

120

12(X1

9

“ jj tj }y

10

150

750

375

N-P

9

30

180

8

(M

9

yy yy ?• yy

40

360

7200

3600

N-t-

Von ganz ebenso geringerer Wirkung wie das Desensi*
bilisierungsvermSgen dieses Peptonpr&parates im Vergleiche
zu jenen frflher verwendeten war die Schutzwirkung, welche
der anaphylaktische Shock, ja selbst eine komplette Antiana-
phylaktisierung mit dem Antigen der Vorbehandlung gegen
die Injektion dieses so giftigen Peptons gew&hrte.

Das ergibt sich aus Tabelle XXXI, die zwar unverkennbar
die Tatsache neuerdings festgestellt, wie im Stadium der Anti*
anaphylaxie die Tiere unterempfindlich gegen Peptonwirkungen
werden, andererseits aber hinsichtlich der Schutzwerte wesent-
lich gegen frtlhere Erfahrungen zurQckbleiben.

Wie aus der Zusammenstellung dieser 26 Versuche hervorgeht, wurden
die Tiere mit 0,01 Pferdeserum sensibilisiert und davon 13 nach 25 bis
.'K) Tagen mit inaktivem Pferdeserum nachgespritzt. Sie machten sehr
intensive Shocks durch, eines der Tiere wurde letal vergiftet und schied
von den weiteren Versuchen aus. Die anderen Here erhalten nach einem
Intcrvall von 4 Tagen 0,3 Pepton, eine Dosis, die von den Eontrollen der
Tiere 1 bis inklusive 8 mit 12 243 E, von den Eontrollen der Tiere 9 bis
]2 mit 11073 E im Mittel beantwortet wurden. Wie aus den in der
letzten Tabelle berechneten Schutzwerten hervorgeht, war die Wirkung der
iiberstandenen anaphylaktischen Erkrankung unverkennbar, betrug in
2 Fallen (Tier 3 imd 6) das Doppelte der eigenen Beaktion, iiberwog in

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TabeUe XXXI.

Beeinflussung der Peptonwirkung.
a) Dutch den anaphylaktischen Shock.

Weitere Beitriige zur Kenutnls det Ueberempfindlichkeit etc. 637

Zeitscbr. f. ImmoDiUtsfonchaD^. Oii;. Bd. X. 42

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638

Hermann Pfeiffer,

zwei anderen (Tier 8 und 9) die eigene Reaktion nicht nnbetrachtlich,
blieb in den iibrigen um die Halite oder gar ein Drittel hinter dieser
zuriick und war beim 12. Versuchstier endlich 0 gleich zu setzen.

Diese Ergebnisse warden tlbrigeng, and das verdient
hervorgehoben zu werden, mit Tieren gewonnen, die nach
vielf&ltigen Erfahrungen sicherlich nicht vdllig antianaphy-
laktisch waren, sondern (vgl. dazu die Tiere der Tabelle XXII!)
sicherlich auch auf erneute Antigeninjektionen nicht unbe-
tr&chtlich reagiert h&tten. Sie warden ferner mit sehr be-
deutenden Giftmengen erhalten, die sicherlich die Dosis toxica
um ein Mehrfaches flberschritt. Trotz dieser ungQnstigen
Versuchsbedingungen, die damals noch in Unkenntnis dieser
beiden, die Resultate trflbenden Faktoren gew&hlt warden, ist
aber doch die Peptonwirkung wesentlich milder verlaufen, als
bei den Kontrollen. Und das gilt hier wieder sowohl von der
Intensit&t des Temperatursturzes, als insbesondere von der
Ansdehnung der Erkrankang.

W^rend der durch das Pepton gesetzten Vergiftung
warden die Harne der 13 Tiere von Tabelle XXXI gesammelt
und nach 5 Stunden einzeln ausgewertet, was in Tabelle XXXII
wiedergegeben ist. Die Harne batten, der immerhin betrtlcht-
lichen Reaktion entsprechend, recht betrSLchtliche Giftwirkungen,
welche sowohl hinsichtlich der allgemeinen, als auch der

Tabelle XXXIl.

Beeinflussung der Peptonwirkung.
b) Hamauawertung der Peptontiere von Tabelle XXXI.

Tier

No.

Injektionamenge
und Art

Tempe-

ratur

Zeit

Shock

T0X.-E

Lokal-

wirkung

Shock des
Ham-
spenders

1

2 ccra Ham
intrap. u. subk.

3

115

172

86

11

8640

2

dgl.

8

210

840

420

N = 3 : 2

8160

3

yy

28'

240

3 360

1680

N = 3,5 : 2

3 750

4

>>

7

165

577

288

N = 3,5 : 2

9 120

5

60

450

13 500

6750

N = 2 : 2

8880

t

yy

.30

360

54(X)

2700

N = 2,5 : 1

4200

8

yy

25

360

4 500

2250

N = 2,5 : 2,5

8400

0

25

l330

4125

: 2063

N = 2,5 : 2,5

; 5 775

10

yy

9

210

945

* 472

II

i 4800

11

yy

1 10

120

600

300

glattI

8 640

12

y

1 18

300

2 700

. 1350

N = 1 : 1

14 175

13

!

13

|135

877

4.38

N = 2 ; 2

1 7 200

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 639

lokalen Komponente die Norm wesentlich liberschritten. Das
konnte nicht anders erwartet werden. ImmerhiD ist es aber
bedeutungsvoll und wird vielleicht in Znkunft bei n3.herer
experimenteller Analyse kl&rend auf das Problem der Pepton-
wirkungen und der EiweiBzerfallstoxikosen wirken, da6 inner-
halb 'weitgesteckter Grenzen aus diesen Versuchen folgendes
Gesetz hervorzugehen scheint: Der Harn unterempfind-
licher, mit Pepton vergifteter Meerschweinchen
ist um so weniger giftig, je grdller der Shock des
vergifteten Tieres war und entfaltet umgekehrt
um so intensivereWirkungen beiderbiologischen
Untersuchung, je weniger das Meerschweinchen
dadurch geschadigt wurde, je grbBer also der
durch die Antianaphylaxie bewirkte Schutz ist.

Die bisher angestellten Versuche sind zu wenig zahlreich,
um mit Bestimmtheit diesen Satz aussprechen zu konnen;
die gewonnenen Resultate scheinen aber immerhin in diesem
noch weiterhin zu prhfenden Sinne zu sprechen.

Die erste Versuchsgruppe (Harne 1—4) zeigt bei einem Shock des
Harnspenders tod 3750 E im Haro 1680, bei einer E^rkrankung von
ca. 80(X) E 250 im Haro, von 9000 E = 288 E im Haro. Aehnlich die
zweite Versuchsgroppe: Es entsprechen der Beihe nach Erkrankungen tod
8600, 5000 und 4000 E einer Harngiftigkeit von 2400, 2000 und 2700 E.
In der letzten Gruppe endlich finden wir bei der Beaktion von 14175 E
den am starksten wirksamen Harn. Hinter seiner Wertigkeit bleibt die
dcr Harne weniger schwer wahrend der Harnexkretion geschiidigter Tiere
weit zuruck.

Wir finden bier also geradezu umgekehrte Verhfiltnisse
wie bei der unbeeinfluCt ablaufenden Anaphylaxie- und Pepton-
vergiftung, bei der einem schweren Shock auch die grSBere
Harntoxizitat, ganz allgemein ausgedrflckt, eutsprach. Ich
mbchte das Gebiet des tatsfichlich Beobachteten um dieser noch
zu wenig zahlreichen Tatsachen willen nicht verlassen, aber
doch zu bedenken geben, ob hier von weiteren Versuchen nicht
hinsichtlich der heute in ihren Ursachen noch immer nicht klar-
gelegten Peptonimmunit&t und damit auch fiir die Anaphylaxie
und dieses ganze fQr die Folge so bedeutungsvolle Problem
des parenteralen EiweiBzerfalles eine Entscheidung erhofft
werden kbnnte. Dieser Parallelismus bei einem ungeschutzt
den EiwelBzerfall iiberstehenden Tiere dort, das Gegenteil hier,

42*

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640

Hermann Pfeiffer,

WO unverkennbare SchutzwirkungeD vorliegen, lafit neaerdings
die experimentelle Erdrterung der Frage nach dem Vorliegen
einer antitoxischen Immunit&t jedenfalls nicht ganz aussichtslos
erscheinen. Das um so weniger, als fQr die sogenaonte ^Pepton-
imiDunitS.t‘‘ die Hinflllligkeit der seinerzeit gangbaren Er-
schdpfungstheorie durch die Versuche von E. Pick und Spiro
wohl endgtlltig dargetan ist. Diese Autoren haben schon vor
nunmehr 10 Jahren an diese eben ausgesprochene Mbglichkeit
gedacht. Im Hinblicke auf die spS,ter noch zn besprechende
intensiv schUdigende Wirkung des Giftkdrpers auf die Nieren
und die terminal beim Verbrfibungstod gefundenen Verhfiltnisse
muB aber fiir die Znkunft auch die Erkl&rungsmdglichkeit ins
Auge gefaBt werden, ob nicht bei st&rkerer NierenschBdigung
infolge funktioneller Schfidigung diese Organe ihrer Aufgabe,
als Ausscheidungsapparate zu dienen, nicht mehr gerecht
werden kbnnen und aus diesem Grunde ganz unabhBngig von
der sogenannten „Peptonimmunit9,t‘‘ die Harngiftigkeit sinkt,
w&hrend bei schwSlcherer primUrer SchUdigung bei neuerlichem
Shock auch grdfiere Giftmengen abgeschieden werden kdnnen.
Doch bliebe auch durch diese Vermutung die Differenz gegen-
flber einer unbeeinfluBt abgelaufenen Anaphylaxie ungekl^t.

Die hier vorgebrachten Tatsachen insgesamt haben wohl
keinen Zweifel darfiber gelassen, daB zwischen dem im Earn
znr Zeit des anaphylaktischen Shocks auftretenden GiftkSrper
und der Erkrankung seines Spenders ffir das Verstfindnis des
Vorganges wesentliche und innige Beziehungen bestehen, wie
sie andererseits ebenso erwiesen haben, daB sowohl in bio>
logischer als auch (so weit dies heute zu sagen moglich ist!)
in chemisch-phjsikalischer Hinsicht nur vdllige Uebereinstim-
mung der Wirkungen und des Verhaltens, aber keine Differenz-
punkte fflr Harngift und Peptongift aufgefunden werden konnten.

Welche Folgerungen daraus fflr das Anaphjlaxieproblem
sich ergeben, soli spBter ausfiihrlich dargetan, jetzt aber zum
Schlusse dieses Abschnittes noch die experimentelle Erledigung
einer Fragestellung mitgeteilt werden, die sich aus den bisher
gemachten Erfahrnngen von selbst ergibt. Sie lautet: Ist die
so weitgehende Aehnlichkeit in Verhalten und Wirkung zwischen
Harngift und Peptongift wirklich als zu Recht bestehend an-
zusehen, so muB, ganz ebenso wie eine Peptonvergiftung ein

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 641

anaphylaktisches Tier zu desensibilisieren vermag, ebenso wie
ein antiauaphylaktisches gegen jene Giftwirkung geschiitzt ist,
auch dieselbe Wirkung toxischen Aoaphylaxieharnen bezw. den
RflckstSnden normaler Harne eigen sein. Hier in Kiirze die
experimentelle Erfullung auch dieses Postulates.

Tabelle XXXIII.

Desensibilisie rung diirch Anaphylaxieharn.

.•s

Vorbe-

"3 '
> :

!

Eeaktion auf

Inter-

Reaktion aaf i

1

Inter-

Reaktion aaf

Mittel

i

o

handhing

"c '

i 2 Ana. Haj

vail

2 Ana. H,

1

vail

2 Pf.S.

a

&

|430|

370

344

415

381

|0,1 Pf.S. ip.
dgl.

]8= 3510124 Std.'^iXi?^ = 10 290

18 |?iXJ^90 ^

I

21
21
21

dgl.

2

48Std.

dgl.

180 ^ ,7201

3X45 _

67

6382

== 10 312

37 X 345 _

> 393

8752

8032

8685

_ ^^5_ 9563

In Tabelle XXXIII warden 5 Meerschweinchen gegen Pferdeserum in
gewohnter Weise mit 0,01 ccra des Antigens sensibilisiert. Zwei der Tiere,
die im Grewichte den drei librigen Kontrolltieren entsprachen, warden nach
18 Tagen and 24 Standen spiiter neaerdings mit je 2 ccm hochgiftiger
Anaphylaxieharne peritoneal gespritzt. Die Shocks waren insbesondere
bei der zweiten Injektion intensive. Nach einem weiteren Intervall von
48 Standen bekamen diesmal alle 5 Tiere, die geschadigten and ange-
schadigten, je 2 ccm des Antigens. Wahrend die letzteren ein Reaktions-
mittel von 8752 E ergaben, erkrankten die ersteren nar im AasmaSe von
393 E, also 20mal schwacher. Der Schatz betrag bei dem ersten Tiere
mehr als das Zehnfache, beim zweiten Tier mehr als das Handertfache der
eigenen Reaktion.

Eine ebenso beredte Sprache fflhren die Versuche der
Tabelle XXXIV, die unter der notwendig gewordenen Voraus-
setzung, die Giftigkeit des Anaphylaxieharnes beruhe lediglich
auf der Ueberproduktion und gesteigerten Ausscheidung eines
schon normalerweise in Spuren den Organismus passierenden
Korpers, Parallelversuche mit den RuckstUnden normalen
Harnes bringt.

Von 16 Meerschweinchen werden 8 zweimal in Ahstanden von
24 Stunden mit Harnruckstanden peritoneal injiziert und erkranken aus-
giebig. 2 Tage spater erhalten alle 16 Tiere, die 8 ausschliefilich sensibili-

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642

Hermann Pfeiffer

Tabelle XXXIV.

DesenBibilisierung durch Harnvergiftung.

Vorbe- Inter- Seaktion auf Inter- Beaktion auf Inter- Beaktion auf s
g handlung vail 2 HB ip. vail 2 HR ip. vail 2 Pf.-S. ip.

1

3200,1P1-S.ip.

18 Tg.

28 X 270 ^3^gQ

24Std.

^X240 _ 336048gtd,

20 X 300 ^ 3000

0

2

:;65

dgl.

dgl.

??X?^ = 7500

dgl.

40 X 390^7000
2

dgl.

10XI»_9(X)

1357

3

280

J7

77

30 X

?LXi^ = 6000

77

2f.X360_45g(,

2

77

6X105^315

2

1942

4

350

7 7

77

77

32 X 330 ^ 5280

^2X^==5850

77

20 X 300 ^ 3000
28 X 240 _333o

0

5

315

»

77

540^,^00

77

77

0

6

350

17

77

^X ^0^ 5940

77

22X300^ 3300

77

8 X105 ^

1837

7

315

77

77

2^X^=.6187
2?^._^ = 6600

77

2^X^ = 3860

77

2X70 = 702187

1

8|3(X)

77

77

77

30 X 390 _

2

77

_§X ®0_^ 320

1937

9

347

77

21 Tg.

—

—

24 X 275 _33oo

10

341

77

dgl.

—

—

—

—

29 X 315 _ ^7

11

301

77

77

—

—

—

—

20 X195 _ 1950

12

287

77

—

—

—

—

12X195_jj7^

13

275

1

77

—

—

—

—

^x^ = 3290
2

14

313

n

—

—

—

—

l?Xl?5 = i4e2

15

328

77

—

- 1

—

—

wxsio.ioso

16

305

77

—

—

—

—

13 X 105_1267

Beaktionsmittel der sensiblen 2257
„ „ deeensibilis. 405

(mit Ausnahme von No. 1, 4, 5).

sierten ebenso wie die 8 anderen 2 ccm Antigen. 3 der Tiere erkrankten
dabei im Ausmafie der Kontrollen, die 5 anderen aber zeigten wesentlich
schw&chere Beaktionen, indem ihr Beaktionsmittel nur ein Funftel betrug.
Gehen wir die Falle im einzelnen durch, so war Tier 2 g^n die eigene
Beaktionsbreite, Tier 3 gegen das Bechsfache, Tier 6 gegen das mehr als
Vierfache, Tier 7 gegen das DreiOigfache, Tier 8 endlich g^en das Fiinf-
fache geschiitzt.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberenipfindlichkeit etc. 043

Diese Schutzwirkung vielleicht aus Zufalligkeiten herzu-
leiten und mit einer geringeren Empfiodlichkeit der Tiere er-
klaren zu wollen, geht im Hinblicke auf die zahlreichen Kon-
trollen, die ausnahmslos intensive Ausschltige gegeben haben,
nicht an. Vielniehr beweisen die Versuche wohl zur Evidenz,
daB das Ueberstehen intensiver Vergiftungen
mit Anaphylaxieharn oder von ROcksttinden nor¬
ma len Harnes zu desensibilisieren vermogen,
^antianaphylaktisch“machen,wiederlandlaufige,
wenn auch nicht in alien Einzelheiten richtige
Ausdruck lautet.

Auch die MSglichkeit einer vom Pepton her durch Biedl
und Kraus bekannt gewordenen Umkehrung der Versuchs-
anordnung ist vorhanden. Das ergibt die Betrachtung der
Tabellen XXXV und XXXVI, von denen die erstere fiir den
Anaphylaxieharn, die zweite fur normale HarnrQckstande dar-
tun, daB Antianaphylaxie eine Aufhebung bezw. wesentliche
Herabsetzung der Empfindlichkeit gegen beide Vergiftungen
bedingt.

Tabelle XXXV.

Unterempfindlichkeit anaphylaktischer Tiere gegen
Anaphylaxieharn.

d

Qewicht

Vorbe-
j handluDg

1

Inter¬

val!

Reaktion auf
1,5 Pf.-S.

Inter¬

val!

Reaktion auf

2 Pf.-S.

Inter-

vaU

1

1 Reaktion auf

2 Harn

Schutz

1

I 344

OlPf-S ip

1

18 Tc

37 X _ 0339

24 Std.

5X75

3Tg.

5X^5 _

3337

2

dgl.

dgl.

55X375_-,(^gjp

' dgl.

2

1X^ = 187

dgl.

2

0X0 _ 0

3450

2

2

2

3

381

51X375_

10 X105 _ 526

„

10X60 _ 3QQ

3150

JJ

yj

2 \

2

2

1

0,3 Pepton:

4

375

1

_

27 X 315 _

—

—

4Tg.

8 X 195_ noQ

2670

0,3 Pepton:

2

5

350

_ 1

_

29 X 375^

_

—

dgl.

6X105_

3135

6

1

410

j

0,lPf.-S.ip.

1

22 Tg.

2

— I

—

23 X 300 ^3450
2

Beaktionsmittel des sensiblen Tieres 3450

„ „ desensibil. „ 137 = ','30

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644

Hermann Pfeiffer,

Von 6 Meerschweinchen werden 3 durch das Antigen, 2 durch Pepton
desensibilisiert und mehrere Tage nachher mit hochtoxischem Anaphylaxie-
harn reinjiziert. Der Harn hat eine Wertigkeit von 3450 E bei uber-
empfindlichen (doch in ihrer Reaktionsfahigkeit in nichts von normalen
Tieren imterschiedenen) Meerschweinchen ergeben. An antianaphylaktischen
Tieren konnen nur 113 und 0 E, am peptonvergifteten nur 300 und 780 E
mit denselben Men gen erzielt werden, was eine 30-, 3000-, 10- und 4-fache
Schutzwirkung unter Beriicksichtigung der Breite der Eigenreaktion der
Tiere besagt.

d

1

2

3

4

5

6

7

8
9

10

Tabelle XXXVI.

Unterempfindlichkeit antianaphylaktischer Tiere gegen

Har nr lick stand.

Gewicht

Vorbe-

handlung

Inter¬

val!

Reaktion auf
1,5 Pf.-S.

Inter¬

val!

Reaktion auf
2,0 Pf.-S.

Inter¬

val

Reaktion auf
1,0 Pf.-S.

X

347

0,1 Pf.-S.

20Std.

24X275

1^X135 _ 1012

2 Tg.

10X150

341

dgl.

dgl.

2 -

29X315

dgl.

17X150_

dgl.

2

20X150

= 1500

1607

2 —400^

2

2 ~

301

20X195_

17X145_

10X150_

750

2357

>>

-2- - XUkJKJ

2 J-v/Ov

yy

2

287

12X195_

■9X90

13X150

975

2132

275

»

yy

2

28X235

yy

28X105_j^,(,

yy

2

20X135

1350

1757

JJ

jy

-2-— octijyj

yy

yy

2

313

15X195_ ^

10X105_ 2

10X135

1

R7f; 24.32

328

yy

1

1

yy

yy

i^><'99_l485

yy

yy

2

15X160

2

vt a/

.1200

1907

305

1

'13 X195 _ 25

120 _ 1140

7X135

472

2635

270

»>

yy

2 —

2 ~

yy

23 Tg.

2

22X160

2

= 1760

310

—

1

—

—

dgl.

33 X 270

2

= 4455

Reaktionsmittel der sensib. Tiere 3107

„ „ desensib. „ 959 = Vs

Ein gleichsinniges Resultat liegt in Tabelle XXXVI vor. Es werden
von 10 mit Pferdeserum sensibilisierten Meerschweinchen 8 durch das
Antigen antianaphylaktisch gemacht, 2 bleiben im Zustande der Ueber-
empfindlichkeit, der wieder an ihrer Empfindlichkeit gegen das Harngift
nichts geandert hat. 5 der 8 Tiere weisen nur ganz geringe Eeaktioneii
auf, die nur Bruchteile jener der Kontrollen sind, 2 weitere Tiere sind deut-
lich, ebies kaum geschiitzt.

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 645

DieseletzteGruppevonVersuchenzasammen-
fassend kann also gesagt werden, dafi ebensowie
PeptoD eine bestehende Ueberempfindlichkeit
aufzuheben vermag, das Ueberstehen des ana-
pbylaktischen Shocks gegen Pepton schfltzen
kann, ebenso auch die Vergiftung mit Ana-
phylaxieharn in weit stJlrkerem, mit Rflckst&nden
normalen Harnes in geringerem Aasmafie, aber
doch sehr betrSchtlich das Fortbestehen einer
Anaphylaxie zerstdrt, der anaphylaktische Shock
hingegen einen refraktHren Znstand gegen das
Harngift schafft. Auch d i e Pepton vergiftung
scheint, insoweit aus zwei Versuchen Schlilsse
zul&ssig erscheinen, den Ablauf einer Harnver-
giftung milder zu gestalten.

Ich kann dieses, die Ueberempfindlichkeit behandelnde
Kapitel nicht verlassen, ohne noch auf eine Reihe von
anatomischen Ver&nderungen hingewiesen zu haben,
die fflr die Bewertung der eben mitgeteilten Resultate be-
deutungsvoll sind und der Allgemeinheit der anaphylaktische
Versuche anstellenden Untersucher entgangen sind, and zwar
dank der allgeraeinen und ansschlielllicben Verwendung der
intravenOsen Injektionstechnik und dem Bestreben, auf diesem
Wege mdglichst konstant den akuten Tod des Meerschweinchens
zu erzielen.

Wird, wie ich mich im Laufe der Jahre selbst oftmals
tlberzeugen konnte, auf dem genannten Wege ein Meer-
schweinchen im anaphylaktischen Shock rasch getdtet, so be-
obachtet man anfier dem hier regelmSQig anzutreffepden Auer-
Lewisschen Phfinomen und der Hyperftmie der Banchorgane
hie und da und das insbesondere bei l&ngerem Verlauf
Blutungen und Ekchymosen im Magen und Darin, worauf
schon Gay und Southard sowie sp&ter Schittenhelm
und Weichardt hingewiesen haben. £s sei hier flbrigens
die im Gegensatze zu Biedl und Kraus von E. Fried-
berger, jQngst wieder in besonders grfindlicher Weise von
Graetz nachgewiesene Tatsache vollkommen best^tigt, dafi
in Fallen von positivem Befunde an den Lungen diese bei

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646

Hermann Pfeiffer,

echtem anaphylaktischen Tode keineswegs immer anfimisch
siDd, sondern da6 sich hftufig auch hier Hyper^mien, multiple
Blutungen und dann immer ein akutes Lungenddem findet,
wenn die Erstickung — und als solcbe milssen wir ja den
akuten Tod der Meerschweinchen, aber nur diesen auffassen!
— nicbt blitzartig, sondern erst im Verlaufe mehrerer Minuten
bis zn Stunde eintritt. In solcben Fallen ist das Lungen-
5dem bHufig aucb agonal nacbweisbar, indem den Tieren
blutiger Scbaum aus Maul und Nase tritt, Tatsacben, die bei
ausgedebnteren Erfabrungen an Erstickten, wie sie mir dank
dem forensischen Material reicblicb zur VerfQgung steben, selbst-
verst^lndlicb sind. Icb mull also aucb nacb meinen Sektions-
befunden an anapbylaktiscben Meerscbweincben flbereinstim-
mend mit Friedberger nnd Graetz die Angabe zurftck-
weisen, den Befund einer geblSbten, dabei antlmiscben und
trockenen Lunge bier als Norm aufzustellen und daraus irgend-
ein Kriterium ffir die Differentialdiagnose gegenflber den Ver-
giftungen mit Friedbergers Anapbylatoxin bezw. mit der
HSmolysinvergiftung abzuleiten. Vielmebr finden wir bier wie
dort bei akutem Tode aucb akute Lungenblabung, die bald mit
einer Anfimie (bei blitzartigem Tod), bald mit einer deutiicben
Hyper&mie und bald mit ganz intensiven Graden von Oedem
(bei lUngerem Verlaufe) vergesellscbaftet ist.

Zergliedert man die Leicben von Meerscbweincben, die
durcb kleine Dosen intravenSs, durcb gr56ere intrapcritoneal
erst nacb einer Stunde oder nacb mebreren Stunden sterben,
so ist das in Rede steben de Pb&nomen flberbaupt nicbt nacb¬
weisbar. Die Lungen sind dann nicbt gebl&bt, ein Beweis fbr
den geringen Geltungsbereicb dieses in Grenzf^llen Qbrigens
kaum mit Sicberbeit erbebbaren Befundes. Es ist gleicbfalls
ein Beweis dafQr, daC die bei intravenOser Reinjektion mit
kompakten Dosen von Biedl und Kraus gemacbte und
zu Unrecht generalisierte Erfabrung, die anapbylaktiscben
Meerscbweincben stiirben im Gegensatze zum Hunde an Er¬
stickung, gleicbfalls nur eine ganz eng umscbriebene Gflltigkeit
bat, bei intraperitonealer Antigenzufubr wobl kaum je Be-
deutung erlangt.

Bei solcben Tieren entwickeln sicb aber, und das, je sp§ter
der Tod eingetreten ist, um so sinnftllliger, deutlicbe bis scbwere

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Weitere Beitriige zur Eenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 647

Degeneration der parenchymatdsen Organe, ins-
besondere der Nieren, Ver&nderungen, die wir auch in
F&llen eben noch subletaler Vergiftung an den geschlachteten
Tieren regelmfifiig wabrnehmen kdnnen. Die Nieren werden
dann von strohgelber Farbe angetroifen. Sie sind matsch,
Sufierst brflcbig. Die Leber ist gleichfalls h&ufig bl^ser, mit
gelblichen Herden durchsetzt, und die Gallenblase (vgl. dazu
die Erfahrungen Popielskis liber die Wirkung seines „Vaso-
dilatins") ist wShrend der Vergiftung strotzend mit
Galle gefiilit Die Magenschleimhaut, weniger der Darm der
Meerschweinchen, insbesondere aber der Kaninchen, sind wie
besS,t mit ekchymotischen Geschwtirsbildungen.

Wir haben also, besonders was die Nieren,
die Gallenblase und die Magendarm wand anlangt,
anatomischeVer&nderungenvongrofierPrkgnanz
und ftufierst charakteristische L^sionen, die, das
sei bier mit allem Nacbdrucke betont, sicb so-
wobl beim Verbrbbungstode solcber Tiere als
aucb bei der durcb Ureterenligatur erzeugten
Ur&mie, wie aucb nacb letalen oder eben nocb
subletalen Vergiftungen mit Harn rttckstEn den
bezw. mit toxiscbem Verbrllbungs- und Ana-
pbylaxiebarn wiederfinden.

Welcbe Bedeutnng librigens fQr das anapbylaktiscbe Tier
die Nierenfunktion besitzt, gebt, abgeseben von den scbon
mitgeteilten Befunden an den Harnen und patbologiscb-ana-
tomiscben Verftnderungen aus einer Versucbsreibe bervor,
welcbe in anderer Absicbt unternommen wurde. Es wurden
drei gegen Pferdeserura sensibilisierte Kanincben einseitig
nepbrektomiert und zweien von den Tieren mebrere Tage
darnacb das Antigen reinjiziert zu einer Zeit, wo eine vbllige
funktionelle Anpassung des zuriickbleibenden Organes nocb
ausgescblossen war. Die Tiere macbten entsprecbend ibrer ge-
ringen Empfindlicbkeit trotz intravendser Injektion nur ganz
m^fiige Shocks durcb, ibr Earn wurde deutlicb giftiger als in
der Norm. Bei der Sektion der beiden waren die zurlick-
gebliebenen Nieren bochgradig degeneriert, wacbsbleicb und
boten ein Bild dar, wie ich es nur bei schwersten Erkrankungs-
formen zu sehen gewohnt war. Das dritte Kontrolltier, das

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648

Hermann Pfeiffer,

auf Kochsalzldsung nicht reagiert hatte, besafi ein g^nzlich
intaktes Nierengewebe.

Hiermit ist das bis heute vorliegende experimeDtelle
Material fiber die Harngiftigkeit anapbylaktischer Tiere und
fiber die Beziehung dieses Giftkfirpers zum anaphylaktischen
Shock und der Peptonvergiftung erschfipft. Bevor ich auf die
Besprechuug der Folgeruugen aus den gemachten Befnnden
fibergehe, mfichte ich nenerlich betonen, welche wesentliche
Dienste mir auch in diesen, scheinbar so fern von ihrem
Ausgangspunkte abliegenden Versuchen die Temperatnrreaktion
insofern geleistet bat, als so feine graduelle und ziffernmfifiig
darstellbare Abstufungen auf einem anderen der heute gang-
baren Versuchswege wohl von vornherein ausgeschlossen ge-
wesen wfiren.

Schlufibemerkungen.

Die bei der Ueberempfindlichkeit nach dem Zusammen-
treffen von Antigen und Antieiweill nnter wesentlicher Mit-
beteiligung von Komplement auftretenden Krankheitserschei-
nungen warden heute vollkommen zu Recht als Autotoxikose
aufgefafit. Man wird bei dem Mangel durchaus notwendiger,
vielleicht aber derzeit noch unmOglicher chemischer Unter-
suchungen und Identifiziernngen doch zu einiger Klarheit,
wenigstens in biologischer Hiusicht, fiber den dabei wirk-
samen Kdrper gelangen kdnnen, wenn man aus der Symptoma-
tologie des anaphylaktischen Shocks und der Peptonvergiftung
das wesentliche Vergiftungsbild herausschfilt und dieses ffir
die Annahme, in einem gegebenen Falle liege ein Oder das
Anaphylaxiegift vor, als Kriterinm verwendet.

Nehmen wir dies als Grundlage, so mfissen von einem der-
artigen Kdrper folgende Eigenschaften gefordert warden:

1) Er mufi in mdglichst hochgegriffenen Dosen Meer-
schweinchen bei intravendser Injektion blitzartig, bei etwas
geringeren Dosen nach Minuten und Viertelstunden nnter den
bekannten Allgemeinerscheinungen tdten. Bei der Autopsie
finden sich ballonierte Lungen mit mehr oder weniger ausge-
sprochenen Erstickungsbefunden, wie Ekcbymosen der serdsen
Ueberzfige und Oedem.

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Weiteie Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. (j49

2) Mittlere Dosen t5ten bei Zufuhr verdfinoten Materials
von den Venen oder konzentrierten Materials von den Leibes-
bbhlen aus die Tiere nicht momentan, sondern erst nach
einem l&ngeren, durch folgende Symptome zu prilzisierenden
Krankheitsverlauf:

a) peri^her ausgelbste Blutdrocksenkung,

b) als deren sinn^lligsten und einfach zu registrierenden
Ausdruck einen enormen and sofort einsetzenden und bis zum
Tode anhaltenden Temperatursturz,

c) damit parallel gehend Mattigkeit, Somnolenz, und
terminale Kr&mpfe als Folgeerscheinung der Blutdruck-
senkung,

d) als Erscheinung einer Darmreizung Diarrhbe,

e) Leukopenie,

f) eine bei dieser Species nur sehr vage und angedeutete
Verzbgerung der Gerinnungsffihigkeit des Blutes.

Die Autopsie zeigt HyperUmie der Bauchorgane, Blu-
tungen im Magen-Darmtrakt, beginnende Degeneration der
Nieren, auffallend pralle Gallenblase, aber keinen Auer*
Lewis.

3) Kleine Dosen vermdgen weder von der Blutbahn noch
von den Leibeshbhlen aus die Versuchstiere zu tdten. Als
Ausdruck der Blutdrucksenkung sehen wir vielmehr auch bier
kritiscbe, nocb ganz scbwacbe Scb&digung des Versucbstieres
widerspiegelnde TemperaturstQrze, parallel mit ibnen gebend
die flbrigen, eben gescbilderten Symptome. Tritt Erbolung
ein, so kommt es ganz gesetzmfifiig zu einer betr&cbtlicben
und lange anbaltenden Fiebersteigerung (E. Friedberger)
und polynukleSren Leukocytose. Schwer geschftdigte Tiere
geben dieselben, nur meist nocb deutlicber in die Erscbeinung
tretenden Obduktionsbefunde von ekcbymotiscben GeschwQrs-
bildungen in Magen und Darm, scbwerster Nieren-, leicbter
Leberdegeneration.

4) Kleinste Dosen fflbren direkt, obne Blutdruck und
Temperatur berabzusetzen, zu Fieber.

5) In die Subcutis gebracbt, bilden sicb am Orte der
Einwirkung charakteristiscbe Nekrosen, in leicbteren FSllen
Infiltrate, rasch sicb resorbierende Oedeme, im tibrigen nacb
Mafigabe der Grdfie der Giftdosis und der ungfinstigeren

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650

Hermann Pfeiffer,

Resorptionsverh^lltDisse in st^kerem oder geringerem AusmaBe
auch das allgemeine Vergiftungsbild. Organveranderungen
kdnnen bei 4 und 5 kaum jemals angetroffen werden.

Das Phanomen des Komplementschwundes aber muB zwar
als ein fQr den anaphjlaktischen Shock, kann aber nicht als
ein fflr die Vergiftung mit Anaphylaxiegift wesentliches Kri-
terium betrachtet werden, da wir es ja nur im Sinne eines
Verbrauches zur Giftbildung, nicht aber als eine Folge der
Giftwirkung auffassen mtissen.

Es ist hier der Ort, neuerlich auf Einw^nde einzugehen, die
in ihrer jfingsten Zusammenstellung Biedl und Kraus gegen
die Deutung des trotz anfknglicher gegenteiliger Behauptungen
wohl sicbergestellten anaphylaktischen Temperatursturzes als
Ausdruck der Blutdrucksenkung im anaphylaktischen Shock
und gegen die Allgemeingiiltigkeit, Brauchbarkeit und Feinheit
dieses Symptoms erhoben haben. Biedl und Kraus meinen,
daB der Temperatursturz deshalb nicht der Ausdruck eines
Druckabfalles beim Meerschweinchen sein kbnne, da es dazu
bei diesem Tiere tiberhaupt nicht komme, sie vielmehr an
Erstickung sterben.

Die Autoren haben dabei ausschlieBlich den durch kom-
pakte, intravenSs beigebrachte Antigendosen hervorgerufenen
anaphylaktischen Anfall mit blitzartigem Tode im Auge, und
sie hktten mit ihrer eben wiedergegebenen Behauptung mit
manchen anderen EinschrSnkungen Recht, wenn es auBer
dieser Form der Erkrankung nicht auch noch den protahierten
Verlauf und einen in Genesung ausgehenden Shock gdbe.
FQr diese beiden groBen Krankheitsgruppen hat aber der von
ihnen genau studierte Mechanismus des akuten Todes gar
keine Bedeutung, was aus dem vblligen Fehlen des Auer-
Lewisschen Phgnomens sich ergibt. Solche Reaktionen er-
h&lt man aber ausnahmslos bei

1) intravenoser Injektion verdQnnten Antigens,

2) bei intravendser Injektion kompakter EiweiBmengen in
ein nur ganz schwach (z. B. durch 0,0001 ccm genuinen oder
stark erhitzten Serums) sensibilisiertes Versuchstier,

3) fast ohne Ausnahme bei intraperitonealer Injektion.

Diese Umstinde beweisen, daB bei verdftnnten oder kleinen

Antigenmengen, bei ungflnstigeren ResorptionsverhSltnissen

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Weitere Beitrage zur Eenntnis der Ueberempfiodlichkeit etc. 651

Oder, was auf dasselbe binauskomint, bei nur mSfiig dber-
empfindlichen Tieren Krankheitsbilder erscheinen, wie sie vom
Hunde her bekannt sind und sich mit diesen vdllig decken.
Das hochempfindliche Meerschweincheo erkrankt also unter
ungfinstigeren VersuchsbedinguDgen nicht in anderer,
soodern in derselben Weise wie der relativ unempfindliche
Hund. Die Autoren fibersehen, wie ich frflher betont habe
und jfkngst erst wieder E. Friedberger filr das Kaninchen
hervorhob, bei ihren Einwtlnden die quantitativen Verhfilt-
nisse und generalisieren zu Unrecht Resultate, die sie mit
einer extremen Versuchsvoraussetzung erhalten baben, fOr
den anaphylaktischen Tod und die Erkrankung des Meer-
schweinchens fiberhaupt. Sie negieren abermals und aus den-
selben Grflnden zu Unrecht die Ergebnisse E.Friedbergers,
nach denen auch bei dem in Rede stebenden Versuchstiere
und dem Meerschweincben tatsS.cblich Blutdrucksenkung ein-
tritt, und lassen endlich den Umstand aufier acht, daB
jede Blutdrucksenkung aus begreiflichen Grtlnden auch von
einer Temperaturabnahme gefolgt ist. Aus alien diesen
GrOnden muB ich trotz der EinwS,nde von Biedl und Kraus
daran festhalten, daB der anaphylaktische Temperatur-
sturz tatsBchlich dieFolge einer auch beim Meer-
schweinchen einsetzenden Blutdrucksenkung ist,
die insbesondere dann eintritt und wesensgleich mit der beim
unemphndlichen Hunde ist, wenn nicht eine momentane Ueber-
schwemmung des Organismus mit Anaphylaxiegift durcb kom-
pakte Dosen gesetzt wird, sondern dieses allmlihlich ge-
bildet wird, zur Resorption und demnach auch zur Wirkung
kommt.

Was die Angabe derselben Autoren anlangt, dem ana¬
phylaktischen Temperatursturz komme keine allgemeine Gilltig-
keit zu, so genOgt es, auf meine tausendfkltigen gegenteiligen
Erfahrungen beim Meerschweincben und Kaninchen und auf
die zahlreichen bisher vorliegenden und mich bestatigenden
Erfahrungen anderer Autoren hinzuweisen, welche einstimmig
in alien FMlen anaphylaktischen Shocks beim Meerschweincben
Temperaturstiirze eintreten sahen. Es sei in dieser Hinsicht
auf die Erfahrungen von E. Friedberger, J. Braun,
Dunbar, Krusius, Bachrach u. a. verwiesen, denen sich

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652

Hermann Pfeiffer,

dieses Kriterium der anaphylaktischen Erkrankung auch noch
unter Versuchshedingungen bew&hrte, wo andere Methoden im
Stiche liefien. Dafi dieses Ph&QomeD auch fUr die Anaphjlaxie
der Vogel Gditigkeit habe, beweisen die Versuche von
Joachimoglu, und daB es selbst bei akut mit dem Tode
endigenden F&Ilen nachweisbar und, wie ich gezeigt habe, zur
quantitativen Auswertung des Shocks verwertbar bleibt, also
gar wohl allgemeinere Gflltigkeit als irgendeine andere
bisher bekannt gewordene Erscheinung besitzt, ergeben eigene
Versuche und die jener Autoren, die Temperaturmessungen
vornahmen. Am eingehendsten haben bisher zu ihren (auch
intravendsen!) Versuchen Krusius beim Studium der Sonder-
stellung des LinseneiweiB und Dunbar bei der Analyse des
EiweiB von Geschlechtszellen sich damit besch&ftigt. Beiden
hat sich die Arbeitsmethode aufs beste bew9.hrt. So hat ins-
besondere Krusius bei seinen Arbeiten quantitative Resultate
erhalten, wie sie mit alien anderen Techniken nie zu erhalten
gewesen w&ren. Ich bin daher vollauf berechtigt, das un-
begrQndete, den hier so wesentlichen quantitativen Verh&lt-
nissen nicht Rechnung tragende Urteil von Biedl und Kraus
in alien Punkten entschieden zurflckzuweisen.

Wenn wir die oben zusammengestellten und den ver-
schiedensten Versuchstechniken und ihren Resultaten gleich-
m§.Big Rechnung tragenden Kriterien des anaphylaktischen
Vergiftungsbildes mit den Folgeerscheinungen einer Pepton-
intoxikation und der Vergiftung mit toxischen Anaphylaxie-
harnen, sowie der Ruckst&nde normaler Harne vergleichen, so
muB ohne weiteres zugegeben werden, daB in dieser Hinsicht
irgendein Unterschied zwischen ihnen nicht aufgefunden werden
kann, vielmehr vom Standpunkte des biologischen Experiments
aus die erwShnten drei Vergiftungen als wesensgleich be>
zeichnet werden mflssen.

Dazu kommen noch folgende, in den bisher mitgeteilten
Versuchen festgestellte Tatsachen: 1) Die das Bild des ana¬
phylaktischen Shocks wiedergebende Giftigkeit von Anaphylaxie- -
harn tritt nur auf, wenn der Harnproduzent eine anaphylak-
tische Erkrankung durchmacht; sie bleibt aus, wenn diese
fehlt. 2) Die genaue Auswertung der Giftigkeit ergibt einen
v511igen Parallelismus zwischen der Giftigkeit des Harnes und

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Weitere Beitrage zur Keontois der Ueberempfindlichkeit etc. 653

der Schwere des Vergiftungsbildes des dberempfindlichen
Tieres. 3) Die Harntoxizit^t des vdllig antianaphylaktischen
Tieres bewegt sich trotz neuerlicher Injektion des Antigens
der Vorbehandlung innerhalb der Grenzen von normalen
Tieren. Nach MaBgabe, als die Tiere bei nur partieller Anti-
anaphylaxie bei der Reinjektion grofiere Oder kleinere Shocks
dorchmachen, steigt und f&Ilt auch die Giftigkeit des in diesem
Zeitpunkte sezernierten Harnes. 4) Das Ueberstehen einer
intensiven Anaphylaxie-Harn- Oder Harnrflckstandvergiftung
hebt eine bestehende Anaphylaxie auf. 5) Antianaphylaktische
Tiere sind unterempfindlich gegen Vergiftungen mit Anaphy-
laxieharn, sowie mit HarnrOckst^nden norroaler Menschen und
Tiere. 6) Der Harn peptonvergifteter Tiere zeigt ein gleich-
sinniges und gleichartiges Ansteigen seiner Giftigkeit wie im
anaphylaktischen Shock.

Diese Erfahrungen insgesamt lassen es wohl
kanm mehr zweifelhaft erscheinen, daB wir in den
die Giftigkeit toxischer Anaphylaxieharne aus-
machenden Kdrpern jene die anaphylaktische
Autotoxikose bedingenden Gifte vor uns haben,
und daB der Organismus durch die Nieren sich
ihrer entledigt.

Wenn ich diesen Satz nicht so apodiktisch hinstelle, wie
die vorgebrachten Erfahrungen es vielleicht rechtfertigen
wQrden, so geschah dies einerseits aus dem BewuBtsein heraus,
daB jede biologische, aus analogen Wirkungen auf gleiche
Ursachen schlieBende Identifizierung nur zu Wahrscheinlich-
keitsschlflssen berechtigt. Sie kdnnen, so zwingend sie auch
sein mdgen, erst auf dem Wege einer Analyse zur absolut
feststehenden Tatsache erhBrtet werden.

Zur Vorsicht mahnen aber auch die Eigenschaften des
von E. Friedberger zuerst aufgefundenen und, was seine
Wirkung aniangt, schon mehrfach bestfitigten ^Anaphylatoxins^^.
Es liegen Angaben (iber einige physikalische und chemische
Eigenschaften dieses giftigen Produktes vor, die, insbesondere
was seine LabilitBt gegen schBdigende Einfliisse verschiedener
Art betrifift, recht betrBchtliche Unterschiede sowohl gegenhber
dem wirksamen K5rper des Peptons als des Harnes aufweist.

Zeitschr. U ImmunltlitsforscbuD^. Orig. Bd, X. 43

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654

Hermann Pfeiffer,

Es scheint leichter zerstdrbar zu sein als diese. Doch mochte
ich za bedenken geben, welchen Eioflufi die Anwesenheit
reichlicher Salzmengen, wie wir solcbe ja sowohl im Harn als
noch mehr in den Harnrfickstllnden haben, z. B. auf die
LabilitSt des so hinf&lligen Komplementes besitzen.

Weniger bedeutungsvoll scheinen mir E. Friedbergers
Angabcn zu sein, aus denen sich ergibt, dafi der Alkohol-
niederschlag einer Anaphylatoxinldsung giftig ist. Die F&llung
wurde erstens mit weitaus gr5&eren Alkoholmengen vor-
genommen als in unseren Versuchen, die Filtrate nach Ver-
jagung des Alkobols im Vakuum noch nicht untersucht und
endlich hat es sich ja auch fOr den im Pepton wirksamen
K5rper ergeben, dafi er nur relativ in Alkohol Ibslich sei, ja
auch bei relativ geringffigigem Alkoholzusatz (2—5-faches
Volumen der Peptonldsung) zwar die Hauptmengen des Giftes
im Filtrat, kleinere aber auch im Niederschlag sich finden. Hin-
sichtlich der Differenzen in der Dialysierbarkeit des Anaphyla-
toxins, die in Gemengen mit nativem Eiweifi ebenso wie jene
des Peptongiftes zu fehlen scheint, habe ich frfiher schon
erwfihnt, wie auch hierin scharfe Unterscheidungsmerkmale
nicht gegeben sind, da es sich z. B. fOr das Pepton gezeigt
hat, dafi sein Gift, welches das Nierenfilter passiert hat, nun-
mehr leichter dialysabel durch Schweinsblasen ist.

Vollige Klarheit wird jedenfalls erst weitere experimentelle
Arbeit schaffen. Es sei nur betont, dafi die hier festgestellten
Unterschiede nebens&chlicher Natur sein kdnnen und dafi bei
der Ausscheidung der Anaphylaxiegifte durch den Harn die
oben gezogene Schlufifolgernng trotzdem dnrchaus zulfissig
erscbeinen mufi. Diese heute experimentell wohlgestfitzte
Vorstellung hat weiter nichts Wunderbares, wenn man sich
der alten Tatsachen erinnert, dafi die Ausscheidung durch die
Nieren der vom tierischen Organismus vielen Giften gegen-
aber gewtlhlte Weg ist und dafi, worauf vor Jahren U. Fr i ede-
mann und Isaak aufmerksam machten, die Stickstoffaus-
scheidung bei wiederholter Zufuhr artfremder Eiweifikdrper
betrEchtlich ansteigt. Dieses Ergebnis und das weitere, von
vielen Seiten bestatigte, dafi parenteral zugefahrtes Pepton in
den Exkreten und im Harne sehr rasch ausgeschieden werde,
die von Biedl und Kraus fQr den Hund erwiesene, dann

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 655

von mir and S. Mita aaf das Meerschweinchen ausgedehnte
Identit^t der Peptonvergiftung mit dem anaphylaktischen
Shock, die hier mitgeteilten Erfahrungen fiber das Ansteigen
der Toxizitfit der Peptonharne, der schweren Nierendegenera-
tion, insbesondere nach kurz vorausgehender einseitiger
Nephrektomie, sind wobl insgesamt nur im Sinne einer Be-
stiltigung meiner Annahme zu verwerten.

Anch die Tatsache, dafi dieselben giftigen Korper, die zur
Zeit des anaphylaktischen Shocks in groBen Mengen im Harne
erscheinen, zar Zeit eines ungestorten Stofifwechsels spuren-
weise den Organismus verlassen, hat nichts Ueberraschendes
an sich, sie kann vielmehr gerade im Hinblicke auf diese
Ergebnisse als der Ausdruck des normalen, mit dem Lebens*
prozeB einhergehenden, relativ geringen, parenteralen Eiweifi-
zerfalls angesehen warden. Da ferner bei der Anaphylaxie
sowobl wie nach der Einverleibung von vorher zum Zerfall
gebrachtem EiweiB im Harne eine gleichartige nnd gleich-
sinnige Vermehrung seiner Toxizitftt auftritt, die auf sicherlich
tiefstehende Bausteine des EiweiB zurfickgeffihrt warden muB,
so kommt man auf diesem scheinbar fernab
ffihrenden Versuchswege zu einer neuerlichen
Bestfitigung des von mir nnd Mita speziell ffir
die Ueberempfindlichkeit zuerst geffihrten
Beweises, daB wir es dabei tatsfichlich mit den
Folgen einer parenteralen EiweiBverdauung zu
tun haben, deren toxische Produkte nicht nur
das Krankheitsbild an sich bedingen, sondern,
durch den Harn ausgeschieden, das Ansteigen
seiner Giftigkeit bedingen.

Dieses vorausgesetzt, kommen wir zu der
weiteren Folgerung, daB wir in der, nach den
oben festgestellten Prinzipien durchgeffihrten
biologischen Auswertung des Harnes ein einfach
zu handhabendes und exaktes Kriterium zur Be-
antwortungdertheoretisch wieklinisch gleicher-
weise wichtigen Frage haben, ob in einem ge-
gebenen Erkrankungsfalle parenteraler EiweiB-
zerfall vorliege. Es soil Aufgabe des IV. und V. Ab-
schnittes der vorliegenden Arbeit sein, ffir zwei Sonderffille, ffir

43*

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656

Hermann Pfeiffer,

die HSmolysinvergiftung und die Giftwirkung fluoreszierender
Stoffe im Sonaenlicht, zu zeigen, wie fruchtbar auch hier
Fragestellung und Versuchstechnik in gleicher Art sich er-
weisen.

Zusanimenfassend kann demnach gesagt werden: Der
anaphylaktische Shock ist aller Wahrscheinlichkeit nach als
eine Vergiftung init jenem toxischen Prinzipe des nonnalen
Harnes aufzufassen, welches als Ausdruck des fortwilhrend
inoerhalb physiologischer Grenzen sich abspielenden paren-
teralen EiweiBzerfalles im Harne erscheint und dessen alU
mllhliche Retention das Erkrankungsbild der Urtmie be-
dingt.

Ist, wie im anaphylaktischen Shock, der Eiweifizerfall ge-
steigert, oder geht er gar explosionsartig vor sich, so bedingt
diese Ueberproduktion an toxischem Harnprinzip die schweren
und nach der Schwere wechselnden Symptome des akuten
EiweiBzerfalles, demnach ein Krankheitsbild, welches nur hin-
sichtlich seiner Genese und in quantitativer Hinsicht, nicht
aber was seine Wesenheit anlangt, von der UrSmie sich unter-
scheidet. Es ist also im weseutlichen der anaphy¬
laktische Shock nichts anderes als eine Ueber-
produktionsurUmie, die im konkreten Falle
bedingt wird durch denAbbauvonEiweiB infolge
der fermentativen Einwirkung des Komplexes
Immunkorper-Komplement auf das Antigen der
Vorbehandlung,wahrscheinlich aber auch auf das
kdrpereigene EiweiB des Versuchstieres.

Konform mit ^Iteren Anschauungen tiber das Wesen der
Antianaphylaxie, bei welcher im Harn eine Ueberproduktion
des Harngiftes nicht vorgefunden wnrde, ist diese vielmehr
auf mangelnde Giftbildung durch ImmunkSrperverbrauch, denn
auf eine antitoxische Immunitit zurfickzufdhren. DaB aber
doch nebenbei durch das Ueberstehen des anaphylaktischen
Shocks eine relative Unempfindlichkeit gegen das wirksame
Gift eintritt, lehren SJtere Versuche von H. Pfeiffer und
S. Mita fiber die herabgesetzte Wirksamkeit von hEmolytischen
Seren gegen antianapbylaktische Meerschweinchen und jetzt
vorgebrachte Resultate Qber Unempfindlichkeit harnvergifteter
Tiere gegen Anaphylaxiegift und antianaphylaktischer Tiere

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Weiteie Beitr^e zur Kenntnis der Ueberempfiodlichkeit etc. 657

gegen das Harngift. Worin diese Unterempfindlichkeit besteht,
ist heute auch nur mit Wahrscheinlichkeit nicht zu sagen
mdglich.

So weit heute diese Frage experimentell erortert wurde,
liegt kein zwingender Grund vor, sie im Siune einer echteu
antitoxischen ImmunitfttaufzufasseD. Vielmehr sprecbeu manche
Ergebnisse, so insbesondere das rasche Auftreten dieser Er-
scheinnng zu einer Zeit, in der von Antikdrperbildung kaum
noch die Rede sein kann, heute strikte gegen eine solche
Annahme.

Endlich sei noch darauf hingewiesen, dafi die in den vor-
liegenden Untersuchungen bisher vorgebrachten Resultate
meine schon vor Jahren geauBerten Anschauungen fiber die
Ursache des primfiren Verbrfihungstodes, wie sie eingangs in
aller Kfirze wiedergegeben und begrfindet wurden, nur vollauf
bestfitigen. Ich kam damals auf Grund der toxischen Wirkung
der Harne und Seren verbrfihter Tiere, der gleicbartigen
Wirkung der Alkoholextrakte von verdautem EiweiB und der
Tatsache, dafi durch die Hitze bei der Verbrfihung das Eiweifi
des Haut und des Blutes in grofiem Umfange zugrunde geht,
zu der Vorstellung, es handle sich dabei um eine, durch einen
gesteigerten parenteralen Eiweifizerfall bedingte Autotoxikose
durch die Ueberproduktion von Stoifen, die schon normaler-
weise in Spuren durch den Harn ausgeschieden werden und
bei verhinderter Ausscheidung das Bild der Retentionsurfimie
bedingen.

Der Umstand, dafi bei der Anaphylaxie, also bei einem,
auf ganz anderen Versuchswegen und in Verfolgung femab-
liegender Ziele sicher bewiesenen, parenteralen Eiweifizerfall
nicht nur identische Krankheitsbilder, identische pathologisch-
anatomische Veranderungen vorgefunden wurden, sondern der
Harn eine gleichsinnige Zunahme seiner ToxizitSt erffihrt, ist
ein schlagender Beweis fur die Stichhaltigkeit der damals ge-
wonnenen Anschauung.

IV. Zur Eenntuis der Hfimolysinvergiftimg.

Die toxische Wirkung heterologer Normalseren, die ins¬
besondere von Uhlenhuth und H. Pfeiffer experimentell

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658

Hermann Pfeiffer,

bearbeitet wnrde, &hnelt, worauf Doerr und Moldovan
sowie E. Friedberger zuerst hingewiesen haben, aaller>
ordentlich dem Bilde des anaphylaktischen Shocks. Diese
Uebereinstimmung ist eine so vollst&ndige, dail die genannten
Autoren die dadurch bewirkte Vergiftung schlechtweg als
^anaphylaktische^^ bezeichnet haben ond von der Vorstellnng
ausgehen, dafi das Anaphylaxiegift nicht nur beim Zusammen-
treffen von immunisatorisch gebildetem ImmunkOrper mit
seinem Antigen, sondern auch von normalem Immnnkdrper
mit dem EiweiB eines empfindlichen Versuchstieres sich
unter wesentlicher Mitbeteiligung des Komplementes bilde.
Sie akzeptierten dabei die von H. Pfeiffer zuerst experi-
mentell versnchte Beweisfuhrung, daB zur Erkl^ung der
Wirkung heterologer Normalseren ihr Gehalt an H&molysin
(also hUmolytischem Ambozeptor + Komplement) genhge und
es nicht, wie Uhlenhuth und Haendel glauben, notwendig
sei, fQr die lokale und allgemeintoxische Wirkung besondere,
von dem hBmolytischen Vermbgen abzutrennende, nekroti-
sierende und allgemeintoxische Giftkomponenten anzunehmen.

In eigenen Versuchen kam auch der Verfasser zu der
Anschauung der vblligen Identit&t beider in Rede stehenden
Vergiftungsbilder, die er im Verein mit S. Mita noch da¬
durch zu sttitzen suchte, daB er zeigte, daB das Ueberstehen
einer H&molysinvergiftung anaphylaktischer Tiere desensibili-
siert und umgekehrt antianaphylaktische Tiere unterempfindlich
gegen die EinfQhrung eines sonst auf sie wirkenden normalen
Htmolysines sind. Was die Einwendungen von Biedl und
Kraus gegen diese Identifizierung beider Vergiftungsbilder
anlangt, Einwfinde, die auf minutidsen Unterschieden im Ver-
halten der gebIBbten Lunge akut zugrunde gegangener ana¬
phylaktischer und hSmoIysinvergifteter Tiere basieren, so haben
schon E. Friedberger sowie Grfttz die Haltlosigkeit der-
artiger Unterscheidungsmerkmale dargetan und gezeigt, daB
es unmdglich ist, darauf irgendeine Differentialdiagnose auf-
zubauen. Auch ich kann diese SchlQsse aus eigener ein-
schldgiger Erfahrung nur vollauf besttltigen. Ich wendete
mich aber trotzdem in meiner monographischen Bearbeitung
der EiweiBanaphylaxie gegen die von Doerr gewfthlte Aus-
drucksweise, die Hamolysinvergiftung als eine „anaphylaktische“

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Wdtere Beitrage zur Eenntnis der Ueberempfiadlichkdt etc. @59

schlechtweg zu bezeichnen. Das deshalb, well ich, selbst die
EntstehuDg gleicher Gifte bier and dort vorausgesetzt, die Be-
zeichnungeD nflberempfindlich**, ^anaphylaktisch^, die klassische
Bedeatung des Wortes beibehaltend, nur fflr jene Fklle reser-
viert wissen wollte, wo tatsilchlich' durch ein immani-
satorisch gebildetes Antieiweifi aus einem an sich atoxischen
Material das Gift gebildet wird. Dali in diesem Sinne anch
bei vblliger Uebereinstimmnng der Yergiftangsbilder die
normale Sernmvergiftnng von der Anaphjlaxie abgetrennt
bleiben mnfi, geht ans dem Umstande hervor, dail bier dnrch
ein von anfien in den Kreislanf gelangendes aktives HUmolysin,
bei Annahme einer IdentittLt beider Yergiftangsbilder, der
Giftkdrper abgespalten wird. Icb mnB ancb bente nenerdings
diese Notwendigkeit im Interesse einer klaren and scbarfen
Abgreuznng der einzelnen Begriffe betonen and es in diesem
Sinne lebbaft begrflfien, dafi £. Friedberger wenigstens teil-
weise dnrcb die Bezeicbnnng der nAntisernmanapbylaxie** diese
von ibm znerst genaner bescbriebene Wirknng von Immnn-
seren gegenflber den kliniscb ebenso verlanfenden, anf die-
selben Giftkdrper znrbckznftlbrenden, aber dnrcb die Art ibres
Znstandekommens von der klassiscben Ueberempfindlicbkeit
sicberlicb abzntrennenden Toxikosen in der Bezeicbnnng nnter-
scbieden bat. Im Sinne einer mdglicbsten Prftgnanz der
Terminologie and Begriffsbestimmnng wire freilicb ancb bier
vielleicbt der Yorscblag zn bedenken, ob nicbt dnrcb die Be¬
zeicbnnng nAntiseramvergiftang** eine scbSriere Umgrenznng
gew^brleistet wilre, wobei natOrlicb fiber eine Yerscbiedenbeit
Oder Identit&t der bier and dort bei der ecbten Anapbylaxie
sicb bildenden wirksamen Kfirper nicbts ansgesagt wfirde,
ihre Einbeitlichkeit vielmehr trotzdem angenommen werden
kdnnte.

Icb betracbtete nrsprfinglicb das in den Normalseren ent-
baltene Hfimolysin selbst als den bei der Hfimolysinvergiftnng
als solcben wirksamen Kdrper, wfihrend schon Do err and
Moldovan bei ibrer ersten Besprecbnng dieser toxiscben
Effekte anf dem Standpnnkte standen, daB sicb erst dnrcb den
Znsammentritt von Hfimolysin mit dem EiweiBkdrper des Yer-
sncbstieres das eigentlicbe toxiscbe Prodnkt bilde and dieses
identiscb mit dem Anapbylaxiegift sei.

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660 Hermann Pfeiffer,

Die eben geschilderten and bei der Ueberempfindlichkeit
gewonnenen Erfahrangen, die neuerdings das Entstehen
toxischer Produkte derselben Wirksamkeit bei parenteralem
Eiweifizerfall erh&rten, ffihrten nun auch mich zu der von
Do err und Moldovan von Beginn an vertretenen An-
schauung. Sie legten aber andererseits aach den Gedanken
nahe, die bei der Anaphylaxie eingeschlagene Versnchs*
anordnung auf die HSmolysinvergiftang zu iibertragen. Waren
tats^hlich beide Vergiftungsbilder miteinander identisch, was
ja den identischen Erankheitserscheinungen nach aufs §.ufierste
wahrscheinlich war, so mufite gefordert werden, dafi 1) auch
bei der Hamolysinvergiftung dasselbe Ansteigen der Harn-
giftigkeit in die Erscheinung treten miisse wie im anaphy-
laktischen Shock, 2) daB sie bei fehlender Hlimolysinvergiftung,
also mit inaktivierten Seren, ausbleibe, 3) das Ueberstehen
einer Harnvergiftung unterempfindlich mache gegen Reinjektion
eines ffir die Kontrollen wirksamen Hemolysins and umge-
kehrt, 4) durch wiederholte Hemolysininjektionen unter-
empfindliche Tiere ganz oder teilweise geschfltzt sind gegen
das Harngift. Ferner muBte sich weiter zeigen lassen, daB
die von Biedl und Kraus zuerst beschriebenen Beziehungen
zwischen Anaphylaxie und Peptonwirkung auch hier ange-
trolfen werden insofern, als 5) das Ueberstehen einer HSmo-
lysinvergiftung die Peptonwirkung aufbebt oder wenigstens
abschwecht and umgekehrt eine Peptonvergiftung vor einem
toxischen Hemolysin scbQtzt. Endlich muBte 6), was meines
Wissens bisher noch nicht untersucht wurde, ein wesentlicbes
Symptom des anapbylaktiscben Shocks, der Pepton- und Harn¬
vergiftung im Bilde der Hemolysinwirkung sicb wiederfinden,
und zwar das der initialen Leukopenie im Shock and ibres
Ueberganges in eine sekundere polynukleere Leukocytose. Im
Meerschweincbenversuche lassen sich nun zum mindesten fbr
das Kinder- und Pferdeserum die eben angefflhrten Postulate
tatsechlich ohne Schwierigkeit erfullen. Hier die experimen-
tellen Belege.

Dabei mdchte ich zuerst auf die in Tabelle XIX im
III. Abscbnitte wiedergegebenen Resultate zuriickkommen. In
diesen Versuchen wurde eine Reihe von unvorbehandelten
Meerschweinchen teils mit inaktivem Kinder-, toils mit inak-

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Weitere Beitrage zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. ggl

tivem Pferdeserum in Versuchsmengen von 2 ccm intraperi-
toneal injiziert und ihr innerbalb der ersten 5 Stunden abge*
schiedener Harn gesammelt und biologisch ausgewertet. Diese
Harne batten eine die Norm nicbt uberscbreitende Giftigkeit
in alien jenen F&llen, wo wirklicb das Versucbstier keine,
Oder fast keine Schadigung durcb das artfremde Eiweiil er-
fahren batte, mit anderen Worten, in alien Fallen, wo v611ig
inaktiviertes Material verwendet worden war. Dort aber, wo
es zu mehr weniger heftigen Shocks durcb unvollstandig
inaktivierte Seren gekommen war, stieg in demselben Aus-
malle auch die Toxizitat der Harne fiber die Norm.

Diese Versuche kfinnen jedenfalls als Kontrollen ffir die
nun folgenden berangezogen werden. Es ergibt sich aus ihnen,
daii der Harn unvorbehandelter und mit an sich
ungiftigem, artfremdem Eiweifi gespritzter Tiere
hinsichtlich seiner Giftigkeit die normalen Gren-
zen nicbt fiberschreitet.

Ganz anders ist es aber, wenn man Meerschweinchen
aktives Rinderserum intraperitoneal beibringt, also eine Ver-
giftung mit Normalhamolysin setzt und die Schfidigung der
Tiere so wfihlt, daB sie schwere, eben noch subletal ver-
laufende Shocks mitmachen.

Derartige Harne zeigen, wie aus Tabelle XXXVII hervor-
gebt, eine enorme und ebensolche Gittigkeit, wie wenn sie von
einem anaphylaktischen Tiere gewonnen worden wfiren. Nicbt
nur das allgemeine Vergiftungsbild des Meerschweincbens ist
ein vfillig identiscbes, sondern auch lokal vermdgen derartige
Harne bei vfilliger Inaktivitfit gegen die Erythrocyten die Cutis
unter Nekrosebildung zu zerstdren. An der Mans geprfift,
scheint jegliche Lokalwirkung auch dort zu fehlen, wo sie am
Meerschweinchen ohne weiteres nachweisbar wird. Die Ex-
traktion der Harne mit Alkohol zeigt die Alkoholloslichkeit
der in Frage kommenden Substanzen und beweist zugleich,
daB nicbt etwa durcb das Nierenfilter passiertes, artfremdes
EiweiB oder gar Hfimolysin diese Wirkung bedinge, ebenso wie
vom Hfimoglobin- Oder EiweiBgehalt die Wirkung dieser Harne
ebenso vollstfindig unabhfingig ist, wie jene anapbylaktischer
Tiere. Die Unabhfingigkeit beider Giftwirkungen ergeben die
Harne von Tier 3, 12, 15 und 16, welche bei stfirkerer Allge-

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662

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Hermann Pfeiffer,

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 603

meiowirkung die MeerschweincheDcutis nicht anzugreifen ver-
mochten.

Die biologische Aaswertang des allgemeinen Giftgehaltes
nnd der lokalen Wirkung zeigt wieder einen Parallelismus
zwischen der Schwere des Shocks des Harnspenders und der
Gr56e der in ihrem Harn zu ermittelnden Giftwerte. Bei
einem Shock von fiber 10000 Einheiten erhalten wir ffir 1 ccm
Harn im Mittel 3052 E bei 100 Proz. Nekrosen, fiber 5 und
unter 10000 E enthfilt 1 ccm Harn 2341 E bei 66 Proz.
Nekrosen, unter 5000 Shockeinheiten im Mittel 832 E im Harn
nur bei 50 Proz. Nekrosen.

Es ergibt sich also aus diesen Versnchen, dafi ebenso
vrie bei der Anaphylaxie auch bei der mit Rinderserum vor-
genommenen Hfimolysinvergiftung der Harn der
Tiere dieselbe enorme Zunahme seiner Toxizitfit
erffthrt, dall er im Tierversnch von der Wirkung
solcher Harne schlechterdings nicht zu unter-
scheiden ist und auch, so weit sein chemisch-
physikalisches Verhalten geprfift wurde, nur
dieselben Edrper in Frage kommen konnen.

Nicht ohne Interesse scheint mir das Ergebnis einer Ver'
suchsreihe zu sein, welche darauf hinauslief, zu prfifen, wie
es sich denn mit der Harngiftigkeit von Tieren verhfilt, die
durch das wiederholte Ueberstehen von Rinderserumvergiftung
unterempfindlich gegen eine neuerliche Einbringung des Hfimo-
lysins geworden sind, ein Befund, der annfihernd vor Jahres-
frist von mir und S. Mit a zum erstenmale beschrieben
wurde. Tabelle XXXVIII bringt zunfichst eine experimentelle
Bestfitigung dieser Angabe. Berechnet man sich aus der Gr56e
der Temperaturabnahme und der Zeitdauer bis zur vdlligen
Wiedererholung die Shockgrdfien, ein Vorgehen, dessen Zu*
Ifissigkeit schon in frfiheren Arbeiten aus der Identitfit des
Vergiftungsbildes mit dem der Anaphylaxie begrfindet wurde,
und ist man so in den Stand gesetzt, exakt die Reaktionsgrofien
der Tiere bei erster, zweiter und dritter Injektion derselben
Menge von ganz frischem, aktivem Rinderserum zu verfolgen,
so sieht man, wie eine wesentliche Abnahme der Empfindlich-
keit der Tiere eintritt. Genau parallel mit dieser nun nimmt
auch die Toxizitilt der Harne ab. Bei einer Reaktion von

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664

Hermann Pfeiffer,

Tabelle XXXVIII.

Harntoxizitat hiimolysinunterempfindlicher Tiere.

Reaktion

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I. Injektion am
18. Oktober 1910

II. Injektion am
20. Oktober 1910

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am 21. Oktober i
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22 X 330 —

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5Std.

2 ccm

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(Harn

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3630 E bei drittnialiger Einverleibung wird ein Harn von
2700 E ini Kubikzentimeter und stark nekrotisierender Wir-
kung gefunden, bei 945 E 22 E bei glatter Resorption von der
Subcutis aus festgestellt.

Die MSglichkeiten zu erortern, worauf diese Abnahme der
Empfindlichkeit hamolysinvergifteter Tiere beruhen kann, bleibt
spateren Auseinandersetzungeu vorbehalten.

Im Prinzip iibereinstimmende Ergegnisse zeitigte eine in
Tabelle XXXIX wiedergegebene Versuchsreilie, in welcher
Meerschweinchen durch Injektionen mit nativem, gelagerteni,
und bei 58® partiell entgiftetem Schweineserum eingespritzt
und ihr Harn ausgewertet wurde. Auch bier finden wir recht
betrachtliche, die Norm weitaus iibersteigende Giftwerte in
den Harnen, sowie eine deutliche Lokalwirkung. Ferner kann
man feststellen, daB entsprechend der schwacheren (hamo-
lytischen und daher toxischen) Wirkung von Schweineserum
im Vergleicli zu aktivem Rinderserum auch derart hochgradig
toxische Harne wie dort hier nicht angetroffen werden. Es
sei aber auch festgestellt, daB hier die inaktiven Seren keine
so weitgehende EinbuBe ihrer Giftigkeit in den verwendeten
Versuchsmengen aufwiesen, wie dies bei Riuder- und Pferde-
serum der Fall war, dementsprechend auch die Harntoxizitat

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. ()65

Tabelle XXXIX.

Harntoxizitiit bei Vergiftung mit Schweineserum.

6

Injektion

intraperitoneal von

Temperatur

Zeit

Shock

Harn-

gewinnung

nach

Injektionsart
und Meuge
(ip. u. sunk.)

Temperatur

Zeit

Shock

E in 1 ccm

Lokal-

wirkung

1

3,0 Schw.-Ser. aktiv^32

2704320

5Std.

2 ccm

12

180

1080

540

n-h

2

dgl.

44

36017820

dgl.

dgl.

29

170

3915

1957

N-1-

3

34

300,5100

16

210

1680

840

N —I-F

4

35

320:5600

22

270

2970

1485!N —In-

5

3,0 Schw.-S. gelagert

15

1801350

>>

28

270

3780

1890:N —1 +

6

dgl.

23

240:2760

jy

27

300

40502025|N —I -t-

7

13

16011040

yy

17

240

204o:io2o;n-i +

8

13

160 1040

yy

10

160

800

400

N-H-

9' 2,0 Schw.-Ser. 2'> 58®

17

200

1700

yy

22|280

3080

1540

glatt

10

dgl.

8

120

480

yy

18210

1890

945

yy

11

10

120

600i „

10^210

1050

525

i V

der damit behandelten Tiere nur wenig hinter der der anderen
Versuchsgruppen zurflckblieb. Eine ErklSrung fflr diese
Differenz der Resultate babe ich derzeit nicht, mochte aber
aof die Tatsache hinweisen, dafi auch die letzteren drei mit
erwSrmten Seren behandelten Tiere jene schwere Nieren-
degeneration bei der Obduktion darboten, die, wie spSter be-
schrieben werden soli, bei der Vergiftung mit Rinderserum
nur das aktive Injektionsmaterial, nicht aber inaktiviertes
erzeugt.

Da schon durch die vorhergehenden Versuchsreihen ins-
besondere des III. Abschnittes gezeigt wurde, dafi die Toxi-
zit&t derart giftiger Harne nur eine, allerdings sehr betrUcht-
liche Steigerung der normalen Verh&ltnisse zu bedeuten hat,
so wurden die nachfolgenden, in Tabelle XL zusammengestellten
Versuche, eine nachfolgende Hamolysinwirkung durch Harn-
gift abzuschw&chen, ebenso wie die Umkehrung dieser Ver-
suchsanordnung in Tabelle XLI und XLII, nur mit den
billigeren und in reichlicherer Menge gewinnbaren Rflckst&nden
normalen Menschenharnes angestellt.

Von 7 Meerschweinchen erhalten 5 Tiere an zwei aufeinanderfolgenden
Tagen groSe, eben subletal schadigende Injektionen von Harnriickat^den,
von denen der zweite weitaus grdfiere Giftwirknng besafi, ala der erate.
Nach 3-tagiger Pauae wild alien Tieren, alao auch den unvorbehandelten

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666

Hermann Pfeiffer,

TabeUe XL.

Schutz der Harnvergiftung gegen Hamolysinwirkung.

6 (^- [
55 wicht!

1 345

2 259

3 289

4 337

5 322

6 320

I

7 330

43 X 570 ^

600 = 17 700
^^X570_j4 250

27_XJ00^ 4 050

Inter¬

val!

Reaktion auf

3 cem HR 1 :10

Inter-
! vail

24 Std.

3 Tage

dgl.

dgl.

77

77

77

2^X™_3240

77

77

3oX30O ^5250

77

—

—

—

Schutz

10X150 ^ ygQ, jjgoy

y = 900 ! 11757

^ y 49 . = 3480 ' 9177

25^ 40 ^ gOQQ gg_^

43X610^^3,1- _

i0^ = 12200 -

Reaktionsmittel der normalen Tiere: 12 657.

Reaktionsmittel der vorbehandelten Tiere: 2 385 = 76-

Kontrollen je 1 ccra ganz frischen, aktiven, und hochgradig giftig wirkenden
Rinderserums eingespritzt. Das Reaktionsmittel der normalen Tiere betriig
ca. 12000, das der vorbehandelten 2000 E.

Nach den Durchschnittszahlen waren also die Tiere zu
funf Sechstel der Reaktionsbreite der unvorbehandelten ge-
schutzt. Betrachtet man die einzelnen Reaktionen, so kann
insbesondere an zwei Tieren ein fast vollstandiger Schutz,
bei zwei weiteren ein sehr ausgiebiger, bei einem geringere
Wirkung der prSventiven Harninjektionen erkannt werden.
Aber auch bei dem am wenigsten geschiitzten Tiere betrug
dies immerhin noch das fast Dreifache der eigenen Reaktions¬
breite.

Auch die Umkehrung des Versuches gelingt, wie aus
Tabelle XLI und XLII sich ergibt.

In beiden Tabellen warden insgesamt 9 Meerschweinchen in der
einen Versuchsreihe zweimal, in der zweiten dreimal mit steigenden Mengen
aktiven Rinderserums gespritzt. Auch hier zeigte sich die intensive Ab-
nahme der Empfindlichkeit gegen eine nachfolgende Hamolysinvergiftung
im Vergleich zu einer vorangehenden. Nach einem Intervall von 3 und
4 Tagen erhielten die Tiere Hamriickstande in den aus den Tabellen er-
sichtlichen Mengen und Konzentrationen. Die unvorbehandelten Kontrollen
reagierten in der ersten Versuchsreihe mit 6720 E im Mittel, die Ver-

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc.

o

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CO

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*4

II

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Beaktionsmittel der normalen Tiere: 2220. Eeaktionsmittel der vorbehandelten Tiere: 1106

668

Hermann Pfeiffer,

gleichstiere mit 674 E, varen also g^n neun Zehntel der Wirkung im
Durchschnitte geschutzt. Insbesondere zwei dieser Tiete verhielten sich,
man kann sagen voUkommen refraktar, die anderen deutlich unterempfind-
lich. In den Versuchen der Tabelle XLII steht dem Beaktionsmittel von
2220 der unvorbehandelten eine solche von 1106 E der rorbehandelten
g^eniiber, der Schutz betrug bier also im Durchschnitt nur die Hklfte
der normalen Keaktion. Dieses schlechtere Besultat erklfirt sich aus dem
Umstande, da6 eines der Tiere im Ausmafie der normalen reagierte, zwei
sehr gut (bis zu einem Zehntel, bezw. einem Fiinftel der Norm), ein weiteres
nur deutlich geschutzt war. Welche Bedeutung die Lihige des Zeitintervalles
zwischen letzter Vorbehandlung und nachfolgender Probe spielt, habe ich
schon in Gremeinschaft mit S. Mit a fiir die Peptonwirkung und ihre Be-
ziehung auf die Anaphylaxie beschrieben. Es mag sein, dafi dieses
schlechtere, aber doch unverkennbar positive Ergebnis darauf zuruckzu-
fiihren ist, dafi hier nur 3 statt der in der anderen Versuchsreihe ge-
wiihlten 4 Tage zwischen der letzten Binderserum- und der Haminjektion
liegen.

Jedenfalls zeigen diese Versuchsreihen un-
zweifelhaft, daB ebenso wie bei der Anaphylaxie,
so auch hier ausgiebige und wiederholte Harn-
vergiftungen gegen die normale Hfimolysinwir-
kung, diese gegen Harnvergiftung einen dent-
lichen Schutz gewShren.

In ganz gleicher Weise Igfit sich die Tatsache feststellen,
dafi durch vorausgehendes Pepton die Wirkung des HSmo-
lysins abgeschw^cht wird.

Tabelle XLIII bringt eine einschlagige Versuchsreihe. Von 10 Ver-
suchstieren werden 8 zweimal mit 0,3 Pepton intraperitoneal vorbehandelt.
Ihre zweite Beaktion gegen dieses Gift ist wesentlich schwacher als die
erste. Nach einem weiteren Intervall von 3 Tagen erhalten alle 10 Here,
also auch die beiden unvorbehandelten Eontrollen 1,0 Binderserum aktiv.
Die Beaktion der normalen Tiere im Mittel betrug 13 725 E, jene der vor-
behandeltcn 2743, so daB sie also nur zu einem Funftel dieses Beaktions-
wertes erkrankten. Die bei den einzelnen Tieren festgestellten Beaktions*
werte difTerieren nur innerhalb geringer Grenzen voneinander, so da6 sich
eine Besprechung im einzelnen eriibrigt. Die Schutzwerte fiir sie finden
sich in der letzten Vertikalkolonne einzeln angefiihrt.

Die Umkehrung des eben erw&hnten Versuches bringen
die Tabellen XLIV und XLV: Schaffung einer Unterempfind-
lichkeit durch aktives Rinderserum, Priifung der Reaktions-
fllhigkeit nach 3 und 4 Tagen an vorbehandelten Tieren und
normalen Kontrollen bei Injektion von je 0,1 Pepton.

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Ueberempfindlicbkeit etc,

669

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670

Hermann Pfeiffer

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Reaktionsmittel der normalen Tiere gegen Pepton : 2145. Beaktionsmittcl der Torbehandelten Here gegen Pepton: 651 = ‘/b*

Weitere Beitrage ziir Kenntnis der Ueberempfindlichkdt etc. g71

In der ersten Versuchsreihe erkrankten die vorbehandelten Tiere rait
einem Dnrchschnittswerte von 206, die KontroUen von 1525 E, in der
zweiten der entsprechenden Grofien mit 651, bezw. 2145 E. Es reagierten
also die mit Eindersemm desensibilisierten Tiere mit einem Siebentel, bezw.
einem Drittel des normalen Ausmafies.

Diese Versuche ergeben demnach die Tatsache, daB
ebenso wie bei der Anaphylaxie, so auch bei der
nnter demselben Erkrankungsbilde ablaufenden
Vergiftnng mit aktivem Rinderh9.molysin eine
UnterempfindlichkeitgegenPepton,andererseits
durch Pepton gegen eine nachfolgende Hs.mo-
lysinwirkung zustande kommt. Und wenn seiner-
zeit Biedl und Kraus aus diesen Tatsachen im
Zusammenhang mit der Identitiit der Krankheits-
bilder denSatz aussprechen durften,der anaphy-
laktische Shock istnichts an deresals eine Pep ton-
vergiftung, so kann dasselbe demnach auch von
der HBrnolysinvergiftung gesagt werden, womit
die Beweiskette fiir diese Identifizierung ge-
schlossen erscheint.

Auch ein anderes, meines Wissens noch nicht geprfiftes
Verhalten des h&molysinvergifteten Tieres reiht sich diesen
und ftlteren Erfahrungen vollst^ndig ein: die Leukopenie
zur Zeit der intensivsten HSmolysinwirkung.

Eine Auswahl einschlSgiger Versuche bringt die Ta-
belle XLVI. Sie zeigt, wie bei den Versuchstieren 3 und 4,

TabeUe XLVI.

Leukopenie bei Anaphylaxie und Hamolysinvergiftung.

Tier

Zeit

0

1 Stunde

a

'S

c

3

ai

<M

38tunden

4Stunden

5 Stunden

1

i

CQ

CO

M. 1, eensibil. mit
0,1 Pf.-S.

Temperatur

39,1

37,0

36.0

7500

34,2

36,0

36,2

38,5

0,5 „

Leukocyten

20500

10750

—

—

27 000

M. 2, antianaphy-

Temperatur

Leukocyten

39,5

16750

39,0

39,5

40,0

_

_

lakt. gegen

14000

—

21000

—

- j

—

pf.-a

M. 3, 2 ccm R.-8.

Temperatur

39,0

35,0

31,0

32,5

aktiv

Leukocyten

13500

—

7500

—

—

—

M. 4, 2 ccm R.-S.

If

39,3

35,0

34,2

36,5

_

_

16000

—

9250

140TO

—

—

—

44*

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672

Hermann Pfeiffer,

die mit aktivem Rinderserum vergiftet worden, in vdlliger
UebereinstimmuDg mit dem ersten, anaphylaktisch erkrankten
Tiere, mit der Temperaturabnahme auch eine intensive Leuko-
penie eintritt, im Gegensatz zum antianaphylaktischen Tiere,
welches entsprechend seiner geringgradigen Reaktion nur eine
unwesentliche Beeinflussung der Leukocytenzahl zeigt.

Zum Schlnsse sei nocb auf die pathologisch-ana-
tomischen Ver&nderungen hingewiesen, die man im
Gefolge einer Vergiftung mit Rinderhamolysin beobachtet und
die identisch und ebenso charakteristisch sind, wie die ana¬
phylaktisch erkrankter, urkmischer oder verbrflhter Meer-
schweinchen und insbesonders Kaninchen. Dort wie hier bei
akutem Tode (intravenbse Injektion!) das Symptom der Lungen-
blahung mit und obne Hyperamie, mit und ohne Oedem der
Organe, bei schwacherer, chronisch verlaufender Vergiftung
das Bild schwerster Nierenschadigung in Form parenchyma-
tdser bis fettiger Entartung, Biasse der Leber, eine- stark
vorragende maximal gefflllte Harnblase und im Magen-Darm-
trakt zahlreiche bis zahllose ekchymotische Geschwfirsbildungen,
bezw. in akuteu Fallen Blutungen.

Zusammenfassend kann ich also, und das in
voller Bestatigung und unter vielfacher Ergan-
zung der Anschauungen von Doerr, aussagen,
dafi nichtnurim klinischenBilde der mitRinder-
serum durchgeffihrten Hamolysinvergiftung Un-
terschiedegegenflber dem anaphylalctischen Shock
nicht bestehen, sonderndafi in gleicher Weise die
typischen anatomischen Veranderungen vorge-
funden werden, und der Harn derartiger Tiere
dieselben hohen toxischen, zurZeit des normalen
StoffwechselsnurinSpurennachweisbarenEigen-
schaften gewinnt

Wenn wir nunmehr sehen, wie im Falle einer immunisa-
torischen Bildung von AntieiweiB aus dem an sick ungiftigen
Antigen der Vorbehandlung durch parenteralen Zerfall ein
Gift gebildet wird, welches unter dem typischen Bilde des
allgemeinen anaphylaktischen Shocks, bei subkutaner Injektion
unter lokaler Nekrosenbildung das Versuchstier zu schadigen
vermag, wie weiter die wesensgleichen Folgeerscheinungen

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Weitere Beitrage zur Kenniais der Ueberempfindlichkeit etc. 673

bei Einspritzung eines gegen die betreifende Tierart aktiven
Normalh3.molysiD8 eintreten und uns daran eriDoern, daB
schon each dem Reagenzglasversuch zwischen diesen immuni-
satorisch gewonnenen und den normalen Antikbrpern nur
hinsichtlich ihrer Entstehung, nicht aber hinsichtlich des Zu-
standekommens ihrer Wirkung Unterschiede sich ergeben, so
gelangt man zu der von D o e r r schon lange vertretenen An-
schaunng, daB die schUdigende Wirkung von Normalseren nicht
dem HBmolysin als solchem zuzuschreiben ist, sondern ebenso
wie bei der Anaphylaxie das Gift erst als Resultante aus der
Wechselwirkung von HSmolysin zum Antigen in vivo entsteht.

DaB es auch von diesem Gesichtspunkte aus nicht angeht,
mit Uhlenhuth und Haendel im Serum eigene, von den
hfimolytischen Antikdrpern wesensverschiedene Gifte, nekroti-
sierende und allgemein toxische Eomponenten anzunehmen,
ergibt sich daraus ohne weiteres. Denn die bei einem Ver-
suchstiere nach Injektion wirksamer NormalhBmolysine zutage
tretende unmittelbare Wirkung ist eben nicht der toxische
Effekt von in dem Serum prUformierten toxischen Substanzen.
sondern sie entsteht erst bei dem Zusammentritt von HBmo-
lysin und dem Antigen als Produkt der dadurch eingeleiteten
chemischen Umsetzung, die man sich wohl (insbesondere nach
den Ergebnissen der biologischen Harnuntersuchung) als
wesensverwandt oder wesensgleich mit den im anaphylaktischen
Tiere sich abspielenden ansehen muB.

Diese Auffassung legt aber auch fhr die weiter noch zu
untersuchende Wirkung mancher anderer, in vitro h&moly-
sierend, in vivo unter einem Bhnlichen Vergiftungsbilde
schBdigender Verbindungen die Frage nahe, ob denn nicht
auch hier im Gefolge der Zerstorung des lebenden EiweiB
wesensverwandte Zersetzungen im Sinne der Entstehung von
Kdrpern mit Peptonwirkung vor sich gehen. Gemeint ist hier
die von Doerr nBher untersuchte Wirkung von Saponin,
also einem heftig hBmolytisch wirkenden Kdrper, auf das
Meerschweinchen, gelegentliche Bemerkungen von R. Kraus,
daB er Shnliche Kr&nkheitsbilder auch bei Vergiftungen mit
einer ganzen Reihe auderer teils organischer, teils anorganischer
Gifte gesehen hat und eigene Bhnliche Erfahrungen. Den-
selben Vermutnngen gibt auch Popielski auf Grund von

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674

Hermann Pfeiffer,

Versuchen Studzinskis fiber die giftigen Eigenschaften
defibrinierten Blutes Ausdruck, Resultate, welche in dem-
selben Sinne der schon jahrelang vorliegenden Ergebnisse
von W. Weichardt sprechen, der seine „Kenotoxin‘‘-Wirkung
auch bei Einwirkung verschiedener anorganischer Gifte auf
den Organismus sab.

Sollte sich diese Frage durch weitere Versuche in dem
vermuteten Sinne Ifisen lassen, so wird man aber dock immer
in der Lage sein, zwischen solchen ^sekundfiren Toxikosen*^
(der Bildnng eines Giftes durch Einverleibung einer eiweifi-
zersetzenden Substanz) und den primSren, durch die Injektion
des Produktes selbst, zu unterscheiden. Ffir erstere mufi
in vitro dem Eiweiiikfirper des entsprechenden
Versuchstieres gegenfiber der Nachweis einer
hfimolytischen Wirkung gefordert werden. Das
fertige Prodnkt scbfidigt hingegen, wie wir an dem Giftkdrper
des Pepton und des Harnes im akuten Eiweifizerfall befind-
licher Tiere sehen kfinnen, die Erythrocyten in keiner Weise,
erzeugt aber dabei im Gegensatz zur weiBen Mans, die dagegen
nnempfindlich, aber schwer und typisch allgemein erkrankt,
lokale Schfidigung der Zellen der Cutis und vermag unabhfingig
davon das charakteristische Bild der allgemeinen Wirkung
auszuldsen. Erst fehlende Hfimolyse bei vorhandener
lokaler und allgemeiner Giftigkeit gibt den Be-
weis der primfiren Anwesenheit des Zerfalls-
produktes in einem Substrat.

V. Zur Kenntnis der photodsmamisoheii Wirkung
fluoreszierender StoflEb.

Die eben erfirterten Beziehungen zwischen der Wirkung
eines Normalhfimolysins und dem anaphylaktischen Shock
veranlaBten dazu, zunfichst zu prfifen, wie sich denn der
tierische Organismus (Mans und Meerschweinchen) verhSlt,
wenn man den Schauplatz einer jedenfalls ganz andersartig
zustandekommenden Hfimolyse aus dem Reagenzglas in den
Organismus eines Tieres verlegt.

Im AnschluB an die grundlegenden Versuche Tappeiners
fiber die deletfire Wirkung gewisser fluoreszierender StofFe bei
gleichzeitiger Anwesenheit von Licht auf Paramficien habe

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Weiteie Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 675

ich gleichzeitig mit und unabhldigig von Sacharoff und
Sachs fiber die mittlerweile von W. Hausmann ffir ver-
schiedene fluoreszierende Stoffe, so insbesondere ffir das
Hfimatoporpbyrin bestlitigte Erfahrung berichtet, dafi rote Blut-
kfirperchen, welche im Dnnkeln durch Eosin innerhalb der
gewfihlten Versuchsgrenzen nicbt geschfidigt werden, sich in
diesem Medium in kurzer Zeit aufldsen, wenn man sie, selbst-
verstfindlicb unter entsprechender Wasserkfihlung, dem Sonnen-
lichte Oder den Strahlen einer Bogenlampe aussetzt. Ohne
den Zusatz eines fluoreszierenden Stoffes halten sie aber
stundenlang durchaus ungescbfidigt die Einwirkung der Licht-
quelle aus. Selbst Eosinverdfinnungen von 1:1000000 er-
weisen sicb dabei nach 8*stfindiger Belichtung noch als wirksam.
Im Zusammenbang mit diesen Versuchen stehen andere eigene,
welcbe das rasche Zugrnndegehen des hamolytischen Kom-
plementes und Ambozeptors von Normalseren dartaten. Jns-
besondere durch die erstgenannte Versuchsanordnung war ffir
das Studium derartiger Wirkungen ein einfach zu beschaffendes
Untersuchungsmaterial, sowie das exakte Kriterium einge-
tretener oder fehlender Hlimolyse gegeben.

Besonders durch die mfihevollen und exakten Versuche
W. Hansmanns hat dann dieses Kapitel eine eingehende
Bearbeitung erfahren indem er ffir das Hfimatoporphyrin in
alkalischer Lfisnng, die Galle, das Chlorophyll und eine Reihe
anderer fluoreszierender Stoffe ein intensives sensibilisierendes
Vermfigen nachwies. Er war es auch, der zuerst das Ver-
halten des lebenden Warmblfitlers, der weillen Mans, bei Sen-
sibilisierung mit diesen Farbstoffen genau studierte und die
Beobachtung machen konnte, dafi vorbehandelte Tiere, wenn
sie ins Licht gebracht werden, in kfirzester Zeit unter einem
aufierordentlich charakteristischen, rauschfihnlichen, mit teta-
nischen Anffillen einhergehendem Zustandsbilde erkranken und
rasch sterben, wfihrend die im Dunkeln gehaltenen, ebenso
behandelten Kontrollen auf die Einspritznng gar nicht rea-
gierten, normale Kontrollmfiuse die Belichtung, ohne Schaden

1) Aum. bei der Eorrektur: Sacharoff und Sachs (Miinch. med.
Wochenschr., 1905, No. 7) berichteten schon friiher ubCT positive VOTsuche,
photodynamische Wirkungen im Tierkdrper zu erzielen. Sie erhielten mit
Erythrosin an weifien Mausen akuten Lichttod.

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676

Hermann Pfeiffer,

zn Dehmen, ertrugen. Wurde die Belichtung nicht so inteosiv
gew&hlt, so blieb der Tod der Versuchstiere aus, es ent-
wickelten sich aber dann, insbesondere an den Ohren, Ent-
zfindnngen, Nekrosen und Hautausschl&ge.

Hinsichtlich der Ursache dieser Erscheinung erdrtert
W. Hausmann verschiedene Mdglichkeiten: primSre Blnt-
schkdigung, Eindickung, Shockwirkung und insbesondere die
Entstehung von Giften. Er hlUt kbnliche Verhkltnisse wie bei
dem Verbrflhungstode fiir gegeben und erinnert daran, dafi
das Erkrankungsbild seiner sensibilisierten und belichteten
Tiere aufs Haar jenem gleiche, die der Verfasser dieser Mit-
teilung frOher aus AnlaB der eingangs besprochenen Unter-
suchungen fiber den Verbrfihungstod beobachtet hatte, wenn
er auf weifie Mliuse den toxischen Harn verbrfihter Kaninchen
fiberimpfte.

In dasselbe Kapitel scheinen endlich Untersuchungen von
H. Raubitschek, J. Horbaczewski und Lode zu ge-
horen.

Sie betreffen insbesondere die Pathogenese der Pellagra.
H. Raubitschek konnte ffir die weifie Maus die Erfahrung
machen, daB lange Zeit mit Mais geffitterte und im Lichte
gehaltene Tiere akut zugrunde gingen, wfihrend unbelichtete
Kontrollen gesund blieben. Schon erkrankte und belichtete
Tiere konnten durch Uebertragen ins Dunkel gerettet werden.
Mit Alkohol von seinem Farbstoff befreiter Mais vermochte
im Licht gehaltene Tiere nicht zu schfidigen. Der Autor zieht
aus diesen Resultaten die Folgerung, daB sie in engem Zu-
sammenhange mit der (auf andere Weise nicht zu erklfirenden)
Pathogenese der Pellagra stehen mfissen, daB diese hervor-
gerufen wird durch eine einseitige Ernfihrung mit Mais guter
Oder schlechter Qualitfit, die aber erst unter dem EinfluB des
Sonnenlicbtes ihre deletfire Wirkung entfalte. Wir hfitten also
auch hier eine Sensibilisierungserkrankung mit dem Maisfarb-
stoffe vor uns, eine Annabme, die durch die umfassenden und
grfindlichen Versuche von J. Horbaczewski eine weitere
Stfitze erhfilt.

Die mit Normalhfimolysin gemachten Erfahrungen dort,
die hfimolytische Wirkung fluoreszierender Farbstoffe im Lichte,
das Erkrankungsbild weiBer Mfiuse bei diesem von W. Haus¬
mann kurz und schlagend so bezeichneten ^Lichttode*^ hier

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Weitere Beiti%e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. QTJ

veranlafiten mich, mit Hilfe der bei verschiedenen Formen des
parenteraleD EiweiBzerfalls aafgefundenen Eriterien, die un-
abhSDgig von W. Hausmann gefafite Vermutungexperimentell
zu prflfen, ob nicht auch bier wie in jenen anderen Formen
eine Vergiftung mit derartigen KSrpern vorliege.

War das der Fall, so mufite sowohl die weifie Mans als
auch das Meerschweinchen, also die beiden in grdfieren Versuchs-
reihen bier nntersuchten Tierspecies, beim Lichttode unter
Sjmptomen erkranken, die von den anderen Formen des akuten
parenteralen EiweiBzerfalls her bekannt sind, die dabei sich
bildenden krankhaften anatomischen Verfindernngen auch hier
nachweisbar sein und insbesondere die biologische PrBfung
der Harntoxizitat zeigen, daB derartig geschBdigte Tiere in
quantitativer und qualitativer Hinsicht ebenso giftige Harne
ausschiedeo, wie jene anderen.

Die bis heute angestellten Versuche ergeben die im
nachfolgenden gescbilderten Verbaltnisse:

1. Versuche an weiBen MBusen.

Als sensibilisierendes Agens wurde eine ganze Reihe von
Stoffen benutzt, so alkaliscbes Hilmatoporphyrin, Eosin wasser*
ISslich, Chlorophyll von R. Willstadter, wfisserige Chloro-
phyllbsung von Merk, monatelang fortgesetzte Polenta-
futterung und Rindergalle. Von alien diesen Stoffen hat sich
das alkalische Hamatoporphyrin, in zweiter Reihe das wasser-
Idsliche Eosin am besten bewahrt, weshalb ich hier auch aus-
schlieBlich fiber diese fiberzeugenden Versucbsreihen berichten
mfichte. Insbesondere der erstgenannte fluoreszierende Stoff,
den ich kristallisiert und v511ig rein der besonderen Gfite
W. Hausmanns verdankte — ich mSchte ihm an dieser
Stelle ffir sein steles Entgegenkommen auf das herzlichste
danken — besaB zwei bei soichen Versuchen wichtige Eigen-
schaften in hohem MaBe: intensives sensibilisierendes Ver-
mOgen neben vfilliger Unschadlichkeit ffir die weiBe Maus in
den notwendigen kleinen Dosen. Die anderen erwahnteu
fluoreszierenden Stoffe stehen hinsichtlichihres Sensibilisierungs-
vermfigens hintcr diesen weit zurfick, manche von ihnen be-
sitzen eine an sich intensive Giftigkeit ffir die Maus. Die
Injektion erfolgte regelmaBig subkutan in den spater in der
Tabelle angeffihrten Mengen. Zwischen Einspritzung und Be-

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678

Hermann Pfeiffer,

lichtuDg wurde immer ein Ifingerer oder kflrzerer Zeitraum
eingeschaltet, in dem die Tiere im Dunkeln blieben und anf
eventuell an sich schfidigende Einflflsse des fluoreszierenden
Stoffes beobachtet wurden.

Als Lichtquelle benutzte ich eine 30—40-Ampfere-Bogen-
lampe. Fttr ihre Benutzung, sowie fQr sein vielfkltig be-
wiesenes Entgegenkommen mdchte ich bier Herrn Prof. K1 e-
mensiewicz gleichfalls meinen beaten Dank aussprechen.

Die senBibilisierten Mauee und die nonnalen Kontrollen wimlen in
diesem beatandig mit Wasser gekuhlten Lichte roSglichst in einer Ent-
femung von 80 cm von der Lichtquelle in Glasgefa^en belichtet und die
Lichtwirkung noch durch eine zwischengestellte SammellinBe derart ver-
Btarkt, dafi die Versuchstiere dem konvergenten Strahlenbiindel dicht hinter
der linse, also innerhalb ihres Brennpunktes ausgesetzt wurden. Dm die
Lichtwirkung noch intensiver zu gestalten, wurden alle dem Lichte aus-
gesetzten Tiere, selbstversUindlich auch die Kontrollen, von der Schwanz-
wurzel bis zum Genick mit der Schere geschoren.

Von den feineren qnantitativen VerhSltnissen zunSchst
abgesehen, beginnen die mit Erfolg sensibilisierten Mfiuse im
Gegensatz zu den normalen Kontrollen und ebenso vorbe-
handelten aber unbelichteten Tieren sofort nach der Licht-
einwirkung konstant das von W. Hausmann beschriebene
Juckphanomen, Aufregung, intensive Lichtscheu, im weiteren
Verlaufe TrSnenflufi und ddematdse Anschwellung des Kopfes,
der Ohren, manchmal auch des Schwanzes zu zeigen. Wurde
die sensibilisierende Dosis sehr grofi gewflhlt (0,001 g HiLmato-
porpbyrin in 1-prom, schwach alkalischer Lbsung), so verfallen
die Tiere nach kurzer Zeit im Lichte in Mattigkeit und
Somnolenz und gehen darin schon nach zweistflndiger Be-
lichtung rasch zugrnnde, nachdem manchmal auch hier ein
knrz ausgeprflgtes Stadium der Reflexerregbarkeit (Fufiklonus,
AnfUlle tetanischer Starre, rauschfthnliche Zustandsbilder) nach-
weisbar werden. Die normalen und belichteten Kontrollen
bleiben vbllig ungeschMdigt, ebenso sind die im Dunkeln ge-
haltenen, mit denselben Farbstoffmengen behandelten Tiere
gesund und flberleben, ohne je Krankheitserscheinungen ge-
zeigt zu haben. Auch Hautaffektionen kann man vollkommen
vermeiden, wenn man von ihnen Licht fernhfilt.

Wurde die sensibilisierende Dosis kleiner gewShlt (0,0005
bis 0,00025 g HUmatoporphyrin) oder wurden die Tiere kflrzere

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Weitere Beitrage zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. 679

Zeit dem Lichte ausgesetzt, so Qberstehen die ersteren eine
zweistfiDdige Bestrahlung bei lebhaftem Jnckreiz and bleiben
bis gegen Ende der Lichteinwirkung munter. Nimmt man
die Tiere aber dann aus dem Lichtkegel, so verfallen sie aufier-
ordentlich rasch. In wenigen Minnten oder Vs Stunde stellt
sich Mattigkeit, spkter Somnolenz ein. Mit Progredienz der
Erscheinungen, nach 1—2 Stunden zeigen sie die mit nichts zu
verwechselnden, von W. Hausmann bier zuerst beobachteten
Streckkrkmpfe, spkter jenen rauschldinlichen Zustand, der mir
von der Wirkung toxischer Eiweifizerfallsharne Oder der kon-
zentrierten Riickst&nde normaler Harne her so wohl bekannt
war. Diese Aehnlichkeit der Erkrankung war es ja auch, die
den eben genannten Autor veranlaBte, die Mdgiichkeit einer
Vergiftung wie beim Verbrflhungstode in Betracht zu ziehen.
Derart geschfidigte Tiere gehen dann raeist rasch im Verlaufe
von 5—8 Stnnden vom Beginn der Lichteinwirkung an gerechnet
in typischer Weise zugrunde. Sucht man bei derart schwer
erkrankten Tieren durch Oeffnen der Halsvene oder selbst
durch Dekapitation Blut zu erlangen, so ist das oft kaum
mbglich. Nur 1—2 Tropfen entquellen den auffallend kolla-
bierten Gefftfien, wkhrend man von der normalen Mans leicht
reichliche Blutmengen nach Durchschneidung des Vorderhalses
gewinnen kann.

Warden ganz kleine HSmatoporphyrinmengen gew9.hlt
Oder die Belichtung bei grdfierer Dosis nur kurze Zeit vor-
genommen, so verlftuft die Erkrankung der Tiere ilhnlich der
eben beschriebenen, nur weitaus protahierter. Viele Stunden,
ja tagelang kdnnen die Mkuse in einem Zustande verharren,
in dem man ein Fortleben kaum f(lr mdglich halten mdchte.
Schwerste tetanische Erampfanfklle bringen die Atmung oft
auf Minuten vbllig zum Sistieren, wobei der ganze kleine Tier-
kdrper bretthart, der Schwanz steif daliegt. Al]m§.hlich kommt
die Atmung aber wieder in Gang, die Tiere erholen sich
etwas, wobei sie mit lebhaft taumelnden Bewegungen in ihrem
Ekfig sich herumwfilzen, bis ein neuer Starrkrampf sie hber-
fUllt. Ich habe extreme Ftille beobachtet, die 2, 3 Tage lang
in diesem Zustande verharrten, bis endlich der Exitus eintrat.

Schon aus dieser Beschreibung ergibt sich demnach, und
zwar in voller BesUtigung der von W. Hausmann ausge-

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680

Hermann Pfeiffer,

sprochenen Vermutung, das wir hier bis in die kleinsten Zflge
das seinerzeit von mir fflr die Wirkung toxischer Verbriihungs-
harne und Seren geschilderte Bild vor uns haben, mit anderen
Worten das Bild der so charakteristischen ^Mfinseurfimie*^
Oder, was auf dasselbe hinauskommt, das Bild einer Eiweifi-
zerfallstoxikose.

War die Sch&digung der Tiere subletal gewkhlt, so er-
kranken sie in den leichtesten Fallen unter einer vorflber-
gehenden Mattigkeit, in schwereren unter ausgesprochener
Somnolenz, zu der sich dann in eben noch mit Erholung aus-
gehenden Fallen Klonus, Streckkrampf und rauschahnliche
Erregungsbilder hinzugesellen. Spater treten dann, wie H a u s -
mann bescbrieb. Infiltrate und Nekrosen der Ohren, juckende
Haotausschiage und Nekrosen an der Haut auf.

Ich m5cbte dieses Krankheitsbild noch in einem wesent-
lichen Punkte erganzen, der bisher von den Untersuchern noch
nicht beachtet wurde und mir in mancherlei Hinsicht be-
deutungsvoll erscheint: das Verhalten der Kbrpertemperatur
der Tiere.

Unbelichtete Tiere, die eine sorgfaitig zubereitete, ins-
besondere von viel fiberschfissigem Alkali freie Hamatoporphjrin-
Idsung in den Dosen von 0,001 g erhalten haben, reagierten
darauf, wie aus der zweiten der hier abgebildeten Kurven
(Fig. 7) hervorgeht, mit einer kaum nennenswerten Temperatur-
abnahme, die in kurzer Zeit behoben ist, auf kleinere Dosen
fiberhaupt mit keiner Stdrnng ihrer Eigenwarme. Nach 12 bis
24 Stunden jedenfalls ist diese minimale Wirkung vollstandig
geschwunden.

Werden nun solche, mit groilen Dosen sensibilisierte Tiere
ins Licht gebracht und von Vi Stunde zu Vi Stunde gemessen,
so zeigt es sich, dafi mit fortschreitender Lichtwirkung schon
im Lichte ihre KOrperwarme rapid abfailt und dann, wenn
der Tod noch im Lichte eintritt, einen auBerordentlich niedrigen
Stand, 30—28® C erreicht hat. Daffir sei Fig. 6 ein Beleg.

Das erste der Tiere starb wahrend einer 2-stundigen Belichtung im
Lichte bei einer Temperaturabnabme von 8®, das zweite immittelbar
darauf bei einem TemperaUirsturz von 11* C. bchon mit B^inn der Licht¬
wirkung setzte diese Stdrung ein und nahm gleichmaUig bis zum EIxitus
zu. Bei dem ersten Tiere war das eben geschilderte Krankheitsbild nur
ganz vonibergehend, bei dem zweiten unter 30* deutUch ausgesprochen.

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Weitere Beitrage zur Kenntiiis der Ueberempfindlichkeit etc. 081

Bei groBerer Widerstandsfahigkeit gegen die Schadigung,
Oder, wie bei dem in Fig. 7 gewShlten Versuch, bei kurzer
Belichtung bleibt zu Beginn der Belichtung die Temperatur
annahernd auf der Norm und zeigt erst spSter, sobald das
Tier aus dem Lichte gebracht wird, denselben tiefen und
plotzlichen Abfall.

Dieses Versuchstier, mit 0,001 Hiimatoporphyrin behandelt und durch
60 Minuten belichtet, iiberwand noch im Lichte die friiher erwiihnte neben-
sacbliche, dem Farbstofie selbst eigentiimliche Einwirkung auf seine Tem¬
peratur, indem diese zur Norm zuriickkelirte. Als die Maus aus dem
Lichtkegel geriickt wurde, fiel unter immer zunehmenden typischen Er-
scheinungen ihre Temperatur innerhalb zweier Stunden von 37® auf unter
25® und betrug bei dem 6 Stunden nach Beginn des Versuches eintreten-
den Tode nur mehr 20® C.

Die Kurve 8, die bei 2-8tundiger Bestrahlung und mit 0,005 Hamato-
porphyrin gewonnen wurde, zeigt, wie bei langerer Lichtwirkung allerdings
nur zogernd und in geringem AusmaBe die Temperatur im Lichte abzusinken
beginnt, im Dunklen aber dann fast momentan ein jiiher Temperatursturz
mit Ausbruch der typischen allgemeinen Erscheinungen bis unter 25® ein-
setzt und wie das Tier 9 Stunden nach Beginn des Versuches eingeht.

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682

Hermann Pfeiffer,

Die mit 7 imd 8 bezeichneten
dieser Kurven bringen Kon-
trollen einer unbelichteten,
ebenso sensibilisierten und
einer belichteten, nicht sen¬
sibilisierten Mans. Ihre Kor-
perwarme zeigt nur ganz
geringe Schwankiingen, wie
sie bei diesen kleinen Tieren
durchaus physiologisch sind,
ihr allgemeines Befinden war
in keiner Weise gestort.

Kurve 9, die in der ge-
strichelten eine unbelichtete
Kontrolle wiedergibt, zeigt
die Wirkung von 0,00025
Hamatoporphyrin bei 2-8tun-
diger B^trahlung. Sie lafit
erkennen, wic wieder plotz-
lich mit dem Entfemen aus
dem Lichte die Temperatur
abstiirzt, dieser Abfall aber
noch um viele Stunden iiber-
lebt wird. So setzte er bei diesem Tiere um 10 Uhr ein, betrug um 11 Uhr
30 Minuten schon 13® C. Das Tier iiberlebte aber noch um 4 Stunden

Figur 9.

Figur 8.

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Weitere Beitriige zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 683

Man kann schon daraus, besser noch aus spater zu
bringenden Beispielen entnehmen, daB es sich bei dem in
Rede stehenden Phanomen keineswegs um terminale
Kollapserscheinungen, sondern um ein initiales
Erkrankungssymptom handelt, welches dem Ausbruche
der anderen Erscheinungen, die ich unter dem Namen des
^status typicus“ schon in meiner Verbruhungsarbeit zusammen-
gefaBt habe, vorausgeht und sie einleitet.

Dasselbe ergibt sich besonders uberzeugend dann, wenn man nicht
znm Tode fiihrende Versuchsbedingungen wiihlt, sondern die Tiere nur
subletal scbiidigt. Das ist z. B. in dem Versuche der Kurve 10 geschehen.

.f

Figur 10.

Ein mit 0,00012 Hamatoporphyrin sensibilisierte Mans wird durch 2 Stunden
im Bogenlicht belichtet, ^^^rd von intensivem Jnckreiz befallen, bleibt aber
wahrend dieser Zeit munter und zeigt einen leichten Temperaturanstieg.
Im Dunkeln sinkt nun ihre Temperatur staffelformig innerhalb 6 Stunden
bis auf 28®. Die iibrigen Krankheitserscheinungen bestanden zuerst in
Mattigkeit, der sich bei 32® ein intensiver FuUklonus zugesellte, unter 30®
tetanische Krampfanfalle und rauschahnliches Taumeln, mit Anstieg der
Korpertemperatur allmahliches Nachlassen der Erscheinungen.

Wird, wofur hier wohl ein kurvenmaBig belegtes Versuchs-
beispiel nicht gebracht werden muB, die Schadigung noch
kleiner gewahlt, so ist haufig der Temperatursturz die einzige
objektiv erkennbare Schadigung des Versuchstieres, eine ge-
ringe Mattigkeit ausgenommen. In solchen Fallen koinmt es,

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684

Hermann Pfeiffer,

wie flbrigens auch beim Meerschweinchen, h&ufig vor, dafi
nicht nnmittelbar nach dem Aufhbren der Licbtwirkung, son-
dern oft erst nach Stunden, ja selbst noch am n&chsten Tage
ein mehr minder betrllchtlicher Temperaturabfall mit seinen
Folgeerscheinungen nachweisbar wird. Das gilt inbesondere
z. B. ffir das wfisserige Chlorophyll und andere, schwScher
sensibilisierende Farbstoffe. Man kann also von einem nega-
tiven Ausfall eines M&useversuches nur dann sprechen, wenn
die KbrperwSrme des Tieres 36—48 Stunden nach Aufhbren
des Versuches einen intensiven Abfall (unter 5®) nicht er-
fohren hat.

Aus den hier nur ganz kursorisch erdrterten, im folgenden
noch n&her zu belegenden Verh&ltnissen ergibt es sich, dad
ebenso wie bei der auf anderen Versuchswegen
ur^lmisierten Maus im Zentrum des, insbesondere
durch Mattigkeit, Somnolenz, tetanische Krampf-

TabeUe XLVII.

Mauseversuche mit Hamatoporphyrin.

d

55

Dosis

ccm

Inter¬

val!

Belich-

tungs-

dauer

Tem-

pera-

tur

Zeit

Reak-

tion

Mittel

1

0,001 Hlimatoporph.

2 Std.

60 Min.

1

1-130

t300'

160500

2

dgl.

2 „

80 „

•

•130

t240'

tl20'

tl65'

t300'

t330'

164400

3

4

12 „

12 „

120 „

120 „

1

1

80

1-160

175 200
166800

It 171000

5

6

48 „
48 „

120 „

120 „

1

1

[-150

[-150

158000
155 250

t 156 620

7

12 „

0

0

0

8

„

12 „

—

0

0

0

9

120 Min.

0

0

0

10

—

—

120 „

0

0

0

11

0,0005 Hamatopor.

l2Std.

120 „

tl35

t640'

143550

Jt 152025

12

: dgl.

12 „

120 „

tl30

t300'

160500

13

1 jy

12 „

0

0

0

14

ty

12 „

—

0

0

0

15 1

120 Min.

0

0

0

16 i

—

_

120 „

0

0

0

17 !

0,00025 Hamatopor.

12 Std.

120 „

tl30

t960'

t420'

117600

11 135150

18

dgl.

12

120 „

tl30

152700

19

yy

12 „

0

0

0

20

jy

12 „

—

0

0

0

21

120 Min.

0

0

0

22

0,00012 H&matopor.

12 Std.

60 „

23

65'

863

1 521

23

dgl.

12 „

60 „

6

60'

180

24

yy

12 „

120 ,.

20

405'

4050

1 38475

25

yy

12 „

120 „

90

1620'

72900

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 085

anfftlle und rausch&hniiche Firregungszust&ude
charakterisierten Krankheitsbildes auch bier ein
Temperatursturz steht, der, der Schwere der Er-
krankuDg vollst&ndig parallel gehend, zugleich
sein feinster und objektiv mefibarer Ausdruck ist.

Wie sehr das den Tatsachen entspricht, crgibt sich auch aus der
nunmehr zu besprechenden Tabelle XLVII. Sie berichtet fiber die Ver-
Buche an 25 Mausen, die mit den in Eolonne 2 ang^ebenen fallenden
Hamatoporphyrinmengen wahrend verschieden langer Zeit — Eolonne 4 —
zu verschiedenen Zeiten belichtet worden waren. Eolonne 5 bringt die
Intensitfit des beobachteten Temperatiuabhdles, 6 die Zeitdauer der £r-
krankung vor Eintritt des Todes, bezw. der Wiedererholung mit Bfickkehr
zu normalen Temperatuirerbaltnissen.

Betrachtet man vorlSufig diese 4 Kolonnen, so sieht man
1) dafi bei fallenden HJlmatoporphyrindosen, kon-
stantem Zeitintervall zwischen Einspritzung und Belicbtung
und konstanter Lichteinwirkung — 8 Stunden, 80 cm von einer
30—40 Amp^re-Bogenlampe — der Tod urn so rascher ein*
getreten ist, die Erkrankung also um so rascher verlief, je
grdller innerhalb an sich unschadlicber Breiten die Menge des
einverleibten FarbstofTes war.

So tdten bei Gleichbleiben der anderen angegebenen Faktoren 0.001 g
des FarbstofTes bei einer Temperaturabnahme von 12® in der Zeit von
140 Minuten, 0,0005 g bei —13® in 400 Minuten, 0,00025 g bei —13®
in 650 Minuten. 0,00012 g setzen eine subletale Schadigung, die bei einer
Temperaturabnahme von 5,5® nach 1000 Minuten wieder in Erholung
fibergeht

2) Wird, wie in Versuch 4 und 22—25, dieFarbstoff-
menge konstant, die B e 1 i ch t u n g s d au er aber
steigend gewahlt, so tritt der Tod um so rascher
ein, bezw. die Erkrankung wird um so schwerer,
je intensiver die Bestrahlung gewesen ist.

So tdten 0,001 g Hiimatoporphyrin bei 120 Minuten Licht in 120
Minuten bei —8,0®, bei 80 Minuten Licht in 240 Minuten bei —13®, bei
60 Minuten Licht in 300 Minuten bei derselben schweren Temperatur-
schadigung; hingegen schadigen 0,00012 g Hiimatoporphyrin bei 60 Minuten
Licht mit einer mittleren Temperaturabnahme von —1,5® C, die in
67 Minuten in Erholung fibergeht, erzengt bei 120 Minuten Licht eine
Temperaturabnahme von 5,5® C, die sich erst nach beilaufig 1000 Minuten
wieder ausgleicht.

Zeltschr. f. ImmanitHtsforschna^:. Ori^. Bd. X. 45

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686

Hermann Pfeiffer,

3) Konstante Lichtwirkung mit konstanten
Mengen des sensibilisierenden Agens sch&digen
innerhalb eines Zwischenraumes von 12—48Stun-
den nach der Injektion um so schwerer, je rascher
auf die Einverleibung die Belichtung folgt, mit
anderen Worten: je reichlichere Mengen des
Sensibilisans noch im Korper kursieren, oder
noch nicht ansgeschieden wurden.

Auf 2-8tundige8 Bogenlicht erfolgt — 0,001 H^atoporphyrin iiberall
TorauBgesetzt — der Tod in einem 48 Stunden nach der Einspritzung
durchgefuhrten Versuche im Mittel in 315 Minuten und einer Temperatur-
abnahme von —15,0®, nach 12 Stunden aber bd —14,0* in 140 Minuten.
2 Stunden nach der Eiuspritzung werden ganz alinliche schwere Effekte
schon bei Lichteinwirkungen von 80 Minuten erreicht. (VgL dazu iibrigens
auch die spateren VerBuchsreihen der Tabelle XLVllI).

4) Man sieht ferner aus diesen Versuchen die schon frdher
erhobene Tatsache, daC auch hier bei Erholungsfallen
die Temperaturabnahme nm so grCfier ist, je
schwerer das allgemeine Vergiftungsbild ver-
iSuft und desgleichen um so l&ngere Zeit anh§lt,
in tbdlichen Fallen aber um so geringer ist, je
rascher der Tod eintritt, um so hbhere Grade er¬
reicht, je linger die Agone dauert

Die Temperaturabnahme und die Zeitdauer
ihres Anhaltens sind demnach in Erholungsfallen
direkt proportional der Schwere des Krankheits-
bildes, bei tbdlichen Fallen ihr verkehrt pro¬
portional.

Da wir fernerhin, wie frflher erwahnt, am lebenden Tiere
in der Temperaturabnahme auf photodynamische Schadigungen
das feinste Reagens besitzen, welches auch in Fallen zu be-
obachten ist, wo andere Kriterien dafflr vbllig im Stiche lassen,
ferner darin die Mbglichkeit eines exakten ziifernmaiiigen Aus-
druckes der Schadigung haben, so kdnnen wir auch hier in ahn-
licher Weise, wie dies fur die Harnwirkung auf Mause und
Meerschweinchen eingangs, fQr den anaphylaktischen Shock der
Meerschweinchen in zahlreichen frflheren Arbeiten ausgefOhrt
wurde, das Produkt aus der Temperaturabnahme
(ta)und derZeitdauer der Tern peraturabnahme (Z)

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Weitere fieitr^e zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 687

zu einer quantitativen EinschStzung der photo-
dynamischen Wirkung verwenden. Aus der direkten
Proportion beider Faktoren zum Krankheitsbilde in Erholungs-
fallen und aus der Art des Knrvenverlaufes, mit seinem einen
Dreiecke entsprechenden Fiacheninhalte, dessen Hdhe der
Intensitat des Temperatnrsturzes, dessen Basis der Zeitdauer
bis zum Eintritt der vdlligen Wiedererholung, also der Er-
langung der normalen Ausgangstemperatur gleichkommt, ist
es durchaus zuiassig und erwies sich in der Folgezeit auch
als fruchtbar, den Qberstandenen Shock gleich
schwerer Versuchstiere auszudrQcken in der

Formel: S ^

In derselben Weise, wie bei todlich endigenden ana-
phylaktischen Shocks und wie in Fallen letaler Harnvergiftung
Oder Uramie der f S bewertet werden kann durch die Formel
Sf = Schwellenwert der iiberlebenden Falle + grdHten Wert
des in eigenen Versuchsreihen direkt beobachteten und be-

rechneten Produktes ^ — tatsachlicher Shock des Ver-

suchstieres — geht es auch hier an, das zu tun. Denn wie
dort ist die Zeitdauer des Ueberlebens und die Intensitat
der Temperaturabnahme verkehrt proportioniert der Schwere
des Erkranknngsbildes. Nur hinsichtlich der Grdfie des

Schwellenwertes und des Produktes ergeben sich in

der Praxis Unterschiede gegenCiber dem Meerschweinchen
insofern, als die Mans weitaus grdfiere Schadigungen ertragt
als dieses Tier.

Die 30—40-Ampere-Bogenlampe bei konvergierendem,
wassergekuhltem Lichtkegel und einer Entfernnng der Versuchs¬
tiere = 80 cm von der Lichtquelle vorausgesetzt, ergeben non
als grdBten und allgemeinen Schwellenwert bei Ueberlebenden
Temperatorabnahmen von 9,0® C bei einer Erkrankungsdauer
von 1620 Minuten, demnach eine Zahl von 72900 Einbeiten,
wobei, urn Dezimalen zu vermeiden, als Einheit fdr die Tem¬
peraturabnahme = 0,1 ® C fflr die Zeit 1 Minute nach Beginn
der Belichtung gewahlt ist. Es entspricht demnach eine Zahl
von 80000 Einheiten der grdBten, eben noch ertragbaren
Schadigung. Wird andererseits aus einer grdBeren Reihe

45 *

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688

Hermann Pfeiffer,

tddlicher Falle das grSBte Produkt berechnet, so

betrag es etwas unter 20000. Wir kommen demnach bier
fur tddliche Falle zu der in der Praxis durchaus bewahrten
uod erprobten empirisch gefundenen Formel:

St = 80000 + (20000 —

wobei UQter taf die Temperaturabnahraeii in Zehntelgraden
Celsius bis zum Momente des Todes, unter Zf die bis zum
Tode vom Beginn der Belichtung verstricbene Zeit in Minuten
verstanden ist.

Wenden wir die eben gefnndenen ziffernmaBigen Aus-
drucksmittel ffir die pbotodynamiscbe Scbadigung gleicb fOr
die Versucbsreibe der Tabelle XLVII an und berecbnen
darnacb die Shocks, so ergibt sicb, mit welcber Feinbeit die
Zahlen den Krankbeitsverlauf widerspiegeln und wie ans den
gefundenen Mittelwerten direkt Rflckscbliisse auf Zu- oder
Abnahme der Scbadigung gezogen werden kdnnen.

Ein Beispiel genflge: 0,001 Hamatoporpbyrin setzt —
2-stttndige Belicbtungsdaner und gleicbe Zeitintervalle zwischen
Einspritzung und Belicbtung vorausgesetzt — Scbadigungen
von 1 171000, 0,0005 von 1 152025, 0,00025 von f 135150,
0,00012 Hamatoporpbyrin von 38475 E.

Ganz kongruente Resnltate erzielt man bei Belicbtung
sensibilisierter Mause bezw. normaler Kontrollen im direkten
Sonnenlicht. Nur muB man dabei die intensive Licbtwirkung,
die bekanntlich namentlicb an beiBen Tagen gesunde Tiere
scbwer zu scbadigen und zu toten vermag, immer genauestens
mit unvorbebandelten Tieren fOr den Einzelfall verfolgen, die
Tiere mOglicbst vor der Sonnenwarme eventuell durcb Wasser-
kablung des Kafigs scbiitzen, fttr gute Ventilation sorgen, die
Strahlen nur kurze Zeit — nicbt viel fiber 1 Stnnde! — ein-
wirken lassen. Diese Belichtungszeit genfigte selbst bei der
relativ scbwachen Marzsonne immer, Hamatoporpbyrinmause
letal zu scbadigen, wahrend sie unvorbebandelte Kontrollen
vdllig ungescbadigt laBt.

Dies ergibt sicb in vOlliger Uebereinstimmung mit den
grundlegenden Versucben von W. Hausmann aus der neben-
stehend abgedruckten Tabelle XLVIII, in welcber bei Ver-

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 689

suchstieren nnd den Kontrollen die Sch3digung nach den eben
anfgestellten Formeln berechnet und in der vorletzten und
letzten Kolonne ansgewertet ist.

Tabelle XLVIU.

Hamatoporphyrinmause bei Sonnenlicht.

No.

Vorbehandlung

Inter¬

val!

Sonnen-

licht

durch

Tem-

peratur

Zeit

Shock

Mittel

1

0,001 Hamatoporph.

12Std.

60 Min.

1

55

t 75'

177 938

}l76606

2

dgl.

dgl.

ff

dgl.

7f

1

• 105

t 90'

175 275

3

0,0005 Hamatoporph.

1

130

t 120'

172200

j 172 060

4

dgl.

jj

ff

•

■ 134

1120'

171960

5

0,00025 Hamatoporph.

ff

H

180

t255'

157050

[l56 375
j 147 600

6

dgl.

ft

ff

•

- 180

t 270'

155 700

7

0,00012 Hamatoporph.

If

ff

1

185

t 300'

152250

8

dgl.

4 Monate Polenta

ff

1

- 180

t 360'

147 600

9‘)

0

0

0

10

dji.

_

0

0

0

110

—

0

0

0

12 »)

0

—

0

0

0

13

0,001 Hamatoporph.

12Std.

keinesi

0

0

0

14

0,0005 .,

fj

dgl.

0

0

0

15

0,00025

ft

ff

0

0

0

16

0,00012

ff

0

0

0

9

0,0005 Hamatoporph.

12Std.

120 Min.

t 170

t300'

154 500

j 154120

BogenL

10

dgl.

dgl.

dgl.

t 175

•

300'

153 750

11

12

ff

•f

fj

ff

t 175
t 176

-

360'
• 360'

148500

148320

j 148 410

Die 8, in gesonderten KHfigen exponierten HSmatoporphy-
rinm&nse blieben w&hrend der 60 Minuten dauernden Belichtung
durch Sonnenlicht wechselnder Intensit&t (teilweise bewSlkter
Hinimel!), von ihrem Juckparoxysmus abgesehen, munter und
boten normale Temperaturen dar. Wie bei Bogenbelichtung,
so auch hier, sinkt mit der Uebertragung in das D&mmerlicht
eines wohlerw^rmten Raumes die K5rpertemperatur rapid bis
zum Tode ab. Auch hier derselbe Parallelismus zwischen
Intensitkt der Temperaturabnahme und Schwere des Erkran-
kungsbildes. Die in der letzten Kolonne berechneten Mittel-
werte zeigen, wie mit fallenden Htmatoporphyrinmengen, also
SchSdigung fallender Intensit§.t, auch diese absinken, die Art

1) Dieae Kontrollen erhalten 24 Stunden spater 0,0005 und werden
nach einem Intervall von 12 Stunden im Bogenlicht belichtet. Efifekt siehe
unter dem Stiich der Tabelle 1

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690

Hermann Pfeiffer,

der Messung also auch hier aufs beste sich bewfihrt. Die im
Dunkeln gehaltenen Eontrollen blieben vdllig ungeschSdigt,
ebenso die belichteten Normaltiere. Sie warden 24 Stunden
spHter mit je 0,0005 H&matoporphyrin gespritzt und 12 Stunden
spHter im Bogenlichte durch 120 Minuten belichtet Sie er-
krankten und starben in tjpischer Weise, ein Beleg daffir, dafi
ihr Ueberleben im Sonnenlichte nicht auf irgendwelche Zu-
fklligkeiten, sondern eben auf das Fehlen des fluoreszierenden
Stoffes zurdckgefflhrt werden mu 6.

Die weitaus grofiere Wirksamkeit des Sonnenlichtes ergibt
sich aus der Tatsache, dall eine Sensibilisierung mit 0,00012
Htmatoporphyrin bei einer Stunde Belichtung einen unfehlbar
tOdlichen Eingriff (f 147 600 E) bedeutet, wkhrend selbst zwei
Stunden Bogenlicht die Tiere nur in dem Ausmafie von 38475 E
zu schkdigen vermochte, also eine zwar immerhin erhebliche,
aber keineswegs letale Erkrankung verursachte.

Interessant im Hinblicke auf die Versuche von Raubi-
tschek und Horbaczewskiist das Verhalten der Versuchs-
tiere 9 und 10. Dies waren Mtiuse, die durch 4 Monate mit
zahlreichen anderen ausschliefilich durch Wasserpolenta in ab*
gedunkelten KellerrS.umen geffittert worden waren und dieses
Futter sehr gut vertragen batten. In diesen und in mehr-
fachen anderen, hinsichtlich der Belichtungsintensit&t allerdings
nicht differierenden Versuchen wurden die Tiere wie die sen-
sibilisierten MSuse belichtet ohne jeglichen Erfolg. Die Tiere
blieben bei Iknger fortgesetzter Beobachtungsdauer vollkommen
normal, zeigten auch nicht andeutungsweise das ftir den Nachweis
photodynamiscberWirkungempfindlichsteErkrankungssjmptom,
den Temperatursturz. Sie verhielten sich also durchwegs wie
normale Tiere. Auch die eben erw&hnten, konform mit H a u s -
mann bei belichteten, aber tlberlebenden HSmatoporphyrin-
mhusen beobachteten lokalen Affektionen blieben aus.

Aus diesen zahlreichen, durchaus negativen Versuchen,
von denen ich nur zwei hier angefdhrt habe, mdchte ich in
Anbetracht der Kfirze der Belichtungszeit keine wie immer
gearteten Schltlsse auf die Stichhaltigkeit der Befunde von
Raubitschek und Horbaczewski ziehen, insbesondere
in Anbetracht des Umstandes, dafi das von ihnen beschriebene
Erkrankungsbild fdr die weiCe Mans sich vdllig mit meinen

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 691.

eigenen Beobachtaogen deckt Vielleicht war meine Polenta
weniger farbstoffreicb. Eines mufi aber gesagt werden, dafi
wir in dem in Rede stehenden Futtermittel jedenfalls im Ver*
gleiche znm Hftmatoporphyrin nnd Eosin ein Sensibilisans
gegeben haben, welches hinsichtlich seiner photodjnamischen
Qualit&ten weit hinter diesen zurQcksteht DaB das refraktfire
Verhalten nicht aus einer Unempfindlichkeit der Tiere erklftrt
werden kann, geht aus dem Umstande hervor, daB dieselben
Tiere 12 Stunden nach Injektion von 0,0005 Hftmatoporphyrin
durch 2 Stunden Bogenlicht — also durch eine viel schw&chere
Lichtwirkung! — prompt zugrunde gingen.

Will man mit dem auf die Mans giftiger wirkenden und
schwHcher sensibilisierenden Eosin zn denselben klaren und
eindeutigen Resultaten gelangen, so empfiehlt es sich, jedesmal
zwischen Injektion und Belicbtnng 24 Stunden verstreichen zu
lassen, innerhalb welcher Zeit die dem Eosin selbst eignende,
nicht unbetrftchtliche, temperatnrherabsetzende Beeinflussung
der Kdrperwkrme der Tiere sich meist vOllig wieder ausge-
glichen hat, die Tiere aber noch stark sensibilisiert sind.

TabeUe XLIX.

Maaserersuche mit Eosin.

No.

Dosis

Inter-

vdl

Be-

lichtungs-

dauer

Tern-

peratur

Zeit

Reaktion

Mittel

1

0,01 Eosin

3Std.

120 Min.

.

120

.

720 Min.

t 136800

} 136 800

2

dgl.

3 „

dgL

-

■ 120

-

^ 720 „

t 136800

3

4

jy

yy

4 „

4 „

yy

.

130

160

.

1-720 „
1440 „

1 133 200
t 64800

99000

5

yy

6 „

yy

, "

120

•

660 „

1 140400

\ 74400

6

6 „

yy

35

480

8400

7

8

yy

yj

14 „

14 „

yy

yy

1110
25

t 720 „
480 ..

1140400
6000

73200

9

0,005’ko6in

24 „

yy

130

720 „

46800

46800

10

24 „

32

300 „

4800

4800

11

dgl.

yy

—

uberlebtl

12

—

—

iiberlebtl

13

yy

_

—

uberlebtl

14

yy

—

—

iiberlebt!

15

0,01 Eosin

248td.

—

0

0

0

0

16

dgl.

24 „

—

0

0

0

0

17

120 Min.

0

0

0

0

18

—

—

dgl.

0

0

0

0

19

—

—

yy

0

0

0

0

20

_

_

yy

0

0

0

0

21

—

—

yy

0

0

0

0

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692

Hermann Pfeiffer,

Setzt man unter diesen Kautelen die mil 0,01—0,005 Eosin
vorbehandelten, vdllig von dem toxischen Temperaturabfall
wieder erholten Versuchstiere und normalen Kontrollen dem
Bogenlichte aos, so ergeben sich, wie aus Tabelle XLIX hervor-
geht, qualitativ dieselben VerhSltnisse wie bei H&matoporphjriD.
Unter denselben Krankheitserscheinungen gehen die Tiere zu-
grunde. Im Zentrum des Erkrankungsbildes steht wieder ein
initialer, der Schwere des Verlaufes durchaus proportionaler
Temperatursturz, der aber wie dort in tddlichen F&llen um so
geringer ist, je rascber der Tod eintritt, bei SpILttod dieselben
extremen Grade annehmen kann.

Fiir die Bedeutung des Krankheitsbildes nicht unwesent-
liche Beobachtungen machte ich bei der Belichtung von solchen
Tieren, die kurz nach einer Eosininjektion durch diesen Farb-
stoff an sich, also zuntlchst ohne Lichtzutritt, toxisch
geschSdigt waren und subnormale Temperaturen von 34, 35 ** C
aufwiesen. Warden solche Tiere in das gekflblte Bogenlicht
gebracht, so bemerkte ich einen raschen, innerhalb V2
1 Stunde vollzogenen Anstieg ihrer Kdrperw&rme zur Norm,
wShrend die unbelichteten Kontrollen noch viele Stunden (bis
zu 12 und dardber) krank blieben und ibre tiefe K5rpertem-
peratur unverdndert beibehielten. Ja, in einzelnen Fdllen ge-
lang es mir, durch sofortige Belichtung die toxische Wirkung
des Eosin im Vergleiche zu Kontrollen desselben Gewichtes
abzuschwdchen oder ganz aufzuheben. Ich werde spfiter, nach
Besprechung der Meerschweinchenversucbe, auf diesen Umstand
znrQckzukommen haben.

•

Was die Obduktionsbefunde der im Lichte akut ein-
gegangenen Mduse anlangt, so fand sich bei Ifingerem Verlaufe,
wie das schon Horbaczewski f(ir die gleiche Species be-
schreibt, Erscheinungen einer oft hdmorrhagischen Gastritis
und Enteritis, mittlere bis schwere fettige Degeneration, ins-
besondere der Nieren, weniger ausgesprochen der Leber und
wieder jene pralle, ganz au^allende Fdllung der Gallenblase,
die auf eine Vermehrung der Gallensekretion hinweist. In
ganz akuten Ffillen fand sich ausschlieBlich eine Hyperdmie
der Bauchorganc.

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Weitere Beitrage zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. 693

2. Meerschweinchenversuche.

Zu diesen Versuchsreihen wurden ausschliefilich ausge-
wachsene, zwischen 400 bis 500 g schwere Meerschweinchen
gewShlt, einerseits um bei so kr&ftigen Tieren einen protra-
hierten Krankheitsverlauf erzielen zu kdnnen, andererseits um
ftkr die biologische Harnuntersuchung mdglichst reichliches
Material, fUr die Leukocytenztlhlung ohne ernstere SchUdigung
Blut gewinnen zu kbunen, was auch bei der photodjnamischen
SchUdiguDg dieser Tiere ebenso schwer geliugt wie im ana-
phylaktischen Shock, der Harn- oder H§.molysinvergiftuDg.
Hier wurden die Sensibilisierungsversuche ausschliefilich mit
HSmatoporphyrin und Eosin vorgenommen; ersteres erwies
sich wieder zweckentsprechender als letzteres. Der fluores-
zierende Stoff wurde in den gewShlten Versuchsmengen meist
subkutan unter die umffinglich rasierte Bauchhaut injiziert,
durch Massage verteilt und so lange mit der Belichtung ge-
wartet, bis eine Braunfarbung der Haut eingetreten war.

Die Belichtung wurde teils an mbglichst schonend und
locker aufgespannten Tieren, teils in hohen Glaszylindern vor*
genommen, in denen die Meerschweinchen gezwungen waren,
sich aufrecht zu halten. Ersteres ist der grofien Unruhe wegen
vorzuziehen, die sich der Tiere bemachtigt, sobald sie ins
Licht kommen. Das Bogenlicht war gleichfalls wassergekuhlt.
Bei aufgespannten Tieren wurde in den Sonnenlichtversuchen
durch konstante Berieselung mit Wasser einer dbermafiigen
Warmewirkung gesteuert.

Sowohl im Bogen- wie im Sonnenlicht zeigten die Meer¬
schweinchen aufier einer grSfieren Unruhe, Lichtscheu und
Juckreiz zunfichst keine Erankheitserscheinungen. Wurden
die Tiere aber aus der Lichtquelle entfernt, so begann sich
ein Symptomenkomplex rasch zu entwickeln, der durchaus
bis in alle Einzelheiten dem des schweren anaphylaktischen
Shocks entsprach.

Im Zentrum wieder ein initialer, enorme Grade erreichender
Temperatursturz, der bei tddlichem Verlaufe zwischen 10 bis
16® C ausmachte, in leichteren Fallen ausschliefilich Paresen
und Mattigkeit, in schwereren hochgradige Somnolenz, Igel-
stellung, Zusammenschauern, klonische Zuckungen, Abgang

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694

Herraann Pfeiffer,

von Kot, Polyurie, bei akutestem Verlaufe, der nur zweimal
zur Beobachtung kam, inspiratorische Dyspnoe, rasch auf-
tretende Krampfe bei maximaler Lungenblabung im Kadaver,
sowie eine den Tod liberdauernde Herzaktion. Es ist nicht
mdglich, derartige Erkrankungsbilder in irgendeiner Weise
von denen des anaphylaktischen Shocks abzugrenzen. Ihre
Uebereinstimmung ist eine frappante und vollstandige.

Tritt nicht der Tod ein, erholen sich vielmehr die Tiere,
so schwinden unter einem allmahlichen Anstieg der Temperatur
bis zur Norm die geschilderten Erkrankungssymptome. Aus-
nahmslos schliefit sich dann ein tagelang anhaltendes heftiges
Fieber an. Auch Spattod nach 2—3 Tagen wurde wiederholt
beobachtet, wobei es aber wieder zu einem, dem Tode weit
vorauseilenden Temperaturabfalle kommt.

Tabelle L.

Photodynamische Wirkung auf Meerschweinchen.

6

!z;

Vorbehandlung

Inter¬

val!

Belichtuiigsdauer
und Art

Temp.

Zeit

Min.

Shock

Klinische

Erscheinungen

1

2

3

0,1 Eosin subkutan
0,12 „

0,1 „

12Std.
1 „

1 „

2 Std. Bogenlicht

2 77 77

2 77 77

100

160

30

t 960
t 780
t 60

|Bild des schweren,
mrotrahiert zumTode
[iuhrenden anaphy-
1 laktischen Shocks

4

0,004

Hamatop.

a.

subk.

1

77

1 „

77

40

6000

12000

/Leichte Paresen und
\ Mattigkeit

Wie 1-3

5

_

38

77

2 „

77

100

t 780

6

0,005

Hamatop.

a.

subk.

2

77

2 „

77

41

600

12 300

/Deutliche Paresen
\ und Mattigkeit

7

0,001

77

2

77

105 Min.

77

12

360

8

0,005

77

77

2

77

2 Std.

17

100

t 480

TDeutl. Paresen und
< Mattigkeit, spater
( tagdang Pieber

9

0,005

>>

7 *

7 .’*

2

77

2 „

7 ?

33

480

7 920

10

0,005

77

iv.

2

77

2 „ Sonnenlicht

20

300

3000

11

0,005

77

subk.

2

77

2 .,

77

120

t 300

Wie 1—3

12

0,005

77

77

2

77

2 .,

77

120

t 720

dgl.

wechselnde Be-

,

wolkung

f Wiihrend der ganzen
lErkrankg. subnorm.

13

0,005

77

77

2

77

1 Std.Sonnenlicht

no

48 Std.

1 Temperatur von 33,0
\his 32,0®. Bild des

14

0,0025

77

7 »

77

2

77

2 „

77

120

36 „

schweren anaphy lak-
[ tischen Shocks

15

0,0025

77

77

77

-

—

bleibtimDunkeln

0

0

16

0,0025

77

77

77

-

—

»7 77

77

0

0

17

-

—

2 Std.Sonnenlicht

0

0

18

—

-

-

2 „

77

0

0

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Weitere Beitrage zur Kenntiiis der Ueberempfindlichkeit etc. 695

Auch hier wieder ist, wie aus der beigegebenen Tabelle L
hervorgeht, der Temperaturabfall nicht nur das erste, son-
dern in ganz leichten F&llen auch das einzige nachweisbare
Erkrankungssymptom, welches wieder jenen schon so oft
besprochenen absoluten Parallelismus zu den allgemeinen
Krankheitserscheinungen aufweist. In ErholangsflUIen babe
ich daraus die SchUdigung in der gewohnten Weise berechnet,
bei letalem Ausgange vorl&ufig lediglich Temperaturabnabme
und Zeitdauer der Erkrankung fixiert, da mir zur Bestimmung
der notwendigen Schwellenwerte eine grdfiere Zahl von Er-
fabrungen feblte.

Es braucbt nicbt erst bervorgeboben zu werden, daB mit
HBmatoporphyrin subkutan bebandelte, aber unbelicbtete Tiere
die Belicbtung anstandslos und obne Scbadigung ertrugen.
Nur mull man hier in Betracht ziehen, dall die Fesselung
solcher Tiere schon an sich aucb obne Belicbtung einen Tem¬
peraturabfall im Gefolge hat, der sich aber mit der Befreiung
der Tiere sofort auszugleichen beginnt und nacb kurzer Zeit
behoben ist, wihrend gerade erst nachher der, oft von einem
deletftren Ausgange begleitete, auf die photodynamische Schfi-
digung allein zurdckzufflhrende typische Temperatursturz sich
einstellt.

Wird der Injektionsort sensibilisierter Meerschwein-
chen nicht belichtet, so resorbiert sich innerhalb 24—48 Stunden
die Fltissigkeit vollsttlndig, wohl bleibt aber lange Zeit hin-
durch die FSrbung der Hautdecken zurQck. Wird sie aber
belichtet, so entwickelt sich — Hbnlich wie bei der Mans —
ein umfangreiches, schwappendes Oedem. Die Belichtungs-
stelle ist von auffallender K&lte. Bei Ifingerem Ueberleben
der Tiere entwickelt sich dann dort zun&chst ein mfichtiges
teigiges Infiltrat. Nach einigen Tagen beginnt die Haut
darQber zu nekrotisieren und gegen die nicht oder weniger
belichteten gesunden Hautpartien durch einen Entztlndnngs-
hof sich abzugrenzen. In grdilerem Umfange stirbt die Haut
ab, trocknet zu einem braunschwarzen, derben, lederartigen
Schorf ein, der sich spHter abstdBt und einem tiefgreifenden
GeschwQr mit aufgeworfenen Rfindern Platz macht. Erliegt
das Tier nicht einer interkurrenten Infektion, so heilt dieses
dann im Verlaufe von Wochen aus.

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696

Hermann Pfeiffer,

Der Sektionsbefund akut zugrunde gegangeaer Tiere
ergibt in den allerschwersten FUllen akute LungenblShung, die
bei nnr etwas protahiertem Krankheitsverlaufe fehlt, Hyper&mie
der Bauchorgane, sowie umf&ngliche Ekchymosen und oft
fl&chenhafte Blutungen im Magen, eine zum Platzen prall ge-
failte Gallenblase. Bei langsamer zum Tode fQhrender Er-
krankung regelm&fiig schwere bis schwerste Degeneration der
Nieren, weniger der Leber, Bilder einer schweren, der ana-
phylaktischen und ur^lmischen durchaus gleichenden Gastro*
enteritis, wie bei der Mans, also auch hinsichtlich der patbo-
logisch-anatomischen Erscheinungen eine vSllige Ueberein-
stimmung zu den Befunden im akuten pafenteralen Eiweifi-
zerfall.

Als xveiteres verl^lfiliches und empfindliches Kriterium des
parenteralen Eiweifizerfalls hatte ich, wie in den frdheren Ab-
schnitten des ausfQhrlicheren dargetan wurde, die Harn-
toxizitllt kennen gelernt, und es war bei dieser v511igen
Uebereinstimmung der Krankheitsbilder wohl der Mfihe wert,
zu versuchen, ob auch dieses Symptom dabei nicht im Stiche
iSBt. Hier einige an 11 Harnen gewonnene Ergebnisse:

Tabelle LI.

Harne photodynamisch geschadigter Meerschweinchen.

Ham von
VerBuchs-
tier

Tabelle L

Zeit der
Hara-
gewinnung
nach

iDjektioDsart und
Menge

Temperat.

Zeit

Min.

Shock

E in

1 ccm

Lokal-

wirkong

2

1— 4 Std.

2,0 ccm intrap. u. subk.

20

105

1050

525

N —1 +

5

1— 6 „

20

Jf 99

43

585

12577

6288

N-I +

6

1- 5 „

99 99 99

40

6(X)

12000

6000

—

6

7-20 „

99 99 99

23

300

3 450

1725

N —1 +

7

1- 6 „

2 0

1 99 99 99 99

30

450

6 750

3375

N —1 +

8

1- 3 „

' y| 99 99 99

18

225

2025

1012

N + I +

8

68 - 72 „

9 0

99 >> 99

29

300

4 350

2125

N + I +

9

1- 4 „

2,0 „ 8ui)kutan

—

—

—

N + I +

9

23-27 „

1,5 „ intrap. n. subk.

12

90

300

300

N-I —

11

1- 8 „

2,0 „ intraperitoneal

50

1 390

9 750

4875

—

13

1- 5 „

12,0 „ in trap. u. subk.

30

1 540

8100

4050

N-I +

Derartige Harne vermSgen nicht nnr, wie aus ihrer Aus-
wertung in Tabelle LI hervorgeht, in gleichartiger Weise wie
Verbruhungsharne und solche anaphylaktischer Tiere Meer¬
schweinchen zu sch&digen. Sie haben Giftwerte bis zu 6000 E

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 697

und darflber in 1 ccm und bewirken auch von der Subcutis
aus die Bildung lokaler Nekrosen und Infiltrate. Die weifie
Maus erkrankt auf die Einspritzung toxischen Materials
nnter Entwicklung des vielfach erdrterten Krankheitsbildes,
wobei der Harn gleichzeitig glatt, ohne lokale Verfinderungen
zu setzen, resorbiert wird. H&molytische oder agglutinierende
Eigenschaften konnten nicht beobachtet werden. Die ToxizitUt
ist dort wie hier, unabhUngig von den Eiweifikdrpern, an die
alkoholldsliche Harnfraktion geknfipft, auch unabhhngig von
dem HUmatoporphjringehalt des Harnes. Das geht erstens
aus der fehlenden Giftigkeit dieses K5rpers sowohl fQr Meer-
schweinchen als auch fQr MQuse selbst in relativ groilen Dosen
hervor und dann aus der Tatsache, dafl die Harne der zahl-
reichen unbelichteten und mit HQmatoporphyrin gespritzten
Kontrollen nur innerhalb normaler ToxizitQt sich bewegende
Werte bei fehlender lokaler Nekrose lieferten.

Es weist also auch das Kriterium der Harngiftigkeit in
ganz derselben Weise wie das Erkrankungsbild der photo-
dynamisch geschQdigten Tiere darauf hin, dall man es dabei
gleichfalls mit einem durch die Lichteinwirkung eingeleiteten
parenteralen Eiweifizerfall und dem damit verbundenen Ver-
giftungseffekt zu tun hat. Der Harn derartiger Tiere
zeigt dasselbe Ansteigen der ToxizitQt, wie jener
verbrQhter, anaphylaktischer oder hQmolysin-
vergifteter Tiere.

Von Interesse sind endlich auch die Ergebnisse von Ver-
suchen, die Zahl der Leukocyten unter dem EinfluB
photodynamiscber Wirkung nSher zu verfolgen. Da wieder-
holte Blutentnahmen ohne schwere SchQdigung dieses Versuchs-
tieres unmdglich waren, suchte ich zuerst an zahlreichen Blut-
proben normaler, mit HQmatoporphyrin gespritzter, aber
unbelichteter weiBer MQuse zu Mittelwerten fQr die Leuko-
cytenzahl der Kontrollen zu gelangen und sie dann mit jenen
von Blut zu vergleichen, die ich agonal photodynamisch ge-
schQdigten MQusen entnahm. Es zeigte sich wohl im all-
gemeinen eine nicht unwesentliche Verringerung der Zahl der
weifien Blutkdrperchen bei den letztgenannten. Ich mdchte
auf diese Resultate aber kein allzu groBes Gewicht legen, da
wohl nur die genaue Verfolgung der Leukocytenkurve bei ein

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698

Hermann Pfeiffer,

und demselben Tiere sichere Aufschliisse gewahren kann. Des-
halb moge es auch geniigen, wenn ich auf die Versuche an
der weiBen Mans nur in dieser kursorischen Art hinweise.

Wie wichtig die genaue Verfolgung der in Rede stehenden
Verhaltnisse an ein und demselben Tiere durch nioglichst
haufige Blutentnahmen ist, zeigte mir das folgende Versuchs-
beispiel, das ich in zahlreichen Versuchen ira Prinzipe wieder
bestatigt fand.

Von den Kurven der Fig. 11 entspricht die ausgezogene der Korper-
temperatiir eines mit 0,01 Hiimatoporphyrin vor 12 Stunden sensibilisierten
Meerschweinchens, die unterbrochene dem Resultat der Leukocytenzahlung

bis zum Exitus. Die Tem-
peraturen sind links, die
Leukocytenzahlen rechts
in der Vertikalen aufge-
tragen. Es zeigte sich, dafl
unmittelbar nach der Be-
lichtung trotz eines (durch
das Aufspannen bewirkten)
Teraperaturabfalles von
38,8 ® auf 37,5 ® die Leuko-
cytenzahl von 10000 auf
20000 angestiegen war, sich
also verdoppelt hatte. Als
nunmehr, der letalen Scha-
digung entsprechend, die
Korpertcmperatur ini dif-
fusen Tageslichte des Zim¬
mers rasch abfiel, schlug
auch die Leukocytose in
eine ausgesprochene und
schwere Leukopenie um, so
dafi 1 Stunde spater 14500,
4 Stunden spater 8500 und
agonal 7000 weifie Bhit-
korperchen gezahlt wurden.

Dieses Verhalten ergab sich, wenn ich unmittelbar nach
der Belichtung untersuchte, als ganz konstanter Befund in
6 weiteren Fallen, die in der Uebersichtstabelle LII hinsicht-
lich der wesentlichen Ergebnisse zusammengestellt sich finden.
Ausnahmslos wurde durch die Belichtung zunSchst eine aus¬
gesprochene Leukocytose gesetzt, die oft zu einer Verdoppelung
der Leukocytenzahl fuhrte, parallel mit dem Temperatursturz

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Weitere Beitriige zur Eenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 699

TabeUe LIL

Verhalten der Leukocyten bei photodynamischer Wirkung.

No.

Erankheitsverlauf
des Meerschweinchens

Initiale

Leukocytose

Terminale

Leukopenie

7

Tot

+ 10000

I -13000

9

Ueberlebt

+ 6750

keine

10

Tod nach 300 Minuten

+ 16500

— 20250

11

„ „ 720

+ 9000

— 1250

12

,, ,, 48 Stunden

+ 14500

— 27 750

13

„ „ 36 „

+ 20000

— 24 750

aber zur Leukopenie fiihrte, die manchmal nur relativ — in
Beziehung zum Werte der Leukocytose — war, manchmal
aber Werte erreichte, die zn weit niedrigeren Ziffern fQhrteu,
als der Ausgangszahl entsprach. Unbelichtete Tiere lieferten
nor ganz unbetrtlchtliche Schwankungen, wie sie in die Grenzen
der Versuchsfehler fallen.

Es ergibt sich demnach auch fhr die photo-
dynamische Wirkung eine intensive Bee in flussung
desBlutbildes imSinne einer Leukopenie, wodurch
eine weitere Analogie zu dem Symptomenkomplex des akuten
parenteralen Eiweifizerfalls hergestellt ist.

Wir finden aber bier insofern eine Umkehrung der dort
festgestellten Gesetzm&fiigkeit, als zun&chst eine initiate Leuko¬
cytose gesetzt wird, die terminal einem Verschwinden der
weiBen Blutkdrperchen aus der Blutbabn Platz macht. dort
aber bei den explosionsartig ablaufenden Vergiftungsbildern
der Anaphylaxie Oder bei einer pldtzlichen Ueberschwemmung
des Organismus mit flbergroBen Mengen von Gift, der Tempe-
ratursturz bezw. die Blutdrucksenkung zonBchst mit Lenko-
penie einhergebt und erst sekundtlr, nach MaBgabe wieder
eingetretener Erholong, wenn also nur kleinere Giftmengen
zur Wirksamkeit gelangen, der Umscblag in die Leukocytose
erfolgt. Wir finden also ganz analoge Verb&ltnisse wie bei
der Meerschweinchen- (Tier 4) und der KaninchenurSmie
(Tier 1 und 2 der Tabelle XI), also bei langsamer Ansamm-
lung des Giftes im Organismus.

Gerade diese Differenz auf der einen, diese Ueber-
einstimmung auf der anderen Seite spricht aber gleichfalls
eine beredte Sprache ftlr die Annahme, daB wir es auch bei

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700

Hermann Pfeiffer,

den photodynamischen Wirkungen auf lebende Organismen in
letzter Linie mit einer Intoxikation mit gleichartig wirkenden
Giftkdrpern, in diesem Sinne mit einer ^UrJlmie" zu tun haben.
Wie wir schon bei den M&useversuchen gesehen haben, tritt
bei schwilcheren Lichtwirkungen zunSchst ein Temperatur-
anstieg auf. So sehen wir, dafi beginnende, also noch schwache,
photodynamische Wirkungen steigernd, Starke herabsetzend
auf die Korpertemperatur wirken. Unter der Annahme einer
Intoxikation far diese Erkrankungsform ist das nach den Er-
gebnissen der Anaphylaxie, HUmolysin- und Harnvergiftung
ganz selbstverstOndlicb und stellt sogar die experimentelle Er-
fQllung einer notwendigen Forderung dar. Denn wir haben
auch dort gesehen, wie kleine Giftmengen Fieber und Leuko-
cytose, erst grSBere Temperatursturz und Leukopenie hervor-
riefen. Nun wurde speziell beim Meerschweinchen und seiner
hoheren Widerstandsfdhigkeit gegen die photodynamischen
Einflusse als konstant hervorgehoben, daB erst nach der Ent-
fernung aus dem Lichte eine SchBdigung der KdrperwBrme im
Sinne einer Abnahme erfolgt Der Gedanke, daB durch die
Lichtwirkung bei sensibilisierten Tieren erst kleine, spBter
grbBere Giftmengen als Folge eines bypothetiscben parenteralen
EiweiBzerfalles sich bilden und von der Subcutis aus erst all-
mahlich zur Wirkung kommen — die Annahme der Intoxi¬
kation immer vorausgesetzt! — ist demnach vollstOndig durch
die Tatsachen gesthtzt.

Fassen wir das Ergebnis des bis heute vor-
liegenden Tatsach enm ateriales zusammen, so
kommen wirnotgedrungenzuder experimentellen
Erhartung der von W. Hausmann hypothetisch er-
brtertenWesensgleichheitphotodynamischerund
thermischer SchBdigungen, demnach zur Folge-
rung, beide Prozesse seien als Autotoxikosen des
parenteralen EiweiBzerfalles anzusehen.

Die eingangs aufgestellten Postulate fttr die ZulOssigkeit
dieser Annahme sind im Versuche vSllig erfttllt worden. Wir
haben speziell bei der Wirkung fluoreszierender Stoffe im
Lichte nicht nur das im letzten Abschnitte als wesentlich be-
tonte Pbanomen der Hamolyse in vitro, wir haben auch das
so auBerordentlich typische Krankheitsbild des anaphylaktischen

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 701

Shocks, bezw. der akuten Urkmie bis in alle Einzelheiten so-
wohl fiir die Mans als auch fQr das Meerschweinchen festzu-
stellen, dieselben pathologischen Ver&nderungen an den Tier-
leicben nachweisen kdnnen, dieselben lokalen Effekte vorge-
funden, sondern sehen endlich auch als wesentliches Kriterium,
als Ausdrnck der akuten Ueberproduktion des Giftes das
spezihsche Ansteigen der Harngiftigkeit im Gefolge der Be-
lichtung gegeben.

Ich stehe deshalb nicht an, in dem eben ausgesprochenen
Sinne die photodynamischenWirkungen als Eiweifi-
zerfallstoxikose, als eine „Ueberproduktions-
Ur&mie** wie den VerbrQhungstod aufzufassen und mdchte
nur mit wenigen Worten auf die anderen, von Hausmann
erorterten Mdglichkeiten eingehen. Am wahrscheinlichsteo
scheint noch die primkre Blutschftdignng im Sinne einer par-
tiellen Ausschaltung der respiratorischen OberflSche zu sein^
da in vitro HSmoIyse bei photodynamischen Wirkungen un-
ausbleiblich ist, wie ich eigenen frflheren Versuchen entnehme.
DaB dieser Faktor in Form der „Blntzerfallsanilmie‘‘ hier in
Betracht kommt, glaube ich nicht Es mQBte zuerst bewiesen
sein, daB das, was ftir den Reagenzglasversuch gilt, auch in
vivo tatskchlich sich abspielt. Und dafQr haben die Tierver-
suche gar keine Anhaltspnnkte gegeben. Im Gegenteilel
Schon bei meinen VerbrQhungsversucben habe ich feststellen
kdnnen, daB der unmittelbar der Hitzewirkung folgende, leichter
noch an der Hkmoglobinurie als in dem H&moglobulingehalt
des Serums nachweisbare, durch die Hitze selbst bedingte
Blutkdrperchenzerfall um viele Tage (iberlebt wird, rasch und
vollsttindig aus dem Krankheitsbilde schwindet, demnach be-
deutungslos sein muB. Hier aber konnte, so oft auch darnach
gesucht wurde, ein betrkchtlicher Grad von Hkmoglobinurie,
als leicht kontrollierbarer und recht empfindlicher Ausdruck
der Blutschkdigung nicht nachgewiesen werden. Bluteindickung,
wie es den tllteren Verbrtihungshypothesen entsprilche, als
Todesursache anzunehmen, geht gleichfalls nicht an. Denn allein
die Tatsache, daB auch die Injektion von toxischem Harn nach
anaphylaktischem EiweiBzerfall, oder Htlmolysininjektionen die¬
selben, wie gesagt, mit nichts zu verwechselnden Krankheits-
bilder schafft, iSBt das ausschlieBen. Embolien und Thromben-

Zeltschr. f. ImmunlUttforschang. Orig. Bd. X. 46

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702

Hermann Pfeiffer,

bildungen fehlten trotz genauester Durchmusterung meiner Tier-
leichen bei der sofort vorgenommenen Obduktion ausnahmslos.
Das Blut wurde durchaus fldssig angetroffen, ja es war, wie
in einigen Versuchen an diesem, dazu wenig geeigneten Tier-
materiale (Meerschweinchen) beobachtet werden konnte, seine
GerinnungsfUhigkeit nicht unbetrSchtlich herabgesetzt. Shock
infolge des Juckreizes ist eine Verlegenheitshypothese, die
wohl angesichts der zahlreichen iiberzeugenden Momente, die
eine Autotoxikose direkt erweisen, ernsthaft tiberhaupt nicht
in Betracht kommt.

Wie wollte man Qbrigens mit diesen Annahmen die
schweren anatomischen VerEnderungen, wie die Magendarm-
blutungen, die Gastroenteritis, die Nierensch&digung halbwegs
befriedigend erkl&ren, deren Auftreten, wie ich schon vor acht
Jahren dargetan habe, nur durch die Wirkung eines akuten
Parenchjrmgiftes verstSndlich wird.

Die positiven experimentellen Ergebnisse sowie die Halt-
losigkeit anderer Theorien unterstOtzen in gleicher Weise die
Annahme einer Autotoxikose im akuten, photo-
dynamisch bewirkten Eiweiiizerfall fQr die unter-
suchten Species. Dafi aber ein solcher nicht nur in vitro
— Hfimolyse! — sondern tatsftchlich auch im lebenden Or-
ganismus eintritt, zeigen die Entztlndungs- und Nekrosen-
bildungen am Orte der Belichtung.

In aller Kflrze seien hier noch Versuche erw&hnt, die
eine Generalisierung des bisher an so differenten Beispielen
ans der Pathologie best&tigt gefundenen Satzes zum Ziele
hatten: „Bewirkt eine Schftdigung in vitro Hftmolyse, so er-
scheint bei Uebertragnng der Versuchsanordnung auf das
lebende Tier das Krankheitsbild einer Eiweifizerfallstoxikose^.

Es warden teils durch ausgedehnte Hautverfttzungen mit
Minerals&uren, teils durch subkutane Einspritzung freier
Mineralsfturen in Meerschweinchen die Tiere geschftdigt, die
dabei auftretenden Erankheitserscheinungen verfolgt und die
zur Zeit der Vergiftung sezernierten Harne in der gewohnten
Weise ausgewertet. Wie ic^hier nur vorlftufig feststellen
mdchte, erkrankten meine Versuchstiere nicht nur unter den-
selben typischen Erscheinungen des parenteralen Eiweifizerfalls

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Weitere Beitnige zur Kenntnis der Ueberempfiudlichkeit etc. 703

wie in den anderen bisher besprochenen Formen, sonderu
auch die anatomischen Erscheinungen, insbesondere die Ge-
schwtirsbildung im Magen-Darmtrakt, die schweren Nieren-
sch^digungen fehlten bei protrahiertem Krankheitsverlaufe in
keinem Falle und endlich, was ich als das Wesentlichste be*
zeichnen mbchte: der Harn zeigte ein Ansteigen seiner Giftig*
keit wie bei der Verbruhung, im anaphylaktischen Shock, bei
der Hamolysinvergiftung und bei photodynamischen Wirkungen.
In 2 Versuchsreihen, die mit eineni starken und einem sehr
schwach in vitro htlmolytisch wirkenden Quecksilbersalz in
iihnlicher Weise vorgenommen wurden, erkrankte die erste
Gruppe der Tiere unmittelbar auf die Einbringung des Giftes
unter schweren, die zweite unter ganz vagen Symptomen des
parenteralen EiweiBzerfalls, die wieder zurflckgingen, um
sptlter erst dem typischen, nunmehr in den Vordergrund
tretenden und letal endigenden Krankheitsbilde der Queck-
silbervergiftung zu weichen.

Endlich konnte durch die Injektion grOBerer Mengen
hypotonischer, sonst aber indifferenter FlQssigkeiten,^ z. B.
destillierten Wassers, gleichfalls bei Meerschweinchen ein Ver-
giftungsbild hervorgerufen werden, welches dem des anaphy¬
laktischen Shocks auffallend gleicht. Zu einem fihnlichen Er-
gebnis an der weiBen Mans ist mittlerweile A. I nab a ge-
kommen. In seinen Versuchen rief die wiederholte Injektion
hypotonischer, wfisseriger Ldsungeu bei diesem Versuchstiere
tiefen Temperaturabfall, Mattigkeit und Somnolenz hervor,
welche bei einer Isotonie des Materiales ausblieb.

Ich mochte aus den noch wenig zahlreichen, auch in den
Details noch nicht gentigend ausgearbeiteten Versuchen keinerlei
bindende Schliisse ziehen, aber doch die Frage zur naheren
experimentellen ErwSgung aufwerfen, inwiefern nicht auch ge-
wisse anorganische, das EiweiB des lebenden Tieres sch^digende
und zum Zerfall bringende Edrper, abgesehen von den ihnen
eignenden toxischen Sonderwirkungen — wie z. B. bei Queck-
silber- oder As-Verbindungen, bei der Phosphorwirkung —
und abgesehen von dem durch die spezifischen Gewebs-
schadigungen bedingten Funktionsausfall, Gifte des paren¬
teralen EiweiBzerfalles erzeugen und diese als Teilkomponenten
im Krankheitsbilde erkennbar werden. Einen ahnlichen Ge-

46*

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704

Hermann Pfeiffer.

danken hat jiingst Popielski ausgesprocben und es erscheint
nach dem hier Mitgeteilten durchaus nicht a priori aussichts-
los, auf dem eingeschlagenen Versuchswege im Einzelfalle das
VorhaDdensein, bezw. die Rolle dieses Faktors bei der Wir-
kung der sogenaiiDteii Parenchymgifte nHher zu verfolgen.
DaB innige Beziehungen zwischen S&ure- and Peptonwirkung
bestehen, warde iibrigens schon vor Jabren insbesondere durch
die grilndlicben Untersuchungen von Ellinger und Spiro
nachgewiesen. Sie zeigten, dafi Siurewirkung gegen Pepton,
Peptonwirkung gegen nachfolgende SSure zu schtttzen vermag.

VI. SohluBbemerkungen.

Da ich bei jedem der einzelnen Abschnitte die gewonnenen
Resultate gewQrdigt babe, geniigen hier ein paar zusammen-
fassende Hinweise.

Durch anscbeinend heterogene Sch§.diguugen des Tier-
kSrpers, durch beiderseitige Ureterenunterbindung, durch die
Verbriihung, den anaphylaktischen Shock, die Einverieibung
eines Normalhtimoljsins und die photodynamischeLichtwirkung
gelang es, im lebenden Organismus vdllig identische und
wohlcharakterisierte Krankheitsbilder zu erzeugen, die auch
hinsichtlich ihrer Residuen, der pathologisch-anatomischen Ver*
Snderungen, und insbesondere durch das Phihiomen der urn
ein Vielfaches gegeniiber der Norm gesteigerten HarntoxizitiLt
ein durchaus einheitliches GeprSge zeigen. Allen diesen Einzel-
f&llen gemeinsam ist aber, mit Ausnahme der einfachen Reten-
tionsur&mie, weiterhin der Umstand, daB durch die an sich
diiferenten SchSidigungen lebendes Eiweifi zugrunde geht, oder,
wie speziell fQr den Fall der Anaphylaxie sichergestellt ist,
abgebaut wird. Als Ausdruck dieses Zelltodes sehen wir in
vitro die WfirmehSmolyse fiir die Verbriihung, E. Fried-
berger und Moreschis H&molysebeschleunigung und Ver-
stiirkung sowie die spezifische Filllung der PrUzipitationsvorgSnge
zwischen Antigen und AntieiweiB bei der Ueberempfindlichkeit,
die HSmolyse durch normale Ambozeptoren + Komplement
bei der Rinderserumwirkung, die photodynamische Hftmolyse
beim Zusammenwirken von fluoreszierendem Stoff und Licht.

Ein wie wesentlicher Ausdruck die Vitroreaktion fflr die
im Tierkdrper gesetzten Stdrungen ist, ergibt sich speziell fQr
die Ueberempfindlichkeit und Normal-HQmolysinwirkung aus

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 705

der SpezifizitUt dieser Erscheinung, ein Punkt, der selbstver-
stftndlich id den beiden anderen bier behandelten Spezialffillen
nicht in Betracbt kommt. Ebenso wie bei der Ueberempfind-
lichkeit die Erankheitserscbeinungen im Tiere ansbleiben, so-
bald die Wirkung des Komplementes durch den Immunkdrper
auf das bei der Reinjektion einverleibte Antigen nicht mbglich
ist, also auch die Vitroreaktion ausbleibt (Reinjektion eines
nicht zur Vorbehandlung verwendeten, sondern eines ver-
scbiedenen Antigens), ebenso bleibt ein Tier selbst durch
grofie Mengen eines normalen H&molysins ungeschildigt, wenn
dieses keine Affinit&ten zu seinem Eiweiil, fQr den Fall des
Hfimolyseversuches in vitro, fflr seine Erythrocyten hat.

Es ist also ohne Zweifel durchans zul&ssig, als den wesent-
lichsten und gemeinsamen Punkt aller dieser scheinbar so
verschiedenartigen und einander dock hinsichtlich der Sym-
ptomatologie bis in alle Einzelheiten gleichenden Erkrankungen
den Nachweis einer primUren Eiweifischfidigung
zu setzen, als dessen sinnfSlligsten Ausdruck wir im Reagenz-
glase die HSmolyse, bezw. die PrSzipitation zu betrachten
haben.

Wir wissen nun schon von den alteren, Jahrzehnte zurttck-
liegenden Studien fiber Peptonwirkung her, daC in diesen
inkonstanten Gemischen der verschiedenartigsten Bruchstficke
des EiweiCmolekiils stets Gifte enthalten sind, die im Tier-
versuche dieselben Wirkungen auslosen, wie wir sie in den
geschilderten 4 Spezialfallen der Eiweifischadigung in vivo
wiedergefunden haben. Und wir konnten weiters feststellen,
dafi dort wie bier konstant und in inniger Beziehung zum
Auftreten und der Schwere der Erkrankung hn Harn Gifte
erscbeinen, die in Spuren als Ausdruck des physiologischen,
parenteralen Eiweillzerfalls den Organismus verlassen, bei
ihrer Retention aber das wesensgleiche Erankheitsbild der
Uramie erzeugen. Diese im UebermaB den Ebrper verlassen-
den Gifte vermbgen, in ein gesundes Tier fibertragen, ohne
in vitro eine Reaktion mit den Erythrocyten zu geben, die-
selben schweren Erkrankungen zu setzen, wie sie der Harn-
produzent durchgemacht hat. Sie kehren in normale Grenzen
zurhck, wenn vdllige Erholung eingetreten ist. Es ist dem-
nach durch die Summe aller dieser so wohl ineinander sich
einpassenden Glieder der Beweis als erbracht anzusehen, daB

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706

Hermann Pfeiffer,

%

wir in den erSrterten 4 Sonderffillen Autotoxi-
kosen vor uns haben, die als Resultante einer
verschiedenartig eingeleiteten und weitaus die
Norm iibertreffenden parenteralen SchSdigung
des EiweiQ aufzufassen sind. Dabei entstehen
Gifte,welchedieErkrankungssymptomeausl5sen
und dann durch den Harn den Organismus ver-
lassen. In Spuren bilden sich diese schon unter
physiologischen Bedingungen. Ihre Retention
fiihrt bier zum Krankheitsbilde der einfachen
Retentionsur&mie. Wir haben demnach bei den
genannten Toxikosen nichts anderes vor uns als
wesensgleiche, jedoch durch verschiedene Ur-
sachen bedingte ^Ueberproduktionsur&mien*^.

Es erQbrigt noch fflr den Einzelfall das Zustandekommen
der wesentlichen und prim9.ren EiweiBschSdigung zu skizzieren.
Fflr den Verbrfihungstod haben wir unzweifelhaft die physi-
kalisch-chemische Zerstdrung des Gewebes am Orte der Hitze-
einwirkung dafiir verantwortlich zu machen, ebenso wie fhr
die photodynamische Wirkung fluoreszierender Stoffe. Bei der
Anaphylaxie ist es der fermentative Abbau des Antigens der
Reinjektion, wahrscheinlich auch des Eiweifies des Versuchs-
tieres durch AntieiweiH + Komplement, bei der Wirkung der
Normalbfimolysine, die wahrscheinlich auch als fermentative
der Mitbeteiligung des Komplementes wegen aufzufassen ist^
die ausscblieBliche Zerstbrung von EiweiB des Versuchstieres.
Wie frtther schon angedeutet wurde, bleibt es weiteren Ver-
suchen anheimgestellt, zu entscheiden, inwieweit diese Gifte
als Teilfaktoren auch das Vergiftungsbild der Parenchymgifte
im weitesten Sinne des Wortes zu beeinflussen vermdgen.

Zusammenfassung.

Die vorliegenden Untersuchungen tiber Anaphylaxie
besch^tigen sich mit der Toxizitllt des Meerschweinchenharnes
in und auBerhalb des anaphylaktischen Shocks. Sie erbringen
den Nachweis, daB im Harn normalerweise in Spuren, im
anaphylaktischen Shock in betrachtlich gesteigerter Menge
Giftkorper ausgeschieden werden, die das Meerschweinchen
unter dem Bilde der Ueberempfindlichkeitserkrankung lokal
und allgemein zu schUdigen vermbgen. Das Ansteigen der

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Weitere Beitrage zur Keontnis der Ueberempfindlichkeit etc. 707

HarntoxizitM steht in nahen Beziehungen zur anaphylaktischen
Erkrankung, denn sie geht der Grdfie des Shocks parallel^
fehlt, wenn andersartiges Antigen als das der Vorbehandlung
injiziert wurde, fehlt ebenso bei der Antianaphylaxie. Pepton-
vergiftete Tiere zeigen denselben Anstieg ihrer Harngiftigkeit.
Das Ueberstehen einer Harnvergiftung hebt auf Oder schwScht
eine bestehende Anaphylaxie. Antianaphylaktische Tiere sind
onterempfindlich gegen das Harngift. Durch Nephrektomie
urUmisierte Meerschweinchen und Kaninchen zeigen dasselbe
Symptomenbild und dieselben pathologisch-anatomischen Er-
scheinungen, wie anaphylaktische. Die beobachtete Harngiftig¬
keit h&ngt nicht ab von der Konzentration der Harne an
Salzen, nicht von ihrem Gehalt an Eiweifi, nicht von ihrer
Reaktion, sondern vielmehr von zwei voneinander vollkommen
nnabh§,ngigen (lokal und allgemein wirksamen) Giftkompo-
nenten verschiedener Thermolabilitit, die wahrscheinlicherweise
abiurete Abkommlinge des im anaphylaktischen Shock abge-
bauten EiweiBmolekills und allem vorliegenden Tatsachen-
material nach wahrscheinlicherweise das Anaphylaxiegift sind.
Denmach ist die anaphylaktische Erkrankung aufzufassen als
eine „Ueberproduktionsuramie‘‘.

Dadurch wird in neuer Weise die Tatsache eines akuten
parenteralen Eiweifizerfalles im anaphylaktisch erkrankten Tiere
sichergestellt. Als Kriterien dieser EiweiBzerfallstoxikose hat
sich die Trias: Erkrankungssymptome, pathologisch-anatomische
Verlhiderungen und gesteigerte HarntoxizitBt durchaus bew^lhrU

BezQglich der Hftmolysin- (Rinderserum) Ver-
giftung ergab es sich neuerdings, daB, wie schon Ultere
Versuche lehrten, die dabei zu beobachtenden Krankheits-
erscheinungen nicht nur fthnlich, sondern identisch sind mit
jenen des anaphylaktischen Shocks. Ebenso sind die patho-
logisch-anatomischen Befunde hier wie dort dieselben. Auch
hier ist das neu aufgefundene Kriterium der gesteigerten
Harntoxizit^t in gesetzmEBiger Weise nachweisbar, indem mit
artfremdem, hSmolytischem Serum vergiftete Meerschweinchen
dieselbe Harngiftigkeit erkennen lassen, wie anaphylaktische.
Fehlen bei Injektion inaktivierter Seren die Krankheitserschei-
nungen, so bleibt auch die Harngiftigkeit in normalen Grenzen.
Eine vorausgehende Harnvergiftung schiltzt vor nachfolgender
HBmolysinwirkung und umgekehrt. Das bei der Anaphylaxie

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708

Hermann Pfeiffer,

voD den Harngiften Gesagte gilt in derselben Weise auch
Mer. Es ist demnach auch die Vergiftung mit hSmolytischem
Binderserum als Eiweifizerfallstoxikose, demnach als „Ueber-
produktionsur&mie*^ aufzufassen. Seine Giftwirkung ist nicht
auf prftformiert im htlmoljtischen Serum vorhandene Gifte
zurhckzuffihren, sondern diese, wirkungsgleich mit den Pepton-
giften, entstehen erst durch die Einwirkung von artfremdem,
fQr die betreffende Tierspecies wirksamem Komplement +
Bormalambozeptor auf das EiweiB des Versuchstieres (Meer-
schweinchen), womit alte Anschaunngen von Do err auf neuen
Versuchswegen erhftrtet wurden.

Die photodynamischen Lichtwirkungen nach
Injektion fluoreszierender Stofife auf Sllugetiere (Maus und
Meerschweinchen) erzeugen dasselbe identische Krankheitsbild,
wie es bei der Anaphylaxie, der H&molysinvergiftung und
frilher schon beim VerbrQhungstode beobachtet wurde. Die
pathologisch - anatomischen Ver^nderungen der Tiere sind
gleichfalls identisch mit jenen. Der Harn derartiger Tiere
vermag im Gegensatz zum normalen die Maus unter einem
Krankheitsbilde zu tdten, welches von dem des photodynamisch
geschMigten nicht unterschieden werden kann, aber auch
vbllig kongruent ist mit dem Bilde des anapkylaktischen
Shocks, der Hamolysin- und Peptonvergiftung. Das Ansteigen
der Harngiftigkeit erfolgt gleichsinnig wie beim parenteralen
Eiweillzerfall der Anaphylaxie nur bei der Kombination Licht-
wirkung + fluoreszierendem StoflFe, fehlt aber, wenn nur einer
<ler beiden an sich unschadiichen Faktoren auf das Tier ein-
wirkt. Er stellt demnach etwas fOr die photodynamische
Wirkung Spezitisches dar.

Aus diesen Tatsachen ergibt sich, dafi das Wesen der
photodynamischen Schadigung gleichfalls als eine Toxikose des
parenteralen Eiweifizerfalles aufzufassen ist, als deren sinn-
falliger Ausdruck in vitro wir die ^photodynamische Hamolyse“
(H. Pfeiffer, Sacharoff und Sachs) gegeben haben.

Diese Toxikose ist hinsichtlich der dabei zur Wirkung
gelangenden Kdrper als wesensgleich mit der Anaphylaxie-,
Hamolysin-und Peptonvergiftung als nUeberproduktionsuramie"
zu bezeichnen und nimmt nur hinsichtlich der Genese der
GiftkOrper eine Sonderstellung gegenflber diesen ein.

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Weitere Beitrage zur Kenntnis der Ueberempfindlichkeit etc. 709

Die Versuche insgesamt bilden eine BestStigung frttherer
Ergebnisse tiber die Pathogenese des prim&ren Verbrdhungs-
todes, denen nach diese thermische und parenterale SchSdigung
lebender Eiweifikdrper gleichfalls aufgefafit werden mufi als
€ine Toxikose des parenteralen Eiweifizerfalls.

Endlich wird fiber Versuche berichtet, welche es nahelegen,
•dafi auch bei der Eiowirkung in vitro Hfimolyse hervorrufende
anorganische Gifte auf das lebende Tier unter den zur Be-
obachtung kommenden Erkrankungssymptomen der Faktor
nparenteraler Eiweifizerfall** im Sinne einer wesensgleichen
Oder wesensfihnlichen Toxikose neben anderen eine Rolle spielt.

Llteratarrerzelehiiis.

Abderhalden und seine Mitarbeiter, Zeitschr. f. physiol. Cbemie,
1909, 1910, 1911.

Abelous und Bardier, Referat im Biochem. Centralbl., Bd. 7 und 8.
Biedl und Kraus, Wiener klin. Wochenschr.. 1909 und 1910, No. 11.

-Handbuch der Technik und Methodik der Immunitatsforschung,

ErgiLnzungsband, Jena, Fischer.

-^itschr. f. Immunitatsf., Bd. 4, 1909, Heft 1 und 2; Bd. 7, 1910,

Heft 2 und 3.

Birkelbach, W., Inaug.-Diss. Marburg, 1910.

— Zeitschr. f. exp. Pathologie und Therapie, Bd. 8.

D ecker, Berl. klin. Wochenschr., 1887.

Doerr und Moldovan, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 5, 1910, Heft 2
und 3; Bd. 7, Heft 3.

— und Russ, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 3, 1909, Heft 7.
Edenbuizen, Zeitschr. f. rationelle Medizin, Bd. 17, 1863.
Friedberger, E., Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 2, 1908, Heft 2; Bd. 3,

1909, Heft 7; Bd. 4, Heft 5.

— Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 7, Heft 5; Bd. 8, Heft 2.

— und Bezzola, Centralbl. f. Bakt., Bd. 46, 1908.

— und Burkhardt, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 4, Heft 5.

— und GrSber, Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 9, Heft 1.

— und Hartoch, ebenda, Bd. 3, Heft 6; Bd. 4, Heft 1.

— und Jerusalem, E,, l^tschr. f. Immunitatsf., Bd. 7, Heft 6.

— und Mita, S., Versammlung deutscher Naturforscher und Aerzte in

Konigsberg 1910.

— und Moreschi, Centralbl. t Bakt., Bd. 45.

— und Vallardi, C., Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 7, Heft 1 und 2.
Oraetz, Fr., ebenda, Bd. 8, Heft 5 und 6.

Hausmann, W., Biochem. Zeitschr., Bd. 12, Heft 3 und 4; Bd. 15,
Heft 1: Bd. 16, Heft 4 und 5; Bd. 17, Heft 1-3; Bd. 30, Heft 3 und 4.

— Wiener klin. Wochenschr., Bd. 21, No. 44; Bd. 22, No. 52; Bd. 23, No. 36.

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710 iffer, Weitere Beitrage zur Kcnntnis der Ueberempfindlichkeit.

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Hel8tedt, Arch. f. klin. Chirurgie, Bd. 79, Heft 2.

Horbaczewski, „Da8 osterr. Sanitatsweseu'-. Beilage zu No. 31, Jahr-
gang 1910.

Jehn, W., Zeitschr. f. exp. Pathologie und Therapie, Bd. 6.
Joachimoglou, G., Zeitschr. f. Immunit&tsf., Bd. 8, Heft 4.

In aba, A., Zeitschr. f. Hygiene u. Infektionskrankheiten, Bd. 68, Heft 1.
Kraus, B., 2^it8chr. f. Imrounitatsf., Bd. 8, Heft 3.

— und Mfiller, P., ebenda, Bd. 8, Heft 3.

Lesser, Virchows Archiv, Bd. 79 und 81, 1880.

— Archiv f. Anatomie und Physiologic, 1881, p. 236.

Modrakowski, G., Archiv ffir die gesamte Physiologic, Bd. 124.
Pfeiffer, H., Wiener klin. Wochenschr., 1905, No. 9 und 13.

— Virchows Archiv, Bd. 93, 1905.

— Zeitschr. f. Hyg. u. Infekt., Bd. 51, 54, 56, 57.

— Wiener med. Wochenschr., 1907, No. 8 und 9.

— Mitteilungen aus den Grenzgebieten der Medizin und Chirurgie, Bd. 18,

1907, No. 3.

— Wien. klin. Wochenschr., 1909, No. 1; 1910. No. 42; 1911, No. 1 u. 16.

— und Mita, S., Zeitschr. f. Immunitatsf., Bd. 4, Heft 4; Bd. 6, Heft 1

und 5.

Pick, E., und Spiro, K., Zeitschr. f. phys. Chemie, Bd. 31, 1909, p. 235.

(Hier die altere Peptonliteratur.)

Popielski, Centralbl. f. Physiol., Bd. 24, 1911, No. 24.

— und Panek, Arch. f. d. ges. Physiol., Bd. 128, 130; Centralbl. f. Phys.,

Bd. 24, No. 15.

Raubitschek, Centralbl. f. Bakt., 1910, Bd. 57.

Reiss, Arch. f. Dermatologie und Syphilis, 1893.

Sacharoff und Sachs, Mfinch. med. Wochenschr., 1905, No. 7.
Sauerbruch, F., und Heyde, M., Zeitschr. f. exp. Path. u. Therapie.
Bd. 6, 1909.

Schenk, F., Wiener klin. Wochenschr., 1911, No. 15.

Spiro, K., und Ellinger, A., Zeitschr. f. physiol. Chemie, Bd. 23, 1897,

p. 121.

Stockis, E., Archiv intemationale de Pharmakodynamie et de Therapie,
1905.

Studzinski, J., Centralbl. f. Physiol., Bd. 23, No. 22.

Tappeiner, Mfinch. med. Wochenschr., 1900, 1901, 1904.

— und Jesionek, ebenda, 1903.

— und Jodlbauer, ebenda, 1904.

Uhlenhuth, P., Versamralung deutscher Naturforscher und Aerzte in
Breslau, 1904.

— Zeitsc-hr. f. Hyg. u. Infekt.. Bd. 26.

— und Haendel, Zeitschr. f. Immunitiitsf., Bd. 4, Heft 6.

— und Moxter, Fortschritte der Medizin, 1898, 1910.

Weichardt, W., „Ueber Ermfidungsstoffe", Stuttgart, Enke. 1910.

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Biedl u. Kraus, Bemerkungen zu der Arbeit von H, Pfeiffer. 711

Nachdruck verboten.

Bemerkungen zu der Arbeit you H. Pfeiffer: „Weitere
Beitrftge zur Eenntnis der Ueberempfindllchkelt und
anderer Toxikosen des parenteralen Eiwelfizerfalls*^

Von A. Biedl and B. Kraos.

(Eing^angen bei der Bedaktion am 10. Juli 1911.)

Zu den nachfolgenden Bemerkungen sehen wir uns ver-
anlafit, um die von H. Pfeiffer gegebene und den Tat-
sachen nicht entsprechende Darstellung der Entwicklung der
Anaphylaxielehre richtig zu stellen.

Es sei hier festgestellt, dafi wir zuerst die Analogie der
Peptonvei^iftung und der Serumanaphylaxie experl-
mentell bewiesen haben und daB vor uns in der Ana¬
phylaxielehre die Frage des Entstehens von Elweifi-
abbanprodukten rom Peptoncharakter von niemandem
erwShnt wnrde. Durch unsere Versuche angeregt, haben
H. Pfeiffer und Mita dann erst die PeptonimmunitSt und
ihre Beziehungen zur Anaphylaxie beim Meerschweinchen
studiert und Versuche unternommen, den Abbau des ein-
gefflhrten Antigens auch mit Hilfe der inzwischen bekannt
gewordenen optischen Methode Abderhaldens nachzu-
weisen.

Weiter sei konstatiert, dafi die Identit&t des Vergiftungs-
bildes bei der Anaphylaxie und bei entsprechend
groBen intravends injizierten Dosen von Witte-
pepton auch beim Meerschweinchen von uns zum ersten
Male bewiesen wurde.

Es zeigt von einer eigenartigen BenQtzung der Literatur,
wenn Pfeiffer bei der Znsammenstellung des bisher fiber
die Peptonvergiftung bekannt gewordenen Tatsachenmaterials
den die intravenbse Peptonvergiftung der Meerschweinchen
charakterisierenden Bronchialmuskelkrampf nicht mit einem
Worte erw&hnt, obwohl die grdBte Zahl seiner Versuche sich
auf das Meerschweinchen bezieht. In vSlliger Verkennung

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712

A. Biedl und R. Kraus,

der tatsfichlichen Verh&Itnisse fQhrt er als Sjmptome der
Peptonvergiftung auch beim Meerschweinchen: 1) die durch
L&hmuDg vasomotorischer Endapparate bedingte Blutdrock-
senkuDg; 2) die Leukopenie mit sekundfirer Leukocytose und
3) die Ungerinnbarkeit des Blutes an. Dafi das Pepton
bei Meerschweinchen eine Blutdrncksenkung
hervorruft, ist bisher von niemandem behauptet
w or den. Die Blntdracksenknng bei der Serumanaphylaxie
des Meerschweinchens haben zwar Friedberger und Har-
toch beschrieben, doch hat schon H. Braun bemerkt, daH
die Blutdrncksenkung nicht das Wesentliche der Vergiftung,
sondern nur ein Zeichen des eintretenden Todes sei. Auer
und Lewis fanden, dafi im anaphylaktischen Shock des Meer¬
schweinchens zun&chst der Blutdruck eine sogar betrftchtliche
Steigerung aufweist, dann erst im Verlaufe der nSchsten
Minuten absinkt. Die toxikologische Analyse l&Bt
keinen Zweifel darfiber, dafi im akut anaphylak¬
tischen Shock der Meerschweinchen ebenso wie
bei der Peptonvergiftung dieser Tierart nicht
eine primftre Zirkulationsfindernng, sondern
eine schwere Respirationsstdrung vorliegt, die
bei der fortschreitenden Erstickung zu einer Ab-
nahme des Blutdruckes fiihren muB. In Ermangelung
eigener Untersuchungen sucht H. Pfeiffer unsere Kritik
an den Angaben Friedbergers fiber die Blutdrncksenkung
als unrichtig hinzustellen (^sie negieren zu Unrecht die Er-
gebnisse Fried berger s^). Begreiflich erscheint es aller-
dings, daB H. Pfeiffer die Blutdrncksenkung zur besseren
Fundiernng seines Temperatursturzes willkommen wfire. Ist
doch nach H. Pfeiffer ^jede Blutdrncksenkung aus be-
greiflichen Grfinden auch von einer Temperaturabnahme ge-
folgt“.

In bezug auf die weiteren Symptome der Peptonvergiftung,
Leukopenie, Ungerinnbarkeit des Blutes sei nur darauf hin-
gewiesen, daB die von H. Pfeiffer aus der Literatur zu-
sammengestellten Angaben sich nur auf den Hund beziehen
und daB das Vorkommen dieser Erscheinungen bei der Pepton¬
vergiftung der Meerschweinchen und Kaninchen bisher nicht

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Bemerkungen zu der Arbdt von H. Pfeiffer.

713

nachgewiesen wurde. Diese Differenzen in der Wirkungsweise
derselben Substanz warden von mehreren Autoren ausdriick-
lich betont.

H. Pfeiffer wirft uns vor, daB wir unseren Befund,.
die anaphylaktiscben Meerschweinchen sterben im Gegensatze
zum Hnnde an Ersticknng, zu Unrecht generalisieren, nach-
dem derselbe nach seinen Erfahrnngen nach intraperitonealer
Antigenznfuhr kaum je Bedentnng erlangt Wir haben aber
nieroals behauptet, daB der Tod nach peritonealer Injektion
gleichfalls durch Bronchialmuskelkrampf bedingt ist, wenn
wir auch anf Grund eigener Erfahrnngen sagen kGnnen, daB
man den akuten Tod auch nach peritonealer ebenso wie
nach cerebraler Injektion unter schweren Erstickungs-
erscheinungen eintreten sieht and bei der Obduktion di&
Lungenbl&hung vorfinden kann.

Wenn H. Pfeiffer unsere Angabe, daB der Tod im
anaphylaktiscben Shock durch eine geblfthte und anfimische-
Lunge charakterisiert ist, zurOckweist, so befindet er sich in
Uebereinstimmung mit Friedber ger undGraetz, doch im
Widerspruch mit seiner eigenen Angabe, derznfolge man beim
blitzartigen Tode die Lungenbl&hung mit einer Anfimie und
beim l&ngeren Verlaufe der Vergiftung mit Hyperftmie und
Oedem vergesellschaftet findet.

Eine weitere Veranlassnng zu diesen Bemerkungeu bildet
auch die Polemik fiber den Temperatursturz, welche H. Pfeiffer
gegen uns begann, obwohl wir niemals gegen die Allgemein-
gfiltigkeit. Brauchbarkeit dieses Symptomes Einwfinde erhoben
haben. In unserer experimentellen Analyse der anaphylak-
tischen Vergiftung (siehe Ergfinzungsband des Handbuches
der Technik und Methodik der Immunitfitsforschung) haben
wir den Temperatursturz als ein Symptom der Anaphylaxis
zumeist mit seinen eigenen Worten beschrieben. Es heiBt
in unserer Arbeit: „Aaf die Frage, ob dem Temperatur¬
sturz nur diagnostische Bedeutung zukomme, soli bier nicht
eingegangen werden. DaB der von H. Pfeiffer gefundene
Temperatursturz nicht die Folge einer primfiren Herabsetzung
des Blutdruckes ist, geht aus dem Vorangehenden hervor.“
Endlich sagen wir: ebenso kann man H. Pfeiffer und

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714 Biedl u. Kraus, Bemerkungen zu der Arbeit von H. Pfeiffer.

Mita nicht zustimmen, wenn sie im Temperatursturz nicht
Dur das empfindlichste, sondern auch das einzige Symptom
eioer Ueberempfindlichkeit sehen wollen. Auch zu dieser Be-
merkuDg hielten wir uns fdr berechtigt, nachdem wir im
Bronchialmuskelkrampf des Meerschweinchens und der vaso-
paralytischen Blutdrucksenkung des Hundes noch andere ob-
jektive und empfindliche mefibare Symptome anzufflhren in der
Lage waren. Wir haben, dies sei ausdriicklich betout, nirgends
die Angabe gemacht, daB dem anaphylaktischen Temperatur¬
sturz keine allgemeine Gdltigkeit zukommt.

Ob H. Pfeiffer bei dieser Sachlage berechtigt ist, .„das
unbegrtindete Urteil von Biedl und Kraus in alien Punkten
entschieden zurflckzuweisen**, kOnnen wir getrost dem Urteile
der Fachgenossen tiberlassen. Was aber wir auf das
energischste zurtkckweisen wollen, ist der in der
wissenschaftlichen Diskussion nicht QblicheTon,
welchen H. Pfeiffer anschldgt.

Frommannscho Buchdruckerei (Hermann Pohle) in Jena. — :j956

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Zfilsrhr, f. Inn)fHriftillsforsrlnintj. Grig, B(L X,

Tafcl L

Anna F., 28. I. 11. Janke Schultcr, 5 Tji^e nach der Revaccination
(Protokoll la—d).

Ohen die drei Inipfstellen, darnnter die Injektionsstelle. Die erste
Iinpfstelle links olx^n hat niir Pajxjlbildiin^ ergeben, an den beiden
anderen sicht man kleine Papilien von der Farbe der Haut. iimgeben von
vcrhiiltiiismiibig sehr groBer Area; diese ist iioch hochrot, wiihrend die
Rotnng an der I n jc k tion sstel le der verdiinnten, sterilen Lyniphe bereits
abgeblaBt ist.

V. Pinpiet. Verlag von Gustav Fischer in Jeua.

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Zeilsrkr. f. ImnmniliHsfctrscIning. Orhj. Bd, X,

Taffi IL

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Anna F., 2G. I. 11. Linke Schniter, 8 Tage nach der Revaceination.

Niir die dritte Iinpfstelle hat sieh noch welter entwickclt; sie zeigt
jetzt cine gelbliche Papille von 5,5 mm Durchmesser, umgchen von hoch-
roter Areii. Die Papille der zwciten Impfstelle ist im Eintrocknen l)c-
griden, die Pajx)! der ersten Impfstelle (links) sehr iindeutlieh, ebenso die
Injektionsstelle.

V. Pirquet. Verlag von Gustav Fischer in Jena.

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Zeitsrhr. /! Ltnnunitatsfofsrhung, Orig. Bd, X.

TafrI III.

Anna F., 31. I. 11. Rechtc Sohulter, 24 ytunden nach der zweMten
Kcvaccination (Protokoll le—h).

Allc drei Impfstellen zeigen eine leiehtv Rotiing (Friihreaktion), die
Injektionsstelle eine ausgedehnte Areabildiing.

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V. Pirquet. Verlag von Gustav Fischer in Jena,

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ZcUsrhr. f. Iminunitdisforscliumj Onij. Bd. X.

Tafd IV.

1

Martha R, 23. T. 11. 5 Tage nach der ersten Revaccination.
Resohleii n igte Reaktion. Maulbeerform. (Protokoll Ila, b, c, d).

Wiihrend die beiden Irnpfstellen rechts iind links nur einen kleinen
hellroten Hof haben, geht cine intensive Area von der mittleren Iinpfstellc
aus. Diese zcigt keine grangelbe Papille, sondern die Maulbeerform der
Rcvaccination: stark erhaben, rotbraun, aus den einzelnen Hautpapillen
bestehcnd. Ringsherum ist die inncre Area cl>enso gekornt und hochrot,
die Farbe nimmt gcgen die Peripheric zu ab. Rechts iintcn ist der Rest
der Injektionsstelle d.

V. IMrqiiet. Verlag von (iustav Fischer in Jeiin.

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Zeilsrhr, f, Innnunitatsf<n'srJiunii. Onr], B(L X.

Tafcl r.

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Martha P., 31. I. 11. 1 Tag nach dcr zweiten Kcvaccination.
Stichreaktion. (Protokoll He, f, g, h.)

Die drei Impfstellen sind vollkommen negativ. Daninter ist die J^telle
der intrakutanen Injektioii hoehrot >vic ein AbszeB iiiid zeigt deutlich den
Piinkt des Einstichs.

V. Pirqiiet. Verlag von Gustav Flselier in Jena.

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Tiiirje, Intrapiilnionale Immunisieriing mit Diphtherietoxin

,,j4iv Fischer iii Jeiiai,

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Apoiant Df^p^Umpfungen von Tummn,

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Apolani Dۤp^mpf%mgtn pon Tumorwn.

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Apolant D^m^Umpfkngem wm Tumorwn,

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Zeitfichrift f. Immunitatsforschunff. I. Teil. Oi’ig. Bd. X.

Fig. 4. Fig.

Verlag von Gustav

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Tiiirje, Intrapulmonale Immiinisieriing mit Diphthcrietoxin.

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Apolant Ik^q^UmT^ngen wm Tumarm.

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Zeitschriftf. Immunitdtsforschung I. Teil Orig. Bd.X. Apolant ooppeumpfung^n

Tab. 8. Mausekarzinom ii.

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Verlag tod Gustav Fischer in Jena.

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Zeitschrifif.Imnmnitdtsforschung I. Teil Orig. Bd. X.

Tab. I. Impfiing am

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Apolant u. Marks, GesehwuistimmuTiitdt.

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Zeitschrift/,Iinmunit&ts/orschung I. Teil Orig. Bd.X.

Tab, n. Impfung: am lo. i<

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Apolant u. Marks, Creschwuistimmuniutt.

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mit Carcinom 5.

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Zeitschr^f.Immunitdtsforschung I. Teil Orig. Bd. X.

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Apolant u. Marks, Gesehwulstimmunitat,

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