Archiv für Hygiene

This is a digital copy of a book that was preserved for generations on library shelves before it was carefully scanned by Google as part of a project
to make the world's books discoverable online.

It has survived long enough for the Copyright to expire and the book to enter the public domain. A public domain book is one that was never subject
to Copyright or whose legal Copyright term has expired. Whether a book is in the public domain may vary country to country. Public domain books
are our gateways to the past, representing a wealth of history, culture and knowledge that's often difficult to discover.

Marks, notations and other marginalia present in the original volume will appear in this file - a reminder of this book's long journey from the
publisher to a library and finally to you.

Usage guidelines

Google is proud to partner with libraries to digitize public domain materials and make them widely accessible. Public domain books belong to the
public and we are merely their custodians. Nevertheless, this work is expensive, so in order to keep providing this resource, we have taken Steps to
prevent abuse by commercial parties, including placing technical restrictions on automated querying.

We also ask that you:

+ Make non-commercial use of the file s We designed Google Book Search for use by individuals, and we request that you use these flies for
personal, non-commercial purposes.

+ Refrain from automated querying Do not send automated queries of any sort to Google's System: If you are conducting research on machine
translation, optical character recognition or other areas where access to a large amount of text is helpful, please contact us. We encourage the
use of public domain materials for these purposes and may be able to help.

+ Maintain attribution The Google "watermark" you see on each file is essential for informing people about this project and helping them find
additional materials through Google Book Search. Please do not remove it.

+ Keep it legal Whatever your use, remember that you are responsible for ensuring that what you are doing is legal. Do not assume that just
because we believe a book is in the public domain for users in the United States, that the work is also in the public domain for users in other
countries. Whether a book is still in Copyright varies from country to country, and we can't off er guidance on whether any specific use of
any specific book is allowed. Please do not assume that a book's appearance in Google Book Search means it can be used in any manner
any where in the world. Copyright infringement liability can be quite severe.

About Google Book Search

Google's mission is to organize the world's Information and to make it universally accessible and useful. Google Book Search helps readers
discover the world's books while helping authors and publishers reach new audiences. You can search through the füll text of this book on the web

at jhttp : //books . qooqle . com/

>*

* t ■

* •

■k w A

II

s "

El H

■ 4 ti

- : "

HM

rr l

BOSTONIENSIS •

t*.******™*.** ** n *tm*«***Hx***'

-}:}XXV-}-V-\Hjn-T

jj» , — r-^r

2

1 * i

^ ffX OOMOT... ~^iwiJ|

■ rf» Wm mi

rrr-^TT^

ARCHIV

FÜR

HYGIENE.

(BEGRÜNDET VON MAX t. PETTENKOFER.

UNTER MITWIRKUNG

VON

Prof. Dr. 0. BOLLINGER, Mönchen ; Prof. Dr. BONHOFF, Marburg a. L. ; Prof. Dr. R. EMMERICH, München ;
Prof. Dr. F. ERISMANN. Zürich ; Prof. Dr. HEIM, Erlangen; Prof. Dr. F. HUEPPE, Prag; Prof. Dr. KABRHEL,
Prag; Prof. Dr. F. KRATSCHMER, Wien ; Prof. Dr. K. LEHMANN, Wartburg; Prof. Dr. A. LODE, Innsbruck ;
Prof. Dr. L PFEIFFER. Rostock; Generalarzt Dr. J. PORT, Woaburg; Prof. Dr. W. PRAUSNITZ, Graz;
Prof. Dr. F. RENK, Dresden; Prof. Dr. SCHOTTELIUS, Freibarg i. B.; Generaloberarzt Dr. A.SCHUSTER.
Manchen ; Prof. Dr. WERNICKE. Posen.

HERAUSGEGEBEN

VON

J. FÖRSTER, M. GRÜBER, FB. HOFMANN, M. BUBNEB,

O. Ö. PROFESSOREN DIR HYUIEKE UND DIREKTORIEN DER HYGIENISCHEN INSTITUT! AN DEN UNIVERSITÄTEN ZU

8TRAS8BORO MÜNCHEN LEIPZIG BERLIN.

DBEIÜNDFÜNFZIGSTER BAND.

MÜNCHEN und BERLIN.

DRUCK UND VERLAG VON R. OLDENBOURG.

1905.

0EC25 W

*£ H. 4-

«

iA

Inhalt.

Seile

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe. Von Dr. Oskar R. von
Wunschheim, Assistenten am Institute. (Aus dem Hygieni-
schen Institute der k. k. Universität Innsbruck. Vorstand: Prof.
A. Lode.) 1

Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationsapparat.
Von Professor M. Fieker. (Aus dem Hygienischen Institute
der Universität Berlin. Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M.
Rubner.) 50

Der „Vakuumreiniger", ein Apparat [ wir staubfreien Reinigung der
Wohnräume. Von Stabsarzt Dr. Berghaus, Assistenten am
Institut. (Aus dem Hygienischen Institute der Universität Berlin.
Direktor; Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M.* Rubner.) 50

Experimentell e« über die bakterizide Wirkung des Lichtes auf mit
Eosin, Erythrosin und Fluoreszein- gefärbte Nährböden. Von
E. Mettler, med. pract. (Aus der bakteriologischen Abteilung
des Hygiene-Institutes der Universität Zürich. Vorstand: Privat-
dozent Dr. W. Silberschmidt.) 80

Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen. Von Dr. G. Werner,
Kreisassistenzarzt in Marburg. (Aus der hygienischen Abteilung
des Instituts für Hygiene und experim. Therapie zu Marburg a. L.
Vorstand: Prof. Bonhoff.) . . 128

Vorschlag eines neuen Apparates zur Bestimmung des spezifischen
Gewichtes von Baumaterialien. Von Ing. R. Bianchini und
Dr. E. Cler. Hygienisches Institut der Kgl. Universität Turin.
(Direktor: Prof. Dr. L. Pagliani.) 145

Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien. Zugleich ein Beitrag
zur Aerobiose anaerober Bakterien. I. Mitteilung. Von R. Grafs-
berger. (Aus dem Hygienischen Institut der Universität Wien.) 158

IV Inhalt.

Seite

Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere. Von
Dr. med. A. Nifsle. (Aus dem Hygienischen Institut der Univer-
sität Berlin. Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M. Rubner.)
(Mit einer Tafel) 181

Über das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren. Von Dipl.-

Ing. Erich Hof städt er. (Mit einer Tafel) 205

Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft.
(Infektion der vorderen Augenkammer mit abgewogenen kleinsten
Tb-Mengen.) Von Dr. Richard Link, Privatdozent für innere
Medizin, Assistenzarzt an der medizinischen Klinik. (Aus dem
Hygienischen Institut der Universität Freiburg i. B.) 264

Bakterizide Reagenzglas versuche mit Choleravibrionen. Von Prof.
Dr. Oskar Bail, Assistenten des Institutes, und Dr. YonetarO
Kikuchi, Osaka (Japan). (Aus dem Hygienischen Institut der
deutschen Universität in Prag. Vorstand: Prof. Hueppe.) . . 275

Über Agglutinationsbehinderung der Typhusbazillen. Von Dr. E d m u n d
Weil, Assistenten des Institutes. (Aus dem Hygienischen Institut
der deutschen Universität in Prag. Vorstand: Prof. Hueppe) . 291

Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio. Von Prof.
Dr. Oskar Bail, Assistenten des Institutes. (Aus dem Hygieni-
schen Institut der deutschen Universität Prag. Vorstand: Prof.
Hueppe.) 302

Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung. I. Mitteilung.
Von Dr. Antonio Rode IIa, Vorstand des bakteriologischen
Laboratoriums zu Lodi. (Mit einer Tafel.) 329

Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrün agare zum
Nachweise der Typhusbazillen im Stuhle. Von Dr. med.
K. Nowack. (Aus dem Hygienischen Institut der Universität
Berlin. Direktor: Geh. Medizinalrat Prof. Dr. M. Rubner.) . . 374

#

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Von

Dr. Oskar R. von Wunschheim,

Assistenten am Institute.

(Aas dem Hygienischen Institute der k. k. Universität Innsbruck. Vorstand:

Prof. A. Lode.)

Mit der Frage nach dem Erreger der Hundestaupe betritt
man ein äufserst strittiges Gebiet, und in den mafsgebenden
Kreisen der Forschung gilt diese Frage eigentlich noch als un-
gelöst. In der neuesten Auflage (1904) des trefflichen Lehrbuches
von Friedberger und Fröhner ( x ) lesen wir noch den Satz:
»Die Staupe ist eine kontagiöse Infektionskrankheit,
deren Infektionsstoff zurzeit noch nicht mit ein-
wandfreier Sicherheit nachgewiesen ist; es fehlt die
Darstellung der Reinkulturen und ihre erfolgreiche
Übertragung auf andere Tiere.c

An Bemühungen, den Erreger dieser verheerenden Krankheit
aufzufinden, hat es nicht gefehlt, und wenn man die dieser Frage
gewidmete Literatur überblickt, so zeigt sich, dafs fast jeder
Beobachter einen anderen Erreger verantwortlich macht, und dafs
Bakterien, deren Formen und kulturelles Verhalten durchaus
untereinander verschieden sind, als die Erreger der Hundestaupe
bezeichnet werden. (Vgl. Tab. I pag. 16 u. 17.)

Die Krankheit war nach den Angaben von Laosson( 2 )
schon zu Aristoteles' Zeiten bekannt, auch eine im Jahre 1028 in
Böhmen verbreitete Hundeseuche soll eine Staupeepidemie ge-
wesen sein. Bei Friedberger und Fröhner finden wir die

Archiv für Hygiene. Bd Uli. 1

2 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Angabe, dafs die Staupe um die Mitte des 18. Jahrhunderts aus
Amerika (Peru) nach Europa verschleppt worden sei, und zwar
zuerst nach Spanien, von da nach Frankreich, Deutschland und
den übrigen Ländern. Nach Frankreich soll sie etwa im Jahre
1740, nach Deutschland ums Jahr 1748, nach Italien 1764* nach
England 1760, nach Rufsland 1770 vorgedrungen sein. Heute
ist wohl kein Land mehr von ihr verschont.

Die Seuche ist unter den verschiedensten Bezeichnungen
bekannt. In Deutschland wird sie mit dem Namen Sucht, Hunde-
pest, Hunderotz, Hundekrankheit, Hundeseuche, Hundeschwach-
heit, Laune, Katarrhalfieber, Radeseuche belegt; in Frankreich
heilst sie maladie du jeune ftge, fifevre typhoide, peste canine,
catarrhe des chiens, pneumonie infectieuse et typhus des chenils,
variole du chien, maladie oder morve; sie wird in England dis-
temper, in Italien cimurro, in der Republik Argentinien moquillo
genannt.

Das klinische Bild ist ein äufserst mannigfaltiges. Es äufsert
sich meist in einer infektiösen, katarrhalischen Erkrankung der
Schleimhäute der Augen, des Respirations- oder Digestionstraktus,
oft kompliziert mit schweren Erscheinungen von Seiten des ner-
vösen Apparates, oft begleitet von fast immer tödlichen Pneu-
monien und mitunter durch Auftreten eines pustulösen Aus-
schlages auf der Bauchhaut und Innenseite der Schenkel charak-
terisiert. Je nach dem Vorwiegen der einen oder anderen Krank-
heitserscheinungen pflegt man die Hundestaupe einzuteilen in:

1. Die katarrhalische Form,

2. die gastrische,

3. die nervöse und

4. die exanthematische Form der Staupe.

Natürlich sind Vermischungen der Typen häufig zu sehen.

Bezüglich der Schwere der Erkrankung unterscheiden wir
hochakute (septikämische), subakute und chronische Formen,
letztere meist in schwere Kachexien ausgehend. Bezüglich ge-
nauerer Details sei auf das oben zitierte Lehrbuch von Fried -
berger und Fröhnert 1 ) verwiesen.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 3

Die ältesten Literaturangaben über die Krankheit sind wohl
die von Taplin( 8 ) und Donauer ( 4 ).

Die Tatsache, dafs wir es bei der Hundestaupe mit eirjter
Infektionskrankheit zu tun haben, wurde schon frühzeitig erkannt
und legen die Arbeiten von Waldinger ( 6 ), v. Gemmeren ( 6 )
und Delabfcre-Blain( 7 ) hiervon Zeugnis ab.

Die ersten erfolgreichen Impf versuche dürften Renner und
Karle ( 8 ) zu verzeichnen haben.

Die Experimente von Trastowo( 9 ) wiesen nach, dafs die
Staupe für junge Hunde, die die Seuche noch nicht durchgemacht
hatten, ansteckend, dafs sie direkt und indirekt übertragbar sei,
und dafs auch ältere Tiere krank gemacht werden könnten.

Trasbot ( 10 ) hatte anfangs kein Glück mit seinen Über-
tragungsversuchen; später gelangen ihm diese, als er Nasenaus-
flufs mit Bläschensekret gemischt, in skarifizierte Partien der
Bauchgegend verrieb. Nach 8 Tagen erkrankten die Versuchs-
tiere Trasbots, welche zwischen 13 Tagen bis zu 3% Monaten
alt waren. Auch den Nachweis, dafs durch blofses Zusammen-
wohnen die Krankheit übertragen werden könne, erbrachte der
genannte Untersucher.

Venuta ( 1X ) gibt das Inkubationsstadium mit 4 — 6 Tagen
an, bestätigt, dafs durch Zusammenwohnen Infektion möglich sei,
und berichtet,, dafs das Kontagium genügend widerstandsfähig
sich erweise, um Trocknen an der Luft bis zu einem gewissen
Grade zu ertragen.

Krajewski^) verfügt Über Impf versuche an 36 Tieren,
von denen allerdings die gröfsere Hälfte nicht erkrankte, nach
Ansicht des Autors vielleicht deshalb nicht, weil sie die Krank-
heit schon durchgemacht hätten. Das Inkubationsstadium gibt
Krajewski mit 4 — 7 Tagen an, Exantheme hat er selten und
nur bei sehr schweren Fällen beobachtet; bei leichten Erkran-
kungen erfolgte Genesung schon nach 6 — 8 Tagen, nach ein-
maligem Überstehen der Krankheit trat meist Immunität ein.
Das Kontagium haftete am Nasen- und Augenausflufs sowie am
Blute; durch Eintrocknen und Gefrierenlassen bis zu 20° C wurde
es nicht zerstört, jedoch durch monatelanges Aufbewahren in

4 Kin Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

trockenem Zustande in seiner Wirkung abgeschwächt. Krajewski
hat bei der Impfstaupe eine Mortalität von nur 10 — 15°/ kon-
statiert und empfiehlt deshalb die Staupeimpfung als vorbeugende
Mafsregel.

Laosson ( 2 ) hat durch 98 an Hunden und Katzen gemachte
Impfversuche die kontagiöse Natur der Staupe sicher erwiesen,
auch zeigte er, dafs Katzen- und Hundestaupe identisch und
gegenseitig übertragbar ist. Ältere Tiere wurden seltener ange-
steckt als solche in jugendlichem Alter, einmaliges Überstehen
der Krankheit verlieh eine gewisse Immunität. Der Nasenausflufs
verlor seine Infektionsfähigkeit nach 14 Tagen, der Inhalt der
Pusteln erwies sich als unwirksam. Das Inkubationsstadium be-
trug 4—7 Tage.

Es möge nicht unerwähnt bleiben, dafs Trasbot( J0 ) und
mit ihm eine Reihe von anderen, meist französischen Autoren
die Staupe als echte Pockenkrankheit aufgefafst wissen wollten,
was dazu führte, dafs eine Menge von erfolglosen Versuchen
angestellt wurde, mittels Kuhpockenimpfung der Staupeinfektion
vorzubeugen.

Dupuis( 18 ) hat die Trasbotsche Auffassung widerlegt, da
es ihm in keinem Falle gelang, bei jungen Hunden durch Vak-
zineimpfungen eine Immunität gegen Staupe zu erzeugen. Doch
hält Trasbot auch heute noch an seiner Theorie fest, worauf
wir weiter unten noch zurückkommen wollen.

Impfversuche, die Konhäuser ( 14 ) mit Pustelinhalt vornahm,
hatten einen negativen Erfolg, auch die Bemühungen von Jefs ( 26 ),
durch den Pustelinhalt staupekranker Hunde die Staupe zu über-
tragen, blieben erfolglos.

Mit der Verbesserung der Mikroskope und dem beginnenden
Verständnis für bakteriologisches Arbeiten wurde naturgemäfs das
Interesse an der ätiologischen Erforschung der Hundestaupe in
exaktere Bahnen der Untersuchung gelenkt und zahlreiche, leider
aber vielfach recht lückenhafte Beobachtungen über Bakterien als
Erreger dieser Krankheit erscheinen in der neueren Literatur.

Wie Waldinger, v. Gemmeren und Mecke sowie
Delabfere-Blain die ersten waren, welche den Charakter der

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 5

Hundestaupe als Infektionskrankheit richtig erkannten, so waren
es Semmer( 16 ), Krajewski ( 12 ) und Laosson ( 2 ), welche zu-
erst berichteten, dafs sie im Blute von staupekranken Hunden
Mikroorganismen gefunden hätten, welche sie für die eigentlichen
Staupeerreger hielten. Semmer und Laosson hatten kleine,
äufserst zarte Stäbchen, Krajewski Mikrokokken beobachtet.

Ein Jahr nach Laosson machte Rabe( 16 ) die Mitteilung,
dafs er in dem eitrigen Inhalte der Pusteln, im Nasenausflufs
und im Konjunktivalsekret staupekranker Hunde Pilze gefunden
habe, welche er als die Infektionserreger verantwortlich macht;
sie zeigten sich als kleinste, kaum mefsbare Kügelchen, in kleinen
unregelmäfsigen Häufchen zusammenliegend oder sarcineartig zu
2 — 4 miteinander verbunden oder aber zu 4 — 5 perlschnurartig
aneinander gereiht. Mit Methylviolett färbten sie sich dunkelblau.
Diese Bakterien fanden sich im Nasensekret der erkrankten
Tiere um so zahlreicher, je schwerer diese erkrankt waren, und
sie verschwanden aus dem Sekret vollständig in der Rekon-
valeszenz.

Fried berger ( 17 ) verzeichnet denselben Befund wie Rabe,
steht aber der spezifischen Natur der beschriebenen Mikroorganis-
men sehr skeptisch gegenüber.

Im Jahre 1887 fand Mathis( 18 ) in den Säften, Geweben,
im Auswurf und den Pusteln staupekranker Hunde einen »spe-
zifischen« Diplokokkus. Mathis züchtete denselben in neutraler
oder leicht alkalischer Bouillon in Reinkultur. Durch Verimpfung
der Reinkulturen wurden Krankheitserscheinungen hervorgerufen,
welche mit den bei der Staupe beobachteten übereinstimmten
(Temperatursteigerung, Pusteln usf.). Ganz junge Tiere starben
oft infolge der Impfung, geimpfte erwiesen sich als immun.

Marcone und Meloni ( 19 ) fanden Mikroorganismen, welche
grof8e Ahnliohkeit mit dem Staph. pyog. aureus hatten.

Jacquot und Legrain (*°) wiesen im Pusteleiter Mikro-
kokken nach, 0,6 — 0,8 /u im Durchmesser haltend, zu Diplokokken
vereint und mit Beweglichkeit ausgestattet. Impfungen mit diesen
Kokken erzeugten zwar Pusteln an der Impfstelle, jedoch keine
Staupeerkrankung.

6 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Galli-Valerio ( 21 ) beschreiben des ausführlichen einen
Bazillus, welchen sie aus den Lungen, dem Gehirn, aus dem
Rückenmark, aus dem Konjunktivalsekret, sowie aus dem Ex-
sudat der Rückenmarkshaut erkrankter 'Tiere isoliert hatten.
Auch im Eiter der Sinus frontales fand sich der erwähnte Mikro-
organismus. Dieser > Ovalbazillus« der italienischen Autoren
stellt ein Stäbchen von 1,25 — 2,5 : 0,3 ju dar, welches durch Beweg-
lichkeit ausgezeichnet ist, die Gram sehe Färbung annimmt und
Sporen bildet. Es wächst auf der Agarplatte in Form von
»kleinen, weifsen Punkten, welche zu einer weiblichen Platte
zusammenfliefsen«, in Gelatine zeigen sich nach 24 Stunden Gas-
blasen längs des Stiches, ferner beobachtet man Trichterbildung
ohne Verflüssigung. Peptonbouillon zeigt bei 18—20° C nach
24 Stunden Trübung ohne Bodensatz, nach einigen Tagen bilden
sich Flocken am Boden des Kulturgefäfses. Auf Kartoffeln sieht
man nach 24 Stunden eine weifsliche Auflagerung. Milch ge-
rinnt nicht, Indol wird nicht gebildet, mit Milchzucker versetzte
Peptonbouillon wird nicht vergoren. Der Impfversuch versagte
bei alten Hunden, ein 5 Monate altes Tier gab alle Symptome
der Staupe. Für Kaninchen und Meerschweinchen war der Pilz
nicht pathogen.

Babes und Barsanescu (**) haben in zwei Fällen einen
Mikroorganismus gezüchtet, der als feiner, beweglicher Bazillus
von 0,3 — 0,4 /ii beschrieben wird, keine Sporen bildete und sich
gramnegativ verhielt. Von 9 geimpften jungen Hunden gingen

7 innerhalb von 10—18 Tagen an Staupe zugrunde.

Mi Hais ( 23 ) fand einen Bazillus, der dem Pneumoniebazillus
ähnlich war, aufserdem noch Mikrokokken. Wurde jungen Hunden
ein Gemisch beider Kulturen in die Nase eingerieben, so er-
krankten dieselben leicht an Staupe.

Der Ansicht von Jensen^), der die Staupepneumonie als
durch Streptokokken hervorgerufen annimmt, müssen wir auf
Grund unserer Erfahrungen und Experimente widersprechen.

Taty und Jacquin f 26 ) wiesen bei der nervösen Staupe im
Zentralnervensystem Diplokokken nach und halten dieselben für
die Krankheitserreger.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 7

Jefs ( 26 ) meint, in einem Stäbchen von 1,8—2,3:0,6—0,9^,
das sich grampositiv verhält und beweglich ist, den Erreger der
Hundestaupe vor sich zu haben. Dieses Stäbchen wächst auf
der Kartoffel als weifser, samtartiger Belag und ist nach Jefs
für Meerschweinchen, Katzen und Hunde pathogen. Jefs hält
seinen Bazillus für absolut verschieden von allen bei Staupe
früher beschriebenen und gibt an, durch Verimpfung der Rein-
kultur Hunde staupekrank gemacht zu haben.

Petropawlowskyf 27 ) beschreibt als Erreger der Staupe
einen Mikroorganismus, der grofse Ähnlichkeit mit dem 1895
von Galli- Valerio und 1896 von Babes und Barsanescu
beschriebenen aufweisen soll. Kulturen, Hunden intraperitoneal
oder subkutan einverleibt, erzeugen Staupesymptome und Eiterung
an der Injektionsstelle mit Ausgang in Tod oder Genesung. Blut-
serum genesener Hunde agglutiniert den Bazillus, welcher noch
für Mäuse (weifs und grau), weifse Ratten und Meerschweinchen
Pathogenität besitzt. Petropawlowsky findet seinen Mikro-
organismus sehr ähnlich dem Bacterium coli, Bazillus Fried-
länder, Rotzbazillus, besonders aber dem Pestbazillus.

Mari (*) erklärt den Petropawlo wskyschen Erreger kurz-
weg für ein Bacterium coli.

Von ganz besonderem Interesse erscheint uns eine im Jahre 1900
publizierte Arbeit von Ligniferes ( M ), welche sich u. a. auch
mit der Frage nach dem Erreger der Hundestaupe intensiv be-
fafst, und hier ausführlicher besprochen werden soll, schon aus
dem Grunde, weil die in Buenos-Aires erschienene Publikation
des französischen Autors im allgemeinen schwer zugänglich sein
dürfte.*)

Die Ansicht von Ligniöres, es müfsten aus der Gruppe
der Bakterien der hämorrhagischen Septikämie der herrschenden
Verwirrung wegen — >il n'est pas un auteur qui n'ait reconnu
la n^cessitä de mettre un peu d'ordre dans ce groupe des mala-

•) Herrn Professor Dr. Th. Kitt in München, welcher die Güte
gehabt hat, mir sowohl seine Privatbibliothek als auch die seines Institutes
zur Verfügung zu stellen, sei auch an dieser Stelle nochmals mein ergebenster
Dank ausgesprochen.

8 Ein Beitrag zur Ätiologie der Handestaupe.

dies causöes par les bacteries ovoides, d'etablir une Classification ou
desclassificationsnouvellesc — zwei Gruppen herausgehoben werden,
die Gruppe der »Pasteurellosen« und die »Salmonellosen« (Typus
Hog choWra Salmons) hat wenig Freunde gefunden.

Montfallet( 68 ) und Boschetti( 62 ) konnten sich mitLig-
nifcres nicht einverstanden erklären. Auch Kitt( 80 ) erscheint
die Neubenennung bekannter Bakterien unnötig und willkürlich,
sowie der alte Name, welcher den Charakter der Krankheit aus-
drückt, passender.

L i g n i & r e s verlangt als spezifische Charaktere der Pasteurella :
unbewegliche, sehr polymorphe und involutionsfähige Kokkobazillen,
welche Gelatine nicht verflüssigen, Milch nicht koagulieren, auch
deren Reaktion nicht verändern, keine sichtbare Kultur auf
natürlich sauerer Kartoffel geben, kein Indol bilden, keine Sporen
und keine Geilsein besitzen. Der Geruch sei »sui generis«, die
meist grofse Virulenz variabel. Bei intravenöser Einverleibung
»affinite speciale pour les synoviales tendineuses et articulaires.c

Die Gruppe wird streng kategorisch begrenzt durch Lig-
niferes 7 Ausspruch il'absence de Tun ou de Tau tre (dieser
Merkmale) exclue le microbe du Groupe des Pasteu-
rella«. Sonst wäre noch icornme in'dication gdn&ale« hinzuzu-
fügen, dafs Polfärbung, mitunter äufserst zartes (discrötement)
Wachstum und grofse Schwierigkeit des Nachweises im Orga-
nismus zu bemerken sind.

Zur Gruppe der Pasteurellosen zählt Lignit res:

1. Pasteurellose aviaire (cholära des poules, septic&nie
des lapins etc.).

2. P. po reine (Schweineseuche, swine-plague , pneumoen-
tdrite, peste du porc etc.).

3. P. ovine (pneumoentörite, septicemie hömorragique du
mouton, Lombriz, Cachexie aqueuse etc.).

4. P. bovine (Wildseuche, Rinderseuche, Barbone des
buffles, entäquä).

5. P. öquine (affections typhoides du cheval avec toutes
leur formes et leurs complications).

Von Dr. Oflkar R. von Wunechheim. 9

6. P. canine (nialadie des chiens dans toutes ses raani-
festations).

Im Jahre 1896 fiel Ligniferes gelegentlich seiner Unter-
suchungen über die typhoiden Erkrankungen beim Pferd die
grofse Ähnlichkeit dieser Affektion mit der Hundestaupe auf.
Versuche, einen spezifischen Erreger zu finden, mifsglückten,
Impfversuche mit gefundenen Mikroorganismen fielen negativ aus.

Erst viel später züchtete Lignifcres aus dem Blute eines
sehr jungen Hundes, welcher einer akuten Pneumonie erlegen
war, ein kurzes Stäbchen, welches alle Charaktere der >Pasteu-
rella« zeigte. Die Lunge dieses Tieres ergab einen andern Mikro-
organismus. AufserdemwillLigniöre bei zwei Zwingerepidemien,
deren Fälle ihm M^tivet und T rasbot zur Verfügung stellten,
dasselbe Stäbchen gefunden haben. Die Epidemie M^tivets
war septikämischen, die von Trasbot gastroenteritischen hoch-
akuten Charakters mit Ikterus einhergehend.

Soweit seien Ligniöres' Untersuchungen gediehen gewesen,
als er in Mission des Instituts Paste ur nach Buenos-Aires ge-
schickt wurde, wo sich- ihm ein günstiges Feld der Beobachtung
bot, da, wie er sagt, die Bewohner Argentiniens grofse Hunde-
freunde sind, auch viel reine Rassen gezüchtet werden, die ja be-
kanntermafsen viel empfindlicher gegen die Staupe sind als
Kreuzungen oder Bastarde.

Ligniöres unterläfst es leider, in seiner Publikation uns mit-
zuteilen, ausweichen Organen der Tiere er seinen >Kokkobazillusc
gezüchtet hat, ob er ihn oft oder selten angetroffen hat; er teilt
uns kein einziges Sektionsprotokoll mit, sondern er begnügt sich
damit, uns zu versichern »l'orsqu'on retire le microorganisme
du chien il se präsente sous la forme des bacilles assez longs, ne
ressemblant pas beaucoup aux Pasteurellac. Nach der ersten
Passage durch das Meerschweinchen >Taspect du microbe cora-
mence h changer et bientöt il se montre sous la forme cocco-
bacillaire si charactäristique«, ein Befund, den wir durchaus nicht
bestätigen können.

Der Ligniferesche Mikroorganismus färbt sich gut mit
den gewöhnlichen Anilinfarben, nicht nach Gram. Involu-

10 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

tionsformen sind häufig, Beweglichkeit fehlt. Er wächst
gut bei 37° C, jedoch auch. bei 18 oder 20°, manchmal sogar
bei letzterer Temperatur besser als bei 37 ° C. In neutraler oder
leicht alkalischer Bouillon gedeiht er besser als in »Bouillon
simple«. Säure unterdrückt das Wachstum. Die Bouillonkultur
zeigt jedoch nicht die charakteristische Eigenschaft der »Pasteu-
rella«, eine gleichmäfsige Trübung, sondern äufsert sich in Flöck-
chenbildung bei erhaltener Durchsichtigkeit der Nährflüssigkeit.
Diese, von Lignifcres als charakteristisch bezeichnete Eigenschaft
verliert sich jedoch nach seiner Aussage mit der Zeit, insbesondere
nach Passagen durch das Meerschweinchen (in einem Falle nach
der 20. Passage). Dann zeigt die Bouillon das Verhalten wie
alle »Pasteurellosen«, eine diffuse Trübung. Kleine Serummengen,
der Bouillon zugesetzt, begünstigen das Wachstum, Glyzerin zeigt
keine merkbare Wirkung.

Milch wird nicht koaguliert, die Reaktion wird nicht verändert.

In Pankreasbouillon reichliches Wachstum, Indolbildung
findet nicht statt.

Auf der Gelatine platte erscheinen nach 36 — 40 Stunden
kleine, runde, punktförmige Kolonien, die, erst durchsichtig,
nach 8—10 Tagen weifslich opak erscheinen.

Im Gelatinestich entwickelt sich die Kultur längs des
Stiches entweder in Form von kleinen weifslichen Kolonien oder
in Form eines Streifens von gleicher Farbe. Die Kultur er-
scheint an der Oberfläche erst durchsichtig, dann opak, rund, und
erreicht niemals die Wand der Eprouvette.

Der Gelatinestrich erscheint als ein weifser, irisierender
Streifen, der später opak wird, und auch hier niemals bis an den
Rand des Kulturgefäfses vordringt. Die Gelatine wird nicht
verflüssigt; Kolonien, die mehrere Tage alt sind, haften fest
an der Unterlage und lassen sich nur schwer abheben.

In der Agar platte ist die Entwicklung rascher und reich-
licher als in Gelatine. Die ersten Kulturen wachsen als kleine,
streptokokkenähnliche Kolonien, nach einigen Passagen werden
sie jedoch voluminöser und glänzend. Auf die Dauer behält
dann die Kultur das opake Aussehen und die weifsliche Farbe.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. Jj

Im A garst ich Wachstum längs des Stiches, opak, ohne
die Wand des Reagensglases zu erreichen.

Auf Serum ist das Wachstum zart, aber oft auch dann
noch in Erscheinung tretend, wenn die Agarkultur versagt.

Auf der Kartoffel mit unbewaffnetem Auge kein sicht-
bares Wachstum zu bemerken.

Was nun die Impf versuche von Ligni&res anbelangt, so
stellt er die Behauptung auf, dafs die frisch aus dem Hunde ge-
wonnene Kultur relativ wenig virulent für andere Tiere sei mit
Ausnahme der Katze, wiederum eine Beobachtung, die wir nicht
bestätigen können.

Subkutane Impfungen von Mäusen mit 4 — 8 Tropfen
Peptonbouillon blieben oft ohne Erfolg; an der Impfstelle bildete
sich meist nur eine intensive Schwellung, die nach und nach
verhärtete. In anderen Fällen trat nach 2, 3 oder 4 Tagen der
Tod ein. Intraperitoneale Einverleibung tötete innerhalb von
24 Stunden unter dem Bilde der Peritonitis.

Meerschweinchen erwiesen sich für intraperitoneale und
subkutane Impfung empfänglich; 1 ccm Bouillonkultur, intra-
peritoneal gegeben, tötete innerhalb von 24 Stunden, subkutan
hatten 5 dem binnen 2 Tagen denselben Erfolg.

Auch das Kaninchen erlag innerhalb von 24— 48 Stunden
der intravenösen, subkutanen oder intraperitonealen Infektion.

Für Hunde verwendete Ligniferes mit Erfolg Bouillon-
kulturen von frischen Fällen. Passagen durch Meerschweinchen
können die Virulenz für den Hund erheblich herabsetzen. 1 bis
2 ccmvonPeptonbouillonkultur bewirken, subkutan injiziert, inner-
halb von 24 Stunden eine sehr schmerzhafte Schwellung um die
Injektionsstelle. Bei älteren Hunden pflegt sodann gegen den
dritten Tag eine starke Abmagerung und Ausgang in Eiterung
oder Resorption einzutreten. Die Wunde heilt rasch. Bei sehr
jungen Hunden finden wir starkes Ödem, Schwellung der regio-
nären Lymphdrüsen, schwere Eiterungen, oft mit Ausgang in Tod
am vierten oder fünften Tage nach der Infektion. Durch intra-
venöse Injektion will Ligni&res die verschiedenen Formen der
Staupe hervorgerufen haben: die septikämische mit Gastroen-

12 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

teritis, Pleuroperikarditis mit Arthritis und Gastroenteritis, Gastro-
enteritis allein, Gastritiden mit Hautpusteln, die nervöse Etom,
Gelenkaffektionen mit anschließender Kachexie, endlich auch
die mit schwerer Pneumonie komplizierte Form.

Durch Zusammenwohnen kranker und gesunder Hunde
«wurden letztere infiziert, Verfütterung der Reinkulturen in Milch
hatte keinen Erfolg, ebenso milslangen Versuche, die Krankheit
durch Einverleiben von Blut, Eingeweidestückchen oder patho-
logischen Produkten zu übertragen. Nur ganz ausnahmsweise
gelingt die Übertragung mit dem Auswurf, dem serösen Brust-
inhalt oder Blut bei subkutaner, hauptsächlich aber intravenöser
Einverleibung. Durch Einreiben der Nase mit Auswurf sind die
Aussichten auf die Übertragung wesentlich gröfser.

Bezüglich der in manchen Fällen von Staupe auftretenden
Pusteln der Haut steht Ligni&res auf dem Standpunkte, dafs
wir es hier mit einer Sekundärinfektion zu tun haben, wie sie
sich auch beim Pferd, Schwein und Schaf findet, während Tras-
bot, wie oben erwähnt, gerade in den Pusteln das Charakte-
ristische der Staupe zu sehen gewohnt ist. Ligniferes hat nie-
mals in den Pusteln > Pas teure IIa* gefunden, auch ist es ihm
nicht geglückt, mit deren Inhalt die Krankheit zu übertragen;
die Pustelflüssigkeit erzeugt, verimpft, lediglich eine lokale Läsion,
keine Allgemeinerkrankung, wasschonvorLigniöres Laosson( 2 ),
Konhäuser( 14 ) und Jefs^) festgestellt hatten.

Kitt^) wies schon im Jahre 1884 nach, dafs sich in dem
eitrigen Inhalte der Pusteln verschiedene Bakterien befinden, und
gelang es ihm auch, durch Verreiben des Eiters oder der rein
kultivierten Mikroorganismen auf der leicht skarifizierten Bauch-
haut junger Hunde einen pustulösen Ausschlag zu erzeugen, ohne
dafs jedoch das Krankheitsbild der Staupe auftrat.

Ein Jahr nach dem Erscheinen der eben besprochenen Arbeit
von Lignifcres machte Phisalix( 31 ) Mitteilungen über das-
selbe Arbeitsgebiet. Er erinnert zunächst daran, dafs er früher
einmal ( 82 ) gezeigt habe, dafs ein Bazillus, den er gelegentlich
einer Meerschweinchenepidemie isoliert hatte, auch für den Hund
sehr virulent gewesen sei. Je nach Dosis und Virulenz tötete

Von Dr. Oskar R. von Wanschheim. 13

dieser Mikroorganismus mit akutester Erkrankung innerhalb von
8 — 10 Stunden oder auch langsamer entweder die gastro-inte-
stinale oder chronische Form, mit Ausgang in Kachexie hervor-
rufend. Der Eindruck dieser Krankheitsbilder wäre der der
> malad ie des chiensc gewesen. Phisalix hatte bei Hunden, die
an Staupe zugrunde gegangen waren, verschiedene Bakterien,
zumeist Streptokokken gefunden, doch blieben Inokulationsver-
suche resultatlos. Nach Erscheinen der Arbeit von Ligniferesf 29 )
war Phisalix der Ansicht, dafs die morphologischen und biolo-
gischen Charaktere seines Bazillus der »septicdrnie du cobaye«
vollständig gleich seien mit denen der »Pasteurellose caninec
und versuchte neuerdings den fraglichen Bazillus bei staupe-
kranken Hunden zu finden.

Es gelang Phisalix auch, wie er berichtet, in einer be-
trächtlichen Anzahl von Fällen, die ihm Laurent und Saint
Yves zur Verfügung stellten, >le microbe spdcifiquec zu iso-
lieren. Am besten gelang die Reinkultur (aus Blut und den
Organen des Hundes), wenn man das Tier tötete, ehe noch eine
Sekundärinfektion eingetreten war. Jedoch auch auf dem Wege
gelang die Isolierung, dafs Phisalix die aus Cerebrospinal-
flüssigkeit gewonnenen Kulturen einem Meerschweinchen intra-
peritoneal einverleibte; im Peritonealexsudate gelangte nur der
fragliche Mikroorganismus zur Entwicklung und Übertragungen
in Bouillon liefsen in Reinkultur einen Bazillus gewinnen,
welcher kulturelle Eigenschaften besafs, die dem aus Meer-
schweinchen gezüchteten Erreger der »septic^mie du cobaye«
äufserst ähnlich waren. Nur die Virulenz war für das Meer-
schweinchen geringer.

Dem Hunde gegenüber erwiesen sich beide Arten gleich
pathogen, es trat bei intravenöser Einverleibung der Tod zwischen
5 — 10 Stunden ein, eventuell auch kam es zu langsamerem Ver-
lauf mit verschiedenen klinischen Formen. Den manchmal
äufserst rasch eintretenden Tod (innerhalb von 4 — 5 Stunden)
schreibt Phisalix dem gelösten Gifte (es handelt sich wohl
immer um Bouillonkulturen) zu, und bemerkt, dafs man in
solchen Fällen oft die aus Blut angelegten Kulturen steril findet.

14 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

In der Folge berichtet Phisalix noch, dafs das gelöste Gift
schwer von den Mikroben zu trennen sei, weil es Filter nicht
passiere, und dafs das Gift durch Hitze inaktiviert wird.*)

In einer Sitzung der Sociätä centrale de Medäcine Vdteri-
naire teilt Lign iöres ( w ) mit, dafs er, um seinen Erreger der
»Pasteurullose caninec mit dem von Phisalix gefundenen Mikro-
organismus identifizieren zu können, Phisalix um Übersendung
einer Kultur gebeten habe. Da nun Phisalix dem Wunsche
von Lignifcres nicht entsprochen habe, sah sich letzterer ge-
zwungen, aus der Vakzine von Phisalix dessen Bazillus heraus-
zuzüchten. Der Vergleich beider Bakterien ergab nach Lig-
niferes' Mitteilung völlige Identität in kultureller und patho-
gener Hinsicht. In der an diese Ausführungen sich anschließen-
den Diskussion betmit Trasbot f 86 ), dafs er nicht glaube, dafs
Ligniferes den Erreger der Hundestaupe in Händen habe.
Trasbot hält die Pusteln für das alleinige Kriterium der Staupe,
und weil Lignifcres nicht aus diesen seinen Kokkobazillus ge-
züchtet hat, will Trasbot denselben nicht im Sinne desselben
gedeutet haben und erklärt die Erkrankungen des Respirations-
traktus, die Pneumonie, die gastrischen Erscheinungen, die
Krampfanfälle usw. als durch Sekundärinfektionen verursacht,
und behauptet, dafs immer während der ersten Woche der Er-
krankung am Bauche und an der Innenseite der Schenkel die
typischen Pusteln zu finden seien.

Bezüglich der Auffassung der Hundestaupe in bakterio-
logischer Hinsicht möge auch die Ansicht von Schantyr^)
nicht uuerwähnt bleiben. Der genannte Autor ist der Meinung,
dafs der als Staupe bekannte Symptomenkomplex in drei ver-
schiedene Krankheiten zerlegt werden müsse, die durch drei so-
wohl morphologisch . als auch kulturell und in ihrer pathogenen
Wirkung durchaus verschieden sich verhaltende Mikroorganismen
verursacht werden; ja, Schantyr meint sogar, dafs aufer diesen
drei noch andere ätiologisch verschiedene Krankheiten bisher

*) In unseren Versuchen konnten wir mit Bouillonkulturnitraten (Berke-
feld) Kaninchen toten und einen Hund schwer krank machen, was wohl
nur durch Giftwirkung erklärbar ist.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 15

mit dem Namen Staupe benannt worden seien. Friedb erger
und Fröhner (*) lehnen diese Auffassung energisch ab und auch
wir möchten uns nach unseren Erfahrungen ihrem Urteile an-
schliefsen.

Hundestaupe und Stuttgarter Hundeseuche (Hundetyphus).

Im August 1898 wurde in Stuttgart eine Hundeseuche be-
obachet, über die als Erster Klettf 36 ) berichtet, der sich auf
den Standpunkt stellt, dafs diese Seuche eine von der Hunde-
staupe streng zu unterscheidende Krankheit sei.

Weitere Beobachtungen stammen von A 1 b r e c h t ( M ) in
München, Scheibel( 37 ) in Frankfurt a. M., Richter^) in
Dessau, Mattel ( 39 ) in Mödling, Tremmel ( 40 ) in Wien und
Gun delach ( 41 ) in Magdeburg. Zschokke( 42 ) hat die > Stutt-
garter Hundeseuchec, wie sie nunmehr genannt wird, in Zürich,
Tr^visan ( 4S ) in Venedig beobachtet und beschrieben. In
Frankreich wurde sie von Huet, Brun, Frägis( 44 ), Guille-
mard und Chigot( 45 ), Ducourneau ( 46 ) und BenDanou( 47 )
studiert.

Bimes und Särfes( 48 ) berichten über dieselbe in Toulouse
beobachtete Seuche, stellen sich aber in schroffem Gegensatz zu
Klett, indem sie erklären, die »Stuttgarter Hundeseuchec sei
nichts anderes als Hundestaupe. Sie stützen ihr Urteil auf die
nicht zu unterschätzenden Befunde von Le ciain che und Vallöe,
welche in den von den Verfassern klinisch und pathologisch-
histologisch genauest studierten Fällen durchaus Bakterien vom
Typus Pasteurella (Ligniöres) gefunden haben wollen. Da aber
auch andere Forscher wie Scheibel, Richter und Pirl sowie
Zschokke bei ihren Fällen von »Stuttgarter Hundeseuchec
»ovoidec, wie sie sagen, hühnercholeraähn liehe Bakterien ge-
funden haben, so ist es anzunehmen, dafs sich in Zukunft die
Mehrzahl der Bakteriologen vielleicht auf den unitarischen Stand-
punkt stellen wird.

16

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

g

a

I?

©

I

s
s

©

3

es

a

•3
*

©

©

cfi
H

a

P
©

o

08

Hund

Beim Hund nur
Pustelbildung,
keine Staupe-
erkrankung

Junge Hunde,
nicht für Meer-
schweinchen
und Kaninchen

Junge Hunde

io»<n«5i

Weib-
liche Auf-
lagerung

*>a

äunp[iq
-lopai

nein

i i i ■ i i i I i

p

1 -qoiirc

iii iii 1 i

p

uoninog

i i i i i i i i

uajodg

1 1 i III Ä 1

P

Suiip(iq
-SB©

in Gela-
tine
längs
des
8tictaes

ua^i'Bq.iaA

posi-
tiv

nega-
tiv

1 qoii*9M

III ||A Ä Ä

Form

Zarte Stäbchen

Mikrokokken

Sehr kleine
Kokken

Diplokokken

Kokken, ähnlich
dem Staph. pyog.

Diplokokken

Ovalbazillus
1,25—2,5 : 0,5 «

Feiner Bazillus
von 0,3—0,4 fi

Autor Fundort

Semmer und Blut
Laosson

Krajewski —

Rabe Pustelinhalt,
(Friedberger) Nasen- und Kon
junktivalsekret

Mathis Säfte, Gewebe,
Auswurf, Pusteln

Marcone und 1 —
Meloni

Jacquot und ' —
Legrain

Galli-Valerio ' Lunge, Gehirn,
Rückenmark,
Sekrete, Eiter d.
sinus frontal

Babes —
und Barsanescu J

i

Von Dr. Oskar R. von Wanscbheim.

17

©

C

©

Öd

fl

3

© ©

§ g

© fl

© ©

2 2 ^"5
g«2 © fl

© © fl.5

i« r

3|?

lil

i ©
* ► 5

et 9*h p

3« H

•'S

2*©.fl

«50

'S

"© ti •

§

af-SägS

Sfl«'3g3

©

fl

.5
'S

a

60

fl
fl

O

'S Sil

© 60 ,

ö öS 3

•=? «3

©

fl

p*

©*.

fl

©*i3

c

S eo

© -

a

II

sin

•Sil*

W ° * fl

I

+* XI «8

«> "^ <~

► o
©o

©CO

©

'S

fl
©

c

S
©

.+A 00
fl fl
© ©

9

er

«SS 3

•22 .»
3 ©

9 fl fl o s

• od AJ2 'S

© 5 fl .i °

ö — p "3 •*

4ii° «

©

_c

o

"35

©

c

o ^.
U1°

fl

B"<gB
- - i ^

« u * "

SS

OD

|2

C

©

sSSg
Heß-©«

Archiv für Hygiene. Bd. Uli

lg Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Mouquet( 49 ) führt gegen die Identität von Hundestaupe
und »Stuttgarter Hundeseuche < (Typhus du chien) vor allem den
Einwand ins Feld, dafs letztere Krankheit im Gegensatz zur
Staupe vornehmlich ausgewachsene und alte, sehr selten nur junge
Hunde befalle, (eigene Beobachtungen von Mouquet und
Ducourneau), sowie dafs nervöse Komplikationen beim »Typhus
du chien« fehlen sollen.

M. Butelt 50 ), der ebenfalls Anhänger der Verschiedenheit
von Hundestaupe und Hundetyphus ist, legt viel Gewicht auf
den Umstand, dafs die gegen Staupe erworbene Immunität,
welche immerhin nicht zu verachten sei, keinen Schutz gegen
die Infektion mit Hundetyphus gewähre, und dafs typhuskranke
Hunde, solche, die die Staupe schon einmal überstanden hatten,
tödlich zu infizieren imstande waren.

Wenn man der Auffassung Rechnung trägt, dafs die Hunde-
staupe und der Typhus der Hunde (Stuttgarter Hundeseuche)
durch einen Erreger verursacht und nur durch ihren verschieden
grofsen Virulenzgrad unterschieden sein sollen, so erscheint uns
gewifs höchst merkwürdig, dafs gerade bei den durch gröfsere
Virulenz der Erreger ausgezeichneten Epidemien (Stuttgarter
Hundeseuche, Typhus du chien der Franzosen) die wohl zweifellos
durch Toxinwirkung ausgelösten schweren nervösen Symptome
fehlen sollen (Mouquet), während bei den Epidemien minderer
Virulenz (Hundestaupe) nervöse Symptome so überaus häufig
beobachtet werden. Aber Bim es und Sörfcs( 48 ) geben uns da
die Versicherung, dafs auch beim Hundetyphus nervöse Symptome
durchaus geläufige Erscheinungen seien. Und die Tatsache, dafs
Hunde, welche die Staupe durchgemacht hatten, an »Typhus
de chien« erkrankten, kann man wohl leicht gerade durch
eine gesteigerte Virulenz des gemeinsamen Erregers erklären, zumal
ja bekannt ist, dafs Hunde mehrmals an Staupe erkranken
können.

Bezüglich des viel erwähnten Kokkobazillus sei noch er-
wähnt, dafs Ligniferes mitteilt, seine » Pas teurel lose canine«
auch im Nasenraum und im Speichel gesunder Hunde gefunden
zu haben; sie sei wenig virulent gewesen und besser bei 20° C

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 19

als bei 37 °C gewachsen. Ebenso hat Ligniöres Pasteurella
im Nasenraum von Schafen und Pferden gefunden.

Bi8anti( 61 ) hat bei Untersuchungen über die Bakterienflora
des normalen Hundes bei zehn untersuchten Fällen einmal eine
> Pasteurella c im Darminhalt vorgefunden.

Eigene Beobachtungen.

Die Staupeepidemie, über welche wir berichten wollen,
wurde nachweislich von aufsen in einen vorher vollständig ge-
sunden Bestand von Hunden eingeschleppt.

Ein allseitig durch hohe Bretterwände abgeschlossener Raum
diente Ende April 1904 13 Airedaleterriern und einem Irish-
terrier zum Aufenthalte. Sämtliche Airedales in den ver-
schiedensten Altersstufen waren vom Verfasser gezüchtet und
seit ihren ersten Lebenstagen beobachtet worden. Keiner der-
selben war jemals krank gewesen. Der Irishterrier war Mitte
März aus England importiert worden, hatte kurze Zeit nach
seiner Ankunft Husten und schleimige Absonderungen aus der
Nase gezeigt, doch war trotz ständigen Zusammenwohnens kein
anderer Hund erkrankt. Wir meinen, dafs damals ein einfacher
Katarrh infolge der Überfahrt und noch nicht erfolgter Akklima-
tisierung vorlag.

Dem Alter nach verteilten sich die Hunde auf eine ungefähr

4 Jahre alte Hündin, zwei Wurfgeschwister je 1 Jahr 3 Monate
alt, fünf Wurfgeschwister im Alter von 7 Monaten (Fall I, IV,
VI, VIH und XI), sowie fünf Wurfgeschwister im Alter von

5 Wochen (Fall II, III, V, IX uud X).

Am 27. April wurden der Irishterrier sowie die beiden Aire-
daleterrierhündinnen Mifs (1 Jahr 3 Monate alt) und Sally (Fall I,
Tabelle II), 7 Monate alt, zu der am 30. April und 1. Mai in
München abgehaltenen Ausstellung eingesandt. Am 2. Mai gingen
die Hunde, jeder in seinem Behälter, bei bestem Wohlbefinden
von München direkt nach Berlin, wo sie am 7. und 8. Mai aus-
gestellt waren. Von der Berliner Ausstellung trafen die drei
Hunde am 11. Mai wieder in Innsbruck ein; der Irishterrier und

20 Ein Beitrag zur Ätiologie der Handestaupe.

die ältere Hündin Mils vollkommen gesund, während Sally
abgemagert aussah und etwas hustete. Dieselbe erholte sich bei
guter Frefslust sehr rasch, der Husten liefs nach 3 Tagen voll-
ständig nach, das Tier war sehr munter, so dafs kein Grund vor-
lag, Sally, die mit einigen Stallgenossen zu der am 22. und
23. Mai in Wien stattfindenden Ausstellung reisen sollte, zu Hause
zu lassen. Am 19. Mai wurden nun der Irishterrier und die
Airedalehündin Mifs in je einem Behälter allein, Sally und deren
Bruder Jimmy (Fall IV, Tabelle V) in einem gemeinsamen Be-
hälter nach Wien abgeschickt.*) In Wien am 24. Mai zurück
aufgegeben, gelangten die Tiere am 26. Mai gegen Mittag erst
in meine Hände. Es waren diesmal die (immer gesund ge-
bliebene) Hündin Mifs mit Jimmy (Fall IV) in einem Behälter
verpackt, während Sally (Fall I) und der Irishterrier in je einem
Korbe sich allein befanden. Sally war in desolatem Zustande.
Die Hündin zeigte, aus dem Korb genommen, schwankenden
Gang, grofse Schwäche in der Hinterhand und hatte in Inter-
vallen von ca. 10 Minuten Krampfanfälle tonisch-klonischer Natur,
bei denen sie sich zusammenkauerte und insbesondere heftige
Zuckungen der Gesichtsmuskeln aufwies, die sich in Zähne-
fletschen und Klappern der Kiefer äufserten. Auch bestand
intensiver Speichelflufs.

Die Hündin wurde sofort beim Wasenmeister isoliert und
ging unter an Intensität und Häufigkeit zunehmenden Krämpfen
am Abend des nächsten Tages ein (Fall I, Tabelle II).

Die anderen drei Hunde waren anscheinend gesund in den
Zwinger zurückgebracht worden, doch soll Jimmy (Fall IV) auf
dem Heimwege einige Male gehustet und am nächsten Tage ver-
minderte Frefslust gezeigt haben. Das Husten führte der Wärter
auf Drosseln des Zughalsbandes zurück und legte ihm deshalb
keine Bedeutung bei.

Als ich am 30. Mai, also nach drei Tagen, im Zwinger Nach-
schau hielt, zeigten mit Ausnahme der alten Hündin und der

*) Die Hände waren in München, Berlin und Wien in sog. Kollektions
räumen untergebracht, die ihnen freie Bewegung und natürlich auch Kontakt
gestatten.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 21

zwei im Alter von 15 Monaten stehenden Hunde alle mehr oder
weniger ausgeprägte Krankheitssymptome wie serösen Ausflufs
aus der Nase, leichten Husten, Trübung der Kornea; es konnte
kein Zweifel mehr bestehen, dafs sämtliche jungen Hunde an
der katarrhalischen Form der Staupe erkrankt waren.

Es wäre nun wohl angezeigt gewesen, die noch gesunden
älteren Hunde zu isolieren und so einer möglichen Erkrankung
derselben vorzubeugen. Da nun aber einerseits gerade die wert-
vollsten Tiere bereits erkrankt waren, anderseits uns die Frage,
ob die bis jetzt gesund gebliebenen älteren Tiere sich auch
fernerhin d er Infektion gegenüber resistent verhalten ^würden,
interessierte, so beliefsen wir dieselben in Kontakt mit den er-
krankten Genossen. In der Tat blieb die vierjährige Hündin
und die beiden im Alter von 15 Monaten stehenden Wurf-
geschwister trotz des steten Beisammenseins mit den Patienten
vollkommen gesund. Der einjährige Irishterrier zeigte Husten
und starken eitrigen Ausflufs aus der Nase, so dafs er wohl als
staupekrank angesehen werden mufste, doch war der Verlauf
seiner Erkrankung ein durchaus gutartiger; er verlor niemals
die Frefslust und war nach ungefähr 14 Tagen völlig her-
gestellt.

Anders jedoch die jungen Airedales. In kurzen Zwischen-
räumen gingen trotz sorgfältigster Wartung sechs der erkrankten
Hunde ein, denen in etwas längeren Intervallen noch drei andere
nachfolgten. Von zehn erkrankten Hunden kam nur ein einziger
mit dem Leben davon.

Wir geben im folgenden die Protokolle der einzelnen Fälle
sowie mikroskopische und kulturelle Befunde wieder.

Fall I, Protokoll Nr. 212.

Airedalehündin >Sally«, gew. am 2. Oktober 1903.

Vorgeschichte oben geschildert Exitus am 27. Mai, 8 ühr 45 Min.
p.m. Über Nacht in kühlem Raum aufbewahrt. Sektion am 28. Mai,
4 ühr p. m.

Augen tief in den Höhlen liegend, Schaum vor dem Maule, Kadaver
sehr abgemagert, doch Fettpolster noch reichlich vorhanden. Die Schleim-

22 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

haut des Maules blaffe, ohne Ulcera. In der Trachea viel glasiger Schaum.
In der Pleurahöhle seröser, nicht hämorrhagischer Erguüs. Lungen
normal.

Am Herzen äufserlich nichts Abnormes. Im Perikard reichlich gelbes
Serum.

Die Leber grofs und brüchig.

Die Milz mittelgroß und zähe.

Die Nieren mäfsig blutreich, normal.

Der Magen leer, nur wenig Schleim enthaltend, ohne Entzündungs-
erscheinungen, ohne Blutungen.

Mikroskopisch wurden untersucht Ausstrichpräparate vom Pleural -
exsudate, Peri kardiale xsudate, von der Oberfläche der Lunge, vom Herzblut,
von Leber und Milzsaft, auch von der Oberfläche der Leber wurde ein
Klatschpräparat angefertigt. Im Pleuraexsudat wurden einige wenige Stäb-
chen beobachtet, welche meist in Verbänden zu zweien auftraten, von einer
deutlichen Kapsel umgeben waren und sehr an Bac. Proteus erinnerten. Im
Perikardialexsudat konnte trotz langen Suchens nur ein einziges solches
Stäbchen nachgewiesen werden, den gleichen Erfolg hatte unser Nachsuchen
im Ausstrichpräparate von der Milz. In allen anderen Präparaten war von
Mikroorganismen nichts zu sehen.

Kulturen (schräger Agar) wurden angelegt vom Pleuralexsudat,
Perikardialexsudat, von der Oberfläche der Lunge, vom Herzblut, von der
Leber, vom Milzsafte.

Am nächsten Tage waren alle Röhrchen mit Ausnahme der-
jenigen, welche mit Perikardialexsudat und Exsudat von der
Oberfläche der Lunge beimpft worden waren, bewachsen, die
Kulturen zeigten jedoch zu unserem Erstaunen keineswegs die
Bakterien, welche wir im Ausstrichpräparate gesehen hatten,
sondern durchwegs und rein ovale kleine Kurzstäb-
chen mit deutlicher Polfärbung, Formen, wie sie dem
Erreger der Hühnercholera, also den Bakterien der
hämorrhagischen Septikämie eigentümlich sind. Das
vom Perikardialexsudat angelegte Agarröhrchen blieb steril, das
mit Exsudat von der Oberfläche der Lunge beimpfte zeigte
nach weiteren 24 Stunden ebenfalls eine Reinkultur von hühner-
choleraähnlichen Bakterien.

Wir benennen in allen weiteren Protokollen dieses
ovoide Stäbchen mit »Stäbchen 212c.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim.

23

Tabelle n.

Fall I, Protokoll Nr. 212.

Airedaleterrierhündin >8ally«, gew. 2. Oktober 1903, erkrankt zwischen 2. und
11. Mai 1904, f am 27. Mai.

1

Pleural-
exsudat

Peri-
kardial-
exsudat

Ober-
fläche der
Lunge

Herzblut

Ober-
fläche d.
Leber

Leber

Milz

■ö x:

3 «• i

S ^ |

Einige
grolse

Stäbchen
mit

Kapseln

Äufserst
spärliche

grofse
Stäbchen

Äufserst
spärliche

grofse
Stäbchen

Kultar

Kleines
ovales Kurz-
stäbchen
(später als
Stäbchen
212 geröhrt)

steril

Kleines
ovales
Kurzstäb-
chen

Kleines

ovales

Kurzstäb-

cben

—

Kleines
ovales
Kurzstäb-
chen

Kleines
ovales
Kurzstäb-
chen

Fall H, Protokoll Nr. 216.
Airedalehflndin >Mifs Katec, gew. am 24. März 1904.

Am 29. Mai munter und gesund. Frifst gut.

Am 30. Mai schwer krank. Verweigert jede Nahrung. Erbricht Schwäche
in der Hinterhand, taumelnder Gang. Grolser Durst

Am 81. Mai früh fast bewufstlos. Exitus 10 Uhr 50 Min.

Sektion 40 Min. später.

Am Respirations- undDigestionstraktus keine pathologischen
Veränderungen. Keine serösen Ergüsse.

Herzblut flüssig, dunkel, teerig.

Leber sehr grofs, blutreich, sehr brüchig.

Milz mittelgroß, licht mit einzelnen dunkelroten Flecken, zäh.

Mikroskopisch fanden sich im Herzblute einzelne spärliche kurze
Stäbchen, sonst nirgendwo Bakterien.

Kulturen wurden angelegt vom Herzblut (Agar und Serum), von der
Leber, vom Milzsaft und aus der Galle.

Am nächsten Tage zeigte uns nur eine Kultur (Herzblut auf Agar)
Wachstum und zwar ein 8täbchen mit runden Polen von ca. 1—2 fi Länge
und mindestens 0,5 /* Dicke, ein Befund also, der sich mit dem in Fall I
kulturell erhobenen nicht gut identifizieren liefs.

Behufs Erprobung im Tierexperiment wurde diese am 31. Mai aus dem
Tier direkt angelegte Kultur am 1. Juni überimpft (0J, und von dieser am
2. Juni eine weitere Abimpfung (0 t ) vorgenommen. Am 4. Juni erhält nun
ein Hase eine Öse 48 stündiger Agarkultur 0, in eine Ohrvene injiziert. Bei
der mikroskopischen Kontrolle der Kultur erweist sich dieselbe aus den oben
beschriebenen grofsen Stäbchen bestehend. Am 6. Tage nach der Infektion
geht das Kaninchen zugrunde.

24

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Bei der Sektion findet sich blutig seröses Exsudat in der Bauchhöhle
und im Herzbeutel. Leber und Milz sind geschwellt und brüchig. Im Herz-
blut konnten wir mikroskopisch keine Mikroorganismen nachweisen, doch
fanden sich im Leber- und Milzsaft zahlreiche Bakterien wie Stäbchen 212.
Die Kultur ergab uns aus Bauchexsudat, Herzblut, Leber und Milz in Rein-
kultur einen Bazillus, der dem Stäbchen 212 identisch war, keineswegs aber
die eingeimpften grofsen Formen.

Nach dem Ausfall dieses Tierexperimentes lag es wohl nahe
anzunehmen, dafs in Fall II die eigentlichen Erreger durch Ver-
gesellschaftung mit einem saprophytischen Bakterium, eben den
erwähnten grofsen Stäbchen, in der Kultur durch Beeinflussung
ihres Konkurrenten nicht genügend zur Entwicklung kommen
konnten, aber einem Versuchstiere eingeimpft, ihre pathogene
Wirkung sofort, wenn auch nur in geringster Menge eingebracht,
geltend machten.

Diese unsere Überzeugung wurde bestätigt, als wir schon in
vierter Generation (0 8 ) der Fortzüchtung aus der Originalkultur
nur mehr wenige grofse Stäbchen, aber in überwiegender Zahl
Stäbchen wie 212 wachsen sahen. Es war nunmehr ein Leichtes,
durch Plattengiefsen dieselben Bakterien reinzuzüchten, wie wir
sie schon bei Fall I gefunden hatten.

Dieses Ergebnis scheint uns recht klar darauf hinzuweisen,
wie leicht es möglich ist, dafs infolge von Mischinfektionen oder
Auftreten von Saprophyten der eigentliche Erreger der Hunde-
staupe verdeckt werden kann.

Tabelle III.

Fall H, Protokoll Nr. 215.

Airedaleterrierhündin »Mifs Katec, gew. am 24. Mars 1904, erkrankt am

30. Mai, t am 31. Mai.

Herzblut

Leber

Milz

Galle

Mikroskopischer

Befund im

Aasstrichpräparate

Wenige kleine ovale Kurzstäbchen
mit Polf&rbung

.

Kultur

• Agar : Nach 24 Std. grofse plumpe

'Stäbchen, erst nach dem dritten

Überimpfen treten neben diesen

auch die ovalen Stäbchen wie Stäl>

eben 212 auf. Serum: Steril.

steril

steril

steril

Von Dr. Oskar R. von Wunsch heim.

25

Fall m, Protokoll Nr. 227.
Airedaleterrierrüde >Tipsy<, gew. am 24. März 1904.

Am 30. Mai seröser Ausflufs aus der Nase. Husten.

Da Nahrung nicht genommen wird, erhält der Hund dreimal täglich je
zwei rohe Eier, mit Milch oder Suppe verrührt, eingegossen. Auch die Hunde
Fall IV, V, VIII und IX müssen künstlich ernährt werden und erhalten
anfiserdem wie auch Tipsy >8taupeantigoneminec als Heilmittel verabreicht.
Nach einigen Tagen wechselnden Befindens tritt am 3. Juni eine Verschlim-
merung des Zustandes ein, der Hund liegt im Stall, rasselt beim Atmen
(Pneumonie?) und stöhnt schwer.

In der Nacht vom 4. auf den 5. Juni zwischen 12 Uhr 30 Min. und
4 Uhr erfolgt der Exitus.

Sektion am 5. Juni Vormittag 11 Uhr.

Linke Lunge: Der Oberlappen zu dreiviertel, der Mittellappen voll-
ständig pneumonisch infiltriert im Stadium der Eiterung, im Unterlappen
einige gröfsere disseminierte Herde.

Rechte Lunge: Der Oberlappen zur Hälfte, der Mittel- und Unter-
lappen gänzlich pneumonisch infiltriert, in stadio suppurationis.

Die serösen Höhlen frei von Exsudaten.

Die Leber stark steatotisch, nicht sehr blutreich.

Die Milz zäh, derb.

Am Digestions traktus nichts Abnormes.

Mikroskopisch in dem eitrigen Lungenparenchym zahlreiche pol-
gefärbte ovale Stäbchen vom Typus des Stäbchens 212 nachzuweisen, be-
sonders häufig zu zweien angeordnet und mit Kapseln umgeben, so dafs
man bei flüchtiger Beobachtung an das Bild des Diplokokkus Fränkel-
Weichselbaum gemahnt wird. Im Herzblut, Leber und Milz sind Bakterien
nicht nachweisbar.

Die Kultur ergibt aus der Lunge und Herzblut das typische Stäb-
chen 212, Kulturen aus Leber und Milz bleiben steril.

Tabelle IV.
Fall HI, Protokoll Nr. 227,

Airedaleterrierrüde »Tipsy«, gew. am 24. März 1904, erkrankt am 30. Mai,

f am 5. Juni 1904.

Oberfläche
der Lunge

Pneumonischer I
Herd in der [
| rechten Lunge

Herzblut

Lebe/

Müz

Sil

s»2

Zahlreiche
Stäbchen 212

Zahlreiche Stäb-
chen 212, meist
zu zweien neben-
einanderliegend

S !

3 Stäbchen 212 Stäbchen 212

I.Strich: Steril

steril

U. Strich: Stäbch.212 (2 Striche)

steril
(2 Striche)

26

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Fall IV, Protokoll Nr. 231.
Airedaleterrierrüde »Jimmy«, gew. am 2. Oktober 1903.

Der Hund war mit >Sally« (Fall I, Tabelle II) gesund am 19. Mai in
einem gemeinsamen Behälter zur Wiener Ausstellung gesandt worden, da-
selbst im Kollektionsraum in regem Kontakt mit den anderen Hunden
gewesen und am 26. Mai wieder eingelangt.

Leichter Husten. Scheint am 27., 28. und 29. Mai krank, frifst aber
mit Appetit, geht nicht gerne von seinem Lager.

Am 30. Mai stärkerer Husten, seröser Ausflufs aus der Nase, Schwäche
in der Hinterhand, keine Frefslust. Die Diagnose Staupe ist au&er Zweifel.
Künstliche Ernährung und Staupeantigourminetherapie.

In der Folge nimmt der Husten an Intensität zu, der Ausflufs aus der
Nase mit der Zeit eitrig. Wechselndes Befinden. Ab und zu Muskelzittern
und leichte tonisch-klonische Krämpfe.

Am 7. Juni abends starke anfallsweise Krämpfe, die sich oft wiederholen.

Am 8. Juni Früh zahlreiche Anfälle. Exitus zwischen 9 Uhr 45 Min.
und 11 Uhr vormittags.

Sektion 3 Uhr 15 Min. nachmittags.

In beiden Lungen gröfsere und kleinere pneumonische Herde in
stadio suppurationis. Kein Exsudat im Herzbeutel oder Bauchraum.

Herzblut flüssig, teerig.

Leber reich brüchig.

Milz zähe, blafs.

Keinerlei Erscheinungen am Digestionstraktus.

Mikroskopisch sehr wenige ovale polgefärbte Stäbchen im Lungen-
parenchym, keine Bakterien im Herzblut, Leber- oder Milzsaft zu finden.

Das typische Stäbchen 212 läfst sich aus dem Lungenparenchym in
Reinkultur züchten, Kulturen aus Herzblut, Leber und Milz bleiben steril.

Tabelle V.

Fall IT, Protokoll Nr. 231.

Airedaleterrierrüde » Jimmy «, gew. 2. Oktober 1903, erkrankt zwischen

19.

und 26. Mai, f am

3. Juni.

ü

i Lunge

| pneumonisch. Herd

Herzblut

Leber

Milz

Mikroskopischer Befund | Sehr wenige

im Ausstrichpräparat Stäbchen 212

i

Kultur

Stäbchen 212

steril

steril

steril

FaU V, Protokoll Nr. 232.

Airedaleterrierhündin >Tosca<, gew. am 24. März 1904.

Seit 29. Mai krank, starker Ausflufs aus der Nase, starke Konjunktivitis,
Husten. Kein Erbrechen. Künstliche Ernährung und Behandlung mit Staupe-
antigourmine. In der Folge wird der Husten stärker.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim.

27

Am 9. Juni abends Erbrechen.

Das Tier lebt noch am 9. Juni abends 9 Uhr 30 Min., wurde am 10. Juni
Früh 5 Uhr tot aufgefunden.

Sektion 10 Uhr vormittags.

Kein Exsudat in der Bauch- und Brusthöhle, noch im Herzbeutel.

In der Trachea weifeer glasiger Schaum. Beiderseitige Pleuritis
fibrinosa.

Beide Lungen mit groTseren und kleineren pneumonischen Herden
im Stadium der Eiterung durchsetzt Der linke Mittel- und der rechte
Unterlappen gänzlich infiltriert und vereitert.

Die Leber brüchig, fettig degeneriert.

Die Milz zäh, derb.

Mikroskopisch nirgends Bakterien zu finden. Von drei aus den
Lungenherden angelegten Kulturen bleiben zwei steril, in der dritten
finden wir das Stäbchen 212 in Reinkultur gewachsen. Kulturen von Herz-
blut, Leber, Milz und Niere blieben steril.

Tabelle VI.
Fall V, Protokoll ffr. 232.

Airedaleterrierhündin >Tosca«, gew. 24. März 1904, erkrankt am 29. Mai,
f am 10. Juni 1904.

;' Ober-
j! fläche der
1 linken
Lunge

Ober-
fläche der
rechten
Lunge

Unke

Lunge

pneum.

Herd

Herzblut

Leber

Milz

Linke
Niere

Mikroskop!-! 1

scher
Befund im
Ausatrich-
präparate ,

Kultur " steril

steril

Stäb-
chen 212

steril
(4 Striche)

steril
(28triche>

steril
(2 Striche)

steril

Fall VI, Protokoll Nr. 233
Airedaleterrierhündin »Sissie«, gew. am 2. Oktober 1903.

Seit dem 29. Mai erkrankt. Typischer Ausflufs aus der Nase, Husten,
Schwäche der Hinterhand, taumelnder Gang.

Am 8. Juni abends und 9. Juni Früh treten Krämpfe auf.

Am 9. Juni starkes Rasseln. Das Tier liegt fast bewufstlos im Stall
und geht am Abend des 10. Juni ein.

Sektion am 11. Juni vormittags 11 Uhr.

Kein Exsudat in den serösen Höhlen.

In beiden Lungen mehr oder weniger grofse pneumonische Herde
im Stadium der Infiltration, nur wenige in stadio suppurationis.

Herzblut teerig.

28

Ein Beitrag zur Ätiologie der Handestaupe.

Leber brüchig.

Milz derb.

Von seiten des Digestionstraktus keinerlei Erscheinungen.

Mikroskopisch in der Lange grofse Stäbchen, wie wir sie schon
einmal in Fall II zu beobachten Gelegenheit hatten. Eine Kultur, welche
aus einem pneumonischen Herde stammte, ergab jedoch unser typisches
Kurzstäbchen 212 rein. Sämtliche von der Oberfläche der Lunge, aus dem
Herzblute, Milz und Lebersafte angelegten Kulturen blieben steril, nur in
einem der drei vom Herzblute angelegten Ausstriche wuchs am 3. Tage eine
Gattung Clostridien formen, welche sich als nicht pathogen erwies.

Tabelle VH.

Fall VI, Protokoll Nr. 233.

Airedaleterrierhflndtn tSissie«, gew. 2. Oktober 1903, erkrankt am 29. Mai,

t 10. Juni.

Oberfläche

der

rechten

Lunge

Lunge

pneumon.

Herd

Herzblut

Leber

Milz

Mikroskopischer
Befund im Aus-
strichpräparat

i

Grofse
plumpe atypi-
sche Stäben.

Kultur

steril

Typisches
Stäbchen 212

In einem Strich

Klostridien-

formen,

2 Striche steril

steril
(2 Striche)

steril
(2 Striche)

PaU VII, Protokoll Nr. 228.
Bastardhund >Ratz«, ca. 10 Wochen alt

Der vollständig gesunde junge Hund wird am 4. Juni, zu einer Zeit
da unsere Epidemie sich noch auf der Höhe befand (sieben kranke Hunde), in
den Zwinger gesperrt und in regem Kontakt mit den kranken Tieren gelassen.

Am 16. Juni Husten.

Am 17. Juni ist der Husten sehr stark, Ausflufs aus der Nase,

Am 18. Juni Zustand etwas besser.

Am 19. Juni typischer Nasenausflufs, rechtes Auge ganz verklebt,
Husten geringer.

Nach wechselndem Befinden am 22. Juni 3 Uhr 30 Min. p. m. Exitus.

Sektion 4 Uhr p. m.

Der Oberlappen und Mittellappen der rechten Lunge pneumonisch
infiltriert, hie und da gröfsere Eiterherde. Derselbe Befund an dem Ober-
lappen der linken Lunge. Starke fibrinöse Auflagerungen auf der ganzen
rechten Lunge und auf dem Perikard.

Leber sehr brüchig, stark steatotisch.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim.

29

Milz sehr zäh, pulpa- and blutarm.

Nieren blafs.

Im Magen keine Blutungen, nur etwas galliger Inhalt

Mikroskopisch fanden wir in den pleuritischen Auflagerungen der
rechten Lunge, sowie in einem pneumonischen Herde des Mittellappens der
rechten Lunge einzelne polgefärbte ovale Stäbchen vom Typus unseres Stäb-
chens 212. Im Herzblut, Leber und Milz konnten wir keinerlei Bakterien
auffinden.

Kulturen wurden angelegt von den pleuritischen Auflagerungen der
rechten Lunge, von dem pneumonischen Herde daselbst, von Herzblut,
Leber- und Milzsaft. Am nächsten Tage waren von sieben angelegten Strichen
fünf mit Kokken bewachsen, zwei waren steril geblieben, nirgends zeigten
sich unsere ovalen 8täbchen. Doch auch hier erwies sich Überimpfen als
gutes Mittel, um den pathogenen Mikroorganismus von seinem Begleiter zu
trennen, und schon die zweite Kultur zeigte uns in dem aus einem pneu-
monischen Herd angelegten Striche neben den Kokken zahlreiche Stäb-
chen 212, welche durch die Platte nunmehr leicht isoliert werden konnten.

. Tabelle VHI.
Fall YII, Protokoll Kr. 228.
Bastardhund »Ratz«, ca. 10 Wochen alt, wird am 4. Juni zu den erkrankten
Hunden gesperrt; erkrankt am 16. Juni, f am 22* Juni 1904.

, Pleuritische
Schwarte
der rechten
I] Lunge

Pneumonischer

Herd,
rechte Lunge

Herzblut

Leber

Milz

Mikroskopisch.
Befand im Aub-
strichprdparat

Stäbchen
212, auch zu

zweien
angeordnet

Stäbchen 212,

auch zu zweien

angeordnet

3 i
13

Kokken

Kokken, nach
einmaliger Über
impf ung zeigte sich
neben Kokken das

Stäbchen 212

I. Strich: Eine
Kolonie Kokken

IL Strich : Steril
HI. Strich:

Kokken

Kokken
(2 Striche)

I. Strich:

Steril
IL Strich
lOKolonien
Kokken

Fall Vm, Protokoll Nr. 2ö7.
Airedaleterrierrflde >Jackc, ge-w. am 2. Oktober 1903.

Am 29. Mai gesund.

Am 30. Mai leichter Husten, etwas seröser Ausflufs aus der Nase.

Leicht krank bis ca. 8. Juni, dann bedeutende Verschlimmerung, starker
Husten, typischer eitriger Nasen ausflufs, taumelnder Gang, Zittern einzelner
Muskelgruppen, Zähneklappern, Zucken einzelner Extremitäten. Starke
Konjunktivitis.

30

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Der Zustand bleibt bei der äufserst kräftigen Konstitution des Patienten
schwankend bis zum 22. Juni, an welchem Tage mehr pneumonische Symp-
tome in den Vordergrund treten.

Am 23. Juni gegen 9 Uhr abends Exitus.

Sektion am 25. Juni 10 Uhr vormittags.

Die linke Lunge in toto pneumonisch infiltriert, die rechte Lunge zeigt
zahlreiche kleinere Herde.

Leber stark brüchig, steatotisch.

Milz ziemlich pulpareich und weicher als sonst.

Der Magen blafs, klein, geschrumpft.

Mikroskopisch nirgends Bakterien nachzuweisen. Kulturell läfst
sich das Stäbchen 212 aus einem pneumonischen Herde des rechten Ober-
lappens rein gewinnen. Alle anderen angelegten Kulturen bleiben steril.

Tabelle IX.
Fall VIII, Protokoll Nr. 257.

Airedaleterrierrüde »Jack«, gew. 2. Oktober 1903, erkrankt am 30 Mai,

f am 23. Juni.

Pneumonischer Herd
der rechten Lunge

Herzblut

Leber

Milz

Mikroskopisch. Befund
im Ausstrichpräparate

Kultur

Stäbchen 212 und

einige wenige Kolonien

Staph. pyog. aureus

steril
(3 Striche)

steril
(2 Striche)

steril
(2Striche)

Fall IX, Protokoll Nr. 260.

Airedaleterrierhündin >Jessie<, gew. am 24. März 1904.

Am 29. Mai munter und frefslustig.

Am 30. Mai leichter Husten, seröser Ausflufs aus der Nase, keine
Nahrungsaufnahme. Künstliche Ernährung und Verabreichen von Staupe-
antigourmine.

Wechselndes Befinden. Um den 8. Juni herum scheint eine Besserung
Platz zu greifen, die ca. 14 Tage anhält. Der eiterige Nasenausflufs ist fast
verschwunden, als am 23. Juni ohne äufsere Veranlassung der Zustand sich
verschlimmert, insbesondere der Husten viel stärker wird.

Am 26. Juni Früh 7 Uhr Exitus.

Sektion 5 Uhr p. m.

Das schon oft gesehene Bild. Spitze und unterste Partie des Ober-
lappens, der ganze Mittellappen der rechten Lunge pneumonisch infiltriert,
stellenweise in Suppuration begriffen. Der gleiche Befund am ganzen Ober-
lappen der linken Lunge.

Im Herzbeutel etwas farbloses Serum.

Leber ziegelrotgelb, brüchig.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim.

31

Milz auffallend grofs und pulpareich, doch eher blafs.

Nieren normal.

Magen and Darmschleimhaut ohne pathologische Veränderungen.

Mikroskopisch nirgends Bakterien nachzuweisen. Aas Herden der
rechten and linken Lange konnte das Stäbchen 212 in Reinkultur gewonnen
werden. Vom Herzblut waren zwei Striche angelegt worden. In einem war
nur Staph. pyog. aur. gewachsen, in dem anderen fanden sich nur drei
Kolonien vor; zwei gelbliche, welche aus plumpen grofsen Formen bestanden
and eine weifsliche Kolonie, welche unser Stäbchen 212 ergab. Eultaren
aas Leber and Milzsaft waren steril geblieben.

Tabelle X.
Fall IX, Protokoll Kr. 260.

Airedaleterrierhündin tJessie«, gew. 2. Oktober 1903, erkrankt am

D. Mai,

t am

26. Juni 1904.

1
1

Pneumon.

Herd in

der rechten

Lunge

Pneumon.

Herd in

der linken

Lunge

Herzblut

Leber

Milz

Mikroskop, i
Befund im \
Ausstrich'
prftparate

o

i

Kultur ;

Stäbchen

212
(2 Striche)

Stäbchen
212

(2 Striche)

Strich I : Staph. pyog. aur.
Strich II: Zwei Kolonien
plumpe grobe Bakterien,
eine Kolonie Stäbchen 212
Strich m: Steril

steril steril
(2 Striche)| (2 Striche)

1

Fall X, Protokoll Nr. 266.
Airedaleterrierrüde »Lucas«, gew. am 24. Mars 1904.

Am 30. Mai gesund.

In der Folge Hasten, Nasenausflufs. Künstliche Ernährung, Staupe -
antigourmine. Eine Zeit lang scheint der Hund fast hergestellt, dann tritt
eine aurfallende Verschlechterung seines Zustandes ein.

Am 3. Juli Symptome von Pneumonie.

Am 6. Juli ca. 10 Uhr vormittags Exitus.

Sektion 5 Uhr p. m.

In der Bauchhöhle wenig blutig seröse Flüssigkeit. Die rechte Lunge
mit Ausnahme ganz geringer Randpartien am Oberlappen in toto pneumonisch
infiltriert, meist in stadio suppurationis. Der linke Ober- und Mittellappen
ebenfalls gänzlich infiltriert, der linke Unterlappen bis auf einen haselnufs-
greisen Bezirk in suppuration.

Leber mäfsig brüchig, eher etwas zäh und trocken.

Milz blafs, zäh und trocken.

32

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Der Magen- und Darmtraktus, sowie die Nieren ohne patho-
logische Veränderungen.

Mikroskopisch in der Lunge spärliche Stäbchen wie 212, auch
Diploformen. Sonst nirgends Bakterien nachweisbar.

Kulturell gewinnen wir nur aus den pneumonischen Herden der Lunge
unser typisches Stäbchen ; Striche von Herzblut, Leber und Milz bleiben steril.

Tabelle XL

Fall X, Protokoll Nr. 266.

Airedaleterri errüde »Lucas«, gew. 24. März 1904, erkrankt am 31. Mai,

f am 6. Juli 1904.

o 5 s
£ < S

ill

in

Pneumonischer

Herd

linke Lunge

Pneumonischer

Herd
rechte Lunge

Herzblut > Leber I Galle

Milz

Wenige

Stäbchen 212,

auch zu zweien

angeordnet

Wenige

Stäbchen 212,

auch zu zweien .

angeordnet

Kultur!'

Stäbchen 212
(2 Striche)

Stäbchen 212

steril steril

(3 Striche). (3 Striche)

steril

steril
(2 Striche)

Fall XI, Protokoll Nr. 261.
Airedaleterrierhündin »Sitta«, gew. am 2. Oktober 1903.

Am 29. Mai gesund.

Am 30. Mai etwas Husten, seröser Nasenausflufs. Im weiteren Verlaufe
entwickelt sich der typische Symptomenkomplex der Staupe, insbesondere
treten hier die nervösen Erscheinungen stark in den Vordergrund (Masseteren.-
krämpfe, Zucken der Beine).

Anfangs Juli starkes nervöses Zittern der Kaumuskeln bei psychischer
Erregung. Der Husten verliert sich erst gegen Mitte Juli, die nervösen.
Symptome nehmen ab und Ende Juli scheint das Tier gesund. Ab und zu
treten im Laufe der nächsten Monate noch leichte Zuckungen der Gesichts-
muskulatur auf, zurzeit (November) sind auch diese geschwunden.

Wenn wir nun den Verlauf der eben geschilderten eilf
Krankheitsfälle überblicken, so fällt uns vor allem der Umstand
auf, dafs von 10 Todesfällen nicht weniger als 8 mit Pneumonie
kompliziert waren, ja wir nehmen gar keinen Anstofe, direkt
diese Pneumonien für den letalen Ausgang verantwortlich zu
machen.

Nur Fall I und II sind offenbar reine Septikämien
mit schweren toxischen Erscheinungen gewesen.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 33

Über Fall I haben wir folgende Vorstellung : Die Hündin ist
infolge der Berliner vielleicht schon infolge der vorhergehenden
Münchener Ausstellung erkrankt. Wir sagen »infolge«:, denn nach-
dem Ligni&res uns gezeigt hat, dafs in der Nase gesunder Hunde
seine Pasteurella gefunden wird, scheint uns die Möglichkeit ge-
geben, dafs — wenn sie überhaupt der Erreger der Hundestaupe
ist — insbesondere jüngere, weniger widerstandsfähige Hunde
durch Strapazen und mangelhafte Ernährung, wie sie ja mit
jeder Ausstellung unvermeidlich verbunden sind, in einen Zu-
stand »minoris resistentiaec gebracht werden, so dafs der
etwa vorhandene Erreger sich leicht schädigend bemerkbar
machen kann. Dafs dann solche erkrankte Hunde mit ihren
virulent gewordenen Keimen eine gute Infektionsquelle für andere
abgeben, hegt auf der Hand. Sei dem nun wie immer, Tatsache
ist, dafs Sally aus Berlin am 11. Mai sehr abgemagert (sie sah
»gewachsene aus) und hustend eintraf.

Die günstigen Lebensbedingungen, unter denen sie nun in
den nächsten Tagen (11. bis 19. Mai) zu Hause wieder stand,
trugen wohl im Vereine mit der natürlichen Widerstandskraft
des immerhin schon über 7 Monate alten Tieres dazu bei, die er-
folgte Infektion nicht in allzu schweren Symptomen auftreten zu
lassen. Es mag irgendwo im Körper ein Depot von Infektions-
erregern den Kampf mit dem Organismus geführt haben. Durch
die Reise zur Wiener Ausstellung nun, welche bei der üblichen
schwerfälligen Manipulation des Bahnbetriebes die Tiere zu 48-
stündiger Enthaltsamkeit von Futter und Wasser zwang, durch
die Strapazen und Aufregungen der Ausstellung selbst und gewifs
nicht zum Geringsten durch den wiederum zwei Tage währenden
Rücktransport bei grofser Hitze (Ende Mai) sind Noxen genügend
gegeben, um begreiflich erscheinen zu lassen, dafs der nunmehr
äufserst geschwächte Organismus von Bakterien geradezu über-
schwemmt worden war, und dafs die so intensiv sich geltend
machende toxische Wirkung rasch zum Tode führte.

In der Tat konnten wir auf dem Wege der Kultur
aus Herzblut und Organen, wie wir es bei septikä-
mischen Erkrankungen gewöhnt sind, ein ovoides,

Archiv für Hygiene. Bd. LIII. 3

34 Ein Beitrag zur Ätiologie der Handestaupe.

dem Erreger der Hühnercholera aufserordentlich
ähnliches Stäbchen gewinnen, das wir in allen
anderen sezierten Fällen — oft nicht ohne Mühe —
ausnahmslos wieder fanden, und das sich im Tier-
experiment auch für den Hund als pathogen erwies.

Auch in Fall II (Tabelle III) war die Infektion eine so
überaus heftige, dafs das ohnedies erst 8 Wochen alte Tier schon
innerhalb von 30 Stunden in schwerem Koma seiner Krankheit
erlag. Während wir mikroskopisch hier im Herzblut dasselbe
Stäbchen nachweisen konnten, welches uns bei Fall I die Kultur
geliefert hatte, bedurfte es hier erst des kleinen Kunstgriffes
zweimaliger Überimpfung, bzw. der Filtration durch ein empfäng-
liches Versuchstier (Kaninchen), um den durch einen Konkurrenten
verdeckten spezifischen Mikroorganismus in Reinkultur zu er-
halten.

Auffallend aber sowohl in diesen, als auch in den anderen
mitgeteilten Fällen ist die Beobachtung, dafs es nur vereinzelt
gelingt, schon mikroskopisch im Ausstrichpräparat die für die
Staupe wohl ohne Zweifel verantwortlichen Bakterien zur Ansicht
zu bringen. So konnten wir beim Hunde nur einmal (Fall II,
Tabelle III) unter zehn Fällen im Herzblut das typische Bakterium
mikroskopisch nachweisen und es nur viermal daraus durch die
Kultur gewinnen. Letzteres war der Fall in den beiden septi-
kämischen Fällen I und II, bei dem immerhin schon im Laufe
von 6 Tagen tödlich verlaufenen Fall III und bei Fall IX. In
diesem ist es wohl nur glücklicher Zufall gewesen, wenn es uns
gelungen ist, aus dem Herzblute unseren Erreger zu züchten,
denn das Resultat dreier Agarstriche bestand in einer einzigen
Kolonie unseres typischen Stäbchens, das von begleitenden
Staphylokokken fast erdrückt war. Wir haben schon oben be-
tont, dafs die bei längerem Verlaufe der Krankheit auftretenden
Sekundärinfektionen schuld daran tragen dürften, dafs der eigent-
liche Erreger der Staupe oft nicht mehr auf unseren Nähr-
substraten zur Entwicklung gelangen kann.

In keinem unserer zehn natürlich erkrankten Fälle — mit
Ausnahme des septikämischen Falles I — ist es uns gelungen,

Von Dr. Oskar R. von Wunechheim. 35

das Stäbchen aus der Leber oder Milz zu züchten, wohl aber in
den Fällen, wo wir experimentell mit der Reinkultur Hunde ge-
tötet hatten.

Ausnahmslos dagegenwaren wir in derLage, das-
selbe aus den pneumonischen Herden zu gewinnen.
Da aber gerade in der Lunge den Misch- und Sekundärinfektionen
alle Wege offen stehen, nimmt es uns sehr wunder, dals wir
nur zweimal aufser dem typischen Stäbchen, welches sich wohl
zweifelsohne bei längerem Verlaufe der katarrhalischen Affektion
in der Lunge ansiedelt und so die tötlichen Pneumonien ver-
ursacht, hier andere Bakterien (Kokken) gefunden haben.

Morphologisches und kulturelles Verhalten des isolierten
Kurzstäbchens.

Wir haben bereits darauf hingewiesen, dafs das von uns in
sämtlichen Staupefällen, welche wir zu sezieren Gelegenheit hatten,
gefundene ovale Kurzstäbchen im mikroskopischen Bilde dem Er-
reger der Hühnercholera durchaus ähnelt. Wir finden, allerdings
meist nur wenige, kleine kurze Stäbchen (0,3-0,5 : 0,75-1,5 [*) mit ab-
gerundeten Enden, die in nicht überfärbten Präparaten deutlich aus-
gesprochene Polfärbung zeigen. In Ausstrichpräparaten, welche aus
pneumonischen Herden angefertigt waren, zeigten sich unsere Bak-
terien häufig zu zweien angeordnet, mit Kapseln umgeben, sehr an
das Bild des Diplokokkus Fränkel-Weichselbaum erinnernd.

Diese unsere Beobachtungen stehen im Widerspruch mit den
Angaben von Lignifcres über seinen Bazillus, wenn wir auch
im allgemeinen der Ansicht sind, dafs der von Ligniferes in
Argentinien gefundene und beschriebene Erreger der »Pasteurellose
caninec wohl mit unserem europäischen Erreger der Hundestaupe
nahe verwandt sein dürfte (vgl. die Kulturmerkmale auf Tabelle I).
Das Stäbchen von Ligniöres soll ja nach dessen Beschreibung,
frisch aus dem Hunde gezüchtet, ein langer .Bazillus sein, der
erst nach der Passage durch das Meerschweinchen seine charak-
teristische »kokkobazillärec Form annehme. Eine solche merk-
würdige Metamorphose konnten wir niemals beobachten; hatten
wir es mit unserem typischen Stäbchen 212 zu tun, dann zeigte

3*

36 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

es seine Form sowohl im Ausstrichpräparate als in der Kultur,
abgesehen von ganz geringen Gröfsenschwankungen, immer in
gleicher Weise; andere mitunter gefundene Formen (zweimal
lange Stäbchen) versägten stets im Tierversuch und waren ganz
gewifs erst sekundär beteiligt gewesen. Immerhin möglich scheint
uns aber, dafs es vielleicht Ligni&res so ergangen sein könnte
wie uns bei Fall II (Sektionsprotokoll), und dafs er erst durch
die Tierpassage zu einer Reinkultur gelangt sei.

Morphologisch und kulturell besteht in vielem eine gewisse
Kongruenz zwischen unserem Mikroorganismus und den bisher
beschriebenen Erregern der hämorrhagischen Septikämie (Hühner-
cholera), wenn beide auch durch ihr Verhalten auf der Kartoffel,
bezüglich der Indolbildung und Milchgerinnung und ganz be-
sonders hinsichtlich der Pathogenität auseinandergehen.

Bezüglich des Wachstums unseres Stäbchens stellt die Tem-
peratur von 37° C das Optimum dar, doch entwickelt sich
der Mikroorganismus auch bei 22 ° C und Temperaturen darunter
in typischer Weise.

Sporen werden nicht gebildet. Der Bazillus verhält sich
gramnegativ.

Auf dem Agarstrich uncharakteristischer, weif slicher, diffuser,
kräftiger, feuöhtglänzender Belag, im durchfallenden Licht an
den Rändern opalisierend. Gasbildung häufig. Agarstich
wie bei der Hühnercholera, Nährboden durch Gasbildung oft zer-
rissen. In Traubenzuckeragar Gasproduktion ungemein heftig.

In der Agarplatte finden wir nach 24 Stunden hirsekorn-
bis linsengrofse gelblichweifse opake glänzende Kolonien, die im
durchfallenden Lichte leicht opalisieren. Die Ränder sind meist
scharf und glatt, mitunter jedoch auch leicht gekerbt, was be-
sonders bei kleineren Kolonien in Erscheinung tritt. Die Kolo-
nien sind oft granuliert.

Der Gelatinestrich ist nach drei Tagen mit weifser, opaker
Kultur bewachsen, die Vegetation hält sich vom Rande des
Reagensgläschens fern.

Keine Verflüssigung der Gelatine.

Der Gelatinestich zeigt Nagelkultur.

Von Dr. Oskar R. von Wonscnheim. 37

In der Gelatineplatte beobachtet man nach 3 — 4 Tagen
Wachstum. Die tiefliegenden Kolonien erscheinen rund, bräun-
lich mit scharfem Rande. Die oberflächlichen sind oft unregel-
mäßig polygonal, zart gekörnt, mit deutlichem Vegetations-
zentrum.

Auf Blutserum gedeiht der Mikroorganismus, doch nicht
besser als auf Agar. Wir sahen im Gegensatz zu Ligniferes
Kulturen aus dem Tierkadaver mitunter auf Agar angehen,
während sie auf Serum ausblieben.

In Bouillon tritt diffuse Trübung ein, oft auch die Bildung
einer starken Kahmhaut.

Auf der Kartoffel ist das Verhalten ein und desselben
Stammes (212) verschieden gewesen. Impften wir mit der direkt
aus dem Hunde gezüchteten Kultur, so beobachteten wir (am
dritten Tage) einen feuchten, schmierigen, weifslichen, von der
Oberfläche der Kartoffel sich gut abhebenden Belag ohne Ver-
färbung der Kartoffel. Dieselbe Kultur, nur einmal durch das
Kaninchen gegangen, wuchs mit Bräunung der Kartoffel als
gelblichbräunlicher, schmieriger Strich (3.-4. Tag) etwa so, wie
wir es bei Bacterium coli zu beobachten gewöhnt sind.

(Der Ligniöressche Bazillus wächst auf Kartoffel ipas de
culture visible h Toeil nuc.)

Milch wird nicht koaguliert.

Indol wird nicht gebildet.

Traubenzuckerbouillon wird kräftig vergoren.

Pathogenität.

Unser Mikroorganismus ist für eine grofse Anzahl von Tieren
sehr pathogen.

WeifseMäuse wurden durch subkutane Einverleibung einer
Ose 24 stündiger Agarkultur innerhalb von 15 Stunden getötet.

Junge weilse Ratten erlagen ebenfalls rasch der subku-
tanen Impfung, alte Ratten erkrankten zwar, gingen aber nicht
zugrunde.

Meerschweinchen erliegen der Impfung innerhalb von
48 Stunden oder nur wenig darüber.

38 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Kaninchen zeigen sich für Impfungen mit Reinkulturen
sehr empfänglich und gehen stets zugrunde, doch nicht so rasch
wie bei Infektionen mit Hühnercholera. Öfters, besonders dann,
wenn der Verlauf sich mehrere Tage hinzieht, finden wir an der
Infektionsstelle ein sulziges, mitunter schwartiges Infiltrat, welches
manchmal eine grofse Ausdehnung einnimmt.

Hühner gingen nach 48 Stunden,

Tauben innerhalb von 16 — 18 Stunden zugrunde.

Naturgemäfs waren die Versuche an Hunden von dem
gröfsten Interesse und mögen hier einige unserer Protokolle wieder-
gegeben sein. Zur Zeit, als wir unsere ersten Reinkulturen aus
Fall I gewonnen hatten, stand uns nur ein gewifs schon über
ein Jahr alter Hund als Versuchstier zur Verfügung, den wir nur
ungern in Verwendung nahmen, nachdem ja die allgemeine und
unsere persönliche Erfahrung darauf hinwies, dafs mit steigendem
Alter die Empfänglichkeit für das Staupevirus abzunehmen pflegt.
Dennoch war der Erfolg ein sehr zufriedenstellender.

Pinscherbastard „Bubi", Protokoll Nr. 220,

erhält am 1. Juni 1904 ein halbes Röhrchen 24 stündiger Agarkultur (Fall I,
Stäbchen 212) intraperitoneal injiziert.

Am 4. Juni Appetitmangel.

Am 5. Juni kränker, frifst nichts mehr.

Am 6. Juni trübe Augen, seröser Ausflufs aus der Nase. In der Folge
wechselnder Befund ohne besondere Erscheinungen.

Am 11. Juni starker typischer eiteriger Ausflufs aus der Nase.

Am 12. Juni schlechtes Gehen, Steifigkeit in der Hinterhand.

Am 13. Juni das rechte Auge ganz verklebt, Hinterhand fast gelähmt,
wird nachgeschleppt.

Am 14. Juni status idem. (Vgl. Tierexperiment auf Tabelle XII, S. 41.)

Am 15. Juni leichte Besserung der Lähmungserscheinungen.

Am 17. Juni Verschlimmerung.

Am 18. Juni starke Krämpfe, Gesicht ganz verfallen, das Tier kann
sich nicht mehr erheben, fast agonal.

Am 19. Juni sehr starker Ausflufs aus der Nase, fast ununterbrochene
Krämpfe. Exitus in der Nacht zum 20. Juni.

Sektion am 20. Juni, 11 Uhr vormittags.

Keine Ergüsse in den serösen Höhlen, keinerlei Erscheinungen von
Seiten der Lungen. Magen- und Darmtraktus normal.

Leber sehr brüchig und blutreich.

Milz pulpareicher als sonst bei Sektionen von Hunden beobachtet.

Von Dr. Oskar R. von WunBchheim. 39

Mikroskopisch fanden sich in der Leber plumpe grofse Stäbchen,
in der Milz änfserst zahlreiche ovale typische Stäbchen 212. Im Herzblut
konnten keinerlei Bakterien nachgewiesen werden.

Die Kultur ergab aas Herzblut, Leber und Milz unser Stäbchen 212.

Ein anderer Hund, im Alter von 3 l l 2 Monaten erhielt
ein Röhrchen 24 stündiger Agarkultur intraperitoneal. Wir fanden
ihn am nächsten Morgen tot. Im Herzblut, Leber und Milz
fanden sich überall zahlreiche typische Stäbchen vor, und auch
die Kultur ergab aus allen Organen das inokulierte Stäbchen 212.

Da wir nun gesehen hatten, dafs unsere angewandten Kultur-
mengen unbedingt den Tod nach sich ziehen, gaben wir einem
anderen ca. 3 — 4 Monate alten Hunde nur 3 Ösen Kultur intra-
peritoneal. Das Tier ist einige Tage sehr krank und magert auf-
fallend ab, erholt sich sodann wieder ziemlich rasch. Vier Wochen
nach der ersten Injektion erhält der Hund die als unbedingt
tödlich erwiesene Dosis von 1 Röhrchen 24 stündiger Agarkultur
intraperitoneal. Das Tier reagiert diesmal kaum, es hat offenbar
durch die erste Einverleibung einen gewissen Grad von Immunität
erlangt.

Derselbe Versuch, an einem anderen Hunde mit einer anderen
Staupekultur wiederholt, gab das gleiche Resultat.

Auf subkutane Impfungen reagieren die Hunde nicht
in so stürmischer Weise wie auf intraperitoneale. Wir erzielten
durch subkutane Injektion bei einem 8 Monate alten Hunde zu-
nächst eine starke Reaktion an der Injektionsstelle. Die Um-
gebung derselben schwoll mächtig an, war sehr schmerzhaft,
nach einigen Tagen entwickelte sich ein etwa apfelgrofser Abszefs,
welcher spontan aufbrach. Etwa 4 Wochen nach der Infektion
entwickelte sich eine leichte Konjunktivitis beider Augen und
eitriger typischer Ausflufs aus der Nase trat auf. Der Hund war
sehr herabgekommen und erholte sich nicht mehr. Er ging an
zunehmender Kachexie ca. 3 Monate nach seiner Infizierung zu-
grunde.

Ein anderer Versuch sollte uns Aufklärung bringen, ob
zwischen der Pneumonie und unserem Stäbchen wohl ein ätio-
logischer Zusammenhang mit Recht angenommen werden könne.

40 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Bastardhund. Protokoll Nr. 230.
Zirka 10 Wochen alt, Wurfbruder zu Fall VII (Tabelle VIII).

Am 13. Juni inhaliert der Hund durch 20 Min. lang eine Aufschwem-
mung unserer Reinkultur mittels des Buchn ersehen Zerstäubers.

Am 14. Juni und den folgenden Tagen sehr schläfrig.

Am 17. Juni seröser Ausflurs aus der Nase.

Am 19. Juni typisches Nasensekret, sehr krank.

Am 20. Juni Husten.

In der Folge wechselndes Befinden, das sich anfangs Juli verschlechtert.
Das Tier wird am 12. Juli Früh tot aufgefunden.

8 e k t i o n. Der Oberlappen der rechten Lunge zur Hälfte pneumonisch
infiltriert, teilweise in Suppuration, der Mittellappen zur Gänze vereitert, im
Unterlappen einige pneumonische Herde. Ober- und Unterlappen der linken
Lunge frei, im Mittellappen zwei gröTsere pneumonische Herde.

Leber brüchig, mäfsig blutreich.

Milz zäh, Olafs.

Die linke Niere hydronephrotisch.

An Magen- und Darmtraktus nichtB Pathologisches.

Mikroskopisch fanden sich in den pneumonischen Herden zahl-
reiche Bakterien wie Stäbchen 212, in Herzblut, Leber und Milz konnten
keine Bakterien nachgewiesen werden. In der linken Niere fanden sich
aufser anderen Bakterien auch polgefärbte ovale Stäbchen.

Die Kultur ergab aus den pneumonischen Herden und aus dem Herz-
blut das Stäbchen 212, vermischt mit Kokken. Die aus der Milz und Niere
angelegten Kulturen zeigten das Stäbchen 212 rein. Die Kulturen aus der
Leber blieben steril. Kulturen aus Herzblut auf Serum zeigten das Stäb-
chen 212 in Reinkultur.

Es erscheint uns also nach dem Ausfall dieses
Experimentes nicht mehr zweifelhaft, dafs unser
Stäbchen auch bei der Entstehung der Pneumonien
in unserer Epidemie seine Rolle gespielt hat.

Durch Fütterungen mit dem in Milch verabreichten Mikro-
organismus gelang es uns nicht, bei jungen Hunden Staupe zu
erzeugen.

Auch das Einnähen von Organstückchen eines aller-
dings erst nach langer Krankheit verendeten Tieres (Fall X) konnte
bei Hunden keine Erkrankung hervorrufen, doch zeigten sich hier
Kaninchen als aufserordentlich wertvolle Indikatoren. Trotzdem
wir bei Fall X in Herzblut, Leber, Galle und Milz weder mikro-
skopisch noch kulturell imstande waren, unseren Mikroorganismus
nachzuweisen, gingen zwei Kaninchen, denen ein Stück Leber

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim.

41

bzw. Milz des Tieres unter die Haut eingenäht worden war, das
eine nach 3, das andere nach 14 Tagen zugrunde, und konnten
wir unser Stäbchen 212 aus den Organen der Kaninchen in
Reinkultur gewinnen.

Wir haben diese Eigenschaft des Kaninchens für die Staupe-
erreger einen trefflichen Kulturboden darzubieten, mit Erfolg be-
nützt, um deren Vorhandensein in den Sekreten der Konjunk-
tiva und der Nase staupekranker Hunde nachzuweisen bzw. deren
Virulenz zu prüfen. Nachfolgende Tabelle mag kurz darüber
orientieren.

Tabelle XII.

Hund

Nasensekret wurde

einem Kaninchen

eingeimpft am

Tot nach
Tagen

Reinkultur

des Stäbchens wurde

gewonnen aus

Pi nscherbastard
Protokoll Nr. 220 s. S. 38

Fall VIII
Protokoll Nr. 257

Derselbe

Fall IX
Protokoll Nr. 260

Derselbe

14. Juni

14. Juni

17. Juni
14. Juni

17. Juni

7

34

3
34

Herzblut und Leber

Leber

Hersblut und Leber
Herzblut und Leber

Herzblut und Leber

Ein auffallender Unterschied macht sich da bei Fall VII [
und IX bemerkbar bezüglich des Ausfalles der am 14. bzw.
17. Juni mit Nasensekret vorgenommenen Inokulationen. Die
an ersterem Termine geimpften Kaninchen erlagen erst nach
4 Wochen der Infektion, während die am 17. Juni infizierten
Tiere schon nach 3 bzw. 4 Tagen zugrunde gingen. Da dürften
wohl Quantitäts- und Virulenzunterschiede eine Rolle gespielt
haben.

Als wir uns überzeugt hatten, dafs wir imstande seien, mit
unseren Reinkulturen Hunde typisch krank zu machen, ja zu
töten, untersuchten wir noch die Giftwirkung unserer Kul-
turen in Piltraten.

Ein Hund von ca. 8 — 9 Monaten erhielt 20 ccm Berkefeldflltrat einer
dreitägigen Bouillonkultur intraperitoneal. Am nächsten Tage zeigte sich

42 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

derselbe schwer krank, so dafs wir überrascht waren, ihn am zweiten Tage
noch am Leben zu finden. Nach einem ungefähr 6—7 Tage anhaltenden
schweren Somnolenzzustande wird der Hund vollständig gesund.

Empfindlicher zeigte sich das Kaninchen. Ein Hase, der 10 ccm des-
selben Filtrates erb alten hatte, ging unter starkem Abmagern nach 5 Tagen
ein. Krämpfe wurden bei beiden Tieren nicht beobachtet.

Erwähnenswert scheint uns auch eine epidemiologisch hin-
sichtlich unseres Erregers interessante Tatsache.

Der letzte Todesfall im Zwinger ereignete sich am 6. Juli.
Wir hatten in dem Bestrehen, noch eine gröfsere Anzahl von
Fällen der bakteriologischen Untersuchung zuzuführen, in den
letzten Tagen des Juni einige junge Hunde in den Hundestall
gebracht, doch erkrankte trotz des innigen Kontaktes mit Fall X
keines der Tiere, und auch in der Folge ereignete sich kein
Fall von Stallinfektion, alle blieben gesund.

Im Institut befanden sich zu dieser Zeit streng separiert
eine Reihe von Hunden, welche zu den verschiedensten Ver-
suchen mit dem Staupevirus benutzt worden und teils nicht er-
krankt waren, teils schon einen gewissen Grad von Immunität
erworben hatten ; auch ein Hund, welcher auf subkutane Einver-
leibung von Reinkultur mit Abszedierung und Nasenausflufs
reagiert hatte, befand sich darunter; derselbe wies jedoch zu
jener Zeit keine katarrhalischen Symptome mehr auf. Alle diese
Hunde wurden aus äufseren Gründen am 25. Juli in den Zwinger
verbracht. Nach einiger Zeit sahen wir von neuem eine Staupe-
epidemie ausbrechen, welche nun sämtliche Versuchshunde dahin-
raffte mit Ausnahme derjenigen, welche erst kleine, dann gröfsere
Dosen Reinkultur erhalten hatten und so wohl immunisiert worden
waren. Es unterliegt nach der ganzen Sachlage keinem Zweifel,
dafs die im Laboratorium mit Reinkulturen behandelten Tiere
den ihnen anhaftenden Infektionsstoff auf die anderen Hunde
übertragen haben.

Die drei in der ersten Epidemie gesund gebliebenen Airedale-
terrier erkrankten auch diesmal nicht.

Dafs aufser Hunden auch die Katzen für das Staupekon-
tagium empfänglich sind, ist eine seit langem bekannte Sache.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 43

Wir versuchten also mit unseren Reinkulturen auch bei Katzen
ein Resultat zu erzielen.

Eine Katze erhält etwa ein halbes Röhrchen 24 stündiger Agarkultur
intraperitoneal. Am nächsten Tage ist das Tier schwer krank und geht nach
6 Tagen zugrunde.

Die Sektion ergab eine fibrinöse Peritonitis, auch Exsudat im Herz-
beutel. Mikroskopisch konnten wir in allen Organen die injizierten
Stäbchen nachweisen, und die Kultur liefe in allen angelegten Röhrchen
unser Stäbchen 212 in Reinkultur erkennen.

Eine zweite Katze, welche mit der eben erwähnten den Käfig
geteilt hatte, ohne künstlich infiziert worden zu sein, fing unge-
fähr eine Woche nach dem Tode ihrer Gefährtin an zu kränkeln,
stark abzumagern und ging nach weiteren 8 Tagen ein.

Die Sektion zeigte uns eine schwere Pneumonie der rechten Lunge,
wie wir sie so häufig bei unseren Hunden gesehen hatten.

Mikroskopisch und kulturell konnten wir in den pneumonischen
Herden, im Herzblut, Leber und Milz die typischen Stäbchen nachweisen,
die wir der anderen Katze inokuliert hatten.

Das zweite Tier war also einer reinen Kontakt-
infektion erlegen.

Obersicht.

Wir glauben, im vorhergehenden durch den Ausfall unserer
Tierexperimente an Hunden und an der Katze wohl zur Genüge
klargelegt zu haben, dafs ein ätiologischer Zusammen-
hang zwischen unseren aus staupekranken Hunden
gewonnenen Kulturen und der Erkrankung unserer
Versuchstiere bestanden hat. Es ist uns zweifellos
gelungen, durch Einverleibung unserer Reinkultur
bei Hunden jene Krankheitsformen hervorzurufen,
welche man als die katarrhalische und nervöse Form
der Staupe bezeichnet, ja wir konnten sogar durch
Inhalation unseres Erregers den Ausgang in Pneu-
monie, wie ihn uns die meisten Fälle unserer Zwinger-
epidemie dargeboten hatten, künstlich hervorrufen.

Es sei bei dieser Gelegenheit hervorgehoben, dafs wir in
keinem unserer zehn genauest beobachteten Fälle imstande waren,

44 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

das pustulosa Exanthem, dessen differentialdiagnostischen Wert
manche Autoren so ausdrücklich betonen, konstatieren zu können.
Die in unserer Epidemie so gut ausgesprochenen Symptome, als
seröse, später eitrige Konjunktivitis, erst seröser, später eitriger
Nasenausflufs, Husten, Krämpfe tonisch-klonischer Form, Paresen
der Nachhand, Pneumonie, sind wohl schon an und für sich so
beweisend, dafs wir die Sicherung der Diagnose »katarrhalische
und nervöse Form der Staupe c wohl nicht erst von dem Auf-
treten der > Staupepusteln c abhängig zu machen brauchten. Wir
haben im Gegenteil die Überzeugung gewonnen, dafs Staupe
durchaus ohne jedes Exanthem verlaufen kann, und möchten
hier nochmals die Ansicht mancher Autoren registrieren, dafs
das Staupeexanthem lediglich als eine Sekundärinfektion aufzu-
fassen sei, eine Ansicht, die in neuester Zeit Ligniferes mit
Hartnäckigkeit gegenüber Trasbot verficht, der ja überhaupt
die Hundestaupe, wie eingangs erwähnt, als eine Pockenkrank-
heit aufgefafst sehen will.

Von grofsem Interesse ist es für uns, ein Urteil darüber zu
gewinnen, in welchem Verhältnis der von Ligniferes be-
schriebene Erreger der »Pasteurellose canine« zu
unserem Mikroorganismus steht.

Wir haben bei Besprechung der Literatur uns bereits aus-
führlich mit der Arbeit von Lignifcres beschäftigt und hervor-
gehoben, dafs dieser Forscher seinen Kokkobazillus in die selbst
konstruierte Gruppe der Pasteurella einreiht und dafs er die Zu-
gehörigkeit zu dieser Gruppe streng umschrieben hat.

Bezüglich der Stellung von unserem Mikroorga-
nismus im Bakteriensystem sind wir der Ansicht,
dafs derselbe seinem morphologischen und bio-
logischen Verhalten nach in die Gruppe der Bakte-
rien der hämorrhagischen Septikämie (Hueppe, Kitt)
gehöre.

Lignit res verlangt unter den Kriterien der Pasteurellose,
dafs der »microbe ne donne aucune culture visible sur la pomme
de terrec, eine Forderung, die unser Bazillus, wie wir bereits dar-
getan haben, nicht erfüllen kann. Fehlt nun unserem Stäbchen

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 45

für seine absolute Identität mit der > Pasteurellose caninec das
gleiche Verhalten auf der Kartoffel, worauf Lignifcres ein viel-
leicht doch zu grofses Gewicht zu legen scheint, so ist dies aber
nicht der einzige Unterschied, der zwischen unseren Mikro-
organismen zu verzeichnen ist. Wir haben schon oben darauf
hingewiesen, dafs unser Stäbchen 212 von Anfang an seine
typische Form besitzt und behält, während der Erreger des fran-
zösischen Autors erst nach Tierpassage (I) die »charakteristische
Form« annehmen soll, eine Eigenschaft, welche in der Biologie
der Bakterien wohl noch niemals verzeichnet wurde.

Auch in der Bouillon verhält sich das Stäbchen 212 anders
als die Pasteurellose canine. Während letztere Flocken bildet,
die zu Boden sinkend die Bouillon ungetrübt lassen, trüben
unsere Stämme ausnahmslos die Nährbouillon und bilden eine
Kahmhaut. Bezüglich der Eigenschaft der Pasteurellose canine,
mitunter auf Serum noch zu wachsen, wenn Agar versage,
können wir gegenteilige Erfahrungen vermelden, ohne jedoch
dem Zufall eine mögliche Rolle absprechen zu wollen.

Der Angabe Ligniferes', er habe frisch aus dem Hund
gezüchtete Kulturen für andere Tiere wenig virulent gefunden,
müssen wir auf Grund unserer Experimente widersprechen.

Immerhin aber möchten wir mit diesen Differen-
zen, welche sich vielleicht aus der Verschiedenheit
klimatischer Einflüsse und verschiedenen Labora-
toriumsbedingungen ableiten lassen, nicht eine ab-
solute Artverschiedenheit konstruieren. Denn in
den grofsen Grundzügen sowohl biologischer als
kultureller Natur scheinen uns der von Ligniferes in
Argentinien und der von uns hier isolierte Mikro-
organismus viele gleiche Eigenschaften zu besitzen
(vgl. Tab. I). Ob nun die iPasteurellose canine< Lig-
niferes' und unser »Stäbchen 212c identisch sind,
kann wohl nur durch einen unter gleichen Labora-
toriumsbedingungen vorgenommenen Vergleich
seiner und meiner Reinkulturen entschieden werden.

46 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

Immunität.

Im allgemeinen galten durch lange Zeit die Aussichten, eine
verläfsliche und andauernde Immunität gegen Bakterien aus der
Gruppe der hämorrhagischen Septikämie zu erreichen, nicht für
besonders günstige. In neuester Zeit hat jedoch Kitt ( 67 ) über
recht ermutigende Resultate bei Hühnercholera berichtet, und
auch Lignifcres ( 29 > M ) spricht von befriedigenden Resultaten,
die er mit seinen verschiedenen Pasteurellosen zu verzeichnen
habe. Phisalix ( 81 » 66 ) bringt uns eine Zusammenstellung von
Impfresultaten, die sehr günstig ausgefallen ist, doch macht ihm
Lignifcres mancherlei Einwände. Es gehört nicht in den
Rahmen der heutigen Mitteilungen, auf die Methoden und Resul-
tate der beiden Franzosen näher einzugehen, doch möchten wir
unseren Bericht nicht schliefsen, ohne darauf hingewiesen zu
haben, dafs die von uns auf Seite 39 erwähnten Hunde zweifel-
los durch Verabreichung kleiner Kulturmengen gegen die töd-
liche Dosis widerstandsfähig gemacht worden waren. 1 )

1) Wir wollen noch in Kürze erwähnen, dafs wir versucht haben, unser
wertvolles Material an Hunden durch therapeutische Eingriffe zu retten.
Gerade in der letzten Zeit wufsten kynologische Zeitschriften viel Rühmens-
wertes über ein neues, angeblich spezifisches Heilmittel gegen Hunde-
staupe zu berichten. Dieses »Staupeantigourmine« benannte Mittel
ist ein »Dauerpräparat« von Bierhefe, und wird von der Aktiengesellschaft
für industrielle Bakteriologie >la Zyma« in Montreux (Schweiz) in den
Handel gebracht.

Wir behandelten mit diesem Präparat, uns genauest an die demselben
beigegebene Gebrauchsanweisung haltend, fünf Hunde (Fall III, IV, V, IX
und X), während wir drei Hunde (Fall VI, VII und XI) als Kontrolltiere
unbehandelt liefsen. Sämtliche mit Staupeantigourmine behan-
delten Hunde gingen zugrunde, von den Nichtbehandeiten starben
zwei, einer (Fall XI) blieb am Leben. Wir können also nach dem
Ausfall unserer Versuche dem in Prospekten sehr marktschreierisch
angepriesenen Präparate auch nicht die geringste Heilwirkung
zusprechen. Nicht unerwähnt bleibe, dafs die Gebrauchs Vorschrift die
Anwendung anderer Mittel zu gleicher Zeit mit der Antigourmine ausdrück-
lich verbietet, da hierdurch die Heilkraft derselben beeinträchtigt und die
Wirkung vollständig verhindert werde. Der Preis von 5 Mark für 300 g
macht, da man grofse Mengen des Präparates zu verabreichen gezwungen
ist (z. B. 9 Efslöffel täglich für einen über 8 Wochen alten Hund grofser
Rasse), die Behandlung zu einer recht kostspieligen Sache.

Von Dr. Oskar R. von Wunschheim. 47

Schiurssätze.

1. Wir haben aus einer Reihe von Hunden, welche
an katarrhalischer und nervöser Staupe zu-
grunde gegangen waren, und zwar aus sämt-
lichen Tieren, ein und dasselbe Kurzstäb-
chen isoliert und gezüchtet.

2. Dieses Stäbchen gehört biologisch, morpho-
logisch und kulturell in die Gruppe der
Bakterien der hämorrhagischen Septikämie
(Hueppe, Kitt).

3. Wir waren imstande, durch Inokulationen
mit diesem Stäbchen bei Hunden das Krank-
heitsbild der katarrhalischen und nervösen
Staupe hervorzurufen und halten dasselbe
für den Erreger der Hundestaupe.

4. Wir schlagen für dieses von uns isolierte und
beschriebene Stäbchen den Namen iBacillus
canicidusc vor.

Literatnr.

1. Friedberger and Froh n er, Lehrbach der speziellen Pathologie und
Therapie der Hanstiere, 6. Aufl., 1904.

2. La oßßo n, Inaug.-Diss., Dorpat, 1882, zit. nach Friedberger und Fröhner.

3. Taplin, Stallmeister oder neuere Rofsarzneikunde, nebst einem An-
hang über die Hundeseuche, 1797.

4. Donauer, Vorschläge zur zweckmässigen Behandlung kranker Hunde.
Marburg und Kassel, 1815.

5. Waldinger, Abhandlung über die gewöhnliche Krankheit der Hunde.
Wien und Triest, 1818.

6. v. Gemmeren und Mecke, Anweisung zur Vorbauung und Heilung
der gewöhnlichen Krankheiten der Hunde. Münster, 1833.

7. Delabere-Blain (aus d. Französ. v. P. Eckert), Handbuch über die
Krankheiten der Hunde, 1834.

8. Karle, Rep. 1844, 8. 117.

9. Trastowo, zit. bei Friedberger und Fröhner, s. o.

10. Trasbot, Recueil 1868, 1885, A. d' Alf ort, 1879.

11. Venuta, 11 med. vet, 1873.

48 Ein Beitrag zur Ätiologie der Hundestaupe.

12. Krajewski, Ost Revue, 1881, Nr. 12, 1882, Nr. 1—7 u. 9, ausführliche
Literaturangaben. D. Z. f. T., 1887, 8. 324.

13. Dupuis, Recueil, 1887.

14. Konhäuser, Ost. M., 1884, Nr. 8.

15. Semmer, Deutsche Zeitschrift für Tiermedizin, 1875, S. 204.

16. Rabe, Wiener tierärztliche Wochenschrift, 1883, S. 126.

17. Fried berger, M. J. B. 1877/78, 8. 64, 1882/83, 8. 52, 1886/87, S. 34,
1888/89, 8. 47, 1889/90, S. 140. V. f. Tierärzte, 1881, Heft 5—7 mit
Literaturangaben .

18. Mathis Journal de Lyon 1887, zit nach Friedberger und Fröhner.

19. Marcone und Meloni, Giorn. di A., 1888.

20. Jacquot und Legrain, Recueil, 1890.

21. Galli-Valerio, Clin, vet, 1895, S. 131, und Der Mikroorganismus der
Hundestaupe. C. f. B., 1896, Bd. XIX, 8. 694.

s. auch la meningo-mielite da cimurro. II moderno zooiatro, 1893, Nr. 12.

22. B a b e s und Barsanescu, zit. nach Vecchia (la clinica veterinaria, 1896,
p. 122), vgl. auch Jahresbericht von Ellenberger und Schütz, 1896, S. 68.

23. Millais, The Vet, 1896.

24. Jensen, Maanedskr. f. Dyrl., 1895 u. 1896.

25. TatyetJacquin, Sciences mödicales de Lyon, 1898, Nr. 44.
Dieselben, Maladie du jeune chien. Lyon mödical, 1898, p. 261.

26. Jefs, Berl. t. W., 1899, S. 227. Der Bazillus der Hundestaupe (febris
catarrhalis epizootica canum). C. f. B., XXV, 1899, S. 541.

27. Petropawlowsky, Zur pathologischen Anatomie und Bakteriologie
der Hundestaupe. Russisches Archiv für Pathologie, klin. Med. u. Bak-
teriologie, Lief. 6, 1899, ref. Jahresbericht von Ellenberger und Schütz,
1899, S. 84.

28. Mari, ref. im Jahresbericht von Ellenberger und Schütz, 1899.

29. Lignieres, Oontribution ä l'£tude et a la Classification des Septice' mies
hämorrhagiques. Laboratoire de 1' Association des HacendadoB. Buenos
Aires, lmprimerie Coni freres, 684 nie Peru, 1900, und Sociöte* centrale
de mödecine vötörinaire, 28 juin 1900.

30. Kitt, Septikämie der Vögel (Hühnercholera) im Handbuch der pathog.
Mikroorganismen von Kolle und Wassermann, IL Bd., 1903.
Derselbe, Septicaemia haemorrhagica s-pluriformis. Ebenda.

31. Phi salix, Recherches sur la maladie des chiens. Vaccination du chien
contre l'infection expörimentale. Comptes rendus des 8£ances de
l'Acad£mie des Sciences (Paris), 9. Avril 1901.

32. Derselbe, Academie des Sciences und Sociäte* de Biologie, 1898.

33. J. Lignieres, Sur le microbe de la »Maladie deB chiens« Pasteurellose
canine. Recueil de m öde eine vötärinaire«, Nr. 14, 30 Juillet 1903.

und >Sur la vaccination contre la Maladie des chiens« mit Diskussion
(Trasbot), ebenda, S. 340 ff.

34. Schantyr, Untersuchungen über die Mikroorganismen der Hundestaupe.
Deutsche Zeitschrift für Tiermedizin und vgl. Pathologie, XVIII, 1892.

35. Klett, Die Stuttgarter Hundeseuche. Deutsche tierärztliche Wochen-
schrift, 1899, Nr. 5—8.

Von Dr. Oskar R. von Wunßchheim. 49

36. Albrecht, Eine Hundeseuche in München. Ebenda, 1899, Nr. 21, 22.

37. S c h e i b e 1 , Eine eigenartige im Herbst 1898 anter den Hunden Frank-
furts beobachtete Krankheit. Berliner tierärztl. Wochenschr., 1899, Nr. 7 u. 8.

38. Richter, »Über die Hundeseuche«. Berliner tierärztl. Wochenschr.,
1900, S. 413 u. 424.

39. Mattel, Die Stuttgarter Hundeseuche, österr. Monatsschrift für Tier-
heilkunde, 1900, S. 491.

40. Tremmel, Die Stuttgarter Hundekrankheit in Wien. Tierärztliches
Centralblatt, 1900, Nr. 28, S. 453.

41. Gundelach, Gastroenteritis haemorrhagica. Archiv für Tierheilkunde,
XXVII, 1901, S 308.

42. Zschokke, Die Hundeseuche. Schweizer Archiv für Tierheilkunde.
1900, 8. 241.

43. A. Trävisan, La moria dei cani a Francoforte ed a Stoccarda come
a Veneria. II moderno zooiatro, 1899, p. 247.

44. Huet, BrunetFrlgis, Discussion ä la Societe" de mädecine väteri-
naire pratique Bulletin, 1899, p. 76.

45. Guillemard et Chigot, Epizootie sur la race canine. Notes sur la
gastro-enterite. Bulletin de la Sociäte* de medecine v£terinaire pratique.
1899, p. 101.

46. Ducourneau, Gastro-enterite dysenterique ou hemorrhagique du chien.
Societö centrale de mldecine vöterinaire, 1899, p. 316.

47. BenDanou, Sur une affection gastro intestinale adynamique et ather-
mique che* le chien et chez le chat. Revue vltennaire, 1900, p. 293.

48. E. Bim es et E. 8 eres, Le Typhus du chien (Pasteurellose canine de
Lignieres). Toulouse chez Lagarde et Sebille, 1901.

49. Mouquet, Recueil de meclecine vlterinaire. 30 Juillet 1903, Nr. 14,
Diskussion.

50. M. Butel, Recueil de med. vät. 30 Juillet 1903, Nr. 14, Diskussion.

51. Ch. Bisanti, De la flore microbienne du chien. Rec. de mädecine
v£t 30 Avril 1903, Nr. 8.

52. Boschetti, Sülle dasein" catione pathologiche a proposito di Pasteurella
e Pasteurellosi. Giorn. della R. Societa et Accad. Veterin. Italiana, 1901,
Nr. 14.

53. Montfallet, Etudes danatomie pathologique et de bacteriologie com-
paree. Santiago de Chile. 1901, p. 44.

54. Kitt, Lehrbuch der patholog. Anatomie der Haustiere, 1900, Bd. I, 8. 152.

55. Lignieres, La Vacdnation contre lee Pasteurelloses. Academie des
8ciences (Paris)» 20. Mai 1902.

56. Phi salix, Maladie des jeunes chiens (Statistique) le Progres mädical
Nr. 24, 14. Juni 1902.

57. Kitt, Immunität und Schutzimpfungen bei Geflügelcholera. Handbuch
von Kolle und Wassermann, 21.— 25. Lief., 1904.

Archiv für Hygiene. Bd. Uli.

Über die Aufnahme von Bakterien durch den
Bespirationsapparat.

Von

Prof. M. Picker.

(Aas dem Hygienischen Institut der Universität Berlin. Direktor: Geh.
Medizinalrat Prof. Dr. M. Rabner.)

Nachdem es durch Verfütterung leicht wieder zu erkennender
saprophy tischer Keime sichergestellt war 1 ), dafs die Schleimhaut
des infantilen Magendarmtraktus nicht als keimdicht angesehen
werden kann, mufste sich die Frage aufdrängen, ob denn diese
Eigentümlichkeit der Magendarmschleimhaut allein zukomme,
oder ob nicht der jugendliche Organismus, entsprechend seiner
allgemein gröfseren Infirmität, auch anderwärts zunächst nur mit
unzureichenden Schutzmitteln gegenüber dem Eindringen von
Mikroorganismen ausgestattet sei. Es lag nahe, hierbei das
Augenmerk zunächst auf den Respirationsapparat zu richten.

Der Lösung unserer Frage kann man näher treten, wenn
man jungen Versuchstieren entweder kulturell gut charakteri-
sierte, in der Luft der Untersuchungsräume nicht vorhandene,
oder aber mikroskopisch gut differenzierbare Bakterien mit der
Atemluft verabreicht, um im ersten Falle durch die Kultur, im
letzteren Falle durch Schnittfärbungen ihr weiteres Schicksal zu
verfolgen.

In den folgenden Versuchen wurde das erstere Verfahren
zur Anwendung gebracht.

1) M. F ick er, Diese Zeitschrift, Bd. LII, S. 179.

Aufnahme von Bakterien durch d. Respirationsapparat. Von M. Ficker. 51

In einem besonderen, abgelegenen Zimmer wird in einen sonst als
Trockensterilisator benutzten doppel wandigen Eisenblechkasten mit den
Innenmalsen 30 X 24 X 20 cm das Versuchstier eingesetzt, der Schrank ver-
schlossen und sodann durch die für das Thermometer bestimmte Öffnung
das AusfQhrungsrohr des Buchn ersehen Sprayapparates unter Watte-
dichtung eingeführt. In dem Sprayapparat befindet sich eine wäfsrige Sus-
pension von Prodigiosus oder Rotem Kieler. Der Ballon des Gebläses wird
alle 2—5 Minuten aufgeblasen. Nachdem das Tier eine bestimmte Zeit
diesem Spraynebel ausgesetzt war, wird es in Sublimattücher gehüllt, durch
Stich getötet, abgebalgt, mit Sublimat abgewaschen und auf einem mit
Sublimat befeuchteten Sektionsbrett aufgespannt, dieses wird sofort nach
dem Sektionszimmer transportiert, wo die Sektion sogleich stattfindet Das
Versprayen und Abbalgen, dann das Überbringen und weiterbin das Sezieren
wird von drei verschiedenen Personen ausgeführt, die hierbei untereinander
nicht in Berührung kommen durften. Während der Dauer der Sektion
waren auf dem Arbeitsplatz sechs Luftplatten exponiert. Es zeigte sich,
dafs auf diese Weise eine Verbreitung der verstäubten Keime nach dem
Sektionsraum in keinem Falle eintrat Beim öffnen des Inhalierkastens
war es unvermeidlich, dafs sich die Keime des Kastens der Zimmerluft bei-
mischten, in der Tat wiesen die aufgestellten Luftplatten bis 4 m im. Um-
kreis die verstäubten Keime auf. Einer Verschleppung dieser Keime wurde
dadurch in wirksamer Weise vorgebeugt, dafs von den drei am Versuch be-
teiligten Personen keine die Zimmer der andern betreten durfte, ein öffnen
der Türen erfolgte nur so weit, dafs das Sektionsbrett durchgereicht werden
konnte. Im übrigen wurden dieselben technischen Maisnahmen befolgt
wie sie in dieser Zeitschrift, Bd. 52, S. 179 ff. von mir geschildert sind.

Versuch 1.

Kaninchen, grau, 8 Tage alt, 160 g ; verbleibt 1 */« Stunden im Inhalier-
kasten. Zum Versprayen kommt eine Aufschwemmung von 3 Ösen 16 Stun-
den lang bei 27° gezüchteter Prodigiosusagarkultur in 15 cem steril is.
Leitungswasser. Von Blut und Organen werden insgesamt 45 Bouillon-
röhrchen geimpft. Die Überimpfung der angegangenen Röhrchen auf Kar-
toffel ergibt, dafs alle 4 Röhrchen von Lunge, sowie 2 Röhrchen von Herz-
blut Prodigiosus enthalten.

Versuch 2.

Kaninchen, grauweifs I, 8 Tage alt, 152 g ; verbleibt 2 7* Stunden im
Inhalierkasten. Geimpft werden mit Blut und Organen 42 Bouillonröhrchen.
Alle 5 Lungenröhrchen, 1 Röhrchen mit Herzblut, 1 mit Leber, enthalten
Prodigiosus.

Yersueh 3.

Kaninchen, grauweifs II, 5 Tage alt, 102 g; verbleibt l 9 /« Stunden im
Inhalierkasten, gesprayt wird 1 Stunde lang, dann */ 4 Stunden lang nicht.
Zum Verstäuben kommt eine Aufschwemmung von einer 1 Tag alten Agar-
kultur (27 •) vom Roten Kieler in 15 cem sterilisiertem Leitungswasser. Von
51 geimpften Röhrchen enthalten alle 4 Lungenröhrchen, 5 Blutröhrchen,
2 Leberröhrchen Roten Kieler.

4*

52 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationsapparat

Yersueh 4.

Meerschweinchen, 8chw*rzgelb, 3 Tage alt, 68 g; verbleibt 2 Stunden
10 Minuten im Inhalierkasten, Zum Versprayen kommt eine Suspension
von 5 Ösen Agarkultur des Roten Kielers (1 Tag, 27°) in ca. 15 ccm
sterilis. Leitungswasser. Gesprayt wird 1 Stunde lang, darnach 1 Stunde
10 Minuten lang nicht. Von 41 geimpften Bouillonröhrchen enthalten
4 Rohrchen mit Blut Roten Kieler. Lunge war nicht auf Roten Kieler
geprüft.

Yersueh 5.

Meerschweinchen, schwarz, 2 Tage alt, 58 g; verbleibt 2 Stunden im
Inbalierraum. Prodigiosusspray (5 Ösen Agarkultur, 1 Tag, 25 °, in 15 ccm
sterilis. Leitungswasser). Von den ca. 40 geimpften Bouillonröhrchen ent-
halten alle 3 Lungenröhrchen, sowie 3 Blutröhrchen Prodigiosus.

Yersueh 6.

Meerschweinchen, gelbschwan, 2 Tage alt, 63 g; verbleibt IV« Standen
im Inhalierraum, gesprayt wird mit Prodigiosussuspension (5 Ösen Agar-
kultur, 1 Tag, 27 °, in ca. 20 ccm Wasser) 1 Stunde lang, % Stunden lang
nicht. Von 38 geimpften Bouillonröhrchen enthalten beide Röhrchen mit
Lunge, 2 mit Blut Prodigiosus.

Um einen Einblick in den Gehalt der Inhalationsluft an verstäubten
Keimen tu gewinnen, wurden am Schlufs des 3. und 6. Versuchs je 100 ccm
Luft aus dem Isolierraum entnommen, in 50 ccm sterilen Wassers aufge-
fangen und hiervon Keime gezählt. Es ergab sich, dafs in 100 ccm Luft
im 3. Versuch 52000, im 6. Versuch 15200 vorhanden waren.

Aus diesen Versuchen ist zu ersehen, dafs bei allen sechs
säugenden Versuchstieren, die einem Spray von
Prodigiosus oder Rotem Kieler ausgesetzt waren,
ausnahmslos im Blut, in zwei Fällen auch in der
Leber die verstäubten Keime enthalten waren. Da
der Aufenthalt im Inhalierkasten im Mittel nur 2 Stunden betrug
und die Sektion sich sofort anschlofs, so kann hier von einer
Vermehrung der inhalierten Keime, von einer Infektion, nicht
die Rede sein, zumal wir wissen, dafs der Prodigiosus im Kanin-
chenkörper (Halb an) 1 ), und speziell in der Kaninchenlunge
(Paul) 2 ) schon in den ersten Stunden nach der Einführung einen
starken Rückgang erfährt.

1) Halb an, Siteungeber, d. K. Akad. d. Wiseensch., Wien, CV, Abt. III,
Des. 1896.

2) Paul, L., Zeitscbr. f. Hyg., Bd. 40, S. 499.

Vod Prof. M. Ficker. 53

Durch die angeführten Versuche wird jedoch die eingangs
gestellte Frage noch nicht einwurfsfrei beantwortet; es braucht
doch die Keimaufnahme nun nicht notwendig vom Respirations-
traktus aus erfolgt zu sein: die inhalierten Mikroorganismen
.können an der Kreuzungsstelle des Respirations- und Ver-
dauungstraktus auch den Weg nach dem letzteren einschlagen
und könnten somit von der Magendarmschleimhaut aufgenommen
sein. Auch wird daran zu denken sein, dafs das im Inhalier-
raum gehaltene Tier, selbst wenn es so eingestellt wird, dafs es
mit der Schnauze weder sein Fell noch die mit Keimen bedeckte
Wand berühren kann, doch auch per os Keime aufnehmen wird.
In Wirklichkeit war indessen bei den vorliegenden Versuchen
diese Aufnahme per os oder die Zahl der hinuntergeschluckten
Atmungskeime nicht sehr bedeutend. Bei Kaninchen 1 enthielt
der Ösophagus 15 Prodigiosuskeime, beim 2. Kaninchen 3. Vom
Mageninhalt des 1. Kaninchens enthielt 1 Öse im Mittel von
4 Untersuchungen 5 Prodigiosuskeime, beim 2. Kaninchen konnte
im Magen überhaupt kein Prodigiosus nachgewiesen werden,
dasselbe gilt vom Darm beider Tiere. Aber auch aus folgendem
Grunde ist anzunehmen, dafs bei unseren Versuchstieren der
Magendarmkanal an der Keimaufnahme unbeteiligt war: im Ver-
laufe der Verfütterungsversuche bei säugenden Kaninchen konnte
ich feststellen, dafs der Nachweis von Prodigiosus im Blut oder
in den Organen von ca. 180 g schweren Kaninchen nur nach
der Verabreichung von 3 Ösen eintägiger Prodigiosuskultur ge-
lang, bei kleineren Dosen nicht. In den vorliegenden Inhalations-
versuchen ist aber ungleich weniger Keimmaterial in den tubus
alimentarius gelangt; bei Versuch 3 stellte ich fest, dafs von
der Suspension einer Agarkultur (d. s. ca. 10 Ösen) in 15 ccm
Wasser während einer Stunde Verstäubens nicht mehr wie 0,3 g
verbraucht wurden, es berechnet sich damit x / 6 Öse Kultur als
im ganzen verstäubte Keimmenge. Hiervon aber kommen so
geringe Mengen auf den Verdauungstraktus, dafs dieser für den
Übertritt der Keime nicht in Frage kommen dürfte.

Es könnte aber auch die Nasen- und Pharynxschleim-
haut als Eingangspforte angesehen werden. Aus diesem Grunde

54 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationsapparat.

wurden in weiteren Versuchen die oberen Partien der Luftwege
durch Tracheotomie ausgeschaltet, um die versprayten Keime
direkt von der Trachealkanüle aus inhalieren zu lassen.

Versuch 7.

Kaninchen, grau, ca. 10 Tage alt, 145 g, wird tracheotomiert. Das
rechtwinklig abzweigende, zur Exspiration bestimmte Stück des T-förmigen
Glasrohrs wird mit einem Gummischlauch in Verbindung gebracht, der zum
Fenster hinausführt. Das dem Tracheairohr entgegengesetzte Ende wird
durch Gummischlauch, der eine Klemme trägt, mit einem den Kautschuk-
stopfen des unteren Auslasses einer 2 Liter-Auslaufflasche durchsetzenden
Glasrohr verbunden. Die obere Flaschenöffnung ist mit doppelt durch-
bohrtem Stopfen versehen, der zwei Glasröhren trägt: die eine ist sehr weit
und mit Watte verschlossen, die andere ist mit dem Ausführungsrohr eines
Buchn ersehen Sprayapparates verbunden. In diesem befindet sich eine
Suspension von einer 16—20 Stunden alten, bei 27 ° gezüchteten Prodigiosus-
Agarkultur in ca. 10 cem Leitungswasser. Bei geschlossen gehaltener Klemme
wird die Auslaufflasche durch etwa 20 maligen Ballonhub gefüllt, darnach
öffnen der Klemme, so dafs das Tier die prodigiosushaltige Luft einatmet.
Nach 10 Minuten wiederum Verschlufs des Zuleitungsschlauches, erneute
Füllung der Auslauf flasche mit Spray usf. Auf diese Weise bleibt das
Tier ca. 2 Stunden aufgespannt liegen, sodann Stich, Abbalgen usf.

Prodigiosus enthalten 3 Blut- und 2 Leberröhrchen ; frei von Prodigiosus
sind 9 Röhrchen von Blut, 12 von Leber, 2 von Milz, 6 von Nieren und
2 von Herz.

Versuch 8.
Kaninchen, grau weif s, 160 g, Alter unbekannt. Anordnung wie Ver-
such 7. Das Tier bleibt im ganzen 1 Stunde 25 Minuten in Sprayatmung,
nach einer weiteren V, Stunde Wartens Stich usf. Prodigiosus ist ent-
halten in 2 Röhrchen von Blut. 6 Röhrchen von Blut, 15 von Leber, 2 von
Milz, 4 von Niere sind negativ.

Versuch 9.

Kaninchen, grau, 5 Tage alt, 107 g. Anordnung wie oben, nur wird
anstatt Prodigiosus Roter Kieler verstäubt. Die Kanüle bleibt 1 Stunde
10 Minuten lang mit der Auslaufflasche in Verbindung, nach 3 /< Stunden
Wartens Stich. 3 Blutröhrchen enthalten Roten Kieler, die übrigen 4 Röhr-
chen von Blut, 17 von Leber, 2 von Milz, 4 von Niere sind negativ.

Zum Vergleich wurden folgende Inhalationsversuche an
traeheotomierten erwachsenen Kaninchen vorgenommen:

Versuch 10.

Kaninchen, gelb I, 2050 g. Als Spray dient eine Suspension von einer
eintägigen Prodi giosuskultur in 6 cem Leitungswasser. Die erneute Füllung
der Auslauf flasche mit verstäubten Keimen geschieht alle 5 Minuten. Das

Von Prof. M. Ficker. 55

Tier bleibt lVi Stunden in Sprayatmung, nach V« Stunde Wartens Entnahme
von 18 ccm Blut aus linker Jugularis, die auf 32 Bouillonröhrchen und Kolben
verteilt werden. In keinem Kulturglas geht Prodigiosus an.

Yersueh U,

Kaninchen, schwarz« 1840 g. Als Spray dient eine Suspension von zwei
Agarröhrchen (1 Tag, 27 °) Rotem Kieler in 5 ccm Leitungswasser. Das Tier
bleibt 1*/« Stunden in Sprayatmung. Nach 7t Stunde Wartens Strangulation,
Verteilung von Blut und Organen auf 52 Bouillon-Röhrchen und 28-Kolben.
Zur Prüfung der Verteilung der inhalierten Keime in den Lungen werden
vom äufsersten Rand des rechten Unterlappens und von der äufsersten
linken Lungenspitze gesondert kleine Stückchen in Röhrchen übertragen.
Alle 8 Glaser mit Lunge, darunter auch die beiden von den peripheren
Partien geimpften, enthalten Roten Kieler. Die mit Bronchialdrüsen, sowie
mit Blut und Organen geimpften Gläser sind negativ.

Yersueh 12.

Kaninchen, gelb II, 1946 g. Als Spray dient eine Aufschwemmung von
2 Agarröhrchen (1 Tag, 27°) Prodigiosus in 7—8 ccm Wasser. Das Tier atmet
durch die Kanüle 2'/ 4 Stunden lang den Spray. Darnach Entblutung von
rechter Karotis aus. Blut und Organe werden auf 49 Röhrchen und 31 Kolben
verimpft Von linker Lungenspitze und vom äufsersten Rand des rechten
und linken Lungenunter] appens werden besondere Röhrchen mit kleinen
Stückchen beschickt. Alle Lungengläser, darunter auch die letztgenannten,
enthalten Prodigiosus. Die Gläser von Bronchialdrüsen, Blut und Organen
sind negativ.

Es bestätigen diese Versuche einmal die schon von Nen-
ninger 1 ) und Paul 2 ) festgestellte Tatsache, dafs bei erwach-
senen Kaninchen durch den Inhalationsstrom in
Tröpfchen suspendierte Bakterien bis in die peri-
pheren Lungengebiete geführt werden. Ferner folgt
aus meinen Versuchen, dafs bei erwachsenen Kaninchen
die verstäubten Keime, selbst wenn 2 x / 4 Stunden lang
der stark keimhaltige Spray direkt von der Trachea aus
inhaliert wird, im Blut oder in Organen nicht nach-
zuweisen sind. Im Gegensatz dazu sind bei säu-
genden Kaninchen ausnahmslos die inhalierten
Keime im Blute, mitunter auch in Organeu wieder-
zufinden. Die Versuche beweisen nicht, wie hervorgehoben
werden mufs, dafs beim erwachsenen Kaninchen reichlich inha-
lierte Keime nicht doch auch in die Lymph- bzw. Blutbahn

1) Nenninger, O., Zeitschr. f. Hyg., Bd. 38, S. 94.

2) a. a. 0.

56 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Reepirationeapparat.

weitergeführt werden, denn es könnten die eingeatmeten Keime
ja so rasch vermehrungsunfähig gemacht werden, dafs der kul-
turelle Nachweis nicht gelingt, oder aber es beansprucht dieser
Übertritt beim älteren Tiere längere Zeit als die hier innegehal-
tene: und das ist wohl das Wahrscheinlichere, denn Arnold 1 )
sah beim erwachsenen Kaninchen zeitigstens nach 3 Stunden
Ultramarinstaub in den perivaskulären und peribronchialen
Lymphknoten. Vielleicht ist der jugendliche Organismus zu einer
besonders rasch erfolgenden Resorption befähigt. Für die Auf-
saugung von Flüssigkeiten ist diese Ansicht in der Physiologie
des Kindesalters von K. v. Vierordt 2 ) ausgesprochen, es sind
als Beleg hierfür allerdings weiter keine experimentellen Erfah-
rungen als diejenigen Kaupps 8 ) genannt, der nach subkutaner
Einverleibung von Strychnin bei jungen Kaninchen viel raschere
Resorption beobachtete als bei älteren Tieren, Was den Trans-
port von Mikroorganismen in Lymphgefäfsen jugendlicher Indi-
viduen betrifft, so fand ich in der Literatur nur von Weigert 4 )
die Wahrscheinlichkeit ausgesprochen, dafs die Passage des
Tuberkulosevirus in den Lymphbahnen bei Kindern leichter er-
folge. Versuche in dieser Richtung wären erwünscht. Von an-
deren Fragestellungen, die sich aus obigen Resultaten ergeben,
sind einige schon in Angriff genommen, viele jedoch liegen
aufserhalb des Arbeitsgebietes des Hygienikers. Zunächst wird
durch Schnittfärbungen festzustellen sein, wo der Durchtritt der
inhalierten Bakterien in den infantilen Luftwegen erfolgt, ob die
Alveolarsepten den Keimen besonders günstige Chancen zum
Eintritt geben, wie das nach den Untersuchungen Arnolds 6 ) über
die Staubinhalation oder nach den Beobachtungen W. Müll_ers 6 )
über die Entstehung der Pneumonie, insbesondere der Vagus-
Pneumonie, angenommen werden könnte, oder ob die Alveor-

1) Arnold, J., Staubinhalation, Leipzig, Vogel, 1885, S. 39.

2) Vierordt, K. v., Physiologie des Kindesalters in Gerhardte Handb.
d. Kinderkrankheiten, 6. 340.

3) Kaupp, Arch. f. physiol. Heilkunde, 1855, S. 145.

4) Weigert, C, Fortschr. d. Medizin, 1883, Bd. 1.

5) a. a. 0.

6) Müller, W., Arch. f. klin. Med., 71 Bd., S. 80.

Von Prof. M. Ficker. 57

epithelien selbst die Mikroorganismen aufnehmen, oder ob die
Beschaffenheit der beim infantilen Organismus sicher zarteren
Schleimhaut das Ausschlaggebende ist, hierbei wird an die Tätig-
keit der Flimmerepithelzellen und an die namentlich durch
F. Müllers 1 ) Untersuchungen erwiesene wichtige Wirksamkeit
des Oberflächenschleims der Luftwege zu denken sein. Bei der
nftheren Analyse solcher Fragen steht zu hoffen, dafs wir einen
Einblick gewinnen, worin denn der Unterschied im Verhalten
des kindlichen und erwachsenen Organismus gegenüber Mikro-
organismen begründet ist; denn hier kommen wir mit den gern
gebrauchten, aber bei naturwissenschaftlicher Betrachtungsweise
recht unbefriedigt lassenden allgemeinen Erklärungen wie: er-
höhte Resistenz, geringere Disposition usf. nicht aus. Die
experimentelle Forschung wird dabei wohl auch mit der Frage
zu rechnen haben, ob denn da, wo eine erhöhte Aufnahme-
fähigkeit für Mikroorganismen besteht, die Natur nicht auch
auf einer andern Seite für besondere Abwehrvorrichtungen ge-
sorgt hat.

Jedenfalls erscheint es nach den mitgeteilten Untersuchungen
nicht angängig, dem tubus alimentarius des säugenden
Versuchstieres allein die Besonderheit der Bakteriendurchlässig-
keit zuzuschreiben, vielmehr ist der infantile Respirations-
traktus mit dem gleichen Mangel behaftet. Ja, es ist sicher,
dafs ungleich geringere Keimmengen dazu gehören und
genügen, um von den Atemwegen aus der Blutbahn des jugend-
lichen Organismus zugeführt zu werden. Hat man ein solches
Paradigma der Aufnahme saprophytischer Mikroorganismen
aufgestellt, so ist man versucht und bis zu einem gewissen Grade
auch berechtigt, für infektiöse Keime die gleichen Verhältnisse
anzunehmen, es müssen diesen wohl sogar noch günstigere
Chancen zuerkannt werden ; zwar werden in der Wirklichkeit die
im Versuch angewendeten Keimmengen nicht inhaliert, aber
dafür steht auch den vereinzelten in die Atemwege ein-
dringenden Keimen u. a. das Mittel der Vervielfältigung zu

1) Maller, F., Sitxangsber. d. Ges. f. Naturw. zu Marburg, 1896, S. &3.

58 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationaapparat.

Gebote, so dafs damit hinsichtlich der Keimzahl dem Versuch
nicht nachstehende Bedingungen gegeben sind.

Wer nach dem Konstatieren der Bakteriendurchlässigkeit des
infantilen Magendarmtraktus darin eine Stütze für die Anschauung
sah, dafs hier die hauptsächlichste Eintrittspforte für Infektionser-
reger, wie z. B. für Tukerkelbazillen, zu suchen sei, wird diese Ansicht
mit Hinblick auf die vorliegenden Resultate, welche die gleiche
Empfindlichkeit auch dem Respirationstraktus zuschreiben, modifi-
zieren müssen. Damit scheint die alte Frage, die bis in die jüngste
Zeit hinein einen so breiten Raum einnimmt, ob Inhalations-
oder Fütterungstuberkulose in den Vordergrund zustellen
sei, wiederum der Lösung nicht nähergebracht zu sein. Aber
ist die Frage überhaupt lösbar und ist sie in dieser
Formulierung zulässig? Wenn, wie genugsam erwiesen,
der Übertritt von Tuberkelbazillen erfolgen kann, ohne dafs an
der Durchtrittsstelle Veränderungen gefunden werden, so wird
schon aus diesem Grunde ein Zweifel an der Lösbarkeit berechtigt
erscheinen; in vielen Fällen fehlt jede Kontrolle. Vor allem
aber mufs man einmal aufhören, an der einseitigen Ansicht fest-
zuhalten, dafs die inhalierten Keime immer nur gerade nach der
Lunge, und die per os aufgenommenen nur in den Magendarm
gelangen. Die Verdauungs- und Atmungswege kreuzen sich, sie
anastomosier^n, am Ende der Wege können wir gar nicht mehr
sagen, aus welcher Richtung vor der Kreuzungsstelle der Keim
gekommen ist. Dafs wir inhalierte Keime im Verdauungs-
traktus wiederfinden, ist längst bekannt und erhellt auch wieder
aus den oben mitgeteilten Untersuchungen, und anderseits ist
es mir zur Gewifsheit geworden, dafs per os verabreichte
Mikroorganismen,, viel häufiger als man gemeinhin
annimmt, ihren Weg in die tieferen Luftbahnen nehmen.
Man findet hierfür schon einige experimentelle Unterlagen in
den zitierten Arbeiten von Nenninger und Paul. Ich selbst
hatte, zunächst ganz beiläufig, Gelegenheit, eigene Erfahrungen
zu sammeln, als ich säugenden Tieren zur Einverleibung bak-
terienhaltigeu Materials die Bakterienaufschwemmung auf die
Zunge aufträufelte : geschah dies mit 1 ccm-Pipetten des gewöhn-

Von Prof. M. Ficker. 59

liehen Kalibers, so konnten in jedem Falle die verabreichten
Keime in so grofsen Quantitäten in den unteren Luftwegen nach-
gewiesen werden, dafs ein direktes Einlaufen aus der Mundhöhle
oder ein » Verschlucken c angenommen werden mufste. Aus diesem
Grunde bin ich von der Einträufelung abgekommen und habe
diese Versuche als »Fütterungs« versuche überhaupt nicht gelten
lassen, weil mir die Frage, ob die im Blut und in den Organen
gefundenen Keime vom Magendarmkanal aus übergetreten seien,
so nicht einwandsfrei lösbar erschien. Es wurden vielmehr weiter-
hin die natürlichen Verhältnisse möglichst nachgeahmt, indem
die Bakteriensuspension bei säugenden Tieren mit Saugfläschchen
zur Verabreichung kam, bei erwachsenen Kaninchen die Keime
zwischen Kohlrabischeiben, bei Hunden mit Fleisch vermischt
verfüttert wurden. Von den hierher gehörenden Versuchen sollen
nur folgende angeführt werden.

Versuch 13.

Kaninchen, weifs, 3 Wochen alt, 375 g; erhält mit Puppensaugflasche
8 cem einer Suspension einer Würzagarplatte (1 Tag, 27 °) von Hefe Nr. 696
in 20 cem destilliertem Wasser. Das Tier saugt stark und hastig, mehr als
es schlacken kann. Wenn kleine Tropfen zwischen Gummihütchen und
Lippen sichtbar wurden, wird die Saugflasche abgesetzt, bis das Tier den
Überschafs hinuntergeschluckt hat. In 5 Minuten sind die 8 cem genossen.
Nach lVi Stunden Wartens wird das Tier mit Sublimattüchern bedeckt, stran-
guliert unter Halten mit Kopf nach unten, auf schrägstehendem, mit Sub-
limat befeuchtetem Sektionsbrett mit Kopf nach unten aufgespannt, dann in
einem entfernten Zimmer seziert. Die im Umkreis des Sektionsplatzes auf-
gestellten Luftplatten (Würzagar) enthalten keine Kolonie von Hefe Nr. 696.
Von der Tracbealschleimhaut oberhalb der Bifurkation werden 2 Abstrich-
ösen in Würze übertragen. Vom linken und rechten Unterlappen der Lungen
werden an den peripheren Partien kleine Randstücke abgeschnitten und in
je ein besonderes Würzröbrcben gegeben, die übrige Lunge wird auf 4 Würz-
röhrchen verteilt, Blut und Organe auf ca. 50 weitere Röhrchen.

Resultat: Die Röhrchen vom Trachealschleim, sowie sämtliche 6 von
den Lungen enthalten Hefe 696 (durch Agglutination mit spezifischem
Kaninchenserum identifiziert). In Blut und Organen keine Hefe.

Versuch 14.

Kaninchen, grau, ca. 4 Wochen alt, 510 g ; erhält mittels Saugflasche,
dessen Gummihütchen mit feinster Öffnung versehen ist, ca. 5 cem einer
Aufschwemmung des Belages eines Würzagarröhrchens (Hefe 696, 1 Tag, 27°)
in 10 cem Wasser. Das Tier saugt gut, jedoch erfolgt wegen der Feinheit

60 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationsapparat.

der Säugöffnung die Aufnahme langsam, ca. 15 Minuten. Darnach bleibt
das Tier 1 Stunde in Ruhe. Tötung, Sektion wie oben.

Resultat: Weder im Abstrich der Luftröhre, noch in den Lungen ist
Hefe nachweisbar, Blut und Organe ebenfalls negativ.

Versuch 15.

Kaninchen, grauweifs, von demselben Wurf wie 14, 535 g; erhält von
derselben Aufschwemmung und mittels der gleichen Saugflasche wie in Ver-
such 14 innerhalb von 12 Minuten 5 ccm. Während der darauffolgenden
Stunde wird durch zeitweiliges Zuhalten von Nase und Maul mittels Tuches
(12 — 15 mal) tiefe Inspiration eingeleitet. Tötung, Sektion wie oben.

Resultat: Von 3 mit Tracheaischleim geimpften Würzagarröhrchen ist
1 positiv, von den 6 Lungenröhrchen sind 2 positiv (die peripheren Stücke
negativ). Blut und Organe negativ.

Versuch 16.

Grofses schwarzes Kaninchen, ca. 2 kg; erhält zwischen Kohlrabi eine
Agarplatte (1 Tag, 27°) von Prodigiosus, frifst alles in ca. */« Stunde auf,
wird während der darauffolgenden V, Stunde im Zimmer herumgejagt.
Darnach Tötung, Sektion wie oben.

Resultat : Prodigiosus ist nachweisbar in den 2 Trachealabstrichen. Alle
Lungen-, Blut- und Organröhrchen sind negativ, ebenso die Bronchialdrüsen.

Versuch 17.

Kaninchen, gelb, 1670 g; erhält zwischen Kohlrabi eine 15 Stunden
alte Agarplatte Roten Kieler, frifst innerhalb von 10 Minuten fast alles, wird
in der darauffolgenden Stunde durch Einhüllen des Kopfes in ein Tuch,
sowie durch ca. 10 mal auf die Trachea ausgeübten Druck zu tiefer Inspira-
tion veranlafst. Dann Tötung, Sektion wie oben.

Resultat: Die beiden Röhrchen von der Trachealschleimhaut, 2 von
<\er Lunge, 1 vom Rand des linken Unterlappens enthalten Roten Kieler.
Alle anderen sind negativ, auch die Bronchialdrüsen.

Es zeigt sich also zunächst, dafs auch bei vorsichtigerer Art
der Einverleibung der keimhaltigen Flüssigkeit, nämlich mittels
Verwendung von Saugfläschchen, es nicht möglich war, die ver-
abreichten Bakterien von den Atmungswegen fern zu halten, so
lange durch die Saugbewegungen eine zu grofse Flüssigkeits-
menge der Mundhöhle übermittelt wurde. Es hat den Anschein,
als ob die Selbststeuerung des Kehldeckelverschlusses bei den
säugenden Tieren, zumal bei dem plötzlichen Übergang zur
künstlichen Ernährung, noch nicht in der nötigen exakten Weise
funktioniert, wie ja überhaupt verschiedene reflektorische Vor-
richtungen des infantilen Organismus zunächst noch Mängel

Von Prof. M. Ficker. 61

aufweisen. Ich möchte betonen, dafs die Verabreichung der
Bakteriensuspension in der schonendsten und vorsichtigsten Form
erfolgte, und dafs es sich keineswegs um übertrieben grofse
Flüssigkeitsraengen handelte. Man braucht aber diese Bakterien-
invasion in die Luftwege nicht nur auf ein direktes Herabfliefsen
zurückzuführen, sondern es ist sogar wahrscheinlicher, dafs die
Keime erst durch die beim »Verschlucken« stofsend und ruck-
weise erfolgende Aspiration tiefer geführt werden. Erst durch
weitgehende Verkleinerung der Ausflufsöffnung des Gummihüt-
chens gelang es, diesen Transport der Keime nach den Luftwegen
hintanzuhalten, dafs aber schon die Erzeugung tiefer Inspira-
tionen genügt, ihnen den Eingang in die Luftwege zu ver-
schaffen, beweist Versuch 15. Diese Aufnahme der Keime in
die Lungen unter dem Einflüsse tiefer Atmung erfolgt nun nicht
nur bei Zufuhr von bakterienhaltigen Flüssigkeiten, sondern
auch bei Verabreichung von kompakterer Nahrung, wie das aus
den Versuchen an erwachsenen Kaninchen hervorgeht. Über die
zu gleichen Resultaten führenden Versuche an Hunden soll in
einer demnächst erscheinenden Arbeit im Zusammenhange mit
anderen Fragen berichtet werden.

Handelt es sich also um Keime, die erfahrungsgemäß in
erster Linie die Lunge als Eintrittspforte benutzen, so wird man
die Frage, wie diese denn nach der Lunge gelangen, ohne Rück-
sicht auf die Vermittelung der Lymph- und Blutbahnen — ein
Thema, das noch der weiteren Klärung durch den Pathologen
bedarf — folgendermaßen beantworten können;

1. können sie durch Nasen- und Mundatmung aus der
Aufsenwelt in trockenem Zustande oder in Tröpfchen-
form aufgenommen werden und nach den tieferen Luft-
wegen gelangen,

a) sofort mit dem gleichen Atemzuge oder

b) sie können auf der Nasen-, Rachen- oder Mund-
schleimhaut abgefangen und gelegentlich von der
Schleimhautoberfläche aus der Lunge zugeführt werden
(tiefe Inspiration, »Verschlucken«, Erbrechen usf.);

62 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationsapparat.

2. können sie zunächst durch Kontakt auf die Mund-,
Rachen- oder Nasenschleimhaut gelangen (Fingerkontakt,
bei Kindern Spielsachen usf., auf Mund- und Rachen-
schleimhaut mit der Nahrung), um dann denselben Weg
wie sub lb nach der Lunge einzuschlagen.
An der Hand der Kenntnisse über die biologischen Eigen-
tümlichkeiten der einzelnen Keimarten kann man erst abschätzen,
welcher dieser Infektionswege gangbarer ist als der andere.

Für den Tuberkelbazillus wird man, seitdem die Lehre
seiner Ubiquität im Luftstaub widerlegt ist, der direkten Ein-
atmung von der Aufsenluft her nicht mehr die ihr früher zu-
geschriebene souveräne Rolle zuschreiben, die Tröpfcheninfektion
kommt nur für die nächste Umgebung der Phthisiker in Frage.
Demgegenüber dürfte heute der Aufnahme der Tuberkelbazillen
durch Kontakt doch eine gröfsere Bedeutung als ehedem bei-
zumessen sein und die Ansicht, dafs die Tuberkelbazillen ihren
Weg häufiger durch den Mund als durch die Nase nehmen,
dürfte das Richtige treffen. Ist aber bei überwiegender Aufnahme
per os die Lunge die hauptsächlichste Eingangspforte, dann
müssen zwischen Mundschleimhaut und Lunge be-
tretenere Wege existieren, als man annimmt. Wenn von
manchen Autoren hierbei die Rachen- und Gaumentonsillen in
den Vordergrund gestellt werden oder auf andere Verbindungs-
wege der Lymphbahnen — Submaxillar- und Supraklavikular-
drüsen — hingewiesen wird, so ist doch nicht zu vergessen, dafs
aufser auf diesen Umwegen die auf der Mundschleimhaut be-
findlichen Keime auch auf direktem Wege, durch tiefe Inspira-
tion, durch »Verschlucken« etc. in die Tiefe der Atmungsorgane
gelangen können. Es kann eine nach diesem Modus der Auf-
nahme von Tuberkelbazillen in den Lungen erfolgende tuberkulöse
Infektion in vielen Fällen wohl eine Inhalations tuberkulöse
genannt werden, obwohl die Keime zunächst durch Kontakt
aufgenommen wurden; dann mufs der Begriff »aörogene In-
fektion«, den man für gewöhnlich nur für Infektion von
in der Aufsenluft befindlichen Keimen verwendet, erweitert
werden.

Von Prof. M. Picker. 63

Der Hygieniker mufs, glaube ich, auf die Klarstellung dieser
Verhältnisse einiges Gewicht legen; denn wenn diejenigen, die
später berufen sein sollen, den Kampf gegen die Tuberkulose in
der Praxis aufzunehmen , in der Klinik und am Sektionstisch
hören, dafs der aörogenen Infektion für die Genese der Tuberkulose
die gröfste Bedeutung zukomme, so könnte damit leicht die
Kontaktinfektion, deren Verhütung nicht minder wichtig erscheinen
mufs, unterschätzt werden.

Man wird zu dieser Einschränkung der dominierenden Be-
deutung der Tuberkelbazilleninhalation nicht nur hingeführt,
wenn man sich mit Zahl und Arten der Luftkeime näher befafst,
sondern auch wenn man die Eigentümlichkeiten anderer von der
Lunge aus wirkender Keime sich vergegenwärtigt: ich meine
die hauptsächlichen Pneumonieerreger. Solhen wir dehn
lediglich der beiden Tatsachen wegen : einmal, dafs der Pneumo-
coccus lanceolatus in der Lunge seine Infektionskraft entfaltet,
und dann, dafs er, in Blut und in Sputum eingehüllt, das Ein-
trocknen bis zu 100 Tagen *) verträgt, glauben, dafs er in der
Luft vorhanden sein müsse, und dafs die Infektion vor allem
nach der Inhalation der Pneumokokken aus der Aufsenluft her
erfolge? Wie oft sind die Pneumokokken bisher ein wandsfrei
in der Luft gefunden worden ? Dafs der Keim das Austrocknen
eine Zeitlang verträgt, wenn man ihn im schützenden Blut oder
in dicken Sputumhüllen eintrocknen läfst, berechtigt uns nicht
dazu, seine Übertragbarkeit durch die Luft anzunehmen: man
müfste denn das Gleiche auch für die Choleravibrionen
tun, die unter geeigneter Versuchsanordnung im trockenen Zu-
stande noch eine Lebensfähigkeit nach 120 2 ), ja nach 186 Tagen 8 )
zeigen, und doch denkt niemand an eine aerogene Cholerainfek-
tion. Vielmehr offenbart der Pneumokokkus, wie kaum ein an-
derer Keim, bei der Prüfung seiner biologischen Eigenschaften
die parasitäre Natur, er ist, wenn man so sagen darf, endemisch
in der Nasen-, Mund- und Rachenhöhle vieler Organismen und

l)Germano, £, Zeitschr. f. Hygiene, Bd. 26, 8. 66.

2) Gayon, Arch. d. meU exp. et d'an. Path., 1892, Nr. 1.

3) Berckholtz, Arbtn. a. d. K. Ges.-Amt, Bd. III, S. 166.

64 Über die Aufnahme von Bakterien durch den Respirationsapparat.

besonders beim Menschen. Erst vor kurzem habe ich mich
wieder von der Ubiquität von Pneumonieerregern in der mensch-
lichen Mundhöhle überzeugen können, als ich in einem zahn-
ärztlichen Fortbildungskurs Mundspülwasser auf Mäuse verimpfen
liefe: von zehn Mundhöhlen enthielten sieben den
Pneumokokkus, eine den Bac. Friedländer und eine
einen ebenfalls als Septikämieerreger bei der Maus wirkenden,
Friedländer-ähnlichen Keim.

Wenn wir also die Aufnahme der Pneumokokken durch den
Luftstaub als unwahrscheinlich annehmen müssen 1 ) und ander-
seits sicher wissen, dafs der Keim auf der menschlichen Nasen-
und Mundschleimhaut einheimisch ist, so wird man z. B. den
nicht zu leugnenden Einflufs der Jahreszeiten und der Witterung
auf die entstehenden Pneumonien so zu deuten haben, dafs im
Menschen selbst damit günstige Bedingungen für die Keime,
deren Träger er ist, geschaffen werden. Es kann denn auch
kein Zweifel sein, dafs der Keim von der gewöhnlichen Stätte
seines Aufenthaltes aus auf die oben geschilderte Weise häufiger
als man annimmt, nach den unteren Luftwegen gelangt, dafür
sprechen auch die neueren Untersuchungen an normalen Lungen.
Wenn nicht alle Untersucher zu dem gleichen Ergebnisse kommen
und manche die normalen Lungen steril fanden, so beweist das
doch nichts dagegen, dafs die gesuchten Keime zeitweilig nicht
doch hier vorhanden sind, denn dafs gerade den Lungen und
dem Bronchialbaum eine bedeutende selbstreinigende Kraft inne-
wohnt, ist, zweifellos erwiesen 8 ) und sogar quantitativ festgestellt 4 ).

In ähnlicher Weise haben wir auch bei der Entstehung der
durch Bac. Friedländer oder Influenzabazillen entstehenden In-
fektionen nicht in erster Linie an eine Aufnahme durch Luft-
staub zu denken, sondern müssen uns für einen Teil der Fälle
eine Inhalation von aufsen nur in Tröpfchenform in direkter
Nähe des Kranken oder Bazillenträgers vorstellen, für den andern

1) Vgl. anch Neifser, M., Zeitechr. f. Hyg, Bd. 27, 8. 191.

2) Gramatschikoff, Arbtn. a. d. path. Inst Tübingen, Bd. I, S. 460.

3) Snel, Zeitechr. f. Hyg., Bd. 40, S. 103.

4) P a u 1 , L, a. a. O.

Von Prof. M. Ficker. 65

Teil kommt auch hier eine endogene Infektion in Betracht,
indem die auf der Nasen oder Mundschleimhaut heimischen
oder nach Tröpfcheuinhalation oder nach Kontakt vorübergehend
angesiedelten Mikroorganismen von hier aus die Lungeninfektion
einleiten, entweder auf dem Umweg von Lyinph- und Blut-
bahnen, oder auf aörogenem Wege (starke Inspiration usf.), oder
durch direkten Import mit nach folgender Aspiration (»Ver-
schluckenc, Erbrechen).

So drängen wohl auch die Erfahrungen mit unseren häufig-
sten Pneumonieerregern dazu, den Begriff der aärogenen Infek-
tion deutlicher zu präzisieren und der Frage die weitere Auf-
merksamkeit zu widmen, wie denn die mit der Mundschleim-
haut in Kontakt kommenden Keime nach der Lunge gelangen.
Dals wir da häufigere Kommunikationen anzunehmen haben,
raufs gerade an dem Beispiel des Pneumokokkus einleuchten,
weil hier die bei der Tuberkulose in den Vordergrund gedrängte
Frage der intestinalen Infektion von vornherein nicht die ge-
ringste Wahrscheinlichkeit für sich hat.

Für den beobachtenden Arzt bedarf es nicht der näheren
Ausführung, dafs wir auch beim Menschen mit ähnlichen Ver-
hältnissen, wie sie im vorstehenden das Tierexperiment nachzu-
ahmen suchte, zu rechnen haben. Die geschilderten Arten des
Keimtransportes nach den Lungen müssen insbesondere auch für
Säuglinge und Kinder bedeutungsvoll sein: die Atmung
des Kindes ist zunächst wohl immer ungleichmäfsig und unregel-
mäßig; auffallend häufig wechseln schon für gewöhnlich, dann
aber auch bei äufseren Einflüssen, die die Aufmerksamkeit des
Kindes erregen, tiefe und flache Inspirationen. Ganz besonders
aber kann man bei und nach dem Schreien forcierte und tiefe
Atemzüge beobachten, die sicherlich entweder die beim Schreien
losgeschleuderten Mund- und Rachenkeime in die tieferen Luftwege
aspirieren, oder die selbst so kräftig sind, um von der Schleim-
haut oberflächliche Auflagerungen hinabzureifsen. Ferner sind
mit der künstlichen Ernährung Möglichkeiten des Keimimports
von dem Mund nach der Lunge genug verknüpft: wie oft kann
man beobachten, dafs beim ruhig liegenden Kinde das aus der

Archiv für Hygiene. Bd. Uli. 6

66 Aufnahme v. Bakterien durch d. ftespirationsapparat. Von Prof. M. Ficker.

Milchflasche ausfliefsende Quantum nicht mit den regulären
ßchhickbewegungen fortgeschafft werden kann, dafs »Verschlucken«
Oder Erbrechen eintritt, es ist klar, dafs hierbei nicht nur Milch-
sondern auch Rachen- und Mundkeime Eingang in die Luftwege
finden, zumal ja danach auch wieder tiefe Inspirationen erfolgen.
Ganz besonders fällt es auf, mit welcher Wucht die Milch aus
dar Flasche in die Mundhöhle des trinkenden Kindes dann ein-
getrieben wird, wenn es in schlecht federndem Kinderwagen
über holprige Wege oder schlechtes Pflaster gefahren wird.

Wenn die mitgeteilten Ergebnisse einen Schlufs auf die
Tuberkuloseentstehung beim Menschen zulassen sollten,
so tnüssen sie geeignet erscheinen, in etwas zu vermitteln zwischen
der Ansicht, dafs nur die Luft als infizierendes Medium in Frage
komme und der andern, dafs die Nahrungsinfektion das Aus-
schlaggebende sei: der Begriff der Luftinfektion mufs eine Um-
wertung erfahren, ferner ist daran zu denken, dafs der Modus
der Aufnahme durch die Nahrung nur einen Bruchteil der
sonstigen Kontaktübertragungen ausmacht, und dafs auch für die
dem Mund zugeführten Kontaktkeime die Lunge als Eintritts-
pforte zu gelten hat. Speziell mit Rücksicht auf die Säuglings-
infektion ist nochmals hervorzuheben, dafs die gröfsere Bakterien-
durohlässigkeit dem Magendarm traktus nicht allein, sondern auch
den Atmungsorganen zukommt. Wenn es noch der Beweise be-
durft hätte, dafs gerade der infantile Organismus den Infektions-
erregern eine breitere Angriffsfläche darbietet, so mufs die fest-
gestellte Tatsache des geringeren Schutzes des Verdauungs- und
Atmungsapparates, die der täglichen ärztlichen Erfahrung eine
experimentelle Stütze gibt, dazu auffordern, noch weitergehende
Mafsnahmen als die bisherigen zur Verhütung von Säuglings-
infektionen zu ergreifen.

Der „Vakunmreiniger", ein Apparat zur staubfreien
Reinigung der Wohnräume.

Von
Stabsarzt Dr. Berghaus,

Assistenten am Institut.

(Ans dem Hygienischen Institut der Universität Berlin. Direktor : Geh. Med.-
Rat Prof. Dr. M. Rübner.)

Bei der grofsen Bedeutung, welche die Luft für die gesamte
Tier- und Pflanzenwelt, speziell für die Gesundheit des Menschen
hat, mufsten ihre Verunreinigungen, wie sie vorzugsweise durch
die verschiedensten gewerblichen Betriebe hervorgerufen werden,
bald die Aufmerksamkeit der Hygiene auf sich lenken und diese
veranlassen, geeignete Mittel und Wege ausfindig zu machen, die
nach Möglichkeit die gesundheitsschädlichen Einflüsse beseitigen
oder doch abschwächen. Diese Bestrebungen der Hygiene, dank
den Fortschritten auf dem Gebiete der Technik in vielen Fällen
erfolgreich, fanden in fast sämtlichen Industriestaaten ihren Aus-
druck in gesetzlichen Bestimmungen über den Betrieb und die
Einrichtung derartiger gewerblicher Anlagen.

Unter den Verunreinigungen der Luft verdienen vom hygie-
nischen Standpunkte aus die staubförmigen besondere Beachtung.
Denn abgesehen von den mechanischen Schädigungen, die sie
bei ihrer Einatmung den Atmungsorganen zufügen können und
die in Katarrhen sich äufsern, bergen sie in sich eine grofse
Menge kleinster Lebewesen, unter denen spezifische Krankheits-
erreger, wie z. B. Tuberkelbazillen, Diphtheriebazillen, nicht zu

68 * Vakuumreiniger«, ein Apparat zur staubfreien Reinigung d. Wohnräume.

den Seltenheiten gehören. Ein Aufenthalt in einer so verun-
reinigten Luft mufs den Menschen der Gefahr aussetzen, dafs er
Krankheitskeime in sich aufnimmt, die, treffen sie einen empfang-
licheh Organismus, in diesem ihre pathogenen Wirkungen zum
Ausdruck bringen können.

Ein Vorgang, bei dem eine mehr oder minder grofse Staub-
entwicklung stattfindet, spielt sich fast täglich ab bei der Reini
gung von Wohnräumen und den in ihnen befindlichen Aus-
stattungsgegenständen durch Kehren, Bürsten und Ausklopfen,
Ist hierbei die Staubentwicklung auch keineswegs so erheblich
wie in mancherlei Fabrikbetrieben, so kann diese Art der Reini
gung gesundheitlich nicht als einwandfrei angesehen und die
Gefahren, die in ihr liegen, dürfen nicht unterschätzt werden.
Auch der Effekt einer solchen Reinigung ist in vielen Fällen
sehr gering. Handelt es sich um geschlossene Räumlichkeiten,
so findet bei dem Ausklopfen zwar ein Aufwirbeln des Staubes
statt, dieser aber senkt sich mangels genügenden Luftzuges bald
wieder auf die umstehenden Möbel. Es tritt also nur eine Um-
lagerung und keine Beseitigung der Staubteilchen ein. Geschieht
die Entstaubung bei kräftiger Lüftung oder im Freien, so ist
der Erfolg erheblich besser ; die Belästigungen des Arbeiters und
der Umgebung durch den Staub sind jedoch nicht beseitigt.

Ein Apparat, der diesen Übelständen abzuhelfen in der Lage
sei, wurde anfangs dieses Jahres in Deutschland in den Handel
gebracht, nachdem er bereits in England einige Zeit Anwendung
gefunden hatte. Auf Veranlassung meines hochverehrten Chefs,
des Herrn Geh. Medizinalrats Prof. Dr. Rubner, dem ich an
dieser Stelle für das stetige Interesse an den Versuchen meinen
Dank ausspreche, befafste ich mich im Laufe des vergangenen
Sommers mit der Prüfung des neuen Verfahrens.

Das Prinzip der neuen Reinigungsmethode ist, durch Saug-
luft, wie sie durch das Vakuum erzeugt wird, die den Gegen-
ständen anhaftenden Staubpartikelchen aufzusaugen und zu
sammeln, um sie vernichten zu können; auf die Verwendung
des Vakuums nimmt die Bezeichnung > Vakuumreiniger t bzw.
»Vacuum Cleanerc Bezug.

Von Stabsarzt Dr. Berghaus.

69

Der Apparat (Fig. 1), der bereits von Hoettecke be-
schrieben wurde *), besteht im wesentlichen aus einer Luftpumpe,
einem luftdicht verschliefsbaren, kesselartigen Behälter, dem sog.
Vakuumraum, in dem sich ein Filter befindet, und einer Schlauch-
leitung, welche, vom Vakuum ausgehend, zu den zu reinigenden
Räumen führt. Das freie Ende der letzteren wird je nach der
Art der Gegenstände, die entstaubt werden sollen, mit verschieden
geformten metallenen Mundstücken versehen; die antreibende
Kraft wird von einem Elektro-Benzin- oder Gasmotor geliefert.

^

Fig. 1.

Wird die Luftpumpe, die je nach der Gröfse des Apparates
ein- oder zweizylindrig ist, in Betrieb gesetzt, so entsteht in dem
kesseiförmigen Raum eine Luftverdünnung, die zu einer völligen
Luftleere sich steigern würde, wenn nicht von aufsen ein Luft-
zutritt erfolgte. Dies geschieht nun mittels der Schlauchleitung.
Je nach dem Grade der im Vakuum vorliegenden Luftverdünnung
strömt die Luft mit mehr oder minder grofser Kraft ein, und
dementsprechend macht sich an dem freien, mit Mundstück ver-
sehenen Ende die Saugwirkung bemerkbar. Bringt man das
Mundstück auf einen luftdurchlässigen Gegenstand (Fig. 2), z. B.
Teppich, Polstermöbel usw., so müssen, genügende Saugkraft
vorausgesetzt, die in, auf und unter dem betreffenden Gewebe

1) Gesuudheits Ingenieur 1904, Nr. 31, S. 502.

70 »Vakuumreiniger« , ein Apparat zur staubfreien Reinigung d. Wohnräume.

liegenden beweglichen Körperchen, deren wesentlicher Bestandteil
der Staub ist, angesaugt und durch die Schlauchleitung dem
Vakuumrauin zugeführt werden; ähnlich verhält es sich bei der
Reinigung von festen, luftundurchlässigen Gegenständen, z. B.
Bildern, oder Wänden Fufsböden. Die angesaugte Luft wird
durch das Filter von dein ihr anhaftenden Staub befreit und

Fig. 2.

tritt gereinigt in die Zylinder der Luftpumpe.^Aus letzteren wird
sie nach aufsen befördert. Das Filter besteht aus einem Sack
dichten und kräftigen Leinwandgewebes. Es wird über ein den
oberen Teil des Vakuumraumes im Querschnitt fast völlig aus-
füllendes, pilzförmiges Stativ gestülpt und mit der Öffnung nach
unten mittels Bandeisen befestigt. Unterhalb der Kuppel des
Stativs, im Innern des Filtersackes, ist die Einmündungssteile

Von Stabsarzt Dr. Berghaus.

71

der Saugleitung. Der von dem Filter zurückgehaltene Staub
sammelt sich in dem trichterförmig zulaufenden unteren Abschnitt
des Vakuums und wird durch eine Öffnung, die mit einer luft-»
dicht verschliefsbaren Klappe versehen ist, nach der jedesmaligen
Entstaubung entfernt.

Bei regelrechtem Gang arbeiten die Apparate mit einem
Minderdruck von ca. einer halben Atmosphäre (35— 40 cm Queck-
silber). Bei Verwendung der einzylindrigen Pumpe werden ca. 60,

Flg. 3.

der zweizylindrigen die doppelte Anzahl Kubikmeter Luft in einer
Minute durch das Filter gesaugt.

Die gesamte Einrichtung kann als transportabler Apparat
oder als stationäre Anlage Verwendung finden. Ersterer (Fig. 3)
ist auf einem kleinen Wagen angebracht, der jeweils an die
Wohnungen, welche einer Reinigung unterzogen werden sollen,
gefahren und im Hofe oder Keller aufgestellt wird. Der stationäre

72 * Vakuumreiniger«, ein Apparat zur staubfreien Reinigung d Wohnräume.

Apparat, dessen Anlage sich nur für gröfsere Gebäulichkeiten,
z. B. Theater, Hotels, eignet, findet in der Regel im Keller-
•geschofs Aufstellung; Anschlüsse nach Art der Hydranten stellen
alsdann die Verbindung mit den einzelnen Stockwerken her.
Durch Einschalten von Gummischläuchen kann die Saugleitung
beliebig verlängert und durch Türen, Fenster und über Treppen
in die betreffenden Wohnräume geführt werden. Um zu ver-
hüten, dafs der aufsen auf ihnen lastende Luftdruck bei der im
Inneren bestehenden Luftverdünnung sie zusammenprefst und ver-
schliefst, sind die Schläuche mit Draht durchzogen.

Zur Bedienung des Apparats sind im allgemeinen zwei Mann
erforderlich, von denen der eine den Motor zu beaufsichtigen,
der andere das Mundstück zu dirigieren hat.

Meine Versuche erstreckten sich auf die Prüfung der Leistungs-
fähigkeit der Apparate. Um auch ein Urteil für eine etwaige
Überlegenheit des Verfahrens gegenüber der gewöhnlichen Reini-
gungsmethode durch Bürsten, Klopfen usw. zu erhalten, stellte
ich unter möglichst gleichen Bedingungen Parallel versuche an.
Von besonderem hygienischen Interesse mufste es sein, in Er-
fahrung zu bringen, ob und in welchem Mafse durch den
Vakuumapparat neben einer schnelleren und gründlicheren Reini-
gung die Staubentwicklung beseitigt oder doch vermindert würde.
Zu diesem Zweck versuchte ich die Zahl der bei beiden Ver-
fahren in dia Luft gewirbelten Bakterien zu bestimmen ; ich be-
diente mich hierzu der von Koch zur Untersuchung der Luft
auf Mikroorganismen angegebenen »Absitzmethodec. Wenn auch
bekanntlich diese Methode einen genauen Aufschlufs über die
Zahl der in einer Luft vorhandenen Keime nicht gibt, so bot
sie mir doch, bei den beiderseitigen, unter möglichst gleichen,
wenn nicht denselben Verhältnissen angestellten Versuchen sehr
wohl verwertbare Vergleichspunkte für die Beurteilung. Die von
Petri-Ficker angegebene Untersuchungsmethode konnte aus
äufseren Gründen nicht angewandt werden.

Die im nachfolgenden angeführten Keimzahlen stellen den
Durchschnitt der Kolonien dar, die auf je zwei Gelatineplatten
zur Entwicklung kamen, nachdem sie 10 Minuten, falls nicht

Von 8tabsarzt Dr. Berghaus. 73

eine andere Zeitdauer besonders angegeben ist, der Luft aus-
gesetzt gewesen waren ; die Zählung der Kolonien erfolgte 3 bis
4 Tage später.

1. Versuch.

Ein Perserteppich von 15 qm Gröfse wurde mit 1000 g 8taab impräg-
niert und Ober Nacht liegen gelassen. Am folgenden Tage wurde er bei
geöffnetem Fenster zusammengelegt und behufs Reinigung durch Ausklopfen
auf den Hof gebracht. Die Anzahl der Luftkeime war vor dem Zusammen-
legen 10, sie stieg während desselben (3 Minuten) auf 173 und
war eine Stunde später, während im Freien die Reinigung vorgenommen
wurde, wieder auf 15 zurückgegangen. Mit dem Ausklopfen waren zwei
Arbeiter 1 Stunde lang beschäftigt, bis kein Staub mehr nachgewiesen werden
konnte. Die anfänglich sich entwickelnden Staubwolken waren für die
Arbeiter äufserst belästigend. Alsdann wurde der Teppich in den früheren
Kaum zurückgebracht und einer nachträglichen Vakuumreinigung unterzogen.
Lnftkeime waren vorhanden: vor, während und nach dieser 50, 36 und 38.
Es wurden nach 35 Minuten noch 43 g Staub aus dem Teppich entfernt.

2. Versuch.

In denselben Teppich wurden wiederum 1000 g Staub gerieben, als-
dann die Entstaubung durch das Vakuum vorgenommen. Anzahl der Luft-
keime vor, während und 30 Minuten nach dem Versuch: 12, 39, 18. Ab-
gesaugt wurden 999g Staub, die Reinigung erforderte zwei Arbeitskräfte
während 75 Minuten.

8. Versuch.

Imprägnieren desselben Teppichs mit 250 g Staub, Reinigen durch Ab-
fegen bei geöffneten Fenstern. Nach 35 Minuten konnten 48 g Staub
gesammelt werden, die anschliefsende Reinigung durch das Vakuum ent-
fernte noch 139 g in 50 Minuten.

4. Versuch.

Es wurden 100 g Staub auf einen 4,62 qm grofsen Teppich gebracht.
Lnftkeime waren vorhanden vor, während und nach der 15 Minuten dauern-
den Vakuumreinigung 34, 61, 30. Die Staubmenge betrug 92 g.

5. Versuch.

Einem Treppenläufer von 0,67 : 13,0 m Gröfse, welcher durch Ausklopfen
möglichst entstaubt worden war, wurden durch den Vakuumreiniger nach-
träglich 18 g Staub entzogen.

6. Versuch.

Ein Hotelzimmer mit einem Sofa, einem Lehnstuhl und einem Teppich
von 16 qm Gröfse wurde von einem Arbeiter in 15 Minuten mittels Klopfens
und Bürstens gereinigt. Vor und während der Reinigung waren 8 bzw.
3436 Luftkeime vorhanden, die nach 40 Minuten, bei Beginn und während
der Vakuumentstaubung sich auf 41 verringerten und unmittelbar
nach der letzteren 32 betrugen. Nachträglich entfernte Staubmenge

74 > Vakuumreiniger«, ein Apparat zur staubfreien Reinigung d. Wohnräume.

393 g. Es waren beschäftigt, wie auch bei den beiden folgenden Versuchen,
zwei Arbeiter mit je einer Saugieitung 30 Minuten.

7. Versuch.

Ein ähnliches Hotelzimmer mit einem Sofa, zwei Lehnstühlen, einem
Vorhang und Teppich von 20,7 qm wurde durch den Vakuumreiniger in
50 Minuten von 651 g Staub befreit. Auf den Gelatineplatten kamen 24,
22 und 27 Keime zur Entwicklung.

8. Versuch.

Aus einem Teppich von 28,8 qm, der sich in einem grofsen Hotelzimmer
befand, wurden in einer Stunde 518g Staub gesaugt. Es wurden 26 Keime
vor, 33 während und 53 nach der Reinigung gezählt.

9. Versuch.

Ein Abteil II. Klasse eines Eisenbahnwagens wurde mittels des Vakuums
bei Anwendung einer Saugleitung in 20 Minuten gereinigt. Die Gelatine-
platten wiesen vor, während und nach der Entstaubung 6, 144 und 7 Keime auf.

Bei dem 10. Versuch, einer Reinigung eines gleichen Abteils durch
Klopfen, betrug im Gegensatz hierzu die Anzahl der Keime, die sich inner-
halb 2 M i n u t e n während und unmittelbar nach demselben auf den Platten
ablagerten, 9688 bzw. 318.

Gelatineplatten, die während des Ausklopfens in einem Abteil I. Klasse
i Minute der Luft ausgesetzt gewesen waren, zeigten 771 Keime.

11. Versuch.

Ein Eisenbahnwagen, der zwei Abteile I. Klasse, vier Abteile II. mit
doppelten Sitzen und ein Halbabteil mit einfachen Sitzen hatte, wurde mit
einer Schlauchleitung des Vaknumreinigers in 2 Stunden entstaubt, indem
971 g Staub entfernt wurden.

Nach den vorstehenden Ergebnissen haben die von mir ge-
prüften Vakuumapparate beachtenswerte Leistungen aufzuweisen.
Ihre Saugwirkung blieb nicht auf die oberflächlichen Teile der
Teppiche und Polster beschränkt. Sie machte sich auch in den
tiefer gelegenen Partien geltend. Der unter den Teppichen, auf
dem Fufsboden liegende Schmutz wurde gleichfalls mitgerissen.
Auch Körperchen schwerer als Staub, kleine Steinchen, Eisen-
teilchen wurden absorbiert. Motten, die sich in den Polstern fest-
genistet hatten, wurden vielfach abgesaugt und fanden sich unter-
halb des Filters als zerquetschte Masse vor. Der Umstand, dafs
aus Zimmern und Teppichen, die durch Klopfen und Kehren
einer gründlichen und anscheinend vollkommenen Reinigung
unterzogen waren, noch nachträglich mittels des Vakuumreinigers

Von Stabsarzt Dr. Berghaus.

75

erhebliche Mengen Staub entfernt werden konnten, zeigt die
praktische Überlegenheit des neuen Verfahrens gegenüber dem
alten. Bei sorgfältiger Vornahme der Entstaubung dürfte der
Apparat wohl imstande sein, aus Teppichen, Vorhängen und

Flg. 4. Gelatineplatte während einer Zimmerreinigung durch Klopfen, Bürsten usw.
10 Minuten der Luft ausgesetzt.

Läufern den gesamten in ihnen befindlichen Staub zu beseitigen,
wie dieses der 2. Versuch zeigt.

Die mit dem Vakuumreiniger behandelten Gegenstände
wurden, soweit es sich nach den Versuchen beurteilen liefs, nicht
mehr angegriffen als durch das Klopfen und Bürsten. Die Menge
der Wollfasern, die gesammelt werden konnten, war bei beiden
Verfahren ungefähr dieselbe. Infolge der Saugwirkung richten
sich, wie dies besonders bei den Teppichen zu beobachten war,
die niedergetretenen Fasern wieder auf, wodurch die betreffenden
Gewebe ein vorteilhafteres frisches Aussehen annehmen.

76 > Vakuumreiniger«, ein Apparat zur staubfreien Reinigung d. Wohnräume.

Ein grofser Vorzug dieser neuen Methode besteht darin, dafs
sie die Reinigung in den Wohnräumen selbst gestattet ohne
grofse Belästigung der Bewohner. Es kommt bei ihr das um-
ständliche, zeitraubende und kostspielige Entfernen und Wieder-

Fig. 5. Gelatineplatte während Zimmerreinigung durch Vakuumreiniger.
20 Miouten der Luft ausgesetzt.

anbringen der Ausstattungsstücke in Fortfall, Unbequemlichkeiten,
die vielleicht manche Hausfrau und Hotelbesitzer bewegen, die
Reinigung über Gebühr hinauszuschieben.

Zeit und Arbeitskräfte werden bei einer Vakuumreiniguug
nicht erspart. Eine gründliche Entstaubung erfordert im allge-
meinen denselben, öfters jedoch einen gröfseren Aufwand an
Zeit und Bedienungsmannschaften, wie meine Versuche zeigten,
als das bisher übliche Verfahren.

Abgesehen von den oben erwähnten, mehr auf praktischem
Gebiete liegenden Vorzügen verdient der Vakuumreiniger speziell

Von Stabsarzt Dr. Bergbaus. 77

hygienischerseits besonderes Interesse. Die Schädlichkeiten, die
in der Verunreinigung der Luft durch Staub liegen, werden
durch ihn nicht bedingt; ein Aufwirbeln des Staubes und mit
ihm der Bakterien findet nicht statt. (Vgl. Fig. 4 und 5 ) Die
geringe Vermehrung der Luftkeime in den Räumen, in denen
die Entstaubung vorgenommen wurde, darf dieser nicht zur Last
gelegt werden. Sie wird schon durch das Betreten eines Raumes
und das Hin- und Herbewegen in demselben hervorgerufen.

Der aus den Möbeln, von den Wänden und Decken abge-
saugte Staub kann durch Verbrennen, Desinfektion oder Ver-
graben unschädlich gemacht werden; der durch Ausklopfen
mobilisierte dagegen belästigt nicht nur die Umgebung in weitem
Umfange, ein Übelstand, der sich besonders in den Grofsstädten
fühlbar macht, sondern er bildet in erster Linie für die Arbeiter
eine ständige, nicht zu unterschätzende Gefahr einer Infektion
durch Einatmung von Krankheitskeimen.

Von gesundheitlichem Standpunkte betrachtet, bedeuten die
Vakuum-Reinigerapparate einen Fortschritt auf dem Gebiete der
Wohnungshygiene. Ihrer allgemeinen Einführung stehen zunächst
noch die ziemlich erheblichen Kosten entgegen, die nicht nur
die Beschaffung, sondern auch die leihweise Benutzung ver-
ursachen. In gröfseren Betrieben, wie z. B. bei den Eisenbahn-
verwaltungen, Theatern und Hotels dürften sie ihrer praktischen
Verwendbarkeit wegen bald Eingang finden, zumal da in diesen
wohl ohne Ausnahme die zum Antrieb des Apparates erforder-
lichen Kraftmaschinen vorhanden sind.

Experimentelles über die bakterizide Wirkung des

Lichtes auf mit Eosin, Erythrosin und Flaoreszein

gefärbte Nährböden.

Von

E. Mettler, med. pract.

(Ans der bakteriologischen Abteilang des Hygiene-Institutes der Universität
Zürich. Vorstand: Privatdozent Dr. W. Silberschmidt.)

Der günstige Einflufs des Sonnenlichtes auf das Wohlbefinden
des Menschen und auf die Lebenstätigkeit tierischer und pflanz-
licher Wesen ist seit langer Zeit bekannt. Diese Beobachtung
hat in den letzten Jahren Laien und Ärzte zu der Verwendung
des Lichts als Heilfaktor bei den verschiedenartigsten Krank-
heiten veranlagt. Es wurde neben dem Sonnenlicht das elek-
trische Licht, neben dem weifsen Licht die einzelnen Spektral-
farben angewendet. Und so haben sich die verschiedenartigsten
Lichtheilverfahren entwickelt. Unsere Kenntnisse über die bio-
logischen Wirkungen des Lichtes wurden besonders durch Niels
R. Finsen 1 ) in sehr hohem Grade erweitert, indem dieser Gelehrte
eine wertvolle Behandlungsmethode gegen Hautkrankheiten, spe-
ziell gegen Lupus vulgaris, und eine gleich bedeutsame Therapie
gegen Pocken aufstellte. Besonders letztere Therapie ist stets
ein Gegenstand scharfer Kritik gewesen, und auch heute noch

1) Niels B. Finsen: Behandlang der Pocken im roten Licht.
2. Lief., 1904.

Arohi? für Hygiene Bd. LITT C

80 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

gehen die Ansichten der verschiedenen Autoren über den Wert
des Aufenthalts im roten Zimmer sehr auseinander. Ferner
schlössen sich therapeutische Versuche mit rotem Licht bei Masern,
Scharlach, Ekzem, Erysipel, Kuhpockenimpfung unter rotem Licht
an, doch ist die Zahl der Versuche noch zu gering und die Er-
gebnisse noch zu wenig übereinstimmend, um ein Urteil zu ge-
statten. Während die ersten therapeutischen Versuche rem empy-
risch waren, so hat man in neuerer Zeit auch versucht, die Wirkung
des Lichts experimentell festzustellen. Neben der anregenden
wurde namentlich die bakterientötende Wirkung wiederholt
untersucht. Schon vor Finsens bahnbrechenden Arbeiten ist
die Wirkung des Lichts eingehend experimentell geprüft worden.
Wir verdanken die ersten Versuche über den Einflute des Lichts
auf Mikroben den englischen Forschern Down es und Blunt 1 ),
deren Resultate aufs deutlichste zeigten, dafs diffuses Tageslicht
das Wachstum der Bakterien verlangsamt, direktes Sonnenlicht
dasselbe vollständig hemmt, und dafs vornehmlich die stark
brechenden violetten Strahlen, trotz ihrer verhältnismässig geringen
Wärmeenergie, die wirksamsten sind. Über die Dauer der Licht-
einwirkung in den verschiedenen Jahreszeiten, sowie über die
Art der Lichtquelle haben wir ausführliche Berichte in der Arbeit
von Dieudonnd 2 ). Bezüglich der Spektralfarben des Lichtes
fand er, dafs rote und gelbe Strahlen (Passieren der Strahlen
durch eine Lösung von Kaliumbichromat) keine Entwicklungs-
hemmung bedingen, dagegen die blauen und violetten (die eine
schwefelsaure Kupferoxydammoniaklösung passierten) bei gleich-
zeitiger Absorption von roten, gelben und grünen Strahlen.
Dieselben übereinstimmenden Resultate 'ergaben ihm die Ver-
suche bei direkter Benutzung des Spektrums eines elektrischen
BogenUchts. Um eine eventuelle Wärmewirkung auszuschalten,
mufsten die Strahlen eine Schicht einer Alaunlösung passieren.
Die Frage, ob die Lichtstrahlen die Bakterien selbst beein-
flussen oder den Nährboden chemisch verändern durch Ent-

1) Proceeding of the Royal Society of London, 1877, XXVI, 8. 488.

2) Arbeiten aus dem kaiserlichen Gesandheitsamt, Bd. 11.

Von E. Mettler. 81

wicklung eines bakteriziden Stoffes, wurde von verschiedenen
Autoren mit nicht übereinstimmenden Resultaten geprüft. So
glaubt Richardson 1 ), dafs Wasserstoffsuperoxyd der bakteri-
zide Stoff sei. Auch Dieudonnd 2 ) wies Wasserstoffsuperoxyd
nach bei Belichtung unter Gegenwart von Sauerstoff. Kruse 8 )
hält teils die Lichteinwirkung auf die Bakterien als solche, teils
die Entwicklung eines anderen Giftstoffes für das schädliche
Agens. Bie 4 ) schreibt die bakterizide Wirkung einer direkten
Lichteinwirkung zu; zugleich mufs aber Sauerstoff vorhanden
sein, nach den Forschungen von Dieudonnö. Und wenn
Moment's 6 ) und Kedzior's 8 ) Untersuchungen zeigen, dafs Bak-
terien auch im Vakuum oder in einer indifferenten Luftart durch
das Licht getötet werden können, so bedingt doch der Zutritt
von Sauerstoff eine erhöhte bakterizide Kraft in Milch, wie auch
Bies 7 ) neueste Untersuchungen bestätigen. Aschkinas Caspari 8 ),
E. W. Wittlin 9 ), ausgehend von den Resultaten, dafs die Bak-
terien durch die kurzwelligen Strahlen des Spektrums in ihrer
Entwicklungsfähigkeit geschädigt werden, machten Versuche mit
Röntgenstrahlen. Ihre Resultate waren negativ. Nachdem somit
festgestellt war, dafs den blauen, violetten und ultravioletten
Strahlen die bakterientötende Wirkung zuzuschreiben ist, diese
Strahlen den roten, langwelligeren Strahlen gegenüber aber ge-
ringere Penetrationskraft besitzen, d. h. nicht so tief in tierisches
Gewebe zu dringen vermögen, kam nun Dreyer 10 ) auf die Idee,
Gewebe auch künstlich in einen Zustand zu versetzen, um sie

1) Jonrnal of the Chemical Society, 1898, LXIII, S. 1109.

2) Arbeiten aas dem kaiserlichen Gesundheitsamt, Bd. IX, 1894.

3) Zeitschrift f. Hygiene u. Infektionskrankheiten, 1895, XIX.

4) Ohm Lysets Wirkung paa Bacterier., Köbenhavn, 1903.
6) Ann. de l'Inst Past., 1892, VI.

6) Archiv f. Hygiene, 1899, XXXVI.
7)L. C.

8) Über den Einflufs dissoz. Strahlen auf organ. Subst. Chein. Central-
blatt, Bd. 7.

9) Ghem. Zentralblatt, 1897, I. (Zentralbl. ' f. Bakt u. Parasitenkunde,
2. Abt., H, 30. XI. 1896.)

10) Mitteilung Ober Lichtbehandlung nach Dreyer, Deutsche Medizinische
Wochenschrift, 1904, Nr. 8.

6*

82 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

für die fast wirkungslosen roten, orangen, gelben und grünen
Strahlen empfänglich zu machen. Er »sensibilisiertet die Gewebe
mit Erythrosin. In der Photochemie versteht man unter dem
Namen optische Sensibilisatoren solche Stoffe, die imstande sind,
Silbersalze empfindlich zu machen für die auf sie nur in ge-
ringem Mafse einwirkenden Strahlen des Spektrums, d. h. rot,
orange, gelb und grün, während die Silbersalze sonst mit be-
sonderer Vorliebe die blauen und violetten Strahlen absorbieren.
Es ist jedoch nicht jeder Farbstoff als Sensibilisator zu verwenden.
Welche Eigenschaften einem Sensibilisator zukommen müssen,
darüber gibt die Photochemie noch keinen völligen Aufschlufs.
Als Sensibilisatoren sind bis jetzt u. a. bekannt:

1. Erythrosin (Tetrajodfluoreszein) ;

2. Eosin (Tetrabromfluoreszein), dessen sensibilisierende Kraft
nur ein viertel so stark wie die des Erythrosins ist;

3. Chinolinrot;

4. Cyanin (Ohinolinblau, für lebendes Gewebe unbrauchbar
wegen seiner Giftigkeit);

5. Alizarinblausulfid;

6. Äthylrot (als unwirksam erwiesen);

7. Ortochrom (Derivat von Äthylrot).

Diese Frage der Sensibilisation von tierischem Gewebe, um
sie auch der Therapie zugänglich zu machen, hat besonders in
den letzten Jahren viele Autoren zu Versuchen angeregt, und
es sind schon eine Anzahl günstiger Resultate speziell der
Eosin- und Erythrosin-Behandlung mit Sonnenlicht bei Lupus
vulgaris von Prof. Tappeiner in München, der N e i f s er sehen
Klinik in Breslau und Finsens Lichtinstitut in Kopenhagen
veröffentlicht worden. Eine befriedigende Erklärung für die Wir-
kung dieser eigenartigen Farbstoffe besitzen wir aber bis heute
noch nicht. Bei der grofsen Bedeutung dieser Frage sowohl für
die Medizin als für die Hygiene erschien es angezeigt, diejenigen
Lebewesen, welche sich schon bei der Prüfung der Lichteinwirkung
als sehr geeignet erwiesen, die Bakterien, auch hier zu verwenden.
Die Wirkung der Sensibilisation auf Mikroorganismen ist bis
jetzt noch wenig studiert worden, und so habe ich, aufgefordert

Von £. Mettier. 83

durch Herrn Privatdozenten Dr. W. Silberschmidt, Vorstand
der bakteriologischen Abteilung am Hygiene-Institut in Zürich,
dem ich an dieser Stelle für seine vielseitige Anregung und das
stete Interesse, mit dem er meiner Arbeit folgte, bestens danke,
experimentelle Versuche angestellt über das Verhalten mehrerer
pathogener Mikroorganismen gegenüber der Einwirkung verschie-
dener Lichtarten auf mit sensibilisierenden Farbstoffen gefärbter
Nährboden. Es sei mir gestattet, vorerst eine kurze Beschreibung
der angewandten Methode vorauszuschicken.

Die meisten Versuche hatten die Prüfung der entwicklungs-
hemmenden Wirkung zum Zweck. Es wurde aber auch eine
Anzahl Untersuchungen vorgenommen, um die bakterientötende
Wirkung zu prüfen. Die Versuche wurden meist an Kulturen
auf festen Nährböden vorgenommen. Es wurden verwendet:
10 proz. Fleisch wasserpeptongelatine und Fleischwasserpepton-
agar mit 4 proz. Glyzerinzusatz. Die Kulturen wurden meist in
sogenannten Petridoppelschalen angelegt. Die Agarplatten wurden
fast ausschlief 8l ich an der Oberfläche beschickt, die Gelatine-
platten wurden zum Teil flüssig, zum Teil oberflächlich geimpft.
Bouillon und Schrägagar erwiesen sich als ungeeignet, da die
Resultate nicht so eindeutig waren; es wurden nur wenige
Versuche damit gemacht.

Zur Färbung benutzte ich Eosin, Marke: Eosin 2A extra
Höchst, Erythrosin und später auch Fluoreszein ohne bestimmte
Marke aus dem Vorrat des Instituts, und zwar in Verdünnungen
1 : 1000, 1 : 5000 und 1 : 10000. Die Nährböden wurden so ge-
färbt, dafs z. B. bei der Herstellung eines 1 promill. eosinhaltigen
Nährbodens 100 ccm flüssigen Agars oder Gelatine mit 11 com
einer lproz. Eosinlösung gefärbt, in sterile Röhrchen gegossen
und nochmals sterilisiert wurden.

Folgende Bakterien wurden geprüft:

1. Cholera vibrio;

2. Staphylococcus pyogenes aureus:

3. Typhusbazillus;

4. Bacterium Coli commune;

5. Bacterium phosphorescens (nur wenige Versuche).

84 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

Abends vor den Versuchen wurde von den zu prüfenden
Bakterien der Staininkultur etwas Material entnommen, überimpft
in Bouillon, welche ungefähr 12 Stunden im Brutschrank von
36° C aufbewahrt wurde. Die Gelatineröhrchen wurden darauf
mit 3 Ösen einer Aufschwemmung der ursprünglichen Bouillon-
kultur in sterile Bouillon beschickt. Die Agarversuche wurden
meist an Agarplatten, welche oberflächlich infiziert worden waren,
vorgenommen; diese Methode lieferte die besten Resultate.
Die zu prüfenden Kulturen wurden mit sterilen Wattetupfern,
wie dieselben bei der Entnahme von diphtherieverdächtigem
Material benutzt werden, auf Agarplatten möglichst gleichmäfsig
ausgebreitet. Es sei hier besonders hervorgehoben, dafs für jede
Versuchsreihe eine Kontrollreihe auf denselben Nährböden ohne
Belichtung der Kulturen ausgeführt wurde. Die betreffenden
Kontrollplatten wurden nach der Beschickung sofort in schwarzes
Papier eingewickelt und unter denselben Bedingungen aufbewahrt
wie die andern.

Einige vergleichende Versuche wurden mit Neutralrot, Karmin
und Blutfarbstoff angeschlossen. Nach Ablauf der bestimmten
Expositionszeit wurden die Platten ebenso in schwarzes Papier
eingehüllt. Die Gelatine wurde im Brutschrank von 22° C, die
Agarplatten bei 36 ° C aufbewahrt und einige Tage der Beobach-
tung bezüglich des Wachstums unterzogen, und zwar die Gelatine-
platten 4 — 5 Tage, die Agarplatten nur 1 — 2 Tage, da bei den
ersten Versuchen kein Wachstum mehr zu konstatieren war,
wenn nicht solches schon am ersten Tage aufgetreten war. Es
wurden nur sehr deutliche Unterschiede als positives Resultat
notiert.

Als Lichtquellen wurde diffuses Tageslicht bzw. Sonnen-
licht, Auerlicht, elektrisches Bogenlicht und Röntgenstrahlen be-
nutzt. Die Intensität der Beleuchtung wurde gemessen bei den
dem Tageslicht exponierten Kulturen mittels der Photometerskala
nach Vogel 1 ). Die Temperaturverhältnisse und die Dauer der
Exposition werden bei den einzelnen Versuchen angegeben. Bei

1) Handbuch der Photographie, 1890.

Von. E. Mettler. 85

einer ganzen Anzahl von Versuchen wurde, wie schon von früheren
Autoren, eine Alaunlösung zwischen Lichtquelle und Kultur ein-
geschaltet, um die Einwirkung der Wärme nach Möglichkeit aus-
zuschließen.

I. Versuche mit durch Rubinglas passierten Lichtstrahlen.
A. Dunkelkammer mit Gaslampe und rotem Glas.

Für diese Versuche stand mir die Dunkelkammer des hygi-
enischen Institutes zur Verfügung. Zur Belichtung wurde ein
Blechkasten konstruiert, dessen Vorder- und beide Seitenwände
aus rotem Glas bestanden. Die Vorderwand selbst neigte sich
nach vorn, damit eine grölsere AufsenflÄche gleichmäfsig be-
leuchtet werden konnte. Das rote Glas, spektroskopisch untersucht,
liefs die roten und gelben Strahlen des Spektrums durch bis an
die Grenze von Grün. Agar- und Gelatineplatten sowie Gelatine-
Rollröhrchen wurden in gleicher Entfernung von dieser Laterne
aufgestellt. Die Wärmeeinwirkung von seiten der Laterne auf
die Kulturen selbst war sehr gering. Die Versuche wurden in
folgender Weise angeordnet. Die beschickten Kulturen wurden
je 1, 2 bzw. 3 X 24 Stunden lang ohne Unterbrechung dem roten
Lichte ausgesetzt. Nach Ablauf dieser Zeit wurden die Platten in
schwarzes Papier eingehüllt. Eine Kontrollplatte wurde von Anfang
an in schwarzes Papier eingehüllt, exponiert und bis nach Ablauf
der Expositionszeit in der Dunkelkammer belassen. Als Nähr-
böden wurden gewöhnliche, d. h. ungefärbte sowie mit Eosin und
Erythrosin gefärbte je in Konzentrationen von 1 : 1000 verwendet.

Je eine Platte resp. Rollröhrchen wurde nebst dem in
schwarzes Papier eingehüllten Kontroll in der Kapelle des
Laboratoriums bei schwacher diffuser Beleuchtung der Beob-
achtung ausgestellt und am Ende des Versuches mit den übrigen
verglichen. Die Resultate sind in Tabelle I zusammengestellt.
Erklärung der Zeichen:

+ + + sehr üppiges Wachstum,

+ -f- üppiges Wachstum, Kolonien nicht zählbar,
-f- ziemlich viele Kolonien.
L spärliche Kolonien,
kein Wachstum.

86 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Licntes etc.

Tabelle I.
Versuche im Dunkelzimmer.

(Auerbrenner und Rubinglas.)

Expositionszeit

Staphylokokkus

Cholerabazillus

Gelatine-
rollröhrchen

Gelatine-
platten

Gelatine-
platten

Agar-
platten

A. Ungefärbte Nährboden.

24 Stunden

48 »

72 »

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln)

Kontroll in Kapelle (diffuses

Licht)

+++
+++
+++

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

+++

+ + +

+ + +

L

L

L

i

+++
+++
+++

+++

24 Stunden

48 »

72 >

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln)

Kontroll in Kapelle (diffuses

Lichti

B. Mit Eosin gefärbte Nährböden 1 : 1000.

+++
+++

1 +++

; +++
+++

+++

+++

+

+

C. Mit Erythrosin gefärbte Nährböden 1 : 1000.

24 Stunden

48 »

72 »

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln)

Kontroll in Kapelle (diffuses

Licht)

+++
+++
+++

+++
+++
+++

+++

+++

+

+

Expositionszeit

Typhusbazillus

Kolibazillus

Gelatine-
platten

Gelatine- Gelatine-

rollröhrchen platten

Gelatine-
rollröhxchen

24 8tunden

48 >

72 »

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln)

Kontroll in Kapelle (diffuses

Licht)

A. Ungefärbte Nährböden.

+ + + I + + +
+ + + + + +
+ + + + + +

+ + + , + + +

+++ : +++

+++ +++
+++ ■ +++
+++ | +++

+++ ! +++
+++ ! +++

Von E. Mettler.

87

Expositionszeit

Typhusbazillus

Kolibazi litis

Gelatine-
platten

Gelatine- |j
. roll röhrchen .

Gelatine-
platten

Gelatine-
rollröhrchcn

24 8tanden

48 >

B. Mit Eoein gefärbte Nährböden 1 : 1000.

+ + +

Kontroll (schwarzes Papier
im Dunkeln)

Kontroll in Kapelle (diffuses
licht)

+ + +
+ + +

+ + +

+ +

C. Mit Erythros» gefärbte Nährböden 1 : 1000.

24 Stunden

48 »

72 >

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln)

Kon troll in Kapelle (diffuses

Licht)

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ +

Expositionszeit

BaxillasPhosphoreszens

2°/p Pepton-
lösung

Gelatine-
platten

A. Ungefärbte Nährböden.

24 Stunden

48 »

72 » ......

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln

Kontroll in Kapelle (diffuses

Licht)

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ +

B. Mit Eosin gefärbte Nährböden 1 : 1000.

24 Stunden

48 >

72 »

Kontroll (schwarzes Papier

im Dunkeln)

Kontroll in Kapelle (diffuses

Licht)

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

+ +

Resümee. In Übereinstimmung mit den Befunden anderer
Autoren haben auch unsere Versuche mit aller Bestimmtheit er

88 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

geben, dafs das durch Rubinglas filtrierte rote Licht einer inten-
siven Auerlampe auch bei 3 Tage langer Einwirkung nicht im-
stande ist, die geprüften Bakterien in ihrer Entwicklung in merk-
licher Weise zu hemmen. Wir ersehen aus diesen Versuchen
weiter, dafs Eosin und Erythrosinzusatz einen Unterschied in den
Resultaten nicht ergeben hat, da das Wachstum auf den expo-
nierten gefärbten Nährböden in gleicher Weise erfolgte wie auf den
nicht gefärbten. Bei Bacillus Phosphorescens war auch keine
Einbufse des Leuchtvermögens zu konstatieren ; die dem diffusen
Licht exponierte Kultur leuchtete nach 4 Tagen nicht mehr.

B. Elasten aus Rubinglas bei Tageslicht exponiert
Ein aus ziemlich dunklem Rubinglas, wie es zu photogra-
phischen Zwecken benutzt wird, fabrizierter Kasten — Länge
50 cm, Breite 25 cm, Höhe 15 cm — wurde auf dem Dache
des Laboratoriums dem diffusen Lichte exponiert. Das Glas
zeigte spektroskopisch dieselben Verhältnisse wie dasjenige der
Laterne in der Dunkelkammer. In diesem wurden Kulturen auf
gefärbten und auf ungefärbten Nährböden verschieden lange Zeiten
exponiert, nach verstrichener Expositionszeit in schwarzes Papier
gehüllt und in den Brutschrank gestellt. Die Intensität der Belich-
tung wurde außerhalb mit dem Photometer gemessen. Auch diese
Versuche wurden stets von Kontrollversuchen begleitet.

Tabelle II.
Versuche im Kasten aas rotem Rabinglas.

Staphylokokkus

Cholerabazillus

Agarplatten

Gelatine-
platten

Agarplatten

Gelatine-
platten

Datum

Temperatur

Intensität d. Beleuchtung

Expositionszeit ....

Nicht gefärbter Nährbod.
Mit Eosin gefärbt Nährb.
Mit Erythrosin gef . Nährb.
Kontroll (schwarz. Papier)

17. Nov.

+-4°C

2 Std. : 20

4 Std.: 20-1-24

6 Std.: 20 4- 24 + V

18. Nov.
8 Std.: 24

15. Nov.

+ 8°C

Vi Std.:

18. Nov.
+ 3*C

8Std:24

16
lStd.: 16 + 19
1»/, Std.: 16 + 19 + 15 |
2 Std.: 16 + 19:15 + 10

"/,. 1, IV, u. 2 Std. | 8 Std.

2, 4 u. 6 Std. i 8 Std.
+ + + ! ++-M + + + '+++

+++ -H-+: +++ "+++

Von E. Mettler.

89

Typhusbazillus

Kolibazillua

Agarplatten

Gelatine-
platten

Agarplatten

Gelatine-
platten

Datum

Temperatur

Intensität d. Beleuchtung

Expositioosseit ....

Nicht gefärbter Nährbod.
Mit Eosin gefärbt Nährb.
MitErythrosingef. Nährb.
Kontroll (schwarz. Papier)

16. Nov.
+ 6*C

2 8td : 22

4 8td.: 224-21

|68td.:22+21 + 13

2, 4 u 6 Std

18. Nov
+ 3°C
88td.:24

8 Std.

+ + +
+ + +

+ + +

+++,1

+++ii

19. Nov.
+ 4°C

2 Btd. : IS

4 Std.: 18+20

6 8t.: 18 + 20 + 17

2, 4 u. 6 StJ.

+ + +
+ + +
+ + +
+ + +

18. Nov
+ 3°C
8 Std.: 24

8 Std.

+++
+++
+++
+++

Resümee. Die in der Tabelle II zusammengestellten Ver-
suche wurden ausgeführt, um zu prüfen, ob das diffuse Tages-
licht bzw. ob das Sonnenlicht, welches viel intensiver ist als
das Licht einer Auerlampe, imstande wäre, nachdem dasselbe ein
rotes Glas passiert hatte, bakterizid zu wirken, ferner ob sich in
diesem roten Licht die Kulturen auf Eosin- und Erythrosin-Nähr-
böden anders verhalten als die auf ungefärbten Nährböden. Die
Resultate sind alle negativ gewesen. Nach 1, 2, 4, 6 und sogar
8 Stunden Exposition wurde eine Entwicklungshemmung bei
keinem einzigen der geprüften Mikroorganismen wahrgenommen.

II. Entwicklungshemmender Einflufs des Tageslichtes auf Kulturen
mit und ohne sensibilisierende Farbstoffe.

Die Versuchsanordnung war dieselbe, wie weiter oben bei der
Beschreibung der allgemeinen Methode angegeben. Die Kulturen
wurden auf dem Dache des hygienischen Institutes dem diffusen
und jenachdem dem Sonnenlicht exponiert. Es sei bemerkt, dafs
während der Versuchszeit in Zürich ausnahmsweise viel Sonnen
schein notiert werden konnte. Um die durch die Wärmestrahlen
bedingte Verflüssigung der Gelatine zu vermeiden, wurden die
Rollröhrchen in mit Alaunlösung gefüllten hohen Gläsern ex-
poniert, die Gelatineplatten dagegen einfach mit einer Glasglocke
bedeckt. Auch diese Versuche wurden stets mit Kontroll-
versuchen in schwarzem Papier ausgeführt.

90 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc

Tabelle III.
Diffuses Tageslicht und Sonnenlicht.

1. Staphylococcus pyog. aur.

Wachstum nach
24 Std. | 48 Std | 3 Tag. I 4 Tag.

Nährboden: Gelatineplatten u. Rollröhrchen.

1. Versuch mit Eosinnahrböden.

Datum: 17. Okt. — Expositionszeit: 6 u. 13 Std. — Temperatur: 16° C.
Aufbewahrung: 22° im Gelatine-Brutschrank.

1. Ungefärbte Gel. nicht exponiert

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 6 8td. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 13 Std. exponiert . .

5. Mit Eosin gef. Gelatine 6 Std. exponiert i

6. Mit Eosin gef. Gel. 13 Std. exponiert

+++

!+++

, L

+

+ +

! l

L

+

+
o
o

2. Versuch mit Eosinnahrböden.

Datum: 6. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 9° C. —
Intensität der Beleuchtung : 18. 18 + 20. — Aufbewahrung : 22° im Gelatine-
Brutschrank.

1. Ungefärbte Gel. nicht exponiert

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 6 Std. exponiert

• +++

• !'+++

•ii +

++

• +

++

. ''

. !! o

il

+ ++'
+++

Nährboden : Gelatine-Rollröhrchen.

3. Versuch mit Erythrosinnährboden.

Datum: 9. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 10° C. —

Intensität der Beleuchtung: 2 Std.: 18, 4 Std.: 18 + 13. — Aufbewahrung:

22° im Gelatine-Brutschrank.

1. Ungefärbte Gel. nicht exponiert . .

2. Mit ErythroBin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert ....

5. Mit Erythrosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Erythrosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

+++

+++

+++

+++

+++

+++

1 °

i

„

Von E. Mettler.

91

Wachstum nach
24 Std. I 48 Std. | 3 Tag. I 4 Tag.

Datum: 28. Okt

Nährboden: A garplatten.
1. Versuch mit Eosinnährboden.

- Expositionszeit : 2 u. 4 Std. — Temperatur: 10° C.
Aufbewahrung 36° C im Brutschrank.

1. Ungefärbter Agar nicht exponiert .

2. Mit Eosin gel Agar nicht exponiert

3. Ungef . Agar 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Agar 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin Agar gef. Agar 4 Std. exponiert

+++

+++

+

++

++

++

2. Versuch mit Erythrosinnäbrboden.

Datum: 12. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 10° 0. —

Intensität der Beleuchtung : 2 Std. : 18, 4 Std. : 18 -f 20. — Aufbewahrung

36° C im Brutschrank.

1. Ungefärbter Agar nicht exponiert

2. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert '

3. Ungef. Agar 2 Std. exponiert. .

4. Ungef. Agar 4 Std. exponiert. . . .

5. Mit Erythrosin gef. Agar 2 Std. exponiert

6. Mit Erythrosin gef. Agar 4 Std. exponiert

+++

+++

++

++

++

+

++

++

3. Versuch mit Eosin- und mit Erythrosinn&hrboden.

Datum: 17. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 8td. — Temperatur 4° 0. —
Intensität d. Beleuchtung: 2 Std. : 20, 4 Std. : 20 + 24. — Aufbewahrung 36° C.

1. Ungef. Agar nicht exponiert . . . . ' -\ — | — |-

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert . -\ — | — \-

3. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert -| — | — |-

4. Ungef. Agar 2 Std. exponiert. . . . ' - L -- L

5. Ungef. Agar 4 Std. exponiert. . . .

6. Mit Eosin gef. Agar 2 8td. exponiert .

7. Mit Eosin gef. Agar 4 Std. exponiert .

8. Mit Erythrosin gef. Agar 2 Std. exponiert

9. Mit Erythrosin gef. Agar 4 8td. exponiert

+ +

++

++

92 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

2. Cholera.
Nährböden : Gelatine-Rollröhrchen.

Wachstum nach
24 Std. I 48 Std. I 3 Tag. 4 Tag.

1. Versach mit Eosin.

Datum: 31. Nov. — Expositionszeit: 1 u. 4 Std. — Temperatur: 11° C. —
Intensität der Beleuchtung: IStd.: 23, 4 Std.: 23 + 24. — Aufbewahrung.

22° G im Brutschrank.

1. üngef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. X Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. l'Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

1

1

+++

1

+++

L

+

1 Col.

°

+

lCol.

2. Versuch mit Eosin.

Datum: 9. Nov. — Expositionszeit: 1 u. 4 8td. — Temperatur: 10° C. —
Intensität der Beleuchtung: 1 St : 22, 4 Std. : 22+18. — Aufbewahrung:

22° im Brutschrank.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . x

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 1 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exnoniert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 1 tStd. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

++
++

+++
+++

+

+++

+++

++

+++
+++
+++

3. Versuch mit Erythrosin.

Datum : 9. Nov. — Expositionszeit : 2 u. 4 Std. — Temperatur : 10° C. —
Intensität der Beleuchtung: 2 Std.: 22, 4 Std.: 22 + 18. — Aufbewahrung

22° C im Brutschrank.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . . . :,

2. Mit Erythrosin gef. Gel. nicht exponiert ',

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . . •

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert

5. Mit Erythrosin gef. Gel. 2 Std. exponiert ]

6. Mit Erythrosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

+ +
+ +

3 Col.

+++
+++

7 Col.

Von E. Mettler.
Nährboden: Agarplatten.

93

[i Wachstum nach

' 24 Std. I 48 Std. I 3 Tag. I 4 Tag.

1. Versuch mit Eosinnährboden.

Datum: 7. Nov. — Expositionszeit : V, u. 1 8td. — Temperatur: 9° C. —
Intensität d. Beleuchtung : »/, Std. : 18, 1 Std. : 13 + 17. — Aufbewahrung : 35° C.

1. Ungef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert .

3. Ungef. Agar Vi Std. exponiert . . .

4. Ungef. Agar 1 Std. exponiert ....

5. Mit Eosin gef. Agar Vi Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Agar 1 8td. exponiert .

+

+++

+

+++

2. Versuch mit Eosinnährboden.

Datum: 23. Nov. — Expositionsseit : 2 a. 4 Std. — Temperatur: l'C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 18, 4 Std. : 18 + 20. — Aufbewahrung : 35° C.

1. Ungef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert .

3. Ungef. Agar 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Agar 4 Std. exponiert. . . .

5. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert .

6. Mit Eosin gef. Agar 4 8td. exponiert .

+++
! +++
+++
+++

+++

+++

+++
+++

8. Versuch mit Eiythrosinnährboden.

Datum: 14. Nov. — Expositionszeit: 1 u. 2 Std. — Temperatur: 6°
Intensität der Beleuchtung: 1 Std.: 13, 2 Std.: 134-15. —
Aufbewahrung: 86° C.

O —

1. Ungef. Agar nicht exponiert . .

2. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert
3 Ungef Agar 1 Std. exponiert ....

4. Ungef. Agar 2 Std. exponiert . . .

5. Mit Erythrosin gef. Agar 1 8td. exponiert

6. Mit Erythrosin gef. Agar 2 Std. exponiert

I!

I + +

' o

n

+++

+++

+ +

++

n

o

94 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

24Std.

Wachstum nach
I 48 Std. I 3 Tag. I

4 Tag.

4. Versuch mit Eosin- und mit Erythrosinnährboden.

Datum: 15. Nov. — Expositionszeit : Vit 1, 17 t Q. 2 Std. — Temperatur: 8° C.

— Intensität der Beleuchtung: 7« Std.: 16, l Std.: 16 + 19, lV t Std.: 16 +

19 + 15, 2 Std.: 16 + 19 + 15 + 10. - Aufbewahrung: 36° C.

1. TJngef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gel Agar nicht exponiert .

3. Mit Erythrosin gef . Agar nicht exponiert

4. Ungef. Agar Vj Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Agar V, Std. exponiert

6. Mit Erythrosin gef .Agar Vi Std.exponiert

7. Ungef. Agar 1 Std. exponiert. .

8. Mit Eosin gef. Agar 1 Std. exponiert .

9. Mit Erythrosin gef. Agar 1 Std. exponiert

10. TJngef. Agar 1 Vi Std. exponiert . . .

11. Mit Eosin gef. Agar 1 V« Std. exponiert

12. Mit Erythrosin gef . Agar 1 V, Std. expon.

13. Ungef. Agar 2 Std. exponiert. . . .

14. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert

15. Mit Erythrosin gef. Agar 2 Std. exponiert

3. Typhusbazillus.
Nährboden : Gelatine-Rollröhrchen.

1. Versuch mit Eosinnährboden.

Datum: 81. Okt — Expositionszeit : 2 u. 4 8td. — Temperatur: 11° C. —

Aufbewahrung :

1. Ungef. Gel. nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gel. Gel. nicht exponiert .

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . ... + ++ + +

4. Ungef. Gel. 4 StdL exponiert . , . . + -j- +

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert .

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert .

2. Versuch mit Eosinnährboden.

+++
+++
+++
++

+++
+++
+++
++

++

++

++

++

++

++

22° C.

+++
+++

+

++

+

Datum: 4. Nov. — Expositionszeit: 2 u.
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std.: 18, 4 Std.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert .

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert ....

5. Mit ßosin gef. Gel. 2 Std. exponiert .

6. Mit Eosin gel Gel. 4 Std. exponiert .

4 Std. — Temperatur: 9° C. —
: 18 + 20. — Aufbewahrung : 22° C.

1 '+++

I +

! +

++
++

++
++

Von E. Mettler.

95

24 Std.

Wachstum nach
I 48 Std. I 3 Tag. I

4 Tag.

3. Versuch mit Eryth rosin nfthrboden.
Datum: 9. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 10° C. —
Intensität d. Beleuchtung: 2 Std. : 22, 4 Std. : 22 + 18. — Aufbewahrung: 22° C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert ....

2. Mit Erythrosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert ....

5. Mit Erythrosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Erythrosin gef. Gel. 4 Std. exponiert ,

+
+

4-4-4-

4-4-4-

4-4-

4-4-

4-

4-4-

36° C.

+++

+++

4-4-

+

4-4-4-
4-4-

4-4-4-

+4-+

Nfthrboden: Agarplatten.
1. Versuch mit Eoein agarplatten.
Datum: 29. Okt. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 8° C.

Aufbewahrung :

1. Ungef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert .

3. Ungef. Agar 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Agar 4 Std. exponiert ....

5. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Agar 4 Std. exponiert

2. Versuch mit Erythrosinagarplatten.
Datum: 12. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 10° C. —
Intensität d. Beleuchtung: 2 Std. : 18, 4 Std. : 18 + 20. — Aufbewahrung: 36° C.

1. Ungef. Agar nicht exponiert . . . . -\ — | — |-

2. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert I ~\ — | — |-

3. Ungef. Agar 2 Std. exponiert . . . . ! -f- +

4. Ungef. Agar 4 8td. exponiert . . . . |j +

5. Mit Erythro sin gef. Agar 2 Std. exponiert .

6. Mit Erythrosin gef. Agar 4 Std. exponiert I

3. Versuch mit Eosin- und mit Erythrosinagarplatten.

Datum: 16. Nov. — Expositionszeit: 2, 4 u. 6 Std. — Temperatur: 6° C. —

Intensität der Beleuchtung: 2 Std.: 17, 4 Std.: 17+21, 6 Std.: 17 + 21 + 18.

— Aufbewahrung : 36° C.

++

4-4-

4-4-

4-4-

1. Ungef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert .

3. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert

Archiv fttr Hygten«. Bd. t-ttt

+4-4-4-4-4-
++++++
++++++

96 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

24Std.

Wachstum nach
48 Std. 3 Tag.

4 Tag.

4. Ungef. Agar 2 Std. exponiert ....

5. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert .

6. Mit Erythrosin gef. Agar 2 Std. exponiert

7. Ungef. Agar 4 Std. exponiert ....

8. Mit Eosin gef. Agar 4 Std. exponiert .

9. Mit Erythrosin gef. Agar 4 Std. exponiert

10. Ungef. Agar 6 Std. exponiert. . . .

11. Mit Eosin gef. Agar 6 Std. exponiert .

12. Mit Ery throsin gef. Agar 6 Std. exponiert

+ +

+

++

++

4. Kolibazillus.

Nährboden : Gelatinerollröhrchen.

1. Versuch mit Eosinnährboden.

Datum: 4. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 9° C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 18, 4 Std. : 18 + 20. — Aufbewahrung : 22° C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

+++

+++

+

+

+

L

L

+

+
+

2. Versuch mit Eosinnährboden.

Datum: 17. Okt. —

Expositionszeit: 5 u. 14 Std.
Aufbewahrung: 22° C.

Temperatur: 16° C. —

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 5 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 14 Std. exponiert . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 5 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 14 Std. exponiert

li

• :+++

• 1+++

• ,! l

+ +

- 1 L

+

. ll

L

in d. Tiefe

+++
++

L

Von E. Mettler.

97

Wachstum nach
24 Std. | 48 Std. | 3 Tag. | 4 Tag.

+++

+++

++

+ +

L

+

3. Versuch mit ErythroBinnährboden.

Datum: 14. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std.: — Temperatur: 6° C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 23, 4 Std. : 23 + 22. — Aufbewahrung : 22° C.

1. üngef. Gel. nicht exponiert ....

2. Mit Erythrosin gef. Gel. nicht exponiert

3. ÜDgef. Gel. 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert ....

5. Mit Ery throsin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Erythrosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

4. Versuch mit Erythrosin nähr boden.

Datum: 9. Nov. — Expositionszeit : 2 u. 4 8td. — Temperatur: 10° C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 18, 4 Std. . 18 + 20. — Aufbewahrung : 22° C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert ....

2. Mit Erythrosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert ....

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert ....

5. Mit Erythrosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Erythrosin gef. Gel. 4 Std. exponiert j

Nährboden: Agarplatten.
1. Versuch mit Eosin agarplatten.
Datum: 29. Okt. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur:

Aufbewahrung: 36° C.

1

+++

1 +

+ +

+ +

1 L

+ +

+ +

L

L

L

in d. Tiefe

8°0. —

1. Ungef. Agar nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert

3. Ungef. Agar 2 Std. exponiert . .

4. Ungef. Agar 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Agar 4 Std. exponiert

+++

+++

+ +

++

Ü

++

++

2. Versuch mit Erythrosinagarplatten.
Datum: 14. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 6° C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 23, 4 Std. : 23 -f 22. — Aufbewahrung : 36° C.

1. Ungef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert :,

3. Ungef. Agar 2 Std. exponiert . . . . '

4. Ungef. Agar 4 Std. exponiert . . . .

5. Mit Erythrosin gef . Agar 2 Std. exponiert !,

6. Mit Erythrosin gel Agar 4 Std. exponiert

!+++
>,+++

+
o

++

7«

98 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

24 Std.

Wachstum nach
I 48 Std. I 3 Tag. I

4 Tag.

Ü. Versuch mit Eosin und mit Erythrosinagarplatten.
Nov. — Expositionszeit: 2, 4 u. 6 Std. — Temperatur: 4°

Datum: 19,

Intensität der Beleuchtung : 2 Std.: 18, 4 Std.: 18-1-20, 6 Std
— Aulbewahrung: 36° 0.

18 + 5

C. -

+ 17.

1. Ungef. Agar nicht exponiert ....

2. Mit Eosin gef. Agar nicht exponiert .

3. Mit Erythrosin gef. Agar nicht exponiert

4. Ungef. Agar 2 Std. exponiert ....

5. Mit Eosin gef. Agar 2 Std. exponiert .

6. Mit Erythrosin gef. Agar 2 Std. exponiert

7. Ungef. Agar 4 Std. exponiert ....

8. Mit Eosin gef. Agar 4 Std. exponiert .

9. Mit Erythrosin gef. Agar 4 Std. exponiert

10. Ungef. Agar 6 Std. exponiert ....

11. Mit Eosin gef. Agar 6 Std. exponiert .

12. Mit Erythrosin gef. Agar 6 Std. exponiert

j+++
+++
+++

+ +

+ +
+ +

+ +

+ +
+ +

+ +

Tabelle IV.

Versuche mit stärker verdünnter Eosinlfoung.

(1:5000 und 1:10000.)

Verdünnung : 1 : 5000.

Wachstum nach
24 Std. I 48 Std. I 3 Tag. I 4 Tag.

A. Staphylokokkus.

Nährboden : Gelatinerollröhrchen.

Datum: 18. Nov. — Expositionszeit : 2 u. 4 Std. — Temperatur: 3° C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 22, 4 Std. : 22 -f 18. — Aufbewahrung : 22 ° C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

• . ++

++f

• 1 ++

+++

• 1 ++

++

L

+

•1. o

. II

+++
+++
+++
++

Von E. Mettler.

99

Wachstum nach
24 Std. I 48 Std. I 3 Tag. I 4 Tag.

B. Cholerabazillus.
Datum: 18. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 3° C. —
Intensität d. Beleuchtung : 2 Std. : 22, 4 Std. : 22 + 18. — Aufbewahrung : 22 • C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

+ +
+ +

L

+++
+++

L

+++

+++

+

+++

+++

+++

+++

++

++4-

+

++

Verdünnung: 1:10000.

A. Staphylokokkus pyog. aur.

Nährboden : Gelatinerollröhrchen.

Datum: 19. Nov. — Expositionszeit : 2 u. 4 Std. — Temperatur: 4 9 C. —

Intensität d. Beleuchtung: 2 Std. : 18, 4 Std. : 18 + 22. — Aufbewahrung : 22° C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

B. Cholera.
Datum: 19. Nov. — Expositionszeit: 2 u. 4 Std. — Temperatur: 4° C. —
Intensität d. Beleuchtung: 2 Std. : 18, 4 Std. : 18 -f 22. — Aufbewahrung: 22° C.

1. Ungef. Gel. nicht exponiert . . .

2. Mit Eosin gef. Gel. nicht exponiert

3. Ungef. Gel. 2 Std. exponiert . . .

4. Ungef. Gel. 4 Std. exponiert . . .

5. Mit Eosin gef. Gel. 2 Std. exponiert

6. Mit Eosin gef. Gel. 4 Std. exponiert

Resümee. Die zahlreichen Versuche, welche hier tabellarisch
mitgeteilt worden sind, beweisen, dafs die auch an ungefärbten
Nährböden zutage tretende entwicklungshemmende Wirkung des
diffusen Tageslichtes und namentlich des Sonnenlichtes in viel
höherem Grade zu beobachten ist auf mit Eosin und mit Eryth-
rosin gefärbten Nährböden als auf ungefärbten. Es genügt in

+++

+++

+++

+++

++

+ +

L

L

100 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

diesen Fällen häufig eine zweistündige Expositionszeit zu einer
vollständigen Entwicklungshemmung, währenddem die gleichzeitig
infizierten exponierten ungefärbten Nährböden noch nach 4 und
sogar noch nach 6 Stunden Wachstum zeigen. Dafs die Ver-
suche nicht absolut übereinstimmende Resultate ergeben haben,
liegt auf der Hand. Von den geprüften Bakterienarten ist der
Choleravibrio am empfindlichsten, das Bakterium coli am wider-
standsfähigsten, während Typhus und Staphylokokkus zwischen
beiden liegen. Auch bei den Versuchen mit ein und derselben
Bakterienart sind die Resultate nicht vollständig übereinstimmend
wegen den Schwankungen in der Tagesbeleuchtung. Die hier
angeführten Versuche wurden in den Monaten Oktober, November
und Dezember vorgenommen, d. h. zu einer Zeit, wo die Wärme-
strahlen nicht von grofsem Einflufs sind. Immerhin wurde, um
die Mitwirkung der Wärme auszuschalten, eine gröfsere Anzahl
von Versuchen unter doppel wandigen, mit Alaun gefüllten Glas-
glocken ausgeführt, wie wir weiter unten sehen werden.

Wie in der Einleitung angegeben, wurden die meisten Nähr-
böden mit l /oo Eosin- und Erythrosinlösung gefärbt. Auf Tabelle IV
sind einige Versuche mit Eosinnährböden, welche nur 1 : 5000
resp. 1 : 10000 des Farbstoffes enthielten, angeführt worden. Die
Resultate sind mit den vorhergehenden übereinstimmend und be-
weisen, dafs eine noch stärkere Verdünnung des sensibilisierenden
Farbstoffes ungefähr dieselbe Wirkung auf Bakterien ausübt.

III. Vergleichende Versuche mit nicht sensibilisierenden roten

Farbstoffen.

Tabelle V.
1. Versuch mit Blutfarbstoff.

Staphylokokkus pyog. aur.

Datum: 22. Nov. — Temperatur: + 8°Ü. — Intensität: 2Std.: 20, 4Std.:

20 + 23, 8Std.: 20 + 23 + 17.

Expositionszeit

2Std.

4Std. | 8Std.

1. Nicht gef. Agar

2. Mit Blutfarbstoff gef. Agar .

+ + +
+ + +

+ i -

+++I+++

Von £. Mettler.

101

Cholera.

Datum: 23. Nov. — Temperatur: +1° C. — Intensität: 2 Std.: 18, 4 Std.:
18 + 12, 8 Std.: 18 + 12 + 11.

Expositionsseit

; 2 Std.

4 Std.

8 Std.

1. Nicht gef. Agar

2. Mit Blutfarbstoff gef. Agar .

I++ +

|+ + +

+
+ + +

+
+ + +

Resümee. Diese mehrmals wiederholten Versuche beweisen,
dafs im Gegensatz zu den mit Erythrosin und mit Eosin erhal-
tenen Resultate die entwicklungshemmende Wirkung auf Bakterien
auf einem mit Blutfarbstoff gefärbten Agarnährboden geringer
ist als auf einem nicht gefärbten.

2. Yersneh mit Terschledenen Farbstoffen«

Cholera.
Datum: 24. Nov. — Temperatur: +1°C. — Intensität: 1 Std.

19, 2 Std.

19 + 22, 8 Std.: 19

+ 22 + 18.

Expositionszeit

IStd.

2 n. 8 Std.

1- Uneef. Amur

+ + +

+++

2 Mit Eosin gef. Agar. . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar .

4. Mit Karmin gef. Agar. .
Kontroll schwarzes Papier

+++

Kolibazillus.
Datum : 28. Not. — Temperatur: 0° C. — Intensität: 2 Std. : 19, 4 Std. : 19 + 18.

Ezpositionszeit

2 Std.

4 Std.

1. Nicht gef. Agar

2. Mit Neutralrot gef. Agar . .
Kontroll schwarzes Papier .

+ + +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

Es konnte in diesen allerdings wenigen Versuchen ein Unter-
schied zwischen den mit Karmin und Neutralrot gefärbten Nähr-
böden und den ungefärbten in bezug auf schädigende Einwirkung
des Tageslichtes nicht beobachtet werden.

102 Experimentelles Über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

IV. Entwicklungshemmender Einflute des Gaslichtes (Auerlicht)

des elektrischen Bogenlichtes und der Röntgenstrahlen auf Gelatine

und Agarkulturen mit und ohne sensibilisierende Farbstoffe.

A. Gaslicht.

Zu diesen Versuchen benutzte ich dieselbe Laterne wie bei
den Rotlichtversuchen unter Weglassung des roten Glases im
Dunkelzimmer. Die Platten wurden auch hier in der gleichen
Entfernung von der Lichtquelle exponiert. Es bildete sich bei
den exponierten Platten viel Kondenswasser. Die Wärmeeinwirkung
jedoch war nicht derart, dafs sie die Gelatine verflüssigt hätte.
Es wurden sowohl Agar- wie Gelatineplatten exponiert. Die
Dauer der Exposition war 24 und 48 Stunden ohne Unter-
brechung.

Tabelle VI.
A. CtalatLneplatten.

Staphy-
lokokkus

Cholera

Typhus-
bazillus

Kolibazillus

48 Std.

24 8td.

48Std.

48 Std.

24 Std.

48 Std.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. .

3. Mit Erythrosin gef.

Gelatine

Kontroll schw. Papier

+++
+ ++

+++
+++

+ + + +
+ + + +

+++
+++

+++
+++

B. Agarplatten.

1. Ungef. Agar ....

2. Mit Eosin gef. Agar .
2. Mit Erythrosin gef.

Agar

Kontroll schw. Papier

+++
++

+++
+++

+++
+++

+++

+++
+++

+++
+++

+++
+++

+++

B. Elektrisches Bogenlioht.

Diese Versuche worden in der Privatwohuung von Herrn
Professor Dr. O. Roth, Professor der Hygiene am Eidgenössischen
Polytechnikum, und im Physikgebäude des Polytechnikums (Abteil.
Prof. Dr. Weifs) ausgeführt. Es sei mir gestattet, Herrn Professor

Von E. Mettler.

103

Dr. 0. Roth und Herrn Professor Dr. We i f s für ihre grofse Freund-
lichkeit auch an dieser Stelle bestens zu danken. Mit Bacterium coli
und Staphylokokkus beschickte Platten wurden 3 und 4 Stunden
lang dem elektrischen Bogenlicht exponiert. Die Platten (Gelatine
und Agar) wurden teils umgekehrt, teils mit dem Deckel nach
oben aufgestellt und zwar möglichst nahe der Lichtquelle.

Tabelle VH
1. Versuchsreihe.

(In der Privatwohnung von Herrn Prof. Dr. 0. Roth.)

1. Versuch.

Staphylokokkus auf Agarplatte.

I Die tanz von
der Licht-
quelle

1. Ungef. Agar (am nächsten

gelegen)

2. Mit Eosin gef. Agar . . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar. .

4. Mit Fluoreszein gef. Agar .
Kontroll

14 cm
16 »
20 >

15 >

Resultat

+++

+++
+++

Alle diese Platten wurden umgekehrt, d. b. mit dem Boden der Petri-
schale nach oben exponiert.

2. Versuch.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar
Kontroll

Distanz von
der Licht-
quelle

21 cm
28 »
17 »
24 »

Resultat

+++
++

+++
+++

Alle Platten wurden mit dem Deckel nach oben exponiert (viel Kondens-
wasser am Deckel).

3. Versuch.

Staphylokokkus Gelati nerollröhrchen.
Schon nach einstündiger Expositionszeit trat mit Ausnahme des un-
gefärbten Gelatinerollröhrchens Verflüssigung infolge der ausstrahlenden
Wärme ein. Nach verflossener Expositionszeit wurden sie wieder zum Er-
starren gebracht. Die ungefärbten und die mit Fluoreszein gefärbten Gelatine-
rollrOhrchen waren nach 2 Tagen vollständig verflüssigt, während die zwei
andern mit Eosin und Erythrosin gefärbten eine noch nicht so starke Ver-
flüssigung zeigten.

_J

104 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

4. Versuch.
Kolibazillus auf Agarplatte.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

Kontroll schwarzes Papier

'Distanz von
der Licht-
quelle

Resultat

26 cm + + +
+ + +

+ + +
(Platte verunglückt)

Diese Platten wurden mit dem Deckel nach oben exponiert. Eine weitere
Reihe von Koliagarversuchen in einer Entfernung von 33—38 cm von der Licht-
quelle aufgestellt und zwar mit dem Deckel nach unten und mit je einem
schwarzen Quadrat in der Mitte des Bodens ergaben üppiges Wachstum.
Auch war ein Unterschied zwischen dem mit schwarzem Papier bedeckten
und dem übrigen Teil bezüglich des Wachstums nicht bemerkbar.

Die Koligelatinerollröhrchen waren nach einer Stunde Exposition ver-
flüssigt. Sie wurden zum Erstarren gebracht und zeigten nach 2 Tagen
üppiges Wachstum.

2. Versuchsreihe.

(Im Laboratorium des Eidgenössischen Physikgebäudes.)

1. Versuch.

Amp. 13. 50 Volt. 200 Kerzen Lichtstarke.

Expositionszeit: 3 Stunden.

Distanz von der Lichtquelle 40 cm.

Staphy-

Koli-

lokokkus

bazillus

1. Ungef. Agar

+ + +

+++

2. Mit Eosin gef. Agar . . .

L

(am Rand)

++

3. Mit Erythrosin gef. Agar

1 Koli

++

4. Mit Fluoreszein gef. Agar .

+ + +

+++

Kontroll schwarzes Papier .

+ + +

1

+++

2. Versuch.

18 Amp. 70 Volt. 150 Kerzen Lichtstärke.

Expositionszeit: 4 Stunden.

Distanz von der Lichtquelle 30 cm.

Ungef. Agar

Mit Eosin gef. Agar . .
Mit Erythrosin gef. Agar
Mit Fluoreszein gef. Agar
Kon troll schwarzes Papier

I

+ +
+
L

+ +
+ + +

+ + +
+ + +
+ + +

+ + +

Ton £. Mettler. 105

Die Versuche mit Röntgenstrahlen wurden mir er-
möglicht dank der Liebenswürdigkeit von Herrn Privatdozenten
Dr. Zuppinger, Vorstand des Röntgenlaboratoriums am Kan-
tonsspital in Zürich, welcher die Bestrahlung in freundlicher
Weise ausführte. Als Nährböden wurden Agarplatten, sowohl
gefärbte wie ungefärbte, verwendet. Die Platten wurden mit
Staph. pyog. aur. und mit Pact. coli commune beschickt.
Herr Dr. Zuppinger beleuchtete nun die Platten in Intervallen
von je 10 Minuten 12 Minuten lang, im ganzen 7 /< Stunden.
Die Stromstärke betrug 4 Ampere und 47 Volt. Die Kontroll-
platten im schwarzen Papier wurden im Dunkelzimmer auf-
bewahrt. Das Resultat der Untersuchungen war:

Üppiges Wachstum der Staphylokokken und Colibazillen,
sowohl der den Röntgenstrahlen exponierten wie der Kontroll.
Ein Unterschied bei den mit Fluoreszein, Eosin und Erythrosin
gefärbten Nährböden gegenüber den ungefärbten war nicht nach-
weisbar. Ebenso war das Wachstum der den Röntgenstrahlen
zunächst gelegenen Colibazillen gleich üppig wie das der an sie
sich anschliefsenden Staphylokokkenplatten, so dafs ein entwick-
lungshemmender Einflufs der Röntgenstrahlen in der allerdings
kurzen Zeit von 7 / 4 Stunden nicht nachgewiesen werden konnte.

Resümee. Von den hier mitgeteilten Versuchen verdienen
die mit elektrischem Bogenlicht vorgenommenen besondere Er-
wähnung. In drei Versuchsreihen konnte der entwicklungs-
hemmende Einflufs auf Staphylokokken deutlich beobachtet
werden, nach relativ kurzer 3 — 4 stündiger Expositionszeit. Das
widerstandsfähigere Bacterium coli hat in diesen Versuchen unter
denselben Bedingungen nicht so deutliche Resultate ergeben;
wir haben in früheren Versuchen die gröfsere Widerstandsfähig-
keit dieses Mikroorganismus angeführt. Es mufs hier allerdings
bemerkt werden, dafs sämtliche Platten mit Deckel aus gewöhn-
lichem Glas exponiert worden waren, die besonders wirksamen
ultravioletten Strahlen werden von diesem Glas zurückgehalten.
Es wären die Versuche möglicherweise noch günstiger ausge-
fallen, wenn wir, wie dies im Finsensschen Institut gemacht
worden ist, Gefäfse aus Bergkristall verwendet hätten.

106 Experimentelles aber die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

Eine deutliche entwicklungshemmende Wirkung des Auer-
lichtes und der Röntgenstrahlen festzustellen, ist bei der ange-
gebenen Versuchsanordnung nicht gelungen. In einem Versuch
mit Auerlicht war allerdings die Zahl der Cholerakolonien auf
der Eosinplatte etwas geringer. Eine sichere Einwirkung konnte
aber doch nicht nachgewiesen werden.

V. Versuche unter doppelwandigen Glasglocken.

Drei doppelwandige Glasglocken (48 cm hoch, 20 cm Durch-
messer) wurden mit folgenden Lösungen versehen:

Die erste mit gewöhnlichem Wasser : 6000 ccm und 300 g
Alaun zur Wärmeabsorption. In den folgenden Versuchen als
»weifse Glocke« bezeichnet; in die zweite, etwas mehr fassend,
kamen 7000 ccm einer Eosinlösung von 1 : 10000 und 350 ccm
Alaun; als »Eosinglocke« bezeichnet. In die dritte gleichfalls
7000 ccm einer Erythrosinlösung von 1 : 10000 mit 350 g Alaun;
als »Erythrosinglockec bezeichnet. Die Lösung war nicht ganz
beständig, sowohl bei Eosin als bei Erythrosin kam es zu einem
Niederschlag am Boden und auf der Kuppel der inneren Wand
der Glocke. Ferner kam es zu einer teilweisen Entfärbung und
Zersetzung.

Für jede Glocke resp. das Glockeninnere wurde ein Gestell
aus Draht mit vier Etagen konstruiert, auf welche Etagen die
Petrischalen zu liegen kamen, und zwar war das Gestell kon-
struiert analog den in den bakteriologischen Instituten verwen-
deten Dreifüfsen, so dafs also eine Petrischale an ihrem Rande
nur auf drei Drähten ruhte. Die Versuche mit diesen Glocken
wurden wiederum in diffusem Sonnenlicht auf dem Dache
des Laboratoriums ausgeführt, derart, dafs in jeder der Glocken
ungefärbte und mit Eosin, mit Erythrosin und mit Fluo-
reszein gefärbte Plattenkulturen bestimmte Zeiten zugleich ex-
poniert wurden. Auf die unterste Etage des Gestells kamen
die Erythrosinplatten zu liegen, auf die zweite die Eosinplatten
auf die dritte die Fluoreszein- und auf die vierte die unge-
färbten Nährböden, alle mit dem Deckel nach oben, so dafs

Von £. Mettler.

107

zwischen den einzelnen Etagen und Platten noch genügend weite
Distanzen waren. Die Eontroll platten wurden, in schwarzes
Papier eingehüllt, neben den Glocken exponiert.

Tabelle VHI.

Versuche unter doppelwandigen Glasglocken.

A. Versuche mit Gelatineplatten in farblosen, mit Eosin bzw. mit Erythrosin

gefärbten Glocken.

1. Staphylokokkus.

Weifse
Glocke

Eosin
Glocke

Eryth-
rosin Gl.

1. Versuch.
Datum: 17. De*. — Temperatur: 6° C. — Intensität:
Expositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gef. Gel. .
Kontroll (schw. Pap.) +++

+ + +

+ + +

+ + + + + +

+ +++

2. Versuch.
Gelatinerollröhrchen : 1 : 10000.
Datum : 9. Jan. — Temperatur: 6° 0. — Intensität: 3 Std. : 22, 6 Std.
Expositionszeit : 3 Stunden.

22+24.

1. üngef. Gel. . .

2. Mit Eosin gef. Gel.

+

+ + +

Expositionszeit: 6 Stunden.

1. üngef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . . .
Kontroll (schw. Pap.) +++

L

+ + +

+ + +

+++

2. Cholerabazillus.
1. Versuch.
Datum: 5. Dez. — Temperatur: 0° C. — Intensität: 2 Std.: 21, 4 Std. 21 + 5
Expositionszeit: 2 Stunden.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gef. Gel.

+

+++

1 &_,■§

+++

:s^(S

+++

J « «

+++i

3

4) © fl

Js3

2"ö a

108 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

Weifee
Glocke

Eosin
Glocke

Eryth-
rosin Gl.

Ezpositionszeit: 4 Stunden.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . . . j

3. Mit Erythrosin gef. Gel. . <

4. Mit Fluoreszein gef. Gel. . ji

I Öfl

2. Versuch.
Datum : 19. Dez. — Temperatur : 6° C. — Intensität: 6 Std.
Expositionszeit: 12 Stunden.

1. üngef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gef. Gel.
Kontroll + + +

3. Typhusbazillus.
Datum: 17. Dez. — Temperatur: 5° C. — Intensität:
Ezpositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gef. Gel.
Kontroll + + +

4. Kolibazillus.
1. Versuch.
Datum : 21. Dez. — Temperatur: 5° C. — Intensität:
Ezpositionszeit: 6 Stunden.

17, 12 Std.: 17+20.

o

+++

1

1

++

++

+

18.

1. Ungef. Gel

2. Mit EoBin gef. Gel.

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

++

+++

L

am Rand

, ++

+++

i

+++

L

am Rand

+++

4. Mit Fluoreszein gef. Gel.
Kontroll + + +

2. Versuch.
Datum: 10. Jan. — Temperatur: 4° C. — Intensität:
Ezpositionszeit: 7 Stunden.

1. Ungef. Gel j ++ + + + +

2. Mit Eosin gef. Gel. ...

3. Mit Erythrosin gef. Gel. .000
Kontroll + + +

! ++

+ +

! o

Von E. Mettler.

109

Weifse
Glocke

Eosin
Glocke

Eryth-
rosin 61.

3. Versuch.
Datum: 6. Des. — Temperatur: 9° C. — Intensität:
19 +24, 6 Std.: 19 + 24 + 19.
Expositionszeit: 2 Stunden.

2 Std.: 19, 4 Std.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gef. Gel.

+++

L
L

+ + +

+ + +
+ + +
+ + +
+ + +

Expositionszeit: 4 Stunden.

1. Ungef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gef. Gel.

+++

+++

4 +

+ +

+ + +

Expositionezeit : 6 Stunden.

1. üngef. Gel

2. Mit Eosin gef. Gel. . .

3. Mit Erythrosin gef. Gel.

4. Mit Fluoreszein gel Gel.
Kontroll + + +

+++

+++

+++

+++

+++

+ +4-

+ +

+ + +

+ + +

+ + +
+ +
+ +

+ + +

+ + +

B. Versuche mit Agarplatten in farbloser, mit Eosin bzw. mit Erythrosin

gefärbten Glocken.

1. Staphylokokkus.

Datum: 16. Dez. — Temperatur: 5* C. — Intensität: 3 8td.: 23, 6 Std.: 23+24.

Expositionszeit: 8 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gel Agar.

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

! o

+++

i °

einige Kol.

i °

+++

Expositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar .

Kontroll (schw. Pap.) ++ +

+++

1

+++

+++

+++

+++

+ -f +

HO Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

2. Cholera.

Weifse
Glocke

Eosin
Glocke

Eryth-
rosin Gl.

1. Versuch.

Datum : 22. Dez. — Temperatur: 4° C. — Intensität: 3 8td. : 18, 6 Std. : 18+20.

Expositionszeit: 3 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

+

+++

+++

Expositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar
Kontroll + + +

+++

+++

+++

+++

+++

+++

2. Versuch.

Datum: 19. Dez. — Temperatur: 6° C. — Intensität: 7 Std.: 22.

Expositionszeit: 7 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar
Kontroll + + +

! •

+++

; o

+

++f

+++

+++

3. Versuch.

Datum : 13. Dez. — Temperatur : 6° C. — Intensität: 2 Std. : 21, 5 Std. : 21 +23.

Expositionszeit: 2 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gel Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

+++

+++

Expositionszeit: 5 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

Kontroll + + +

+++

++

+++

+++

Von £. Mettler.
3. Typhusbazil) us.

111

Weifse
Glocke

Eosin
Glocke

Eryth-
rosin Gl.

Datum: 1. Dez. —

1. Versuch.

Temperatur: 3° C. — Intensität:

19 + 23, 6 Std.: 19 + 23 + 17.

Expositionszeit: 2 Stunden.

2 Std. : 19, 4 Std.

1. Ungef. Agar I + + + + + +

2. Mit Eosin gef. Agar . . . jj + + +

Expositionszeit: 4 Stunden.

1. Ungef. Agar . . .

2. Mit Eosin gef. Agar

+ + +

+ + +
+ + +

Expositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar . . .

2. Mit Eosin gef. Agar

Kontroll + + +

+ + +

+ + +
+ + +

2. Versuch.

Datum : 10. Dez. — Temperatur : 4° C. — Intensität : 3 Std. : 18, 6 Std. : 18 + 5

Expositionsseit : 8 Stunden.

1. Ungef. Agar I + + + + + +

2. Mit Eosin gef. Agar . . . ] L ++ +

3. Mit Erythrosin gef. Agar . . + + +

4. Mit Fluoreszein gef. Agar . j + + + + + +

Expositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar • .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

Kontroll + + +

++

+++

+++

+++

++

+++

+++
+++
+++
+++

+++
+++

+++
+++

Datum : 14. Dez.

4. Kolibazillus.
3. Versuch.
Temperatur: 6° 0. — Intensität: 3 Std. : 20, 6 Std.
Expositionsseit: 3 Stunden.

20 + 22.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .
8. Mit Erythrosin gef. Agar
4. Mit Fluoreszein gef. Agar

Archiv fflr Hygiene. Bd. LITT.

1 ++

+

1 ++

+++

! ++

+++

1 ++

+++

+++
+++
+++
+++

8

112 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

Weifse
Glocke

Eosin I Eryth-
Glocke rosin Gl.

Expositionszeit: 6 Stunden.

1. Ungei Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar
Kontroll -f + +

++

+ + +

L

+ + +

+ + +

+ +

+ + +

+++
+++
+++
+++

2. Versuch.
Datum: 6. Dez. — Temperatur: 2° C. — Intensität:
Expositionszeit : 6 Stunden.

Ungef. Agar

Mit Eosin gef. Agar . .
Mit Erythrosin gef. Agar
Mit Fluoreszein gef. Agar
Kontroll + + +

++

+++

o

+++

+++

+++

+++

+++

Resümee. Die in den beiliegenden Tabellen angeführten
Versuche mit den drei Glocken sollten vor allem die Frage lösen,
ob das durch eine Eosin- bzw. Erythrosinglocke filtrierte Tages-
licht sich stärker entwicklungshemmend erweist als das gewöhn-
liche weifse Licht. Ferner sollte geprüft werden, ob die mit
Eosin, Erythrosin und Fluoreszein gefärbten Nährböden in den
gefärbten Glocken stärker beeinflufst werden als in den ungefärb-
ten. Es ist zu bemerken, dafs die mit Eosin und Erythrosin
gefärbten Lösungen der zwei Glocken nicht sämtliche übrigen
Lichtstrahlen absorbierten. So wurde z. B. in einem Fall das
filtrierte Licht mit dem Vogel sehen Photometer unter einer
roten Glocke gemessen, und die Zahl 23 abgelesen. Die zahl-
reichen Versuche ergeben, dafs ein Unterschied zwischen der weif sen
und den roten Glocken nur darin besteht, dafs stets ohne
Ausnahme die Entwicklungshemmung in der weifsen
Glocke rascher und deutlicher auftrat als in den
gefärbten. Auf die nicht vollständig übereinstimmenden Resultate
der Eosin- und der Erythrosinglocke wollen wir nicht näher
eingehen, da beide Lösungen photometrisch nicht verglichen

Von E. Mettler. 113

worden sind. Es sei aber doch darauf hingewiesen, dafs nament-
lich zu Beginn der Versuche die Unterschiede keine grofsen waren.
Es wurden neben den mit Eosin und Erythrosin gefärbten in
diesen Versuchen auch mit Fluoreszein gefärbte Nährböden ex-
poniert. Ein Unterschied zwischen diesem letzteren Farbstoff
und den zwei andern ist deutlich vorhanden gewesen. Die F 1 u o -
reszeinplatten wurden nicht so stark beeinflufst
als die mit Eosin und Erythrosin gefärbten. Immerhin
war die Entwicklungshemmung auf den exponierten Fluores-
zeinplatten in der Regel etwas stärker als auf den ungefärbten
Nährböden. Diese Versuche liefern eine Bestätigung der mit
diffusem, unfiltriertem Tageslicht und mit rotem Licht erhaltenen
Resultate und beweisen, dafs die Wärme keine wichtige Rolle in
den vorliegenden Fällen spielt. Die Versuche zeigen uns mit
aller Deutlichkeit, dafs die ungefärbten Nährböden in der farb-
losen Glocke früher steril bleiben als in den gefärbten Glocken,
woraus hervorgeht, dafs die mit Eosin oder Erythrosin
gefärbten Lichtstrahlen nicht intensiver wirken als
das diffuse Licht, dafs im Gegenteil das diffuse Tageslicht
stets stärker bakterizid wirkt als das durch Eosin- oder Erythro-
sinlösungen filtrierte.

Es konnte ferner nachgewiesen werden, dafs, bei unserer
Versuchsanordnung, die entwicklungshemmende Wirkung des
Lichtes ungefähr gleich grofs ist, wenn die Wärmestrahlen durch
Passieren einer Alaunlösung möglichst zurückgehalten werden,
als wenn das Licht unfiltriert einwirken konnte.

VI. Versuche im reflektierten Licht
1. Versuch«

Um die Frage noch zu prüfen, ob überhaupt die roten
Strahlen, als solche, Entwicklungshemmung bedingen, stellten
wir Petrischalen mit ungefärbtem und mit eosinhaltigem Nähr-
boden in umgekehrtem, rotem Glaskasten auf, d. h. das Licht
konnte direkt in den Kasten von oben eindringen, in dem ein
Deckel fehlte, während die Kulturen auf dem Boden des Glas-
kastens aufgestellt waren. Letzterer war durch vier Holzblöcke

114 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

ungefähr 10 cm über dem Boden erhoben, so dafs das Licht
auch von unten Zutritt hatte.

Folgende Tabelle veranschaulicht die Resultate:

Tabelle IX.

Im roten umgekehrten Glaskasten.

1. Cholerabazillus.

Nährboden: Agarplatten.

Datum : 30. Nov. — Temperatur : 5° C. — Intensität: 2 Std.: 23, 4 Std. : 23+20.

Expositionszeit: 2 Stunden.

1. Ungef. Agar. . . .

2. Mit Eosin gef . Agar ,
Kontroll + + +

+ + +

Expositionszeit: 4 Stunden.

1. Ungef. Agar ....

2. Mit Eosin gef. Agar .

+ + +

2. Staphylokokkus.
Datum : 23. Not. — Temperatur : 1° C. — Intensität: 2 8td. : 18, 4 Std. : 18+20.

Expositionszeit: 2 Stunden.

1. Ungef. Agar. . . .

2. Mit Eosin gef. Agar .

+ + +

Expositionszeit: 4 Stunden.

1. Ungef. Agar. . . .

2. Mit Eosin gef. Agar .
Kontroll + + +

+ + +

Datum : 28. Nov.

3. Kolibazillus.
Temperatur: 0° 0. — Intensität: 2 Std. : 22, 4 Std. : 22+18.

Expositionszeit: 2 Stunden.

1. Ungef. Agar ....

2. Mit Eosin gef. Agar .

+ + +

Expositionszeit: 4 Stunden.

1. Ungef. Agar. . . . I + + +

2. Mit Eosin gef. Agar .
Kontroll + + + |

2. Versuch mit ungefärbten Agarplatten.

Die mit den entsprechenden Bakterien beschickten Agar-
platten wurden dem Lichte exponiert, und zwar hatte die eine
Platte als Unterlage ein weifses, die zweite ein schwarzes und
die dritte ein mit einer Eosinlösung gleichmäßiges gefärbtes
Papier. Eine vierte Agarplatte kam auf eine 1 °/oo Eosin-
agarschicht zu liegen.

Diese Platten werden 2 und 4 Stunden dem Lichte ex-
poniert mit folgenden Resultaten:

Von £. MetÜer.

115

Tabelle X.
Nährboden: Agarplatten.

ü

Staphylokokkus

Weifses
| Papier

Cholerabazillus

Schwär*. ' Eo !L^ Äp Weifses i Schwans.
Pa P ,er !Eo™nV Pa P ler j Pa P ier

EosinPap.

resp.
EobIq Ag.

Datum . .

Temperatur

Intensität

Ungef. Agar . .

Ungef. Agar . .
Kontroll + + +

. li 13. Jan.

. , 6°C

. | 2Std.: 20

l! 4Std.: 20 + 21

i ii

Expositionszeit: 2 Stunden.

■ 3+++I+++I+++

Expositionszeit : 4 Stunden.

+++

+++!+++

12. Jan.

3°C.

2 Std. : 20

4 Std.: 20 + 24

Typhusbazillus

Weifses
Papier

Schwarz. Eo !^ a P

Kolibazillus

Weifses Schwans.

P »P ,er Ort» Ag. P * tor *■*"

EosinPap.

resp.
Eosin Ag.

Datum . .

Temperatur

Intensität

Ungef. Agar

Ungef. Agar . .
Kontroll + + +

14. Jan.
0°C.
2 Std. : 20
4 Std.: 20 + S

16. Jan.

8°C

2 Std. : 20

4 Std.: 20 + 20

Expositionszeit: 2 Stunden.
Expo8itionszeit : 4 Stunden.

-+++

+ + + I+++II+++I+++

i ü i

+++

Resümee. Diese Versuche zeigen mit Deutlichkeit, dals
die Wirkung des reflektierten Lichtes, sei es das Licht eines
Rubinglaees oder eines mit Eosin gefärbten Papieres, eine Er-
höhung des entwicklungshemmenden Einflusses des Tageslichtes
nicht bedingt. Die auf roter Unterlage exponierten Platten er-
gaben genau dieselben Resultate wie die auf schwarzem und
weilsem Papier exponierten.

116 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

VII. Abtötungsversuche.

Im Brutschrank üppig gewachsene Kulturen auf ungefärbten
bzw. auf mit Eosin und mit Erythrosin gefärbten Agarplatten
wurden verschieden lange Zeiten dem diffusen resp. Sonnenlicht
exponiert. Nach 2, 4, 6 und mehrstündiger Expositionszeit wurde
jeweils einer jeden Platte mittels der Öse viel Material entnommen
und auf Schrägagar und in Bouillion überimpft, nachher 24 Stunden
in den Brutschrank gestellt.

NB. Es werden die wenigen mit Bouillon angestellten Versuche, da
sie meist negative Resultate lieferten, hier nicht angeführt.

Tabelle XI.
AbttttungSYersuche«

1. Staphylokokkus.
Nährboden: Agarplatten.

Expositionszeit

Intensität

TJngef.
Agar

Eosin
Agar

Eryth-
rosin Agar

1.
Datum

Versuch.

IS. Dezember.

2 Stunden

7
10
19 >

7 Stunden
14

2 Stunden
4 >
6

21

21 + 22

21+22+19

+ + +

+ + +

+ +

2. Versuch.
Datum: 12. Januar.

• II 24 + + +

. |j 24 + 24

2. Cholerabazillus.

1. Versuch.
Datum: 9. Dezember.

2 Stun«
4
6
9
16

len

20

20 + 19
20+19+17

+ + +I
I

L

L

2. Versuch.
Datum : 6. Januar.

13

11 13 + 16
13 + 16+23

jl 24

! 23

+++ '+++
+++ +++

+ + ,

+ + o

L

+
L

+ + +
+ + +

Von E. Mettler.
3. Kolibazillus.

117

Expositionszeit

I

Intensität

Ungef.
Agar

Eos in Eryth-
Agar rosin Agar

2 Standen

7

12 >

18
24

2 Standen

6
11
14
22
29

Datum: 12. Jan aar.

7 Standen
14 >
21 >

26 >
33

+++

+++

Zeitweise

+++

++

intensives

+++

L

Sonnenlicht

++

++

4. Typhusbazillus.

1. Versuch.
Datum: 12. Dezember

16
16 + 20

Intensive
Sonne

2. Versuch.
Datum: 7. Janaar.

16
16 + 23

Zeitweise

intensives

Sonnenlicht

+++

+ + +

+++

+ + +

+++

+

++

I.

L

+++
++

L

+++

+++

+++

++

+++

++

4-+

L

+

+++
++
+

+++

+++
+

L

ü

Resümee. Die genügend zahlreichen Versuche, welche zu
verschiedenen Zeiten mit ziemlich übereinstimmenden Resultaten
ausgeführt worden sind, beweisen, dals die Kulturen auf der
Oberfläche von Eosin und von Erythrosinagarplatten viel rascher
nach Exposition am Tageslicht abgetötet werden als die Kul-
turen auf nichtgefärbten Nährböden.

Die sensibilisierenden Farbstoffe bedingen nicht nur eine
Erhöhung des entwicklungshemmenden, sondern auch eine Stei-
gerung des bakterientötenden Einflusses des Tageslichtes.

118 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

VIII. Versuche mit Nährböden, die vor der Impfung dem Lichte
auegesetzt wurden.

Ungefärbte, mit Eosin, Erythrosin und Fluoreszein gefärbte
Agarplatten wurden ohne vorhergehende Beschickung mit Bak-
terien dem Tageslichte verschieden lange Zeiten exponiert. Nach
Ablauf der Exposition wurde ein Teil der Platten sofort geimpft
und in den Brutschrank gestellt, der andere Teil in dem Arbeits-
tisch bis zum folgenden Tage unter Lichtabschlufs aufbewahrt
und erst dann infiziert und in den Brutschrank gebracht.

Die Resultate veranschaulicht folgende Tabelle:

Tabelle XU.
Versuche mit Nährböden, die Tor der Impfung dem Lichte ausgesetzt wurden.

1. Staphylokokkus.

Wachstum nach
24 Std. I 48 Std.

A. Impfung der Platten sofort nach der Exposition.
Expositionsdauer der ungeimpften Platten: 1 Stunde.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar .

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

+++
+++
+++
+++

Expositionsdauer der ungeimpften Platten: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar .

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

L

L

B. Impfung am Tage nach der Exposition.
Expositionsdauer der ungeimpften Platten: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar .

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

I

+ + ! +++
++ I+++
++ I+++

Von E. Mettler
2. Kolibazillus.

119

Wachstum nach
24 Std. I 48 8td.

A. Impfung der Platten sofort nach der Exposition.
Expositionsdauer der ungeimpften Platten : 1 Stunde.

1. üngef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar.

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

+++
+++
+++
+++

Expositionszeit der ungeimpften Platten: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2 Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

+++

+

L

+ + +

+

+ +

+

B. Impfung am Tage nach der Exposition.
Expositionsdauer der ungeimpften Platten: 6 Stunden.

1. Ungef. Agar

2. Mit Eosin gef. Agar . .

3. Mit Erythrosin gef. Agar .

4. Mit Fluoreszein gef. Agar

+++

eine Kol.

++

+++

eine Kol.

+++

eine Kol.

Resümee. Diese Versuche bestätigen die bekannte Tat-
sache, dafs dem Tageslicht ausgesetzte Nährböden sich für die
Züchtung der Bakterien weniger eignen. Vergleichen wir die
vorliegende Tabelle mit den früheren, so ist ohne weiteres er-
sichtlich, dals der Unterschied zwischen ungefärbten und sensi-
bilisierten Platten nicht zutage tritt, wie bei Belichtung infi-
zierter Kulturen. Diese Versuche beweisen, dafs die entwicklungs-
hemmende Wirkung, welche weiter oben als regelmäfsiger Be-
fund beschrieben worden ist, nicht identifiziert werden darf mit
der direkten Schädigung des Nährbodens durch Lichteinwirkung.
Der Einflute der Sensibilisierung kommt hier kaum in Betracht.
Schon früher wurde von Dreyer beobachtet, dafs Lösungen
sensibilisierender Farbstoffe nicht schädlich wirken nach der Ex-
position, sondern während derselben. Unsere Resultate liefern
eine Bestätigung dieser Annahme.

120 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

Nachdem die Resultate unserer Versuche mitgeteilt worden
sind, sei es uns gestattet, die in der Literatur veröffentlichten
Befunde früherer Autoren auf diesem Gebiete in Kürze zu resü-
mieren, soweit dieselben für die Deutung unserer Ergebnisse von
Interesse sind. Die Mediziner, welche sich mit der Sensibilisie-
rungsfrage befafst haben, Tappeiner, Neisser, Finsen und
ihre Schüler, haben auch die ersten bakteriologischen Arbeiten
auf diesem Gebiete veranlafst.

Raab 1 ) prüfte die Wirkung photodynamischer Stoffe auf
Bakterien, ohne jedoch auf entscheidende Resultate zu kommen,
während nach Tappeiner und Jodlbauer 2 ) Bac. prodig.
durch eine 0,2proz. Eosinlösung nach 5 — 7 Tagen, durch eine
stärkere Erythrosinlösung nach 2 — 4 Tagen getötet wurde. Nach
Jakobsohns Untersuchungen aus Marmorecks Laboratorium
wird der Tuberkelbazillus durch Eosin nach 24 Stunden getötet.

Währenddem Untersuchungen mit Bakterien bis jetzt nur
in geringerer Zahl mitgeteilt worden sind, sind die Versuche
über die Wirkung sensibilisierender Stoffe auf Infusorien, speziell
Paramäzien, ausgedehnter.

Raab 8 ) resümiert seine diesbezüglich angestellten Versuche
in folgende Punkte:

Die Einwirkung des Tageslichtes hat in Versuchen mit
Acridin, Phosphin und Eosin einen schädlichen Einfluls und
zwar beruht nach ihm dieser Einfluls auf Hervorrufung von
Fluoreszenz. In einer späteren Arbeit schreibt Raab 4 ), dafs
Chinolinrot und Harmalinlösung gegenüber Paramäzien dieselbe
Fluoreszeinwirkung zeigten wie Acridin und Eosin. Die Wirkung
des nicht fluoreszierenden Fuchsins und der Kristallviolettlösung
wird dagegen im Lichte nicht verstärkt. Raab sieht in diesen
Phänomenen eine vom Licht hervorgerufene erhöhte Giftwirkung
von verschiedenen fluoreszierenden Stoffen, während es sich nach
Halberstädter 6 ), der analoge Versuche anstellte, um eine Ver-

1) Münchener Medizinische Wochenschrift, 1900, S. 1810.

2) Münchener Medizinische Wochenschrift, 1904, Nr. 25.

3) Zeitschrift f. Biologie, 1900, Bd. 39.

4) Zeitschrift f. Biologie, 1902, Bd. 49.

5) Deutsche Medizinische Wochenschrift, 1904, Nr. 16.

Vod E. Mettler. 121

Schiebung der Lichtempfindlichkeit in ein anderes Strahlgebiet
handelt. Ledoux-Lebard 1 ) hält den Prozefs für eine Zersetzung
des Eosins durch die aktiven Strahlen und somit Entwicklung
einer für Paramäzien giftigen Substanz. Ebenso schreibt auch
Jakobsohn 2 ) (Versuche mit Fröschen, die mit Eosin injiziert
wurden) der Giftwirkung der betreffenden Stoffe entscheidende
Bedeutung zu.

Nach Tappeiner 8 ) ist die Fluoreszenz das Entscheidende;
Sensibilisierung und photodynamische Wirkung sind keine iden-
tischen Vorgänge; beide Wirkungen besitzen nun jene Stoffe,
welche nicht blofs absorbieren, sondern auch fluoreszieren.
Dreyer 4 ) macht geltend, dafs die Wirkung dieser bespro-
chenen Stoffe als eine Sensibilisierung aufgefafst werden mufs.
Er hält das Phänomen für eine direkte Lichtwirkung, die
durch die Gegenwart der betreffenden Stoffe ermöglicht wird,
also für eine Analogie mit der Wirkung optischer Sensibilisation
auf die Silberhaloide. Nach ihm ist die Fluoreszenz bei der
Sensibilisation nicht das Entscheidende, denn es gibt einerseits
Stoffe, welche stark fluoreszieren, aber schwach oder gar nicht
sensibilisieren (Fluoreszein, Aeskulin), und anderseits gibt es
Stoffe, die nicht fluoreszieren und doch sensibilisieren (Cyanin).
Ferner ist die Absorption ebenfalls nicht bestimmend, denn es
gibt sowohl fluoreszierende wie nicht fluoreszierende Stoffe,
welche stark absorbieren und trotzdem nicht für die Strahlen,
die sie absorbieren, sensibilisieren. Natürlich sind Fluoreszenz
und Absorption von Bedeutung, denn würden einmal die gelben
und grünen Strahlen nicht absorbiert, so würden sie auch keine
tötende Wirkung ausüben können, und was die Fluoreszenz an-
betrifft, so sind alle bei diesen Versuchen angewandten Farbstoffe
mehr oder weniger stark fluoreszierend.

Die Sensibilisierung beruht auch kaum darauf, dafs sich
während der Belichtung im Sensibilisator giftige Stoffe bilden,

1) Ann. de l'Inst. Pasteur, 1902, Nr. 8.

2) Zeitschrift f. Biologie, 1901, Bd. 41.

3) Tapp einer and Jodlbauer, Deutsch. Arch. f Klin. Med., 1904,
Bd. 80, 8. 427.

4) Mitteilungen aas Finsens Medizinischem Lichtinstitut, 1904, Heft 7.

122 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc

die auf Mikroorganismen und tierisches Gewebe schädlich ein-
wirken, denn wird ein Sensibilisator erst 10 Minuten lang be-
lichtet und danach zur Sensibilisierung benutzt, so wird dessen
sensibilisierende Fähigkeit bedeutend herabgesetzt.

Was die chemische Konstitution dieser sensibilisierenden
Stoffe anbelangt, so gehören Eosin, Erythrosin und Fluoreszein
zu der Gruppe der Phthaleine 1 ) und sind Säurefarbstoffe: Eosin
= Tetrabromfluoreszein, Erythrosin = Tetrajodfluoreszein, Fluo-
reszein = Resorcinphthalein. Das Erythrosin unterscheidet sich
von Eosin durch das Fehlen der Fluoreszenz. Was die Beziehung
zwischen Fluoreszenz und chemischer Konstitution anbetrifft, so
bezeichnet Richard Meyer 2 ) gewisse Atomgruppen als fluoro-
phore Gruppen, welche als Ursache der Fluoreszenz organischer
Verbindungen anzusehen sind. Wirkt das Licht auf diese fluo-
reszierenden Substanzen, so bildet sich (nach den quantitativen
und qualitativen Versuchen) von Straub 3 ) bei einer gegebenen
Menge Eosin und Überschufs von Sauerstoff und von oxydablen
Körpern dauernd aktiver Sauerstoff. Die Giftwirkung der be-
lichteten Eosinlösung beruht nach ihm auf Autooxydation, indem
zugunsten eines anwesenden oxydablen Körpers das Peroxyd
reduziert wird, wobei der oxydable Körper verbrennt. In seinen
weiteren Versuchen 4 ) (mit einer Lösung von 100g H 2 0, 0,005 Eosin,
6,0 Jodkali mit Stärkekleister) zeigte Straub, dafs nach etwa
30 Minuten Sonneneinwirkung das möglichste Maximum der Jod-
abspaltung erreicht ist. Die ausgeschiedene Jodmenge erwies
sich direkt proportional der Konzentration des Eosins.

Dafs aber eine wirkliche chemische Verbindung bei Belich-
tung sauerstoffhaltiger Eosinlösung entsteht, ergibt der von
Ledoux-Lebard 6 ) erbrachte Versuch. Er konnte nachweisen,
dafs bei der Belichtung von Eosinlösung ein Zersetzungsprodukt
entsteht, das imstande ist, auch im Dunkeln Paramäzien zu töten.

1) G. Lunge, chemisch-technische Untersuchungsmethode, Bd. 3.

2) Chemisches Zentralblatt, 1897, Bd. 2.

3) Münchener Medizinische Wochenschrift, 1904, Nr. 25.

4) Münchener Medizinische Wochenschrift, 1904, Nr. 38.

5) C. c.

Von £. Mettler. 123

In Bestätigung früherer Arbeiten haben auch unsere Ver-
suche ergeben, dafs das diffuse Tageslicht, bzw. Sonnenlicht,
einen deutlich schädigenden Einflufs auf Bakterien ausübt. In
der von uns gewählten Versuchsanordnung — es wurde stets
mit grofsen Mengen Bakterien gearbeitet — sind die untersuchten
pathogenen Mikroorganismen Cholera, Staphylokokkus, Typhus
und Koli in Zeiten, welche zwischen zwei und sechs Stunden
varierten, abgetötet worden. Nur selten war auch noch auf den
sechs Stunden exponierten infizierten Platten Entwicklung von
Kolonien zu beobachten. Der schädliche Einflufs des Lichtes
kann beträchtlich gesteigert werden, wenn man statt gewöhn-
lichen Nährböden, mit sensibilisierenden Farbstoffen gefärbte
verwendet. Mit Eosin und mit Erythrosin gefärbte Gelatine und
nachher infizierte Gelatine und Agarplatten zeigen gegenüber
den nicht gefärbten Kulturen keinen merklichen Unterschied im
Wachstum der untersuchten Mikroorganismen. Wurden hingegen
diese gefärbten Nährböden nach der Beschickung dem Lichte
ausgesetzt, so konnte mit aller Deutlichkeit eine beträchtliche
Zunahme des schädigenden Einflusses des Lichtes wahrgenommen
werden. Ähnliche, wenn auch nicht so prägnante Unterschiede
zwischen Eosin- und Erythrosin-Kulturen und Kulturen auf nicht
gefärbten Nährböden konnte auch durch Belichtung mit elek-
trischem Bogenlicht nachgewiesen werden. Dafs die Farbe bei
dieser Wirkung keine wesentliche Rolle spielt, beweisen die Ver-
suche mit Karmin, mit Neutralrot und mit Blutfarbstoff. Wurden
die Nährböden statt mit Eosin mit den erwähnten Substanzen
gefärbt, so war eine Erhöhung der entwicklungshemmenden
Wirkung des Lichtes nicht zu konstatieren. Die mit Blutfarb-
stoff versetzten Platten zeigten sogar eine üppigere Entwicklung
als die farblosen. Eine Wirkung des reflektierten Eosinfarbstoffes
war ebenfalls nicht zu beobachten.

Nicht nur die entwicklungshemmende, sondern auch die
bakterientötende Eigenschaft des Tageslichtes wird erhöht, wenn
der Nährboden mit den in Frage stehenden Farbstofflösungen
gefärbt worden ist. Zur Hervorbringung der erwähnten erhöhten
bakteriziden Wirkung sind schon geringe Mengen Farbstoff aus-

124 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

reichend (in unsern Versuchen wurde meist 1 °/oo Eosin- und Eryth-
rosinlösung verwendet; sogar Zusätze von nur 1 : 5000 und 1 : 10000
Eosin haben dieselben Resultate ergeben). Die Versuche mit Fluores-
zein haben gezeigt, dafs mit diesem Farbstoff gefärbte Nähr-
böden der Lichtwirkung gegenüber etwas empfänglicher sind
als die ungefärbten; immerhin war der Unterschied gegenüber
Eosin und Erythrosin ein ziemlich grofser, währenddem zwischen
Eosin und Erythrosin grofse Unterschiede in den Resultaten
nicht beobachtet werden konnten.

Für unsere Frage wichtig ist ferner die in allen Versuchen
gemachte Beobachtung, dafs auch infizierte sensibilisierende Nähr-
böden im roten Licht nicht anders beeinflufst werden als ungefärbte,
dafs somit eine Aktivierung der roten Lichtstrahlen durch Sensi-
bilisation nicht beobachtet werden konnte. Um eine Erklärung
für diese eigenartigen Wirkungen zu erhalten, wurde eine Reihe
weiterer Versuche angestellt. Das rote Licht, welches im Dunkel-
zimmer oder durch Filtration des Tageslichtes durch ein Rubinglas
erzeugt worden war, hatte, wie dies schon angegeben worden war,
keinen deutlichen Einflufs auf Bakterien.

Wurde das Licht durch eine Alaunlösung filtriert, um die
Wärmestrahlen einigermafsen auszuschalten, so stellte sich heraus,
dafs die Resultate nicht verändert wurden; da ferner unsere
Versuche während der kalten Jahreszeit angestellt worden sind,
dürfen wir wohl annehmen, dafs der Wärme keine oder jeden-
falls keine wesentliche Bedeutung bei der entwicklungshemmenden
Wirkung des Lichtes zukommt. Weitere Versuche mit "durch
Eosin und durch Erythros in filtrierten Lichtstrahlen haben den
Beweis erbracht, dafs das direkte Tages- bzw. Sonnenlicht inten-
siver wirkt auf ungefärbte sowohl wie auf gefärbte Nährböden
als das filtrierte farbige Licht.

Unsere Versuche führen uns zur Annahme, dafs die spezi-
fische Wirkung der sensibilisierenden Farbstoffe bei intensiver
Beleuchtung nur dann zutage tritt, wenn der betreffende Farb-
stoff sich im Nährboden selbst befindet und nicht zum Vor-
schein kommt, wenn der Farbstoff oberhalb oder unterhalb (Fil-
tration resp. Reflexion des Lichtes) des beschickten Nährbodens

Von E. Mettler. 125

sich befindet. Ohne eine bestimmte Erklärung für diese eigenartige
Wirkung geben zu wollen, können wir aber doch auf Grund
unserer Versuche die weiter oben angedeuteten Ansichten der
Autoren unterstützen bzw. widerlegen. Die beobachtete Wirkung
der mit Eosin und Erythrosin gefärbten Nährböden läfst sich als
eine Sensibilisierung erklären unter der Bedingung, dafs dieser
Bezeichnung, wie dies Busck 1 ) in seiner Kritik der letzten
Arbeiten von Tappeiner angibt, eine ebenso ausgedehnte Be-
deutung gegeben werde wie in der Photographie. Diese Sensi-
bilisierung bedingt eine Verstärkung der Wirkung des Tages-
bzw, elektrischen Bogenlichtes, welches sich am leichtesten dadurch
erklären läfst, dafs strahlende Spektren, welche für gewöhnlich
nicht wirksam sind, durch die betreffenden Substanzen wirksam
gemacht werden. Ob daneben der Fluoreszenz, der Wirkung des
Wasserstoffsuperoxyds, dessen Entstehung in den Nährböden bei
Lichteinwirkung nachgewiesen worden ist, der Spaltung von
Halogenen, eine grolse Bedeutung zukommt, wollen wir dahin-
gestellt sein lassen. Unsere Resultate lassen auch diese An-
nahme zu. Tapp ein er spricht von einer photodynamischen
Wirkung und zieht diese Bezeichnung vor.

Zwischen den sensibilisierten und den nicht sensibilisierten
Nährböden sind in unsern Versuchen keine qualitativen, sondern
nur quantitative graduelle Unterschiede beobachtet worden.

Schlufefolgerungen.

1. Die entwicklungshemmende Wirkung des Lichtes
auf Agar- und Gelatineplatten, welche mit Choleravibrio,
Staphylokokkus pyogenes aureus, Bakterium typhi, Bac-
terium coli commune infiziert worden sind, wird be-
deutend erhöht, wenn man dem Nährboden geringe
Mengen sog. sensibilisierender Farbstoffe (Eosin und
Erythrosin) zusetzt. Ein Zusatz von 1 /oo Eosin oder
Erythrosin, ja sogar von 1 : 5000 und 1 : 10000 Eosin

1) Mitteilungen aus Finsens Medizinischem Lichtinstitut, 1904, Heft 8.

126 Experimentelles über die bakterizide Wirkung des Lichtes etc.

zum Nährboden genügt für die erwähnte Wirkung. Das
Fluoreszein hat sich als weniger wirksam erwiesen.

2. Die bakterientötende Wirkung des Lichtes auf
Kulturen wird unter denselben Bedingungen erhöht, so
dafs die Mikroorganismen auf mit Eosin und mit Eryth-
rosin gefärbten Nährböden rascher abgetötet werden als
auf ungefärbten.

3. Neben dem Sonnenlicht und dem diffusen Tageslicht
konnte auch mit elektrischem Bogenlicht die entwicklungs-
hemmende Wirkung, wenn auch in geringerem Grade
nachgewiesen werden, währenddem das Gasglühlicht (ge.
wohnlicher Auerbrenner) auch nach mehreren Tagen Ex-
poeition eine deutliche Wirkung nicht ausübte.

4. Der schädigende Einflufs des Tageslichtes wurde nicht
erhöht, wenn die Nährböden statt mit sensibilisierenden,
mit andren roten Farbstoffen (Karmin, Neutralrot und
Blutfarbstoff) gefärbt worden waren.

5. Das rote Licht, wenn dasselbe durch ein Rubinglas
erhalten wird, zeigte keine schädigende Einwirkung auf
Bakterien. Eine mehrtägige Exposition der Kulturen
im Dunkeln, in dem roten Lichte einer photographischen
Lampe und eine vielstündige Exposition am Tageslicht
unter Rubinglas hatte eine entwicklungshemmende Wir-
kung auf Bakterien nicht zur Folge. Auch die auf
sensibilisierten Nährböden exponierten Kulturen zeigten
keinen Unterschied gegenüber den ungefärbten. Die be-
nutzten Farbstoffe scheinen somit eine Sensibilisierung
für rotes Licht nicht hervorzurufen.

6. Wurde das Tageslicht durch eine verdünnte Lösung
eines sensibilisierenden Farbstoffes filtriert, so konnte
eine Erhöhung des schädigenden Einflusses nicht kon-
statiert werden. In jedem Fall war das unveränderte
Tageslicht wirksamer, sowohl gegenüber gefärbten als
gegenüber ungefärbten Nährböden.

Von £. Mettief. 12?

7. Ein Unterschied zwischen direktem und durch Alaun-
lösung filtriertem Licht konnte nicht beobachtet werden,
so dafs wir annehmen dürfen, dafs die Wärme eine
Hauptrolle bei diesen bakteriziden Eigenschaften nicht
spielt.

8. Das reflektierte rote Licht eines Rubinglases oder
einer mit Eosin gefärbten Unterlage hatte keinen deut-
lichen Einflufs auf die Lichtwirkung.

9. Wurden die Nährböden vor der Infektion dem Tageslichte
exponiert, so war eine Verschlechterung der Entwicklung
sowohl aufungefärbten als auf gefärbten Nährböden zu
beobachten. Ein deutlicher Unterschied zwischen Eosin-,
Erythrosin- und ungefärbten Nährböden trat nicht auf,
wenn die Infektion nach der Belichtung erfolgte.

10. Die mitgeteilten Resultate lassen sich am .ehesten durch
die Annahme erklären, dafs die Sensibilisierung eine
Steigerung der Lichtwirkung zur Folge hat, in der Weise,
dafs für gewöhnlich unwirksame Strahlen wirksamer
werden, bzw. dafs die Gesamtwirkung des weifsen Lichtes
erhöht wird. Es ist möglich, dafs die durch Lichtein-
wirkung auftretende Bildung von Wasserstoffsuperoxyd
und die Abspaltung bakterizid wirkender Stoffe auch eine
Rolle spielt. Der Unterschied zwischen dem Einflufs
des Tageslichtes auf die sensibilisierten und auf andere
Nährböden war in unseren Versuchen nur ein quanti-
tativer.

Archiv f. Hygiene. Bd. Uli.

Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

Von

Dr. G. Werner,

Kreiaassistenzarzt In Marburg.

(Aas der hygienischen Abteilung des Instituts für Hygiene und experim
Therapie in Marburg a/L. Vorstand: Prof. Bon hoff.)

Die nähere Bestimmung und Charakterisierung des Frank ei-
schen Bacillus phlegmonös emphysematosae, welchen
man als den häufigsten Erreger der mit Gasbildung einhergehen-
den und oft so schwer verlaufenden entzündlichen Prozesse am
lebenden Körper sowie vieler Gasbildungen in der Leiche ange-
sehen hatte, führte namentlich durch die eingehenden Anaeroben-
untersuchungen von Grafsberger und Schattenfroh ( 6_7 )
in den letzten Jahren zu dem Resultat, dafs die durch E. Fränkel
( 2_4 ) noch in seinen letzten Publikationen versuchte Abgren-
zung gegenüber anderen Anaeroben aus der Gruppe der Butter-
säurebildner sich nicht aufrechterhalten lasse. Unter Anderen
zeigte Kamen ( 9 ), dafs die dem unbeweglichen Butter-
säurebazillus (Grafsberger und Schattenfroh) gegenüber
für differentiell • charakteristisch gehaltenen Eigenschaften , wie
Pathogenität, Inkonstanz der Sporenbildung u. a. auf der einen
wie auf der andern Seite in wechselndem Mafse vorkommen.
Eine Identifizierung des Fränkel sehen Gasbazillus mit dem
unbeweglichen Buttersäurebildner konnte nicht mehr umgangen
werden, nachdem auch die Sonderstellung als einer »pathogenen

Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen. Von Dr. G. Werner. 129

Varietät* desselben durch die Versuche Kamen 8 unhaltbar ge-
macht worden war. Auch mit dem aus Milch gezüchteten Granulo-
bacillus buthyricus immobilis lieben sich von ihm Gasphlegmonen
beim Meerschweinchen erzeugen.

War nun schon durch die grofse Verbreitung dieses seither
als harmlos angesehenen Keims, welcher sich nach Grafsberger
und Schattenfroh in 80°/ der Marktmilch finden soll — was
wir übrigens für die hiesige Gegend nicht bestätigen konnten —
das allgemeine Vorkommen von Gasphlegmoneerregern in ein
ganz anderes Licht gerückt worden, so dürfte dies in noch viel
höherem Mafse nach den neueren Forschungen der Wiener Schule
auf diesem Gebiete der Fall sein. Die seither genauer bekannten
streng au aeroben, unbeweglichen, nur ganz ausnahmsweise Sporen
bildenden, Kohlehydrate vergärenden Buttersäurebildner, unter
welche auch der F r ä n k e 1 sehe Gasphlegmonebazillus eingegliedert
werden mufste, bilden hiernach nur eine Erscheinungs-
form der betreffenden Bakterienart, wie sie besonders auf zucker-
haltigen Nährböden zur Entwicklung kommen soll. Auf kohle-
hydratarmen, aber eiweifsreichen Nährböden dagegen soll dieselbe
bewegliche regelmässig sporulierende und Ei weifsfäulnis bedingende
Typen hervorbringen (Passini 1L 12 ).

Durch diese Variabilität, welche übrigens auch in ähnlicher
Weise von Grafsberger und Schattenfroh bei Rauschbrand
und malignem Ödem beobachtet wurde, würde für die Gasphleg-
monebazillen ein Übergang zu anderen, seither streng von ihnen
geschiedenen Anaerobengruppen geschaffen werden, welche zur
Eiweifsfäulnis in Beziehung stehen und im menschlichen Darm
sowohl als auch sonst in der Natur — meist wohl in Sporenform
— allgemein verbreitet sind. Es kann somit nicht auffallen,
wenn auch die Gasphlegmonebazillen jetzt als regelmäfsige Be-
wohner des menschlichen, namentlich auch des kindlichen Darms
bezeichnet werden (Passini).

Wenn also die morphologischen und kulturellen Eigenschaften
der aus Fällen unzweifelhafter Gasphlegmone gewonnenen Stämme
bei näherem Studium sich als immer weniger genügend erwiesen,
diese aus einer grofsen Gruppe weit verbreiteter Anaeroben ab-

130 t>ie Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

zugrenzen, so lag es nahe, das Agglutinationsphänoinen zur Dif-
ferenzierung heranzuziehen, das uns ja nach dieser Seite hin bei
anderen Infektionskrankheiten so aufserordentliche Dienste ge-
leistet hat. Auch Schattenfroh ( 7 ) bezeichnet bei der jetzt
bekannten grofsen Variabilität dieser Anaeroben die Reaktionen
mit spezifischem Serum als die sichersten Mittel zur Unterschei-
dung fraglicher Ödem- und Rauschbrandbazillenstämme ! Allein
es sind mir über diese Verhältnisse bei Gasphlegmonebazillen bis
jetzt nur ganz wenige Veröffentlichungen bekannt geworden.

Als erster erzielte Kamen ( 9 ) bei seinen schon erwähnten
Versuchen, welche ihm auch auf anderem Wege keine charakte-
ristischen Unterschiede zwischen mehreren aus Gasphlegmonen
gezüchteten und aus normaler Milch gewonnenen Stämmen er
geben hatten, ein negatives Resultat bezüglich der Agglutination.
Bei der von ihm benutzten Versuchsanordnung, auf welche wir
später noch zurückkommen werden, konnte er eine Agglutinin-
bildung überhaupt nicht konstatieren.

Bachmann ( l ) arbeitete in erster Linie mit den den Gas-
phlegmonebazillen nahe stehenden Bazillen des malignen Ödems.
Bei der Immunisierung von Tieren mit mehreren Stämmen er-
hielt er nur bei einem Teil derselben (drei von fünf) ein den
gleichen Stamm in höheren, die beiden anderen in geringen Ver
dünnungen agglutinierendes Serum. Die anderen erzeugten über-
haupt keine Agglutination. Sämtliche Sera wurden auch von
ihm mit einem Stamm des Frank eischen Gasphlegmonebazillus
geprüft, ohne dafs aber eine Agglutination beobachtet werden
konnte.

Positive Resultate mit der Agglutination von Gasphlegmone-
bazillen berichtete demgegenüber Passini ( u ). Bei Studien
über pathologische Zustände, welche durch vermehrte Darm-
fäulnis verursacht zu sein schienen, sollte die Frage von ihm
näher untersucht werden, ob es hierbei vielleicht im Blute zur
Bildung spezifischer Agglutinine für gewisse, im Darm vorkom-
mende und zur Eiweilsfäulnis in enger Beziehung stehende Bak-
terienarten kommen könne. In erster Linie handelte es sich um
den Bacillus putrificus Bienstock, einen beweglichen, leicht sporn-

Von Dr. G. Werner. 131

lierenden, strengen Anaeroben, welcher seither von der Gruppe
der Gasphlegmonebazillen oder unbeweglichen Buttersäurebildner
durch Gestalt und Eigenschaften weit getrennt gehalten worden
war. Infolge der oben erwähnten, von Grafs berger und
Schattenfroh ausgehenden Beobachtungen aber, dafs letztere
durch Züchtung auf Eiweifsnährböden in eine vollständig ver-
änderte, in Form und Lebenserscheinungen dem Putrificus Bien-
stock so ähnliche Form übergeführt werde, dafs dieselbe sich in
älteren Kulturen gar nicht mehr von diesem unterscheiden lasse,
ergaben sich auch bei den Untersuchungen dieses Autors bezüg-
lich der Agglutinationserscheinungen ganz eigenartige, nahe Be-
ziehungen .zwischen dem Putrificus Bienstock und den Gas-
phlegmonebazillen, aber nur in ihrer neu entdeckten,
sporulierenden, beweglichen Form, nähere als zwischen
dieser und ihrem seither bekannten, asporogenen, unbeweglichen
Typus. Das Putrificusserum agglutinierte sowohl den sporulieren-
den, beweglichen Gasphlegmonebazillus als dessen Serum den
Putrificus, das Serum der asporogenen Form aber ebensowenig
den Putrificus, wie dessen Serum die asporogene Form des Gas-
phlegmonebazillus. Dagegen agglutinierte das Serum der asporo-
genen Form auch die sporulierende, nicht aber war das Um-
gekehrte der Fall.

Abgesehen aber von diesen überraschenden, durch die Agglu-
tinationserscheinungen angedeuteten nahen Beziehungen zu ande-
ren Bakteriengruppen, erzielte Pas sini, jedenfalls durch Immuni-
sierung mit Gasphlegmonestämmen der seither bekannten Art,
Sera, welche seine — anscheinend sämtlichen — Stämme von
Gasphlegmonebazillen agglutinierten, bei den wenigen allerdings,
über welche er nähere Angaben macht, nur in geringeren Ver-
dünnungen (1 : 30—80).

Schon bevor diese Untersuchungen Passin is mir bekannt
geworden waren, hatte ich auf der hiesigen hygienischen Ab-
teilung, angeregt durch einen dort von mir untersuchten Fall
von menschlicher Gasphlegmone mit Schaumniere (vgl. 18 ), zu
dem hierbei gewonnenen Stamm von Gasphlegmonebazillen eine
Reibe anderer gesammelt, welche morphologisch und kulturell

132 Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

sich im ganzen gleichartig zeigten und dem früher von E. Fränkel
u. A. umschriebenen Bild der Gasphlegmonebazillen entsprachen.
Dieselben sollten durch Agglutinationsversuche auf ihre gegen-
seitigen Beziehungen untersucht werden, zumal ihre Herkunft
eine ganz verschiedenartige war:

1. Stamm GB. Aus dem Unterhautzellgewebe in der Nähe
einer Bifsverletzung beim Menschen, von welcher eine
tödliche Gasphlegmone ausging.

Stamm GBN. Aus der Schaumniere desselben Falls
(vgl. »).

2. Stamm T. Aus einem auf Tetanus mit negativem Re-
sultat untersuchten ausgeschnittenen Schüfskanal mit
Resten des Filzpfropfens aus der chirurgischen Klinik
(vgl. 13 ).

3. Stamm L. Aus der Schaumleber eines gesunden, un-
behandelten Kaninchens, welches nach der Tötung
20 Stunden im Brütschrank gelegen hatte (vgl. 18 ).

4. Stamm Gr(anulo)-B(acillus) I aus Marktmilch.

5. Stamm Gr(anulo)-B(acillus) II, desgl. Beides die
von Kamen ( 9 ) bei seinen Untersuchungen verwandten
und uns gütigst zur Verfügung gestellten Stämme.

6. Stamm Fr. Ein von Herrn E. Fränkel-Hamburg
uns bereitwilligst überlassener Stamm seines Bacillus
phlegmonös emphysematosae.

7. Stamm M. Aus einem gashaltigen Abszefs der Impf-
stelle eines mit einem Milzbrandsporenseidenfaden ge-
impften und an Milzbrand eingegangenen Meerschwein-
chens.

8. Stamm MK I. Aus der Gasphlegmone eines mit ge-
sunder, steril entnommener und verriebener Kaninchen-
milz subkutan geimpften Meerschweinchens.

9. Stamm MK II, desgl. (von einem andern Meer-
schweinchen).

Von Dr. G. Werner. 133

10. Stamm GPh. Aus einer gashaltigen, blutigen Flüssig-
keit, welche nach komplizierter, mit Erde verunreinigter
Unterschenkelfraktur durch einen Einschnitt am Ober-
schenkel entleert worden war. (Aus der chirurgischen
Klinik.)

Die Stämme, von denen die beiden letzten erst wenige Tage
vor Abschlufs der Versuche gewonnen waren und hochgradige
Virulenz für Meerschweinchen besafsen, waren durch Stich-
kulturen in hohem Zuckeragar zum Teil seit Monaten fortgezüchtet
und verhielten sich im ganzen gleich, wenn auch kleine Differenzen
in der Üppigkeit des Wachstums, sowie in der Fähigkeit, Gas zu
bilden, vorhanden waren. Nur Stamm 2 T. zeigte mit der Zeit
ein abweichendes Verhalten, indem die Bakterienmassen des
Stichkanals eine zähschleimige, faden ziehende Beschaffenheit an-
nahmen und der Bakterienrasen bei Oberflächenkulturen dem
Nährboden so fest anhaftete, dafs eine Abnahme mit der Öse
und Verreibung zu Agglutinationszwecken unmöglich war. Dieser
Stamm wurde deshalb später aufser Betracht gelassen.

Von den übrigen Stämmen rührten also drei von Gasphleg-
monen des Menschen her (1, 6, 10), zwei aus normaler Milch
(4 und 5), einer sicher (3) und zwei mit Wahrscheinlichkeit
(8 und 9) aus den Bauchorganen gesunder Kaninchen, schliefs-
lich einer von einer unkontrollierbaren Wundinfektion beim
Meerschweinchen ( 7 ).

Es handelte sich für mich zunächst darum, ob sich gegen-
über den negativen Resultaten Kamens überhaupt durch Im-
munisierung mit Gasphlegmonebazillen ein agglutinierendes Serum
erzielen lasse. Ferner aber wollte ich womöglich erstens ein der
Gasphlegmonegruppe gegenüber reagierendes Serum, zweitens
ein solches für die aus der Milch stammenden Buttersäurebazillen
zu erhalten suchen. Es wurden deshalb Kaninchen zunächst
mit den Stämmen 1 (GBN) und 4 (GrB I) immunisiert, und als
sich ohne Mühe hierdurch spezifisch agglutinierende Sera er-
reichen liefsen, die aber auf die Stämme 3 (L) und 6 (Fr) keine
Wirkung aufseilen, so wurde später eine Immunisierung weiterer

134 Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

Tiere mit diesen Stämmen L. und Fr. angeschlossen. Mit den so
erhaltenen vier Seren wurden sodann sämtliche, inzwischen auf
die oben angeführte Zahl angewachsenen Stämme, sowie auch
im Anschlufs daran die in der Institutssammlung befindlichen
Stämme von malignem Ödem und Rauschbrand auf Agglutination
wiederholt untersucht.

Es erschien nicht unwahrscheinlich, dafs der Mifserfolg
Kamens, welcher zur Immunisierung lebende Kulturen sub-
kutan appliziert hatte, durch diese Immunisierungsmethode be-
dingt war. Auf Veranlassung des Herrn Prof. Bonhoff, unter
dessen Leitung ich auf seiner Abteilung diese Arbeiten aus-
führen konnte, verwandte ich deshalb zur Erreichung spezifischer
Agglutinationserscheinungen genau dieselbe, hauptsächlich auf
den Angaben K olles beruhende Methode, wie sie auf der Ab-
teilung für Agglutinationsarbeiten bei Typhus- und anderen Bak-
terien im Gebrauch ist, wenn dieselbe auch gerade bei anaeroben
Bakterien entschieden umständlicher ist, als die von den meisten
Untersuchern bei ähnlichen Arbeiten benutzten. Dieser Punkt
erscheint mir bezüglich des Resultats von gröfserer Wichtigkeit,
als vielfach angenommen zu werden scheint. Ich sehe mich
deshalb auch veranlafst, etwas ausführlicher darauf einzugehen.

Zur Immunisierung wurden nur 20 — 24 Stunden alte Zucker-
agar-Oberflächenkulturen verwendet, welche in Petrischalen unter
der Wasserstoffglocke bei 37,5° gewachsen und unter Zuhilfe-
nahme einer geeigneten Platinöse mit Kochsalzlösung möglichst
ohne Verletzung des Nährbodens abgeschwemmt waren. Vor der
direkt in den Blutkreislauf (Ohrvene) des Kaninchens erfolgenden
Injektion wurden dieselben 1 Stunde auf 60° erhitzt. Diese In-
jektionen wurden im allgemeinen ohne besondere Reaktion von
den Tieren gut vertragen, was ja auch den früheren Erfahrungen
bezüglich der Impfung lebender Gasphlegmonebazillen beim
Kaninchen entspricht, und alle 6 — 7 Tage in gesteigerter Dosis
wiederholt. 8 — 10 Tage nach der letzten Injektion wurde sodann
Blut zur Gewinnung des Serums aus der Karotis entnommen.

Zur Anstellung des Agglutinationsversuchs wurde das Serum
ferner mit physiologischer Kochsalzlösung in verschiedenen Graden

Von Dr. G. Werner. 135

verdünnt, in Quantitäten von 1 ccm in entfettete Röhrehen ge-
fällt, and das Bakterienmaterial sodann wieder aus etwa zwanzig
Stunden alten, unter Wasserstoff gewachsenen Zuckeragar-Ober-
flächenkulturen in Mengen von einer Normalöse unter sorgfältig-
ster Verreibung an der Wandung hinzugefügt und das Resultat
nach zweistündigem Aufenthalt im Brütschrank zunächst makro-
skopisch, aber unter jedesmaliger Kontrolle durch den mikro-
skopischen Befund im hängenden Tropfen, festgestellt.

Zu dieser mikroskopischen Kontrolle in jedem Falle war ich
nach zahlreichen vergleichenden Untersuchungen dadurch ge-
kommen, dafs sich die fein verteilten, unbeweglichen, sehr
grofsen Bakterien in ihren Aufschwemmungen etwas anders ver-
hielten als z. B. Typhusbazillen und andere kleine, bewegliche
Arten. Die sorgfältigsten Verreibungen der verwendeten Kulturen
in Kochsalzlösung sahen bei genauer makroskopischer Betrach-
tung schon so aus, dafs man, wenn es sich um Typhusbazillen
handelte, mit Bestimmtheit eine beginnende Agglutination dia-
gnostiziert hätte. Auch senkte sich das Bakterienmaterial unter
vollständiger Klärung der darüberstehenden Flüssigkeit in etwa
12 — 24 Stunden völlig zu Boden. Allerdings konnte man durch
kräftiges Aufschütteln dann immer wieder den früheren Zustand
herstellen. Verschiedene von mir versuchte Zusätze vermochten
an dieser Tatsache nichts zu ändern. Nur die mikroskopische
Untersuchung im hängenden Tropfen brachte mit Sicherheit den
Beweis, dafs von einer Agglutination keine Rede war.

Demgegenüber trat bei entsprechender Konzentration des
Serums — durchschnittlich bei Verdünnungen bis auf 1 : 100 —
und positivem Ausfall der Reaktion eine nicht zu verkennende
Agglutination in sehr eklatanter Weise fast augenblicklich in
Erscheinung. Nach makroskopisch sehr deutlich sichtbarer Häuf-
chenbildung setzte sich schon in wenigen Minuten das Bakterien-
material in dicken, klumpigen Massen unter vollständiger Klärung
der Flüssigkeit zu Boden, und kein Schütteln vermochte wieder
eine gleichmäfsige Verteilung zu erzielen. Die — übrigens sehr
deutliche Bilder von Agglutination liefernde — mikroskopische
Kontrolle war in diesen Fällen eigentlich unnötig.

136 Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

Bei stärkeren Verdünnungen jedoch, wenn es sich darum
handelte, die Grenzwerte der Reaktion festzustellen, war eine
solche nicht zu entbehren, da die makroskopische Beurteilung,
entsprechend den bei den Kontrollverreibungen gemachten Beob-
achtungen, zu Täuschungen Anlafs gab. Die mikroskopische
Untersuchung vermochte dann häufig die makroskopisch gestellte
Diagnose auf Agglutination nicht zu bestätigen. Als Grenzwerte
wurden auch nur die Verdünnungsgrade angenommen, bei welchen
die mikroskopische Untersuchung des hängenden Tropfens,
und zwar in erster Linie bei schwacher Vergrößerung, noch
deutliche Agglutination erkennen liefs.

Bezüglich des Zeitpunkts für die Feststellung des Resultats
— nach 2 Stunden bei Brutschranktemperatur — mufs ich be-
merken, dafs ich auch nach 24 Stunden, wenn die inzwischen zu
Boden gesunkenen Bakterienmassen aufgeschüttelt waren, eine
Änderung des Resultats niemals habe feststellen können.

Ausführung und Resultate der Versuche.

1. Kaninchen Nr. 309, immunisiert mit Stamm 1 6 B N.

Vom 12. 7. 04 bis 15. 8. 04 in 6— 7tägigen Zwischenräumen
6 Injektionen von 1 — 10 Kulturen von Petrischalen. Blutentnahme
am 24. 8. 05.

Agglutination mit Stamm 1GB und 1 G BN bis 1 : 1000 positiv.

2. Kaninchen Nr. 280 immunisiert mit Stamm 4 GrBI (Kamen).

Vom 12. 7. 04 bis 8. 8. 04. 5 Injektionen von 1—8 Petrischalen-
Kulturen, Blutentnahme am 15. 8. 04.

Agglutination mit Stamm 4 GrBI und 5 GrBII bis 1 : 10000
positiv. Mit den weiteren damals zur Verfügung stehenden Stämmen
1—3 und 6 zeigten beide Sera keine Agglutination.

3. Kaninchen, grau, immunisiert mit Stamm 3 L.

Vom 22. 11. 04 bis 6. 12. 04. 3 Injektionen von 2, 4 und
6 Schalenkulturen. Blutentnahme am 15. 12. 04.
Agglutinationswert damals nicht festgestellt.

4. Kaninchen, weifs, immunisiert mit Stamm 6 Fr (Fränkel).

Vom 22. 11. 04 bis 6. 12. 04. Dreimalige Injektion von 2, 4
und 6 Schalen. Blutentnahme am 15. 12. 04.
Agglutinationswert damals nicht festgestellt.

Von Dr. G. Werner.

137

Agrsrlutinatioiiswerte Ende Januar 1905.

II

III

IV

Stämme

!|

Immunsera

von Stamm

1. GBN

4. GrBI

l_

3. L

6. Fr

1. GBN . .

. 1:250 = +

1: 10 = —

l:

10 = —

1: 10 = -

3. L . .

. | 1: 10 = -

1: 10 = -

1:

200 = +

1: 10 = —

4. GrBI

. ' 1: 10 = —

1:1000 = +

1:

10 = —

1: 10 = —

5. GrBII

. 1: 10 = -

1:600 = +

1:

10 = —

1: 10 = -

6. Fr

. 11: 10 = -

l: 10 = -

1:

10 = —

1 : 500 =r= +

7. M. .

1: 10= —

1: 10 = —

1:

10 = -

1: 10=-

8. MKI

. 1: 10= —

1: 10 = -

1:

10 = -

1: 10 —

9. MKH .

. |l= 10=-

1: 10 = —

1:

10 = -

1: 10 = -

10. GPh .

. 1: 10 = —

1: 10 = -

* =

10 = -

1: 10 = -

malign. ödem

. 1: 10 = —

1: 10 = —

1:

10 = -

1: 10---

Rauschb

rac

id

. ||l: 10=-

1: 10 = —

1:

10 = —

1: 10=-

— bedeutet keine Agglutination.
+ » deutliche »

Zu dieser Tabelle ist unter Bezugnahme auf frühere Angaben
noch zu bemerken, dafs Stamm 1 GB, der sich völlig identisch
mit 1 GBN zeigte, weil aus demselben Falle stammend, nicht
mehr weitergezüchtet worden war.

Der Rückgang des Agglutinationswerts der Sera I und II
ist in Anbetracht dessen, dafs dieselben jetzt fünf Monate alt
waren, nicht auffallend. Die verhältnismäfsig niedrigen Werte
der Sera III und IV erklären sich durch den geringen Orad der
Immunisierung sowie durch ihr Alter von ca. vier Wochen.

Aus diesen Versuchsresultaten geht zunächst hervor, dafs in
jedem Falle durch die geschilderte Immunisierung spezifische
Agglutinine erzeugt wurden, und zwar in nicht unbedeutenden
Mengen. Zeigten doch die beiden ersten Sera noch ausge-
sprochene Agglutination bei Verdünnungen von 1 : 1000 bzw.
1 : 10000. Auch bei den beiden anderen, zu deren Erzeugung
die Immunisierung viel weniger hoch getrieben worden war, be-
trugen die Werte noch nach einem Monat 1 : 220 und 1 : 500. Leider
war es infolge anderer Arbeiten und der Umständlichkeit der An-
aerobenzüchtung versäumt worden, den Titre sofort nach Ge-
winnung des Serums festzustellen!

138 Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

Ferner aber ergab die Prüfung mit sämtlichen Stämmen nur
in einem Falle bei Serum III die Agglutination mit einem an-
deren als dem zur Immunisierung verwendeten Stamm, und zwar
handelte es sich dabei um einen solchen, welcher gleichzeitig
von Kamen aus einer anderen Probe Marktmilch gewonnen war
und sich auch im übrigen als mit dem ersteren gleichartig er-
wiesen hatte. Es ist somit in diesem Falle nicht unwahrschein-
lieh, dafa es sich um einen Stamm nicht nur derselben Gruppe
— etwa der in der Milch vorkommenden — , sondern ganz der-
selben Herkunft gehandelt haben könne I

Die Agglutination der homologen Stämme war, wie schon
erwähnt, eine sehr ausgesprochene, während bei den anderen,
auch in stärkeren Konzentrationen, keine Spur einer Reaktion
vorhanden war. Irgend welche Beziehungen etwa zwischen den
aus menschlichen Gasphlegmonen herrührenden oder den zum
Darmkanal des Kaninchens in Beziehung stehenden oder den
aus Gasphlegmonen der Meerschweinchen gezüchteten Stämmen
konnten also auf diesem Wege nicht festgestellt werden.

Da der Beweis für die Agglutinabilität der Bakterien,
wenigstens bezüglich der vier zur Serumbereitung benutzten
Stämme sowie des Stammes 5 Gr. B. II erbracht ist, so kann sich
dies Verhalten nur erklären entweder dadurch, dals den Gas-
phlegmonebazillen, wie den Koliarten, die Eigenschaft fehlt, für
ihre ganze Art typische Agglutination hervorzurufen, während
eine solche für die einzelnen Stämme oder Stämme gleicher Her-
kunft von ihnen erzeugt werden kann. Oder aber die grofse
Gruppe unsrer sog. Gasphlegmonebazillen zerfällt noch in zahl-
reiche Arten, von welchen keine, wenigstens in bezug auf die
zur Serumerzeugung benutzten vier Stämme, mehrfach in unserer
Sammlung vertreten war, mit Ausnahme vielleicht von 5 Gr. B. IL
Die weitere Abgrenzung derselben müfste dann der so emsigen,
aber noch weiten unbekannten Gebieten gegenüber stehenden
Anaerobenforschung überlassen bleiben !

Zu ähnlichen Resultaten kommt auch Bachmann in seinen
schon erwähnten Untersuchungen über die Bazillen des malignen
Ödems. Neben manchen morphologischen und kulturellen Eigen-

Von Dr. G. Werner. 139

scbaften veranlassen ihn gerade die Resultate seiner Agglutinations-
versuche zu dem Schlüsse, dals die Bezeichnung Bacillus des
malignen Ödems ein Sammelbegriff sei.

Passini dagegen gelang es, durch Immunisierung mit Gas-
phlegmonebazillen Sera zu erzielen, durch welche auch seine
anderen Stämme agglutiniert wurden. Nur über ein solches
macht er aber nähere Angaben : Das durch Immunisierung eines
Kaninchens mit einem aus Fäeces stammenden asporogenen Gas-
bazillenstamm gewonnene Serum agglutinierte den eigenen Stamm
bis 1 : 120, drei andere noch in Verdünnungen 1 : 30, 1 : 60 und
1 : 80. Von" diesen stammte der letztere ebenfalls aus Stuhl,
über die Herkunft der beiden anderen ist nichts angegeben.

Auf die von den Wiener Forschern beschriebene eigenartige
und seither unbekannte Variabilität der Gasphlegmonebazillen
und die sich daraus ergebenden Konsequenzen möchte ich hier
um so weniger eingehen, als es mir bei den mir zu Gebote
stehenden Stämmen bis jetzt weder durch Züchtung auf erstarrtem
Blutserum, noch auf koaguliertem Eiweifs gelungen ist, die-
selbe zu beobachten. In den Serumkulturen, in welchen die
St&mme, wie schon früher von Fränkel und den meisten Be-
obachtern angegeben — mit fötidem Geruch (H 2 S), auch bis-
weilen mit Gasbildung kräftig wuchsen, zeigte sich überhaupt
keine wesentliche Veränderung der charakteristischen Stäbchen,
auch nicht nach mehreren Generationen auf diesem Nährboden.
Bei den Kulturen auf Eiweifs dagegen sah man schon bald
eigentümliche Form Veränderungen, helle Stellen im gefärbten
Protoplasma, wie sie schon früher wiederholt geschildert worden
sind, auch spindelförmige Auftreibungen bis zu enormer Gröfse,
wie sie Grafsb erger bei Rauschbrand beschrieben und abge-
bildet hat, niemals aber Eigenbeweglichkeit, Geifseln
oder deutliche Sporenbildung.

Es ist wohl unmöglich, heute auf Grund des vorliegenden
geringen Materials die Ursache der anscheinenden Inkongruenz
der P a ss in i sehen Resultate mit dem unseren klarzustellen.
Begeben wir uns aber einmal in das Reich der Vermutungen,
so ist es nicht unwahrscheinlich, dafs die vier untersuchten

140 £> ie Agglutination bei Gasphlegmonebaziilen.

Stämme Passin is sämtlich, wie es von zweien ausdrücklich
angegeben ist, dem menschlichen Darminhalt entstammen, zumal
er wiederholt betont, die Gasphlegmonebaziilen regelmäßig aus
Stühlen von Erwachsenen und Säuglingen gezüchtet zu haben.
Dieselben können also ebenso einer gleichen Herkunft sein und
einer bestimmten — vielleicht derselben — Gruppe in dem
grolsen Geschlecht der sog. Gasphlegmonebaziilen angehören,
als die beiden von Kamen gleichzeitig aus Milch gezüchteten
Stämme, welche in meinen Versuchen allein von dem gleichen
Serum agglutiniert wurden. Unter dieser Konstellation würde
die Inkongruenz der Resultate nur eine scheinbare sein und dem
Agglutinationsphänomen noch eine wichtige Rolle für die Ab-
grenzung kleinerer Gruppen in dem grofsen Reich der anscheinend
gleichartigen Anaeroben zufallen. Hierzu bedürfte es jedoch
allerdings noch weit ausgedehnter Untersuchungen!

Gerade im Hinblick auf solche aber möchte ich zum Schlufs
unter Bezugnahme auf die Untersuchungen Bachmanns und
Passinis noch auf einige Einzelheiten derselben näher ein-
gehen, da diese Verhältnisse gerade für Anaeroben noch nicht
häufig beschrieben sind:

Zur Ausführung der Immunisierung benutzte Bachmann
mehrtägige — bis 18 Tage alte — Gelatine- und Agarkulturen,
letztere in einer nach Zerkleinerung des Agarzylinders vorge-
nommenen Aufschwemmung mit Bouillon. Dieselben wurden
bei Meerschweinchen und Kaninchen teils lebend, teils nach
x / 4 stündiger Erhitzung auf 100° intraperitoneal, intramuskulär,
meist aber subkutan, nie direkt in die Blutbahn eingespritzt. Bei
den Agglutinationsversuchen kommen die erwähnten Aufschwem-
mungen von Agarkulturen mit Bouillon oder Kochsalzlösung
wieder zur Verwendung. Dieselben enthielten immer Bestand-
teile des festen Nährbodens und wurden wegen möglichster Ab-
kürzung der aeroben Herstellung nicht filtriert. Für die lange
Erhaltung der Beweglichkeit der Ödembazillen — was ja bei den
unbeweglichen Gasphlegmonebaziilen nicht in Betracht kommt
— erwies sich dabei Bouillon als die geeignetere Flüssigkeit,
doch wurde in ihr gegenüber der Kochsalzlösung die Bildung

Von t>r. G. Werner. 141

zur Täuschung führender Pseudohäufchen beobachtet. Als grofser
Milsstand, welcher die Ausschaltung zahlreicher Versuchsreihen
bedingte, wurde das Auftreten vollständiger oder unvollständiger
Agglutination in den Kontrollen empfunden. Derselbe liefs sich
am besten durch Benutzung möglichst junger Kulturen
und stark verdünnter Aufschwemmungen beseitigen. Für die
makroskopische Beobachtung in Fickerschen Röhrchen zeigte
sich ferner Kochsalzlösung als geeigneter wie Bouillon, da in ihr
eine schwache Reaktion deutlicher erkannt werden konnte.

Passini verwandte zur Immunisierung seiner Tiere eben-
falls ganze Kulturen der verschiedensten Art. Ohne nähere An-
gaben erwähnt er Zückerbouillon-, Gelatine , Milch-, Eiweifs-
und Blutserumkulturen. Zur Beobachtung der Agglutinations-
reaktion nimmt er mit Vorliebe älteres Bakterienmaterial und
empfiehlt besonders die Faulflüssigkeit (!) aus alten Blutserum-
kulturen sowie alte, nicht mehr überimpfbare oder durch Er-
hitzung abgetötete Zuckerbouillonkulturen, während bei jungen,
lebenden Bakterien die Einwirkung des Serums oft inkonstant sei !

Die Vergleichung von Versuchsresultaten bedingt nun eine
gewisse Gleichheit der Methodik, und ihre weitere Verwertung
hat zur Voraussetzung, dafs die letztere nach dem derzeitigen
Stand der Wissenschaft und Erfahrung einwandfrei ist. Nach
beiden Richtungen hin kann ich gegenüber den Versuchen
Passinis gewisse Bedenken nicht unterdrücken. Wenn auch
diese Verhältnisse bei den anaeroben Bakterien, deren Eigenart
nicht zu verkennen ist, noch nicht so genau studiert sind, so
haben sich doch aus der intensiven Bearbeitung der Agglutinations-
frage in den letzten Jahren ziemlich allgemein anerkannte Grund-
sätze über ihre Theorie und Praxis gebildet, deren grundlose
Vernachlässigung die Zuverlässigkeit eines Resultats nicht zu
erhöhen geeignet ist

So erscheint es mir geboten, so lange wir die Agglutinine
als Reaktionskörper von Substanzen der Bakterienleiber auffassen,
bei der Immunisierung, wenn irgend angängig, diese allein zu
verwenden ohne Anhäufungen ihrer Stoff Wechselprodukte, also
in frisch gewachsenen Kulturen. Ferner ohne Bei-

142 Die Agglutination bei Gasphlegmonebazillen.

mengungen des durch die eigene Zusammensetzung und durch
die in ihm entstandenen Zersetzungs- und Stoffwechselprodukte
nicht als indifferent zu betrachtende Nährbodens, also in auf-
geschwemmten Oberflächenkulturen. Neben anderem
könnte bei der von Passini angewandten Methode die Mit-
einführung der verschiedensten Eiweifskörper bei der Immuni-
sierung zur Bildung spezifischer Eiweifepräzipitine führen, welche
dann in ähnliches Eiweifs enthaltenden Bakterienaufschwemmungen
bei stärkeren Konzentrationen Niederschläge und Trübungen
hervorrufen und, von dem Bakteriengehalt völlig unabhängig,
sehr leicht zu Täuschungen führen könnten.

Ob eine Abtötung der Bakterien durch Erhitzung, wie bei
den Typhusbazillen, sich zur besseren Erzielung von Aggluti-
ninen empfehlen würde, mufs durch Versuche festgestellt werden.
Zur Immunisierung von Kaninchen wäre sie bei Gasphlegmone-
bazillen nicht nötig, bei Meerschweinchen aber, für welche viele
Stämme derselben äufserst pathogen sind, kaum zu umgehen.
Jedenfalls hat die von mir angewandte Methode einer einstün-
digen Erhitzung auf 60° Sera höheren Agglutinationswertes er-
zielt, als sie Passini anzugeben hat.

Was nun das zur Anstellung des Agglutinationsversuchs
geeignete Bakterienmaterial betrifft, so ist wohl auch hierfür die
Forderung junger, lebender, von Beimengungen freier
Bakterienmassen in feiner Verteilung allgemein anerkannt. Wie
dieselbe auch bei den vorliegenden Verhältnissen erfüllt werden
kann, haben meine Versuche gezeigt. Die Vorteile einer klaren
Kochsalzlösung als Medium liegen ferner sowohl für die makro-
skopische als für die mikroskopische Beobachtung auf der Hand.
Auch Bachmann erkannte dieselben gegenüber der Bouillon,
in welcher andere Niederschläge (»Pseudohäufchen«) Täuschungen
hervorriefen. Ebenso führten ihn seine Erfahrungen zur Ver-
wendung junger Kulturen, wie schon oben erwähnt wurde.

Wenn Passini nun behauptet, dafs die Reaktion bei jungen,
lebenden Kulturen oft inkonstant sei und von alten abgetötetem,
zersetztem Material besser ausgelöst würde, so steht er mit den
sonstigen Erfahrungen in Widerspruch. Auch ich habe mich

Von Dr. G. Werner. 143

gerade bei dem vorliegenden Material hiervon nicht überzeugen
können, war im Gegenteil immer überrascht gewesen über die
aulserordentlich prompte und ins Auge fallende Reaktion bei
Verdünnungen meiner Sera bis etwa 1 : 100. Allein auf die be-
stimmten Angaben Passinis hin wollte ich von einer Nach-
prüfung nicht absehen und war begierig, ob hierbei eventuell
auch eine Reaktion bei anderen Stämmen eintreten würde. In
Ermangelung alter Zuckerbouillonkulturen mufste ich zu Zucker-
agarkulturen greifen, die ich nach Zerkleinerung mit Bouillon
aufschwemmte. Der Erfolg war wenig ermutigend: Selbst bei
stärkerem Serumkonzentrationen trat Häufchenbildung und
Sedimentierung in nicht sehr deutlichem Unterschied gegen die
ebenfalls nicht homogen bleibenden Kontrollen erst langsam
ein, blieb aber, soweit man dies bei einem so unklaren Bilde
sehen konnte, welches sich auch durch mikroskopische Unter-
suchung nur schlecht aufklären liefs, nur auf die eigenen Stämme
beschränkt.

Auch durch Erhitzung abgetötete Zuckeragar-Oberflächenkul-
turen lieferten dasselbe Resultat und bestätigten die Angaben Pas si -
nis über die leichtere Agglutinabilität abgestorbener Bakterien nicht.

Es dürfte auch wohl recht zweifelhaft sein, ob man in dieser
Situation nicht lieber der Inkonstanz der jungen, lebenden Stämme,
als der Konstanz dieses alten, abgestorbenen, in veränderter,
durch Gärung zersetzter Nährflüssigkeit befindlichen Bakterien-
materials Glauben schenken müfstel

Unter diesen Umständen erscheint mir eben die Berück*
sichtigung der allgemein anerkannten Grundsätze der Sero-
diagnostik, wenn diese sich auch in erster Linie auf die Ver-
bältnisse der Typhusbazillen, als Prototyp der agglutinablen
Bakterien beziehen, auch bei solchen Untersuchungen notwendig,
nachdem sich ihre Durchführbarkeit mit dem Resultat einer
glatten, durchsichtigen Versuchsanordnung bei unseren Versuchen
gezeigt hat. Speziell kann bei Verwendung von in ihrer Zu-
sammensetzung inkonstanten, durchaus nicht indifferenten Nähr-
flüssigkeiten als Medium der so überaus empfindlichen Reaktion
ein einwandfreies Resultat nicht erwartet werden.

Archiv für Hygiene. Bd. Uli. 10

144 Die Agglutination bei Gasphlegmonebaaillen. Von Dr. G. Werner.

Literatur.

1. Btchminn, Zentralblatt f. Bakt, Originale, Bd. 37.

2. E. Frank el, Über Gaaphlegmonen. Hamburg, 1893.

3. » MOnchener med. Wochenschrift, 1899.

4. » Zeitschrift f. Hyg. u. Inf., 1902, Bd. 40.

5. > Labarsch n. Ostertag, 8. Jahrg., 1902.

6. Grafaberger nnd Schatten froh, Archiv f. Hygiene, 1900, Bd. 37.

7. > » > » 1903, Bd. 48.

8. > > » Münch. med. Wochenschr, 1900.

9. Kamen, Zentralblatt f. Bakt. Originale, 1904, Bd. 35.

10. Pal tan f, Art. Agglutination in Kolle u. Wassermanns Handbuch d. path.
Mikroorganitm., 1904.

11. Passini, Münchener med. Wochenschrift, 1904, S. 1283.

12. » Zeitscbr. f. Hyg. u. Inf , 1905, Bd. 49.

13. Werner, Archiv f. Hygiene, 1904, Bd. 50 S. 274.

Vorschlag eines neuen Apparates zur Bestimmung des
spezifischen Gewichtes von Baumaterialien.

Von

Ing. R. Bianchini und Dr. E. Oler.

Hygienisches Institut der Kgl. Universität Turin.
(Direktor: Prof. Dr. A. Pagliani.)

Die genaue Kenntnis des spezifischen Gewichts der Bau-
materialien hat vom hygienischen Gesichtspunkte aus sehr oft
seine interessante Seite, sei es nun für Nachforschungen in der
Praxis oder wissenschaftliche Bestimmungen. Tatsächlich stehen
nun unter den Erscheinungen, die den Hygieniker bezüglich der
vorgenannten Materialien interessieren, die wichtigsten, d. h. die
Transmission der Geräusche, die Leitungsfähigkeit für Wärme
und Feuchtigkeit, das Kapillarvermögen und sogar die Leichtig-
keit der Stauberzeugung, in Verbindung mit der gröfseren oder
kleineren Dichtigkeit der Körper; in allen diesen Fällen erwirbt
der spezifische Wert angesichts der Übereinstimmung zwischen
Dichtigkeit und spezifischem Gewicht eine weitgehende Bedeutung
für die daraus entspringenden praktischen Folgen.

Es ist allgemein bekannt, dafs das spezifische Gewicht
das Gewicht der Einheit des Volumens ist. Es ist also,
will man es bestimmen, unbedingt erforderlich, das schein-
bare Volumen des Körpers mit der gröfsten Sorgfalt
abzuwerten, und diese Vornahme gerade bietet heute noch

10*

146 Vorschlag eines neuen Apparates etc.

die gröfste Schwierigkeit, während die Abschätzung des Gewichts
mit den heute üblichen Präzisionswagen wenigstens für diesen
Zweck hinreichend genau ist.

In der Absicht, genaue Bestimmungen zu erhalten, und in
der Überzeugung, dafs die direkteste und genaueste Methode
immer noch in Abzug des scheinbaren Volumens von der Volumen-
steigerung einer den Versuchskörper umgebenden Flüssigkeit be-
stehe, dies nicht zuletzt auch, weil sie nur ein einmaliges Ab-
wiegen erheischt (vorausgesetzt immerhin, dafs die verwendete
Flüssigkeit keine Fehlerquellen erzeugt infolge von Aufsaugung
oder anderen chemischen Erscheinungen), haben wir einen Appa-
rat geschaffen, den wir nachstehend näher beschreiben werden.

Beschreibung des Apparates.

Beschreibung des Apparats. Dieser Apparat besteht
aus einem zylinderförmigen, gläsernen Gefäfs mit einer leichten,
die ganze Höhe entlang laufenden Rinne. Seine auf Grund der
Berechnung möglicher und der Methode anhaftenden Fehler-
quellen bestimmte Gröfsen Verhältnisse sind folgende: Innerer
Durchmesser 1 ) 45 mm, Höhe verschieden, je nach den auszu-
führenden Bestimmungen. Das Gefäfs hat starke Wände und
kräftigen Boden und ist mit der dem Apparat zur Stütze
dienenden Fufsplatte aufs festeste verbunden.

Von dem unteren Teile des Gefäfses geht eine kurze Röhre
aus, die ca. 1 cm vom Boden desselben absteht und dem Ende
zu verdickt ist.

Am Rand dieses Gefäfses, oder genauer, auf der Rinne ist
vermittelst einer Druckschraube ein gabelartiges Gestell ange-
bracht, das an seinem oberen Teil eine Art Klammer mit kreis-
förmigem Ausschnitt trägt. In diesem ruht eine gläserne Stange,
die am Ende in eine Spitze ausläuft und parallel zu der Wand

1) Eine leichte Formveränderung im Schnitt des Glases führt zu keinen
bedeutenden Verschiebungen in der Berechnung der Schnittfläche, so dafs
wir also das Wort Durchmesser gebrauchen können, um den Durchmesser
des eigentlichen kreisförmigen Teils besagten Schnittes auszudrücken.

Von Ing. R. Bianchini und Dr. E. Cler.

147

des Gefäfses steht. Diese Anordnung hatte besonders die Er-
leichterung des Ersatzes einer eventuell gebrochenen Spitze
im Auge.

Das freie Ende der Spitze steht 4 mm von der Wand des
Glases ab und 8 mm von den an der Wand des Gefäfses ange-
brachten Glasspitzen. Diese Glasspitzen, ihrer drei, stehen gleich-
weit auseinander und können zusammen in verschiedener Ent-
fernung vom Boden des Glases
angebracht werden, treten 5 mm
weit ins Innere hinein und dienen
dazu, den die Materialien fassen-
den Teil des Apparats unter
Flüssigkeit . zu halten. Es ist
dies ein leicht konkaves Eben-
holzdeckelchen; am Rande trägt
es drei Öffnungen, die den Durch-
gang vorgenannter Glasspitzen
gestatten, überdies besitzt es
Löcher, die dem Austreten der
Luft und der Flüssigkeit dienen.
In seinem Zentralteile nehmen
wir eine weitere Öffnung wahr, die
es gestattet, auf ihm ein anderes,
stärker gehöhltes Deckelchen an-
zubringen, das einen ganz beson-
deren Zweck hat. Auch dieses
zweite Deckelchen, ebenfalls aus

Ebenholz, hat drei Durchlafsöffnungen, zahlreiche Löcher, deren
eines sich im Gipfelpunkte vorfindet.

Vor dem Teile der Gefäfswand, der dem Experimentierenden
gegenüber zu stehen kommt, ist ein kleiner Halter angebracht,
in den ein kleines, 8 X 15 cm messendes Pappschild eingefügt
werden kann, das im obern Teile, der linken Ecke zu, mit einer
kleinen Öffnung versehen ist.

Auf die andern, an der Fufsplatte des ganzen Apparats an-
gebrachten Halter stützt sich eine dickwandige Röhre, deren

Flg. 1. Vertikaler Schnitt des Gefäfses.

148

Vorschlag eines neuen Apparates etc.

innerer Durchmesser ca. 3 mm beträgt, und die zweimal im rech-
ten Winkel mit abgerundeten Ecken umgebogen ist.

Unmittelbar an ihrem Ende, das dazu bestimmt ist, mit dem
Gefäfse in Verbindung zu treten, findet sich ein einfacher Glas-
hahn, überdies zwei Nüsse zur Aufnahme der unteren Enden
von zwei graduierten Büretten. Dieser ganze Teil des Apparats
fällt nach dem Boden des Gefäfses hin sehr leicht ab.

Die beiden Büretten stehen mit der soeben beschriebenen
horizontalen Röhre vermittelst zweier zweckentsprechend ausge-
dachter, spezieller Hähne in Verbindung, die für das stete Ver-
bundenbleiben des Gefäfses mit den Büretten bürgen, welches
auch immer die Stellung dieser letzteren sein mag.

Fig. 2. Oberansicht cU'.s Apparates.

Unter dem letzten Teilungsstrich der Büretten finden sich
zwei Hähnchen mit feinster Öffnung; das an der Bürette gerin-
geren Durchmessers angebrachte kann infolge zweier Vorlege-
stücke nur bis zu einem bestimmten Mafse geöffnet werden.

Jeder zu den Nüssen der horizontal liegenden Röhre ge-
hörende Hahn hat einen gewöhnlichen, längs des Durchmessers
laufenden Kanal; senkrecht zu diesem Kanal und längs der
Achse läuft ein zweiter, welcher den ersten Kanal mit der
Bürette in Verbindung setzt. Überdies findet sich am Glashahn
eine die beiden Mündungen des ersten Kanals verbindende kreis-
förmige Furche.

Wie schon angedeutet, bleibt durch diese Vorrichtung
die Verbindung zwischen der horizontalen Röhre und den gra-

Von Ing. R. Bianchini und Dr. E. Cler. 149

duierten Büretten stets aufrecht erhalten, welches auch immer
die Inklination der letzteren sein mag.

Die Umbiegungen der horizontalen Röhre sind derart be-
rechnet, dafs die Bewegung der Büretten freibleibt, wie dies für
die Funktion des Apparates erforderlich ist.

Flg. •"». (iesain tan wicht des Apparates.

Ein säulenartiges Gestell, das an die Fufsplatte befestigt ist,
hat auf erforderlicher Höhe zwei mit kleinen Federn versehene
Ausleger, die dazu dienen, die Büretten zu fassen und sie in verti-
kaler Stellung festzuhalten. Besagte Büretten sind nicht gleich
stark ; die eine, ca. 20 ccm fassende, hat doppelte Einteilung in

150 Vorschlag eines neuen Apparates etc.

Kubikzentimeter und % ccm, die andere, nur 2 ccm haltende, ist
in 1 j 100 ccm eingeteilt. In der Gröfseren bewegt sich ein gewöhn-
licher Schwimmer, der infolge seines besonderen Baues die Ab-
lesung der Höhe genauer werden läfst.

Gebrauchsanweisung für den Apparat.

Man gie[st in das Gefäfs eine bestimmte Quantität Queck-
silber (eine kurze Übung mit dem Apparat wird genügen, darzu-
tun, wieviel von der Flüssigkeit je nach dem Volumen des zu
prüfenden Stücks passend eingegossen werden soll), und läfst
dasselbe bis zur Füllung der Büretten zufliefsen. Sollte sich
ausnahmsweise an einem Punkte der Kanälchen ein Luftbläschen
bilden, so ist es leicht, bei etwas Aufmerksamkeit dasselbe zu
vermeiden.

Daraufhin werden die beiden Hähne der Büretten geschlossen
und letztere selbst in eine zu den beschriebenen Auslegern ver-
tikale Lage gebracht. In die weitere Bürette wird der zur Ab-
lesung bestimmte Schwimmer nur dann eingeführt, wenn be-
treffende Bürette funktionieren soll.

Ist das Probestück dann in das Gefäfs eingeführt, so hält
man es mit dem eigens dazu verfertigten Deckelchen vollständig
unter Quecksilber. Dieses Deckelchen wird durch die Dichtig-
keit des Quecksilbers gegen die Glasspitzen festgedrängt, an denen
der Deckel, dank seiner Randausbuchtungen, beim Niedergehen
durchgekommen war.

Im allgemeinen (d. h. wenn es sich nicht darum handelt,
ganz kleine Stückchen zu prüfen) läfst man aus der grofsen
Bürette eine gewisse Quantität ausfliefsen, und zwar so lange,
bis die Spitze ca. I mm vom Quecksilberspiegel entfernt zu stehen
kommt ; dann läfst man noch weiter ausfliefsen, bis der Schwim-
mer mit voller Genauigkeit mit dem unmittelbar darunterstehenden
Teilungsstrich der Bürette zusammenfällt.

In diesem Moment wird der Hahn der weiteren Röhre ge-
schlossen und der der engeren geöffnet, und nun läfst man hier-
aus langsam ablaufen, bis die Spitze und der Spiegel des Queck-

Von Ing. R. Bianchini und Dr. £. Cler. 151

silbers in Berührung kommen. Diese letzte Lesung kann der
Genauigkeit halber wiederholt werden.

Es wird nun der Stand der beiden Büretten abgelesen und
addiert, sodann der Deckel abgenommen, das Prüfungsstück
herausgeholt, wonach der Experimentierende nach neuerlicher
Eintauchung des Deckels in vorbesagter Weise eine neue Ab-
lesung vornimmt und zuletzt wiederum die beiden Teilergebnisse
summiert.

Der Unterschied zwischen der ersten und der
zweiten Zahl gibt ohne weiteres in ccm, in l j 10 ccm
und in Vioo ccm das scheinbare Volumen des Stückes.

Zur Volumenbestimmung kleinster Stücke wird die Operation
nur mit der kleinkalibrigen Bürette vorgenommen, die andern
Ausführungseinzelheiten bleiben ganz und gar dieselben.

In diesem Falle kommt das kleinere, stärker gewölbte Eben-
holzdeckelchen zur Verwendung, wodurch das Austreten der
Materialstücke vermieden und an Quecksilber gespart wird.

Theorie des Apparates.

Unter den verschiedenen Aufgaben, die sich uns stellten,
und die wir nachstehend vorbringen werden, befand sich vor
allem diese, einen Apparat zu schaffen, der es ermöglichte, ein
fortwährend gleiches Untertauchen der die Probe haltenden Vor-
richtung zu haben, und dies sowohl bei der Ablesung mit unter-
getauchtem Stück wie auch ohne dasselbe.

Zahlreiche Erfahrungen mit verschiedenartigen Vorrichtungen,
die am Glasrande angebracht wurden (und somit teilweises Ein-
tauchen in die Flüssigkeit bedingten), brachten uns zur Über-
zeugung, dals derartige Apparate trotz sorgfältigster Konstruktion
und trotz Verwendung aller technischen Geschicklichkeit bei nach-
folgenden Lesungen veränderte Stellung einnehmen konnten,
was allerdings nur zu sehr geringen Unterschieden führte, die
aber, dank der Empfindsamkeit unseres Apparats, für die Volumen-
veränderung eingetauchter Körper von demselben stets angezeigt
wurden. Nach in verschiedenem Sinne angestellten Versuchen

152 Vorschlag eines neuen Apparates etc.

nahmen wir unsere Zuflucht zu einem nach unserer Ansicht ein-
facheren System, zu einer Festhaltevorrichtung bei vollständigem
Eintauchen in das Quecksilber, wodurch also der genannte Fehler
bei beliebiger Stellung der Vorrichtung in der Flüssigkeit absolut
zum Ausfall kam, eben weil das Volumen der Festhaltevorrich-
tung unveränderlich war.

Was dann die Spitze des Glasstäbchens anbetrifft, so
ist sie, da sie mit dem Gefäfs aufs festeste verbunden, bei den
verschiedenen Bestimmungen durchaus keiner Veränderung fähig.

Der Moment der Berührung zwischen Spitze und
Quecksilber wird direkt beobachtet, ohne Zwischenstellung
der Glaswand zwischen Auge und beobachtetem Punkt, infolge
zweckmäßiger Höhe der Gefäfswand, die derart ist, dafs sie mit
aller Bequemlichkeit das sichtliche Erfassen der Berührung über
dem Rand des Gefäfses gestattet. Überdies ist die Gleichheit
der Bedingungen bei jeder Ablesung dadurch garantiert, dafs die
betreffende Beobachtung durch ein im Pappschirm angebrachtes
Löchchen stattfindet. Um nun diese Beobachtungen einer abso-
luten Genauigkeit möglichst nahe zu bringen, wurde dazu stets
ein Vergrößerungsglas verwendet, das an dem Glas mittels eines
gabelförmigen Gestells und einer Druckschraube an das Gefäfs
festgefügt werden kann und mit Hilfe eines biegsamen Armes
beweglich bleibt.

Die Gröfsenverhältnisse des Gefäfses wurden derart
berechnet, dafs auch mit einem grofsen Fehler in der Festsetzung
des Kontakts zwischen Spitze und Quecksilberfläche (ein Fehler
von Vio mm), dieser bei Ablesung einundeinhalbes Hundertstel ccm
nicht überschreiten kann.

Will man zu genauen Ergebnissen gelangen, so ist auch
eine zweckmäßige Erleuchtung des Apparats erforderlich, und
zwar mit gleichmäfsigem, diffusem Licht, und das besonders auf
dem Quecksilberspiegel, damit der Moment der Berührung zwi-
schen Spitze und Quecksilber genau festgesetzt werden kann.
Zuweilen unterliefen uns Fehler infolge eines zu raschen Ab-
laufens des Quecksilbers aus den Büretten, Fehler,
die leicht zu verstehen sind, insofern, als die zum Schliefsen des

Von Ing. R. Bianchini and Dr. E. Gier. 153

Hahnes nötige Zeit unter solchen Umständen ein noch weiteres
Ausfliefsen der Flüssigkeit zuliefs, nach dem Zeitpunkt also, in
dem das Auge uns schon von dem Kontakt in Kenntnis gesetzt
hatte. Zur Ausschiebung auch dieser Fehlerquelle beschränkten
wir die Öffnungsmöglichkeit des Hahnes der kleinen Bürette,
und um nun hierin auch das stete Gleichmafs der Bedingungen
vorzufinden, brachten wir, wie beschrieben, zwei Vorlegestücke
an, bis zu welchen der Hahn bei jeder Bestimmung gedreht
werden mufste.

Die Ablesung des jedesmaligen Standes der Flüs-
sigkeit in der grofsen Bürette geschieht mittels eines
Schwimmers, der einen feinen, kreisförmigen Teilungsstrich trägt;
wurde bei Lesung dieser Bürette ein Fehler begangen, der ! /io ram
Höhe erreicht, so würde dies einem Volumenfehler von 5 cmm
entsprechen.

Anderseits kann man nicht a priori annehmen, dafs die
Kurvendifferenz in dem Meniskus des Quecksilbers zu einer
Fehlerquelle werden kann, dadurch dafs er auf die Lage des Schwim-
mers einwirkt, eben weil das Ablesen stets nach mehr oder
weniger starkem Sinken des Quecksilbers in der Bürette erfolgte,
wobei stets derselbe Meniskus vorhanden ist.

Mit diesen Betrachtungen stimmen die aus einer ganzen
Reihe von Beobachtungen erhaltenen Zahlen überein, Beobach-
tungen, bei denen jeder andere Teil des Apparats unbeweglich
blieb, was eben nur den Zweck hatte, den Fehler in der Ab-
lesung an der grofsen Bürette zu bewerten.

Hinsichtlich des Flüssigkeitsstandes der kleineren Bürette
kann angesichts des geringen Durchmessers* der Bürette in
der Ablesung kein bemerkenswerter Fehler auftreten. Bei den
von uns ausgeführten Proben mit feststehendem Gefäfs und Fest-
haltgestell und verschiedenem Stand in den beiden Büretten er-
gaben sich nie 5 cmm übersteigende Unterschiede.

Daran denken zu wollen, dafs Ausdehnung des Quecksilbers
infolge Temperaturveränderung Anlafs zu Fehlern geben könne,
dafür liegt keine Berechtigung vor, denn die beiden zur Bestim-
mung nötigen Ablesungen erfolgen zu rasch hintereinander, und

154 Vorschlag eines neuen Apparates etc.

der gröberen Sicherheit wegen ist überdies das vorbeschriebene
Schild zwischen dem Experimentierenden und dem Gefäfs an-
gebracht, wodurch eine eventuell von diesem ausgehende Wärme
abgehalten wird.

Es könnte nun noch auf eine andere Fehlerquelle hinge-
wiesen werden, nämlich auf die Kapillarität oder besser, die
Depression des Quecksilbers. Die Ablesungen finden jedoch
immer mit dem Quecksilber statt, das allmählich in die Röhren
absteigt, und so könnte also dieser Fehler nicht bedeutend sein.
Nehmen wir auch den Fall an, dafs er aus ganz besonderen
Gründen vorkommen könne, so würde er doch angesichts der
Diameterverhältnisse zwischen dem Gefäfs und den Büretten
nur winzig klein sein und ganz und gar übergegangen werden
können.

Schliefslich kommen wir auf die Natur der von uns zur
Immersion verwendeten Flüssigkeit selbst zu sprechen und können
da feststellen, dafs das Quecksilber sich zweifellos nicht nur zur
Bestimmung aller Baumaterialien vorzüglich eignet (und das ist
unser besonderer Zweck), sondern auch zur Determination sehr
vieler anderer fester Körper dienen kann, denn ausgenommen
davon sind nur alle jene Materien, die mit ihm Verbindungen
oder Mischungen eingehen, wie z. B. das Kupfer, das Gold, das
Silber.

Nichts berechtigt uns zu der Annahme, dafs die besagten
Mindestfehler sich summieren oder sich gegenseitig ausschalten;
was wir indes behaupten können, ist, dafs nach zahlreichen
Proben niemals ein Fehler hervortrat, der sich auf mehr als
1 ccm belaufen hätte.

Dieser analytisch berechnete und experimentell nachgewiesene
Gesamtfehler bleibt konstant, welches auch immer die Dimen-
sionen des zu prüfenden Materials sein mögen. Je gröfser somit
das scheinbare Volumen des Probestückes ist, desto geringfügiger
wird der Fehler sein.

Von Ing. R. Bianchini und Dr. E. Cler. 155

In der Absicht, die uns von diesem Apparat gelieferten An-
gaben zu prüfen, haben wir unsere Zuflucht zu verschiedenen
Versuchen genommen. Damit wir nun unter Verhältnissen ar-
beiten konnten, die uns erlaubten, zuverlässige Vergleiche anzu-
stellen mit dem Piknometer, der nach unserer Ansicht zu Ver-
gleichen der am genauesten arbeitende Apparat ist, handelte es
sich vor allem darum, ein Material zu verwenden, das auch bis
in die kleinsten Stückchen möglichst homogen war. Auf diese
Weise gelang es uns mit Hilfe der Kombination verschiedener
Stücke, gleiche oder sehr naheliegende Bestimmungen bezüglich
des spezifischen Gewichts zu erhalten. Wir zogen demgemäfs das
Glas zu unseren Versuchen heran, und zwar teilweise in Gestalt
von kleinen, zylindrischen Stäbchen und sehr unregelmäfsigen
Stücken, die durch Zerbrechung 10 mm dicken Krystalls erhalten
worden waren.

Diese Versuche, deren Einzelheiten wir der Kürze halber
übergehen, haben uns stets äufserst zufriedenstellende Ergebnisse
geliefert, die uns zu nachstehenden Folgerungen berechtigen:

1. Die mit der Quecksilbermethode erhaltenen Volumen
weisen eine relative Proportion zu dem absoluten Ge-
wicht der Versuchsstücke auf, und dieses Resultat wird
deutlicher erreicht als mit dem Piknometer.

2. Ist in der Zahl des absoluten Gewichts eine bestimmte
Grenze überschritten (ca. 4 g), so bleibt mit dem darauf-
folgenden Anwachsen desselben das von dem Queck-
silber gegebene scheinbare Volumen immer unter dem
vom Piknometer gegebenen.

3. Die mit unserem Apparat bewerteten spezifischen Ge-
wichte in Verbindung mit den schon angeführten Ver-
schiedenheiten im scheinbaren Volumen resultieren stets
höher als die von dem Piknometer unter gleichen Ver-
hältnissen gemessenen;

4. der Unterschied zwischen den mit der Quecksilbermethode
erhaltenen spezifischen Gewichten ist, laut vorgenommenem
Vergleich, bei einer bestimmten Grenze des absoluten Ge-

156 Vorschlag eines neuen Apparates etc.

wichts beginnend (2 g), niemals höher als 2 / 100 ccm, wäh-
rend unter den vom Piknometer gelieferten Werten der
Unterschied zuweilen bis zu x /io ccm ansteigt;

5. der Unterschied ist beim Piknometer noch viel bedeuten-
der, wenn die Stücke sehr klein sind.

Dafs nur der Piknometer bei relativ kleinvolumigen Mate-
rialien und bei denen von verhältnismäfsig grofsem Volumen
weniger genaue Messungen liefert, läfst sich unschwer begreifen,
wenn man berücksichtigt, dafs im ersten Falle die der Methode
anhaftenden Fehler von nicht zu unterschätzender Bedeutung
sind, da sie doch auf ein kleines Volumen verteilt sind (so er-
hielten wir mit einem kleinen, von einem Stäbchen abgeschnit-
tenen, 0,1436 g wiegenden Stück Glas, welch* ersteres ein spezi-
fisches Gewicht von ungefähr 2,65 aufwies, ein spezifisches Gewicht
von 3,4430). Im zweiten Fall vermehrt sich die Existenzmöglich-
keit von Fehlern infolge kleiner, dem Material anhaftender Luft-
bläschen, infolge der Umständlichkeit, das Gefäfs gut zu schliefsen
und vor allem infolge der Schwierigkeit, die Dichtigkeit des
Wassers auf 4° zu bringen.

Mit einer zweiten Versuchsreihe haben wir uns vorgenommen,
auszuforschen, ob mit unregelmäfsig geformtem Material bei Be-
stimmungen mit einem einzigen Stück oder bei zu summierenden
Teilbestimmungen infolge von Lufteinschlufs oder nicht voll
ständigem Kontakt des Quecksilbers mit den verschiedenen Ober
flächen der Versuchsstücke ein Fehler vorgefunden werden könne
Überdies experimentierten wir mehrere Male mit denselben Stücken
indem wir sie dabei verschiedene Stellungen einnehmen liefsen
Die so nach zahlreichen Prüfungen erhaltenen Ergebnisse waren
jeder Verschiedenheit bar.

Es sei an dieser Stelle noch darauf hingewiesen, dafs bei
Bestimmungen mit Quantitäten von Stücken, deren spezifisches
Einzelgewicht vorher festgestellt worden war, wir stets eine Ziffer
erhielten, die der Durchschnittszahl der Einzelbestimmungen ent-
sprach.

Auf Grund unserer Untersuchungen glauben wir also zu
nachfolgenden Schlüssen berechtigt zu sein, die besagen:

Von Ing. R. Bianchini und Dr. E. Gier. 157

Der vorgeschlagene und ausgeprüfte Apparat arbeitet bis auf
% ccm mit absoluter Genauigkeit, bis auf Vioo ccm mit relativer
Genauigkeit, wobei jedoch niemals 2 / 100 ccm übersteigende Fehler
vorkommen.

Die Handhabung des Apparats ist einfach, zeitersparend und
verlangt keine lange Vorübung von seiten des Experimentierenden.

Jede beliebige Materialprobe kann mit diesem Apparat ge-
messen werden, ohne vorher einer Vorbehandlung unterliegen
zu müssen.

Jede Lesung findet ist bei diesem Apparat direkt statt ohne
Zuhilfenahme besonderer Korrektionsvorrichtungen und ist also
äufserst einfach.

Zur Berechnung des spezifischen Gewichts ist auf der Wage
nur eine einmalige Gewichtsmessung der Materialproben vorzu-
nehmen.

Was nun nach unserer Ansicht dem Apparat den gröfsten
Wert verleiht, ist die Tatsache, dafs man auch mit Stücken grös-
seren Volumens eine bis auf ^m ccm gehende Genauigkeit erhält,
was eben beim Piknometer nicht der Fall ist.

Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

Zugleich ein Beitrag zur Aerobiose anaerober Bakterien. 1 )

I. Mitteilung.

Von

R. Grafsberger.

(Aus dem Hygienischen Institut der Universität Wien.)

Die Gesetze der Anpassung und Vererbung sind bereits
mehrfach auch bei Bakterien verfolgt worden. Meist handelte
es sich wohl bei solchen Arbeiten mehr um Übertragungen der
an höheren Organismen gewonnenen Erfahrungen auf die Beo-
bachtungen, soweit sie bisher in der umfangreichen bakteriologischen
Literatur vorliegen, oder um Berücksichtigung einzelner spezieller,
biologisch interessanter Details, seltener um eine ausreichend
vollständige Analyse der an einer bestimmten Bakterienart im
Verlaufe der Züchtung auftretenden Erscheinungen.

Und doch laden gerade die hier bestehenden Verhältnisse
zu einem ähnlichen züchterischen Spezialstudium ein, wie es
vielfach mit Geduld und Ausdauer von Züchtern in der höheren
Organismenwelt versucht worden ist. Einfache Formen, ein an-
scheinend überaus einfacher Mechanismus der Fortpflanzung, die
Möglichkeit, die Organismen zu züchten und in verhältnismäfsig
kurzer Zeit eine grobe Zahl von Generationen zu erhalten,
schaffen günstige Vorbedingungen.

1) Vortrag, gehalten in der morphologisch-physiologischen Gesellschaft
in Wien am 14. Man 1905.

Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien. Von R. Grafsberger. 159

Hierzu kommt noch die Gelegenheit, die gleichzeitig oder
neben den Veränderungen der Formen vor sich gehenden
Änderungen des Chemismus zu studieren.

Freilich eignet sich für solche Studien nicht jede Bakterien-
art. Wir werden von solchen Bakterien, die bei den verschie-
denen Einwirkungen natürlich oder künstlich geänderter Lebens-
bedingungen morphologisch bzw. biologisch träge reagieren,
deren Ausschläge sich z. B. in bezug auf den Chemismus in dem
wechselnden Erscheinen oder Ausbleiben schwierig zu isolierender
oder nur in geringer Quantität nachweisbarer charakteristischer
Stoffe äufsern, kaum viel zu erwarten haben.

Viel eher werden uns solche Bakterien Dienste leisten, die
überaus empfindlich, auf jeden Reiz mit sozusagen über-
triebenen Ausschlägen reagieren, Bakterien, welche, etwa als
Gärungserreger grofse Quantitäten gut charakterisierter Stoffe
ausscheiden.

Handelt es sich weiters um verhältnismäßig grofse Bakterien,
denen wir mit unseren üblichen mikroskopischen Hilfsmitteln
in das Innere der Zelle hineinsehen können, deren wechselnde
Zustände durch die unter geeigneten Bedingungen vor sich
gehende Bildung von Dauerformen — Sporen — in bequemer
Weise konserviert werden können, dann scheinen allerdings diese
günstigen Vorbedingungen zusammenzutreffen.

Derart liegen die Dinge nun bei einer Anzahl jener an-
aeroben Bakterien, die insbesonders wegen ihrer menschen-
und tierpathogenen Eigenschaften andauernd das Interesse der
Bakteriologen fesseln.

Die Schwierigkeiten der Züchtung, welche vor allem darin
liegen, dals die genannten Bakterien in ihrem vegetativen Zustand
eine überaus grofse Empfindlichkeit gegenüber dem freien Sauer-
stoff zeigen, bieten bei dem heutigen Stand der Technik eher
einen Reiz als eine Verlegenheit.

Die nachfolgend mitgeteilten Erfahrungen beziehen sich im
wesentlichen auf den »anaeroben Rauschbrandbazillusc, den vor
längerer Zeit entdeckten Erreger des Rauschbrandes, einer Tier-

Arcbiy für Hygiene. Bd LEI. H

160 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

seuche, die seit mehreren Jahren der Gegenstand eingehender
Untersuchungen von Schattenfroh und mir ist.

Im Interesse des Zusammenhanges sei es gestattet, unsere
bisherigen Ergebnisse kurz wiederholend zusammenzufassen.

Ich will vorausschicken, dafs wir im rauschbrandkranken
Tier unsere Stäbchen in verschieden virulentem Zustand an-
treffen. Gerade die virulentesten Rassen sind verhältnismäßig
schwer züchtbar. Wir haben grofse Mühe, sie an unsere üblichen
Nährböden anzupassen, und anderseits zeigt uns eine Betrachtung
der primär aus dem Originalsaft erhaltenen Kolonien, dafs bei
diesem ersten Versuche die Stäbchen durch sehr charakteristische
Gestaltsveränderungen die schwierige Anpassung verraten.

Zunächst verweise ich auf das Bild (s. Bd. 48, T. XI, Nr. 66),
welches unsere Stäbchen häufig zeigen, wenn wir einen Tropfen
Rauschbrandsaft auf ein Deckglas streichen und mit Gentiana-
violett färben.

Wir treffen hier eine Anzahl von mäfsig grofsen Stäbchen,
sie hegen gewöhnlich zu weit, manche von ihnen zeigen eine
Differenzierung. Oben im Bilde zeigt sich eine Kette von vier
auffallend dicken Exemplaren.

Um diese Stäbchen zu züchten, geben wir einen Tropfen
des Saftes in eine unserer verflüssigten Gallerten (Agar oder
Gelatine), mischen und giefsen in eine sog. Petrischale, wobei
wir zweckmäTsigerweise, um die Anpassung zu erleichtern, kleine
Stückchen sterilen Rindermuskels — den die Sttäbchen von
früher her kennen — mit einschliefsen, wir lassen erstarren und
geben die Schalen unter anaeroben Verschluß, am besten so
hergestellt, dafs wir aus dem Aufbewahrungsraum die Luft durch
einen kräftigen Strom von reinem H. vertreiben.

Nach 24 Stunden (s. Bd. 48, T. VI, Nr. 31) zeigen sich in
der Umgebung des wachstumbefördernden Rindermuskels steck-
nadelkopfgroße primäre Kolonien.

Fertigen wir von solchen Kolonien Präparate an, so zeigt
sich ein auffälliges Bild.

Wir sehen statt oder neben den früher gesehenen regelraäfsig
geformten Stäbchen eine grofse Zahl spindelförmig oder kolben-

Von R. Grafsberger. 161

förmig geschwollener Gebilde, welche die Färbung mit Gentiana
schlecht annehmen.

Es handelt sich hier nicht etwa um in gewöhnlicher Weise
degenerativ veränderte Individuen, wie wir sie oft in unseren
alten Bakterienkulturen antreffen , um die bekannten Abs^erbe-
erscheinungen (Alterserscheinung der Kultur), sondern um einen
ganz spezifisch degenerativen Prozefs (s. Bd. 48, T. II, Nr. 9).

Die Behandlung eines solchen Präparates mit Lugol scher
Lösung gibt uns sofort die Richtung an, in der sich unsere
Nachforschungen zu bewegen haben. Es zeigt sich, dafs bei
dieser Behandlung die Individuen fast entsprechend der Ab-
weichung ihrer Form vom normalen Typus, sich mit Jod intensiv
braun bis schwarzviolett färben.

Es handelt sich demnach um eine Degeneration, die durch
das diffuse Auftreten einer mit Jod färbbaren Substanz — wir
nennen sie schlechtweg Granulöse — ausgezeichnet ist. Diese
Zellen sind oft so schwer erkrankt, so hinfällig, dafs alle Ver-
suche, die Kolonien auf die üblichen bakteriologischen Nähr-
böden (flüssige und Gallerten) zu übertragen, fehlschlagen, indem
sie die bei der Übertragung unvermeidlichen Schädigungen nicht
überstehen.

Gelingt die Übertragung, dann sind wir in der Lage, den
eben besprochenen Prozefs der Einlagerung der Granulöse
genauer zu verfolgen.

Übertragen wir von solchen oder anderen primären Kolonien
in zuckerhaltige, mit Kreide versehene flüssige Nährböden, so
tritt nach wenigen Stunden stürmische Gärung ein (Buttersäure-
gärung). Dabei zeigen die meisten Individuen das typische Ver-
halten jener Bakterien, welche als überall verbreitete (Boden,
Darm etc.), anaerobe Buttersäuregärungserreger bekannt sind
(vgl. Bd. 42, T. V u. Bd. 48, T. II).

Wir sehen bei Färbung mit Gentianaviolett den färbbaren
Teil der Zellen an das eine Ende gerückt, während der übrige
Teil der Zelle bei mehr minder starker Anschwellung blafs

gefärbt erscheint.

11 •

1Ö2 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

Jodfärbung zeigt sofort, dafs hier grofse Mengen von Granu-
löse eingelagert sind. Es handelt sich um ein altbekanntes
Phänomen, welches solche typische Buttersäurebakterien zeigen,
wenn sie bei Gegenwart von Zucker versporen. Sie bilden
Klostridien.

Die Zellen befinden sich im Stadium der Sporenanlage. Im
weiteren Verlaufe kommt es bei einem Teil der Zellen zur Ent-
wicklung der reifen Spore, die entweder endständig bleibt oder
vor dem Zerfall der Zelle mehr gegen die Mitte rückt.

Ein grofser Teil der Zellen aber kommt nicht zur Sporen-
reife, sie füllen sich vollständig mit Granulöse und verfallen
dem Untergang.

Die Sporen aus solchen Gärkolben fixieren jenen Zustand,
den wir als den typischen Buttersäurebakterien zukommend be-
schrieben haben.

Es erhebt sich nun sofort die Frage, ob wir den eben
geschilderten Prozefs, Versporung mit intermediärem Auftreten
von Granulöse, im Sinne des Auftretens beträchtlicher Mengen
einer Reservesubstanz etwa als Zeichen eines Fortschrittes zu
einer höheren Organisation begrüfsen dürfen. Die Frage ist
verschieden gedeutet worden. Zugunsten der eben geäufserten
Auffassung — man hat geradezu von einem Granuloseorgan
gesprochen — läfst sich anführen, dafs der Prozefs sich häufig
im Rahmen einer gewissen unverkennbaren Regelmäfsigkeit voll-
zieht, dafs ferner in der Tat wenigstens eine Anzahl der Zellen
je eine normale, ziemlich grofse Spore entwickelt.

Man kann aber anderseits darauf hinweisen, dafs stets er-
hebliche Mengen von Zellen vorzeitig zugrunde gehen, dafs
weiters bei künstlicher Übertreibung des Prozesses zweifellos
biologisch wertlose, sterile Sporen erzeugt werden (s. Bd. 42,
T. V, Nr. 5, 6; Bd. 48, T. II u. ffl, Nr. 12 u. 13).

Es gelingt leicht, bei passender Auswahl der zur Züchtung
verwendeten Rassen und passender Wahl des Nährbodens, die
Zellen so zu beeinflussen, dafs sie auch in die Sporenanlage je
ein Granulosekorn einschliefsen.

Von R. Grafsberger. 163

Es kommt dann im Anschlufs zum Freiwerden von Sporen,
die lebhaft glänzen und ebenso wie normale Sporen sich mit
Gentianaviolett nicht färben, wohl aber mit Jod ein deutlich
abgegrenztes Granulosekorn im Innern erkennen lassen. Aber
diese Sporen keimen, auf Nährböden gleicher oder anderer
Zusammensetzung gebracht, nicht aus, sie sind, biologisch be-
trachtet, wertlos.

Ja, überträgt man besonders schwer anzupassende primäre
Kolonien des Rauschbrandbazillus unter Verwendung geeigneter
Hilfssubstanzen (steriler Rindermuskel) in Kolben mit Zucker-
bouillon und Kreide, so sehen wir zwar wieder (s. Bd. 48, T. II,
Nr. 8) stürmische Entwicklung mit energischer Gärung, die
Spaltung der Zellen geht ungemein rasch vor sich, eine Anzahl
von Nachkommen lenkt in Versporung, die Granulöse füllt aber
bald das ganze Stäbchen aus und dieses geht vorzeitig zugrunde.
Diese Gärkolben bieten mitunter das Bild lebhaft gärender
Flüssigkeiten, mit reichlicher Gegenwart von Zellen, doch jeder
Versuch einer Übertragung vom gärenden Inhalt, selbst auf
Gärflüssigkeiten derselben Zusammensetzung (5 ccm), schlägt fehl.
Es ist dies ein Experiment, das uns wichtige Anhaltspunkte
gibt für die Beurteilung so vieler mifslingender Versuche, aus
manchen Spontangärungen die Erreger auf kurzem Wege zu
züchten. Trotz reichlicher Vermehrung und auffälliger Gärung
sind die Organismen schlecht angepaßt und gehen bei neuer-
lichem Nährbodenwechsel ausnahmslos zugrunde.

Auch Bejeringk erwähnt solche Bakterien, die nur einmal
gären und nicht wieder.

Man braucht nun nur noch hinzuzufügen, dafs gelegentlich
ruhende Formen anderer Bakterien, die in solchen Spontan-
gärungen enthalten sind, bei Neuübertragung und Ausschaltung
der eigentlichen Erreger zur Entwicklung kommen, oder dafs
die eigentlichen Erreger, wenn ihre Anpassung bei Neutiber-
tragung gelingt, Form und Chemismus ändern, um einzusehen,
dafs hier in der Tat eine Quelle von Mißverständnissen vorliegt-,
die geeignet sind, in unsere Literatur der Gärungserreger Zwie-

164 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

tracht und Unfrieden zu säen, was auch in der Tat in hohem
Marse der Fall ist.

Nur die strengste Kritik, und das immer wiederholte Aus-
gehen von Sporenreinmaterial kann hier Aufklärung schaffen.

Ein anderer Weg, um über den Prozefs der Granuloseein-
lagerung Aufschlufs zu gewinnen, ist der, dafs man sich die
Frage stellt, ob das Auftreten dieser Substanz für die Versporung
dieser Bakterien nötig ist. Man kann sehr leicht zeigen, dafs
dies keineswegs der Fall ist, dafs diese Bakterien auch ohne
Granuloseaufspeicherung versporen können.

Durch Wahl eines geeigneten Nährbodens, der keine gröfseren
Mengen von Kohlehydraten enthält (steriler Rindermuskel), und
Anwendung eines altbekannten Kunstgriffes gelingt dies nach
folgendem Rezept:

Auswahl spekulierender Rassen, Übertragung auf sterilen
Rindermuskel — sobald die ersten Sporen gebildet, wird vor-
sichtig pasteurisiert — die Stäbchen und minderwertigen Sporen
gehen zugrunde, Übertragung auf Rindermuskel — neuerlich
Versporung — neuerlich Pasteurisierung — nach ungefähr
6 — 7 maliger Wiederholung bekommt man nun Sporen, die
folgende Eigenart zeigen. Sie keimen aus, die Stäbchen teilen
sich und lenken bald, nahezu gleichzeitig in eine überaus gleich-
artige und regelmäfsige verlaufende Versporung. An einein Ende
sitzt die Sporenanlage, das Stäbchen ist dabei mäfsig und ziem-
lich gleichmäßig vergrößert, Granulöse fehlt oder tritt nur
vorübergehend in Spuren auf (s. Bd. 48, T. I, Nr. 4, 5, 6).

Wenige Stunden nach diesem Vorstadium rückt die Spore
wie auf Kommando in die Mitte, wobei gleichzeitig Glanz und
das ablehnende Verhalten gegenüber Gentianaviolett auftreten.
Die reifen Sporen, auf frischen Nährboden gebracht, keimen oft
fast ausnahmslos aus.

Wir haben nun durch geeignete Züchtung bei einer Bakterien-
art zweierlei verschiedene Versporungsformen hervorgerufen.
Zwischen beiden gibt es Übergänge und ein Heer von Zellen,
die in frühem oder spätem Stadium der Versporung vorzeitig
verunglücken. Die Übergänge und die Mifsbildungen sind so

Von R. Grafsberger. 165

häufig, dals wir sogar besondere Bedingungen einhalten müssen,
um sie auszuschließen. Derartiges kommt bei vielen anderen
Bakterienarten vor.

Ich verweise hier auf die eigentümliche Form der Ver-
sporung, wie wir sie so oft beim Ödembazillus unter dem Ein-
flufs von Zucker verlaufen sehen. Es werden hier (s. Bd. 48,
T. VII, Nr. 39 u. 40) in einem Stäbchen (Doppelstäbchen mit
ausgebliebener Trennung der Individuen) zwei Sporenanlagen
gebildet, von denen in der Regel eine (oft auch beide) verkümmert.
Die betreffenden Bilder erinnern an bipolar gefärbte Stäbchen,
wie wir sie bei manchen, nicht sporulierenden Bakterienarten an-
treffen. Es mag sich hier vielleicht manchmal in der Tat um
mifslungene Ansätze zur Versporung handeln.

Wir müssen alle die genannten abnormen Versporungsfälle
genau kennen, wenn wir z. B. den Vorgang der normalen Ver-
sporung studieren. Ein Gesichtsfeld solcher sporulierender Bak-
terien ist oft einem Schlachtfeld, reich an Krüppeln und Leichen,
zu vergleichen. Es liegt nun die Gefahr nahe, dafs solche Morpho-
logen, die in ihren Kulturen immer nur auf die Art und nicht
auf die Individuen Rücksicht nehmen, absammeln gehen, sie
uehmen, indem sie aus dem Nebeneinander ohne weiteres auf das
Nacheinander schliefsen, von der einen Zelle ein Körnchen, von
der anderen ein Fäserchen, und konstruieren so ein überaus farben-
und namenreiches Bild der normalen Versporung. In der Wirk-
lichkeit verläuft aber die normale Versporung anscheinend unter
dem Bild sehr einfacher Formen. Der biochemische Vorgang
hierbei ist gewifs sehr kompliziert — dafür sprechen schon die
häufigen Störungen im Ablauf — doch es scheint, als ob die
normalen Stäbchen ihre Geheimnisse ungern preisgeben.

Ich will allerdings nicht verschweigen, dafs unter Umständen
solche überaus normale Sporen ein eigentümliches Verhalten
zeigen. Die Stäbchen, die aus ihnen ausschlüpfen, vermehren
sich nur einige Male, sie wenden sich lange, bevor der Nähr-
boden auch nur halbwegs ausgenutzt ist, neuerlich zur Ver-
sporung, sie sind sozusagen übertrieben vorsichtig geworden.

166 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

Recht lehrreich sind Versuche, welche zeigen, dafs die derart
gewonnenen normalen Sporen nun auch bei neuerlicher Aussaat
in zuckerhaltige Nährböden, keineswegs mehr dieselbe Neigung
zur übertriebenen Einlagerung von Granulöse besitzen, sie sind
erblich für einige Zeit von der spezifischen Degeneration zurück-
gestoßen bzw. geheilt.

Zu einem andern, bemerkenswerten Zustand des Rausch-
brandbazillus gelangen wir, wenn wir Kulturbedingungen wählen,
bei welchen eine rasche Aufeinanderfolge von Generationen ohne
einfallende Versporung befördert wird.

Ich verweise zunächst ein Bild einer solchen Rauschbrand-
kultur, die sich am Übergang zum asporogenen Zustand befindet
(s. Bd. 48, T. II, Nr. 7).

Man sieht (bei Jodfärbung) die Granulöse in feinen Körnchen
diffus verteilt auftreten, die Versporung bleibt aus. Mit Gentiana
gefärbt zeigen diese abnormen Zellen einen sehr schönen wabigen
Bau. Bei normalen Zellen sind die Wabenräume viel kleiner.
Bei ganz normalen so klein, dafs man sie nicht sieht.

Man gelangt derart oft mit einem Schlage, einer einzigen
Kultur zu asporogenen Rauschbrandkulturen. Mit diesem Zustand
ist eine weitgehende Gestaltsänderung verbunden, die Stäbchen
werden plump und, was das wesentlichste ist, während die nicht
denaturierten Rauschbrandbazillen im Extrem lebhaft beweglich
und peritrich begeifselt sind (s. Bd. 48, T. I, Nr. 2), sind diese
asporogenen Zustände vollkommen unbeweglich, geifsellos(s. Bd.48,
T. V, Nr. 25). Dieser Zustand wird vererbt und unter Umstän-
den zähe festgehalten.

Die Übergänge zwischen beiden Zuständen sind ungemein
zahlreich, hier finden sich alle Kombinationen vor, indem nicht
selten die Stäbchen bereits plumpe Gestalt besitzen, aber noch
reichlich Geifsel tragen.

Der eben besprochene asporogene, geifsellose Typus ist in-
sofern recht interessant, als auch andere Buttersäurebakterien
einen derartigen Dimorphismus aufweisen. Der Erreger der
häufigsten Form der menschlichen Gasphlegmone ist ein solcher

Von R. Grafeberger. 167

unbeweglicher Zustand eines Buttersäurebazillus, der von seinem
Entdecker als eigener Bazillus isoliert und beschrieben wurde.
Man kann, allerdings nur dann, wenn dieser unbewegliche
Zustand nicht durch zu häufige Aufeinanderfolge gleichartiger
Züchtung fest vererbt ist, leicht Rückschläge erzielen und sieht
dann wieder Sporen und Geifseln auftreten.

Auch dieser asporogene, geifsellose Typus ist streng anaerob.
Passini hat eine sehr verwendbare und einfache Methode an-
gegeben, solche asporogene Zustände wieder sporogen zu machen
(Passini, Jahrbuch f. Kinderheilkunde 1903, Zeitschrift f.
Hygiene 1905).

Bemerkenswerte Differenzen ergeben sich nun, nach den
Beobachtungen Schattonfrohs, wenn man die in den Gär-
kolben gebildeten Gärprodukte analysiert, es zeigt sich, dafs im
einen Extrem (bewegl. Zustand) bei der Vergärung von Zucker
überwiegend Buttersäure gebildet wird, während im anderen
Extrem (unbeweglicher Zustand) überwiegend Rechtsmilchsäure
ausgeschieden wird. Diese Unterschiede zeigen sich nur in den
Extremen ausgebildet, bei den Übergangszuständen ist oft der
eine Chemismus mit den anderen Formen verbunden.

Sehr instruktive Bilder liefern nicht selten Kolonien des
beweglichen Zustandes, die der Denaturierung nahestehen, wenn
wir von einer solchen Kolonie in Zuckeragarstich übertragen. Es
tritt ein ausgesprochener Dimorphismus auf, indem die zur
Entwicklung gelangenden Stäbchen zwei Wege einschlagen, die
einen bleiben dünn und beweglich, die anderen werden dick und
unbeweglich (s. Bd. 48, T. X, Nr. 54).

Es wäre weit gefehlt, wenn wir etwa den früher geschilderten
Chemismus des Rauschbrandbazillus, bei welchem sich dieser als
typischer Kohlehydratvergärer beweist (Bildung von Buttersäure
oderRechtsmilchsäure), als den einzigen, zur Beobachtung kommen-
den ansehen wollten, sondern man kann leicht zeigen, dafs bei ge-
eigneter Wahl des Nährbodens der Rauschbrandbazillus im Sinne
eines Fäulnisbazillus ein energischer Eiweifszersetzer ist. Nach
der gegenwärtigen Auffassung von Schatten froh und mir ist

168 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

der Rauschbrandbazillus, so wie er sich im Tiere findet, am
Übergang zwischen Fäulnis und Gärung. Lassen wir ihn in
diesem Übergangszustand in geeigneten, Dextrose enthaltenden
Nährböden zur Entwicklung kommen, so scheidet er seine Gifte
aus. Ich will auf diesen abseits liegenden Gegenstand nicht ein-
gehen, sondern mich auf das morphologische beschränken.

In dieser Hinsicht ist es nun bemerkenswert, dafs wir, wenn
wir von primären Kolonien des Rauschbrandbazillus ausgehen
und auf geeignete Nährböden übertragen (Vermeidung von Zucker),
auch parallel mit dem Chemismus (Fäulnis) eine Alteration der
Versporungsvorgänge beobachten können. Die Stäbchen bleiben
beweglich, zart, sie entwickeln am einen Ende eine Sporenanlage,
dieselbe ist aber scharf vom übrigen Stäbchen abgegrenzt, sie
bleibt bei der Reife am Ende (vgl. Bd. 48, T. IX, Nr. 52).

Dieser Modus der Versporung ähnelt ganz jenem, wie wir
ihn bei einem anderen typischen anaeroben Fäulnisbakterium,
dem Bienstockschen Bakterium zu beobachten gewohnt sind.
Auch hier gibt es reichlich während der Sporulierung Unglücks-
fälle.

Eine überaus oft zu beobachtende Versporungskrankheit ist
die, dafs die Sporenanlagen massenhaft unreif abfallen und sie
liegen dann im Gesichtsfelde wie Kokken verstreut umher.

Auch diese Zustände werden nun durch Sporulierung fixiert,
erblicher Besitz, derart, dafs nun bei Übertragung in Zucker-
bouillonkolben keineswegs mehr die typische Buttersäuregärung,
die typische Klostridiumform zur Entwicklung gelangt, ebenso
wie umgekehrt typische Klostridien, auf zuckerfreie Nährböden
geimpft, zunächst noch reichlich Granulöse bilden. Die weitere
Verfolgung der Übergänge und Rückschläge ist derart kompliziert,,
dafs sie sich für eine kurze Darstellung nicht eignet.

Es bleibt uns noch eine Aufgabe zu lösen, das Verhältnis
des Rauschbrandbazillus zu den aeroben Bakterien festzustellen.
Die Bemühungen, streng anaerobe Bakterien in aerobe umzu-
wandeln, sind verhältnismäfsig recht alt. Zum Teil handelt es
sich hier freilich um Beobachtungsfehler. So wurde die Tat-
sache, dafs bei üppiger Entwicklung von streng anaeroben

Von R. Grafsberger. 169

Bakterien in flüssigen Nährböden eine Übertragung grösserer
Mengen der Kultur in ausgekochte Nährflüssigkeit zum An-
wachsen führt, auch wenn für Abschlufs gegenüber dem O der
Luft nicht Sorge getragen wird, falsch gedeutet. Die einmal
im Gang befindliche Gärung hält durch die beständige Produk-
tion von CO a und anderen Gasen den Nährboden andauernd
hinreichend frei von 0. Man darf hier nicht von aerobem
Wachstum sprechen. Andere Beobachter wieder gingen so vor,
dafs sie aus Spontangärungen gleichzeitig aerobe und anaerobe
Bakterien züchteten und als aerobe bzw. anaerobe Formen der-
selben Bakterien beschrieben.

Sie mögen hie und da Recht gehabt haben, sind aber wohl
den Beweis für die richtige Anschauung schuldig geblieben, der
nur durch Überführung von strengen Beinkulturen von der An-
aerobiose zur Aerobiose erbracht werden kann. Auch mufs
betont werden, dafs man bei der Deutung von Befunden, darin
bestehend, dafs aus lange gärenden Kolben nach Wochen aerob
wachsende Bakterien gezüchtet werden, sehr vorsichtig sein mufs.
In solchen lange gärenden Kolben, die eventuell mehrmals ge-
öffnet werden, kommt es doch gelegentlich zur Verunreinigung
durch aerobe Bakterien. Es mufs deshalb der Wunsch aus-
gesprochen werden, diese sog. Umzüchtung ausschliefslich auf
festen Nährböden, wo die Verhältnisse sich gut überblicken
lassen, vorzunehmen. Ich möchte übrigens die Gelegenheit er-
greifen, hier auf einige Erscheinungen hinzuweisen, die wir in
unseren Rauschbrand-Giftkolben, die sich oft durch 14 Tage in
Nachgärung befinden, feststellen konnten.

Wir verwenden als geeignete Zustände zum Impfen dieser
Kolben sog. halbdenaturierte Rauschbrandbazillen. In diesen
Kolben kommt es nun während der Nachgärung (wobei die
zuerst ausgeschiedene Rechtsmilchsäure in Buttersäure vergoren
wird) zu üppigen Zoogloeen von Fäden und Ketten, die
sehr häufig ihren Rückschlag zum sporulierenden Zustand durch
herdweise Einlagerung von Granulöse verraten (s. Bd. 48, T. IV,
Nr. 19—24).

170 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

Solche Vegetationen geben oft ganz das Bild von Leptothrix*
fäden 1 ), sie gleichen ihnen anch darin, dafs es nicht gelingt, sie
mit Erhaltung der charakteristischen Formen herauszuzüchten.
Aerobe und anaerob angelegte Kulturen bleiben steril, oder es
entwickeln sich charakteristische Rauschbrand -Klostridien-Kultu-
ren, was kaum als Rückschlag der Leptothrixformen aufgefafst
werden darf, sondern so gedeutet werden mufs, dafs es gelegent-
lich in solchen Spätgenerationen unter Zerfall der Fäden in
Ketten zum Auftreten von Clostridiensporen kommt.

Solche Sporen liefern Kulturen, die brillant milchsauren
Kalk unter Entstehung von buttersaurem Kalk vergären und noch
eine Besonderheit zeigen. Die Kulturen, in Kalziumlaktat-
Bouillon gezüchtet, zeigen stets bewegliche Stäbchen, die, bei nicht
zu hoher Konzentration des Kalziumlaktat, nicht versporen und
keine Granulöse bilden, und diese Eigenheit, durch beliebig viele
Generationen fortgezüchtet, bewahren. Trotzdem behalten sie die
Neigung für diese eigentümliche Stoffwechselanomalie. Läfst man
zur 10. Kulturfolge einen Tropfen steriler Dextroselösung fliegen,
so zeigen sich nach 2 Stunden massenhaft Klostridien. Trotz
fehlender Gelegenheit zur Entwicklung von Klostridien , ist die
Neigung zur Entstehung solcher Formen durch 10 Kulturfolgen
erhalten geblieben.

Setzt man hingegen gröfser Mengen (mehrere Prozent) milch-
sauren Kalk hinzu, so entstehen Ketten mit mittelständigen
Sporen (s. Bd. 48, T. IV, Nr. 19).

Es ist uns aber, um dies nochmals zu wiederholen, niemals
gelungen, aus diesen gärenden Kolben aerobwachsende Rausch-
brandkulturen zu erzielen.

Eine kurze Überlegung und Berücksichtigung der in der
Literatur vorliegenden Erfahrungen läfst überhaupt vermuten,
dafs gerade solche Zustände, wie sie sich bei lebhafter Gärung
entwickeln, wobei in den hier in Betracht kommenden Fällen
die Empfindlichkeit gegenüber dem freien Sauerstoff gesteigert

^ Beyerinck hat schon 1893 in seiner Arbeit über das Butylferment
auf derartige Leptothrixformen von Buttersäurebakterien autmerksam gemacht.

Von R. Grafsberger. 17 X

wird, kaum geeignet sind, zur Aerobiose überzuleiten. Man hat
im Gegenteil alles zu versuchen, um energischere Gärung zu ver-
meiden. Weiters ist zu berücksichtigen, dals in vielen Fällen,
die mit dem Fortschreiten des Alterns der Kultur sich geltend
machenden Verhältnisse — vielleicht die sich ansammelnden
Zersetzungsprodukte — zu einer Schwächung der Individuen
führen, welche sich — viele im früheren angeführten Beispiele
belegen dies — im Sinne einer gesteigerten Empfindlichkeit bei
Übertragung in neuen Nährböden äufsern.

Ein Weg, der anscheinend mit Erfolg bei einigen anaeroben
Bakterienarten betreten wurde, besteht darin, dafs man die
Bakterien allmählich an gröfsere Sauerstoffspannung gewöhnt.
Derartige gelungene Versuche liegen für den Tetanusbazillus
vor, auch beim Rauschbrandbazillus ist behauptet worden, dafs
lang fortgezüchtete Laboratoriumskulturen allmählich weniger
empfindlich gegenüber dem Sauerstoff werden.

Es scheint, dafs hier unter Umständen eine von Haus aus
bestehende geringere Empfindlichkeit mancher frisch isolierter
Bakterienrassen vorliegt. Allerdings sind die hier vorliegenden
Verhältnisse noch wenig systematisch untersucht, — ich will
nur anführen, dafs nach einer Literaturangabe Belfanti die
Umzüchtung des Tetanusbazillus in eine aerobe Bakterienart unter
Auftreten der sonderbarsten Formveränderungen beobachtet hat.

Da mir bisher die betr. Originalarbeit nicht zugänglich war, und
ich mich anderseits mit entsprechenden Versuchen am Tetanus-
bazillus nicht beschäftigt habe, bin ich nicht imstande zu äufsern,
ob die von einzelnen Autoren stark angezweifelten Befunde stich-
haltig sind oder auf Täuschung beruhen. Es sei hier bemerkt,
dafs bei einer anderen Gelegenheit eine kritische Übersicht über
die Angaben der Literatur, soweit sie das vorliegende Thema
betreffen, gegeben werden wird.

Ich kehre nun zu eigenen Versuchen, am Rauschbrand-
bazillus angestellt, zurück.

Meine Versuche begannen zunächst damit, stark sporulierende,
hochvirulente, frisch aus Tiermaterial gezüchtete Stämme zu Ober-

172 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

flächenwachstum auf Agar zu britigen. Es ist nun keineswegs
leicht, unter diesen Verhältnissen Spuren von Sauerstoff zu ent-
fernen, bzw. fernzuhalten.

Gerade die Empfindlichkeit solcher Rassen gegenüber dem
freien Sauerstoff ist aber eine ganz exorbitante. Man erlebt bei
den Versuchen, diese Organismen auf der Oberfläche zum aus-
giebigeren Wachstum zu bringen, sehr auffallende Befunde, die
man, wie ich jetzt glaube, doch mit Recht auf den schädigenden
Einflufs von Spuren freien Sauerstoffs zurückführen darf.

Ich verweise zunächst auf ein derartiges Bild einer 24 Stunden
alten Kultur auf Schrägagar (s. Bd. 48, T. XI, Nr. 68 u. 69).

Man zweifelt bei diesem Anblick fast daran, dafs es sich
um eine Reinkultur handelt. Kaum eine Zelle gleicht der
anderen. Jede Zelle scheint ein Individuum zu sein, die glänzende
Spore ist bald übertrieben grofs, bald winzig klein.

Bei genauerem Zusehen sieht man aber, dafs es sich nicht
um Individuen handelt, sondern um Karikaturen, um verunglückte
sporulierende Stäbchen. Das Auftreten von Karikaturen ist aber
der sicherste Beweis einer mifslungenen Anpassung. Die Jod-
reaktion zeigt uns sofort, dafs in der Tat gerade die am meisten
von der Norm abweichenden Zellen am stärksten mit Granulöse
beladen sind (s. auch Bd. 48, T. XI, Nr. 67 u. T. IV, Nr. 41,
42, sowie den zugehörenden Text).

In den vorerwähnten Beispielen sahen wir eine Anzahl von
Bildern, die uns Mifserfolge bei dem Versuche vorführen, unsere
Stäbchen dem Oberflächen Wachstum anzupassen.

Ich wählte nun eine Versuchsanordnung, bei welcher trotz
Oberflächenwachstum die Luft in der denkbar exaktesten Weise
von den Kulturen ferngehalten wird.

Die Nährböden (Agar) werden über der freien Flamme lange
ausgekocht, rasch abgekühlt, es wird ausgesät und sofort erstarren
gelassen. Die Schalen werden augenblicklich in die von
Schattenfroh und mir modifizierte Botkinsche Glocke ge-
bracht und der Raum durch einen starken Strom von H rasch
ausgefegt, wobei dafür gesorgt wird, dafs die Reinigung des H. so
weit geht, dafs eine Vorlage, die alkalische Pyrogallollösung enthält,

Von R. Grafeberger. 173

nicht gebräunt wird. Unter diesen Umständen entwickeln sich
nach Durchbruch der Kolonien an die Oberfläche der Gallerte
zarte Rasen, die gut färbbare Stäbchen enthalten. Wir
entnehmen die Schalen dem Apparat erst nach 48 Stunden,
wobei für absolute Fernhaltung von O-Zutritt Vorsorge getroffen
ist Übertragen wir nun von den am weitesten vorgerückten
Randpartien auf Schrägagar, so sehen wir auf diesem Nährboden,
obwohl unter gewöhnlichen aeroben Verhältnissen gehalten, nach
24 Stunden auf der Oberfläche sehr zarte Tautropfenkolonien.
Das mikroskopische Präparat zeigt bewegliche Stäbchen (s. Fig. 1
der vorl. Arbeit). Im Eondenswasser der senkrecht gestellten
Röhrchen zeigen sich Gasblasen. Wir haben somit mit einem
Schlage den Rauschbrandbazillus zu aerobem Wachstum befähigt.
Durch strengste Anaerobiose und Oberflächenwachstum sind unsere
Stäbchen fakultativ aerob geworden. Wie ist dies zu erklären?
Hier ist von einer Angewöhnung nicht die Rede , viel eher von
einer Heilung. Wir haben, indem wir den Sauerstoff durch eine
Anzahl von Generationen (48 Std.) diesen überaus empfindlichen
Mikroorganismen ferngehalten haben, ihre Empfindlichkeit ver-
erbbar herabgesetzt.

Diese primäre aerobe Form schlägt in Agarstich oder Zucker-
agarstich übertragen zurück in anaerobe Zustände. Es tritt sofort
wieder Versporung ein, die bei dem Oberflächenwachstum
ausblieb. Es entstehen schliefslich Stäbchen mit Köpfchensporen
und vereinzelt dicke Stäbchen mit mittelständigen Sporen.

Die aeroben Kolonien bleiben in ihrem Wachstum beschränkt,
nach 48 Stunden treten Scheinfäden auf, dann sistiert das
Wachstum.

Es war nun zu untersuchen, ob sich nicht durch geeignete
Züchtung auch eine unbewegliche aerobe Form des Rausch-
brandbazillus gewinnen läfst. Dies gelingt in der Tat.
Und zwar auf folgende Weise. Wir übertragen von solchen
aeroben Kolonien auf Schräggelatine und züchten bei 22°. Das
ist ein schwerer Eingriff, schroffer Nährbodenwechsel und Tem-
peraturwechsel. Die Vegetation geht sehr langsam an. Nach
48 Stunden zeigt sich am Stich ein zarter Belag. Die Kulturen

174 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

nehmen aber tagelang an Üppigkeit zu. Bald treten diffus oder
vereinzelt feinste büschelförmige Ausläufer aus, die aus Schein-
fäden bestehen (vgl. Bd. 48, T. X, Nr. 62).

Impfen wir nun von solchen Gelatinekulturen neuerlich auf
Schrägagar und züchten wieder bei höherer Temperatur, so wird
die Neigung zum Auftreten von Scheinfäden beibehalten.

Darin besteht das Wesen der zum Fortschnitt neigenden Bak-
terien, dafs sie die in der Kultur erworbenen Eigenschaften (z. B.
Scheinfäden) unter Umständen bei Neuübertragung beibehalten
und nicht rückschlagen wie viele andereßakterien, die zwar auch
in alten Kulturen Fäden bilden, bei Neuübertragungen aber in
einfache Stäbchen rückschlagen.

Die früher scharf randigen , glashellen aeroben Kolonien
senden zopfig gewundene Ausläufer aus und gewinnen nach
48 Stunden das Aussehen von Kolonien aus der Milzbrand-
gruppe (s. Fig. 5 dieser Arbeit).

Im Kondenswasser hingegen entwickeln sich schleimig-
fadenziehende krümmelige Massen.

Das mikroskopische Bild ist höchst charakteristisch (s. Fig. 6
u. 10 dieser Arbeit).

Der Rauschbrandbazillus sucht eine neue Form. Fast scheint
es, als wollte er sich an der heute bei den niederen Organismen
herrschenden Mode, Kunstformen zu versuchen, beteiligen, er
bildet Schnörkel. Es handelt sich hier um eine schleimige
Degeneration der Bewegungsorgane. Die Organismen bekommen
oft Kapseln. Man beobachtet partiellen Verlust der Geifseln,
asymmetrischen Bau des Plasmas und Aufdrehung der Leibes-
substanzen. Das ist jedoch nur ein Übergangszustand.

Man sieht in Fig. 10 neben den Schnörkeln schon wieder
einfache Linien, lange Ketten von plumpen Stäbchen mit ab-
gestutzten Enden, Bilder, die in der Tat an Präparate aus Milz-
brandagarkulturen erinnern.

Diese Ketten sind vollkommen unbeweglich, es tritt im
Extrem ein Verlust der Geifseln auf.

Von R. Grafsberger. 175

Derartige Kolonien lassen sich nun bei Erhaltung der
charakteristischen Formen auf Schrägagar unbegrenzt weiter-
übertragen.

Die Ähnlichkeit mit den Kolonien des Milzbrandbazillus ist
aber nur eine beschränkte.

Die Vegetationen sind zwar ebenso fadenziehend, sie er-
reichen aber stets nur eine raäfsige Üppigkeit, sie werden
niemals konfluierend, es werden niemals mittelständige Sporen
gebildet, und was das wesentliche ist, sie schlagen bei geeigneter
Behandlung in frühere Zustände zurück. 1 )

Schon Präparate aus dem Kondenswasser, in welchen sich
fadenziehende Krümmel entwickeln, zeigen den Rückschlag zur
beweglichen Form, sie enthalten lange Konvolute von Schnörkeln.
Die Organismen kehren aber prompt in die endständig sporu-
lierende anaerobe Form zurück, wenn wir sie auf Agarstich über-
tragen und aerob aufbewahren. Nach 24 Stunden zeigen sich
zartere Fäden und Ketten (s. Fig. 9) , nach 48 Stunden erfolgt
Zerfall in Stäbchen (s. Fig. 7). Mit Auftreten der endständigen
Sporenanlage bei nochmaliger Übertragung auf Agarstich zarte
Stäbchen (Fig. 4) oder Köpfchen-Sporen (in Bouillon Fig. 2), von
hier oder von Agarstich zurück sofort wieder Schnörkel und
Milzbrandformen .

Diese Kulturen sind derart empfindlich gegen wechselnde
Reize, dafs sie sich in vorzüglicher Weise zur Anstellung von
züchterischen Experimenten eignen. Es ist keineswegs für sie
gleichgültig, ob der Agar trocken oder feucht ist, ob man die
Röhrchen legt oder stellt, ob man Kolonien überträgt, die nahe
dem Kondenswasser, oder am oberen Rande sitzen. Man kann
diese Organismen, durch abwechselnde Folge von Agarstich und
Strich zwischen Anpassung und Rückschlag hin und her jagen,

*) Bei Untersuchung einer grösseren Zahl von Rauschbrandstämmen
verschiedener Provenienz ergaben sich Verschiedenheiten hinsichtlich der
mehr oder minder ausgesprochenen Schnörkelbildung der Üppigkeit der
aeroben Kolonien etc. während des Übergangs der verschiedenen Zustände.
Die genaueren Details sowie die Beziehungen dieser Übergangszustände zu
den Spirillen und Kapselpakterien folgen in einer späteren Arbeit.
Archiv für Hygiene. Bd. Uli. 12

176 Über Anpassung and Vererbung bei Bakterien.

man kann sie einmal dünn und beweglich, dann dick und un-
beweglich machen, in Ketten und Fäden, dann als einzelne
Stäbchen erscheinen lassen, man kann sie am Übergang sich in
Schnörkeln winden lassen und durch rechtzeitige Unterbrechung
der wiedererscheinenden Sporulation zum Abwerfen der Sporen-
anlagen (s. Fig. 3) zwingen oder sie derart beeinflussen, dafs
sie zwischen Rückschlag und Fortschritt zweifelnd monströse
Gebilde entwickeln (s. Fig. 8), wobei wir nach Art unserer
Züchter vorgehen, die mit Liebe und Grausamkeit ihre nütz-
lichen Karrikaturen ziehen.

Meine Studien über das Verhalten dieser verschiedenen
Zustände gegenüber spezifisch-agglutinierenden Seris sind noch
nicht abgeschlossen, wohl aber kann ich auf eine andere bio-
chemische Tatsache hin weisen. Als differential-diagnostisch
wichtiges Mittel dient zur Untersuchung von Bakterienarten die
Grammfärbung.

Hier zeigt sich nun, dafs die einen Formen gramnegativ
sind, während die anderen, oft die Schnörkel und Ketten, relativ
gramfest sind. An einem und demselben Faden läfst sich bei
Übergangskulturen streckenweise das differente Verhalten gegen-
über der Grammfärbung verfolgen.

Sind die bisher mitgeteilten Befunde geeignet, die Annahme
einer näheren Verwandtschaft zwischen Milzbrandbazillus und
Rauschbrandbazillus zu begründen? Sind wir mit einem Worte
berechtigt, diese beiden anscheinend so grundverschiedenen
Bakterienarten als verwandt zu bezeichnen? Ich habe bereits
darauf hingewiesen, dafs die Ähnlichkeit, morphologisch betrachtet,
eine beschränkte ist.

Versuche, den Milzbrandbazillus dem Rauschbrandbazillus
zu nähern sind mir bisher nur bis zum Auftreten von Schnörkeln
gelungen (welche Wuchsform ja bereits bekannt ist). Weiter will
er nicht. Man kann am Ende einwenden, unter Hinweis auf die
bekannte Neigung des Rauschbrandbazillus zur Bildung von
Karikaturen, dafs es sich um eine rein äufserliche Ähnlichkeit
handelt, hervorgerufen durch züchterische Mifshandlung unter
unnatürlichen Bedingungen. Ja, aber vielleicht ist auch der

Von R. Grafsberger. 177

Milzbrandbazillus in seinen vorscbriftsmäfsigen Formen nur eine
Karikatur, der unbewegliche Zustand eines beweglichen Stäb-
chens (derartige bewegliche milzbrandähnliche Stäbchen sind be-
kanntlich im Boden verbreitet). Darüber kann kein Zweifel be-
stehen, die Natur versteht das Variieren noch viel besser als
wir, und auch das Mifshandeln, speziell dort, wo es sich um
Wechselwirkung zwischen verschiedenen Organismen dreht.

Wir sind heute nicht sicher, ob nicht gut beschriebene
asporogene, unbewegliche Stäbchen, die wir mit der Nahrung auf-
nehmen, als anders geartete, sporogene, bewegliche Bakterien den
Darm verlassen oder umgekehrt.

Ich will auch ganz kurz die Frage der Virulenz bzw. Patho-
genität streifen. Gelingt es etwa in diesem Sinne, den Rausch-
brandbazillus in den Milzbrandbazillus umzuwandeln? Davon
ist nicht die Rede. Die einmal an unsere Nährböden so weit
angepafsten, durch Umzüchten veränderten Organismen sind
ebenso, wie die bei solchen Verhältnissen veränderten Milzbrand-
bazillen harmlos, avirulent. Bei den einschneidenden Verände-
rungen des Biochemismus ist der Verlust der Virulenz, dieser
seltenen und hochangesebenen Eigenschaft, nicht zu verwundern.

Ich habe mich wiederholt bemüht, von der Vorstellung aus-
gehend, dafs es sich bei der Giftbildung der Bakterien um das
Erscheinen abnormer Stoffe als Begleiterscheinung von ungeord-
neten Übergängen aus einem Biochemismus in einen anderen
(z. B. Fäulnis in Gärung) handle, durch schroffen Nährboden-
wechsel und wiederholte Züchtung unter Bedingungen, welche
solchen Übergängen entsprechen, harmlose Bakterien virulent
oder wenigstens giftig zu machen. Ich habe alle Mittel
versucht, die Stäbchen aufzureizen. Alles vergeblich. Wir
können die unseren Kulturen angepafsten harmlosen Bakterien
nicht mehr virulent machen. Wir sind ja kaum imstande,
abklingende Virulenz aufzuhalten, noch viel weniger Viru-
lenz künstlich hervorzurufen. Dazu reichen offenbar unsere
Mittel nicht aus. Es ist das Vorrecht der Natur, diese
Zustände im Kampf ums Dasein zu erzeugen, und in ihrer

Eigenart mehr minder dauernd festzuhalten, in dem Kampf ums

12»

178 Über Anpassung und Vererbung bei Bakterien.

Dasein, in dem zwar in der Regel die schwächeren Individuen
unterliegen, jedoch gelegentlich, wenn sich die Organismen gegen-
seitig vergiften, die schwächeren die stärkeren umbringen. Wie
dem auch sei, die vorliegenden Erfahrungen berechtigen uns zu
einer freieren Auffassung in bakteriologischen Dingen. Diese
freiere Auffassung kann nicht darin bestehen, dafs wir sagen,
dafs alle Bakterien gleich sind. Das wäre biologisch taktlos.
Wir werden nach wie vor behaupten müssen, die Zustände dieser
verschiedenen Bakterienarten sind streng spezifisch, doch ihre
Träger sind vielleicht näher verwandt, als wir heute zugeben
wollen. Wir müssen nur früh mit unserer variierenden Behand-
lung eingreifen, sobald wir sie aus der Natur bekommen, wo so
häufig Übergangszustände vorkommen, und wir dürfen nicht
hiermit warten, bis sie uns aus Kr als Laboratorium in Prag
zugeschickt werden.

Die Übergangszustände sind es also, die unser ganzes
Interesse verdienen.

Die Natur ist nach einem berühmten Ausspruch alle Augen-
blicke am Ziele. Sie schiefst aber bekanntlich auch alle Augen-
blicke übers Ziel. Sehr oft, wenn sie am Ziele ist, zeigt sie sich in
rätselhaft einfacher Form. Wenn sie aber ihr Ziel verläfst und
zum Sprunge auf ein neues Ziel ansetzt, wenn sie sich selbst
nicht ganz sicher fühlt und dies durch bizarre Formen verrät,
dann können wir sie fassen. Daher mufs unsere Beobachtung
an sicheren Formen beginnen, unser Experiment an Übergangs-
zustände anschliefsen.

Gerade durch die in unserer Technik übliche und zum Teil
berechtigte, etwas schablonenhafte Gleichheit der kulturellen Be-
handlung verschiedener Bakterien werden die Differenzen der
Zustände recht markant und gut fixiert.

Ein Beispiel: Wir können, von einem Rauschbrandbazillus
ausgehend, zehn verschiedene Zustände herstellen. Um diese
zehn verschiedenen Zustände auf denselben Zustand zurückzu-
führen, müfsten wir sie alle verschieden behandeln.

Behandeln wir sie aber gleich, dann behandeln wir sie
verschieden, denn dann wirken gleicher Nährboden und

Von R. Grafsberger. 179

gleiche Bedingungen auf diese verschiedenen Zustände einer
Bakterienart als ganz verschiedener Reiz, und wir treiben unter
Umständen die Extreme noch mehr auseinander.

Ich bin am Schlüsse. Durch die ganze Reihe der vor-
geführten Bilder konnten wir den gestaltenden Einflufs des
Fortschrittes erkennen, aber auch den der Krankheit. Die
Unterscheidung zwischen beiden ist oft sehr schwierig zu
treffen. Oft stehen wir zweifelnd und wissen nicht recht,
sollen wir in einer Erscheinung einen Fortschritt oder eine
Degeneration erblicken. Es geht uns eben auch hier ähnlich
wie bei dem Studium der höheren Organismen. Wie dem auch
sei, wir dürfen, wenn wir dem Zug der in der Entwicklung nach
oben fortschreitenden Organismen folgen, neben dem gestaltenden
Einflufs des Fortschritts nicht den karikierenden Einflufs der
Krankheit übersehen. Die Krankheit begleitet den Zug, sie
marschiert gleich der bekannten Person, bald vorne, lustig
springend, die Schellenkappe schwingend, sich auf den Kopf
stellend und Purzelbäume schlagend. Dann tritt sie, Grimassen
schneidend, in die vorderste Reihe der Marschierenden ein.
Jetzt schleicht sie erschöpft dem Zuge nach, hier verschwindet
sie, dort taucht sie wieder auf. Sie begleitet den Zug, angefangen
von den Stäbchen, den Runen der Natur.

Bemerkungen zu den Tafeln.

Die vorliegenden Photogramme geben ein Beispiel für den Formenkreis,
wie er sich in einem speziellen näher studierten Fall des Übergangs vom
Rauschbrandbazillus in den aeroben Zustand entwickelte.

Fig. 5 zeigt eine 40 fach vergrößerte Kolonie. Die übrigen Photogramme
sind bei 1000 fach er Vergröfserung aufgenommen. (Die Aufnahmen wurden
von dem Verfasser im Privatlaboratorium des Universitätslehrers Herrn
Hinterberger hergestellt.)

iiv für Hygiene BdLIE.

Tafel 1.

Grassberger. UeberAnpassungurul^^ibiing bei Bakterien.

i^^j&$&?*

ort« '/s!N

Fig.l.

Kg.2.

Fig.3.

*• Ä

Fig.*.

Fig.b.-

Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen
geimpfter Tiere.

Von

Dr. med. A. Nifsle.

(Aas dem Hygienischen Institut der Universität Berlin. Direktor: Geh. Med.-
Rat Prof. Dr. M. Rabner.)

(Mit einer Tafel.)

Im folgenden soll eine Reihe von Befunden mitgeteilt und
besprochen werden, die ich am Blut von Laboratoriums-
tieren festzustellen Gelegenheit hatte, welchemitTrypanosoma
Brucei, Tr. equinum oderTr. Lewisii infiziert waren. Ich
beziehe mich dabei auf eine vorläufige Mitteilung der ersten Re-
sultate dieser Untersuchungen, die im November vorigen Jahres
in der hygienischen Rundschau erschienen ist.

Als Impftiere dienten weifse bzw. schwarzweifse Ratten (in
der ersten Zeit ausschliefslich) und weifse Mäuse, soweit sie bei
den betreffenden Trypanosomenarten in Betracht kamen; in
letzter Zeit wurden auch Meerschweinchen mit Nagana- und
Cadärasparasiten infiziert. Ersteres Virus stammte aus dem
hiesigen Institut für Infektionskrankheiten (Togo b engst), wo es
sich als schwaches Gift insofern erwiesen hatte, als es grofse
Tiere nicht tötete (Martini). Die Trypanosomen des Mal de
Caderas verdanke ich Herrn Geheimrat Ehrlich. Die Ratten-
trypanosomen wurden dem Blut einer hier frisch getöteten grauen
Ratte entnommen.

Archiv für Hygiene. Bd. Uli. 13

182 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

Als Mikroskop diente Zeifs Ia mit Kreuztisch, den Objek-
tiven AA, DD und Ölimmersion l j 12% sowie den Okularen 2 und 4.
Als Lichtquelle benutzte ich bei allen feineren Untersuchungen
den Auerbrenner, mit dessen Hilfe sich Konturen und Farben-
unterschiede in vielen Fällen weit genauer feststellen liefsen,
als selbst bei hellem Tageslicht.

Die Herstellung der Blutausstriche geschah nur auf Objekt-
trägern und zwar nach dem Verfahren von Jansco und Rosen-
berger; die Präparate wurden in Alkohol absolutus fixiert und
nach Giemsas älterer Methode gefärbt. Wo die Anwendung
anderer Arten der Fixierung und Färbung der Kontrolle halber
herangezogen werden mufste, sollen diese besonders erwähnt
werden.

Ihren Ausgang nahmen meine Untersuchungen von der be-
kannten Erfahrung, dafs bei der von Neal und Novy ange-
gebenen Züchtung von Trypanosomen auf künstlichen Nährböden
jede Verunreinigung durch Bakterien zum schnellen Absterben
der Kulturen führe und daher sorgfältig vermieden werden
müsse. Ich wollte nun prüfen, ob auch innerhalb des Tier-
körpers den Trypanosomen diese Empfindlichkeit Bakterien gegen-
über zukäme, und wählte dazu den Prodigiosus, da er aus
Blut und Organen leicht wieder zu züchten sein mufste, falls
er überhaupt im Tierkörper am Leben blieb (die Bertarellische
Arbeit war mir damals noch nicht bekannt). Kartoffelröhrchen
wurden mit einem Farbstoff bildenden Institutsstamm beschickt
und bei 22 ° aufbewahrt. Unter diesen Bedingungen entwickelte
sich in 4 — 6 Tagen ein dicker, dunkelroter Belag. Einige Vor-
versuche mit Aufschwemmungen davon in 0,9 proz. Koch-
salzlösung, die Ratten intraperitoneal injiziert wurden, erwiesen
eine enorme Toxizität dieser Kulturen und ferner die Mög-
lichkeit, Farbstoff bildenden Prodigiosus aus dem Herzblut frisch
verendeter Tiere wieder rein zu züchten.

Bei der Durchsicht der Literatur erfuhr ich nun aus dem
eben erwähnten Aufsatz Bertarellis, der mit Prodigiosus-
bouillonkulturen an Meerschweinchen experimentierte, dafs auch
sein Prodigiosus giftige Eigenschaften gezeigt, dafs er sich im

Von Dr. med. A. Nifsle. 183

Tierkörper vermehrt und ferner, dafs er die Fähigkeit besessen
hatte, durch Beimischung mäfsiger Mengen zu Milzbrandin-
jektionen Tiere länger am Leben zu erhalten, als die nur
mit Milzbrand geimpften Kontrolltiere. Dieser letzte Umstand
veranlafste mich, die geplanten Versuche doch mit diesem Bak-
terium, wenn auch unter verändertem Gesichtspunkt, vorzu-
nehmen.

Von der Verwendung von Mäusen als Impftieren wurde Ab-
stand genommen, da die Dosierung des Prodigiosus, ihrer geringen
Widerstandsfähigkeit entsprechend, noch weit mehr Schwierig-
keiten bot, als dies schon bei den ausgewachsenen Ratten der
Fall war, die ausschliefslich für diese Versuche benutzt wurden.

Sobald in den subkutan mit Naganaparasiten geimpften
Tieren eine einigermafsen reichliche Trypanosomenansammlung
erzielt war, die der Zahl nach etwa dem zweiten Tage vor dem
Tode bei den Kontrolltieren entsprach, wurden ihnen Aufschwem-
mungen der 4 — 6 Tage alten Prodigiosuskulturen intraperitoneal
injiziert. Dabei zeigte sich, dafs man unter diesen Bedingungen
meist nicht über eine Dosis von %<) Öse hinausgehen durfte;
kam es doch vor, dafs auch bei dieser Menge die Tiere inner-
halb kurzer Zeit verendeten, zuweilen schon nach */* Stunde.
Bei einer der Ratten, die die Injektion gut vertragen hatte und
auch am nächsten Tage trotz der weiter vermehrten, jetzt sehr
reichlichen Trypanosomen einen verhältnismäfsig munteren Ein-
druck machte, konnte ich nun am Morgen darauf (45 Stunden
nach der Injektion) das Verschwinden der Flagellaten bis
auf ganz spärliche Exemplare konstatieren; das Blut sah heller
als vorher aus, auch war die Zahl der roten Blutkörperchen
deutlich vermindert. In gefärbten Ausstrichpräparaten fiel die
grofse Menge polychromatophiler Erythrozyten, meist zu-
gleich Megalozyten, auf, die die normalen Blutkörperchen oft um
das Vier- bis Fünffache überragten; die Mehrzahl zeigte ziemlich
dunkle blaurote Färbung, der kleinere Teil war heller tingiert.
Schon bei mittlerer Vergröfserung waren in vielen dieser poly-
chromatophilen Blutkörperchen Anhäufungen chromatinroter
Elemente sichtbar, während die orthochromatischen Erythrozyten

13*

184 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

nichts Abnormes erkennen liefsen. Bei der genaueren Unter-
suchung dieser Präparate gelang es mir, einen dunkel gefärbten
Megalozyten anzutreffen, in dem deutlich die Konturen eines
geifsellosen Trypanosomas mit etwas blassem Kern, aber
leuchtendroter Geifselwurzel (Zentrosom) erkennbar waren; der
Körper lag in Hufeisenform, die Plasmaenden waren zugespitzt.
Fig. 1 stellt einen solchen Befund dar, nur sind in diesem Falle
die Plasmaenden abgerundet, so dafs das Gebilde mehr Wurst-
form angenommen hat. Die Wiedergabe der ersten Beobachtung
war mir aus äufseren Gründen leider nicht mehr möglich.

Ähnliche hufeisenförmige Gebilde wurden in diesen Präpa-
raten gar nicht so selten angetroffen, doch waren bei ihnen
die Konturen nicht so scharf und ein Kern, oft auch eine
Geifselwurzel nicht deutlich sichtbar ; es konnte dann nur ausser-
halb des Hufeisens und zwar in seiner Konkavität eine gröfsere
oder kleinere Menge roter Körnchen nachgewiesen werden.
Unter diesen Körnchen, deren Mehrzahl unregelmäfsige Form,
Zahl und Anordnung zeigten, befanden sich nun oft an ein oder
zwei Stellen paarweis aneinandergelagerte, punktförmige
Elemente von l j 6 — Vs P Gröfse, die Ähnlichkeit mit Diplokokken
oder den in Teilung begriffenen Geifselwurzelu eines Trypano-
somas hatten. Sie fanden sich jedoch auch in solchen polychro-
matophilen Erythrozyten, die aufser ihnen nur noch unregel-
mäfsige rote Körnchen oder gar nichts Besonderes aufwiesen.
Diese selben Gebilde konnte ich im Blut aller Ratten feststellen,
bei denen es gelungen war, eine Naganainfektion durch den
Prodigiosus günstig zu beeinflussen, doch auch schon auf der
Höhe der Infektion, wenn auch in geringerer Zahl. Ferner fand
ich die Körperchen bei wilden und zahmen Ratten, die in der
Freiheit resp. künstlich mit Tr. Lewisii infiziert waren und
entweder zahlreiche Flagellaten aufwiesen oder in der Heilung
begriffen waren. Auch graue Ratten, die keine Trypanosomen
enthielten, aber von Orten stammten, wo Tr. Lewisii angetroffen
worden war, zeigten, allerdings meist ziemlich spärlich, diese
Doppelkörnchen, während ich sie bei ungeimpften zahmen Tieren
nicht gefunden hatte. Angesichts dieser Resultate hielt ich vor-

Von Dr. med. A. Nifsle. 185

behaltlich weiterer sicherstellender Beweise die Vermutung für
berechtigt, dafs es sich hier um Formen handle, die Latenz-
zustände des Trypanosomas darstellen.

Bestärkt wurde ich in dieser Auffassung, als ich bei frischen
Präparaten von geeignetem Blut in vereinzelten Megalozyten,
allerdings weit seltener als im entsprechenden gefärbten Aus-
strich, ebenso geformte Gebilde bemerkte, welche sich durch einen
etwas dunkleren Farbenton vom Hämoglobin abhoben und im-
stande waren wackelnde Bewegungen auszuführen, durch
die sie in einem kontrollierten Falle in 5 Minuten von einem Pol
des Blutkörperchens zum andern gelangten ; die Lage der Doppel-
körperchen zueinander blieb dabei unverändert, sie be-
wegten sich also wie ein kurzes Stäbchen.

Die Vermutung, dafs diese Gebilde, bei denen das Gesetz-
mäfsige ihrer Form, ihrer Anordnung und ihrer Zahl jeden Ver-
dacht auf Zerfallsprodukte von vornherein auszuschließen ge-
eignet war, Latenzstadien von Trypanosomen darstellten, hat sich
nun nicht aufrechterhalten lassen. Denn bei weiteren Durch-
musterungen von Blutausstrichen nicht geimpfter, ausgewachsener,
zahmer Ratten gelang es mir doch in ganz vereinzelten poly-
chromatischen Erythrozyten dieselben diplokokkenartigen Formen
aufzufinden, namentlich als ich im Laufe der Zeit die Erfahrung
gemacht hatte, dafs ich sie in manchen Fällen erst dann nach-
weisen konnte, wenn ich die Präparate bei täglich erneuerter
Giemsamischung mehrere Tage liegen liefs ; trotz der störenden
reichlichen braunen Farbniederschläge waren dadurch oft die
roten Körnchen einwandsfrei festzustellen, die bei kürzerer Fär-
bung noch nicht sichtbar gewesen waren.

Als ich später begann, auch an anderen Tieren zu experi-
mentieren, zeigte sich, dafs diese Gebilde bei ungeimpften
Mäusen oft weit häufiger angetroffen wurden. Ferner fand
ich sie im Blut gesunder Meerschweinchen und Kaninchen, eines
unter bronchopneumonischen Erscheinungen erkrankten Hundes,
während sie sich bei einem gesunden Hunde und mehreren ge-
sunden Rindern nicht feststellen liefsen. Ebenso habe ich sie
im gesunden menschlichen Blut bisher niemals auffinden können,

186 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

dagegen in einigen Ausstrichen von fiebernden Kranken, auch
hier überall nur in polychromatischen Blutkörperchen.

Nachdem sich das Vorhandensein der eigentümlichen Doppel-
körnchen nicht als spezifisch für Trypanosomenerkrankungen
erwiesen hat, halte ich es für berechtigt, vorläufig nur diejenigen
Bilder als beweisend für das Einwandern von Trypanosomen in
Erythrozyten anzusehen, wo sich innerhalb derselben noch ein
abgegrenzter Plasmakörper mit Kern bzw. Kernrest und Geifsel-
wurzel unterscheiden läfst (Fig. 1). Da meine erste derartige
Beobachtung das Blut eines Tieres betraf, bei dem ein sehr
reichlicher Parasitengehalt in verhältnismäßig kurzer Zeit bis auf
den Rest spärlicher Flagellaten beseitigt worden war, die Be-
handlung mit Prodigiosusinjektionen, wie schon oben erwähnt,
wegen der schwierigen Dosierung viele Mifserfolge mit sich
brachte — - geringere Dosen wie die angegebenen wirkten wiede-
rum gar nicht, — so ging ich dazu über, die Behandlung
cadöraskranker Mäuse mittels Trypanrot, wie sie von Ehr-
lich und Shiga angegeben worden ist, für meine Zwecke aus-
zunutzen. Virus und Farbstoff verdanke ich der Liebenswürdig-
keit des Herrn Geheimrats Ehrlich.

Der in Fig. 1 abgebildete Befund ist mit dieser Methode
gewonnen. Immerhin blieben trotz der Durchmusterung zahl-
reicher Ausstriche Bilder, die die oben angegebenen Bedingungen
erfüllten, ein überaus seltenes Vorkommnis. Eventuell sind die
Chancen bei größeren Tieren günstiger, da dort eine hoch-
gradige Infektion weit länger einwirken kann, ohne dafs Remis-
sionen ausgeschlossen sind.

Was bedeuten nun die kleinen, stets paarweise angeordneten
Körperchen? Ich habe schon darauf hingewiesen, dafs eine Er-
klärung derselben als Zerfallsprodukte nicht in Frage käme, da
deren Genese schon den Begriff des Unregelmäfsigen in sich
berge. Von wirklichen Zerfallsprodukten trifft man solche, die
gleichfalls das Chromatinrot annehmen, auch häufig gerade in
den polychromatophilen Blutkörperchen an; in besonders starkem
Mafse ist dies bei denjenigen trypanosomiasiskranken Tieren der
Fall, wo nach hochgradiger Infektion die Zahl der Flagellaten

Von Dr. med. A. Nifsle. 187

in verhältnismäfsig kurzer Zeit zurückgegangen ist. Dabei zeichnen
sich unter den polychromatophilen Blutkörperchen im allgemeinen
wieder die Megalozyten durch besonderen Reichtum an solchen
unregelmäfsigen, meist mehr im Zentrum gelegenen Körnchen
aus. Dieselben stellen die Reste des in Zerfall bzw. Auf-
lösung begriffenen Kerns dar. Bei aufmerksamer Betrachtung
wird man auch unter diesen Körnchen häufig genug die diplo-
kokkenähnlichen Gebilde herauserkennen; sie sind stets durch
dunkleren Farbenton den Kernresten gegenüber ausgezeichnet.
Es sei bemerkt, dafs sie in solchen i akuten« Fällen meist gröfser
erscheinen (zuweilen x / 2 ju grofs) als bei ungeimpften Tieren, wo
sie manchmal kaum % p erreichen und nur vermöge der leuch-
tenden Kontrastfärbung hervortreten (vergl. Fig. 2 und 3). Ferner
sei hervorgehoben, dafs man gerade unter den genannten Be-
dingungen ziemlich oft einen Zwischenraum zwischen den beiden
Pünktchen wahrnehmen kann, der zuweilen durch ein gerades
oder bogenförmig gespanntes Fädchen überbrückt wird.

Die Lage der Doppelkörnchen in der Blutscheibe ist keine
konstante; sie werden bald mehr zentral, bald mehr peripher
angetroffen; es scheint, als ob letzteres häufiger wäre.

Zum Vergleich herangezogene Methoden haben ergeben, dafs
sie einerseits ebensogut hervortreten bei Fixierung durch die von
Ehrlich zuerst empfohlene Erhitzung der Ausstriche wie bei
der Argutinsky sehen Osmiumfixierung. Von anderen Fär-
bungen wurden Karbolthionin und Heidenhainsches
Eisenhämatoxilin, beide mit positivem Erfolg, angewandt,
wenn auch keine so scharfen Kontraste zu erzielen waren. Der
Polychromasie entsprach bei Thioninfärbung eine deutliche Meta-
chromasie.

Ich bemerke noch, dafs bei Hitze- und Osmiumfixierung
Kemzerfallsreste in den Blutkörperchen viel zahlreicher sichtbar
werden als bei der Fixierung mit Alkohol absolutus. Ich möchte
deshalb der Vermutung Raum geben, dafs bei den beiden ersteren
Behandlungsmethoden auch ein Teil der nukleoiden Substanz,
wie Lavdowsky nach seinen Versuchen eine in den meisten
Blutkörperchen enthaltene, aus dem Kern hervorgegangene, mit

188 Beobachtungen am Blat mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

ihm chemisch aber nicht mehr identische Substanz nennt, zur
Farbstoffaufnahme befähigt wird.

Um die Doppelkörperchen läfst sich bei Alkoholfixierung fast
immer ein bald schmälerer, bald breiterer heller Hof abgrenzen,
der zuweilen zipfelartig ausgezogen erscheint, meist aber mehr
Kreis- oder Ellipsenform zeigt. Da dieser Hof bei Hitze- und
Osmiumfixierung niemals so deutlich erkennbar ist, so kann der
Verdacht nicht ganz von der Hand gewiesen werden, dafs er
eventuell nur ein Artefakt darstellt.

Auch für die Identität der Doppelkörperchen mit den in
frischem Blut beobachteten, gleichgestalteten Gebilden ist in-
sofern ein exakter Beweis noch nicht erbracht, als sie dort weit
seltener gesehen wurden als im gefärbten Präparat; allerdings
erklärt sich dies zum Teil dadurch, dafs fast nur Megalozyten in
Betracht gezogen werden konnten, da ja die meisten Normozyten
zu bald durch Übergang zur Stechapfelform ein weiteres Studium
von Details unmöglich machen.

Th. Smith beschreibt intraglobuläre Körperchen, die er im
frischen Blut kranker und gesunder Rinder gefunden hat; sie
sollen meist einzeln, manchmal auch zu zweien vorkommen, im
Maximum 0,5 // grofs und imstande sein, zitternde Bewegungen
auszuführen. Smith hielt sie für jüngste Stadien des Texas-
fieberparasiten. Nach Celli und Santori hat Marchiafava
bereits dieselben Formen im Malariablut beobachtet; sie selbst
wollen sie u. a. im Blut gesunder Meerschweinchen gesehen
haben. Im frischen Rinderblut konnte ich gleichfalls kokken-
artige Elemente wahrnehmen, die einzeln oder zu zweien im
Erythrozyten vorhanden waren und sich zeitweise bewegten, sie
zeigten aber stärkeres Lichtbrechungsvermögen als die oben be-
schriebenen, und ebenso konnte ich konstatieren, worauf schon
Smith hingewiesen hatte, dafs sie sich nicht färben liefsen.

Auch die von Schmauch in den roten Blutkörperchen der
Katze entdeckten Elemente, die er für Kernreste hält, und deren
Auftreten er auf die toxischen Stoffwechselprodukte von Darm-
parasiten zurückführt, kommen hier nicht in Betracht, da ihre
Form und Zahl nichts so Charakteristisches zeigt.

Von Dr. med. A. Nif sie. 189

Bei Präparaten, die mit einer besonderen Fixierungsmethode
behandelt waren (Osmium-Pikrinsäure) hatte Petrone in Säuge-
tiererythrozyten Körperchen von körniger Struktur gefunden, die
er als Kern angesehen hatte; diese Hypothese war von Negri
dadurch widerlegt worden, dafs er sie auch in Erythroblasten
neben dem Kern nachgewiesen hatte. Da es sich um Gebilde
bandelt, die einzeln auftreten, und da ihre Gröfse die der oben
beschriebenen bedeutend übertrifft, so können auch sie nicht zur
Erklärung herangezogen werden.

Ehrlich fand bei Prüfung von Blutgiften an Mäusen in einem
Teil, manchmal in den meisten Blutscheiben ein, zwei oder drei
kuglige Gebilde, die er hämoglobinämische Innenkörper nennt,
und die er für Degenerationsprodukte hält. Der Umstand, dafs
gerade Mäuse als Versuchstiere benutzt wurden, die auch unter
normalen Verhältnissen oft relativ viele der eigentümlichen Dop-
pelkörperchen enthalten, ferner das Unbestimmte der Anzahl der
hämoglobinämischen Innenkörper, sowie das Fehlen jedes Hin-
weises auf ihr Vorkommen. in bestimmten Arten der Blutkörper-
chen, müssen die Identität auch dieser Formen ausschliefsen.

Nun hat Dehler 1895 Untersuchungen über die roten Blut-
körperchen von wenige Tage alten Hühnerembryonen an-
gestellt (Schnittmaterial, Sublimatfixierung, Färbung mit Eisen-
hämatoxilin nach Heidenhain) und dabei konstant unmittelbar
neben dem Kern Zentrosomen nachweisen können. Dieselben
sind stets in beschränkter Zahl vorhanden und zwar scheint
nach den vorzüglichen beigegebenen Zeichnungen die Zahl 2
vorzuherrschen; darauf deutet auch die Tatsache, dafs beim Vor-
handensein von dreien das dritte bedeutend kleiner und nach
Dehler als Nebenkörperchen aufzufassen ist. Die Gröfse der
Zentrosomen beträgt fy— Va p; umgeben sind sie meist von einem
hellen Hof von etwa 2 /i Durchmesser. Vereinzelt werden auch
Verbindungen zwischen zwei Körperchen beobachtet: > Fälle, in
denen man auch an gut differenzierten Präparaten eine Verbin-
dung von zwei in der Schnittebene liegenden Zentralkörpern
durch eine schmale, dunkelgefärbte Zwischensubstanz findet, sind
selten (primäre Zentrodesmose von M. Heidenhain). t

190 Beobachtungen am Blnt mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

Die Ähnlichkeit dieser Gebilde mit den in polychromato-
philen Erythrozyten von Säugetieren beobachteten ist eine außer-
ordentlich frappante; rechnet man dazu, dafs auch die Erklärung
der letzteren als Zerfalls- oder Kunstprodukte jeder Wahrschein-
lichkeit entbehrt, dafs es sich vielmehr ebenfalls um morphologisch
präzisierte Gebilde handelt, so kann meines Erachtens kein
Zweifel obwalten, dafs sie wirklich die erhalten gebliebenen
Zentrosomen von Erythroblasten darstellen, zumal sie gerade
häufig in solchen Blutkörperchen angetroffen werden, wo noch
Reste des zerfallenen Kerns nachweisbar sind.

Darauf, dafs die relative Widerstandsfähigkeit der Zentro-
somen bei der Kernnekrose allgemeiner begründet ist, deuten
die bekannten Befunde von Resten in ihrem natürlichen Medium
zugrundegegangener Flagellaten, z. B. Trypanosomen oder Lam-
blia intest., wo die mit den Fufspunkten bzw. Zentrosomen in
Verbindung gebliebenen Geifseln diese beim Mangel jeglichen
Kerns und Plasmas noch als solche feststellen lassen und damit
verraten, dafs sie morphologisch und tinktoriell noch unverändert
erhalten geblieben sind. Ja, ich habe in einem frischen Trypa-
nosomenpräparat eine Geifsel sich in der Art der vollständigen
Trypanosomen fortbewegen sehen, der neben dem Zentrosom nur
noch ein spärlicher Plasmarest anhaftete. Wenn auch die
Intensität der Bewegungen allmählich abnahm, so dauerte es
doch 10 Minuten, ehe sie vollkommen aufgehört hatten. (Die
unmittelbare Bedeutung des Kerns für die Funktion der Geifsel
erscheint also hier in ähnlicher Weise ausgeschlossen, wie dies
bei den Haaren der Flimmerepithelien der Fall ist, da für
deren Funktion in erster Linie auch nur die Integrität ihrer
Basalkörperchen und ihr Zusammenhang mit ihnen erfor-
derlich ist).

Nun ist von Bremer in jedem roten Blutkörperchen der
Vögel und niederen Wirbeltiere ein Gebilde beobachtet worden,
das er seiner Lage wegen Paranuklearkörperchen nennt.
Er identifiziert es mit einem im Säugetierblut auch von ihm ge-
fundenen Stigma genannten Pünktchen, anderseits erklärt er
es auf Grund der De hier sehen Befunde für das Zentrosom der

Von Dr. med. A. Nifsle. 191

Blutzelle. Das Stigma beschreibt Bremer als ein winziges
| Kügelchen, das er besonders bei chronischen Nervenerkrankungen

wahrgenommen haben will ; beim Absterben des Blutkörperchens
soll es deutlicher und grölser werden. Nach diesen Angaben
und nach der beigegebenen Zeichnung glaube ich unter Berück-
sichtigung meiner Befunde nicht, dals eine Identifizierung des
Stigmas mit den Zentrosomen der Blutkörperchen aufrechter-
halten werden kann.

Bei der Bedeutung, die der weitere Ausbau der normalen
und pathologischen Anatomie der Blutelemente für den Para-
sitologen besitzen mufs, mag hier noch ein eigentümliches Gebilde
Erwähnung finden, das ich zuerst in polychromatophilen Ery-
throzyten von Meerschweinchen augetroffen habe, bei denen
nach Anhäufung reichlicher Trypanosomen im Blut (Nagana und
Cad&as) eine spontane Remission eingetreten war. Es handelt
sich um scharf konturierte Reifen, die in der Peripherie des
Blutkörperchens gelegen sind, bei Giemsafärbung intensiv rot und
etwas dicker erscheinen als Trypanosomengeifseln. Ihr Durch-
messer beträgt im Maximum etwa 8 — 10 ju. Meist ist an ein
oder zwei Stellen der Reifen punktförmig verdickt. Im frischen
Präparat habe ich dieses Gebilde bisher nicht auffinden können.
Sind die Reifen so fixiert, dafs ihre Ebene senkrecht zu der des
Objektträgers gelegen ist, so entsteht entweder das Bild einer
langen Ellipse, oder, wenn sich die gegenüberliegenden Bögen
schneiden, eine Achtform (Fig. 4); durch Verstellung der
Mikrometerschraube kann man sich dabei leicht überzeugen,
welche Hälfte oberhalb und welche unterhalb des Blutkörper-
chens sich befindet. In seltenen Fällen konnte ich eine Zer-
reißung des sonst unveränderten Reifens konstatieren (Kunst-
produkt?).

Wenn man Blutausstriche zu einer Zeit herstellt, wo die
Remission der Trypanosomenerkrankung schon einige Tage be-
standen hat, so trifft man häufig kleinere Reifen von etwa
4— 5ju Durchmesser, die sich entweder sonst durch nichts von
den grölseren unterscheiden oder zugleich dünner als diese und
weniger intensiv gefärbt (mehr graurot) erscheinen; oft zeigen

192 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

solche dünne Reifen dann aufserdem einen mehr oder minder
vorgeschrittenen körnigen Zerfall. Es fiel mir auf, dafs
Blutscheiben, die degenerierte Reifen enthielten, nicht selten
gleichzeitig basophile Körnung aufwiesen. Ob die körnig zer-
fallenden Reifen mit irgend welchen Fädchen oder kreisförmig an-
geordneten Elementen, wie man sie zuweilen, auch im Blut
anderer Tiere beobachtet, identisch sind, mufs durch weitere
Untersuchungen klargestellt werden.

In dem Blut der Meerschweinchen, bei denen ich diese Ge-
bilde zuerst verhältnismäfsig häufig beobachtete (ca. in jedem 5.
bis 6. Gesichtsfelde bei Immersion 1 Reifen), wurden sie bei
länger bestehender Remission allmählich seltener. Bei Ratten
und Mäusen habe ich sie niemals gesehen trotz der grofsen Zahl
von Ausstrichen, die ich gerade vom Blut dieser beiden Tier-
arten durchmustert habe. Nur sehr vereinzelt traf ich sie im
Blut normaler Meerschweinchen. Um so mehr war ich erstaunt,
teils unveränderte, teils degenerierte Reifen in manchen Präpa-
raten vom Blute fieberhaft erkrankter Menschen und
zwar auch hier zuweilen gar nicht so selten vorzufinden; einzelne
Reifen lagen vollkommen frei, bei anderen erkannte man noch
das zugrundegehende zugehörige Blutkörperchen an der hell-
rötlich blauen Farbe. Ebenso zeigten auch die erhaltenen Ery-
throzyten, die Reifen einschlössen, meist deutliche Polychromasie.

In der Literatur habe ich nur an einer Stelle die Beschrei-
bung von Blutkörperchen mit reifenartiger Einfassung vorgefun-
den und zwar in derselben oben zitierten D eh 1 ersehen Arbeit,
die sich mit den Untersuchungen an Blutzellen junger Hühner-
embryonen befafst. Dehler, der am Schnittmaterial beobachtete,
beschreibt das Gebilde als */ 4 — x / 2 j" dicken, intensiv geschwärzten
Saum (Färbung nach Heidenhain), der »als zum Protoplasma
der Zelle gehöriger Reifen aufzufassen ist, in dem die Substanz
der Zelle ausgespannt ist.c Der Reifen soll, sobald die Zelle
eine gewisse Gröfse erreicht und sich zur Teilung anschickt,
schwinden. Bei den jungen Zellen soll er, wenn sie aus der
Kugelform zur bikonvexen Linsenform übergehen, sich wieder
einstellen.

Von Dr. med. A. Nifsle. 193

In der Literatur seit 1895 habe ich vergebens Notizen über
Nachprüfung oder weitere Untersuchungen dieser gerade bei
Metazoenzellen einzig dastehenden Erscheinung gesucht. Mögen
deshalb meine Beobachtungen und das damit begründete prak-
tische Interesse dazu beitragen, weitere vergleichend em-
bryologische und pathologisch anatomische Studien
über diesen Gegenstand anzuregen.

Sowohl die Zentrosomen wie die Dehler sehen Reifen stellen,
wie ich schon hervorhob, Eigentümlichkeiten mancher polychro-
matophiler Erythrozyten dar. Auf die Polychromasie bat zuerst
Ehrlich aufmerksam gemacht und sie anfangs für eine Alters-
erscheinung angesehen, da derartige Blutkörperchen häufig aus-
gesprochene Degeneration erkennen lielsen. Nachdem Gabrit-
schewsky dem gegenüber durch seine Untersuchungen er-
wiesen hatte, dafs die polychromatophilen Erythrozyten vielmehr
junge Formen darstellten, modifizierte Ehrlich seine Anschau-
ung dahin, dafs er sie für von Jugend auf degenerierte Elemente
erklärte.

Die Degenerationserscheinungen dokumentierten sich bei
meinen Präparaten entweder in der Weise, dafs sich an den
Blutkörperchen Einkerbungen zeigten, die ihnen bei tieferem
Eindringen bisweilen Rosettenform gaben — ihr Farbenton war
dann stets mehr dunkelblau — , oder dafs grolse, blasse, deshalb
oft kaum erkennbare Gebilde in den Ausstrichen, mauchmal in
grofser Zahl, wahrgenommen werden konnten, die eine meist
exzentrisch gelegene Vakuole von ziemlicher Ausdehnung er-
kennen liefsen und deshalb den Eindruck von rosa oder bläulich-
rosa gefärbten Halbmonden machten, zumal die dünnste Stelle
der Vakuolenwand wirklich oft eingerissen war (Fig. 3). In man-
chen Halbmonden liefsen sich noch deutlich Zentrosomen nach-
weisen (Fig. 3 rechts).

Schon weiter oben hatte ich bemerkt, dafs polychromatophile
Erythrozyten oft zugleich Megalozyten sind ; in besonderem Mafse
trifft dies bei hochgradigen Trypanosomeninfektionen zu, die eine
möglichst akute Besserung erfahren haben. Diese Resultate
stehen in Parallele mit den Befunden Askanazys bei perniziöser

194 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

und Bothriocephalusanämie, der Polychromasie als Haupteigen-
tümlichkeit der meisten Erythroblasten, die Mitose zeigten, und
der meisten Megalobl asten angetroffen hat. Askanazy hält
Megaloblasten und Normoblasten nicht für prinzipiell, sondern
nur für graduell verschieden, da er Megaloblastenkerne in Normo-
blasten beobachtet hat und umgekehrt.

Meine Befunde sind geeignet, diese Anschauungen hinsicht-
lich der Megalozyten und Normozyten zu bestätigen. Meines
Erachtens ist viel eher die Polychromasie als Merkmal eines
prinzipiell verschiedenen Entwicklungsganges zu betrachten, wenig-
stens bei den frisch eingetretenen Anämien, wie sie unter den
eben angegebenen Bedingungen bei Trypanosomeninfektionen
zustande kommen. Hier trifft man Kernzerfallsreste, Zentrosomen
und De hier sehe Reifen nur bei polychromatophilen roten Blut-
körperchen und zwar ohne sonstige Unterschiede bei Megalo-
zyten und Normozyten. Besonders unter Benutzung der
grofsen, leicht erkennbaren Dehlerschen Reifen ist man des-
halb imstande, die Schicksale der polychromatophilen Erythro-
zyten mit weit gröfserer Genauigkeit zu verfolgen als bisher.
Man findet nämlich nach einigen Tagen neben der bekannten,
mit Vermehrung der Blutplättchen verbundenen Neubildung
orthochromatischer Blutkörperchen auch solche, die er-
haltene oder degenerierte Reifen ein schliefsen und
dadurch beweisen, dafs sie aus polychromatischen
Erythrozyten hervorgegangen sind. Die degenerierten
Reifen lassen sogar erkennen, dafs das betreffende Blutkörperchen
nicht nur trotz des überstürzten Entwicklungsganges noch aus-
reichende Widerstandsfähigkeit besitzt, sondern dafs es auch zu
ausgesprochener Aktivität befähigt ist.

Ebenso kann man die Zentrosomen zum Beweis heran-
ziehen, dafs Umwandlungen polychromatischer Erythrozyten in
orthochromatische vorkommen; denn unter denselben Bedin-
gungen werden Zentrosomen auch in den letzteren angetroffen.

Das Vorhandensein von Zentrosomen bzw. Reifen im Blut-
körperchen ist in höherem Mafse als die einfache Polychromasie
das Merkmal einer Blutschädigung. Da eine solche bei kleinen

Von Dr. med. A. Nifele. 195

Tieren, z. B. Mäusen, durch weit geringere Anlässe hervorgebracht
wird, da ferner die Häufigkeit der Anlässe mit davon abhängig
ist, ob das Tier in der Freiheit oder im Käfig lebt (graue und
zahme Ratten), so erklärt sich auch ohne weiteres die Ver-
schiedenheit der Befunde bei gesunden, ausgewachsenen
Tieren verschiedener Art.

Ich kehre zu den Trypanosomen selbst zurück. Wie schon
im Beginn der Arbeit mitgeteilt wurde, hatte ich Gelegenheit,
mit Tr. Lewisii, Tr. Brucei und Tr. equinum zu experi-
mentieren.

Es ist bekannt, dafs das erstere von den beiden letzteren
in der Art seiner Vorwärtsbewegung abweicht; dabei ist
jedoch vorausgesetzt, dafs dieser Unterschied nur in solchen Be-
zirken deutlich hervortritt, wo die Bewegung ungehindert ge-
schehen kann, also an blutkörperchenfreien Stellen. Sucht man
nun den Bewegungsmodus genauer zu analysieren, so kommt
man zu dem Resultat, dafs hier prinzipielle Unterschiede be-
stehen. Während nämlich Tr. Brucei und Tr. equinum, Körper
und Geifsel als Ganzes genommen, sich in der Weise fortbewegt,
dafs eine Welle nach der andern an dem Flagellaten von hinten
nach vorn entlang läuft, wobei nur manchmal das hintere Körper-
drittel fixiert und als Steuer benutzt wird, kann man bei Tr.
Lewisii stets zwei Knotenpunkte beobachten, von denen der
vordere im ersten Körperdrittel liegt, während der hintere sich
ungefähr an der Grenze vom zweiten und dritten Drittel be-
findet. Der Hauptteil dieses hintersten Drittels dient stets als
Steuer und schwingt deshalb nicht mit; der übrige Teil der
Parasiten bewegt sich in der Weise eines in zwei Knotenpunkten
fixierten, transversal schwingenden Stabes. Die beiden Be-
wegungsarten unterscheiden sich deshalb genau so wie fort-
laufende und stehende Wellen. Bei manchen geringfügigen
Ortsveränderungen und stets bei Entgegenstehen von Hinder-
nissen wählt dagegen auch Tr. Lewisii den ersteren Modus.

Zwischen Tr. Brucei und Tr. equinum konnte ich hinsicht-
lich ihrer Bewegung keine charakteristischen Unterschiede wahr-

196 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

nehmen; die Schwingungen des Tr. equinum erschienen nur
im allgemeinen eckiger, ungeschickter.

Am leichtesten erkennen läfst sich vielmehr der letztere
Flagellat durch sein bekanntlich sehr kleines Zentrosom, das
früher von manchen Beobachtern überhaupt geleugnet wurde.
Laveran und Mesnil geben seine Gröfee auf */ 4 — Vs i" an un ^
betonen, dafs es sich tinktoriell nicht von der Geifsel unter-
scheide. Auch ich konnte mich, namentlich im Anfang, von
der Schwierigkeit überzeugen, welche die Färbung dieser Körper-
chen bietet. Dadurch, dafs ich Farbstofflösungen, wie bisweilen
bei den Blutkörperchenzentrosomen, zwei oder drei Tage ein-
wirken liefs, erzielte ich auch hier oft doch noch ein deutliches
Resultat. Die Zentrosomen hatten also in diesen Fällen das
Chromatinrot später aufgenommen als die Geifsel, während bei
Ratten- und Naganatrypanosomen ja die Reihenfolge umgekehrt
ist. Sind die Ausstriche dünn, so dafs die einzelnen Parasiten
und Blutkörperchen vollkommen isoliert liegen, so erreicht
man bei guter Fixierung meist schon nach 24 stündigem Färben
einwandsfreie Zentrosomen. Man kann dann sogar oft einen
gegenüber der Geifsel deutlich dunkleren Farbenton au ihnen
bemerken ; bisweilen erscheint auch Zentrosom und Geifsel durch
eine helle Zone getrennt wie bei Nagana. Ebenso liefs sich
oft genug die Hintereinanderstellung der frisch geteilten
Zentrosomen feststellen, wie sie Martini beim Tr. Brucei be-
schrieben hat.

Schon in meiner früheren Arbeit habe ich auf Befunde in
frischen und gefärbten Präparaten aufmerksam gemacht, die
mich veranlafsten anzunehmen , dafs die Trypanosomen die
Fähigkeit besitzen, durch rote Blutkörperchen hindurchzu-
schlüpfen. Weitere häufige Blutuntersuchungen waren nur
geeignet, mich in dieser Annahme zu bestärken, nachdem ich
noch andere Begleiterscheinungen des Durchschlüpfens an den
roten Blutkörperchen kennen gelernt hatte.

Den ersten Verdacht auf die Möglichkeit des Eindringens
der Geifsel in das Erythrozytenplasma schöpfte ich aus den zahl-
reichen Bildern, wo ein isoliertes Blutkörperchen durch die

Von Dr. med. A. Kifsle. 19?

Geifselspitze eines Trypanosomas in der Weise hin- und herge-
schleudert wurde, wie es etwa mit einem Stück Wäsche beim
Spülen derselben geschieht. Doch lassen derartige Bilder immer-
hin noch eine verhältnismäfsig einfache Erklärung zu, wenn man
mit Weidenreich eine Glockenform der Erythrozyten in
isotonischen Lösungen annimmt.

Das beste Material zu diesen Untersuchungen liefern Tiere,
bei denen eine einigermafsen reichliche Trypanosomenzahl be-
reits mehrere Tage vorhanden ist ; es mag dies darin seinen Grund
haben, dafs unter diesen Bedingungen der Widerstand des Blut-
körperchenplasmas den Flagellaten gegenüber bedeutend geringer
ist als im Beginn der Infektion. Richtet man hier sein Augen-
merk auf solche Stellen, wo neben isolierten Blutscheiben auch
Zusammenballungen von solchen zu beobachten sind, wo also
ein genügender Zwischenraum zwischen Deckglas und Objekt-
träger vorhanden ist, so wird man in mehr oder weniger häufigen
Fällen während und nach dem Zusammentreffen von Flagellat
und Erythrozyt an letzterem Veränderungen wahrnehmen können,
die sich teils schwer, teils gar nicht durch ein einfaches Vorbei-
gleiten erklären lassen.

Zu den ersteren gehört die Verkürzung des Blutkörperchens
in der Bewegungsrichtung des Parasiten, der deutlich langsamer
fortschreitet und dessen Weg nach dem Verschwinden durch
eine oft mehrere Sekunden sichtbare helle Linie im Erythro-
zyten markiert bleibt. Zu den letzteren gehört das momentane
Vorstülpen der Blutkörperchenperipherie zu einer Spitze durch
die von der Gegenseite her vordringende Geifsel, wie man es
bisweilen beim Nachlassen der Bewegungsintensität beobachten
kann. Es empfiehlt sich überhaupt, nach der Untersuchung des
frischen Bluttropfens zum Studium der Details zu warten, bis
die Bewegungen der Trypanosomen langsamer geworden sind.

Ferner ist meiner Meinung nach das Auftreten solcher Ver-
änderungen als sicherer Beweisgrund zu verwerten, die selbst bei
der hohen Elastizität der Erythrozyten nicht mehr ausgeglichen
werden. So konnte ich im Blut nagana- oder caddraskranker
Meerschweinchen beim Zusammentreffen von Trypanosomen mit

Archiv f. Hygiene. Bd. Uli. 14

198 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

Blutscheiben oft in diesen helle, zickzackförmige Linien
entstehen sehen, die, je nachdem sie mehr horizontal oder mehr
vertikal gerichtet waren, durch das ganze Blutkörperchen oder
nur durch einen Teil desselben zu verlaufen schienen. Wurde
es von einem neuen Flagellaten erfafst und kräftig geschüttelt,
so verschwand auch die Zickzacklinie wieder, geringere Erschüt-
terungen vermochten sie dagegen nicht zu beseitigen. Deshalb
war es auch möglich, in einem vorsichtig hergestellten frischen
Präparat dieselbe Veränderung schon an einer Reihe von Blut-
körperchen vorzufinden, ein Beweis, dafs Degenerations Vor-
gänge aufserhalb des Körpers auch als disponierende Momente
nicht in Betracht kommen.

Weniger häufig als die eben beschriebene Art konnte ich
au den Erythrozyten beim Zusammenstofs mit Trypanosomen
Veränderungen entstehen sehen, die auch bei längerer Beobach-
tung jeder Erschütterung widerstanden; sie bestanden im Auf-
treten kreisförmiger oder mehr langgestreckter Stellen, die sich
aber auch allmählich zur Kreisform abrundeten; beide zeich-
neten sich durch ihre blendend weifse Farbe aus (Vakuolen?).
Ihre Gröfse entsprach vom Beginn ihres Entstehens an unge-
fähr dem 5. bis 6. Teil des Blutkörperchens.

Auch in gefärbten Präparaten liefsen sich Bilder nach-
weisen, die meiner Ansicht nach als Beweisgründe für die Fähig-
keit des Durchschlüpfens der Trypanosomen verwendbar er-
schienen. Dazu gehören die hellen Streifen in Erythrozyten,
die eben von einem Flagellaten verlassen werden oder verlassen
worden sind und sicher auf deren Einwirkung zurückgeführt
werden dürfen. Will man aber auch diese Erscheinung deshalb
nicht als beweiskräftig anerkennen, weil dafür Vorgänge verant-
wortlich zu machen wären, die sich erst auf dem Objektträger
abgespielt hätten, so inufs doch ihre Übereinstimmung mit den
Streifen auffallen, die eben als Blutplättchen ausgestofsene
Erytbroblastenkerne zurückgelassen haben.

Fig. 6 zeigt an dem Blutkörperchen die schon erwähnte
Verkürzung in der Bewegungsrichtung des Parasiten, der in
diesem Bezirk deutlich eingeschnürt erscheint und weniger

Von Dr. med. A. NiTsIe. 199

scharfe Konturen aufweist als außerhalb; hinter dieser Zone ist
es durch Anstauung des Plasmas zur keulenartigen Verdickung
des Körperendes gekommen. In Fig. 7 ist die Einschnürung
noch erheblicher. Derartige Bilder, die ich für beweisend halte,
sind in geeignetem Material gar nicht so selten.

Wie schon bemerkt, lieferten für diese Beobachtungen das
brauchbarste Material diejenigen Tiere, bei denen schon mehrere
Tage eine einigermafsen hochgradige Infektion bestand. Ander-
seits schien es mir nach den zahlreichen Untersuchungen, als
ob ein Teil der Trypanosomen auffallend häufig den Weg durch
Blutkörperchen wählte, während ein anderer sie vermied, so dafs
also zu der Disposition des Blutes noch eine Disposition der
Parasiten hinzukäme.

Trotz der ausgiebigen Verzerrungen, welche die Folgen des
Durchbohrens an und in den Blutkörperchen darstellen und zum
Teil zu dauernden Veränderungen führen, glaube ich doch nicht,
dafs auf dieser Eigenschaft der Trypanosomen ein wesentlicher
Teil ihrer pathogenen Wirkung basiert; denn dem Tr. Lewisii
kommt sie ebenso zu wie dem Tr. Brucei und Tr. equinum.

Die Vermutung, dafs mit dem Durchschlüpfen eine Nah-
rungsaufnahme verbunden sein könnte, hat insofern ziem-
lich wenig Wahrscheinlichkeit für sich, als von einem Verweilen
im Blutkörperchen nur dort die Rede sein kann,, wo es sich
durch den deutlich erkennbaren Widerstand ohne weiteres er-
klären läfst. Gegen eine Sauerstoff auf nähme im Erythro-
zyten spricht aufser dieser Tatsache, dafs die Trypanosomen
gegen Sauerstoff abschlufs überhaupt nicht so empfindlich sind.
Bewahrt man trypanosomenhaltige Blutstropfen in reiner Kohlen-
säureatmosphäre bei Zimmertemperatur auf, so ist am Tr. Brucei
und Tr. equinum nach l x / 2 Stunden, am Tr. Lewisii sogar nach
20 Stunden noch keine Schädigung erkennbar; bei 37° und
sonst gleichen Bedingungen geht in denselben Zeiten ein grofser
Teil zugrunde, der Rest zeigt jedoch deutliche, wenn auch ver-
langsamte Bewegung.

Es erübrigt noch, auf einige Beobachtungen hinzuweisen,
die geeignet erscheinen, dem bisher ziemlich planlosen Aus-

14 •

200 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

probieren von Heilmitteln gegen Trypanosornenkrankheiten,
wenigstens nach einer Seite hin, eine wissenschaftliche Basis zu
geben. Ich bemerke im voraus, dafs diese Untersuchungen, die
ich erst seit verhältnismäfsig kurzer Zeit durchführe, noch keinen
Anspruch auf Vollständigkeit erheben können. Trotzdem sollen
sie doch schon hier erörtert werden, da ihre Folgerungen viel-
leicht die Lösung der Heilmittelfrage beschleunigen helfen, deren
Wert besonders durch die schnelle Ausbreitung der mensch-
lichen Trypanosomiasis im steten Wachsen begriffen ist.

Bei meinen meisten Experimenten handelte es sich, wie ich
öfter erwähnt habe, darum, einigermafsen hochgradige Infektionen
so zu beeinflussen, dafs die Parasiten in möglichst kurzer Zeit
vollständig oder bis auf spärliche Reste beseitigt wurden. In-
sofern dürfen diese Versuche deshalb mit Heilversuchen nicht
ganz allgemein auf eine Stufe gestellt werden. Aufser dem Pro-
digiosus und dem Trypanrot benutzte ich an einer Reihe von
Naganaratten auch das von Wendelstadt empfohlene Mala-
chitgrün.

Was das Trypanrot anbetrifft, so konnte ich bei Mäusen,
die mit dem für grofse Tiere schwach virulenten Naganastamm
infiziert waren, eher noch bessere Heilerfolge feststellen wie
bei Caddrasmäusen ; denn bei den im allgemeinen für Heilzwecke
zu kleinen Dosen von 0,3 ccm der 1 proz. Lösung auf 15 g Maus
waren bei Nagana seltener Rezidive zu verzeichnen als bei ebenso
behandelten Caderasmäusen ; aufserdem wurden bei Nagana nach
dem 10. Tage überhaupt keine Rezidive mehr beobachtet, bei
Caddras sogar noch nach 7 Wochen.

Das Auftreten grofser Mengen von polychromatophilen Ery-
throzyten war, wie schon öfter bemerkt, besonders in den Fällen
zu beobachten, wo es sich um ein akutes Verschwinden reich-
licher Parasiten aus der Blutbahn handelte, mochte dieses Ver-
schwinden durch künstliche Mittel hervorgerufen sein, oder
mochte es eine spontane Remission darstellen, wie sie bei
Tr. Lewisii im Rattenblut und wie sie bei Tr. Brucei und
equinum im Meerschweinchenblut häufig konstatiert wird. Doch
auch schon dann, wenn die Anzahl der Parasiten einen

Von Dr. med. A. Nifcle. 201

einigermaßen hohen Grad erreicht hatte, war im allgemeinen
schon eine deutliche Zunahme der polychromatophilen Blut-
körperchen festzustellen. Da das Auftreten bzw. die Vermehrung
dieser Elemente stets darauf hinweist, dafs hier Blut in Regene-
ration begriffen ist, dafs also vorher gröfsere Mengen Blutkörper-
chen zerstört sein müssen, so beschlofs ich mittels Zählung
derselben mich genauer über den Verlauf der Anämie zu infor-
mieren.

In Übereinstimmung mit dem Auftreten der Polychromasie
fand sich nun selbst bei reichlichem Parasitengehalt des Blutes
eine verhältnismäfsig geringe Abnahme der Zahl der Erythro-
zyten, die sich erst zu einer viel hochgradigeren Anämie steigerte,
wenn die Parasiten verschwanden. Wenn z. B. einer Nagana-
maus, die schon ziemlich zahlreiche Trypanosomen aufwies, eine
nicht zu hohe Trypanrotdosis injiziert wurde, so liefs sich oft
am nächsten Tage noch keine Abnahme der Flagellaten, sondern
nur das deutliche Häufigerwerden von Degenerationserscheinungen
an ihnen beobachten; erst am Tage darauf waren in solchen
Fällen die Trypanosomen verschwunden, und erst mit ihrem
Verschwinden war gleichzeitig eine rapide Abnahme der
Erythrozyten, oft um 2 — 3 Millionen pro cmm erfolgt. Geht
nun die Zerstörung der roten Blutkörperchen noch weiter, so
kann ein solches Tier, das von der Infektion vollständig ge-
heilt ist, in den nächsten Tagen noch an der Anämie zu-
grundegehen. In der Tat sind solche Fälle gar nicht selten ;
in einem derselben sank die Zahl der Erythrozyten innerhalb
von 20 Stunden von 8 auf 3,5 Millionen pro cmm, obwohl die
vorschriftsmäfsige Trypanrotdosis nicht überschritten war; das
Tier war parasitenfrei und wurde am nächsten Morgen tot vor-
gefunden. Es liegt nahe, ähnliche Beobachtungen Wendel-
stadts bei einzelnen Naganaratten, die mit Malachitgrün be-
handelt waren und auch trotz der Beseitigung der Flagellaten
verendeten, in der gleichen Weise zu erklären.

An ungeimpften Mäusen kann man sich ebenso überzeugen,
dafs nach Verabfolgung von Trypaurot im Körper ein hämo-
lytisch wirkender Stoff erzeugt wird. Bekanntlich ist auch die

202 Beobachtungen am Blnt mit Trypanosomen geimpfter Tiere.

mikrobizide Wirkung des Trypanrots keine unmittelbare und
deshalb nicht als die eines üesinfiziens aufzufassen, wie schon
Ehrlich und Shiga in ihrer Arbeit hervorheben.

Das bei den akuten Fällen so ausgesprochene zeitliche
Zusammenfallen der Vernichtung von Parasiten und Blut-
körperchen veranlafst mich, nun anzunehmen, dafs die zum Teil
auf der Höhe der Trypanosomeninfektion, besonders aber bei
raschem Abfall derselben auftretende Anämie auch bei den künst-
lich nicht beeinflußten Heilungen bzw. Remissionen auf eine
Wirkung der gleichen Stoffe zurückzuführen ist, welche die
Parasiten abtöten. Vielleicht kommt dabei die Tatsache in Be-
tracht, dafs die Trypanosomen iierische Zellen darstellen und
aufserdem in derselben Nährflüssigkeit leben wie die Erythrozyten.

Das Zusammenfallen von keimtötender und hämolytischer
Eigenschaft konnte auch beim Prodigiosus beobachtet werden
(s. o.). Wie Bertarelli berichtet, hat zuerst Pasquini auf das
Vorhandensein hämolytischer Substanzen in Prodigiosusbouillon-
kulturen hingewiesen. Versuche mit der von Laveran gegen
Trypanosomiasis empfohlenen arsenigen Säure ergaben bei
ungeimpften Tieren gleichfalls ziemlich erhebliche Verminderung
der Blutkörperchenzahl (bei einer Maus von 18 g z. B. nach In-
jektion von 0,1 mg pro die in 3 Tagen von 10 auf 7 Millionen).
Ebenso fällt unter den von Wendelstadt versuchten Stoffen
die verhältnismäfsig günstige Wirkung des stark hämolytischen
Ricins auf. In dieser Beziehung reiht sich auch das von
Laveran und Mesnil bei Naganatieren mitErfolg angewandte
menschliche Serum den übrigen therapeutischen Mitteln an.

Alle diese Tatsachen fordern dazu auf, weiter zu untersuchen,
ob die sogar bei spontanen Remissionen zutage tretende hämo-
lytische Wirkung als unbedingtes Postulat aller die Trypano-
somiasis günstig beeinflussender Stoffe anzuerkennen ist, wie es
nach den bisherigen Untersuchungen, zumal bei dem auffallenden
Synchronismus der beiden Reaktionen für wahrscheinlich gelten
kann, und ferner, ob der mikrobizide und der hämolytische Körper
soweit identisch sind, dafs dadurch z. B. die nur bei Mäusen
ausgesprochenen Erfolge des Trypanrots ihre Erklärung finden.

Von Dr. med. A. Nifsle. 203

Literatur.

Argutinsky. Malariastudien. Archiv f. mikroskop. Anatomie, 1902, Bd. 61.

Askanazy. Über einen interessanten Bintbefund bei rapid letal verlau-
fender perniziöser Anämie. Zeitscbr. f. klin. Medizin, 1893, Bd. 23.

Derselbe. Über Botbriocephalasanämie und die prognostische Bedeutung der
Megaloblasten im anämischen Blute. Zeitschr. f. klin. Medizin, 1895,
Bd. 27.

Bertarelli. Untersuchungen und Beobachtungen über die Biologie und
Pathogenität des Bacillus prodigiosus. Zentralblatt f. Bakteriologie,
I. Abt Originale, 1903, Bd. 34.

Bremer. Über das Paranuklearkörperchen der gekernten Erythrozyten.
Archiv f. mikroskop. Anatomie, 1895, Bd. 45.

Derselbe. Die Identität des Paranuklearkörperchens der gekernten Erythro-
zyten mit dem Zentrosom. Archiv f. mikroskop. Anatomie, 1895, Bd. 46.

Celli u. Santori. Die Rindermalaria in der Campagna von Rom.
Zentralbl. f. Bakteriologie, 1897, Bd. 21.

Dehler. Beitrag zur Kenntnis des feineren Baues der roten Blutkörperchen
beim Hühnerembryo. Archiv f. mikroskop. Anatomie, 1895, Bd. 46.

Ehrlich. Verhandlungen des XI. Kongresses f. innere Medizin, 1892.

Ehrlich u. Lazarus. Die Anämie, 1898. (In Spezielle Pathologie und
Therapie von Nothnagel.)

Ehrlich u. Shiga. Farbentherapeutische Versuche bei Trypanosomen-
erkrankungen. Berliner klin. Wochenschrift, 1904, Heft 13 u. 14.

Gabritschewsky. Klinische hämatologische Notizen. Archiv f. experi-
mentelle Pathologie und Pharmakologie, 1891, Bd. 28.

Lavdowsky. Blut und Jodsäure und der sogenannte Ghemotropismus.
Zeitschr. f. wissenschaftl. Mikroskopie, 1893, Bd. 10.

Laveran u. Mesnil. Trypanosomes et Trypanosomiases, 1904.

Martini. Festschrift zum 60. Geburtstage von Robert Koch, 1903.

Negri. Über die Persistenz des Kernes in den roten Blutkörperchen er-
wachsener Säugetiere. Anat. Anzeiger, 1899, Bd. 16.

Nifsle. Zur Kenntnis der Nagana- und Rattentrypanosomen. Hygienische
Rundschau, 1904.

Schmauch. Über endoglobuläre Körperchen in den Erythrozyten der
Katze. Archiv f. patholog. Anat., 1899, Bd. 156.

Smith. Die Ätiologie der Texasfieberseuche des Rindes. Zentralblatt f.
Bakteriologie, 1893, Bd. 13.

Weidenreich. Studien Über das Blut und die blutbildenden und -zer-
störenden Organe. Archiv f. mikroskop. Anatomie, 1902, Bd. 61.

Wendelstadt. Über die Wirkung von Malachitgrün und anderer ver-
schiedenartiger Stoffe gegen Naganatrypanosomen bei weifsen Ratten.
Deutsche med. Wochenschr., 1904, Nr. 47.

204 Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen etc. Von Dr. med. Nifsle.

Erklärungen zu Tafel m.

Die Abbildungen entsprechen durch Auerlicht beleuchteten Präparaten,
welche mit Alkohol absolutus fixiert und mit der älteren Giemsamischung
gefärbt wurden.

Fig. 1. Geifsellofles Trypanosoma in polychromatischem Blutkörperchen :
Caderasinaus, mit Trypanrot behandelt.

Fig. 2. Zentrosomen mit hellem Hof im polychromatischen Blutkörper-
chen eines gesunden Meerschweinchens.

Fig. 3. Blut einer weifsen Ratte, bei der durch Injektion einer Prodi-
giosusaufschwemmung nach hochgradiger Naganainfektion akute Besserung
eingetreten war. Im untern dunklen polychromatischen Megalozyten aufser
den Zentrosomen Beste des eigentlichen Kerns. Mehrere zu Halbmonden
degenerierte, leicht bläuliche Erythrozyten; in einem noch deutliche Zentro-
somen.

Fig. 4. In polychromatischem Blutkörperchen Dehler scher Reifen, von
der Seite gesehen (Achtform); an zwei Stellen punktförmige Verdickungen.
Meerschweinchen im Beginn der spontanen Remission einer Cadörasinfektion.

Fig. 5. Dehler scher Reifen, von der Fläche gesehen, einige Tage
später. Polychromasie weniger ausgesprochen, Reifen dünner, mehr graurot.

Fig. 6. Durchschlüpfendes Tr. Brucei , Ratte.

Fig. 7. Durchschlüpfendes Tr. equinum, Maus. Einschnürung noch
erheblicher, hochgradige Infektion, daher viele Granula im Parasiten.

Archiv für Hygiene. Bd. LIH.

TafdlU.

1*1.

10

Flg. 2.

Mg. 8.

9

V

o

<

^ "

m

Ilf. ♦.

B». 5.

r

rif . e.

Flg. 7.

Druck und Verlag von R. OWenbourg, Münehen u. Berlin.

Über das Eindringen yon Bakterien in feinste Kapillaren.

Von

Dipl. Ing. Erich Hofstädter.

(Aas dem Hygienischen Institut der Technischen Hochschule zu Dresden.)

(Mit eitier Tafel.)

Nicht in allen Fällen steht einem Gemeinwesen in hygieni-
scher Beziehung einwandfreies Wasser zu Gebote, um damit den
Bedarf seiner Bewohner an Trinkwasser zu decken. Sehr häufig
mufs das Wasser, das aus Flüssen, Seen, Talsperren entnommen
wird, vorher gereinigt werden, ehe es der Leitung übergeben
werden kann. Diese Reinigung geschieht mit Hilfe von Filtern ;
sei es, dafs das Wasser grofse Sandfilter durchtreten mufs, ehe
es in die Leitung kommt, sei es, dafs die Filtration erst im
Hause selbst dadurch vor sich geht, dafs an dem Auslaufhalm
kleine Filter angeschlossen werden. Von beiden Filterarten er-
wartet man, dafs sie alle auch die kleinsten suspendierten Sub-
stanzen, in erster Linie also die beigemischten Mikroorganismen
zurückhalten.

Es hat sich nun herausgestellt, dafs diese Filter durchaus
nicht in gleicher Weise arbeiten. Es kommt z. B. vor, dafs das
eine Sandfilter drei Wochen und darüber ein gutes, keimarmes
Filtrat liefert, während das andere, scheinbar in der gleichen
Weise hergestellte, schon nach wenigen Tagen undicht wird.
Diese und andere Erscheinungen lenkten die Aufmerksamkeit
der Untersucher auf das Studium des Prozesses, der sich bei

Archiv für Hygiene. Bd. LUX. 15

206 D*b Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

der Filtration abspielt, und liehen die Frage entstehen, auf
welche Weise die Bakterien durch die Filter zurückgehalten
werden.

Wir haben es den Untersuchungen von Fränkel und
Piefke 3 ) zu verdanken, dafs man heute wenigstens bei den
Sandfiltern einigermafsen Klarheit über das Wesen dieses wich-
tigen Vorganges gewonnen hat. Als das Resultat dieser und
anderer Untersuchungen hat sich vor allem herausgestellt, dafs
die Wirkung der Sandfilter in hohem Mafse von dem Vorhanden-
sein und der Beschaffenheit einer oberflächlichen Schlammschicht
abhängig ist. Die Sandmassen allein sind nicht imstande, Bak-
terien zurückzuhalten, dazu sind die Poren, die sich zwischen
den einzelnen Körnchen des Feinkieses befinden, viel zu grofs.
Erst wenn diese durch Unreinigkeiten verschiedener Art, die im
Wasser enthalten sind (Schlammteilchen, abgestorbene und auf-
gequollene Bakterienleiber), verengt sind und sich dadurch eine
genügend dichte oberflächliche Schmutzhaut gebildet hat, wird
das Filter wirksam.

Ein weiteres Haupterfordernis für ein günstiges Ergebnis
der Sandfiltration ist das Einhalten einer gewissen, 100 mm pro
Stunde nicht übersteigenden Filtriergeschwindigkeit. Wird ein
Sandfilter zu stark beansprucht, so kann leicht ein Durch-
schwemmen der Bakterien stattfinden. Fränkel und Piefke 8 )
haben bei ihren Untersuchungen gefunden, dals Anfang und
Ende einer jeden Filtrationsperiode besonders gefährliche Zeiten
sind. Im ersteren Falle ist die Bildung der Schmutzhaut noch
nicht genügend weit fortgeschritten, um den Bakterien den Durch-
gang zu verwehren. Im anderen Falle ist die Stärke derselben
schon zu bedeutend, und es bedarf hoher Drucke, um überhaupt
Wasser hindurchzubekommen. Als Folge davon kann leicht ein
Durchpressen der Bakterien in die Tiefe oder ein Zerreifsen der
Schlammscbicht eintreten.

Aulser dieser Gefahr des Durchschwemmens der Bakterien
tritt bei langer Dauer der Filtration noch die Möglichkeit hinzu,
dafs ein Durchwachsen der Bakterien stattfindet. Bei langer Be-
nutzung des Filters sammelt sich in den Poren desselben ge-

Von Üipl.-lng. Erich Hofstaate*. 20?

nügend Nähruiaterial an, wodurch eine Vermehrung der Mikro-
organismen ermöglicht wird.

Die Kleinfilter sollen den Konsumenten in die Lage setzen,
aus dem ihm gelieferten, unvollkommen gereinigten Wasser voll-
kommen keimfreies Wasser herzustellen. Inwieweit sie dieser
Anforderung gerecht werden, kann man aus den zahlreichen, in
der Literatur behandelten Untersuchungen ersehen, die darüber
aasgeführt worden sind. Ebenso wie bei den Sandfiltern gilt es
heute als eine wissenschaftlich feststehende Tatsache, dafs
die Kleinfilter auf die Dauer kein keimfreies Filtrat
liefern.

Bei der grofsen Bedeutung der Kleinfilter in hygienischer
Beziehung ist es nicht zu verwundern, dafs sich die Forschung
in ausgedehntem Mafse dem Studium derselben widmete.

Es liegt mir fern, die Wirkungsweise und An-
wendung der Kleinfilter zu kritisieren. Vielmehr ver-
anlafst mich die heute noch in manchen Punkten zutage tretende
Unklarheit über das Wesen der Filtration, das Verhalten der
Bakterien bei diesem wichtigen Vorgange zum Gegenstand eines
genauen Studiums zu machen. Über die Gröfse der Poren der
Kleinfilter befindet man sich z. B. noch sehr im Unklaren. Es
sind nach dieser Richtung bis jetzt aufser einer Arbeit von
E. v. Esmarch 2 ) keinerlei Untersuchungen angestellt worden.
Und doch ist es von gröfstem Interesse, in dieser Beziehung
genaue Anhaltspunkte zu gewinnen. Ich stellte mir daher die
Aufgabe, das Hindurchgehen von Bakterien durch feinste Capil-
laren zu untersuchen. Bei den nahen Beziehungen, die zwischen
den in der Literatur befindlichen Arbeiten und den von mir an-
gestellten Untersuchungen bestehen, halte ich es für angebracht,
die von den verschiedenen Forschern vertretenen Ansichten über
Kleinfilter einer kurzen Betrachtung zu unterwerfen.

Zur Herstellung von Kleinfiltern hat man sich der mannig-
fachsten porösen Materialien bedient. In erster Linie kamen
hierfür Stoffe in Betracht, deren wasserreinigende Wirkung be-
kannt ist, wie feiner Sand und Tierkohle. Auch verschiedene

15*

208 D&a Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Faserstoffe wie Watte und Cellulose wurden in komprimiertem
Zustande verwendet. Über Filter aus letztgenannten Materialien
hat W. Hesse 6 ) Versuche angestellt. Er fand, dafs ihre Wir-
kung eiue äufserst geringe war. Schon nach verhältnisinäfsig
kurzer Zeit zeigte sich ein massenhaftes Auftreten von Keimen
im Filtrat. Bessere Resultate erzielte er mit Filtern, die aus
Tierkohle und komprimiertem Asbest hergestellt waren. Sie
hielten anfangs alle Keime zurück; erst nach einigen Tagen traten
Bakterien im Filtrat auf. Von Interesse ist die von Hesse be-
sonders bei Kohlefiltern gemachte Beobachtung, dafs nicht die
allerkleinsten Bakterienarten zuerst im Filtrat erschienen, sondern
ein schon etwas gröfserer Bazillus, der lebhafte Eigenbewegung
besafs. Es berechtigt diese Erscheinung zu der Folgerung, da[s
die Keime nicht passiv von der Filtrationsströmung durcli-
geschwemmt wurden, sondern aktiv durch das Filter hindurch-
gewachsen waren. Diese Annahme wird noch bestärkt durch
die Wahrnehmung, dass nach einiger Zeit die Menge der im
Filtrat enthaltenen Keime gröfser war als im Rohwasser. Ebenso
wie bei der Sandfiltration nach längerer Betriebsdauer kann man
auch hier auf eine Vermehrung der Bakterien im Filter selbst
schliefsen. Die günstigsten Resultate erhielt W. Hesse 6 ) mit
Filtern aus stark komprimiertem Asbest. In einer späteren Arbeit 7 )
beschreibt er eine Reihe von Versuchen, durch die er die Überlegen-
heit der von ihm vorgeschlagenen Asbestfilter über die Chamber-
land-Pasteurschen Tonfilter feststellt. Er behandelt eiugehend
den grofsen Einflufs verschieden hoher Drucke auf die Wirkung
der Filtration und führt den Beweis, dafs eine Erhöhung des
Druckes eine Verminderung der Leistungsfähigkeit zur Folge hat.
Weitere ausführliche Untersuchungen über Ton- und Asbest-
filter wurden von Plagge 19 ) angestellt. Nach ihm vermag die
Mehrzahl der bekannten Hausfilter keineswegs längere Zeit die
Bakterien zurückzuhalten. Es kann vielmehr der Keimgehalt
des Filtrates nach längerer Zeit 100 — 1000 mal gröfser sein als
der des Wassers vor der Filtration. Auch nach Plagge findet
eine reichliche Vermehrung der Bakterien innerhalb des Filters
selbst und ein Durchwachsen durch dieses statt.

Von Dipl. Ing. Erich Hofstädter. 209

Über die von Hesse 6 ) vorgeschlagenen Asbestfilter und die
Tonfilter verschiedener Konstruktion äufsert sich Plagge dahin,
dafs sie in der Tat eine Zeit lang völlig keimfreies Wasser liefern,
dafs dies aber auch nur eine vorübergehende Erscheinung sei.
Kubier 10 ) stellte ebenfalls über die Leistungsfähigkeit des
Pasteur Chamberlandschon Tonfilters eine gröfsere Anzahl von
Versuchen an. Er kam bei Anwendung aller Vorsichtsmars-
regeln zu dem Resultat, dafs es nur sehr kurze Zeit, nämlich
höchstens vier Tage vollkommen keimfreies Wasser liefert, und
er fand in Übereinstimmung mit Plagge, dafs nach ca. acht
Tagen im Filtrat mehr Keime enthalten waren als im Rohwasser.
Die Menge des Filtrats liefs ebenfalls bedeutend nach, da sich
auf der Oberfläche der Pilterkerze eine dichte Schlammschicht
bildete.

Aufser dem Pasteur-Chamberlandschen Tonfilter hat das aus
gebrannter Infusorienerde hergestellte Berkefeld- Filter eine grofse
Verbreitung gefunden und ist Gegenstand zahlreicher Unter-
suchungen gewesen. Die über die Leistungsfähigkeit dieses
Filters , namentlich hinsichtlich seines Verhaltens gegenüber
Typhus- und Cholerakeimen ausgesprochenen Meinungen sind
derartig verschieden, dafs es von grofsem Interesse ist, kurz
darauf einzugehen.

Hierbei ist allerdings die Ansicht Plagges zu erwähnen,
die besagt, dafs eine Unterscheidung der Keime in pathogene
und nicht pathogene bei der Filtration zunächst nicht in Betracht
komme. Er findet keine Erklärung dafür, dafs ein Filter patho-
gene Keime zurückhalten und nicht pathogenen Keimen den
Durchgang gestatten sollte.

M. Kirchner 8 ) sprach die Behauptung aus, dafs die ge-
nannten Kleinfilter keineswegs für die pathogenen Keime un-
durchlässig seien. Er führte seine Versuche derart aus, dafs er
dem Rohwasser Typhus- bzw. Cholerakeime enthaltende Nähr-
bouillon zusetzte. Es gelang ihm schon nach kurzer Zeit der
Nachweis der betreffenden pathogenen Keime im Filtrat. Dieses
Ergebnis führte ihn zu einer strengen Verurteilung der Klein-
filter.

210 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren. #

Der von M. Kirchner ausgesprochenen Meinung treten
M. Grub er 4 ) und H. Schöfer 21 ) mit Entschiedenheit entgegen.
Sie stellen die Behauptung auf, dafs nur durch Zusatz von Nähr-
lösung zum Rohwasser ein Durchwachsen von Typhus- und
Cholerakeimen möglich sei.

Die Ernährungsansprüche dieser pathogenen Keime seien mit
denen der gewöhnlichen Wasserbakterien nicht zu vergleichen.
Nach Gruber können nur solche Bakterienarten durch die Filter
hindurchwachsen, die in den Poren die Bedingungen für ihre
Vermehrung vorfinden. Bei den gewöhnlichen Wasserbakterien
ist dies der Fall, was durch die Tatsache bewiesen wird, dafs sie
oft im Filtrat in gröfserer Menge vorhanden sind als im Roh-
wasser. Für Typhus- und Cholerakeime ist nach Grub er das
Wasser eine viel zu schlechte Nährflüssigkeit, und es ist aus
diesem Grunde ihre Vermehrung im Filter unmöglich. Infolge-
dessen ist ein Durchwachsen dieser pathogenen Keime unter ge-
wöhnlichen Umständen gänzlich ausgeschlossen. Schöfer stellte
seine Versuche mit Typhus- und Cholerabazillen zum Unterschied
von Kirchner derart an, dafs er nicht Aufschwemmungen in Nähr-
bouillon, sondern in sterilem Leitungswasser benutzte. Er fand,
dafs die betreffenden Keime im Filtrat nicht erschienen; wohl
aber trat dies sofort ein, wenn er dem Rohwasser Nährlösung
zusetzte. Es wurde dadurch die Bedingung zur Vermehrung im
Filter erfüllt, und die Folge war ein Auftreten der Typhus und
Cholerakeime im Filtrat. Beide verschwanden aber, sobald die
Nährlösung durch Auswaschen entfernt war.

Diese von Grub er und Schöfer vertretene Ansicht wird
durch Versuche von Lübbert 12 ) bestätigt, der dem Rohwasser
Reinkulturen pathogener Keime zusetzte und nachwies, dafs sie
nicht ins Filtrat tibergingen. Die Verschiedenheit der von zahl-
reichen Forschern gemachten Angaben über die Zeit, während
welcher ein Filter keimfreie Filtrate liefert, ist nach Schöfer
zurückzuführen auf den grofsen Einflufs, den die Temperatur
ausübt. Wurde von den Beobachtern Wasser von Zimmertem-
peratur zu den Versuchen benutzt, so zeigte sich, dafs schon
nach einigen Tagen der Keimgehalt des Filtrates rasch anstieg.

Von Dipl.Ing. Erich Hofstädter. 211

Wandte man aber Wasser von niederer Temperatur an, so erhielt
man mehrere Wochen hindurch keimfreie Filtrate. Die Ursache
hiervon ist wiederum in den Lebensbedingungen der Bakterien
zu suchen. Durch höhere Temperaturen wird ihre Vermehrung
in hohem Malse begünstigt, durch niedere jedoch verhindert.

E. v. Esmarch 2 ) fand, dafs die bekannten Filterarten, selbst
wenn sie sämtliche gröfseren Bakterien mit Sicherheit zurück-
zuhalten vermögen, keineswegs als keimdicht zu bezeichnen sind,
weil sie von den kleinsten, mit den besten Mikroskopen nicht
erkennbaren Bakterien mit Leichtigkeit durchdrungen werden.

Aus der von vielen Forschern festgestellten Tatsache, dafs
die Filterwände von den Bakterien unter geeigneten Umständen
in verhältnismäfsig kurzer Zeit durchdrungen werden, kann man
den Schlufs ziehen, dafs die Poren der Filter bedeutend gröfser
sind als die Durchmesser der Bakterien. Nach Möller 16 ) müssen
Filter, die dauernd keimdicht bleiben sollen, Poren haben, die
kleiner sind als die kleinsten Keime, und er glaubt, dafs man
dies mit komprimiertem Asbest oder Ton erreichen kann. Man
vertritt heute die für die Theorie der Filtration wichtige Ansicht,
dals die Zurückhaltung der Bakterien in einem Filter nicht durch
die Feinheit der Poren, sondern durch Flächenattraktion bewirkt
wird. Man stellt sich vor, dafs, ebenso wie bei den Sandfiltern
die oberflächliche Schlammschicht die Wirksamkeit des Filters
ausmacht, bei den Kleinfiltern die Bakterien sich an der Ober-
fläche anlagern.

Angesichts dieser verschiedenen Ansichten über das Hin-
durchtreten von Bakterien durch Filter ist es von Interesse zu
untersuchen, wie eng Kapillaren sein müssen, damit Bakterien
durch sie nicht mehr hindurchzugehen vermögen, und die Kapil-
laren dann mit Schliffen von Filterkerzen zu vergleichen.

Es lag mir nun in erster Linie daran, sicheren Auf schlufs
über die Gröfse der Poren verschiedener Kleinfilter zu erlangen.
Zu diesem Zwecke verschaffte ich mir eine gröfsere Anzahl Filter-
kerzen, und zwar: 1. Tonfilter von der Kgl. Porzellanmanufaktur,
Berlin, 2. Tonfilter von Haldenwanger, Charlottenburg, 3. Berke-
feldsche Kieseiguhrfilter. Die ersteren beiden besafsen die von

212 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Pukall 20 ) angegebene und wegen ihrer grofsen Oberfläche als
am vorteilhaftesten gepriesene Ballonform. Die geringe Wider-
standsfähigkeit der Chamberland-Pasteurschen Filter veranlafste
Pukall in dieser Richtung Versuche anzustellen. Durch ge-
eignete Mischung verschiedener Kaoline, und namentlich durch
Anwendung höherer Temperaturen beim Brennen gelang es ihm,
ein Filter von gröfster Haltbarkeit herzustellen. Er war der
Meinung, dafs dasselbe nach seinem physikalischen Verhalten
Poren von gröfster Feinheit haben müfste.

Die von zahlreichen Forschern bis jetzt angestellten Unter-
suchungen wurden alle in der Absicht ausgeführt, den praktischen
Wert der Kleinfilter zu prüfen. Es lag mir fern und wäre zweck-
los gewesen, mit den Zellen Filtrationsversuche auszuführen,
sondern ich wollte einzig und allein rein theoretische Unter-
suchungen darüber anstellen, in welchen Zeiten die Zellen von
verschiedenen Bakterienarten durchdrungen würden. Es handelte
sich zuerst um die passende Wahl der Bakterien, die bei den
Versuchen zur Anwendung gelangen sollten. Da für mich nur
Reinkulturen in Betracht kamen, und ich die Anwesenheit anderer
Bakterien bei den Versuchen strengstens vermeiden wollte, kamen
in erster Linie Bakterienarten in Betracht, die sich mit grofser
Leichtigkeit nachweisen lassen. Es sind dies vor allem die Farb-
stoff bildenden Bakterien. Da aufserdem ein schnelles und
üppiges Wachstum der betreffenden Bakterien erwünscht war,
so wählte ich für meine Versuche Bacillus prodigiosus und Bacillus
fluoresceus longus. Den ersteren züchtete ich auf Agar, den
letzteren auf Gelatine. Aufser diesen beiden sehr kleinen Bak-
terienarten wählte ich zu meinen Versuchen als gröfseren den
Heubazillus, der durch seine charakteristische Wuchsform leicht
zu erkennen ist.

Von Kokken, deren Verhalten Kapillaren gegenüber eben-
falls von Interesse schien, wählte ich zwei Arten. Die einen
hatte ich aus Ingwerwurzel isoliert, die anderen waren grofse
gelbe Kokken.

Die Versuche stellte ich in der folgenden Weise an. Die
Zellen wurden durch wiederholtes Auskochen in destilliertem

Von Dipl.Ing. Erich Hofstädter. 213

Wasser gereinigt und durch Erhitzen in strömendem Wasser-
dampf sterilisiert. Die Berkefeld-Zellen mufsten wiederholt mit
einer Bürste abgerieben werden, da sich von denselben ein feiner
Schlamm loslöste, der während des Versuches die Nährlösung
trübte und ein genaues Beobachten der Versuche auf das Wachs-
tum von Bakterien hin sehr erschwerte.

Um während der Versuche die Zellen vollkommen steril
aufzubewahren, traf ich die Fig. 1 dargestellte Anordnung.
Ich setzte die Zelle in ein dünnwandiges Becher-
glas und überspannte dieses mit einer Gummi- f$f

kappe, durch deren Mitte ich mit einer Nadel
ein Loch stiefs und eine bis in die Zelle reichende,
am unteren Ende spitz ausgezogene Glasröhre
hindurchsteckte. Letztere wurde oben mit einem
Wattebausch verschlossen. Die zu den Versuchen
benutzte Nährlösung bestand aus lproz. Fleisch-

120

o

extraktbouillon mit Zusatz von 1 °/ Pepton und Fig x

0,5% Kochsalz. Bei den Versuchen mit Heu-
bazillus nahm ich an Stelle der Bouillon Nährgelatine aus
Fleischwasser, in der er besser wuchs.

Der Apparat wurde nun soweit mit Nährlösung gefüllt, dafs
nur der ballonförmige Teil der Zellen davon bedeckt wurde.
Hierauf erfolgte durch ^stftocHg 68 Erhitzen im strömenden Dampf
die Sterilisation des Apparates, und nach dem Abkühlen wurde
durch das Glasrohr das Bakterienmaterial in das Innere der Zelle
gebracht. Es geschah dies in der Weise, dafs ich der Reinkultur
der betreffenden Bakterienart eine grofse Öse entnahm, diese
in 10 ccm sterile Bouillon brachte und damit gehörig vermengte.
Die so hergestellte Aufschwemmung füllte ich mittels einer
sterilen Pipette in das Innere der Zelle. Die Pipetten stellte ich
mir durch Ausziehen von Glasröhren her und benutzte sie nur
zu einem Versuche. Die so geimpften Zellen wurden in dem
Brütschrank einer Temperatur von ca. 35° C ausgesetzt und täg-
lich nachgesehen, ob die aufsen befindliche Nährlösung noch
vollkommen klar war, also die Wandung der betreffenden Zelle
von Bakterien durchdrungen worden war oder nicht. Zeigte sich

214

Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

bei einem Apparate eine deutliche Trübung der Nährlösung, so
wurde er auseinandergenommen und der Nachweis geführt, dafs
die bei dem Versuche zur Anwendung gekommene Bakterienart
auch wirklich in Reinkultur vorhanden war.

Bei der von mir getroffenen Anordnung der Versuche, ins-
besondere des Abschlusses der Zellen, ist eine Infektion durch
andere Keime von aulsen her nicht ein einziges Mal eingetreten.
Wohl aber stellten sich mir grofse Schwierigkeiten in den Weg
bei der Sterilisation der schon zu einem Versuche benutzten
Zellen. Da es vor allem in bezug auf die Genauigkeit der Re-
sultate interessant war, zu erfahren, in welchen Zeiten ein und
dieselbe Zelle von verschiedenen Bakterienarten durchdrungen
würde, machte sich eine gründliche Reinigung der schon be-
nutzten Zellen erforderlich. Zu diesem Zwecke wässerte ich letz-
tere zunächst wiederholt in destilliertem Wasser, um die Nähr-
lösung aus den Poren zu entfernen, und setzte mittels Gummi-
Stopfens ein ca. 1,5 m langes Trichterrohr auf die Zellen, um
Wasser durch deren Wandungen treiben zu können. Darauf
wurden die Zellen ca. 2 Stunden lang ausgekocht und nun zu
anderen Versuchen benutzt. Sehr oft trat nach 1 — 2 Tagen in
den z. B. mit Kokken und Bacillus fluorescens angesetzten Ap-
paraten bereits starkes Wachstum ein. In allen Fällen war es
ein gröfserer, Gelatine verflüssigender Bazillus, der sich hier ein-
geschlichen hatte. Die Zellen wurden darauf wieder gewässert
und im Autoklaven 1 Stunde auf 110° erhitzt, doch auch das
erwies sich als ungenügend, und erst nach 2 stündigem Erhitzen
bei 1 Atm. im Autoklaven waren die Zellen vollkommen steril.

Tabelle I.
Angabe der Tage, innerhalb welcher die Bakterien durch die Zellen

hindnrehtraten.

Bac. prodigiosus
Bac. fluorescens
Heubazillus . .
Gelbe Kokken .
Ingwer-Kokken .

Haldenw.Z.

14

Berliner.-Z.

14

Berkefeld-Z.

25

Von Dipl. Ing. Erich Hofstädter. 215

Heubazillen und gelbe Kokken waren innerhalb von 30 Tagen
noch nicht hindurchgetreten. Der Versuch wurde dann abge-
brochen.

Aus dieser Zusammenstellung ersieht mau einen bedeutenden
Unterschied in dem Verhalten der einzelnen Bakterienarten.
Bacillus prodigiosus durchdringt die Zellen am schnellsten. Es
ist dies wahrscheinlich durch seine äufserst geringe Gröfse und
vor allem durch seine lebhafte Eigenbewegung zu erklären. Pro-
digiosus am nächsten steht Fluorescens. Er zeichnet sich eben-
falls durch schnelle Eigenbewegung aus, ist aber immerhin be-
trächtlich gröfser als Prodigiosus, braucht infolgedessen auch
längere Zeit zum Durchwachsen. Die gröfste von mir ange-
wandte Bakterienart, der Heubazillus, durchdrang die Zellen
trotz ausgezeichneten Nährbodens selbst in 30 Tagen nicht.
Wegen seiner schnellen Bewegungsfähigkeit könnte man zu dem
Glauben neigen, dafs er in verhältnismätsig kurzer Zeit die Zellen
durchwandern würde. Doch es ist hier seine bedeutende Länge
und vor allem die für ihn charakteristische Kettenbildung, die
oft ganz beträchtliche Ausdehnung erreicht, in Betracht zu
ziehen. Eine weitere Erklärung findet man in dem Vergleich
der mit Prodigiosus, Fluorescens und Heubazillus angesetzten
Bouillonkulturen. Während man bei den ersteren beiden eine
äufserst starke Trübung der Nährlösung wahrnimmt, ist die durch
den Heubazillus hervorgerufene nur sehr gering, und nur die auf
dem Boden sich ansammelnden Flocken lassen deutlich das
Wachstum desselben erkennen.

Von Interesse ist ferner der in dem Verhalten der beiden
Kokkenarten zutage tretende Unterschied. Die gelben Kokken
durchdringen trotz starken Wachstums selbst in 30 Tagen nicht
die Zellen, während die Ingwer-Kokken schon in 14 Tagen die
Tonzellen durchwandern. Bei allen mit den gelben Kokken von
mir angestellten Versuchen war im Innern der Zellen ein starker
Bodensatz zu bemerken, und die Nährlösung war gänzlich in
Fäulnis übergegangen, während aufsen nicht die geringste Trü-
bung wahrzunehmen war.

216 D&a Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

In bezug auf die Dauer der Versuche war ich der Meinung,
dafs die Frist von 30 Tagen eine genügend lange sei. Den be-
treffenden Bakterienarten waren die günstigsten Bedingungen für
schnelles Wachstum und reichliche Vermehrung gegeben, und es
wäre unter diesen Umständen überflüssig gewesen, die Dauer der
betreffenden Versuche noch länger auszudehnen.

Deutlich werden die Resultate auch beeinflufst durch die
Stärke der Zellwand und deren mehr oder weniger dichtes Ge-
füge. Die Haldenwangersche war ungefähr doppelt, die Berke-
feldsche ziemlich dreimal so stark als die Berliner-Zelle. Während
dies beim Prodigiosus von ganz geringem Einflüsse ist, tritt es
beim Fluorescens schon deutlicher zutage und der gröfste Unter-
schied besteht bei den Ingwer-Kokken. Fluorescens braucht zum
Durchwachsen der Berkefeld-Zelle 4 Tage, die Ingwer-Kokken
10 Tage mehr Zeit als zur Durchdringung der Tonzellen.

Die weitere Aufgabe bestand darin, genaue Kenntnis über
die Gröfse der Poren der verschiedenen Zellen zu erlangen. Die
einzige Möglichkeit, dies zu erreichen, bestand in der Anfer-
tigung von DünnschlifEen. In der Mineralogie bedient man sich
bekanntlich dieser Methode, um das Gefüge poröser Gesteine,
Schlacken usw. näher zu studieren, und die Gestalt und Gröfse
der in ihnen vorkommenden Hohlräume kennen zu lernen. Zu
diesem Zwecke wurden die Zellen zertrümmert, zum Schleifen
geeignete Stücke herausgesucht und sorgfältig getrocknet. Letz-
tere wurden in Kanadabalsam gekocht, um die Poren damit aus-
zufüllen und ein Verstopfen derselben beim Schleifen durch
Schmirgel usw. zu verhindern. Das so behandelte Stück der
Tonzelle wurde auf einen Objektträger mit Kanadabalsam auf-
gekittet, nachdem an ihm eine ebene Fläche erzeugt worden war,
und mit der Hand ein Schliff von möglichster Feinheit herge-
stellt. Es ergab sich bei der Betrachtung der so gewonnenen
Dünnschliffe unter dem Mikroskop die überraschende Tatsache,
dafs die Poren der Zellen mitunter von bedeutender Gröfse waren,
und dafs zwischen den drei verschiedenen von mir benutzten
Arten in dieser Hinsicht nur ein verhältnismäfsig geringer Unter-
schied bestand. In bezug auf die Anzahl der Poren stand die

Von Dipl. Ing. Erich Hofstädter.

217

Berkefeld-Zelle obenan, während die Berliner-Zelle nur äufserst
wenig grofse Poren aufwies, überhaupt ein viel dichteres Gefüge
zeigte. Die auf Tafel IV bei 50facher Vergröfserung dargestellten
Abbildungen der Zellschliffe lassen diesen Unterschied deutlich
erkennen. Die Dimensionen der gröfsten in den einzelnen Dünn-
schliffen gemessenen Hohlräume will ich in der folgenden Über
sieht in /i angeben.

Tabelle IL
Dimensionen 4er gToTsten Poren (In /<).

Haldenw.Z

| Berliner-Z.

Berkefeld-Z.

L. | ß.

L.

B.

L.

B.

100

100

40

75

100

100

60

100

! 40

60

90

90

50

75

25

30

75

100

Die Vermutung, dafs diese Hohlräume durch unvorsichtige
Behandlung des höchst empfindlichen Materials beim Schleifen
entstanden sein könnten, ist gänzlich ausgeschlossen, da der
Schliff nach dem Schleifen eine spiegelglatte Oberfläche hatte,
und etwaige Sprünge oder gar Lücken selbst bei genauester Be-
trachtung nicht zu bemerken waren.

Bei dem Vorhandensein derartig grofser Hohlräume in den
Wandungen der Zellen kann man mit Sicherheit annehmen, dafs
in ihnen eine Vermehrung der Bakterien stattfindet. Dies wäre
festgestellt durch die Herstellung von gefärbten Präparaten. Ich
wurde hauptsächlich durch den Erfolg der von Miller 14 ) ange-
stellten Untersuchungen über die in zerstörtem Zahnbein ent-
haltenen Bakterien veranlagst, die nämliche Färbung bei den
Tonzellen anzuwenden. Miller stellte aus dem Zahnbein feine
Schliffe her, färbte die darin enthaltenen Bakterien nach einer
besonderen Methode, und es gelang ihm auf diese Weise, über
die Anordnung der Bakterien genauen Aufschi ufs zu erhalten.
Um die Bakterien in Dünnschliffen von Filtern sichtbar zu
machen, filtrierte E. v. Esmarch 2 ) durch die betreffenden Filter

2 18 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

ca. 5 — 10 Minuten lang wässerige Fuchsinlösung. Es gelang mir
durch eine derartige einfache Färbung nicht, befriedigende Re-
sultate zu erzielen.

Gröfsere Anhäufungen von Bakterien waren deutlich zu er-
kennen, vereinzelte Bakterien hingegen traten gegenüber stark
gefärbten Partien der Zellmasse vollkommen zurück. Ich hielt
aus dem Grunde eine Entfärbung der Zellmasse durch Anwen-
dung der G ramschen Färbungsmethode für unbedingt erforder-
lich. Nach einigen mifslungenen Versuchen, Bacillus fluorescens
und prodigiosus in den Schliffen zu färben, setzte ich einige
Haldenwangersche Zellen an, in deren Inneres ich faule Bouillon
brachte, in welcher, wie ich mich vorher überzeugt hatte, ein
gröfserer, nach Gram gut färbbarer Proteus ähnlicher Bazillus,
in einem andern Fall eine gröfsere Kokkenart in Menge vor-
handen war. Nach ca. 8 Tagen wurden von den Zellen Schliffe
angefertigt, die ich nach der Günther -Gram sehen Methode
färbte. Der Kanadabalsam wurde, wie oben, aus dem Schliff
entfernt, und dieser darauf ca. J /i Stunde lang in die Farbstoff-
lösung gelegt, die aus 1 Teil konzentrierter alkoholischer Gentiana-
violettlösung und 9 Teilen Anilinwasser bestand. Darauf kam
der Schliff einige Minuten in Jod-Jodkaliumlösung und wurde
dann solange in oft erneuerten Alkohol gelegt, bis keine Farb-
wolken mehr aufstiegen. Nach dem Aufhellen in Xylol bettete
ich den Schliff in Kanadabalsam ein.

Die so erhaltenen Präparate, von denen auf Tafel IV, Fig. 5
und 6, einige Ansichten abgebildet sind, gaben ein deutliches Bild
von der Anordnung der Bakterien. An manchen Stellen waren
gröfsere Anhäufungen derselben wahrzunehmen, aber auch auf
der übrigen Fläche waren sie in mehr oder weniger grofser Zahl
vorhanden. Die letztere Beobachtung läfst auf das Vorhanden-
sein von vielen feinen Poren schliefsen, die nur bei Schliffen
von allergrößter Feinheit zutage treten würden.

Durch die Herstellung dieser Präparate gelang mir also der
Nachweis, dafs die ganze Zellwandung von Bakterien durchsetzt
ist und besonders in den gröfseren Poren eine Anhäufung der-
selben stattfindet.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädttt. 219

Nachdem ich das Verhalten einiger Bakterienarten gegen die
Kleinfilter festgestellt und durch die Anfertigung von Dünn-
schliffen und gefärbten Präparaten einigermafsen Klarheit über
die Beschaffenheit der Poren von Kleinfiltern gewonnen habe,
will ich nun zum Hauptteil meiner Arbeit, dem Eindringen von
Bakterien in feinste Kapillaren übergehen. Zuvor will ich noch
eine kurze Übersicht über die Untersuchungen geben, die bereits
über das Eindringen von Bakterien in Kapillaren angestellt
worden sind. In erster Linie sind hier die ausgedehnten Unter-
suchungen zu erwähnen, die Pfeffer 16 ) 17 ) ausführte, um die
durch chemische Reize hervorgerufenen Richtungsbewegungen
von Bakterien und anderen Mikroorganismen kennen zu lernen,
und vor allem um die Reizschwellen festzustellen.

Die Methode, deren sich Pfeffer 18 ) bei seinen zahlreichen
Versuchen bediente, bestand darin, dafs er 7 — 12 mm lange Glas-
kapillaren, die meist innere Durchmesser von 0,1 — 0,14 mm und
0,03 — 0,04 mm hatten, zum Teil mit der zu untersuchenden Flüs-
sigkeit anfüllte. Es geschah dies derart, dafs er die Kapillaren
auf einer Seite zerschmolz, in ein Uhrglas mit der betreffenden
Lösung brachte und letztere durch Evakuieren unter der Luft-
pumpe ca. 2— 4 mm weit einsaugte. Die Kapillaren wurden dar-
auf sorgfältig mit Wasser abgespült und unter dem Mikroskop
zu dem geimpften Wassertropfen geschoben. Auf zwei Papier-
streifen legte Pfeffer ein Deckglas über den Tropfen, um ein
zu schnelles Verdunsten desselben zu verhindern. Zuerst unter-
suchte Pfeffer das Verhalten der Samenfäden von Farnkräutern,
die mit lebhafter Eigenbewegung ausgestattet sind, gegen 0,01- bis
0,5 proz. Lösungen von Apfelsäure. Es zeigte sich, dafs schon
nach kürzester Zeit ein zahlreiches Einwandern derselben in
Kapillaren stattfand. Die Samenfäden änderten ihre Bewegungs-
richtung und bewegten sich nach der Öffnung der Kapillare hin.
Enthielt das Wasser nicht eine zu grofse Anzahl davon, so waren
mitunter nach ca. 1 Stunde fast alle in das Innere der Kapillare
eingedrungen. Mit fortschreitender Diffusion der Apfelsäure
nahm die durch sie hervorgerufene Reizwirkung ab. Selbst eine

220 Dae Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

0,001 proz. Lösung von Apfelsäure rief noch einen deutlich wahr-
nehmbaren Reiz hervor.

In bezug auf meine Untersuchungen sind die von Pfeffer
über das Verhalten der Bakterien angestellten Versuche von weit
gröfserem Interesse. Die von ihm zuerst benutzten Arten waren
ein gewöhnlicher Fäulnisbazillus und Spirillum uudula. Aller-
dings wandte er diese nicht in Reinkultur an, sondern er hatte
ein Gemenge mehrerer Arten, und er benutzte die Flüssigkeit
erst dann, wenn die zu untersuchende Art in ihr das Über-
gewicht hatte. Die Kapillaren von 0,025—0,05 mm inneren
Durchmesser wurden mit 1 proz. Fleischextrakt- oder 1 ptoz. As-
paraginlösung zum Teil angefüllt. Wurden sie zu dem die be-
treffende Bakterienart enthaltenden Tropfen geschoben, so fand
eine massenhafte Ansammlung um die Öffnung der Kapillare
und ein zahlreiches Eindringen in diese statt. Aufserdem war
nach kurzer Zeit am Ende der Flüssigkeitssäule in den Kapil-
laren eine reichliche Anhäufung von Bakterien zu bemerken, wo
hin sie aus Verlangen nach Sauerstoff gewandert waren. Be-
obachtete er das Verhalten an der Öffnung der Kapillaren, so
konnte er ein Anstofsen mancher Bakterien an den Rand der
Öffnung und eine dadurch hervorgerufene Ablenkung von der
Richtung in das Innere der Kapillare feststellen. Begreiflicher-
weise ist die Möglichkeit des Anstofsens der Bakterien um so
gröfser, je enger man die Kapillaren wählt, und infolgedessen
wird die Zahl der in die letzteren eindringenden Bakterien mit
der Verringerung der Weite ebenfalls abnehmen.

Als Resultat seiner Untersuchungen fand Pfeffer, dafs die
Bakterien durch die verschiedensten Nährstoffe angelockt, durch
zu hohe Konzentration derselben aber abgestoben wurden.

Die in seiner zweiten Arbeit 17 ) beschriebenen Versuche unter-
scheiden sich von den eben besprochenen besonders durch die
Anwendung von Reinkulturen. Die Weiten der von ihm be-
nutzten Kapillaren waren ungefähr dieselben wie vorher:
0,03—0,06 mm für kleine Bakterien,
0,05—0,08 » » gröfsere »
0,06—0,12 > » gröfsere Organismen.

Von Dipl.-Ing. Erich Hof Städter. 221

Ihre Länge betrug ebenfalls 4 — 7 mm. Die Kapillaren wurden
vorher mit der Versuchsflüssigkeit ausgewaschen, indem sie ge-
füllt und durch entsprechendes Evakuieren 1 — 2 mal ausgesaugt
wurden.

Bei gröfseren Organismen benutzte Pfeffer 30 — 70 fache,
bei kleineren 100— 200 fache Vergröfserung. Mit verschiedenen
Bakterienarten bestimmte Pfeffer die Reizwirkungen von zahl-
reichen anorganischen und organischen Verbindungen. Es ge-
lang ihm die genaue Feststellung der Reizschwelle und die Auf-
findung der diese Vorgänge beherrschenden Gesetzmäßigkeiten.
Die verschieden starke Reizbarkeit der Bakterien ermöglichte es
ihm, eine wenn auch nicht ganz genaue Trennung verschiedener
in einem Gemisch enthaltener Bakterienarten auszuführen. Eine
empfindliche Art liefs sich in eine Kapillare schon durch schwache
Reizmittel einfangen, die auf weniger empfindliche Arten noch
keinen Reiz ausübten.

Es hätte mich zu weit geführt, wenn ich diese von Pfeffer
angestellten chemotaktischen Untersuchungen in ebenso ausge-
dehnter Weise mit feineren und allerfeinsten Kapillaren wieder-
holt haben würde. Für mich hatte nur die Beantwortung der
Frage Bedeutung, ob die Bakterien, durch ihnen dargebotene
Nährstoffe angelockt, auch in die feinsten Kapillaren eindringen.
Bevor ich zur Beschreibung der von mir in dieser Richtung an-
gestellten Versuche übergehe, will ich einige Worte über die
Wahl des Glases und die Art und Weise der Herstellung der
feinsten Kapillaren vorhergehen lassen.

Die Wahl des Glases.

Anfangs benutzte ich zur Herstellung der Kapillaren Röhren
von gewöhnlichem Glas. Da aber bei einer Reihe von Versuchen
die Nährlösung wochenlang mit dem Glase in Berührung blieb
und ein schädigender Einflufs des letzteren das Resultat in hohem
Mafse beeinträchtigt hätte, war es ausgeschlossen, die Kapillaren
ohne weitere Behandlung zu den Versuchen zu benutzen. Ich
hatte deshalb die Absicht, die von mir hergestellten feinsten
Kapillaren, deren feinste einen Durchmesser von nicht ganz

Archiv für Hygiene. Bd. Uli. 16

222 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Viooo mm besaiten, vor dem Gebrauch einer gründlichen Reinigung
zu unterziehen. Sie sollten mit verdünnter Schwefelsäure zwecks
Entfernung der anhaftenden Alkalien behandelt, darauf mit destil-
liertem Wasser ausgespült und bei höherer Temperatur getrocknet
werden. Der Versuch lehrte aber, dafs die Ausführung dieser
Reinigung mit den gröfsten Schwierigkeiten verbunden, ja
geradezu unausführbar zu nennen ist. Um die in die Kapillare
eingesaugte Schwefelsäure wieder zu entfernen und mit destil-
liertem Wasser jegliche Spuren davon auszuwaschen, bedarf es
der Anwendung sehr hoher Drucke. Und selbst bei der Be-
nutzung derartig hoher Drucke würde es lange Zeit dauern, ehe
genügend Wasser durch die Kapillaren hindurchgeprefst worden
wäre, um die letzten Reste der Schwefelsäure zu entfernen.

Aus diesen Gründen mufste ich von einer vorherigen Reini-
gung der Kapillaren und damit auch von einer Benutzung des
gewöhnlichen Glases absehen. Ich wählte nun zu meinen Ver-
suchen eine Glassorte, deren hoher Wert für bakteriologische
Zwecke schon von verschiedenen Seiten bestätigt worden ist,
nämlich das Schottsche Borosilikatglas 59 III. In neuester Zeit
führte G. Hesse 6 ) Versuche über die Alkaliabgabe verschiedener
Gläser aus. Er fand, dafs die Wahl des Glases von grofsem Ein-
flüsse auf das Wachstum der Bakterien ist. Nach Hesse kommen
im Jenaer Normalglas ungefähr 5 — 6 mal soviel Keime zur Ent-
wicklung als in gewöhnlichen Gläsern. Ganz besonders gün-
stige Resultate erzielte er aber mit dem wegen seiner äufserst ge-
ringen Alkaliabgabe bekannten Schott sehen Borosilikatglas 59 III.
In Gläsern aus diesem Material hergestellt wuchsen ca. 20 — 30°/
mehr Keime aus als in den gewöhnlichen Jenaer Gläsern. Im
Vergleich zu den gewöhnlichen Glassorten sind die Vorzüge dieses
Glases ganz bedeutend, und aus diesem Grunde glaubte ich es
ohne Bedenken bei meinen Versuchen anwenden zu dürfen.

Die Herstellung der Kapillaren.

Zur Ausführung meiner Versuche brauchte ich Kapillaren
von gröfster Feinheit. Der innere Durchmesser der feinsten durfte
nicht ganz ^iooo mm betragen. Aufserdem waren aber auch weitere

Von DipL-Ing. Erich Hofetädter. 223

Kapillaren, deren Durchmesser einige Viooo mm bis mehr als J / 100 mm
betrugen, erforderlich.

Von dem Schottschen Borosilikatglas 59 III beschaffte ich
mir eine gröfeere Anzahl Stabröhren von kleinstem inneren
Durchmesser. Der äufsere Durchmesser derselben schwankte
zwischen 4—6 mm, die Öffnung der Kapillaren war gerade noch
mit blofsem Auge wahrzunehmen und betrug ca. l j 10 mm und
darunter. Aus diesen Stabröhren stellte ich mir die Kapillaren
auf folgende Weise her. Ich schnitt aus ihnen Stücke von ca.
12 cm Länge, fafste die Enden eines Stückes mit den Händen
und erhitzte die Mitte unter beständigem Drehen in der heifsen
Flamme einer Gebläselampe. Wurde das Glas rotglühend und
fing an zu erweichen, so liefs ich im richtigen Augenblick von
einer anderen Person das eine Ende fassen und nahm das Rohr
aus der Flamme, nachdem ich dem Betreffenden ein Zeichen
gegeben hatte, sich möglichst schnell damit zu entfernen. Das
Gelingen hing lediglich von dem rechtzeitigen Herausnehmen
aus der Flamme und dem unmittelbar darauf durch den schnellen
Lauf der anderen Person in entgegengesetzter Richtung be-
wirkten Ausziehen ab. Bei der schweren Schmelzbarkeit und
Zähigkeit des Barosilikatglases in erweichtem Zustande war ein
starkes und langes Erhitzen nötig und es erforderte längere
Übung, ehe befriedigende Erfolge erzielt wurden.

Das Sortieren der Kapillaren.

Auf diese Weise erhielt ich Kapillarfäden von ca. 1,5 m
Länge, an deren Enden sich noch die Stücke der Stabröhren
befanden. Die Stärke der so erhaltenen Kapillaren war äufserst
gering, sie betrug im Durchschnitt 0,2 — 0,4 mm. Das Umgehen
damit erforderte aus dem Grunde grofse Vorsicht. Die Messung
und das Sortieren der Kapillaren geschah auf folgende Weise.

Die Hauptlänge, nicht ganz 2 / 8 des durch das Ausziehen er-
haltenen Kapillarfadens, war von ungefähr gleichem inneren und
äufseren Durchmesser. Die stärkeren, an den Enden befind-
lichen Teile wurden entfernt und das mittlere Stück in Längen

von 10 — 12 cm zerteilt; doch geschah dies nicht auf einmal,

16*

224 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

sondern nachdem der innere Durchmesser des vorhergebenden
festgestellt war. Zu diesem Zwecke wurden die Enden des be-
treffenden Stückes vorsichtig durch kurze Berührung mit der
Sparflamme eines Bunsenbrenners zugeschmolzen, um jegliche
Verunreinigung des Kapillarinnern durch Immersionsöl usw. aus-
zuschließen. Darauf wurde der Kapillarfaden auf einen Objekt-
träger gelegt, in der Mitte mit einem Tropfen Zedernöl versehen
und mit der Ölimmersion unter Benutzung eines Okularmikro-
meters der Durchmesser der Kapillare gemessen. Da zwischen
2—3 Stücken ein nennenswerter Unterschied in der Gröfse des
Durchmessers nicht bestand, war es unnötig, alle Stücke einer
Messung zu unterwerfen. Die Entfernung des Immersionsöles
geschah durch Reinigung der Kapillare mit Benzin und Alkohol.

Die gemessenen Stücke wurden in Reagensgläsern aufbewahrt,
die zum Schutze gegen Staub mit Wattestopfen versehen waren.
Es gelang mir durch lange fortgesetztes Ausziehen von Kapil-
laren eine Sammlung der verschiedensten Gröfsen zu erhalten,
was für die Ausführung meiner Versuche von grölstem Wert war.
Es waren z. B. Gröfsen von 0,3 — 2,0 /u aufwärts vorhanden, die
sich nur durch 8 / 10 /u unterschieden. Weitere Kapillaren bis ca.
20 ju waren nach Unterschieden von 1,5 jm geordnet

Die genaue Messung.

Die von mir soeben beschriebene Methode der Messung der
Kapillaren war nur eine oberflächliche, deren ich mich nur des-
halb bediente, weil es mir in der Hauptsache darauf ankam, die
beim Ausziehen erhaltenen Stücke möglichst schnell nach ihrem
inneren Durchmesser zu sortieren. Bei den für bestimmte Ver-
suche benutzten Kapillaren bedurfte es allerdings einer weitaus
gröfsereu Genauigkeit der Messung.

Wegen der Verschiedenheit der Brechungsexponenten des
Glases 59 III und des Zedernöles entsprachen die derart erhal-
tenen Werte nicht ganz der wirklichen Weite. Es war also un-
bedingt erforderlich, ein Immersionsöl anzuwenden, das den
gleichen Brechungsexponenten wie das Borosilikatglas besafs.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 225

Von Schott u. Gen., Jena, wurde mir der Brecbungsexponent

dieses Glases als

n Na = 1,4967

angegeben. Flüssigkeiten, deren Brechungsexponenten dem an-
gegebenen am nächsten kommen, sind chemisch reines Toluol
und Ortho-Xylol mit folgenden Brechungsexponenten:

T

20° Toluol n Na = 1,4955,
18° o-Xylol n Na = 1,4986.

Es gelang mir, beide Flüssigkeiten in chemisch reinem Zu-
stande zu bekommen. Bei der ziemlichen Obereinstimmung ihrer
Brechungsexponenten mit dem des Glases 59 III wandte ich beide
als geeignetste Immersionsöle bei meinen genauen Messungen
an. Da aber das Toluol und in noch höherem Mafse das
o-Xylol in kurzem den aus Kanadabalsam bestehenden Kitt der
Immersionslinie aufgelöst und diese zerstört hätte, machte sich
eine andere Anordnung als gewöhnlich erforderlich. Um das
Toluol resp. o-Xylol von einer Berührung mit der Linse fernzu-
halten, deckte ich über die Kapillare ein Deckgläschen und auf
dieses brachte ich einen Tropfen Zedernöl, in das ich die Im-
mersionslinse einsenkte. Um dem Deckgläschen einen festen
Halt zu geben, legte ich auf beide Seiten darunter parallel zur
Kapillare nahe an den Rand zwei weitere Kapillare von der-
selben Stärke wie jene. Mittels eines Glasstabes brachte ich die
betreffende Flüssigkeit tropfenweise unter das Deckglas, und zwar
derart, dafs der ganze Raum unter demselben davon erfüllt war.
Während einer Messung machte sich allerdings oft wegen des
schnellen Verdunstens der betreffenden Flüssigkeiten ein Nach-
füllen nötig.

Ich stellte nun zuerst einen Vergleich über die Verschieden-
heit der Werte an, die man erhält, wenn man Zedernöl, Toluol
oder o-Xylol als Immersionsöl anwendet. Hinsichtlich der das
Innere der Kapillare erfüllenden Flüssigkeit erschien es mir am
vorteilhaftesten, im ersteren Falle Wasser, in den beiden anderen
die betreffenden Flüssigkeiten in gefärbtem Zustande zu nehmen.

226 Da* Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Ich färbte sie mit Alkannin, das sich dafür als sehr geeignet
erwies und von mir in Form der im Handel befindlichen Paste
angewandt wurde.

Ich nahm nun drei Kapillaren von ganz gleichem Durch-
messer und liefs in diese die betr. Flüssigkeiten einsaugen. Den
inneren Durchmesser der ersteren bestimmte ich, indem ich einen
Tropfen Zedernöl auf dieselbe brachte und in der gewöhnlichen
Weise eine Messung ausführte. Bei den anderen führte ich die
Messung mit Toluol resp. o-Xylol als Immersionsöl aus. Es
war in dem Falle äufserst schwierig, das Innere der Kapillaren
unter dem Mikroskop einzustellen. Es erforderten diese Mes-
sungen aus dem Grunde viel Zeit und es war die Auffindung
des Kapillarlumens nur dadurch möglich, dafs zuvor die Grenze
von Luft und Flüssigkeit in der Kapillare bei schwacher Ver-
gröfserung aufgesucht wurde. Autserdem war grofse Vorsicht
nötig, damit nicht das Deckgläschen durch ein wenig zu tiefes
Senken der Linse zerdrückt wurde. Das Toluol resp. o-Xylol
mufste ganz stark gefärbt sein, um ein deutliches Erkennen des
Kapillarinnern zu ermöglichen. Der in den Resultaten zutage
tretende Unterschied ist z. B.

L

a) Zedernöl (Zeile.) . . . . D = 6,2 Teilstriche

b) Toluol D = 5,5 >

c) o-Xylol D = 6,6 t

n.

a) Zedernöl D = 6,6 »

b) Toluol D = 7,0

c) o-Xylol D = 7,0 »

Wie man aus den Messungen ersehen kann, ist die Differenz
eine ziemlich geringe. Es wäre nun eine äufserst zeitraubende
Arbeit gewesen, alle Kapillaren für die vielen Versuche mit
Toluol resp. o-Xylol als Immersionsöl zu messen. Aus diesem
Grunde stellte ich die Durchmesser der Kapillaren durch die
unvergleichlich einfachere Messung mit Zedernöl fest und be-

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 227

stimmte die genauen Werte durch Proportion oder Multiplikation
mit dem sich aus folgenden Proportionen ergebenden Faktor a:

5,2 : 5,5 = 1 : a

a = 1,05
6,6 : 7,0 = 1 : a
a = 1,05.
Bei Kapillaren von geringer Weite handelte es sich nur um
eine äufserst geringfügige Korrektur, z. B. :

Mit Zedernöl: D = 0,8 Teilstrich gemessen
0,8 . 1,05 = 0,84 Teilstrich.

Wenn man bedenkt, dafs es überhaupt nur möglich ist,
0,2 Teilstrich des Maßstabes annähernd genau zu schätzen, so
wäre es übertriebene Genauigkeit, diese Korrektur bei den ge-
ringen Weiten anzubringen. Erst wenn diese ca. 0,1 T. beträgt,
mufs man sie in Rechnung bringen. Es ist dies aber erst bei
Weiten von 2,0 T. an der Fall. Aufserdem mufste ich noch die
Skala des von mir zu allen Messungen benutzten Okularmikro-
meters gegen einen genauen Mafsstab eichen. Es geschah dies
durch Vergleichung mit einem in genau 100 Teile geteilten
Millimeter von A. Zeifs, Jena. Auf diese Skala, welche sich
auf einem Objektträger befand, brachte ich einen Tropfen Zedern-
öl und las mittels Ölimmersion ab, wie viel Teilstriche des
Vioo mm-Mafsstabes den 50 Teilstrichen meines Okularmikro-
meters entsprachen;

50 T. -» 8 T. des Vioo mm-Mafsstabes
1 T. -> 0,16 T.

Ich mufste also sämtliche von mir mittels meines Okular-
mikrometers gemessene Werte mit 1,6 multiplizieren.

Eine andere physikalische Methode zur Bestimmung der
inneren Durchmesser der Kapillaren, als die direkte Messung
unter dem Mikroskop, war im vorliegenden Falle nicht anwend-
bar. Die Berechnung des Durchmessers durch Quecksilber-
wägung oder aus der kapillaren Steighöhe ist erstens wegen der
hier vorliegenden Feinheit der Kapillaren und zweitens wegen
der Umständlichkeit der Messungen nicht ausführbar.

228 D&b Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

I. Das Eindringen von Bakterien in feinste mit Nährlösung
gefüllte Kapillaren.

Die Versuche über das Eindringen von Bakterien in feinste
mit Nährlösung gefüllte Kapillaren führte ich mit denselben
Bakterienarten aus, die ich zu den oben beschriebenen Versuchen
über das Durchdringen von Kleinfiltern benutzt hatte. Die
Weiten der angewandten Kapillaren schwankten zwischen 0,001
und 0,006 mm, während die inneren Durchmesser der von
Pfeffer benutzten feinsten Kapillaren 0,025 mm betrugen. Ich
führte die Untersuchungen derart aus, dafs ich erst die im Ver-
hältnis zur Gröfse der betreffenden Bakterien ziemlich weiten
Kapillaren nahm. Darauf ging ich allmählich zu immer engeren
über, bis ich die Grenze des Eindringens erreicht hatte. Die
von mir getroffene Anordnung der Versuche war der von Pfeffer
beschriebenen sehr ähnlich. Da ich weniger die Bewegungen
der Bakterien vor der Kapillaröffnung beobachten, als vielmehr
mit möglichster Genauigkeit feststellen wollte, ob und in welchem
Grade ein Eindringen derselben in die Kapillare stattfindet,
reichten die von Pfeffer angewandten schwächeren Vergröfse-
rungen nicht aus. Es war bei der geringen Weite der Kapillaren
unbedingt erforderlich, mit der Ölimmersion die Vorgänge in
deren Innern zu beobachten. Aus dem Grunde mufste ich eine
andere Anordnung der Versuche treffen. Der geimpfte Wasser-
tropfen durfte mit dem Immersionsöl nicht in Berührung kom-
men; zu dem Zwecke zog ich quer über den Objektträger einen
schmalen Fettstreifen, der die Fläche desselben ungefähr im
Verhältnis 1 : 2 teilte. Die 6—8 cm lange Kapillare liefs ich
nun durch Eintauchen in die Nährlösung zum Teil vollsaugen,
schmolz die eine Seite zu und entfernte die aufsen anhaftende
Nährlösung. Alsdann legte ich die Kapillare derart auf den
Objektträger, dafs sie den Fettstreifen mit dem offenen Ende
ca. x j 2 — 1 cm überragte. Mit einer kleinen Pipette brachte ich
nun einen Tropfen der Bakterienaufschwemmung an die Öffnung
der Kapillare und beobachtete auf der anderen Seite des Fett-
randes die Vorgänge im Innern derselben. Bei den weiteren

Von Dipl.-Ing. Erich HofstAdter. 229

Kapillaren war schon nach kurzer Zeit ein Einwandern der
Bakterien zu beobachten. Durch geeignetes Abblenden des Ge-
sichtsfeldes konnte ich jeden in die Kapillare eindringenden
Bazillus deutlich erkennen. Die Kapillare wurde zunächst
V 4 Stunde lang beobachtet ; wenn ich bis dahin keine Einwande-
rung wahrgenommen hatte, brachte ich die Kapillaren für mehrere
Stunden in eine feuchte Kammer. Nach Verlauf dieser Zeit
nahm ich sie vom Objektträger, reinigte sie und schmolz das
andere Ende ebenfalls zu. Dann durchsuchte ich mit der Öl-
immer8ion die ganze Länge der Kapillare nach Bakterien. Meist
waren nach dem Aufenthalt in der feuchten Kammer die Bak-
terien sämtlich, ihrem Verlangen nach Sauerstoff folgend, nach
der am Ende der Kapillare befindlichen Luftblase gewandert.

Am gröfsten war die Möglichkeit des Einwanderns ganz im
Anfang. Die Reizwirkung der in der Kapillare befindlichen
Nährlösung auf die Bakterien ist anfangs am stärksten und nimmt
ab in dem Mafse, wie sich die Diffusionszone in dem geimpften
Wassertropfen ausbreitet. Waren also innerhalb einer Stunde
keine Bakterien eingedrungen, so geschah dies später um so
weniger.

Bei den feinsten Kapillaren war es unbedingt erforderlich,
etliche Versuche mit derselben Weite anzustellen, da nur dadurch
der Beweis für die Richtigkeit der erzielten Resultate geführt
werden konnte. Denn wie ich schon oben erwähnte, ist das
Eindringen der Bakterien in feine Kapillaren um so mehr dem
Zufall unterworfen, je enger man letztere wählt. Die Möglich-
keit des Anstofsens der Bakterien an den Rand der Kapillar-
öffnung und die Ablenkung von der Bewegungsrichtung in das
Innere der Kapillare wird mit Verringerung ihrer Weite immer
gröber.

Die zu den Versuchen benutzten Bakterienarten züchtete
ich auf schräg erstarrtem Agar oder Gelatine, und zwar Prodi-
giosus, die gelben Kokken und den Heubazillus auf Agar,
Fluorescens und die Ingwer-Kokken auf Gelatine. Ich benutzte
nur möglichst frische Reinkulturen, die nicht älter als 8 Tage
waren. Für die Versuche wurde den Kulturen mittels steriler

230 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Platinöse etwas entnommen und mit sterilem Leitungswasser auf-
geschwemmt.

Die Gröfsenverhältnisse der von mir benutzten Bakterien-
arten bestimmte ich in der Weise, dafs ich von den Reinkulturen
wiederholt Präparate anfertigte und nach diesen am Ende der
Untersuchungen die durchschnittliche Gröfse angab. Es stellte
sich allerdings heraus, dafs bei der langen Dauer der Unter-
suchungen in dieser Beziehung keine Änderung vor sich ge-
gangen war. Zwischen den von mir angewandten Arten bestan-
den ungefähr die folgenden Gröfsenverhältnisse:

a) Bacillus prodigiosus : Länge 0,8 — 1,8 fi

Breite 0,3 — 0,4 »

b) Bacillus fluorescens: Länge 1,3 — 1,8 >

Breite 0,3 — 0,4 >

c) Heubazillus : Länge 2,4 — 5,0 >

Breite 0,4 — 0,8 >

d) Gelbe Kokken : D 0,6 — 1,0 >

e) Ingwer-Kokken: D 0,6 — 1,0 >

Im folgenden will ich kurz die Resultate zusammenstellen,
die sich bei der vorliegenden Untersuchung ergaben.

a) Prodigiosus.

Bei der äufserst schnellen Eigenbewegung und der geringen
Gröfse des Prodigiosus war es anzunehmen, dafs er in verhält-
nisinäfsig enge Kapillaren eindringen würde, und ich unterliefe
aus dem Grunde die Versuche mit weiteren Kapillaren.

Kap. 3,4 /<: Nach gans kurier Zeit Einwanderung
in dichten Schwärmen,

> 2,4 > : Zahlreiche Einwanderung,

> 1,6 > : Geringe Einwanderung, bei einigen

Versuchen keine Einwanderung,

> 1,3 > : Keine Einwanderung,

> 1,0 > : Keine Einwanderung.

Die Grenze des Eindringens hegt also für Bacillus prodigiosus
bei 1,6 i*.

Da bei der geringen Gröfse des Prodigiosus ein Versehen
selbst bei genauester Ausführung der Untersuchungen bei der

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 231

Feinheit der Kapillaren von 1,3 /> und 1,0 ju nicht ausgeschlossen
wäre, hielt ich einen genaueren Nachweis als das Auge für an-
gebracht. Ich reinigte die beiderseits zugeschmolzenen Kapillaren
in absolutem Alkohol, zerbrach sie mit zwei sterilen Pinzetten
und brachte die Stücke in sterile Bouillon. Prodigiosus wurde
wie früher durch Aufstrich auf Kartoffel nachgewiesen. Das
folgende Resultat bewies die Richtigkeit meiner Beobachtungen :

a) Kap. 1,6 /<: Wachstum,

b) > 1,3 » : Kein Wachstum,

c) > 1,0 » : Kein Wachstum.

Kap. 3,4/*
» 2,4 >

> 1,6 >

b) Fluoresoene.

Zahlreiche Einwanderung,
Geringe Einwanderung,
Sehr geringe Einwanderung.

Bei mehreren Versuchen mit dieser Weite fand keine Ein-
wanderung statt.

Kap. 1,8 fi\ Keine Einwanderung,
> 1,0 > : Keine Einwanderung.

Die Grenze liegt ebenfalls bei 1,6//, trotzdem Fluoreszens
gröfser ist als Prodigiosus. Der Beweis für die Richtigkeit der
Beobachtungen wurde wie beim Prodigiosus geführt, mit dem
Unterschied, dafs die zertrümmerte Kapillare in flüssige Gelatine
geworfen wurde. Das Auftreten der grünlichen Fluoreszenz
lieferte den genauesten Beweis:

a) Kap. 1,6 p -. Wachstum,

b) > 1,3 > : Kein Wachstum,

c) > 1,0 » : Kein Wachstum.

o) Heubazillus.

Nach der Gröfse des Heubazillus zu urteilen, könnte man
glauben, dafs die Grenze des Eindringens für ihn bedeutend
höher liegt. Die Versuche zeigten aber, dafs derselbe noch in
Kapillaren eindrang, deren Durchmesser ungefähr die Hälfte
seiner durchschnittlichen Länge betrugen.

232 D&s Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Kap. 6,7 f*
5,0»
3,4 >
2,6»
2,3»
1,9»
1,6»
1,3 »

Sehr zahlreiche Einwanderung,
Zahlreiche Einwanderung,
Mäfsig starke Einwanderung,
Geringe Einwanderung,
Äufßerst geringe Einwanderung,
Einwanderung ganz selten,
Keine Einwanderung,
Keine Einwanderung.

Die Grenze läfst sich beim Heubazillus nicht so genau an-
geben wie beim Fluorescens und Prodigiosus. Bei Kap. 1,9 n
z. B. war unter mehreren Versuchen nur bei einem einzigen ein
Eindringen des Heubazillus wahrzunehmen. Und man kann es
auch als einen grofsen Zufall ansehen, wenn sich gerade in eine
derartig enge Kapillare ein Bazillus verirrt. Während ich in
den weiteren Kapillaren ein Eindringen des Heubazillus in
langen Ketten beobachten konnte, waren es meist einzelne
kleinere Individuen, die ihren Weg in die engeren Kapillaren
fanden.

d) Gelbe Kokken.

Trotz des grofsen Unterschiedes in der Gestalt fand ich für
die Kugelform besitzenden Bakterienarten fast die gleichen Ver-
hältnisse. Man könnte glauben, dafs sie, durch ihre Form be-
günstigt, in noch engere Kapillaren eindringen könnten. Es
zeigte sich aber, dafs dies nicht der Fall ist, sondern dafs ich
für diese Bakterienarten dieselbe Grenze des Eindringens fest-
stellen konnte wie für Prodigiosus und Fluorescens. Das Ein-
dringen der letzteren in verhältnismäfsig enge Kapillaren ist vor
allem ihrer lebhaften Eigenbewegung zuzuschreiben, die bei den
Kokken nur äufserst gering oder meist gar nicht vorhanden ist.
Die Resultate, die ich mit den beiden von mir benutzten Kokken-
arten erhielt, stimmten bei ihrer fast gleichen Gröfse ziemlich
überein. Doch machte sich in diesem Falle, ähnlich wie oben
bei dem Durchwachsen von Kleinfiltern, der Unterschied be-
merkbar, dafs die Ingwer-Kokken in Kapillaren von gleicher
Weite zahlreicher und vor allem schneller eindrangen als die
gelben Kokken.

Von Dipl.-Iug. Erich Hofstädter. 233

Kap. 4,5 it: Zahlreiche Einwanderung, in Reihen
hintereinander angeordnet,

> 4,0 > : Zahlreiche Einwanderung,

> 8,4 > : Wenig sahireiche Einwanderang,

> 2,4 > : Geringe Einwanderung,

> 1,9 > -. Ganz geringe Einwanderung,

> 1,6 » : Einwanderung sehr selten, in mehreren
Fällen nicht beobachtet,

> 1,3 » : Keine Einwanderung,

> 1,0 » : Keine Einwanderung.

e) Ingwer-Kokken.

Kap. 4,2 fi: Zahlreiche Einwanderung,

3,4 > : Weniger zahlreiche Einwanderung,

2,4 > : Geringere Einwanderung,

1,9 > : Geringe Einwanderung,

1,6 > : Sehr geringe Einwanderung,

1,3 > : Keine Einwanderung,

1,0 > : Keine Einwanderung.

Ergebnis.

Als wichtigstes Ergebnis dieser Untersuchungen hat sich die
Tatsache herausgestellt, dafs ein Eindringen von Bakterien
in die feinsten Kapillaren nicht stattfindet. Die Grenze
des Eindringens liegt sogar etwas höher als man erwarten könnte.
Denn die Bakterien dringen, wie durch die zahlreichen Versuche
bewiesen worden ist, schon in Kapillaren von einem Durch-
messer nicht mehr ein, der gröfser ist als ihre Breite, in welchen
ihr Körper also noch bequem Raum hätte.

II. Das Einsaugen von Bakterien In leere Kapillaren.

Bekanntlich wird eine Flüssigkeit um so stärker in eine
Kapillare eingesaugt, je kleiner ihr Durchmesser ist. Man
könnte sich nun die Frage vorlegen: Welche Umstände treten
ein, wenn man eine leere Kapillare zu einer Aufschwemmung
von Bakterien bringt? Werden die Bakterien selbst in
ganz feine Kapillaren eingesaugt oder widerstreben
sie dem Eintritt in das Kapillarinnere? Die genaue

234 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Beantwortung dieser Frage auf experimentellem Wege schien
mir von grobem Interesse, da man sich über diesen Vorgang
gänzlich im Unklaren befindet und nur Vermutungen darüber
aufstellen kann.

Ich führte die Versuche derart aus, dafe ich fast dieselbe
Anordnung wie bei den soeben beschriebenen Untersuchungen
über das Eindringen der Bakterien in mit Nährlösung gefüllte
Kapillaren traf. Unter dem Mikroskop stellte ich das Innere
der leeren, beiderseits offenen Kapillare ein, brachte einen
Tropfen der Bakterienaufschwemmung an ihre Öffnung und be-
obachtete, ob in der eingesaugten Flüssigkeit Bakterien vor-
handen waren. Um an der entgegengesetzten Seite ein Ein-
dringen von Immersionsöl in die offene Kapillare zu verhindern,
mufste dieses Ende etwas über den Objektträger hinausragen.
Nach beendigter Beobachtung wurde die Kapillare beiderseits
zugeschmolzen und nochmals in ihrer ganzen Länge genau auf
das Vorhandensein von Bakterien geprüft. Im vorliegenden
Falle war besonderes Gewicht darauf zu legen, dafs die Flüssig-
keit eine möglichst grofse Anzahl von Bakterien enthielt, da da-
durch die Genauigkeit der Beobachtungen bedeutend erhöht
wurde. Denn je mehr Bakterien in der Flüssigkeit enthalten
waren, desto gröfser wurde die Möglichkeit des Eindringens in
die Kapillaren. Ich nahm deshalb bedeutend mehr Bakterien-
material als bei den vorhergehenden Versuchen und benutzte
Aufschwemmungen, die eine starke milchige Trübung zeigten.
Wie ich an späterer Stelle bei anderen Versuchen fand, enthielt
1 ccin dieser Aufschwemmungen viele Millionen Keime. Mit den
feinsten Kapillaren führte ich eine gröfsere Anzahl von Ver-
suchen aus, um die Grenze des Eindringens mit Sicherheit fest-
stellen zu können. Aufser den von mir vorher benutzten Bak-
terienarten stellte ich diese Versuche noch mit zwei Hefearten
an, die ich auf Bierwürzegelatine züchtete. Die Hefe 740 hatte
eine kurze, runde, die Hefe Saaz eine lange, schmale Form.
Beide Hefen stammten aus dem Hefereinzuchtlaboratorium von
Lindner, Berlin. Die Gröfsenverhältnisse dieser Hefen waren
ungefähr folgende:

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 235

Länge

Hefe 740

14,0-8,0^

Breite j 3,2 — 4,0 »

j

HefeSaaz

4,0- 9,6 t*
2,4-8,2»

Die speziellen, mit den verschiedenen Bakterienarten ge-
machten Beobachtungen will ich im folgenden kurz anführen:

a) Prodigiosuß.

Kap. 3,4 fi : Äufserst zahlreiche Einwanderung,

> 2,4 > : Weniger zahlreiche Einwanderang,

> 1,6 > : Ganz geringe Einwanderung,

> 1,3 > : Keine Einwanderung,

> 1,0 » : Keine Einwanderung.

Wie bei den vorigen Versuchen mit Prodigiosus hielt ich es
auch hier für nötig, bei seiner geringen Gröfse die Sicherheit
des Ergebnisses durch den kulturellen Nachweis zu erhärten.
Ich schmolz nach den Versuchen die Kapillaren beiderseits zu,
reinigte sie in absolutem Alkohol, zertrümmerte sie mit sterilen
Pinzetten und warf die Stücke in sterile Bouillon. Es bestätigten
sich die von mir gemachten Beobachtungen:

Kap. 1,6 /i: Wachstum,

> 1,3 > : Kein Wachstum,

> 1,0 > : Kein Wachstum.

b) Fluorescene.

Kap. 3,4 /' : Äufserst zahlreiche Einwanderung,

> 2,3 > : Weniger zahlreiche Einwanderung,

> 1,6 > : Geringe Einwanderung,

> 1,3 > : Keine Einwanderung,

> 1,0 » : Keine Einwanderung.

Der Nachweis nach der oben angegebenen Art lieferte
folgendes Resultat:

Kap. 1,6 n
> 1,3 »
» 1,0 »

Wachstum,
Kein Wachstum,
Kein Wachstum.

236 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

o) Heubazillus.

Kap. 5,6/*. Äufeeret zahlreiche Einwanderung,

4.2 > : Geringe Einwanderung,
3,4 > : Sehr geringe Einwanderung,

2.3 > : Nur selten Einwanderung,
1,6 > : Keine Einwanderung,
1,3 > . Keine Einwanderung.

Iu mehreren der mit Kapillaren von 2,3 /< angestellten Ver-
suche fand kein Eindringen von Bakterien statt. Von Interesse
ist die von mir in den weiteren Kapillaren manchmal beobachtete
Erscheinung, dafs ein Bazillus in der Kapillare umkehrte und
wieder nach der Öffnung zurückwanderte.

d) Gelbe Kokken.

Kap. 2,7 fA : Zahlreiche Einwanderung,

> 2,3 » : Geringe Einwanderung,

> 1,9 > : Sehr geringe Einwanderung,

> 1,6 » : Einwanderung selten,

> 1,3 > : Keine Einwanderung,

> 1,0 > : Keine Einwanderung.

•e) Ingwer-Kokken.

Kap. 3,4 fi : Sehr zahlreiche Einwanderung,

> 2,4 > : Zahlreiche Einwanderung,

> 1,6 » : Geringe Einwanderung,

> 1,3 > : Keine Einwanderung,

> 1,0 > Keine Einwanderung.

f) Hefe 740.

Kap. 8,3 fi : Geringe Einwanderung,

> 6,7 » : Sehr geringe Einwanderung,

> 5,0 > : Äufaerst geringe Einwanderung,

> 4,2 > ; Keine Einwanderung,

> 3,4 > : Keine Einwanderung.

Kap. 6,7 fi
» 5,0 »

> 4,2 >

> 3,4 >
» 2,4»

g) Hefe-Saaz.

Zahlreiche Einwanderung,
Geringe Einwanderung,
Gans geringe Einwanderung,
Keine Einwanderung,
Keine Einwanderung.

Bei den mit den Hefen angestellten Versuchen kam oft
eine Verstopfung der Kapillaren vor.

Von Dipl.-Ing. Erich' HofstÄdter. 237

Ergebnis.

Vergleicht man die Ergebnisse dieser Versuchsreihe mit
denen der vorigen, so bemerkt man eine auffällige Übereinstim-
mung. Ich stellte für die Einschwemmung der Bak-
terien in leere Kapillaren dieselben Grenzen fest,
die ich vorher für das freiwillige Eindringen der
Bakterien in Kapillaren ermittelt hatte, die mit Nähr-
lösung gefüllt waren. Aus den erhaltenen Resultaten kann man
den Schlufs ziehen, dafs die Bakterien dem Einschwemmen in
die feinsten Kapillaren einen gewissen Widerstand entgegen-
setzen. Sie folgen nicht einfach der eindringenden Flüssigkeit,
sondern man kann sich die Vorstellung machen, dafs sie sich
an dem Rand der Kapillaröffnung festklammern. Das Ergebnis
dieser Versuche läfst sich dahin zusammenfassen, dafs ein Ein-
saugen der Bakterien in leere Kapillaren, deren Durchmesser
unterhalb der von mir bestimmten Grenze von 1,6 ^ liegen,
nicht stattfindet.

III. Ober die Zeiten, in denen verschieden starke Kapillaren von
Bakterien durchdrungen werden.

Solange es sich darum bandelt, das durch die Reizwirkung
eines Nährstoffes hervorgerufene Eindringen von Bakterien in
feine Kapillaren zu beobachten, genügt die von mir oben be-
schriebene Methode vollkommen. Es zeigte sich, dafs die Mög-
lichkeit des Eindringens zuerst am gröfsten ist, mit der durch
die Diffusion des Nährstoffes hervorgerufenen Ausdehnung der
Reizzone aber schnell abnimmt. Eine lange Beobachtuugsdauer
kam also bei diesen Versuchen nicht in Frage.

Sollen aber nun die Verhältnisse erforscht werden, die ein-
treten, wenn die Bakterien sich bereits in einer Nährlösung be-
finden, und zu dieser eine mit der gleichen Nährlösung gefüllte
Kapillare gebracht wird, so kann man sich der obigen Versuchs-
anordnung nicht mehr bedienen. Es läfst sich voraussagen, dafs
die Zeit, in welcher ein Durchwandern der Kapillaren durch die

Archiv für Hygiene. Bd. Uli. 17

238 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Bakterien erfolgt, eine viel längere sein wird als in dem Falle,
wo ein auf die Bakterien ausgeübter Reiz das Eindringen in die
Kapillaren hervorrief. Die Kapillaren, in welche die Bakterien
gar nicht oder nur selten durch den von dem Nährstoff aus-
geübten Reiz hineingelockt wurden, werden hier nicht in Be-
tracht kommen, sondern nur jene, in welchen eine zahlreiche
Einwanderung beobachtet wurde.

Da die Dauer einiger Untersuchungen ca. 30 Tage betrug,
machte sich eine Anordnung der Versuche erforderlich, die diesem
Umstände genügend Rechnung trug. Die Beobachtung mit dem
Mikroskop war von vornherein ausgeschlossen, es mufste mit
dem unbewaffneten Auge möglich sein, den Gang der Versuche
zu verfolgen. Um dieser Forderung in vollem Mafse gerecht zu
werden, konstruierte ich den in Fig. 2 dargestellten Apparat.

Die beiden mit den Ansatzröhrchen a und b versehenen
Reagensgläser A und B liefs ich mir, um die oben erwähnten

schädigenden Einflüsse ge-
wöhnlicher Gläser auszu*
schliefsen, aus dem Schott-
sehen Borosilikatglas 59 III
herstellen. Besonders die
lange, bis zu 1 Monat be-
tragende Dauer einiger Ver-
suche veranlagte mich zu
dieser Vorsicht. Um diese
beiden Gläser gut befestigen zu können, nahm ich zwei schmale
Bandeisen, zwischen welche ich die Gläser durch eine in der Mitte
befindliche Schraube festklemmen konnte. Um ein Zerdrücken der
Gläser zu verhüten, umgab ich sie unten mit Streifen dicken Tuches.
Es mufsten nun die Gefäfse A und B durch die feinen Kapillaren
von verschiedenen Weiten verbunden werden. Die Befestigung
der Kapillaren in den Ansatzröhrchen a und b bereitete mir
zuerst grofse Schwierigkeiten. Kleine Gummistopfen erwiesen
sich aus dem Grunde als untauglich, weil beim Einsetzen der-
selben die Kapillaren zerbrachen. Aufserdem war es wegen der

A

, (

a b
— r?2?ä Pför —

Tu
B

r — ^ ER- X

W

o

S J

Fig.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 239

Elastizität des Gummis schwierig, die Kapillaren durch die
Bohrung der Gummistopfen hindurchzustecken ohne sie zu zer-
brechen. Am besten bewahrten sich kleine, etwas konisch zu-
laufende Korke von möglichst fehlerfreier Beschaffenheit. Diesen
brachte ich mittels einer feinen Nadel eine Bohrung von solcher
Weite bei, dafs sich die Kapillaren ohne Druck bequem hin-
durchstecken liefsen. Die Korke wurden vor Gebrauch, um etwa
in ihnen enthaltene Sporen abzutöten, ca. 1 Stunde auf 120°
erhitzt. Die Versuche wurden mit diesem Apparat folgender-
mafsen ausgeführt.

Die beiden Gläser A und B wurden mit passenden Korken
und Wattebausch versehen und locker im Stativ befestigt. Die
für den betreffenden Versuch bestimmte Kapillare, die beider-
seits zugeschmolzen und genau gemessen war, wurde sorgfältig
gereinigt und zuerst durch den einen Kork gesteckt. Nun erst wurde
das zugeschmolzene Ende abgebrochen, der Kork in dem Röhr-
chen a befestigt und dasselbe auf der anderen Seite wiederholt.
Das Befestigen der Kapillare in dem zweiten Kork und das Ein-
stecken desselben in das Röhrchen b erforderte sehr grofse Vor-
sicht, da bei einer etwas zu starken Neigung eines der beiden
Gläser ein Zerbrechen der Kapillare erfolgte. Dadurch, dafs die
zugeschmolzenen Enden der Kapillare erst abgebrochen wurden,
nachdem diese durch die Korke gesteckt war, wurde jegliche
Verunreinigung oder Verstopfung des Kapillarinnern ausge-
schlossen. Es war nun wegen der leichten Zerbrechlichkeit der
Kapillaren unmöglich, die Korke so fest in die Ausatzröhrchen
hineinzupressen, dafs ein vollkommen dichter Verschlufs erreicht
wurde. Als bestes Mittel zum Abdichten erwies sich Kollodium.
Vor dem Überziehen der Korke mit Kollodium wurde der
Apparat ca. 1 Stunde bei 120° erhitzt. Die Nachteile, welche
das Sterilisieren des mit Nährlösung gefüllten Apparates im
strömenden Dampf mit sich brachte, veranlafsten mich, den
Apparat in leerem Zustande durch trockene Hitze zu sterilisieren.
Durch die Einwirkung des Dampfes wurde vor allem die Flüssig-
keitssäule in der Kapillare zertrennt, so dafs von vornherein ein

Gelingen der Versuche ausgeschlossen war.

17*

240 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Allerdinga raufste nun das Füllen der Apparate mit Nähr-
lösung in einer Weise vorgenommen werden, die jegliche Ver-
unreinigung durch Luftkeime ausschlofs. Zu dem Zwecke führte
ich diese Operation in einer sterilen Kammer aus, einem Glas-
kasten, dessen vordere Wand beweglich war, um die Arbeiten
im Innern bequem verrichten zu können. Die Apparate wurden
etwas schräg gestellt, die eine Seite mit Nährlösung gefüllt, und
so einige Stunden stehen gelassen, damit die Flüssigkeit bestimmt
bis an das Ende der Kapillare laufen sollte. Dann erst wurde
die andere Seite mit Nährlösung beschickt. Eine Verunreinigung
durch das Hineinfallen fremder Keime während des Füllens trat
bei der grofsen Anzahl der von mir angestellten Versuche nicht
ein einziges Mal ein. Hingegen mifsglückte ein beträchtlicher
Teil deshalb, weil die Kapillaren nicht vollkommen mit Flüssig-
keit angefüllt waren. Um dies möglichst zu vermeiden, stellte
ich in dem noch nicht gefüllten Röhrchen des Apparates durch
Saugen mit der Wasserluftpumpe einen luftverdünnten Raum her.
Doch auch dies war nicht immer von Erfolg begleitet und das
Gelingen der Versuche war deshalb sehr vom Zufall abhängig.
In der sterilen Kammer wurde die eine Seite des Apparates mit
einer Öse Bakterienmaterial geimpft, gut umgeschüttelt und in
den Brutschrank gebracht.

Die angesetzten Versuche wurden täglich einer genauen
Musterung unterworfen. War in dem nicht geimpften Röhrchen
Wachstum eingetreten, so wurde die betreffende Bakterienart,
die zu dem Versuche benutzt worden war, in der oben beschrie-
benen Weise nachgewiesen. Der Apparat wurde auseinander-
genommen und die Kapillare zur Kontrolle nochmals genau
gemessen.

Ich benutzte wiederum dieselben Bakterienarten und Hefen,
wie bei den vorhergehenden Versuchen über das Einsaugen in
leere Kapillaren. Für die verschiedenen Arten suchte ich zuerst
die Durchmesser der Kapillaren festzustellen, für welche die
Dauer des Durchdringens nur ca. 1 Tag betrug. Ich stellte dann
Versuche mit immer engeren Kapillaren an, bis ich schliefslich
die Weite fand, bei der selbst nach 30 Tagen keiu Wachstum in

Von Dipl.Ing. Erich Hofstädter.

241

dem nicht geimpften Röhrchen eintrat. Ein Haupterfordernis
für die Erzielung genauer Resultate bestand darin, dals die Ver-
suche mit ein und derselben Bakterienart uuter ganz gleichen
Bedingungen ausgeführt wurden. Vor allem mufste zu einer
Versuchsreihe stets nur dieselbe Nährlösung genommen werden,
da sonst eine wesentliche Veränderung der Resultate eingetreten
wäre, die eine Anstellung von Vergleichen ausgeschlossen hätte.

Um genauere Resultate zu erhalten, impfte ich zu Beginn
der Versuche auf der einen Seite des Apparates soviel Bakterien-
material ein, dals schon nach wenigen Stunden kräftigstes Wachs-
tum eintrat. Bei den Versuchen mit den Hefen rechnete ich
den Beginn von dem Zeitpunkte an, wo lebhafte Gasentwicklung
eingetreten war. Die mit Hefen angesetzten Apparate blieben
bei Zimmertemperatur (20° C) stehen.

Die so erhaltenen Resultate sind für die angewandten Arten
in hohem Mafee charakteristisch. Ich will sie in der folgenden
Übersicht zusammenstellen.

a) Prodigioßus.

b) Fluoreecenß.

Kap. 6,4 ß — » 1 Tag,

Kap. 6,7 /< -> 1 Tag,

» 4,5 > — » 2 Tage,

» 5,0 » — > 2 Tage,

> 4,2 > — > 4 »

> 3,8 > -» 10 »

» 3,4 » — > 12 »

> 2,4 » — » mehr als 30 Tage.

» 2,4 » — » 26 »

» 1,9 » — > mehr als 30 Tage.

c) Heubazillus.

d) Ingwer-Kokken.

Kap. 13,1 f t — > 1 Tag,

Kap. 13,1 ,« -> 1 Tag,

> 9,7 » — > 3 Tage,

> 10,0 » — > 2 Tage,

» 8,3 » — » 12 >

8,3 > — > 6 »

» 7,5 » — > 23 »

5,0 > — » 8 »

» 5,0 » — > 34 >

> 3,4 » — » mehr als 30 Tage.

e) Gelbe Kokken.

f) Hefe 740.

Kap. 16,8 fi — > 1 Tag,

Kap. 32,0 fi — » 3 Tage,

» 12,5 > — > 3 Tage,

» 23,5 » — > 4 >

» 10,0»-) 6 »

» 15,7 » — > 6 »

» 8,0 » — > 7 »

> 13,4 > -* 7 »

t 6,7 » — » 8 »

» 11,3 » -» 20 »

» 5,0 » -» 11 »

> 7,5 > — > 30 »

> 3,1 > —> mehr als 30 Tage.

242 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

g) Hefe-Saaz.

Kap. 25,3 fi — » 4 Tage,

> 16,0 > — » 5 »

» 13,4 » -» 12 >

» 9,3 > — > 20 >

» 7,6 » — > 28 »

Die vorstehenden Ergebnisse zeigen deutlich, wie mit
Verringerung des Durchmessers der Kapillaren eine
rasche Zunahme der Dauer des Durchwanderns statt-
findet. Die Länge der Kapillaren betrug im Durchschnitt
8 cm. Der Weg, den die Bakterien zurückzulegen hatten, war
also im Vergleich zu ihrer Gröfse von ganz beträchtlicher Länge.
Die Ergebnisse der Versuche lassen ferner den grolsen Einflufs
der Bewegungsfähigkeit und Gröfse der angewandten Bakterien-
arten deutlich erkennen. Der kleine und mit lebhafter Eigen-
bewegung versehene Bacillus prodigiosus durchwandert die Kapil-
laren im Vergleich zu den anderen Arten in der kürzesten Zeit.
Der gröfste von allen, der Heubazillus, wächst durch dieselbe
Kapillare in 34 Tagen, durch welche Prodigiosus in 2 Tagen
gelangt.

Die von manchen Forschern gemachte Angabe, dafe ver-
schiedene Kokkenarten nur zeitweise Eigenbewegung besitzen
und dies in hohem Grade von der Beschaffenheit des Nährbodens
abhängig ist, fand ich bei meinen Versuchen mit den Ingwer-
kokken bestätigt. Aufser den oben von mir für diese Bakterien-
art angegebenen Zeiten erhielt ich gegen Ende meiner Unter-
suchungen einige Resultate, die mit den ersteren nicht im gering-
sten übereinstimmten. Es durchwanderten z. B. die Ingwer-Kokken
eine Kapillare von 4,2 /* in 4 Tagen und von 6,7 fi in 1 Tage,
also ebenso schnell wie Prodigiosus und Fluoreszenz. Während
die Ingwer-Kokken bei der ersten Versuchsreihe fast das gleiche
Verhalten wie die gelben Kokken gezeigt hatten, traten bei An-
wendung einer anderen, ihnen offenbar mehr zusagenden Nähr-
lösung ganz andere Erscheinungen zutage. Durch diese Beob-
achtung findet auch der bei meinen Versuchen über das Durch-
wachsen von Kleinfiltern zwischen den beiden Kokkenarten fest-
gestellte Unterschied vollkommene Aufklärung.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofetädter. 243

IV. Über den Einflufs höherer Drucke auf das Eindringen von
Bakterien in feinste Kapillaren.

Die bis jetzt von mir beschriebenen Versuche sind alle
unter gewöhnlichen Druckverhältnissen ausgeführt
worden. Da es aber von grofsem Interesse ist, den Ein flu Is
höherer Drucke auf das Eindringen von Bakterien in feinste
Kapillaren genau festzustellen, stellte ich auch nach dieser Rich-
tung hin Versuche an. Es handelte sich also um die Beant-
wortung der für die Theorie der Filtration überaus wichtigen
Frage, ob durch Anwendung höherer Drucke Bakte-
rien auch durch die engsten Kapillaren hindurch-
geprefst werden.

Ich hatte anfangs die Absicht, die Versuche nicht wie bis-
her mit einer einzigen Kapillare anzustellen, sondern durch Ver-
einigung einer grofsen Anzahl feinster Kapillaren einen Apparat
zu konstruieren, den man ein absolut keimfrei arbeitendes Filter
nennen könnte. Von den beiden Apparaten, die ich zu diesem
Zwecke herstellte, war der eine aus 50, der andere aus ca. 100
Kapillaren zusammengesetzt. Ich wählte Kapillaren von einer
Weite, die nach den bei den oben beschriebenen Versuchen ge-
machten Erfahrungen auf keinen Fall den Bakterien den Durch-
gang gestatteten. Die dazu benutzten Kapillaren wurden vor-
her sorgfältig gemessen, mit absolutem Alkohol gereinigt und
durch eine flache Korkscheibe gesteckt, die im unteren Teile
eines ca 12 cm langen und 8 cm weiten Glaszylinders befestigt
war. Mit Kollodium wurden die Kapillaren eingekittet und
aufserdem auf beiden Seiten der Korkscheibe eine ca. 2 cm starke
Paraffinschicht aufgetragen, die ein Durchwachsen der Bakterien
durch etwaige, von dem Kollodium noch nicht verstopfte Poren
des Korkes gänzlich ausschliefsen sollte. Nach dem Erstarren
des Paraffins wurden die Enden der Kapillaren vorsichtig mit
einer sterilen Zange abgebrochen, der Apparat mit einem ca.
2,5 m langen Steigrohr versehen und mit der Bakterienaufschwem-
mung gefüllt. Es zeigte sich, dafs bei dem Drucke dieser Wasser-
säule mit dem blofsen Auge nicht die geringste Tröpfchenbildung

244 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

an den Kapillaren zu beobachten war. Wohl aber konnte ich
unter dem Mikroskop an einigen abgebrochenen Kapillaren fest-
stellen, dafs sie bis an das Ende mit Flüssigkeit gefüllt waren.
Um etwa in die Kapillaren eingedrungene Bakterien nachzu-
weisen, liefs ich die Kapillaren in eine kleine, vor Luftinfektion
geschützte Schale mit sterilem Leitungswasser eintauchen. Nach
ca. 24 stündiger Dauer des Versuches gofs ich von dem in dem
Schälchen befindlichen Wasser einige Platten, auf welchen ich
selbst nach 8 Tagen keine Kolonien des betreffenden Bazillus
bemerkte.

Leider erlaubte mir die Konstruktion des Apparates nicht,
den Einflufs höherer Drucke durch Versuche festzustellen. Aber
nicht nur dieser Umstand, sondern vor allem die mannigfachen
Nachteile dieser Versuchsanordnung im allgemeinen veranlafsten
mich, den beschrittenen Weg zu verlassen und die Versuche wie
früher mit nur einer Kapillare anzustellen. So günstig es auch
wäre, die Untersuchungen gleichzeitig mit mehreren Kapillaren
von demselben Durchmesser auszuführen, verbietet sich dies be-
sonders aus dem Grunde, weil ein solcher Apparat nicht über-
sichtlich ist und einwandfreie Resultate mit ihm nicht erzielt
werden können. Von vornherein ist die senkrechte Stellung der
Kapillaren auszuschliefsen, weil bei der geringsten Undichtheit,
die namentlich bei Anwendung höherer Drucke trotz gröfster
Sorgfalt beim Einkitten der Kapillaren nicht zu vermeiden ist,
die Bakterien mit einem aufsen an der Kapillare herunterfliefsen-
den Tropfen in das Filtrat gelangen können. Es geht also aus
diesen Überlegungen zur Genüge hervor, dafs man einwandfreie
Resultate bei diesen Versuchen nur dann erzielen kann, wenn
man nur eine Kapillare benutzt und diese in horizontaler Lage
anbringt.

Die Anwendung eines geringeren Druckes, als er uns in dem
Leitungsnetz der städtischen Wasserleitung zur Verfügung steht,
hielt ich für überflüssig, und ich ging dazu über, den Einflufs
dieses ca. 3 Atra. betragenden Druckes durch eine gröfsere An-
zahl von Versuchen festzustellen.

Von Dipl-Ing. Erich Hofrtädter. 245

a) Waeserleitungßdruck.

Um allen soeben erwähnten Anforderungen gerecht zu
werden, konstruierte ich den in Fig. 3 dargestellten Apparat.
Aus einem dickwandigen Glasrohr von ca. 1 cm äufseren Durch-
messer bog ich mir das bajonnetförmige Rohr A, welches bei
B mit einer Einschnürung versehen ist, um ein Abgleiten des
Gummischlauches zu verhindern, durch den ein nach dem Wasser-
leitungshahn führendes, dünnes Bleirohr mit dem Apparat ver-
bunden wurde. Der Gummischlauch wurde durch Anziehen
einiger um ihn gelegter Drahtschlingen sicher befestigt. Bei C
zog ich das Rohr zu einer dünnen, langen Spitze aus, in deren
Ende die Kapillaren eingekittet wurden. Das Einkitten geschah

D

-&Z

n g . 3.

v_/

mit Schellack und wurde folgendermaßen ausgeführt. Die für
den betreffenden Versuch bestimmte, genau gemessene und gut
gereinigte Kapillare wurde nach Abbrechen des einen zugeschmol-
zenen Endes ca. 2 — 3 cm tief in das dünne Rohr C gesteckt.
Darauf brachte ich in einem kleinen Röhrchen fein gepulverten
braunen Schellack zum Schmelzen und gofs einen Tropfen an
die Öffnung des dünnen Rohrs. Durch vorsichtiges Nähern an
die Sparflamme eines Bunsenbrenners bewirkte ich, dafs der
Schellack einige Millimeter weit in das Rohr C eindrang. Nach
diesem brachte ich noch einen Tropfen Schellack daran, den ich
durch vorsichtiges Erwärmen und beständiges Drehen gut ver-
teilte, so dafs ich dadurch einen ganz sicheren Abschlufs erreichte.
Ein Verstopfen der in dem Rohre C befindlichen Öffnung der
Kapillare trat bei Anwendung der nötigen Vorsicht nicht ein
einziges Mal ein. Wohl aber war das Erwärmen in der Nähe

246 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

der Flamme insofern sehr gefährlich, als bei einem zu starken
Nähern die dünne Kapillare erweichte und sofort herunterknickte.
Analog den oben beschriebenen Versuchen begann ich auch hier
mit weiteren Kapillaren und ging allmählig zu immer engeren
über, bis ich schlielslich die Grenze des Eindringens fand, die
ich durch mehrere Versuche genau feststellte.

War die Kapillare in das Rohr C eingekittet, so füllte ich
dasselbe zum Teil mit einer starken Aufschwemmung der be-
treffenden Bakterienart in sterilisiertem Leitungswasser. Durch
Schütteln des Rohres entfernte ich die Luftblasen aus seiner
Spitze, spannte es in ein Stativ ein und stellte die Verbindung
mit der Wasserleitung her. Vorher brachte ich noch in das
Ende B des Rohres A einen kleinen Wattebausch, um ein Hinein-
gelangen von Gummiteilchen etc. zu verhindern. An einem andern
Stativ befestigte ich ein steriles, mit durchbohrtem Kork ver-
sehenes Borosilikatröhrchen D von derselben Form, wie ich sie
bei den Versuchen mit gewöhnlichem Druck benutzte. Dieses
klemmte ich derart ein, dafs die Kapillare und die Bohrung des
Korkes in genau derselben Linie lagen. Nun reinigte ich die
Kapillare noch einmal mit absolutem Alkohol und entfernte dann
den Kork aus dem Ansatzröhrchen, ohne jedoch den nach innen
gerichteten Teil des letzteren mit den Fingern zu berühren. Mit
einer sterilen Nadel erweiterte ich die Bohrung des Korkes ein
wenig, schob ihn über die Kapillare und brach nun deren zu-
geschmolzenes Ende ab. Das Befestigen des Korkes in dem
Ansatzröhrchen mufste mit gröfster Vorsicht vorgenommen werden,
da bei einer etwas zu starken Biegung die Kapillare sofort zer-
brach. In dem Falle blieb nichts anderes übrig, als eine neue
Kapillare einzukitten, nachdem das Rohr C gut getrocknet war.
Gewöhnlich hielt ich jedoch, um mehrere Vorsuche hintereinander
ausführen zu können, etliche Rohre vorrätig.

Es bedurfte der Ausführung einer grofsen Anzahl von Ver-
suchen, um die Zusammenstellung des Apparates mit der nötigen
Sicherheit bewerkstelligen zu können. War der Apparat fertig
und der Kork mit Kollodium gut abgedichtet, so wurde der
Wasserleitungshahn geöffnet. Das Einfüllen der Nährlösung in D

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 247

geschah erst nach einigen Minuten, und zwar deshalb, um erst
die in der Kapillare befindliche Luft zu verdrängen. Die Dauer
eines Versuches betrug ca. 15 Minuten. Trotz der grofsen Ge-
nauigkeit, mit der das Einkitten der Kapillaren vorgenommen
wurde, war doch in manchen, bei Anwendung dieses geringen
Druckes allerdings seltenen Fällen eine Tropfenbildung an der
Kittstelle zu bemerken. Es zeigte dies, von wie grofsem Vorteil
die von mir benutzte Stellung der Kapillaren gegenüber der senk-
rechten ist. Bei der letzteren hätte der Tropfen seinen Weg in
die Nährlösung nehmen können, während dies jetzt gänzlich
ausgeschlossen war. Die Tropfen fielen senkrecht hinunter, ohne
sich auch nur ein Stück an der Kapillare entlang fortzubewegen.

Nach Beendigung eines Versuches wurde die Kapillare bei a
zerbrochen, zugeschmolzen und das Röhrchen D in den Brut-
schrank gestellt. Bei den mit dem Heubazillus angesetzten Ver-
suchen blieben die Röhrchen mindestens 10 Tage stehen. Es
wurde übrigens wegen des langsamen Wachstums desselben als
Nährlösung nicht Bouillon, sondern Gelatine benutzt. Bei den
anderen Arten trat gewöhnlich schon nach 1 — 2 Tagen Wachs-
tum ein. Die Hefen zeigten bei Zimmertemperatur auch erst
nach ca. 10 Tagen deutliches Wachstum.

Den Nachweis der betreffenden Bakterienarten führte ich in
derselben Weise wie oben. Nach Beendigung des Versuches
wurden die Kapillaren aus dem Korke durch vorsichtiges Ein-
drücken der Kollodiumhaut entfernt, gut gereinigt und das offene
Ende zugeschmolzen. Unter dem Mikroskop wurde nun die
Kapillare nochmals genau gemessen und vor allem festgestellt,
ob die Flüssigkeit die ganze Kapillare erfüllte. War dies nicht
der Fall, so wurde der Versuch als ungültig betrachtet.

Keimzahl der Aufschwemmungen.

Die für die Versuche benutzten Bakterienaufschweminungen
mufsten eine sehr grofse Anzahl von Keimen enthalten. Ich
nahm möglichst frische, ca. 8 — 14 Tage alte Kulturen,
deren Belag ich mit sterilisiertem Leitungswasser aufschwemmte.
Um ein Verstopfen der Kapillaren durch gröbere, zusammen-

248 D*s Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

hängende Bakterienmassen zu verhüten, filtrierte ich die Auf-
schwemmungen durch dünnes Fliefspapier. Während dies bei
den übrigen Bakterienarten eine wesentliche Veränderung der
Keimzahl nicht herbeiführte, enthielt die Aufschwemmung des
Heubazillus nach dem Filtrieren nur ungefähr den zehnten Teil
der erst darin befindlichen Keime. Die Ursache hierfür ist in
der Kettenbildung des Heubazillus und der damit zusammen-
hängenden Bildung von festeren Massen zu suchen. Ich mufste
aus diesem Grunde ein Filtrieren der Aufschwemmungen des Heu-
bazillus unterlassen.

Die Keimzahl der Aufschwemmungen bestimmte ich jedes-
mal durch das Plattenverfahren. Da diese ungeheuer viel Keime
enthielten, entnahm ich denselben nur Vio ccra > verdünnte diese
Menge mit 100 ccm Wasser und gofs mit % ccm dieser Ver-
dünnung eine Platte. Die so festgestellten Keimzahlen
bezifferten sich pro Kubikzentimeter bis auf mehrere
hundert Millionen. Für die Genauigkeit der erhaltenen Re-
sultate war dies meines Erachtens von gröfster Bedeutung.

Die mit den Hefekulturen hergestellten Aufschwemmungen
filtrierte ich nicht, sondern benutzte sie nach Absetzenlassen der
gröberen Bestandteile ohne weiteres zu den Versuchen. Aller-
dings hatte dies oft ein Verstopfen der Kapillaren zur Folge und
erforderte die Ausführung einer gröfseren Anzahl von Versuchen.

Ergebnis.

Es wäre nun zu erwarten gewesen, dafs unter der Einwir-
kung des Wasserleitungsdruckes die Bakterien durch bedeutend
feinere Kapillaren hindurchgeprefst würden, als sich bei dem
Einsaugen in leere Kapillaren herausgestellt hatte. Merkwürdiger-
weise ist dies aber keineswegs der Fall. Es gelang mir, durch
eine grofse Anzahl von Versuchen den Beweis zu liefern, dafs
für die vorliegenden Untersuchungen mit Wasser-
leitungsdruck die Grenzen des Eindringens für die
einzelnen Arten genau dieselben sind wie bei dem
Einsaugen in leere Kapillaren. Es ergab sich die über-
raschende Tatsache, dafs dieser Druck von ca. 3 Atm. es nicht

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstadter.

249

yennag, die Bakterien durch feinere Kapillaren hindurchzupressen.
Die Ergebnisse der Versuche will ich in der folgenden Tabelle
wiedergeben und zum Vergleich die Resultate der anderen Ver-
sachsreihe gegenüberstellen.

Wasserleltnngsdraek.

Einsangen In leere Kapillaren.

a) Prodigiosns.

a) Prodigiosns.

Kap. 1,9 H

pos.

Kap. 1,9/4*. pos.

» 1,6 » ■

>

» 1,6 » : »

» 13 »

neg.

> 1,3 > : neg.

» 1,0»

>

« 1,0 » : »

b) Fluorescens.

b) Fluorescens.

Kap. 1,9 (i

: pOS.

Kap. 1,9 fi: pos.

» 1,6»

>

» 1,6 » : >

» 1,3»

neg.

» 1,3 » : neg.

» 1,0»

»

> 1,0 » : »

c) Heubasillus.

c) Heubazillns.

Kap. 4,6/*

DOS.

Kap. 4,2 ft: pos.

» 3,0»

»

» 3,4 » : »

» 2,4»

>

» 2,4 » : »

» 1,9»

• neg.

» 1,9 » : neg.

» 1,6»

>

» 1,6 » : »

» 1,0»

>

» 1,3 » : »

d) Ingwer-Kokken.

d) Ingwer-Kokken.

Kap. 2,7 fi

: DOS.

Kap. 2,4 ßi

pos.

» 1,9»

>

» 1,9»

>

» 1,6 »

»

» 1,6»

>

» 1,3 >

neg.

> 1,3 »

neg.

> 1,0»

>

» 1,0 »

>

e) Hefe 740.

1 e) Hefe 740.

Kap. 9,3 u : pos.

Kap. 8,3 fi

pos.

» 6,1 > : >

» 6,7 .

9

» 5,0 » : »

» 5,0 .

9

> 4,2 » : neg.

> 4,2 »

neg.

» 3,4 > : »

» 3,4 >

>

f) Hefe-Saaz.

f) Hefe Saaz.

Kap. 6,7 fi : pos.

Kap. 6,7 fi

pos.

» 5,0 » : >

» 5,0 .

>

» 4,2 » : >

» 4,2 »

»

> 3,4 » : neg.

: > 3,4 »

neg.

» 2,4 »

»

* 2,4 »

»

250 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

b) Drucke von 50—100 Atm.

Da es mit dem Druck der Wasserleitung nicht möglich war,
Bakterien durch feinste Kapillaren hindurchzupressen, könnte
man sich fragen, ob nicht durch die Anwendung bedeutend
höherer Drucke diese Erscheinung tatsächlich herbeigeführt
werden kann. Wenn auch die Beantwortung dieser Frage für
die Praxis der Filtration von geringer Bedeutung ist, so ist es
doch immerhin von grofsem Interesse, auf experimentellem Wege
diese Aufgabe zu lösen.

Vor allem aber schien mir die Anstellung dahin zielender
Versuche deshalb von grofsem Werte, da durch die auf diesem
Wege erhaltenen Resultate meine Untersuchungen über das Ver-
halten der Bakterien gegen feinste Kapillaren an Vollständigkeit
bedeutend gewannen und das von mir entworfene Bild über
diese interessanten Vorgänge ein noch viel deutlicheres wurde.

Bei der Wahl des anzuwendenden Druckes leitete mich be-
sonders die Überlegung, dafs derselbe bedeutend höher sein
mufste als der Wasserleitungsdruck. Es handelte sich aber darum,
auf welche Weise der erforderliche Druck am besten zu erzeugen
war. Den durch Kompression irgend eines Gases entstehenden
Druck zu verwerten, war aus mehreren Gründen so gut wie aus-
geschlossen. Erstens standen mir die dazu erforderlichen Appa-
rate nicht zur Verfügung und zweitens ist die Anwendung stark
komprimierter Gase wegen der Möglichkeit eines Zerspringens
der Glasteile des Apparates mit grofsen Gefahren verbunden.
Bei weitem bequemer und vor allem sicherer ist die Benutzung
hydraulischer Drucke. Ich war in der angenehmen Lage, eine
grofse hydraulische Presse benutzen zu dürfen, welche die Er-
zeugung eines Höchstdruckes von ca. 300 Atm. gestattete. Diese
Presse war mit Glyzerinfüllung versehen, und um mich ihrer
bei meinen Versuchen bedienen zu können, bedurfte es nur einer
kleinen Änderung. Die von mir getroffene Anordnung der Ver-
suche will ich im folgenden kurz beschreiben.

Zum Einfüllen des Glyzerins war an der Presse eine Schraube
angebracht. Diese liefs ich durchbohren und mittels Differential-

Von Dipl.-Ing. Erich Hofutädter. 251

gewindes eine aus dickwandigem, auf ca. 500 Atm. Druck ge-
prüftem Messingrohr bestehende Druckleitung anbringen.

Es war unbedingt nötig, das Glyzerin von einer Berührung
und Vermischung mit der Bakterienaufschwemmung fernzuhalten.
Zu dem Zwecke schaltete ich direkt hinter die Druckleitung
(siehe Fig. 5) eine U- förmig gebogene, starke Barometerkapillare
ein, die durch Einkitten in eine Messinghülse mit dieser ver-
bunden wurde. Durch eine 10 — 12 cm lange Quecksilbersäule
wurde in dieser ca. 3 mm weiten Kapillare eine Trennung des
Glyzerins von der Aufschwemmung bewirkt. Ähnlich wie bei
den Versuchen mit Wasserleitungsdruck hätte ich die Barometer-
kapillare zu einer langen Spitze ausziehen können. Durch Aus-
übung eines geringen Druckes hätte das Quecksilber bis an das
Ende derselben getrieben, ein darüber gesteckter Gummischlauch
mit der Aufschwemmung gefüllt und diese durch Zurückbewegen
des Druckstempels in das Rohr eingesaugt werden müssen. In
die Spitze würde ich dann nach sorgfältigem Trocknen die feine
Kapillare in der oben beschriebenen Weise eingekittet haben.
Es wäre dies bei dem feststehenden Apparat eine schwer auszu-
führende Arbeit gewesen. Nach einer gröfseren Reihe von Ver-
suchen hätte sich das Ausziehen einer neuen Spitze oder gar das
Einkitten eines neuen U- Rohres an die Druckleitung nötig ge-
macht. Vor allem aber erlaubte mir diese Anordnung nicht
ein Sterilisieren des Apparates vor der Benutzung einer anderen
Bakterienart, was zur Erzielung genauer Resultate unbedingt er-
forderlich war. Diesem Umstände mufste ich in erster Linie
Rechnung tragen, und ich glaube es durch die Konstruktion
des in Fig. 4 im Längsschnitt dargestellten Apparates in ge-
nügender Weise getan zu haben.

Der eiserne Zylinder A ist zur Aufnahme der Aufschwem-
mung bestimmt und kann, wie aus der Fig. 5 skizzierten
Gesamtanordnung des Versuches zu ersehen ist, mittels des Ge-
windes C in der eisernen Hülse b befestigt werden, in welche
das Ende der Barometerkapillare eingekittet ist. Durch eine
Vulkanfiberdichtung wird daselbst ein ganz vollkommener Ab-
scblufs erreicht. Der Zylinder A kann durch den Deckel D ver-

252 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

schlössen werden, der auf denselben aufgeschraubt wird und mit
einer Vulkanfiberdichtung versehen ist. In der Mitte dieses
Deckels ist ein l 1 /? cm langes eisernes Ansatzröhrchen E von
ca. 3 mm innerem Durchmesser, in welches eine 8 — 9 cm lange
und 1,5 mm weite Glaskapillare mittels Schellack eingekittet
werden kann. In dem Ende derselben wird endlich die für den
Versuch bestimmte feine Kapillare befestigt. Die Ausführung
der Versuche geschah in der folgenden Weise.

Nachdem die Quecksilbersäule in das U-Rohr gebracht
worden war, ohne dafs sich zwischen ihr und dem Glyzerin eine
Luftblase befand, wurde über die eiserne Hülse b (Fig. 5)
ein kurzer Gummischlauch gesteckt und das Quecksilber durch
Ausübung eines geringen Druckes langsam bis in die Bohrung
der Hülse getrieben. Ehe das Quecksilber bis ganz an das Ende

B C

>* &km® ? "'" ^r^

^T S g fe^j ri'.'-Nt«,

Fig. 4.

gelangt war, wurde der Schlauch mittels Spritzflasche mit destil-
liertem Wasser gefüllt und letzteres durch Zurückbewegen des
Druckstempels in das Glasrohr eingesaugt, und zwar solange, bis
zwischen dem Anfang der Quecksilbersäule und der Messing-
hülse d noch genügend Abstand blieb. Nun wurde der eiserne
Zylinder vollkommen mit der Aufschwemmung gefüllt, der Deckel,
in dessen Ansatzröhrchen die für den Versuch bestimmte Kapil-
lare befestigt war, aufgeschraubt und mittels Zange fest ange-
zogen. Darauf wurde der Zylinder in die Hülse b eingeschraubt.
Um ein festes Anziehen der Schrauben zu ermöglichen, waren
Zylinder a und Hülse b mit Einkerbungen versehen, so dafs
man an ihnen die Schraubenschlüssel fest ansetzen konnte. In
der bei den Versuchen mit Wasserleitungsdruck beschriebenen
Weise wurde alsdann die Verbindung der feinen Kapillare mit
dem zur Aufnahme der Nährlösung bestimmten Röhrchen c her-
gestellt.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter.

253

Bei den ersten Versuchen wandte ich Drucke bis über
200 Atm. an. Es veranlafsten mich aber die fast immer, trotz
gröfster Sorgfalt beim Einkitten des Glasröhrchens F (Fig. 4)
und der feinen Kapillare, eintretenden Uudichtheiten und
das häufige Zerplatzen des Röhrchens F, von der Benutzung der-
artig hoher Drucke abzusehen und mich mit solchen von 50 bis
100 Atm. zu begnügen. Nicht nur an den eben genannten
Teilen, sondern auch an den Kittstellen des U-Rohres in den
Metallhülsen b und d kamen Tropfen zum Vorschein. Es läfst
sich ja auch leicht denken, dafs die Schellackdichtungen, für die
allerdings in diesem Falle kein Ersatz zu finden war, derartig
hohen Drucken nicht standzuhalten vermögen.

O

^ t

_ b a jt

Flg. 5.

Bei den feinsten Kapillaren wandte ich Drucke von unge-
fähr 100 Atm., bei den weiteren von 50 Atm. an. Die Dauer
der Einwirkung des Druckes betrug 10 — 15 Minuten. Die Nähr-
lösung füllte ich aus oben bereits angegebenen Gründen erst einige
Minuten nach Beginn des Versuches in das Gläschen c ein.
War bei einem Versuche eine Undichtheit eingetreten, so konnte
die Einwirkung des betreffenden Druckes nur solange dauern,
bis das Quecksilber bis nahe an das Ende des U-Rohres vorge-
rückt war. Wenn nicht gerade ein Rifs im Schellack entstanden
war, dauerte es immerhin eine genügend lange Zeit, ehe dies
eintrat. Aus dem Grunde mufste zu Anfang eines jeden Ver-
suches die Quecksilbersäule möglichst weit nach der Druckleitung
hin zurückbewegt werden.

Am Ende des Versuches wurde die Kurbel der Presse so-
weit zurückgedreht, bis das Manometer auf stand, die Kapil-

Archir für Hygiene. Bd. Lin. 18

254 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

lare wie bei den Versuchen mit Wasserleitungsdruck abgebrochen,
zugeschmolzen, und das Röhrchen c in den Brutschrank gestellt.

Das Auseinandernehmen des Apparates hatte deshalb mit
grofser Vorsicht zu geschehen, weil immer noch ein beträcht-
licher Überdruck vorhanden war. Die Kurbel der Presse mufste
noch, ehe der Zylinder a abgeschraubt werden konnte, ein be-
stimmtes Stück zurückgedreht werden, um einen vollkommenen
Ausgleich des Druckes herbeizuführen. Geschah dies zu reichlich,
so wurde das Quecksilber beim Abschrauben des Zylinders a in
die Druckleitung hineingesaugt, im anderen Falle wurde es
herausgeschleudert. Der Zylinder a mufste deshalb nach einigen
Drehungen der Kurbel vorsichtig gelockert und dabei die Be-
wegung der Quecksilbersäule genau beobachtet werden, um das
Eintreten dieser unerwünschten Zufälle durch rasches ent-
sprechendes Drehen der Kurbel zu vermeiden.

Nach Losschrauben des Zylinders a wurde der Deckel von
demselben entfernt und das Innere mit destilliertem Wasser
ausgespült. Von dem Glasröhrchen F wurde das vom Schellack
erfüllte Ende abgebrochen und nach vorherigem vorsichtigen
Trocknen des Röhrchens in einer Flamme die Kapillare für den
nächsten Versuch eingekittet. Ein Röhrchen reichte in der Regel
für 4—6 Versuche.

Sollten Versuche mit einer anderen Bakterienart angestellt
werden, so wurde nach vorherigem Sterilisieren des Zylinders a
ein neues Röhrchen eingekittet. Die Vulkanfiberdichtung war
meist durch eine gröfsere Anzahl von Versuchen schadhaft ge-
worden, und es machte sich das Einlegen einer neuen nötig.
Bei Anwendung dieser Vorsichtsmafsregeln war das Fehlschlagen
eines Versuches durch Verunreinigung mit der zu den vorher-
gehenden Versuchen benutzten Bakterienart ausgeschlossen.

Ergebnis.

Die bei der grofsen Anzahl der von mir angestellten Versuche
erzielten Ergebnisse will ich in der nachfolgenden Übersicht wieder-
geben, und zum Vergleich die Ergebnisse der Untersuchungen über
den Einflufs des Wasserleitungsdruckes gegenüberstellen.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstlldter.

255

a) Prodiglosus.

1. 50—100 Atm

i 2. W

nsserleitungsdruck.

Kap. 1,6 ft

: pos.

1

i

Kap. 1,6 fi

: pos.

» 1,3 »

»

!

» 1,3 »

neg.

» 1,0»

i

i

» 1,0»

»

» 0,6 »

>

I

» 0,5 »

neg.

1

» 0,3 »

i

i

b) Flaorescens.

1. 50-100

Atm.

2. W

asscrleitungsdruck.

Kap. 1,6/*

. pos.

Kap. 1,6/«

. p08.

» 1,3 »

>

t 1,3 >

neg.

» 1,0 »

»

» 1,0»

>

> 0,6 »

neg.

» 0,3 »

9

e) HeabaziUns.

1 50-100

Atm.

2. W

asser] oitnngscl ruck.

Kap. 3,4 fi

• p08.

Kap. 3,4 fi

pos.

» 2,4 »

>

» 2,4»

*

> 2,1 >

>

» 2,1 »

m*

> 1,9 i

neg.

» 1,9 »

>

» 1,6 >

>

> 1,6»

»

d) Ingwer-Kokken.

1. 50—100

Atm.

2. W

asserleitu

ngsdruck.

Kap. 1,6 a

: pos.

Kap. 1,6 fi

pos.

> 1,3 »

>

» 1,3»

neg.

» 1,0 >

neg.

» 1,0»

»

» 0,6 >

>

e) Hefe 740.

Kap. 5,0/*

. pos.

Kap. 5,0 fi

: pOS.

» 4,6 >

»

» 4,6 »

neg.

» 4,2 »

neg.

» 4,2 »

»

» 3,4 »

>

» 3,4 »

»

•

f) Hefe-Saaz.

Kap. 4,6 fi

pOri.

Kap. 5,0 fi

pos.

» 4,2 >

>

» 4,2 »

1

» 3,8 >

»

» 3,8 »

neg.

> 3,0 »

neg.

» 3,0 >

>

18*

256 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Durch diese Vorsuche ist vor allem der Beweis dafür ge-
führt worden, dafs unter der Einwirkung hoher Drucke
die Bakterien durch noch engere Kapillaren hindurch-
geprefst werden, als es mit dem Wasserleitungsdruck
möglich war. Vor allem aber hat sich die interessante Tatsache
ergeben, dafs es selbst bei der Anwendung so bedeutender
Drucke nicht gelingt, die Bakterien durch die engsten
Kapillaren hindurchzupressen. Für die verschiedenen
Arten haben sich wiederum ganz bestimmte Grenzen ergeben,
unterhalb derer ein Eindringen der Bakterien nicht stattfindet.
Vergleicht man diese Grenzen mit den bei der Untersuchung
mit Wasserleitungsdruck erhaltenen, so bemerkt man, dafs bei
den vorliegenden Versuchsergebnissen ein gröfserer Unterschied
in dem Verhalten der einzelnen Bakterienarten zutage tritt als
bei jenen. In diesem Falle spielt die Gröfse der Bakterien eine
deutliche Rolle, und es handelt sich um ein rein mechanisches
Zurückhalten, während bei den vorigen Versuchen physiologische
Momente in Betracht kamen. Für drei in bezug auf ihre Gröfse
so verschiedene Arten, wie Bacillus prodigiosus, Bacillus fluore-
scens und die Ingwer-Kokken, konnte ich bei den vorigen Unter-
suchungen genau dieselbe Grenze feststellen, während hier ein
deutlicher Unterschied zu bemerken ist. Die von mir für diese
Arten festgestellten Grenzen, unterhalb derer ein Eindringen auf
keinen Fall stattfindet, sind folgende:

0,6 li für Bacillus prodigiosus,
1,0 i für Bacillus fluorescens,
1,8 » für die Ingwer-Kokken.

Man könnte die Frage aufwerfen, ob die Lebenstätigkeit der
Bakterien durch die Einwirkung hoher Drucke eine Schädigung
erleidet. Von verschiedenen Forschern sind bereits dahin gehende
Versuche ausgeführt worden, und es hat sich die Tatsache
herausgestellt, dafs dies keineswegs der Fall ist. Es benutzten
Krause 9 ) Drucke bis zu 500 Atm., Chlopin und Tamman 1 )
sogar bis 2900 Atm., ohne eine Schädigung der Bakterien fest-
stellen zu können.

Von Dipl. Ing. Erich Hofet&dter. 257

Das Verhalten der Bakterien gegen künstliche Membranen.

Der Gedanke, dafs fein verteilte chemische Niederschläge ver-
möge ihrer Dichtheit in ausgedehntem Mafee die Fähigkeit be-
sitzen, in einer Flüssigkeit enthaltene Bakterien an ihrer Ober-
fläche zurückzuhalten, hat schon vielen Forschern die Veranlas-
sung zu eingehenden Untersuchungen gegeben. So suchte man
durch fein verteiltes Aluminiumhydroxyd die oberflächliche
Schlammschicht der Sandfilter zu ersetzen, indem man dem Roh-
wasser Aluminiumsulfat zufügte. Bei den Hausfiltern hat man
durch Zusatz fein verteilter Substanzen zum Rohwasser das gleiche
zu erreichen versucht. Diese Substanzen setzten sich allmählich
auf der Oberfläche des Filters ab und bildeten eine feinporige
Schicht, was allerdings die Dauer der Wirksamkeit des Filters
wesentlich verkürzte.

Der Versuch, durch Erzeugung von chemischen Nieder-
schlägen innerhalb der Zellwandungen die Leistungsfähigkeit der
Kleinfilter zu erhöhen, ist bis jetzt noch von keiner Seite aus-
geführt worden. Und doch ist es von grofsem Interesse, den
Einflufs dieser Niederschläge auf den Durchtritt der Bakterien
kennen zu lernen.

Es hätte mich zu weit geführt, das Verhalten der Bakterien
gegen chemische Niederschläge, wie z. B. das bei den Sandfiltern
benutzte Aluminiumhydroxyd, festzustellen. Ich hatte vielmehr
die Absicht, die Bakteriendurchlässigkeit von chemischen Nieder-
schlägen zu untersuchen, die sich innerhalb der Zellwandungen
befinden und sich durch grofse Feinheit der Schicht auszeichnen.
Sie sind in Gestalt der sog. künstlichen Membranen seit langem
bekannt und werden wegen der Erscheinungen des osmotischen
Druckes für physikalisch-chemische Untersuchungen viel ver-
wendet. Bekanntlich besitzen diese sog. halbdurchlässigen Mem-
branen die interessante Eigenschaft, dem Lösungsmittel, nicht
aber der gelösten Substanz den Durchtritt zu gestatten. Von der
gröfseren Zahl dieser Membranen schien mir wegen ihrer meist
sicher gelingenden Herstellung die Ferrocyankupfermembran für
meine Untersuchungen am geeignetsten.

258 Das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

Zu den Versuchen benutzte ich Haldenwangersche Ton-
zellen von der oben beschriebenen Form. Die Herstellung der
Ferrocyankupfermembran geschah zuerst nach der Vorschrift von
Pfeffer 18 ). Da ich nach diesen Angaben keine guten Resul-
tate erzielte, bediente ich mich der von Lüpke 18 ) gegebenen
Vorschrift, nach welcher ich gute Erfolge zu verzeichnen hatte.
Die Zellen wurden vollkommen mit Wasser durchtränkt, darauf
mit einer ca. 3proz. Ferrocyankaliumlösung gefüllt, mit einem
höchstens 1 cm tief eingesetzten Gummistopfen verschlossen, der
mit einer beiderseits offenen Glasröhre versehen war, und bis an
den Rand in ca. 3proz. Kupfersulfatlösung getaucht. In dieser
blieben die Zellen ca. 8 Tage stehen und wiyden dann gründ-
lich gewässert.

Ehe ich nun das Verhalten der Bakterien gegen diese so
hergestellten künstlichen Membranen untersuchte, mufste ich sie
vor allem auf ihre Dichtheit prüfen, d. h. feststellen, ob dieselben
der gelösten Substanz auch wirklich den Durchtritt verwehrten.
Zu dem Zwecke füllte ich die Zellen mit 50proz. Rohrzucker-
lösung, verschlofs sie durch einen mit Steigrohr versehenen
Gummistopfen und stellte sie soweit in destilliertes Wasser, dafs
der Hals der Zelle zum gröfsten Teil frei blieb. Nach 24 Stunden
wurde das aufsen befindliche Wasser auf 100 ccm aufgefüllt, fil-
triert und durch Polarisieren der Zuckergehalt festgestellt. Nur
bei einigen Zellen betrug derselbe 0,03 — 0,05 °/ , während bei
den anderen eine Drehung nicht stattfand, die Zellen sich also
als absolut dicht erwiesen.

Zu bemerken wäre noch die interessante Wahrnehmung, dafs
die Membranen selbst nach mehreren Monaten durch wieder-
holtes Auskochen und Sterilisieren im Autoklaven und durch
die Stoffwechselprodukte der Bakterien nicht den geringsten
Schaden erlitten.

Bei den Versuchen bediente ich mich wieder der in Fig. 1
dargestellten Anordnung. Als Nährlösung wandte ich wie
früher lproz. Fleischextraktbouillon an. Da bei den früheren
Versuchen Bacillus prodigiosus die Tonzellen in der kürzesten
Zeit durchwanderte, schien er mir zu diesen Versuchen besonders

Von Dipl. Ing. Erich Hofstädter. 259

geeignet, weil mit ihm bei weitem schnellere und sicherere Resul-
tate zu erzielen waren als mit den anderen Arten. Die Apparate
wurden nach dem Einfüllen der Bakterienaufschwemmung in den
Brutschrank gestellt und täglich kontrolliert.

Ergebnis der Versuche.

Es ergab sich die interessante Tatsache, dafs durch die
Zellen, welche sich als absolut dicht erwiesen hatten, Bacillus
prodigiosus selbst nach mehreren Wochen nicht hindurchwuchs.
Durch die anderen jedoch, bei denen ich eine ganz geringe Un-
dichtheit nachgewiesen hatte, wuchs er in ca. 8 — 14 Tagen hin-
durch. Doch trat dies nicht immer ein, sondern ich habe einige
Fälle beobachtet, wo er derartige Zellen selbst nach mehreren
Wochen nicht durchdrang. Die Erklärung hierfür ist nur darin
zu suchen, dafs die undichte Stelle nicht von der Nährlösung
berührt wurde, sondern sich am Hals der betreffenden Zellen be-
fand, wo allerdings bei der Prüfung auf Dichtheit eine Diffusion
des Zuckers möglich war.

Das Durchwachsen von Bacillus prodigiosus durch eine Mem-
branzelle mit geringer Undichtheit (0,03 proz. Zucker) wurde da-
durch wesentlich beschleunigt, dafs in das Innere der Zelle Pep-
ton wasser, aufsen aber Bouillon gebracht wurde. Während
Bacillus prodigiosus bei der gewöhnlichen Anordnung zum Durch-
dringen der betreffenden Membranzelle 12 Tage brauchte, fand
im letzteren Falle bereits nach 5 Tagen ein Durchwachsen statt.
Dadurch, dafs aufsen eine ungleich bessere Nährlösung vor-
handen war, wurde auf den Bazillus ein Reiz ausgeübt, der ein
schnelleres Durchwachsen zur Folge hatte.

Um einen Vergleich mit einer anderen Bakterienart anzu-
stellen, setzte ich einige Membranzellen, die bereits zu Versuchen
mit Prodigiosus gedient hatten, nach vorheriger Sterilisation mit
Bacillus fluorescens an. Es zeigte sich, dafs dieser selbst nach
ca. 6 Wochen nicht durch die Membranen hindurchtrat, selbst
durch die nicht, die Bacillus prodigiosus in 10 Tagen durch-
drungen hatte. Trotz seiner schnellen Eigenbewegüng und ver-

260 D& 8 Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

hältnismäfsig geringen Gröfse ist Bacillus fluorescens nicht im-
stande, die Membranen zu durchdringen. Ich glaube aus dieser
Tatsache den Schlufs ziehen zu dürfen, dafs die Undichtheiten
der Ferrocyankupfermembran von derartig geringer Ausdehnung
waren, dafs nur ein Bazillus von der Gröfse des Prodigiosus durch
sie hindurch gelangen konnte.

Um genauen Aufschlufs über die Stärke und Gestalt der
Membranen zu erlangen, bediente ich mich wieder der Dünn-
schliffe, die in der oben beschriebenen Weise hergestellt wurden.
Zertrümmerte man eine Zelle, so war die Membran ganz genau
in der Mitte der Zellwandung als feiner gleichmäßiger, dunkel-
brauner Strich zu erkennen. Bei schwacher, ca. 50 f acher Ver-
gröfserung des Dünnschliffes zeigte es sich aber (vergl. Tafel IV,
Fig. 4), dafs sie von sehr verschiedener Ausdehnung war. Teil-
weise waren die Poren der Zellen vom Niederschlag ausgefüllt,
an anderen Stellen war die Stärke der Membran sehr gering.
Wie ich mit der Ölimmersion feststellte, schwankte die Stärke
der Membran zwischen ungefähr 8 — 70 \i. Bei dieser ca. 800-
fachen Vergröfserung waren auch in der Membran Poren von
grofser Feinheit zu bemerken, die aber nur eine geringe Länge
besafsen.

Es wäre von grofsem Interesse gewesen, in einem derartigen
Dünnschliffe die Bakterien zu färben, um deren eventuelle An-
sammlung an der inneren Seite der Membran vor Augen zu
führen. Leider war mir dies wegen der äufserst geringen Halt-
barkeit dieser Schliffe und aus den oben angeführten Gründen
nicht möglich, da sich Bacillus prodigiosus und Bacillus fluore-
scens nicht nach Gram färben lassen. Und mit einer gewöhn-
lichen Färbemethode ist es, wie ich feststellen konnte, ausge-
schlossen, gute Bilder zu erhalten, da das Ausziehen des Farb-
stoffes mittels Alkohol aus den Partien, die ungefärbt erscheinen
sollen, nur unvollkommen geschieht.

Das Ergebnis der vorliegenden Untersuchung über das Ver-
halten der Bakterien gegen künstliche Membranen läfst sich da-
hin zusammenfassen, dafs eine absolut dichte Ferrocyan-
kupfermembran den Bakterien auf keinen Fall den

Von Dipl.-Ing. Erich Hofetädter. 261

Durchtritt gestattet, dafs aber schon eine minimale Un-
dichtheit derselben genügt, um ein Hindurchtreten der Bakterien
zu ermöglichen.

Man könnte die Frage aufwerfen, ob dieses Ergebnis irgend
welche praktische Bedeutung für die Wasserfiltration hat. Ver-
sucht man durch eine derartige, absolut dichte Membranzelle
Wasser zu filtrieren, so gehört ein beträchtlicher Druck dazu, um
dies zu erreichen. Aufserdem steigt bei Erhöhung des Druckes
die Möglichkeit einer Zerstörung der Membran. Eine praktische
Anwendung der Membranzellen für Zwecke der Wasserfiltration
ist daher ausgeschlossen. In bezug auf Keimdichtheit würden
diese Zellen nahezu ideal zu nennen sein, in Hinsicht auf die
Menge des gelieferten Filtrates würde ihre Verwendung aber
nicht in Frage kommen.

Zusammenfassung.

Die Hauptergebnisse meiner Untersuchungen lassen sich in
folgendem zusammenfassen :

1. Die Zeit, in welcher ein Filter von einer bestimmten
Bakterienart durchdrungen wird, ist in hohem Mafse ab-
hängig von der Bewegungsfähigkeit und Gröfse der be-
treffenden Bakterienart.

2. Aufser den grofsen Poren besitzen die Kleinfilter auch
solche von grofser Feinheit, deren Vorhandensein durch
die Anordnung der Bakterien in gefärbten Präparaten
von Zeilschliffen bewiesen wird.

3. Für das Eindringen von Bakterien in feinste mit Nähr-
lösung gefüllte Kapillaren bestehen bestimmte Grenzen;
der Unterschied derselben ist im Vergleich zur Ver-
schiedenheit der Gröfse der angewandten Bakterienarten
nur sehr gering.

4. Ein Hineindrängen der Bakterien in mit Nährlösung ge-
füllte Kapillaren, deren Durchmesser unterhalb der be-
stimmten Grenzen von 1,6 — 1,9 (i liegen, findet nicht statt.

Archiv für Hygiene. Bd. LUL 19

262 b&8 Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren.

5. Für das Einsaugen von Bakterien in leere Kapillaren be-
stehen gleichfalls bestimmte Grenzen von 1,6 — 2,3 p,
unterhalb derer ein Eindringen der Bakterien nicht mehr
stattfindet.

6. Die Zeiten, in denen mit Nährlösung gefüllte Kapillaren
von Bakterien durchdrungen werden, sind in hohem
Mafse abhängig von den Durchmessern der Kapillaren.
Sie werden ferner wesentlich bestimmt durch die Gröfse
und Bewegungsfähigkeit der betreffenden Bakterienarten.

7. Unter Einwirkung eines Druckes von 3 Atm. gelingt es
nicht, Bakterien durch Kapillaren hindurchzupressen,
durch die sie freiwillig nicht hindurchgegangen sind.

8. Durch Anwendung hoher Drucke von 50 — 100 Atm.
werden die Bakterien durch noch engere Kapillaren hin-
durchgeprefst, als durch Wasserleitungsdruck. Auch hier
bestehen für die verschiedenen Arten bestimmte Grenzen
von 0,6 — 2,1 /*, unterhalb derer ein Hindurchgehen der
Bakterien auf keinen Fall stattfindet. Diese Grenzen
werden in der Hauptsache bedingt durch die Gröfse der
betreffenden Bakterienarten. Durch Kapillaren unter 0,4 /«
Durchmesser sind Bakterien unter keinen Umständen hin-
durchzutreiben.

9. Absolut dichte künstliche (Ferrocyankupfer-) Membranen
gestatten den Bakterien auf keinen Fall den Durchtritt.

10. Das physikalische Verhalten derartiger absolut keim-
dichter Membranen schliefst ihre praktische Verwertbar-
keit für die Filtration aus, wie überhaupt Filter, deren
Poren kleiner sind als die kleinsten Keime, zur Filtration
nicht verwendet werden können, da durch sie Wasser
nur unter Anwendung sehr hoher Drucke hindurchgeht.

Die vorliegende Arbeit wurde in der Zeit vom Februar 1904
bis Januar 1905 im Hygienischen Institut der Kgl. S. Technischen
Hochschule zu Dresden ausgeführt.

Von Dipl.-Ing. Erich Hofstädter. 263

Es sei mir an dieser Stelle gestattet, Herrn Geh. Med. -Rat Prof.
Dr. med. Renk für die gütige Überlassung des Themas, sowie
meinem hochverehrten Lehrer, Herrn Prof. Dr. med. K. Wolf,
meinen verbindlichsten Dank für die mir zu jeder Zeit in liebens-
würdigster Weise gewährte Unterstützung bei meinen Arbeiten
auszusprechen.

Literatur.

1. Chlopin a. Tarn man, Ȇber den Einflufs hoher Drucke auf Mikro-
organismen«. Zeitschrift f. Hygiene, 1903, Bd. 45.

2. v. Esmarch, E., Ȇber kleinste Bakterien und das Durchwachsen von
Filtern«. Zentralblatt f. Bakteriologie, 1902, Bd. 32.

3. Frftnkelu Piefke, »Versuche Ober die Leistungen der Sandfiltration«.
Zeitschrift f. Hygiene, 1890, Bd. 8.

4. 6 ruber, M., »Gesichtspunkte für die Prüfung und Beurteilung von
Wasserfiltern«. Zentralblatt f. Bakteriologie, 1893, Bd. 14.

5. Hesse, G., »Beiträge zur Herstellung von Nährböden und Bakterien-
züchtung«. Zeitschrift f. Hygiene, 1904, Bd. 26.

6. Hesse, W., »Über Wasserfiltration«. Deutsche Medizinische Wochen-
schrift, 1885.

7. Hesse, W., »Über Wasserfiltration«. Zeitschrift f. Hygiene, Bd. 1, 8. 178.

8. Kirchner, M., Untersuchungen über die Brauchbarkeit der Berkefeld-
Filter aus gebr. Infusorienerde«. Zeitschrift f. Hygiene, Bd. 14 u. 15.

9. Krause, Zentralblatt f. Bakteriologie, 0. Bd. 31.

10. Kubier, > Untersuchung über die Brauchbarkeit der Filtres sans pression,
Systeme Chamberland-Pasteur« . Zeitschrift f. Hygiene, 1890. Bd. 8.

11. Landolt, H., Physikalisch-Chemische Tabellen.

12. Lübbert, Pharmazeutische Zentralhalle, 1891, Nr. 39 u. 40.

13. Lüpke, R., Grundzüge der Elektrochemie. Berlin 1896.

14. Miller, W. D., Mikroorganismen der Mundhöhle.

15. Möller, Tageblatt d. 59. Versammlung deutsch. Naturforscher u. Ärzte. 1886.

16. Pfeffer, W., »Lokomotorische Richtungsbewegungen durch chemische
Reize«. Untersuchungen aus dem Botanischen Institut Tübingen, Bd. 1.

17. Pfeffer, W., Über chemotaktische Bewegungen von Bakterien, Flagel-
laten und Volvozineen«. Untersuchungen aus dem Botanischen Institut
Tübingen. Bd. 2.

18. Pfeffer, W., Osmotische Untersuchungen. Leipzig 1877.

19. Plagge, Tageblatt der 59. Versammlung deutscher Naturforscher und
Ärzte. 1886, S. 323.

20. Pukall, W., Ȇber Tonfilter, ihre Eigenschaften und ihre Verwend-
barkeit in chemischen und bakteriologischen Laboratorien«. Berichte
der deutschen chemischen Gesellschaft 1893.

21. Schöfer, H., »Über das Verhalten von pathogenen Keimen in Klein-
filtern«, Zentralblatt f. Bakteriologie, 1893, Bd. 14.

19«

Beitrag zur Wirkung von Tnberkelbazillen
verschiedener Herkunft

(Infektion der vorderen Augenkammer mit abgewogenen kleinsten Tb.-Mengen.)

Von

Dr. Richard Link,

Privatdozent für innere Medizin, Assistenzarzt an der medizinischen Klinik.
(Aus dem Hygienischen Institut der Universität Freiburg i. B.)

Die sowohl in theoretischer wie in praktischer Beziehung so
aufserordentlich wichtige Frage nach der Identität oder Nicht-
identität der Erreger der menschlichen und der Rindertuberkulose,
dieser zwei klinisch so verschiedenen Krankheitsbilder, ist auch
heutzutage noch immer nicht in einer allgemein anerkannten
Weise gelöst. Noch immer steht der Ansicht : beide Krankheits-
erreger sind identisch, und das verschiedene Krankheitsbild be-
ruht nur auf der Verschiedenheit der beiden Organismen — die
andere gegenüber: beide Krankheitserreger sind, wenn auch nicht
kulturell und morphologisch, so doch biologisch verschieden, und
erzeugen deshalb verschiedene Krankheitsbilder.

Um die Wirkungsweise bzw. die Verschiedenheit derselben
bei genau abgewogenen kleinsten Mengen von Tuberkelbazillen
verschiedener Herkunft festzustellen, schlugen wir folgende Ver-
suchsanordnung ein: In eine vordere Augenkammer 1 ) von 18 tun-

1) Die Operation an den Augen führte Herr Privatdozent Dr. Stock,
I. Assistent an der Universitäts-Augenklinik aus. Für diese Unterstützung
sage ich ihm auch an dieser Stelle meinen verbindlichsten Dank, ebenso
den chemischen Assistenten am Hygienischen Institut, Herrn Krause and
Theobold, für die Wägungen der zu den Operationen verwendeten
kleinsten Mengen von Tuberkelbazillen-Kulturen.

Beitrag rar Wirkung von Taberkelbaallen etc. Von Dr. Bichard Link. 265

liehst gleichartigen Kaninchen wurden chemisch genau abgewogene
Stückchen von Tuberkelbazillenkulturen eingebracht, und nun
der Verlauf der sich einstellenden tuberkulösen Entzündung so-
wohl im Auge selbst wie auch hinsichtlich der später eintreten-
den Allgemeininfektion beobachtet.

Zwei Reihen von Versuchen mit je neun Kaninchen wurden
angestellt ; es kamen Mengen von 0,0001 bis 0,0002 g Tuberkel-
bazillenkultur zur Verwendung, wobei es besondere Schwierig-
keiten machte, diese kleinsten Portionen in einem Stück zu er-
halten. — Was die verwendeten Kulturen von Tuberkelbazillen
verschiedener Herkunft betrifft, so stammte das als menschliche
Tuberkelbazillen bezeichnete Infektionsmaterial von einem schwer
kranken Phthysiker, der sich im hiesigen klinischen Hospital in
Behandlung befand, und aus dessen Sputum nach einmaliger
Passage durchs Meerschweinchen die Reinkulturen gewonnen
waren. Die typische Kultur der Perlsuchtbazillen verdanken
wir Herrn Professor v. Behring in Marburg, welcher sie uns
durch seinen Assistenten Herrn Dr. Römer überliefs.

Als Kontrolltiere wurden je einem Meerschweinchen am
5. November 1904 je 1 cem einer Emulsion der beiden Bazillen-
arten in die Bauchhöhle injiziert. Das mit den menschlichen
Tuberkelbazillen infizierte Tier starb schon nach 23 Tagen und
zeigte das gewöhnliche Bild einer generalisierten Tuberkulose
mit linksseitigem pleuritischem Ergufs. Das mit den Perlsucht-
bazillen behandelte Meerschweinchen dagegen wurde am 9. März
1905 bei noch verhältnismäßig gutem Allgemeinbefinden getötet.
Es zeigte eine nicht sehr hochgradige generalisierte Tuberkulose.
Da der Verlauf der Infektion von Meerschweinchen meist ein
schwererer ist bei den Perlsuchtbazillen, so wird das hier be-
obachtete umgekehrte Verhalten vielleicht auf Zufälligkeiten be-
ruhen ; denkbar wäre auch, dafs die Meerschweinchenpassage der
menschlichen Tuberkelbazillen als virulenzvermehrend hier in Be-
tracht käme.

Das Nähere über Versuchsanordnung, Verlauf und den Ob-
duktionsbefund geht aus den beigefügten zwei Tabellen hervor.

266 Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft.

A. Verstehe mit Bazillen der meischliehen Tuberkulose.

Lfd. Nr. d. Kaninchen

!" " i

II

III

Datum der Infektion

! 16. I. 04.

15. t. 04.

15. I. 04

Anfangsgewicht. . .

1950 g

2200 g

2240 mg

Gew.d.eingebrachten
Bakterienmenge. .

0,2 mg

0,15 mg

0,1 mg

Verlauf der In-

Unter starker In-

Bis Ende Januar

Unter starker In-

fektion an den

jektion u. Schwel-
lung der Iris

entwickelt sich ein

jektion u. Schwel-

Augen . . .

Vi der Vorder-

lung der Iris sind

' sind nach 9 Ta-

kammer einneh-

nach 9 Tagen klein-

gen kleinste mi-
liare Knotehen

mendes Hypopvon
mit schwerer Iritis

ste miliare Knöt-

chen in derselben

in derselben auf-

mit massenhaften

aufgetreten , die

getreten, die all-

Knötchen. Die

dann an Zahl zu-

mählich gröfser

Kornea wird trüb,

nehmen und sich

werden. Die Kor-

dann nach vor-

vergrößern. Vor-

nea wird im Fe-

abergehender Bes-

derkammer voll

bruar trüb, nekro- serung nekrotisch,

Fibrin. Die Iritis

tisch, perforiert, perforiert. Der Bul-

wird stärker, die

Der Bulbus ver- j bus Verkäst.

Kornea trüb, per-

käst.

foriert. Der Bul-
bus verkäst.

20. V. bei verhält-

20. V. bei verhält-

nismäfsig gutem

nismäfsig gutem

Allgemeinbe-

Allgemeinbe-
finden getötet.

finden getötet.

16. III. gestorben.

Befund ....

Auge verkäst.

Auge verkäst

Auge verkäst.

Lungen : Zahlrel- ! Lungen : Graue

Lungen : Schwere

che graue Knöt- 1 Knötchen , am

Tuberkulose.

chen mit gelben 1 Rand konfluiert;

Milz: Frei.

Einsprengungen. 1 hier gelb gefärbt.

Nieren : Einzelne

Milz: Frei.

Milz: Frei.

Tuberkel.

Nieren: Frei.

Nieren: Frei.

Leber: Frei.

Leber : >

!
i

1

Leber : >

Von Pr. Richard link.

267

Lfd. Nr. d. Kaninchen

IV

Datum der Infektion

15. I. 04

15. I. 04

VI

15. I. 04

Anfangsgewicht .

(iew.d. eingebrachten
Bakterien menge .

2390 g

2780 g

2520 g

0,1 mg

0,1 mg

0,11 mg

Verlauf der In-
fektion an den
Augen . . .

Befund

Unter starker In-
jektion u. Schwel-
lung der Iris und
etwas Exsudat in
der Vorderkam-
mer treten zu-
nächst einzelne,
dann Anfang Fe-
bruar mehr Knöt-
chen in der Iris
aui Diese werden
grofser, die Kor-
nea dann trüb,
nekrotisch, perfo-
riert Anfang März
durchs Oberlid.
Der Bulbus ver-
käst

18. III. gestorben.
ii Grofser tuberku-
i| löser Abszefs auf
i der Nase.

Auge verkäst.

Lungen : Nichtsehr
starke Tuberku-
lose. Betroffen be-
sonders die oberen
Teile.

Milz: Frei.

Nieren: Frei.

Leber: >

Unter starker In-
jektion u. Schwel-
lung der Iris und
dann Entwicklung
eines grofsen Hy
popyons treten
massenhafte Knöt-
chen auf. Die Kor-
nea wird schnell
nekrotisch perfo-
riert. Vom Bul-
bus istschliefslich
nur mehr eine gra-
nulierende Fläche
übrig.

20. V. bei schlech-
tem Allgemeinbe-
finden getötet

Aqge verkäst

Lungen : rechts in
der Mitte einige
Knötchen , links
grofser Abszefs.

Milz: Frei.

Nieren: rechts ein
Knötchen , links
frei.

Leber: Frei.

Während anfange
nur ein fibrinöses
Exsudat entsteht,
treten erst Anfang
Februar ^zahlrei-
chere Knötchen in
der Iris auf. Die
Hornhaut wird
trüb , vasculari-
siert, erst Ende
März perforiert
Der Bulbus ver-
käst

20. V. bei etwas
besserem Allge-
meinbefinden als
V getötet

Auge verkäst

Lungen: r>/ zahl-
reiche graue und
gelbe Knötchen
zum Teil kon-
fluiert.

Milz: Frei.

Nieren: Frei.

Leber : >

268 Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft.

Lfd. Nr.d. Kaninchen

VII

VIII

IX

5. XL 04

Datum der Infektion

5. XI. 04

5. XI. 04

Anfangsgewicht . .

2820 g

g

3070 g

Uew.d.eingebrachten
Bakterienmenge

0,1 mg

0,1 mg

0,15 mg

Verlauf der In-
fektion an den
Augen . . .

Befund .

In den ersten 8 Ta-
gen entwickelt
sich starke Injek-
tion und Schwel-
lung der Iris und
Trübung der Horn-
haut. Dann tritt
vorübergehend
Hypopyon auf. Die
Hornhaut wird
stärker trüb, per-
foriert; der Bul-
bus verkäst

9. III. 06 bei gutem
Allgemeinbe-
finden (Gewicht
2910 g) getötet

Auge verkäst

Lungen : Beider-
seits wenig miliare
graue , durch-
scheinende Knöt-
chen ohne Ver
käsung.

Milz: Frei.

Nieren: Frei.

Leber : >

In den ersten 8 Ta-
gen entwickelt sich
eine Konjunk-
tivitis , Keratitis,
Iritis. Dann treten
knötchenförmige
Bildungen an der
Hornhaut auf.
Diese wird trüb,
wölbt sich vor,
wird perforiert ;
der Bulbus ver-
käst.

9. UI. 05 bei liem-
lich gutem Allge-
meinbefinden (Ge-
wicht 3050 g) ge-
tötet.

Auge verkäst

Lungen : Beider-
seits Knötchen ,
gröfser als bei VII,
zum Teil verkäst.

Milz : miliare Knöt-
chen.

Nieren: Frei.

Leber : »

Es entsteht eine
Iritis mit 3 all-
mählich wachsen-
den Knötchen. Die
Hornhaut trübt
sich schnell, wird
perforiert und der
Bulbus verkäst

9. m. 05 bei
schlechtem Allge-
meinbefinden (Ge-
wicht 2480 g) ge-
tötet

Auge verkäst

Lungen: Beider-
seits serofibrinöse
Pleuritis. Lungen
fast völlig tuber-
kulös verändert
und verkäst Sehr
wenig Gewebe
mehr übrig.

Milz : miliare Knöt-
chen.

Nieren: frei.

Leber : >

Von Dr. Richard Link.
B. Versuche mit Perlsuchtbazillen.

269

Lfd. Nr.d. Kaninchen

XI

Datum der Infektion

20 II. 04

20. n 04

XII

IL 04

Anfangsgewicht .

.1

1805 ff

1890 ff

2075 ff

Gew.d.eingebrachten
Bakterienmenge. . »

0,2 mff

0,1 mg

0,2 mg

Verlauf der In-
fektion an den
Augen . . .

Befund

Es entsteht nur
Vascularisation
und Schwellung
der Iris ohne Knöt-
chenbildung. Diese
nimmt zu, es tritt
Exsudat hinzu und
Keratitis paren-
chymatosa. Ende
März ist die Horn-
haut perforiert,
der Bulbus ver-
käst.

20. V. 04 bei sehr
|i schlechtem Allge-
i meinbefinden ge-
I tötet.

Auge verkäst.

Lungen : Grofse
teils graue, teils
gelbe Knoten.

Milz: Grofse gelb-
liche Knoten.

Nieren: 2—3 gelb-
liche Knoten.

Leber: frei.

Es entsteht zu-
nächst nur Vascu-
larisation und
Schwellung der
Iris, die allmählich
zunimmt Erst
Ende März ist ein
weifser Herd in
der Iris zu sehen.
Es entwickelt sich
eine Keratitis pa-
renchy matosa, die
Hornhaut wird
perforiert, der Bul-
bus verkäst.

20. V. 04 bei sehr
schlechtem Allge-
meinbefinden ge-
tötet.

Auge verkäst.

Lungen : Grofse,
graue Knoten mit
käsigen Einspren-
gungen.

Milz: Frei.

Nieren: Frei.

Leber : »

Es entsteht zu-
nächst nur Schwel-
lung und Vascu-
larisation der Iris
ohne Knötchen-
bildung, die all-
mählich zunimmt.
Erst Ende März
ist ein kleiner grau-
gelber Herd in der
Iris zu sehen. Die
Kornea wird erst
später diffus pa-
renchymatös ge-
trübt und perfo-
riert. Der Bulbus
verkäst.

20. V. 04 bei sehr
schlechtem Allge-
meinbefinden ge-
tötet. Abszefs am
rechten Bein.

Auge verkäst.

Lungen : Grofse
graue Knoten mit
käsigen Ein-
sprengungen.

Milz : Kleine Knöt-
chen.

Nieren : Kleine
Knötchen.

Leber: Frei.

19 <

270 Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft.

Lfd. Nr. d. Kaninchen

Datum der Infektion

Anfangsgewicht . . .

Gew.d eingebrachten
Baktericnnienge . .

XIII

5. XL 04

3750 g

0,15 g

XIV

5. XI. 04

3200 g

0,1 mg

XV^

ft^XI. 04
27Ö0 g ~

0,1 mg

Verlauf d. Infek
tion an den
Augen . . .

Befund .

Es entsteht zu-
nächst eine Iritis
ohne Knötchen-
bildung, sowie pa-
I renehymatöse Ke-
| ratitis. Ende No-
! vember sind un-
deutlich einige
: Knötchen in der
, Iris zu erkennen.
Die Hornhaut
stark trüb, vorge-
wölbt, Mitte De-
zember perforiert.
Der Bulbus ver-
käst.

;< 15. 1. 05 gestorben
!| (Gewicht 13. I.
,j 2520 g.)

,. Auge verkäst.
Lungen: Biskirsch
kerngrofse Knoten
mit sehr starker

, Verkäsung , teil-
weise käsige Pneu-
monie.

, Milz: Zahlreiche
kleine Knötchen.

, Nieren: Zahlreiche

1 bis gerstenkorn-

l| grofse Knötchen
l>r.

I Leber : Frei.

Es entsteht zu-
nächst etwas Iritis
und Keratitis.
Ende November
sind zahlreiche
Knötchen zu
sehen. Dann trübt
sich die Hornhaut
schnell, wird sehr
stark vasculari-
siert. Dahinter
käsige Massen.

1. II. 05 gestorben.
(Gewicht 30. I.
2670 g.)

Auge verkäst

Lungen: Bis erb-
sengrofse , stark
verkäste Knoten.

Milz: Frei.

Nieren : Bis gersten-
kern grofse Kno-
ten.

Leber: Frei.

Es entsteht eine
Iritis mit 2 Knöt-
chen, die langsam
wachsen. Ende
November ist die
Hornhaut in toto
trüb , vasculari-
siert, wird Anfang
Dezember perfo-
riert. Der Bulbus
verkäst

4. II. 05 gestorben.
(Gewicht 30. I.
2270 g.)

Auge verkäst.

Lungen : Bis erb-
sengrofee stark
verkäste Knoten.

Milz: Ganz kleine
Knötchen.

Nieren : Bis erbsen-
grofse, zentral ver
käste Knoten.

Leber: Frei.

Von Pr. Richard Link.

271

Lfd. Nr. d. Kaninchen

XVI

Datum der Infektion

5. XL 04

Anfangsgewicht . . .

( iew.d .eingebrachten
Bahterienmenge .

2600 g
0,2 mg

XVII

5. XI. 04

2370 g

0,2 mg

XVIII

5. XI. 04

2170 g

0,2 mg

Verlauf d. Infek-
tion an den
Angen . . .

Befund

Es entsteht eine
starke Iritis und
Keratitis mit star-

, ker Trübung und
Vascularisation
der Hornhaut. Bei

, einigen Knötchen
läfst sich nicht

• genau erkennen,
ob sie Bazillen-

. häufen oder Tuber

I kel sind. Die Horn-
haut wird sehr
schnell perforiert,
der Bulbus ver-
käst.

Es entsteht eine
starke Iritis, ohne
dafs Knötchen
sichtbar werden,
und eine heftige
Keratitis. Die
Hornhaut wird
stark parenchy-
matös getrübt und
vascularisiert und
Mitte Dezember
perforiert. Der
Bulbus verkäst.

i

25. XII. 04 gestor-
ben. (Gewicht
16. XII. 2600 g,
nach vorheriger
Abnahme bis
2820 g.)

Auge verkäst

Doppelseitiger,
grofser, pleuri ti-
scher Ergufs. Pe-
ricarditiß exsuda-
tiva und Ascites.

Lungen : Kleine
Knötchen.

Milz: Frei.

Nieren : Kleinste
Knötchen.

Leber: Frei.

28. I.
ben.
13. I.

05 gestör-
te wicht
2320 g.

Auge verkäst.

Doppelseitiger pleu-
ritischer Ergufs.

Lungen : Schwerste
konfluierende Tu-
berkulose mit sehr
starkerVerkasung.
Kaum mehr nor-
males Gewebe vor
handen.

Milz : Kleinere
Knötchen.

Nieren : Beiderseits
fast kleine erbsen-
grofse Knoten.

Leber: Frei.

Bis Mitte Novem-
ber hat sich eine
schwere Konjunk-
tivitis und Ke-
ratitis parenchy-
matosa entwickelt,
so dafs von der
Iris, die ebenfalls
starke Entzün-
dungserschei-
nungen zeigte, nur
mehr der obere
Teil zu sehen ist.
Keine Knötchen-
bildung. An Stelle
der Hornhaut ibt
Ende November
nur mehr eine
völlig vasculari-
sierte, bindegewe-
bige Masse zu
sehen, die dann
perforiert wird.

12. XII. 04 gestor-
ben. (Gewicht
2. XII. 1900 g.)

Auge verkäst.
Lungeu: Bis gcr-

stenkerngrofse

Knoten.
Milz : Kleinere

Knoten.
Nieren: Nur links

ein Knötchen ,

rechts frei.
Leber: Frei.

272 Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft.

Bei sämtlichen Obduktionen der zur Untersuchung gelangen-
den Tiere wurde durch Ausstrichpräparate das Vorhandensein
von Tuberkelbazillen festgestellt. Dabei erwiesen sich die Perl-
zuchtbazillen — entsprechend den von Kossei, Weber und
Heufs 1 ) mitgeteilten eigenen und den Befunden zahlreicher
anderer Autoren — ebenso wie bei der Ausgangskultur stets
als ziemlich kurze Stäbchen, die nie eine Spur von Körnelung
zeigten, während die menschlichen Tuberkelbazillen mehrfach
eine solche erkennen liefsen. — Mikroskopische Untersuchungen
verschiedener von Tuberkulose befallener innerer Organe ergaben
nichts Besonderes.

Bezüglich des Verlaufs der Tuberkulose an den Augen scheint
mir ein Unterschied insofern zutage getreten zu sein, als bei der
Infektion mit menschlichen Tuberkelbazillen die Knötcheubildung
in den Vordergrund trat, während bei der mit Perlsuchtbazillen
die diffus entzündlichen Erscheinungen — nicht etwa auf Wund-
infektion beruhend — überwogen. Bei sieben von den neun
Versuchstieren der ersten Reihe, der mit menschlichen Tuberkel-
bazillen infizierten, ist das Auftreten von meist massenhaften
Knötchen vermerkt ; bei einem der zwei anderen Tiere erschwerte
die sehr früh, in den ersten acht Tagen auftretende Hornhaut-
trübung die Beurteilung. Bei nur fünf der mit Perlsuchtbazillen
infizierten Tiere ist dagegen das Auftreten von Knötchen ver-
zeichnet; bei drei sind es nur eins oder einzelne, bei einem sind
es zahlreiche, bei einem sind sie in ihrer Art zweifelhaft. Eine
starke Iritis mit erheblicher Schwellung und Vascularisation trat
bei allen Versuchstieren dieser Reihe sehr bald auf.

Eine Abhängigkeit des Verlaufs der Krankheitserscheinungen
von der Menge der eingebrachten Bazillen liefs sich weder an
den Augen noch auch bei der Gesamtinfektion des Organismus
nachweisen : es konnten keine Verschiedenheiten festgestellt werden
zwischen den Fällen, welche nur mit 0,0001 und denen, welche
mit 0,0002 g Kultur behandelt waren. Allerdings hatte z. B.
Tier XVIII in der zweiten Reihe, das nach der überhaupt

1) Tuberkulose Arbeiten aus dem Kaiserlichen Gesundheitsamt, 1. o.
3. Heft, 1904 u. 1905.

Von Dr. Richard Link. 273

kürzesten Krankheitsdauer von 37 Tagen starb, 0,0002 g Kultur
erhalten; dem steht aber Tier XVII gegenüber, das, mit der
gleichen Menge infiziert, beinahe so lange lebt wie XIV, das
nur 0,0001 g erhalten hatte. Es bedeutet ja auch 0,0001 g
Trockenkultur für ein Kaninchen eine ganz enorme Bazillenmasse.

Der Allgemeinverlauf gestaltete sich bei den mit Perlsucht-
bazillen infizierten Tieren schwerer als bei den mit menschlichen
Tuberkelbazillen behandelten. Von ersteren starben sechs nach
37 — 87 Tagen, darunter die zwei bei Beginn der Versuche
schwersten Tiere XIII und XIV ; die anderen drei wurden nach
90 Tagen getötet, alle bei sehr schlechtem Allgemeinbefinden.
Von den letzteren dagegen starben nur zwei nach 61 und 63 Tagen,
von den übrigen sieben wurden vier getötet nach 126, drei nach
124 Tagen. Vier von den sieben waren noch bei ziemlich gutem
Allgemeinbefinden.

Bei sämtlichen Tieren trat eine Allgemeininfektion
ein. Am stärksten waren stets die Lungen befallen; bei einem
Tier (VII) fanden sich nur miliare graue Knötchen; bei allen
andern waren die Veränderungen gröfser. Die schwersten Affek-
tionen zeigten auch hier die mit Perlsuchtbazillen behandelten
Kaninchen. — Frei blieb bis auf zwei Fälle (IX und XVI) die
Pleura ; stets frei blieb die Leber. Ascites fand sich nur einmal.
Beteiligt waren die Milz und die Nieren — bei der menschlichen
Tuberkulose in je zwei, bei der Perlsucht in je sechs bzw. acht
Fällen. Unter den letzteren, den Nierenaffektionen der Perl-
suchtreihe, sind bis erbsengrofse Knoten vermerkt. — Tier XI,
das nach 90 Tagen noch intakte Milz und Nieren aufwies, inufs
hier freilich im Vergleich mit den nach 124 bzw. 126 Tagen ge-
töteten Tieren der Reihe mit menschlicher Tuberkulose aus-
scheiden.

Während somit an den Augen bei der Infektion mit Perl-
suchtbazillen ein Überwiegen der diffus entzündlichen Erschei-
nungen gegenüber der sehr starken Knötchenbildung bei der In-
fektion mit menschlichen Tuberkelbazillen zu beobachten ist,
tritt sowohl in bezug auf den Allgemeinverlauf als auch auf die
Beteiligung der einzelnen Organe und der Ausdehnung des Krank-

274 Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen etc. Von Dr. R. Link.

heitsprozesses in denselben eine gröfsere Virulenz der verwendeten
Perlsuchtkultur als der menschlichen Tuberkelbazillen für Ka-
ninchen zutage. Es entspricht dieses Ergebnis bei der hier ge-
wählten Versuchsanordnung durchaus dem von zahlreichen Au-
toren *) erhobenen Befund, wonach bei verschiedenen Übertragungs-
arten Perlsuchtbazillen für Kaninchen erheblich virulenter sind
als menschliche Tuberkelbazillen.

Zum Schlufs ist es mir eine angenehme Pflicht, Herrn Hof-
rat Professor Dr. Schot telius für die Anregung zu dieser Arbeit
und seine freundliche Unterstützung bei Ausführung der Versuche
meinen verbindlichsten Dank auszusprechen.

1) Kossei, Weber u. Heufs, Vergleichende Untersuchungen Ober
Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft, Tuberkulosearbeiten aus dem
Kaiserlichen Gesundheitsamte, 1. u. 3. Heft, 1904 u. 1905. Sonstige Literatur
hier sowie bei:

A. v. Szökely, Die Frage der Identität der menschlichen und Binder-
tuberkulose. Zentralblatt f. Bakteriologie, Bd. 32, Nr. 6, 7 u. 8.

Ziegler, Artikel Tuberkulose in den Enzyklopädischen Jahrbachern
der gesamten Heilkunde. Neue Folge, Bd. 2.

P. Cornet u. A. Meyer, Tuberkulose im 2. Band des Handbuchs der
pathogenen Mikroorganismen, herausgegeben von Wassermann u. Kolle.

Arohiv für Hygiene. Bd. LIIT.

Fig. 1. Haldenwangcr-Z.
Vergr. ÖOfach. (Zeift, ObJ. AA., Ok. 2)

Fig. 2. I
Veisr. 50 fach. 7>,

Fig. 4. Ferrocyankupf er- Membran.
Vergr. ÖOfach. (Zeift, Obj. AA., Ok. 2.)

Fig. 5. Bäi. in
Vergr. 730 fach. Zoil

Tafel IV.

liiner-Z.

Obj. AA., Ok. 2.)

Fig. 3. Berkefeld-Z.
Vergr. öOfach. (Zeifs, Obj. AA., Ok. 2.)

alcienwanger-Z.
*• '. V,, kom. Imm.

Fig. 6. Kokken in Halden wanger-Z.
Vergr 7 30 fach. (Zeifs, Ok. 3, l l lt kom. Imm.)

Bakterizide Beagenzglasversuche mit Choleravibrionen.

Von

Prof. Dr. Oskar Bali und Dr. Yonetaro Kikuchi.

Auustenten des Institute!. Osaka (Japan).

(Aus dem Hygienischen Institut der deutschen Universität in Prag.
Vorstand: Prof. Hueppe.)

Im Anfang dieses Jahres veröffentlichten Pfeiffer und
Friedberger eine kurz gehaltene, aber anscheinend erschöp-
fende Mitteilung über Versuche, die Immunserumwirkung bei
Choleravibrionen und Typhusbazillen durch Zugabe eines vor-
her mit den betreffenden Organismen bebandelten Serums zu
behindern. Ihre Versuche wurden in der Meerschweinchenbauch-
höhle so angestellt, dafs ein vorher mit z. B. Choleravibrionen
behandeltes Serum von Ziege, Kaninchen und Tauben, nicht
aber von Meerschweinchen, nach Entfernung der Bakterien: 1. die
untertödliche Dosis von Choleravibrionen tödlich zu machen,
2. die Wirkung eines gleichzeitig eingespritzten Immunserums,
wenn auch nicht im vollen Umfange des Gesetzes der Multipla
zu hindern vermochte.

Auf den ersten Blick schien hier eine auffallende Ähnlich-
keit mit den von einem von uns studierten Choleraaggressinen vor-
zuliegen, doch ergibt eine nähere Überlegung tiefgreifende Unter-
schiede. Die wichtigsten davon sind, abgesehen von den gänzlich
verschiedenen quantitativen Verhältnissen, die, dafs Pfeiffer
und Friedberger das Meerschweinchenserum unfähig zur Aus-

ArchJv für Hygiene. Bd. Uli. 20

276 bakterizide Reagenzglas versuche mit Cholera Vibrionen.

lösung dieser Erscheinung fanden, während das Choleraaggressin
gerade von Meerschweinchen stammt, ferner aber, dafs die mit
Vibrionen behandelten Sera eine Vermehrung der Bazillen zu-
lielsen, während bei Anwendung von Aggressin in der sehr
grolsen Mehrzahl der Fälle das Pfeiffersche Phänomen voll-
ständig ablief und nur der Tod des Tieres mit keimarmer
Bauchhöhle nicht verhindert wurde. Bei Typhus fand wenig-
stens Granulabildung neben Vermehrung statt. Ob trotz dieses
Unterschiedes nicht doch ein Zusammenhang an der Wurzel
zwischen dem Pfeiffer-Friedbergerschen und den Aggressin-
versuchen besteht, kann hier nicht weiter untersucht werden.

Pfeiffer und Friedberger konnten ausschliefsen, dafs
diese Serumwirkung durch vitale Funktion der Bakterien herbei-
geführt wird, ferner dafs zurückbleibende Vibrionenkörper die
Ursache sein könnten. Weiter geben sie an, dafs in Lösung
gegangene Bakterienleibessubstanz nicht an der Erscheinung be-
teiligt sein könnte, da auch erwärmtes ( 8 / 4 h 58°) Serum nach
Bakterienbehandlung hemmend wirkt, und da Peritonealexsudat,
das nach vorhergegangener Bakteriolyse reich an gelösten Bak-
terienleibern sein müfste, nichts davan erkennen läfst.

Bei Erklärung dieser eigenartigen Serumwirkung schliefsen
Pfeiffer und Friedberger mit grofser Wahrscheinlichkeit
das Zwischentreten von Antiambozeptoren und Antikomplementen,
sowie von Komplementablenkung aus und neigen der Annahme
zu, dafs es sich um noch nicht bekannte Serumstoffe (bakterio-
lytische Antagonisten) handeln könnte.

Die nachstehenden Versuche wurden zwar durch die Mit-
teilung von Pfeiffer und Friedberger unmittelbar veranlaf st,
aber sie waren von vornherein nicht etwa als Nachprüfung der-
selben angelegt, weshalb auch das Abwarten der ausführlichen
Mitteilung von Pfeiffer und Friedberger nicht unbedingt
erforderlich erschien. Während die genannten Autoren im Tier-
körper arbeiteten, sind die eigenen Versuche ausschliefslich
Reagenzglasversuche, die sich bis zu einem gewissen Grade an
eine mehrere Jahre zurückliegende Arbeit des einen von uns
anschlössen. Freilich dürften ihre Ergebnisse ziemlich unmittel-

Von Prof. Dr. Oskar ßail und Dr. YonetarÖ Kikuchi. 277

bar auf die Meerschweinchenbauchhöhle übertragen werden können,
da das Phänomen der Bakteriolyse daselbst schwerlich etwas
anderes als ein unter besonderen Umständen angestellter Reagenz-
glasversuch sein kann. Tatsächlich stimmen auch die nach-
stehenden Versuchsresultate in sehr vielen Punkten mit denen
Pfeiffer und Friedbergers überein, wenn gleich die Aus-
legung eine ganz andere sein mufs.

Pfeiffer und Friedberger schliefsen, wie erwähnt, aus,
dafs die eigenartige Wirkung eines mit Bakterien behandelten
Serums auf einer vitalen Funktion der Bakterien oder im Zu-
rückbleiben von solchen nach dem Abzentrifugieren beruhen
könnte. Ersteres ist ohne weiteres zu bestätigen, bei Begründung
letzteren Punktes weichen die Reagenzglasversuche teilweise darin
von den Tierversuchen ab, dafs »eine Kochsalzlösung, in der
Bakterien emulsioniert waren, nach dem Abzentrifugieren der
Bakterien nicht hemmend wirkt.« Der wichtigste Punkt ist aber
der bereits obenerwähnte, dafs Leibessubstanzen nach Pfeiffer
und Friedberger nicht in Lösung gegangen sein könnten, da
hemmendes Serum ohne Bakteriolyse und umgekehrt keine Hem-
mungswirkung einer Flüssigkeit, in der vollständige Bakteriolyse
stattgefunden hatte, erhalten werden könne. Hier gibt sich
offenbar eine Lücke in den scharfsinnigen Schlußfolgerungen
der beiden Autoren kund. Denn dafür, dafs Leibessubstanz von
Bakterien auch im Serum nur infolge von typischer Bakteriolyse
in Lösung gehen könnte, fehlt jeder Beweis. Im Gegenteil ist
schon seit langem eine sonstige Lösung von Bakterienleibern be-
obachtet oder angenommen worden, es sei an die Lösung durch
Emmerichs Pyozyanase, an die freiwillige Auflösung älterer
Bouillonkulturen erinnert und schließlich an die sog. »freien
Rezeptoren c von Neisser und Shiga 1 ). £s ist zuzugeben,
dafs man sich gerade von letzteren nicht leicht eine bestimmte
Vorstellung machen kann, da es von vornherein nicht recht
wahrscheinlich ist, dafs labile Gruppen des Bakterienkörpers sich
loslösen und getrennt davon ein relativ selbständiges Dasein

1) Deutsche medix. Wochenschrift, 1903, Nr. 4.

20*

278 Bakterizide fteagenzglasversuche mit Choleravibrionen.

führen könnten. Hat man sich aber einmal diese Vorstellungs-
weise zu eigen gemacht, die doch eine Art Lösung voraussetzt,
so könnte man die Hemmungswirkung für eine Besetzung der
Serumimmunkörper mit freien Rezeptoren halten, die sich durch
den Aufenthalt der Bakterien im Serum ablösen und dann als
eine Art von Antiambozeptoren gelten könnten. Wenngleich
ein schöner, im folgenden bestätigter Versuch von Pfeiffer
und Friedberger sich direkt gegen diese Annahme richtet,
(a. a. 0. S. 7, Punkt 8), so beweist dieselbe doch, dafs eine
Lösung von Bakterienteilen und noch dazu so wesentlichen, wie
die supponierten Bakterienrezeptoren, auch ohne spezifische
Bakteriolyse, wie bei N eis 8 er und Shiga für möglich gehalten
wird. Der Umstand, dafs man mit Bakterienextrakten z. B.
Präzipitation erhalten (Kraus), damit immunisieren, d. h.
Agglutinine und Bakteriolysine (B rieger, Neisser und Shiga)
erzeugen kann, beweist das Gleiche.

In der Tat läfst sich mittels nicht bakteriolytisch erhaltener
Bakterienextrakte die bakterizide Serumwirkung mehr weniger
vollständig aufheben. Als Extraktionsflüssigkeit kann Serum oder
physiologische Kochsalzlösung (auch Wasser, schwache Ammon-
karbonat- oder Ammonsulfatlösung) verwendet werden. In den
folgenden Versuchen wurde vorwiegend die als indifferent an-
gesehene, neutrale 0,8proz. NaCl-Lösung verwendet, die ebenso wie
Serum am besten wirkt, wenn sie */ 2 — l h bis 60° auf Bakterien
wirken kann. 1 ) Die allermeisten Versuche wurden mit dem
Choleravibrio, nur zur Ergänzung auch solche mit dem Typhus-
bazillus angestellt. In der Regel wurde nur mit Kaninchen-
serum, das einen Zusatz von Choleraimmunserum (von Herrn
Prof. Pfeiffer in liebenswürdiger Weise überlassenes Serum
einer immunisierten Ziege) erhielt, gearbeitet.

Tabelle I.
3 junge Choleraagarkulturen wurden in physiologischer Kochsalzlösung
aufgeschwemmt und zu je Vi Kultur in Eprouvetten verteilt. Durch Zentri-
fugieren mit vieler NaCl-Lösung werden die Vibrionen gewaschen und die
Bodensätze wie folgt behandelt:

1) Vgl. Shiga, Berl. klin. Wochenschrift, 1904, Nr. 4.

Von Prof. Dr. Oskar Bail und Dr. Yonetarö Kikuchi.

279

a) In 1,5 ccm aktivem Kaninchenseram 1 Std. bei 37° belassen, zentri-
f agiert and dann die klare Flüssigkeit 1 Std. auf 60° erwärmt

b) In 1,5 ccm aktivem Kaninchenseram 1 Std. bei 60 ° erwärmt, dann
zentrifagiert

c) Wie a mit inaktivem (Vi Std. auf 60 ° erwärmtem) Kaninchenseram.

d) Wie b mit inaktivem Serum.

e) Wie a mit NaCl-Lösang.

f) Wie b mit NaCl-Lösang.

o

Nach

5

4 Standen

1 . 1,0 ccm Kaninch.-Serum + 0,0001 Immunserum

2.

+

+ 0,01 a

48

3.

+

+ 0,1 a

434

4.

+

+ 0,01 b

152

5.

+

+ 0,1 b

368

6.

+

+ 0,01 c

22

7.

+

+ 0,1 c

1120

8.

+

+ 0,01 d

g

21

9.

+

+ 0,1 d

3

720

10.

+

+ 0,01 e

528

11.

+

+ 0,1 e

764

12.

+

+ 0,01 f

&

800

13.

+

+ 0,1 f

ca. 20000

14.

+

+ 0,1

Kaninch.-Serum

15.

+

+ 0,1

Inakt. Kan.-Serum

6

16.

+

NaCl-LösuDg

112

Die Hemmung der Bakterizidie tritt deutlich hervor. Merk-
würdigerweise bleiben die gleichen Extrakte auf frisches Schweine-
serum (ohne künstlichen Immunkörperzusatz) ohne Wirkung.
Ebenso konnte Rinder-, Pferde- und Schafserum durch Bakterien-
extrakte, die in gleicher Weise mit den Serie selbst, mit Kanin-
chenseram und Na Cl-Lösung hergestellt waren, nicht unwirksam
gemacht werden, während Schweine- und Ziegenserum mit Cholera-
vibrionen, in der angegebenen Weise behandelt, Kaninchenseram
stark beeinflußten. Über die Gründe dieser Erscheinung wurden
weitere Untersuchungen nicht angestellt, doch läfst sich ver-
muten, dafs der natürlich hohe Immunkörpergehalt dieser Sera
das Wesentliche ist.

280

Bakterizide Reagenzglasversuche mit Choleravibrionen.

Am interessantesten sind natürlich die mit Na Cl-Lösung her-
gestellten Extrakte, bei deren Herstellung von einer besonderen
Bakteriolyse keine Rede sein kann. Sie sind ungleich wirksamer,
wenn sie bei 60° als bei 37° gewonnen werden; namentlich
letztere schwanken in ihrer Wirkung einigermaßen, was wohl
mit der Menge und dem Alter der zur Extraktion verwendeten
Kulturen zusammenhängt. Ganz junge, ca. 15 stündige Kulturen
sind die geeignetsten.

Tabelle IL

2 junge Choleraagarkaltaren worden in Na Cl-Lösung aufgeschwemmt
und in 4 Teile geteilt, dann zentrifugiert. Nach dem Abgiefsen der Zentri-
fugate wurden die Bodensätze in folgender Weise behandelt:

a) Ein Teil der gewaschenen Vibrionen -f- 1,0 ccm Kaninchenserum
IStd. bei 37°.

b) Ein Teil der gewaschenen Vibrionen + 1>0 ccm Kaninchenserum
1 Std. bei 60°.

c) Wie a mit Na Cl-Lösung.

d) Wie b mit Na Cl-Lösung.
Dann völlig klar zentrifugiert.

1

Nach

o

OD

4 Stunden

1. 1,0 ccm Kan.-Serum + 0,0001 Serum Pfeiffer + 0,1 Na Cl-Lös.

56

2. » » + » +0,1 a

8480

3 » » + » +0,1 b

ca. 10 000

4. » » + > +0,1 c

g

1792

5. » > + » +0,1 d

1

5 760

6. l,0ccmRind.-Serum+0,l ccm Na Cl-Lösung

*

7. > » +0,1 a

o

8. » » +0,1 b

9. » > +0,1 c

10. » » +0,1 d

Beim Zentrifugieren von Cholerabakterien, die bei 60° mit
Na-Cl-Lösung hergestellt sind, bemerkt man ganz deutlich, dafs
tatsächlich sehr starke Veränderungen mit der Bakterienmasse
vor sich gegangen sein müssen. Dieselbe wird schleimig und
bleibt zusammenhängend beim leichten Zentrifugieren oder wenn
sie in grofser Menge frischer Na Cl-Lösung gegossen wird. Erst
durch kräftiges Schütteln läfst sie sich zerteilen, durch kräftiges
Zentrifugieren als fester Bodensatz abscheiden. Bei Typhus-
bazillen ist das weniger deutlich.

Von Prof. Dr. Oskar Bail und Dr. YonetarG Kikuchi.

281

Tabelle HI.

2. Agarkultaren junger Cholera werden in 1,0 ccm NaCl-Lösung aufge-
schwemmt und 1 Std. bei 60° gehalten. Von der dadurch erhaltenen halb-
geronnenen Masse wird je V« zugesetzt zu:

a) 1,0 ccm aktivem Kaninchenserum und Vi Std. bei 37 ° gehalten.

b) » > > > > > i 60° >

c) 1,0 ccm NaCl-Lösung wie a.

d) » > » b.

e) 1,0 ccm inaktivem Kaninchenserum wie a.

f) > > > > b.
Dann alle Proben völlig klar zentrifugiert.

*

Nach

«M
O

GQ

4 Stunden

1. 1,0 ccm Kan.Serum + 0,0001 Pfeiffersches Serum -f- 0,1 NsCl

12

2. » » + . +0,1 a

8000

3. » » + > +0,1 b

8

ca. 10 000

4. . . + , +0,1 c

&

6 848

5. » , + , +0,1 d

8

ca. 15 000

6. • » + » +0,1 e

5 376

7. » . + , +0,1 f

1

5 696

Tabelle IV.

Dieselben Flüssigkeiten wie in Tab. III werden in der Kälte aufbewahrt
und am andern Tage zu Versuchen verwendet.

-*a

O

Nach

1

1

4 Stunden

1. 1,0 ccm Kan.Serum + 0,0001 Pfeiffersches Serum -f 0,1 Na Gl

672

2.

+

9

+ 0,1 a

3.

+

>

+ 0,1 b

§

4. >

+

»

+ 0,1 c

£

5.

► -h

9

+ 0,1 d

fe

6.

+

>

+ 0,1 e

$

£

7.

+

»

+ 0,1 f

S!

8.

+ 0,0005 Pfeiffersches Serum +0,1 Na Ol

s

544

9.

+

9

+ 0,1 a

e

2016

10.

+

>

+ 0,1 b

1568

11. >

+

>

+ 0,1 c

5284

12.

+

»

+ 0,1 d

3808

13.

+

9

+ 0,1 e

2944

14.

+

9

+ 0,1 f

3104

282

Bakterizide Reagenzglasversacne mit Choleravibrionen.

Auch bei der Versuchsanordnung, die in Tabelle III und IV
eingehalten wurde, tritt der Einflute der Bakterienextrakte über-
all deutlich hervor. Aus Tab. IV geht aber noch weiter hervor,
dals die hemmende Wirkung mit steigendem Immunkörperge-
halte des Serums geringer wird.

Tabelle V.

a) 1 Choleraagarkultur -f- 1 ccm Kaninchenserum.

b) 1 » +1 ccm NaCl-Lösung.

Beide Proben 1 Std. bei 60° extrahiert und dann klar uentrif agiert.

-

-*ä ~

S

Nach

&

4 Stunden

1 . 1,0 ccm Kan.-Serum + 0,1 NaCl

ca. 20 000

2.

+0,1 a

00

3.

+ 0,1 b

00

4.

> + 0,0001 Pfeiffersches Serum + 0,1 Na Gl

3 680

5.

i

+ 0,1 a

g

00

6.

+

+ 0,1 b

iO

CO

7.

+ 0,001

+ 0.1NaCl

1

2 688

8.

+

+ 0,1 a

1-H

ca. 10000

9.

+

+ 0,1 b

5184

10.

+ 0,006

+ 0,lNaCl

8

11.

+

+ 0,1 a

352

12.

+

+ 0,1 b

720

Aus diesem Befunde läfst sich mit Sicherheit eine Einwir-
kung des hemmenden Extraktes erschließen, die sich zum min-
desten vorwiegend, wenn nicht gänzlich gegen den Immun-
körper richtet. Diese Feststellung stimmt ganz mit der Er-
mittelung von Pfeiffer und Friedberger in Tierversuchen
überein.

Bezüglich eines anderen Punktes war die Übereinstimmung
in einigen Fällen ebenfalls zu erzielen. Pfeiffer und Fried-
berger geben an, dafs es ihnen gelungen sei, mit Kaninchen-
serum, nicht aber mit Meerschweinchenserum, die mit Vibrionen be-
handelt waren, bakteriolytischen Antagonismus im Meerschweinchen-
versuch zu erzielen. Auf den Reagenzglasversuch übertragen,
würde das heifsen, dafs Meerschweinchenserum + Immunkörper

Von Prof. Dr. Oskar Bail und Dr. Yonetarö" Kikuchi.

283

wohl durch ein mit Vibrionen behandeltes Kaninchenserum,
nicht aber durch ein ebenso behandeltes Meerschweinchen-
serum gehemmt würde. Entsprechend auch beim Kaninchenserum.
In einem Falle ergab der bakterizide Glasversuch wirklich dieses
Resultat, ebenso auch, dafs mit Na-Cl-Lösung bei 37 ° hergestellte
Extrakte unwirksam waren. Bei 60° extrahierte Vibrionen
machten jedes Serum und auch Kochsalzlösung hemmend.

Tabelle VI.

a) V T Agar-Cholerakaltnr + 1,0 ccm Meerschweinchenserum 1 Std. bei 37 °.

b) » > 1 > » 60°.

c) Wie a mit Kaninchenseram.

d) Wie b mit Kaninchenseram.

e) Wie a mit NaCl-Lösung.

f) Wie b mit NaCl-Lösung.
Dann klar zentrifugiert.

o

OD

Nach
4 Stunden

1. 1,0 ccm

Meerschw.-Serum +0,0001 Pf eiff ersches Seram

2.

>

+

>

+0,1 a

4

3.

>

+

>

+ 0,1 b

2432

4.

»

+

>

+0,1 c

ca. 10 000

5.

>

+

>

+0,1 d

ca. 15 000

6.

»

+

>

+0,1 e

g

5

7.

>

+

>

+0,1 f

s

192

8. 1,0 ccm

Kaninchenserum +0,0001 Pfeiffersches Serum

1

9. >

>

+

i

+0,1 a

2 272

10.

>

+

>

+0,1 b

ca. 10000

11.

>

+

>

+0,1 c

88

12.

>

+

>

+0,1 d !

ca. 10 000

13.

>

+

»

+0,1 e .

14.

>

+ '

>

+ 0,1 f

1248

Es lag wohl an der Verwendung gröfserer Choleramengen,
wenn sonst auch durch Kochsalzlösung und jedes Serum bei 37 °
wirksame Extrakte erhalten wurden.

Bei einigem Probieren würde man wohl noch wirksamere
Extraktionsmethoden finden können, z, 6. mit Wasser oder stark
verdünnten Salzlösungen.

284 Bakterizide Reagenzglasversuche mit Choleravibrionen.

Tabelle VIL

Eine gröfsere Menge von Cholera Vibrionen mit NaCl-Lösung aufge-
schwemmt und dazu Ammoniumkarbonatlösung bis zur deutlich allkalischen
Reaktion zugesetzt und 1 Std. bei 60° extrahiert, dann ca. 1 7* Tage lang
zentrifugiert. Dadurch wurde eine obere, leicht opaleszierende Schicht von
dem bazillenhaltigen Bodensatz tadellos getrennt Diese klare Flüssigkeit
diente zum folgenden Versuch:

•*»

—

s

Nach

•M

o

4 Stunden

1. 1,0 ccm Meerschw.-Serum + 0,0001 Pfeiffersches Serum

1984

2. > +

+0,01 Extr.

ca. 150OO

3. > +

+0,05 »

-

00

4. > +

> +0,1 »

ö

00

5. > +

+ 0,25 >

s

00

6. > +

+0,25 NaCl

u

1856

7. 1,0 ccm Kan.-Serum +0,0001 Pfeiffersches Serum + 0,1 »

*3

36

8. > » +

+0,01 Extr.

10 880

9. > > +

+ 0,05 »

ca. 300OO

10. » » + »

+0,1 >

00

Die Wirkung der hemmenden Extrakte richtet sich gegen
den Immunkörper des Choleraimmunserums, es läfst sich aber
durch Zusatz von Immunkörper zur Flüssigkeit, mit welcher die
Vibrionen ausgezogen werden, eine stärkere, hemmende Flüssig-
keit nicht erzielen. Es bleibt vielmehr dann der Immunkörper
so vollständig erhalten, dafs Extraktionsflüssigkeiten mit höherem
Immunkörpergehalt weniger stark, als solche mit geringerem oder
gar keinem, hemmen. Es ist dabei gleichgültig, ob man ein
Immunserum oder ein Serum mit natürlichem, hohem Immun-
körpergehalt, z. B. Rinderserum, verwendet.

Tabelle VIII.
a) */• Agar-Cholerakultur + 1,0 ccm NaCl-Lösung.

b) > +

c) +

d) +

e) +

f) Vio Agar Cholerakultur +0,01 Rinderserum

g) > +0,05
h) > +0,1

i) » +0,25

ß > +0,9

+ 0,00005 Pfeiff. Serum.

+ 0,0001

+ 0,0005

+ 0,001

+ 0,99 NaCl

+ 0,95 >

+ 0,9 >

+ 0,75 >

+ 0,1

Von Prof. Dr. Oskar Bau and Dr. YonetarS Kikachi. 285

Alle Proben 1 Std. bei 37 ° belassen and dann völlig klar zentrif agiert.

*
.2

Nach

o

4 Standen

1. l,OccmKan.

Serum + 0,0001 Pfeiffersches Serum+ 0,15 Na Cl

48

2. > i

+

+ 0,15 a

10240

3.

+

+ 0,15 b

i

i

ca. 15 000

4. >

+

+ 0,15 c

1

10560

5.

+

+ 0,15 d

§

ca. 15 000

6.

+

+ 0,15 e

o

7 680

7. » i

+

+ 0,15 f

!*

ca. 15 000

8.

+

+ 0,15 g

V

4960

9.

+

+ 0,15 h

4160

10.

+

+ 0,15 i

2240

11. > i

+

+ 0,15 j

41

Bereits aus diesem Versuche ergibt sich mit Wahrscheinlich-
keit, dals ein Etwas, das nur den Vibrionen selbst entstammen
kann, die Wirkung des Immunkörpers hemmt, ohne direkt in
ihn einzugreifen. Immerhin wäre bei diesem Versuch noch an
eine Erklärung durch freie Rezeptoren, die am Immunkörper
angreifen und so als eine Art Antiambozeptor wirken würden,
zu denken. Wirkliche Antiambozeptoren und Antikomplemente
sind schon nach der Gewinnungsweise der hemmenden Flüssig-
keiten ausgeschlossen. Dafs für solche freie Rezeptoren quanti-
tative Bindungsverhältnisse an die Immunkörper gelten und das
Ergebnis von Tab. VI erklären könnten, ist zuzugeben.

Es blieb also zu entscheiden, ob wirklich die hemmende,
durch Extraktion bei 60° gelöste Vibrionensubstanz den Immun-
körper etwa durch Bindung direkt beeinflufst. Wäre dies der
Fall, so müfste ein Immunserum, das mit hemmender Flüssigkeit
versetzt ist, unfähig sein, sich mit dem darin enthaltenen Immun-
körper an zugefügte Vibrionen anzulegen; diese müfsten daher
nach Zusatz von normalem Kaninchenserum, als Komplement,
nicht stärker als ohne vorherige Immunserumbehandlung beein-
flufst werden. Dies würde um so eher der Fall sein, als man
bei einem Erklärungsversuche durch freie Rezeptoren zu der
zweiten, allerdings ganz willkürlichen Annahme gezwungen wäre,

286

Bakterizide Reagenzglasversuche mit Choleravibrionen.

für diese eine gröfsere, mindestens aber die gleiche Affinität zu
den Immunkörpern, als sie den normalen Bakterien zukommt,
zu fordern.

Tabelle IX.

Der hemmende Extrakt wurde aas 2 jungen Agarkultaren von Cholera
in 2,0 ccm Kochsalzlösung durch 1 Std. Erwärmung auf 60° hergestellt und
klar zentrifugiert. Zur Einsaat wurden Vibrionen benutzt, die in folgender
Weise behandelt wurden:

Cholera a) 1 / 4 Agarkultur + 0,001 ccm Serum Pfeiffer in 1,0 ccm NaCl-Lösung,
» b)V 4 » +0,01 > > > »

Beide wurden 1 Std. bei 37° belassen und dann zentrifugiert; die
Vibrionensatze wurden mit Na Cl- Lösung gewaschen und wieder aufge-
schwemmt.

.3*

w 3

Nach
4 Stunden

1. 1,0 ccm Kan.-Serum + 0,25 NaCl-Lösung

2. > » + °> 15 » + 0,lExtr.

3. > » -j-0> 25Extr akt

4. Wie 1

ii

IS

S

8

ca. 10000

über 20 000

» 30000

68

5. » 2 .

» 20000

6. »3

> 50000

Während der Serumeinwirkung war Cholera b vollständig, Cholera a
zum Teil agglutiniert worden.

Tabelle X.

Der hemmende Extrakt wird durch 1 stündige Erwärmung auf 60° von
2 Choleraagarkulturen in 2,0 ccm NaCl-Lösung gewonnen und klar zentrifugiert.
Die zu den Einsaaten bestimmten Vibrionen werden durch Zusatz einer
Verdünnung von Serum > Pfeiffer t 0,1 ccm : 0,9 ccm in folgender Weise vor-
behandelt :

Cholera a) 0,01 ccm Serum Verdünnung + 0,49 ccm Na Cl-Lösung,
* b) 0,05 > » +0,45 > »

> c) 0,1 i > +0,4 » »

> d) 0,05 » » +0,2 » * +0,25 ccm Extr.

Nach 10 Minuten langem 8tehen dieser Proben wird jeder derselben
7io Choleraagarkultur in 0,5 ccm NaCl-Lösung zugesetzt, 1 Std. bei 37°
gehalten, dann zentrifugiert. Der gewaschene und wieder aufgeschwemmte
Vibrionensatz dient zur Einsaat.

Von Prof. Dr. Oskar fiail und Dr. Yonetarö Kikuchi.

287

a es

W OD

Nach
4 Standen

1. 1,0 ccm Kan. Serum + 0,25 NaCl-Lösung

2.

>

3.

9

4. Wie 1

5. i

2

6. i

> 3

7. i

> 1

8. .

> 2

9. i

> 3

10.

> 1

11.

> 2

12. i

> 3

+ 0,15

+ 0,26 Extrakt

+ 0,lExtr.

li
IS
li

2

Je

1660
ca. 30 000

00

8
aber 50 000

00

2080

über 50000

136

OD
00

Tabelle XI.
Extrakt wie in Tab. X hergestellt. Verdünnung von Serum »Pfeiffer«
0,1 : 0,9 ccm Na Cl Lösung:

Cholera a) 0,05 ccm Serum Verdünnung + 0,7 ccm NaCl-Lösung,
b) 0,25 > » + °» 5 »

> c) 0,05 > > + » 2 » * + 0,5ccmExtr.

d) 0,25 » » -f °> 5 ccm Extrakt.

Nach V« stund. Stehenlassen wird überall 0,25 ccm NaCl-Lösung, in der
je Vio Gholeraagarkultur aufgeschwemmt ist, zugesetzt. Nach 1 stund.
Aufenthalt bei 37° wird abzentrifugiert und der gewaschene Vibrionensatz
zur Einsaat verwendet

w s

Nach
4 Stunden

1,0 ccm Kan.-Serum +0,15 NaCl-Lösung

+ 0,1 > +0,05Extr.

+ 0,15 Extrakt

1. 1,1

)cco

2.

>

3.

>

4. Wie 1

5. i

2

6. >

3

7. .

1

8.

► 2

9. i

> 3

10. s

; i

11.

> 2

12

> 3

li
li
li

N|2

§

li

496

oo

184

2 656

ca. 30 000

oo

10

6 336

288 Bakterizide Reagenaglasversuche mit Choleravibrionen.

Tabelle XH.

Extrakt wie in Tab. X mit 3 Agarkulturen in 3 ccm Na Cl-Lösnng herge-
stellt. Verdünnung von Serum > Pfeiffer» 0,1 : 0,9 NaCl-Lösung:

Cholera a) 0,05 ccm Serum Verdünnung -f- 1,0 ccm Na Cl Lösung,

> b) 0,25 y » + • »

» c) 0,05 * > +1,0 ccm Extrakt,

> d) 0,25 » > + » »

Nach V 4 stflnd. Stehenlassen wird überall '/io Choieraagarkultur in
0,1 ccm NaCl-Lösung zugesetzt, dann wie früher vorgegangen«

ii

£

Nach
4 Stunden

1. 1,0 ccm Kaninchenserum + 0,09 NaCl-Lösung

2. > + 0,09 Extrakt

3. Wie 1

Cholera
a

Cholera
b

Cholera
c

Cholera
d

S
8

126

oo
O

4. »2

5. > 1

6. »2

1504
704

oo

7. > 1

104

8. > 2

ca. 200OO

Die in den letzten vier Tabellen angeführten Versuche wider-
legen zunächst jeden Erklärungsversuch mit Hilfe von freien
Rezeptoren. Würden solche durch Anlagerung an den Immun-
körper des Serums die weitere Wirkung desselben auf Cholera-
vibrionen verhindern, so wäre nicht einzusehen, warum sie sich
nicht sofort mit demselben verbinden, wenn noch gar keine
Vibrionen in der Mischung von Immunserum und Vibrionen-
extrakt vorhanden sind. Die später in eine solche Mischung
eingebrachten Vibrionen müfsten dann nach Zusatz von Kom-
plement unbehelligt wachsen können oder nur jene Einwirkung
erfahren, welche dem natürlichen Immunkörpergehalt des als
Komplement dienenden Kaninchenserums entspricht. Bei den
hier zur Anwendung gelangten hohen Einsaaten kann der letztere
übrigens ganz vernachlässigt werden; denn kein normales Ka-
ninchenserum vermag dabei noch zu wirken (vgl. dazu überdies
Tab. X, wo in der ersten Reihe das Immunserum in wenigster
Menge angewendet worden war).

Von Prof. t>r. Oskar Bau und Dr. YönetarÖ iükuchi. 289

Die Versuche zeigen aber deutlich, dafs selbst die gröfsten
Mengen hemmender Substanz die Sensibilisierung (Bord et) oder
Präparierung (Gruber) durch das Immunserum nicht wesentlich
hindern können.

Denn einen dieser beiden Ausdrücke wird man wählen
müssen, da die Versuche auch geeignet sind, gegen die Annahme
einer Bindung (nach Art der chemischen Bindung) des Immun-
körpers an die Vibrionen die schwersten Bedenken hervorzurufen.
Während 1 stündigen Aufenthaltes bei 37°, den man wegen des
Eigenwachstums der Bakterien ja kaum länger ausdehnen darf,
mufs die Bindung des Immunkörpers an die Vibrionen erfolgt
sein und solche Bakterien müfsten im gröfsten Mafsstabe nach
Komplementzusatz abgetötet werden, wie dies ja auch tatsächlich
der Fall ist. Wenn der gleichzeitige Zusatz des Vibrionenextraktes
die Abtötung verhindert, so wäre eine Erklärung nach der
Ehrlich sehen Vorstellungsweise nur noch durch eine Art anti-
komplementärer Wirkung oder dadurch möglich, dafs nicht die
zytophile, sondern die komplementophile Gruppe des Ambozeptors
besetzt wird. Ersteres wird durch die schon angeführten Versuche
widerlegt, dafs die gleiche Menge Komplement trotz Anwesenheit
wirksamer Hemmungsextrakte sehr wohl zu wirken vermag, wenn
der Immunkörpergehalt erhöht wird; das Komplement an sich
wird also gar nicht beeinflufst. Bei der zweiten Annahme, die
mit Rücksicht auf die der komplementophilen Gruppe zuge-
schriebenen funktionellen Beschaffenheit nicht recht wahrschein-
lich klingt, entsteht wieder die Frage, warum denn nicht ihre
Besetzung auch bei blofser Anwesenheit von Immunkörpern und
hemmenden Extrakten erfolgt.

Es bliebe demgegenüber nur noch die Annahme offen, dafs
der Extrakt nur dann auf den Immunkörper wirkt, wenn nicht
dieser allein, sondern in Verbindung mit dem Komplement als
fertiges Bakteriolysin vorhanden ist. Dann müfste er einzig und
allein durch Besetzung der zytophilen Gruppe, d. h. wieder als
freier Rezeptor wirken, da ja die komplementophile bereits von
Komplement besetzt wäre oder schnellstens besetzt würde. Es
wäre also wieder ein freier Rezeptor, an den man denken

290 Bakterizide fteagenzglasverauche mit Choleravibrioneü.

müfste. Nun zeigten aber Tab. IX — XII aufs deutlichste, dafs
isolierte und an die Vibrionen gebundene Immunkörper mit dem
Komplement ein fertiges und wirksames Bakteriolysin liefern,
das erst durch neuerlichen Zusatz des Extraktes gehemmt wird.
Es müfste also der freie Rezeptor eine so grofse Affinität zu dem
fertigen Bakteriolysin besitzen, dafs er dasselbe in kürzester Zeit,
noch ehe es wirken kann, von den Bakterien losreifsen und an
sich fesseln würde. Diese Annahme würde wohl kaum ernstlich
in Diskussion gestellt werden können.

Es ist somit nicht möglich, diese einfachen Versuche durch
die Ehrlich sehe Theorie zu erklären. Hält man an der Existenz
bestimmter, eigener, bakterientötender Stoffe im Serum fest, so
bleibt nur die Annahme Bordets, der auch Gruber im wesent-
lichen zustimmte, übrig, dafs eine Sensibilisierung oder Prä-
parierung nicht im Sinne einer chemischen Bindung, sondern
eines zurzeit noch nicht näher zu definierenden physikalischen
Vorganges erfolgt, wodurch dann die Alexinwirkung erleichtert
wird. Diese Präparierung ist dann eine Art von Adsorption,
die nicht notwendigerweise genau quantitativ erfolgen müfste
und daher im Überschusse eintreten kann. Damit wäre dann
leicht erklärt, dafs Vibrionen, die der Wirkung starker Serum-
konzentration ausgesetzt waren, nachträglich nach Zusatz von
Komplement trotz Anwesenheit hemmenden Extraktes noch bis
zu einem gewissen Grade abgetötet werden.

Es fragt sich nur, ob es nicht noch besser wäre, die An-
nahme besonderer bakteriolytischer Stoffe ganz fallen zu lassen
und nur einen besonderen physikalisch-chemischen Zustand zu
berücksichtigen, vermöge dessen Bakteriolyse und ihre Hemmung
erklärt werden könnten.

In dieser Richtung sollen weitere Versuche angestellt werden.

Soweit Versuche mit Typhusbazillen gemacht wurden, stimm-
ten sie in ihren Ergebnissen mit denen bei Cholera überein, nur
dafs die bakterizide Wirkung der Sera schwächer war, wie dies
ja für Typhus gewöhnlich ist.

Über Agglntinationsbehinderung der Typhnsbazillen.

Von

Dr. Edmund Weil,

Assistenten des Institutes.

(Ana dem Hygienischen Institut der deutschen Universität in Prag.
Vorstand: Prof. Hueppe.)

Pfeiffer und Friedberger 1 ) konnten normales Kanin-
chenserum durch Behandlung von Typhusbazillen und Cholera-
vibrionen in einen Zustand versetzen, dafs dasselbe im Tierkörper
die bakterizide Wirkung eines Immunserums aufhebt. Die Autoren
schliefsen die Wirkung von Antikomplementen und Antiambo-
zeptoren aus und nehmen an, dafs dadurch, dafs die Typhus-
bazillen und Choleravibrionen im normalen Serum Stoffe binden,
— dasselbe eine Substanz von der eben genannten Funktion in
Wirksamkeit treten läfst, welche bakteriolytischer Antagonist
benannt wird. Dafs diese Substanz nicht aus den Bakterien-
leibern stammen könne, beweisen sie damit, dafs auch inakti-
viertes Serum, bei welchem es nicht zur Bakteriolyse kommen
kann und demnach Leibessubstanzen aus den Bakterien nicht
frei werden könnten, dieselbe Wirkung entfaltet, und dafs Koch- ,
Salzlösung, mit Bakterien behandelt, stets unwirksam ist. Bail
und Kikuchi 2 ) konnten durch ihre Versuche den Nachweis
erbringen, dafs diese Substanz aus den Bakterien stammen müsse,

1) Deutsche med. Wochen sehr., 1905, Nr. 1.

2) Archiv f. Hygiene, s. dieses Heft.

Archiv für Hygiene. Bd. Lffl. 21

J

292 Über Agglutinationsbehinderung der Typliusbazillen.

da sie stets in stärkster Wirksamkeit in Kochsalzlösung vor-
handen ist, welche bei 60° auf die Bakterien eingewirkt hat,
jedoch meist nicht bei 37°, welche Temperatur Pfeiffer und
Friedberger bei ihren Kontroll versuchen mit Kochsalzlösung
gewählt hatten.

Die grofse Ähnlichkeit betreffs des Mechanismus aller Im-
munitätsreaktionen, speziell der Bakteriolyse und Agglutination,
boten die Veranlassung, zu untersuchen, ob ähnliche Verhält-
nisse nicht auch für die Agglutination Gültigkeit haben. Die
nachfolgenden Untersuchungen nehmen von folgendem Versuche
ihren Ausgang: Man schwemmt eine üppig gewachsene Agarkultur
in 1 ccm Kochsalzlösung ab, setzt sie 1 Stunde der Temperatur
von 60° aus und zentrifugiert hierauf die Bakterien bis zur voll-
ständigen Klärung der Flüssigkeit ab. Verreibt man in diese
Flüssigkeit Typhusbazillen, so weisen dieselben nach Zugabe
von agglutinierendem Serum eine ungemein starke Hemmung
der Agglutination auf.

Um die Bedingungen, unter welchen ein möglichst wirksamer
Extrakt zu erlangen ist, kennen zu lernen, wurde folgender Ver-
such angestellt:

a) Die Bakterienmasse einer Agarkultur in 1 ccm Kochsalzlösung
abgeschwemmt und 24 Stunden bei Zimmertemperatur gehalten.

b) Die 10 fache Verdünnung dieser Bakterienmenge, sonst wie a.

c) Wie a, nur 4 Stunden bei 37° gehalten.

d) Wie b, > » » > >

e) Wie a, > 1 Stund » 60°

f) Wie b, » » > » »

g) Wie a, * > > * 100°
h) Wie b, > » » > »

Alle Röhrchen wurden hierauf durch Zentrifugieren von
den Bakterien befreit und zu jedem vier Tropfen einer dichten
Agaraufschwemmung von Typhusbazillen gegeben, so dafs eine
sehr deutliche Trübung zustande kam. Nach l j A stündigem Ver-
weilen bei 37 ° wurde ein Tropfen agglutinierendes Serum hinzu-
gesetzt, so dafs die entsprechende Verdünnung zustande kam.
Bakterien und Serum wurden deshalb mit wenig Flüssigkeit

Von Dr. Edmund Weil.

Ö9ä

hinzugefügt, damit eine wesentliche Verdünnung des Extraktes
nicht zustande kam. Die beifolgende Tabelle gibt Aufschlufs
über die Wirksamkeit der verschiedenen Bakterienextrakte.

Tabelle I.
SerumYerdttnjuraff 1 : 700.

Zusatz von
Extrakt

V« Stande

>/* Stande

1 Stande

1'/, Stunden

2 Standen

a)
b)

d)
e)
1)
t)
b)
Kontrolle

+ +
+ +

i + +
+ +

+ + +
+ + +
+ + +
+ + +

+++
+++
+++
+++

+ + +
+ + +
+ + +

-M- +
+++
+ + +
+++

1

+

+

+ +

++

1

i + " +

+
+ + +

+
+++

+ +
+ + +

++
+++

Um also eine hemmende Substanz von starker Wirkung zu
erreichen, mufs man grofse Bakterienmengen verwenden; denn
wie aus der vorangehenden Tabelle ersichtlich ist, tritt zwar auch
in der zehnfachen Verdünnung eine erhebliche Hemmung der
Agglutination ein, ein vollständiges Versagen jedoch nur bei
Extrakten, die aus einer grofsen Bakterienmasse gewonnen sind.
Die geeignetste Temperatur zur Gewinnung des Extraktes liegt
zwischen 60° und 100°. Die Wirkung versagt bei 37° und
niederer Temperatur.

Wie stark die Hemmung in den verschiedenen Serumkon-
zentrationen ist, zeigt Tabelle II (auf S. 294). Der hier zur Verwen-
dung gelangte Bakterienextrakt wurde auf die Weise gewonnen,
dafs die gesamte Bakterienmasse einer Koll eschen Schale in
8 ccm Kochsalzlösung abgeschwemmt und eine Stunde zwischen
60° und 65° gehalten wurde. Bakterien und agglutinierendes
Serum wurden in der oben beschriebenen Weise hinzugefügt.

21*

294 Über Agglutinationebehinderung der Typhußbazillen.

Tabelle IL
Typhushazille*, In 1 wm Kochsalzlösung aufgeschwemmt.

Serum-
Verdünnung

V 4 Stunde

Vi Stunde

1 Stunde

l'/j Standen

2 Standen

1: 100
1: 700
1: 1400
1:2800
1:7000

+ +

+ +

+

+ + +

+ + +

+ +

+

+++
+++
•++ +

+

+ + +
+ + +
+ + +

+
+

+ + +

+ + +

+ + +

+ +

+

Typhushazillen, in 1 ccm Bakterienextrakt aufgeschwemmt.

1:
1:

1:
1:
1 :

100

700

1400

2800

7000

+

Die hier erzielte Hemmung ist eine so starke, data nur in
der Konzentration 1 : 100 nach 2 Stunden bei 37 ° der erste Be-
ginn der Agglutination zu beobachten ist. In allen übrigen
Konzentrationen ist die Reaktion eine negative. Bei Stehen-
bleiben über Nacht tritt in allen Röhrchen etwas Bodensatz ein,
was wohl auf mechanische Senkung der Bakterien zu beziehen ist.

Um über den Mechanismus der hemmenden Substanz Auf-
schlufs zu erlangen, mufs vor allem daran festgehalten werden,
dafs dieselbe aus den Bakterien stammt. Nach den jetzigen
Anschauungen kennen wir in den Typhusbazillen zwei Substanzen,
welche durch Beeinflussung durch das Agglutinin die Aggluti-
nation auslösen, und zwar die bindende Substanz oder die Bak-
terienrezeptoren, welche die Verankerung des Agglutinins be-
sorgen, und die fällbare oder agglutinierbare Substanz, an deren
Intaktheit die sichtbare Agglutination geknüpft ist. Eine einfache
Überlegung bringt den Gedanken nahe, dafs die von der Koch*
Salzlösung extrahierte Substanz die Bakterienrzeptoren sein
könnten; denn man kann sich sehr leicht vorstellen, dafs die-
selben, einer Bakterienaufschwemmung zugesetzt, das Agglutinin

Von Dr. Edmund Weil. 295

binden, so dals dasselbe zu den fixen Bakterienrezeptoren nicht
gelangen kann. Eine Agglutination müfste demnach ausbleiben.
Man mufs dabei allerdings annehmen, dafs die freien Rezeptoren
eine grölsere Bindongskraft für das Agglutinin besitzen, als die
fixen Bakterienrezeptoren, eine Annahme, die man zur Erklärung
verschiedener Immunitätsreaktionen zu machen gezwungen ist.
Es ist nicht zu bezweifeln, dafs die hemmenden Extrakte, mit
denen gearbeitet wurde, denen von Neifser und Shiga 1 ), trotz
der in einigen unwesentlichen Punkten abweichenden Darstel-
lungsart, entsprechen. Die hemmende Wirkung, die auch die
genannten Autoren feststellen, die in unseren Extrakten wegen
der ungleich gröfseren Bakterienmengen, die verwendet werden,
in verstärktem Mafse .vorhanden war, führen dieselben direkt
auf die von ihnen so benannten i freien Rezeptoren c zurück.

Entspricht also die hemmende Substanz im Bakterienextrakte
den freien Rezeptoren, so mufsten dieselben folgende Bedingungen
erfüllen: 1. Durften sie die Bakterien nicht beeinflussen,
2. mufsten sie das Agglutinin binden. Beides mufste sich
experimentell nachweisen lassen.

Um den ersten Punkt zu erweisen, mufste gezeigt werden,
dafs Typhusbazillen, die mit dem Bakterienextrakte in Kontakt
gewesen sind, in ihrer Agglutinabilität vollständig unverändert
sind, was auch tatsächlich der Fall ist; denn die in der hem-
menden Substanz suspendierten, abzentrifugierten und gewaschenen
Bakterien zeigen nach Zusatz von agglutinierendem Serum die-
selbe Agglutinierbarkeit wie vorher, ein Beweis dafür, dafs die
hemmende Substanz von den Bakterien nicht gebunden wird,
was ja schon vorauszusehen war.

Verschiedene Versuche standen zu Gebote, um den zweiten
Punkt zu beweisen. Aus Tabelle II ist zu entnehmen, dafs
1 ccm Bakterienextrakt die Serumkonzentration 1 : 100 sehr
stark hemmt, wobei die Bakterien in der Kochsalzaufschwem-
mung in der 70 fach schwächeren Konzentration (1:700) agglu-
tiniert werden. Wirkt nun die hemmende Substanz im Bakterien-

1) Deutsche med, Wocheuschr., 1903, Nr, 4,

296 Über Agglatinationsbehinderung der Typhusbazillen.

extrakt als freier Rezeptor, so wird er als solcher das A gglutinin
binden und die Agglutination nicht ermöglichen. Da man je-
doch die hemmende Substanz im Bakterienextrakt vom agglu-
tinierenden Serum nicht trennen kann, um so die Einwirkung
auf das Agglutinin zu beweisen, so mufs man mit solchen Ver-
dünnungen arbeiten, bei welchen das agglutinierende Serum
noch Agglutination hervorbringt, die hemmende Substanz jedoch
die Agglutination zu verhindern nicht mehr imstande ist. Zum
genaueren Verständnis des eben Gesagten sei ein solcher Ver-
such geschildert.

Man setzt zu 1 ccm Bakterienextrakt 3 Tropfen der Serumver-
dünnung 1:3, woraus dann die Verdünnung 1:30 resultiert.
Nach % stündigem Verweilen im Brutschrank setzt man davon
1 Tropfen zu 1 ccm Bakterienaufschwemmung in Kochsalzlösung.
Die Bakterien sind hier der Serumverdünnung 1 : 900 ausgesetzt
(Röhrchen I.) Ferner setzt man zu 1 ccm Kochsalzlösung eben-
falls 3 Tropfen der Serumverdünnung 1 : 3 und gibt 1 Tropfen
davon zu 1 ccm Bakterienemulsion (Röhrchen II). Zu Röhr-
chen III, welches Röhrchen II vollständig entspricht, setzt man
vor der Serumzugabe 1 Tropfen Bakterienextrakt, welche Menge
auch in Röhrchen I enthalten ist; blofs hat der Bakterienextrakt
hier nicht Gelegenheit gehabt, in so konzentriertem Zustande auf
das Serum (Kontrolle) einzuwirken wie bei Röhrchen I. Während
also in Röhrchen II prompt Agglutination eintritt, in Röhrchen III
nur geringe Hemmung infolge des Tropfens Bakterienextraktes
zu beobachten ist, bleibt in Röhrchen I die Agglutination wäh-
rend zweistündiger Beobachtung aus. Die Deutung dieses schein-
bar komplizierten Versuches ist einfach die, dafs die hemmende
Substanz im Bakterienextrakt das Serum unwirksam macht,
ebenso wie etwa freie Rezeptoren auf das Agglutinin wirken
würden, ob durch Bindung, ist allerdings nach diesem Versuche
nicht zu sagen. Doch scheint auch diese Annahme möglich,
denn diese Bakterien zeigen, abzentrifugiert, gewaschen und in
Kochsalzlösung aufgeschwemmt, keine Reagglutination. Darnach
wäre die Vorstellung gerechtfertigt, dafs die freien Rezeptoren
durch Bindung des Agglutinins verhindern, dafs dasselbe an die

Von Dr. Edmund Weil. 297

fixen Bakterienrezeptoren gelangt. Die Bakterien also, vom
Agglutinin nicht beeinflufst, weisen dann, wie es hier der Fall
ist, keine Reagglutination auf. Wir kommen auf diesen Versuch,
der auch eine andere Deutung zuläfst, noch zurück. Schliefslich
spricht aus der Hitzebestftndigkeit der hemmenden Substanz, die
ja bei 100° extrahiert wurde, für die Möglichkeit eines freien
Rezeptors, da ja die Temperatur von 100° die Bindungsfähig-
keit der T yphusbazillen, also ihre fixen Rezeptoren, nicht beein-
trächtigt. Wir haben nun alle jene Momente in Betracht ge-
zogen, welche dafür sprechen, dafs die hemmende Substanz im
Bakterienextrakte den von Neils er und Shiga beschriebenen
freien Rezeptoren entspricht.

In einer früheren Publikation 1 ) wurde festgestellt, dafs die
günstigste Temperatur für die Agglutinationsreaktion zwischen
50° und 55° liegt, indem bei dieser Temperatur die Agglutination
viel rascher und vollständiger verläuft als bei 37°. Setzt man
nun die Typhusbazillen im Bakterienextrakt nach Zugabe agglu-
tinierenden Serums der Temperatur von 55° aus, so tritt zwar
ebenfalls Hemmung ein, welche jedoch nicht so intensiv und
ausgesprochen ist wie bei 37 °. Mögen wir uns nun die schnellere
Agglutination bei 55° wie immer vorstellen, sei es durch raschere
oder durch festere Bindung des Agglutinins an die Bakterien, so
müfsten die freien Rezeptoren im Bakterienextrakt durch ihre
stärkere Bindungskraft als die fixen Rezeptoren bei 55° um so
intensiver wirken, und die Agglutinationsbehinderung müfste bei
dieser Temperatur eher stärker sein. Dies ist jedoch, wie eben
erwähnt, nicht der Fall, ein Umstand, der sehr schwer mit der
Annahme, dafs als Ursache der Hemmung freie Rezeptoren an-
zusehen sind, vereinbar ist. Hier sei auch darauf hingewiesen,
dafs Agglutinationshemmung in starken Serumkonzentrationen, die
der Wirkung von Agglutinoiden zugeschrieben wird, bei 55° eben-
falls viel weniger zutage tritt, was aus ebendemselben Grunde
gegen die Wirkung von Agglutinoiden spricht, welche nach der
bestehenden Anschauung eine stärkere Affinität (Proagglutinoide)

1) Zentralblatt f. Bakteriologie, Bd. 36, Nr. 5; Bd. 37, Nr. 1.

298 Über Agglutinationsbehinderung der Typhusbazillen.

zu den Bakterien besitzen als das Agglutinin. Diese Affinität
mülste aber bei 55° noch gesteigert sein. Doch lassen sich viel-
leicht gegen diese Deutungen Einwände erheben, jedenfalls geben
sie Anlafs zur weiteren Untersuchung, ob die Hemmung durch,
den Bakterienextrakt tatsächlich auf die Wirkung freier Rezep-
toren zurückzuführen sei.

Wir wissen, dafs agglutinierte Bakterien das Agglutinin so fest
binden, dafs es nicht gelingt, dasselbe durch Waschen zu ent-
fernen, so dafs also agglutinierte Bakterien, abzentrifugiert, zer-
schüttelt und in einer indifferenten Flüssigkeit aufgeschwemmt,
immer wieder reagglutiniert werden. Wenn also die Agglutinations-
behinderung durch den Bakterienextrakt auf die freien Rezep-
toren zu beziehen ist, so mufste die Wirkung desselben bei Bak-
terien, die das Agglutinin bereits gebunden haben, vollständig
versagen, da die haptophore Gruppe des Agglutinins, der Angriffs-
punkt der freien Rezeptoren, schon durch die normalen Bakterien
besetzt ist. Derartige Versuche wurden so ausgeführt, dafs
Typhusbazillen durch die Serumkonzentration 1:700 zur Agglu-
tination gebracht wurden. Nachdem dieselbe vollendet war,
wurde zentrifugiert, gewaschen und die Bakterien einerseits in
Kochsalzlösung, anderseits im Bakterienextrakt aufgeschwemmt.
Während in der Kochsalzlösung prompt Reagglutination eintrat,
zeigten die Bakterien, im Bakterienextrakt aufgeschwemmt, die-
selbe Hemmung, als ob sie mit Agglutinin gar nicht beladen
wären, genau so, als ob der Bakterienextrakt auf das aggluti-
nierende Serum eingewirkt hätte, das an Bakterien nicht ge-
bunden ist. Solche Versuche fielen stets eindeutig aus und
sprechen mit grofser Wahrscheinlichkeit gegen die Annahme der
freien Rezeptoren als Ursache der Hemmung. Man mülste sich
denn vorstellen, dafs dieselben durch ihre starke Affinität zum
Agglutinin imstande wären, das schon an die Bakterien gebundene
Agglutinin wieder loszureifeen. Diese Bakterien müfsten dann,
in Kochsalzlösung aufgeschwemmt, nicht mehr reagglutiniert
werden. Dies ist nun wirklich der Fall. Da jedoch die An-
nahme, dafs ein Überspringen von der fixen auf die freien Rezep-
toren stattfindet, gezwungen und unnatürlich erscheint, so trat

Von Dr. Edmund Weil. 299

der Gedanke nahe, ob die hemmende Substanz im Bakterien-
extrakte nicht anders als ein freier Rezeptor, wogegen schon
so manches sprach, wirken mülste. Es wäre möglich, dafs
die Agglutinationsbehinderung darin bestehe, dafs die hemmende
Substanz direkt das Serum unwirksam mache, nicht durch Bin-
dung, wie ein freier Rezeptor, sondern ebenso wie etwa die Tem-
peratur von 75°, oder chemische Agentien, die thermolabile
Gruppe des Agglutinins zerstören, das Agglutinin inaktivieren.
In dem vorliegenden Falle wäre nach dieser Annahme an der
Bindung des Agglutinins bei den agglutinierten Bakterien durch
die hemmende Substanz nichts geändert; die hemmende Sub-
stanz des Bakterienextraktes hätte das an die Bakterien gebun-
dene Agglutinin an den Bakterien inaktiviert, seine fällende
Gruppe zerstört, so dafs diese Bakterien nicht mehr mit Agglu-
tinin, sondern mit Agglutinoiden besetzt wären. Ist das richtig,
so mufsten sie, wenn sie mit einer genügend starken Konzen-
tration besetzt sind, unempfänglich sein gegenüber aktivem agglu-
tinierendem Serum. Nach der Richtung hin ausgeführte Ver-
suche entsprachen vollkommen der Erwartung. Bakterien wurden
durch die Serumkonzentration 1 : 100 agglutiniert, abzentrifugiert,
gewaschen und hierauf in Bakterienextrakt aufgeschwemmt: jede
Agglutination blieb aus. Hierauf wurde abermals abzentrifugiert
und gewaschen und schliefslich in der Serumkonzentration 1 : 1000
aufgeschwemmt. Auch hier blieb während zweistündiger Be-
obachtung die Agglutination, die in der Kontrolle bereits nach
*/ 4 Stunde deutlich war, aus.

Als weiteren Beweis hierfür wurden die Versuche derart aus-
geführt, dafs die gleiche Serumkonzentration, wie im voran-
gehenden Versuche (1 Tropfen der Verdünnung 1 : 4), mit 1 ccm
Bakterienextrakt versetzt wurde. Nach */ 2 stündigem Verweilen
der Mischung bei 37° wurden Bakterien hinzugesetzt und nach
kurzer Zeit abzentrifugiert und gewaschen. Nach Aufschwem-
mung in derselben Konzentration aktiven Serums (1:1000), wie
im vorigen Versuche, trat gegenüber der Kontrolle starke Hem-
mung auf, die jedoch nicht so stark war wie im vorhergehenden
Versuche, wo die Agglutination während zweistündiger Beobach-

300 Über Agglutinationsbehinderung der Typhasbazillen.

tung vollständig ausblieb. Die Ursache dieser schwächeren
Wirkung dürfte iu folgendem gelegen sein: Wird eine starke
Serumkonzentration mit nicht genügend wirksamen Bakterien-
extrakt gemischt, so vermag derselbe nur einen Teil des vor-
handenen Agglutinins zu inaktivieren. Bringt man jetzt Bak-
terien hinein, so bleibt die Vorstellung, dafs dieselben nicht voll-
ständig mit inaktiviertem Serum besetzt und demnach auch nicht
vollständig inagglutinabel sind. Im Gegensatz dazu binden Bak-
terien aus derselben Serumkonzentration nur einen Teil des Agglu-
tinins, und zur Paralysierung dieses Teiles reicht die Konzen-
tration der hemmenden Substanz eben aus, und das bereits an
die Bakterien gebundene Agglutinin wird vollständiger inaktiviert.
Über die Wirkung des Bakterienextraktes mufsten noch Ver-
suche mit inaktiviertem Serum Klarheit verschaffen. Die Bin-
düng des inaktivierten Serums an die Bakterien mufste verhin-
dert werden, wenn die hemmende Substanz als freier Rezeptor
wirkt, mufste jedoch stattfinden, wenn die hemmende Substanz
nicht durch Bindung des Agglutinins, sondern durch Inakti-
vierung desselben wirkt. Im ersten Falle mtifsten Typhusbazillen,
die mit inaktiviertem Serum und Bakterienextrakt behandelt sind,
von aktivem Serum agglutiniert werden, in letzterem Falle wegen
der Besetzung mit Agglutinoiden inagglutinabel sein. Ein derart
ausgeführter Versuch sei hier beschrieben. Zu je 1 ccm Koch-
salzlösung und 1 ccm Bakterienextrakt wurden je 2 Tropfen in-
aktivierten Serums (1 Stunde auf 75° erwärmt) von der Konzen-
tration 1:8 gegeben, wodurch die Bakterien, die nach einiger
Zeit hinzugefügt wurden, unter der Einwirkung der Konzentration
inaktivierten Serums 1:100 standen. Nach % stündigem Ver-
weilen im Brutschrank, nach Abzentrifugieren und Waschen der
Bakterien werden dieselben in beiden Röhrchen der Serumkon-
zentration 1 : 1000 ausgesetzt. Während die Agglutination in der
Kontrolle nach */ 4 Stunde zu beobachten war, blieb dieselbe
während zweistündiger Beobachtung bei 37 ° in den beiden oben
erwähnten Röhrchen aus. Dieser Versuch beweist, dafs trotz
Anwesenheit der hemmenden Substanz die Besetzung mit inak-
tiviertem Serum stattfand, in demselben Grade wie bei Nicht-

Von Dr. Edmund Weil. 301

vornandensein derselben. Die Wirkung eines freien Rezeptors
scheint nach diesem Versuche ausgeschlossen.

Von der Annahme einer fast unbeschränkten Bindung des
Agglutinins an die Bakterien ausgehend (Eisenberg und Volk),
wurde versucht festzustellen, wie oft sich dieselben Bakterien mit
Kochsalzlösung bei 60° extrahieren lassen, um einen wirksamen
Extrakt zu liefern. Es zeigte sich, dafs schon nach der ersten
Extraktion nur mehr ganz schwach hemmende Flüssigkeiten zu
erlangen waren.

Wenn wir nun alle jene Momente prüfen, welche für das
Vorhandensein freier Rezeptoren als Ursache der hemmenden
Wirkung sprachen, so sehen wir, dafs dieselben auch vollkommen
mit der Anschauung in Einklang zu bringen sind, dafs die hem-
mende Substanz im Bakterienextrakt das Agglutinin nicht durch
Bindung, sondern durch Inaktivierung unwirksam macht. Die-
jenigen Umstände jedoch, welche der Wirkung von freien Re-
zeptoren widersprechen, finden* nach obiger Deutung eine unge-
zwungene Erklärung.

Es läfst sich also, um das Ergebnis dieser Untersuchung zu-
sammenzufassen, durch Kochsalzlösung aus den Typhusbazillen
eine Substanz extrahieren, welche befähigt ist, die Serumagglu-
tinine zu inaktivieren. Inwiefern dieser Bakterienextrakt spezifisch
ist und mit der Bildung von Agglutinin im Tierkörper zusammen-
hängt, darüber werden weitere Untersuchungen Aufschlufs geben.

Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

Von
Prof. Dr. Oskar Bau,

Assistenten des Institutes.

(Aus dem Hygienischen Institute der deutschen Universität Prag.
Vorstand: Prof. H neppe.)

In einer vor kurzem in diesem Archiv, Band 52, veröffent-
lichten Abhandlung wurde über die Aggressivität von Bakterien,
insbesondere von Typhusbazillen und Choleravibrionen, berichtet.
Da das Vorhandensein und die Besonderheit von aggressiven
Bakterieneigenschaften die Grundlage einer neuartigen Anschau-
ung über Infektion und Immunität zu bilden geeignet erscheint,
so mögen die wesentlichen Punkte nochmals kurz hervorgehoben
werden.

Jeder Bazillus mufs, um sich im Körper eines Tieres halten
und weiterhin durch seine Vermehrung Krankheit hervorrufen
zu können, über die Fähigkeit verfügen, die Schutzkräfte des-
selben lahmzulegen oder abzuhalten. Diese Fähigkeit ist als
Aggressivität des betreffenden Bazillus zu bezeichnen, und man
kann sie sich in der üblichen Weise durch eigene Stoffe, die
Aggressine, erklärt denken, die etwa nach Art eines Toxins ab-
geschieden werden. Durch geeignete Versuchsanordnung lassen
sich im Körper entsprechend geimpfter Tiere krankhafte Flüssig-
keiten erzeugen, in welchen die aggressiven Eigenschaften, kürzer
gesagt; die Aggressine, nachweisbar werden. Für Typhusbazillen

Untersuchungen über die Aggressivität etc. Von Prof. Dr. Oskar Bail. 303

und Choleravibrionen ist dazu das Bauchhöhlenexsudat von Meer-
schweinchen geeignet, ebenso für Dysenteriebazillen nach den
Untersuchungen von Kikuchi 1 ); für die Erreger der Hühner-
cholera läfet sich nach Weil 2 ) die Brusthöhlenflüssigkeit von
Kaninchen, für Milzbrand das Unterhautödem verschiedener Tiere
mit Vorteil verwenden.

Da die Aggressivität die unerläfsliche Vorbedingung für das
Wachstum von Bakterien im Tierkörper, somit auch für die
Krankheitsmöglichkeit ist, so gibt ihr Fehlen oder ihre Bildung
einen guten Einteilungsgrund für Bakterienwirkung auf ein be-
stimmtes normales Tier ab. Unter Berücksichtigung der dabei
zu beachtenden Umstände lassen sich unterscheiden: 1. Reine
oder obligat invasive Parasiten; 2. Halbparasiten oder fakultativ
invasive Parasiten; 3. Saprophyten.

Die erste Gruppe wird dargestellt von Bakterien, die unter
allen Umständen sich im Tierkörper vermehren können, während
Halbparasiten dazu nur bei Einimpfung gröfserer Mengen im-
stande sind und Saprophyten dies überhaupt nicht vermögen.
So ist z. B. für das Meerschweinchen der Milzbrand- und wahr-
scheinlich auch der Tuberkelbazillus reiner Parasit, d. h. beide
haften bei jeder Impfart und schon in der geringsten Menge.
Der Hühnercholerabazillus, der erst einer gröfseren Individuen-
zahl und auch oft besonderer Impfart (Weil) bedarf, um sich
ungestört vermehren zu können, ist für dieses Tier Halbparasit
und ebenso Typhus, Dysenteriebazillen, Choleravibrionen, Staphylo-
kokken usw.

Aufser diesem Hauptmerkmal, der durch starke Aggressivität
bedingten unbeschränkten Vermehrungsfähigkeit, unterscheiden
sich echte und Halbparasiten wahrscheinlich noch durch eine
Reihe von Eigenschaften. Dazu gehört vor allem die ausge-
sprochene Ausbildung von Giften bei Halbparasiten, die entweder
als gelöste Toxine, wie bei Diphtherie, oder als Endotoxine, wie
bei vielen anderen Bakterien, leicht nachzuweisen sind, während

1) Kikuchi, dieses Archiv, Bd. 52, 8. 378.

2) Weil, dieses Archiv, Bd. 52, 8. 412.

304 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

sie bei echten Parasiten zwar wahrscheinlich auch nicht fehlen,
aber doch nicht leicht aufzufinden sind. Ferner gehört sehr
wahrscheinlich eine sehr grofse Unempfindlichkeit gegen die auf-
lösende Wirkung der normalen Körpersäfte zu den Eigenschaften
der echten Parasiten, womit es wieder zusammenhängt, dafs die
künstliche Steigerung derselben durch Vorbehandlung von Tieren
mit Bazillenleibern u. dgl. nur schwer gelingt. Der sehr nahe-
liegende Hinweis auf die Abtötung des Milzbrandbazillus, also
eines echten Parasiten, durch Kaninchenserum, hat viel von
seiner Bedeutung verloren, seitdem Pi renne 1 ) gezeigt hat, dafs
diese Keimvernichtung sich von der anderer Bakterien sehr
wesentlich unterscheidet. Auch Wilde hatte ja schon viel
früher im Kaninchenserum zur Milzbrandvernichtung ein beson-
deres i Alexin c angenommen.

Im Gegensatz dazu sind Halbparasiten der auflösenden
Serumwirkung sehr zugänglich; es ist ja bekannt, welch ver-
hältnismäTsig grofse Mengen von Choleravibrionen durch 1 ccm
Kaninchen- oder gar Rinderserum aufgelöst werden können.
Jedenfalls hängt damit auch zusammen, dafs die künstlich ge-
steigerte Bakteriolyse gerade für typische Halbparasiten in be-
sonders hohem Marse möglich ist. Wie sich die einzelnen Mikro-
organismen verhalten, z. B. Staphylokokken, bedarf noch genauerer
Untersuchungen, für welche hier ein weites und dankbares Ge-
biet vorliegt.

Schliefslich wäre es nicht unmöglich, dafs zum Charakter
der echten Parasiten die schrankenlose Durchwucherung des ganzen
befallenen Tierkörpers gehört, als akuteste Septikämie wie bei
der Hühnercholera an Kaninchen und Vögeln, als verhältnis-
mäfsig langsamere bei Milzbrand von Kaninchen und Meer-
schweinchen, oder als chronisches aber ungehemmtes Weiter-
wachsen in fast allen Organen wie bei der Tuberkulose der
Meerschweinchen. Demgegenüber tritt bei Halbparasiten der
lokale Charakter der Erkrankung mehr oder weniger deutlich in
den Vordergrund.

1) Zentralblatt für Bakteriologie, 1904, Bd. 36.

Von Prof. Dr. Oskar Bail. 305

Von gröfster Wichtigkeit ist aber, dafs die Aggressivität,
deren höchste Ausbildung den echten Parasitismus bedingt, va-
riabel oder vielmehr variierbar ist. Es ist ja bekannt, dafe man
Milzbrand- oder Hühnercholerabazillen abschwächen kann, so dafs
sie sich auch im empfänglichen Tiere nur noch als Halbparasiten
oder gar als reine Saprophyten erweisen. Derartige Abstufungen
der Aggressivität kann man nach den bisherigen Kenntnissen in
der Gruppe der Halbparasiten leicht feststellen. So steht Cholera,
wie bereits Hueppe sehr frühzeitig betont hatte, den reinen
Saprophyten wahrscheinlich noch sehr nahe, während Typhus
sich den Parasiten schon weit mehr nähert. 1 ) Staphylokokken
und Streptokokken nehmen wahrscheinlich unter den Halbpara-
siten den höchsten Rang ein und befinden sich z. B. für das
Kaninchen auf einem Übergange zum reinen Parasitismus.

Die Variierbarkeit der Aggressivität ist bei echten Parasiten
nur verhältnismässig schwer und nur nach der negativen Seite hin
zu erweisen, indem z. B. ein aus einem gestorbenen Kaninchen ge-
wonnener Milzbrandbazillus seine absolute Aggressivität erst nach
Einwirkung von Gewaltmitteln ganz oder teilweise verliert. In
der Gruppe der Halbparasiten dagegen gehören Änderungen der
Aggressivität zu den gewöhnlichsten Erscheinungen und können im
positiven wie im negativen Sinne mit Leichtigkeit erfolgen. Ein
Choleravibrio, der z. B. augenblicklich in der Menge von % Öse
Agarkultur genug Aggressivität entfaltet, um in der Meerschwein-
chenbauchhöhle zu wachsen, kann nach verhäUnismäfeig kurzer
Züchtung diese Fähigkeit zum gröfsten Teile einbüfsen; er ge-
winnt sie aber durch erzwungenen Aufenthalt im Tierkörper leicht
wieder. Es ist klar, dafs hier der Begriff der Aggressivität sich
mit dem älteren und unbestimmten der Virulenz fast völlig deckt.
Überhaupt werden diese beiden Begriffe vielfach, aber nicht
immer, zusammenfallen. Der Begriff der Virulenz setzt die ein-
geimpfte Bazillenmenge nur mit der Krankheit oder dem Tode
eines Tieres in Beziehung, mit der Bezeichnung Aggressivität ist
die bestimmte Vorstellung einer Wachstumsmöglichkeit im Or

1) Vgl. dieses Archiv, Bd. 62, S. 369.

306 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

ganismus durch Abhaltung der Schutzkräfte verbunden. Wenn
nach der wichtigen Entdeckung Pfeiffers eine bestimmte
Vibrionenzahl Meerschweinchen typisch tötet, so gibt diese Menge
das Mals der Virulenz, auch wenn keine Vermehrung erfolgt ist.
Die Aggressivität des gleichen Cholerastammes wäre aber eine
andere, und zwar niedrigere, da erst eine gröfsere Vibrionenmenge
die Schutzkräfte des Körpers genügend abhalten kann, um aktive
Vermehrung herbeizuführen. Die Vergiftung, die in diesem Falle
Krankheit und Tod herbeiführt, ist das Sekundäre, für die Ag-
gressivität entscheidet die Möglichkeit der eigenen Vermehrung
im Tiere. Die Wichtigkeit dieser Feststellung wird nicht beein-
flufst durch die später noch zu besprechende Erscheinung, dafs
die Vergiftung selbst durch künstlich gewonnene aggressive Flüs-
sigkeiten begünstigt werden kann. Noch deutlicher wird der
Unterschied zwischen Aggressivität und Virulenz bei Betrachtung
der toxinbildenden Bakterien. Die meisten Stämme von Tetanus-
bazillen wird man als hochvirulent bezeichnen müssen, da sie,
in geringster Menge eingeimpft, den charakteristischen Tod er-
zeugen. Ihre Aggressivität ist aber dabei aufserordentlich gering,
da sie erst bei geeigneter Impfmethode sich vermehren, vielleicht
überhaupt im ganz gesunden Gewebe nicht wachsen können.
Von Diphtheriebazillen gilt ähnliches.

Es mögen hier einige Worte über das Verhältnis von toxischer
und aggressiver Wirkung eingeschaltet werden. Beide können
z. B. in einem Dysenterieexsudate nebeneinander vorhanden sein
und biologisch getrennt werden, wenn zwei Tiere von sehr ver-
schiedener Toxinempfindlichkeit zur Verfügung stehen (Meer-
schweinchen und Kaninchen bei Dysenterie). Dies sowie der
Umstand, dafs die ausgesprochen aggressiven Flüssigkeiten, die
man bei echten Parasiten gewinnen kann, jeder Giftwirkung ent-
behren, ist der zwingende Grund, beide Wirkungen auseinander-
zuhalten. Sollte sich etwa herausstellen, dafs die aggressive
nur ein Teil der Giftwirkung wäre, so bleibt derselben doch ihre
Wichtigkeit, die Abhaltung der Körperschutzkräfte erhalten. Man
könnte sich ganz gut vorstellen, dafs Ausscheidungs- oder Auf-
lösungsprodukte von Bazillen schon in geringer Konzentration

Von Prot Dr. Oskar Bail. 30?

Leukozyten abhalten, d. h. die bisher einzig sichtbar zu machende
Wirkung der lAggressiuec entfalten, während in stärkerer die
giftige, den Tierorganismus unmittelbar schädigende herrschend
hervortritt. Negative Chemotaxis, vermutlich die wichtigste Eigen-
schaft der Aggressine 1 ) ist ja bereits mehrfach bei Stoffwechsel-
produkten von Bakterien untersucht worden (vgl. die Literatur
bei Metschnikoff), und es hindert nichts, auch die Aggressivi-
tät so zu bezeichnen, wenn sie wirklich nur in der Leukozyten-
abhaltung besteht. Denn es kann nicht scharf genug betont
werden, dafs dort, wo von Aggressinen wie von Stoffen ge-
sprochen wird, zunächst nur Eigenschaften gemeint sind, die
einer sonst in ihrer Zusammensetzung unbekannten Flüssigkeit
zukommen, und für welche die üblich gewordene materialisierende
Ausdrucksweise der Kürze halber gewählt wurde. Sollten sich als
Träger dieser Eigenschaften bestimmt charakterisierte, bei genauerer
Kenntnis chemisch darstellbare Stoffe herausstellen, dann ist es
um so besser. Vorläufig aber ist diese einschränkende Bemerkung
durchaus notwendig und das Studium der »Aggressine« verliert
dadurch, namentlich mit Rücksicht auf ihre immunisierenden
Wirkungen nichts an seinem Werte.

Hat man sich einmal mit dem Begriff der Aggressivität ver-
traut gemacht, so ist es nicht schwer, die Verhältnisse der Ag-
gressivität bei verschiedenen Bakterien, die Stärke derselben u. dgl.
aus dem Infektionsverlaufe, der Keimzahl in den Organen und
ähnlichen Vorkommnissen zu erschließen. Das würde aber nur
ein blofser, wenn auch vielleicht sehr nützlicher Begriff bleiben,
wenn es nicht gelingt, die Aggressivität eines Bazillus gewisser-
mafsen in Gestalt seiner Aggressine zu materialisieren, d. h. sie
getrennt von den Bazillen zu erhalten und ihre Wirkung deut-
lich zu machen.

Das ist zurzeit wenigstens noch nicht leicht. Zwar gelingt
es, in krankhaften Flüssigkeiten eine Anzahl von Eigenschaften

1) D. h. der Aggressine in Verbindung mit den zugehörigen Bazillen.
Aggressine Flüssigkeiten allein wirken nicht stark negativ chemotaktisch.
Über diese wichtigen Verhältnisse wurden eingehende Studien bei Typhus
und Tuberkelbazillen gemacht, die ihrem Abschlüsse nahe sind.
Archiv für Hygiene. Bd. LUX. —

308 Untersuchungen Über die Aggressivität des Choleravibrio.

nachzuweisen, die dem Begriff der Aggressivität entsprechen;
aber dieser Aggressinnachweis ist sozusagen bisher nur ein quali-
tativer, entbehrt noch der Feinheit, bedarf verhältnismäßig grober
Flüssigkeitsmengen. Das kann nicht wundernehmen und darf
kein Vorwurf sein; denn wenn man sich auch über die Aus-
bildung von Aggressinen nach der Art des Infektionsverlaufes
bestimmte Vorstellungen machen kann, so fehlen doch noch
sichere Anhaltspunkte dafür, wie man die Aggressine möglichst
reichlich an bestimmten Stellen des Körpers zur Ansammlung
bringen und nachher gewinnen kann. Das aber ist für das Ar-
beiten notwendig, und so bleibt hier noch viel zu tun.

Am empfindlichsten ist dabei die mangelnde Beständigkeit
der Aggressinbefunde, wie sie z. B. bei Choleraversuchen hervor-
tritt. Im Bauchhöhlenexsudat von Meerschweinchen lassen sich
gegebenenfalls alle Aggressineigenschaften leicht nachweisen; es
kommen aber oft genug Tiere vor, deren Exsudate selbst in
grofsen Mengen unwirksam sind, ohne dafs man den Grund dafür
angeben könnte. Dem gleichen Übelstande begegnete Kikuchi
bei Dysenteriebazillen, so dafs er es »bis zu einem gewissen
Grade als Glücks- und Zufallssachec bezeichnete, ein wirksames
Aggressin zu finden 1 ). Versuche, die Beschaffenheit und den
Zellgehalt solcher Exsudate als Kennzeichen höherer oder ge-
ringerer Aggressivität zu verwerten, hatten schliefslich keinen
sicheren Erfolg.

Weitere Versuche in dieser Richtung wurden durch folgende
Erwägung veranlafst. Echte Parasiten, wie Hühnercholera (Weil)
und Milzbrand, ergeben fast ausnahmslos wirksame Aggressine.
Da aber, wie bereits oben bemerkt wurde, die Aggressivität offen-
bar eine variierbare Eigenschaft ist, so könnte man versuchen,
sie bei einem bestimmten Choleravibrio so zu steigern, dafs der-
selbe dadurch dem Zustande echter Parasiten genähert würde.
Eine leichtere und sicherere Aggressingewinnung könnte dann
die Folge sein. Kikuchi 2 ) hat bereits für Dysenteriebazillen
in dieser Hinsicht sehr bemerkenswerte Ergebnisse erzielt.

1) Kikuchi, dieses Archiv, Bd. 52, S. 393.

2) Berliner klinische Wochenschrift, 1905, Nr. 15.

Von Prof. Dr. Oskar Bau. 509

Das einzige Mittel, das für solche Versuche zur Verfügung
steht, ist das, den Choleravibrio zum beständigen Aufenthalte im
Tierkörper zu zwingen, also bei intraperitonealer Meerschweinchen-
impfung fortgesetzt das gebildete Exsudat ohne Einschaltung
künstlicher Kulturen als Infektionsstoff zu verwenden. Derartige
Versuche sind bereits mehrfach unternommen worden, und es
wird auf die wichtigsten derselben später eingegangen. Dabei
kam es darauf an, ob eine unbegrenzte Infektionsreihe möglich
sei. Dies war bei den folgenden Serienimpfungen nicht der
Zweck, weshalb auch abgebrochen wurde, sobald das angestrebte
Ziel, die Aggressingewinnung, als erreicht gelten konnte. Die
verwendete Kultur ist die gleiche wie in den früheren Versuchen.

I. Reihe.

Meerschweinchen 259. Erhält 1 Agarkultur Cholera-» 3tamm< ip. 8tirbt
nach ca. 11 Std. und enthält ca. 8 ccm wenig trübes, dünnes Exsudat mit
spärlichen, kleinen, polynukleären Leukozyten mit schwacher Phagozytose.
Massenhaft Vibrionen, öfters in Klumpen, vielfach sehr lang (Spirillenform).
Spärliche, zellarme, mehr fibrinöse Auflagerungen am Netz und der Leber
mit grofsen, polynukleären Leukozyten und schwacher Granulaphagozytose.
Dazwischen zahlreiche Vibrionen.

Meerschweinchen 260. Erhält 3 ccm frisches, nicht verändertes Exsudat
von Nr. 259 ip. Stirbt in der Nacht. Enthält ca. 6 ccm dünnes, wenig trübes
Exsudat mit spärlichen, kleinen, polynukleären Leukozyten und grofse Mengen
ven oft Behr langen Vibrionen. Auflagerungen fehlen.

Meerschweinchen 261. Erhält 2 ccm frisches Exsudat von 260 ip. Stirbt
bereits abends nach ca. 10 Std., konnte aber erst am nächsten Tage seziert
werden. Es enthielt ca. 4 ccm mäfsig trübes, etwas fadenziehendes Exsudat
mit einer mäfsigen Zahl kleiner, polynuklearer Leukozyten ohne Phagozytose.
Vibrionenbefund wie bisher. Keine Auflagerungen.

Meerschweinchen 262, Erhält 1 ccm frisches Exsudat von 261 ip. Stirbt
nach 10 Std. mit schwerster Infektion, ohne Auflagerungen, ca. 9 ccm trübes
Exsudat, das aufser einer Anzahl von Endothelien fast keine Zellen, aber
grofse Mengen von langen Vibrionen enthält.

Meerschweinchen 263. Erhält 0,5 ccm frisches Exsudat von 262 ip. Stirbt
nach 15 Std. Enthält ca. 2 ccm dickes, trübes Exsudat mit einer mäfsigen
Zahl kleiner, polynukleärer Zellen, fast ohne Phagozytose, massenhafte
Vibrionen. Mäfsig reichliche Auflagerungen auf Netz, Leber, Milz, aus
grofsen polynukleären Leukozyten mit starker Granulaphagozytose ; dazwischen
zahlreiche normale Vibrionen. In der Milz sind mikroskopisch grofse Mengen
von Vibrionen nachzuweisen, spärlicher, aber ohne Mühe zu finden sind sie
in Leber nnd Herzblut. Ausstriche auf Agar liefern aus allen Organen
üppiges, zusammenhängendes Wachstum.

22*

3 10 Untersuchungen Über die Aggressivität des Choleravibrio.

Meerschweinchen 270. Erhält zuerst 0,001 ccm Immunserum > Pfeiffer«,
gleich darauf 0,4 ccm frisches Exsudat von 263 ip. Eine Kapillarentnahme
zeigt nach 5 8td. bereits zahlreiche, teils unbewegliche teils schwärmende
Vibrionen, daneben mäfsig viele Granula. 2 Std. später Bind ziemlich viel
Leukozyten aufgetreten ; massenhaft Vibrionen neben Granula. Stirbt nach
genau 24 Std. Enthält 2,5 ccm dickes, trübes Exsudat mit vielen poly nukle-
aren Leukozyten, die z. T. in schon makroskopisch sichtbaren Klumpen vereint
sind. Grofse Mengen von Vibrionen, daneben viel weniger Granula. Auflage-
rungen verhältnismässig wenige, mit dem gewöhnlichen Befunde. Kulturen
aus Exsudat go, aus Leber ca. 200, aus Herzblut ca. 600 Kolonien (je 1 Öse).

Meerschweinchen 271. Geimpft wie 270, aber ohne Immunserum. Stirbt
in der Nacht und enthält ca. 3 ccm trübes Exsudat mit einer beträchtlichen
Anzahl meist verklumpter, kleiner, polynukleärer Leukozyten. Vibrionen in
grofser Zahl. Eitrige Auflagerungen reichlicher als bisher. Kulturell aus
Exsudat oo, aus Milz 74, aus Leber 128, aus Herzblut 560 Kolonien (je 1 Öse).

Meerschweinchen 272. Erhält zuerst 0,001 ccm Serum > Pfeiffer«, gleich
darauf 0,4 ccm frisches Exsudat von 271 ip. Bleibt am Leben.

Meerschweinchen 273. Geimpft wie 272, ohne Serum. Bleibt am Leben.

Im Anschluls an diese Reibe seien sofort die Aggressivitäts-
versuche mit Exsudaten angeführt. Geprüft wurde die Aggressin-
wirkung durch gleichzeitige oder meistens nachträgliche Ein-
spritzung der Exsudate mit Immunserum * Pfeiffer c und Cholera-
vibrionen.

a) Mischung aus 2 ccm Exsudat 261 mit 2,5 ccm Exsudat 260 mit Toluol
sterilisiert

Meerschweinchen 267. Erhält 0,001 ccm Serum »Pfeiffer« + 1 Öse Cholera-
agarkultur ip. */ 4 Std. später sind nur Granula vorhanden, deren Zahl sich
nach einer weiteren V4 Std. bereits vermindert hat. Jetzt erhält das Tier
3,5 ccm obiger Exsudatmischung ip. Im weiteren Verlaufe verschwinden
die Granula nach 3 Std. vollständig. Leukozyten treten nach 5 Std. auf,
bleiben aber weit weniger zahlreich als sonst, und ihre Zahl vermindert
sich eher bis zu 8 Std. nach der Infektion. Dabei ist das Tier um diese Zeit
typisch cholerakrank, schlaff und liegt auf der Seite. Wider Erwarten ist
es am andern Morgen noch am Leben, sogar etwas erholt und die Bauch-
höhle enthielt jetzt Eiter. Es starb nach 32 Std. Reichlich sulziges Ödem
unter der Haut ohne Zell- und Bazillenbefund 1 ). Einige Tropfen Exsudate
im Bauchraum mit kleinen und grofsen polynukleären Leukozyten. Von
Auflagerungen finden sich nur am Netz einige kleine Flöckchen, die grofse,
polynukleäre Zellen mit Granulaphagozytose enthalten und überdies Vibrionen
von gutem Aussehen. Kulturen aus dem Exsudate bleiben steril, Ausstriche
aus den Auflagerungen liefern spärliches Wachstum.

1) Das Auftreten von Unterhautödemen ist bei Versuchen mit Aggres-
sion verschiedener Bazillen (Cholera, Dysenterie, Tuberkulose) sehr häufig.
Meist läfst sich darin überhaupt nichts finden.

Von Prof. Dr. Oskar Bail. 311

b) Exsudat von 262 völlig klar zentrif agiert, ca. 24 Std. kalt aufbewahrt,
nicht sterilisiert

Meerschweinchen 268. Erhält 3 ccm Exsudat, gleich darauf 0,001 ccm
Serum > Pfeiffer c -f- 1 Öse Choleraagarkultur. Nach V« Std. finden sich fast
nur Granula, nach 2 Std. sind sie bereits vollständig verschwunden. Erst
nach 3 Std. treten Leukozyten in geringer Zahl, meist zu Klumpen geballt,
auf, ihre Zahl steigt sehr langsam bis zu 8 Std., bleibt aber immer verhältnis-
mässig klein. Abends ist das Tier sehr hinfällig und bleibt so bis zu dem
nach 2 Tagen erfolgten Tode. Es finden sich in der Bauchhohle weder Ex-
sudat noch Auflagerungen. Auffällig ist die starke Degeneration, fast Ver-
fettung, der Leber.

Meerschweinchen 269. Erhält 0,001 ccm Serum » Pfeiffer * + 1 Öse Cholera-
agarkultur ip. Nach V 4 Std. sind nur Granula vorhanden und das Tier erhält
jetzt 3 ccm Exsudat ip. Noch nach 3 Std. fehlen Leukozyten fast vollständig,
erst nach 6 Std. treten sie ganz vereinzelt auf und bleiben bei schwerer
Krankheit des Tieres sehr spärlich. Der Tod tritt in der Nacht ein. In dem
ca. 3 ccm fast klaren Exsudate der Bauchhöhle sind nur wenige Lympho-
zyten und zusammengeballte, kleine, polynukleäre Zellen enthalten. Auf dem
Netz finden sich einige kleine, weifse Flöckchen, mit polynukleären Leuko-
zyten und schwacher Gran ulaphagozy tose. Überdies lassen sich hier gut
erhaltene Vibrionen ohne Muhe auffinden, während sonst weder Granula
noch Vibrionen zu finden sind. Kulturen liefern aus 1 Öse Exsudat 29 Kolo-
nien, aus den Flöckchen dichte Beläge.

H. Reihe.

Meerschweinchen 280, 290 g. 1 Öse Choleraagarkultur ip. Stirbt nach 12 Std.
und liefert 4 ccm mäfsig trübes, dünnes Exsudat mit wenigen kleinen, poly-
nukleären Leukozyten und schwacher Phagozytose. Vibrionen in Menge,
vielfach verknäuelt. Keine Auflagerungen. In der Milz lassen sich spärliche
und unsichere, in Hers und Leber keine Vibrionen finden.

Meerschweinchen 281, 430 g. Erhält 2 ccm frisches Exsudat 280 ip. Stirbt
nach ca. 20 Std. mit dem Befunde der verhältnismässig leichten Infektion,
ca. 2,5 ccm sehr dickes, trübes Exsudat mit sehr zahlreichen kleinen, aber
auch grofsen, polynukleären Leukozyten mit guter Granulaphagozytose.
Vibrionen sehr reichlich, wobei aber auffällt, dafs lange Formen sowie
Knäuelbildung weit spärlicher sind als sonst im Verlauf der Reihen. Dicker
Eiter auf der Leber mit dem gewöhnlichen Befunde grofser, polynukleärer
Zellen und starker Granulaphagozytose. Dazwischen Vibrionen. Mikro-
skopisch Vibrionen in der Milz spärlich, in Leber und Herz nicht nachweis-
bar. — Die Bauchhöhle des Tieres wird nach Entnahme des Exsudats mit
2 ccm Na Cl- Lösung ausgespült, beide Flüssigkeiten vereinigt und dann zentri-
fugiert, bis die obenstehende Flüssigkeit etwa die Trübung einer jungen
Pepton wasserkultur besitzt. Der Satz samt den Zellen wird in Na Cl -Lösung
aufgeschwemmt.

312 Untersuchungen über die Aggressivität des Cholera vibrio.

Meerschweinchen 282, 325 g. Erhalt 3,5 ccm der Flüssigkeit ip. Stirbt
nach 10 Std. und enthält nur etwa 2 ccm dünnes, trübes Exsudat mit einer
mäfeigen Anzahl von kleinen, polynukleären Leukozyten und schwacher
Granulaphagozytose. Massenhaft Vibrionen, oft sehr lang und verknäuelt
Leber und Milz mit dünnen, eitrigen Überzügen, die den gewöhnlichen Be-
fund zeigen. Milz vergrößert; darin sowie in der Leber und im Herzblut
zahlreiche Vibrionen mikroskopisch nachweisbar. Kulturell aus allen Or-
ganen üppige Kulturen.

Meerschweinchen 283, 315 g. Erhält den in 3,5 ccm Na Cl- Lösung auf-
geschwemmten Satz von Exsudat 281 ip. Stirbt nach ca. 10 Std. und liefert
5 ccm dünnes, wenig trübes Exsudat mit spärlichen, kleinen, polynukleären
Zellen, ohne Phagozytose. Vibrionen massenhaft, fast sämtlich verknäuelt.
Mikroskopisch in Milz und Leber zahlreiche, im Herzen keine Vibrionen ge-
funden. Kulturell von überallher Üppige Kulturen.

Meerschweinchen 284, 310 g. Erhält zuerst 0,002 ccm Serum > Pfeiffer«,
gleich darauf 2 ccm frisches Exsudat 283 ip. War am Abend sehr krank,
erholte sich dann, magerte aber zusehends ab und starb am 4. Tage ohne
besonderen Befund marastisch.

Meerschweinchen 285, 260 g. Geimpft, wie 284 ohne Immunserum. Stirbt
nach 8 Std. und liefert ca. 8 ccm trübes, etwas dickliches Exsudat, das fast
nur Vibrionen in langen Knäueln enthält ; wenige kleine, polynukleäre Zellen
mit Granulaphagozytose. Keine Auflagerungen. Kulturell gingen aus allen
Organen und dem Herzen üppige Kulturen auf.

Meerschweinchen 286, 250 g. Erhält 0,8 ccm frisches Exsudat von 285 ip.
und stirbt nach weniger als 11 Std. Es enthält ca. 4 ccm dünnes, wenig
trübes Exsudat, mit spärlichen kleinen, polynukleären Leukozyten und massen-
haften Vibrionen in der gewöhnlich beobachteten Form und Anordnung.
Keine Auflagerungen. Herz, Milz und Leber ergeben üppige, Lunge spär-
lichere Kulturen.

Meerschweinchen 287, 230 g. Erhält zuerst 0,001 ccm Serum »Pfeiffer«,
gleich darauf 0,5 ccm frisches Exsudat von 286 ip. Die fortlaufende Beob-
achtung ergibt nach l 1 /* Std. eine beträchtliche Anzahl meist zusammen-
geballter Leukozyten, spärliche Granula und unbewegliche Vibrionen. Nach
3 Std. hat die Zahl der Leukozyten nicht weiter zugenommen. Vibrionen
finden sich vereinzelt neben auffällig vielen Körnchen. Nach 6 Std. enthält
das deutlich kranke Tier mäfsig viel Leukozyten, zum Teil in Klumpen,
wimmelnde Vibrionen, die aber sehr kurz aussehen, neben sehr vielen Körn-
chen. Der Tod erfolgt in der Nacht. Das in sehr geringer Menge vorhandene
Exsudat enthält ziemlich reichlich kleine, polynukleäre Leukozyten mit stärk-
ster Granulaphagozytose, sehr viele normale Vibrionen neben noch mehr
gequollenen und Körnchen. Reichliche Auflagerungen mit Granulaphago-
zytose in grofsen, polynukleären Leukozyten.

Meerschweinchen 288, 210 g. Geimpft wie 287, ohne Serum. Stirbt nach
11 Std., enthält aber nur sehr wenig Exsudat, fast ohne Zellen, mit dem
gewöhnlichen Vibrionenbefunde. Fast keine Auflagerungen. In lieber, Milz
und Herzblut sind bereits mikroskopisch zahlreiche Vibrionen nachweisbar.

Von Prof. Dr. Oskar Bail. 313

Die Reihe wurde bei diesem Tiere abgebrochen; zum Ag-
gressinversuche diente das sehr sorgfältig und ganz klar zentri-
fugierte Exsudat von Nr. 286.

Meerschweinchen 289, 200 g. Erhält 2 ccm Exsudat, gleich darauf 0,001 ccm
Serum »Pfeifferc -f- 1 Öse Choleraagarkultur aus Nr. 282. Nach 20 Minuten
nur Granula. Während der ganzen 7 ständigen Beobachtungsdauer traten
nur ganz spärliche Leukozyten in die Bauchhöhle ein. Der Tod trat in der
Nacht ein. Es fanden sich ca. 2 ccm wenig trüben, etwas dicklichen Ex-
Budates, mit einer mäfsigen Zahl kleiner, polynukleärer Leukozyten ohne
Phagozytose. Weder Körnchen noch Vibrionen. Nur am Netz finden sich
einige kleine Auflagerungen mit grofsen, polynukleären Zellen und starker
Granulaphagozytose. Zwischenliegend vereinzelte normale Vibrionen.

Meerschweinchen 290, 240 g. Erhält 0,001 ccm Serum > Pfeiffer < + 1 Öse
Choleraagarkultur ip., 20 Minuten später, wo nur noch Granula in der Bauch-
höhle vorhanden sind, 2 ccm Exsudat ip. Wie bei 289 treten während der
ganzen Beobachtungsdauer fast keine Leukozyten auf. Typisch krank war
das Tier bereits nach 4 Std., doch trat der Tod erst in der Nacht ein. In
der Bauchhöhle fand sich wenig, fast klare Flüssigkeit mit spärlichen, kleinen,
polynukleären Leukozyten, ohne Vibrionen und Granula. Am Netz waren
zwei kleine, weifse Flocken mit dem gleichen Befunde wie bei 289.

in. Reihe.

Meerschweinchen 296, 470 g. Erhält 1 Agarkultur der wenig virulenten
Stammcholera ip. Stirbt erst nach 21 Std. und liefert 3,5 ccm trübes, dickes
Exsudat mit zahllosen Vibrionen und sehr vielen, meist kleinen, poly-
nukleären Leukozyten und starker Granulaphagozytose. Reichliche Auf-
lagerungen.

Meerschweinchen 297, 510 g. Erhält das fast klar zentrifugierte Exsudat
von 296 -f- Vi» des zellfrei gemachten Satzes aus diesem Exsudate (Satz in
warmem, sterilem Wasser aufgeschwemmt, durch Papier filtriert, wieder zentri-
f agiert). Stirbt in der Nacht und liefert 10 ccm dünnes, trübes, fast zellfreies
Exsudat, dessen Trübung so gut wie ganz aus Vibrionen besteht. Wenige
kleine, weifse Flocken am Netz mit dem gewöhnlichen Befunde. Ausstriche
der Organe ergeben aus Leber und Milz je ca. 800 — 900, aus der Lunge 29,
aus dem Herzblut 320 Kolonien.

Meerschweinchen 298, 530 g. Erhält 2 ccm frisches Exsudat 297 ip., stirbt
nach 7 8td. und enthält 3 ccm dünnes, trübes, fast zellfreies Exsudat mit
massenhaften, z. T. in Haufen liegenden Vibrionen. Keine Auflagerungen.
Ausstriche aus Leber, Milz, Lunge und Herzblut ergeben dicht zusammen-
hängende Beläge.

Meerschweinchen 302, 350 g. Erhält zuerst 0,02 ccm Serum »Pfeifferc,
gleich darauf 1,5 ccm frisches Exsudat von 298 ip. Nach 2 Std. finden sich
in der Bauchhöhle neben wenig Leukozyten und vielen Körnchen eine kleine

314 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

Zahl normaler, aber unbeweglicher Vibrionen. Nach 4 Std. fehlen Leukozyten
noch immer ; viele Granula, vereinzelte Vibrionen. Nach 15 Std. enthält die
Bauchhöhle des sehr kranken Tieres eitriges Exsudat, noch immer Granula.
Der Tod erfolgt nach ca. 40 Std. Starkes Hautödem, ohne Zell* und Bazillen-
befand. In der Bauchhöhle ca. 2 ccra wenig trübes, dünnes Exsudat mit
verhältnismässig recht wenigen, kleinen, polynukleären Leukozyten ohne
Vibrionen und Körnchen. Sehr spärliche, fibrinöse, relativ zellarme Auf-
lagerungen. (Nach dem Exsudatbefunde nach 15 Std. hätte eigentlich Oberall
Eiter erwartet werden müssen I) In beiden Pleuren ca. 5 ccm fast zellfreie
Flüssigkeit. Kulturen daraus, sowie aus Hautödem, Leber, Milz und Herzblut
bleiben steril, eine Öse Peritonealexsudat liefert 300 Kolonien.

Meerschweinchen 303, 350 g. Geimpft wie 302, ohne Serum, stirbt in
der Nacht und ergibt 7,5 ccm fast zellfreies, trübes, dünnes Exsudat mit
massenhaften, teils einzelnen teils zusammengeballten Vibrionen, die länger
werden als bisher. Keine Auflagerungen. Kulturen aus Milz Leber, Lunge
und Herzblut ergeben dicht zusammenhängende Beläge.

Meerschweinchen 304, 720 g. Erhält 1,75 ccm frisches Exsudat von 303,
stirbt nach 8 1 /» Std. und liefert 9 ccm dünnes, trübes, fast nur Vibrionen
enthaltendes Exsudat. Keine Auflagerungen. In der Bauchhöhle ca. 3 ccm
wenig trübe Flüssigkeit mit spärlichen Zellen und Vibrionen. Ausstriche aus
Milz und Leber ergaben ca. 500, aus Lunge 79, aus Herzblut 1280 Kolonien.

Meerschweinchen 307, 490 g. Erhält 1,5 ccm frisches Exsudat von 304,
stirbt nach 14 Std. und enthält ca. 5 ccm* leicht blutiges Exsudat mit einer
geringen Zahl kleiner, polynukleärer Leukozyten mit Phagozytose und un-
zähligen Vibrionen. Sehr dünne, spärliche Auflagerungen. Kulturen aus
Leber, Milz, Lunge und Herzblut ergeben dicht zusammenhängende Beläge.

Meerschweinchen 306, 510 g. Erhält zuerst 0,02 ccm Serum »Pfeiffers
dann wie 307. Ist einige Tage krank und magert stark ab.

Meerschweinchen 309 (Gewicht nicht notiert). Erhält 1,25 ccm frisches
Exsudat von 307, stirbt nach 10 Std. und enthält 9 ccm dünnes, trübes Ex-
sudat mit Massen von Vibrionen, spärlichen kleinen, polynukleären Leuko-
zyten, etwas mehr Endothelen. Milz auffällig vergrößert und dunkel. Kul-
turen aus Milz, Leber und Herz ergeben dichte, solche aus Lunge reichliche,
aber aus erkennbaren Kolonien zusammengesetzte Beläge.

Meerschweinchen 3IQ (Gewicht?). Erhält erst 0,02 ccm Serum »Pfeiffer«,
dann wie 309 ip. Die fortlaufende Beobachtung ergibt nach 1 Std. nur Gra-
nula, Leukozyten strömen nach 3 Std. und später reichlich zu, sind aber
meist zusammengeballt. Dennoch ist das Tier abends schwer krank, erholt
sich nicht mehr ganz, magert ab und stirbt nach 4 Tagen marantisch ohne
sonstigen Befund.

Meerschweinchen 314, 390 g. Erhält 1,5 ccm. Exsudat 309 ip., stirbt
nachts und liefert ca. 10 ccm dünnes, wenig trübes Exsudat, das fast nur
Vibrionen enthält. Keine Auflagerungen. Milz dunkel und stark vergröfsert.
Kulturen aus Leber und Herz liefern dichte Beläge, die aus Milz und Lunge
ca. 500 und 800 Kolonien. #

Von Prof. Dr. Oskar ßail. 315

Meersohwelnohei 315, 375 g. Erhält erst 0,02 Sernm > Pfeiffers dann wie
314 ip. Wird krank and magert stark ab.

Von den Tieren dieser mit Nr. 314 abgebrochenen Reihe
wurden die Exsudate von 297, 303, 304, 309 und 314 auf ihr
aggressives Verhalten geprüft. Alle Exsudate waren völlig klar
zentrifugiert, sterilisiert war überdies das von Nr. 309. Wie be-
reits bei Nr. 267 wurde das aggressinhaltige Exsudat nicht nur
gleichzeitig oder vor der Vibrionen - Immunserummischung ein-
gespritzt, sondern nachträglich, zu einer Zeit, wo die aus der
Bauchhöhle entnommenen Flüssigkeitsproben die alleinige An-
wesenheit von Körnchen ergaben. Bei den stets in beträcht-
lichem Überschusse verwendeten Serummengen war das in kür-
zester Zeit erfolgt. Das Ergebnis der Aggressinanwendung war,
wie immer, eine Abhaltung der Leukozyten oder eine Verzöge-
rung ihres Zutritts, offenbar je nach Menge und Stärke des ver-
wendeten Aggressins. Der Tod erfolgte immer, und zwar mehr-
mals früher als bei gleichzeitiger Aggressin- und Seruminjektion.
Damit ist so gut wie sicher nachgewiesen, dafs es sich bei der
Aggressinwirkung um eine Vergiftung handle, nicht als ob das
aggressive Exsudat selbst giftig wäre, sondern so, dafs die ein-
gespritzten Vibrionen hinreichend Gift enthalten, das durch die
Immun8erumbakteriolyse leicht und schnell zur Aufsaugung fähig
gemacht wird. Während bei einem gewöhnlichen Pfeifferschen
Versuche das freigewordene Gift offenbar durch die zuströmenden
Leukozyten in irgend einer Weise unschädlich gemacht wird,
bewirkt die durch das Aggressin herbeigeführte Zellabhaltung
freie und ungehinderte Giftresorption, die entweder zum schnellen
Tode innerhalb 24 Stunden oder zu einem mehr chronischen
Vergiftungszustande mit Marasmus führt. Auf das Unzureichende
der Bakteriolyse, das durch diese Versuche aufgedeckt wird, wurde
bereits früher hingewiesen. 1 )

Die Versuche wurden noch in einer andern Richtung er-
weitert. Da das Aggressin sich gegen die Leukozyten richtet,
so lag der Gedanke nahe, dafs auch umgekehrt Leukozyten das

1) Wiener klinische Wochenschrift, 1905, Nr. 9.

316 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

Aggressin beeinflussen könnten. Kikuchi 1 ) hat bereits für das
Aggressin des Dysenteriebazillus nachgewiesen, dafs dasselbe
durch Leukozytenbehandlung seine Wirkung vollständig einbüfst.
Das gleiche gilt auch bei Cholera , nur dafs die Aggressivität
hier nicht vollständig aufgehoben wurde. Die Versuchstiere
blieben zwar am Leben, waren aber lange krank und magerten
sehr stark ab. Quantitative Versuche stehen noch aus 2 ).

Meerschweinchen 299, 200 g. Erhält zuerst 0,02 ccm Serum > Pfeiffer*,
gleich darauf 3,5 ccm Exsudat -f- 1 Öse Oholeraagarkultur aus 296 ip. Nach
7 4 Std. nur Granula, wenig Leukozyten. Nach 3 1 /, Std. treten die ersten
Leukozyten auf, werden nach 6 Std. etwas zahlreicher, sind meist verklumpt
und nehmen dann eher ah als zu. Der Tod tritt in der Nacht ein. In den
wenigen Tropfen Flüssigkeit der Bauchhöhle finden sich ziemlich viele kleine,
polynukleäre Zellen. Auflagerungen sind ansehnlich, die Milz ist vergröTsert.
Vibrionen und Granula waren nicht zu finden, doch lieferte 1 Öse Exsudat
6 Kolonien.

Meerschweinchen 300, 205 g. Erhält 0,02 ccm Serum »Pfeiffer« + 1 Öse
Cholera wie 299 ip. Nach V« Std. sind in der Bauchhöhle nur noch Granula
vorhanden, und es werden 3,5 ccm Exsudat 297 eingespritzt. Leukozyten
treten in irgend erheblicher Zahl während 9 Std. nicht in die Bauchhöhle
über, die Granula sind nach 2 Stunden verschwunden. Der Tod erfolgt in
der Nacht. Starkes Hautödem ohne Befund. In der Bauchhöhle ca. 2 1 /, ccm
mäfsig trübes Exsudat mit ziemlich viel kleinen, polynukleären Leukozyten.
Spärliche Auflagerungen, Milz vergröfsert. Vibrionen und Granula nicht
zu finden. 1 Öse Exsudat ergibt 2 Kolonien.

Meerschweinchen 301, 175 g. Wird wie 300 geimpft, ohne nachträgliche
Exsudatinjektion. Granulabildung nach V« Std. beendet, nach 2 Std. treten
bereits reichlich Leukozyten auf, deren Zahl rasch ansteigt, so dafs sich
nach 6 Std. zähes, dickes Eiter entnehmen läfst. Bleibt ohne Krankheit.

Meerschweinchen 305, 220 g. Erhält 0,02 ccm Serum > Pfeiffer« + 1 Öse
Oholeraagarkultur aus 297 ip. Nach 7<Std. wenige, in Klumpen zusammen-
geballte Leukozyten; ausschlief Blich Granula. Jetzt Jnjektion von 2 ccm
Exsudat 303 ip. Leukozyten fehlen bis zu 3 Std. fast ganz und bleiben
während der Beobachtungsdauer von 9 Std. äufserst spärlich. Das Tier ist
dabei typisch krank und stirbt in der Nacht. Es enthält in der Bauchhöhle
ca. 2,5 ccm fast klares, sehr zellarmes Exsudat ohne Vibrionen und Granula
Von Auflagerungen findet sich nur ein vom Netz Über den Magen zum

1) Berliner klinische Wochenschrift, 1905, Nr. 15.

2) Soweit bisher Versuche vorliegen, scheint das Typhusaggressin noch
weniger durch Leukozyten beeinflufst zu werden, so dafs die Vermutung
eines Zusammenhanges zwischen Parasitismus und diesen Verbältnissen
naheliegt.

Von Prof. Dr. Oskar Bau. 317

Leberrand ziehender fibrinöser Faden mit wenigen grofsen, polynukleären
Leukozyten. In der Bauchhöhle ca. 3 ccm klarer, steriler Flüssigkeit. Aus-
striche aus dem Peritonealexsudat liefern ziemlich reichliche Kolonien.

Meerschweinchen 306, 225 g. Erhält 0,02 ccm Serum »Pfeiffer« , gleich
darauf die abzentrifugierten und gewaschenen Vibrionen aus den bei Nr. 305
verwendeten 2 ccm Exsudat 303 ip. Die Einspritzung erfolgt gleichzeitig mit
der ersten bei Nr. 305, die verwendete Aufschwemmung der tierischen Vi-
brionen ist weniger trüb als die der Kulturbazillen. Nach l / 4 Std. ist der
Unterschied gegen Nr. 305 ganz auffallend. Es finden sich zwar sehr viele
Granula, daneben aber ist etwa Vi der Vibrionen gut erhalten, z. T. noch
beweglich. Nach 1 Std. sind nur noch wenige, aber auch noch teilweise be-
wegliche Vibrionen vorhanden, nach 2 Std. sind nur Granula in erstaunlich
grofser Menge zu finden und Leukozyten treten in geringer Zahl auf. Sie
vermehren sich nicht stark bis zu 9 Std. Granula bleiben mit Ausnahme
einer nach 6 Std entnommenen Probe immer zahlreich. Das Tier machte
einen schwerkranken Eindruck. Nach 22 Std. war das Exsudat bei an-
dauernder Krankheit des Tieres eitrig, mit grofsen Leukozytenklumpen, ge-
worden. Granula waren ohne Mühe nachzuweisen. Der Tod trat in der
Nacht des zweiten Tages ein; es fand sich eine relativ zellarme Flüssigkeit,
in welcher Granulaphagozytose und vereinzelte normale Vibrionen nachweis-
bar waren. Reichliche Auflagerungen mit dem gewöhnlichen Befunde, meist
grofsen, polynukleären Leukozyten mit spärlicher Granulaphagozytose. Auch
hier einzelne Vibrionen.

Das zum folgenden Versuche mit Nr. 312 und 313 dienende Exsudat
ist z. T. mit gewaschenen Leukozyten eines Exsudates von dem ip. mit
Aleuronat injizierten Meerschweinchen 311 behandelt. Ihre Menge war
nicht sehr grofs, sie blieben V« Std. bei 37 ° mit dem Exsudat in Berührung
und wurden dann abzentrifugiert.

Meerschweinchen 312, 210 g. Erhält 0,02 ccm Serum > Pf ei ff er < + 1 Öse
Cholera ip. Nach V 4 Std. nur Granula. Jetzt wird das mit Zellen behandelte
Exsudat 301 eingespritzt. Nach 2 Std. sind eine Anzahl von weifsen Blut-
körperchen, die meist verklumpt sind, in der Bauchhöhle vorhanden. Ihre
Menge steigt allmählich an, ohne dafs man aber von Eiter während der
8etündigen Beobachtungszeit reden könnte. Erst am nächsten Tage findet
sich Eiter. Das Tier wird elend und stirbt in der Nacht des 5. Tages ohne
besonderen Befund maras tisch.

Meerschweinchen 313, 225 g. Wird wie 312, aber mit unverändertem
Exsudate geimpft. Auch hier waren vor der Exsudateinspritzung nur
Granula vorhanden, die nach 2 Std. vollständig verschwanden. Leukozyten
fanden sich nach 3 Std. in mäfsiger Zahl ein, nahmen dann aber eher ab und
blieben jedenfalls während der 8 stündigen Beobachtung spärlich. Der Tod
trat nachts ein. In der Bauchhöhle fanden sich ca. 4 ccm wenig trüber
Flüssigkeit, die aber doch mehr Zellen (kleine, polynukleäre) enthielt, als
am Vortage beobachtet waren. Vibrionen und Granula fehlten. Von Auf-
lagerungen war nur ein kleines Flöckchen am Leberrande vorhanden, das
grofse, polynukleäre Leukozyten und einzelne Granula enthielt. Milz nicht

318 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

vergroTsert. Mäfsiges Hautödem. Kulturen aus Leber und Herzblut blieben
steril, Milzausstriche lieferten 1, 1 Öse Exsudat etwa 1000 Kolonien.

Meerschweinchen 313a, 165 g. Wie 312, ohne nachtragliche Exsudat-
einspritsung. Auch hier sind nach V 4 Std. nur Granula vorhanden, die rasch
(nach 2 Std. fehlen sie ganz) verschwinden. Schon nach 2 Std. zahlreiche
Leukozyten, nach 3 Std. eitrig, nach 6 Std. dicker Eiter. Lebt.

Die Zellen für die Behandlung der nachfolgenden Exsudate entstammen
der Bauchhöhle eines mit Aleuronat injizierten grofsen Meerschweinchens.
Für jedes Exsudat wird die Hälfte der Zellen nach der oben angegebenen
Methode verwendet.

Meerschweinchen 316, 200 g. Erhält erst 0,02 ccm Serum »Pfeiffer c
-f- 1 Öse Cholera, nach V 4 Std. bei alleiniger Anwesenheit von Körnchen 2 ccm
mit Toluol sterilisiertes, mit Zellen behandeltes Exsudat 309 ip. Die Zahl
der Leukozyten steigt nicht bis zu 3 Std. Nach 6 Std. vermehren sie sich
rasch, nach 9 Std. ist in der Bauchhöhle Eiter. Das Tier erscheint 2 Tage
lang krank, erholt sich dann.

Meerschweinchen 317, 200 g. Wie 316 mit unverändertem Exsudate ge-
impft Bis 6 Std. bleiben die Leukozyten sehr spärlich, dann tritt allmähliche
Zunahme derselben ein, die aber mit der bei 316 nicht zu vergleichen ist.
Am andern Morgen ist das Tier sehr hinfällig, enthält aber viel Leukozyten
in der Bauchhöhle. Der Tod erfolgt in der Nacht des 2. Tages. Die Sektion
ergibt weder flüssiges Exsudat noch Auflagerungen.

Meerschweinchen 318, 205 g. Genau wie 316, mit 1,5 ccm des völlig klar
zentrifugierten, aber nicht sterilisierten Exsudates 314. Zellvermehrung tritt
nach 5 Std. ein, wird rasch stärker, bis nach 9 Std. Eiter gefunden wird.
Auch dieses Tier war sehr hinfällig, erholte sich noch wider Erwarten.

Meerschweinchen 319, 210 g. Genau wie 317, mit Exsudat 314. Die
Leukozyten blieben bis zu 5 Std. sehr spärlich, vermehrten sich dann, aber
ohne Vergleich weniger als bei 318. Am nächsten Tage lag das Tier kraft-
los auf der Seite, lebte aber im ganzen 31 Std. In der Bauchhöhle fanden
sich 2 ccm trübes Exsudat mit reichlichen, kleinen, polynukleären Leuko-
zyten, ohne Granula und Vibrionen. Auflagerungen gering, mit dem gewöhn-
lichen Befunde und vereinzelten Vibrionen. Kulturen aus Exsudat lieferten 2,
aus den Auflagerungen ca. 500 Kolonien. Das Herzblut war steril.

Auf die hohe Bedeutung der die Aggressivität von Bazillen
neutralisierenden Eigenschaft der Leukozyten hat bereits K i k u c h i
nachdrücklich hingewiesen.

Das Hauptziel der Versuche war erreicht, indem nachge-
wiesen war, dafs alle Exsudate der serienweise geimpften Tiere
schon in relativ geringen Mengen aggressiv waren. Immerhin
zeigt auch hier das Exsudat 309 im Versuche mit Meerschwein-
chen 317 sowohl nach der Lebensdauer des Tieres als nach dem

Von Prof Dr. Oskar Bau. 319

Zellbefunde während des Lebens eine relativ schwächere Wirkung,
obwohl das Meerschweinchen 309 bereits dem Ende der Reihe
nahestand. Es dürfte sich daher auch bei dieser Versuchs-
anordnung empfehlen, mit dem gewonnenen Exsudate nicht unter
2,5 ccm herabzugehen.

Die Reihenimpfungen waren in der ausgesprochenen Absicht
unternommen worden, den Halbparasiten der Cholera dem para-
sitischen Zustande zu nähern. Bei der hohen Wichtigkeit, die
ein derartiger gelungener Versuch für viele Fragen haben würde,
ist eine genaue und strenge Kritik der Reihen unbedingt er-
forderlich, wobei auch auf die Literatur etwas genauer einge-
gangen sei.

Es gelang Hueppe 1 ) 1887, die Infektiosität der Cholera zu
beweisen, indem er durch Anwendung intraperitonealer Impfung
schliefslich mit sehr geringer Menge Bouillonkultur Meerschwein-
chen töten konnte. Er erreichte dies durch Serienimpfungen,
die bis zu 10 Tiere umfafste. Dabei war im Peritoneum der
Tiere bei erfolgreich fortgesetzten Impfungen stets rein seröses Ex-
sudat vorhanden. Ausführlichere Versuchsprotokolle werden dann
angegeben in den Arbeiten von Gruber und Wiener 2 ) 1892
und Voges 8 ) 1894.

Voges kommt nach Ausführung einer Serie von 10 Tieren
zu der Überzeugung, dafs es möglich sei, eine unbegrenzte Reihe
von Meerschweinchen durch Exsudatimpfung zu töten, »sobald
die injizierte Dosis gröfser ist als die Menge, welche durch die
bakteriziden Kräfte des Tieres vernichtet wird.< Dafs es auf die
Menge der Vibrionen allein sicher nicht ankommt, wird später
an Grube r sehen und eigenen Versuchen gezeigt werden. Leider
gibt die Tabelle von Voges nichts bestimmtes über die Be-
schaffenheit des Exsudates an. Es läfst sich aus dem mehrfach
angeführten Zusätze »reichliches Exsudate nur schliefsen, dafs
viele seiner Exsudate dünn, nicht eitrig waren. Weiter zeigen
seine Versuche, dafs man im Anfange einer Serie mehr Exsudat

1) Berliner klinische Wochenschrift* 1887, Nr. 9 u. 22.

2) Dieses Archiv, Bd. 15, 8. 241.

3; Zeitschrift f. Hygiene, Bd. 17, S. 195.

320 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

zur erfolgreichen Impfung notwendig hat als später. Denn 0,9 ccm
Exsudat des vierten Tieres reichten zur Weiterführung der Serie
nicht aus, wohl aber 2 ccm; später waren selbst 0,1 ccm genügend.
Die am weitesten ausgedehnten und sorgfältig wiedergegebenen
Reihen stellten Grub er und Wiener an, wobei sie zum ent-
gegengesetzten Resultat wie später Voges gelangten, nämlich,
dafs es unmöglich sei, »die Krankheit dauernd rein kontagiös,
durch Übertragung von Tier zu Tier, fortzupflanzen c ; »trotzdem
in dem übertragenen Krankheitsprodukte oft massenhafte Vibrionen
vorhanden sindc bleibt früher oder später der Erfolg der Über-
tragung aus.

Dieses Ergebnis, das für die Auffassung der Krankheits-
erregung von allergrölster Wichtigkeit ist und dem daher auch
die genannten Autoren grofse Bedeutung beilegen, konnte durch
die eigenen Kontagionsimpfungen durchaus bestätigt werden.
Zwar sehen die II. und III. Reihe, ebenso wie die von Voges,
auf den ersten Blick so aus, als ob sie eine beliebig lange Fort-
setzung zulassen würden, aber eine genauere, unten auszu-
führende Betrachtung erweckt bereits Bedenken. Dazu kommt
aber vor allem, dafs die I. Reihe tatsächlich beim sechsten Tiere
abgebrochen ist und dafs einige andere Reihen, genau so wie
einige von Grub er und Wiener, schon sehr bald aufhörten.

Meerschweinchen 236, 220 g. Erhält eine ältere Choleraagarkultur ip. Stirbt
nach 8—9 Std. und enthält ca. 6 ccm dickes, trübes Exsudat mit vielen kleinen,
polynukleären Leukozyten, ohne besonders starke Phagozytose, mit massen-
haften, oft spirillenartigen Vibrionen. Leber, Därme etc. Überall eitrig belegt,
mit dem gewöhnlichen Befunde.

Meerschweinchen 239. Erhält 0,9 ccm frisches Exsudat von 236 ip.
Lebt, ohne Krankheit gezeigt zu haben.

Um die Reihe nicht abbrechen zu lassen, erhält

Meerschweinchen 240, 230 g, 4 ccm des über Nacht kalt gestandenen
Exsudates 236 ip. Überlebt ohne Krankheit.

Meerschweinchen 243, (Gewicht?). Erhält 2 Ösen Choleraagarkaltur aus
236 ip. Stirbt in der Nacht and liefert ca. 9 ccm trübes, nicht sehr dickes
Exsudat mit vielen, polynukleären Leukozyten und Gran ulaphagozy tose.
Massenhaft Vibrionen, oft in Haufen, verhältnismässig wenige, lange Spirillen-
formen. Wenige Auflagerungen mit dem gewöhnlichen Befunde.

Meerschweinchen 245, (Gewicht?). Erhält 1,75 ccm frisches Exsudat von
243 ip. Lebt.

Von Prof. Dr. Oskar Bail 321

Meerschweinchen 253, 450 g. Erhält 1 Öse Cholera ip. Stirbt in der
Nacht In der Bauchhöhle findet sich kein eigentliches Exsudat, aber viele
eitrige Belage. Die mit Na Cl- Lösung (3 ccm) gewonnene Spülflüssigkeit ent-
halt viel Leukozyten mit starker Phagozytose, aber auch sahireichen, langen
Vibrionen, und wird dem

Meerschweinchen 254 eingespritzt. Das Tier war am Abend schwer krank,
am andern Tage erholt. Es erhielt jetzt eine ganze Agarkultur aus 253 ip.
Das in der Nacht gestorbene Tier lieferte ca. 16 ccm trübes, mit weichen
Eiterflocken erfülltes Exsudat und wies überall Eiterauflagerungen auf.
Vibrionen waren typisch, aber nicht zahlreich.

Meerschweinchen 255, 500 g. Erhalt 5 ccm frisches Exsudat von 254. Lebt

Meerschweinchen 256. Erhielt eine ganze Agarkultur aus 254 ip. Stirbt
in der Nacht mit dem Bilde schwerster Infektion, eiterfreier Bauchhöhle und
ca. 10 ccm Exsudat mit massenhaften Vibrionen.

Meerschweinchen 257. Erhalt 5 ccm frisches Exsudat von 256 ip. Stirbt
nach ca. 8 Std. und enthalt 2 ccm zellreiches Exsudat mit starker Phago-
zytose, massenhaft Vibrionen, viele lang und meist in Haufen. Viele Auf-
lagerungen.

Meerschweinchen 258. Erhält 2 ccm frisches Exsudat von 257 ip. Ist
am nächsten Tage deutlich krank, erholt sich dann aber sehr rasch.

Der unmittelbare Eindruck solcher Versuche erhellt am
besten aus der an den Rand des Protokolles von Nr. 258
niedergeschriebenen Bemerkung: »Der Bazillenmenge nach hätte
das Tier ganz gut sterben können, c Eine ganz ähnliche Be-
merkung machen Gruber und Wiener (a. a. 0. S. 487).

Für einen Erklärungsversuch dieser Erscheinungen sind offen-
bar drei Momente zu berücksichtigen: 1. Menge und Beschaffen-
heit der verimpften Vibrionen; 2. Menge und Beschaffenheit des
gleichzeitig eingeführten Exsudates ; 3. Besonderheit des jeweiligen
Versuchstieres.

Um alle diese Verhältnisse auch nur annähernd beurteilen
zu können, reichen die bisher angestellten Reihenimpfungen
weder der Zahl noch der Art der Ausführung nach aus. Es wäre
sehr leicht, in der Verschiedenheit des Gewichtes der Versuchs-
tiere z. B. direkte Fehler aufzufinden. Denn dafs ein Meer-
schweinchen von 200 und ein solches von 500 g ganz verschiedene
Tiere sind, ist längst bekannt. Dennoch genügen die Reihen,

^ 322 Untersuchungen Aber die Aggressivität des Choleravibrio.

um einige wichtige Erscheinungen hervortreten zu lassen. Es
zeigt sich vor allem, dafs die Serien dort abbrechen, wo das
vorhergehende Tier eitriges Exsudat liefert, wobei das Aufhören
der Infektiosität entweder ein unmittelbares ist, oder doch im
nächsten Tiere erfolgt. Auch hierin stimmen die Versuche
Grub er 8 mit den hier mitgeteilten überein, soweit sich das aus
den Protokollen ersehen läTst. So hören die Reihen 1, 2, 8, 8a,
10 mit dem Eitrigwerden des Exsudates auf, Reihe 11, wo das
Exsudat mit reichlichem Vibrionengehalt serös bleibt, geht weiter.
Für die Reihe 12 schuldigt Grub er selbst die zu geringe Impf-
menge als Grund des bevorstehenden Mifserfolges an, vielleicht
gilt das gleiche für die Reihen 9 und 13, wo das Exsudat zwar
serös bleibt, die Vibrionenzahl aber abnimmt. Nur die kurzen
Serien 3 und 7 1 ) von Gruber, wo ein seröses Exsudat mit viel
Vibrionen und doch negativem Impferfolg verzeichnet sind, lassen
sich schwer beurteilen.

Im ganzen aber stimmen die eigenen und die Reihen von
Grub er und Wiener darin überein, dafs das Auftreten von
Eiter bei einem Tiere der Serie den Impferfolg unsicher macht.
Derartige Exsudate können dabei, ebenfalls übereinstimmend mit
Grub er und Wiener, so grorse Mengen von Vibrionen ent-
halten, dafs das Nichteintreten von Krankheit und Tod geradezu
wie eine Schutzwirkung aussieht.

Die oben erwähnten Befunde, dafs Leukozyten die Aggressi-
vität einer Flüssigkeit beeinträchtigen oder aufheben, scheinen
für eine Erklärung geeignet zu sein. Dort, wo der Vibrio von
Leukozyten umgeben ist, verhält er sich bei Hemmung seiner
Aggressivität wie ein harmloser Saprophyt Das mit einem
solchen Exsudat geimpfte Tier ist daher fähig, Leukozyten in
seine Bauchhöhle treten zu lassen, die ihrerseits an der Beseiti-
gung des etwa neu entstehenden Aggressins sowie des gebildeten
Giftes arbeiten und überdies als Phagozyten die Vibrionen selbst
zerstören. Es bedarf nicht erst des Hinweises, dafs quantitative
Verhältnisse eine grofse Rolle spielen müssen; man braucht in

1) Vgl. dazu a. a. 0. 8. 286 n. 267.

Von Prot Dr. Oskar fiail. S23

dieser Hinsicht nur an die Erscheinung zu erinnern, dafs trotz
zahlreicher, nach Bouilloneinspritzung lebenskräftig in der Bauch-
höhle angesammelter Zellen durch entsprechende Steigerung der
Impfmenge erfolgreiche Infektion erzwungen werden kann 1 ). Auf
diese Weise ist es auch zu erklären, dafs nach Entfernung der
Zellen aus einem solchen Exsudate noch erfolgreiche Weiter-
impfung möglich ist, wobei freilich auch noch gröfsere Mengen
Flüssigkeit verwendet werden sollten. Der einzige bisher an-
gestellte Versuch, einen Unterschied in der Infektiosität eines
Exsudats bei Anwesenheit und nach Entfernung der Zellen auf-
zufinden (Nr. 282 und 283), gelang nicht, wohl deshalb, weil eben
die quantitativen Verhältnisse nicht berücksichtigt wurden. Da-
bei bleibt stets noch zu bedenken, dafs ein Vibrio, der in einer
eitrigen Bauchhöhle sich entwickelt, wo er nicht genügend Ag-
gressin bilden kann, auch an sich Veränderungen erfahren dürfte,
die ihn dann unfähig machen, bei der nächsten Übertragung
sofort wieder in relativ geringer Menge die nötige Aggressivität
aufzubringen. Da gleichzeitig das miteingespritzte Exsudat mit
sinkender Menge nicht mehr aggressiv ist, so wirkt es eher leuko-
zytenanlockend als -abstofsend, und das Ergebnis ist dasselbe
wie bei einem Tiere, das z. B. untertödliche Bazillenmengen mit
unwirksamem Aggressin erhalten hat und das unter rascher
Leukozyteneinwanderung in die Bauchhöhle am Leben bleibt.
Sobald also innerhalb einer Reihe ein Tier infolge seines Alters
oder seiner individuellen Disposition überhaupt mit Eiter in der
Bauchhöhle reagiert, ist das Resultat der ganzen Serie in Frage
gestellt, besonders dann, wenn durch Herabgehen mit der Impf-
menge sowohl die Zahl der Bazillen wie die Menge des mitver-
impften aggressiven Exsudats stetig verkleinert wird. Wird jetzt
von einem solchen Tiere aus das nächste z. B. mit der gleichen
Gabe infiziert, so erhält es noch weniger Aggressin, überdies

1) Dafs sich unter solchen Verhältnissen selbst ein für andere Tiere
wirksames Aggressin gewinnen l&fst, ist bereits an anderer Stelle (dieses
Archiv, Bd. 52, S. 366) mitgeteilt. Die daselbst ausgesprochene Vermutung,
dafs gerade unter solchen Verhältnissensich besonders wirksame Aggressin e ge-
winnen lassen könnten, bat sich nicht bestätigt.

Archiv für Hygiene. Bd. LDL 23

324 Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio.

Zellen, welche das etwa neu entstehende sofort bis zu einem
gewissen Grade paralysieren können, und schliefslich auch Vi-
brionen, die vielleicht gar nicht mehr so aggressiv sind, selbst
wenn ihre Zahl die gleiche oder selbst gröber wie früher wäre.

Damit ist aber auch die Frage, ob es bisher gelungen ist,
den Choleravibrio durch fortgesetzten Aufenthalt im Tierkörper
zum echten Parasiten zu machen, im wesentlich verneinenden
Sinne beantwortet. Gewifs wird es gelingen, eine ununterbrochene
Reihe erfolgreicher Tierimpfungen zu erzielen, wenn man stets
durch grobe Mengen Exsudats Verhältnisse wie die eben ge-
schilderten vermeidet, was gewifs möglich ist, besonders wenn
man z. B. die Zellen eines sonst ungeeignet erscheinenden Ex-
sudats vor der Injektion entfernt. Bei immer absinkender oder
dauernd gleichbleibender, aber kleiner Infektionsmenge läfst sich
aber nach den bisherigen Ergebnissen, in Übereinstimmung mit
Grub er und Wiener, ein schliefsliches Aufhören des Impf-
erfolges sicher vorhersagen. Das heilst aber, dafs es nicht ge-
lungen ist, den Choleravibrio zum echten Parasiten zu machen,
der schon in kleinster Zahl unter allen Umständen genug ag-
gressiv wäre, um im Tiere zu wachsen. Ob dies möglich wäre,
wenn man vorher den Vibrio lange Zeit als Halbparasit im Tier-
körper halten würde, ist nicht ohne den Versuch zu entscheiden,
der jedenfalls ganz unverhältnismäfsige Lebensopfer erfordern
würde.

Gleichwohl ist nicht zu verkennen, dafs eine gewisse An-
näherung an den parasitischen Zustand zu erreichen ist. Hierher
gehört auch die von Kikuchi bei entsprechenden Dysenterie-
versuchen ermittelte Beobachtung, dafs der Keimgehalt der Or-
gane und des Blutes von solchen Serientieren ein ganz auffällig
hoher ist, was trotz der Schwierigkeit, diesen Umstand richtig
zu ermitteln und zu beurteilen, fast überall in Erscheinung tritt.
Gerade der Befund, dafs bei Nr. 314 der III. Reihe der Keim-
gehalt einiger Organe ganz unvermittelt absinkt, läfst vermuten,
dafs bereits eine Störung der Serienimpfung bevorsteht.

Deutet schon die Neigung, den Körper zu durchwuchern,
die trotz der Unmöglichkeit zahlen mäfsiger Angaben deutlich

Von Prof. Dr. Oskar fcail. 325

hervortritt, auf eine gewisse Annäherung an den parasitischen
Zustand hin, so spricht im gleichen Sinne die Erscheinung, dafs
wirksame Immunsera gegen die tödliche Impfung mit Exsudat
von Serientieren nur noch mangelhaft schützen, d. h., dafs der
Vibrio eine gewisse Unempfindlichkeit gegen bakteriolytische Ein-
flüsse annimmt. Es handelt sich allerdings nur um eine relative
Widerstandskraft : nur die kleinen, wenn auch noch immer über-
schüssigen Serummengen der I. Reihe werden wirkungslos, nicht
die gröfseren, die bei der III. Reihe angewendet wurden. Das
ist auch deshalb bedeutungsvoll, weil damit festgestellt ist, dafs
zwischen der bei tierischen Typhusbakterien jederzeit zu findenden
Unempfindlichkeit gegen Immunserum und dem scheinbar ent-
gegengesetzten Verhalten der Choleravibrionen kein grundsätz-
licher Unterschied besteht. Es läfst sich mit grofser Wahrschein-
lichkeit aussagen, dafs der Typhusbazillus wegen seiner den
Parasiten sich nähernden Eigenschaften von vornherein durch
einfachen Aufenthalt im Tierkörper Unempfindlichkeit gegen die
Bakteriolyse annimmt, während das bei dem noch sehr sapro-
phytischen Choleravibrio erst durch längeres, künstlich erzwun-
genes Wachstum innerhalb eines lebenden Organismus erreicht
wird. Gleichwohl gehen alle diese Eigenschaften verloren, so-
bald die Vibrionen in ein Tier gelangen, das aus irgend welchen
Gründen reichlich Leukozyten an den Infektionsort zu bringen
imstande ist. Tiefgehend kann somit die Annäherung an den
parasitischen Zustand, dessen unmittelbare Aggressivität von vorn-
herein alle Zellen fernhält, nicht gewesen sein.

Mit dem ziemlich unbestimmten Begriffe der Virulenz ist
bei solchen Versuchen wenig anzufangen. Ein aus einer eitrigen
Bauchhöhle gezüchteter Choleravibrio hat, wie ebenfalls Grub er
und Wiener schon fanden, seine krankmachende Fähigkeit
nicht verloren; es könnte sich höchstens um minimale Unter-
schiede handeln.

Es liegen hier Probleme von grofser, allgemeiner Bedeutung
vor. Biologisch die Frage der Anzüchtung und eventuell Ver-
erbung nicht ganz neuer, aber gesteigerter Eigenschaften, für die
Pathologie und Hygiene die Frage, ob ein Krankheitserreger bei

23*

326 Untersuchungen ober die Aggressivität des Choleravibrio.

andauernder Kontagion seinen Infektionswert durch Übergang
vom Halbparasiten zum Parasiten steigern kann. Es liegt wenig
daran, wenn die mitgeteilten Versuche nach Art und Vollständig-
keit nicht viel zur Entscheidung beitragen: wenn nur gezeigt ist,
dafs durch Verwendung des Begriffes der Aggressivität eine neue
Behandlungsweise möglich ist. Deshalb sei noch kurz ein Reihen-
versuch mit Kaninchen (von ca. 1000 g) angeführt, der viel Über-
einstimmung mit den früheren zeigt.

Kaninchen 83 erhält 2 Agarkulturen Cholera ipl. Stirbt in der Nacht.
In der rechten Brusthöhle ca. 4, in der linken 2,5 ccm trübes, etwas dickes
Exsudat. Darin massenhaft Vibrionen, nur kurze Formen, ziemlich schlecht
gefärbt. Zahlreiche, polynukleäre Leukozyten mit starker Phagozytose, die
aber viel weniger Körnchen als normale Vibrionen betrifft. Kleinflockige Auf-
lagerungen auf Pleura und Lunge mit ungefähr dem gleichen Befunde.
Kulturen (1 Öse) lieferten aus Milz 2000, Leber 1800, Niere 82, Herzblut 2500
Kolonien.

Kaninchen 84 erhält 6 ccm (gemischtes) Exsudat von 83 ipl. Tod nach
9 Std. In der Brusthöhle nur ca. 1 ccm blutige Flüssigkeit, die fast nur
Vibrionen, meist in kleinen Haufen, enthält. In der Bauchhöhle ca. 12 ccm
trübes, etwas dickes Exsudat, mit sehr wenig Zellen und massenhaften
Vibrionen in derselben Anordnung wie in der Brusthöhle. Milz vergrößert.
Hämorrhagien am Magen und Netze.

Kaninchen 85 erhält 3 ccm frisches Exsudat von 84 ipl. Tod nach
12 Std. In der rechten Brusthöhle ca. 3 ccm trübes, dünnes Exsudat, das
fast keine Zellen, aber massenhaft Vibrionen, meist in Haufen, enthält
Keine Auflagerungen; in der linken Brusthöhle und der Bauchhöhle kein
Exsudat. Je 1 Öse Milz, Niere, Leber und Herzblut liefern 402, 89, 732 und
ca. 5300 Kolonien.

Kaninchen 86 erhält erst 0,05 ccm Serum »Pfeiffer« iv., nach 10 Minuten
1,5 ccm frisches Exsudat 85 ipl. Schon nach 4 Std. deutlich hinfällig, stirbt
das Tier nach 7 Std. In der rechten Brusthöhle ca. 5 ccm leicht blutiges
Exsudat mit ziemlich vielen polynukleären Zellen l ); diese zeigen Phagozytose,
die aber fast nur normal aussehende Vibrionen betrifft. Massenhaft Vibrionen,
fast alle in Haufen, mehrfach schlecht gefärbt, aber ohne Granulabildung.
Keine Auflagerungen. Links ca. 3 ccm weit weniger trübe Flüssigkeit mit
spärlichen Zellen, vielen, aber nicht so reichlichen Vibrionen wie im ander-
seitigen Exsudate. Milz vergröfsert. Ausstriche aus beiden Exsudaten der
Leber, Milz und dem Herzblute liefern dichte Beläge.

1) Die Unterscheidung in grofse und kleine polynukleäre Leukozyten
läfst sich beim Kaninchen weit weniger leicht als beim Meerschweinchen
durchführen.

Von Prof. Dr. Oskar Bail. 327

Kaninchen 87, geimpft wie 86, ohne Serum. Stirbt in der Nacht, 14 bis
20 Std. Rechts ca. 9 ccm trübes, sehr seilarmes Exsudat mit massenhaften
Vibrionen, die sämtlich in Häufchen liegen. Ziemlich viele carte Auflage-
rungen, die fast nur aus niedergeschlagenen Vibrionenhaufen bestehen. links
ca. 4 ccm Exsudat von gleicher Beschaffenheit wie rechts. Milz vergröfsert.
Von je 1 Öse Niere gehen 2 Kolonien, von Leber und Mils dicht gedrängte
Kolonien auf, Hersblut liefert einen zusammenhängenden Belag.

Kanloohen 88 erhält 1,5 ccm frisches Exsudat 87 + 0,01 ccm Serum
»Pfeiffer«, beides unmittelbar vor der Einspritzung gemischt, ipl. Ist am
nächsten Tage krank und wird nach 8 Tagen verblutet. Es finden sich nur
rechts ca. 8 ccm leicht blutiges Exsudat mit sahireichen Leukozyten, von
denen viele typische Granula enthalten. Reichliche, bereits ziemlich trockene
Auflagerungen mit dem gleichen Befunde. Kulturen aus Hers, Leber, Ex-
sudat und den Auflagerungen ergeben kein Wachstum.

Kaninchen 89, geimpft wie 88, ohne Serum. Stirbt erst nach 30 Std.
und enthält 16 ccm trübes Exsudat mit spärlichen, polynukleären Zellen und
massenhaften Vibrionen. Reichliche Auflagerungen, die aber wohl grössten-
teils aus Fibrin bestehen, sehr seilarm sind, hingegen viele Vibrionen ent-
halten ; in den Zellen starke, s. T. Graunlaphagosytose. Milz grofs. Kulturen
liefern mit 1 Öse : Exsudat od, Mils 0, Leber 1, Niere 0, Hers 128 Kolonien.

Kaninchen 92, 1400 g. Erhält 1,5 ccm Exsudat 89 ipl. Lebt, magert ab.
Dann Erholung.

Auch hier tritt das Aufhören der Infektiosität ganz auf*
fallend in Erscheinung; vielleicht ist der Abbruch, der sich
übrigens von Kaninchen 87 an bereits leise ankündigt, deshalb
so plötzlich erfolgt, weil das letzte Tier 92 etwas gröfser war.
Die Unwirksamkeit des Immunserums ist auf dem Gipfel der
Infektiosität bei Nr. 86 sehr deutlich, später verschwindet diese
Erscheinung bei Verwendung der doppelten Serummenge und
gleichzeitiger Einspritzung. Ein Aggressinversuch mit dem Ex-
sudate von Nr. 84 hatte Erfolg.

Kaninchen 90 erhält 8 ccm zentrif ugiertes, sterilisiertes Exsudat von 84
-f- 1 Öse Choleraagarkultur aus 84 ipl. Der Tod erfolgt nach ca. 82 Std. In
der rechten Brusthöhle ca. 5 ccm fast zellfreies Exsudat mit massenhaften,
in Häufchen wachsenden Vibrionen. Keine Auflagerungen. Links ca. 2 ccm
ähnlicher, aber vibrionenärmerer Flüssigkeit. Milz vergröfsert. Kulturen
mit 1 Öse aus beiden Exsudaten und dem Herzblut oo, aus Milz und Leber
ca. 3000 Kolonien.

Kanlnohen 91 erhält 1 Öse Choleraagarkultur aus 84 in 8 ccm NaCl ipl.
Stirbt am Abend des 4. Tages und enthält trübes, zellreiches Exsudat mit
starker Phagozytose, spärlichen, aber gut aussehenden Vibrionen. Reichliche
Auflagerungen, deren Zellen viele kleine Körnchen (keine typischen Granula)
enthalten. Kulturen aus Exsudat gehen üppig auf, sonst war das Tier
cholerafrei.

328 UnterBuchungen über die Aggressivität etc. Von Prof. Dr. Oskar Bail.

Im ganzen dürfte eine gewisse Übereinstimmung mit den
Meerschweinchenreihen nicht zu verkennen sein. Über eine
Erklärung der Abweichungen lälst sich kaum etwas sagen.

In Kürze sei noch auf den eigentümlichen Befund bei Meer-
schweinchen 306 hingewiesen, das gewaschene, tierische Vibrionen
eines Serientieres mit Immunserum zusammen erhalten hatte.
Die Serummenge war sehr grofs, dennoch tritt die geringere
Bakteriolyse deutlich hervor. Höchst auffallend aber ist, dafs
sich auch hier, ohne Anwendung von Aggressin und trotz schliess-
lich vollständiger Granulabildung, die Hyperleukozytose im Peri-
toneum so sehr verzögert. Solche Befunde, deren Studium fort-
gesetzt wird, erwecken die Hoffnung auf eine Möglichkeit der
Erklärung der Aggressivität.

Im Anfange dieses Jahres berichteten Pfeiffer und Fried-
berger über Versuche, bei denen es ihnen gelang, mit Hilfe
von normalem Serum verschiedener Tiere, das vorher mit Vi-
brionen behandelt war, nicht nur die Immunserumwirkung zu
unterdrücken, sondern auch mit untertödlichen Dosen Meer-
schweinchen zu töten. Die anscheinend übereinstimmende Wir-
kung dieser Sera mit Aggressinen besteht bei näherer Betrach-
tung nicht. Es sei nur darauf hingewiesen, dafs die Versuche
mit Meerschweinchenserum nicht gelangen und dafs die Bakterio-
lyse gehindert wurde, während die bisher vorwiegend benutzten
Aggressine gerade Meerschweinchenflüssigkeiten sind und die
Bakteriolyse selbst nicht hemmen. Pfeiffer und Friedberge r
schliefsen aus ihren Versuchen auf die Anwesenheit neuer, hem-
mender Stoffe im Serum. Eigene Versuche, die in Gemeinschaft
mit Dr. Kikuchi angestellt wurden, ergaben ein ganz anderes
Resultat bei Wiederholung der wichtigen Experimente der ge-
nannten Forscher. Nicht neue Stoffe haben Pfeiffer und Fried -
berger im Serum entdeckt, wohl aber die Existenz der Bak-
teriolysine (als Stoffe betrachtet) auf das tiefste erschüttert.

Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

I. Mitteilung.

Von

Dr. Antonio Rodella.

Vontand dea bakteriologischen Laboratorium* zu Lodl.
(Mit einer Tafel.)

Das Studium der Bakterien der menschlichen Mundhöhle
hat in den letzten Jahren aufserordentlich an Interesse und Be-
deutung gewonnen. Der alte Spruch : Prima fit in ore digestio,
konnte keine bessere Bestätigung und Illustrierung finden als
gerade durch die modernen bakteriologischen Untersuchungs-
ergebnisse. Es mutete sowohl die gärungserregende Eigenschaft
der Mundbakterien anerkannt als auch zugegeben werden dafs
sie nicht nur in der Mundhöhle sondern auch im Magen und
dem übrigen Darmtraktus Gärungsprozesse zu entwickeln ver-
mögen, da der Magensaft nur einen geringen Bruchteil derselben
abzutöten imstande ist, so dafs dieses Studium für die mensch-
liche Physiologie und Pathologie von immer gröfserer Wichtigkeit
wurde. Die Hygiene hat auch die Bedeutung dieser Forschungen
zu schätzen und die gewonnenen Resultate richtig auszunützen
gewufst.

Heutzutage kann man sagen, dafs die Mundhygiene für
jedes Alter und jeden Stand eine grobe Rolle spielt. Ich betone
»für jedes Altere, da, während früher viele Ärzte den Milch-
zähnen keine Aufmerksamkeit schenkten, weil sie ja den perma-
nenten Zähnen Platz machen müfsten, man jetzt weifs, dafs, wie

330 ^er anaörobe Mandbakterien und ihre Bedeutung.

Miller treffend bemerkt, »schlechte Zähne für das Allgemein-
befinden der Kinder ebenso schlechten Einfluls haben wie
schlechte permanente Zähne für das allgemeine Wohlbefinden
der Erwachsenen«:. Aufserdem hat ein schadhafter Zustand des
Milchgebisses einen recht nachteiligen Einflufs auf die Entwick-
lung des Kiefers und der permanenten Zähne. In dieser Be-
ziehung folgert Spiegelberg ganz richtig, dafs »wie der Grofs-
verbrauch eines Volkes an Seife sprichwörtlich einen Gradmesser
für die Kulturstufe und den Wohlstand abgeben soll, man in
gleichem Sinne die Sorgfalt in der Mund- und Zahnpflege ihrer
Kinder zum Maßstäbe für hohes Verständnis und Können in
einer Familie machen könnte c.

Was die Erwachsenen betrifft, so weifs jedermann, welche
Wohltat ein gut gepflegter und gesund erhaltener Mund sei. Der
Wunsch, die Mundhöhle sauber zu halten, wird beinahe zum
Instinkt. Die instinktiven Mafsregeln zur Erhaltung eines ge-
sunden Mundes sind aber nicht hinreichend. Es ist nötig, von
den Prozessen, die sich in der Mundhöhle abwickeln, und von
der Bedeutung mancher Gärungen etwas nähere Kenntnis zu
haben, um letztere in den richtigen Grenzen zu halten, damit
sie nicht pathologischer Natur werden. Empirische Kenntnisse
sind hier nicht genügend, es mufs vielmehr die Wissenschaft
mit ihrer Forschung tätig sein, die Resultate dieser Forschung
müssen geordnet und dann aus der systematischen Zusammen-
stellung aller die bestmöglichen Früchte zur Wohlfahrt der
Menschheit abgeleitet werden.

Zweck der vorliegenden Mitteilung 1 ) ist nun der, einen neuen
Weg für die Forschung zu zeigen, die bis jetzt von zu einseitigen
Mitteln Gebrauch gemacht hat. Gestützt auf die neuen Resultate
und mit näheren Kenntnissen über die unzähligen Feinde aus-
gerüstet, die wir in unserer Mundhöhle beherbergen, werden
wir leichter imstande sein, Mittel und Wege kennen zu lernen,
die zu benützen wären, um die notwendigen prophylaktischen

1) Die hier mitgeteilten Untersuchungen wurden im städtischen bakt.

mtnrinm *n Pari ha vnrmnnmmAn.

Laboratorium zu Padua vorgenommen,

Von Dr. Antonio Rodella. 331

Mafsnahmen im Interesse des Volkswohles durchzusetzen. Hierbei
spielen Schule, Gewerbebetrieb und Heer eine bedeutende Rolle,
und in allen hochzivilisierten Ländern sucht man bereits Fach-
leute für diese drei Kategorien anzustellen. Dieses Beispiel wird
auch von den anderen Ländern nachgeahmt werden, wenn dort
die Odontotherapie aus dem Empirismus, worin sie gröfstenteils
noch liegt, sich zur Wissenschaft aufgeschwungen haben wird.

Zur Erlangung einer exakten Kenntnis von den physiologisch-
pathologischen Gärungsprozessen des Darmtraktus und der Mund-
höhle sind neue chemisch-physiologische Studien nötig, vor allem
aber eine systematische Forschung der lebenden Gärungserreger
unter Anwendung einer ganz anderen Technik, als man bis
jetzt eingeschlagen hat. Wir kommen somit auf die gleiche An-
schauung zurück, die wir vor zwei Jahren in der Zeitschrift für
Hygiene in der Sache geäussert haben. Jede Bestrebung, die der
Bewegung für das neue Verfahren Vorschub leistet, scheint mir
annehmenswert, mögen auch die gewonnenen Resultate als dürftig
und unzulänglich bezeichnet werden können. Aus diesem Grunde
erlaube ich mir, auch meine Befunde über die Mundanaörobien
mitzuteilen, trotzdem sie unvollkommen sind.

Ich habe meine Untersuchungen auf das Gebiet der Anae-
robien beschränkt, um nicht in den Fehler zu verfallen, den
Miller offen zugestanden, die späteren Forscher aber dessenun-
geachtet nicht vermieden haben: »Ich selber sowohl als andere,
die sich mit diesem Gegenstand beschäftigt, haben den Fehler
begangen, dafs ich den unausführbaren Versuch gemacht habe,
sämtliche isolierten Bakterienarten einer Prüfung zu unterziehen,
statt mich auf einzelne Arten zu beschränken und dieselben
möglichst gründlich nach allen Richtungen hin zu prüfen. Man
erzielte meistens nur allgemeine Resultate und die Arbeiten ver-
schiedener Forscher deckten sich anstatt sich zu ergänzen. Es
besteht infolgedessen eine Verwirrung in unseren Anschauungen
über die Bakterien der Mundhöhle, welche nur mit einem enormen
Arbeitsaufwand aufgehellt werden kann.c

Ich habe bereits an anderem Orte angegeben, bei welcher
Gelegenheit ich mich der Anaärobenkulturen bedient habe, in

332 Über anaärobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

der Hoffnung, diejenigen Mundbakterien zii isolieren, welche bis
jetzt als unzüchtbar bezeichnet wurden. Die Notwendigkeit,
bei den bakteriologischen Untersuchungen der Mundhöhle zur
Anaörobiose Zuflucht zu nehmen, wurde übrigens schon 1892
von Miller (wahrscheinlich nur aus Gründen der Methodik) an-
erkannt. Er sagte in der Tat: iDie bei der Züchtung von streng
anaerobiotischen Bakterien angewandten Verfahren (die Anlagen
von Kulturen bei Luftabschlufs, in einer Atmosphäre von Was-
serstoff etc.) müssen selbstverständlich auch bei den Mundunter-
suchungen zur Anwendung kommen, obgleich man im Munde
a priori eher fakultativ anaörobiotische Mikroorganismen ver-
muten dürfte als streng anaärobiotische : eine Vermutung, welche
mit den Versuchsergebnissen übereinzustimmen scheint, c Diese
aphoristischen Vermutungen finden nicht nur in den Unter-
suchungen Millers eine Bestätigung sondern auch in den vielen
Studien, die vom Jahre 1892 bis zu unseren Tagen gemacht
wurden: ein weiterer Beweis, welche Kraft eine vorausgefafste
Meinung auch auf Resultate experimenteller Untersuchungen
ausüben kann. Die menschliche und experimentelle Pathologie
hätte indes die Forscher auf den richtigen Pfad führen sollen.
Schon im Jahre 1886 erwähnte Eonrad einen Fall von
Tod durch Tetanus, verursacht durch Extraktion zweier Zähne.
Derartige Fälle haben sich in der Literatur des Gegenstandes
in grofser Anzahl angesammelt. Auch in jüngster Zeit hat
Dr. Bandisch einen Tetanusfall erwähnt, welcher nach seinem
Dafürhalten der Wirkung eines unsauberen Zahnstochers, mit
dem der Betreffende in einem Zahn herumzubohren pflegte, zu-
zuschreiben war. Aber auch abgesehen von solchen Fällen, bei
denen ein infiziertes Instrument oder sonst ein Gegenstand als
Ursache angenommen werden kann, registriert die Pathologie
auch Fälle, die weder Wunden noch äufserem Einflufs zuzu-
schreiben sind. So erwähnte Mars hall einen Fall von
emphysematöser Gangräne, die, von einem abszedierten kariösen
untern Weisheitszahn ausgehend, nach einem schweren, mit
profusem Eiter, Schwellung und Abstofsung von grofsen nekro-
tischen Massen verbundenen Verlaufe in 12 Tagen tödlich endete.

Von Dr. Antonio Rodella. 333

Obwohl bei diesem Fall keine Erwähnung vom ätiologischen
Agens gemacht wird, noch weniger angegeben, ob ein obligat
Anaerobium in Frage stand, darf man doch dank der in den
letzten Jahren gemachten Untersuchungen über emphysematöse
Gangräne annehmen, dals die Ursache der Gangräne unter den
Anaerobien zu suchen war. Noch beweisender ist der von Frosch
geschilderte Fall, bei welchem genaue bakteriologische Unter-
suchungen angestellt wurden, welche zur Entdeckung eines
anaärobiotischen Organismus führten. Frosch fand bei der
Obduktion eines an Diphtherie gestorbenen Kindes einen Gas-
abszefs, welcher auch nach der Meinung des Untersuchers den
Anaärobien zuzuschreiben war.

Die Tierversuche ergaben auf diesem Gebiete sehr interessante
Resultate. So schreibt Miller: > Während meiner Untersuchungen
über die Bakterien der gangränösen Zahnpulpa fand ich ein
Bakterium, das, Mäusen subkutan beigebracht, sich durch das
Hervorrufen eines gangränösen Prozesses auszeichnete. Schon
24 Stunden nach der Infektion war eine erbsengrofse Geschwulst
vorhanden, die bei Eröffnung mit zahlreichen Gasblasen ver-
mengten Eiter von höchst üblem Geruch entleerte. Die In-
fektion liefs sich durch geringe Eitermenge von einem Tier auf
ein anderes durch mehrere Generationen umimpfen; den aus
solchen Geschwüren gezüchteten Bakterien fehlte die charakte-
ristische Wirkung ganz, so dafs ich daraus schliefsen mufste, dafs
die spezifischen Bakterien sich nicht züchten lassen. Dafs man
bei fortgesetztem Forschen andere dieser Gruppe angehörige
Organismen entdecken wird, bezweifle ich nicht.«

Obwohl von verschiedenen Autoren angenommen wird, dafs
auch einige gasbildende Aerobien den Abszefs und die emphy-
sematöse Gangräne hervorrufen können, darf man doch, gestützt
auf die neueren Mitteilungen, dafür halten, dafs zur Entstehung
dieser Prozesse in der Regel Anaerobien nötig sind. Da-
gegen ist man nicht einig, welche Arten von Anaörobien diese
Erkrankungen verursachen. Ist der Bacillus putrificus Bienstock,
der, wie wir später dartun werden, ein steter Bewohner der gan-
gränösen Zahnpulpa ist, auch imstande, einen Gasabszefs hervor-

334 Über anagrobe Mahdbakterien und ihre Bedeutung.

zurufen? Diese Frage mufs ich bejahen. Ich halte es von
Interesse, den folgenden von mir untersuchten Fall mitzuteilen.

Bei Untersuchung eines Eiters, welcher aus einem Gas-
abszefs stammte, fand ich neben Bacterium Coli und Kokken
auch zwei Anaörobien. Das eine war Gelatine nicht verflüssigend,
während das andere nicht nur die Gelatine verflüssigte sondern
auch imstande war, alle Eiweifsarten (Kasein, SerumeiweiCs,
Hühuereiweils) zu zersetzen, und zwar unter Bildung eines üblen
Geruches. Ich sprach schon damals die Vermutung aus, data
von den vielen gefundenen Mikroorganismen dieser letzte Bazillus
derjenige . gewesen sei, welcher die Gasbildung im Abszefs her*
vorgerufen hat. Allein ich konnte damals bei kleinen Tieren
weder durch Einimpfung des Eiters noch durch Einimpfung der
einzelnen Mikroorganismen in Reinkulturen einen Gasabszefs
verursachen. In dieser Beziehung versagte auch der zuletzt er-
wähnte Bazillus vollständig. Mit grofser Verwunderung mutete
ich dann von Herrn Dr. Fritz Passini-Wien vernehmen, dafs
dieser Bazillus, den er sich von mir erbeten hatte, bei einem
Meerschweinchen einen Gasabszefs hervorgerufen habe. Ich er-
suchte den Genannten, die Versuche fortzusetzen und mir dar-
über zu berichten. Er hatte die Freundlichkeit , . mir nach Ver-
lauf einiger Zeit mitzuteilen, dafs keine weiteren Gasabszesse
mehr zu erzielen gewesen seien. Er schrieb mir aber ferner,
dafs das geimpfte Meerschweinchen ein ganz junges Tier ge-
wesen. Wie man auch aus den neueren Studien von Achalme
ersehen kann, sind die abweichenden Resultate, die mit diesem
Bazillus erhalten wurden, auf das verschiedene Alter zurückzu-
führen, indem jüngere Tiere das antitriptische Vermögen in ge-
ringerem Grade besitzen als ältere Individuen. Dafs es sich bei
diesem Bazillus um den fäulniserregenden Buttersäurebazillus
(Bacillus putrificus Bienstock) handelte, wurde durch die im
Hygiene-Institut Wien von Passini angestellten Untersuchungen
aufser Zweifel gesetzt.

Übrigens ist der Bacillus putrificus unter den Mundanaörobien
nicht der einzige Vertreter der Gruppe der Buttersäurebazillen,
da auch der anaerobe Bacillus butyricus immobilis liquefaciens

Von Dr. Antonio Rodella. 335

sich vorfindet. Es ist also sehr wahrscheinlich, dafs auch die
pathogenen Varietäten des letzteren, der gasphlegmone Bazillus
und der Rauschbrandbazillus, nicht besonders selten vorhanden
sind. Auf alle Fälle ist festgestellt worden, dafs in der kranken
Zahnpulpa unter anderen Anaörobienarten Vertreter der Gruppe
der anaeroben Buttersäurebazillen anzutreffen sind.

Im Jahre 1892 schrieb Miller: »Eine Bearbeitung und
Klassifikation der Bakterien der kranken Zahnpulpa liegt bis
jetzt nicht vor.c Dieses Wort hat auch heute noch Geltung und
man kann noch hinzufügen, dafs die bis jetzt angewandte Technik
keine besseren Resultate gegen damals erzielt hat. Durch die-
selbe waren sowohl Miller wie die späteren Forscher zu einem
Schlufs gekommen, den die folgenden Worte Millers wieder-
geben: »Es kann daher leicht vorkommen, dafs eine verfaulte
Pulpa kein einziges entwicklungsfähiges Bakterium mehr enthält.
Bei 17 nekrotischen Zahnpulpen, die ich daraufhin untersuchte,
fand ich 7 ohne lebende Bakterien. c Miller wiederholte dann
seine Versuche und bei 18 Pulpen fand er wieder 3, bei denen
ein Wachstum auf Agar-agar nicht zu erzielen war; er erklärte
sich diese negativen Resultate damit, dafs (die geschlossene Pulpa-
höhle vorausgesetzt) der ganze Vorrat von Nährmaterial in der
Pulpa bald verbraucht werde und die Bakterien dann wegen
Mangels an Nahrung zugrunde gehen oder durch ihre eigenen
Produkte abgetötet werden. In welchen Fällen diese Ursache
zugetroffen hat, will ich dahingestellt lassen. Ich habe aber,
wie schon (in einer vorläufigen Mitteilung) erwähnt, an kranken
und verfaulten Pulpen regelmäfsig Anaörobien gefunden,
und dafs Miller mit seiner Annahme nicht auf der richtigen
Fährte sei, hätte er aus folgenden, von ihm selbst gemachten
Erwägungen ableiten können: »Dafs die Zahnpulpa die Bedin-
gungen für Sporenbildung in bester Weise darbietet, wurde schon
betont, und da die Sporen eine grofse Widerstandsfähigkeit be-
sitzen, so ist durch diesen Umstand die antiseptische Behandlung
von Wurzelkanälen möglicherweise erheblich erschwert, c Miller
liefs sich, indem er diese Wahrheit anerkannte, mehr von theo-
retischer Voraussetzung über Sporenbildung und vom Umstände

336 Über anaBrobe Mundbakterien Und ihre Bedeutung.

der schweren Autisepsis der Wurzelkanäle leiten, ohne dagegen
angeben zu können, welches die Sporen seien, die er vermutete.
Durch meine Untersuchungen ist jetzt dargetan worden, dafs
diese Sporen größtenteils aus Anaerobien der Buttersäure-
bazillengruppe bestehen. Die Widerstandskraft einiger dieser
Sporen ist bekanntlich sehr grofs, ein Umstand, welcher mich
zur Annahme veranlassen möchte, dafs auch bei den Unter-
suchungen von Miller die Pulpen nicht steril waren. Miller
hat aber bei seinen Untersuchungen eine interessante Beobach-
tung gemacht, nämlich dafs die von ihm studierten Pulpen
schwarz und übelriechend waren. Wie ich schon andern-
orts bemerkt habe, ist diese Schwarzfärbung hauptsächlich dem
fäulniserregenden Buttersäurebazillus zuzuschreiben, obwohl ich
damit nicht ausgeschlossen haben wollte, dafs auch andere Bak-
terien, wie z. B. der Bacillus fuscans, sowie andere Aerobien
und Anaörobien dabei beteiligt sein können. Der üble Geruch
der Pulpen kann nicht befremden, wenn man erwägt, dafs es
sich hier um einen wahren Fäulnisprozefs handelt, bei welchem
bekanntlich übelriechende, meist gasige Produkte, Ammoniak,
Schwefelwasserstoff, Methan etc., entstehen. Die Zahnpulpa be-
steht vorwiegend aus Eiweifssubstanzen, die exquisit fäulnisfähig
sind. Bei der Fäulnis dieser Substanzen sind, wie schon von
Pasteur angenommen und dann von vielen Forschern dargetan
wurde, notwendigerweise Anaerobien tätig. Dieselben entfalten
ihre Wirkung sowohl bei Luftabschlufs wie auch bei Luftzutritt.
In letzterem Falle ist die Symbiose mit Aerobienbakterien nötig.
Im Grunde genommen sind in beiden Fällen die sich bildenden
Produkte ungefähr gleich. Wenn aber eine Zahnpulpa im ge-
schlossenen Wurzelkanal fault, so bildet sich eine grofse Menge
übelriechenden Gases, so dafs, wenn die Pulpahöhle geöffnet wird,
die ganze Umgebung, ja sogar das ganze Zimmer mit Gestank
erfüllt wird. Wenn dagegen die Zahnpulpa unter Luftzutritt
zum Faulen kommt, dann wird der Geruch nur ein sehr geringer
sein, obwohl die Bakterien, welche sich bei diesem Prozefs be-
teiligt haben, fast die gleichen sind und die von ihnen hervor-
gerufenen Veränderungen sich kaum unterscheiden lassen. Im

Von Dr. Antonio Kodella. 337

ersteren Falle bilden die Anaörobien, welche fast in Reinkultur
sind, reichlichere und stärkere Fäulnisprodukte. Im zweiten
Falle werden die von den Anaerobien gebildeten Produkte vom
Luftsauerstoff weiter zerlegt und oxydiert und machen sich des-
halb weniger bemerkbar. In diesem zweiten Falle, wo die Pulpa-
höhle weit geöffnet ist, wird vom Munde aus immer neues Ma-
terial zugeführt. Es bilden sich dann Gärungsprozesse verschiedener
Art, nicht nur auf Kosten der Zahnpulpa, sondern auch der
Speisereste, welche sozusagen die Pulpahöhle obstruieren. Wer-
den diese in Gärung sich befindenden Speisereste auf Anaerobien
untersucht, so findet man deren in grofser Menge. Aus diesem
Umstände kann man auch schliefen, welch schlechten Einflufs
diese faulenden Zahnpulpen für die Physiologie der Verdauung
haben. Es sind Millionen von kontinuierlich in den Magen ge-
langenden Mikroorganismen, welche imstande sind, abnorme Gä-
rungsprozesse hervorzurufen.

Die Autoren, welche sich mit den Gärungserregern des
Mundes am eingehendsten befafst haben, sind Vignal und
Miller. Diese haben die Wirkung von verschiedenen Arten
sowohl auf Kohlehydrate wie auf Eiweifssubstanzen untersucht.
Bekanntlich hat Miller nachgewiesen, dafs in der Mundhöhle
mehrere Bakterien vorkommen, welche die Fähigkeit besitzen,
aus Zucker Milchsäure zu bilden. Früher glaubte man, dafs es
ein bestimmtes Bakterium gebe, das allein die Milchsäuregärung
bewirken könne. Die von Miller betreffs der Milchsäure be-
obachtete Tatsache wurde nachher nicht nur für diese Gärung
sondern auch für verschiedene andere als richtig erwiesen; so
z. B. liefert uns die Buttersäuregärung das interessante Beispiel,
dafs Mikroorganismen, welche Buttersäure als Hauptprodukt
bilden sollten, manchmal dagegen fast ausschliefslich Milchsäure
liefern. Was die Buttersäuregärung anbelangt, so findet man ge-
wöhnlich in den meisten Lehrbüchern der Zahnheilkunde, dafs
im Munde die Buttersäure sich sehr regelmässig bilde. Miller
behauptet dagegen, dafs im Munde weder das spezifische Bak-
terium der Buttersäuregärung existiere, noch Spuren von dieser
Säure daselbst nachgewiesen werden könnten. Der anaerobe

338 Über anaörobe Mandbakterien und ihre Bedeutung.

Bacillus butyricus wurde trotzdem einmal von Rasmussen in .
der Mundhöhle nachgewiesen. Da dieser Befund aber später von
keinem anderen Autor bestätigt wurde, so nahm man an, dafs
im Munde keine Anaerobien vorhanden wären, und dies haupt-
sächlich aus der Erwägung, dafs der dort zur Wirkung kommende
Sauerstoff die Entwicklung anaerober Bazillen verhindert hätte.
Auch nachdem durch einige Forscher der Beweis erbracht wor-
den war, dafs Anaerobien in Symbiose mit Aerobien bei Luft-
zutritt wachsen können, machte die Frage keine Fortschritte.
Ob andere Arten der doch ziemlich verbreiteten buttersäure-
bildenden Bakterien, unter denen bekanntlich auch Aerobien
beschrieben wurden, in der Mundhöhle vorkommen und dort
ihre Gärwirkung entfalten, ist unbekannt. Die Möglichkeit ist
durchaus nicht auszuschliefsen.

Zu der von uns beobachteten Tatsache, dafs sich im Munde
regelmäßig Anaerobien befinden, steht auch ein Experiment im
Gegensatz, das von Miller mit Hilfe des Herrn Prof. Kossei
gemacht wurde. Miller wollte damit keineswegs die Frage der
Möglichkeit des Vorhandenseins anaerober Bakterien lösen, da
er ja schon für sicher annahm, dafs solche sich nicht vorfänden,
sondern die andere Frage beantworten: »Braucht das Bakterium
bei seinen eigentlichen Lebensvorgängen Sauerstoff? Würde es
in einem nicht gärungsfähigen Medium Spuren von Sauerstoff
nötig haben? Der Versuch wurde folgendermafsen angestellt:
»Ein sehr langhalsiges Glaskölbchen, welches am unteren Teile
des Halses ein Thermometer trug, wurde mit 100 ccm einer
infizierten Fleischextrakt- Zucker-Lösung gefüllt, der Hals in einen
rechten Winkel umgebogen und mittels eines sehr dickwandigen
Gummischlauches mit der Luftpumpe in Verbindung gesetzt.
Um den Schlauch sicher luftdicht zu machen, wurde er mit Lack
überzogen. Es wurde jetzt so viel Luft aus dem Kölbchen ge-
saugt, dafs die Lösung bei etwa 37,5° C. kochte. Das
Kochen wurde eine halbe Stunde fortgesetzt, wonach der Schlauch
zugequetscht, unter Quecksilber von der Luftpumpe getrennt
und der Apparat unter normaler Temperatur in den Brutofen
gestellt wurde.

Von Dr. Antonio ttodella. 339

Nach 48 Stunden war keine Spur von Säurebildung noch
von Trübung wahrzunehmen, während die Kontrollösung schon
nach 8 Stunden in heftige Gärung geriet.

Es wurde nun Luftzutritt gestattet, aber trotzdem fand selbst
nach ferneren 48 Stunden keine Entwicklung von Säure statt.
Die Bakterien waren zugrunde gegangen. Leider läfst sich die
Frage hiedurch doch noch nicht entscheiden, da es möglich,
obwohl nicht wahrscheinlich ist, dafs die Bakterien durch die
Koch Wirkung getötet wurden, c

So befremdend dieses Resultat auch sein mag, für das man
keine plausible Erklärung finden kann, so ist heutzutage von
vielen Forschern, wie Nencki, Lackewicz, Beijerinck und
Kabrehl, mit gröfster Sicherheit nachgewiesen worden, dafs
Anaerobien auch dort sich entwickeln können, wo der Sauerstoff
auch mit den empfindlichsten Reagenzien nicht nachgewiesen
werden kann, wo z. B. Ferroferrecyanüre und reduziertes Hämo-
globin unverändert bleibt, wo reduziertes Indigoblau und Methylen-
blau (sogar bei Anwesenheit des Reduktionsmittels in Überschuß)
keine Spur von Reoxydation erkennen läfst, wo endlich obligat
aerobe Mikroben nach wenig Zellteilungen zugrunde gehen.
Somit ist die von Miller aufgeworfene Frage beantwortet, da
im Munde immer Anaörobien vorhanden sind und dieselben auch
ohne Spur von Sauerstoff leben können.

Die Mehrzahl der Mundbakterien, sowohl Aörobien wie Anaö-
robien, vergären die Kohlehydrate; sie sind nicht nur die Ur-
sache der Milchsäure- und Buttersäuregärung, sondern haben
auch eine invertierende und diastatische Wirkung. Diese Eigen-
schaften sind den Aörobien und Anaörobien gemeinsam; eine
beinahe ausschliefsliche Wirkung üben aber die letzteren
hinsichtlich der Zersetzung der Ei weifssubs tanzen aus. Hier ist
das eigentliche Arbeitsfeld dieser Lebewesen, welche also als die
wichtigsten Mikroorganismen derPulpenerkrankungen
anzusehen sind. Während die Aärobienbakterien allein nicht
imstande wären, eine vollständige Vernichtung der Zahnpulpa
hervorzurufen, tun die Anaerobienbakterien nicht nur das, sondern
zerstören auch die übrigen Komponenten der Zähne.

Archiv für Hygiene. Bd. LIJ1. 24

340 Über anaörobe Mundbakterien and ihre Bedeutung.

Welches sind nun die wichtigsten Anaörobien, welche diesen
Zerstörungsprozefs herbeiführen? Es sind Fäulnisanaörobien,
die von Achalme unter die gemeinschaftliche Bezeichnung von
Anaerobien triptobutyrici gefafst worden sind. Die Fäulnis
wurde übrigens schon im Jahre 1756 von Pf äff als Ursache
der Zahnkaries angesehen, i Speisereste^ erklärt er, i welche
zwischen den Zähnen in Fäulnis übergehen, geben zur Fäulnis
der Zähne Veranlassung, c Auch heutzutage wird die Zahnkaries
von vielen Zahnfäule genannt und als ein wahrer Fäulnisprozefs
betrachtet.

Die Gegner dieser Theorie und hauptsächlich Miller glauben
dieselbe mit der Einwendung zu widerlegen, dafs ein Zahn
aufserhalb der Mundhöhle nie faule. Dies ist aber nicht der
Fall, da unter entsprechenden Bedingungen Zähne auch aufser-
halb des Mundes verfaulen, wie wir im folgenden sehen werden.

Die anaeroben Mundbakterien.

Bevor ich von den Wirkungen, welche die anagroben Bak-
terien sowohl auf die Zähne wie auch auf die Bestandteile der
Mundhöhle ausüben, spreche, halte ich es für zweckmäfsig, über
einige der am häufigsten im Munde vorkommenden anaöroben
Arten zu berichten, wie auch die Technik anzuführen, die ich
bei meinen Untersuchungen zur Anwendung gebracht habe.

a) Der Mund wurde mit 20 ccm sterilen Wassers gespült.
Von dieser Ausspülung wurden 4 ccm in Grub ersehe Röhr-
chen getan, die eine 2proz. Lösung von kohlensaurem Kalk und
einige Eiereiweifswürfel (im Autoklav sterilisiert!) enthielten. —
Nach dieser Methode wurden zehn Versuche gemacht.

b) Mit einem Platinspatel wurde von in ziemlich gutem
Zustande befindlichen Zähnen und aus den Zwischenräumen
derselben möglichst viel Material abgekratzt und in alkalische
(5proz. Natronlauge) Lösung gut verteilt. Von dieser Flüssigkeit
wurden sodann 5 ccm in 6 ruber sehe Röhrchen mit sterili-
siertem Eiereiweifs gebracht. Die Zahl der Versuche belief sich
auch hier auf zehn.

Von Dr. Antonio ftodella. 341

c) Anstatt der alkalischen Natronlaugelösung wurde in zehn
weiteren Versuchen eine Mischung von 2°/ kohlensaurem Kalk,
2% Natronlauge und 1 °/ Traubenzucker und an Stelle des Eier-
eiweifses Rinderblutserum verwendet.

Bei diesen Versuchen wurde häufig, und zwar bei den letz-
teren schon nach 4— 6 stündigem Aufenthalt bei 37°, deutliche
Gasbildung wahrgenommen, die manchmal 6 — 8 Tage andauerte.

Beim Schütteln des Röhrchens entwickelten sich auch, nach
4— 6 monatlichem Aufenthalt im Brutschrank, aus dem Boden
zahlreiche kleine Luftblasen. Diese Erscheinung liefs sich indes
nicht in allen Fällen beobachten.

Die Veränderungen, welche das Eiereiweifs erlitten hatte,
waren sehr verschieden. Einigemal hatte das Eiereiweifs nach
mehrwöchigem Stehen im Brutschrank ein gallertartiges Aussehen.
Dasselbe Röhrchen, noch weitere 2 — 3 Monate bei 22° aufbe-
wahrt, zeigte das Eiweifs vollständig verflüssigt. Das Gerinnsel
war von weifsgelber Farbe und wies spärlichen staubigen Boden-
satz auf. In den Fällen, wo sich der Bacillus putrificus sehr
üppig entwickelt hatte, war dieser Bodensatz schön schwarz.

Noch verschiedenartiger war das Aussehen der Röhrchen
mit Rinderblutserum, das in den Grub er sehen Röhrchen sowohl
in Würfeln als in toto zur Gerinnung kam. Interessant war die
Tatsache, dafs in zwei Fällen die kleinen Würfel von Blutserum,
nachdem die Röhrchen 4 Wochen lang im Brutschrank aufbe-
wahrt worden waren, an verschiedenen Stellen kleine schwarze
Punkte zeigten, die mit der Zeit stecknadelkopfgroß wurden. In
der Folge trat die Verflüssigung des Serums ein, die in keinem
Falle ausblieb.

Was den Geruch der Kulturen betrifft, so war derselbe
nicht immer ein schlechter. Bemerkenswert scheint es mir, dals
die Kulturen, bei welchen das Eiereiweifs bzw. das Serum voll-
ständig verflüssigt war und wie eine klare Flüssigkeit aussah,
wider mein Erwarten einen schwachen süfsen Geruch aufwiesen,
der gar nichts Widerwärtiges hatte. Es wickeln sich wahrschein-
lich auch hier in vitro dieselben Prozesse ab wie in Abfalls-

24»

342 Über anagrobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

gruben usw. Im allgemeinen waren aber meine Kulturen mit
sehr üblem Geruch behaftet.

Die Kulturen in den Grub ersehen Röhrchen wurden, wie
bereits erwähnt, nach einem Zeitraum von 1 — 12 Monaten geöffnet;
die meisten wurden jedoch im zweiten oder dritten Monat unter-
sucht. Vor der Verpflanzung in andere anaerobische Substrate
stellte ich mikroskopische Präparate her, die regelmäßig das Vor-
handensein von dicken, plumpen Bazillen, von Formen mit zen-
tralen Sporen oder solchen in Trommelschlägergestalt, von iso-
lierten Sporen in grofser Menge, von einigen nicht genau gekenn-
zeichneten bazillären Formen und überdies von isolierten, zu
zweien oder kettenförmig angeordneten Kokken dartaten. Bis-
weilen zeigten sich ferner in geradezu bedeutender Anzahl dünne,
schlanke Bazillen mit zugespitztem Ende und einer gewissen Ver-
dickung in der Mitte. Auch hinsichtlich ihres Verhaltens gegen
die Anilinfarben riefen diese Bazillen den Eindruck der Ähnlich-
keit mit den unter dem Namen »bacilles fusiformesc bekannten
hervor. Wir werden später darauf zurückkommen.

Mittels der Pasteurisierung des Materials konnte ich jedes-
mal die Bazillen der Buttersäuregruppe isolieren. Ich will hier
vor allem die Arten beschreiben, die für unsere Untersuchung
von gröfserem Interesse sind.

Bacillus putrificus (Bienstock). Dieser Bazillus findet
sich in Unmenge im schlecht gereinigten Munde, in den Zwischen-
räumen der mit Zahnstein überzogenen Zähne sowie in den Speise-
resten, die sich in den Winkeln der Mundhöhle festsetzen. Bei
der Pulpitis, insbesondere der chronischen, scheint er gleichsam
allein das Feld zu beherrschen, das er mit unzähligen kleinen
runden Sporen bedeckt. Bei der einfachen Karies findet er sich
ebenfalls verhältnismäfsig reichlich vor und erreicht hier seine
längste, eine beinahe fadenförmige Gestalt, während sich bei der
chronischen Karies mit tiefgehender Gewebezerstörung auch die
kleinen Formen ziemlich häufig beobachten lassen. Plumpe,
keulenartige Formen (» Trommelschlägerformen c) oder solche von
Clostridium dagegen zeigen sich in Menge in Präparaten von
chronischer Pulpitis, die aber nicht zu weit zurückdatieren darf.

Von Dr. Antonio Rodella. 343

Die Vielgestaltigkeit dieses Mikroorganismus veranlagt uns
zu einer etwas eingehenderen Schilderung desselben, um ihn in
den verschiedenen Erscheinungen, unter denen er sich in den
histologischen Präparaten darbietet, erkennen zu können.

Der Bacillus putrificus ist meistenteils ein Stäbchen von
5—8 (x Länge, 0,6 — 0,8 \i Breite und abgerundeten Enden, der
sich mit den gewöhnlichen Anilinfarben und der Gram sehen
Methode gut färbt. Er hat eine sehr starke Neigung zur Sporen-
bildung, doch sind seine Sporen nicht immer einander gleich,
noch auch in jedem Fall mit Rücksicht auf den Bazillus gleich-
mäßig angeordnet. Bisweilen findet sich die Spore an einem
Ende des Bazillus in einer Weise, die ihm ein dem Tetanus-
bazillus ziemlich ähnliches Aussehen verleiht. Die Spore ist
aber im allgemeinen eiförmig anstatt rund, wie sie beim Bazillus
von Nicolai er beschrieben wird. Diese Endspore färbt sich in
einzelnen Fällen ganz leicht, in toto, und zwar intensiv, mit
den gewöhnlichen Anilinfarben ohne irgendwelches besonderes
Verfahren. Es genügt, 1 j 2 Minute lang beispielsweise Fuchsin
Ziehl kalt auf dem Präparat zu belassen, um eine prächtige
Färbung der Sporen zu erzielen. In anderen Fällen dagegen
läTst sich trotz gleichen Vorgehens nur eine Färbung des äufseren
Hofes wahrnehmen, auch ist es häufig vorgekommen, dafs die
Spore vollständig ungefärbt blieb und sich am Ende des Stäb-
chens als runder, stark liebtbrechender Punkt zeigte.

Die Spore befindet sich jedoch nicht immer am Ende, sie
kann ihren Platz auch in der Mitte des Stäbchens haben, das
dann eine gewisse Schwellung aufweist, ohne aber das Aussehen
eines wahren und eigentlichen Clostridiums anzunehmen. Dieser
Umstand war bereits von Bienstock beobachtet worden.
Während aber Tissier in seiner Beschreibimg des Bacillus putri-
ficus hievon keine Erwähnung tut, scheut sich Gottlieb Salus
nicht vor der Annahme, Bienstock habe mit unreinen Kul-
turen operiert, da ihm selbst diese abweichende Anordnung der
Spore am Bazillus nie vorgekommen sei.

Die vom Bacillus putrificus herrührenden freien Sporen sind
geradezu in Unmasse anzutreffen und es ist bemerkenswert, dafs

344 Über anagrobe Mundbakterien and ihre Bedeatnng.

sie bisweilen eine verschwindend kleine und vollkommen runde
Gestalt aufweisen. Der Bacillus putrificus von jungen Kulturen
besitzt in der Flüssigkeit Eigenbewegung; hat er seine tetanus-
ähnliche Gestalt, so strebt er mit der Spore vorwärts.

In albuminarmen Böden ist er mehr gewunden, wie auch
gefaltet und faserig.

Es ist nunmehr allgemein anerkannt, dafs der Bacillus putri-
ficus ein strenges Anaärobium ist, das sowohl bei Zimmertem-
peratur wie bei 37° gut zur Entwicklung kommt. Es ist indes
angezeigt, zu bemerken, dafs dasselbe hinsichtlich der Temperatur
zu den weniger anspruchsvollen Bakterien zählt, da sich auch
noch bei 44° ein ziemlich gutes Wachstum erzielen läfst, und
dafs anderseits seine Anforderungen für Anaörobiose nicht so
hoch sind wie bei anderen Anaörobien.

Die hervorragendsten kulturellen Merkmale ergeben sich aus
folgenden Kulturen:

Agarstich. — Das Wachstum erfolgt binnen 2—4 Tagen
flötenbürstenförmig. Die einzelnen Kolonien sind am Rande
des dicken Stiches an ihrem watteähnlichen Aussehen zu er-
kennen.

Diese Kultur gibt bereits ein gutes Unterscheidungsmerkmal
gegenüber anderen Kulturen, die als Putrificusarten gelten. Mein
AnaBrobion III, das nach Tissiers Ansicht der Putrificus Bien-
stock sein soll, bildet in der Stichkultur die Figur eines Tannen-
baumes; die längsten Aste desselben können sich bis zu den
Wänden des Röhrchens erstrecken.

Wenn im flüssig geimpften, und nachher erstarrten Agar nur
einige Kolonien zur Entwicklung kommen, so können sie die
Gröfse einer Erbse erreichen und die schönen geschlängelten Aus-
läufer sind dann .bei ihnen am besten zu erkennen.

Agarstrich. — Die Kultur zeigt ein farnkrautähnliches Aus-
sehen.

Gelatinestich. — In Gelatine erscheinen die Kolonien wie
Haarwuchs. Das Material wird allmählich weich und verflüssigt
sich binnen 5—6 Tagen. Das watteähnliche Aussehen der
Kolonien tritt indes nicht immer zutage. Manchmal zeigen sich

Von Dr. Antonio Rodella. 345

die Kolonien als dunkle Punkte, die von trüben runden Höfen
verflüssigter Gelatine umgeben sind. Diese Erscheinung tritt
hauptsächlich bei gut peptonisierenden Stämmen auf, wo infolge
der raschen Verflüssigung keine Bildung von Ausläufern statt-
findet.

Ein gutes Unterscheidungsmerkmal für den Bazillus putri-
ficus ist ferner die schwarze Färbung, welche in dem von Pas-
sini vorgeschlagenen Eiereiweifsnährboden sehr deutlich her-
vortritt.

Ist der Bacillus putrificus für die gewöhnlichen Laboratoriums-
tiere pathogen oder nicht?

Bienstock, Tissier, Schattenfroh und Grasberger
u. a. geben an, dafs er nicht pathogen sei. Ich fand indes wieder-
holt, sowohl bei meinen früheren Untersuchungen über Darm-
anaörobien wie bei den vorliegenden, Putrificusarten, die eine ge-
wisse Pathogenität aufwiesen. Eine Putrificusart vermochte, in
Quantitäten von 3 ccm Meerschweinchen unter die Haut einge-
impft, den Tod dieser Tiere hervorzurufen. Weiter oben habe
ich einen Fall von Gasabszefs angeführt, für den ich einen Bacillus
putrificus verantwortlich machen konnte. Derselbe war, wie dort
erwähnt, bei meinen Untersuchungen wirkungslos geblieben, hat
aber bei einem von Passini geimpften Meerschweinchen einen
Gasabszefs zur Folge gehabt.

Auf die grofsen Schwankungen in der Virulenz der Anaö-
robien macht übrigens schon Achalme aufmerksam, welcher
schreibt :

»Weist das beobachtete Mikrobium eine sich nahezu gleich-
bleibende Virulenz auf, so hat man in der pathogenen Wirkung,
mag ihr Wert auch noch so relativ sein, einen wertvollen Stütz-
punkt. Wenn dagegen die Virulenz gleich Null oder schwankend
ist, wie man dies vielfach in bedeutendem Mafse, und zwar unter
schwer definierbaren Umständen, wahrnehmen kann, so mufs die
pathogene Wirkung notwendigerweise an die zweite Stelle zurück-
treten, c

Aufser diesen Pathogenitätsschwankungen, die den meisten
Mikroorganismen eigen sind, kommt für den in Bede stehenden

346 Über anagrobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

Bazillus auch noch die Tatsache in Betracht, dafs seine morpho-
logischen und biologischen Eigenschaften ebenfalls grofsen Ände-
rungen unterliegen. Ich konnte mich bei meinen Untersuchungen
über die Anaerobien des Darms, der Milch und der Mundhöhle
tatsächlich überzeugen, dafs, während einige Putrificusarten das
Eiweifs rasch und intensiv aufbrauchen, andere hinwiederum das-
selbe nur wenig und langsam verändern. Es scheint mir daher,
dafs wir unter der Bezeichnung Bacillus putrificus Bienstock heut-
zutage nicht mehr eine einzige Art, sondern eine ganze Familie
mit vielen Varietäten (darunter auch einige pathogene) zu ver-
stehen haben.

Die gleiche Verbreitung wie der Bacillus putrificus Bien-
stock hat in der menschlichen Mundhöhle der unbewegliche
Buttersäurebazillus(von Schattenfroh und Grasberger
Granulobacillus saccharobutyricus immobilis liquefaciens genannt).

Wir haben es hier mit dem Trait-d'union zwischen den zwei
äulsersten Vertretern der Gruppe der anaeroben Buttersäure-
bazillen zu tun, wovon einige Varietäten nur gauz geringe Fähig-
keit besitzen, die Gelatine zu peptonisieren, während andere mit
starkem Vermögen zur Zerlegung der Eiweifssubstanzen ausge-
stattet sind, so dafs sie in dieser Hinsicht mit dem Bacillus putri-
ficus Bienstock verwechselt werden können. Sie unterscheiden
sich jedoch hievon durch die verhältnismäfsig schwierige Sporen-
bildung, die sich dagegen beim Bacillus putrificus mit gröfster
Leichtigkeit einstellt. Auch die Gestalt der Sporen wie deren
Gröfse leistet zur differentiellen Diagnose gute Dienste. Einzelne
morphologische Kennzeichen, wie seine Unbeweglichkeit usw.,
erleichtern diese Aufgabe.

Agarstrich. — Im Rasen entwickelt sich eine weifsliche
Schicht, mehr oder weniger dick je nach der Masse des Säe-
materials. Die isolierten Kolonien weisen einen runden oder
länglichrunden Mittelpunkt auf, während die Umgebung dieses
mittleren Teils granuliert erscheint.

Agar stich. — Gleichmäfsig dicker oder leicht höckerig be-
grenzter Faden, manchmal von Gasblasen durchsetzt.

Von Dr. Antonio Rodella. 347

Gelatinestich. — Nach 2 — 6 Tagen weifser Faden oder eine
kleine Kette von ebenso unregelmäfsigen rundlichen Punkten,
welche bei weiterem Wachstum die Gelatine trichterförmig ver-
flüssigen.

Kartoffelscheiben. — Auf Kartoffeln bildet der Bazillus
einen kaum sichtbaren Rasen. Bei manchen Varietäten sind einige
Kolonien kuppenförmig erhaben, was auch bei vielen Putrificus-
stammen beobachtet wird.

Sporenbildung. — Die freien Sporen sind oval, bis 2,0 p
breit und bis 2,3 n lang. Ihre Widerstandsfähigkeit gegen Er-
hitzen ist eine aufserordentlich hohe.

Eine weitere interessante Varietät, welche häufig von der
Mundhöhle beherbergt wird und die ich mit dem von Ti ssier
und Martelly unter dem Namen Bacillus bifermentans sporo
genes beschriebenen Mikroorganismus, der wegen der Gestalt
seiner Sporen charakteristisch ist, identifizieren zu dürfen glaubte,
ist die folgende.

Der Bazillus hat eine Länge von 6 — 8 /u, eine Breite von
ungefähr 1 \i und ist vielfach in Ketten von mehreren Individuen
angeordnet. Er bildet sehr rasch Sporen, die sich von denen
der zwei vorhergehenden Arten durch ihre ellipsoide Gestalt
unterscheiden. Ich konnte aus dem Munde tatsächlich Bazillen
isolieren, die in zuckerfreien Böden in der Mitte des Bazillus
längliche Sporen von bisweilen 3 — 3,5 p Länge bildeten. Wenn
ich bei Vornahme der für die Sporen spezifischen Färbung den
Grund mit Methylenblau färbte, so wies die Spore im Mittel-
punkte des Bazillus roten Schleim auf; der Bazillus selbst lief
fast gar nicht blau an.

Morphologisch und kulturell hat dieser Bazillus einer gewisse
Ähnlichkeit mit dem Bacillus putrificus. Die Kolonien werden
indes nie fadenförmig, strahlenförmig oder watteähnlich wie beim
Bacillus putrificus. Sie sind kompakt und linsenförmig. Die Gas-
bildung ist nicht reichlicher als beim Granulobacillus saccharo-
butyricus immobilis liquefaciens und tritt erst spät auf. Die Ver-
flüssigung der Gelatine geht langsam vor sich. Dieser Bazillus
greift Kasein, Serum- und Eiereiweifs an, jedoch nicht in sq

348 Über anaerobe Mandbakterien und ihre* Bedeutung.

hohem Marse wie der Bacillus putrificus. Meine mangelhaften.
Kenntnisse in der Chemie und in den chemischen Untersuchungs-
methoden erlauben mir nicht, von einer sicheren Identifizierung
dieses im Munde häufig vorkommenden Mikroorganismus mit dem
Bacillus bifermentans sporogenes zu sprechen. Ich kann nur mit
Bestimmtheit angeben, dafs der Bazillus aus Glykose Buttersäure
bildet.

Während diese drei Saprophyten als regelmäßige Bewohner
der Mundhöhle anzusehen sind, ist ein anderer Vertreter der
Buttersäuregruppe seltener anzutreffen, mufs aber wegen seiner
grofsen pathologischen Bedeutung wohl in Betracht gezogen
werden. In drei Fällen von lakunärer Angina konnte ich mittels
Tierversuch den typischen gasphlegmonen Bazillus isolieren.
Ich will diesen Befund nicht gerade mit der Ätiologie der Angina,
die übrigens einen gutartigen Verlauf nahm, in Zusammenhang
bringen. Es scheinen mir aber diese Fälle schon deshalb von
Bedeutung, weil wir mit der näheren Kenntnis der anaäroben
Mundflora die Entstehungsursache mancher infektiösen Prozesse
mit unbekanntem Eintrittsort des pathogenen Erregers besser er-
klären werden.

Ich unterlasse hier eine Beschreibung des gasphlegmonen
Bazillus, da sich eine solche im schönen Werk von Schatten-
froh und Gras berg er findet, die auf meine drei Stämme genau
pafst. Ich konnte mich überzeugen, dafs der gasphlegmone
Bazillus, auf den von Passini vorgeschlagenen Nährboden über-
geimpft, tatsächlich ein sporenbildender Mikroorganismus ist.

Weniger Glück hatte ich bei meinen Untersuchungen mit
dem Nachweis des Tetanusbazillus im Munde. Sämtliche Ver-
suche fielen negativ aus ; trotzdem halte ich für sicher, dafs auch
dieser Mikroorganismus häufig in der Mundhöhle haust.

Es sind in der Literatur genügend Fälle von echtem Tetanus
bekannt, bei denen der spezifische Bazillus sich nicht nachweisen
liefs, und nicht minder kennt man die Schwierigkeiten, welchen
der Bakteriologe hauptsächlich begegnet, wenn es sich um eine
Mischinfektion von Tetanus mit anderen anaöroben Mikroorga-
nismen handelt. Auf alle Fälle gebe ich diese interessante Auf-

Von Dr. Antonio Rodella. 349

gäbe noch nicht auf und hoffe, im Laufe meiner diesbezüglichen
Untersuchungen für die oben ausgesprochene Vermutung den
Beweis liefern zu können.

Die eben beschriebene Bakteriengruppe bat überaus grofse
Bedeutung für die Zahnkaries wegen der Bildung von Säuren
wie auch von Diastasen, so z. B. der Trypsin, die eine vollstän-
dige Zerstörung des Zahnes herbeizuführen vermag, wie ich mich
bei meinen Untersuchungen über künstliche Zahnkaries auf das
festeste überzeugen konnte. Dagegen ist die Bedeutung der ge-
nannten Bakterien für gewisse Formen von Angina noch von nie-
mand zum Gegenstand des Studiums gemacht worden, ja, so-
viel ich weifs, hat noch kein Forscher ihr Vorkommen in ähn-
lichen krankhaften Zuständen überhaupt erwähnt. Während
meiner Tätigkeit als Assistent am Hygiene-Institut Zürich fand
ich diese Köpfchenformen wiederholt in direkten Präparaten in
ansehnlicher Menge vor; da mir aber damals das Studium der
klinischen Fälle nicht möglich war, so beschränkte ich mich auf
die Angabe, ob das Ergebnis der Untersuchung in bezug auf den
Diphtheritisbazillus ein positives oder negatives gewesen war.

Dagegen hatte ich bei meinen Untersuchungen in Padua
Gelegenheit, auch den Kranken zu sehen, und nicht selten hob
ich das Material selbst ab. Ich zählte nun über acht Fälle von
akuter Pharyngitis, bei denen ich unter dem Mikroskop eine Un-
menge von Köpfchenbakterienformen beobachten konnte. Ich er-
wähne hiervon noch besonders den folgenden ausgezeichneten
Fall: Der Feuerwehrmann Albertini Carlo erschien beim hie-
sigen Amt mit einer ausgesprochenen Form von Angina, von der
vornehmlich die beiden Mandeln betroffen waren. Die Rötung
derselben sowie des ganzen Pharynx hatte einen hohen Grad er-
reicht; aufserdem liefs sich besonders an den Mandeln ein schmutzig-
graues Exsudat wahrnehmen.

Einige mit diesem Exsudat hergestellte mikroskopische Prä-
parate gaben, mit Gentianaviolett gefärbt, die charakteristischen
Formen der Köpfchenbakterien in erheblicher Anzahl und fast in
Reinkulturen zu erkennen. Die Endspore war bei einzelnen
Bazillen vollständig violett, bei andern wies nur der sie um»

350 Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

gebende Hof die violette Färbung auf, während das übrige voll-
ständig entfärbt war. Bei andern Bazillen wieder ergab sich eine
entfärbte lichtbrechende ovale Spore am dünnen, gut gefärbten
Bazillus hängend, ferner lagen viele von diesen Sporen, vom
Bazillus abgetrennt, da und dort im Präparat zerstreut. Be-
merkenswert ist die Tatsache, dafs die mit jenem Material im
Serum angelegten aörobischen Kulturen keinerlei Entwicklung auf-
wiesen. Die anaörobischen Kulturen dagegen förderten den
Bacillus putrificus zutage. Was den klinischen Verlauf betrifft,
so war derselbe ein äufserst gutartiger. Bei täglich zweimal
vorgenommenen Überpinselungen mit Quecksilbersublimat zu
l°°/oo war die Angina in 3 Tagen gänzlich verschwunden.

Wie ist es nun möglich, dafs diese Anaerobien bei Zutritt
des atmosphärischen Sauerstoffes existieren? Die Symbiose mit
aörobischen Mikroorganismen reicht in solchen Fällen noch nicht
allein zur Erklärung der Tatsache hin, umsoweniger als beim
angeführten Falle, auch wenn man eine Reinkultur von Anae-
robien nicht als gegeben erachten will, immer nur das Vorkommen
von wenigen Aerobien vorausgesetzt werden darf, da die zwei
Kulturen in aerobischem Serum steril blieben. Man mufs sich
vielmehr zur Annahme verstehen, dafs sich in den kranken Ge-
weben besondere Substanzen entwickeln, die anaörobische Keime
auch bei Luftzutritt am Leben zu erhalten vermögen, wie wir
das gleiche bei Kulturen mittels entsprechender chemischer Sub-
stanzen zu erzielen in der Lage sind.

Das über die Anaerobien der Buttersäure Gesagte trifft auch
auf die spindelförmigen Bazillen von Vincent zu, die,
wie ich sofort ausführen werde, streng anaörobisch sind und die
in einer so grofsen, die anderen Mikroorganismen derart über-
wiegenden Menge auftreten können, dafs viele Autoren, darunter
Plaut 1 ), sie als wahre und tatsächliche Reinkultur angesehen
haben.

*) Es klingt fast paradox: »Reinkultur aus der Mundhöhle — und
doch kommen solche Fälle, freilich recht selten, vor. Bei einer Form von
Angina, die ich, nicht Bernheim oder Vincent, wie häufig zitiert, zuerst
1894 beschrieben habe, fand ich in einem Falle auf vielen Kulturmedien

Von Dr. Antonio Rodella. 351

Man mufs demnach zugeben» dafs bei einzelnen pathologi-
schen Zuständen (Angina, Stomatitis, Noma) infolge uns noch
unbekannter biochemischer Prozesse eine Veränderung der
Gewebe Platz greift, die das Fortkommen der gewöhnlichen
Aerobien auf denselben schwierig gestaltet, während sie das der
Anaärobien ermöglicht und sogar begünstigt. Unter den letzteren
mufs noch einer Gruppe von Bazillen Erwähnung getan werden,
die wegen ihrer häufigen Beteiligung bei verschiedenen Krank-
heitsformen und der grofsen Schwierigkeit, die sie ihrem Studium
in Reinkulturen entgegenstellt, in letzter Zeit die Aufmerksam-
keit der Forscher auf sich gelenkt hat.

Der bekannteste Vertreter dieser Gruppe führt gemeinhin
den Namen Bacillus fusiformis von Vincent, weil dieser Autor
es ist, den wir die meisten Abhandlungen über dieselbe ver-
danken, wenngleich Miller die Priorität zufällt, ihn als ge-
wöhnlichen Gast der Mundhöhle beschrieben zu haben. Die
Literatur über diesen Mikroorganismus ist in der Folge derart
angeschwollen, dafs Beitzke in seiner zusammenfassenden Über-
sicht in der Lage war, nicht weniger als 113 Autoren anzuführen.
Aufserdem sind mir noch die Arbeiten von weiteren 50 (deutschen,
französischen und italienischen) Autoren bekannt, die von Beitzke
nicht eingereiht werden konnten. Ich halte jedoch für sicher,
dafs viele von diesen Forschern Mikroorganismen in Händen
hatten, die vom echten spindelförmigen Bazillus gemäls der
J. Seitz- Vincent sehen Auffassung abwichen, und dafs unter

beim Ausstich keinen einzigen Mikroorganismus entwickelt, weil die Pseudo-
membran nur Spirochäten und sog. Millerache Bazillen enthielt, die sich
auf unseren gebräuchlichen Nährmedien nicht züchten lassen. < Also Plaut I
Wenn sich auch bei mir einigemal der Fall ereignete, dafs sich unter dem
Mikroskop in einem oder in zwei Präparaten nur eine einzige Art von Mikro-
organismen beobachten Hefa, so konnte ich mich doch leicht vergewissern,
dafs es sich auch in diesen Fällen nicht um eine wirkliche Reinkultur
bandelte. Wir haben es bisweilen tatsächlich mit einer Vereinigung von
verschiedenen Anaärobienarten zu tun, die als solche auf unseren gewöhn-
lichen Nährmedien nicht wachsen ; häufiger jedoch handelt es sich um Sym-
biose von Aerobien mit Anaerobien, die in den Geweben schichtweise ange-
ordnet sind, infolgedessen ein Befund, der sich nur auf die obersten Partien
erstreckt, nur eine einzige Spezies zutage fördert

352 Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

dem bequemen Vorwand, der Bazillus habe sich noch nicht iso-
lieren lassen, gar oft Mundanaörobien jedem Typ zugerechnet
wurden, einzig und allein deshalb, weil auch diese sich auf
unseren gewöhnlichen Nährböden (unter diesen wurden stets die
aörobischen verstanden) nicht züchten lassen.

Im Jahre 1901 hatte sich Vincent in seiner Arbeit: >Sur
la culture et l'inoculation du bacille fusiformec neuerdings mit
seinen Bazillen beschäftigt. Er erprobte eine Anzahl von Nähr-
böden und kam zum Schlüsse, dafs die reichlichsten Kulturen
sich mit der aus einer chronischen rheumatischen Hydrartrose
gewonnenen Flüssigkeit erzielen liefsen. Nach Vincents eigenem
Ausdruck jedoch >la culture du bacille fusiforme ä l'ätat pur
n'a pas &t& jusqu'ici rdalisöec.

Matzenauer, der die beiden Krankheitsprozesse von Noma
und Hospitalbrand ganz richtig miteinander in klinische und
ätiologische Verbindung gebracht hatte, behauptete hinwieder-
um, das spezifische Agens derselben in Reinkultur gewonnen
und es anaörobisch in Agar mit hoher Schicht gezüchtet zu haben.
Trotzdem haben wir keinen Anlafs, bei den tüchtigen Arbeiten
Matzenauers lange zu verweilen, da im Widerspruch zu der
Überzeugung des Autors von der Identität seines Bazillus mit
dem von Vincent, wie Beitzke mit Recht bemerkt, alles zur
Annahme drängt, dafs ein ganz verschiedenes Anaärobium in
Frage gestanden habe.

Das gleiche ist meiner Ansicht nach von dem von V ei Hon
und Zuber beschriebenen Bazillus zu halten, wenn auch Beitzke
hierin die einzige Angabe einer Reinkultur von spindelförmigen
Bazillen erblickt.

Wie jene beiden französischen Autoren berichten, wächst
ihr Bacillus fusiformis in strenger Anaärobiose, und zwar bei
Zimmertemperatur langsam, rasch dagegen im Thermostat.

In der Gelatine entwickeln sich kleine körnige dunkle
Kolonien mit gut ausgeprägtem, glattem Rande. Verflüssigung
der Gelatine tritt nicht ein.

Im Agar lassen sich bereits nach 24 Stunden kleine Kolonien
beobachten, die hernach dunkel, undurchsichtig werden und mit

Von Dr. Antonio Rodel la. 353

der Zeit eine gewisse Gröfse erreichen können. Die meisten
weisen linsenförmige Gestalt auf.

Im schiefen Agar wachsen sie wie Bacterium coli, doch
sind sie mehr transparent.

Bouillon wird rasch und stark getrübt; es zeigt sich ein
dicker, weifslicher Bodensatz sowie übelriechendes Gas.

Sporenbildung wird nicht beobachtet.

Die Kulturen sind sehr hinfällig und halten sich nur 5 bis
6 Tage lebensfähig; etwas widerstandsfähiger sind die bei Zim-
mertemperatur gezüchteten.

Die von Veillon und Zuber gegebene Beschreibung des
in Frage stehenden Bazillus entspricht in sehr vielen Punkten
der meines im Gasabszefs ermittelten Bazillus II.

Der Umstand, dafs beim Bazillus der beiden französischen
Autoren die Sporenbildung ausblieb, während der meine sporen-
bildend war, dürfte kein unüberwindliches Hindernis bilden, da
wir wissen, wie schwankend das Auftreten der Sporenbildung
ist und wie viele verschiedene Faktoren es beeinflussen.

Wie aus der meiner Arbeit angefügten Tafel ersichtlich ist,
hatte auch mein Bazillus II mikroskopisch grofse Ähnlichkeit
mit dem spindelförmigen Bazillus von Vincent-Seitz, während
der weitere Befund eine ausgesprochene Verschiedenheit ergab.

Im Jahre 1903 veröffentlichte Lewkowicz Ksawcry eine
Arbeit, worin er anführt, es sei ihm die Reinzucht des Spindel-
bazillus mittels anaörobischer Kulturen in gezuckertem Agar
unter Hinzufügung von Serummaterial gelungen und dafs er ohne
Beifügung des letzteren in keinem Nährboden zur Entwicklung
komme.

Leider kenne ich die genannte Arbeit nur aus dem kurzen
Referat des Bull. Ann. Pasteur vom 30. Dezember 1903, und es
ist überaus schwer, auf Grund desselben ein Urteil zu fällen.

Im allgemeinen darf ich sagen, dafs in der Literatur der
Spindelbazillus erwähnt wird, wenn er in mehr oder weniger
evidentem Zusammenhang mit den pathologischen Prozessen ge-
bracht werden kann.

354 Über anagrobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

Der Ansicht der meisten Autoren, dafs der Spindelbazillus
das ätiologische Agens von Krankheitsformen, auch wenig ver-
wandter, sei, war J. Seit« bereits im Jahre 1899 mit der Er-
klärung entgegengetreten, dafs eine bestimmte Beziehung dieses
Gebildes mit einer besonderen Krankheitsgruppe, aufser etwa zu
Mundgestank, nicht hervorgetreten sei.

Die allzuengen Begriffe hinsichtlich des Charakters der
pathogenen Mikroorganismen, wie sie übrigens auch heutzutage
noch bei vielen herrschen, haben es nicht zugelassen, dafs seine
Versicherung gewürdigt und geziemend interpretiert wurde. Die
scharfe Beobachtungsgabe dieses Forschers hatte aber bereits ein
wichtiges Merkmal aufgestellt, um den in Frage stehenden Mikro-
organismus von anderen, die man in der Folge mit ihm zusammen-
werfen wollte, unterscheiden zu können, nämlich die Gestankbildung.

Aufser als fast beständiger Bewohner unseres Mundes wurde
der spindelförmige Bazillus häufig in ziemlich vielen Krankheits-
formen verschiedenster Art angetroffen, und nun einmal die Auf-
merksamkeit auf ihn gelenkt ist, mehren sich die Fälle seines
Vorkommens ins Unermefsliche. Er zählt daher wie der Bacillus
putrificus Bienstock und andere Fäulnisanaerobien zu den ge-
wöhnlichsten Saprophyten, nur mit dem einzigen Unterschiede,
dafs der Bacillus fusiformis infolge seiner wenig ausgeprägten Fär-
bung (in den Geweben z. B. ist der Nachweis desselben beinahe un-
möglich, insbesondere wenn er sich in Begleitschaft von vielen
anderen Keimen befindet) sich leicht unserer Nachforschung entzieht.

Seine morphologischen Eigentümlichkeiten sind zu bekannt,
um angeführt zu werden. Den am meisten strittigen Punkt dürfte die
Bewegungsfähigkeit bilden. Einige Autoren schreiben ihm Eigen-
bewegung zu, ich für meinen Teil habe ihn unbeweglich gefunden.

Geringere Bedeutung hat die Kontroverse bezüglich seiner
Färbefähigkeit nach Gram. Ähnliche Fälle sind für eine Reihe
von aerobischen und anaerobischen Bazillen bekannt. Um das
auf den vorliegenden Fall passendste Beispiel anzuführen, sei
nur auf den Bacillus bifidus von Ti ssier verwiesen. Tissier hat
unter Anwendung der Methode Gram-Escherich in derselben
Bifidus Kultur neben violetten auch rote Formen angetroffen.

Von £>r. Antonio fcodella. 355

Bei mir hat sich der Bacillus fusiformis immer nach Gram entfärbt.
Die Autoren, welche angeben, dafs er sich nach dieser Methode
nicht abfärbt, fügen indes hinzu, dafs er sich nach dem Ver-
fahren von Claudius entfärbt, was ein Beweis dafür ist, dafs seine
Widerstandskraft beim Abgeben der Farbe jedenfalls sehr gering ist.

Leider weist der Bacillus fusiformis auch in Reinkultur einen
so grofsen Formenreichtum auf, dafs eine Identifizierung durch die
Prüfung seiner morphologischen Eigentümlichkeiten nicht leicht
wird. Ferner gibt es sicher auch noch andere Arten, die mor-
phologisch mit dem Bacillus fusiformis ein Ganzes bilden, bei
eingehender kultureller und biologischer Untersuchung aber von
ihm geschieden werden müssen.

Schon Vincent hatte auf die Veränderlichkeit seines Ba-
zillus aufmerksam gemacht, indem er angab, dafs derselbe sich
in der nach der Formel von Martin bereiteten Bouillon ver-
mehre, aber möglicherweise darin unerkenntlich werde; er ent-
wickle sich nämlich zu langen, geradlinigen Fäden, bisweilen von
riesiger Ausdehnung. Aus der Bouillon von Martin in die
flüssigen organischen Böden versetzt, nehme er den Umfang und
das spindelförmige Aussehen an, womit er im Mandelexsudat
der Kranken ausgestattet ist.

Ich kann noch hinzufügen, dafs dieser Bazillus sich manch-
mal mit sehr kurzer Gestalt, ohne Verdickung in der Mitte wie
auch ohne zugespitzte Enden vorfindet, sodafs man zur Annahme
verführt werden könnte, es handle sich nicht um den Spindel-
bazillus, während dies trotzdem der Fall ist.

Anderseits beherbergt der Mund auch noch Anaörobien,
deren Studium ich noch nicht abgeschlossen habe und die unter
dem Mikroskop die gleiche Vielgestaltigkeit wie der Bacillus fusifor-
mis aufweisen, von dem sie übrigens alle die verschiedenen Formen
zeigen. 1 ) Bei der kulturellen Untersuchung lassen sich jedoch

1) Es sei hier besonders hervorgehoben, dafs häufig die anaäroben
Mandbakterien in den nach P a s b i n i oder A c h a 1 m e hergestellten Kulturen
kein mikroskopisches Wachstum erkennen lassen. Impft man nun von
genannten Kulturen im flüssigen Agar ein dann erfolgt nach 3—4 Tagen bei
37° ein ziemlich üppiges Wachstum in der Tiefe der Gläser. In Bouillon
(anaerobe) ist dagegen das Wachstum mikroskopisch nicht sichtbar.
Archiv für Hygiene. Bd. LHL 25

356 Über anaörobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

Unterschiede beobachten, in der Verflüssigung des Blutserums
oder darin bestehend, dafs einige Varietäten in Gelatine bei
Zimmertemperatur zur Entwicklung kommen.

Wie schon an anderem Orte erwähnt, gedeiht der Bacillus fusi-
formis am besten in flüssigen Nährmedien, wo er die Eigenschaft
hat, grofse, watteähnliche Flocken zu bilden, die im Reagenz-
glase teils zu Boden sinken teils an dessen Wänden haften bleiben.
Die Flüssigkeit wird unter Ansammlung eines wenig kompakten
Bodensatzes nach einigen Tagen klar. Ascites- und Serum-
bouillon wie auch die Bouillon nach Martin eignen sich für
die Kultur dieses Bazillus gut. Er kann auch in einfacher
Bouillon zum Wachstum kommen; viel schwieriger gestaltet es
sich in Pferde- oder in Zuckerbouillon. Interessant ist die Tat-
sache, dafs, während in einfacher Bouillon Gasbildung auftritt,
dieselbe unterbleibt, falls der Bazillus in Zuckerbouillon zur
spärlichen Entwicklung kommt (üppig wächst er in diesem Nähr-
boden überhaupt nicht).

In einem Substrat, bestehend aus kleinen Würfeln von ge-
ronnenem, sterilisiertem Binderblutserum, mit sterilem Wasser
hergestellt, wächst der Bazillus unter Erzeugung eines unange-
nehmen Geruches.

Die Kolonien auf erstarrtem Blutserum (in Gruberschen
Röhrchen 8 Tage lang auf 75° sterilisiert 1) zeigen ein filzig- ver-
zweigtes Aussehen. Verflüssigung des Serums wird nicht be-
obachtet. Die Kultur ist ziemlich übelriechend. Die Gröfse der
einzelnen Kolonien übertrifft auch in den günstigsten Fällen nie
diejenige eines kleinen Stecknadelkopfes. Auf der Oberfläche
von Ascites-Agar wachsen streptokokkenähnliche Kolonien. Auf
gewöhnlichem Agar ist das Wachstum ein äufserst spärliches
und geschieht nicht jedesmal. Es scheinen besondere, mir un-
bekannte Bedingungen nötig zu sein, um auf diesem Nährboden
eine Entwicklung zu ermöglichen.

In tiefem Agar kann es bei reichlicher Aussaat zu üppigem
Wachstum kommen, welches dadurch gefördert wird, dafs man
den gewöhnlichen Nähragar durch Hinzufügung von etwas
Bouillon weich macht. Es kommt hier, wie in den flüssigen,

Von Dr. Antonio Rodella. 357

ungezuckerten Nährmedien, zu starker Gasbildung. Der Bacillus
fusiformis wächst nur unter streng anaöroben Verhältnissen und
nur bei Bruttemperatur. Es haben demnach die Autoren, welche
ihn auch bei Zimmertemperatur und in gewöhnlicher Nährgelatine
gezüchtet haben wollen, sicherlich einen anderen Mikroorganis-
mus in Händen gehabt.

Wenn die Züchtung dieses Mikroorganismus aus dem Belag
von einigen Angina- Formen, aus Abszessen etc. herrührend, kurz
mittels eines Materials, wo er reichlich und fast in Reinkultur
vorhanden ist, sich leicht durchführen läfst, so darf man das-
selbe nicht für die physiologischen Fälle annehmen, auch wenn
der Mikroorganismus in grofser Zahl vorhanden sein sollte, wie
dies manchmal am Zahnbelag gesunder Personen der Fall ist.
Die unmittelbare Verwendung von festen Nährböden würde uns
hier bei einer Isolierung des Spindelbazillus unbedingt im Stich
lassen, wir müssen vielmehr zu einem Anreicherungsverfahren
in flüssigen Nährböden unsere Zuflucht nehmen und von diesen
auf die festen übergehen. Aber auch mit diesem Behelf wird der
Zweck nicht immer erreicht, die Mifserfolge sind sogar sehr häufig.

Im allgemeinen kann man sagen, dafs, wenn das direkte
mikroskopische Präparat die eben erwähnten Formen in vor-
wiegender oder wenigstens in gleicher Menge wie z. B. Kokken
aufweist, eine Isolierung mit Hoffnung auf Erfolg unternommen
werden könne. Bei den erstmaligen derartigen Versuchen ist
eine Selbsttäuschung sehr leicht möglich, da die Kokken klein,
die Spindelbazillen aber grofs sind und deshalb auf dem mikro-
skopischen Felde jene zu überwiegen scheinen. Die sich daraus
leicht ergebenden Mifserfolge werden aber dazu führen, mehr die
tatsächliche Anzahl der Mikroorganismen der verschiedenen Arten
ins Auge zu fassen als deren Gröfse. In den Fällen, wo die
Spindelbazillen gegenüber den übrigen Keimen nicht wirklich
die Überzahl aufweisen, ist es geraten, auf den Versuch zu ver-
zichten, der doch keinen Erfolg zeitigen würde. Auch in den
günstigsten Fällen wird es angezeigt sein, aufser den von mir
bereits angegebenen Methoden auch noch zu den sauren Böden

(V2 °/o Essigsäure) Zuflucht zu nehmen; diese leisten besonders

25*

358 Über ana&robe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

dort gute Dienste, wo eine Verunreinigung von Mikroorganismen,
die nicht zu den Kokken geboren, vorliegt. Der Widerstand dieser
zwei Mikroorganismenformeh gegen Essigsäure ist nämlich stärker
als der der übrigen Bakterien, wie z. B. des Bacterium coli,
während er hinter dem der gewöhnlichen Kokken zurückbleibt.

Ein anderes Gebilde, dessen Isolierung und Studium mit
noch gröfseren Schwierigkeiten als beim Spindelbazillus von
Vincent verknüpft ist, tritt uns in der Zahnspirokäte ent-
gegen. Miller schreibt darüber:

»Spirochaete denticola, Spirochaete dentium, Zahnspirokäte
wird nicht im kariösen Zahnbein, sondern an denselben Stellen
gefunden wie .Spirillum sputigenum , nämlich unter dem Zahn-
fleischrande, wo das Zahnfleisch schmutzig belegt und leicht ent-
zündet ist, also bei Gingivitis marginalis. Das Bakterium stellt
8 — 25 ju lange Schrauben von sehr ungleichen Windungen und
ungleicher Dicke dar, auch zeigen die Schrauben grolse Differenzen
in ihrer Affinität für Farbstoffe. Die dickeren nehmen meist
den Farbstoff viel schneller auf als die dünneren, sie haben auch
weniger und höhere Windungen. Es ist fraglich, ob es sich hier
nicht um zwei verschiedene Mikroorganismen handelt, von wel-
chen der dickere möglicherweise einen Entwicklungszustand von
Spirillum sputigenum darstellt. Die Entwicklung und Pathogenese
der Spirochaete dentium ist ebenso unbekannt wie die der anderen
oben besprochenen nicht züchtbaren Mundbakterien. Auch über
die Lebensbedingungen und Lebensäufserungen (Gärung, patho-
gene Wirkung etc.) wissen wir Näheres so gut wie gar nicht, c

Es ist bekannt, dafs nach Miller von Vincent auf die
Spirokäten aufmerksam gemacht wurde, und zwar nicht wegen
der Gingivitis marginalis, sondern wegen eines anderen krank-
haften Prozesses.

Vincent beschrieb eine Form von Angina, welche er als
die der Spindelbazillen bezeichnete und von der er in der Folge
zwei Gruppen unterschied, nämlich die pseudodifterica und ulcero-
membranosa. Bei der ersteren weist die etwas geschwürige
Schleimhaut eine kompakte Pseudomembran auf, die einige Tage
bestehen bleibt. Das Fiber dauert 3 Tage und die submaxillaren

Von Dr. Antonio Rodella. 359

Drüsen sind geschwollen. Bei der Angina ulcero-membranosa
jedoch bildet sich am dritten Krankheitstage ein mehr oder
minder tiefes, mit einer Pseudomembran überzogenes Geschwür.
Die Dauer dieser Form, die ebenfalls von Fieber und Schling-
beschwerden begleitet ist, wäre nach Vincent eine etwas längere
als bei der Angina pseudodif terica , sie schwanke zwischen
8 Tagen und 2 Monaten.

Mikroskopisch wäre die Angina pseudodifterica durch fast aus-
schliefsliches Vorkommen von 8 — 12 fx langen , manchmal ziem-
lich krummen, spindelförmigen Bazillen charakterisiert. Bei der
Angina ulcero-membranosa fänden sich aufser den obengenannten
Bazillen auch noch der Zahnspirokäte vollkommen ähnliche
Spirillen.

In der Folge wäre die Spirochaete dentium wie auch der
Spindelbazillus in den verschiedensten Krankheitsprozessen, wie
Geschwüren, Bauchfellentzündungen usw., angetroffen werden.

Was nun die Behauptung von Mliller betrifft, dafs die Zahn-
spirokäte nicht im kariösen Zahnbein gefunden werde, so mufs
ich dieselbe als zum mindesten sehr gewagt betrachten. Die
tatsächliche Schwierigkeit des Nachweises von Spirokäten im
kariösen Gewebe hat ihren Grund in der geringen Empfänglich-
keit für die gewöhnlichen Anilinfarben seitens dieser Mikro-
organismen wie auch in der Leichtigkeit, womit er die einmal
angenommene Farbe abgibt. Trotzdem habe ich Gelegenheit ge-
habt, bei genauer Beobachtung meiner zahlreichen Präparate von
kariösen Zähnen manchmal auch im kariösen Zahnbein die
schönsten Spirokäten, entweder beinahe entfärbt oder mit noch
gut erhaltener Färbung, wahrzunehmen.

Während uns die Reinkultur des Spindelbazillus gelungen
ist, ist uns bis zur Stunde eine Reinzucht der Spirokäte nicht
geglückt. Das erfolgreichste Kulturverfahren bestand im übrigen
in der Verpflanzung des Mikroorganismus aus dem ihn in Menge
enthaltenden Material in anaärobisches Serum • Kondenswasser
Letzteres erhielten wir durch Sterilisierung der Proben von ge-
neigtem Serum, das in Grub er sehe Röhrchen gebracht und zu

360 Über anaörobe Mundbakterien and ihre Bedeutung

gleichen Teilen mit Wasser versetzt wurde. Auch die Ascites-
Bouillon ergab gute Resultate.

Bemerkenswert ist, dafs der Spindelbazillus dann und wann
ein dieser Spirokäte ganz und gar ähnliches Aussehen annimmt.
In einer unserer nächsten Veröffentlichungen, worin wir uns mit
weiteren Anaörobien des Mundes befassen werden, hoffen wir
auch von ihr eine genaue Beschreibung liefern zu können.

HatOriiche Zahnkaries.

Beim Studium dieses Prozesses wie übrigens bei allen Teilen
meiner Arbeit diente mir als Führer das meisterhafte Werk von
Miller. Als Material benützte ich eben ausgezogene kariöse
Zähne, die mir vom Zuchthause, von der Poliklinik und von
einem befreundeten Kollegen, der hier als Zahnarzt praktiziert,
geliefert wurden. Die Zähne wurden in wässerigen Lösungen
von 9% Salpetersäure, die man ein paar Wochen einwirken liefs,
wiederholt entkalkt. Nach stattgehabter Entkalkung wurden die-
selben 10 Stunden lang in fließendem Wasser gelassen, damit
jede Spur von Säure entfernt würde. Nachher wurden sie in
die verschieden titrierten Alkohollösungen (mit 55 proz. Alkohol an-
gefangen) hineingetan. Bei späteren Versuchen verfuhr ich in
folgender bequemeren Weise: Es wurde eine 3 proz. Lösung von
Salpetersäure in 70 proz. Alkohol verwendet und darin der Zahn
einige Wochen gelassen. Hierauf wurden die Zähne in 96 proz.
Alkohol gebracht, welcher so oft erneuert wurde, bis das Lack-
muspapier sich nicht mehr rot färbte. Gute Dienste leistete mir
auch die X J 2 — lproz. wässerige Lösung von Salzsäure. Da aber
die Salzsäure die Grundsubstanz der Zähne anschwellt, so ist es
empfehlenswert, die von Ebner angegebene Formel zu verwerten,
bei welcher das Kochsalz die Anschwellung des Gewebes ver-
hindert. Die Ebner sehe Lösung wird folgendermafsen herge-
gestellt : Eine kalt gesättigte Kochsalzlösung wird mit 2 Volumen
Wasser verdünnt, worauf 20% Salzsäure hinzugefügt wird. Diese
Flüssigkeit entkalkt sehr langsam und mufs häufig erneuert
werden. Nach der Entkalkung müssen die Zähne in einer ge-

Von Dr. Antonio Rodella. 361

sättigten Kochsalzlösung, welche zur Hälfte mit Wasser verdünnt
wird, gewaschen werden. Um die vollständige Neutralisierung
des Zahngewebes zu erzielen, werden der Kochsalzlösung zweck-
mäßig einige Tropfen Ammoniak hinzugefügt. Miller sagt von
diesem Verfahren: »Solche Präparate haben den grofsen Nach-
teil, dafs man nicht imstande ist, an ihnen das kariös erweichte
von dem künstlich erweichten Zahnbein genau zu unterscheiden ;
auch vermag man nicht genau festzustellen, welche Verände-
rungen des Zahnbeins etwa durch die künstliche Entkalkung
hervorgerufen worden sind.«

Millers Bemerkung ist richtig; ich beabsichtigte indes,
mich bei dieser ersten Veröffentlichung nur mit den verschie-
denen Bakterienarten zu beschäftigen, die zur Entstehung der
Karies beitragen, wie auch mich ein wenig über die Verbreitung
der Bakterien im Gewebe zu orientieren, und deshalb hatten die
Veränderungen, welche das Zahngewebe aufweist, für mich ge-
ringeres Interesse.

Gewöhnlich stellt man Präparate von Zahnbein in der Weise
her, dafs man ziemlich dicke, das erweichte und normale Gewebe
umfassende Schliffe anlegt, die dann in verdünnter Säure ent-
kalkt und mit dem Mikrotom in mikroskopisch dünne Schnitte zer-
legt werden. Wie gesagt, habe ich statt dessen die Zähne in
toto in der oben angegebenen Weiso entkalkt, entwässert und
dann in Xylol 10—20 Stunden gelassen; hierauf wurden sie in
der üblichen Weise paraffiniert und fast immer in horizontaler
Richtung zerschnitten. Die ganze Schnittfläche war aber nicht
leicht zu gewinnen, und ich mufste mich oft mit einem Teile der-
selben begnügen.

Was die Färbung des Gewebes betrifft, so gibt Miller an,
dafs nach seiner Erfahrung das Pikrokarmin resp. Pikrolithion-
karmin sich am besten eignet. Da mich hauptsächlich die Bak-
terienfärbung interessierte, habe ich zu den basischen Anilin-
farben und vornehmlich zum Gentianaviolett Zuflucht genommen.
Sehr gute Resultate lieferte mir auch die von Miller empfohlene
Gram sehe Methode, ebenso das Karbolsäurethionin. Effektvolle

362 Über anagrobe Mundbakterien and ihre Bedeutung.

Präparate (Fig. 1 und 6) erhielt ich durch die folgende Nog-
gerathsche Mischung:

Methylenblau 2 g

Gentianaviolett 4 »

Methylgrün 1 »

Krisoidin 4 '»

Fuchsin 3 »

Destilliertes Wasser 200 »

Dafs es übrigens schwer hält, über Färbungsmethoden einig
zu werden, bewies mir die Tatsache, dafs ich mit dem von
Miller angegebenen Färbungsverfahren keine guten Präparate
erzielen konnte. Miller schreibt : »Eine auffallend schöne Doppel-
färbung erhält man, wenn man die mit Fuchsin gefärbten Schnitte
auf einige Minuten in eine Vesuvinlösung bringt, sie dann mit
Wasser abspült, auf einige Minuten in Alkohol legt, dann in
Nelkenöl aufhellt und sie in Kanadabalsam einlegt. Die Bak-
terien zeigen sich rot, das Zahnbein gelbbraun, c Nach meinen
Erfahrungen war dieses Verfahren das am wenigsten erfolg-
reiche.

Was die herkömmliche Einteilung der Zahnkaries in die
Karies des Schmelzoberhäutchens, die des Schmelzes und die
des Zahnbeins anbelangt, so hat dieselbe für das Studium der ver-
schiedenen Bakterien, welche bei der Karies tätig sind, weniger
Bedeutung. Sie hätte Wert, falls wir es mit sehr akuter Karies
zu tun hätten, wo beim schnellen Verlauf die Bakterien nicht
zum Verfall kommen und deshalb mangels Degenerations-
formen einem genaueren Studium unterzogen werden können.
Das dürfte indes höchst selten vorkommen und in der Regel
wird man es immer auch mit Degenerationsformen zu tun haben,
die auch bei genauen Untersuchungen, wie die von Miller waren,
Täuschungen hervorrufen können.

Wie ich in meinen Präparaten sehen konnte, ist bei kariösen
Zähnen das Schmelzoberhäutchen in eine solche Anhäufung von
Bakterien umgewandelt, dafs Wedels Ausdruck »matrix von
Leptotrix bucalisc, womit er das Schmelzoberhäutchen belegt.

Von Dr. Antonio Rodella. 363

insofern den Nagel auf den Kopf trifft, als er die beständige
Wucherung von Leptotrix schildert. Von einem genetischen Zu-
sammenhang zwischen Schmelzoberhäutchen und Bakterium kann
natürlich heutzutage nicht die Rede sein.

Miller schrieb: »In den letzten Stadien der Karies sehen
wir nur eine aus Bakterien (Kokken, Stäbchen und Fäden) zu-
sammengesetzte Membran, welche durch den Rest des Häutchens
zusammengehalten wird.c Man darf sich jedoch nicht täuschen
lassen, da wegen der schlechten Färbbarkeit der Leptotrix- und
Streptotrixfäden in diesem Stadium der Karies es leicht vor-
kommen kann, dafs die einzelnen Fäden wie aus Kokken, Ba-
zillen und kleinereu Fäden zusammengesetzt erscheinen (wie
z. B. in den Abbildungen 1, 2, 4, 5).

Was den Schmelz angeht, so ist es bekannt, dafs die Bak-
terien auf den normalen Schmelz keine direkte Wirkung auszu-
üben imstande sind und dafs, wie Miller richtig bemerkte,
nachdem der Schmelz einmal von der Karies durchbohrt ist, die
weitere Zerstörung desselben hauptsächlich von der inneren
Fläche vor sich geht. Die äufsere Fläche des Schmelzes hat
keine Anlage, von den Bakterien angegriffen zu werden. Die
Dissolution des Schmelzes ist eine indirekte und auf die chemische
Leistung der Bakterien zurückzuführen. Der Schmelz hat jedoch
für die Möglichkeit der Entstehung der Karies eine, ausschlag-
gebende Bedeutung und mag die Erklärung geben, warum mecha-
nische Einflüsse, welche das Verschwinden eines Teils des Schmelzes
zur Folge haben, auch zur Karies führen. Der Schmelz und seine
Beschaffenheit kann auch die Erklärung geben, warum manche
Zähne leichter von der Karies befallen werden als andere.

Die Karies des Zahnbeins ist in so trefflicher Weise von
Miller studiert und beschrieben worden, dafs ich nur diejenigen
Punkte erwähnen möchte, die von Millers Untersuchungen in
irgend einer Beziehung abweichen oder dieselben ergänzen. Vor
allem beschreibt Miller das Vorschreiten der Bakterienmassen
im Zahngewebe und als eine sehr seltene Eigentümlichkeit des-
selben führt er einen Fall an, wo die Bakterien in einer Art vor-
dringen, die sich am besten mit dem Marsch einer Armee in ein

364 Vber anaörooe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

feindliches Gebiet vergleichen lälst. In der von Miller ge-
gebenen Abbildung sehen wir zwei durch Zwischenräume ge-
trennte, von Bazillen gebildete Bogen, welche konzentrisch ein
am äulseren Zahnrande befindliches Nest von Mikroorganismen
umspannen. Miller gibt an, dafs es ihm nicht möglich war,
für diese Erscheinung eine Erklärung zu finden. Ich habe einen
Fall studiert, den ich abbilden liefs, wobei das Eindringen der
Bakterien ins Gewebe sich mit einem hämorhagischen Nieren-
infarkt vergleichen liefs. Ich legte mir dabei die Frage vor, ob
die von Miller beobachtete Erscheinung nicht etwa dadurch
hervorgerufen worden sei, dafs in einem dem meinen ähnlichen
Falle das Zahnbein vom Bakterieninfarkt zwar infiziert, aber nicht
vollgepfropft wurde, so dafs die Schnitte die von Miller be-
schriebene Form aufwiesen (Fig. 3).

Ich mufs ferner noch einen Punkt hervorheben, der bei
Millers Untersuchungen unklar ist und wahrscheinlich auf un-
genauer Interpretation der Präparate und mangelhafter Techuik
in den Kulturmethoden beruht. Miller schreibt, nachdem er
die Fransen von Bakterienfäden am Rande des kariösen Zahn-
beins geschildert hat, folgendes: »Untersuchen wir eine etwas
tiefer gelegene Zone, so finden wir die Kanälchen meist mit
Mikrokokken und Stäbchen gefüllt, erstere aber entschieden vor-
herrschend, c Diese Angabe von Miller, dafs in den mikro-
skopischen Präparaten die Mikrokokken vorherrschen, sollte er-
warten lassen, dafs auch bei den Kulturmethoden am meisten
Kokken zutage träten. Das ist indessen nicht der Fall und so-
wohl bei der Beschreibung seiner eigenen Versuche wie auch
jener von Vignal undGalippe, ferner auch jener von C. Jung
kommt Miller zum Schlüsse, dafs die Kulturen sowohl auf Agar
wie auf Gelatine fast ausschließlich Bazillen zutage gefördert
haben. Auf 18 Untersuchungen von kariösen Zähnen, die von
Vignal und Galippe angestellt wurden, war z. B. nur fünf-
mal ein grofser Kokkus vorhanden und das nur bei solchen
Zähnen, wo die Karies schon bedeutend vorgeschritten war und
die Kanälchen schon sehr erweitert waren. Bakterien wurden
dagegen in jedem Falle beobachtet. Ungefähr gleich lauten die

Von Dr. Antonio Rodella. 365

Untersuchungen von Miller und Jung. Millers Angabe, dafs
man viele Präparate finde, die beinahe ausschliesslich Kokken
zeigen, ist daher schwer verständlich. Wir müssen also auch
hier die früher von uns geäufserte Annahme gelten lassen, dafs
es sich auch in den Fällen, wo Miller ausschließlich Kokken
vorzufinden glaubte, um Bazillen gehandelt habe, die degeneriert
waren, und deshalb sich nur stellenweise und nur punktförmig
färben liefsen. Auf alle Fälle sind wir nach Durchmusterung
von vielen Präparaten zur Überzeugung gekommen, dafs die
bazilläre Infektion bei der Karies eine viel gröfsere Ausdehnung
hat als die Infektion durch Kokken.

Auch mit folgendem Passus von Miller kann ich mich
nicht einverstanden erklären : »Diese beiden Bakterienarten kommen
gewöhnlich in getrennten Kanälchen vor; so sehen wir häufig
das eine nur mit Mikrokokken, das daneben liegende nur mit Stäb-
chen vollgepfropft, doch findet man auch Kanälchen, die mit
einer Mischung beider Arten angefüllt sind. Selten sieht man
das eine Ende des Kanälchens mit Stäbchen, das andere mit
Kokken gefüllte Was für Miller die Ausnahme wäre, ist aber
für unsere Untersuchungen die Regel, nämlich die Mischinfektion
von Kokken und Stäbchen in ein und demselben Kanälchen
(Fig. 9).

Was ich am meisten hervorheben möchte und wovon in den
Mi 11 ersehen Untersuchungen keine Rede ist, ist das häufige
Auftreten in den mikroskopischen Präparaten von Köpfchen-
bakterien, die, wie aus meinen kulturellen Untersuchungen als
sehr wahrscheinlich hervorgeht, Putrificusarten darstellen (Fig. 6
und 7).

Weitere Formen, die von Miller keine Berücksichtigung
fanden, sind ebenfalls sporenhaltige Bazillen, die, blafs gefärbt,
hie und da, aber immerhin seltener als die Köpfchenbakterien,
sich in den Präparaten zeigen. Einigemal sah ich in meinen
Präparaten typische Klostridienformen, welche gleichfalls schwach
gefärbt erschienen. Im Widerspruch zu der oben angegebenen
Behauptung von Miller habe ich in meinen Präparaten von
kariösem Zahnbein auch Spirillen und schön gewundene Spiro«

366 Über anaörobe Mundbakterien und ihre Bede ata ng.

käten wahrgenommen. Wenn man einmal die Aufmerksamkeit
auf alle diese Formen lenken wird, die nach meinem Dafürhalten
zu den Anaeroben gerechnet werden müssen, werden dieselben
sicher häufiger vorgefunden werden (Fig. 8).

K0n8tiiohe Zahnkaries.

Schon seit 1867 hatte Magitot verschiedene Experimente
vorgenommen, um die Wirkung der Säuren, der Salze und ver-
schiedener Gärungsprodukte von Kohlehydraten und Eiweifs-
stoffen auf die Zähne zu studieren. Das Ergebnis dieser Unter-
suchungen war, dafs sich mittels verschiedener Substanzen an
den Zähnen Veränderungen hervorrufen liefsen, welche makro-
skopisch denjenigen der Zahnkaries ganz ähnlich waren. Er
schrieb diese Veränderungen der Wirkung von Säuren zu. Bei
den Gärungen würden die Säuren von den Gärungserregern ge-
bildet, auf Kosten der vergärenden Substanzen. Mille s und
Underwood konstruierten einen grofsen Inkubator, in welchem
sie während 6 Monaten eine Mischung von Milch, Brot, Fleisch,
Speichel und kariösen Zähnen bei Bruttemperatur liefsen. Sie
mulsten aber erklären: »Nachdem dieses höchst unappetitliche
Experiment 6 Monate fortgesetzt worden war, verbreitete die
Fäulnis des Inhalts in dem Behälter einen so üblen Geruch, dafs
wir genötigt waren, das Experiment aufzugeben. Meine Gesund-
heit hatte dadurch gelitten, da ich jener schlechten Ausdünstung
anhaltend ausgesetzt war.c Mit diesem Experiment konnte aber
keine der Zahnkaries ähnliche Veränderung verursacht werden.

Miller bemerkte hiezu richtig: »Es mufs einem jeden ohne
weiteres einleuchten, dafs ein solcher Versuch gänzlich mifslingen
muf8te, da man in einem faulenden Gemisch nimmermehr Karies
wird erzeugen können. Es fehlt dazu die nötige Säure. c Miller
wiederholte dann den Versuch, indem er denselben in geeigneter
Weise abänderte.

Er zerschnitt Zähne, welche von Karies frei waren, in kleine
Stücke und stellte dieselben in eine Mischung von Brot und
Speichel. Diese Mischung wurde 3 Monate lang bei einer Tem-

Von Dr. Antonio ftodella. 367

peratur von 37 ° C gehalten und während dieser Zeit verschiedene-
mal erneuert. Nach dieser Zeit beobachtete man bei fast allen
Stücken mehr oder weniger deutliche Veränderungen. Bei vielen
konnte man diese künstlich kariös gemachten Zähne von auf
natürlichem Wege kariös gewordenen unmöglich unterscheiden.
Als einziger Unterschied zwischen künstlicher und natürlicher
Karies ergab sich, dafs das künstlich kariös gemachte Zahnbein
nicht die Jodreaktion gibt. Wie soll man sich nun die künst-
lich hervorgerufenen Veränderungen der Zähne erklären?

Die harte Zahnsubstanz, welche bekanntlich aus Calcium-
phosphatkarbonat besteht, wird von den bei den Gärungsprozessen
gebildeten Säuren angegriffen und gespalten; die harte Zahn-
substanz würde also bei den Gärungen sich so verhalten wie der
kohlensaure Kalk, welcher in den Kulturen zugesetzt wird, um
die gebildete Säure zu neutralisieren. Die Hinzufügung von
kohlensaurem Kalk ist von vielen Autoren empfohlen worden,
um eine Peptonisierung von Eiweifssubstanzen durch Reinkulturen
von peptonisierenden Bakterien oder auch durch Mischkulturen
von diesen letzteren mit anderen Bakterien zu ermöglichen. Die
Säure, welche in diesen Experimenten hauptsächlich die Entkal-
kung der Zähne hervorruft, ist die Milchsäure, was man schon
im voraus aus dem Umstände annehmen konnte, dafs durch
Gärung der Kohlehydrate im Munde hauptsächlich Milchsäure
gebildet werde ; überhaupt ist diese Säure das Hauptprodukt bei
den meisten Aerobien- und Anaärobiengärungen. Den Beweis
für diese Anschauung kann man durch die Ewald sehe Probe
oder durch andere chemische Verfahren liefern; anderseits weifs
man, dafs die Zahnsubstanz in verdünnten Lösungen von Milch-
säure schnell entkalkt wird. Sind die Zähne auf einem Gebiet
einmal entkalkt und hat das Calciumphosphatkarbonat die Aci-
dität der Lösung entweder neutralisiert oder abgeschwächt, so
sind die günstigsten Bedingungen geschaffen für die Wirkung
der peptonisierenden Fermente der Bakterien. Es mufs aber
hervorgehoben werden, dafs die Aörobien allein, wenn sie auch
die Entkalkung verursachen könnten, doch niemals imstande
wären, die organische Substanz der Zähne aufzulösen. Diese

368 Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

Arbeit wird von den anaeroben Bakterien geleistet.
Dieser Punkt ist eigentlich das wichtigste Ergebnis unserer Unter-
suchungen. Aus dem Versuch von Miller wurde man einiger-
maßen orientiert, in welcher Weise die Karies vor sich gehe.
Über die eigentlichen Erreger derselben wufste man aber gar
nichts, da dieser Autor niemals mit Reinkulturen Zahnkaries her-
vorgerufen katte. Das Fehlen der Jodreaktion wurde von Miller
richtig erklärt, welcher annahm, dafs von den vielen Bakterien-
arten, die sich beim Kariesprozefs beteiligen, die eine wenigstens,
welche die Jodreaktion bedinge, außerhalb des Mundes nicht zu
wachsen scheine. Diese Erklärung müssen wir nur insofern ver-
ändern, dafs wir sagen, dafs diejenigen Arten, welche die
Jodreaktion bedingen, aufserhalb des Mundes unter
aerobiotischen Zuständen nicht wachsen können.

Einen anderen Punkt möchten wir erwähnen, der von Miller
falsch erklärt wurde und der scheinbar mit unserer obigen Fest-
stellung, dafs die Fäulnisanaörobien die Ursache der Karies sind,
im Widerspruch steht. Miller schreibt: »Bewahrt man einen
frisch extrahierten kariösen Zahn in einer faulenden Eiweifslösung
längere Zeit auf, so hört die Erweichung des Zahnbeins voll-
kommen auf, während das schon erweichte Zahnbein allmählich
verschwindet. c Diese Tatsache wurde von Miller ins Treffen
geführt, um die Fäulnistheorie zu bekämpfen. Dabei hat aber
der Genannte übersehen, dafs es Fäulnisanaörobien gibt, wie z. B.
Bacillus bifennentans sporogenes, welche imstande sind, beide
Aufgaben zu erfüllen, welche also Kohlehydrate zu vergären ver-
mögen wie auch Eiweifs zu zersetzen. Im Munde fehlt die
Säurequelle niemals, welche in den künstlichen Unter-
suchungen der obenerwähnten Autoren natürlich nicht vorhanden
war, weil hier bei der Gärung der Eiweifsstoffe die Verhältnisse
der verschiedenen Bakterien zueinander ganz andere waren als
im Munde. Deshalb ist auch die folgende Behauptung Millers
gar nicht zutreffend: »Die Auffassung, dafs beim Zerfall der Pulpa
die zur Erweichung des Zahnbeins nötige Säure gebildet wurde,
ist unhaltbar. Einmal, weil die Reaktion putrider Pulpen stets
alkalisch ist, sodann weil im Fall eine saure Reaktion unter ganz

Von Dr. Antonio Rodella. 369

besonderen Umständen auftreten sollte, alle Bakterien der Pulpa
ihr Lebeh einbüfsen würden, bevor nur ein Bruchteil der zu
der obenerwähnten Entkalkung erforderlichen Säuremenge ge-
bildet würde, c Die Behauptung, dafs die Bakterien durch die
gebildete Säuremenge getötet würden, ist hinfällig, wie wir schon
in unserer vorläufigen Mitteilung dargetan haben. Wie wir da-
mals berichteten, gibt es unter den Mundanaörobien solche, welche
in 2 °/ milchsäurehaltigen Nährböden gut gedeihen, einige darunter,
die sogar in Nährböden von 3°/ dieser Säure wachsen können.
Die Tatsache, dafs die Reaktion putrider Pulpen stets alkalisch
sei, läfst sich dadurch erklären, dafs die beim Zerfall der Pulpa
gebildete Säure vom Zahnsalze gebunden wird. Dafs übrigens
bei der Fäulnis auch Säure gebildet werden kann, ist durch die
in jüngster Zeit erschienene Abhandlung von Gottlieb Salus be-
wiesen worden.

Die Frage, ob die Zahnkaries durch einen spezifischen Mikro-
organismus bedingt sei oder ob dieselbe von verschiedenen Bak-
terien hervorgerufen werden könne, haben sich viele Autoren
vorgelegt. K 1 e n k e beschrieb im Jahre 1850 eine Protokokkus-
art, welche Schmelz und Zahnbein in ähnlicher Weise verflüssigen
sollte, wie der Hausschwamm das Holz der Möbel erweicht.
Kien ke sagt: »Wir haben in dem Prozefs, welchen ich der Kürze
wegen Destnictio dentis vegetativa nennen will, den Pilz vor uns,
der durch seine Vegetation die Zahnmasse erweicht und zerstört
und aus den chemischen Elementen derselben sich selbst ernährt ;
es ist dieser Parasit ein wahrer Protococcus dentalis.« Die fol-
genden Forscher, unter denen hauptsächlich Miller, Vignal,
Galippe und Jung zu erwähnen sind, sind hierin etwas vor-
sichtiger gewesen. Das Ergebnis der von diesen Autoren ange-
stellten Untersuchungen läfst sich im folgenden Wort von
Galippe zusammenfassen: »II n'y a point un parasite de la
Carie, il y a des parasites de la Carie.« Dem möchte auch ich
beipflichten, mit der Einschränkung jedoch, dafs einzelne be-
stimmte Arten und gerade diejenigen, welche von diesen
Autoren aus den obenerwähnten Gründen übersehen worden
sind, notwendigerweise vorhanden sein müssen. Mit

370 Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung.

diesem Vorbehalt kann man auch die Mi Her sehe Definition der
Zahnkaries annehmen, die also lautet: »Die Zahnkaries ist ein
chemisch-parasitärer Vorgang, bestehend aus zwei deutlich aus-
geprägten Stadien: der Entkalkung resp. Erweiterung des Ge-
webes und der Auflösung des erweichten Rückstandes«, — und
der wir also nur anzufügen hätten: bedingt hauptsächlich
durch die Tätigkeit der anaeroben Bazillen.

Die Richtigkeit dieser Auffassung geht auch aus folgenden
Experimenten hervor. Ich entkalkte Zähne mittels 5 — lOproz.
Salzsäure und nach stattgehabter Entkalkung neutralisierte ich
die saure Reaktion der Zähne, indem ich dieselbe in einem
Kolben Wasser, welches mit einigen Tropfen Ammoniak alkalisch
gemacht wurde, einen Tag lang liefs. Nachher tat ich die Zähne
in Bouillonreinkulturen von Bacillus proteus vulgaris, Bacillus
fluorescens liquefaciens und von den gewöhnlichen Eiterkokken
hinein. Eine vollständige Peptonisierung des Zahnknorpels konnte
auch nach Verlauf vieler Wochen nicht beobachtet werden. Auch
bei Verwendung von Mischkulturen der aöroben Bakterien, die
aus Agarplatten isoliert wurden, konnte kein besseres Resultat
erzielt werden. Dagegen gewann ich eine vollständige Peptoni-
sierung der erkalkten Zähne durch Anwendung von Reinkulturen
des aus dem Munde isolierten Bacillus putrificus wie auch von
Mischkulturen der von mir rein gezüchteten anagroben Bazillen
der Buttersäuregruppe. Das Ausbleiben der Peptonisierung bei
den Versuchen mit Aöroben konnte nicht durch die Säurebildung al-
lein erklärt werden, obwohl dieselbe gewifs eine grofse Rolle spielt,
was sich auch dadurch kundgab, dafs schon nach viertägigem
Aufenthalte im Brutschrank eine deutliche Gasbildung bemerkbar
war. Dieselbe war auch in den mit Reinkulturen von Kokken
angestellten Versuchen aufgetreten und die Reaktion des Nähr-
bodens war auch hier deutlich sauer. Aber selbst nach wieder-
holter Neutralisierung des Substrates waren weder die Kokken
noch die Mischung der aöroben Bakterien imstande, das Zahn-
bein so zu verändern, wie dies die Anaöroben allein bewirkten.
Andere Versuche machte ich mit vollständig gesunden Zähnen,
welche ich in Röhrchen, die sich von den Grub ersehen nur

Von Dr. Antonio ftodella. 371

durch Erweiterung des Halses unterschieden, steckte und dieselben
bei 100° eine l j 2 Stunde lang im Koch sehen Topfe sterilisierte.
In diese Röhrchen brachte ich noch 10 cem 2proz. Zucker-
bouillon, der ich ferner einige Zuckerkristalle beifügte. Solche
Kulturen wurden mit den isolierten Anaeroben und hauptsäch-
lich mit Bacillus bifermentans sporogenes infiziert und dann das
Vakuum hergestellt. Nach 4 — 6 wöchigem Aufenthalt bei 37°
wurden die Zähne untersucht. Der Schmelz war von den Bak-
terien nicht angegriffen, dagegen waren die Wurzeln der Zähne
so erweicht, dafs sie mit einem Seziermesser zerschnitten werden
konnten.

Sie zeigten ferner alle die makroskopischen Veränderungen,
welche der Karies eigen sind.

Wenn die mit den Anaeroben eingeimpfte Zuckerlösung, die
beim Öffnen der Gr übersehen Röhrchen sehr übelriechend war
und sauer reagierte, alkalisch gemacht wurde, konnte man bei
zweckmälsiger Erneuerung der Flüssigkeit eine vollständige Zer-
störung des Zahngewebes hervorrufen, welche als wahre Fäulnis
anzusehen war. Somit ist die Annahme, dafs die Zähne auf ser-
halb der Mundhöhle nie faulen, widerlegt.

Die grolse Bedeutung der Reaktion des Substrats für die
Tätigkeit der anaeroben Mikroorganismen sowohl bei den im
Munde sich abwickelnden Prozessen wie auch bei den verschie-
denen durch genannte Mikroorganismen im Magen und Darm-
traktus hervorgerufenen Erscheinungen werde ich in der folgenden
Mitteilung auseinandersetzen.

Berichtigung.

In der Fufsnote 1 auf S. 355, Zeile 1 und 4 von unten lies Btatt
mikroskopisch makroskopisch.

Arakir für Hygiene. Bd. LIIL 26

372 Über anaärobe Mündbakterien und ihre Bedeutung.

Literatur.

Achalme. Annales de l'Institut Pasteur. Annee XVI, 1902.

Band is eh. Berl. Klin. Woch. Zitiert nach P. Ritter.

Beijerinck- Ref. Kochs Jahresberichte d . GärungsorganiBmen, 1893, S. 364

Beitzke. Zentralbl. f. Bakt. Referate, 1904.

Bien stock. Archiv f. Hygiene, Bd. 36, 1899 u. Bd. 39, 1901.

Frosch. Zeitschrift f. Hygiene, Bd. 13.

Konrad. Archive of Dentistry, 1886.

LewkowiczKsawory. Ref. Bull. Ann. Pasteur., 1903, 30/12.

Matzenaue r. Archiv f. Dermath. u. Syph., 1901.

Miller. Die Mikroorganismen der Mundhöhle. G. Thieme, 1892.

Miller u. Underwood. Zitiert nach Miller.

Nencki u. Lachewicz. Pflügers Archif f. d. ges. Phyriologie, Bd. 33.

Pf äff. Abhandlung der Zähne, 1756.

Passini. Jahrb. f. Kinderheilk, N. F. 57, H. 1.

Plaut. Handbuch d. pathog. Mikroorganismen von Kolle u. Wassermann, Bd. 1.

Rasmussen. Om Dryking af Mikroorganisme Uro Spyt af sunde Me-
nesker, 1883.

Rodella. Bakteriologische Befunde im Eiter eines gashaltigen Abszesses.
Zentralbl. f. Bakt., 1903, Nr. 3. — II bacillo fusiforme di Vincent
Reale Societa ital. d'igiene, 1903, Nr. 3. — Einiges zur Technik der
bakt. Untersuchungen der Mundhöhle. Zentralbl. f. Bakt., I. Abt.,
Bd. 37, 1904.

Salus. Archiv f. Hygiene, 1904.

Schattenfroh u. Grafsberger. Ebendaselbst, Bd. 37, 1900 u. Bd. 48 1903.

Spiegelberg. Zitiert nach P. Ritter.

Tissier. Annales de llnstitut Pasteur, 1902 et 1903.

Vignal u. Galippe. L'odontologie, März 1889.

Veillon et Zuber. Archives de pathologie.

Wedl. Pathologie der Zähne. Zitiert nach Miller.

Von Dr. Antonio Rodella. 373

Erklärung zu Tafel V.

Fig. 1. Kariöses Zahnbein. Querschnitt. Viele den Streptokokken ahnliche
Gebilde sind bei näherer Betrachtang als Leptotrix- bzw. Streptotrix-
fäden aufzufassen. Färbung mit der Noggeratschen Mischung.

Fig. 2. Querschnitt durch einen stark kariösen Zahn. Die Infektion erfolgt
in der Richtung der Zahnbeinkanälchen und auch parallel der
Schnittfläche. Karbolthioninfärbung.

Fig. 3. Zuckern utähnliche Infektion des Zahnbeins. Gram sehe Färbung.

Fig. 4. Querschnitt durch einen Backenzahn. Deutliche Leptotrix- und
Streptotrixfransen (meistenteils Involutionsformen) am Rande des
Zahnes. Durchwucherung der Grundsubstanz mit Kokken, plumpen
Bazillen, schmalen Bazillen und einigen Köpfchenbakterien. G ram-
sche Färbung.

Fig. 5. Schöne Fäden am Rande des Zahnbeines. Noggerat sehe Färbung.

Fig. 6. Querschnitt durch einen Backenzahn; zeigt die Kanälchen fast aus-
schliefslich mit Bazillen infiziert. In der äufsersten Partie des
Präparats neben schlanken Bazillen sind verschiedene Kokken -
formen zu erkennen. Zwei Köpfchenbakterien (Putrifiensarten)
treten sehr deutlich hervor, andere sind in den Kanälchen mit ver-
schiedenartigen Bakterienformen vermischt Färbung mit der
Noggeratschen Mischung.

Fig. 7. Querschnitt durch einen Backenzahn; zeigt sehr viele Köpfchen-
bakterien (Putrifiensarten), spirochätenahnliche Gebilde, Streptotrix-
arten, schlanke Bazillen und wenige Kokken. Karbolthioninfärbung.

Fig. 8. Querschnitt durch einen Spitzzahn. Es war in dem Zahn wie ein Nest
von feinen Spirillen und anderen Formen, die ich nicht erkennen
konnte (Degenerationsformen? Kunstprodukte?). Färbung mit der
Noggeratschen Mischung.

Fig. 9. Querschnitt durch einen Backenzahn. Die einzelnen Kanälchen sind
mit Bazillen und Kokken vollgepfropft. Karbolthioninfärbung.

Die Zeichnungen wurden von Herrn Dr. med. Marangoni der
Kgl. Chirurgischen Klinik zu Padua ausgeführt.

Vergrößerung der Fig. 8: Reichert, Oc. 8, Imm. »/«i
> > » 9: Reichert, » 6, » Vis«

Sämtliche übrigen Abbildungen wurden mit Oc. 4, Imm. */,, gezeichnet.

Bei der Reproduktion der Tafel V, Figur 6, sind leider einige Köpfchen-
bakterien, die im Original deutlich sichtbar waren, ausgeblieben.

26*

Ül)er die Grenzen der Verwendbarkeit des Malaehitgrün-
agars znm Nachweise der Typhnsbazillen im Stnhle.

Von
Dr. med. K. Nowack.

(Aas dem Hygienischen Institut der Universität Berlin. Direktor: Geh.
Medisinairat Prof. Dr. M. Rubner.)

Nachdem Löfflerf 1 ) einen Malachitgrünagar zum kulturellen
Nachweise der Typhusbazillen in Fäces, Wasser und Erde
empfohlen hatte, haben Lentz u. Tietz ( 2 ) an Typhusstühlen
die Löffl ersehe Methode nachgeprüft und eine besondere
Untersuchungsmethode geschaffen, mit der sie Typhusbazillen
noch nachweisen konnten, wo das v. Drigalski-Con radische ( 6 )
Verfahren versagte. Jörns ( 3 ) konnte bei seinen Versuchen
mit künstlichen Typhusstühlen, bei denen er die Zahl der vor-
handenen Typhusbazillen genau kannte, diese nach dem Ver-
fahren von Lentz u. Tietz noch nachweisen bei einem Ver-
hältnis der Typhusbazillen : Stuhlkeimen = 1 : 8000, während ihm,
ebenso wie Ficker u. Hoffmann ( 6 ) (zitiert nach Klinger),
der Nachweis der Typhusbazillen nach dem Verfahren von
v. Drigalski-Conradi nur bis zu dem Verhältnis von 1:300
gelang. Schliefslich kam auch Klinger ( 4 ), der an Typhus-
stühlen vergleichende Untersuchungen über die Leistungsfähigkeit
der neueren Methoden zum Nachweise der Typhusbazillen in den
Darmentleerungen anstellte, zu dem Resultate, dafs die Lentz
u. Tietz sehe Methode die leistungsfähigste sei; er verlangt
aber eine ganz bestimmte Reaktion des Agars.

Ober d. Verwendbarkeit d. Malachitgrünag. etc. Von Dr. med . K. Nowack. 375

Diese von Klinger zuerst aufgestellte Forderung nach
einer ganz bestimmten Reaktion des Agars forderte zur Nach-
prüfung auf, weil seine Resultate bei den vergleichenden Unter-
suchungen über die Einwirkung des Malachitgrünagars auf das
Wachstum der Typhus- und Kolibazillen mit den von Jörns
gefundenen nicht übereinstimmen. Jörns fand ebenso wie
Löffler, dafs Typhusbazillen bei einer Konzentration des Ma-
lachitgrüns Nr. 120 der Höchster Farbwerke von 1 : 1000 noch
auswuchsen, Kolibazillen aber nicht. Dagegen stellte Klinger
fest, dals auf lakmusneutralem mit 0,1 °/ (= 1 : 1000) desselben
Malachitgrüns versetztem Agar Typhusbazillen in 24 Stunden
nicht, Kolibazillen aber verhältnismäfsig gut und dafs bei 0,08 °/
(= 1 : 1400), 0,07 °/ {= 1 : 1600), 0,06 °/ (= 1 : 1800) und 0,05%
(= 1 : 2000) die Typhusbazillen zwar immer besser, die Koli-
bazillen aber noch üppiger auswuchsen.

Die folgende Tabelle giebt eine vergleichende Übersicht über
die Zusammensetzung des Agars und die verwendete Sorte und
Menge des Malachitgrüns bei den bisherigen Untersuchern. Die-
jenigen Angaben, welche in den betreffenden Arbeiten nicht
ausdrücklich gemacht sind, deren Annahme aber berechtigt ist,
sind in der Tabelle mit einem ? versehen.

(Tabelle siehe Seite 376.)

Ich verwendete wegen der viel gröberen Billigkeit ebenso
wie Klinger Liebigs Fleischextrakt bei der Herstellung des
Agars, da das ebenfalls billige Pf erdefleisch wasser nach Ficker
wegen seines hohen Zuckergehaltes das Wachstum des Bacillus
coli sehr begünstigt. Die Bereitung des Agars geschah folgender-
mafsen : In einem 2 1 Kolben wurden 1 1 destilliertes Wasser,
5 g Kochsalz , 10 g Pepton sicc. Witte , 10 g Liebigs Fleisch-
extrakt und 20 g Stangenagar gegeben und im kochenden
Wasserbade oder schneller im siedenden Kochsalzbade (gesättigte
Kochsalzlösung vom Siedepunkt 107 °) gelöst. Genau 20 ccm
des flüssigen Agars wurden mit \ Normalnatronlauge bis zum
Phenolphhtaleinneutralpunkte titriert und zu dem übrigen gemes-

376 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagars etc.

5

5'
'S

o

ST

P

ff

p

a

5

CD tO

8 'S

p $•

SB

5 3 1

f If I-

3 2

&8

CO

o

P-

e-

Ot

OD

P
P
9Q

OD 00
C 2
£ &

S.8L 5 • P 2

Ige g."

— QD

P t-l

SL g

CS
p
ff

s

p

s-

©

3

t2j
SO

5

©

>
JQ

ff

P
P

§*

CS3

P

OB

5
B

P

5 o
3 ff

ff •

►

(KJ

8»

©

8?

O
P

H

er

©

^ hrjpc S 8» S ©

3 5 er 8 £<« 2

5*7*2. eu&o-o
• ' ff© g© cr

o

8

o

2. P © © PT

5. p ©
O © ©
HB 3 p.

Von Dr. med. E. Nowack. 377

senen Agar die berechneten Mengen Normalnatronlauge — nur
bei kleinen Mengen Agar der gröfseren Genauigkeit wegen
% Normalnatronlauge — zugesetzt. Der unverminderte Alkali-
gehalt der Natronlauge wurde vor jedesmaligem Gebrauche durch
Titrierung gegen % Normal- resp. Normalschwefelsäure festgestellt.
Der Lakmusneutralpunkt des Agars lag bei 0,5— 0,6 °/ Normal-
natronlauge, der Phenolphthaleinneutralpunkt bei 1,9 — 2,0 °/
(einmal bei 2,2%) Normalnatronlauge; also lag der Lakmus-
neutralpunkt 1,3— 1,5°/ (1,6 — 1,7%) Normalnatronlauge unter
dem Phenolphthaleinneutralpunkte gegenüber etwa 1,6 — 1,8%
des von Klinger verwendeten Agars. Wie viel Prozent Normal-
natronlauge bis zum Phenolphthaleinneutralpunkte verbraucht
wurden, darüber gibt Klinger nichts an. Nach dem Neutrali-
sieren wurde der Agar zur Ausscheidung der Salze in ein
kochendes Wasserbad gestellt und dann im Dampftopf durch
Watte filtriert. Darnach wurde das Malachitgrün in wässeriger
Lösung in der berechneten Menge zugesetzt. Gröfseren Mengen
Agars wurde Malachitgrün Nr. 120 auch in Substanz hinzu-
gefügt, dann aber aus den bei Kling er angeführten Gründen
erst nach dem Erkalten des Agars, der dann noch einmal ver-
flüssigt werden mufste. Wurde der fertige Malachitgrünagar auf
Röhren gefüllt, so genügte es, diese einmal 15 Minuten zu
sterilisieren.

Zur Verwendung kamen drei Sorten Malachitgrün von den
Höchster Farbwerken.

Malachitgrün Kristalle extra = chemisch reines oxalsaures

Salz des Malachitgrüns.

Malachitgrün Kristalle superfein = chemisch reines Chlorzink-
doppelsalz d. Malachitgrüns.

Malachitgrün Nr. 120 = chemisch reines Chlorzink-

doppelsalz d. Malachitgrüns
+ ca. 95,2% Dextrin.

Malachitgrün extra und superfein wurden als 1 pro m., Malachit-
grün Nr. 120 als 1 oder 2 proz. Lösungen in sterilem destillierten
Wasser angewendet.

j

378 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagara etc.

Die Versuchsanordnung war im wesentlichen dieselbe wie
bei Jörns. Von 18 — 24 stündigen Bouillonkulturen des Typhus-
stammes 101 und des Kolistammes F wurden mittels Tropf-
gläsern Verdünnungen in sterilem Leitungswasser hergestellt und
mit gleicher Tropfenzahl je zwei Schalen (ca. 9 cm Durchmesser)
von gewöhnlichem Agar und Malachitgrünagar gegossen. Die Koli-
bazillen wurden in — meist erheblich — gröfserer Menge ausgesät
als die Typhusbazillen, um den wirklichen Verhältnissen nach
Möglichkeit Rechnung zu tragen. Durch Vergleichen der Zahl
der ausgewachsenen Kolonien wurde das Verhältnis von Aussaat
zu Ernte bestimmt; die zweite Schale diente zur Kontrolle für
die gleichmäfsige Aussaat.

Die folgende Tabelle zeigt das Ergebnis der Versuche über
die günstigste Reaktion des Malachitgrünagars für die Typhus-
bazillen.

Tabelle U.
Malachitgrün Nr. 120, 1 : 2000.

Reaktion des Agars
in Prozent

Typhus

Koli

Normalnatronlauge

unter dem

Phenolphthalein-

Aus-

Ernte

Aus-

Ernte

neutralp.

saat

nach 42 Std.

saat

nach 42 Std.

2,2 •

200

44 = 22 %

438

215 = 49,1 <7o

1,8 •

200

21 = 10,5 »

438

1,4*

200

18= 9 >

438

1 ,3 (Lakmusneutral)

363

42 = 11,6 »

2456

1,0

363

48 = 13,2 >

2456

0,8

363

69 = 16,3 >

2456

0,6 •

200

27 = 13,5 >

438

276 = 62,8%

Der Phenolphthaleinneutralpunkt lag bei l,9°/ Normalnatron-
lauge, bei den mit * bezeichneten bei 2,2 °/ .

Zum Vergleich gebe ich einen Teil der Tabelle I aus der
Klinger sehen Arbeit wieder.

Von Dr. med. K. Nowack.
Malachitgrün Nr. 120 (Höchst).

379

Menge des Malachitgrüns
in Prozent

0,07 o/o

0,06°/,

0,06«»/.

Reaktion des Agars
in Prozent

Typh.

Koli |

i

Typh.

Koli

Typh.

Koli

Normalnatronlauge unter dem

i
nach 24 Std. \

nach 24 Std.

nach 24 Std.

Phenolphtbaleinneutralp.

1,8% (Lakmusnentral)

+

+

+

+

+

+

1,4°/.

+

+

+

+

+

1,2»

+

+

+

+

1,0 »

+

+

+

+

0,8 »

+

+

+

+

0,4 >

+

i

+

+

+

+

-f- zahlreiche, gut aasgewachsene Kolonien,
±_ spärliche, kaum sichtbare Kolonien,
kein Wachstum.

Es geht daraus hervor, dals bei stärker alkalischer Reaktion
ein etwas höherer Prozentsatz von Typhusbazillen auswächst als
auf lakmusneutralem Malachitgrünagar, dafs aber die Kolibazillen
auch bei lakmusneutraler Reaktion vollständig zurückgehalten
werden, während sie nach Kling er mindestens ebenso üppig
wachsen wie die Typhusbazillen. Nur der überhaupt nicht mit
Natronlauge versetzte — sauer reagierende — und der stark —
fast bis zum Phenolphthaleinneutralpunkte — alkalisierte Malachit-
grünagar begünstigte das Wachstum der Kolibazillen mehr als
das der Typhusbazillen.

Auffallend war, dafs das Verhältnis von Aussaat zu Ernte
so sehr hinter dem von Jörns angegebenen zurückblieb, der
bei einer Konzentration des Malachitgrüns Nr. 120 von 1 : 2500
dieses wie 2: 1 fand. Auch die von Klinger — Tabelle II in
der Klinger sehen Arbeit — angegebenen Zahlen der ausge-
wachsenen Typhusbazillen bleiben hinter den von Jörns er-
zielten Ernten bedeutend zurück.

Da bei Jörns und Klinger bei einer Konzentration des
Malachitgrüns Nr. 120 von 1 : 2500 resp. 1 : 2000 Kolibazillen
schon etwas wuchsen (siehe Tabelle I und Tabelle I der

380 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrün agars etc.

Klinge r sehen Arbeit), sie aber bei meinen Versuchen auf Agar
von bestimmter Reaktion bei 1 : 2000 noch vollständig zurück-
gehalten wurden, wurde versucht, ob sich durch Heruntergehen
mit der Konzentration des Malachitgrüns das Verhältnis von
Aussaat zu Ernte der Typhusbazillen bessern liefse. Die Versuche
ergaben folgendes:

Tabelle III.

Reaktion des Agars 0,8% Normalnatronlauge unter dem Phenolphthalein-
neutralp. Malachitgrün Nr. 120.

Konzen-

Typhus

Koli

tration des |

i

Malachit-

Aus-

Ernte

Aus-
saat

Ernte

grüns

saat

nach 22 Std.

nach 45 Std.

nach 22 Std.

nach 45 Std.

1 : 2500 !

900

95;= 10,6%

100 = 11,1 %

2300

1 :3000

900

106 = 11,8 »

106 = 11,8 »

2300

1:4000 i

91

—

24 = 26,4 »

66000

—

9 = 0,014°/

(!

900

134=: 14,8 »

146 = 16,2 >

2300

1 : 4167 \ 1

(aufd.2.S<-halel)

l

326

59 = 18,1 »

66 = 20,2 >

6800

3 = 0,04%

40 = 0,6%

1 : 5000 | i

500

71 = 14,2 »

73 = 14,8 »

2 730

7 = 0,3 >

326

104 = 31,9 »

104 = 31,9 »

i 6800

100=1,5 >

500 = 7,4 »

1 : 6250

500

96=19,2 »

—

1 2 730

945 = 35 »

—

1 : 7700

500

130 = 26 »

—

! 2 730

l

983 = 36 >

—

Jörn 8.

Konzen-
tration des
Malachit-
grüns

Typhus

Aus-
saat

Ernte

Koli

1:2500
1 :3000

337

;14 397

188 = 55,8%
10075 = 69,8 »

deutliches
Wachstum

Es wurden also auch mit bedeutend schwächeren Konzen-
trationen des Malachitgrüns Nr. 120, als Jörns anwendete, seine
günstigen Ernten nicht erreicht. Es wurde beobachtet, dafs bei
derselben Konzentration des Malachitgrüns die verschiedenen
Ernten in ziemlich weiten Grenzen schwankten (siehe 1 : 5000),
so dafs mitunter die Ernte bei einer höheren Konzentration

Von Dr. med. K. Nowack.

381

gröfser war als bei einer niedrigeren (siehe 1 : 4000, 1 : 4167 und
1 : 5000). Dein besseren Wachstum des Bacillus typhi entsprach
jedesmal auch eine Begünstigung des Bacillus coli. Es wurde
ferner festgestellt, dafs es für das Wachstum der Typhusbazillen
wenig ausmacht, wo die Konzentration des Malachitgrüns zwischen
1 : 2000 und 1 : 5000 liegt. Mit Bezug auf das Wachstum der
Kolibazillen ist hervorzuheben dafs, während bei einer Ver-
dünnung von 1 : 4000 bis 1 : 5000 höchstens ein geringes Wachs-
tum, meist erst nach ca. 48 Stunden, stattfindet, bei einer Kon-
zentration von 1 : 6250 die Ernte gleich auf 35 °/ hochschnellt.
Bei einem Versuche, der mit verschiedenen Typhusstämmen
zur Vergleichung der auf Malachitgrünagar erzielten Ernten an-
gestellt wurde, zeigte es sich wiederum, dafs in keinem Falle
das günstige Ergebnis Jörns' erreicht wurde und ferner, dals
die Ernten ganz verschieden ausfielen, wie die Zusammenstellung
in folgender Tabelle zeigt.

Tabelle IV.

Reaktion des Agars 0,8% Normalnatronlauge unter dem Phenolphthalein-
neutralp. Malachitgrün Nr. ISO, 1 : 4000.

Aussaat

Ernte
nach 46 Std.

Typhus Friedricbsha

in .

308

40 = 13 Vo

Halle . .

123

36 — 29,3 »

► Drigalski . .

181

10 = 6,5 »

► Trier I . .

344

12= 8,5 >

Milz . .

324

34 = 10,5 >

Niedlich . .

207

53 = = 25,6 »

► Jürgens . ,

267

31 = 11,6 »

► Timm . . .

264

43 = 16,3 »

> Musebold

391

16= 4,1 »

101 .. .

91

24 -— 26,4 >

Kol

iF

66 000

9— 0,014 i

Das verschiedene Verhalten verschiedener Typhusstämme
hinsichtlich des Wachstums auf demselben Malachitgrünagar hat
auch Klinger in Tabelle II seiner Arbeit beschrieben, von der
ich einen Teil mit einigen Zusätzen — die Umrechnung der

382 Übe? die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagars etc.

Ernte in Prozente — wiedergebe. Jörns, der sechs verschie-
dene Typhusstämrne benutzte, erhielt stets übereinstimmende
Resultate.

Malachitgrunagar 1,0 °/ Normalnatronlauge unter dem Phcnolphthalein-

neutralp.

Menge des Mala-
chitgrüns in Proz.

0,06%

0,05 •/,

Zahl der Kolonien
auf der Lakmuspl.

Koli. . .
Typhus . .

Typhus Ho
Typhus Be
Typhus Co

300

kleine Kol., die gröfsten

Stecknadelköpfe rofs

= 3°/

500

gut ausgewachsene Kol.

= 57.

800

gut ausgewachsene Kol.
= 20%

600

kaum sichtbare Kol.

= 6%

800
meist gut ausgewach-
sene Kol.
= 8°/

3000

gut ausgewachsene Kol.
= 30°/

1000
gut ausgewachsene Kol.

= 25 o/o

26

gut ausgewachsene Kol.
= 0,65 •/,

unzählbar, mindestens
10000

ca. 10000

> 4000

> 4000

Mit Bezug auf die Jo rn ssche Angabe , dafs eine ca. 4 Wochen
alte wässerige Lösung von Malachitgrün Nr. 120 die wachstum-
hemmende Wirkung auch gegenüber Typhusbazillen verstärkte,
habe ich folgendes feststellen können.

Tabelle V.
Malachitgrün Nr. 120, 1 : 2000, 2 proz. wässerige Lösung.

Reaktion des

13 Taue alte Lösung

frisch bereitete Lösung

Agars in Proz.
Normalnatron-

Typhus

Koli

Typhus

Koli

lauge unter d.
Phenolphtha-
leinneutralp.

Aus-
saat

Ernte
nach 43 Sld.

Aus-
saat

Ernte

nach

43Std.

Aus-
saat

Ernte
nach 43 Std.

kna 1 Ernte
Aus- „„ Ä .

8ftÄt '43 Std.

u

(Lakmus-
neutral)

1,0

0,8

363

363
363

42 = 11,6 '/o

48 = 13,2 >
59 = 16,3 »

2456

2456
2456

363

363
363

(aufd.2.Soha1el)

(auld.2.8chale2)

7 = l,9Vo

2456

2456
2466

Es trat also bei der frisch zubereiteten Lösung die Wachstum-
hemmende Wirkung auf die Typhusbazillen stärker hervor; zu

Von Dr. med. K. Nowack.

383

beobachten ist auch hierbei der Einflufs der Reaktion des Agars.
Bei denselben 18 resp. 5 Tage alten Lösungen war ein nennens-
werter Unterschied in der Wirkung nicht mehr festzustellen.

Bei Malachitgrün superfein und extra verhielt sich
das Wachstum der Typhus- und Kolibazillen bei verschiedenen
Konzentrationen folgendermaßen.

Tabelle VI.

Reaktion des Agars 0,8 % Normalnatronlauge unter dem Phenolphthalein-

nentralp.

Konsentratlon

des
Malachitgrün«

Malachitgrün superfein

Malachitgrün extra

Typhus

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Koli

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Typhus

Koli

Aus-
i saat

Ernte I Aus-
nach 22 Std. ! saat

Ernte
nach 22 Std.

1: 50000
1:100000

1:150000
1:200000

334
334

500
500

7= »,1V.
45 = 13,5 »

88 -= 17,6 »
202 — 40 »

21000
21000

2730
2000

900=-- 36%
2000 = 100 »j

500
500

62 = 12,4%
86 = 17,2 >

2730
2730

(aufd2.Schalel)

1060=39%

Es blieb also auch hier die erzielte Ernte von Typhus-
bazillen gegenüber den Jornsschen Erfolgen sowohl mit Malachit-
grün Nr. 120 als auch mit Malachitgrün Ia (Aussaat: Ernte =
4 : 1) erheblich zurück.

Da Malachitgrün Nr. 120 ca. 95,2 °/ Dextrin enthält, wurden
Versuche angestellt, welchen Einflufs ein höherer Dextringehalt
des Malachitgrünagars auf das Wachstum der Typhus- und Koli-
bazillen ausübte. Als Malachitgrün wurde das dextrinfreie
Malachitgrün superfein und Malachitgrün extra verwendet, von
denen das erste auch im Malachitgrün Nr. 120 enthalten ist.

Das Dextrin wurde in hochprozentiger (25%) wässeriger
Lösung angewendet, um eine Verdünnung des Agars möglichst
zu vermeiden; die Lösung wurde folgendermafsen hergestellt:
25 g Dextrin pur. von Schering wurden in 100 ccm destilliertem

384 "Über die Grenzen der Verwendbarkeit des MalachitgrÜnagars etc.

Wasser im kochenden Wasserbade gelöst, filtriert und im Dampf-
topfe sterilisiert. Die berechnete Menge wurde dem flüssigen
neutralisierten filtrierten Agar zusammen mit dem Malachitgrün
mittels steriler Pipette zugesetzt.

Tabelle VII.

Reaktion des Agars 0,8 °/ Normaluatronlauge unter dem Phenolphthaleln-
nentralp. — Malachitgrün superfein.

Menge

Konzentration

r

Typhus

i

Koli

des Dextrins

des

i

in Prosen t

Malachitgrüns

Aas-
saat

Ernte
nach 69 Std.

Aus
paat

Ernte
nach 69 Std.

1 1:50000 334

11= 3,3 X

21000

0,2

1

50000 I 1 334

26 = 7,8 »

21000

0,5

1 1

50000 |l 334

36 = 10,8 »

21000

1,0

1 1

50000 | 334

42 = 12,6 »

21000

2,0

1

50000

334

55 =-16,6 >

21000

Konzentration

des
Malachitgrüns

Typhus

1

Koli

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

1:100000

334

45 = 13,5°/o

21000

Es wuchsen also bei Dextrinzusatz mehr Typhusbazillen aus
als ohne und zwar wurde die Ernte um so gröfser, je mehr
Dextrin zugesetzt wurde. Bei Zusatz von l°/ Dextrin konnte
die Konzentration des Malachitgrüns schon auf das doppelte
erhöht werden, um das Auswachsen der gleichen Menge von
Typhusbazillen zu erzielen. Von den in bedeutend grölserer
Menge ausgesäten Kolibazillen war auch nach 69 Stunden kein
einziger ausgewachsen. Das Wachstum der Typhusbazillen war
jedoch verhältnismäfsig gering.

Von Dr. med. K. Nowack.

385

Um nun einen höheren Prozentsatz von Typhusbazillen zum
Auswachsen zu bringen, wurde bei Zusatz von 1 und 2°/ Dextrin
mit der Konzentration des Malachitgrüns weiter heruntergegangen ;
dabei zeigte es sich, dafs Bacillus coli nicht mehr zurückgehalten
wurde, sondern auch auswuchs und zwar in schneller Steigerung,
so dafs er Bacillus typhi bald an Menge erreichte.

Tabelle VIII.

Reaktion des Agars 0,8 °/ Xormalnatronlaage unter dem Phenolphthalein-
nentralp. Malachitgrün superfein.

Konzentration

des
Malachitgrüns

Menge des

Dextrins

in Prozent

Typhus

l

> Aus-
1 saat

1

Koli

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Ernte
nach 20 Std.

1 -.100000
1:100000

1

, 2

1

334
334

62 = 18,6%
72 = 21,6 >

i

21000
121000

2100 = 10 • /
4500 = 21 >

Man sieht aus dem Versuche, dafs bei der nur halb so
starken Konzentration des Malachitgrüns der Gewinn hinsichtlich
der Typhusbazillen gegenüber dem vorigen Versuche (18,6 gegen
12,6 resp. 21,6 gegen 16,5%) nur gering ist, während Bacillus
coli in erheblicher Menge auswächst. Ferner zeigt dieser Versuch,
dafs es für Typhusbazillen wenig ausmacht, ob der Dextrin-
gehalt 1 oder 2% ist, dafs dagegen die Koliernte durch den
doppelt so hohen Dextringehalt auch auf das Doppelte steigt.
Infolgedessen sah ich mich nicht veranlagt, bei meinen Versuchen
über einen Dextringehalt von 2% hinauszugehen.

Auch bei Dextrinzusatz zeigt sich der Vorteil der Reaktion
des Agars von 0,8 °/ Normalnatronlauge unter dem Phenol*
phthaleinneutralpunkte gegenüber der lakmusneutralen, in diesem
Falle l,4°/ Normalnatronlauge unter dem Phenolphthaleinneutral-
punkte.

586 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagare etc.

Tabelle IX.
Malachitgrün superfein 1 : 80000.

Reaktion des Agars 0,8 % Normal natronlauge
unter dem Phenolphthalein neutral p.

Lakr
na

ph

ausneutraler Agar (1,4% Normal-
tronlauge unter dem Phenol-
thaleinneutralp.).

Menge
d. Dex-
trins In
Prozent

Typhus

Eoli

Typhus

Koli

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Aus-
saat

Ernte
nach 20 Std.

Aus
saat

Ernte
nach 20 Std.

0,5
1,0

2,0

500
500

500

68 = 13,6%
96 = 19,0 >

91 = 18,2 »

2000
2000

2000

(aufd.2.8chalel)

7 = 0,35%

500
500

500

46- 9,2%
80 = 16,0 >

101=20,2 >

2000
2000

2000

70=3,5%
836=42 >

1336 = 67 »

Es zeigt sich auch hier wieder — wie bei der Anwendung
des Malachitgrüns Nr. 120 (Tabelle II) — , dafs die Typhusbazillen
auf dem stärker alkalischen Agar nur wenig besser wachsen als
auf dem lakmusneutralen ; dagegen wird Bacillus coli durch die
lakmusneutrale Reaktion sehr begünstigt. Auch der ganz ver-
schiedene Einflufs, den die Erhöhung des Dextringehaltes von
1 auf 2°/ auf Typhus- und Kolibazillen ausübt, tritt hier wieder
sehr deutlich, wie im vorigen Versuche, hervor.

Schließlich ist noch das verschiedene Verhalten von Typhus-
und Kolibazillen bei kürzerer und längerer Bebrütungszeit zu er-
wähnen. Während die innerhalb 24 Stunden ausgewachsenen
Typhuskolonien auch bei weiterem Aufenthalt im Brütschrank
kaum eine Vermehrung erfuhren, wurde bei Bacillus coli fest-
gestellt, dafs, wenn auch nach ca. 24 Stunden noch gar keine
oder doch nur ganz vereinzelte Kolonien ausgewachsen waren,
bei weiterer Bebrütung, nach 2 — 3 Tagen, ein recht erheblicher
Prozentsatz ausgewachsen war.

Von Dr. med. K. Nowack.

387

3 -

o
o

A

5®

|83

3

CO

3

W -S

||

II

a
i 'S

o

d

t~

i H

»'S

©

<D

p g

©

1 ^

«4j 00

8

1 ©

o

S-

o

CM

.«

(M

: +

00

9

g8S

00

i

A

«•S

||

Cu

fr

O

OS

SS

§

«< OD

lÖ

'O *

s^

m

© 00

QO

iß

las

o

II

1

JS

w^

d

O

o

a

j

3

|

c

—

H

«'S

5 s

^ OD

o

"

*

.

1 ©

i iH

„00

!

o

0k

CO

1 +

OD

P

385

i

ao

Od

.c

«.g

M

II

II

a

3s

3

SS

snf)iäi!q;>v[«OT p

00008

:i

i uoiq

i

PJQIK

»zuox

000 001 : 1

AichiT fttx Hygiene. Bd. I4JJ.

87

388 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagars etc.

Zusammenfassung.

1. Die stärker alkalische Reaktion des Agars — 0,8 °/ Normal-
natronlauge unter dem Phenolphthaleinneutralpunkte —
begünstigt das Wachstum der Typhusbazillen mehr und
verhindert das Auswachsen der Kolibazillen besser als
lakmusneutrale Reaktion bei gleicher Konzentration des
Malachitgrüns; sie hat aber nicht die ausschlaggebende
Bedeutung, die Klinger ihr beimifst.

2. Das Verhältnis von Aussaat: Ernte der Typhusbazillen =
2:1 resp. 4:1, wie bei Jörns, konnte bei den unter-
suchten Typhusstämmen auf keine Weise erreicht werden ;
die Ernte belief sich unter den günstigsten Verhältnissen
nur auf ca. 20°/ .

3. Während bei Klinger und Jörns Bacillus coli schon
bei einer Konzentration des Malachitgrüns Nr. 120 von
1 : 2000 resp. 1 : 2500 nicht mehr vollständig zurück-
gehalten wurden, trat dies bei meinen Versuchen erst
bei einer Verdünnung von 1 : 4000 — 1 : 5000 ein.

4. Malachitgrün superfein und extra waren in der Wirkung
fast gleich, aber verschieden von dem von Jörns
angewendeten Malachitgrün Ia.

5. Die keimtötende Wirkung stärkerer Malachitgrünkonzen-
trationen wurde bei Malachitgrün superfein und extra
bis zu einem gewissen Grade durch Dextrinzusatz ab-
geschwächt, so dafs durch stärkere Konzentrationen mit
Dextrinzusatz dasselbe erreicht wurde wie durch schwächere
ohne Dextrinzusatz. — Die im Malachitgrün Nr. 120 ent-
haltene Dextrinmenge ist absolut zu gering, um die
Dextrinwirkung hervorzurufen.

6. Durch den Dextrinzusatz — namentlich höheren Grades
— wurde Bacillus coli erheblich mehr begünstigt als
Bacillus typhi; doch trat diese Wirkung erst bei einem
bestimmten Grade der Verdünnung des Malachitgrüns ein.

7. Eine Überlegenheit der beiden reinen Malachitgrünsorten
gegenüber dem Malachitgrün Nr. 120 wurde nicht be-
obachtet.

Von Dr. med. K. Nowack. 389

Bei den Versuchen mit künstlichen Typhusstühlen, d. h.
normaler Stuhl, dem bestimmte Mengen Typhusbazillen zugesetzt
waren, wurde folgendermaßen verfahren:

Der Stuhl wurde mit etwa der gleichen Menge Leitungs-
wasser verrührt und von dieser Aufschwemmung oder dem von
ihr hergestellten Filtrate eine abgemessene Menge und eine be-
stimmte Anzahl Tropfen der wie früher bereiteten Typhusverdün-
nung auf zwei — bei den ersten Versuchen nur eine — grofsen
Malachitgrünagarschalen (a und ß) mit dem Glasspatel (nach
Drigalski) ausgestrichen. Die Schalen hatten einen Durch-
messer von ca. 18 cm, wurden mit 40 — 50 ccm Malachitgrünagar
beschickt und blieben bis zur vollständigen Erstarrung des Agars
offen stehen; eine Verunreinigung durch Luftkeime tritt selbst
bei stundenlangem Offenstehen nicht ein.

Zur Bestimmung der Zahl der ausgesäten Typhusbazillen
und Stuhlkeime und des Grades der Zurückhaltung wurden wie
früher Schalen (von ca. 9 cm Durchmesser) mit gewöhnlichem
resp. Malachitgrünagar gegossen; nur bei den ersten Versuchen
wurde der Grad der Zurückhaltung der Stuhlkeime auf einer
grofsen mittels Oberflächenausstrich besäten Malachitgrünagar-
schale festgestellt.

Nach 16 — 24 Stunden wurde die grofse Malachitgrünagar-
schale, bei zwei Schalen meist die weniger dicht bewachsene
/^-Schale, nur wenn auf ihr zu wenig Kolonien waren, die a-Schale,
nach Lentz u. Tietz in der Modifikation von Jörns mit 5 ccm
steriler 0,9 proz. Kochsalzlösung — nur bei den ersten Versuchen
mit steriler Bouillon — abgeschwemmt und je nach der Dichte
der Schalen mehr oder weniger von der Abschwemmung auf
4 Endo-Agarschalen (a — d) von ca. 9 cm Durchmesser aus-
gestrichen.

Der Endo -Agar wurde ebenfalls mit Fleischextrakt, nach
dem Beispiele Klingers, sonst genau nach der Vorschrift des
Erfinders bereitet, bis auf die Neutralisation, die — wie beim
gewöhnlichen Agar — nach der Angabe von Clauditz schon
vor dem Filtrieren stattfand. Ich habe mit Endo- und nicht

27*

390 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagars etc.

mit Drigalski-Agar gearbeitet aus den Gründen, die Endo (*),
Petko witsch ( 8 ), Clauditz ( 9 ), Klinger u. Marschall ( 10 ) als
seine Vorzüge für den Typhusbazillennachweis gegenüber dem
Drigalski-Agar übereinstimmend anführen. Nur in der Frage
nach der wachstumshemmenden Wirkung des Endo- u. Dri-
galski-Agars auf die Typhusbazillen und Stuhlkeime gehen die
Ansichten auseinander, so dafs nach Clauditz die Stuhlkeime
auf »Endoc in bedeutend gröfserer Zahl aus wachsen als auf
»Drigalskic, während nach Klinger u. Marschall der
Endo -Agar gerade eine erheblich stärkere Hemmung auf die
Fäcesbakterien ausübt. Andrerseits wachsen Typhusbazillen nach
Clauditz auf »Endoc ebenso oder vielleicht noch etwas mehr
aus als auf gewöhnlichem Agar; auf »Drigalskic dagegen
viel weniger; im Gegensatze dazu sagt Klinger: > Diese Wachs-
tumsbehinderung — (der Fäcesbakterien auf Endo -Agar) —
scheint sich auch auf schwächere Individuen des Typhusbazillus
zu erstrecken .... bisweilen ist nur die Hälfte angewachsen.«
Die Entscheidung dieser Frage ist um so wichtiger, als Lentz
u. Tietz und vor allem Klinger (siehe Tabelle H seiner Arbeit)
bei Anwendung des Malachitgrünagars die Menge der ausgesäten
Keime nach der Zahl der von Drigalski-Agar geernteten
Kolonien bestimmen.

Nach 16—20 Stunden wurde die orientierende Agglutinations-
probe mit den typhusverdächtigen Kolonien (in Tabelle XI
als Ty. ? - Kol. bezeichnet) direkt vom Endo- Agar angestellt,
wobei festgestellt wurde, dafs jedesmal die ihrem Aussehen nach
als Typhus anzusprechende Kolonie auch wirklich Typhus war,
wiederum ein Beweis dafür, wieviel leichter infolge der weit-
gehenderen Differenzierung die Auffindung von Typhuskolonien
auf Endo- als auf Drigalski-Agar ist. Nach dem positiven
Ausfall der orientierenden Agglutinationsprobe wurde ein Agar-
strich zur Anstellung der Agglutinationsprobe im Reagenzglase
angelegt. Zur Agglutinationsprobe wurde trockenes agglutinie-
rendes Typhus-Pferdeserum aus dem Kgl. Institute für Infektions-
krankheiten vom Titer 1 : 8000 verwendet. Die orientierende
Agglutinationsprobe wurde als positiv angesehen, wenn bei einer

Von Dr. med. K. Nowack. 391

Verdünnung des Serums von 1 : 500 sofort deutliche Haufen-
bildung eintrat. (Die Angaben über die Verdünnungen [mit 0,9 proz.
steriler Kochsalzlösung] beziehen sich auf flüssiges Serum, das
erhalten wurde durch Auflösen von einem Teil trockenen Serums
in neun Teilen sterilen destillierten Wassers.) Die entscheidende
Agglutinationsprobe im Reagenzglase wurde mit den Verdünnungen
1 : 500, 1 : 5000, 1 : 7500 und 0,9 proz. Kochsalzlösung angestellt.
Bei beiden Agglutinationsproben wurde eine unter gleichen Be-
dingungen gewachsene Typhuskultur zum Vergleich in derselben
Weise behandelt. Da derselbe Typhusstamm mit dem Stuhle
ausgesät und zur Kontrolle benutzt wurde, wurde von weiterer
Identifizierung durch Nährböden abgesehen.

(Tabelle siehe Seite 392.)

Ich konnte also noch bei einem Verhältnis der Typhus-
bazillen: Stuhlkeimen = 1 : 17000, 1 : 26 000 und 1 : 50000 den
Nachweis der Typhusbazillen führen, während es Jörns nach
dem Verfahren von Lentz u. Tietz nur noch bei 1:8000
gelang. Dafs bei meinen Versuchen das Verhältnis der Typhus-
bazillen zu den Stuhlkeimen als sehr ungünstig anzusehen ist,
geht aus der Angabe von Lentz u. Tietz hervor, die einen
Stuhl, von dem auf Drigalski-Agar das Verhältnis von Typhus-
bazillen: Stuhlkeimen = 4: ca. 2000 ist, als relativ arm an
Typhusbazillen bezeichnen.

Das wesentlich Neue bei meinen Versuchen ist die erheblich
größere Menge des Aussaatmaterials. Lentz u. Tietz und
Klinger säten wenig aus. Lentz u. Tietz versetzten Stuhl
von Typhuskranken mit der doppelten Menge Kochsalzlösung
und verrieben davon 0,1 — 0,2 ccm mit dem Glasspatel auf eine
Malachitgrünplatte von 10cm Durchmesser und 2 Drigalski-
Platten von 20 cm Durchmesser. Klinger brachte eine
grolse Öse einer Typhusstuhlauf seh wemraung , die je nach
der Konsistenz des Stuhles durch feines Verreiben mit mehr
oder weniger steriler Kochsalzlösung hergestellt war, auf 2 bis

392 Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrunagars etc.

O

OB
O

5«

' oi $o* Hoi Hoi

£o<

_._ 8_ JB.

c5 2.2 2?»

SaBSr

§P

gsrg f o SP
g *?S|| B **

8 fe 8 8_

= O»

13

Sg : | N Keimzahl

I-- 'S M*

H gj-ä g-te

3

3.

8?

er

p

o

o

OD

to

6

to

J8._

8 S

g

8 8

8

3

Ol

09

II

s

ii

ii

s

ft° eis

O

'S

OD

to

II»

2

£a-s

8 SB

OD

E" S (B 3

~e

et m N -,

a
5"

p-

er

I 8 §

ö_

Ob'

p

p

£ü!

"*E

o <D co

3 a

*5

^—

&

• MW®

«5

B«

«2

00 10

+ + + +

+"

Art u. Konzentra-
tion des Malachit-
grüns

3 £ £? Aussaatmenge

B S 8*

n » **
p •*»

p

IQ

Aussaat-
menge

Keim-
zahl

Gesarat aussaatmenge
in cem

** OD h
S. ff «<

Zahl der besäten
Schalen

Tyb.

Stahl-
keime

p

er

M

&

Nach Stunden

Aussehen der ab-
geschwemmten
Malachitgrünagar-
schalen

Aussaatmenge auf
die Endoschalen

P

a
& 8

SL ®

© P

p

nach Standen

Nachweis der Tyb.

Von Dr. med. K. Nowack. 393

4 Platten von 20 cm Durchmesser. Trotzdem konnten Lentz
u. Tietz 8 mal Typhusbazillen noch nachweisen, wo Drigalski
versagte (zitiert nach Klinger) und Klinger bei der Unter-
suchung von 35 Stuhlproben von Typhuskranken

durch Drigalski - Agar 12 mal = 34,3°/

> Endo-Agar . . 15 > =42,9»

> Vorkultur auf Ma-

lachitgrün-Agar 24 > = 68,6 >

Es ist zu erwarten, dafs bei Erhöhung der Aussaatmenge
das Malachitgrünverfahren noch bessere Resultate liefern wird,
da der Grund für den Mifserfolg oft darin liegt, dafs in der
geringen Aussaatmenge überhaupt keine Typhusbazillen enthalten
sind, ein Umstand, auf den auch Kling er hinweist. Es ist
nach meinen Versuchen sehr gut möglich 0,5 — 1,0 ccm auf zwei
grofse Malachitgrünagarschalen auszusäen. Dabei sind die Nähr-
böden billig, schnell und ohne Schwierigkeiten herzustellen und
jede Anwendung des Verfahrens verbraucht nur 80 — 100 ccm
Malachitgrün- und 30 — 40 ccm Endo-Agar. Es wäre ganz un-
möglich, eine gleich grofse Aussaatmenge auf Endo- oder
gar auf Drigalski- Agar zu bringen, ohne die Zahl der
Schalen derart zu steigern, dafs schon der Verbrauch an
Nährboden allein dieses Verfahren verbieten würde. Der
Malachitgrünagar hat den grofsen Vorzug, dafs er in ge-
eigneter Konzentration auf die Stuhlkeime sehr stark wachstum-
hemmend wirkt, wenn auch dabei, wie schon Jörns und
Klinger feststellten, niemals alle ausgesäten Typhusbazillen
aus wachsen, sondern nach meinen Versuchen sogar nur ein
geringer Prozentsatz. Der Nachweis der Typhusbazillen gelingt
jedoch auch bei absolut geringer Zahl der ausgesäten Bazillen.
Die Möglichkeit, viel Stuhlmaterial zur Aussaat verwenden zu
können, dürfte besonders für Stuhluntersuchungen bei Typhus-
rekonvaleszenten wertvoll sein, da hier die mit kleinen Aussaat-
mengen erzielten Erfolge recht ungünstig sind. Klinger konnte
in 17 Stuhlproben von Typhusrekonvaleszenten die Bazillen durch
Drigalski- Agar, Endo-Agar, Vorkultur auf Malachitgrün-Agar

Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagare etc.

nur 2, 2 und 3 mal nachweisen. Den Nachteil, den das Malachit-
grünverfahren gegenüber dem einfachen Plattenverfahren ebenso
wie jede andere Vorkultur hat, dafs die Stellung der Diagnose
um ca. 24 Stunden verzögert wird, möchte ich bei der grofsen
Sicherheit, die diese Methode bietet, nicht allzu hoch bemessen.
Es ist noch zu erwähnen, dafs ich die Angaben Löfflers
und Lentzu. Tietz über Unterscheidungsmerkmale der Typhus-
kolonien auf Malachitgrünagar nicht bestätigen kann; sie waren
in keiner Weise weder nach 24 noch nach 48 Stunden von Koli-
oder anderen Kolonien von Stuhlkeimen zu unterscheiden. Die
Umwandlung des Grüns des Agars in helles Gelb, die Löffler
und Lentzu. Tietz als eine spezifische Eigenschaft der Typhus-
bazillen und der Alkalibildner hinstellen, habe ich auch beobachtet,
aber als eine Eigenschaft, die allen Bakterien zukam und auch
nur bei dichtbewachsenen Schalen. Den Nachweis, dafs der
dem Nährboden entzogene Farbstoff in den Kolonien abgelagert
ist, kann man auf folgende Weise führen : Legt man eine solche
Schale, auf der die Kolonien gelblichweifs und undurchsichtig
sind, in eine Sublimatsalzsäurelösung — die im Institut gebräuch-
liche Desinfektionsflüssigkeit — so werden sämtliche Kolonien
sofort intensiv dunkelgrün. Das Aufnehmen des Farbstoffes von
den Kolonien erklärt auch die Notwendigkeit eine stärkere Kon-
zentration des Malachitgrüns anzuwenden bei sehr starker Be-
säung, namentlich der Oberfläche, als bei Anlegung von Gufs-
schalen bei geringerer Aussaatmenge, bei welch letzterem Ver-
fahren die Verteilung der Keime eine gleichmäfsigere und die
Wachstumsbedingungen für die nicht an der Oberfläche liegenden
schon an sich ungünstigere sind. Die wenigen von vornherein
aufgehenden Kolonien entziehen in ihrer Umgebung dem Agar
Farbstoff, wodurch den an dieser Stelle befindlichen geschädigten
aber noch nicht abgetöteten Keimen ermöglicht wird, auf dem
nunmehr für sie günstigeren Nährboden zu Kolonien auszu-
wachsen. Diese Kolonien bewirken nun wiederum dasselbe, so
dafs schliefslich auf dem immer malachitgrünärmeren Agar viel
mehr wächst, als nach der ursprünglichen Konzentration anzu-
nehmen war.

Von Dr. med. K. Nowack. 395

Zusammenfassung.

1. Die für die praktische Verwendung geeignete Konzen-
tration des Malachitgrüns Nr. 120 ist in Übereinstimmung
mit Jörns und Klinger 1:2000 — 1 : 2500.

2. Malachitgrün superfein ist in entsprechend stärkerer
Verdünnung ebenso gut brauchbar.

3. Die Stuhlaussaatmenge und damit die Leistungsfähigkeit
der Malachitgrünmethode konnte erheblich gesteigert
werden gegenüber den bisherigen Untersuchern.

4. Die Typhuskolonien sind auf Malachitgrünagar nicht
von anderen Kolonien zu unterscheiden.

5. Als zweiter Nährboden hat sich Endo- Agar als sehr
brauchbar erwiesen.

6. Der Malachitgrünagar eignet sich für die Fälle, in denen
der Typhusbazillennachweis in sehr keimreichen Bakterien-
gemischen geführt werden soll, wo das Verhältnis der
Typhusbazillen zu den Begleitbakterien sehr ungünstig,
nicht aber die absolute Zahl der Typhusbazillen eine zu
geringe ist; für die Fälle, bei denen nur auf einige
wenige und vielleicht sogar noch dazu geschädigte
Typhusbazillen in der Aussaatmenge gerechnet werden
kann, eignet der Malachitgrünagar sich nicht, selbst
dann nicht, wenn Begleitbakterien in geringer Menge
vorhanden sind.

Herrn Geheimen Medizinalrat Professor Dr. Rubner sage
ich für das Interesse an meiner Arbeit, Herrn Professor Dr. Ficker
für seine stets freundliche Unterstützung aufrichtigen Dank.

27 ••

396 Über Malachitgrünagar etc. Von Dr. med. K. Nowack.

Literatur.

1. Löffler, Neues Verfahren zum kulturellen Nachweise der Typhus-

bazillen in Faeces, Wasser, Erde. Deutsche med. Wochenschr., 1903,
Nr. 36, Vereinsbeilage.

2. Lentz u. Tietz, Eine Anreicherungsmethode für Typhus- nnd Para-

typhusbazillen. Münchener med. Wochenschr., 1903, Nr. 49, 8. 2139.

3. Jörns, Über die Brauchbarkeit des Malachitgrün-Nähragars zum Nach-

weise von Typhusbazülen. Hygienische Rundschau, 1904, 14. Jahrgang,
Nr. 15, 8. 713.

4. K 1 i n g e r , Über neuere Methoden zum Nachweise des Typhusbazillus

in den Darmentleerungen. Inaug.-Dissertat., Strafsburg 1904.

5. Ficker u. Hoffinann, Weiteres über den Nachweis von Typhus-

bazillen. Archiv f. Hygiene, Bd. 49, 8. 229.

6. v. Drigalski u. H. Conradi, Über ein Verfahren zum Nachweis der

Typhusbazillen. Zeitschr. f. Hygiene, 1902, Bd. 89, 8. 283.

7. 8. Endo, Über ein Verfahren zum Nachweis der Typhusbazillen.

Zentralblatt f. Bakteriologie, 1904, Bd. 35, 8. 109.

8. Petkowitsch, Beitrag zur Frage des diagnostischen Wertes einiger

Nährboden für die Typhusbakterien. Zentralblatt f. Bakteriologie, 1904,
Bd. 36, 8. 304.

9. Clauditz, Untersuchungen über die Brauchbarkeit des von Endo

empfohlenen Fuchsinagars zur Typhusdiagnose. Hygienische Rundschau,
1904, 14. Jahrgang, Nr. 15, 8. 718.
10. F. Marschall, Die Bedeutung des Endo sehen Nährbodens für die
bakteriologische Typhusdiagnose. Zentralblatt f. Bakteriologie, 1905,
Bd. 38, Heft 3.

e s t « »

Archiv fttr Hygiene. Bd. LIII.

Tafel V.

Flg. 1.

■l

■«&*';

* I

Flg. 2.

Flg. 3.

Flg. 4.

****Ti"*

Fig. 6.

i.

^3&flA4V

Flg. «.

Fig. 7.

.Ml -

Fig. 8.

Fig. 9.

-~ i

.Ilfe*

'-v"c> .Iff"'^ - . i ^.^/^W*-

YerlAg von R. Oldenbourg. München und Berlin.

/» jf A An st. v. Hubert Köhler, Mchn.

ARCHIV

FÜR

HYGIENE.

(BEGRÜNDET VON MAX t. PETTENKOFER.)

UNTER MITWIRKUNG

VON

Prof. Dr. 0. BOLLINGER, München; Prof. Dr. BONHOFF, Marburg a. L. ; Prof. Dr. R. EMMERICH, München ;
Prof. Dr. F. ERISMANN, Zürich; Prof. Dr. HEIM, Erlangen; Prof. Dr. A. HILGER, München; Prof. Dr.
F. HUEPPE. Prag; Prof. Dr. KABRHEL, Prag; Prof. Dr. F. KRATSCHMER. Wien; Prof. Dr. K. LEHMANN,
V/Orzburg; Prof. Dr. A. LODE, Innsbruck; Prof. Dr. L. PFEIFFER, Rostock; Generalarzt Dr. J. PORT,
Würzbarg; Prof. Dr. W. PRAÜSNITZ, Grai; Prof. Dr. F. RENK, Dresden; Prof. Dr. SCHOTTELIUS,
Freiborg i. B.; Generaloberarzt Dr. A. SCHUSTER, München; Prof. Dr. WERNICKE, Posen.

HERAUSGEGEBEN

VON

J, FORSTEE, M. GBUBEB, FB. HOFMANN, M. BUBNEB,

O.ö. PROFESSOREN HSR HYOIKNK ONr» DIRKETORRN DRK HYGIKNISCHKN INSTITUTE AN DEN UNIVKRRITAT1CN ZI)

STRA8SBTJRG MÜNCHEN LEIPZIG BERLIN.

DREIUNDFÜNFZIG8TER BAND. 1. HEFT.

.->- «»j^ax».»»

MÜNCHEN und BERLIN.

DRUCK UND VERLAG VON R. OLDKNBOURG.

1905.

| From

! PAUL B. HOEBE

A

/ Y" Seite

Ein Beitrag zur Ätiologie der Hunde^taüipe. .Voö Tfrj. Oskar R. von Wunsch-
heim, Assistenten am Ins^tute. (Aus dem Hygienischen Institute der

k. k. Universität Innsbruck. .Vorstand: Prof.^A. Lode) 1

Über die Aufnahme von Bakterien dujrch 'dfen kospifationsapparat. Von Prof.
M. Ficker. (Aus dem Hygienischen Institute der Universität Berlin.

Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M. Rubner) 60

Der „Vakuumreiniger", ein Apparat zur staubfreien Reinigung der Wohnräume.
Von Stabsarzt Dr. Berghaus, Assistenten am Institut. (Aus dem Hygie-
nischen Institute der Universität Berlin. Direktor: Geh. Med.-Rat Prof.
Dr. M. Rubner) 67

NACHDRUCK VERBOTEN.

In dem nächsten Hefte folgen:

Experimentelles über die bakterieide Wirkung des Lichtes auf mit Eosin, Erythrosin
und Fluoreszein gefärbte Nährböden. Von £. Mettler, med. pract. (Aus der
bakteriologischen Abteilung des Hygiene-Institutes der Universität Zörich. Vor-
stand: Privatdozent Dr. W. Silber Schmidt.)

Die Agglutination bei Gasphlegmonebacillen. Von Dr. G. Werner, Kreisassistenz-
arzt in Marburg. (Aus der hygienischen Abteilung des Instituts für Hygiene und
experim. Therapie zu Marburg. Vorstand : Prof. B o n h o f f.)

Vorschlag eines neuen Apparats zur Bestimmung des spezifischen Gewichts von Bau-
materialien. Von Ing. R. Bianchini und Dr. E. Cler. (Aus dem Hygienischen
Institut der Kgl. Universität Turin. (Direktor: Prof. Dr. L. Pagliani.)

Einsendungen beliebe man an Prof. fhbner, Berlin £, K/osierstr. 38, ztt richten.

Verlag von R. Oldenbourg in München und Berlin.

Blätter für Volksgesundheitspflege.

Gemeinverständliche Zeitschrift.
Organ des Deutschen Vereins für Volkshygiene.

Herausgeber :

Präsident Dr. Bödiker, Dr. Graf Douglas, Geheimrat Prof. Dr. von Leyden,

Geheimrat Prof. Dr. Rubner.

Schriftleitung :

Dr. med. K. Beerwald, Arzt, Berlin, Prof. Dr. Ficker, vom hygien. Institut der

Universität Berlin, Dr. jur. G. Kautz, Geh. Reg.-Rat, Berlin.

Monatlich a Hefte ä x6 Seiten in Quartformat. Die Zeitschrift kostet jährlich M. 4.80.

Verlag von Aug. Hirsehwald in Berlin.

Soeben erschien:

Zeitschrift für Krebsforschung.

Herausgegeben vom

Komitee für Krebsforschung sa Berlin,

redigiert von

Prof. Dr. D. t. Ilansemuin

und

Prof. Dr. Georg* Meyer. (4)

III. Band. 1. Heft

1905. gr. 8. Mit 8 Tafeln u. Textfigaren.
7 Mark.

Verlag von Aug. Hirsehwald in Berlin.

Soeben erschien:

Die Wirkungen

von Arzneimitteln und Giften

auf das Auge.

Handbuch für die gesamte arztliche Praxis
von Prof. Dr. L. Lewin (3)

und Oberstabsarzt Dr. H. Guillery.
IL Band. gr. 8. Mit Textfig 1905. 26 M.

Verlag von R. Oldenbourg in München und Berlin.

' m r w ^fi"K < "i*' ii " > ^~ r^ J *iii ■ •"• >i f*' M ~iio_oj — <_j> _j~n"^o_r~ w J *i » ~ i *~ iii _r^nr

Theorie und Praxis der Trinkwasser-Beurteilung

Von

Dr. Gustav Kabrhel,

o. ö. Professor der Hygiene,

Vorstand des Hygienischen Institutes der böhm. Universität und der staatlichen

Untersuchungsanstalt für Lebensmittel in Prag.

V and 234 Seiten oktav. Preis in Leinen geb. M. 5. — .

Aus dem staatlichen Hygienischen Institut In Hamburg.

Leitfaden

für die

chemische Untersuchung von Abwasser.

Von

Dr. K. Farnsteiner, Dr. P. Buttenberg, Dr. O. Korn,

Chemiker am Hygienischen Institut zu Hamburg.
Preis M. 3.—.

Zur Ursache und spezifischen Heilung

des

Heufiebers.

Von Prof. Dr. Dunbar, Direktor des Hygienischen Instituts.
Preis M. 3.— .

%

Verlag von E. Oldenbourg in München und Berlin.

Gesundheits-Ingenieur.

Zeitschrift

für die

gesamte Stadtehygiene.

Herausgegeben von

Regierangsrat t. Boehmer, Berlin-Lichterfelde-West,

Prof. Dr. Dunbar, Direktor des Staatl. Hygienischen Instituts

zu Hamburg,

Regierungsrat Härder, Berlin W.,

Prof. Proskauer, Berlin-Charlottenburg.

Das Programm des >Gesundheits-Ingenieurs<,
Zeitschrift für die gesamte Städtehygiene, umfaßt die Gebiete :
Wasseryersorgung und alle mit ihr* verknüpften, ver-
wickelten' Aufgaben, die Städtereinigung einschließlich
des Kanalisationswesens, Abwasserbeseitigung
und -Reinigung, die ganze Straßenhygiene, das Ab-
deckoreiwesen und Leichenwesen, die Fragen der
Volksernährung und Nahrungsmittelkontrolle
einschließlich des Schlachthauswesens, alle Fragen der
Wohnungsbauhygiene und Baupolizei, Heizungs-
wesen, Beleuchtungswesen, Rauchplage, Bäder,
Krankenhauswesen, Armenversorgung, Gefäng-
niswesen, die Fragen der Schulhygiene und des.
öffentlichen Kinderschutzes, des Schutzes gegen
Seuchen einschließlich Desinfektion, der Gewerbe-
hygiene und des Feuerlöschwesens sowie noch
manche andere in das Gebiet der Städtehygiene fallenden
Fragen.

Die Zeitschrift erscheint monatlich 3 mal und kostet
jährlich M. 20.—.

JProtoeiiuiiiiner fgra/tls und franlco.

.*» *~«

nX

'st

ß>

ARCHIV

HYGIENE.

(BEGRÜNDET VON MAX t. PETTENKOFER.)

UNTER MITWIRKUNG

VON

Prof. Dr. 0. BOLLINGER, München ; Prof. Dr. BONHOFF, Marburg a. L. ; Prof. Dr. R. EMMERICH, Manchen ;
Prof. Dr. F. ERISMANN, Zürich; Prof. Dr. HEIM, Erlangen; Prof. Dr. F. HUEPPE. Prag; Prof. Dr. KABRHEL.
Prag; Prof. Dr. F. KRATSCHMER, Wien ; Prof. Dr. K.LEHM ANN, Würzburg; Prof. Dr. A. LODE, Innsbruck;
Prof. Dr. L. PFEIFFER, Rostock; Generalarzt Dr. J. PORT, Wflreburg; Prof. Dr. W. PRAUSN1TZ, Grai;
Prof. Dr. F. RENK, Dresden; Prof. Dr. SCHOTTELIUS, Freiburg i. B.; f i i Njih ll ril Hl Jirmrjrn,
Mönchen; Prof. Dr. WERNICKE, Posen :/ /^5Q - S MJqN^

AUG22 1905

HERAUSGEGEBEN

VON

J. FOESTEE, M. GEUBEB, FE. HOFMAlfN,

0.0. PROFESSOREN DER HYGIENE UND DIREKTORIN DER HYGIENISCHEN INSTITUT! AN DIN UMVEBB1TITEN ZU

STRASSBUBG MÜNCHEN LEIPZIG BERLIN

DREIUNDFÜNFZIGSTER BAND. 3. HEFT.

n OQQO $ ** + -

MÜNCHEN UND BERLIN.

DRUCK UND VERLAG VON R. OLDENBOURG.

1905.

Inhalt.

Seite
Beobachtungen am Blut mit Trypanosomen geimpfter Tiere. Von Dr. med.

A. Nif sie. (Aus dem Hygienischen Institut der Universität Berlin. Direktor:

Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M. Rabner.) (Mit einer Tafel) 181

Über das Eindringen von Bakterien in feinste Kapillaren. Von Dipl -Ing. Erich

Hofstädter. (Mit einer Tafel) 205

Beitrag zur Wirkung von Tuberkelbazillen verschiedener Herkunft. (Infektion
der vorderen Augen kammer mit abgewogenen kleinsten Tb-Mengen.) Von
Dr. Richard Link, Privatdozent für innere Medizin, Assistenzarzt an der
medizinischen Klinik. (Aus dem Hygienischen Institut der Universität
Freiburg i. B.) 264

NACHDRUCK VERBOTEN.

In dem nächsten Hefte folgen:

Bakterizide Reagenzglasversuche mit Choleravibrionen. Von Prof. Dr. Oskar B a i 1 und
Dr. YonetarÖ Kikuchi, Osaka (Japan), Assistenten des Institutes. (Aus dem
Hygienischen Institut der deutschen Universität in Prag. Vorstand: Prof. Hueppe.)

Über Agglutinationsbehinderung der Typhusbazillen. Von Dr. Edmund Weil. ;Aua
dem Hygienischen Institut der deutschen Universität in Prag. Vorstand: Prof.
Hueppe.)

Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio. Von Prof. Dr. Oskar Bai 1,
Assistenten des Institutes. (Aus dem Hygienischen Institute der deutschen Uni-
versität Prag. Vorstand : Prof. Hueppe.)

Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung. I. Mitteilung. Von Dr. Antonio
Rodella. Vorstand des bakteriologischen Laboratoriums zu Lodi. (Mit einer Tafel.)

Über die Grenzen der Verwendbarkeit des Malachitgrünagars zum Nachweise der
Typhusbazillen im Stuhle. Von Dr. med. K. Nowack. (Aus dem Hygienischen
Institut der Universität Berlin. Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. M. Rubner.)

Einsendungen beliebe man an Prof. Rubner, Berlin C, K/ostersir. 36, zu richten.

Verlas von FERDINAND ENKE in Stuttgart.

Soeben erschienen:

Ascher, Dr. med. L., Der Einfluss des
Rauches auf die Atmungsorgane.

Eine sozialhygienische Untersuchung für Mediziner, Nationalökonomen, Gewerbe-
und Verwaltungsbeamte, sowie für Feuerungstechniker. Mit 4 Abbildungen und
zahlreichen Tabellen, gr. 8°. 1905. geh. M. 1.60. (s,

Verlag von R. Oldenbourg in München und Berlin.

Blätter für Volksgesundheitspflege.

6eneln»erstiidliche Zeltschritt. — Organ des Deutschen Vereins fflr Volkskjgine.

Monatlich a Hefte a 16 Seiten in Quartformat Die Zeitschrift kostet jährlich M. 4-80

Verlag von R. Oldenbourg, München und Berlin W. 10.

Der Angelsport
♦ im süsswasser

von Dr. KARL HEINTZ.

Mit 285 Abbildungen und 7 farbigen Tafeln. 452 und VIII Seiten gr. 8°.
Preis elegant gebunden M. 15.—.

m

HERR Dr. Brehm- Berlin, Präsident des deutschen Anglerbundes, schreibt in der
»Allgemeinen Fischerei-Zeitungc wie folgt über das Werk: ». . . Dieses Buch ist in
der Tat ein köstlicher Schatz nicht nur für jeden Besitzer, nein, auch für die deutsche
Literatur und insonderheit für den deutschen Angelsport. Für diesen bedeutet es
geradezu eine befreiende Tat, die ihn aus seiner Aschenbrödelrolle emporhob zu dem ihm ge-
bührenden Range. Kein ausländischer Sportsmann, vor allem kein solcher englischer Zunge
nahm bis dahin die deutsche Wasserweid und ihre Vertreter ernst oder betrachtete sie gar als
ebenbürtig. Wohl fehlte es nicht an deutschen Angelbüchern, aber ohne diesen und ihren ver-
ehxungswürdigen Autoren zu nahe treten und ihre gewiß großen Verdienste im geringsten verkennen
und schmälern zu wollen — mit diesem Werke vermag sich keines zu messen I . . . Während
alle bisherigen Werke über unseren Gegenstand noch gar zu sehr unter englischem Einflüsse
standen und mehr oder minder bedrückt anerkannten, daß nur in England der wahre Gral des
Angelsports gehütet werde, während sie gewissermaßen den Schüler nur in den Elementarf&chern
der Schule ausbildeten und ihm dann den Abschluß anglerischer Kenntnisse bei den Engländern
zu suchen anheimgeben, hat Heintz geradezu sein Thema in die Beleuchtung der Hochschule
gerückt und uns von den Engländern bei voller Gerechtigkeit gegen sie emanzipiert, zum mindesten
gezeigt, daß es einen ebenbürtigen deutschen Angelsport gibt, der sich weder zu ver-
stecken noch zu beugen braucht. Sein Buch ist ein ernstes, wissenschaftliches Werk, ohne
doch jemals ungemütlich gelehrt zu werden. Es bietet eine Fülle von Anregungen, und der
Verfasser schöpft Überall aus dem nie versiegenden Born persönlicher Erfahrungen und eigenen
Nachdenkens. Dabei beherrscht er neben seinem Thema die Sprache in so glänzender Weise,
«laß das Lesen dieses Buches selbst für einen Laien ein Genuß, zur Quelle reicher Belehrung
und zum Ausgangspunkte achtungsvollster Beurteilung unseres so viel verkannten Sports werden
muß. Ich kann mein Urteil nur dahin zusammenfassen: Die deutschen Angler können stolz
auf das schöne Buch sein und mögen sich bemühen, sich desselben wert zu erweisen und den
Verfasser in Dankbarkeit wie einen Reformator des Angelsports zu ehren I Ganz besonderer
Dank gebührt aber auch dem getreuen Mitarbeiter, Herrn Prof. Dr. Hofer in München, der den
naturwissenschaftlichen, anatomischen und physiologischen Teil des Werkes systematisch bear-
beitet hat und dessen exzellente Fachkenntnis selbstverständlich Mustergültiges schuf. ....
Daß auch die äußere Ausstattung des Werkes vornehm und seiner Verfasser würdig ist, sei nur
nebenbei, wenn auch mit voller Anerkennung, erwähnt. Das Buch wird seinen sicheren Weg
nehmen, es wird klassisch werden und sich seine dauernde Stellung nicht nur in Deutsch-
land sondern auch in der Weltliteratur erwerben, und kein künftiger Autor wird an Karl Heintz
vorbeigeben können, ohne achtungsvoll sich zu verneigen. . . . <

3&

Verlag von R. Oldenbourg in München und Berlin.

Gesundheits-Ingenieur.

Zeitschrift

für die

gesamte Stäijtehygiene.

Herausgegeben von

Regierungsrat t. Boehmer, Berlin-Lichterfelde-West, .

Prof, Dr. Dunbar, Direktor des Staatl. Hygienischen Instituts

zu Hamburg,

Regierungsrat Härder, Berlin W.,

Prof. Proskaner, Berlin-Charlottenburg.

Das Programm des >Gesundheits -Ingenieur sc,
Zeitschrift für die gesamte Städtehygiene, umfaßt die Gebiete :
Wasserversorgung und alle mit ihr verknüpften, ver-
wickelten Aufgaben, die Städtereinigung einschließlich
des Kanalisationswesens, Abwasserbeseitigung
und -Reinigung, die ganze Straßenhygiene, das Ab-
deckereiwesen und Leichenwesen, die Fragen der
Volksernährung und Nahrungsmittelkontrolle
einschließlich des Schlachthauswesens, alle Fragen der
Wohnungsbauhygiene und Baupolizei, Heizungs-
wesen, Beleuchtungswesen, Rauchplage, Bäder, .
Krankenhauswesen, Armenversorgung, Gefäng-
niswesen, die Fragen der Schulhygiene und des
öffentlichen Kinderschutzes, des Schutzes gegen
Seuchen einschließlich Desinfektion, der Gewerbe-
hygiene und des Feuerlöschwesens sowie noch
manche andere in das Gebiet der Städtehygiene fallenden
Fragen.

Die Zeitschrift erscheint monatlich 3 mal und kostet
jährlich M. 20.—.

Probenumnier gratis und franko.

ARCHIV

FÜR

HYGIENE.

(BEGRÜNDET VON MAX t. PETTENKOFER.)

UNTER MITWIRKUNG

VON

Prof. Dr. 0. B0LL1NGER, München; Prof. Dr. BONHOFF, Marburg t. L. ; Prof. Dr. R. EMMERICH, Mönchen;
Prof. Dr. F. ER1SMANN, Zürich ; Prof. Dr. HEIM, Erlangen ; Prof. Dr. F. HUEPPE. Prag; Prof. Dr. KABRHEL,
Prag ; Prof. Dr. F. KRATSCHMER, Wien ; Prof. Dr. K. LEHMANN. Würzburg ; Prof. Dr. A. LODE, Innsbruck ;
Prof. Dr. L. PFEIFFER, Rostock; Generalarzt Dr. J. PORT, Wflrzborg; Prof. Dr. W. PRAUSN1TZ, Graz;
Prof. Dr. F. RENK, Dresden; Prof. Dr. SCHOTTELIUS, Frtibnrg i. B.; Generaloberarzt Dr. A. SCHUSTER,
München; Prof. Dr. WERN1CKE, Posen.

HERAUSGEGEBEN

VON

J.FOBSTEB, M. GBUBEB, FB. HOFMANN, M, BUBNEB,

0.0. PROFESSORIN DIE HYGIIN1 UND DIREKTOREN DIR HTGIKNIßCHlN INSTITUT! AN DIN UN1YUBIT1TIN ZU

8TBASSBURQ MÜNCHEN LEIPZIG BERLIN.

DREIUNDFÜNFZIG8TEB BAND. 4. HEFT.

iiooooaaiiii

MÜNCHEN UND BERLIN.

DRÜCK UND VERLAG VON R. OLDENBOURG.

1906.

Inhalt.

Seite
Bakterizide Reagenzglasversuche mit Cholera Vibrionen. Von Prof. Dr. Oskar Bai 1,

Assistent des Institutes, und Dr. Yonetarö" Kikuchi, Osaka (Japan). (Aus

dem Hygienischen Institut der deutschen Universität in Prag. Vorstand:

Prof. Hueppe) 275

Über Agglutinationsbehinderung der Typhusbazillen. Von Dr. Edmund Weil,
Assistent des Institutes. (Aus dem Hygienischen Institut der deutschen
Universität in Prag. Vorstand : Prof. Hueppe) 291

Untersuchungen über die Aggressivität des Choleravibrio. Von Prof. Dr. Oskar
Bail, Assistent des Institutes. (Aus dem Hygienischen Institute der deut-
schen Universität Prag. Vorstand : Prof. Hueppe) 302

Über anaerobe Mundbakterien und ihre Bedeutung. I. Mitteilung. Von Dr.
Antonio Rodella, Vorstand des bakteriologischen Laboratoriums zu Lodi.
(Mit einer Tafel) 329

Über die Grenzen der Verwendbarkeit des MalachitgrQnagars zum Nachweise
der Typhusbazillen im Stuhle. Von Dr. med. K. Nowack. (Aus dem
Hygienischen Institut der Universität Berlin. Direktor : Geh. Med.-Rat Prof.
Dr. M. Bubner) 374

NACHDRUCK VERBOTEN.

In dem nächsten Hefte folgen:

Spezifische Sera gegen Infusorien. Von Privatdozent Dr. Robert Röfsle in Kiel.
(Aus dem Hygienischen Institut der Universität München.)

Studien zur relativen Photometrie. III. Teil. Vom Dozenten Dr. Stan. Rüzicka. (Aus
dem k. k. Hygienischen Institut des Prof. Dr. Gustav Kabrhel in Prag.)

Wasserstoffsuperoxyd als ReinigUngs- und Desinfektionsmittel im Friseurgewerbe. Von
Dr. R. Hilgermann. (Aus dem Hygienischen Institut der Universität Berlin.
Direktor: Geh. Med.-Rat Prof. Dr. Rubner.)

Bemerkungen zur Abhandlung von E. Mettler über die bakterizide Wirkung des Lichtes
auf gefärbte Nährböden. Von H. v. Tappeiner.

Weitere Versuche mit photodynamischen , sensibilisierenden Farbstoffen. (Eosin,
Erythros in.) Prüfung der Wirkung des Tageslichtes auf Lebensfähigkeit und
Virulenz von Bakterien, auf Toxine und Antitoxine und auf das Labferment.
Von Hans Hub er, med. prakt. (Aus der bakteriologischen Abteilung des Hygiene-
Institutes der Universität Zürich. Vorstand: Privatdozent Dr. W. Silberschmidt)

Einsendungen beliebe man an Prof. Rubner, Bertin C, K/osterstr. 36, zu richten.

Verlag von Aug. Hirsch wald in Berlin.

Soeben erschien:

HANDBUCH

der

gerichtlichen Medizin.

Herausgegeben von

Geh. Ober-Med.-Rat Prof. Dr. A. Sehmidtmann,

unter Mitwirkung von Prof. Dr. A. Haberda, Prof.
Dr. Kock«l, Prof. Dr. Wachholz, Prof. Dr.
Puppe, Prof. Dr. Ziemke, Geh. Med.-Rat Prof.
Dr. Ungar u. Geh. Med.-Rat Prof. Dr. Siemerling.

Nennte Auflage (">)

des Oasper-Li man sehen Handbuches.

I. Bd. gr. 8. Mit 40 Textabb. 1905. 24 M.

Verlag von Aug. Hirschwald in Berlin.

Soeben erschien:

Bakteriologische Untersuchungen

über

Hände-Desinfektion

und ihre Endergebnisse für die Praxis

von

Prof. Dr. 0. Sarwey.

1905. 8. Mit 4 Lichtdrucktafeln.
2 M. 40 Pf. (9)

Verlag von E. Oldenbourg in München und Berlin.

Gesundheits-Ingenieur.

Zeitschrift

für die

gesamte Städtehygiene.

Herausgegeben von

Regierungsrat T. Boehmer, Berlin-Lichterfelde-West,

Prof. Dr. Dunbar, Direktor des Staatl. Hygienischen Instituts

zu Hamburg,

Regierungsrat Härder, Berlin W.,

Prof. Proskaner, Berlin-Charlottenburg.

Das Programm des >Gesundheits -Ingenieur sc,
Zeitschrift für die gesamte Städtehygiene, umfaßt die Gebiete :
Wasserversorgung und alle mit ihr verknüpften, ver-
wickelten Aufgaben, die Städtereinigung einschließlich
des Kanalisations wesens, Abwasserbeseitigung
und -Reinigung, die ganze Straßenhygiene, das Ab-
deckereiwesen und Leichenwesen, die Fragen der
Volksernährung und Nahrungsmittelkontrolle
einschließlich des Schlachthauswesens, alle Fragen der
Wohnungsbauhygiene und Baupolizei, Heizungs-
wesen, Beleuchtungswesen, Rauchplage, Bäder,
Krankenhauswesen, Armenversorgung, Gefäng-
niswesen, die Fragen der Schulhygiene und des
öffentlichen Kinderschutzes, des Schutzes gegen
Seuchen einschließlich Desinfektion, der Gewerbe-
hygiene und des Feuerlöschwesens sowie noch
manche andere in das Gebiet der Städtehygiene fallenden
Fragen.

Die Zeitschrift erscheint monatlich 3 mal und kostet
jährlich M. 20.—.

Protoemiiiimei* gratis und franko.

*

Verlag von R. Oldenbourg, München und Berlin.

Leitfaden der Hygiene

für Techniker, Verwaltungsbeamte b. Studierende dieser Fächer.

Von

Professor H. Chr. Nussbaum in Hannover,
ca. 40 Bogen mit zahlreichen Abbildungen. Preis eleg. geb. M. 16. — .

Aus dem Inhalts-Verzeichnis:

I.

Die Luft.

VIII. Die künstl. Beleuchtg.

XVI. Die Wass erversorgu n g

II.

Die Lüftung der Auf-

IX. Der Boden.

XVII. Die Beseitigung der

enthaltsräume.

X. Der Städtebau.

Abwässer und Abfall-

III.

Die Wärme.

XL Das Wohnhaus.

stofTe.

IV.

Die Heizung.

XII. Die Schule.

XVIII. DieLeichenbestattunK.

V.

Die Kleidung.

XIII. Das Krankenhaus.

XIX. Die Gewerbthätigkeit.

VI.

Das Licht.

XIV. Die Kaserne.

XX. Bakteriologie.

VII.

Die Tagesbeleuchtung.

XV. Das Gefängnis.

XXL Die Ernährung.

Einige Urteile der Presse:

. . . Der Inhalt dieses Buches erscheint uns so wertvoll, dass wir vielleicht mit
Erlaubnis des Verfassers Gelegenheit nehmen werden, kurze Auszüge aus demselben
über besonders aktuelle Fragen unseren Lesern in der >Technischen Woche« vor-
zuführen. Wir können die Anschaffung dieses interessanten Buches, welches auch für
den gebildeten Laien gut verständlich geschrieben ist, durchaus empfehlen.

(Technische Wocfu.)

. . . Das Werk, das unseres Wissens einzig in seiner Art ist, sollte in keiner
städtischen oder überhaupt kommunalen Bibliothek fehlen. (Gemeinde- Verwaltungsblatt.)

. . . Jeder Fachmann, und der es werden will, muss an dem Buche seine helle
Freude haben und wird in den klaren, lichtvollen und leicht fasslichen Ausführungen
der Anregung und Belehrung nicht ermangeln. . . .

(Zeitschrift, für Polizei- und Verwaltungsbeamte.)

. . . Alles in allem : der Leitfaden ist ein vollendetes Werk, das nicht nur dem
Fachnianne reiche Belehrung bringt und nirgends im Stiche lässt, sondern auch dem
Laien ein Urteil über die hygienischen Verhältnisse seiner näheren und weiteren Um-
gebung ermöglicht. (Münchner Allgemeine Zeitung.)

. . . Das Buch bedeutet mehr als ein wertvolles Handbuch, es ist für den Tech-
niker ein wichtiges Rüstzeug, insofern es ihn befähigen soll, viele Fragen deren Be-
antwortung bisher anderen Faktoren überlassen blieb, selbst zu lösen. Es ist deshalb
für alle diejenigen, die als Verwaltungsbeamte oder in öffentlicher Arbeit stehen, un-
entbehrlich, und der Verfasser darf das Verdienst in Anspruch nehmen, mit seinem
Werke der deutschen Technikerschaft ein wertvolles Geschenk gemacht zu haben.

(Deutsche Bauhütte.)

ARCHIV

FÜR

HYGIENE.

(BEGRÜNDET VON MAX r. PETTENKOFER.)

UNTER MITWIRKUNG

VON

Prof. Dr. 0. BOLLINGER, München; Prof. Dr. BONHOFF, Marburg t. L.; Prof. Dr. R. EMMERICH, München;
Prof. Dr. F. ERISMANN, Zürich; Prof. Dr. HEIM, Erlangen; Prof. Dr. A. HILCER, München; Prof. Dr.
F. HÜEPPE. Prag; Prof. Dr. KABRHEL, Prag; Prof. Dr. F. KRATSCHMER, Wien; Prof. Dr. K. LEHMANN.
WBrzbnrg; Prof. Dr. A. LODE, Innsbruck; Prof. Dr. L. PFEIFFER, Rostock; Generalarzt Dr. J. PORT,
Wflrrbnrg; Prof. Dr. W. PRAUSNITZ, Graz; Prof. Dr. F. RENK, Dresden; Prof. Dr. SCHOTTELIUS,
Freibarg i. B.; Generaloberarzt Dr. A. SCHUSTER, München; Prof. Dr. WERNICKE. Posen.

HERAUSGEGEBEN

VON

J.FOBSTEB, M, GRUBER, FR, HOFMANN, M, RÜBNER,

0.0. PROFESSOREN DER HYÜIKNK UNO

STRASSBURQ MÜNj

BREIUNB]

INSTITUTE AN OBN UN1YKR8IT1TBN ZU

BERLIN.

2. HEFT.

-~nr»X>J»>"

MÜNCHEN und BERLIN.

DRÜCK UND VERLAG VON R. OLDENBOURG.

1905.

Htß>

3 2044 103 036 4 V

■